CN104523580A - 一种肌苷氯化钠注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种肌苷氯化钠注射液及其制备方法。本发明的肌苷氯化钠注射液含有0.3%的肌苷和0.9%的氯化钠。本发明的肌苷氯化钠注射液中以氯化钠作为助溶剂，0.9%氯化钠溶液为等渗溶液，避免了静脉滴注时额外引入其他成分。此外，本发明的肌苷氯化钠注射液是大瓶配方，其中的肌苷浓度较低，避免了结晶析出的可能性，且可直接用于静脉滴注。本发明的肌苷氯化钠注射液性质稳定，易于存储，在遮光密闭状态下可以保存超过24个月。

Description

一种肌苷氯化钠注射液及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种注射液及其制备方法，具体地说，涉及一种肌苷氯化钠注射液及其制备方法。

背景技术

肌苷（Inosine），化学名称为9-β-D-核糖次黄嘌呤，分子式为C₁₀H₁₂N₄O₅，分子量为268.23，结构式如下：

肌苷为次嘌呤核苷类化合物，白色结晶性粉末。熔点218℃（分解）。微溶于水，在氯仿或乙醇中不溶。无臭，味微苦。

肌苷是一种次黄嘌呤核苷酸制剂，是三磷酸腺苷的前体物质，直接或间接参与体内能量代谢及蛋白质合成，并提高各种酶的活性。对收缩缺氧动脉有扩张作用，增加缺血组织的血流灌量。还广泛参与神经系统细胞内和细胞间的信息传递。在人体生化代谢中，细胞内和细胞外的ATP都可经过ADP、AMP转化为腺苷，腺苷经腺苷脱氧酶降解为肌苷，后者可经核苷酸酶形成次黄嘌呤、在合成过程中，首先在胞浆中合成次黄嘌呤核苷酸，然后经不同途径分别生成AMP和GMP。

医用肌苷为辅酶类药，具有改善机体代谢的作用，临床用于各种原因所致的白细胞减少和血小板减少、心力衰竭、心绞痛、肝炎等各种急慢性肝脏疾患、肺原性心脏病等心脏疾患的辅助治疗，也可用于视神经萎缩、中心性视网膜炎的辅助治疗。

肌苷注射液（Inosine Injection）的主要成份为肌苷，为无色或几乎无色的澄明液体，是临床应用广泛的药物制剂之一。现有肌苷注射液在生产、贮存、使用过程中，易出现染菌（可能与该产品为半生化药品有关），易氧化变质，其外观性状表现为色泽变黄。这个问题成了困扰医药生产企业多年的技术难题。

发明内容

本发明的目的是提供一种稳定且安全性高，并可直接用于静脉滴注的肌苷氯化钠注射液及其制备方法。

本发明的第一方面提供了一种肌苷氯化钠注射液，其为复方制剂，主要成分是肌苷和氯化钠。

优选地，本发明的肌苷氯化钠注射液含有0.3%的肌苷和0.9%的氯化钠。

本发明的肌苷氯化钠注射液中以氯化钠作为助溶剂。

本发明的第二方面提供了上述肌苷氯化钠注射液的制备方法，包括：

（1）称取300g肌苷和900g氯化钠加入90000ml注射用水中，加热至50℃～54℃，搅拌溶解，降至室温；

（2）将上述溶液粗滤，加入针用活性炭，加热搅拌；

（3）过滤脱碳；

（4）用氢氧化钠或盐酸调节pH值为6.5~7.5；

（5）补加注射用水至100000ml；

（6）用0.22μm微孔滤膜精滤；

（7）灌装至100ml玻璃输液瓶，每瓶100ml，轧盖；

（8）121℃灭菌8分钟，灭菌后30分钟内降低到室温。

优选地，上述步骤（2）中加入针用活性炭30g。

优选地，上述步骤（2）中在60℃下加热搅拌15min。

优选地，上述步骤（4）中用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值。

优选地，上述步骤（8）中降温到25℃。

优选地，还包括以下步骤：

（9）对制备的肌苷氯化钠注射液的性状、鉴别、pH值、有关物质、重金属含量、渗透压摩尔浓度、细菌内毒素含量、不溶性微粒数量、装量、可见异物以及肌苷和氯化钠含量进行检测。

检测标准如下：

【性状】

本品应为无色的澄明液体；

【鉴别】

（1）取本品5ml，置150ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，取10ml，加等体积的3,5-二羟基甲苯溶液，混匀，在水浴中加热10分钟，应显绿色；其中，所述3,5-二羟基甲苯溶液为取3,5-二羟基甲苯与三氯化铁各0.1g，加盐酸使成100ml；

（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与肌苷对照品溶液主峰的保留时间一致；

（3）应显钠盐与氯化物的鉴别反应；

【检查】

pH值：应为6.5～7.5；

有关物质：精密量取本品25ml，用水稀释成150ml，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；照含量测定项下的色谱条件进行试验，量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%；再精密量取上述两种溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍；供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，除氯化钠峰外各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰的峰面积；

重金属：取本品50ml，蒸发至约20ml，放冷，加pH 3.5醋酸盐缓冲液2ml与水适量使成25ml，与10μg/ml标准铅溶液1.5ml制成的对照液比较，不得更深，即含重金属不得超过千万分之三；

渗透压摩尔浓度：渗透压摩尔浓度应为270～320 mOsmol/kg；

不溶性微粒：每1ml中含10μm及10μm以上的微粒不得过18粒，含25μm及25μm以上的微粒不得过2粒；

细菌内毒素：每1ml中含内毒素的量应小于0.50EU；

装量：取本品3瓶，单瓶装量大于97ml，平均装量大于100ml；

可见异物：取本品20瓶，均不得检出烟雾状微粒柱，且不得检出金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm的纤维和块状物；如检出点状物、2mm以下的短纤维和块状物的数量仅有1瓶，应另取20瓶同法检查，均不得检出；

【含量测定】

肌苷：高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以10：90的甲醇：水为流动相，检测波长为248nm；取肌苷对照品10mg，80℃水浴加热10分钟，放冷，加水至50ml，取20ml注入液相色谱仪，肌苷峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求，理论板数按肌苷峰计算应不低于2000；

测定法：精密量取本品1ml，用水稀释制成150ml，作为供试品溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取肌苷对照品20mg，加水溶解并稀释成100 ml，再取稀释液5ml，用水稀释制成50ml，同法测定；按外标法以峰面积计算供试品中肌苷的含量，计算结果应为标示量的93.0%～107.0%；

计算公式：

标示量%＝(A_供×C_对)/( A_对×C_标)×供试品稀释倍数×100%

        ＝(A_供×C_对)/( A_对×C_标)×150×100%                           

其中，A_供为供试品主峰面积，C_对为对照品稀释浓度，A_对为对照品主峰面积，C_标为供试品标示浓度；

氯化钠：精密量取本品10ml，硝酸5ml，精密加0.1mol/L硝酸银溶液25ml，再加邻苯二甲酸二丁酯3ml，强力振摇后，加硫酸铁铵指示液2ml，用0.1mol/L硫氰酸铵滴定液滴定至溶液显淡棕红色，并将滴定结果用空白试验校正；计算结果应为标示量的96.0%～104.0%；

计算公式：标示量%＝((V_空－V_供)×f×5.844)/(10×0.9%×1000)×100%                         

其中，V_空为空白耗硫氰酸铵滴定液毫升数，V_供为供试品耗硫氰酸铵滴定液毫升数，f为硫氰酸铵滴定液的校正因子。

本发明的肌苷氯化钠注射液中以氯化钠作为助溶剂，0.9%氯化钠溶液为等渗溶液，避免了静脉滴注时额外引入其他成分。此外，本发明的肌苷氯化钠注射液是大瓶配方，其中的肌苷浓度较低，避免了结晶析出的可能性，且可直接用于静脉滴注。

本发明的肌苷氯化钠注射液性质稳定，易于存储，在遮光密闭状态下可以保存超过24个月。

本发明的方法工艺简单，生产的肌苷氯化钠注射液质量可靠。

具体实施方式

下面通过实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。本文中未单独注明的百分数均为质量体积百分数，即g/ml。

实施例1 制备肌苷氯化钠注射液

称取300g肌苷和900g氯化钠加入90000ml注射用水中，加热至50℃～54℃，搅拌溶解，降至室温。

将上述溶液粗滤，加入针用活性炭30g，在60℃下加热搅拌15min。

过滤脱碳。

用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值为5.5~7.5。

补加注射用水至100000ml。

用0.22μm微孔滤膜精滤。

灌装至100ml玻璃输液瓶，每瓶100ml，轧盖。

121℃灭菌8分钟，灭菌后30分钟内降低到25℃。

实施例2 检验方法和标准

本品为肌苷与氯化钠的灭菌水溶液，含肌苷应为标示量的93.0%～107.0%，含氯化钠应为标示量的96.0%～104.0%。

【性状】

本品应为无色的澄明液体。

【鉴别】

（1）取本品5ml，置150ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，取10ml，加等体积的3,5-二羟基甲苯溶液（取3,5-二羟基甲苯与三氯化铁各0.1g，加盐酸使成100ml），混匀，在水浴中加热约10分钟，应显绿色。

（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与肌苷对照品溶液主峰的保留时间一致。

（3）取本品，照《一般鉴别试验》检查，应显钠盐与氯化物的鉴别反应。

【检查】

pH值：照《pH值测定法》检查，应为6.5～7.5。

有关物质：精密量取本品25ml，用水稀释成150ml，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件进行试验，量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%。再精密量取上述两种溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和（氯化钠峰除外），不得大于对照溶液主峰的峰面积（1.0%）。

重金属：取本品50ml，蒸发至约20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH 3.5）2ml与水适量使成25ml，照《重金属检查法》第一法检查，与标准铅溶液1.5ml（10μg/ml）制成的对照液比较，不得更深（含重金属不得超过千万分之三）。

渗透压摩尔浓度：取本品，照《渗透压摩尔浓度测定法》测定，渗透压摩尔浓度应为270～320 mOsmol/kg。

不溶性微粒：取本品，照《注射液中不溶性微粒检查法》检查，每1ml中含10μm及10μm以上的微粒不得过18粒，含25μm及25μm以上的微粒不得过2粒。

细菌内毒素：取本品，照《细菌内毒素检查法》检查，每1ml中含内毒素的量应小于0.50EU。

装量：取本品3瓶，照《最低装量检查法》检查，单瓶装量大于97ml，平均装量大于100ml 。

可见异物：取本品20瓶，照《可见异物检查法》检查，均不得检出烟雾状微粒柱，且不得检出金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm的纤维和块状物等明显可见异物。如检出微细可见异物（如点状物、2mm以下的短纤维和块状物等）的数量仅有1瓶，应另取20瓶同法检查，均不得检出。

【含量测定】

肌苷：高效液相色谱法测定。

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇：水（10：90）为流动相，检测波长为248nm。取肌苷对照品约10mg，80℃水浴加热10分钟，放冷，加水至50ml，取20ml注入液相色谱仪，肌苷峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求，理论板数按肌苷峰计算应不低于2000。

测定法：精密量取本品1ml，用水稀释制成150ml，作为供试品溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取肌苷对照品20mg，加水溶解并稀释成100 ml，再取稀释液5ml，用水稀释制成50ml，同法测定。按外标法以峰面积计算供试品中肌苷的含量，计算结果应为标示量的93.0%～107.0%。

计算公式：

标示量%＝(A_供×C_对)/( A_对×C_标)×供试品稀释倍数×100%

        ＝(A_供×C_对)/( A_对×C_标)×150×100%                           

式中：

A_供：供试品主峰面积；      

C_对：对照品稀释浓度（μg/ml）；

A_对：对照品主峰面积；     

C_标：供试品标示浓度（μg/ml）。

氯化钠：精密量取本品10ml，硝酸5ml，精密加硝酸银溶液（0.1mol/L）25ml，再加邻苯二甲酸二丁酯3ml，强力振摇后，加硫酸铁铵指示液2ml，用硫氰酸铵滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显淡棕红色，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于5.844mg的NaCl，计算结果应为标示量的96.0%～104.0%。

计算公式：标示量%＝((V_空－V_供)×f×5.844)/(10×0.9%×1000)×100%                         

式中：

V_空：空白耗硫氰酸铵滴定液毫升数；

V_供：供试品耗硫氰酸铵滴定液毫升数；

f：硫氰酸铵滴定液的校正因子。

实施例3 肌苷氯化钠注射液的检验

按照实施例2所述的检验方法对实施例1制备得到的肌苷氯化钠注射液进行检验，结果如表1所示。

根据表1的检验结果，根据实施例1的方法生产的肌苷氯化钠注射液质量可靠。

实施例4 给药方法

静脉滴注。

一次100~200ml（含肌苷0.3~0.6g），每日1-2次。

Claims (9)

1.一种肌苷氯化钠注射液，其特征在于含有0.3w/v%的肌苷和0.9w/v%的氯化钠。

2.根据权利要求1所述的肌苷氯化钠注射液，其特征在于由0.3g肌苷和0.9g氯化钠溶于100ml注射用水得到。

3.权利要求2所述的肌苷氯化钠注射液的制备方法，包括如下步骤：

(1)称取300g肌苷和900g氯化钠加入90000ml注射用水中，加热至50℃～54℃，搅拌溶解，降至室温；

(2)将步骤（1）的溶液粗滤，加入针用活性炭，加热搅拌；

(3)过滤脱碳；

(4)用氢氧化钠或盐酸调节pH值为6.5~7.5；

(5)补加注射用水至100000ml；

(6)用0.22μm微孔滤膜精滤；

(7)灌装至100ml玻璃输液瓶，每瓶100ml，轧盖；

(8)121℃灭菌8分钟，灭菌后30分钟内降低到室温。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其中，步骤（2）中加入针用活性炭30g。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其中，步骤（2）中在60℃下加热搅拌15min。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其中，步骤（4）中用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调节pH值。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其中，步骤（8）中降温到25℃。

8.根据权利要求4-7任一项所述的制备方法，还包括如下步骤：

对制备的肌苷氯化钠注射液的性状、鉴别、pH值、有关物质、重金属含量、渗透压摩尔浓度、细菌内毒素含量、不溶性微粒数量、装量、可见异物以及肌苷和氯化钠含量进行检测。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其中检测标准如下：

【性状】

本品应为无色的澄明液体；

【鉴别】

（1）取本品5ml，置150ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，取10ml，加等体积的3,5-二羟基甲苯溶液，混匀，在水浴中加热10分钟，应显绿色；其中，所述3,5-二羟基甲苯溶液为取3,5-二羟基甲苯与三氯化铁各0.1g，加盐酸使成100ml；

（2）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与肌苷对照品溶液主峰的保留时间一致；

（3）应显钠盐与氯化物的鉴别反应；

【检查】

pH值：应为6.5～7.5；

有关物质：精密量取本品25ml，用水稀释成150ml，摇匀，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；照含量测定项下的色谱条件进行试验，量取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰的峰高约为满量程的20%；再精密量取上述两种溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的2倍；供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，除氯化钠峰外各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰的峰面积；

重金属：取本品50ml，蒸发至约20ml，放冷，加pH 3.5醋酸盐缓冲液2ml与水适量使成25ml，与10μg/ml标准铅溶液1.5ml制成的对照液比较，不得更深，即含重金属不得超过千万分之三；

渗透压摩尔浓度：渗透压摩尔浓度应为270～320 mOsmol/kg；

不溶性微粒：每1ml中含10μm及10μm以上的微粒不得过18粒，含25μm及25μm以上的微粒不得过2粒；

细菌内毒素：每1ml中含内毒素的量应小于0.50EU；

装量：取本品3瓶，单瓶装量大于97ml，平均装量大于100ml；

可见异物：取本品20瓶，均不得检出烟雾状微粒柱，且不得检出金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm的纤维和块状物；如检出点状物、2mm以下的短纤维和块状物的数量仅有1瓶，应另取20瓶同法检查，均不得检出；

【含量测定】

肌苷：高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以10：90的甲醇：水为流动相，检测波长为248nm；取肌苷对照品10mg，80℃水浴加热10分钟，放冷，加水至50ml，取20ml注入液相色谱仪，肌苷峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求，理论板数按肌苷峰计算应不低于2000；

测定法：精密量取本品1ml，用水稀释制成150ml，作为供试品溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取肌苷对照品20mg，加水溶解并稀释成100 ml，再取稀释液5ml，用水稀释制成50ml，同法测定；按外标法以峰面积计算供试品中肌苷的含量，计算结果应为标示量的93.0%～107.0%；

计算公式：

标示量%＝(A_供×C_对)/( A_对×C_标)×供试品稀释倍数×100%

        ＝(A_供×C_对)/( A_对×C_标)×150×100%                           

其中，A_供为供试品主峰面积，C_对为对照品稀释浓度，A_对为对照品主峰面积，C_标为供试品标示浓度；

氯化钠：精密量取本品10ml，硝酸5ml，精密加0.1mol/L硝酸银溶液25ml，再加邻苯二甲酸二丁酯3ml，强力振摇后，加硫酸铁铵指示液2ml，用0.1mol/L硫氰酸铵滴定液滴定至溶液显淡棕红色，并将滴定结果用空白试验校正；计算结果应为标示量的96.0%～104.0%；

计算公式：标示量%＝((V_空－V_供)×f×5.844)/(10×0.9%×1000)×100%                         

其中，V_空为空白耗硫氰酸铵滴定液毫升数，V_供为供试品耗硫氰酸铵滴定液毫升数，f为硫氰酸铵滴定液的校正因子。