CN101538546B - 一种乳酸球菌增殖培养基及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种乳酸球菌增殖培养基，由培养基A和培养基B组成，以重量比计，培养基A由脱脂乳粉、全脂奶粉、乳糖和水组成，培养基B由酵母浸粉、抗坏血酸钠、吐温、脯氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐、缬氨酸和水组成，以占形成的乳酸球菌增殖培养基的重量比计，所述培养基A中的脱脂乳粉占5％-12％，全脂乳粉占3％-10％，乳糖占1％-4％，水占50％-80％；所述培养基B中的酵母浸粉占0.4％-2％，抗坏血酸钠占0.02％-0.50％，吐温80占0.1-1％，脯氨酸占0.02-0.5％，L-半胱氨酸盐酸盐占0.002-0.05％，缬氨酸占0.02％-0.2％，水占5％-30％。本发明同时公开了该培养基的制备方法。本发明的培养基具有成本低、培养周期短、菌体浓度高的优点。

Description

一种乳酸球菌增殖培养基及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种乳酸球菌增殖培养基产品及其生产方法。属于食品微生物技术领域。
背景技术
乳酸球菌为乳品工业微生物中重要的菌种资源之一，具有良好的发酵特性以及改善或调节肠道微生物菌群的平衡、增强机体免疫力、降低胆固醇水平、缓解乳糖不耐症以及抑制肿瘤细胞形成等功效。在食品向天然型、功能型发展的今天，乳酸菌制品正越来越受到人们的重视。
发酵乳制品是乳酸球菌的天然载体，已被广大消费者所认知。发酵制品的品质取决于发酵剂，优良的发酵剂不仅需要菌体自身的发酵特性和生理功效，同时也需要较高的活菌体浓度。由此，菌体的增殖培养成为制备优良发酵剂的关键因素之一。
现阶段乳酸球菌相应的增殖培养基多以番茄汁、胡萝卜汁等植物汁为主要成分，但是其没有相应的质量标准，致使产品质量无法控制与监管，造成质量不一，因此不利于大工业生产。培养时间基本为12-18小时，菌体浓度为5×109cfu/ml左右。
发明内容
本发明的目的是提供一种成本低、安全、且适于乳酸球菌快速增殖的培养基及制备方法。
本发明提供了一种乳酸球菌增殖培养基，由培养基A和培养基B组成，其中，培养基A由脱脂乳粉、全脂奶粉、乳糖和水组成，培养基B由酵母浸粉、抗坏血酸钠、吐温、脯氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐、缬氨酸和水组成，以占形成的乳酸球菌增殖培养基的重量比计，所述培养基A中的脱脂乳粉占5％-12％，全脂乳粉占3％-10％，乳糖占1％-4％，水占50％-80％；所述培养基B中的酵母浸粉占0.4％-2％，抗坏血酸钠占0.02％-0.50％，吐温80占0.1-1％，脯氨酸占0.02-0.5％，L-半胱氨酸盐酸盐占0.002-0.05％，缬氨酸占0.02％-0.2％，水占5％-30％。
本发明还提供了一种制备上述的乳酸球菌增殖培养基的方法，包括：分别按上述组分和各组分的重量比制备培养基A和培养基B，分别灭菌，冷却后将所述培养基A和培养基B在无菌条件下混合均匀。培养基A部分为乳基质，培养基B部分为非乳基质，将培养基A和培养基B分别灭菌可以防止高温条件下物质的相互反应。
本发明中，所述所述灭菌条件为：110-121℃、15-30分钟。
上述冷却为降温至55-30℃以下。
上述方法进一步还包括将乳酸球菌增殖培养基冷藏储存，储存温度为4℃以下。
本发明的培养基采用脱脂乳粉和全脂乳粉，利用它们乳脂肪的区别，来平衡碳氮比。如果只用全脂乳粉培养，菌体不好分离收集，而单纯采用脱脂乳，这样培养效果不好，菌体浓度低。
一般的培养基培养菌体的浓度只能达到109cfu/ml，而采用本发明的培养基来培养乳酸球菌，培养4-6h后菌体浓度达到6×1010cfu/ml左右。本发明的培养基为一种低成本、安全且适于乳酸球菌快速增殖的培养基，进而能够满足乳酸球菌工业化的大量应用，同时也降低其产品的生产成本。此外、本发明的培养基培养乳酸球菌，在菌体浓度和培养时间方面均优于现有培养基质，而且培养基的各组分均有相应的国家标准、行业标准或者其他相应质量标准，进而可以控制原料的质量，因此其更利于工业化生产。
具体实施方式
下面将结合具体实施方案对本发明的方法做更详细的说明。本领域技术人员应当理解，下述实施例均用于对本发明所要求保护的范围进行实例性的描述，以此概括本发明的各参数的相对范围，因而不能将之理解为对本发明的一种具体限制。
实施例1
1.乳酸球菌增殖培养基的配方，见表1：
表1培养基配方
Figure GSB00000183123800031
(上述原料重量比是各组分占形成的乳酸球菌增殖培养基的重量比。)
2.制备300g乳酸球菌增殖培养基，采用以下步骤：
1)按照上述的重量比例取培养基A和B的各组分；
2)将培养基A和培养基B分别混合均匀；
3)将培养基A和培养基B分别灭菌：110-121℃、15-30分钟；
4)将培养基分别冷却至55-30℃以下；
5)在无菌条件下将培养基A和培养基B混合均匀，制成乳酸球菌增殖培养基。
6)制备好的乳酸球菌增殖培养基储藏于4℃以下备用。
实施例2
采用表1中的培养基1的配方制备培养基，培养嗜热链球菌，用于增殖培养。
培养方法：接菌量5％，200rpm，42℃条件下培养，以15％(W/V)氢氧化钠碱液控制发酵液pH值6.1。
发酵6个小时后，结束发酵，乳酸球菌的菌体浓度可达8.7×1010cfu/ml。
实施例3
采用表1中的培养基2的配方制备培养基，培养嗜热链球菌，用于增殖培养。
培养方法：接菌量5％，200rpm，42℃条件下培养，以15％(W/V)氢氧化钠碱液控制发酵液pH值6.5。
发酵6个小时后，结束发酵，乳酸球菌的菌体浓度可达7.9×1010cfu/ml。
实施例4
采用表1中的培养基3的配方制备培养基，培养嗜热链球菌，用于增殖培养。
培养方法：接菌量5％，200rpm，42℃条件下培养，以15％(W/V)氢氧化钠碱液控制发酵液pH值6.1。
发酵6个小时后，结束发酵，乳酸球菌的菌体浓度可达8.2×1010cfu/ml。
一般的培养基培养菌体的浓度只能达到109cfu/ml，而采用本发明的培养基来培养乳酸球菌，培养4-6h后菌体浓度达到6×1010cfu/ml左右，培养时间短、菌体浓度高。同时本发明的培养基具有成本低、能够满足乳酸球菌工业化的大量应用的优点。
以上所述仅为本发明示意性的具体实施方式，并非用以限定本发明的范围。任何本领域的技术人员，在不脱离本发明的构思和原则的前提下所作的等同变化、修改与结合，均应属于本发明保护的范围。

Claims (6)

1.一种乳酸球菌增殖培养基，由培养基A和培养基B组成，其中，培养基A由脱脂乳粉、全脂奶粉、乳糖和水组成，培养基B由酵母浸粉、抗坏血酸钠、吐温、脯氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐、缬氨酸和水组成，以占形成的乳酸球菌增殖培养基的重量比计，所述培养基A中的脱脂乳粉占5％-12％，全脂乳粉占3％-10％，乳糖占1％-4％，水占50％-80％；所述培养基B中的酵母浸粉占0.4％-2％，抗坏血酸钠占0.02％-0.50％，吐温80占0.1-1％，脯氨酸占0.02-0.5％，L-半胱氨酸盐酸盐占0.002-0.05％，缬氨酸占0.02％-0.2％，水占5％-30％。
2.一种制备如权利要求1所述的乳酸球菌增殖培养基的方法，包括：分别按权利要求1中所述的组分和各组分的重量比制备培养基A和培养基B，分别灭菌，冷却后将所述培养基A和培养基B在无菌条件下混合。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述灭菌条件为：110-121℃、15-30分钟。
4.如权利要求3所述的方法，其中，所述冷却为降温至55-30℃以下。
5.如权利要求4所述的方法，进一步还包括将所述乳酸球菌增殖培养基冷藏储存。
6.如权利要求5所述的方法，其中，所述储存温度为4℃以下。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1400304A (zh) * 2002-07-16 2003-03-05 李盛学 以两歧双歧杆菌为主微生态制剂的液－固结合发酵工艺
CN1507878A (zh) * 2002-12-15 2004-06-30 东北农业大学 乳酸杆菌干粉制品的制作方法
CN1584046A (zh) * 2004-06-07 2005-02-23 天津科技大学 检验牛乳中抗生素残留量的微生物制剂制备方法及其应用

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