CN101360478B - 含有红松提取物作为活性成分的化妆品组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种化妆品组合物，该组合物含有红松提取物、和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分。更具体地，本发明的含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分的化妆品组合物具有促进角化细胞生长的功效、清除氧自由基的功效、通过减少MMP-1的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的功效、预防皮肤老化的功效和保湿皮肤的功效。

Description

含有红松提取物作为活性成分的化妆品组合物
技术领域
本发明涉及一种化妆品组合物，该组合物含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分。更具体地，本发明的含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分的化妆品组合物具有促进角化细胞生长的功效、清除氧自由基的功效、通过减少MMP-1(基质金属蛋白酶-1)的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的功效、预防皮肤老化的功效和保湿皮肤的功效。
背景技术
皮肤是主要的保护膜，保护机体中的器官免受温度和湿度变化的影响以及外界环境(如紫外线和污染物等)的影响，并且在维持动态平衡(如控制体温)方面具有非常重要的作用。然而，紫外线、来自外界的过度的物理和化学刺激、应力和营养不良干扰了皮肤的正常功能并加速了皮肤的老化，如丧失弹性、角质化和形成皱纹等。
特别地，在新的角化细胞有序并持续地形成而最外层中的老的角化细胞偶尔脱落时，如果使外层皮肤保持一定厚度的角质化不能正常进行，角化细胞就会异常地形成并积聚在皮肤的表面使皮肤变厚、变粗、变暗并形成细皱纹，从而导致皮肤老化。此外，由紫外线导致的氧自由基的生成和由紫外线导致的MMP-1的生物合成减少1型原骨胶原的生物合成与涉及皮肤老化的皮肤基质的分解相关。
因此，为了防止出现上述现象并且保持更健康和更富有弹性的皮肤，已经研究了使用添加有来自于各种动物、植物和微生物的生物活性材料的化妆品产品以维持皮肤的原有的功能并激活皮肤细胞，从而有效地抑制皮肤老化。然而，化妆品产品的传统材料的主要问题是效果不够好和引发副作用。
发明内容
因此，本发明的发明人努力寻找具有保湿皮肤的功效和预防皮肤老化的功效且对皮肤的保湿不产生副作用的天然物质，并发现含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分的组合物具有促进角化细胞生长的功效、清除氧自由基的功效、通过减少MMP-1的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的功效、预防皮肤老化的功效和保湿皮肤的功效。基于以上发现，完成了本发明。
因此，本发明的目的是提供一种含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分的化妆品组合物，该组合物具有促进角化细胞生长的功效、清除氧自由基的功效、通过减少MMP-1的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的功效、预防皮肤老化的功效和保湿皮肤的功效。
为了实现上述目的，本发明提供了一种化妆品组合物，该组合物含有红松提取物、和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分。本发明的化妆品组合物具有促进角化细胞生长的功效、清除氧自由基的功效、通过减少MMP-1的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的功效、预防皮肤老化的功效和保湿皮肤的功效。
下文将分别详细描述本发明的化妆品组合物的活性成分。
红松(Pinus koraiensis)是属于松科(Pinaceae)的韩国白松的干燥的成熟种子，它的坚果作为草药被称为“白瓷(Baekja)”、“宋雅(Songja)”和“斯贝克(Silback)”，所述坚果存在于看起来与韩国松树的球果相似的球果中，具有三角卵形的形状。自古以来，红松通常被用作营养滋补品，并且已知对于康复期有利。此外，红松还是一种高热量食品，它富含脂肪和蛋白质，尤其富含维生素B，具有使皮肤光滑和降低血压的功能。
梅(Prunus mume)是蔷薇科(Rosaceae)日本杏树的果实，通常被称为“青梅(Maesil)”。在中国的一本古书神农本草经(Shinnongbonchogyeong)中记载梅是用作医药用途的最古老的果树之一。在许多医药书如东医宝鉴(Dongeui Bogam)(东方医药宝典)中记载了梅作为草药的用途。在草药中，梅用于使胃变强壮、止血、止泻、排痰、解酒精中毒和解毒。梅是碱性食物，有利于从疲劳中恢复，并且具有改善体格的功效。特别地，梅具有优异的解毒功效，对皮肤有益并具有抗菌功效。最近，研究了梅作为抗癌食品的潜在的功能。
赤豆(Phaseolus angularis)是豆科(Leguminosae)的植物，砂豆(Sodoo)是红豆的草药名。一般认为其起源于中国，并从古代起在东方开始栽培。在草药中，赤豆被用于控制浮肿、治疗淤血、积聚能量、治疗肿胀、去除体内湿气、促进血液循环、解毒、排脓、强化脾和胃、强化肌肉和骨骼。
木瓜(Chaenomeles sinensis)是木瓜的果实，木瓜树是一种中国本土栽培的植物。木瓜看起来象瓜但挂在树上。因此，木瓜也被称为树上的水果。木瓜的主要成分包括皂角苷、有机酸、类黄酮、丹宁酸等。在草药中，木瓜被用于缓解肌肉中的异常应变状况、强化血管、调整肝脏的能量、治疗胃的功能性失调、除去体内的湿气和缓解疼痛。
众所周知，胡麻(Sesamum indicum)对慢性肠胃炎、神经元炎、高血压、便秘、精力不足和贫血等有效，并且能降低胆固醇、促进血液循环及使皮肤或毛发具有光泽。在草药中，胡麻被用作使五个器官保持良好的状态、强化肝和肾、强化毛发、强化眼和耳的功能、长脂肪和强化肠的功能。胡麻中的蛋白质主要是球蛋白，还含有γ-维生素有助于抗氧化。因此，胡麻能通过抗氧化作用预防皮肤老化，并能够激发皮肤代谢以预防色素在小的区域沉积而导致该区域变黑。
本发明的化妆品组合物中所含的提取物通过本领域技术人员公知的方法制备，这些方法通常用于提取植物中的活性成分。例如，将磨碎的草药与水、无水的或者含水的具有1-3个碳原子的低级醇、丙酮、乙酸乙酯或者乙醚混合，在加热的条件下在装有冷凝器的提取器中50-100℃下提取5-24小时，其中，所述水、无水的或者含水的具有1-3个碳原子的低级醇、丙酮、乙酸乙酯或者乙醚的用量为所述磨碎的草药的干重的1-15倍；将磨碎的草药与水、无水的或者含水的具有1-3个碳原子的低级醇、丙酮、乙酸乙酯或者乙醚混合，通过在4-25℃下浸泡3-20天而进行提取，其中，所述水、无水的或者含水的具有1-3个碳原子的低级醇、丙酮、乙酸乙酯或者乙醚的用量为所述磨碎的草药的干重的1-15倍。或者，将无水的或者含水的低级醇或甲醇提取物与适量的水混合，然后通过过滤除去沉淀。将滤液与乙酸乙酯、丁醇或者乙醚充分混合，搁置一段时间使分相。将上层分出并置于装有冷凝器的提取器中进行浓缩以获得提取物。通过上述方法获得的药草提取物的滤液在真空条件下浓缩，干燥，然后加入到化妆品组合物中。
本发明的提取物可以以分别从不同的药草中提取的提取物的混合物的形式使用，或者以从药草的混合物中提取的提取物的形式使用。
化妆品组合物含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分，其中，以组合物的总重量为基准，所述活性成分的量为0.0001-25重量％。如果所述活性成分的量低于0.0001重量％，效果不够显著；如果超过25重量％，将会出现使用感觉不佳以及制剂不稳定的问题。
本发明的化妆品组合物具有促进角化细胞生长的功效、清除氧自由基的功效、通过减少MMP-1的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的功效、预防皮肤老化的功效和保湿皮肤的功效。
此外，在不削弱本发明的主要功效的范围内，除了添加本发明的提取物外，所述化妆品组合物还可以含有与本发明的主要功效有协同作用的其它成分。所述添加剂可以由本领域的技术人员根据所述化妆品的制剂和目的进行适当的选择和结合。
例如，为了增强所述功效，所述化妆品组合物可以含有皮肤吸收促进剂。此外，所述化妆品组合物还可以含有选自由水溶性维生素、油溶性维生素、多肽、多糖、鞘脂和海藻提取物所组成的组中的一种物质。
此外，根据需要，本发明的化妆品组合物除了含有必需的成分外还可以含有通常加入到化妆品组合物中的添加剂。所述添加剂的实例包括油性成分、保湿剂、润肤剂、表面活性剂、有机和无机的颜料、有机粉末、紫外线吸收剂、防腐剂、抗菌剂、抗氧化剂、植物提取物、pH控制剂、醇、着色剂、香料、血液循环促进剂、清凉剂(cooling agent)、止汗剂和纯净水等。
可以加入到本发明的化妆品组合物中的添加剂不限于上述的物质。所述添加剂的混合比例优选为0.01-10重量％，更优选为0.01-10重量％，混合的比例不限于上述的范围，可以在不削弱本发明的目的和功效的范围内变化。
本发明的化妆品组合物可以制成制剂，所述制剂没有特别限制。例如，所述制剂可以包括乳液、膏、润肤露(skin lotion)、精华素(essence)、面膜(pack)、凝胶、粉、唇膏、化妆品基质、粉底(foundation)、洗液(lotion)、药膏、贴剂(patch)、美容液(beauty liquid)、去污泡沫、去污膏、清洁水、肥皂或喷剂。
具体实施方式
在下文中将通过实施例和实验实施例详细描述本发明。然而，本发明并不限于以下描述的范围。
[参考1]草药提取物的制备
分别收集红松、梅、赤豆、木瓜和胡麻(Kunwha Pharmaceutical CompanyLtd.)并挑选出高质量的草药，洗涤以除去杂质并在阴凉处干燥。然后，分别将100g的红松、梅、赤豆、木瓜和胡麻加入到2L的纯净水中，在回流设备中于约95-100℃下加热提取18小时。在提取结束后，接着将提取物蒸馏并浓缩到总重量约为500g，然后冷却到室温。然后将产品置于过滤布中，施压分离并除去固体成分，过滤后获得粘性浓缩液。将浓缩液在真空条件下于80℃浓缩以完全除去水，在真空中干燥，得到5.0g红松、10g梅、5.0g赤豆、5.0g木瓜和5.0g胡麻的干燥粉末。
[实施例1-15和对比例1]
将在参考1中通过水提取获得的每种药草提取物按照表1所述混合，并用于实施例1-15和对比例1。在此处，每种药草提取物的混合比例相同。
表1
Figure S2006800513646D00061
[实验实施例1]：促进角化细胞的生长的功效(MTT测定)
用MTT方法检测实施例1-15和对比例1的提取物对角质细胞的生长的作用，MTT方法简述如下：
首先，将角化细胞以浓度为5×103/200μl/孔种在96孔板中，培养24小时后，用实施例1-15和对比例1的提取物以浓度为0.0001、0.001、0.01和0.1％处理48小时。然后，吸去培养液并用PBS(磷酸盐缓冲液)洗涤细胞一次，用100μl的MTT(溴化甲基噻唑基二苯基-四唑，Sigma，美国)溶液(0.5mg/ml)处理，在37℃下和5％的CO2中培养细胞4小时。在吸去培养液后，用200μl的DMSO(二甲亚砜)溶液处理细胞，在振动器上搅动10分钟后用ELISA读出器(reader)(DIbiotech，韩国)在540nm下检测吸收值。在此处，采用没有用实施例1-15和对比例1的提取物处理的非处理组作为对照。结果列在表2中。
表2
    ％     0.0001     0.001     0.01     0.1
    实施例1     136     197     245     277
    实施例2     136     197     245     277
    实施例3     139     201     244     276
    实施例4     137     199     247     278
    实施例5     141     205     257     286
    实施例6     141     210     255     285
    实施例7     143     215     255     284
    实施例8     145     217     260     287
    实施例9     141     216     259     284
    实施例10     155     219     265     285
    实施例11     164     222     273     293
    实施例12     173     225     277     297
    实施例13     168     223     275     299
    实施例14     169     219     279     299
    实施例15     185     238     288     331
    对比例1     135     185     235     251
    对照     100     100     100     100
如表2所示，在所有情况下的效果都是显著的，并且通常当所使用的提取物的浓度增加时，对角化细胞生长的促进效果越显著。此外，除了含有红松提取物外还含有选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质的实施例1-15的组合物的效果比只含有红松提取物的对比例1的组合物的效果更好，并且，添加到红松提取物中的选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的物质的种类越多，促进角化细胞生长的效果越显著。
[实验实施例2]：清除氧自由基的效果
为了检测实施例1-15和对比例1抑制由紫外线导致的氧自由基的产生的效果，即清除氧自由基的效果，使用荧光材料进行以下试验。
试验中使用的细胞系为人角化细胞HaCaT细胞系，该细胞系由德国癌症研究中心的Fusenig博士提供。将细胞以浓度为2.0×104/孔种植在黑色的96孔板中以进行荧光测试，在添加有青霉素/链霉素的DMEM(DulbeccosModification of Eagles Medium，胎牛血清(FBS)10％，Gibco，美国)中于37℃下5％的CO2中培养1天，并用实施例1-15和对比例1的提取物以0.5、0.25、0.125、0.0625和0.03125％的浓度处理。
然后，将测试样品加入到孔中并培养24小时。用HCSS(HEPES-缓冲控制盐溶液，Gibco，美国)洗涤培养板以除去残余培养基。将100μl的20μM的DCFH-DA(2′，7′-二氯二氢-荧光素二乙酸酯，分子探针公司(MolecularProbes)，美国)加入到HCSS中，在37℃和5％的CO2的环境中培养20分钟后用HCSS洗涤。在将100μl用不同浓度的样品处理的HCSS加入后，用荧光板阅读仪(激发波长EX＝485nm，发射波长Em＝530nm)检测被氧化成氧自由基的DCF(二氯荧光素)的荧光强度。然后，用UVB(30mJ/cm2)照射，并用荧光板阅读仪(激发波长EX＝485nm，发射波长Em＝530nm)在照射后立刻检测荧光强度(表3)和在照射后3小时检测荧光强度(表4)。在此处，采用没有用实施例1-15和对比例1的提取物处理的非处理组作为对照。
表3
    ％     0.5     0.25     0.125     0.0625     0.03125
    实施例1     71.57     75.70     75.73     82.75     82.75
    实施例2     71.49     75.68     75.70     82.70     82.71
    实施例3     71.47     75.50     75.67     82.69     82.73
    实施例4     71.39     75.51     75.65     82.71     82.70
    实施例5     71.41     75.38     75.40     82.51     82.62
    实施例6     71.36     75.27     75.41     82.52     82.65
    实施例7     71.38     75.25     75.42     82.50     82.53
    实施例8     71.38     75.23     75.31     82.32     82.55
    实施例9     71.31     75.31     75.51     82.43     82.43
    实施例10     71.33     75.27     75.50     82.41     82.41
    实施例11     71.15     74.55     75.33     81.37     82.01
    实施例12     70.87     74.57     76.15     81.37     81.96
    实施例13     71.11     74.42     75.00     81.33     81.83
    实施例14     70.94     74.41     75.01     81.30     81.81
    实施例15     70.65     73.50     74.50     80.20     81.21
    对比例1     72.49     76.25     76.26     83.61     83.73
    对照     100     100     100     100     100
表4
    ％     0.5     0.25     0.125     0.0625     0.03125
    实施例1     61.05     68.88     73.63     80.83     80.50
    实施例2     61.03     68.85     73.51     80.52     79.96
    实施例3     61.02     69.01     73.60     80.55     80.65
    实施例4     61.00     69.00     73.61     80.57     79.99
    实施例5     60.97     69.05     73.02     80.52     79.99
    实施例6     61.34     68.94     72.99     80.52     79.99
    实施例7     60.85     68.93     73.01     80.51     80.43
    实施例8     60.91     69.05     72.82     80.40     79.99
    实施例9     61.00     69.00     73.64     80.41     80.45
    实施例10     60.96     69.05     73.21     80.35     79.96
    实施例11     60.55     68.62     71.61     79.50     79.95
    实施例12     60.41     68.41     71.42     79.73     79.95
    实施例13     60.27     68.42     71.41     79.71     79.94
    实施例14     60.34     68.42     71.42     79.66     79.94
    实施例15     59.37     66.31     71.16     78.57     78.71
    对比例1     61.45     69.97     73.77     81.82     80.77
    对照     100     100     100     100     100
如表3和4所示，所有的测试样品都显著地抑制了氧自由基的产生，并且当提取物的浓度增加时，更显著地抑制了氧自由基的产生。此外，除了含有红松提取物外还含有选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质的实施例1-15的组合物的效果比只含有红松提取物的对比例1的组合物的效果更好，并且，添加到红松提取物中的选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的物质的种类越多，越能有效地抑制氧自由基的产生。此外，在诱导氧自由基产生后3小时检测的效果比在诱导氧自由基产生后立刻检测的效果更显著。
[试验实施例3]：MMP-1和原骨胶原的测定
为了检测实施例1-15和对比例1的提取物通过减少与皮肤基质的分解相关的紫外线导致的MMP-1的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的效果，按照以下描述进行了MMP-1和原骨胶原的测定。
将剥离的具有脂肪层的正常皮肤切成小片，用胶原酶将皮肤分成表皮层和真皮层。将表皮组织和真皮组织分别置于0.25％的胰蛋白酶溶液中，在37℃和5％的CO2的条件下孵育10分钟。然后，进行振荡以分离角化细胞和成纤维细胞。收集分离的细胞并洗涤。将角化细胞以1×104细胞/cm2的浓度培养在KGM(角化细胞生长培养液，Clonetics，美国)中，将成纤维细胞培养在添加10％的胎牛血清(FBS)的DMEM中。当细胞长到汇合度为70-80％时，将细胞按照1∶3的比例分散并传代。第三代和第四代细胞用于试验。
为了检测MMP-1的量，将成纤维细胞培养在48孔板中，当细胞的汇合度达到至少90％时在饥饿的条件下维持一天。然后用PBS将细胞洗涤两次，用100μl的PBS处理并用紫外线A(装备有UVA过滤器的Dermlight cube401，UVAtec，美国)以15J/cm2的强度照射，照射时打开培养板的盖子。在照射后，用PBS将细胞洗涤一次，并置于不含胎牛血清但含有实施例1-15和对比例1的提取物的DMEM中，所述提取物的浓度为0.001和0.01％，在37℃和5％CO2的条件下培养48小时。用人类ELISA系统(RPN2610，Amersham Pharmacia Biothch，英国)检测培养基中分离的MMP-1的量并用成纤维细胞的总蛋白量进行校准(表5)。在此处，采用没有用实施例1-15和对比例1的提取物处理的非处理组作为对照。
与此同时，为了检测原骨胶原的量，用浓度为0.001和0.01％的实施例1-15和对比例1的提取物处理处于与检测MMP-1的量相同的条件下细胞，处理时，细胞处于饥饿状态不用紫外线照射。24小时后，用1型原骨胶原C肽EIA试剂盒(MK101，Takara，日本)检测培养基中分离的原骨胶原的量(表6)。采用没有用实施例1-15和对比例1的提取物处理的非处理组作为对照。
表5
    ％     0.001     0.01
    实施例1     93     77
    实施例2     93     74
    实施例3     88     72
    实施例4     89     72
    实施例5     87     61
    实施例6     85     59
    实施例7     83     61
    实施例8     81     59
    实施例9     83     60
    实施例10     74     53
    实施例11     74     54
    实施例12     73     56
    实施例13     75     55
    实施例14     74     54
    实施例15     70     51
    对比例1     95     79
    对照     100     100
表6
    ％     0.001     0.01
    实施例1     108     116
    实施例2     108     115
    实施例3     105     116
    实施例4     109     116
    实施例5     111     123
    实施例6     114     124
    实施例7     116     124
    实施例8     115     127
    实施例9     117     125
    实施例10     126     136
    实施例11     125     135
    实施例12     125     137
    实施例13     127     137
    实施例14     127     135
    实施例15     135     144
    对比例1     103     111
    对照     100     100
如表5的对MMP-1的生物合成的抑制效果所示，在所有情况下的效果都是显著的，并且通常在所使用的提取物的浓度增加时，生成的MMP-1的量减少更显著。此外，除了含有红松提取物外还含有选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质的实施例1-15的组合物的效果比只含有红松提取物的对比例1的组合物的效果更好，并且，添加到红松提取物中的选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的物质的种类越多，生成的MMP-1就越少。
此外，如表6的对1型原骨胶原的生物合成的促进效果所示，在所有情况下的效果都是显著的，并且通常在所使用的提取物的浓度增加时，生成的原骨胶原的量越多。而且，除了含有红松提取物外还含有选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质的实施例1-15的组合物的效果比只含有红松提取物的对比例1的组合物的效果更好，并且，添加到红松提取物中的选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的物质的种类越多，生成的原骨胶原的量就越多。
[制剂1-15和对比制剂1]：化妆品组合物的制备
使用实施例1-15和对比例1的提取物按照表7中所述的组成制备制剂1-15和对比制剂1的化妆品组合物。表7的组成中的1-7号成分的油相和8-15号成分的水相分别通过加热溶解。在搅拌下将油相缓慢加入到水相中进行乳化。
制剂1-15的化妆品组合物含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的至少一种物质作为活性成分；对比制剂1的化妆品组合物只含有红松提取物。将组合物中的油相和水相在65-75℃下完全溶解并在7,000-8,000rpm下乳化5分钟以制备霜剂。
表7
    成分(含量：重量％)     制剂1-15     对比制剂1
    1、蜂蜡     2     2
    2、硬脂醇     3     3
    3、硬脂酸     8     8
    4、角鲨烯     10     10
    5、丙二醇单硬脂酸酯     3     3
    6、聚氧乙烯醚     1     1
    7、防腐剂、抗氧化剂     适量     适量
    8、甘油     5     5
    9、丙二醇     4     4
    10、三乙胺     1     1
    11、聚丙烯酸钠     0.2     0.2
    12、纯净水     到100     到100
    13、对比例1     -     5
    14、实施例1-15的每种提取物     5     -
    15、卡波姆(Carbomer)     适量     适量
[试验实施例4]：改善皱纹的效果
为了检测制剂1-15和对比制剂1的改善皱纹的效果，进行以下程序。
将140名三十多岁的妇女分成7组，每组20名，每天在眼睛周围施用制剂15和对比制剂1的霜剂两次，持续8周。使用由硅氧烷制成的复制品在能见度仪(SV60，Courage+Khazaka electronic GmbH，德国)作为映像分析仪检测皱纹状况。使用没有用制剂15和对比制剂1的霜剂处理的非处理组作为对照。将由8周前的参数减去8周后的参数所获得的平均值的结果列在表8中。负值表示皱纹改善效果更好。
表8
Figure S2006800513646D00141
从表8的结果可以看出，与只含有红松提取物的对比制剂1的组合物相比，除了含有红松提取物外还含有梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物的制剂15的组合物具有更显著的改善皱纹的效果。
[试验实施例5]：对角化细胞分化的促进效果
将人类的角化细胞培养在培养瓶中，在细胞长到汇合度为约80％时用表9中的样品以5ppm的浓度处理4天。然后向培养物中加入变性剂(如尿素或SDS(十二烷基磺酸钠))和还原剂(如β-巯基乙醇)以除去蛋白质。通过检测在310nm下的吸收值以分析肽浓度来检测残余的角化层。通过将样品与阴性对照的蒸馏水(0％)相比得到的结果列在表9中。
表9
    材料     对不同的角化细胞的促进效果
    实施例1     43
    实施例2     47
    实施例3     45
    实施例4     43
    实施例5     55
    实施例6     57
    实施例7     55
    实施例8     57
    实施例9     56
    实施例10     58
    实施例11     65
    实施例12     68
    实施例13     66
    实施例14     68
    实施例15     76
    对比例1     32
    对照(蒸馏水)     0
从表9的结果可以确定本发明的实施例1-15的组合物具有优异的促进角化细胞分化的效果。
[制剂16-30和对比制剂2]：用于保湿皮肤的化妆品组合物的制备
使用实施例1-15和对比例1的提取物按照表10中所述的组成制备制剂16-30和对比制剂2的化妆品组合物。表10中的组成中的1-5号成分的水相和6-9号成分的醇相分别在室温下溶解。在搅拌下将醇相缓慢加入到水相中进行溶解。然后，在将醇相完全加入后，在搅拌下继续反应3-5分钟，并在真空下脱气以完成化妆品组合物的制备。
表10
成分(含量：重量％)   制剂16-30   对比制剂2
1、纯净水   到100   到100
2、甘油   3   3
3、卡波姆   0.2   0.2
4、实施例1-15的每种提取物   1   -
5、对比例1   -   1
6、乙醇   3   3
7、聚氧乙烯氢化蓖麻油(Polyoxyethylene hydrogenated caster oil)   3   3
8、香料   适量   适量
9、防腐剂   适量   适量
[试验实施例6]：恢复皮肤的阻挡功能的效果
为了检测制剂16-30和对比制剂2恢复皮肤的阻挡功能的效果，将丙酮反复施加到无毛的小鼠的皮肤上以破坏其阻挡功能。当通过蒸发速度测定仪EP1(Servomed，瑞典)检测透皮(transdermal)水损失(TEWL)达到4.0g/m2/h时，用制剂16-30和对比制剂2的样品施用在5cm2的面积上，在1、2、4和8小时后检测的透皮水损失以确定减少的量，从而评价阻挡功能的恢复。此处，使用公知的脂质混合物(神经酰胺、胆固醇和脂肪酸(2∶1∶1)的混合物)作为阳性对照。以破坏阻挡的程度(100％)为基准，通过透皮水损失随时间的变化确定结果，结果列在下表11中。
表11：透皮水损失(％)
  样品  1小时后  2小时后  4小时后  8小时后
  制剂16  69  60  49  35
  制剂17  64  51  48  37
  制剂18  70  61  49  36
  制剂19  69  59  47  37
  制剂20  62  54  41  27
  制剂21  60  55  40  30
  制剂22  61  51  37  29
  制剂23  59  50  41  31
  制剂24  57  55  39  31
  制剂25  61  55  43  27
  制剂26  55  49  35  24
  制剂27  57  50  39  26
  制剂28  56  47  35  26
  制剂29  57  51  35  24
  制剂30  50  43  36  21
  对比制剂2  88  80  75  70
  基质混合物(阳性对照)  64  43  37  26
从表11的结果可以看出，除了含有红松提取物外还含有选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质的制剂16-30的组合物的效果比只含有红松提取物的对比制剂2的组合物的效果更好；并且，添加到红松提取物中的选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的物质的种类越多，阻挡功能的恢复效果就越显著。
现在，将开始描述本发明的化妆品组合物的制剂。然而，它们仅用于说明的目的而不是限制本发明。
<肥皂制剂>
表12
    成分     含量(重量％)
    实施例1-15的每种提取物     1.00
    油     适量
    氢氧化钠     适量
    氯化钠     适量
    香料     少量
    纯净水     到100
<洗液制剂>
表13
    成分     含量(重量％)
    实施例1-15的每种提取物     3.00
    L-维生素C-2-磷酸镁     1.00
    含水胶原(1％的水溶液)     1.00
    柠檬酸钠     0.10
    柠檬酸     0.05
    甘草提取物     0.20
    1，3-丁二醇     3.00
    纯净水     到100
<膏剂>
表14
    成分   含量(重量％)
    实施例1-15的每种提取物   1.00
    聚乙二醇单硬脂酸酯   2.00
    自乳化甘油单硬脂酸酯   5.00
    十六烷醇   4.00
    角鲨烯   6.00
    三-2-乙基丙三醇己酸酯   6.00
    鞘氨醇糖脂(Sphingoglycolipid)   1.00
    1，3-丁二醇   7.00
    纯净水   到100
<面膜>
表15
    成分   含量(重量％)
    实施例1-15的每种提取物   5.00
    聚乙烯醇   13.00
    L-维生素C-2-磷酸镁   1.00
    月桂酰羟基干果糖   1.00
    含水胶原(1％的水溶液)   2.00
    1，3-丁二醇   3.00
    乙醇   5.00
    纯净水   到100
<美容液体剂>
表16
    成分   含量(重量％)
    实施例1-15的每种提取物   2.00
    羟基乙烯纤维素(2％的水溶液)   12.00
    黄原胶(2％的水溶液)   2.00
    13-丁二醇   6.00
    浓缩甘油   4.00
    透明质酸钠(1％的水溶液)   5.00
    纯净水   到100
如上所述，本发明的含有红松提取物和选自由梅提取物、赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质的化妆品组合物具有促进角化细胞生长的功效、清除氧自由基的功效、通过减少MMP-1的生物合成促进1型原骨胶原的生物合成的功效、预防皮肤老化的功效和保湿皮肤的功效，其中MMP-1与由紫外线导致的皮肤基质分解有关。因此，所述组合物可以用作促进角化细胞生长的组合物、清除氧自由基的组合物、通过减少MMP-1的生物合成促进1型原骨胶原的生物合成的组合物、预防皮肤老化的组合物和保湿皮肤的组合物。

Claims (6)

1.一种用于促进角化细胞生长的化妆品组合物，该组合物含有红松提取物和梅提取物作为活性成分，或者该组合物含有红松提取物、梅提取物和选自由赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分，其中，所述提取物是用水作为提取溶剂进行提取的，以该组合物的总重量为基准，所述提取物的含量为0.0001-25重量％，且每种药草提取物的混合比例相同。
2.一种用于清除氧自由基的化妆品组合物，该组合物含有红松提取物和梅提取物作为活性成分，或者该组合物含有红松提取物、梅提取物和选自由赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分，其中，所述提取物是用水作为提取溶剂进行提取的，以该组合物的总重量为基准，所述提取物的含量为0.0001-25重量％，且每种药草提取物的混合比例相同。
3.一种用于通过减少基质金属蛋白酶-1的生物合成而促进1型原骨胶原的生物合成的化妆品组合物，该组合物含有红松提取物和梅提取物作为活性成分，或者该组合物含有红松提取物、梅提取物和选自由赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分，其中，所述提取物是用水作为提取溶剂进行提取的，以该组合物的总重量为基准，所述提取物的含量为0.0001-25重量％，且每种药草提取物的混合比例相同。
4.一种用于预防皮肤老化的化妆品组合物，该组合物含有红松提取物和梅提取物作为活性成分，或者该组合物含有红松提取物、梅提取物和选自由赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分，其中，所述提取物是用水作为提取溶剂进行提取的，以该组合物的总重量为基准，所述提取物的含量为0.0001-25重量％，且每种药草提取物的混合比例相同。
5.一种用于保湿皮肤的化妆品组合物，该组合物含有红松提取物和梅提取物作为活性成分，或者该组合物含有红松提取物、梅提取物和选自由赤豆提取物、木瓜提取物和胡麻提取物所组成的组中的至少一种物质作为活性成分，其中，所述提取物是用水作为提取溶剂进行提取的，以该组合物的总重量为基准，所述提取物的含量为0.0001-25重量％，且每种药草提取物的混合比例相同。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的组合物，该组合物还含有1，3-丁二醇。
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