CN100528970C - 一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法。该方法的步骤为：采用亲水性有机溶剂从栀子中提取栀子黄色素、制成浸膏；经大孔吸附树脂富集纯化、制成栀子黄色素粗品；经热的乙酸乙酯萃取除去栀子苷和绿原酸等杂质、制成E₄₄₀ ^1% _1cm≥580、A₂₃₈/A₄₄₀≤0.25、A₃₂₀/A₄₄₀≤0.24的高色价栀子黄色素。本发明采用分离纯化集成技术制备高色价栀子黄色素，不仅制备工艺简单、分离纯化效率高，容易工业化生产，而且制备的栀子黄色素的色价和纯度高、生产成本低，解决了长期以来中国生产的栀子黄色素在储藏和使用过程中容易发生绿变和灰变的难题，具有较大的推广意义。

Description

一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法

技术领域

本发明涉及一种从植物中分离纯化天然色素的绿色化学制备方法，更具体涉及一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法。

背景技术

栀子为茜草科植物栀子(Gardenia jasminoides Ellis)的果实，具有茵胆、平肝、清热、止血、降压、止泻等作用，为我国大宗传统中药材，是卫生部颁布的首批药食同源材料之一，是中医临床治疗黄疸型肝炎的首选药物，也是提取天然栀子色素的原料，盛产于闽、浙、赣、徽、湘等省山区。

迄今为止，从栀子中分离鉴定出的化合物主要有水溶性类胡萝卜素、环烯醚萜苷类化合物、绿原酸、黄酮类、醇类化合物、栀子多糖等。其中，栀子黄色素是从栀子果实中提取的自然界唯一存在的水溶性类胡萝卜素类天然色素，具有着色力强、色泽鲜艳、色调自然柔和、稳定性好、溶解性强、无异味、无毒副作用、安全性能高等优点，广泛用于食品、果酒、饮料、医药、日用化工、化妆品等，是目前国际上流行的天然食品添加剂，是中草药行业、饮料食品工业、化妆品工业、药品工业不可缺少的天然色素原料。

栀子黄色素在欧美、日本等发达国家颇受欢迎，国际需求量以年均10％的速度在增长，在日本天然色素市场中排位第4。2005年日本高色价栀子黄色素(E₄₄₀ ^1％ _1cm≥220，A₂₃₈/A₄₄₀≤0.40)需求量为400吨，售价为人民币36万元/吨。2005年中国生产的栀子黄(E₄₄₀ ^1％ _1cm≤90、A₂₃₈/A₄₄₀≥1.5)总产量为180吨，且80％出口日本专供二次深加工。中国生产的栀子黄色素的A₂₃₈/A₄₄₀常高达2.0～3.0，其中栀子苷含量较高可达7～8％。日本生产的栀子黄色素可做到A₂₃₈/A₄₄₀0.25和A₃₂₀/A₄₄₀≤0.25。

目前，国际上使用的栀子黄色素仍是一种混合物，是以水溶性类胡萝卜素类的藏红花素(Crocin)和藏红花酸(Crocetin)为主要成分，还含有部分绿原酸和环烯醚萜苷类化合物(主要为栀子苷)等杂质。因此，栀子黄色素水溶液在紫外-可见光区内有三个吸收峰：238nm、320nm、440nm，分别是栀子苷、绿原酸、藏花素和藏花酸的特征吸收峰。国际上通常采用A₂₃₈/A₄₄₀和A₃₂₀/A₄₄₀作为衡量栀子黄色素绿变和灰变可能性的指标，A₂₃₈/A₄₄₀≤0.40可避免绿变的发生，A₃₂₀/A₄₄₀≤0.36可避免灰变的发生。

栀子苷是引起桅子黄色素绿变的主要因素，它在蛋白酶或β-葡萄糖苷酶的作用下易与伯氨基化合物发生反应生成栀子蓝色素。绿原酸在储藏和使用过程中容易被氧化，是引起桅子黄色素灰变的主要因素。为了有效防止绿变和灰变，获得高色价栀子黄色素，必须从提取和精制着手，尽可能地除去桅子黄色素中的栀子苷和绿原酸等杂质。

栀子苷和绿原酸易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂，难溶于乙醚、氯仿、四氯化碳等疏水性有机溶剂。栀子苷和绿原酸在热的乙酸乙酯中可溶、放冷后会析出。在紫外-可见光区域内，栀子苷和绿原酸的最大特征吸收峰分别为238nm和320nm。

以藏红花素和藏红花酸为主要成分的栀子黄色素易溶于水、乙醇等极性溶剂，难溶于乙酸乙酯、氯仿、乙醚、苯、石油醚、正己烷等非极性溶剂。藏红花素和藏红花酸在紫外-可见光区域内有三个吸收峰，400～500nm吸收峰很强，320～340nm吸收峰中等，250～260nm吸收峰很弱，因此，采用440nm作为藏花素和藏花酸的最大特征吸收峰时，栀子黄色素纯品的极限值为A₂₃₈/A₄₄₀≥0.20和A₃₂₀/A₄₄₀≥0.22。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，该制备方法采用亲水性有机溶剂提取、大孔吸附树脂富集和乙酸乙酯萃取除杂的分离纯化集成技术，从栀子中制备高色价栀子黄色素，不仅制备工艺简单、分离纯化效率高、容易工业化生产，而且制备的栀子黄色素的色价和纯度高、生产成本低。

本发明的一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法步骤为：

(1)栀子黄色素粗提物浸膏的制备：以栀子为原料，采用5～20倍栀子干重(W/W)的30～60％亲水性有机溶剂水溶液，于50～80℃条件下提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏；

(2)栀子黄色素粗品的树脂富集：浸膏经大孔吸附树脂吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用不少于3倍树脂量的15～30％的乙醇水溶液(V/V)洗去中等极性杂质，最后用3～9倍树脂量的40～70％亲水性有机溶剂水溶液(V/V)洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品；

(3)高色价栀子黄色素的纯化：50～70℃条件下，用3～10倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。

本发明的显著优点是：

一：本发明采用甲醇、乙醇、丙酮、丙醇或异丙醇中的一种或几种混合溶剂作为亲水性有机溶剂从栀子中提取栀子黄色素，优点1：甲醇、乙醇等亲水性有机溶剂的溶解性能好，对栀子细胞的穿透能力强，更容易渗透到栀子内部组织结构中，大大提高了栀子中栀子黄色素的溶出速率和提取效率；优点2：热的甲醇、乙醇等亲水性有机溶剂对栀子中栀子黄色素的溶解度很大，而对蛋白质、多糖、精油、无机盐等杂质的溶解度较小，更利于后续进一步的分离纯化获得色价和纯度较高的栀子黄色素。

二：本发明优先选用甲醇或丙酮作为亲水性溶剂的优点为：虽然甲醇、乙醇、丙酮、丙醇或异丙醇等亲水性有机溶剂的提取效果相当，但相对于其它亲水性有机溶剂而言，甲醇或丙酮的沸点更低、溶剂回收时能耗更小、回收率更高，能显著降低产品的制备成本。

三：本发明充分利用大孔吸附树脂对栀子黄色素的吸附力与对栀子苷、绿原酸、蛋白质、多糖、无机盐等杂质的吸附力的不同，以及在亲水性有机溶剂水溶液中，以藏红花素和藏红花酸为主要成分的栀子黄色素与栀子苷、绿原酸等杂质的溶解度差异，真正达到栀子黄色素与杂质的高效分离。

四：与已有的专利文献CN 1807441A采用硅胶柱层析纯化和ZL 200310111453.3采用聚酰胺柱层析分离等技术相比，本发明充分利用藏红花素和藏红花酸难溶于乙酸乙酯，而栀子苷和绿原酸在热的乙酸乙酯中可溶、放冷后会析出的特点，不采用柱层析技术，而直接采用乙酸乙酯萃取方式去除桅子黄色素中的栀子苷和绿原酸等杂质，获得高色价栀子黄色素，可大幅度降低栀子黄色素的绿变和灰变可能性，能解决长期以来中国国内生产的栀子黄色素在储藏和使用过程中容易发生绿变和灰变的难题，具有较大的推广性。

五：本发明组合采用亲水性有机溶剂提取、大孔吸附树脂富集和乙酸乙酯萃取除杂的集成技术，能工业化生产高色价栀子黄色素，具有理论新颖、技术合理、操作安全、工艺简便、经济可行、环境友好等优点。

具体实施方式

按照本发明内容所述的方法步骤实施从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素。

其中，步骤(2)中所述的中等极性杂质为环烯醚萜苷类化合物、绿原酸或黄酮。

所用的亲水性有机溶剂可以是甲醇、乙醇、丙酮、丙醇或异丙醇中的一种或几种混合溶剂，优先选用甲醇或丙酮。

所用的大孔吸附树脂的骨架的化学组成可以是聚苯乙烯和聚丙烯酸中的一种或两种。

最终分离纯化获得的栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm≥580、A₂₃₈/A₄₄₀≤0.25、A₃₂₀/A₄₄₀≤0.24。

栀子环烯醚萜苷类化合物是栀子苷、异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷或栀子酸中的一种或几种化合物。

栀子黄色素是藏红花酸、藏红花素1、藏红花素2或藏红花素3中的一种或几种化合物。

本发明各制备物的理化参数测定方法如下：

栀子黄色素、绿原酸和栀子环烯醚萜苷类化合物的含量采用紫外-可见三波长同时检测的高效液相色谱仪测定。测定条件：Agilent 1100型高效液相色谱仪(DAD二极管阵列检测器)，Waters Nova-Pak C18色谱柱(Φ3.9×150mm，5μm)，甲醇-0.2％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，在60min内甲醇比例从15％线性梯度升至100％，然后保持2min。流速1.0mL/min，柱温34℃，进样量20μL。栀子黄色素、绿原酸和栀子环烯醚萜苷类化合物的检测波长分别为440nm、320nm和238nm。

标准品：栀子苷、异栀子苷、栀子酸、京尼平龙胆二糖苷购于Yoneyama公司(日本)，藏红花酸购于Sigma公司，绿原酸、藏红花素购于中国药品生物制品检定所。

经测定，实验所用的福建柘荣产栀子(含水量3.8％)中栀子环烯醚萜苷类化合物、栀子黄色素和绿原酸等成分的含量分别为70.5g/kg、4.2g/kg和12.8g/kg，分离纯化获得的各种高色价栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm≥580、A₂₃₈/A₄₄₀≤0.25、A₃₂₀/A₄₄₀≤0.24。

本发明制备方法的实施例陈述如下：

实施例1

以福建柘荣产栀子为原料，将鲜栀子水洗、干燥(风干、烘干或晒干均可)、粉碎、过10～30目筛，得栀子粉末，将3.3kg栀子粉末放入提取罐中，用5倍粉末干重(W/W)的60％甲醇水溶液，于80℃条件下回流提取2小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏。

加蒸馏水调整浸膏浓度达3.6波美度，采用HZ816大孔吸附树脂，以1.16倍树脂量/小时的上柱流速(V/V)，动态吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用8倍树脂量的19％的乙醇水溶液(V/V)分成2次，在68r/min的搅拌转速条件下，洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用9倍树脂量的40％甲醇水溶液(V/V)以0.56倍树脂量/小时的流速(V/V)洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

50℃条件下，用4倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝615、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.20、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.22。

实施例2

将10～30目已经脱脂的栀子粉末2.6kg放入提取罐中，用20倍栀子粉末干重(W/W)的30％甲醇水溶液，于50℃条件下提取2次，每次3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏，浸膏浓度达8波美度。

在75r/min的搅拌转速条件下，直接采用HZ801大孔吸附树脂对浸膏进行富集吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用6倍树脂量的24％的乙醇水溶液(V/V)以1.0倍树脂量/小时的流速(V/V)洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用6倍树脂量的49％甲醇水溶液(V/V)在100r/min的搅拌转速条件下，洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

70℃条件下，用3倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝583、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.24、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.24。

实施例3

将鲜栀子水洗、粉碎、过10～30目筛，将2.6kg栀子(以干重计，W/W)投入提取罐中，添加10倍栀子干重(W/W)的甲醇-丙酮(1∶1)溶液，使体系中甲醇-丙酮(1∶1)水溶液的终浓度达到52％，于78℃条件下回流提取3小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏。

加蒸馏水调整浸膏浓度达3波美度，采用HZ806大孔吸附树脂，以0.75倍树脂量/小时的上柱流速(V/V)，动态吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用3倍树脂量的30％的乙醇水溶液(V/V)以0.5倍树脂量/小时的流速(V/V)洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用9倍树脂量的70％甲醇-丙酮(1∶1)(V/V)以1.05倍树脂量/小时的流速(V/V)洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

62℃条件下，用5倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝603、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.21、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.23。

实施例4

将10～30目栀子粉末2.9kg放入提取罐中，用5倍栀子粉末干重(W/W)的60％乙醇水溶液，于80℃条件下浸提3次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏。

加蒸馏水调整浸膏浓度达3波美度，采用D101大孔吸附树脂，在78r/min的搅拌转速条件下，吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未的乙醇水溶液(V/V)以被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用4倍树脂量的27％1.03倍树脂量/小时的流速(V/V)洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用3倍树脂量的62％乙醇水溶液(V/V)在89r/min的搅拌转速条件下，洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

65℃条件下，用4倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝592、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.23、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.24。

实施例5

将10～30目栀子粉末2.6kg放入提取罐中，用12倍栀子粉末干重(W/W)的55％甲醇-异丙醇(1∶1)水溶液，于73℃条件下提取2次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏。

加蒸馏水调整浸膏浓度达4.5波美度，采用DK110大孔吸附树脂，以1.0倍树脂量/小时的流速(V/V)，动态吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用12倍树脂量的15％的乙醇水溶液(V/V)分成4次，在60r/min的搅拌转速条件下，洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用8倍树脂量的50％甲醇-异丙醇(1∶1)水溶液(V/V)在90r/min的搅拌转速条件下，洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

58℃条件下，用6倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝602、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.22、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.23。

实施例6

将10～30目栀子粉末2.4kg放入提取罐中，用20倍栀子粉末干重(W/W)的30％乙醇水溶液，于50℃条件下提取2次，每次3小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏，浸膏浓度达8波美度。

在50r/min的搅拌转速条件下，直接采用大孔吸附树脂HZ801∶HZ802(2∶1)对浸膏进行富集吸附栀子黄色素至饱和，吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用5倍树脂量的25％的乙醇水溶液(V/V)以0.65倍树脂量/小时的流速(V/V)洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用6倍树脂量的70％乙醇水溶液(V/V)以1.0倍树脂量/小时的流速(V/V)洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

50℃条件下，用10倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝584、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.25、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.24。

实施例7

将10～30目栀子粉末2.9kg放入提取罐中，用20倍栀子(以干重计，W/W)的30％丙酮水溶液，于50℃条件下提取3次，每次3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏。

加蒸馏水调整浸膏浓度达4波美度，采用Amberlite XAD-4大孔吸附树脂，以0.75倍树脂量/小时的流速(V/V)，动态吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用12倍树脂量的15％的乙醇水溶液(V/V)分成5次，在60r/min的搅拌转速条件下，洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用3倍树脂量的48％丙酮水溶液(V/V)在85r/min的搅拌转速条件下，洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

65℃条件下，用5倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝580、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.25、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.24。

实施例8

将10～30目栀子粉末2.5kg放入提取罐中，用5倍栀子粉末干重(W/W)的60％丙酮水溶液，于80℃条件下回流提取2小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏，浸膏浓度达7.5波美度。

在60r/min的搅拌转速条件下，直接采用HZ802大孔吸附树脂对浸膏进行富集吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用3倍树脂量的30％的乙醇水溶液(V/V)在75r/min的搅拌转速条件下，洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用3倍树脂量的70％丙酮水溶液(V/V)在90r/min的搅拌转速条件下，洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

70℃条件下，用3倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝598、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.22、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.23。

实施例9

将10～30目栀子粉末2.3kg放入提取罐中，用13倍栀子粉末干重(W/W)的60％甲醇-乙醇(2∶5)水溶液，于75℃条件下回流提取2小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、65～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏。

加蒸馏水调整浸膏浓度达5波美度，采用HZ803大孔吸附树脂，以0.85倍树脂量/小时的流速(V/V)，动态吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的蒸馏水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用6倍树脂量的24％的乙醇水溶液(V/V)以1.0倍树脂量/小时的流速(V/V)洗去环烯醚萜苷类化合物、绿原酸和黄酮等中等极性杂质，最后用9倍树脂量的40％甲醇-乙醇(2∶5)水溶液(V/V)以0.75倍树脂量/小时的流速(V/V)，动态洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品。

50℃条件下，用10倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素。经测定，栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm＝608、A₂₃₈/A₄₄₀＝0.21、A₃₂₀/A₄₄₀＝0.23。

以上实施例旨在进一步举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明。

本发明的一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，工艺简单、分离纯化效果好、产品收率高、生产成本低，对我国栀子植物资源的合理利用、食品安全的保障和传统中药产业链的延伸，解决“三农”问题，均具有重要的社会价值和现实意义。

Claims (7)

1.一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，其特征在于：所述方法的步骤为：

(1)栀子黄色素粗提物浸膏的制备：以栀子为原料，采用5～20倍栀子干重(W/W)的30～60％亲水性有机溶剂水溶液，于50～80℃条件下提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗提物浸膏；

(2)栀子黄色素粗品的树脂富集：浸膏经大孔吸附树脂吸附栀子黄色素至饱和，先用不少于2倍树脂量的水(V/V)洗去未被吸附的残留液和吸附力较弱的水溶性杂质，再用不少于3倍树脂量的15～30％的乙醇水溶液(V/V)洗去中等极性杂质，最后用3～9倍树脂量的40～70％亲水性有机溶剂水溶液(V/V)洗脱栀子黄色素，洗脱液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子黄色素粗品；

(3)高色价栀子黄色素的纯化：50～70℃条件下，用3～10倍量(W/W)的乙酸乙酯充分萃取除去栀子黄色素粗品中的栀子苷和绿原酸，萃余液在-0.05～-0.09MPa、50～65℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成高色价栀子黄色素；

所述亲水性有机溶剂是甲醇、丙酮、乙醇、丙醇或异丙醇中的一种或几种混合溶剂。

2.根据权利要求1所述的一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，其特征在于：所述亲水性有机溶剂是甲醇或丙酮。

3.根据权利要求1所述的一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的中等极性杂质为环烯醚萜苷类化合物、绿原酸或黄酮。

4.根据权利要求3所述的一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，其特征在于：所述环烯醚萜苷类化合物是栀子苷、异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷或栀子酸中的一种或几种化合物。

5.根据权利要求1所述的一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，其特征在于：所述栀子黄色素是藏红花酸、藏红花素1、藏红花素2或藏红花素3中的一种或几种化合物。

6.根据权利要求1所述的一种从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，其特征在于：大孔吸附树脂骨架的化学组成是聚苯乙烯和聚丙烯酸中的一种或两种。

7.根据权利要求1所述的从栀子中分离纯化高色价栀子黄色素的方法，其特征在于：所述的高色价栀子黄色素的指标为E₄₄₀ ^1％ _1cm≥580、A₂₃₈/A₄₄₀≤0.25、A₃₂₀/A₄₄₀≤0.24。