CN101502542B - 一种猕猴桃根提取物的提取方法及其抗肝损伤的应用 - Google Patents

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Abstract

一种猕猴桃根提取物的提取方法及其抗肝损伤的应用，属于猕猴桃根提取物的制备和应用技术领域。本发明以猕猴桃根或根皮为原料，利用乙醇溶液进行提取，再上柱分离，提取得到有抗肝损伤作用有效成份的猕猴桃根提取物。该猕猴桃根提取物对急性四氯化碳性肝损伤小鼠血浆的丙氨酸转氨酶ALT有明显下降，降幅达64.72％，大于甘草酸铵的作用，对血清门冬氨酸转氨酶AST也有明显下降，降幅达28.26％，但不如甘草酸铵的作用。本发明为猕猴桃根的综合利用提供了新的有价值的用途。

Description

一种猕猴桃根提取物的提取方法及其抗肝损伤的应用
技术领域
一种猕猴桃根提取物的提取方法及其抗肝损伤的应用，本发明涉及提取分离猕猴桃根抗肝损伤的有效成分的方法。属于猕猴桃根提取物的制备和应用技术领域。
背景技术
猕猴桃根为猕猴桃科植物猕猴桃(Actinidia chinensis planch)的根或根皮，具有清热、利尿、活血、消肿、治肝炎和抗癌作用，民间用猕猴桃根水煎液治疗肝炎和肝癌取得较好的效果。
有关猕猴桃根的抗肝损伤的研究国内尚未见报道，国外有关的研究也很少。
我们在对不同种猕猴桃根部乙醇提取物进行研究时，发现其不但有较好的抗肿瘤活性，也具有很好的抗肝损伤的活性。
为充分利用猕猴桃资源、为肝炎患者的治疗提供更多的途径，进一步开发猕猴桃植株的根或根皮，生产抗肝损伤产品很有必要。参考文献：
1.江苏新医学院.中药大辞典[M].上海人民出版社，1977，2(2)：11.
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发明内容
本发明针对上述现有现状，提供一种更利于工业化生产的、更安全的抗肝损伤有效成分的生产工艺。
为达上述目的，本发明采用如下的技术方案：一种猕猴桃根提取物的提取方法，依次包括如下步骤：
A、猕猴桃植株的根或根皮，粉碎至40目，按kg/L计料液比1∶6加入60％～95％质量浓度的乙醇，在60～80℃的温度中提取3～4小时，离心分离出乙醇液，渣再按料液比1∶6加入60％～95％质量浓度的乙醇，在60～80℃的温度中提取3～4小时，共三次，合并乙醇提取液，浓缩，得乙醇提取物；
B、取乙醇提取物，上AB-8或X-5大孔树脂柱，依次用1-2倍柱体积的50％、60％、70％、80％质量浓度的乙醇洗脱，收集合并60％和70％质量浓度的乙醇洗脱液，浓缩，得猕猴桃根有效成分的提取物：
Figure G2009100262234D00021
化合物1：2α，3β，19，23-四羟基乌苏酸，  化合物2：2β，3β，10-三羟基乌苏酸，
Figure G2009100262234D00022
化合物3：2α，3β，14β-三羟基乌苏酸，    化合物4：2α，3β，19α，23-四羟基齐墩果酸，
Figure G2009100262234D00023
化合物5：2α，3β，23-三羟基乌苏酸，      化合物6：2α，3β-二羟基乌苏酸，
Figure G2009100262234D00024
化合物7：2β，3β-二羟基乌苏酸，          化合物8：2β，3β-23-三羟基乌苏酸。
所述猕猴桃植株的根或根皮选用的猕猴桃植株为软枣猕猴桃、中越猕猴桃、山梨猕猴桃、美味猕猴桃、中华枣猕猴桃中的一种。
得到的猕猴桃根提取物的应用，对急性四氯化碳性肝损伤小鼠血浆的丙氨酸转氨酶ALT有明显下降，降幅达64.72％，大于甘草酸铵的作用，而对血清门冬氨酸转氨酶AST也有明显下降，降幅达28.26％，但不如甘草酸铵的作用。
抗肝损伤活性：
60％乙醇洗脱部分对急性四氯化碳肝损伤小鼠血浆ALT/AST的影响见表1。
表1.猕猴桃根有效成分对急性四氯化碳肝损伤小鼠血浆ALT/AST的影响
Figure G2009100262234D00031
★P＜0.05与模型组相比较
猕猴桃根的有效成分对急性四氯化碳性肝损伤小鼠血浆的丙氨酸转氨酶(ALT)有明显下降，大于甘草酸铵的作用，而对血清门冬氨酸转氨酶(AST)也有明显下降，但作用不如甘草酸铵。
本发明的有益效果：本发明以猕猴桃根或根皮为原料，利用乙醇溶液进行提取，再上柱分离，提取得到有抗肝损伤作用的有效成份。该猕猴桃根提取物对急性四氯化碳性肝损伤小鼠血浆的丙氨酸转氨酶ALT有明显下降，大于甘草酸铵的作用，对血清门冬氨酸转氨酶AST也有明显下降，但作用不如甘草酸铵。本发明为猕猴桃根的综合利用提供了新的有价值的用途。
附图说明
图1化合物1的NMR碳谱
图2化合物2的NMR碳谱
图3化合物3的NMR碳谱
图4化合物4的NMR碳谱
图5化合物5的NMR碳谱
图6化合物6的NMR碳谱
图7化合物7的NMR碳谱
图8化合物8的NMR碳谱
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：
将1kg猕猴桃根粉碎置于10升三角瓶中，用6升70％乙醇提取，搅拌3-4小时，提取温度为80℃，提取三次。离心分离除去残渣，浓缩后上大孔树脂(型号AB-8或X-5)层析柱(60×600mm)，分别用50％、60％、70％、80％乙醇梯度洗脱，收集60-70％乙醇洗脱液。对收集到的猕猴桃根洗脱液浓缩到无乙醇止，得絮状沉淀物，离心分离后将滤饼置于真空干燥箱内，控制温度50-60℃，干燥3小时。得猕猴桃根提取物。
实施例2：
将10kg猕猴桃根粉碎置于100升提取罐中，用60升80％乙醇提取，搅拌3-4小时，提取温度为70℃，提取三次。离心分离除去残渣，浓缩后上大孔树脂(型号AB-8或X-5)层析柱(100×1500mm)，分别用50％、60％、70％、80％乙醇梯度洗脱，收集60％、70％乙醇洗脱液。对收集到的猕猴桃根洗脱液浓缩到无乙醇止，得絮状沉淀物，离心分离后将滤饼置于真空干燥箱内，控制温度50-60℃，干燥3小时。得猕猴桃根提取物。
实施例3：
将50kg猕猴桃根粉碎置于500升提取罐中，用300升90％乙醇提取，搅拌3-4小时，提取温度为60℃，提取三次。离心分离除去残渣，浓缩后上大孔树脂(型号AB-8，X-5)层析柱(300×1800mm)，分别用50％、60％、70％、80％乙醇梯度洗脱，收集60-70％乙醇洗脱液。
对收集到的猕猴桃根洗脱液浓缩到无乙醇止，得絮状沉淀物，离心分离后将滤饼置于真空干燥箱内，控制温度50-60℃，干燥3小时。得猕猴桃根提取物。

Claims (3)

1.一种猕猴桃根提取物的提取方法，其特征在于步骤为：
A、猕猴桃植株的根或根皮，粉碎至40目，按kg/L计料液比1∶6加入60％～95％质量浓度的乙醇，在60～80℃的温度中提取3～4小时，离心分离出乙醇液，渣再按料液比1∶6加入60％～95％质量浓度的乙醇，在60～80℃的温度中提取3～4小时，共三次，合并乙醇提取液，浓缩，得乙醇提取物；
B、取乙醇提取物，上AB-8或X-5大孔树脂柱，依次用1-2倍柱体积的50％、60％、70％、80％质量浓度的乙醇洗脱，收集合并60％和70％质量浓度的乙醇洗脱液，浓缩，得猕猴桃根有效成分的提取物：
Figure FSB00000262044300011
化合物1：2α，3β，19，23-四羟基乌苏酸，    化合物2：2β，3β，10-三羟基乌苏酸，
Figure FSB00000262044300012
化合物3：2α，3β，14β-三羟基乌苏酸，      化合物4：2α，3β，19α，23-四羟基齐墩果酸，
Figure FSB00000262044300013
化合物5：2α，3β，23-三羟基乌苏酸，        化合物6：2α，3β-二羟基乌苏酸，
Figure FSB00000262044300014
化合物7：2β，3β-二羟基乌苏酸，            化合物8：2β，3β-23-三羟基乌苏酸。
2.根据权利要求1所述的猕猴桃根提取物的提取方法，其特征在于：所述A步骤中，猕猴桃植株的根或根皮选用的猕猴桃植株为软枣猕猴桃、中越猕猴桃、山梨猕猴桃、美味猕猴桃中的一种。
3.权利要求1提取方法得到的猕猴桃根提取物在制备对急性四氯化碳性肝损伤小鼠血浆的丙氨酸转氨酶ALT有明显下降作用和对血清门冬氨酸转氨酶AST有明显下降作用的药物中的应用，其特征是对急性四氯化碳性肝损伤小鼠血浆的丙氨酸转氨酶ALT有明显下降，降幅达64.72％，大于甘草酸铵的作用，而对血清门冬氨酸转氨酶AST也有明显下降，降幅达28.26％，不如甘草酸铵的作用。
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