CN101679386A - 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物 - Google Patents
可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101679386A CN101679386A CN200880017700A CN200880017700A CN101679386A CN 101679386 A CN101679386 A CN 101679386A CN 200880017700 A CN200880017700 A CN 200880017700A CN 200880017700 A CN200880017700 A CN 200880017700A CN 101679386 A CN101679386 A CN 101679386A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- alkyl
- cancer
- hetero atoms
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D471/04—Ortho-condensed systems
Abstract
本发明涉及可用作Aurora蛋白激酶抑制剂的化合物。本发明还提供了包含这些化合物的药学上可接受的组合物,以及在治疗不同疾病、病症和障碍中使用所述化合物和组合物的方法。本发明还提供了制备本发明化合物的方法。
Description
技术领域
[0000]本发明涉及可用作Aurora蛋白激酶抑制剂的化合物。本发明还涉及包含本发明化合物的药学上可接受的组合物,使用所述化合物和组合物治疗不同障碍的方法,以及制备所述化合物的方法。
背景技术
[0001]Aurora蛋白是三种相关的丝氨酸/苏氨酸激酶(称为Aurora-A、-B和-C)的家族,它们对于通过细胞周期的分裂期的进程是必需的。特别地,Aurora-A在中心体成熟和分离、有丝分裂纺锤体的形成和染色体的可靠分离中发挥决定性作用。Aurora-B是一种染色体信使蛋白,其在调节赤道板上的染色体的比对、纺锤体组装检测点和胞质分裂的修正完成中发挥中心性作用。
[0002]已在一系列人类癌症中观察到Aurora-A、-B或-C的过表达,所述癌症包括结肠直肠癌、卵巢癌、胃癌和侵袭性导管腺癌。
[0003]许多研究已证实,Aurora-A或-B在人类癌细胞中的缺失或被siRNA、显性负相抗体或中和抗体的抑制中断了通过具有4NDNA的细胞的蓄积的有丝分裂的进展,并且在某些情况下接着会核内复制和细胞死亡。
[0004]Aurora激酶是有吸引力的靶,因为它们与众多人类癌症以及它们在这些癌症细胞增生中所发挥的作用有关。期望拥有具有有利的药物样性质(例如在人肝微粒体中稳定)的Aurora激酶抑制剂。相应地,需要有抑制Aurora激酶并且还显示出有利的药物样性质的化合物。
发明概述
[0005]本发明提供可用作Aurora蛋白激酶的抑制剂的化合物及其药学上可接受的组合物。更特别地,本发明提供了在人肝微粒体中代谢稳定和/或有效抑制细胞增生的化合物。
[0006]这些化合物由式I表示:
或其药学上可接受的盐,其中各变量如本文中所定义。
[0007]这些化合物及其药学上可接受的组合物可用于体外、体内和离体抑制激酶。这些用途包括治疗或预防骨髓增生性障碍以及增生性障碍例如黑素瘤、骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、成神经细胞瘤和癌症。其它用途包括研究生物学和病理学现象中的激酶;研究由此类激酶介导的细胞内信号转导途径;以及比较评价新型激酶抑制剂。
发明详述
[0008]本发明的一个实施方案提供了式I化合物:
或其药学上可接受的盐,其中:
R2是H、C1-3烷基或环丙基;
R2’是H;
Q是-O-、-S-或-C(R’)2-;
RX是H或F;
RY是
J各自独立是F或C1-6烷基;
R’是H或C1-3烷基或者两个R’与它们所连接的碳原子一起形成C3-5环烷基;
n是1或2;
R4是H、C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,包含1-2个选自O、N或S的杂原子;其中所述烷基、环脂族基或杂环基任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代;
R1是8-12元二环杂芳基环,包含1-5个选自O、N和S的杂原子且任选被0-4个JD取代;其中所述系统中的各环含有4-8个环成员和1-4个选自O、N和S的杂原子;
JD各自独立是C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、卤代基或氧代,其中各C1-6烷基任选被0-6个氟取代。
[0009]在某些实施方式中,Q是-S-。
[0011]在其它的实施方式中,R2是C1-3烷基或环丙基。在另外其它的实施方式中,R2’是H。
[0012]在某些实施方式中,Rx是H。
[0013]在某些实施方式中,n是1。在其它的实施方式中,n是2。
[0014]在某些实施方式中,R4是H、C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在其它的实施方式中,R4是C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在另外其它的实施方式中,R4是H、C2-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,包含1-2个选自O或N的杂原子。在某些实施方式中,R4是4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在其它的实施方式中,R4是5-6元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在某些实施方式中,R4是C1-6烷基。在其它的实施方式中,R4是C2-6烷基。在某些实施方式中,R4是C1-6卤代基烷基。在其它的实施方式中,R4是C2-6卤代基烷基。在另外其它的实施方式中,R4是C3-6环烷基。在某些实施方式中,R4是C2-6卤代基烷基、C3-6环烷基或5-6元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在某些实施方式中,所述杂环基含有1-2个氮原子。
[0015]在某些实施方式中,R4任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代。
[0016]在另外的实施方式中,R1是8-12元二环杂芳基,含有1-5个选自O、N和S的杂原子和任选被0-4个JD取代。
[0017]在某些实施方式中,R1是6∶6环系。6∶6环系是二环稠合环系,其中在该环系中的各单环包含6个环原子。
[0018]6∶6环系可以是饱和的、部分不饱和的或完全不饱和的(即芳族)。6∶6环系的实例包括,但不限于,喹啉、喹唑啉、喹喔啉、吡啶并嘧啶和萘啶。在某些实施方式中,R1是喹啉。
[0019]在其它的实施方式中,R1是6∶5环系。
[0020]6∶5环系是二环稠合环系,其中该环系中的一个单环包含6个环原子而该环系中的另一单环包含5个环原子。
[0021]6∶5环系可以是饱和的、部分不饱和的或完全不饱和的(即芳族)。6∶5环系的实例包括,但不限于,吲哚、吲唑、苯并咪唑、苯并噻唑、吡唑并吡啶、咪唑并吡啶、吡唑并嘧啶、咪唑并嘧啶和苯并噻吩。在某些实施方式中,R1是6∶5环系,含有2个氮原子。在某些实施方式中,R1是苯并咪唑、吲唑或咪唑并吡啶环。在某些实施方式中,R1是苯并咪唑环。
[0022]本发明的另一实施方式提供式I化合物或其药学上可接受的盐,其中:
R2是H、C1-3烷基或环丙基;
R2’是H;
Q是-O-、-S-或-C(R’)2-;
RX是H或F;
J各自独立是F或C1-6烷基;
R’是H或C1-3烷基,或者两个R’与它们所连接的碳原子一起形成C3-5环烷基;
n是1或2;
R4是H、C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O、N或S的杂原子;其中所述烷基、环脂族基或杂环基任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代;
R1是8-12元二环杂芳基环,含有1-5个选自O、N和S的杂原子和任选被0-4个JD取代;和
JD各自独立是C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、卤代基或氧代,其中各C1-6烷基任选被0-6个氟取代。
[0023]在某些实施方式中,Q是-S-。
[0025]在其它的实施方式中,R2是C1-3烷基或环丙基。在另外其它的实施方式中,R2’是H。
[0026]在某些实施方式中,Rx是H。
[0027]在某些实施方式中,n是1。在其它的实施方式中,n是2。
[0028]在某些实施方式中,R4是H、C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在其它的实施方式中,R4是C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在另外其它的实施方式中,R4是H、C2-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在某些实施方式中,R4是4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在其它的实施方式中,R4是5-6元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在某些实施方式中,R4是C1-6烷基。在其它的实施方式中,R4是C2-6烷基。在某些实施方式中,R4是C1-6卤代基烷基。在其它的实施方式中,R4是C2-6卤代基烷基。在另外其它的实施方式中,R4是C3-6环烷基。在某些实施方式中,R4是C2-6卤代基烷基、C3-6环烷基或5-6元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。在某些实施方式中,所述杂环基含有1-2个氮原子。
[0029]在某些实施方式中,R4任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代。
[0030]在另外的实施方式中,R1是8-12元二环杂芳基,含有1-5个选自O、N和S的杂原子和任选被0-4个JD取代。
[0031]在某些实施方式中,R1是6∶6环系。
[0032]在其它的实施方式中,R1是6∶5环系。
[0033]在某些实施方式中,式I的变量包括下表1中所示的那些。
[0034]另外的实施方式提供选自下述的化合物:
[0035]为了本发明的目的,化学元素根据CAS版本的化学物理手册(Handbook of Chemistry and Physics)第75版的元素周期表定义。此外,有机化学的一般原理描述于本领域技术人员已知的教科书中,包括,例如“Organic Chemistry”,Thomas Sorrell,University Science Books,Sausalito:1999,以及“March′sAdvanced Organic Chemistry”,5th Ed.,Ed.:Smith,M.B.和March,J.,John Wiley & Sons,New York:2001,其全部内容在此通过引用并入。
[0036]如本文所述,明确说明的原子的数目范围包括其中的任何整数。例如,具有1-4个原子的基团可具有1、2、3或4个原子。
[0037]如本文所述,本发明化合物可任选被一个或多个取代基取代,例如上文一般性描述的那些,或者由本发明的特定类、亚类、种示例的那些。应当理解,短语“任选取代的”可与短语“取代或未取代的”互换使用。通常,术语“取代的”,不管前面是否有“任选”,均指在给定结构中的氢原子团被所指明的基团替换。除非另有说明,任选取代的基团可在该基团的每一个可取代的位置上具有取代基,并且当在任意给定结构中有多于一个位置可被多于一个选自特定组的取代基取代时,在每一个位置上的取代基可以相同或者不同。本发明考虑的取代基的组合优选是导致形成稳定的或化学上可行的化合物的那些。
[0038]如本文所用,术语“稳定的”是指当经受允许其产生、检测并优选其回收、纯化的条件和用于本文公开的一个或多个目的时基本不变化的化合物。在一些实施方案中,稳定的化合物或化学上可行的化合物是当维持于40℃或更低的温度,无水份或其它化学反应性条件至少一周时基本不变化的化合物。
[0039]如本文所用,术语“脂肪族化合物”或“脂肪族基团”等表示未分支或分支的、直链或环状、取代或未取代的烃,其是完全饱和的或者含有一个或多个具有与分子剩余部分连接的单一点的不饱和单元。适当的脂肪族基团包括但不限于线性或分支、取代或未取代的烷基、链烯基或炔基。具体实例包括但不限于甲基、乙基、异丙基、正丙基、仲丁基、乙烯基、正丁烯基、乙炔基和叔丁基。
[0040]术语“环脂肪族化合物”(或“碳环”或“碳环基”或“环烷基”等)是指单环C3-C8烃或二环C8-C12烃,其是完全饱和的或者含有一个或多个不饱和单元,但是其不是芳香族的,其具有与分子剩余部分连接的单一点,在所述分子中的所述二环环系中的任何单独环具有3-7个成员。适当的环脂肪族基团包括但不限于环烷基和环烯基。具体实例包括但不限于环己基、环丙烯基和环丁基。
[0041]如本文所用,术语“烷基”表示未分支或分支的、直链或环状烃,其是完全饱和的,并具有与分子剩余部分连接的单一点。除非另外指出,烷基含有1-12个碳原子。烷基的具体实例包括但不限于甲基、乙基、异丙基、正丙基和仲丁基。
[0042]在本发明的化合物中,环包括线性稠合环、桥接环或螺环。桥接环脂肪族基团的实例包括但不限于二环[3.3.2]癸烷、二环[3.1.1]庚烷和二环[3.2.2]壬烷。
[0043]如本文所用,术语“杂环”、“杂环基”或“杂环化合物”等表示非芳香的单环或二环,其中一个或多个环成员独立地选自杂原子。在一些实施方案中,所述“杂环”、“杂环基”或“杂环化合物”基团具有3-10个环成员,其中一个或多个环成员是独立地选自氧、硫、氮或磷的杂原子,并且系统中的各环含有3-7个环成员。桥接杂环的实例包括但不限于7-氮杂-二环[2.2.1]庚烷和3-氮杂-二环[3.2.2]壬烷。
[0044]适当的杂环包括但不限于3-1H-苯并咪唑-2-酮、3-(1-烷基)-苯并咪唑-2-酮、2-四氢呋喃基、3-四氢呋喃基、2-四氢噻吩基、3-四氢噻吩基、2-吗啉代、3-吗啉代、4-吗啉代、2-硫代吗啉代、3-硫代吗啉代、4-硫代吗啉代、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-四氢哌嗪基、2-四氢哌嗪基、3-四氢哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、1-吡唑啉基、3-吡唑啉基、4-吡唑啉基、5-吡唑啉基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2-噻唑烷基、3-噻唑烷基、4-噻唑烷基、1-咪唑烷基、2-咪唑烷基、4-咪唑烷基、5-咪唑烷基、二氢吲哚基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、苯并硫杂环戊烷、苯并二硫杂环己烷和1,3-二氢-咪唑-2-酮。
[0045]如本文所用,术语“Ht”与“Het”和可互换。
[0046]术语“杂原子”表示一个或多个氧、硫、氮、磷或硅(包括氮、硫、磷或硅的任何氧化形式;任何碱性氮的季铵化形式;或者杂环的可取代氮,例如N(如在3,4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR+(如在N-取代的吡咯烷基中))。
[0047]术语“芳基”是指具有总计5-12个环成员的单环或二环,其中在系统中的至少一个环是芳族的,并且其中系统中的各环含有3-7个环成员。术语“芳基”可与术语“芳基环”互换使用。术语“芳基”还指如下文所定义的杂芳基环系。
[0048]术语“杂芳基”是指具有总计5-12个环成员的单环或二环,其中在系统中的至少一个环是芳族的,在系统中的至少一个环含有一个或多个杂原子,并且其中系统中的各环含有3-7个环成员。术语“杂芳基”可与术语“杂芳基环”或术语“杂芳族基团”互换使用。适当的杂芳基环包括但不限于2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、苯并咪唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、N-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、哒嗪基(例如3-哒嗪基)、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、四唑基(例如5-四唑基)、三唑基(例如2-三唑基和5-三唑基)、2-噻吩基、3-噻吩基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基(例如2-吲哚基)、吡唑基(例如2-吡唑基)、异噻唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,3-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、嘌呤基、吡嗪基、1,3,5-三嗪基、喹啉基(例如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基)和异喹啉基(例如1-异喹啉基、3-异喹啉基或4-异喹啉基)。
[0049]如本文所用,术语“不饱和”表示具有一个或多个不饱和单元的部分。
[0050]术语“卤素”表示F、Cl、Br或I。
[0051]如本文所用,术语“保护基团”是指用于暂时阻断多官能化合物中的一个或多个希望反应位点的基团。在某些实施方案中,保护基团具有以下特征中的一个或多个,或者优选具有所有以下的特征:a)以高收率选择性反应以得到被保护的底物,其对在一个或多个其它反应位点发生的反应是稳定的;以及b)可通过不攻击再生官能团的试剂以高收率选择性除去。示例性保护基团详细描述于Greene,T.W.,Wuts,P.G,“Protective Groups in OrganicSynthesis”,第三版,John Wiley & Sons,New York:1999和此书的其它版本中,其全部内容通过引用并入本文。如本文所用,术语“氮保护基团”是指用于暂时阻断多官能化合物中的一个或多个希望的氮活性位点的基团。优选的氮保护基团也具有上文例举的特征,并且某些示例性氮保护基团也详细描述于Greene,T.W.,Wuts,P.G,“Protective Groups in Organic Synthesis”,第三版,John Wiley & Sons,New York:1999的第7章中,其全部内容通过引用并入本文。
[0052]除非另外指出,本文描述的结构还表示包括此结构的所有异构(例如,对映体、非对映体和几何(或构象))形式;例如,各不对称中心的R和S构型,(Z)和(E)双键异构体,以及(Z)和(E)构象异构体。因此,本发明化合物的单个立体化学异构体以及对映体混合物、非对映体混合物和几何异构体(或构象异构体)混合物在本发明的范围之内。
[0053]除非另外指出,本发明的所有互变异构形式都在本发明的范围之内。如熟练的从业者所理解的,吡唑基团可以不同方式表示。例如,如所示结构也代表其它可能的互变异构体,如同样,如所示结构也代表其它可能的互变异构体,如
[0055]另外,除非另外指出,本文描述的结构还表示包括区别仅在于存在一个或多个同位素富集的原子的化合物。例如,具有除由氘或氚替换氢或由13C-或14C-富集的碳替换碳的本发明结构的化合物在本发明的范围之内。这类化合物可用作,例如生物测定中的分析工具或探针。
[0056]本发明的化合物可根据本说明书使用本领域普通技术人员通常已知的步骤制备。那些化合物可通过已知的方法分析,所述方法包括但不限于LCMS(液相色谱法质谱法)和NMR(核磁共振)。应当理解,下文所示的具体条件仅仅是实例,并且不表示限制可用于制备本发明化合物的条件的范围。此外,本发明还包括根据本说明书对于本领域技术人员是显而易见的用于制备本发明的化合物的条件。除非另外指出,以下方案中的所有变量都如本文中所定义。
方案I
[0057]以上方案I显示了用于制备本发明化合物的一般方法。本发明的化合物可以如上文所示的各种途径制备。基本上,存在向二氯嘧啶原料中添加的三个主要基团。添加这些基团的顺序可变化。涉及的三个主要反应是:添加哌嗪或高哌嗪(homopiperazine),添加氨基-杂芳基以及添加-Q-R1(其包括-SMe氧化为适当的离去基团,例如SO2Me)。如上文所示,哌嗪或高哌嗪、氨基-杂芳基和-Q-R1可以各种不同的顺序添加。例如,氨基-杂芳基可首先添加,随后添加哌嗪或高哌嗪,氧化,并且最后添加-Q-R1。或者,可首先发生氧化,随后添加-Q-R1,添加氨基-杂芳基,并且最后添加哌嗪或高哌嗪。熟练的从业者将理解上文所示的不同反应。
[0058]另外,本发明的化合物可根据WO 2004/000833中所示的方法制备。
[0059]因此,本发明涉及用于制备本发明化合物的方法。
[0060]用于评估本发明化合物的活性的方法(例如激酶测定法)在本领域中是已知的,并且也描述于阐述的实施例中。
[0061]所述化合物作为蛋白激酶抑制剂的活性可在体外、在体内或在细胞系中测定。体外测定法包括测定活化激酶的激酶活性或ATP酶活性的抑制作用的测定法。其它的体外测定法量化抑制剂结合蛋白激酶的能力,并且可通过在结合之前放射性标记抑制剂、分离抑制剂/激酶复合物,以及测定结合的放射标记物的量测定,或者通过进行竞争性实验来测定,在所述竞争性实验中将新的抑制剂和与已知放射性配体结合的激酶一起孵育。
[0062]本发明的另一方法涉及抑制生物样品中的激酶活性,此方法包括使所述生物样品与式I化合物或包含所述化合物的组合物接触。如本文所用,术语“生物样品”表示体外或离体样品,包括不限于细胞培养物或其提取物;得自哺乳动物的活组织检查材料或其提取物;以及血液、唾液、尿液、粪便、精液、眼泪或其它体液或其提取物。
[0063]生物样品中激酶活性的抑制作用可用于本领域技术人员已知的各种目的。这类目的的实例包括但不限于输血、器官移植、生物样品贮存和生物测定。
[0064]生物样品中激酶活性的抑制作用也可用于研究生物学和病理学现象中的激酶;研究由这类激酶介导的细胞内信号转导途径;以及比较评价新的激酶抑制剂。
[0065]Aurora蛋白激酶抑制剂或其药学盐可制成对动物或人类施用的药物组合物。这些药物组合物包含有效治疗或预防Aurora-介导的病症的量的Aurora蛋白抑制剂和药学上可接受的载体,是本发明的另一个实施方案。
[0066]如本文所用,术语“Aurora-介导的病症”或“Aurora-介导的疾病”表示已知Aurora(Aurora A、Aurora B和Aurora C)在其中起作用的任何疾病或其它有害病症。这类病症包括但不限于癌症、增生性障碍和骨髓增生性障碍。
[0067]骨髓增生性障碍的实例包括但不限于真性红细胞增多症、血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓外化生、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性粒单核细胞型白血病、嗜酸细胞过多综合征、幼年型粒单核细胞型白血病和系统性肥大细胞病。
[0068]术语“癌症”还包括但不限于以下癌症:表皮样口腔:口腔、唇、舌、口、咽;心脏:肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤),粘液瘤,横纹肌瘤,纤维瘤,脂肪瘤和畸胎瘤;肺:支气管癌(鳞状上皮细胞或表皮样细胞、未分化的小细胞、未分化的大细胞、腺癌),小泡状(细支气管)癌,支气管腺瘤,肉瘤,淋巴瘤,软骨错构瘤,间皮瘤;胃肠:食道(鳞状上皮细胞癌、喉、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤),胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤),胰腺(导管腺癌、胰岛素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、舒血管肠肽瘤),小肠或小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤、Karposi′s肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神经纤维瘤、纤维瘤),大肠或大肠(腺癌、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤),结肠,结肠-直肠,结肠直肠,直肠;生殖泌尿道:肾(腺癌、Wilm′s瘤[肾胚细胞瘤]、淋巴瘤、白血病),膀胱和尿道(鳞状上皮细胞癌、移行细胞癌、腺癌),前列腺(腺癌、肉瘤)、睾丸(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤);肝:肝癌(肝细胞癌),胆管癌,肝毒细胞瘤,血管肉瘤,肝细胞腺瘤,血管瘤,胆道;骨:成骨肉瘤(骨肉瘤),纤维肉瘤,恶性纤维组织细胞瘤,软骨肉瘤,Ewing′s肉瘤,恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤),多发性骨髓瘤,恶性巨细胞瘤脊索瘤,骨软骨瘤(osteochronfroma,骨软骨外生骨疣),良性软骨瘤,软骨母细胞瘤,软骨粘液样纤维瘤(chondromyxofibroma),骨样骨瘤和巨细胞瘤;神经系统:颅骨(骨瘤、血管瘤、肉芽肿、黄色瘤、畸形性骨炎),脑膜(脑脊膜瘤、脑脊膜肉瘤(meningiosarcoma)、神经胶质瘤),脑(星形细胞瘤、髓母细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜细胞瘤、胚组织瘤[松果体瘤]、成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、神经鞘瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤),脊髓神经纤维瘤,脑脊膜瘤,神经胶质瘤,肉瘤);妇科学:子宫(子宫内膜癌),宫颈(宫颈癌、肿瘤前宫颈发育异常),卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分类的癌]、颗粒状荚膜细胞瘤(granulosa-thecal celltumors)、Sertoli-Leydig细胞瘤、无性细胞瘤、恶性畸胎瘤),外阴(鳞状上皮细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑素瘤),阴道(透明细胞癌、鳞状上皮细胞癌、葡萄糖状肉瘤(胚胎性横纹肌肉瘤),输卵管(癌),乳腺;血液学:血液(髓细胞性白血病[急性和慢性],急性淋巴细胞性白血病,慢性淋巴细胞性白血病,骨髓增生性疾病,多发性骨髓瘤,骨髓增生异常综合征),何杰金氏病,非何杰金氏淋巴瘤[恶性淋巴瘤]毛细胞;淋巴疾病;皮肤:恶性黑素瘤,基底细胞癌,鳞状上皮细胞癌,Karposi肉瘤,角化棘皮瘤,痣发育不良痣,脂肪瘤,血管瘤,皮肤纤维瘤,瘢痕疙瘩,牛皮癣,甲状腺:乳头状甲状腺癌,滤泡性甲状腺癌;甲状腺髓样癌,未分化的甲状腺癌,2A型多发性内分泌瘤病,2B型多发性内分泌瘤病,家族性甲状腺髓样癌,嗜铬细胞瘤,神经节细胞瘤;以及肾上腺:成神经细胞瘤。因此,如本文提供的,术语“癌细胞”包括患有任何一种上述病症的细胞。在一些实施方案中,所述癌症选自结肠直肠癌、甲状腺癌或乳腺癌。
[0069]在一些实施方案中,本发明的化合物可用于治疗癌症,如结肠直肠癌、甲状腺癌、乳腺癌和肺癌;以及骨髓增生性障碍,如真性红细胞增多症、血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓外化生、慢性髓细胞性白血病、慢性粒单核细胞型白血病、嗜酸细胞过多综合征、幼年型粒单核细胞型白血病和系统性肥大细胞病。
[0070]在一些实施方案中,本发明的化合物可用于治疗造血障碍,尤其是急性髓细胞性白血病(AML)、慢性髓细胞性白血病(CML)、急性前髓细胞性白血病(APL)和急性淋巴细胞性白血病(ALL)。
[0071]除本发明的化合物外,本发明化合物的药学上可接受的衍生物或前体药物也可用于组合物中以治疗或预防上述疾病。
[0072]“药学上可接受的衍生物或前体药物”表示本发明化合物的任何药学上可接受的酯、酯的盐或其它衍生物,其对受者施用后,能够直接或间接提供本发明的化合物或其抑制活性的代谢物或残基。这类衍生物或前体药物包括当这类化合物对患者施用时增加本发明化合物生物利用度的那些化合物(例如,使得经口给予的化合物更容易被吸收进入血液),或者那些相对于母体化合物提高母体化合物递送至生物学腔室(例如,脑部或淋巴系统)的化合物。
[0073]本发明化合物的药学可接受的前体药物的实例包括但不限于酯类、氨基酸酯类、磷酸酯类、金属盐类和磺酸酯类。
[0074]对于治疗,本发明的化合物可以游离形式存在,或者如果合适,以药学上可接受的盐存在。
[0075]如本文所用,术语“药学上可接受的盐”是指化合物的盐,其在合理的医学判断之内,适于与人和低等动物的组织接触使用,而没有过度毒性、刺激、过敏反应等,并且与合理的利益/风险比例相称。
[0076]本发明化合物的药学可接受盐包括那些衍生自适当的无机和有机酸和碱的盐。这些盐可在化合物的最终分离和纯化期间原位制备。酸加成盐可通过以下制备:1)使游离碱形式的纯净化合物与适当的有机或无机酸反应,和2)分离由此形成的盐。
[0077]适当的酸盐的实例包括乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、枸橼酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐(digluconate)、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐(glucoheptanoate)、甘油磷酸盐、羟乙酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、扑酸盐(palmoate)、胶质酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐和十一酸盐。其它酸如草酸,尽管其本身不是药学上可接受的,但是可用于制备盐,该盐可用作获得本发明化合物和其药学上可接受的酸加成盐中的中间体。
[0078]碱加成盐可通过以下制备:1)使酸形式的纯净化合物与适当的有机或无机碱反应,和2)分离由此形成的盐。
[0079]衍生自合适的碱的盐包括碱金属(例如钠和钾)、碱土金属(例如镁)、铵和N+(C1-4烷基)4盐。本发明还涉及本文公开的化合物的任何碱性含氮基团的季铵化。水或油溶性或可分散的产物可通过这种季铵化获得。
[0080]碱加成盐还包括碱金属盐或碱土金属盐。代表性的碱金属盐或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁盐等。如果合适,其它的药学可接受的盐包括无毒的铵、季铵和胺阳离子,其使用平衡离子如卤化物、氢氧化物、羧酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、低级烷基磺酸盐和芳基磺酸盐形成。其它的酸和碱,尽管其本身不是药学上可接受的,但是可在获得本发明化合物和其药学上可接受的酸或碱加成盐中用于制备可用作中间体的盐。
[0081]可用于这些药物组合物中的药学可接受的载体包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白如人血清白蛋白、缓冲物质如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅体二氧化胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、聚乙二醇和羊毛脂。
[0082]本发明的组合物可经口、胃肠外、通过吸入喷雾、局部、经直肠、经鼻、颊粘膜、阴道或通过植入型储库给予。如本文所用,术语“胃肠外”包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑膜腔内、胸骨内、鞘内、腹膜内、肝内、病变内和颅内注射或输注技术。
[0083]本发明组合物的无菌注射形式可以是水性或油性混悬液。这些混悬液可根据本领域已知的技术使用适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂制成。无菌注射制剂还可以是在无毒胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射的溶液或混悬液,例如在1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的介质或溶剂中,可以使用的是水、林格氏溶液和氯化钠等渗溶液。另外,无菌不挥发性油常规用作溶剂或悬浮介质。为此,可使用温和的不挥发油,包括合成的单-或二甘油酯。脂肪酸,如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备注射剂,如同天然的药学上可接受的油如橄榄油或蓖麻油,尤其是其聚氧乙基化形式。这些油溶液或混悬液还可含有长链醇稀释剂或分散剂,如羧甲基纤维素或在药学上可接受的剂型包括乳剂和混悬液的制造中常规使用的类似分散剂。其它常规使用的表面活性剂如吐温类、司盘类和其它乳化剂或生物利用度提高剂,可常规用于制造药学上可接受的固体、液体或其它剂型,也可用于制剂目的。
[0084]本发明药物组合物可以以任何口服可接受的剂型经口服施用,所述剂型包括但不限于胶囊剂、片剂、水混悬剂或溶液剂。在供口服使用的片剂的情况下,常用的载体可包括乳糖和玉米淀粉。润滑剂例如硬脂酸镁也可以被加入。对于以胶囊剂型的口服施用,有用的稀释剂可包括乳糖和干玉米淀粉。当水混悬剂需要用于口服使用时,可以将活性成分与乳化剂和助悬剂组合。如果需要,某些甜味剂、调味剂或着色剂也可以被加入。
[0085]或者,本发明药物组合物可以以供直肠施用的栓剂形式施用。这些栓剂可以通过将药物与适宜的非刺激性赋形剂混合来制备,所述赋形剂在室温下是固态但在直肠温度下为液态,因此在直肠肠中熔化以释放药物。此类物质可包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
[0086]本发明药物组合物还可以局部施用,特别是当治疗靶包括通过局部施用容易到达的区域或器官时,包括眼、皮肤或下肠道的疾病。可以针对这些区域或器官的每一种制备适宜的局部剂型。
[0087]用于下肠道的局部应用可以以直肠柱剂(见上文)或以适宜的灌肠剂来完成。还可以使用局部透皮贴片。
[0088]对于局部应用,可以将药物组合物配制成适宜的含有混悬或溶解在一种或多种载体中的活性组分的软膏剂。用于局部施用本发明的化合物的载体可包括但不限于矿物油、液体石蜡、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。另外,该药物组合物可以配制成适宜的含有混悬或溶解在一种或多种药学上可接受的载体中的活性组分的洗剂或乳膏剂。适宜的载体可包括但不限于矿物油、脱水山梨醇单硬脂酸酯、聚山梨酯60、十六烷基酯蜡、十六十八烷(cetearyl alcohol)、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
[0089]对于眼用,可以将药物组合物配制成在等渗、pH调节的无菌盐水中的微粉化混悬剂,或者配制成在等渗、pH调节的无菌盐水中的溶液剂,其含有或者没有防腐剂例如氯化benzylalkonium。或者,对于眼用,可以将药物组合物配制在软膏例如凡士林中。
[0090]本发明药物组合物还可以通过鼻气雾剂或吸入施用。此类组合物可以制备成在盐水中的溶液剂,使用苯甲醇或其它适宜防腐剂、增强生物利用度的吸收促进剂、氟碳化合物、和/或其它常用增溶剂或分散剂。
[0091]可以与载体物质组合以制备单一剂型的激酶抑制剂的量将根据治疗的宿主、具体施用方式和适宜症而改变。在一个实施方案中,该组合物应配制成可使0.01-100mg/kg体重/天的抑制剂的剂量施用于接受这些组合物的患者。在另一个实施方案中,该组合物应配制成可使0.1-100mg/kg体重/天的抑制剂的剂量施用于接受这些组合物的患者。
[0092]还应理解,用于任何特定患者的特定剂量和治疗方案将取决于多种因素,包括所用特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康、性别、饮食、施用时间、排泄速率、药物联合、以及治疗医生的判断和所治疗的特定疾病的严重度。抑制剂的量还取决于在组合物中的特定化合物。
[0093]根据另一个实施方案,本发明提供用于治疗或预防癌症、增生性障碍或骨髓增生性障碍的方法,其包含对患者施用本文所述化合物或药物组合物之一的步骤。
[0094]如本文所用,术语“患者”表示动物,包括人类。
[0095]在一些实施方案中,所述方法用于治疗或预防造血障碍,如急性髓细胞性白血病(AML)、急性前髓细胞性白血病(APL)、慢性髓细胞性白血病(CML)或急性淋巴细胞性白血病(ALL)。
[0096]在其它实施方案中,所述方法用于治疗或预防骨髓增生性障碍,如真性红细胞增多症、血小板增多症、伴有骨髓纤维变性的骨髓外化生、慢性髓细胞性白血病(CML)、慢性粒单核细胞型白血病、嗜酸细胞过多综合征、幼年型粒单核细胞型白血病和系统性肥大细胞病。
[0097]在其它的实施方案中,所述方法用于治疗或预防癌症,如乳腺癌、结肠癌、前列腺癌、皮肤癌、胰腺癌、脑癌、生殖泌尿道癌、淋巴系统癌、胃癌、喉癌和肺癌,包括肺腺癌、小细胞肺癌和非小细胞肺癌。
[0098]另一个实施方案提供了一种治疗或预防癌症的方法,其包含对患者施用式I化合物或包含所述化合物的组合物的步骤。
[0099]本发明的另一方面涉及在患者中抑制激酶活性,此方法包含对所述患者施用式I化合物或包含所述化合物的组合物。在一些实施方案中,所述激酶是Aurora激酶(Aurora A、Aurora B和Aurora C)、Abl、Arg、FGFR1、MELK、MLK1、MuSK、Ret或TrkA。
[00100]根据所治疗或预防的特定病症,其它药物可与本发明的化合物一起给予。在一些情况下,常规地给予这些其它药物,以治疗或预防相同的病症。例如,化学治疗剂或其它抗增生剂可与本发明的化合物组合以治疗增生性疾病。
[00101]本发明的另一个方面涉及在有此需要的受试者中治疗癌症的方法,其包含依次或共同给予本发明化合物或其药学上可接受的盐,以及另外的治疗剂。在一些实施方案中,所述另外的治疗剂选自抗癌剂、抗增生剂或化学治疗剂。
[00102]在一些实施方案中,所述另外的治疗剂选自喜树碱,MEK抑制剂:U0126,KSP(驱动蛋白纺锤体蛋白)抑制剂,阿霉素,干扰素类和铂衍生物如顺铂。
[00103]在其它实施方案中,所述另外的治疗剂选自紫杉烷类;bcr-abl抑制剂(如格列卫Gleevec、达沙替尼和尼洛替尼);EGFR抑制剂(如特罗凯(Tarceva)和易瑞沙(Iressa));DNA损伤剂(如顺铂、奥沙利铂、卡铂、拓扑异构酶抑制剂和蒽环类);以及抗代谢物(如AraC和5-FU)。
[00104]在其它实施方案中,所述另外的治疗剂选自喜树碱、多柔比星、伊达比星、顺铂、紫杉醇、泰索帝、长春新碱、特罗凯、MEK抑制剂、U0126、KSP抑制剂、伏林司他、格列卫、达沙替尼和尼洛替尼。
[00105]在另一个实施方案中,所述治疗剂是达沙替尼。
[00106]在另一个实施方案中,所述治疗剂是尼洛替尼。
[00107]在另一个实施方案中,所述另外的治疗剂选自Her-2抑制剂(如Herceptin);HDAC抑制剂(如伏林司他),VEGFR抑制剂(如Avastin),c-KIT和FLT-3抑制剂(如舒尼替尼),BRAF抑制剂(如Bayer的BAY 43-9006)MEK抑制剂(如Pfizer的PD0325901);以及纺丝体毒剂(例如埃坡霉素类和紫杉醇蛋白结合颗粒(例如)。
[00108]可以与本发明抗癌剂组合的其它治疗或抗癌剂包括手术、放射治疗(例如,γ辐射、中子束辐射治疗、电子束辐射治疗、质子疗法、近距离照射疗法和全身放射性同位素,等等)、内分泌疗法、生物反应调节剂(干扰素类、白细胞介素和肿瘤坏死因子(TNF)等等)、高温和冷冻疗法、减弱任何副作用的药物(例如止吐药),以及其它已批准的化学治疗药,包括但不限于烷化剂(氮芥、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、美法仑、异环磷酰胺)、抗代谢药(甲氨蝶呤)、嘌呤拮抗剂和嘧啶拮抗剂(6-巯嘌呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、吉西他滨)、纺丝体毒剂(长春碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇)、鬼臼毒素类(依托泊苷、伊立替康、托泊替康)、抗生素(多柔比星、博来霉素、丝裂霉素)、亚硝基脲(卡莫司汀、洛莫司汀)、无机离子(顺铂、卡铂)、酶类(门冬酰胺酶)和激素类(他莫昔芬、醋酸亮丙瑞林、氟他胺和甲地孕酮)、格列卫、地塞米松和环磷酰胺。
[00109]本发明化合物还可以与以下治疗剂组合用于治疗癌:阿巴瑞克(Plenaxis);阿地白介素阿地白介素;阿仑单抗;阿利维A 酸;别嘌醇;六甲蜜胺;氨磷汀;阿那曲唑;三氧化二砷门冬酰胺酶;阿扎胞苷;贝伐珠单抗;贝沙罗汀胶囊;贝沙罗汀凝胶;博来霉素;硼替佐米;静脉用白消安;口服用白消安;卡普睾酮卡培他滨;卡铂;卡莫司汀;卡莫司汀;卡莫司汀与聚苯丙生20植入剂(Gliadel);塞来考昔;西妥昔单抗;苯丁酸氮芥;顺铂;克拉屈滨2-);氯法拉滨;环磷酰胺( );环磷酰胺(Cytoxan);环磷酰胺(Cytoxan片);阿糖胞苷(Cytosar-);阿糖胞苷脂质体;达卡巴嗪(DTIC-);更生霉素、放线菌素D;达贝泊汀α;柔红霉素脂质体;柔红霉素、道诺霉素;柔红霉素、道诺霉素;白介素2-白喉毒素融合蛋白;右雷佐生;多西他赛;多柔比星(阿霉素);多柔比星;多柔比星(阿霉素PFS);多柔比星脂质体;丙酸屈他雄酮;丙酸屈他雄酮(屈他雄酮丙酸酯注射剂;Elliott′s B溶液(Elliott′s B溶液);表柔比星;阿法依伯汀;厄洛替尼(特);雌莫司汀;磷酸依托泊苷;依托泊苷、VP-16;依西美坦;非格司亭;氟脲嘧啶脱氧核苷(动脉内用);氟达拉滨;氟尿嘧啶、5-FU;氟维司群;吉非替尼;吉西他滨;吉姆单抗奥佐米星;醋酸戈舍瑞林(Zoladex);醋酸戈舍瑞林;醋酸组氨瑞林(Histrelin);羟基脲;替伊莫单抗;伊达比星;异环磷酰胺;甲磺酸伊马替尼干扰素α2a(Roferon);干扰素α-2b(Intron);伊立替康;来那度胺;来曲唑亚叶酸钙;醋酸亮丙瑞林;左旋咪唑;洛莫司汀、CCNU;氮芥(meclorethamine)、氮芥;醋酸甲地孕酮;美法仑、L-PAM;巯嘌呤、6-MP;美司钠美司钠(Mesnex);甲氨蝶呤;甲氧沙林;丝裂霉素C;米托坦;米托蒽醌苯丙酸诺龙(Durabolin-);奈拉滨;诺非单抗;奥普瑞白介素;奥沙利铂;紫杉醇;紫杉醇紫杉醇蛋白结合颗粒;帕利夫明;帕米膦酸盐;培加酶(Adagen(Pegademase Bovine));培门冬酶;培非司亭;培美曲塞二钠;喷司他丁;哌泊溴烷;普卡霉素、光辉霉素;卟吩姆钠;丙卡巴肼奎纳克林;拉布立酶;利妥昔单抗;沙格司亭;沙格司亭;索拉非尼;链佐星;马来酸舒尼替尼talc他莫昔芬替莫唑胺;替尼泊苷、VM-26;睾内酪;硫鸟嘌呤、6-TG;塞替派;托泊替康;托瑞米芬托西莫单抗;托西莫单抗/I-131托西莫单抗;曲妥单抗;维A酸、ATRA;乌拉莫司汀(Uracil Mustard);戊柔比星;长春碱;长春新碱;长春瑞滨;唑来膦酸盐和伏林司他
[00110]对于最新的癌症治疗的广泛讨论参见http://www.nci.nih.gov/,FDA批准的肿瘤药物清单http://www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe.htm以及TheMerck Manual,第17版.1999,它们的全部内容通过引用并入于此。
[00111]另一个实施方案提供了组合制剂的同时、分别或依次应用。
[00112]这些附加的药物可以作为多剂量方案的一部分与含有激酶抑制剂的化合物或组合物分开施用。或者,这些药物可以为单个剂型的一部分,在单一组合物中与所述激酶抑制剂一起混合。
[00113]为了更充分地理解本发明,提供以下实施例。这些实施例仅仅是为说明的目的,而不应解释为以任何方式限制本发明范围。本文引述的所有文献通过引用并入于此。
实施例
[00114]如用于本文的,术语“Rt(min)”是指与化合物有关的HPLC保留时间,单位为分钟。除非另有指明,用于获得报告的保留时间的HPLC方法如下:
柱:ACE C8柱,4.6x150mm
梯度:0-100%乙腈+甲醇60∶40(20mM Tris磷酸盐)
流速:1.5mL/分钟
检测:225nm。
[00115]质谱样品是在MicroMass Quattro Micro质谱仪上分析的,以单MS模式操作,采用电喷射离子化。使用色谱法将样品引入质谱仪。用于所有质谱分析研究的流动相是由10mM pH 7乙酸铵和1∶1乙腈-甲醇混合物组成的,柱梯度条件为5%-100%乙腈-甲醇,在ACEC 83.0x 75mm柱上历经3.5分钟梯度时间和5分钟运行时间。流速为1.2ml/min。
[00116]使用Bruker DPX 400仪器在400MHz下记录1H-NMR光谱。
[00117]以下式I化合物是根据本文所述方案和实施例中所示方法制备的。还根据本文描述的方法对所述化合物进行了分析。
方案II
实施例1:
2-(8-氟-2-甲基喹啉-6-基硫基)-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-(4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺(I-13)
方法A:6-氯-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺
[00118]向搅拌中的4,6-二氯-2-(甲硫基)嘧啶(25g,0.128mol)的DMF(100ml)溶液中加入二异丙胺(19.8g,0.154mol),随后是3-氨基-5-甲基吡唑(13.7g,0.154mol),在10分钟内分批加入。将溶液加热至50℃持续16小时,在此时间之后全部原料都已反应(通过LC/MS分析)。将混合物冷却至环境温度,倾入水(250ml)中。将沉淀过滤,将湿润固体分散于乙醚(300ml)中。将固体再次过滤,重新分散于甲醇(100ml)中。将过滤产物在烧结物(sinter)上空气干燥,然后进一步真空干燥,提供标题化合物,是灰白色固体(22.1g,66%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)δ2.22(3H,s),3.31(3H,s),6.00-7.50(2H,br m),10.17(1H,s),12.10(1H,s);MS(ES+)256,(ES-)254。
方法B:6-氯-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-胺
[00119]向在冰浴中冷却的搅拌中的6-氯-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(甲硫基)嘧啶-4-胺(8g,31.19mmol)的MeOH(200ml)溶液在10分钟内分批加入oxone(44g,71.73mmol)的水(100ml)浆料。反应混合物在此温度下再搅拌30分钟,之后使之温热至室温保持2小时。通过过滤分离出的固体在水与饱和的碳酸氢盐溶液的1∶1混合物中激烈搅拌。然后过滤固体,在真空下于喷枪中干燥,提供标题化合物,是黄色固体(7.17g,80%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)δ2.23(3H,s),3.32(3H,s),5.80-8.10(2H,br m),10.92(1H,br s),12.26(1H,br s);MS(ES+)288,(ES-)286。
方法C:6-氯-2-(8-氟-2-甲基喹啉-6-硫基)-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-4-胺
[00120]向搅拌中的8-氟-2-甲基喹啉-6-硫醇(1.21g,6.27mmol)的tBuOH(25ml)溶液加入6-氯-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-2-(甲基磺酰基)嘧啶-4-胺(1.5g,5.22mmol)。反应混合物脱气3次(真空/N2),之后加热至90℃持续18小时。粗混合物在真空中部分浓缩。将所得固体过滤,用乙酸乙酯和K2CO3水溶液洗涤。固体在真空下于喷枪(pistol)中干燥,提供标题化合物,是灰白色固体(1.029g,49%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)δ1.42(3H,br s),2.73(3H,s),4.95(1H,br s),6.47(1H,br s),7.61(1H,d),7.78(1H,dd),8.14(1H,s),8.39(1H,d),10.32(1H,br s),11.75(1H,br s);MS(ES+)401,(ES-)399。
方法D:2-(8-氟-2-甲基喹啉-6-硫基)-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)-6-(4-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪-1-基)嘧啶-4-胺
[00121]将搅拌中的6-氯-2-(8-氟-2-甲基喹啉-6-硫基)-N-(3-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-4-胺(200mg,0.5mmol)、1-(1-甲基哌啶-4-基)哌嗪(367mg,2mmol)和二异丙基乙胺(194mg,1.5mmol)在nBuOH(5ml)中的混合物加热至90℃持续18小时。粗混合物真空浓缩,残余物在乙酸乙酯与水之间分配。有机层进一步用水萃取。合并的有机层用盐水洗涤,在MgSO4上干燥,真空浓缩。所得残余物用冷乙腈研制,过滤,干燥,提供标题化合物,是灰白色固体(83mg,30%收率)。
1H NMR(DMSO D6,400MHz)δ1.35-1.50(2H,m),1.64-1.90(6H,m),2.10-2.18(4H,m),2.45-2.54(6H,m),2.70-2.84(5H,m),3.35(3H,m),5.33(1H,br s),6.12(1H,br s),7.57(1H,d),7.71(1H,d),8.05(1H,s),8.38(1H,d),9.25(1H,s),11.67(1H,s);MS(ES+)548,(ES-)546。
[00122]用于式I化合物制备的各种RyH部分描述于文献(参见,例如,Poindexter,G.S.;Bruce,M.A.;LeBoulluec,K.L.;Monkovic,I.Tetrahedron Lett.,1994,35,7331for thesynthesis of 1-cyclohexylpiperazine and 1-tert-butylpiperazine;Zaragoza,F.;Stephensen,H.;Knudsen,S.M.;Pridal,L.;Wulff,B.S.;Rimvall,K.J.Med.Chem.,2004,47,2833for the synthesis of 1-cyclopropylpiperazine)中或者可以按照与下文合成1-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪二氢溴酸盐中描述的那些相类似的方法来制得。
方案III
实施例2:
1-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪二氢溴酸盐
方法E:1-甲苯磺酰基-4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪
[00123]在CEM微波下于160℃下,将1-(1,5-二氯戊烷-3-基磺酰基)-4)甲基苯(1.5g,5mmol)、三氟甲基甲胺HCl盐(1.35g,10mmol)在二异丙基乙胺(15ml)中的混合物搅拌50分钟。残余物用乙酸乙酯稀释。有机层用水和盐水洗涤,在硫酸镁上干燥,减压浓缩。残余物在乙醚中研制。白色固体通过过滤收集(730mg,45%收率)。1H NMR(CDCl3,400MHz)2.45(3H,s),2.82-2.86(4H,m),2.90-3.00(2H,qd),3.01-3.05(4H,m),7.30-7.35(2H,d),7.60-7.65(2H,d);MS(ES+)323。
方法F:1-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪二氢溴酸盐
[00124]将1-甲苯磺酰基-4-(2,2,2-三氟乙基)哌嗪(700mg,2.2mmol)在30%HBr/乙酸溶液中的悬浮液在90℃下搅拌90分钟。将甲苯加至此悬浮液。滤去橙色固体,用乙醚洗涤,提供希望的化合物(400mg,55%收率),是二HBr盐。
[00125]用于制备其中Q是硫原子的式I化合物的各种HQ-R1部分可以制备自其各自的溴-或碘-衍生物。这些卤代基中间体描述于文献(参见例如WO2005/111047for the synthesis of 6-bromo-2-trifluoromethyl-imidazo[1,2-a]pyridine;Keller,H.;Schlosser,M.Tetrahedron,1996,52,4637for thesynthesis of 6-bromo-2-(trifluoromethyl)quinoline)中或按照与下文描述的那些类似的方法来制得。
实施例3:
1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-硫醇
方法G:N1-甲基-5-硝基苯-1,2-二胺
[00126]向1L圆底烧瓶加料4-硝基苯-1,2-二胺(40g,0.26mol)、碘甲烷(13ml,0.21mol)和DMF(300ml),随后在快速搅拌下在2-3分钟内加入饱和碳酸钠(60ml)。在室温下搅拌过夜之后,过滤反应混合物,然后真空浓缩为深红色油状物。残余物通过快速柱色谱法(15-30%乙酸乙酯/汽油)纯化,提供标题化合物(27g,61%收率)。
1H NMR(DMSO D6,400MHz)1.8(1H,br s),2.90(3H,d),3.90(2H,br s),6.65(1H,d),7.50(1H,s),7.68(1H,d);MS(ES+)168。
方法H:1-甲基-6-硝基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑
[00127]向250m l圆底烧瓶加料N1-甲基-5-硝基苯-1,2-二胺(29g,0.16mol)、三氟乙酸(22ml,0.24mol)和数滴浓HCl。加入最少量的DCM(~20ml),搅拌固体混合物。将反应混合物加热至70℃持续12小时,形成深棕色液体。使反应混合物冷却至室温,通过缓慢加入饱和碳酸氢盐溶液来碱化,萃取入乙酸乙酯。水层进一步用乙酸乙酯萃取2次。合并有机层,在硫酸镁上干燥,过滤,真空浓缩。化合物通过快速柱色谱法(10-20%乙酸乙酯/汽油(petrol))纯化,提供标题化合物(8g,20%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)4.2(3H,s),8.05(1H,d),8.35(1H,d),8.55(1H,s);MS(ES+)246。
方法I:1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-胺
[00128]向250ml圆底烧瓶加料1-甲基-6-硝基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(6g,24mmol)和浓HCl(40ml)。一旦溶液变得透明,加水(~15ml)直到溶液刚开始变得浑浊。在5分钟内分批加入SnCl4(27g,120mmol)(小心放热!)。初始放热导致温度升至60℃。搅拌反应混合物,使之冷却至室温。1小时之后,反应混合物用水(100ml)稀释,用1M NaOH碱化,用乙酸乙酯萃取2次。合并有机层,用盐水洗涤,在硫酸镁上干燥,真空浓缩,提供标题化合物,是深色固体。(5g,100%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)3.75(3H,s),4.6(2H,br s),6.65(1H,s),6.7(1H,d),7.75(1H,d);MS(ES+)215。
方法J:6-碘-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑
[00129]向250ml圆底烧瓶加料1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-胺(800mg,3.7mmol)和水(10ml),在冰浴中冷却。滴加浓硫酸(1.5ml),随后缓慢加入亚硝酸钠(270mg,3.9mmol)的水溶液(3ml)。反应在0℃下再搅拌5分钟,然后转移至滴液漏斗。然后在10分钟内将此反应混合物滴加至冷却的KI水溶液(10ml)。加入完成之后,使反应温热至室温。反应混合物用水(10ml)洗涤,用碳酸氢盐溶液碱化,用乙酸乙酯萃取2次。合并有机层,用盐水洗涤,在硫酸镁上干燥,真空浓缩。残余物通过快速柱色谱法(10-20%乙酸乙酯/汽油)纯化,提供标题化合物(600mg,48%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)3.8(3H,s),4.6(2H,br s),7.55(1H,s),7.6(1H,d),7.75(1H,d);MS(ES+)326。
方法K:1,2-二(1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)二硫烷
[00130]向250ml圆底烧瓶加料6-碘-1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑(2g,6.1mmol)、硫脲(1.35g,18mmol)、镍/二氧化硅(400mg)和NMP(20ml)。混合物在140℃下加热过夜。使反应混合物冷却,过滤通过C盐,用乙酸乙酯稀释,用水和盐水洗涤2次。有机层在硫酸镁上干燥,过滤,真空浓缩。残余物通过快速柱色谱法(10%乙酸乙酯/汽油)纯化,提供希望的产物(1.1g,38%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)3.9(3H,s),7.45(0.5H,d),7.5(0.5H,d),7.62(1H,d),7.83(0.5H,s),7.85(1H,s);MS(ES+)462。
方法L:1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-硫醇
[00131]将三-(2-羧基乙基)膦盐酸盐(TCEP.HCl,650mg,2.2mmol)加至1,2-二(1-甲基-2-(三氟甲基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)二硫烷(1g,2.2mmol)和二异丙基乙胺(0.4ml,2.1mmol)在水与二甲基甲酰胺(2ml/10ml)的混合物中的溶液。反应混合物在室温下搅拌120分钟。反应混合物用乙酸乙酯稀释,然后用盐水洗涤。有机层在硫酸镁上干燥,真空浓缩,提供化合物,是白色固体。MS(ES+)233。
实施例4:
8-氟-2-甲基喹啉-6-硫醇
方法M:6-溴-8-氟-2-甲基喹啉
[00132]将2-氟-4-溴苯胺(10g,0.053mol)分散于6M HCl(100ml)。将混合物加热至回流,在1小时内滴加巴豆醛(14.9g,0.212mol)。所得混合物再加热90分钟,然后冷却至室温,通过小心地加入浓氨水溶液中和。混合物用乙酸乙酯萃取,有机层用水和盐水洗涤,在上干燥硫酸镁,过滤,真空浓缩。残余物通过快速柱色谱法纯化,用15-10%乙酸乙酯/汽油洗脱。合并包含产物的级分,浓缩至约60ml。然后通过过滤分离产物。滤饼用汽油洗涤,空气干燥,提供标题化合物,是固体(5.96g,47%收率)。1H NMR(CDCl3,400MHz)2.80(3H,s),7.38(1H,d),7.53(1H,d),7.76(1H,s),8.00(1H,d);MS(ES+)240/242。
方法N:8-氟-2-甲基喹啉-6-硫醇
[00133]将三异丙基硅烷硫醇(3.4g,0.018mol)溶于无水THF(30ml)。混合物在冰浴中冷却,分批加入氢化钠(60%悬浮液,752mg,0.0188mol)。搅拌混合物30分钟。然后加入无水甲苯(30ml),随后是6-溴-8-氟-2-甲基喹啉(4.3g,0.0179mol)和四(三苯基膦)钯(2.07g)。将反应混合物加热至90℃持续90分钟,然后冷却至室温,用乙酸乙酯/水稀释。除去有机相和用水和盐水洗涤,在上硫酸镁干燥,过滤,真空浓缩。残余物通过快速柱色谱法纯化,用30-40%乙酸乙酯/汽油洗脱。这首先提供硅烷基保护的硫醇(2.82g)。进一步洗脱提供需要的硫醇(1.22g,35%收率)。1H NMR(CDCl3,400MHz)2.78(3H,s),3.69(1H,s),7.28-7.35(2H,m),7.47(1H,s),7.93(1H,d);MS(ES+)194,(ES-)192。
实施例5:
5-巯基-2-(2,2,2-三氟乙基)异吲哚啉-1-酮
方法O:4-溴-2-(羟基甲基)-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲酰胺
[00134]向在氮气氛下冷却至5℃的搅拌中的三氯化铝(4.07g,30.5mmol)的二氯甲烷(60ml)悬浮液中以一定速率加入三氟乙胺(5.84g,38.7mmol)溶液,以保持反应混合物的温度低于10℃。加入完成之后,使反应混合物温热至室温,在此温度下搅拌4小时。此段时间之后,一批加入溴苯酞粉(5g,23.5mmol),然后将反应混合物加热至80℃持续18小时。TLC显示原料完全转化为产物,反应小心地用冰水(100ml)淬灭,搅拌30分钟直到冰全部融化。加入二氯甲烷,混合物通过二氧化硅垫过滤,用足量DCM洗涤除去铝残余物。分离滤液,水层进一步用DCM(2x 100ml)萃取。合并有机层,在硫酸镁上干燥,过滤,减压浓缩,提供标题化合物,是灰白色粉末(3.37g,46%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)4.02-4.11(2H,m),4.60-4.61(2H,m),5.43-5.46(H,m),7.36-7.39(H,d),7.55-7.57(H,m),7.76(H,s)和9.09-9.12(H,m);MS (ES+)312,(ES-)310。
方法P:5-溴-2-(2,2,2-三氟乙基)异吲哚啉-1-酮
[00135]向在氮气氛下冷却至5℃的搅拌中的4-溴-2-(羟基甲基)-N-(2,2,2-三氟乙基)苯甲酰胺(3.37g,10.8mmol)在无水四氢呋喃(50ml)/N-甲基-2-吡咯烷酮(20mL)中的溶液以一定速率加入2M异丙基氯化镁的无水THF(25ml)溶液,以保持反应混合物的温度低于10℃。加入(大约45分钟)完成之后反应混合物在此温度下再搅拌60分钟,然后在室温下搅拌60分钟。此段时间之后,将反应混合物冷却至5℃,滴加二(二甲基氨基)磷酰氯(1.85g,14.1mmol)的溶液。未观察到放热,一旦加入完成将反应在回流下加热72小时。在该段时间之后通过TLC和LCMS都未观察到原料,反应混合物小心地用水淬灭,用1M盐水水溶液酸化。水相用乙酸乙酯萃取(3x 100ml),合并有机层,在硫酸镁上干燥,过滤,减压浓缩,剩余流动的油状物,将其通过柱色谱法纯化,用20%乙酸乙酯/石油醚洗脱,提供标题化合物,是白色固体(2.81g,88%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)4.36-4.43(2H,m),4.62(2H,s),7.68-7.74(2H,m)和7.93(1H,s);MS(ES+)296,(ES-)292。
方法Q:2-(2,2,2-三氟乙基)-5-(三异丙基硅烷基硫基)-异吲哚啉-1-酮
[00136]向在氮气氛下冷却至5℃的搅拌中的三异丙基硅烷硫醇(648mg,3.4mmol)的无水THF(10ml)溶液中在10分钟内分批加入60%氢化钠粉末(143mg,3.57mmol)。搅拌所得黄色20分钟,然后加入5-溴-2-(2,2,2-三氟-乙基)-2,3-二氢-异吲哚-1-酮(1g,3.4mmol)的无水THF(10ml)溶液和四(三苯基膦)钯(0)(393mg 0.34mmol)。反应混合物用氮气脱气,在90℃下加热2小时。在该段时间之后,tlc显示为原料、产物和未经保护的硫醇的混合物。真空浓缩该混合物,残余物在硅胶上通过快速柱色谱法纯化,用30%的乙酸乙酯/石油醚洗脱,分离经保护的(406mg,30%收率)和未经保护的硫醇(171mg,20%收率)。MS(ES+)248,(ES-)246,两者皆是。
方法R:5-巯基-2-(2,2,2-三氟乙基)异吲哚啉-1-酮
[00137]将2-(2,2,2-三氟乙基)-5-(三异丙基硅烷基硫基)-异吲哚啉-1-酮(1.39g,3.45mmol)溶于盐酸(6.7ml,1.25M,8.62mmol)的甲醇(10ml)/四氢呋喃(10ml)溶液,在室温下搅拌2小时。反应混合物真空浓缩,提供需要的化合物,是灰白色固体(0.783g,92%收率)。1H NMR(CDCl3,400MHz)3.70(1H,s),4.22(2H,q),4.53(2H,s),7.35-7.39(2H,m)和7.76(1H,d);MS(ES+)248,(ES-)246。
实施例6:
1-甲基-1H-吲唑-5-硫醇
方法s:5-碘-1-甲基-1H-吲唑
[00138]向冷却至0℃的1-甲基-1H-吲唑-5-胺(500mg,3.40mmol)在浓硫酸(1.3ml)/水(5.5ml)混合物中的溶液,滴加亚硝酸钠(258mg,3.74mmol)的水(0.5ml)溶液。反应混合物在0℃下搅拌10分钟,然后滴加至冷却至0℃的碘化钠(1.5g)的水(4.5ml)溶液。加入完成之后,将反应混合物加热至90℃再持续20分钟。所得混合物用稀氢氧化钠溶液碱化,用乙酸乙酯萃取。有机相进一步用盐水洗涤,在硫酸镁上干燥,真空浓缩。残余物在硅胶上通过快速柱色谱法纯化,用20%的EtOAc/石油醚洗脱,提供标题化合物(475mg,54%收率)。1H NMR(DMSO D6,400MHz)4.03(3H,s),7.52(1H,d),7.63(1H,dd),7.99(1H,s),8.17(1H,s)。
方法t:1-甲基-1H-吲唑-5-硫醇
[00139]将5-碘-1-甲基-1H-吲唑(190mg,0.70mmol)和硫脲(112mg,1.50mmol)的混合物溶于NMP(1ml),加热至50℃。反应混合物脱气,加入镍/二氧化硅(20mg)。反应混合物再次脱气,然后温热至150℃持续4小时。使反应混合物冷却,用甲醇和4mlNMP稀释。所得悬浮液通过玻璃纸过滤。真空浓缩滤液。
[00140]向粗二硫化物和二异丙基乙胺(67μl,0.39mmol)在水/二甲基甲酰胺(1ml/5ml)混合物中的体系中加入三-(2-羧基乙基)膦盐酸盐(TCEP.HCl,222mg,0.78mmol)。反应混合物在室温下搅拌120分钟。反应混合物用乙酸乙酯稀释,然后用盐水洗涤。有机层经硫酸镁干燥,真空浓缩,提供化合物,是白色固体。1H NMR(DMSO D6,400MHz)4.01(3H,s),5.34(1H,s),7.32(1H,dd),7.57(1H,d),7.69(1H,s),7.94(1H,s);MS(ES+)165。
实施例7:
方法U:2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶-6-硫醇
[00141]在氮气氛下,将6-溴-2-(三氟甲基)咪唑并[1,2-a]吡啶(500mg,1.89mmol)(其合成见WO2005111047)和甲硫醇钠(400mg,5.67mmol)在二甲基乙酰胺(5ml)中的混合物加热至150℃持续90分钟。将所得混合物冷却至室温,在乙酸乙酯与氯化铵水溶液之间分配。水相用另外的乙酸乙酯萃取,合并的有机层用水和盐水洗涤,在硫酸镁上干燥,真空浓缩,提供标题化合物,是红色油状物(251mg,61%收率)。MS(ES+)219,(ES+)217。
[00142]以下表2描述了表1化合物的数据。化合物编号与表1所示那些化合物相对应。
表2
化合物编号 | M+1(测得值) | 1H NMR | Rt(分钟) |
I-1 | 533 | (d6-DMSO,400MHz)1.00-1.15(2H,m),1.18-1.45(4H,m),1.50-1.60(2H,m),1.75-1.80(2H,m),2.00-2.10(5H,m),2.65-2.70(3H,m),3.05-3.25(5H,m),3.40-3.50(2H,m),4.10-4.20(2H,m),5.20-5.30(1H,s),6.05-6.25(1H,br s),7.55-7.60(1H,d),7.70-7.75(1H,d),8.07(1H,s),8.37-3.90(1H,d),9.40-9.50(2H,m) | 3.84 |
化合物编号 | M+1(测得值) | 1H NMR | Rt(分钟) |
I-2 | 579 | (d6-DMSO,400MHz)1.45(3H,s),1.50(3H,s),1.92(3H,s),3.19(2H,br s),3.36(3H,br s),4.43(2H,q),4.61(2H,s),5.34(1H,s),6.10(1H,s),7.73(1H,d),7.82(1H,d),7.91(1H,s),9.44(1H,s)。 | 3.74 |
I-3 | 572 | (d6-DMSO,400MHz)1.05-1.15(1H,m),1.20-1.40(4H,m),1.55-1.65(1H,m),1.70-1.85(4H,m),2.05-2.10(3H,m),3.00-3.25(5H,m),3.45-3.55(2H,m),3.95-4.00(3H,s),4.10-4.20(2H,m),5.20-5.30(1H,s),6.05-6.25(1H,br s),7.50-7.55(1H,d),7.85-7.90(1H,d),8.10(1H,s),9.30-9.50(2H,m) | 3.83 |
I-4 | 516 | (d6-DMS0,400MHz)0.750-1.00(4H,m),1.60-1.80(3H,s),2.85-2.95(1H,m),3.00-3.30(4H,m),3.40-3.60(2H,m),4.00-4.10(2H,s),5.10-5.20(1H,s),6.00-6.20(1H,br s),7.55-7.60(1H,d),7.80-7.85(1H,d),7.90-8.00(1H,s),9.15-9.35(2H,m)。 | 3.56 |
I-5 | 544.43 | (d6-DMSO,400MHz)0.86(2H,m),0.96(2H,m),1.76(3H,br s),2.89(1H,m),3.29-3.10(4H,m),3.85(3H,s),4.25-3.85(4H,掩蔽的信号),4.24(2H,q),5.25(1H,br s),6.08(1H,brs),7.42(1H,dd),7.72(1H,d),7.87(1H,d),9.38(1H,s)。 | 3.51 |
I-6 | 525 | (d6-DMSO,400MHz)1.19(3H,br s),1.21(3H,br s),1.60(3H,br s),2.48(3H,s),2.98(2H,br s),3.15(3H,br s),3.85(2H,br s),5.11(1H,s),5.91(1H,br s),7.39(1H,d),7.51(1H,dd),7.87(1H,s),8.17(1H,d),9.23(1H,s),9.41(1H,brs)。 | 3.82 |
I-7 | 578.44 | (d6-DMSO,400MHz)1.45(3H,s),1.51(3H,s),1.75(3H,br s),3.85-3.17(13H,掩蔽的信号),4.23(2H,q),5.23(1H,br s),6.03(1H,brs),7.42(1H,dd),7.71(1H,d),7.87(1H,d),9.39(1H,s)。 | 3.75 |
化合物编号 | M+1(测得值) | 1H NMR | Rt(分钟) |
I-8 | 558 | (d6-DMSO,400MHz)1.05-1.18(1H,m),1.20-1.40(4H,m),1.55-1.70(3H,m),1.75-1.85(2H,m),2.00-2.10(3H,m),3.00-3.30(5H,m),3.45-3.50(2H,m),4.05-4.10(2H,m),5.10-5.20(1H,s),6.05-6.15(1H,br s),7.55-7.60(1H,d),7.80-7.85(1H,m),7.95-8.00(1H,s),9.35-9.45(2H,s)。 | 3.7 |
I-9 | 558 | (d6-DMSO,400MHz)1.65-1.75(3H,s),2.55-2.65(4H,m),3.15-3.25(2H,qd),3.35-3.40(4H,m),5.15-5.20(1H,s),5.95-6.05(1H,br s),7.55-7.60(1H,d),7.75-7.80(1H,d),7.95-8.00(1H,s),9.20-9.25(1H,s)。 | 3.65 |
I-10 | 530 | (d6-DMSO,400MHz)0.750-1.00(4H,m),1.75-1.85(3H,s),2.85-2.95(1H,m),3.05-3.35(4H,m),3.45-3.60(2H,m),3.95-4.00(3H,s),4.10-4.25(2H,m),5.20-5.30(1H,s),6.05-6.25(1H,brs),7.55-7.60(1H,d),7.80-7.90(1H,d),8.10(1H,s),9.30-9.50(2H,m)。 | 3.67 |
I-11 | 550 | (CD3OD,400MHz):1.67(3H,s),1.73(3H,s),2.14-2.17(3H,s),3.55-3.70(6H,m),3.90-4.10(4H,br s),5.80(1H,s),6.20(1H,s),7.70-7.75(1H,d),7.80-7.85(1H,d),8.52(1H,s),8.96(1H,s)。 | 385 |
I-12 | 587.8 | (d6-DMSO,400MHz)1.7-1.85(6H,m),2.3-2.4(2H,m),2.7(3H,s),2.9-3.0(2H,m),3.05-3.2(2H,m),3.6-3.7(2H,m),3.95(3H,s),5.35(1H,br s),6.05(1H,br s),7.6(1H,d),7.95(1H,d),8.12(1H,s),9.45(1H,br s),9.7(1H,vbr s),10.3(1H,br s) | 3.24 |
I-13 | 548.46 | (d6-DMSO,400MHz)1.35-1.50(2H,m),1.64-1.90(6H,m),2.10-2.18(4H,m),2.45-2.54(6H,m),2.70-2.84(5H,m),3.35(3H,m),5.33(1H,br s),6.12(1H,br s),7.57(1H,d),7.71(1H,d),8.05(1H,s),8.38(1H,d),9.25(1H,s),11.67(1H,s)。 | 3.18 |
化合物编号 | M+1(测得值) | 1H NMR | Rt(分钟) |
I-14 | 516 | (d6-DMSO,400MHz)0.55-0.60(2H,m),0.65-0.70(2H,m),1.50-1.60(3H,s),2.55-2.65(1H,m),2.80-3.10(4H,m),3.20-3.35(2H,m),3.80-4.00(2H,m),5.10-5.15(1H,s),5.85-6.00(1H,s),7.25-7.30(1H,d),7.45-7.50(1H,d),8.31(1H,s),8.70(1H,s),9.15-9.20(1H,s)。 | 3.67 |
I-15 | 491 | (d6-DMSO,400MHz)。80-0.95(4H,m),1.75-1.80(2H,m),2.00-2.10(3H,s),2.65-2.70(3H,m),3.05-3.25(5H,m),3.40-3.50(2H,m),4.10-4.20(2H,m),5.30-5.40(1H,s),6.05-6.25(1H,brs),7.55-7.60(1H,d),7.70-7.75(1H,d),8.07(1H,s),8.37-3.90(1H,d),9.40-9.50(2H,m) | 3.66 |
I-16 | 478.5 | (CD3OD,400MHz):1.5(9H,s,tBu),1.8(3H,s,CH3),3.05-3.25(4H,m,alk),3.55-3.75(2H,m,alk),4.15(3H,s,CH3),4.4-4.6(3H,s,CH3),5.35(H,s,ar),6.0(H,s,ar),7.6-7.7(2H,q,ar),8.05(H,s,ar)和8.1(H,s,ar)。 | 3.56 |
I-17 | 584 | (d6-DMSO,400MHz)1.64(3H,br s),1.79-1.91(2H,m),2.28-2.33(2H,m),2.79(4H,s),2.91-3.00(2H,m),3.25(4H,br s),5.22(1H,br s),6.15(1H,vbr s),8.05-8.10(2H,m),8.23(1H,d),8.48(1H,s),8.79(1H,d),9.50(1H,s),9.62(1H,brs),10.11(1H,vbr s),11.75(1H,vbrs)。NB水峰掩蔽了一些信号。 | 3.6 |
I-18 | 478.48 | (CD3OD,400MHz):1.35-1.55(11H,m,CH3,和tBu),1.9(3H,s,CH3),3.0-3.3(4H,m,alk),3.6-3.75(2H,m,alk),3.95(3H,s,CH3),4.35-4.6(H,m,alk),5.4(H,s,ar),6.0(H,br s,ar),7.55(H,d,ar),7.75(H,d,ar),7.9(H,s,ar)和8.3(H,s,ar)。 | 3.37 |
I-19 | 586.5 | (d6-DMSO,400MHz)1.42-1.10(5H,m),1.63(1H,d),1.76(3H,br s),1.79(2H,d),2.06(2H,d),3.21-3.05(5H,m),3.52(2H,d),4.17(2H,d),4.24(2H,q),5.24(1H,br s),6.06(1H,br s),7.42(1H,dd),7.72(1H,d),7.87(1H,d),9.39(1H,s),9.47(1H,br s)。 | 3.65 |
化合物编号 | M+1(测得值) | 1H NMR | Rt(分钟) |
I-20 | 545 | (d6-DMSO,400MHz)0.80-0.95(4H,m),1.85-1.95(3H,s),2.85-2.95(2H,m),3.05-3.13(2H,m),3.16-3.30(2H,m),3.50-3.60(2H,m),4.10-4.25(2H,m),4.40-4.50(2H,qd),4.60-4.65(2H,s),5.30-5.40(1H,s),6.05-6.25(1H,br s),7.70-7.75(1H,d),7.80-7.85(1H,d),7.90(1H,s),9.30-9.50(2H,m)。 | 3.62 |
I-21 | 564 | (d6-DMSO,400MHz)1.45(3H,s),1.50(3H,s),1.77(3h,s),3.16(2H,br s),3.32(2H,br s),3.51(3H,br s),3.96-4.08(5H,m),5.25(1H,s),6.07(1H,s),7.56(1H,dd),7.89(1H,d),8.12(1H,s),9.40(1H,s)。 | 3.83 |
I-22 | 558 | (CD3OD,400MHz):2.10-2.15(3H,s),2.60-2.65(4H,m),3.05-3.15(2H,qd),3.45-3.50(4H,s),5.70-5.75(1H,s),5.83-5.88(1H,s),7.60-7.65(1H,d),7.70-7.75(1H,d),8.38(1H,s),8.84(1H,s)。 | 3.75 |
I-23 | 533 | (d6-DMSO,400MHz)1.45-1.55(3H,m),2.40-2.45(4H,m),2.50(3H,s),2.95-3.05(2H,m),3.10-3.15(4H,m),5.10(1H,s),5.80-5.90(1H,brs),7.35-7.40(1H,d),7.50-7.55(1H,d),7.80(1H,s),8.12-8.17(1H,d),9.40-9.05(2H,m) | 3.75 |
I-24 | 587 | (d6-DMSO,400MHz)1.85-1.95(3H,s),2.60-2.70(4H,m),3.15-3.25(2H,qd),3.35-3.40(4H,m),4.40-4.45(2H,qd),4.60-4.65(2H,s)5.30-5.40(1H,s),6.05-6.25(1H,br s),7.70-7.75(1H,d),7.80-7.85(1H,d),7.90(1H,s),9.30(1H,s)。 | 3.67 |
I-25 | 587 | (d6-DMSO,400MHz)1.05-1.15(1H,m),1.20-1.40(4H,m),1.55-1.65(1H,m),1.80-1.95(5H,m),2.05-2.10(2H,m),3.00-3.25(5H,m),3.50-3.55(2H,m),4.10-4.20(2H,m),4.40-4.50(2H,m),4.60-4.65(2H,s),5.30-5.40(1H,s),6.05-6.25(1H,b r s),7.70-7.75(1H,d),7.80-7.85(1H,d),7.90(1H,s),9.30-9.50(2H,m) | 3.78 |
实施例8:Aurora-2(Aurora A)抑制作用分析
[00143]使用标准偶合酶分析法(Fox等人,Protein Sci.,(1998)7,2249)针对它们抑制Aurora-2的能力筛选化合物。分析是在100mM Hepes(pH 7.5)、10mM MgCl2、1mM DTT、25mM NaCl、2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、300μM NADH、30μg/ml丙酮酸激酶和10μg/ml乳酸脱氢酶的混合物中进行的。在该分析中的最终底物浓度为400μMATP(Sigma Chemicals)和570μM肽(Kemptide,American Peptide,Sunnyvale,CA)。分析是在30℃下并在40nM Aurora-2的存在下进行的。
[00144]制备分析贮备缓冲溶液,其含有以上所列所有试剂,除了Aurora-2和目的测试化合物。将55μl的贮备溶液置于96孔板中,接着添加2μl的含有系列稀释的测试化合物的DMSO贮备液(通常从7.5μM的最终浓度开始)。在30℃下将板预孵育10分钟,再通过添加10μl的Aurora-2引发反应。用Molecular DevicesSpectraMax Plus读板器经10分钟过程测定开始反应速率。IC50和Ki数据是使用Prism软件包(GraphPad Prism,3.0cx版本,Macintosh,GraphPad Software,San Diego California,USA)由非线性回归分析计算的。
[00145]发现化合物I-2、I-4、至I-7、I-9、I-17、I-20、I-21和I-24在≤1nM Ki抑制Aurora A激酶活性。
[00146]发现化合物I-10、I-12到I-15、I-18、I-19和I-23在>1nM和≤2nM Ki抑制Aurora A激酶活性。
[00147]发现化合物I-1、I-3、I-8、I-11、I-16、I-22和I-25在>2nM Ki和≤20nM Ki抑制Aurora A激酶活性。
实施例9:Aurora-1(Aurora B)抑制作用分析(放射测定法)
[00148]制备分析缓冲溶液,其组成为25mM HEPES(pH 7.5)、10mM MgCl2、0.1%BSA和10%甘油。还含有1.7mM DTT和1.5mM肯普肽(Kemptide,LRRASLG)的22nM Aurora-B溶液是在分析缓冲液中制备的。向在96-孔板中的22μL的Aurora-B溶液中加入在DMSO中的2μl化合物贮备溶液,再使该混合物在25℃下平衡10分钟。通过添加在分析缓冲溶液中制备的16μl贮备[γ-33P]-ATP溶液(~20nCi/μL),至最终分析浓度为800μM,引发酶反应。3小时后通过添加16μL 500mM磷酸中止反应,结合到肽底物中的33P的水平是通过以下方法测定的。
[00149]将磷酸纤维素96-孔板(Millipore,Cat no.MAPHNOB 50)用100μL的100mM磷酸预处理,然后添加酶反应混合物(40μL)。使溶液浸泡到该磷酸纤维素膜上达30分钟,然后将板用200μL的100mM磷酸洗涤4次。向该干燥板的每个孔中加入30μL的Optiphase‘SuperMix’液体闪烁混合物(Perkin Elmer),然后闪烁计数(1450Microbeta Liquid Scintillation Counter,Wallac)。非酶催化的背景放射活性水平是通过向对照孔中添加16μL的500mM磷酸来测定的,该对照孔中含有所有分析组分(其起使酶变性的作用),然后添加[γ-33P]-ATP溶液。酶催化的33P结合是通过由每一抑制剂浓度下测定的计数减去平均背景计数来计算的。对于每个Ki测定,通常涵盖0-10μM化合物浓度范围的8个数据点是以一式双份获得的(DMSO贮备液是从10mM的起始化合物贮备液以连续1∶2.5系列稀释制备的)。使用Prism软件包(Prism 3.0,Graphpad Software,San Diego,CA)通过非线性回归法从起始速率数据计算Ki值。
[00150]发现化合物I-12、I-17、I-18和I-22在≤10nM Ki抑制Aurora A激酶活性。
[00151]发现化合物I-1到I-5、I-7、I-8、I-10、I-13、I-19、I-20、I-24和I-25在>10nM和≤20nM Ki抑制Aurora A激酶活性。
[00152]发现化合物I-6、I-9、I-11、I-14到I-16、I-21和I-23在>20nM Ki和≤50nM Ki抑制Aurora A激酶活性。
实施例10:微粒体稳定性分析
[00153]微粒体稳定性是通过由-系列物种(雄性CD-1小鼠、雄性Sprague-Dawley大鼠、雄性Beagle犬、雄性Cynomolgus猴和集群混合性别人)的微粒体中消耗-时间模式的生成来监测的。掺入了化合物的溶液是通过将在DMSO中的化合物贮备溶液稀释(通常为10mM)以得到在乙腈中的溶液(0.5mM)来制备的。使化合物(得到最终浓度为5μM)与最终反应混合物(1000μL)孵育,该最终反应混合物组成为肝微粒体蛋白(1mg/mL)和β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸、还原型(NADPH)-生成系统(RGS)[组成为2mM β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)、20.5mM异枸橼酸、0.5U的异柠檬酸盐脱氢酶/mL、30mM氯化镁和0.1M磷酸盐缓冲液(PB)pH 7.4],存在0.1M PB(pH 7.4)。
[00154]通过将(250μL)的预孵育的RGS添加到预孵育的微粒体/VRT/PB混合物(在两种情况下预孵育均为10分钟,37℃)来引发反应。使样品在Eppendorf瓶(1.5ml)中孵育,该Eppendorf瓶在与多探头II HT Ex自动液体处理器连接的加热振荡器(DPC Micromix5(装置;排列(form)20,振幅4)上,该振荡器通过两个与盖(deck)固定并受Packard Manual Heater控制的板加热器被调整加热至37℃)。孵育0、2、10、30和60分钟之后液体处理器按程序(WinPREP软件)对该微粒体孵育混合物取样,再将等分样(100μL)转移到含有100μL冷却的甲醇的中止板(stop block)(96-孔板)中。通过添加适量体积的水性物/有机物(通常为100μL的50∶50甲醇∶水)来优化有机物在该中止混合物中的%,以用于分析。
[00155]分析之前,将该中止板置于振荡器(DPC Micromix 5;10min,排列(form)20,振幅5)上以沉淀出蛋白。然后将该板离心(Jouan GR412;2000rpm,15min,4℃)。然后将等分样品(200μL)转移至分析板,再次将该板离心(Jouan GR412;2000rpm,5min,4℃),然后送去分析。消耗模式是通过由液相色谱法-串联质谱法(LC-MS/MS)监测VRT的消失来测定的。将样品注射(20μL;Agilent 1100液相色谱系统,装配有自动进样器)到分析柱中。流动相组成为水+0.05%(v/v)甲酸(A)和甲醇+0.05%(v/v)甲酸(B)。
[00156]运行针对目的化合物优化的梯度方法,使化合物从分析柱中洗脱。总运行时间为6分钟,流速为0.35mL/min。在运行的0.5至5.9min之间,使全部的柱流出液进Micromass Quattro LC串联质谱仪的电喷射离子化源(正模式)。针对目的的化合物优化质谱分析法。所有孵育均以一式双份进行,结果表示为:相对于0分钟样品,在30分钟或60分钟时的%母体残余(parent remaining)。
[00157]发现以下化合物与人肝微粒体孵育30分钟后有>50%的母体残余:I-1、I-3、I-4、I-8到I-12、I-14、I-17到I-21到I-23。
[00158]发现以下化合物与人肝微粒体孵育60分钟后有>50%的母体残余:I-13和I-17。
实施例11:细胞增生和存活的分析
[00159]使用得自ECACC的Colo205细胞并使用下文所示的分析法针对它们抑制细胞增生的能力和对细胞存活的影响筛选化合物。
[00160]将Colo205细胞种于96孔板,再将连续稀释的化合物加至孔中,一式双份。对照组包括未处理细胞、化合物稀释剂(仅0.1%DMSO)和无细胞的培养基。然后使细胞在37℃下在5%CO2/95%湿度的气氛中孵育72或96小时。
[00161]为了测定增生,在试验结束前3h,将0.5μCi的3H胸腺嘧啶核苷加至各孔中。然后收集细胞,再将掺入的放射性在Wallac微量培养板β-计数器上计数。细胞存活使用Promega CellTiter96AQ测量MTS转化来评价。使用Prism 3.0(GraphPad)或SoftMaxPro 4.3.1LS(Molecular Devices)软件计算剂量反应曲线。
[00162]下列化合物在72小时之后的IC50值<50nM:I-3、I-5、I-7、I-8、I-12、I-13、I-19、I-20和I-25。
[00163]下列化合物在72小时之后的IC50值≥50nM和<100nM:I-1、I-2、I-4、I-10、I-17和I-24。
[00164]下列化合物在72小时之后的IC50值≥100nM和≤1uMnM:I-6、I-9、I-11、I-14、I-15和I-21到I-23。
[00165]下列化合物在96小时之后的IC50值<50nM:I-3、I-10、I-16和I-18。
实施例12:Abl激酶活性抑制分析和抑制常数Ki的测定
[00166]使用标准偶合酶系统(Fox等人.,Protein Sci.,7,pp.2249(1998))针对化合物抑制N-末端截短的(Δ27)Abl激酶活性的能力筛选化合物。在含有100mM HBPES(pH 7.5)、10mMMgCl2、25mM NaCl、300μM NADH、1mM DTT和3%DMS O的溶液中进行反应。在该分析中的最终底物浓度为110μM ATP(SigmaChemicals,St Louis,MO)和70μM肽(EAIYAAPFAKKK,AmericanPeptide,Sunnyvale,CA)。在30℃下和21nM Abl激酶中进行反应。偶合酶系统的各组分最终浓度为2.5mM磷酸烯醇丙酮酸、200μM NADH、60μg/ml丙酮酸激酶和20μg/ml乳酸脱氢酶。
[00167]制备分析贮备缓冲溶液,除了ATP和目的测试化合物外,其含有上面所列的所有试剂。使分析贮备缓冲溶液(60μl)在含有2μl目的测试化合物的96孔板中在30℃下孵育10min,该测试化合物最终浓度通常为0.002μM至30μM。通常,在子体(daughter)板中,通过用DMSO系列稀释(从1mM化合物贮备液)测试化合物制备12点滴定。通过添加5μl的ATP(最终浓度110μM)引发反应。在30℃下使用Molecular Devices Spectramax板读数器(Sunnyvale,CA)经10min获得反应速率。使用非线性回归以抑制剂浓度的函数从剩余速率数据测定Ki值(Prism 3.0,Graphpad Software,SanDiego,CA)。
[00168]发现化合物I-13、I-16、I-17和I-18抑制Abl激酶的Ki值为<25nM。
实施例13:突变体Abl激酶(T315I)活性抑制分析和抑制常数IC50
的测定
[00169]在Upstate细胞信号溶液(Dundee,UK)中针对化合物抑制人Abl的T315I突变体形式的能力筛选化合物。在25μl的最终反应体积中,使人Abl的T315I突变体(5-10mU)与8mM MOPS pH7.0、0.2mM EDTA、50μM EAIYAAPFAKKK、10mM乙酸镁、[γ-33P-ATP](比活性约500cpm/pmol,10mM的最终分析浓度)以及最终浓度范围为0-4μnM的目的测试化合物孵育。通过添加MgATP混合物引发反应。在室温下孵育40分钟之后,通过添加5μl的3%磷酸溶液中止反应。然后将10μl的反应物点样到P 30过滤垫上,再在75mM磷酸中洗涤3次达5分钟,并在甲醇中洗涤1次,然后干燥,再闪烁计数。根据残余酶活性作为抑制剂浓度的函数的非线性回归分析测定抑制作用IC50值(Prism 3.0,Graphpad Software,SanDiego,CA)。
[00170]发现化合物I-17抑制Abl激酶的Ki值为<25nM。
[00171]虽然我们描述了本发明的许多实施方案,显然,可以改变我们的基本的实施例以提供使用或包含本发明化合物、方法、过程的其它实施方案。因此,可以理解,本发明范围应由所附权利要求来定义。
Claims (52)
1.式I的化合物:
或其药学上可接受的盐,其中:
R2是H、C1-3烷基或环丙基;
R2’是H;
Q是-O-、-S-或-C(R’)2-;
RX是H或F;
各自J独立是F或C1-6烷基;
n是1或2;
R4是H、C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O、N或S的杂原子;其中所述烷基、环脂族基或杂环基任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代;
R1是8-12元二环杂芳基环,含有1-5个选自O、N和S的杂原子且任选被0-4个JD取代;
JD各自独立是C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、卤代基或氧代,其中各C1-6烷基任选被0-6个氟取代。
2.权利要求1的化合物,其中Q是-S-。
4.权利要求3的化合物,其中R2是C1-3烷基或环丙基。
5.权利要求4的化合物,其中R2’是H。
6.权利要求5的化合物,其中Rx是H。
7.权利要求1-6中任一项的化合物,其中n是1。
8.权利要求1-6中任一项的化合物,其中n是2。
9.权利要求7或8的化合物,其中R4是H、C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子;其中所述烷基、环脂族基或杂环基任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代。
10.权利要求9的化合物,其中R4是C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子;其中所述烷基、环脂族基或杂环基任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代。
11.权利要求10的化合物,其中R4是4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。
12.权利要求10的化合物,其中R4是5-6元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。
13.权利要求10的化合物,其中R4是C1-6烷基。
14.权利要求10的化合物,其中R4是C3-6环烷基。
15.权利要求10的化合物,其中R1是8-12元二环杂芳基,含有1-5个选自O、N和S的杂原子且任选被0-4个JD取代。
16.权利要求15的化合物,其中R1是6∶6环系。
17.权利要求16的化合物,其中R1是喹啉。
18.权利要求15的化合物,其中R1是6∶5环系。
19.权利要求18的化合物,其中所述6∶5环系含有2个氮原子。
20.权利要求19的化合物,其中R1是苯并咪唑、吲唑或咪唑并吡啶环。
21.权利要求20的化合物,其中R1是苯并咪唑环。
23.权利要求22的化合物,其中R2是C1-3烷基或环丙基。
24.权利要求23的化合物,其中R2’是H。
25.权利要求24的化合物,其中Rx是H。
26.权利要求1、2和22-25中任一项的化合物,其中n是1。
27.权利要求1、2和22-25中任一项的化合物,其中n是2。
28.权利要求26或27的化合物,其中R4是H、C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子;其中所述烷基、环脂族基或杂环基任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代。
29.权利要求28的化合物,其中R4是C1-6烷基、C3-8环脂族基或4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子;其中所述烷基、环脂族基或杂环基任选独立地被0-6次出现的C1-6烷基、-O-(C1-6烷基)、NH2、OH、=O、卤代基、CN或NO2取代。
30.权利要求29的化合物,其中R4是4-8元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。
31.权利要求29的化合物,其中R4是5-6元杂环基,含有1-2个选自O或N的杂原子。
32.权利要求29的化合物,其中R4是C1-6烷基。
33.权利要求29的化合物,其中R4是C3-6环烷基。
34.权利要求29的化合物,其中R1是8-12元二环杂芳基,含有1-5个选自O、N和S的杂原子且任选被0-4个JD取代。
35.权利要求34的化合物,其中R1是6∶6环系。
36.权利要求35的化合物,其中R1是喹啉。
37.权利要求34的化合物,其中R1是6∶5环系。
38.权利要求37的化合物,其中所述6∶5环系含有2个氮原子。
39.权利要求38的化合物,其中R1是苯并咪唑、吲唑或咪唑并吡啶环。
40.权利要求39的化合物,其中其中R1是苯并咪唑环。
45.根据权利要求44的方法,其中所述增生性障碍是癌症。
46.根据权利要求44的方法,其中所述增生性障碍选自黑素瘤、骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、成神经细胞瘤,或者选自以下的癌症:结肠癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、中枢神经系统(CNS)癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、胰腺癌、脑癌(神经胶质瘤)、头颈癌、肾癌、肝癌、黑素瘤、肉瘤或甲状腺癌。
47.根据权利要求45的方法,其进一步包括依次或共同给予另外的治疗剂。
48.根据权利要求47的方法,其中所述治疗剂选自紫杉烷类、bcr-abl的抑制剂、EGFR的抑制剂、DNA损伤剂和抗代谢药。
49.根据权利要求47的方法,其中所述治疗剂选自紫杉醇、格列卫、达沙替尼、尼罗替尼、特罗凯、易瑞沙、顺铂、奥沙利铂、卡铂、蒽环类、AraC和5-FU。
50.根据权利要求47的方法,其中所述治疗剂选自喜树碱、多柔比星、伊达比星、顺铂、紫杉醇、泰索帝、长春新碱、特罗凯、MEK抑制剂、U0126、KSP抑制剂、伏林司他、格列卫、达沙替尼和尼罗替尼。
51.根据权利要求50的方法,其中所述治疗剂是达沙替尼。
52.根据权利要求50的方法,其中所述治疗剂是尼罗替尼。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US92349507P | 2007-04-13 | 2007-04-13 | |
US60/923,495 | 2007-04-13 | ||
US94677607P | 2007-06-28 | 2007-06-28 | |
US60/946,776 | 2007-06-28 | ||
PCT/US2008/059975 WO2008128009A2 (en) | 2007-04-13 | 2008-04-11 | Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101679386A true CN101679386A (zh) | 2010-03-24 |
Family
ID=39764683
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN200880017700A Pending CN101679386A (zh) | 2007-04-13 | 2008-04-11 | 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物 |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US8455507B2 (zh) |
EP (1) | EP2146982A2 (zh) |
JP (2) | JP2010523700A (zh) |
CN (1) | CN101679386A (zh) |
AU (1) | AU2008240313A1 (zh) |
CA (1) | CA2683785A1 (zh) |
MX (1) | MX2009011059A (zh) |
NZ (1) | NZ580343A (zh) |
WO (1) | WO2008128009A2 (zh) |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2683785A1 (en) * | 2007-04-13 | 2008-10-23 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors |
KR20110131302A (ko) * | 2009-03-23 | 2011-12-06 | 엠에스디 가부시키가이샤 | 오로라 a 선택적 억제 작용을 갖는 신규한 아미노피리딘 유도체 |
KR20120004467A (ko) * | 2009-03-24 | 2012-01-12 | 엠에스디 가부시키가이샤 | 오로라 a 선택적 억제 작용을 갖는 신규한 아미노피리딘 유도체 |
PT2841428T (pt) | 2012-04-24 | 2018-11-29 | Vertex Pharma | Inibidores de adn-pk |
UA112897C2 (uk) | 2012-05-09 | 2016-11-10 | Байєр Фарма Акцієнгезелльшафт | Біциклічно заміщені урацили та їх застосування для лікування і/або профілактики захворювань |
DK3527563T3 (da) | 2013-03-12 | 2021-12-06 | Vertex Pharma | Dna-pk-inhibitorer |
SG11201602962PA (en) | 2013-10-17 | 2016-05-30 | Vertex Pharma | Co-crystals of (s)-n-methyl-8-(1-((2'-methyl-[4,5'-bipyrimidin]-6-yl)amino)propan-2-yl)quinoline-4-carboxamide and deuterated derivatives thereof as dna-pk inhibitors |
CA2982890C (en) | 2015-04-17 | 2023-08-22 | Ludwig Institute For Cancer Research Ltd | Plk4 inhibitors |
WO2017207340A1 (de) | 2016-05-31 | 2017-12-07 | Bayer Pharma Aktiengesellschaft | Neue substituierte benzimidazole, verfahren zu ihrer herstellung, pharmazeutische präparate die diese enthalten, sowie deren verwendung zur herstellung von arzneimitteln |
MX2019003317A (es) | 2016-09-27 | 2019-08-05 | Vertex Pharma | Metodo para tratar cancer usando una combinacion de agentes que dañan adn e inhibidores de proteina cinasa dependiente de adn (adn-pk). |
BR112020010120A2 (pt) * | 2017-11-23 | 2020-11-10 | Biomed X Gmbh | compostos derivados de pirimidina e sua composição farmacêutica |
Family Cites Families (75)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3133081A (en) | 1964-05-12 | J-aminoindazole derivatives | ||
US3935183A (en) | 1970-01-26 | 1976-01-27 | Imperial Chemical Industries Limited | Indazole-azo phenyl compounds |
BE754242A (fr) | 1970-07-15 | 1971-02-01 | Geigy Ag J R | Diamino-s-triazines et dinitro-s-triazines |
US3998951A (en) | 1974-03-13 | 1976-12-21 | Fmc Corporation | Substituted 2-arylquinazolines as fungicides |
DE2458965C3 (de) | 1974-12-13 | 1979-10-11 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | 3-Amino-indazol-N-carbonsäure-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie sie enthaltende Arzneimittel |
MA18829A1 (fr) | 1979-05-18 | 1980-12-31 | Ciba Geigy Ag | Derives de la pyrimidine,procedes pour leur preparation,compositions pharmaceutiques contenant ces composes et leur utilisation therapeutique |
DOP1981004033A (es) | 1980-12-23 | 1990-12-29 | Ciba Geigy Ag | Procedimiento para proteger plantas de cultivo de la accion fitotoxica de herbicidas. |
SE8102193L (sv) | 1981-04-06 | 1982-10-07 | Pharmacia Ab | Terapeutiskt aktiv organisk forening och dess anvendning |
SE8102194L (sv) | 1981-04-06 | 1982-10-07 | Pharmacia Ab | Terapeutiskt aktiv organisk forening och farmaceutisk beredning innehallande denna |
JPS58124773A (ja) | 1982-01-20 | 1983-07-25 | Mitsui Toatsu Chem Inc | 5−メチルチオピリミジン誘導体とその製造法と農園芸用殺菌剤 |
DE3725638A1 (de) | 1987-08-03 | 1989-02-16 | Bayer Ag | Neue aryloxy (bzw. thio)aminopyrimidine |
US5710158A (en) | 1991-05-10 | 1998-01-20 | Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. | Aryl and heteroaryl quinazoline compounds which inhibit EGF and/or PDGF receptor tyrosine kinase |
WO1996014843A2 (en) | 1994-11-10 | 1996-05-23 | Cor Therapeutics, Inc. | Pharmaceutical pyrazole compositions useful as inhibitors of protein kinases |
IL117659A (en) | 1995-04-13 | 2000-12-06 | Dainippon Pharmaceutical Co | Substituted 2-phenyl pyrimidino amino acetamide derivative process for preparing the same and a pharmaceutical composition containing same |
US6716575B2 (en) | 1995-12-18 | 2004-04-06 | Sugen, Inc. | Diagnosis and treatment of AUR1 and/or AUR2 related disorders |
GB9619284D0 (en) | 1996-09-16 | 1996-10-30 | Celltech Therapeutics Ltd | Chemical compounds |
US6267952B1 (en) | 1998-01-09 | 2001-07-31 | Geltex Pharmaceuticals, Inc. | Lipase inhibiting polymers |
US6200977B1 (en) | 1998-02-17 | 2001-03-13 | Tularik Inc. | Pyrimidine derivatives |
AU5777299A (en) | 1998-08-21 | 2000-03-14 | Du Pont Pharmaceuticals Company | Isoxazolo(4,5-d)pyrimidines as CRF antagonists |
US6184226B1 (en) | 1998-08-28 | 2001-02-06 | Scios Inc. | Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α |
GB9828511D0 (en) | 1998-12-24 | 1999-02-17 | Zeneca Ltd | Chemical compounds |
DK1171465T3 (da) | 1999-03-29 | 2004-12-13 | Uutech Ltd | Analoger til gastroinhibitorisk peptid og deres anvendelse til behandling af diabetes |
GB9914258D0 (en) | 1999-06-18 | 1999-08-18 | Celltech Therapeutics Ltd | Chemical compounds |
US20020065270A1 (en) | 1999-12-28 | 2002-05-30 | Moriarty Kevin Joseph | N-heterocyclic inhibitors of TNF-alpha expression |
CN1362953A (zh) | 2000-02-05 | 2002-08-07 | 沃泰克斯药物股份有限公司 | 用作erk抑制剂的吡唑组合物 |
CN1429222A (zh) | 2000-02-17 | 2003-07-09 | 安姆根有限公司 | 激酶抑制剂 |
GB0004887D0 (en) | 2000-03-01 | 2000-04-19 | Astrazeneca Uk Ltd | Chemical compounds |
EP1299381B1 (en) | 2000-06-28 | 2008-05-07 | AstraZeneca AB | Substituted quinazoline derivatives and their use as inhibitors |
US7473691B2 (en) | 2000-09-15 | 2009-01-06 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
DE60122176T2 (de) | 2000-09-15 | 2007-07-05 | Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge | Isoxazole und ihre verwendung als erk-inhibitoren |
AU2001292670A1 (en) | 2000-09-15 | 2002-03-26 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
US6613776B2 (en) | 2000-09-15 | 2003-09-02 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
US6660731B2 (en) | 2000-09-15 | 2003-12-09 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
US6610677B2 (en) | 2000-09-15 | 2003-08-26 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
DE10061863A1 (de) | 2000-12-12 | 2002-06-13 | Basf Ag | Verfahren zur Herstellung von Triethylendiamin (TEDA) |
US6716851B2 (en) | 2000-12-12 | 2004-04-06 | Cytovia, Inc. | Substituted 2-aryl-4-arylaminopyrimidines and analogs as activators or caspases and inducers of apoptosis and the use thereof |
MXPA03005606A (es) | 2000-12-21 | 2003-10-06 | Vertex Pharma | Compuestos de pirazol utiles como inhibidores de la proteina cinasa. |
MY130778A (en) | 2001-02-09 | 2007-07-31 | Vertex Pharma | Heterocyclic inhibitiors of erk2 and uses thereof |
EP1373257B9 (en) | 2001-03-29 | 2008-10-15 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of c-jun n-terminal kinases (jnk) and other protein kinases |
JP2004535381A (ja) | 2001-04-13 | 2004-11-25 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | c−JunN末端キナーゼ(JNK)および他のプロテインキナーゼのインヒビター |
EP1383771A1 (en) | 2001-04-20 | 2004-01-28 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | 9-deazaguanine derivatives as inhibitors of gsk-3 |
CA2446864C (en) | 2001-05-16 | 2011-02-15 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Inhibitors of src and other protein kinases |
ATE432929T1 (de) | 2001-06-15 | 2009-06-15 | Vertex Pharma | 5-(2-aminopyrimidin-4-yl)benzisoxazole als proteinkinasehemmer |
JP4342937B2 (ja) | 2001-07-03 | 2009-10-14 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | SrcおよびLckタンパク質キナーゼの阻害剤としてのイソキサゾールピリミジン |
US6698980B2 (en) | 2001-07-30 | 2004-03-02 | Stewart Mining Products Inc. | Rock stabilizing apparatus and method |
WO2003049739A1 (en) | 2001-12-07 | 2003-06-19 | Vertex Pharmaceuticals, Inc. | Pyrimidine-based compounds useful as gsk-3 inhibitors |
ATE468336T1 (de) | 2002-03-15 | 2010-06-15 | Vertex Pharma | Azolylaminoazine als proteinkinasehemmer |
EP1485100B1 (en) | 2002-03-15 | 2010-05-05 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Azinylaminoazoles as inhibitors of protein kinases |
US7863282B2 (en) | 2003-03-14 | 2011-01-04 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions useful as inhibitors of protein kinases |
AU2003220300A1 (en) | 2002-03-15 | 2003-09-29 | Binch, Hayley | Compositions useful as inhibitors of protein kinases |
EP1485381B8 (en) | 2002-03-15 | 2010-05-12 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Azolylaminoazine as inhibitors of protein kinases |
US20030207873A1 (en) | 2002-04-10 | 2003-11-06 | Edmund Harrington | Inhibitors of Src and other protein kinases |
US7304061B2 (en) | 2002-04-26 | 2007-12-04 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Heterocyclic inhibitors of ERK2 and uses thereof |
MY141867A (en) * | 2002-06-20 | 2010-07-16 | Vertex Pharma | Substituted pyrimidines useful as protein kinase inhibitors |
WO2004005283A1 (en) | 2002-07-09 | 2004-01-15 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Imidazoles, oxazoles and thiazoles with protein kinase inhibiting activities |
DK1532145T3 (da) | 2002-08-02 | 2007-01-15 | Vertex Pharma | Pyrazolpræparater der er anvendelige som inhibitorer af GSK-3 |
AU2003286711A1 (en) | 2002-10-25 | 2004-05-13 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Indazolinone compositions useful as kinase inhibitors |
KR20060123164A (ko) | 2003-10-17 | 2006-12-01 | 아스트라제네카 아베 | 암 치료에 사용하기 위한 4-(피라졸-3-일아미노)피리미딘유도체 |
US7737151B2 (en) | 2005-08-18 | 2010-06-15 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazine kinase inhibitors |
WO2007023382A2 (en) | 2005-08-25 | 2007-03-01 | Pfizer Inc. | Pyrimidine amino pyrazole compounds, potent kinase inhibitors |
KR101487027B1 (ko) | 2005-09-30 | 2015-01-28 | 미카나 테라퓨틱스, 인크. | 치환된 피라졸 화합물 |
SG166827A1 (en) | 2005-11-03 | 2010-12-29 | Vertex Pharma | Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors |
CN101360740A (zh) | 2005-11-16 | 2009-02-04 | 沃泰克斯药物股份有限公司 | 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶 |
CA2668429A1 (en) | 2006-11-02 | 2008-05-15 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Aminopyridines and aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases |
MX2009006690A (es) | 2006-12-19 | 2009-07-31 | Vertex Pharma | Aminopirimidinas utiles como inhibidores de proteinas cinasas. |
MX2009009592A (es) | 2007-03-09 | 2009-11-10 | Vertex Pharma | Aminopiridinas utiles como inhibidores de proteinas cinasas. |
MX2009009590A (es) | 2007-03-09 | 2009-11-10 | Vertex Pharma | Aminopirimidinas utiles como inhibidores de proteinas cinasas. |
MX2009009591A (es) | 2007-03-09 | 2009-11-10 | Vertex Pharma | Aminopirimidinas utiles como inhibidores de proteinas cinasas. |
WO2008115973A2 (en) | 2007-03-20 | 2008-09-25 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors |
CA2683785A1 (en) * | 2007-04-13 | 2008-10-23 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors |
WO2008131103A2 (en) | 2007-04-17 | 2008-10-30 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Drug discovery methods for aurora kinase inhibitors |
MX2009011810A (es) | 2007-05-02 | 2010-01-14 | Vertex Pharma | Tiazoles y pirazoles utiles como inhibidores de cinasa. |
AU2008247594A1 (en) | 2007-05-02 | 2008-11-13 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors |
MX2009011811A (es) | 2007-05-02 | 2010-01-14 | Vertex Pharma | Aminopirimidinas utiles como inhibidores de cinasa. |
JP2010528021A (ja) | 2007-05-24 | 2010-08-19 | バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | キナーゼのインヒビターとして有用なチアゾールおよびピラゾール |
-
2008
- 2008-04-11 CA CA002683785A patent/CA2683785A1/en not_active Abandoned
- 2008-04-11 WO PCT/US2008/059975 patent/WO2008128009A2/en active Application Filing
- 2008-04-11 JP JP2010503221A patent/JP2010523700A/ja active Pending
- 2008-04-11 CN CN200880017700A patent/CN101679386A/zh active Pending
- 2008-04-11 AU AU2008240313A patent/AU2008240313A1/en not_active Abandoned
- 2008-04-11 EP EP08745561A patent/EP2146982A2/en not_active Withdrawn
- 2008-04-11 NZ NZ580343A patent/NZ580343A/en not_active IP Right Cessation
- 2008-04-11 MX MX2009011059A patent/MX2009011059A/es not_active Application Discontinuation
-
2009
- 2009-10-13 US US12/595,703 patent/US8455507B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2013
- 2013-03-18 US US13/845,934 patent/US20130324725A1/en not_active Abandoned
- 2013-09-17 JP JP2013191748A patent/JP2013256532A/ja active Pending
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX2009011059A (es) | 2009-11-26 |
US8455507B2 (en) | 2013-06-04 |
AU2008240313A1 (en) | 2008-10-23 |
WO2008128009A2 (en) | 2008-10-23 |
US20120095014A1 (en) | 2012-04-19 |
EP2146982A2 (en) | 2010-01-27 |
WO2008128009A3 (en) | 2009-01-08 |
US20130324725A1 (en) | 2013-12-05 |
NZ580343A (en) | 2012-03-30 |
JP2013256532A (ja) | 2013-12-26 |
CA2683785A1 (en) | 2008-10-23 |
JP2010523700A (ja) | 2010-07-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101679386A (zh) | 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物 | |
JP5328361B2 (ja) | キナーゼインヒビターとして有用なアミノピリミジン | |
CN101801959A (zh) | 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物 | |
CN101679387A (zh) | 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物 | |
US8404694B2 (en) | Aurora kinase modulators and method of use | |
JP5389785B2 (ja) | キナーゼ阻害剤として有用なチアゾールおよびピラゾール | |
JP5255438B2 (ja) | プロテインキナーゼ阻害薬として有用なベンズイミダゾール | |
CN101675041A (zh) | 用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物 | |
CN101687852A (zh) | 可用作激酶抑制剂的噻唑类和吡唑类化合物 | |
US9126935B2 (en) | Aurora kinase modulators and methods of use | |
EP2321298B1 (en) | Aurora kinase modulators and methods of use | |
CN101321530A (zh) | 用作激酶抑制剂的氨基嘧啶 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: DE Ref document number: 1139659 Country of ref document: HK |
|
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20100324 |
|
REG | Reference to a national code |
Ref country code: HK Ref legal event code: WD Ref document number: 1139659 Country of ref document: HK |