CN101571483A - 一种化学发光底物液 - Google Patents
一种化学发光底物液 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101571483A CN101571483A CN 200810105504 CN200810105504A CN101571483A CN 101571483 A CN101571483 A CN 101571483A CN 200810105504 CN200810105504 CN 200810105504 CN 200810105504 A CN200810105504 A CN 200810105504A CN 101571483 A CN101571483 A CN 101571483A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- luminous
- substrate liquid
- agent solution
- luminous substrate
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000000758 substrate Substances 0.000 title claims abstract description 90
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 62
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 37
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 66
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 44
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 239000011630 iodine Substances 0.000 claims description 16
- HXITXNWTGFUOAU-UHFFFAOYSA-N phenylboronic acid Chemical class OB(O)C1=CC=CC=C1 HXITXNWTGFUOAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N urea hydrogen peroxide Chemical compound OO.NC(N)=O AQLJVWUFPCUVLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000012744 reinforcing agent Substances 0.000 claims description 12
- GHXRKGHKMRZBJH-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O.OB(O)O GHXRKGHKMRZBJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 8
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 claims description 7
- 238000013016 damping Methods 0.000 claims description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 7
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 abstract description 10
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000891 luminescent agent Substances 0.000 abstract 2
- YXVFYQXJAXKLAK-UHFFFAOYSA-N biphenyl-4-ol Chemical group C1=CC(O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 YXVFYQXJAXKLAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 21
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 16
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 9
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 7
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 7
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- KQDJTBPASNJQFQ-UHFFFAOYSA-N 2-iodophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1I KQDJTBPASNJQFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 3
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 description 3
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 2
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 101100046775 Arabidopsis thaliana TPPA gene Proteins 0.000 description 1
- 240000003291 Armoracia rusticana Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011095 buffer preparation Methods 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000005281 excited state Effects 0.000 description 1
- 230000005283 ground state Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- XZZNDPSIHUTMOC-UHFFFAOYSA-N triphenyl phosphate Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(OC=1C=CC=CC=1)(=O)OC1=CC=CC=C1 XZZNDPSIHUTMOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明公开了一种可应用于免疫检测领域的化学发光底物液，包含发光剂溶液和氧化剂溶液，所述的发光剂溶液中含有增强剂4－羟基联苯和4－碘代苯基硼酸、发光剂鲁米诺或鲁米诺衍生物以及缓冲液。本发明的化学发光底物液稳定性高、发光效果好、发光时间长、灵敏度高、成本低。
Description
技术领域
本发明涉及免疫分析领域，更具体地说，涉及一种可应用于免疫检测领域的化学发光底物液。
背景技术
化学发光是指伴随化学反应过程所产生的光的发射现象。某些物质在进行化学反应时，吸收了反应过程中所产生的化学能，使反应产物分子激发到电子激发态。当电子从激发态的最低振动能级回到基态的各个振动能级时产生辐射，多余的能量以光子的形式释放出来，这一现象称为化学发光。发光免疫分析(luminescence immunoassay，LIA)是将化学发光或生物发光体系与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。LIA具有灵敏度高、特异性强、无放射性危害等优点，已部分取代放射免疫分析应用于生物学、医学研究和临床实验诊断中。
根据发光反应的不同体系和标记物及标记方法的不同，发光免疫分析大体可分为化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析及生物发光免疫分析三种类型。其中化学发光酶免疫分析技术是用与某一发光反应的酶来标记抗原或抗体，免疫反应后，加入发光试剂，测定发光体系的发光强度进行抗原或抗体测定。辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)-鲁米诺(Luminol)系统是其中的一个重要发展方向。
以HRP催化Luminol的化学发光反应为氧化-还原反应，发光强度较高，起光较迅速，不足的是该反应为闪光型化学反应，发光信号易衰减，光信号持续时间短，造成检测结果稳定性、重现性不佳。研究发现，向该化学发光反应系统中加入一种或多种化学试剂，可以使发光信号提高，并可使发光信号持续几十分钟至几小时。这类化学试剂统称为增强剂。
通常，把参与酶反应，被酶作用的物质称为底物，含有该底物的溶液，称为底物液。
现有辣根过氧化物酶-鲁米诺系统的化学发光底物液主要由发光剂(一般为鲁米诺或鲁米诺衍生物)、氧化剂(一般为过氧化氢)、增强剂、缓冲液组成，其中增强剂是底物液中关键组分，不同的增强剂可衍生出不同的底物液配方。
随着增强剂的深入研究，以辣根过氧化物酶为标记物的化学发光免疫分析成为主要发展趋势。目前国内化学发光底物液还处于研制阶段，大多需要进口，成本较高。
化学发光底物液通常由发光剂溶液和氧化剂溶液组成。发光剂溶液含有化学发光剂及增强剂，并加入缓冲溶液配制而成。氧化剂溶液由氧化剂和缓冲溶液配制而成。在使用前两者等体积混合，加入到待测载体中进行反应。
中国专利CN200410005756.1公开了采用对碘苯酚作为增强剂的底物液。但仅以对碘苯酚为增强剂时，其背景发光值高，灵敏度低，发光强度较低。
中国专利CN200510071823.4公开了采用对碘苯酚和四苯硼钠作为增强剂的底物液。该配方同仅采用对碘苯酚作为增强剂的配方相比，增强发光的效果有限，灵敏度仍然较低。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一种稳定的、发光效果好、发光时间(平台期)长、灵敏度高、成本低的化学发光底物液。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种化学发光底物液，包含发光剂溶液和氧化剂溶液，其中发光剂溶液中含有增强剂4-羟基联苯和4-碘代苯基硼酸、发光剂鲁米诺或鲁米诺衍生物以及缓冲液。
本发明的化学发光底物液成本低，发光强度与进口发光底物无明显差别，在免疫分析领域完全可替代进口底物液，适用于半自动化学发光测量仪，也可用于全自动的测量系统。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进：
化学发光底物液的发光剂溶液中含有：
4-羟基联苯0.1～1mmol/L，4-碘代苯基硼酸0.03～0.5mmol/L，鲁米诺或鲁米诺衍生物1～15mmol/L和0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液，pH8.0～9.0。
采用上述进一步方案的有益效果是发光强度高，灵敏度强，并且平台期长。
在上述进一步方案的基础上，所述化学发光底物液的发光剂溶液中各组分优选浓度为：
4-羟基联苯0.3mmol/L，4-碘代苯基硼酸0.05mmol/L，鲁米诺或鲁米诺衍生物10mmol/L，0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液pH 8.7。
在上述进一步方案的基础上，所述化学发光底物液的发光剂溶液中各组分优选浓度为：
4-羟基联苯0.3mmol/L，4-碘代苯基硼酸0.05mmol/L，鲁米诺10mmol/L，0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液pH 8.7。
以上所述的发光剂溶液中，所用的缓冲液还可采用其他常规的缓冲液系统，例如Tris-HCl缓冲液等。
以上所述的化学发光底物液中的氧化剂溶液中，氧化剂可采用过氧化脲，其浓度为0.5～10mmol/L，吐温20(Tween20)浓度为0.05～0.5％(体积)，磷酸盐缓冲液0.2mol/L，其pH范围为6.5～7.8。
以上所述的化学发光底物液的氧化剂溶液中的缓冲液也可采用其他常规的缓冲液系统，例如硼酸-硼砂缓冲液，Tris-HCl缓冲液。
在上述进一步方案的基础上，所述化学发光底物液的氧化剂溶液中各组分优选方案为：
过氧化脲浓度为3.5mmol/L，吐温20(Tween20)浓度为0.1％(体积)，磷酸盐缓冲液0.2mol/L，pH为7.2。
附图说明
图1为促甲状腺素(TSH)浓度-发光值校准曲线图(进口对照发光底物液)；
图2为促甲状腺素(TSH)浓度-发光值校准曲线图(本发明发光底物液)；
图3为进口对照发光底物液和本发明发光底物液发光平台期比较图；
具体实施方式
以下结合附图对本发明的原理和特征进行描述，所举实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1
配制1000mL化学发光底物液的发光剂溶液和氧化剂溶液，具体配方如下。
化学发光底物液发光剂溶液：
鲁米诺 10mmol/L
4-羟基联苯 0.3mmol/L
4-碘代苯基硼酸 0.05mmol/L
0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液 pH 8.7
化学发光底物液氧化剂溶液：
过氧化脲 3.5mmol/L
吐温20 0.1％(体积)
0.2mol/L磷酸盐缓冲液 pH7.2
化学发光底物的发光剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取鲁米诺1.7716g，4-羟基联苯0.051g，4-碘代苯基硼酸0.012g，硼酸11.4g，硼砂4.9g，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 8.7。
化学发光底物液的氧化剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取过氧化脲0.329g，Tween-20 1mL，Na2HPO4·12H2O 51.58g，NaH2PO4·2H2O 8.74g，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 7.2。
实施例2
比较上述实施例1中所述发光底物液与对照市售进口美国monobind公司生产的signal Reagent A和signal Reagent B发光底物液在测定促甲状腺素(TSH)实验中的发光强度。
实验步骤：样本、校准品及酶标记物各加50μL于微孔板中，室温反应45分钟后，用洗涤液洗5遍，然后在吸水纸上扣干，每孔加入混合后的的发光底物液100μL，室温避光5分钟后，用化学发光仪检测每孔的相对发光值(RLU)。
分别用市售进口美国monobind公司生产的signal Reagent A和signalReagent B发光底物液和实施例1中的发光底物液分别对校准品进行实验，结果如下：
表1 进口对照发光底物液与本发明发光底物液不同校准品浓度发光值表
| 校准品浓度μIU/mL | 进口对照发光底物液相对发光值RLU | 实施例1所述底物液相对发光值RLU |
| 0 | 326 | 341 |
| 0.1 | 1440 | 4585 |
| 0.5 | 6170 | 16624 |
| 2.5 | 33314 | 62702 |
| 10 | 159949 | 228704 |
| 40 | 807126 | 893029 |
以上述进口对照发光底物测定促甲状腺素(TSH)浓度-发光值数据进行线性拟合：
Log(X)-Log(Y)
拟合方程：
Log(Y)＝1.0990Log(X)+4.1149
相关系数：0.9997。
绘制图1，进口对照发光底物液促甲状腺素(TSH)浓度-发光值校准曲线图。
以上述本发明发光底物液促甲状腺素(TSH)浓度-发光值数据进行线性拟合：
Log(X)-Log(Y)
拟合方程：
Log(Y)＝0.8892Log(X)+4.4866
相关系数：0.9993。
绘制图2，本发明底物液促甲状腺素(TSH)浓度-发光值校准曲线图。
参见图1和图2可看出，本发明化学发光底物液发光强度与进口对照发光底物液比较差别不大，但信噪比相对进口发光底物高，灵敏度增加。
分别用市售美国monobind公司生产的signal Reagent A和signalReagent B(进口对照发光底物液)和实施例1中的发光底物液对样本进行实验，结果如下：
表2 进口对照发光底物液与本发明发光底物液对样本检测浓度发光值表
实施例3
比较上述实施例1中所述发光底物液与市售进口美国monobind公司生产的signal Reagent A和signal Reagent B发光底物液(进口对照发光底物液)测定促甲状腺素(TSH)实验中的发光平台期。
样本及酶标记物各加50μL于微孔板中，室温反应45分钟后，用洗涤液洗5遍，然后在吸水纸上扣干，每孔加入混合后的的发光底物液100μL。加完发光底物液后，每隔5分钟用发光仪测量一次，连续测量70分钟，统计相同样本的发光值在70分钟内的变化情况。
分别使用进口发光底物液和实施例1所述发光底物液进行实验。
结果如下：
表3 进口对照发光底物液与本发明发光底物液发光平台测定实验相对发光值表
| 时间min | 相对发光值RLU(进口对照发光底物液) | 相对发光值RLU(实施例1所述发光底物液) |
| 5 | 807126 | 893029 |
| 10 | 790375 | 866236 |
| 15 | 767154 | 843200 |
| 20 | 742272 | 818396 |
| 25 | 722160 | 793164 |
| 30 | 697694 | 772646 |
| 35 | 673791 | 745030 |
| 40 | 653539 | 721763 |
| 45 | 633279 | 700110 |
| 50 | 613014 | 679023 |
| 55 | 593337 | 657328 |
| 60 | 573163 | 635406 |
| 65 | 553676 | 613167 |
| 70 | 533489 | 590811 |
以上表数据绘制反应时间-发光计数值图，见图3。
参见图3，从实验结果可看出，本发明化学发光底物液与进口对照发光底物液发光平台期数据对照，差别不大。
实施例4
配制1000mL化学发光底物液的发光剂溶液和氧化剂溶液，具体配方如下，
化学发光底物液发光剂溶液：
鲁米诺 1mmol/L
4-羟基联苯 0.1mmol/L
4-碘代苯基硼酸 0.03mmol/L
0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液 pH 8.7
化学发光底物液氧化剂溶液：
过氧化脲 9mmol/L
吐温20 0.05％(体积)
0.2mol/L磷酸盐缓冲液 pH7.2
化学发光底物发光剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取鲁米诺0.17716g，4-羟基联苯0.017g，4-碘代苯基硼酸0.0072g，硼酸11.4g，硼砂4.9g，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 8.7。
化学发光底物液氧化剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取过氧化脲0.846g，Tween-20 0.5mL，Na2HPO4·12H2O 51.58g，NaH2PO4·2H2O 8.74g，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 7.2。
实施例5
配制1000mL化学发光底物发光剂溶液和氧化剂溶液，具体配方如下，
化学发光底物液发光剂溶液：
鲁米诺 15mmol/L
4-羟基联苯 1mmol/L
4-碘代苯基硼酸 0.5mmol/L
0.1mol/L Tris-HCl缓冲液 pH 8.5
化学发光底物液氧化剂溶液：
过氧化脲 0.5mmol/L
吐温20 0.1％(体积)
0.2mol/L磷酸盐缓冲液 pH7.2
化学发光底物发光剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取鲁米诺2.6574g，4-羟基联苯0.17g，4-碘代苯基硼酸0.12g，Tris，12.114g，0.2mol/L HCl，147mL，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 8.5。
化学发光底物液氧化剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取过氧化脲0.047g，Tween-20，1mL，Na2HPO4·12H2O 51.58g，NaH2PO4·2H2O 8.74g，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 7.2。
实施例6
配制1000mL化学发光底物发光剂溶液和氧化剂溶液，具体配方如下，
化学发光底物液发光剂溶液：
异鲁米诺 10mmol/L
4-羟基联苯 0.3mmol/L
4-碘代苯基硼酸 0.05mmol/L
0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液 pH 8.7
化学发光底物液氧化剂溶液：
过氧化脲 3.5mmol/L
吐温20 0.5％(体积)
0.2mol/L磷酸盐缓冲液 pH7.2
化学发光底物发光剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取异鲁米诺1.7716g，4-羟基联苯0.051g，4-碘代苯基硼酸0.012g，硼酸11.4g，硼砂4.9g，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 8.7。
化学发光底物液氧化剂溶液1000mL配制可采用以下方法：取过氧化脲0.329g，Tween-20，5mL，Na2HPO4·12H2O 51.58g，NaH2PO4·2H2O 8.74g，用双蒸水溶解定溶至1000mL，pH 7.2。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种化学发光底物液，包含发光剂溶液和氧化剂溶液，其特征在于，所述发光剂溶液中含有增强剂4-羟基联苯和4-碘代苯基硼酸、发光剂鲁米诺或鲁米诺衍生物以及缓冲液。
2.根据权利要求1所述的化学发光底物液，其特征在于，其中的发光剂溶液中含有：
4-羟基联苯 0.1～1.0mmol/L
4-碘代苯基硼酸 0.03～0.5mmol/L
鲁米诺或鲁米诺衍生物 1～15mmol/L
0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液 pH 8.0～9.0。
3.根据权利要求1所述的化学发光底物液，其特征在于，其中的发光剂溶液中含有：
4-羟基联苯 0.3mmol/L
4-碘代苯基硼酸 0.05mmol/L
鲁米诺或鲁米诺衍生物 10mmol/L
0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液 pH 8.7。
4.根据权利要求1所述的化学发光底物液，其特征在于，其中的发光剂溶液中含有：
4-羟基联苯 0.3mmol/L
4-碘代苯基硼酸 0.05mmol/L
鲁米诺 10mmol/L
0.2mol/L硼酸-硼砂缓冲液 pH 8.7。
5.根据权利要求1-4之任一项所述的化学发光底物液，其特征在于，其中的氧化剂溶液中含有过氧化脲。
6.根据权利要求5所述的化学发光底物液，其特征在于，所述氧化剂溶液中含有：
过氧化脲 0.5～10mmol/L
吐温20 0.05～0.5％(体积)
0.2mol/L磷酸盐缓冲液 pH6.5～7.8。
7.根据权利要求6所述的化学发光底物液，其特征在于，所述氧化剂溶液中含有：
过氧化脲 3.5mmol/L
吐温20 0.1％(体积)
0.2mol/L磷酸盐缓冲液 pH7.2。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008101055044A CN101571483B (zh) | 2008-04-29 | 2008-04-29 | 一种化学发光底物液 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2008101055044A CN101571483B (zh) | 2008-04-29 | 2008-04-29 | 一种化学发光底物液 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101571483A true CN101571483A (zh) | 2009-11-04 |
| CN101571483B CN101571483B (zh) | 2011-11-02 |
Family
ID=41230890
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2008101055044A Active CN101571483B (zh) | 2008-04-29 | 2008-04-29 | 一种化学发光底物液 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101571483B (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102368071A (zh) * | 2011-06-30 | 2012-03-07 | 同昕生物技术（北京）有限公司 | 检测肺炎支原体IgM抗体的化学发光免疫试剂盒 |
| CN102368068A (zh) * | 2011-06-30 | 2012-03-07 | 同昕生物技术（北京）有限公司 | 检测肺炎衣原体IgM抗体的试剂盒 |
| CN102435598A (zh) * | 2011-09-06 | 2012-05-02 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 |
| CN102890083A (zh) * | 2012-09-28 | 2013-01-23 | 辽宁科骏生物有限公司 | 化学发光底物溶液和含其的试剂盒及应用其的检测方法 |
| CN103604918A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-02-26 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种发光底物及应用和含该发光底物的检测试剂盒 |
| CN109799352A (zh) * | 2019-01-29 | 2019-05-24 | 北京健坤禾润科技有限公司 | 化学发光试剂及其在免疫检测中应用 |
| CN110927371A (zh) * | 2019-08-30 | 2020-03-27 | 北京贝尔生物工程股份有限公司 | 一种稳定高效的hrp酶促化学发光底物液、其制备方法及应用 |
| WO2023207221A1 (zh) * | 2022-04-29 | 2023-11-02 | 广州中医药大学(广州中医药研究院) | 一种鲁米诺衍生物及其制备方法与应用 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5512451A (en) * | 1993-04-01 | 1996-04-30 | British Technology Group Limited | Enhancement of chemiluminescent reactions |
| CN1661370A (zh) * | 2004-02-23 | 2005-08-31 | 西安君达生物科技有限公司 | 一种高稳定性酶促化学发光方法及其底物 |
| CN1687751A (zh) * | 2005-05-25 | 2005-10-26 | 段虎 | 一种高稳定性增强化学发光底物 |
-
2008
- 2008-04-29 CN CN2008101055044A patent/CN101571483B/zh active Active
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102368071A (zh) * | 2011-06-30 | 2012-03-07 | 同昕生物技术（北京）有限公司 | 检测肺炎支原体IgM抗体的化学发光免疫试剂盒 |
| CN102368068A (zh) * | 2011-06-30 | 2012-03-07 | 同昕生物技术（北京）有限公司 | 检测肺炎衣原体IgM抗体的试剂盒 |
| CN102368071B (zh) * | 2011-06-30 | 2014-01-22 | 同昕生物技术（北京）有限公司 | 检测肺炎支原体IgM抗体的化学发光免疫试剂盒 |
| CN102368068B (zh) * | 2011-06-30 | 2014-01-22 | 同昕生物技术（北京）有限公司 | 检测肺炎衣原体IgM抗体的试剂盒 |
| CN102435598A (zh) * | 2011-09-06 | 2012-05-02 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 |
| CN102435598B (zh) * | 2011-09-06 | 2013-07-10 | 山东博科生物产业有限公司 | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 |
| CN102890083A (zh) * | 2012-09-28 | 2013-01-23 | 辽宁科骏生物有限公司 | 化学发光底物溶液和含其的试剂盒及应用其的检测方法 |
| CN103604918A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-02-26 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种发光底物及应用和含该发光底物的检测试剂盒 |
| CN109799352A (zh) * | 2019-01-29 | 2019-05-24 | 北京健坤禾润科技有限公司 | 化学发光试剂及其在免疫检测中应用 |
| CN109799352B (zh) * | 2019-01-29 | 2022-03-08 | 北京健坤禾润科技有限公司 | 化学发光试剂及其在免疫检测中应用 |
| CN110927371A (zh) * | 2019-08-30 | 2020-03-27 | 北京贝尔生物工程股份有限公司 | 一种稳定高效的hrp酶促化学发光底物液、其制备方法及应用 |
| WO2023207221A1 (zh) * | 2022-04-29 | 2023-11-02 | 广州中医药大学(广州中医药研究院) | 一种鲁米诺衍生物及其制备方法与应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101571483B (zh) | 2011-11-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101571483B (zh) | 一种化学发光底物液 | |
| CN102435598B (zh) | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 | |
| Mayer et al. | Luminescent labels—more than just an alternative to radioisotopes? | |
| Dodeigne et al. | Chemiluminescence as diagnostic tool. A review | |
| US20150323541A1 (en) | Methods and reagents for analyte detection | |
| CN103344633B (zh) | 一种碱性磷酸酶的化学发光底物液 | |
| Kricka | Ultrasensitive immunoassay techniques | |
| CN103293145A (zh) | 一种化学发光试剂 | |
| CN104990912A (zh) | 一种碱性磷酸酶的酶促化学发光底物 | |
| CN102313732A (zh) | 增强和调节化学发光反应的光发射的方法 | |
| CN105806830A (zh) | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液、其制备方法及应用 | |
| CN106990100A (zh) | 一种稳定的hrp酶促化学发光底物液 | |
| CN104655618A (zh) | 一种检测体液中碱性磷酸酶的方法 | |
| JPS62174637A (ja) | 化学発光反応成分検出感度増大法 | |
| CN1201150C (zh) | 一种组合物,化学发光体系及其应用 | |
| CN101769927B (zh) | 癌胚抗原检测微粒、其制备及应用 | |
| CN103713119B (zh) | 用于检测全自动化学发光免疫测定仪性能的试剂盒 | |
| CN104049080A (zh) | 化学发光增敏液及其制备方法 | |
| CN104020162B (zh) | 化学发光增敏液及其制备方法 | |
| CN1257904A (zh) | 酶促化学发光反应的新型增强剂 | |
| CA2373264C (en) | Chemiluminescence redox assay to quantify analytes in biological samples | |
| JP3792898B2 (ja) | ペルオキシダーゼ活性の測定方法 | |
| JP4028648B2 (ja) | ペルオキシダーゼ活性の測定方法 | |
| JP4286356B2 (ja) | ペルオキシダーゼ活性の測定方法 | |
| JP5048889B2 (ja) | ペルオキシダーゼ活性の測定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: BEIJING KEMEI BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO., LTD. Free format text: FORMER OWNER: KEMEI DONGYA BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO., LTD., BEIJING Effective date: 20111031 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20111031 Address after: 100094 Beijing city Haidian District Yongfeng base Feng Xian Road No. 7 North Park Patentee after: Beijing Kemei Biological Technology Co., Ltd. Address before: 100094, Beijing, Yongfeng base, No. 7, Feng Yin Road, Haidian District, 6 floor Patentee before: Kemei Dongya Biological Technology Co., Ltd., Beijing |
|
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 100094 Beijing Haidian District Yongfeng Base Fengxianzhong Road 7 Beike Modern Manufacturing Park Incubation Building Patentee after: Kemei Diagnostic Technology Co., Ltd Address before: 100094 Beijing city Haidian District Yongfeng base Feng Xian Road No. 7 North Park Patentee before: Beijing Kemei Biological Technology Co., Ltd. |
|
| CP03 | Change of name, title or address | ||
| CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 100094 Beijing Haidian District Yongfeng Base Fengxianzhong Road 7 Beike Modern Manufacturing Park Incubation Building Patentee after: Kemei Diagnostic Technology Co., Ltd Address before: 100094 Beijing city Haidian District Yongfeng base Feng Xian Road No. 7 North Park Patentee before: Beijing Kemei Biological Technology Co., Ltd. |
|
| CP03 | Change of name, title or address |