CN105748538A - 松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途 - Google Patents

松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途 Download PDF

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许科科
张雪梅
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Abstract

本发明公开了松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途。药效实验表明，松萝水提物、醇提物能显著降低血清及肝脏甘油三酯、低密度脂蛋白的升高，还能升高血清高密度脂蛋白，进而防治高脂蛋白血症、动脉粥样硬化。此外，松萝醇提物能显著降低血清TBA、ALT及AST含量，松萝水提物可降低血清AST含量，能够保护脂质代谢紊乱所造成的肝损伤，具有防治脂肪肝的功效。松萝来源广泛，防治脂质代谢异常药效明确，具有广阔的临床应用前景。

Description

松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途
技术领域
本发明涉及松萝或其提取物的新用途，属于医药领域。
背景技术
脂质代谢异常是先天性或获得性因素造成的血液及其他组织器官中脂质及其代谢产物质和量的异常，其具体病症主要包括高脂蛋白血症等。这类疾病对人体健康的危害极大：血液中过量的脂质沉着在原本光滑的动脉内膜上，便出现类似粥样的脂类物质堆积形成的白色斑块，即动脉粥样硬化病变；严重的还会引起胰腺炎、冠心病、心绞痛、急性心梗、脑卒中等。
目前，治疗高脂血症的常用药物有：胆酸络合剂、他汀类(statins)、甾体衍生物谷固醇、烟酸、苯酸类、多不饱和脂肪酸、粘多糖及多糖类、雌激素；这些药物成本较高，且大多疗效不确切，长期应用具有一定的副作用，如消化道症状、神经症状、内分泌症状、心脑血管症状等，而且停药后体重、血脂回升快，难以达到长期治疗和预防的目的。因此，开发一种成本低廉、药效明确、无毒副作用的替代药物，成为了一个亟待解决的问题。
松萝(Usnea)为松萝科松萝属植物长松萝(UsnealongissimaAch)或节松萝(U.diffractaVain)地衣体，又名松落、天棚草、龙须草、天蓬草等。味苦、微甜、微辛、性冷，入热经，具有清肝，化痰，止血，解毒的功效。临床用于治疗头痛，目赤，咳嗽痰多，疟疾，瘰疬，白带，崩漏，外伤出血，痈肿，毒蛇咬伤。现代研究表明，松萝中含有巴尔地衣酸(bar-baticacid)、松萝酸(usnicacid)、地弗地衣酸(diffractaicacid)、拉马酸(lamaracid)、地衣聚糖(lichenstarch)等化学成分；其中，松萝酸具有抗菌、抗癌、抗肿瘤、抗细菌毒素及噬菌体、抑制原虫和阴道滴虫、松弛平滑肌和解热镇痛的作用，地衣聚糖具有抗癌、清除氧自由基、抗脂质过氧化等方面的药理活性。目前尚未见将松萝用于防治脂质代谢异常的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途，进而提供一种防治脂质代谢异常的替代药物。
本发明提供了松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途。
进一步的，所述的药物是治疗和/或预防高脂蛋白血症、肥胖、脂肪肝或动脉粥样硬化中一种或几种疾病的药物。
更进一步的，所述的药物是降低血清或肝脏中胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、总胆汁酸、谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量或升高高密度脂蛋白胆固醇含量的药物。
优选的，所述的松萝提取物为松萝水提取物或松萝醇提取物。
进一步的，所述的松萝水提取物由下述方法制备得到：取松萝生药，粉碎，加水煎煮，浓缩煎煮液，即得。
更进一步的，分三次加水煎煮，第一次加入8倍体积量水，第二、三次分别加入4倍体积量水。
进一步的，所述的松萝醇提取物由下述方法制备得到：取松萝生药，粉碎，乙醇浸提，浓缩浸提液，干燥，即得。
更进一步的，以80％乙醇水溶液为溶媒浸提两次，第一次加入6倍体积量溶媒，第二次加入4倍体积量溶媒。
进一步的，所述的药物是由松萝的原生药粉、水或有机溶剂提取物，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
本发明提供了一种治疗和/或预防脂质代谢异常的药物，它是以有效量松萝的原生药粉、水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
本发明提供了松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途。药效实验表明，松萝水提物、醇提物能显著降低血清及肝脏甘油三酯、低密度脂蛋白的升高，还能够升高血清高密度脂蛋白，进而防治高脂蛋白血症、动脉粥样硬化。此外，松萝醇提物能显著降低血清TBA、ALT及AST含量；松萝水提物对降低血清AST含量具有显著性差异，可见松萝水提物、醇提物能够保护脂质代谢紊乱所造成的肝损伤，具有防治脂肪肝的功效。松萝来源广泛，防治脂质代谢异常药效明确，具有广阔的临床应用前景。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
实施例1本发明松萝水提物的制备
称取250g的松萝生药，粉碎，加蒸馏水煎煮，共3次：第一次加水2000ml，从沸腾开始煎煮30min，过滤取药液；药渣加1000ml蒸馏水煎煮20min，过滤取药液；药渣再加1000ml蒸馏水煎煮20min，过滤取药液；合并3次滤液，浓缩，即得本发明松萝水提物。
实施例2本发明松萝醇提物的制备
称取250g的松萝生药，粉碎，以80％乙醇水溶液为溶媒浸提两次：第一次加6倍溶媒(1500ml)浸渍24小时，过滤，取药液；药渣加4倍溶媒(1000ml)浸提12小时，过滤，取药液，合并两次药液，用旋蒸仪浓缩，干燥48小时，即得本发明松萝醇提物的浸膏粉末12.07g，得率为4.828％。
以下通过药效实验证明本发明的有益效果。
实验例1本发明松萝水提物和醇提物促脂质代谢实验
1实验材料
1.1实验动物
SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重170±10g，由成都达硕生物科技有限公司提供，批号：0016522。
1.2实验药物
松萝：购于成都市荷花池药材市场。
辛伐他汀片：苏州第一制药有限公司，规格：20mg/片，生产批号：150214。
1.3实验仪器
DJZ中药粉碎机(上海淀久中药机械制造有限公司)、SK8200LH超声波清洗仪(上海科导超声仪器有限公司)、RE52-86A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)、实验室专用超纯水系统(成都唐氏康宁科技发展有限公司)、BS224S分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)、JY3002电子天平(上海精密科学仪器有限公司)、DHG-9240A电热鼓风型干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)、DK-98-1电热恒温水浴锅(天津市泰斯特仪器有限公司)、SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限公司)等。
2实验方法
2.1高脂血症动物模型的建立
2.1.1高脂饲料的配制
高脂饲料配方：78.8％基础饲料+10％猪油+10％蛋黄粉+1％胆固醇+0.2％胆盐。按配方先将基础饲料、蛋黄粉、胆固醇及胆盐混合均匀后贮存，备用；喂饲时，取一定量在按配方加入猪油，混匀，捏成团喂养大鼠。
2.1.2高脂血症动物模型的建立
选择160-180gSPF级SD大鼠，雌雄各半，适应实验环境3天后，随机分出雌雄各5只大鼠为正常组，喂食普通饲料；其余大鼠喂食高脂饲料，进行高脂血症动物模型制造，造模45天。
2.2药物的制备
2.2.1松萝水提物、醇提物的配制
(1)松萝水提物配制
合并实施例1煎煮3次所得的滤液，分别浓缩成浓度为0.2423g/ml的溶液(对雄性SD大鼠用药)和浓度为0.1394g/ml的溶液(对雌性SD大鼠用药)。密封，4℃冰箱保存，备用。
(2)松萝醇提物的配制
取根据实施例2制备的松萝醇提物的浸膏粉末，分别用蒸馏水配制成浓度为0.0117g/ml的溶液(雄性)和浓度为0.0067g/ml的溶液(雌性)。密封，4℃冰箱保存，备用。
2.2.2阳性对照药物的配制
辛伐他汀片人口服剂量为10-20mg/d，通过体表面积等效法计算得大鼠用药剂量为0.002g/kg/d。但是查得有文献记载大鼠辛伐他汀用药剂量为0.004g/kg/d,且0.02g/kg/d以下都是安全无毒的，故可以考虑适当加大阳性药的给药剂量到0.004g/kg/d。取20mg/片的辛伐他汀片13片，用0.5％CMC-Na溶液配成750mL溶液(浓度为0.00035g/ml，雄性)；另取20mg/片的辛伐他汀片8片用0.5％CMC-Na溶液配成800mL溶液(浓度为0.0002g/ml，雌性)，即得阳性对照药物，密封，4℃冰箱保存，备用。
2.3动物分组及给药方法
2.3.1实验动物分组及饲养
造模45天后，称重各模型大鼠，按每组雌雄各半原则，随机分为4组，每组10只，分别为模型对照组、阳性对照组、松萝水提物组、松萝醇提物组。加上造模前分出的正常组共分为5组。正常组仍喂饲普通饲料，其他组仍喂饲高脂饲料。
443.2给药方法
按5.0mL/只标准给所有大鼠灌胃给药(ig)，每天灌胃一次，连续给药21天。
正常组：每天灌胃0.5％CMC-Na溶液1次。
模型对照组：每天灌胃0.5％CMC-Na溶液1次。
阳性对照组：每天灌胃阳性药物溶液1次。
松萝水提物组：每天灌胃松萝水提药物溶液1次。
松萝醇提物组：每天灌胃松萝醇提药物溶液1次。
2.4标本的采集、制备
2.4.1血清样本的制备
各组大鼠灌胃21天后，于最后一次灌胃后禁食12h，不禁水。第22天，股动脉取全血，静置0.5-1小时，用高速冷冻离心机4000r/min离心15min，取上清液制得血清样本，置于-20℃冰箱冷冻保存，用于血清生化测定。
2.4.2肝组织匀浆样本的制备
2.4.2.1测定肝组织胆固醇、甘油三酯匀浆样本的制备
各组大鼠取血后，迅速取出肝，冰生理盐水冲洗、滤纸吸湿后，精确称取组织约0.05g，按比例每0.001g组织加20ul裂解液，用匀浆器破碎组织，而后室温静置10分钟。取匀浆液于70℃水浴加热10分钟，室温2000r/min离心5min，取上清液置于-20℃冰箱冷冻保存，用于肝组织胆固醇、甘油三酯测定。
2.4.2.2测定肝组织低密度脂蛋白、高密度脂蛋白匀浆样本的制备
各组大鼠取血后，迅速取出肝，冰生理盐水冲洗、滤纸吸湿后，精确称取组织，按重量(g)：体积(ml)＝1:9的比例，加入9倍体积的匀浆介质(无水乙醇)，冰水浴条件下机械匀浆，2500r/min，离心10min，取上清液置于-20℃冰箱冷冻保存，用于肝组织低密度脂蛋白、高密度脂蛋白测定。
2.5生化指标的检测
2.5.1血清、肝组织脂质生化指标测定
分别取各组血清及肝组织样本，按各检测试剂盒说明方法加样，用全波长酶标仪，测定胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。
2.5.2肝功能指标检测
各组血清样本，分别按各检测试剂盒说明方法加样，用全波长酶标仪，测定总胆汁酸(TBA)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性。
2.6数据处理与分析方法
运用SPSS16.0统计软件，对检测的生化指标数据进行单因素方差分析后，采用t检验。
3结果与分析
3.1对大鼠血液、肝组织脂质生化指标的考察
3.1.1对大鼠血清TC、肝组织TC的影响，实验结果见表1。
表1对血清TC、肝组织TC的影响
注：与正常组比较**P＜0.01；与模型对照组比较△P＜0.05，△△P＜0.01
表1结果显示，模型对照组血清TC及肝组织TC含量明显高于正常组，具有极显著性差异(p＜0.01)。与模型对照组比较，阳性药物(辛伐他汀)、本发明松萝水提物及醇提物均能显著降低血清TC含量，其中松萝醇提物降低血清TC含量的幅度最为明显，下降幅度甚至比辛伐他汀更大；阳性药物对血清TC含量有显著性差异(p＜0.05)，松萝醇提物对血清TC含量有极显著性差异(p＜0.01)。
以上实验结果表明，本发明松萝水提物及醇提物均能显著降低血清TC含量，其中松萝醇提物药效甚至优于阳性药物辛伐他汀。
3.1.2对大鼠血清TG、肝组织TG的影响，实验结果见表2。
表2对实验性高脂血症大鼠血清TG、肝组TG的影响
注：与正常组比较**P＜0.01；与模型对照组比较△P＜0.05，△△P＜0.01
表2结果显示，模型对照组血清TG、肝组织TG含量明显高于正常组，具有极显著性差异(p＜0.01)。与模型对照组比较，阳性药物、松萝醇提物均能降低血清TG含量，有极显著性差异(p＜0.01)；松萝水提物也能降低血清TG含量，有显著性差异(p＜0.05)。与模型对照组相比，松萝水提物、松萝醇提物都具有降低肝组织TG的作用，具有极显著差异(p＜0.01)，阳性药物则没有这方面的药效，其中，松萝水提物降低肝组织TG的作用更为明显。
以上实验结果表明，本发明松萝水提物及醇提物均能显著降低血清、肝组织TG含量，阳性药物辛伐他汀则没有观测到具有降低肝组织TG的药效。
3.1.3对大鼠血清HDL、肝组织HDL的影响，实验结果见表3。
表3对血清HDL、肝组织HDL的影响
注：与正常组比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较△△P＜0.01
表3结果显示，模型对照组血清HDL含量明显低于正常组，具有极显著性差异(p＜0.01)，肝组织HDL含量也明显低于正常组，具有显著性差异(p＜0.05)。与模型对照组比较，松萝水提物、松萝醇提物均能显著升高血清HDL含量，有极显著性差异(p＜0.01)，其中松萝水提物升高血清HDL含量的作用更为明显，阳性药物则没有这方面的药效。
以上实验表明，本发明松萝水提物及醇提物均能显著升高血清HDL含量，阳性药物辛伐他汀则没有观测到具有升高血清HDL含量的药效。
3.1.4对大鼠血清LDL、肝组织LDL的影响，实验结果见表4。
表4对血清LDL、肝组织LDL的影响
注：与正常组比较**P＜0.01；与模型对照组比较△P＜0.05，△△P＜0.01
表4结果显示，模型对照组血清LDL、肝组织LDL含量明显高于正常组，具有极显著性差异(p＜0.01)。与模型对照组比较，阳性药物、松萝水提物、松萝醇提物均能降低血清LDL含量，有极显著性差异(p＜0.01)。与模型对照组比较，松萝水提物能明显降低肝组织LDL含量，有极显著性差异(p＜0.01)，松萝醇提物也能降低肝组织LDL含量，有显著性差异(p＜0.05)，阳性药物则没有这方面的药效。其中，松萝水提物降低血清、肝组织LDL的作用更为显著。
以上实验表明，本发明松萝水提物及醇提物均能显著降低血清、肝组织LDL含量，阳性药物辛伐他汀则没有观测到具有降低肝组织LDL含量的药效。
3.2对大鼠肝功能指标的考察，主要考察指标为TBA(总胆汁酸)、AST(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)，实验结果见表5。
表5对大鼠血清TBA、AST、ALT的影响
注：与正常组比较*P＜0.05；与模型对照组比较△P＜0.05，△△P＜0.01
表5结果显示，模型对照组血清TBA、AST含量高于正常组，具有显著性差异(p＜0.05)。与模型对照组比较，松萝醇提物能降低血清TBA、ALT含量，具有显著性差异(p＜0.05)；能明显降低血清AST含量，具有极显著性差异(p＜0.01)。与模型对照组比较，松萝水提物具有降低血清AST含量的作用，具有显著性差异(p＜0.05)。阳性药物则没有降低血清TBA、ALT含量的作用。
以上实验表明，本发明松萝醇提物能显著降低血清中TBA、ALT及AST含量，松萝水提物能显著降低AST含量，阳性药物辛伐他汀则没有观测到具有降低血清TBA、ALT含量的药效。
血脂是血浆或血清中的脂类，包括胆固醇、甘油三酯、磷脂、游离脂肪酸等。高脂血症就是指血液中一种或多种脂质成分异常升高，超出正常范围，如果符合以下一项或几项，就说明患有高脂血症：总胆固醇、甘油三酯过高；低密度脂蛋白过高；高密度脂蛋白过低等。
实验例1考察了大鼠血清及肝组织中上述脂质成分的含量。综合实验结果分析可知，松萝水提物、醇提物能显著降低血清及肝脏甘油三酯、低密度脂蛋白的升高，还能够升高血清高密度脂蛋白，表明其具有防治高脂蛋白血症、动脉粥样硬化的药效。
此外，松萝醇提物能显著降低血清TBA、ALT及AST含量；松萝水提物对降低血清AST含量具有显著性差异(p＜0.05)，可见松萝水提物、醇提物能够保护脂质代谢紊乱所造成的肝损伤，具有防治脂肪肝的功效，且松萝醇提物药效更佳。

Claims (10)

1.松萝或其提取物在制备治疗和/或预防脂质代谢异常的药物中的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其特征是：所述的药物是治疗和/或预防高脂蛋白血症、肥胖、脂肪肝或动脉粥样硬化中一种或几种疾病的药物。
3.如权利要求2所述的用途，其特征是：所述的药物是降低血清或肝脏中胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、总胆汁酸、谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量或升高高密度脂蛋白胆固醇含量的药物。
4.如权利要求1所述的用途，其特征是：所述的松萝提取物为松萝水提取物或松萝醇提取物。
5.如权利要求4所述的用途，其特征是：所述的松萝水提取物由下述方法制备得到：取松萝生药，粉碎，加水煎煮，浓缩煎煮液，即得。
6.如权利要求5所述的用途，其特征是：分三次加水煎煮，第一次加入8倍体积量水，第二、三次分别加入4倍体积量水。
7.如权利要求4所述的用途，其特征是：所述的松萝醇提取物由下述方法制备得到：取松萝生药，粉碎，乙醇浸提，浓缩浸提液，干燥，即得。
8.如权利要求7所述的用途，其特征是：以80％乙醇水溶液为溶媒浸提两次，第一次加入6倍体积量溶媒，第二次加入4倍体积量溶媒。
9.如权利要求1-8任意一项所述的用途，其特征是：所述的药物是由松萝的原生药粉、水或有机溶剂提取物，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
10.一种治疗和/或预防脂质代谢异常的药物，其特征是：它是以有效量松萝的原生药粉、水或有机溶剂提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
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