JP4217069B2 - 選択的環状ペプチド - Google Patents

Description

【０００１】
肥満は、先進国の重大な健康問題として広く認識されており、米国において流行の状態に達している。米国人口の５０％を越えた者が体重過剰と見なされ、２５％を越えた者が臨床的肥満と診断され、心臓病、インスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）、高血圧および特定の癌に対するかなりの危険性がある。この流行病は、米国だけでも毎年７００億ドルを越える突出した肥満治療費用が予想されているので、ヘルスケアシステムにかなりの負担を与えている。肥満治療方法は、食物摂取量の減少、またはエネルギー消費量の増加を含む。
【０００２】
メラノコルチン−４−受容体（ＭＣ４−Ｒ）作動薬活性を有するα−メラノサイト刺激ホルモン（αＭＳＨ）の環状ヘプタペプチド類似体が、脳の第３脳室内にまたは腹膜内に注射されると、マウスの食物摂取の長期にわたる抑制をもたらすことが、実証されている。この効果は、ＭＣ４−Ｒ拮抗薬と一緒に投与すると逆になる（Ｆａｎら、Ｎａｔｕｒｅ（１９９７年）第３８５巻：１６５〜１６８頁）。したがって、ＭＣ４−Ｒ活性の作動薬は、肥満の治療または予防において有用である。
【０００３】
同類の構成員間で３５〜６０％の類似性に及ぶ配列類似性に基づいて、５種類のメラノコルチン受容体が知られているが（Ｃｏｎｅら、Ｒｅｃ．Ｐｒｏｇ．Ｈｏｒｍｏｎｅ Ｒｅｓ．（１９９６年）第５１巻：２８７〜３１８頁）、これらの受容体は、機能が異なる。例えば、ＭＣ１−Ｒは、ＭＣ１−Ｒの有効な作動薬であるαＭＳＨに反応して、色素沈着を制御する、Ｇ−蛋白が結合した受容体である（Ｃｏｎｅら、前掲書）。ＭＣ１−Ｒ受容体の作動により、メラノサイトが刺激され、それがユーメラニンを発生させ、皮膚癌の危険性を高める。ＭＣ１−Ｒの作動は、神経作用も有し得る。ＭＣ２−Ｒ活性の刺激により、副腎組織の癌が発生し得る。ＭＣ３−ＲおよびＭＣ５−Ｒの作動の効果は、まだ知られていない。すべてのメラノコルチン受容体が、メラノサイト刺激ホルモン（ＭＳＨ）のペプチドホルモンクラスに反応する。これらのペプチドは、メラノコルチン類（α、βおよびγ）、アドレノコルチコトロピンホルモン（ＡＣＴＨ）および種々のエンドルフィン類（例えば、リポトロピン）の３種のクラスのホルモンに加工される、１３１のアミノ酸からなるプロホルモンであるプロ−オピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）から誘導される（Ｃｏｎｅら、前掲書）。それらの異なる機能のゆえに、複数のメラノコルチン受容体の活性が同時に作動することは、望まれない副作用を引き起こす可能性がある。したがって、ＭＣ４−Ｒの作動薬は、１種以上の他のメラノコルチン受容体に対するよりも、ＭＣ４−Ｒに対してより選択的であることが望ましい。
【０００４】
Ｈａｓｋｅｌｌ−Ｌｕｅｖａｎｏら（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ（１９９６年）第１７（６）巻、９９５〜１００２頁）は、トリペプチド（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐを含むと共にカエル（Ｒａｎａ ｐｉｐｉｅｎｓ）皮膚の生物学的検定においてメラノトロピック（皮膚暗色化）活性を示すペプチドを開示している。Ｈａｓｋｅｌｌ−Ｌｕｅｖａｎｏら（前掲書）は、以下に記載の式ＩまたはＩＩで示される、いかなる化合物も開示していない。
【０００５】
Ｂｅｄｎａｒｅｋら（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ（１９９９年）第２０巻：４０１〜４０９頁）およびＢｅｄｎａｒｅｋら（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．（１９９９年）第２６１巻：２０９〜２１３頁）は、環状ペピチドＭＴ−ＩＩの類似体を開示している。これらは、以下に記載の式ＩまたはＩＩで示されるいかなる化合物も開示していない。
【０００６】
本発明は、下記式で示される化合物、および薬学的に許容されるその塩を提供する。
【０００７】
【化４４】

【０００８】
式Ｉで示される化合物中、Ｒ¹およびＲ¹²は、ＸおよびＹと一緒になってフェニル環を形成し、Ｘは、Ｃであり、そしてＹは、Ｃであるか、あるいは
Ｒ¹は水素、
【０００９】
【化４５】

【００１０】
であり；そして
Ｒ¹²は、水素であり、ＸおよびＹは、それぞれＣであり、ＸとＹとの間の結合は二重結合であるか、またはＸおよびＹは、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合は一重結合であり；Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；ｎは、０または１であり；そしてＱは、
【００１１】
【化４６】

【００１２】
であり（式中、Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵は、独立して水素、ハロ、１〜４個の炭素原子を有するアルキル、ヒロドキシ、または１〜４個の炭素原子を有するアルコキシであり、ここで、Ｒ⁴が水素でない場合、Ｒ³およびＲ⁵はいずれも水素であり；そしてＲ⁶は、水素、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、１〜３個の炭素原子を有するアルコキシ、フェノキシまたはハロであり；Ｒ¹¹およびＲ¹³は、それぞれ独立して水素、３または４個の炭素原子を有するアルキル、５または６個の炭素原子を有するシクロアルキルであるか、あるいはＲ¹¹およびＲ¹³は、いずれもフェニルである）；Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨであり；Ｒ⁸は、水素またはメチルであり；Ｒ⁹は、
【００１３】
【化４７】

【００１４】
であり；
Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；ｐは０または１であり；ｍは、０、１、２または３であり；Ｚは、
【００１５】
【化４８】

【００１６】
であり；そして
Ｒ¹⁷は、水素または低級アルキル、好ましくはメチルである。
【００１７】
式Ｉで示される化合物中の点線で示す結合は、ＸおよびＹがそれぞれＣＨ−である場合、水素化される。一方、点線で示す結合が存在する場合、ＹおよびＸが、Ｒ¹およびＲ¹²と一緒になってフェニル環を形成することはなく、ＸおよびＹはいずれも４価炭素原子である。
【００１８】
本発明は、また、下記式で示される化合物、および薬学的に許容されるその塩も提供する。
【００１９】
【化４９】

【００２０】
式ＩＩで示される化合物中、Ｒ¹は、水素、
【００２１】
【化５０】

【００２２】
であり；
Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；ｎは０または１であり；Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵のうち１個は、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、または１〜３個の炭素原子を有するアルコキシであり、残りは、水素である。Ｒ⁷はＯまたはＮＨである。Ｒ⁸は、水素またはメチルである。Ｒ⁹は、
【００２３】
【化５１】

【００２４】
であり；
Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；ｐは、０または１であり；ｍは、０、１、２または３であり；Ｚは、
【００２５】
【化５２】

【００２６】
である。
Ｒ¹⁷は、水素または低級アルキル、好ましくはメチルである。
【００２７】
式ＩおよびＩＩで示される化合物ならびにペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２Ｓ，３Ｓ）βメチル−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂は、ＭＣ４−Ｒの作動薬である。ＭＣ４−Ｒ活性の作動薬が、ヒト肥満のマウスモデルにおいて、食物摂取量の低下を引き起こすことが知られている。したがって、こららの化合物は、肥満の治療または予防において有用である。
【００２８】
以下に例示する式ＩおよびＩＩで示されるすべての化合物ならびにペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２Ｓ，３Ｓ）βメチル−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂を、生物学的活性試験Ａにおける以下のインビトロ検定において、ＭＣ４−Ｒ作動活性およびＭＣ１−Ｒ作動活性について試験した。試験したすべての化合物が、ＭＣ４−Ｒ作動薬活性についてのＥＣ５０が、５００mM未満であり、すべて、ＭＣ１−Ｒ作動薬活性よりも、少なくとも１０倍大きなＭＣ４−Ｒ作動薬活性を示した。これに対して、Ａｃ−Ｎｌｅ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ｈｉｓ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂は、ほぼ同じＭＣ１−Ｒ作動薬活性とＭＣ４−Ｒ作動薬活性を示した。
【００２９】
命名法および略称
「アルキル」という用語は、直鎖または分岐鎖アルキル基を意味し、「低級アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。「アルケニル」という用語は、直鎖または分岐鎖アルケニル基を意味する。「アルキニル」という用語は、直鎖または分岐鎖アルキニル基を意味する。
【００３０】
「アルコキシ」という用語は、アルキルが前述に定義されたとおりである式：アルキル−Ｏ−で示される基を意味する。「フェノキシ」という用語は、フェニル−Ｏ−で示される基を意味する。特記されない限り、「フェニル」は、非置換フェニル環を意味し、「フェノキシ」は、非置換フェノキシ基を意味する。
【００３１】
「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードから選択される基を意味する。
【００３２】
「薬学的に許容される塩」という用語は、遊離塩基または遊離酸の、生物学的効果および特性を維持する塩であって、生物学的にまたは他の点で望ましくないことが存在しないものを意味する。これらの塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等のような無機酸とで；および酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、Ｎ−アセチルシステイン等のような有機酸とで形成される。さらに、これらの塩は、遊離酸に無機塩基または有機塩基を添加することにより調製することができる。無機塩基から誘導される塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム等の塩があるが、限定されるものではない。有機塩基から誘導される塩には、第一級、第二級および第三級アミン、天然に由来する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂、例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、リシン、アルギニン、Ｎ−エチルピペリジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂等の塩があるが、限定されるものではない。
【００３３】
以下のような式ＩＡで示される化合物、および薬学的に許容されるその塩がある。
【００３４】
【化５３】

【００３５】
（式中、Ｒ¹、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、Ｒ¹²、Ｘ、Ｙ、Ｚ、ｍおよびｐは、前述のとおりである）
【００３６】
式ＩＡで示される化合物において、Ｒ¹およびＲ¹²は、ＸおよびＹと一緒になってフェニル環を形成し、または
Ｒ¹は水素、
【００３７】
【化５４】

【００３８】
であり；そして
Ｒ¹²は、水素であり、ＸおよびＹは、それぞれＣであって、ＸとＹとの間の結合は二重結合である、またはＸおよびＹは、それぞれＣＨであって、ＸとＹとの間の結合は一重結合であり；Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；そしてｎは、０または１である。Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵は、独立して水素、ハロ、１〜４個の炭素原子を有するアルキル、ヒロドキシまたは１〜４個の炭素原子を有するアルコキシであり、ここで、Ｒ⁴が水素でない場合、Ｒ³およびＲ⁵は、いずれも水素である。Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨである。Ｒ⁸は、水素またはメチルである。Ｒ⁹は、
【００３９】
【化５５】

【００４０】
であり；
Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；ｐは、０または１であり；ｍは、０、１、２または３であり；Ｚは、
【００４１】
【化５６】

【００４２】
であり；そして
Ｒ¹⁷は、水素または低級アルキル、好ましくはメチルである。
【００４３】
式ＩＡ中の点線で示される結合は、水素化することができる。点線で示される結合が水素化された場合、ＸおよびＹは、いずれも−ＣＨ−である。一方、点線で示される結合が存在する場合、ＹおよびＸがＲ¹およびＲ¹²と一緒になってフェニル環を形成することはなく、ＸおよびＹは、いずれも４価炭素原子である。
【００４４】
式ＩＡで示される化合物の一つの実施態様において、ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が、水素化された一重結合であり；Ｚが、
【００４５】
【化５７】

【００４６】
であり；
Ｒ⁷が、Ｏであり；Ｒ¹が、
【００４７】
【化５８】

【００４８】
であり；
Ｒ²が、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；そしてＲ¹⁰およびＲ¹²が、いずれも水素である。そのような化合物の例には、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【００４９】
式ＩＡで示される化合物のもう一つの好ましい実施態様においては、Ｚが、
【００５０】
【化５９】

【００５１】
であり；
Ｒ⁷が、ＮＨであり；Ｒ¹が、水素、
【００５２】
【化６０】

【００５３】
であり、
Ｒ²が、アルキルであり；そしてＲ¹⁰およびＲ¹²が、いずれも水素である。
【００５４】
式ＩＡで示される化合物の他の実施態様においては、Ｚが、
【００５５】
【化６１】

【００５６】
であり；
Ｒ⁷が、ＮＨであり；Ｒ¹が、
【００５７】
【化６２】

【００５８】
であり；
Ｒ²が、アルキルであり；そしてＲ¹⁰およびＲ¹²が、いずれも水素である。
【００５９】
より具体的な実施態様において、ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が水素化された一重結合であり；ｎが、０であり；そしてＲ⁹が、
【００６０】
【化６３】

【００６１】
である。
【００６２】
そのような化合物の例には、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチル（２）Ｎａｌ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【００６３】
式ＩＡで示される化合物のもう一つのより具体的な実施態様において、Ｚが、
【００６４】
【化６４】

【００６５】
であり；
Ｒ⁷が、ＮＨであり；Ｒ¹が、
【００６６】
【化６５】

【００６７】
であり；
Ｒ²が、アルキルであり；Ｒ¹⁰およびＲ¹²が、いずれも水素であり；Ｒ⁹が、
【００６８】
【化６６】

【００６９】
であり；そして
Ｒ¹⁷が、水素または低級アルキル、好ましくはメチルである。
【００７０】
そのような化合物には、ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が一重結合であり；Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵のうち一つが水素、ハロまたはアルキルであり、残りが水素である化合物があり、例えば、
【００７１】
【表７】

【００７２】
がある。
【００７３】
式ＩＡで示される化合物のもう一つの具体的な実施態様は、ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が一重結合であり；Ｒ¹が、
【００７４】
【化６７】

【００７５】
であり；Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵のうち一つがアルコキシであり、残りが水素であり；ｎが、０である化合物であり、例えば、
【００７６】
【表８】

【００７７】
である。
【００７８】
式ＩＡで示される化合物の実施態様は、Ｒ¹、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、水素であり；Ｒ⁷がＮＨであり；Ｒ⁹が、
【００７９】
【化６８】

【００８０】
であり；
Ｒ¹⁷が、水素または低級アルキル、好ましくはメチルであり；そしてｐが０である化合物を含み、例えばシクロ（コハク酸−Ｌｙｓ）−コハク酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂、シクロ（マレイン酸−Ｌｙｓ）−マレイン酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂、シクロ（コハク酸−Ｄｐｒ）−コハク酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂およびシクロ（マレイン酸−Ｄｐｒ）−マレイン酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂である。
【００８１】
式ＩＡで示される化合物の他の実施態様において、Ｒ¹およびＲ¹²が、ＸおよびＹと一緒になってフェニル環を形成する。そのような化合物に例には、シクロ（フタル酸−Ｌｙｓ）−フタル酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂、シクロ（フタル酸−Ｄｐｒ）フタル酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂およびＡｃ−Ｎｌｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｃｙｓ）−Ｃｙｓ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂がある。
【００８２】
式ＩＢの化合物は、以下のように示され、そして薬学的に許容されるその塩である。
【００８３】
【化６９】

【００８４】
式ＩＢで示される化合物において、Ｒ¹は、水素、
【００８５】
【化７０】

【００８６】
であり；
Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルである。Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルである。ｎは、０または１である。Ｒ⁶は、水素、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、１〜３個の炭素原子を有するアルコキシ、フェノキシまたはハロであり；Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨである。Ｒ⁸は水素またはメチルである。Ｒ⁹は、
【００８７】
【化７１】

【００８８】
であり；
Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；ｐは、０または１であり；ｍは、０、１、２または３であり；Ｚは、
【００８９】
【化７２】

【００９０】
であり；そして
Ｒ¹⁷は、水素または低級アルキル、好ましくはメチルである。
【００９１】
式ＩＢで示される化合物の一つの実施態様において、すなわち、式ＩＢ１で示される化合物において、Ｚが、
【００９２】
【化７３】

【００９３】
であり；
Ｒ⁷が、ＮＨであり；Ｒ¹が、
【００９４】
【化７４】

【００９５】
であり；
Ｒ²が、アルキルであり；Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、それぞれ水素であり；Ｒ⁹が、
【００９６】
【化７５】

【００９７】
であり、Ｒ¹⁷が、前述のとおりである。
【００９８】
式ＩＢ１で示されるそのような化合物のより具体的な実施態様においては、Ｒ⁶が、水素またはアルキルである。そのような化合物の例には、
【００９９】
【表９】

【０１００】
がある。
【０１０１】
式ＩＢ１で示されるそのような化合物のもう一つのより具体的な実施態様においては、Ｒ⁶がハロである。そのような化合物の例には、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＣｌＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１０２】
式ＩＢ１で示されるそのような化合物のもう一つのより具体的な実施態様においては、Ｒ⁶がアルコキシまたはフェノキシである。そのような化合物の例には、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＰｈＯＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−３−ＭｅＯ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｙｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１０３】
式ＩＣの化合物は、以下のように示されるもの、および薬学的に許容されるその塩である。
【０１０４】
【化７６】

【０１０５】
式ＩＣで示される化合物において、
Ｒ¹は、水素、または
【０１０６】
【化７７】

【０１０７】
であり；
Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルである。Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルである。ｎは、０または１であり；Ｒ¹¹およびＲ¹³は、それぞれ独立して水素、３もしくは４個の炭素原子を有するアルキル、または５もしくは６個の炭素原子を有するシクロアルキルであり、あるいは、Ｒ¹¹およびＲ¹³は、いずれもフェニルであり；Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨであり；Ｒ⁸は、水素またはメチルであり；Ｒ⁹は、
【０１０８】
【化７８】

【０１０９】
であり；
Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；ｐは０または１であり；ｍは、０、１、２または３であり；Ｚは、
【０１１０】
【化７９】

【０１１１】
であり；そして
Ｒ¹⁷は、水素または低級アルキル、好ましくはメチルである。
【０１１２】
式ＩＣで示される化合物の一つの実施態様において、すなわち式ＩＣ１で示される化合物において、Ｚが、
【０１１３】
【化８０】

【０１１４】
であり；
Ｒ⁷が、ＮＨであり；Ｒ¹が、
【０１１５】
【化８１】

【０１１６】
であり；
Ｒ²が、アルキルであり；Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、それぞれ水素であり；Ｒ⁹が、
【０１１７】
【化８２】

【０１１８】
である。
【０１１９】
式ＩＣ１で示されるそのような化合物の、一つのより具体的な実施態様においては、Ｒ¹¹およびＲ¹³のうち１個がアルキルまたはシクロアルキルであり、他が水素である。そのような化合物の例には、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｃｈｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｂｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１２０】
式ＩＣ１で示されるそのような化合物のもう一つのより具体的な実施態様においては、Ｒ¹¹およびＲ¹³のうち１個がフェニルであり、他が水素またはフェニルである。そのような化合物の例には、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−Ａｄｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１２１】
式ＩＩで示される化合物の一つの実施態様において、すなわち式ＩＩＡで示される化合物において、Ｚが、
【０１２２】
【化８３】

【０１２３】
であり；
Ｒ¹が、
【０１２４】
【化８４】

【０１２５】
であり；
Ｒ²が、アルキルであり；
Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、それぞれ水素であり；
Ｒ⁶が、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、または１〜３個の炭素原子を有するアルコキシであり；
Ｒ⁹が、
【０１２６】
【化８５】

【０１２７】
であり；そして
Ｒ¹⁷が、前述のとおりである。
【０１２８】
式ＩＩ−Ａで示される化合物の一つの実施態様においては、先の段落において記載したように、Ｒ⁷がＮＨである。より具体的な実施態様においては、Ｒ⁷がＮＨであり、Ｒ⁶が、水素またはアルキルである。そのような化合物の例には、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−（Ｄ，Ｌ）−Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂、ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−Ｍｅ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂、ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−Ｅｔ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ｉＰｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１２９】
式ＩＩＡで示される化合物のもう一つの具体的な実施態様においては、Ｒ⁷がＮＨであり、Ｒ⁶がハロである。そのような化合物の例には、ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１３０】
式ＩＩ−Ａで示される化合物の他の具体的な実施態様においては、Ｒ⁷がＮＨであり、Ｒ⁶がアルコキシである。ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＭｅＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂、ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＥｔＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ｉＰｒＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂。
【０１３１】
式ＩＩで示される化合物の他の実施態様は、Ｚ、Ｒ¹〜Ｒ⁵およびＲ⁸〜Ｒ¹⁰が前述のとおりであり、Ｒ⁷がＯであり、Ｒ⁶がハロである、式ＩＩで示される化合物である。そのような化合物の例には、ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１３２】
式ＩＩで示される化合物の他の実施態様において、すなわち式ＩＩＢで示される化合物は、Ｚが、−Ｓ−Ｓ−であり；
Ｒ¹が、
【０１３３】
【化８６】

【０１３４】
であり；
Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、水素であり；Ｒ⁶が、水素またはハロであり；Ｒ⁷が、ＮＨであり；そしてＲ⁹が、
【０１３５】
【化８７】

【０１３６】
であり、ここでＲ¹⁷は、前述のとおりである。
【０１３７】
式ＩＩＢで示されるそのような化合物の例には、Ａｃ−Ｎｌｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｃｙｓ）−Ｃｙｓ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｃｙｓ）−Ｃｙｓ−５−Ｂｒ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂がある。
【０１３８】
本発明は、次の化合物をも提供する：ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２Ｓ，３Ｓ）βメチル−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂。
【０１３９】
ペプチドを定義するために用いる命名法は、当技術分野において典型的に用いられるものであり、Ｎ末端においてアミノ基が左側に現れ、カルボキシル基がＣ末端において右側に現われる。天然アミノ酸とは、蛋白中に見出される天然産のアミノ酸；すなわち、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｐｒｏ、ＴｒｐおよびＨｉｓの一つを意味する。アミノ酸が異性体形状を有する場合、それは、特記しない限り、表されるアミノ酸のＬ型である。
【０１４０】
以下の略号またはシンボルは、アミノ酸、保護基、溶媒、試薬等を表すのに用いられる。
符号 意味
β−Ａｌａ ベータ−アラニン
（２）−Ｎａｌ （２）−ナフチルアラニン
Ａｔｃ ２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ＢｒＡｔｃ ５−ブロモ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ＣｌＡｔｃ ５−クロロ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ＭｅＯＡｔｃ ５−メトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ＥｔＯＡｔｃ ５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ｉＰｒＯＡｔｃ ５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ＭｅＡｔｃ ５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ＥｔＡｔｃ ５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ｉＰｒＡｔｃ ５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
５−ＤｍａＡｔｃ ５−ジメチルアミノ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸
ＤＢｒ Ｄ−２，４−ジアミノブタン酸ＤＰｒ Ｄ−２，３−ジアミノプロピオン酸Ｓａｒ サルコシン（Ｎ−メチルグリシン）Ｃｉｔ シトルリンＡｐｃ １−アミノ−４−フェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸
４−ＨＯＡｐｃ １−アミノ−４−（４−ヒドロキシフェニル）−シクロヘキサン−１−カルボン酸
４−ＭｅＯＡｐｃ １−アミノ−４−（４−メトキシフェニル）−シクロヘキサン−１−カルボン酸
３−ＭｅＯＡｐｃ １−アミノ−４−（３−メトキシフェニル）−シクロヘキサン−１−カルボン酸
４−ＥｔＯＡｐｃ １−アミノ−４−（４−エトキシフェニル）−シクロヘキサン−１−カルボン酸
４−ｉＰｒＯＡｐｃ １−アミノ−４−（４−イソプロポキシフェニル）−シクロヘキサン−１−カルボン酸
４−ＭｅＡｐｃ １−アミノ−４−（４−メチルフェニル）−シクロヘキサン−１−カルボン酸
４−ＣｌＡｐｃ １−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−シクロヘキサン−１−カルボン酸
Ａｐｐｃ ４−アミノ−１−フェニルピペリジン−４−カルボン酸２−ＭｅＡｐｐｃ ４−アミノ−１−（２−メチルフェニル）−ピペリジン−４−カルボン酸
２−ｉＰｒＯＡｐｐｃ ４−アミノ−１−（２−イソプロポキシフェニル）−ピペリジン−４−カルボン酸
３−ＭｅＡｐｐｃ ４−アミノ−１−（３−メチルフェニル）−ピペリジン−４−カルボン酸
３−ＭｅＯＡｐｐｃ ４−アミノ−１−（３−メトキシフェニル）−ピペリジン−４−カルボン酸
４−ＭｅＡｐｐｃ ４−アミノ−１−（４−メチルフェニル）−ピペリジン−４−カルボン酸
４−ＣＩＡｐｐｃ ４−アミノ−１−（４−クロロフェニル）−ピペリジン−４−カルボン酸
４−ＰｈＯＡｐｐｃ ４−アミノ−１−（４−フェノキシフェニル）−ピペリジン−４−カルボン酸
Ａｃｈｃ １−アミノ−４−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸
Ａｄｐｃ １−アミノ−４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸
Ａｂｃ １−アミノ−４−tert−ブチルシクロヘキサン−１−カルボン酸
３−Ａｍｂ ３−アミノメチル安息香酸
４−Ａｍｂ ４−アミノメチル安息香酸
２−Ａｂａ ２−アミノ安息香酸
Ｂｕ ブチル
Ｐｅｎｔａ ペンタノイル
Ｆｍｏｃ ９−フルオレニルメトキシカルボニル
Ｐｍｃ ２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル
Ｔｒｔ トリチル（トリフェニルメチル）
ＣＨ₂Ｃｌ₂ 塩化メチレン
ＣＨ₃ＣＮ アセトニトリル
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＩＰＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＨＯＢＴ Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＤＩＣ Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピルカルボジイミド
ＢＯＰ ベンゾトリアール−１−イルオキシ−トリス−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスファート
ＰｙＢｒｏＰ ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスファート
ＨＢＴＵ ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート
ＦＡＢ−ＭＳ 高速原子衝撃質量分析法
ＥＳ−ＭＳ エレクトロスプレー質量分析法
【０１４１】
前記括弧内の置換アミノ酸は、ペプチド配列の類似体を示す。Ｎ−末端アミノ基の誘導を、ハイフンで分離されたＮ−末端置換の左に示す。すなわち、例えば、Ａｃ−Ｈｉｓ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−ＮＨ₂は、Ｎ−末端の水素をアセチル基が置換したアミノ酸配列を有するペプチドを示す。ハイフンまたは括弧に続く末尾「−ＯＨ」および「−ＮＨ₂」は、それぞれ、ポリペプチドの遊離酸およびアミド型を示す。
【０１４２】
これら代表的化合物用の前駆体として用いられる線状ペプチドは、アミノ酸の間のペプチド結合の形成のための、任意の既知の従来の手順により、容易に合成することができる。そのような従来の手順には、例えば、アミノ酸、または保護されたカルボキシル基もしくは他の反応性基を有する残基の遊離αアミノ基と、もう一つのアミノ酸、または保護されたアミノ基もしくは他の反応性基を有する残基の遊離第一級カルボキシル基との間に、縮合を生じさせる溶液相による手順がある。
【０１４３】
線状ペプチドを合成するためのプロセスは、所望の配列中の各アミノ酸をもう一つのアミノ酸またはその残基に引き続き添加する手順により、または所望のアミノ酸配列を有するペプチドフラグメントを、最初に従来法により合成し、次に縮合して所望のペプチドを提供する手順により、行うことができる。
【０１４４】
前駆体の線状ペプチドを合成するためのそのような従来の手順には、例えば、任意の固相ペプチド合成法がある。そのような方法において、新規化合物の合成は、所望のアミノ酸残基を、固相の一般的原理に従って、成長下のペプチド鎖に逐次組み込むことにより行うことができる〔Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｒ．Ｂ．，Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９６３年、第８５巻、２１４９〜２１５４頁；Ｂａｒａｎｙら、Ｔｈｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第２巻、Ｇｒｏｓｓ，Ｅ．およびＭｅｉｅｎｈｏｆｅｒ，Ｊ．編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ １〜２８４頁（１９８０年）〕。
【０１４５】
ペプチドの化学的合成で一般的なのは、種々のアミノ酸部分の反応性側鎖基を、保護基が完全に除去されるまで化学反応がその部位で生じるのを防止する、適切な保護基で保護することである。通常、アミノ酸またはフラグメントのαアミノ基を保護すると同時に、カルボキシル基を反応させ、続いて、αアミノ保護基を選択的に除去し、その部位において続いて反応を起させることも一般的である。特定の保護基を固相合成法について開示したが、溶液相合成におけるそれぞれのアミノ酸について従来用いられていた保護基により、各アミノ酸を保護することができることに注目すべきである。
【０１４６】
αアミノ基は、芳香族ウレタン型保護基、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｚ）および置換ベンジルオキシカルボニル、例えば、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ−ビフェニルイソプロポキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）およびｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（Ｍｏｚ）；脂肪族ウレタン型保護基、例えば、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロポキシカルボニルおよびアリルオキシカルボニルから選択される適切な保護基で、保護することができる。ここで、αアミノ保護のためには、Ｆｍｏｃが最も好ましい。
【０１４７】
グアノジノ基は、ニトロ、ｐ−トルエンスルホニル（Ｔｏｓ）、Ｚ、ペンタメチルクロマンスルホニル（Ｐｍｃ）、アダマンチルオキシカルボニルおよびＢｏｃから選択される適切な保護基により、保護することができる。アルギニン（Ａｒｇ）用には、Ｐｍｃが最も好ましい。
【０１４８】
イソプロパノール（ｉＰｒＯＨ）、塩化メチレン（ＣＨ₂Ｃｌ₂）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）のすべての溶媒は、Ｆｉｓｈｅｒ社またはＢｕｒｄｉｃｋ ＆ Ｊａｃｋｓｏｎ社から購入し、さらに蒸留することなく用いた。トリフルオロ酢酸は、Ｈａｌｏｃａｒｂｏｎ社またはＦｌｕｋａ社から購入し、さらに精製することなく用いた。ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）およびジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）は、Ｆｌｕｋａ社またはＡｌｄｒｉｃｈ社から購入し、さらに精製することなく用いた。ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、ジメチルスルフィド（ＤＭＳ）および１，２−エタンジチオール（ＥＤＴ）は、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．から購入し、さらに精製することなく用いた。保護アミノ酸は、概してＬ型であり、Ｂａｃｈｅｍ社、Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ社またはＮｅｏｓｙｓｔｅｍ社から購入した。これらの試薬の純度は、使用前に、薄層クロマトグラフィー、ＮＭＲおよび融点により確かめた。ベンズヒドリルアミン樹脂（ＢＨＡ）は、Ｂａｃｈｅｍ社またはＡｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｔｅｃｈ社から得られるスチレン−１％ジビニルベンゼン（１００〜２００メッシュまたは２００〜４００メッシュ）のコポリマーである。これらの樹脂の合計窒素含量は、通常、０．３〜１．２ミリ当量／ｇであった。
【０１４９】
Ｃｏｎｓｔａｍｅｔｒｉｃ ＩおよびＩＩＩポンプ、Ｇｒａｄｉｅｎｔ Ｍａｓｔｅｒ溶媒プログラマーおよびミキサー、およびＳｐｅｃｔｒｏｍｏｎｉｔｏｒ ＩＩＩ可変波長ＵＶ検出器からなるＬＤＣ装置において、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を行った。Ｖｙｄａｃ Ｃ₁₈カラム（０．４×３０cm）を用いて、逆相方式で分析的ＨＰＬＣを行った。Ｖｙｄａｃカラム（２×２５cm）において、分取ＨＰＬＣ分離を行った。
【０１５０】
線状ペプチドは、好ましくは、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄにより一般的に記載されている方法〔Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６３年、第８５巻、２１４９頁〕により固相合成を用いて調製したが、前述のように、当技術分野において知られている他の同等の化学合成を用いることができる。固相合成は、保護されたαアミノ酸を、適切な樹脂に結合させることにより、ペプチドのＣ末端から始める。そのような出発物質は、αアミノ保護アミノ酸をエステル結合によってｐ−ベンジルオキシベンジルアルコール（Ｗａｎｇ）樹脂に結合させることにより、またはｐ−〔（Ｒ，Ｓ）−α−〔１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシホルムアミド〕−２，４−ジメチルオキシベンジル〕フェノキシ酢酸（リンクリンカー）のようなＦｍｏｃ−リンカーと、ベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂との間のアミド結合により調製することができる。ヒドロキシメチル樹脂の調製は、当技術分野においてよく知られている。Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂支持材は市販されており、合成される所望のペプチドが、Ｃ末端に非置換アミドを有する場合に、一般的に用いられる。
【０１５１】
本発明の化合物は、ラクタムまたはジスルフィド結合の形成により調製される環状ペプチドなので、前駆体の線状ペプチドは、分子内アミド結合またはジスルフィド結合の形成がなされるように、最終的に誘発され得る線状ペプチド中の位置に、適切な側鎖残基を有する適切なアミノ酸または擬似体を配するように集められる。ラクタムは、Ｃ末端アミノ酸残基の側鎖アミノ官能性を、遠位カルボン酸残基と結合させることにより形成され、一方、ジスルフィド結合は、前駆体の線状ペプチドのＣ末端およびＮ末端において、またはその近くに略導入された２個のシステイン残基の酸化的結合により形成される。例えば、ラクタムペプチドの調製においては、前駆体の線状ペプチド内で、Ｎ−キャップをカルボキシル残基、例えば構造Ｘを組み込むためのテンプレートとして用いることができ、またヘキサペプチドの場合、ペプチドは、適切に保護された側鎖カルボン酸基を含むアミノ酸、例えば、アスパラギン酸やグルタミン酸のうちの１種から選択されるように設計される。線状ヘプタペプチドにおいて、アスパラギン酸またはグルタミン酸が、Ｎ末端から二番目の残基として組み込まれる。すべての前駆体線状ペプチド、すなわち、ヘプタ−、ヘキサ−およびペンタペプチドにおいて、Ｃ末端残基は、脱保護されたときにアミド結合を形成することができる、適切に保護された塩基性側鎖残基を有する、天然または非天然アミノ酸、例えば、リシン、オルニチン、２，３−ジアミノプロピオン酸、２，４−ジアミノブタン酸から選択される。ジスルフィド結合を含む環状ペプチドを形成するためには、前駆体が線状ヘキサペプチドの場合、ペプチドは、適切にＳ保護されたシステイン残基が、Ｃ末端残基とＮ末端残基の両方として組み込まれるように設計され、前駆体が線状ヘプタペプチドの場合、適切にＳ保護されたシステイン残基が、例えばＸにおけるように、Ｃ末端残基および最後から二番目のＮ末端残基の両方として組み込まれる。
【０１５２】
一般に、線状ペプチドを形成するために、２〜５当量相当のアミノ酸または擬似体のＦｍｏｃ保護型および適切なカップリング剤を用いて、アミノ酸または擬似体をＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂にカップリングする。カップリング後、樹脂を洗浄して、減圧下に乾燥してもよい。樹脂へのアミノ酸の担持は、少量のＦｍｏｃアミノ酸樹脂のアミノ酸分析により、または、ＵＶ分析によりＦｍｏｃ基の決定により決められる。あらゆる未反応のアミノ基は、樹脂を塩化メチレン中の無水酢酸およびジイソプロピルエチルアミンと反応させることにより、キャップすることができる。
【０１５３】
樹脂は、複数の繰り返しサイクルを経てアミノ酸を順次増やしてゆく。αアミノＦｍｏｃ保護基は、塩基性条件下に除去される。ＤＭＦ中のピペリジン、ピペラジンまたはモルホリン（２０〜４０％ｖ／ｖ）を、この目的で用いることができる。好ましくは、ＤＭＦ中の４０％ピペリジンを使用する。
【０１５４】
αアミノ保護基の除去の後に、続いて、保護されたアミノ酸が所望の順序で段階的に結合されて、中間体である保護されたペプチド樹脂が得られる。ペプチドの固相合成において、アミノ酸をカップリングするのに用いられる活性化剤は、当該技術分野においてよく知られている。例えば、そのような合成用の適切な試薬には、べンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリ（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＢＯＰ）、ブロモトリスピロリジノホスホニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢｒｏＰ）、２−（１Ｈ−べンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）およびジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）がある。ここで好ましいのは、ＨＢＴＵおよびＤＩＣである。ＢａｒａｎｙおよびＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄにより記載されている他の活性化剤〔Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ、第２巻、Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９７９年、１〜２８４頁〕を利用することができる。１−ヒドロキシべンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）および３，４−ジヒドロ−３−ヒドロキシ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン（ＨＯＯＢＴ）のような種々の試薬を、カップリング混合物に添加して、合成サイクルを最適化することができる。ここで好ましいのはＨＯＢＴである。
【０１５５】
典型的合成サイクル用のプロトコールは、以下のとおりである。
プロトコール１
工程 試薬 時間
１ ＤＭＦ ２×３０分
２ ４０％ピペリジン／ＤＭＦ １分
３ ４０％ピペリジン／ＤＭＦ １５分
４ ＤＭＦ ２×３０分
５ ｉＰｒＯＨ ２×３０分
６ ＤＭＦ ３×３０分
７ カップリング ６０分〜１８時間
８ ＤＭＦ ２×３０秒
９ ｉＰｒＯＨ １×３０秒
１０ ＤＭＦ １×３０秒
１１ ＣＨ₂Ｃｌ₂ ２×３０秒
【０１５６】
すべての洗浄および結合用の溶媒の体積を測定すると、樹脂１ｇ当たり１０〜２０mlであった。合成中のカップリング反応を、カイゼルニンヒドリンテストによりモニターして完了の程度を決めた〔Ｋａｉｓｅｒら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９７０年、第３４巻、５９５〜５９８頁〕。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）について、および立体障害された酸による第二級アミンへのカップリングについて、遅い反応速度が観察された。あらゆる不完全なカップリング反応が、新しく調製された活性化アミノ酸と再び組み合わされ、または前述のように無水酢酸でペプチド樹脂を処理することによりキャップされた。充分に組み立てられたペプチド樹脂を、減圧下に数時間乾燥した。
【０１５７】
各化合物について、ブロッキング基を除去し、以下の手順により線状ペプチドを分解した。ペプチド樹脂を、室温で、樹脂１ｇに対してエタンジチオール１００μL、ジメチルスルフィド１００μL、アニソール３００μLおよびトリフルオロ酢酸９．５mLを用いて１２０分間処理する。樹脂を濾去し、濾液を冷たいエチルエーテルで沈殿させる。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションする。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離する。所望であれば、粗線状ペプチドを分取ＨＰＬＣで精製する。ペプチドを最少体積のＡｃＯＨ／Ｈ₂Ｏまたは０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ中の最小の容量でカラムに適用する。傾斜溶離は、通常、８mL／minの流速で、１０％Ｂ緩衝液から出発し、９０分間でＢを１０〜６０％にする（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）。２８０nmでＵＶ検出を行う。画分を１．０〜２．５分の間隔で収集し、分析的ＨＰＬＣで検査する。高純度と判断された画分を溜めて、凍結乾燥する。
【０１５８】
ラクタムを調製するために、適切な非精製線状ペプチドを適切な不活性溶媒、例えば、Ｎ−メチルピロリドンまたはＤＭＦ、好ましくはＤＭＦ中に溶解し、第三級アミン塩基、例えば、Ｎ−メチルモルホリンの添加により、見掛けのｐＨ８．０に調節し、次に、アミド結合形成試薬、好ましくはＢＯＰで処理する。反応は、４０〜０℃、好ましくはほぼ室温で行うのが好都合である。粗環状ペプチドの精製を、分取ＨＰＬＣにより行う。傾斜溶離は、通常、８mL／minの流速で、２０％Ｂ緩衝液から出発し、９０分間でＢを２０〜６０％にする（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）。２８０nmでＵＶ検出を行う。画分を集め、分析的ＨＰＬＣでモニターする。高純度と判断された画分を溜めて、凍結乾燥する。
【０１５９】
環状ジスルフィドペプチドを調製するために、２個の適切に位置付けられたシステイン残基を含む、精製されたＨＰＬＣ精製線状ペプチドを、かなり高い希釈水準で、適切な不活性溶媒混合物、例えば、ＤＭＳＯ水溶液に溶解し、溶液を、水酸化アンモニウムを注意深く添加することにより、ｐＨ８．０に調節する。次に、酸素を撹拌下の溶液に吹き込む。反応は、４０〜０℃、好ましくはほぼ室温で行うのが好都合で、環化の進行を分析的ＨＰＬＣでモニターする。反応が完了したと判断された後、溶液を凍結乾燥し、粗環状ペプチドを、分取ＨＰＬＣで精製する。傾斜溶離は、通常、８mL／minの流速で、２０％Ｂ緩衝液から出発し、９０分間でＢを２０〜６０％にする（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）。２８０nmでＵＶ検出を行う。画分を集め、分析的ＨＰＬＣでモニターする。高純度と判断された画分を溜めて、凍結乾燥する。
【０１６０】
粗ペプチドの精製を分取ＨＰＬＣで行う。ペプチドを最少の容量のＡｃＯＨ／Ｈ₂Ｏまたは０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ中でカラムに適用する。傾斜溶離は、通常、８mL／minの流速で、１０％Ｂ緩衝液から出発し、９０分間でＢを１０〜６０％にする（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）。２８０nmでＵＶ検出を行う。画分を１．０〜２．５分の間隔で収集し、分析的ＨＰＬＣで検査する。高純度と判断された画分を溜めて、凍結乾燥する。
【０１６１】
最終生成物の純度を、前述のような逆相カラム上の分析的ＨＰＬＣによって調べる。すべての生成物の純度は、約９５〜９９％であると判断される。すべての最終生成物を、高速原子衝突質量分析（ＦＡＢ−ＭＳ）またはエレクトロスプレー質量分析（ＥＳ−ＭＳ）にも付した。すべての生成物は、許容限度内に予想された親Ｍ＋Ｈイオンを産生した。
【０１６２】
代表的化合物の合成のための製造法は、所望の配列中の各アミノ酸をもう１個のアミノ酸またはその残基に引き続き添加する手順により、または所望のアミノ酸配列を有するペプチドフラグメントを最初に従来法により合成し、次に縮合して所望のペプチドを提供する手順により行うことができる。
【０１６３】
本発明の新規化合物を合成するためのそのような従来の手順には、例えば、任意の固相ペプチド合成法がある。そのような方法において、新規化合物の合成は、所望のアミノ酸残基を、固相法の一般的原理に従って、成長下のペプチド鎖に逐次組み込むことにより行うことができる〔Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，Ｒ．Ｂ．，Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９６３年、第８５巻、２１４９〜２１５４頁；Ｂａｒａｎｙら、Ｔｈｅ ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ａｎａｌｙｓｉｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ、第２巻、Ｇｒｏｓｓ、Ｅ．およびＭｅｉｅｎｈｏｆｅｒ、Ｊ．編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ １〜２８４頁（１９８０年）〕。
【０１６４】
ペプチドの化学的合成で一般的なのは、種々のアミノ酸部分の反応性側鎖基を、保護基が完全に除去されるまで化学反応がその部位で生じるのを防止する、適切な保護基で保護することである。通常、アミノ酸またはフラグメントのαアミノ基を保護すると同時にカルボキシル基において反応させ、続いて、αアミノ保護基を選択的に除去し、その部位において続いて反応を起させることも一般的である。特定の保護基を固相合成法について開示したが、溶液相合成におけるそれぞれのアミノ酸について従来用いられていた保護基により、各アミノ酸を保護することができることに注目すべきである。
【０１６５】
αアミノ基は、芳香族ウレタン型保護基、例えばベンジルオキシカルボニル（Ｚ）および置換ベンジルオキシカルボニル、例えば、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ−ビフェニル−イソプロポキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）およびｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（Ｍｏｚ）；脂肪族ウレタン型保護基、例えば、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメトキシカルボニル、イソプロポキシカルボニルおよびアリルオキシカルボニルから選択される適切な保護基で保護することができる。ここで、αアミノ保護のためにＦｍｏｃが最も好ましい。
【０１６６】
グアノジノ基は、ニトロ、ｐ−トルエンスルホニル（Ｔｏｓ）、Ｚ、ペンタメチルクロマンスルホニル（Ｐｍｃ）、アダマンチルオキシカルボニルおよびＢｏｃから選択される適切な保護基により保護することができる。アルギニン（Ａｒｇ）用には、Ｐｍｃが最も好ましい。
【０１６７】
イソプロパノール（ｉＰｒＯＨ）、塩化メチレン（ＣＨ₂Ｃｌ₂）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）およびＮ−メチルピロリジノン（ＮＭＰ）のすべての溶媒は、Ｆｉｓｈｅｒ社またはＢｕｒｄｉｃｋ ＆ Ｊａｃｋｓｏｎ社から購入し、さらに蒸留することなく用いた。トリフルオロ酢酸は、Ｈａｌｏｃａｒｂｏｎ社またはＦｌｕｋａ社から購入し、さらに精製することなく用いた。ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）およびジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）は、Ｆｌｕｋａ社またはＡｌｄｒｉｃｈ社から購入し、さらに精製することなく用いた。ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、ジメチルスルフィド（ＤＭＳ）および１，２−エタンジチオール（ＥＤＴ）は、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．から購入し、さらに精製することなく用いた。保護アミノ酸は、概してＬ型であり、Ｂａｃｈｅｍ社、Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ社またはＮｅｏｓｙｓｔｅｍ社から購入した。これらの試薬の純度は、使用前に、薄層クロマトグラフィー、ＮＭＲおよび融点により確かめた。ベンズヒドリルアミン樹脂（ＢＨＡ）は、Ｂａｃｈｅｍ社またはＡｄｖａｎｃｅｄ Ｃｈｅｍｔｅｃｈ社から得られるスチレン−１％ジビニルベンゼン（１００〜２００メッシュまたは２００〜４００メッシュ）のコポリマーである。これらの樹脂の合計窒素含量は、通常、０．３〜１．２ミリ当量／ｇであった。
【０１６８】
Ｃｏｎｓｔａｍｅｔｒｉｃ ＩおよびＩＩＩポンプ、Ｇｒａｄｉｅｎｔ Ｍａｓｔｅｒ溶媒プログラマーおよびミキサー、およびＳｐｅｃｔｒｏｍｏｎｉｔｏｒ ＩＩＩ可変波長ＵＶ検出器からなるＬＤＣ装置において、高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を行った。Ｖｙｄａｃ Ｃ₁₈カラム（０．４×３０cm）を用いて逆相方式で分析的ＨＰＬＣを行った。Ｖｙｄａｃカラム（２×２５cm）において分取ＨＰＬＣ分離を行った。
【０１６９】
ペプチドは、好ましくは、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄにより一般的に記載されている方法〔Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６３年、第８５巻、２１４９頁〕により固相合成を用いて調製したが、前述のように、当技術分野において知られている他の同等の化学合成を用いることができる。固相合成は、保護されたαアミノ酸を適切な樹脂に結合させることにより、ペプチドのＣ末端から始める。そのような出発物質は、αアミノ保護アミノ酸をエステル結合によりｐ−ベンジルオキシベンジルアルコール（Ｗａｎｇ）樹脂に結合させることにより、またはｐ−〔（Ｒ，Ｓ）−α−〔１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）−メトキシホルムアミド〕−２，４−ジメチルオキシベンジル〕フェノキシ酢酸（リンクリンカー）のようなＦｍｏｃ−リンカーと、ベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）樹脂との間のアミド結合により調製することができる。ヒドロキシメチル樹脂の調製は、当技術分野においてよく知られている。Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂支持材は市販されており、合成される所望のペプチドが、Ｃ末端に非置換アミドを有する場合に、一般的に用いられる。
【０１７０】
一般に、２〜５当量相当のアミノ酸または擬似体のＦｍｏｃ保護型および適切なカップリング剤を用いて、アミノ酸または擬似体がＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂にカップリングされる。カップリング後、樹脂を洗浄して、減圧下に乾燥してもよい。樹脂へのアミノ酸の担持は、少量のＦｍｏｃアミノ酸樹脂のアミノ酸分析により、または、ＵＶ分析によりＦｍｏｃ基の決定により決められる。未反応アミノ基は、樹脂を塩化メチレン中の無水酢酸およびジイソプロピルエチルアミンと反応させることにより、キャップすることができる。
【０１７１】
樹脂は、複数の繰り返しサイクルを経てアミノ酸を順次増やしてゆく。αアミノＦｍｏｃ保護基は、塩基性条件下に除去される。ＤＭＦ中のピペリジン、ピペラジンまたはモルホリン（２０〜４０％ｖ／ｖ）を、この目的で用いることができる。好ましくは、ＤＭＦ中の４０％ピペリジンを使用する。
【０１７２】
αアミノ保護基の除去の後に、続いて、保護されたアミノ酸が所望の順序で段階的に結合されて、中間体である保護されたペプチド樹脂が得られる。ペプチドの固相合成において、アミノ酸をカップリングするのに用いられる活性化剤は、当該技術分野においてよく知られている。例えば、そのような合成用の適切な試薬には、べンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリ（ジメチルアミノ）ホスホニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＢＯＰ）、ブロモトリスピロリジノホスホニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＰｙＢｒｏＰ）、２−（１Ｈ−べンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）およびジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）がある。ここで好ましいのは、ＨＢＴＵおよびＤＩＣである。ＢａｒａｎｙおよびＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄにより記載されている他の活性化剤〔Ｔｈｅ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，第２巻、Ｊ．Ｍｅｉｅｎｈｏｆｅｒ編、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、１９７９年、１〜２８４頁〕を利用することができる。１−ヒドロキシべンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）および３，４−ジヒドロ−３−ヒドロキシ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアジン（ＨＯＯＢＴ）のような種々の試薬を、カップリング混合物に添加して、合成サイクルを最適化することができる。ここで好ましいのはＨＯＢＴである。
【０１７３】
典型的合成サイクル用のプロトコールは以下のとおりである。
プロトコール１
工程 試薬 時間
１ ＤＭＦ ２×３０秒
２ ４０％ピペリジン／ＤＭＦ １分
３ ４０％ピペリジン／ＤＭＦ １５分
４ ＤＭＦ ２×３０秒
５ ｉＰｒＯＨ ２×３０秒
６ ＤＭＦ ３×３０秒
７ カップリング ６０分〜１８時間
８ ＤＭＦ ２×３０秒
９ ｉＰｒＯＨ １×３０秒
１０ ＤＭＦ １×３０秒
１１ ＣＨ₂Ｃｌ₂ ２×３０秒
【０１７４】
すべての洗浄および結合用の溶媒の体積を測定すると、樹脂１ｇ当たり１０〜２０mlであった。合成中のカップリング反応を、カイゼルニンヒドリンテストによりモニターして完了の程度を決めた〔Ｋａｉｓｅｒら、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９７０年、第３４巻、５９５〜５９８頁〕。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）について、および立体障害された酸による第二級アミンへのカップリングについて遅い反応速度が観察された。あらゆる不完全なカップリング反応が、新しく調製された活性化アミノ酸と再び組み合わされ、または前述のように無水酢酸でペプチド樹脂を処理することによりキャップされた。充分に組み立てられたペプチド樹脂を、減圧下に数時間乾燥した。
【０１７５】
各化合物について、ブロッキング基を除去し、以下の手順によりペプチドを分解した。ペプチド樹脂を、室温で、樹脂１ｇに対してエタンジチオール１００μL、ジメチルスルフィド１００μL、アニソール３００μLおよびトリフルオロ酢酸９．５mLを用いて１２０分間処理する。樹脂を濾去し、濾液を冷たいエチルエーテルで沈殿させる。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションする。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離する。粗生成物を減圧下に乾燥する。
【０１７６】
粗ペプチド製剤の精製
粗ペプチドの精製を、分取ＨＰＬＣで行った。ペプチドを最少の容積のＡｃＯＨ／Ｈ₂Ｏまたは０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ中でカラムに適用した。傾斜溶離は、通常、８mL／minの流速で、１０％Ｂ緩衝液から出発し、９０分間でＢを１０〜６０％にした（緩衝液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衝液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）。２８０nmでＵＶ検出を行った。画分を１．０〜２．５分の間隔で収集し、分析的ＨＰＬＣで検査する。高純度と判断された画分を溜めて、凍結乾燥する。
【０１７７】
最終生成物の純度を、前述のような逆相カラム上の分析的ＨＰＬＣによって調べた。すべての生成物の純度は、約９５〜９９％であると判断された。すべての最終生成物を、高速原子衝突質量分析（ＦＡＢ−ＭＳ）またはエレクトロスプレー質量分析（ＥＳ−ＭＳ）にも付した。すべての生成物は、許容限度内に予想された親Ｍ＋Ｈイオンを産生した。
【０１７８】
前述の技術を利用して、以下の反応スキームに従って、本発明の化合物を合成することができる。
【０１７９】
【化８８】

【０１８０】
本発明の環状ペプチド（構造１）の合成における、最後から二番目の中間体としてここで用いられる線状ペプチドは、先の部分において説明した従来の固相ペプチド合成法により調製される。各サイクルは、次の２個の手順からなる；樹脂結合鎖における末端窒素からのＦｍｏｃ保護基の分解、およびその後のＦｍｏｃ保護アミノ酸によるアミン官能基のアシル化である。サイクルは、通常、プロトコール１に概説する段階的手順に従って行われる。脱保護は、適切な不活性溶媒、例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）またはＮ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）中において、有機塩基、例えば、ピペラジン、モルホリンまたはピペリジン、好ましくはピペリジンを用いて達成される。カップリング反応は、アミド結合形成のために開発された多くの条件の一つ、例えば、不活性溶媒、例えばＤＭＦ中における有機塩基、例えばジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）の存在下におけるＯ−ベンゾチアゾール−１−イルＮ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロホスファート（ＨＢＴＵ）により行うことができる。または、本例において、ＤＭＦのような適切な不活性溶媒中において、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）のような活性化剤と共にカルボジイミド、例えばジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）を用いて、アミド基を形成することができる。
【０１８１】
反応スキームＡにおいて、ＺがＮＨＣＯである構造１の環状ペプチド用の線状ポリペプチド前駆体の調製の第一のサイクルいおいて、構造２で表されるＦｍｏｒ−リンカー−ＢＨＡ樹脂を脱保護し、構造３のＦｍｏｃ−アミノ酸と縮合させて樹脂結合化合物４を得る。環状ペプチドのこの合成において、Ｆｍｏｃ−アミノ酸３が、脱保護されたときに分子内アミド結合の形成に参加し得る適切に保護された塩基性側鎖である、重要な構造的要件を含むことが必要である。成長下のペプチド鎖を延長するために、第二のサイクルは、Ｆｍｏｃ−アミノ酸５を取り入れて構造６の化合物を与える。第三のサクルにおいて、樹脂結合ペプチド６を処理すると、Ｒ⁸が水素である構造７ａの中間体が得られる。Ｒ⁸がメチルである構造７ｂの中間体は、スキームＣに示すように合成される。
【０１８２】
構造７ｂの中間体は、スキームＣに記載されるように構造７ａの化合物から調製する。この手順において、プロトコール１の工程１〜５に記載されるように、構造６の化合物を処理することによって調製された構造７ａの化合物を、アリールスルホニルクロリド、好ましくは、２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド２３と反応させて、構造２４の化合物を製造する。この反応は、適切な不活性溶媒、好ましくはＤＭＦ中で、プロトン受容体、例えば、ピリジン、トリエチルアミン（ＴＥＡ）またはＤＩＰＥＡ、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下に行われる。洗浄された構造２４の樹脂結合化合物中に形成されたスルホンアミド結合のＮ−メチル化が、ミツノブ条件下に達成されて、構造２５の化合物が製造される。この反応の実施において、構造２４のスルホンアミドが、溶媒としてメタノールを用いて、アゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）およびトリフェニルホスフィンの存在下にメタノールと反応する。反応完了後、構造２５の樹脂結合Ｎ−メチルスルホンアミドを洗浄して、残留試薬および副生物が含まれないようにする。
【０１８３】
反応スキームＡに示す次の工程において、適切な溶媒、好ましくはＤＭＦ中において、２５を２−メルカプトエタノールおよび有機強塩基の１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）と反応させることにより、２−ニトロベンゼンスルホニル残基を構造２５から除去して、構造７ｂの樹脂結合中間体を得る。反応スキームＡの第三サイクルを、構造７ａまたは７ｂの化合物をＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）−ＯＨ（８）またはＦｍｏｃ−Ｃｉｔ−ＯＨ（９）と反応させて、構造１０の樹脂結合化合物を得ることにより完了させる。
【０１８４】
反応スキームＢに示す次の２個のサイクルは、まず、構造１０のペプチドをアミノ酸であるＦｍｏｃ−（Ｄ）−Ｐｈｅ−ＯＨと反応させて、構造１１の化合物を生成し、次にこの構造１１の化合物を、構造１２または１３のアミノ酸擬似体の一つと反応させて、これらのアミノ酸を樹脂結合ペプチドに組み込んで、どのアミノ酸擬似体を用いたかに依存して、構造１４または１５の樹脂結合ペンタペプチドを得ることにより実施する。本発明の環状ペプチドの形成に最終的に参加するのに適している線状ペンタペプチドに、カルボン酸側鎖を含むさらなるアミノ酸を組み込むことは、２つの方法により達成される。
【０１８５】
ａ．反応スキームＢに見られるように、適切に保護された酸側鎖を有するＦｍｏｃアミノ酸を、樹脂結合ペンタペプチド１４および１５に組み込む。このように、サイクル６（反応スキームＢ）において、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（１６）またはＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（１７）が、成長しているペプチド鎖中に組み込まれて、構造１８および１９を有する樹脂結合ヘキサペプチドが、それぞれまたは選択的に得られる。
【０１８６】
ｂ．樹脂結合ペンタペプチド１４および１５が、構造２８′（反応スキームＦ）の環状無水物、例えば、無水マレイン酸または無水フタル酸でＮ−キャッピングされて、構造２９および３０の化合物が、それぞれまたは選択的に得られる。
【０１８７】
ｃ．反応スキームＢに見られるように、樹脂結合ヘキサペプチド１８および１９は、さらに、さらなるアミノ酸と反応して、ヘプタペプチドを形成することができ、その後Ｎ−キャッピングされる。これは、通常の方法で、アミノ酸残基、好ましくはＦｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨを組み込むことにより達成され、２１および２２が得られる。
【０１８８】
ヘプタペプチドまたはヘキサペプチドをＮ−キャッピングすると、化合物１の末端アミド官能基が形成される。このようにして、置換基Ｘ、Ｙ、Ｒ¹²およびＲ¹が作られる。樹脂結合ヘキサペプチド（１８，１９）またはヘプタペプチド（２１，２２）をＮ−キャッピングするために、ポリペプチドをまず、ＤＭＦ中のピペリジンで処理してＦｍｏｃ保護基を除去し、次にアシル化剤と反応させる。構造１の化合物を製造してから、ＸおよびＹがＣＨで、Ｒ¹が
【０１８９】
【化８９】

【０１９０】
であるＺを形成するための反応スキームＤに示すように、構造１８の樹脂結合ポリペプチドを脱保護しおよびＮ−アシル化して構造２７の樹脂結合アミドを得る、または脱保護後に、イソシアネートと反応させて構造２８の尿素を形成する。Ｎ−アシル化は、当業者に周知の種々の方法により実施される。これらの方法には、以下のものがある。
【０１９１】
（ｉ）ＤＭＦのような適切な溶媒中、ＨＢＴＵおよび有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下に、末端アミノ官能基を、カルボン酸Ｒ²−ＣＯ₂Ｈと反応させる。
（ｉｉ）ジクロロメタンのような適切な溶媒中、ピリジン、ＴＥＡおよびＤＩＰＥＡのような有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下に、末端アミノ官能基を、カルボン酸クロリドＲ２−ＣＯＣｌと反応させる。または、
（ｉｉｉ）反応スキームＦに示すように、末端アミノ官能基を、構造２８′のカルボン酸無水物と反応させる。この反応は、ジクロロメタンまたはＤＭＦのような適切な溶媒中、有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下に行われる。
【０１９２】
構造１８の化合物が構造２８の尿素に転換される、反応スキームＤにおけるＮ−キャッピング反応は、構造２８の化合物中の末端アミノ基を、イソシアネートＲ²−ＮＣＯと反応させることにより行われる。この反応は、ジクロロメタンまたはＤＭＦのような適切な溶媒中、有機塩基、好ましくはＤＩＰＥＡの存在下に行われる。アシル化および尿素形成反応が完了すると、樹脂結合生成物２７および２８を洗浄して、残留試薬および副生物を含まないようにする。同様の条件を用いて、構造３３、３５および３７のＮ−アシル化化合物ならびに構造３４、３６および３８の尿素の形成（反応スキームＥ）により、構造１９、２１および２２の樹脂結合ペプチドのＮ−キャッピングを行う。しかしながら、構造２１および２２の化合物を製造する反応スキームＢ中の、構造２０の化合物以外の既知のアミノ酸を利用することにより、Ｎｌｅから誘導されるものとは異なる基Ｒ¹⁴を提供するように、反応スキームＥを修正することができる。
【０１９３】
反応スキームＧおよびＨは、Ｎ−キャップしたポリペプチド２９、３０、３３〜３８における残りの保護基の分解、および同時に起こる固体支持体からのペプチドの分解を示している。この反応は、場合により、ジクロロメタンのような不活性溶媒および微量（１％）の水の存在下で、場合により１種または２種以上のカルボカチオンスカベンジャー、例えば、エタンジチオール、ジメチルスルフィド、トリエチルシランおよびアニソールの存在下に、有機強酸、好ましくはトリフルオロ酢酸を用いることによって行われる。ポリペプチド分解溶液を濾過して、固体支持体を含まないようにし、次に適切な溶媒、好ましくはジエチルエーテルで希釈し、形成された固形物を濾過により収集する。反応スキームＨで製造された構造３９〜４４の固体ポリペプチドを、分取Ｃ１８カラムを用いることにより、逆相クロマトグラフィーで精製することができる。
【０１９４】
このように分子内アミド結合を形成するのに現在利用できる適切な官能基で、Ｎ−キャップされた線状ポリペプチドを、当技術分野において周知のアミド形成反応条件に付す。したがって、線状ポリペプチド３１、３２（反応スキームＧ）および３９〜４４（反応スキームＩ）のそれぞれが、不活性溶媒、例えば、ＤＭＳＯに溶解され、第三級アミン塩基、例えば、Ｎ−メチルモルホリンを添加することにより、溶液の見掛けのｐＨが８に調節され、その後、アミド形成試薬、例えば、ＢＯＰが添加される。反応は、０〜４０℃、好ましくはほぼ室温で行うことが好都合である。反応は、完了したと判断されるまで続けられる。平均的技術を有する人が反応の進行をモニターするために用いる一般的方法は、例えば、ＴＬＣまたは分析的ＨＰＬＣである。反応溶媒を減圧下に除去した後、反応スキームＩに示すように、ＺがＮＨＣＯである構造Ｉの粗環状ペプチドを、分取Ｃ１８カラムを用いて逆相クロマトグラフィーにより精製することができる。このようにして、ＺがＮＨＣＯ橋である構造１の化合物が製造される。
【０１９５】
ＺがＳ−Ｓである構造１の環状ジスルフィドペプチドは、ＺがＮＨＣＯである構造１のラクタムの調製のための上述の反応スキームＡ〜Ｈに類似した反応スキームにおいて概説される方法論により調製される。最後から二番目の線状ポリペプチドは、保護されたチオール側鎖残基、例えばＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨを含むアミノ酸が、成長している樹脂結合ポリペプチドの適切な位置、好ましくはサイクル１および６において組み込まれること以外は同様にして、組み立てられる。樹脂結合線状ポリペプチドのこの調製を、反応スキームＪおよびＫに示す。先に説明し、スキームＬに示すように、樹脂結合線状ポリペプチド５２は、Ｆｍｏｃ保護基を除去した後、５６を与えるアシル化により、または尿素５７を形成するイソシアネートとの反応により、Ｎ−キャッピングすることができる。同様にして、樹脂結合ヘキサペプチド５３、ならびに樹脂結合ヘプタペプチド５４および５５が、対応するＮ−アシル化誘導体５８、６０および６２、ならびに尿素誘導体５９、６１および６３（反応スキームＭ）に転換される。
【０１９６】
反応スキームＮにおいて、Ｎ−キャップされた樹脂結合線状ヘキサペプチド５６を、場合によりジクロロメタンのような不活性溶媒の存在下で、場合により１種以上のカルボカチオンスカベンジャー、例えば、エタンジチオール、ジメチルスルフィド、トリエチルシタンおよびアニソールの存在下に、強酸、好ましくはトリフルオロ酢酸で処理する。これにより、すべての側鎖保護基の分解、および固体支持体からの線状ペプチドの分解が引き起こされる。反応は、０〜３５℃、好ましくは室温で行われるのが好都合である。ポリペプチド分解溶液を、濾過された固体支持体を含まないようにし、次に適切な溶媒、好ましくはジエチルエーテルで希釈し、形成された固体を濾過により収集する。このように製造された構造６４の固体ポリペプチドは、場合により、分取Ｃ１８カラムを用いて逆相クロマトグラフィーにより精製することができる。線状ヘキサペプチド６４は、次に、当業者に周知の、チオールにジスルフィド結合を形成させることができる、酸化的条件下に処理される。したがって、６４の希釈水溶液は、穏やかで弱い無機塩基、好ましくは水酸化アンモニウムを用いてｐＨ８．０に調節され、次に、環化が完了したと判断されるまで、標準的方法、例えばＴＬＣまたはＨＰＬＣを用いて酸素を容器に吹き込む。凍結乾燥により反応溶媒を除去した後、このように調製され、単離された粗環状ペプチド（Ｉ；Ｚ＝Ｓ−Ｓ）を、分取Ｃ１８カラムを用いて、逆相クロマトグラフィーにより精製することができる。
【０１９７】
反応スキームＨおよびＩに関して前述したのと同様の条件下に、反応スキームＯおよびＰに示すような樹脂結合線状ポリペプチド５８〜６３を脱保護し、固体支持体から解離して線状ペプチド６５〜７０を与え（反応スキームＯ）、次にこれを前述のように酸化的に環化して、対応する構造１の化合物を得る（反応スキームＰ）。
【０１９８】
前述のペプチドの調製において用いられるＦｍｏｃ−アミノ酸ならびにポリペプチドをＮ−キャッピングするのに用いられるアシル化剤およびイソシアネートは、市販されている既知の化合物である。反応スキームＢで用いられる、その種である構造１３の化合物を含むＦｍｏｃ−アミノ酸１２は、有機化学の当業者に周知の方法によって、ここに記載されたように調製される。スキームＱには、環状ケトンから構造１２の化合物のＦｍｏｃ−アミノ酸種の調製が概説されている。構造１２ならびに構造１３、７９および８０のこれらの種は、スキームＱの手順に概説されているように、構造７５の種と同様に調製される。構造７１の４−フェニルシクロヘキサノン類を、炭酸アンモニウムおよびシアン化カリウムによる処理で、構造７２のヒダントインに転換される。反応は、水性エタノール混合物中で５０〜９０℃、好ましくは８０〜９０℃の温度で行われる。ヒダントインから構造７３のアミノ酸への直接加水分解には、還流温度で、強塩基、例えば、６Ｎ水酸化ナトリウム溶液または水酸化バリウムで長期間処理することが必要である。または、構造７２の化合物を、構造７４のビス−Ｂｏｃ誘導体に転換することができる。反応は、不活性溶媒、好ましくはテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中、有機アミン塩基、好ましくはＴＥＡおよび触媒の４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下、０℃〜室温、好ましくは室温で重炭酸tert−ブチル〔（Ｂｏｃ）₂Ｏ〕を用いて行われる。構造７４のビス−Ｂｏｃヒダントインは、構造７３のアミノ酸に容易に転換される。反応は、不活性溶媒、好ましくはジメトキシエタン（ＤＭＥ）中、０〜５０℃、好ましくはほぼ室温で１Ｎ水酸化ナトリウムを用いて達成される。構造７３の化合物中のＦｍｏｃ基によるアミノ官能基の保護は、構造１２の化合物のＦｍｏｃ−アミノ酸種である構造７５の化合物を与える種々の反応条件下に行われる。反応は、好都合には、ＴＨＦまたはジオキサン、好ましくはジオキサンと炭酸ナトリウム水溶液との混合物中にアミノ酸７３を含む溶液を、０℃〜室温、好ましくは室温で、９−フルオレニルメトキシクロロホルマート（ＦｍｏｃＣｌ）で処理することにより行われる。あるいは、Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニロキシ）スクシンイミド（ＦｍｏｃＯＳｕ）を、有機第三級アミン塩基、好ましくはＴＥＡを含むアセトニトリル水溶液にアミノ酸７３を含む溶液に添加する。反応は、０℃〜室温、好ましくは室温で行う。もう一つの異なる手順において、７４から７３への転換において、加水分解混合物からＤＭＥを蒸発させ、反応生成物をｐＨ１１に調節する。７３のナトリウム塩の得られる溶液を、次に、その場で、ジオキサン中のＦｍｏｃＯＳｕまたはＦｍｏｃＣｌにより、０℃〜室温、好ましくは室温で処理する。反応スキームＱと同様の方法で、テトラロン７６、Ｎ−アリール−４−ケトピペリジン７７およびシクロヘキサノン誘導体７８を、対応する構造１３、７９および８０のＦｍｏｃ−アミノ酸に転換することができ、これらはすべて、７３と一緒に、反応スキームＢで利用される構造１２の亜属を形成する。
【０１９９】
反応スキームＱにおいて、亜属構造８２においてＲ⁴が線状または分岐低級アルコキシを表し、Ｒ²およびＲ³の両方が水素である構造７３の化合物を、反応スキームＲに示すように、構造８１の化合物のＯ−アルキル化により調製することができる。Ｒ¹⁶が非分岐状低級アルキル部分を表す場合、アルキル化は、アルカリ金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムの存在下に、構造Ｒ¹⁶ハライドの第一アルキルハライドを用いることにより行われる。アルキルハライドは、クロロ、ブロモまたはヨード誘導体、好ましくはアルキルヨージドであり得る。反応は、ＳＮ₂置換反応を促進する不活性溶媒、例えば、アセトン、２−ブタノンまたはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、好ましくはアセトン中で、室温から溶液の還流温度の間の温度、好ましくは還流温度で、好都合に行うことができる。Ｒ¹⁶が分岐状低級アルキル基、例えば２−プロピルを表す場合、構造８２の化合物を製造するための構造８１の化合物のアルキル化は、アルカリ金属炭酸塩、例えば炭酸カリウムの存在下に、構造Ｒ¹⁶ハライドの第二級アルキルハライドを用いて行われる。第二級アルキルハライドは、好ましくは第二級アルキルヨージド、例えば２−ヨードプロパンである。反応は、不活性溶媒、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中で、室温から溶媒の還流温度の間、好ましくは約１００℃で好都合に行うことができる。
【０２００】
反応スキームＱにおける出発物質である構造７１の４−アリールシクロヘキサノンは、有機化学の当業者に周知の方法により調製することができる。スキームＳに概説するように、Ｘ¹がブロモまたはヨードを表す構造８３のアリールハライドを、アルキル金属試薬、好ましくはｔ−ブチルリチウムで処理すると、金属交換反応を生じて、対応する構造８４のアリールリチウムが得られる。反応は、ジエチルエーテルまたはテトラヒドロフランのような不活性無水溶媒、好ましくはテトラヒドロフラン中に構造８３の化合物を含む溶液に、アルキルリチウムの溶液を添加することにより、−７８℃で好都合に行われる。このように製造される構造８４のアリールリチウムは、次に、その場で、シクロヘキサン−１，４−ジオール（８５）のモノケタールの、適切な不活性溶媒の溶液、例えばテトラヒドロフラン溶液で処理し、反応温度を−６０℃より低い温度、好ましくは約−７８℃に維持して、構造８６のカルビノールを得る。構造８７の化合物は、構造８６のカルビノールの脱水により得られる。反応は、不活性溶媒、例えばベンゼンまたはトルエン、好ましくはベンゼン中の有機強酸触媒、好ましくはｐ−トルエンスルホン酸を用いて、溶媒の還流温度で好都合に行われる。形成された水は、反応を完了可能にするために、ディーンシュタルク装置により反応混合物から除去される。構造８８の化合物は、構造８７のオレフィンの水素化により製造される。反応は、不活性溶媒、例えばエタノールまたは酢酸エチル中、水素雰囲気下に、貴金属触媒、例えば炭素担持パラジウムを用いて好都合に行われる。水素化は、通常、室温および４０psiの水素下に行われるが、構造８７中のアリール環が水素化分解し易い基を含む場合、例えば、Ｒ³、Ｒ⁴またはＲ⁵がクロロを表す場合、反応圧力は約５psiに維持される。構造８８の化合物は、ヒドロキシル基の還元的除去により構造８６のカルビノールから直接得ることもできる。この反応において、不活性溶媒、例えば、ジクロロメタン中に構造８６の化合物（Ｒ³＝Ｒ⁴＝ＨおよびＲ⁵＝ＯＭｅ）を含む溶液を、三フッ化ホウ素エーテラートのようなルイス酸、および還元剤、例えば、トリエチルシランにより、０℃〜室温で処理する。構造８８の化合物中のケタール保護基の除去により、式７１で示されるケトンが得られ、これは、構造１２の化合物の構造７５のＦｍｏｃ−アミノ酸種を調製するための反応スキームＱのための出発物質である。反応は、アセトンまたは２−ブタノン、好ましくはアセトン中で、酸触媒、例えば、４Ｎ塩酸またはｐ−トルエンスルホン酸の存在下に、室温〜反応混合物の還流温度、好ましくは還流温度で好都合に行われる。
【０２０１】
構造１３の化合物を調製するための出発物質である、反応スキームＱに示される構造７６の５−置換−β−テトラロンは、既知の化合物である、あるいは、知られていない場合、有機化学の当業者に周知の方法により、調製することができる。本例の場合、構造７６の化合物は、基本的に、反応スキームＴおよびＵに概説する２つの方法により調製される。スキームＴに示すように、構造９０の２−置換ヒドロケイ皮酸は、構造９１の対応するカルボン酸クロリドに転換される。この転換は、いくつかの方法により、例えば、ベンゼンまたはジクロロメタンのような不活性溶媒、好ましくはジクロロメタン中、場合によっては触媒量のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドの存在下に、ヒドロケイ皮酸を塩化オキサリルで処理することにより行うことができる。反応は、０℃〜室温、好ましくは室温で好都合に行うことができる。あるいは、構造９０の化合物を、不活性溶媒、例えばベンゼンまたはトルエン、好ましくはトルエン中、室温ないし溶液の還流温度、好ましくは還流温度で、塩化スルフリルのようなアシルクロリド形成試薬と反応させる。構造９２のジアゾケトンを、不活性溶媒、例えばジクロロメタン中、このように形成された構造９１のアシルハライドを、過剰量の新しく調製したジアゾメタンのエーテル溶液で処理することにより調製する。試薬の組合せは、氷浴温度で行うのが好都合であり、反応は、次に、０℃〜室温、好ましくは室温で行われる。反応スキームＴに示すように、構造７６のテトラロンを得るための構造９２のジアゾケトンの環化は、不活性溶媒、例えば、ジクロロメタン中の酢酸ロジウム（ＩＩ）により促進される。反応は、通常、室温〜溶液の還流温度、好ましくは還流温度で行われる。
【０２０２】
Ｒ⁶が線状または分岐状の低級アルコキシ基を表す、反応スキームＱ中の出発物質である構造７６の化合物は、構造９３の化合物から反応スキームＵに示すように調製することができる。反応スキームＵにおいて、Ｒ^{15 ′}が非分岐状低級アルキル部分を表す構造９４の化合物は、アルカリ金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムのような塩基の存在下に、第一級アルキルヨージドまたはブロミド、好ましくはヨージドを用いて、構造９３のナフタレンジオールの全部のＯ位置をアルキル化することにより調製される。反応は、不活性溶媒、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中、室温〜１００℃、好ましくは３５℃で行うことができる。Ｒ^{15 ′}が分岐状低級アルキルを表す構造９７の化合物は、構造９４の２−テトラロンから２段階で調製される。構造９５のテトラロンは、ｐ−シメンのような適切な高沸点溶媒中における、パラジウム金属（炭素担持、１０％）のような貴金属触媒の存在下の脱水素に付され、構造９６の芳香族化された化合物が得られる。次に、構造９６のナフトールは、アルカリ金属炭酸塩、好ましくは炭酸セシウムのような塩基の存在下に、第二級アルキルヨージドを用いてＯアルキル化されて、構造９７の化合物が得られる。反応は、不活性溶媒、好ましくはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中、室温〜１００℃、好ましくは約４０℃で行うのが好都合である。
【０２０３】
構造７６のテトラロンは、構造９４および９７の化合物を、溶解性金属条件下に還元し、続いて中間体のエノールエーテルを酸触媒による加水分解によって製造される。変換は、低級アルコール、好ましくはエタノール中に基質を含む、沸騰している溶液に、出発物質が消費されるまで、大過剰のナトリウムまたはカリウムのようなアルカリ金属、好ましくはナトリウムを少量ずつ添加することにより好都合に行われる。構造７６のテトラロンは、単離された中間体エノールエーテルの溶液を、強酸触媒、好ましくはｐ−トルエンスルホン酸で処理することによって得られる。加水分解は、低級アルコール、好ましくはエタノールと水との混合物中、室温〜溶液の還流温度、好ましくは還流温度で好都合に行われる。
【０２０４】
構造１２の化合物のＦｍｏｃ−アミノ酸種である、式７９で示される化合物の製造における出発物質として反応スキームＱで利用される、構造７７の化合物の調製において、構造９８の化合物が、出発物質として用いられる。これを、反応スキームＶに示す。反応スキームＶにおいて、構造１００の化合物は、それ自体知られている反応により調製することができる。例えば、これらは、構造９８の第二級アミンを、アリールブロミドまたはヨージド、好ましくは構造９９のアリールヨージド（反応スキームＶ）にカップリングすることにより調製することができる。カップリング反応は、キレート化ホスフィン配位子、好ましくはトリ−ｏ−トリルホスフィン、およびナトリウムtert−ブトキシドのようなヒンダードアルコキシドの存在下に、貴金属触媒、好ましくはトリ（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムの触媒作用を受ける。反応は、不活性雰囲気中、ジオキサンまたはトルエンのような無水溶媒、好ましくはジオキサンを用いて、６０℃〜還流温度、好ましくは９０℃で行うのが好都合である。化合物１００中のカルボニル保護基を除去して、構造７７の化合物を得ることは、有機化学の分野で周知の種々の方法により行うことができる。例えば脱保護は、アセトンまたは２−ブタノンのような低沸点ケトン中に化合物１００を含む溶液を、鉱酸水溶液、例えば６Ｎ塩酸により、室温〜混合物の還流温度、好ましくは還流温度で処理することにより、達成することができる。構造１００の化合物は、このように鉱酸水形態で処理すると、反応スキームＶにおいて、構造７７の化合物を形成する。反応スキームＱの説明で示したように、構造７７の化合物は、Ｑが、
【０２０５】
【化９０】

【０２０６】
である構造１２の酸の種である、構造７９の化合物用の中間体である。
【０２０７】
反応スキームＡにおいて、構造５のアミノ酸は、Ｒ⁹が、
【０２０８】
【化９１】

【０２０９】
である既知の化合物である。
【０２１０】
一方、Ｒ⁹中のＲ¹⁷が低級アルキルである、すなわちＲ⁹が、
【０２１１】
【化９２】

【０２１２】
である構造５のアミノ酸は、式１０１で示される化合物から、以下の反応スキームＶを介して調製される。
【０２１３】
【化９３】

【０２１４】
反応スキームＷに示すように、Ｂｏｔｅｊｕ，Ｌ．Ｗ．、Ｗｅｎｇｅｒ Ｋ．およびＨｒｕｂｙ，Ｖ．Ｊ．、Ｔｅｔ．Ｌｅｔｔ．、第３３巻、７４９１頁（１９９２年）によって先に記載された方法により、β−メチル（Ｎｉｎ−Ｍｅｓ）トリプトファン１０９を調製した。第一工程において、トランス−インドール−３−アクリル酸１０１中の窒素が、対応するメシチレンスルホンアミド１０２への転換により保護される。反応は、不活性溶媒、好ましくはテトラヒドロフラン中にアルキルまたはアリールリチウム試薬、例えば、フェニルリチウムまたはｎ−ブチルリチウム、好ましくはｎ−ブチルリチウムを含む過剰（＞２当量）の溶液で、インドール酸１０１を−４０℃〜約−１００℃、最も都合よくは、−７８℃で処理することにより行われる。反応は約−７８℃に維持されるが、形成された、ジリチウム化された種は、次に、塩化メシチレンスルホニルで処理されて、メシチレンスルホンアミド１０２が得られる。Ｎ−保護されたインドールアクリル酸１０２は、次に、キラルな助剤（Ｒ）−４−フェニル−２−オキサゾリジノン（調製には、Ｎｉｃｏｌａｓら、Ｊ．Ｏｒｇ Ｃｈｅｍ．１９９３年、第５８巻、７６６〜７７０頁を参照）のＮ−リチウム化種１０４とカップリングして、キラルなアクリルアミド１０５を得る。カップリングは、１０２から形成された混成酸無水物を介して行う。混成酸無水物１０３を形成するために、Ｎ−保護されたインドールアクリル酸１０２を、第三級アミン塩基、例えばトリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミン、好ましくはトリエチルアミンの存在下に、適切なアシルクロリド、例えば、クロロギ酸ｔ−ブチル、２，４，６−トリクロロベンゾイルクロリドまたは塩化ピバロイル、好ましくは塩化ピバロイルと反応させた。酸無水物１０３を形成するための適切なアシルクロリドの選択を可能にする基準は、充分に達成されており、有機化学の当業者により知られている。酸無水物の形成を、不活性溶媒、例えば、テトラヒドロフラン中、−１００〜０℃、好ましくは約−７８℃の初期温度で行う。反応は、−７８〜０℃、好ましくは約０℃の温度で完了させられる。このように形成された混成酸無水物１０３を、次に、（Ｒ）−４−フェニル−２−オキサゾリジノンを不活性溶媒、例えばテトラヒドロフラン中に含む溶液を、アルキルまたはアリールリチウム試薬、例えばフェニルリチウムまたはｎ−ブチルリチウム、好ましくはｎ−ブチルリチウムを不活性溶媒、例えばヘキサン中に含む等モル量の溶液により、−１００〜０℃、好ましくは約−７８℃で処理することにより、先に調製したＮ−リチウム化（Ｒ）−４−フェニル−２−オキサゾリジノン１０４の溶液と、インサイチューで反応させる。キラルなアクリルアミド１０５を産出するカップリング反応は、−１００〜０℃、好ましくは約−７８℃の初期温度で行われ、すべての試薬が組み合わされた後、反応を−７８℃〜室温、好ましくはほぼ室温で進行させる。
【０２１５】
キラルなアクリルアミド１０５から１０６への変換の重要点は、１０６における２個の新しい隣接したキラルセンターの、制御された発生である。反応は、臭化第一銅−ジメチルスルフィド複合体および臭化メチルマグネシウムからその場で形成されるメチル銅酸エステル（methyl cuprate）を、１０５中に存在するマイケル受容体であるα，β−不飽和カルボニル系に立体選択的に１，４−共役付加（マイケル付加）することを含む。得られる金属キレート化エノラートを、次に、ハロゲン化剤、好ましくはＮ−ブロモスクシンアミドで直接ハロゲン化して１０６を得る。ここでも、マイケル付加の場合と同様に、臭素原子の混入は、α，β−不飽和アシルオキサゾリジノン系および中間体の金属キレート化エノラートの両方のｓｉ面を、侵入してくる試薬の攻撃から効果的に遮蔽するキラルな助剤上のかさ高いフェニル基により、立体選択的に制御される。メチル銅酸エステルの調製のために、臭化メチルマグネシウムをジエチルエーテル中に含む溶液を、不活性溶媒、例えば、硫化ジメチルまたはテトラヒドロフラン、好ましくはそれらの混合物中に臭化第一銅−ジメチルスルフィド（１：１）複合体を含む溶液に添加する。反応は、−７８℃〜室温、好ましくは−４℃で行う。臭化メチルマグネシウムの代わりに、任意の低級アルキルブロミドを添加して、メチル以外の低級アルキル基であるＲ¹⁷を形成することができる。この形成されたメチル銅酸エステル溶液に、その場でα，β−不飽和アシロキサゾリジノン１０５を、不活性溶媒、好ましくはテトラヒドロフラン中に含む溶液に添加する。メチル銅酸エステルの添加は、最初は−３０℃〜室温、好ましくは−４℃で行い、次に、室温で行う。反応が完了したと判断（例えば、ＴＬＣまたはＨＰＬＣによる分析）されると、次に−１００〜−４０℃、好ましくは約−７８℃に冷却し、その時点で、ハロゲン化剤、好ましくはＮ−ブロモスクシンイミドの不活性溶媒溶液、例えばテトラヒドロフラン溶液を添加する。反応を、次に、０℃〜室温、好ましくはほぼ室温で進めて、単離した後、臭化物１０６を得る。該臭化物を、アジドイオンで置換し、それに付随して構造は逆転される。この変換は、不活性溶媒、例えばアセトニトリル中で、臭化物１０６をテトラブチルアンモニウムアジドと反応させることにより達成されて、アジド１０７が得られる。反応は、８０℃〜室温、好ましくはほぼ室温で好都合に行われる。１０７およびアルカリ金属水酸化物、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化リチウム、好ましくは水酸化リチウムを、過酸化水素の存在下に処理すると、キラルな助剤が加水分解されて、アジド酸１０８が得られる。加水分解反応は、不活性溶媒、好ましくは水中で、０℃〜室温、好ましくは約０℃で行われる。α−アジド酸１０８を水素化すると、β−メチル（Ｎｉｎ−Ｍｅｓ）トリプトファンが得られ、これは、ただちに対応するＮ（α）−Ｆｍｏｃ−β−メチル（Ｎｉｎ−Ｍｅｓ）トリプトファン１０９に転換される。１０８の水素化は、貴金属触媒、好ましくは１０％Ｐｄ／Ｃを用いて、不活性溶媒、例えば低級アルカノール、好ましくはメタノール中、低圧（＜２気圧）と室温で行う。濾過により触媒を除去した後、揮発成分を除去し、生成物を不活性溶媒、例えばテトラヒドロフランまたは水、好ましくはこれらの混合物中に溶解し、穏やかな無機塩基、例えばアルカリ金属重炭酸塩、好ましくは重炭酸ナトリウム、およびＦｍｏｃ Ｎ−保護基形成試薬、例えば、９−フルオレニルメチルクロロホルメート（Ｆｍｏｃ−Ｃｌ）または９−フルオレニルメチル−Ｎ−スクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−Ｏｓｕ）、好ましくはＦｍｏｃ−Ｏｓｕで処理して１０９を得る。反応は、０℃〜室温、好ましくはほぼ室温で行うのが好都合である。式１０９で示される化合物は、反応スキームＡにおける構造５のアミノ酸の種である。
【０２１６】
本発明は、前駆体線状ペプチドのＺ位にラクラム結合またはジスルフィド結合を形成することにより、下記式で示される化合物を調製するプロセスにも関する。
【０２１７】
【化９４】

【０２１８】
（式中、Ｒ¹〜Ｒ¹²，ｍ，ｐ，Ｑ，Ｘ，ＹおよびＺは、前述に定義されたとおりである）。
【０２１９】
薬学的組成物
本発明は、先に定義した化合物、および治療に不活性なキャリアを含んでなる薬学的組成物にも関する。
【０２２０】
式ＩおよびＩＩで示される化合物、ならびに本発明により調製されたペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂およびペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２Ｓ，３Ｓ）βメチル−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂は、当技術分野において知られている方法により、適切なキャリアまたはビヒクルと一緒に投与し、または吸入させるのに適した薬学的組成物中で調製することができる。
【０２２１】
前述の化合物は、例えば非経口投与用の薬剤として、例えば薬学的製剤の状態で用いることができる。これらは、例えば非経口的に、例えば注射溶液または輸液溶液として投与することができる。
【０２２２】
薬学的製剤の製造は、当業者に周知の方法において、前述の化合物を、場合により他の治療価値のある物質と組み合わせて、適切な非毒性の不活性な治療適合性固体または液体キャリア材料、および所望であれば薬学的アジュバントと一緒に投与する形にして、実施することができる。
【０２２３】
適切なキャリア材料は、無機キャリア材料のみならず、有機キャリア物質もある。
【０２２４】
通常の安定化剤、防腐剤、湿潤および乳化剤、稠度向上剤、風味向上剤、浸透圧を変化させるための塩、緩衝物質、可溶化剤、着色剤およびマスキング剤ならびに酸化防止剤が、薬学的アジュバントとして考えられる。
【０２２５】
前述の化合物の投与量は、制御すべき疾患、患者の年齢および個々の症状、ならびに投与方法に依存して、広い限定内で変化させることができ、もちろん、それぞれの特定の場合の個々の要求に合わせられる。成人患者には、約１mg〜約１，０００mg、特に約１０mg〜約５００mgの日用量が考えられる。投与量に依存して、日用量を複数の投与単位に分けて投与することが好都合である。
【０２２６】
薬学的製剤は、前述の化合物を、約１〜５００mg、好ましくは５〜２００mg含むことが好都合である。
【０２２７】
肥満の処置
本発明により調製される化合物は、インビトロで選択的にＭＣ−４受容体作動活性を示す。ＭＣ４−Ｒ活性の作動薬は、ヒト肥満のマウスモデルにおいて食物摂取の低下を引き起こすことが知られている。したがって、これらの化合物を投与すると、体重の制御に重要なＭＣ４−Ｒ活性を作動する。本発明の化合物を含む薬学的組成物は、望ましくない程上昇した体重を有するヒトまたは動物患者に、種々の方法で、単独で、またはＩＩ型糖尿病のような、望ましくない医学的症状もしくは疾患の一部として投与するのに効果的な強さで調製することができる。種々の投与技術を用いることができる。活性化合物の平均量は変化することができ、特に、権威のある医者または獣医の薦めおよび処方に基づくべきである。
【０２２８】
したがって、本発明は、メラノコルチン−４−受容体活性に関連する疾患の治療および／または予防のための薬剤の調製のための、前述の化合物の使用にも関する。さらに、本発明は、メラノコルチン−４−受容体活性に関連する疾患の治療および／または予防のための方法であって、前述の化合物をヒトまたは動物に投与することを含んでなる方法に関する。本化合物は、特に肥満の治療および／または予防のために有用である。本発明は、また、前述のようなプロセスにより製造されたときの、前記化合物にも関する。さらに、本発明は、治療活性物質としての、特に、メラノコルチン−４−受容体に関わる疾患、例えば、肥満の治療および／または予防用の治療用活性物質としての前述の化合物の使用に関する。
【０２２９】
実施例
本発明は、以下の実施例により、より良く理解される。ここで記載する実施例は、本発明を説明するが、制限するものではない。実施例セクションで現される特定の化合物の構造において、水素は通常、便宜上省略する。
【０２３０】
実施例１
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−フェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ）の調製
【０２３１】
工程１：
【０２３２】
【化９５】

【０２３３】
ガラス耐圧瓶中の、４−フェニルシクロヘキサノン（１０．０ｇ、５７．５mmol）のエタノール（１００mL）と水（３３mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（３３ｇ、３４４mmol、６当量）およびシアン化カリウム（５．６ｇ、８６．２mmol、１．５当量）を添加した。混合物を、８０〜９０℃で２４時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に加え、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を、吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥して、ヒダントインＡを白色固体として得た（１４．０ｇ、収率１００％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：８．６３（ｓ，１Ｈ），７．２３〜７．３６（ｍ，４），７．１５（ｍ，１），２．５０（ｍ，１Ｈ），２．１０（ｍ，１Ｈ），１．８５（ｄ，１Ｈ）および１．５５〜１．８０（ｍ，６Ｈ）。
【０２３４】
工程２：
【０２３５】
【化９６】

【０２３６】
ヒダントインＡ（１０．０ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６Ｎ、３５０mL）中に懸濁させ、１３０℃で２〜３日加熱した。加水分解が完了したとき、反応混合物を濃ＨＣｌで中和して、僅かに酸性（ｐＨ約６）にした。得られたスラリーを、濾過し、水洗し、乾燥して、１−アミノ−４−フェニルシクロヘキサンカルボン酸（ＡＰＣ）を白色固体として得て（２５ｇ、収率＞１００％、無機塩が混入）、それを次の工程に直接用いた。少量の粗生成物を、ＨＰＬＣで精製した。
【０２３７】
【表１０】

【０２３８】
工程３：
【０２３９】
【化９７】

【０２４０】
直前の工程からの粗１−アミノ−４−フェニルシクロヘキサンカルボン酸（ＡＰＣ）（２５ｇ）をジオキサン（３００mL）および１０％Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（１５０ml）中に懸濁し、一夜激しく撹拌した。反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６Ｎ ＨＣｌで中和して僅かに酸性（ｐＨ５〜６）にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得、これを次にフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により精製して、純Ｆｍｏｃ−シス−ＡＰＣ（１８．２ｇ、２工程についての合計収率７２％）およびＦｍｏｃ−トランス−ＡＰＣ（２．１ｇ、８％）を得た。
【０２４１】
【表１１】

【０２４２】
実施例２
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
【０２４３】
工程１：
【０２４４】
【化９８】

【０２４５】
４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサノン（５．０ｇ、２６．３mmol）のアセトン（１００mL）溶液を、Ｋ₂ＣＯ₃（１４．５ｇ、１０５mmol、４当量）およびヨードエタン（４．９mL、１１．２ｇ、７８．６mmol、３当量）で処理した。反応液を６５℃で一夜加熱した。溶媒を除去した後、残渣をＨ₂Ｏで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して分光分析的に純粋な４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサノン（５．３４ｇ、１００％）を得た。
【０２４６】
【表１２】

【０２４７】
工程２：
【０２４８】
【化９９】

【０２４９】
ガラス耐圧瓶中の、４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサン（３．８６ｇ、１８．９mmol）のエタノール（５０mL）と水（１５mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（１４．５ｇ、１５１mmol、８当量）およびシアン化カリウム（２．０ｇ、３０．７mmol、１．６当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で２４時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥してヒダントインＢを白色固体として得た（４．７５ｇ、収率９１％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２７３（Ｍ−Ｈ）、Ｃ₁₅Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₃についての計算値：２７４。
【０２５０】
工程３：
【０２５１】
【化１００】

【０２５２】
ヒダントインＢ（１８．７ｇ、６８．２５mmol）の無水ＴＨＦ（４５０mL）中の懸濁液に、重炭酸ジ−tert−ブチル（３７．２ｇ、１７０．５mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（１０．５mL、７．５９ｇ、７５．０mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（４６０mg、３．６５mmol）を順次添加した。添加から約１５分後、反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固体を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（８００mL）に取り込み、１Ｎ ＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（２×５０mL）およびブライン（２×５０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＣを白色固体として得た（２７．６ｇ、８７％）。
【０２５３】
【表１３】

【０２５４】
工程４：
【０２５５】
【化１０１】

【０２５６】
ビス−ＢｏｃヒダントインＣ（１５．０８ｇ、３１．７８mmol）をＤＭＥ（５００ml）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ（２９０ml、２９０mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、僅かに曇った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた１−アミノ−４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＭｅＯＡＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを加えてｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（約３００mL）に、ＤＭＥ（３００mL）、およびＦｍｏｃ−ＯＳｕ（１６．７ｇ、４９．４２mmol）のＤＭＥ（２００mL）溶液を添加し、反応液を室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、３Ｎ ＨＣｌで酸性にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）で精製して、粗生成物Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＯＡＰＣを白色固体として得た（１２．４ｇ、ビス−ＢｏｃヒダントインＣからの収率８３％）。
【０２５７】
【表１４】

【０２５８】
実施例３
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−エトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＥｔＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
【０２５９】
工程１
【０２６０】
【化１０２】

【０２６１】
４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサノン（５．０ｇ、２６．３mmol）のアセトン（１００mL）溶液に、Ｋ₂ＣＯ₃（１４．５ｇ、１０５mmol、４当量）およびヨードエタン（１０．５mL、２０．５ｇ、１３１mmol、５当量）を添加した。反応液を６５℃で一夜加熱した。溶媒を除去後、残渣をＨ₂Ｏで処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して、分光分析的に純粋な４−（４−エトキシフェニル）シクロヘキサノン（５．７４ｇ、１００％）を得た。
【０２６２】
【表１５】

【０２６３】
工程２：
【０２６４】
【化１０３】

【０２６５】
ガラス耐圧瓶中の、４−（４−エトキシフェニル）シクロヘキサノン（４．１５ｇ、１９．０１mmol）のエタノール（５０mL）と水（１５mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（１４．５ｇ、１５１mmol、８当量）およびシアン化カリウム（２．０５ｇ、３１．４２mmol、１．６当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１９時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥して、ヒダントインＤを白色固体として得た（５．１７ｇ、収率９４％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２８７（Ｍ−Ｈ）、Ｃ₁₆Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₃についての計算値：２８８。
【０２６６】
工程３：
【０２６７】
【化１０４】

【０２６８】
ヒダントインＤ（４．２２ｇ、１４．６５mmol）の無水ＴＨＦ（１００mL）中の懸濁液に、重炭酸ジ−tert−ブチル（７．９８ｇ、３６．６０mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（２．３mL、１．６３ｇ、１６．１１mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（８９．４mg、０．７３mmol）を順次添加した。添加から約１５分後、反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固体を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り込み、１Ｎ ＨＣｌ（３×２０mL）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（２×２０mL）およびブライン（２×２０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＥを白色固体として得た（７．０１ｇ、９８％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．２７（ｄｔ，２Ｈ），６．８７（ｄｔ，２Ｈ），４．０２（ｑ，２Ｈ），１．５９，（ｓ，９Ｈ）１．４３（ｔ，３Ｈ）および１．３８（ｓ，９Ｈ）；ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ９９９（２Ｍ＋Ｎａ）⁺、Ｃ₂₆Ｈ₃₆Ｎ₂Ｏ₇についての計算値：４８８。
【０２６９】
工程４：
【０２７０】
【化１０５】

【０２７１】
ビス−ＢｏｃヒダントインＥ（６．５８ｇ、１３．４６mmol）をＤＭＥ（２００mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ（１２１mL、１２１mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、僅かに曇った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた１−アミノ−４−（４−メトキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＥｔＯＡＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを加えて、ｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（約１３０mL）に、ＤＭＥ（１００mL）、およびＦｍｏｃ−ＯＳｕ（６．８３ｇ、２０．２４mmol）のＤＭＥ（３０mL）溶液を添加し、反応液を室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、３Ｎ ＨＣｌで酸性にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）で精製して、純生成物Ｆｍｏｃ−４−ＥｔＯＡＰＣを白色固体として得た（５．５６ｇ、ビス−ＢｏｃヒダントインＥからの収率８５％）。
【０２７２】
【表１６】

【０２７３】
実施例４
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＨＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
【０２７４】
工程１：
【０２７５】
【化１０６】

【０２７６】
ガラス耐圧瓶中の、４−（４−エトキシフェニル）シクロヘキサノン（２．００ｇ、１０．５２mmol）のエタノール（３０mL）と水（１０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（６．１７ｇ、６４．２mmol、６当量）およびシアン化カリウム（１．０７ｇ、１５．８mmol、１．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で一夜加熱した。冷却した反応混合物を氷水（２００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥して、ヒダントインＦを白色固体として得た（２．５６ｇ、収率９４％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２６１（Ｍ＋Ｈ）⁺、Ｃ₁₄Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₃についての計算値：２６０。
【０２７７】
工程２：
【０２７８】
【化１０７】

【０２７９】
ヒダントインＦ（２．１０ｇ、８．０６mmol）をＮａＯＨ水溶液（６Ｎ、１００mL）中に懸濁させ、１３０℃で２〜３日加熱した。加水分解が完了したとき、反応混合物を濃ＨＣｌで中和して、僅かに酸性（ｐＨ約６）にした。得られたスラリーを濾過し、水洗し、乾燥して１−アミノ−４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＨＯＡＰＣ）を白色固体として得た（３．１ｇ、収率＞１００％、無機塩が混入）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２３６（Ｍ＋Ｈ）⁺、Ｃ₁₃Ｈ₁₇ＮＯ₃についての計算値：２３５。
【０２８０】
工程３：
【０２８１】
【化１０８】

【０２８２】
直前の工程からの粗１−アミノ−４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＨＯＡＰＣ）（３．１ｇ）を、ジオキサン（１００mL）と１０％Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（５０ml）中に懸濁し、一夜激しく撹拌した。反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６Ｎ ＨＣｌで中和して、僅かに酸性（ｐＨ５〜６）にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得て、これを次にフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により精製して、純Ｆｍｏｃ−４−ＨｏＡＰＣ（２．７６ｇ、２工程についての合計収率：７５％）を得た。
【０２８３】
【表１７】

【０２８４】
実施例５
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−イソプロポキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ｉＰｒＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
【０２８５】
工程１：
【０２８６】
【化１０９】

【０２８７】
４−（４−ヒドロキシフェニル）シクロヘキサノン（６．０ｇ、３１．６mmol）のＤＭＦ（９０mL）溶液に、Ｋ₂ＣＯ₃（２１ｇ、１５８mmol、５当量）および２−ヨードプロパン（１５mL、２６．８ｇ、１５８mmol、５当量）を添加した。反応液を１００℃で一夜加熱した。溶媒を除去した後、残渣にＨ₂Ｏを加え、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を合わせ、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して、分光分析的に純粋な４−（４−イソプロポキシフェニル）シクロヘキサノン（７．０２ｇ、９５％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．１４（ｄｔ，２Ｈ），６．８４（ｄｔ，２Ｈ），４．３（七重線，１Ｈ），２．９７（ｔｔ，１Ｈ），２．４６〜２．５２（ｍ，４Ｈ），２．１６〜２．２４（ｍ，２Ｈ），１．８３〜１．９８（ｍ，２Ｈ）および１．３３（ｄ，６Ｈ）。
【０２８８】
工程２：
【０２８９】
【化１１０】

【０２９０】
ガラス耐圧瓶中の、４−（４−イソプロポキシフェニル）シクロヘキサノン（５．１ｇ、２１．９８mmol）のエタノール（９０mL）と水（３０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（１２．６ｇ、１３１mmol、６当量）およびシアン化カリウム（２．１４ｇ、３２．９mmol、１．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で２４時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥して、ヒダントインＧを白色固体として得た（６．６０ｇ、収率９９％）。
【０２９１】
【表１８】

【０２９２】
工程３：
【０２９３】
【化１１１】

【０２９４】
ヒダントインＧ（５．８ｇ、１９．２０mmol）の無水ＴＨＦ（１８０mL）中の懸濁液に、重炭酸ジ−tert−ブチル（１０．４６ｇ、４８．０mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（２．９mL、２．１３ｇ、２１．１２mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（１４０mg、１．１５mmol）を順次添加した。添加から約１５分後、反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（６００mL）に取り込み、１Ｎ ＨＣｌ（３×４０mL）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（２×４０mL）およびブライン（２×４０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。粗淡黄色生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＨを白色固体として得た（９．４ｇ、９８％）。
【０２９５】
【表１９】

【０２９６】
工程４：
【０２９７】
【化１１２】

【０２９８】
ビス−ＢｏｃヒダントインＨ（４．３４ｇ、８．６４mmol）をＤＭＥ（１００mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に１Ｎ ＮａＯＨ（７８mL、７８mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、かなり透明な混合物を得た。ＨＰＬＣは、反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた１−アミノ−４−（４−イソプロポキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ｉＰｒＯＡＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを加えて、ｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（約９mL）に、ＤＭＥ（１２０mL）、およびＦｍｏｃ−ＯＳｕ（３．４９ｇ、１０．３４mmol、１．２当量）のＤＭＥ（２０mL）溶液を添加し、反応液を室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、３Ｎ ＨＣｌで酸性にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）で精製して、粗生成物Ｆｍｏｃ−４−ｉＰｒＯＡＰＣを白色固体として得た（３．２３ｇ、ビス−ＢｏｃヒダントインＨからの収率７５％）。
【０２９９】
【表２０】

【０３００】
実施例６
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−メチルフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｃ−ＯＨ）の調製
【０３０１】
工程１：
【０３０２】
【化１１３】

【０３０３】
４−ヨードトルエン（１０．９ｇ、５０．０mmol）の無水ＴＨＦ（１８０mL）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍ、３１．０mL、５０mmol）のヘキサン溶液を、−７８℃で２０分間かけて添加した。反応液をさらに２０分間撹拌してから、１，４−シクロヘキサンジオンモノエチレンケタール（６．０ｇ、３８．４６mmol）の無水ＴＨＦ（１００mL）溶液を滴下した。−７８℃で２時間撹拌後、反応液をＮＨ₄Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して分光分析的に純粋な生成物Ｉを白色固体として得た（９．３４ｇ、収率９８％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．４１（ｍ，２Ｈ），７．１６（ｄ，２Ｈ），３．９８（ｍ，４Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ ２４８（Ｍ⁺），Ｃ₁₅Ｈ₂₀Ｏ₃についての計算値：２４８。
【０３０４】
工程２：
【０３０５】
【化１１４】

【０３０６】
ディーンシュタルクトラップを設けたフラスコ中の、アルコールＩ（９．１０ｇ、３６．６５mmol）の乾燥ベンゼン（２００mL）溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（６５０mg）を添加し、反応液を１００℃で３時間加熱した。反応液を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（５００mL）で希釈し、Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（５０mL）およびブライン（３×５０mL）で洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して、分光分析的に純粋な生成物Ｊ（８．３６ｇ、収率１００％）を得て、これを精製することなく次の工程に用いた。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ ２３０（Ｍ⁺）、１９０（Ｍ−ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）、Ｃ₁₅Ｈ₁₈Ｏ₂についての計算値：２３０。
【０３０７】
工程３：
【０３０８】
【化１１５】

【０３０９】
オレフィンＪ（７．４９ｇ）のＥｔＯＡｃ（１８０mL）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（炭素上５重量％、８００mg）を添加し、反応を４０psiの水素雰囲気下に室温で３時間行った。触媒を濾去し、濾液を濃縮して、分光分析的に純粋な生成物Ｋを無色油状物として得た（７．４０ｇ、収率１００％）。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ ２３２（Ｍ⁺）、１８８（Ｍ−ＯＣＨ₂ＣＨ₂）、Ｃ₁₅Ｈ₂₀Ｏ₂についての計算値：２３２。
【０３１０】
工程４：
【０３１１】
【化１１６】

【０３１２】
ケタールＫ（６．９０ｇ）のアセトン（１４０mL）溶液に、４Ｎ ＨＣｌ（６０mL）を添加し、６５℃で４時間加熱した。溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、４Ｎ ＨＣｌで中和した。水溶液をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、乾燥し、濃縮した。得られた粗４−（４−メチルフェニル）シクロヘキサンを、精製することなく次の工程に用いた（５．５７ｇ、定量的収率）。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ １８８（Ｍ⁺）、Ｃ₁₃Ｈ₁₆Ｏについての計算値：１８８。
【０３１３】
工程５：
【０３１４】
【化１１７】

【０３１５】
ガラス耐圧瓶中の、４−（４−メチルフェニル）シクロヘキサノン（５．３２ｇ、２８．３mmol）のエタノール（９０mL）と水（３０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（１６．３ｇ、１６９．８mmol、６当量）およびシアン化カリウム（３．６８ｇ、５６．５mmol、２当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で一夜加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥して、ヒダントインＬを白色固体として得た（６．３ｇ、収率８６％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ５１７（２Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₅Ｈ₁₈ＣｌＮ₂Ｏ₂についての計算値：２５８。
【０３１６】
工程６：
【０３１７】
【化１１８】

【０３１８】
ヒダントインＬ（５．８２ｇ、２２．５５mmol）の無水ＴＨＦ（２５０mL）中の懸濁液に、重炭酸ジ−tert−ブチル（１２．３ｇ、５６．４mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（３．５mL、２．５ｇ、２４．７mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（２７５mg、２．２５mmol）を順次添加した。反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（５００mL）に取り込み、１Ｎ ＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（２×５０mL）およびブライン（２×５０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＭを白色固体として得た（１０．０３ｇ、収率１００％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．２６（ｄ，２Ｈ），６．８７（ｄ，２Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｓ，３Ｈ），１．５９（ｓ，９Ｈ）および１．３７（ｓ，９Ｈ）。
【０３１９】
工程７：
【０３２０】
【化１１９】

【０３２１】
ビス−ＢｏｃヒダントインＭ（６．４０ｇ、１３．９７mmol）をＤＭＥ（２００mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ（１２０mL、１２０mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、僅かに曇った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた１−アミノ−４−（４−メチルフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＭｅＡＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを加えて、ｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（約１４０mL）に、ＤＭＥ（２４０mL）、およびＦｍｏｃ−Ｏｓｕ（５．１０ｇ、１５．１３mmol、１．１当量）のＤＭＥ（４０mL）溶液を添加し、反応液を室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、３Ｎ ＨＣｌで酸性にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）で精製して、純生成物Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡＰＣを白色固体として得た（４．３５ｇ、ビス−ＢｏｃヒダントインＭからの収率６９％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：７．８８（ｄ，２Ｈ），７．７５（ｄ，２Ｈ），７．２４〜７．４３（ｍ，４Ｈ），７．０２〜７．１４（ｍ，４Ｈ），４．２５（ｍ，３Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ）。
【０３２２】
実施例７
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（４−クロロフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｃ−ＯＨ）の調製
【０３２３】
【化１２０】

【０３２４】
工程１：
【０３２５】
４−クロロフェニルブロミド（７．５ｇ、３９．２mmol）の無水ＴＨＦ（１８０mL）溶液を−７８℃に冷却し、ｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍ、２５mL、４０mmol）のヘキサン溶液を、２０分間かけて滴下した。反応液をさらに３０分間撹拌してから、１，４−シクロヘキサンジオンモノエチレンケタール（６．０ｇ、３８．４６mmol）の無水ＴＨＦ（１００mL）溶液を滴下した。−７８℃で１時間撹拌し、反応液をＮＨ₄Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して、分光分析的に純粋な生成物Ｎを白色固体として得た（９．４０ｇ、収率９１％）。
【０３２６】
【表２１】

【０３２７】
工程２：
【０３２８】
【化１２１】

【０３２９】
ディーンシュタルクトラップを設けたフラスコ中の、アルコールＮ（６．７８ｇ、２５．３０mmol）の乾燥ベンゼン（１２０mL）溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（９６０mg）を添加し、反応液を還流下に３時間加熱した。反応液を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ（５００mL）で希釈し、Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（５０mL）およびブライン（３×５０mL）で洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して分光分析的に純粋な生成物Ｏ（６．３０ｇ、収率１００％）を得て、これを精製することなく次の工程に用いた。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ ２５０（Ｍ⁺）、１９０（Ｍ−ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₅ＣｌＯ₂についての計算値：２５０。
【０３３０】
工程３：
【０３３１】
【化１２２】

【０３３２】
オレフィンＯ（６．１１ｇ）のＥｔＯＡｃ（１２０mL）溶液に、Ｐｄ／Ｃ（炭素上５重量％、６００mg）を添加し、反応を５psiの水素雰囲気下に室温で３時間行った。触媒を濾去し、濾液を濃縮して、分光分析的に純粋な生成物Ｐを無色油状物（６．１０ｇ、収率１００％）として得た。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ ２５２（Ｍ⁺）、Ｃ₁₄Ｈ₁₇ＣｌＯ₂についての計算値：２５２。
【０３３３】
工程４：
【０３３４】
【化１２３】

【０３３５】
ケタールＰ（５．８１ｇ、２３．０６mmol）のアセトン（２００mL）溶液に、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（８７６mg）を添加し、６０℃で一夜加熱した。溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃに取り込み、Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液およびブラインで洗い、乾燥し、濃縮して、粗生成物を黄色油状物（５．３８ｇ、収率＞１００％）として得た。フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８０／２０→６０／４０）により精製して、４−（４−クロロフェニル）シクロヘキサノンを淡黄色油状物（４．５４ｇ、収率９５％）として得た。ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ ２０８（Ｍ⁺）、Ｃ₁₂Ｈ₁₃ＣｌＯ₂についての計算値：２０８。
【０３３６】
工程５：
【０３３７】
【化１２４】

【０３３８】
ガラス耐圧瓶中の、４−（４−クロロフェニル）シクロヘキサノン（４．２６ｇ、２０．４８mmol）のエタノール（９０mL）と水（３０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（１３．８ｇ、１４４mmol、７当量）およびシアン化カリウム（３．５６ｇ、５４．７７mmol、２．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で一夜加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥して、ヒダントインＱを白色固体として得た（５．５８ｇ、収率９８％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２７７（Ｍ−Ｈ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₅ＣｌＮ₂Ｏ₂についての計算値：２７８
【０３３９】
工程６：
【０３４０】
【化１２５】

【０３４１】
ヒダントインＱ（５．１５ｇ、１８．５mmol）の無水ＴＨＦ（２５０mL）中の懸濁液に、重炭酸ジ−tert−ブチル（１０．１ｇ、４６．３mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（２．８mL、２．０７ｇ、２０．４５mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（２２６mg、１．８５mmol）を順次添加した。反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（５００mL）に取り込み、１Ｎ ＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（２×５０mL）およびブライン（２×５０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＲを白色固体として得た（８．０５ｇ、収率９１％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ５４２（Ｍ＋Ｍａ＋ＭｅＣＮ）、Ｃ₂₄Ｈ₃₁ＣｌＮ₂Ｏ₆についての計算値：４７８。
【０３４２】
工程７：
【０３４３】
【化１２６】

【０３４４】
ビス−ＢｏｃヒダントインＲ（６．４１ｇ、１３．９７mmol）をＤＭＥ（２００mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ（１２０mL、１２０mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、僅かに曇った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた１−アミノ−４−（４−クロロフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（４−ＣｌＡＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを加えて、ｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（約１８０mL）に、ＤＭＥ（２４０mL）、およびＦｍｏｃ−Ｏｓｕ（５．３１ｇ、１５．７４mmol、１．１当量）のＤＭＥ（３０mL）溶液を添加し、反応液を室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、３Ｎ ＨＣｌで酸性にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）で精製して、純生成物Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡＰＣを白色固体として得た（５．０４ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率７６％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：７．８８（ｄ，２Ｈ），７．７４（ｄ，２Ｈ），７．１９〜７．４２（ｍ，８Ｈ），４．２０〜４．３１（ｍ，３Ｈ）；ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ４７４（Ｍ−Ｈ）、Ｃ₂₈Ｈ₂₆ＣｌＮＯ₄についての計算値：４７５。
【０３４５】
実施例８
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−（３−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｃ−ＯＨ）の調製
【０３４６】
工程１：
【０３４７】
【化１２７】

【０３４８】
３−ヨードアニソール（１１．７ｇ、５０．０mmol、１．３当量）の無水ＴＨＦ（１８０mL）溶液に、ｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍ、３１．０mL、５０mmol、１．３当量）のヘキサン溶液を、−７８℃で２５分間かけて添加した。反応液をさらに３０分間撹拌してから、１，４−シクロヘキサンジオンモノエチレンケタール（６．０ｇ、３８．４６mmol）の無水ＴＨＦ（１００mL）溶液を滴下した。−７８℃で２時間撹拌後、反応液をＮＨ₄Ｃｌ水溶液でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して、分光分析的に純粋な生成物Ｓを白色固体として得た（９．３４ｇ、収率９８％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．２６（ｄｄ，１Ｈ），７．０６〜７．１１（ｍ，２Ｈ），６．７９（ｄｄ，１Ｈ），３．９８（ｍ，４Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ）。
【０３４９】
工程２：
【０３５０】
【化１２８】

【０３５１】
窒素雰囲気下の、アルコールＳ（５．６ｇ、２１．２１mmol）の撹拌しつつある無水ＣＨ₂Ｃｌ₂（２００mL）溶液に、塩−氷浴温度で、トリエチルシラン（１０．２mL、７．４ｇ、６３．６３mmol、３当量）および三フッ化ホウ素エーテラート（２１．５mL、２４．１ｇ、１６９．７mmol、８当量）を順次添加した。次に反応混合物を室温まで暖め、３時間撹拌してから、１０％Ｋ₂ＣＯ₃水溶液およびＨ₂Ｏで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮して、脱酸素化合物を油状物（４．９１ｇ）として得た。これは直接用いるのに充分な純度であった。この粗中間体をアセトン（１３０mL）に溶解し、４Ｎ ＨＣｌ（６０mL）を添加し、６５℃で４時間加熱した。溶媒を減圧下に除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、４Ｎ ＮａＯＨ溶液で中和した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、乾燥し、濃縮した。得られた残渣をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（８０／２０→６０／４０）で精製して、４−（３−メトキシフェニル）シクロヘキサノン（３．６７ｇ、全収率８５％）を黄色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．２５（ｄｔ，１Ｈ），６．７５〜６．８６（ｍ，３Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．００（ｔｔ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＩ）ｍ／ｅ ２０４（Ｍ＋）、Ｃ₁₃Ｈ₁₆Ｏ₂についての計算値：２０４。
【０３５２】
工程３：
【０３５３】
【化１２９】

【０３５４】
ガラス耐圧瓶中の、４−（３−メトキシフェニル）シクロヘキサノン（３．１０ｇ、１５．２０mmol）のエタノール（６０mL）と水（２０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（８．７５ｇ、９１．２０mmol、６当量）およびシアン化カリウム（１．９８ｇ、３０．４０mmol、２当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で一夜加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で充分に洗い、乾燥して、ヒダントインＴを白色固体として得た（４．０８ｇ、収率９８％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：７．１１（ｄ，１Ｈ），６．７０〜６．９４（ｍ，３Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ３１６（Ｍ＋ＭｅＣＮ＋Ｈ）、Ｃ₁₅Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₃についての計算値：２７４。
【０３５５】
工程４：
【０３５６】
【化１３０】

【０３５７】
ヒダントインＴ（５．２９ｇ、１９．３０mmol）の無水ＴＨＦ（２５０mL）懸濁液に、重炭酸ジ−tert−ブチル（１０．５ｇ、４８．１６mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（３．０mL、２．１７ｇ、２１．５２mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（２３５mg、１．９２mmol）を順次添加した。反応液は、透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（５００mL）に取り込み、１Ｎ ＨＣｌ（３×５０mL）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（２×５０mL）およびブライン（２×５０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８０／２０→６０／４０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＵを白色固体として得た（８．７０ｇ、収率９５％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ５３８（Ｍ＋ＭｅＣＮ＋Ｎａ）、Ｃ₂₅Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₇についての計算値：４７４。
【０３５８】
工程５：
【０３５９】
【化１３１】

【０３６０】
ビス−ＢｏｃヒダントインＵ（２．３０ｇ、４．８４mmol）をＤＭＥ（８０mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ（４４ml、４４mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、僅かに曇った混合物を得た。ＨＰＬＣは反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた１−アミノ−４−（３−メトキシフェニル）シクロヘキサンカルボン酸（３−ＭｅＯＡＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを加えてｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（約４０mL）に、ジオキサン（８０mL）およびＦｍｏｃ−Ｃｌ（１．７３ｇ、６．７６mmol、１．４当量）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、３Ｎ ＨＣｌで酸性にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ、９８／２→９０／１０）で精製して、Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡＰＣを白色固体として得た（１．９８ｇ、ビス−ＢｏｃヒダントインＵからの収率８７％）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：７．８８（ｄ，２Ｈ），７．７５（ｄ，２Ｈ），７．４０（ｔｄ，２Ｈ），７．３０（ｔｄ，２Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），６．７１〜６．８０（ｍ，３Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ４９４（Ｍ＋Ｎａ）、Ｃ₂₉Ｈ₂₉ＮＯ₅についての計算値：４７１。
【０３６１】
実施例２９
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−ブロモ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−Ｂｒ−Ａｔｃ−ＯＨ）の調製
【０３６２】
工程１：
【０３６３】
【化１３２】

【０３６４】
３−（２−ブロモフェニル）プロピオン酸（２−ブロモベンジルブロミドから２工程で調製、２．０ｇ、８．７３mmol）、塩化オキサリル（１．１４ml、１３．１mmol）および塩化メチレン（２０ml）の混合物を氷浴中で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３４μL、０．４４mmol）を滴下した。混合物を室温で３時間撹拌した。減圧下に濃縮して、３−（２−ブロモフェニル）プロパノイルクロリドを得て、これを塩化メチレンに取り込み、粗生成物のままで次の工程に用いた。
【０３６５】
工程２：
【０３６６】
【化１３３】

【０３６７】
前記酸クロリド（粗生成物、８．７３mmol）の塩化メチレン溶液を、氷浴中で冷却したジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン５．７０ｇから得られた）のエーテル（４０ml）溶液に、ゆっくり添加した。次に、混合物を室温まで暖め、一夜撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１０→２０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（１．８８ｇ、２工程で８５％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．５０（１Ｈ，ｄ，フェニル），７．２４（２Ｈ，ｍ，フェニル），７．０６（１Ｈ，ｍ，フェニル），５．２１（１Ｈ，ブロードｓ，ジアゾ），３．０５（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．６２（２Ｈ，ｍ）。
【０３６８】
工程３：
【０３６９】
【化１３４】

【０３７０】
塩化メチレン（１２０ml）中の酢酸ロジウム（ＩＩ）二量体（１５mg、０．０６８mmol）の還流下の混合物に、１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（１．７４ｇ、６．８５mmol）の塩化メチレン（３０ml）溶液を添加した。添加完了後、混合物をさらに２０分間還流した。混合物を室温まで冷却し、トリフルオロ酢酸（１．５ml）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応液を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を、飽和重炭酸ナトリウム溶液でもう一度洗った。合わせた水層を、塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮して、褐色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（１０→１５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して５−ブロモ−β−テトラロン（１．１８ｇ、収率７７％）を無色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．４６（１Ｈ，ｔ，フェニル），７．０５〜７．０９（２Ｈ，ｍ，フェニル），３．５８（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），３．２２（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５４（２Ｈ，ｔ）。
【０３７１】
工程４：
【０３７２】
【化１３５】

【０３７３】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、５−ブロモ−β−テトラロン（１．１８ｇ、５．２４mmol）、シアン化カリウム（５１２mg、７．８６mmol）、炭酸アンモニウム（３．０ｇ、３１．２２mmol）、エタノール（２５ml）および水（５ml）の混合物を、８０℃の油浴中で４日間加熱した。室温まで冷却後、白色スラリーを氷水中に注ぎ、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、その後、風乾してヒダントインＶ（１．３１ｇ、８５％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１０．７１（１Ｈ，ブロード，ＮＨ），８．２８（１Ｈ，ブロードｓ，ＮＨ），７．０〜７．５（３Ｈ，ｍ，フェニル）。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₂Ｈ₁₁ＢｒＮ₂Ｏ₂についての計算値：２９４；実測値：２９３（Ｍ−Ｈ）、２９５（Ｍ−Ｈ）
【０３７４】
工程５：
【０３７５】
【化１３６】

【０３７６】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＶ（１．２８７ｇ、４．３６mmol）とＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（４．２０ｇ、２２．２mmol）の、水（２５ml）中に含む混合物を、１２５℃の油浴中で４日間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に、４Ｎ硫酸を用いて、ｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を、沸騰している水浴中で１時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約２０mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得て、これを濾過し、水で洗い、減圧下に一夜乾燥してラセミ５−ブロモ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（８９３mg、収率７６％）を得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ₁₁Ｈ₁₂ＢｒＮＯ₂についての計算値：２６９；実測値：２７０（Ｍ＋Ｈ）、２７２（Ｍ＋Ｈ）、２６８（Ｍ−Ｈ）、２７０（Ｍ−Ｈ）。
【０３７７】
工程６：
【０３７８】
【化１３７】

【０３７９】
ラセミ５−ブロモ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（８８２mg、３．２７mmol）、トリエチルアミン（０．６０ml、４．３０mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、１．３２ｇ、３．９１mmol）の、アセトニトリル（３０ml）および水（３０ml）中の混合物を、室温で一夜撹拌した。翌日、反応液をＴＬＣ分析すると、出発物質のアミノ酸の存在が示された。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（０．２５ｇ）、トリエチルアミン（０．６ml）およびアセトニトリル（５ml）を添加し、混合物を室温でさらに１日撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを塩化メチレンで２回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（２→５→１０％メタノール／塩化メチレンで溶離）によって精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−ブロモ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．０９ｇ、収率６８％）を白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₆Ｈ₂₂ＢｒＮＮａＯ₄（Ｍ＋Ｎａ）についての計算値：５１４．０６３０；実測値：５１４．０６４３。
【０３８０】
実施例１０
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−クロロ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＣｌＡｔｃ−ＯＨ）の調製
【０３８１】
工程１：
【０３８２】
【化１３８】

【０３８３】
３−（２−クロロフェニル）プロピオン酸（５．０ｇ、２７．１mmol）、塩化チオニル（１０．９ml、１４９mmol）およびトルエン（７５ml）の混合物を、２時間還流した。減圧下に濃縮して３−（２−クロロフェニル）プロパノイルクロリドを得、これを塩化メチレンに取り込み、さらに精製することなく次の工程に用いた。
【０３８４】
工程２：
【０３８５】
【化１３９】

【０３８６】
前記酸クロリド（粗生成物、２７．１mmol）の塩化メチレン溶液を、氷浴中で冷却された、ジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン１７．８ｇから得られた）のエーテル（１２０ml）溶液にゆっくり添加した。次に混合物を室温まで暖め、一夜撹拌した。混合物を減圧下に濃縮して、１−ジアゾ−４−（２−クロロフェニル）ブタン−２−オン（５．８７ｇ、２工程で＞１００％）を淡黄色油状物として得た。化合物をさらに精製することなく次の工程に用いた。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．０５〜７．３２（４Ｈ，ｍ，フェニル），５．１３（１Ｈ，ブロードｓ，ジアゾ），３．００（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５７（２Ｈ，ｍ）。
【０３８７】
工程３：
【０３８８】
【化１４０】

【０３８９】
酢酸ロジウム（ＩＩ）二量体（６０mg、０．２７mmol）の還流下の塩化メチレン（４００ml）中の混合物に、粗１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（５．８７ｇ、理論値２７．１mmol）の塩化メチレン（５０ml）溶液をゆっくり添加した。添加完了後、混合物をさらに２０分間還流した。混合物を室温まで冷却し、トリフルオロ酢酸（６．０ml）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応液を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を飽和重炭酸ナトリウム溶液でもう一度洗った。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮して、褐色油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（１０→１５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、５−ブロモ−β−テトラロン（３．３２ｇ、工程１〜３についての収率６８％）を淡褐色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．３０（１Ｈ，ｍ，フェニル），７．１５（１Ｈ，ｔ，フェニル），７．０５（１Ｈ，ｄ，フェニル），３．６０（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），３．２２（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５６（２Ｈ，ｔ）。
【０３９０】
工程４：
【０３９１】
【化１４１】

【０３９２】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、５−クロロ−β−テトラロン（８８０mg、４．８７mmol）、シアン化カリウム（５００mg、７．６７mmol）、炭酸アンモニウム（２．８５ｇ、２９．７mmol）、エタノール（２５ml）および水（５ml）の混合物を、８０℃の油浴中で６６時間加熱した。室温まで冷却後、スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて風乾して、ヒダントインＷ（０．９２ｇ、７５％）を淡ベージュ色固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１０．７０（１Ｈ，ブロード，ＮＨ），８．２５（１Ｈ，ブロードｓ，ＮＨ），７．０〜７．３（３Ｈ，ｍ，フェニル）。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ₁₂Ｈ₁₁ＣｌＮ₂Ｏ₂についての計算値：２５０；実測値：２４９（Ｍ−Ｈ），２５１（Ｍ−Ｈ）。
【０３９３】
工程５：
【０３９４】
【化１４２】

【０３９５】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＷ（８８０mg、３．５１mmol）とＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（３．４０ｇ、１８mmol）を水（５０ml、希釈用）中に含む混合物を、１２５℃の油浴中で２日間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を、沸騰している水浴中で２時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約５０mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得て、これを濾過し、水で洗い、減圧下に一夜乾燥して、ラセミ５−クロロ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（７８８mg、収率９９％）を得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ₁₁Ｈ₁₂ＣｌＮＯ₂についての計算値：２２５；実測値：２２６（Ｍ＋Ｈ）、２２８（Ｍ＋Ｈ）、２２４（Ｍ−Ｈ）、２２６（Ｍ−Ｈ）。
【０３９６】
工程６：
【０３９７】
【化１４３】

【０３９８】
ラセミ５−クロロ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（４０２mg、１．７８mmol）、トリエチルアミン（０．３８ml、２．７３mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、９０４mg、２．６８mmol）を、アセトニトリル（２０ml）と水（２０ml）中に含む混合物を、室温で２日間撹拌した。２日後、反応液をＴＬＣ分析すると、出発物質のアミノ酸の存在が示された。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（０．１２ｇ）およびトリエチルアミン（０．１ml）を添加し、混合物を室温でさらに１日撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（３→６→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−クロロ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（５４０mg、収率６８％）を白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＥＩ）：Ｃ₂₆Ｈ₂₂ＣｌＮＯ₄（Ｍ）についての計算値：４４７．１２３７；実測値：４４７．１２３４。
【０３９９】
実施例１１
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−メトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＭｅＡｔｃ−ＯＨ）の調製
【０４００】
工程１：
【０４０１】
【化１４４】

【０４０２】
ラセミ５−メトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｏｂｒｅｃｈｔ，Ｄ．ら、Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ Ａｃｔａ．１９９２年、第７５巻、１６６６頁に従って調製）（８０２mg、３．６２mmol）、トリエチルアミン（０．６２ml、４．４５mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、１．４７ｇ、４．３６mmol）を、アセトニトリル（２５ml）と水（２５ml）中に含む混合物を、室温で３０分間撹拌した。反応液をＴＬＣ分析すると、出発物質のアミノ酸の存在が示された。９−炭酸フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（３７９mg）およびトリエチルアミン（０．６ml）を添加し、混合物を室温でさらに２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（１→３→５→１０％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−メトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．１４ｇ、収率７１％）を、灰色がかった白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₇Ｈ₂₆ＮＯ₅（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４４７．１８１２；実測値：４４４．１８１４。
【０４０３】
実施例１２
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＥｔＡｔｃ−ＯＨ）の調製
【０４０４】
工程１：
【０４０５】
【化１４５】

【０４０６】
１，６−ジヒドロキシナフタレン（５．０２ｇ、３１．３mmol）、無水炭酸カリウム（５２．０ｇ、３７６mmol）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ml）およびヨードエタン（１５ml、１８８mmol）の混合物を、３５℃の油浴中で２４時間撹拌した。反応混合物を濾過し、固体残渣をエチルエーテルで完全に濯いだ。濾液と洗浄液を合わせ、減圧下に濃縮して溶媒の大部分を除去した。褐色残渣を水とエーテルとで分配し、層を分離した。エーテル層を水で洗った。合わせた水層をエーテルで逆抽出した。エーテル抽出物を合わせ、ブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して、未精製の褐色固体（６．７４ｇ、収率９９％）を得た。熱いメタノールから粗生成物を再結晶して、１，６−ジヒドロキシナフタレン（４．３６ｇ、収率６４％、第一の生成物）を淡褐色固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ８．２０（１Ｈ，ｄ，フェニル），７．０６〜７．３６（４Ｈ，ｍ，フェニル），６．６６（１Ｈ，ｄｄ，フェニル），４．１０〜４．２３（４Ｈ，２組のｑ、２ＣＨ₂），１．４５〜１．５６（６Ｈ，２組のｔ、２ＣＨ₃）。
【０４０７】
工程２：
【０４０８】
【化１４６】

【０４０９】
１，６−ジエトキシナフタレン（４．１５ｇ、１９．２mmol）の還流下の無水エタノール（１００ml）溶液に、ナトリウム金属の小片（６．８ｇ、２９６mmol）を６０分間かけて注意深く添加した。混合物をさらに９０分間還流した。ＴＬＣは、未反応の出発物質の存在を示した。さらなるナトリウム金属（１．０ｇ、４３．５mmol）を添加し、反応混合物をさらに６０分間還流した。反応液を室温まで冷却し、水でクエンチし、濃塩酸で酸性にした。混合物を減圧下に濃縮してエタノールの大部分を除去した。水性混合物をエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を、水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して褐色固体を得て、これを１：１エタノール／水（２００ml）に溶解し、次に、ｐ−トルエンスルホン酸（４００mg）を添加した。混合物を２１０分間還流した。さらなるｐ−トルエンスルホン酸（１００mg）を添加し、混合物をさらに６０分間還流した。室温まで冷却後、エタノールの大部分を減圧下に除去した。水性混合物をエーテルで３回抽出し、合わせた有機層を、水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して褐色油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（７％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、５−エトキシ−β−テトラロン（２．４３ｇ、収率６７％）を淡黄色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．１５（１Ｈ，ｔ，フェニル），６．７６（１Ｈ，ｄ，フェニル），６．７２（１Ｈ，ｄ，フェニル），４．０５（２Ｈ，ｑ，ＣＨ₂），３．５６（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），３．１０（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５３（２Ｈ，ｔ），１．４４（３Ｈ，ｔ，ＣＨ₃）。
【０４１０】
工程３：
【０４１１】
【化１４７】

【０４１２】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、５−エトキシ−β−テトラロン（２．２３ｇ、１１．７mmol）、シアン化カリウム（１．２０ｇ、１８．４mmol）、炭酸アンモニウム（６．７５ｇ、７０．２mmol）、エタノール（８０ml）および水（２０ml）の混合物を、８０℃の油浴中で３日間加熱した。室温まで冷却後、スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて風乾してヒダントインＸ（２．６９ｇ、８８％）をベージュ色固体として得た。
【０４１３】
【表２２】

【０４１４】
工程４：
【０４１５】
【化１４８】

【０４１６】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＸ（２．５７ｇ、９．８７mmol）とＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（９．４０ｇ、４９．６mmol）を水（２００ml、希釈兼用）中に含む混合物を、１０５℃の油浴中で３９時間加熱した。さらなるＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（９．４０ｇ、４９．６mmol）を添加し、混合物を１２５℃の油浴中でさらに２１時間過熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を、沸騰している水浴中で１時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を減圧下に約７５mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得て、これを濾過し、水で洗い、風乾して、ラセミ５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２．３４ｇ、定量的収率）を淡ベージュ色固体として得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ₁₃Ｈ₁₇ＮＯ₃についての計算値：２３５；実測値：２３６（Ｍ＋Ｈ）、２３４（Ｍ−Ｈ）。
【０４１７】
工程５：
【０４１８】
【化１４９】

【０４１９】
ラセミ５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２．２２ｇ、９．４４mmol）、トリエチルアミン（２．００ml、１４．３mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、４．８１ｇ、１４．３mmol）をアセトニトリル（７５ml）と水（７５ml）中に含む混合物を、室温で２日間撹拌した。反応液をＴＬＣ分析すると、出発物質のアミノ酸の存在が示された。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（６４５mg）およびトリエチルアミン（１．０ml）を添加し、混合物を室温でさらに１日撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（３→５→１０％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−エトキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（４．６６ｇ、＞定量的収量）を白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₈Ｈ₂₈ＮＯ₅（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４５８．１９６７；実測値：４５８．１９８５。
【０４２０】
実施例１３
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ｉＰｒＯＡｔｃ−ＯＨ）の調製
【０４２１】
工程１：
【０４２２】
【化１５０】

【０４２３】
６−メトキシ−１−テトラロン（５．０７ｇ、２８．８mmol）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３．５３ｇ、３．３２mmol）を乾燥ｐ−シメン（２５０ml）中に含む混合物を、アルゴン雰囲気下に３８時間加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却し、セライトで濾過し、残渣をｐ−シメンで完全に濯いだ。濾液と洗浄液を合わせ、１Ｎ塩化ナトリウム溶液（２×７０ml）で２回抽出した。合わせた水性抽出物を、６Ｎ塩酸でｐＨ約３まで酸性にし、エーテルで３回抽出した。合わせた有機層を水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮することにより、粗５−ヒドロキシ−６−メトキシナフタレン（２．３１ｇ、収率４６％）が淡褐色固体として得られ、これをさらに精製することなく次の工程に用いた。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ₁₁Ｈ₁₀Ｏ₂についての計算値：１７４；実測値：１７３（Ｍ−Ｈ）。
【０４２４】
工程２：
【０４２５】
【化１５１】

【０４２６】
５−ヒドロキシ−６−メトキシナフタレン（２．１０ｇ、１２．１mmol）、炭酸セシウム（１９．７ｇ、６０．５mmol）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２ml）および２−ブロモプロパン（３．５０ml、３６．９mmol）の混合物を、４０℃の油浴中で一夜撹拌した。反応混合物を濾過し、固体残渣をエチルエーテルで完全に濯いだ。濾液と洗浄液を合わせ、減圧下に濃縮して溶媒の大部分を除去した。褐色の残渣を水とエーテルとに分配し、層を分離した。エーテル層を水で洗った。合わせた水層をエーテルで逆抽出した。エーテル抽出物を合わせ、ブラインで洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（２．５→５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−イソプロポキシ−６−メトキシナフタレン（２．２３ｇ、収率８６％）を淡褐色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ８．１７（１Ｈ，ｄ，フェニル），７．０５〜７．３８（４Ｈ，ｍ，フェニル），６．７２（１Ｈ，ｄｄ，フェニル），４．７３（１Ｈ，ｍ，ｉＰｒのＣＨ），３．９２（３Ｈ，ｓ，ＯＣＨ₃），１．４２（６Ｈ，ｄ，ｉＰｒの２ＣＨ₃）。
【０４２７】
工程３：
【０４２８】
【化１５２】

【０４２９】
１−イソプロポキシ−６−メトキシナフタレン（２．２３ｇ、１０．３mmol）の還流下の無水エタノール（５０ml）溶液に、ナトリウム金属の小片（３．６ｇ、１５７mmol）を４５分間かけて注意深く添加した。混合物をさらに１２０分間還流した。反応液を室温まで冷却し、水でクエンチし、濃塩酸で酸性にした。混合物を減圧下に濃縮してエタノールの大部分を除去した。水性混合物をエーテルで３回抽出した。合わせた有機層を、水で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して赤色がかった油状物を得て、これを１：１エタノール／水（９０ml）に溶解し、次に、ｐ−トルエンスルホン酸（２００mg）を添加した。混合物を６０分間還流した。室温まで冷却後、エタノールの大部分を減圧下に除去した。水性混合物をエーテルで２回抽出し、合わせた有機層を、水および飽和塩化ナトリウム溶液で洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して赤色がかった油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（８→１５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−イソプロポキシ−β−テトラロン（１．３７ｇ、収率６５％）を無色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．１６（１Ｈ，ｔ，フェニル），６．７８（１Ｈ，ｄ，フェニル），６．７１（１Ｈ，ｄ，フェニル），４．５３（１Ｈ，ｍ，ｉＰｒのＣＨ），３．５６（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），３．０８（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５０（２Ｈ，ｔ），１．３７（６Ｈ，ｄ，ｉＰｒの２ＣＨ₃）。
【０４３０】
工程４：
【０４３１】
【化１５３】

【０４３２】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、５−イソプロポキシ−β−テトラロン（１．３７ｇ、６．７１mmol）、シアン化カリウム（６６０mg、１０．１mmol）、炭酸アンモニウム（３．８７ｇ、４０．３mmol）、エタノール（４４ml）および水（９ml）の混合物を、８０℃の油浴中で４２時間加熱した。室温まで冷却後、スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて風乾して、ヒダントインＹ（１．６４ｇ、８９％）を得た。
【０４３３】
工程５：
【０４３４】
【化１５４】

【０４３５】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＹ（１．６４ｇ、５．９８mmol）とＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（５．６６ｇ、２９．９mmol）を水（２５ml）中に含む混合物を、１００℃の油浴中で７０時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約７に中和した。懸濁液を沸騰している水浴中で１時間撹拌し、室温まで冷却した。１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で塩基性にし、白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約７５mlまで濃縮した。濃塩酸溶液で中和して、白色沈殿を得、これを濾過し、水で洗い、風乾してラセミ５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（３．４８ｇ、湿っていて無機塩を含む、＞定量的収率）を得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₄Ｈ₁₉ＮＯ₃についての計算値：２４９；実測値：２４８（Ｍ−Ｈ）。
【０４３６】
工程６：
【０４３７】
【化１５５】

【０４３８】
ラセミ５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（３．４８ｇ、理論値５．９８mmol）、トリエチルアミン（１．１０ml、７．８９mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．６２ｇ、７．７７mmol）を、アセトニトリル（３０ml）と水（３０ml）中に含む混合物を、室温で１日間撹拌した。反応液をＴＬＣ分析すると、出発物質のアミノ酸の存在が示された。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（５００mg）を添加し、混合物を室温でさらに１日撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを塩化メチレンで３回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（１→２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−イソプロポキシ−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（０．５０ｇ、２工程での収率１８％）を白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₉Ｈ₃₀ＮＯ₅（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４７２．２１２４；実測値：４７２．２１１７。
【０４３９】
実施例１４
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＭｅＡｔｃ−ＯＨ）の調製
【０４４０】
工程１：
【０４４１】
【化１５６】

【０４４２】
２−メチルヒドロケイ皮酸（３．０ｇ、１８．３mmol）、塩化オキサリル（３．１９ml、３６．６mmol）および塩化メチレン（３０ml）の混合物を氷浴中で冷却し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．１４ml、１．８１mmol）を滴下した。混合物を室温で一夜撹拌した。減圧下に濃縮して、３−（２−メチルフェニル）プロパノイルクロリドを得て、これを塩化メチレン中に取り込み、粗生成物として次の工程で用いた。
【０４４３】
工程２：
【０４４４】
【化１５７】

【０４４５】
前記酸クロリド（粗生成物、１８．３mmol）の塩化メチレン溶液を、ジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン１１．９ｇから得られた）の、氷浴中で冷却されたエーテル（８０ml）溶液にゆっくり添加した。次に混合物を室温まで暖め、一夜撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１０→２０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−ジアゾ−４−（２−メチルフェニル）ブタン−２−オン（２．０８ｇ、２工程で６０％）を、淡黄色油状物として得た。
【０４４６】
工程３：
【０４４７】
【化１５８】

【０４４８】
酢酸ロジウム（ＩＩ）二量体（２４mg、０．１０９mmol）を塩化メチレン（２００ml）中に含む還流下の混合物に、１−ジアゾ−４−（２−メチルフェニル）ブタン−２−オン（２．０８ｇ、１１．１mmol）の塩化メチレン（５０ml）溶液に、１８０分間かけてゆっくり添加した。添加完了後、混合物をさらに２０分間還流した。混合物を室温まで冷却し、トリフルオロ酢酸（２．４０ml）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応液を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を飽和重炭酸ナトリウム溶液でもう一度洗った。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮して褐色の粗油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（１５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−メチル−β−テトラロン（１．４８ｇ、収率８４％）を淡褐色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ６．９０〜７．２０（３Ｈ，ｍ，フェニル），３．５８（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），３．０３（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５５（２Ｈ，ｔ），２．３４（３Ｈ，ｓ，ＣＨ₃）。
【０４４９】
工程４：
【０４５０】
【化１５９】

【０４５１】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、５−メチル−β−テトラロン（１．４８ｇ、９．２４mmol）、シアン化カリウム（９０２mg、１３．９mmol）、炭酸アンモニウム（５．３３ｇ、５５．５mmol）、エタノール（４５ml）および水（９ml）の混合物を、８０℃の油浴中で３日間加熱した。室温まで冷却後、スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて風乾して、ヒダントインＺ（１．８１ｇ、収率８５％）をベージュ色固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１０．６６（１Ｈ，ブロード ｓ，ＮＨ），８．２２（１Ｈ，ブロードｓ，ＮＨ），６．８５〜７．０５（３Ｈ，ｍ，フェニル），２．１７（３Ｈ，ｓ，ＣＨ₃）。
【０４５２】
工程５：
【０４５３】
【化１６０】

【０４５４】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＺ（１．８０ｇ、７．８２mmol）およびＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（７．４０ｇ、３９．１mmol）を水（２８ml）中に含む混合物を、１２５℃の油浴中で８８時間加熱した。反応混合物を、室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を沸騰している水浴中で１時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約５０mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得、これを濾過し、水で洗い、風乾して、ラセミ５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．０５ｇ、収率６５％）をベージュ色固体として得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₂Ｈ₁₅ＮＯ₂についての計算値：２０５；実測値：２０６（Ｍ＋Ｈ）。
【０４５５】
工程６：
【０４５６】
【化１６１】

【０４５７】
ラセミ５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．０５ｇ、５．１２mmol）、トリエチルアミン（０．９３ml、６．６７mmol）および９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．２４ｇ、６．６４mmol）を、アセトニトリル（３０ml）と水（３０ml）中に含む混合物を、室温で２日間撹拌した。反応液をＴＬＣ分析すると、出発物質のアミノ酸の存在が示された。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（５２０mg）を添加し、混合物を室温でさらに２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを塩化メチレンで２回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して、粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−メチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．６２ｇ、収率７４％）を、淡褐色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₇Ｈ₂₆ＮＯ₄（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４２８．１８６２；実測値：４２８．１８４４。
【０４５８】
実施例１５
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ＥｔＡｔｃ−ＯＨ）の調製
【０４５９】
工程１：
【０４６０】
【化１６２】

【０４６１】
３−（２−エチルフェニル）プロピオン酸（１−エチル−２−ヨードベンゼンから３工程で調製、４．２４ｇ、２３．８mmol）、塩化チオニル（９．５０ml、１３０mmol）およびトルエン（１００ml）の混合物を、２時間還流した。減圧下に濃縮して、３−（２−エチルフェニル）プロパノイルクロリドを得、これを塩化メチレン中に取り込み、粗生成物として次の工程で用いた。
【０４６２】
工程２：
【０４６３】
【化１６３】

【０４６４】
３−（２−エチルフェニル）プロパノイルクロリド（粗生成物、２３．８mmol）を塩化メチレン中に含む溶液を、ジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン１５．６ｇから得られた）の氷浴中で冷却されたエーテル（１００ml）溶液に、ゆっくり添加した。次に混合物を室温まで暖め、一夜撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１０→２０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、１−ジアゾ−４−（２−エチルフェニル）ブタン−２−オン（３．４７ｇ、２工程で７２％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．１〜７．２５（４Ｈ，ｍ，フェニル），５．２１（１Ｈ，ブロードｓ，ジアゾ），２．９７（２Ｈ，ｍ，エチルのＣＨ₂），１．２０（３Ｈ，ｔ，ＣＨ₃）。
【０４６５】
工程３：
【０４６６】
【化１６４】

【０４６７】
酢酸ロジウム（ＩＩ）二量体（３８mg、０．１７２mmol）を塩化メチレン（３００ml）中に含む還流下の混合物に、１−ジアゾ−４−（２−エチルフェニル）ブタン−２−オン（３．４７ｇ、１７．２mmol）の塩化メチレン（５０ml）溶液を、９０分間かけてゆっくり添加した。添加完了後、混合物をさらに２０分間還流した。混合物を室温まで冷却し、トリフルオロ酢酸（３．７５ml）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応液を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を飽和重炭酸ナトリウム溶液でもう一度洗った。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮して、粗５−エチル−β−テトラロン（３．０９ｇ、＞定量的収量）を、赤褐色油状物として得た。化合物をさらに精製することなく、次の工程に用いた。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ６．９〜７．２（３Ｈ，ｍ，フェニル），３．５８（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），３．０８（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），２．７０（２Ｈ，ｑ，エチルのＣＨ₂），２．５２（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），１．２０（３Ｈ，ｔ，エチルのＣＨ₃）。
【０４６８】
工程４：
【０４６９】
【化１６５】

【０４７０】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、５−エチル−β−テトラロン（３．０９ｇ、１７．７mmol）、シアン化カリウム（１．７３ｇ、２６．６mmol）、炭酸アンモニウム（１０．２ｇ、１０６mmol）、エタノール（８０ml）および水（１６ml）の混合物を、８０℃の油浴中で４８時間加熱した。室温まで冷却後、白色スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて風乾してヒダントインＡＡ（３．８５ｇ、２工程で収率９２％）を淡ベージュ色固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：δ１０．６７（１Ｈ，ブロード ｓ，ＮＨ），８．２６（１Ｈ，ブロード ｓ，ＮＨ），６．８〜７．１（３Ｈ，ｍ，フェニル），１．１３（３Ｈ，ｔ，ＣＨ₃）。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₄Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₂についての計算値：２４４；実測値：２４３（Ｍ−Ｈ）
【０４７１】
工程５：
【０４７２】
【化１６６】

【０４７３】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＡＡ（１．００ｇ、４．０９mmol）およびＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（４．００ｇ、２１．１mmol）を水（２０ml）中に含む混合物を、１２５℃の油浴中で４８時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を、沸騰している水浴中で２時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約５０mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得て、これを濾過し、水で洗い、減圧下に一夜乾燥して、ラセミ５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（７９６mg、収率８９％）を得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₃Ｈ₁₇ＮＯ₂についての計算値：２１９；実測値：２２０（Ｍ＋Ｈ）。
【０４７４】
工程６：
【０４７５】
【化１６７】

【０４７６】
ラセミ５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（７６５mg、３．４９mmol）、トリエチルアミン（１．０ml、７．１７mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、１．７９ｇ、５．３１mmol）を、アセトニトリル（４０ml）と水（４０ml）中に含む混合物を、室温で２日間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを塩化メチレンで２回、酢酸エチルで２回抽出した。塩化メチレン抽出物を水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチル抽出物を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−エチル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（３３０mg、収率２１％）を白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₈Ｈ₂₈ＮＯ₄（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４４２．２０１８；実測値：４４２．２０１０
【０４７７】
実施例１６
Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）５−ｉＰｒＡｔｃ−ＯＨ）の調製
【０４７８】
工程１：
【０４７９】
【化１６８】

【０４８０】
３−（２−イソプロピルフェニル）プロピオン酸（１−イソプロピル−２−ヨードベンゼンから３工程で調製，２．０１ｇ，１０．５mmol）、塩化チオニル（４．３０ml，５９．０mmol）およびトルエン（４０ml）の混合物を、２時間還流した。減圧下に濃縮して３−（２−イソプロピルフェニル）プロパノイルクロリドを得て、これを塩化メチレンに取り込み、粗生成物として次の工程に用いた。
【０４８１】
工程２：
【０４８２】
【化１６９】

【０４８３】
３−（２−イソプロピルフェニル）プロパノイルクロリド（粗生成物、１０．５mmol）の塩化メチレン溶液を、ジアゾメタン（１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン６．９５ｇから得た）の氷浴中で冷却されたエーテル（５０ml）溶液にゆっくり添加した。次に、混合物を室温まで暖め、一夜撹拌した。混合物を減圧下に濃縮し、カラムクロマトグラフィー（２０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製して、１−ジアゾ−４−（２−イソプロピルフェニル）ブタン−２−オン（１．８７ｇ、２段階で８２％）を淡黄色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：δ７．１０〜７．３０（４Ｈ，ｍ，フェニル），５．２１（１Ｈ，ブロードｓ，ジアゾ），３．１５（１Ｈ，ｍ，ｉＰｒのＣＨ），３．００（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５７（２Ｈ，ｍ），１．２４（６Ｈ，ｄ，ｉＰｒの２ＣＨ₃）。
【０４８４】
工程３：
【０４８５】
【化１７０】

【０４８６】
酢酸ロジウム（ＩＩ）二量体（２０mg、０．０９１mmol）を塩化メチレン（１６０ml）中に含む還流下の混合物に、１−ジアゾ−４−（２−ブロモフェニル）ブタン−２−オン（１．８７ｇ、８．６５mmol）の塩化メチレン（２５ml）溶液を６０分間かけてゆっくり添加した。添加完了後、混合物をさらに１５分間還流した。混合物を室温まで冷却し、トリフルオロ酢酸（１．９０ml）を添加し、混合物を室温で４５分間撹拌した。反応液を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチした。層を分離し、塩化メチレン層を飽和重炭酸ナトリウム溶液でもう一度洗った。合わせた水層を塩化メチレンで逆抽出した。合わせた有機層を、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下に濃縮して、褐色の粗油状物を得た。カラムクロマトグラフィー（５％酢酸エチル／ヘキサン）により精製して、５−イソプロピル−β−テトラロン（１．５７ｇ、収率９６％）を淡黄色油状物として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ６．９３〜７．２２（３Ｈ，ｍ，フェニル），３．５９（２Ｈ，ｓ，ベンジル性），３．２４（１Ｈ，ｍ，ｉＰｒのＣＨ），３．１２（２Ｈ，ｔ，ベンジル性），２．５２（２Ｈ，ｔ），１．２７（６Ｈ，ｄ，ｉＰｒの２ＣＨ₃）。
【０４８７】
工程４：
【０４８８】
【化１７１】

【０４８９】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、５−イソプロピル−β−テトラロン（１．５７ｇ、８．３４mmol）、シアン化カリウム（０．８２ｇ、１２．６mmol）、炭酸アンモニウム（４．８１ｇ、５０．１mmol）、エタノール（４０ml）および水（１０ml）の混合物を、８０℃の油浴中で４８時間加熱した。室温まで冷却後、褐色スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２時間撹拌した。濾過し、続いて風乾して、粗ヒダントインＢＢをベージュ色固体として得て、これをさらに精製することなく次の工程に用いた。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１０．６９（１Ｈ，ブロード ｓ，ＮＨ），８．３０（１Ｈ，ブロード ｓ，ＮＨ），６．８５〜７．３２（３Ｈ，ｍ，フェニル），１．１５（６Ｈ，ｔ，ＣＨ₃）。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₅Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₂についての計算値：２５８；実測値：５３９（２Ｍ＋Ｎａ）。
【０４９０】
工程５：
【０４９１】
【化１７２】

【０４９２】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＢＢ（粗生成物、理論値８．３４mmol）とＢａ（ＯＨ）₂・Ｈ₂Ｏ（７．９０ｇ、４１．７mmol）を水（４０ml）中に含む混合物を、１２５℃の油浴中で３８時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を、沸騰している水浴中で２時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約５０mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得て、これを濾過し、水で洗い、減圧下に一夜乾燥して、ラセミ５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（１．２３ｇ、２工程の収率６３％）をベージュ色固体として得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₄Ｈ₁₉ＮＯ₂についての計算値：２３３；実測値：２３２（Ｍ−Ｈ）。
【０４９３】
工程６：
【０４９４】
【化１７３】

【０４９５】
ラセミ５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２５０mg、１．０７mmol）、トリエチルアミン（１．２ml、８．６１mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．７０ｇ、８．００mmol）を、アセトニトリル（３０ml）と水（３０ml）中に含む混合物を、室温で２日間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを酢酸エチルで抽出した。有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得、これをカラムクロマトグラフィー（２→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、ラセミＦｍｏｃ−５−イソプロピル−２−アミノテトラリン−２−カルボン酸（２０８mg、収率４３％）を灰色がかった白色泡状物として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₉Ｈ₃₀ＮＯ₄（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４５６．２１７５；実測値：４５６．２１８４。
【０４９６】
実施例１７
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−フェニルピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０４９７】
工程１：
【０４９８】
【化１７４】

【０４９９】
ヨードベンゼン（６．３７ｇ、３．５mL、３１．２mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（１０．３２ｇ、９．３mL、７２．２mmol、２．３当量）およびナトリウムtert−ブトキシド（８．０ｇ、８３．３mmol、２．７当量）の無水ジオキサン（１２０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（１８０mg、０．５９１mmol）を添加した。反応液を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純生成物ＣＣを微黄色固体（６．０８ｇ、８９％）として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）７．２５（ｄｄｔ，２Ｈ），６．９５（ｄｄ，２Ｈ），６．８４（ｔ，１Ｈ），４．００（ｓ，４Ｈ），３．３２（ｔ，４Ｈ）および１．８４（ｔ，４Ｈ）；ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２２０（Ｍ＋Ｈ），Ｃ₁₃Ｈ₁₇ＮＯ₂についての計算値：２１９。
【０５００】
工程２：
【０５０１】
【化１７５】

【０５０２】
ケタールＣＣ（３．２２ｇ、１５．１６mmol）のアセトン（１００mL）溶液に、６Ｎ塩酸（１５０mL）を添加し、反応液を還流下に一夜加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃに取り込み、６ＮのＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、８０／２０→６０／４０）により精製して、生成物ＤＤを黄色油状物（２．５８ｇ、９７％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ １７６（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₁Ｈ₁₃ＮＯについての計算値：１７５。
【０５０３】
工程３：
【０５０４】
【化１７６】

【０５０５】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＤＤ（２．５３ｇ、１４．４６mmol）をエタノール（７５mL）と水（２５mL）に含む溶液に、炭酸アンモニウム（１２．９ｇ、１３４．３mmol、９当量）およびシアン化カリウム（２．１１ｇ、３２．５mmol、２当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を減圧下に濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出（４回）した。合わせた有機抽出物を水で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して分光分析的に純粋なヒダントインＥＥを白色固体（３．３６ｇ、収率９５％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２４６（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₃Ｈ₁₅Ｎ₃Ｏ₂についての計算値：２４５。
【０５０６】
工程４：
【０５０７】
【化１７７】

【０５０８】
ヒダントインＥＥ（３．３６ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６Ｎ、１００mL）中に懸濁させ、１３０℃で２〜３日加熱した。加水分解が完了（ＨＰＬＣによる）したとき、反応混合物を濃ＨＣｌで中和して、僅かに酸性（ｐＨ約６）にした。得られるスラリーを濾過し、水で洗い、乾燥して４−アミノ−１−フェニルピペリジン−４−カルボン酸（ＡＰＰＣ）を白色固体として得て（５．２６ｇ、収率＞１００％、湿っていて無機塩を含む）、これはＨＰＬＣでシングルピークを示し、次の工程に直接用いた。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ ｅ２２１（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₂Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₂についての計算値：２２０。
【０５０９】
工程５：
【０５１０】
【化１７８】

【０５１１】
直前の工程からの４−アミノ−１−フェニルピペリジン−４−カルボン酸（ＡＰＰＣ）を、ジオキサン（８０mL）と１０％Ｎａ₂ＣＯ₃（４０ml）中に懸濁し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（５．３ｇ、２０．５７mmol、１．５当量）を添加し、一夜激しく撹拌した。次に、反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６Ｎ ＨＣｌで中和して僅かに酸性（ｐＨ６）にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得、これを次にフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により精製して、純Ｆｍｏｃ−ＡＰＰＣ（４．９１ｇ、２工程からの全収率：８１％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）７．８８（ｄ，２Ｈ），７．７４（ｄ，２Ｈ），７．１９〜７．４２（ｍ，８Ｈ），４．２０〜４．３１（ｍ，３Ｈ）；ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ４６５．１７８８、Ｃ₂₇Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₄Ｎａについての計算値：４６５．１７９１。
【０５１２】
実施例１８
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（４−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０５１３】
工程１：
【０５１４】
【化１７９】

【０５１５】
４−ヨードトルエン（２．１２ｇ、９．７mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（２．８mL、２１．８２mmol、２．２当量）およびナトリウムtert−ブトキシド（２．６ｇ、２７．０８mmol、２．８当量）の無水ジオキサン（４０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４４．４mg、０．０４８５mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（５９．０mg、０．１９４mmol）を添加した。反応液を９０℃で２６時間加熱した。得られる反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純生成物ＦＦを微黄色固体（１．９３７ｇ、８５％）として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）７．０６（ｄ，２Ｈ），６．８７（ｄ，２Ｈ），３．９９（ｓ，４Ｈ），３．２６（ｔ，４Ｈ），２．２６（ｓ，３Ｈ）および１．８５（ｔ，４Ｈ）。
【０５１６】
工程２：
【０５１７】
【化１８０】

【０５１８】
ケタールＦＦ（１．５８ｇ、６．７９mmol）のアセトン（５０mL）溶液に、６Ｎ塩酸（２５mL）を添加し、反応液を還流下に一夜加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃに取り込み、６ＮのＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）により精製して、生成物ＧＧを黄色油状物（１．２７ｇ、９８％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ １９０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₂Ｈ₁₅ＮＯについての計算値：１８９。
【０５１９】
工程３：
【０５２０】
【化１８１】

【０５２１】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＧＧ（１．１７ｇ、６．１８mmol）のエタノール（６０mL）と水（２０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（４．７４ｇ、４９．４４mmol、８当量）およびシアン化カリウム（１．０１ｇ、１５．５４mmol、２．５当量）を添加した。混合物を９０℃で２２時間加熱した。冷却した反応混合物を減圧下に濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出（４回）した。合わせた有機抽出物を水で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して分光分析的に純粋なヒダントインＨＨを、白色固体（１．５５４ｇ、収率９７％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２６０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₂についての計算値：２５９。
【０５２２】
工程４：
【０５２３】
【化１８２】

【０５２４】
ヒダントインＨＨ（１．５０２ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６Ｎ、４０mL）中に懸濁させ、１３０℃で４日間加熱した。加水分解が完了（ＨＰＬＣによる）したとき、反応混合物を濃ＨＣｌで中和して、僅かに酸性（ｐＨ約６）にした。得られたスラリーを濾過し、水で洗い、乾燥して、４−アミノ−１−（４−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＭｅＡＰＰＣ）を白色固体として得て（２．１０ｇ、収率＞１００％、湿っていて無機塩を含む）、これはＨＰＬＣでシングルピークを示し、次の工程に直接用いた。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２３５（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₃Ｈ₁₈Ｎ₂Ｏ₂についての計算値：２３４。
【０５２５】
工程５：
【０５２６】
【化１８３】

【０５２７】
直前の工程からの粗４−アミノ−１−（４−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＭｅＡＰＰＣ）を、ジオキサン（８０mL）と１０％Ｎａ₂ＣＯ₃（４０ml）の水溶液中に懸濁し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（２．２ｇ、８．５９mmol、１．５当量）を添加し、一夜激しく撹拌した。次に、反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６Ｎ ＨＣｌで中和して僅かに酸性（ｐＨ６）にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去して、粗生成物を得て、これを次にフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により精製して、純Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡＰＰＣ（２．１６ｇ、２工程からの全収率：８２％）を得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：７．８８（ｄ，２Ｈ），７．７２（ｄ，２Ｈ），７．３９（ｔ，２Ｈ），７．３０（ｔｄ，２Ｈ），６．９９（ｄ，２Ｈ），６．８２（ｄ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ４５７（Ｍ＋Ｈ），Ｃ₂₈Ｈ₂₈Ｎ₂Ｏ₄についての計算値：４５６。
【０５２８】
実施例１９
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（４−クロロフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０５２９】
工程１：
【０５３０】
【化１８４】

【０５３１】
１−クロロ−４−ヨードベンゼン（２．３８ｇ、１０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（３．１mL、３．４４ｇ、２４．０mmol、２．４当量）およびナトリウムtert−ブトキシド（２．６８ｇ、２８．０mmol、２．８当量）の無水ジオキサン（４０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４５．５mg、０．０４９７mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（６１mg、０．２０mmol）を添加した。反応液を９０℃で９時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純生成物ＩＩを微黄色固体（２．１７ｇ、８６％）として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）７．１８（ｄｔ，２Ｈ），６．８５（ｄｔ，２Ｈ），３．９８（ｓ，４Ｈ），３．２８（ｔ，４Ｈ）および１．８２（ｔ，４Ｈ）。
【０５３２】
工程２：
【０５３３】
【化１８５】

【０５３４】
ケタールＩＩ（２．１２３ｇ、８．３９mmol）のアセトン（７５mL）溶液に、６Ｎ塩酸（３０mL）を添加し、反応液を還流下に一夜加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃに取り込み、６ＮのＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７０／３０）で精製して、生成物ＪＪを黄色油状物（１．５１５ｇ、８６％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２１０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₁Ｈ₁₂ＣｌＮＯについての計算値：２０９。
【０５３５】
工程３：
【０５３６】
【化１８６】

【０５３７】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＪＪ（１．４６５ｇ、６．９８６mmol）のエタノール（７５mL）と水（２５mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（５．３６ｇ、５５．８８mmol、８当量）およびシアン化カリウム（１．１３５ｇ、１７．４６mmol、２．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を減圧下に濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出（４回）した。合わせた有機抽出物を水で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して、分光分析的に純粋なヒダントインＫＫを白色固体（１．８１７ｇ、収率９３％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２８０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₃Ｈ₁₄ＣｌＮ₃Ｏ₂についての計算値：２７９。
【０５３８】
工程４：
【０５３９】
【化１８７】

【０５４０】
ヒダントインＫＫ（１．７６８ｇ）をＮａＯＨ水溶液（６Ｎ、５０mL）中に懸濁させ、１３０℃で４日間加熱した。加水分解が完了（ＨＰＬＣによる）したとき、反応混合物を濃ＨＣｌで中和して、僅かに酸性（ｐＨ約６）にした。得られたスラリーを濾過し、水で洗い、乾燥して、４−アミノ−１−（４−クロロフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＣｌＡＰＰＣ）を白色固体として得て（２．０５ｇ、収率＞１００％、湿っていて無機塩を含む）、これはＨＰＬＣでシングルピークを示し、次の工程に直接用いた。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２５３（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₂Ｈ₁₅ＣｌＮ₂Ｏ₂についての計算値：２５４。
【０５４１】
工程５：
【０５４２】
【化１８８】

【０５４３】
直前の工程からの４−アミノ−１−（４−クロロフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＣｌＡＰＰＣ）を、ジオキサン（１００mL）と１０％Ｎａ₂ＣＯ₃（５０ml）の水溶液中に懸濁し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（２．０ｇ、７．７５mmol、１．２当量）で処理し、一夜激しく撹拌した。次に、反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６Ｎ ＨＣｌで中和して僅かに酸性（ｐＨ６）にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得て、これを次にフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により精製して、純Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡＰＰＣ（１．１８ｇ、２工程の全収率：８１％）を得た。
【０５４４】
【表２３】

【０５４５】
実施例２０
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（４−フェノキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−４−ＰｈＯＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０５４６】
工程１：
【０５４７】
【化１８９】

【０５４８】
１−ヨード−４−フェノキシベンゼン（３．１５ｇ、１０．６mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（３．３mL、３．６６ｇ、２５．６mmol、２．４当量）とナトリウムtert−ブトキシド（２．８５ｇ、２９．７mmol、２．８当量）の無水ジオキサン（４０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（４８．５mg、０．０５３mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（６４mg、０．４mmol）を添加した。反応液を９０℃で９時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→８０／２０）により精製して、純生成物ＬＬを微黄色固体（２．８０５ｇ、８５％）として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）７．２６〜７．３２（ｍ，２Ｈ），７．０３（ｔ，１Ｈ），６．９２〜６．９７（ｍ，６Ｈ），４．００（ｓ，４Ｈ），３．２６（ｔ，４Ｈ），１．８６（ｔ，４Ｈ）。
【０５４９】
工程２：
【０５５０】
【化１９０】

【０５５１】
ケタールＬＬ（２．７５５ｇ、８．８６mmol）のアセトン（９０mL）溶液に、６Ｎ塩酸（４５mL）を添加し、反応液を還流下に一夜加熱した。得られる反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、６ＮのＮａＯＨ水溶液で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）で精製して、生成物ＭＭを黄色油状物（２．２１ｇ、９３％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２６８（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₇Ｈ₁₇ＣｌＮＯ₂についての計算値：２６７。
【０５５２】
工程３：
【０５５３】
【化１９１】

【０５５４】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＭＭ（２．０１ｇ、７．５２mmol）のエタノール（８０mL）と水（２５mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（５．７８ｇ、６０．０mmol、８当量）およびシアン化カリウム（１．２２ｇ、１８．８０mmol、２．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を減圧下に濃縮し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出（４回）した。合わせた有機抽出物を、水で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して、分光分析的に純粋なヒダントインＮＮを、白色固体（２．３４ｇ、収率９５％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ３３８（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₉Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₃についての計算値：３３７。
【０５５５】
工程４：
【０５５６】
【化１９２】

【０５５７】
ヒダントインＮＮ（２．２８ｇ、６．７６mmol）をＮａＯＨ水溶液（６Ｎ、６０mL）中に懸濁させ、１３０℃で４日間加熱した。加水分解が完了（ＨＰＬＣによる）したとき、反応混合物を濃ＨＣｌで中和して、僅かに酸性（ｐＨ約６）にした。得られたスラリーを濾過し、水で洗い、乾燥して、４−アミノ−１−（４−フェノキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＰｈＯＡＰＰＣ）を白色固体として得（２．５３ｇ、収率＞１００％、湿っていて無機塩を含む）、これはＨＰＬＣでシングルピークを示し、次の工程に直接用いた。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ３１３（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₈Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₃についての計算値：３１２。
【０５５８】
工程５：
【０５５９】
【化１９３】

【０５６０】
直前の工程からの粗４−アミノ−１−（４−フェノキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（４−ＰｈＯＡＰＰＣ）を、ジオキサン（５０Ｌ）と１０％Ｎａ₂ＣＯ₃（５０ml）の水溶液中に懸濁し、一夜激しく撹拌した。反応混合物を濃縮してジオキサンを除去し、６Ｎ ＨＣｌで中和して僅かに酸性（ｐＨ６）にし、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去して粗生成物を得て、これを次にフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ〜ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により精製して、純Ｆｍｏｃ−４−ＰｈＯＡＰＰＣ（２．１８ｇ、２工程の全収率：６０％）を得た。
【０５６１】
【表２４】

【０５６２】
実施例２１
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（２−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−２−ＭｅＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０５６３】
工程１：
【０５６４】
【化１９４】

【０５６５】
２−ヨードトルエン（４．３６ｇ、２．５mL、２０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（６．８８ｇ、６．２mL、４８．１mmol、２．４当量）およびナトリウムtert−ブトキシド（５．３ｇ、５５．２mmol、２．８当量）の無水ジオキサン（８０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（１２２mg、０．４mmol）を添加した。反応液を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純生成物ＯＯを微黄色固体（２．６６ｇ、５７％）として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）７．１２〜７．１８（ｍ，２Ｈ），６．９４〜７．０６（ｍ，２Ｈ），４．０１（ｓ，４Ｈ），２．９８（ｔ，４Ｈ）および１．８８（ｔ，４Ｈ）。
【０５６６】
工程２：
【０５６７】
【化１９５】

【０５６８】
ケタールＯＯ（２．６６ｇ、１１．４mmol）のアセトン（７０mL）溶液に、６Ｎ塩酸（３５mL）を添加し、反応液を一夜８５℃で加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ水溶液（６Ｎ）で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）で精製して、生成物ＰＰを黄色油状物（２．０４ｇ、９５％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ １９０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₂Ｈ₁₅ＮＯについての計算値：１８９。
【０５６９】
工程３：
【０５７０】
【化１９６】

【０５７１】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＰＰ（１．５４ｇ、８．１５mmol）のエタノール（６０mL）と水（２０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（４．６９ｇ、４８．９mmol、６当量）およびシアン化カリウム（８００ｇ、１２．２mmol、１．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（３００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で完全に洗い、乾燥して、ヒダントインＱＱを白色固体（２．０１ｇ、収率９５％）として得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ２６０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₂についての計算値：２５９。
【０５７２】
工程４：
【０５７３】
【化１９７】

【０５７４】
ヒダントインＱＱ（１．０７ｇ、４．１３mmol）を無水ＴＨＦ（２５mL）中に含む懸濁液に、ピロ炭酸ジ−tert−ブチル（２．２５ｇ、１０．３２mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（０．６３mL、４６０mg、４．５４mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（３６mg、０．２９mmol）を順次添加した。添加から約１５分後、反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得、これを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り込み、１Ｎ ＨＣｌ（３×３０mL）、飽和Ｎａ₂ＣＯ₃水溶液（２×３０mL）およびブライン（２×３０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＲＲを白色固体として得た（１．７１ｇ、９０％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）ｍ／ｅ ４６０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₂₄Ｈ₃₃Ｎ₃Ｏ₆についての計算値：４５９。
【０５７５】
工程５：
【０５７６】
【化１９８】

【０５７７】
ビス−ＢｏｃヒダントインＲＲ（１．７１ｇ、３．７２mmol）をＤＭＥ（２３mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に１Ｎ ＮａＯＨ（３３mL、３３mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、かなり透明な混合物を得た。ＨＰＬＣは、反応の完了を示した。反応混合物を、減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた４−アミノ−１−（２−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（２−ＭｅＡＰＰＣ）を含む水層を、６Ｎ ＨＣｌで処理して、ｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（３０mL）を１，４−ジオキサン（３０mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（１．２８ｇ、４．９６mmol、１．３当量）を添加し、室温で一夜撹拌した。反応混合物を、減圧下に濃縮してジオキサンを除去し、１Ｎ ＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）で精製して、粗生成物Ｆｍｏｃ−２−ＭｅＡＰＰＣを白色固体として得た（１．０９ｇ、ビス−ＢｏｃヒダントインＲＲからの収率６４％）。
【０５７８】
【表２５】

【０５７９】
実施例２２
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（２−イソプロピルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−２−ｉＰｒＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０５８０】
工程１：
【０５８１】
【化１９９】

【０５８２】
１−ヨード−２−イソプロピルベンゼン（１０．０ｇ、４０．７mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（１２．０mL、１３．３ｇ、９３．０mmol、２．３当量）およびナトリウムtert−ブトキシド（１０．０ｇ、１０４．２mmol、２．６当量）の無水ジオキサン（１６０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（１８０mg、０．１９７mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（２４４mg、０．８０mmol）を添加した。反応液を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去し、水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して、褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純生成物ＳＳを微黄色固体（３．６１ｇ、収率３５％）を得た。ＭＳ ｍ／ｚ ２６２（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₆Ｈ₂₃ＮＯ₂についての計算値：２６１。
【０５８３】
工程２：
【０５８４】
【化２００】

【０５８５】
ケタールＳＳ（３．２４ｇ、１２．４mmol）のアセトン（９０mL）溶液に、６Ｎ塩酸（４５mL）を添加し、反応液を一夜還流下に加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去し、残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ水溶液（６Ｎ）で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）で精製して、生成物ＴＴを黄色油状物（２．４２ｇ、８９％）として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．２７（ｍ，１Ｈ），７．０４〜７．１９（ｍ，３Ｈ），３．５８（ｍ，１Ｈ），３．２０（ｔ，４Ｈ），２．６０（ｔ，４Ｈ）および１．２５（ｄ，６Ｈ）；ＭＳ ｍ／ｚ ２１８（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₉ＮＯについての計算値：２１７
【０５８６】
工程３：
【０５８７】
【化２０１】

【０５８８】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＴＴ（２．３０ｇ、１０．６mmol）のエタノール（９０mL）と水（２０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（８．１ｇ、８４．３mmol、８当量）およびシアン化カリウム（１．７２ｇ、２６．５mmol、２．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（４００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で完全に洗い、乾燥して、ヒダントインＵＵを白色固体（２．７８ｇ、収率９１％）として得た。ＭＳ ｍ／ｚ ２８８（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₆Ｈ₂₁Ｎ₃Ｏ₂についての計算値：２８７。
【０５８９】
工程４：
【０５９０】
【化２０２】

【０５９１】
ヒダントインＵＵ（２．７４ｇ、９．５４mmol）を無水ＴＨＦ（１００mL）中に含む懸濁液に、ピロ炭酸ジ−tert−ブチル（５．２ｇ、２４．２４mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（１．５mL、１．０７ｇ、１０．５mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（４６mg、０．２９mmol）を順次添加した。添加から約１５分後、反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り込み、ブライン（３×３０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物を、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＶＶを白色固体として得た（４．３９ｇ、収率９４％）。ＭＳ ｍ／ｚ ４８８（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₂₆Ｈ₃₇Ｎ₃Ｏ₆についての計算値：４８７。
【０５９２】
工程５：
【０５９３】
【化２０３】

【０５９４】
ビス−ＢｏｃヒダントインＶＶ（２．３４ｇ、４．８mmol）をＤＭＥ（３０mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に１Ｎ ＮａＯＨ（４５mL、４５mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、かなり透明な混合物を得た。ＨＰＬＣは、反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた４−アミノ−１−（２−イソプロピルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（２−ｉＰｒＡＰＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを添加して、ｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（約４５mL）を１，４−ジオキサン（４５mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（１．７８ｇ、６．８９mmol、１．５当量）を添加し、室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してジオキサンを除去し、１Ｎ ＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）で精製して、純生成物Ｆｍｏｃ−２−ｉＰｒＡＰＰＣを白色固体として得た（１．４６ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率６３％）。ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ５０７．２２６３、Ｃ₃₀Ｈ₃₂Ｎ₂Ｏ₄Ｎａについての計算値：５０７．２２６０。
【０５９５】
実施例２３
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（３−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０５９６】
工程１：
【０５９７】
【化２０４】

【０５９８】
３−ヨードトルエン（４．３６ｇ、２．６mL、２０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（６．８８ｇ、６．２mL、４８．１mmol、２．４当量）およびナトリウムtert−ブトキシド（５．３ｇ、５５．２mmol、２．８当量）の無水ジオキサン（８０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（１２２mg、０．４mmol）を添加した。反応液を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純生成物ＷＷを微黄色固体（３．２１ｇ、収率６９％）として得た。
【０５９９】
工程２：
【０６００】
【化２０５】

【０６０１】
ケタールＷＷ（１．２５ｇ、５．３６mmol）のアセトン（２０mL）溶液に、６Ｎ塩酸（１０mL）を添加し、反応液を一夜還流下に加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ水溶液（６Ｎ）で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）で精製して、生成物ＸＸを黄色油状物（８４３mg、収率８３％）として得た。ＭＳ ｍ／ｚ １９０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₂Ｈ₁₅ＮＯについての計算値：１８９。
【０６０２】
工程３：
【０６０３】
【化２０６】

【０６０４】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＸＸ（７６３ｇ、４．０３mmol）のエタノール（４５mL）と水（１５mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（３．０９ｇ、３２．２１mmol、８当量）およびシアン化カリウム（６７５mg、１０．３８mmol、２．５当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（２００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で完全に洗い、乾燥して、ヒダントインＹＹを白色固体（９３０mg、収率８９％）として得た。ＭＳ ｍ／ｚ ２６０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₂についての計算値：２５９。
【０６０５】
工程４：
【０６０６】
【化２０７】

【０６０７】
ヒダントインＹＹ（７８０mg、３．０１２mmol）を無水ＴＨＦ（２２mL）中に含む懸濁液に、ピロ炭酸ジ−tert−ブチル（１．６４ｇ、７．５２mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（０．４２mL、３０５mg、３．０１mmol、１．０当量）およびＤＭＡＰ（２０mg、０．１６４mmol）を順次添加した。添加から約５分後、反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り込み、ブライン（３×３０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＺＺを白色固体として得た（１．３７ｇ、定量的）。ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ４８２．２２６１（Ｍ＋Ｎａ）、Ｃ₂₄Ｈ₃₃Ｎ₃Ｏ₆Ｎａについての計算値：４８２．２２６７。
【０６０８】
工程５：
【０６０９】
【化２０８】

【０６１０】
ビス−ＢｏｃヒダントインＺＺ（１．２９ｇ、２．８１８mmol）をＤＭＥ（２０mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に１Ｎ ＮａＯＨ（２５mL、２５mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、かなり透明な混合物を得た。ＨＰＬＣは、反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた４−アミノ−１−（３−メチルフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（３−ＭｅＡＰＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを添加して、ｐＨを１１〜１２に調節した。次にこの溶液（約３０mL）を１，４−ジオキサン（３０mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（１．４６ｇ、５．６５mmol、２．０当量）で処理し、室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してジオキサンを除去し、１Ｎ ＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）で精製して、純生成物Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＡＰＰＣを白色固体として得た（１．００２ｇ、ビス−Ｂｏｃヒダントインからの収率７８％）。ＨＲＭＳ ｍ／ｚ ４７９．１９４０（Ｍ＋Ｎａ）、Ｃ₂₈Ｈ₂₈Ｎ₂Ｏ₄Ｎａについての計算値：４７９．１９４７。
【０６１１】
実施例２４
Ｆｍｏｃ−４−アミノ−１−（３−メトキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｐｃ−ＯＨ）の調製
【０６１２】
工程１：
【０６１３】
【化２０９】

【０６１４】
３−ヨードアニソール（４．６８ｇ、２．４mL、２０．０mmol）、１，４−ジオキサ−８−アザスピロ〔４．５〕デカン（６．２mL、６．８８ｇ、４８．１mmol、２．４当量）およびナトリウムtert−ブトキシド（５．３ｇ、５５．２mmol、２．８当量）の無水ジオキサン（８０mL）溶液に、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（９１mg、０．１mmol）およびトリ−o−トリルホスフィン（１２２mg、０．４mmol）を添加した。反応液を９０℃で２６時間加熱した。得られた反応混合物を濃縮して溶媒を除去し、残渣を水で処理し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮して褐色油状物を得た。この粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９５／５→７５／２５）により精製して、純生成物ＡＡＡを微黄色固体（３．１０ｇ、収率６２％）として得た。ＭＳ ｍ／ｚ（Ｍ＋Ｈ）、２５０（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₉ＮＯ₃についての計算値：２４９。
【０６１５】
工程２：
【０６１６】
【化２１０】

【０６１７】
ケタールＡＡＡ（３．１０ｇ、１２．４５mmol）のアセトン（９０mL）溶液に、６Ｎ塩酸（４５mL）を添加し、反応液を一夜還流下に加熱した。得られた反応溶液を濃縮して溶媒を除去した。残渣をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮａＯＨ水溶液（６Ｎ）で中和した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→７０／３０）で精製して、生成物ＢＢＢを黄色油状物（２．５３ｇ、収率９９％）として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．２０（ｍ，１Ｈ），６．５８（ｄ，１Ｈ），６．３９〜６．５６（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．５９（ｍ，４Ｈ）および２．５８（ｍ，４Ｈ）。
【０６１８】
工程３：
【０６１９】
【化２１１】

【０６２０】
ガラス耐圧瓶中の、ケトンＢＢＢ（１．８１ｇ、８．８２mmol）をエタノール（６０mL）と水（２０mL）中の溶液に、炭酸アンモニウム（６．７７ｇ、７０．５２mmol、８当量）およびシアン化カリウム（１．１４ｇ、１７．６mmol、２．０当量）を添加した。混合物を８０〜９０℃で１８時間加熱した。冷却した反応混合物を氷水（２００ml）に添加し、３０分間激しく撹拌した。得られた沈殿を吸引濾過し、水で完全に洗い、乾燥して、ヒダントインＣＣＣを白色固体（２．２３ｇ、収率９２％）として得た。ＭＳ ｍ／ｚ ２７６（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₁₄Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₃についての計算値：２７５。
【０６２１】
工程４：
【０６２２】
【化２１２】

【０６２３】
ヒダントインＣＣＣ（１．１０ｇ、４．００mmol）を無水ＴＨＦ（５０mL）中に含む懸濁液に、ピロ炭酸ジ−tert−ブチル（２．１８ｇ、１０．０mmol、２．５当量）、トリエチルアミン（０．６２mL、４４５mg、４．４mmol、１．１当量）およびＤＭＡＰ（２０mg、０．１６４mmol）を順次添加した。添加から約１５分後、反応液は透明な黄色溶液に変化し、これを室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮して固形物を得て、これを次にＥｔＯＡｃ（３００mL）に取り込み、ブライン（３×３０mL）で洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、減圧下に濃縮した。淡黄色の粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、９０／１０→８０／２０）により精製して、純ビス−ＢｏｃヒダントインＤＤＤを白色固体として得た（１．９０ｇ、定量的）。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）：７．１６（ｔ，１Ｈ），６．５７（ｄ，１Ｈ），６．２４（ｓ，１Ｈ），６．１９（ｄ，１Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），１．５８（ｓ，９Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）；ＭＳ ｍ／ｚ ４７６（Ｍ＋Ｈ）、Ｃ₂₄Ｈ₃₃Ｎ₃Ｏ₇についての計算値：４７５。
【０６２４】
工程５：
【０６２５】
【化２１３】

【０６２６】
ビス−ＢｏｃヒダントインＤＤＤ（１．０６ｇ、２．２３mmol）をＤＭＥ（２０mL）に溶解して、透明溶液を得た。この溶液に１Ｎ ＮａＯＨ（２０mL、２０mmol）を添加し、反応液を室温で一夜撹拌して、かなり透明な混合物を得た。ＨＰＬＣは、反応の完了を示した。反応混合物を減圧下に濃縮してＤＭＥを除去し、Ｅｔ₂Ｏで抽出した。精製することなく、得られた４−アミノ−１−（３−メトキシフェニル）ピペリジン−４−カルボン酸（３−ＭｅＯＡＰＰＣ）を含む水層に、６Ｎ ＨＣｌを添加して、ｐＨを１１〜１２に調節した。この溶液（３５mL）を１，４−ジオキサン（３５mL）で希釈し、Ｆｍｏｃ−Ｃｌ（７５５mg、２．９３mmol、１．３当量）を添加し、室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してジオキサンを除去し、１Ｎ ＨＣｌで中和し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を、ブラインで洗い、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ→ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）で精製して、純生成物Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡＰＰＣを白色固体として得た（６６８mg、ビス−ＢｏｃヒダントインＤＤＤからの収率６３％）。
【０６２７】
【表２６】

【０６２８】
実施例２５
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｃｈｃ−ＯＨ）の調製
【０６２９】
工程１：
【０６３０】
【化２１４】

【０６３１】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、４−シクロヘキシルシクロヘキサノン（３．００ｇ、１６．６mmol）、シアン化カリウム（１．６３ｇ、２５．０mmol）、炭酸アンモニウム（９．５９ｇ、９９．８mmol）、エタノール（７５ml）および水（１５ml）の混合物を、８０℃の油浴中で１５時間加熱した。室温まで冷却後、白色スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、続いて風乾して、ヒダントインＥＥＥ（６．１０ｇ、湿ったまま、収率＞１００％）を白色固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１０．５２（１Ｈ，ブロード，ＮＨ），８．４３（１Ｈ，ブロード ｓ，ＮＨ），０．８０〜１．８０（２０Ｈ，ｍ）．ＬＲＭＳ（ＡＰＣＩ）：Ｃ₁₄Ｈ₂₂Ｎ₂Ｏ₂についての計算値：２５０；実測値：２４９（Ｍ−Ｈ）、２５１（Ｍ＋Ｈ）。
【０６３２】
工程２：
【０６３３】
【化２１５】

【０６３４】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＥＥＥ（１．３９ｇ、５．５５mmol）および６Ｎ水酸化ナトリウム溶液（５０ml）の混合物を、１３０℃の油浴中で２日間加熱した。反応混合物を氷浴中で冷却し、濃塩酸を用いてｐＨ約７に中和した。白色スラリーを濾過し、沈殿を水で濯いで、粗１−アミノ−４−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（４８．３ｇ、湿っていて無機塩を含む、収率＞１００％）を得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₁₃Ｈ₂₃ＮＯ₂についての計算値：２２５；実測値：２２６（Ｍ＋Ｈ）
【０６３５】
工程３：
【０６３６】
【化２１６】

【０６３７】
粗１−アミノ−４−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（４８．３ｇ、理論値５．５５mmol）、トリエチルアミン（１．０ml、７．１７mmol）、９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、２．４３ｇ、７．２０mmol）を、アセトニトリル（７５ml）と水（７５ml）中に含む混合物を、室温で２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを塩化メチレンで３回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（１→５→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−トランス−シクロヘキシルシクロヘキサン−１−カルボン酸（２５０mg、２工程の収率１０％）を得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₈Ｈ₃₄ＮＯ₄（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４４８．２４８８；実測値：４４８．２４９７。
【０６３８】
実施例２６
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｄｐｃ−ＯＨ）の調製
【０６３９】
工程１：
【０６４０】
【化２１７】

【０６４１】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、４，４−ジフェニルシクロヘキサン（Ｆｒｅｅｍａｎ，Ｐ．Ｋ．ら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９８９年、第５４巻、７８２〜７８９頁の手順に従って、４，４−ジフェニルシクロヘキサンの水素化により調製）（１．５５ｇ、６．１９mmol）、シアン化カリウム（０．６５ｇ、９．９７mmol）、炭酸アンモニウム（３．６０ｇ、３７．５mmol）、エタノール（４８ml）および水（１２ml）の混合物を、８０℃の油浴中で２４時間加熱した。室温まで冷却後、白色スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過し、風乾して、ヒダントインＦＦＦ（１．８９ｇ、収率９５％）を白色固体として得た。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１０．５７（１Ｈ，ブロード，ＮＨ），８．５９（１Ｈ，ブロードｓ，ＮＨ），７．００〜７．５０（１０Ｈ，ｍ，フェニル）。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）：Ｃ₂₀Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₂についての計算値：３２０；実測値：３１９（Ｍ−Ｈ）。
【０６４２】
工程２：
【０６４３】
【化２１８】

【０６４４】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＦＦＦ（１．８８ｇ、５．８７mmol）、水酸化バリウム一水和物（５．６０ｇ、２９．６mmol）および水（１００ml、希釈用）の混合物を、１０５℃の油浴中で２日間加熱した。さらなる水酸化バリウム一水和物（５．６０ｇ、２９．６mmol）を添加し、混合物を１０５℃の油浴中でさらに２４時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を、沸騰している水浴中で２時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約３０mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得て、これを濾過し、水で洗い、減圧下に一夜乾燥して、粗１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（０．５２ｇ、収率３０％）を白色固体として得た。ＬＲＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ₁₉Ｈ₂₁ＮＯ₂についての計算値：２９５；実測値：２９４（Ｍ−Ｈ）、２９６（Ｍ＋Ｈ）。
【０６４５】
工程３：
【０６４６】
【化２１９】

【０６４７】
１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（５１０mg、１．７３mmol）、トリエチルアミン（０．３７ml、２．６５mmol）、９−フルオレニルメチルスクシニルイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、８８０mg、２．６１mmol）をアセトニトリル（２５ml）および水（２５ml）中に含む混合物を、室温で一夜撹拌した。反応液をＴＬＣ分析すると、出発物質のアミノ酸の存在が示された。９−フルオレニルメチルスクシンイミジルカーボネート（２００mg）およびアセトニトリル（５ml）を添加し、混合物を室温でさらに２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してアセトニトリルの大部分を除去し、１０％クエン酸水溶液でｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを塩化メチレンで３回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗油状物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（１→４→８％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４，４−ジフェニルシクロヘキサン−１−カルボン酸（３５０mg、収率３９％）を白色固体として得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₃₄Ｈ₃₂ＮＯ₄（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：５１８．２３３１；実測値：５１８．２３１。
【０６４８】
実施例２７
Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−トランス−ｔ−ブチルシクロヘキサン−１−カルボン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｂｃ−ＯＨ）の調製
【０６４９】
工程１：
【０６５０】
【化２２０】

【０６５１】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、４−ｔ−ブチルシクロヘキサン（２．００ｇ、１３．０mmol）、シアン化カリウム（１．２７ｇ、１９．５mmol）、炭酸アンモニウム（７．４８ｇ、７７．８mmol）、エタノール（６０ml）および水（１２ml）の混合物を、８０℃の油浴中で１５時間加熱した。室温まで冷却後、白色スラリーを氷水中に注ぎ込み、室温で２〜３時間撹拌した。濾過して、ヒダントインＧＧＧ（２．７８ｇ、収率９６％）を白色固体として得て、これを粗生成物として、次の工程で用いた。¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１０．５２（１Ｈ，ブロード，ＮＨ），８．５０（１Ｈ，ブロード ｓ，ＮＨ），０．８１（９Ｈ，ｓ，ｔ−Ｂｕ）。
【０６５２】
工程２：
【０６５３】
【化２２１】

【０６５４】
密封した厚壁耐圧フラスコ中の、ヒダントインＧＧＧ（２．７８ｇ、１２．４mmol）、水酸化バリウム一水和物（１１．７４ｇ、６２．０mmol）および水（５０ml）の混合物を、１２０℃の油浴中で２日間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、激しい撹拌下に４Ｎ硫酸を用いてｐＨ約３まで酸性にした。懸濁液を、沸騰している水浴中で１時間撹拌し、室温まで冷却した。白色懸濁液を濾過し、沈殿を水で濯いだ。合わせた濾液と洗浄液を、減圧下に約３０mlまで濃縮した。濃水酸化アンモニウム溶液で中和して、白色沈殿を得て、これを濾過し、水で洗い、減圧下に一夜乾燥して、１−アミノ−４−トランス−ｔ−ブチルシクロヘキサン−１−カルボン酸（２．１０ｇ、収率８５％）を白色固体として得た。
【０６５５】
工程３：
【０６５６】
【化２２２】

【０６５７】
粗１−アミノ−４−トランス−ｔ−ブチルシクロヘキシル−１−カルボン酸（２．１０ｇ、１０．５４mmol）と９−フルオレニルメチルスクシニルイミジルカーボネート（Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ、６．３３ｇ、７．２０mmol）を、ジオキサン（１５０ml）と１０％炭酸ナトリウム溶液（１２０ml）中に含む混合物を、室温で２４時間撹拌した。反応混合物を減圧下に濃縮してジオキサンの大部分を除去し、３Ｎ ＨＣｌでｐＨ約３まで酸性にし、白色エマルションを塩化メチレンで２回抽出した。合わせた有機層を、水およびブラインで洗い、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（１→４→５％メタノール／塩化メチレンで溶離）により精製して、Ｆｍｏｃ−１−アミノ−４−トランス−ｔ−ブチルシクロヘキサン−１−カルボン酸（１．４２ｇ、収率３２％）を得た。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）：Ｃ₂₆Ｈ₃₂ＮＯ₄（Ｍ＋Ｈ）についての計算値：４２２．２３３１；実測値：４２２．２３。
【０６５８】
実施例２８
３Ｓ，２Ｓ−Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−βメチル（Ｎｉｎ−Ｍｅｓ）トリプトファン、Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−β−Ｍｅ（Ｎｉｎ−Ｍｅｓ）Ｔｒｐ−ＯＨの調製
【０６５９】
工程１：
【０６６０】
【化２２３】

【０６６１】
トランス−３−インドールアリール酸（１５．０ｇ、０．０８mole）の無水ＴＨＦ（３５０mL）溶液に、１．６Ｍ ｎ−ＢｕＬｉヘキサン溶液１２５mLを、−７８℃でゆっくり添加した。得られた懸濁液を−７８℃で１時間撹拌した。次に、２−メシチレンスルホニルクロリド（２１．９ｇ、０．１mole）の無水ＴＨＦ（５０mL）中に含む溶液を、ゆっくり添加した。混合物を室温まで暖め、一夜撹拌した。混合物を飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液に注いだ。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を除去すると、粗生成物ＨＨＨ １４．１ｇが得られ、これをさらに精製することなく次の工程に用いた。¹Ｈ ＮＭＲ分析は、２−メシチレンスルホン酸を含有していることを示した。¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ）δ７．５７（ｓ，１Ｈ），７．４２（ｄ，１Ｈ），７．１５〜７．３０（ｍ，３Ｈ），７．０２（ｓ，２Ｈ），６．５４（ｄ，１Ｈ），６．３６（ｄ，１Ｈ），２．５２（ｓ，９Ｈ），２．３０（ｓ，３Ｈ）。
【０６６２】
工程２：
【０６６３】
【化２２４】

【０６６４】
Ｎ−２−メシチレンスルホニル−トランス−３−インドールアリール酸（３．２６ｇ、８．８mmol）の無水ＴＨＦ（１４０mL）溶液に、−７８℃でトリエチルアミン３．７mL（３当量）およびＭｅ₃ＣＣＯＣｌ ２．１７mL（２当量）を添加した。得られた混合物を−７８℃で１５分間撹拌し、０℃で１．５時間撹拌した。混合物を−７８℃まで冷却し、ここに１．６Ｍ ｎ−ＢｕＬｉヘキサン溶液５．５mLを添加し、次に、（Ｒ）−４−フェニル−２−オキサゾリジノンおよびｎ−ＢｕＬｉをＴＨＦ中に含む混合物（（Ｒ）−４−フェニル−２−オキサゾリジノン（２．８７ｇ、１７．６mmol）を無水ＴＨＦ ７０mL中に含む溶液に、１．６Ｍ ｎ−ＢｕＬｉヘキサン溶液１１mLを−７８℃で添加することにより調製）を、カニューレを介して添加した。得られた混合物を−７８℃で２時間撹拌し、室温で一夜撹拌した。反応液をＮＨ₄Ｃｌ水溶液（１００mL）でクエンチした。有機溶媒を減圧下に除去した後、水性残渣をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫化ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：４）で精製して、生成物ＩＩＩを淡褐色ガム状物として得た（収率６３％（２．８６ｇ））。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₂₉Ｈ₂₆Ｎ₂Ｏ₅Ｓについての計算値：５１４、実測値：ｍ／ｚ ５１５（Ｍ＋Ｈ）。
【０６６５】
工程３：
【０６６６】
【化２２５】

【０６６７】
ＣｕＢｒ・Ｍｅ₂Ｓ（０．８４ｇ、４．０８mmol）および硫化ジメチル（５mL）の無水ＴＨＦ（１０mL）中の溶液に、３Ｍ ＣＨ₃ＭｇＢｒエーテル溶液（１．３６mL）を−４℃で添加した。１０分間撹拌した後、無水ＴＨＦ（８mL）中の前記生成物（１．４ｇ、２．７２mmol）を添加した。得られた混合物を、−４℃で１時間撹拌し、室温で６時間撹拌した。−７８℃に冷却後、Ｎ−ブロモスクシンイミド１．４５ｇ（８．１６mmol）を無水ＴＨＦ（１５mL）中に含む混合物を添加した。混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、室温で一夜撹拌した。混合物をブライン１００mL中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×１００mL）で抽出した。有機層を硫化ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン、１：４）で精製して、生成物ＪＪＪを淡褐色ガム状物として得た（収率４６％（０．７７ｇ））。
【０６６８】
【表２７】

【０６６９】
工程４：
【０６７０】
【化２２６】

【０６７１】
前記ブロミドＪＪＪ（０．７２ｇ、１．１８mmol）を、アセトニトリル１０mL中のテトラ−ｎ−ブチルアンモニウムアジド（１．６８ｇ、５．９mmol）およびナトリウムアジド（７７mg、１．１８mmol）と混合し、室温で６時間撹拌した。混合物をＮＨ₄Ｃｌ水溶液１００mLに注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×１００mL）で抽出した。有機層を硫化ナトリウムで乾燥した。濾過し、濃縮して粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂／ヘキサン、１：２：５）で精製して、生成物ＫＫＫを淡褐色ガム状物として得た（収率８２％（０．５５ｇ））。
【０６７２】
【表２８】

【０６７３】
工程５：
【０６７４】
【化２２７】

【０６７５】
前述のアジドＫＫＫ（０．５５ｇ、０．９６mmol）、水（４mL）およびＴＨＦ（１２mL）の混合物に、３０％Ｈ₂Ｏ₂ ０．６５mLを０℃で添加し、次に、水１mL中のＬｉＯＨ ４８mg（２当量）を添加した。得られた混合物を０℃で２時間撹拌した。反応液を水６mL中のＮａ₂ＳＯ₃（１ｇ）でクエンチした。混合物を室温でさらに３０分間撹拌した。有機溶媒を除去した後、水溶液を飽和ＮａＨＣＯ₃溶液１０mLで希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×３０mL）で抽出した。濾過し、濃縮して粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＨＯＡｃ／ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、１：１０：１００）により精製して、生成物ＬＬＬを灰色がかった白色固体として得た（収率８３％（０．３４ｇ））。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₂₁Ｈ₂₂Ｎ₄Ｏ₄Ｓについての計算値：４２６、実測値：ｍ／ｚ ４２５（Ｍ−Ｈ）。
【０６７６】
工程６：
【０６７７】
【化２２８】

【０６７８】
前記アジド酸ＬＬＬ（０．３４ｇ、０．８mmol）をメタノール２０mLに溶解した。溶液に、炭素担持１０％Ｐｄ １７０mgを添加した。得られた混合物をＨ₂（バルーン）雰囲気下に、室温で３時間撹拌した。濾過および濃縮後、粗生成物をＴＨＦ（１２mL）と水（４mL）の混合溶媒に溶解した。混合物にＮａＨＣＯ₃（２５４mg、３mmol）およびＦｍｏｃ−ＯＳｕ（５４０mg、１．６mmol）を添加した。得られた混合物を、室温で１８時間撹拌した。飽和ＮＨ₄Ｃｌ溶液３０mLで希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×３０mL）で抽出した。濾過し、濃縮して粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（ＨＯＡｃ／ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ、１：１０：１００）により精製して、生成物３Ｓ，２Ｓ−Ｆｍｏｃ−（Ｌ）−βメチル（Ｎｉｎ−Ｍｅｓ）トリプトファンを、灰色がかった白色固体として得た（収率５０％（０．２５ｇ））。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₃₆Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₆Ｓについての計算値：６２２、実測値：ｍ／ｚ ６２１（Ｍ−Ｈ）。
【０６７９】
実施例２９
Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂の調製
ベンズヒドリルアミンコポリスチレン−１％ジビニルベンゼン架橋樹脂（１０．０ｇ、９．３当量、１００〜２００ＡＳＴＭメッシュ、Ａｄｖａｎｃｅｄ ＣｈｅｍＴｅｃｈ製）を、ＣＨ₂Ｃｌ₂ １００mL中で膨潤させ、濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）およびＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）のそれぞれ１００mLで順次洗った。樹脂を、２５％ＤＭＦ／ＣＨ₂Ｃｌ₂ １００mL中のｐ−〔（Ｒ，Ｓ）−α−〔１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシホルムアミド〕−２，４−ジメトキシベンジル〕フェノキシ酢酸（Ｆｍｏｃ−リンカー）（７．０１ｇ、１３．０mmol）、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（２．１６ｇ、１６．０mmol）およびジイソプロピルカルボジイミド（２．０４ml、１３．０mmol）により、室温で２４時間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール（２回）、ＤＭＦおよびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ１００mlで順次洗った。カイゼルニンヒドリン分析は、ネガティブであった。樹脂を減圧下に乾燥して、Ｆｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂１６．１２ｇを得た。この樹脂の一部（３．５mg）をＦｍｏｃ脱保護に付し、定量的ＵＶ分析は、０．５６mmol／ｇの負荷を示した。
【０６８０】
実施例３０
Ａｃ−Ｎｌｅ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ｈｉｓ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０６８１】
【化２２９】

【０６８２】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載されたプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。７回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）（６００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ（４３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の無水酢酸１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、Ａｃ−ヘプタペプチド樹脂１．２ｇを得た。Ａｃ−ヘプタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０６８３】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ２５０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン６００μLを添加して、見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ３００mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られる反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０６８４】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末６０mg（１５％）を得た。この化合物は、ＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₀Ｈ₆₉Ｎ₁₅Ｏ₉計算値：１０２４、実測値：ｍ／ｚ（１０２５ Ｍ＋Ｈ）。
【０６８５】
実施例３１
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０６８６】
【化２３０】

【０６８７】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載されたプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０６８８】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで、１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。粗線状ペプチド２２０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られる反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０６８９】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５３mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₂Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０１７、実測値：ｍ／ｚ（１０１８ Ｍ＋Ｈ）。
【０６９０】
実施例３２
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０６９１】
【化２３１】

【０６９２】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載されたプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ（２）Ｎａｌ（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０６９３】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０６９４】
粗線状ペプチド２４０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られる反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０６９５】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₃Ｎ₁₁Ｏ₈計算値：１０２８、実測値：ｍ／ｚ（１０２９ Ｍ＋Ｈ）。
【０６９６】
実施例３３
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチル（２）Ｎａｌ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０６９７】
【化２３２】

【０６９８】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。２回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ（２）Ｎａｌ（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。
【０６９９】
２−Ｎａｌ残基からＦｍｏｃを除去した後、得られるアミンを、ＤＭＦ中の塩基としての２−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（５当量、４２６mg、１．９３mmol）およびＤＩＰＥＡ（５当量）を用いて、その２−ニトロベンゼンスルホニル誘導体に転換した。ＤＭＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ₂Ｃｌ₂（３×３０ml）を用いて洗浄を行い、樹脂を減圧下に乾燥した。得られたスルホンアミドを、ＴＨＦ中のトリフェニルホスフィン（５当量、５０５mg、１．９３mmol）、Ｎ，Ｎ−ジエチルアゾジカルボキシレート（５当量、３０３μL、１．９３mmol）およびメタノール（１０当量、１５６μL、３．８５mmol）を用いてメチル化に付した。ＴＨＦ（６×３０ml）、続いてＣＨ₂Ｃｌ₂（５×３０ml）を用いて洗浄を行い、樹脂を減圧下に乾燥した。次に、２−ニトロベンゼンスルホニル基を、ＤＭＦ中の１，８−ジアザビシクロ〔５．４．０〕ウンデカ−７−エン（３当量，１７３μL、１．１６mmol）、２−メルカプトエタノール（５当量、１３５μL、１．９３mmol）を用いて除去した。ＤＭＦ（３×３０ml）、イソプロパノール（３×３０ml）、続いてエチルエーテル（３×３０ml）を用いて洗浄を行ない、樹脂を減圧下に乾燥した。得られたＮ−Ｍｅ−２−Ｎａｌ樹脂を、４回のカップリングサイクルに付し、各１回のサイクルは、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０７００】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで、１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２３５mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７０１】
粗線状ペプチド２３５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られる反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７０２】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末４３mg（１０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₇Ｈ₇₅Ｎ₁₁Ｏ₈計算値：１０４２、実測値：ｍ／ｚ（１０４３ Ｍ＋Ｈ）。
【０７０３】
実施例３４
シクロ（コハク酸−Ｌｙｓ）−コハク酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７０４】
【化２３３】

【０７０５】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、ＤＭＦ中の無水コハク酸（６００mg、６mmol）とＤＩＰＥＡ １．１mlを用いた。
【０７０６】
樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンタペプチド樹脂１．０ｇを得た。ペンタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７０７】
粗線状ペプチド２２０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７０８】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末４０mg（１１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₄₉Ｈ₆₃Ｎ₁₁Ｏ₇計算値：９１８、実測値：ｍ／ｚ（９１９ Ｍ＋Ｈ）。
【０７０９】
実施例３５
シクロ（マレイン酸−Ｌｙｓ）−マレイン酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７１０】
【化２３４】

【０７１１】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、ＤＭＦ中の無水マレイン酸（６００mg、６mmol）にＨＯＢＴ（８００mg、６mmol）を加え、ＤＩＰＥＡは加えず用いた。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンタペプチド樹脂１．０ｇを得た。ペンタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２３０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７１２】
粗線状ペプチド２３０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られる反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７１３】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して：白色無定形粉末３８mg（１１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₄₉Ｈ₆₁Ｎ₁₁Ｏ₇計算値：９１６、実測値：ｍ／ｚ（９１７ Ｍ＋Ｈ）。
【０７１４】
実施例３６
シクロ（フタル酸−Ｌｙｓ）−フタル酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７１５】
【化２３５】

【０７１６】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、ＤＭＦ中の無水フタル酸（６６０mg、６mmol）にＤＩＰＥＡ １．１mlを加えて用いた。
【０７１７】
樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンタペプチド樹脂１．０ｇを得た。ペンタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７１８】
粗線状ペプチド２２０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７１９】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末３５mg（１０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₃Ｈ₆₃Ｎ₁₁Ｏ₇計算値：９６６、実測値：ｍ／ｚ（９６７ Ｍ＋Ｈ）。
【０７２０】
実施例３７
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＯＨＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７２１】
【化２３６】

【０７２２】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＯＨＡｐｃ（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０７２３】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２５mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７２４】
粗線状ペプチド２２５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７２５】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₂Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０３３、実測値：ｍ／ｚ（１０３４ Ｍ＋Ｈ）。
【０７２６】
実施例３８
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＭｅＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７２７】
【化２３７】

【０７２８】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＯＡｐｃ（６００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０７２９】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２３５mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７３０】
粗線状ペプチド２３５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７３１】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末４９mg（１２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₅Ｈ₇₄Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０４７、実測値：ｍ／ｚ（１０４８ Ｍ＋Ｈ）。
【０７３２】
実施例３９
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＥｔＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７３３】
【化２３８】

【０７３４】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＥｔＯＡｐｃ（６４０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０７３５】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２３５mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７３６】
粗線状ペプチド２３５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７３７】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末６０mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₆Ｈ₇₆Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０６１、実測値：ｍ／ｚ（１０６２ Ｍ＋Ｈ）。
【０７３８】
実施例４０
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ｉＰｒＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７３９】
【化２３９】

【０７４０】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ｉＰｒＯＡｐｃ（６６０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０７４１】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２６０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７４２】
粗線状ペプチド２６０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７４３】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末６３mg（１５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₇Ｈ₇₈Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０７５、実測値：ｍ／ｚ（１０７６ Ｍ＋Ｈ）。
【０７４４】
実施例４１
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−３−ＭｅＯＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７４５】
【化２４０】

【０７４６】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｃ（６００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０７４７】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２３５mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７４８】
粗線状ペプチド２３５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７４９】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末４９mg（１２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₅Ｈ₇₄Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０４７、実測値：ｍ／ｚ（１０４８ Ｍ＋Ｈ）。
【０７５０】
実施例４２
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＣｌＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７５１】
【化２４１】

【０７５２】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｃ（５６０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０７５３】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２３０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７５４】
粗線状ペプチド２３０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７５５】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末４９mg（１２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₁Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０５１、実測値：ｍ／ｚ（１０５２ Ｍ＋Ｈ）。
【０７５６】
実施例４３
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＭｅＡｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７５７】
【化２４２】

【０７５８】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｃ（５９０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０７５９】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７６０】
粗線状ペプチド２４０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７６１】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₅Ｈ₇₄Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０３１、実測値：ｍ／ｚ（１０３２ Ｍ＋Ｈ）。
【０７６２】
実施例４４
ペンタ−シクロ（Ｇｌｕ−Ｌｙｓ）−Ｇｌｕ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０７６３】
【化２４３】

【０７６４】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｕｔ）（５１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０７６５】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５５mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７６６】
粗線状ペプチド２５５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７６７】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末６０mg（１５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₅Ｈ₇₄Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０３１、実測値：ｍ／ｚ（１０３２ Ｍ＋Ｈ）。
【０７６８】
実施例４５
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｏｒｎ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｏｒｎ−ＮＨ₂の調製
【０７６９】
【化２４４】

【０７７０】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１５ｇを得た。
【０７７１】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７７２】
粗線状ペプチド２４０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７７３】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５３mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₃Ｈ₇₀Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１００３、実測値：ｍ／ｚ（１００４ Ｍ＋Ｈ）。
【０７７４】
実施例４６
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｄｂｒ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｂｒ−ＮＨ₂の調製
【０７７５】
【化２４５】

【０７７６】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｄｂｒ（Ｂｏｃ）（５４０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１０ｇを得た。
【０７７７】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７７８】
粗線状ペプチド２２０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７７９】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末３５mg（９％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₈Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：９８９実測値：ｍ／ｚ（９９０ Ｍ＋Ｈ）。
【０７８０】
実施例４７
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｄｐｒ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂の調製
【０７８１】
【化２４６】

【０７８２】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ）（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０７８３】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２００mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７８４】
粗線状ペプチド２００mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７８５】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末３０mg（８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₁Ｈ₆₆Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：９７５、実測値：ｍ／ｚ（９７６ Ｍ＋Ｈ）。
【０７８６】
実施例４８
Ａｃ−シクロ（Ａｓｐ−Ｄｐｒ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂の調製
【０７８７】
【化２４７】

【０７８８】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ）（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、アセチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０７８９】
アセチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２００mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７９０】
粗線状ペプチド２１０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７９１】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２８mg（８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₄₈Ｈ₆₀Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：９３３、実測値：ｍ／ｚ（９３４ Ｍ＋Ｈ）。
【０７９２】
実施例４９
シクロ（フタル酸−Ｄｐｒ）−フタル酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂の調製
【０７９３】
【化２４８】

【０７９４】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ）（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、ＤＭＦ中の無水フタル酸（６６０mg、６mmol）にＤＩＰＥＡ １．１mlを加えて用いた。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンタペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０７９５】
ペンタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０７９６】
粗線状ペプチド２２０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０７９７】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末３０mg（８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₀Ｈ₅₇Ｎ₁₁Ｏ₇計算値：９２４、実測値：ｍ／ｚ（９２５ Ｍ＋Ｈ）。
【０７９８】
実施例５０
シクロ（コハク酸−Ｄｐｒ）−コハク酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂の調製
【０７９９】
【化２４９】

【０８００】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ）（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、ＤＭＦ中の無水コハク酸（６００mg、６mmol）にＤＩＰＥＡ １．１mlを加えて用いた。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンタペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０８０１】
ペンタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２２０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０８０２】
粗線状ペプチド２２０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８０３】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末３１mg（８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₄₆Ｈ₅₇Ｎ₁₁Ｏ₇計算値：８７６、実測値：ｍ／ｚ（８７７ Ｍ＋Ｈ）。
【０８０４】
実施例５１
シクロ（マレイン酸−Ｄｐｒ）−マレイン酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂の調製
【０８０５】
【化２５０】

【０８０６】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｄｐｒ（Ｂｏｃ）（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、ＤＭＦ中の無水マレイン酸（６００mg、６mmol）にＨＯＢＴ（８００mg、６mmol）を加えＤＩＰＥＡは加えないで用いた。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンタペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０８０７】
ペンタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２３０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０８０８】
粗線状ペプチド２３０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８０９】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０ｃｍ）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２８mg（８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₄₆Ｈ₅₅Ｎ₁₁Ｏ₇計算値：８７４、実測値：ｍ／ｚ（８７５ Ｍ＋Ｈ）。
【０８１０】
実施例５２
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８１１】
【化２５１】

【０８１２】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｉｔ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．３ｇを得た。
【０８１３】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体３００mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０８１４】
粗線状ペプチド３００mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８１５】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末８０mg（２０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₁Ｎ₁₁Ｏ₉計算値：１０１８、実測値：ｍ／ｚ（１０１９ Ｍ＋Ｈ）。
【０８１６】
実施例５３
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８１７】
【化２５２】

【０８１８】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ（３８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．４ｇを得た。
【０８１９】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体３３０mgを得た。粗ペプチドを、精製することなく環化に付した。
【０８２０】
粗線状ペプチド３３０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８２１】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末８７mg（２０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₁Ｈ₆₅Ｎ₉Ｏ₈計算値：９３２、実測値：ｍ／ｚ（９３３ Ｍ＋Ｈ）。
【０８２２】
実施例５４
Ａｃ−Ｎｌｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｃｙｓ）−Ｃｙｓ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８２３】
【化２５３】

【０８２４】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。７回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（７１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（７１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ（４３０、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、Ａｃ−ヘプタペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０８２５】
Ａｃ−ヘプタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。
【０８２６】
この粗線状ペプチドを、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、精製された線状ペプチド４５mgを得た。
【０８２７】
精製された線状ペプチドをＤＭＳＯ ２mlに溶解し、水５００mlで希釈し、ＮＨ₄ＯＨでｐＨを８．０に調節した。Ｏ₂を溶液に吹き込み、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は２４〜４８時間で完了した。溶液を凍結乾燥し、材料をＣＨ₃ＣＯＯＨに溶解し、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣに付し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、精製された環状ペプチド２０mg（４．７％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₃Ｈ₇₀Ｎ₁₂Ｏ₈Ｓ₂計算値：１０６７、実測値：ｍ／ｚ（１０６８ Ｍ＋Ｈ）。
【０８２８】
実施例５５
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−（Ｄ，Ｌ）−Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８２９】
【化２５４】

【０８３０】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）−Ａｔｃ（５１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１５ｇを得た。
【０８３１】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４５mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８３２】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８３３】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₈Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：９８９、実測値：ｍ／ｚ（９９０ Ｍ＋Ｈ）。
【０８３４】
実施例５６
ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク１）
【０８３５】
【化２５５】

【０８３６】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｂｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０８３７】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２４０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８３８】
粗線状ペプチド２４０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８３９】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第１の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２６mg（６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₇Ｎ₁₂Ｏ₈Ｂｒ計算値：１０６８、実測値：ｍ／ｚ（１０６９ Ｍ＋Ｈ）。
【０８４０】
実施例５７
ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク２）
【０８４１】
【化２５６】

【０８４２】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｂｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０８４３】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８４４】
粗線状ペプチド２４０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８４５】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第２の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２０mg（５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₇Ｎ₁₂Ｏ₈Ｂｒ計算値：１０６８、実測値：ｍ／ｚ（１０６９ Ｍ＋Ｈ）。
【０８４６】
実施例５８
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク１）
【０８４７】
【化２５７】

【０８４８】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｃｌ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（５６０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０８４９】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８５０】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８５１】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第１の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２４mg（６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₇Ｎ₁₂Ｏ₈Ｃｌ計算値：１０２４、実測値：ｍ／ｚ（１０２５ Ｍ＋Ｈ）。
【０８５２】
実施例５９
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク２）
【０８５３】
【化２５８】

【０８５４】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｃｌ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（５６０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８５５】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８５６】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第２の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２０mg（４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₇Ｎ₁₂Ｏ₈Ｃｌ計算値：１０２４、実測値：ｍ／ｚ（１０２５ Ｍ＋Ｈ）。
【０８５７】
実施例６０
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＭｅＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８５８】
【化２５９】

【０８５９】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ＭｅＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０８６０】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８６１】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８６２】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₃Ｈ₇₀Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０１９、実測値：ｍ／ｚ（１０２０ Ｍ＋Ｈ）。
【０８６３】
実施例６１
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＥｔＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８６４】
【化２６０】

【０８６５】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ＥｔＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．３ｇを得た。
【０８６６】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２６０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８６７】
粗線状ペプチド２６０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８６８】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₂Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０３３、実測値：ｍ／ｚ（１０３４ Ｍ＋Ｈ）。
【０８６９】
実施例６２
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ｉＰｒＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８７０】
【化２６１】

【０８７１】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ｉＰｒＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０８７２】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８７３】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８７４】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５８mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₅Ｈ₇₄Ｎ₁₂Ｏ₉計算値：１０４７、実測値：ｍ／ｚ（１０４８ Ｍ＋Ｈ）。
【０８７５】
実施例６３
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−Ｍｅ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８７６】
【化２６２】

【０８７７】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｍｅ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（５９０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０８７８】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２６０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８７９】
粗線状ペプチド２６０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８８０】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末６２mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₃Ｈ₇₀Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１００３、実測値：ｍ／ｚ（１００４ Ｍ＋Ｈ）。
【０８８１】
実施例６４
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−Ｅｔ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８８２】
【化２６３】

【０８８３】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｅｔ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．３ｇを得た。
【０８８４】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４５mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８８５】
粗線状ペプチド２４５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８８６】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₂Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０１７、実測値：ｍ／ｚ（１０１８ Ｍ＋Ｈ）。
【０８８７】
実施例６５
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ｉＰｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０８８８】
【化２６４】

【０８８９】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ｉＰｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０８９０】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４５mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８９１】
粗線状ペプチド２４５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８９２】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５４mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₅Ｈ₇₄Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０３１、実測値：ｍ／ｚ（１０３２ Ｍ＋Ｈ）。
【０８９３】
実施例６６
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク１）
【０８９４】
【化２６５】

【０８９５】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｉｔ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｂｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０８９６】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２６０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０８９７】
粗線状ペプチド２４０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０８９８】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第１の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２４mg（５．６％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₆Ｎ₁₁Ｏ₉Ｂｒ計算値：１０６９、実測値：ｍ／ｚ（１０７０ Ｍ＋Ｈ）。
【０８９９】
実施例６７
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク２）
【０９００】
【化２６６】

【０９０１】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｉｔ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｂｒ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０９０２】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２４０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９０３】
粗線状ペプチド２４０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９０４】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第２の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２２mg（４．８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₆Ｎ₁₁Ｏ₉Ｂｒ計算値：１０６９、実測値：ｍ／ｚ（１０７０ Ｍ＋Ｈ）。
【０９０５】
実施例６８
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク１）
【０９０６】
【化２６７】

【０９０７】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｉｔ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｃｌ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（５６０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９０８】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４５mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９０９】
粗線状ペプチド２４５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９１０】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第２の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２２mg（５．８％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₆Ｎ₁₁Ｏ₉Ｃｌ計算値：１０２４、実測値：ｍ／ｚ（１０２５ Ｍ＋Ｈ）。
【０９１１】
実施例６９
ペンタ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製（ピーク２）
【０９１２】
【化２６８】

【０９１３】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｉｔ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−Ｃｌ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（５６０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９１４】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９１５】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９１６】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。第２の主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末２０mg（５．４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₆₆Ｎ₁₁Ｏ₉Ｃｌ計算値：１０２４、実測値：ｍ／ｚ（１０２５ Ｍ＋Ｈ）。
【０９１７】
実施例７０
Ａｃ−Ｎｌｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｃｙｓ）−Ｃｙｓ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９１８】
【化２６９】

【０９１９】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。７回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（７１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（７１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ（４３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、Ａｃ−ヘプタペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０９２０】
アセチル−ヘプタペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４０mgを得た。
【０９２１】
この粗線状ペプチドを、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、精製された線状ペプチド５５mgを得た。
【０９２２】
精製された線状ペプチドをＤＭＳＯ ２mlに溶解し、水５００mlで希釈し、ＮＨ₄ＯＨでｐＨを８．０に調節した。Ｏ₂を溶液に吹き込み、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は２４〜４８時間で完了した。溶液を凍結乾燥し、材料をＣＨ₃ＣＯＯＨに溶解し、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣに付し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、精製された環状ペプチド２０mg（５．０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₁Ｈ₆₆Ｎ₁₂Ｏ₈Ｓ₂計算値：１０３９、実測値：ｍ／ｚ（１０４０ Ｍ＋Ｈ）。
【０９２３】
実施例７１
ペンタ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｃｙｓ）−Ｃｙｓ−５−Ｂｒ（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９２４】
【化２７０】

【０９２５】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。７回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（７１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−５−ＢｒＡｔｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）（７１０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物１mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、Ａｃ−ヘプタペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０９２６】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４０mgを得た。
【０９２７】
この粗線状ペプチドを、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、精製された線状ペプチド５０mgを得た。
【０９２８】
精製された線状ペプチドをＤＭＳＯ ２mlに溶解し、水５００mlで希釈し、ＮＨ₄ＯＨでｐＨを８．０に調節した。Ｏ₂を溶液に吹き込み、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は２４〜４８時間で完了した。溶液を凍結乾燥し、材料をＣＨ₃ＣＯＯＨに溶解し、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣに付し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、精製された環状ペプチド２２mg（５．２％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₄₈Ｈ₆₀Ｎ₁₁Ｏ₇Ｓ₂計算値：１０４７、実測値：ｍ／ｚ（１０４８ Ｍ＋Ｈ）。
【０９２９】
実施例７２
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９３０】
【化２７１】

【０９３１】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９３２】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４５mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９３３】
粗線状ペプチド２４５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９３４】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５７mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₃Ｈ₇₁Ｎ₁₃Ｏ₈計算値：１０１８、実測値：ｍ／ｚ（１０１９ Ｍ＋Ｈ）。
【０９３５】
実施例７３
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−２−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９３６】
【化２７２】

【０９３７】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−２−ＭｅＡｐｐｃ（５７０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９３８】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９３９】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９４０】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末６１mg（１５％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₃Ｎ₁₃Ｏ₈計算値：１０３２、実測値：ｍ／ｚ（１０３３ Ｍ＋Ｈ）。
【０９４１】
実施例７４
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−２−ｉＰｒＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９４２】
【化２７３】

【０９４３】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−２−ｉＰｒＡｐｐｃ（６００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９４４】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４５mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９４５】
粗線状ペプチド２４５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９４６】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５２mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₆Ｈ₇₇Ｎ₁₃Ｏ₈計算値：１０６０、実測値：ｍ／ｚ（１０６１ Ｍ＋Ｈ）。
【０９４７】
実施例７５
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−３−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９４８】
【化２７４】

【０９４９】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＡｐｐｃ（５７０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９５０】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４８mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９５１】
粗線状ペプチド２４８mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９５２】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₃Ｎ₁₃Ｏ₈計算値：１０３２、実測値：ｍ／ｚ（１０３３ Ｍ＋Ｈ）。
【０９５３】
実施例７６
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＭｅＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９５４】
【化２７５】

【０９５５】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＭｅＡｐｐｃ（５７０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９５６】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５４mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９５７】
粗線状ペプチド２５４mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９５８】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５７mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₃Ｎ₁₃Ｏ₈計算値：１０３２、実測値：ｍ／ｚ（１０３３ Ｍ＋Ｈ）。
【０９５９】
実施例７７
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＣｌＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９６０】
【化２７６】

【０９６１】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＣｌＡｐｐｃ（５８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９６２】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９６３】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９６４】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５５mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₃Ｈ₇₀Ｎ₁₃Ｏ₈Ｃｌ計算値：１０３２、実測値：ｍ／ｚ（１０３３ Ｍ＋Ｈ）。
【０９６５】
実施例７８
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＰｈＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９６６】
【化２７７】

【０９６７】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−４−ＰｈＡｐｐｃ（６５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９６８】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２７０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９６９】
粗線状ペプチド２７０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９７０】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５８mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₉Ｈ₇₅Ｎ₁₃Ｏ₉計算値：１１１０、実測値：ｍ／ｚ（１１１１ Ｍ＋Ｈ）。
【０９７１】
実施例７９
ペンタ−（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−３−ＭｅＯ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９７２】
【化２７８】

【０９７３】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−３−ＭｅＯＡｐｐｃ（５８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．２ｇを得た。
【０９７４】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９７５】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９７６】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５４mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₃Ｎ₁₃Ｏ₉計算値：１０４８、実測値：ｍ／ｚ（１０４９ Ｍ＋Ｈ）。
【０９７７】
実施例８０
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−Ａｄｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９７８】
【化２７９】

【０９７９】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｄｐｃ（６２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０９８０】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２４２mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９８１】
粗線状ペプチド２４２mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９８２】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末４８mg（１１％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₆₀Ｈ₇₆Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０９３、実測値：ｍ／ｚ（１０９４ Ｍ＋Ｈ）。
【０９８３】
実施例８１
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｃｈｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９８４】
【化２８０】

【０９８５】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｃｈｃ（５６０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．１ｇを得た。
【０９８６】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９８７】
粗線状ペプチド２５０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９８８】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５２mg（１３％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₄Ｈ₇₈Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０２３、実測値：ｍ／ｚ（１０２４ Ｍ＋Ｈ）。
【０９８９】
実施例８２
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｂｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９９０】
【化２８１】

【０９９１】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（５２０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｂｃ（５３０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、０．６mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１３ｇを得た。
【０９９２】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、室温で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびトリフルオロ酢酸１０mLで１８０分間処理した。樹脂を濾去し、ＴＦＡ約２mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体２５５mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９９３】
粗線状ペプチド２５５mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【０９９４】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末５８mg（１４％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₂Ｈ₇₆Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：９９７、実測値：ｍ／ｚ（９９８ Ｍ＋Ｈ）。
【０９９５】
実施例８３
ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２Ｓ，３Ｓ）βメチル−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂の調製
【０９９６】
【化２８２】

【０９９７】
実施例２９からのＦｍｏｃ−リンカー−ＢＨＡ樹脂（７２０mg、０．４mmol）を、先に記載のプロトコール１を用いて固相合成に付した。すべてのカップリングは、カップリング剤としてのＤＭＦ中のＨＢＴＵおよび塩基としてのＤＩＰＥＡ（３当量）を用いて行った。６回のカップリングサイクルを行い、その各１サイクルは、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）（５６５mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（２Ｓ，３Ｓ）βメチル（nMｅｓ）Ｔｒｐ（６１６mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｍｃ）（８００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ（４８０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｐｃ（５５０mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｕｔ）（５００mg、１．２mmol）およびＨＢＴＵ（４５２mg、１．２mmol）を用いた。ペプチド樹脂をプロトコール１の工程１〜５に付し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗い（３回）、６％ＤＩＰＥＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂中の吉草酸無水物２mLで３０分間処理した。樹脂を濾過し、ＣＨ₂Ｃｌ₂（２回）、イソプロパノール、およびＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）のそれぞれ５０mlで順次洗った。樹脂を減圧下に乾燥して、ペンチルヘキサペプチド樹脂１．０ｇを得た。
【０９９８】
ペンチルヘキサペプチド樹脂を、０℃で、エタンジチオール１００μL、硫化ジメチル１００μL、アニソール２５０μLおよびＨＦ１０mLで６０分間処理した。ＨＦを蒸発させて、樹脂を酢酸エチルで洗い、濾過し、ＴＦＡ約５mlで洗い、濾液を冷たいエチルエーテル中で沈殿させた。沈殿を遠心分離し、エーテル層をデカンテーションした。残渣を２倍または３倍体積のＥｔ₂Ｏで洗い、再び遠心分離し、粗線状生成物を減圧下に乾燥して、灰色がかった白色固体１８０mgを得た。粗ペプチドを精製することなく環化に付した。
【０９９９】
粗線状ペプチド１８０mgをＤＭＦ ２２０mlに溶解し、Ｎ−メチルモルホリン５００μLを添加して見掛けのｐＨを８．０とした。ＢＯＰ ２８０mgを添加し、ＨＰＬＣで環化をモニターした。典型的には、環化は１８〜２４時間で完了した。水１０mlを添加して反応を停止し、ＤＭＦを減圧下に蒸発させ、得られた反応混合物をＨＰＬＣで精製した。
【１０００】
この粗環状材料を、Ｖｙｄａｃ Ｃ１８−カラム（２．５×２０cm）上の分取ＨＰＬＣで精製し、２０〜６０％Ｂ（緩衡液Ａ：０．１％ＴＦＡ／Ｈ₂Ｏ、緩衡液Ｂ：０．１％ＴＦＡ／ＣＨ₃ＣＮ）の線形勾配で９０分間溶離し、流速を８ml/minとし、検出を２８０nmで行った。主なピークは、集めた画分の分析的ＨＰＬＣ分析によりカットし、貯留し、凍結乾燥して、白色無定形粉末４０mg（１０％）を得た。この化合物はＨＰＬＣによると均質であった。ＬＲ−エレクトロスプレー：Ｃ₅₅Ｈ₇₄Ｎ₁₂Ｏ₈計算値：１０３１、実測値：ｍ／ｚ（１０３２ Ｍ＋Ｈ）。
【１００１】
生物学的活性実施例
実施例Ａ：作動薬アッセイ
方法
説明：ＭＣ−４受容体またはＭＣ−１受容体をトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞を、９６ウエルプレートで成長させた。細胞を、１００nMのＮＤＰ−αＭＳＨまたはスクリーニング化合物で刺激した。細胞から環状ＡＭＰを抽出し、濃度を、Ｂｉｏｔｒａｋ−ｃＡＭＰアッセイを用いて測定した。作動薬は、ｃＡＭＰの増加を引き起こす化合物と認識した。
【１００２】
細胞培養：ＭＣ−４受容体またはＭＣ−１受容体をトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞を、１０％ＦＣＳおよびＧ４１８ ５００μg／mlを補ったＤ−ＭＥＭ中、７５cmフラスコで培養した。細胞をトリプシン処理し、９６ウエル平底組織培養処理プレートに１：３に分割した。コンフルエンスで細胞を刺激した（２〜４日）。
【１００３】
ｃＡＭＰ反応：１００％ＤＭＳＯ中に連続的に希釈した化合物を、さらに１０％ＦＢＳおよび０．１mM ＩＢＭＸを含むＤ−ＭＥＭ中で、１：２００に希釈した（希釈化合物２．５μl＋培地５００μl）。非刺激細胞については、ＤＭＳＯ ２．５μlを培地５００μlに添加した。ＮＤＰ−αＭＳＨ刺激細胞については、１００％ＤＭＳＯ中の２０μM ＮＤＰ−αＭＳＨ ２．５μlを培地５００μlに添加した（最終濃度：１００nM）。ＤＭＳＯの最終濃度はすべてのウエルにおいて０．５％であった。
【１００４】
注意：各サンプルは、別のプレートで２回実施した。
【１００５】
培養培地を、コンフルエントの９６ウエルから除去し、前記希釈材料２００μlと共に適切なウエル内に置き換えた。プレートを室温で１時間インキュベートした。培地を除去し、プレートを、ＰＢＳ ２００μlで１回洗った。ＣＡＭＰを、７０％エタノール６０μlを添加して抽出した（冷蔵庫内に貯蔵）。３０分の抽出時間後、エタノール抽出物１０μｌを、ｃＡＭＰアッセイプレートに移し、またはサンプルをｃＡＭＰアッセイが行われるまで−２０℃で貯蔵した。
【１００６】
ｃＡＭＰアッセイ：抽出されたサンプルおよびキットに含まれるすべての試薬を、室温に調整した。９６ウエル光学プレートに、エタノール抽出物１０μl、アッセイ緩衝液４０μl、〔１２５Ｉ〕ｃＡＭＰ ５０μl、抗血清５０μlおよびＳＰＡビード５０μlを添加した。添加後の合計ウエル体積は２００μlであった。プレートを密封し、室温で１５〜２０時間インキュベートした。ＳＰＡビードにカップリングしている〔１２５Ｉ〕ｃＡＭＰを、各プレートをＰａｃｋａｒｄ ＴｏｐＣｏｕｎｔ（商標）上で２分間数えることにより測定した。
【１００７】
注意：各プレートは、非刺激細胞用の対照サンプル、および刺激細胞用のＮＤＰ−αＭＳＨを含んでいた。
【１００８】
結果を以下の表Ｉに示す。
【１００９】
【表２９】

【１０１０】
実施例Ｂ：注射溶液は、以下の組成をとり得る。
式Ｉで示される化合物 ３．０mg
ゼラチン １５０．０mg
フェノール ４．７mg
注射溶液用の水 １．０mlにする量

Claims (48)

1. 下記式：
   

   

   （式中、
   Ｒ¹およびＲ¹²は、ＸおよびＹと一緒になってフェニル環を形成し、ＸはＣであり、ＹはＣであるか、あるいは、
   Ｒ¹は、水素、
   

   

   であり；そして
   Ｒ¹²は、水素であり、ＸおよびＹは、それぞれＣであり、ＸとＹとの間の結合は二重結合であるか、またはＸおよびＹは、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合は一重結合であり；
   Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；
   Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
   ｎは、０または１であり；そして
   Ｑは、
   

   

   であり（式中、Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵は、独立して水素、ハロ、１〜４個の炭素原子を有するアルキル、ヒロドキシ、または１〜４個の炭素原子を有するアルコキシであり、ここで、Ｒ⁴が水素でない場合、Ｒ³およびＲ⁵はいずれも水素であり；そしてＲ⁶は、水素、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、１〜３個の炭素原子を有するアルコキシ、フェノキシまたはハロであり；Ｒ¹¹およびＲ¹³は、それぞれ独立して水素、３または４個の炭素原子を有するアルキル、５または６個の炭素原子を有するシクロアルキルであるか、あるいはＲ¹¹およびＲ¹³は、いずれもフェニルである）；
   Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨであり；
   Ｒ⁸は、水素またはメチルであり；
   Ｒ⁹は、
   

   

   であり；
   Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；
   ｐは、０または１であり；
   ｍは、０、１、２または３であり；
   Ｚは、
   

   

   であり；そして
   Ｒ¹⁷は、水素または１〜６個の炭素原子を有するアルキルである）
   の化合物、ならびに薬学的に許容されるその塩。
2. 下記式：
   

   

   （式中、
   Ｒ¹およびＲ¹²は、ＸおよびＹと一緒になってフェニル環を形成し、ＸはＣであり、ＹはＣであるか、あるいは、
   Ｒ¹は、水素、
   

   

   であり；そして
   Ｒ¹²は、水素であり、ＸおよびＹは、それぞれＣであり、ＸとＹとの間の結合は二重結合であるか、またはＸおよびＹは、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合は一重結合であり；
   Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；
   Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
   ｎは、０または１であり；
   Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵は、独立して水素、ハロ、１〜４個の炭素原子を有するアルキル、ヒロドキシまたは１〜４個の炭素原子を有するアルコキシであり、ここで、Ｒ⁴が水素でない場合、Ｒ³およびＲ⁵はいずれも水素であり；
   Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨであり；
   Ｒ⁸は、水素またはメチルであり；
   Ｒ⁹は、
   

   

   であり；
   Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；
   ｐは、０または１であり；
   ｍは、０、１、２または３であり；
   Ｚは、
   

   

   であり；そして
   Ｒ¹⁷は、水素または１〜６個の炭素原子を有するアルキルである）
   の化合物、ならびに、薬学的に許容されるその塩。
3. ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が一重結合であり；Ｚが、
   

   

   であり；
   Ｒ⁷が、Ｏであり；
   Ｒ¹が、
   

   

   であり；
   Ｒ²が、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；そして
   Ｒ¹⁰およびＲ¹²が、いずれも水素である、
   請求項２記載の化合物。
4. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項３記載の化合物。
5. Ｚが、
   

   

   であり；
   Ｒ⁷が、ＮＨであり；
   Ｒ¹が、水素、
   

   

   であり；
   Ｒ²が、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；そして
   Ｒ¹⁰およびＲ¹²が、いずれも水素であり；かつ
   ｎおよびＲ¹⁴が、請求項２に定義されたとおりである、
   請求項２記載の化合物。
6. ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が一重結合であり；ｎが０であり；そしてＲ⁹が、
   

   

   である、
   請求項５記載の化合物。
7. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−（２）Ｎａｌ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂またはペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｎ−メチル（２）Ｎａｌ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項６記載の化合物。
8. Ｚが、
   

   

   であり；
   Ｒ⁷が、ＮＨであり；Ｒ¹が、
   

   

   であり；
   Ｒ²が、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；Ｒ¹⁰およびＲ¹²が、いずれも水素であり；Ｒ⁹が、
   

   

   であり；そして
   Ｒ¹⁷が、請求項２に定義されたとおりである、
   請求項５記載の化合物。
9. ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が一重結合であり；Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵のうち１個が水素、ハロまたは１〜４個の炭素原子を有するアルキルであり、残りが水素である、請求項５記載の化合物。
10. 

    である、請求項９記載の化合物。
11. ＸおよびＹが、それぞれＣＨであり、ＸとＹとの間の結合が一重結合であり；Ｒ¹が、
    

    

    であり；
    Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵のうち１個が１〜４個の炭素原子を有するアルコキシであり、残りが水素であり；ｎが、０である、請求項８記載の化合物。
12. 

    である、請求項１１記載の化合物。
13. Ｒ¹、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、それぞれ水素であり；
    Ｒ⁷が、ＮＨであり；
    Ｒ⁹が、
    

    

    であり；
    ｐが、０であり；そしてＲ¹⁷が、請求項２に定義されたとおりである、
    請求項８記載の化合物。
14. 

    である、請求項１３記載の化合物。
15. Ｒ¹およびＲ¹²が、ＸおよびＹと一緒になってフェニル環を形成する、請求項２記載の化合物。
16. シクロ（フタル酸−Ｌｙｓ）−フタル酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂もしくはシクロ（フタル酸−Ｄｐｒ）フタル酸−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｄｐｒ−ＮＨ₂、またはＡｃ−Ｎｌｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｃｙｓ）−Ｃｙｓ−Ａｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ＮＨ₂である、請求項１５記載の化合物。
17. 下記式：
    

    

    （式中、
    Ｒ¹は、水素、
    

    

    であり；
    Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；
    Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
    ｎは、０または１であり；
    Ｒ⁶は、水素、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、１〜３個の炭素原子を有するアルコキシ、フェノキシまたはハロであり；
    Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨであり；
    Ｒ⁸は、水素またはメチルであり；
    Ｒ⁹は、
    

    

    であり；
    Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；
    ｐは、０または１であり；
    ｍは、０、１、２または３であり；そして
    Ｚは、
    

    

    であり；かつ
    Ｒ¹⁷は、水素または１〜６個の炭素原子を有するアルキルである）
    の化合物、ならびに、薬学的に許容されるその塩。
18. Ｚが、
    

    

    であり；
    Ｒ⁷が、ＮＨであり；
    Ｒ¹が、
    

    

    であり；
    Ｒ²が、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
    Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、それぞれ水素であり；そして
    Ｒ⁹が、
    

    

    であり；かつ
    Ｒ¹⁷が、請求項１７に定義されたとおりである、
    請求項１７記載の化合物。
19. Ｒ⁶が、水素または１〜３個の炭素原子を有するアルキルである、請求項１８記載の化合物。
20. 

    である、請求項１９記載の化合物。
21. Ｒ⁶が、ハロである、請求項１７記載の化合物。
22. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＣｌＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項２１記載の化合物。
23. Ｒ⁶が、１〜３個の炭素原子を有するアルコキシまたはフェノキシである、請求項１８記載の化合物。
24. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−ＰｈＯＡｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂またはペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−３−ＭｅＯ−Ａｐｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項２３記載の化合物。
25. 下記式：
    

    

    （式中、
    Ｒ¹は、水素、
    

    

    であり；
    Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；
    Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
    ｎは、０または１であり；
    Ｒ¹¹およびＲ¹³は、それぞれ独立して水素、３個もしくは４個の炭素原子を有するアルキル、または５個もしくは６個の炭素原子を有するシクロアルキルであるか、あるいはＲ¹¹およびＲ¹³は、いずれもフェニルであり；
    Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨであり；
    Ｒ⁸は、水素またはメチルであり；
    Ｒ⁹は、
    

    

    であり；
    Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；
    ｐは、０または１であり；
    ｍは、０、１、２または３であり；そして
    Ｚは、
    

    

    であり；かつ
    Ｒ¹⁷は、水素または１〜６個の炭素原子を有するアルキルである）
    の化合物、ならびに、薬学的に許容されるその塩。
26. Ｚが、
    

    

    であり；
    Ｒ⁷が、ＮＨであり；
    Ｒ¹が、
    

    

    であり；
    Ｒ²が、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
    Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、それぞれ水素であり；そして
    Ｒ⁹が、
    

    

    であり；かつ
    Ｒ¹⁷が、水素または１〜６個の炭素原子を有するアルキルである、
    請求項２５記載の化合物。
27. Ｒ¹¹およびＲ¹³のうち１個が、３個もしくは４個の炭素原子を有するアルキル、または５個もしくは６個の炭素原子を有するシクロアルキルであり、他が水素である、請求項２６記載の化合物。
28. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｃｈｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂またはペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−Ａｂｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項２７記載の化合物。
29. Ｒ¹¹およびＲ¹³が、いずれもフェニルである、請求項２６記載の化合物。
30. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−４−Ａｄｐｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項２９記載の化合物。
31. 下記式：
    

    

    （式中、
    Ｒ¹は、水素、
    

    

    であり；
    Ｒ²は、１〜５個の炭素原子を有するアルキル、２〜５個の炭素原子を有するアルケニル、または２〜５個の炭素原子を有するアルキニルであり；
    Ｒ¹⁴は、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
    ｎは、０または１であり；
    Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵およびＲ⁶のうち１個が、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、または１〜３個の炭素原子を有するアルコキシであり、残りが、水素であり；
    Ｒ⁷は、ＯまたはＮＨであり；
    Ｒ⁸は、水素またはメチルであり；
    Ｒ⁹は、
    

    

    であり；
    Ｒ¹⁰は、水素またはメチルであり；
    ｐは、０または１であり；
    ｍは、０、１、２または３であり；そして
    Ｚは、
    

    

    であり；かつ
    Ｒ¹⁷は、水素または１〜６個の炭素原子を有するアルキルである）
    の化合物、ならびに、薬学的に許容されるその塩。
32. Ｚが、
    

    

    であり；
    Ｒ¹が、
    

    

    であり；
    Ｒ²が、１〜５個の炭素原子を有するアルキルであり；
    Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、それぞれ水素であり；
    Ｒ⁶が、水素、ハロ、１〜３個の炭素原子を有するアルキル、または１〜３個の炭素原子を有するアルコキシであり；そして
    Ｒ⁹が、
    

    

    であり；かつ
    Ｒ¹⁷が、請求項３１に定義されたとおりである、
    請求項３１記載の化合物。
33. Ｒ⁷が、ＮＨである、請求項３２記載の化合物。
34. Ｒ⁶が、水素、または１〜３個の炭素原子を有するアルキルである、請求項３２記載の化合物。
35. 

    である、請求項３４記載の化合物。
36. Ｒ⁶が、ハロである、請求項３１〜３３のいずれか１項記載の化合物。
37. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂またはペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項３６記載の化合物。
38. Ｒ⁶が、１〜３個の炭素原子を有するアルコキシである、請求項３１〜３３のいずれか１項記載の化合物。
39. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＭｅＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂、ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＥｔＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂またはペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ｉＰｒＯ−（Ｄ，Ｌ）Ａｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項３８記載の化合物。
40. Ｒ⁷が、Ｏであり、Ｒ⁶が、ハロである、請求項３１または３２記載の化合物。
41. ペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＢｒＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂またはペンタ−シクロ（Ａｓｐ−Ｌｙｓ）−Ａｓｐ−５−ＣｌＡｔｃ−（Ｄ）Ｐｈｅ−Ｃｉｔ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−ＮＨ₂である、請求項４０記載の化合物。
42. Ｚが、−Ｓ−Ｓ−であり；
    Ｒ¹が、
    

    

    であり；
    Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁸およびＲ¹⁰が、水素であり；
    Ｒ⁶が、水素またはハロであり；
    Ｒ⁷が、ＮＨであり；そして
    Ｒ⁹が、
    

    

    であり；ここでＲ¹⁷は、前述のとおりである、
    請求項３1記載の化合物。
43. 

    である、請求項４２記載の化合物。
44. 前駆体線状ペプチドのＺ位において、ラクタム結合またはジスルフィド結合を形成することにより、式：
    

    

    （式中、Ｒ¹〜Ｒ¹²、ｍ、ｐ、Ｑ、Ｘ、ＹおよびＺは、請求項１〜４３に定義されたとおりである）
    の化合物を製造する方法。
45. 請求項１〜４３のいずれか１項記載の化合物、および治療に不活性な担体を含む、肥満の治療および／または予防用の薬学的組成物。
46. 請求項１〜４３のいずれか１項記載の化合物を使用する、肥満の治療および／または予防用の薬剤を調製する方法。
47. 請求項４４記載の方法により製造される、請求項１〜４３のいずれか１項記載の化合物。
48. 治療活性物質として用いるための、請求項１〜４３のいずれか１項記載の化合物。