CN105770059A - 栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途 - Google Patents

栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途 Download PDF

Info

Publication number
CN105770059A
CN105770059A CN201610239931.6A CN201610239931A CN105770059A CN 105770059 A CN105770059 A CN 105770059A CN 201610239931 A CN201610239931 A CN 201610239931A CN 105770059 A CN105770059 A CN 105770059A
Authority
CN
China
Prior art keywords
medicine
extract
solution
polyphenol
purposes
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610239931.6A
Other languages
English (en)
Inventor
张晓喻
刘刚
王战国
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Normal University
Original Assignee
Sichuan Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan Normal University filed Critical Sichuan Normal University
Priority to CN201610239931.6A priority Critical patent/CN105770059A/zh
Publication of CN105770059A publication Critical patent/CN105770059A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/35—Extraction with lipophilic solvents, e.g. Hexane or petrol ether
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps

Abstract

本发明公开了栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途。药效实验表明，本发明药物具有明显的减肥效果，其中，高剂量的栘[木衣]多酚控制小鼠体重增长的效果与市售的减肥药物奥利司他相当。另外，该提取物可降低小鼠血清中的胆固醇TC、甘油三脂TG、高密度脂蛋白HDL‑C、低密度脂蛋白LDL‑C水平，表明其可有效防治机体中的血脂含量异常引起的肥胖、高脂血症、动脉粥样硬化和冠心病等脂质代谢异常疾病。

Description

栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途
技术领域
本发明涉及栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途，属于功能食品、医药领域。
背景技术
脂质代谢异常是先天性或获得性因素造成的血液及其他组织器官中脂质及其代谢产物质和量的异常，其具体病症主要包括高脂血症、肥胖、脂肪肝等。这类疾病对人体健康的危害极大：血液中过量的脂质沉着在原本光滑的动脉内膜上，便出现类似粥样的脂类物质堆积形成的白色斑块，即动脉粥样硬化病变；严重的还会引起胰腺炎、冠心病、心绞痛、急性心梗、脑卒中等。
目前，治疗脂质代谢异常的药物常用药物有：胆酸络合剂、他汀类(statins)、甾体衍生物谷固醇、烟酸、苯酸类、多不饱和脂肪酸、粘多糖及多糖类、雌激素；这些药物成本较高，且大多疗效不确切，长期应用具有一定的副作用，如消化道症状、神经症状、内分泌症状、心脑血管症状等，而且停药后体重、血脂回升快，难以达到长期治疗和预防的目的。因此，开发一种成本低廉、药效明确、无毒副作用的替代药物，成为了一个亟待解决的问题。
栘[木衣]是蔷薇科栘[木衣]属植物的通称，有三个种：云南栘[木衣]Docynia delavayi(Franch.)Schneid、栘[木衣]Docynia indica(Wall.)Dcne.和长爪栘[木衣]Docynia longiunguis Q.Luo et J.L.Liu，主要分布于云贵川等地，其中云南栘[木衣]是当地有名的野生水果。
目前，对于栘[木衣]属植物的研究开发还处于初级阶段，关于栘[木衣]属植物的基础性研究还很不足，对其有效成分的研究很少，造成了较大的资源浪费。刘海霞等对传统的Folin-Ciocalteu比色法进行改良，建立了一种专属性强的栘[木衣]多酚的测定方法，为栘[木衣]属植物资源的综合利用和开发提供理论支持(栘[木衣]属植物多酚的含量测定与比较[J].食品科学.2014，35(24)：295～300)。刘刚等(云南栘[木衣]叶提取物片段抗氧化活性及成分分析[J].西南师范大学学报.2014，39(9)：73～81)研究发现云南栘[木衣]叶中含有较高活性的抗氧化成分，其中有四种化合物是典型的黄酮类化合物，为云南栘[木衣]抗氧化功能的开发提供了理论依据。
然而，迄今尚未见将栘[木衣]属植物叶及其提取物用于防治脂质代谢异常的研究报道。
发明内容
本发明的目的在于提供栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途。
本发明提供了栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途。
进一步的，所述的提取物为栘[木衣]属植物叶的多酚提取物。
优选的，所述的栘[木衣]属植物为栘[木衣]Docynia indica(Wall.)Dcne.。
进一步优选的，所述的提取物为栘[木衣]属植物的乙醇粗提物或其纯化物。
进一步的，所述的乙醇粗提物由下述方法制备得到：取栘[木衣]属植物，粉碎，乙醇超声提取，浓缩提取液，即得；所述纯化物中多酚含量为91.24％～92.12％w/w，根皮苷含量为66.67％～97.48％w/w。
更进一步的，所述的乙醇粗提物中多酚含量为39.7％w/w；所述提取物中多酚含量为91.34％w/w，根皮苷含量为87.49％w/w。
进一步的，所述的药物是治疗和/或预防肥胖、高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病中一种或几种疾病的药物。
进一步的，所述的药物是降低血清中甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白中一种或几种浓度的药物。
更进一步的，所述的药物是抑制消化酶的药物。
一种治疗和/或预防脂质代谢异常的药物，其特征是：它是以有效量栘[木衣]属植物叶的原生药粉、水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
本发明提供了栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途。药效实验表明，本发明药物具有明显的减肥效果，其中，高剂量的栘[木衣]多酚控制小鼠体重增长的效果与市售的减肥药物奥利司他相当。另外，该提取物可降低小鼠血清中的胆固醇TC、甘油三脂TG、高密度脂蛋白HDL-C、低密度脂蛋白LDL-C水平，表明其可有效防治机体中的血脂含量异常引起的肥胖、高脂血症、动脉粥样硬化和冠心病等脂质代谢异常疾病。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1为不同浓度DT溶液对胰脂肪酶活力的影响图；
图2为不同浓度DC溶液对胰脂肪酶活力的影响图；
图3为不同浓度DT溶液对胰蛋白酶活力的影响图；
图4为不同浓度DC溶液对胰蛋白酶活力的影响图；
图5为不同浓度DT溶液对胰淀粉酶活力的影响图；
图6为不同浓度DC溶液对胰淀粉酶活力的影响图。
具体实施方式
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
1、材料、试剂与仪器
材料与试剂
栘[木衣]Docynia indica(Wall.)Dcne.叶于2014年4月采于四川省西昌市，经西昌学院罗强教授鉴定，符合该物种的特征。
根皮苷对照品(HPLC＞98％，购于四川省成都市植标化纯有限公司)；Folin-Ciocaileus试剂(FC试剂，购于上海如吉生物科技有限公司)；乙醇(分析纯)、无水碳酸钠(分析纯)(购于成都科龙有限公司)。
仪器
仪器名称 型号或规格 生产厂家
紫外分光光度计 UV-1700 日本岛津
真空冷冻干燥箱 wizard 2.0 美国VirTis公司
恒温水浴锅 B-260 上海亚荣生化仪器厂
超声波清洗仪 KQ5200DE 昆山超声仪器
电子天平 BP211D 德国赛多利斯
超声循环提取机 CTXNW-5B 北京弘祥隆生物技术股份有限公司
电热鼓风干燥箱 DB-210SGB 成都天宇试验设备有限责任公司
旋转蒸发仪 Buchi R-3 上海岛通应用科技有限公司
循环水真空泵 SHB-III 郑州长城科工贸有限公司
2、检测方法
2.1多酚含量的测定
将提取液浓缩定容至50mL，稀释至一定浓度后取0.5mL，加入质量分数为10％的Na2CO3溶液2.5mL，再加FC显色剂0.5mL，在55℃条件下反应7min，在760nm测定吸光度，计算多酚含量。
根据下式计算多酚提取率：
栘依多酚提取率(％)＝C×N×V×100/M
式中：C—样液中多酚含量(μg/mL)；
V—样液的体积(mL)；
N—稀释倍数；
M—栘[木衣]叶片干粉的质量(mg)。
未经纯化的栘[木衣]叶乙醇提取物冻干后，经测定其多酚含量为(39.7±1.25)％。
2.2根皮苷含量的测定
HPLC法色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX Extend-C18柱(4.6×250mm，5μm)；流动相为A：C＝乙腈：超纯水，线性梯度洗脱：0-10min，15％-50％A：85％-50％C；流速为1mL/min，柱温为25℃，进样量为6μL，检测波长为285nm。
以根皮苷为标准品，测定不同浓度根皮苷溶液的峰面积，并以根皮苷质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标进行线性拟合，得线性回归方程y＝0.2147x+1.0425，R2＝0.9999，用于检测洗脱液中根皮苷的质量浓度。
实施例1本发明药物的制备
准确称取研磨后的栘[木衣]Docynia indica(Wall.)Dcne.叶1kg，超声功率800W，超声频率40KHz，用63％乙醇按液料比20:1(mL/g)，在65℃下提取41min，提取2次，合并提取液，浓缩，得粗提物；
对D-101型大孔吸附树脂进行预处理：将大孔树脂D-101用体积分数为95％的乙醇水溶液密封浸泡24h后，用超纯水冲洗至无醇味；再用5％HCl溶液密封浸泡2～4h，用超纯水冲洗至中性；最后用2％NaOH溶液密封浸泡2～4h，用超纯水冲洗至中性，备用；
取粗提物，上样于经过预处理的D-101型大孔吸附树脂，上样溶液质量浓度为25mg/mL，上样体积为10BV，上样流速为1mL/min。上样完成后，用50％v/v乙醇水溶液洗脱，洗脱体积为4BV(BV即树脂床体积)，洗脱流速为3mL/min，收集洗脱液，浓缩冻干，即得栘[木衣]属植物多酚纯化物4.3g，测定其中多酚含量为91.34％，根皮苷含量为87.49％。按所使用样品上样两种多酚含量计算，上样多酚质量为5.0g，所得纯化物中多酚为3.9g，多酚回收率为78％。
实施例2本发明药物的制备
准确称取研磨后的栘[木衣]Docynia indica(Wall.)Dcne.叶1kg，超声功率800W，超声频率40KHz，用63％乙醇按液料比20:1(mL/g)，在65℃下提取41min，提取2次，合并提取液，浓缩，得粗提物；
对D-101型大孔吸附树脂进行预处理：将大孔树脂D-101用体积分数为95％的乙醇水溶液密封浸泡24h后，用超纯水冲洗至无醇味；再用5％HCl溶液密封浸泡2～4h，用超纯水冲洗至中性；最后用2％NaOH溶液密封浸泡2～4h，用超纯水冲洗至中性，备用；
取粗提物，上样于经过预处理的D-101型大孔吸附树脂，上样溶液质量浓度为25mg/mL，上样体积为10BV，上样流速为1mL/min。上样完成后，用50％v/v乙醇水溶液洗脱，洗脱体积为8BV(BV即树脂床体积)，洗脱流速为3mL/min，收集洗脱液，浓缩冻干，即得栘[木衣]属植物多酚纯化物4.8g，其中，多酚含量为91.24％，根皮苷含量为88.26％。按所使用样品上样两种多酚含量计算，上样多酚质量为5.0g，所得纯化物中多酚为4.38g，多酚回收率为87.6％。
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
实验例1本发明药物抑制胰脂肪酶、胰蛋白酶、胰淀粉酶的药效实验
1、材料与试剂
栘[木衣]叶粗提物(DT)：按实施例1所述工艺条件提取、干燥所得的粗提物浸膏粉。
栘[木衣]叶多酚纯化物(DC)：按实施例1所述纯化工艺纯化干燥所得干粉。
胰酶(USP级，上海晶纯生化科技股份有限公司生产)、大黄提取物(由实验室严伟老师提供)、盐酸、氢氧化钠、三羟甲基甲烷、橄榄油、阿拉伯胶、牛胆盐、茚三酮、甘氨酸、酪蛋白、乙酸钠、乙酸、氯化钙、硼砂、硼酸、氯化钠、三氯乙酸、95％乙醇、无水碳酸钠(均为分析纯，购于成都科龙有限公司)。
分别称取一定量的DT、DC粉末，用体积分数为50％的乙醇溶解并定容，再用50％的乙醇稀释成不同浓度的溶液，即为栘[木衣]多酚供试样品溶液。
三羟甲基甲烷缓冲溶液：准确称取三羟甲基甲烷606.02mg，用45.7mL的0.1mol/L的HCl溶液溶解，用蒸馏水定容至100mL容量瓶中，摇匀，调节pH值至7.1，置于4℃冰箱中保存，备用。
橄榄油乳液：称取阿拉伯胶7.50001g，加入4mL橄榄油，缓慢加蒸馏水研磨，使溶液中90％的乳粒直径小于3μm，且其中最大乳粒直径不得超过10μm，转移并用蒸馏水定容至100mL容量瓶中。现配现用。
8％牛胆盐溶液：准确称取8.00004g牛胆盐，用温水溶解并定容于100mL容量瓶中，备用。
0.1mol/L氢氧化钠溶液：准确称取0.40009g氢氧化钠于50mL烧杯中，加入30mL蒸馏水溶解，待溶液冷却后，转移至100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
0.1mol/L HCl溶液：准确吸取4.15mL浓盐酸溶液至500mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度。
胰酶溶液：精密称定0.10006g胰酶放置于乳钵中，加入少量冷至5℃以下的三羟甲基甲烷缓冲溶液，研磨均匀，转移至50mL容量瓶中，用缓冲液定容，得2.012mg/mL的胰酶溶液，备用。
大黄溶液：准确称取5.00003g大黄提取物，加入蒸馏水溶解并定容于50mL容量瓶中，备用。
2、实验方法
栘[木衣]多酚对胰脂肪酶的抑制作用实验参照《中华人民共和国药典》(2010版)中的胰脂肪酶活力测定方法(国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京：中国医药科技出版社，2010:848-849)。
栘[木衣]多酚对胰蛋白酶的抑制作用实验参照王晓宇的胰蛋白酶活力测定方法(王晓宇.大黄复方治疗单纯性肥胖症的初步研究[D].成都：四川师范大学，2012)。
栘[木衣]多酚对胰淀粉酶的抑制作用实验参照曹建康的淀粉酶活性的测定方法(曹建康，姜微波，赵玉梅.果蔬采后生理生化实验指导[M].北京：中国轻工业出版社，2011:81-84)。
3、实验结果
3.1不同浓度DT溶液对胰脂肪酶的抑制作用，结果见表1、图1。
表1不同浓度DT溶液对胰脂肪酶活力的影响
实验结果：胰酶中原脂肪酶活力为(1932.17±208.04)/g；当加入不同浓度的DT溶液时，胰脂肪酶的活力均有所下降，说明DT对脂肪酶具有抑制作用。当DT溶液浓度在2.5～20mg/mL时，随着溶液浓度的增大，其抑制率明显呈增加趋势，抑制率从(31.50±1.19)％增加至(52.08±6.25)％，当DT溶液浓度为20mg/mL时，抑制率达到最大值，为(52.08±6.25)％，之后随DT溶液浓度的增加，抑制率反而开始下降，最终趋于稳定，抑制率值为30％左右。
3.2不同浓度DC溶液对胰脂肪酶的抑制作用，结果见表2、图2。
表2不同浓度的DC溶液对胰脂肪酶活力的影响
实验结果：胰酶中脂肪酶活力为(1932.17±208.04)/g；当加入不同浓度的DC溶液时，胰脂肪酶的活力均有所下降，说明DC对脂肪酶具有抑制作用。当DC溶液浓度在1.25～40μg/mL时，随着溶液浓度的增大，抑制率可从(36.92±3.95)％增加至(89.66±2.59)％，当DC溶液浓度在20μg/mL时，抑制率达到最大值，之后随浓度的增大开始下降，说明DC浓度对脂肪酶的抑制并无明显的量效关系。
DC溶液与DT溶液相比较(见3.1、3.2实验结果)，DC溶液对脂肪酶的最高抑制率大约为DT溶液的2倍，说明随着栘[木衣]多酚纯度的提高对脂肪酶的抑制率也逐渐增大。
100mg/mL的大黄溶液与5mg/mL的DT溶液对脂肪酶的抑制作用相当，抑制率为大约为37％；1.25μg/mL的DC溶液对脂肪酶的抑制率为(69.83±2.99)％，明显优于大黄溶液。这表明栘[木衣]多酚对胰脂肪酶具有很好的抑制作用。
3.3不同浓度DT溶液对胰蛋白酶的抑制，结果见表3、图3。
表3不同浓度DT溶液对胰蛋白酶活力的影响
实验结果：胰酶中蛋白酶活力为(0.224±0.001)mg/min﹒g；不同浓度的DT溶液对胰蛋白酶均有抑制作用，当DT溶液浓度在2.5～5mg/mL时，抑制率有明显的增加，抑制率从(31.22±1.21)％增加至(40.00±1.52)％，当DT溶液浓度继续增加时，抑制率有缓慢下降的趋势，当DT溶液浓度增加至10mg/mL，抑制率为(35.00±0.91)％，后随着溶液浓度的增加，抑制率基本保持不变。
3.4不同浓度DC溶液对胰蛋白酶的抑制，结果见表4、图4。
表4不同浓度的DC溶液对胰蛋白酶活力的影响
实验结果：胰酶中蛋白酶活力为(0.224±0.001)mg/min﹒g；不同浓度的DC溶液对胰蛋白酶的抑制率不同，当DC溶液浓度在1.25～20μg/mL时，随着溶液浓度的增大，抑制率从(46.22±1.87)％增加至(82.54±0.16)％，当DC溶液浓度在20μg/mL时，抑制率达到最大值，为(82.54±0.16)％，之后随浓度的增大对胰蛋白酶的抑制反而开始下降，当其浓度为160μg/mL时，抑制率为(56.85±3.97)％。
通过对DT溶液与DC溶液对胰蛋白酶的抑制作用比较可知(见3.3、3.4实验结果)，DT溶液对胰蛋白酶活力的影响明显优于DC溶液，说明随着栘[木衣]多酚纯度的增加，对胰蛋白酶的抑制作用逐渐增强，但其抑制率并不与栘[木衣]多酚浓度呈正向相关。
与阳性对照组大黄溶液(100mg/mL)相比，DT溶液对胰蛋白酶的抑制作用较差，20μg/mL的DC溶液对胰蛋白酶的抑制作用较高，但其浓度远远低于大黄溶液，即DC溶液对胰蛋白酶的抑制作用更佳。
3.5不同浓度DT溶液对胰淀粉酶的抑制，结果见表5、图5。
表5不同浓度DT溶液对胰淀粉酶活力的影响
实验结果：胰酶中原淀粉酶活力为(42.57±0.18)mg/min﹒g；当加入不同浓度的DT溶液时，胰淀粉酶的活力均有所下降，说明DT对淀粉酶具有抑制作用。当DT溶液浓度在2.5～10mg/mL时，随着溶液浓度的增大，抑制率从(31.50±1.19)％增加至(42.33±1.45)％，之后随浓度增加抑制率开始下降，最后趋于稳定。
3.6不同浓度DC溶液对胰淀粉酶的抑制，结果见表6、图6。
表6不同浓度的DC溶液对胰淀粉酶活力的影响
实验结果：胰酶中淀粉酶活力为(0.224±0.001)mg/min﹒g；不同浓度的DT溶液对胰淀粉酶的抑制率不同，当DC溶液浓度在1.25～40μg/mL时，随着溶液浓度的增大，抑制率明显呈增加趋势，其抑制率可从(31.48±0.42)％增加至(56.35±1.27)％,当DC溶液浓度在40μg/mL时，抑制率达到最大值，为(56.35±1.27)％，之后随溶液浓度的增大抑制率开始下降，最后趋于稳定。
通过DT溶液和DC溶液对胰淀粉酶的抑制作用比较可知(见3.5、3.6实验结果)，DC溶液对淀粉酶的抑制作用明显优于DT溶液，说明随着栘[木衣]多酚纯度的提高，对淀粉酶的抑制作用也逐渐增强。
与阳性对照大黄溶液(100mg/mL)相比，DT溶液对淀粉酶的抑制作用相当，DC溶液对淀粉酶有较强的抑制作用。
以上实验结果表明：栘[木衣]多酚对胰脂肪酶、胰蛋白酶、胰淀粉酶都具有良好的抑制作用，尤其是纯化后的栘[木衣]多酚在低剂量情况下(微克级)也具有很好的抑制胰酶活性的作用，说明栘[木衣]多酚可以通过对减少人体食物中的脂肪、蛋白质、糖类的消化吸收，达到降低血糖、血脂和防治肥胖等的作用。
实验例2本发明药物治疗肥胖及降血脂的药效实验
1、材料、试剂与仪器
1.1材料
栘[木衣]叶多酚纯化物(DC)：按实施例1所述纯化工艺纯化干燥所得干粉。
实验动物：SPF级昆明系小鼠，体重：18～22g,购于四川省成都市成都达硕生物科技有限公司，动物合格证号：SCXK(川)2013-24。
小鼠基础饲料：购于四川省成都市成都达硕生物科技有限公司。
小鼠高脂饲料：80％小鼠基础饲料、10％猪油、10％蛋黄。
1.2药物与试剂配制
0.5％(CMC-Na)的配制：称取5.00018g羧甲基纤维素钠(成都市科龙化工试剂厂生产)至烧杯中，加蒸馏水加热使溶解，冷却至室温后，转移于1000mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度。
阳性对照药物混悬液的配制：称取胶囊(批号：国药准字20103180，重庆华森制药有限公司生产)中的粉末0.60023g,用0.5％的羧甲基纤维素钠配制成浓度6mg/mL的奥利司他混悬液，灌胃剂量为60mg/kg﹒bw。
栘[木衣]多酚(DC)混悬液的配制：分别称取1.00001、3.00002、5.00001、7.50011g的DC，用0.5％的羧甲基纤维素钠溶液配制成浓度为10、30、50、75mg/mL的DC混悬液。
2、实验方法
2.1造模及分组
实验将48只昆明系小鼠(雌雄各半，体重为18～22g)每只一笼饲养于湿度为64％RH，温度为27℃的适宜的动物观察室内，给小鼠投食基础饲料,使其适应环境，3d后，随机分为6组：空白对照组、阳性对照组、模型对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组8只小鼠。其中空白对照组喂食小鼠普通饲料，其余5组喂食高脂饲料，按每只每天10g的进食量投食，自由饮水。每隔三天称重一次，并对数据进行分析，直至实验组和空白对照组体重有显著差异，造模成功。
2.2给药方法
小鼠喂食2周(14d)高脂饲料后，体重明显增加，与空白组有显著性差异，说明造模成功。从第15d开始灌胃实验药物和阳性药物进行抗肥胖实验。
称量每只小鼠体重，确定已建立小鼠单纯性肥胖模型。每只小鼠仍按造模期一样喂食，每天定量投食饲料。空白对照组每天投食之前先灌胃0.2mL的0.5％羧甲基纤维素钠溶液；阳性对照组小鼠灌胃人日服剂量10倍的奥利司他60mg/kg﹒bw(即每千克体重给药60mg)；低、中、高剂量组分别按300、500、750mg/kg﹒bw的量灌胃DC混悬液。
2.3实验小鼠的指标测定
实验期间，每隔三天记录小鼠的体重及进食量的数据。20天后，禁食12h,称量各组小鼠体重，断尾采血，再将小鼠用乙醚麻醉后，测量每只小鼠鼻尖到肛门的长度作为体长，按照公式计算Lee’s指数,解剖小鼠并分离生殖器旁的脂肪，称重，用脂肪湿重除以相对应的小鼠体重记作脂肪系数。
将所取的各小组小鼠血液，3000r/min离心9min,取出血清，用全自动生化分析仪检测各血清中的甘油三酯(TG)、胆固醇(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)浓度。
2.4统计与分析
实验数据用spss17.0软件处理，组间比较用方差分析，多重比较用最小显著差数(least significant difference，LSD)法。
3、实验结果
3.1栘[木衣]多酚(DC)对肥胖小鼠体重的影响，结果见表7。
注：与空白组比较，#p≤0.05差异显著；##p＜0.01；差异极显著。
与模型组比较，*p≤0.05，差异显著；**p＜0.01，差异极显著。
与阳性对照组比较，△p≤0.05，差异显著；△△p＜0.01，差异极显著。
实验结果：抗肥胖实验中，灌胃前各实验组小鼠与空白组小鼠体重均有极显著差异(p＜0.01)，实验组之间无显著差异(p＞0.05)，表明小鼠单纯性肥胖模型建立成功。给药4天后阳性对照组较模型组有显著差异(p≤0.05)，而高中低各剂量组与模型组之间无显著差异；给药8天后低剂量组与模型组有显著差异(p≤0.05)，高、中剂量组及阳性对照组均与模型组表现出极显著差异(p＜0.01)；低剂量组与阳性药物对照组有显著差异(p≤0.05)；随着给药时间的延长，给药12天后低、中、高剂量组、阳性对照组与模型组均表现出极显著差异(p＜0.01)，高剂量组及阳性对照组对小鼠的体重增长抑制作用相当；给药16天时，中、高剂量组、阳性对照组与模型组比较均有极显著差异(p＜0.01)，随着给药时间的延长至第20天时，低剂量组与模型组小鼠体重无显著差异(p＞0.05)，其他各实验组与模型组都具有极显著差异(p＜0.01)，高、中剂量组与阳性对照组之间均无显著差异。
以上实验结果表明，栘[木衣]多酚各浓度均对单纯性肥胖小鼠具有减肥效果，并呈一定的剂量关系；其中，高剂量的栘[木衣]多酚控制小鼠体重增长的效果与阳性对照药物奥利司他相当。
3.2栘[木衣]多酚(DC)对肥胖小鼠进食量的影响，结果见表8。
表8栘[木衣]多酚对肥胖小鼠进食量的影响(n＝8，x±s)
注：与空白组比较，#p≤0.05差异显著；##p＜0.01；差异极显著。
与模型组比较，*p≤0.05，差异显著；**p＜0.01，差异极显著。
与阳性对照组比较，△p≤0.05，差异显著；△△p＜0.01，差异极显著。
实验结果：给药初期各小组小鼠进食量无显著差异，均为5克左右，随着小鼠给药时间的延长，各实验组小鼠进食量与空白组小鼠进食量有极显著差异(p＜0.01)。给药20天后，低、中、高剂量组的进食量低于阳性对照组的小鼠进食量。
以上实验结果表明，本发明栘[木衣]多酚提取物可减少小鼠的进食量。
3.3栘[木衣]多酚(DC)对肥胖小鼠Lee’s指数和肥胖指数的影响，结果见表9。Lee’s指数是用来反应小鼠的肥胖程度的，与人体的体重指数相似。
表9栘[木衣]多酚对肥胖小鼠Lee’s指数和肥胖指数的影响(n＝8，x±s)
注：与空白组比较，#p≤0.05差异显著；##p＜0.01；差异极显著。
与模型组比较，*p≤0.05，差异显著；**p＜0.01，差异极显著。
与阳性对照组比较，△p≤0.05，差异显著；△△p＜0.01，差异极显著。
实验结果：阳性对照组、高、中剂量组的Lee’s指数较模型组的有极显著差异(p＜0.01)，阳性对照组与高剂量组之间无显著差异(p＞0.05)；阳性对照组、高剂量组小鼠的脂肪湿重较模型组有极显著差异(p＜0.01)，中剂量组较模型组有显著差异(p≤0.05)；高剂量组及阳性对照组的脂肪系数较模型组有显著差异(p≤0.05)；高剂量组和阳性对照组的各指标均无显著差异(p＞0.05)。
以上实验结果表明，本发明栘[木衣]多酚提取物能够降低小鼠的Lee’s指数、脂肪系数和脂肪湿重，对于小鼠单纯性肥胖症具有治疗作用。
奥利司他是目前减肥药物中，性质较为稳定，比较健康的减肥药物之一，以上实验结果显示750mg/kg﹒bw栘[木衣]多酚DC与60mg/kg﹒bw的奥利司他其作用相当，奥利司他是高纯度的化学药剂，本发明栘[木衣]多酚提取物与其仅有10倍的差异，表明其具有较好的开发潜力。
3.4栘[木衣]多酚(DC)对小鼠血清生化指标的影响，结果见表10。
表10栘[木衣]多酚对肥胖小鼠血清生化指标的影响(n＝8，x±s)
注：与空白组比较，#p≤0.05差异显著；##p＜0.01；差异极显著。
与模型组比较，*p≤0.05，差异显著；**p＜0.01，差异极显著。
与阳性对照组比较，△p≤0.05，差异显著；△△p＜0.01，差异极显著。
实验结果：小鼠给药20天后，与模型组小鼠比较其余各组小鼠的各项指标均有降低。其中低剂量组的胆固醇与模型组表现出显著差异(p≤0.05)，中、高剂量组、阳性对照组的胆固醇较模型组有极显著差异(p＜0.01)；高剂量组和阳性对照组的甘油三酯较模型组有极显著差异(p＜0.01)，中剂量组的与模型组有显著差异(p≤0.05)；低、中、高剂量组和阳性对照组的高密度脂蛋白与模型组的有极显著差异(p＜0.01)。高剂量组与阳性对照组的各项生化指标差异不大。
以上实验结果表明，本发明栘[木衣]多酚提取物可降低小鼠血清中的胆固醇TC、甘油三脂TG、高密度脂蛋白HDL-C、低密度脂蛋白LDL-C。机体中的TC、TG、HDL-C、LDL-C含量异常可引起肥胖、高脂血症、动脉粥样硬化和冠心病等脂质代谢异常疾病，而本发明栘[木衣]多酚提取物可有效的降低这些生化指标，表明其可有效防治此类疾病。

Claims (10)

1.栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征是：所述的提取物为栘[木衣]属植物叶的多酚提取物。
3.如权利要求1或2所述的用途，其特征是：所述的栘[木衣]属植物为栘[木衣]Docynia indica(Wall.)Dcne.。
4.如权利要求1～3任意一项所述的用途，其特征是：所述的提取物为栘[木衣]属植物的乙醇粗提物或其纯化物。
5.如权利要求4所述的用途，其特征是：所述的乙醇粗提物由下述方法制备得到：取栘[木衣]属植物，粉碎，乙醇超声提取，浓缩提取液，即得；所述纯化物中多酚含量为91.24％～91.34％w/w，根皮苷含量为87.49％～88.26％w/w。
6.如权利要求5所述的用途，其特征是：所述的乙醇粗提物中多酚含量为39.7％w/w；所述提取物中多酚含量为91.34％w/w，根皮苷含量为87.49％w/w。
7.如权利要求1～6任意一项所述的用途，其特征是：所述的药物是治疗和/或预防肥胖、高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病中一种或几种疾病的药物。
8.如权利要求7所述的用途，其特征是：所述的药物是降低血清中甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白中一种或几种浓度的药物。
9.如权利要求8所述的用途，其特征是：所述的药物是抑制消化酶的药物。
10.一种治疗和/或预防脂质代谢异常的药物，其特征是：它是以有效量栘[木衣]属植物叶的原生药粉、水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
CN201610239931.6A 2016-04-18 2016-04-18 栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途 Pending CN105770059A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610239931.6A CN105770059A (zh) 2016-04-18 2016-04-18 栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610239931.6A CN105770059A (zh) 2016-04-18 2016-04-18 栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105770059A true CN105770059A (zh) 2016-07-20

Family

ID=56397644

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610239931.6A Pending CN105770059A (zh) 2016-04-18 2016-04-18 栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105770059A (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6448232B1 (en) * 1999-08-27 2002-09-10 Joel R. L. Ehrenkranz Method of using dihydrochalcone derivatives to block glucose transfer
CN101297880A (zh) * 2007-04-30 2008-11-05 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 含根皮苷的活性提取物及其用途
CN101638423A (zh) * 2008-07-29 2010-02-03 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 根皮苷衍生物及其制备方法和用途
CN104208204A (zh) * 2013-06-03 2014-12-17 四川省中医药科学院 蔷薇科苹果属植物或其提取物的新用途

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6448232B1 (en) * 1999-08-27 2002-09-10 Joel R. L. Ehrenkranz Method of using dihydrochalcone derivatives to block glucose transfer
CN101297880A (zh) * 2007-04-30 2008-11-05 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 含根皮苷的活性提取物及其用途
CN101638423A (zh) * 2008-07-29 2010-02-03 常州高新技术产业开发区三维工业技术研究所有限公司 根皮苷衍生物及其制备方法和用途
CN104208204A (zh) * 2013-06-03 2014-12-17 四川省中医药科学院 蔷薇科苹果属植物或其提取物的新用途

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘海霞，刘刚，张晓喻，朱明君，彭彤，王战国: "栘[木衣]属植物多酚的含量测定与比较", 《食品科学》 *
范金波等: "果蔬中酚类成分及其抑制酶活性的研究进展", 《食品与发酵科技》 *
赵红辉: "类黄酮与胰蛋白酶相互作用特性的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xiao et al. Rice bran phenolic extract protects against alcoholic liver injury in mice by alleviating intestinal microbiota dysbiosis, barrier dysfunction, and liver inflammation mediated by the endotoxin–TLR4–NF-κB pathway
Gurrola-Díaz et al. Effects of Hibiscus sabdariffa extract powder and preventive treatment (diet) on the lipid profiles of patients with metabolic syndrome (MeSy)
Chang et al. Regulation of lipid disorders by ethanol extracts from Zingiber zerumbet in high-fat diet-induced rats
CN103417601B (zh) 一种具有调节血脂作用的药物组合物及其用途
CN101836725A (zh) 红曲渣产品在制备降血脂保健食品方面的应用
CN105030802B (zh) 一种木脂素类化合物的应用
Deng et al. Anti-hyperglycemic effects and mechanism of traditional Chinese medicine Huanglian Wan in streptozocin-induced diabetic rats
Ma et al. Discovery of human pancreatic lipase inhibitors from root of Rhodiola crenulata via integrating bioactivity-guided fractionation, chemical profiling and biochemical assay
Bao et al. Mongolian medicine in treating type 2 diabetes mellitus combined with nonalcoholic fatty liver disease via FXR/LXR-mediated P2X7R/NLRP3/NF-κB pathway activation
Qiu et al. Xie Zhuo Tiao Zhi formula modulates intestinal microbiota and liver purine metabolism to suppress hepatic steatosis and pyroptosis in NAFLD therapy
CN101234160B (zh) 一种降脂及保肝的中药制剂及其制备方法
Zhu et al. Danhe granule ameliorates nonalcoholic steatohepatitis and fibrosis in rats by inhibiting ceramide de novo synthesis related to CerS6 and CerK
Shao et al. The anti-inflammatory effect of zhibaidihuang decoction on recurrent oral ulcer with Sirt1 as the key regulatory target
He et al. Liang-Ge decoction ameliorates acute lung injury in septic model rats through reducing inflammatory response, oxidative stress, apoptosis, and modulating host metabolism
Ren et al. Fecal metabolomics analysis for deciphering the lipid-lowering effect of Qizhi capsule on high-fat feed induced hyperlipidemia
CN106038738A (zh) 一种栘*属植物多酚提取物及其制备方法
Shi et al. Effects of dietary supplementation with Radix Isatidis polysaccharide on egg quality, immune function, and intestinal health in hens
Zhao et al. Quercetin ameliorates hepatic fat accumulation in high-fat diet-induced obese mice via PPARs
CN105287709A (zh) 一种具有降尿酸作用的山核桃叶提取物总黄酮及其制备方法及用途
CN105770059A (zh) 栘[木衣]属植物叶及其提取物在制备防治脂质代谢异常的药物中的用途
CN108478610A (zh) 一种赶黄草提取物及其应用
CN105535152B (zh) 一种枇杷叶总倍半萜苷提取物的应用
CN109876022B (zh) 黑木耳降血脂活性部位及其制备方法和应用
CN105748538A (zh) 松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途
CN102793891B (zh) 一种降血脂抗高尿酸的中药组合物

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20160720

RJ01 Rejection of invention patent application after publication