CN100491396C

CN100491396C - 选择性环肽

Info

Publication number: CN100491396C
Application number: CNB018150284A
Authority: CN
Inventors: 陈立; A·W·H·张; 崔信洁; W·丹霍; J·斯威斯托克; 王跃; K·A·亚安洛夫
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2000-08-30
Filing date: 2001-08-21
Publication date: 2009-05-27
Anticipated expiration: 2021-08-21
Also published as: PL366630A1; JO2454B1; NZ523989A; EP1315750B1; WO2002018437A2; HUP0303078A2; PA8527201A1; TWI248941B; PE20020483A1; AR030504A1; NO20030916D0; YU15603A; CZ2003584A3; AR061422A2; IL154575A; EP1315750A2; ECSP034503A; IL154575A0; ES2280393T3; CN1451017A

Abstract

本发明涉及通过二硫键或内酰胺桥环合的肽，所述肽具有黑皮质素-4受体(MC4-R)激动剂活性，可用于治疗肥胖。

Description

选择性环肽

对于发达国家，肥胖普遍被认为是一种严重的健康问题，并且在美国已经达到流行的程度。超过50％的美国人被认为超重，其中超过25％的人被诊断为临床性肥胖并处于心脏病、非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)、高血压和某些癌症的相当危险之中。这种流行状况代表了卫生保健系统的沉重负担，因为仅在美国预期每年计划的肥胖治疗费用就超过700亿美元。治疗肥胖的策略包括减少摄食或者促进能量消耗。

现已证实，当将具有黑皮质素(melanocortin)-4受体(MC4-R)激动剂活性的α-促黑激素(αMSH)的环五肽类似物注射到第三脑室或腹膜内时，对小鼠产生长时间的摄食抑制。当与MC4-R拮抗剂联合施用时，这种作用是可逆的。(Fan等，Nature(1997)385：165-168)。因此，MC4-R活性的激动剂可用于治疗或预防肥胖。

根据成员间具有35—60％同源性范围的序列同源性，存在五种已知的黑皮质素受体((Cone等，Rec.Prog.Hormone Res.(1996)51：287-318)，但这些受体在它们的功能上不同。例如，MC1-R是G-蛋白偶联受体，它调节对αMSH反应的色素沉着，是MC1-R的高效激动剂(Cone等，同上)。MC1-R受体的激动作用导致对黑素细胞的刺激，由此产生真黑素并增高皮肤癌的危险性。MC1-R的激动作用还具有神经学作用。MC2-R活性的刺激可导致肾上腺组织癌。MC3-R和MC5-R的激动作用的影响尚未知晓。所有黑皮质素受体对促黑激素(MSH)类的肽类激素均作出反应。这些肽由阿黑皮素原(POMC)—一种131个氨基酸的激素原衍生，它们可被加工为三类激素：黑皮质素(α、β和γ)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和各种内啡肽(如促脂素)(Cone等，同上)。因为它们功能的不同，多种黑皮质素受体活性的同时激动作用可能会产生不希望的副作用。因此理想的是，与一种或多种其他的黑皮质素受体相比，MC4-R激动剂对于MC4-R具有更高的选择性。

Haskell-Luevano等(Peptides(1996)17(6)：995-1002)公开了包含三肽(D)Phe-Arg-Trp的肽，该肽在青蛙(Rana pipiens)皮肤的生物测定中表现出促黑素(melanotropic)(皮肤暗化)活性。Haskell-Luevano等(同上)没有公开任何下述式I或II的化合物。

Bednarek等(Peptides(1999)20：401-409)和Bednarek等(Biochem.Biophys.Res.Comm.(1999)261：209-213)公开了环肽MT-II的类似物。它们没有公开任何下述式I或II的化合物。

本发明提供式I化合物及其可药用盐：

式I化合物中，R¹和R¹²与X和Y一起形成苯环，并且X是C且Y是C；或者

R¹是氢、

，或

；并且

R¹²是氢；其中X和Y各自是C并且X与Y之间的键是双键，或者其中X和Y各自是CH并且X与Y之间的键是单键；R²是具有1—5个碳原子的烷基、具有2—5个碳原子的链烯基或者具有2—5个碳原子的炔基；R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；并且n是0或者1，Q是

或

或

其中R³、R⁴和R⁵独立地是氢、卤素、具有1—4个碳原子的烷基、羟基或者具有1—4个碳原子的烷氧基，其中当R⁴不是氢时，R³和R⁵都是氢；R⁶是氢、具有1—3个碳原子的烷基、具有1—3个碳原子的烷氧基、苯氧基或者卤素；并且R¹¹和R¹³各自独立地是氢、具有3或4个碳原子的烷基或者具有5或6个碳原子的环烷基，或者R¹¹和R¹³都是苯基；R⁷是O或者NH；R⁸是氢或者甲基。R⁹是

或

R¹⁰是氢或者甲基；p是0或者1；m是0、1、2或者3；Z是

或——S——S——；和

R¹⁷是氢或者低级烷基，优选甲基。

当X和Y各自是CH-时，式I化合物中的虚化键是氢化的。另一方面，当存在虚化键时，Y和X不与R¹和R¹²一起形成苯环，X和Y都是四价的C原子。

本发明还提供式II化合物及其可药用盐：

式II化合物中，R1是氢、

，或

R²是具有1—5个碳原子的烷基、具有2—5个碳原子的链烯基或者具有2—5个碳原子的炔基；R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；并且n是0或者1，R³、R⁴、R⁵和R⁶中的一个是氢、卤素、具有1—3个碳原子的烷基或者具有1—3个碳原子的烷氧基，其余是氢。R⁷是O或者NH。R⁸是氢或者甲基。R⁹是

或

R¹⁰是氢或者甲基；p是0或者1；m是0、1、2或者3；Z是

或——S——S——.

R¹⁷是氢或者低级烷基，优选甲基。

式I和II化合物以及Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S，3S)β-甲基-Trp-Lys-NH₂是MC4-R的激动剂。已知MC4-R的激动剂活性在人肥胖的小鼠模型中引起食欲降低。因此，这些化合物可用于治疗或预防肥胖。

在下述生物学活性实施例A的体外分析中，测试了下面列举的所有式I和II的化合物以及Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg(2S，3S)β-甲基-Trp-Lys-NH₂的MC4-R激动剂活性和MC1-R激动剂活性。所有测试的化合物的MC4-R激动剂活性的EC50均低于500nM，并且所有化合物表现出的MC4-R激动剂活性比MC1-R激动剂活性均大至少10倍。相比之下，化合物Ac-Nle-环(Asp-Lys)-Asp-His-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂表现出大约相同的MC1-R和MC4-R激动剂活性。

命名与缩写

术语“烷基”是指直链或支链的烷基，术语“低级烷基”是指包含1—6个碳原子的烷基。术语“链烯基”是指直链或支链的链烯基。术语“炔基”是指直链或支链的炔基。

术语“烷氧基”是指通式为“烷基-O-”的基团，其中烷基定义如上。术语“苯氧基”是指式“苯基-O-”的基团。除非另有说明，“苯基”是指未取代的苯环，“苯氧基”是指未取代的苯氧基。

术语“卤素”是指选自氟、氯、溴和碘的基团。

术语“可药用盐”是指那些盐，它们保留了游离碱或游离酸的生物有效性和性质，但不是生物学上或在其他方面不合乎需要的。盐是与无机酸形成的盐，例如氢氯酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；和与有机酸形成的盐，例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、N-乙酰基半胱氨酸等。此外，这些盐可通过向游离酸中加入无机碱或有机碱制得。由无机碱得到的盐包括，但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐等。由有机碱得到的盐包括，但不限于伯胺、仲胺和叔胺，取代的胺(包括天然存在的取代胺)，环胺和碱性离子交换树脂的盐，如异丙基胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、赖氨酸、精氨酸、N-乙基哌啶、哌啶、聚胺树脂等的盐。

式IA化合物如下所示：

其中R¹、R³、R⁴、R⁵、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰、R¹²、X、Y、Z、m和p如上所述及其可药用盐。

在式IA的化合物中，R¹和R¹²与X和Y一起形成苯环；或者R¹是氢、

或

；和

R¹²是氢，其中X和Y各自是C并且X与Y之间的键是双键，或者其中X和Y各自是CH并且X与Y之间的键是单键；R²是具有1—5个碳原子的烷基、具有2—5个碳原子的链烯基或者具有2—5个碳原子的炔基；R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；并且n是0或者1。R³、R⁴和R⁵独立地是氢、卤素、具有1—4个碳原子的烷基、羟基或者具有1—4个碳原子的烷氧基；其中当R⁴不是氢时，R³和R⁵都是氢。R⁷是O或者NH。R⁸是氢或者甲基。R⁹是

或

R¹⁰是氢或者甲基；p是0或者1；m是0、1、2或者3，Z是

或——S——S——；和

R¹⁷是氢或者低级烷基，优选甲基。

式IA中的虚化键可以是氢化的。当虚线是氢化的时，X和Y都是-CH-。另一方面，当存在虚化键时，Y和X不与R¹和R¹²一起形成苯环，X和Y都是四价的C原子。

在式IA化合物的一个实施方案中，X和Y各自是CH并且X与Y之间的键被氢化为单键；Z是

R⁷是O；R¹是

R²是具有1—5个碳原子的烷基；并且R¹⁰和R¹²都是氢。这类化合物的实例包括Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂。

在式IA化合物的另一个实施方案中，Z是

R⁷是NH；R¹是氢、

或

R²是烷基；并且R¹⁰和R¹²都是氢。

在式IA化合物的另一个实施方案中，Z是

R⁷是NH；R¹是

R²是烷基；并且R¹⁰和R¹²都是氢。

在一个更优选的实施方案中，X和Y各自是CH并且X与Y之间的键被氢化为单键；n是0；并且R⁹是

这类化合物的实例包括：Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2)Nal-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-N-甲基(2)Nal-Lys-NH₂。

在式IA化合物的另一个更具体的实施方案中，Z是

R⁷是NH；R¹是

R²是烷基；并且R¹⁰和R¹²都是氢；并且R⁹是

并且R¹⁷是氢或者低级烷基，优选甲基。

这类化合物包括那些化合物，其中X和Y各自是CH并且X与Y之间的键是单键；并且R³、R⁴和R⁵中的一个是氢、卤素或者烷基，其余是氢，例如Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Glu-Lys)-Glu-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Orn)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Orn-NH₂；Penta-环(Asp-Dbr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dbr-NH₂；Penta-环(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂；和Ac-环(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂。

式IA化合物的另一个优选实施方案是那些化合物，其中X和Y各自是CH并且X与Y之间的键是单键；并且R¹是

R³、R⁴和R⁵中的一个是烷氧基，其余是氢；并且n是0，例如Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-EtOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-iPrOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-3-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-OHApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-ClApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

式IA化合物的实施方案包括那些化合物，其中R¹、R³、R⁴、R⁵、R⁸和R¹⁰各自是氢；R⁷是NH；R⁹是

并且R¹⁷是氢或者低级烷基，优选甲基；

并且p是0，例如环(琥珀酸-Lys)-琥珀酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂、环(马来酸-Lys)-马来酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂、环(琥珀酸-Dpr)-琥珀酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂、环(马来酸-Dpr)-马来酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂。

在式IA化合物的另一个实施方案中，R¹和R¹²与X和Y一起形成苯环。这类化合物的实例包括环(邻苯二甲酸-Lys)-邻苯二甲酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；环(邻苯二甲酸-Dpr)-邻苯二甲酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂；和Ac-Nle-环(Cys-Cys)-Cys-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂。

式IB化合物由下式所示：

在式IB的化合物中，R¹是氢，

或

R²是具有1—5个碳原子的烷基、具有2—5个碳原子的链烯基或者具有2—5个碳原子的炔基。R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基。N是0或者1。

R⁶是氢、具有1—3个碳原子的烷基，具有1—3个碳原子的烷氧基、苯氧基或者卤素；R是O或者NH。R⁸是氢或者甲基。R⁹是

或

或

R¹⁰是氢或者甲基；p是0或者1；m是0、1、2或者3；Z是

或——S——S——；和

R¹⁷是氢或者低级烷基，优选甲基；及其可药用盐。

在式IB化合物的一个实施方案，即，式IB1化合物中，Z是

R¹是NH；R¹是

R²是烷基；R⁸和R¹⁰各自是氢；并且R⁹是

并且R¹⁷如上所述。

在这类式IB1化合物的一个更具体的实施方案中，R⁶是氢或者烷基。这类化合物的实例包括：Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-2-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-2-iPrAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-环(Asp-Lys)-Asp-3-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

在这类式IB1化合物的一个更具体的实施方案中，R⁶是卤素。这类化合物的实例包括Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-ClAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

在这类式IB1化合物的一个更具体的实施方案中，R⁶是烷氧基或者苯氧基。这类化合物的实例包括：Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-PhOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；和Penta-(Asp-Lys)-Asp-3-MeO-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

R²是具有1—5个碳原子的烷基、具有2—5个碳原子的链烯基或者具有2—5个碳原子的炔基。R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基。n是0或者1，R¹¹和R¹³各自独立地是氢、具有3或4个碳原子的烷基、具有5或6个碳原子的环烷基，或者R¹¹和R¹³各自都是苯基；R⁷是O或者NH；R⁸是氢或者甲基；R⁹是

或

或

R¹是氢或者甲基；p是0或者1；m是0、1、2或者3；并且Z是

或——S——S——；；和

R¹⁷是氢或者低级烷基，优选甲基；及其可药用盐。

在式IC化合物的一个实施方案，式IC1化合物中，Z是

R⁷是NH；R¹是

R²是烷基；R⁸和R¹⁰各自是氢；并且R⁹是

在这类式IC1化合物的一个更具体的实施方案中，R¹¹和R¹³中的一个是烷基或者环烷基并且另一个是氢。这类化合物的实例包括：Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Achc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Abc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

在这类式IC1化合物的另一个更具体的实施方案中，R¹¹和R¹³中的一个是苯基并且另一个是氢或者苯基。这类化合物的实例包括Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-Adpc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

在式II化合物的一个实施方案，式IIA化合物中，Z是

R¹是

R²是烷基；

R³、R⁴、R⁵、R⁸和R¹⁰各自是氢；

R⁶是氢、卤素、具有1—3个碳原子的烷基或者具有1—3个碳原子的烷氧基；

R⁹是

并且R¹⁷如上所述。

在前段所述的式II-A化合物的一个实施方案中，R⁷是NH。在一个更具体的实施方案中，R⁷是NH并且R⁶是氢或者烷基。这类化合物的实例包括：Penta-环(Asp-Lys)-Asp-(D，L)-Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-Me-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-Et-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；和Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-iPr-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

在式II-A化合物的另一个具体实施方案中，R⁷是NH并且R⁶是卤素。这类化合物的实例包括：Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；和Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

在式II-A化合物的另一个具体实施方案中，R⁷是NH和R⁶是烷氧基。Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-MeO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-EtO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂；Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-iPrO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

式II化合物的另一个实施方案是那些式II化合物，其中Z、R¹—R⁵和R⁸—R¹⁰如上所述，R⁷是O并且R⁶是卤素。这类化合物的实例包括：Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂；和Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂。

式II化合物的另一个实施方案中，式II-B化合物是那些化合物，其中Z是-S-S-；

R¹是

，或

R³、R⁴、R⁵、R⁸和R¹⁰各自是氢；R⁶是氢或者卤素；R⁷是NH；并且R⁹是

并且R¹⁷如上所述。

这类式II-B化合物的实例包括：Ac-Nle-环(Cys-Cys)-Cys-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂；和Penta-环(Cys-Cys)-Cys-5-Br(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂。

本发明还提供下列化合物：Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S，3S)β-甲基-Trp-Lys-NH₂。

用于定义肽的命名原则是本领域中常用的，其中N-末端的氨基出现在左侧并且C-末端的羧基出现在右侧。关于天然氨基酸是指发现于蛋白质中的天然存在的氨基酸之一，即，Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Ser、Thr、Lys、Arg、Asp、Asn、Glu、Gln、Cys、Met、Phe、Tyr、Pro、Trp和His。其中氨基酸具有异构体形式；除非另有指示，它是指所表示的L形式的氨基酸。

使用下列缩写或符号表示氨基酸、保护基、溶剂、试剂等。

符号含义

β-Ala β-丙氨酸

(2)-Nal (2)-萘基丙氨酸

Atc 2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-BrAtc 5-溴-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-ClAtc 5-氯-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-MeOAtc 5-甲氧基-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-EtOAtc 5-乙氧基-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-iPrOAtc 5-异丙氧基-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-MeAtc 5-甲基-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-EtAtc 5-乙基-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-iPrAtc 5-异丙基-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

5-DmaAtc 5-二甲基氨基-2-氨基四氢化萘-2-羧酸

DBr D-2，4-二氨基丁酸

DPr D-2，3-二氨基丙酸

Sar 肌氨酸(N-甲基甘氨酸)

Cit 瓜氨酸

Apc 1-氨基-4-苯基环己烷-1-羧酸

4-HOApc 1-氨基-4-(4-羟基苯基)环己烷-1-羧酸

4-MeOApc 1-氨基-4-(4-甲氧基苯基)环己烷-1-羧酸

3-MeOApc 1-氨基-4-(4-甲氧基苯基)环己烷-1-羧酸

4-EtOApc 1-氨基-4-(4-乙氧基苯基)环己烷-1-羧酸

4-iPrOApc 1-氨基-4-(4-异丙氧基苯基)环己烷-1-羧酸

4-MeApc 1-氨基-4-(4-甲基苯基)环己烷-1-羧酸

4-ClApc 1-氨基-4-(4-氯苯基)环己烷-1-羧酸

Appc 4-氨基-1-苯基哌啶-4-羧酸

2-MeAppc 4-氨基-1-(2-甲基苯基)哌啶-4-羧酸

2-iProAppc 4-氨基-1-(2-异丙氧基苯基)哌啶-4-羧酸

3-MeAppc 4-氨基-1-(3-甲基苯基)哌啶-4-羧酸

3-MeOAppc 4-氨基-1-(3-甲氧基苯基)哌啶-4-羧酸

4-MeAppc 4-氨基-1-(4-甲基苯基)哌啶-4-羧酸

4-ClAppc 4-氨基-1-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸

4-PhOAppc 4-氨基-1-(4-苯氧基苯基)哌啶-4-羧酸

Achc 1-氨基-4-环己基环己烷-1-羧酸

Adpc 1-氨基-4-二苯基环己烷-1-羧酸

Abc 1-氨基-4-叔丁基环己烷-1-羧酸

3-Amb 3-氨基甲基苯甲酸

4-Amb 4-氨基甲基苯甲酸

2-Aba 2-氨基苯甲酸

Bu 丁基

Penta 戊酰基

Fmoc 9-芴基甲氧羰基

Pmc 2，2，5，7，8-五甲基苯并二氢吡喃-6-磺酰基

Trt 三苯甲游基(三苯基甲基)

CH₂CI₂ 二氯甲烷

CH₃CN 乙腈

DMF 二甲基甲酰胺

DIPEA N，N-二异丙基乙基胺

TFA 三氟乙酸

HOBT N-羟基苯并三唑

DIC N，N′-二异丙基碳化二亚胺

BOP 苯并三唑-1-基氧-三-(二甲基氨基)膦鎓六氟磷酸

盐

PyBroP 溴-三-吡咯烷基-膦鎓六氟磷酸盐

HBTU 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸

盐

FAB-MS 快速原子轰击质谱

ES-MS 电子喷雾质谱

在圆括号中列出的取代的氨基酸表示肽序列的类似物。N-末端氨基的衍化通过一个连字符分隔表示在N-末端取代基的左侧。即，例如Ac-His-(D)Phe-Arg-Trp-Gly-NH₂表示具有这样一种氨基序列的肽，其中用乙酰基替代N-末端的氢。连字符或者圆括号后的后缀“-OH”和“-NH₂”分别是指多肽的游离酸和酰胺形式。

用作本发明代表性化合物的前体的线性肽可通过任何已知形成氨基酸之间肽键的常规方法方便地合成。这类常规方法包括，例如任何液相方法，该方法允许一个氨基酸或者其具有羧基或其它被保护的反应性基团的残基的游离α-氨基与另一个氨基酸或者其具有氨基或其它被保护的反应性基团的残基的游离伯羧基发生缩合反应。

用于合成前体线性肽的方法可以通过这样一种方法进行，其中顺序添加目的序列中的各个氨基酸或其残基，每次一个；或者通过这样一种方法进行，其中首先常规合成具有目标氨基酸序列的肽片段，然后缩合得到目标肽。

这类用于合成前体线性肽的常规方法包括，例如任何固相肽合成方法。在这类方法中，新化合物的合成可按照固相方法的一般性原则，通过将所需氨基酸残基每次一个地顺序引入到生长的肽链上进行[Merrifield，R.B.，J.Amer.Chem.Soc.1963，85，2149-2154；Barany等，Thepeptides，Analysis，Synthesis and Biology，Vol.2，Gross，E.和Meienhofer，J.，Eds.Academic Press 1-284(1980)]。

肽的化学合成中常使用适宜的保护基保护各种氨基酸部分的反应性侧链基团，这将阻止在该位置发生化学反应，直至最后保护基被除去时。另外，当整体在羧基上反应时，也常见对氨基酸或其片段的α氨基的保护，然后通过选择性除去α氨基保护基，使其在该位置上发生随后的反应。虽然已经公开了有关固相合成方法的特定保护基，但应注意到，每种氨基酸都可通过常用于溶液相合成中的各种氨基酸的保护基进行保护。

α氨基可通过适宜的选自下列的保护基进行保护：芳族氨基甲酸乙酯类保护基，如苄氧羰基(Z)和取代的苄氧羰基，如对氯苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、对溴苄氧羰基、对联苯基-异丙氧羰基、9-芴基甲氧羰基(Fmoc)和对甲氧基苄氧羰基(Moz)；脂族氨基甲酸酯类保护基，如叔丁氧羰基(Boc)、二异丙基甲氧羰基、异丙氧羰基和烯丙氧羰基。本发明中，对于α氨基的保护，Fmoc是最优选的。

胍基可通过适宜的选自下列的保护基保护：硝基、对甲苯磺酰基(Tos)、Z、五甲基苯并二氢吡喃磺酰基(Pmc)、金刚烷氧羰基和Boc。对于精氨酸(Arg)而言，Pmc是最优选的。

所有溶剂，异丙醇(iPrOH)、二氯甲烷(CH₂Cl₂)、二甲基甲酰胺(DMF)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)均购自Fisher或Burdick & Jackson并且未经进一步蒸馏就使用了。三氟乙酸购自Halocarbon或Fluka并且未经进一步纯化就使用了。二异丙基碳化二亚胺(DIC)和二异丙基乙基胺(DIPEA)购自Fluka或者Aldrich并且未经进一步纯化就使用了。羟基苯并三唑(HOBT)、二甲基硫醚(DMS)和1，2-乙二硫醇(EDT)购自Sigma Chemical Co.并且未经进一步纯化就使用了。

保护的氨基酸通常是L构型的并且可购自Bachem、AdvancedChemTech或Neosystem。在使用前，通过薄层色谱、NMR和熔点证实这些试剂的纯度。二苯甲胺树脂(BHA)是苯乙烯-1％二乙烯基苯的共聚物(100-200或者200-400目)，它得自Bachem或者Advanced Chemtech。这些树脂的含氮总量通常为0.3-1.2毫克当量/g。

高效液相色谱(HPLC)在LDC仪器上进行，该仪器由Constametric I和III泵、Gradient Master溶剂程序器和混合器以及Spectromonitor III可变波长UV检测器组成。分析性HPLC使用Vydac C₁₈柱(0.4 x 30cm)以反相方式进行。制备性HPLC分离在Vydac柱(2 x 25cm)上进行。

线性肽优选通过Merrifield概述的方法[J.Amer.Chem.Soc.，1963，85，2149]，使用固相合成法制备，但如前所述也可使用本领域已知的其它等同化学合成方法。固相合成法通过将保护的α-氨基酸偶联到适宜的树脂上从肽的C-末端开始。这类原料可如下制备：将α-氨基-保护的氨基酸通过酯键连接到对苄氧基苄醇(Wang)树脂上，或者通过Fmoc-Linker，如对[(R，S)-α-[1-(9H-芴基-9-基)-甲氧基甲酰氨基]-2，4-二甲基氧基苄基]-苯氧基乙酸(Rink linker)间的酰胺键连接到二苯甲胺(BHA)树脂上。羟甲基树脂的制备是本领域公知的。Fmoc-Linker-BHA树脂支持物可从市场上得到，并且通常在被合成的目标肽在C-末端具有未取代的酰胺时使用。

由于本发明化合物是通过形成内酰胺或二硫键制备的环肽，装配前体线性肽，以将带有适当侧链基团的适宜氨基酸或者类似物置于线性肽的位置中，最终引发线性肽分子内酰胺键或二硫键形成。内酰胺通过将C-末端氨基酸残基的侧链氨基官能团与远端羧酸基团偶联形成，二硫键通过氧化偶联适当结合在前体线性肽的C-末端和位于或接近于前体线性肽的N-末端的两个半胱氨酸形成。例如，在内酰胺肽的制备中，在前体线性五肽中，N-cap可用作引入羧基，如结构X的模板，或者在六肽的情况下，设计肽，这样从一种包含被适当地保护的侧链羧基的氨基酸如天冬氨酸、谷氨酸中选择N-末端氨基酸残基。在线性六肽中，引入天冬氨酸或谷氨酸作为自N-末端倒数第二的残基。在所有前体线性肽，即七-、六-和五肽中，C-末端残基选自天然或非天然的氨基酸，它们具有被适当地保护的碱性侧链基团，当脱保护时能形成酰胺键，例如赖氨酸、鸟氨酸、2，3-二氨基丙酸、2，4-二氨基丁酸。为形成包含二硫键的环肽，在前体是线性六肽的情况下，设计肽，这样引入被适当地S-保护的半胱氨酸残基同时作为C和N-末端残基，但如果前体是线性七肽时，在例如X中，引入适当S-保护的半胱氨酸残基同时作为C-末端残基和倒数第二的N-末端残基。

通常，为制备线性肽，用2—5当量的氨基酸和适宜的偶联试剂，使用Fmoc保护形式的氨基酸或类似物，将氨基酸或类似物偶联到Fmoc-Linker-BHA树脂上。偶联后，将树脂洗涤并真空干燥。可通过对等分试样的Fmoc-氨基酸树脂的氨基酸分析测定或者通过UV分析Fmoc基团测定加载到树脂上的氨基酸。可通过在二氯甲烷中，将树脂与乙酸酐和二异丙基乙基胺反应对任何未反应的氨基加帽。

对树脂进行数次重复循环，以顺序添加氨基酸。在碱性条件下除去α氨基Fmoc保护基。为此，可使用哌啶、哌嗪或吗啉(20-40％ v/v)的DMF液。优选使用40％哌啶的DMF溶液。

除去α氨基保护基后，以所需顺序逐步偶联随后保护的氨基酸，以获得中间体—保护的肽-树脂。在肽的固相合成中，用活化试剂偶联氨基酸是本领域公知的。例如，用于这类合成的适合试剂是苯并三唑-1-基氧-三-(二甲基氨基)膦鎓六氟磷酸盐(BOP)、溴-三-吡咯烷基-膦鎓六氟磷酸盐(PyBroP)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基碳化二亚胺(DIC)。本发明优选HBTU和DIC。也可使用如Barany和Merrifield所述的其它活化试剂[The Peptides，Vol.2，J.Meienhofer编辑，Academic Press，1979，p.1-284]。为使合成循环最佳化，可将不同试剂，如1-羟基苯并三唑(HOBT)、N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)和3，4-二氢-3-羟基-4-氧代-1，2，3-苯并三嗪(HOOBT)加到偶联混合物中。本发明优选的是HOBT。

代表性的合成循环方案如下：

方案1

步骤试剂时间

1 DMF 2 x 30秒

2 40％哌啶/DMF 1分钟

3 40％哌啶/DMF 15分钟

4 DMF 2 x 30秒

5 iPrOH 2 x 30秒

6 DMF 3 x 30秒

7 偶联 60分钟—18小时

8 DMF 2 x 30秒

9 iPrOH 1 x 30秒

10 DMF 1 x 30秒

11 CH₂Cl₂ 2 x 30秒

测量用于所有洗涤和偶联的溶剂，使其体积为10-20ml/g树脂。

通过Kaiser茚三酮试验监测整个合成过程中的偶联反应，以确定完成的程度[Kaiser等，Anal.Biochem.1970，34，595-598]。观测通过立体位阻酸的Fmoc-Arg(Pmc)和与仲胺偶联的慢反应动力学。任何未完全的偶联反应使用新鲜制备的活化氨基酸再偶联或者如上所述使用乙酸酐处理肽树脂进行加帽。将完全装配好的肽-树脂真空干燥数小时。

对于各化合物，除去封阻基团并通过下述方法将线性肽从树脂上裂解下来。通常，将每克肽-树脂用100μL乙二硫醇、100μL二甲基硫醚、300μL茴香醚和9.5mL三氟乙酸在室温处理120分钟。滤出树脂并将滤液在冷乙醚中进行沉淀。离心沉淀物并弃去乙醚层。残余物用两或三倍体积的乙醚洗涤并再次离心。如果需要，线性肽粗品经制备性HPLC纯化。用最少体积的AcOH/H₂O或0.1％ TFA/H₂O将肽加样于柱上。进行梯度洗脱，一般以8mL/分的流速用10％ B缓冲液开始洗脱，然后用10％-60％B洗脱90分钟(缓冲液A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲液B：0.1％TFA/CH₃CN)。在280nm进行UV检测。以1.0—2.5分钟的间隔收集馏分并通过分析性HPLC检测。合并断定为高纯度的馏分并将其冻干。

为制备内酰胺，将适当未纯化的线性肽溶于适宜惰性溶剂，例如N-甲基吡咯烷酮或者DMF，优选DMF并通过加入叔胺碱，例如N-甲基吗啉将表观pH调至8.0，然后用酰胺键形成试剂，优选BOP处理。反应宜在40℃至0℃之间进行，优选在约室温进行并通过分析性HPLC检测环合进程。断定反应完全后，将溶液冻干并使环肽粗品通过制备性HPLC进行纯化。进行梯度洗脱，一般以8mL/分的流速用20％ B缓冲液开始洗脱，然后用20％-60％B洗脱90分钟(缓冲液A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲液B：0.1％ TFA/CH₃CN)。在280nm进行UV检测。收集馏分并通过分析性HPLC检测。合并断定为高纯度的馏分并将其冻干。

为制备环状二硫化物的肽，将纯化的HPLC-纯化的包含两个在适当位置的半胱氨酸残基的线性肽以高度稀释的水平溶于适宜的惰性溶剂混合物，例如DMSO水溶液中并通过小心地加入氢氧化铵将该溶液的pH调至8.0。然后向该搅拌的溶液中吹入氧。反应宜在40℃至0℃之间进行，优选在约室温进行并通过分析性HPLC检测环合进程。断定反应完全后，将溶液冻干并使环肽粗品通过制备性HPLC进行纯化。进行梯度洗脱，一般以8mL/分的流速用20％ B缓冲液开始洗脱，然后用20％-60％B洗脱90分钟(缓冲液A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲液B：0.1％ TFA/CH₃CN)。在280nm进行UV检测。收集馏分并通过分析性HPLC检测。合并断定为高纯度的馏分并将其冻干。

肽粗品经制备性HPLC纯化。用最少体积的AcOH/H₂O或0.1％TFA/H₂O将肽加样于柱上。进行梯度洗脱，一般以8mL/分的流速用10％B缓冲液开始洗脱，然后用10％-60％B洗脱90分钟(缓冲液A：0.1％TFA/H₂O，缓冲液B：0.1％ TFA/CH₃CN)。在280nm进行UV检测。以1.0—2.5分钟的间隔收集馏分并通过分析性HPLC检测。合并断定为高纯度的馏分并将其冻干。

在如上所述的反相柱上，经分析性HPLC检测终产物的纯度。经判定，所有产物的纯度均为约95—99％。对所有终产物均进行原子轰击质谱(FAB-MS)或者电子喷雾质谱(ES-MS)。所有产物均得到可接受限度内的预期的母体M+H离子。

合成代表性化合物的方法可通过这样一种方法进行，其中顺序添加目的序列中的各个氨基酸或其残基，每次一个；或者通过这样一种方法进行，其中首先常规合成具有目标氨基酸序列的肽片段，然后缩合得到目标肽。

合成本发明新化合物的这类常规方法包括例如任何固相肽合成方法。在这类方法中，新化合物的合成可按照固相方法的一般性原则，通过将所需氨基酸残基每次一个地顺序引入到生长的肽链上进行[Merrifield，R.B.，J.Amer.Chem.Soc.1963，85，2149-2154；Barany等，Thepeptides，Analysis，Synthesis and Biology，Vol.2，Gross，E.和Meienhofer，J.，Eds.Academic Press 1-284(1980)]。

肽的化学合成中常使用适宜的保护基保护各种氨基酸部分的反应性侧链基团，这将阻止在该位置发生化学反应，直至最后保护基被除去。另外，当整体在羧基上反应时，也常见对氨基酸或其片段的α氨基的保护，然后通过选择性除去α氨基保护基，使其在该位置上发生随后的反应。虽然已经公开了有关固相合成方法的特定保护基，但应注意到，每种氨基酸都可通过常用于溶液相合成中的各种氨基酸的保护基进行保护。

α氨基可通过适宜的选自下列的保护基进行保护：芳族氨基甲酸酯类保护基，如苄氧羰基(Z)和取代的苄氧羰基，如对氯苄氧羰基、对硝基苄氧羰基、对溴苄氧羰基、对联苯基-异丙氧羰基、9-芴基甲氧羰基(Fmoc)和对甲氧基苄氧羰基(Moz)；脂族氨基甲酸酯类保护基，如叔丁氧羰基(Boc)、二异丙基甲氧羰基、异丙氧羰基和烯丙氧羰基。本发明中，对于α氨基的保护，Fmoc是最优选的。

所有溶剂，异丙醇(iPrOH)、二氯甲烷(CH₂Cl₂)、二甲基甲酰胺(DMF)和N-甲基吡咯烷酮(NMP)均购自Fisher或Burdick & Jackson并且未经进一步蒸馏就使用了。三氟乙酸购自Halocarbon或Fluka并且未经进一步纯化就使用了。二异丙基碳化二亚胺(DIC)和二异丙基乙基胺(DIPEA)购自Fluka或者Aldrich并且未经进一步纯化就使用了。羟基苯并三唑(HOBT)、二甲基硫醚(DMS)和1，2-乙二硫醇(EDT)购自Sigma Chemical Co.并且未经进一步纯化就使用了。保护的氨基酸通常是L构型的并且可购自Bachem、Advanced ChemTech或Neosystem。在使用前，通过薄层色谱、NMR和熔点证实这些试剂的纯度。二苯甲胺树脂(BHA)是苯乙烯-1％二乙烯基苯的共聚物(100-200或者200-400目)，它得自Bachem或者Advanced Chemtech。这些树脂的含氮总量通常为0.3-1.2毫克当量/g。

高效色谱(HPLC)在LDC仪器上进行，该仪器由Constametric I和III泵、Gradient Master溶剂程序器和混合器以及Spectromonitor III可变波长UV检测器组成。分析性HPLC使用Vydac C₁₈柱(0.4 x 30cm)以反相方式进行。制备性HPLC分离在Vydac柱(2 x 25cm)上进行。

肽优选通过Merrifield概述的方法[J.Amer.Chem.Soc.，1963，85，2149]，使用固相合成法制备，但如前所述也可使用本领域已知的其它等同化学合成方法。固相合成法通过将保护的α-氨基酸偶联到适宜的树脂上从肽的C-末端开始。这类原料可如下制备：将α-氨基-保护的氨基酸通过酯键连接到对苄氧基苄醇(Wang)树脂上，或者通过Fmoc-Linker，如对[(R，S)-α-[1-(9H-芴基-9-基)-甲氧基甲酰氨基]-2，4-二甲基氧基苄基]-苯氧基乙酸(Rink linker)间的酰胺键连接到二苯甲胺(BHA)树脂上。羟甲基树脂的制备是本领域公知的。Fmoc-Linker-BHA树脂支持物可从市场上得到，并且通常在被合成的目标肽在C-末端具有未取代的酰胺时使用。

通常，用2—5当量的氨基酸和适宜的偶联试剂，使用Fmoc保护形式的氨基酸或类似物，将氨基酸或类似物偶联到Fmoc-Linker-BHA树脂上。偶联后，将树脂洗涤并真空干燥。可通过对等分试样的Fmoc-氨基酸树脂的氨基酸分析测定或者通过UV分析Fmoc基团测定加载到树脂上的氨基酸。可通过在二氯甲烷中，将树脂与乙酸酐和二异丙基乙基胺反应对任何未反应的氨基加帽。

除去α氨基保护基后，以所需顺序逐步偶联随后保护的氨基酸，以获得中间体—被保护的肽-树脂。在肽的固相合成中，用活化试剂偶联氨基酸是本领域公知的。例如，用于这类合成的适合试剂是苯并三唑-1-基氧-三-(二甲基氨基)膦鎓六氟磷酸盐(BOP)、溴-三-吡咯烷基-膦鎓六氟磷酸盐(PyBroP)、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基碳化二亚胺(DIC)。本发明优选HBTU和DIC。也可使用如Barany和Merrifield所述的其它活化试剂[The Peptides，Vol.2，J.Meienhofer编辑，Academic Press，1979，p.1-284]。为使合成循环最佳化，可将不同的试剂，如1-羟基苯并三唑(HOBT)、N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)和3，4-二氢-3-羟基-4-氧代-1，2，3-苯并三嗪(HOOBT)加到偶联混合物中。本发明优选的是HOBT。

代表性的合成循环方案如下：

方案1

步骤试剂时间

1 DMF 2 x 30秒

2 40％哌啶/DMF 1分钟

3 40％哌啶/DMF 15分钟

4 DMF 2 x 30秒

5 iPrOH 2 x 30秒

6 DMF 3 x 30秒

7 偶联 60分钟—18小时

8 DMF 2 x 30秒

9 iPrOH 1 x 30秒

10 DMF 1 x 30秒

11 CH₂Cl₂ 2 x 30秒

测量用于所有洗涤和偶联的溶剂，使其体积为10-20ml/g树脂。通过Kaiser茚三酮试验监测整个合成过程中的偶联反应，以确定完成的程度[Kaiser等，Anal.Biochem.1970，34，595-598]。观测用于通过立体位阻酸的Fmoc-Arg(Pmc)和与仲胺偶联的慢反应动力学。任何未完全的偶联反应使用新鲜制备的活化氨基酸再偶联或者如上所述使用乙酸酐处理肽-树脂进行加帽。将完全装配好的肽-树脂真空干燥数小时。

对于各化合物，除去封阻基团并通过下述方法将线性肽从树脂上裂解下来。通常，将每克肽-树脂用100μL乙二硫醇、100μL二甲基硫醚、300μL茴香醚和9.5mL三氟乙酸在室温处理120分钟。滤出树脂并将滤液在冷乙醚中进行沉淀。离心沉淀物并弃去乙醚层。残余物用两或三倍体积的乙醚洗涤并再次离心。将粗产物真空干燥。

肽粗制品的纯化

利用上述技术，本发明化合物可按照下列反应方案合成。

反应方案A

式中“piperidine”表示“哌啶”，“Cycle”表示“时段”。

R⁸、R⁹、R¹⁰和m如前所述。

反应方案B

式中“piperidine”表示“哌啶”。

以同样方式： R⁹、R¹⁰和m如前所述。

反应方案D

R²、R⁸、R⁹、R¹⁰、Q和m如前所述。式中“piperidine”表示“哌啶”。

反应方案F

反应方案G

反应方案H

反应方案I

R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R⁹、R¹⁰、Q、p和m如前所述。

反应方案J

R⁸、R⁹和R¹⁰如前所述。

反应方案K

式中“piperidine”表示“哌啶”。

m、p、Q、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁸、R¹⁰如前所述。

反应方案L

R²、R⁸、R⁹、R¹⁰、Q和m如前所述。

反应方案M

反应方案N

反应方案O

反应方案Q

反应方案R

反应方案S

R³、R⁴、R⁵如前所述。

反应方案T

R³、R⁴、R⁵、R⁶如前所述。

反应方案U

反应方案V

R⁶如前所述。

本发明中，作为本发明环肽合成中的倒数第二的中间体的线性肽(结构式1)通过上面讨论的常规的固相肽合成方法制备。每个循环由两个步骤组成；首先从树脂结合的链的末端氮上裂解Fmoc保护基，然后用Fmoc保护的氨基酸酰化胺官能团。该循环一般按照方案1中概括的各步进行。脱保护在适宜惰性溶剂，例如N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或者N-甲基吡咯烷酮(NMP)中，使用有机碱，例如哌嗪、吗啉或者哌啶，优选哌啶进行。偶联反应可通过多种形成酰胺键的条件之一进行，例如在惰性溶剂，如DMF中，在有机碱，如二异丙基乙基胺(DIPEA)的存在下，使用如O-苯并三唑-1-基N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)进行。或者在本发明的实例中，可在适宜的惰性溶剂，如DMF中，使用碳化二亚胺，如二异丙基碳化二亚胺(DIC)与活化试剂，如1-羟基苯并三唑(HOBT)形成酰胺基。

在反应方案A，在结构式1的环肽的线性多肽前体的制备的第一个循环中，Z是NHCO，将结构式2代表的Fmoc-Linker-BHA树脂脱保护并与结构式3的Fmoc-氨基酸缩合，得到树脂结合的化合物4。在该环肽的合成中，要求Fmoc-氨基酸3包含关键的结构，该结构是适宜保护的碱性侧链，当将其脱保护时，该侧链可参与分子内酰胺键的形成。为延长生长的肽链，第二循环引入Fmoc-氨基酸5，得到结构式6的化合物。在第三循环中，处理树脂连接的肽6，得到结构式7a的中间体，其中R⁸是氢。如方案C所示，合成其中R⁸是甲基的结构7b的中间体。

如方案C所示，结构式7b的中间体由结构式7a的化合物制得。在该步骤中，将结构式7a的化合物(如方案1的步骤1-5所述，通过处理结构式6的化合物制备)与芳基磺酰氯，优选2-硝基苯磺酰氯反应，制备结构式24的化合物。该反应在适宜的惰性溶剂，优选DMF中，在质子接受剂，如吡啶、三乙胺(TEA)或者DIPEA，优选DIPEA的存在下进行。在Mitsunobu条件下，在结构式24的树脂结合的化合物的洗涤中完成对形成的磺酰氨基的N-甲基化，制备结构式25的化合物。在进行该反应时，使用甲醇作为溶剂，在偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)和三苯基膦的存在下，将结构式24的磺酰胺与甲醇反应。待反应完全后，洗涤结构式25的树脂结合的N-甲基磺酰胺，以除去残余的试剂和副产物。

在反应方案A描述的下步中，在适宜溶剂，优选DMF中，通过将结构25与2-巯基乙醇和强的有机碱1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)反应，从结构式25除去2-硝基苯磺酰基，得到结构式7b的树脂结合的中间体。反应方案A的第三循环如下完成：将结构式7a和7b的化合物与Fmoc-Arg(Pmc)-OH(8)或者Fmoc-Cit-OH(9)偶联，得到结构式10的树脂结合的化合物。

反应方案B显示的下面两个循环如下进行：首先将结构式10的肽与氨基酸Fmoc-(D)-Phe-OH反应，得到结构式11的化合物，然后将该结构式11的化合物与结构式12或13的氨基酸类似物反应，将这些氨基酸引入树脂结合的肽中，根据使用的氨基酸类似物，得到结构式14和15的树脂结合的五肽。以两种方式完成将另外的包含羧基侧链的氨基酸引入该线性五肽，该五肽适于最终参与本发明环肽的形成。

a.如反应方案B所示，将具有适宜保护的酸侧链的Fmoc氨基酸引入树脂结合的五肽14和15中。这样，在第6循环(反应方案B)，将Fmoc-Asp(OtBu)-OH(16)或者Fmoc-Glu(OtBu)-OH(17)引入到了生长的肽链中，分别得到结构式18和19的树脂结合的六肽，或者

b.用结构式28′(反应方案F)的环酸酐，如马来酸酐或者邻苯二甲酸酐对树脂结合的五肽14和15进行N-加帽，分别得到结构式29和30的化合物，或者

c.如反应方案B所示，进一步将树脂结合的六肽18和19与另一种氨基酸反应，形成N-加帽前的七肽。N-加帽通过以常规方式引入氨基酸残基，优选Fmoc-Nle-OH完成，得到21和22。

七肽或六肽的N-加帽产生化合物1的末端酰胺官能团。以此方式，制备取代基X、Y、R¹²和R¹。对于N-加帽的树脂结合的六肽(18、19)或者七肽(21、22)，首先将该多肽用哌啶的DMF处理，以除去Fmoc保护基，然后与酰化试剂反应。如反应方案D所示，为制备结构式1的化合物，在形成Z(其中X和Y是CH，并且R¹是

)之前，将结构式18的树脂结合的多肽脱保护并进行N-乙酰化，得到结构式27的树脂结合的酰胺，或者在脱保护之后，与异氰酸酯反应，形成结构式28的脲。在本领域专业技术人员公知的各种方法下进行N-酰化。使用的这些方法是：

(i)在适宜溶剂，如DMF中，在HBTU和有机碱，优选DIPEA的存在下进行的末端氨基官能团与羧酸R²-CO₂H的反应；

(ii)在适宜溶剂，如二氯甲烷中，在有机碱，如吡啶、TEA和DIPEA，优选DIPEA的存在下进行的末端氨基官能团与酰氯R²-COCl的反应；或者

(iii)如反应方案F所示的末端氨基官能团与结构式28′的羧酸酐的反应。该反应在适宜的溶剂，如二氯甲烷或者DMF中，在有机碱，如DIPEA的存在下进行。

反应方案D中的N-加帽反应如下进行：通过结构式28的化合物的末端氨基与异氰酸酯R²-NCO反应将结构式18的化合物转化为结构式28的脲。该反应在适宜的溶剂，如二氯甲烷或DMF中，在有机碱，优选DIPEA的存在下进行。当酰化和脲形成反应完成后，将树脂结合的产物27和28进行洗涤，除去残留的试剂和副产物。采用类似的条件，对结构式19、21和22的树脂结合的多肽进行N—加帽，形成结构式33、35、37的N-酰化的化合物和结构式34、36和38的脲(反应方案E)。但可对反应方案E进行修改，通过利用已知的，但不是反应方案B中用于制备结构式21和22的化合物的结构式20的化合物，可提供除Nle衍生的基团以外的基团R¹⁴。

反应方案G和H描绘了N-加帽的多肽29、30、33—38中剩余的保护基的裂解和肽与固体支持物的裂解。该反应使用强的有机酸，优选三氟乙酸，任选在惰性溶剂，如二氯甲烷和痕量(1％)水的存在下，并任选在一种或多种碳阳离子清除剂，例如乙二硫醇、二甲基硫醚、三乙基硅烷和茴香醚的存在下进行。从固体支持物中滤净多肽裂解溶液，然后用适宜的溶剂，优选乙醚洗涤，并过滤收集形成的固体。在反应方案H中制得的结构式39—44的固体多肽会使用制备性C18柱通过反相色谱进行纯化。

使具有可用于形成分子内酰胺键的适当官能团的N-加帽的线性多肽在本领域公知的酰胺形成反应条件下进行反应。因此，分别将线性肽31、32(反应方案G)和39—44(反应方案I)溶于惰性有机溶剂，如DMSO，并加入叔胺碱，如N-甲基吗啉将该溶液的表观pH调至8，然后加入酰胺形成试剂，如BOP。该反应可方便地在0—40摄氏度，优选在约室温下进行。使该反应一直进行，直至经判断反应完全。普通专业技术人员对于监测反应进程的常用方法是例如TLC或者分析性HPLC。真空除去反应溶剂后，结构式I的环肽粗品(其中Z是NHCO，如反应方案1中所示)可使用制备性C18柱通过反相色谱进行纯化。由此方式制得其中Z是NHCO桥的结构式1的化合物。

其中Z是S-S的结构式1的环二硫化肽可通过类似于上述用于制备其中Z是NHCO的结构式1的内酰胺的反应方案A—H中的反应方案概括的方法制备。不同在于，优选在第1—6个循环，将包含保护的硫醇侧链残基的氨基酸，例如Fmoc-Cys(Trt)-OH引入生长的树脂结合的多肽的适当位置，以类似方式装配倒数第二的线性多肽。反应方案J和K中说明了该树脂结合的线性多肽的制备。如前面的方案L中所述和所示，在除去Fmoc保护基后，树脂结合的线性六肽52可通过酰化进行N-加帽得到56，或者通过与异氰酸酯反应得到脲57。同样，可将树脂结合的六肽53，以及树脂结合的七肽54和55转化为相应的N-酰化的衍生物58、60和62以及脲衍生物59、61和63(反应方案M)。

反应方案N中，将N-加帽的树脂结合的线性六肽56用强酸，优选三氟乙酸，任选在惰性溶剂，如二氯甲烷并且任选在一种或多种碳阳离子清除剂，如乙二硫醇、二甲基硫醚、三乙基硅烷和茴香醚的存在下进行处理。这种处理导致所有侧链保护基的裂解以及线性肽从固体支持物上裂解下来。该反应方便地在0—35摄氏度下，优选在室温下进行。从固体支持物中过滤多肽裂解溶液，然后用适宜的溶剂，优选乙醚稀释，并过滤收集形成的固体。由此制得的结构式64的固体多肽可任选地使用制备性C18柱通过反相色谱进行纯化。然后在本领域专业技术人员公知的氧化条件下处理线性六肽64，该处理致使硫醇形成二硫键。因此，使用适当的弱无机碱，优选氢氧化铵将64的稀水溶液的pH调至8.0，然后向溶液中吹入氧气，直至使用标准方法，如TLC或HPLC判断环合完成。通过冻干除去反应溶剂后，由此制得和分离的环肽粗品(I；Z＝S-S)可使用制备性C18柱通过反相色谱进行纯化。

在类似于上述有关反应方案H和I描述的条件下，将如反应方案O和P中所示的树脂结合的线性多肽58—63脱保护并从固体支持物上裂解下来，得到线性多肽65—70(反应方案O)，然后如上所述，将它们氧化环合，得到相应的结构式1的化合物(反应方案P)。

用于制备上述肽的Fmoc-氨基酸，以及用于对多肽进行N-加帽的酰化试剂和异氰酸酯是有市售的已知化合物。反应方案B中使用的Fmoc-氨基酸12，包括其同类化合物—结构式13的化合物可如本发明所述通过有机化学领域的普通专业技术人员公知的方法制备。方案Q中，概括了由环酮制备结构式12的化合物Fmoc-氨基酸类。这类结构式12和结构式13、79和80一类的化合物，它们的制备方式与方案Q的方法中概括的结构式75一类的化合物相同。通过使用碳酸铵和氰化钾处理，将结构式71的4-苯基环己酮转化为结构式72的乙内酰脲。该反应可方便地如下进行：在含水乙醇混合液中，在50—90℃，优选80—90℃下，乙内酰脲转化为结构式73的氨基酸的直接水解需要在回流温度下使用强碱，例如6N氢氧化钠溶液或者氢氧化钡处理较长的时间。或者，可将结构式72的化合物转化为结构式74的二-Boc衍生物。该反应如下进行：使用叔丁基二碳酸酯[(Boc)₂O]在惰性溶剂，优选四氢呋喃(THF)中，在有机胺碱，优选TEA和催化剂，4-二甲基氨基吡啶(DMAP)的存在下，在0℃至室温，优选在室温下进行。结构式74的二-Boc乙内酰脲很容易转化为结构式73的氨基酸。该反应可在惰性溶剂，优选二甲氧基乙烷(DME)中，在0℃—50℃，优选在近室温下，使用1N氢氧化钠完成。结构式73的化合物中，使用Fmoc基团的氨基官能团的保护在得到结构式75化合物的各种条件下进行，结构式75化合物是结构式12的化合物的Fmoc-氨基酸类。该反应可方便地如下进行：在0℃至室温，优选在室温下，使用9-芴基甲氧基氯甲酸酯(FmocCl)处理氨基酸73在THF或二噁烷，优选二噁烷与碳酸钠水溶液的混合液中的溶液。或者，将N-(9-芴基甲氧基羰基氧)琥珀酰亚胺(FmocOSu)加到氨基酸73在包含有机叔胺碱，优选TEA的含水乙腈中的溶液中。该反应在0℃至室温，优选在室温下进行。在另一种改变的方法中，从74转化为73的水解混合物中蒸发DME，并将反应物调至pH11。然后将所得的73的钠盐溶液就地用FmocOSu或者FmocCl在二噁烷中，在0℃至室温的温度下，优选在室温下进行处理。同样，如同在反应方案Q中，可将四氢萘酮76、N-芳基-4-酮基哌啶77和环己酮衍生物78转化为相应的结构式13、79和80的Fmoc-氨基酸，所有这些均可与73形成用于反应方案B的结构式12的小类物质。

反应方案Q中，在结构式82的小组中，结构式73的化合物(其中R⁴代表直链或支链的低级烷氧基并且R²和R³都是氢)可如反应方案R中所述，将结构式81的化合物进行O-烷基化来制备。

在R¹⁶代表直链低级烷基时，在碱金属碳酸盐，例如碳酸钠或碳酸钾的存在下，使用结构式R¹⁶卤化物的伯烷基卤化物进行烷基化。烷基卤化物可以是氯、溴或碘衍生物，优选烷基碘化物。该反应可方便地在促进SN₂置换反应的惰性溶剂，例如丙酮、2-丁酮或者N，N-二甲基甲酰胺，优选丙酮中，在室温至溶液的回流温度下，优选在回流温度下进行。当R¹⁶代表支链低级烷基，如2-丙基时，结构式81的化合物制备结构式82的化合物的烷基化反应是在碱金属碳酸盐，如碳酸钾的存在下，通过使用结构式R¹⁶卤化物的仲烷基卤化物进行。仲烷基卤化物优选是仲烷基碘化物，例如2-碘代丙烷。该反应可方便地在惰性溶剂，优选N，N-二甲基甲酰胺中，在室温至溶液的回流温度，优选在约100℃下进行。

作为反应方案Q中的原料的结构式71的4-芳基环己酮可通过有机化学领域的专业技术人员公知的方法进行制备。如方案S中所概括，用烷基金属试剂，如叔丁基锂处理结构式83的芳基卤化物(其中X¹代表溴或碘)与烷基金属试剂优选叔丁基锂发生转金属反应，得到相应的结构式84的芳基锂。该反应可方便地在-78℃下，将烷基锂的溶液加到结构式83的化合物在惰性无水溶剂，如乙醚或四氢呋喃，优选四氢呋喃中的溶液中进行。然后将如此制得的结构式84的芳基锂就地与环己烷-1，4-二酮的单酮缩醇(monoketal)(85)在适宜惰性溶剂，如四氢呋喃中的溶液中，同时使反应温度保持在低于-60℃，优选在约-78℃，得到结构式86的甲醇。通过使结构式86的甲醇脱水，得到结构式87的化合物。该反应方便地是使用强有机酸催化剂，优选对甲苯磺酸，在惰性溶剂，如苯或甲苯中，优选苯，在溶剂的回流温度下进行。使用Dean Stark装置从反应混合物中除去生成的水，以使反应完全。通过氢化结构式87的烯烃制备结构式88的化合物。该反应可方便地使用贵金属催化剂，如批钯碳，在氢气氛中，在惰性溶剂，如乙醇或乙酸乙酯中进行。氢化一般在室温和40psi的氢气下进行，但如果结构式87中的芳环包括易于氢解的基团，例如如果R³、R⁴或R⁵代表氯，则反应压力应保持在约5psi。结构式88的化合物也可由结构式86的甲醇，通过直接还原除去羟基得到。在该反应中，在0℃至室温下，使用路易斯酸，如三氟化硼乙醚合物，和还原剂，如三乙基硅烷处理结构式86的化合物(R³＝R⁴＝H并且R⁵＝OMe)在惰性溶剂，如二氯甲烷中的溶液。脱去结构式88化合物中的酮缩醇保护基，得到式71的酮，该化合物是反应方案Q中用于制备结构式12的化合物的结构式75的Fmoc-氨基酸类化合物的原料。该反应方便地是在丙酮或2-丁酮中，优选在丙酮中，在酸，如4N盐酸或对甲苯磺酸的催化下，在室温至反应混合物的回流温度，优选回流温度下进行。

用于制备结构式13的化合物的原料的反应方案Q中所示的结构式76的5-取代的-β-四氢萘酮是已知化合物，或者如果它们不是已知化合物，它们可通过有机化学领域专业技术人员公知的方法制备。在本发明的实例中，结构式76的化合物主要通过反应方案T和U中概括的两种方法制备。如反应方案T所示，将结构式90的2-取代的氢化肉桂酸转化为结构式91的相应的酰氯。该转化反应可通过数种方法进行，例如通过在惰性溶剂，如苯或二氯甲烷，优选二氯甲烷中，任选在催化量的N，N-二甲基甲酰胺的存在下，使用草酰氯处理氢化肉桂酸。该反应可方便地在0℃至室温下，优选在室温下进行。或者，将结构式90的化合物与酰氯形成试剂，如磺酰氯，在惰性溶剂，如苯或甲苯，优选甲苯，在室温至溶液回流温度，优选在回流温度下反应。结构式92的重氮甲酮通过在惰性溶剂，如二氯甲烷中，使用过量新鲜制备的重氮甲烷的乙醚溶液处理生成的结构式91的酰卤来制备。试剂的混合方便地是在冰浴温度下进行，然后使其在0℃至室温，优选在室温下进行反应。如反应方案T中所示，结构式92的重氮甲酮环合制备结构式76的四氢萘酮的反应通过在惰性溶剂，如二氯甲烷中使用二聚乙酸铑(II)促进。该反应通常在室温至溶液的回流温度下，优选在回流温度下进行。

作为反应方案Q中的原料，其中R⁶代表直链或支链低级烷氧基的结构式76的化合物可如反应方案U所示，由结构式93的化合物制备。在反应方案U中，其中R¹⁵是直链低级烷基的结构式94的化合物如下制备：在碱，例如碱金属碳酸盐，如碳酸钠或碳酸钾的存在下，使用伯烷基碘化物或溴化物，优选碘化物对结构式93的萘二醇进行全-O-烷基化。该反应在惰性溶剂，优选N，N-二甲基甲酰胺中，在室温至100℃，优选在35℃下进行。其中R¹⁵是支链低级烷基的结构式97的化合物可由结构式94的2-四氢萘酮开始，分两步制备。然后在贵金属催化剂，如钯金属(披在10％碳上)的存在下，在适宜的高沸点溶剂，如对甲基异丙基苯中，使结构式95的四氢萘酮脱氢，得到结构式96的芳香化化合物。然后在碱，如碱金属碳酸盐，优选碳酸铯的存在下，使用仲烷基碘化物，将结构式96的萘酚进行O-烷基化，得到结构式97的化合物。该反应方便地是在惰性溶剂，优选N，N-二甲基甲酰胺中，在室温至100℃，优选约40℃下进行。

结构式76的四氢萘酮如下制备：在溶解金属条件下，还原结构式94和97的化合物，然后使中间体烯醇醚进行酸催化水解。该转化反应方便地是将大大过量的碱金属，如钠或钾，优选钠，分次加入底物在低级醇，优选乙醇中的沸腾溶液中，直至原料被消耗。结构式76的四氢萘酮通过使用强酸催化剂，优选对甲苯磺酸处理分离的中间体烯醇醚的溶液获得。该水解反应可方便地在低级醇，优选乙醇和水的混合液中，在室温至溶液的回流温度，优选回流温度下进行。

在反应方案Q中用作制备式79的化合物的原料的结构式77的化合物的制备中，使用结构式98的化合物作为原料，所述式79的化合物是结构式12的化合物的Fmoc-氨基酸类化合物。这显示在反应方案V中。在反应方案V中，结构式100的化合物可通过先前已知的反应制备，例如它们可通过将结构式98的仲胺与结构式99的芳基溴化物或碘化物，优选芳基碘化物偶联进行制备(反应方案V)。该偶联反应通过贵金属催化剂，优选三(二亚卞基丙酮)二钯，在螯合膦配体，优选三-o-甲苯基膦，和位阻的醇盐碱，例如叔丁醇钠存在下进行催化。该反应方便地是在惰性气氛下，使用无水溶剂，如二噁烷或甲苯，优选二噁烷中，在60℃至回流温度，优选90℃下进行。除去化合物100中的羰基保护基以得到结构式77的化合物的反应可通过有机化学领域中公知的各种方法进行。例如，可如下实现脱保护：在室温至混合物的回流温度，优选在回流温度下，使用无机酸溶液，例如6N盐酸处理化合物100在低沸点酮，如丙酮或2-丁酮中的溶液。在反应方案V中，当以这种方式使用无机酸水溶液处理结构式100的化合物时，形成结构式77的化合物。如反应方案Q的讨论中证明的那样，结构式77的化合物是结构式79的化合物的中间体，结构式79是结构式12的酸类化合物，其中Q是

在反应方案A中，结构式5的氨基酸是已知化合物，其中R⁹是

另一方面，结构式5的氨基酸(其中R⁹中的R¹⁷是低级烷基，即，其中R⁹是

可如下由式101的化合物，通过反应方案V制备：

如反应方案W所示，(β-甲基(Nin-Mes)色氨酸109通过Boteju，L.W.、Wenger K.和Hruby，V.J.在Tet.Lett.，33，7491(1992)中先前描述的方法进行制备。第一步中，通过将反式-吲哚-3-丙烯酸101转化为相应的1，3，5-三甲基苯磺酰胺102对氮进行保护。该反应如下进行：在惰性溶剂，优选四氢呋喃，在-40—约-100℃下，最方便地是在-78℃下，使用过量(>2当量)的烷基锂或者芳基锂试剂，如苯基锂或正丁基锂，优选正丁基锂试剂处理吲哚酸101。同时使反应保持在约-78℃，然后将形成的二锂化物与1，3，5-三甲基苯磺酰氯反应，得到1，3，5-三甲基苯磺酰胺102。然后将N-保护的吲哚丙烯酸102与手性助剂(R)-4-苯基-2-噁唑烷酮(制备参见Nicolas等，J.Org Chem.1993，58，766-770)(以其N-锂化物104的形式)偶联，得到手性的丙烯酰胺105。该偶联通过由102形成的混合酸酐完成。为形成混合酸酐103，在叔胺碱，如三乙胺或二异丙基乙基胺，优选三乙胺的存在下，将N-保护的吲哚丙烯酸102与适宜的酰氯，如叔丁基氯甲

反应方案W

酸酯，2，4，6-三氯苯甲酰氯或者新戊酰氯，优选新戊酰氯反应。选择适宜的酰氯以形成酸酐103的标准是有机化学领域的专业技术人员十分明确和公知的。酸酐的形成是在惰性溶剂，如四氢呋喃中，在-100℃—0℃，优选约-78℃的初始温度下进行。在-78℃—0℃，优选在约0℃下，使该反应完成。然后将如此形成的混合酸酐103就地与N-锂化的(R)-4-苯基-2-噁唑烷酮104反应，104预先如下制备：在-100℃—0℃，优选在约-78℃下，使用等摩尔量的烷基锂或芳基锂试剂，例如苯基锂或正丁基锂，优选正丁基锂在惰性溶剂，如己烷中的溶液处理(R)-4-苯基-2-噁唑烷酮在惰性溶剂，如四氢呋喃中的溶液。得到手性丙烯酰胺105的偶联反应在-100℃—0℃，优选在约-78℃的初始温度下进行，待所有的试剂混合后，使反应在-78℃至室温，优选在室温下进行。

手性丙烯酰胺105转化为106的关键是控制106中两个新的相邻的手性中心的生成。该反应涉及甲基铜酸盐的立体选择性1，4-共轭加成(Michael加成)，由溴化亚铜-甲硫醚配合物和甲基溴化镁就地形成Micheal接受剂，105中存在的α，β-不饱和的羰基体系。然后，使用卤化试剂，优选N-溴琥珀酰亚胺直接卤化所得的金属螯合的烯醇化物，得到106。再者，如同在Michael加成中一样，溴原子的引入是立体选择性的，该过程通过手性助剂上的体积较大的苯基控制，该苯基有效地保护了α，β-不饱和酰基噁唑烷酮体系和中间体金属-螯合的烯醇化物的si面，使它们免受进一步加入的试剂的进攻。为制备甲基铜酸盐，将甲基溴化镁的乙醚溶液加到溴化亚铜-甲硫醚(1：1)配合物在惰性溶剂，如甲硫醚或四氢呋喃，优选其混合液中的溶液中。该反应在-78℃至室温，优选在-4℃下进行。可加入任何低级烷基溴化物来代替甲基溴化镁，以形成R¹⁷，其中R¹⁷是除甲基以外的低级烷基。向如此形成的甲基铜酸盐的溶液中就地加入α，β-不饱和酰基噁唑烷酮105在惰性溶剂，优选四氢呋喃中的溶液。该甲基铜酸盐加入的起始温度为-30℃至室温，优选在-4℃下加入，然后使反应在室温下进行。当判定反应完成(如通过TLC或HPLC分析)，后，将其冷却到-100℃—-40℃，优选约-78℃，此时加入卤化试剂，优选N-溴琥珀酰亚胺在惰性溶剂，如四氢呋喃中的溶液。使该反应在0℃至室温下进行，优选在近室温下进行，分离后，得到溴化物106。该溴化物用叠氮离子进行置换，同时伴随构型的转化。该转化通过在惰性溶剂，如乙腈中，在过量叠氮化钠的存在下，将溴化物106与四丁基叠氮化铵反应来完成，得到叠氮化物107。该反应方便地是在80℃至室温，优选在近室温下进行。在导致手性助剂水解的过氧化氢的存在下，处理107和碱金属氢氧化物，例如氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化锂，优选氢氧化锂，得到叠氮酸108。该水解反应在惰性溶剂，优选水中，在0℃至室温下，优选在约0℃下进行。氢化α-叠氮酸108，得到β-甲基(Nin-Mes)色氨酸，并将其立即转化为相应的N-(α)-Fmoc-β-甲基(Nin-Mes)色氨酸109。108的氢化是在贵金属催化剂，优选10％ Pd/C的存在下，在惰性溶剂，如低级链烷醇，优选甲醇中，在低压(<2个大气压)和室温下进行。过滤除去催化剂后，除去挥发物并将产物溶于惰性溶剂，如四氢呋喃或水中，尤其其混合液中，并使用温和的无机碱，如碱金属碳酸氢盐，优选碳酸氢钠，和Fmoc N-保护基形成试剂，例如9-芴基甲基氯甲酸酯(Fmoc-Cl)或9-芴基甲基-N-琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu)，优选Fmoc-Osu进行处理，得到109。该反应方便地是在0℃至室温下，优选在近室温下进行。式109的化合物是反应方案A中结构式5的氨基酸类化合物。

本发明还涉及通过在前体线性肽的Z位形成内酰胺键或二硫键制备式I化合物的方法，

其中R¹—R¹²、m、p、Q、X、Y和Z定义如上。

药物组合物

本发明还涉及包含如上定义的化合物和治疗惰性载体的药物组合物。

按照本发明方法制备的式I和II的化合物以及Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH₂；和Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S，3S)β-甲基-Trp-Lys-NH₂可通过本领域已知的方法，使用适宜载体或赋形剂制成适于服用或吸入的药物组合物。

上述化合物可用作药物，例如以药物制剂形式，如用于非胃肠给药。它们也可以以注射液或输液形式经非胃肠给药。

药物制剂可采用本领域专业技术人员熟悉的方式制备，将上述化合物，任选地和其他有治疗价值的物质与适宜的、无毒的、惰性的、治疗学上相容的固体或液体载体物质，如果需要还可包括制药助剂一起制成给药形式。

适宜的载体物质不仅包括无机载体物质，还包括有机载体物质。

常用的稳定剂、防腐剂、润湿剂和乳化剂、均匀性改善剂、矫味剂、改变渗透压的盐、缓冲物质、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧化剂都可考虑作为制药助剂。

上述化合物的剂量可根据下列因素在较宽的范围内变化：所控制的疾病、患者的年龄和个体状况以及给药方式，当然，对于每个具体病例，剂量应适合于个体的要求。对于成人患者，考虑的每日剂量为约1mg—约1000mg，优选约10mg—约500mg。根据剂量，方便地以数个剂量单位进行给药。

药物制剂通常包含约1—500mg，优选5—200mg的上述化合物。

治疗肥胖

本发明制备的化合物在体外表现出选择性MC-4受体激动剂活性。已知MC4-R活性的激动剂在人肥胖的小鼠模型中减少食物的摄入。因此，服用这些化合物拮抗MC4-R活性，这对于体重的调节具有重要意义。包含本发明化合物的药物组合物可以以有效强度进行配制，用于通过各种手段给药于体重过重的人或动物患者，所示体重过重是单纯性的或者是不利的医学适应症或疾病，如II型糖尿病的部分表现。可采用各种给药技术。活性化合物的平均量可以改变，但优选应根据有资格的医师或兽医的建议和处方进行改变。

因此，本发明还涉及如上定义的化合物用于制备治疗和/或预防与黑皮质素-4-受体活性有关的疾病的药物的用途。此外，本发明涉及治疗和/或预防与黑皮质素-4-受体活性有关的疾病的方法，该方法包括给人或动物施用如上定义的化合物。所述化合物尤其可用于治疗和/或预防肥胖。

本发明还涉及通过上述方法制备的如上定义的化合物。此外，本发明涉及作为治疗活性物质，特别是作为治疗和/或预防与黑皮质素-4-受体有关的疾病，如肥胖的治疗活性物质的如上定义的化合物。

参考下列实施例可更好地理解本发明，这些实施例举例说明而非限制本发明。实施例部分出现的具体化合物的结构式中，为方便起见，通常省略氢。

实施例

实施例1

Fmoc-1-氨基-4-苯基环己烷-1-羧酸(Fmoc-Apc)的制备

步骤1：

向玻璃耐压瓶中的4-苯基环己酮(10.0g，57.5mmol)在乙醇(100mL)和水(33mL)中的溶液中加入碳酸铵(33g，344mmol，6当量)和氰化钾(5.6g，86.2mmol，1.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热24小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(400ml)中并剧烈搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲A(14.0g，收率100％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：8.63(s，1H)，7.23-7.36(m，4)，7.15(m，1)，2.50(m，1H)，2.10(m，1H)，1.85(d，1H)和1.55-1.80(m，6H)。

步骤2：

将该乙内酰脲A(10.0g)混悬于NaOH水溶液中(6N，350mL)并将其在130℃下加热2-3天。在完全水解后，将该反应混合物用浓HCl中和至弱酸性(pH～6)。将所得的结晶浆液进行过滤，用水进行洗涤并进行干燥，得到白色固态的1-氨基-4-苯基环己烷羧酸(APC)(25g，收率>100％，该收率中包含无机盐)，其可直接用于下一步骤。用HPLC对该粗品中的一小部分进行纯化。¹H NMR(DMSO-d₆)：7.23-7.35(m，2)，7.10-7.19(m，3H)，2.45(m，1H)，1.92-2.18(m，3H)，1.56-1.78(m，4H)和1.20(m，1H)；LRMS(电子雾化)m/e220(M+1)⁺，计算值(Cl₃H₁₇NO₂)：219。

步骤3：

将得自上一步骤的1-氨基-4-苯基环己烷羧酸(APC)粗品(25g)混悬于二噁烷(300mL)和10％ Na₂CO₃水溶液(150ml)中并剧烈搅拌一整夜。将该反应混合物进行浓缩以除去二噁烷，用6N HCl中和至弱酸性(pH 5-6)并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行洗涤并用Na₂SO₄进行干燥。将该溶剂除去，得到粗品，然后用闪柱色谱法对其进行纯化(己烷/EtOAc至CH₂Cl₂/MeOH)，得到纯的Fmoc-顺式-APC(18.2g，两个步骤的总收率为72％)和Fmoc-反式-APC(2.1g，8％)。Fmoc-顺式-APC，¹HNMR(CD₃OD)，7.79(d，2H)，7.72(d，2H)，7.37(t，2)，7.24-7.32(m，4)，7.14-7.23(m，3)，4.37(d，2H)，4.24(t，1H)，2.55(m，1H)，2.28(m，2H)，1.84-1.96(m，2H)和1.64-1.73(m，4H)。

实施例2

Fmoc-1-氨基-4-(4-甲氧基苯基)环己烷-1-羧酸(Fmoc-4-MeOApc-OH)的制备

步骤1：

将4-(4-羟基苯基)环己酮(5.0g，26.3mmol)在丙酮(100mL)中的溶液用K₂CO₃(14.5g，105mmol，4当量)和碘甲烷(4.9mL，11.2g，78.6mmol，3当量)进行处理。将该反应在65℃下加热一整夜。在将该溶剂除去后，将该残余物用H₂O进行处理并用EtOAc进行萃取。将该有机萃取液进行合并并用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥并在真空下进行浓缩，得到光谱纯的4-(4-甲氧基苯基)-环己酮(5.34g，100％)。¹H NMR(CDCl₃)7.16(dt，2H)，6.87(dt，2H)，3.78(s，3H)，2.99(tt，1H)，2.47-2.53(m，4H)，2.20(m，2H)和1.83-1.98(m，2H)；MS(电子雾化)m/e，205(M+1)⁺，计算值(C₁₃H₁₆O₂)：204。

步骤2：

向玻璃耐压瓶中的4-(4-甲氧基苯基)-环己酮(3.86g，18.9mmol)在乙醇(50mL)和水(15mL)中的溶液中加入碳酸铵(14.5g，151mmol，8当量)和氰化钾(2.0g，30.7mmol，1.6当量)。将该混合物在80-90℃加热24小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(300ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲B(4.75g，收率91％)。MS(电子雾化)m/e 273(M-H)，计算值(C₁₅H₁₈N₂O₃)，274。

步骤3：

向乙内酰脲B(18.7g，68.25mmol)在无水THF(450mL)中的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(37.2g，170.5mmol，2.5当量)、三乙胺(10.5mL，7.59g，75.0mmol，1.1当量)和DMAP(460mg，3.65mmol)。在加入这些物质后约15分钟，该反应变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(800mL)，用1N的HCI(3 x 50mL)、饱和Na₂CO₃水溶液(2 x 50mL)和盐水(2 x 50mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的粗产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到白色固态的纯的二-Boc乙内酰脲C(27.6g，87％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.28(dt，2H)，6.88(dt，2H)，3.79(s，3H)，2.14-2.24(m，2H)，1.59(s，9H)和1.38(s，9H)；MS(电子雾化)m/e 538(M+MeCN+Na)⁺，计算值(C₂₅H₃₄N₂O₇)：474。

步骤4：

将该二-Boc乙内酰脲C(15.08g，31.78mmol)溶解于DME(500mL)中得到澄清的溶液。向该溶液中加入1N NaOH(290mL，290mmol)，将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种稍微有些浑浊的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，然后用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将包含1-氨基-4-(4-甲氧基苯基)环己烷羧酸(4-MeOAPC)的水层用6N HCl进行处理，以将该pH值调节至11-12。向这种溶液(～300mL)中加入DME(300mL)和Fmoc-OSu(16.7g，49.42mmol)在DME(200mL)中的溶液，然后将该反应在室温下搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，用3N HCl进行酸化，用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(CH₂Cl₂/MeOH，)，得到纯的白色固态的Fmoc-4-MeOAPC产物(12.4g，从二-Boc乙内酰脲C所得的收率为83％)。¹H NMR(DMSO-d₆)，7.88(d，2H)，7.76(d，2H)，7.40(t，2H)，7.30(t，2H)，7.11(d，2H)，6.85(d，2H)，3.71(s，3H)；MS(电子雾化)m/e 470(M-H)，计算值(C₂₉H₂₉NO₅)：471。

实施例3

Fmoc-1-氨基-4-(4-乙氧基苯基)环己烷-1-羧酸(Fmoc-4-EtOApc-OH)的制备

步骤1：

将4-(4-羟基苯基)环己酮(5.0g，26.3mmol)在丙酮(100mL)中的溶液用K₂CO₃(14.5g，105mmol，4当量)和碘乙烷(10.5mL，20.5g，131mmol，5当量)进行处理。将该反应在65℃下加热一整夜。在将该溶剂除去后，将该残余物用H₂O进行处理并用EtOAc进行萃取。将该有机萃取液进行合并并用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥并在真空下进行浓缩，得到光谱纯的4-(4-乙氧基苯基)-环己酮(5.74g，100％)。¹H NMR(CDCl₃)7.15(dt，2H)，6.86(dt，2H)，4.02(q，2H)，2.99(tt，1H)，2.46-2.54(m，4H)，2.16-2.24(m，2H)，1.83-2.00(m，2H)和1.41(t，3H)；MS(电子雾化)m/e，219(M+1)⁺，计算值(C₁₄H₁₈O₂)：218。

步骤2：

向玻璃耐压瓶中的4-(4-乙氧基苯基)-环己酮(4.15g，19.01mmol)在乙醇(50mL)和水(15mL)中的溶液中加入碳酸铵(14.5g，151mmol，8当量)和氰化钾(2.05g，31.42mmol，1.6当量)。将该混合物在80-90℃下加热19小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(300ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲D(5.17g，收率94％)。MS(电子雾化)m/e287(M-H)，计算值(C₁₆H₂₀N₂O₃)：288。

步骤3：

向乙内酰脲D(4.22g，14.65mmol)在无水THF(100mL)中的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(7.98g，36.60mmol，2.5当量)、三乙胺(2.3mL，1.63g，16.11mmol，1.1当量)和DMAP(89.4mg，0.73mmol)。在加入这些物质后约15分钟，该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc(300mL)中，用1N HCl(3 x 20mL)进行洗涤，用饱和Na₂CO₃水溶液(2 x 20mL)和盐水(2 x 20mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到白色固态的纯的二-Boc乙内酰脲E(7.01g，98％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.27(dt，2H)，6.87(dt，2H)，4.02(q，2H)，1.59(s，9H)，1.43(t，3H)和1.38(s，9H)；MS(电子雾化)m/e 999(2M+Na)⁺，计算值(C₂₆H₃₆N₂O₇)：488。

步骤4：

将二-Boc乙内酰脲E(6.58g，13.46mmol)溶解于DME(200mL)中得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(121mL，121mmol)，然后将该反应在室温下搅拌一整夜，得到稍微有些浑浊的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME并用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含1-氨基-4-(4-乙氧基苯基)环己烷羧酸(4-EtOAPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调节至11-12。向这种溶液(～130mL)中加入DME(100mL)和Fmoc-OSu(6.83g，20.24mmol)在DME(30mL)中的溶液，并将该反应在室温下搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，用3N HCl进行酸化，用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(CH₂Cl₂/MeOH，98/2-90/10)得到白色固态的纯的Fmoc-4-EtOAPC产物(5.56g，用双Boc乙内酰脲E计算而得的收率为85％)。¹H NMR(DMSO-d₆)，7.88(d，2H)，7.74(d，2H)，7.40(td，2H)，7.30(td，2H)，7.11(d，2H)，6.84(d，2H)，3.97(q，2H)和1.29(t，3H)；MS(电子雾化)m/e 484(M-H)，计算值(C₃0H₃₁NO₅)：485。

实施例4

Fmoc-1-氨基-4-(4-羟基苯基)环己烷-1-羧酸(Fmoc-4-HOApc-OH)的制备

步骤1：

向玻璃耐压瓶中的4-(4-羟基苯基)环己酮(2.00g，10.52mmol)在乙醇(30mL)和水(10mL)中的溶液中加入碳酸铵(6.17g，64.2mmol，6当量)和氰化钾(1.07g，15.8mmol，1.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热一整夜。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(200ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥得到白色固态的乙内酰脲F(2.56g，收率94％)。MS(电子雾化)m/e 261(M+H)⁺，计算值(C₁₄H₁₆N₂O₃)：260。

步骤2：

将乙内酰脲F(2.10g，8.06mmol)混悬于NaOH水溶液(6N，100mL)中，并将其在130℃下加热2-3天。在完全水解后，将该反应混合物用浓HCl中和至弱酸性(pH约为6)。将所得的浆液进行过滤，用水进行洗涤并进行干燥，得到白色固态的1-氨基-4-(4-羟基苯基)环己烷羧酸(4-HOAPC)(3.1g，在包含无机盐的情况下其收率>100％)。MS(电子雾化)m/e 236(M+H)⁺，计算值(C₁₃H₁₇NO₃)：235。

步骤3：

将得自上一步骤的1-氨基-4-(4-羟基苯基)环己烷羧酸(4-HOAPC)粗品(3.1g)混悬于二噁烷(100mL)和10％ Na₂CO₃水溶液(50ml)中并剧烈的搅拌一整夜。将该反应混合物进行浓缩以除去二噁烷，用6N HCl将其中和至弱酸性(pH5-6)并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行处理并用Na₂SO₄进行干燥。将该溶剂除去，得到粗品，用闪柱色谱法对其进行纯化(己烷/EtOAc至CH₂Cl/MeOH)得到纯的Fmoc-4-HOAPC(2.76g，两个步骤的总收率为75％)。¹H NMR(CD₃OD)，7.78(d，2H)，7.72(d，2H)，7.38(t，2H)，7.30(td，2H)，7.04(d，2H)，6.72(dt，2H)，4.38(d，2H)，4.25(t，1H)，2.46(m，1H)，2.24-2.34(m，2H)和1.81-1.92(m，6H)；MS(电子雾化)m/e456(M-H)，计算值(C₂₈H₂₇NO₅)：457。

实施例5

Fmoc-1-氨基-4-(4-异丙氧基苯基)环己烷-1-羧酸(Fmoc-4-iPrOApc-OH)的制备

步骤1：

将4-(4-羟基苯基)环己酮(6.0g，31.6mmol)在DMF(90mL)中的溶液用K₂CO₃(21g，158mmol，5当量)和2-碘丙烷(15mL，26.8g，158mmol，5当量)进行处理。将该反应在100℃下加热一整夜。在将该溶剂除去后，将该残余物用H₂O进行处理并用EtOAc进行萃取。将该有机萃取液进行合并并用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后在真空下进行浓缩，得到光谱纯的4-(4-异丙氧基苯基)环己酮(7.02g，95％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.14(dt，2H)，6.84(dt，2H)，4.3(七峰，1H)，2.97(tt，1H)，2.46-2.52(m，4H)，2.16-2.24(m，2H)，1.83-1.98(m，2H)和1.33(d，6H)。

步骤2：

向玻璃耐压瓶中的4-(4-异丙氧基苯基)环己酮(5.1g，21.98mmol)在乙醇(90mL)和水(30mL)中的溶液中加入碳酸铵(12.6g，131mmol，6当量)和氰化钾(2.14g，32.9mmol，1.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热24小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(400ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲G(6.60g，收率99％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：10.60(s，1H)，8.65(s，1H)，7.18(d，2H)，6.80(d，2H)，4.52(七峰，1H)，2.43(m，1H)，1.85-2.15(m，2H)，1.56-1.80(m，6H)和1.22(d，6H)；MS(电子雾化)m/e 301(M-H)，C₁₇H₂₂N₂O₃的计算值，302。

步骤3：

向乙内酰脲G(5.8g，19.20mmol)在无水THF(180mL)中的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(10.46g，48.0mmol，2.5当量)、三乙胺(2.9mL，2.13g，21.12mmol，1.1当量)和DMAP(140mg，1.15mmol)。在加入这些物质后约15分钟，该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(600mL)，用1N HCl(3 x 40mL)、饱和Na₂CO₃水溶液(2 x 40mL)和盐水(2 x 40mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，90/10-80/20)，得到纯的白色固态的二-Boc乙内酰脲H(9.4g，98％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.27(dt，2H)，6.87(dt，2H)，4.02(q，2H)，2.98(t，1H)，2.26-2.56(m，4H)，2.14-2.24(m，2H)，1.76-1.86(m，2H)，1.59(s，9H)，1.43(t，3H)和1.38(s，9H)；MS(电子雾化)m/e999(2M+Na)⁺，C₂₆H₃₆N₂O₇的计算值，488。

步骤4：

将二-Boc乙内酰脲H(4.34g，8.64mmol)溶解于DME(100mL)中得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(78mL，78mmol)，并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种十分澄清的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，并用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含1-氨基4-(4-异丙氧基苯基)环己烷羧酸(4-iPrOAPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调至11-12。向这种溶液(～90mL)中加入DME(120mL)和Fmoc-OSu(3.49g，10.34mmol，1.2当量)在DME(20mL)中的溶液中，并将该反应在室温下搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，用3N HCl进行酸化，用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并将其进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷

₂Cl₂/MeOH)，得到纯的白色固态的Fmoc-4-iPrOAPC产物(3.23，用二-Boc乙内酰脲H获得的收率为75％)。¹H NMR(DMSO-d₆)，7.76(d，2H)，7.60(d，2H)，7.39(t，2H)，7.31(t，2H)，7.08(d，2H)，6.84(d，2H)，4.24(m，1H)和1.34(d，6H)；MS(电子雾化)m/e498(M-H)，C₃₁H₃₃NO₅的计算值，499。

实施例6

Fmoc-1-氨基-4-(4-甲基苯基)环己烷-1-羧酸(Fmoc-4-MeApc-OH)的制备

步骤1：

在-78℃下，在20分钟内，向4-碘代甲苯(10.9g，50.0mmol)在无水THF(180mL)中的溶液中加入正-BuLi(1.6M，31.0mL，50mmol)在己烷中的溶液。在滴加1，4-环己烷二酮单-乙二醇缩酮(6.0g，38.46mmol)在无水THF(100mL)中的溶液前，将该反应再进行搅拌20分钟。在-78℃下搅拌2小时后，用NH₄Cl水溶液来结束该反应，并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，在真空下进行浓缩，得到光谱纯的白色固体产物I(9.34g，收率98％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.41(m，2H)，7.16(d，2H)，3.98(m，4H)，2.34(s，3H)；MS(EI)m/e248(M⁺)，Cl₁₅H₂₀O₃的计算值，248。

步骤2：

向盛放于配有Dean-Stark收集器的烧瓶中的醇I(9.10g，36.65mmol)在干苯(200mL)中的溶液中加入对-甲苯磺酸单水合物(650mg)，并将该反应在100℃下加热3小时。将该反应冷却至室温，用EtOAc(500mL)进行稀释并用Na₂CO₃水溶液(50mL)、盐水(3x50mL)进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩，得到光谱纯的产物J(8.36g，收率100)，其不需进行纯化就可用于下一步。MS(EI)m/e230(M⁺)，190(MOCH₂CH₂O)，C₁₅H₁₈O₂的计算值，230。

步骤3：

向烯烃J(7.49g)在EtOAc(180mL)中的溶液中加入Pd/C(碳占5重量％，800mg)，并将该反应在室温下，在40psi的氢下进行3小时。将该催化剂通过过滤除去，将滤液浓缩，得到无色油状物形式的光谱纯的产物K(7.40g，收率100％)。MS(EI)m/e232(M⁺)，188(M-OCH₂CH₂)，C₁₅H₂₀O₂的计算值，232。

步骤4：

将缩酮K(6.90g)在丙酮(140mL)中的溶液用4N HCl(60mL)进行处理，并在65℃下加热4小时。除去溶剂，并将残余物用EtOAc进行稀释，然后用4N HCl进行中和。将该水溶液用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，干燥并进行浓缩。不需进行纯化，将所得的粗4-(4-甲基苯基)环己酮用于下一步(5.57g，定量的收率)。MS(EI)m/e188(M⁺)，C₁₃H₁₆O的计算值，188。

步骤5：

向玻璃耐压瓶中的4-(4-甲基苯基)环己酮(5.32g，28.3mmol)在乙醇(90mL)和水(30mL)中的溶液中加入碳酸铵(16.3g，169.8mmol，6当量)和氰化钾(3.68g，56.5mmol，2当量)。将该混合物在80-90℃下加热一整夜。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(400ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲L(6.3g，收率86％)。MS(电子雾化)m/e517(2M+H)，C₁₅H₁₈ClN₂O₂的计算值，258。

步骤6：

向乙内酰脲L(5.82g，22.55mmol)在无水THF(250mL)的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(12.3g，56.4mmol，2.5当量)、三乙胺(3.5mL，2.5g，24.7mmol，1.1当量)和DMAP(275mg，2.25mmol)。该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(500mL)，用1N HCl(3 x 50mL)、饱和Na₂CO₃水溶液(2 x 50mL)和盐水(2 x 50mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的粗产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，90/10-70/30)，得到纯的白色固态的二-Boc乙内酰脲M(10.03g，收率100％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.26(d，2H)，6.87(d，2H)，3.00(m，1H)，2.32(s，3H)，1.59(s，9H)和1.37(s，9H)。

步骤7：

将二-Boc乙内酰脲M(6.40g，13.97mmol)溶解于DME(200mL)中，得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(120mL，120mmol)，并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种稍微有些浑浊的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，然后用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含1-氨基-4-(4-甲基苯基)环己烷羧酸(4-MeAPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调至11-12。向这种溶液(～140mL)中加入DME(240mL)和Fmoc-OSu(5.10g，15.13mmol，1.1当量)在DME(40mL)中的溶液，并将该反应在室温下搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，用3N HCl进行酸化，用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(CH₂Cl₂/MeOH，98/2—90/10)，得到纯的白色固态的Fmoc-4-MeAPC产物(4.35g，由二-Boc乙内酰脲M而得的收率为69％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：7.88(d，2H)，7.75(d，2H)，7.24-7.43(m，4H)，7.02-7.14(m，4H)，4.25(m，3H)，2.24(s，3H)。

实施例7

Fmoc-1-氨基-4-(4-氯苯基)环己烷-1-羧酸(Fmoc-4-ClApc-OH)的制备

步骤1：

将4-氯苯基溴化物(7.5g，39.2mmol)在无水THF(180mL)中的溶液冷却至-78℃，并在20分钟内向其中通过滴加正-BuLi(1.6M，25mL，40mmol)在己烷中的溶液来进行处理。在向其中滴加1，4-环己烷二酮单-乙二醇缩酮(6.0g，38.46mmol)在无水THF(100mL)中的溶液前，将该反应再搅拌30分钟。在-78℃下搅拌1小时后，用NH₄Cl水溶液来结束该反应，并用EtOAc对其进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，在真空下进行浓缩，得到光谱纯的白色固态的产物N(9.40g，收率91％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.45(m 2H)，7.31(m，2H)，3.99(m，4H)，2.02-2.20(m，4H)，1.75-1.82(m，2H)，1.66-1.73(m，2H)，1.54(s，1H)；MS(EI)m/e 268(M⁺)，251(M-OH)，250(M-H₂O)，C₁₄H₁₇ClO₃的计算值，268。

向盛放于带有Dean-Stark收集器的烧瓶中的醇N(6.78g，25.30mmol)在干苯(120mL)中的溶液中加入对-甲苯磺酸单水合物(960mg)，将该反应加热回流3小时。将该反应冷却至室温，用EtOAc(500mL)进行稀释并用Na₂CO₃水溶液(50mL)、盐水(3 x 50mL)进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩，得到光谱纯的产物O(6.30g，100收率)，不需进行纯化，将其用于下一步。MS(EI)m/e 250(M⁺)，190(MOCH₂CH₂O)，C₁₄H₁₅ClO₂的计算值，250。

步骤3：

向该烯烃O(6.11g)在EtOAc(120mL)中的溶液中加入Pd/C(碳占5重量％，600mg)，并使该反应在室温下，在5psi的氢下进行3小时。将该催化剂通过过滤除去，并将滤液进行浓缩，得到无色油状物形式的光谱纯的产物P(6.10g，收率100％)。MS(EI)m/e252(M⁺)，C₁₄H₁₇ClO₂的计算值，252。

步骤4：

将该缩酮P(5.81g，23.06mmol)在丙酮(200mL)中的溶液用对-甲苯磺酸单水合物(876mg)进行处理，并在将其60℃下加热一整夜。除去溶剂，并将残余物用EtOAc吸收，用Na₂CO₃水溶液、盐水进行洗涤，干燥，浓缩，得到黄色油状物状的粗品(5.38g，收率>100％)。用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，80/20-60/40)，得到淡黄色油状物状的4-(4-氯苯基)环己酮(4.54g，收率95％)。MS(EI)m/e208(M⁺)，C₁₂H₁₃ClO₂的计算值，208。

步骤5：

向玻璃耐压瓶中的4-(4-氯苯基)环己酮(4.26g，20.48mmol)在乙醇(90mL)和水(30mL)中的溶液中加入碳酸铵(13.8g，144mmol，7当量)和氰化钾(3.56g，54.77mmol，2.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热一整夜。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(400ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲Q(5.58g，收率98％)。MS(电子雾化)m/e277(M-H)，C₁₄H₁₅ClN₂O₂的计算值，278。

向乙内酰脲Q(5.15g，18.5mmol)在无水THF(250mL)中的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(10.1g，46.3mmol，2.5当量)、三乙胺(2.8mL，2.07g，20.45mmol，1.1当量)和DMAP(226mg，1.85mmol)。该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(500mL)，用1N HCl(3 x 50mL)、饱和Na₂CO₃水溶液(2 x 50mL)和盐水(2 x 50mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到白色固态的纯的二-Boc乙内酰脲R(8.05g，收率91％)。MS(电子雾化)m/e542(M+Ma+MeCN)，C₂₄H₃₁ClN₂O₆的计算值，478。

步骤7：

将二-Boc乙内酰脲R(6.41g，13.97mmol)溶解于DME(200mL)中，得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(120mL，120mmol)，并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种稍微有些浑浊的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，并用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含1-氨基-4-(4-氯苯基)环己烷羧酸(4-ClAPC)的水层用6N HCl将pH调至11-12。向这种溶液中(～180mL)加入DME(240mL)和Fmoc-OSu(5.31g，15.74mmol，1.1当量)在DME(30mL)中的溶液，并将该反应在室温下搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，用3N HCl进行酸化，用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(CH₂Cl₂/MeOH，98/2-90/10)，得到白色固态的纯的Fmoc-4-ClAPC产物(5.04g，由二-Boc乙内酰脲计算而得的收率为76％)。¹H NMR(DMSO-d₆)，7.88(d，2H)，7.74(d，2H)，7.19-7.42(m，8H)，4.20-4.31(m，3H)；MS(电子雾化)m/e474(M-H)，C₂₈H₂₆ClNO₄的计算值，475。

实施例8

Fmoc-1-氨基-4-(3-甲氧基苯基)环己烷-1-羧酸(Fmoc-3-MeOApc-OH)的制备

步骤1：

在-78℃下，在25分钟内，向3-碘茴香醚(11.7，50.0mmol，1.3当量)在无水THF(180mL)中的溶液中加入正-BuLi(1.6M，31.0mL，50mmol，1.3当量)在己烷中的溶液。在向其中滴加1，4-环己烷二酮单-乙二醇缩酮(ethylene ketal)(6.0g，38.46mmol)在无水THF(100mL)中的溶液前，将该反应再搅拌30分钟。在-78℃下搅拌2小时后，用NH₄Cl水溶液来结束该反应并用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，在真空下进行浓缩，得到白色固态的光谱纯的产物S(9.34g，98％收率)。¹H NMR(CDCl₃)：7.26(dd，1H)，7.06-7.11(m，2H)，6.79(dd，1H)，3.98(m，4H)，3.81(s，3H)。

步骤2：

在氮气气氛下，在盐-冰浴的温度下，在搅拌下向醇S(5.6g，21.21mmol)在干CH₂Cl₂(200mL)的溶液中连续地加入三乙基硅烷(10.2mL，7.4g，63.63mmol，3当量)和三氟化硼醚合物(21.5mL，24.1g，169.7mmol，8当量)。然后将该反应混合物加热至室温，并将其搅拌3小时，然后用10％ K₂CO₃水溶液和H₂O进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后在真空下进行浓缩，得到油状的脱氧化合物(4.91g)，其纯度足够高，以至于可以直接应用。将这种中间体的粗品溶解于丙酮(130mL)中，并用4N HCl进行处理(60mL)，并将其在65℃下加热4小时。在减压的条件下除去溶剂，将残余物用EtOAc进行稀释并用4N NaOH溶液进行中和。将水层用EtOAc进行萃取，将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，干燥并进行浓缩。将所得的残余物通过用硅胶来进行的闪柱色谱法来进行纯化(

)，得到黄色油状物状的4-(3-甲氧基苯基)环己酮(3.67g，总收率为85％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.25(dt，1H)，6.75-6.86(m，3H)，3.81(s，3H)，3.00(tt，1H)；MS(EI)m/e 204(M⁺)，C₁₃H₁₆O₂的计算值，204。

步骤3：

向4-(3-甲氧基苯基)环己酮(3.10g，15.20mmol)在乙醇(60mL)和水(20mL)的溶液中加入碳酸铵(8.75g，91.20mmol，6当量)和氰化钾(1.98g，30.40mmol，2当量)。将该混合物在80-90℃下加热一整夜。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水中(300ml)并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲T(4.08g，收率98％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：7.11(d，1H)，6.70-6.94(m，3H)，3.72(s，3H)；MS(电子雾化)m/e316(M+MeCN+H)，C₁₅H₁₈N₂O₃的计算值，274。

步骤4：

向乙内酰脲T(5.29g，19.30mmol)在无水THF(250mL)中的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(10.5g，48.16mmol，2.5当量)、三乙胺(3.0mL，2.17g，21.52mmol，1.1当量)和DMAP(235mg，1.92mmol)。该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(500mL)，用1N HCl(3 x 50mL)、饱和Na₂CO₃水溶液(2 x 50mL)和盐水(2 x 50mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到白色固态的纯的二-Boc乙内酰脲U(8.70g，收率95％)。MS(电子雾化)m/e538(M+MeCN+Na)，C₂₅H₃₄N₂O₇的计算值，474。

步骤5：

将二-Boc乙内酰脲U(2.30g，4.84mmol)溶解于DME(80mL)中，得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(44mL，44mmol)并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种稍微有些浑浊的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，然后用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含1-氨基-4-(3-甲氧基苯基)环己烷羧酸(3-MeOAPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调节至11-12。向这种溶液中(～40mL)加入二噁烷(80mL)和Fmoc-Cl(1.73g，6.76mmol，1.4当量)并将该反应在室温下搅拌一整夜。然后在减压的条件下将该反应混合物进行浓缩以除去DME，用3N HCl进行中和并用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将粗品通过硅胶上的闪柱色谱法来进行纯化(CH₂Ck/MeOH，98/2-90/10)，得到白色固态的Fmoc-3MeOAPC(1.98g，由二-Boc乙内酰脲U而得的收率为87％)。¹H NMR(DMSO-d₆)，7.88(d，2H)，7.75(d，2H)，7.40(td，2H)，7.30(td，2H)，7.21(m，1H)，6.71-6.80(m，3H)，3.72(s，3H)；MS(电子雾化)m/e494(M+Na)，C₂₉H₂₉NO₅的计算值，471。

实施例28

Fmoc-(D，L)-5-溴-2氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5-Br-Atc-OH)的制备

步骤1：

将3-(2-溴苯基)丙酸(在步骤2中由2-溴苯甲基溴化物制得的，2.0g，8.73mmol)、乙二酰氯(1.14ml，13.1mmol)和二氯甲烷(20ml)的混合物在冰浴中进行冷却，并向其中滴加N，N-二甲基甲酰胺(34μL，0.44mmol)。将该混合物在室温下搅拌3小时。在真空中进行浓缩，得到3-(2-溴苯基)丙酰氯，将其用二氯甲烷进行吸收并以粗品的形式用于下一步中。

步骤2：

在冰浴的冷却下，将上述酸性氯化物(粗品，8.73mmol)在二氯甲烷中的溶液缓慢的加入到重氮甲烷(得自5.70g的1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍)在乙醚(40ml)中的溶液中。然后将该混合物加热到室温，并搅拌一整夜。将该混合物在真空下进行浓缩并通过柱色谱法来对其进行纯化(

乙酸乙酯/己烷)，得到1-重氮-4-(2-溴苯基)丁-2-酮(1.88g，经2步的收率为85％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.50(1H，d，苯基)，7.24(2H，m，苯基)，7.06(1H，m，苯基)，5.21(1H，宽单峰，重氮)，3.05(2H，t，苄基)，2.62(2H，m)。

步骤3：

向醋酸铑(II)二聚物(15mg，0.068mmol)在二氯甲烷(120ml)的混合物中在回流下缓慢的加入1-重氮-4-(2-溴苯基)丁-2-酮(1.74g，6.85mmol)在二氯甲烷(30ml)中的溶液。在完全加入后，将该混合物再回流20分钟。将该混合物冷却至室温，向其中加入三氟醋酸(1.5ml)并将该混合物在室温下搅拌1小时。用饱和的碳酸氢钠溶液来结束该反应。将水层分离出来，并且将二氯甲烷层再用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤一次。将所合并的水层用二氯甲烷重新进行反萃取。将所合并的有机层用硫酸镁进行干燥，过滤，在真空下进行干燥，得到棕色的油。用柱色谱法进行纯化(乙酸乙酯/己烷)，得到无色油状的5-溴-β-四氢萘酮(1.18g，收率77％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.46(1H，t，苯基)，7.05-7.09(2H，m，苯基)，3.58(2H，s，苄基)，3.22(2H，t，苄基)，2.54(2H，t)。

步骤4：

将5-溴-β-四氢萘酮(1.18g，5.24mmol)、氰化钾(512mg，7.86mmol)、碳酸铵(3.0g，31.22mmol)、乙醇(25ml)和水(5ml)在带刻度的、厚壁的压力瓶中的混合物在80℃的油浴中加热4天。在冷却至室温后，将白色的浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。在过滤后，通过风干得到乙内酰脲V(1.31g，85％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.71(1H，宽峰，NH)，8.28(1H，宽单峰，NH)，7.0-7.5(3H，m，苯基).LRMS(电子雾化)：C₁₂H₁₁BrN₂O₂，计算值：294；实测值：293(M-H)，295(M-H)。

步骤5：

将乙内酰脲V(1.287g，4.36mmol)、Ba(OH)_2·H₂O(4.20g，22.2mmol)在水(25ml)中的混合物在一个密封的厚壁压力烧瓶中在125℃的油浴中加热4天。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌下将其用4N的硫酸酸化至～pH 3。将所得的混悬液在沸水浴中搅拌1小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～20ml。用浓氨水溶液对其进行中和，产生白色沉淀，将其过滤出来，用水进行洗涤并在真空下干燥一整夜，得到外消旋的5-溴-2-氨基四氢萘-2-羧酸(893mg，收率76％)。LRMS(电子雾化)：C₁₁H₁₂BrNO₂，计算值：269；实测值：270(M+H)，272(M+H)，268(M-H)，270(M-H)。

步骤6：

将外消旋的5-溴-2氨基四氢萘-2-羧酸(882mg，3.27mmol)、三乙胺(0.60ml，4.30mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，1.32g，3.91mmol)在乙腈(30ml)和水(30ml)中的混合物在室温下搅拌一整夜。在第二天对该反应的TLC分析表明了起始物质氨基酸的存在。在另外一天，向其中加入9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(0.25g)、三乙胺(0.6ml)和乙腈(5ml)，并且在室温下将该混合物再搅拌一天。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，将白色的乳剂用二氯甲烷萃取两次。将有机层进行合并，并用水、盐水进行洗涤，用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，用柱色谱法对其进行纯化(用2→5→10％的甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到白色固态的外消旋的Fmoc-5-溴-2氨基四氢萘-2-羧酸(1.09g，收率68％)。HRMS(FAB)：C₂₆H₂₂BrNNaO₄(M+Na)计算值：514.0630；实测值：514.0643。

实施例10

Fmoc-(D，L)-5-氯-2氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5-ClAtc-OH)的制备

步骤1：

将3-(2-氯苯基)丙酸(5.0g，27.1mmol)、亚硫酰氯(10.9ml，149mmol)和甲苯(75ml)的混合物回流2小时。在真空下进行浓缩，得到3-(2-氯苯基)丙酰氯，将其用二氯甲烷进行吸收，不需要另外进行纯化，将其用于下一步中。

步骤2：

在冰浴的冷却下，将上述的酸性氯化物(粗品，27.1mmol)在二氯甲烷中的溶液缓慢的加入到重氮甲烷(得自17.8g的1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍)在乙醚(120ml)中的溶液中。然后将该混合物加热至室温并将其搅拌一整夜。将该混合物在真空下进行浓缩，得到嫩黄色油状的1-重氮-4-(2-氯苯基)丁-2-酮(5.87g，2步总收率>100％)。不需进行进一步的纯化，将该化合物直接用于下一步中。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.05-7.32(4H，m，苯基)，5.13(1H，宽单峰，重氮)，3.00(2H，t，苄基)，2.57(2H，m)。

步骤3

在回流下，向醋酸铑(II)二聚物(60mg，0.27mmol)在二氯甲烷(400ml)中的溶液中缓慢的加入粗制的1-重氮-4-(2-溴苯基)丁-2-酮(5.87g，理论值为27.1mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液。在完全加入后，将该混合物再回流20分钟。将该混合物冷却至室温，向其中加入三氟醋酸(6.0ml)，然后将该混合物在室温下搅拌2小时。用饱和的碳酸氢钠溶液来结束该反应。将水层分离出来，并且将二氯甲烷层再用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤一次。将所合并的水层用二氯甲烷重新进行反萃取。将所合并的有机层用硫酸镁进行干燥，过滤，在真空下进行干燥，得到棕色的油。用柱色谱法进行纯化(从10％到15％乙酸乙酯/己烷)，得到浅棕色油状的5-氯-β-四氢萘酮(3.32g，由步骤1至3所得的收率为68％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.30(1H，m，苯基)，7.15(1H，t，苯基)，7.05(1H，d，苯基)，3.60(2H，s，苄基)，3.22(2H，t，苄基)，2.56(2H，t)。

步骤4：

将盛放于密封的厚壁压为力烧瓶中的5-氯-β-四氢萘酮(880mg，4.87mmol)、氰化钾(500mg，7.67mmol)、碳酸铵(2.85g，29.7mmol)、乙醇(24ml)和水(6ml)的混合物在80℃的油浴中加热66小时。在冷却至室温后，将该结晶浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。在过滤后，通过风干得到浅淡棕色固态的乙内酰脲W(0.92g，75％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.70(1H，宽峰；NH)，8.25(1H，宽单峰，NH)，7.0-7.3(3H，m，苯基)。LRMS(电子雾化)：C₁₂H₁₁ClN₂O₂，计算值：250；实测值：249(M-H)，251(M-H)。

步骤5：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲W(880mg，3.51mmol)、Ba(OH)_2·H₂O(3.40g，18.0mmol)在水(50ml，非常稀)中的混合物在125℃的油浴上加热2天。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌下将其用4N的硫酸酸化至～pH 3。将该混悬液在沸水浴上搅拌2小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～50ml.用浓氨水溶液对其进行中和，产生白色沉淀，将其过滤出来，用水进行洗涤并在真空下干燥一整夜，得到外消旋的5-氯-2-氨基四氢萘-2-羧酸(788mg，99％收率)。LRMS(电子雾化)：C₁₁H₁₂ClNO₂，计算值：225；实测值：226(M+H)，228(M+H)，224(M-H)，226(M-H)。

步骤6：

将外消旋的5-氯-2-氨基四氢萘-2-羧酸(402mg，1.78mmol)、三乙胺(0.38ml，2.73mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，904mg，2.68mmol)在乙腈(20ml和水(20ml)中的混合物在室温下搅拌2天。在两天后对该反应所进行的TLC分析表明了起始材料氨基酸的存在。向其中加入9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(0.12g)和三乙胺(0.1ml)，然后在室温下将其再搅拌1天。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，用乙酸乙酯将该白色的乳液萃取3次。将有机层进行合并，并用水、盐水进行洗涤，用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，用柱色谱法对其进行纯化(用368％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到白色固态的外消旋的Fmoc-5-氯-2-氨基四氢萘-2-羧酸(540mg，收率68％)。HRMS(EI)C₂₆H₂₂ClNO₄(M)计算值：447.1237；实测值：447.1234。

实施例11

Fmoc-(D，L)-5-甲氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5-MeOAtc-OH)的制备

步骤1：

将外消旋的5-甲氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(根据Obrecht，D.等人Helv.Chim Acta.1992，75，1666进行制备)(802mg，3.62mmol)、三乙胺(0.62ml，4.45mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，1.47g，4.36mmol)在乙腈(25ml)和水(25ml)中的混合物在室温下搅拌30小时。对该反应进行的TLC分析表明了起始材料氨基酸的存在。将9芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(370mg)和三乙胺(0.6ml)加入其中，然后将该混合物在室温下搅拌24小时。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，然后将该白色的乳剂用乙酸乙酯萃取3次。将所合并的有机层用水、盐水进行洗涤，然后用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，将其用柱色谱法进行纯化(用13 5 10％甲醇/二氯甲烷进行稀释)，得到黄白色固态的外消旋的Fmoc-5甲氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(1.14g，71％收率)。HRMS(FAB)：C₂₇H₂₆NO₅(M+H)计算值：444.1812；实测值：444.1814。

实施例2

Fmoc-(D，L)-5-乙氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5-EtOAtc-OH)的制备

步骤1：

将1，6-二羟基萘(5.02g，31.3mmol)、无水碳酸钾(52.0g，376mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(50ml)和碘乙烷(15ml，188mmol)的混合物在35℃上的油浴上加热24小时。将该反应混合物进行过滤，然后将固体残余物用乙醚进行仔细的清洗。将滤液和清洗液进行合并，并在真空下进行浓缩以除去大多数的溶剂。将该棕色的残余物在水和醚间进行分配，并将各层分离出来。将该醚层用水进行洗涤。将所合并的水层用醚进行反萃取。将醚萃取物进行合并，用盐水进行洗涤，并用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的棕色固体(6.74g，收率99％)。用热甲醇对该粗品进行重结晶，得到浅棕色固态的1，6-二乙氧基萘(4.36g，收率64％，初产量)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.20(1H，d，苯基)，7.06-7.36(4H，m，苯基)，6.66(1H，dd，苯基)，4.10-4.23(4H，2套q，2CH₂)，1.45-1.56(6H，2套t，2CH₃)。

步骤2：

在60分钟内，向回流着的1，6-二乙氧基萘(4.15g，19.2mmol)在无水乙醇(100ml)中的溶液中仔细的加入金属钠的小块(6.8g，296mmol)。将该混合物再回流90分钟。TLC表明存在未反应的起始材料。再向其中加入一些金属钠(1.0g，43.5mmol)，然后再将该混合物回流60分钟。将该反应冷却至室温，用水使该反应结束，然后用浓盐酸对其进行酸化。将该混合物在真空下进行浓缩以除去大多数的乙醇。将该含水混合物用乙醚萃取3次。将所合并的有机层用水进行洗涤并用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到棕色固体，将其溶解于1：1的乙醇/水(200ml)中，然后向其中加入对-甲苯磺酸(400mg)。T将该混合物回流210分钟。向其中再加入一些对-甲苯磺酸(100mg)，然后将该混合物再回流60分钟。在冷却至室温后，在减压的条件下除去大多数的乙醇。将该水性混合物用乙醚萃取3次，然后将所合并的有机层用水、饱和的氯化钠溶液进行洗涤，然后用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到棕色的油，将其用柱色谱法进行纯化(7％乙酸乙酯/己烷)，得到淡黄色油状的5-乙氧基-β-四氢萘酮(2.43g，收率67％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.15(1H，t，苯基)，6.76(1H，d，苯基)，6.72(1H，d，苯基)，4.05(2H，q，CH₂)，3.56(2H，s，苄基)，3.10(2H，t，苄基)，2.53(2H，t)，1.44(3H，t，CH₃)。

步骤3：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的5-乙氧基-β-四氢萘酮(2.23g，11.7mmol)、氰化钾(1.20g，18.4mmol)、碳酸铵(6.75g，70.2mmol)、乙醇(80ml)和水(20ml)在80℃的油浴上加热3天。在冷却至室温后，将该结晶浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。在过滤后，通过风干得到淡棕色固态的乙内酰脲X(2.69g，88％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.65(1H，宽单峰，NH)，8.22(1H，宽单峰，NH)，7.06(1H，t，苯基)，6.75(1H，d，苯基)，6.65(1H，d，苯基)，3.98(2H，q，CH₂)，1.32(3H，t，CH₃)。LRMS(电子雾化)：C₁₄H₁₆N₂O₃，计算值：259；实测值：258(M-H)。

步骤4.

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲X(2.57g，9.87mmol)、Ba(OH)_2·H₂O(9.40g，49.6mmol)在水(200ml，极稀)中的混合物在105℃的油浴上加热39小时。再向其中加入一些Ba(OH)_2·H₂O(9.40g，49.6mmol)，然后将该混合物在125℃的油浴上再加热21小时。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌下将其用4N的硫酸酸化至～pH 3。将所得的混悬液在沸水浴中搅拌1小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～75ml.用浓氨水溶液对其进行中和，产生白色沉淀，将其过滤出来，用水进行洗涤，将其风干，得到浅棕色固态的外消旋的5-乙氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(2.34g，一定量的收率)。LRMS(电子雾化)：C₁₃H₁₇NO₃，计算值：235；实测值：236(M+H)，234(M-H)。

步骤5：

将外消旋的5-乙氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(2.22g，9.44mmol)、三乙胺(2.00ml，14.3mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，4.81g，14.3mmol)在乙腈(75ml)和水(75ml)中的混合物在室温下搅拌2天。对该反应进行的TLC分析表明了起始材料氨基酸的存在。向其中加入9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(645mg)和三乙胺(1.0ml)，然后在室温下将其再搅拌1天。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，用乙酸乙酯将该白色的乳液萃取3次。将有机层进行合并，并用水、盐水进行洗涤，用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，将其用柱色谱法进行纯化(用35 10％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到白色固态的外消旋的Fmoc-5-乙氧基-2氨基四氢萘-2-羧酸(4.66g，收率>一定的量)。HRMS(FAB)：C₂₈H₂₈NO₅(M+H)计算值：458.1967；实测值：458.1985.

实施例13

Fmoc-(D，L)-5-异丙氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5iPrOAtc-OH)的制备

步骤1：

将6-甲氧基-1-四氢萘酮(5.07g，28.8mmol)、10％ Pd/C(3.53g，3.32mmol)在干对-甲基异丙基苯(250ml)中的混合物在氩气下加热回流38小时。将该反应混合物冷却至室温，用次乙酰塑料进行过滤，将残余物用对-甲基异丙基苯充分洗涤。将滤液和洗涤液进行合并，然后用1N的氢氧化钠溶液萃取2次(2 x 70ml)。将所合并的水性萃取液用6N的盐酸进行酸化至pH～3，然用用乙醚萃取3次。将所合并的有机层用水进行洗涤，用无水硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到浅棕色固态的5-羟基-6-甲氧基萘粗品(2.31g，收率46％)，不需要进行进一步的纯化，将其用于下一步中。LRMS(电子雾化)：C₁₁H₁₀O₂，计算值；174；实测值：173(M-H)。

将5-羟基-6-甲氧基萘(2.10g，12.1mmol)、碳酸铯(19.7g，60.5mmol)、N，N-二甲基甲酰胺(12ml)和2-溴丙烷(3.50ml，36.9mmol)的混合物在40℃的油浴上搅拌一整夜。将该反应混合物进行过滤，然后将固体残余物用乙醚进行仔细的清洗。将滤液和清洗液进行合并，并在真空下进行浓缩以除去大多数的溶剂。将该棕色的残余物在水和醚间进行分配，并将各层分离出来。将该醚层用水进行洗涤。将所合并的水层用醚进行反萃取。将该醚萃取液进行合并，用盐水对其进行洗涤，然后用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到一种粗品，将其用柱色谱法进行纯化(

乙酸乙酯/己烷)，得到浅棕色油状的1-异丙氧基-6-甲氧基萘(2.23g，86％收率)。¹H NMR(CDCl₃)δ 8.17(1H，d，苯基)，7.05-7.38(4H，m，苯基)，6.72(1H，dd，苯基)，4.73(1H，m，iPr的CH)，3.92(3H，s，OCH₃)，1.42(6H，d，iPr的2个CH₃)。

步骤3：

在45分钟内，向回流着的1-异丙氧基-6-甲氧基萘(2.23g，10.3mmol)在无水乙醇(50ml)中的溶液中小心加入金属钠的小块(3.6g，157mmol)。将该混合物再回流120分钟。将该反应冷却至室温，用水使该反应结束，然后用浓盐酸对其进行酸化。将该混合物在真空下进行浓缩以除去大多数的乙醇。将该水性混合物用乙醚萃取3次。将所合并的有机层用水进行洗涤并用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到略带红色的油，将其溶解于1：1的乙醇/水(90ml)中，然后向其中加入对-甲苯磺酸(200mg)。将该混合物回流60分钟。在冷却至室温后，在减压的条件下除去大多数的乙醇。将该水性混合物用乙醚萃取两次，然后将所合并的有机层用水、饱和的氯化钠溶液进行洗涤，然后用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到一种略带红色的油，将其用柱色谱法进行纯化(815％乙酸乙酯/己烷)，得到无色油状的5-异丙氧基-β-四氢萘酮(1.37g，收率65％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.16(1H，t，苯基)，6.78(1H，d，苯基)，6.71(1H，d，苯基)，4.53(1H，m，iPr的CH)，3.56(2H，s，苄基)，3.08(2H，t，苄基)，2.50(2H，t)，1.37(6H，d，iPr的2个CH₃)。

步骤4：

将盛放于密封的厚壁压力瓶中的5-异丙氧基-β-四氢萘酮(1.37g，6.71mmol)、氰化钾(660mg，10.1mmol)、碳酸铵(3.87g，40.3mmol)、乙醇(44ml)和水(9ml)的混合物在80℃的油浴上加热42小时。在冷却至室温后，将该结晶浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。在过滤后，通过风干得到乙内酰脲Y(1.64g，89％)。

将盛放于密封的厚壁压力瓶中的乙内酰脲Y(1.64g，5.98mmol)、Ba(OH)_2·H₂O(5.66g，29.9mmol)在水(25ml)中的混合物在100℃的油浴上加热70小时。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌的条件下用4N的盐酸将其中和至～pH7。将所得的混悬液在沸水浴中搅拌1小时，然后冷却至室温。用1N的氢氧化钠溶液对其进行碱化，然后将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～75ml。用浓盐酸溶液对其进行中和产生白色沉淀，将其过滤出来，用水进行洗涤并将其风干，得到外消旋的5-异丙氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(3.48g，湿润并包含无机盐，收率>一定的量)。LRMS(电子雾化)：C₁₄H₁₉NO₃，计算值：249；实测值：248(M-H)。

步骤6：

将外消旋的5-异丙氧基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(3.48g，5.98mmol理论值)、三乙胺(1.10ml，7.89mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，2.62g，7.77mmol)在乙腈(30ml)和水(30ml)中的混合物在室温下搅拌1天。对该反应进行的TLC分析表明了起始材料氨基酸的存在。向其中加入9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(500mg)，然后在室温下将其再搅拌1天。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，然后将该白色的乳剂用二氯甲烷萃取3次。将有机层进行合并，并用水、盐水进行洗涤，用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，用柱色谱法对其进行纯化(用12 5 8％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到白色固态的外消旋的Fmoc-5-异丙氧基-2氨基四氢萘-2-羧酸(0.50g，2个步骤的收率为18％)。HRMS(FAB)：C₂₉H₃₀NO₅(M+H)计算值：472.2124；实测值：472.2117。

实施例14

Fmoc-(D，L)-5-甲基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5-MeAtc-OH)的制备

步骤1：

将2-甲基氢化肉桂酸(3.0g，18.3mmol)、乙二酰氯(3.19ml，36.6mmol)和二氯甲烷(30ml)的混合物在冰浴中进行冷却，并向其中滴加N，N-二甲基甲酰胺(0.14ml，1.81mmol)。将该混合物在室温下搅拌一整夜。在真空下进行浓缩，得到3-(2-甲基苯基)丙酰氯，将其用二氯甲烷进行吸收并以粗品的形式用于下一步中。

步骤2：

在冰浴冷却下，将上述的酸性氯化物(粗，18.3mmol)在二氯甲烷中的溶液缓慢的加入到重氮甲烷(得自11.9g的1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍)在乙醚(80ml)中的溶液中。然后将该混合物加热至室温并将其搅拌一整夜。将该混合物在真空下进行浓缩并通过柱色谱法来对其进行纯化(

乙酸乙酯/己烷)，得到嫩黄色油状的1-重氮-4-(2-甲基苯基)丁-2-酮(2.08g，两步的收率为60％)。

步骤3：

在180分钟内，在回流的条件下，向醋酸铑(II)二聚物(24mg，0.109mmol)在二氯甲烷(200ml)中的混合物中缓慢的加入1-重氮-4-(2-甲基苯基)丁-2-酮(2.08g，11.1mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液。在完全加入后，将该混合物再回流20分钟。将该混合物冷却至室温，向其中加入三氟醋酸(2.40ml)，然后将该混合物在室温下搅拌1小时。用饱和的碳酸氢钠溶液来结束该反应。将水层分离出来，并且将二氯甲烷层再用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤一次。将所合并的水层用二氯甲烷重新进行反萃取。将所合并的有机层用硫酸镁进行干燥，过滤，在真空下进行干燥，得到棕色油的粗品。用柱色谱法进行纯化(15％乙酸乙酯/己烷)，得到浅棕色油状的5-甲基-β-四氢萘酮(1.48g，84％收率)。¹H NMR(CDCl₃)δ 6.90-7.20(3H，m，苯基)，3.58(2H，s，苄基)，3.03(2H，t，苄基)，2.55(2H，t)，2.34(3H，s，CH₃)。

将盛放于密封的厚壁的压力烧瓶中的5-甲基-β-四氢萘酮(1.48g，9.24mmol)、氰化钾(902mg，13.9mmol)、碳酸铵(5.33g，55.5mmol)、乙醇(45ml)和水(9ml)的混合物在80℃的油浴上加热3天。在冷却至室温后，将该结晶浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。过滤，然后将其风干，得到淡棕色固态的乙内酰脲Z(1.81g，收率85％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.66(1H，宽单峰，NH)，8.22(1H，宽单峰，NH)，6.85-7.05(3H，m，苯基)，2.17(3H，s，CH₃)。

步骤5：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲Z(1.80g，7.82mmol)、Ba(OH)_2·H₂O(7.40g，39.1mmol)在水(28ml)中的混合物在125℃的油浴上加热88小时。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌下用4N的硫酸将其酸化至～pH 3。将该混悬液在沸水浴上搅拌1小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～50ml。用浓氨水溶液对其进行中和，产生白色沉淀，将其过滤出来，用水进行洗涤，将其风干，得到淡棕色固体的外消旋的5-甲基-2氨基四氢萘-2-羧酸(1.05g，收率65％)。LRMS(电子雾化)：C₁₂H₁₅NO₂，计算值：205；实测值：206(M+H)。

步骤6：

将外消旋的5-甲基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(1.05g，5.12mmol)、三乙胺(0.93ml，6.67mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，2.24g，6.64mmol)在乙腈(30ml)和水(30ml)中的混合物在室温下搅拌2天。对该反应进行的TLC分析表明了起始材料氨基酸的存在。向其中加入9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(520mg)，然后将该混合物在室温下再搅拌24小时。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，然后用二氯甲烷将该白色的乳剂萃取2次。将所合并的有机层用水、盐水进行洗涤，然后用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，用柱色谱法对其进行纯化(用25 8％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到浅棕色固态的外消旋的Fmoc-5-甲基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(1.62g，收率74％)。HRMS(FAB)：C₂₇H₂₆NO₄(M+H)计算值：428.1862；实测值：428.1844。

实施例15

Fmoc-(D，L)-5-乙基-2氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5-EtAtc-OH)的合成

步骤1：

将3-(2-乙基苯基)丙酸(在第3步中由1-乙基-2-碘苯制备而得，4.24g，23.8mmol)、亚硫酰氯(9.50ml，130mmol)和甲苯(100ml)的混合物回流2小时。在真空下进行浓缩，得到3-(2-乙基苯基)丙酰氯，将其用二氯甲烷进行吸收并以粗品的形式用于下一步中。

步骤2：

在冰浴的冷却下，将3-(2-乙基苯基)丙酰氯(粗品，23.8mmol)在二氯甲烷中的溶液缓慢的加入到重氮甲烷(得自15.6g的1-甲基-3硝基-1-亚硝基胍)在乙醚(100ml)中的溶液中。然后将该混合物加热至室温并将其搅拌一整夜。将该混合物在真空下进行浓缩并通过柱色谱法来对其进行纯化(

乙酸乙酯/己烷)，得到1-重氮-4-(2乙基苯基)丁-2-酮(3.47g，两步的收率为72％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.1-7.25(4H，m，苯基)，5.21(1H，宽单峰，重氮)，2.97(2H，m，乙基的CH₂)，1.20(3H，t，CH₃)。

步骤3：

在90分钟内，向醋酸铑(II)二聚物(38mg，0.172mmol)在二氯甲烷(300ml)中的溶液在回流的条件下缓慢的加入1-重氮-4-(2-乙基苯基)丁-2-酮(3.47g，17.2mmol)在二氯甲烷(50ml)中的溶液。在完全加入后，将该混合物再回流20分钟。将该混合物冷却至室温，向其中加入三氟醋酸(3.75ml)，然后将该混合物在室温下搅拌1小时。用饱和的碳酸氢钠溶液来结束该反应。将水层分离出来，并且将二氯甲烷层再用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤一次。将所合并的水层用二氯甲烷重新进行反萃取。将所合并的有机层用硫酸镁进行干燥，过滤，在真空下进行干燥，得到粗制的略带红棕色的油状的5-乙基-β-四氢萘酮(3.09g，收率>一定的量)。不需进行进一步的纯化，将该化合物直接用于下一步中。¹H NMR(CDCl₃)δ 6.9-7.2(3H，m，苯基)，3.58(2H，s，苄基)，3.08(2H，s，苄基)，2.70(2H，q，乙基的CH₂)，2.52(2H，t，苄基)，1.20(3H，t，乙基的CH₃).

步骤4：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的5-乙基-β-四氢萘酮(3.09g，17.7mmol)、氰化钾(1.73g，26.6mmol)、碳酸铵(10.2g，106mmol)、乙醇(80ml)和水(16ml)的混合物在80℃的油浴上加热48小时。在冷却至室温后，将白色的结晶浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。在过滤后，通过风干得到浅淡棕色固态的乙内酰脲AA(3.85g，两步的收率为92％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.67(1H，宽单峰，NH)，8.26(1H，宽单峰，NH)，6.8-7.1(3H，m，苯基)，1.13(3H，t，CH₃)。LRMS(电子雾化)：C₁₄H₁₆N₂O₂，计算值：244；实测值：243(M-H)。

步骤5：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲AA(1.00g，4.09mmol)、Ba(OH)_2·H₂O(4.00g，21.1mmol)在水(20ml)中的混合物在125℃的油浴上加热48小时。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌下将其用4N的硫酸酸化至～pH 3。将该混悬液在沸水浴上搅拌2小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～50ml。用浓氨水溶液对其进行中和，产生白色沉淀，将其过滤出来，用水进行洗涤并在真空下干燥一整夜，得到外消旋的5-乙基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(796mg，收率89％)。LRMS(电子雾化)：C₁₃H₁₇NO₂，计算值：219；实测值：220(M+H)。

步骤6：

将外消旋的5-乙基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(765mg，3.49mmol)、三乙胺(1.0ml，7.17mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，1.79g，5.31mmol)在乙腈(40ml)和水(40ml)中的混合物在室温下搅拌2天。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，将白色的乳剂用二氯甲烷萃取两次，用乙酸乙酯萃取两次。将该二氯甲烷萃取液用水、盐水进行洗涤，然后用硫酸镁进行干燥。将该乙酸乙酯萃取液用水、盐水进行洗涤，然后用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，用柱色谱法对其进行纯化(用25 8％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到白色固态的外消旋的Fmoc-5-乙基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(330mg，收率21％)。HRMS(FAB)：C₂₈H₂₈NO₄(M+H)计算值：442.2018；实测值：442.2010。

实施例16

Fmoc-(D，L)-5-异丙基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(Fmoc-(D，L)5iPrAtc-OH)的制备

步骤1：

将3-(2-异丙基苯基)丙酸(在步骤3中由1-异丙基2-碘苯制得，2.01g，10.5mmol)、亚硫酰氯(4.30ml，59.0mmol)和甲苯(40ml)的混合物回流2小时。在真空下进行浓缩，得到3-(2-异丙基苯基)丙酰氯，将其用二氯甲烷进行吸收并以粗品的形式用于下一步中。

步骤2：

在冰浴冷却下，将3-(2-异丙基苯基)丙酰氯(粗品，10.5mmol)在二氯甲烷中的溶液缓慢的加入到重氮甲烷(得自6.95g of 1-甲基-3硝基-1-亚硝基胍)在乙醚(50ml)中的溶液中。然后将该混合物加热至室温并将其搅拌一整夜。将该混合物在真空下进行浓缩并通过柱色谱法来对其进行纯化(20％乙酸乙酯/己烷)，得到嫩黄色油状的1-重氮-4-(2-异丙基苯基)丁-2-酮(1.87g，两步的收率为82％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.10-7.30(4H，m，苯基)，5.21(1H，宽单峰，重氮)，3.15(1H，m，iPr的CH)，3.00(2H，t，苄基)，2.57(2H，m)，1.24(6H，d，iPr的2个CH₃)。

步骤3：

在60分钟内，在回流的条件下，向醋酸铑(II)二聚物(20mg，0.091mmol)在二氯甲烷(160ml)中的混合物中缓慢的加入1-重氮-4-(2-溴苯基)丁-2-酮(1.87g，8.65mmol)在二氯甲烷(25ml)中的溶液。在完全加入后，将其混合物再回流15分钟。将该混合物冷却至室温，向其中加入三氟醋酸(1.90ml)，然后在室温下将混合物搅拌45分钟。用饱和的碳酸氢钠溶液来结束该反应。将水层分离出来，并且将二氯甲烷层再用饱和的碳酸氢钠溶液洗涤一次。将所合并的水层用二氯甲烷重新进行反萃取。将所合并的有机层用硫酸镁进行干燥，过滤，在真空下进行干燥，得到粗制的棕色油。用柱色谱法进行纯化(5％乙酸乙酯/己烷)，得到淡黄色油状的5-异丙基-β-四氢萘酮(1.57g，收率96％)。¹H NMR(CDCl₃)δ 6.93-7.22(3H，m，苯基)，3.59(2H，s，苄基)，3.24(1H，m，iPr的CH)，3.12(2H，t，苄基)，2.52(2H，t)，1.27(6H，d，iPr的2个CH₃)。

步骤4：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的5-异丙基-β-四氢萘酮(1.57g，8.34mmol)、氰化钾(0.82g，12.6mmol)、碳酸铵(4.81g，50.1mmol)、乙醇(40ml)和水(10ml)的混合物在80℃的油浴中加热48小时。在冷却至室温后，将该棕色的浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。过滤，然后将其风干，得到淡棕色固态的粗制的乙内酰脲BB，不对其进行纯化而直接将其用于下一步中。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.69(1H，宽单峰，NH)，8.30(1H，宽单峰，NH)，6.85-7.32(3H，m，苯基)，1.15(6H，t，CH₃)。LRMS(电子雾化)：C₁₅H₁₈N₂O₂，计算值：258；实测值：539(2M+Na)。

步骤5：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲BB(粗品，理论上为8.34mmol)、Ba(OH)_2·H₂O(7.90g，41.7mmol)在水(40ml)中的混合物在125℃的油浴上加热38小时。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌下将其用4N的硫酸酸化至～pH 3。将该混悬液在沸水浴上搅拌2小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～50ml。用浓氨水溶液对其进行中和，产生白色沉淀，将其过滤出来，用水进行洗涤并在真空下干燥一整夜，得到外消旋的淡棕色固态的5-异丙基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(1.23g，两步的收率为63％)。LRMS(电子雾化)：C₁₄H₁₉NO₂，计算值：233；实测值：232(M-H).

步骤6：

将外消旋的5-异丙基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(250mg，1.07mmol)、三乙胺(1.2ml，8.61mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，2.70g，8.00mmol)在乙腈(30ml)和水(30ml)中的混合物在室温下搅拌2天。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，然后将该白色的乳剂用乙酸乙酯进行萃取。将该有机层用水、盐水进行洗涤，然后用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，用柱色谱法对其进行纯化(用258％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到外消旋的白色泡沫状的Fmoc5-异丙基-2-氨基四氢萘-2-羧酸(208mg，收率43％)。HRMS(FAB)：C₂₉H₃₀NO₄(M+H)计算值：456.2175；实测值：456.2184。

实施例17

Fmoc-4-氨基-1-苯基哌啶-4-羧酸(Fmoc-Appc-OH)的合成

步骤1：

向碘苯(6.37g，3.5mL，31.2mmol)、1，4-二噁-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(10.32g，9.3mL，72.2mmol，2.3当量)和叔丁醇钠(8.0g，83.3mmol，2.7当量)在干二噁烷(120mL)中的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(91mg，0.1mmol)和三-邻-甲苯基膦(180mg，0.591mmol)。将该反应在90℃加热26小时。将所得的反应混合物浓缩以除去溶剂。将该残余物用水进行处理并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到一种棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，95/5至75/25)得到微黄的固态的产物CC(6.08g，89％)。¹H NMR(CDCl₃)，7.25(ddt，2H)，6.95(dd，2H)，6.84(t，1H)，4.00(s，4H)，3.32(t，4H)和1.84(t，4H)；MS(电子雾化)m/e220(M+H)，C₁₃H₁₇NO₂的计算值，219。

步骤2：

向缩酮CC(3.22g，15.16mmol)在丙酮(100mL)中的溶液中加入6N的盐酸(50mL)，然后将该反应加热回流一整夜。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用EtOAc进行吸收，然后用6N NaOH水溶液进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到黄色油状的产物DD(2.58g，97％)。MS(电子雾化)m/e176(M+H)，C₁₁H₁₃NO的计算值，175。

步骤3：

在玻璃压力瓶中向酮DD(2.53g，14.46mmol)在乙醇(75mL)和水(25mL)的溶液中加入碳酸铵(12.9g，134.3mmol，9当量)和氰化钾(2.11g，32.5mmol，2当量)。将该混合物在80-90℃加热18小时。将进行了冷却的反应混合物在真空下进行浓缩，然后将残余物用水进行处理，用EtOAc进行萃取(4x)。将所合并的有机萃取液用水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并将其进行浓缩，得到白色固态的光谱纯的乙内酰脲EE(3.36g，收率95％)。MS(电子雾化)m/e 246(M+H)，C₁₃H₁₅N₃O₂的计算值，245。

步骤4：

将乙内酰脲EE(3.36g)混悬于NaOH水溶液(6N，100mL)中并将其在130℃加热2-3天。一旦完全水解(通过HPLC)，将该反应混合物用浓HCl中和至弱酸性(pH约为6)。将所得的浆液进行过滤，用水进行洗涤并进行干燥，得到白色固态的4-氨基-1-苯基哌啶-4-羧酸(APPC)(5.26g，收率>100％，潮湿并且包含无机盐)，其在HPLC上表现为单峰，将其直接用于下一步。MS(电子雾化)m/e 221(M+H)，C₁₂H₁₆N₂O₂计算值，220。

步骤5：

将得自上一步粗制的4-氨基-1-苯基哌啶-4-羧酸(APPC)混悬于二噁烷(80mL)和10％ Na₂CO₃水溶液(40ml)中，将其用Fmoc-Cl(5.3g，20.57mmol，1.5当量)进行处理，然后将其强烈的搅拌一整夜。然后将反应混合物进行浓缩以除去二噁烷，用6N HCl将其中和至弱酸性(pH 6)并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行处理并用Na₂SO₄进行干燥。将该溶剂除去，得到粗品，将其用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc至CH₂Cl₂/MeOH)，得到纯的Fmoc-APPC(4.91g，两步的总收率为81％)。¹H NMR(DMSO-d₆)，7.88(d，2H)，7.74(d，2H)，7.19-7.42(m，8H)，4.20-4.31(m，3H)；HRMS m/z 465.1788，C₂₇H₂₆N₂O₄Na的计算值，465.1791。

实施例18

Fmoc-4-氨基-1-(4-甲基苯基)哌啶-4-羧酸(Fmoc-4-MeAppc-OH)的制备

步骤1：

向4-碘代甲苯(2.12g，9.7mmol)、1，4-二噁-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(2.8mL，3.12g，21.82mmol，2.2当量)和叔丁醇钠(2.6g，27.08mmol，2.8当量)在干二噁烷(40mL)中的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(44.4mg，0.0485mmol)和三-邻-甲苯基膦(59.0mg，0.194mmol)。将该反应在90℃下加热26小时。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用水进行处理，然后用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，95/5至75/25)，得到纯的微黄色的固态的产物FF(1.937g，85％)。¹H NMR(CDCl₃)，7.06(d，2H)，6.87(d，2H)，3.99(s，4H)，3.26(t，4H)，2.26(s，3H)和1.85(t，4H)。

步骤2：

向缩酮FF(1.58g，6.79mmol)在丙酮(50mL)中的溶液中加入6N的盐酸(25mL)，然后将该反应加热回流一整夜。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用EtOAc进行吸收，然后用6N NaOH水溶液进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，90/10-70/30)，得到黄色油状的产物GG(1.27g，98％)。MS(电子雾化)m/e190(M+H)，C₁₂H₁₅NO的计算值，189。

步骤3：

在玻璃压力瓶中向酮GG(1.17g，6.18mmol)在乙醇(60mL)和水(20mL)的溶液中加入碳酸铵(4.74g，49.44mmol，8当量)和氰化钾(1.01g，15.54mmol，2.5当量)。将该混合物在90℃下加热22小时。将冷却的反应混合物在真空下进行浓缩并将该残余物用水进行处理，用EtOAc进行萃取(4x)。将所合并的有机萃取液用水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩，得到白色固态的光谱的纯乙内酰脲HH(1.554g，97％收率)。MS(电子雾化)m/e260(M+H)，C₁₄H₁₇N₃O₂的计算值，259。

步骤4：

将乙内酰脲HH(1.502g)混悬于NaOH水溶液(6N，40mL)中并将其在130℃下加热4天。一旦完全水解(通过HPLC)，将反应混合物用浓盐酸中和至弱酸性(pH 6)。将所得的浆液进行过滤，用水进行洗涤并进行干燥，得到白色固态的4-氨基-1-(4-甲基苯基)哌啶-4-羧酸(4MeAPPC)(2.10g，收率>100％，潮湿并且包含无机盐)，其在HPLC上表现为单峰，可将其直接用于下一步。MS(电子雾化)m/e235(M+H)，C₁₃H₁₈N₂O₂的计算值，234。

步骤5：

将得自上一步的粗制的4-氨基-1-(4-甲基苯基)哌啶-4-羧酸(4-MeAPPC)步骤混悬于二噁烷(80mL)和10％ Na₂CO₃水溶液(40ml)中，将其用Fmoc-Cl(2.2g，8.59mmol，1.5当量)进行处理，并将其强烈的搅拌一整夜。将该反应混合物进行浓缩以除去二噁烷，用6N的HCl将其中和至弱酸性(pH6)并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行处理并用Na₂SO₄进行干燥。将该溶剂除去，得到粗品，将其用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc—CH₂CIa/MeOH)，得到纯的Fmoc-4-MeAPPC(2.16g，两步的总收率为82％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：7.88(d，2H)，7.72(d，2H)，7.39(t，2H)，7.30(td，2H)，6.99(d，2H)，6.82(d，2H)，2.18(s，3H)；MS(电子雾化)m/e457(M+H)，C₂₈H₂₈N₂O₄的计算值，456。

实施例19

Fmoc-4-氨基-1-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸(Fmoc-4-ClAppc-OH)的制备

步骤1：

向1-氯-4-碘苯(2.38g，10.0mmol)，1，4-二噁-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(3.1mL，3.44g，24.0mmol，2.4当量)和叔丁醇钠(2.68g，28.0mmol，2.8当量)在干二噁烷(40mL)中的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(45.5mg，0.0497mmol)和三-邻-甲苯基-膦(61mg，0.20mmol)。将该反应在90℃下加热9小时。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用水进行处理，然后用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到一种棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，95/5—75/25)，得到纯的略带黄色的固态产物II(2.17g，86％)。¹H NMR(CDCl₃)，7.18(dt，2H)，6.85(dt，2H)，3.98(s，4H)，3.28(t，4H)和1.82(t，4H)。

步骤2：

向缩酮II(2.123g，8.39mmol)在丙酮(75mL)中的溶液中加入6N的盐酸(30mL)并将该反应加热回流一整夜。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用EtOAc进行吸收，然后用6N NaOH水溶液进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到黄色固态的产物JJ(1.515g，86％)。MS(电子雾化)m/e210(M+H)，C₁₁H₁₂ClNO的计算值，209。

在玻璃压力瓶中向酮JJ(1.465g，6.986mmol)在乙醇(75mL)和水(25mL)中的溶液中加入碳酸铵(5.36g，55.88mmol，8当量)和氰化钾(1.135g，17.46mmol，2.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热18小时。将冷却了的反应混合物在真空中进行浓缩，将残余物用水进行处理，用EtOAc进行萃取(4x)。将所合并的有机萃取液用水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩，得到光谱纯的白色固态的乙内酰脲KK(1.817g，收率93％)。MS(电子雾化)m/e280(M+H)，C₁₃H₁₄ClN₃O₂的计算值，279。

步骤4：

将乙内酰脲KK(1.768g)混悬于NaOH水溶液(6N，50mL)中并将其在130℃下加热4天。在水解完全后(通过HPLC来进行鉴定)，将该反应混合物用浓盐酸中和至弱酸性(pH～6)。将所得的浆液进行过滤，用水进行洗涤并进行干燥，得到白色固态的4-氨基-1-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸(4-ClAPPC)(2.05g，收率>100％，潮湿并且包含无机盐)，其在HPLC上表现为单峰，将其直接用于下一步。MS(电子雾化)m/e253(M-H)，C₁₂H₁₅ClN₂O₂的计算值，254。

步骤5：

将得自上一步的粗制的4-氨基-1-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸(4-ClAPPC)混悬于二噁烷(100mL)和10％ Na₂CO₃水溶液(50ml)中，将其用Fmoc-Cl(2.0g，7.75mmol，1.2当量)进行处理，并将其强烈地搅拌一整夜。将该反应混合物进行浓缩以除去二噁烷，用6N的HCl将其中和至弱酸性(pH6)并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行洗涤并用Na₂SO₄进行干燥。将该溶剂除去，得到粗品，用闪柱色谱法对其进行纯化(己烷/EtOAc至CH₂Cl₂/MeOH)，得到纯的Fmoc-4-ClAPPC(1.18g，两步的总收率为81％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：7.87(d，2H)，7.71(d，2H)，7.39(td，2H)，7.30(td，2H)，7.20(d，2H)，6.92(d，2H)，3.44(d，2H)，2.93(t，2H)；MS(电子雾化)m/e477(M+H)，C₂₇H₂₅N₂O₄的计算值，476。

实施例20

Fmoc-4-氨基-1-(4-苯氧基苯基)哌啶-4-羧酸(Fmoc-4-PhOAppc-OH)的制备

步骤1：

向1-碘-4-苯氧基苯(3.15g，10.6mmol)、1，4-二噁-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(3.3mL，3.66g，25.6mmol，2.4当量)和叔丁醇钠(2.85g，29.7mmol，2.8当量)在干二噁烷(40mL)中的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(48.5mg，0.053mmol)和三-邻-甲苯基-膦(64mg，0.4mmol)。将该反应在90℃下加热9小时。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用水进行处理，然后用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到一种棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，95/5至80/20)，得到纯的微显黄色的固态产物LL(2.805，85％)。¹H NMR(CDCl₃)，7.26-7.32(m，2H)，7.03(t，1H)，6.92-6.97(m，6H)，4.00(s，4H)，3.26(t，4H)，1.86(t，4H)，

步骤2：

向缩酮LL(2.755g，8.86mmol)在丙酮(90mL)中的溶液中加入6N的盐酸(45mL)，然后将该反应加热回流一整夜。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将残余物用EtOAc进行稀释并用6N NaOH水溶液进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到粗制的产物，将其用闪柱色谱法对其进行纯化(己烷/EtOAc，90/10—70/30)，得到黄色油状的产物MM(2.21g，93％)。MS(电子雾化)m/e 268(M+H)，C₁₇H₁₇ClNO₂的计算值，267。

步骤3：

向酮MM(2.01g，7.52mmol)在乙醇(80mL)和水(25mL)的溶液中加入碳酸铵(5.78g，60.0mmol，8当量)和氰化钾(1.22g，18.80mmol，2.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热18小时。将冷却了的反应混合物在真空中进行浓缩，将残余物用水进行处理，用EtOAc进行萃取(4x)。将所合并的有机萃取液用水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并将其进行浓缩，得到白色固态的光谱纯的乙内酰脲NN(2.34g，收率95％)。MS(电子雾化)m/e 338(M+H)，计算值(C₁₉H₁₉N₃O₃)：337。

步骤4：

将乙内酰脲NN(2.28g，6.76mmol)混悬于NaOH水溶液(6N，60mL)中并将其在130℃下加热4天。一旦完全水解(通过HPLC)，将该反应混合物用浓盐酸中和至弱酸性(pH～6)。将所得的浆液进行过滤，用水进行洗涤并进行干燥，得到白色固态的4-氨基-1-(4-苯氧基苯基)哌啶-4羧酸(4-PhOAPPC)(2.53g，收率>100％，潮湿并且包含无机盐)，其在HPLC上表现为单峰，将其直接用于下一步。MS(电子雾化)m/e313(M+H)，C₁₈H₂₀N₂O₃的计算值，312。

步骤5：

将得自上一步的粗制的4-氨基-1-(4-苯氧基苯基)哌啶-4-羧酸(4-PhOAPPC)混悬于二噁烷(50L)和10％ Na₂CO₃水溶液(50ml)中并将其剧烈的搅拌一整夜。将该反应混合物进行浓缩以除去二噁烷，用6N的HCl将其中和至弱酸性(pH 6)并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液用盐水进行洗涤并用Na₂SO₄进行干燥。将该溶剂除去，得到粗品，用闪柱色谱法对其进行纯化(己烷/EtOAc—CH₂Cl₂/MeOH)，得到纯的Fmoc-4-PhOAPPC(2.18g，两步的总收率为60％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：7.87(d，2H)，7.72(d，2H)，7.38(t，2H)，7.30(td，4H)，7.02(dt，1H)，6.86-6.96(m，6H)，3.35(m，2H)，2.94(t，2H)；MS(电子雾化)m/e535(M+H)，C₃₃H₃₀N₂O₅的计算值，534。

实施例21

Fmoc-4-氨基-1-(2-甲基苯基)哌啶-4-羧酸(Fmoc-2-MeAppc-OH)的制备

步骤1：

向2-碘代甲苯(4.36g，2.5mL，20.0mmol)、1，4-二噁-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(6.88g，6.2mL，48.1mmol，2.4当量)和叔丁醇钠(5.3g，55.2mmol，2.8当量)在干二噁烷(80mL)的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(91mg，0.1mmol)和三-邻-甲苯基膦(122mg，0.4mmol)。将该反应在90℃下加热26小时。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用水进行处理，然后用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，95/5—75/25)，得到略显黄色的固态的纯的产物OO(2.66g，57％)。¹H NMR(CDCl₃)，7.12-7.18(m，2H)，6.94-7.06(m，2H)，4.01(s，4H)，2.98(t，4H)和1.88(t，4H)。

步骤2：

向缩酮OO(2.66g，11.4mmol)在丙酮(70mL)丙酮中的溶液中加入6N的盐酸(35mL)，将该反应在85℃下加热一整夜。将所得的反应物进行浓缩以除去溶剂。将所得残余物用EtOAc进行稀释并用NaOH(6N)进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，90/10—70/30)，得到黄色油状的产物PP(2.04g，95％)。MS(电子雾化)m/e190(M+H)，C₁₂H₁₅NO的计算值，189。

步骤3：

在玻璃压力瓶中向酮PP(1.54g，8.15mmol)在乙醇(60mL)和水(20mL)的溶液中加入加入碳酸铵(4.69g，48.9mmol，6当量)和氰化钾(800g，12.2mmol，1.5当量)。将该混合物在80-90下加热18小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(300ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲QQ(2.01g，收率95％)。MS(电子雾化)m/e 260(M+H)，C₁₄H₁₇N₃O₂的计算值，259。

步骤4：

向乙内酰脲QQ(1.07g，4.13mmol)在无水THF(25mL)的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(2.25g，10.32mmol，2.5当量)、三乙胺(0.63mL，460mg，4.54mmol，1.1当量)和DMAP(36mg，0.29mmol)。在加入这些物质后约15分钟，该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(300mL)，用1N HCl(3 x 30mL)、饱和Na₂CO₃水溶液(2 x 30mL)和盐水(2 x 30mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，90/10-80/20)，得到纯的白色固态的二-Boc乙内酰脲RR(1.71g，90％)。MS(电子雾化)m/e460(M+H)，C₂₄H₃₃N₃O₆的计算值，459。

步骤5：

将二-Boc乙内酰脲RR(1.71g，3.72mmol)溶解于DME(23mL)中，得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(33mL，33mmol)并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种十分澄清的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，并用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含4-氨基-1-(2-甲基苯基)哌啶-4-羧酸(2-MeAPPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调节至11-12。然后将这种溶液(30mL)用1，4-二噁烷(30mL)进行稀释并用Fmoc-Cl(1.28g，4.96mmol，1.3当量)进行处理，然后在室温下将其搅拌一整夜。将反应混合物在减压的条件下进行浓缩以除去二噁烷，用1N的HCl进行中和并用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc-CH₂Cl₂/MeOH)得到纯的白色固态的Fmoc-2-MeAPPC(1.09g，由二-Boc乙内酰脲RR而得的收率为64％)。¹H NMR(DMSO-d₆)：7.87(d，2H)，7.74(d，2H)，7.40(td，2H)，7.31(td，2H)，7.12(m，2H)，6.97(d，1H)，6.92(td，1H)，2.72-2.88(m，4H)和2.22(s，3H)；MS(电子雾化)m/e457(M+H)，C₂₈H₂₈N₂O₄的计算值，456。

实施例22

Fmoc-4-氨基-1-(2-异丙基苯基)哌啶-4-羧酸(Fmoc-2iPrAppc-OH)的制备

步骤1：

向1-碘-2-异-丙基苯(10.0g，40.7mmol)、1，4-二噁-8氮杂螺环[4.5]癸烷(12.0mL，13.3g，93.0mmol，2.3当量)和叔丁醇钠(10.0g，104.2mmol，2.6当量)在干二噁烷(160mL)的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(180mg，0.197mmol)和三-邻-甲苯基-膦(244mg，0.80mmol)并将该反应在90℃下加热26小时。将所得的反应混合物进行浓缩以除去溶剂，用水对其进行处理并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到一种棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，9575/25)，得到略显黄色的固态的纯的产物SS(3.61g，35％收率)。MS m/z 262(M+H)，C₁₆H₂₃NO₂的计算值，261。

步骤2：

向缩酮SS(3.24g，12.4mmol)在丙酮(90mL)中的溶液中加入6N的盐酸(45mL)，然后将该反应加热回流一整夜。将所得的反应混合物进行浓缩以除去溶剂，将残余物用EtOAc进行稀释，用NaOH水溶液(6N)进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，将其进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到黄色油状的产物TT(2.42g，89％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.27(m，1H)，7.04-7.19(m，3H)，3.58(m，1H)，3.20(t，4H)，2.60(t，4H)和1.25(d，6H)；MS m/z 218(M+H)，C₁₄H₁₉NO的计算值，217

步骤3：

在玻璃压力瓶中向酮TT(2.30g，10.6mmol)在乙醇(90mL)和水(20mL)中的溶液中加入碳酸铵(8.1g，84.3mmol，8当量)和氰化钾(1.72g，26.5mmol，2.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热18小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(400ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲UU(2.78g，收率91％)。MS m/z 288(M+H)，C₁₆H₂₁N₃O₂的计算值：287。

步骤4：

向乙内酰脲UU(2.74g，9.54mmol)在无水THF(100mL)的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(5.2g，24.24mmol，2.5当量)、三乙胺(1.5mL，1.07g，10.5mmol，1.1当量)和DMAP(46mg，0.29mmol)。在加入这些物质后约15分钟，该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(300mL)，用盐水(3 x 30mL)对其进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到白色固态的纯的二-Boc乙内酰脲VV(4.39g，收率94％)。MS m/z 488(M+H)，C₂₆H₃₇N₃O₆的计算值，487。

步骤5：

将二-Boc乙内酰脲VV(2.34g，4.8mmol)溶解于DME(30mL)中，得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(45mL，45mmol)并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种十分澄清的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，并用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含4-氨基-1-(2-异丙基苯基)哌啶-4-羧酸(2-iPrAPPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调至11-12。然后将这种溶液(～45mL)用1，4-二噁烷(45mL)进行稀释并用Fmoc-Cl(1.78g，6.89mmol，1.5当量)进行处理，然后将其在室温下搅拌一整夜。将反应混合物在减压的条件下进行浓缩以除去二噁烷，用1N的HCl进行中和并用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/

₂Cl₂/MeOH)，得到纯的白色固态的Fmoc-2-iPrAPPC(1.46g，由二-Boc乙内酰脲而得的收率为63％)。HRMS m/z507.2263，C₃₀H₃₂N₂O₄Na的计算值，507.2260。

实施例23

Fmoc-4-氨基-1-(3-甲基苯基)哌啶-4-羧酸(Fmoc-3-MeAppc-OH)的制备

向3-碘代甲苯(4.36g，2.6mL，20.0mmol)、1，4-二噁-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(6.88g，6.2mL，48.1mmol，2.4当量)和叔丁醇钠(5.3g，55.2mmol，2.8当量)在干二噁烷(80mL)中的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(91mg，0.1mmol)和三-邻-甲苯基膦(122mg，0.4mmol)。将该反应在90℃下加热26小时。将所得的混合物进行浓缩以除去溶剂。将该残余物用水进行处理，然后用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到一种棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，95/5至75/25)，得到略带黄色的油状的纯的产物WW(3.21g，69％)。

步骤2：

向缩酮WW(1.25g，5.36mmol)在丙酮(20mL)中的溶液中加入6N的盐酸(10mL)，然后将该反应加热回流一整夜。将所得的反应物进行浓缩以除去溶剂。将所得残余物用EtOAc进行稀释并用NaOH(6N)进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，90/10至70/30)，得到黄色油状的产物XX(843mg，收率83％)。MS m/z 190(M+H)，C₁₂H₁₅NO的计算值，189。

步骤3：

在玻璃压力瓶中向酮XX(763g，4.03mmol)在乙醇(45mL)和水(15mL)中的溶液中加入碳酸铵(3.09g，32.21mmol，8当量)和氰化钾(675mg，10.38mmol，2.5当量)。将该混合物在80-90℃下加热18小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(200ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态的乙内酰脲YY(930mg，收率89％)。MS m/z 260(M+H)，C₁₄H₁₇N₃O₂的计算值，259。

步骤4：

向乙内酰脲YY(780mg，3.012mmol)在无水THF(22mL)中的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(1.64g，7.52mmol，2.5当量)、三乙胺(0.42mL，305mg，3.01mmol，1.0当量)和DMAP(20mg，0.164mmol)。在加入这些物质后约5分钟，该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(300mL)，用盐水(3 x 30mL)进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到纯的白色固态的二-Boc乙内酰脲ZZ(1.37g，一定数量)。HRMS m/z 482.2261(M+Na)，C₂₄H₃₃N₃O₆Na的计算值，482.2267。

步骤5：

将二-Boc乙内酰脲ZZ(1.29g，2.818mmol)溶解于DME(20mL)中，得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N的NaOH(25mL，25mmol)并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种十分澄清的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，然后用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含4-氨基1-(3-甲基苯基)哌啶-4-羧酸(3-MeAPPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调节至11-12。然后将这种溶液(30mL)用1，4-二噁烷(30mL)进行处理，然后用Fmoc-Cl(1.46mg，5.65mmol，2.0当量)对其进行处理并将其在室温下搅拌一整夜。将反应混合物在减压的条件下进行浓缩以除去二噁烷，用1N HCl进行中和并用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc-CH₂Cl₂/MeOH)，得到纯的白色固态的产物Fmoc-3-MeAPPC(1.002g，由二-Boc乙内酰脲而得的收率为78％)。HRMS m/z479.1940(M+Na)，C₂₈H₂₈N₂O₄Na的计算值，479.1947。

实施例24

Fmoc-4-氨基-1-(3-甲氧基苯基)哌啶-4-羧酸(Fmoc-3-MeOAppc-OH)的制备

步骤1：

向3-碘茴香醚(4.68g，2.4mL，20.0mmol)、1，4-二噁-8-氮杂螺环[4.5]癸烷(6.2mL，6.88g，48.1mmol，2.4当量)和叔丁醇钠(5.3g，55.2mmol，2.8当量)在干二噁烷(80mL)的溶液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(O)(91mg，0.1mmol)和三-邻-甲苯基膦(122mg，0.4mmol)，然后将该反应在90下加热26小时。将所得的反应混合物进行浓缩以除去溶剂，然后将干残余物用水进行处理并用EtOAc进行萃取。将所合并的有机萃取液进行合并，用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后浓缩得到棕色的油。将这种粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，95/5至75/25)，得到略带黄色的油状的纯的产物AAA(3.10g，收率62％)。MS m/z(M+H)，250(M+H)，C₁₄H₁₉NO₃的计算值，249。

步骤2：

向缩酮AAA(3.10g，12.45mmol)在丙酮(90mL)中的溶液中加入6N的盐酸(45mL)，然后将该反应加热回流一整夜。将所得的反应物进行浓缩以除去溶剂。将所得残余物用EtOAc进行稀释并用NaOH(6N)进行中和。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用Na₂SO₄进行干燥，然后进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，90/10—70/30)，得到黄色油状的产物BBB(2.53g，收率99％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.20(m，1H)，6.58(d，1H)，6.39-6.56(m，2H)，3.80(s，3H)，3.59(m，4H和2.58(m，4H)。

步骤3：

向酮BBB(1.81g，8.82mmol)在乙醇(60mL)和水(20mL)中的溶液中加入碳酸铵(6.77g，70.52mmol，8当量)和氰化钾(1.14g，17.6mmol，2.0当量)。将该混合物在80-90℃下加热18小时。将冷却了的反应混合物加至冰冷的水(200ml)中并剧烈的搅拌30分钟。将所得的沉淀吸滤出来，用水充分洗涤并将其进行干燥，得到白色固态乙内酰脲CCC(2.23g，92％收率)。MS m/z 276(M+H)，C₁₄H₁₇N₃O₃的计算值，275。

步骤4：

向乙内酰脲CCC(1.10g，4.00mmol)在无水THF(50mL)的混悬液中连续地加入二-叔丁基重碳酸盐(2.18g，10.0mmol，2.5当量)、三乙胺(0.62mL，445mg，4.4mmol，1.1当量)和DMAP(20mg，0.164mmol)。在加入这些物质后约15分钟，该反应物变成澄清的黄色溶液，在室温下将其搅拌一整夜。将该反应混合物在减压下进行浓缩，得到一种固体，然后将其溶于EtOAc中(300mL)，用盐水(3 x 30mL)对其进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥，然后在减压下进行浓缩。将该淡黄色的产物用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc，

)，得到白色固态的纯的二-Boc乙内酰脲DDD(1.90g，一定量)；¹H NMR(CDCl₃)：7.16(t，1H)，6.57(d，1H)，6.24(s，1H)，6.19(d，1H)，3.77(s，3H)，1.58(s，9H)，1.42(s，9H)；MS m/z 476(M+H)，C₂₄H₃₃N₃O₇的计算值，475。

步骤5：

将二-Boc乙内酰脲DDD(1.06g，2.23mmol)溶解于DME(20mL)中，得到一种澄清的溶液。向这种溶液中加入1N NaOH(20mL，20mmol)并将该反应在室温下搅拌一整夜，得到一种十分澄清的混合物。HPLC表明该反应已经进行完全。将该反应混合物在减压下进行浓缩以除去DME，并用Et₂O进行萃取。不进行纯化，将所得的包含4-氨基1-(3-甲氧基苯基)哌啶-4-羧酸(3-MeOAPPC)的水层用6N HCl进行处理以将pH调至11-12。然后将这种溶液(35mL)用1，4-二噁烷(35mL)进行稀释并用Fmoc-Cl(755mg，2.93mmol，1.3当量)进行处理，然后将其在室温下搅拌一整夜。将反应混合物在减压的条件下进行浓缩以除去二噁烷，用1N的HCl进行中和并用EtOAc进行萃取。将所合并的萃取液用盐水进行洗涤，用无水Na₂SO₄进行干燥并进行浓缩。将该粗品用闪柱色谱法进行纯化(己烷/EtOAc CH₂Cl₂/MeOH)，得到白色固态的纯的产物Fmoc-3-MeOAPPC(668mg，由二-Boc乙内酰脲DDD而得的收率为63％)。¹H NMR(CDCl₃)：7.83(d，2H)，7.72(d，2H)，7.41(td，2H)，7.34(dt，2H)，7.16(t，1H)，6.52(d，1H)，6.42(s，1H)，6.36(d，1H)，4.25(m，3H)，3.68(s，3H)，3.23-3.40(m，2H)，2.96(t，2H)和1.86-2.18(m，4H)。HRMS m/z495.1901(M+Na)，C₂₈H₂₈N₂O₅Na的计算值：495.1896。

实施例25

Fmoc-1-氨基-4-环己基环己烷-1-羧酸(Fmoc-Achc-OH)的制备

步骤1：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的4-环己基环己酮(3.00g，16.6mmol)、氰化钾(1.63g，25.0mmol)、碳酸铵(9.59g，99.8mmol)、乙醇(75ml)和水(15ml)的混合物在80℃的油浴中加热15小时。在冷却至室温后，将白色的浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。过滤，风干，得到白色固态的乙内酰脲EEE(6.10g，仍然潮湿，收率>100％)。¹H NMR(DMSO-dg)10.52(1H，宽峰，NH)，8.43(1H，宽单峰，NH)，0.80-1.80(20H，m)。LRMS(APCI)：C₁₄H₂₂N₂O₂计算值：250；实测值：249(M-H)，251(M+H)。

步骤2：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲EEE(1.39g，5.55mmol)和6N的氢氧化钠溶液在130℃上的油浴上加热2天。将该反应混合物在冰浴上进行冷却，用浓盐酸将其中和至～pH 7。将这种白色的浆液进行过滤，将所得的沉淀用水进行洗涤，得到粗制的1-氨基-4-环己基环己烷-1-羧酸(48.3g，潮湿并包含无机盐，收率>100％)。LRMS(电子雾化)：C₁₃H₂₃NO₂，计算值225；实测值：226(M+H)。

步骤3：

将粗制的1-氨基-4-环己基环己烷-1-羧酸(48.3g，5.55mmol理论值)、三乙胺(1.0ml，7.17mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，2.43g，7.20mmol)在乙腈(75ml)和水(75ml)中的混合物在室温下加热24小时。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％的酸性柠檬酸溶液酸化至pH～3，然后将该白色的乳剂用二氯甲烷萃取3次。将有机层进行合并，并用水、盐水进行洗涤，用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，用柱色谱法对其进行纯化(用15 8％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到Fmoc-1-氨基-4-反-环己基环己烷-1-羧酸(250mg，两步的收率为10％)。HRMS(FAB)：C₂₈H₃₄NO₄(M+H)计算值：448.2488；实测值：448.2497。

实施例26

Fmoc-1-氨基-4，4-二苯基环己烷-1-羧酸(Fmoc-Adpc-OH)的制备

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的4，4-二苯基环己酮(根据Freeman，P.K.等人的方法，J.Org.Chem.1989，54，782-789，通过4，4-二苯基环己烯酮的氢化而进行制备的)(1.55g，6.19mmol)、氰化钾(0.65g，9.97mmol)、碳酸铵(3.60g，37.5mmol)、乙醇(48ml)和水(12ml)的混合物在80℃的油浴中加热24小时。在冷却至室温后，将白色的浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。过滤，风干，得到白色固态的乙内酰脲FFF(1.89g，收率95％)。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.57(1H，宽峰，NH)，8.59(1H，宽单峰，NH)，7.00-7.50(1OH，m，苯基)。LRMS(电子雾化)：C₂₀H₂₀N₂O₂，计算值320；实测值：319(M-H)。

步骤2：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲FFF(1.88g，5.87mmol)、氢氧化钡单水合物(5.60g，29.6mmol)和水(100ml，极稀)的混合物在105℃的油浴上加热2天。再向其中加入一些氢氧化钡单水合物(5.60g，29.6mmol)，将该混合物在105℃的油浴上再加热24小时。将该反应混合物冷却至室温，在强烈搅拌下将其用4N的硫酸酸化至～pH 3。将该混悬液在沸水浴上搅拌2小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行洗涤。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～30ml。用浓氢氧化铵溶液进行中和，得到白色沉淀，过滤，用水进行洗涤并在真空下干燥一整夜，得到粗制的白色固态的1-氨基-4，4-二苯基环己烷-1-羧酸(0.52g，收率30％)。LRMS(电子雾化)：C₁₉H₂₁NO₂，计算值295；实测值：294(M-H)，296(M+H)。

步骤3：

将粗制的1-氨基-4，4-二苯基环己烷-1-羧酸(510mg，1.73mmol)、三乙胺(0.37ml，2.65mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，880mg，2.61mmol)在乙腈(25ml)和水(25ml)中的混合物在室温下搅拌一整夜。对该反应进行的TLC分析表明了起始材料氨基酸的存在。向其中加入9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(200mg)和乙腈(5ml)，然后将该混合物在室温下再搅拌24小时。在真空下将该反应物进行浓缩以除去大多数的乙腈，用10％柠檬酸水溶液将其酸化至pH～3，用乙酸乙酯将该白色的乳液萃取3次。将有机层进行合并，并用水、盐水进行洗涤，用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到粗制的油，将其用柱色谱法进行纯化(用148％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到白色固态的Fmoc-1-氨基-4，4二苯基环己烷-1-羧酸(350mg，39％收率)。HRMS(FAB)：C₃₄H₃₂NO₄(M+H)计算值518.2331；实测值：518.231

实施例27

Fmoc-1-氨基-4-反-t-丁基环己烷-1-羧酸(Fmoc-Abc-OH)的制备

步骤1：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的4-叔丁基环己酮(2.00g，13.0mmol)、氰化钾(1.27g，19.5mmol)、碳酸铵(7.48g，77.8mmol)，乙醇(60ml)和水(12ml)的混合物在80℃的油浴中加热15小时。在冷却至室温后，将白色的浆液倒入到冰-水中并将其在室温下搅拌2小时。过滤，得到白色固态的乙内酰脲GGG(2.78g，收率96％)，将其以粗品的形式用于下一步。¹H NMR(DMSO-d₆)δ 10.52(1H，宽峰，NH)，8.50(1H，宽单峰，NH)，0.81(9H，s，叔-Bu)。

步骤2：

将盛放于密封的厚壁压力烧瓶中的乙内酰脲GGG(2.78g，12.4mmol)、氢氧化钡单水合物(11.74g，62.0mmol)和水(50ml)的混合物在120℃的油浴上加热2天。将该反应混合物冷却至室温，在强烈的搅拌下将其用4N的硫酸将其酸化至～pH 3。将所得的混悬液在沸水浴中搅拌1小时，然后冷却至室温。将该白色的混悬液进行过滤，将沉淀用水进行清洗。将所合并的滤液和洗涤液在真空下浓缩至～30ml。用浓氢氧化铵溶液进行中和，得到白色沉淀，过滤，用水进行洗涤并在真空下干燥一整夜，得到白色固态的1-氨基-4-反-叔丁基环己烷-1-羧酸(2.10g，收率85％)。

步骤3：

将粗制的1-氨基-4-反-叔丁基环己基-1-羧酸(2.10g，10.54mmol)、9-芴基甲基琥珀酰亚氨基碳酸酯(Fmoc-OSu，6.33g，7.20mmol)在二噁烷(150

ml)和10％碳酸钠溶液(120ml)中的混合物在室温下搅拌24小时。将干反应混合物在真空下进行浓缩以除去大多数的二噁烷，用3N的HCl将其酸化至pH～3，将白色的乳剂用二氯甲烷萃取两次。将有机层进行合并，并用水、盐水进行洗涤，用硫酸镁进行干燥。过滤，浓缩，得到一种粗品，将其用柱色谱法进行纯化(用14 5％甲醇/二氯甲烷进行洗脱)，得到Fmoc-1-氨基-4-反-叔-丁基环己烷-1-羧酸(1.42g，收率32％)。HRMS(FAB)：C₂₆H₃₂NO₄(M+H)计算值422.2331；实测值：422.23

实施例28

3S，2S-Fmoc-(L)-β-甲基(Nin-Mes)色氨酸，Fmoc-(L)-β-Me(Nin-Mes)Trp-OH)的制备

在-78℃下，向反-3-吲哚丁酸(indolearylic acid)(15.0g，0.08mole)在350mL的无水THF中的溶液中缓慢的加入125mL在己烷中的1.6M的正-BuLi。将所得的混悬液在-78℃下搅拌1小时。然后，将2-均三苯磺酰氯(21.9g，0.1mole)在50mL的无水THF中的溶液缓慢的加入到其中。将该混合物加热至室温，并将其搅拌一整夜。将该混合物倒入到饱和NH₄Cl水溶液中。将水层分离出来，然后将水层用EtOAc进行萃取。将所合并的有机层用硫酸钠进行干燥。除去溶剂，得到14.1g的粗制的产物HHH，不进行纯化，将其用于下一步中。¹H NMR分析表明其包含2.8的-均三苯磺酸。¹H NMR、(CD₃OD)δ 7.57(s，1H)，7.42(d，1H)，7.15-7.30(m，3H)，7.02(s，2H)，6.54(d，1H)，6.36(d，1H)，2.52(s，9H)，2.30(s，3H)。

步骤2：

在-78℃下，向N-2-均三苯磺酰基-反-3-吲哚丁酸(3.26g，8.8mmol)在140mL的无水THF中的溶液中加入3.7mL(3当量)的三乙胺和2.17mL(2当量)的Me₃CCOCl。将所得的混合物在-78℃下搅拌15分钟，并将其在0℃下搅拌1.5小时。将所得的混合物冷却至-78℃，向其中加入5.5mL的在己烷中的1.6M的正-BuLi，然后通过一根套管向其中加入(R)-4-苯基-2-噁唑酮和正-BuLi在THF(通过在-78℃下向(R)-4-苯基-2-噁唑酮(2.87g，17.6mmol)在70mL的无水THF中的溶液中加入11mL的在己烷中的1.6M的正-BuLi来进行制备的)中的溶液。将所得的混合物在-78℃下搅拌2小时，然后在室温下搅拌一整夜。用NH₄Cl水溶液(100mL)来结束该反应。在真空的条件下除去有机溶剂后，将水性的残余物用EtOAc进行萃取。将所合并的有机层用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到一种粗品，将其用闪柱色谱法进行纯化(EtOAc/己烷，1：4)，得到浅棕色胶状的产物III，收率为63％(2.86g)。LR-电子雾化：C₂₉H₂₆N₂O₅S，计算值：514实测值：m/z 515(M+H)。

步骤3：

在-4℃下，向CuBr.Me₂S(0.84g，4.08mmol)和5mL的甲硫醚在10mL的无水THF的混合物中加入1.36mL的在乙醚中的3M CH₃MgBr。在搅拌10分钟后，向其中加入在8mL的无水THF中的上述产物(1.4g，2.72mmol)。将所得的混合物在-4℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌6小时。在将其冷却至-78℃后，向该混合物中加入1.45g(8.16mmol)的在15mL的无水THF的正-溴琥珀酰亚胺。将该混合物在-78℃下搅拌30分钟，并将其在室温下搅拌一整夜。将该混合物倒入到100mL的盐水中，并用EtOAc(2 x 100mL)对其进行萃取。将有机层用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到一种粗品，将其用闪柱色谱法进行纯化(EtOAc/己烷，1：4)，得到浅棕色胶状的产物JJJ，收率为46％(0.77g)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.63(d，1H)，7.47(s，1H)，7.20-7.37(m，8H)，6.98(s，2H)，6.16(d，1H)，5.13(dd，1H)，4.49(t，1H)，4.17(dd，1H)，3.75(dt，1H)，2.54(s，9H)，2.31(s，3H)，1.59(d，3H)。

步骤4：

将上述的溴化物JJJ(0.72g，1.18mmol)与在10mL乙腈中的四-正-丁基铵叠氮化物(1.68g，5.9mmol)和叠氮化钠(77mg，1.18mmol)进行混合，并在室温下搅拌6小时。将该混合物倒入到100mL的NH₄Cl水溶液中并用EtOAc进行萃取(2 x 100mL)。将有机层用硫酸钠进行干燥。过滤，浓缩，得到一种粗品，将其用闪柱色谱法进行纯化(EtOAc/CH₂Cl₂/己烷，1：2：5)，得到浅棕色胶状的产物KKK，收率为82％(0.55g)。¹H NMR(CDCl₃)δ 7.65(d，1H)，7.59(s，1H)，7.18-7.29(m，8H)，6.90(s，2H)，5.54(d，1H)，5.50(dd，1H)，4.78(t，1H)，4.35(dd，1H)，3.62(五重峰，1H)，2.43(s，9H)，2.28(s，3H)，1.28(d，3H)。

在0℃下，向上述叠氮化物KKK(0.55g，0.96mmol)、水(4mL)和THF(12mL)的混合物中加入0.65mL的30％的H₂O₂，然后加入位于1mL的水中的48mg(2当量)的LiOH。将所得的混合物在0℃下搅拌2小时。用在6mL水中的Na₂SO₃(1g)来结束该反应。将该混合物在室温下搅拌30分钟。在除去有机溶剂后，用10mL的饱和NaHCO₃溶液对该水溶液进行稀释并用EtOAc进行萃取(2 x 30mL)。过滤，浓缩，得到一种粗品，将其用闪柱色谱法进行纯化(HOAc/MeOH/EtOAc，1：10：100)，得到黄白色固态的产物LLL，收率为83％(0.34g)。LR-电子雾化：C₂₁H₂₂N₄O₄S，计算值：426实测值：m/z 425(M-H)。

步骤6：

将上述的叠氮酸LLL(0.34g，0.8mmol)溶解于20mL甲醇中。向该溶液中加入170mg的10％披钯碳。将所得的混合物在室温下，在H₂(气球)下搅拌3小时。在过滤、浓缩后，将该粗品溶解于THF(12mL)和水(4mL)的混合物溶剂中。向该混合物中加入NaHCO3(254mg，3mmol)和Fmoc-OSu(540mg，1.6mmol)。将所得的混合物在室温下搅拌18小时。用30mL饱和的NH₄Cl溶液对其进行稀释，并用EtOAc进行萃取(2 x 30mL)。过滤，浓缩，得到一种粗品，将其用闪柱色谱法进行纯化(HOAc/MeOH/EtOAc，1：10：100)，得到黄白色固态的3S，2S-Fmoc-(L)-β-甲基(Nin-Mes)色氨酸，收率为50％(0.25g)。LR-电子雾化：C₃₆H₃₄N₂O₆S，计算值：622实测值：m/z 621(M-H)。

实施例29

Fmoc-Linker-BHA树脂的制备

二苯甲胺共聚苯乙烯-1％二乙烯基苯交联树脂(10.0g，9.3mequiv，100-200 ASTM目，Advanced ChemTech)在100mL的CH₂Cl₂中进行溶胀，过滤，并连续地用各100mL的CH₂Cl₂、6％ DIPEA/CH₂Cl₂(两次)、CH₂Cl₂(两次)进行洗涤。将该树脂用在100mL 25％的DMF/CH₂Cl₂中的对-[(R，S)-α-[1-(9H-芴-9-基)-甲氧基甲酰胺]-2，4-二甲氧基苯甲基]-苯氧基醋酸(Fmoc-Linker)(7.01g，13.0mmol)、N-羟基苯并三唑(2.16g，16.0mmol)、和二异丙基碳二亚胺(2.04ml，13.0mmol)在室温下处理24小时。将该树脂进行过滤，并连续地用各100ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇(两次)、DMF、和CH₂Cl₂(三次)进行处理。Kaiser茚三酮分析为阴性。将该树脂在真空下进行干燥，得到16.12g的Fmoc-Linker-BHA树脂。将这种树脂中的一部分(3.5mg)进行Fmoc去保护，定量的UV分析表明负载率为0.56mmol/g。

实施例29

Ac-Nle-环(Asp-Lys)-Asp-His-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将由实施例29所得的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述所描述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是在DMF中哟嘎HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。七个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-His(Trt)(600mg 1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Nle(430，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来得到的，将其用CHUCK进行洗涤(三次)，然后将其用在1mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的醋酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤，然后将其连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行处理。将该树脂在真空的条件下进行干燥，得到1.2g的Ac-七肽树脂。将该Ac-七肽树脂用100μL的二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、以及10mL的三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA对其进行洗涤并将该滤液在冷却的乙醚中进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤，重新离心，然后将粗制的直链产物在真空中进行干燥，得到250mg黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将250mg的粗制的直链肽溶解于250mL的DMF中，向其中加入600μL的N-甲基吗啉以使其获得8.0的表观pH。向其中加入300mg的BOP，并且通过HPLC来对该环合进行检测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水来停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8mL/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到60mg(15％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₀H₆₉N₁₅O₉计算值：1024，实测值：m/z(1025 M+H)。

实施例31

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是使用在DMF中的HBTU作为偶联剂并以DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是与Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。将该肽树脂用方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂来对其进行洗涤(三次)并用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐对其处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂在室温下用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL的三氟醋酸处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到220mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。220mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP，并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备性HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化，并用在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到53mg

(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₄H₇₂N₁₂O₈计算值：1017实测值：m/z(1018 M+H)。

实施例32

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2)Nal-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所用的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是与Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc(2)Nal(530mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2.mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骡1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL的三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到220mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将240mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₆H₇₃N₁₁O₈计算值：1028实测值：m/z(1029 M+H)。

实施例33

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-N-甲基(2)Nal-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并且以DIPEA(3当量)作为碱来进行的。两个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)，Fmoc-(2)Nal(530mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2.mmol)来进行的。

在将Fmoc从2-Nal残基上除去后，用2-硝基苯磺酰氯(5当量，426mg，1.93mmol)以及在DMF中的作为碱的DIPEA(5当量)将所得的胺转换成其2-硝基苯磺酰基衍生物。用DMF(6 x 30ml)来对其进行洗涤，然后用CH₂Cl₂(3 x 30ml)来进行洗涤，然后将该树脂在真空的条件下进行干燥。将所得的磺胺用三苯基膦(5当量，505mg，1.93mmol)、N，N-二乙基偶氮基二羧酸盐(5当量，303μL，1.93mmol)和甲醇(10当量156μL，3.85mmol)在THF中来进行甲基化。用THF(6 x 30ml)来进行洗涤，然后用CH₂Cl₂(5 x 30ml)进行洗涤，然后将该树脂在真空的条件下进行干燥。然后，在DMF中用1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(3当量，173μL，1.16mmol)、2-巯基乙醇(5当量135μL，1.93mmol)来除去该2-硝基苯磺酰基。用DMF(3 x 30ml)、异丙醇(3 x 30ml)来进行洗涤，然后用乙醚(3 x 30ml)来进行洗涤。然后将该树脂在真空的条件下进行干燥。将所得的N-Me-2-Nal残基形成四个偶联循环，分别为Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到235mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将235mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TPA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到43mg(10％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₇H₇₅N₁₁O₈计算值：1042实测值：m/z(1043 M+H)。

实施例34

环(琥珀酸-Lys)-琥珀酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、在DMF中的琥珀酸酐(600mg，6mmol)与1.1ml的DIPEA来进行的。

将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g的五肽树脂。将该五肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μl茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤，重新离心，然后将该粗制的产物1在真空的条件下进行干燥，得到220mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将220mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

将这种粗制的循环物质用制备HPLC在Vydac C18-柱(2.5×20cm)上进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％ TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到40mg(11％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₄₉H₆₃N₁₁O₇计算值：918实测值：m/z(919 M+H)。

实施例35

环(马来酸-Lys)-马来酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、在DMF中的马来酸酐(600mg，6mmol)与加入的不含DIPEA的HOBT(800mg，6mmol)来进行的。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g五肽树脂。将该五肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2ml TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤，重新离心，然后将该粗制的产物在真空的条件下进行干燥，得到230mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将230mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到38mg(11％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₄₉H₆₁N₁₁O₇计算值：916实测值：m/z(917 M+H)。

实施例36

环(邻苯二甲酸-Lys)-邻苯二甲酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、在DMF中的邻苯二甲酸酐(660mg，6mmol)与1.1ml的DIPEA来进行的。

将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g的五肽树脂。五肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤，重新离心，然后将该粗制的产物1在真空的条件下进行干燥，得到220mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将这种粗制的循环材料用制备HPLC在Vydac C18-柱(2.5 x 20cm)上进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％ TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到35mg(10％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₃H₆₃N₁₁O₇计算值：966实测值：m/z(967 M+H)。

实施例37

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-OHApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-OHApc(565mg1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL的在60％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到225mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将225mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₄H₇₂N₁₂O₉计算值：1033实测值：m/z(1034 M+H)。

实施例38

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-MeOApc(600mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

235mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到49mg(12％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₅H₇₄N₁₂O₉计算值：1047实测值：m/z(1048 M+H)。

实施例39

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-EtOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-EtOApc(640mg 1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并将其连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤，并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到235mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到60mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₆H₇₆N₁₂O₉计算值：1061实测值：m/z(1062 M+H)。

实施例40

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-iPrOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-iPrOApc(660mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到260mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将260mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到63mg(15％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₇H₇₈N₁₂O₉计算值：1075实测值：m/z(1076 M+H)。

实施例41

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-3-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-3-MeOApc(600mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2ml TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到235mg的白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将235mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMP中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/HzO，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到49mg(12％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₅H₇₄N₁₂O₉计算值：1047实测值：m/z(1048 M+H)。

实施例42

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-ClApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-ClApc(560mg1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到230mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将230mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到49mg(12％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₄H₇₁N₁₂O₈Cl；计算值：1051实测值：m/z(1052 M+H)。

实施例43

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-MeApc(590mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂来对其进行洗涤(三次)并用2mL的在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐对其处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μl茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到240mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

240mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空中将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg0(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₅H₇₄N₁₂Os计算值：1031实测值：m/z(1032 M+H)。

实施例44

Penta-环(Glu-Lys)-Glu-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Glu(OBut)(510mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。将该肽树脂用方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

将戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到255mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将255mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TPA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到60mg(15％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₅H₇₄N₁₂O₈计算值：1031实测值：m/z(1032 M+H)。

实施例45

Penta-环(Asp-Orn)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Om-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Orn(Boc)(550mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.15g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到240mg的白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将240mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10ml的水以使该反应停止，在真空中将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到53mg(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₃H₇₀N₁₂O₈计算值：1003实测值：m/z(1004 M+H)。

实施例46

Penta-环(Asp-Dbr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dbr-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Dbr(Boc)(540mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.10g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到220mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将220mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水来停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到35mg(9％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₈N₁₂O₈计算值：989实测值：m/z(990 M+H)。

实施例47

Penta-环(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Dpr(Boc)(530mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μl茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到200mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将200mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到30mg(8％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₁H₆₆N₁₂O₈计算值：975实测值：m/z(976 M+H)。

实施例48

Ac-环(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Dpr(Boc)(530mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的醋酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的乙酰基-六肽树脂。

将该乙酰基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μl茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到200mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将210mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH3CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到28mg(8％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₄₈H₆₀N₁₂O₈计算值：933实测值：m/z(934 M+H)。

实施例49

环(邻苯二甲酸-Dpr)-邻苯二甲酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Dpr(Boc)(530mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、在DMF中的邻苯二甲酸酐(660mg，6mmol)与1.1ml的DIPEA来进行的。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g五肽树脂。

将该五肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤，重新离心，然后将该粗制的产物1在真空的条件下进行干燥，得到220mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到30mg(8％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₀H₅₇N₁₁O₇计算值：924实测值：m/z(925 M+H)。

实施例50

环(琥珀酸-Dpr)-琥珀酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Dpr(Boc)(530mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、在DMF中的琥珀酸酐(600mg，6mmol)与1.1ml的DIPEA来进行的。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g五肽树脂。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/HzO，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到31mg(8％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₄₆H₅₇N₁₁O₇计算值：876实测值：m/z(877 M+H)。

实施例51

环(马来酸-Dpr)-马来酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Dpr(Boc)(530mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、在DMF中的马来酸酐(600mg，6mmol)与加入的不含DIPEA的HOBT(800mg，6mmol)来进行的。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g五肽树脂。

将该五肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤，重新离心，然后将该粗制的产物在真空的条件下进行干燥，得到230mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过用制备HPLC在C18-柱(2.5 x 20cm)上对这种粗制的循环物质进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％ TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到28mg(8％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₄₆H₅₅N₁₁O₇计算值：874实测值：m/z(875 M+H)。

实施例52

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Cit(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)，Fmoc-Apc(550mg 1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.3g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到300mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将300mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH3CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到80mg(20％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₄H₇₁N₁₁O₉计算值：1018实测值：m/z(1019 M+H)。

实施例53

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Ala(380mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg 1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.4g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到330mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将330mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到87mg(20％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₁H₆₅N₉O₈计算值：932实测值：m/z(933 M+H)。

实施例54

Ac-Nle-环(Cys-Cys)-Cys-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。七个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Cys(Trt)(710mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Cys(Trt)(710mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Nle(430，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并用1mL的在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的醋酸酐对其处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的Ac-七肽树脂。

将该Ac-七肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到250mg的黄白色的固体。

用制备HPLC在Vydac C18-柱(2.5 x 20cm)上对这种粗制的直链肽进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％ TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到45mg的纯的直链肽。

将这种进行了纯化的直链肽溶解于2ml的DMSO中，用500ml的水对其进行稀释并用NH₄OH将pH调至8.0。向该溶液中通入O₂并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在24-48小时之内完成。将该溶液冷冻干燥，将所得的物质溶解于CH₃COOH中并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，将其用使用Vydac C18-柱的制备HPLC进行处理并用20-60％B的线性梯度进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到20mg(4.7％)纯的环肽。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₃H₇₀N₁₂O₈S₂计算值：1067实测值：m/z(1068 M+H)。

实施例55

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-(D，L)-Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D，L)-Atc(510mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.15g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到245mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将250mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₈N₁₂O₈计算值：989实测值：m/z(990 M+H)。

实施例56

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂(峰1)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Br-(D，L)Atc(620mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚，240μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到240mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析来将第一主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到26mg(6％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₇N₁₂O₈Br计算值：1068实测值：m/z(1069 M+H)。

实施例57

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂(峰2)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Br-(D，L)Atc(620mg 1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析而将第二主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到20mg(5％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₇N₁₂O₈Br计算值：1068实测值：m/z(1069 M+H)。

实施例58

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂(峰1)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Cl(D，L)Atc(560mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到250mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析来将第一主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到24mg(6％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₇N₁₂O₈Cl计算值：1024实测值：m/z(1025 M+H)。

实施例59

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂(峰2)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Cl-(D，L)Atc(560mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。将戊基六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到250mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析而将第二主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到20mg(4％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₇N₁₂O₈Cl计算值：1024实测值：m/z(1025 M+H)。

实施例60

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-MeO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-MeO-(D，L)Atc(600mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₃H₇₀N₁₂O₉计算值：1019实测值：m/z(1020 M+H)。

实施例61

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-EtO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-EtO-(D，L)Atc(620mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.3g的戊基-六肽树脂。

将260mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到58mg

(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₄H₇₂N₁₂O₉计算值：1033实测值：m/z(1034 M+H)。

实施例62

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-iPrO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-iPrO-(D，L)Atc(620mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到58mg(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₅H₇₄N₁₂O₉计算值：1047实测值：m/z(1048 M+H)。

实施例63

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-Me-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Me-(D，L)Atc(590mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL的在60％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到62mg(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₃H₇₀N₁₂O₈计算值：1003实测值：m/z(1004 M+H)。

实施例64

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-Et-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Et-(D，L)Atc(600mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.3g的戊基-六肽树脂。

将245mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg(12％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₄H₇₂N₁₂O₈计算值：1017实测值：m/z(1018 M+H)。

实施例65

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-iPr-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-iPr-(D，L)Atc(600mg 1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将245mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500

μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到54mg

(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₅H₇₄N₁₂O₈计算值：1031实测值：m/z(1032 M+H)。

实施例66

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂(峰1)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Cit(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Br-(D，L)Atc(620mg1.2mol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚，240μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到260mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析来将第一主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到24mg(5，6％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₆N₁₁O₉Br计算值：1069实测值：m/z(1070M+H)。

实施例67

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂(峰2)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Cit(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Br-(D，L)Atc(620mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析而将第二主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到22mg(4.8％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₆N₁₁O₉Br计算值：1069实测值：m/z(1070M+H)。

实施例68

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂(峰1)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Cit(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Cl-(D，L)Atc(560mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2ml的TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到245mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将245mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP1并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析来将第一主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到22mg(5.8％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₆N₁₁O₉Cl计算值：1024实测值：m/z(1025M+H)。

实施例69

Penta-(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂(峰2)的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Cit(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-Cl-(D，L)Atc(560mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将250mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集的部分进行的分析上的HPLC分析而将第二主峰切割下来，将其汇集起来并冷冻干燥，得到20mg(5.4％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₆₆N₁₁O₉Cl计算值：1024实测值：m/z(1025M+H)。

实施例70

Ac-Nle-环(Cys-Cys)-Cys-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。七个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Cys(Trt)(710mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D，L)Atc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Cys(Trt)(710mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Nle(430mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并用1mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的醋酸酐将其处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g of Ac-七肽树脂。

将该乙酰基-七肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤，将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到240mg的黄白色的固体。

将这种粗制的直链肽用使用Vydac C18-柱(2.5 x 20cm)的制备HPLC进行纯化，并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％ TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg的纯的直链肽。

将这种进行了纯化的直链肽溶解于2ml的DMSO中，用500ml的水对其进行稀释并用NH₄OH将pH调至8.0。向该溶液中通入O₂并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在24-48小时之内完成。将该溶液冷冻干燥，将所得的物质溶解于CH₃COOH中并将其用使用Vydac C18-柱(2.5x 20cm)的制备HPLC进行处理，在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20-60％B的线性梯度进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到20mg(5.0％)纯的环肽。HPLC表明这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₁H₆₆N₁₂O₈S₂计算值：1039实测值：m/z(1040 M+H)。

实施例71

Penta-环(Cys-Cys)-Cys-5-Br(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。七个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Cys(Trt)(710mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-5-BrAtc(620mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Cys(Trt)(710mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用1mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g of Ac-七肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到240mg的黄白色的固体。

将这种粗制的直链肽用使用Vydac C18-柱(2.5 x 20cm)的制备HPLC进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％ TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到50mg纯的直链肽。

将这种进行了纯化的直链肽溶解于2ml的DMSO中，将其用500ml的水进行稀释并将其pH用NH4OH调至8.0。向该溶液中通入O₂并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在24-48小时之内完成。将该溶液冷冻干燥，将所得的物质溶解于CH₃COOH中并用使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC对其进行处理，在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20-60％B的线性梯度进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％ TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到22mg(5.2％)纯的环肽.通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₄₈H₆₀N₁₁O₇S₂Br计算值：1047实测值：m/z(1048M+H)。

实施例72

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Appc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。将该肽树脂用方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐for30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2ml TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到245mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将245mg的粗制的直链肽溶解于220ml of DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到57mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₃H₇₁N₁₃O₈计算值：1018实测值：m/z(1019 M+H)。

实施例73

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-2-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-2-MeAppc(570mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2ml TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到250mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到61mg(15％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₄H₇₃NO₈计算值：1032实测值：m/z(1033 M+H)。

实施例74

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-2-iPrAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-2-iPrAppc(600mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将245mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水来停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到52mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₆H₇₇N₁₃O₈计算值：1060实测值：m/z(1061 M+H)。

实施例75

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-3-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-3-MeAppc(570mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到248mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将248mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₄H₇₃N₁₃O₈计算值：1032实测值：m/z(1033 M+H)。

实施例6

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-MeAppc(570mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到254mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将254mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到57mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₄H₇₃N₁₃O₈Cl：1032实测值：m/z(1033 M+H)。

实施例77

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-ClAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-ClAppc(580mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将250mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水来停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速，用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到55mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₃H₇₀N₁₃O₈Cl计算值：1032实测值：m/z(1033 M+H)。

实施例78

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-PhOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-4-PhOAppc(650mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2ml TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到270mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将270mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₉H₇₅N₁₃O₉c计算值：1110实测值：m/z(1111 M+H)。

实施例79

Penta-(Asp-Lys)-Asp-3-MeO-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2t9mmol)、Fmoc-3-MeOAppc(580mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL的在60％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.2g的戊基-六肽树脂。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到54mg(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₄H₇₃N₁₃O₉计算值：1048实测值：m/z(1049 M+H)。

实施例80

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-Adpc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Adpc(620mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。将该肽树脂用方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到242mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将242mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到48mg(11％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₆₀H₇₆N₁₂O₈计算值：1093实测值：m/z(1094 M+H)。

实施例81

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Achc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Achc(560mg1.2mmol)和HBTU(452mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是用方案1的步骤1-5而获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)对其进行洗涤，然后将该树脂在真空下进行干燥，得到1.1g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10m_L三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到250mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将250mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到52mg(13％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化：C₅₄H₇₈N₁₂O₈计算值：1023实测值：m/z(1024 M+H)。

实施例82

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Abc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Trp(520mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Abc(530mg1.2mmol)和HBTU(45mg，0.6mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是用方案1的步骤1-5来获得的，将其用CH₂Cl₂进行洗涤(三次)并将其用2mL在6％DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐处理30分钟。将该树脂进行过滤并将其连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)。将该树脂在真空下进行干燥，得到13g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL三氟醋酸在室温下处理180分钟。将该树脂过滤出来，用～2mL的TFA进行洗涤并将该滤液用冷却的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到255mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将255mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到58mg(14％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₂H₇₆N₁₂O₈计算值：997实测值：m/z(998 M+H)。

实施例83

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S，3S)β甲基-Trp-Lys-NH₂的制备

将得自实施例29的Fmoc-Linker-BHA树脂(720mg，0.4mmol)用上述的方案1来进行固相合成。所有的偶联都是用在DMF中的HBTU作为偶联剂并用DIPEA(3当量)作为碱来进行的。六个偶联循环是通过各循环分别是Fmoc-Lys(Boc)(565mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc(2S，3S)β甲基(nMes)Trp(616mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Arg(Pmc)(800mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-(D)Phe(480mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Apc(550mg1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)、Fmoc-Asp(OBut)(500mg，1.2mmol)和HBTU(452mg，1.2mmol)来进行的。该肽树脂是通过方案1的步骤1-5来获得的，用CH₂Cl₂(三次)进行洗涤并将其用2mL的在6％ DIPEA/CH₂Cl₂中的戊酸酐for 30分钟。将该树脂进行过滤并连续地用各50ml的CH₂Cl₂(两次)、异丙醇、和CH₂Cl₂(三次)进行洗涤。将该树脂在真空下进行干燥，得到1.0g的戊基-六肽树脂。

将该戊基-六肽树脂用100μL二巯基乙烷、100μL甲硫醚、250μL茴香醚、和10mL HF在0℃下处理60分钟。将HF蒸发掉，并将所滤出的树脂用乙酸乙酯进行洗涤，用～5ml的TFA进行洗涤并将该滤液用冰冷的乙醚进行沉淀。将这种沉淀进行离心并将醚层倒出。将残余物用两或三体积的Et₂O进行洗涤并重新离心，然后将该粗制的直链产物在真空下进行干燥，得到180mg的黄白色的固体。不进行纯化，将该粗制的肽进行环合。

将180mg的粗制的直链肽溶解于220ml的DMF中，向其中加入500μL的N-甲基吗啉以使之具有8.0的表观pH。向其中加入280mg的BOP并用HPLC对该环合进行监测。该环合一般在18-24小时之内完成。向其中加入10mL的水以停止该反应，在真空的条件下将DMF蒸发掉，然后将所得的反应混合物通过HPLC来进行纯化。

通过使用Vydac C18-柱(2.5×20cm)的制备HPLC来对这种粗制的循环材料进行纯化并在90分钟内，以8ml/分钟的流速用20—60％B的线性梯度来进行洗脱(缓冲剂A：0.1％ TFA/H₂O，缓冲剂B：0.1％TFA/CH₃CN)，在280nm进行检测。通过对所收集部分的分析学上的HPLC分析来将该主峰切割下来，将其汇聚到一起并进行冷冻干燥，得到40mg(10％)白色的、无定形的粉末。通过HPLC证实这种化合物是同质的。LR-电子雾化C₅₅H₇₄N₁₂O₈计算值：1031实测值：m/z(1032 M+H)。

生物活性实施例：

实施例A：激动剂试验

方法

说明：将用MC-4受体或者MC-1受体转染来的HEK 293细胞在96孔板中进行培养。用100nM的NDP-αMSH或筛选化合物来对这些细胞进行激发。从这些细胞中提取环状的AMP并用Biotrak-cAMP SPA分析来对该浓缩物进行测定。激动剂是能使细胞内cAMP增加的这些化合物。

细胞培养：将用MC-4受体或者MC-1受体转染来的HEK 293细胞在75cm²的烧瓶中，在另外加入有10％ FCS和500μg/ml G418的D-MEM中进行培养。将这些细胞用胰蛋白酶进行作用并将其以1：3的比例分割到用组织培养物进行来处理的96孔扁平底的板中。在融合时(2-4天)对细胞进行激发。

CAMP反应：将连续地用100％ DMSO进行了稀释的化合物进一步的用包含10％ FBS和0.1mM IBMX的D-MEM以1：200的比例进行稀释(2.5μl的化合物稀释物+500μl介质)。对于未进行激发的细胞而言，向500μl的介质中加入2.5μl的DMSO。对于用NDP-αMSH进行激发的细胞而言，向500μl的介质中加入2.5μl的在100％ DMSO中包含20μM NDP-αMSH的物质(最终浓度为100nM)。在所有孔中，DMSO的最终浓度为0.5％。

注意：各样品在各板中是一式两份的进行的。

培养介质：将培养介质从融合的96孔培养板中除去，并以向适当的孔中加入200μl上述稀释物来取代所除去的培养介质。将这些板在室温下培养1小时。将介质除去，将板孔用200μl的PBS洗涤lx。通过加入60μ170％的乙醇来提取CAMP(被储存于冰箱中)。在30分钟的提取后，将10μl乙醇提取物转移到cAMP试验板上或将样品储存在-20℃下直至进行cAMP试验。

cAMP试验：将所提取的样品和所有的包含在试剂盒内的试剂置于室温下。向96孔Opti板中加入10μl乙醇提取物、40μl试验缓冲剂、50μ1[125I]cAMP、50μl抗血清和50μl SPA珠。加入后的总孔容积为200μ1。将这些板密封并将其在室温下培养15-20小时。通过用PackardTopCount^TM对各板进行2分钟的计数来测定结合到SPA珠上的[125I]cAMP。

注意：各板包含未进行激发的细胞的对照样品和用NDP-αMSH进行了激发的细胞的样品。

结果列于下面的表I中。

表I

表I中，“Cyclo”表示“环”，“succ”和“succinic”表示“琥珀酸”，“maleic”表示“马来酸”，“phthalic”表示“邻苯二甲酸”，“Example”表示“实施例”，“Compounds”表示“化合物”。

Example	Compounds	MC-1(EC50nM)	MC-4(EC50nM)
Example	Compounds	MC-1(EC50nM)	MC-4(EC50nM)	30	Ac-Nle-Cyclo(D-K)-Asp-His-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	0.6	0.6
31	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	654	9.2	30	Ac-Nle-Cyclo(D-K)-Asp-His-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	0.6	0.6
31	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	654	9.2	32	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2)Nal-Lys-NH2	310	7
34	Cyclo(succ-K)-succinic-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	985	6.4	32	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2)Nal-Lys-NH2	310	7
34	Cyclo(succ-K)-succinic-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	985	6.4	35	Cyclo(maleic-K)-maleic-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		2.9
36	Cyclo(phthalic-K)-phthalic-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	2150	3.1	35	Cyclo(maleic-K)-maleic-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		2.9
36	Cyclo(phthalic-K)-phthalic-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	2150	3.1	38	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	999，999	8.4
40	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-iPrOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	50％@50μM	6.1	38	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	999，999	8.4
40	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-iPrOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	50％@50μM	6.1	41	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-3-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-	76	1.5

	Lys-NH2
	Lys-NH2			42	Penta-Cyclo(D-K)-Asp4-ClApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	796	2.2
43	Penta-Cyclo(D-K-Asp-4-MeApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	719	2.2	42	Penta-Cyclo(D-K)-Asp4-ClApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	796	2.2
43	Penta-Cyclo(D-K-Asp-4-MeApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	719	2.2	44	Penta-Cyclo(D-K)-Glu-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	168	1.3
45	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Orn-NH2	154	1.1	44	Penta-Cyclo(D-K)-Glu-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	168	1.3
45	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Orn-NH2	154	1.1	46	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dbr-NH2	848	2.5
47	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH2	1180	6.9	46	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dbr-NH2	848	2.5
47	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH2	1180	6.9	48	Ac-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH2	2969	7.4
59	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-5ClAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	2130(PA)	4	48	Ac-Cyclo(D-K)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH2	2969	7.4
59	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-5ClAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	2130(PA)	4	60	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-MeO(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		4.8
62	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-iPrO(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		7.3	60	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-MeO(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		4.8
62	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-iPrO(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		7.3	64	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-Et(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	422	8.4
65	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-iPr(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		6.7	64	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-Et(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	422	8.4
65	Penta-Cyclo(D-K)-As-5-iPr(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		6.7	72	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	268	3.6
73	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-2-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	213	3.2	72	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	268	3.6

74	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-2-iPrAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		10
74	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-2-iPrAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		10	75	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-3-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	221	2.6
76	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	770	6.3	75	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-3-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	221	2.6
76	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	770	6.3	77	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-CLAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	330	9.1
78	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-PhOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		6.7	77	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-CLAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	330	9.1
78	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-4-PhOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		6.7	79	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-3-MeOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		4.7
81	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Achc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	160	6.3	79	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-3-MeOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2		4.7
81	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Achc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	160	6.3	82	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Abc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	941	4.2
83	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Ape-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	510	1.4	82	Penta-Cyclo(D-K)-Asp-Abc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH2	941	4.2

实施例B：注射溶液可具有如下组成：

式I的化合物 3.0mg

明胶 150.0mg

苯酚 4.7mg

注射溶液用水添加至 1.0ml

Claims

1.式I化合物或其可药用盐：

其中，R¹和R¹²与X和Y一起形成苯环，并且X是C且Y是C；或R¹是氢，

或

和

R¹²是氢；其中X和Y各自是C并且X与Y之间的键是双键，或者其中X和Y各自是CH并且X与Y之间的键是单键；

R²是具有1—5个碳原子的烷基、具有2—5个碳原子的链烯基或者具有2—5个碳原子的炔基；

R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；

n是0或1；并且

Q是

或或

其中R³、R⁴和R⁵独立地是氢、卤素、具有1—4个碳原子的烷基、羟基或者具有1—4个碳原子的烷氧基，其中当R⁴不是氢时，R³和R⁵都是氢；和

R⁶是氢、具有1—3个碳原子的烷基、具有1—3个碳原子的烷氧基、苯氧基或者卤素；

R¹¹和R¹³各自独立地是氢、具有3或4个碳原子的烷基、具有5或6个碳原子的环烷基，或者R¹1和R¹³都是苯基；

R⁷是O或者NH；

R⁸是氢或者甲基；

R⁹是

或

R¹⁰是氢或者甲基；

p是0或者1；

m是0、1、2或者3；并且

Z是

或s—s—；和

R¹⁷是氢或者低级烷基。

2.式IA化合物或其可药用盐：

其中，

R¹和R¹²与X和Y一起形成苯环，并且X是C且Y是C；或者

R¹是氢、

或

和

R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；

n是0或1；

R³、R⁴和R⁵独立地是氢、卤素、具有1—4个碳原子的烷基、羟基或者具有1—4个碳原子的烷氧基，其中当R⁴不是氢时，R³和R⁵都是氢；

R⁷是O或者NH；

R⁸是氢或者甲基；

R⁹是

或

R¹⁰是氢或者甲基；

p是0或者1；

m是0、1、2或者3；并且

Z是

或s—s—；和

R¹⁷是氢或者低级烷基。

3.权利要求2的化合物，其中X和Y各自是CH并且X和Y之间的键是单键；Z是

R⁷是O；

R¹是

R²是具有1—5个碳原子的烷基；并且

R¹⁰和R¹²都是氢。

4.权利要求3的化合物，是Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂。

5.权利要求2的化合物，其中Z是

R⁷是NH；

R¹是氢、

或

R²是烷基；和

R¹⁰和R¹²都是氢；并且

n和R¹⁴如权利要求2所定义。

6.权利要求5的化合物，其中，X和Y各自是CH并且X和Y之间的键是单键；n是0；并且R⁹是

7.权利要求6的化合物，是Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2)Nal-Lys-NH₂或者Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-N-甲基(2)Nal-Lys-NH₂。

8.权利要求5的化合物，其中Z是

R⁷是NH；R¹是

R²是烷基；并且R¹⁰和R¹²都是氢；R⁹是

并且R¹⁷如权利要求2所定义。

9.权利要求5的化合物，其中X和Y各自是CH并且X与Y之间的键是单键；和R³、R⁴和R⁵之一是氢、卤素或烷基，其余是氢。

10.权利要求9的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Glu-Lys)-Glu-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Orn)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Orn-NH₂，

Penta-环(Asp-Dbr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dbr-NH₂，

Penta-环(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂，或者

Ac-环(Asp-Dpr)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂。

11.权利要求8的化合物，其中X和Y各自是CH并且X与Y之间的键是单键；并且R¹是

R³、R⁴和R⁵之一是烷氧基，并且其余是氢；且n是0。

12.权利要求11的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-EtOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-iPrOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-3-MeOApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-OHApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，或者

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-ClApc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

13.权利要求2的化合物，其中R¹、R³、R⁴、R⁵、R⁸和R¹⁰是氢；

R⁷是NH；

R⁹是

p是0；并且R¹⁷如权利要求2所定义。

14.权利要求13的化合物，是

环(琥珀酸-Lys)-琥珀酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

环(马来酸-Lys)-马来酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

环(琥珀酸-Dpr)-琥珀酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂，或者

环(马来酸-Dpr)-马来酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂。

15.权利要求2的化合物，其中R¹和R¹²与X和Y一起形成苯环。

16.权利要求15的化合物，是

环(邻苯二甲酸-Lys)-邻苯二甲酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，或环(邻苯二甲酸-Dpr)-邻苯二甲酸-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Dpr-NH₂，或者Ac-Nle-环(Cys-Cys)-Cys-Apc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂。

17.式IB的化合物或其可药用盐：

其中

R¹是氢、

或

R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；

n是0或者1；

R⁷是O或NH；

R⁸是氢或甲基；

R⁹是

或

R¹⁰是氢或甲基；

p是0或1；

m是0、1、2或3；并且

Z是

或s—s—；和

R¹⁷是氢或低级烷基。

18.权利要求17的化合物，其中

Z是

R⁷是NH；

R¹是

R²是烷基；

R⁸和R¹⁰各自是氢；并且

R⁹是

和

R¹⁷如权利要求2所定义。

19.权利要求18的化合物，其中R⁶是氢或烷基。

20.权利要求19的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-2-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-2-iPrAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-3-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，或者

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-MeAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

21.权利要求17的化合物，其中R⁶是卤素。

22.权利要求21的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-ClAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

23.权利要求17的化合物，其中R⁶是烷氧基或苯氧基。

24.权利要求23的化合物，是Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-PhOAppc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂或者Penta-环(Asp-Lys)-Asp-3-MeO-Appc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

25.式IC的化合物及其可药用盐：

其中

R¹是氢、

或

R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；

n是0或者1；

R¹¹和R¹³各自独立地是氢、具有3或4个碳原子的烷基或具有5或6个碳原子的环烷基，或者R¹¹和R¹³都是苯基；

R⁷是O或NH；

R⁸是氢或甲基；

R⁹是

或

R¹⁰是氢或甲基；

p是0或1；

m是0、1、2或3；并且

Z是

或—s—s—；和

R¹⁷是氢或低级烷基。

26.权利要求25的化合物，其中

Z是

R⁷是NH；

R¹是

R²是烷基；

R⁸和R¹⁰各自是氢；并且

R⁹是

和

R¹⁷是氢或低级烷基。

27.权利要求26的化合物，其中R¹¹和R¹³中之一是烷基或环烷基，并且另一个是氢。

28.权利要求27的化合物，是Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Achc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂或者Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Abc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

29.权利要求26的化合物，其中R¹¹和R¹³是苯基并且另一个是氢或苯基。

30.权利要求29的化合物，是Penta-环(Asp-Lys)-Asp-4-Adpc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

31.式II化合物或其可药用盐：

其中

R¹是氢、

或

R¹⁴是具有1—5个碳原子的烷基；

n是0或1；

R³、R⁴、R⁵和R⁶中之一是氢、卤素、具有1—3个碳原子的烷基、或者具有1—3个碳原子的烷氧基，并且其余都是氢；

R⁷是O或者NH；

R⁸是氢或者甲基；

R⁹是

或

R¹⁰是氢或者甲基；

p是0或者1；

m是0、1、2或者3；并且

Z是

或s—s—；和

R¹⁷是氢或者低级烷基。

32.权利要求31的化合物，其中Z是

R¹是

R²是烷基；

R³、R⁴、R⁵、R⁸和R¹⁰各自是氢；

R⁶是氢、卤素、具有1—3个碳原子的烷基或具有1—3个碳原子的烷氧基；并且

R⁹是

并且R¹⁷如权利要求31所定义。

33.权利要求32的化合物，其中R⁷是NH。

34.权利要求32的化合物，其中R⁶是氢或烷基。

35.权利要求34的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-(D，L)-Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-Me-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-Et-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂，或者

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-iPr-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

36.权利要求31—33的化合物，其中R⁶是卤素。

37.权利要求36的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂或

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

38.权利要求31—33的化合物，其中R⁶是烷氧基。

39.权利要求38的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-MeO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂、

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-EtO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂或者

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-iPrO-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Lys-NH₂。

40.权利要求31或32的化合物，其中R⁷是O并且R⁶是卤素。

41.权利要求40的化合物，是

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-BrAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂或者

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-5-ClAtc-(D)Phe-Cit-Trp-Lys-NH₂。

42.权利要求31的化合物，其中

Z是-S-S-；

R¹是

或

R³、R⁴、R⁵、R⁸和R¹⁰是氢；

R⁶是氢或卤素；

R⁷是NH；

R⁹是

其中R¹⁷是氢或低级烷基。

43.权利要求42的化合物，是

Ac-Nle-环(Cys-Cys)-Cys-(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂，

Penta-环(Cys-Cys)-Cys-5-Br(D，L)Atc-(D)Phe-Arg-Trp-Cys-NH₂，

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Ala-Trp-Lys-NH₂，或者

Penta-环(Asp-Lys)-Asp-Apc-(D)Phe-Arg-(2S，3S)β甲基-Trp-Lys-NH₂。

44.通过在前体直链肽的Z位置形成内酰胺键或二硫键制备式I化合物的方法，

其中

R¹至R¹²、m、p、Q、X、Y和Z如权利要求1—43所定义。

45.药物组合物，包含权利要求1—43中任一项的化合物和治疗学上惰性的载体。

46.权利要求1—43中任一项的化合物用于制备治疗和/或预防与黑皮质素-4受体活性有关的疾病的药物的用途。

47.权利要求46的用途，其中所述疾病是肥胖。

48.通过权利要求44的方法制备的权利要求1—43中任一项的化合物。

49.作为治疗活性物质的权利要求1—43中任一项的化合物。

50.作为用于治疗和/或预防与黑皮质素-4受体有关的疾病的治疗活性物质的权利要求1—43中任一项的化合物。