CN101461385B - 一种革兰氏阳性、阴性细菌的抑菌剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌的抑菌剂及其应用,其活性成份为玫瑰花水提液,玫瑰花水提液对革兰氏阳性和/或阴性菌具有抑制作用;玫瑰花露可用于饮品、食品添加剂、药品、药食同源的保健品或天然清洁保鲜剂。本发明的优点为:成本低,适用性强,易于操作,获得的结果翔实可靠。
Description
技术领域
本发明涉及革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌的抑菌剂,具体地说是玫瑰花露在抑制革兰氏阳性、阴性菌中的应用,玫瑰花露可用于天然的、医疗保健、果蔬保鲜或药食同源天然保健品中。
背景技术
玫瑰(Rosa rugosa Thumb.)为蔷薇科,蔷薇属的落叶灌木。原产我国,栽种历史悠久,早在汉代就有关于玫瑰的记载。玫瑰资源分布广,南起广东,北到辽宁至黑龙江,东起沿海地区,西到内陆都有部分栽培。其中以甘肃、山东、北京、辽宁、黑龙江、台湾、和新疆等地为主。
沈阳地区的玫瑰其优势为:耐寒、耐贫瘠、抗病、抗旱、适应性强,易管理,生长快,花期长(5月-10月),盛花期能维持在15年以上。
玫瑰不仅能美化、绿化城市还集药用、食用为一体,广泛应用于化工、食品、酿酒、医药等领域。中医认为,玫瑰花性温、味甘、微苦,归肝、肾经,可行经解郁、活血散瘀。用于肝胃气痛、乳痛肿毒、月经过多、赤白带下、肠炎下痢疾跌打损伤等。
玫瑰花含有丰富的维生素C、葡萄糖、木糖、蔗糖、柠檬酸、苹果酸、食之芳香甘美,令人心旷神爽。用玫瑰鲜花生产“玫瑰露酒”畅销世界45个国家,并屡获殊荣,享有“中国白兰地”之美誉。
这种天然绿色的玫瑰花,具有广阔的应用前景,越来越备受国内外人们的青睐。
现今,玫瑰花的主导产品是提取玫瑰精油,是一种珍贵的天然香精。曾有报导用两滴玫瑰油就能制成1千克上好的香水。玫瑰油是世界性名贵精油之一,价格高达7000-8000美元/千克,素有“液体黄金”之称。
关于玫瑰露、玫瑰精油的化学成分,已有人对保加利亚、土耳其、苏联等国作了全面的研究。余珍等分析了法国玫瑰油、摩洛哥玫瑰油、甘肃苦水玫瑰油及山东平阴玫瑰油的化学成分,各鉴定了79,74,45和54个组分,并与文献进行了比较,其主要化学成分均为香茅醇、香叶醇、苯乙醇、金合欢醇及其酯类、芳樟醇、玫瑰醚、丁香酚、甲基丁香酚,但由于含量上的多少。及其化学成分上的差异,使这几种玫瑰油的香气产生了微妙的出人。而吴秋霞等对平阴玫瑰精油的成分进行了研究,并对从蒸馏过程中不冷凝的尾气中回收的轻质精油进行了分析,发现轻质精油成分普遍偏轻,重组分很少,尤其是顺、反一玫瑰醚高达8.8%,这是极其宝贵的轻质成分,使轻质精油的香气更为浓郁。刘纪正等对平阴玫瑰精油进行了预分离,鉴定出393种化合物,定量分析148种化合物,与其他地区的玫瑰精油作了对比,并测试了理化指标[西北林学院学报2004,19(4);138-141]。
发明内容
本发明的目的在于提供一种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌的抑菌剂及其应用。玫瑰花露对革兰氏阳性、阴性菌具有抑制作用,其可制成具有抑菌作用的饮品、食品添加剂、药品、药食同源的保健品或天然清洁保鲜剂等。
为实现上述目的,本发明采用的技术方案为:
一种革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌的抑菌剂,其活性成份为玫瑰花水提液,也可称之为玫瑰花露,玫瑰花水提液对革兰氏阳性和/或阴性菌具有抑制作用。
玫瑰花露,是由玫瑰花的花瓣、花蕊、花托经水提取、蒸馏获取的,它保留了玫瑰油的所有的有效成分,得到的是玫瑰花的精华,故称其为玫瑰花露;其感官嗅觉具有与鲜玫瑰花相似的芳香、味浓,清而不浊,闻之另人心旷神怡。
所述的革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌、八叠球菌和/或链球菌(无乳链球菌);革兰氏阴性菌为:大肠杆菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、变形杆菌、肺炎杆菌和/或流感杆菌等这类菌群的其他菌。
所述玫瑰花水提液的提取方法为水蒸气蒸馏法、超声提取法或微波提取法;所采用的提取原料玫瑰花为花瓣、花蕊和/或花托。提取的玫瑰花露的抑菌率为50一80%。
1)所述水蒸气蒸馏法为,取鲜玫瑰花,以料液重量比1∶20~40倍加水装入配有冷凝装置的蒸馏器内,加热蒸馏2~5小时,通过利用高温水蒸气,使玫瑰花中的油状香精、香料在全封闭情况下蒸馏、气化随水蒸气一起通过冷凝使之完全液化后即得玫瑰花露,可按各类要求收集储藏。
2)所述超声提取法为,取玫瑰花以料液比1∶15~30倍加水进行超声提取,工作频率20~40khz,电动功率100~400w,温度30~80度,超声波作用时间10~45分钟(这时的玫瑰花通过超声提取技术使其细胞破裂则内含物释放于料液中,然后再经过同上述蒸馏法制得的玫瑰花露),然后再用水蒸气蒸馏2~3小时,获得玫瑰花露;所获的玫瑰露量与蒸馏制取的量相当,但其大部分营养成分的含量均增加了几个百分点。
3)所述微波提取法为,取玫瑰花以料液比1∶15~20倍加水,微波功率100~400w,温度30~80度,时间20~50分钟,在该作用功能的范围内能迅速使玫瑰花的细胞壁穿透,则细胞内的各类化学成分随之而释放于该料液之中,然后再用水蒸气蒸馏2~3小时,获得玫瑰花露。
玫瑰花露对革兰氏阳性、阴性菌具有抑制作用,其可制成具有抑菌作用的食品、天然食品添加剂、药品、药食同源的保健品或天然清洁保鲜剂等。
作为天然清洁保鲜剂,可应用到采摘的果蔬如苹果、梨、桃、李子、黄瓜、辣椒等的喷洒以延长它们的保鲜期;同时,其本身所具有的芳香气息,果蔬食用后,使之余味更加;
作为天然食品添加剂和抗氧剂,可应用到焙烤食品中,制备具有玫瑰芳香的蛋糕、蛋塔、月饼或米制糕团,起到抗氧、防腐保鲜作用;
作为食品、天然食品添加剂,玫瑰花露可制备成糕点、糖果、营养羹、饮品(即营养保健露)、茶、玫瑰露酒等各种食品、营养保健品;
作为天然清洁剂,其可净化空气,并广泛适用于家居、写字楼、宾馆酒店、公共场所、办公室、电脑桌、手边案头、汽车飞机等交通工具内清除异味、清新空气、杀菌消毒等;
作为药品,玫瑰花露可制备成具有抑菌作用天然的清洁消炎去敏、润肤剂,用于修复夏季太阳晒红皮肤2-3小时内见效退红;用于电脑前眼睛疲劳,喷射湿润后立即缓解眼部疲劳;用于淋浴后皮肤喷洒立时爽身舒心;用于不小心开水烫伤立即喷洒,止痛不起泡;还可用于蚊虫叮咬、过敏性皮肤等的止痒、抗过敏等;
作为药品,还可制备具有健胃消食功效,能够平衡及强化胃肠道功能,调节消化液的分泌,促进消化和吸收的药品;其对消化不良及胃酸分泌过多等慢性疾患有很好的调节和改善作用;对情绪紧张、压抑等引起的胃痛也有明显的改善功能。
作为药品,其还具有调经止痛功效,还能全方位调节女性生殖系统功能,增强卵巢机能;调节雌激素及黄体素分泌,调整月经周期,并减少过多的经血,镇静经前紧张;能活血化淤,通经活血,有效改善痛经、月经不规则等。
作为药食同源保健品,可制成上等的口服玫瑰露,其除最宜人的芳香外,还富含上百种有益于人体健康的营养成分,能和血、养胃、宽胸散郁、舒气活血、美容养颜、令人神爽。同时她还具有一定的抗菌抑菌润肠护肝功能:能促进肠道蠕动,净化消化道,帮助毒素排解及代谢;能改善反胃、呕吐及便秘;能增强及改善肝功能,尤其能减低酒精对肝脏的毒害作用,改善酒精过量造成的肝充血。
作为清洁液,玫瑰花露可大量用于接触现金、票据的银行、海关、审计等行业中,作为数点钞票、票据等的清洁液,又可为舒心液;同时又可用于清洁脸部、手部以及婴儿皮肤的布料的吸附液。
玫瑰花露可制备具有药食同源和药理作用的产品:玫瑰花露中的化学成分:苯乙醇、橙花醇、橙花叔醇、丁香酚等具有解毒、降血压、镇静等功效;香茅醇、香叶醇和香叶醛具有杀菌、消炎、抗抑郁、促吸收、活血和镇静作用;苯乙醇、香叶醇、香茅醇、橙花醇具有通经、安眠镇静等作用。同时丁香酚不仅具有活血功能而且还具有调节胃肠功能作用。
另外,玫瑰花露中所含的黄酮类物质即:十三酮、马兜铃酮、2-十一酮等,通过羟基化使细胞水解失去致癌活性,起到抗癌效果。因此它具有抗肿瘤作用,抗心脑血管疾病,增加冠脉血流量和脑血流量,降低血压,可有效防治高血压和冠心病等的心脑血管疾病。
本发明的优点:
1.本发明产品成本低,实用性强,易于操作制取,产品性能翔实可靠。
2.作为上好的美容养颜的佳品、天然营养保健食品添加剂。备受人们推崇,尤其是发现她具有对革兰氏阳性、阴性细菌及霉菌抑制作用后,使其玫瑰花露应用范围增大、领域加宽、价值加强。
1)应用到焙烤等食品中具有防腐保鲜作用。
2)作为采摘蔬菜、水果的天然清洁保鲜剂。
3)作为家居、宾馆酒店等公共场所的空气清新剂。
4)制作药食同源保健品的口服玫瑰露,所具有的抗菌抑菌润肠护肝功能:能促进肠道蠕动,净化消化道,帮助毒素排解等代谢功能。
3.在人们日益追求环保,崇尚自然增强营养的今天,可作为天然清洁保鲜剂、食品天然添加剂、药食同源的药理作用的产品玫瑰花露,具有非常广阔的市场应用前景。
附图说明
图1为实施例1中本发明抑菌试验的部分照片;
图2为实施例4中本发明抑菌试验的部分照片。
具体实施方式
实施例1
1.玫瑰露的制取如下:
取新鲜玫瑰花1000g,加水量为花重量的25倍,加热进行水蒸汽蒸馏4h后制取的玫瑰花露,其主要成分如表1所示。
玫瑰花露的头段(1小时内的馏份)为1#,二段(1-2小时内的馏份)为2#,三段(2-4小时内的馏份)为3#;
将所有馏份混合为一体后放置一个月的玫瑰花露4#、放置一年的玫瑰花露12#、储藏两年的玫瑰花露5#、11#。
2.抑菌试验
将选用的指示菌革兰氏阳性(金黄色葡萄菌)、阴性细菌(大肠杆菌)进行复壮培养,其培养步骤为:
1)制备适合指示菌生长的培养基,适合革兰氏阳性、阴性菌生长的培养基,按着常规适合菌种生长的培养基为牛肉膏蛋白胨,基质重量配比:牛肉膏0.3%,蛋白胨1.0%,NaCl 10.5%,琼脂1.6-2.0%,自来水100ml,PH 7.0-7.2;将配制好的培养基1个大气压灭菌30分钟后,制备斜面备用;
2)再将菌种接种在制备好的斜培养基中,置于适合其生长的温度37℃恒温培养3天;
3)菌种培养好后稀释100倍制成菌悬液待用;
4)采用平板纸片测定法,检测通过蒸馏制取的不同储藏方式的玫瑰花露;
所述采用平板纸片测定法,首先制备混有各指示菌种的营养基质平板,再将事先灭好菌的1cm纸片分别浸入待测上述各类的玫瑰花露浸10分钟后,取出分别以2-6枚纸片放入指示菌类的基质平板内,分别置入恒温培养,培养温度32-37℃,培养2天,测其抑制指示菌的抑菌直径D;
1#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=13.5mm,大肠杆菌D=16mm:
2#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=13.5mm,大肠杆菌D=16.5mm;
3#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=15mm,大肠杆菌D=15mm;
4#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=14mm,对大肠杆菌D=抑菌直径不够明显;
5#玫瑰花露的抑菌直径金黄色葡萄菌D=13.5mm,大肠杆菌D=18mm;
11#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=14mm,大肠杆菌D=16mm:
12#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=14mm,大肠杆菌D=14mm。
制得的玫瑰花露可作为用于天然清洁剂、可净化空气,用于卧室及人群集中的场所;又可制备消炎润肤剂,用于蚊虫叮咬及过敏性皮肤的止痒等的抗过敏作用。还用于电脑前眼睛疲劳,喷射湿润后立即缓解眼部疲劳。
实施例2
采用超声波提取蒸馏方法制取的玫瑰花露,可制备成功能性保健品口服玫瑰露。
1.玫瑰露的制取如下:
称取鲜玫瑰花1000g,加水量为花的30倍,用超声波提取,选用工作频率为28.5KHZ,电动功率为130W,超声波作用时间为30min,温度为70℃。玫瑰花在超声提取技术下,使其细胞迅速破裂,内含物随之释放出来,然后再经过蒸馏法蒸馏2h后,制得的玫瑰花露,其主要成分如表1所示;
玫瑰花露的头段(0.5小时内的馏份)为1#,二段(0.5-1小时内的馏份)为2#,三段(1-2小时内的馏份)为3#;
将所有馏份混合为一体后放置一个月的玫瑰花露4#、放置一年的玫瑰花露7#、储藏两年的玫瑰花露5#、6#。
2.抑菌试验
选用的指示菌革兰氏阳性、阴性细菌进行复壮培养,其培养、实验步骤同实施例1。测得的抑菌直径D为:
1#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=20mm,大肠杆菌D=22mm;
2#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=15mm,大肠杆菌D=19mm;
3#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=23.5mm,大肠杆菌D=19mm:
4#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=20mm,大肠杆菌D=抑菌直径不够明显;
5#玫瑰花露的抑菌直径金黄色葡萄菌D=15mm,大肠杆菌D=18mm;
6#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=25mm,大肠杆菌D=16mm;
7#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=15mm,大肠杆菌D=18mm;
3.玫瑰花制备成的口服玫瑰露
取超声波提取法制取的玫瑰花露100ml与冰糖加热频服,治肺病咳嗽吐血。该口服玫瑰露,除具有宜人的芳香外,还富含数百种有益于人体健康的营养成分,能和血、养胃、润肺、宽胸散郁、舒气活血、美容养颜、令人神爽。代茶频服可治肝胃气痛,同时她还具有一定的抗菌抑菌润肠护肝功能。
实施例3
采用微波低温提取蒸馏的玫瑰花露,可制备成为药品
1.玫瑰露的制取如下:
称取鲜玫瑰花1000g,加水量为花的20倍,微波提取的温度为60℃,微波功率为150W,提取时间为25min。玫瑰花在微波提取技术下,能迅速使玫瑰花的细胞壁穿透,则细胞内的各类化学成分随之而释放出来,然后进入蒸汽蒸馏2h后,获得玫瑰花露,其主要成分如表1所示。
玫瑰花露的头段(0.5小时内的馏份)为1#,二段(0.5-1小时内的馏份)为2#,三段(1-2小时内的馏份)为3#;
将所有馏份混合为一体后放置一个月的玫瑰花露4#、放置一年的玫瑰花露7#、储藏两年的玫瑰花露5#、6#。
2.抑菌测试
选用的指示菌革兰氏阳性、阴性细菌进行复壮培养,其培养、实验步骤同实施例1。测得的抑菌直径D为:
1#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=20mm,大肠杆菌D=18mm;
2#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=16mm,大肠杆菌D=20mm;
3#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=23mm,大肠杆菌D=19mm;
4#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=20mm,大肠杆菌D=抑菌直径不够明显;
5#玫瑰花露的抑菌直径金黄色葡萄菌D=16mm,大肠杆菌D=18mm;
6#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=25mm,大肠杆菌D=18mm;
7#玫瑰花露的抑菌直径:金黄色葡萄菌D=15mm,大肠杆菌D=17mm;
3.玫瑰花露制备成药品的应用
取微波法蒸馏的玫瑰花露50ml,红花5g,全当归5g,,加热去渣,好酒和服七剂。具有调经止痛功效,还能全方位调节女性生殖系统功能,增强卵巢机能;调节雌激素及黄体素分泌,调整月经周期,并减少过多的经血,镇静经前紧张;能活血化淤,通经活血,有效改善痛经、月经不规则等。
表1玫瑰花露的部分化学成分及含量
序号 | 化合物成分名称 | 含量(μg/mL) | 分子量 |
1 | 香茅醇 | 496.1 | C10H20O |
2 | 香叶醇 | 111.9 | C10H18O |
3 | 芳樟醇 | 46.6 | C10H18O |
4 | 橙花醇 | 307.5 | C10H18O |
5 | 苯乙醇 | 38.4 | C8H10O |
6 | 帖品醇 | 6.7 | C10H18O |
7 | 香叶醛 | 1.8 | C10H16O |
8 | 橙花醛 | 10.0 | C10H16O |
9 | 香茅醇甲酸酯 | 1.4 | C11H20O2 |
10 | 香茅醇乙酸酯 | 6.5 | C12H22O2 |
11 | β-香叶烯 | 0.8 | C10H16 |
12 | 乙醇 | 0.8 | C2H6O |
13 | 丁香酚 | 46.2 | C10H12O2 |
14 | 香茅醛 | 1.2 | |
15 | 丁子香酚 | 65.8 | C10H12O2 |
16 | 2-十一酮 | 1.6 | C11H22O |
17 | 2-十一醇 | 1.2 | C11H21O |
18 | 十三醇 | 1.0 | C13H28O |
19 | 二十二烷 | 11.2 | C22H46 |
20 | 二十三烷 | 24.0 | C23H48 |
21 | 棕榈酸 | 9.7 | C18H12O2 |
22 | 9-十八碳烯酸 | 2.9 | C18H31O2 |
23 | 十三酮 | 78.4 | C13H26O |
24 | 二十五烷 | 12.5 | C25H52 |
25 | 马兜铃酮 | 32.5 | C15H22O |
26 | 丁子香酚甲醚 | 31.0 | C11H11O2 |
27 | 顺式玫瑰醚 | 7.7 | C10H18 |
28 | 反式玫瑰醚 | 17.9 | C10H18 |
29 | 棕榈酸乙酯 | 19.9 | C18H36O2 |
30 | 金合欢醇 | 41.8 | C15H26O |
表1涵盖了制取的玫瑰花露主要的成分及部分次要成分。
实施例4
1.玫瑰露的制取如下:
取新鲜玫瑰花1000g,加水量为花重量的40倍,加热进行水蒸汽蒸馏3h后制取的玫瑰花露,其主要成分如表1所示。
玫瑰花露的一段(1小时内的馏份)为1#,二段(1-2小时内的馏份)为2#,三段(2-4小时内的馏份)为3#;
将所有馏份混合为一体后放置一个月的玫瑰花露4#、放置一年的玫瑰花露7#、储藏两年的玫瑰花露5#、6#。
2.抑菌试验
采用平板纸片测定法,检测蒸馏制取的玫瑰花露;
首先制备营养基质平板,再未灭菌的1cm纸片分别浸入待测上述各类的玫瑰花露浸10分钟后,取出分别以2-6枚纸片放入基质平板内,以浸入灭菌蒸馏水的未灭菌纸片为对照,分别置入恒温培养,培养温度32-37℃,培养2天;
玫瑰花露抑菌作用的初步测试。
测试结果显示:图2〔图中的Ck-W-牛:为牛肉膏蛋白胨基质的对照处理,玫瑰花露-05-1-牛:为在牛肉膏蛋白胨基质中一段玫瑰花露〕,对照已长出菌落,而被测的玫瑰花露05-1却无任何菌落生长,说明玫瑰花露已抑制了未灭菌纸片上的杂菌。W:为测定纸片所浸入的无菌水water的缩写
检测对照组中的菌类,其均为日用食品、营养保健品等保藏不慎常滋生细菌类:
革兰氏阳性菌:金黄色葡萄球菌(Staphyloccus aureus)、八叠球菌(Methanosarcina barkeri)、链球菌(无乳链球菌Streptococcus agalactiae);
革兰氏阴性菌;大肠杆菌(Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)、沙门氏菌(Salmonella choleeraesuis)、变形杆菌(ProteusHauser)、肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)、流感杆菌(Hemophilus Influenzae)等。
这类菌群均为病原菌类,其分布均为自然界中适合于滋生繁育它们的空气、土壤及某些物品之中,但世间的宇宙万物均都存在着滋生和拮抗的双重性,
所以本发明玫瑰花露的抑菌作用就是这宇宙间万物的双重性之一。因此常温下玫瑰花露就显示了抑制这类菌的作用效果。
研究发现玫瑰花露中的化学成分互为协同功效,完成杀菌作用。因此,玫瑰花露的混合物在起着抑菌作用而非某种成分的作用。
Claims (2)
1.一种革兰氏阳性、阴性细菌的抑菌剂的应用,其特征在于:所述抑菌剂作为具有抑菌作用的饮品、护肤消毒剂、天然食品添加剂、药食同源的保健品、天然清洁剂或水果疏菜保鲜剂;
其活性成份为玫瑰花水提液,玫瑰花水提液对革兰氏阳性和/或阴性菌具有抑制作用;
所述玫瑰花水提液的提取方法为水蒸气蒸馏法、超声提取法或微波提取法,所获取的玫瑰花水提液亦可称之为玫瑰花露,其由玫瑰全花经提取、蒸馏制取并保留玫瑰油所有活性成份的玫瑰花精华;玫瑰花水提液所采用的提取原料为玫瑰花的花瓣、花蕊和/或花托;
所述水蒸气蒸馏法为,取玫瑰花,以料液质量比1∶20~40倍加水,加热蒸馏2~5小时,获得玫瑰花露;
所述超声提取法为,取玫瑰花以料液质量比1∶15~30倍加水进行超声提取,工作频率20~40khz,电动功率100~400w,温度30~80度,时间10~45分钟,然后再用水蒸气蒸馏2~3小时,获得玫瑰花露;
所述微波提取法为,取玫瑰花以料液质量比1∶15~20倍加水,微波功率100~400w,温度30~80度,时间20~50分钟,然后再用水蒸气蒸馏2~3小时,获得玫瑰花露。
2.根据权利要求1所述的革兰氏阳性、阴性细菌的抑菌剂的应用,其特征在于:所述的革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌(Staphyloccus aureus)、八叠球菌(Methanosarcina barkeri)和/或链球菌(Streptococcus agalactiae);革兰氏阴性菌为:大肠杆菌(Escherichia coli)、绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)、沙门氏菌(Salmonella choleeraesuis)、变形杆菌(Proteus Hauser)、肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)和/或流感杆菌(Hemophilus Influenzae)。
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