CN101463373B - 一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 - Google Patents
一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101463373B CN101463373B CN2009100364134A CN200910036413A CN101463373B CN 101463373 B CN101463373 B CN 101463373B CN 2009100364134 A CN2009100364134 A CN 2009100364134A CN 200910036413 A CN200910036413 A CN 200910036413A CN 101463373 B CN101463373 B CN 101463373B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- yeast
- dextran
- preparation
- immunocompetence
- high purity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,该制备方法是将酵母原料经自溶预处理后,进行酶解,离心过滤收集沉淀,再经过碱处理后,加酸中和,洗涤,脱水,干燥,粉碎即得高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖产品。本发明制备方法条件温和、工艺简单、易操作、得率高,符合国家清洁生产的政策,是一条较为环保、工业可行的工艺路线。采用本发明制备方法获得的产品具有纯度高、活性高的特点,能够显著增强人体的免疫力,抑制肿瘤的生长,降低胆固醇,可广泛应用于食品、医药、化妆品行业中。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域,具体涉及一种葡聚糖的制备方法,尤其是一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法。
背景技术
早在二十世纪四十年代,Pillemer博士首次发现并报道酵母细胞壁中有一种物质具有提高免疫力的作用,进一步研究发现该物质是一种多糖即酵母β-1,3葡聚糖,并从面包酵母中分离出这种物质;从二十世纪七十年代开始,越来越多的科学家开始了对酵母葡聚糖生理功能的深入研究,现在对其生理机制已有共识,认为酵母葡聚糖是一种高效的机体免疫功能活化因子;2003年6月24日,美国NIAID(National Institute of Allergy and Infectious Diseases)和AMRIID(Army MedicalResearch Institute of Infectious Diseases)的研究人员在其发表的研究报告中指出:酵母β-1,3/1,6-D葡聚糖可用作预防SARS病毒的一种重要的生物活性物质。
酵母葡聚糖的机体免疫激活功能可以概括为以下几个主要方面:(1)能有效提高机体免疫力,这在许多动物包括人类试验在内都得到了证实;(2)抗癌、抗肿瘤作用,目前研究抗癌功能的主要目标就是加强人体组织中的巨噬细胞的活性;(3)抗氧化作用,酵母葡聚糖能够有效地清除提体内的自由基,保护巨噬细胞在遭受辐射期间和辐射后都能免受自由基的攻击,使这些巨噬细胞继续正常发挥作用;(4)抗辐射作用,国际上许多著名的研究机构,包括哈佛大学医学院、华盛顿大学以及美国空军放射生物学研究所等都证实酵母葡聚糖具有显著提高免疫力的作用。
目前,在国内有关制备β-1,3-葡聚糖方面及用酵母、啤酒废酵母制备β-1,3-葡聚糖方面已有文献报道,如酸法、碱法、自溶-酚碱法等,这些方法虽然得率高,纯度高,但是产品的活性被破坏,失去了葡聚糖作为功能因子增强人体免疫力的意义,而且工艺涉及到了强酸、强碱,产生大量的污水,不环保,不利于工业化生产;超声波法、发酵法,虽然避免了环境污染,产品活性高,但是得率低,生产成本较高,仅适合在实验室,不利于工业化生产。
发明内容
本发明的目的是提供一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,该制备方法提取条件较为温和、工艺简单、易操作、得率高,制备获得的酵母葡聚糖具有纯度高和免疫活性高的特点。
β-1,3-葡聚糖是酵母细胞壁中主要的多糖成分,是一种天然的高分子亲水胶体,具有较高的持水能力,不能溶于水,但可均匀分散于水中,也不溶于酒精、丙酮等常见的有机溶剂。以β-1,3-糖苷键连接为主,带有少量β-1,6-糖苷键分枝的葡萄糖高聚物,β-1,3-葡聚糖平均分子量在20万以上,化学结构是以分子间和分子内氢键构成的三股螺旋形式存在,三股多糖链平行排列并缠绕在一起,研究表明酵母葡聚糖的免疫活性源于葡聚糖骨架的三螺旋结构和螺旋结构的外表面存在的亲水基团。
本发明提供的技术方案是将酵母原料经自溶预处理后,进行酶解,离心过滤收集沉淀,再经过碱处理后,加酸中和,洗涤,脱水,干燥,粉碎即得高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖产品。
进一步的,本发明提供的高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,包括以下步骤:
(1)自溶:取酵母原料,加水,调节温度为100~130℃,pH为7,反应1~8h,对酵母细胞壁进行破壁处理,提取酵母β-1,3-葡聚糖;
(2)酶解:在步骤(1)所得葡聚糖溶液中加入蛋白酶和甘露聚糖酶,调节温度为40~60℃,pH为5~9,反应1~5h后,即得含酵母β-1,3-葡聚糖的溶液;
(3)纯化:将步骤(2)所得含酵母β-1,3-葡聚糖的溶液离心、过滤,收集沉淀,所得沉淀经碱处理后,加酸中和,洗涤,脱水,干燥,粉碎即得高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖产品。
上述制备方法中,
步骤(1)中所述酵母原料为啤酒酵母或面包酵母。
步骤(1)中所述酵母原料和水的重量份配比为1∶2~15。
步骤(2)中所述蛋白酶和甘露聚糖酶的重量含量为酵母原料的1~10‰。
步骤(2)中所述蛋白酶是由枯草芽孢杆菌经发酵提取制得的中性蛋白酶,所述甘露聚糖酶是地衣芽孢杆菌经发酵提取制得的β-甘露聚糖酶。
步骤(3)中所述洗涤过程为:首先经碱液洗涤后,加酸中和,离心过滤,收集沉淀,所得沉淀再用水洗涤1~3次。
步骤(3)中所述碱液洗涤的过程为:加氢氧化钠调节溶液PH为7.5~9,温度为70~80℃,反应1~3小时。
与现有技术相比,本发明具有以下优点:
(1)本发明制备方法条件温和、工艺简单、易操作、得率高;
(2)本发明制备方法清洁环保,无污染,符合国家清洁生产的相关政策;
(3)本发明制备方法制得的酵母葡聚糖纯度和活性高,最大程度的保留了其原本的免疫活性;
(4)本发明制备方法制得的酵母葡聚糖能够显著增强人体的免疫力,抑制肿瘤的生长,降低胆固醇,可广泛应用于食品、医药、化妆品行业中。
具体实施方式
以下列举具体实施例对本发明进行说明。需要指出的是,实施例只用于对本发明作进一步说明,不代表本发明的保护范围,其他人根据本发明的提示做出的非本质的修改和调整,仍属于本发明的保护范围。
实施例1
取啤酒酵母原料100kg,加水500kg,密封加压,升温到110℃,pH为7,持续搅拌反应3h,对酵母细胞壁破壁溶出葡聚糖,在常压下降温到45℃,加入150g中性蛋白酶和200克甘露聚糖酶,调节pH为6恒温持续搅拌反应2.5h,采用吊袋式离心机,离心转速为1000rpm,滤袋采用涤纶材料,400目孔径,离心收集得到沉淀1,加入原料5倍的水,搅拌均匀后用氢氧化钠调节水溶液到PH为7.5,70℃反应1小时,然后用盐酸中和反应液,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀2,加入原料10倍的自来水到沉淀2中,搅拌25min,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀3,然后加入原料5倍的无水乙醇,在室温下搅拌1小时,进而抽滤,将抽滤得到的产品烘干,打粉,所得的产品外观是白色粉末状,产品纯度达到70%,这种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖可广泛应用于食品、保健品、化妆品等行业中。
实施例2
取啤酒酵母原料100kg,加水800kg,密封加压,升温到125℃,pH为7,持续搅拌反应5h,对酵母细胞壁破壁溶出葡聚糖,在常压下降温到50℃,加入100g中性蛋白酶和150克甘露聚糖酶,调节pH为6恒温持续搅拌反应3h,采用吊袋式离心机,离心转速为1000rpm,滤袋采用涤纶材料,400目孔径,离心收集得到沉淀1,加入原料5倍的水,搅拌均匀后用氢氧化钠调节水溶液到PH为8,75℃反应2小时,然后用盐酸中和反应液,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀2,加入原料10倍的自来水到沉淀2中,搅拌25min,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀3,加入原料10倍的自来水到沉淀3中,搅拌25min,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀4,然后加入原料5倍的无水乙醇,在室温下搅拌1小时,进而抽滤,将抽滤得到的产品烘干,打粉,所得的产品外观是白色粉末状,产品纯度达到74%,这种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖可广泛应用于食品、保健品、化妆品等行业中。
实施例3
取面包酵母原料100kg,加水1200kg,密封加压,升温到130℃,pH为7,持续搅拌反应8h,对酵母细胞壁破壁溶出葡聚糖,在常压下降温到60℃,加入300g中性蛋白酶和350克甘露聚糖酶,调节pH为8恒温持续搅拌反应5h,采用吊袋式离心机,离心转速为1000rpm,滤袋采用涤纶材料,400目孔径,离心收集得到沉淀1,加入原料5倍的水,搅拌均匀后用氢氧化钾调节水溶液到PH为9,80℃反应3小时,然后用硫酸中和反应液,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀2,加入原料10倍的自来水到沉淀2中,搅拌25min,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀3,加入原料15倍的自来水到沉淀3中,搅拌25min,采用吊袋式离心机离心收集得到沉淀4,然后加入原料5倍的无水乙醇,在室温下搅拌1小时,进而抽滤,将抽滤得到的产品烘干,打粉,所得的产品外观是白色粉末状,产品纯度达到80%,这种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖可广泛应用于食品、保健品、化妆品等行业中。
Claims (6)
1.一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)自溶:取酵母原料,加水,调节温度为100~130℃,pH为7,反应1~8h,对酵母细胞壁进行破壁处理,提取酵母β-1,3-葡聚糖;
(2)酶解:在步骤(1)所得葡聚糖溶液中加入蛋白酶和甘露聚糖酶,调节温度为40~60℃,pH为5~9,反应1~5h后,即得含酵母β-1,3-葡聚糖的溶液;
(3)纯化:将步骤(2)所得含酵母β-1,3-葡聚糖的溶液离心、过滤,收集沉淀,所得沉淀经碱处理后,加酸中和,洗涤,脱水,干燥,粉碎即得高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖产品,其中碱处理的过程为:加氢氧化钠调节溶液pH为7.5~9,温度为70~80℃,反应1~3小时。
2.根据权利要求1所述高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,其特征在于步骤(1)中所述酵母原料为啤酒酵母或面包酵母。
3.根据权利要求1所述高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,其特征在于步骤(1)中所述酵母原料和水的重量份配比为1∶2~15。
4.根据权利要求1所述高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,其特征在于步骤(2)中所述蛋白酶和甘露聚糖酶的重量含量为酵母原料的1~10‰。
5.根据权利要求1所述高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,其特征在于步骤(2)中所述蛋白酶是由枯草芽孢杆菌经发酵提取制得的中性蛋白酶,所述甘露聚糖酶是地衣芽孢杆菌经发酵提取制得的β-甘露聚糖酶。
6.根据权利要求1所述高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法,其特征在于步骤(3)中所述洗涤过程为:首先经碱液洗涤后,加酸中和,离心过滤,收集沉淀,所得沉淀再用水洗涤1~3次。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2009100364134A CN101463373B (zh) | 2009-01-04 | 2009-01-04 | 一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2009100364134A CN101463373B (zh) | 2009-01-04 | 2009-01-04 | 一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101463373A CN101463373A (zh) | 2009-06-24 |
CN101463373B true CN101463373B (zh) | 2011-08-10 |
Family
ID=40804163
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2009100364134A Active CN101463373B (zh) | 2009-01-04 | 2009-01-04 | 一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101463373B (zh) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102379391B (zh) * | 2010-09-03 | 2013-09-25 | 湖北国力生物技术开发有限公司 | 松花粉葡聚糖纳豆保健食品的制备 |
CN103468765A (zh) * | 2013-09-18 | 2013-12-25 | 陕西省微生物研究所 | 啤酒酵母可溶性1,3-β-D-葡聚糖的生物提炼及纯化方法 |
CN103757071B (zh) * | 2014-01-24 | 2015-09-30 | 侯梦斌 | 一种生产酵母聚糖的方法 |
CN105732840B (zh) * | 2014-12-08 | 2018-12-11 | 中粮集团有限公司 | 一种对乳或乳制品中酵母β-葡聚糖进行前处理的方法 |
CN106755196A (zh) * | 2016-12-20 | 2017-05-31 | 广东工业大学 | 一种提高β‑葡聚糖水溶性的方法 |
CN109303195B (zh) * | 2017-07-28 | 2021-09-07 | 安琪酵母股份有限公司 | 一种可替代抗生素的酵母细胞壁及其制备方法和应用 |
CN110105466A (zh) * | 2019-03-21 | 2019-08-09 | 浙江九如堂生物科技有限公司 | 基于酵母自溶结合机械化学法提取酵母β-葡聚糖的方法 |
CN113897294B (zh) * | 2021-11-15 | 2024-02-20 | 唐山拓普生物科技有限公司 | 一种提取高纯度酵母β-葡聚糖的方法 |
CN114304353B (zh) * | 2021-12-30 | 2023-09-19 | 艾苛密(上海)健康科技股份有限公司 | 一种具有降糖降压保健功能的β-葡聚糖糖果片及制备方法 |
CN114343045B (zh) * | 2022-01-20 | 2023-11-17 | 河南省寓生堂食养科技有限公司 | 一种保健压片糖果及其制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1583802A (zh) * | 2004-06-02 | 2005-02-23 | 中国农业大学 | 一种提取β-1,3-葡聚糖的方法 |
CN1767837A (zh) * | 2003-03-18 | 2006-05-03 | 碧欧普罗吉有限公司 | 用于免疫活性或防治癌症的包含从酿酒酵母is2中得到的可溶性葡聚糖低聚物的组合物及其制备方法 |
CN101230371A (zh) * | 2008-02-01 | 2008-07-30 | 中国科学院近代物理研究所 | 用甜高粱汁液生产酵母葡聚糖的方法 |
-
2009
- 2009-01-04 CN CN2009100364134A patent/CN101463373B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1767837A (zh) * | 2003-03-18 | 2006-05-03 | 碧欧普罗吉有限公司 | 用于免疫活性或防治癌症的包含从酿酒酵母is2中得到的可溶性葡聚糖低聚物的组合物及其制备方法 |
CN1583802A (zh) * | 2004-06-02 | 2005-02-23 | 中国农业大学 | 一种提取β-1,3-葡聚糖的方法 |
CN101230371A (zh) * | 2008-02-01 | 2008-07-30 | 中国科学院近代物理研究所 | 用甜高粱汁液生产酵母葡聚糖的方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
黄国宏等.酵母β-1 3-葡聚糖研究进展.《酿酒科技》.2006 |
黄国宏等.酵母β-1,3-葡聚糖研究进展.《酿酒科技》.2006,(第 12 期),100-103. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101463373A (zh) | 2009-06-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101463373B (zh) | 一种高纯度酵母免疫活性β-1,3-葡聚糖的制备方法 | |
Patel et al. | Algal polysaccharides: current status and future prospects | |
CN102898536B (zh) | 一种降解浒苔多糖的方法 | |
CN103360514B (zh) | 一种快速降解制备水溶性低聚壳聚糖的方法 | |
CN106432538B (zh) | 一种甲壳质低聚糖、壳低聚糖和壳寡糖的制备方法 | |
CN103484513B (zh) | 一种酶法制备小分子寡聚透明质酸的方法 | |
CN102690847A (zh) | 酶切法制备寡聚透明质酸盐的方法及所得寡聚透明质酸盐和其应用 | |
RU2562172C2 (ru) | СПОСОБ СОВМЕСТНОГО ПОЛУЧЕНИЯ ХИТИН-ГЛЮКАНОВОГО КОМПЛЕКСА И ПОЛИМЕРОВ, СОДЕРЖАЩИХ ГЛЮКОЗУ, МАННОЗУ И/ИЛИ ГАЛАКТОЗУ, ПУТЕМ ФЕРМЕНТАЦИИ ДРОЖЖЕЙ Pichia pastoris | |
CN102154395A (zh) | 一种无机盐、有机溶剂共沉作用提取γ-聚谷氨酸的方法 | |
CN102676614A (zh) | 一种低聚半乳糖的制备方法 | |
CN106834379A (zh) | 一种新琼四糖的制备方法及其应用 | |
CN101250237A (zh) | 一种硫酸软骨素的无溶剂提取方法 | |
CN1861640A (zh) | 一种壳寡糖盐酸盐的制备方法 | |
CN109576324A (zh) | 一种黄芪多糖及其生物提取法 | |
CN103436573A (zh) | 一种生物催化的高效农业壳寡糖的生产方法 | |
CN106498004A (zh) | 以虾蟹壳为原料酸解酶解生产壳寡糖的方法 | |
CN1233664C (zh) | 一种制备水溶性壳聚糖的方法 | |
CN102212595B (zh) | 一种水溶性纳米级谷物多糖的制备方法及应用 | |
CN101891837B (zh) | 一种羧甲基化双歧杆菌胞外多糖及其制备方法和应用 | |
CN109071683A (zh) | 几丁质低聚物、n-乙酰葡糖胺和1-o-烷基-n-乙酰葡糖胺的制造方法 | |
CN113999327B (zh) | 一种具有显著抗光老化活性的羊栖菜多糖及其应用 | |
CN101851259A (zh) | 硒壳寡糖及其制备方法 | |
CN102477106A (zh) | 一种辐射法制作水溶性壳聚糖方法 | |
CN104450665A (zh) | 一种固定红发夫酵母及制备新科思糖的方法及应用 | |
CN109134682A (zh) | 一种红藻低聚糖及其制备方法与应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CP03 | Change of name, title or address |
Address after: 510308 No. 146 East Xingang Road, Guangzhou, Guangdong, Haizhuqu District Patentee after: Guangdong Food Industry Research Institute Co Ltd Address before: 510308 No. 146 East Xingang Road, Guangdong, Guangzhou Patentee before: Guangdong Prov. Food Industry Inst. |
|
CP03 | Change of name, title or address |