CN101259271A - 抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂及其制备方法。所述抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂，分别以羊轮状病毒、羊大肠杆菌、羊B型魏氏梭菌制备的单苗，或羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌制备的联苗疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，再收集免疫产蛋母鸡卵黄并提取、制备。所述抗羊腹泻卵黄抗体都是通过提高羊机体对引起腹泻相应病原微生物的抗体水平来防治腹泻病的。本发明的有益效益是：抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂方便喂食羊，防治效果显著。抗羊腹泻卵黄抗体注射剂在羊发病后使用，药效更快。本发明疗效显著，成本低、见效快，无毒副作用，不会产生耐药性菌株；制备简单，原料来源广泛，使用方便，易于推广。

Description

抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂及其制备方法

技术领域

本发明属于饲料和医药领域，特别涉及一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂及其制备方法。

背景技术

羊腹泻多见于羔羊，15日龄以内的羔羊尤为严重，成年羊少见。羊腹泻通常与小肠疾病有关，主要是分泌过多和吸收不良两个病理过程。羔羊肠黏膜发育不全，胃液酸度小，酶的活性低，在不良因素作用下，进入胃肠的内容物容易发生分解不全而发酵，这样发酵的中间产物刺激肠蠕动加快就出现下痢。肠消化功能紊乱使食糜的氢离子浓度改变，给肠内细菌创造了有利于繁殖的环境。由于病原菌的大量繁殖，从而使羔羊腹泻加剧。

羊腹泻的病因比较复杂，常见的有饲养管理不良引起的羔羊单纯性消化不良和中毒性消化不良。有轮状病毒、大肠杆菌、魏氏梭菌等病原微生物引起的拉稀，也有球虫、隐孢子虫引起的虫源性拉稀。

(一)轮状病毒病

轮状病毒多见于5-15日龄羔羊。单纯性感染临床并不一定表现腹泻或轻微腹泻，但饲养环境卫生状况不良、气候寒冷或潮湿，轮状病毒与其他肠道细菌发生继发感染，拉稀将特别严重。水泻、体温升高、粪便的颜色与性状因感染程度和细菌种类不同而异，15日龄内羔羊死亡率高。该病没有特殊有效的治疗方法。

(二)大肠杆菌病

1.大肠杆菌下痢型：多见于1-8日龄羔羊。母羊乳房不洁，产羔房卫生环境不良，潮湿、拥挤、寒冷和通风不良，是发生该病的主要原因。病羊粪便稀薄、恶臭，有时有气泡并混有血液。羔羊腹痛，尖叫。粪便起初为黄色，后呈灰白色，羔羊严重虚脱，体温下降，脱水死亡。病程1-2天。死亡率有的高达50％。由于羔羊体质弱，病程短，因此及时治疗是关键。在治疗中，庆大霉素、丁胺卡那霉素、卡那霉素、氟哌酸、菌必治仍然是大肠杆菌的首选药。对于大肠杆菌的常发场(地区)，在改善产羔环境和加强母羊乳房消毒的基础上，对初生羔羊建议口服0.2克土霉素粉，对控制大肠杆菌病有一定效果。

2.大肠杆菌败血型——肠出血症：该病多见于15-45日龄发育比较好的体胖的羔羊，具有明显的区域性。有的场发病率高达20％左右，病程短，一般3-5个小时，有的未见症状只听尖叫声后就立即死亡，少数病程长达12小时以上，死亡率100％。病羊精神萎顿，眼结膜充血、潮红、呼吸浅表，随后出现明显的神经症状，尖叫、四肢僵硬、运动失调、视力障碍、口吐白沫、磨牙、空嚼、角弓反张、四肢或一侧呈游泳状，死前腹部膨胀，未见体温升高和下痢症状。解剖病理变化可见：心内外膜有出血点，心包积液，肾表面及肾盂有出血斑和出血点、肠系膜淋巴结明显肿胀呈香肠状。另外，解剖的最大明显之处就是肠出血，整个肠道呈红色或深红色、肠腔膨胀、臌气、肠管内充满红色液体。

(三)羔羊痢疾

该病病原是B型魏氏梭菌，主要危害7日龄以内的新生羔羊，2-3日龄的发病最多，10日龄以上的很少发病。临床症状有两种表现形式：

1.腹泻型：病初病羊精神萎顿，低头拱背，不吃乳，不久就发生持续性剧烈腹泻，粪便由糊状转变为水样，黄白色或灰白色，后期为棕色形成血便，大便失禁，恶臭。1-3天衰竭死亡。

2.神经型：少数病羔羊腹胀而不下痢、四肢瘫软、卧地不起、呼吸急促、口吐白沫、角弓反张、体温下降，常数小时后死亡。在治疗中，由于羔羊患病后，病程短，衰弱快，磺胺药疗效不确切，特别是继发感染，症状更为严重，死亡率更高，将乳酸环丙沙星0.2克放入100毫升等渗糖盐水中静脉注射，预防羔羊痢疾，首先要加强产羔母羊的饲养管理和产羔环境的卫生消毒工作，同时在产羔前15-20天再给待产母羊接种一次魏氏梭菌联苗，以保证羔羊获得充足的母源抗体。由于羔羊从母羊的初乳中获得抗体而产生被动获得性免疫，因此使新生羔羊吃足初乳尤为重要，这是预防羔羊痢疾成败的关键。

在兽医临床上，卵黄抗体已广泛用于鸡(传染性法氏囊、新城疫、鸡白痢等)、鸭(肝炎)、鹅(小鹅瘟)、犊牛(腹泻)、仔猪(黄白痢、猪轮状病毒腹泻)等疫病的紧急治疗和预防。卵黄抗体制备简单，而且具有性质均一、易提取、可有效避免非特异性免疫反应发生等特性，在免疫技术、免疫监测、人畜治疗等方面有很大的发展潜力。国内的研制工作主要集中在对禽类疾病的防治，江苏省农业科学研究院畜牧兽医研究所已获得防治鸡传染性法氏囊、新城疫、鸡白痢、鸭肝炎、小鹅瘟等多联高免卵黄抗体注射液；华西医科大学一项防治禽病的卵黄抗体针剂已取得生物兽药证书；四川省养猪研究所研制了大肠杆菌卵黄抗体注射液。抗鸡法氏囊病、鸡新城疫、鸭病毒性肝炎高免卵黄广泛用于治疗鸡法氏囊病、鸡新城疫、鸭病毒性肝炎，均取得满意结果。

03128310.1提供一种预防仔猪腹泻的特异性卵黄抗体及其制备方法与应用；

200410084558.9提供一种抗仔猪病毒性疫病复合卵黄抗体制剂的制备方法；

200410084559.3提供一种抗仔猪细菌性疫病复合卵黄抗体制剂的制备方法；

200510027330.0提供一种抗猪伪狂犬病卵黄抗体的制备方法；

03117507.4提供一种抗仔猪黄痢、白痢病原菌卵黄抗体及其制备和应用；

02103667.5提供一种猪传染性胃肠炎病毒卵黄抗体和抗原及其制备。

目前，有关用抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体的制备方法还未见报道。

因此，提供一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂及其制备方法，有效预防和治疗羊腹泻，是该技术领域科研人员急需开发的新课题之一。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂及其制备方法。

为实现上述目的本发明所采用的实施方式如下：一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂，其特征在于以羊轮状病毒、羊大肠杆菌、羊B型魏氏梭菌制备的单苗，或羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌制备的联苗疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，再收集免疫产蛋母鸡卵黄并提取、制备。

一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂的制备方法，实施步骤如下：

(1)分离羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌进行增殖培养，当具有抗原性后制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗；

(2)利用制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，第一轮次免疫注射时免疫剂量呈1.0ml；10天后进行第二轮次免疫注射，免疫剂量为首免的2倍；再过10天后进行第三轮次免疫注射，免疫剂量为首免的4倍；以后每隔一个月再以首免的4倍剂量进行免疫；诱导产蛋母鸡持续性产生羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌抗体；

(3)第三轮次免疫结束后10天，经卵黄抗体效价测定后收集免疫卵，无菌获取卵黄，用0.01M无菌磷酸盐缓冲液液稀释、0.5％羟丙甲基纤维素、邻苯二甲酸盐处理，真空抽滤，弃渣，抽滤液喷雾干燥，即得本发明的抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂。

一种抗羊腹泻卵黄抗体注射剂，其特征在于以羊轮状病毒、羊大肠杆菌、羊B型魏氏梭菌制备的单苗，或羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌制备的联苗疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，再收集免疫产蛋母鸡卵黄并提取、制备。

一种抗羊腹泻卵黄抗体注射剂的制备方法，实施步骤如下：

(1)分离羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌进行增殖培养，当具有抗原性后制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗；

(2)利用制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，第一轮次免疫注射时免疫剂量呈1.0ml；10天后进行第二轮次免疫注射，免疫剂量为首免的2倍；再过10天后进行第三轮次免疫注射，免疫剂量为首免的4倍；以后每隔一个月再以首免的4倍剂量进行免疫；诱导产蛋母鸡持续性产生羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌抗体；

(3)第三轮次免疫结束后10天，用1％新洁尔灭消毒蛋壳，在无菌条件下收集卵黄，用无菌蒸馏水对倍稀释，置组织捣碎机中用3000r/min匀浆1min，匀浆后加入乳酸液，在1-4℃温度下静止3-4h或过夜，去除杂蛋白，收集上清液，上清液中加入硫酸铵至饱和度20-40盐析，4000r/min离心20min，收集沉淀，加入生理盐水，调整IgY的浓度分装，该注射剂内含有效价≥1∶256的抗羊相应病原微生物的卵黄抗体，即得本发明的抗羊腹泻卵黄抗体注射剂。

本发明的有益效果是：抗羊腹泻卵黄抗体是治疗羊腹泻的特异性生物制品，是一种被动免疫制剂，同时还有鉴别诊断和紧急预防接种等作用，具有较高的推广应用价值。卵黄抗体的使用，在免疫学理论中可成为被动免疫。当免疫缺陷、疫苗缺乏及免疫失败时，可利用卵黄抗体注射、口服替代主动免疫接种，发挥抗病作用。卵黄抗体作为替代抗生素的新型饲料添加剂，正在引起人们的关注。卵黄抗体取代抗生素用作生长促进剂，不会产生药物残留，是一种安全的绿色添加剂。

抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂都是通过提高羊机体对抗羊腹泻卵黄抗体的抗体水平来防治羊腹泻的。抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂喂食羊，既使用简便，又特适宜羊使用。由羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌毒引起的腹泻，可直接给羊饲喂本发明产品，有效率可达100％以上。也可添加于饲料中用于预防腹泻。抗羊腹泻卵黄抗体注射剂治疗腹泻，1-2天见效，临床治愈率可达96.2％以上。使用本发明的卵黄抗体注射治疗羊腹泻，试验组临床症状比对照组明显减轻，且试验组的死亡率显著低于对照组，具有明显的防治腹泻作用。本发明的抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂防治羊腹泻效果显著。该方法成本低，见效快，无副作用，不会产生耐药性菌株，制备工艺简单，原料来源广泛，使用方便，易于在基层推广。

具体实施方式

以下结合实施例，对依据本发明提供的具体实施方式详述如下：

实施例1

一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂，其特征在于以羊轮状病毒、羊大肠杆菌、羊B型魏氏梭菌制备的单苗，或羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌制备的联苗疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，再收集免疫产蛋母鸡卵黄并提取、制备。

抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体饲料添加剂的制备方法，实施步骤如下：

(1)分离羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌进行增殖培养，当具有抗原性后制备成羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌三联疫苗。

(2)利用制备成羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌三联疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，第一轮次免疫注射时免疫剂量呈1.0ml；10天后进行第二轮次免疫注射，免疫剂量为首免的2倍；再过10天后进行第三轮次免疫注射，免疫剂量为首免的4倍；以后每隔一个月再以首免的4倍剂量进行免疫。诱导产蛋母鸡持续性产生羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌三联疫苗抗体。

(3)第三轮次免疫结束后10天，经卵黄抗体效价测定后收集免疫卵，无菌获取卵黄，用0.01M无菌磷酸盐缓冲液液稀释、0.5％羟丙甲基纤维素、邻苯二甲酸盐处理，真空抽滤，弃渣，抽滤液喷雾干燥，即得本发明的抗羊轮状病毒和羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体饲料添加剂。将粉剂封装保存。

实施例2

一种抗羊腹泻卵黄抗体注射剂，其特征在于以羊轮状病毒、羊大肠杆菌、羊B型魏氏梭菌制备的单苗，或羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌制备的联苗疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，再收集免疫产蛋母鸡卵黄并提取、制备。

抗羊轮状病毒和羊大肠杆菌卵黄抗体注射剂的制备方法，实施步骤如下：

(1)分离羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌进行增殖培养，当具有抗原性后制备成羊轮状病毒和羊大肠杆菌二联疫苗。

(2)利用制备成羊轮状病毒和羊大肠杆菌二联疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，第一轮次免疫注射时免疫剂量呈1.0ml；10天后进行第二轮次免疫注射，免疫剂量为首免的2倍；再过10天后进行第三轮次免疫注射，免疫剂量为首免的4倍；以后每隔一个月再以首免的4倍剂量进行免疫。诱导产蛋母鸡持续性产生羊轮状病毒和羊大肠杆菌抗体。

(3)第三轮次免疫结束后10天，用1％新洁尔灭消毒蛋壳，在无菌条件下收集卵黄，用无菌蒸馏水对倍稀释，置组织捣碎机中用3000r/min匀浆1min，匀浆后加入乳酸液，在1-4℃温度下静止3-4h或过夜，去除杂蛋白，收集上清液，上清液中加入吸取上清，加入50％的饱和硫酸铵，摇匀，4℃盐析2h。4000r/min离心20min，弃上清，沉淀以100ml的PBS(pH 7.4)完全溶解。用30％的饱和硫酸铵重复盐析3次，沉淀用PBS透析24h或过夜，沉淀中加入生理盐水，同时加青霉素、链霉素各2000IU/mL，调整IgY的浓度分装于灭菌玻璃瓶中，该注射剂内含有效价≥1∶256的抗羊相应病原微生物的卵黄抗体，即得本发明的抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌卵黄抗体注射剂。其IgY的得率达95％以上，一个免疫卵一般可得IgY 80-110mg。初诊为羊腹泻的羊，按每千克体重0.5-1毫升的剂量确定用量，选择肌肉丰满的部位进行多点肌肉注射，严重者间隔3-4日可再次注射。同时要饮用白糖水、维生素或葡萄糖水溶液，辅助给予青饲料等含维生素丰富的食物。

实施例3

抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体注射剂的制备方法，实施步骤如下：

(1)分离羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌进行增殖培养，当具有抗原性后制备成羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌三联疫苗。

(2)利用制备成羊轮状病毒和羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌三联疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，第一轮次免疫注射时免疫剂量呈1.0ml；10天后进行第二轮次免疫注射，免疫剂量为首免的2倍；再过10天后进行第三轮次免疫注射，免疫剂量为首免的4倍；以后每隔一个月再以首免的4倍剂量进行免疫。诱导产蛋母鸡持续性产生羊轮状病毒和羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌三联疫苗抗体。

(3)第三轮次免疫结束后10天，用1％新洁尔灭消毒蛋壳，在无菌条件下收集卵黄，用无菌蒸馏水对倍稀释装于灭菌玻璃瓶中，同时加青霉素、链霉素各2000IU/mL，置组织捣碎机中用3000r/min匀浆1min，匀浆后加入乳酸液，在1-4℃温度下静止3-4h或过夜，去除杂蛋白，收集上清液，上清液中加入硫酸铵，在1-4℃温度下静止3-4h或过夜，4000r/min离心20min，收集沉淀，加入生理盐水，调整IgY的浓度分装，该注射剂内含有效价≥1∶256的抗羊相应病原微生物的卵黄抗体，即得本发明的抗羊轮状病毒羊大肠杆菌卵黄抗体注射剂。其IgY的得率达95％以上，一个免疫卵一般可得IgY 80-110mg。初诊为羊腹泻的羊，按每千克体重0.5-1毫升的剂量确定用量，选择肌肉丰满的部位进行多点肌肉注射，严重者间隔3-4日可再次注射。同时要饮用白糖水、维生素或葡萄糖水溶液，辅助给予青饲料等含维生素丰富的食物。

应用实例1：

抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体饲料添加剂防治羊腹泻的试验研究

用添加了实施例1中制备的抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体饲料添加剂的饲料和普通饲料分别饲喂2-15日龄而且口服攻毒羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌的羔羊，同时设正常对照组，未攻毒同时饲喂普通饲料。观察10日疗效，实验结果如下：

表1卵黄抗体饲料添加剂防治羊腹泻的试验效果

组别	病例数(头)	饲喂饲料治愈(头)	死亡(头)	有效(头)	有效率(％)
						药物实验组	11	卵黄抗体饲料添加剂	0	11	100
阴性对照组	10	普通饲料	3	7	70
						正常对照组	10	普通饲料	0	10	100

从表1看出，口服攻毒羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌的羔羊饲喂抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂的饲料后，腹泻很快痊愈，有效率达100％，死亡率为0，而口服攻毒的羔羊饲喂普通饲料后，有效率达70％，死亡率为30％，

结论：本发明的抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体饲料添加剂防治羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌引起的羔羊腹泻具有良好的治疗效果。当前治疗动物病毒性疾病，抗病毒药品种太少，抗羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌卵黄抗体饲料添加剂防治羔羊腹泻的有效药物。羊轮状病毒、羊大肠杆菌和羊B型魏氏梭菌引起的羔羊腹泻，严重威胁羊的健康，造成了重大经济损失。当羊发生腹泻时时，可立即口服或皮下注射卵黄抗体，能阻止羊轮状病毒病毒进入细胞，中和病毒数量，经2-10小时就可发现羊精神好转，食欲增加，减少羔羊的死亡率。

应用实例2：

内蒙古赤峰市某羊场的85只羔羊相继发生腹泻，经临床症状和实验室诊断诊断为羊轮状病毒和大肠杆菌混合感染。对发病羊用实施例2中制备的抗羊轮状病毒和羊大肠杆菌卵黄抗体进行治疗。按每千克体重1毫升的剂量确定用量，选择肌肉丰满的部位进行多点肌肉注射，严重者间隔2日可再次注射羊轮状病毒卵黄抗体。同时要饮用白糖水、维生素或葡萄糖水溶液，辅助给予青菜、水果等含维生素丰富的食物，结果康复82头，有效率为96.2％。临床试用表明，患腹泻羔羊经抗羊轮状病毒和羊大肠杆菌卵黄抗体治疗后疗效好。制成的抗羊轮状病毒和羊大肠杆菌卵黄抗体，注入动物机体后治疗羔羊腹泻，具有疗效好、安全可靠、无毒副作用和成本低等优点。

上述参照实施例对该抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂和注射剂及其制备方法进行的详细描述，是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1、一种抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂，其特征在于以羊轮状病毒、羊大肠杆菌、羊B型魏氏梭菌制备的单苗，或羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌制备的联苗疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，再收集免疫产蛋母鸡卵黄并提取、制备。

2、一种根据权利要求1所述的抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂的制备方法，实施步骤如下：

(1)分离羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌进行增殖培养，当具有抗原性后制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗；

(2)利用制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，第一轮次免疫注射时免疫剂量呈1.0ml；10天后进行第二轮次免疫注射，免疫剂量为首免的2倍；再过10天后进行第三轮次免疫注射，免疫剂量为首免的4倍；以后每隔一个月再以首免的4倍剂量进行免疫；诱导产蛋母鸡持续性产生羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌抗体；

(3)第三轮次免疫结束后10天，经卵黄抗体效价测定后收集免疫卵，无菌获取卵黄，用0.01M无菌磷酸盐缓冲液液稀释、0.5％羟丙甲基纤维素、邻苯二甲酸盐处理，真空抽滤，弃渣，抽滤液喷雾干燥，即得本发明的抗羊腹泻卵黄抗体饲料添加剂。

3、一种抗羊腹泻卵黄抗体注射剂，其特征在于以羊轮状病毒、羊大肠杆菌、羊B型魏氏梭菌制备的单苗，或羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌制备的联苗疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，再收集免疫产蛋母鸡卵黄并提取、制备。

4、一种根据权利要求3所述的抗羊腹泻卵黄抗体注射剂的制备方法，实施步骤如下：

(1)分离羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌进行增殖培养，当具有抗原性后制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗；

(2)利用制备成羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌联合疫苗免疫非免疫产蛋母鸡，第一轮次免疫注射时免疫剂量呈1.0ml；10天后进行第二轮次免疫注射，免疫剂量为首免的2倍；再过10天后进行第三轮次免疫注射，免疫剂量为首免的4倍；以后每隔一个月再以首免的4倍剂量进行免疫；诱导产蛋母鸡持续性产生羊轮状病毒和/或羊大肠杆菌和/或羊B型魏氏梭菌抗体；

(3)第三轮次免疫结束后10天，用1％新洁尔灭消毒蛋壳，在无菌条件下收集卵黄，用无菌蒸馏水对倍稀释，置组织捣碎机中用3000r/min匀浆1min，匀浆后加入乳酸液，在1-4℃温度下静止3-4h或过夜，去除杂蛋白，收集上清液，上清液中加入硫酸铵至饱和度20-40盐析，4000r/min离心20min，收集沉淀，加入生理盐水，调整IgY的浓度分装，该注射剂内含有效价≥1∶256的抗羊相应病原微生物的卵黄抗体，即得本发明的抗羊腹泻卵黄抗体注射剂。