CN1939457B - 一种栀子提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种栀子提取物的制备方法。该制备方法的特征在于：以栀子为原料，采用亲水性溶剂，提取以栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸为主要成分的提取物，合并提取液，过滤，滤液经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。本发明构思新颖，工艺简单，提取效率高，生产成本低，所制提取物具有现代中成药“三高”、“三小”和“三便”等优点，具有较大推广性。

Description

一种栀子提取物的制备方法

技术领域

本发明涉及一种从植物中提取药用活性成分的绿色化工生产方法，更具体涉及一种栀子提取物的制备方法。

背景技术

栀子为栀子属(Gardenia)茜草科(Rubiaceae)常绿灌木栀子的果实，为我国大宗传统中药材，从《本草纲目》到《中国药典》等历代医药名著均有记载。栀子内服具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒等功用，外用能治疗扭伤、挫伤，在我国临床用药史长达1600年。

栀子入选中国卫生部首批药食两用中药材名录，为国家中药保护品种清开灵注射液、龙胆泻肝片和茵胆平肝胶囊的主要药效成分，是中医临床治疗黄疸型肝炎的首选药物和提取栀子天然色素的原料，盛产于闽、浙、赣、徽、湘等省山区。

栀子含有环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和有机酸等药用活性成分。其中，以栀子苷为主要组成成分的环烯醚萜苷类化合物和绿原酸，具有利胆护肝、清热解毒功能，是市场前景广阔的中药提取物，广泛用于中医临床治疗黄疸型肝炎。

栀子黄色素是从栀子果实中提取的自然界唯一存在的水溶性类胡萝卜素类天然色素，主要成分是藏花素和藏花酸等类胡萝卜素类化合物，成品中还可能存有熊果酸、栀子苷和绿原酸。在欧美、日本等发达国家，栀子黄色素颇受欢迎，国际需求量以年均10％的速度在增长。2000年日本的需求量为320吨，在日本天然色素市场中排在第4位，栀子黄色素(E440≥220、A238/A440≤0.20)的售价为4500日元/Kg。

栀子黄色素具有着色力强、色泽鲜艳、色调自然柔和、稳定性好、溶解性强、无异味、无毒副作用、安全性能高等优点，广泛用于食品、果酒、饮料、医药、日用化工、化妆品等，是目前国际上流行的天然食品添加剂，是中草药行业、饮料食品工业、化妆品工业、药品工业不可缺少的天然色素原料。

以栀子苷为原料，采用微生物转化技术还可以生产栀子京尼平。在此基础上，利用栀子京尼平与氨基酸反应，还可生产栀子蓝色素。栀子蓝色素溶解性好，着色力强，属于水溶性天然色素。在生产天然栀子蓝色素的过程中，控制不同的转化条件还可生产出天然栀子红色素。由栀子黄、蓝、红三元色，可以调制出诸如栀子绿、栀子紫等色素。因此，进行天然色素原料栀子的精深加工开发，制备含有环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等成分的栀子提取物，具有广阔的市场前景。

栀子为丰产速生型植物，适应性极强，即可人工种植、也可野生于山间。通常，种植第2～3年即可挂果，鲜果亩产可达200～250Kg，种植第4～5年即进入丰产期，鲜果亩产可达1500～2000Kg。

在中国，栀子资源丰富，价廉易得，药效明确，民间广泛用于食物和药物中，为不可多得的大宗天然药用植物资源。但每年全国有数以万吨的栀子未加以合理利用，浪费了宝贵的资源。为切实实现栀子资源的高效利用和生产的可持续发展，研究以栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸为主要成分的栀子提取物的制备方法与用途，对于栀子的综合利用和系列产品开发具有一定的指导意义。

栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等药用活性成分，均易溶于热水以及乙醇、甲醇、丙酮等亲水性溶剂中，因此，可采用热水、不同pH值缓冲溶液或甲醇、丙酮等亲水性溶剂进行提取。

发明内容

本发明的目的在于提供一种栀子提取物的制备方法，该制备方法不仅工艺简单、提取效率高，而且提取的栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等成分的收率高。

本发明栀子提取物的制备方法，其特征在于：以栀子为原料，采用亲水性溶剂，提取以栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸为主要成分的栀子提取物，合并提取液，过滤，滤液经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。

较之已有的提取方法而言，本发明采用甲醇、丙酮等亲水性溶剂水溶液，提取以栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等药用活性成分，制成栀子提取物，其优点在于：

一是充分利用了栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等活性成分与蛋白质、多糖、精油、无机盐等杂质成分在亲水性溶剂水溶液中溶解度的差异，真正达到了栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等药用活性成分与杂质成分的高效分离。

二是甲醇、丙酮等亲水性溶剂的溶解性能好，对栀子植物细胞的穿透能力强，更容易渗透到栀子内部组织结构中，大大提高了栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等活性成分的溶出速率和提取效率。

三是甲醇、丙酮等亲水性溶剂对栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等目标活性物质的溶解度很大，而对蛋白质、多糖、精油、无机盐等杂质的溶解度较小，能使栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸等活性成分被高效地从栀子中被选择性分离出来的同时，大大降低了提取液中蛋白质、多糖、精油、叶绿素等杂质的含量，更利于后续进一步的分离纯化和高纯度栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸的制备，显著提升了产品的品质和附加值，明显增加了产品的市场竞争力。

本发明优先选用甲醇或丙酮的优点是：甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮或不同pH值缓冲溶液等亲水性溶剂的提取效果相当，但相对于其它亲水性溶剂而言，甲醇或丙酮的沸点更低、能耗更小，能显著降低产品的制备成本。

本发明采用中药现代化生产技术提取栀子主要药用活性成分制成国际通行的中药提取物，具有现代中药产品的“三高”、“三小”和“三便”等优点，能适应和满足现代中医临床用药需求，符合国家倡导的中药现代化及国际化的产业政策。

具体实施方式

本发明的制备方法是：以鲜栀子或栀子粉末为原料，采用5～15倍栀子干重(W/W)的25～75％亲水性溶剂水溶液，于50～80℃条件下提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。

上述亲水性溶剂可以是甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇或丙酮的一种或几种混合溶剂，其中优先选用甲醇或丙酮，亲水性溶剂也可以是不同pH值缓冲溶液。

本发明各制备物的理化参数测定方法如下：

栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸的含量采用紫外可见三波长同时检测的高效液相色谱仪测定。测定条件：Agilent 1100型高效液相色谱仪(DAD二极管阵列检测器)，Waters Nova-Pak C18色谱柱(Ф3.9×150mm，5衸)，甲醇-0.2％磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，在60min内甲醇比例从15％线性梯度升至100％，然后保持2min。流速1.0mL/min，柱温34℃，进样量20μL。类胡萝卜素类化合物、绿原酸和栀子环烯醚萜苷类化合物的检测波长分别为440nm、320nm和238nm。

标准品：栀子苷、异栀子苷、栀子酸、京尼平龙胆二糖苷购于Yoneyama公司(日本)，藏红花酸购于Sigma公司，绿原酸、藏红花素购于中国药品生物制品检定所。

经测定，实验所用的福建产栀子(含水量5.3％)中栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸等主要药用活性成分的含量分别为69.8～77.3g/kg、2.1～3.9g/kg和12.3～15.6g/kg。

本发明制备方法的实施例陈述如下：

实施例1

以福建产栀子为原料，将鲜栀子水洗、干燥(风干、烘干或晒干均可)、粉碎、过20～30目筛得栀子粉末，将2.9kg栀子粉末放入提取罐中，用栀子粉末10倍干重(W/W)的40％的甲醇-丙酮(1∶1)水溶液，于68℃条件下回流提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为93.2％、96.3％和93.1％。

实施例2

将20～30目栀子粉末2.6kg放入提取罐中，用栀子粉末15倍干重(W/W)的25％甲醇水溶液，于50℃条件下提取2次，每次3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为92.3％、92.8％和91.8％。

实施例3

将20～30目栀子粉末2.7kg放入提取罐中，用栀子粉末5倍干重(W/W)的75％甲醇水溶液，于80℃条件下回流提取1小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为95.6％、95.0％和93.5％。

实施例4

以福建产栀子为原料，将鲜栀子水洗、干燥(风干、烘干或晒干均可)、粉碎、过20～30目筛得栀子粉末，将2.9kg栀子粉末放入提取罐中，用栀子粉末5倍干重(W/W)的75％乙醇水溶液，于80℃条件下提取1小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为94.8％、94.3％和93.6％。

实施例5

将20～30目栀子粉末2.6kg放入提取罐中，用栀子粉末8倍干重(W/W)的45％甲醇-异丙醇(1∶1)水溶液，于73℃条件下提取2次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为94.3％、95.4％和93.7％。

实施例6

将20～30目栀子粉末2.4kg放入提取罐中，用栀子粉末15倍干重(W/W)的38％乙醇水溶液，于50℃条件下提取3次，每次3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为92.5％、92.7％和91.2％。

实施例7

以福建产栀子为原料，将鲜栀子水洗、干燥(风干、烘干或晒干均可)、粉碎、过20～30目筛得栀子粉末，将2.6kg栀子粉末放入提取罐中，用栀子粉末15倍干重(W/W)的25％丙酮水溶液，于50℃条件下提取3次，每次3小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为93.8％、91.5％和91.8％。

实施例8

将20～30目栀子粉末2.5kg放入提取罐中，用栀子粉5倍干重(W/W)的75％丙酮水溶液，于80℃条件下回流提取2次，每次1小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、50～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为93.9％、93.2％和93.5％。

实施例9

将20～30目栀子粉末2.3kg放入提取罐中，用栀子粉末15倍干重(W/W)的pH 8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲溶液，于80℃条件下提取3次，每次2小时，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、65～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。经测定，栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物和绿原酸提取率分别为90.1％、82.6％和88.9％。

以上实施例旨在进一步举例描述本发明，而不是以任何方式限制本发明。

本发明构思新颖，工艺简单，提取效率高，生产成本低，具有较大的推广意义。

Claims (4)

1.一种栀子提取物的制备方法，其特征在于：以栀子为原料，提取以栀子环烯醚萜苷类化合物、类胡萝卜素类化合物或有机酸为主要成分的栀子提取物；采用栀子粉末15倍干重(W/W)的pH 8.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲溶液，于80℃条件下提取3次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤液在-0.06～-0.095MPa、65～80℃条件下，经减压回收溶剂、真空浓缩成栀子提取物。

2.根据权利要求1所述的栀子提取物的制备方法，其特征在于：所述栀子环烯醚萜苷类化合物是栀子苷、异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷或栀子酸中的一种或几种化合物。

3.根据权利要求1所述的栀子提取物的制备方法，其特征在于：所述类胡萝卜素类化合物是藏红花酸、藏红花素1、藏红花素2或藏红花素3中的一种或几种化合物。

4.根据权利要求1所述的栀子提取物的制备方法，其特征在于：所述有机酸是绿原酸。