CN100349610C - 一种治疗口腔溃疡的口腔粘贴片及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及的是一种抗口腔溃疡的蛋白质类药物——重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片及其制备方法。该口腔粘贴片分为两层:一层为含药的粘附层;一层为不溶于水的保护层。粘附层中不仅含有粘附剂,还含有对蛋白质活性起稳定作用的稳定剂和促进药物吸收的促透皮吸收剂,并且在制备工艺中采用特殊的处理方法,以充分保护蛋白质主药的生物活性在制备过程中不受破坏。保护层可以延缓药物在口腔内的溶解过程,防止片剂的双向粘附作用而带来的不适感,增加药物的作用时间,提高局部作用药物的疗效。该重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片具有局部给药浓度高、药物缓释时间长、粘贴效果好等优点,是一种适用于临床治疗的新型制剂。
Description
技术领域
本发明涉及一种抗口腔溃疡药物重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片及其制备方法。
背景技术
口腔溃疡是一种常见病,多发病。其发病率占口腔门诊总病例的15%左右。口腔溃疡引发的原因有多种,如自身免疫力低下;维生素缺乏;个体创口愈合障碍;各种病毒侵入口腔;血液中白细胞水平低等原因都可以引起口腔溃疡。口腔溃疡虽非严重疾病,但由于发病人在各年龄组都有,而且病程长,难以治愈,影响饮食甚至交谈,故广大患者盼望有一种使用方便,疗效好的药物剂型。
目前,治疗口腔溃疡的药物有几种,中药有锡类散、冰硼散等散剂,但这种剂型使用时不便,而且即使将其涂于患处,也很快随唾液而流失,限制了其药物的充分发挥。西药有含漱剂、金霉素油膏,B2膜及其它一些药物的膜剂,抗溃疡蛋白质药物现在还没有上市产品。含漱剂作用时间更短;油膏难于涂于患处;膜剂虽可以贴于溃疡面,但一般在几分钟左右溶解消失,药物渗透作用不够,作用发挥不足。国内已生产的用于口腔溃疡的药物膜剂有谷固醇膜(黄河药厂),利福平膜(北京第六制药厂),溶菌酶膜(武汉生物药厂),克霉唑膜,蜂皇浆膜(武汉第三制药厂),地塞米松中西药复方口腔溃疡膜,醋酸地塞米松粘贴片(太太药业)。以上膜剂均以聚烯醇或羧甲基纤维素钠为膜材料的单层膜剂,在口腔中保留时间一般不超过5分钟,不能有更长的用药时间。国内用于口腔溃疡的粘贴片有甲硝唑口腔溃疡粘贴片,能较长时间粘贴在口腔中,但厚度较大,有不适感和药物损失大等缺点。醋酸地塞米松粘贴片克服了以上的不足,但由于其主药的作用限制,只对部分病因引起的口腔溃疡起作用,如由于人体免疫缺陷或各种原因引起的白细胞减少时引起的口腔溃疡,就起不到应有的作用。
PHarm.Int.,6,196-200,1985报道了日本在八十年代推出的一种含曲安缩松(triamcinolone acetonide)的双层口腔溃疡粘贴片商品,商品名为AFTACH。含药层厚0.4mm,以卡波普和羟丙基纤维素为粘贴剂;背衬层厚0.7mm,以乳糖为基质,能较长时间地粘贴在口腔中。
日本救急药品工业株式会社在九十年代推出一种含曲安缩松的双层膜剂,商品名为WAPLON-P。总厚度为0.16mm,直径为12mm,保护层为羟丙甲基纤维素苯二甲酸脂,粘贴层基质为羟丙甲基纤维素及PVP。该品在口腔中可停留约30分钟。
英国专利(1279214)介绍了一种海藻酸钠和海藻酸钙的双层膜剂,药物为二性霉素,用于治疗口腔溃疡。
J.PHarm.Sci.,73,548-552,1989报道了用部分中和的甲基丙烯酸为基质的口腔粘贴膜治疗口腔粘膜损害。
J.Clin.PHarm.Ther.,14,153-158,1989报道了用高分子CMC-Na制成的粘贴片剂倍他米松为主药,能维持四小时之九。
J.PHarm.Sci.,79,116-119,1990报道了口腔粘贴的片剂,其材料HPC和Carbopol的应用
J.Control Rel.,6,123-131,1987报道了口腔三层粘贴片,在口腔中长时间输送可的松类激素。
Int.J.PHarmaceut,49,231-240,1989报道了含背膜的水凝胶粘贴膜。
Int.J.PHarmaceut,49,231-240,1989报道了一种双层口腔粘贴膜,一层为不透性背膜,一层为含激素的水凝胶。
目前尚无使用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子制成的粘贴片,更无一层为含蛋白质药物的粘附层;另一层为不溶于水的保护层的双层口腔粘贴片剂的报道。
重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子是近年来发现的重要的细胞因子,由于它具有多种生物学活性,对多种造血谱系和消炎反应有明确作用,而受到越来越多的重视。GM-CSF除具有刺激增殖分化过程中的造血细胞外,对调节髓系成熟细胞的功能也有重要作用。当人体的局部如口腔溃疡时,GM-CSF起到弱的化学引诱剂的作用,它可以抑制炎症细胞离开炎症部位,且可与G-CSF协同作用。Metcalf认为GM-CSF与其它集落刺激因子协同在炎症反应中发挥作用。GM-CSF可激活中性粒细胞。由于GM-CSF的作用中性粒细胞对趋化因子等呈现高反应性,并增强其氧化代谢,膜去极化及吞噬功能,同时GM-CSF还能激活单核细胞,血液及组织中的巨噬细胞及嗜酸细胞,并刺激其增殖,增强其功能,另外,GM-CSF还可刺激其它细胞因子如TNF,IL-1等的产生,由此可见,GM-CSF能调节免疫功能,并具有一定的免疫增强作用。
为了说明GM-CSF可加强抗感染的作用,慕尼黑大学选择了32例病人,其中22例接受过3种以上的抗菌素治疗,其余10例也用过全身性的抗真菌药物,结果发现,凡是使用GM-CSF后白细胞计数迅速升高到正常者,其所需抗菌素治疗时间明显比那些使用GM-CSF后白细胞计数来能迅速升高者少,这一结果有力说明GM-CSF具有一定的抗感染能力。当肿瘤患者需要放化疗时,常常会伴有身体各部位的溃疡,其中口腔粘膜溃疡为较常见的现象。我们曾用GM-CSF的水溶液漱口或采用局部用药的方法给病人使用能够起到治愈的作用,例如Rovirosa等人用GM-CSF漱口水治疗颈部等部位的放疗年引起的口腔粘膜溃疡:12位患者中有9例(75%)的病情明显好转,50%的患者感到微痛,未见GM-CSF有关的其它副作用,在对照中,12例患者的溃疡都有加重,无一例好转,结果说明GM-CSF对免疫机能低下和放化疗后白细胞减少引起的口腔溃疡有明显的作用。Wandl报道了用GM-CSF来治疗乳腺癌患者的皮肤溃疡,也取得了令人满意的效果。对于很多复杂原因引起的感染,GM-CSF也都具有显著的作用。如江丽芸等人认为GM-CSF在登革病毒的致病与免疫的过程中起重要作用。
我们通过动物实验进一步证实GM-CSF对抗单纯疱疹病毒感染有疗效。以上说明重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子是一种安全有效的抗感染药物,在临床上已被广泛用于提高白细胞。作为体表用药,如中国专利号02150093.2以及中国专利号0310044.X发明的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶剂,主要治疗皮肤烧伤、烫伤以及皮肤或粘膜的溃疡,但凝胶剂在皮肤患处滞留的时间短,容易被去除,尤其是口腔用药,凝胶剂更是容易被唾液冲淡从而达不到治疗口腔溃疡的很好效果。而口腔粘贴片就克服了这一缺点,尤其是使用新的技术将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子制成双层粘贴片剂,更是体现了它的独到之处。这在大分子蛋白类药物的的制剂中也还曾有报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子作为活性组分的治疗口腔溃疡的口腔粘贴片。
本发明的再一目的是提供制备以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子作为活性组分的治疗口腔溃疡的口腔粘贴片的方法。
本发明的治疗口腔溃疡的口腔粘贴片以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子作为活性组分,并且该片剂分为两层,一层为含活性组分的粘附层,一层为不溶于水的保护层,粘附层与保护层的质量比为1~5∶1,以4∶1做为优选。经过多次大量的试验,筛选了大量的配方,确定了该口腔粘贴片的粘附层由主药、稳定剂、促透皮吸收剂以及粘附剂组成。其中以重量份计算,主药占0.01~0.5份优选0.05重量份、稳定剂占10~50份、促透皮吸收剂占0.01~0.5份、粘附剂占0.5~20份。
本发明的口腔粘贴片的稳定剂为一种或多种选自包括甘油、丙二醇、维生素B2、人血白蛋白、乳糖、海藻酸钠、透明质酸的组的复合稳定剂,优选所述稳定剂为维生素B2、海藻酸钠、人血白蛋白、乳糖联合作为稳定剂,且其重量比为1∶5∶1∶10。该稳定剂不仅长时间保持主药有效的生物活性,而且有效地提高了粘贴片的药效。
本发明的口腔粘贴片的促透皮吸收剂为一种或几种选自包括卵磷脂、胆酸钠,脱氧胆酸钠、油酸、十二烷基硫酸钠、聚山梨酯80、苄泽的组的物质,优选所述促透皮吸收剂为卵磷脂和聚山梨酯80,且其重量比为1~4∶1。该复合促透皮吸收剂不仅可以生物降解,对生物膜无任何破坏作用,而且它能够充分地提高主药机体的局部或全身的生物利用度。
本发明的口腔粘贴片的粘附剂为一种或多种选自包括粘附剂(或称胶粘剂)是由卡波姆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、硬脂酸镁的组的物质,优选所述粘附剂为卡波姆、羟丙基纤维素和硬脂酸镁,且其重量比为20∶10∶0.1。
本发明的口腔粘贴片的保护层包括丙烯酸树脂,聚乙烯醇17-88,甘油,黄色素,邻苯二甲酸二辛酯,且其重量比为25∶30∶5∶4∶3,所用的色素为黄色素。
本发明的口腔粘贴片的制备方法,包括以下步骤:
1)制备含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的颗粒:将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与丙二醇、维生素B2、人血白蛋白等稳定剂同促透皮吸收剂按0.05~1.0∶5~20∶0.4的重量比混合制成溶液,将透明质酸、海藻酸钠和乳糖等稳定剂同粘附剂按25~50∶10~40的重量比制成混合粉末,然后将溶液加入到粉末中充分搅拌混合10~20分钟,过20目筛后,35℃~42℃干燥1~3小时,过18目筛整粒;
2)压片:加入0.5~20重量份的粘附剂,然后压片;
3)在药片表面喷涂保护层:将聚乙烯醇17-88按3.0~8.0的重量份加入70ml~100ml蒸馏水中,80℃加热使溶解完全,再按重量比8.0∶3.0∶1.0∶0.5加入甘油、丙烯酸树脂、邻苯二甲酸二辛酯、黄色素研磨均匀,用喷膜机均匀喷涂于药片表面,经25℃~40℃干燥后,形成片剂的保护层。
本发明提供的是一种重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片,这种粘贴片是采用对大分子蛋白质起保护作用的可溶性生物粘附性高分子材料以及难溶性水的防水基质制成的一种新颖的含有蛋白质类药物的双层片剂。其中一层为含药的粘附层,这层中含有的成分不仅增强片剂粘附性,而且还保证了主药的稳定性,提高药物的药效,使药物无刺激性,容易被皮肤或粘膜患处吸收;不溶于水的另一层为保护层,可以延缓药物在口腔内的溶解过程,防止药物向口腔粘膜的对侧的溶解和片剂在齿龈和口腔粘膜的双向粘附,从而尽量使药物向溃疡面渗入,同时也减少该粘贴片在口腔中的不适感,增加药物的作用时间,提高局部作用药物的疗效。在上市治疗口腔溃疡药物中还没有蛋白质药物,更没有重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片。该口贴片选用的主药是有抗溃疡作用的蛋白质药物重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子,此因子对于免疫能力低下和白细胞减少等引起的口腔溃疡有特效。所以将主药制成口腔粘贴片剂不仅可以较长时间粘贴在创面,使局部有较高的、较长时间的药物滞留并保持较好的疗效,而且与该主药的注射剂相比,同样治疗口腔疾患的剂量大大的降低,并且减少了全身副反应。另外,作为口腔粘贴片,迄今尚未见报道有蛋白质类的此剂型。在该口腔粘贴片中,主药重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的含量为0.01~0.5重量份,优选为0.05重量份。
如上所述,本发明的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片是一种蛋白质双层贴片剂,它不同于市场上已有的单独化学消炎贴片和常见的激素类药物,无任何副作用。药效明确,用药安全,长期使用也无任何潜在不安全因素。这种双层贴片剂是一种双层单向释药的复合片剂。其中一层为可溶性的高分子组成含药的粘贴层,另一层为不溶性高分子组成的不含药的保护层。
如上所述的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片,其制备方法为:用含有复合稳定剂维生素B2、人血白蛋白以及复合促透皮吸收剂卵磷脂和聚山梨酯80的磷酸缓冲溶液将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的原液稀释成一定的浓度,然后与乳糖混合后制粒,干燥后加入卡波姆(carbopol)、海藻酸钠和硬脂酸镁,混合均匀后压片,再将含有丙烯酸树脂,聚乙烯醇17-88,邻苯二甲酸二辛脂、甘油和色素的溶液喷涂于药片表面,干燥后得到重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片。所用到的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子是通过菌体发酵表达出的含有重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子分泌物,经粗提、精提得到符合国家质检标准的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液。其它辅料均为药用级别的辅料。
对本发明的产品经过光照(2500LUX)、高温(25℃、37℃),高湿(RH60%、75%、90%)、室温空气各10天的影响因素试验,加速试验(37℃、RH75%)三个月和室温留样30个月的稳定性考察,制剂的外观、PH、微生物限度、药物活性、溶解性等均无明显变化。
具体实施方式
实施例一:
1、组分:
主药:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),是根据《中国生物制品规程》(2000版),采用菌体发酵,柱层析技术制备的原液。
稳定剂:丙二醇、人血白蛋白、乳糖均为药用级市售产品。
促透皮吸收剂:脱氧胆酸钠、油酸均为药用级市售产品。
粘附剂:卡波姆、硬脂酸镁均为药用级市售产品。
保护层的辅料:丙烯酸树脂,聚乙烯醇17-88,均为市售产制品。
2、制备1000片的主药及辅料投量:
GM-CSF: 0.1g 丙二醇: 5.0g
人血白蛋白: 5.0g 乳糖: 40.0g
脱氧胆酸钠: 0.12g 油酸: 0.08g
卡波姆: 13.9g 硬脂酸镁 0.2g
丙烯酸树脂: 8.9g 聚乙烯醇17-88: 6.0g
甘油: 1.0g
3、制备方法
3.1制备含主药的颗粒
取重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液,以及按投料量称取丙二醇、人血白蛋白、油酸,用PBS配制重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子稀释液10ml,其中重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的浓度为10.0mg/ml。按投料量称取乳糖、卡波姆、硬脂酸镁加入密闭物料锅,再加入已配好的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子溶液,开机混合10分钟,过20目筛制粒,40℃干燥1小时后,过18目筛整粒。
3.2压片
用直径8平冲压片即得,每片约重100mg,含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子10ug(10IU)。
3.3制备贴片保护层
将6.0g聚乙烯醇17-88加入95ml蒸馏水中,80℃加热使溶解完全。再加入甘油1.0g,丙烯酸树脂8.9g研磨均匀,用喷膜机均匀喷涂于药片表面,经25℃~37℃干燥后,形成片剂的保护层。
实施例二:
1、组分:
主药:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),是根据《中国生物制品规程》(2000版),采用菌体发酵,柱层析技术制备的原液。
稳定剂:甘油、乳糖、透明质酸均为药用级市售产品。
促透皮吸收剂:卵磷脂、油酸均为药用级市售产品。
粘附剂:卡波姆、硬脂酸镁均为药用级市售产品。
保护层的辅料:聚乙烯醇17-88,邻苯二甲酸二辛酯,黄色素均为市售产品。
2、制备1000片的主药及辅料投量:
GM-CSF: 0.3g 甘油: 2.0g
透明质酸: 5.0g 乳糖: 30.1g
卵磷脂: 0.1g 油酸: 0.1g
卡波姆: 15.2g 硬脂酸镁 0.2g
黄色素: 0.5g 聚乙烯醇17-88: 6.0g
邻苯二甲酸二辛酯: 2.5g 甘油: 8.0g
3、制备方法
3.1制备含主药的颗粒
取重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液,以及按投料量称取甘油、透明质酸、油酸、卵磷脂,用PBS配制重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子稀释液6ml,其中重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的浓度为50.0mg/ml。按投料量称取乳糖、卡波姆、硬脂酸镁加入密闭物料锅,再加入已配好的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子溶液,开机混合20分钟,过20目筛制粒,37℃干燥2小时后,过18目筛整粒。
3.2压片
用直径8平冲压片即得,每片约重80mg,含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子30ug(30IU)。
3.3制备贴片保护层
将6.0g聚乙烯醇17-88加入95ml蒸馏水中,80℃加热使溶解完全,再加入甘油8.0g,邻苯二甲酸二辛酯2.5g,黄色素0.5g研磨均匀,用喷膜机均匀喷涂于药片表面,经干燥后,形成片剂的保护层。
实施例三:
1、组分:
主药:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),是根据《中国生物制品规程》(2000版),采用菌体发酵,柱层析技术制备的原液。
稳定剂:人血白蛋白、维生素B2、乳糖、海藻酸钠均为药用级市售产品。
促透皮吸收剂:卵磷脂、聚山梨酯80均为药用级市售产品。
粘附剂:卡波姆、羟丙基纤维素、硬脂酸镁均为药用级市售产品。保护层的辅料:丙烯酸树脂,聚乙烯醇17-88,甘油,邻苯二甲酸二辛酯,黄色素均为市售产品。
2、制备1000片的主药及辅料投量:
GM-CSF: 0.05g
人血白蛋白: 2.0g 维生素B2: 2.0g
海藻酸钠: 10.0g 乳糖: 19.8g
卵磷脂: 0.15g 聚山梨酯80: 0.05g
卡波姆: 20.0g 硬脂酸镁 0.1g
羟丙基纤维素: 10.0g 甘油: 8.0g
丙烯酸树脂: 3.0g 聚乙烯醇17-88: 3.5g
邻苯二甲酸二辛酯: 1.0g 黄色素: 0.5g
3、制备方法
3.1制备含主药的颗粒
取重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子原液,以及按投料量称取维生素B2、人血白蛋白、卵磷脂、聚山梨酯80,用PBS配制重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子稀释液8ml,其中重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的浓度为6.25mg/ml。按投料量称取海藻酸钠、乳糖、卡波姆、羟丙基纤维素、硬脂酸镁加入密闭物料锅,再加入已配好的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子溶液,开机混合15分钟,过20目筛制粒,37℃干燥2小时后,过18目筛整粒。
3.2压片
用直径8平冲压片即得,每片约重80mg,含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子50ug(50IU)。
3.3制备贴片保护层
将4.0g聚乙烯醇17-88加入95ml蒸馏水中,80℃加热使溶解完全。再加入甘油8.0g,丙烯酸树脂3.0g,邻苯二甲酸二辛酯1.0g,黄色素0.5g研磨均匀,用喷膜机均匀喷涂于药片表面,经干燥后,形成片剂的保护层。
实施例四:
1、组分:
主药:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),是根据《中国生物制品规程》(2000版),采用菌体发酵,柱层析技术制备的原液;
稳定剂:丙二醇、人血白蛋白、乳糖、海藻酸钠均为药用级市售产品。
促透皮吸收剂:卵磷脂、十二烷基硫酸钠均为药用级市售产品。
粘附剂:卡波姆、羟丙基纤维素、硬脂酸镁均为药用级市售产品。
保护层的辅料:丙烯酸树脂,聚乙烯醇17-88,甘油,邻苯二甲酸二辛酯,黄色素均为市售产品。
2、制备1000片的主药及辅料投量:
GM-CSF: 0.1g
人血白蛋白: 3.0g 丙二醇: 5.0g海
藻酸钠: 10.3g 乳糖: 25.1g
卵磷脂: 0.1g 十二烷基硫酸钠:0.1g
卡波姆: 20.0g 硬脂酸镁 0.1g
羟丙基纤维素: 15.0g 甘油: 8.0g
丙烯酸树脂: 3.0g 聚乙烯醇17-88: 4.0g
邻苯二甲酸二辛酯: 1.0g 黄色素: 0.5g
3、制备方法:
制备方法实施例同三。
实施例五:
1、组分:
主药:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),是根据《中国生物制品规程》(2000版),采用菌体发酵,柱层析技术制备的原液;
稳定剂:乳糖、海藻酸钠、透明质酸均为药用级市售产品。
促透皮吸收剂:卵磷脂、苄泽均为药用级市售产品。
粘附剂:卡波姆、羟丙基纤维素、硬脂酸镁均为药用级市售产品。
保护层的辅料:聚乙烯醇17-88,甘油,邻苯二甲酸二辛酯,黄色素均为市售产品。
2、制备1000片的主药及辅料投量:
GM-CSF: 0.05g
海藻酸钠: 6.0g 乳糖: 30.0g
透明质酸: 2.0g 卵磷脂: 0.1g
苄泽: 0.1g 卡波姆: 20.0g
羟丙基纤维素: 10.0g 硬脂酸镁 0.1g
甘油: 8.0g 聚乙烯醇17-88: 4.0g
邻苯二甲酸二辛酯: 1.0g 黄色素: 0.5g
3、制备方法:
制备方法实施例同三。
实施例六:
1、组分:
主药:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),是根据《中国生物制品规程》(2000版),采用菌体发酵,柱层析技术制备的原液;
稳定剂:人血白蛋白、乳糖、海藻酸钠均为药用级市售产品。
促透皮吸收剂:胆酸钠、聚山梨酯80均为药用级市售产品。
粘附剂:卡波姆、羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁均为药用级市售产品。
保护层的辅料:丙烯酸树脂,甘油,邻苯二甲酸二辛酯,黄色素均为市售产品。
2、制备1000片的主药及辅料投量:
GM-CSF: 0.2g
人血白蛋白: 2.0g 乳糖: 30.0g
胆酸钠: 0.15g 海藻酸钠: 5.0g
聚山梨酯80: 0.05g 卡波姆: 25.0
羧甲基纤维素钠: 10.0g 硬脂酸镁 0.1g
甘油: 7.0g 丙烯酸树脂: 3.0g
邻苯二甲酸二辛酯:1.0g 黄色素: 0.5g
3、制备方法:
制备方法实施例同三。
以上实施例用于描述本发明,但不作为对本发明的限制。
实施例的实验结果比较:
试验实施例一:穿透粘膜、粘附力与溶解以及稳定性实验
1.透粘膜试验:
(1)实验材料:试验样品:是按着实施例三制备的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片。对照品:按着实施例三制备的不含有促透皮吸收剂的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片。生物膜为市售的鸡肫囊。Frank释放池,保温箱,高压液相仪均为市售产品。
(2)实验方法:
取鸡肫囊作为生物膜,用水洗净,置生理盐水中待用。取容积2ml、直径为1cm的Frank释放池,二池之间放上生物粘膜,在膜的一侧供给室放上本口腔粘贴片一片;另一侧接受池加2ml生理盐水,然后于37℃保温。样品与对照品的释放池每隔1h取出2ml溶液,同时补充2ml生理盐水。将取出液用高效液相色谱法测定,与标准重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子比较,得出测定的样品与对照品在释放池取出溶液的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的含量。
(3)实验结果:
时间 | 第1小时 | 第2小时 | 第3小时 | 第4小时 | 第5小时 | 第6小时 |
对照品(ug/ml) | 0.81 | 1.13 | 1.39 | 1.56 | 1.51 | 1.53 |
样品(ug/ml) | 1.09 | 1.96 | 2.37 | 2.52 | 2.66 | 2.58 |
本品的透粘膜作用要比不含促透皮剂的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子普通粘贴片的透皮作用强,6h本品透过粘膜的量为标示量的26.32%,而重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子普通粘贴片剂透过粘膜的量为标示量的15.86%。
2.粘附力与溶解试验:
(1)实验材料:
试验样品:是按着实施例三制备的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片。
对照品:按着实施例三制备的不含有促透皮吸收剂的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片。
生物膜为新鲜的鸡蛋壳膜。
人工唾液为市售分析纯的磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、氯化钠配制而成。
(2)实验方法:
按照中国药科大学学报2001年第32卷第2期介绍的方法和粘附力测定装置进行试验。
将待测药片的一面粘贴于玻片1上,取新鲜的鸡蛋壳膜用人工唾液浸泡45min后,剪取1cm2粘贴于玻片2上,用少量人工唾液将药片表面润湿后,迅速将粘有鸡蛋膜的玻片2覆盖于其上,使鸡蛋壳膜与药片紧密接触,同时施加外力1N,持续5min。5min后撤去外力,调整输液流量为每秒2滴。称量玻片2脱落时塑料袋中的水与玻片2的总重量,即为药片粘附力的大小。
将片剂粘贴于片剂溶出仪的烧杯中(离开液面约1cm),以人工唾液为基质,温度37℃,桨法,100r/min,记录片剂消失所需时间。
(3)实验结果:
实施例一 | 实施例二 | 实施例三 | 实施例四 | 实施例五 | 实施例六 | |
粘附力(g/cm2) | 151.31 | 160.52 | 164.15 | 161.28 | 163.83 | 156.76 |
溶解时间(min) | 23.5 | 26.5 | 37.0 | 37.5 | 35.0 | 33.5 |
根据上述实验,选择主要组成的乳糖∶卡波姆∶羟丙基纤维素为20∶20∶10以及保护层由丙烯酸树脂,聚乙烯醇17-88,甘油,邻苯二甲酸二辛酯,黄色素的处方,因为此配方既有较长的粘附力,又可保持适合的溶解时间。
3.稳定性试验:
(1)实验材料:试验样品是分别按着实施例一、二、三、四、五和六制备的重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片。所用的仪器设备如恒温箱、冰箱、pH计均为市售产品,所用的细胞培养基RM1640、血清以及TF1细胞均为市售产品。
(2)实验方法:
活性测定:将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片用1640细胞培养液溶解,按着《生物制品规程》2000版规P417的方法测定。
pH值测定:将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片用蒸馏水溶解,再利用pH计测定。
粘附力测定,溶解性测定均同上。
(3)实验结果:
试验样品经加速试验,即37℃情况下放置,在0、1、2、3个月和25℃室温情况下放置,在0、1、3、6个月测定其性状、pH值、粘贴力、活性含量、溶解性等5项稳定性实验指标,比较六种实施例的样品,实施例三的样品的5项指标均与0个月初始情况没有明显变化,而其它五种均在不同指标上有所改变。
实验实施例二:药理及毒理性实验
1、动物的药理学研究实验
(1)实验材料:豚鼠,小白鼠,猫,均为市售动物;重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片为:分别以主药10ug/片、50ug/片、100ug/片、200ug/片、500ug/片,按照实施例三的辅料配方及方法制备的样品。
(2)实验方法:
①重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片10ug/只组、50ug/只组、100ug/只组、200ug/只组、500ug/只五个剂量,每日分2次,连续7日,贴于豚鼠体表患处,观察对豚鼠实验性单疱病毒性疱疹是否有明显抑制作用;是否随其剂量强度增大而增强。
②将粘贴片10ug/只组、50ug/只组、100ug/只组、200ug/只组、500ug/只组涂抹小鼠破损皮肤,然后观察药物对其自主活动有无明显影响;
③将猫麻醉,然后在其破损的口腔粘膜处贴上该粘贴片10ug片/只、50ug片/只、100ug片/只、200ug片/只、500ug片/只,观察药物对其血压、心率、呼吸频率、呼吸深度及心电图有无明显影响。
(3)实验结果:
药物对豚鼠实验性单疱病毒性疱疹有明显抑制作用,且其强度随剂量增大而增强;对小白鼠自主活动无明显影响;对麻醉后的猫血压、心率、呼吸频率、呼吸深度及心电图无明显影响。方法和药效学实验所述相同。观察对溃疡的抑制作用;对小鼠自主活动的影响;对猫的血压、心跳、呼吸频率、呼吸深度及心电图有无明显影响。
2、动物的急性毒性实验
(1)实验材料:大鼠为市售动物;重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片——是主药为2500ug/片按照实施例三的辅料配方及方法制备的样品。
(2)实验方法:将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片最大给药量4×2500ug/片/kg贴于大鼠的体表破损皮肤处,连续观察7天,记录异常现象和死亡数。
(3)实验结果:7天内大鼠无一死亡,亦未出现异常反应,该剂量相当于临床剂量的1.2×104倍,所以临床用药非常安全。
3、动物的长期毒性研究实验
(1)实验材料:大鼠为市售动物;重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片为实施例三制备的样品,
(2)实验方法:将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片按50ug/片/只剂量贴于大鼠溃疡的皮肤处给药,每日一次,连续28天(相当于临床拟用周期的4倍),与对照品比较,观察大鼠的活动、体重、饮食量、饮水量、血常规、血生化指标、脏器系数以及进行组织病理学检查,记录异常现象和死亡数。
(3)实验结果:与对照组比较,对所观察的各指标均无明显异常。连续给药28天后再停药观察14天,上述各指标均无明显异常。
实验实施例三:安全性检查实验
1、动物的过敏性研究实验
(1)实验材料:豚鼠为市售动物;重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片为实施例三制备的药品,主药含量为50ug/片/80mg;按实施例三制备的不含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的口腔粘贴片为阴性对照品;市售的2,4-二硝基氯代苯为阳性对照品。
(2)实验方法:豚鼠背部脱毛后,其分成三,各组分别用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片、阴性对照品按0.24g/次剂量,阳性对照品按浓度0.1%、0.2毫升/次进行致敏接触,然后在7天和14天,以同样的方法各重复一次,再经过14天,用同样的剂量将受试药物、阴性对照品和阳性对照品涂于用药部位进行激发接触,6小时后去除,即刻观察皮肤过敏反应情况,然后于24、48、72小时再观察一次,记录反应现象。
(3)实验结果:药品组和阴性对照组君未见红肿、坏死等过敏反应,阳性对照组则有明显的过敏性反应。
2、动物的刺激性实验
(1)实验材料:豚鼠为市售动物;口腔粘贴片为实施例三制备的药品,活性单位为5.0×104IU/g。
(2)实验方法:依照《新药(西药)临床研究指导原则汇编》,中华人民共和国卫生部药政局,1993年7月,205页方法和王北婴的《中药新药研制与申报》,中国中药出版社出版,262页的方法进行实验。
(3)实验结果:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片按50ug/片/次剂量,连续7日贴于皮肤,对豚鼠完整皮肤和破损皮肤无刺激性反应。
实验实施例四:主要药效学实验
1.动物的药效学实验
(1)实验材料:豚鼠为市售动物;重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口腔粘贴片为:分别以主药10ug/片、50ug/片、100ug/片、200ug/片、500ug/片,按照实施例三的辅料配方及方法制备的样品。
(2)实验方法:
本发明的产品临床前动物药效模型采用豚鼠,攻击病毒用I型和II型单纯庖疹病毒。具体方法是将两组豚鼠口腔粘膜划破,两组分别涂抹一定量的I型和II型单纯庖疹病毒,4~5d后造成口腔溃疡,将造模豚鼠按病变程度均分5组:模型组、阳性药对照组、重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子贴片10ug/只组、50ug/只组、100ug/只组、200IU/只组、500IU/只。
各组豚鼠分别于溃疡部位贴敷各受试药物,模型组贴敷等体积的空白基质片,1贴/次,2次/日,连续给药7d左右。分别于给药前、给药期间及给结束根据溃疡愈合程度按下列评分标准进行半定量评分,结果进行统计学处理。于末次给药后约16h,处死豚鼠,取溃疡部位的口腔粘膜置10%中性福尔马林溶液中,进行病理组织学检查。
评分标准
病变程度 | 评分标准 |
口腔粘膜无明显变化 | 0 |
口腔粘膜红肿、散在水疱 | 1 |
水疱破裂形成小圆形溃疡 | 2 |
小圆形溃疡汇集成大面积糜烂 | 3 |
口腔粘膜红肿减轻、溃疡面开始缩小 | 2 |
溃疡面继续减小、结痂 | 1 |
口腔粘膜溃疡面完全愈合 | 0 |
(3)实验结果:本发明的产品各剂量组给药后,豚鼠口腔粘膜红肿减轻、溃疡面缩小、结痂直至溃疡面完全愈合。病理组织学检查与对照组比较未见黏膜形态结构异常。
实验实施例四:临床实验
本发明的产品用于治疗疱疹性口炎、复发性口腔溃疡及放化疗引起的口腔黏膜炎的适应症进行了318例病人的临床实验。实验采用随机单盲法,实验组(重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子口贴片)206例,对照组(安慰组)112例,剂量:一次一片(50IU/片),一日2次。疗程:疱疹性口炎及复发性口疮7天;放化疗粘膜炎14天。结果显示:试验组与对照组总有效率分别为93.89%与32.19%。其中疱疹性口炎有效率93.88%和28.65%;复发性口腔溃疡91.85%和38.52%;防化疗黏膜炎91.98%和22.79%。经统计学处理,P<0.03,显示试验组有显著的疗效,且有统计学意义。
Claims (11)
1、一种治疗口腔溃疡的口腔粘贴片,其特征在于所述粘贴片以重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子作为活性组分,并且该片剂分为两层,一层为含活性组分的粘附层,一层为不溶于水的保护层,两层的重量比为1~5∶1,该粘附层按重量份含有重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子0.01~0.5份、稳定剂10~50份、促透皮吸收剂0.01~0.5份、粘附剂0.5~20份,所述粘附层通过以下方法制得:重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与稳定剂同促透皮吸收剂按0.05~1.0∶5~20∶0.4的重量比混合制成溶液,稳定剂同粘附剂按25~50∶10~40的重量比混合成粉末,所述溶液与所述粉末搅拌混合后过筛、干燥,再次过筛后进行整粒,然后加入粘附剂压片。
2、如权利要求1所述的口腔粘贴片,其特征在于粘附层与保护层的重量比为4∶1。
3、如权利要求1所述的口腔粘贴片,其特征在于该粘附层中重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的含量为0.05重量份。
4、如权利要求1所述的口腔粘贴片,其特征在于所述稳定剂为一种或多种选自包括甘油、丙二醇、维生素B2、人血白蛋白、乳糖、海藻酸钠、透明质酸的组的物质。
5、如权利要求4所述的口腔粘贴片,其特征在于所述稳定剂为维生素B2、海藻酸钠、人血白蛋白、乳糖联合作为稳定剂,且其重量比为1∶5∶1∶10。
6、如权利要求1所述的口腔粘贴片,其特征在于所述促透皮吸收剂为一种或几种选自包括卵磷脂、胆酸钠,脱氧胆酸钠、油酸、十二烷基硫酸钠、聚山梨酯80、苄泽的组的物质。
7、如权利要求6所述的口腔粘贴片,其特征在于所述促透皮吸收剂为卵磷脂和聚山梨酯80,且其重量比为1~4∶1。
8、如权利要求1所述的口腔粘贴片,其特征在于所述粘附剂为一种或多种选自包括卡波姆、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、硬脂酸镁的组的物质。
9、权利要求8所述的口腔粘贴片,其特征在于所述粘附剂为卡波姆、羟丙基纤维素和硬脂酸镁,且其重量比为20∶10∶0.1。
1 0、如权利要求1所述的口腔粘贴片,其特征在于所述保护层包括丙烯酸树脂、聚乙烯醇1 7-88、甘油、黄色素、邻苯二甲酸二辛酯,且其重量比为25∶30∶5∶4∶3。
11、如权利要求1所述的口腔粘贴片的制备方法,包括以下步骤:
1)制备含重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的颗粒:将重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子与稳定剂同促透皮吸收剂按0.05~1.0∶5~20∶0.4的重量比混合制成溶液,将稳定剂同粘附剂按25~50∶10~40的重量比制成混合粉末,然后将溶液加入到粉末中充分搅拌混合10~20分钟,过20目筛后,35℃~42℃干燥1~3小时,过18目筛整粒;
2)压片:加入0.5~20重量份的粘附剂,然后压片;
3)在药片表面喷涂保护层:将聚乙烯醇17-88按3.0~8.0的重量份加入70ml~100ml蒸馏水中,80℃加热使溶解完全,再按重量比8.0∶3.0∶1.0∶0.5加入甘油、丙烯酸树脂、邻苯二甲酸二辛酯、黄色素研磨均匀,用喷膜机均匀喷涂于药片表面,经25℃~40℃干燥后,形成片剂的保护层。
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Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1389200A (zh) * | 2000-11-24 | 2003-01-08 | 深圳太太药业股份有限公司 | 醋酸地塞米松粘贴片及其制备 |
CN1435258A (zh) * | 2002-11-26 | 2003-08-13 | 哈药集团技术中心 | 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶剂 |
US6670334B2 (en) * | 2001-01-05 | 2003-12-30 | University Of Virginia Patent Foundation | Method and compositions for treating the inflammatory response |
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Patent Citations (4)
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---|---|---|---|---|
CN1389200A (zh) * | 2000-11-24 | 2003-01-08 | 深圳太太药业股份有限公司 | 醋酸地塞米松粘贴片及其制备 |
US6670334B2 (en) * | 2001-01-05 | 2003-12-30 | University Of Virginia Patent Foundation | Method and compositions for treating the inflammatory response |
CN1435258A (zh) * | 2002-11-26 | 2003-08-13 | 哈药集团技术中心 | 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶剂 |
CN1517125A (zh) * | 2003-01-14 | 2004-08-04 | 北京迈德康医药技术有限公司 | 重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子凝胶剂及其制备方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
醋酸地塞米松粘贴片的研制 刘国勤等.海军医学杂志,第21卷第2期 2000 * |
重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的临床新用途 赵忠信.中国肿瘤生物治疗杂志,第7卷第1期 2000 * |
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