CN101401842A - 一种中药组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗冠心病的中药组合物，由丹参、川芎、红花按2∶1∶1的重量比组成。将本发明的中药组合物，运用现有中药制剂领域中的常规方法，制备出含有本发明丹参、川芎、红花按2∶1∶1的重量比得到的水提物或醇提物的各种药学可接受形式的口服制剂，如片剂、颗粒剂、胶囊剂等。本发明是从中药大复方中精简优化出疗效等同的中药小复方，在疗效一致的前提下，原材料浪费小、生产成本低；便于进行复方作用原理、质量控制、药物动力学等研究及治疗药物监测；可减少中药材的农药、重金属等污染及其产地、气候等对品质的影响。

Description

一种中药组合物

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，特别涉及一种冠心病治疗的中药组合物。

背景技术

传统中药复方制剂“冠心II号”是一种由丹参和川芎作为君药，红花与赤芍作为臣药，以及降香组成的中药复方，丹参、川芎、红花、赤芍和降香的比例为重量比2∶1∶1∶1∶1，该药具有行气活血化瘀的功效，是临床上治疗冠心病的经典名方。已有大量的文献表明“冠心II号”在增加冠脉血流量，缓解心绞痛，改善s-t段，调节血脂，降低内皮素，降低血粘度均等方面均有良好疗效。

发明内容

发明人在研究中发现，将冠心II号整方及其各单位药、及将有效的单位药合用(剂量等同于母方中的剂量)，通过比较药效学研究发现：川芎、丹参、红花三药组合(以下简称为“丹川红”)的药效学等同于冠心II号整方，即在增加心肌血流量、抗心肌缺血、抗心肌细胞凋亡与减少心梗面积等方面的疗效，精简方“丹川红”与其母方“冠心II号”其有高度的一致性。

在此研究基础上，发明人提出本发明的技术方案：一种治疗冠心病的中药组合物，由丹参、川芎、红花按2∶1∶1的重量比组成。

将本发明的中药组合物，运用现有中药制剂领域中的常规方法，可以制备各种药学可接受形式的各种常规口服制剂。例如可以将这些原料药研成粉末混合后制成散剂冲服。也可以先将丹参、川芎、红花按2∶1∶1的重量比混合，制得其水提物或醇提物作为药物有效成分，再加入制备不同剂型所需的各种口服制剂的常规辅料，制得颗粒剂、胶囊剂、片剂、口服液等。如可以先将丹参、川芎、红花按2∶1∶1的重量比混合，加水浸泡20～40分钟后，水煎后取滤液，浓缩干燥即得本发明药物的冻干粉。也可以用醇提法，制备出本发明药物的醇提取物。

本发明是从中药大复方中精简优化单味药较少但疗效等同的中药小复方，通过比较药效学研究、优化配伍方案，将由原方的五味药精简为三味药，是一来源于母方又优于母方的全新中药小复方，该小复方对冠心病疗效肯定，且较母方“冠心II号”有如下优势：在疗效一致的前提下，原材料浪费小、生产成本低；便于进行复方作用原理、质量控制、药物动力学等研究及治疗药物监测；可减少中药材的农药、重金属等污染及其产地、气候等对品质的影响。本发明通过运用科学方法对传统中药复方进行研究，并纠正长期以来人们对经验复方运用上的偏见，找到传统复方冠心II号的有效作用部位，从而提出疗效一致的简减方。

附图说明

图1：各实验组心梗面积测定结果柱状图；

图2：TUNEL法检测心肌细胞凋亡各实验组的荧光显微图；

图3：TUNEL法检测心肌细胞凋亡实验组的凋亡指数柱状图；

图4：Caspase-3活性检测柱状图。

具体实施方式

实施例1：本发明中药组合物丹川红合煎剂的制备

将丹参400g、川芎200g、红花200g加入不锈钢奶锅中，加12倍水并浸泡30分钟；电磁炉加热，待第一次煮沸后，煎煮30分钟，药液以三层纱布和脱脂棉过滤；再加12倍量水继续煎煮30分钟，三层纱布和脱脂棉过滤后将两次药液合并；将合并液在65℃下旋转蒸发得到浓缩液后，制备成冻干粉，保存冻干粉于4℃冰箱备用，提取物得率约33.19％。使用前，冻干粉用蒸馏水溶解。

比较例：“冠心II号”煎剂的制备

冠心II号1200g，包括400g丹参；200g川芎；200g赤芍；200g红花、200g降香。当五个药材一起煎煮时，冠心II号制成冻干粉的得率(重量比，干粉/生药)为22.86％(w/w)。

药效学比较

动物：雄性SD大鼠42只，体重200～300g。

试剂：TUNEL试剂盒(美国ROCHE公司)；Caspase-3试剂盒(美国CHEMICON公司)其余药品和试剂均为市售分析纯。

方法：大鼠随机分为冠心II号组、丹川红合煎剂组、模型对照组、假手术组。所有计数资料均采用均数±标准差表示，使用统计软件SPSS10.0进行统计分析，以one-way ANOVA方法进行总体比较，q检验做组间比较，以P＜0.05为有统计学显著性差异。

分别灌胃给药物20g/kg，或0.9％生理盐水。给药后30分钟，建立大鼠急性心肌梗塞模型。用3％戊巴比妥钠(1.5ml/kg)腹腔内注射麻醉，四肢皮下连接心电图电极记录整个实验过程。常规消毒，行气管插管，接动物人工呼吸机，调节呼吸频率为80～90次/分，于左侧第四、五肋间打开胸腔，暴露心脏，于肺动脉圆锥与左心耳之间、左心耳根部下方2～3mm处穿线并结扎冠状动脉左前降支，造成冠状动脉阻塞。关闭胸腔，缝合皮肤，局部应用青霉素以预防感染。假手术组只穿线不结扎。术后观察心电图改变，心电图ST段明显抬高和/或T波高耸则说明缺血模型成功。造模后的大鼠分成两部分，一部分缺血3h后收集心脏，用于检测心肌细胞凋亡指数和Caspase-3浓度。另一部分缺血24h收集心脏，用于测定心梗面积。

(1)心梗面积测定

缺血24h，3％伊文蓝染料1ml注入左心室，勾画出危险区。剪下大鼠心脏，生理盐水冲洗心腔残液，冻于-20℃冰箱。自结扎线以下，从心尖起平行切成等厚5片。在37℃，1％氯化三苯基四氮唑(TTC)磷酸缓冲液(PH7.4)中水浴15min。出现三个分区：未梗死区(红染)，梗死区(未红染)，危险区(蓝染)。危险区面积大小以危险区占左室面积的百分比用表示(Ar/LV)，心梗面积大小用梗死区占危险区的百分比表示(An/Ar)。

实验结果见表1及附图1，各组危险区面积大小(Ar/LV)组间比较，P＞0.05，无显著差异，表明造模成功。各给药组心肌梗死范围(An/Ar)明显减小，与模型对照组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；而冠心II号组和丹川红组比较无显著差异。

表1    心梗面积(％)(x±s，n＝6)

注：与模型对照组比较，*P＜0.05，  **P＜0.01。

(2)细胞凋亡检测

缺血3h，取结扎部位以下左室心肌组织放入4％多聚甲醛固定，常规石蜡包埋、切片，用脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)标记凋亡细胞(测定方法遵照罗氏凋亡检测试剂盒说明书)。每个石蜡包埋的组织块被切成4-5um厚度的切片，蛋白酶K孵育，修复后加上TUNEL反应液。切片加盖含DAPI的封片剂来计数全部细胞。每个石蜡块取6个切片，每张切片任选10个视野，计数凋亡细胞数和细胞总数。凋亡指数(Apoptosis Index)AI＝(凋亡细胞数/细胞总数)×100％。

TENEL法检测丹川红合煎剂对大鼠心肌缺血心肌凋亡的影响见图2，在荧光倒置显微镜(OLYMPUS IX71)下观察，凋亡的细胞核显示绿色荧光，经DAPI染色后的所有细胞核显示蓝色荧光。图1中，从左至右依次为：假手术组、冠心II号组、丹川红组、模型对照组的荧光显微图。图中第一行为各组切片经TUNEL染色呈绿色荧光的凋亡细胞核；第二行为各组切片经DAPI染色呈蓝色荧光的全部细胞核。

模型对照组大鼠心肌细胞凋亡指数显著高于假手术组(P＜0.01)，冠心II号组、丹川红合煎剂组心肌细胞凋亡指数低于模型对照组，差异有显著性(P＜0.01)，而两药物组比较无显著差异。各组凋亡指数柱状图见图3，从左至右，依次为假手术组、冠心II号组、丹川红组和模型对照组。与模型对照组比较，^**P＜0.01；与假手术组比较，##P＜0.01。

(3)心肌细胞Caspase-3活性测定

缺血3h，取结扎部位以下左室心肌组织放-70℃冰箱待测，测定方法遵照CHEMICON公司Caspase-3浓度检测试剂盒说明书。冷冻的左室心肌组织在冰的溶解缓冲液中匀浆。BCA法测定蛋白浓度。每孔加36μg的蛋白质与20μg Caspase-3底物Ac-DEVD-pNA共同孵90min。游离的pNA在405nm下的酶标仪中读数。结果计算依据标准曲线，标准曲线浓度范围：10～640μM ofpNA，单位：μmol pNA/μg protein，x±s，n＝6。

Caspase-3活性检测结果见图4，从左至右，依次为假手术组、冠心II号组、丹川红组、模型对照组。与模型对照组比较，^*P＜0.05，^**P＜0.01；与假手术组比较，##P＜0.01。而两药物组比较无显著差异。与假手术组比较，模型对照组心肌缺血3h心肌组织的Caspase-3活性显著增加(P＜0.01)，与模型对照组比较，冠心II号组、川丹红组Caspase-3活性明显降低(P＜0.05， P＜0.01)，而两药物组比较无显著差异。

实施例2：丹川红胶囊剂的制备

按质量比2∶1∶1比例取丹参、川芎、红花粉碎，加90％乙醇回流3次，第一次2小时，第二次和第三次各为1.5小时，分别滤过，合并3次滤液，减压浓缩成浸膏，加入等于浸膏10倍量的水，边加边搅拌，静置沉淀，滤过，沉淀物于60℃以下干燥、粉碎，过60目筛，分装于胶囊内，每粒含丹川红提取物0.4g。用量：2-4粒/次，3次/日。

实施例3：丹川红片剂的制备

按质量比2∶1∶1比例取量后，将丹参、川芎、红花粉碎成粗颗粒，用适量70％乙醇湿润、搅拌，放置4-8小时后装入渗漉缸内，铺匀压紧，上面覆盖纱布和卵石块防止药渣上浮。加入70％乙醇浸过药面30cm，浸泡48小时后，开始渗漉，流速控制在100-150ml/min，收集渗漉液，上面不断加入70％乙醇溶媒，至渗漉液量达到药材重量的6-8倍量。最后漉出液量很淡，生物碱反应呈阴性时停止渗漉。把渗漉液放入减压蒸发浓缩罐中，减压回收乙醇，至乙醇全部回收后将浓缩液转入敞口蒸发锅内，加热继续浓缩稠膏状，制成软材。过20目筛制成湿颗粒摊于干燥盘内，80℃温度干燥后，取出加入0.8％硬酯酸镁，再过20目筛制粒，混匀、称重供压片。调节片重与硬度合格进行压片，片重为每三片重相当于原药材5g。用法和剂量：2-3片/次，3次/日。

Claims (10)

1.一种中药组合物，其特征在于：由2∶1∶1的重量份的原料药丹参、川芎、红花制成。

2.如权利要求1所述的中药组合物，包含常规药学载体，其特征在于：由原料药丹参、川芎、红花按2∶1∶1的重量比混合，制备其水提取物或醇提取物作为有效成分。

3.如权利要求1或2所述的药物的制备方法，其特征在于包括下列步骤：将重量份的丹参2份、川芎1份、红花1份，加水浸泡20～60分钟后，煎煮两次，合并过滤药液，将合并液浓缩后制得本发明的药物活性组分。

4.如权利要求4所述的药物的制备方法，其特征在于：合并液浓缩步骤是指在65℃下旋转蒸发浓缩。

5.如权利要求1或2所述的药物的制备方法，其特征在于包括下列步骤：将重量份的丹参2份、川芎1份、红花1份粉碎，加90～95％乙醇回流3次，分别滤过，合并3次滤液，减压浓缩成浸膏，制得本发明的药物活性组分。

6.如权利要求2所述药物的口服制剂。

7.如权利要求3所述药物的胶囊剂。

8.如权利要求3所述药物的颗粒剂。

9.如权利要求3所述药物的片剂。

10.如权利要求1、2、6～8所述之一的中药组合物作为治疗冠心病的药物的应用。

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