CN101031546A

CN101031546A - 异吲哚啉化合物和其制备和使用方法

Info

Publication number: CN101031546A
Application number: CNA2005800328759A
Authority: CN
Inventors: 乔治·W·穆勒; 汉－华·曼
Original assignee: Celgene Corp
Current assignee: Celgene Corp
Priority date: 2004-07-28
Filing date: 2005-07-27
Publication date: 2007-09-05
Also published as: ATE507204T1; US20070244183A1; DE602005027707D1; CA2577222A1; US20060084815A1; AU2005280499A1; EP1778635B1; AU2005280499B2; IL180979A; NZ553028A; KR20130097818A; US8026269B2; JP2008508299A; KR101564153B1; JP5586830B2; WO2006025991A3; KR20070047808A; ES2362104T3; US7495112B2; IL180979A0

Abstract

本发明包括异吲哚啉化合物、含有它们的药物组合物以及它们用于治疗、预防或控制各种疾病和紊乱的方法。其实例包括但不限于癌症、炎性肠病和骨髓增生异常综合征。

Description

异吲哚啉化合物和其制备和使用方法

1.发明领域

本发明包括新的异吲哚啉衍生物、这些化合物的药物组合物以及将这些化合物和组合物用于治疗、预防和控制由PDE4抑制介导的疾病和/或与异常TNF-α水平相关的疾病。

2.发明背景

据报道，异吲哚啉衍生物可用于治疗、预防和控制各种紊乱或疾病。例如，美国专利6,667,316，在此引入其全部内容作为参考，公开了可降低肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平和抑制磷酸二酯酶(PDE)的一类化合物。然而，仍需要能够有效地治疗、预防和/或控制由TNF-α和PDE介导的各种紊乱和疾病的化合物。

2.1.TNF-α

肿瘤坏死因子α(TNF-α)是在响应免疫刺激物时主要由炎症细胞和单核吞噬细胞释放的细胞因子。TNF-α能够增强大多数细胞过程，例如分化、募集、增殖和蛋白酶降解。在低水平时，TNF-α赋予针对感染因子、肿瘤和组织损害的保护作用。然而，TNF-α在许多疾病中也起作用。当给予患者例如人时，TNF-α引起或加重炎症、发热、心血管效应、出血、凝固和类似于在急性感染和休克状态下所看到的急性期反应。TNF-α产生增加或失调与许多疾病和医学病症有关，例如癌症，例如实体肿瘤和血源性肿瘤；心脏病，例如充血性心衰竭；以及病毒性疾病、遗传性疾病、炎性疾病、变应性疾病和自身免疫性疾病。

癌症是一种特别的破坏性疾病，血液中TNF-α水平的增加与癌症的危险和扩散有关。正常条件下，在健康个体中，癌细胞在循环系统中无法存活，其原因之一是血管内壁对肿瘤细胞的外渗起到屏障作用。然而，已经知道，在体外，细胞因子水平增加会大幅度增加癌细胞对内皮的粘附。一种解释是TNF-α等细胞因子刺激一种被称为ELAM-1(内皮白细胞粘附分子)的细胞表面受体的生物合成和表达。ELAM-1是称为LEC-CAM的钙依赖性细胞粘附受体的家族成员，LEC-CAM包括LECAM-1和GMP-140。在炎症反应期间，内皮细胞上的ELAM-1对于白细胞来说起到“归巢受体(homing receptor)”的作用。已经表明，内皮细胞上的ELAM-1能介导增强结肠癌细胞粘附到经细胞因子处理过的内皮上(Rice等，1989，Science 246：1303-1306)。

炎性疾病例如关节炎、相关性关节炎(例如骨关节炎和类风湿性关节炎)、炎性肠病、脓毒病、银屑病、慢性阻塞性肺病和慢性炎性肺病也很普遍并且是疑难病症。TNF-α在炎症反应中起到重要作用，给予其拮抗剂在炎性疾病动物模型中会阻断慢性和急性反应。

TNF-α产生的增加或失调与以下疾病有关：病毒性疾病、遗传性疾病、炎性疾病、变应性疾病和自身免疫性疾病。这类疾病的实例包括但不限于：HIV；肝炎；成人呼吸窘迫综合征；骨吸收病；慢性阻塞性肺病；慢性肺部炎性疾病；皮炎；囊性纤维化；脓毒性休克；脓毒病；内毒素休克；血流动力性休克；脓毒病综合征；局部缺血后再灌注损伤；脑膜炎；银屑病；纤维化病；恶病质；移植物抗宿主病(GVHD)；移植排斥；自身免疫性疾病；类风湿性脊椎炎；关节炎，例如类风湿性关节炎、类风湿性脊椎炎和骨关节炎；骨质疏松症；炎性肠病；克罗恩病(Crohn’sdisease)；溃疡性结肠炎；多发性硬化；系统性红斑狼疮；麻风结节性红斑(ENL in leprosy)；辐射损伤；哮喘；和高氧性肺泡损伤。Tracey等，1987，Nature 330：662-664和Hinshaw等，1990，Circ.Shock 30：279-292(内毒素休克)；Dezube等，1990，Lancet，335：662(恶病质)；Millar等，1989，Lancet 2：712-714和Ferrai-Baliviera等，1989，Arch.Surg.124：1400-1405(成人呼吸窘迫综合征)；Bertolini等，1986，Nature 319：516-518，Johnson等，1989，Endocrinology 124：1424-1427，Holler等，1990，Blood 75：1011-1016，和Grau等，1989，N.Engl.J.Med.320：1586-1591(骨吸收病)；Pignet等，1990，Nature，344：245-247，Bissonnette等，1989，Inflammation13：329-339和Baughman等，1990，J.Lab.Clin.Med.115：36-42(慢性肺部炎性疾病)；Elliot等，1995，Int.J.Pharmac.17：141-145(类风湿性关节炎)；von Dullemen等，1995，Gastroenterology 109：129-135(克罗恩病)；Duh等，1989，Proc.Nat.Acad.Sci.86：5974-5978，Poll等，1990，Proc.Nat.Acad.Sci.87：782-785，Monto等，1990，Blood 79：2670，Clouse等，1989，J.Immunol.142，431-438，Poll等，1992，AIDS Res.Hum.Retrovirus，191-197，Poli等1990，Proc.Natl.Acad.Sci.87：782-784，Folks等，1989，Proc.Nat.Acad.Sci.86：2365-2368(HIV和HIV引起的机会感染)。

2.2.PDE4

3’，5’-环一磷酸腺苷(cAMP)是一种在许多疾病和病症中起作用的酶，所述疾病和病症例如但不限于哮喘和炎症(Lowe和Cheng，Drugs of theFuture，17(9)，799-807，1992)。已经表明，cAMP在炎性白细胞中的增加会抑制其活化，并随之释放包括TNF-α和核因子κB(NF-κB)在内的炎性介质。cAMP水平增加也会导致呼吸道平滑肌松弛。

目前认为cAMP失活的主要细胞机制是由称为环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)的同工酶家族分解cAMP(Beavo和Reitsnyder，Trends in Pharm.，11，150-155，1990)。已知PDE家族有12个成员。已经知道，IV型PDE(PDE4)的抑制在抑制炎症介导的释放和呼吸道平滑肌松弛中都特别有效(Verghese等人，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics，272(3)，1313-1320，1995)。因此，特异性抑制PDE4的化合物可抑制炎症并有助于呼吸道平滑肌松弛，并且具有最少的不需要的副作用，例如心血管效应或抗血小板效应。

对cAMP具有特异性的PDE4家族目前是最大的家族，由至少4种同工酶(a-d)和多种剪接变异体组成(Houslay，M.D.等人，Advances inPharmacology 44，J.August等编著，第225页，1998)。有超过20种PDE4同种型，它们以受许多不同启动子调节的细胞特异性方式进行表达。已经为包括以下的疾病状态探索了选择性PDE4抑制剂：哮喘、特应性皮炎、抑郁症、再灌注损伤、脓毒性休克、中毒性休克、内毒素休克、成人呼吸窘迫综合征、自身免疫性糖尿病、糖尿病性乏味、多梗塞性痴呆、AIDS、癌症、克罗恩病、多发性硬化、脑缺血、银屑病、同种异体移植物排斥、再狭窄、溃疡性结肠炎、恶病质、脑型疟疾、变应性鼻结膜炎、骨关节炎、类风湿性关节炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、慢性支气管炎、嗜酸性肉芽肿和自身免疫性脑脊髓炎(Houslay等，1998)。PDE4存在于脑和大量炎性细胞中，已经发现其在包括特应性皮炎或湿疹、哮喘和枯草热在内的许多疾病中水平异常升高(参考OHSU flyer和J.of Allergyand Clinical Immunology，70：452-457，1982，Grewe等人)。在患有特应性疾病的个体中，在其外周血单核白细胞、T细胞、肥大细胞、嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞中都发现PDE-4活性升高。这样升高的PDE活性降低了cAMP水平并导致这些细胞中cAMP控制的破坏。这造成在受其影响的血和组织中免疫应答增加。

据报道，一些PDE4抑制剂具有广谱抗炎活性，在哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)和其它变应性疾病(例如特应性皮炎和枯草热)的模型中具有很高活性。已经使用的PDE4抑制剂包括茶碱、咯利普兰、登布茶碱、ARIFLO、罗氟司特、CDP 840(三芳基乙烷)和CP80633(嘧啶酮)。已经表明，PDE4抑制剂会影响嗜酸性粒细胞反应，降低嗜碱性粒细胞组胺释放，降低IgE、PGE2、IL10的合成，降低抗CD3刺激的Il-4产生。同样，已经表明，PDE4抑制剂能阻断嗜中性粒细胞的功能。嗜中性粒细胞在哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)和其它变应性疾病中起重要作用。已经表明，PDE4抑制剂能抑制粘附分子、各种活性氧、白介素(IL)-8和嗜中性粒细胞弹性蛋白酶的释放，这些都与破坏肺部结构因而破坏呼吸道功能的嗜中性粒细胞有关。PDE4抑制剂影响多种功能性途径，对多种免疫和炎症途径起作用，因而影响许多免疫介质的合成或释放。(J.M.Hanifin和S.C.Chan，″Atopic Dermatitis-Therapeutic Implication for NewPhosphodiesterase Ihibitors″Monocyte uysreguianon of T Cells in AACINews，7/2，1995；J.M.Hanifin等人，″Type 4 Phosphodiesterase IhibitorsHave clinical and In Vitro Anti-inflammatory Effects in Atopic Dermatitis″Journal of Investigative Dermatology，1996，107，第51-56页)。

一些第一代PDE-4抑制剂能有效抑制PDE4活性并缓解由该酶过量表达而引起的许多炎症问题。然而，其有效性因副作用而受到限制，特别是当用于全身时，例如恶心和呕吐。Huang等人，Curr.Opin.In Chem.Biol.2001，5：432-438。实际上，迄今为止开发的所有PDE4抑制剂都是具有中枢神经系统副作用和胃肠副作用的小分子化合物，例如头痛、恶心/呕吐和胃液分泌。

3.发明概述

本发明包括用于治疗各种疾病的新的并吲哚啉衍生物，包括抑制PDE4和/或TNF-α介导的疾病。本发明也提供包含这些化合物的药物组合物以及治疗各种疾病的方法。

3.1.缩写和定义

本文所用的缩写均为常规的，除非另有定义。

除非另有说明，本文所用的术语“治疗”是指当患者患有特定疾病或紊乱时所采取的措施，以降低该疾病或紊乱的严重程度。

除非另有说明，本文所用的术语“预防”是指在患者开始患有特定疾病或紊乱之前所采取的行动，以抑制或降低该疾病或紊乱的严重程度。

除非另有说明，本文所用的术语“控制”是指在已经患有特定疾病或紊乱的患者中防止所述疾病或紊乱的复发，和/或使得已经患有特定疾病或紊乱的患者处于缓解状态的时间延长。该术语包括调节疾病或紊乱的阈值(threshold)、发展和/或持续时间，或者改变患者响应疾病或紊乱的方式。

除非另有说明，本文所用的术语“治疗有效量”是指所给予的化合物的用量足以预防或在某种程度上缓解一种或多种所治疗的病症或障碍的症状以及缓解或根除该疾病的病因。

除非另有说明，本文所用的术语“PDE4-反应性疾病或紊乱”或“由PDE4抑制介导的”或“由抑制PDE4介导的”是指对调节PDE4活性产生有利反应的疾病或紊乱。对PDE4调节产生的有利反应包括减缓或消除疾病和/或其伴随症状，抑制疾病(即阻止或减少疾病的发展)或其临床症状，并且消除疾病或其临床症状。PDE4-反应性疾病或紊乱可以完全或部分地对PDE4调节有反应。PDE4-反应性疾病或紊乱可能与不适当的，例如小于或大于正常的PDE4活性有关。由于PDE4在一般不表达PDE4的细胞中表达，PDE4表达降低(导致例如脂质和代谢障碍和疾病)或PDE4表达增加，因此会导致不适当的PDE4功能性活性。PDE4-反应性疾病或紊乱包括PDE4-介导的疾病或紊乱。

除非另有说明，本文所用的术语″调节(modulate)″和″调节(modulation)″指被调节的分子(例如，酶)的活性或表达增加或下降。在一些实施方案中，与未被调节的分子的活性或表达相比，被调节的分子的活性或表达增加10％、20％、50％、100％、或200％或更大。在其它实施方案中，与未被调节的分子的活性或表达相比，被调节的分子的活性或表达下降10％、20％、50％、70％、80％、或90％或更大。

除非另有说明，本文所用的术语“药学上可接受的盐”包括用相对无毒的酸或碱制备的盐，这取决于在本文所述化合物上存在的特定取代基。当本发明的化合物含有相对酸性官能团时，可以通过使所述化合物的中性形式与足够量的所需碱(可以是纯的碱或者在合适的惰性溶剂中)接触，而得到碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐的实例包括钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、有机胺盐和镁盐。当本发明的化合物含有相对碱性官能团时，可以通过使所述化合物的中性形式与足够量的所需酸(可以是纯的酸或者在合适的惰性溶剂中)接触，而得到酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括衍生自无机酸的盐以及衍生自相对无毒有机酸的盐，所述无机酸例如氢氯酸、氢溴酸、硝酸、碳酸、一氢碳酸、磷酸、一氢磷酸、二氢磷酸、硫酸、一氢硫酸、氢碘酸和亚磷酸；所述有机酸例如乙酸、丙酸、异丁酸、草酸、马来酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、富马酸、扁桃酸、苯二甲酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、柠檬酸、酒石酸和甲磺酸。也包括氨基酸盐(例如精氨酸盐)和有机酸盐(例如葡糖醛酸盐和半乳糖醛酸盐)。参见例如Berge等.(1977)J.Pharm.Sci.66：1-19。某些具体的本发明的化合物同时含有碱性官能团和酸性官能团，这使得该化合物既能转变成碱加成盐又能转变成酸加成盐。

使一些化合物的盐与碱或酸接触可以恢复其中性形式，并且可以通过常规方式分离出母体化合物。在某些物理性能(例如在极性溶剂中的溶解度)方面，化合物的母体形式可以与其各种盐形式不同，但是就本发明的目的而言，盐形式通常等同于其化合物的母体形式。

本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式、包括水合形式存在。一般而言，溶剂化形式等同于非溶剂化形式。本发明的某些化合物可以以多晶形或无定形形式存在。一般来说，就本发明中给出的用途而言，所有物理形式都是等同的并且都包括在本发明的范围内。

本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学或立体中心)或双键。外消旋体、对映异构体、非对映异构体、几何异构体及其混合物全都包括在本发明内。

本发明的化合物在构成所述化合物的一个或多个原子上也可含有非天然比例的原子同位素。例如，所述化合物可以用例如以下放射性同位素进行放射性标记：氚(³H)、碘-125(¹²⁵I)和碳-14(¹⁴C)。放射性标记的化合物可用作治疗性试剂(例如癌症治疗性试剂)、研究用试剂(例如测定用试剂)和诊断试剂(例如体内造影剂)。本发明的化合物的所有同位素变体，无论是否具有放射性，都包括在本发明的范围内。

当在本文中使用时，除非另外指明，术语“立体异构体混合物”包括外消旋混合物以及对映体富集的混合物(例如，R/S＝30/70、35/65、40/60、45/55、55/45、60/40、65/35和70/30)。

当在本文中使用时，除非另外指明，术语“立体异构体纯的”或“对映体纯的”指化合物包括一种立体异构体并且基本上不含有该化合物的相反立体异构体或对映体。例如，当化合物含有80％、90％、或95％或更多的一种立体异构体和20％、10％、或5％或更少的相反立体异构体时，化合物是立体异构体纯的或对映体纯的。在某些情况下，当化合物是约80％ee(对映体过量)或更大，优选相对于特定的手性中心等于或大于90％ee，更优选相对于特定的手性中心为95％ee时，本发明的化合物被认为相对于手性中心是光学活性纯的或立体异构体/对映体纯的(即，基本上R-型或基本上S-型)。因此，本发明包括所有的对映体纯的/立体异构纯的，对映体富集的/立体异构富集的本发明的化合物，和其外消旋混合物。

4.发明详述

本发明包括可用于治疗、预防或控制患者(例如人)的疾病和紊乱的新的化合物和组合物。这种疾病或紊乱的例子包括但不限于：癌症；病毒性疾病、遗传性疾病、炎性疾病、变应性疾病和自身免疫性疾病；细菌感染；CNS紊乱；MDS和相关综合征；CRPS和相关综合征；MD和相关综合征；MPD和相关综合征；和石棉相关疾病或紊乱。本发明的化合物可用于治疗、预防或控制由PDE4和/或TNF-α水平的过量、不足或失调引起或加重的疾病。

本发明中所用的具体化合物列于下表1中，及其药学上可接受的前药、盐、溶剂化物和立体异构体：

表1

在另一个实施方案中，本发明还包括2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4，5-二硝基异吲哚啉-1，3-二酮和其酸加成盐。在一个特别实施方案中，本发明包括2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4，5-二硝基异吲哚啉-1，3-二酮的盐酸盐。

本发明的化合物通常以固体形式存在，可以按照众所周知的方法重结晶，得到高纯度的晶体，优选纯度大于95％，更优选纯度大于98％。窄熔点范围通常是纯度的标志。因此，优选本发明的化合物的熔点范围为3℃-4℃内，更优选范围为2℃内。

各种本发明的化合物含有一个或多个手性中心，可以以对映异构体的外消旋混合物或非对映体混合物存在。本发明包括使用这种化合物的立体异构体纯的形式以及使用那些形式的混合物。例如，可以在本发明的方法和组合物中使用含有等量或不等量本发明的特定化合物的对映异构体的混合物。可以不对称合成或使用标准技术例如手性柱或手性拆分剂拆分这些异构体。例如参见：Jacques，J.等人，Enantiomers，Racematesand Resolutions(Wiley-Interscience，New York，1981)；Wilen，S.H.等人，Tetrahedron 33：2725(1977)；Eliel，E.L.，Stereochemistry of CarbonCompounds(McGraw-Hill，NY，1962)；和Wilen，S.H.，Tables of ResolvingAgents and Optical Resolutions，268页(E.L.Eliel编辑，Univ.of NotreDame Press，Notre Dame，IN，1972)。

本发明的化合物可含有一个或多个手性中心和/或双键，因此可以以立体异构体和几何异构体形式存在。本文所示化学结构和部分化学结构包括它们所有的对映体和立体异构体，例如立体异构体纯的形式和立体异构体混合物。

在一个实施方案中，本发明包括所述化合物的立体异构纯的R异构体，基本上没有其S异构体，或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)或前药。

在另一个实施方案中，本发明还包括所述化合物的立体异构纯的S异构体，基本上没有其R异构体，或药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)或前药。

可以通过例如手性相气相色谱、手性相高效液相色谱、将化合物结晶为手性盐络合物或者将化合物在手性溶剂中结晶等众所周知的方法，将本发明的化合物的对映体混合物和立体异构体混合物拆分为它们的组分对映体或立体异构体。也可通过众所周知的不对称合成法，从立体异构体或对映体纯的中间体、试剂或催化剂，得到对映体和立体异构体。

本发明还包括本发明的化合物的前药。除非另有说明，本文所用的术语“前药”指的是化合物的衍生物，该衍生物可以在生物学条件(体外或体内)下进行水解、氧化或其它反应从而提供该化合物。前药的实例包括但不限于包含可生物水解的部分如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯类似物的本发明的化合物的衍生物。前药的其它实例包括包含-NO、-NO2、-ONO或-ONO2部分的本发明的化合物的衍生物。前药一般可以用众所周知的方法来进行制备，例如在Burger抯Medicinal Chemistry and Drug Discovery，172-178，949-982(Manfred E.Wolff ed.，5th ed.1995)和Design of Prodrugs(H.Bundgaafd ed.，Elselvier，New York 1985)中描述的方法。

除非另有说明，本文所使用的术语″可生物水解的酰胺″、″可生物水解的酯″、″可生物水解的氨基甲酸酯″、″可生物水解的碳酸酯″、″可生物水解的酰脲″、″可生物水解的磷酸酯″分别表示具有以下性质的化合物的酰胺、酯、氨基甲酸酯、碳酸酯、酰脲或磷酸酯：1)不干扰该化合物的生物活性，但是在体内可赋予该化合物有利属性，例如吸收、作用持续时间或作用起始；或2)没有生物活性，但是在体内转化成生物活性化合物。可生物水解的酯的实例包括但不限于低级烷基酯、低级酰氧基烷基酯(例如乙酰氧基甲基、乙酰氧基乙基、氨基羰氧基甲基、新戊酰氧基甲基和新戊酰氧基乙基酯)，内酯基酯(例如酞基和硫代酞基酯)、低级烷氧基酰氧基烷基酯(例如甲氧基羰氧基甲基、乙氧基羰氧基乙基和异丙氧基羰氧基乙基酯)、烷氧基烷基酯、胆碱酯和酰基氨基烷基酯(例如乙酰氨基甲基酯)。可生物水解的酰胺的实例包括但不限于低级烷基酰胺、-氨基酸酰胺、烷氧基酰基酰胺和烷氨基烷基羰基酰胺。可生物水解的氨基甲酸酯的实例包括但不限于低级烷基胺、取代的乙二胺、氨基酸、羟烷基胺、杂环和杂芳族胺以及聚醚胺。

在本文中，本发明的化合物用其化学结构和/或化学名称来限定。当化合物同时提到其化学结构和化学名称但其化学结构和化学名称又彼此矛盾时，以其化学结构为准。

本发明提供了药物组合物，所述组合物包含治疗或预防有效量的一种或多种本发明的化合物和药学上可接受的运载体或载体。药学上可接受的运载体或载体可包括赋形剂、稀释剂或其混合物。术语“治疗有效量”是指在经兽医或医生治疗的患者中引发生物学或医学反应的本发明的化合物的用量。术语“预防有效量”是指在患有兽医或医生试图预防、抑制或减轻的医学病症的患者中，能预防或抑制痛苦或减轻痛苦的本发明的化合物的用量。

在另一个实施方案中，本发明包括抑制PDE4的方法，所述方法包括使PDE4接触有效量的本发明的化合物。一个特别的实施方案包括抑制患者中PDE4的方法，所述方法包括给予患者有效量的本发明的化合物。在一个实施方案中，患者是人。

在另一个实施方案中，本发明包括调节患者(例如人)内TNF-α产生或降低TNF-α水平的方法，所述方法包括给予所述患者有效量的本发明的化合物。在一个实施方案中，患者是人。

在又一个实施方案中，本发明包括治疗患者(例如人)中不希望有的血管生成的方法，所述方法包括给予所述患者有效量的本发明的化合物。血管生成相关疾病是本领域众所周知的。参见例如，Harrison′s Principleof Internal Medicine，第13版，(1994)，第947页。

本发明的一个独立的实施方案包括治疗、预防或控制骨髓增生异常综合征(MDS)的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者治疗或预防有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药。MDS是指各种造血干细胞紊乱。MDS的特征是细胞髓的形态和成熟度受损(骨髓组织形成异常)、外周血血细胞减少和发展成急性白血病的不确定风险，均起因于无效的血细胞生成。The Merck Manual 953(第17版，1999)和List等，1990，J.Clin.Oncol.8：1424。

本发明另一个独立的实施方案包括治疗、预防或控制黄斑变性(MD)的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者治疗或预防有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药。MD是指一种因损伤黄斑而破坏中心视力的眼病。

本发明的一个独立的实施方案包括治疗、预防或控制骨髓增生性疾病(MPD)的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者治疗或预防有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药。骨髓增生性疾病(MPD)是指以造血干细胞克隆异常为特征的一组障碍。参见例如Current Medical Diagnosis& Treatment，第499页(第37版，Tierney等主编，Appleton & Lange，1998)。

本发明也包括治疗、预防或控制复杂局部性疼痛综合征(CRPS)的方法，所述方法包括在手术治疗或物理治疗之前、期间或之后给予需要这种治疗、预防或控制的患者治疗或预防有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药，所述手术治疗或物理治疗旨在减轻或避免患者的复杂局部性疼痛综合征的症状。

在另一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制中枢神经系统(CNS)紊乱的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者治疗或预防有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药。

在另一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制石棉相关疾病或紊乱的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者治疗或预防有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药。石棉相关疾病或紊乱是指由接触石棉而引起的疾病或紊乱。石棉相关疾病或紊乱的例子包括但不限于恶性间皮瘤、石棉沉滞症、恶性胸腔积液、良性胸腔积液、胸膜斑、胸膜钙化、弥漫性胸膜增厚、圆形肺不张、和支气管肺癌。

在再一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制患者的癌症的方法，所述方法包括给予所述患者治疗有效量的本发明的化合物。本发明的化合物可用于治疗、预防或控制任何癌症，例如，实体肿瘤和血源性肿瘤。可以用本发明的化合物进行治疗、预防或控制的癌症的具体实例包括但不限于皮肤癌，例如黑素瘤；淋巴结癌；乳腺癌；宫颈癌；子宫癌；胃肠道癌；肺癌；卵巢癌；前列腺癌；结肠癌；直肠癌；口腔癌；脑癌；头颈部癌；咽喉癌；睾丸癌；肾癌；胰腺癌；骨癌；脾脏癌；肝癌；膀胱癌；喉癌；鼻道癌；和AIDS相关癌症。所述化合物在治疗例如以下血癌和骨髓癌中特别有用：多发性骨髓瘤和急性及慢性白血病，例如淋巴母细胞性白血病、髓母细胞性白血病、淋巴细胞性白血病和髓细胞性白血病。本发明的化合物可用于治疗、预防或控制原发性或转移性肿瘤。

在再一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制患者的癌症的方法，所述方法包括给予有需要的患者治疗有效量的本发明的化合物和第二治疗性试剂。本文描述了额外治疗性试剂的例子。

在再一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制患者的炎症性紊乱的方法，所述方法包括给予所述患者治疗有效量的本发明的化合物。炎性疾病包括与TNF-α上调相关的炎性疾病，例如但不限于关节炎(例如类风湿性关节炎和骨关节炎)；类风湿性脊椎炎；银屑病；局部缺血后灌注损伤；炎性肠病；和慢性炎性肺部疾病。

在再一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制患者的炎症性紊乱的方法，所述方法包括给予有需要的患者治疗有效量的本发明的化合物和第二抗炎性试剂。

在另一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制患者的心脏病的方法，所述方法包括给予所述患者治疗有效量的本发明的化合物。心脏病的例子包括但不限于充血性心力衰竭、心肌病、肺水肿、内毒素介导的脓毒性休克、急性病毒性心肌炎、心脏同种异体移植排斥和心肌梗塞。

在一个其它实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制患者的骨质疏松症的方法，所述方法包括给予所述患者治疗有效量的本发明的化合物。

在另一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制病毒性疾病、遗传性疾病、变应性疾病和自身免疫性疾病的方法。这些疾病的例子包括但不限于：HIV、肝炎、成人呼吸窘迫综合征、骨吸收病、慢性肺部炎性疾病、皮炎、囊性纤维化、脓毒性休克、脓毒病、内毒素休克、血液动力学休克(hemodynamic shock)、脓毒病综合征、局部缺血后再灌注损伤、脑膜炎、银屑病、纤维化病、恶病质、移植物抗宿主病、移植排斥、自身免疫性疾病、类风湿性脊椎炎、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、炎性肠病、多发性硬化、系统性红斑狼疮、麻风结节性红斑、辐射损伤、癌症、哮喘或高氧性肺泡损伤。

在再一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制患者的疟疾、分枝杆菌感染或由HIV引起的机会感染的方法，所述方法包括给予所述患者治疗有效量的本发明的化合物。

在另一个实施方案中，本发明包括调节患者细胞或组织中PDE4的产生、优选抑制或降低其水平的方法，所述方法包括使有效量的本发明的化合物接触所述哺乳动物细胞或组织。

在另一个实施方案中，本发明包括调节哺乳动物细胞或组织中TNF-α的产生或降低其水平的方法，所述方法包括使有效量的本发明的化合物接触所述哺乳动物细胞或组织。

在这些实施方案中，术语“有效量”是指由研究人员、兽医、内科医生或临床医师所确定的能引起生物学反应的化合物用量。可以理解，细胞可以在细胞培养物或组织培养物(体外)中或者在包括人在内的生物体中(体内)。

在所有实施方案中，术语″患者″包括哺乳动物，优选人。

可以通过参考旨在说明本发明的非限制性实施方案的发明详述和实施例，来理解本发明。

4.1.所述化合物的制备

可采用通常用于制备酰亚胺和2，3-二氢-1H-异吲哚啉酮的已知方法，来制备所述化合物。也可以使用下述新的方法制备。

在一个特别的实施方案中，在碱例如碳酸钠或碳酸氢钠存在下，使N-烷氧基羰基酰亚胺与胺反应，得到N-取代的酰亚胺，如Shealy等，Chem.& Ind.，(1965)1030-1031和Shealy等，J.Pharm.Sci.57，757-764(1968)所述。或者，可以使环状酸酐与合适的胺反应，生成酰亚胺。也可以通过合适取代的二羧酸单酰胺的无水四氢呋喃溶液与N，N′-羰基二咪唑回流，生成环状酰亚胺。另外，如下所示，2-溴甲基-苯甲酸酯可以与合适的胺反应，生成2，3-二氢-1H-异吲哚啉酮。

用于制备本发明的化合物的其它方法记载在美国专利5,605,914和6,667,316以及国际公开号WO 01/34606A1中，所述文献通过引用全部结合到本文中。

4.2.药物组合物

本发明提供了药物组合物，所述组合物包含药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂以及一种或多种本发明的化合物。

在一个实施方案中，本发明的化合物与药学上可接受的赋形剂(例如但不限于无菌盐水、甲基纤维素溶液、去垢剂溶液或其它介质、水、明胶、油等)混合。所述化合物或组合物可单独使用或与任何常规载体和/或稀释剂等联用，并且以单剂量或多剂量给药。所述组合物优选是无菌的，尤其是当用于肠胃外给药时。然而，口服单位剂型不必无菌。有用的载体包括水溶性固体和水不溶性固体、脂肪酸、胶束、反相胶束、脂质体和半固体介质或液体介质，包括水溶液和无毒有机溶剂。以上所有配料均通过超声、搅拌、混合、高应力混合、加热、研磨、碾磨、气溶胶化、粉碎和/或冻干等处理，以制成药学上可接受的组合物。

为了用本发明的化合物制备药物组合物，药学上可接受的载体可以是固体或液体。固体形式的制剂包括粉剂、片剂、丸剂、胶囊剂、扁囊剂、栓剂和可分散颗粒剂。固体载体可以是一种或多种物质，所述物质还可以作为稀释剂、矫味剂、粘合剂、防腐剂、片剂崩解剂或包囊材料。

在粉剂中，载体是微细固体，与微细活性成分一起存在于混合物中。在片剂中，活性成分与具有必要粘合性的载体按合适比例混合在一起并且压制成所需形状和大小。

粉剂和片剂优选含有5％或10％至70％的活性化合物。合适的载体是碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、果胶、糊精、淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂等。术语“制备”包括将活性化合物与作为载体的包囊材料配制在一起，制成胶囊剂，其中带有或不带有其它载体的活性成分被载体包围，所述载体因而与其缔合。同样，本发明也包括扁囊剂和锭剂。片剂、粉剂、胶囊剂、丸剂、扁囊剂和锭剂可以用作适于口服给药的固体剂型。

为了制备栓剂，首先融化低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯或可可脂的混合物)，然后通过搅拌使活性成分均匀分散在其中。然后将融化均匀的混合物倒入常规大小的模子中，让其冷却并固化。

液体形式的制剂包括溶液、混悬剂和乳剂，例如水或水/丙二醇溶液。对于胃肠外注射剂，液体制剂可以用聚乙二醇水溶液来配制。

可以通过将活性成分溶于水中并按需要加入合适的着色剂、矫味剂、稳定剂和增稠剂，来制备适于口服使用的水溶液。可以通过将微细活性成分分散在含有例如如下粘性材料的水中，制备适于口服使用的含水混悬剂：天然或合成树胶、树脂、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和其它众所周知的悬浮剂。

也包括固体形式的制剂，所述制剂可以在临用前转变成液体形式的制剂供口服给药。所述液体形式包括溶液剂、混悬剂和乳剂。这些制剂除含有活性成分外，还可含有着色剂、矫味剂、稳定剂、缓冲剂、人工甜味剂和天然甜味剂、分散剂、增稠剂、增溶剂等。

药物制剂优选呈单位剂型。在这样的形式中，制剂可再分为含有合适量活性成分的单位剂量。单位剂型可以是包装制剂，其包装包括许多独立剂量的制剂，例如包装的片剂、胶囊剂和小瓶或安瓿中的粉剂。另外，单位剂型也可以是胶囊剂、片剂、扁囊剂或锭剂本身，或者它们在包装形式中可以为任何合适的数量。

单位剂量制剂中活性成分的量可以是不同的，或者根据具体用法和活性成分的功效，在0.1mg至1000mg之间优选1.0mg至100mg之间进行调整。如有需要，所述组合物也可含有其它相容性治疗性试剂。

如本文所述，本发明的药物组合物和方法还可包括其它的治疗性活性化合物或其它辅料，用于治疗代谢障碍、心血管疾病、炎性病症或肿瘤性疾病及其相关病症(例如糖尿病性神经病)。在许多情况下，在给药时，包含本发明的化合物和其它药物的组合物具有相加作用或协同作用。

4.3.治疗、预防和控制方法

按照本发明，将本发明的化合物或组合物给予患有疾病或紊乱的或具有患病危险的患者(例如人)。所述疾病或紊乱的例子包括癌症，例如但不限于皮肤组织、器官、血液以及脉管的癌症，包括但不限于：膀胱癌，骨癌或血癌，脑癌，乳腺癌，宫颈癌，胸癌，结肠癌，子宫内膜癌，食道癌，眼部癌症，头部癌症，肾癌，肝癌，淋巴结癌，肺癌，口腔癌，颈部癌，卵巢癌，胰腺癌，前列腺癌，直肠癌，胃癌，睾丸癌，喉癌以及子宫癌。具体的癌症包括但不限于：晚期恶性肿瘤，淀粉样病变，神经母细胞瘤，脑膜瘤，血管外皮细胞瘤，多发性脑转移，多形性胶质母细胞瘤，胶质母细胞瘤，脑干神经胶质瘤，不良预后的恶性脑瘤，恶性神经胶质瘤，再发性恶性神经胶质瘤，退行性星形细胞瘤，退行性少突神经胶质瘤，神经内分泌肿瘤，直肠腺癌，Dukes C&D结肠直肠癌，不可切除的结肠直肠癌，转移性肝细胞癌，卡波济氏肉瘤，karo型急性成髓细胞性白血病，何杰金氏淋巴瘤，非何杰金氏淋巴瘤，皮肤性T细胞淋巴瘤，皮肤性B细胞淋巴瘤，弥漫性大B细胞淋巴瘤，低级滤泡性淋巴瘤，转移性黑素瘤(局部黑素瘤，包括但不限于眼部黑素瘤)，恶性间皮瘤，恶性胸腔积液间皮瘤综合征，腹膜癌，乳头状浆液癌，妇科肉瘤，软组织肉瘤，硬皮病，皮肤脉管炎，朗格汉斯细胞组织细胞增生症，平滑肌肉瘤，进行性骨化性纤维发育不良，激素难治性前列腺癌，可切除的高风险软组织肉瘤，不可切除肝细胞癌，瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症，阴然性骨髓瘤，隐匿性骨髓瘤，输卵管癌，非雄激素依赖型前列腺癌，雄激素依赖型IV期非转移性前列腺癌症，非激素敏感性前列腺癌，非化疗敏感性前列腺，乳头状甲状腺癌，滤泡性甲状腺癌，甲状腺髓样癌，以及平滑肌瘤。在具体的实施方案中，癌症是转移性的。在另一个实施方案中，癌症是难以治愈的或化疗或辐射耐受的，尤其是用沙利度胺难于治愈。

本发明还包括治疗、预防或控制心脏病，例如充血性心衰竭、心肌病、肺水肿、内毒素介导的脓毒性休克、急性病毒性心肌炎、心脏同种异体移植排斥和心肌梗塞。

本发明的化合物也可用于治疗、预防或控制病毒性疾病、遗传性疾病、炎性疾病、变应性疾病和自身免疫性疾病。这些疾病的例子包括但不限于：HIV；肝炎；成人呼吸窘迫综合征；骨吸收病；慢性阻塞性肺病、慢性肺部炎性疾病；皮炎；囊性纤维化；脓毒性休克；脓毒病；内毒素休克；血液动力学休克；脓毒病综合征；局部缺血后再灌注损伤；脑膜炎；银屑病；纤维化病；恶病质；移植排斥；自身免疫性疾病；类风湿性脊椎炎；关节炎，例如类风湿性关节炎和骨关节炎；骨质疏松症，帕金森病，克罗恩氏病；溃疡性结肠炎；炎性肠病；多发性硬化；系统性红斑狼疮；麻风结节性红斑；辐射损伤；哮喘；和高氧性肺泡损伤。

本发明还包括治疗、预防或控制细菌感染，包括但不限于疟疾、分枝杆菌感染或由HIV引起的机会感染。

本发明的另一实施方案包括治疗、控制或预防与不希望有的血管生成有关或以此为特点的疾病和紊乱的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、控制或预防的患者治疗或预防有效量的本发明的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂化物(例如，水合物)、立体异构体或前药。

与不希望有的血管生成有关或以此为特点的疾病和紊乱的例子包括但不限于炎性疾病、自身免疫性疾病、病毒性疾病、遗传疾病、过敏性疾病、细菌疾病、眼部新血管生成疾病、脉络膜新血管生成疾病、视网膜新血管生成疾病、和虹膜发红(角新血管形成)，它们由不希望有的或不受控制的血管生成所介导。

其它实例包括但不限于糖尿病性视网膜病，早产儿视网膜病，角膜移植排斥，新生血管性青光眼，晶状体后纤维组织增生症，增殖性玻璃体视网膜病变，沙眼，近视，视窝，流行性角膜结膜炎，遗传性过敏角膜炎，上边缘角膜炎，翼状胬肉干燥性角膜炎，sjogrens，红斑痤疮，phylectenulosis，梅毒，脂质降解，细菌性溃疡，真菌性溃疡，单纯性疱疹感染，带状疱疹感染，原生动物性感染，卡波西氏肉瘤，蚕食性角膜溃疡，Terrien边缘性变性，边缘性角质层分离，风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，多动脉炎，创伤，Wegeners肉状瘤病，巩膜炎，Steven’s Johnson疾病，periphigoid径向角膜切开，镰状细胞性贫血，类肉瘤，弹性假黄色瘤，佩吉特病，静脉闭塞，动脉闭塞，颈动脉梗性葡萄膜炎，慢性葡萄膜炎，慢性玻璃体炎，莱姆病，伊尔斯病，Bechet疾病，视网膜炎，脉络膜炎，拟眼组织胞浆菌病，Bests病，Stargarts病，扁平部睫状体炎，慢性视网膜剥离，高粘度综合征，弓形体病，潮红，结节病，硬化症，soriatis，牛皮癣，原发性硬化性胆管炎，直肠炎，原发性胆汁srosis，特发性肺纤维变性，酒精性肝炎，内毒素血症，中毒性休克综合征，骨关节炎，逆转录病毒复制，消瘦，髓膜炎，硅石诱导纤维化，石棉诱导纤维化，恶性肿瘤相关的高钙血症，中风，循环休克，牙周炎，牙龈炎，大红细胞性贫血，难治性贫血，5q综合征，以及猫免疫缺损病毒、马传染性贫血病病毒、羊关节炎病毒、绵羊髓鞘脱落病毒、梅迪病毒或慢病毒引起的兽医学病症。

在本发明的某些实施方案中，具体疾病不包括充血性心力衰竭、心肌病、肺水肿、内毒素介导的脓毒性休克、急性病毒性心肌炎、心脏同种异体移植排斥、心肌梗塞、HIV、肝炎、成人呼吸窘迫综合征、骨吸收病、慢性阻塞性肺病、慢性肺部炎性疾病、皮炎、囊性纤维化、脓毒性休克、脓毒病、内毒素休克、血流动力性休克、脓毒病综合征、局部缺血后再灌注损伤、脑膜炎、银屑病、纤维化病、恶病质、移植排斥、类风湿性脊椎炎、骨质疏松症、帕金森病、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、炎性肠病、多发性硬化、系统性红斑狼疮、麻风结节性红斑、辐射损伤、哮喘、高氧性肺泡损伤、疟疾和分枝杆菌感染。

本发明的化合物也可用于治疗、预防或控制MDS及相关综合征，例如但不限于难治性贫血(RA)、伴有环形铁粒幼细胞的难治性贫血(RARS)、伴有原始细胞增多的难治性贫血(RAEB)、伴有原始细胞增多-转变型的难治性贫血(RAEB-T)、慢性骨髓单核细胞性白血病(CMML)，以及症状，例如贫血、血小板减少症、嗜中性粒细胞减少症、血细胞减少症、两类血细胞减少症(两种细胞系缺乏)和各类血细胞减少症(三种细胞系缺乏)。

本发明还包括治疗、预防或控制CRPS及相关综合征。除非另有说明，本文所用的术语“CRPS”是指具有以下一种或多种特征的慢性疼痛障碍：疼痛，无论是自发的还是诱发的，包括异常性疼痛(对通常不引起疼痛的刺激感到疼痛)和痛觉过敏(对通常仅引起轻度疼痛的刺激有夸大的反应)；对刺激事件不相称的疼痛(例如踝关节扭伤后的多年严重疼痛)；不限于单一外周神经分布的局部疼痛；和与营养型皮肤改变(毛发和指甲生长异常和皮肤溃疡)有关的自发失调(例如水肿、血流改变和多汗)。除非另有说明，术语“复杂局部性疼痛综合征”、“CRPS”和“CRPS及相关综合征”包括：I型，包括称为反射性交感神经营养不良(RSD)的病症，所述病症在非神经损伤的最初有害事件后发生；II型，包括称为灼性神经痛的病症，所述病症在神经损伤后发生；急性期(通常为2-3个月的发热期)；营养不良期(显示出持续数月的血管舒缩不稳定)；萎缩期(通常肢端冰冷并伴有萎缩性变化)；反射性神经血管性营养不良；反射性营养不良；交感神经持续性疼痛综合征；Sudeck骨萎缩；痛觉神经营养不良；肩手综合征；创伤后营养不良；三叉神经痛；疱疹后神经痛；癌症相关疼痛；幻肢痛；纤维性肌痛；慢性疲劳综合征；神经根病；和其它疼痛性神经病，例如糖尿病性神经病、梅毒性神经病或由例如以下药物引起的医源性疼痛性神经病：长春新碱、velcade和沙利度胺。

本发明的化合物可用于治疗、预防或控制所有类型的CRPS及相关综合征，包括但不限于称为以下的病症：I型CRPS、II型CRPS、反射性交感神经营养不良(RSD)、反射性神经血管性营养不良、反射性营养不良、交感神经持续性疼痛综合征、灼性神经痛、Sudeck骨萎缩、痛觉神经营养不良、肩手综合征、创伤后营养不良、三叉神经痛、疱疹后神经痛、癌症相关疼痛、幻肢痛、纤维性肌痛、慢性疲劳综合征、手术后疼痛、脊髓损伤疼痛、中风后中枢性痛、神经根病和其它疼痛性神经病，例如糖尿病性神经病。

本发明还包括治疗、预防或控制MD及相关综合征，例如但不限于萎缩性(干性)MD、渗出性(湿性)MD、年龄相关性黄斑病变(ARM)、脉络膜新生血管形成(CNVM)、视网膜色素上皮细胞脱离(PED)和视网膜色素上皮细胞萎缩(RPE)。

本文所用的术语黄斑变性(MD)包括所有类型的黄斑变性性疾病，而与患者的年龄无关，尽管一些黄斑变性性疾病在某些年龄组更常见。这些包括但不限于Best’s病或卵黄样黄斑变性(vitelliform)(在约7岁以下的患者中最常见)；施塔加特病、青少年黄斑营养不良或眼底黄斑(在约5岁至约20岁的患者中最常见)；Behr’s病、索斯比病(Sorsby′s disease)、多英病(Doyne′s disease)或蜂窝状营养不良(在约30岁至约50岁的患者中最常见)；和年龄相关性黄斑变性(在约60岁或更年长的患者中最常见)。

与MD及相关综合征相关的症状包括但不限于在眼底环绕白黄斑的玻璃疣、黄斑下盘状瘢痕组织、脉络膜新生血管形成、视网膜色素上皮细胞脱离、视网膜色素上皮细胞萎缩、从脉络膜上生长的异常血管(恰好在视网膜下的富含血管的组织层)、模糊或变性的视力区、中心盲点、色素异常、沉积在玻璃膜内部的微粒物的连续层以及玻璃膜透性增加和减少。

MD的病因包括但不限于遗传性、物理创伤、疾病例如糖尿病和感染，例如细菌感染(例如麻风，特别是ENL)。本发明的化合物能有效治疗、预防或控制所有类型的MD及相关综合征或症状，而无论其病因是什么。

本发明还包括治疗、预防或控制所有类型的MPD及相关综合征或症状。本发明的化合物可以治疗、预防或控制的MPD的实例包括但不限于红细胞增多症(PRV)、原发性血小板增多症(PT)、慢性髓细胞性白血病(CML)和原因不明的骨髓化生(AMM)。

本文所用的术语“骨髓增生性疾病”或“MPD”是指具有以下一个或多个特征的造血干细胞紊乱：伴有一种或多种所形成的血元素的过量产生(例如升高的红细胞计数、升高的白细胞计数和/或升高的血小板计数)的多能造血祖细胞的克隆扩增，费城染色体或bcr-abl基因的存在，外周血涂片上泪珠状红细胞异形，成白红细胞增多血象，巨型异常血小板，伴有网状或胶原纤维化的骨髓细胞数异常增加，伴有低百分率早幼粒细胞和胚细胞的标记左移的骨髓系列，脾肿大，血栓形成，发展成急性白血病的危险或形态受损的细胞髓。除非另有说明，术语“骨髓增生性疾病”或“MPD”包括：红细胞增多症(PRV)、原发性血小板增多症(PT)、慢性髓细胞性白血病(CML)和原因不明的骨髓化生(AMM)。

MPD相关症状包括但不限于头痛、头晕、耳鸣、视力模糊、疲劳、盗汗、低烧、全身瘙痒、鼻出血、视力模糊、脾肿大、腹胀、血栓形成、出血增加、贫血、脾梗塞、严重骨痛、肝脏造血、腹水、食管曲张、肝衰竭、呼吸窘迫和阴茎异常勃起。MPD相关化验所见包括但不限于伴有一种或多种所形成的血元素的过量产生(例如升高的红细胞计数、升高的白细胞计数和/或升高的血小板计数)的多能造血祖细胞的克隆扩增，费城染色体或bcr-abl基因的存在，外周血涂片上泪珠状红细胞异形，成白红细胞增多血象，巨型异常血小板，伴有网状或胶原纤维化的骨髓细胞数异常增加，伴有低百分率早幼粒细胞和胚细胞的标记左移的骨髓系列。

本发明还包括治疗、预防和控制所有类型的CNS疾病。CNS疾病的实例包括但不限于帕金森病(Parkinson’s disease)；阿尔茨海默病(Alzheimer disease)、轻度认知减退；抑郁症；长期记忆缺陷；肌萎缩性侧索硬化(ALS)；CNS创伤；运动机能减退障碍；运动过缓；运动迟缓；运动少；灵巧性降低；声音微弱；讲话单调；肌肉僵直；面具样面容；眨眼减少；体态弯曲；走路时手臂摆动减少；写字过小症；帕金森震颤；帕金森步态；体位不稳；慌张步态；动作僵硬；认知紊乱、心境紊乱、感觉紊乱、睡眠或自主功能紊乱；痴呆；和睡眠紊乱。

在一个具体的实施方案中，所述中枢神经系统疾病是帕金森病、阿尔茨海默病、轻度认知减退、痴呆、抑郁症、长期记忆缺陷、肌萎缩性侧索硬化(ALS)或CNS创伤。

在一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制运动相关紊乱，包括但不限于动作缓慢或运动过缓、运动少或运动不能，缺乏准确动作控制和手指灵巧性的运动障碍，和其它运动过缓的表现，例如但不包括声音微弱和讲话单调。在另一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制肌强直相关障碍，包括但不限于在抵抗被动运动方面的一致增加、中断被动运动以及强直和张力失常的组合。在一个具体的实施方案中，治疗帕金森病相关炎症或相关疾病。在本发明的再一个实施方案中，治疗、预防或控制类似帕金森震颤的紊乱。这种紊乱包括但不限于面部、下巴、舌头、体位的震颤，以及其它在休息状态下存在而在运动中减弱的震颤。在另一个实施方案中，本发明包括治疗、预防或控制包括但不限于以下紊乱的步态方面的紊乱：类似帕金森步态、滑步、碎步、转身趋势和慌张步态。在本发明的另一个实施方案中，治疗、预防或控制的非运动症状。这种紊乱包括但不限于心境障碍、认知障碍、长期记忆缺陷障碍、感觉障碍、睡眠障碍、痴呆和抑郁症。在本发明的其它实施方案中，治疗、预防或控制帕金森病的继发性形式。其例子包括但不限于药物诱发的帕金森病、血管性帕金森病、多系统萎缩、进行性核上麻痹、伴有原发性τ病理的障碍、皮层基底交感神经节变性、伴有痴呆的帕金森病、运动机能亢奋障碍、舞蹈病、亨延顿病(Huntington disease)、张力失常、威尔逊病(Wilson disease)、图雷特综合征(Tourette syndrome)、特发性震颤、肌阵挛和迟发性运动障碍。在本发明的其它实施方案中，治疗、预防或控制其它中枢神经系统紊乱。这种紊乱包括但不限于阿尔茨海默病、轻度认知减退、肌萎缩性侧索硬化(ALS)和CNS创伤。

本发明还包括治疗、预防或控制石棉相关疾病或紊乱和相关症状。石棉相关疾病或紊乱的实例包括但不限于恶性间皮瘤、石棉沉滞症、恶性胸腔积液、良性胸腔积液、胸膜斑、胸膜钙化、扩散性胸膜增厚、圆形肺不张和支气管癌。本发明还包括治疗以下患者的方法：所述患者以前已经接受石棉相关疾病或紊乱的治疗，但是疗效不好或没有疗效，以及所述患者以前没有接受所述疾病或紊乱的治疗。因为患者具有不同的临床表现和不同的临床结果，所以给予患者的治疗可以是不同的，这取决于他/她的预后。熟练医师无需过多实验即可容易地确定对治疗单个患者有效的具体的第二试剂和物理治疗类型。

石棉相关疾病或紊乱的症状包括但不限于呼吸困难、隔膜阻塞、射线可见的片状胸膜外套、胸腔积液、胸膜增厚、胸围减小、胸部不适、胸痛、易疲劳、发热、出汗和体重减轻。具有石棉相关疾病或紊乱危险的患者的实例包括但不限于已经在工作场所接触石棉的人及其家庭成员，后者已经接触了工人衣服上附着的石棉。具有石棉相关疾病或紊乱家族史的患者也优选作为预防方案的候选者。

4.4.药物制剂

可以全身或局部给予本发明的化合物。在大多数情况下，对患者的给药将导致全身释放本发明的化合物(即进入血流中)。给药方法包括肠内途径，例如口服、口腔含化、舌下和直肠；局部给药，例如经皮和透皮给药；和胃肠外给药。合适的胃肠外途径包括通过皮下注射针头或导管进行注射以及非注射途径，前者例如静脉内、肌内、皮下、透皮、腹膜内、动脉内、心室内、鞘内和前房内注射；后者例如阴道内、直肠或鼻腔给药。优选本发明的化合物和组合物经口服给药。在具体的实施方案中，需要将一种或多种本发明的化合物局部给予到需要治疗的部位。这可以通过以下方式来实现：在外科手术中局部灌注、局部应用(例如在外科手术后结合伤口敷剂)、通过注射、通过导管、通过栓剂或者通过植入物来实现；所述植入物是多孔的、无孔的或凝胶状材料，包括膜(例如硅化橡胶膜)或纤维。

本发明的化合物可通过典型的给药系统以及非标准给药系统给予，例如包裹在脂质体、微粒、微胶囊、胶囊等中。例如，本发明的化合物和组合物可通过囊泡、特别是脂质体给予(参见Langer，1990，Science249：1527-1533；Treat等，载于Liposomes in Therapy of Infectious Diseaseand Cancer，Lopez-Berestein和Fidler(主编)，Liss，New York，第353-365页(1989)；Lopez-Berestein，出处同上，第317-327页；通常参见上文)。在另一个实例中，本发明的化合物和组合物可以用控释系统来给药。在一个实施方案中，可以使用泵(参见Langer，同上；Sefton，1987，CRC Crit.Ref.Biomed.Eng. 14：201；Buchwald等，1980，Surgery 88：507 Saudek等，1989，N.Engl.J.Med. 321：574)。在另一个实例中，可以使用聚合材料(参见Medical Applications of Controlled Release，Langer和Wise(主编)，CRC Press.，Boca Raton，Florida(1974)；Controlled Drug Bioavailability，Drug Product Design and Performance，Smolen和Ball(编著)，Wiley，NewYork(1984)；Ranger和Peppas，1983，J.Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem. 23：61；也参见Levy等，1985，Science 228：190；During等，1989，Ann.Neurol. 25：351；Howard等，1989，J.Neurosurg. 71：105)。在再一个实例中，控释系统可以放置在有待治疗的靶区(例如肝脏)附近，因此，仅需要全身剂量的一小部分(参见例如Goodson，载于MedicalApplications of Controlled Release，出处同上，第2卷，第115-138页(1984))。可以使用以下综述中讨论的其它控释系统：Langer，1990，Science249：1527-1533。

当作为组合物给药时，本发明的化合物可以与合适量的药学上可接受的运载体或载体配制在一起，以提供适于给予患者的合适的给药形式。术语“药学上可接受的”是指被联邦或州政府管理部门批准的或者列于美国药典或其它公认的药典中用于患者、尤其是人类的。术语“运载体”是指与本发明的化合物配制在一起以适于给予患者的稀释剂、辅料、赋形剂或载体。这样的药用运载体可以是液体，例如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。药用运载体可以是盐水、阿拉伯树胶、明胶、淀粉糊、滑石粉、角蛋白、胶态二氧化硅、尿素等。另外，可以使用助剂、稳定剂、增稠剂、润滑剂和着色剂。优选当给予患者时，本发明的化合物和组合物以及药学上可接受的运载体、赋形剂或稀释剂是无菌的。当本发明的化合物经静脉给予时，含水介质是优选运载体，例如水、盐水溶液和葡萄糖水溶液和甘油溶液。

本化合物和组合物可以呈胶囊剂、片剂、丸剂、小丸剂、锭剂、粉剂、颗粒剂、糖浆剂、酏剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、栓剂或其缓释制剂形式，或者其它适于给予患者的任何形式。在一个优选的实施方案中，依照常规方法，将本发明的化合物和组合物配制成适于口服或静脉内给予人体的药物组合物。在一个实施方案中，药学上可接受的载体是硬明胶胶囊。合适的药用载体的实例及其配制方法描述于Remington：TheScience and Practice of Pharmacy，Alfonso R.Gennaro主编，MackPublishing Co.Easton，PA，第19版，1995，第86，87，88，91和92章，所述文献通过引用结合到本文中。

配制成供口服给药用的本发明的化合物和组合物优选呈胶囊剂、片剂、丸剂或任何压制药物形式。此外，当呈片剂或丸剂形式时，可以将所述化合物和组合物包衣，以延缓在胃肠道中的崩解和吸收，因而在延长的时间周期中提供持续作用。选择性渗透膜包裹渗透活性驱动化合物，也适于口服给予本发明的化合物和组合物。在后面这些平台中，吸入来自胶囊周围环境的液体，使得驱动化合物膨胀并通过小孔排出药物或药物组合物。这些给药平台可提供与速释制剂的峰值模式不同的基本上为零级给药模式。也可使用时间延迟材料例如单硬脂酸甘油或硬脂酸甘油。口服组合物可包括标准运载体、赋形剂和稀释剂，例如硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁、乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、糖浆和甲基纤维素，所述制剂还可包含润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸镁、矿物油、润湿剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂，例如羟基苯甲酸甲酯和羟基苯甲酸丙酯。这类运载体优选为药用级的。口服给予的本发明的化合物和组合物可任选包括一种或多种甜味剂，例如果糖、天冬甜素或糖精；一种或多种矫味剂，例如薄荷、冬青油或樱桃；或一种或多种着色剂，以提供适口的药物制剂。

治疗具体疾病或病症的治疗有效剂量方案将取决于疾病的性质和严重程度，并且可以根据医生的判断，通过标准临床技术来确定。此外，可以采用体外或体内试验，来帮助鉴定最佳剂量。当然，构成治疗有效剂量的本发明的化合物的用量也取决于给药途径。一般而言，合适的口服给药剂量为每公斤体重每天约0.001毫克至约20毫克本发明的化合物，优选约0.7毫克至约6毫克，更优选约1.5毫克至约4.5毫克。在一个优选的实施方案中，每天口服给予患者(优选人)约0.01mg至约1000mg本发明的化合物，更优选每天约0.1mg至约300mg，或约1mg至约100mg单次剂量或分次剂量。本文所述剂量是指给药的总剂量，也就是说，如果给予多种本发明的化合物时，优选剂量对应于给予的本发明的化合物的总剂量。口服组合物优选含有10％至95％(重量)本发明的化合物。优选的单位口服-剂型包括丸剂、片剂和胶囊剂，更优选胶囊剂。通常这样的单位剂型可含有约0.01mg、0.1mg、1mg、5mg、10mg、15mg、20mg、50mg、100mg、250mg或500mg本发明的化合物，优选每单位剂量为约5mg至约200mg化合物。

在另一个实施方案中，本发明的化合物和组合物可以通过胃肠外给药(例如通过肌内、鞘内、静脉内和动脉内途径)，优选静脉内。通常，用于静脉内给药的本发明的化合物和组合物是溶于无菌等渗水性运载体的溶液，所述水性运载体例如水、盐水、林格液或葡萄糖溶液。必要时，组合物还可包含增溶剂。静脉内给药的组合物可任选包含局部麻醉药(例如利多卡因)以减轻注射部位的疼痛。对于静脉内给药，本发明的化合物和组合物可以在密封容器中呈无菌冻干粉或无水浓缩物的形式提供，所述容器例如安瓿或小袋，容器上标明活性剂的量。这样的粉针剂或浓缩剂可在静脉内给药前用合适的含水介质稀释。在使用前，可以提供装有无菌水、盐溶液或其它合适的含水介质的安瓿，用于稀释粉针剂或浓缩剂。或者可以提供即可使用的呈预混合形式的组合物。当本发明的化合物或组合物用于静脉内输注给药时，它可以分散在装有无菌药用级水、盐水或其它合适的介质的输液瓶中。

可通过使用由常规载体(例如可可脂、改性植物油和其它脂肪基质)制备的栓剂，进行直肠给药。可通过众所周知的方法，使用众所周知的的配方，制备栓剂，例如参见Remington：The Science and Practice ofPharmacy，Alfonso R.Gennaro主编，Mack Publishing Co.Easton，PA，第19版，1995，第1591-1597页，所述文献通过引用结合到本文中。

为了配制和给予局部用剂型，可以使用众所周知的经皮和透皮给药介质(例如洗剂、乳膏剂和软膏剂)以及经皮给药装置(例如贴剂)(Ghosh，T.K.；Pfister，W.R.；Yum，S.I.Transdermal and Topical Drug DeliverySystems，Interpharm Press，Inc.第249-297页，所述文献通过引用结合到本文中)。例如贮库型贴剂设计可包括涂有粘合剂的底片和包含本发明的化合物或组合物的贮库，所述贮库与皮肤之间通过一层半透膜隔开(例如美国专利4,615,699，所述文献通过引用结合到本文中)。涂有粘合剂的底层延伸到贮库的边界外，以提供与皮肤之间的同心密封并使贮库保持与皮肤贴近。

本发明的粘膜用剂型包括但不限于眼科用溶液剂、喷雾剂和气雾剂或本领域技术人员已知的其它形式。参见例如Remington′sPharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing，Easton PA(1990)；和Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms，第4版，Lea & Febiger，Philadelphia(1985)。适于治疗口腔内粘膜组织的剂型可配制为漱口剂或口服凝胶剂。在一个实施方案中，气雾剂包含载体。在另一个实施方案中，气雾剂不包含载体。

本发明的化合物也可通过吸入直接给予肺部。为了吸入给药，本发明的化合物可以通过各种不同装置，方便地向肺部给药。例如可以使用计量吸入器(“MDI”)，计量吸入器利用装有合适的低沸点挥发剂(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合适气体)的金属罐，将式I化合物直接给予肺部。MDI装置可由各家供应商提供，例如3M Corporation、Aventis、Boehringer Ingleheim、Forest Laboratories、Glaxo-Wellcome、Schering Plough和Vectura。

或者，可以使用干粉吸入器(DPI)装置，将本发明的化合物给予到肺部(参见例如Raleigh等，Proc.Amer.Assoc.Cancer Research AnnualMeeting，1999，40，397，所述文献通过引用结合到本文中)。DPI装置通常使用例如气体爆破等机制，使容器内的干粉产生气雾，该气雾再由患者吸入。DPI装置也是本领域众所周知的，并且可以购自各家卖主，包括例如Fisons、Glaxo-Wellcome、Inhale Therapeutic Systems、MLLaboratories、Qdose和Vectura。常见的同类装置是多剂量DPI(“MDDPI”)系统，该系统可给予多种治疗性剂量。MDDPI装置可得自各家公司，例如AstraZeneca、GlaxoWellcome、IVAX、Schering Plough、SkyePharma和Vectura。例如，可以配制用于吸入器或吹入器的明胶胶囊和药筒，其中含有所述化合物和适用于这些系统的粉基(例如乳糖或淀粉)的粉末混合物。

可将本发明的化合物给予肺部的另一类装置是液体喷雾装置，所述装置由例如Aradigm Corporation等公司提供。液体喷雾系统用非常小的喷嘴孔，将液体药物制剂气溶胶化，然后可以直接吸入到肺部。

在一个优选的实施方案中，用雾化器装置将本发明的化合物给予到肺部。雾化器通过使用例如超声能量以形成易于吸入的微粒，从而从液体药物制剂产生气溶胶(参见例如Verschoyle等，British J Cancer，1999，80，增刊2，96，所述文献通过引用结合到本文中)。雾化器的实例包括由以下公司提供的装置：Sheffield/Systemic Pulmonary Delivery Ltd.(参见Armer等，美国专利第5,954,047号；van der Linden等，美国专利第5,950,619号；van der Linden等，美国专利第5,970,974号，所述文献通过引用结合到本文中)、Aventis和Batelle Pulmonary Therapeutics。

在一个特别优选的实施方案中，使用电子流体动力(“EHD”)气溶胶装置，将本发明的化合物给予到肺部。EHD气溶胶装置利用电能，使液体药物溶液或混悬液气溶胶化(参见例如Noakes等，美国专利第4,765,539号；Coffee，美国专利第4,962,885号；Coffee，PCT申请，WO94/12285；Coffee，PCT申请，WO 94/14543；Coffee，PCT申请，WO95/26234，Coffee，PCT申请，WO 95/26235，Coffee，PCT申请，WO95/32807，所述专利文献通过引用结合到本文中)。当使用EHD气溶胶装置将含有本发明化合物的制剂给予肺部时，该药物制剂的电化学特性是有待最佳化的重要参数，可以由本领域技术人员常规地进行这样的最佳化。EHD气溶胶装置比起现有的肺部给药技术来说，能更有效地给予肺部。肺内给药的其它方法是技术人员已知的并且在本发明范围内。

适用于雾化器和液体喷雾装置和EHD气溶胶装置的液体药物制剂通常含有药学上可接受的载体。优选药学上可接受的载体是液体，例如乙醇、水、聚乙二醇或全氟化碳。任选还加入其它材料，以改变本发明的化合物的溶液剂或混悬剂的气溶胶特性。优选该材料为液体，例如乙醇、乙二醇、聚乙二醇或脂肪酸。适用于气溶胶装置的液体药物溶液剂或混悬剂的其它配制方法是本领域技术人员已知的(参见例如Biesalski，美国专利第5,112,598号；Biesalski，美国专利第5,556,611号，所述专利文献通过引用结合到本文中)。本发明的化合物也可配制成直肠用组合物或阴道用组合物，例如栓剂或滞留型灌肠剂，例如含有常规栓剂基质，例如可可脂或其它甘油酯。

除了以上描述的制剂外，本发明的化合物也可配制成贮库制剂。这样的长效制剂可以通过植入(例如皮下或肌内)或通过肌内注射来给药。因此，例如，所述化合物可以与合适的聚合材料或疏水性材料(例如作为在可接受的油中的乳剂)或者与离子交换树脂一起配制，或作为微溶衍生物，例如作为微溶盐。

或者，可以使用其它给药系统。脂质体和乳剂是众所周知的给药载体的实例，其可用于给予本发明的化合物。也可使用某些有机溶剂，例如二甲亚砜，尽管通常会带来更高毒性。也可在控释系统中给予本发明的化合物。在一个实施方案中，可使用泵(Sefton，CRC Crit.Ref BiomedEng.，1987，14，201；Buchwald等，Surgery，1980，88，507；Saudek等，N.Engl.J Med，1989，321，574)。在另一个实施方案中，可使用聚合材料(参见Medical Applications of Controlled Release，Langer和Wise(编著)，CRCPres.，Boca Raton，Fla.(1974)；Controlled Drug Bioavailability，DrugProduct Design and Performance，Smolen和Ball(编著)，Wiley，New York(1984)；Ranger和Peppas，J Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.，1983，23，61；也参见Levy等，Science 1985，228，190；During等，Ann.Neurol.，1989，25，351；Howard等，1989，J.Neurosurg.71，105)。在又一个实施方案中，控释系统可放置在本发明的化合物的靶标(例如肺)附近，因此，仅需要全身剂量的一小部分(参见例如Goodson，载于Medical Applications ofControlled Release，出处同上，第2卷，第115页(1984))。可以使用其它控释系统(参见例如Langer，Science，1990，249，1527)。

对于药学领域的技术人员来说，可用于提供本发明所包括的粘膜用剂型的合适的赋形剂(例如载体和稀释剂)和其它材料是众所周知的，并且取决于给定的药物组合物或剂型的具体给药部位或给药方法。记住这一事实，典型的赋形剂包括但不限于水、乙醇、乙二醇、丙二醇、丁-1，3-二醇、豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、矿物油及其混合物，这些物质是无毒的并且是药学上可接受的。这些附加成分的实例是本领域众所周知的。参见例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，MackPublishing，Easton PA(1990)。

可以对药物组合物或剂型的pH、或者应用药物组合物或剂型的组织的pH进行调节，以改善一种或多种活性成分的输送。同样，也可以对溶剂载体的极性、其离子强度或张力进行调节，以改善递药。硬脂酸酯等化合物也可加入到药物组合物或剂型中，以有利地改变一种或多种活性成分的亲水性或亲油性，从而改善递药。基于此，硬脂酸酯可作为制剂的脂质载体、作为乳化剂或表面活性剂以及作为递药增强剂或渗透增强剂。可以使用活性成分的不同盐或溶剂化物(例如，水合物)，以进一步调节所得组合物的特性。

本发明也提供药物包装或试剂盒，所述包装或试剂盒包括一个或多个容器，其中装有一种或多种本发明的化合物。所述容器任选附有说明书，说明书的格式必须符合政府管理部门对药品或生物制品的生产、使用或销售的规定，并且说明书必须标明政府管理部门对人用药品的生产、使用或销售的批准文号。在一个实施方案中，所述试剂盒包含不止一种本发明的化合物。在另一个实施方案中，所述试剂盒包含本发明的化合物和其它生物活性药物。

本发明的化合物最好在用于人体之前进行体外和体内试验，以测定其所需的治疗活性或预防活性。例如，可以用体外试验来确定是否优选给予本发明的具体化合物或本发明的化合物的组合。也可以用动物模型系统，来证明本发明的化合物和组合物是安全有效的。其它方法对于技术人员来说是已知的并且包括在本发明范围内。

4.5.联合疗法

在某些实施方案中，将本发明的化合物与一种或多种其它治疗性试剂、或者将一种或多种本发明的化合物与一种或多种其它治疗性试剂同时给予患者，优选人。“同时”是指本发明的化合物和其它药物依次并且在一段间隔时间内给予患者，使得本发明的化合物能与其它药物一同起作用，以提供比它们的其它给药方式来说增加的或协同的益处。例如，各成分可以同时或按任何顺序在不同时间点依次给予；然而，如果不是同时给药，它们应在足够短的时间内给药，以提供所需的治疗效果。优选所有成分同时给予，并且如果不是同时给予时，优选它们彼此全都在约6小时至约12小时内给予。

当与其它治疗性试剂联用时，本发明的化合物和所述治疗性试剂可起到相加作用，或者更优选协同作用。在一个实施方案中，本发明的化合物或组合物与其它治疗性试剂在同一药物组合物中同时给予。在另一个实施方案中，本发明的化合物或组合物与其它治疗性试剂在独立的药物组合物中同时给予。在再一个实施方案中，本发明的化合物或组合物在给予其它治疗性试剂之前或之后给予。因为可以用本发明的化合物和组合物进行治疗的许多疾病都是慢性病，所以，在一个实施方案中，联合治疗涉及交替给予本发明的化合物或组合物和含有其它治疗性试剂的药物组合物，例如，以使特定药物相关的毒性最小化。在某些实施方案中，当本发明的组合物与潜在产生毒副作用(包括但不限于毒性)的其它治疗性试剂同时给予时，所述治疗性试剂最好以低于诱发毒副作用的域值的剂量给予。其它治疗性试剂包括但不限于造血生长因子、细胞因子、抗癌药、抗生素、免疫抑制剂、类固醇、抗组胺药、白三烯(leukotriene)抑制剂和本文所述的其它治疗性试剂。

优选的其它治疗性试剂包括但不限于英夫利昔单抗(RemicadeTM)、多西他赛、塞来考昔(Celecoxib^TM)、美法仑、地塞米松、类固醇、吉西他滨、顺铂、替莫唑胺、依托泊苷、环磷酰胺、temodar、卡铂、丙卡巴肼、Gliadel、他莫昔芬、托泊替康、甲氨蝶呤、Arisa^、Taxol^TM、泰索帝、氟尿嘧啶、亚叶酸、依立替康、适罗达、CPT-11、干扰素α、聚乙二醇化干扰素α、卡培他滨、顺铂、塞替派、氟达拉滨、卡铂、脂质体柔红霉素、阿糖胞苷、doxetaxol、太平洋紫杉醇(pacilitaxel)、长春碱、IL-2、GM-CSF、达卡巴嗪、长春瑞滨、唑来膦酸、palmitronate、克拉霉素制剂、白消安、泼尼松、二膦酸盐、三氧化二砷、PEG INTRON-A、阿霉素脂质体、长春新碱、地塞米松(decadron)、多柔比星、紫杉醇、更昔洛韦、阿霉素、雌莫司汀、Emcyt、舒林酸和依托泊苷。

本发明还包括天然存在的蛋白质的突变体和衍生物(例如修饰形式)，所述突变体和衍生物在体内显示出基于该蛋白的至少一些药理学活性。突变体的实例包括但不限于其一个或多个氨基酸残基不同于该蛋白质天然存在形式中的相应氨基酸残基的蛋白。术语“突变体”还包括缺乏通常在其天然存在的形式中存在的糖部分的蛋白质(例如非糖基化形式)。衍生物的实例包括但不限于聚乙二醇化衍生物和融合蛋白，例如IgG1或IgG3与目标蛋白或其活性部分融合而形成的蛋白。参见例如Penichet，M.L.和Morrison，S.L.，J.Immunol.Methods 248：91-101(2001)。

可以按照以下文献来制备G-CSF的重组和突变形式：美国专利第4,810,643、4,999,291、5,528,823和5,580,755号；所有这些文献都通过引用结合到本文中。可以按照以下文献来制备GM-CSF的重组和突变形式：美国专利第5,391,485、5,393,870和5,229,496号；所有这些文献都通过引用结合到本文中。事实上，G-CSF和GM-CSF的重组形式目前已在美国销售，用于治疗特定化疗相关症状。G-CSF的重组形式称为非格司亭，已在美国销售，其商品名为NEUPOGEN^，适用于在患有非骨髓性恶性肿瘤并接受骨髓抑制性抗癌药的患者中降低表现为发热性嗜中性粒细胞减少症的感染的发生率，该抗癌药与伴随发热的严重嗜中性粒细胞减少症的高发生率有关。Physicians′Desk Reference，587-592(第56版，2002)。GM-CSF的重组形式称为沙格司亭，也已在美国销售，其商品名为LEUKINE^。LEUKINE^适于在诱导化疗后用于患有急性髓细胞性白血病(AML)的老年患者以缩短嗜中性粒细胞恢复的时间。Physicians′Desk Reference，1755-1760(第56版，2002)。EPO的重组形式称为阿法依泊汀，在美国销售，其商品名为EPOGEN^。EPOGEN^用于通过刺激定型红细胞前体细胞的分裂和成熟而刺激红细胞生成。Physicians′DeskReference，582-587(第56版，2002)。

也可以疫苗形式给予生长因子或细胞因子，例如G-CSF、GM-CSF和EPO等。例如，分泌G-CSF和GM-CSF等细胞因子或引起G-CSF和GM-CSF等细胞因子分泌的疫苗可用于本发明的方法、药物组合物和试剂盒。参见例如Emens，L.A.等，Curr.Opinion Mol.Ther：3(1)：77-84(2001)。

可用于本发明的不同实施方案(包括本发明的方法、给药方案、鸡尾酒、药物组合物和剂型及试剂盒)的抗癌药的实例包括但不限于：阿西维辛；阿柔比星；盐酸阿考达唑；阿克罗宁；阿多来新；阿地白介素；六甲蜜胺；安波霉素；醋酸阿美蒽醌；安吖啶；阿那曲唑；安曲霉素；天冬酰胺酶；曲林菌素；阿扎胞苷；阿扎替派；阿佐霉素；巴马司他；苯佐替派；比卡鲁胺；盐酸比生群；二甲磺酸双奈法德；比折来新；硫酸博来霉素；布喹那钠；溴匹立明；白消安；放线菌素C；卡普睾酮；卡醋胺；卡贝替姆；卡铂；卡莫司汀；盐酸卡柔比星；卡折来新；西地芬戈；塞来考昔；苯丁酸氮芥；西罗霉素；顺铂；克拉屈滨；甲磺酸克立那托；环磷酰胺；阿糖胞苷；达卡巴嗪；放线菌素D；盐酸柔红霉素；地西他滨；右奥马铂；地扎呱宁；甲磺酸地扎呱宁；地吖醌；达卡巴嗪；多西他赛；多柔比星；盐酸多柔比星；屈洛昔芬；柠檬酸屈洛昔芬；丙酸屈他雄酮；达佐霉素；依达曲沙；盐酸依氟鸟氨酸；依沙芦星；恩洛铂；恩普氨酯；依匹哌啶；盐酸表柔比星；厄布洛唑；盐酸依索比星；雌莫司汀；雌莫司汀磷酸钠；依他硝唑；依托泊苷；磷酸依托泊苷；氯苯乙嘧胺；盐酸法倔唑；法扎拉滨；芬维A胺；氟尿苷；磷酸氟达拉滨；氟尿嘧啶；氟西他滨；磷喹酮；福司曲星钠；吉西他滨；盐酸吉西他滨；羟基脲；盐酸伊达比星；异环磷酰胺；伊莫福新；白介素II(包括重组白介素II或rIL2)、干扰素α-2a；干扰素α-2b；干扰素α-n1；干扰素α-n3；干扰素β-Ia；干扰素γ-Ib；异丙铂；依立替康；盐酸依立替康；醋酸兰瑞肽；来曲唑；醋酸亮丙立德；盐酸利阿唑；洛美曲索钠；洛莫司汀；盐酸洛索蒽醌；马索罗酚；美登素；盐酸氮芥；醋酸甲地孕酮；醋酸美仑孕酮；美法仑；美诺立尔；巯嘌呤；甲氨蝶呤；甲氨蝶呤钠；氯苯氨啶；美妥替派；米丁度胺；米托卡星；丝裂红素；米托洁林；米托马星；丝裂霉素；米托司培；米托坦；盐酸米托蒽醌；麦考酚酸；诺考达唑；诺拉霉素；奥马铂；奥昔舒仑；太平洋紫杉醇；培门冬酶；培利霉素；奈莫司汀；硫酸培洛霉素；培磷酰胺；哌泊溴烷；哌泊舒凡；盐酸吡罗蒽醌；普卡霉素；普洛美坦；卟吩姆钠；泊非霉素；泼尼莫司汀；盐酸丙卡巴肼；嘌罗霉素；盐酸嘌罗霉素；吡唑呋林；利波腺苷；沙芬戈；盐酸沙芬戈；司莫司汀；辛曲秦；磷乙酰天冬氨酸钠；司帕霉素；盐酸锗螺胺；螺莫司汀；螺铂；链黑霉素；链佐星；磺氯苯脲；他利霉素；替可加兰钠；泰索帝；替加氟；盐酸替洛蒽醌；替莫泊芬；替尼泊苷；替罗昔隆；睾内酯；thiamiprine；硫鸟嘌呤；塞替派；噻唑呋林；替拉扎明；柠檬酸托瑞米芬；醋酸曲托龙；磷酸曲西立滨；三甲曲沙；葡萄糖醛酸三甲曲沙；曲普瑞林；盐酸妥布氯唑；乌拉莫司汀；乌瑞替派；伐普肽；维替泊芬；硫酸长春碱；硫酸长春新碱；长春地辛；硫酸长春地辛；硫酸长春匹定；硫酸长春甘酯；硫酸长春罗辛；酒石酸长春瑞滨；硫酸长春罗定；硫酸长春利定；伏氯唑；折尼铂；净司他丁；和盐酸佐柔比星。其它抗癌药包括但不限于：20-表-1，25-二羟基维生素D3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龙；阿柔比星；acylfulvene；腺环戊醇；阿多来新；阿地白介素；ALL-TK拮抗剂；六甲蜜胺；氨莫司汀；amidox；氨磷汀；5-氨基酮戊酸；氨柔比星；安吖啶；阿那格雷；阿那曲唑；穿心莲内酯；血管生成抑制剂；拮抗剂D；拮抗剂G；antarelix；抗背侧发育形态发生蛋白-1；抗雄激素药，前列腺癌；抗雌激素药；抗瘤酮；反义寡核苷酸；甘氨酸阿非迪霉素；细胞凋亡基因调节药；细胞凋亡调节药；无嘌呤酸；ara-CDP-DL-PTBA；精氨酸脱氨酶；asulacrine；阿他美坦；阿莫司汀；axinastatin 1；axinastatin 2；axinastatin 3；阿扎司琼；阿扎毒素；氮杂酪氨酸；浆果赤霉素III衍生物；balanol；巴马司他；BCR/ABL拮抗剂；benzochlorins；苯甲酰星孢素；β-内酰胺衍生物；β-alethine；亚阿克拉霉素B；白桦脂酸；bFGF抑制剂；比卡鲁胺；比生群；双氮丙啶基精胺(bisaziridinylspermine)；双奈法德；bistratene A；比折来新；breflate；溴匹立明；布度钛；buthionine sulfoximine；卡泊三醇；抑激酶素C；喜树碱衍生物；canarypox IL-2；卡培他滨；甲酰胺-氨基-三唑；羧基酰胺基三唑；软骨衍生抑制剂；卡折来新；酪蛋白激酶抑制剂(ICOS)；粟精胺；杀菌肽B；西曲瑞克；chlorlns；氯喹喔啉磺酰胺；西卡前列素；顺卟啉；克拉屈滨；氯米芬类似物；克霉唑；collismycin A；collismycin B；考布他汀A4；考布他汀类似物；conagenin；crambeseidin 816；克立那托；缩酚酸肽(cryptophycin)8；缩酚酸肽A衍生物；curacin A；cyclopentanthraquinones；cycloplatam；cypemycin；阿糖胞苷ocfosfate；细胞溶解因子；cytostatin；达昔单抗；地西他滨；dehydrodidemnin B；地洛瑞林；地塞米松；右异环磷酰胺；右雷佐生；右维拉帕米；地吖醌；didemnin B；diethylnorspermine；二氢-5-氮胞苷；二氢紫杉醇；dioxamycin；二苯基螺莫司汀；多西他赛；二十二烷醇；多拉司琼；去氧氟尿苷；多柔比星；屈洛昔芬；屈大麻酚；倍癌霉素SA；依布硒啉；依考莫司汀；依地福新；依决可单抗；依氟鸟氨酸；榄香烯；乙嘧替氟；表柔比星；依立雄胺；雌莫司汀类似物；雌激素激动剂；雌激素拮抗剂；依地硝唑；磷酸依托泊苷；依西美坦；法倔唑；法扎拉滨；芬维A胺；非格司亭；非那雄胺；黄酮类抗肿瘤药(flavopiridol)；氟卓斯汀；fluasterone；氟达拉滨；fluorodaunorunicin hydrochloride；福酚美克；福美坦；福司曲星；福莫司汀；钆替沙林；硝酸镓；加洛他滨；加尼瑞克；明胶酶抑制剂；吉西他滨；谷胱甘肽抑制剂；hepsulfam；heregulin；六亚甲基双乙酰胺；金丝桃素；依班膦酸；伊达比星；艾多昔芬；伊决孟酮；伊莫福新；伊洛马司他；咪喹莫特；免疫刺激肽；胰岛素样生长因子-1受体抑制剂；干扰素激动剂；干扰素；白介素；碘苄胍；碘多柔比星；4-依波米醇；伊罗普拉；伊索拉定；isobengazole；isohomohalicondrin B；伊他司琼；jasplakinolide；kahalalide F；lamellarin-N triacetate；兰瑞肽；leinamycin；来格司亭；硫酸香菇多糖；leptolstatin；来曲唑；白血病抑制因子；白细胞α干扰素；亮丙立德+雌激素+黄体酮；亮丙瑞林；左旋咪唑；利阿唑；线状聚胺类似物；亲脂二糖肽；亲脂铂类化合物；lissoclinamide 7；洛铂；蚯蚓磷脂；洛美曲索；氯尼达明；洛索蒽醌；洛索立宾；勒托替康；lutetium texaphyrin；lysofylline；裂解肽；美坦新；制甘糖酶素A；马立马司他；马索罗酚；乳腺丝抑蛋白；matrilysin抑制剂；基质金属蛋白酶抑制剂；美诺立尔；merbarone；美替瑞林；甲硫氨酸酶；甲氧氯普胺；MIF抑制剂；米非司酮；米替福新；米立司亭；米托胍腙；二溴卫矛醇；丝裂霉素类似物；米托萘胺；mitotoxin成纤维细胞生长因子-皂草毒蛋白；米托蒽醌；莫法罗汀；莫拉司亭；Erbitux，人绒毛膜促性腺激素；莫哌达醇；芥子类抗癌药；mycaperoxide B；分枝杆菌细胞壁提取物；myriaporone；N-乙酰基地那林；N-取代的苯甲酰胺；那法瑞林；那瑞替(nagrestip)；纳洛酮+喷他佐辛；napavin；naphterpin；那托司亭；奈达铂；奈莫柔比星；奈立膦酸；尼鲁米特；nisamycin；一氧化氮调节剂；硝基氧抗氧化剂；nitrullyn；O⁶-苄基鸟嘌呤；奥曲肽；okicenone；寡核苷酸；奥那司酮；昂丹司琼；昂丹司琼；oracin；口服细胞因子诱导剂；奥马铂；奥沙特隆；奥沙利铂；oxaunomycin；紫杉醇；紫杉醇类似物；紫杉醇衍生物；palauamine；棕榈酰根霉素；帕米膦酸；人参三醇；帕诺米芬；parabactin；帕折普汀；培门冬酶；培得星；戊聚糖多聚硫酸钠；喷司他丁；pentrozole；全氟溴烷；培磷酰胺；perillyl alcohol；苯连氮霉素；乙酸苯酯；磷酸酶抑制剂；溶血性链球菌制剂；盐酸毛果芸香碱；吡柔比星；吡曲克辛；placetin A；placetin B；纤溶酶原激活物抑制剂；铂络合物；铂化合物；铂-三胺络合物；卟吩姆钠；泊非霉素；泼尼松；丙基二吖啶酮；前列腺素J2；蛋白酶体抑制剂；基于A蛋白的免疫调节剂；蛋白激酶C抑制剂；微藻蛋白激酶C抑制剂；蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂；嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂；红紫素；吡唑啉吖啶；吡多酸化血红蛋白聚乙二醇轭合物；raf拮抗剂；雷替曲塞；雷莫司琼；ras法尼基蛋白转移酶抑制剂；ras抑制剂；ras-GAP抑制剂；脱甲基瑞替普汀；依替膦酸铼Re 186；根霉素；核酶；RII retinamide；rohitukine；罗莫肽；罗喹美克；rubiginone B1；ruboxyl；沙芬戈；saintopin；SarCNU；sarcophytol A；沙格司亭；Sdi 1模拟物；司莫司汀；衰老衍生抑制剂1；有义寡核苷酸；信号转导抑制剂；西佐喃；索布佐生；硼卡钠；苯乙酸钠；solverol；生长调节素结合蛋白；索纳明；膦门冬酸；穗霉素D；螺莫司汀；splenopentin；海绵抑制素1；角鲨胺；stipiamide；溶基质蛋白酶抑制剂；sulfinosine；超活性血管活性肠肽拮抗剂；suradista；苏拉明；八氢吲嗪三醇；他莫司汀；他莫昔芬甲碘化物；牛磺莫司汀；他扎罗汀；替可加兰钠；替加氟；tellurapyrylium；端粒酶抑制剂；替莫泊芬；替尼泊苷；tetrachlorodecaoxide；tetrazomine；thaliblastine；噻可拉林；血小板生成素；血小板生成素模拟物；胸腺法新；胸腺生成素受体激动剂；胸腺曲南；促甲状腺激素；tin ethyl etiopurpurin；替拉扎明；titanocene bichloride；topsentin；托瑞米芬；翻译抑制剂；维A酸；三乙酰尿苷；曲西立滨；三甲曲沙；曲普瑞林；托烷司琼；妥罗雄脲；酪氨酸激酶抑制剂；酪氨酸磷酸化抑制剂；UBC抑制剂；乌苯美司；泌尿生殖窦衍生生长抑制因子；尿激酶受体拮抗剂；伐普肽；variolin B；维拉雷琐；vermine；verdins；维替泊芬；长春瑞滨；vinxaltine；牡荆碱；伏氯唑；扎诺特隆；折尼铂；亚苄维C；和净司他丁斯酯。

在本发明的一个实施方案中，也可使用本发明的化合物，不仅可直接治疗疾病，而且可降低其它化疗药的剂量或毒性。例如，可以给予本发明的化合物，以减低拓扑异构酶抑制剂(例如依立替康)相关的胃肠毒性。

4.6.生物学试验

可以使用本领域众所周知的方法，测定具有PDE4和/或TNF-α抑制活性的化合物，所述方法包括但不限于酶免疫测定、放射免疫测定、免疫电泳和亲和标记。可以使用的其它测定包括LPS诱导的TNF和PDE4酶学分析及以下文献中给出的方法：国际专利公布号WO01/90076A1、WO01/34606A1，每个所述专利文献都通过引用全部结合到本文中。

通过Ficoll-Hypaque密度梯度离心，从正常供体得到PBMC。细胞在补充10％AB+血清、2mM L-谷氨酰胺、100U/ml青霉素和100mg/ml链霉素的RPMI中培养。

将试验化合物溶于二甲亚砜(Sigma Chemical)中，在经补加的RPMI中做进一步稀释。在药物存在或不存在下，二甲亚砜在PBMC悬浮液中的终浓度为0.25wt％。从50mg/ml开始，以半对数稀释来测定试验化合物。在加入LPS前1小时，将试验化合物加入到96孔板中的PBMC(106个细胞/ml)中。

在试验化合物存在或不存在下，用1mg/ml来自明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minnesota)R595的LPS(List Biological Labs，Campbell，CA)处理以刺激PBMC(10⁶个细胞/ml)。然后将细胞在37℃培养18-20小时。收获上清液并立即测定TNFα的水平，或者在-70℃冷藏(不超过4天)直到测定。

用人TNFαELISA试剂盒(ENDOGEN，Boston，MA)，按照生产商的说明，测定上清液中TNFα的浓度。

可以用常规模型测定磷酸二酯酶。例如，使用Hill和Mitchell的方法，让人前单核细胞系U937细胞生长至1×10⁶个细胞/ml，然后离心收集。将1×10⁹个细胞的细胞沉淀在磷酸缓冲盐溶液中洗涤，然后在-70℃冷冻，用于后面的纯化，或者立即在冷的匀浆缓冲液(20mM Tris-HCl，pH7.1，3mM 2-巯基乙醇、1mM氯化镁、0.1mM乙二醇-双-(β-氨基乙基醚)-N，N，N′，N′-四乙酸(EGTA)、1μM苯基-甲磺酰氟(PMSF)和1μg/ml亮抑酶肽)中裂解。细胞在Dounce匀浆器中用20次冲程进行匀浆，离心得到含有胞质部分的上清液。然后将上清液上样到用匀浆缓冲液平衡的Sephacryl S-200柱上。用匀浆缓冲液，以约0.5ml/min的速度洗脱磷酸二酯酶，然后测定各流分中的磷酸二酯酶活性-/+咯利普兰。合并含有磷酸二酯酶活性(咯利普兰敏感型)的流分并分成等分试样供以后使用。

在含有以下物质的总体积为100μl中进行磷酸二酯酶测定：不同浓度试验化合物、50mM Tris-HCl(pH 7.5)、5mM氯化镁和1μM cAMP(其中1％是³H cAMP)。反应物在30℃保温30分钟，然后通过煮沸2分钟终止反应。预先测定用于这些实验的萃取物中磷酸二酯酶IV的含量，使得反应在线性范围内，并且消耗小于15％的总底物。反应终止后，将样品在4℃冷却，然后用10μl 10mg/ml蛇毒液在30℃处理15min。然后，加入200μl季铵型离子交换树脂(AG1-X8，BioRad)达15分钟，除去未用的底物。然后将样品以3000rpm离心5min，取出50μl水相进行计数。每个数据点重复测定2次，活性表示为对照的百分数。然后，根据三次独立实验的最小值的剂量反应曲线，确定化合物的IC₅₀。

下面提供的实施例是说明性的，不得解释为对本发明范围的限制。

5.实施例

5.1.实施例1

3-(1，3-二氧代苯并[e]异吲哚啉-2-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)丙腈

将萘并[1，2-c]呋喃-1，3-二酮(440mg，2.2mmol)和3-氨基-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙腈(490mg，2.2.mmol)在乙酸(10mL)中的溶液加热回流过夜。真空除去溶剂，得到固体，色谱纯化(硅胶，CH₂Cl₂)，得到3-(1，3-二氧代苯并[e]异吲哚啉-2-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)丙腈，为黄色固体(430mg，48％产率)：mp 163.0-165.0℃；¹H NMR(CDCl₃)δ1.46(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，3.34(dd，J＝7，17Hz，1H，CHH)，3.80-3.92(m，1H，CHH)，3.84(s，3H，CH₃)，4.10(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，5.67(dd，J＝7，10.1Hz，1H，NCH)，6.82-6.86(m，1H，Ar)，7.11-7.13(m，2H，Ar)，7.61-7.74(m，2H，Ar)，7.81(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.92(d，J＝7.9Hz，1H，Ar)，8.14(d，J＝8.3Hz，1H，Ar)，8.87(d，J＝8Hz，1H，Ar)；¹³C NMR(CDCl₃)δ14.66，21.22，50.97，55.91，64.48，111.43，112.19，117.00，118.46，120.03，124.79，126.79，127.96，128.73，128.94，129.24，129.66，130.78，135.37，136.68，148.56，149.72，168.37，168.92。分析计算值C₂₄H₂₀N₂O₄：C 71.99；H 5.03；N 7.00。实测值：C 71.81；H 5.04；N 7.00。

5.2.实施例2

(1S)-呋喃-2-羧酸{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-1，3-二氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-酰胺

将(1S)-7-氨基-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(0.85g，2.0mmol)和2-糠酰氯(0.40mL，4.1mmol)在THF(5mL)中的溶液加热回流17小时。向混合物中加入甲醇(4mL)。真空除去溶剂，得到固体，色谱纯化(硅胶，EtOAc/己烷)，得到(1S)-呋喃-2-羧酸{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-1，3-二氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-酰胺固体(380mg，37％产率)：mp 184-186℃；¹H NMR(CDCl₃)δ1.45(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，2.86(s，3H，CH₃)，3.76-3.80(m，1H，CHH)，3.83(s，3H，CH₃)，4.10(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，4.56(dd，J＝10，14Hz，1H，CHH)，5.90(dd，J＝5，10Hz，1H，NCH)，6.57-6.58(m，1H，Ar)，6.81-6.84(m，1H，Ar)，7.10-7.13(m，2H，Ar)，7.27-7.28(m，1H，Ar)，7.47-7.50(m，1H，Ar)，7.63-7.69(m，2H，Ar)，8.84(d，J＝9Hz，1H，Ar)，10.39(s，1H，NH)；¹³C NMR(CDCl₃)δ14.70，41.65，48.74，54.68，55.95，60.37，64.55，111.51，112.51，112.75，115.76，116.47，118.42，120.42，125.03，129.34，131.26，136.15，137.25，145.40，147.05，148.63，149.75，156.49，167.51，169.39。分析计算值C₂₅H₂₄N₂O₈S：C 58.59；H 4.72；N 5.47。实测值：C 58.34；H 4.86；N 5.38。

5.3.实施例3

(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-1，3-二氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2-甲氧基-乙酰胺

将(1S)-7-氨基-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(0.5g，1.2mmol)和2-甲氧基乙酰氯(0.3mL，3.2mmol)在THF(6mL)中的溶液加热回流17小时。向混合物中加入甲醇(5mL)。真空除去溶剂，得到固体，用制备性HPLC纯化，得到(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-1，3-二氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2-甲氧基-乙酰胺，为灰白色固体(180mg，32％产率)：mp151-153℃；¹H NMR(CDCl₃)δ1.47(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，2.84(s，3H，CH₃)，3.56(s，3H，CH₃)，3.77(dd，J＝5，14Hz，1H，CHH)，3.85(s，3H，CH₃)，4.08(s，2H，CH₂)，4.12(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，4.53(dd，J＝10,15Hz，1H，CHH)，5.87(dd，J＝5,10Hz，1H，NCH)，6.81-6.82(m，1H，Ar)，7.10-7.13(m，2H，Ar)，7.51(d，J＝7HZ，1H，Ar)，7.67(t，J＝8Hz，1H，Ar)，8.81(d，J＝8Hz，1H，Ar)，10.42(s，1H，NH)；¹³C NMR(CDCl₃)δ14.69，41.59，48.80，54.81，55.96，59.74，64.55，72.18，111.49，112.53，116.06，118.59，120.49，125.09，129.39，131.33，136.02，136.59，148.62，149.77，167.57，168.89，169.16。分析计算值C₂₃H₂₆N₂O₈S：C 56.32；H 5.34，N 5.71。实测值：C 56.23；H 5.30；N 5.56。

5.4.实施例4

(1S)-7-(环丙基甲基-氨基)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

室温下向7-氨基-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(1.8g，4.5mmol)，环丙烷甲醛(0.47mL，6.3mmol)，和乙酸(1.6mL，28mmol)在1，2-二氯乙烷(20mL)中的溶液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.4g，6.7mmol)。1.5小时后，混合物用二氯甲烷(50mL)和水(20mL)萃取。有机层用碳酸氢钠(饱和，25mL)和盐水(25mL)洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂，得到黄色油，用制备性HPLC纯化，得到(1S)-7-(环丙基甲基-氨基)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮，为白色固体(1.6g，79％产率)：mp147-149℃；¹H NMR(CDCl₃)δ0.25-0.31(m，2H，CH₂)，0.55-0.62(m，2H，CH₂)，1.09-1.20(m，1H，CH)，1.45(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，2.93(s，3H，CH₃)，3.03-3.08(m，2H，CH₂)，3.67(dd，J＝5，15Hz，1H，CHH)，3.85(s，3H，CH₃)，4.08(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，4.18(d，J＝17Hz，1H，CHH)，4.29(dd，J＝10，15Hz，1H，CHH)，4.34(d，J＝17Hz，1H，CHH)，5.62(dd，J＝5，10Hz，1H，NCH)，6.47-6.55(m，2H，Ar)，6.69(t，J＝5Hz，1H，NH)，6.83(d，J＝8Hz，1H，Ar)，6.91-6.95(m，2H，Ar)，7.21-7.30(m，1H，Ar)；¹³C NMR(CDCl₃)δ3.57，10.63，14.71，41.42，47.52，48.09，52.04，55.98，56.39，64.60，108.35，109.21，111.48，112.32，113.77，119.37，130.45，133.64，142.78，147.50，148.79，149.54，171.16。分析计算值C₂₄H₃₀N₂O₅S：C 62.86；H 6.59；N 6.11。实测值：C 62.77；H 6.62；N 6.13。

5.5.实施例5

(1S)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-7-异丁基氨基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮

室温下向(1S)-7-氨基-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(0.5g，1.2mmol)，2-甲基-丙醛(0.13mL，1.4mmol)，和乙酸(0.44mL，7.65mmol)在1，2-二氯乙烷(10mL)中的溶液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.52g，2.5mmol)。1.5小时后，混合物用二氯甲烷(50mL)和水(20mL)萃取。有机层用碳酸氢钠(饱和，25mL)和盐水(25mL)洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂，得到黄色油，用制备性HPLC纯化，得到(1S)-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-7-异丁基氨基-2，3-二氢-异吲哚-1-酮，为白色固体(0.27g，47％产率)：mp122-124℃；¹H NMR(CDCl₃)δ0.99(d，J＝7Hz，6H，2CH₃)，1.43(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，1.89-1.99(m，1H，CH)，2.91(s，3H，CH₃)，3.00(t，J＝6Hz，2H，CH₂)，3.66(dd，J＝5，15Hz，1H，CHH)，3.84(s，3H，CH₃)，4.07(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，4.09-4.35(m，3H，CH₂，CHH)，5.60(dd，J＝5，10Hz，1H，NCH)，6.47-6.53(m，2H，Ar)，6.72(t，J＝6Hz，1H，NH)，6.81-6.97(m，3H，Ar)，7.26(t，J＝8Hz，1H，Ar)；¹³CNMR(CDCl₃)δ15.44，20.42，28.07，41.40，48.16，50.42，52.14，55.97，56.42，64.56，108.30，108.98，111.47，112.31，113.77，119.38，130.08，133.63，142.80，147.79，148.79，149.52，171.28。分析计算值C₂₄H₃₂N₂O₅S+0.32H₂O：C 61.81；H 7.05；N 6.01；H₂O 1.24。实测值：C 61.86；H 7.02；N 6.00；H₂O 1.25。

5.6.实施例6

(3R)-3-[7-(2，2-二甲基-丙基氨基)-1-氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基]-3-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-N，N-二甲基-丙酰胺

室温下向(3R)-3-(7-氨基-1-氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-N，N-二甲基丙酰胺(0.5g，1.3mmol)和三甲基乙醛(0.26mL，2.3mmol)在1，2-二氯乙烷(10mL)中的溶液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.53g，2.5mmol)。1天后，混合物用二氯甲烷(50mL)和水(20mL)萃取。有机层用碳酸氢钠(饱和，25mL)和盐水(25mL)洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂，得到黄色油，用制备性HPLC纯化，得到(3R)-3-[7-(2，2-二甲基-丙基氨基)-1-氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基]-3-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-N，N-二甲基-丙酰胺，为白色固体(0.59g，99％产率)：mp 111-113℃；¹H NMR(CDCl₃)δ1.01(s，9H，3CH₃)，1.43(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，2.89(s，3H，CH₃)，2.98(d，J＝6Hz，2H，CH₂)，3.07(dd，J＝6,15Hz，1H，CHH)，3.11(s，3H，CH₃)，3.45(dd，J＝9,15Hz，1H，CHH)，3.84(s，3H，CH₃)，4.08(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，4.12(d，J＝16Hz，1H，CHH)，4.33(d，J＝16Hz，1H，CHH)，5.59(dd，J＝7,9Hz，1H，NCH)，6.47-6.51(m，2H，Ar)，6.79-7.01(m，4H，NH，Ar)，7.22(t，J＝8Hz，1H，Ar)；¹³C NMR(CDCl₃)δ14.75，27.63，32，27，35.52，36.67，37.54，48.56，53.10，54.49，55.95，64.42，107.82，108.77，111.25，112.66，114.58，119.22，132.35，132.96，143.09，148.16，148.41，148.81，169.97，170.79。分析计算值C₂₇H₃₇N₃O₄：C 69.35；H 7.98；N 8.99。实测值：C69.70；H 7.95；N 8.74。

5.7实施例7

3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-异丁基氨基-1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-丙腈

室温下向二甲基-3-氨基邻苯二甲酸酯(0.75g，3.6mmol)，3-甲基-丁醛(0.36mL，4.0mmol)，乙酸(1.3mL，23mmol)在1，2-二氯乙烷(30mL)中的混合物中加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.5g，7.2mmol)。30分钟后，混合物用二氯甲烷(30mL)和水(30mL)萃取。有机层用碳酸氢钠(饱和，30mL)洗涤。真空除去溶剂，得到黄色油。向甲醇(5mL)中的油中加入氢氧化钠(10N，1.5mL)，室温下过夜。向混合物中加入HCl(12N，1.3mL)。真空除去溶剂，得到固体。固体溶解在吡啶(10mL)中，将3-氨基-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-丙腈(1.0g，3.6mmol)加到溶液中。溶液加热回流2天。真空除去溶剂，得到油。油用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)萃取。有机层用水(50mL)，HCl(1N，2×50mL)，水(50mL)，碳酸氢钠(饱和，2×50mL)，和盐水(50mL)洗涤，用MgSO₄干燥。真空过滤和除去溶剂，得到油。油用柱色谱纯化(硅胶，1∶3 EtOAc∶己烷)，得到3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-3-(4-异丁基氨基-1，3-二氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-丙腈，为黄色固体(700mg，46％产率)：mp，12-123℃；¹H NMR(CDCl₃)δ1.01(d，J＝7Hz，6H，2CH₃)，1.45(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，1.88-1.99(m，1H，CH)，3.07(t，J＝6Hz，2H，CH₂)，3.27(dd，J＝7,17Hz，1H，CHH)，3.76(dd，J＝10,17Hz，1H，CHH)，3.84(s，3H，CH₃)，4.09(q，J＝1Hz，2H，CH₂)，5.55(dd，J＝7,10Hz，1H，NCH)，6.37(t，J＝6Hz，1H，Ar)，6.81-6.86(m，2H，Ar)，7.01-7.06(m，3H，Ar)，7.44(t，J＝8Hz，1H，Ar)；¹³C NMR(CDCl₃)δ14.69，20.26，21.29，28.27，50.31，50.63，55.95，64.49，109.63，111.10，111.42，112.22，116.58，117.09，119.96，129.55，132.33，135.93，147.14，148.53，149.66，168.18。分析计算值C₂₄H₂₇N₃O₄：C 68.39；H 6.46；N 9.97。实测值：C 68.32；H 6.39；N 9.95。

5.8实施例8

N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}乙酰胺

将2-氨基-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈乙酸酯(4.1g，14.6mmol)和3-乙酰氨基邻苯二甲酸酐(3.0g，14.6mmol)在冰乙酸(60mL)中的混合物加热回流17小时。混合物真空浓缩，提供油。油溶解在EtOAc中，用水、盐水洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂，用色谱法纯化残渣(SiO₂，己烷∶EtOAc 6∶4)，得到4.9g(83％)N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}乙酰胺，为白色固体；mp 118-120℃；¹H NMR(CDCl₃)δ9.43(s，1H)，8.76(d，J＝8.4Hz，1H)，7.67(t，J＝7.7Hz，1H)，7.51(d，J＝7.2Hz，1H)，7.05-6.82(m，3H)，5.60-5.54(dd，J＝6.63和10.0Hz，1H)，4.10(q，J＝6.8Hz，2H)，3.81(s，3H)，3.81-3.74(m，1H)，3.29-3.20(dd，J＝6.2和16.8Hz，1H)，2.27(s，3H)，1.46(t，J＝7Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ169：56，169.12，167.19，149.92，148.64，137.73，136.30，130.87，128.70，125.11，119.92，118.29，116.76，114.94，112.14，111.98，64.56，55.94，51.08，24.92，21.04，14.68。分析计算值C₂₂H₂₁N₃O₅：C 64.86；H 5.20；N 10.31。实测值：C 65.01；H 5.10；N 10.19.

5.9实施例9

N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}(苄基氨基)羧酰胺

5.9.1 2-(4-硝基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈

将2-氨基-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈乙酸酯(8.0g，28.5mmol)，乙酸钠(2.6g，31mmol)和3-硝基邻苯二甲酸酐(5.5g，28.5mmol)在冰乙酸(60mL)中的混合物加热回流5小时。真空浓缩混合物，得到油。油溶解在CH₂Cl₂中，用水和盐水洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂，用色谱法纯化残渣(SiO₂，己烷∶EtOAc 6∶4)，得到9.5g(84％)2-(4-硝基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈；mp 155-157℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.31(d，J＝7.8Hz，1H)，8.20(d，＝7.2Hz，1H)，8.09(t，J＝7.8Hz，1H)，7.06-6.91(m，3H)，5.59(t，J＝8.0Hz，1H)，4.04-3.96(q，J＝7Hz，2H)，3.74(s，3H)，3.66(d，J＝8Hz，2H)，1.31(t，J＝7Hz，3H)；¹³C NMR(DMSO-d₆)δ165.46，162.69，149.07，147.78，144.45，136.63，132.81，128.81，128.52，127.24，122.39，119.77，118.08，112.46，111.68，63.80，55.48，50.36，20.30，14.60。分析计算值C₂₀H₁₇N₃O₆：C 60.75；H 4.34；N 10.63。实测值：C 60.95；H 4.37；N 10.50。

5.9.2 2-(4-氨基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈

将2-(硝基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基4-甲氧基苯基)乙腈(3.9g，7.8mmol)和10％Pd/C(0.6g)在甲醇(150mL)中的混合物在50psi下氢化3小时。用硅藻土过滤混合物，硅藻土用二氯甲烷洗涤。浓缩滤液，用色谱法纯化残渣(SiO₂，CH₂Cl₂∶CH₃OH 95∶5)，得到3.3g(91％)2-(4-氨基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈；¹HNMR(DMSO-d₆)δ7.50-7.43(dd，J＝7.3和8.3Hz，1H)，7.03-6.91(m，5H)，6.55(s，2H)，5.55-5.48(dd，J＝6.6和9.9Hz，1H)，3.99(q，J＝7.0Hz，2H)，3.72(s，3H)，3.76-3.48(m，2H)，1.31(t，J＝7Hz，3H)；¹³CNMR(DMSO-d₆)δ168.81，167.59，148.88，146.82，135.55，131.56，129.70，121.86，121.80，119.27，118.26，112.10，111.82，111.06，63.82，55.48，49.46，20.54，14.61。

5.9.3 N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}(苄基氨基)羧酰胺

将2-4-氨基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈(1.0g，2.7mmol)和苄基异氰酸酯(0.6g，4.1mmol)在乙腈(25mL)中的溶液加热回流7天。真空浓缩混合物，用色谱法纯化残渣(SiO₂，CH₂Cl₂∶EtOAc 95∶5)，得到0.95g(70％)N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}(苄基氨基)羧酰胺；mp 98-100℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.68-8.40(m，2H)，7.58(t，J＝7.4Hz，1HO，7.38-7.26(m，6H)，6.99-6.96(m，2H)，6.80-6.77(m，1H)，5.59-5.49(m，2H)，4.47(d，J＝5.7Hz，2H)，4.07(q，J＝7Hz，2H)，3.82(s，3H)，3.84-3.65(m，1H)，3.29-3.19(dd，J＝6.6和17Hz，1H)，1.43(t，J＝7.1Hz，3H)；¹⁴C NMR(CDCl₃)δ169.81，167.43，153.94，149.86，148.57，139.37，138.10，136.09，130.84，128.81，128.71，127.65，127.60，124.38，119.90，116.94，116.74，113.65，112.21，111.44，64.58，55.89，50.87，44.40，21.07，14.66。分析计算值C₂₈H₂₆N₄O₅：C 67.46；H 5.26；N 11.24。实测值：C 67.31；H 5.13；N 11.03。

5.10实施例10

N-{2-[氰基(3-环戊基氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}乙酰胺

将2-氨基-2-(3-环戊基氧基-4-甲氧基苯基)乙腈乙酸酯(3.5g，11.0mmol)和3-乙酰氨基邻苯二甲酸酐(2.3g，11.0mmol)在冰乙酸(40mL)中的混合物加热回流17小时。真空浓缩混合物，得到油。油溶解在EtOAc中，用水、盐水洗涤，干燥(MgSO₄)。除去溶剂，用色谱法纯化残渣(SiO₂，CH₂Cl₂∶EtOAc 98∶2)，得到3.1g(62％)N-{2-[氰基(3-环戊基氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}乙酰胺，为白色固体；mp124-126℃；¹H NMR(CDCl₃)δ9.44(s，1H)，8.76(d，J＝8.4Hz，1H)，7.67(t，J＝7.6Hz，1H)，7.52(d，J＝7.2Hz，1H)，7.03-6.99(m，2H)，6.84(d，J＝8.0Hz，1H)，5.60-5.53(dd，J＝6.2和10.4Hz，1H)，4.79-4.74(m，1H)，3.86-3.75(m，1H)，3.82(s，3H)，3.29-3.20(dd，J＝6.4和17Hz，1H)，2.72(s，3H)，1.97-1.56(m，8H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ169.58，169.11，167.18，150.61，147.98，137.72，136.28，130.89，128.66，125.09，119.80，118.29，116.78，114.19，111.90，80.68，56.02，51.10，32.73，24.92，24.03，21.07。分析计算值C₂₅H₂₅N₃O₅：C 67.10；H 5.63；N 9.39。实测值：C 66.89；H 5.42；N 9.26。

5.11实施例11

氨基-N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-5-基}酰胺

将2-(5-氨基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈(1.0g，2.7mmol)和氯磺酰基异氰酸酯(0.6g，4.1mmol)在乙腈(20mL)中的溶液在室温下搅拌17小时。浓缩混合物，残渣与水(10mL)搅拌。得到的混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。乙酸乙酯溶液用水和盐水洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂，用色谱法纯化残渣(SiO₂，CH₂Cl₂∶CH₃OH95∶5)，得到0.25g(22％)氨基-N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-5-基}酰胺；mp 163-165℃；¹H NMR(CDCl₃)δ8.05(s，1H)，7.88(s，1H)，7.61-7.49(m，2H)，7.03-6.99(m，2H)，6.82(d，J＝8Hz，1H)，5，60-5.53(dd，J＝6.1和10.3Hz，1H)，5.30(s，2H)，4.07(q，J＝7Hz，2H)，3.88-3.77(m，1H)，3.81(s，3H)，3.26-3.17(dd，J＝6.2和17Hz，1H)，1.41(t，J＝7.0Hz，3H)；¹³C NMR(CDCl₃)δ167.77，167.48，155.72，149.68，148.44，145.34，132.95，129.08，124.76，124.34，123.11，120.13，117.62，113.23，112.31，111.53，64.69，55.91，50.93，21.21，14.66。分析计算值C₂₁H₂₀N₄O₅：C 61.76；H 4.94；N 13.72。实测值：C 62.01；H 5.21；N 13.07。

5.12实施例12

氨基-N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}酰胺

将2-(4-氨基-1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-2-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)乙腈(0.5g，1.4mmol)和氯磺酰基异氰酸酯(0.3g，2.1mmol)在乙腈(20mL)中的溶液在室温下搅拌17小时。浓缩混合物，残渣与水搅拌。得到的混合物用CH₂Cl₂萃取。CH₂Cl₂溶液用水和盐水洗涤，用MgSO₄干燥。除去溶剂，和用色谱法纯化残渣(SiO₂，CH₂Cl₂∶EtOAc 7∶3)，得到0.3g(57％)氨基-N-{2-[氰基(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)甲基]-1，3-二氧代异吲哚啉-4-基}酰胺；mp 179-181.5℃；¹H NMR(DMSO-d₆)δ8.81(s，1H)，8.59(d，J＝8.6Hz，1H)，7.72(t，J＝8Hz，1H)，7.43(d，J＝7.1Hz，1H)，7.03-6.91(m，4H)，5.57(t，J＝7.4Hz，1H)，4.01(q，J＝7Hz，2H)，3.73(s，3H)，3.67-3.54(m，2H)，1.31(t，J＝7.0Hz，3H)；¹³C NMR(DMSO-d₆)δ168.46，167.06，155.10，148.95，147.83，139.21，135.85，130.92，129.15，124.12，119.33，118.18，115.88，113,42，112.18，111.77，63.83，55.48，49.66，20.47，14.62。分析计算值C₂₁H₂₀N₄O₅+0.35H₂O：C 60.82；H 5.03；N13.53。实测值：C 60.75；H 4.93；N 13.44。

5.13实施例13

N-{2-[1-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)2-甲磺酰基-乙基]-1，3-二氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-乙酰胺

向1-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基胺(1.0g，3.3mmol)在乙酸(10mL)中的溶液中加入3-乙酰氨基-邻苯二甲酸酐(1.37g，6.7mmol)和乙酸钠(0.54g，6.7mmol)。混合物在回流温度下加热过夜。真空除去溶剂。得到的油用乙酸乙酯(50mL)和水(30mL)萃取。有机层用水(30mL×2)和盐水(30mL)洗涤，用硫酸镁干燥。真空除去溶剂，得到的油用硅胶柱纯化，得到N-{2-[1-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-1，3-二氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-乙酰胺，白色固体(340mg，21％)：mp 102-104℃；¹H NMR(CDCl₃)δ0.35-0.37(m，2H，c-CH₂)，0.62-0.67(m，2H，c-CH₂)，0.88-0.93(m，2H，c-CH₂)，1.25-1.32(m，1H，c-CH)，2.25(s，3H，CH₃)，2.87(s，3H，CH₃)，3.75(dd，J＝4，15Hz，1H，CHH)，3.83-3.85(m，5H，OCH₂+OCH₃)，4.53(dd，J＝10，15Hz，1H，CH₂)，5.85(dd，J＝4,10Hz，1H，NCH)，6.84(d，J＝8Hz，1H，Ar)，7.07-7.10(m，2H，Ar)，7.45(d，J＝5Hz，1H，Ar)，7.62(t，J＝8Hz，1H，Ar)，8.72(d，J＝8Hz，1H，Ar)，9.45(s，1H，NHCO)；¹³C NMR(CDCl₃)δ1.6，3.2，3.3，24.7，41.4，48.3，54，2，55.8，73.9，111.5，113.1，115.0，118.0，120.3，124.7，129.1，130.9，135.9，137.2，148.6，149.8，167.2，169.0，169.3。分析计算值C₂₄H₂₆N₂O₇S：C 59.25；H 5.39；N 5.76。实测值：C 59.00；H 5.36；N 5.55。

5.14实施例14

环丙烷甲酸{2-[1-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-酰胺

向1-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基胺(1.0g，3.3mmo1)在DMF(18mL)中的溶液中加入2-溴甲基-6-(环丙烷羰基-氨基)-苯甲酸甲基酯(1.0g，3.3mmol)和三乙胺(1.3mL，9，8mmol)。混合物在90℃下加热过夜。真空除去溶剂。得到的油用乙酸乙酯(50mL)和水(30mL)萃取。有机层用水(30mL×4)和盐水(30mL)洗涤，用硫酸镁干燥。真空除去溶剂，得到的油用硅胶柱纯化，得到环丙烷甲酸{2-[1-(3-环丙基甲氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-酰胺，白色固体(50mg，5％)：mp 224-226℃；¹H NMR(CDCl₃)δ0.35-0.39(m，2H，c-CH₂)，0.60-0.63(m，2H，c-CH₂)，(0.88-0,93(m，2H，c-CH₂)，1.08-1.12(m，2H，c-CH₂)，1.25-132(m，1H c-CH)，1.63-1.69(m，1H，c-CH)，2.95(s，3H，CH₃)，3.69(dd，J＝5,15Hz，1H，CHH)，3.82(d，J＝4Hz，2H，c-CH)，3.86(s，3H，CH₃)，4.19(dd，J＝10,17Hz，1H，CHH)，4.20(d，J＝17Hz，1H，CHHN)，4.43(d，J＝17Hz，1H，CHHN)，5.72(dd，J＝5,10Hz，1H，NCH)，6.84-7.02(m，4H，Ar)，7.45(t，J＝8Hz，1H，Ar)，8.43(d，J＝8Hz，1H，Ar)，10.46(s，1H，NHCO)；¹³C NMR(CDCl₃)δ3.3，3.4，8.3，10.2，16.2，41.5，47.9，51.7，55.9，56.0，74.3，77.2，111.8，113.0，116.7，117.1，117.9，119.6，129.4，133.6，138.2，141.3，149.1，150.0，170.1，172.6。分析计算值C₂₆H₃₀N₂O₆S：C 62.63；H 6.06；N 5.62。实测值：C 62.41；H 5.95；N 5.43。

5.15实施例15

(3R)-3(7-(3，3-二甲基-脲基)-1-氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基}-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-N，N-二甲基-丙酰胺

将(3R)-3-(7-氨基-1-氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基)-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-N，N-二甲基-丙酰胺(1.1g，2.8mmol)和二甲基氨基甲酰氯(0.5mL，5.4mmol)在THF(5mL)中的溶液加热回流2天。真空除去溶剂，得到固体，用制备性HPLC纯化，得到(3R)-3-[7-(3，3-二甲基-脲基)-1-氧代-1，3-二氢-异吲哚-2-基]-3-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-N，N-二甲基-丙酰胺，白色固体(450mg，34％产率)：mp 105-107℃；¹H NMR(CDCl₃)δ1.44(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，2，90(s，3H，CH₃)，3.05(dd，J＝6,16Hz，1H，CHH)，3.09(s，9H，3CH₃)，3.46(dd，J＝9.15Hz，1H，CHH)，3.85(s，3H，CH₃)，4.07(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，4.22(d，J＝17Hz，1H，NCHH)，4.41(d，J＝17Hz，1H，NCHH)，5.63(dd，J＝6,9Hz，1H，NCH)，6.91-6.96(m，4H，Ar)，7.39(t，J＝8Hz，1H，Ar)，8.30(d，J＝8Hz，1H，Ar)，9.99(s，1H，NH)；¹³C NMR(CDCl₃)δ14.76，35.57，36.31，36.38，37.45，48.70，53.35，55.97，64.53，111.46，112.63，115.07，116.27，117.57，119.16，131.90，133.02，139.61，141.54，148.55，149.08，155,49，149.69，170.15。分析计算值C₂₅H₃₂N₄O₅+1.2H₂O：C 61.26；H 7.07；N 11.43；H₂O 4.41。实测值：C 60.89；H 6.95；N 11.10；H₂O 4.04。

5.16实施例16

(1S)-3-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-1，1-二甲基-脲

将(1S)-7-氨基-2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-2，3-二氢-异吲哚-1-酮(0.5g，1.2mmol)和二甲基氨基甲酰氯(0.6mL，6.5mmol)的混合物加热回流2小时。真空除去溶剂。残渣用二氯甲烷(50mL)和碳酸氢钠(饱和，50mL)萃取。有机层用盐水(50mL)洗涤，用MgSO₄干燥。真空除去溶剂，残渣用制备性HPLC纯化，得到(1S)-3-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-1，1-二甲基-脲，白色固体(280mg，48％产率)：mp 170-172℃；¹H NMR(CDCl₃)δ1.44(t，J＝7Hz，3H，CH₃)，2.91(s，3H，CH₃)，3.11(s，6H，2CH₃)，3.70(dd，J＝5,15Hz，1H，CHH)，3.86(s，3H，CH₃)，4.08(q，J＝7Hz，2H，CH₂)，4.16-4.25(m，2H，CHH，NCHH)，4.41(d，J＝17Hz，1H，NCHH)，5.69(dd，J＝5,10Hz，1H，NCH)，6.83-6.95(m，4H，Ar)，7.43(t，J＝8Hz，1H，Ar)，8.33(d，J＝8Hz，1H，Ar)，9.85(s，1H，NH)；¹³C NMR(CDCl₃)δ14.71，3.32，41，50，48.06，51.89，55.99，56.16，64.65，131.62，112.30，115.09，116.63，116.77，119.34，129.51，133.68，139.67，141.19，148.93，149.80，155.31，170.64。分析计算值C₂₃H₂₉N₃O₆S+1H₂O：C 55.97；H 6.33；N 8.51；H₂O 3.65。实测值：C 55.57；H 6.02；N 8.44；H₂O，2.97。

5.17实施例17 50mg固体片剂

可以按照以下方式制备片剂，每片含有50mg(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺：

组成(对于1000片)

(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺 50.0g

乳糖 50.7g

小麦淀粉 7.5g

聚乙二醇6000 5.0g

滑石粉 5.0g

硬脂酸镁 1.8g

去离子水适量

首先，使固体配料过0.6mm目宽的筛。然后，将活性成分、乳糖、滑石粉、硬脂酸镁和一半淀粉混合。另一半淀粉悬浮于40ml水中，将该悬浮液加入到沸腾的聚乙二醇的100ml水溶液中。所得糊状物加入到粉状物料中，将混合物制粒，必要时加入水。颗粒在35℃干燥过夜，过1.2mm目宽的筛并压制成直径约为6mm的片剂，所得片剂两面均为凹面。

5.18实施例18 100mg固体片剂

可以按照以下方式制备片剂，每片含有100mg(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺：

组成(对于1000片)

(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺 100.0g

乳糖 100.0g

小麦淀粉 47.0g

硬脂酸镁 3.0g

首先，使所有固体配料过0.6mm目宽的筛。然后，将活性成分、乳糖、硬脂酸镁和一半淀粉混合。另一半淀粉悬浮于40ml水中，将该悬浮液加入到100ml沸水中。所得糊状物加入到粉状物料中，将混合物制粒，必要时加入水。颗粒在35℃干燥过夜，过1.2mm目宽的筛并压制成直径约为6mm的片剂，所得片剂两面均为凹面。

5.19实施例19 75mg咀嚼片剂

可以按照以下方式制备咀嚼片剂，每片含有75mg(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺：

组成(对于1000片)

(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺 75.0g

甘露醇 230.0g

乳糖 150.0g

滑石粉 21.0g

甘氨酸 12.5g

硬脂酸 10.0g

糖精 1.5g

5％明胶溶液适量

首先，所有固体配料过0.25mm目宽的筛。将甘露醇和乳糖混合，加入明胶溶液制粒，通过2mm目宽的筛，在50℃干燥，然后再过1.7mm目宽的筛，将(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺、甘氨酸和糖精小心混合，加入甘露醇、乳糖颗粒、硬脂酸和滑石粉，将所有物料混合均匀并压制成直径约为10mm的片剂，所得片剂两面均为凹面并在其上面具有刻痕。

5.20实施例20 10mg片剂

可以按照以下方式制备片剂，每片含有10mg(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺。

组成(对于1000片)

(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺 10.0g

乳糖 328.5g

玉米淀粉 17.5g

聚乙二醇6000 5.0g

滑石粉 25.0g

硬脂酸镁 4.0g

去离子水适量

首先，使固体配料过0.6mm目宽的筛。然后，将活性酰胺成分、乳糖、滑石粉、硬脂酸镁和一半淀粉混合均匀。另一半淀粉悬浮于65ml中，将该悬浮液加入到沸腾的聚乙二醇的260ml水中。所得糊状物加入到粉状物料中，然后将全部配料混合并制粒，必要时加入水。颗粒在35℃干燥过夜，过1.2mm目宽的筛并压制成直径约为10mm的片剂，所得片剂两面均为凹面并在其上面具有刻痕。

5.21实施例21 100mg明胶胶囊剂

可以按照以下方式制备明胶干充填胶囊，每粒胶囊含有100mg(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺：

组成(对于1000粒)

微晶纤维素 30.0g

十二烷基硫酸钠 2.0g

硬脂酸镁 8.0g

将十二烷基硫酸钠通过0.2mm目宽的筛加到(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺中，将这两种组分充分混合10分钟。然后，将微晶纤维素过0.9mm目宽的筛加入其中，再将所有组分再充分混合10分钟。最后，将硬脂酸镁通过0.8mm宽的筛加入其中，再混合3分钟后，将混合物分别充填0号(长型)明胶干充填胶囊中，每粒胶囊填充140mg。

5.22实施例22 注射液

例如，可以按照以下方式制备0.2％注射液或输注液：

(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺 5.0g

氯化钠 22.5g

磷酸缓冲液pH 7.4 300.0g

去离子水至2500.0ml

将(1S)-N-{2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基-苯基)-2-甲磺酰基-乙基]-3-氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-4-基}-2，2-二甲基-丙酰胺溶于1000ml水中，然后通过微型过滤器过滤。加入缓冲液，然后加水使总体积达到2500ml。为了制备单位剂型，每支玻璃安瓿中灌入1.0ml或2.5ml(每支各含2.0mg或5.0mg酰胺)。

2003年10月14日提交的共同未决美国申请10/685,942的全部内容引入本文作为参考。美国申请10/685,942是2000年11月8日提交的美国申请09/708,199(现在是美国专利6,667,316)的连续申请，后者是2000年6月8日提交现已放弃的美国申请09/590,344的部分连续申请，其中要求了1999年11月12日提交的美国临时申请60/165,158的优先权，它们的全部内容均引入作为参考。

本说明书中引用的所有出版物和专利申请都通过引用结合到本文中，其程度如同每个出版物或专利申请各自通过引用结合到本文中一样。尽管通过详细说明和实施例描述了上述发明以达到清楚阐明的目的，但是对本领域所属技术人员来说，根据本发明的公开内容，在不偏离所附权利要求书的精神和范围的情况下，对本发明进行某些改变和修改是显而易见的。

Claims

1.化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述化合物是：

2.化合物或其药学上可接受的立体异构体，其中所述化合物是：

3.化合物或其药学上可接受的前药，其中所述化合物是：

4.药物组合物，其包含权利要求1、2或3的化合物。

5.如权利要求4所述的药物组合物，其还包含药学上可接受的载体或赋形剂。

6.包含权利要求1、2或3的化合物的剂型。

7.如权利要求6所述的剂型，其适于口服或肠胃外给予。

8.抑制患者PDE4的方法，其包括给予所述患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

9.调节患者TNF-α产生的方法，其包括给予患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

10.治疗、预防或控制患者的不希望有的血管生成的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

11.治疗、预防或控制患者的癌症的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述癌症是实体肿瘤或血源性肿瘤。

13.如权利要求11所述的方法，其中所述癌症是皮肤癌、淋巴结癌、乳腺癌、宫颈癌、子宫癌、胃肠道癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、结肠癌、直肠癌、口腔癌、脑癌、头颈部癌、咽喉癌、睾丸癌、肾癌、胰腺癌、骨癌、脾脏癌、肝癌、膀胱癌、喉癌、或鼻道癌。

14.治疗、预防或控制患者的疾病或紊乱的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物，其中所述疾病或紊乱是炎性疾病、自身免疫性疾病、关节炎、类风湿性关节炎、炎性肠病、帕金森病、克罗恩病、口疮性溃疡、恶病质、移植物抗宿主病、哮喘、成人呼吸窘迫综合征、肺部炎症、抑郁症、慢性阻塞性肺病、炎性肠病、特应性皮炎、银屑病或获得性免疫缺陷综合征。

15.治疗、预防或控制患者哮喘的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

16.如权利要求15所述的方法，其中化合物通过吸入器给予。

17.治疗、预防或控制患者的多发性硬化的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

18.治疗、预防或控制患者的心脏病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

19.治疗、预防或控制患者的慢性阻塞性肺病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

20.治疗、预防或控制患者的炎性肠病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

21.治疗、预防或控制患者的特应性皮炎的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

22.治疗、预防或控制患者的克罗恩病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

23.治疗、预防或控制患者的类风湿性关节炎的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

24.治疗、预防或控制患者的复杂局部性疼痛综合征的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

25.治疗、预防或控制患者的骨髓增生性疾病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

26.治疗、预防或控制患者的骨髓增生异常综合征的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

27.治疗、预防或控制患者的中枢神经紊乱的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

28.治疗、预防或控制患者的黄斑变性的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

29.治疗、预防或控制患者的石棉相关疾病或紊乱的方法，所述方法包括给予需要这种治疗、预防或控制的患者有效量的权利要求1、2或3的化合物。

30.2-[1-(3-乙氧基-4-甲氧基苯基)-2-甲磺酰基乙基]-4，5-二硝基异吲哚啉-1，3-二酮的盐酸盐。