CN101085809A - 巴替非班及其类似物的合成与制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及巴替非班及其类似物的化学合成法。该方法利用固相(包括Fmoc法和Boc法)或液相合成法首先合成线性肽类化合物，然后利用碘氧化环化获得环化物。本发明进一步涉及作为巴替非班及其类似物合成过程中做为中间体的各个肽片段及其合成方法。
Description
技术领域
本发明属于生物化学领域，尤其是涉及肽合成领域。具体来说，本发明涉及巴替非班及其类似物的合成与纯化工艺。
背景技术
冠心病是西方国家的第一死亡原因。在美国，每年约有125万人发病。虽然在我国发病率为美国的30-35％，但冠心病总数已达每年约150-200万人，且呈不断上升趋势，心脑血管疾病死亡人数已占总死亡人数的1/3。冠心病患者即使进行成形或搭桥手术后，血小板凝集引起的再梗塞几率依然很高，同样需要药物治疗。大量研究表明，治疗冠心病最理想的药物是能直接阻断血小板糖蛋白受体IIb/IIIa与配体的结合。
巴替非班的化学名为N2-(3-mercapto-1-oxopropyl)-L-arginylglycyl-L-α-aspartyl-L-α-trypotophyl-L-α-prolyl-L-α-cysteinamide，cyclic(1→6)-disulfide，其中文化学名为N2-(3-巯基-1-氧代丙基)-L-精氨酰甘氨酰-L-α-天冬氨酰基-L-α-色氨酰基-L-α-脯氨酰基-L-α-半胱酰胺-环(1→6)-二硫。本发明所合成的巴替非班及其类似物能特异性地与血小板糖蛋白受体IIb/IIIa结合，阻抑该受体与纤维蛋白原的结合，因此可用于治疗血小板凝集有关的疾病。可以预计，巴替非班及其相关化合物在治疗学上将得到更广泛的应用，因此，需要能够大量合成该类肽的技术。
尽管已有肽合成技术(参见例如Williams等，1997，Chemical Approaches to theSynthesis of Peptides and Proteins；Rinkiker等，1993，Tetrahedron 49：9307-9320；Wang等，1977，J.Org.Chem.42：1286-1290；Kiso等，1995，Peptides Synthesis，Structuresand Applications。)，但是目前还没有可用于大规模、经济地合成与纯化肽(如，巴替非班及其类似物)的技术，尤其是环化线性肽需要用到激烈条件，不方便产业化生产。为此，本发明提供一系列适宜规模化、经济地合成与纯化巴替非班及其类似物的方法，其中尤其避免了使用激烈条件环化线性肽。
发明内容
本发明的第一个方面提供了一种化学合成如下式所示的巴替非班(即化合物I)及其类似物(即化合物II和化合物III)的液相合成方法，
其中
(化合物I，巴替非班)，
其包括以下步骤：
(a)液相合成带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har；
(b)将步骤(a)所得的带有侧链保护基的线性肽脱去侧链保护基；
(c)环化步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽。
优选本发明第一个方面的合成方法中的步骤(c)包括：对步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽用I2和H2O在0-30℃进行环化反应10-40分钟。优选步骤(c)包括：将该脱去侧链保护基的线性肽先溶于水中，向其中加入I2，用碘溶液在0-30℃进行氧化环化反应，反应时间为10-40分钟，生成环肽。在步骤(c)完成后，即线性肽环化成巴替非班(即化合物I)或其类似物(即化合物II和化合物III)后，优选还可进一步包括纯化过程。例如，通过层析进行纯化，优选通过HPLC进行纯化，然后冻干，得到纯度＞98％的精制肽。
在本发明第一个方面中，步骤(a)的液相合成过程可以包括：在存在偶联剂的条件下，将α氨基受保护的氨基酸与α氨基不受保护的氨基酸或与N末端氨基不受保护的片段肽偶联，然后脱掉偶联生成的肽的N末端氨基的保护基。其中，α氨基受保护的氨基酸上的α氨基保护基团是本领域技术人员所熟知的，如Fmoc或Boc等。在存在偶联剂的条件下，将α氨基受保护的氨基酸与α氨基不受保护的氨基酸进行偶联，即α氨基受保护的氨基酸的羧基与α氨基不受保护的氨基酸的氨基进行反应形成肽键，由此生成二肽，该肽的N端氨基仍旧受保护基团的保护。然后，在存在能够脱掉所述N端氨基的保护基的试剂的条件下，脱掉N端氨基的保护基(如Fmoc、Boc等)，由此形成裸露氨基的二肽。接着再将α氨基受保护的氨基酸与该二肽偶联，然后再脱掉N端氨基的保护基，得到裸露氨基的三肽，依次类推，最后偶联上Mpr，形成序列为Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2(其中X为Arg，Lys或Har)的线性肽。在步骤(a)的液相合成过程中，为了避免偶联等反应发生在某些氨基酸的其他活性基团(如，侧链的活性基团)上，其中某些氨基酸的除偶联的基团之外其他活性基团(如，侧链的活性基团)受到侧链保护基的保护，由此步骤(a)的液相合成过程生成的线性肽是带有侧链保护基的线性肽。需要侧链保护基保护的氨基酸或氨基酸残基有Mpr、Asp、Cys、Arg、Lys和/或Har；合适的侧链保护基有OBzl、2-Cl-Z、Trt、Acm、Tos、OcHex、Boc、OtBu、NO2等。
在本发明优选的具体实施方式中，带有侧链保护基的氨基酸或氨基酸残基包括Asp(OBzl)、Lys(2-Cl-Z)、Cys(Trt)、Cys(Acm)、Arg(Tos)、Har(Tos)、Asp(OcHex)、Trp(Boc)、Arg(Pbf)、Lys(Boc)、Mpr(Trt)和/或Arg(NO2)。优选本发明合成的带有侧链保护基的线性肽及其中间产物如表1所示。
优选在步骤(a)的液相合成过程中，偶联剂选自以下各组之一：
(1)NMM和i-C4H9OCOCl；
(2)HOBt、DCC和DIPCDI；
(3)HOBt、HOBt和DIPCDI；
(4)HOBt、EtPr2N和HBTU；和
(5)BOP试剂、HOBt和NMM。
可以根据实际生产状况(如，成本、生产条件等)，选择以上一组，在加入该组中所述全部试剂的条件下，进行偶联反应。
本发明也优选在步骤(a)的液相合成过程中，脱掉所述N末端氨基的保护基团的试剂选自以下组之一：
(1)含1-6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，或含1-6mol/L的HCl的冰醋酸溶液；
(2)含1-20％的TFA的DCM溶液，或含1-20％的TFA的冰醋酸溶液；和
(3)含1-20％的六氢吡啶的乙腈溶液，或含1-20％的六氢吡啶的DMF溶液。
可以根据实际生产状况(如，成本、生产条件等)，选择以上一组并选择该组中一种溶液，进行脱掉所述N末端氨基的保护基团的反应。
优选在本发明第一个方面中，步骤(b)的脱去侧链保护基的过程可以包括选自以下组之一或其组合所述的过程：
(1)用钯炭和甲酸铵、或者用钯炭和氢气脱除Asp(OBzl)、Lys(2-Cl-Z)和/或Arg(NO2)的侧链保护基；
(2)Cys(Acm)在氧化成二硫键的同时脱除侧链保护基；和
(3)用(CH3)2S、C6H5OCH3、CF3COOH和CF3SO3H脱除Mpr(Trt)、Har(Tos)、和/或Arg(Tos)、Arg(NO2)、Asp(OcHex)、Lys(Boc)和/或Trp(Boc)的侧链保护基，其中(CH3)2S∶C6H5OCH3∶CF3COOH∶CF3SO3H的摩尔比为1∶1∶4∶1。
也就是说，根据所需要脱除侧链保护基的具体对象，进行选自以上一组或几组所述的过程，反应脱去侧链保护基。如只需要脱去Asp(OBzl)的侧链保护基，那么只需要进行以上第(1)组所述的反应；如果需要脱去Asp(OBzl)和Arg(Tos)的侧链保护基，那么就需要进行以上第(1)和(3)组所述的反应了。
本发明的第二个方面提供了一种化学合成如下式所示的巴替非班(即化合物I)及其类似物(即化合物II和化合物III)的Fmoc固相合成方法，
其中
(化合物I，巴替非班)，
其包括以下步骤：
(a)用Fmoc-Rink Amide AM树脂固相合成连接在树脂上的带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys，其中X为Arg，Lys或Har；
(b)将步骤(a)所得的带有侧链保护基的线性肽脱去侧链保护基并从树脂上切下，得到线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har；
(c)环化步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽。
优选本发明第二个方面的合成方法中的步骤(c)包括：对步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽用I2和H2O在0-30℃进行环化反应10-40分钟。优选步骤(c)包括：将该脱去侧链保护基的线性肽先溶于水中，向其中加入I2，用碘溶液在0-30℃进行氧化环化反应，反应时间为10-40分钟，生成环肽。在步骤(c)完成后，即线性肽环化成巴替非班(即化合物I)或其类似物(即化合物II和化合物III)后，优选还可进一步包括纯化过程。例如，通过层析进行纯化，优选通过HPLC进行纯化，然后冻干，得到纯度＞98％的精制肽。
在本发明第二个方面中，步骤(a)的固相合成过程可以包括：将Fmoc-Rink Amide AM树脂脱掉Fmoc基团后得到H2N-Rink Amide AM树脂；然后在H2N-Rink Amide AM树脂上依次偶联Fmoc基团保护的氨基酸并脱掉Fmoc基团。其中，用Fmoc基团保护氨基酸的氨基是本领域普通技术人员所熟知的，这样氨基酸的羧基可以与树脂上的氨基连接，偶联到树脂上，然后脱掉Fmoc基团，形成裸露的氨基，使之与下一个氨基酸偶联。依次合成，最终产生连接在树脂上的带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys(其中X为Arg，Lys或Har)。同时，在步骤(a)的合成过程中，为了避免偶联反应发生在某些氨基酸的其他活性基团(如，侧链的活性基团)上，其中某些氨基酸的除了用于偶联的基团之外的其他活性基团(如，侧链的活性基团)受到侧链保护基的保护，由此步骤(a)的合成过程生成的线性肽树脂是带有侧链保护基的线性肽树脂。需要侧链保护基保护的氨基酸或氨基酸残基有Mpr、Asp、Cys、Arg、Lys、Trp和/或Har；合适的侧链保护基有OBzl、2-Cl-Z、Trt、Acm、Tos、OcHex、Boc、OtBu、Pbf等。在本发明优选的具体实施方式中，带有侧链保护基的氨基酸或氨基酸残基包括Asp(OBzl)、Lys(2-Cl-Z)、Cys(Trt)、Cys(Acm)、Arg(Tos)、Har(Tos)、Asp(OcHex)、Trp(Boc)、Asp(OtBu)、Arg(Pbf)、Har(Pbf)、Lys(Boc)和/或Mpr(Trt)。
当把Mpr偶联到肽上时，一般采用Trt来保护Mpr的巯基，但是本发明人惊人发现，不保护巯基的Mpr也能使偶联反应得以顺利进行，而且采用Trt保护的Mpr和不保护的Mpr在环化纯化之后的产率和纯度无显著差异，但是成本上没有Trt保护巯基的Mpr要比有保护的便宜得多。因此在步骤(a)的固相合成过程中，优选采用不保护巯基的Mpr(即，Mpr)来直接进行偶联反应。也就是说，优选固相合成带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har，其中Mpr的巯基上不带有保护基。
在本发明的一个具体实施方案中，优选在H2N-Rink Amide AM树脂上依次偶联如下氨基酸(必要时带有侧链保护基)：Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Trp(Boc)-OH，Fmoc-Asp(OtBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-X-OH(其中X为Arg(Pbf)或者Lys(Boc))和Mpr，得到Mpr-X-Gly-Asp(OtBu)-Trp(Boc)-Pro-Cys(Trt)-HN-Rink Amide AM树脂，接着将该线性肽从树脂切割下来；在偶联期间，当偶联上一个氨基酸时，就要脱去Fmoc保护基团，以便下一步偶联。
优选在步骤(a)的固相合成过程中，脱掉Fmoc基团的过程包括选自以下组之一所述的过程：
(1)用含10-30％哌啶的DMF溶液室温反应1-30分钟，优选用含20％的哌啶的DMF溶液室温20反应分钟；和
(2)用含10-30％DBU的DMF溶液室温反应1-30分钟，优选用含20％DBU的DMF溶液室温反应20分钟。
可以根据实际生产状况(如，成本、生产条件等)，选择以上一组中的一种溶液，进行脱掉所述Fmoc保护基团的反应。
本发明也优选在步骤(a)的固相合成过程中，偶联Fmoc基团保护的氨基酸的步骤包括选自以下组之一所述的过程：
①用DIPCDI、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-3小时；和
②用HBTU、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-3小时。
可以根据实际生产状况(如，成本、生产条件等)，选择以上一组中的所有试剂，进行偶联Fmoc基团保护的氨基酸的反应。
优选在本发明第二个方面中，步骤(b)的脱去侧链保护基并从树脂上切下的过程包括：用F试剂(即Reagent F)在室温并在N2保护的条件下，搅拌1-2小时，其中F试剂中各成分的体积配比为TFA∶H2O∶TIS＝90∶5∶5。
本发明的第三个方面提供了一种化学合成如下式所示的巴替非班(即化合物I)及其类似物(即化合物II和化合物III)的Boc固相合成方法，
其中
(化合物I，巴替非班)，
其包括以下步骤：
(a)用甲基二苯甲氨基树脂(即，MBHA树脂)固相合成连接在树脂上的带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys，其中X为Arg，Lys或Har；
(b)将步骤(a)所得的带有侧链保护基的线性肽脱去侧链保护基并从树脂上切下，得到线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har；
(c)环化步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽。
优选本发明第三个方面的合成方法中的步骤(c)包括：对步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽用I2和H2O在0-30℃进行环化反应10-40分钟。优选步骤(c)包括：将该脱去侧链保护基的线性肽先溶于水中，向其中加入I2，用碘溶液在0-30℃进行氧化环化反应，反应时间为10-40分钟，生成环肽。在步骤(c)完成后，即线性肽环化成巴替非班(即化合物I)或其类似物(即化合物II和化合物III)后，优选还可进一步包括纯化过程。例如，通过层析进行纯化，优选通过HPLC进行纯化，然后冻干，得到纯度＞98％的精制肽。
在本发明第三个方面中，步骤(a)的固相合成过程可以包括：在MBHA树脂上依次偶联Boc基团保护的氨基酸并脱掉Boc基团。其中，用Boc基团保护氨基酸的氨基是本领域普通技术人员所熟知的，这样氨基酸的羧基可以与树脂上的氨基连接，偶联到树脂上，然后脱掉Boc基团，形成裸露的氨基，使之与下一个氨基酸偶联。依次合成，最终产生连接在树脂上的带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys(其中X为Arg，Lys或Har)。同时，在步骤(a)的合成过程中，为了避免偶联等反应发生在某些氨基酸的其他活性基团(如，侧链的活性基团)上，其中某些氨基酸的除了用于偶联的基团之外的其他活性基团(如，侧链的活性基团)受到侧链保护基的保护，由此步骤(a)的合成过程生成的线性肽树脂是带有侧链保护基的线性肽树脂。需要侧链保护基保护的氨基酸或氨基酸残基有Mpr、Asp、Cys、Trp、Arg、Lys和/或Har；合适的侧链保护基有Tos、Fmoc、OcHex、Acm、OMeBzl等。在本发明优选的具体实施方式中，带有侧链保护基的氨基酸或氨基酸残基包括Cys(OMeBzl)、Cys(Acm)、Arg(Tos)、Lys(Fmoc)、Har(Tos)、Asp(OcHex)和/或Mpr(Trt)。
当把Mpr偶联到肽上时，一般采用Trt来保护Mpr的巯基，但是本发明人惊人发现，不保护巯基的Mpr也能使偶联反应得以顺利进行，而且采用Trt保护的Mpr和不保护的Mpr在环化纯化之后的产率和纯度无显著差异，但是成本上没有Trt保护巯基的Mpr要比有保护的便宜得多。因此在步骤(a)的固相合成过程中，优选采用不保护巯基的Mpr(即，Mpr)来直接进行偶联反应。也就是说，优选固相合成带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har，其中Mpr的巯基上不带有保护基。
在本发明的一个具体实施方案中，优选在MBHA树脂上依次偶联如下氨基酸(必要时带有侧链保护基)：Boc-Cys(OMeBzl)-OH，Boc-Pro-OH，Boc-Trp-OH，Boc-Asp(OcHex)-OH，Boc-Gly-OH，Boc-X-OH(其中X为Har(Tos)、Arg(Tos)或者Lys(Fmoc))和Mpr，得到Mpr-X-6ly-Asp(OcHex)-Trp-Pro-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂，接着将该线性肽从树脂切割下来；在偶联期间，当偶联上一个氨基酸后，就要脱去Boc-保护基团，以便下一步偶联。
优选在步骤(a)的固相合成过程中，偶联Boc基团保护的氨基酸的步骤包括选自以下组之一所述的过程：
①用DIPCDI、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-2小时；和
②用HBTU、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-3小时。
可以根据实际生产状况(如，成本、生产条件等)，选择以上一组中的所有试剂，进行偶联Boc基团保护的氨基酸的反应。
本发明也优选在步骤(a)的固相合成过程中，脱掉Boc基团的过程包括：用50％TFA的DCM溶液室温反应30分钟。
另外，优选在本发明第二个方面中，步骤(b)的脱去侧链保护基并从树脂上切下的过程包括：用B试剂(即Reagent B)在室温并在N2保护的条件下，搅拌1-2小时，其中B试剂中各成分的体积配比为HF∶Anisole＝90∶10。
本文中所使用的化合物、化学基团和试剂等的表示方法均为所属领域公认的表示方法。为了方便查阅，以下将列出本文中所用到的缩略语及其具体名称或化学结构
Acm 乙酰胺甲基
ACN 乙腈
Asp(或D) 天冬氨酸或天冬氨酸残基
Arg(或R) 精氨酸或精氨酸残基
Anisole 苯甲醚
Boc 叔丁氧甲酰基
Bop试剂 卡特缩合剂，即苯并三唑-1-氧-三(二甲氨基)膦六氟磷
酸盐
CF3SO3H 三氟甲磺酸
i-C4H9OCOCl 氯甲酸异丁酯
Cys(或C) 半胱氨酸或半胱氨酸残基
DBU 1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯
DCC 二环己基碳二亚胺
DCM 二氯甲烷
DIPCDI 二异丙基碳二亚胺
DMF N，N-二甲基甲酰胺
EtPr2N 乙基二丙基胺
Fmoc 芴甲氧羰基
Gly(或G) 甘氨酸或甘氨酸残基
Har 高精氨酸或高精氨酸残基
HF 氟化氢
HBTU O-苯并三唑-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟硼酸盐
HOBt 1-羟基苯并三唑
HPLC 高效液相色谱
Mpr 三巯基丙酸
NMM N-甲基吗啉
NO2 硝基
OBzl 苄氧基
OcHex 环己基酯
OMeBzl 对甲氧基苄基
OtBu 叔丁基酯
Pbf 2，2，4，6，7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基
Pro(或P) 脯氨酸或脯氨酸残基
TFA(或CF3COOH) 三氟乙酸
TIS 三异丙基硅烷
TLC 薄层层析
Tos 对甲苯磺酰基
Trp(或W) 色氨酸或色氨酸残基
Trt 三苯甲基
Z 苄氧羰基
Fmoc-Rink Amide AM树脂
MBHA树脂
表1本发明优选合成的线性肽及其中间产物
附图说明
附图1是Boc固相法工艺流程图
附图2是Fmoc固相法工艺流程图
附图3是液相合成带侧链保护基的线性肽的路线一
附图4是液相合成带侧链保护基的线性肽的路线二
附图5是液相合成带侧链保护基的线性肽的路线三
附图6是液相合成带侧链保护基的线性肽的路线四
附图7是液相合成带侧链保护基的线性肽的路线五
附图8是巴替非班的质谱图
附图9是巴替非班的1H-NMR
附图10是巴替非班的13C-NMR
具体实施方式
为了便于理解，以下将通过具体的实施例对本发明进行详细地描述。需要特别指出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，尽管本发明优选采用这些实施例所述的方法，但是它们并不构成对本发明范围的限制。依据本说明书的论述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人员来说都是显而易见了。
实施例一：Fmoc固相法合成
1：Fmoc-Cys(Trt)-HN-Rink Amide AM树脂的合成
(1)将Fmoc-Rink Amide AM树脂(天津南开和成科技有限公司生产，替代度为0.59mmol/g，8.4746g)投入固相反应柱，用DMF洗三次，DCM溶胀30分钟。
(2)抽干溶液，以20％的哌啶的DMF，室温下，去Fmoc-保护20分钟。
(3)抽干溶液，树脂用DMF洗五次，抽干溶液。
(4)将Fmoc-Cys(Trt)-OH(2.9285g)、HOBt(0.6755g)、DIPCDI(0.8ml)以DMF(20ml)、DCM(20ml)溶解，于冰浴中预反应20分钟。
(5)将上述反应液加入固相反应柱中，N2气流搅拌，使之与树脂充分接触反应，室温下(31℃)反应2小时。
(6)抽干溶液，树脂用DMF洗三次，DCM洗一次，加入醋酸酐(10ml)、吡啶(8ml)，N2气流搅拌，使之与树脂充分接触反应，室温下(31℃)反应10小时。
(7)抽干溶液，树脂用DMF洗三次，DCM洗三次，甲醇洗三次，真空充分抽干，即得到Fmoc-Cys(Trt)-HN-Rink Amide AM树脂(10.2578g)，测得替代度为0.5086mmol/g。
2：Fmoc-Pro-Cys(Trt)-HN-Rink Amide AM树脂的合成
(1)将Fmoc-Cys(Trt)-Rink Amide AM树脂(替代度为0.5086mmol/g)10.2578g投入固相反应柱，用DMF洗三次，DCM溶胀30分钟。
(2)抽干溶液，以20％的哌啶的DMF，室温下，去Fmoc-保护20分钟。
(3)抽干溶液，树脂用DMF洗五次，抽干溶液。
(4)将Fmoc-Pro-OH(5.061g)、HOBt(3.04g)、DIPCDI(7.5ml)以DMF(20ml)、DCM(20ml)溶解，于冰浴中预反应20分钟。
(5)将上述反应液加入固相反应柱中，N2气流搅拌，使之与树脂充分接触反应，室温下(30℃)反应2小时，用Kaiser test检测反应进程。
(6)抽干溶液，树脂用DMF洗三次，即得到Fmoc-Pro-Cys(Trt)-HN-Rink Amide AM树脂。
3：Mpr-X-Gly-Asp(OtBu)-Trp(Boc)-Pro-Cys(Trt)-HN-Rink Amide AM树脂的合成，其中X为Arg(Pbf)、Har(Pbf)或Lys(Boc)
偶联每一个保护氨基酸的反应步骤同2，所不同的是进行偶联的保护氨基酸依次为：Fmoc-Trp(Boc)-OH(7.899g)；Fmoc-Asp(OtBu)-OH(6.172g)；Fmoc-Gly-OH(4.460g)；Fmoc-X-OH(9.732g)；Mpr(1.592g)。
4：线性粗肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2的制备
(1)将3中得到的树脂用DMF洗三次，DCM洗三次，甲醇洗三次，真空充分抽干，即得到Mpr-X-Gly-Asp(OtBu)-Trp(Boc)-Pro-Cys(Trt)-HN-Rink Amide AM树脂共21.182g。
(2)将得到的树脂置于圆底烧瓶中，加入TFA(180ml)、H2O(10ml)、TIS(10ml)的混合溶液，通入N2，于冰浴中电磁搅拌10分钟，撤掉冰浴，于室温(29℃)反应2小时。
(3)反应结束后，将溶液过滤，树脂用TFA洗2次，合并滤液，往滤液中加入冰冻乙醚(2L)中，有白色沉淀析出，离心分离，收集沉淀，真空充分干燥。
(4)收集干燥后的白色沉淀(4.237g)，即得到巴替非班及其类似物线性粗肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，-20℃条件下密封保存。
5：线性粗肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2的环化
将实施例4所得到的巴替非班及其类似物线性粗肽溶解于水中，于搅拌中加入1mmol/ml的I2的甲醇溶液(50ml)，室温反应30分钟，用分析型HPLC跟踪环化反应至完全，即得到Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2(Disulfide bridge，Mprl-Cys7)。
实施例二：Boc固相法合成
1：Boc-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂的合成
(1)将MBHA树脂(天津南开和成科技有限公司生产，替代度为1.0mmol/g，5g)投入固相反应柱，用甲醇洗三次，DMF洗三次，DCM洗三次，取少量树脂用Kaiser test检测，呈黑蓝色。
(2)将Boc-Cys(OMeBzl)-OH(5.121g)、HOBt(2.027g)、DIPCDI(2.3ml)以DMF(20ml)、DCM(20ml)溶解，于冰浴中预反应20分钟。
(3)将上述反应液加入固相反应柱中，N2气流搅拌，使之与树脂充分接触反应，室温下(28℃)反应2小时，取少量树脂以Kaiser test检测，呈阴性。
(4)抽干溶液，树脂用DMF洗三次，DCM洗三次，即得到Boc-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂。
2：Boc-Pro-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂的合成
(1)将Boc-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂以50％TFA，DCM，室温下，去Boc-保护30分钟。
(2)抽干溶液，树脂用DMF洗三次，DCM洗三次，6％三乙胺/DCM溶液中和2次，DCM洗三次。
(3)将Boc-Pro-OH(3.230g)、HOBt(2.027g)、DIPCDI(2.3ml)以DMF(20ml)、DCM(20ml)溶解，于冰浴中预反应20分钟。
(4)将上述反应液加入固相反应柱中，N2气流搅拌，使之与树脂充分接触反应，室温下(29℃)反应2小时，取少量树脂以Kaiser test检测，呈阴性。
(5)抽干溶液，树脂用DMF洗三次，DCM洗三次，即得到Boc-Pro-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂。
3：Mpr-X-Gly-Asp(OcHex)-Trp-Pro-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂的合成，其中X为Arg(Tos)、Har(Tos)或Lys(Fmoc)
偶联每一个保护氨基酸的反应步骤同2，所不同的是进行偶联的保护氨基酸依次为：Boc-Trp-OH(4.566g)；Boc-Asp(OcHex)-OH(4.731g)；Boc-Gly-OH(2.628g)；Boc-X-OH(6.428g)；Mpr(1.592g)
4：线性粗肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2的制备
(1)将3中得到的树脂用DMF洗三次，DCM洗三次，甲醇洗三次，真空充分抽干，即得到Mpr-X-Gly-Asp(OcHex)-Trp-Pro-Cys(OMeBzl)-HN-MBHA树脂共10.642g。
(2)将得到的树脂置于HF裂解装置中，加入HF(90ml)、Anisole(10ml)的混合溶液，于0～5℃，搅拌反应1.5小时。
(3)反应结束后，抽去HF，加入冰冻乙醚(1L)，有沉淀析出，收集沉淀，真空充分干燥。
(4)收集干燥后的白色沉淀(4.135g)，即得到巴替非班及其类似物线性粗肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，-20℃条件下密封保存。
5：线性粗肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2的环化
将实施例4所得到的巴替非班及其类似物线性粗肽溶解于水中，于搅拌中加入1mmol/ml的I2的甲醇溶液(50ml)，室温反应30分钟，用分析型HPLC跟踪环化反应至完全，即得到Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2(Disulfide bridge，Mprl-Cys7)。
实施例三：液相合成法
巴替非班及其类似物结构相似，下面以巴替非班的合成为例说明该类化合物的合成。
(一)、带侧链保护基的线性肽MprRGDWPC-NH2的合成
路线一：
1、H-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.076克Boc-Pro-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入600μL的NMM，稍后加入700μL的i-C4H9-OCOCl，保持0℃以下30min，加入0.957克H-Cys(Acm)-NH2，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl。
2、Boc-Asp(OBzl)-Trp-OH的合成
在圆底烧瓶中加入1.617克Boc-Asp(OBzD-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入600μL的NMM，稍后加入700μL的i-C4H9-OCOCl，保持0℃以下30min，加入1.021克H-Trp-OH，再加入4mL的DMF，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
3、H-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入2.038克Boc-Asp(OBzl)-Trp-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入0.7094克HOBt和1.114克DCC，混合物在-20℃活化。TLC跟踪活化完全，过滤掉DCU。滤液中加入1.154克H-Pro-Cys(Acm)-NH2，室温下反应，TLC检测反应完全。旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
4、Boc-Arg(Tos)-Gly-OH的合成
在圆底烧瓶中加入2.143克Boc-Arg(Tos)-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入600μL的NMM，稍后加入700μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入0.628克HCl·Gly-OMe，再补加600μL的NMM和5mL的DMF，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含2当量NaOH的甲醇溶液，室温下反应，TLC检测反应完全后，用稀HCl中和至pH值为3，用乙酸乙酯萃取多次，旋蒸掉乙酸乙酯后得到固体。
5、H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.46克Boc-Arg(Tos)-Gly-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入360μL的NMM，稍后加入420μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入2.041克H-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2，再补加360μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
6、Mpr(Trt)-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入0.696克Mpr(Trt)，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入240μL的NMM，稍后加入280μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入2.134克H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2，再补加240μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
路线二：
1、H-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
参考路线一
2、H-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.37克Boc-Trp-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入570μL的NMM，稍后加入665μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.299克H-Pro-Cys(Acm)-NH2，再补加570μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl。
3、H-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.294克Boc-Asp(OBzl)-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入480μL的NMM，稍后加入560μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.899克H-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2，再补加480μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
4、H-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入0.526克Boc-Gly-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入360μL的NMM，稍后加入420μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入2.041克H-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2，再补加360μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
5、H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.071克Boc-Arg(Tos)-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入300μL的NMM，稍后加入350μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.888克H-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2，再补加300μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
6、Mpr(Trt)-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入0.696克Mpr(Trt)，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入240μL的NMM，稍后加入280μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入2.134克H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2，再补加240μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
路线三：
l、H-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
参考路线一
2、H-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
参考路线二
3、H-Gly-Asp(OcHex)-OH的合成
在圆底烧瓶中加入0.876克Boc-Gly-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入600μL的NMM，稍后加入700μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.077克H-Asp(OcHex)-OH，再补加4mL的DMF，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl。
4、Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-OH的合成
在圆底烧瓶中加入1.928克Boc-Arg(Tos)-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入540μL的NMM，稍后加入630μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.226克H-Gly-Asp(OcHex)-OH，再补加540μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
5、H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入2.732克Boc-Arg(Tos)-Gly-Asp(OcHex)-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入0.681克HOAT和680μL的EtPr2N，再加入1.896克HBTU。混合物在-20℃下活化，HPLC跟踪活化完全。加入1.888克H-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2，HPLC检测反应完全。旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。用20mL的2-丙醇研磨固体15小时，，加入4mL水，抽滤得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
6、Mpr(Trt)-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入0.696克Mpr(Trt)，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入240μL的NMM，稍后加入280μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入2.134克H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acn)-NH2，再补加240μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
路线四：
1、H-Trp-Pro-OCH3的合成
在圆底烧瓶中加入1.522克Boc-Trp-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入600μL的NMM，稍后加入700μL的i-C4H9-OCOCl，保持0℃以下30min，加入0.957克H-Pro-OCH3，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
2、H-Asp(OBzl)-Trp-Pro-OCH3的合成
在圆底烧瓶中加入1.455克Boc-Asp(OBzl)-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入540μL的NMM，稍后加入630μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.419克H-Trp-Pro-OCH3，再补加540μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
3、Boc-Arg(Tos)-Gly-OH的合成
参考路线一
4、H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-OCH3的合成
在圆底烧瓶中加入1.459克Boc-Arg(Tos)-Gly-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入360μL的NMM，稍后加入420μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.562克H-Asp(OBzl)-Trp-Pro-OCH3，再补加360μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
5、Mpr(Trt)-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-OH的合成
在圆底烧瓶中加入0.696克Mpr(Trt)，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入240μL的NMM，稍后加入280μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.776克H-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-OCH3，再补加240μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含2当量NaOH的甲醇溶液，室温下反应，TLC检测反应完全后，用稀HCl中和至pH值为3，用乙酸乙酯萃取多次，旋蒸掉乙酸乙酯后得到固体。
6、Mpr(Trt)-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.827克Mpr(Trt)-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入0.245克HOAT和256μL的EtPr2N，再加入0.683克HBTU。混合物在-20℃下活化，HPLC跟踪活化完全。加入0.545克H-Cys(Trt)-NH2，HPLC检测反应完全。旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。用20mL的2-丙醇研磨固体15小时，加入4mL水，抽滤得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
路线五：
1、H-Pro-Cys(Trt)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.687克Fmoc-Pro-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入600μL的NMM，稍后加入720μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.813克H-Cys(Trt)-NH2，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入20mL乙腈和1mL六氢吡啶的混合液，室温下搅拌，TLC检测反应完全，旋蒸浓缩溶液，往溶液中加入甲基叔丁基醚，有沉淀析出，冷冻静置，抽滤，得到固体。
2、Boc-Asp(OBzl)-Trp-OH的合成
参考路线一
3、Boc-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入1.63克Boc-Asp(OBzl)-Trp-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入0.568克HOBt和0.891克DCC，混合物在-20℃活化。TLC跟踪活化完全，过滤掉DCU。滤液中加入1.842克H-Pro-Cys(Trt)-NH2，室温下反应，TLC检测反应完全。旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
4、
的合成
在圆底烧瓶中加入1.903克Boc-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Trt)-NH2，用50mL甲醇溶解，搅拌下加入1mmol/ml的碘的甲醇溶液，HPLC检测环化反应完全。柱层析，得到固体。往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
5、Boc-Arg(Tos)-Gly-OH的合成
参考路线一
6、
的合成
在圆底烧瓶中加入0.973克Boc-Arg(Tos)-Gly-OH，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入240μL的NMM，稍后加入280μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入1.703克
再补加360μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
往上述固体中加入含6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，室温下搅拌，TLC检测反应完全后，旋转蒸发掉乙酸乙酯。残留物再用乙酸乙酯溶解，旋转蒸发掉乙酸乙酯。如此重复数次，直至除净游离的HCl，柱层析得到固体。
7、
的合成
在圆底烧瓶中加入0.696克Mpr(Trt)，用20mL无水THF溶解，冰浴下加入240μL的NMM，稍后加入280μL的i-C4H9-OCOCl，混合物在-20℃下活化，TLC跟踪活化完全。加入2.676克
再补加240μL的NMM，室温下反应，TLC检测反应完全。抽滤，滤液旋蒸掉THF，加入乙酸乙酯溶解。依次用5％的盐酸、5％碳酸氢钠和饱和食盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发掉乙酸乙酯后得到固体。
8、Mpr(Trt)-Arg(Tos)-Gly-Asp(OBzl)-Trp-Pro-Cys(Acm)-NH2的合成
在圆底烧瓶中加入2.502克
加入20mL甲醇溶解，氮气保护下滴加780μL的1，3-丙二硫醇。室温下反应6小时，TLC检测反应完全，旋蒸掉溶剂。往剩余物中加入12mL己烷，研磨4小时后抽滤得到固体。
(二)、带侧链保护基的线性肽MprRGDWPC-NH2去侧链保护基
1、如果侧链含有OBzl、Lys(2-Cl-Z)和/或NO2保护基，则将线性肽溶解于甲醇中，加入甲酸铵水溶液，然后把湿的钯炭加入，在氮气保护中反应，TLC检测反应完全。反应液通过长的硅胶柱，所得液体旋蒸掉甲醇后过滤得到固体；如果侧链不含OBzl、Lys(2-Cl-Z)和/或NO2保护基，则直接进行步骤2。
2、将线性肽溶解于二甲硫醚2mL，苯甲醚2mL和CF3COOH-CF3SO3H(1∶4)10mL混合液中，0℃反应1h。旋转蒸发掉部分溶剂，往残留物中加入20mL冰冻乙醚，抽滤得固体。
(三)、脱去侧链保护基的线性粗肽Mpr-Arg-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2的环化
将(二)所得到的巴替非班线性粗肽溶解于水中，于搅拌中加入1mmol/ml的I2/甲醇溶液(50ml)，室温反应30分钟，用分析型HPLC跟踪环化反应至完全，即得到Mpr-Arg-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2(Disulfide bridge，Mpr1-Cys7)。
实施例四：纯化巴替非班及其类似物
分为纯化、冷冻干燥、包装三个阶段。
在此给出的实施例可将巴替非班及其类似物粗品纯化至纯度＞98％材料：使用的柱：7.7cm×30cm装填有Chromatorex C18(FUJI)SMB100-10颗粒缓冲液的制备：
缓冲液A＝H2O+0.1％TFA
缓冲液B＝ACN+0.1％TFA
方法：
1用约2柱体积10％B平衡柱
2将含有巴替非班及其类似物2.4g的粗品溶液以100ml/min上柱，同时监测柱压力。
3如下开始梯度操作，并在整个层析期间监测压力：
时间(分钟) ％B 流速(ml/min)
0 10 140
50 36 140
4当主峰开始流出时收集流分直到检测器吸光度小于0.1AU或在主峰洗出后达到主要拐点时为止。
5用分析型反相HPLC检测每个流分的纯度。
结果：
此方法，可收到纯度＞98％的流分2.16g，收率为90％。
将所收集的样品溶液旋蒸浓缩后在冷冻干燥机内冻成干粉后包装。所分离的巴替非班及其类似物纯度在98％-99％之间。
实施例五：巴替非班能有效地抑制血小板糖蛋白受体IIb-IIIa的结合。
糖蛋白受体IIb-IIIa可以从表达的中国仓鼠卵巢上皮细胞，或者其他细胞，或者直接从人的血小板中分离，提纯。然后结合到微量平板。固定的糖蛋白IIb-IIIa，然后和纤维蛋白原结合。本发明可以阻抑该受体蛋白与纤维蛋白原的结合，而对照物不会阻抑。因此，可以测定抑制剂的抑制效率。这种抑制效率可用百分比来描述。即以纤维蛋白原与IIb-IIIa受体蛋白的结合在对照物的实验条件下为百分之百来计算。50％的抑制浓度(IC50)是常用来表达抑制剂抑制效果的。我们测定到巴替非班的50％的有效抑制浓度为2-4微摩尔。人血小板糖蛋白受体IIb-IIIa表达在中国仓鼠卵巢上皮细胞表面，能与纤维蛋白原结合。巴替非班能有效地抑制纤维蛋白原与表达受体的中国仓鼠卵巢上皮细胞的结合。本发明化合物对上皮细胞受体粘附的影响是按以下测定的：首先将纤维蛋白原在磷酸缓冲液中稀释到每毫升20微克，pH值为7.4，然后在96孔平板中，每孔加入100微升，让其粘附过夜。第二天，用PBS洗一次，每孔加入100微升的浓度为每毫升10毫克的牛血清白蛋白，覆盖1小时。其目的是阻止与此非特异性的结合，同时，准备好培养好的表达不同受体的中国仓鼠卵巢上皮细胞，每孔加入100微升，10万细胞，在37℃下，孵化不同的时间后，(通常30分钟或60分钟)，洗脱三次。粘附的细胞数则从测细胞内的内源性磷酸化酶的活性来进行比较。即洗脱未粘附的细胞后，加上100微升的细胞溶解液，加上磷酸酶底物(1％Triton X-100，每毫升6毫克硝基苯磷，50毫摩醋酸钠(pH5.0)。一小时后，反应以50微升的1M氢氧化钠终止。活性用平板分光光度测定。在浓度高于1微摩尔时，巴替非班能完全抑制细胞受体对纤维蛋白原的结合。
实施例六：化合物II能有效地抑制血小板糖蛋白受体IIb-IIIa的结合。
糖蛋白受体IIb-IIIa可以从表达的中国仓鼠卵巢上皮细胞，或者其他细胞，或者直接从人的血小板中分离，提纯。然后结合到微量平板。固定的糖蛋白IIb-IIIa，然后和纤维蛋白原结合。本发明可以阻抑该受体蛋白与纤维蛋白原的结合，而对照物不会阻抑。因此，可以测定抑制剂的抑制效率。这种抑制效率可用百分比来描述。即以纤维蛋白原与IIb-IIIa受体蛋白的结合在对照物的实验条件下为百分之百来计算。50％的抑制浓度(IC50)是常用来表达抑制剂抑制效果的。我们测定到化合物II的50％的有效抑制浓度为5-7微摩尔。人血小板糖蛋白受体IIb-IIIa表达在中国仓鼠卵巢上皮细胞表面，能与纤维蛋白原结合。化合物II能有效地抑制纤维蛋白原与表达受体的中国仓鼠卵巢上皮细胞的结合。本发明化合物对上皮细胞受体粘附的影响是按以下测定的：首先将纤维蛋白原在磷酸缓冲液中稀释到每毫升20微克，pH值为7.4，然后在96孔平板中，每孔加入100微升，让其粘附过夜。第二天，用PBS洗一次，每孔加入100微升的浓度为每毫升10毫克的牛血清白蛋白，覆盖1小时。其目的是阻止与此非特异性的结合，同时，准备好培养好的表达不同受体的中国仓鼠卵巢上皮细胞，每孔加入100微升，10万细胞，在37℃下，孵化不同的时间后，(通常30分钟或60分钟)，洗脱三次。粘附的细胞数则从测细胞内的内源性磷酸化酶的活性来进行比较。即洗脱未粘附的细胞后，加上100微升的细胞溶解液，加上磷酸酶底物(1％Triton X-100，每毫升6毫克硝基苯磷，50毫摩醋酸钠(pH5.0)。一小时后，反应以50微升的1M氢氧化钠终止。活性用平板分光光度测定。在浓度高于10微摩尔时，化合物II能完全抑制细胞受体对纤维蛋白原的结合。
实施例七：化合物III能有效地抑制血小板糖蛋白受体IIb-IIIa的结合。
糖蛋白受体IIb-IIIa可以从表达的中国仓鼠卵巢上皮细胞，或者其他细胞，或者直接从人的血小板中分离，提纯。然后结合到微量平板。固定的糖蛋白IIb-IIIa，然后和纤维蛋白原结合。本发明可以阻抑该受体蛋白与纤维蛋白原的结合，而对照物不会阻抑。因此，可以测定抑制剂的抑制效率。这种抑制效率可用百分比来描述。即以纤维蛋白原与IIb-IIIa受体蛋白的结合在对照物的实验条件下为百分之百来计算。50％的抑制浓度(IC50)是常用来表达抑制剂抑制效果的。我们测定到化合物III的50％的有效抑制浓度为10-15微摩尔。人血小板糖蛋白受体IIb-IIIa表达在中国仓鼠卵巢上皮细胞表面，能与纤维蛋白原结合。化合物III能有效地抑制纤维蛋白原与表达受体的中国仓鼠卵巢上皮细胞的结合。本发明化合物对上皮细胞受体粘附的影响是按以下测定的：首先将纤维蛋白原在磷酸缓冲液中稀释到每毫升20微克，pH值为7.4，然后在96孔平板中，每孔加入100微升，让其粘附过夜。第二天，用PBS洗一次，每孔加入100微升的浓度为每毫升10毫克的牛血清白蛋白，覆盖1小时。其目的是阻止与此非特异性的结合，同时，准备好培养好的表达不同受体的中国仓鼠卵巢上皮细胞，每孔加入100微升，10万细胞，在37℃下，孵化不同的时间后，(通常30分钟或60分钟)，洗脱三次。粘附的细胞数则从测细胞内的内源性磷酸化酶的活性来进行比较。即洗脱未粘附的细胞后，加上100微升的细胞溶解液，加上磷酸酶底物(1％Triton X-100，每毫升6毫克硝基苯磷，50毫摩醋酸钠(pH5.0)。一小时后，反应以50微升的1M氢氧化钠终止。活性用平板分光光度测定。在浓度高于15微摩尔时，化合物III能完全抑制细胞受体对纤维蛋白原的结合。
Claims (15)
1.一种化学合成如下式所示的化合物的液相合成方法，
其中
(化合物I，巴替非班)，
(化合物II)或者CH2-NH2(化合物III)，
其包括以下步骤：
(a)液相合成带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har；
(b)将步骤(a)所得的带有侧链保护基的线性肽脱去侧链保护基；
(c)环化步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽。
2.按照权利要求1所述的合成方法，其中步骤(c)包括：对步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽用I2和H2O在0-30℃进行环化反应10-40分钟。
3.按照权利要求1或2所述的合成方法，其中步骤(a)的液相合成过程包括：
在存在偶联剂的条件下，将α氨基受保护的氨基酸与α氨基不受保护的氨基酸或与N末端氨基不受保护的片段肽偶联，然后脱掉偶联生成的肽的N末端氨基的保护基，
其中偶联剂选自以下各组之一：
①NMM和i-C4H9OCOCl；
②HOBt、DCC和DIPCDI；
③HOBt、HOBt和DIPCDI；
④HOBt、EtPr2N和HBTU；和
⑤BOP试剂、HOBt和NMM。
4.按照权利要求3中所用的合成方法，其中脱掉所述N末端氨基的保护基团的试剂选自以下组之一：
①含1-6mol/L的HCl的乙酸乙酯溶液，或含1-6mol/L的HCl的冰醋酸溶液；
②含1-20％的TFA的DCM溶液，或含1-20％的TFA的冰醋酸溶液；和
③含1-20％的六氢吡啶的乙腈溶液，或含1-20％的六氢吡啶的DMF溶液。
5.按照权利要求1或2所述的合成方法，其中步骤(b)的脱去侧链保护基的过程包括选自以下组之一或其组合所述的过程：
①用钯炭和甲酸铵、或者用钯炭和氢气脱除Asp(OBzl)、Lys(2-Cl-Z)和/或Arg(NO2)的侧链保护基；
②Cys(Acm)在氧化成二硫键的同时脱除侧链保护基；和
③用(CH3)2S、C6H5OCH3、CF3COOH和CF3SO3H脱除Arg(Tos)、Har(Tos)、Mpr(Trt)、Asp(OcHex)和/或Cys(Trt)的侧链保护基，其中(CH3)2S∶C6H5OCH3∶CF3COOH∶CF3SO3H的摩尔比为1∶1∶4∶1。
6.一种化学合成如下式所示的化合物的Fmoc固相合成方法，
其中
(化合物I，巴替非班)，
其包括以下步骤：
(a)用Fmoc-Rink Amide AM树脂固相合成连接在树脂上的带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys，其中X为Arg，Lys或Har；
(b)将步骤(a)所得的带有侧链保护基的线性肽脱去侧链保护基并从树脂上切下，得到线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har；
(c)环化步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽。
7.按照权利要求6所述的合成方法，其中步骤(c)包括：对步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽用I2和H2O在0-30℃进行环化反应10-40分钟。
8.按照权利要求6或7所述的合成方法，其中步骤(a)的固相合成过程包括：
将Fmoc-Rink Amide AM树脂脱掉Fmoc基团后得到H2N-Rink Amide AM树脂；然后在H2N-Rink Amide AM树脂上依次偶联Fmoc基团保护的氨基酸并脱掉Fmoc基团，
其中脱掉Fmoc基团的过程包括选自以下组之一所述的过程：
①用10-30％哌啶的DMF溶液室温反应1-30分钟，优选用20％的哌啶的DMF溶液室温20反应分钟；和
②用10-30％DBU的DMF溶液室温反应1-30分钟，优选用20％DBU的DMF溶液室温反应20分钟。
9.按照权利要求8所述的合成方法，其中偶联Fmoc基团保护的氨基酸的步骤包括选自以下组之一所述的过程：
①用DIPCDI、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-3小时；和
②用HBTU、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-3小时。
10.按照权利要求6或7所述的合成方法，其中步骤(b)的脱去侧链保护基并从树脂上切下的过程包括：用F试剂在室温并在N2保护的条件下，搅拌1-2小时，其中F试剂中各成分的体积配比为TFA∶H2O∶TIS＝90∶5∶5。
11.一种化学合成如下式所示的化合物的Boc固相合成方法，
其中
(化合物I，巴替非班)，
其包括以下步骤：
(a)用甲基二苯甲氨基树脂(即，MBHA树脂)固相合成连接在树脂上的带有侧链保护基的线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys，其中X为Arg，Lys或Har；
(b)将步骤(a)所得的带有侧链保护基的线性肽脱去侧链保护基并从树脂上切下，得到线性肽Mpr-X-Gly-Asp-Trp-Pro-Cys-NH2，其中X为Arg，Lys或Har；
(c)环化步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽。
12.按照权利要求11所述的合成方法，其中步骤(c)包括：对步骤(b)所得的脱去侧链保护基的线性肽用I2和H2O在0-30℃进行环化反应10-40分钟。
13.按照权利要求11或12所述的合成方法，其中步骤(a)的固相合成过程包括：在MBHA树脂上依次偶联Boc基团保护的氨基酸并脱掉Boc基团，
其中偶联Boc基团保护的氨基酸的步骤包括选自以下组之一所述的过程：
①用DIPCDI、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-2小时；和
②用HBTU、HOBt、DMF和DCM，反应时间为室温下1-3小时。
14.按照权利要求13所述的合成方法，其中脱掉Boc基团的过程包括：用50％TFA的DCM溶液室温反应30分钟。
15.按照权利要求6或7所述的合成方法，其中步骤(b)的脱去侧链保护基并从树脂上切下的过程包括：用B试剂在室温并在N2保护的条件下，搅拌1-2小时，其中B试剂中各成分的体积配比为HF∶Anisole＝90∶10。
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|---|---|---|---|---|
| CN101255187B (zh) * | 2008-02-18 | 2011-09-07 | 济南环肽医药科技有限公司 | Atl肽的固相合成方法 |
| CN103969228A (zh) * | 2013-02-04 | 2014-08-06 | 百奥泰生物科技(广州)有限公司 | 一种整合素GP IIb/IIIa特异性结合分子巴替非班的生物学效应检测方法 |
| CN104628826A (zh) * | 2013-11-11 | 2015-05-20 | 华东理工大学 | 利那洛肽的制备方法 |
| US11939369B2 (en) | 2014-01-06 | 2024-03-26 | The General Hospital Corporation | Integrin antagonists |
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