CN101007842A - 一种t4合成产物及其用途 - Google Patents

一种t4合成产物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN101007842A
CN101007842A CN 200610002074 CN200610002074A CN101007842A CN 101007842 A CN101007842 A CN 101007842A CN 200610002074 CN200610002074 CN 200610002074 CN 200610002074 A CN200610002074 A CN 200610002074A CN 101007842 A CN101007842 A CN 101007842A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lys
branch
functional
thr
arg
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN 200610002074
Other languages
English (en)
Other versions
CN100503634C (zh
Inventor
韩苏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Yuansen Kangtai Pharmaceutical Research Co., Ltd.
Original Assignee
韩苏
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 韩苏 filed Critical 韩苏
Priority to CNB2006100020744A priority Critical patent/CN100503634C/zh
Publication of CN101007842A publication Critical patent/CN101007842A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100503634C publication Critical patent/CN100503634C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及应用一种人工合成的功能性4分支多肽产物，(Thr－Lys－Pro－Arg－AAN)4－(Lys－AAN)2－Lys－AAN其中AA为天然氨基酸肽链，N为自然数。该分支多肽合成产物具有综合提高机体的免疫能力的功效，可制备成临床用于抗感染和抗肿瘤的治疗用药。

Description

一种T4合成产物及其用途
技术领域
本发明涉及应用一种人工合成的功能性4分支多肽产物，该多肽合成产物具有提高机体免疫能力的功效，具有开发成为抗感染和抗肿瘤的临床药物潜力。本发明属于医药领域。
技术背景
脾脏是机体的一个重要的器官，它担负着造血、储血、内分泌和免疫的生理功能。脾脏产生一种结构为N-苏氨酸-赖氨酸-脯氨酸-精氨酸-C的短肽具有强烈的抗感染和抗肿瘤的作用。该短肽具有能迅速特异性地与巨噬细胞、单核细胞的结合，增加其活性和与T淋巴细胞的接触，从而提高巨噬细胞对外来入侵者或自身变异细胞的杀伤作用，提高自然杀伤细胞(NK细胞)的活性，促进T淋巴细胞的细胞毒作用，使机体T淋巴细胞和其它免疫细胞增强识别和杀伤外来入侵病原体或自身变异的细胞(如肿瘤细胞)的能力。因此该短肽在临床上具有重要的抗感染和抗肿瘤的应用价值。
发明内容
由N-苏氨酸-赖氨酸-脯氨酸-精氨酸-C(N-Thr-Lys-Pro-Arg-C)短肽作为功能肽段可通过人工多肽合成的途径制备。由于该功能肽段分子小，作为药物进入体内后易降解而难以达到预期的药效。为了达到保留功能肽段的药效、提高药效、提高其在体内代谢的半衰期，所以对该功能肽段做结构设计上的改进。
利用固相多肽合成的技术，可将赖氨酸联接在固相树脂上，在此基础上继续联接赖氨酸。由于赖氨酸含有两个氨基，可以在一个赖氨酸的2个氨基上进行氨基酸的缩合联接形成分支多肽。联接2轮赖氨酸可形成4分支骨架，联接3轮赖氨酸可形成8分支的骨架。最后将合成的分支多肽从树脂上断裂下来。
Figure A20061000207400041
合成的分支多肽可以是以下几种结构形式：
1.将N-苏氨酸-赖氨酸-脯氨酸-精氨酸-C(N-Thr-Lys-Pro-Arg-C)功能肽段与4分支多肽骨架(Multipal Antigen peptide，MAP4)上的分支末端联接。可自主合成或购买商品化的4分支多肽骨架(MAP4)，通常采用Fmoc或Boc的合成方式将功能肽段在多肽骨架的分支末端序列合成，产生含有N-Thr-Lys-Pro-Arg-C肽段的功能性4分支多肽合成产物(Thr-Lys-Pro-Arg)4-(Lys)2-Lys。
2.N-Thr-Lys-Pro-Arg-C功能肽段与多肽骨架的分支末端之间可通过由N个天然氨基酸(AA)形成的肽链相连(Thr-Lys-Pro-Arg-AAN)4-(Lys)2-Lys，N为自然数。由此方式产生的功能性4分支多肽合成产物的目的是为了减少功能肽段与骨架之间可能产生的空间位阻效应。
3.在多肽骨架的分支末端上将多个功能肽段线性地合成出来，如(Thr-Lys-Pro-Arg-Thr-Lys-Pro-Arg-)4-(Lys)2-Lys而产生的功能性4分支多肽合成产物。此方式可能会提高该多肽产物的功能。
4.与功能肽段相连的4分支多肽骨架与固相树脂之间可通过N个天然氨基酸(AA)形成的肽链相连，经与树脂断裂而产生的功能性4分支多肽合成产物(Thr-Lys-Pro-Arg)4-(Lys)2-Lys-AAN，N为自然数。此合成方式是为了减少骨架分子与固相树脂之间可能产生的空间位阻效应。
5.功能肽段与4分支骨架形成的(Thr-Lys-Pro-Arg-AAN)4-(Lys-AAN)2-Lys-AAN，AA为N个天然氨基酸连接成的肽链，N为自然数。增加N个天然氨基酸肽链作联接是为了减少功能肽段之间的空间位阻效应。
根据以上设计通过多肽合成的方式制备而成的功能性4分支多肽产物具有提高机体免疫能力的功效。合成产物可成为兽用药，用于提高家畜的免疫能力，作为免疫增强剂治疗传染病和提高对疾病的抵抗力。
合成产物还可开发成为临床用药，用于提高病人免疫抗病能力，作为免疫增强剂可用于抗感染、抗病毒和对肿瘤的预防和治疗。
经过纯化后的合成产物纯度可超过98％以上，符合国家食品药品监督管理局对药品注册的纯度质量要求。将该合成产物作为主药原料经过注射用水的溶解，通过无菌过滤灌装到无菌、无内毒素、无热源的药用安瓿瓶或西林瓶中。灌装后可直接封口成为水针剂型或经过冷冻干燥后封口成为冻干粉针剂型。该合成产物的灌装量可根据治疗需求来确定，灌装规格可在50ug-2mg/ml/瓶范围之间。给药途径可为口服或体内注射，注射方式可为1次/天至1次/周，给药剂量可为250ug/次或2mg/次，12周为一个疗程，或可根据病情调整使用剂量和治疗方案。
由于本药物是多肽药物，降解产物为游离氨基酸可直接被机体吸收利用，所以毒副作用小，安全性好，并且使用剂量小，疗效高，在临床上可成为抗感染和抗肿瘤的治疗药物。
具体实施方式
一.【剂型】注射用冻干粉针。
   【规格】1mg/安瓿。
处方组成：
原辅料 用量
合成产物甘露醇磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)注射用水加至 1g50g0.796g1.755g1000ml
共制成 1000瓶
制备工艺：
溶液配制：在100级无菌室内操作。
磷酸缓冲液的配制：
①0.2mol/L NaH2PO4：准确称取磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)17.8g，加注射用水溶解并定溶至500ml，摇匀，备用；
②0.2mol/L Na2HPO4：准确称取磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)35.82g，加注射用水溶解并定溶至500ml，摇匀，备用；
③10mmol/L磷酸缓冲液(pH6.8)：取51ml 0.2mol/L NaH2PO4溶液、49ml 0.2mol/L Na2HPO4溶液混匀，并定溶至2000ml，用磷酸调pH值至6.8，备用。
药液配制：
按照配方准确称取处方量的甘露醇和合成产物，用10mmol/L磷酸缓冲液(pH6.8)溶解并定溶至1000ml。准确称取配制液体积0.2％(W/V)的活性碳，加入上述溶液中，搅拌15分钟；取上述溶液粗滤两遍脱炭，再用0.2μm微孔滤膜进行正压无菌过滤，4℃存放备用。
分装与冷冻：
在无菌室内操作；取上述精滤液测定含量，调整装量，取1ml分装于3ml药用安瓿瓶中；制品20℃入冷冻干燥机，预冻3小时使制品温度至-40℃(板温预先冷至-20℃)，保温1小时，制冷冷凝器温度至-55℃；开启真空泵，使干燥箱内真空度达到8.0×10-2mBar左右，对板层加热升温，每小时升温5℃；6小时后板温至10℃恒定，品温随板温约每小时升温3℃，真空度维持在6.0×10-2mBar左右，约干燥8小时，品温至共熔点-15℃左右，制品水层消失；而后对板层继续加热升温，速率为每小时5℃，7小时后板温至25℃，品温约经14小时至25℃，保温3小时，干燥箱极限真空度为6.0×10-2mBar左右；停机，将安瓿封口即得。
工艺验证：
按照处方制备工艺，制备三批注射用冻于粉针，考察成品的合格率需大于90％。随机抽样检测成品的理化性质、有关物质、含量、热源、细菌的含量。
要求不同批次的制剂含量与标示量基本一致，有关物质在制备前后无明显变化，无菌、无热源、血管刺激性、溶血性及过敏性试验均为阴性。
原辅料的来源及质量规格：
原辅料     质量规格         来源    用途
合成产物甘露醇磷酸二氢钠磷酸氢二钠注射用水针用活性炭     符合暂定标准CP.2000 89页CP.2000 1058页GB1263-86CP.2000 428页CP.2000 465页  自制北京制药厂苏州中化药品有限公司苏州中化药品有限公司北京制药厂北京大力活性炭厂   主药支撑剂缓冲盐缓冲盐溶剂吸附剂
包装规格：成品为白色冻干粉针，1mg/安瓿，10安瓿/盒
储存：2-8℃避光保存，有效期3年。
二.【剂型】注射用水针。
   【规格】1mg/ml/安瓿。
处方组成：
原辅料 用量
合成产物注射用水加至 1g1000ml
共制成 1000瓶
制备工艺：
溶液配制：在100级无菌室内操作。
精确称量合成产物，取无菌注射用水将其溶解并定溶在1000ml。用0.2μm微孔滤膜进行正压无菌过滤后取1ml分装于3ml药用安瓿瓶中封口。
成品在包装时目测封口是否整齐光滑，做内容物的外观、色泽、澄明度检查。随机抽查成品完成装量、含量、有关物质，细菌、热源的检查需达到质检标准，血管刺激性、溶血性及过敏性试验均需为阴性。
包装规格：1mg/ml/安瓿，10支安瓿/盒。
保存：2-8℃避光保存，有效期1年。
制备方法可做适当变通而不必拘泥于此。
实施例1
动物药效学模型试验设置：
取6周龄的C57小鼠，雌雄不限，体重在18克之间，设置对照组、先导物组、改构组，每组10只小鼠。在小鼠前肢肩胛皮下种植1×106个小鼠黑色素细胞瘤(B16瘤株)，7天后可观察到出现黄豆大肿瘤开始给药，持续每周1次，按照1ug/g体重向小鼠皮下注射药物，对照组为生理盐水。先导物组为N-Thr-Lys-Pro-Arg-C多肽产物，改构组为N-Thr-Lys-Pro-Arg-C的4分支多肽合成产物。给药4周后结束试验。测定各组动物的瘤重。
抑瘤试验结果：
    组别     给药剂量   试验结束瘤重(g)
    对照组(生理盐水)     200ul/只     5.34±1.838
    先导物组     1ug/g体重     3.90±2.614
    改构组     1ug/g体重     0.664±0.337
试验结束各组小鼠未出现死亡，无体重下降。解剖未见肿瘤组织液化和呈现异常。
抑瘤率的计算公式：(对照组瘤重-改构组瘤重)/对照组瘤重＝87.56％
P＜0.001
结果评价：改构产物比先导物明显提高了抑瘤效果。
实施例2
肿瘤切除的术后病人给予本合成药物冻干粉针(1mg/安瓿)皮下注射。剂量为1mg/次/周，12周为一个疗程。可将安瓿内的药物用1ml注射用水溶解，用注射器将溶液抽出安瓿后再为病人进行皮下注射。密切观察病人的反应状况，如发现病人出现心悸、出汗、乏力、震颤等症状应立即停止注射。

Claims (8)

1.一种含有由N-苏氨酸-赖氨酸-脯氨酸-精氨酸-C(N-Thr-Lys-Pro-Arg-C)组成的功能肽段，该功能肽段与4分支多肽骨架-(Lys)2-Lys-或采购的商品化的4分支骨架(Multipal Antigen peptide，MAP4)上的分支末端联接而产生的功能性4分支多肽合成产物(Thr-Lys-Pro-Arg)4-(Lys)2-Lys。
2.功能肽段与4分支多肽骨架的分支末端之间可通过由N个天然氨基酸(AA)形成的肽链相连产生功能性4分支多肽合成产物(Thr-Lys-Pro-Arg-AAN)4--(Lys)2-Lys，N为自然数。
3.多个功能肽段可线性地相连再与4分支多肽骨架的分支末端联接产生的功能性4分支多肽合成产物。
4.与功能肽段相连的4分支多肽骨架与固相树脂之间可通过N个天然氨基酸(AA)形成的肽链相连，经与树脂断裂而产生的功能性4分支多肽合成产物(Thr-Lys-Pro-Arg)4-(Lys)2-Lys-AAN，N为自然数。
5.功能肽段与4分支骨架形成的(Thr-Lys-Pro-Arg-AAN)4-(Lys-AAN)2-Lys-AAN，AA为N个天然氨基酸连接成的肽链，N为自然数。
6.制备的功能性4分支多肽合成产物具有耐降解和提高机体免疫能力的功效，可制备成口服用药或注射用药用于提高机体的免疫能力。
7.可制备成兽用药，作为免疫增强剂用于治疗传染病和提高抵抗力。
8.可制备成临床用药，作为免疫增强剂用于抗感染、抗病毒和对肿瘤的预防和治疗。
CNB2006100020744A 2006-01-24 2006-01-24 一种t4合成产物及其用途 Expired - Fee Related CN100503634C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006100020744A CN100503634C (zh) 2006-01-24 2006-01-24 一种t4合成产物及其用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006100020744A CN100503634C (zh) 2006-01-24 2006-01-24 一种t4合成产物及其用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101007842A true CN101007842A (zh) 2007-08-01
CN100503634C CN100503634C (zh) 2009-06-24

Family

ID=38696533

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2006100020744A Expired - Fee Related CN100503634C (zh) 2006-01-24 2006-01-24 一种t4合成产物及其用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100503634C (zh)

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101402677A (zh) * 2008-11-19 2009-04-08 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 一种四分肽及其应用
WO2010111910A1 (zh) * 2009-03-30 2010-10-07 北京元森康泰医药研究有限公司 一种合成肽及其应用
WO2011079817A1 (zh) * 2009-12-31 2011-07-07 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 Tuftsin和流感基质蛋白的树状聚合物及其应用
CN102190713A (zh) * 2010-03-12 2011-09-21 北京元森康泰医药研究有限公司 一种合成肽及其应用
CN103961685A (zh) * 2014-01-09 2014-08-06 中国人民解放军总医院第一附属医院 一种用于脓毒症治疗的t-肽免疫调节剂
WO2015169225A1 (zh) * 2014-05-07 2015-11-12 韩苏 四分支多肽化合物及其制备方法与应用
CN105504070A (zh) * 2016-01-29 2016-04-20 深圳市中美康士生物科技有限公司 一种四分支多肽及其应用
CN106119195A (zh) * 2016-06-16 2016-11-16 江苏安泰生物技术有限公司 一种用于诱导产生识别hpv的dc细胞的试剂盒以及诱导方法
CN107224582A (zh) * 2016-03-24 2017-10-03 韩震 免疫增强肽在制备通过粘膜给药的增强免疫功能药物中的应用

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101402677A (zh) * 2008-11-19 2009-04-08 中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所 一种四分肽及其应用
WO2010111910A1 (zh) * 2009-03-30 2010-10-07 北京元森康泰医药研究有限公司 一种合成肽及其应用
EP2415780A1 (en) * 2009-03-30 2012-02-08 Hebei Yuansen Pharmaceutical Co., Ltd. Synthetic peptide and uses thereof
EP2415780A4 (en) * 2009-03-30 2012-10-10 Hebei Yuansen Pharmaceutical Co Ltd SYNTHETIC PEPTIDE AND USES THEREOF
WO2011079817A1 (zh) * 2009-12-31 2011-07-07 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 Tuftsin和流感基质蛋白的树状聚合物及其应用
CN102190713A (zh) * 2010-03-12 2011-09-21 北京元森康泰医药研究有限公司 一种合成肽及其应用
CN103961685A (zh) * 2014-01-09 2014-08-06 中国人民解放军总医院第一附属医院 一种用于脓毒症治疗的t-肽免疫调节剂
CN103961685B (zh) * 2014-01-09 2016-05-11 中国人民解放军总医院第一附属医院 一种用于脓毒症治疗的t-肽免疫调节剂
WO2015169225A1 (zh) * 2014-05-07 2015-11-12 韩苏 四分支多肽化合物及其制备方法与应用
CN105504070A (zh) * 2016-01-29 2016-04-20 深圳市中美康士生物科技有限公司 一种四分支多肽及其应用
CN105504070B (zh) * 2016-01-29 2019-04-12 深圳市中美康士生物科技有限公司 一种四分支多肽及其应用
CN107224582A (zh) * 2016-03-24 2017-10-03 韩震 免疫增强肽在制备通过粘膜给药的增强免疫功能药物中的应用
CN106119195A (zh) * 2016-06-16 2016-11-16 江苏安泰生物技术有限公司 一种用于诱导产生识别hpv的dc细胞的试剂盒以及诱导方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN100503634C (zh) 2009-06-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN100503634C (zh) 一种t4合成产物及其用途
CN104994847B (zh) 美法仑氟灭酰胺的冻干制剂
CN102670497A (zh) 一种稳定的s-奥拉西坦注射用制剂及其制备方法
WO2002032399A1 (fr) Composition pharmaceutique pour le traitement du cancer combinant le taxol et un liposome ainsi que son procede de preparation
CN102351844B (zh) 泮托拉唑钠化合物及其药物组合物
CN101947234A (zh) 含有氨基葡萄糖制剂的制备方法及其应用
CN101007846A (zh) 一种t8合成产物及其用途
CN102423487A (zh) 一种骨关节保健组合物及其应用
CN101856335B (zh) 注射用阿奇霉素组合物冻干粉针
CN102512437A (zh) 一种脂溶性维生素注射液（i）和注射用水溶性维生素的药物组合物及其制法
US20040121949A1 (en) Composition comprising partly-hydrolysed fish gelatin and a method for treatment of a patient suffering from arthrosis, osteoporosis and other diseases
US10758578B2 (en) Herbal formulations of carnivorous plants and methods for treating inflammation
CN102018720B (zh) 一种复合维生素冻干粉针剂的制备方法
US20200384051A1 (en) Herbal formulations of carnivorous plants and methods for treating inflammation
CN101732263A (zh) 磷酸肌酸钠冻干制剂及其制备方法
CN107519136A (zh) 一种氯化琥珀胆碱冻干制剂及其制备方法
CN104511007B (zh) 一种脑蛋白水解物的制备方法
CN103622907B (zh) 一种布洛芬脂肪乳注射液及其制备方法
CN102429864A (zh) 一种脂溶性维生素注射液（ii）和注射用水溶性维生素的药物组合物及其制法
CN103462910A (zh) 一种注射用阿奇霉素组合物及其制备方法
CN102247373A (zh) 一种甲硫氨酸维b1化合物的组合物
CN101198350A (zh) 含胃动素样肽的稳定的缓冲的药物组合物
CN102499939A (zh) 一种注射用脂溶性维生素和注射用水溶性维生素的药物组合物及其制法
CN101940596A (zh) 一种新的制备脑蛋白水解物的方法
CN105125507B (zh) 一种埃索美拉唑钠注射用冻干粉组合物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: BEIJING ZHONGTIAN KANGTAI BIOLOGY TECHNOLOGY CO.,

Free format text: FORMER OWNER: HAN SU

Effective date: 20080704

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20080704

Address after: Room 807, design building, No. 8, Fu Xin East Street, Beijing, Chaoyang District, China: 100029

Applicant after: Beijing Zhongtian Kangtai Bio-Tech Co., Ltd.

Address before: Beijing City, Haidian District Institute of Road D China University of Mining and Technology No. 11 East two building 1-302 No. 100083 post encoding:

Applicant before: Han Su

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20090320

Address after: Room 807, design building, No. 8, Fu Xin East Street, Beijing, Chaoyang District, China: 100029

Applicant after: Beijing Zhongtian Kangtai biological science and Technology Co., Ltd.

Co-applicant after: Beijing Yuansen Kangtai Pharmaceutical Research Co., Ltd.

Address before: Room 807, design building, No. 8, Fu Xin East Street, Beijing, Chaoyang District, China: 100029

Applicant before: Beijing Zhongtian Kangtai Bio-Tech Co., Ltd.

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20090624

Termination date: 20180124