CN101143872B - 3-卤素取代头孢菌素衍生物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及新的3位由卤素取代的头孢菌素衍生物、其易水解的酯、或其药学上可接受的盐，这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在制备用于治疗和/或预防感染性疾病的药物中的应用，属于医药技术领域。研究发现新的头孢菌素衍生物、其易水解的酯、或其药学上可接受的盐，具有广谱、高效的抗菌作用、耐药性小等优点，具有良好的临床使用价值，可广泛用于临床。

Description

3-卤素取代头孢菌素衍生物

1、技术领域

本发明涉及新的3位由卤素取代的头孢菌素衍生物、其易水解的酯、或其药学上可接受的盐，这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在制备用于治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途，属于医药技术领域。

2、背景技术

头孢菌素的抗菌谱广、抗菌作用强，对多数革兰氏阳性及阴性菌有较好的抗菌作用，在当今临床治疗呼吸道感染及泌尿道感染中广泛应用。但是随之而来的则是细菌的耐药性，耐药性的不断产生和泛滥使感染性疾病越来越难防治，因此新的广谱、高效且抗耐药菌药物的研发已成为国内外关注的焦点。

3、发明内容

为了克服临床上广泛的耐药性，使感染性疾病得到更好的治疗，本发明提供了新的3位由卤素取代的头孢菌素衍生物，其具有广谱、高效、耐药性小的特点。

本发明的技术方案如下：

本发明提供了通式(1)所示的化合物、其易水解的酯、或其药学上可接受的盐：

其中：R₁为氟、氯、溴或碘原子；

R₂为氢原子、1～6个碳原子的直链或支链的烷基或被1～2个碳原子的烷基取代的或未取代的3～7个碳原子的环烷基或苯基。

上文所述的1～6个碳原子的直链或支链的烷基包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、戊基、新戊基、己基等。

上文所述的被1～2个碳原子的烷基取代的或未取代的3～7个碳原子的环烷基或苯基包括环丙基、环丁基、甲基环丙基、环戊基、2-甲基环丁基、3-甲基环丁基、乙基环丙基、环己基、2-甲基环戊基、3-甲基环戊基、2-乙基环丁基、3-乙基环丁基、环庚基、2-甲基-环己基、3-甲基-环己基、4-甲基-环己基、2-乙基环戊基、3-乙基环戊基、苯基、苄基等。

优选的化合物为：

R₁为氟、氯、溴或碘原子；

R₂为氢原子或1～4个碳原子的直链或支链的烷基。其中，列举部分化合物如表1所示：

表1  本发明的部分头孢菌素衍生物的分子式及分子量

化合物	R<sub>1</sub>	R<sub>2</sub>	分子式	分子量
					1	F	H	C<sub>13</sub>H<sub>10</sub>FN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	355.30
2	F	CH<sub>3</sub>	C<sub>14</sub>H<sub>12</sub>FN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	369.33
					3	F	CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>15</sub>H<sub>14</sub>FN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	383.35
4	F	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>16</sub>H<sub>16</sub>FN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	397.38
					5	F	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>17</sub>H<sub>18</sub>FN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	411.41
6	Cl	H	C<sub>13</sub>H<sub>10</sub>ClN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	371.75
					7	Cl	CH<sub>3</sub>	C<sub>14</sub>H<sub>12</sub>ClN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	385.78
8	Cl	CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>15</sub>H<sub>14</sub>ClN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	399.81
					9	Cl	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>16</sub>H<sub>16</sub>ClN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	413.83
10	Cl	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>17</sub>H<sub>18</sub>ClN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	427.86
					11	Br	H	C<sub>13</sub>H<sub>10</sub>BrN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	416.20
12	Br	CH<sub>3</sub>	C<sub>14</sub>H<sub>12</sub>BrN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	430.23
					13	Br	CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>15</sub>H<sub>14</sub>BrN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	444.26
14	Br	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>16</sub>H<sub>16</sub>BrN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	458.28
					15	Br	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>17</sub>H<sub>18</sub>BrN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	472.31
16	I	H	C<sub>13</sub>H<sub>10</sub>IN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	463.20
					17	I	CH<sub>3</sub>	C<sub>14</sub>H<sub>12</sub>IN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	477.23
18	I	CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>15</sub>H<sub>14</sub>IN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	491.26
					19	I	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>16</sub>H<sub>16</sub>IN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	505.28
20	I	CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	C<sub>17</sub>H<sub>18</sub>IN<sub>3</sub>O<sub>6</sub>S	519.31

最优的化合物为：

R₁为氯；R₂为甲基。

其化学名称和结构式如下：

化学名称：(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸。以下简称化合物A：

结构式：

本发明人对最优化合物A的衍生物进行了研究，发现其钠盐具有良好的水溶性。其化学名称和结构式如下：

化学名称：(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸钠盐。以下简称化合物B：

结构式：

本发明上述任一化合物易于水解的酯是其羧基以易于水解的酯基形式存在的化合物。这些酯可以是常规的，例如乙酰氧基乙酯、乙酸基甲基酯、新戊酰氧甲基酯、1-乙酸基乙基酯、1-新戊酰氧乙基酯、甲氧羰基氧甲基酯、1-乙氧羰基氧乙基酯、1-异丙基羰基氧乙基酯、苯并呋喃酮基酯、硫代苯并呋喃酮基酯、甲氧基甲基酯、乙酰氨基甲基酯。也可以使用其他的酯例如：苄基酯和氰基甲基酯。这些酯的其他实例如下：(2，2-二甲基-1-氧丙氧基)甲基酯；(1RS)-1-乙酰氧基乙酯；2-[(2-甲基丙氧基)羰基]-2-戊烯基酯；1-[[(1-甲基乙氧基)羰基]氧]乙基酯；1-(乙酸基)乙基酯；(5-甲基-2-氧代-1，3-间二氧杂环戊烯-4-基)甲基酯；1-[[(环己氧基)羰基]氧]乙基酯；3，3-二甲基-2-氧代丁基酯。对于本领域专业人员来说显而易见的是，本发明化合物的易于水解的酯可以在该化合物的游离羧基处形成，例如在2末位的羧基处。

本发明上述任一化合物药学上可接受的盐为有机酸盐、无机酸盐、有机碱盐或无机碱盐，其中有机酸包括乙酸、三氟乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、马来酸、琥珀酸、酒石酸、柠檬酸、富马酸；无机酸包括盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸；有机碱包括葡甲胺、氨基葡萄糖、精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸、组氨酸；无机碱包括碱金属钠、钾、锂的碱性化合物，碱土金属包括钡、钙、镁的碱性化合物。

本发明还提供了制备上述化合物A的制备方法，但不仅限于下述制备方法，也可以通过其他方法制得：

方法一：

反应方程式：

反应步骤：

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酰氯(II)的制备

在干燥的反应瓶中，加入顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸铵，甲苯，无水N，N-二甲基甲酰胺，室温搅拌下，滴加草酰氯反应。反应毕，迅速降温至0℃，加入水，搅拌，分离出甲苯层，用无水Na₂SO₄进行干燥，减压回收溶剂得到黄色油状物，溶于丙酮中，得到(II)的丙酮溶液(备用)。

(2)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备

在干燥反应瓶中，依次加入7-ACCA、水，用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH，搅拌溶解后，滴加(II)的丙酮溶液，滴毕，保温搅拌，反应毕，用稀盐酸调节pH，有白色固体析出，过滤，真空干燥，得到白色固体(I)。

方法二：

反应方程式：

反应步骤：

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酸(II)的制备

在反应瓶中，加入顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸铵溶于水，搅拌溶解下，迅速降温，滴加盐酸。用二氯甲烷萃取，合并有机相，减压回收溶剂，残余物真空干燥，得到白色固体(II)。

(2)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃基-(Z)-硫代乙酸苯胼噻唑酯(III)的制备

在三口瓶中，依次加入(II)，促进剂DM，三乙胺，加入CH₂Cl₂混合，开始搅拌，滴加亚磷酸三乙酯及CH₂Cl₂混合液，控制滴加速度，使反应液温度保持在25～30℃，滴加，加完后降温，抽滤，用乙腈洗涤，置真空干燥箱内干燥，得到淡黄色固体(III)。

(3)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备

在四口瓶中，依次加入乙腈，7-ACCA，用三乙胺调节pH值，加入N，N二甲基乙酰胺，搅拌溶解，然后加入(III)的乙腈溶液，搅拌反应2h后，加入蒸馏水，搅拌，反应结束，静置分层，有机相用水洗涤，合并水相，并用CH₂Cl₂洗涤水相，上述水相加入THF，用HCl调pH值，析出白色固体，过滤，滤饼分别用异丙醇和丙酮洗涤，干燥得到白色固体(I)。

方法三：

反应方程式：

反应步骤：

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酸-(对甲苯磺酸)酐(II)的制备

在干燥的反应瓶中，加入顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸，二氯甲烷，无水N，N-二甲基甲酰胺，迅速降温，搅拌，滴加对甲苯磺酰氯的二氯甲烷溶液反应。反应毕，降温，加水，搅拌，分离出有机层，用无水Na₂SO₄进行干燥，减压回收溶剂得到黄色油状物。溶于丙酮中，得到(II)的丙酮溶液(备用)。

(2)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备

在干燥的反应瓶中，依次加7-ACCA、水，用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH，搅拌溶解后，滴加(II)的丙酮溶液，滴毕，保温搅拌，反应毕，用稀盐酸调节pH，有白色固体析出，过滤，真空干燥，得到白色固体(I)。

方法四：

反应方程式：

反应步骤：

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酰氯(II)的制备

在干燥的反应瓶中，五氯化磷加到的无水二氯甲烷中，冷却，加入滴加的DMA，在-15℃下搅拌反应，加入顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸铵侧链，保持温度反应。加入碎冰，继续搅拌，然后分离出有机相，即得到的(II)的二氯甲烷溶液(待用)。

(2)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备

在干燥反应瓶中，依次加入7-ACCA，DMA，乙腈，在0℃以下，滴加三乙胺，得到浅黄色的溶液，然后滴加(II)的二氯甲烷溶液，然后让其自然的升温，但是一定要控制在0℃以下反应，反应毕，用盐酸调节pH，分离出有机相，蒸除溶剂，得到深红色的溶液，向此溶液加入去离子水，有大量的粘稠状固体析出，将水倒出，用的水再洗涤，得到固体的粉末，然后，再加入去离子水，机械搅拌，过滤得到白色的粉末状固体。

本发明包括上面所述的任一化合物及其药学上可接受的盐与其它药用活性成分的药物组合物，如舒巴坦及其钠盐、他唑巴坦及其钠盐、克拉维酸及其钾盐。

本发明进一步要求保护包括上面所述的任一化合物及其药学上可接受的盐与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物，其中含有按式(1)所述化合物0.1g～5g的活性组分，可以为0.1g、0.125g、0.25g、0.5g、0.75g、1g、1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.5g、3g、4g、5g等，例如对优选化合物A及其衍生物如B而言，可以为0.1g、0.125g、0.25g、0.5g、0.75g、1g、1.25g、1.5g、1.75g、2g、2.5g、3g、4g、5g等(以化合物A计)，优选0.25g、0.5g、1g、2g。

本发明化合物及其药学上可接受的盐可以口服或肠胃外给药等方式施用于需要这种治疗的患者。用于肠胃外给药时，可将其制成注射剂，注射剂系指药物制成的供注入体内的溶液、乳液或混悬液及供临用前配制或稀释成溶液或混悬液的粉末或浓溶液的无菌制剂，包括注射液、注射用无菌粉末和注射用浓溶液。注射液系指药物制成的供注射入体内用的无菌溶液型注射液、乳液型注射液或混悬型注射液，其标示装量可以为0.5ml、1ml、2ml、5ml、10ml、20ml、50ml、100ml、200ml、250ml、500ml等，一般不小于100ml的供静脉滴注用的大体积注射液也称静脉输液。注射用无菌粉末系指药物制成的供临用前用适宜的无菌溶液配制成澄清溶液或均匀混悬液的无菌粉末或无菌块状物，无菌粉末可以用溶媒结晶法、喷雾干燥法或冷冻干燥法等制得。注射用浓溶液系指药物制成的供临用前稀释供静脉滴注用的无菌浓溶液。

用于口服给药时，可将其制成常规的固体制剂，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂和口服溶液剂等。片剂系指药物与适宜的辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的固体制剂；片剂以口服普通片为主，另有含片、舌下片、口腔贴片、咀嚼片、分散片、可溶片、泡腾片、缓释片、控释片与肠溶片等。胶囊剂系指药物或加有辅料充填于空心胶囊或密封于软质囊材中的固体制剂；胶囊剂依据其溶解与释放特性，可分为硬胶囊(通称为胶囊)、软胶囊(胶丸)、缓释胶囊、控释胶囊和肠溶胶囊。颗粒剂系指药物与适宜的辅料制成具有一定粒度的干燥颗粒状制剂；颗粒剂可分为可溶颗粒(通称为颗粒)、混悬颗粒、泡腾颗粒、肠溶颗粒、缓释颗粒和控释颗粒等。丸剂系指药物与适宜的辅料均匀混合，以适当方法制成的球状或类球状固体制剂；丸剂包括滴丸、糖丸、小丸等。口服溶液剂系指药物溶解于适宜溶剂中制成供口服的澄清液体制剂。

本发明化合物及其药学上可接受的盐的制剂可采用现有制药领域中的常规方法生产，需要的时候可以添加各种药学上可接受的载体。所述的载体包括药学领域常规的渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。

本发明化合物及其药学上可接受的盐在制成注射剂时，所用溶剂可以是水性溶剂和非水性溶剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂，如渗透压调节剂、pH值调节剂、增溶剂、抗氧剂、抑菌剂、乳化剂、助悬剂等。水性溶剂最常用的水性溶剂为注射用水，也可用0.9％氯化钠溶液或其他适宜的水溶液；非水性溶剂常用的非水性溶剂为植物油，主要为供注射用大豆油，其他还有乙醇、丙二醇、聚乙二醇等的水溶液。常用的渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、氯化钾、氯化镁、氯化钙、山梨醇等，优选氯化钠或葡萄糖；常用的pH值调节剂包括醋酸+醋酸钠、乳酸、枸橼酸+枸橼酸钠、碳酸氢钠+碳酸钠等；常用的增容剂包括聚山梨酯80、丙二醇、卵磷脂、聚氧乙烯蓖麻油等；常用的抗氧剂包括亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠等；常用抑菌剂包括苯酚、甲酚、三氯叔丁醇、苯甲醇等。

本发明化合物及其药学上可接受的盐在制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。填充剂包括淀粉、糖粉、磷酸钙、硫酸钙二水物、糊精、微晶纤维素、乳糖、预胶化淀粉、甘露醇等；粘合剂包括羧甲基纤维素钠、PVP-K30、羟丙基纤维素、淀粉浆、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙甲纤维素、胶化淀粉等；崩解剂包括干淀粉、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等；润滑剂包括硬脂酸镁、滑石粉、十二烷基硫酸钠、微粉硅胶等。

本发明还进一步要求保护头孢菌素衍生物在制备用于治疗和/或预防感染性疾病的药物中的用途，本发明的头孢菌素衍生物对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、B型化脓性链球菌、淋病奈瑟氏菌等细菌均有良好的抗菌活性，可用于治疗和/或预防哺乳动物(包括人)的由病原微生物引起的各种疾病，可治疗由敏感菌所致的呼吸系统、泌尿系统、耳鼻喉科及皮肤软组织感染，对败血症、脑膜炎也有效。

本发明的头孢菌素衍生物具有以下优点：

(1)首次提供了一种新的头孢菌素衍生物，尤其是(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(即上述优选化合物A)。

(2)本发明进一步对上述优选化合物即化合物A的衍生物进行研究，实验发现其钠盐即化合物B具有更好的水溶性。

(3)本发明进一步对上述优选化合物即化合物A进行药效学实验，结果表明其具有广谱、高效的抗菌作用及耐药性小等优点。

(4)本发明化合物的制备工艺简单，药品纯度高、收率高、质量稳定，易于进行大规模工业生产。

以下通过实验例来进一步阐述本发明的头孢菌素衍生物的有益效果，这些实验例包括本发明的新的头孢菌素衍生物的药效学实验。本发明的新的头孢菌素衍生物具有下列有益效果，但不应将此理解为本发明的新的头孢菌素衍生物仅具有下列有益效果。

以下实验例中化合物A表示(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸。

实验例1：化合物A的抗菌谱及抗菌活性

供试菌种：金黄色葡萄球菌ATCC25923、表皮葡萄球菌CMCC02502、大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC49790、卡他莫拉菌ATCC3658、流感嗜血杆菌CMCC00332、淋病奈瑟氏菌ATCC49266、B型化脓性链球菌CMCC02404、肺炎链球菌ATCC49619。

实验方法：

(1)试管法

实验菌液的制备：从新鲜菌种斜面蘸取少量菌苔，接种在适合实验菌生长的培养基上，于规定温度培养适当的时间，培养后作为原菌液，用灭菌生理盐水进行10倍系列的稀释，取适宜浓度的0.1ml菌液测定活菌数。

取灭菌试管15支，各加入肉汤1ml，第一管加入药物原液1ml，混匀后取1ml加入第二管，依次稀释至第15管，从第15管取出1.0ml于一灭菌试管内不加实验菌作为空白对照，其余试管各加入0.1ml菌液，同时设阳性对照。置培养箱中培养18小时，观察结果，以肉眼观察无细菌生长的药物浓度作为最低抑菌浓度MIC(μg/ml)，取无菌生长的试管中0.01ml液体接种于平板上，测出和MBC(最低杀菌浓度，μg/ml)。

(2)药敏纸片法

菌悬液的制备：挑取3～5个菌落，置肉汤中孵育2～6小时，其浊度相当于0.5号麦氏浊度或用生理盐水调至0.5号麦氏浊度，此时肉汤中细菌数约为1亿个细菌/ml。

接种M-H平板：在琼脂平板上均匀的涂布一层稀释的实验菌，用无菌镊子将待测药纸片均匀的贴在平板上，在适宜温度下培养18小时，取出平板，测量纸片周围抑菌圈直径(mm，每张纸片含药量均为10μg)。

表2  化合物A的抗菌谱及抗菌活性

实验结果及结论：结果见表2。

从表2可以看出，化合物A对所有供试菌种的MIC值和MBC值都较低，且抑菌圈也很大，表明化合物A对所有供试菌种均有很好的抑菌作用及杀菌作用。

上述实验结果中，化合物A对供试菌种的抑菌效果及杀菌效果均很好，表明本发明的新的头孢菌素衍生物对各菌属的革兰氏阳性及革兰氏阴性菌均有较好的作用，因此本发明的新的头孢菌素衍生物具有抗菌谱广、抗菌活性高的优点，为具有很好的临床应用潜力的新化合物。

实验例2：化合物A的耐药性研究

实验菌株：实验用菌株主要来源于包括痰、分泌物、咽拭子、血液、尿液、胸腔积液、腹腔积液等。共分离出656株大肠埃希菌，628株肺炎克雷伯菌两种革兰氏阴性杆菌，其余分离的菌株未作统计。

供试品：头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮、头孢他啶、头孢地尼、头孢泊肟酯7种头孢类抗生素均市购。本发明化合物A，自制。

方法：采用纸片扩散法、Microscam系统的MIC法进行药敏实验，严格按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2005年制定的规则进行操作及判读。

质量控制：每批实验同时用标准大肠埃希菌ATCC25924、标准肺炎克雷伯菌ATCC700603测定相对应抗生素纸片。

表3  化合物A的耐药情况

注：S：敏感；R：耐药。

实验结果及结论：结果见表3。通过临床分离的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮、头孢他啶、头孢地尼、头孢泊肟酯以及本发明化合物A的耐药率表明：头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮、头孢他啶、头孢地尼、头孢泊肟酯对大肠埃希菌的耐药率均已在40％以上，而本发明化合物A的耐药率仅为13.26％，说明本发明化合物A对大肠埃希菌的的抗菌活性高于头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮、头孢他啶、头孢地尼、头孢泊肟酯；头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮、头孢他啶、头孢地尼、头孢泊肟酯对肺炎克雷伯菌的耐药率均已在35％以上，而本发明化合物A的耐药率仅为13.06％，说明本发明化合物A对肺炎克雷伯菌的抗菌活性均高于头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠、头孢哌酮、头孢他啶、头孢地尼、头孢泊肟酯。实验结果表明本发明化合物A在抗革兰氏阴性菌耐药性方面有意想不到的优点。

4、具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。以下实施例中各剂型的辅料可以用药学上可接受的辅料替换，或者减少、增加。

以下实施例中用化合物A表示(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸。

用化合物B表示(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸钠盐。

实施例1  化合物A的制备方法一

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酰氯(II)的制备

在干燥的反应瓶中，加入顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸铵3.72g(0.02mol)，甲苯40ml，无水N，N-二甲基甲酰胺1ml，室温搅拌下，滴加草酰氯1.6ml(0.013mol)，于20～30℃反应60min。反应毕，迅速降温至0℃，加入20ml的水，搅拌5分钟，分离出甲苯层，用无水Na₂SO₄进行干燥，减压回收溶剂得到黄色油状物2.78g，收率为74.1％，溶于20ml丙酮中，得到(II)的丙酮溶液(备用)。

(2)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备(即化合物A)

在250ml的干燥反应瓶中，依次加入2.81g(0.012mol)7-ACCA，40ml水，用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH至7.5，搅拌溶解后，于0～5℃下，滴加(II)的丙酮溶液，滴毕，保温搅拌2小时，反应毕，用2mol/L的稀盐酸调节pH至2，有白色固体析出，过滤，真空干燥，得到白色固体(I)2.78g，收率60.1％。

分子式：C₁₄H₁₂ClN₃O₆S

分子量：385.78

元素分析结果：

实测值：C：43.65％，H：3.15％，Cl：9.15％，N：10.92％，S：8.30％

理论值：C：43.59％，H：3.14％，Cl：9.19％，N：10.89％，S：8.31％

实施例2  化合物A的制备方法二

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酸(II)的制备

在100ml的反应瓶中，加入顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸铵1.86g(0.01mol)及40ml水，搅拌溶解后，迅速降温至0℃以下，滴加5ml2mol/L的盐酸。用40ml的二氯甲烷萃取2次，合并有机相，减压回收溶剂，残余物真空干燥，得到1.55g白色固体(II)，收率为91.7％。

(2)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃基-(Z)-硫代乙酸苯胼噻唑酯(III)的制备

在100ml的三口瓶中，依次加入3.38g(0.02mol)的(II)，促进剂DM8g(0.024mol)，三乙胺4ml，加入50mlCH₂Cl₂混合，开始搅拌，在20℃滴加10ml亚磷酸三乙酯及10mlCH₂Cl₂混合液，控制滴加速度，使反应液温度保持在25～30℃，1h内滴加，加完后降温到10℃以下，抽滤，用20ml乙腈洗涤三次，置真空干燥箱内干燥，得到淡黄色固体4.54g(III)，产率为71.4％。

(3)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备(即化合物A)

在250ml四口瓶中，依次加入100ml乙腈，2.35g(0.01mol)7-ACCA，用三乙胺调节PH值到8.5，加入0.5mlN，N二甲基乙酰胺，搅拌溶解，然后加入(III)的乙腈溶液20ml，搅拌反应2h后，加入30ml蒸馏水，搅拌5min，反应结束，静置分层，有机相用60ml水洗涤2次，合并水相，并用CH₂Cl₂洗涤水相3次，上述水相加入10mlTHF，用2mol/L的HCl调pH值到2，析出白色固体，过滤，滤饼分别用20ml异丙醇和20ml丙酮洗涤2次，干燥得到白色固体(I)2.96g，产率76.8％。

分子式：C₁₄H₁₂ClN₃O₆S

分子量：385.78

元素分析结果：

实测值：C：43.57％，H：3.03％，Cl：9.21％，N：10.95％，S：8.34％

理论值：C：43.59％，H：3.14％，CL：9.19％，N：10.89％，S：8.31％

实施例3  化合物A的制备方法三

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酸-(对甲苯磺酸)酐(II)的制备

在干燥的反应瓶中，加入顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸铵3.72g(0.02mol)，二氯甲烷40ml，无水N，N-二甲基甲酰胺1ml，迅速降温至-15℃，搅拌，滴加4.96g对甲苯磺酰氯的二氯甲烷溶液20ml，于-15～-10℃反应4小时。反应毕，降温至-15℃，加入20ml的水，搅拌5分钟，分离出有机层，用无水Na₂SO₄进行干燥，减压回收溶剂得到黄色油状物5.98g，收率为87.9％。溶于20ml丙酮中，得到(II)的丙酮溶液(备用)。

(2)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备(即化合物A)

在250ml干燥的反应瓶中，依次加入2.35g(0.01mol)7-ACCA，40ml水，用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH至7.5，搅拌溶解后，于-5～0℃下，滴加(II)的丙酮溶液，滴毕，保温搅拌4小时，反应毕，用2mol/L的稀盐酸调节pH至2，有白色固体析出，过滤，真空干燥，得到白色固体(I)2.92g，收率75.7％。

分子式：C₁₄H₁₂ClN₃O₆S

分子量：385.78

元素分析结果：

实测值：C：43.51％，H：3.11％，Cl：9.25％，N：10.91％，S：8.34％

理论值：C：43.59％，H：3.14％，Cl：9.19％，N：10.89％，S：8.31％

实施例4  化合物A的制备方法四

(1)顺-2-甲氧亚胺基-2-呋喃乙酰氯(II)的制备

在干燥的反应瓶中，15g五氯化磷加到150ml的无水二氯甲烷中，冷却到-15℃，滴加27.5ml的DMA，在-15℃下搅拌反应30min后，加入12.4g(0.067mol)顺-2-甲氧亚氨基-2-呋喃乙酸铵侧链，保持温度反应2小时。加入10g碎冰，继续搅拌10min，然后分离出有机相，即得到的(II)的二氯甲烷溶液(待用)。

(2)(6R，7R)-7-[2-呋喃基-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸(I)的制备

250ml的干燥反应瓶中，依次加入13.25g(0.056mol)7-ACCA，75mlDMA，75ml乙腈，在0℃以下，滴加42ml的三乙胺，滴加时间在半小时以内，得到浅黄色的溶液，然后在-10℃下，滴加(II)的二氯甲烷溶液，一小时内滴加完毕，然后让其自然的升温，控温在0℃以下，反应3小时，反应毕，用2mol/L的盐酸调节pH至2，分离出有机相，蒸除溶剂，得到深红色的溶液，向此溶液加入1000ml的去离子水，有大量的粘稠状固体析出，将水倒出，用400ml的水再洗涤3次，得到固体的粉末，然后，再加入400ml的去离子水，机械搅拌12小时，过滤得到白色的粉末状固体14.6g(0.038mol)。收率为67.8％。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ：13.95(1H，m)，9.86(1H，d)，7.84(1H，s)，6.65(2H，d)，5.83(1H，q)，5.28(1H，d)，3.99(1H，d)，3.89(3H，s)，3.71(1H，d)

分子式：C₁₄H₁₂ClN₃O₆S

分子量：385.78

元素分析结果：

实测值：C：43.55％，H：3.12％，Cl：9.23％，N：10.90％，S：8.32％

理论值：C：43.59％，H：3.14％，Cl：9.19％，N：10.89％，S：8.31％

实施例5  化合物A、化合物B无菌粉针的制备

1、处方：

处方1：

化合物A或化合物B  250g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

共制备            1000支

处方2：

化合物A或化合物B    500g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

共制备              1000支

处方3：

化合物A或化合物B    1000g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

共制备              1000支

处方4：

化合物A或化合物B    2000g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

共制备              1000支

2、制备工艺：

(1)将制备所用的抗生素玻璃瓶、胶塞等进行无菌处理；

(2)按处方称取原料(折算后投料)，将无菌粉末置于分装机中分装，随时检测装量；

(3)加塞，压盖，成品全检，包装入库。

实施例6  化合物A、化合物B片剂的制备

1、处方：

处方1：

化合物A或化合物B    250g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

预胶化淀粉          50g

低取代羟丙基纤维素  40g

微晶纤维素          40g

2％HPMC水溶液       适量

微粉硅胶            4.0g

硬脂酸镁            4.0g

羧甲淀粉钠          2.0g

共制备              1000片

处方2：

化合物A或化合物B      500g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

预胶化淀粉            80g

低取代羟丙基纤维素    50g

微晶纤维素            50g

2％HPMC水溶液         适量

微粉硅胶              8.0g

硬脂酸镁              8.0g

羧甲淀粉钠            4.0g

共制备                1000片

2、制备工艺：

(1)将原料粉碎过100目筛，其余辅料分别过100目筛，备用。

(2)按照处方量称取原料和辅料。

(3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。

(4)将化合物A(或化合物B)、预胶化淀粉、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。

(5)过20目筛制颗粒。

(6)颗粒在60℃的条件下烘干。

(7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁、微粉硅胶和羧甲淀粉钠，过18目筛整粒，混合均匀。

(8)取样，半成品化验。

(9)按照化验确定的片重压片。

(10)成品全检，包装入库。

实施例7  化合物A、化合物B胶囊的制备

1、处方

处方1：

化合物A或化合物B    250g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

预胶化淀粉          50g

低取代羟丙基纤维素  40g

微晶纤维素          40g

2％HPMC水溶液       适量

微粉硅胶            4.0g

硬脂酸镁            4.0g

共制备              1000粒

处方2：

化合物A或化合物B        125g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

预胶化淀粉              30g

低取代羟丙基纤维素      20g

微晶纤维素              20g

2％HPMC水溶液           适量

微粉硅胶                4.0g

硬脂酸镁                4.0g

共制备                  1000粒

2、制备工艺：

(1)将原料粉碎过100目筛，其余辅料分别过100目筛，备用。

(2)按照处方量称取原料和辅料。

(3)将羟丙甲纤维素溶于水中制成2％的水溶液备用。

(4)将化合物A(或化合物B)、预胶化淀粉、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入2％HPMC水溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材。

(5)过20目筛制颗粒。

(6)颗粒在60℃的条件下烘干。

(7)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁、微粉硅胶，过18目筛整粒，混合均匀。

(8)取样，半成品化验。

(9)按照化验确定的装量装入胶囊。

(10)成品全检，包装入库。

实施例8  化合物A、化合物B颗粒剂的制备

1、处方

处方1：

化合物A或化合物B        250g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

糖粉                    2000.0g

2％HPMC60％乙醇溶液     适量

共制备                  1000包

处方2：

化合物A或化合物B        500g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

糖粉                    4000.0g

2％HPMC60％乙醇溶液     适量

共制备                  1000包

2、制备工艺：

(1)将蔗糖粉碎过100目筛备用。将化合物A(或化合物B)粉碎过100目筛备用。

(2)按照处方量称取原料和辅料。

(3)将化合物A(或化合物B)与糖粉以等量递加的方法混合均匀，加入2％HPMC60％乙醇溶液适量，搅拌均匀，制成适宜软材，

(4)过20目筛制颗粒。

(5)颗粒在60℃的条件下烘干。

(6)干颗粒过18目筛整粒。

(7)取样，半成品化验颗粒中主药的含量，确定装量。

(8)包装，成品全检，包装入库。

实施例9  化合物A、化合物B分散片的制备

1、处方

处方1：

化合物A或化合物B    250g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

交联聚维酮          30g

预胶化淀粉          30g

微晶纤维素          20g

羟丙基纤维素        20g

水                  适量

硬脂酸镁            2g

二氧化硅            4g

交联聚乙烯吡咯烷酮  5g

共制备              1000片

处方2：

化合物A或化合物B    500g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

交联聚维酮          40g

预胶化淀粉          40g

微晶纤维素          20g

羟丙基纤维素        30g

水                  适量

硬脂酸镁            4g

二氧化硅            8g

交联聚乙烯吡咯烷酮  15g

共制备              1000片

处方3

化合物A或化合物B    125g(以C₁₄H₁₂ClN₃O₆S计)

交联聚维酮          20g

预胶化淀粉          20g

微晶纤维素          20g

羟丙基纤维素        30g

水                  适量

硬脂酸镁            4g

二氧化硅            5g

交联聚乙烯吡咯烷酮  5g

共制备              1000片

2、制备工艺：

(1)将原料粉碎过100目筛，其余辅料分别过100目筛，备用。

(2)按照处方量称取原料和辅料。

(3)将化合物A(或化合物B)、预胶化淀粉、交联聚维酮、微晶纤维素、羟丙基纤维素混合均匀，加入水适量，搅拌均匀，制成适宜软材。

(4)20目筛制颗粒。

(5)颗粒在60℃的条件下烘干。

(6)干燥好的颗粒加入硬脂酸镁、二氧化硅和交联聚乙烯吡咯烷酮，过18目筛整粒，混合均匀。

(7)取样，半成品化验。

(8)按照化验确定的片重压片。

(96)成品全检，包装入库。

Claims (10)

1.通式(1)所示的化合物或其药学上可接受的盐：

其中：R₁为氟、氯、溴或碘原子；

R₂为氢原子或1～6个碳原子的直链或支链的烷基。

2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：R₁为氟、氯、溴或碘原子；

R₂为氢原子或1～4个碳原子的直链或支链的烷基。

3.如权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：R₁为氯；R₂为甲基。

4.(6R，7R)-7-[2-(呋喃-2-基)-2-甲氧亚胺基乙酰氨基]-3-氯-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸钠盐。

5.权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其药学上可接受的盐为钠、钾、钡、钙、镁、锂盐或葡甲胺、氨基葡萄糖盐。

6.包括权利要求1～5任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种药用载体和/或稀释剂的药物组合物。

7.如权利要求6所述的药物组合物，其含有所述化合物或其药学上可接受的盐0.1g～5g的活性组分。

8.如权利要求6所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物为药学上可接受的任一剂型。

9.如权利要求8所述的药物组合物，药学上可接受的剂型为口服制剂或注射剂。

10.权利要求1～5任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗和/或预防感染性疾病的药物中的应用。