具体实施方式
本发明中的鱼鳞骨胶原肽是从来自鱼鳞的骨胶原得到的肽,其平均分子量是1,000~10,000,优选苏氨酸的含量为2.5~4.5质量%(氨基酸组成比,相对全部氨基酸的质量%)、丝氨酸的含量为2.5~4.5质量%(氨基酸组成比、相对全部氨基酸的质量%)。
本发明中可以使用的鱼鳞骨胶原肽的来源没有特别限定,例如,作为鱼鳞,可以列举罗非鱼或加吉鱼等的属于鲈鱼目的鱼、沙丁鱼等的属于鲱鱼目的鱼、鲑鱼等属于鲑鱼目的鱼、鲤鱼等属于鲤鱼目的鱼、狭鳕等属于鳕鱼目的鱼、针鱼等属于颌针鱼(ダツ)目的鱼、鲽鱼等属于鲽鱼目的鱼。
作为本发明中使用的鱼鳞骨胶原肽,可以使用加水分解骨胶原蛋白或作为骨胶原蛋白的热改性物的明胶的物质。骨胶原蛋白或明胶的加水分解,没有特别的限制,可采用利用加水分解酶的方法,也可以利用酸或碱进行加水分解。酶、酸或碱处理的条件(例如,基质的浓度、酶量、处理温度、pH或时间等),可以在实验中设定各种最佳的或适合的条件。作为在鱼鳞骨胶原蛋白的加水分解中使用的酶,使用食品卫生上无害的酶即可,没有特别限定,例如,可以列举来自细菌、放线菌或真菌等的胶原酶。此外,通过基因组合转换技术生产为其它菌体的物质,因此也可以是具有类似的基质专一性的酶,通过这些微生物发酵也是有效的。再者,还可以单独或组合使用其它的蛋白质加水分解酶。
鱼鳞骨胶原肽可以是精制的物质,也可以是不进行精制的物质。例如,也可以是与其它的骨胶原或明胶的分解生成物等的混合物。
本发明的食品组合物的每日摄取量没有特别限制,优选在0.1~6g/日的范围摄取鱼鳞骨胶原肽。此外,每日的摄取次数优选为1~4次。
在本发明的美容用食品组合物中,还可以配合抗坏血酸、及氨基葡糖和/或透明质酸。
抗坏血酸是骨胶原的构成成分羟脯氨酸的生成过程中的必须成分。本发明中使用的抗坏血酸,可以是抗坏血酸、抗坏血酸衍生物或它们的盐。作为抗坏血酸衍生物,可以列举抗坏血酸硬脂酸酯等的脂肪酸酯、抗坏血酸磷酸酯等的抗坏血酸无机酸酯等。作为盐,可以列举钠盐、钾盐等的碱金属盐。
氨基葡糖等的氨基糖或透明质酸、硫酸软骨素等的粘多糖,认为具有提高真皮的保湿性的效果。
本发明中使用的氨基葡糖,也可以是氨基葡糖或其盐。此外,也可以使用将氨基葡糖乙酰化得到的N-乙酰氨基葡糖。氨基葡糖在体内被合成为透明质酸,由此可提高皮肤的保湿性。因此,也可以配合透明质酸或其盐取代氨基葡糖。作为氨基葡糖或透明质酸的盐,可以列举硫酸盐、盐酸盐等的无机酸盐;乙酸盐、柠檬酸盐、苹果酸盐等的有机酸盐。
本发明的食品组合物中的鱼鳞骨胶原肽、抗坏血酸、氨基葡糖和/或透明质酸的含量,可以根据其用途任意地设定,但作为食品组合物中1次的摄取量,优选含有100~50,000mg鱼鳞骨胶原肽、10~1,000mg抗坏血酸、1~1,000mg氨基葡糖和/或透明质酸,特别优选含有1,000~10,000mg鱼鳞骨胶原肽、10~100mg抗坏血酸、1~100mg氨基葡糖和/或透明质酸。
此外,根据需要,可以配合精氨酸。精氨酸是一氧化氮(NO)的底物,通过摄取精氨酸在体内产生NO,以促进皮肤的再生。
精氨酸在食品组合物中1次的摄取量为1~1,000mg,优选含有1~50mg。
作为本发明中可并用的其它成分,可以列举例如碳水化合物、蛋白质、氨基酸、矿物质类和/或维生素类等,没有特别限定。
本发明提供的美容用食品组合物或骨胶原制剂,特征在于含有鱼鳞骨胶原肽。这里,所谓“含有”,意指可以根据期望的目的和用途含有载体,也包含含有可并用的其它成分的情况。
本发明中所谓“食品组合物”,包括健康食品、功能性食品、特定保健用食品、病人用食品等。“食品组合物”在以人以外的哺乳动物为对象使用时,也可以具有饲料的含义。
“食品组合物”的形态没有特别的限制,例如,可以为饮料的形态。因此,根据本发明的其他形态,本发明的食品组合物以饮料的形态提供。
本发明的食品组合物,可以由本领域中通行的方法制造。鱼鳞骨胶原肽可以在该制品的制造工序中或最终制品中添加,在制造工序中有改性鱼鳞骨胶原肽的工序时,也可以在该工序后添加鱼鳞骨胶原肽。
此外,本发明的食品组合物,其有效成分是鱼鳞骨胶原肽,因此,对可以安全的用于哺乳动物(例如人、小鼠(mouse)、大鼠(rat)、兔、犬、猫、牛、马、猪、猴等)。
本发明的食品组合物,还可以单独配合在食品中或含有其它成分配和在食品中。本发明的食品组合物,骨胶原成分的吸收效率和体内利用率高,因此可以作为日常摄取的食品提供,或作为增补摄取的健康食品、功能性食品等提供。
以其原装使用本发明的食品组合物,或在食品中配合使用时,上述食品组合物可以作为提高肌肤的保湿性能、皮肤的弹性的改善皮肤状态的美容用品使用。本发明的食品组合物,可以作为适用于期望提高肌肤的保湿性能、皮肤弹性等的改善皮肤状态效果的消费者的食品提供,或作为适用于在意这些症状的消费者的食品、例如作为特定保健用食品提供。
作为这样的食品的具体例子,可以列举饮料、粉末饮料、浓饮料、药片、烤制点心、汤、汉堡包、粉末状食品、胶囊状食品、果冻、咖喱食品、面包、红肠、酸乳酪、干酪、巧克力、口香糖、果酱、冰淇淋等,但没有特别限定于这些。在本发明的食品组合物中,可以将由本发明产生的有效成分以其原状配合在食品中。
在这样的食品中,可以适当配合保存料、着色料、甜味料、抗氧化剂、增稠稳定剂、乳化剂、调味料、防腐剂等。
本发明中,含有鱼鳞骨胶原肽的骨胶原制剂中,适当使用药学中允许使用的载体,例如赋型剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、稀释剂、缓冲剂、增稠剂、稳定剂、乳化剂、分散剂、悬浊剂、防腐剂、添加剂、着色剂、香料等,优选制成为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂等的口服制剂,或注射剂等的非口服制剂。
此外,本发明的骨胶原制剂中,除鱼鳞骨胶原肽以外,可以适当配合上述的抗坏血酸、氨基葡糖和/或透明质酸、精氨酸等。这些成分的配合量、摄取量与上述食品组合物的情况相同。
本发明中,鱼鳞骨胶原肽的有效给药量通常优选为0.1~6g/日(成人)。此外,本发明的骨胶原制剂的每日的给药次数优选为1~4次。
此外,根据本发明的其它形态,提供鱼鳞骨胶原肽的使用,制造可以提高骨胶原成分的吸收效率,具有提高肌肤保湿性能、皮肤弹性等的皮肤状态的改善效果的美容用食品组合物和骨胶原制剂。
实施例
接着,列举实施例更具体的说明本发明,但本发明不限定于以下的实施例。
实施例1
将平均分子量5,000的来自鱼鳞的骨胶原肽(新田肽生产)作为肽A。
实施例2
将含有20重量%肽A的水溶液作为食品1。
比较例1
将平均分子量5,000的来自鱼皮的骨胶原肽(ニツピ生产)作为肽B。
比较例2
将平均分子量5,000的来自猪皮的骨胶原肽(新田肽生产)作为肽C。
比较例3
将含有20重量%肽B的水溶液作为食品2。
比较例4
将含有20重量%肽C的水溶液作为食品3。
试验例1-1
在6N-HCl中溶解肽A、肽B及肽C,真空下、120℃、加水分解8小时。将加水分解的样品供给HPLC-支柱OPA荧光分析,表1显示得到的羟脯氨酸(Hyp)量。
表1
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实施例1 |
比较例1 |
比较例2 |
肽A |
肽B |
肽C |
Hyp |
11.26 |
8.50 |
13.10 |
全部氨基酸 |
100 |
100 |
100 |
与肽C的Hyp量的比例 |
0.86 |
0.65 |
1 |
试验例1-2
采用5名健康正常人为志愿者,以以下所示的方法进行骨胶原的吸收效率评价。
对各志愿者,作为饮食限制从试验前一日限制摄取含骨胶原多的食物。摄取前采血前的12小时进晚餐,此后只可饮水。绝食12小时后,进行摄取前采血,体重65kg左右的使之摄取含有25g肽A量的食品1。分别在摄取食品1的0.5、1、2、4、7、24小时后采取7mL的血液。试验中,禁止在摄取3小时后的白天进食并禁止在摄取8小时后的晚间进食以及摄取矿泉水以外的物质。
从采取的血液得到血浆,此后加入乙醇、进行除蛋白。加水分解该血浆样品,通过柱LiChoroCART Superpher 100 RP-18(e)(4.0mm×250mm、5μm)、柱温:43℃、测定波长:254nm、移动相:A液150mM乙酸铵·5%乙腈溶液(pH6.0)(为游离型氨基酸时)或80mM乙酸铵·5%乙腈溶液(pH5.0)(肽型氨基酸)、B液:乙腈∶水(6∶4)的梯度进行的HPLC分析游离型Hyp量和肽型Hyp量。
制成5名被试验者的游离型Hyp和肽型Hyp量的平均值的图表,分别求出曲线下的面积(AUC),算出游离型Hyp量和肽型Hyp量的比例,示于表2。
以游离型Hyp量和肽型Hyp量的比例(表2)和在总氨基酸中占有的Hyp的组成比(表1)为基础,从以下的式1算出相对食品3的游离型Hyp量和肽型Hyp量的比例,示于表3。
食品2与食品3中,都针对同一被试验者,放置从对食品1的试验开始6日以上的期间,与食品1同样评价骨胶原的吸收效率。表2与表3分别显示其结果。
表2
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实施例2 |
比较例3 |
比较例4 |
食品1 |
食品2 |
食品3 |
AUG(g) |
(%) |
AUG(g) |
(%) |
AUG(g) |
(%) |
游离型Hyp |
0.17667 |
66.3 |
0.10826 |
69.0 |
0.17499 |
73.5 |
肽型Hyp |
0.08965 |
33.7 |
0.04857 |
31.0 |
0.06293 |
26.5 |
总Hyp |
0.26632 |
100.0 |
0.15683 |
100.0 |
0.23792 |
100.0 |
[式1]
表3
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实施例2 |
比较例3 |
比较例4 |
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食品1 |
食品2 |
食品3 |
游离型Hyp |
117.4 |
95.2 |
100 |
肽型Hyp |
165.7 |
118.7 |
100 |
总Hyp |
130.2 |
101.4 |
100 |
从表1的结果可知,相比于肽C,肽A在全部氨基酸中占有的Hyp的比例少。另一方面,从表3的结果可知,相比于摄取食品2和食品3的群,摄取含有肽A的食品1的群血中的总Hyp量多。即,可知肽A与Hyp量少无关、在血中检出大量Hyp。这些结果意味着,与鱼皮骨胶原肽(肽B)、猪皮骨胶原肽(肽C)相比、鱼鳞骨胶原肽(肽A)的骨胶原吸收效率和体内利用率高。
此外,从表2和表3的结果可知,相比于摄取食品2和食品3的群,摄取含有肽A的食品1的群,尤其是肽型Hyp被大量检出。
实施例3
以5,000mg平均分子量5,000的来自鱼鳞的骨胶原肽(新田肽生产)、50mg维生素C和60mg氨基葡糖的比例混合,制造粉末剂。将该粉末剂作为食品4(上述用量为1次量)。
试验例2
采用25名健康正常女性为志愿者,以以下所示的内容进行提高肌肤保湿性、提高皮肤的可逆性·弹性等的皮肤状态改善的评价。
对各志愿者,作为饮食限制从试验前一日限制摄取含骨胶原多的食物。食品4的摄取,1日1次、连续地每日摄取6周。测定在摄取前(第0周)、摄取后(摄取第6周)实施。此外,为了在测定时保持一定的环境,在室温23℃、湿度40%的恒温室中安静地等待30分钟以上后进行测定。
使用Corneometer(Courage+Khazaka Elctrotic Gmbh)、以低频电容法测定皮肤角质层的水分量。测定在脸颊部位、上腕内侧部位、颈背部位3处进行。此外,将其改善程度以“食品摄取后(II)-食品摄取前(I)”表示。表4显示这些结果。
表4
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摄取的食品 |
测定部位 |
皮肤角质层的水分量 |
改善程度 |
食品摄取前(I) |
食品摄取后(II) |
实施例3 |
食品4 |
脸颊部位 |
65.75±10.75 |
68.84±10.43 |
3.09 |
上腕内侧部位 |
46.99±7.17 |
52.21±9.38 |
5.22 |
颈背部位 |
64.51±10.90 |
68.92±9.56 |
4.41 |
平均值±标准偏差
使用Cutometer SEM575(Courage+Khazaka Elctrotic Gmbh)测定皮肤的柔软性与弹性。测定在脸颊部位进行,动作模式以T模式、以2mm直径探针进行。得到的数据,以在减压吸引时的变位量(mm)为皮肤柔软性、吸引后的返回弹性(%)为皮肤弹性。此外,将其改善程度以“食品摄取后(IV)-食品摄取前(III)”表示。这些结果示于表5。
使用Visioscan(Courage+Khazaka Elctrotic Gmbh)测定皮肤的光滑度、皮肤皱纹数和宽度、皮肤的粗糙度。测定对脸颊部位进行,以特殊的紫外线抗原照射皮肤表面,以高性能CCD照相机摄入其图像、数字化处理图像,①皮肤的光滑度:由皱纹的宽和深度算出;②皮肤皱纹数和宽度:从皮肤的垂直方向、水平方向的纹理或皱纹数和宽度算出;③皮肤的粗糙度:通过计算设定点以上的暗点在全部图像中所占的比例算出。此外,将其改善程度以“食品摄取前(III)-食品摄取后(IV)”表示。这些结果示于表5。
表5
|
摄取的食品 |
测定项目 |
食品摄取前(III) |
食品摄取后(IV) |
改善程度 |
实施例3 | 食品4 |
皮肤柔软性 |
0.151±0.051 |
0.253±0.137 |
0.102 |
皮肤弹性 |
0.662±0.068 |
0.698±0.073 |
0.036 |
皮肤的光滑度(SEsm) | 25.79±3.45 | 24.40±2.86 | 1.39 |
皮肤皱纹数和宽度(SEw) |
34.96±3.72 |
33.95±2.34 |
1.01 |
皮肤的粗糙度(SEr) |
0.796±0.648 |
0.635±0.409 |
0.161 |
平均值±标准偏差
从表4与表5的结果可以确认,通过摄取本发明的食品组合物,显示出提高肌肤保湿性,皮肤柔软性、弹性的皮肤状态改善的优异的美容效果。
制造例1(饮料)
混合3重量份鱼鳞骨胶原肽、2重量份桃汁、0.3重量份白葡萄酒(醇度15)、5重量份砂糖、0.3重量份柠檬酸、0.05重量份柠檬酸钠、89.35重量份水,在90℃加热5分钟,得到加入骨胶原肽的饮料。
制造例2(骨胶原肽颗粒)
在流动层造粒机中在65℃加入、混合69重量份鱼鳞骨胶原肽粉末、23重量份蔗糖、0.5重量份氨基葡糖、0.5重量份精氨酸,同时喷雾20重量份溶解有30重量%的鱼鳞骨胶原肽的粘合剂液,进行造粒。喷雾结束后,在85℃、干燥至水分为1重量%,得到骨胶原肽颗粒。