CN100500688C - 一种西洋参总皂苷及其注射液 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从西洋参或西洋参茎叶中提取总皂苷的制备方法，该将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加纯化水先温浸，逆流循环超声提取，提取液用三效浓缩器进行浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；将清膏用输药泵打入醇沉罐中，冷藏，过滤；滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，过滤得过滤液；过滤液上大孔吸附树脂柱，用纯化水冲洗乙醇解析；解析液导入脱色柱脱色；减压回收脱色药液得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉。将本发明干粉溶解到注射用水中，制成注射液。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取物的制备方法，特别涉及一种从西洋参茎叶中提取总皂苷的制备方法。
背景技术
西洋参(panax quinguefolium Lima.)和西洋参茎叶含有多种相同的人参总皂苷，经研究表明西洋参茎叶总皂苷具有对实验性心肌梗塞和异丙基肾上腺素诱发的大鼠心肌缺血具有显著的保护作用；可增加心肌耐受缺氧的能力；可明显地增加动物心肌的血流量并降低冠状动脉阻力等生理活性，是传统的中药。以西洋参及西洋参茎叶为有效成分制成的注射用西洋参及西洋参茎叶精制总皂苷在临床上具有益气养阴，活血通脉，生津除烦之功效。用于治疗冠心病心绞痛，证见胸闷隐痛，心悸气短，倦怠懒言，头昏目眩，自汗咽干等气阴两虚证。用于治疗心、脑血管疾病、衰老、高血脂及免疫功能低下等症的治疗。
目前，由于生产西洋参及西洋参茎叶总皂苷的工艺中没有应用较高效率的过滤过程，也没有采用十分有效的方法沉淀杂质，回收乙醇时没有PH的调节，经过树脂柱后没有进一步脱色，因而生产出来的西洋参及西洋参茎叶总皂苷的总皂苷含量偏低，总皂苷含量仅达50％-75％，所含有的杂质量高；以往的制备工艺尚存在提取过程有机溶媒的使用，造成成本高，工业化生产危险性强，不利于工业化生产。
发明内容
本发明公开一种从西洋参茎叶中提取总皂苷及其注射液的制备工艺。
从西洋参茎叶中提取制备总皂苷及其注射液的工艺步骤如下：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加8-15倍量纯化水先温浸1-5小时后，在常温下，搅拌速度150-250r/min，逆流循环超声提取1-3小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃、真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃、真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃、真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入60-95％乙醇，搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏20-30小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06-0.1Mpa，温度45-55℃，真空度控制0.06-0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的大孔吸附树脂柱(如山东鲁抗生产型号为8621型)，进行吸附，流速为0.5-1ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用70-80％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.5-1ml/min/cm2；解析液导入脱色柱(山东鲁抗生产型号为941型)，流速0.5-1ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉备用。
将总皂苷干粉1重量份溶解到10-20体积份注射用水中，充分混匀，调PH值至6-6.8，用微孔滤膜(如0.45um深层复合膜)粗滤，后用超滤系统(如VG湖北非尔特公司提供滤速3L/min)进行超滤，得超滤液；
将超滤液投入配液罐中，加入注射用水至15-30体积份，调节PH值至6-6.8，充分搅匀，用已处理好的超滤设备进行超滤(如VAG湖北非尔特公司提供滤速2.5L/min)，放置于贮罐，灌装时通过0.1μm微孔筒式膜过滤器打入高位罐中；罐装，即得总皂苷注射液。
从西洋参茎叶中提取制备总皂苷及其注射液的优选工艺步骤如下：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加10或12倍量纯化水先温浸2小时后，在常温下，搅拌速度200r/min，逆流循环超声提取1小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃、真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃、真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃、真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇快速搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏24小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06-0.1Mpa，温度45-55℃，真空度控制0.06-0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的大孔吸附树脂柱(如山东鲁抗生产型号为8621型)，进行吸附，流速0.8或0.7ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用75％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.8或0.7ml/min/cm2；解析液导入脱色柱(如山东鲁抗生产型号为941型)，流速0.8或0.7ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用新型压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉备用。
将总皂苷干粉1重量份溶解到15体积份注射用水中，充分混匀，调PH值至6-6.8，用微孔滤膜(如0.45um深层复合膜)粗滤，后用超滤系统(如VG湖北非尔特公司提供滤速3L/min)进行超滤，得超滤液；
将超滤液投入配液罐中，加入注射用水至20体积份，调节PH值至6-6.8，充分搅匀，用已处理好的超滤设备进行超滤(如VAG湖北非尔特公司提供滤速2.5L/min)，放置于贮罐，灌装时通过0.1μm微孔筒式膜过滤器打入高位罐中；罐装，即得总皂苷注射液。
本发明重量份与体积份的关系为g/ml。
下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1 总皂苷与人参皂苷Re的检测分析
提取方法1：参照03127632.6中西洋参茎叶精制总皂苷的提取方法
(1)取西洋参茎叶1kg加适量16kg的水，加热煮沸2次，每次1.0小时；(2)收集并合并所得的水提液，浓缩至50℃相对密度为1.10波美；(3)浓缩液中加入乙醇，使溶液中乙醇含量达到80％，滤过，滤液回收乙醇；(4)将上述滤液调节PH值至10，放置，滤过；(5)将滤液通过D21大孔吸附树脂柱，用10％乙醇洗脱树脂柱，分别洗脱至洗脱液无色后，弃去洗脱液，用80％浓度乙醇洗脱树脂柱，收集洗脱液；(6)80％乙醇洗脱液通过阳离子树脂柱及阴离子树脂柱，减压回收醇，浓缩成浸膏状或干粉；(7)将干粉用70％乙醇溶液溶解，配制成5％总皂苷溶液，加1％的药用活性炭，加热回流1小时，(8)趁热滤过，再精滤，滤液减压回收乙醇，浓缩并干燥至干粉(总皂苷含量达93％)；(9)将上述精制总皂苷加注射用水配制成5％的水溶液，Φ0.20微米微孔滤膜过滤；(10)将上述精滤后的溶液灌装，灭菌后-40℃预冻3小时后，一次升华干燥得西洋参茎叶精制总皂苷冻干粉针剂。
提取方法2：参照本发明实施例1的方法制备。
西洋参茎叶总皂苷的检测分析与人参皂苷Re的检测分析均以含量中人参皂苷Re计，结果如下表：
表1
以上实验数据1组和2组，2组数据高于1组，对比情况表明采用本发明提取方法所制备的药物组合物注射剂，由于采用逆流循环超声提取、纯化、精制后，能得到纯度更高的西洋参茎叶总皂苷和人参皂苷Re，采用本发明方法后，总皂苷含量不被破坏，成分单纯，药效更显著，质量稳定。
实验例2 节约能源方面的对比实验
提取方法1：参照03127632.6中西洋参茎叶精制总皂苷的提取方法；提
取方法2：参照本发明实施例1的方法制备。
提取方法2由于采用了先进的逆流循环超声提取技术，工艺路线缩短，能源消耗大大降低。
表2：
逆流循环超声提取方法，在常温下提取药材的有效成分，保证了有效成分的稳定性，提取率高，节约能源。
具体实施方式
实施例1：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加10倍量纯化水先温浸4小时后，在常温下，搅拌速度180r/min，逆流循环超声提取2小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃，真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃，真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃，真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇快速搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏24小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06-0.1Mpa，温度45-55℃，真空度控制0.06-0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的山东鲁抗生产型号为8621型大孔吸附树脂柱进行吸附，流速0.8ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用75％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.8ml/min/cm2；解析液导入山东鲁抗生产型号为941型脱色柱，流速0.8ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用新型压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉。
实施例2：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加10倍量纯化水先温浸2小时后，在常温下，搅拌速度200r/min，逆流循环超声提取1小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃、真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃、真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃、真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇快速搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏24小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06-0.1Mpa，温度45-55℃，真空度控制0.06-0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的山东鲁抗生产型号为8621型大孔吸附树脂柱进行吸附，流速0.8ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用75％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.8ml/min/cm2；解析液导入山东鲁抗生产型号为941型脱色柱，流速0.8ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用新型压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉备用；
将总皂苷干粉1kg溶解到15L注射用水中，充分混匀，调PH值至6-6.8，用0.45um深层复合膜微孔滤膜粗滤，后用VG湖北非尔特公司提供滤速3L/min超滤系统进行超滤，得超滤液；
将超滤液投入配液罐中，加入注射用水至20L，调节PH值至6-6.8，充分搅匀，用已处理好的VAG湖北非尔特公司提供滤速2.5L/min的超滤设备进行超滤，放置于贮罐，灌装时通过0.1μm微孔筒式膜过滤器打入高位罐中；罐装，2ml/支，即得总皂苷注射液。
Claims (6)
1、一种从西洋参或西洋参茎叶中提取总皂苷的制备方法，其特征在于：将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加8-15倍量纯化水先温浸1-5小时后，在常温下，搅拌速度150-250r/min，逆流循环超声提取1-3小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃、真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃、真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃、真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入60-95％乙醇，搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏20-30小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06-0.1Mpa，温度45—55℃，真空度控制0.06～0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的大孔吸附树脂柱，进行吸附，流速为0.5-1ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用70-80％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.5-1ml/min/cm2；解析液导入脱色柱，流速0.5-1ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉。
2、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加10倍量纯化水先温浸2小时后，在常温下，搅拌速度200r/min，逆流循环超声提取1小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃、真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃、真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃、真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇快速搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏24小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06—0.1Mpa，温度45—55℃，真空度控制0.06～0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的大孔吸附树脂柱，进行吸附，流速0.8ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用75％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.8ml/min/cm2；解析液导入脱色柱，流速0.8ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉。
3、如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加12倍量纯化水先温浸4小时后，在常温下，搅拌速度180r/min，逆流循环超声提取2小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃，真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃，真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃，真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇快速搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏24小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06—0.1Mpa，温度45—55℃，真空度控制0.06～0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的8621型大孔吸附树脂柱进行吸附，流速0.7ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用75％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.7ml/min/cm2；解析液导入941型脱色柱，流速0.7ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉。
4、一种总皂苷注射液的制备方法，其特征在于：将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加8-15倍量纯化水先温浸1-5小时后，在常温下，搅拌速度150-250r/min，逆流循环超声提取1-3小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃、真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃、真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃、真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入60-95％乙醇，搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏20-30小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06—0.1Mpa，温度45—55℃，真空度控制0.06～0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的大孔吸附树脂柱，进行吸附，流速为0.8ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用70-80％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.8ml/min/cm2；解析液导入脱色柱，流速0.8ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉；
将总皂苷干粉1重量份溶解到10-20体积份注射用水中，充分混匀，调PH值至6-6.8，用微孔滤膜粗滤，后用超滤系统进行超滤，得超滤液；将超滤液投入配液罐中，加入注射用水至处方量15-30体积份，调节PH值至6-6.8，充分搅匀，用已处理好的超滤设备进行超滤，放置于贮罐，灌装时通过0.1μm微孔筒式膜过滤器打入高位罐中；罐装，即得总皂苷注射液。
5、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加10倍量纯化水先温浸2小时后，在常温下，搅拌速度200r/min，逆流循环超声提取1小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃、真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃、真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃、真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇快速搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏24小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06—0.1Mpa，温度45—55℃，真空度控制0.06～0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的大孔吸附树脂柱，进行吸附，流速0.8ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用75％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.8ml/min/cm2；解析液导入脱色柱，流速0.8ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉；
将总皂苷干粉1重量份溶解到15体积份注射用水中，充分混匀，调PH值至6-6.8，用0.45um深层复合膜微孔滤膜粗滤，后用超滤系统进行超滤，得超滤液；
将超滤液投入配液罐中，加入注射用水至20体积份，调节PH值至6-6.8，充分搅匀，用已处理好的超滤设备进行超滤，放置于贮罐，灌装时通过0.1μm微孔筒式膜过滤器打入高位罐中；罐装，即得总皂苷注射液。
6、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：
将西洋参或西洋参茎叶碎段投入逆流循环超声提取罐中，加12倍量纯化水先温浸4小时后，在常温下，搅拌速度180r/min，逆流循环超声提取2小时，提取液用三效浓缩器进行浓缩，控制一效浓缩器温度70-80℃，真空度0.03Mpa，二效浓缩器温度60-70℃，真空度0.06Mpa，三效浓缩器温度50-60℃，真空度0.08Mpa，浓缩至60℃相对密度1.10-1.15的清膏；
将清膏用输药泵打入醇沉罐中，缓缓加入95％乙醇快速搅拌至含醇量达70％，并充分搅拌之后静置，冷藏24小时，过滤；回收乙醇及浓缩：滤液用外循环蒸发器进行回收乙醇，控制压力在0.06—0.1Mpa，温度45—55℃，真空度控制0.06—0.085Mpa；回收完毕，用饱和氢氧化钙溶液调PH值至10-12，冷藏，过滤，得过滤液；
取过滤液上预处理好的8621型大孔吸附树脂柱进行吸附，流速0.7ml/min/cm2；吸附完毕，用纯化水冲洗至无色；用75％乙醇进行解析，至无色无药味，用纯化水冲，至无醇味，无色，流速0.7ml/min/cm2；解析液导入941型脱色柱，流速0.7ml/min/cm2；进行脱色；减压回收脱色药液，使药液中的醇回收完全，得浓缩液；将浓缩液用压力式喷雾干燥器进行干燥，得总皂苷干粉；
将总皂苷干粉1重量份溶解到15体积份注射用水中，充分混匀，调PH值至6-6.8，用0.45um深层复合膜微孔滤膜粗滤，后用超滤系统进行超滤，得超滤液；
将超滤液投入配液罐中，加入注射用水至20体积份，调节PH值至6-6.8，充分搅匀，用已处理好的超滤设备进行超滤，放置于贮罐，灌装时通过0.1μm微孔筒式膜过滤器打入高位罐中；罐装，即得总皂苷注射液。
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