CN101200468A - 新型化合物和其用途 - Google Patents
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Abstract
式(I)的化合物:其中X1,X2,X3,X4,Y1,Y2,Y3,Y4和Z的定义如说明书所述,和这种化合物的金属化形式,其可用于需要光动力学化合物的医学状况的治疗中。还公开了药物制剂和治疗那些需要光动力学试剂的医学状况的方法。还公开了包含本发明化合物的消毒液,和其用途。
Description
本申请是以下申请的分案申请:申请日:2003年12月23日;申请号:200380109937.2(PCT/GB2003/005649);发明名称:同上。
领域
本发明涉及化合物和其在需要光动力学化合物的医学病症的治疗中的用途,特别是,在治疗或预防性治疗微生物集群和感染中的用途。
背景
有越来越多的微生物演生出对于抗生素的抗药性,这已经被认为是世界范围内的健康问题(Tunger等人,2000,Int.J.Microb.Agents,15:131-135;Jorgensen等人,2000,Clin.Infect.Dis.,30:799-808)。因此,迫切需要研制出用于消灭微生物的非抗生素手段,来控制不能用抗生素治疗的感染,和限制演变出另外的耐抗生素的菌株。
通过光动力学疗法(PDT)治疗微生物感染代表着一种有价值的用于根除细菌的可供选择的方法,因为它涉及到一种与大多数抗生素的典型机理明显不同的机理。因此,PDT的作用基础是使用光敏分子,它们一旦被光活化,就能生成反应性氧物种,这种物种对于大量原核和真核细胞,包括细菌、支原体和酵母菌是有毒的(Malik等人,1990,J.Photochem.Photobiol.BBiol.,5:281-293;Bertoloni等人,1992,Microbios,71:33-46)。重要的是,许多光动力学试剂对于细菌的光敏活性不会被对抗生素的抗药性削弱,而是主要取决于它们的化学结构(Malik等人,1992,J.Photochem.Photobiol.BBiol.,14:262-266)。
各种类型的中性和阴离子型光敏试剂显示出突出的对革兰氏阳性细菌的光毒活性。但是,这种光敏试剂不会对革兰氏阴性细菌产生明显的细胞毒素活性,除非用乙二胺四乙酸(EDTA)或多聚阳离子处理而改变外膜的渗透性(Bertoloni等人,1990,FEMS Microbiol.Lett.,71:149-156;Nitzan等人,1992,Photochem.Photobiol.,55:89-97)。人们相信,革兰氏阴性细菌的细胞外膜,比革兰氏阳性细菌的更复杂,更厚,它们能阻碍光敏试剂的有效结合,或阻断并钝化由光敏试剂通过光产生的细胞毒素活性组分(Ehrenberg等人,1985,Photochem.Photobiol.,41:429-435;Valduga等人,1993,J.Photochem.Photobiol.B.Biol.,21:81-86)。
相反,带正电的(阳离子的)光敏试剂,包括卟啉和酞菁,会促进革兰氏阴性细菌的有效钝化而不需要对细胞外膜的自然结构进行改性(Merchat等人,1996,J.Photochem.Photobiol.B.Biol.,32:153-157;Minnock等人,1996,J.Photochem.Photobiol.B.Biol.,32:159-164)。看来,正电荷有利于光敏试剂在关键细胞位点上的结合,它们一旦被曝光损害,就会造成细胞生存能力丧失(Merchat等人,1996,J.Photochem.Photobiol.B.Biol.,35:149-157)。
因此,已经有人报道说,在用阳离子的5,10,15,20-四-(4-N-甲基吡啶基)-卟吩(T4MPyP)培养之后,大肠杆菌能有效地被可见光灭活(Valduga等人,1999,Biochem.Biophys.Res.Commun.,256:84-88)。这种卟啉的光毒活性主要通过损伤酶和外膜及细胞质膜的传输功能,而不是由与DNA的结合介导。
但是,由于对哺乳动物宿主组织细胞的的毒性,即,化合物没有能力把靶标微生物细胞和寄主细胞区分开来,已知的卟啉基光动力学疗法试剂的应用受到一定的限制。另外,使用已知的卟啉基光动力学疗法试剂由于它们对于靶标微生物细胞的相对低效能而受到进一步的限制。
因此,需要具有提高的毒性分布、具有高效能、并可用于PDT中以优先消灭微生物细胞的卟啉基化合物。
概述
根据本发明的第一方面,提供具有下式I的化合物:
其中:
X1,X2,X3和X4独立地代表(即,是相同或不同的)氢原子,亲脂性片断,苯基,低级烷基,烷芳基或芳烷基,或下式的阳离子基团:
-L-R1-N+(R2)(R3)R4
其中:
L是连接片断或者不存在;
R1代表低级亚烷基、低级亚烯基或低级亚炔基,其任选被一个或多个选自低级烷基、低级亚烷基(任选被氧间隔)、氟、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代;和
R2、R3和R4独立地代表(即是相同或不同的)H,芳基,低级烷基,低级烯基或低级炔基,后三者任选被一个或多个选自低级烷基、低级亚烷基(任选被氧间隔)、芳基、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代;
Z是-CH或N;
Y1、Y2、Y3和Y4不存在或者独立地代表芳基,低级烷基,低级烯基或低级炔基,后三者任选被一个或多个选自低级烷基、低级亚烷基(任选被氧间隔)、芳基、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代;和
R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14独立地代表H或低级烷基,
条件是X1、X2、X3和X4中的至少一个是如上定义的阳离子基团,和X1、X2、X3和X4中的至少一个是氢原子、苯基、亲脂性片断、或低级烷基、烷芳基或芳烷基。
术语″低级烷基″用来包括直链或支链、环状或非环状C1-C20烷基,其可以被氧间隔(优选在每一烷基链中存在不超过5个氧原子)。R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14可以代表的低级烷基包括C1-C18烷基,C1-C16烷基,C1-C14烷基,C1-C12烷基,C1-C10烷基,C1-C9烷基,C1-C8烷基,C1-C7烷基,C1-C6烷基,C1-C5烷基,C1-C4烷基,C1-C3烷基,和C1-C2烷基。R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10和R11可以代表的优选的低级烷基包括C1,C2,C3,C4,C5,C6,C7,C8,C9,C10,C11,C12,C13,C14,C15和C16烷基。
因此,R1-R14(或X1-X4)中的任何一个或多个可以代表环胺/铵基团,例如:
应当理解,所述环胺/铵基团也可以包括比6个少或多于6个的成员,例如这种基团可以包括4-,5-,7-,8-,9-或10-元环。
术语″低级亚烷基″也被相应地解释。
术语″低级烯基″和″低级炔基″分别用来包括直链或支链、环状或非环的C2-C20烯基和炔基,每一个都可以被氧间隔(优选每一个烯基或炔基链中存在不超过5个氧原子)。
术语″低级烯基″还包括顺和反式几何异构体。R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14可以代表的低级烯基包括C2-C18烯基,C2-C17烯基,C2-C16烯基,C2-C14烯基,C2-C12烯基,C2-C10烯基,C2-C8烯基,C2-C7烯基,C2-C6烯基,C2-C5烯基,C2-C4烯基,C2-C3烯基,和C3-C4烯基。R1、R2、R3、R4、R5、R 6、R7、R8、R9、R10和R11可以代表的优选的低级烯基包括C2,C3,C4,C5,C6,C7,C8,C9,C10,C11,C12,C13,和C14烯基。
术语″低级亚烯基″也被相应地解释。
R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14可以代表的低级炔基包括C2-C18炔基,C2-C16炔基,C2-C14炔基,C2-C12炔基,C2-C10炔基,C2-C9炔基,C2-C8炔基,C2-C7炔基,C2-C6炔基,C2-C5炔基,C2-C4炔基,C2-C3炔基,和C3-C4炔基。R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10和R11可以代表的优选的低级炔基包括C2,C3,C4,C5,C6,C7,C8,C9,C10,C11,C12,C13,和C14炔基。
术语″低级亚炔基″也被相应地解释。
术语″芳基″包括6-10元碳环芳族基团,如苯基和萘基,这些基团任选被一个或多个选自氟、氰基、硝基、低级烷基(即烷芳基)、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9和NR10R11的取代基取代。
术语″芳烷基″包括通过低级烷基连接到卟啉环上的芳基基团。
本发明的第二方面,提供具有下式II的化合物:
其中M是金属元素或准金属元素,X1,X2,X3,X4,,Y1,Y2,Y3,Y4和Z定义如上。
术语″金属元素″用来包括二价或三价金属元素。优选,所述金属元素是抗磁的。更优选,所述金属元素选自Zn(II),Cu(II),La(III),Lu(III),Y(III),In(III),Cd(II),Mg(II),Al(III),Ru,Ni(II),Mn(III),Fe(III)和Pd(II)。最优选,所述金属元素是Ni(II),Mn(III),Fe(III)或Pd(II)。
术语″准金属″用来包括具有处于金属和非金属之间的物理和化学性质,如导电能力的元素。术语准金属元素包括硅(Si)和锗(Ge)原子,其任选被一个或多个配体取代。
应当理解,术语金属元素和准金属元素包括具有正氧化态的金属元素或准金属元素,所有这些均被一个或多个选自氟、OH、OR15的配体取代,其中R15是低级烷基,低级烯基,低级炔基,芳烷基,芳基或烷芳基,这些基团的定义如上(其中芳基和烷芳基是单取代的)。
式I和II的化合物包括至少一个阳离子基团。因此,本发明的化合物可以带有净的正电荷,例如+1,+2,+3,+4,+5,+6或更多电荷。在优选实施方案中,化合物带有低于+4的净电荷,例如+1,+2或+3。在特别优选的实施方案中,化合物带有净电荷+2。
本领域的技术人员应当理解,式I和II的化合物可以用抗衡阴离子平衡。示范性的抗衡阴离子包括,但是不局限于,卤化物(如氟化物,氯化物和溴化物),硫酸盐(如癸基硫酸盐),硝酸盐,高氯酸盐,磺酸盐(如甲烷磺酸盐)和三氟醋酸盐。其他适当的抗衡阴离子是本领域技术人员公知的。因此,式I和II化合物的药物学和/或兽医学可接受的衍生物,如盐和溶剂化物,也包括在本发明的范围内。可以提及的盐包括:酸加成盐,例如,与无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸形成的盐,与羧酸或有机磺酸形成的盐;碱加成盐;与碱形成的金属盐,例如钠和钾盐。
本领域技术人员另外也将理解,式I的化合物可以显示互变异构现象。所有的互变异构形式和其混合物包括在本发明的范围内。
式I和II的化合物也可以包含一个或多个不对称碳原子,因此可以显示光学和/或非对映异构现象。非对映异构体可以使用传统方法,如色谱法或分步结晶法分离。各种不同的立体异构体可以通过用通用的方法,如分步结晶或HPLC,分离所述化合物的外消旋或其他混合物来分离。或者,希望的光学异构体可以通过使适当的光学活性原料在不会产生消旋或差向异构的条件下反应,或者例如用同手性酸衍生,随后通过传统方法(如HPLC,硅胶色谱)分离非对映的酯来制备。所有的立体异构体都包括在本发明的范围内。
在本发明第一和第二方面化合物的优选实施方案中,Z是-CH。
本发明第一和第二方面化合物的特征在于,取代基X1,X2,X3和X4中至少一个是如上定义的式-L-R1-N+(R2)(R3)R4的季铵阳离子基团。优选,X1、X2、X3和X4中没有一个是苯胺或吡啶盐阳离子基团。
在优选实施方案中,R1是未取代的低级亚烷基,低级亚烯基或低级亚炔基基团。
有利的是,R1是式-(CH2)m-的直链低级亚烷基基团。
优选,″m″是1-20的整数,更优选,″m″是1-10的整数,例如1-6,1-5,1-4或1-3。R1可以代表的优选的直链低级亚烷基基团包括上述化学式的基团,其中m是2,3,4,5,6,7,8,9或10。最优选,″m″是2或3。
季铵片断上的其余3个取代基,即,R2、R3和R4,可以相同或不同,选自H,低级烷基,低级烯基或低级炔基,后三者任选被一个或多个选自低级烷基、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代。
在优选实施方案中,R2、R3和/或R4是低级烷基,低级烯基或低级炔基基团。
优选,R2、R3和/或R4是未取代的低级烷基。
任选,R2、R3和R4中的至少一个是被伯、仲或叔胺基团或季铵基团取代的烷基。
在本发明第一和第二方面化合物的优选实施方案中,R1是-(CH2)3-,R2和R3是CH3,R4是-(CH2)3-N(CH3)2。
在本发明第一和第二方面化合物的供选择的优选实施方案中,R1是-(CH2)3-,R2、R3和R4均为CH3。
在本发明第一和第二方面化合物的另外供选择的优选实施方案中,R1是-(CH2)3-,R2、R3和R4都是C2H5。
有利的是,X1、X2、X3和X4中的至少一个是如上定义的阳离子基团,和X1、X2、X3和X4中的至少一个是氢原子。
优选,X1、X2、X3和X4中的每一个都是氢原子或如上定义的阳离子基团。
方便地,如果存在于本发明的化合物中的话,任何伯、仲或叔胺基团的pK值都大于8,以确保当处于生理环境中时该基团被质子化。
季铵阳离子基团任选通过连接片断L连接到卟啉环上。
优选的连接片断L包括苯氧基、亚苯基、磺酰胺基、氨基磺酰基、磺酰亚氨基、苯基磺酰胺基、苯基氨基磺酰基、脲、尿烷和氨基甲酸酯连接片断。
在优选实施方案中,季铵阳离子基团通过苯氧基连接基连接到卟啉环上。
因此,X1、X2、X3和/或X4可以具有以下化学式:
其中R是如上定义的R1-N+(R2)(R3)R4,″n″是1-3的整数。
在供选择的优选实施方案中,季铵阳离子基团通过亚苯基连接基连接到卟啉环上。
因此,X1、X2、X3和/或X4可以具有以下化学式:
其中R是如上定义的R1-N+(R2)(R3)R4,″m″是1-3的整数。
优选,″m″是2,最优选1。
在供选择的优选实施方案中,X1、X2、X3和/或X4可以具有以下化学式:
其中R是R1-N+(R2)(R3)R4,″n″和″m″定义如上,且″n+m″在1-3之间。
有利的是,L包含在对位单取代的苯环(如苯氧基,亚苯基,苯基磺酰胺基或苯氨基磺酰基)。或者,L可以是在间或邻位单或二取代的。L也可以是同时在对和邻位取代的。
在供选择的优选实施方案中,季铵阳离子基团直接连接到卟啉环上,即L不存在。
在本发明第一和第二方面的优选实施方案中,化合物包括两个如上定义的阳离子基团,在卟啉环的相对侧,即在环位5和15上,或者在环位10和20上。例如,X1和X3可以是氢原子,亲脂性片断,苯基,低级烷基,烷芳基或芳烷基,X2和X4可以是阳离子基团,或反之亦然。
优选,X1和X3两个都是氢原子,X2和X4两个都是阳离子基团,或反之亦然。
或者,本发明的化合物可以包括两个如上定义的阳离子基团,在卟啉环的相邻位置上,即,在环位5和10上,或在环位10和15上,或在环位15和20上,或在环位20和5上。例如,X1和X2可以是氢,X3和X4可以是阳离子基团,或者X2和X3可以是氢,X4和X1可以是阳离子基团,等。
本领域的技术人员应当理解,当Z代表氮时可能产生另外的异构结构。这种可能性包括在本发明的范围内。
在本发明第一和第二方面化合物的进一步优选的实施方案中,所述化合物在一个或多个其组成部分吡咯环上被取代。因此,Y1、Y2、Y3和Y4可以不存在或者独立地代表芳基,低级烷基,低级烯基或低级炔基,后三者任选被一个或多个选自低级烷基、低级亚烷基(任选被氧间隔)、芳基、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代;本领域技术人员应当理解,Y1、Y2、Y3和/或Y4可以包括环基,其可以是饱和的或者芳族的。例如,一个或多个吡咯环可以被取代形成异吲哚基团,即,Y1、Y2、Y3和/或Y4和它们所连接的吡咯环一起,可以是环状的。
在本发明第一和第二方面化合物的供选择的优选实施方案中,Y1、Y2、Y3和Y4不存在。因此,所述卟啉环优选只在位置5、10、15或20中的一个或多个上被取代。
在本发明第一和第二方面化合物进一步优选的实施方案中,X1、X2、X3和X4中的至少-个是或者包括亲脂性片断。
我们用″亲脂性片断″来包括在生理学的pH值和25℃下,在1-正辛醇和水之间的分配系数,用logP表示,大于1.0的片断。
通常,所述亲脂性片断是式-(CH2)pCH3的饱和的直链烷基,或者是等价的式-(CH2)p的亚烷基基团,其中″p″是1-22的整数,例如为1-18。优选,″p″在1-18之间,更优选2-16,4-16,6-18,8-16,或4-12。最优选,″p″在10-12之间。
应当理解,X1、X2、X3和/或X4可以是如上定义的阳离子基团,其也包括亲脂性片断。
在本发明第一和第二方面的供选择的优选实施方案中,X1、X2、X3和X4中没有一个是亲脂性片断。
有利的是,本发明的化合物可溶于水。优选,化合物可以溶于水,使得在水中的浓度为至少5μg/升,例如至少10μg/升,15μg/升,或20μg/升。更优选,化合物溶于水中的浓度为至少100μg/升,例如,200μg/升,300μg/升,400μg/升,500μg/升,1mg/mL,5mg/mL,10mg/mL,20mg/mL,50mg/mL,或100mg/mL。
合适地,与没有活化光照/辐射的情况相比,本发明的化合物在光照/辐射条件下能显示对靶标微生物(如细菌)更大的毒性,即,它们显示比黑暗毒性(参见下文)更强的光动力学活性(光毒性)。应当理解,这种毒性可以用细胞培养物测定。优选,化合物的光动力学活性至少比化合物的黑暗毒性大两倍,更优选大至少3倍,至少4倍,至少5倍,至少6倍,至少8倍,至少10倍,至少15倍,或至少20倍。最优选,本发明的化合物在没有光照/辐射的情况下基本上无毒。
在优选实施方案中,本发明的化合物在低剂量下对靶标微生物(如细菌细胞)有毒。优选,所述化合物在浓度低于10μM,例如在低于1μM,低于0.1μM,低于0.01μM,低于0.005μM或低于0.001μM下对靶标微生物有毒(参见实施例B)。
本发明的优选化合物包括以下所述:
(a)5,15-双(4-{3-[(3-二甲氨基-丙基)-二甲基铵基]-丙氧基}-苯基)-卟啉二氯化物(″化合物8″)
优选,该化合物以二氯化物或四氯化物盐的形式提供。
(b)5,15-双[4-(3-三乙铵基-丙基氧)-苯基]-卟啉二氯化物(″化合物9″);
优选,该化合物以二氯化物盐的形式提供。
(c)5,15-双[3-(3-三甲铵基-丙基氧)-苯基]-卟啉二氯化物(″化合物12″);
优选,该化合物以二氯化物盐的形式提供。
(d)5,15-双-[4-(3-三甲铵基-丙基氧)-苯基]-卟啉二氯化物(″化合物10″);
优选,该化合物以二氯化物盐的形式提供。
(e)5-[3,5-双-3-三甲铵基-丙基氧)-苯基]-15-十一烷基-卟啉二氯化物(″化合物6″);
优选,该化合物以二氯化物盐的形式提供。
(f)5-{4-[3-二甲基-(3-二甲基氨丙基)-铵基-丙基氧]苯基}-15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉氯化物(″化合物23″);
优选,该化合物以氯化物或二氯化物盐的形式提供。
(g)3-[({3-[(3-{4-[15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉-5-基]-苯氧基}-丙基)-二甲基铵基]-丙基}-二甲基铵基)-丙基]-三甲基-铵三氯化物(″化合物25″);
优选,该化合物以三氯化物盐的形式提供。
(h)5,15-双-[3-(3-三甲基铵基-丙氧基)-苯基]-10-十一烷基-卟啉二氯化物(″化合物28″);
优选,该化合物以二氯化物盐的形式提供。
(i)5-{4-[3-二甲基-(3-三甲铵基-丙基)-铵基-丙氧基]-苯基}-15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉二氯化物(″化合物31″);和
优选,该化合物以二氯化物盐的形式提供。
(j)5-[4-(3-二甲基癸基-铵基丙氧基)-苯基]-15-{4-[3-二甲基-(3-二甲基氨丙基)-铵基丙氧基]-苯基}卟啉二氯化物(″化合物32″)。
优选,该化合物以二氯化物盐的形式提供。
应当理解,上述化合物可以选择性地呈金属化的形式,即它们可以在卟啉环内包括螯合的金属元素或准金属元素。
本发明的第三方面,提供用作选择性光动力学疗法试剂,即用于有选择性地消灭微生物的化合物,其中所述化合物是根据本发明第一或第二方面的化合物。
我们用″选择性的″来表示光动力学疗法试剂,与哺乳动物,如人的寄主细胞相比,优先对一种或多种微生物(如细菌、支原体、酵母菌、真菌和/或病毒)有毒。优选,化合物对靶标微生物的毒性比化合物对哺乳动物细胞(如人的皮肤细胞)的毒性大至少两倍,更优选大至少3倍,至少4倍,至少5倍,至少6倍,至少8倍,至少10倍,至少15倍,或至少20倍。最优选,本发明的化合物对哺乳动物细胞基本上无毒。
因此,当本发明的化合物用来处理细菌感染时,例如,剂量疗法的选择可以使得细菌细胞被破坏,而对于健康的宿主组织(如皮肤细胞)的损害则降到最小程度。因此,光动力学疗法试剂优选显示″治疗窗″。
本发明的第四方面,提供药物制剂,其包括与药学上或兽医学上可接受的助剂、稀释剂或载体混合的根据本发明的第一或第二方面的化合物。
根据将要使用的化合物的效能/毒性以及它所使用的适应症,本发明的化合物可以配制成各种浓度。优选,所述制剂包括以下浓度的本发明的化合物,即0.1μM-1mM,更优选1μM-100μM,5μM-50μM,10μM-50μM,20μM-40μM,最优选约30μM。对于体外应用来说,制剂可以包括较低浓度的本发明的化合物,例如0.0025μM-1μM。
本领域的技术人员应当理解,本发明的化合物将通常以与适当的药物赋形剂、稀释剂或载体的混合物形式施用,所述药物赋形剂、稀释剂或载体的选择是针对预定的施用途径和标准的药物实践进行的(例如,参见Remington:The Science and Practice of Phamacy,第19版,1995,Alfonso Gennaro编,Mack Publishing Company,Pennysylvania,USA)。
例如,对于局部应用,如局部用于皮肤或伤口位点来说,本发明的化合物可以以洗液、溶液、乳膏、凝胶、软膏或扑粉的形式施用(例如,参见Remington的上述文章,1586-1597页)。因此,本发明的化合物可以配制成适当的软膏形式,其中包含悬浮或溶于,例如,一种或多种以下所述的混合物中的活性化合物:矿物油,液体矿脂,白矿脂,丙二醇,聚氧乙烯聚氧化丙烯化合物,乳化蜡和水。或者,它们可以配制成适当的洗液或乳膏,其中活性化合物悬浮或溶于,例如,一种或多种以下所述物质的混合物中:矿物油,单硬脂酸山梨糖醇酐酯,聚乙二醇,液体石蜡,聚山梨糖醇酯60,鲸蜡基酯蜡,e-月桂基硫酸酯,醇(如乙醇,鲸蜡硬脂醇,2-十八醇,苯甲醇)和水。
在优选实施方案中,所述制剂(如洗液,溶液,乳膏,凝胶或软膏)是水基的。
适合于口中局部施用的制剂进一步包括在香味基质中的活性成分的糖锭剂,所述香味基质通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶;在惰性基质如明胶和甘油、或者蔗糖和阿拉伯胶中包含活性成分的锭剂;和在适当的液体载体中包含活性成分的漱口剂。
本发明的化合物也可以经鼻或者通过吸入施用,并且能很方便地借助于适当的推进剂,如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、氢氟烷烃如1,1,1,2-四氟乙烷(HFA 134A3或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷(HFA 227EA3)、二氧化碳或其他适当的气体,从加压容器、泵、喷雾器或者雾化器中以干燥粉末吸入剂或气溶胶喷雾的形式施用。在加压气雾剂的情况下,剂量单元可以通过提供用于递送计量量的阀来确定。加压容器、泵、喷雾器或雾化器可以包含活性化合物的溶液或悬浮液,如使用乙醇和推进剂的混合物作为溶剂,其可以另外包含润滑剂,如去水山梨糖醇三油酸酯。用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒(例如由明胶制备)可以配制得使其包含有本发明化合物和适当的粉末基质,如乳糖或淀粉的粉末混合物。
对于气雾剂或干燥粉末制剂来说,优选将其设计得使每一次计量的剂量或″吹喷″包含至少1mg本发明的化合物以递送给患者。应当理解,气雾剂的整个剂量将随患者及适应症不同而各异,并且可以以单一剂量或,更通常的是,在一天中以等分的几个剂量施用。
或者,也可以使用本领域已知的其他通用的施用途径;例如,本发明的化合物可以以片剂、胶囊、小泡、酏剂、溶液或悬浮液的形式口服、经口腔或舌下施用,上述剂型还可以包含矫味剂或着色剂用于快速、延迟或受控释放的应用场合。本发明的化合物也可以经眼(参见下文)、经耳或通过腔内施用注射施用。
本发明的化合物也可以胃肠外,例如,通过静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、胸骨内、颅内、肌内或皮下(包括通过一系列细针或使用无针粉末注射技术)施用,或者可以通过输注方法施用。它们最适合以无菌水溶液的形式使用,这种无菌水溶液可以包含其他的物质,例如,用于制备与血液等渗溶液的盐或葡萄糖。如果必要的话,应该对水溶液进行适当缓冲(优选缓冲到pH值为3-9)。在无菌条件下来制备适当的胃肠外制剂可很容易地通过本领域技术人员公知的标准药物方法实现。
适合于肠胃外施用的制剂包括水性和非水无菌注射液,其可以包含抗氧化剂,缓冲剂,抑菌剂和使制剂与目标接受者的血液等渗的溶质;水和非水的无菌悬浮液形式,其可以包括助悬剂和增稠剂。制剂可以以单元剂量或多剂量容器,例如密封的安瓿和管瓶的形式存在,并且可以保存在冻结干燥的(冷冻干燥)条件下,它只需要在使用之前立即加入无菌液体载体,例如注射用水即可。临时的注射溶液和悬浮液可以由先前所述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备。
本发明的化合物也可以通过眼睛施用,特别是用于治疗眼睛疾病时。对于眼睛方面的应用来说,本发明的化合物可以配制为处于等渗的、pH值经过调节的无菌生理盐水中的微粒化的悬浮液形式,或者优选,配制成处于等渗的、pH值经过调节的无菌生理盐水中的溶液形式,其任选与防腐剂如苄基烷基氯化铵结合。或者,它们可以配制在软膏如石蜡油中。
对于兽用用途来说,本发明的化合物以适当的依照正常的兽医实践可接受的制剂形式施用,并且兽医将决定最适合于特定动物的剂量疗法和施用途径。
本发明的化合物和/或制剂可以保存在任何适当的容器或者本领域已知的设备中。本领域的技术人员应当理解,所述容器或设备应该优选是不透气的和/或经过消毒的。有利的是,所述容器或设备用塑料物质如聚乙烯制成。
本发明的第五方面,提供根据本发明第一或第二方面的化合物在医药,特别是,在微生物感染的治疗和/或预防性治疗方面的用途。
本发明的化合物是光敏的(光动力学的),因为它们在氧气的存在下,在用适当波长(通常是400nm-800nm;参见下文)的光进行光照/辐射后,会放出反应性的氧物种,如单线态氧或氧自由基。因此,本发明的化合物适合于在需要光动力学试剂的医学病症的治疗和/或预防性治疗中用作光动力学疗法试剂(例如,参见Smith,2002,CurrProbl Cancer.,26(2):67-108;Hopper,2000,Lancet Oncol.,1:212-9;Dougherty,2002,J Clin Laser Med Surg.,20(1):3-7;Ceburkov&Gollnick,2000,Eur J Dermatol.,10(7):568-75)。
优选,本发明的化合物用于细菌感染的治疗性和/或预防性治疗中,如革兰氏阳性球菌(如链球菌)、革兰氏阴性球菌(如奈瑟氏球菌)、革兰氏阳性杆菌(如棒状杆菌)、革兰氏阴性杆菌(如大肠杆菌)、耐酸杆菌(如典型的分枝杆菌),并且包括导致脓肿、囊肿、皮肤感染、创伤感染、关节炎、尿路感染、胰腺炎、盆腔炎、腹膜炎、前列腺炎、阴道感染、口腔感染(包括牙齿感染)、眼睛感染和/或耳感染、溃疡及其他局部感染的感染;放线菌感染;真菌感染例如白色念珠菌、曲霉和芽生菌感染;病毒感染如HIV、脑炎、胃肠炎、出血热、汉坦病毒感染、病毒性肝炎、疱疹病毒(如巨细胞病毒、Epstein-Barr、疱疹病毒simiae、单纯性疱疹和水痘-带状疱疹);原虫感染如阿米巴病、巴贝西虫病、球虫病、隐孢子虫病、贾第鞭毛虫病、利什曼病、滴虫病、弓形体病和疟疾;肠虫感染如由线虫、绦虫和吸虫所引起的感染,如蛔虫病、十二指肠虫病、淋巴管丝虫病、盘尾丝虫病、血吸虫病和弓蛔虫病;和炎症性疾病如软组织风湿病、骨关节炎、类风湿性关节炎和脊椎关节病。
更优选,本发明的化合物用于治疗性和/或预防性治疗由革兰氏阳性细菌和/或革兰氏阴性细菌引起的感染。最优选,本发明的化合物用于治疗性和/或预防性治疗由革兰氏阳性细菌引起的感染。
本发明的化合物优选用于消灭微生物,如细菌,支原体,酵母菌,真菌和病毒。本发明的化合物特别适合于消灭已经对常规的抗生素处理产生了抗药性的细菌,如耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)。
本领域的技术人员应当理解,本发明的化合物适合于治疗在光可到达表面或光可达到的区域(如表皮,口腔,鼻腔,窦道,耳,眼睛,肺,尿-生殖道,和胃肠道)可能存在目标微生物的所有感染。另外,本发明的化合物适合于治疗光可暂时达到的表面或区域上的感染,如在外科操作过程中暂时暴露的骨骼感染。腹膜腔的感染,如由于阑尾破裂产生的感染,是光至少可通过腹腔镜设备达到的。
本发明化合物的剂量将取决于若干因素;包括使用的具体化合物,制剂,施用途径和化合物所用于的适应症。但是,典型地,剂量将在每公斤体重0.01-20mg化合物范围内,优选0.1-15mg/kg体重,例如1-10mg/kg体重。
在优选实施方案中,本发明的化合物与通用的抗微生物剂结合使用。例如,所述化合物可以与一种或多种以下通用的抗生素结合使用:杀菌剂,例如天然和合成的青霉素和头孢菌素,磺胺类,红霉素,卡诺霉素(Kanomycin),四环素,氯霉素,利福平,并包括庆大霉素,氨苄青霉素,苄青霉素(benzypenicillin),苯胺青霉素,苄星青霉素,苯氧乙基青霉素,苯氧基甲基青霉素,普鲁卡因青霉素,邻氯青霉素,氟氨青霉素,甲氧苯青霉素钠,阿莫西林,巴氨西林盐酸盐,环己西林,美洛西林,匹氨西林,酞氨青霉素盐酸盐,羧苄青霉素苯酯钠,哌拉西林,替卡西林,美西林,pirmecillinan,头孢克洛,头孢羟氨苄,头孢氨噻,头孢西丁,头孢磺啶钠,头孢他定,头孢唑肟,头孢呋辛,头孢氨苄,头孢噻吩,头孢孟多,头孢唑林,头孢拉定,拉氧头孢二钠,氨曲南,金霉素盐酸盐,氯莫环素钠,demeclocydine盐酸盐,强力霉素,赖甲环素,美满霉素,土霉素,阿米卡星,新霉素B硫酸盐,新霉素硫酸盐,奈替米星,妥布霉素,粘菌素,夫西地酸钠,多粘菌素B硫酸盐,大观霉素,万古霉素,磺胺酞酸钙,磺胺甲氧吡嗪,磺胺嘧啶,磺胺二甲嘧啶,磺胺脒,磺胺酰脲,卷曲霉素,甲硝哒唑,替硝唑,_噌星,环丙沙星,呋喃妥因,乌洛托品,链霉素,羧苄青霉素,多粘菌素E甲磺酸盐,多粘菌素B,呋喃唑酮,萘啶酸,甲氧苄氨嘧啶-磺胺异_唑,氯洁霉素,林可霉素,环丝氨酸,雷米封,乙胺丁醇,乙硫异烟胺,吡嗪酰胺等;抗真菌剂,例如咪康唑,酮康唑,伊曲康唑,氟康唑,两性霉素,氟胞嘧啶,灰黄霉素,那他霉素,制霉菌素,等;以及抗病毒剂,如无环鸟苷,AZT,双脱氧肌苷(ddI),盐酸金刚烷胺,肌苷pranobex,阿糖腺苷,等。
在进一步的优选实施方案中,本发明的化合物与渗透增强剂如聚(乙亚胺),或与显示这种渗透增强能力的抗生素(如多粘菌素或粘菌素)共同施用。
本发明的化合物特别适合用于一种或多种以下适应症的治疗或预防性治疗中:
脓疱病,
脓疱病是一种高度传染性的感染。它是孩子中最常见的感染。
脓疱病具有两种典型的形式,非大疱形式和大疱形式。非大疱形式的脓疱病,也称触染性脓疱病,大约占病例的70%。在不进行处理的情况下,损伤通常2-3周内消退。脓疱病也可能并发其他的皮肤病,如疥疮、水痘、特异性皮炎、和毛囊角化病。
(a)非大疱脓疱病
细菌类型
非大疱是主要由A组β-溶血链球菌(致脓链球菌)、金黄色葡萄球菌、或这两种生物体的组合引起的感染(参见Andrews′diseases ofthe skin:clinical dermatology,第9版,(2000),Odom RB编著,Saunders,312-4页)。非A组(B、C、和G组)链球菌可能是造成罕见脓疱病例的原因,B组链球菌与新生儿的脓疱病有关。
创伤类型
非大疱是表面的、表皮内的、单房性的水疱脓疱感染。
非大疱脓疱病的病变首先从脸部皮肤或在受到外伤后从肢端开始。一般说来,完整的皮肤是抗脓疱疮的。
脓疱病的临床表现是以有序的方式从小疱或脓疱开始发展,一直进展到形成蜂蜜色痂皮斑点。伤痕的直径通常低于2厘米。伤痕倾向于干燥,不进行结瘢的情况下,留下细小的痂皮。病变通常有最低限度的症状。很少,但是有可能会出现与轻微疼痛或轻微瘙痒有关的红斑。感染通过由抓挠接种其他的伤处而波及到邻近的和远侧的区域。
细菌位点
非大疱脓疱病是表面的链球菌或葡萄球菌感染,局限于皮肤的角膜层(刚好在角质层)之下(参见图1)。更具体地讲,脓疱病的感染在病理组织方面限于高度分化的上表皮角质化细胞。一旦细菌侵入皮肤破裂处,它们就开始繁殖。
组织病理学上的表现是,在毛囊皮脂腺滤泡的漏斗状上部附近产生极其浅的炎症。形成角膜下的水脓疱,其包含一些扩散的球菌,以及多形核白细胞和表皮细胞碎屑。在真皮中,存在轻微的炎症反应-脉管扩张,水肿,多形核白细胞浸入(Andrews′diseases of the skin,如上所述,312-4页)。
(b)大疱脓疱病
细菌类型
大疱脓疱病主要是由生成剥脱性毒素的金黄色葡萄球菌菌株引起的(Sadick等人,1997,Dermatologic Clinics,15(2):341-9)。
创伤类型
大疱脓疱病的病理组织特征在于,角膜下的解离和与多形核白细胞一起通过表皮渗透迁移并聚集在颗粒和角质层皮层之间。在躯干和肢端上出现小或大的、表层的易碎的泡。
松驰的泡和围绕红斑的潮湿的糜烂是这种角膜下感染的特征。往往,在有症状的时候,只能看见破裂的泡的残余物。表皮的分离是由于金黄色葡萄球菌生成了外毒素的缘故。
细菌位点
大疱脓疱病是在角质层以及刚好在角质层之下存在的表层葡萄球菌感染(参见图1)。大疱脓疱病被认为是由于某些附着于角质层细胞上的金黄色葡萄球菌生成了剥脱性毒素的缘故。
特异性皮炎(AD)
特异性皮炎,也称特应性湿疹,是一种产生发痒性皮疹,特别是在折褶处,即膝盖后面、肘前面、手腕、颈、和眼睑处出现皮疹的皮肤慢性炎症。皮疹的感染是常见的,并且会进一步导致发炎和瘙痒。
在1-6个月的小孩中,通常表现为湿疹。大约60%的患者最初暴发是在1岁,到5岁为止暴发的有90%。青春期或青春期之后,发生特异性皮炎比较罕见,并且将会提醒作出另一种诊断考虑。疾病的表现随着年龄而变化。
细菌类型
细菌和其超级抗原会促进AD的发病。
在AD患者中有90%的皮肤被金黄色葡萄球菌形成集落(慢性湿疹病损伤),在非特异性患者中只有5%。在具有AD的患者中,在没有临床感染症状的情况下,金黄色葡萄球菌的集群密度可以达到高达107菌落数cm-2。另外,特异性患者的正常非病变皮肤也明显包含增加数量的金黄色葡萄球菌。
特异性皮炎中金黄色葡萄球菌生长过度的理由,尽管在诸如牛皮癣的疾病中这种生长过度很多不太严重或者完全没有,但现在还不清楚。比起在正常人或者牛皮癣患者中,蛋白质A在特异性患者中会引起猛烈程度小得多的应答,但是这可能是结果而不是集群现象的原因。近来,人们的注意力转向了皮肤脂质,有一些证据表明,在特异性患者中缺乏脂肪酸,它们有可能会控制葡萄球菌的集落形成。
超级抗原是一种独特的由细菌和病毒生成的蛋白质,它们省略了通用的抗原介导的免疫序列中的某些单元。鉴于通用的抗原活化大约0.01%-0.1%的身体T细胞,超级抗原能够刺激5%-30%的T细胞种群。金黄色葡萄球菌可以通过分泌一组发挥超级抗原作用的外毒素而使AD中皮肤发炎加剧或者保持皮肤发炎程度。AD患者具有改变的皮肤屏障,比角质层内神经酰胺的不足要次要一些。已经有人认为,这些外毒素穿透皮肤可能会引起T细胞、巨噬细胞、LCs、和肥大细胞的活化,从而导致释放出细胞活素和肥大细胞介质。可以设想,这些情况可能会成为慢性AD中发炎的基础。不论AD中金黄色葡萄球菌集群和局部超级抗原分泌是主要的或者是次要的现象,都会有这样的推测(Andrews′diseases of skin,第5章,Atopic Dermatitis,Eczema,andnon-infectious immuno deficiency disorders,69-76页)。
皮肤病毒、真菌、和细菌感染在AD患者中更为常见。病毒感染和T细胞缺陷一致,并包括单纯性疱疹(局部或全身性,即,疱疹性湿疹)、触染性软疣、和人乳头状瘤病毒。带有红色毛癣菌和卵形糠秕孢子菌的表层真菌感染也经常存在。细菌感染,具体地说指金黄色葡萄球菌的那些细菌感染,极其常见。超级感染会导致产生蜂蜜色痂皮、大范围的严重泌水或毛囊炎。
创伤类型
急性病变表现为红斑状丘疹,小囊泡,和糜烂;慢性疾病包括纤维化丘疹和变厚的成苔藓状的皮肤。
查觉到有增加数目的病原性葡萄球菌往往与泌水、痂皮、毛囊炎和腺病有关。二次葡萄球菌感染是很常见的,在特异性皮炎期间通常存在局部水肿和局部腺病。脓疱病可能是一种特异性皮炎的二次感染。
根据皮肤损害活组织检查的形态,特异性皮炎的组织结构从急性棘细胞层水肿性皮炎一直延伸到慢性单纯性苔癣。
细菌位点
金黄色葡萄球菌细胞壁显示出用于表皮和皮肤粘连蛋白以及纤维蛋白原的受体,所谓的粘附素。已经表明,AD患者中,金黄色葡萄球菌的结合是由纤维蛋白原和粘连蛋白介导的。由于AD患者的皮肤缺乏完整的角质层,因此皮肤的粘连蛋白可能未被覆盖,因此增加了金黄色葡萄球菌的依附。在金黄色葡萄球菌细胞和角质细胞之间已经被记录到有纤丝状和无定形结构的痕迹,并且可能会导致形成细菌生物薄膜。已经注意到,金黄色葡萄球菌穿透到细胞间隙中,这说明AD患者的皮肤表面脂质受到损坏(参见Breuer K等人,2002,BritishJournal of Dermatology,147:55-61)。
溃疡
皮肤溃疡,比如糖尿病患者脚溃疡,压迫性溃疡,和慢性静脉性溃疡,是具有组织损毁特征的裂口疮或皮肤损伤,有时伴随着形成脓。
皮肤溃疡可能具有不同的原因,并且影响不同的人群,但是它们都倾向于痊愈极慢,即使可能痊愈的话,而且治疗起来可能十分困难并且昂贵。
细菌类型
表层压迫性溃疡与主要的感染问题无关。好气性微生物在很低的水平下就将沾污压迫性溃疡,但是不会阻碍及时痊愈。但是,深度的全厚度压迫性溃疡可能会被二次感染,并且可能发生骨髓炎。同未坏死的溃疡相比,那些带有坏死组织的压迫性溃疡包含有大量的需氧和厌氧微生物;当厌氧菌侵入组织时,通常会出现恶臭。因此,处理策略是从伤口处清除坏死组织,减少厌氧菌的存在。
压迫性溃疡的感染通常是多微生物感染,并且可能包含酿脓链球菌,肠道球菌,厌氧链球菌,Enterobacteriaece,铜绿假单胞菌,脆弱拟杆菌和金黄色葡萄球菌。
创伤类型
阶段I压迫性溃疡:完整皮肤的不可漂白的红斑被认为预示着皮肤溃疡的病变。
阶段II压迫性溃疡:发生局部皮肤厚度损伤,包括表皮和/或真皮。溃疡是表层的,在临床上表现为擦破、水泡、或浅的溃疡龛。因为表皮可能会被擦破、水泡、浅溃疡龛遮断,所以溃疡应该被认为是二次感染的征兆。
阶段III:全厚度皮肤的损伤,包括皮下组织损害或坏死,其可能会向下扩展到,但不通过下层筋膜。溃疡在临床上表现为深的溃疡龛,其中存在或者不存在相邻组织的破坏。
阶段IV:全厚度皮肤损伤,大范围的破裂,组织坏死,或肌肉、骨骼、或下部结构,如腱或关节囊的损害。
细菌位点
在创伤中可能会存在3种微生物状态:玷污、集群和感染。玷污的特征是微生物只单纯地存在于伤口中而没有增殖。人们通常认为,所有的创伤,不管其病原学如何都是被沾污的。集群的特征是在伤口中存在微生物并且微生物有增殖,但是没有寄主反应。集群是慢性创伤如静脉曲张性溃疡和压迫性溃疡中常见的状况,不一定会延误痊愈的过程。当细菌侵入健康组织并且继续增殖到它们的存在和副产物会引起或控制宿主免疫应答的程度时,这种微生物状态被称为感染。感染典型的体征和症状包括局部红色,疼痛和发胀,发烧以及伤口渗出液的量和特性发生变化。
肺部感染
本发明的化合物也适用于治疗具有肺部传染性疾病的患者,它是通过给予患者本发明的化合物并用其波长能导致该化合物产生抗微生物作用的光来照射(即光照)肺来实现的。肺部感染可能由许多细菌属和种引起,其包括结核分枝杆菌(肺结核),假单胞菌属(囊性纤维化患者死亡的主要原因),链球菌,肺炎葡萄球菌,克雷白菌属,弓型体属,等。肺部感染也可能由许多病毒株和机会病原体(真菌,寄生虫)引起。由于肺部病原体越来越耐典型的抗生素疗法,因此光动力学疗法提供了一种选择性的用于消除这些有害生物的方法。
本发明的化合物可以通过多种方式施用到肺部。例如,所述化合物可以通过呼吸道施用(即气管内、支气管内、或肺泡内)或通过胸部体壁施用。光源可以同样借助于例如可弯曲的纤维光学制品通过这些途径施加。光照/辐射可以对着肺的基部,肺的顶端或同时对着它们。
其他的适应症
本发明的化合物也适用于以下适应症的治疗性和/或预防性治疗:烧伤点和皮肤移植处的感染;耳炎(耳感染),细菌性结膜炎及其他眼睛感染,牙周炎及其他牙齿感染,以及在外科操作过程中暴露的骨骼感染。
因此,本发明的另一方面,提供以下内容:
(i)本发明化合物在制备用于光动力学疗法的药物方面的用途;
(ii)本发明的化合物在制备用于消灭和/或防止微生物,如细菌、酵母菌、真菌和病毒生长的药物方面的用途(例如,所述药物可以用来防止或降低病原体扩展或转移到其他对象,比如患者,护工,等身上);
(iii)本发明的化合物在制备用于治疗性和/或预防性治疗皮肤感染的药物方面的用途;
(iv)本发明的化合物在制备用于治疗性和/或预防性治疗肺感染的药物方面的用途;
(v)本发明的化合物在制备用于治疗和/或预防性治疗伤口感染和/或溃疡的药物方面的用途;
(vi)一种治疗需要用光动力学疗法试剂治疗的患者的方法,其包括给予患者本发明的化合物并辐射/照射该化合物;和
(vii)一种用于防止伤口感染的方法,其包括使伤口与本发明的化合物接触,并照射/辐射该化合物(以便生成反应活性氧物种)。
使用中,本发明的光敏化合物被用光动力学疗法领域已知的传统方法照射/辐射,即活化。优选,该化合物在400nm-800nm的波长下照射/辐射。更优选,对化合物的照射/辐照波长相当于卟啉的一个或多个吸收窗,即在约417nm(索瑞氏带),485nm,515nm,550nm,590nm和650nm处。最优选,该化合物在约417nm的波长下照射/辐射。
最佳波长将取决于具体的化合物和它将要应用的适应症。例如,对于脓疱病来说,由于创伤处颜色,优选波长为510-560nm。对于裂口创伤来说,优选波长为560-700nm,为了将血红蛋白的活化减到最小,优选朝向较高的波长(最低在690nm)。
本领域的技术人员将会理解,在施用本发明的化合物后,光照/辐射可以在各种时点进行。通常,在施用后5分钟到24小时之间照射/辐射所述化合物,例如,在5分钟-2小时之间或在10分钟-1小时之间。最佳的光照时间可以通过实验确定。
当本发明的化合物施用于皮肤上时,可以选择光的波长以便控制穿透深度。例如,为了深度穿透,优选较长的波长。为了控制穿透深度,光强度和总的光照量也可以变化。
优选,光动力学疗法试剂只穿透角质层。
同样,化合物暴露于光照/辐射下的最佳持续时间将取决于具体的化合物和它要应用的适应症。但是,通常,光照时间在1-30分钟之间,更优选5-20分钟,例如10分钟。
光照/辐射的总量将根据要治疗组织的治疗和位置不同而变化。通常,光照/辐射的量在10-1000J/cm2之间,优选10-350J/cm2。
适当的光源包括德国Waldmann AG公司的PDT 450L,PDT 650L和PDT 1200灯。或者,可以使用白光对化合物进行活化。
本发明的化合物也可以用来体外消灭微生物。因此,本发明的另一方面,提供包含有根据本发明第一和/或第二方面化合物的消毒液。该溶液也可以呈洗手液形式或在使用前要稀释的浓缩液形式。
优选,本发明的化合物在溶液中的存在浓度为1-100μg/ml。
优选,该溶液另外包括表面活性试剂或表面活性剂。适当的表面活性剂包括阴离子表面活性剂(如脂肪族的磺酸盐),两性和/或两性离子表面活性剂(如脂肪族季铵、磷_和锍_化合物的衍生物)和非离子型表面活性剂(如含有环氧烷的脂族醇,酸,酰胺或烷基酚)。通常,表面活性剂的存在浓度为0.5-5重量%。
本发明的消毒液特别适合用于医院环境。例如,消毒液可以用来对手术器械和外科手术室表面,以及手术室工作人员的手和手套消毒。另外,所述消毒液可以在手术过程中使用,例如对暴露的骨骼进行消毒。在所有情况下,所述溶液都将施用于要消毒的表面上,然后照射/辐照以便产生反应性氧物种(参见上文)。
因此,本发明的另一方面,提供一种体外消灭微生物的方法,其包括使将要被消灭的微生物与本发明的化合物接触,并照射/辐照该化合物。
现在将通过实施例,并参考附图来描述本发明优选的非限定性实施方案,其中:
图1示出皮肤结构简图。
图2示出(A)金黄色葡萄球菌BAA-44细胞和(B)大肠杆菌ATCC25922细胞的生长抑制率(%),这两种细胞用白光(150mW/cm2)照射0或30分钟,随后预温孵5分钟,含有的试验化合物浓度为3μM。
图3示出在用浓度为0.1μM的试验化合物培养并用光(光毒性,即光动力学活性)照射或在没有光照(黑暗毒性)条件下,(A)金黄色葡萄球菌BAA-44和(B)大肠杆菌ATCC 25922细胞的细菌存活率(细胞数)。
图4示出在不同剂量下,(A)“化合物8”和(B)“化合物10”对于金黄色葡萄球菌BAA-44的光动力学活性(空棒)和黑暗毒性(有阴影的棒)。
图5示出在有和没有用光源(236,Waldmann)光照的条件下,叠氮化钠(50mM)和D2O在用化合物10培养的人体皮肤成纤维细胞(NHDF)上的作用。
三角形/实线:化合物10+PBS缓冲剂+光;
正方形/实线:化合物10+D2O+光;
圆形/实线:化合物10+叠氮化钠+光;
三角形/虚线:化合物10+PBS缓冲剂w/o光;
正方形/虚线:化合物10+D2O w/o光;
圆形/虚线:化合物10+叠氮化钠w/o光(n=3,平均值±标准)。
图6示出在用化合物10重复处理后没有对金黄色葡萄球菌BAA-44产生抗药性积累。所示数据为平均值,具有9 5%的置信区间误差线。
图7示出9次暴露于用化合物10进行的PDT处理的细胞株和首次用于实验的未处理的细胞株的存活率比较。
图8示出在不同剂量下,化合物8对于人体成纤维细胞(有阴影的棒)和金黄色葡萄球菌BAA-44(空棒)的毒性。
图9示出236光源(Waldmann)的尺寸图。
图10示出用蓝光在(A)15mW/cm2和(B)150mW/cm2下照射各种不同的时间后10μM化合物10的光致退色情况。
图11示出化合物10配制成(A)固体,(B)在水中和(C)在PBS中的化学稳定性。
图12示出化合物10在PBS缓冲剂中21天后的稳定性(通过HPLC测定)的3D图。
图13示出(A)化合物1,(B)化合物8,(C)化合物12和(D)化合物10的各种制剂在8周后的稳定性。
图14示出(A)化合物10和(B)化合物8的各种制剂在17周后的延长稳定性。
图15示出在用(A)溶酶体-特异性染料LysoTracker Green(绿色)和(B)线粒体-特异性染料-若丹明G6(红色)共染后,培养的NHDF细胞的细胞内光动力学分布。
图16示出在用(A)线粒体-特异性若丹明G6和(B)溶酶体-特异性染料LysoTracker Green共染后,用1μM化合物10培养1小时后的NHDF的细胞内光动力学分布。化合物10的光动力学局限在核外,而且,用线粒体-特异性若丹明G6进行共染导致化合物10和线粒体光动力学的共定位。共定位消失在黄光动力学作用中。用溶酶体-特异性染料LysoTracker Green进行共染导致化合物10(红色)和溶酶体光动力学(green)的不同定位(图16B)。共定位由黄色光动力学表示。
实施例
实施例A:示例化合物的合成
物质和方法
核磁共振(NMR)测定
在Bruker B-ACS60(300MHz)仪器上,使用TMS作为内标记录质子核磁共振谱。在指明的溶剂中,给出的化学位移以ppm为单位,偶合常数的单位是Hz。用于NMR的一些缩写:单峰(s),宽单峰(bs),双峰(d),三重峰(t),四重峰(q),五重峰(quint),多重峰(m)。
化学试剂
所有的溶剂和试剂都从Aldrich,Fluka,Merck和Lancaster公司购买,使用时不进行进一步的纯化。
根据C.Brucker等人在J.Porphyrins Phthalocyanines,2,455(1998)中所述制备二吡咯甲烷。
色谱
柱色谱是使用硅胶(Merck Silicagel 60,Fluka 60,0.040-0.063mm)和Sephadex LH-20(Pharmacia)进行的。用于色谱的所有溶剂(Synopharm)都是工艺纯的(technical pure)。
缩写
DDQ:2,3-二氯-5,6-二氰-对苯醌
DMF:N,N-二甲基甲酰胺
TFA:三氟乙酸
试验化合物的合成路线
合成以下试验化合物:
本发明的示例化合物
化合物6,8-10,12,23,25,28,31和32。
参考化合物(用作对照)
化合物1,3,16,19,26,29,33,36,37,39,41和46-51。
化学中间体
化合物2,4,5,7,11,13-15,17,18,20-22,24,27,30,34,35,38,40和42-45。
化合物1
5,10,15,20-四-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉四氯化物
在50℃下,在30分钟内,向剧烈搅拌的5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(50mg,0.07mmol)和K2CO3(230mg,1.7mmol)的DMF(20mL)悬浮液中滴加(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(0.27g,1.05mmol)的DMF(5mL)溶液。混合物在50℃搅拌15小时。减压脱除DMF之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(1升)洗涤之后,所述垫用乙酸洗脱。将洗脱液蒸发溶剂之后,得到的残余物通过色谱法在Sephadex LH20柱(2.5X40厘米)上,用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱纯化。将回收的物质溶于最小体积的甲醇中并使溶液通过短(3.5X20厘米)的阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)柱。回收的四氯化物盐在高真空下干燥,得到紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):2.35-2.50(bs,8H),3.25-3.35(bs,36H),3.65-3.75(bs,8H),4.35(m,8H),7.30,8.10(2 x d,3J8.5Hz,16H),8.80-9.00(bs,8H).
化合物2
5,10,15-三-(4-羟基苯基)-20-(4-十一烷氧基-苯基)-卟啉
在50℃下,在30分钟内,向剧烈搅拌的5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(400mg,0.59mmol)和K2CO3(1.0g,7.1mmol)的DMF(75mL)悬浮液中滴加1-溴十一烷(0.1mL,0.45mmol)的DMF(10mL)溶液,并将混合物在相同的温度下搅拌1.5小时。滤除K2CO3并减压脱除DMF之后,将得到的残余物溶于二氯甲烷(200mL)中,用水(3X150mL)洗涤,并将溶液干燥(Na2SO4)。减压蒸发溶剂,得到的残余物溶于甲苯∶乙醇(体积比5∶1,大约10mL)中,并通过使用硅胶(Merck 60)柱(5X50厘米)的色谱纯化。该柱先用甲苯洗脱,随后用甲苯∶乙酸乙酯(体积比2∶1)洗脱,通过从适当的馏份中蒸发溶剂回收所需的物质,并在高真空下干燥。得到产物,为紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,d6-丙酮):0.95(t,3J 7.5Hz,3H),1.25-1.55(m,14H),
1.58(quint,3J7.5Hz,2H),1.85(quint,3J7.5Hz,2H),4.16(t,3J7.5Hz,2H),7.20(d,3J 8.1Hz,2H),7.25(d,3J 8.2 Hz,6H),8.00-8.15(m,8H),8.80-9.10(m,8H).
化合物3
5,10,15-三-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-20-(4-十一烷氧基苯基)-卟啉三氯化物
在50℃下,向剧烈搅拌的化合物2(100mg,0.12mmol)和K2CO3(230mg,1.7mmol)的DMF(30mL)悬浮液中加入(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(0.3g,16.6mmol)的DMF(10mL)溶液,并将混合物在此温度下搅拌12小时。减压脱除DMF之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(大约1升)洗涤后,该垫用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。从洗脱液中减压蒸发溶剂之后,得到的残余物通过色谱法在Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)上,用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱纯化。从洗脱液的适当馏份中减压脱除溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。脱除溶剂并在高真空下干燥之后,得到最终产物,为三氯化物盐,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.80(t,3J 7.5Hz,3H),1.15-1.45(m,16H),1.50-1.60(bs,2H),2.25-2.45(bs,6H),3.25-3.35(bs,27H),3.75-3.85(bs,,6H),4.18(t,3J 7.5Hz,2 H),4.40-4.45(bs,6H),7.20-7.40,7.95-8.15(2xm,16H),8.60-9.00(bs,8H).
化合物4
5-(3,5-二甲氧基苯基)-15-十一烷基-卟啉
向搅拌着的二吡咯甲烷(0.62g,4.2mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中加入处于脱气的二氯甲烷(1升)中的3,5-二甲氧基苯甲醛(0.35g,2.1mmol)和月桂醛(0.464g,2.52mmol)。滴加TFA(0.07mL,3.0mmol)。溶液在室温下、在黑暗中、在氩气下搅拌17小时。加入DDQ(2.7g,12mmol)之后,混合物在室温下再搅拌1小时。减压脱除溶剂后,通过用甲苯洗脱的硅胶(Merck 60)柱(400g)色谱对回收的物质进行纯化,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):0.80(t,3J 7.5Hz,3H),1.10-1.25(m,12H),1.40(m,2H),1.75(quint,,3J 7.5Hz,2H),2.45(quint,3J 7.5Hz,2H),3.90(s,6H),4.90(t,3J 7.5Hz,2H),6.80(m,1H),7.35(m,2H),9.00,9.25,9.30,9.50(4xd,,3J 4.7Hz,4x2H),10.15(s,2H).
化合物5
5-(15-十一烷基-卟啉-5-基)-苯-1,3-二醇
在-70℃下,在氩气气氛中,向化合物4(80mg,0.133mmol)的无水二氯甲烷(80mL)溶液中滴加BBr3(5mL,1M的二氯甲烷溶液),混合物在此温度下搅拌1小时,然后升温到室温并搅拌过夜。将混合物冷却到-10℃,并通过加入水(2mL)水解,并搅拌1小时。直接加入NaHCO3(3g)进行中和。混合物进一步搅拌12小时,过滤掉NaHCO3并真空脱除二氯甲烷后,得到的残余物通过用二氯甲烷洗脱的硅胶柱色谱纯化。从适当的合并馏份中蒸发溶剂并将得到的残余物高真空干燥之后,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,d6-丙酮):0.75(t,3J7.5Hz,3H),1.05-1.25(m,12H),1.30-1.40(m,2H),1.45-1.50(m,2H),2.40(quint,3J 7.5Hz,2H),4.90(t,3J 7.5Hz,2H),6.65(m,1H),7.18(m,2H),8.60-8.65,9.00-9.05,9.35-9.40,9.55-9.60(4xm,8H),10.25(s,2H).
化合物6
5-[3,5-双-(3-三甲铵基丙氧基)-苯基]-15-十一烷基-卟啉二氯化物
在50℃下,向剧烈搅拌的化合物5(80mg,0.14mmol)和K2CO3(230mg,1.7mmol)的DMF(30mL)悬浮液中加入(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(0.3g,16.6mmol)。混合物在此温度下搅拌18小时。减压脱除DMF之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(大约1升)洗涤该垫之后,粗产物用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。收集适当的馏份,并在减压蒸发溶剂之后,将得到的残余物通过用正丁醇∶水∶乙酸(5∶4∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。从适当馏份中减压脱除溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。收集洗脱液后,减压脱除溶剂,并将得到的残余物在高真空下干燥,得到二氯化物盐,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CD3OD):0.75(t,3J 7.5Hz,3H),1.05-1.20(m,14H),1.45-1.50(m,2H),2.05-2.15(m,4H),2.15-2.20(m,2H),2.95(s,18H),3.35-3.45(m,4H),3.95(t,3J 7.5Hz,4H),4.55(t,3J 7.5Hz,2H),6.85(m,1H),7.35(m,2H),8.85-8.90,9.15-9.20,(3xm,8H),10.10(s,2H).
化合物7
5,15-双[4-(3-溴丙氧基)-苯基]-卟啉
向搅拌的二吡咯甲烷(0.61g,4.1mmol)和4-(3-溴丙氧基)-苯甲醛(1.03g,4.2mmol)在脱气二氯甲烷(1升)中的溶液中滴加TFA(0.07mL,1.5mmol)。溶液在室温下、在黑暗中、在氩气下搅拌17小时。加入DDQ(2.76g,0.012摩尔)之后,混合物在室温下再搅拌1小时。通过使用二氯甲烷为洗脱剂的硅胶(Fluka 60,100g)过滤后,得到粗产物,用二氯甲烷∶正己烷重结晶,得到纯产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,C6D6):-3.15(2H,s),2.00(quint,3J 7.5Hz,4H),3.30(t,3J7.5Hz,4H),3.90(t,3J 7.5Hz,4H),7.15-7.18,7.95-8.15(2xm,2x4H),9.15-9.20,(m,8H),10.05(s,2H).
化合物8
5,15-双-(4-{3-[(3-二甲氨基丙基)-二甲基铵基]-丙氧基)-苯基)-卟啉二氯化物
将化合物7(200mg,0.27mmol)溶于含N,N,N′,N′-四甲基-1,3-丙二胺(5mL,13,9mmol)的无水DMF(40mL)中,并将溶液在50℃在氩气下搅拌过夜。减压蒸发溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并使溶液通过载于烧结钢(直径3.5cm)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。该垫先用甲醇(约1升)洗脱,随后用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。从适当的馏份中蒸发溶剂后,将得到的粗产物溶于甲醇(5mL)中,并进一步通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)作为洗脱剂的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。洗脱的初镏分是所需的产物。减压脱除溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。从洗脱液中减压脱除溶剂后,残余物用二乙醚结晶,并在高真空下干燥,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):2.20-2.35(m,4H),2.40-2.50(m,4H),2.80(s,12H),3.05(4H,t,3J 7.8,2H),3.25(s,12H),3.45-3.55(bs,4H),3.65-3.75(m,4H),4.30(t,3J 4.2Hz,4H),7.40,8,10(2xd,3J 7.5Hz,2x4H),8.95,9.45(2xd,3J4.2Hz,8H),10.40(s,2H).
化合物9
5,15-双-[4-(3-三乙铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉二氯化物
向化合物7(50mg,0.068mmol)的无水DMF(20mL)溶液中加入三乙胺(4.7mL,0.034摩尔,500当量)。混合物在60℃搅拌2 4小时。减压脱除溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5cm)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(约1升)洗涤后,该垫用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。从洗脱的馏份中减压蒸发溶剂之后,将得到的粗产物溶于甲醇(5mL)中并通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。从适当的馏份中减压脱除溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并使溶液通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米),蒸发溶剂后,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CD3OD):1.25(m,18H),2.13(m,4H),
CH2NCH2(16H)的信号处于3.00-3.40区域,是被溶剂性后覆盖的
多重峰的部分,4.15(t,4H,3J=7.5Hz),7.36(d,4H,3J=7.5Hz),8.15(d,4H,3J=7.5hz),9.05(d,4H,3J=7.5Hz),9.54(d,4H,3J=7.5Hz),10.45(s,2H)
化合物10
5,1 5-双[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉二氯化物
将化合物7(300mg,0.41mmol)的无水DMF(50mL)溶液转移到100mL高压釜中。加入三甲胺(4.5g)后,混合物在50℃下搅拌16小时。减压蒸发溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并使溶液通过载于烧结钢(直径3.5cm)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(约1升)洗涤后,该垫用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。从适当的馏份中蒸发溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。得到两个馏份,其中第一洗脱液是所需的产物。减压脱除溶剂后,将得到的残余物再溶解于甲醇(5mL)中并使溶液通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20cm)。减压蒸发溶剂后,残余物用甲醇∶二乙醚结晶,并在高真空下干燥,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CD3OD):2.40-2.60(m,4H),3.30-3.25(bs,18H),3.75-3.80(m,4H),4.40(t,3J7.5H2,4H),7.40,8.20(2xd,3J8.5Hz,8H),9.05,9.50(2xd,3J4.5Hz,8H),10.45(s,2H).
化合物11
5,15-双-[3-(3-溴丙氧基)-苯基]-卟啉
向搅拌的二吡咯甲烷(1.22g,8.2mmol)和3-(3-溴丙氧基)-苯甲醛(2.06g,8.2mmol)在脱气二氯甲烷(2升)中的溶液中滴加TFA(0.14mL,3mmol)。溶液在室温下、在黑暗中、在氩气下搅拌17小时。加入DDQ(5.4g,0.024摩尔)之后,混合物在室温下再搅拌1小时。减压脱除溶剂后,将得到的残余物溶于二氯甲烷(5mL)中并通过用二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶(Fluka 60)柱(300g),得到粗产物,用二氯甲烷∶甲醇结晶,得到纯物质,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):-3.20(2H,s),2.40(quint,3J 7.5Hz,4H),3.65(t,3J7.5Hz,4H),4.25(t,3J 7.5Hz,4H),7.20-7.25,7.60-7.65,7.75-7.80(3xm,8H),9.05,9.25,(2xd,3J 4.2Hz,8H),10.25(s,2H).
化合物12
5,15-双-[3-(3-三甲铵基丙氧基)-苯基]-卟啉二氯化物
将化合物11(400mg,0.543mmol)的无水DMF(50mL)溶液转移到100mL高压釜中。加入三甲胺(6.3g)后,混合物在50℃下搅拌8小时。减压蒸发溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并使溶液通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。该垫用甲醇(约1升)洗涤后,用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱,得到馏份,其在减压蒸发溶剂后,形成固体残余物。将其溶于甲醇(5mL)中并通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。从该柱得到两个馏份,其第一馏份是所需的产物。减压脱除溶剂之后,把得到的残余物溶于甲醇(5mL)中。使溶液通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米),减压脱除溶剂,粗产物用甲醇∶二乙醚结晶,得到紫色晶体,将其在高真空下干燥。
1H-NMR:
δH(300Mz,CD3OD):2.30-2.35(m,4H),3.15(s,18H),3.95-4.05(m,4H),4.20-4.25(m,4H),7.40-7.45,7.65-7.70,7.80-7.85(3xm,8H),9.00-9.05,9.40-9.45,(2xm,8H),10.40(m,2H).
化合物13
5,15-双-(4-羟基苯基)-10,20-双-(4-十一烷氧基-苯基)-卟啉
在用于合成化合物2的色谱分离过程中,从柱子中洗脱的第三馏份,其特征在于为5,15-双-(4-羟基苯基)-10,20-双-(4-十一烷氧基-苯基)-卟啉
1H-NMR:
δH(300MHz,CDCl3):-2.88(2H,s),0.85(t,3J 7.5Hz,6H),1.20-1.40(m,28H),1.55(br m,4H),1.80(quint,3J 7.5Hz,4H),4.15(t,3J 7.5Hz,4H),6.65,7.15(d,3J 8.1Hz,8H),7.80,8.00(d,3J 8.1Hz,8H),8.75-8.80(m,8H).
在d-乙酸中通过1H-13C-2D-NMR确认其为反式区域异构体几何结构。
化合物14
5,10-双-(4-羟基苯基)-15,20-双-(4-十一烷氧基-苯基)-卟啉
在用于合成化合物2的色谱分离过程中,从柱子中洗脱的第四馏份,其特征在于为5,10-双-(4-羟基苯基)-15,20-双-(4-十一烷氧基-苯基)-卟啉。
1H-NMR:
δH(300MHz,CDCl3):-2.80(2H,s),0.90(t,3J 7.5Hz,6H),1.20-1.60(m,28H),1.65(quint,3J 7.5Hz,4H),2.00(quint,3J 7.5Hz,4H),4.22(t,3J 7.5Hz,4H),7.15(d,3J 8.1Hz,4H),7.25(d,3J 8.2Hz,4H),8.10(d,3J 8.2Hz,4H),8.15(d,3J 8.2Hz,4H),8.80-8.90(m,8H).
在d-乙酸中通过1H-13C-2D-NMR确认其为顺式区位异构体几何结构。
化合物15
5,10,15-三-[4-(3-溴-丙氧基)-苯基]-20-(4-十一烷氧基苯基)-卟啉
在氩气气氛下,在K2CO3(500mg)和1,3-二溴丙烷(1.02mL,10mmol)的存在下,将化合物2(200mg,0.24mmol)溶于绝对无水DMF(40mL)中。混合物在80℃下加热过夜,根据上述化合物2中所给出的步骤进行后处理。产物通过用己烷∶乙酸乙酯(体积比5∶1)洗脱的硅胶(Merck 60)柱色谱纯化。
1H-NMR:
δH(300MHz,CDCl3):-2.75(2H,s),0.85(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.45(m,14H),1.50(quint,3J 7.5Hz,2H),1.90(quint,3J 7.5Hz,2H),2.40(quint,3J 7.4Hz,6H),3.65(t,3J 7.4Hz,6H),4.16(t,3J 7.5Hz,2H),4.25(t,3J 7.5Hz,6H),7.18-7.20(m,8H),8.00-8.05(m,8H),8.75-8.85(m,8H).
化合物16
5,10,15-三-[4-(3-三乙铵基-丙氧基)-苯基]-20-(4-十一烷氧基苯基)-卟啉三氯化物
将化合物15(200mg,0.17mmol)溶于含三乙胺(5mL,34.5mmol,208当量)的无水DMF(40mL)中。混合物加热到50℃,加热48小时。真空脱除DMF后,将得到的残余物溶于甲醇中并通过硅胶(Merck 60)柱色谱纯化,先用甲醇∶水∶乙酸(体积比2∶1∶3)洗脱,然后用乙酸∶吡啶(体积比1∶1)。从适当的馏份中真空脱除溶剂后,得到粗产物,将其溶于甲醇∶NaCl水溶液(1M)(5mL,体积比1∶1)中。将混合物搅拌30分钟并通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(200mL)洗涤该垫之后,将其用甲醇∶水∶乙酸(体积比2∶1∶3)洗脱。从适当的合并馏份中蒸发溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇(2mL)中并滴加二氯甲烷(5mL)。通过过滤收集沉淀出来的白色凝胶,高真空脱除溶剂。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.90(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.45(m,43H),1.45-1.65(bs,2H),2.25-2.40(bs,6H),3.35-3.45(bs,24H),3.50-3.60(bs,,6H),4.25(t,3J 7.5Hz,2H),4.40-4.45(bs,6H),7.25-7.40,8.10-8.20(m,16H),8.80-9.10(bs,8H).
化合物17
5-[4-(3-羟基苯基)]-15-(3-十一烷氧基苯基)-卟啉
溶解5,15-双-(3-羟基苯基)-卟啉(Wiehe,A.,Simonenko,E.J.,Senge,M.O.和Roeder,B.,Journal of Porphyrins andPhthalocyanines,5,758-761(2001))(86mg,0.17mmol),并将K2CO3(250mg,7.1mmol)悬浮在DMF(40mL)中.在50℃下,在30分钟内,向剧烈搅拌的混合物中滴加1-溴代十一烷(0.04mL,0.17mmol)的DMF(5mL)溶液,将混合物在此温度下加热1小时。通过过滤脱除K2CO3后,高真空脱除DMF。得到的残余物得到通过用正己烷∶乙酸乙酯(体积比10∶1)洗脱的硅胶(Merck 60)柱色谱纯化。收集第二个馏份,高真空干燥得到产物。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):-3.15(2H,s),0.75(t,3J 7.5Hz,3H),1.10-1.30(m,14H),1.35(m,2H),1.80(quint,3J 7.5Hz,2H),4.05(t,3J 7.5Hz,2H),6.85-6.90,7.20-7.25,7.35-7.45,7.50-7.65,7.75-7.80(5xm,8H),8.85,8.95,9.10,9.20(4xd,3J 4.9Hz,4x2H),10.15(s,2H).
化合物18
5,10,15-三-(3-羟基苯基)]-20-(3-十二烷氧基苯基)-卟啉
将3-羟基苯甲醛(1.8g,14.8mmol,3当量)和3-十二烷氧基苯甲醛(1.35g,4.9mmol,1当量)溶于乙酸(145mL)和硝基苯(98mL,960mmol)的混合物中并加热到120℃。一次性加入吡咯(1.35mL,19.6mmol,4当量),并将混合物在120℃搅拌1小时。冷却到室温后,在50℃下真空脱除溶剂。通过用甲苯作为洗脱剂的硅胶柱(500g)色谱分离产物。从该柱得到的第五个馏份是所需的产物,并将其用甲苯洗脱的用较少量(200g)硅胶的色谱再进行分离。蒸发溶剂后得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CDCl3):0.64(t,3H,3J 6.8Hz),0.94-1.15(m,16H),1.25(bs,2H),1.62(bs,2H),3.90(bs,2H),6.33-6.95(m,8H),7.08-7.60(m,8H),8.20-8.47(m,4H),8.51-8.70(m,4H)
化合物19
5-{3-[双-(2-二乙基氨基乙基)-氨基丙氧基]-苯基)-15-(3-十一烷氧基-苯基)-卟啉
将化合物17(50mg,0.065mmol)溶于含有N,N,N′,N′四乙基二乙三胺(1mL,39mmol)的THF(10mL)中并将混合物在室温下搅拌4天。蒸发溶剂后,把残余物溶于乙醚(20mL)中并用水(5X30mL)洗涤溶液。将有机相干燥(Na2SO4),并在高真空下浓缩。混合物通过柱色谱(硅胶,Merck60)纯化,先用正己烷∶乙酸乙酯(体积比5∶1)洗脱,随后用正己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺(体积比10∶10∶1)洗脱。收集适当的馏份后,减压脱除溶剂,残余物通过用乙醚∶甲醇结晶,得到纯产物。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):0.80(t,3J 7.5Hz,3H),0.9(t,3J 7.5Hz,12H),1.20-1.40(m,14H),1.45(quint,3J 7.5Hz,2H),1.80(quint,3J 7.5Hz,2H),1.95(quint,3J 7.5Hz,2H),2.40-2.60(m,16H),2.65(t,3J 7.5Hz,2H),4.10(t,3J 7.5Hz,2H),4.20(t,3J 7.5Hz,2H),7.30-7.40,7.55-7.65,7.75-7.80(3xm,8H),9.10-9.15,9.20-9.25(2xm,2x4H),10.15(s,2H).
化合物20
5-[4-(3-溴-丙氧基)-苯基]-15-(4-十二烷氧基苯基)-卟啉
向搅拌的二吡咯甲烷(0.31g,2.1mmol)、4-(3-溴丙氧基)-苯甲醛(0.27g,1.1mmol)和4-十二烷氧基苯甲醛(0.32g,1.1mmol)在脱气二氯甲烷(2升)中的溶液中滴加TFA(0.035mL,1.5mmol)。溶液在室温下、在黑暗中、在氩气下搅拌17小时。加入DDQ(1.38g,6mmol)之后,混合物在室温下再搅拌1小时。通过用甲苯作为洗脱剂的硅胶(Merck60,400g)柱色谱纯化,得到和化合物7(第三馏份)在一起的产物(第二馏份)。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):-3.15(2H,s),0.90(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.40(m,16H),1.55(quint,3J 7.5Hz,2H),1.90(quint,3J 7.5Hz,2H),2.40(quint,3J 7.5Hz,2H),3.75(t,3J 7.5Hz,2H),4.20(t,3J 7.5Hz,2H),4.35(t,3J 7.5Hz,2H),7.20-7.30,8.10-8.15(2xm,8H),9.10-9.15,9.25-9.30(2xm,2x4H),10.20(s,2H).
化合物21
5,10,15,20-四-(3-羟基苯基)-卟啉
将3-羟基苯甲醛(0.910g,7.45mmol)溶于丙酸(50mL)中并加热到140℃。一次性加入吡咯(0.52mL,7.45mmol),并将混合物回流加热2小时。在室温下继续搅拌12小时。真空脱除丙酸,将残余物溶于丙酮中,并通过硅胶柱(250g)色谱纯化,用包含有连续不断增加的乙酸乙酯比例的甲苯洗脱。产物用甲苯∶乙酸乙酯(体积比6∶1)洗脱。真空脱除溶剂,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,d6-丙酮):7.18(d,4H,3J=8.25Hz),7.49(t,4H,3J=8.25 Hz),7.56-7.62(m,8H),8.81(M,8H)
化合物22
5,10,15-三-[4-(3-溴-丙氧基)-苯基]-20-(4-十二烷氧基苯基)-卟啉
向搅拌的吡咯(0.7g,10mmol)、4-(3-溴丙氧基)-苯甲醛(1.8g,7.5mmol)和4-正十二烷氧基苯甲醛(0.725g,2.5mmol)在脱气二氯甲烷(1升)中的溶液中滴加TFA(0.085mL,10mmol)。反应溶液在氩气下、在室温下、在黑暗中搅拌17小时。加入DDQ(6.9g,30mmol)后,反应混合物在室温下再搅拌1小时。减压除去溶剂,并将残余物再溶于甲苯中。在使用甲苯∶正己烷(体积比1∶4)作为洗脱剂的硅胶(Merck 60)柱(3.5×30cm)色谱上纯化,得到粗产物,用甲醇∶二氯甲烷重结晶,得到紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CDCl3):0.90(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.45(m,16H),1.60(quint,3J 7.5Hz,2H),1.90(quint,3J 7.5Hz,2H),2.50(quint,3J 7.4Hz,6H),3.75(t,3J 7.4Hz,6H),4.20(t,3J 7.5Hz,2H),4.35(t,3J 7.5Hz,6H),7.25-7.30(m,8H),8.15-8.30(m,8H),8.80-8.85(m,8H).
化合物23
5-{4-[3-二甲基-(3-二甲基氨丙基)-铵基-丙氧基]苯基}-15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉氯化物
将化合物20(30mg,0.038mmol)溶于含有N,N,N′,N′-四甲基-1,3-丙二胺(156mg,1.2mmol)的THF∶DMF(体积比1∶1,20mL)中并在50℃搅拌18小时。减压蒸发溶剂后,将残余物溶于二氯甲烷中并通过用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱的柱色谱(硅胶:Merck 60)纯化。合并适当的馏份并减压脱除溶剂后,残余物用二氯甲烷∶己烷结晶,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3+1%乙酸):0.85(m,3H),1.20-1.40(m,18H),1.55-1.60(m,2H),1.60-1.65(m,4H),2.10-2.20(bs,8H),3.15-3.25(m,8H),3.75(bs,2H),4.20(bs,2H),4.35(bs,2H),7.15-7.20,8.10-8.15(2xm,8H),8.95-9.00,9.10-9.15,9.25-9.30(3x bs,8H),10.20(s,2H).
化合物24
5,15-双-(3-甲氧基苯基)-10-十一烷基卟啉
在氩气气氛下,向含锂(500mg,71mmol)的50mL烧瓶中加入新近蒸馏的乙醚(15mL)。悬浮液回流1小时,冷却到15℃,并用通过注射器滴加的正十一烷基溴化物(6.58g71mmol)的乙醚(6mL)溶液处理。混合物冷却到7-10℃,5分钟后,当悬浮液变得稍微浑浊并在金属锂上出现亮点后,在30分钟内匀速加入其余的正十一烷基溴化物溶液,同时将内部温度维持在10℃以下。加料结束时,混合物在10℃进一步搅拌1小时。将悬浮液在氩气下过滤脱除过量的锂和溴化锂。
把5,15-双-(3-甲氧基苯基)-卟啉(100mg,0.19mmol)在-50℃在氩气气氛下溶于无水THF(30mL)中。把上述有机锂试剂(5mL)滴加到混合物中。5分钟后,除去冷浴,将混合物升温到室温。在室温下搅拌15分钟后,通过缓慢加入水(2mL)猝灭反应。15分钟后,通过加入DDQ(4mL,0.4mmol,0.1M的THF溶液)将混合物氧化,并进一步搅拌15分钟。混合物通过氧化铝(中性,Brockman级+)过滤,并通过用己烷:二氯甲烷(体积比4∶1)洗脱的硅胶柱色谱纯化。收集初馏分,用甲醇∶二氯甲烷结晶。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):-3.05(bs,2H,s),0.80(t,3J 7.5Hz,3H),1.10-1.20(m,12H),1.25(m,2H),1.70(quint,3J 7.5Hz,2H),2.40(quint,3J 7.5Hz,2H),3.85(s,6H),4.95(t,3J 7.5Hz,2H),7.20-7.23,7.50-7.60,7.65-7.75(3x m,8H),8.85-8.90,9.10-9.15,9.35-9.40(3xm,8H),9.95(s,1H).
化合物25
3-[((3-[(3-{4-[15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉-5-基]-苯氧基-丙基)-二甲基铵基]-丙基}-二甲基铵基)-丙基]三甲基铵三氯化物
将化合物23(20mg,0.022mmol)和(1-溴丙基)-三甲基-溴化铵(26mg,0.1mmol)溶于DMF(15mL)中并在50℃下搅拌过夜。减压蒸发溶剂后,将残余物溶于甲醇(5mL)并施加到硅胶垫(深3厘米)上,先用甲醇(500mL)洗涤,随后用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗涤。蒸发溶剂后,残余物通过柱色谱纯化(硅胶:Merck 60),先用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱,然后用吡啶∶乙酸(体积比1∶1)洗脱。收集洗脱出来的第二个馏份,并真空干燥。将残余物溶于甲醇(2mL)中并通过用正丁醇∶乙酸∶水(5∶1∶4,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。减压脱除溶剂后,残余物在80℃下真空干燥。核磁共振表明,产物中含有小比例的消除产物。
化合物26
5,10,15-三-[4-(3-二乙基氨基-丙氧基)-苯基]-20-(4-十二烷氧基苯基)-卟啉
将化合物22(50mg,0.06mmol)和新近蒸馏的二乙胺(5mL)在氩气下溶于无水DMF(30mL)中。反应混合物在室温下搅拌20小时,然后倾入到乙酸乙酯(50mL)中。混合物用水(4x50mL)洗涤,合并的有机相经干燥(Na2SO4)后,蒸发溶剂得到残余物,该残余物通过用乙酸乙酯∶正己烷∶三乙胺(体积比10∶10∶1)洗脱的硅胶(Merck 60)柱(2.5X30厘米)色谱纯化。酌情合并馏份,减压蒸发溶剂,残余物在高真空下干燥。用二氯甲烷∶正己烷重结晶得到纯产物。
1H-NMR:
δH(300MHz,CDCl3):0.85(t,3J 7.5Hz,3H),1.05(m,18H),1.20-1.45(m,18H),1.55(quint,3J 7.5Hz,2H),2.15(quint,3J 7.5HZ,6H),2.75(quint,,3J 7.4Hz,6H),3.15-3.25(m,12H),4.15(t,3J 7.5Hz,2H),4.25(t,3J 7.5Hz,6H),7.15-7.20(m,8H),8.00-8.05(m,8H),7.95-8.05(m,8H).
化合物27
5,15-双-(3-羟基苯基)-10-十一烷基卟啉
在氩气气氛和-70℃下,向化合物24(95mg,0.14mmol)的无水二氯甲烷(80mL)溶液中滴加BBr3(6mL,1M的二氯甲烷溶液),并将混合物搅拌1小时。将混合物升温到室温,搅拌过夜,然后冷却到-10℃,通过在1小时内加入2mL水进行水解。直接加入NaHCO3(3g)进行中和。混合物进一步搅拌12小时,过滤掉NaHCO3并真空脱除二氯甲烷后,得到的残余物通过用二氯甲烷洗脱的硅胶柱色谱纯化。从适当的合并馏份中脱除溶剂并在高真空下干燥之后,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):-3.05(bs,2H,s),0.85(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.40(m,12H),1.50(m,2H),1.80(quint,3J 7.5Hz,2H),2.55(quint,3J 7.5Hz,2H),5.00(t,3J 7.5Hz,2H),7.15-7.25,7.50-7.60,7.80-7.90(3xm,8H),8.95-9.00,9.20-9.25,9.50-9.60(3xm,8H),10.15(s,1H).
化合物28
5,15-双-[3-(3-三甲铵基-丙氧基))-苯基]-10-十一烷基-卟啉二氯化物
在氩气气氛下,向化合物27(50mg,0.08mmol)的DMF(20mL)溶液中加入K2CO3(100mg,0.72mmol)和(3-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(300mg,1.2mmol),并将混合物在50℃下搅拌18小时。高真空脱除溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(500mL)洗涤该垫之后,对其用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。将适当的合并馏份在高真空下干燥后,把残余物溶于甲醇中并通过用正丁醇∶乙酸∶水(5∶1∶4,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱色谱纯化。蒸发溶剂后,把由洗脱的第一个馏份得到的残余物溶于甲醇中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱,蒸发溶剂后得到纯产物。
1H-NMR:
δH(300Mz,CD3OD):0.85(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.40(m,12H),1.50(m,2H),1.80(m,2H),2.40(bs,4H),2.55(m,2H),3.20(bs,18H),3.65(bs,4H),4.35(bs,4H),5.10(m,2H),7.50-7.55,7.70-7.85(2xm,8H),8.95-9.00,9.25-9.24,9.50-9.70(3xbs,8H),10.15(bs,1H).
化合物29
5,10-双-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-15,20-双-(4-十一烷氧基苯基)-卟啉二氯化物
将化合物14(50mg,0.05mmol)溶解,并把K2CO3(150mg,1.1mmol)悬浮在DMF(30mL)中。在50℃下向剧烈搅拌的混合物中滴加(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(0.3g,16.6mmol)的DMF(10mL)溶液,并将混合物加热18小时。高真空脱除DMF之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5cm)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(大约500mL)洗涤该垫之后,再用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。从适当合并的馏份中蒸发溶剂之后,将得到的残余物通过用正丁醇∶水∶乙酸(5∶4∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化,以进一步与过量的铵盐及其他副产物分离。减压脱除溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。减压蒸发溶剂后,产物在高真空下干燥。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.80(t,3J 7.5Hz,6H),1.15-1.35(m,28H),
1.35-1.45(bs,4H),1.70-1.80(bs,4H),2.30-2.40(bs,4H),3.15-3.30(bs,18H),3.65-3.75(bs,4H),4.00-4.05(m,4H),4.30-4.40(bs,4H),7.00-7.15,7.20-7.30,7.80-95,7.95-8.15(4 xm,4x4H),8.60-9.00(bs,8H).
化合物30
5,10,15-三-(3-羟基苯基)]-20-(3-十一烷氧基苯基)-卟啉
将吡咯(1.31g,19.6mmol)一次性加入到3-羟基苯甲醛(1.8g,14.8mmol)、3-十一烷氧基苯甲醛(1.36g,4.9mmol)在预热到130℃的乙酸(145mL)和硝基苯(118g,960mmol)中的混合物中,并把混合物在120℃下搅拌1小时。将混合物冷却并高真空脱除溶剂。将残余物溶于二氯甲烷(5mL)中并通过用己烷∶甲苯(体积比4∶1)洗脱的硅胶(Merck 60)柱色谱纯化。从洗脱液中减压脱除溶剂后,得到产物,并将得到的残余物真空干燥。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):0.75-0.80(m,3H),1.05-1.35(m,14H),1.40-1.50(m,2H),1.75-1.85(m,2H),3.90-4.10(m,2H),6.90-7.70(m,16H),8.45-8.80(m,8H).
化合物31
5-{4-[3-二甲基-(3-三甲铵基丙基)-铵基-丙氧基]苯基}-15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉二氯化物
将化合物23(50mg,0.055mmol)用处于无水DMF(30mL)中的碘甲烷(5mL,80mmol)溶解,混合物在40℃下搅拌3小时。蒸发溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5cm)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。该垫用甲醇(大约1升)洗涤后,先用二氯甲烷∶甲醇(体积比2∶3,500mL)洗脱,然后用乙酸∶水∶甲醇(体积比3∶1∶2)洗脱。从适当的合并馏份中脱除溶剂后,将得到的残余物溶于乙酸中并通过用乙酸洗脱的Sephadex LH-20柱色谱纯化。从适当合并的馏份中蒸发溶剂并将得到的残余物在高真空下干燥后,将残余物溶于甲醇(5mL)中并通过阴离子交换树脂(AmberLite IRA 400,氯化物形式)小的柱(3.5X20厘米)。从洗脱液中蒸发溶剂后,产物在高真空下干燥。
化合物32
5-[4-(3-二甲基癸基-铵基丙氧基)-苯基]-15-{4-[3-二甲基-(3-二甲基氨丙基)-铵基丙氧基]-苯基}-卟啉二氯化物
将化合物23(50mg,0.068mmol)溶于含有N,N,N′,N′-四甲基-1,3-丙二胺(354mg,1.36mmol)和N,N-二甲基癸胺(1g,2.72mmol)的DMF∶THF(30mL,体积比1∶1)中,混合物在50℃搅拌过夜。减压蒸发溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇(10mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(大约500mL)洗涤该垫之后,用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。合并洗脱的头两个馏份,并在减压蒸发溶剂之后,将得到的残余物溶于甲醇中,并通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。从洗脱的第二个馏份中减压脱除溶剂后,将残余物溶于甲醇(5mL)中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。把洗脱液蒸干,将得到的残余物高真空干燥,得到产物。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.80(m,3H),1.05-1.25(m,10H),1.25-1.40(bs,2H),1.80-1.90(bs,4H),2.15-2.30(bs,2H),2.80-3.60(m,20H),3.80-3.95(bs,4H),7.05-7.15,7.85-8.00(2xm,2x4H),8.75-8.90,9.20-9.35(2xbs,2x4H),10.15(bs,2H).
化合物33
5,10,15-三-[3-(3-三甲基-铵基丙氧基)-苯基]-20-(3-十一烷氧基-苯基)-卟啉三氯化物
将化合物30(100mg,0.12mmol)溶解,并把K2CO3(230mg,1.7mmol)悬浮在DMF(30mL)中。在50℃下,在30分钟内,向剧烈搅拌的混合物中滴加(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(0.3g,16.6mmol)的DMF(10mL)溶液,并将混合物加热18小时。减压脱除DMF之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5cm)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(大约500mL)洗涤该垫之后,用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。从适当的合并馏份中减压蒸发溶剂之后,残余物通过用正丁醇∶水∶乙酸(5∶4∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40cm)柱色谱纯化。从洗脱液中减压脱除溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇中并使该溶液通过阴离子交换树脂(AmberLite IRA400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。从洗脱液中蒸发溶剂,得到产物,将其在高真空下干燥。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.75-0.80(m,3H),1.00-1.40(m,18H),1.60-1.80(bs,2H),2.25-2.40(bs,6H),3.29(bs,27H),3.40-3.60(m,6H),3.90-4.00(m,2H),4.05-4.25(m,6H),7.10-7.20,7.25-7.40,7.60-7.80,7.80-7.90(4xm,16H),8.70-9.00(bs,8H).
化合物34
5,15-双-(3-羟基苯基)-卟啉
该化合物是根据以下文献制备的:Wiehe,A.,Simonenko,E.J.,Senge,M.O.和Roeder,B.,Journal of Porphyrins andPhthalocyanines,5,758-761(2001)。
化合物35
5,10,15-三-(4-羟基苯基)-20-(4-十四烷氧基-苯基)-卟啉
溶解5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(170mg,0.25mmol),并将K2CO3(0.65g,mmol)悬浮在DMF(30mL)中。在50℃下,在30分钟内,向剧烈搅拌的混合物中滴加1-溴十四烷烃(0.1mL,0.45mmol)的DMF(10mL)溶液,并将混合物加热1.5小时。蒸发溶剂后,将残余物溶于甲苯∶乙醇(体积比1∶1,大约5mL),并通过用甲苯洗涤的硅胶(Merck60)柱(5X25厘米)色谱纯化。洗脱最初的3个馏份,之后用甲苯∶乙酸乙酯(体积比2∶1)继续洗脱。收集洗脱的第五个化合物,蒸发溶剂,将残余物高真空干燥,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,d6-丙酮):0.85(t,3J 7.5Hz,3H),1.15-1.55(m,20H),1.45(quint,3J 7.5Hz,2H),1.75(quint,3J 7.5Hz,2H),4.10(t,3J 7.5Hz,2H),7.20(d,3J 8.5Hz,2H),7.25(d,3J8.5Hz,6H),8.00-8.15(m,8H),8.80-9.10(m,8H).
化合物36
5,10,15-三-[4-(3-三甲基-铵基丙氧基)-苯基]-20-(4-十四烷氧基苯基)-卟啉三氯化物
化合物2的正十四烷氧基同系物,类似于上述化合物2那样制备,但是使用1-溴代十四烷烃代替1-溴代十一烷烃(50mg,0.057mmol),溶解(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(210mg,0.8mmol),并将K2CO3(230mg,1.7mmol)悬浮在DMF(20mL)中。混合物在此温度下剧烈搅拌18小时。减压脱除DMF之后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过载于烧结钢(直径3.5厘米)上的硅胶垫(深2厘米)过滤。用甲醇(大约500mL)洗涤该垫之后,粗产物用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。从适当合并的馏份中蒸发溶剂之后,将得到的残余物通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化,以便与过量的铵盐及其他杂质分离。洗脱并从适当的馏份中脱除溶剂后,将得到的残余物溶于甲醇(5mL)中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。减压脱除溶剂,并将得到的残余物在高真空下干燥,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.75(t,3J 7.5Hz,3H),0.95-1.25(m,22H),1.50-1.65(bs,2H),2.20-2.40(bs,6H),3.05-3.15(bs,27H),3.45-3.60(bs,6H),3.60-3.80(bs,2H),4.05-4.25(bs,6H),6.80-7.25,7.65-8.05,(2xm,16H),8.45-8.95(bs,8H).
化合物37
5-(4-{3-[2,4,6-三-(二甲基氨甲基)-苯氧基]-丙氧基}-苯基)-15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉
在2,4,6-三-(二甲基氨甲基)-苯酚(1mL,3.7mmol)存在下,将化合物20(50mg,0.063mmol)溶于DMF(20mL)中,并在50℃下搅拌过夜。蒸发溶剂后,残余物用二氯甲烷∶甲醇结晶,以脱除过量的胺。过滤后,把卟啉再溶于二氯甲烷中并通过用二氯甲烷洗涤的硅胶(Merck 60)柱色谱纯化。减压蒸发溶剂,残余物用二氯甲烷∶甲醇重结晶,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,CDCl3):-3.15(2H,s),0.85(t,3J 4.5Hz,3H),1.20-1.40(m,18H),1.55(quint,3J 4.5Hz,2H),1.90(quint,3J 4.5Hz,2H),2.20(s,18H),2.55(t,3J 5.2Hz,2H),3.45(s,6H),4.15(t,3J 5.5Hz,2H),4.20(t,3J 5.5Hz,2H),4.35(t,3J 7.5Hz,2H),6.85(2xs,2H),7.20-7.30,8.10-8.15(2xm,8H),9.00-9.05,9.25-9.30(2xm,2x4H),10.20(s,2H).
化合物38
5,10,15-三-(4-羟基苯基)-20-(4-癸氧基-苯基)-卟啉
溶解5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(100mg,0.15mmol),并将K2CO3(230mg)悬浮在DMF(30mL)中。在70℃下,在30分钟内,向剧烈搅拌的混合物中滴加1-溴癸烷(0.016mL,0.11mmol)的DMF(10mL)溶液,并将混合物搅拌1.5小时。蒸发溶剂后,将残余物溶于甲苯∶乙醇(体积比1∶1,大约3mL),并通过使用甲苯作为洗脱剂的硅胶(Merck 60)柱(150g)色谱纯化。洗脱最初的3个馏份后,再用甲苯∶乙酸乙酯(体积2∶1)洗脱所述柱,并收集洗脱的第5个馏份,脱除溶剂,残余物经高真空干燥,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,d6-丙酮):0.95(t,3J 7.5Hz,3H),1.25-1.55(m,12H),1.55(quint,3J 7.5Hz,2H),1.85(quint,3J 7.5Hz,2H),4.15(t,3J 7.5Hz,2H),7.20(d,3J 8.5Hz,2H),7.25(d,3J 8.5Hz,6H),8.00-8.15(m,8H),8.80-9.10(m,8H).
化合物39
5,10,15-三-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-20-(4-癸氧基苯基)-卟啉三氯化物
溶解化合物38(50mg,0.061mmol)和(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(210mg,0.8mmol)并把K2CO3(230mg,1.7mmol)悬浮在DMF(20mL)中。剧烈搅拌的反应混合物在50℃下加热18小时。蒸发溶剂之后,将粗产物溶于甲醇中并通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱纯化。脱除溶剂后,将残余物溶于甲醇中并使该溶液通过Amberlite IRA 400,(氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。蒸发溶剂,产物在高真空下干燥,得到紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.90(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.40(m,12H),1.45-1.60(bs,2H),1.80-1.90(bs,2H),2.45-2.55(bs,6H),3.25-3.35(bs,27 H),3.75-3.85(bs,,6H),4.05-4.25(m,2H),4.35-4.40(bs,6H),7.10-7.40,7.95-8.15(2xm,16H),8.60-9.00(bs,8H).
化合物40
5,10,15-三-(4-羟基苯基)-20-(4-十三烷氧基-苯基)-卟啉
溶解5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(400mg,0.59mmol),并将K2CO3,(1.0g,7.1mmol)悬浮在DMF(75mL)中。在50℃下,在30分钟内,向剧烈搅拌的反应混合物中滴加1-溴十三烷烃(0.1mL,0.45mmol)的DMF(10mL)溶液,并将混合物加热1.5小时。把反应混合物冷却到室温,倾入到水(150mL)中。用乙酸乙酯(100mL)萃取卟啉,萃取液用盐水(3x50mL)洗涤并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂后,将残余物溶于甲苯∶乙醇(体积比1∶1,大约10mL),并通过用甲苯作为洗脱剂的硅胶(Merck 60)柱(200g)色谱纯化。洗脱最初的3个馏份,之后将洗脱剂转变为甲苯∶乙酸乙酯(体积比2∶1)。收集洗脱的第五个化合物,并高真空干燥,得到产物,紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300Mz,d6-丙酮):0.85(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.60(m,18H),1.50(quint,3J 7.5Hz,2H),1.80(quint,3J 7.5Hz,2H),4.14(t,3J7.5Hz,2H),7.20(d,3J 8.5Hz,2H),7.25(d,3J 8.5Hz,6H),8.00-8.15(m,8H),8.80-9.10(m,8H).
化合物41
5-(4-十三烷氧基-苯基)-10,15,20-三-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉三氯化物
溶解化合物40(50mg,0.057mmol)和(1-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(210mg,0.8mmol)并把K2CO3(230mg,1.7mmol)悬浮在DMF(20mL)中。剧烈搅拌的反应混合物在50℃下加热18小时。脱除DMF后,将残余物溶于甲醇(5mL)中并施加到硅胶垫(2厘米厚)上,对其先用甲醇(大约1000mL)洗涤,然后用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。蒸发溶剂之后,将残余物溶于甲醇(5mL)中并通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)洗脱的Sephadex LH-20柱(2.5X40厘米)色谱进一步纯化。脱除溶剂后,将残余物溶于甲醇中并使其通过阴离子交换树脂(Amberlite IRC 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米)。蒸发溶剂,产物在高真空下干燥,得到紫色晶体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.90(t,3J 7.5Hz,3H),1.20-1.40(m,18H),1.45-1.60(m,2H),1.80-1.90(bs,2H),2.40-2.55(bs,6H),3.25-3.35(bs,27H),3.75-3.85(bs,6H),4.05-4.25(m,2H),4.35-4.40(bs,6H),7.10-7.40,7.90-8.15(2xm,16H),8.60-9.00(bs,8H).
化合物42
5,15-双-(4-羟基苯基)-卟啉
该化合物是根据以下文献制备的:Mehta,Goverdhan;Muthusamy,Sengodagounder;Maiya,BhaskarG.;Arounaguiri,S.,J.Chem.Soc.Perkin Trans.1;2177-2182(1999)。
化合物43
5,10,15-三-(4-羟基苯基)-20-(4-辛氧基-苯基)-卟啉
溶解5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(200mg,0.294mmol),并在氩气下将碳酸钾(487mg,3.53mmol,12当量)悬浮在无水DMF(50mL)中,将混合物加热到55℃。在30分钟内滴加溴代辛烷(35.8μL,0.206mmol,0.7当量)的无水DMF(10mL)溶液,将混合物在55℃搅拌2小时。在50℃下真空脱除溶剂,加入水(80mL),并用乙酸乙酯(3X40mL)萃取混合物。合并的有机馏份经干燥(Na2SO4)后蒸发溶剂。残余物通过硅胶柱(300g)色谱纯化。用甲苯∶乙酸乙酯(体积比30∶1)洗脱四烷基化的和三烷基化的化合物。用甲苯∶乙酸乙酯(体积比15∶1)洗脱第三个馏份(二取代的化合物,反式异构体)。第四个馏份(二取代的化合物,顺式异构体)用甲苯∶乙酸乙酯(体积比10∶1)洗脱,所需的产物(单烷基化的化合物)用甲苯∶醋酸乙酯(体积比5∶1)洗脱。减压脱除溶剂,残余物经高真空干燥,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,d6-丙酮):0.75(t,3H,3J=6.8Hz),1.13-1.25(m,8H),1.43(quint,2H,3J=7.5Hz),1.73(quint,2H,3J=7.5Hz),3.50(t,2H,3J=8Hz),7.11(d,2H,3J=7.5Hz),7.16(d,6H,3J=7.5Hz),7.90-7.94(m,8H),8.80-8.90(m,8H)
化合物44
5-(4-十二烷氧基苯基)-10,15,20-三-(4-羟基-苯基)-卟啉
溶解5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(200mg,0.294mmol),并将碳酸钾(487mg,3.53mmol,12当量)在氩气下悬浮在无水DMF(50mL)中,将混合物加热到55℃。在30分钟内滴加十二烷基溴(49.4μg,0.206mmol,0.7当量)的无水DMF(10mL)溶液。混合物在55℃下搅拌2小时。在50℃下真空脱除溶剂,加入水(80mL),并用乙酸乙酯(3X40mL)萃取混合物。合并的有机馏份经干燥(Na2SO4)后蒸发溶剂。产物通过硅胶柱(300g)色谱分离。用甲苯∶乙酸乙酯(体积比30∶1)洗脱四烷基化的和三烷基化的化合物,二取代的化合物(反式异构体)用甲苯∶乙酸乙酯(体积比15∶1)洗脱,二取代的化合物(顺式异构体)用甲苯∶乙酸乙酯(体积比10∶1)洗脱,所需的产物(单烷基化的化合物)用甲苯∶乙酸乙酯(体积比5∶1)洗脱。真空脱除溶剂,残余物在高真空下干燥,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,d6-丙酮):0.75(t,3H,3J=6.8Hz),1.13-1.25(m,16H),1.41(quint,2H,3J=7.5Hz),1.63(quint,2H,3J=7.5Hz),3.89(t,2H,3J=6Hz),7.11(d,2H,3J=7.5Hz),7.16(d,6H,3J=7.5Hz),7.9-7.94(m,8H),8.78-8,83(m, 8H)
化合物45
5,10,15-三-(4-羟基苯基)-20-(4-壬氧基-苯基)-卟啉
溶解5,10,15,20-四-(4-羟基苯基)-卟啉(200mg,0.294mmol),并将碳酸钾(487mg,3.53mmol,12当量)在氩气下悬浮在无水DMF(50mL)中,将混合物加热到55℃。在30分钟内滴加壬基溴(49.4μg,0.206mmol,0.7当量)的无水DMF(10mL)溶液。混合物在55℃下搅拌2小时。在50℃下真空脱除溶剂,加入水(80mL),并用乙酸乙酯(3X40mL)萃取混合物。合并有机萃取液经过干燥(MgSO4),在减压下脱除溶剂。产物通过硅胶柱(300g)色谱分离。用甲苯∶乙酸乙酯(体积比30∶1)洗脱四烷基化的和三烷基化的化合物,二取代的化合物(反式异构体)用甲苯∶乙酸乙酯(体积比15∶1)洗脱,二取代的化合物(顺式异构体)用甲苯∶乙酸乙酯(体积比10∶1)洗脱,所需的产物(单烷基化的化合物)用甲苯∶乙酸乙酯(体积比5∶1)洗脱。减压脱除溶剂,残余物在高真空下干燥,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,d6-丙酮):0.87(t,3H,3J=7.5Hz),1.14-1.26(m,10H),1.41(quint,2H),1.70(quint,2H,3J=7.5Hz),3.92(t,2H,3J=7.5Hz),7.02(d,2H,3J=8.25Hz,),7.15(d,6H,3J=7.5Hz,),7.85(d,2H,3J=8.25Hz),7.91(d,3J=7.5Hz),8.76-8,84(m,8H)
化合物46
5-(4-辛氧基-苯基)-10,15,20-三-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉三氯化物
溶解化合物43(50mg,0.063mmol)和(3-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(164mg,0.63mmol,10当量),并将碳酸钾(130mg,0.95mmol,15当量)在氩气下悬浮在无水DMF(30mL)中,将混合物在55℃搅拌12小时。在50℃真空脱除溶剂,把残余物施加到硅胶垫(2厘米深)上。用甲醇(1000mL)洗掉未反应的铵盐,所述产物用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。减压蒸发溶剂之后,将残余物通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)作为洗脱剂的Sephadex LH-20柱(100g)色谱进一步纯化。减压脱除溶剂,将得到的残余物溶于甲醇中并通过阴离子交换树脂(Amberlite IRA 400,氯化物形式)短柱(3.5X20厘米),用甲醇作为洗脱剂。蒸发溶剂后,把粗产物溶于最少量的甲醇中,加入二乙醚(50mL)。该溶液离心15分钟。把清液层蒸干,残余物高真空干燥,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.90(t,3H,3J=7.5Hz),1.25-1.41(m,8H),1.45(bs,2H),1.87(bs,2H),2.38(bs,6H),3,29(bs,27H),3.67(t,6H,3J=7.5Hz),4.01(t,2H,3J=7.5Hz),4.30(t,6H,3J=7.5Hz),7.11(d,2H,3J=7.5Hz),7.38(d,6H,3J=7.5Hz),7.95(d,2H,3J=7.5Hz),8.11(d,6H,3J=7.5Hz),8.93(bs,8H)
化合物47
5-(4-十二烷氧基-苯基)-10,15,20-三-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉三氯化物
溶解化合物44(50mg,0.059mmol)和(3-溴丙基)-三甲基铵基溴化物(154mg,0.59mmol,10当量),并将碳酸钾(122mg,0.885mmol,15当量)在氩气下悬浮在无水DMF(30mL)中,将混合物在55℃搅拌12小时。在50℃真空脱除溶剂,将残余物再溶于少许甲醇中并施加到硅胶(2厘米深)垫上。用甲醇(1000mL)洗掉未反应的铵盐。产物用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。减压蒸发溶剂之后,将粗产物通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)作为洗脱剂的Sephadex LH-20柱(100g)色谱进一步纯化。减压脱除溶剂,将残余物再溶于少许甲醇中,并使该溶液通过阴离子交换树脂(Amberlite IRC400,氯化物形式)短柱,用甲醇作为洗脱剂。脱除溶剂后,把粗产物再溶于最低量的甲醇中,加入乙醚(50mL)。该溶液离心15分钟。把清液层蒸干,产物高真空干燥,得到紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.88(t,3H,3J=7.5Hz),1.25-1.37(m,16H),1.48(bs,2H),1.93(bs,2H),2.42(bs,6H),3,28(bs,27H),3.68-3.75(m,6H),4.05(t,2H),4.33(t,6H),7.17(d,2H,3J=7.5Hz),7.33(d,6H,3J=7.5Hz),7.99(d,2H,3J=7.5Hz),8.08(d,6H,3J=7.5Hz),8.85(bs,8H)
化合物48
5-(4-壬氧基-苯基)-10,15,20-三-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉三氯化物
溶解化合物45(50mg,0.062mmol)和(3-溴丙基)-三甲铵基溴化物(162mg,0.62mmol,10当量),并将碳酸钾(128mg,0.93mmol,15当量)在氩气下悬浮在无水DMF(30mL)中,将混合物在55℃搅拌12小时。在50℃真空脱除溶剂,将残余物再溶于少许甲醇中并施加到硅胶(2厘米深)垫上。用甲醇(1000mL)洗掉未反应的铵盐。产物用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。减压蒸发溶剂之后,通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)作为洗脱剂的Sephadex LH-20柱(100g)色谱进一步纯化。减压脱除溶剂,将残余物再溶于少许甲醇中,并使该溶液通过阴离子交换树脂(Amberlite IRC 400,氯化物形式)短柱,用甲醇作为洗脱剂。脱除溶剂后,将残余物高真空干燥,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.89(t,3H,3J=7.5Hz),1.18-1.34(m,10H),1.41(bs,2H),1.73(quint,2H,3J=7.5Hz),2.30-2.44(m,6H),3,31(bs,27H),3.65-3.73(m,6H),3.93(t,2H,3J=7.5Hz),4.25-4.42(m,6H),7.08(d,2H,3J=7.5 Hz),7.30(d,6H,3J=7.5Hz),7.93(d,2H,3J=7.5Hz),8.05(d,6H,3J=7.5Hz),8.94(bs,8H)
化合物49
5-(4-辛氧基-苯基)-10,15,20-三-[4-(5-三甲铵基-戊氧基)-苯基]-卟啉三氯化物
溶解化合物43(23mg,0.03mmol)和(5-溴戊基)-三甲基铵基溴化物(84mg,0.3mmol,10当量),并将碳酸钾(62mg,0.45mmol,15当量)在氩气下悬浮在无水DMF(15mL)中,将混合物在55℃搅拌12小时。在50℃真空脱除溶剂,将残余物再溶于少许甲醇中并施加到硅胶(2厘米深)垫上。用甲醇(1000mL)洗掉未反应的铵盐。产物用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。减压蒸发溶剂之后,将J粗产物通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)作为洗脱剂的Sephadex LH-20柱(100g)色谱进一步纯化。减压脱除溶剂,将残余物再溶于少许甲醇中,并使该溶液通过阴离子交换树脂(Amberlite IRC 400,氯化物形式)短柱,用甲醇作为洗脱剂。如果产物中残留有杂质,重复全部的纯化过程。脱除溶剂后,将残余物高真空干燥,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,CD3OD):0.78(bs,3H),1.08-1.35(m,10H),1.45-1.59(m,6H),1.63-1.93(m,14H),3.17-3.32(m,6H),3,31(bs,33H),3.84(bs,2H),4.07(bs,6H),6.93(bs,2H),7.09(d,2H,3J=7.5Hz),7.74(bs,2H),7.88(d,2H,3J=7.5Hz),8.71(bs,8H)
化合物50
5,10,15-三-[4-(5-三甲铵基-戊氧基)-苯基]-20-(4-十一烷氧基苯基)-卟啉三氯化物
溶解化合物2(50mg,0.06mmol)和(5-溴戊基)-三甲基铵基溴化物(174mg,0.6mmol,10当量),并将碳酸钾(124mg,0.9mmol,15当量)在氩气下悬浮在无水DMF(30mL)中,将混合物在55℃搅拌12小时。在50℃真空脱除溶剂,将残余物再溶于少许甲醇中并施加到硅胶(2厘米深)垫上。用甲醇(1000mL)洗掉未反应的铵盐。产物用乙酸∶甲醇∶水(体积比3∶2∶1)洗脱。减压蒸发溶剂之后,将产物通过用正丁醇∶水∶乙酸(4∶5∶1,体积比,上面的相)作为洗脱剂的Sephadex LH-20柱(100g)色谱进一步纯化。减压脱除溶剂,将残余物再溶于最少量的甲醇中,并使该溶液通过阴离子交换树脂(Amberlite IRC400,氯化物形式)短柱,用甲醇作为洗脱剂。如果产物中残留有杂质,重复全部的纯化过程。脱除溶剂后,将残余物高真空干燥,得到产物,紫色固体。
1H-NMR:
δH(300MHz,MeOD):0.71-0,88(m,13H),0.91-1.38(m,14H),1.48-1.81(m,12H),-CH2NCH2和OCH2-长链烷基的信号是在2.8-3.3区域与溶剂信号在一起的多重峰,
3.91(bs,6H),6.33(bs,2H),6.86(bs,6H),7.35(bs,2H),7.70(bs,6H),8.65(bs,8H)
化合物51
5,10,15,20-四-(3-十二烷氧基苯基)-卟啉
将吡咯(0.7mL,10mmol)和3-十二烷氧基苯甲醛(2.91g,10mmol)溶于脱气的二氯甲烷(1000mL)中,滴加TFA(0.77mL,10mmol)。混合物在室温下在黑暗中搅拌17小时。一次性加入DDQ(6.81g,30mmol),并将混合物在室温下再搅拌1小时。混合物通过硅胶柱(400g)过滤,先用二氯甲烷作为洗脱剂,随后用在二氯甲烷中加入三乙胺以将pH值调节到8的洗脱剂。如果产物中残留有杂质,重复这一纯化过程,直到得到纯产物。
1H-NMR:
δH(300MHz,d6-丙酮):0.80(bs,12H),1.03-1.45(m,80H),1.78(quint.,8H,3J=7.5Hz),4.05(t,8H,3J=7.5Hz),7.24(d,4H,3J=7.5Hz),7.49-7.55(m,4H),7.68-7.71(m,8H),8.80(m, 8H)
实施例B:示例化合物在细菌细胞上的非特异(黑暗毒性)分布和光动力学活性(光毒性)分布
实验方法
通过测定在黑暗中和在光曝晒下生长抑制(抑菌力)和生长抑制(杀细胞作用)的程度,评价本发明的示例化合物对于两种菌株,革兰氏阴性细菌大肠杆菌(菌株ATCC 25922)和革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌(耐甲氧西林的菌株ATCC BAA-44)的毒性。起始化合物的筛选使用各个不同时间点的白光进行[390-740nm](150mw/cm2),浓度为3μM(参见表1)。另外的实验在那些用在417-420nm波长,15.2mW/cm2,13.68J/cm2下发光的光源(Waldmann Eclairage SA,France)进行了初步筛选而确定的化合物上进行(参见表2)。
以下规程用于示例化合物(表1)的初步筛选(参见Reddi等人,2002,Photochem.Photobiol.,75(5):462-470):
(i)大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞在脑心浸液琼脂上生长过夜,再悬浮在脑心浸液发酵液中,通过离心法采集(3000g下离心15分钟)并用pH值为7.4、包含2.7mM KCl和0.14M NaCl的磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤一次。
(ii)然后将细胞再悬浮在PBS中,直到在650nm下的光密度为0.7,这相当于密度为108-109个细胞/mL。
(iii)接下来,将细胞在黑暗中在PBS中培养5分钟,其中待试验的化合物为3.0μM。
(iv)黑暗培养后,用白光(波长:390-740nm)(150mw/cm2)照射细胞最高达30分钟。在光照过程中,细胞保持在37℃,并用磁力进行搅拌。
(v)最后,将处理过的和未处理的(对照)细胞稀释在脑心浸液发酵液中并保持在37℃,与此同时在预定时间点监测悬浮液在650nm处的吸光率,以测定生长曲线。
通过以下方程计算处理过的细胞中生长抑制的百分比:
[1-(Ar-A0)/(Ac-A0)] X 100
其中,Ax和Ac是培养3小时后测定的吸光率,分别对应于处理过的和对照细胞的悬浮液,A0代表起始吸光率。
为了进一步研究示例化合物(表2),采用以下方法:
(i)细菌(金黄色葡萄球菌BAA-44和大肠杆菌25922)在脑心浸液(BHI)发酵液中生长直到它们达到生长停滞期。
(ii)用台式离心机通过离心法(3000g,离心15分钟)采集细胞,用pH值为7.4、包含有2.7mM Kcl和0.14M Nacl的10mM PBS洗涤,并悬浮在PBS中,在650nm下的光密度为0.7,这相当于108-109个细胞/mL。
(iii)用各种不同浓度的示例化合物,在黑暗中将处于所需细胞密度(约108细胞/mL)的细菌培养5分钟。
(iv)在培养期结束时,将细胞用PBS洗涤3次,悬浮在PBS中,转移到96孔微滴定盘中(200μL/孔)并用Waldmann光源(15.2mW/cm2;13.7J/cm2)照射15分钟。细胞从放在灯的玻璃罩上面的盘的底部照射。
(v)光照后,通过将逐次稀释的等分量的经过处理和未经处理的(即没有示例化合物或没有光存在)的细胞放到脑心琼脂(BHA)上并在37℃培养18-24小时,之后对菌群数目计数来测定细胞的存活率。
表1:在用选择的浓度为3μM的试验化合物培养5分钟后,用白光辐照的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞的生长抑制(%)
(A)
光照时间(分钟) | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | ||||||
Cpd16 | Cpd3 | Cpd19 | Cpd28 | Cpd16 | Cpd3 | Cpd19 | Cpd28 | |
0 | 8 | 5 | 3 | 4 | 12 | 21 | 13 | 15 |
1 | 34 | 68 | 5 | 21 | 97 | 83 | 33 | 91 |
5 | 92 | 99 | 6 | 60 | 100 | 100 | 42 | 100 |
10 | 99 | 100 | 5 | 73 | 100 | 100 | 48 | 100 |
15 | 100 | 99 | 10 | 81 | 100 | 100 | 54 | 100 |
30 | 100 | 99 | 12 | 92 | 100 | 100 | 58 | 100 |
(B)
光照时间(分钟) | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | ||||||||
Cpd29 | Cpd31 | Cpd32 | Cpd6 | Cpd33 | Cpd29 | Cpd31 | Cpd32 | Cpd6 | Cpd33 | |
0 | ND | ND | 3 | 9 | 6 | 14 | 9 | 23 | 29 | 22 |
1 | ND | ND | 10 | 17 | 10 | 43 | 28 | 100 | 100 | 57 |
5 | ND | ND | 16 | 30 | 25 | 49 | 38 | 100 | 100 | 99 |
10 | ND | ND | 22 | 54 | 53 | 53 | 78 | 100 | 100 | 100 |
15 | ND | ND | 22 | 69 | 67 | 55 | 82 | 100 | 100 | 100 |
30 | ND | ND | 38 | 93 | 78 | 55 | 83 | 100 | 100 | 100 |
(C)
光照时间(分钟) | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | ||
Cpd 36 | Cpd 8 | Cpd 36 | Cpd 8 | |
0 | 6 | 23 | 22 | 80 |
1 | 56 | 69 | 96 | 99 |
5 | 84 | 100 | 100 | 100 |
10 | 90 | 100 | 100 | 100 |
15 | 92 | 100 | 100 | 100 |
30 | 95 | 100 | 100 | 100 |
结果
对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的毒性研究结果示于表1和2,以及图2和3(化合物″Cpd″的结构参见实施例A)
表2:在用选择的试验化合物培养并用白光照射(光‘动力学’活性或‘光毒性’)或没有光照(‘黑暗毒性’)条件下,大肠杆茵和金黄色葡萄球菌细胞的存活率
(A)
光动力学活性(a)金黄色葡萄球菌 | ||||||||
化合物3 | 化合物6 | 化合物8 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
10μM | 15min | >6(>10-6) | 1μM | 15min | 6(10-6) | 1μM | 15min | 6(10-6) |
1μM | 15min | >3(>10-3) | 0.1μM | 15min | 3(10-3) | 0.1μM | 15min | 3(10-3) |
(b)大肠杆菌 | ||||||||
化合物3 | 化合物6 | 化合物8 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
ND | ND | 10μM | 15min | >6(>10-6) | ||||
ND | ND | 0.01μM | 15min | <1(<10-1) | ||||
黑暗毒性(a)金黄色葡萄球菌 | ||||||||
化合物3 | 化合物6 | 化合物8 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
10μM | N/A | >3(>10-3) | 10μM | 15min | 2(10-2) | 1μM | N/A | <l(<10-1) |
1μM | N/A | <1(<10-1) | 1μM | 15min | 1(<10-1) | 10μM | N/A | <1(<10-1) |
(b)大肠杆菌 | ||||||||
化合物3 | 化合物6 | 化合物8 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
ND | ND | 10μM | N/A | 2(10-2) | ||||
ND | ND | 0.01μM | N/A | <1(<10-1) |
表2-续
光动力学活性(a)金黄色葡萄球菌 | ||||||||
化合物1 | 化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
1μM | 12min | >6(>10-6) | 1μM | 15min | >6(>10-6) | 0.01μM | 15min | >4(>10-4) |
0.1μM | 15min | <1(<10-1) | 0.1μM | 15min | >3(>10-3) | 0.005μM | 15min | >3(>10-3) |
0.005μM | 15min | <2(<10-3) | ||||||
(b)大肠杆菌 | ||||||||
化合物1 | 化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
ND | 1μM | 15min | >6(>10-6) | 1μM | 15min | >6(>10-6) | ||
ND | 0.5μM | 15min | <1(<10-1) | 0.5μM | 15min | <3(<10-1) | ||
黑暗毒性(a)金黄色葡萄球菌 | ||||||||
化合物1 | 化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
10μM | N/A | <1(<10-1) | 1μM | N/A | <1(<10-1) | 0.01μM | N/A | <1(<10-1) |
(b)大肠杆菌 | ||||||||
化合物1 | 化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 | 浓度 | 光照 | 减少的log数 |
ND | 1μM | N/A | <1(<10-1) | 1μM | N/A | <1(<10-1) |
结论
结果表明,本发明的化合物,当用光照射时,在研究的低浓度下,能够消灭革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌细胞。
化合物10在低剂量下的活性
上述茵落形成单位(CFU)规程也用于研究极低浓度的本发明化合物的光动力学活性。例如,图4表明了在光的存在下(光动力学性质)和没有光的情况下(固有毒性性质),使用(A)化合物8和(B)化合物10得到的结果。
结果
(i)在试验浓度下,化合物8和10都显示对于BAA-44的可忽略的黑暗毒性。
(ii)在浓度低到0.01μM下,此时在BAA-44中达到了3个log的降低,化合物8显示出有效的抗菌作用。
(iii)化合物10显示出甚至更有效的抗菌作用,导致在浓度为0.005μM下,在BAA-44有3个log的降低,并且在0.0025μM浓度下能够消灭90%的细菌。
结论
甚至在非常低的剂量下,化合物8和10也能对细菌细胞显示出依赖于剂量和依赖于光的毒性。
抗菌活性的范围
试验化合物10对于一些菌株的抗菌活性:
-金黄色葡萄球菌ATCC BAA-44(一种耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌)
-铜绿假单胞菌ATCC 25668
-表皮葡萄球菌ATCC 700565
-酿脓链球菌ATCC 49117
-大肠杆菌ATCC 25922
表3
菌株 | 在细胞中达到3个log的降低所需化合物10的浓度(μM) |
金黄色葡萄球菌ATCC BAA-44 | 0.005 |
铜绿假单胞菌ATCC 25668 | 5.0 |
表皮葡萄球菌ATCC 700565 | 0.0025 |
酿脓链球菌ATCC 49117 | 0.01 |
大肠杆菌ATCC 25922 | 0.1 |
结论
化合物10对于宽范围的革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌显示光动力学活性(即光毒性)。
在猪皮上,化合物10对MRSA的体外光动力学活性
将切开的猪皮在无菌条件下切成3(4)X3(4)厘米的小片,并在70%的乙醇中培养5分钟以减少移植细菌的基底。在PBS中洗涤3次后,将所述皮片固定在含有N-2-羟乙基哌嗪-N′-2-乙烷磺酸(Hepes)-琼脂的陪替(petri)培养皿中。此时,在表皮(角质层)上接种金黄色葡萄球菌ATCC BAA-44(~108,体积:100μL),并将皮片表面在层流柜中干燥直到目测已经无水。使用″乳头状″笔(直径1cm2)划定感兴趣区。把化合物10(10μM)的消毒液施加到该皮上10分钟。施加后,将体外猪皮置于Waldmann光源236下照射15分钟(15.2mW/cm2,13.7J/cm2)。使用无菌棉棍从角质层上除去细菌,进行菌落形成单位试验以确定刚刚辐射后生存的细菌细胞的数目。把无菌的棉棍在样品溶液(0.1%的Tween 80在pH值为7.9的0.0075M磷酸盐缓冲液中的溶液)浸湿,之后擦洗该皮表面(3次),并在样品溶液中旋转,之后进行系列稀释以确定细菌的采收量。
用化合物10培养(10μM),随后辐射15分钟,导致生长降低3.2个log10(3个目标区的平均值)。相反,对照实验(对施加的没有用化合物10培养的细菌进行辐射)没有显示细菌细胞数目的减少。
因此,这些数据表明,甚至在皮脂和酶的存在下,在猪皮表面上,化合物10仍然对于MRSA具有光动力学活性。
使用叠氮化钠和D2O来证实光动力学性质
使用D2O和叠氮化物的猝灭研究是用化合物10和光相对于体外角质化细胞进行的。为了研究试验化合物对于NHDF、NHEK和细菌的光毒性是否遵循光氧化类型II,使用叠氮化钠---单线态氧的物理猝灭剂,和D2O---反应性氧物种增强剂(Lin等人,1991,Cancer Res.,51:1109-1116;Moan等人,1979,Brit.J.Cancer,39:398-407)。
图5示出了在照射后,用化合物10和猝灭剂培养或者用化合物10和D2O培养的效果。正如细胞存活率增加所表明的,在叠氮化钠的存在下,化合物10的杀细胞能力降低,而加入D2O,则显示细胞生存能力显著降低。
因此,照射时,化合物10对NHDF的消灭看起来主要由单线态氧而不是由化合物本身介导的。
化合物10的急性毒性试验
在标准急性毒性试验中,在局部制剂中使用百万倍抗菌剂剂量(3.2mM)的化合物10,以确定是否能检测到该化合物任何的临床或组织毒性。把化合物同时施用于完整的和擦破的大鼠皮肤上24小时。
急性毒性规程的基准是,用于化学品试验的OECD指导方针/第4部分-健康影响试验402:急性皮肤毒性。
结果和结论
临床、肉眼检查和显微镜观察后,都没有观察到临床毒性。没有观察到任何主要器官(包括皮肤)的组织毒性。没有注意到有细胞渗透,包括肥大细胞,也没有刺激。
总之,化合物10不会导致任何的急性毒性或过敏效果:事实上,没有观察到明显的与该物质及其赋形剂施加有关的临床或病理征状。
化合物10的光毒性试验
光毒性规程的基准是,用于化学品试验的OECD指导方针/第4部分-健康影响试验406:皮肤敏感性。
初步试验表明,30分钟的曝光不会产生任何由光源引起的对皮肤表面的损害。类似地,对照实验表明,在没有光的情况下,当化合物10的施加浓度为32μM时,不会产生任何对皮肤表面的损害。通过施加到14只豚鼠的皮肤上(完整的和擦破的)24小时,随后曝光30分钟,研究局部制剂中化合物10的光毒性。化合物10在两种不同的浓度,32μM和0.32μM,下进行试验。在照射后24小时和72小时时,通过典型的光毒性试验方式进行皮试点的临床和组织学检查。不从邻近点进行活体检查,以避免接合带处任何的相互作用。在活体检查时评价总的发现。在对每一终点(红斑,水肿和发炎)给出一个分值之前,将每一对象的数据与从其他动物得到的数据以及对照数据进行对比。对于每一个点和每一终点,根据Draize尺度给出0-4的分值(对于发炎来说,在用显微镜观察所有的皮肤部分后,通过与正常的皮肤和步骤1中的发现相对比,形成类似于Draize尺度的尺度)。然后,对每一动物和每一样点计算平均分值。
通过分析结果并将试验数据与对照动物的数据进行比较,得出的结论是,没有临床征状或症状或组织检查发现能说明化合物10可能有任何的光毒性可能。
实施例C:本发明的示例化合物与细菌细胞的结合
化合物8,10和12与大肠杆菌的结合
用各种不同浓度(1-7.5μM)的化合物8、10或12将大肠杆菌细胞培养5分钟。在培养期结束时,通过离心使细胞沉淀出来,除去未结合的试验化合物部分,将细胞团粒再悬浮在2mL2%的SDS中,得到细胞溶菌产物。用SDS培养过夜后,通过细胞溶菌产物的分光光动力学分析估算与细胞结合的试验化合物的量。细胞溶菌产物中化合物的浓度是通过测定发射光动力学光谱的峰值强度并将数据插入到校准曲线中计算出来的。与细胞结合的试验化合物的量表示为化合物的nmoles数/每mg细胞蛋白质。蛋白质浓度通过Lowry的方法测定(Lowry等人,1951,J.Biol.Chem.,193:265-275)。
所有的实验均运行3次,结果表示为在标准偏差范围内3次测定值的平均值。
从细胞中回收的卟啉的量示于表4。
表4
化合物浓度(μM) | 结合的化合物(nmoles/mg细胞蛋白质) | ||
(a)洗涤0次 | |||
化合物8 | 化合物12 | 化合物10 | |
0.01 | 0.024±0.01 | 0.041±0.02 | 0.026±0.005 |
0.1 | 0.056±0.02 | 0.151±0.02 | 0.274±0.05 |
0.5 | 0.522±0.2 | 0.806±0.14 | 1.542±0.350 |
1 | 3.670±0.7 | 2.70±0.30 | 2.70±0.354 |
(b)洗涤3次 | |||
化合物8 | 化合物12 | 化合物10 | |
0.01 | 0.009±0.001 | 0.021±0.005 | 0.015±0.0004 |
0.1 | 0.030±0.02 | 0.089±0.02 | 0.078±0.02 |
0.5 | 0.274±0.15 | 0.622±0.10 | 0.334±0.092 |
1 | 2.230±0.8 | 1.930±0.20 | 1.278±0.102 |
表4所示结果表明,三个试验化合物在结合到大肠杆菌上时具有类似的效率,并且在培养期结束(5分钟)时,缔合到细胞上的化合物有约50%的通过用PBS洗涤3次而除去。
实施例D:示例化合物对PDT产生细菌抗药性的试验
在耐多种药(包括甲氧西林)的革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌BAA-44中,使用化合物10作为光动力学试剂试验细菌细胞对本发明示例化合物产生耐药性的可能性。在第二次处理后再一次将金黄色葡萄球菌BAA-44的存活率与没有用PDT处理的金黄色葡萄球菌BAA-44细胞的存活率进行对比。
为了评价金黄色葡萄球菌BAA-44细胞对PDT的敏感是否保持恒定或者在重复处理后是否会观察到产生出某种程度的耐药性,相同的处理总共重复10次。在另外的实验中,对于已经有9次暴露于通过上述规程进行的PDT处理的细胞株进行第10次处理,并将结果与其中对首次用于实验的培养物(即,从来没有暴露于PDT下)在完全相同的条件下进行PDT处理的平行试验中观察到的细胞消灭情况相对比。在连续10次的PDT处理后得到的结果示于图6。
将已经连续10次暴露于PDT处理下的培养物与首次用于实验的培养物(即从来没有暴露于PDT下)的细胞消灭情况进行比较,得到的结果示于图7。存活率表示为log N0/N,其中N0和N表示每mL未处理的和已经处理的细胞悬浮液中CFU的数目。T试验的统计分析表明,两值之间的差异不明显(P>10%)。
结论
化合物10对金黄色葡萄球菌ATCC BAA-44的光敏作用不会明显诱发演变出耐药性。事实上,虽然在上述处理中暴露的细菌细胞,被培养并二次暴露于化合物10和光下,但化合物10的光动力学活性效率在10次连续的光动力学序列期间保持不变。因此,不象其中存在明显多耐药性问题的抗生素疗法那样,由于明显缺少诱发出细菌抗药性的情况,所以以光动力学方式使用化合物10对细菌进行处理得到进一步的加强。
实施例E:毒性分布-示例化合物对于细菌的选择性
研究方法
使用正常的人体表皮角质化细胞(NHEK)和正常的人体皮肤成纤维细胞(NHDF)(从Cell Systems Biotechnologie GmbH,Germany购买),筛选试验化合物对培养的人体皮肤细胞的毒性。
NHEK和NHDF细胞在通道3和10之间使用。以7.5和/或15x104细胞/孔(微滴定盘)接种细胞,使其在培养箱中(37℃,5%的CO2)附着过夜。用不同浓度所选定的光敏剂培养后,对细胞照射15分钟(光源236,Waldmann;15.2mW/cm2,13.7J/cm2),然后在黑暗中培养24小时。
通过标准的MTT-试验测定其光毒性(Mossman等人,1983,Immunological Methods,65:55-63)。MTT是代谢活性细胞的指示剂。根据线粒体中的酶活性,可以目测显色反应,其可以通过酶联免疫吸附测定读数器(ELISA)(540nm)测量。对细胞的生存能力数据进行归一化,即,把在没有光敏剂的情况下进行PDT后细胞的OD值调节到1。每个实验重复3次。
结果
角质化细胞和成纤维细胞中的毒性研究结果示于表5。
表5用选择的试验化合物培养并照射(光动力活性)或者不进行光照(黑暗毒性)条件下角质化细胞和成纤维细胞的存活率
(A)
光动力学活性(a)成纤维细胞 | ||||||
化合物8 | 化合物1 | |||||
浓度 | 照射 | 存活率 | 浓度 | 照射 | 存活率 | |
0.01μM | 15min | 100% | 0.01μM | 15min | 100% | |
0.1μM | 15min | 12% | 0.1μM | 15min | 39% | |
1μM | 15min | 3% | 1μM | 15min | 2% | |
(b)角质化细胞 | ||||||
化合物8 | 化合物1 | |||||
浓度 | 照射 | 存活率 | 浓度 | 照射 | 存活率 | |
0.01μM | 15min | 98% | 0.01μM | 15min | 94% | |
0.1μM | 15min | 33% | 0.1μM | 15min | 52% | |
1μM | 15min | 0.5% | 1μM | 15min | 0.4% | |
黑暗毒性(a)成纤维细胞 | ||||||
化合物8 | 化合物1 | |||||
浓度 | 照射 | 存活率 | 浓度 | 照射 | 存活率 | |
10μM | N/A | 68% | 10μM | N/A | 92% | |
1μM | N/A | 100% | 1μM | N/A | 100% | |
(b)角质化细胞 | ||||||
化合物8 | 化合物1 | |||||
浓度 | 照射 | 存活率 | ||||
10μM | N/A | 97% | 10μM | N/A | 83% | |
1μM | N/A | 100% |
表5-续
光毒性(a)成纤维细胞 | |||||||
化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 照射 | 存活率 | 浓度 | 照射 | 存活率 | ||
0.01μM | 15min | 100% | 0.01μM | 15min | 80% | ||
0.1μM | 15min | 85% | 0.1μM | 15min | 8% | ||
1μM | 15min | 1.0% | 1μM | 15min | 0.5% | ||
(b)角质化细胞 | |||||||
化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 照射 | 存活率 | 浓度 | 照射 | 存活率 | ||
0.01μM | 15min | 97% | 0.01μM | 15min | 62% | ||
0.1μM | 15min | 75% | 0.1μM | 15min | 1.0% | ||
1μM | 15min | 1.5% | |||||
黑暗毒性(a)成纤维细胞 | |||||||
化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 照射 | 存活率 | 浓度 | 照射 | 存活率 | ||
10μM | N/A | 95% | 10μM | N/A | 91% | ||
1μ | N/A | 100% | 1μM | N/A | 100% | ||
(b)角质化细胞 | |||||||
化合物12 | 化合物10 | ||||||
浓度 | 照射 | 存活率 | 浓度 | 照射 | 存活率 | ||
10μM | N/A | 92% | 10μM | N/A | 51% | ||
1μM | N/A | 100% | 1μM | N/A | 100% |
图8示出在不同剂量下,化合物8对于人体成纤维细胞和金黄色葡萄球菌BAA-44的毒性
结论
上述数据表明,本发明的化合物,例如化合物8(在剂量为0.01μM时),化合物12(在剂量为0.1μM时)和化合物10(在剂量为0.01μM时),与人体皮肤细胞相比,都优先对细菌细胞有毒。
相反,参比化合物1显示对细菌和人细胞同等的毒性。
实施例F:稳定性研究
研究方法
为了活化试验化合物,研制能够输送适当波长(417nm)光的预定光源(Waldmann光源236)。在室温下(25℃),3分钟后,该光源光强度为15mW/cm2,产生的光剂量为14J/cm2。它由光箱(493mm长x278mm宽x93.3mm高)组成,其中要试验的样品位于光箱的上表面上并从下面照射。
化合物10的光稳定性
使用标准的光动力学方法研究示例化合物的光稳定性。如上所述,在磷酸缓冲盐水/乙醇中制备10μM的化合物10的溶液,使用吸光率最高为417nm的光源用蓝光(15mW/cm2)对其进行照射。溶液被照射不同的时段:10、20和30分钟。在每一预定的照射时段后,都测定404nm下相应于化合物最大吸收峰值的吸光度。进行平行试验,其中测定将化合物10的溶液在黑暗中保存与所述照射周期相同时间时,化合物10的吸光度。在30分钟的照射时段内,观察到在404nm处吸光度值有较小的损失(参见图10A)。
当将光调节到较高的流量率(150mW/cm2;即通常使用流量率的10倍)时,研究化合物10对于光致退色的敏感性。用这一照明系统,在照明期间将溶液保存在石英比色杯中,同时将相等量的溶液保存在黑暗中。发现,在照明30分钟后,由光致退色引起的吸光度的降低在浓度为10μM时大约为15-20%(参见图10B)。
上述结果表明,化合物10经受的光致退色比在文献中已知的其他卟啉要少得多(例如,参见Reddi等人,2002,Photochem.Photobiol.,75:462-470)。
化学稳定性
建立以下HPLC研究方法来分析本发明的示例化合物。
该方法包括在波长420nm下进行紫外检测,这对于这些化合物来说是非常特异性的。为了监测与卟啉结构无关的杂质(因此在420nm下不产生吸收),在某些实验中,还在200nm-700nm之间通过DAD(二极管阵列检测器)记录整个色谱的紫外线吸收光谱。
柱:Zorbax Phenyl,250x4.6mm,5μM
洗脱剂A:1.5g十二烷基磺酸钠+在1000mL水中的1mL甲酸
洗脱剂B:1.5g十二烷基磺酸钠+在200mL水中的1mL甲酸+800mL四氢呋喃
梯度:
时间[min] | 洗脱剂[%] |
0 | 50 |
31 | 65 |
32 | 90 |
33 | 50 |
43 | 50 |
流速:0.4mL/分钟
检测:420nm
柱温:25℃
注入体积:10μL
溶液:将卟啉衍生物溶于洗脱剂A中,使最后浓度大约为0.3mg/mL。
示例化合物典型的保留时间是大约8分钟(运行时间为18分钟)。
在本发明的示例化合物上进行定性应力试验。通过HPLC&LC-MS进行分析。化合物的应力试验在固态、水溶液、以及在磷酸盐缓冲盐水中制成的溶液中进行。样品最初在50℃下培养7天,之后将样品移去进行试验。之后将样品在70℃再培养7天,如前所述将其移去,并在90℃下再培养7天。对新近制备的溶液进行HPLC分析,并与培养7、14和21天后的样品进行对比。然后进行色谱的视觉比较,按面积百分比值测定主要产物和副产物的含量(参见图11)。
色谱的3D曲线图表明,没有另外形成片段的迹象(在较低的波长下没有迹象)。
图12中的曲线图表明,在PBS缓冲剂中21天后的样品,表现出最大的降解效果。结果表明,对固体药物和处于加热到80℃若干周的溶液中的药物进行分析时,降解程度最小。
结论
化合物10和12,两者都被发现能显示良好的稳定性,并且甚至在试验规程的应力条件下也很稳定。尽管化合物8不如化合物10和12稳定,但发现其显示出的稳定性足以满足实际的应用。
示例化合物在制剂中的稳定性
按如下所述评价本发明的三个示例化合物(化合物8,10和12)和一个参考化合物(化合物1)的稳定性,它们处于各种不同的水基制剂中,在聚乙烯药水瓶中、在黑暗中、在40℃下储存8周以上:
-月桂基硫酸钠(SLES)+水
-9∶1的水∶乙醇
-SLES+9∶1的水∶乙醇
在7周时间内,在350-700nm范围内记录紫外线吸收光谱,并在8周时对样品进行视觉评价。
结果表明,所有的试验化合物都在8周以上的期间显示优良的稳定性(参见图13)。
对于化合物8和10来说,稳定性研究延至17周(参见图14)。
实施例G:分布研究
人体皮肤分布
使用Franz细胞系中的人体皮肤(完整的)来检测高浓度培养22小时后,化合物10和12在皮肤区的分布。对每一制剂进行三个单独的实验,每一个实验都使用一块皮肤样品(来自相同的捐献者)。将250μL的各个制剂在封闭下施用,22小时后移开。将皮肤分离,并使用HPLC测定角质层、表皮和真皮、以及收集器溶液中化合物的含量。
建立以下HPLC研究方法来分析本发明的示例化合物:HPLC系统的具体条件:
TSP SCM1000膜脱气仪,P4000四元泵,AS3000自动取样器,UV6000LP UV/Vis PDA检测器,SN4000控制器,PC1000(版本3.5.1)软件。Zorbax SB-Phenyl,5μM,250x4.6毫米柱加上Phenyl安全防护筒(Phenomenex)。
流动相:550mL水;45 0mL四氢呋喃;1.5g十二烷基硫酸钠和1mL甲酸,流速为0.8mL/分钟。注入体积为50μL(全回路注入),操作温度为25℃。检测器设定在波长409nm,加上UV/Vis扫描(240-752nm,步长4nm)。示例化合物典型的保留时间是大约8分钟(运行时间为18分钟)。
与皮肤相关连的大部分化合物被发现存在于角质层中。在表皮中检测到的浓度低(约0.01μM),即,为潜在的抗细菌浓度。在真皮中检测到的浓度更低(约0.002μM)。在收集器溶液中没有检测到化合物。
表6
实验1:在9∶1的水∶乙醇中,化合物10的浓度为32μM
μg/cm2
制剂 | 剂量(ml) | 总回收率(%) | 洗涤 | 擦拭 | 条1 | 条2-3 | 条4-6 | 条7-10 | 表皮 | 真皮 | 接收器相 |
在9∶1的水∶乙醇中的32μM化合物10 | 0.25 | 63.00 | 0.618 | 1.880 | 0.146 | 0.079 | 0.051 | 0.032 | 0.054 | 0.035 | 0.0000 |
nmoles/cm2
制剂 | 剂量(ml) | 总回收率(%) | 洗涤 | 擦拭 | 条1 | 条2-3 | 条4-6 | 条7-10 | 表皮 | 真皮 | 接收器相 |
在9∶1的水∶乙醇中的32μM化合物10 | 0.25 | 63.00 | 0.807 | 2.455 | 0.191 | 0.103 | 0.066 | 0.042 | 0.070 | 0.045 | 0.0000 |
组织浓度(μM)
表7
实验2:含16μM化合物10的三种制剂的直接比较
μg/cm2
制剂 | 剂量(ml) | 总回收率(%) | 洗涤 | 擦拭 | 条1 | 条2-3 | 条4-6 | 条7-10 | 表皮 | 真皮 | 接收器相 |
16μM化合物10+32μMSLES,在水中 | 0.25 | 50.53 | 0.454 | 0.741 | 0.0031 | 0.0015 | 0.0018 | 0.0007 | 0.0028 | 0.0059 | 0.0028 |
16μM化合物10,在9∶1的水∶乙醇中 | 0.25 | 53.01 | 0.564 | 0.544 | 0.0024 | 0.0023 | 0.0030 | 0.0007 | 0.0163 | 0.0088 | 0.0000 |
16μM化合物10+32μM SLES,在9∶1的水∶乙醇中 | 0.25 | 58.94 | 0.478 | 0.430 | 0.0051 | 0.0026 | 0.0026 | 0.0014 | 0.0151 | 0.0028 | 0.0000 |
nmoles/cm2
制剂 | 剂量(ml) | 总回收率(%) | 洗涤 | 擦拭 | 条1 | 条2-3 | 条4-6 | 条7-10 | 表皮 | 真皮 | 接收器相 |
16μM化合物10+32μM SLES,在水中 | 0.25 | 50.53 | 0.593 | 0.968 | 0.0041 | 0.0020 | 0.0024 | 0.0009 | 0.0037 | 0.0077 | 0.0037 |
16μM化合物10,在9∶1的水∶乙醇中 | 0.25 | 53.01 | 0.736 | 0.710 | 0.0031 | 0.0031 | 0.0039 | 0.0010 | 0.0212 | 0.0115 | 0.0000 |
16μM化合物10+32μM SLES,在9∶1的水∶乙醇中 | 0.25 | 58.94 | 0.625 | 0.562 | 0.0066 | 0.0034 | 0.0034 | 0.0019 | 0.0198 | 0.0037 | 0.0000 |
组织浓度(μM)
结果和结论
人体皮肤分布研究的结果参见上表6和7。
重要的发现如下:
(i)从角质层的表面回收到大多数的化合物10。
(ii)在角质层内回收到浓度低得多的,但依然有抗菌潜能的化合物10。
(iii)在没有乙醇的情况下,在表皮和真皮中发现亚治疗浓度的化合物10。
(iv)在有乙醇的情况下,在表皮中发现较高治疗浓度的化合物10。
(v)没有制剂导致有潜在抗菌浓度的化合物10到达真皮。
(vi)所述包含SLES的制剂是唯一在极低浓度下在受体相中检测到化合物10的制剂。
(vii)在某种程度上,皮肤中化合物10的分布可以通过使用的制剂进行控制。
人的皮肤细胞分布:成像研究
已经研究了染料在人的皮肤成纤维细胞(NHDF)和人的皮肤角质化细胞(NHEK)中的亚细胞分布。NHDF在显微镜载片上生长过夜,然后所述细胞用化合物10单独培养5分钟、1小时和4小时,或者将培养的细胞用对细胞器特异性染料共染。为了标记溶酶体和线粒体,分别使用LysoTrackerGreen(分子探针)和若丹明G6(Sigma)。在培养后紧接着,使用适当的用于激发和发射的二元带滤波装置(Omega Optical),通过光动力学显微术(Zeiss Vario AxioTech,Germany)检测亚细胞定位情况。使用适当的应用软件,可以透明地将数字照相(光动力学)压在光学显微术照相上面。因此,染料的分布可以通过一次成像定位。此外,还可以使用不同颜色的成像重叠若干个数字照相。
NHDF细胞在显微镜载片上生长过夜。然后,用1μM的化合物10将细胞(绿色光动力学)培养1小时并用以下(A)或(B)对其进行共染:(A)用于线粒体(若丹明G6;50ng/ml,5;红色光动力学)和原子核(Hoechst33342;蓝色光动力学)的细胞器特异性染料;或(B)用于溶酶体(LysoTrackerGreen;10μM,2小时;绿色光动力学)和原子核(Hoechst33342;蓝色光动力学)的细胞器特异性染料。使用适当的用于激发和发射的二元带滤波装置(Omega Optical),通过光动力学显微术(ZeissVario AxioTech,Germany)检测亚细胞定位情况。共定位没入黄色光动力学中。
在没有共染时,(A)溶酶体和(B)线粒体的染色情况示于图15。
图16表明了用1μM化合物10对NHDF细胞培养1小时后NHDF细胞的细胞内光动力学分布。
化合物10的光动力学色谱图局限在原子核外,用对线粒体有特异性的若丹明G6进行共染导致化合物10的共定位(绿色)和线粒体的光动力学性(红色)。共定位没入黄色光动力学中(图16)。
用对溶酶体有特异性的染料(LysoTrackerGreen)进行共染导致产生化合物10的不同定位(红色)和溶酶体的光动力学性(绿色)(图16)。
结论
在这些研究中,在核物质中没有观察到化合物10的核缔合,这表明,化合物对于DNA的活性可能性很低。
Claims (73)
1.式I的化合物:
其中:
X1,X2,X3和X4独立地代表氢原子,亲脂性片断,苯基,低级烷基,烷芳基或芳烷基,或下式的阳离子基团:
-L-R1-N+(R2)(R3)R4
其中:
L是连接片断或者不存在;
R1代表低级亚烷基、低级亚烯基或低级亚炔基,其任选被一个或多个选自低级烷基、低级亚烷基(任选被氧间隔)、氟、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代;和
R2、R3和R4独立地代表H,芳基,低级烷基,低级烯基或低级炔基,后三者任选被一个或多个选自低级烷基、低级亚烷基(任选被氧间隔)、芳基、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代;
Z是-CH或N;和
Y1、Y2、Y3和Y4不存在或者独立地代表芳基,低级烷基,低级烯基或低级炔基,后三者任选被一个或多个选自低级烷基、低级亚烷基(任选被氧间隔)、芳基、OR5、C(O)R6、C(O)OR7、C(O)NR8R9、NR10R11和N+R12R13R14的取代基取代;和
R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14独立地代表H或低级烷基,条件是X1、X2、X3和X4中的至少一个是如上定义的阳离子基团,且X1、X2、X3和X4中的至少一个是氢原子。
3.根据权利要求2的化合物,其中M是二价或三价金属元素。
4.根据权利要求2或3的化合物,其中M选自Zn(II),Cu(II),La(III),Lu(III),Y(III),In(III),Cd(II),Mg(II),Al(III),Ru,Ni(II),Mn(III),Fe(III)和Pd(II)。
5.根据权利要求2的化合物,其中M是准金属元素,例如硅(Si)和锗(Ge)。
6.根据在前权利要求任一项的化合物,其中,Y1、Y2、Y3和Y4不存在。
7.根据在前权利要求任一项的化合物,其中Z是-CH。
8.根据在前权利要求任一项的化合物,其中R1是未取代的低级亚烷基,低级亚烯基或低级亚炔基基团。
9.根据在前权利要求任一项的化合物,其中R1是-(CH2)M-,且″m″是1-20的整数。
10.根据权利要求9的化合物,其中″m″是1-10的整数,例如1-6,1-5,1-4或1-3。
11.根据权利要求10的化合物,其中″m″是3。
12.根据在前权利要求任一项的化合物,其中R2、R3和/或R4是低级烷基,低级烯基或低级炔基基团。
13.根据权利要求12的化合物,其中R2、R3和/或R4是未取代的低级烷基。
14.根据权利要求12或13的化合物,其中R2、R3和R4中的至少一个是被伯、仲或叔胺基团或季铵基团取代的烷基。
15.根据在前权利要求任一项的化合物,其中R1是-(CH2)3-,R2和R3是CH3,R4是-(CH2)3-N(CH3)2.
16.根据在前权利要求任一项的化合物,其中R1是-(CH2)3-,且R2、R3和R4均为CH3。
17.根据在前权利要求任一项的化合物,其中R1是-(CH2)3-,且R2、R3和R4均为C2H5。
18.根据在前权利要求任一项的化合物,其中L选自苯氧基、亚苯基、磺酰胺基、氨基磺酰基、磺酰亚氨基、苯基磺酰胺基、苯基氨基磺酰基、脲、尿烷和氨基甲酸酯连接片断。
22.根据权利要求19-21任一项的化合物,其中″n″或″m″是3。
23.根据权利要求19-21任一项的化合物,其中″n″或″ m″是2。
24.根据权利要求19-21任一项或23的化合物,其中″n″和/或″ m″是1。
25.根据权利要求19-21任一项的化合物,其中L是对位单取代的。
26.根据权利要求19-21任一项的化合物,其中L是间位单或二取代的。
27.根据权利要求19-21任一项的化合物,其中L是邻位单或二取代的。
28.根据在前权利要求任一项的化合物,其中所述化合物包括两个如权利要求1定义的阳离子基团,在卟啉环的相对侧,即在环位5和15上,或者在环位10和20上。
29.根据权利要求28的化合物,其中,X1和X3是氢原子,亲脂性片断,苯基,低级烷基,烷芳基或芳烷基,X2和X4是阳离子基团,或反之亦然。
30.根据权利要求1-28任一项的化合物,其中所述化合物包括两个如权利要求1定义的阳离子基团,在卟啉环的相邻位置上,即,在环位5和10上,或在环位10和15上,或在环位15和20上,或在环位20和5上。
31.根据权利要求30的化合物,其中X1和X2是氢,X3和X4是阳离子基团,或者X2和X3是氢,X4和X1是阳离子基团。
32.根据在前权利要求任一项的化合物,其中X1、X2、X3和X4中的至少一个是亲脂性片断。
33.根据权利要求32的化合物,其中所述亲脂性片断是式-(CH2)pCH3的饱和的直链烷基,其中″p″是1-22的整数。
34.根据权利要求30的化合物,其中″p″是1-18,例如为2-16或4-12。
35.根据权利要求1-32任一项的化合物,其中X1、X2、X3和X4中没有一个是亲脂性片断。
36.根据在前权利要求任一项的化合物,其中X1、X2、X3和X4中没有一个是苯基。
37.根据在前权利要求任一项的化合物,其中所述化合物是水溶性的。
38.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5,15-双-(4-{3-[(3-二甲氨基-丙基)-二甲基铵基]-丙氧基}-苯基)-卟啉二氯化物。
39.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5,15-双[4-(3-三乙铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉二氯化物。
40.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5,15-双-[3-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉二氯化物。
41.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5,15-双-[4-(3-三甲铵基-丙氧基)-苯基]-卟啉二氯化物。
42.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5-[3,5-双-(3-三甲铵基-丙氧基1-苯基]-15-十一烷基-卟啉二氯化物。
43.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5-{4-[3-二甲基-(3-二甲基氨丙基)-铵基-丙氧基]苯基}-15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉氯化物。
44.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是3-[({3-[(3-{4-[15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉-5-基]-苯氧基}-丙基)-二甲基-铵基]-丙基}-二甲基-铵基)-丙基]-三甲基-铵三氯化物。
45.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5,15-双-[3-(3-三甲基-铵基-丙氧基)-苯基]-10-十一烷基-卟啉二氯化物。
46.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5-{4-[3-二甲基-(3-三甲铵基-丙基)-铵基-丙氧基]-苯基}-15-(4-十二烷氧基-苯基)-卟啉二氯化物。
47.根据权利要求1的化合物,其中所述化合物是5-[4-(3-二甲基癸基-铵基丙氧基)-苯基]-15-{4-[3-二甲基-(3-二甲基氨丙基)-铵基丙氧基]-苯基}卟啉二氯化物。
48.如权利要求38-47任一项定义的化合物,其中所述化合物呈金属化的形式。
49.根据在前权利要求任一项的化合物,其用作选择性的光动力学疗法试剂。
50.根据权利要求49的化合物,其中所述化合物对靶标微生物的毒性比化合物对哺乳动物细胞的毒性大至少两倍,例如大至少3倍,至少4倍,至少5倍,至少6倍,至少8倍,至少10倍,至少15倍,或至少20倍。
51.根据权利要求50的化合物,其中所述化合物对哺乳动物细胞基本上无毒。
52.一种药物制剂,其包括与药学上或兽医学上可接受的助剂、稀释剂或载体混合的根据权利要求1-51任一项的化合物。
53.用于药物中的根据权利要求1-51任一项的化合物。
54.根据权利要求1-51任一项的化合物在制备用于光动力学疗法的药物方面的用途。
55.根据权利要求1-51任一项的化合物在制备用于治疗和/或预防性治疗微生物感染的药物方面的用途。
56.根据权利要求1-51任一项的化合物在制备用于消灭微生物的药物方面的用途。
57.根据权利要求55或56的用途,其中所述微生物选自细菌、支原体、酵母菌、真菌和病毒。
58.根据权利要求55或56的用途,其中所述微生物是对一种或多种常规的抗生素有耐药性的细菌。
59.根据权利要求1-51任一项的化合物在制备用于预防和/或治疗皮肤感染的药物方面的用途。
60.根据权利要求1-51任一项的化合物在制备用于预防和/或治疗肺感染的药物方面的用途。
61.根据权利要求1-51任一项的化合物在制备用于预防和/或治疗伤口感染和/或溃疡的药物方面的用途。
62.一种治疗需要用光动力学疗法试剂治疗的患者的方法,其包括给予患者根据权利要求1-51任一项的化合物并照射该化合物。
63.根据权利要求62的方法,其中所述患者具有皮肤感染或肺感染。
64.根据权利要求62的方法,其中所述患者具有伤口感染。
65.一种用于防止伤口感染的方法,其包括使伤口与根据权利要求1-51任一项的化合物接触并照射该化合物。
66.一种消毒液,其包括根据权利要求1-51任一项的化合物。
67.根据权利要求66的消毒液,还包括表面活性试剂。
68.一种体外消灭微生物的方法,其包括使微生物与根据权利要求1-51任一项的化合物接触,并照射该化合物以消灭所述微生物。
69.基本上如上文参考说明书所述的化合物。
70.基本上如上文参考说明书所述的化合物的用途。
71.基本上如上文参考说明书所述的药物制剂。
72.基本上如上文参考说明书所述的消毒液。
73.基本上如上文参考说明书所述的消灭微生物的方法。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103402552A (zh) * | 2010-12-22 | 2013-11-20 | 奥特纳净室工程有限公司 | 表面上微生物生长的光动力学控制 |
CN103601727A (zh) * | 2013-10-23 | 2014-02-26 | 中国医学科学院生物医学工程研究所 | 一种新型的胺类化合物修饰原卟啉的用途 |
Families Citing this family (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ITFI20020200A1 (it) | 2002-10-21 | 2004-04-22 | Molteni & C Dei Flii Alitti S P A Societa L | Porfirine meso-sostituite. |
GB2397067B (en) * | 2002-12-23 | 2005-05-11 | Destiny Pharma Ltd | Porphin & azaporphin derivatives with at least one cationic-nitrogen-containing meso-substituent for use in photodynamic therapy & in vitro sterilisation |
AU2004252078A1 (en) * | 2003-06-06 | 2005-01-06 | Eukarion, Inc. | Orally bioavailable low molecular weight metalloporphyrins as antioxidants |
GB2415373A (en) * | 2004-06-23 | 2005-12-28 | Destiny Pharma Ltd | Porphyrins for sonodynamic therapy |
GB2415372A (en) * | 2004-06-23 | 2005-12-28 | Destiny Pharma Ltd | Non photodynamical or sonodynamical antimicrobial use of porphyrins and azaporphyrins containing at least one cationic-nitrogen-containing substituent |
US20090092550A1 (en) * | 2004-07-15 | 2009-04-09 | The University Of Sydney | Porphyrin linked metronidazole against gum disease: porphyromonas gingivalis |
US20070110788A1 (en) * | 2005-11-14 | 2007-05-17 | Hissong James B | Injectable formulation capable of forming a drug-releasing device |
GB0526474D0 (en) * | 2005-12-24 | 2006-02-08 | Destiny Pharma Ltd | Novel process |
GB0602125D0 (en) | 2006-02-03 | 2006-03-15 | Univ Belfast | Sensitizer-incorporated biomaterials |
US8882267B2 (en) * | 2006-03-20 | 2014-11-11 | High Performance Optics, Inc. | High energy visible light filter systems with yellowness index values |
US20120075577A1 (en) | 2006-03-20 | 2012-03-29 | Ishak Andrew W | High performance selective light wavelength filtering providing improved contrast sensitivity |
WO2007127894A2 (en) * | 2006-04-28 | 2007-11-08 | Ondine International Ltd. | Photodisinfection delivery devices & methods |
US20070264296A1 (en) * | 2006-05-10 | 2007-11-15 | Myntti Matthew F | Biofilm extracellular polysachharide solvating system |
US7959943B2 (en) * | 2006-05-10 | 2011-06-14 | Medtronics Xomed, Inc. | Solvating system and sealant for medical use in the middle or inner ear |
US7976873B2 (en) * | 2006-05-10 | 2011-07-12 | Medtronic Xomed, Inc. | Extracellular polysaccharide solvating system for treatment of bacterial ear conditions |
US7993675B2 (en) * | 2006-05-10 | 2011-08-09 | Medtronic Xomed, Inc. | Solvating system and sealant for medical use in the sinuses and nasal passages |
US8088095B2 (en) | 2007-02-08 | 2012-01-03 | Medtronic Xomed, Inc. | Polymeric sealant for medical use |
RU2513142C2 (ru) | 2008-06-12 | 2014-04-20 | Медтроник Ксомед Инк. | Способ лечения хронических ран |
US8859760B2 (en) | 2008-07-29 | 2014-10-14 | Frontier Scientific, Inc. | Compositions for killing or preventing the growth of microbes |
CN102245027A (zh) | 2008-07-29 | 2011-11-16 | 尖端科学公司 | 四(n-烷基吡啶)-卟啉衍生物用于杀死微生物或防止微生物生长的用途 |
EP2346324A4 (en) | 2008-10-06 | 2012-10-10 | Microbial Defense Systems Llc | ANTIMICROBIAL COMPOSITION AND METHODS OF MAKING AND USING |
RU2011120796A (ru) * | 2008-10-24 | 2012-11-27 | Дестини Фарма Лимитед | Новые применения |
US10653133B2 (en) | 2011-05-10 | 2020-05-19 | Next Science IP Holdings Pty Ltd | Antimicrobial solid and methods of making and using same |
CN104151386B (zh) * | 2013-11-12 | 2017-01-11 | 毕毅良 | 苦马豆素衍生物及其科研试剂的制备方法 |
EP3408270B1 (en) | 2016-01-29 | 2021-12-15 | Wichita State University | Compounds for inhibiting bacterial growth via phosphatidylglycerol binding |
US10722582B2 (en) * | 2018-04-12 | 2020-07-28 | Purdue Research Foundation | Targeted antimicrobial photodynamic therapy |
CN110713603B (zh) * | 2019-09-18 | 2020-12-01 | 山东大学 | 一种聚合物、其制备方法及作为检测细菌及抗菌材料的应用 |
CN111777616B (zh) * | 2020-08-11 | 2023-04-07 | 湖南科技大学 | 基于自组装的可检测透明质酸酶的卟啉衍生物、其制备方法及应用 |
GB202102556D0 (en) | 2021-02-23 | 2021-04-07 | Destiny Pharma Ltd | Method for reducing antibiotic resistance emergence |
CN115260204A (zh) * | 2022-05-17 | 2022-11-01 | 滨州医学院 | 一种用作光动力抗菌剂的季铵化卟啉衍生物及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (170)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2387658A1 (fr) | 1977-03-25 | 1978-11-17 | Ciba Geigy Ag | Procede pour combattre les microorganismes |
SU721442A1 (ru) | 1977-09-12 | 1980-03-15 | Московский Ордена Трудового Красного Знамени Институт Тонкой Химической Технологии Им. М.В. Ломоносова | Способ получени -незамещенных порфиринов |
EP0330801A1 (en) | 1983-02-08 | 1989-09-06 | Schering Aktiengesellschaft | Ferromagnetic, diamagnetic or paramagnetic particles useful in the diagnosis and treatment of disease |
FR2566766A1 (fr) | 1984-07-02 | 1986-01-03 | Rataud Pierre | Procede d'argenture decorative sur glace |
US4986256A (en) | 1985-02-28 | 1991-01-22 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Use of paramagnetic metalloporphyrins as contrast agents for tumors in MRI imaging |
JPS61275228A (ja) | 1985-03-14 | 1986-12-05 | バクスタ−、トラベノ−ル、ラボラトリ−ズ、インコ−ポレイテツド | 治療用タンパク組成物中のビ−ルスの光動的不活性化 |
US4775625A (en) | 1986-11-21 | 1988-10-04 | The Medical College Of Wisconsin, Inc. | Inactivating enveloped viruses with a merocyanine dye |
US5663328A (en) | 1987-01-02 | 1997-09-02 | Sun Company, Inc. (R&M) | Haloporphyrins and their preparation and use as catalysts |
US5489716A (en) | 1987-01-02 | 1996-02-06 | Sun Company, Inc. (R&M) | Reactions catalyzed by haloporphyrins |
US5571908A (en) | 1987-01-02 | 1996-11-05 | Sun Company, Inc. (R&M) | Porphyrins |
US5990363A (en) | 1987-01-02 | 1999-11-23 | Sun Company, Inc. | Method for oxidizing alkanes using novel porphyrins synthesized from dipyrromethanes and aldehydes |
US5077394A (en) | 1987-04-17 | 1991-12-31 | Sandoz Ltd. | Porphyrins and uses thereof |
US4892941A (en) | 1987-04-17 | 1990-01-09 | Dolphin David H | Porphyrins |
US4851403A (en) | 1987-04-21 | 1989-07-25 | Johnson Matthey, Inc. | Radiation sensitizers |
US4878891A (en) | 1987-06-25 | 1989-11-07 | Baylor Research Foundation | Method for eradicating infectious biological contaminants in body tissues |
DE3731689A1 (de) | 1987-09-21 | 1989-03-30 | Degussa | Rhenium-oxo-porphyrin-komplexe |
US4962197A (en) | 1988-02-12 | 1990-10-09 | Rowland Institute For Science | Photo-inactivation of cancer cells |
US5284647A (en) | 1988-03-18 | 1994-02-08 | Schering Aktiengesellschaft | Mesotetraphenylporphyrin complex compounds, process for their production and pharmaceutical agents containing them |
US5192788A (en) | 1988-05-23 | 1993-03-09 | Georgia State University Foundation, Inc. | Porphyrin antiviral compositions |
US5109016A (en) | 1988-05-23 | 1992-04-28 | Georgia State University Foundation, Inc. | Method for inhibiting infection or replication of human immunodeficiency virus with porphyrin and phthalocyanine antiviral compositions |
FR2632187B1 (fr) | 1988-06-02 | 1990-09-14 | Centre Nat Rech Scient | Derives de metalloporphyrines, leur preparation, leur application en therapeutique et leur utilisation pour la preparation de molecules hybrides |
FR2633925B1 (fr) | 1988-07-06 | 1990-10-26 | Elf Aquitaine | Procede d'oxydation par catalyse biomimetique d'alcools benzyliques et de composes apparentes |
DE68928607T2 (de) | 1988-07-14 | 1998-07-23 | Toyohakka Kogyo K K | Porphyrinderivate |
US5041209A (en) | 1989-07-12 | 1991-08-20 | Western Research Institute | Process for removing heavy metal compounds from heavy crude oil |
FR2650761B1 (fr) | 1989-08-10 | 1994-03-04 | Elf Aquitaine Ste Nale | Catalyseur d'oxydation a base de metalloporphyrine sur support |
US5223494A (en) | 1989-09-25 | 1993-06-29 | The Rockefeller University | Orally administered porphyrins to control intestinal iron absorption |
US4917784A (en) | 1989-09-26 | 1990-04-17 | The United States Of America As Represented By The United States Department Of Energy | Process for light-driven hydrocarbon oxidation at ambient temperatures |
FR2656866B1 (fr) | 1990-01-10 | 1992-05-15 | Cis Bio Int | Derives de porphyrine et metalloporphyrines eventuellement couples a une molecule biologiquement active, et composition pharmaceutique les contenant. |
US6187572B1 (en) | 1990-04-16 | 2001-02-13 | Baxter International Inc. | Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants |
US5545516A (en) | 1990-05-01 | 1996-08-13 | The American National Red Cross | Inactivation of extracellular enveloped viruses in blood and blood components by phenthiazin-5-ium dyes plus light |
US5236915A (en) | 1990-05-31 | 1993-08-17 | Health Research, Inc. | Meso poly(4-sulfonatophenyl) porphines as MRI image enhancing agents |
DK0461958T3 (da) | 1990-06-15 | 1995-02-20 | Synthelabo | 2-(aminoalkyl)-5-(arylalkyl)-1,3-dioxanderivater, fremgangsmåde til fremstilling deraf og anvendelse deraf i terapien |
ATE146508T1 (de) | 1990-11-02 | 1997-01-15 | Zeneca Ltd | Polysubstituierte phthalocyanine |
US5149697A (en) | 1991-04-18 | 1992-09-22 | Glaxo Inc. | Cobalt porphyrin pharmaceutical compositions |
US5179120A (en) | 1991-06-28 | 1993-01-12 | Cytopharm, Inc. | Porphycene compounds for photodynamic therapy |
US5262401A (en) | 1991-06-28 | 1993-11-16 | Cytopharm, Inc. | Porphycene compounds for photodynamic therapy |
US5262532A (en) | 1991-07-22 | 1993-11-16 | E.R. Squibb & Sons, Inc. | Paramagnetic metalloporphyrins as contrast agents for magnetic resonance imaging |
EP0601183A4 (en) | 1991-08-02 | 1996-12-04 | Meiji Milk Prod Co Ltd | ANTI-HIV MEDICINE. |
US5212300A (en) | 1991-09-12 | 1993-05-18 | Sun Company, Inc. (R&M) | Cyano- and polycyanometallo-porphyrins as catalysts for alkane oxidation |
US5280115A (en) | 1991-09-12 | 1994-01-18 | Sun Company, Inc. (R&M) | Nitrated metalloporphyrins as catalysts for alkane oxidation |
US6362175B1 (en) | 1991-09-20 | 2002-03-26 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Porphyrin compounds for imaging tissue oxygen |
US5603820A (en) | 1992-04-21 | 1997-02-18 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Nitric oxide sensor |
US5371199B1 (en) | 1992-08-14 | 1995-12-26 | Univ Pennsylvania | Substituted porphyrins porphyrin-containing polymers and synthetic methods therefor |
US5493017A (en) | 1992-08-14 | 1996-02-20 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Ring-metalated porphyrins |
US5599924A (en) | 1992-08-14 | 1997-02-04 | Trustees Of The University Of Pennsylvania | Electron-deficient porphyrins and processes and intermediates for preparing same |
US5471162A (en) | 1992-09-08 | 1995-11-28 | The Regents Of The University Of California | High speed transient sampler |
DE4232925A1 (de) | 1992-09-28 | 1994-03-31 | Diagnostikforschung Inst | 3-,8-substituierte Deuteroporphyrinderivate, diese enthaltende pharmazeutische Mittel und Verfahren zu ihrer Herstellung |
US5312896A (en) | 1992-10-09 | 1994-05-17 | Sri International | Metal ion porphyrin-containing poly(imide) |
DE4305523A1 (de) | 1993-02-17 | 1994-08-18 | Diagnostikforschung Inst | Meso-Tetraphenylporphyrin-Komplexverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende pharmazeutische Mittel |
US5345008A (en) | 1993-06-09 | 1994-09-06 | Sun Company, Inc. (R&M) | Decomposition of organic hydroperoxides with nitrated porphyrin complexes |
US6127356A (en) | 1993-10-15 | 2000-10-03 | Duke University | Oxidant scavengers |
US5994339A (en) | 1993-10-15 | 1999-11-30 | University Of Alabama At Birmingham Research Foundation | Oxidant scavengers |
TW247876B (en) | 1993-12-28 | 1995-05-21 | New York Blood Ct Inc | Pharmaceutical compositions for prevention or treating HIV-1 or HIV-2 infection |
US5608054A (en) | 1993-12-29 | 1997-03-04 | Sun Company, Inc. (R&M) | Porphyrins and metal complexes thereof having haloalkyl side chains |
WO1995033463A2 (en) | 1994-06-02 | 1995-12-14 | Bar-Ilan University | Synergistic antibiotic compositions containing a perphyrin and an antibiotic |
US5563132A (en) | 1994-06-21 | 1996-10-08 | Bodaness; Richard S. | Two-step cancer treatment method |
WO1996003426A1 (en) | 1994-07-22 | 1996-02-08 | Duke University | Human serum albumin-porphyrin complexes with the ability to bind oxygen and therapeutic uses thereof |
FR2723694B1 (fr) | 1994-08-19 | 1996-09-27 | Oreal | Utilisation de sels de derives cationiques de porphine comme agents photosensibilisants de bacteries de type gram-negatif |
US5703230A (en) | 1994-12-02 | 1997-12-30 | University Of British Columbia | Meso-monoiodo-substituted tetramacrocyclic compounds and methods for making and using the same |
US6013241A (en) | 1995-01-23 | 2000-01-11 | Schering Aktiengesellschaft | Use of porphyrin-complex or expanded porphyrin-complex compounds as an infarction localization diagnosticum |
US5610175A (en) | 1995-04-06 | 1997-03-11 | Cytopharm, Inc. | 9-Substituted porphycenes |
US5637608A (en) | 1995-04-06 | 1997-06-10 | Cytopharm, Inc. | 9-substituted porphycenes |
AU6497996A (en) | 1995-08-02 | 1997-02-26 | Warner-Lambert Company | Amino acid complexes of cobalt (iii) mesoporphyrin ix and cobalt (iii) protoporphyrin ix |
US5877165A (en) | 1995-11-02 | 1999-03-02 | Brookhaven Science Associates | Boronated porhyrins and methods for their use |
US6620805B1 (en) | 1996-03-14 | 2003-09-16 | Yale University | Delivery of nucleic acids by porphyrins |
US6004530A (en) | 1996-06-04 | 1999-12-21 | Roche Diagnostics Gmbh | Use of metallo-porphyrin conjugates for the detection of biological substances |
EP0812920A1 (en) | 1996-06-14 | 1997-12-17 | Packard Instrument B.V. | Use of porphyrins in instrumental detection methods |
US6002026A (en) | 1996-07-26 | 1999-12-14 | The Trustees Of Princeton University | Catalytic oxygenation of hydrocarbons by metalloporphyrin and metallosalen complexes |
US5756492A (en) | 1996-09-09 | 1998-05-26 | Sangstat Medical Corporation | Graft survival prolongation with porphyrins |
US6104714A (en) | 1996-09-26 | 2000-08-15 | International Business Machines Corporation | Method and apparatus for allowing communication in an isochronous traffic of asynchronous transfer mode (ATM) cells in a ring network |
US6028025A (en) | 1996-10-21 | 2000-02-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Metalloporphyrin oxidation catalyst covalently coupled to an inorganic surface and method making same |
US6124452A (en) | 1997-12-19 | 2000-09-26 | University Of Nebraska-Lincoln | Octafluoro-meso-tetraarylporphyrins and methods for making these compounds |
WO1998030102A1 (en) | 1997-01-09 | 1998-07-16 | Emory University | Non-iron metalloporphyrins and methods of use |
JP2001514617A (ja) | 1997-01-21 | 2001-09-11 | ジ・アメリカン・ナショナル・レッド・クロス | 両親媒性フェノチアジン−5−イウム染料と光による全血および血液成分の細胞内および細胞外汚染除去 |
WO1998033503A1 (en) | 1997-02-05 | 1998-08-06 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Porphyrin compounds as telomerase inhibitors |
EP1091742A4 (en) | 1997-02-14 | 2007-05-30 | Miravant Pharm Inc | PHOTOSENSITIVE INDIUM, FOR TPD |
US6462070B1 (en) | 1997-03-06 | 2002-10-08 | The General Hospital Corporation | Photosensitizer conjugates for pathogen targeting |
IL120891A0 (en) | 1997-05-22 | 1997-09-30 | Technion Res & Dev Foundation | Photodynamic and sonodynamic therapy and agents for use therefor |
DE19743903A1 (de) | 1997-07-16 | 1999-04-15 | Deutsch Zentr Luft & Raumfahrt | Verwendung von metallierten und/oder unmetallierten polymergebundenen Porphyrinen |
US5864044A (en) | 1997-07-24 | 1999-01-26 | Universite De Sherbrooke | Syntheses of trisulfonated phthalocyanines and their derivatatives using boron (111) subphthalocyanines as intermediates |
IT1294325B1 (it) | 1997-08-14 | 1999-03-24 | Molteni L E C Dei Fratelli Ali | Zinco-ftalocianine e relativi coniugati, preparazione e uso nella terapia fotodinamica e come diagnostici |
US6524379B2 (en) | 1997-08-15 | 2003-02-25 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Colorants, colorant stabilizers, ink compositions, and improved methods of making the same |
CA2309154C (en) | 1997-11-03 | 2010-02-16 | Duke University | Substituted porphyrins |
US6194566B1 (en) | 1997-12-02 | 2001-02-27 | Schering Aktiengesellschaft | Process for the production of metalloporphyrin-metal complex conjugates |
US6399769B1 (en) | 1998-01-20 | 2002-06-04 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Method of making sulfanatophenyl substituted porphines |
JP3673888B2 (ja) | 1998-03-09 | 2005-07-20 | 独立行政法人科学技術振興機構 | ポルフィリン類金属錯体の製造方法 |
US6103892A (en) | 1998-04-08 | 2000-08-15 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Catalyst that oxidizes steroids and other substrates with catalytic turnover |
AU771259B2 (en) | 1998-04-24 | 2004-03-18 | Aeolus Sciences, Inc. | Substituted porphyrins |
US6136841A (en) | 1998-06-02 | 2000-10-24 | Schering Aktiengesellschaft | 3-, 8-substituted deuteroporphyrin derivatives, pharmaceutical agents that contain the latter, process for their production and their use in photodynamic therapy and MRI diagnosis |
US6147070A (en) | 1998-06-05 | 2000-11-14 | Facchini; Francesco | Methods and compositions for controlling iron stores to treat and cure disease states |
NL1009472C2 (nl) | 1998-06-23 | 1999-12-27 | Univ Leiden | Werkwijze voor het inactiveren van virussen. |
US6251367B1 (en) | 1998-07-24 | 2001-06-26 | Schering Aktiengesellschaft | Paramagnetic 3-,8-substituted deuteroporphyrin derivatives, pharmaceutical agents that contain the latter, process for their production, and their use for MR imaging of necrosis and infarction |
US6632808B1 (en) | 1998-08-11 | 2003-10-14 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors of amyloid formation |
CA2341507C (en) | 1998-08-28 | 2011-05-24 | William Guy Love | Porphyrin derivatives, their use in photodynamic therapy and medical devices containing them |
FI982422A0 (fi) | 1998-11-09 | 1998-11-09 | Arctic Diagnostics Oy | Porfyriiniyhdisteitä, niiden konjugaatit sekä määritysmenetelmiä pohjautuen näiden konjugaattien käyttöön |
EP1144512B1 (en) | 1999-01-19 | 2003-04-23 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Novel colorants, colorant stabilizers, ink compositions, and improved methods of making the same |
DK1155019T3 (da) | 1999-01-25 | 2006-04-18 | Nat Jewish Med & Res Center | Substituerede porphyriner og deres terapeutiske anvendelse |
WO2000052012A2 (en) | 1999-03-05 | 2000-09-08 | Emory University | A method for synthesizing porphyrin compounds |
US6107326A (en) | 1999-04-12 | 2000-08-22 | Cytopharm, Inc. | Porphycenes for treatment of microbial populations |
WO2000074674A1 (en) | 1999-06-03 | 2000-12-14 | Research Foundation Of The City University Of New York | Novel porphyrin derivatives for photodynamic therapy |
US6448239B1 (en) | 1999-06-03 | 2002-09-10 | Trustees Of Princeton University | Peroxynitrite decomposition catalysts and methods of use thereof |
US6324091B1 (en) | 2000-01-14 | 2001-11-27 | The Regents Of The University Of California | Tightly coupled porphyrin macrocycles for molecular memory storage |
US6208553B1 (en) | 1999-07-01 | 2001-03-27 | The Regents Of The University Of California | High density non-volatile memory device incorporating thiol-derivatized porphyrins |
US6436171B1 (en) | 1999-07-22 | 2002-08-20 | The Boc Group, Inc. | Oxygen-selective adsorbents |
US6372727B1 (en) | 1999-10-13 | 2002-04-16 | Uab Research Foundation | Metalloporphyrin treatment of neurologic disease |
US6245707B1 (en) | 1999-10-28 | 2001-06-12 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Methanol tolerant catalyst material |
US20040208855A1 (en) | 1999-11-17 | 2004-10-21 | Allison Beth Anne | Use of PDT to inhibit intimal hyperplasia |
US6548045B2 (en) | 1999-11-30 | 2003-04-15 | Photochemical Co., Ltd. | Nitroimidazole substituted porphyrin complex |
US6272038B1 (en) | 2000-01-14 | 2001-08-07 | North Carolina State University | High-density non-volatile memory devices incorporating thiol-derivatized porphyrin trimers |
US6212093B1 (en) | 2000-01-14 | 2001-04-03 | North Carolina State University | High-density non-volatile memory devices incorporating sandwich coordination compounds |
WO2001071318A1 (en) | 2000-03-21 | 2001-09-27 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Colorimetric artificial nose having an array of dyes and method for artificial olfaction |
US6368558B1 (en) | 2000-03-21 | 2002-04-09 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Colorimetric artificial nose having an array of dyes and method for artificial olfaction |
DE60008354T2 (de) | 2000-06-15 | 2004-12-09 | L. Molteni & C. dei Fratelli Alitti Società di Esercizio S.p.A. | Substituierte Metallphthalocyaninen, ihre Herstellung und Verwendung |
US6857926B1 (en) | 2000-06-19 | 2005-02-22 | Advanced Lighting Technologies, Inc. | Method of making arc tubes |
US6403788B1 (en) | 2000-07-11 | 2002-06-11 | Eukarion, Inc. | Non-genotoxic metalloporphyrins as synthetic catalytic scavengers of reactive oxygen species |
US6407330B1 (en) | 2000-07-21 | 2002-06-18 | North Carolina State University | Solar cells incorporating light harvesting arrays |
US6420648B1 (en) | 2000-07-21 | 2002-07-16 | North Carolina State University | Light harvesting arrays |
FR2812637B1 (fr) | 2000-08-01 | 2002-10-25 | Anulm Ass Nantaise Pour L Util | Nouveaux composes derives de dihydroporphyrine et leurs applications |
WO2002013820A1 (en) | 2000-08-11 | 2002-02-21 | Ceramoptec Industries, Inc. | Photosensitizing ointment |
JP4049357B2 (ja) | 2000-08-11 | 2008-02-20 | 独立行政法人科学技術振興機構 | ポルフィリン環が互いにメゾ−メゾ炭素結合と2つのβ−β炭素の結合との三つの結合により一方向に縮環したポルフィリン化合物およびその合成方法 |
US6573258B2 (en) * | 2000-09-27 | 2003-06-03 | Frontier Scientific, Inc. | Photodynamic porphyrin antimicrobial agents |
EP1197229A1 (en) | 2000-10-13 | 2002-04-17 | Boston Clinics PDT B.V. | Method of inactivating microorganisms |
EP1197147A1 (en) | 2000-10-13 | 2002-04-17 | Boston Clinics PDT B.V. | Method of inactivating viral particles in a blood product |
JP2004523501A (ja) | 2000-12-15 | 2004-08-05 | マイトコー | コバルト−ポリフィリン錯体および肥満抑制薬としてのそれらの使用 |
EP1392328B1 (en) | 2001-01-19 | 2009-08-12 | National Jewish Medical and Research Center | Medicament for protection in radiotherapy |
GB0104177D0 (en) | 2001-02-20 | 2001-04-11 | Isis Innovation | Aryl-aryl dendrimers |
PT102572B (pt) | 2001-03-05 | 2004-01-30 | Univ Aveiro | Sintese e aplicacao de porfirinas em formulacoes aintivirais |
PT102581B (pt) | 2001-03-14 | 2004-01-30 | Univ Aveiro | Aplicacao de porfirinas em formulacoes antifungicas |
US6683175B2 (en) | 2001-04-12 | 2004-01-27 | Canon Kabushiki Kaisha | Porphyrin compound, and electrophotographic photosensitive member, process-cartridge and apparatus using the compound |
US6642376B2 (en) | 2001-04-30 | 2003-11-04 | North Carolina State University | Rational synthesis of heteroleptic lanthanide sandwich coordination complexes |
EP1401430A4 (en) | 2001-05-31 | 2005-10-19 | Miravant Pharm Inc | SUBSTITUTED PORPHYRIN AND AZAPORPHYRIN DERIVATIVES AND USE IN PHOTODYNAMIC THERAPY, RADIOIMAGING, AND MRI DIAGNOSIS |
WO2002096366A2 (en) | 2001-05-31 | 2002-12-05 | Miravant Pharmaceuticals, Inc. | Metallotetrapyrrolic photosensitizing agents for use in photodynamic therapy |
WO2002098431A1 (en) | 2001-06-01 | 2002-12-12 | National Jewish Medical And Research Center | Oxidant scavengers for treatment of diabetes or use in transplantation or induction of immune tolerance |
US6566517B2 (en) | 2001-06-06 | 2003-05-20 | Brookhaven Science Associates, Llc | Metalloporphyrins and their uses as imageable tumor-targeting agents for radiation therapy |
GB0114155D0 (en) | 2001-06-11 | 2001-08-01 | Unilever Plc | Complex for catalytically bleaching a substrate |
DE10132490B4 (de) | 2001-07-03 | 2007-04-12 | Hahn-Meitner-Institut Berlin Gmbh | Platinfreies Chelat-Katalysatormaterial für die selektive Sauerstoffreduktion und Verfahren zu seiner Herstellung |
EP1279676A1 (en) | 2001-07-19 | 2003-01-29 | Institut Curie | Porphyrin derivatives for photodynamic therapy |
JP5000050B2 (ja) | 2001-08-31 | 2012-08-15 | 浩 前田 | 抗腫瘍剤及びその製造方法 |
US7025734B1 (en) | 2001-09-28 | 2006-04-11 | Advanced Cardiovascular Systmes, Inc. | Guidewire with chemical sensing capabilities |
US20050090428A1 (en) | 2002-01-08 | 2005-04-28 | Emory University | Porphyrins with virucidal activity |
IL147898A (en) | 2002-01-30 | 2007-05-15 | Yuval Golan | A method of treating cancer based on the Ugar effect |
US20030176326A1 (en) | 2002-03-15 | 2003-09-18 | Ceramoptec Industries Inc. | Photosensitzers for photodynamic therapy of microbial infections |
US6951935B2 (en) | 2002-03-28 | 2005-10-04 | University Of Tennessee Research Foundation | Heteroatom-substituted porphyrins and methods for synthesis of same |
US20060030718A1 (en) | 2002-03-28 | 2006-02-09 | University Of Tennessee Research Foundation | Cobalt-based catalysts for the cyclization of alkenes |
US7417142B2 (en) | 2002-03-28 | 2008-08-26 | The University Of Tennessee Research Foundation, Inc. | Chiral porphyrins, chiral metalloporphyrins, and methods for synthesis of the same |
NL1020336C2 (nl) | 2002-04-09 | 2003-10-13 | Photobiochem Leiden N V | Toepassing van een verbinding voor de bereiding van een farmaceutisch preparaat voor het behandelen van brandwonden, en een werkwijze voor het behandelen van brandwonden. |
RU2238950C2 (ru) | 2002-04-25 | 2004-10-27 | Небольсин Владимир Евгеньевич | Производные гемина и их фармацевтически приемлемые соли, способ получения, применение и фармацевтическая композиция |
NZ536666A (en) | 2002-06-04 | 2007-10-26 | Infacare Pharmaceutical Corp | Preparation of metal mesoporphyrin halide compounds |
AU2003240512B2 (en) | 2002-06-04 | 2009-11-05 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Device and method for rapid aspiration and collection of body tissue from within an enclosed body space |
US7375216B2 (en) | 2002-06-04 | 2008-05-20 | Infacare Pharmaceutical Corporation | Preparation of metal mesoporphyrin compounds |
AU2003237500A1 (en) | 2002-06-07 | 2003-12-22 | Duke University | Substituted porphyrins |
US20040019204A1 (en) | 2002-07-23 | 2004-01-29 | Chi-Ming Che | Intramolecular amidation of sulfamate esters catalyzed by metalloporphyrins |
US20040127479A1 (en) | 2002-08-27 | 2004-07-01 | Merck Patent Gmbh | Peroxynitrite rearrangement catalysts |
EP1545512B1 (en) | 2002-09-16 | 2013-03-20 | The University of Hong Kong | Gold (III) complexes as anti-tumor and anti-HIV agents |
ITFI20020200A1 (it) | 2002-10-21 | 2004-04-22 | Molteni & C Dei Flii Alitti S P A Societa L | Porfirine meso-sostituite. |
EP1422311B1 (en) | 2002-11-19 | 2007-02-28 | Hitachi Tool Engineering Ltd. | Hard film and hard film coated tool |
GB0227259D0 (en) | 2002-11-21 | 2002-12-31 | Photobiotics Ltd | Porphyrin derivatives |
CA2505608A1 (en) | 2002-12-06 | 2004-06-24 | Alcon, Inc. | Superoxide dismutase mimics for the treatment of ocular disorders and diseases |
GB2397067B (en) * | 2002-12-23 | 2005-05-11 | Destiny Pharma Ltd | Porphin & azaporphin derivatives with at least one cationic-nitrogen-containing meso-substituent for use in photodynamic therapy & in vitro sterilisation |
NL1022597C2 (nl) | 2003-02-05 | 2004-08-06 | Photobiochem N V | Toepassing van een fotosensitizerverbinding voor de bereiding van een farmaceutisch preparaat, werkwijze voor het bereiden van een farmaceutisch preparaat en een werkwijze voor het behandelen van een zoogdier. |
FR2854633B1 (fr) | 2003-05-07 | 2005-06-24 | Sanofi Synthelabo | Derives de piperidinyl-et piperazinyl-alkylcarbamates, leur preparation et leur application en therapeutique |
US7008937B2 (en) | 2003-06-10 | 2006-03-07 | Frontier Scientific, Inc. | Porphyrins and metalloporphyrins for inhibiting heme iron uptake |
US20050008687A1 (en) | 2003-07-07 | 2005-01-13 | Makoto Yuasa | Metal-porphyrin-complex-embedded liposomes, production process thereof, and medicines making use of the same |
DE10335457B4 (de) | 2003-08-02 | 2005-08-18 | Schott Ag | Verfahren zur quantitativen Bestimmung der Eignung von optischen Materialien für optische Elemente bei hohen Energiedichten, derart bestimmte optische Materialien sowie deren Verwendung |
NL1025049C2 (nl) | 2003-12-18 | 2005-06-21 | Photobiochem N V | Werkwijze voor de bereiding van porfyrinederivaten. |
FR2867473B1 (fr) | 2004-03-12 | 2006-06-23 | Guerbet Sa | Compose de porphyrines et utilisation a haut champ en irm |
US7432369B2 (en) | 2004-03-29 | 2008-10-07 | Inotek Pharmaceuticals Corporation | Pyridyl-substituted porphyrin compounds and methods of use thereof |
US6995260B2 (en) | 2004-05-20 | 2006-02-07 | Brookhaven Science Associates, Llc | Carboranylporphyrins and uses thereof |
US7738423B2 (en) | 2004-07-09 | 2010-06-15 | Alcatel-Lucent Usa Inc. | Cell switching and packet combining in a wireless communication system |
US7582750B2 (en) | 2004-08-17 | 2009-09-01 | University Of Hong Kong | Method for conversion of terminal alkenes to aldehydes using ruthenium (IV) porphyrin catalysts |
-
2002
- 2002-12-23 GB GB0229742A patent/GB2397067B/en not_active Expired - Fee Related
-
2003
- 2003-12-23 CN CNB2003801099372A patent/CN100360536C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2003-12-23 AU AU2003295157A patent/AU2003295157B8/en not_active Expired
- 2003-12-23 CA CA2527155A patent/CA2527155C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-12-23 WO PCT/GB2003/005649 patent/WO2004056828A2/en active IP Right Grant
- 2003-12-23 NZ NZ540918A patent/NZ540918A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-12-23 PT PT03786158T patent/PT1578750E/pt unknown
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