CN101485783A - 一种补肾益精、养血益气调经的中药复方制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗绝经后骨质疏松症的中药复方制剂及其制备，特别涉及用中药骨碎补，菟丝子，补骨脂，枸杞子，覆盆子，阿胶，香附，丹参，牛膝等原料制备的中药制剂。

Description

一种补肾益精、养血益气调经的中药复方制剂及其制备方法

技术领域：

本发明涉及一种治疗月经周期推后、量少或伴闭经、不孕等肾虚血亏证的中药复方制剂及其制备，特别涉及用中药党参，黄芪，当归，熟地，白芍，川芎，枸杞子，菟丝子，覆盆子，补骨脂，肉苁蓉，鸡血藤等原料制备的中药制剂。

背景技术：

本发明是由党参、黄芪、当归、熟地、白芍、川芎、枸杞子、菟丝子、覆盆子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤十二味药经提取加工制成的中药复方制剂，其配方为一临床验方，该方以汤剂形式用于临床多年，疗效确切，其功能补肾益精、养血益气调经。主治月经周期推后、量少或伴闭经、不孕等肾虚血亏证者。临床以汤剂口服，疗效显著。

处方中药物主要化学成分及药理作用

1、党参药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：党参中含皂苷、菊糖、植物甾醇和微量生物碱等。近10年来，国内外对党参中水水性与脂溶性成分进行了深入的研究，已从党参和川党参中分离鉴定了：甾醇类10种；糖苷类21种；生物碱及含氮成分5钟；挥发性成分34种；三萜及其它类成分13种；以及多种人体必需无机元素和氨基酸。

药理作用：党参功能补中益气，健脾益肺。现代药理报道党参具有抗心肌缺血、对微循环障碍具有改善作用；能够提高机体适应性；用水提醇沉法制得的党参注射液(每1ml相当生药1g)，对小白鼠用药组ip0.2ml/10g常压耐缺氧有明显的对抗作用，血气分析证明党参可降低氧耗量，增加供氧。

2、白芍

化学成分：含芍药甙(paeoniflorin)，芍药花甙(paeonin)、牡丹酚(paeonol)，少量氧化芍药甙(oxypaeoniflorin)、芍药内酯甙(albiflorin)、苯甲酰芍药甙(benzoylpaeoniflorin)、芍药新甙(lactiflorin)和(Z)-(1S，5R)-β-蒎烯-10-基-β-巢菜糖甙((Z)(1S，5R)-β-pinen-10-yl-β-vicianoside)。单萜芍药吉酮(paeonifloregenone)，1，2，3，4，6-黄稖酰单宁(1，2，3，4，6-pentagalloyl-glucose)、稖单宁(callotannin)以及d-儿茶素(d-catechin)、没食子酸、没食子酸乙酯、鞣质、β-谷甾醇、糖、淀粉、粘液质、还含挥发油，油中主要成分为苯甲酸和芍药酮(peonol)，根中的金属元素含量为(ppm)Mn22.4、Fe2.2、Cu0.39、Zn23.3、PL0.4，还含17种氨基酸。

药理作用：白芍功能平肝止痛，养血调经，其药理作用主要有以下几点：

①免疫调节作用：芍药苷和白芍总苷均具有双向免疫调节作用。

②对心血管系统的作用：芍药苷和白芍总苷可以扩张血管、延长小鼠常压缺氧存活时间、可增加小鼠心肌的营养性血流量。

3、覆盆子药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：含有机酸、糖类及少量VC。

药理作用：覆盆子在试管内能抑制霍乱细菌的生长，100％煎剂平板打洞对金葡菌有较抑制作用。以大鼠、免的阴道涂片及内膜切片作观察指标，覆盆子具有雌激素样作用。

4、黄芪药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：黄芪含有苷、黄酮、氨基酸、蛋白质、维生素、香豆素、有机酸及多糖等多类物质。皂苷类有黄芪甲苷(astragaloside I)、黄芪皂苷乙(astragaloside II)、黄芪苷、异黄芪苷(isoastragaloside)、大豆皂苷等四十余种。

药理作用：药理研究证明，黄芪可增强机体免疫功能，调整机体代谢，对肾脏、心血管系统均有一定的作用。

5、川芎药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：本品中主要含有苯酞类(phthalides)化合物，如：4-羟基-3-丁基苯酞(4-hydroxy-3-butylph-thalide)、藁本内酯(ligustilide)、丁烯基苯酞(butylidenephthalide)、丁基苯酞(butylphthalide)、新蛇床内酯(neocnidilide)、蛇床内酯(cnidilide)、正丁基-4，5-二氢苯酞A(senkyunolide)和其它成分如：四甲基吡嗪(tetramethylpyrazine)、大黄酚(chrysophanol)、瑟丹酸(sedanonic acid)、1-(5-羟甲基-2-呋喃基)-9氢-吡啶(3，4，6)吲哚等。

药理作用：川芎活血行气，祛风止痛。药理作用主要有以下几点：

①对心脏的作用：川芎对大鼠心肌缺血再灌注所致的损伤有预防作用，可使左心室室内压峰值(LVSP)及最大正负变化速度增大，可使再灌注室性心律失常发生率、死亡率降低使窦律恢复时间缩短。

②对冠脉循环的作用：川芎水提物及生物碱能扩张冠状动脉，增加冠脉流量，改善心肌缺氧状况。

6、补骨脂药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：补骨脂含香豆素类化合物，主要有补骨脂素、异补骨脂素。黄酮类成分有补骨脂查耳酮、补骨脂乙素、甲素等。其它还含有补骨脂酚、豆甾醇等。

药理作用：异补骨脂素、补骨脂酚对小鼠有明显的抗着床作用，补骨脂粉对去卵巢雌鼠可引起动情期变化，使子宫重量明显增加，有较强的雌激素样作用。补骨脂能提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，提高机体非特异性免疫的能力。

7、当归药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：当归中主要含有中性油成分、酸性油成分、有机酸成分、糖类、维生素、氨基酸等成分。

药理作用：当归功能补血活血，调经止痛，对机体免疫功能具有调节作用，具有改善心肌营养性血流量的作用。此外当归水煎剂还具有降低血小板聚集及抗血栓形成的作用。

8、枸杞子药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：含甜菜碱(Betaine)、酸浆红素(Physalein)、阿托品、茛菪碱、多糖隐黄素、玉蜀黍黄素(Zeaxanthin)、β-谷甾醇、亚油酸及多种氨基酸。

药理作用：枸杞子煎剂给予小鼠ip0.3ml/20g其耐缺氧能力与对照组生存时间显著的差异。枸杞子乙醇提取物100mg/kg、500mg/kg连续给药50天，对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆能力的下降有明显提高作用，并可减少心、肝、脑组织脂褐质浓度，提高RBC的SOD活力。枸杞总皂苷可显著增加小鼠耐受缺氧的能力以及延长小鼠游泳持续时间。

9、肉苁蓉药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：国内学者从肉苁蓉中分得D-甘露醇、8-麦马钱子酸苷、15种氨基酸、甜菜碱及多糖类成分。另还分得苯丙基苷类成分，

药理作用：肉苁蓉功能补肾阳，益精血。肉苁蓉乙醇提取物能明显抑制脾细胞中的空斑数，还具有调整内分泌、促进代谢及强壮作用；肉苁蓉总苷有增强细胞免疫功能的作用，肉苁蓉对阳虚和阴虚动物的肝脾核酸含量的下降和升高有调整作用，有激活肾上腺素、释放皮质激素的作用。除上述作用外，还对肾脏有一定的保护作用。

10、熟地黄药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：本品化学成分有梓醇、地黄素、桃叶珊瑚苷、地黄苷、益母草苷、单密力特苷、双氢梓醇、环烯醚萜、单萜及其甙类，其次还含有葫萝卜甙(daucosterol)、1-乙基-β-D-半乳糖甙(1-ethyl-β-D-galactoside)，还含有铁、锌锰、铬等二十余种微量元素。

药理作用：功能滋阴补血，益精填髓。现代药理证实熟地乙醇提取物能增加红细胞免疫功能和红细胞膜的稳定性。

11、菟丝子药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：菟丝子含黄酮、香豆精、甾萜类化合物，糖树脂、淀粉、蛋白质、糖类、有机酸、脂肪酸，淀粉酶等。

药理作用：菟丝子可以增加下丘脑-垂体-卵巢促黄体功能，具有助阳和增强性活力作用，有增加非特异性抵抗力作用，同时具有雌激素样作用。

12、鸡血藤药材中主要化学成分及药理作用

化学成分：鸡血藤中主要含有异黄酮类，三萜类及甾体等类型化合物等。

药理作用：现代药理表明鸡血藤对免疫系统有双向调节作用，能促进小鼠肾脏及子宫的能量代谢及合成代谢，还能促进小鼠对水和氯化物的排泄。

目前市场上治疗月经周期推后、量少或伴闭经、不孕等肾虚血亏证的中药，有些属于治标不治本，有些使用价格昂贵的成分，有些在应用过程中由于疗效不确切而中断使用。本发明提供了一种疗效确切、安全方便、副作用小、价格低廉的纯中药复方药物，比现有技术更加优越。

发明内容：

本发明提供一种治疗月经周期推后、量少或伴闭经、不孕等肾虚血亏证的中药复方制剂及其制备。

本发明是由党参、黄芪、当归、熟地、白芍、川芎、枸杞子、菟丝子、覆盆子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤十二味药经提取加工制成的中药复方制剂，其配方为：

党参   180-720g    黄芪   108-432g     当归   60-240g

熟地   60-240g     白芍   90-360g      川芎   60-240g

枸杞子 60-240g     菟丝子 90-360g      覆盆子 60-240g

补骨脂 60-240g     肉苁蓉 60-240g      鸡血藤 108-432g

优选的是：

党参360g、黄芪216g、当归120g、熟地120g、白芍180g、川芎120g、枸杞子120g、菟丝子180g、覆盆子120g、补骨脂120g、肉苁蓉120g、鸡血藤216g。

以上组成中，重量是以生药计算的，以上组成可制成药物制剂1000剂，所述1000剂指，制成的成品药物制剂，如制成胶囊制剂1000粒，片剂1000片，颗粒剂1000克，注射液1000ml，注射剂1000支等。每次服用剂量可以是1-20片，共可服用50-1000次。如作为颗粒剂，制成125袋，每次服用1-2袋，共可服用62.5-125次。

以上组成是按重量作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减少，如大规模生产可以以公斤为单位，或以吨为单位，小规模生产也可以以毫克为单位，重量可以增大或者减小，但各组成之间的生药材重量配比的比例不变。以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，如重症或轻症，肥胖或瘦小的病人，可以相应调整组成的量的配比，增加或减少不超过100％，药效不变。

以上组成中的单味中药，也可以被适当的具有相同药性的中药替换，替换后的中药制剂其药物作用不变。

本发明的中药制剂，是通过将上述配方组成的中药原料经过提取或其他方式加工，制成药物活性物质，随后，以该物质为原料，需要时加入药物可接受的载体，按照制剂学的常规技术制成的。所述活性物质可以通过分别提取中药原料得到，也可以通过共同提取中药原料得到，也可以通过其他方式得到，如：通过粉碎、压榨、煅烧、研磨、过筛、渗漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、层析等方法得到、这些活性物质可以是浸膏形式的物质，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根据制剂的不同需要决定制成不同的浓度。

本发明的中药制剂中的药物活性物质，其在制剂中所占重量百分比可以是0.1-99.9％，其余为药物可接受的载体。本发明的药物制剂，以单位剂量形式存在，所述单位剂量形式是指制剂的单位，如片剂的每片，胶囊的每粒胶囊，口服液的每瓶，颗粒剂每袋，注射剂每支等，本发明优选的是胶囊剂。

本发明的中药制剂可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括：片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如：软胶囊剂、胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂，最优选的是胶囊剂。

本发明的中药制剂，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β—环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。

本发明的制剂在使用时根据病人的情况确定用法用量。本发明的制剂在使用时根据病人的情况确定用法用量，可每日服三次，每次1-20剂，如：1-20袋或粒或片。

本发明的中药制剂可以通过以下方法制备。

以上十二味，菟丝子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤四味药材，加入2-10倍量70-95％乙醇，回流提取两次，每次1-4小时，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，备用；白芍、黄芪、当归、川芎、熟地、党参、枸杞子、覆盆子八味药材加2-10倍量水，煎煮提取3次，每次1-4小时，合并滤液，滤过，浓缩至相对密度1.20(60℃测)，放置至室温，加入乙醇使含醇量达65％，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，与上述清膏合并，混合均匀，减压干燥至干，得到药物活性成分；该成分单独或与药物可接受的载体混合，依照制剂学常规技术制成本发明的中药制剂。

本发明制剂的功能主治为：补肾益精、养血益气调经。主治月经周期推后、量少或伴闭经、不孕等肾虚血亏证者。

以下通过实验数据说明本发明的有益效果。

实验采用本发明实施例1的技术制备的胶囊剂进行，命名为：补经胶囊对补经胶囊进行了补肾调经、养血、益气和增强免疫的药效学研究，结果表明：

(1)补经胶囊有减轻无排卵型月经不调模型大鼠体重的作用，有增加该模型大鼠子宫和卵巢脏器系数的作用趋势，并有升高模型大鼠血清FSH、LH、E₂和P水平的作用，病理学检查显示，补经胶囊对模型大鼠的卵巢、子宫、乳腺的萎缩现象有改善趋势；补经胶囊能增加去卵巢模型大鼠子宫湿重和脏器系数，能升高模型大鼠血清E₂水平，对P水平也有升高趋势，病理学检查显示，补经胶囊有改善模型大鼠子宫内膜、腺体萎缩现象的趋势；补经胶囊能增加大鼠离体子宫的收缩频率、收缩强度和子宫活动力，能增强家兔在体子宫的收缩强度和子宫活动力。补经胶囊还能显著升高氢化可的松肾虚模型小鼠的肛温和延长负重游泳时间，提高胸腺、脾脏指数。可见，补经胶囊可以通过影响下丘脑-垂体-卵巢-子宫轴达到补肾调经的作用。结果提示，补经胶囊具有补肾调经作用。

(2)补经胶囊能升高失血性血虚模型小鼠HGB水平，能升高乙酰苯肼血虚模型小鼠RBC、HGB和Ret水平，说明补经胶囊具有养血作用。

(3)补经胶囊能增加限食法气虚模型小鼠自发活动次数和负重游泳时间，延长游泳劳损小鼠断头后喘气持续时间，提高小鼠耐低温存活百分率。结果显示，补经胶囊有较好的益气作用。

(4)补经胶囊能增加小鼠脾脏和胸腺系数，提高小鼠单核—巨噬细胞吞噬系统的吞噬系数。结果显示，补经胶囊具有增强细胞免疫功能的作用。

结果提示，补经胶囊具有明显的补肾益精、调经、养血、益气和提高免疫力的作用。

实验如下：

20.1 补肾调经作用

20.1.1 雄激素致无排卵月经不调大鼠试验

20.1.1.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

乌鸡白凤丸：中药阳性对照药物，由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产，生产批号：国药准字Z11020026。规格：每100粒重12克，每瓶装36克。实验时用蒸馏水配制成浓度为0.4g/ml的药液，备用。

枸橼酸氯米芬胶囊：西药阳性对照药物，由上海衡山药业有限公司生产，生产批号：060701。规格：50mg/粒，临用时用蒸馏水配成浓度为0.8mg/ml的药液，备用。

(2)实验器材

XH6010A型γ计数仪，由西安二六二厂生产。TSJ-1A型自动组织脱水机，天津天利航空机电有限公司生产。DCSK-III型超声波人体组织快速处理仪，常州市中威电子仪器厂生产。BMJ-III型包埋机、BMJ-III型病理组织包埋冷冻台、PHY-III型病理组织漂烘仪，均由常州市中威电子仪器厂生产。LEICA RM2235切片机，Olympus BH-2型显微镜。组织细胞分析诊断系统，Zoneking softronics co.ltd。

(3)主要试剂

丙酸睾丸酮注射液，由天津金耀氨基酸有限公司生产，生产批号：国药准字H12020531，规格：1ml:25mg。

大鼠E2、P、FSH、LH试剂盒，均由天津市协和医药科技有限公司生产。

20.1.1.2 实验动物

同批出生9日龄健康雌性SD大鼠，动物生产许可证号：SCXK2005-11号。由成都中医药大学实验动物中心提供，检疫后备用。

20.1.1.3 实验方法

造模^[3]及分组：取110只出生9日龄雌性SD大鼠，随机取出15只颈背部皮下注射无菌色拉油(0.05ml/只)，其余大鼠颈背部皮下注射丙酸睾丸酮1.25mg/只(0.05ml/只)，常规饲养。第22日龄断奶，待70日左右阴道开口，连续阴道上皮细胞涂片两个周期(每个周期5天)，阴道上皮无周期性变化，呈持续角质化，提示ASR无排卵大鼠动物模型制作成功。将筛选出的模型大鼠按体重随机分为6组：模型组(N＝9)、乌鸡白凤丸组(N＝10)、氯米芬组(N＝10)、补经胶囊高剂量组(N＝10)、补经胶囊中剂量组(N＝10)和补经胶囊低剂量组(N＝10)。另取10只注射无菌色拉油的大鼠为空白对照组。给药方法：80日龄时开始给药，空白对照组和模型组灌胃蒸馏水，其余各组分别灌胃高、中、低剂量的受试药和阳性药。均按照1ml/100g体重给药，每日一次，连续给药8周。标本取材及指标检测：停药前十天开始行阴道涂片两个周期，观察给药后阴道角化上皮细胞的周期变化。于动情前期处死大鼠。股动脉取血，用放射免疫法检测血清E₂、P、FSH和LH。剖解双侧卵巢、子宫称湿重计算系数。并HE染色观察卵巢、子宫、阴道、乳腺的形态学变化。

20.1.1.4 实验结果

20.1.1.4.1 对雄激素致无排卵大鼠体重的影响

与空白对照组比较，8周后模型组体重明显高于空白对照组，有极显著性差异(P<0.01)；与模型组比较，补经胶囊高、中、低剂量组均能明显降低模型大鼠体重，有显著或极显著性差异(P<0.05)。氯米芬组和乌鸡白凤丸组也能明显降低模型大鼠体重，有显著或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结果详见下表1。

表1  补经胶囊对雄激素致无排卵大鼠体重的影响(X±SD)

注：与空白对照组比较，**P<0.01；与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01。

20.1.1.4.2 对雄激素致无排卵大鼠卵巢和子宫湿重和脏器系数的影响

与空白对照组比较，模型组大鼠卵巢湿重、子宫和卵巢系数均明显降低，有显著或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)；补经胶囊高剂量组能明显增加模型大鼠卵巢湿重及卵巢、子宫系数，补经胶囊中剂量组也能明显增加模型大鼠子宫系数，有显著或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。氯米芬组和乌鸡白凤丸组也能明显增加模型大鼠的卵巢系数，与模型组比较有显著或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结果详见下表2。

表2  补经胶囊对雄激素致无排卵大鼠卵巢和子宫湿重和脏器系数的影响(X±SD)

注：与空白对照组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01。

20.1.1.4.3 对血清E₂、P、FSH、LH的影响

与空白对照组比较，模型组大鼠血清E₂、P、FSH水平均明显降低，有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，LH水平也有下降趋势，但无统计学意义(P>0.05)；与模型组比较，补经胶囊高、中、低剂量组均能显著升高模型大鼠血清FSH水平、补经胶囊高剂量组还能明显升高模型大鼠血清LH水平，有显著或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)，补经胶囊各剂量组对模型大鼠血清E₂和P水平也有升高趋势，但无统计学意义(P>0.05)。氯米芬组和乌鸡白凤丸组能明显升高模型大鼠血清LH、FSH水平，有显著或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结果详见下表3。

表3  补经胶囊对雄激素致无排卵大鼠血清E₂、P、LH、FSH的影响(X±SD)

注：与空白对照组比较，**P<0.01；与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01。

20.1.1.4.4 对垂体、卵巢、子宫、乳腺、阴道组织学的影响

卵巢

空白对照组：卵巢皮髓质结构清晰。原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡均清晰可见；各期卵泡形态、数量正常；生长卵泡中、初级卵母细胞大而胞浆淡染，核居中。部分卵巢可见黄体结构，未见滤泡囊肿或黄体血肿。间质未见纤维增生。

模型组：卵巢囊性扩张，卵泡颗粒细胞层减少，排列松散，卵细胞减少，黄体减少，卵巢间质呈小团块或小梁状，各级发育期卵泡可见，形态正常。

西药组：卵泡颗粒层增加，优势卵泡内见卵细胞，间质明显增多。

中药组(乌鸡丸、低、中、高剂量组)：原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡均清晰可见，形态未见异常，卵泡颗粒细胞层减少与排列松散有所改善，卵细胞与模型组比较有所增加，部分卵巢可见黄体。

子宫

空白对照组：子宫壁各层结构清，子宫肌层平滑肌胞浆红染，核轮廓清晰。各层细胞未见变性及坏死。子宫内膜完整，单层柱状上皮未见增生。子宫腔管径较粗，内膜腺体丰富，腺体由单层柱状上皮构成，间质反应与腺体周期性改变同步。

模型组：子宫腔管径变狭，体积变小，内膜腺体减少、萎缩，仅1-2层细胞组成。肌层变薄，肌纤维变细，间质细胞瘦小深染。

西药组：子宫腔管径较模型组扩大，内皮厚度也有所增厚，上皮呈高柱状，腺体及间质细胞正常，腺体上皮核分裂较多，表现为增生状态。

中药组(乌鸡丸、低、中、高剂量组)：子宫壁各层结构清晰，子宫内膜完整，单层柱状上皮较模型组未见增生。各层细胞未见变性及坏死。内膜腺体减少、萎缩变薄现象较模型组有减轻趋势。

乳腺

空白对照组：乳腺组织由正常乳腺小叶及纤维脂肪组织构成。腺泡及导管上皮无增生、萎缩、变性及坏死，间质无炎症反应。

模型组：乳腺轻度萎缩。腺泡减少，导管上皮细胞扁平或仅剩残留上皮，周围反应性间质减少。

西药组：乳腺腺泡导管数量较模型组多，无管腔闭塞现象，导管中出现较多红染分泌颗粒。

中药组(乌鸡丸、低、中、高剂量组)：乳腺小叶、腺泡和腺管改变与模型组对照仅有恢复的趋势，但无显著性差异。

阴道

空白对照组：阴道粘膜被覆复层鳞状上皮，粘膜无水肿、变性、坏死、增生及炎症形成。固有层结缔组织无增生、变性、充血、炎症改变。肌层为平滑肌，肌纤维间质无炎症及纤维组织增生，平滑肌细胞结构及排列正常，肌细胞核无肿胀及增生，无水肿及坏死改变。外膜无增厚及炎性反应。

模型组：阴道粘膜鳞状上皮变薄，细胞体积轻度缩小，上皮层次减少。

西药组：与模型组比较阴道粘膜鳞状上皮变薄有所改善，细胞体积正常，有一定程度好转。

中药组(乌鸡丸、低、中、高剂量组)：与模型组比较，各组阴道粘膜鳞状上皮变薄，细胞体积轻度缩小，上皮层次减少的现象没有改变。

垂体

空白对照组、模型组、西药组与中药治疗组：腺垂体与神经垂体均正常，各种细胞成分比例及分布均正常。各组比较，未见明显病理组织学差异。

20.1.2 大鼠去卵巢月经不调试验

20.1.2.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

乌鸡白凤丸：中药阳性对照药物，由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产，生产批号：国药准字Z11020026。规格：每100粒重12克，每瓶装36克。实验时用蒸馏水配制成浓度为0.4g/ml的药液，备用。

己烯雌酚片：西药阳性对照药物，由合肥久联制药有限公司生产，生产批号：20060401，规格：0.5mg/片，实验时用蒸馏水配制成浓度为0.008g/ml的药液，备用。

(2)实验器材

XDS-1型倒置显微镜，由重庆光学仪器厂生产。XH6010A型γ计数仪，由西安二六二厂生产。TSJ-1A型自动组织脱水机，天津天利航空机电有限公司生产。DCSK-III型超声波人体组织快速处理仪，常州市中威电子仪器厂生产。BMJ-III型包埋机、BMJ-III型病理组织包埋冷冻台、PHY-III型病理组织漂烘仪，均由常州市中威电子仪器厂生产。LEICA RM2235切片机，Olympus BH-2型显微镜。组织细胞分析诊断系统，Zoneking softronics co.ltd。小镊子，棉签，剪刀，皮肤针，持针器，丝线。

(3)主要试剂

乌拉坦，由成都科龙化式试剂厂生产，批号20060727，临用时用蒸馏水配成10％的溶液备用。

95％乙醇，由成都科龙化式试剂厂生产，批号20060725。

注射用青霉素钠，80万U/只，由华北制药股份有限公司生产，批号B0511001，用生理盐水配成20万U/ml备用。

E2、P试剂盒，均由天津市协和医药科技有限公司生产。

20.1.2.2 实验动物

雌性SD大鼠，(200±20)g。动物生产许可证号：SCXK2005-11号。由成都中医药大学实验动物中心提供，检疫后备用。

20.1.2.3 实验方法

造模及分组：取100只雌性SD大鼠，待适应环境一周后，10％乌拉坦(1g/kg)腹腔注射麻醉，俯卧位固定，参考文献方法^[4]行双侧卵巢切除术。其中10只雌性大鼠只行假手术，即手术时仅暴露卵巢，切除小块脂肪，不切除卵巢，组成假手术组。术后连续3天注射青霉素4万U/只·次以防感染。术后第5天对去卵巢大鼠逐只进行阴道涂片，每日一次，连续10天。将出现了阴道脱落细胞周期性变化的大鼠除掉。阴道涂片及读片方法：以左手背位固定大鼠，右手用一棉签以生理盐水湿润后，伸入大鼠阴道上1/3侧壁轻卷之，取出棉签滚涂于载玻片上，置95％的乙醇中固定20min，取出晾干。将每只鼠的涂片放在一起，于涂片开始的第5天和第10天逐只读片观察阴道脱落细胞变化，将有明显周期性变化的大鼠剔除，没有明显周期性变化的即为造模成功者。将筛选出的59只造模成功动物随机分为6组：模型组(N＝9)、补经胶囊高剂量组(N＝10)、补经胶囊中剂量组(N＝9)、补经胶囊低剂量组(N＝10)己烯雌酚组(N＝10)和乌鸡白凤丸组(N＝11)，行假手术的10只鼠组成假手术组(N＝10)。给药方法：补经胶囊高，中，低剂量组和阳性对照组分别灌胃高、中、低受试药和阳性药，模型组和假手术组灌胃等剂量的生理盐水，均按10ml/kg体重给药，连续给药5周。标本取材及指标检测：于末次给药前10天行阴道涂片两个周期，假手术组动物在动情间期处死取血，其余各组于末次给药后24小时股动脉取血，测定雌二醇(E2)、孕酮(P)，取子宫称重并与阴道、乳腺一起送病检。

20.1.2.4 实验结果

20.1.2.4.1 补经胶囊对去势大鼠体重的影响

与假手术组比较，模型组体重明显增加，有极显著性差异(P<0.01)；与模型组比较，己烯雌酚组体重明显降低，有极显著性差异(P<0.01)，其它各给药组动物体重与模型组比较无统计学差异(P>0.05)。结果详见下表4。

表4  补经胶囊对去势大鼠体重的影响(X±SD)

注：与假手术组比较，**P<0.01；与模型组比较，^ΔΔP<0.01。

20.1.2.4.2 对去势大鼠子宫湿重及脏器系数的影响

与假手术组比较，模型组大鼠去卵巢后，子宫湿重和子宫系数明显低于假手术组，有极显著性差异(P<0.01)；与模型组比较，己烯雌酚组、乌鸡白凤丸组及补经胶囊高、中剂量组子宫湿重和脏器系数均明显升高，有极显著性差异(P<0.01)，补经胶囊低组子宫湿重和脏器系数也有升高趋势但无统计学差异；补经胶囊各组与乌鸡白凤丸组比较均无统计学差异。结果详见下表5。

表5  补经胶囊对去势大鼠子宫湿重和子宫系数的影响(X±SD)

注：与假手术组比较，**P<0.01；与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01。

20.1.2.4.3 对E2、P血清水平的影响

与假手术组比较，模型组大鼠血清E2和P水平均明显下降，有显著性差异(P<0.05)；与模型组比较，己烯雌酚组及补经胶囊高剂量组E₂明显升高，有显著性差异(P<0.05)，乌鸡白凤丸组E₂、P水平、补经胶囊中、低剂量组E₂水平及补经胶囊高、中、低剂量组P水平与模型组比较均有升高趋势，但无显著性差异(P>0.05)。结果是详见下表6。

表6  补经胶囊对去势大鼠E₂、P血清水平的影响(X±SD)

注：与假手术组比较，*P<0.05；与模型组比较，^ΔP<0.05。

20.1.3 离体、在体子宫功能试验

20.1.3.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

乌鸡白凤丸：中药阳性对照药物，由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产，生产批号：国药准字Z11020026。规格：每100粒重12克，每瓶装36克。实验时用蒸馏水配制成浓度为0.4g/ml的药液，备用。

(2)实验器材

BL-420E生物机能实验系统，由成都泰盟电子有限公司生产。

JH-2肌张力传感器，由北京航空医学工程研究所生产。

HH·S11-2型电热恒温水浴箱，由北京市东霞电子仪器厂生产。

氧气袋，由上海四美实业有限公司生产、玻璃固定器。

L型通气玻钩、麦氏浴槽。

(3)主要试剂

NaCl，由天津市瑞金特化学品有限公司生产，批号20070119。

KCl，由天津市博迪化工有限公司生产，生产批号20070130。

无水CaCl₂，由天津市科密欧化学试剂开发中心生产，生产批号20070312。

NaHCO₃，由天津市博迪化工有限公司生产，生产批号20070129。

缩宫素注射液，由成都海普平原药业有限公司生产，规格10U/ml，生产批号060862。

己烯雌酚片，由合肥久联制药有限公司生产，生产批号：20060401，规格：0.5mg/片，实验时用蒸馏水配制成浓度为0.016g/ml的药液，备用。

己烯雌酚注射液，由上海通用药业股份有限公司生产，规格1mg/ml，生产批号030903。

20.1.3.2 实验动物

健康家兔，雌性未孕，2.0～2.5kg；SD大鼠，全雌，(200±20)g。动物质量合格证号：SCXK2005-10，SCXK2005-11。由成都中医药大学实验动物中心提供，检疫后备用。

20.2.2.3 实验方法

20.2.2.3.1 对大鼠离体子宫平滑肌的影响

取成年雌性大鼠，待适应环境后，连续灌胃己烯雌酚16mg/kg·d2日，人工造成动情期，提高子宫对药物的敏感性。于实验第3日将动物颈椎脱臼处死，迅速取出一侧子宫角悬吊于盛30ml洛氏液(营养液的配置：1000ml含NaCl9.2g、KC10.42g、CaCl₂0.24g、NaHCO₃0.15g、葡萄糖1.0g)的麦氏浴槽内，一端固定在通气钩上，另一端连接在张力传感器上，浴槽内保持温度在37℃左右，持续通入氧气。子宫负荷1.0g。待子宫稳定30min，描记10min子宫正常收缩曲线后，开始加血清，每次记录舒缩曲线10min。然后用营养液冲洗三次，待子宫稳定后，再进行下一组试验。空白血清组和乌鸡白凤丸组加100μl血清，补经胶囊血清组分别加25、50、100μl血清，催产素组加催产素0.1u，催产素加给药组同时加催产素和各种含药血清。观察收缩张力、频率及子宫活动力(收缩强度×频率)的变化^[5]。实验数据用SPSS11.5统计软件处理。

血清制备：取10只180～220g雌性SD大鼠，灌胃浓度为0.738g药粉/ml补经胶囊，给药剂量40ml/kg，每天一次，连续给药3天，于末次给药后1h取血，3000r/min离心10min，分离血清，经56℃、30min灭活后放入-20℃冰箱中备用。另取10只180～220g雌性SD大鼠分别灌胃0.4g/ml的乌鸡白凤丸(4.0g/ml)和生理盐水各5只，同法制备乌鸡白凤丸含药血清和空白含药而清备用。

20.1.3.3.2 对家兔在体子宫平滑肌的影响

取健康未孕雌兔，待适应环境后，于实验前2日，腹腔注射已烯雌酚1mg/kg(体重)，给药2日，人工造成动情期，提高子宫对药物的敏感性。实验当日用乌拉坦1.2g/kg(体重)静脉麻醉后开腹，在子宫分叉旁约2cm外穿线，将一侧子宫角拉过特制的玻璃筒底部橡皮膜中央的圆孔，缝线悬吊，连接张力换能器，玻璃筒内盛洛氏液，玻璃筒内保持温度在37℃左右，待子宫稳定30min，描记10min子宫正常收缩曲线后，行十二指肠给药，记录给药后10、30、60、90、120min子宫收缩曲线各10min，观察收缩张力、频率及子宫活动力(收缩强度×频率)的变化^[5]。统计数据用SPSS11.5统计软件处理。

20.1.3.4 实验结果

20.1.3.4.1 对大鼠离体子宫的影响

乌鸡白凤丸及补经胶囊高、中剂量均能增加大鼠离体子宫收缩频率，提高子宫的活动力，补经胶囊高剂量还能增强子宫收缩强度，与给药前比较有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结果详见下表7、8。

表7  补经胶囊对大鼠离体子宫的影响(X±SD)

注：与给药前比较，*p<0.05，**p<0.01。

表8  补经胶囊对催产素所致大鼠子宫平滑肌收缩的影响(X±SD)

20.1.3.4.2 对家兔在体子宫影响

与同时间段空白组比较，乌鸡白凤丸在给药后30min时能增加家兔在体子宫活动力；补经胶囊高剂量组在给药120min时能增加子宫收缩频率，60、90min时能增加子宫收缩幅度，30、90及120min能增加子宫活动力，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结果详见下表9、10、11。

表9 补经胶囊对家兔在体子宫收缩频率的影响(X±SD)

注：与给药前比较，*p<0.05。

表10  补经胶囊对家兔在休子宫收缩强度的影响(X±SD)

注：与同时间段空白组比较，*P<0.05。

表11  补经胶囊对家兔在体子宫活动力的影响(X±SD)

注：与同时间段空白组比较，*P<0.05；**P<0.01。

20.1.4 小鼠氢化可的松肾虚试验

20.1.4.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

金匮肾气丸：阳性药物，由北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂生产，批号：6033462，临用时用蒸馏水配成浓度为0.33g/ml的药液，备用。

氢化可的松，由天津药业集团新郑股份有限公司生产，生产批号：0601031。规格：10mg/2ml。

(2)实验器材：JA2003型上皿电子天平，上海天平仪器厂生产。温度计、水缸(150cm×50cm×50cm)、螺丝帽

20.1.4.2 实验动物

昆明种小鼠，全雌，(30±2)g。生产许可证号：SCXK2005-12。由成都中医药大学实验动物研究中心提供，检疫后备用。

20.1.4.3 实验方法

分组：取60只雌性小鼠，待适应环境一周后，按体重随机分为6组：空白组(N＝10)、模型组(N＝10)、金匮肾气丸组(N＝10)、补经胶囊高剂量组(N＝10)、中剂量组(N＝10)和低剂量组(N＝10)。造模^[6]及给药方法：小鼠每天灌胃一次，给药容量为0.1ml/10g。空白组灌胃等量蒸馏水。给药的同时，除空白组外，其余各组动物肌肉注射氢化可的松(25mg/kg体重)，空白组予等量生理盐水肌注，每天一次，连续9天。指标检测：于末次给药后1小时，称重并测量肛温，随后将小鼠尾根部用细线束一重为1g的螺丝帽，放入水缸中游泳，水深35cm，水温为16℃。从小鼠放入水中开始计时，当小鼠头部没入水中10秒钟不能浮出水面者即为体力耗竭，终止计时，即为小鼠负重游泳时间。立即取出小鼠剖解胸腺、脾脏、子宫和卵巢称取湿重，并计算脏器系数，以上数据均采用SPSS11.5统计软件进行统计学分析。

20.1.4.4 实验结果

给予氢化可的松9天后，小鼠出现体重减轻、萎靡不振、竖毛、反应迟钝等症状。与空白组比较，模型组小鼠体重、肛温明显低于空白组，游泳时间和脾、胸腺系数也明显低于空白组，有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)；与模型组比较，金匮肾气丸及补经胶囊高、中剂量能明显升高小鼠肛温；金匮肾气丸和补经胶囊高剂量能明显延长小鼠低温游泳时间，提高脾脏系数；金匮肾气丸和补经胶囊中、低剂量能明显提高胸腺系数，均有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结果详见下表12。

表12  补经胶囊对肾阳虚小鼠肛温、游泳时间和脏器系数的影响(X±SD)

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，ΔP<0.05，ΔΔP<0.01。

20.1.5 结论

补经胶囊有减轻无排卵型月经不调模型大鼠体重的作用，有增加该模型大鼠子宫和卵巢脏器系数的作用趋势，并有升高模型大鼠血清FSH、LH、E₂和P水平的作用，病理学检查显示补以经胶囊对雄激素致无排卵大鼠的卵巢、子宫、乳腺的萎缩现象有改善趋势；补经胶囊能增加去卵巢模型大鼠子宫湿重和脏器系数，升高模型大鼠血清E₂水平，对P水平也有升高趋势，病理学检查显示补经胶囊能改模型大鼠子宫内膜和腺体的萎缩现象；补经胶囊能增加大鼠离体子宫的收缩频率、收缩强度和子宫活动力，能增强家兔在体子宫的收缩强度和子宫活动力。补经胶囊还能显著升高氢化可的松肾虚模型小鼠的肛温和延长负重游泳时间，提高胸腺和脾脏指数。可见，补经胶囊可以通过影响下丘脑-垂体-卵巢-子宫轴达到补肾调经的作用。结果提示，补经胶囊具有补肾益精调经作用。

20.2 养血作用

20.2.1 小鼠急性失血性血虚试验

20.2.1.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

乌鸡白凤丸：中药阳性对照药物，由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产，生产批号：国药准字Z11020026。规格：每100粒重12克，每瓶装36克。实验时用蒸馏水配制成浓度为0.4g/ml的药液，备用。

(2)实验器材

BC3000血球仪，迈瑞公司生产。

(3)主要试剂

血液学指标试剂盒均由迈瑞公司生产，批号：20061106。

20.2.1.2 实验动物

KM小鼠，全雌，体重(20±2)g，动物生产许可证号：SCXK2005-12。由成都中医药大学实验动物中心提供，检疫后备用。

20.2.1.3 实验方法

分组：取50只小鼠，适应环境一周后，随机分为模型组(N＝10)，补经胶囊高剂量组(N＝10)、补经胶囊中剂量组(N＝10)、补经胶囊低剂量组(N＝10)和乌鸡白凤丸组(N＝10)。造模^[7]及给药：每只鼠眼眶取血约0.5ml使其失血，失血24小时后，模型组小鼠行眼内眦取血0.2ml测定RBC、HGB和网织红细胞百分率(Ret)，同时补经胶囊高，中，低剂量组和乌鸡白凤经丸组分别灌胃相对应的药物，模型组灌胃等剂量的生理盐水，连续给药7天。标本取材及指标检测：于末次给药24h后各给药组眼内眦取血，测RBC、HGB和Ret。以上实验数据均用SPSS11.5统计软件分析。

20.3.1.4 实验结果

给药一周后与模型成组比较，补经胶囊各剂量组均能增加外周血红细胞、血红蛋白含量，中、低剂量组降低网织红细胞比率，均有显著的统计学差异(P<0.01)；。实验结果详见下表13。

表13  补经胶囊对失血性血虚小鼠HGB的影响(X±SD)

与模型组比较，**P，0.01。

20.2.2 小鼠乙酰苯肼血虚试验

20.2.2.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

四物合剂：阳性药物，由四川新斯顿制药有限责任公司生产，生产批号：国药准字Z51022267，规格：每支装10ml，每盒10支。

(2)实验器材

BC3000血球仪，迈瑞公司生产。

(3)主要试剂

乙酰苯肼，由天津市博迪化工有限公司生产，生产批号20060329，临用时配成2％溶液。

血液学指标检测试剂均由迈瑞公司生产，批号：20061106。

20.2.2.2 实验动物

KM小鼠70只，全雌，体重(20±2)g，动物生产许可证号：SCXK2005-12。由成都中医药大学实验动物中心提供，检疫后备用。

20.2.2.3 实验方法：

分组：取60只小鼠，适应环境一周后，按体重随机分为6个组：空白组(N＝10)、模型组(N＝10)、四物合剂组(N＝10)、补经胶囊高剂量组(N＝10)、补经胶囊中剂量组(N＝10)和补经胶囊低剂量组(N＝10)。造模^[7]及给药：补经胶囊高，中，低剂量组和阳性对照组分别灌胃高，中，低受试药和阳性药，按15ml/kg给药，空白组和模型组灌胃等剂量的生理盐水，连续给药8天。在给药的第1，4，7天，除空白组予皮下注射相应体积的生理盐水外，其余各组皮下注射2％乙酰苯肼，给药量分别为0.2，0.1，0.1g/kg。标本取材及指标测定：第9天眼球取血，测定RBC、HGB和网织红细胞百分率(Ret)。以上实验数据均用SPSS11.5统计软件分析。

20.2.2.4 实验结果

给予乙酰苯肼后，模型组RBC、HGB明显低于空白组，Ret明显高于空白组，有显著性统计学差异(P<0.01)；与模型组比较，补经胶囊高、中、低剂量组及四物合剂组均能明显提高小鼠RBC，有显著性统计学差异(P<0.05或P<0.01)，四物合剂和补经胶囊各剂量组也有提高HGB和Ret的趋势.结果详见下表14。

表14  补经胶囊对乙酰苯肼致血虚小鼠RBC、HGB和Ret的影响(X±SD)

注：与空白组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01。

20.2.3 结论

补经胶囊能升高失血性血虚小鼠RBC和HGB，降低Ret，能升高乙酰苯肼致血虚小鼠RBC，说明补经胶囊能有养血作用。

20.3 益气作用

20.3.1 小鼠限食法气虚试验

20.3.1.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

人参皂苷：阳性药物，由成都中医药大学药学院自制，临用时用蒸馏水配制成浓度为0.01g/ml的药液，备用。

(2)实验器材

CB3201数字描记式小动物活动观测仪，中国川北电子工业公司生产。

水缸(150cm×50cm×50cm)

20.3.1.2 实验动物

KM小鼠60只，全雌，(26±2)g。生产许可证号：SCXK2005-12。由成都中医药大学实验动物研究中心提供，检疫后备用。

20.3.1.3 实验方法

分组：取60只小鼠，适应环境一周后，按体重随机分为空白组(N＝10)、模型组(N＝10)、人参皂苷组(N＝10)、补经胶囊高剂量组(N＝10)、补经胶囊中剂量组(N＝10)和补经胶囊低剂量组(N＝10)。造模^[7]及给药：空白组按足量饲料(250g/kg)喂养，其它各组按照100g/kg限制食量喂养，持续9天；同时空白组和模型组每日灌胃生理盐水、其它组分别灌胃相应药液，剂量均为10ml/kg体重。指标检测：第9天下午给药1h后，把小鼠放入活动观测仪内稳定1分钟后，测三分钟内的自发活动次数。次日上午在水温20℃、水深35cm的水缸中游泳，小鼠尾根部束一重1.0g的螺丝帽。从小鼠放入水中开始计时，当小鼠没入水中10秒不能上浮为其游泳时间。以上数据均用SPSS11.5统计软件分析。

20.3.1.4 实验结果

与空白组比较，模型组小鼠三分钟内的自发活动次数明显低于空白组，有极显著差异(P<0.01)；与模型组比较，人参皂苷组和补经胶囊高、中剂量组小鼠三分钟内的自发活动次数显明显高于模型组，有显著性差异(P<0.05)。人参皂苷组及补经胶囊高剂量组小鼠负重游泳时间明显高于模型组，有显著性差异(P<0.05)。结果详见下表15。

表15  补经胶囊对限食致气虚小鼠自发活动和游泳时间的影响(X±SD)

注：与空白组比较，**P<0.01；与模型组比较，^ΔP<0.05。

20.3.2 小鼠断头喘气试验

20.3.2.1 实验材料

(1)药物

补经胶囊：受试药物，由成都康奥药物研究所提供，生产批号060503。实验设三个剂量组：1.06、0.53、0.265g药粉/kg体重(即6.032、3.016、1.508g原生药/kg体重，分别相当于每日临床剂量的20、10、5倍)。配制方法：取蒸馏水配制成相应浓度的药液，备用。

人参皂苷：阳性药物，由成都中医药大学药学院自制，临用时用蒸馏水配制成浓度为0.01g/ml的药液，备用。

(2)实验器材

水缸(50cm×50cm×50cm)

20.3.2.2 实验动物

昆明种小鼠，全雌，(20±2)g。生产许可证号：SCXK2005-12，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，检疫后备用。

20.3.2.3 实验方法

分组：取60只小鼠，待适应环境一周后，按体重随机分为6组：空白组(N＝10)、模型组(N＝10)人参皂苷组(N＝10)、补经胶囊高剂量组(N＝10)、补经胶囊中剂量组(N＝10)和补经胶囊低剂量组(N＝10)。造模^[7]及给药：空白组和模型组灌胃同体积生理盐水、其它组分别灌胃相应的药液，给药剂量10ml/kg体重。每日一次，连续给药7天。同时从给药开始，除空白组外，其它各组小鼠每天给生理盐水或给药40min后，放入水温(15±???0.5)℃、水深35cm的水缸中游泳，当全组一半的小鼠出现自然沉降时全部停止游泳，连续6天。指标检测：于末次给药后30min，于小鼠双耳后部位迅速断头计时，至最后一次喘气停止的时间作为断头喘气持续时间。采用SPSS11.5统计学软件处理数据。

20.3.2.4 实验结果

模型组小鼠断头喘气持续时间明显短于空白组，有显著性差异(P<0.05)；人参皂苷和补经胶囊高、中剂量能延长气虚小鼠断头喘气时间，与模型组比较有显著性或极显著性差异(P<0.05或P<0.01)，补经胶囊低剂量也有延长气虚小鼠断头喘气时间的趋势，与模型组比较无显著性差异，但与空白组比较也无显著性差异。结果详见下表16。

表16  补经胶囊对游泳疲劳气虚小鼠断头喘气时间的影响(X±SD)

注：与空白组比较，*P<0.05；与模型组比较，^ΔP<0.05，^ΔΔP<0.01。

20.5 小结

补经胶囊为现代复方纯中药制剂，具有补肾益精、养血益气调经的功能。经主要药效学实验研究，结果表明：

(1)补经胶囊有减轻无排卵型月经不调模型大鼠体重的作用，有增加该模型大鼠子宫和卵巢脏器系数的作用趋势，并能升高模型大鼠血清FSH、LH、E₂和P水平，有改善卵巢、子宫、乳腺的萎缩现象的趋势；补经胶囊能增加去卵巢模型大鼠子宫湿重和脏器系数，升高模型大鼠血清E₂水平，对P水平也有升高趋势，有改善模型大鼠子宫内膜、腺体萎缩现象的趋势；补经胶囊能增加大鼠离体子宫的收缩频率、收缩强度和子宫活动力，能增强家兔在体子宫的收缩强度和子宫活动力。补经胶囊还能显著升高氢化可的松肾虚模型小鼠的肛温和延长负重游泳时间，提高胸腺、脾脏指数。可见，补经胶囊可以通过影响下丘脑-垂体-卵巢-子宫轴达到补肾调经的作用。结果提示，补经胶囊具有补肾调经作用。

(2)补经胶囊能升高失血性血虚模型小鼠RBC、HGB水平，降低Ret水平，能升高乙酰苯肼血虚模型小鼠RBC水平，说明补经胶囊具有养血作用。

(3)补经胶囊能增加限食法气虚模型小鼠自发活动次数和负重游泳时间，延长游泳劳损小鼠断头后喘气持续时间，提高小鼠耐低温存活百分率。结果显示，补经胶囊有较好的益气作用。

(4)补经胶囊能增加小鼠脾脏和胸腺系数，提高小鼠单核—巨噬细胞吞噬系统的吞噬系数。结果显示，补经胶囊具有增强细胞免疫功能的作用。

结果提示，补经胶囊具有明显的调经、补肾益精、养血益气和增强免疫力的作用。

具体实施方式：

以下通过实施例进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。

实施例1：

本处方由党参360g、黄芪216g、当归120g、熟地120g、白芍180g、川芎120g、枸杞子120g、菟丝子180g、覆盆子120g、补骨脂120g、肉苁蓉120g、鸡血藤216g组成，

【制法】以上十二味，菟丝子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤四味药材，加入2-10倍量70-95％乙醇，回流提取两次，每次1-4小时，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，备用；白芍、黄芪、当归、川芎、熟地、党参、枸杞子、覆盆子八味药材加2-10倍量水，煎煮提取3次，每次1-4小时，合并滤液，滤过，浓缩至相对密度1.20(60℃测)，放置至室温，加入乙醇使含醇量达65％，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，与上述清膏合并，混合均匀，减压干燥至干，粉碎成细粉，制粒，装成1000粒胶囊。

实施例2：

党参    720g     黄芪       432g       当归      240g

熟地    240g     白芍       360g       川芎      240g

枸杞子  240g     菟丝子     360g       覆盆子    240g

补骨脂  240g     肉苁蓉     240g       鸡血藤    432g

制备方法同实施例1

实施例3：

党参    180g     黄芪       108g       当归      60g

熟地    60g      白芍       90g        川芎      60g

枸杞子  60g      菟丝子     90g        覆盆子    60g

补骨脂  60g      肉苁蓉     60g        鸡血藤    108g

制备方法同实施例1

实施例4：口服液的制备：

本处方由党参360g、黄芪216g、当归120g、熟地120g、白芍180g、川芎120g、枸杞子120g、菟丝子180g、覆盆子120g、补骨脂120g、肉苁蓉120g、鸡血藤216g组成，

【制法】以上十二味，菟丝子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤四味药材，加入2-10倍量70-95％乙醇，回流提取两次，每次1-4小时，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，备用；白芍、黄芪、当归、川芎、熟地、党参、枸杞子、覆盆子八味药材加2-10倍量水，煎煮提取3次，每次1-4小时，合并滤液，滤过，浓缩至相对密度1.20(60℃测)，放置至室温，加入乙醇使含醇量达65％，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，与上述清膏合并，混合均匀，减压浓缩，配制口服液。

实施例5：片剂的制备

本处方由党参360g、黄芪216g、当归120g、熟地120g、白芍180g、川芎120g、枸杞子120g、菟丝子180g、覆盆子120g、补骨脂120g、肉苁蓉120g、鸡血藤216g组成，

【制法】以上十二味，菟丝子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤四味药材，加入2-10倍量70-95％乙醇，回流提取两次，每次1-4小时，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，备用；白芍、黄芪、当归、川芎、熟地、党参、枸杞子、覆盆子八味药材加2-10倍量水，煎煮提取3次，每次1-4小时，合并滤液，滤过，浓缩至相对密度1.20(60℃测)，放置至室温，加入乙醇使含醇量达65％，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，与上述清膏合并，混合均匀，减压干燥至干，粉碎成细粉，制粒，压片，即得片剂。

实施例6：颗粒剂的制备

本处方由党参360g、黄芪216g、当归120g、熟地120g、白芍180g、川芎120g、枸杞子120g、菟丝子180g、覆盆子120g、补骨脂120g、肉苁蓉120g、鸡血藤216g组成，

【制法】以上十二味，菟丝子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤四味药材，加入2-10倍量70-95％乙醇，回流提取两次，每次1-4小时，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，备用；白芍、黄芪、当归、川芎、熟地、党参、枸杞子、覆盆子八味药材加2-10倍量水，煎煮提取3次，每次1-4小时，合并滤液，滤过，浓缩至相对密度1.20(60℃测)，放置至室温，加入乙醇使含醇量达65％，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，与上述清膏合并，混合均匀，减压干燥至干，粉碎成细粉，制粒，包装。

Claims (10)

1.一种治疗月经周期推后、量少或伴闭经、不孕等肾虚血亏证的药物组合物，其药物活性成分由以下中药为原料制备的：党参，黄芪，当归，熟地，白芍，川芎，枸杞子，菟丝子，覆盆子，补骨脂，肉苁蓉，鸡血藤。

2.权利要求1的制剂，其特征在于，其中中药各组分的重量配比为：

党参180-720g    黄芪108-432g    当归60-240g

熟地60-240g     白芍90-360g     川芎60-240g

枸杞子60-240g   菟丝子90-360g   覆盆子60-240g

补骨脂60-240g   肉苁蓉60-240g   鸡血藤108-432g。

3.权利要求1的药物组合物，其特征在于，其中中药各组分的重量配比为：党参360g、黄芪216g、当归120g、熟地120g、白芍180g、川芎120g、枸杞子120g、菟丝子180g、覆盆子120g、补骨脂120g、肉苁蓉120g、鸡血藤216g。

4.权利要求1的药物组合物，其特征在于，是任何可药用的剂型。

5.权利要求1的药物组合物，其特征在于，是片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。

6.权利要求1的药物组合物，其特征在于，是胶囊剂。

7、权利要求1的药物组合物的制备方法，其特征在于，是通过将配方组成的中药原料经过提取或其他方式加工，制成药物活性物质，随后，以该物质为原料，需要时加入药物可接受的载体，按照制剂学的常规技术制成的。

8、权利要求7的制备方法，其特征在于，其中所述活性物质是通过分别提取中药原料或通过共同提取中药原料得到，也可以通过其他方式得到，如：通过粉碎、压榨、煅烧、研磨、过筛、渗漉、萃取、水提、醇提、酯提、酮提、层析等方法得到、这些活性物质可以是浸膏形式的物质，可以是干浸膏也可以是流浸膏，根据制剂的不同需要决定制成不同的浓度。

9、权利要求8的制备方法，其特征在于，经过以下步骤：

菟丝子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤四味药材，加入2-10倍量70-95％乙醇，回流提取两次，每次1-4小时，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，备用；白芍、黄芪、当归、川芎、熟地、党参、枸杞子、覆盆子八味药材加2-10倍量水，煎煮提取3次，每次1-4小时，合并滤液，滤过，浓缩至相对密度1.20，放置至室温，加入乙醇使含醇量达65％，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，与上述清膏合并，混合均匀，减压干燥至干，得到药物活性成分；该成分单独或与药物可接受的载体混合，依照制剂学常规技术制成本发明的中药制剂。

10、权利要求8的制备方法，其特征在于，经过以下步骤：

菟丝子、补骨脂、肉苁蓉、鸡血藤四味药材，加入8倍量80％乙醇，回流提取两次，每次2小时，滤过，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，备用；白芍、黄芪、当归、川芎、熟地、党参、枸杞子、覆盆子八味药材加8倍量水，煎煮提取3次，每次2小时，合并滤液，滤过，浓缩至相对密度1.20，放置至室温，加入乙醇使含醇量达65％，搅匀，冷藏12小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，与上述清膏合并，混合均匀，减压干燥至干，粉碎成细粉，制粒，装成1000粒胶囊。