发明内容
本发明提供了一种下式I化合物、或其药学上可接受的盐或其溶剂化物,
其中,R1选自:
(a)卤素、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、甲氧基乙氧基、N-吗啉丙氧基、酯基、酰胺基、或磺酰胺基;
(b)取代或未取代的苯基;其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团:卤素、-OH、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-C1-C4烷基-OH、C1-C4烷氧基甲基、C2-C4酯基、或磺酸酯;
(c)取代或未取代的呋喃基、取代或未取代的噻吩基,其中所述的取代基为1-3个选自下组的基团:卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、烷氧基甲基,酯基,或磺酸酯;
或者R1为以下结构:
式中,R1通过氧原子与环相连,且X选自呋喃基、吡咯基,吡啶基,噁唑啉,噻唑基,或噻吩基;
R1′选自氢、C1-C4烷基、卤素取代的C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、或卤素取代的C1-C4烷氧基;
R2、R2′分别独立地选自苄基,一卤代-、二卤代或三卤代苄基、苯甲酰基、吡啶基甲基、吡啶基甲醚基、苯氧基、一卤代-、二卤代或三卤代苯氧基或苯磺酰基、呋喃基甲基、吡咯基甲基、吡咯基甲氧基、卤素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基,其中所述的苄基、苯基、吡啶基、呋喃基和吡咯基可具有1-3个选自下组的取代基:卤素、-OH、-NH2、C1-C4烷基、或C1-C4烷氧基。
本发明还提供了本发明所述的化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明还提供了一种药物组合物,含有0.05-100mg的式I化合物或其药学上可接受的盐,以及药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
本发明还提供了一种治疗肿瘤(尤其是由蛋白酪氨酸激酶介导的肿瘤)的方法,包括步骤:给需要治疗的病人使用0.05-100mg/kg体重/天的式I的化合物或其药学上可接受的盐。
本发明还提供了一种制备药物组合物的方法,其特征在于,包括步骤:将式I化合物、或其药学上可接受的盐或其溶剂化物与药学上可接受的载体的混合,从而形成药物组合物。
在另一优选例中,R2选自苄氧基、一卤代-、二卤代或三卤代苄氧基;而R2’表示卤素。
在另一优选例中,R1选自卤素、C1-C4烷氧基、卤素取代的C1-C4烷氧基、甲氧基乙氧基、N-吗啉丙氧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、苯基、呋喃基,或者R1为以下结构:
其中,X选自呋喃基。
在另一优选例中,R1为酰胺基:
其中,R3选自H、N,N-二甲基胺基甲基、N,N-二乙基胺基甲基、N,N-二丙基胺基甲基、或N-吗啉甲基。
在另一优选例中,R1为酰胺基:
其中,R3选自H、或N,N-二甲基胺基甲基。
在另一优选例中,R1选自α、β-不饱和磺酰胺,或者芳香基磺酰胺,或者
R1选自被烷基、烷氧基、烷氧基甲基、酯基、磺酸酯、羟甲基取代的苯基。
在另一优选例中,所述的R1选自具有烷氧基、烷氧基甲基、酯基、羟甲基取代的苯基。
本发明优选的化合物选自下组:
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺;
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-对甲苯磺酰胺;
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺;
N-[4-(3-氯-4-苄氧基-苯基胺基)-喹唑啉-6-基-]-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺;
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-三氟乙氧基-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺;
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺;
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺;
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺;
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺;
O-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-乙酸酯;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-羟基-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-氧代-丁氧基)-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6,7-二甲氧基-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-溴-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(4-甲氧基苯基)-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基-苯基)-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基乙酸酯-苯基)-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(3-氧代-丁氧基-甲基)-苯基]-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基甲磺酸酯-呋喃-2-基)-喹唑啉;
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-二甲基胺甲基-呋喃-2-基-甲氧基)-喹唑啉;或
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-7-甲氧基-喹唑啉。
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明,否则份数和百分比为重量份和重量百分比。
实施例13-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯胺
在一装有回流冷凝装置的250ml的烧瓶内加入2-氯-4-硝基苯酚4.65g(26.6mmol),间氟苄溴3.31ml(27.0mmol,1eq),碳酸钾9.4g(54mmol,2eq),DMF 50ml,加热回流。反应4h后,取出趁热滤去固体,滤液冷至室温。向体系中加入300ml乙酸乙酯稀释,用水洗涤3次,有机相干燥,浓缩,柱层析纯化得固体产物。
将上述固体产物置于一个装有回流冷凝装置的250ml烧瓶内,加入还原铁粉4.7g(87mmol),冰醋酸10ml,无水乙醇50ml。加热回流,5h后取出,冷却至室温,用大量水-乙酸乙酯混和溶剂萃取,合并有机相,用碳酸氢钠溶液洗涤两次,干燥,浓缩,柱层析纯化样品,得到浅棕色固体,经鉴别该产物为标题化合物。总收率75%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.38-7.29(1H,m),7.23-7.16(2H,m),7.04-6.96(1H,m),6.79-6.74(2H,m),6.50(1H,dd,J=2.75Hz,8.61Hz),5.03(2H,s),3.50(2H,br).
实施例23-氯-4-苄氧基苯胺
在一装有回流冷凝装置的250ml的烧瓶内加入2-氯-4-硝基苯酚4.65g(26.6mmol),苄溴2.97ml(27.0mmol,1eq),碳酸钾9.4g(54mmol,2eq),DMF60ml,加热回流。操作参照实例1,柱层析纯化样品,得到浅棕色固体,经鉴别该产物为标题化合物。总收率:73%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ7.30-7.28(1H,m),7.23-7.16(3H,m),7.08-6.99(1H,m),6.80-6.75(2H,m),6.52(1H,dd,J=2.75Hz,8.61Hz),4.83(2H,s),3.20(2H,br).
实施例34-氯-6-硝基喹唑啉
在一装有回流冷凝装置的100ml烧瓶中加入6-硝基喹唑酮2.85g(15mmol),三氯氧磷25ml,105℃回流反应3h,取出小心顷入150ml冰水体系中,慢慢析出鳞片状固体,过滤干燥,经鉴别该化合物为目标化合物。收率78%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.22(2H,s),8.74(1H,dd,J=2.57Hz,9.16Hz),8.27(1H,d,J=9.16Hz).
实施例44-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉
在一装有回流冷凝装置的100ml烧瓶中加入6,7-二甲氧基喹唑酮4.5g(20mmol),三氯氧磷45ml,105℃回流反应2h,取出小心顷入100ml冰水体系中,慢慢析出类白色鳞片状固体,过滤干燥,经鉴别该化合物为目标化合物。收率80%。
1H NMR(400MHz,DMSO):δ8.89(1H,s),7.47(1H,s),7.41(1H,s),4.02(3H,s),4.00(3H,s).
实施例50-(4-氯-喹唑啉-6-基)-乙酸酯
在一装有回流冷凝装置的100ml烧瓶中加入6-乙酸酯基喹唑酮3.06g(15mmol),三氯氧磷35ml,105℃回流反应2h,取出小心顷入150ml冰水体系中,慢慢析出大量固体,过滤干燥,经鉴别该化合物为目标化合物。收率74%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.05(1H,s),8.11(1H,d,J=9.06Hz),8.01(1H,d,J=2.52Hz),7.73(1H,dd,J=2.52Hz,9.06Hz),2.40(3H,s).
实施例64-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-硝基喹唑啉
在一个装有冷凝装置的烧瓶中,将原料6-硝基-4-氯-喹唑啉1.20g(5.7mmol)和4-间氟苄氧基-3-氯苯胺1.37g(5.6mmol)溶于80ml异丙醇,回流反应3h,体系中析出大量黄色固体,过滤,样品真空干燥,经鉴别该化合物为目标化合物,收率67%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ11.30(1H,br),9.54-9.48(1H,m),8.45-8.41(1H,m),8.31-8.25(1H,m),7.98-7.89(1H,m),7.50-7.47(1H,m),7.35-7.26(1H,m),7.05-6.96(1H,m),6.90-6.80(2H,m),7.74-7.60(2H,m),4.84(2H,s).
实施例74-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-胺基喹唑啉
在一个装有回流冷凝装置的烧瓶中加入实施例6制备的硝基取代物1.60g(3.77mmol),还原铁粉1.05g(18.85mmol,5eq),冰醋酸2ml,甲醇40ml,85℃油浴下回流反应2.5h后,过滤除去铁粉,滤液用乙酸乙酯稀释,碳酸氢钠溶液洗涤,水洗,有机相干燥浓缩,得到黄色固体,经鉴别该化合物为目标化合物,收率61%。
1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.32(1H,s),8.31(1H,s),8.04(1H,d,J=2.64Hz),7.73(1H,dd,J=2.64Hz,8.80Hz),7.54-7.43(2H,m),7.36-7.28(3H,m),7.26-7.14(3H,m),5.57(2H,br),5.27(2H,s).
实施例8N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺
在一个100ml烧瓶中,在冰浴下加入实施例7氨基化合物1.2g(3.04mmol),三乙胺0.61ml(4.2mmol,1.5eq),丙烯酰氯0.25ml(3.04mmol,1eq),THF40ml,逐渐升至室温反应,3h后,停止反应,用乙酸乙酯-水混和体系萃取,合并有机相,干燥浓缩,硅胶柱分离,得到固体1.0g,经鉴别该化合物为目标化合物,收率67%。
1H NMR(400MHz,CDCl3+DMSO):δ8.75(1H,s),8.60-8.52(2H,m),7.81(1H,d,J=2.44Hz),7.69(2H,s),7.54(1H,dd,J=2.56Hz,8.92Hz),7.30-7.22(2H,m),7.18-7.08(2H,m),6.96-6.86(2H,m),6.37(2H,d,J=5.86Hz),5.67(1H,t,J=5.86Hz),5.06(2H,s).
实施例9N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-对甲苯磺酰胺
在一个50ml烧瓶中,在冰浴下加入实施例7氨基化合物1.2g(3.04mmol),三乙胺1.22ml(8.4mmol,3eq),对甲苯磺酰氯0.25ml(3.04mmol,1eq),THF40ml,逐渐升至室温反应,3h后,停止反应,用乙酸乙酯-水混和体系萃取,合并有机相,干燥浓缩,硅胶柱分离,得到固体1.0g,经鉴别该化合物为目标化合物,收率67%。
1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.52(1H,s),8.45(1H,s),8.09(1H,d,J=2.61Hz),7.95-7.88(3H,m),7.82-7.77(2H,m),7.64(1H,d,J=8.80Hz),7.55-7.44(3H,m),7.35-7.15(5H,m),5.25(2H,s),3.05(3H,s).
实施例10
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
在一个50ml烧瓶中加入3-N,N-二甲胺基甲基丙烯酰氯0.4g(2.7mmol),10ml无水THF溶解,在0℃强力搅拌下向其中滴加实例1中所得芳胺1.06g(2.7mmol)配成无水THF的15ml溶液,保持0℃,滴加二异丙基乙基胺0.2ml的5ml无水THF溶液,冰水浴下强烈搅拌3h。加入乙酸乙酯-水混和体系萃取,水层用乙酸乙酯-THF洗涤3次,合并有机相,干燥,浓缩,硅胶柱分离纯化,得到固体0.73g,经鉴别该化合物为目标化合物,收率54%。
1H NMR(400MHz,CDCl3+DMSO):δ8.77(1H,s),8.61-8.52(2H,m),7.80(1H,d,J=2.44Hz),7.69(2H,s),7.55(1H,dd,J=2.54Hz,8.90Hz),7.32-7.24(2H,m),7.18-7.08(2H,m),7.00-6.86(3H,m),6.21(1H,dt,J=1.56Hz,15.65Hz),5.10(2H,s),3.07(2H,d,J=7.14Hz),2.18(6H,s).
实施例11
N-[4-(3-氯-4-苄氧基-苯基胺基)-喹唑啉-6-基-]-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
使用实例2中的产物(0.97g,2.7mmol)代替实例10中的取代芳胺,其它反应条件不变,硅胶柱层析,得到固体0.67g,经鉴别该化合物为目标化合物,收率51%。
1H NMR(400MHz,CDCl3+DMSO):δ8.76(1H,s),8.60-8.52(2H,m),7.82(1H,d,J=2.45Hz),7.69(2H,s),7.55(1H,dd,J=2.56Hz,9.02Hz),7.32-7.24(2H,m),7.18-7.06(3H,m),7.00-6.86(3H,m),6.18(1H,dd,J=1.56Hz,15.65Hz),5.08(2H,s),3.10(2H,d,J=7.14Hz),2.21(6H,s).
实施例12
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-三氟乙氧基-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
4-氯-2-胺基苯甲酸10.0g溶于50ml甲酰胺,回流反应5h,析出大量固体,过滤干燥得7-氯喹唑酮11.5g。取10.0g喹唑酮,冰浴下缓慢加入到浓硫酸和发烟硝酸(1∶1)混酸40ml中,然后升温90℃反应3h,体系澄清溶液,小心倾入300ml冰水中,析出浅黄色固体,过滤水洗,再溶于热的冰醋酸中,析出6-硝基-7-氯喹唑酮晶体,收集得产物6.50g。取4.00g该产物与15ml三氯氧磷一起回流反应2h,倾入冰水中,过滤干燥得6-硝基-4,7-二氯喹唑啉中间体;将之溶于30ml异丙醇中,加入3.00g 3-氯-4-(间氟苄氧基)-苯胺回流反应2h,析出大量固体,过滤真空干燥得6-硝基-7-氯-4-胺基取代的喹唑啉固体产物3.83g。
取上述中间体2.00g溶于50ml无水THF中,加入三氟乙氧醇钠盐0.64g,回流反应16h,后处理得6-硝基-7-三氟乙氧基-4-胺基取代喹唑啉产物1.78g。
取上述制备的三氟乙氧基取代中间体1.60g,还原铁粉1.05g(17.85mmol,5eq),冰醋酸2ml,甲醇40ml,85℃油浴下回流反应2.5h后,过滤除去铁粉,滤液用乙酸乙酯稀释,碳酸氢钠溶液洗涤,水洗,有机相干燥浓缩,得到浅黄色固体0.90g,经鉴别该化合物为6-胺基-7-三氟乙氧基-4-胺基取代喹唑啉,收率61%。
在一个50ml烧瓶中,加入上述还原芳胺0.50g溶于30ml无水THF中,0℃下,依次滴加二异丙基乙基胺试剂0.18ml和3-N,N-二甲胺基甲基丙烯酰氯0.17g(1.1mmol),维持温度反应3h。加入乙酸乙酯-水混和体系萃取,水层用乙酸乙酯洗涤3次,合并有机相,干燥,浓缩,硅胶柱分离纯化,得到固态标题化合物0.45g,收率72%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.77(1H,s),8.61-8.52(2H,m),7.80(1H,d,J=2.46Hz),7.69(2H,m),7.55(1H,dd,J=2.56Hz,8.94Hz),7.32-7.24(1H,m),7.18-7.08(2H,m),7.00-6.86(3H,m),6.23(1H,dd,J=1.55Hz,15.59Hz),5.10(2H,s),4.48(2H,m),3.11(2H,d,J=7.15Hz),2.19(6H,s).
实施例13
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
实验操作流程同实施例12,只是6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉改为与甲醇钠-甲醇体系反应,最后生成6-硝基-7-甲氧基-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉;接着还原硝基,再与3-N,N-二甲胺基甲基丙烯酰氯反应,纯化后得标题产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.80(1H,s),9.70(1H,s),8.91(1H,s),8.50(1H,s),7.98(1H,d,J=2.44Hz),7.69(1H,dd,J=2.44Hz,9.16Hz),7.51-7.42(1H,m),7.39-7.16(5H,m),6.90-6.87(1H,m),6.19(1H,dd,J=2.14Hz,10.06Hz),5.27(2H,s),4.02(3H,s),3.07(2H,d,J=3.8Hz),2.18(6H,s)。
实施例14
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-甲氧基-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺
实验操作流程同实施例12,只是6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉改为与甲醇钠-甲醇体系反应,最后生成6-硝基-7-甲氧基-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉;接着还原硝基,再与丙烯酰氯反应,纯化后得标题产物。
1H NMR(300MHz,CDCl3):δ9.80(1H,s),9.70(1H,s),8.91(1H,s),8.50(1H,s),7.98(1H,d,J=2.44Hz),7.69(1H,dd,J=2.44Hz,9.16Hz),7.51-7.42(1H,m),7.39-7.16(5H,m),6.75(1H,q,J=10.06Hz,16.78Hz),6.31(1H,dd,J=2.14Hz,7.09Hz),5.80(1H,dd,J=2.14Hz,10.06Hz),5.27(2H,s),4.02(3H,s)。
实施例15
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-E,4-二甲基胺基-丁-2-烯酰胺
实验操作流程同实施例12,只是中间体6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉直接还原硝基成胺基,再与3-N,N-二甲胺基甲基丙烯酰氯反应,纯化后得标题产物。
实施例16
N-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-7-氯-喹唑啉-6-基-}-丙烯酰胺
实验操作流程同实施例12,只是中间体6-硝基-7-氯-4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基-喹唑啉直接还原硝基成胺基,再与丙烯酰氯反应,纯化后得标题产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ10.18(1H,s),9.97(1H,s),8.80(1H,s),8.59(1H,s),7.95(1H,m),7.71(1H,m),7.54-7.41(1H,m),7.39-7.10(5H,m),6.67(1H,q,J=10.17Hz,17.21Hz),6.35(1H,dd,J=1.57Hz,16.83Hz),5.87(1H,dd,J=1.57Hz,10.17Hz),5.24(2H,s)。
实施例17
0-{4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-喹唑啉-6-基-}-乙酸酯
6-乙酸酯基-4-氯喹唑啉原料(0.90g,4.04mmol)和3-氯-4-(间氟苄氧基)苯胺(1.00g,3.97mmol)溶于40ml异丙醇中,回流反应3h,析出大量浅灰色固体,过滤后用少量乙酸乙酯洗涤滤饼,真空60℃干燥过夜,得目标产物1.65g,收率95%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.68(1H,s),7.89-7.81(2H,m),7.58-7.48(2H,m),7.40-7.32(1H,m),7.27-7.19(3H,m),7.16(1H,d,J=2.46Hz),7.07-6.96(2H,m),5.14(2H,s),2.11(3H,s).
实施例18
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-羟基-喹唑啉
6-乙酸酯基-4-胺基喹唑啉中间体0.47g溶于12ml甲醇中,滴加入1ml浓氨水,立即析出浅黄色固体。室温反应3h,过滤得一部分产物,液相浓缩后层析纯化又得一部分固体产物,合计0.41g,收率97%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.68(1H,s),7.88-7.81(2H,m),7.58-7.48(2H,m),7.40-7.32(1H,m),7.27-7.19(3H,m),7.16(1H,d,J=2.44Hz),7.07-6.96(2H,m),5.15(2H,s).
实施例19
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-氧代-丁氧基)-喹唑啉
6-羟基-4-胺基喹唑啉原料0.20g和2-甲氧基溴乙烷0.07ml,(1.5eq.)溶于15ml DMF中,加入催化量的四丁基碘化铵和0.14g K2CO3固体,60℃反应过夜。趁热过滤,减压蒸去溶剂,残余物干法上柱,层析纯化得产物0.17g,产率74%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.67(1H,s),7.88-7.81(2H,m),7.56-7.47(2H,m),7.41-7.32(1H,m),7.27-7.19(3H,m),7.15(1H,d,J=2.44Hz),7.06-6.96(2H,m),5.16(2H,s),4.29-4.24(2H,m),3.85-3.81(2H,m),3.49(3,s).
实施例20
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-喹唑啉
操作同实施例15,原料6-羟基-4-胺基喹唑啉0.10g和过量3-(N-吗啉)1-氯丙烷反应,最终得产物0.09g,产率70%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.69(1H,s),7.87-7.82(2H,m),7.55(1H,dd,J=2.56Hz,8.87Hz),7.46(1H,dd,J=2.56Hz,9.17Hz),7.40-7.32(1H,m),7.29-7.19(3H,m),7.16(1H,d,J=2.49Hz),7.10-6.96(2H,m),5.17(2H,s),4.17(2H,t,J=6.45Hz),3.74(4H,t,J=4.69Hz),2.57(2H,t,J=7.18Hz),2.50(4H,t,J=4.61Hz),2.10-2.01(2H,m).
实施例21
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6,7-二甲氧基-喹唑啉
4-氯-6,7-二甲氧基喹唑啉1.50g与3-氯-4-(间氟苄氧基)苯胺1.70g溶于150ml异丙醇中,回流反应3h,析出大量浅黄色固体,过滤后用少量冰乙醇洗涤滤饼,真空60℃干燥过夜,得目标产物2.50g,收率84%。
1H NMR(400MHz,DMSO):δ11.30(1H,br),8.83(1H,s),8.25(1H,s),7.86(1H,d,J=2.64Hz),7.62(1H,dd,J=2.63Hz,9.08Hz),7.52-7.44(4H,m),7.23-15(1H,m),5.30(2H,s),4.01(3H,s),3.99(3H,s).
实施例22
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-溴-喹唑啉
6-溴-4-氯喹唑啉1.36g与3-氯-4-(间氟苄氧基)苯胺1.42g溶于50ml异丙醇中,回流反应3h,析出大量黄色固体,过滤后用少量冰乙醇洗涤滤饼,真空60℃干燥过夜,得6-溴-4-胺基喹唑啉产物2.20g,收率86%。
1H NMR(400MHz,DMSO):δ11.33(1H,s),9.07(1H,s),8.94(1H,s),8.25-8.16(1H,m),7.94(1H,d,J=2.64Hz),7.85(1H,d,J=9.09Hz),7.69-7.61(1H,m),7.53-7.44(1H,m),7.38-7.29(3H,m),7.24-7.16(1H,m),5.30(2H,s).
实施例23
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(4-甲氧基苯基)-喹唑啉
6-溴4-胺基取代的喹唑啉中间体0.30g与4-甲氧基苯基硼酸0.15g溶于20mlDMF溶剂中,氮气氛围中,加入0.15g Pd(PPh3)4催化剂和0.14g Na2CO3固体,60℃反应3h。减压蒸去溶剂,残余物干法上柱,柱纯析纯化,得6-(4-甲氧基苯基)-4-胺基取代的喹唑啉产物0.21g,收率66%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.78(1H,s),8.04-7.89(3H,m),7.85(1H,d,J=2.75Hz),7.63-7.53(3H,m),7.46(1H,m),7.40-7.32(1H,m),7.27-7.19(2H,m),7.06-6.96(4H,m),5.19(2H,s),3.88(3H,s).
实施例24
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基-苯基)-喹唑啉
6-溴4-胺基取代的喹唑啉中间体1.50g与3-甲酰基苯基硼酸1.37g溶于100ml1,4-二氧六环溶剂中,氮气氛围中,加入0.76g Pd(PPh3)4催化剂和20%K2CO3水溶液5ml,升温回流反应0.5h。减压蒸去溶剂,残余物干法上柱,柱纯析纯化,得6-(3-甲酰基苯基)-4-胺基取代的喹唑啉中间体1.45g。
将上述中间产物溶于60ml THF/MeOH(2∶1)混合溶剂中,0℃搅拌下分批加入0.12g NaBH4固体,体系颜色逐渐变暗,30min后减压蒸去大部分溶剂,残余物用乙酸乙酯溶解,有机相用饱和食盐水洗涤,干燥后硅胶柱层析纯化得标题化合物0.82g,两步总收率51%。
1H NMR(400MHz,DMSO+CDCl3):δ9.34(1H,s),8.40(1H,s),8.33(1H,d,J=3.69Hz),7.75(1H,dt,J=2.02Hz,8.56Hz),7.65(1H,t,J=2.27Hz),7.59-7.44(3H,m),7.39-7.14(1H,m),7.20-7.03(3H,m),6.98-6.88(2H,m),6.76-6.67(2H,m),4.87(2H,s),4.52(1H,t,J=5.70Hz),4.42(2H,d,J=5.70Hz).
实施例25
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(3-羟甲基乙酸酯-苯基)-喹唑啉
6-[1-(3-羟甲基苯基)]-4-胺基取代喹唑啉原料108mg溶于10ml THF溶剂中,冰浴下依次加入0.19ml Et3N和乙酰氯(0.03ml,1.8eq.),反应3h,后处理得乙酸酯类产物422mg,收率72%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.79(1H,s),8.06-7.96(3H,m),7.86(1H,d,J=2.69Hz),7.69-7.48(5H,m),7.44-7.33(2H,m),7.26-7.19(1H,m),7.07-6.97(2H,m),5.20(2H,s),5.17(2H,s),2.13(3H,s).
实施例26
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(3-氧代-丁氧基-甲基)-苯基)-喹唑啉
6-[1-(3-羟甲基苯基)]-4-胺基取代喹唑啉原料112mg溶于10ml DMF溶剂中,加入2-甲氧基1-溴乙烷0.04ml,四丁基碘化铵10mg和碳酸钾100mg,升温60℃反应8h.后处理得目标产物64mg,收率51%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.67(1H,d,J=2.2Hz),7.82(1H,dd,J=2.3Hz,8.7Hz),7.74-7.68(2H,m),7.60(1H,d,J=7.69Hz),7.45(1H,t,J=7.69Hz),7.39-7.30(2H,m),7.29-7.19(5H,m),7.03-6.92(3H,m),5.01(2H,s),4.78(2H,s),4.10(2H,t,J=4.95Hz),3.69(2H,t,J=4.95Hz),3.35(3H,s).
实施例27
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基-呋喃-2-基)-喹唑啉
6-溴4-胺基取代的喹唑啉中间体3.00g与5-甲酰基-2-呋喃硼酸1.37g溶于150ml 1,4-二氧六环溶剂中,氮气氛围中,加入1.50g Pd(PPh3)4催化剂和20%Na2CO3水溶液7ml,升温100℃回流反应2h。减压蒸去溶剂,残余物干法上样,柱纯析纯化,得6-[2-(5-甲酰基呋喃基)]-4-胺基取代的喹唑啉中间体。
上述中间产物溶于THF/MeOH(2∶1)混合溶剂中,0℃搅拌下分批加入NaBH4固体,体系颜色逐渐变暗,30min后减压蒸去大部分溶剂,残余物用乙酸乙酯溶解,有机相用饱和食盐水洗涤,干燥后硅胶柱层析纯化得标题化合物2.18g,两步总收率70%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.29(1H,s),8.36(1H,s),8.21(1H,d,J=8.38Hz,),7.73-7.68(1H,m),7.60-7.58(1H,m),7.45-7.35(2H,m),7.04-6.96(1H,m),6.92-6.82(2H,m),6.70-6.60(2H,m),6.50-6.47(1H,m),6.08-6.02(1H,m),4.80(2H,d,J=6.04Hz),4.61(1H,t,J=5.63Hz),4.25(2H,t,J=6.87Hz).
实施例28
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-羟甲基甲磺酸酯-呋喃-2-基)-喹唑啉
上述6-[2-(5-羟甲基呋喃基)]-4-胺基取代的喹唑啉原料250mg溶于25mlDMF中,室温搅拌下依次加入Et3N(0.22ml,3.0eq.)和甲磺酰氯(0.06ml,1.5eq.),反应完全后,体系用大量乙酸乙酯稀释后,用冰水和饱和氯化铵溶液洗涤,有机相干燥后,浓缩层析纯化得标的产物178mg,收率61%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.66(1H,s),8.19(1H,d,J=1.18Hz),8.03(1H,dd,J=1.57Hz,9.00Hz),7.91-7.87(1H,m),7.62-7.55(2H,m),7.40-7.33(1H,m),7.28-7.20(3H,m),7.06-7.68(2H,m),6.77(1H,d,J=3.13Hz),6.49(1H,d,J=3.52Hz),5.17(2H,s),4.51(2H,s),3.44(3H,s).
实施例29
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-(5-二甲基胺甲基-呋喃-2-基-甲氧基)-喹唑啉
原料二甲胺,甲醛,呋喃甲醇按文献方法操作,最后制备得到5-二甲胺基甲基2-呋喃甲醇油状物。该化合物0.50g溶于20ml CH2Cl2中,依次加入Et3N和甲磺酰氯,室温反应3h,后处理得5-二甲胺基甲基2-呋喃甲醇甲磺酸酯中间体0.45g。
取上述甲磺酸脂0.20g溶于20ml DMF溶剂中,加入6-羟基4-胺基取代喹唑啉原料0.20g以及四丁基碘化铵30mg和碳酸钾105mg,升温50℃反应4h。后处理得目标产物129mg,收率48%。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.70(1H,s),7.88-7.80(2H,m),7.58-7.48(2H,m),7.40-7.32(1H,m),7.27-7.19(3H,m),7.16(1H,d,J=2.44Hz),7.07-6.98(2H,m),6.21-6.18(1H,m),6.14-6.10(1H,m),5.19(2H,s),4.64(2H,s),3.51(2H,s),2.20(6H,s).
实施例30
4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-[3-(4-吗啉代)丙氧基]-7-甲氧基-喹唑啉
6,7-二甲氧基喹唑酮在甲磺酸和L-蛋氨酸溶液回流2小时后,倒入冰水中析出固体,为6-羟基-7-甲氧基喹唑酮中间体,将其羟基乙酰化保护后,在SOCl2体系下转化成4-氯-6-乙酰氧基-7-甲氧基喹唑啉。
该片段按照上述相关方法与3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基在异丙醇溶剂中反应制备得到4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-乙酰氧基-7-甲氧基-喹唑啉;该化合物在氨水作用下脱出乙酰基,得到中间体4-[3-氯-4-(3-氟-苄氧基)苯基胺基]-6-羟基-7-甲氧基-喹唑啉。
接着按照实施例15操作,该中间体与过量3-(N-吗啉)1-氯丙烷反应,最终得标题产物。
1H NMR(400MHz,CDCl3):δ9.46(1H,s),8.45(1H,s),7.95(1H,d,J=2.75Hz),7.80(1H,s),7.59(1H,dd,J=2.44Hz,8.85Hz),7.52-7.44(1H,m),7.39-7.26(3H,m),7.23-7.15(2H,m),5.25(2H,s),4.17(2H,t,J=6.26Hz),3.93(3H,s),3.59(4H,m),2.49(2H,m),2.39(4H,m),2.00(2H,m)。
另外,用类似方法,制得表A中的化合物30a。
在本发明中,化合物的抑瘤实验方法如下:
将本发明化合物配制成5个浓度梯度,参照活细胞的改良MTT方法,将1×105A431(人表皮样鳞癌细胞)悬液100ul接种于96孔培养板内,然后加入不同浓度药液10ul,使其达到终浓度;置37℃湿性培养箱中,72小时后取出培养板,每孔再加MTT,继续培养6hr,加入100ul SDS终止液。在自动酶标仪测定各孔光密度(OD)值,计算出抑制率,并计算50%抑制浓度IC50。其中:
IC50<1μM,以“+++”表示;
IC50=1-10μM,以“++”表示;
IC50=10-50μM,以“+”表示;
IC50>50μM,以“-”表示。
本发明实施例化合物经肿瘤细胞抑制实验,计算IC50结果如下:
实施例31
药物组合物
配方如下:
实施例8化合物 23g
淀粉 140g
微晶纤维素 67g
按常规方法,将上述物质混合均匀后,装入普通明胶胶囊,得到1000颗胶囊。
按类似方法,制得含实施例9化合物的胶囊。
实施例32
1、细胞株:A431人表皮样鳞癌细胞
再次按照实施例30的方法,将化合物配制成5个浓度梯度,测定50%抑制浓度IC50。细胞实验结果见表A。
2、细胞株:BT-474:人乳腺癌细胞
细胞与不同浓度化合物(分别为10-0.001μM)温育5天,采用SRB方法评价化合物对细胞增殖的抑制程度,计算抑制率,根据抑制率采用Logit方法计算IC50,比较化合物的体外抗肿瘤活性。细胞实验结果见表A。
表A
注:实施例8-30中制备的化合物分别命名为化合物8-30和30a。
*:两次试验的两个结果。
实施例33
化合物8和化合物14对Erb-B2磷酸化的抑制作用:
人乳腺癌BT474细胞调整到合适浓度,接种于培养板,经各个化合物处理1.5小时;然后,收集并裂解细胞,定蛋白到相同的量。蛋白变性后,进行SDS-PAGE,转移到硝酸纤维素膜,分别与抗磷酸化抗体(一抗),抗β-tublin抗体(一抗),抗小鼠IgG抗体(二抗)杂交,最后用ECL试剂盒检测,X光片曝光。根据相应蛋白条带的大小及密度,评价化合物对Erb-B2激酶的抑制程度。
结果如图1所示:与市售药物Iressa相比,化合物8和14在0.1μM和1μM下具有更优的抑制活性。
实施例34
化合物8对移植于裸鼠的人体表皮癌A431的抑瘤作用取生长良好的A431实体瘤,无菌条件下切割成2-3mm大小的均匀小块,用套管针每只小鼠右腋皮下接种一块,接种后7日起开始给药,连续经口灌胃13天,并用游标卡尺每4天测瘤块的长径(a)、短径(b),根据公式V=ab2/2计算肿瘤体积(mm3),接种后23天脱颈处死动物,解剖取瘤块,称瘤重,计算抑瘤率。
结果如下表所示,表明本发明化合物有明显的抑瘤作用。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考,就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解,在阅读了本发明的上述讲授内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。