CN100378107C - 唑并嘧啶和呋喃并嘧啶化合物以及它们作为抗肿瘤药物的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及可药用的式I化合物，其中各基团具有说明书中给出的含义。式I化合物可用于对抗肿瘤疾病。

Description

唑并嘧啶和呋喃并嘧啶化合物以及它们作为抗肿瘤药物的用途

发明概述

本发明涉及唑并嘧啶和/或呋喃并嘧啶衍生物、制备它们的中间体和方法、含这些化合物的药物制剂以及它们作为药物或在制备药物中的用途。

背景技术

在工业化国家中，肿瘤疾病是引起死亡的最重要的原因之一。为了提供能有效治疗肿瘤的组合物和方法，已经作出了大量的努力。具体地讲，由于可能发生的肿瘤疾病数量众多并且变异广泛，一直需要有新的药理学活性的化合物和组合物，这种新的化合物和组合物由于其活性成分，可适合于治疗尽可能多的肿瘤疾病，或者适合于治疗特定的肿瘤疾病。此外，还存在大量其它增殖性疾病或由于缺少生理调节或调节不佳而引起的疾病。

发明详述

本发明涉及式I化合物或其盐，制备它们的中间体和方法、含这些化合物的药物制剂、以及它们作为药物或在制备药物(药物制剂)中的用途，

其中，X代表氮或带有基团A的碳原子；

A代表氢或-COOW，其中W为氢、烷基、芳基、杂环基或环烷基，其中每个基团均可以是未取代或取代的；

Y为NR′、S或O，其中R′代表氢或烷基；

R代表烷基、芳基、杂环基、环烷基、芳基-烷基、杂环基-烷基或环烷基-烷基，其中每个基团均可以是未取代或取代的；或者R为COOR′、COR′或CONR′R″，其中R′和R″彼此独立地为氢、烷基、芳基、杂环基、环烷基、芳基-烷基、杂环基-烷基或环烷基-烷基，其中每个基团均可以是未取代或取代的；且

Q为芳基、芳基-烷基、杂环基、杂环基-烷基、环烷基或环烷基-烷基，其分别是未取代或取代的。

除非特别指出，以上和以下采用的通用术语在整个公开文本中优选具有以下含义：

前缀“低级”指最多含7个(包括7个)碳原子的基团，尤其是含最多4个(包括4个)碳原子的基团，所述基团为直链或带一个或多个支链的支链基团。

用于化合物或盐等的复数形式也可用于指单个化合物或盐等。

取代基中任何存在的非对称碳原子可以是(R)、(S)或(R，S)构型，优选是(R)或(S)构型。因此本发明的化合物可以是异构体混合物或纯异构体，优选是纯非对映异构体或对映体。

烷基优选为含1至20个碳原子、尤其是1至10个碳原子的烷基，优选低级烷基，特别是甲基。烷基为直链的或带有一个或多个支链。烷基为未取代的或被一个或多个、优选最多三个、尤其是1或2个彼此独立地选自以下称为芳基取代基的取代基所取代。

低级烷基为直链的或带有一个或多个支链，尤其是甲基或乙基，也可以是正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基。

芳基优选为含6至18个碳原子、优选6至14个碳原子的芳香基团，尤其是苯基、萘基、芴基或菲基，其中芳基、特别是所述基团可以是未取代的或者被一个或多个取代基、优选最多三个、主要是一或两个取代基取代，所述取代基选自：氨基；低级烷基氨基；N，N-二低级烷基氨基；氨基低级烷基；低级烷基氨基低级烷基；N，N-二低级烷基氨基低级烷基；低级链烷酰基氨基，特别是乙酰氨基；卤素，特别是氟、氯或溴；低级烷基，特别是甲基，也可以是乙基或丙基；低级链烯基；苯基；萘基；低级卤代烷基，特别是三氟甲基；羟基；低级烷氧基，特别是甲氧基，也可以是乙氧基；低级链烯氧基；苯基低级烷氧基，特别是苄氧基；低级链烷酰氧基；氨基甲酰基低级烷氧基；羧基低级烷氧基；苯基低级烷氧羰基低级烷氧基；巯基；硝基；羧基、低级烷氧羰基；苯基低级烷氧羰基；氰基；C₈-C₁₂-烷氧基，特别是正癸氧基；氨基甲酰基；低级烷基氨基甲酰基，如N-甲基-或N-叔丁基氨基甲酰基；N，N-二低级烷基氨基甲酰基；N-苯基-或N，N-二苯基低级烷基氨基甲酰基；低级链烷酰基，如乙酰基；苯氧基；低级卤代烷氧基，如三氟甲氧基或1，1，2，2-四氟乙氧基；低级烷氧羰基，如乙氧羰基；低级烷基哌嗪基羰基；吗啉基羰基；低级烷基哌嗪基低级烷基；吗啉基低级烷基；低级烷硫基，如甲硫基；低级卤代烷硫基，如三氟甲硫基；低级羟烷基，如羟甲基或1-羟甲基；低级烷基磺酰基，如甲磺酰基；卤素低级链烷磺酰基，如三氟甲磺酰基；苯磺酰基；二羟基硼基-B(OH)₂)；低级烷基嘧啶基，如2-甲基嘧啶-4-基；唑基，如唑-5-基；低级烷基二氧杂环戊基，如2-甲基-1，3-二氧戊环-2-基；吡唑基，如1H-吡唑-3-基；低级烷基吡唑基，如1-甲基吡唑-3-基；与两个相邻碳原子键合的低级亚烷基二氧基，如亚甲二氧基；吡啶基；哌嗪基；低级烷基哌嗪基；吗啉基；未取代或苯基部分被卤素、低级烷基、羟基、低级链烷酰氧基、低级烷氧基、羧基、低级烷氧羰基、氨基甲酰基、N-低级烷基氨基甲酰基、N，N-二低级烷基氨基甲酰基、氰基、氨基、低级链烷酰基氨基、低级烷基氨基、N，N-二低级烷基氨基或三氟甲基取代的苯氨基或苯基低级烷基氨基；或式R₃-S(O)_m-的基团，其中R₃为低级烷基，m为0、1或2。在本发明的优选实施方案中，被一个或多个取代基取代的芳基具体是低级烷基哌嗪基羰基苯基、吗啉基羰基苯基、N，N-二低级烷基氨基甲酰基苯基、低级烷基哌嗪基低级烷基苯基、吗啉基低级烷基苯基或N，N-二低级烷基氨基低级烷基苯基。

卤素特别是氟、氯、溴或碘，尤其是氟或氯。

低级卤代烷基为特别是被卤素如氟或氯取代的甲基或乙基，尤其是甲基氟或甲基氯。

低级羟烷基特别是末端被羟基取代的低级烷基，优选羟甲基。

杂环基优选为完全饱和、部分饱和或不饱和的基团，并且优选是单环、双环或三环；其优选含1至20、尤其是含1至14个环原子，其中至少是在与式I化合物中其余的基团键合的环和/或其它环(如果存在的话)中有一个或多个、尤其是1至4个、主要是1或2个环原子为特别选自于氮、氧和硫的杂原子；其中杂芳基为未取代的或被一个或多个彼此独立地选自指定为芳基取代基的基团所取代；所述杂芳基特别选自于吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌啶基、哌嗪基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、奎宁环基、吗啉基、硫代吗啉基、苯并二氢吡喃基、异苯并二氢吡喃基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、吡喃基、噻蒽基、异苯并呋喃基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、2H-吡咯基、吡咯基、苯并咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、唑基、异唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吲嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、三唑基、四唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、异喹啉基、喹啉基、2，3-二氮杂萘基、1，5-二氮杂萘基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、咔唑基、菲啶基、吖啶基、萘嵌间二氮杂苯基、菲咯啉基和呋咱基，其中这些基团可以是未取代的或者被1至3个、优选1或2个可以彼此独立地进行选择的、指定为芳基取代基的取代基所取代。Q最优选为吡啶基或吲哚基。

环烷基优选为C₃-C₁₂-环烷基，尤其是C₃-C₈-环烷基，特别是环丙基、环丁基、环戊基或环己基；其为未取代的或被一个或多个、尤其是1至3个、优选1或2个彼此独立地指定为芳基取代基的取代基所取代。

芳基烷基优选为芳基低级烷基，例如芳基甲基，其中芳基优选如上所定义，并且是未取代的或如上所述被取代。

杂环基烷基优选是杂环基低级烷基，例如杂环基甲基，其中杂环基优选如上所定义，并且是未取代的或如上所述被取代。

环烷基烷基优选为环烷基低级烷基，例如环烷基甲基，其中环烷基优选如上所定义，并且是未取代的或如上所述被取代。

带有基团A的碳原子具有式C(A)的结构。

优选其中X代表氮的式I化合物。另一方面也优选其中X代表带有基团A的碳原子，尤其是X代表CH的式I化合物。

盐主要是式I化合物的可药用盐。如果式I化合物中有成盐基团，则可以生成盐。式I化合物的盐特别是酸加成盐(如果式I化合物中有碱性基团，如氨基或亚氨基的话)或者是与阳离子或碱形成的盐(如果式I化合物中有酸性基团，如羧基的话)；当存在多个成盐基团时，也可生成内盐或混盐。

该盐可由含碱性氮原子的式I化合物形成，例如优选与有机酸或无机酸形成酸加成盐，特别是可药用盐。适宜的无机酸例如是氢卤酸如盐酸、硫酸或磷酸。适宜的有机酸例如是羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、月桂酸、乙醇酸、乳酸、2-羟基丁酸、葡萄糖酸、葡萄糖单羧酸、富马酸、琥珀酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、葡糖二酸、半乳糖二酸、氨基酸如谷氨酸、天门冬氨酸、N-甲基甘氨酸、乙酰甘氨酸、N-乙酰天门冬酰胺或N-乙酰半胱氨酸、丙酮酸、乙酰乙酸、磷酸丝氨酸、2-或3-甘油磷酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、环己烷甲酸、苯甲酸、水杨酸、1-或3-羟基萘基-2-甲酸、3，4，5-三甲氧基苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙酰氧基苯甲酸、4-氨基水杨酸、邻苯二甲酸、苯乙酸、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、甲磺酸或乙磺酸、2-羟基乙磺酸、1，2-乙二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘二磺酸、N-环己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基-或N-丙基氨基磺酸、或其它有机质子酸如抗坏血酸。如果存在酸性基团(例如羧基)，则可能生成相应的与阳离子或碱形成的盐，如元素周期表中Ia、Ib、IIa或IIb族的无毒金属盐、特别是适当的碱金属盐如锂、钠或钾盐或者碱土金属盐如镁盐或钙盐、或是锌盐或铵盐；或者也可以是与有机胺如未取代或取代的一、二或三烷基胺，尤其是一、二或三低级烷基胺或者季铵盐化合物形成的盐，例如N-甲基-N-乙基胺、二乙基胺、三乙基胺、单-、二-或三-(2-羟基低级烷基)胺如一-、二-或三-(2-羟乙基)胺、N，N-二低级烷基-N-(羟基低级烷基)-胺如N，N-二甲基-N-(2-羟乙基)-胺、三-(2-羟乙基)-胺、N-甲基-D-葡糖胺或者季铵盐如四丁铵盐形成的盐。

为了分离或纯化的目的，也可以使用非药用盐，例如苦味酸盐或高氯酸盐。只有可药用盐或非盐形式存在的游离化合物(任选以药物制剂的形式)可用于治疗用途，因此是优选的。

鉴于新化合物的游离形式与其盐形式(包括那些在例如纯化或鉴定新化合物中用作中间体的盐形式)之间的密切关系，以上和以下提到的任何游离化合物在适当和有利时同样可理解为相应的盐。

式I化合物具有有价值的药理学性质。特别是它们表现出具有很高药理学价值的特异性抑制活性。它们优选可作为酪氨酸激酶抑制剂和/或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂。例如，它们表现出对表皮生长因子(EGF)受体和血管内皮生长因子(VEGF)受体的酪氨酸活性有非常好的抑制作用。此外，它们表现出对抗一系列其它酪氨酸蛋白激酶如c-erbB2激酶的效力。由该特异性酶活性介导的效应在大量哺乳动物细胞、包括人细胞、特别是上皮细胞、免疫系统细胞和中枢及外周神经系统细胞的信号传导中起重要作用。例如，表皮生长因子EGF受体的受体相关性酪氨酸蛋白激酶(EGF-R-TPK)的活化是细胞分化的先决条件，因此也是给定细胞群增殖的先决条件。因此，EGF受体特异性酪氨酸蛋白激酶抑制剂浓度的增加抑制了细胞的增殖。对血管内皮生长因子VEGF的酪氨酸蛋白激酶(VEGF-R-TPK，如KDR和FIt-1)活性的抑制以相似的方式减少了血管生成，并且因此阻止了依赖足够血管供应的肿瘤生长，同时阻止了转移瘤的形成。对上文和下文提到的其它所述激酶及其类似物也可以产生相似的效力。

除了具有或不具有EGF受体酪氨酸蛋白激酶和/或VEGF受体激酶的抑制作用外，式I化合物还可不同程度地抑制在营养因子介导的信号传导中所涉及的其它酪氨酸蛋白激酶，例如abl激酶，特别是v-abl激酶；src激酶家族的激酶，尤其是c-src激酶、Ick、fyn；er EGF家族的其它激酶，例如c-erbB2-激酶(HER-2)、c-erbB3激酶或c-erbB4激酶；PDGF受体酪氨酸蛋白激酶家族的成员，例如PDGF受体激酶、CSF-1受体激酶、Kit受体激酶和FGF受体激酶；胰岛素样生长因子的受体激酶(IGF-1激酶)；和/或丝氨酸/苏氨酸激酶，例如蛋白激酶C或cdc激酶，所有这些激酶均在哺乳动物细胞包括人细胞的生长调节和转化中起重要作用。

对EGF受体特异性酪氨酸蛋白激酶(EGF-R-TPK)的抑制作用可通过已知的方法证明，例如利用EGF-受体的重组细胞内结构域[EGF-R ICD；例如见E.McGlynn等，Europ.J.Biochem.207，265-275(1992)]来证明。与没有抑制剂的对照相比，式I化合物抑制50％酶活性(IC₅₀)的浓度为例如0.001至100μM，尤其是0.001至20μM。

上述提到的对v-abl酪氨酸激酶的抑制作用可通过N.Lydon等人，Oncogene Research(致癌基因研究)5，161-173(1990)和J.F.Geissler等人，Cancer Research(癌症研究)52，4492-4498(1992)中的方法证明。这些方法中用[Val⁵]-血管紧张素II和[γ^-32P]-ATP作为底物。

对c-erbB2酪氨酸激酶(HER-2)的抑制作用可通过例如与EGF-R-TPK相同的方法(见House等人，Europ.J.Biochem.140，363-367[1984])证明。c-erbB2激酶可以被分离，并且其活性可通过本身已知的方案、例如按照T.Akiyama等人，Science(科学)232，1644(1986)中描述的方案证明。

式I化合物对EGF-受体中由EGF-刺激的细胞酪氨酸磷酸化的活性可在人A431上皮癌细胞系中通过ELISA(EGFR-ELISA)法证明，该方法记载于U.Trinks等人，J.Med.Chem.37：7，1015-1027(1994)中。

EGF对休眠的BALB/c3T3细胞的刺激快速诱导了c-fos nRNS的表达。在EGF刺激之前用式I化合物预处理细胞，可抑制c-fos表达。该测试方法也记载于U.Trinks等人，J.Med.Chem.37：7，1015-1027(1994)中。

测定对其它激酶、例如以上指定的那些激酶如kit、Flt-1或KDR的抑制作用的其它分析方法可用其各自的酪氨酸激酶来进行，所述酪氨酸激酶可以作为使用例如杆状病毒体系的谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白来使用。各自的融合蛋白可用谷胱甘肽琼脂糖柱色谱法纯化，用于测定待测式I化合物的IC₅₀值。可发现Flt-1或KDR的IC₅₀值范围为1nM至200μM，例如KDR的IC₅₀值范围为100nM至100μM。

在微摩尔范围内，例如，式I化合物对EGF依赖性细胞系如表皮样BALB/c大鼠角质细胞系(见Weissmann，B.A.，和Aaronson，S.A.，Cell 32，599(1983))或被认为是EGF-依赖性上皮细胞有用的常规来源的A431细胞系(见Carpenter，G.，和Zendegni，J.Anal.Biochem.153，279-282(1985))的细胞生长同样可表现出抑制作用。在已知的测试方法中[见Meyer等人，Int.J.Cancer 43，851(1989)]，式I化合物的抑制作用简而言之可如下证明：将BALB/MK细胞(10,000个/微量滴定板孔)转移至96-孔微量滴定板。加入一系列浓度(稀释系列)的测试化合物(溶解于DMSO中)，使得DMSO终浓度不高于1％(v/v)。加入后将滴定板孵育三天，在此过程中，不含测试物质的对照培养物至少经过三个细胞分化循环。MK细胞的生长用亚甲基兰染料测定：孵育后，细胞用戊二醛固定，用水洗涤，用0.05％亚甲基兰染色。洗涤一次后，染料用3％HCl洗脱，于665nm处用Titertek多扫描法测定微量滴定板中每孔的光密度。通过计算机辅助的系统用下式测定IC₅₀值：

IC₅₀＝[(OD_测试-OD_初始)/(OD_对照-OD_初始)]×100。

这些试验中得到的IC₅₀值以导致细胞数比用不含抑制剂的对照得到的细胞数减少50％的待测化合物的浓度给出。

式I化合物也可抑制体内肿瘤细胞的生长，例如可通过以下描述的测试证实：该测试基于对植入雌性BALB/c裸鼠(Bomholtgard，丹麦)的人表皮癌A431(ATCC No.CRL 1555；美国典型培养物保藏中心，Rockville，马里兰州，USA；见Santon，J.B.等人，Cancer Research(癌症研究)46，4701-4705(1986)和Ozawa，S.，等人，Int.J.Cancer 40，706-710(1987))生长的抑制作用。该肿瘤的生长与EGF-受体的表达程度有关。在试验中，无菌条件下手术除去实验动物体内生长的体积接近1cm³的肿瘤。将肿瘤碾成粉末，悬浮在10倍(w/v)体积的磷酸盐缓冲液中。将混悬液(在磷酸盐缓冲液中，0.2ml/小鼠)皮下注入动物的左侧腹。或者注入含来源于体外培养物的1×10⁶个细胞的0.2ml磷酸盐缓冲液。植入后第5或7天、即肿瘤直径达4-5mm时，开始用待测的式I化合物治疗。连续15天每天口服一次各活性物质(不同动物组剂量不同)。肿瘤生长通过测定肿瘤沿两条互相垂直轴的直径来确定。肿瘤体积用已知公式p×L×D²/6计算(见Evans，B.D.，等人，Brit.J.Cancer 45，466-8(1982))。以治疗/对照百分数(T/C×100＝T/C％)给出结果。

除了A431细胞系，其它细胞系也可用于证明式I化合物在体内的抗肿瘤活性，例如：

-MCF-7乳腺癌细胞系(ATCC No.HTB 22；也可参见J.Natl.CancerInst.(国立癌症研究所杂志)(Bethesda) 51，1409-16[1973])；

-MDA-MB 468乳腺癌细胞系(ATCC No.HTB 132；也可参见In Vitro 14，911-15[1978])；

-MDA-MB 231乳腺癌细胞系(ATCC N0.HTB 26；也可参见J.Natl.Cancer Inst.(国立癌症研究所杂志)(Bethesda)53，661-74(1974))；-Colo 205结肠癌细胞系(ATCC No.CCL 222；也可参见Cancer Res.(癌症研究)38，1345-55[1978])；

-HCT 116结肠癌细胞系(ATCC No.CCL 247；也可参见Cancer Res.(癌症研究)41，1751-6[1981])；

-DU145前列腺癌细胞系(ATCC No.HTB 81；也可参见Cancer Res.(癌症研究)37，4049-58[1978])；和

-PC-3前列腺癌细胞系PC-3(ATCC No.CRL 1435；也可参见Cancer Res.(癌症研究)40，524-34[1980])。

本发明的式I化合物作为VEGF受体酪氨酸激酶活性抑制剂的效力可如下证明：

抗VEGF-受体酪氨酸激酶活性的试验。本试验用Flt-1VEGF-受体酪氨酸激酶进行。具体方法如下：将30μl于20mM Tris·HCl，pH7.6、3mM二氯化锰(MnCl₂)、3mM二氯化镁(MgCl₂)和3μg/ml聚(谷氨酸，酪氨酸)4∶1(Sigma，Buchs，瑞士)、8μM[³³P]-ATP(0，2μCi/批)、1％二甲基亚砜中的激酶溶液(10ng Flt-1的激酶结构域，Shibuya等人，Oncogene(癌基因)5，519-24[1990])和0至50μM待测化合物在室温下一起孵育15分钟。接着，加入10μl 0.25M乙二胺四乙酸(EDTA)(pH7)中止反应。使用“多道分样器”(LAB SYSTEMS，USA)将20μl等分试样加到PVDF-(＝聚二氟乙烯-)稳定素P膜(Millipore，USA)上，接着加入Millipore微滴过滤歧管，连接真空。完全除去溶剂后，将膜在含0.5％磷酸(H₃PO₄)的浴中连续孵育4次，每次10分钟，同时振摇，接着转移至Hewlett Packard TopCount Manifold，加入10μl Microscint^((β-闪烁计数液；Packard USA)后测定放射活性。通过将每种测试化合物在三种浓度(通常为0.01、0.1和1μM)下的抑制作用百分数进行线形回归分析，确定IC₅₀值。据发现，抑制浓度(与不含式I的抑制物质的对照相比，为最大抑制作用50％的IC₅₀)的优选范围为1-300μM，尤其为1-100μM。

式I化合物的体内活性也可用A-431细胞或其它小鼠细胞系、通过上述测试来证明。

VEGF-诱导的KDR-受体自身磷酸化的抑制可通过其它细胞体外试验证明：将可永久表达人VEGF受体KDR的转染CHO细胞接种在6孔细胞培养板的培养基(含10％胎牛血清＝FCS)中，于37℃、5％CO₂中孵育，直到显示80％融合。接着将待测化合物在培养基中(不含FCS，含0.1％牛血清白蛋白)稀释，加入细胞中(对照含有仅仅不含测试化合物的培养基)中。于37℃孵育2小时后，加入重组VEGF；VEGF最终浓度为20ng/ml。于37℃再孵育5分钟后，细胞用冰冷的PBS(磷酸盐缓冲的生理盐水)洗涤两次，并且立即分批溶解在100μl溶胞缓冲液中。接着离心溶胞产物除去细胞核，用市售蛋白质分析盒(BIORAD)测定上清液中蛋白质的浓度。溶胞产物可当时立即使用，或者如果需要可于-20℃冷藏。

进行夹层ELISA法测定KDR-受体的磷酸化。将KDR-特异性单克隆抗体(例如Mab 1495.12.14；由H.Towbin制备)吸附在黑ELISA板(OptiPlate^TM HTRF-96，Packard)上。接着洗涤该板，残余的游离蛋白结合位点用1％牛血清白蛋白的PBS溶液饱和。然后将细胞溶胞产物(20μg蛋白/批)和与碱性磷酸酶结合在一起的抗磷酸酪氨酸抗体(来自于传导实验室(Transduction Laboratories)的PY20：AP)一起于4℃过夜孵育。接着用发光AP底物(CDP-Star，即可使用的，含Emerald II；TROPIX)测定与抗磷酸酪氨酸抗体的结合。在Packard Top Count微板闪烁计数器(TopCount)中测定发光。阳性对照(VEGF刺激)和阴性对照(没有VEGF刺激)得到的信号之间的差异与VEGF-诱导的KDR受体磷酸化一致(＝100％)。测试化合物的活性以VEGF-诱导的KDR受体磷酸化抑制％计算，因此，引起半数最大抑制的化合物的浓度定义为ED50(50％抑制的有效剂量)。

式I化合物用于治疗关节炎、例如炎症性风湿病或类风湿疾病的适宜性可按如下描述证明：

用已知的大鼠佐剂关节炎模型(大鼠佐剂助关节炎模型；Pearson，Proc.Soc.Exp.Biol.91，95-101(1956))证明式I化合物的抗关节炎活性。雄性Wistar大鼠(每组5只，体重约200g，Iffa Credo提供，法国)分别在尾部皮内注射0.1ml含0.6mg冷冻干燥的热灭活的结核分支杆菌的矿物油。从第15至22天用测试化合物(3、10或30mg/kg，每天口服一次)或载体物质(水)处理小鼠(治疗剂量方案)。试验结束时，用微螺旋标尺测定跗骨关节的肿胀。通过比较用载体物质处理的关节炎动物(0％抑制)和用载体物质处理的健康动物(100％抑制)的数值，计算出每只爪肿胀抑制的百分数。

式I化合物对疼痛的影响可通过以下感受伤害模型证明。在该模型中，通过足底内酵母注射引起的痛觉过敏可通过对足部逐渐增加压力、直到试验动物叫喊或从压力垫移开爪来测定。该模型对COX抑制剂有反应，用双氯芬酸(3mg/kg)作为阳性对照。

分别确定(治疗前2小时)使雄性Sprague-Dawley大鼠(体重约180g，Iffa Credo提供，法国)发出叫声或移开爪子所需要的基线压力。接着将100μl、20％酵母的水混悬液注射入后爪。2小时后，给大鼠口服测试化合物(3、10或30mg/kg)或双氯芬酸(3mg/kg)或载体物质(生理盐水)(时间点：零)，给药后1和2小时重复压力测试。在这些时间点用标准仪器(Ugo Basile，意大利)测定用测试化合物治疗的动物发出叫声或移开爪所需要的压力，并且与那些仅用载体物质处理的动物比较。

由于它们的上述性质，例如作为VEGF或EGF受体酪氨酸激酶抑制剂，式I化合物特别适合用于治疗炎症性风湿病或类风湿性疾病、特别是它们在运动系统的症状，例如炎症性类风湿病如多关节炎，和/或治疗疼痛。

基于它们作为VEGF受体激酶活性抑制剂的效力，式I化合物可抑制血管的生长，并且因此例如可有效对抗一系列与血管生成失调有关的疾病，特别是由眼部新血管生成引起的疾病如糖尿病性视网膜病或老年性黄斑变性；牛皮癣、成血管细胞瘤如血管瘤；肾小球系膜细胞增殖疾病如慢性或急性肾脏疾病，例如糖尿病性肾病、恶性肾硬化、栓塞微血管病综合症、移植排斥反应、或特别是炎症性肾疾病，如肾小球肾炎、特别是肾小球系膜增生性肾小球肾炎、溶血性尿毒症综合症、糖尿病性肾病或高血压性肾硬化；动脉粥样化、动脉再狭窄；自身免疫疾病、急性炎症、纤维化疾病(例如肝硬化)、糖尿病、子宫内膜异位、慢性哮喘、动脉或移植后粥样硬化、神经变性疾病和特别是肿瘤疾病(实体瘤、白血病和其它液体性瘤，特别是那些表达c-kit、KDR或flt-1的肿瘤)，如特别是乳癌、结肠癌、肺癌(特别是小细胞肺癌)、前列腺癌、Kaposi′s肉瘤、CNS肿瘤、卵巢癌、肾脏肿瘤或VHL肿瘤。式I化合物可抑制肿瘤的生长，并且特别适合于阻止肿瘤的转移性扩散和微小转移瘤的生长。

由于它们作为表皮生长因子(EGF)受体的酪氨酸激酶活性抑制剂或提到的其它酪氨酸蛋白激酶抑制剂的效力，式I化合物尤其可用于治疗良性或恶性肿瘤。它们能使肿瘤缩小、并阻止肿瘤转移灶的形成以及微小转移瘤的生长。它们尤其可用于治疗表皮过度增殖(牛皮癣)、治疗上皮性质的肿瘤形成(如乳房癌)和白血病。此外，式I化合物还可用于治疗涉及数种或者优选一种酪氨酸蛋白激酶和/或(此外)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的免疫系统疾病；式I化合物还可用于治疗涉及数种或者优选一种酪氨酸蛋白激酶和/或(此外)丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的信号传导的中枢或外周神经系统疾病。

通常，本发明还涉及式I化合物用于抑制所提到的蛋白激酶的用途。

对例如肿瘤细胞增殖或在牛皮癣的情况下对上皮细胞增殖的抑制作用在某些情况下可基于对一种或多种所述激酶的抑制，或者可能存在其它未知的机理。

根据本发明的化合物可单独给药或与一种或多种其它治疗药物联合给药，可能的联合治疗可采取固定的组合物的形式、或将本发明的化合物与一种或多种其它治疗药物交替或分别给药、或将固定的组合物与一种或多种其它治疗药物联合给药。具体地讲，在例如肿瘤的治疗中，可将式I化合物与化学疗法、放射疗法、免疫疗法、外科手术介入或这些方法的组合一起给药。长期治疗同样可能作为如上所述的其它治疗方案的辅助治疗。其它可行的治疗是肿瘤消退后维持患者状况的治疗，甚至是对处于危险阶段的患者的化学保护性治疗。

可能联合使用的治疗药物特别是一种或多种抗增殖化合物、细胞抑制剂或细胞毒性化合物，例如化疗药或几种选自下列的药物，所述药物包括但不限于：多胺生物合成抑制剂；蛋白激酶抑制剂，特别是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂如蛋白激酶C抑制剂，或者是酪氨酸蛋白激酶抑制剂，如EGF受体酪氨酸激酶如PKI166的抑制剂、VEGF受体酪氨酸激酶如PTK787的抑制剂、或PDGF受体酪氨酸激酶如STI571的抑制剂；细胞因子；负生长调节剂如TGF-β或IFN-β；芳香酶抑制剂如来曲唑或阿拉曲唑(anastrozole)；SH2结构域与磷酰化蛋白相互作用的抑制剂；抗雌激素；拓扑异构酶I抑制剂如伊立替康；拓扑异构酶Il抑制剂；微管活化剂如紫杉醇、discodermolide或埃博霉素；烷化剂；抗肿瘤抗代谢药如吉西他滨或卡培他滨；铂配合物如卡铂或顺铂；抗血管生成化合物；戈那瑞林激动剂；抗雄激素；二磷酸酯如AREDIA或ZOMETA；以及曲妥单抗。由nos.代码、通用名或商品名区别的活性药物的结构可从现行版本的一般概述“默克索引(The Merck Index)”或数据库如国际专利(PatentsInternational)(如IMS国际公布)中得到。其相应的内容在此引入作为参考。

本发明的优选实施方案

在下述的本发明优选实施方案中，一般定义可彼此独立地被上述或下述指定的优选定义替换，由此得到的本发明实施方案为优选实施方案。

优选如下式I化合物及其盐，其中X代表氮或者带有基团A的碳原子；A代表氢或COOW，其中W代表烷基或氢；Y为NR′、S或O，其中R′代表氢或烷基；R代表烷基、芳基、杂环基、环烷基、芳基烷基、杂环基烷基或环烷基烷基，其中这些基团是未取代或取代的；或者COOR′、COR′或CONR′R″，其中R′和R″彼此独立地为氢、烷基、芳基、杂环基、环烷基、芳基烷基、杂环基烷基或环烷基烷基，其中这些基团是未取代或取代的；且Q为芳基、芳基低级烷基或杂环基，其分别为未取代或取代的。

特别优选如下式I化合物及其盐，其中X代表氮或带有基团A的碳原子；A代表氢或-COOW，其中W代表烷基或氢；Y为NR′、S或O，其中R′代表氢或烷基；R代表芳基；且Q为芳基、芳基低级烷基或杂环基，其分别为未取代或取代的。

本发明特别涉及如下式I化合物或其盐，其中X代表氮(优选)或带有基团A的碳原子；A代表氢或-COOW，其中W代表烷基、特别是低级烷基、或氢；R代表芳基；且Q代表芳基。

优选如下式I化合物或其盐，其中X代表氮或带有基团A的碳原子；A代表氢；R为被硝基或氨基取代的苯基；Q为被一个或多个(特别是1或2个)彼此独立地选自羟基、低级烷氧基、特别是甲氧基、卤素、特别是氯或溴的基团取代的苯基。

此外还优选如下式I化合物或其盐，其中X代表氮或带有基团A的碳原子；A代表氢；R代表芳基；Q代表芳基、芳基低级烷基或杂环基；其中芳基为苯基、萘基、芴基或菲基，其分别为未取代的或被一至三个选自以下基团的取代基取代：氨基、低级烷基氨基、N，N-二低级烷基氨基、氨基低级烷基、低级烷基氨基低级烷基、N，N-二低级烷基氨基低级烷基、低级链烷酰基氨基、卤素、低级烷基、低级链烯基、苯基、萘基、低级卤代烷基、羟基、低级烷氧基、低级链烯氧基、苯基低级烷氧基、低级链烷酰氧基、氨基甲酰基低级烷氧基、羧基低级烷氧基、苯基低级烷氧羰基低级烷氧基、巯基、硝基、羧基、低级烷氧羰基、苯基低级烷氧羰基、氰基、C₈-C₁₂-烷氧基、氨基甲酰基、低级烷基氨基甲酰基、N，N-二低级烷基氨基甲酰基、N-单-或N，N-二苯基低级烷基氨基甲酰基、低级链烷酰基、苯氧基、低级卤代烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷基哌嗪基羰基、吗啉基羰基、低级烷基哌嗪基低级烷基、吗啉基低级烷基、低级烷硫基、低级卤代烷硫基、羟基低级烷基、低级烷基磺酰基、卤代低级烷基磺酰基、苯磺酰基、二羟基硼基、低级烷基嘧啶基、唑基、低级烷基二氧杂环戊基、吡唑基、低级烷基吡唑基、与两个相邻碳原子键合的低级亚烷基二氧基、吡啶基、哌嗪基、低级烷基哌嗪基、吗啉基、未取代或苯基部分被卤素、低级烷基、羟基、低级链烷酰氧基、低级烷氧基、羰基、低级烷氧羰基、氨基甲酰基、N-低级烷基氨基甲酰基、N，N-二低级烷基氨基甲酰基、氰基、氨基、低级链烷酰基氨基、低级烷基氨基、N，N-二低级烷基氨基或三氟甲基取代的苯氨基或苯基低级烷基氨基、或式R₃-S(O)_m-的基团，其中R₃为低级烷基且m为0、1或2。

特别优选如下式I化合物，其中X代表氮或带有基团A的碳原子；A代表氢；R为被氨基取代的苯基、特别是4-氨基苯基；Q为被一个或多个、特别是1或2个彼此独立地选自羟基、低级烷氧基，特别是甲氧基、以及卤素，特别是氯或溴的基团取代的苯基。

特别优选如下式I化合物及其盐，其中X代表氮或带有基团A的碳原子；其中A代表氢；R为被硝基、氨基、低级烷基哌嗪基羰基、吗啉基羰基、N，N-二低级烷基氨基甲酰基、N，N-二低级烷基氨基低级烷基、低级烷基哌嗪基低级烷基或吗啉基低级烷基取代的苯基；Q为苄基、苯乙基、未取代或被一个或多个彼此独立地选自羟基、低级烷基、低级烷氧基和卤素的基团取代的苯基；被羟基或低级烷氧基取代的吡啶基；或被卤素和低级烷基取代的吲哚基。

同样特别优选其中Y为NH(亚氨基)的式I化合物。

非常优选实施例中指定的式I化合物或其盐(如果至少存在一种成盐基团的话)。

制备方法

如果没有特别指定，下述方法中的符号R、A、Q、X和Y分别具有式I化合物中指定的含义，其中在原料中指定为优选的含义同样是优选的。

式I化合物或其盐可通过已知的方法制备，然而这些方法对于这些化合物是新的，特别是通过如下方法制备

a)将式II化合物，

其中X和R具有式I化合物给出的含义，L代表离去基团，如氯，与式III的胺、酚或硫醇反应，

Q-YH    (III)

其中Q具有式I化合物中给出的含义，Y为NR′、S或O，其中R′代表氢或烷基；其中，如果需要，式II和/或III化合物中不参与反应的官能团以被保护的形式出现，然后除去存在的保护基；

并且，如果希望，所得式I化合物可转化为不同的式I化合物；所得式I游离化合物可转化为盐；所得式I化合物的盐可转化为另一种盐或游离的式I化合物；和/或所得式I化合物的异构体混合物可分离为单个异构体。

方法详述

式II或III的化合物可以游离形式存在，或者如果需要阻止不应当参与反应的官能团方式反应，式II或III的化合物可以不参与反应的官能团被保护的形式存在。

如果由于式II化合物中的一个或多个其它官能团如羟基、羧基、氨基或巯基等不应当参与反应从而是被保护或需要被保护的，保护基是那些在肽化合物、头孢菌素和青霉素、核酸衍生物和糖合成中常用的保护基。这些保护基团可以在前体中就已经存在，并且应当保护有关官能团防止其参与不想要的副反应如酰化、醚化、酯化、氧化、溶剂分解和类似的反应。原料中应当避免其发生转化的官能团的保护基特别包括在肽化合物、头孢菌素、青霉素或核酸衍生物和糖合成中常使用的常规保护基。某些情况下，除了保护作用，保护基还可影响反应的选择性如立体选择性。保护基的特点是它们很容易被除去(即，不会产生不利的副反应)，通常是通过溶剂分解、还原、光解或者也可通过酶活性，例如在与生理条件相似的条件下除去，并且它们不出现在最终产物中。

本领域技术人员知道或者能轻易地确定哪些保护基适合于上述和下述的反应。所述保护基对官能团的保护作用、保护基本身及其离去反应例如在如下常规参考著作中有述：J.F.W.McOmie，″Protective Groups inOrganic Chemistry″(有机化学中的保护基)，Plenum Press，London andNew York 1991；T.W.Greene，P.G.M.Wuts，″Protective Groups inOrganic Synthesis″(有机合成中的保护基)，第二版，John Wiley & Son Inc.，1981；″The Peptides″(肽)，第三卷(E.Gross和J.Meienhofer)，AcademicPress，London and New York 1981；″Methoden der organischen Chemie″(有机化学方法)，Houben Weyl，第四版，第15卷/I，Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974；H.-D.Jakubke和H.Jescheit，″amino suren，Peptide，proteine″(氨基酸、肽、蛋白质)，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach，和Basel 1982以及Jochen Lehmann，″Chemie der Kohlenhydrate：Monosac charide und Derivate″，(碳水化合物化学：单糖及其衍生物)Georg Thieme Verlag，Stuttgart 1974。

式II化合物的离去基优选是卤素，特别是溴或主要是氯或碘。也可以采用其它离去基，例如芳基磺酰基或烷基磺酰基，如4-甲苯磺酰基。

式II化合物和式III的胺(Y＝NR′)之间的反应优选在适当的极性溶剂中进行，特别是在醇中、尤其是低级链烷醇如甲醇、丙醇、异丙醇，或特别是乙醇或正丁醇或其混合物中进行，或者不加溶剂而是以熔融的形式(特别是如果反应物之一以液态形式存在时)进行；反应在升高的温度下，优选约60℃至反应混合物的回流温度下、例如在回流下或在约70至120℃之间的温度下进行。式III化合物也可以盐形式例如与强酸如氢卤酸的加成盐如盐酸盐的形式存在，或者可将相关的酸加入到反应混合物中，例如当存在适当的溶剂如醚，例如二烷时。如果L为碘，反应优选在惰性溶剂如甲苯中，在碱、特别是碱金属碳酸盐如碳酸钾的存在下，在催化量的适当贵金属催化剂络合物如四-(三苯基膦)钯的存在下，在升高的温度、特别是80至115℃之间的温度下进行。

式II化合物和式III的酚(Y＝O)之间的反应优选在Russ.Chem.Rev.43，679-689(1974)中描述的乌尔曼(Ullmann)醚合成反应条件下、在铜盐的存下进行。在某些情况下，反应可通过在碱如碳酸钾的存在下、在适当的溶剂如二甲基甲酰胺中加热式II化合物和式III化合物(Y＝O)来完成。

式II化合物和式III的硫醇(Y＝S)之间的反应优选以已知方式，在极性溶剂如二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或HMPT中进行，如果需要，可以在适当催化剂如钯络合物如四-(三苯基膦)钯(0)的存在下进行。

反应

在根据需要进行的其它反应步骤中，原料中不应当参与反应的官能团可以以未保护的形式存在，或者例如被上述步骤a)中提到的一个或多个保护基保护。然后可根据步骤a)中描述的方法之一完全或部分除去保护基。

其中存在硝基作为芳基取代基的式I化合物可通过氢化反应生成其中硝基转化为氨基的相应化合物。在这种情况下，氢化反应可用氢气(H₂)在适当的催化剂例如阮内催化剂、如阮内镍或阮内钴的存在下，在适当的溶剂或溶剂混合物例如醚(如四氢呋喃)和/或二低级烷基咪唑啉酮(如1，3-二甲基-2-咪唑啉酮(DMEU))中，优选在0至50℃之间的温度例如室温下，在升高或降低的压力、优选在常压下进行；或者，氢化反应可通过例如由锡(II)盐如二氯化锡(II)反应产生的初生态的氢来完成，反应在适当的溶剂例如醇(如乙醇、丙醇或丁醇)中进行，反应温度优选为10℃至反应混合物的回流温度，优选室温至80℃之间。

含有成盐基团的式I化合物的盐可通过本身已知的方法制备。因此，式I化合物的酸加成盐可通过例如用酸或适当的阴离子交换试剂处理得到，与阳离子形成的盐可通过例如用金属盐、碱或阳离子交换剂处理得到。盐通常可被转化为游离化合物，例如用适当的碱性试剂如碱金属碳酸盐、碳酸氢盐或氢氧化物如碳酸钾或氢氧化钠处理得到酸加成盐，或者用碱处理得到盐。

立体异构混合物如非对映异构体混合物可用本身已知的方式、通过适当的分离方法分离出其相应的异构体。非对映异构体混合物可通过分级结晶、色谱法、溶剂分配和相似方法拆分成单个的非对映异构体。该拆分可在起始化合物之一或式I化合物本身上进行。对映体可通过与例如对映体纯的手性酸形成非对映异构体的盐来分离，或者通过色谱法例如通过HPLC用带有手性配体的色谱底物来分离。

其中R为苯基-C(＝O)-O-低级烷基、特别是苯基-C(＝O)-O-甲基的式I化合物可通过在适当的碱如LiOH的存在下，如果需要，在适当的溶剂如二烷中水解转化成其中R为苯基-C(＝O)-O-H的式I化合物。可用该式I的游离酸按照文献中已知的方法制备其它衍生物，特别是羧酸酯和羧酸酰胺。该类型的羧酸酰胺，即其中R为苯基-C(＝O)-NR′R″的式I化合物可通过已知的方法，通过与适当的还原剂如二异丁基氢化铝在四氢呋喃中反应转化为其中R为苯基-CH₂-NR′R″的式I化合物。

常规方法条件

这里描述的所有方法步骤可在已知的反应条件下、优选在那些具体描述的条件下，在不存在或通常在溶剂或稀释剂、优选那些对所用反应物呈惰性并且能溶解它们的溶剂或稀释剂的存在下，在没有或有催化剂、缩合剂或中和剂，例如离子交换剂、主要是阳离子交换剂(例如H+形式)存在下，根据反应和/或反应物的类型，在低温、常温或高温下，例如在-100℃至约190℃、优选在约-80℃至约150℃，例如在-80℃至60℃、室温、在-20℃至40℃或在所用溶剂的沸点下，在大气压或密闭容器中，如果需要在加压下，和/或在惰性气体如氩气或氮气中进行。

如果原料化合物和中间体含有成盐基团，那么它们可以盐形式存在。在该化合物的反应过程中也可存在盐，条件是反应不会因此受到干扰。

在各反应阶段中，生成的异构体混合物均可被分离为其单一的异构体，例如非对映异构体或对映体，或分离为异构体的任意混合物，例如外消旋体或非对映异构体混合物，主要如“附加反应步骤”中所述。

在某些情况下，主要在脱氢反应或醇醛缩合反应中，可实现成立体选择性反应，使得例如单一异构体的回收更加容易。

可供选择的适于所述反应的溶剂包括例如水；酯，主要是低级烷基低级链烷酸酯，如乙酸乙酯；醚，主要是脂肪族醚如乙醚、或环醚如四氢呋喃；液态芳烃，主要是苯或甲苯；醇，主要是甲醇、乙醇、1-丙醇或2-丙醇；腈，主要是乙腈；卤代烃，主要是二氯甲烷；酰胺，主要是二甲基甲酰胺；碱，主要是含氮杂环碱如吡啶；羧酸，主要是低级链烷酸如乙酸；羧酸酐，主要是低级链烷酸酐如乙酸酐；环烃、直链烃或支链烃，主要是环己烷、己烷或异戊烷；或这些溶剂的混合物，如水溶液，除非在方法描述中特别指明。该溶剂混合物也可用于后处理、例如色谱或分离中。

本发明还涉及如下一些关于反应过程的实施方案，这些方案包括：由在任意阶段可作为中间体获得的化合物开始并进行其余的步骤，或在任意阶段停止反应，或在反应条件下形成原料，或使用活泼衍生物或盐形式的所述原料，或在这些条件下生产通过本发明的方法可获得的化合物并就地对所述化合物进行进一步的加工。在优选实施方案中，反应由可得到上文所述的优选的、尤其是特别优选的、更优选的和/或最优选的化合物的那些原料开始。

在优选实施方案中，根据实施例中定义的方法和方法步骤制备式I化合物。

式I化合物、包括它们的盐，还可以以水合物的形式获得，或者它们的结晶可包括例如用于结晶的溶剂(以溶剂化物的形式存在)。

药物制剂、方法和用途

本发明还涉及含式I化合物作为活性成分的药物制剂，它们尤其可用于治疗文章开始时提到的疾病。对温血动物、尤其是人而言，特别优选肠内给药如经鼻、口腔、直肠或尤其是口服给药的制剂和非胃肠道给药如静脉、肌内或皮下给药的制剂。制剂仅含有活性成分或者优选还含有可药用载体。活性成分的剂量取决于所治疗的疾病、患者种类、年龄、体重和个体条件、个体药动学数据以及给药方式。

本发明还涉及用于预防或尤其是治疗人或动物、特别是针对上述疾病之一的药物制剂(尤其是用于治疗肿瘤的组合物形式)及其制备方法，并涉及治疗上述疾病、主要是肿瘤疾病、尤其是上文提到的那些肿瘤疾病的方法。

本发明还涉及式I化合物的制备方法及其在制备含式I化合物作为活性组分(活性成分)的药物制剂中的用途。

优选适合于对患有对抑制酪氨酸或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶有响应的疾病、例如牛皮癣或尤其是肿瘤疾病的温血动物、特别是人或有商业价值的哺乳动物给药的药物组合物，其含有相应有效量的式I化合物或其可药用盐(如果存在成盐基团的话)与至少一种可药用载体。

同样优选用于在需要这样治疗的温血动物、特别是人或有商业价值的哺乳动物、特别是患有这种类型疾病的动物中预防或尤其是治疗对抑制酪氨酸或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶有响应的疾病、尤其是肿瘤疾病或其它增殖性疾病的药物组合物，该药物组合物含有预防或特别是治疗所述疾病有效量的式I的新化合物或其可药用盐作为活性成分。

药物制剂含有约0.000001％至95％的活性成分，其中当用于非胃肠道给药时，单剂量给药剂型优选含有约0.00001％至90％活性成分，多剂量给药剂型优选含有约0.0001至0.5％活性成分，或者当用于肠道给药时，含有1％～20％活性成分。单位剂量形式例如是包衣或未包衣片、安瓿、注射小瓶、栓剂或胶囊。其它剂型例如是软膏、喷雾剂等。实施例是含约0.0002g至约1.0g活性成分的胶囊。

本发明的药物制剂以本身已知的方法制备，例如通过常规的混合、制粒、包衣、溶解或冷冻干燥方法制备。

优选使用活性成分的溶液、混悬液或分散体，尤其是等渗水溶液、分散液或混悬液，这些制剂例如可用仅含活性成分或还含有载体如甘露醇的冻干制剂在使用前制备。

口服药物组合物可例如通过将活性成分与一种或多种固体载体混合制备，如果需要可将所得混合物制粒，如果希望还可将混合物或颗粒制成片剂或片芯形式，如果需要可加入其它赋形剂。

适当的载体尤其是填充剂，如糖、纤维素和/或磷酸钙，例如磷酸三钙或磷酸氢钙；粘合剂如淀粉、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要，和/或崩解剂，如上述的淀粉、羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、藻酸或其盐如藻酸钠。

口服给药的药物组合物还包括硬明胶胶囊和由明胶和增塑剂如甘油或山梨醇组成的密封软胶囊。硬胶囊可含有颗粒形式的活性成分，例如与填充剂，如玉米淀粉、粘合剂和/或助流剂如滑石或硬脂酸镁的混合物，如果需要，还可含有稳定剂。软胶囊中，优选活性成分溶解或混悬在适当的液态赋形剂如脂肪油、石蜡油、液态聚乙二醇或者乙二醇或丙二醇的脂肪酸酯中，可向其加入稳定剂或洗涤剂。

适于直肠给药的药物制剂例如是含活性成分和栓剂基质的栓剂。适当的栓剂基质例如是天然或合成的甘油三酯、链烷烃、聚乙二醇或高级链烷醇。

适于非胃肠道给药的剂型主要是水溶性活性成分如水溶性盐的水溶液(例如在生理盐水中，可通过将溶液稀释在聚乙二醇如聚乙二醇(PEG)300或PEG 400中得到)，或者含增粘剂如羧甲基纤维素钠、山梨醇和/或右旋糖酐和适当稳定剂的含水注射混悬液。

用于例如非胃肠道给药的溶液也可以用作输液形式。

本发明还涉及治疗上述病症之一、特别是对抑制酪氨酸或丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶有响应的疾病、尤其是相应的肿瘤疾病的过程或方法。式I化合物可原样或以组合物的形式对需要治疗的温血动物例如人给药，优选以对上述疾病有效的量预防或治疗性地给药，特别是以药物组合物的形式给药化合物。当患者体重为约70公斤时，本发明化合物的给药剂量为约0.1mg至约5g，优选约0.5mg至2000mg。每天给药1次或多次，例如每天1至3次，或者间隔给药，优选例如每1至4星期，例如每星期、每两星期、每三星期或每四星期给药。

本发明还特别涉及式I化合物或其可药用盐、尤其是优选的式I化合物或其可药用盐本身或以含至少一种可药用载体的药物制剂形式在治疗和预防上述一种或多种疾病中的用途。

本发明还特别涉及式I化合物或其可药用盐、尤其是优选的式I化合物或其可药用盐在制备用于治疗和预防上述一种或多种疾病的药物制剂中的用途。

上面描述了在各种情况下使用的药物制剂(药物)的优选剂量、组成以及制备。

原料

式II的原料是已知的，可从市场购得或通过与已知方法相似的方法制备，其中如果需要，可引入、使用、并且在适当时间除去保护基，与上述描述的方法相似。

式II的原料可以通过已知的方法制备，或者它们是已知的或者可从市场购得。

具体地讲，其中X代表氮，其它基团如上定义的式II化合物可通过以下步骤制备。

将式IV的羟基氨基嘧啶化合物

在适当的溶剂或溶剂混合物中，例如叔铵碱如吡啶中；优选在无氧条件下，例如惰性气体如在氩气环境中；在升高的温度下，例如温度为30℃至反应混合物的回流温度，尤其是在回流温度下，

与式V羧酸的活泼衍生物反应，其中R具有式I化合物中给出的含义，

R-C(＝O)-OH    (V)

由此得到式VI化合物，其中R具有式I化合物中给出的含义。

式V羧酸的活泼衍生物可特别理解为相应的酰卤，例如相应的酰氯R-(C＝O)Cl，其中R具有式I化合物中给出的含义。该活泼羧酸衍生物是已知的，可根据已知或与之相似的方法制备，或者可从市场上购得。

接着，所得式VI化合物可就地直接进行进一步反应或在分离后与引入离去基L的试剂反应，例如与选自式VII和VIII化合物的化合物反应，其中L具有式II化合物中给出的含义，

P(＝O)L₃   (VII)

SO₂L₂      (VIII)

尤其是与磷酰卤如磷酰氯或者磺酰卤如磺酰氯反应，其中当引入离去基团而不是式VI化合物的羟基时，得到相应的式II化合物。

反应特别在适当的溶剂或溶剂混合物中，例如在叔胺碱如吡啶中进行；优选在无氧条件下，例如在惰性气体如氩气中；在升高的温度下，例如温度为30℃至反应混合物的回流温度，尤其是在回流温度下进行。

如果需要，原料中的官能团也可被保护基保护，并且存在的保护基可在适当的时间除去。所用保护基的引入和除去如上述式I化合物的制备中所描述。

其中X为带有基团A的碳原子的式II化合物可按以下步骤制备：

将式IX的β-酮酯，其中R具有式I中给出的含义，Y为烷基，特别是低级烷基如乙基，

RC(＝O)-CH₂-COOY    (IX)

用亚硫酰卤如亚硫酰氯转化为式X化合物，其中R和Y具有式IX中给出的含义，Hal为卤素，特别为氯；

R-C(＝O)-CH(～Hal)-COOY    (X)

反应在已知条件下进行(例如见J.Heterocycl.Chem.22，1621-1630(1985))。

接着，式X化合物在常规条件下(例如见Chem.Ber.95，307-318(1962))与式XI的碱金属盐反应，其中Me为碱金属，尤其为钠，A′代表基团-COOW，其中W代表烷基(优选特别是低级烷基，如乙基)、芳基、杂环基或环烷基，其中这些基团是未取代或取代的，

N≡C-CH(Me)-A’    (XI)

由此生成式XII的化合物，

其中R具有式I化合物给出的含义，A′如式XI中所定义。

接着，在适当的溶剂或溶剂混合物例如二低级烷基羧酸酰胺如二甲基甲酰胺中；在升高的温度下，例如在100至150℃的温度下；如果需要可以在加压条件下，用甲酰胺在甲酸的存在下将式XII化合物转化为式XIII化合物，

其中R和A′具有式XII中给出的含义。

接着，在与上述将式VI化合物转化为式II化合物相似的条件下引入如式II中定义的离去基团L，得到式II^＊化合物，其落在式II范围内：

式II^＊中，A′和R具有式XII中给出的含义，L代表离去基团，优选卤素，尤其为氯。

为了由此得到其中Y为带有基团A的碳原子，A代表氢的式II化合物，需要根据已知方法进行皂化反应和脱羧反应(例如皂化反应见Chem.Ber.95，307-318(1962)，脱羧反应见Helv.Chim.Acta 33，130(1950)或Bull.Soc.Chim.Fr.1987，339-349)，例如在如实施例8a2中所述条件下进行。由此得到式II^＊＊化合物：

其同样落在式II范围内，其中R和L具有式I化合物中给出的含义。

为了随后通过所述试剂引入离去基团L，还可以将式XIII化合物脱羧，由此可同样得到式II^＊＊化合物。

式IV化合物可从4，6-二羟基-5-硝基嘧啶(Aldrich，Buchs，瑞士)制得，例如根据M.Ishidate等人，Chem.Pharm.Bull.8，137-139(1960)的描述，用二氯化锡(II)还原得到。式IX的β-酮酯同样是已知的，可通过已知方法制备或者可从市场购得。

实施例：

以下实施例用于解释本发明，但是不以任何方式限制本发明的范围。

除非特别说明，所有IR光谱均在KBr中测定。NMR：^＊)分类基于估计。熔点未校正。溶剂或洗脱剂的体积比以体积比例(v/v)给出。如果没有特别指出，温度为摄氏度(℃)。除非特别指出，反应均在室温下进行。

缩写：

Anal calc.      元素分析中各元素的理论比例

TLC             薄层色谱法

DMEU            1，3-二甲基-2-咪唑啉酮

DMF             二甲基甲酰胺

Et              乙基

EtOAc           乙酸乙酯

实测值  元素分析中发现的(＝测定的)元素比例

h               小时

HV              高真空

konc.           浓缩的

Me              甲基

Min             分钟

MS              质谱

NMR：           核磁共振

RF              回流(在沸点温度加热)

RT              室温

m.p.            熔点

T               温度

TBME            叔丁基甲基醚

THF             四氢呋喃(经Na蒸馏)

实施例1：3-{2′-(4″-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

将0.574g(1.64mmol)3-{2′-(4″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚和1.6ml催化剂悬浮液(阮内镍乙醇悬浮液)一起悬浮在约20ml THF中，然后在H₂下常压振摇过夜。将溶液抽滤，滤液与约50ml H₂O混合，形成浅棕色沉淀，抽滤除去沉淀。几天后，滤液中形成深棕色沉淀，抽滤除去沉淀。从滤液中再次沉淀出米黄色固体。分离出该固体，高真空中干燥。m.p.：～285℃；¹H-NMR(300MHz，DMSO)：9.96，9.39(s，NH，OH)；8.41(s，H-C(5′))；7.88(dd，J＝1.8，8.7，H-C(3″))；7.47(假的t，J＝2，2，H-C(2))；7.30(dd，J＝8.1，1.1，1H)；7.12(假的t，J＝8.1，H-C(5))；6.72(dd，J＝6.9，1.8，H-C(2″))；6.48(m，1H)；6.08(s，NH₂)。

实施例1a：3-{2′-(4″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

将452mg(1.64mmol)7-氯-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶和587mg(5.38mmol)3-氨基苯酚(Fluka，Buchs，瑞士)悬浮在约100ml正丁醇中，于回流下加热90分钟。冷却至室温，抽滤得到紫色残余物，用少量正丁醇洗涤，高真空中干燥。m.p.：＞250℃；元素分析C₁₇H₁₁N₅O₄(349.31)：C 58.45，H 3.17，N 20.05，O 18.32；实测值：C 57.89，H 3.36，N 19.88，O 18.19。

原料的制备如下：

7-氯-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶：

将6.83g(41.8mmol)5-氨基-4，6-二羟基嘧啶(根据M.Ishidate等人，Chem.Pharm.Bull.8，137-139(1960)的描述，用二氯化锡(II)还原4，6-二羟基-5-硝基嘧啶(Aldrich，瑞士)得到)溶解在约100ml无水吡啶中，并且与9.84g(52.9mmol)4-硝基苯甲酰氯混合，在氩气中、于回流下加热约1小时，接着在75℃蒸发浓缩。将75ml磷酰氯加入深红色残余物中，反应混合物在氩气中于回流下加热1小时。冷却后，将反应混合物蒸发浓缩(T＜60℃)，然后在连续搅拌下加入NaOAc/冰混合物中。悬浮液用NaOAc调节pH为5，抽滤。残余物用H₂O和EtOH洗涤，于高真空中干燥后，在约150ml EtOH中煮沸，趁热抽滤，高真空中干燥，得到棕色固体。用色谱柱(硅胶，乙酸乙酯/戊烷90∶10-75∶25)纯化，得到无色至浅黄色针状标题化合物。m.p.：231℃。

实施例2：7-(3″-氯苯氨基)-2-(4′-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶盐酸盐：

将1.61g(4.4mmol)的7-(3″-氯苯氨基)-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶悬浮在室温水浴中的约10ml浓盐酸和10ml乙醇中，加入2.50g SnCl₂之后，水浴加热至约80℃。约100分钟后，加入40ml浓盐酸并且移开水浴。将悬浮液冷却至室温，抽滤，残余物在高真空中干燥。残余物重新悬浮在H₂O中，静置，抽滤，得到的残余物在高真空中干燥。m.p.：260-270°C(部分分解)。¹H-NMR(300MHz，DMSO)：10.36，(s，NH)；8.50(s，H-C(5))；8.16(m，H-C(2″))；7.95(d，J＝8.7，H-C(2′))；7.85(dd，J＝2，0.9，1H)；7.34(假的t，J＝8.1，H-C(5″))；7.12(ddd，J＝6.3，2，0.9，1H)；6.9(d，J＝8.8，H-C(3′))。

实施例2a：7-(3″-氯苯氨基)-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶：

将150mg(0.54mmol)7-氯-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶和0.17ml(1.6mmol)3-氯苯胺(Fluka，Buchs，瑞士)悬浮在约30ml正丁醇中，于回流下加热约2小时。停止加热后，沉淀出固体。抽滤出固体，用少量正丁醇洗涤，高真空中干燥。m.p.：282-287℃。元素分析C₁₇H₁₀ClN₅O₃(376.76)：C55.52，H 2.74，N 19.04，O 13.05；实测值C 55.15，H 3.04，N 18.59，O 13.98。

实施例3：4-{2′-(4″-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

将350mg(1.0mmol)4-{2′-(4″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚悬浮在100ml THF和20ml DMEU中，与一刮铲尖阮内镍催化剂(乙醇悬浮液)混合，然后在H₂中在常压下振摇过周末。将生成的悬浮液抽滤，将滤液浓缩，与约150ml H₂O混合。将得到的悬浮液再次抽滤，残余物用水洗涤，高真空中干燥。将粗产物再次溶解于微热的THF中，立即抽滤。

将滤液通过蒸发浓缩，得到微红色残余物，在高真空中、于150℃下干燥。m.p.：＞250℃.IR：3446w，3311w，3194w，1618s，1509s，1483s，1439m，1322m，1312m，1267m，1225m，1171w，1080w。

实施例3a：4-{2′-(4″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

将2.22g(8.0mmol)7-氯-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶在350ml正丁醇中和2.58g(23.6mmol)4-氨基苯酚(Fluka，Buchs，瑞士)一起于回流温度加热3小时。将橙红色的悬浮液冷却至室温，抽滤，将残余物在高真空中干燥(m.p.＞300℃)，然后悬浮在约40ml的98％EtOH(约70℃)中，再次抽滤，高真空中干燥[结晶状，m.p.＞300℃]。IR：3360w，3178w，1630m，1607m，1518m，1482w，1348m，1217m，1079w，1045w，855w，710w，516w。

实施例4：7-(4″-氯苯氨基)-2-(4′-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶：

将0.536g(2.93mmol)7-(4″-氯苯氨基)-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶与一刮铲尖阮内镍催化剂(乙醇悬浮液)一起悬浮在约15ml DMEU和约75ml THF中，然后常压下在H₂中振摇22小时，然后抽滤。残余物浓缩后与水混合。得到的悬浮液再次抽滤，残余物在高真空中干燥后溶解于THF中，与MeOH混合。抽滤得到的悬浮液，将残余物在高真空中干燥；m.p.：296-301℃。

实施例4a：7-(4″-氯苯氨基)-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶：

将1.99g(7.2mmol)7-氯-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶在约300ml正丁醇中与2.75g(21.6mmol)4-氯苯胺(Fluka，瑞士)一起在回流下加热90分钟。冷却至室温后，抽滤悬浮液，残余物用少量甲醇和大量乙醇洗涤，高真空中干燥，然后在约400ml DMSO中加热，趁热过滤。从滤液中得到片状沉淀；m.p.：约300℃。¹H-NMR(300MHz，DMSO)：10.6(s，NH)；8.57(s，H-C(5))；8.49(d，J＝8.9，2H)；8.43(d，J＝9.0，2H)；7.98(d，J＝9.0，H-C(2″))；7.44(d，J＝8.8，H-C(3″))。

其它实施例：下述式A化合物可通过用7-氯-2-(3’-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶(制备见脚注¹⁰)代替7-氯-2-(4’-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶、按照上述实施例和方法提到的相似方法制备。式B化合物通过将式A化合物还原得到：

¹H-NMR信号(300MHz，DMSO-d₆)

实施例5：10.18，9.44(s，NH，OH)；8.49(s，-H-C(5’)；7.47(假的t，J＝2.1，1H)；7.41(假的t，J＝1.9，1H)；7.39-7.11(m，3H)；7.14(假的t，J＝8.1，H-C(5)；6.83(ddd，J＝8.0，2.3，1.0，1H)；6.52(ddd，J＝8.1，2.4，0.9，H-C(6))；5.55(s，NH₂)。

实施例5a：10.32，9.45(s，NH，OH)；8.98(假的t，J＝2.0，H-C(2″))；8.58(假的d，J＝7.3，1H)；8.55(s，H-C(5′))；8.50(d x假的t，J＝8.4，1.2，1H)；7.97(假的t，J＝8.0，H-C(5″))；7.49(假的t，J＝2.0，H-C(2))；7.34(d x假的d，J＝8.0，1.2，H-C(4))；7.16(假的t，J＝8.1，H-C(5))；6.55(d x假的d，J＝7.6，2.1，H-C(6))。

实施例6：10.51(s，NH)；8.56(s，H-C(5))；8.71(假的t，J＝2.0，H-C(2″))；7.88(ddd，J＝8.3，2.1，0.9，1H)；7.43-7.36(m，3H)；7.28(假的t，J＝7.8，H-C(5′))；7.15(ddd，J＝8.0，2.1，0.9，1H)；6.84(ddd，J＝8.0，2.3，1.1，1H)；5.56(s，NH₂)。

实施例6a：10.60(s，NH)；8.96(假的t，J＝1.9，H-C(2′))；8.62(s，H-C(5))；8.58(假的d，J＝7.7，1H)；8.49(ddd，J＝8.3，2.3，0.9，1H)；8.18(假的t，J＝2.0，H-C(2″))；7.96(假的t，J＝8.0，H-C(5′))；7.88(假的d，J＝7.7，H-C(6″))；7.41(假的t，J＝8.1，H-C(5″))；7.17(假的d，J＝8.2，H-C(4″))。

实施例7：10.02，9.04(s，NH，OH)；8.42(s，H-C(5′))；7.40-7.34(m，3H)；7.29-7.20(m，2H)；6.91(d，J＝8.8，1H)；6.83(dd，J＝8.0，1.0，1H)；5.53(s，NH₂)；3.78(s，CH₃O)。

实施例7a：10.19，9.07(s，NH，OH)；8.95(假的t，J＝1.8，H-C(2″))；8.57(假的d，J＝7.8，1H)，8.51-8.47(m，2H)；7.96(t，J＝8.1，H-C(5″))；7.24(d，J＝2.6，H-C(6))；7.24(dd，J＝8.8，2.6，H-C(4))；6.93(d，J＝8.8，H-C(3))；3.79(s，H₃C)。

¹)名称：3-{2′-(3″-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚；结束时的附加纯化步骤：吸附到10g硅胶上后以粉末的形式上样进行柱色谱分离，用CH₂Cl₂∶甲醇100∶0-95∶5洗脱。

²)有部分分解

³)名称：3-{2′-(3″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

⁴)在290℃左右形成小片，在307-313℃左右熔解。

⁵)名称：7-(3″-氯苯氨基)-2-(3′-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶：

⁶)名称：7-(3″-氯苯氨基)-2-(3′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶：

⁷)结束时的附加纯化步骤：硅胶柱色谱，CH₂Cl₂∶甲醇99∶1-96∶4。

⁸)名称：2-甲氧基-5-{2’-(3”-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7’-基氨基}苯酚。

⁹)名称：2-甲氧基-5-{2’-(3”-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7’-基氨基}苯酚。

¹⁰)7-氯-2-(3’-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶的制备：

将2.25g(17.7mmol)5-氨基-4，6-二羟基嘧啶(制备见实施例1b)和3.73g(20.0mmol)3-硝基苯甲酰氯(Fluka，Buchs，瑞士)一起悬浮在约100ml无水吡啶中，在氩气氛下回流加热1小时，然后在7℃下蒸发浓缩，高真空干燥。将残余物在约100ml磷酰氯中于氩气氛下回流加热约2小时，蒸发浓缩(T＜60℃)，然后在连续搅拌下加入NaOAc/冰混合物中。将悬浮液用NaOAc调节pH至5，静置过夜并在第二天抽滤。残余物用水洗涤，在大量乙醇中煮沸，趁热过滤。滤液在冰箱中静置一个星期，抽滤，将残余物在高真空中干燥。通过柱色谱纯化(乙酸乙酯/戊烷1∶0-2∶1)得到标题化合物：m.p.144-147℃。

¹¹)在260℃左右形成结晶，接着在323-325℃左右熔解。

实施例8：4-(4-氯-2-氟苯氨基)-6-(4-氨基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶：

将0.95g(2.5mmol)4-(4-氯-2-氟苯氨基)-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶悬浮在约50ml THF、2ml三乙基胺和2ml DMEU中，与一刮铲尖催化剂悬浮液(阮内镍乙醇悬浮液)混合，常压下在H₂中过夜振摇。悬浮液通过硅藻土抽滤，蒸发浓缩后与水混合，用5％NaOH溶液调节pH至10，抽滤，得到的残余物用大量水洗涤。将产物通过柱色谱纯化(溶解在丙酮中，并以硅胶吸附物的形式加入柱中，硅胶，戊烷∶乙酸乙酯＝3∶2)。m.p.：229-232℃。

实施例8a：4-(4-氯-2-氟苯氨基)-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶：

将1.65g(5.9mmol)4-氯-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶和2.2ml 4-氯-2-氟苯胺一起于100ml 1-丁醇中加热至沸约4小时。将混合物冷却，抽滤。依次用大量1-丁醇、甲醇和叔丁基甲基醚洗涤残余物，高真空中干燥。粗产物在乙酸中重结晶。m.p.：＞250℃，¹H-NMR(500MHz，DMSO)：10.0(s，NH)；8.41(s，H-C(2))；8.36(d，J＝9.1，H-C(2’))；8.08(d，J＝9.0，H-C(3’))；7.82(假的t，J＝8.6，H-C(6”))；7.78(s，H-C(5))；7.57(dd，J＝10.4，2.4，H-C(3”))；7.35(ddd，J＝8.6，2.4，1.1，H-C(5”))。

原料的制备如下：

8a1：4-氯-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶：

将13.5g 4-羟基-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶加入约200ml磷酰氯(Fluka，Buchs)中，于回流下加热1.5小时。接着，将反应混合物敞口静置3天，然后加入4kg冰中。抽滤悬浮液，残余物用大量水洗涤。产物在约200℃和约0.1mbar时升华。升华物由柠檬黄色非晶型针状物组成：m.p.：始于245℃(分解)。¹H-NMR(300MHz，DMSO)：8.91(s，H-C(2))；8.40，8.31(d，J＝9.2，H-C(2’，3’))；8.09(s，H-C(5))。

8a2：4-羟基-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶：

将21g 4-羟基-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸在加热下溶解于约200ml吡啶中，然后在80℃蒸发浓缩。将残余物在500ml事先用硫酸镁干燥过的喹啉中和1g Cu₂O(Aldrich，Buchs)一起在恒定的氮气流下于190℃加热1小时。反应混合物冷却后加入1升2.5M盐酸中，搅拌然后抽滤。残余物用浓氨水和水洗涤。将得到的深棕色残余物在高真空中干燥：

m.p.：＞350℃。

8a3：4-羟基-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸：

将3.0g(9.1mmol)4-羟基-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸乙酯在约50ml的5％氢氧化钠溶液中煮沸约50分钟。趁热抽滤反应混合物，弃去残余物。[为了得到4-羟基-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸钠，在冰上抽滤冷却的滤液(冷却后，针状)，用少量冰水洗涤。将针状物在高真空中干燥，M.p.＞250℃(分解)]。冷却后，将滤液用浓盐酸小心地调节至pH 1(有沉淀形成)。抽滤并将残余物在高真空中干燥，得到固体状标题化合物，其在300-302℃熔解(在熔点分解)：

m.p.：＞300℃(熔化/分解)。m.p.：＞350℃。¹H-NMR(300¹H-NMR(300MHz，DMSO)：MHz，D₂O，与HDO有关的细节13.5(bs，COOH)；8.40(s，＝4.79ppm)：8.24(d，J＝9.2，arH，C(2)-H)；8.38(d，J＝7.0，arH)；2H)；8.08(s，arH，1H)；7.93(d，J＝8.17(d，J＝9.1，arH)。9.2，arH，2H)。

8a4：4-羟基-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸乙酯：

将7.34g 2-氨基-5-(4-硝基苯基)呋喃-3，4-二甲酸二乙酯在氮气氛下、140℃下于40ml甲酰胺、20ml DMF和10ml 98-100％甲酸中搅拌14小时。将反应混合物用冰浴冷却。然后，滤除粘性的物质，先用2-丙醇洗涤，接着用己烷洗涤。残余物在高真空中干燥后于200ml乙醇中加热，趁热抽滤。将残余物在高真空中干燥，得到标题化合物：m.p.：279-282℃。

8a5：2-氨基-5-(4-硝基苯基)呋喃-3，4-二甲酸二乙酯：

将105g(0.39mol，1当量)4-硝基苯甲酰-氯乙酸乙酯溶解在600ml THF中。在水浴(T＝35℃)上，向该溶液中分批加入49.4g(0.37mol)研细的氰基乙酸乙酯钠(制备：Chem.Ber.1962，95，307-318)。搅拌过夜(在N₂下)，蒸发浓缩后用H₂O和CH₂Cl₂萃取。合并CH₂Cl₂相，用水洗涤，用MgSO₄干燥然后除去溶剂。在甲苯中结晶得到标题化合物，m.p.：174-177℃。

8a6：4-硝基苯甲酰-氯乙酸乙酯(2-氯-3-(4-硝基苯基)-3-氧代-丙酸乙酯)：

描述于J.Heterocycl.Chem.1985，32，1621-1630(和其中的参考文献)中。简化的制备方法：将100.2g(0.42m0l)4-硝基苯甲酰-乙酸乙酯(Acros，Belgium)悬浮在350ml甲苯中，与45ml(75g；0.55mol)SO₂Cl₂混合。于80℃下减压(约900hPa)搅拌1小时。随后，逐渐降低温度和压力。残余物用冰水冷却，用甲苯萃取数次。将有机相用水洗涤，最后用饱和NaHCO₃溶液中和，干燥(MgSO₄)，浓缩，得到标题化合物。

下述衍生物按照与实施例8中所述相似的方法制备：

¹ 计算值和测定值之间的差异≤0.4％

² C_计算：64.20％；C_测定：63.78％

实施例13：4-(1R-苯基乙基氨基)-6-(3-氨基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶

将1.47g(4.1mmol)4-(1R-苯基乙基氨基)-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶溶解在约50ml的THF中，与一刮铲尖阮内镍悬浮液混合，常压下在H₂中过夜振摇，用硅藻土抽滤，将滤液蒸发浓缩，溶解于TBME中并用水萃取。将有机相用MgSO₄干燥，蒸发浓缩后在高真空中干燥。将产物溶于CH₂Cl₂，用稀释一倍的浓盐酸萃取，分离水相，用饱和NaHCO₃溶液中和，用CH₂Cl₂返萃取。将有机相用MgSO₄干燥，蒸发浓缩得到标题化合物。M.p.：64-84℃。IR：3340m br，3028w，2972w，1600s，1570m，1491m，1466m，1352m，1303m，1228w，1141m，941w，776m，700m，551w。EI-MS：330(M⁺)。

原料的制备如下：

13a：4-(1R-苯基乙基氨基)-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶

在约75ml 1-丁醇中将2.43g(8.8mmol)4-氯-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶和4.2ml R-(+)-α-甲基苄基氨基(Fluka，Buchs，[3886-69-9])加热至沸2.5小时。将溶液蒸发浓缩(80℃，100mbar)，与100ml H₂O和300mlTBME混合并振摇，形成沉淀。抽滤两相混合物，将残余物在高真空中干燥。在乙醇中重结晶得到标题化合物，m.p.163-165℃。

原料的制备如下：

13a:4-(1R-笨基乙基氨基)-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2,3-d]嘧啶

在约340ml磷酰氯中将11g 4-羟基-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶于回流下加热4小时。将反应混合物静置过夜后加入5kg冰中。将生成的悬浮液抽滤，用大量水洗涤。将残余物在高真空中干燥，在约200℃时升华；

m.p.：196-205℃。

原料的制备如下：

13c：4-羟基-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶

将18.4g 4-羟基-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸加入约200ml喹啉中，在恒定的氮气流下于200-220℃加热20分钟。接着加入0.7g Cu₂O。2小时后，另外加入0.4g Cu₂O。1小时后，另外加入一刮铲尖Cu₂O并降低温度。第二天，将反应混合物与0.5升2.5M HCl混合，用水稀释，搅拌，静置8小时后抽滤。残余物用浓氨水和大量水洗涤。用浓HCl酸化碱性滤液，抽滤，用大量水洗涤。从两种残余物得到的粗产物不需要另外处理，可直接使用。m.p.：＞300℃。IR：3091w，2853w，1670ss，1593w，1527s，1496w，1475w，1373w，1348s，1297w，1202m，938m，900m，783w，740w，703w，622w。原料的制备如下：

13d：4-羟基-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸：

将0.95g(3.2mmol)4-羟基-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸乙酯加入30ml 5％氢氧化钠溶液中，于100℃加热30分钟。趁热过滤反应混合物，将滤液冷却至室温。然后在冷却下将溶液的pH值用浓盐酸调节至1。形成棕色沉淀，抽滤，高真空干燥。m.p.：＞300℃。IR：3448w，3237m，3088w，1752s，1734s，1672s，1531s，1474m，1407m，1381m，1346s，1241m，1211m。

原料的制备如下：

13e：4-羟基-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸乙酯

在200ml甲酰胺、100ml DMF和40ml 98-100％的甲酸中，在氮气氛、140℃下将72.9g 2-氨基-5-(3-硝基苯基)呋喃-3，4-二甲酸二乙酯搅拌约23小时。溶液冷却后，将反应混合物用水稀释，静置8小时，抽滤。高真空干燥残余物后于300ml乙腈中煮沸，抽滤，用冰冷的乙腈洗涤，高真空干燥。将第二次的残余物于200ml二氯甲烷中煮沸，趁热抽滤，用二氯甲烷洗涤，高真空干燥。所得残余物中含有产物；m.p.：212-220℃。IR：3528w，3246m，3092m，2985w，1936w，1721s，1589m，1543s，1482m，1429w，1378s，1352s，1323m，1287m，1234m，1196m，1076m，1042s。

在所得产物中，副产物为4-羟基-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶-5-甲酸酰胺。可通过在DMF中重结晶得到分析纯的该副产物；m.p.：约380℃(分解)IR：3338m，3180-2810w(多重峰)，1708s，1676s，1589w，1560m，1526s，1406w，1348s，1220w，1105w，1081w，1041w，920w，899w，880w，803w，740w，676w。

原料的制备如下：

13f：2-氨基-5-(3-硝基苯基)呋喃-3，4-二甲酸二乙酯

将25g(3-硝基苯基)-3-氧代丙酸乙酯(0.10mol；Acros，Belgium)加入300ml甲苯中。室温下将12.8ml硫酰氯(0.15mol)加入该悬浮液中。10分钟后，用150ml水终止反应。有机相用饱和碳酸氢钠溶液萃取，直到水相pH＞7。然后，再次用水萃取有机相，用硫酸镁干燥，抽滤。蒸除甲苯。在氩气氛下，将180g所得的油加入400ml经钠蒸馏的THF中。在冷却下将79.6g研细的氰基乙酸酯钠(0.59mol)分批加入该溶液中(制备：Chem.Ber.1962，95，307-318)。于25℃搅拌3小时后，除去THF，将油状残余物用CH₂Cl₂溶解并用水萃取。将有机相用硫酸镁干燥，抽滤，蒸除溶剂。得到橙色的油，将其在对二甲苯中结晶。m.p.：169℃。

下述衍生物按照与实施例8相似的方法由A(实施例13a)制得。

¹ 计算值和测定值之间的差异≤0.4％

下述衍生物可按照与上述实施例相似的方法制得：

^＊4-氟-2-甲基-1.H.-吲哚-5-醇的合成记载于WO 00/47212实施例237中。

原料的制备如下：

a)4-苄氧羰基乙酰基-苯甲酸酯

氮气氛下，将9.5g MgCl₂(100mmol，在130℃下高真空干燥)悬浮在100ml CH₂Cl₂中并在用冰冷却下与25.0g苄基-叔丁基丙二酸酯(100mmol)和27.9ml三乙胺(200mmol)混合。15分钟后，在30分钟内加入溶解于30mlCH₂Cl₂中的19.8g 4-氯羰基-苯甲酸甲酯(100mmol)，室温搅拌过夜。将反应混合物与冰水混合，分离水相，用CH₂Cl₂萃取。有机相用5％柠檬酸溶液和盐水洗涤两次，干燥(Na₂SO₄)，蒸发浓缩(50g油)。将残余物溶解在400ml甲酸中，室温搅拌2天。真空蒸除甲酸。将蒸发残余物溶解在EtOAc和稀NaHCO₃溶液中，分离水相，用EtOAc萃取两次。有机相用NaHCO₃溶液、水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，蒸发浓缩。将残余物溶解在沸腾的甲苯中，部分浓缩，冷却至室温。滤出形成的沉淀，弃去。将滤液用干冰快速冷却，过滤形成的结晶，用冷的甲苯洗涤，最终得到标题化合物：m.p.：71℃。

b)4-(苄氧羰基-氯-乙酰基)-苯甲酸甲酯

将溶解于40ml甲苯中的4.0g(12.8mmol)4-苄氧羰基乙酰基-苯甲酸甲酯和19.2ml 1M SO₂Cl₂的CH₂Cl₂溶液混合，于室温搅拌30分钟。在0℃下，加入水，分离出水相并用EtOAc萃取两次。将有机相用饱和NaHCO₃溶液、水和盐水洗涤两次，干燥(Na₂SO₄)，蒸发浓缩。通过柱色谱法纯化(SiO₂；己烷/EtOAc 9∶1→4∶1；粗产物溶解在CH₂Cl₂中)得到油状标题化合物：MS：[M+1]⁺＝347；TLC(己烷/EtOAc 4∶1)Rf＝0.19。

c)2-氨基-5-(4-甲氧羰基-苯基)-呋喃-3，4-二甲酸-3-甲基-4-苄基酯

氮气氛下，将溶解于3.5ml THF中的785mg(2.28mmol)4-(苄氧羰基-氯-乙酰基)-苯甲酸甲酯在35℃下搅拌。向该溶液中分批加入284mg(2.35mm0l)研细的氰基乙酸甲酯钠(制备：Chem.Ber.1962，95，307-318)。5小时后，过滤混合物，蒸发浓缩滤液，残余物加入水和EtOAc中。分离水相，用EtOAc萃取两次。有机相用水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，蒸发浓缩。通过柱色谱法纯化(SiO₂；CH₂Cl₂→CH₂Cl₂/丙酮39∶1)和在沸腾的甲苯中结晶，得到标题化合物：m.p.：138-139℃；¹H-NMR(CDCl₃)：7.92(d，2H)，7.50(d，2H)，7.42(m，2H)，7.37(m，3H)，5.70(s，H₂N)，5.38(s，2H)，3.91(s，H₃C)，3.64(s，H₃C)。

d)6-(4-甲氧羰基-苯基)-4-氧代-3，4-二氢-呋喃并[2，3-.d.]嘧啶-5-甲酸苄酯

氮气氛下，将100mg(0.25mmol)2-氨基-5-(4-甲氧羰基-苯基)-呋喃-3，4-二甲酸-3-甲基-4-苄基酯溶解于1.25ml HCONH₂、DMF和HCOOH(4∶2∶1)的混合物中，在120℃时搅拌139小时。真空蒸除DMF。在沸腾的甲醇中重结晶，得到标题化合物：m.p.：248-249℃；MS：[M+1]⁺＝405；¹H-NMR(DMSO-d₆)：12.9(s，1H)，8.26(s，1H)，7.98(d，2H)，7.80(d，2H)，7.47(m，2H)，7.35(m，3H)，5.38(s，2H)，3.88(s，H₃C)。除其它杂质外，滤液中还含有6-(4-甲氧羰基-苯基)-4-氧代-3，4-二氢-呋喃并[2，3-.d.]嘧啶-5-甲酸：MS：[M+1]⁺＝315。

e)6-(4-甲氧羰基-苯基)-4-氧代-3，4-二氢-呋喃并[2，3-.d.]嘧啶-5-甲酸

将6-(4-甲氧羰基-苯基)-4-氧代-3，4-二氢-呋喃并[2，3-.d.]嘧啶-5-甲酸苄酯催化氢化得到标题化合物。

实施例38：干法填充的胶囊：按照如下描述制备5000粒胶囊，每粒胶囊含有0.25g前述实施例中提到的式I化合物之一作为活性成分：

组成

活性成分  1250g

滑石      180g

小麦淀粉  120g

硬脂酸镁  80g

乳糖      20g

制备方法：将所述物质粉碎，过0.6mm筛。用胶囊填充机将每份0.33g的混合物填充入明胶囊壳中。

实施例39：软胶囊：按照如下描述制备5000粒软胶囊，每粒胶囊含有0.05g前述实施例中提到的式I化合物之一作为活性成分：

组成

活性成分 250g

PEG 400  1升

吐温80   1升

制备方法：将粉碎的活性成分悬浮在PEG400(聚乙二醇，M_r为约380至约420之间，Fluka，瑞士)和Tween^80(聚氧乙烯失水山梨醇单月桂酸酯，Atlas Chem.Ind.，Inc.，USA，Fluka提供，瑞士)中，在湿粉磨机中粉碎，得到粒径范围为约1至3μm的微粒。接着用胶囊填充机将每份0.43g的混合物填充入软明胶胶囊中。

Claims (13)

1.式I化合物或其盐，

其中，

Y为NR′、S或O，其中R′代表氢或烷基；

X代表带有基团A的碳原子；A代表氢；R代表芳基；Q代表芳基或芳基C_1-7烷基；

其中的芳基为苯基或萘基，其分别为未取代的或被至多三个选自下列的取代基所取代：氨基；C_1-7烷基氨基；N，N-二C_1-7烷基氨基；卤素；C_1-7烷基；羟基；C_1-7烷氧基；硝基；氨基甲酰基；C_1-7烷基氨基甲酰基；N，N-二C_1-7烷基氨基甲酰基；C_1-7烷基哌嗪基羰基；吗啉基羰基；C_1-7烷基哌嗪基C_1-7烷基；吗啉基C_1-7烷基；C_1-7烷硫基。

2.根据权利要求1所述的式I化合物或其盐，其中X代表带有基团A的碳原子；A代表氢；R代表芳基；Q代表芳基或芳基C_1-7烷基；

其中的芳基为苯基或萘基，其分别为未取代的或被至多三个选自下列的取代基所取代：氨基；C_1-7烷基氨基；N，N-二C_1-7烷基氨基；卤素；C_1-7烷基；羟基；C_1-7烷氧基；硝基；氨基甲酰基；C_1-7烷基氨基甲酰基；N，N-二C_1-7烷基氨基甲酰基；C_1-7烷硫基。

3.根据权利要求1所述的式I化合物或其盐，其中

X代表带有基团A的碳原子；其中A代表氢；

R代表被硝基、氨基、C_1-7烷基哌嗪基羰基、吗啉基羰基、N，N-二C_1-7烷基氨基甲酰基、N，N-二C_1-7烷基氨基C_1-7烷基、C_1-7烷基哌嗪基C_1-7烷基或吗啉基C_1-7烷基取代的苯基；且

Q为苄基、苯乙基；或未取代或被一个或多个彼此独立地选自羟基、C_1-7烷基、C_1-7烷氧基和卤素的基团取代的苯基。

4.根据权利要求1所述的式I化合物或其盐，其中

X代表带有基团A的碳原子；A代表氢；

R为被硝基或氨基取代的苯基；Q为苄基、苯乙基；未取代或被一个或多个彼此独立地选自羟基、C_1-7烷氧基和卤素的基团取代的苯基。

5.根据权利要求1所述的式I化合物或其盐，其中

X代表带有基团A的碳原子；A代表氢；

R为被氨基取代的苯基；

Q为苄基、苯乙基或被一个或多个彼此独立地选自羟基、C_1-7烷氧基和卤素的基团取代的苯基。

6.根据权利要求4或5所述的I化合物或其盐，其中所述卤素为氟、氯或溴。

7.根据权利要求4或5所述的I化合物或其盐，其中所述C_1-7烷氧基是甲氧基。

8.根据权利要求5所述的I化合物或其盐，其中所述被氨基取代的苯基是4-氨基苯基。

9.根据权利要求1-5任一项所述的化合物或其盐，其中Y为NH或O。

10.根据权利要求1所述的式I化合物，选自

3-{2′-(4″-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

3-{2′-(4″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

7-(3″-氯苯氨基)-2-(4′-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶盐酸盐：

7-(3″-氯苯氨基)-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶；

4-{2′-(4″-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

4-{2′-(4″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚：

7-(4″-氯苯氨基)-2-(4′-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶；

7-(4″-氯苯氨基)-2-(4′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶；

3-{2′-(3″-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚；

3-{2′-(3″-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7′-基氨基}苯酚；

7-(3″-氯苯氨基)-2-(3′-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶；

7-(3″-氯苯氨基)-2-(3′-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶；

2-甲氧基-5-{2’-(3”-氨基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7’-基氨基}苯酚；

2-甲氧基-5-{2’-(3”-硝基苯基)唑并[5，4-d]嘧啶-7’-基氨基}苯酚。

4-(4-氯-2-氟苯氨基)-6-(4-氨基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(4-氯-2-氟苯氨基)-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(3-氯苯氨基)-6-(4-氨基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(3-氯苯氨基)-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(3-羟基-4-甲氧基苯氨基)-6-(4-氨基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(3-羟基-4-甲氧基苯氨基)-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(3-氨基苯氨基)-6-(4-氨基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(3-氨基苯氨基)-6-(4-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

4-(1R-苯基乙基氨基)-6-(3-氨基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；和

4-(1R-苯基乙基氨基)-6-(3-硝基苯基)呋喃并[2，3-d]嘧啶；

或其盐。

11.一种药物制剂，含有根据权利要求1至10中任一项所述的式I化合物或其可药用盐和至少一种可药用载体。

12.权利要求1-10中任一项的式I化合物或其可药用盐在制备用于治疗与血管生成失调有关的疾病和/或治疗良性或恶性肿瘤的药物中的用途。

13.制备权利要求1中说明的式I化合物的方法，其特征在于，(a)将式II化合物，其中X和R具有权利要求1中式I化合物给出的含义，L为离去基团，

与式III的胺、酚或巯醇反应，

Q-YH                     (III)

其中Q具有式I化合物中给出的含义，Y为NR′、S或O，其中R′代表氢或烷基；

其中，如果需要，式II和/或III化合物中不参与反应的官能团以被保护的形式存在，然后除去存在的保护基；

并且，如果希望，可将所得式工化合物转化为不同的式工化合物；将所得式工的游离化合物转化为盐；将所得式工化合物的盐可转化为另一种盐或式工的游离化合物；和/或将所得式工化合物的异构体混合物分离为单个异构体。