CN105001286A - 一种藏药绿萝花中银椴苷的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明首次公开了一种藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，采用热回流罐提取、干法聚酰胺酚层析和结晶得到高纯度的银椴苷，分离方法简便；同时还利用助沉淀剂回收母液中水合或表面活性物质包裹的银椴苷；进一步将分离和回收的银椴苷合并后重结晶，最终所得银椴苷纯度>90%，本方法提取率高，设备要求低，适用于产业化生产。
Description
技术领域
本发明属于中药有效成分的提取纯化方法，具体是涉及一种从藏药绿萝花中提取银椴苷苷的新方法。
背景技术
藏药绿萝花(Scindapsus aureus)为瑞香科结香属植物，其花蕾似松球，表面披着一层淡绿的茸毛，为喜马拉雅山脉高寒地区特有珍贵草本药材，性微寒，采其花蕾阴干泡水，主治糖尿病、冠心病、高血压和各种血管炎症等疾病。2011年，太志刚等人从绿萝花中分离得到黄酮、三萜和核苷类物质，其中，在分离实验初期就已证明绿萝花中含有大量银椴苷物质（云南大学博士论文. 2011, 131）。
银椴苷具有较好α-葡萄糖苷酶抑制活性的药理活性，2011年Kim等人从沙棘中分离得到银椴苷（J. Agric. Food Chem.2011, 138），并发现其具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性；2012年Wan等人从越橘蓝莓中分离得到银椴苷（Food Chem.2012, 1929），再次验证其具有较强的α-葡萄糖苷酶抑制活性；银椴苷在绿萝花中的含量较高，可以推测银椴苷是治疗糖尿病的主要活性物质。另外，银椴苷还具有广泛的药理活性，2010年Sun等人发现银椴苷具有可逆抑制3种人肝细胞色素P450酶的活性（Phytother. Res. 2010, 1670）； 2012年Goto等人证明银椴苷通过激活脂联素提高肝脏脂肪酸从而改善肥胖所导致的代谢紊乱（J. Nut. Bio.2012, 768）； 2014年Velagapudi等人发现银椴苷具有抑制神经炎症的生物活性（Bio. Bio.Acta. 2014, 3311）；相关文献也曾报道银椴苷具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤及保肝活性。
基于银椴苷较好的药理活性，开发其分离方法具有较强的实际意义。文献和专利报道了银椴苷的提取方法，专利（CN102311467A）报道了一种从结香中分离高纯度银椴苷的新方法，利用超声提取、超滤、大孔树脂层析、高速逆流色谱分离纯化得到97%的银椴苷，该方法工艺步骤繁琐，主要工段所使用的超滤膜易堵塞，成本高，高速逆流色谱设备庞大复杂、溶剂体系难选，易乳化，溶剂耗量大，分离时间长，对于天然产物复杂体系，高速逆流色谱不一定能达到常规生产要求；专利（CN103694293A）报道了一种檵木银椴苷的提取纯化方法及检测方法，利用60%乙醇提取、大孔树脂层析、硅胶柱层析、聚酰胺粉层析、ODS层析、MCI-gel柱层析等方法，最终分离得到96.14%的银椴苷，该方法操作繁琐，反复使用层析手段，不易扩大化生产，且层析材料能吸附原料，特别是硅胶材料能达到50%的吸附量，如此之多的层析手段必然造成生产成本大幅提升，不具备开发价值。
发明内容
本发明克服了现有技术中的不足，提供了一种从藏药绿萝花中分离和回收银椴苷的简便方法。
本发明将分离和回收高纯银椴苷结合为一体，提供了一种提取、干法聚酰胺酚柱层析和结晶分离银椴苷的简便方法，同时还利用助沉淀剂回收固液分离后所剩母液中的水合和表面活性物质包裹的银椴苷，进一步将分离和回收的银椴苷合并后重结晶。
本发明所述从绿萝花提取液中分离和回收银椴苷的步骤如下：
（1）将干燥的绿萝花粉碎至粒径1-5mm，置于热回流提取罐中，并加入原料质量8-10倍的乙醇溶液，搅拌混匀，50-60℃下回流提取2-3次，过滤，浓缩滤液所得粗提物用45-55℃热水分散，冷却至室温后用氯仿重复萃取2-3次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取2-3次，减压浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:2-1:4，冷却，硅藻土过滤得滤液A；
（2）将滤液A与聚酰胺树脂按30-100g:1L比例混合后，减压抽干正丁醇溶剂后立即装柱，然后用体积比为7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿甲醇混合液依次梯度洗脱，合并氯仿甲醇5:1和3:1的洗脱部分，加水萃取并回收氯仿后，剩余液体浓缩至无醇味，静置10-15h，固液分离，得银椴苷沉淀物A和母液A；
（3）将母液A加热至70-80℃，添加助沉淀剂，冷却，静置10-15h，固液分离，得银椴苷沉淀物B；
（4）合并银椴苷沉淀物A和银椴苷沉淀物B，重结晶、洗涤、60-70℃减压干燥，即得银椴苷。
所述重结晶是用质量百分比浓度为95%的乙醇溶液、甲醇、氯仿-甲醇溶液、氯仿-乙醇溶液或乙酸乙酯-乙醇溶液进行；其中氯仿-甲醇溶液是氯仿和甲醇按体积比1:1-7:1的比例混合；氯仿-乙醇溶液是氯仿和乙醇按体积比1:1-6:1的比例混合，乙酸乙酯-乙醇溶液是乙酸乙酯和乙醇按体积比2:1-10:1的比例混合。
所述助沉淀剂是甘草酸二胺、甘草酸钾、甘草酸钠或甘草次酸胺。
所述步骤（1）中乙醇溶液为质量百分比浓度为60-70%的溶液。
所述聚酰胺树脂的型号为CXSZ-60、CXSZ-100或CXSZ-120。
关于上述浓缩至固液比是指一定体积溶液中溶质的质量与溶液体积的比，g:ml。
本发明是对藏药绿萝花中银椴苷分离和回收的简便方法，步骤（1）采用热提取是为了提高银椴苷溶解性，增加提取效率，采用水分散和氯仿萃取是为了去除小分子、糖、蛋白、叶绿素等杂质，使用硅藻土过滤机是为了快速除去正丁醇萃取部分中的胶质、大分子蛋白质、多糖、悬浮物等杂质；步骤（2）所使用聚酰胺树脂是常见的分离材料，采用干法装柱是为使得绿萝花中的黄酮类物质充分吸附在聚酰胺树脂上，氯仿-甲醇作为梯度洗脱二元溶剂，因为银椴苷大多出现在氯仿-甲醇5:1洗脱部分，少部分出现在3:1，所以合并5:1和3:1洗脱部分，之后加水萃取的原因有2个，其一是将银椴苷转溶到甲醇水液中更有利于结晶，其二是为了回收氯仿。结晶时浓缩至无醇味是为了最大限度的降低银椴苷的溶解度，使其沉淀充分析出。以上提取手段虽然是常规的，但提取的工艺路线简单有效，产品纯度高，易扩大化生产，至今没有文献和相关专利报道。
步骤（3）中的母液A中还溶解少量的银椴苷，没有相关文献报道其回收方法。本发明提供的方法是在70-80℃时向将母液B中添加助沉淀剂，冷却，静置，得银椴苷沉淀物B。所添加的助沉淀剂是云南丰产植物甘草中制备得到的甘草酸二胺、甘草酸钾、甘草酸钠或甘草次酸胺，它们在70-80℃时能破坏银椴苷中酚羟基与水形成氢键，减少水化作用，使银椴苷析出。另外，植物提取物中存在诸如皂苷类、蛋白质、糖类、茶皂素、胆甾醇等强表明活性剂，70-80℃时添加甘草酸类有机盐能破坏以上表明活性剂对银椴苷的包裹，使其溶解度显著减少，易于析出。
本发明首次将分离和回收绿萝花中的银椴苷合为一体，充分利用了绿萝花药材资源，与现有的银椴苷制备方法有着本质的区别。本发明提取工艺路线简单有效，具有极强的实用性和可操作性，易扩大化生产。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明的保护范围不局限于所述内容。
实施例1：本藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，具体操作如下：
（1）提取
取干燥的5.0 kg绿萝花（粒径为1mm）和40kg乙醇溶液（质量百分比浓度为70%）置于热回流提取罐中，50℃回流提取3次，过滤，滤液浓缩，得粗提物 (613.56 g)，粗提物用1.5 kg热水（45℃）分散，冷却至室温后用氯仿萃取2次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取3次；浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:2，冷却，硅藻土过滤得滤液A；
（2）聚酰胺树脂吸附和洗脱
聚酰胺树脂（GR，CXSZ-60）与滤液A按1L ：30g比例混合，减压抽干正丁醇后干法装柱，用体积比7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿甲醇二元溶剂依次梯度洗脱，收集合并5:1和3:1洗脱部分，加水回收氯仿，剩余液体浓缩至无醇味，静置10h，得银椴苷沉淀物A(55.13g)和母液A；
（3） 回收银椴苷
将母液A加热至70℃，添加甘草酸钾，1小时后冷却，静置10h，固液分离，得银椴苷沉淀物B（7.02g）；
（4） 重结晶
合并银椴苷沉淀物A和银椴苷沉淀物B，用氯仿-甲醇（4:1）混合液重结晶、洗涤、60 ℃减压干燥，得纯度90%以上的银椴苷(36.67g)，得率为91.77%；
（5）银椴苷含量测定方法体系的建立
采用HPLC检测藏药绿萝花中银椴苷含量，具体检测方法如下：
分别称量100 mg银椴苷，用甲醇（HPLC级）稀释并配制成1.00 mg/mL的标准贮备液，取标准贮备液分别制备为0.01、0.10、0.20、0.40、0.80、1.00mg/mL标准使用液，备用。另外，称量1.000 g的样品，用甲醇配制成1.00 mg/mL的样品溶液，备用。
以上配好的溶液经0.45 μm的过滤膜后注入Agilent 1200HPLC系统，色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18 （250mm× 4.6，5μm），流动相由1.0 %甲酸水液和甲醇组成（48∶52），流速为0.8 mL/min，柱温为25℃， UV检测波长为280 nm，进样量10 μl，保留时间定性，外标法计算相应结果，结果见表1。
实施例2：本藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，具体操作如下：
（1）取干燥的5.0kg绿萝花（粒径为2mm）和45 kg乙醇溶液（质量百分比浓度为65 %）置于热回流提取罐中，55℃回流提取2次，过滤，滤液浓缩得粗提物(638.13 g)，粗提物用2.0kg热水（50℃）分散后，冷却至室温后用氯仿萃取3次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取2次；减压浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:3，冷却，硅藻土过滤得滤液A；
（2）聚酰胺酚材料（GR，CXSZ-60）与滤液A按1L ：50g比例混合，减压抽干正丁醇溶剂后干法上柱，用体积比7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿-甲醇二元溶剂依次梯度洗脱，收集合并5:1和3:1洗脱部分，加水回收氯仿，剩余液体浓缩至无醇味，静置12h，得银椴苷沉淀物A(50.52g)和母液A；
（3）将母液A加热至75℃，添加甘草酸二胺，1小时后冷却，静置12h，得银椴苷沉淀物B（6.33g）；
（4）合并银椴苷沉淀物A和银椴苷沉淀物B，用质量百分比浓度为95%的乙醇溶液重结晶、洗涤、65℃减压干燥，即得纯度90%以上的银椴苷(35.44g)，得率为88.52%。
测定方法见实施例1中银椴苷含量测定方法，结果见表1。
实施例3：本藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，具体操作如下：
（1）取干燥5.0 kg绿萝花（粒径为3mm）和50kg乙醇溶液（质量百分比浓度为70%）置于热回流提取罐中，60℃回流提取3次，过滤，滤液浓缩得粗提物(667.89 g)，粗提物1.5 kg热水（45℃）分散，冷却至室温后用氯仿萃取2次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取3次，减压浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:4，冷却，硅藻土过滤得滤液A；
（2）聚酰胺酚（GR，CXSZ-60）与滤液A按1L ：70g比例混合，减压抽干正丁醇后干法装柱，用体积比7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿-甲醇二元溶剂依次梯度洗脱，收集合并5:1和3:1洗脱部分，加水回收氯仿，剩余液体浓缩至无醇味，静置13h，得银椴苷沉淀物A(55.05g)和母液A；
（3）将母液A加热至80℃，添加甘草酸钠， 1小时后冷却，静置13h，固液分离，得银椴苷沉淀物B（6.66g）；
（4）合并银椴苷沉淀物A和银椴苷沉淀物B，用甲醇重结晶、洗涤、70℃减压干燥，得纯度90%以上的银椴苷(37.70g) ，得率为92.87%。
测定方法见实施例1中银椴苷含量测定方法，结果见表1。
实施例4：本藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，具体操作如下：
（1）取干燥5.0 kg绿萝花（粒径为4mm）和40kg乙醇溶液（质量百分比浓度65%）置于热回流提取罐中，50℃回流提取3次，过滤，滤液浓缩得粗提物(629.33 g)，粗提物用2.0 kg热水分散，冷却至室温后用氯仿萃取2次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取3次，减压浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:2，冷却，硅藻土过滤得滤液A；
（2）聚酰胺酚（GR，CXSZ-60）与滤液A按1L ：80g比例混合，减压抽干正丁醇后干法装柱，用体积比7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿-甲醇二元溶剂依次梯度洗脱，收集合并5:1和3:1洗脱部分，加水回收氯仿，剩余液体浓缩至无醇味，静置14h，固液分离，得银椴苷沉淀物A(49.42g)和母液A；
（3）将母液A加热至70℃，添加甘草次酸胺，1小时后冷却，静置14h，固液分离，得银椴苷沉淀物B（7.41g）；
（4）合并银椴苷沉淀物A和银椴苷沉淀物B，用氯仿-乙醇混合液（3:1）重结晶、洗涤、60 ℃减压干燥，得纯度90%以上的银椴苷(35.80g)，得率为88.47%。
测定方法见实施例1中银椴苷含量测定方法，结果见表1。
实施例5：本藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，具体操作如下：
（1）取干燥的5.0 kg绿萝花（粒径为5mm）和50kg乙醇溶液（质量百分比浓度为70%）置于热回流提取罐中，60℃回流提取3次，过滤，滤液浓缩，得粗提物(643.12 g)，粗提物用1.5 kg热水（55 ℃）分散，冷却至室温后用氯仿萃取3次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取3次；浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:4，冷却，硅藻土过滤，得滤液A；
（2）聚酰胺酚（GR，CXSZ-60）与滤液A按1L：100g比例混合，减压抽干正丁醇后干法装柱，用体积比7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿-甲醇二元溶剂依次梯度洗脱，收集合并5:1和3:1洗脱部分，加水回收氯仿，剩余液体浓缩至无醇味，静置15h，得银椴苷沉淀物A（56.29g)和母液A；
（3）将母液A加热至80℃，添加甘草酸钾，1小时后冷却，静置15h，固液分离，得银椴苷沉淀物B（3.54g）；
（4）合并椴苷沉淀物A和B，用乙酸乙酯-乙醇（6:1）混合液重结晶、洗涤、70 ℃减压干燥，得纯度90%以上的银椴苷(36.35g)，得率为91.17%。
测定方法见实施例1中银椴苷含量测定方法，结果见表1。
实施例6：本藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，具体操作如下：
（1）取干燥的5.0kg绿萝花（粒径为2mm）和45 kg乙醇溶液（质量百分比浓度为60 %）置于热回流提取罐中，60℃回流提取3次，过滤，滤液浓缩得粗提物(631.07 g)，粗提物用2.0kg热水（50℃）分散后，冷却至室温后用氯仿萃取3次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取2次；减压浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:3，冷却，硅藻土过滤得滤液A；
（2）聚酰胺酚材料（GR，CXSZ-100）与滤液A按1L ：40g比例混合，减压抽干正丁醇溶剂后干法上柱，用体积比7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿-甲醇二元溶剂依次梯度洗脱，收集合并5:1和3:1洗脱部分，加水回收氯仿，剩余液体浓缩至无醇味，静置12h，得银椴苷沉淀物A(51.94 g)和母液A；
（3）将母液A加热至80℃，添加甘草酸二胺，1小时后冷却，静置11h，得银椴苷沉淀物B（6.56 g）；
（4）合并银椴苷沉淀物A和银椴苷沉淀物B，用乙酸乙酯-乙醇溶液（体积比2:1）重结晶、洗涤、65℃减压干燥，即得纯度90%以上的银椴苷(34.77 g)，得率为85.13 %。
测定方法见实施例1中银椴苷含量测定方法，结果见表1。
实施例7：本藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，具体操作如下：
（1）取干燥的5.0 kg绿萝花（粒径为5mm）和50kg乙醇溶液（质量百分比浓度为70%）置于热回流提取罐中，60℃回流提取3次，过滤，滤液浓缩，得粗提物(637.12 g)，粗提物用1.5 kg热水（55 ℃）分散，冷却至室温后用氯仿萃取3次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取3次；浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:4，冷却，硅藻土过滤，得滤液A；
（2）聚酰胺酚（GR，CXSZ-120）与滤液A按1L：100g比例混合，减压抽干正丁醇后干法装柱，用体积比7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿-甲醇二元溶剂依次梯度洗脱，收集合并5:1和3:1洗脱部分，加水回收氯仿，剩余液体浓缩至无醇味，静置15h，得银椴苷沉淀物A（48.03 g)和母液A；
（3）将母液A加热至80℃，添加甘草酸钾，1小时后冷却，静置15h，固液分离，得银椴苷沉淀物B（6.02 g）；
（4）合并椴苷沉淀物A和B，用氯仿-乙醇溶液（1:1）重结晶、洗涤、70 ℃减压干燥，得纯度90%以上的银椴苷(32.28 g)，得率为80.14 %。
表1：藏药绿萝花提取主要工段银椴苷含量的测定结果
。
Claims (5)
1.一种藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，其特征在于包含如下步骤：
（1）将干燥的绿萝花粉碎至粒径1-5mm，置于热回流提取罐中，并加入原料质量8-10倍的乙醇溶液，搅拌混匀，50-60℃下回流提取2-3次，过滤，浓缩滤液所得粗提物用45-55℃热水分散，冷却至室温后用氯仿重复萃取2-3次，氯仿萃取部分备用，剩余水相进一步用正丁醇重复萃取2-3次，减压浓缩正丁醇萃取部分至固液比为1:2-1:4，冷却，硅藻土过滤得滤液A；
（2）将滤液A与聚酰胺树脂按30-100g:1L比例混合后，减压抽干正丁醇溶剂后立即装柱，然后用体积比为7:1、5:1、3:1、1:1和0:1的氯仿甲醇混合液依次梯度洗脱，合并氯仿甲醇5:1和3:1的洗脱部分，加水萃取并回收氯仿后，剩余液体浓缩至无醇味，静置10-15h，固液分离，得银椴苷沉淀物A和母液A；
（3）将母液A加热至70-80℃，添加助沉淀剂，冷却，静置10-15h，固液分离，得银椴苷沉淀物B；
（4）合并银椴苷沉淀物A和银椴苷沉淀物B，重结晶、洗涤、60-70℃减压干燥，即得银椴苷。
2.根据权利要求1所述的藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，其特征在于：用质量百分比浓度为95%的乙醇溶液、甲醇、氯仿-甲醇溶液、氯仿-乙醇溶液或乙酸乙酯-乙醇溶液重结晶。
3.根据权利要求1或2所述的藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，其特征在于：步骤（1）中乙醇溶液为质量百分比浓度为60-70%的溶液。
4.根据权利要求3所述的藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，其特征在于：助沉淀剂是甘草酸二胺、甘草酸钾、甘草酸钠或甘草次酸胺。
5.根据权利要求4所述的藏药绿萝花中银椴苷的提取方法，其特征在于：聚酰胺树脂材料的型号为CXSZ-60、CXSZ-100或CXSZ-120。
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| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105001286A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106581032A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-04-26 | 郑州莉迪亚医药科技有限公司 | 一种治疗过敏性肺炎的西药 |
| CN110105411A (zh) * | 2019-06-03 | 2019-08-09 | 五邑大学 | 一种银锻苷的制备方法 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1733788A (zh) * | 2005-06-23 | 2006-02-15 | 浙江工业大学 | 一种从结香花中提取分离银椴苷的方法 |
| CN1916012A (zh) * | 2006-09-06 | 2007-02-21 | 天津医科大学 | 委陵菜有效成分黄酮化合物提取分离方法和应用 |
| CN102276672A (zh) * | 2011-09-08 | 2011-12-14 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种翻白叶苷a的纯化方法 |
| CN102304161A (zh) * | 2011-07-06 | 2012-01-04 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种提取纯化银椴苷的方法 |
| CN102311467A (zh) * | 2011-07-06 | 2012-01-11 | 南京泽朗农业发展有限公司 | 一种从结香中提取分离高纯度银椴苷的新方法 |
| CN102372755A (zh) * | 2010-08-26 | 2012-03-14 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种椴树苷的制备方法 |
| CN103694293A (zh) * | 2013-05-21 | 2014-04-02 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种檵木中银椴苷的提取纯化方法及检测方法 |
-
2015
- 2015-07-23 CN CN201510434178.1A patent/CN105001286A/zh active Pending
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1733788A (zh) * | 2005-06-23 | 2006-02-15 | 浙江工业大学 | 一种从结香花中提取分离银椴苷的方法 |
| CN1916012A (zh) * | 2006-09-06 | 2007-02-21 | 天津医科大学 | 委陵菜有效成分黄酮化合物提取分离方法和应用 |
| CN102372755A (zh) * | 2010-08-26 | 2012-03-14 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种椴树苷的制备方法 |
| CN102304161A (zh) * | 2011-07-06 | 2012-01-04 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种提取纯化银椴苷的方法 |
| CN102311467A (zh) * | 2011-07-06 | 2012-01-11 | 南京泽朗农业发展有限公司 | 一种从结香中提取分离高纯度银椴苷的新方法 |
| CN102276672A (zh) * | 2011-09-08 | 2011-12-14 | 南京泽朗医药科技有限公司 | 一种翻白叶苷a的纯化方法 |
| CN103694293A (zh) * | 2013-05-21 | 2014-04-02 | 江西本草天工科技有限责任公司 | 一种檵木中银椴苷的提取纯化方法及检测方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| MARIA R. G. VEGA，ET AL.: ""Flavonoids from Annona dioica Leaves and their Effects in Ehrlich Carcinoma Cells,DNA-topoisomerase I and II"", 《J. BRAZ. CHEM. SOC.》 * |
| NIRANJAN DAS，ET AL.: ""Antioxidant Phytochemicals from Sida glutinosa"", 《JOURNAL OF PHARMACY RESEARCH》 * |
| 太志刚: ""四种花卉的化学成分及其抗氧化活性研究"", 《中国博士学位论文全文数据库（电子期刊） 农业科技辑》 * |
| 李文茂: ""藏药材绿萝花主要活性成分的提取与研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库（电子期刊） 工程科技I辑》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106581032A (zh) * | 2016-12-21 | 2017-04-26 | 郑州莉迪亚医药科技有限公司 | 一种治疗过敏性肺炎的西药 |
| CN110105411A (zh) * | 2019-06-03 | 2019-08-09 | 五邑大学 | 一种银锻苷的制备方法 |
| CN110105411B (zh) * | 2019-06-03 | 2021-12-07 | 五邑大学 | 一种银锻苷的制备方法 |
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