CN101638423A

CN101638423A - 根皮苷衍生物及其制备方法和用途

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Publication number: CN101638423A
Application number: CN200910141450A
Authority: CN
Inventors: 顾书华; 赵维民; 孙伟新
Original assignee: CHANGZHOU HIGH-TECH INDUSTRIAL DEVELOPMENT ZONE SANWEI INDUSTRY TECHNOLOGY RESEARCH Co Ltd
Current assignee: CHANGZHOU HIGH-TECH INDUSTRIAL DEVELOPMENT ZONE SANWEI INDUSTRY TECHNOLOGY RESEARCH Co Ltd
Priority date: 2008-07-29
Filing date: 2009-05-14
Publication date: 2010-02-03
Anticipated expiration: 2029-05-14
Also published as: CN101638423B; WO2010012153A1

Abstract

本发明提供了具有式(I)的结构通式的根皮苷衍生物，其具有抑制SGLT2的作用。该类化合物制备方法容易，可用于治疗糖尿病及其并发症等代谢类疾病。

Description

根皮苷衍生物及其制备方法和用途

技术领域

本发明主要涉及根皮苷衍生物和合成方法、药物组合物及其应用。

背景技术

根皮苷(phlorizin)属于二氢查耳酮类化合物，于19世纪被发现存在于蔷薇科的根茎中(如苹果、梨)。1987年报道根皮苷的衍生物具有治疗镰刀细胞贫血的功效(美国专利US4665058)，同年又有研究发现根皮苷及其衍生物对于癌症的治疗也有疗效(美国专利US4684627)。根皮苷还具有降压降脂作用，根皮苷能阻止糖类成分进入表皮细胞，抑制皮腺的过度分泌，治疗分泌旺盛型粉刺；根皮苷能治疗银屑病(美国专利US4853388)；根皮苷能抑制黑色素细胞活性，对各种皮肤色斑有淡化作用等(美国专利US6093408)；根皮苷对疟疾的治疗有一定功效(欧洲专利EP0046270)；根皮苷对基质金属蛋白酶具有抑制活性(US2004209952)；此外根皮苷提取物还能治疗病理老化的糖基化最终产物，具有增强记忆力、改善学习能力、预防或治疗骨质疏松、降低血糖、老年痴呆和延缓衰老等独特的生理活性和保健功效(美国公开专利US2006189512)。

但是根皮苷不能通过肠道吸收，口服利用率低，限制了其在临床上的应用。为此需要对根皮苷进行进一步研究。

发明内容

本发明对根皮苷进行结构改造，提高了根皮苷的生物利用度。

本发明提供了一类含有氮原子的根皮苷衍生物，是一类结构新颖的SGLT2抑制剂；

本发明提供了一类根皮苷衍生物的制备方法；

本发明提供了一类活性根皮苷衍生物，可使尿葡萄糖增加，抑制肾小管葡萄糖再吸收，并且有优异的降低血糖的活性；

本发明提供了一类含有根皮苷衍生物的药物组合物，其为含有有效治疗量的根皮苷提取物或根皮苷衍生物和可药用载体；

本发明提供了一类根皮苷衍生物或其药学上可接受的盐用来制备治疗糖尿病、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病、糖尿病性神经病、延迟伤口愈合、胰岛素抗性、高血糖、高胰岛素血症、脂肪酸或甘油的水平升高、高脂血症、肥胖症、高甘油三酯血症、动脉粥样硬化、高血压、代谢综合症(X综合症)、糖尿病并发症和肿瘤、骨质疏松、镰刀细胞贫血等多种疾病的药物。

本发明提供了一种药物组合物，其含有SGLT2抑制剂3’-胺亚甲基根皮苷衍生物和一种或多种下列药物：抗糖尿病药物、治疗糖尿病并发症的药物、抗肥胖症药物、抗高血压药物、抗血小板药物、抗动脉粥样硬化药物/或降血脂药物、抗氧化剂、肉碱(尤其是左旋肉碱)、肉碱(尤其是左旋肉碱)衍生物、肉碱棕榈酰转移酶抑制剂、乙酰肉碱兴奋剂、抗肿瘤药物、抗抑郁症药物、抗老年痴呆药物、抗痛风药物、抗骨质疏松药物。

发明描述

本发明涉及式(I)根皮苷衍生物及其药学上可接受的盐：

R为开链或环状的仲胺基或叔胺基结构NR₁R₂，其中

R₁和R₂独立为氢、任意取代的C₁-C₈的烷基，其选自CH₃、CH(CH₂CH₃)₂、CH₂(CH₂)_mCH₃、C₁-C₄烷氧基CH₂O(CH₂)_mCH₃、C₁-C₄烷巯基CH₂S(CH₂)_mCH₃、(CH₂)_mCX₃、(CH₂)_mCN、(CH₂)_mCOOH、C₁-C₄烷酰基(CH₂)_mCOOR¹、(CH₂)_mOH、(CH₂)_mX、SO₂(CH₂)_mCH₃、(CH2)_mSO₂R¹、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、C₁-C₄烷基氨基，其中X为卤素，R¹为C₁-C₄烷基、C₁-C₄烯基、C₁-C₄炔基，m为0-10的整数，n为2-6的整数，a为0-4的整数；或者

R₁及R₂和它们相连的氮原子与氧、硫或氮原子环合成可任选被取代的3-7元的杂环，该类杂环取代基选自：羟基、羧基、氨基、磺酰基、C₁-C₄烷基、羟基C₁-C₄烷基、羧基C₁-C₄烷基、氨基C₁-C₄烷基、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、苯基、C₁-C₄烷氧苯基、羟基C₁-C₄烷基苯基、羧基C₁-C₄烷基苯基、卤代C₁-C₄烷基苯基、苯基C₁-C₄烷基、苯基C₂-C₄烯基、含氧或含氮的C₅-C₆杂环基、含氧或含氮的C₅-C₆杂环羰基、含氧或含氮的C₅-C₆杂环C₁-C₄烷基。

本发明中所述的3-7元的杂环选自哌啶、吗啉、哌嗪、噻唑、咪唑、吡啶、吡咯、四氢吡咯、吡嗪。

式(I)化合物具有抑制哺乳动物的肠道和肾中的钠依赖性葡萄糖转运蛋白的活性，因而用于治疗糖尿病和糖尿病的微血管和大血管并发症，如视网膜病、神经病、肾病和伤口愈合。

本发明提供式(I)的化合物、使用式(I)化合物的药用组合物和使用式(I)化合物的方法。

本发明提供一种治疗或延缓下列疾病的发展或发作的药物，该药物包括对哺乳动物一种或多种疾病或身心状态有效量的式(I)所述的化合物或其光学异构体、对映异构体、非对映异构体、外消旋体或外消旋混合物、酯、前药、或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。该一种或多种疾病或身心状态为：增加高密度脂蛋白的水平、增强记忆力、改善学习能力、衰老、糖尿病(I型和II型)、糖尿病肾病、糖尿病足病、糖尿病视网膜病、糖尿病性神经病、糖尿病并发症、延迟伤口愈合、胰岛素抗性、高血糖、高胰岛素血症、脂肪酸或甘油的水平升高、高脂血症、肥胖症、高甘油三酯血症、动脉粥样硬化、高血压、代谢综合症(X综合症)、贫血(如镰刀细胞贫血)、粉刺、肿瘤、风湿性关节炎、关节炎、肠炎、银屑病、多发性硬化症、神经变性紊乱、充血性心力衰竭、中风、主动脉瓣狭窄、肾炎、肾衰竭、痛风、红斑狼疮、IgA肾病、阑尾炎、胰腺炎、变态反应(如鼻炎、鼻窦炎)、纤维症、骨病、骨质疏松、心血管疾病(如心律失常、心血管休克、心绞痛)、放疗及化疗并发症、肝病(如肝炎)、胃肠道病症(如胃炎和胃肠炎)、结膜炎、斯耶格伦(Sjogren′s)综合症、肺病、肾病(如多囊肾病)、皮炎、HIV相关病症、疟疾(如脑疟)、强直性脊椎炎、麻风病、免疫性疾病、抑郁症、老年痴呆症、水肿、溃疡、精神分裂症、精神障碍性疾病、过敏性休克、尿崩症、哮喘、青光眼、线粒体疾病、帕金森、病理老化的糖基化终端产物、能量代谢异常疾病、基质金属蛋白酶病理性疾病等相关疾病。

此外，根据本发明，提供一种治疗如在此前和此后定义的糖尿病和相关疾病的药物组合物，其中含有有效治疗量的结构式(I)的化合物与抗糖尿病药物和/或其它类型的治疗药物，可用于治疗哺乳动物一种或多种疾病或身心状态：增加高密度脂蛋白的水平、增强记忆力、改善学习能力、衰老、糖尿病(I型和II型)、糖尿病肾病、糖尿病足病、糖尿病视网膜病、糖尿病性神经病、糖尿病并发症、延迟伤口愈合、胰岛素抗性、高血糖、高胰岛素血症、脂肪酸或甘油的水平升高、高脂血症、肥胖症、高甘油三酯血症、动脉粥样硬化、高血压、代谢综合症(X综合症)、贫血(如镰刀细胞贫血)、粉刺、肿瘤、风湿性关节炎、关节炎、肠炎、银屑病、多发性硬化症、神经变性紊乱、充血性心力衰竭、中风、主动脉瓣狭窄、肾炎、肾衰竭、痛风、红斑狼疮、IgA肾病、阑尾炎、胰腺炎、变态反应(如鼻炎、鼻窦炎)、纤维症、骨病、骨质疏松、心血管疾病(如心律失常、心血管休克、心绞痛)、放疗及化疗并发症、肝病(如肝炎)、胃肠道病症(如胃炎和胃肠炎)、结膜炎、斯耶格伦(Sjogren′s)综合症、肺病、肾病(如多囊肾病)、皮炎、HIV相关病症、疟疾(如脑疟)、强直性脊椎炎、麻风病、免疫性疾病、抑郁症、老年痴呆症、水肿、溃疡、精神分裂症、精神障碍性疾病、过敏性休克、尿崩症、哮喘、青光眼、线粒体疾病、帕金森、病理老化的糖基化终端产物、能量代谢异常、基质金属蛋白酶病理性疾病等相关疾病。

本发明所说的哺乳动物包括人、马、猴、猪、鼠、狗、兔等。

本发明所说的化合物(I)的前药包括但不限于化合物(I)的一种或多种醇羟基和/或酚羟基酰化物如乙酰、丙酰、丁酰产物及一种或多种醇羟基和/或酚羟基苄基、甲基、乙基产物等。

本发明所说的病理老化的糖基化终端产物相关疾病包括但不限于糖尿病、老年痴呆症、动脉粥样硬化、肾病、骨关节炎、骨质疏松、衰老等疾病中的一种或多种。

本发明所说的基质金属蛋白酶病理性疾病包括但不限于动脉粥样硬化、中枢神经系统炎症、阿耳茨海默(氏)病、哮喘、皮肤老化、类风湿性关节炎、骨关节炎、骨质疏松、脓毒性关节炎、子宫内膜异位症、角膜溃疡粘连、骨病、蛋白尿、腹主动脉瘤、退化性软骨损耗、多动性硬化症、髓鞘神经耗损、肝纤维化、nephroglomerular病、胚膜破裂、肠炎、牙周病、老年黄斑变性、糖尿病视网膜疾病、视网膜玻璃体增生、视网膜发育不良、眼炎、角膜溃疡、sjogren′s并发症、眼近视瘤、肿瘤转移中的一种或多种。

本发明所说的线粒体疾病包括但不限于眼肌麻痹、肌肉病变、运动失调、癫痫发作、肌阵挛、中风、视神经病变、感音神经性聋、痴呆、周围神经病、肌张力障碍、脊髓病变、心肌病、白内障、色素性视网膜病变、代谢性酸中毒、恶心、呕吐、肝病、肾病、假性肠梗阻、铁粒幼细胞贫血、糖尿病、胰腺外分泌功能障碍和甲状旁腺功能低下症中的一种或多种。

本发明所说的能量代谢异常疾病包括但不限于创伤、缺血及再灌注损伤导致的疾病，如各种急性化学物理因素所致的创伤、中毒、休克、高原病、放射病、尘肺、电击伤、晕动病、急慢性心功能不全，心律失常、心脏传导异常、人工心脏起搏、心血管介入疗法、瓣膜病、动脉粥样硬化、冠心病、(包括猝死)、先天性心脏病、高血压、感染性心内膜炎、肺源性心脏病、心包炎、心肌病、周围血管疾病(包括多发性大动脉炎、雷诺综合症、血栓闭塞性脉管炎、闭塞性动脉硬化等)、心脏移植手术、神经痛、神经炎、各种周围神经病、各种脊髓疾病、急性脑血管疾病(包括脑梗死、脑栓塞、脑出血、蛛网膜下腔出血等)、颅内肿瘤、中枢神经系统感染(包括病毒和细菌性脑炎、脑膜炎等)、运动障碍性疾病(帕金森病、舞蹈病、肝豆状核变性、肌张力障碍、抽搐与振颤)发作性疾病(包括癫痫、偏头痛、发作性睡病与猝倒症等)、脱髓鞘性疾病(包括多发性硬化症、视神经脊髓炎、脑白质营养不良)、骨骼肌肉病(包括肌营养不良症、强直性肌病、重症肌无力、炎症性肌病、代谢性肌病、周期性瘫痪)、自主神经疾病(包括雷诺病、红斑性肢痛、间脑综合症)、弥散性血管内凝血等；胰岛素抵抗及内分泌等因素引起的疾病，如肥胖症、各种原因所致低血糖、胰岛素抵抗综合症、代谢综合症、营养不良(营养不良性干瘦、恶性营养不良、继发性蛋白质能量营养不良)、肠内营养、肠外营养、水电解质代谢紊乱、酸碱平衡紊乱、糖尿病、糖尿病心血管疾病、糖尿病周围神经病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病足、妊娠与糖尿病、糖尿病并发感染、糖尿病急性代谢并发症、乳酸性酸中毒、各型糖原累积病、血脂蛋白紊乱、高氨基酸尿症、黄瘤、粘多糖病、果糖不耐受症、半乳糖血症、其他嘌呤和嘧啶代谢疾病、营养与代谢障碍性皮肤病(维生素缺乏、肠病性肢端皮炎、原发性皮肤淀粉样变、皮肤卟啉病、黄瘤病)、糖尿病视网膜并发症、生长激素缺乏性侏儒症、成年人腺垂体功能减退症、肾上腺病、甲状腺病、甲状旁腺病、卵巢病、性早熟、胰岛内分泌肿瘤、多发性内分泌腺病等疾病；肿瘤等疾病，如各种肿瘤、癌症、肉瘤、血癌、急慢性白细胞及粒细胞性白血病、各种原因所致的贫血(包括骨髓性贫血、再生障碍性贫血、镰状红细胞性贫血)、淋巴组织细胞病、自身免疫性疾病、原发性和继发性免疫缺陷病、肺部肿瘤、肺肉瘤、消化性溃疡、食道癌、胃癌、胃肿瘤、大肠癌、肾脏肿瘤、口腔肿瘤、原发性和继发性肝癌、胆管肿瘤、艾滋病、各种皮肤癌、骨髓肿瘤等疾病；炎症、严重感染和免疫反应导致的疾病，如感染性休克、多脏器功能衰竭、高温、低温综合症、感染性疾病(呼吸道感染、哮喘、严重急性呼吸综合症、病毒性肝炎、流行性腮腺炎、流行性乙型脑炎、狂犬病、脊髓灰质炎、麻疹、风疹、天花、水痘、单纯疱疹、带状疱疹、流行性出血热、黄热病、肠道病毒所致的各系统感染、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、艾滋病、立克次体病、衣原体感染、支原体感染、细菌性疾病(包括结核性疾病厌氧菌感染、败血症、破伤风等)、真菌性疾病、螺旋体病、寄生虫病、各种原因引起的感染性腹泻、急性出血坏死性小肠炎、溃疡性结肠炎、肠梗阻、胃动力性和功能性疾病、急性腹膜炎、急性胰腺炎、各种原因引起肝硬化、脂肪肝、黄疸、腹泻、消化道出血、反流性食管炎、爆发性肝功能衰竭、肝性脑病、胆石病、胆囊炎、急慢性肾功能衰竭、血液净化疗法、急慢性呼吸功能不全、慢性阻塞性肺疾病、支气管哮喘、支气管扩张、各种原因引起的肺炎、肺脓肿、肺水肿、肺栓塞、肺静脉瘘、肺结核、先天性肺发育不全、阻塞性睡眠呼吸暂停综合症、呼吸衰竭、急性呼吸窘迫综合征、急慢性肾炎、肾病综合症、微小病变性肾病、膜性肾病、局灶性肾小球硬化症、系膜增殖性肾小球肾炎、系膜毛细血管增生性肾炎、继发性肾小球疾病、遗传性肾炎、泌尿道感染、间质性肾炎、肾小管疾病、肾石病、牙周脓肿、病毒性皮肤疾病、细菌性皮肤疾病、真菌性皮肤病、荨麻疹类皮肤病、失聪、美尼尔氏综合症、急慢性中耳炎、结膜病、角膜病、白内障、青光眼、葡萄膜病、视网膜病、视神经病、急慢性扁桃体炎、扁桃体脓肿、骨关节炎、代谢性骨病、骨质疏松症、痛风和高尿酸血症、结节病、淀粉样变性、大骨节病、色素性皮肤病(白癜风、黄褐斑、雀斑、黑变病、遗传性大疱性表皮松解症、鱼鳞病、毛周角化病、家族性良性天疱疮、日光性皮肤病、冻疮、放射性皮肤病、痤疮、脂溢性皮炎、斑秃、雄激素源性脱发、风湿热、系统性红斑囊疮、类风湿性关节炎、脊柱关节病、多发性肌炎和皮肌炎、硬皮病和系统性硬化症、过敏性疾病等；各种原因所致线粒体功能障碍导致的退行性病变以及神经精神性疾病，如衰老、阿尔兹海默病、各种原因导致的线粒体疾病，如亨廷顿氏疾病、帕金森病(PD)、肌萎缩性侧索硬化、线粒体脑肌病伴乳酸中毒及中风样发作综合征(MELAS)、肌阵挛性癫痫伴破碎红纤维病(MERRF)、Leber遗传性视神经病(LHON)、线粒体心肌病、肌病、痴呆、突发的不能控制的肌肉收缩(肌阵挛性的癫痫)、精神疾病包括器质性精神障碍(痴呆综合症、谵妄综合症、遗忘综合症、艾滋病所致精神障碍)、精神活性物质所致精神障碍(酒精中毒和酒精依赖、药物依赖)、精神分裂症、情感障碍、神经症性障碍(恐怖症、焦虑症、强迫症、神经衰弱、癔症、疑病症)、进食障碍、睡眠障碍、广泛性发育障碍、精神发育迟滞、多动障碍、抽动障碍、男性性功能障碍等疾病急慢性缺血、创伤、严重感染、糖尿病和肿瘤等。

本发明所说的糖尿病并发症包括但不限于糖尿病肾病、糖尿病足病、糖尿病视网膜病、糖尿病性神经病等与糖尿病相关的微血管疾病。

统称为“X综合症”(也称做代谢综合症)的病症、疾病和疾患是以中心性肥胖为核心，合并血压、血糖、甘油三酯升高和/或HDL-C降低，是胰岛素抵抗所致的糖，脂代谢紊乱，以合并出现多种代谢性疾病为临床特点的一组严重影响健康的症候群。详述于Johannsson J.Clin.Endocrinol.Metab.，82，727-34(1997)中。

此处所用的术语“其它类型的治疗药物”包括治疗糖尿病并发症的药物、抗肥胖症药物、抗高血压药物、抗血小板药物、抗动脉粥样硬化药物/或降血脂药物、抗氧化剂、肉碱(尤其是左旋肉碱)及其相关的盐、肉碱衍生物(尤其是左旋肉碱衍生物如乙酰肉碱、丙酰肉碱)、肉碱棕榈酰转移酶抑制剂、肉碱辛酰基转移酶抑制剂、乙酰肉碱兴奋剂、抗肿瘤药物、抗痛风药物、治疗骨质疏松药物、抗抑郁症药物、治疗贫血药物、治疗老年痴呆症药物、抗炎药物、免疫性药物及根皮苷提取物中的一种或多种。

本发明的活性成分结构式(I)化合物与一种或多种其它类型的治疗药物(取决于其作用模式)的重量比为1∶0.0001-1∶0.1，优选的重量比为1∶0.0001-1∶0.01的范围内。

优选式(I)的化合物：

其中R为开链或环状的仲胺基或叔胺基结构NR1R2。

R₁和R₂独立为氢、低级烷基、取代的低级烷基、取代的低级链烯基、取代的低级链炔基、取代的5-6元的碳环基、取代的杂环基、取代的芳基、或R₁及R₂和它们相连的氮原子分别与氧、硫或氮原子环合成可任意被取代的3-7元的杂环。

最优选式(I)的化合物：

其中R为开链或环状的仲胺基或叔胺基结构NR₁R₂。

发明详述：

本发明的式(I)化合物可以用如下面所示的方法进行制备。

本发明化合物式(I)中的化合物：

可通过始化合物(I-a)与甲醛(或低级烷基醛)及相应的伯胺或仲胺在质子性溶剂中反应进行制备：

伯胺和仲胺是C₁-C₁₀的脂肪胺、氨基酸、芳胺、不饱和脂肪胺、环烷基胺、杂环烷基胺、不饱和环烷基胺、不饱和杂环烷基胺。

溶剂可以是任何不干扰反应的常规溶剂，例如水；醇(例如甲醇、乙醇、丙醇)；酯(例如乙酸乙酯)；卤代烃(例如二氯甲烷)；酰胺类(例如二甲基甲酰胺)；醚类(例如四氢呋喃)；腈类(乙腈)等，或其混合物。

该反应可在低温至加热温度下进行，优选温度为-10℃至100℃，特别优选0℃至80℃。

本发明的化合物(I-a)可通过将蔷薇科或壳斗科植物的根、茎、叶或果实提取后经过大孔树脂或聚酰胺精制而得到高纯度的根皮苷。

本发明中质子性溶剂包括水、吡啶、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、异丁醇、叔丁醇等各种醇类。

本发明中化合物(I-a)与甲醛(或低级烷基醛)及相应的仲胺在质子性溶剂中进行反应则按摩尔比为化合物(I-a)∶甲醛∶仲胺＝1∶1∶1得到相关的化合物(I)。具体流程为：

本发明中化合物(I-a)与甲醛(或低级烷基醛)及相应的伯胺在质子性溶剂中当按摩尔比为化合物(I-a)∶甲醛∶仲胺＝1∶1∶1进行反应则得到相关的化合物(I)，而当按摩尔比为化合物(I-a)∶甲醛∶仲胺＝2∶2∶1进行反应则得到相关的化合物(I)。具体流程为：

本文使用以下缩略语：

CH₂O＝甲醛

HDL-C＝高密度脂蛋白胆固醇

℃＝摄氏度

SGLT＝钠依赖性糖协同转运蛋白

PPAR＝过氧化物酶体增生物激活受体

min＝分钟

h或hr＝小时

L＝升

mL＝毫升

μl＝微升

g＝克

mg＝毫克

mol＝摩尔

mmol＝毫摩尔

nm＝纳米

μM＝微米

TLC＝薄层分析

HPLC＝高效液相色谱

ESIMS＝电喷雾电离质谱

IR＝红外

HNMR＝氢谱

CNMR＝碳谱

m.p＝熔点

DMSO＝二甲亚砜

mRNA＝信使核糖核酸

cDNA＝互补脱氧核糖核酸

除非另外指明，术语“低级烷基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，包括含1-8个碳原子的直链和支链烃，术语“烷基”和“alk”在此单独或作为另一基团的一部分使用时，包括含1-20个碳原子，优选1-10个碳原子，在直链中，更优选1-8个碳原子的直链和支链烃，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基，其各种支链异构体等，以及包括1-4个以下取代基的此类基团：例如卤代基如氟、溴、氯、碘或三氟甲基、烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、二芳基、芳烷基、芳基烷氧基、链烯基、链炔基、环烷基、环烯基、环烷基烷基、环烷基烷氧基、任选取代的氨基、羟基、羟烷基、酰基、链烷酰基、杂芳基、杂芳氧基、杂环烷基、芳基杂芳基、芳烷氧基羰基、杂芳烷基、杂芳烷氧基、芳氧基烷基、芳氧基芳基、烷基氨基、链烷酰基氨基、芳基羰基氨基、硝基、氰基、硫羟基、卤代烷基、三卤代烷基和/或烷硫基。

除非另外说明，术语“环基”或“环烷基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，包括含1-3个环的饱和或部分饱和(含1或2个双键)的环烃基，包括单环烷基、双环烷基和三环烷基，含有形成环的总共3-20个碳原子，优选形成环的3-10个碳原子，所述环可以稠和于1或2个如对芳基所述的芳环上，其包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、环十二烷基、环己烯基、

以上基团中的任何一个可由以下的取代基中任选一个取代：例如卤素、烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳氧基、芳烷基、环烷基、烷基氨基、链烷酰基氨基、氧代基、酰基、芳基羰基氨基、氨基、硝基、氰基、硫羟基和/或烷硫基和/或任何烷基取代基。

术语“环烯基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指含3-12个碳原子，优选5-10个碳原子和1-2个双键的环烃。环烯基包括环戊烯基、环己烯基、环辛烯基、环己二烯基、环庚二烯基，其可如同于环烷基的定义，任选被取代。

术语“链烷酰基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指与羰基链接的烷基。

除非另外说明，术语“低级链烯基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指2-8个碳原子的直链或支链基团，而术语“链烯基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指2-20个碳原子，优选2-12个碳原子，更优选在直链上有2-8个碳原子的直链或支链基团，其包括在直链上的1-6个双键，如乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-辛烯基、4-癸烯基、3-十一烯基、4，8，12-十四碳三烯基，并且这些基团中的任何一个可由1-4个以下的取代基任选取代：例如卤素、烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳氧基、芳烷基、环烷基、烷基氨基、链烷酰基氨基、氧代基、酰基、芳基羰基氨基、氨基、硝基、氰基、硫羟基和/或烷硫基和/或任何烷基取代基。

除非另外说明，术语“低级链炔基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指2-8个碳原子的直链或支链基团，而术语“链炔基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指2-20个碳原子，优选2-12个碳原子，更优选在直链上有2-8个碳原子的直链或支链基团，其包括在直链上的1-2个叁键，如2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、4-戊炔基、2-己炔基、3-辛炔基、4-癸炔基、3-十一炔基、4，8，12-十四碳三炔基，并且这些基团中的任何一个可由1-4个以下的取代基任选取代：例如卤素、烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳氧基、芳烷基、环烷基、烷基氨基、链烷酰基氨基、氧代基、酰基、芳基羰基氨基、氨基、硝基、氰基、硫羟基和/或烷硫基和/或任何烷基取代基。

术语“芳烷基”、“芳链烯基”和“芳链炔基”单独或作为另一个基团的一部分使用时，指具芳基取代基的如上所述的烷基、链烯基和链炔基。

当如上定义的烷基基团具有连接两个不同的碳原子上的其他基团的单键时，它们被称作“亚烷基”并可如上对“烷基”的定义被任意取代。

当如上定义的链烯基和如上定义的链炔基分别具有连接两个不同的碳原子上的单键时，它们被称作“亚链烯基”和“亚链炔基”，并可如上对“链烯基”和“链炔基”的定义被任意取代。

术语“卤素”或“卤代基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指氯、溴、氟和碘。

术语“金属离子”指碱金属离子如钠、钾、锂和碱土金属离子如镁、钙、锌和铝。

除非另外说明，术语“芳基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指在环部分含6-10个碳的单环和双环芳族基团(如苯基或萘基包括1-萘基和2-萘基)，并可任选包括稠和于碳环和杂环的1-3个其他的环(如芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环)，例如

并且可通过可利用的碳原子由选自以下的1、2或3个基团任选取代：氢、卤代基、卤代烷基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、链烯基、三氟甲基、三氟甲氧基、链炔基、环烷基-烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、芳氧基、芳氧基烷基、芳烷氧基、烷氧基羰基、芳基羰基、芳基链烯基、氨基羰基芳基、芳硫基、芳基亚硫酰基、芳基偶氮基、杂芳基烷基、杂芳基链烯基、杂芳基杂芳基、杂芳氧基、羟基、硝基、氰基、氨基、取代的氨基，其中氨基包括1或2个取代基(其为烷基、芳基或定义中提及的任何其他芳基化合物)、硫羟基、烷硫基、芳硫基、杂芳硫基、芳硫基烷基、烷氧基芳硫基、烷基羰基、芳基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基亚硫酰基、芳基亚硫酰基氨基和芳基磺酰氨基羰基和/或在此提出的任何烷基取代基。

除非另外说明，术语“低级烷氧基”、“烷氧基”、“芳氧基”或“芳烷氧基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，包括连接于氧原子的任何上述烷基、芳烷基或芳基。

除非另外的说明，术语“取代的氨基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指由一个或两个取代基取代的氨基，这些取代基可以是相同或不同的，例如烷基、芳基、芳烷基、杂芳基、杂芳烷基、杂环烷基、杂环烷基烷基、环烷基、环烷基烷基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基烷基、硫代烷基。这些取代基可以羧酸和/或上面列出的任何烷基取代基进一步取代。此外，所述氨基取代基可以与它们连接的氮原子一起形成1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-氮杂卓基、4-吗啉基、4-硫代吗啉基、1-哌嗪基、4-烷基-1-哌嗪基、4-芳烷基-1-哌嗪基、4-二芳基烷基-1-哌嗪基，任选由烷基、烷氧基、烷硫基、卤代基、三氟甲基或羟基取代。

除非另外说明，术语“低级烷硫基”、“烷硫基”、“芳硫基”或“芳烷硫基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，包括连接于氧原子的任何上述烷基、芳烷基或芳基。

除非另外说明，术语“低级烷基氨基”、“烷基氨基”、“芳基氨基”或“芳基氨基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，包括连接于氧原子的任何上述烷基、芳烷基或芳基。

除非另外指明，术语“酰基”在此以其本身或作为在此定义的另一个基团的一部分使用时，指连接于羰基的有机基团；酰基的实例包括连接于羰基的任何烷基取代基，如链烷酰基、链烯酰基、芳酰基、芳基链烷酰基、杂芳酰基、环烷酰基、杂环烷酰基。

除非另外说明，术语“杂环基”在此单独或作为另一基团的一部分使用时，指包含1-3个杂原子(如氮、氧和/或硫)的5、6或7元饱和或不饱和的环(包括芳环)，并且这样的环可以稠和于芳基、环烷基、杂芳基或杂环烷基环上(如苯并噻吩和吲哚基)，并且可能包括N-氧化物。所述杂芳基可任选含1-4个取代基，如上述的任何烷基取代基。杂环基的实例包括以下的基团：

等。

术语“杂环烷基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指通过碳原子或杂原子连接于(CH₂)_n链上的如上定义的杂环烷基。

术语“杂芳烷基”或“杂芳链烯基”在此单独或作为另一个基团的一部分使用时，指通过碳原子或杂原子连接于如上定义的(CH₂)_n链、亚烷基或亚链烯基上的如上定义的杂芳基。

术语“5、6、7元碳环或杂环”在此使用时，如上定义的环烷基、环烯基、杂芳基或杂环芳基，如噻二唑、四唑、咪唑或噁唑。

术语“多卤代烷基”在此使用时，指包含2-9个，优选2-5个卤代取代基，如氟或氯，优选氟的如上定义的“烷基”，如CF₃、CF₃CH₂或CF₃CF₂CH₂。

术语“多卤代烷氧基”在此使用时，指包含2-9个，优选2-5个卤代取代基，如氟或氯，优选氟的如上定义的“烷氧基”或“烷基氧基”，如CF₃O、CF₃CH₂O或CF₃CF₂CH₂O。

因此本发明式(I)中R的杂环胺和芳香杂环胺包括但不限于含有或不含氨基取代的基团：氮杂环丁烷基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲嗪基、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、萘并吡啶基、噁二唑基、噁唑啉、异噁唑啉、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、四氢异喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、1，4-二氧杂环己烷基、六氢氮杂卓基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并噁唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异噁唑基、二氢异噻唑基、二氢噁二唑基、二氢噁唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁烷基、亚甲二氧基苯、四氢呋喃基和四氢噻吩基及其N-氧化物。

本发明式(I)中R可以是任意取代的哌嗪包括但不限于4-甲基哌嗪、肉桂基哌嗪、苄基哌嗪、苯基哌嗪、曲美他嗪、环丙沙星、依诺沙星、诺氟沙星、可乐定、2-氧代哌嗪乙酸、哌啶并哌嗪、二苯甲基哌嗪、1-(2-甲氧基苯基)哌嗪、1-(2-氟苯基)哌嗪、1-(2，3-二甲基苯基)哌嗪、1-(2，4-二甲基苯基)哌嗪、1-(3，4-二甲基苯基)哌嗪、N-羟乙基哌嗪、1-(5-甲基-2-吡啶基)哌嗪、2，5-二甲基哌嗪、2，6-二甲基哌嗪、2-甲基哌嗪、1-(2，4-二氟苯基)哌嗪、1-(2，3-二氯苯基)哌嗪、乙氧羰基哌嗪、4-叔丁氧羰基-2-甲基-哌嗪、2-甲基-叔丁氧羰基哌嗪、2-羧基哌嗪、4-N-叔丁氧羰基哌嗪-2-羧酸、1-(2-氯苯基)哌嗪、1-[2-(2-羟基乙氧基)乙基]哌嗪、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪、1-异丙基哌嗪、N-乙酰基哌嗪、2-乙基哌嗪、N-叔丁氧羰基哌嗪、4-N-叔丁氧羰基-2-甲基哌嗪、4-叔丁氧羰基-哌嗪叔丁酰胺、1-(2-氟-4-硝基苯基)哌嗪、1-(3-三氟甲基)苯基哌嗪、4-叔丁氧羰基哌嗪-2-羧酸、1-(2-甲基苯基)哌嗪、1-[3，5-二(三氟甲基)苯基]哌嗪、N-叔丁氧羰基-2-甲基哌嗪、1-环己基哌嗪、1-(噻唑-2-基)哌嗪、1-(2-嘧啶基)哌嗪、1-环戊基哌嗪、N-丙基哌嗪、1-(4-氟苯基)哌嗪、2-氧代-1-哌嗪乙酸、4-苄基-2-(苄氧基甲基)哌嗪、4，4′-二氟苯甲哌嗪、甲酰高哌嗪、1-(2-甲基)苄基哌嗪、1-(4-氯二苯甲基)哌嗪、苄基-1-哌嗪碳酸酯、1-(3-溴苯基)哌嗪、N-1-苄基-3-乙基哌嗪、N-1-苄基-3-甲基哌嗪、哌啶并哌嗪、N-1-苄基-3-异丙基哌嗪、N-叔丁氧羰基-2-乙基哌嗪、1-(吡啶-3-基甲基)哌嗪、1-(2-吡啶基)哌嗪、1-(2-甲氧基苯基)哌嗪、1-(4-甲氧基苯基)哌嗪、1-(4-氯苯基)哌嗪、叔丁基哌嗪、1-叔丁氧羰基-2-乙基哌嗪、1-(2-氯苯基)哌嗪、1-(2-甲基苯基)哌嗪、1-(2-呋喃甲酰基)哌嗪、1-(3，4-二氯苯基)哌嗪、1-(噻唑-2-基)哌嗪、1-叔丁氧羰基-3-乙基哌嗪、2-甲基哌嗪-1-甲酸苄酯、N4-苄基-2-异丁基哌嗪、4-苯甲基-2-哌嗪乙醇、N-叔丁氧羰基-2-苄基哌嗪、N-叔丁氧羰基-3-苯基哌嗪、N-叔丁氧羰基-3-苄基哌嗪、2-苯基哌嗪、1-甲基-3-苯基哌嗪、N-(2，6-二甲基苯基)-1-哌嗪乙酰胺、N-乙基哌嗪、N-异丁基哌嗪、N-丁基哌嗪、N-1-苄基-3-苯基哌嗪、N-1-苄基-2-苯基哌嗪、2-哌嗪酮、1-(6-氯哒嗪-3-基)哌嗪、1-(2-硝基苯基)哌嗪、N-乙基双氧哌嗪、间羟基苯基哌嗪、2-哌嗪基-4-氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、1-(2-呋喃甲酰基)哌嗪、1-(4-硝基苯基)哌嗪、四氢糠酰哌嗪、1-(4-氟苯基)哌嗪、1-(2-氯苯基)哌嗪、N-叔丁氧羰基-2-异丙基哌嗪、N-叔丁氧羰基-2-异丁基哌嗪、4-哌嗪-1-基苯甲腈、4-(1-苄基哌嗪-4-基)哌啶、1，4-苯并二恶烷-2-羰基哌嗪、1-[2-(4-氟苯基)乙基]哌嗪、5-氯-2-甲基苯基哌嗪、N-甲酰基哌嗪、1-(5-硝基吡啶-2-基)哌嗪、1-二苯甲基哌嗪、2-苄基哌嗪、N-1-叔丁氧羰基-2-苯基哌嗪、1-(3-硝基吡啶-2-基)哌嗪、1，2-苯并异噻唑-3-哌嗪、1-(2-三氟甲基苄基)哌嗪等。

本发明中除哌嗪外其它任意取代的杂环胺和芳香杂环胺可以参考如上哌嗪类取代基团进行取代。

本发明式(I)中R优选的取代基团独立地选自N-吗啉基、N-六氢吡啶基、N-四氢吡咯基、N-N-甲基哌嗪基、N-哌嗪基、N-二甲胺基、N-二乙胺基、N-二正丙胺基、N-二异丙胺基、N-二乙醇胺基、N-肌氨酸基、N-肌氨酸甲酯基、N-甲乙胺基、N-双2-氯乙胺基、N-(R)-3-羟甲基哌啶基、N-(S)-3-羟甲基哌啶基、N-3-甲基哌啶基、N-3-羟基哌啶基、N-4-羟基哌啶基、N-D-氨基葡萄糖基、N-曲美他嗪基、N-肉桂哌嗪基、N-苯基哌嗪、N-苄基哌嗪、N-四氢糠酰哌嗪、N-β-丙氨酸基、N-L-天门冬氨酸基、N-赖氨酸、N-氨基己酸。

本发明式(I)中R特别优选的取代基团独立地选自N-吗啉基、N-六氢吡啶基、N-四氢吡咯基、N-N-甲基哌嗪基、N-哌嗪基、N-肌氨酸基、N-甲氨基乙醇基、N-3-甲基哌啶基、N-3-羟甲基哌啶基、N-曲美他嗪基、N-肉桂哌嗪基、N-苯基哌嗪、N-苄基哌嗪、N-四氢糠酰哌嗪、N-β-丙氨酸基、N-L-天门冬氨酸基、N-赖氨酸、N-氨基己酸。

本发明根皮苷衍生物(I)或其药学上可接受的盐包括其分子内盐、其溶剂化物或水合物。

本发明化合物有可能的内盐或两性离子，因在生理条件下，化合物中的去质子化酸性部分例如羧基可以是阴离子，并且该电荷可由质子化或烷基化的碱性部分例如季氮原子的阳离子电荷在内部平衡。具有内部平衡电荷，并因此不与分子间抗衡离子缔合的分离的化合物也可以视为“游离形式”的化合物。

本发明还提供了一种含有根皮苷衍生物或其互变异构体或其药学上可接受的溶剂化物和药学上可接受的载体的药物组合物。

本发明还提供了含有根皮苷衍生物或其互变异构体或其药学上可接受的溶剂化物和药学上可接受的载体的药物组合物的制备方法，此方法包括将根皮苷衍生物或其互变异构体或其药学上可接受的溶剂化物与药学上可接受的载体相混合或者溶解。

此处术语“药学上可接受的”包括人用和兽用的化合物、组合物和组分，如果需要，组合物可以进行包装，并附有书写或者印刷的使用说明。

本发明化合物的可药用盐可以用常规化学方法由包含碱性或酸性部分的本发明的化合物来合成。一般而言，碱性化合物的盐是通过离子交换柱或通过将游离碱与化学计量的或过量的所需的成盐的无机酸或有机酸在适宜的溶剂或溶剂的各种组合中进行反应来进行制备的。类似地，酸性化合物的盐是通过与适宜的无机或有机碱进行反应来形成的。

本发明化合物的可药用盐包括通过将碱性的本发明化合物与无机或有机酸反应而形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规无毒盐包括得自无机酸和有机酸的那些，所述无机酸是例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等，所述有机酸是例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、枸橼酸、富马酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、大黄酸、牛黄酸、齐墩果酸、熊果酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等。

本发明中优选的有机酸或无机酸包括乙酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、枸橼酸、马来酸、水杨酸、大黄酸、牛磺酸、富马酸、草酸、羟乙基磺酸、盐酸、硫酸、磷酸、硝酸。

当本发明化合物是酸性的时，合适的“可药用盐”是指由可药用无毒碱，包括无机碱和有机碱制得的盐。得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、三价铁盐、二价铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、二价锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐是特别优选的。得自可药用无毒有机碱的盐包括下列碱的盐：伯胺、仲胺和叔胺，取代的胺，包括天然取代的胺、环胺和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱，N，N’-二苄基乙二胺、二乙胺、二乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、黄连素、氨基葡糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三-(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)、N-甲基葡萄糖胺(NMG)、三乙醇胺、三丙胺、氨丁三醇和二氢枞胺等。当本发明化合物是酸性的时，术语“游离形式”是指其非盐形式的化合物，这样的酸性官能团仍然是质子化的。

本发明中优选的有机碱或无机碱包括氨基葡糖、甲基葡糖胺、咖啡因、三乙胺、氢氧化钾、氢氧化钠。

上述可药用盐和其它常见的可药用盐的制备由Berg等人，更详细描述在“Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.Sci.，1977：66：1-19中。

本发明化合物包括所有立体异构体，无论是混合物形式或是纯异构体的形式，本发明化合物可以在任何手性碳原子(包括R取代基中的任何一个)上形成不对称中心。这样，式(I)化合物可以以对映体或非对映体形式或其混合物的形式存在。制备方法可以使用外消旋体、对映体或非对映体作为原料。当制备非对映体或对映体产物时，它们可以通过常规方法，例如层析、化学拆分或分级结晶分离。

需要时，作为第一活性成分的治疗有效量的结构(I)的化合物可以用于与作为第二活性成分的一种或一种以上其它类型的抗糖尿病药物和/或一种或一种以上的其它类型的治疗药物的药物组合物联合给药，它们可以以同一剂型、以分开的剂型口服给予或经注射给予。

本发明药物组合物中作为第一活性成分的治疗有效量的结构(I)的化合物和作为第二活性成分的一种或多种其它类型的治疗药物的比例为1∶0.0001-1∶0.01。

本发明中的药物组合物，其中活性成分占组合物重量的0.1-99.9％。

本发明中的药物组合物，最适宜的组合物是制成单位制剂的，单位制剂通常含有活性成分的剂量根据给药途径，患者年龄体重和病情，或被治疗疾病的严重程度而变化，通常对于口服给药，剂量在0.001-1000mg/kg/天，优选为0.01-100mg/kg/天，更优选为0.05-50mg/kg/天。对于非肠道给药，剂量在0.005-100mg/kg/天，优选为0.01-100mg/kg/天，更优选为0.05-5mg/kg/天。

可以任选式(I)化合物的SGLT2抑制剂联合其它类型的抗糖尿病药物，成为药物组合物，其它类型药物可以是一种或更多种抗糖尿病药物或抗高血糖药物，包括胰岛素、胰岛素衍生物、类胰岛素作用剂、胰岛素抵抗改善剂、糖异生抑制剂、糖吸收抑制剂、肾糖再吸收抑制剂、β3肾上腺素受体激动剂、胰岛素促分泌素或胰岛素增敏剂及其它抗糖尿病药物。优选具有与SGLT2抑制剂不同作用机理的抗糖尿病药物，包括双缩胍类、磺酰脲类、葡糖苷酶抑制剂、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂如噻唑烷二酮、aP2抑制剂、PPARα/γ双重激动剂、二肽基肽酶IV(DP4)抑制剂和/或氯茴苯酸，以及胰岛素、胰高血糖素-样肽-1(GLP-1)、蛋白质酪氨酸磷酸酶IB(PTPIB)抑制剂、糖原磷酸化酶抑制剂和/或葡糖-6-磷酸酶抑制剂。

可以任选用于与式(I)的SGLT2抑制剂联合给予的其它类型的治疗药物包括抗肥胖药物、抗高血压药物、抗血小板药物、抗动脉粥样硬化药物和/或降血酯药物。

结构(I)的SGLT2抑制剂也可以任选用于与治疗糖尿病并发症的药物联合给予。这些药物包括PKC抑制剂和/或AGE抑制剂。

结构(I)的化合物与一种或多种其它抗糖尿病药物联合使用产生的抗高血糖效果大于单独使用这些药物的效果，也大于与这些药物产生的联合使用后的抗高血糖效果。

其它的抗糖尿病药物可以是口服降血糖药物，优选双胍类如二甲双胍或苯乙双胍及其盐，最优选二甲双胍盐酸盐。

其它口服的抗糖尿病药物也可优选磺酰脲如格列本脲、格列吡嗪、格列美脲、格列齐特、格列喹酮、氯磺丙脲等，最优选格列本脲和格列美脲。

其它口服的抗糖尿病药物还可优选葡糖苷酶抑制剂如阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇。

其它口服的抗糖尿病药物还可优选噻唑烷二酮如罗格列酮、吡格列酮、恩格列酮、环格列酮、伊格列酮、曲格列酮、法格列酮、Rivoglitazone、Risarestat、达格列酮、NSC363916、BRN3621848、BRN 5769524、BRN 5549627、BRN 5595208、BRN 5600016、AIDS012476、DRF-2189、5-Nmebontd、Add 4743、AD5075、ZINC01166114、ZINC01154723、BAS00285492、BAS 00072174、ZINC05003429、ZINC04645840、DRF 2519、AIDS209583、BRN 6543939、AIDS352729、AIDS352702、AIDS334931等，最优选罗格列酮、吡格列酮、伊格列酮、达格列酮、Rivoglitazone。

磺酰脲和噻唑烷二酮可以以低于约150mg口服抗糖尿病药物的量与结构(I)的化合物一起混合在一个片剂中。

其它口服的抗糖尿病药物还可选自高血糖素-样肽-1(GLP-1)如GLP-1(1-36)酰胺、GLP-1(7-36)酰胺、GLP-1(1-36)酰胺、GLP-1(7-37)酰胺、GLP-1(S3-20-32)、GLP-1(S3-11-14)、GLP-1(S6-14)、GLP-1(S8)(如在Habener的美国专利5614492，中国科学院上海药物研究所的中国公开专利1884278)，以及AC2993(Amylen)和LY-315902(Lilly)，其可通过注射、鼻内、经皮或口腔装置等给予用药。

可任选的本发明式(I)的化合物联合使用的氯茴苯酸优选瑞格列奈、那格列奈、KAD1229(PF/Kissei)，最优选瑞格列奈。

其它口服的抗糖尿病药物也可以是PPARα/γ双重激动剂如AR-HO39242(Astra/Zeneca)、GW-409544(Glaxo-Wellcome)、KRP297(KyorinMerck)以及由Murakami等在“充当过氧化物酶体增殖-激活的α受体(PPRAα)和PPRAγ的共配体(coligand)的新的胰岛素增敏剂。对PPRAα在Zucker肥胖大鼠的肝中激活异常脂质代谢的作用”，Diabetes，47，1841-1847(1998)。

其它的抗糖尿病药物可以是，例如公开于美国申请序列号09/391053(1999年9月7日递交)和美国临时申请号60/127745(1999年4月5日递交)中的aP2抑制剂，采用以上申请中提出的剂型。优选在以上申请中指定为优选的化合物。

其它口服的抗糖尿病药物还可以是DP4抑制剂，如专利WO99/38501、WO99/46272、WO99/67279、由Hughes等，Biochemistry，38(36)，11597-11603，1999年公开的NVP-DPP728A(Novartis)等、由Yamada等，Bioorg. &Med.Chem.Lett.8(1998)1537-1540公开的TSL-225，采用以上参考文献中叙述的剂型。

可任选与本发明的式(I)化合物联合使用的降血脂药或降脂剂包括一种或更多MTP抑制剂、贝丁酸类、HMG-CoA还原酶抑制剂、角鲨烯合成酶抑制剂、烟酸衍生物、LDL受体活性的上调物、脂氧化酶抑制剂、ACAT抑制剂、胆固醇吸收抑制剂、回肠钠⁺/胆酸协同转运蛋白抑制剂、胆酸螯合剂。

降血脂药物可以是MTP抑制剂，包括但不限于US5595872、US5739135、US5712279、US5760246、US5827875、US5885983、US5962440。公开于以上专利的每一个优选的MTP抑制剂均是优选的。以上所有的美国专利结合到本文中。

降血脂药物可以是贝丁酸类，包括但不限于氯贝丁酯、苯扎贝特、非诺贝特、吉非贝齐、环丙贝特、克利贝特、普罗布考。

降血脂药物可以是HMG-CoA还原酶抑制剂，包括但不限于普伐他汀、美伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、cerivastatin、伊伐他汀、尼伐他汀、visastatin、罗苏伐他汀、帕伐他汀等。具体如公开的US3983140中的美伐他汀及相关化合物、公开的US4231938中的洛伐他汀(mevinolin)及相关的化合物、公开的US4346227中的普伐他汀及其相关化合物、公开的US4448784和US4450171中的辛伐他汀及相关化合物、公开的US5354772中的氟伐他汀及相关化合物、公开的US5006530和US5177080中的cerivastatin、公开的US4681893、US5011930、US5273995、US5385929和US5686104中的阿托伐他汀、公开的US5260440中的Shionogi-Astra/Zeneca visastatin(ZD-4522)、公开的US5753675中的相关他汀类化合物、公开的US4613610中的甲羟戊酸内酯(mevalonolactone)衍生物的吡唑类似物、公开的PCT申请WO86/03488中的甲羟戊酸内酯的咪唑类似物、公开的法国专利2596393中的3-羧基-2-羟基-丙烷-膦酸衍生物、公开于欧洲专利申请号0221025中的2，3-二取代的吡咯、呋喃和噻吩衍生物、公开的US4686237中的甲羟戊酸内酯的萘基衍生物、公开的US4499289中的八氢萘、公开的欧洲专利申请号0142146A2中的mevinolin(洛伐他汀)的酮基类似物和US5506219及US5691322中的喹啉和吡啶衍生物。

降血脂药物可以是角鲨烯合成酶抑制剂，包括但不限于美国专利5712396中的α-膦酰基-磺酸酯、由Biller等，J.Med.Chem.，1988，第31卷，10期，1869-1871公开的化合物。

其它降血酯药物包括但不限于胆酸鏊合剂如考来烯胺、考来替泊，胆固醇吸收抑制剂如依替米贝，烟酸类如烟酸、阿昔莫司及其它药物如普罗布考、泛硫乙胺等。

其它的降血脂药也可以是脂氧化酶抑制剂，包括15-脂氧化酶(15-LO)抑制剂如公开于WO97/12615中的苯并咪唑衍生物、公开于WO97/12613中的15-LO抑制剂、公开于96/38144中的异噻唑酮以及如由Sendobry等“用缺乏显著抗氧化剂特性的高度选择性的15-脂氧化酶抑制剂在兔中减弱食物诱导的动脉粥样硬化”，Brit.J.Pharmacology(1997)120，1199-1206，和Cornicelli等，“15-脂氧化酶及其抑制作用：一种新的血管疾病的治疗剂”，Current PharmceuticalDesign，1999，5，11-20中公开的LO-15抑制剂。

式(I)化合物和降血脂药可以以同一口服剂型一起使用或在相同的时间以分开的口服剂型服用。

优选的降血脂药物为普伐他汀、辛伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀、氟伐他汀、cerivastatin、伊伐他汀、尼伐他汀、visastatin、罗苏伐他汀、帕伐他汀。

可任选与本发明的式(I)化合物联合使用的抗肥胖药物包括一种或更多β3肾上腺素能激动剂、脂酶抑制剂、血清素(和多巴胺)重摄取抑制剂、甲状腺β受体药物、减食欲剂、NPY拮抗剂、MC4激动剂。

抗肥胖药物可以是β3肾上腺素能激动剂，包括但不限于AJ9677(Takeda/Dainippon)、L750355(Merck)、以及US5541204、US5770615、US5491134、US5776983和US5488064中的β3肾上腺素能激动剂。

抗肥胖药物可以是脂酶抑制剂，包括但不限于奥利司他、ATL-962(Alizyme)。

抗肥胖药物可以是血清素(和多巴胺)重摄取抑制剂包括但不限于西布曲明、托吡酯、axokine。

其它抗肥胖药包括但不限于减食欲剂如右苯丙胺、芬特明、苯丙醇胺、马吲哚。

可任选与本发明的式(I)化合物联合使用的抗血小板药物包括阿昔单抗、噻氯匹定、双密达莫、阿司匹林、阿那格雷、tirofiban、eptifibatide、氯吡格雷。

可任选与本发明的式(I)化合物联合使用的抗高血压药物包括ACE抑制剂如依那普利、卡托普利、喹那普利、贝那普利、培哚普利，钙拮抗剂如氨氯地平、硝苯地平、尼群地平、尼莫地平、尼卡地平、地尔硫卓、维拉帕米，α-阻断剂包括特拉唑嗪、多沙唑嗪、哌唑嗪，利尿剂包括氢氯噻嗪、呋塞咪、螺内酯、吲达帕胺、阿米洛利，中枢系统作用剂包括利血平、可乐定、胍法辛，血管紧张素II拮抗剂包括氯沙坦、缬沙坦、替米沙坦，β-阻断剂包括米托洛尔、普萘洛尔、阿替洛尔、卡维地洛、索他洛尔，血管肽酶抑制剂包括omapatrilat、gemopatrilat。

肉碱衍生物包括但不限于肉碱、左卡尼汀、盐酸左卡尼汀、氯化左卡尼汀、乙酰左卡尼汀、丙酰左卡尼汀、丁酰左卡尼汀等，优选左卡尼汀。

肉碱棕榈酰转移酶抑制剂包括但不限于丙二酰辅酶A、琥珀酰辅酶A、甲基丙二酰辅酶A、2-溴棕榈酸、益托某西尔、缩水甘油(如clomoxir，etomoxir)等(张芳林等，国外医学内分泌手册，2005，22(3)：166-169)。

本发明的式(I)化合物联合使用的治疗贫血药物包括但不限于硫酸亚铁、富马酸亚铁、右旋糖酐铁、山梨醇枸橼酸铁、维生素、糖皮质激素、雄激素、促红细胞生成素、叶酸、维生素B12。

本发明的式(I)化合物联合使用的治疗痛风药物包括但不限于秋水仙碱、消炎痛、布洛芬、萘普生、保泰松、扶他林、炎痛喜康、西乐花、美络昔康、别嘌呤醇、枸橼酸钾、碳酸氢钠、丙磺舒、苯溴马隆、硫氧唑酮、磺酰吡唑、痛风利仙等。

本发明的式(I)化合物联合使用的抗抑郁症药物为三环类、单胺氧化酶抑制剂、5-羟色胺再摄取抑制剂、乙酰胆碱再摄取抑制剂等。

抗抑郁症药物可以是三环类药物，包括但不限于丙咪嗪、氯丙咪嗪、阿米替林、多虑平、去甲丙咪嗪、去甲替林。

抗抑郁症药物可以是四环类药物，包括但不限于米安色林、马普替林。

抗抑郁症药物可以是单胺氧化酶抑制剂，包括但不限于苯乙肼、超苯环丙胺、吗氯贝胺。

抗抑郁症药物可以是选择性5-HT再摄取抑制剂，包括但不限于氟西汀、帕罗西定、舍曲林、西酞普兰、伏氟沙明。

抗抑郁症药物可以是5-HT和NE再摄取抑制剂，包括但不限于文拉法辛、万拉法新。

抗抑郁症药物还可以是其它药物，包括但不限于瑞波西汀、布普品、曲唑酮、奈法唑酮、米它扎平、路优泰、安非拉酮。

本发明的式(I)化合物联合使用的治疗痴呆症药物包括但不限于四氢氨基吖啶(他克林)、四羟氨基吖啶、毒扁豆碱、庚烯毒扁豆碱、加兰他敏、美曲磷脂(敌百虫)、盐酸多奈哌齐、石杉碱甲、重酒石酸卡拉巴汀、占诺美林、利培酮、吗氯贝胺、拉扎贝胺、沙贝鲁唑、依斯的明、司来吉兰、丙戊茶碱、新曲非思、安帕来斯、奈非西坦、利诺吡啶、孟替瑞林、氮替瑞林、奥氮平、ZT-1、普拉西坦、二苯美仑、依昔苯酮、茚洛嗪、甲氯芬酯、吡拉西坦、吡硫醇、乙酰谷酰胺、克脑迷、胞磷胆碱、茴拉西坦、尼莫地平、乙酰-L-肉毒碱、L-肉毒碱、尼麦角林、利伐司替明、Sabcomedine hydrochloricde、SR-46659A、SB202026、ENS163、LY246078、Dup996、RU35906、Milameline、Talsaclidine。

本发明的式(I)化合物联合使用的治疗骨质疏松药物为骨吸收抑制剂、骨形成促进剂、骨矿化物质及其它治疗骨质疏松药物。

骨吸收抑制剂包括但不限于双膦酸盐、雌激素、降钙素、孕激素、异黄酮、锶盐。

双膦酸盐包括但不限于依替膦酸盐、氯膦酸盐、替鲁膦酸盐、帕米膦酸盐、阿仑膦酸盐、利塞膦酸盐、incadronate、唑来膦酸盐、dtidronate、伊班膦酸盐。

雌激素包括但不限于雷洛昔芬、克洛米芬(舒筋芬)、他莫昔芬、droloxifene、noforxidine、艾多昔芬、巴多昔芬、拉索昔芬、替勃龙、尼尔雌醇。

降钙素包括但不限于密钙息、益钙宁、salcatonin。

骨形成促进剂包括但不限于氟化物(特乐定)、甲状旁腺激素(PTH)、同化类固醇药物、人免疫球蛋白(IGF)。

其它治疗骨质疏松的药物还可以是他汀类，丙氨酰组氨酸锌(AHZ)、组织蛋白酶K抑制剂、内皮整合素受体阻断剂、神经肽、生长因子(胰岛素样生长因子、转化生长因子、骨形态发生蛋白)、骨保护素(osteoprotegerin OPG)。

本发明的式(I)化合物联合使用的抗炎药物包括但不限于阿司匹林、保泰松、萘普生、芬布芬、布洛芬、吲哚美辛、萘丁酮、二氟尼柳、对乙酰氨基酚、贝诺酯、水杨酸、依托芬那酯、依托度酸、酮洛芬、双氯芬酸、青霉胺、塞来昔布、尼美舒利、美洛昔康、洛索洛芬、来氟米特、非普拉宗、苯并氧酰胺、奥沙普嗪、舒林酸、安替比林、金诺芬、吡罗昔康、咪唑酯、托美汀、甲氯芬那酸、阿西美辛。

本发明的式(I)化合物联合使用的抗肿瘤药物可以为烷化剂、抗肿瘤抗生素、二氢叶酸还原酶抑制剂、嘌呤类、嘧啶类、拓扑异构酶抑制剂、肿瘤新生血管生成抑制剂、天然药物等。

烷化剂包括但不限于环磷酰胺、氮芥、噻替派、萘达铂、奥沙利铂、美法仑、氮甲、卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、尼莫司汀、雷莫司汀、特莫唑胺、米托唑酶胺、特洛西酮、白消胺。

抗肿瘤抗生素包括但不限于阿霉素、丝裂霉素、争光霉素、正定霉素、表柔比星、丝裂霉素、柔红霉素、阿克拉霉素、洋红霉素、米托蒽醌、依达柔比星、吡柔比星、戊柔吡星。

二氢叶酸还原酶抑制剂包括但不限于甲氨碟呤、六甲蜜胺。

嘌呤类药物包括但不限于巯嘌呤。

嘧啶类药物包括但不限于氟尿嘧啶、卡莫氟。

抗肿瘤天然药物包括但不限于喜树碱、长春新碱、紫杉醇、秋水仙碱、绿舒筋、复方醋酸棉酚、康莱特(薏苡仁提取物)、榄香烯(莪术油提取物)、三尖杉酯碱、猪苓多糖、茯苓多糖、香菇多糖、人参多糖、银耳多糖、云芝多糖、地黄多糖、枸杞多糖、猕猴桃多糖、黄芪多糖、当归多糖、绞股蓝多糖、竹荪多糖、刺五加多糖、牛膝多糖等。

拓扑异构酶抑制剂包括但不限于伊立替康、拓扑替康和芦比替坎。

肿瘤新生血管生成抑制剂包括但不限于舒拉明、沙利度胺、夫马洁林、单克隆抗体、巴马司他、马立马司他。

本发明化合物(I)用来制备治疗肿瘤的药物，其中肿瘤包括急性粒细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、肾透明性癌、乳腺癌、淋巴细胞白血病、前列腺癌、肝癌、淋巴瘤、肺癌、胃癌、食道癌、结肠癌等多种肿瘤。

本发明的式(I)化合物联合使用的免疫抑制药物包括但不限于泼尼松、强的松龙、地塞米松、氢化可的松、达那唑、环磷酰胺、环孢菌素A、霉酚酸酯、来氟米特、雷公藤，硫唑嘌呤、肝素-华法林、双密达莫、他克莫司、西罗莫司、康乐霉素C、咪唑立宾、免疫球蛋白、二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸(DHA)、益赛普、达昔单抗、利妥昔单抗、英夫利昔单抗、干扰素。

本发明的式(I)化合物联合使用的抗氧化剂包括但不限于谷胱甘肽、维生素E、维生素C、维生素A、超氧化物歧化酶(SOD)、奥古蛋白、血球铜蛋白、茶多酚、牛磺酸、尿酸、疏基蛋白、丙丁酚、谷氨酸酯、琥珀酸酯、泛醌、叶绿醌、辅酶Q、高半胱氨酸、甲基萘醌、α-硫辛酸、丹曲林、多苯酚类黄酮、卵磷脂、熊去氧胆酸、辅酶A、亚油酸、硫酸软骨素、齐墩果酸、肌醇、水飞蓟素、联苯双酯、门冬氨酸钾镁、甘草甜素、蛋氨酸、核酸、葡萄糖醛酸内酯、维丙胺、甘草酸、免疫球蛋白等。

本发明药物组合物制备成药物制剂，该制剂剂型包括口服给药制剂、注射给药制剂或局部给药制剂，其中：

(1)口服给药制剂包括普通片、缓释片、颗粒剂、硬或软胶囊、糖浆剂、溶液剂、乳剂；口服给药制剂的载体包括填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、着色剂、矫味剂或者其他常规添加剂，具体包括淀粉、乳糖、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙甲纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅和聚山梨脂-80、十二烷基硫酸钠；

(2)注射给药制剂包括无菌注射的水溶液、无菌注射的水包油微乳液、注射用无菌粉末；注射给药制剂的载体包括注射用溶剂、注射用附加剂，具体注射溶剂包括注射用水、注射用油如大豆油，注射用增溶剂如乙醇、丙二醇、聚乙二醇、甘油，等渗物质如氯化钠、葡萄糖；

(3)局部给药制剂是贴剂、栓剂、霜剂、膏剂、凝胶剂、溶液、混悬液或靶向制剂，其中靶向制剂包括脂质体、微球剂、毫微粒、包含物、单克隆抗体耦联物；局部给药制剂的载体包括药学上用于局部给药的常规载体。

本发明的药物制剂给药形式包括：静脉、肌内、腹膜、皮下、口服、直肠栓剂插入法、阴道栓剂插入法、靶向给药、吸入式、灌胃式、鼻饲式、舌下给药、滴药法、微针式给药、连续给药系统和局部给药，局部给药方式如贴皮制剂、或植入式连续给药释放系统，其中贴皮制剂载体包括骨架材料如疏水的聚硅氧烷和亲水的聚乙烯醇等，控释膜材料如聚硅氧烷和乙烯-醋酸乙烯共聚物等，压敏胶如聚异丁烯、聚硅氧烷和聚丙烯酸酯，活性成分一般分散在压敏胶中；其中植入式连续给药释放系统所选用的高分子材料包括聚乳酸一乙醇酸共聚物、聚乙二醇聚乳酸共聚物、聚乳酸/聚己内酯、聚[碳酸(亚丁酯-co-ε-己内酯)酯]、聚丁内酯戊内酯、聚二氧环己酮(PDS)、聚-3-羟基丁酸酯(PHB)、聚左旋乳酸(PLLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚ε-己内酯(PCL)、聚己内酯/聚乙交酯丙交酯(PCL/PLGA)、甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)。

在实施本发明的方法中，将使用含与药学上可接受的载体或稀释剂结合的结构(I)化合物的药用组合物，该组合物可含有或不含有另一种抗糖尿病药物和/或抗高血脂药物，或其它类型的治疗药物。使用常规的固体或液体载体或稀释剂以及适合于所需给药方式的某种类型的药用添加剂，可以配置成药用组合物。该化合物可以以例如片剂、胶囊、颗粒剂或散剂的形式，通过口服途径给予哺乳动物等，包括人、猴、狗、猪、鼠等，或者它们可以以注射制剂的形式经胃肠外途径给予，或者它们可以经鼻腔或以经皮贴剂的形式给予。对于成人，剂量优选在10-2000mg/日之间，其可以单一剂量或以分开的剂量的形式，每日1-4次给予。

本发明化合物的SGLT2抑制剂活性可通过使用如下所述的测定系统测定。

SGLT2活性的测定

采用标准分子生物学技术，通过逆转录和扩增，从人肾mRNA克隆人SGLT2的mRNA序列(GenBank#M95549)。cDNA序列被稳定地转染至CHO细胞中，基本如Ryan(1994)所述，对克隆物进行SGLT2活性的测定。基本如Ryan等所述，但作了以下修改，在克隆选择的细胞系中，进行SGLT2活性的抑制作用的评价。在96-孔板上，在F-12营养混合物(Ham’s F-12)、10％胎牛血清、300μg/ml遗传霉素和青霉素-链霉素中，使细胞生长2-4天，以达到每孔75000或30000个细胞。汇合后，用10mM Hepes/Tris(pH7.4)，137mM N-甲基-D-葡糖胺、5.4mM氯化钾、2.8mM氯化钙、1.2mM硫酸镁洗涤细胞两次。然后于37℃，使细胞与10μM[14C]AMG和10μM抑制剂(最终DMSO＝0.5％)在10mM Hepes/Tris(pH7.4)，137mM氯化钠、5.4mM氯化钾、2.8mM氯化钙、1.2mM硫酸镁中孵育1.5小时。用含0.5mM根皮苷的冰冷的1×PBS猝灭摄取测定物，然后用0.1％氢氧化钠溶解细胞。假如MicroScint闪烁液体后，使细胞振摇1小时，然后在TopCount闪烁计数器上对[¹⁴C]AMG定量。对照试验可在有和无氯化钠的情况下进行。对于EC50值的测定，在合适的响应范围内，以2log间隔，采用10个抑制剂浓度，在测定板上对一式三份板进行平均(Ryan MJ，Johnson G，Kirk J，FuerstenbergSM，Zager RA和Torok-Storb B.1994.HK-2：一种得自正常成人肾的无限增殖化近端小管上皮细胞系。Kidney International 45：48-57)。

附图说明

图1给药前体重曲线

图2STZ注射前每周进食量统计

图33’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷对体重的影响

图4Contro组He染色x200

图5Model组He染色x200

图6Gen-S组He染色x200

图7Gen-H组He染色x200

图8Contro组He染色x400

图9Model组He染色x400

图10Gen-S组He染色x400

图11Gen-H组He染色x400

具体实施方式

本发明将结合实施例作进一步的说明。

本发明的分子结构有的存在立体异构体，它们通过手性试剂定向合成、化学拆分或经手性柱制得单纯的立体异构体，这些立体异构体在本实施例中未全部说明，但不限制本发明。

实施例1 3’-(四氢吡咯-1-基-亚甲基)根皮苷的制备

将根皮苷(0.25g，0.58mmol)溶于25mL无水乙醇中倒入圆底烧瓶中，置磁力搅拌器搅拌，控制温度在3-10℃，向根皮苷乙醇溶液中缓慢滴加37％甲醛水溶液(0.059mL，0.87mmol)，继续搅拌30min。再缓慢滴加吡咯烷(0.066mL，0.87mmol)，控制温度在0～70℃，继续搅拌反应60min，反应结束将母液置60℃真空蒸干，加10mL水溶解产物，有白色产物析出，充分振摇(搅拌)2小时使产物完全析出，抽滤得白色固体粉末，在白色固体粉末中加入2mL水在60℃水浴中搅拌并滴加甲醇使其溶解，冷却静置析出白色针状晶体，抽滤后70℃真空干燥4小时得白色针状晶体。称重0.13g，得率为52％。

m.p.194.5-196.5℃

HPLC检验仪器：岛津LC-10A，色谱柱：C18柱(4.6*150mm，5μm)，流速：1.0ml/min，柱温：40℃，检测波长：284nm，流动相：60％磷酸水溶液(2mmol/L)+40％甲醇，保留时间：2.953min

Element Analyzing：C 58.46％，H 6.55％，O 32.48％，N 2.51％

ESI-MS(m/z)：518[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：520[(M+1)⁺]和ESI-MS(m/z)：542[(M+Na)⁺]

IR cm^-1：3408，3300，1616，1547，1517，1079，1046，989，832

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.83(4H，s)，2.79(2H，t，J＝7.4Hz)，2.86(4H，s)，3.16-3.71(8H，m)，3.91(2H，s)，4.92(1H，d，J＝7.3Hz)，5.91(1H，s)，6.64(2H，d，8.4Hz)，7.04(2H，d，J＝8.4Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：23.0(×2)，29.4，44.3，49.7，52.7(×2)，60.6，69.5，73.2，76.7，77.2，95.6，100.4，100.6，102.3，115.0(×2)，129.1(×2)，131.8，155.3，160.4，163.9，170.6，202.6

实施例2 3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷的制备

对根皮苷∶甲醛∶六氢吡啶＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例1的操作方法进行，得到白色针状晶体，得率为80％。

m.p.184.2-186.0℃

HPLC检验仪器：岛津LC-10A，色谱柱：C18柱(4.6*150mm，5um)，流速：1ml/min，柱温：35℃，检测波长：284nm，流动相：80％水，20％甲醇～40％水，60％甲醇，0～16min，保留时间：14.707min

Element Analyzing：C 58.83％，H 6.92％，O 31.74％，N 2.51％

ESI-MS(m/z)：532[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：534[(M+1)⁺]和ESI-MS(m/z)：556[(M+Na)⁺]

IR cm^-1：3360，1616，1543，1517，1078，987，832

¹H-NMR(DMSO-d6)δ：1.45(2H，m)，1.56(4H，m)，2.59(4H，s)，2.79(2H，t，J＝7.4Hz)，3.15-3.71(8H，m)，3.73(2H，s)，4.95(1H，d，J＝7.3Hz)，6.00(1H，s)，6.65(2H，d，8.4Hz)，7.04(2H，d，J＝8.4Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d6)δ：23.0，24.8(×2)，29.2，44.7，52.6(×2)，53.2，60.6，69.6，73.2，76.7，77.2，94.9，100.2，100.6，103.5，115.0(×2)，129.1(×2)，131.6，155.3，160.0，163.3，168.2，203.9

实施例3 3’-(4-甲基哌嗪-1-基-亚甲基)根皮苷的制备

将根皮苷(0.25g，0.58mmol)溶于25mL无水异丙醇中倒入圆底烧瓶中，置磁力搅拌器搅拌，控制温度在3～10℃，向根皮苷乙醇溶液中缓慢滴加37％甲醛水溶液(0.059mL，0.87mmol)，继续搅拌20min。再缓慢滴加N-甲基哌嗪(0.096mL，0.87mmol)，控制温度在3-10℃，继续搅拌反应60min，反应结束将母液置40℃真空蒸干，加入适量甲醇重结晶得到淡黄色簇晶。称重0.2g，得率为80％。

m.p.138.0～140.0℃

HPLC检验仪器：岛津LC-10A，色谱柱：C18柱(4.6*150mm，5um)，流速：0.8ml/min，柱温：40℃，检测波长：284nm，流动相：70％磷酸水溶液(2mmol/L)+30％甲醇，保留时间：3.581min

Element Analyzing：C 54.54％，H 7.02％，O 33.78％，N 4.66％

ESI-MS(m/z)：547[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：549[(M+1)⁺]

IR cm-1：3433，3401，1613，1538，1514，1212，1074

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.17(3H，s)，2.36(4H，s)，2.55(4H，s)，2.79(2H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.69(2H，s)，4.96(1H，d，J＝7.3Hz)，6.09(1H，s)，6.65(2H，d，8.4Hz)，7.04(2H，d，J＝8.4Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：29.1，44.9，45.4，51.7(×2)，52.2，54.3(×2)，60.7，69.6，73.2，76.7，77.3，94.5，100.7，101.0，104.3，115.0(×2)，129.2(×2)，131.6，155.3，159.9，163.1，165.0，204.7

实施例4 3’-(吗啉-1-基-亚甲基)根皮苷的制备

对根皮苷∶甲醛∶吗啉＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例3的操作方法进行，得到淡黄色针状晶体，得率为80％。

Element Analyzing：C 54.54％，H 7.02％，O 33.78％，N 4.66％

ESI-MS(m/z)：534[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：536[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.50(4H，s)，2.79(2H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(12H，m)，3.65(2H，s)，4.95(1H，d，J＝7.1Hz)，6.12(1H，s)，6.64(2H，d，8.2Hz)，7.03(2H，d，J＝8.2Hz)

实施例5 3’-(N，N-二乙胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，只是用N，N-二乙胺代替四氢吡咯。得到淡黄色结晶，得率为58％。

Element Analyzing：C 59.87％，H 6.76％，O 30.68％，N 2.69％

ESI-MS(m/z)：520[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：522[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.08(6H，t)，2.71(4H，q)，2.78(2H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.82(2H，s)，4.93(1H，d，J＝7.2Hz)，5.93(1H，s)，6.64(2H，d，8.4Hz)，7.03(2H，d，J＝8.4Hz)

实施例6 3’-(N-甲基-N-β-羟乙胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，只是用N-甲基-N-β-羟乙胺代替四氢吡咯。得到淡黄色结晶，得率为62％。

Element Analyzing：C 57.35％，H 6.35％，O 33.62％，N 2.68％

ESI-MS(m/z)：522[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：524[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.27(3H，s)，2.55(2H，t，J＝6.5Hz)，2.74(2H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.63(2H，t，J＝6.5Hz)，3.64(2H，s)，4.94(1H，d，J＝7.4Hz)，6.08(1H，s)，6.67(2H，d，8.4Hz)，7.02(2H，d，J＝8.4Hz)

实施例7 3’-(N-甲基-N-羧甲基胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，只是用肌氨酸代替四氢吡咯。得到淡黄色结晶，得率为54％。

Element Analyzing：C 55.86％，H 5.81％，O 35.72％，N 2.61％

ESI-MS(m/z)：536[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：538[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.27(3H，s)，2.74(2H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.30(2H，s)，3.62(2H，s)，4.96(1H，d，J＝7.4Hz)，6.12(1H，s)，6.68(2H，d，8.4Hz)，7.02(2H，d，J＝8.4Hz)

实施例8 3’-(哌嗪-1-基-亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，只是用哌嗪代替四氢吡咯。得到淡黄色粉末，得率为73％。

Element Analyzing：C 58.42％，H 6.41％，O 29.93％，N 5.24％

ESI-MS(m/z)：533[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：535[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.41(4H，s)，2.54(4H，s)2.78(2H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.70(2H，s)，4.95(1H，d，J＝7.4Hz)，6.09(1H，s)，6.64(2H，d，8.4Hz)，7.03(2H，d，J＝8.4Hz)

实施例9 3’-(N-葡萄糖氨基-亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，只是用哌嗪代替四氢吡咯。得到淡黄色粉末，得率为83％。

Element Analyzing：C 53.59％，H 5.94％，O 38.24％，N 2.23％

ESI-MS(m/z)：626[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：628[(M+1)+]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.78(2H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(14H，m)，3.68(2H，s)，4.95(1H，d，J＝7.4Hz)，5.01(1H，d，J＝7.5Hz)，6.02(1H，s)，6.62(2H，d，8.4Hz)，7.06(2H，d，J＝8.4Hz)

实施例10 3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷的制备

称取根皮苷2.5g于250ml的圆底烧瓶中，加入30ml乙醇溶解并常温搅拌使均匀；向乙醇溶液中滴加1.5ml的37％甲醛水溶液充分搅拌10分钟；向该圆底烧瓶中滴加溶有2.3g盐酸曲美他嗪的15ml水溶液，并常温搅拌2-3小时。在35-40℃减压浓缩反应液至干，用乙醇溶解后滴加丙酮溶液至析出白色固体，抽滤并在40℃真空烘箱中干燥即得白色粉末。

分子量：714，分子式为：C₃₆H₄₆N₂O₁₃；

Element Analyzing(元素分析)：C 60.49％，H 6.49％，N 3.92％，O 29.10％；

ESI-MS(m/s)：713[M-1]⁺；

¹H-NMR(D₂O)δ：7.05(1H，d，J＝8.7Hz)，6.90(2H，d，J＝8.5Hz)，6.75(1H，d，J＝8.7Hz)，6.59(2H，d，J＝8.5Hz)，6.18(1H，s)，5.09(1H，d，J＝7.6Hz)，4.25(2H，s)，4.18(2H，s)，3.78(3H，s)，3.73(3H，s)，3.71(3H，s)，3.21-3.84(6H，m)，3.40-3.46(8H，m)，3.40-3.46(2H，t，J＝7.2Hz)，2.65(2H，t，J＝7.2Hz)。

¹³C-NMR(D₂O)δ：206.7，164.9，163.5，161.5，155.5，153.6，152.4，141.1，133.1，129.6(×2)，128.1，115.3(×2)，113.5，108.4，105.3，99.5，97.0，93.8，76.5，76.1，72.7，69.3，61.6，61.5，61.0，60.8，56.1，47.8，45.0，33.5，29.3，18.4。

实施例11 3’-(脯氨酸-1-基-亚甲基)根皮苷的制备

对根皮苷∶甲醛∶脯氨酸＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为80％。

分子量563 分子式C₂₇H₃₃NO₁₂

Element Analyzing：C 57.54％，H 5.90％，O 34.07％，N 2.49％

ESI-MS(m/z)：562[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：564[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.83(4H，m)，2.2(2H，t，J＝6.5Hz)，2.79(2H，t，J＝7.4Hz)，3.12(1H，t，J＝6.8Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.68(2H，s)，4.92(1H，d，J＝7.3Hz)，6.06(1H，s)，6.64(2H，d，J＝8.4Hz)，7.04(2H，d，J＝8.4Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：23.0，29.4，30.6，44.5，44.7，55.0，62.2，66.7，71.5，73.4，76.8，77.8，94.3，101.0，101.8，102.5，115.0(×2)，129.1(×2)，133.9，155.7，158.1，162.2，162.3，174.7，205.4

实施例12 根皮苷氨基己酸衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶氨基己酸＝2∶2∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为70％。

分子量1027 分子式C₅₀H₆₁NO₂₂

Element Analyzing：C 58.42％，H 5.98％，O 34.24％，N 1.36％

ESI-MS(m/z)：1026[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：1028[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.29-1.52(6H，m)，2.30(2H，t，J＝6.5Hz)，2.46(2H，t，J＝6.8Hz)，2.79(4H，t，J＝7.4Hz)，3.16-3.71(16H，m)，3.68(4H，s)，5.12(2H，d，J＝7.3Hz)，6.06(2H，s)，6.64(4H，d，J＝8.4Hz)，7.04(4H，d，J＝8.4Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：24.4，26.7，28.0，30.6(×2)，34.0，44.5(×2)，47.7(×2)，53.9，62.2(×2)，71.5(×2)，73.4(×2)，76.8(×2)，77.8(×2)，94.3(×2)，101.0(×2)，101.8(×2)，102.5(×2)，115.8(×4)，130.2(×4)，133.9(×2)，155.7(×2)，158.1(×2)，162.2(×2)，162.3(×2)，178.4，205.4(×2)

实施例13 根皮苷肉桂哌嗪衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶肉桂哌嗪＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为87％。

分子量650 分子式C₃₅H₄₂N₂O₁₀

Element Analyzing：C 64.60％，H 6.51％，O 24.59％，N 4.31％

ESI-MS(m/z)：649[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：651[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.35(4H，t，J＝5.6Hz)，2.48(4H，t，J＝5.6Hz)，2.79(2H，t，J＝7.4Hz)，3.02(2H，d，J＝3.4Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.68(2H，s)，4.98(1H，d，J＝7.3Hz)，6.06(1H，s)，6.19(1H，dd，J＝8.5，3.4Hz)，6.56(1H，d，J＝8.5Hz)，6.64(2H，d，J＝8.4Hz)，7.04(2H，d，J＝8.4Hz)，7.24(2H，d，J＝7.2Hz)，7.33-7.40(3H，m)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：30.6，44.5，47.5，52.6(×2)，54.1(×2)，57.0，62.2，71.5，73.4，76.8，77.8，94.3，101.0，101.8，102.5，115.8(×2)，127.4，127.9，128.5(×2)，128.6(×2)，130.2(×2)，133.9，136.2，136.4，155.7，158.1，162.2，162.3，205.4

实施例14 根皮苷苄基哌嗪衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶苄基哌嗪＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为87％。

分子量624 分子式C₃₅H₄₀N₂O₁₀

Element Analyzing：C 63.45％，H 6.45％，O 25.61％，N 4.48％

ESI-MS(m/z)：623[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：625[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.35(4H，t，J＝5.6Hz)，2.48(4H，t，J＝5.6Hz)，2.79(2H，t，J＝5.4Hz)，3.16-3.71(8H，m)，3.66(4H，s)，4.98(1H，d，J＝7.3Hz)，6.06(1H，s)，6.70(2H，d，J＝8.4Hz)，7.12(2H，d，J＝8.4Hz)，7.23(2H，d，J＝7.2Hz)，7.26-7.33(3H，m)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：30.6，44.5，47.5，52.5(×4)，61.9，62.2，71.5，73.4，76.8，77.8，94.3，101.0，101.8，102.5，115.8(×2)，127.2，128.4(×2)，128.8(×2)，130.2(×2)，133.9，138.6，155.7，158.1，162.2，162.3，205.4

实施例15 根皮苷苯基哌嗪衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶苯基哌嗪＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为92％。

分子量610 分子式C₃₂H₃₈N₂O₁₀

Element Analyzing：C 62.94％，H 6.27％，O 26.20％，N 4.59％

ESI-MS(m/z)：609[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：611[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.62(4H，t，J＝5.6Hz)，2.71(2H，t，J＝3.4Hz)，2.88(2H，t，J＝3.4Hz)，3.19(4H，t，J＝5.6Hz)，3.16-3.71(6H，m)，3.66(2H，s)，4.98(1H，d，J＝7.3Hz)，6.06(1H，s)，6.70(2H，d，J＝8.4Hz)，7.12(2H，d，J＝8.4Hz)，6.79(1H，d，J＝7.6Hz)，6.94(2H，dd，J＝7.6，7.4Hz)，7.27(2H，d，J＝7.4Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：30.6，44.5，47.5，49.8(×2)，52.1(×2)，62.2，71.5，73.4，76.8，77.8，94.3，101.0，101.8，102.5，114.3(×2)，115.8(×2)，121.9，129.6(×2)，130.2(×2)，133.9，149.6，155.7，158.1，162.2，162.3，205.4

实施例16 根皮苷二苯甲基哌嗪衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶二苯甲基哌嗪＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为85％。

分子量700 分子式C₃₉H₄₄N₂O₁₀

Element Analyzing：C 66.84％，H 6.33％，O 22.83％，N 4.00％

ESI-MS(m/z)：699[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：701[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.35(4H，t，J＝5.6Hz)，2.48(4H，t，J＝5.6Hz)，2.71(2H，t，J＝3.4Hz)，2.88(2H，t，J＝3.4Hz)，3.16-3.71(6H，m)，3.66(2H，s)，4.98(1H，d，J＝7.3Hz)，5.14(1H，s)，6.06(1H，s)，6.70(2H，d，J＝8.4Hz)，7.12(2H，d，J＝8.4Hz)，7.26(2H，d，J＝7.6Hz)，7.33(4H，dd，J＝7.6，7.4Hz)，7.37(4H，d，J＝7.4Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：30.6，44.5，47.5，51.9(×2)，52.8(×2)，62.2，71.5，73.4，76.0，76.8，77.8，94.3，101.0，101.8，102.5，115.8(×2)，126.2(×2)，128.2(×4)，129.2(×4)，130.2(×2)，133.9，142.7(×2)，155.7，158.1，162.2，162.3，205.4

实施例17 根皮苷呋喃甲酰哌嗪衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶呋喃甲酰哌嗪＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为87％。

分子量628 分子式C₃₁H₃₆N₂O₁₂

Element Analyzing：C 59.23％，H 5.77％，O 30.54％，N 4.46％

ESI-MS(m/z)：627[(M-1)⁺]及ESI-MS(m/z)：629[(M+1)⁺]

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：2.35(4H，t，J＝5.6Hz)，2.48(4H，t，J＝5.6Hz)，2.71(2H，t，J＝3.4Hz)，2.88(2H，t，J＝3.4Hz)，3.16-3.71(6H，m)，3.68(2H，s)，4.98(1H，d，J＝7.3Hz)，6.06(1H，s)，6.70(2H，d，J＝8.4Hz)，6.83(1H，dd，J＝7.6，7.4Hz)，7.12(2H，d，J＝8.4Hz)，7.27(1H，d，J＝7.4Hz)，8.09(1H，d，J＝7.6Hz)

¹³C-NMR(DMSO-d₆)δ：30.6，44.5，47.5，47.8(×2)，52.0(×2)，62.2，71.5，73.4，76.8，77.8，94.3，101.0，101.8，102.5，111.7，115.8(×2)，117.9，130.2(×2)，133.9，143.8，147.0，155.1，155.7，158.1，162.2，162.3，205.4

实施例18 3’-(N，N-二甲胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，用N，N-二甲胺代替四氢吡咯为原料。得到淡黄色粉末，得率为67％。

实施例19 3’-(N，N-甲乙胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，用N，N-甲乙胺代替四氢吡咯为原料。得到淡黄色粉末，得率为65％。

实施例20 3’-(N，N-二丙胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，用N，N-二丙胺代替四氢吡咯为原料。得到淡黄色结晶，得率为68％。

实施例21 3’-(N，N-二乙醇胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，用N，N-二乙醇胺代替四氢吡咯为原料。得到淡黄色结晶，得率为64％。

实施例22 3’-(N，N-二异丙胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，用N，N-二异丙胺代替四氢吡咯为原料。得到淡黄色结晶，得率为55％。

实施例23 3’-(N，N-二氯乙胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，用N，N-二氯乙胺代替四氢吡咯为原料。得到淡黄色结晶，得率为57％。

实施例24 3’-(N-甲基-N-甲氧羰基甲基胺基亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例1，用肌氨酸甲酯盐酸盐代替四氢吡咯为原料。得到淡黄色结晶，得率为57％。

实施例25 3’-(((R)-3-羟甲基哌啶-1-基)-亚甲基)根皮苷的制备

操作过程参见实施例10，用(R)-3-羟甲基哌啶代替曲美他嗪为原料。得到淡黄色结晶，得率为47％。

实施例26 3’-(((S)-3-羟甲基哌啶-1-基)-亚甲基)根皮苷

操作过程参见实施例1，用(S)-3-羟甲基哌啶代替曲美他嗪为原料。得到淡黄色结晶，得率为53％。

实施例27 根皮苷乙胺衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶乙胺＝2∶2∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为75％。

实施例28 根皮苷哌嗪衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶哌嗪＝2∶2∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为82％。

实施例29 根皮苷哌啶并哌嗪衍生物的制备

实施例30 根皮苷2-氧代哌嗪乙酸衍生物的制备

对根皮苷∶甲醛∶2-氧代哌嗪乙酸＝1∶1∶1(摩尔比)按照实施例10的操作方法进行，得到白色粉末，得率为85％。

实施例：31 按下列配方制得3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷和吡咯列酮的复方片剂：(所用含量均为重量百分含量)

3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷 9％

马来酸罗格列酮 12％

微晶纤维素 75％

PVP-k30 2％

硬脂酸镁 2％

将3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷、马来酸罗格列酮、微晶纤维素、PVP-k30混匀，以乙醇制软材，经12目筛制粒，70℃以下通风干燥后整粒，加硬脂酸镁后混匀压片，即得。其中3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷与马来酸罗格列酮的重量比为1∶1.33。

实施例：32 按下列配方制得的3’-(哌嗪-1-基-亚甲基)根皮苷和吉非罗齐的复方胶囊剂：(所用含量均为重量百分含量)

3’-(哌嗪-1-基-亚甲基)根皮苷 4％

吉非罗齐 6％

碳酸钙 45.5％

淀粉 44.5％

将碳酸钙与淀粉混合、过筛，再与适量乙醇分散的3’-(哌嗪-1-基-亚甲基)根皮苷、吉非罗齐粉末混合均匀，过120目筛，于60-70℃下烘干2小时，将混匀的药粉填充到空胶囊即得。其中3’-(哌嗪-1-基-亚甲基)根皮苷与吉非罗齐的重量比为1∶1.5。

实施例33 根皮苷衍生物治疗糖尿病的药效学实验

(一)细胞模型的建立

细胞模型：人血管内皮细胞

观察指标：人成纤维连接蛋白(Human FN)是细胞外基质中粘附蛋白，层连蛋白(Laminin LN)是一组细胞外基质糖蛋白，是基质膜非胶原性结构的主要主要成分。它们是糖尿病及其并发症的发生机制中病变的一个重要指标。

根皮苷衍生物：3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷，3’-(N，N-二乙胺基亚甲基)根皮苷

抗体：FN(mouse)武汉博士德1∶200；LN(human)武汉博士德1∶100；ELISA试剂盒

(二)药效学实验及其结果

本实验在人的血管内皮细胞模型上，经低糖(5.5μM)(正常对照)，高糖(30μM)(糖尿病肾病模型)和高糖+根皮苷衍生物(50μg/ml)(给药)处理48小时后，进行纤维连接蛋白和人层连蛋白免疫组织化学染色。

等量的细胞在OLYMPUS CX31显微镜400倍镜下，目测所见细胞爬片结果表明根皮苷衍生物有明显使内皮细胞外基质中的FN、LN的分泌量减少。

(三)药效学结果分析及初步结论

药效学实验表明，根皮苷衍生物具有明显使内皮细胞外基质中的FN、LN的分泌量减少。实验选取的两个衍生物在该类衍生物中具有相当的代表性，因此，该类根皮苷衍生物有预防和治疗糖尿病及其并发症的作用。

实施例34 根皮苷衍生物治疗糖尿病的药效学实验

(一)细胞模型的建立

细胞模型：人脐静脉内皮细胞

药物：根皮苷，3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷，3’-(4-甲基哌啶-1-基-亚甲基)根皮苷

经低糖刺激组(正常对照)，高糖刺激组(糖尿病模型)，以及药物处理的对比来观察细胞外基质内皮素(ET-1)，纤维连接蛋白(FN)的表达，以观察药物的抗细胞外基质分泌的活性。

(二)实验方法

Trizol常规法抽提细胞总RNA，去除基因组DNA；

RNA定量后逆转录；

取cDNA1-2μl进行荧光定量PCR实验；

2-ΔΔCT方法是实时定量PCR实验中分析基因表达相对变化的一种简便方法。*METHODS 25，402-408(2001)doi：10.1006/meth.2001.1262，available online at http://www.idealibrary.com

(三)药效学结果分析及初步结

通过GAPDH均一化处理，我们对目标基因ET-1和FN的表达变化进行了监测。在8h的时间范围内，在每一时间点都取3个重复样本，每一样本在cDNA合成之后都做定量PCR，数据分析用到了公式，即：

ΔΔC_T＝(C_T.Target-C_T.Actin)_Timex-(C_T.Target-C_T.Actin)_Time 0.

Time x表示任意时间点，Time 0表示经GAPDH校正后1倍量的目标基因表达。目标序列的量通过内均一化处理之后相对于参照因子而言就是：amountof target＝2^-ΔΔCT

结果显示根皮苷衍生物具有明显的抗分泌活性(见表1)，其对ET-1的抗分泌活性依次为：3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷＞3’-(4-甲基哌啶-1-基-亚甲基)根皮苷＞根皮苷；其对FN的抗分泌活性依次为3’-(六氢吡啶-1-基-亚甲基)根皮苷＞根皮苷＞3’-(4-甲基哌啶-1-基-亚甲基)根皮苷。

荧光实时定量PCR结果(基因相对表达量2^-ΔΔCT)

与高糖刺激组的表达量相比^▲P＜0.01

实施例35 3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷抗糖尿病肾病药效学研究

(一)药效学观察方法：

以单侧肾切除，高脂饲料喂食2个月诱发胰岛素抵抗，再辅以小剂量链脲佐菌素(STZ)15mg/kg腹腔注射1-2次的方法，制备了糖尿病肾病大鼠模型。以空腹血糖及餐后血糖、24小时尿蛋白定量显著升高，为成模指标。成模后给与药物干预三个月后，经血糖、血生化、24h尿蛋白测定和病理组织形态学等观察结果，评价新药的药效。

1.造模方法：

1)实验动物选择：动物选用健康Wistar 120只，雄性大鼠，体重180-230g，购自中科院实验动物中心(许可证号：SCXK(沪)2002-0002)。生长在普通级动物房，环境温度25oC，普通饲料喂养1周后开始造模。

2)造模剂选择：i)链脲佐菌素(STZ)(Sigma)；

ii)高脂饲料(基础饲料加蔗糖，炼猪油，蛋黄粉按比例60∶22∶8∶10混合而成)(中科院动物中心)

3)具体造模方法如下

①模型组Wistard大鼠在安定+氯胺酮0.1ml/100g腹腔注射麻醉下行左侧肾脏摘除术，假手术组在切开后立即缝合。术后立即注射青霉素8万单位连续2日。术后进食普通饲料喂养2周使其自然恢复。

②投与高脂饲料进食8周，给予造模剂STZ 15mg/kg，溶于0.1mmol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液(pH4.5)腹腔注射一次，(注射前给与24小时禁食，术后立即给50g/L葡萄糖水饮用，以减少大鼠的死亡)一周后上代谢笼测24h尿量，测量空腹和餐后血糖，以及血生化指标，尿量仍正常者补注射15mg/kg1次。

③正常对照组给予等量0.1mmol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液(pH4.5)溶剂ip。

2.实验及观察指标

①每周称体重一次，并记进食量；

②主要观察指标：i)空腹及餐后血糖ii)24h尿蛋白总量

③次要观察指标

i)肝功能：谷丙转胺酶(SGPT)

ii)肾功能：尿素氮；肌酐

iii)血脂，总胆固醇，甘油三酯，HDL-C

iv)病理检查禁食12h，处死并记录肾重量，部分肾脏以10％甲醛固定，石蜡包埋切片，行HE染色给药前测血糖耐量，24h尿蛋白总量，肝肾功能生化指标。

3.II型糖尿病肾病判断标准：

(1)餐后血糖≥11.7mmol/L

(2)24h尿蛋白的含量显著高于对照组

4.统计方法：计数资料数据以x±s表示，采用方差分析

(二)给药剂量以及给药时间

1.药物及剂量：

3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷生物小剂量20mg/kg；大剂量组200mg/kg

2.给药时间：3个月

(三)药效学实验结果

1.给药前

(1)体重改变：造模开始后，模型组可见体重显著超过正常对照组；STZ注射后可见体重减轻现象，见说明书附图中图1给要前体重。

(2)进食情况

STZ注射前进食情况(根据每周记录统计)，见说明书附图中图2 STZ注射前每周进食量统计。

表1 STZ注射后进食情况(根据代谢笼的记录数据)

表2 STZ注射后正常组与模型组的血生化比较

经过3个月的左肾切除术，高糖高脂饲料加小剂量的STZ腹腔注射的造模，大鼠出现了体重下降，多饮及尿量显著增加；餐后血糖显著上升(P＜0.001)，24小时尿蛋白显著升高(P＜0.001)的II型糖尿病的改变。

2.给药后

(1)给药前分组情况

给药前各组动物的餐后血糖等生化指标无组间显著性差别。

(2)药物对模型动物体重及进食的影响

3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷组的动物一般状态改善的较好，尿量减少，进食量变化不大，其大剂量组体重改善更明显，但无显著性意义。见说明书附图中图33’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷对体重的影响。

表4给药后大鼠的进食情况

(3)各药物对餐后血糖、尿蛋白的影响

3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷对餐后血糖有显著的降低效果，小剂量组的餐后血糖较模型组下降了23.7％，大剂量组下降了53.3％，呈现出剂量依赖关系(P＜0.001)；大剂量组的24h尿蛋白量也显著下降(P＜0.05)

表5各药物组对餐后血糖及24h尿蛋白量的影响

#与正常对照组比较P＜0.05；##P＜0.01；###P＜0.001

*与模型对照组比较P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001

(4)药物对血生化指标的影响

与模型组比较，3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷小剂量组的血清胆固醇值降低了13.2％，大剂量降低了20.5％(P＜0.05)；小剂量组的大鼠血清甘油三酯较模型族降低了20.8％，大剂量组降低了46.5％(P＜0.05)，呈剂量依赖关系。

表6各药物对血生化指标的影响

#与正常对照组比较P＜0.05；##P＜0.01；###P＜0.001

*与模型对照组比较P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001

(5)药物对肝肾功能指标的影响

3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷有轻度降低尿蛋白的作用，小剂量组大鼠24尿蛋白总量比模型组降低了11.3％，大剂量组降低了28.6％(P＜0.05)，可见剂量依赖关系。对肝功能无明显影响。

表7各药物对肝肾功能指标的影响

#与正常对照组比较P＜0.05；##P＜0.01；###P＜0.001

*与模型对照组比较P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001

(6)药物对大鼠内脏器官大体病理的影响

3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷小剂量心/体重比轻度下降(P＜0.05)

表8根皮苷衍生物对大鼠内脏器官大体病理的影响

#与正常对照组比较P＜0.05；##P＜0.01；###P＜0.001

*与模型对照组比较P＜0.05；**P＜0.01；***P＜0.001

(7)肾脏病理改变情况：经HE染色，在光镜x200和x400下，可比较肾小球的体积，肾小球固有细胞数，系膜外基质的增生，以及间质纤维化的情况。

1)低倍镜下(He染色x200)，3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷对肾小球的体积的影响并不十分明显，见说明书附图中图4-7.

2)高倍镜下(HE染色x400)，3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷组的大鼠肾脏的系膜外基质的分泌量有所减少，间质纤维化明显减少，尤以大剂量组为最明显，见说明书附图中图8-11.

结果：

1)3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷可改善糖尿病肾病模型大鼠的一般状况

2)剂量依赖性地降低DN模型大鼠的餐后血糖(P＜0.001)

3)剂量依赖性地降低DN模型大鼠的血清甘油三酯(P＜0.05)和胆固醇值(P＜0.05)

4)大剂量的3’-(N-曲美他嗪基-亚甲基)根皮苷还有降低24小时尿蛋白的作用(P＜0.05)

5)病理检测，对DN大鼠的肾小球体积改变不明显，对肾小球系膜基质的分泌有减少，间质纤维化程度有所减轻。

Claims

1.下式结构的根皮苷衍生物或其药学上可接受的盐或酯，或其异构体或前药：

其中

R为通过N原子与主结构相连的含有N、O或S原子的杂环基或基团-NR₁R₂，其中

R₁和R₂独立为氢、任意取代的C₁-C₈的烷基、C₁-C₄烷氧基CH ₂O(CH₂)_mCH₃、C₁-C₄烷巯基CH₂S(CH₂)_mCH₃、(CH₂)_mCX₃、(CH₂)_mCN、(CH₂)_mCOOH、C₁-C₄烷酰基(CH₂)_mCOOR¹、(CH₂)_mOH、(CH₂)_mX、SO₂(CH₂)_mCH₃、(CH2)_mSO₂R¹、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、C₁-C₄烷基氨基，其中X为卤素，R¹为C₁-C₄烷基、C₁-C₄烯基、C₁-C₄炔基，m为0-10的整数，n为2-6的整数，a为0-4的整数；或者

R₁及R₂和它们相连的氮原子环合成可任选被取代的3-7元的杂环基，该类杂环取代基选自：羟基、羧基、氨基、磺酰基、C₁-C₄烷基、羟基C₁-C₄烷基、羧基C₁-C₄烷基、氨基C₁-C₄烷基、C₂-C₄烯基、C₂-C₄炔基、苯基、C₁-C₄烷氧苯基、羟基C₁-C₄烷基苯基、羧基C₁-C₄烷基苯基、卤代C₁-C₄烷基苯基、苯基C₁-C₄烷基、苯基C₂-C₄烯基、含氧或含氮的C₅-C₆杂环基、含氧或含氮的C₅-C₆杂环羰基、含氧或含氮的C₅-C₆杂环C₁-C₄烷基。

2.权利要求1的化合物，其中所述的杂环基选自哌啶基、吗啉基、哌嗪基、噻唑基、咪唑基、吡啶基、吡咯基、四氢吡咯基和吡嗪基。

3.权利要求1的化合物，其中所述的药学上可接受的盐是：当化合物是碱性时，与有机酸或无机酸形成的盐；当化合物是酸性时，与有机碱或无机碱形成的盐。

4.权利要求3的化合物，其中所述的有机酸或无机酸选自乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、枸橼酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、大黄酸、牛黄酸、齐墩果酸、熊果酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、磺酸、磷酸、硝酸。

5.权利要求4的化合物，其中所述的有机酸或无机酸选自乙酸、琥珀酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、枸橼酸、马来酸、水杨酸、大黄酸、牛磺酸、富马酸、草酸、羟乙基磺酸、盐酸、硫酸、磷酸、硝酸。

6.权利要求3的化合物，其中所述的有机碱或无机碱选自甜菜碱、咖啡因、胆碱，N，N’-二苄基乙二胺、二乙胺、二乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、黄连素、氨基葡糖、组氨酸、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三-(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)、N-甲基葡萄糖胺(NMG)、三乙醇胺、三丙胺、氨丁三醇和二氢枞胺、氢氧化钾、氢氧化钠。

7.权利要求6的化合物，其中所述的有机碱或无机碱选自：氨基葡糖、甲基葡糖胺、咖啡因、三乙胺、氢氧化钾、氢氧化钠。

8.权利要求1的化合物，它是具有如下结构的化合物：

其中R是：

9.权利要求1的化合物，它是具有如下结构的化合物：

其中 R₁： R₂：

CH₃ CH₃

CH₂CH₃ CH₂CH₃

CH₃ CH₂CH₃

CH₂CH₂CH₃ CH₂CH₂CH₃

CH(CH₃)₂ CH(CH₃)₂

CH₂CH₂Cl CH₂CH₂Cl

CH₂CH₂OH CH₂CH₂OH

CH₃ CH₂CH₂OH

CH₃ CH₂COOH

CH₃ CH₂COOCH₃

CH₂CN CH₂CN

CH₃ CH₂SO₃H

CH₂OCH₃ CH₂OCH₃

H C₆H₅

H N-氨基葡萄糖基

H N-井冈霉醇胺基

10.权利要求1所述的化合物，它是具以下结构的化合物：

11.权利要求1所述的化合物，它是具有如下结构的化合物：

12.一种制备权利要求1所述的根皮苷衍生物的制备方法，其特征包括以下一个或几个步骤：

(1)将蔷薇科或壳斗科植物的根、茎、叶或果实用乙醇水溶液提取，所得提取液通过大孔吸附树脂或聚酰胺精制得到根皮苷结晶化合物；

(2)将所得根皮苷结晶化合物在质子性溶剂中，在存在或不存在酸的条件下与甲醛和伯胺或仲胺在0-90℃的温度下反应，得到权利要求1的目标化合物；

(3)将所得的目标化合物通过重结晶或柱层析得到纯品。

13.根据权利要求12所述的根皮苷衍生物的制备方法，其特征是步骤(2中所用的质子性溶剂选用甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇或水中任一种。

14.一种药物组合物，该药物组合物含有权利要求1-11任一项所述的化合物和药用载体。

15.一种药物组合物，该药物组合物含有权利要求1-11或14任一项的化合物作为第一活性成分和一种或多种选自下列的药物作为第二活性成分：抗糖尿病药物、治疗糖尿病并发症的药物、抗肥胖症药物、抗高血压药物、抗血小板药物、抗动脉粥样硬化药物/或降血脂药物、抗氧化剂、肉碱、肉碱衍生物、肉碱棕榈酰转移酶抑制剂、肉碱辛酰基转移酶抑制剂、乙酰肉碱兴奋剂、抗肿瘤药物、抗痛风药物、治疗骨质疏松药物、抗抑郁症药物、治疗贫血药物、治疗老年痴呆症药物、抗炎药物和免疫性药物及根皮苷提取物。

16.权利要求15的药物组合物，其中所述的第二活性成分选自：抗糖尿病药物、治疗糖尿病并发症的药物、抗肥胖症药物、抗高血压药物、抗动脉粥样硬化药物/或降血脂药物、左旋肉碱、左旋肉碱衍生物、抗肿瘤药物、抗炎药物和免疫性药物。

17.权利要求15的药物组合物，其特征在于含有权利要求1-10任一项的化合物作为第一活性成分和一种或多种含有权利要求11的作为第二活性成分的比例为1∶0.0001-1∶0.01。

18.权利要求14或15的药物组合物，其中活性成分占组合物重量的0.1-99.9％。

19.权利要求14或15的药物组合物其特征在于该药物组合物的制剂剂型包括口服给药制剂、注射给药制剂或局部给药制剂，其中：

20.权利要求19的药物组合物，其特征在于该药物组合物的制剂给药形式包括：静脉、肌内、腹膜、皮下、口服、直肠栓剂插入法、阴道栓剂插入法、靶向给药、吸入式、灌胃式、鼻饲式、舌下给药、滴药法、微针式给药、连续给药系统和局部给药，局部给药方式如贴皮制剂、或植入式连续给药释放系统，其中贴皮制剂载体包括骨架材料如疏水的聚硅氧烷和亲水的聚乙烯醇等，控释膜材料如聚硅氧烷和乙烯-醋酸乙烯共聚物等，压敏胶如聚异丁烯、聚硅氧烷和聚丙烯酸酯，活性成分一般分散在压敏胶中；其中植入式连续给药释放系统所选用的高分子材料包括聚乳酸一乙醇酸共聚物、聚乙二醇聚乳酸共聚物、聚乳酸/聚己内酯、聚[碳酸(亚丁酯-co-ε-己内酯)酯]、聚丁内酯戊内酯、聚二氧环己酮(PDS)、聚-3-羟基丁酸酯(PHB)、聚左旋乳酸(PLLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚ε-己内酯(PCL)、聚己内酯/聚乙交酯丙交酯(PCL/PLGA)、甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)。

21.权利要求1-11任一项的化合物或权利要求14或15的药物组合物在制备治疗下列疾病的药物中的应用：

增加高密度脂蛋白的水平、增强记忆力、改善学习能力、衰老、糖尿病、糖尿病肾病、糖尿病足病、糖尿病视网膜病、糖尿病性神经病、糖尿病并发症、延迟伤口愈合、胰岛素抗性、高血糖、高胰岛素血症、脂肪酸或甘油的水平升高、高脂血症、肥胖症、高甘油三酯血症、动脉粥样硬化、高血压、代谢综合症(X综合症)、贫血(如镰刀细胞贫血)、粉刺、肿瘤、风湿性关节炎、关节炎、肠炎、银屑病、多发性硬化症、神经变性紊乱、充血性心力衰竭、中风、主动脉瓣狭窄、肾炎、肾衰竭、痛风、红斑狼疮、IgA肾病、阑尾炎、胰腺炎、变态反应(如鼻炎、鼻窦炎)、纤维症、骨病、骨质疏松、心血管疾病(如心律失常、心血管休克、心绞痛)、放疗及化疗并发症、肝病(如肝炎)、胃肠道病症(如胃炎和胃肠炎)、结膜炎、斯耶格伦(Sjogren′s)综合症、肺病、肾病(如多囊肾病)、皮炎、HIV相关病症、疟疾(如脑疟)、强直性脊椎炎、麻风病、免疫性疾病、抑郁症、老年痴呆症、水肿、溃疡、精神分裂症、精神障碍性疾病、过敏性休克、尿崩症、哮喘、青光眼、线粒体疾病、能量代谢异常疾病、帕金森、基质金属蛋白酶病理性疾病。

22.权利要求21的应用，其中所述的疾病包括：代谢类疾病、糖尿病、糖尿病肾病、糖尿病足病、糖尿病视网膜病、糖尿病性神经病、糖尿病并发症、高脂血症、肥胖症、高血压、肿瘤。

23.权利要求21的应用，其中所述药物成人每天的用量为0.001-1000mg/kg体重。

24.权利要求21的应用，其中所述药物成人每天的用量为0.01-100mg/kg体重。

25.权利要求21的应用，其中所述药物成人每天的用量为0.05-5mg/kg体重。