CN101455693A - 一种从积雪草中渗漉提取积雪草总苷的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从积雪草中渗漉提取积雪草总苷的方法,该方法以积雪草为原料,以乙醇水溶液或甲醇水溶液为提取溶剂,采用渗漉法高效地从积雪草中提取积雪草总苷,积雪草总苷的提取率达到93%以上。该方法具有提取率高、溶剂消耗少、生产成本低、易于工业化生产等优点。
Description
技术领域
本发明涉及积雪草总苷的提取方法,具体涉及一种从积雪草中渗漉提取积雪草总苷的方法。
背景技术
积雪草是我国的传统中药,古药典记载积雪草主要用于治疗湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌打损伤等病症。积雪草的主要活性成分为积雪草总苷,包括积雪草苷、羟基积雪草苷等五环三萜皂甙。现代医学研究表明,积雪草总苷具有显著的生理活性,可用于治疗抑郁症、皮肤创伤、胃溃疡、传染性肝炎、皮肤病和流行性脑脊髓膜炎等。因此积雪草总苷的提取技术研究具有明显的应用价值。
文献报道的积雪草总苷的提取方法有两类:一是醇热回流提取,二是超声辅助提取。专利EP 867447、CN 1194154、US 6417349和IN 183285中均公开了采用乙醇水溶液加热回流提取积雪草总苷的方法,但加热回流提取法为保证有较高的提取率,一般需要较长的提取时间和反复多次的提取,会因此产生一些问题,如提取时间和提取次数增多,会导致提取物中杂质含量上升,使提取物的成分变复杂,后续分离纯化困难,难以制备高纯度产品;此外,会消耗大量溶剂,后续溶剂回收时能耗也较高,而且物料中残留溶剂的充分回收也存在一定困难。总的来说,这种方法并不适合于工业化生产。文献(中药材,2003,26(3):204)公开了超声辅助提取积雪草总苷的方法,但该方法设备成本高,工艺放大困难,因此难以工业化应用。
发明内容
本发明提供了一种从积雪草中渗漉提取积雪草总苷的方法,该提取方法操作简单、成本低、对积雪草总苷的提取率高,有利于工业化生产。
一种从积雪草中渗漉提取积雪草总苷的方法,包括如下步骤:
(1)将颗粒度为5~60目的积雪草粉末装填入渗漉柱内,压实测得积雪草堆积体积,加入0.6~1倍积雪草堆积体积的提取溶剂,在30~70℃浸泡0.2~1小时;
(2)将1~3倍积雪草堆积体积的提取溶剂自上而下流经渗漉柱进行渗漉提取,提取溶剂流速为0.2~1倍积雪草堆积体积/小时,渗漉提取温度为30~70℃,收集渗滤液,减压浓缩得到积雪草总苷提取物。
步骤(2)中收集渗滤液后可采用1~2倍积雪草堆积体积的去离子水自上而下流经渗漉柱,流速为0.5~1.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为30~70℃,收集洗脱液,通过浓缩和精馏等方式回收所用的提取溶剂,进行重复利用,以节约资源。
所述积雪草堆积体积为渗漉柱内经压实的积雪草粉末所占的体积,1千克经压实的积雪草粉末的堆积体积为4~7升。
所述提取溶剂为体积百分比浓度为30~90%的乙醇水溶液或体积百分比浓度为30~90%的甲醇水溶液。含水乙醇或含水甲醇作为提取溶剂对积雪草总苷选择性好、渗透性强、浸出率高、安全性好。在30~70℃下,积雪草总苷在该浓度的甲醇水溶液或乙醇水溶液中的溶解度大,同时,积雪草中其它成分在其中的溶解度小,因此该浓度的甲醇水溶液或乙醇水溶液对积雪草中积雪草总苷的选择性提取率高,并且积雪草总苷提取液中杂质的含量少,从而在提高积雪草总苷提取率的同时提高积雪草总苷的纯度。
本发明中选用0.6~1倍积雪草堆积体积的提取溶剂浸泡积雪草粉末,以保证积雪草粉末能够完全浸泡在提取溶剂中。
本发明中进行渗漉提取时,提取溶剂的流速优选为0.2~1倍积雪草堆积体积/小时。在该流速范围内,既可以保证提取溶剂和积雪草粉末有充分接触的时间,保证积雪草总苷目标活性分子从植物纤维组织溶出、扩散到提取溶剂中,提高提取溶剂的利用率,又能兼顾生产能力。
本发明采用反相高效液相色谱法分析积雪草总苷提取物组成,积雪草总苷的提取率大于93%。反相高效液相色谱分析条件为:C18柱(Φ4.6×250mm,Waters),柱温30℃,流动相:乙腈/水,流速1ml/min,检测波长为203nm。
本发明采用渗漉法从积雪草中提取积雪草总苷可克服醇热回流提取法和超声辅助提取法的缺点。渗漉法提取依靠提取溶剂与植物纤维细胞内外浓度差,使溶质从胞内扩散到胞外的主体相内,随着溶剂连续缓慢地加入到渗漉柱内,细胞周围原本浓度较高的提取液,不断被新溶剂或低浓度提取液所代替,保持着细胞内外最大的浓度梯度,加速溶出传质。而且,溶剂自上向下均匀地流动,渗透与扩散同时进行,每一层原料与溶剂或提取液都保持一定的浓度差,因此能显著提高提取速度与效果,同时降低溶剂消耗。
本发明具有如下有益效果:
本发明在保证一定积雪草总苷提取率的前提下,不但能显著减少提取溶剂的用量,降低浓缩能耗,还可以充分回收提取溶剂,大大降低溶剂的损耗,降低生产成本,有利于工业化生产。
具体实施方式
实施例1
将干积雪草粉碎,得到颗粒度为5~60目的积雪草粉末,称取60克积雪草粉末装入渗漉柱(Φ3.0cm×70cm)内,压实,其堆积体积约为370毫升,加入1倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度70%的乙醇水溶液,在40℃浸泡1小时;将2倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度70%的乙醇水溶液从渗漉柱顶部加入,自上而下流经渗漉柱,流速为0.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为40℃,收集渗滤液,减压浓缩得积雪草总苷提取物;再将1倍积雪草堆积体积的去离子水从渗漉柱顶部加入,置换积雪草内残留的乙醇,流速为0.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为40℃,收集洗脱液,通过浓缩和精馏等方式回收乙醇。反相高效液相色谱分析积雪草总苷提取物组成,积雪草总苷的提取率为95.5%。
实施例2
将干积雪草粉碎,得到颗粒度为5~60目的积雪草粉末,称取60克积雪草粉末装入渗漉柱(Φ3.0cm×70cm)内,压实,其堆积体积约为370毫升,加入0.6倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度50%的乙醇水溶液,在70℃浸泡0.2小时;将3倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度50%的乙醇水溶液从渗漉柱顶部加入,自上而下流经渗漉柱,流速为0.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为70℃,收集渗滤液,减压浓缩得积雪草总苷提取物;再将2倍积雪草堆积体积的去离子水从渗漉柱顶部加入,置换积雪草内残留的乙醇,流速为1.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为70℃,收集洗脱液,通过浓缩和精馏等方式回收乙醇。反相高效液相色谱分析积雪草总苷提取物组成,计算得到积雪草总苷的提取率为97.2%。
实施例3
将干积雪草粉碎,得到颗粒度为5~60目的积雪草粉末,称取60克积雪草粉末装入渗漉柱(Φ3.0cm×70cm)内,压实,其堆积体积约为370毫升,加入1倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度30%的乙醇水溶液,在50℃浸泡1小时;将2倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度30%的乙醇水溶液从渗漉柱顶部加入,自上而下流经渗漉柱,流速为0.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为50℃,收集渗滤液,减压浓缩得积雪草总苷提取物;再将1.5倍积雪草堆积体积的去离子水从渗漉柱顶部加入,置换积雪草内残留的乙醇,流速为1倍积雪草堆积体积/小时,温度为50℃,收集洗脱液,通过浓缩和精馏等方式回收乙醇。反相高效液相色谱分析积雪草总苷提取物组成,计算得到积雪草总苷的提取率为98.7%。
实施例4
将干积雪草粉碎,得到颗粒度为5~60目的积雪草粉末,称取60克积雪草粉末装入渗漉柱(Φ3.0cm×70cm)内,压实,其堆积体积约为370毫升,加入1倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度90%的乙醇水溶液,在40℃浸泡1小时;将2倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度90%的乙醇水溶液从渗漉柱顶部加入,自上而下流经渗漉柱,流速为1倍积雪草堆积体积/小时,温度为40℃,收集渗滤液,减压浓缩得积雪草总苷提取物;再将1.5倍积雪草堆积体积的去离子水从渗漉柱顶部加入,置换积雪草内残留的乙醇,流速为0.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为40℃,收集洗脱液,通过浓缩和精馏等方式回收乙醇。反相高效液相色谱分析积雪草总苷提取物组成,计算得到积雪草总苷的提取率为94.0%。
实施例5
将干积雪草粉碎,得到颗粒度为5~60目的积雪草粉末,称取60克积雪草粉末装入渗漉柱(Φ3.0cm×70cm)内,压实,其堆积体积约为370毫升,加入1倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度30%的甲醇水溶液,在50℃浸泡1小时;将3倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度30%的甲醇水溶液从渗漉柱顶部加入,自上而下流经渗漉柱,流速为0.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为50℃,收集渗滤液,减压浓缩得积雪草总苷提取物;再将2倍积雪草堆积体积的去离子水从渗漉柱顶部加入,置换积雪草内残留的甲醇,流速为1.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为50℃,收集洗脱液,通过浓缩和精馏等方式回收甲醇。反相高效液相色谱分析积雪草总苷提取物组成,计算得到积雪草总苷的提取率为98.2%。
实施例6
将干积雪草粉碎,得到颗粒度为5~60目的积雪草粉末,称取60克积雪草粉末装入渗漉柱(Φ3.0cm×70cm)内,压实,其堆积体积约为370毫升,加入1倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度90%的甲醇水溶液,在50℃浸泡0.5小时;将1倍积雪草堆积体积、体积百分比浓度90%的甲醇水溶液从渗漉柱顶部加入,自上而下流经渗漉柱,流速为0.2倍积雪草堆积体积/小时,温度为50℃,收集渗滤液,减压浓缩得积雪草总苷提取物;再将1倍积雪草堆积体积的去离子水从渗漉柱顶部加入,置换积雪草内残留的甲醇,流速为0.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为50℃,收集洗脱液,通过浓缩和精馏等方式回收甲醇。反相高效液相色谱分析积雪草总苷提取物组成,计算得到积雪草总苷的提取率为93.0%。
Claims (3)
1、一种从积雪草中渗漉提取积雪草总苷的方法,包括如下步骤:
(1)将颗粒度为5~60目的积雪草粉末装填入渗漉柱内,压实测得积雪草堆积体积,加入0.6~1倍积雪草堆积体积的提取溶剂,在30~70℃浸泡0.2~1小时;
(2)将1~3倍积雪草堆积体积的提取溶剂自上而下流经渗漉柱进行渗漉提取,提取溶剂流速为0.2~1倍积雪草堆积体积/小时,渗漉提取的温度为30~70℃,收集渗滤液,减压浓缩得到积雪草总苷提取物。
2、如权利要求1所述的方法,其特征在于:收集渗滤液后采用1~2倍积雪草堆积体积的去离子水自上而下流经渗漉柱,流速为0.5~1.5倍积雪草堆积体积/小时,温度为30~70℃,收集洗脱液,以回收提取溶剂。
3、如权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述的提取溶剂为体积百分比浓度为30~90%的乙醇水溶液或体积百分比浓度为30~90%的甲醇水溶液。
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CN104341479A (zh) * | 2014-11-05 | 2015-02-11 | 桂林三宝生物科技有限公司 | 一种从积雪草中提取羟基积雪草甙的方法 |
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