CH676984A5 - - Google Patents

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Description

La présente invention concerne de nouveaux composés contenant du phosphore qui inhibent l'activité de l'hydroxy-3 méthyl-3 glutaryl coenzyme A réductase, et qui sont donc utiles pour l'inhibition de la biosynthèse du cholestérol et des compositions hypocholestérolemiques contenant de tels composés.

F.M. Singer et col., Proc. Soc. Exper. Biol. Med., 102, 370 (1959) et F.H Hulcher Arch. Biochem. Bio-phys., 146,422 (1971) montrent que certains dérivés mévatonate inhibent la biosynthëse du cholestérol.

Endo et col. décrivent dans les brevets US No 4 049 495, 4 137 322 et 3 983 140 un produit de fermentation actif pour l'inhibition de la biosynthèse du cholestérol. Ce produit est dénommé compactine, et il a été montré par Brown et col., J. Chem. Soc. Perkin 1.1165 (1976) qu'il avait une structure complexe de mévalonolactone.

GB No 1 586 152 décrit un groupe de composés synthétiques de la formule

E

où E représente une liaison directe, un pont alkylène C1-3, un pont vinylène et les différents R représentent divers substituants.

Il a été trouvé que l'activité du produit du brevet anglais correspond à moins de 1% de l'activité de la compactine.

Le brevet US No 4 375 475 accordé à Willard et col. décrit des composés hypocholestérolémiques et hypolipîdémîants ayant la structure où A est un H; E est une liaison directe, un -CH2-, un -GH2-CH2-, un -CH2-CH2-CH2- ou un -CH=CH-: Ri, R2 et R3 sont chacun choisis dans le groupe composé de H, des halogènes, des alkyls C1-4 et des haloalkyls C-m, du groupe phényl, des phényls substitués par un halogène, des alkoxy Ct_4, des groupes alcanoyloxy C2-8, des alkyls C1-4, ou des haloakyls C1-4 et des OR4 où R4 est un H, un ai-kanoyl C2-0, un benzoyl, un phényl, un halophényl, un phényl alkyl Ci_3, un alkyl C1-9, un cinnamyl, un

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haloalkyl Ci_4, un allyl, un cycloalkyl-alkyl C1-3, un adamantyl alkyl C1-3 ou un phényl alkyl C1-3 substitué dont les substituants sont choisis dans le groupe composé des halogènes, des groupes aikoxy C1-4, des alkyls Ci^t des haloalkyls C-m; et les acides dihydroxy correspondants résultant de l'ouverture par hydrolyse du cycle lactone, les sels acceptables sur le plan pharmaceutique de ces acides et les alkyl C1-3 esters substitués par des groupes alkyls Ci_a phényl, diméthylamino ou acétylamino des dihy-droxyacides; tous les composés étant des énantiomères ayant une configuration 4R dans la partie tétra-hydropyrane du racémate trans représenté par la formule ci-dessus.

WO 84/02131 (PCT/EP83/00308) (basé sur la demande de brevet US No 443 668 déposée le 22 novembre 1982 et la demande de brevet US No 548 850 déposée le 4 novembre 1983) par Sandoz AG décrit des analogues hétérocycliques de mévalonolactones et leurs dérivés ayant la structure

3 o où un des groupes R et Ro est R

R

5a et l'autre est un alkyl primaire C1-6, un cycioalkyl C3-6 ou un phényl-(CH2)m-

où R4 est un hydrogène, un alkyl C1-4, un aikoxy C-m, (sauf t-butoxy), un trifluorométhyl, un fluoro, un chloro, un phénoxy ou un benzyioxy,

Rs est un hydrogène, un alkyl Ci_3, un aikoxy C1-3, un trifluorométhyl, un fluoro, un chloro, un phénoxy ou un benzyioxy,

Rsa est un hydrogène, un alkyl Ci_2, un aikoxy C1-2, un fluoro ou un chloro, et m est 1,2 ou 3,

avec la condition que Rs et Rsa doivent tous deux être des hydrogènes lorsque R4 est un hydrogène, Rsa doit être un hydrogène lorsque Rs est un hydrogène, pas plus d'un des deux groupes R4 ou Rs ne doit être un trifluorométhyl, pas plus d'un des groupes R4 et Rs ne doit être un phénoxy et pas plus d'un des deux groupes

R4 et Rs ne doit être un benzyioxy,

R2 est un hydrogène, un alkyl C1-4, un cycioalkyl C3-6, un aikoxy C1-4 (sauf le t-butoxy), un trifluorométhyl, un fluoro, un chloro, un phénoxy ou un benzyioxy,

R3 est un hydrogène, un alkyl C1-3, un aikoxy C1-3 un trifluorométhyl, un fluoro, un chloro, un phénoxy ou un benzyioxy avec comme condition que Rs doit être un hydrogène lorsque R2 est un hydrogène, pas plus d'un des groupes R2 et R3 ne doit être un trifluorométhyl, pas plus d'un des groupes R2 et R3 ne doit être un phénoxy et pas plus d'un des groupes Ra et R3 ne doit être un benzyioxy,

X est un -(CH2)n- ou un -CH=CH- (n = 0,1,2 ou 3),

R

£ £ 6 Ì. 1 Z est un -CH-CH -C-CH -COOH II 1 2 I 2 OH OH

où Re est un hydrogène ou un alkyl C1-3, le produit se présentant sous la forme d'un acide libre, sous la

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forme d'un ester physloiogiquement hydrolysable et physiologiquement acceptable, sous la forme d'une S lactone ou d'un sel.

GB 2 162 179 À décrit des analogues naphtyliques de la mévalolactone utiles comme inhibiteurs de la biosynthèse du cholestérol ayant la structure

Hé Me où Ri est un alkyl Ci_3;

Z est un groupe de la formulé Zi ou Z2:

H .GH

-W,

0

u o

(Z } (Z Ï

1 2

R7 = H, un groupe ester hydrolysable ou un cation.

Le brevet européen 164 698 A décrit une préparation de lactones utiles en tant qu'agents antihyper-cholestérolémiques en traitant un amide avec un halogénure de sulphonyle organique R5 SO2X, puis en enlevant le groupe protecteur Pr

-CHCH CHCH COOR l 21 2 7 OH OH

1

où X = halo;

Pr=groupe protecteur du carbinol;

Ri = H ou CH3;

R3, R4 = H, alkyl C1-3, ou phényl-alkyl Ci_3, le phényl étant, le cas échéant substitué avec un alkyl Ci-g,

un aikoxy C1-3 ou un halo,-

r2 = un groupe de la formule (A) ou (B);

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(A)

6 I

OU R -CH-

I

Q = R -C-

I

CH

6 3

R6 = H ou OH;

R = H ou GH3;

a, b, c et d = des doubles liaisons facultatives;

R7 = phényl ou benzyioxy, le noyau pouvant être, le cas échéant substitué par un alkyl C1-3 ou un halo; R8, R9 = alkyl C1-3 ou halo;

R5 = alkyl C1-3, phényl ou mono- ou di (alkyl C1-3) phényl.

Anderson, Paul Leroy décrivent dans Ger. Offen. DÉ 3 525 256 des analogues naphtyliques de méva-lonolactones de la structure

Me

Me

CHCH CHCH CO R I 2| 2 2 OH OH

Q

H OH

KS

II

Q'

où R1 est un alkyl, Z = Q, Q1; R7 = H ou un groupe ester hydrolysable utiles comme inhibiteurs de la biosynthèse du cholestérol et dans le traitement de l'athérosclérose,

WO 8 402 903 (basé sur le brevet US 460 600 déposé le 24 janvier 1983 par Sandoz AG) décrit des analogues de mévalono-lactones utiles en tant qu'agents hypolipoprotéinémique ayant pour structure

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X-Z R

où les deux groupes forment ensemble un radical de la formule

& 1- c r -{ c = c - c = c.] - ou -(CH y -Il 2 4

R R

2 3

où Rs est un hydrogène, un alkyl C1-4, un aikoxy C1-4 (sauf le t-butoxy) un trifluorométhyl, un fluoro, un chloro, un phénoxy ou un benzyioxy,

R3 est un hydrogène, un alkyl C1-3, un aikoxy Ci_3, un trifluorométhyl, un fluoro, un chloro, un phénoxy ou un benzyioxy, avec comme condition que pas plus d'un des groupes R2 et R3 ne soit un trifluorométhyl, que pas plus d'un des groupes R2 et R3 ne soit un phénoxy et que pas plus d'un des groupes R2 et R3 ne soit un benzyioxy;

Ri est un hydrogène, un alkyl C1-6, un fluoro, un chloro ou un benzyioxy;

R4 est un hydrogène, un alkyl C1-4, un aikoxy C1-4 (sauf le t-butoxy), un trifluorométhyl, un fluoro, un chloro, un phénoxy ou un benzyioxy;

Rs est un hydrogène, un alkyl C1--3, un aikoxy C1-3, un trifluorométhyl, un fluoro, un chiaro, un phénoxy ou un benzyioxy;

Rsa est un hydrogène, un alkyl Ci-2, un aikoxy C1-2, un fluoro ou un chloro, avec comme condition que pas plus d'un des groupes R4 et Rs ne soit un trifluorométhyl, que pas plus d'un des groupes R4 et Rs ne soit un phénoxy, et pas plus d'un des groupes R4 et Rs ne soit un benzyioxy;

H (CH )

\ / 2q X est -{CH ) -, C = C

2 n / ^

-(CH ) H

2 q où n est égal à 0,1,2 ou 3 et les deux q sont 0 ou un est 0 tandis que l'autre est 1, Zest

F tf 36 z. /

-CH-CH -C-CH -COOH II

j 2 I 2 HO OH

où Re est un hydrogène ou un alkyl C1-3, avec comme condition générale que -X-Z et le groupe phényl portant le R4 soient en position ortho l'un par rapport à l'autre;

sous la forme d'un acide libre, d'un ester ou d'une 8 lactone physiologiquement hydrolysables et physiologiquement acceptables, ou d'un sel physiologiquement acceptable.

La demande de brevet européen 127848 (Merck & Co, Ine) décrit des dérivés de l'acide hydroxy-3-thia-5-ö) aryl alcanotque ayant pour structure

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OH ^ . Q

k. ox

S (O) 1 n E J Z

où Z est:

R

n est égal à 0,1 ou 2;

E est un -CH2-, un -CH2-CH2-, un -CH2-CH2-CH2-;

un -CH=CH-CH2- ou un- CH2-GH=CH-;

Ri, R2 et R3 sont par exemple un hydrogène, un chloro, un bromo, un fluoro, un alkyl Ci, un phényl, un phényl substitué ou OR7, où R7 est un hydrogène, un alkanoyl C2-8, un benzoyl, un phényl, un phényl substitué, un alkyl C1-9, un cinnamyl, un haloalkyl C-m, un allyl, un cycloalkyl-alkyl C1-3, un adamantyl alkyl Ci_3 ou un phénylalkyl Ct-s;

R4, R5 et R6 sont un hydrogène, un chloro, un bromo, un fluoro ou un alkyl C1-3; et X est par exemple un hydrogène, un alkyl C1-3, un cation dérivé d'un métal alcalin ou un ammonium.

Ces composés ont une activité antihypercholestérolémique découlant de leur aptitude à inhiber la hy-droxy-3 méthyl-3 glutaryl coenzyme A (HMG-CoA) réductase, ainsi qu'une activité antifongique.

La demande de brevet français No 2 596 393 déposée le 1 avril 1986 (Sanofi SA) décrit des dérivés de l'acide carboxy-3 hydroxy-2 propane phosphonique et en particulier leurs sels qui sont utiles en tant qu'agents hypalipidémiants et qui ont pour formule:

R O OR I 2 11/ 3 S 00C-CH -C-CH -P 1 2 1 2 \

OH OR

4

où Ri et R2 = H, un alkyl inférieur ou le cas échéant un aralkyl substitué;

R3 et R4 = H, un alkyl inférieur ou le cas échéant un aryl substitué ou un araikyl substitué.

Ces composés sont décrits comme provoquant une diminution plus importante des niveaux de cholestérol, de triglycérides et de phospholipides que le mégiutol.

La demande de brevet européen 142146 A (Merck & Co., Ine) décrit des composés du type mévinoline ayant pour formule:

E 1

Z

où R1 est par exemple un hydrogène ou un alkyl C1-4; E est un —C H 2—C H 2—, un —OH—OH— ou —(CH2)i—î et

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Zest

1)

O

II

R

où X est un -O- ou un -NR9 où R9 est un hydrogène ou un alkyl C1-3;

R7 est un alkyl C2-8; et

R8 est un hydrogène ou un CH3;

2)

où R10, R11 et R12 sont, indépendamment, par exemple un hydrogène, un halogene ou un alkyl O1-4;

Conformément à la présente invention, on fournit des composés contenant du phosphore qui inhibent l'enzyme hydroxy-3 méthyl glutaryl coenzyme A réductase (HMG-CoA réductase) et qui sont par conséquent utiles en tant qu'agents hypocholestérolémiques, ces composés comportant le groupe suivant

0 ti

-P-CH -CH-CH -CO-

1 2 s 2

X . OH I

(CH )

1 2 n Z

où X est un -O- ou un -NH-, n est égal à 1 ou 2 et Z est une «ancre hydrophobe».

Le terme ancre hydrophobe employé ici désigne un groupe lipophile qui, lorsqu'il est lié à la partie supérieure de la chaîne de la molécule imitant le groupe HMG par une liaison appropriée (X), se fixe sur une poche hydrophobe de l'enzyme non utilisée pour la fixation du substrat HMG-CoA, ce qui provoque une augmentation de l'activité par comparaison avec les composés où Z = H.

Dans les formes d'exécutions préférées les composés de l'invention ont la formule I

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0 H

H J X

I R-P-CH -C-CH -CO R

1 2 12 2 X OH

I

(CH )

2 n.

Z

où R est OH, un aikoxy inférieur ou un alkyl inférieur substitué ou non substitué Rx est H ou un alkyl inférieur substitué ou non substitué;

X est un -O- ou un -NH-;

n est égal à 1 ou 2;

Z est une groupe lipophile;

ainsi que les sels acceptables sur le plan pharmaceutique.

Les termes «sel» et «sels» indiquent les sels basiques formés à partir de bases minérales et organiques. On peut citer en particulier les sels d'ammonium, les sels des métaux alcalins tel que le lithium, le sodium et le potasium (que l'on préférera), les sels de métaux alcalino-terreux tels que les sels de calcium et de magnésium, les sels de bases organiques tels que les sels d'amines, par exemple les sels de la dicy-clohéxylamine, de la benzathine, de la N-méthyl P-glucamine, les sels d'hydrabamine, et les sels d'acides aminés tels que l'arginine, la lysine, etc. On préférera des sels non toxiques et acceptables sur le plan pharmaceutique, mais d'autres sels peuvent aussi être utiles dans la séparation ou la purification du produit.

Comme exemples d'ancres hydrophobes conformes à la présente invention on peut-citer les exemples non limitatifs suivants

2a 1 R v R

. od*"

2b . 2

R R

q où les pointillés représentent, des doubles liaisons facultatives. On peut mentionner par exemple

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5»

R I

O

alkyl

6 a (R )

ou alkyl où R1, R2, R2a et R20 peuvent être les mêmes ou ils peuvent être différents et choisis indépendamment les uns des autres dans le groupe constitué par H, les halogènes trifluorométhyl, les alkyls inférieurs substitués ou non substitués, les haloalkyls, le groupe phényl, les phényls substitués ou les groupes ORY où RY est un H, un alkanoyl, le groupe benzoyl, le groupe phényl, un halophényl, un phénylalkyl inférieur, un alkyl inférieur substitué ou non substitué, le groupe cinnamyl, un haloalkyl, le groupe allyl, un (cycioalkyl substitué ou non substitué)-(alkyl inférieur substitué ou non substitué), un adamantyt-(alkyl inférieur substitué ou non substitué) ou un phényl substitué -(alkyl inférieur substitué ou non substitué).

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Lorsque Z est

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R 1

O

q rs et R5' sont identiques ou différents et ils sont choisis dans le groupe constitué par H, les alkyls inférieurs substitué ou non substitués et OH;

Re est un (alkyl inférieur substitué ou non substitué)

O O

il II

-C du type CH -CH -C-C-3 2/ \ 7 CH R 3 '

ou aryl CH2-;

R6a est un alkyl inférieur substitué ou non substitué, un hydroxy, un oxo ou un halogène ou un trifluoro-méthyle;

q est égal à 0,1,2 ou 3; et

R7 est un H ou un alkyl inférieur substitué ou non substitué.

Ainsi, les composés de la formule I englobent

O

11 x

IA R-P-CH -CH-CH -CO R et

' 2 = 2 2

0 OH

1

(CH )

12 n Z

0

" X

IB R-P-CH -CH-CH -CO R

1 2 3 22 NH OH

I

(CH )

i 2 n Z

Le terme «alkyl inférieur substitué ou non substitué» ou «alkyl substitué ou non substitué» utilisé seul ou dans un groupe désigne les chaînes hydrocarbonées droites et ramifiées contenant de 1 à 12 atomes de carbone dans la chaîne droite et de préférence, 1 à 7 atomes de carbone, tels que le groupe méthyl, éthyl, propyl, isopropyl, butyl, t-butyl, isobutyl, pentyl, héxyl, isohéxyl, héptyl, diméthyl-4,4, pentyl, oc-tyl, triméthyl-2,2,4 pentyl, nonyl, décyl, undécyl, dodécyl, leurs différents isomères ramifiés, ainsi que les chaînes carbonées citées précédemment et portant des substituants halogénés du type F, Br, Cl, I ou CF3, des substituants aikoxy, aryl, (alkyl substitué ou non substitué)-aryl, haloaryl, cycioalkyl substi11

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tué ou non substitué, alkylcycioalkyl, hydroxy, alkylamino, alkanoylamino, arylcarbonylamino, nitro, cyano, thiol ou alkylthio.

Le terme «cycioalkyl substitué ou non substitué» utilisé seul ou dans un groupe désigne les groupes hydrocarbonés cycliques saturés contenant de 3 à 12 atomes de carbone, et de préférence de 3 à 8 atomes de carbone, en particulier, les groupes cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohéxyl, cyclo-heptyl, cyclooctyl, cyclodécyl et cyclododécyl, ces groupes hydrocarbonés pouvant tous être substitués avec 1 ou 2 halogènes ou trifluorométhyle, 1 ou 2 groupes alkyl inférieur substitué ou non substitué, 1 ou 2 groupes aikoxy inférieur, 1 ou 2 groupes hydroxy, 1 ou 2 groupes alkylamino, 1 ou 2 groupes alkanoylamino, 1 ou 2 groupes arylcarbonylamino, 1 ou 2 groupes amino, 1 ou 2 groupes nitro, 1 ou 2 groupes cyano, 1 ou 2 groupes thiol et/ou 1 ou 2 groupes alkylthio.

Le terme «aryl» ou «ar» utilisé ici désigné les groupes aromatiques monocycliques et bicycliques contenant de 6 à 12 atomes de carbone dans la portion cyclique tels que les groupes phényl, naphtyl, phényl substitué ou naphtyl substitué où les substituants sur le phényl ou le naphtyl peuvent être 1, 2 ou 3 groupes alkyl inférieur substitué ou non substitué, des halogènes (Cl, Br ou F), 1, 2 ou 3 groupes aikoxy inférieur, 1, 2 ou 3 groupes hydroxy, 1, 2 ou 3 groupes phényl, 1, 2 ou 3 groupes alcanoyloxy, 1,2 ou 3 groupes benzoyloxy, 1,2 ou 3 groupes haloalkyl, 1,2 ou 3 groupes halophényl, 1,2 ou 3 groupes allyl, 1,2 ou 3 groupes cycloalkylalkyl, 1, 2 ou 3 groupes adamantylalkyl, 1, 2 ou 3 groupes alkylamino, 1, 2 ou 3 groupes alkanoylamino, 1, 2 ou 3 groupes arylcarbonylamino, 1, 2 ou 3 groupes amino, 1,2 ou 3 groupes nitro, 1,2 ou 3 groupes cyano, 1,2 ou 3 groupes thiol at/ou 1,2 ou 3 groupes alkylthio, le nombre de substituants étant de préférence 3.

Les termes «aralkyl», «aryl-(alkyl substitué ou non substitué)» ou «aryl-(alkyl substitué ou non substitué) inférieur» utilisés seuls ou dans un groupe désignent les groupes alkyl substitué ou non substitué décrits ci-dessus ayant un substituant aryl, tel qu'un benzyl.

Les termes «aikoxy inférieur», «aikoxy», «aryloxy» ou «aralkoxy» utilisés seuls ou dans un groupe désignent un quelconque des groupes alkyl inférieur substitué ou non substitué, alkyl substitué ou non substitué, aralkyl ou aryl liés à un atome d'oxygène.

Les termes «alkylthio inférieur», «alkylthio», «arylthio» ou «aralkylthio» utilisés seuls ou dans un groupe désignent un quelconque des groupes alkyl inférieur substitué ou non substitué, alkyl substitué ou non substitué, aralkyl ou aryl liés à un atome de soufre.

Les termes «alkylamino inférieur», «alkylamino», «arylamino», «arylalkylamino» utilisés seuls ou dans un groupe désignent un quelconque des groupes alkyl inférieur substitué ou non substitué, alkyl substitué ou non substitué, aryl ou arylalkyl liés à un atome d'azote.

Le terme «alkanoyl» utilisé seul ou dans un autre groupe désigne les groupes alkyl inférieur substitué ou non substitué liés à un groupe carbonyl.

Le terme «halogène» ou «halo» utilisé seul ou dans un autre groupe désigne le chlore, le brome, le fluor, l'iode, les halogènes préférés étant le chlore ou le fluor.

Les composés ayant la formule I qui sont préférés sont ceux dont la structure est la suivante

II R O CH H CH

\|1/ 2\ / 2v x

P C CO R

I ^ 2

X OH

I

CH 12 Z

où R est un OH ou un OLÌ; Rx est un Li ou un H;

X est O ou un NH; et

Zest

R

où R1 est un phényl comportant un substituant alkyl substitué ou non substitué et/ou halo, trifluorométhyle

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où R1 est un benzyioxy qui comporte un substituant halo;

R2 et R2a sont identiques et sont un halogène trifluorométhyie, ou un alkyl inférieur substitué ou non substitué.

Z peut également être de préférence:

1

R

où R1 et R2 sont comme défini plus haut à propos des composés de la formule II ou Z est

6

R

' /ViA

R

où Rs est H, CH3 ou OH et R6 est

O

H

CH C r y r

3 / \ 7 CH R 3

ou un phénylméthyl substitué où R7 est H ou CH3.

Les composés selon la formule I de l'invention peuvent être préparés selon la séquence de réactions dont la description suit.

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Ccbic R -P(Oalkyl)

i 2

QSi-C(CH ) III

> 3 3

Il 3 3

Réaction d'Arbuzov (Ra = alkyl inférieur substitué ou non substitué

I—CH -C-CH -CÖ alkyl ou aikoxy inférieur) 2 12 2

H

0 a H

R -P CH-CH-CH -CO alkyl

1 21 2 2 Oalkyl OSi-C(CH )

/ \ 3 3 C H C H 6 5 6 5 IV

30 1. (CH ) -SiBr, CH Cl O

3 3 2 2 a'Il

IV 2. HO R - P-CH-CH-CH -CO alkyl

2 1 2« 2 2

40

OH O l

35 '

Hydrolyse de 1'ester Si-C(CH )

/v 3 3 phosphorique C H C H

6 5 6 5

VA. Ra' = alkyl substitué ou non substitué inférieur quand Ra était un alkyl inférieur substitué ou non substitué

4g VB. Ra' = OH quand Ra était un aikoxy inférieur

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b

VB R OH-DCC O

a' b H

(R = OH) <r» = alkyl inférieur R -O—P-CH -CH-CH ~CO

substitué ou non substitué) _ ' f ,! ,

OH O alkyl

Pyridine

I

Si—C(CH )

(estérification) / \ 3 3

C H C H

6 5 6 5

VI

VI 1) (COC1) ; CH Cl O

2 2 2 c il

(formation Cl acide) R -P-CH -CH-CH -CO alkyl i 2 - 2 2 ou 2) Z-(CH ) -XH X Ô

2 n il

VA (réaction de couplage) (CH ) Si-C(CH )

i2 n / \ 33 (C H ) N, DMAP Z CHCH

2 5 3 ^ 6565

7

(rc est un., alkyl inférieur substitué ou non substitué ou un aikoxy inférieur)

vii

1) n- (C H ) NF, CH COOH, O

4 9 4 3 li x

VII THF (rupture du silyle R-P-CH -CH-CH -CO

I 2 = 2 2 éther) • X OH

I

2) OH , dioxane (hydrolyse) (CH )

l 2 n Z

Comme cela est indiqué par la séquence de réactions qui précède, les composés de Formule I peuvent être préparés en soumettant l'iodure A à une réaction d'Arbuzov consistant à faire chauffer l'iodure A

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avec un phosphonite/phosphite Ili Hl Ra-P(Oalkyl)2

C H •6 5 O—Si-C(CH ) I 3 3

C H 6 5

I-CH -C-CH -CO alkyl 2 i 2 2 H

où Ra est un alkyl inférieur substitué ou non substitué ou un aikoxy inférieur. Les conditions standard d'Arbuzov permettent de former le phosphinate/phosphonate IV

0

a ii

IV R -P-CH -CH-CH -CO alkyl

1 2 z 2 2 O OSi-C(CH )

t / \ 3 3

alkyl CHCH 6 5 6 5

Le phosphinate/phosphonate IV est un nouveau composé et en tant que tel, il fait partie de la présente invention.

La liaison ester phosphorique du phosphinate/phosphonate IV est alors coupée en traitant une solution du composé IV dans un solvant organique inerte tel que le chlorure de méthylène successivement par du bis(triméthyIsilyl)trîfIuoroacétàmide (BSTFA) et du triméthylsilyle bromure sous une atmosphère inerte (par exemple d'argon) pour former l'acide phosphinique VA où Ra de IV est un alkyl inférieur substitué ou non substitué:

0 il

VA alkyl inférieur-P-CH -CH-CH -CO alkyl

1 2 1 2 2 OH O

I

Si-(CH )

/ \ 3 3 C H C H 6 5 6 5

ou l'acidephosphonique VB (où Ra de IV est un aikoxy inférieur):

O II

VB HO-P-CH -CH-CH -CO alkyl

12= 22 OH O l

Si—(C(CH ) / \ 3 3

C H C H 6 5 6 5

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Rn

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Les composés VA et VB sont de nouveaux intermédiaires et à ce titre, font partie de la présente invention.

Lorsque c'est l'acide phosphonique VB qui est obtenu, il est estérifié par un traitement dans de la Pyridine sèche avec un alcool

VC RbOH (où Rb est un alkyl inférieur substitué ou non substitué)

et de la dicyclohéxyle carbodiimide, le mélange réactionnel obtenu étant agité sous une atmosphère inerte (par exemple de l'argon), ce qui permet d'obtenir le monoalkyle ester d'acide phosphonique VI:

O

b H

VI R -O-P-CH -CH-CH -CO alkyl

12= 22 OH O

t

Si-C(CH )

/ \ 3 3 C H C H 6 5 6 5

L'ester VI ou l'acide phosphonique VA est alors dissous dans un solvant organique inerte tel que du chlorure de méthylène, du benzène ou du tétrahydrofurane (THF) et traité avec de la triméthylsilyldi-éthylamine. Le mélange est agité sous une atmosphère inerte (argon). Le mélange est évaporé et dissous dans du chlorure de méthylène (ou un autre solvant organique inerte approprié). La solution obtenue est alors refroidie à une température comprise entre environ 0°C et 25°C, traitée avec de l'oxalyle chlorure et évaporée. On obtient ainsi le phosphonochloridate brut. Le phosphonochloridate est dissous dans un solvant organique inerte tel que le chlorure de méthylène, le benzène, la pyridine ou le THF; la solution est alors refroidie à une température comprise entre environ -20°C et environ 0°C et traité avec

B Z-(CHz)n-XH

en utilisant un rapport molaire VI ou VA:B situé dans la gamme allant d'environ 0,5:1 à environ 3:1 et de préférence d'environ 1:1 à environ 2,1, puis avec de la triéthylamine et de la diméthylamino-4 pyridine (DMAP) catalytique pour former le composé VII

0

C "

VII R -P—CH —CH-CH -CO alkyl

1 2 = 2 2

X O

i l

(CH ) Si-C {CH )_

«2 n / \ 3 S Z C H C H 6 5 5 5

où Rc est un alkyl inférieur substitué ou non substitué ou un aikoxy inférieur.

La liaison ester du silyle du composé VII est coupée en traitant VII dans un solvant organique inerte tel que le tétrahydrofurane avec de l'acide acétique glacial et du fluorure de tétrabutylammonium pour former l'ester VIII

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0

C il X

VIII R -P-CH -CH-CH -CO R

12= 22 X OH

1

(CH )

| 2 il Z

x

(R = alkyl)

L'ester VIII peut alors être hydrolysé pour obtenir le sel de métal alcalin ou l'acide correspondant où R* est un métal acalin ou un H. Pour cela, on traite avec une base forte, telle que l'hydroxyde de lithium en présence de dioxane, de tétrahydrofurane ou d'un autre solvant organique inerte. Ce traitement se feit sous une atmosphère inerte (par exemple sous argon) à 25°C et en utilisant un rapport molaire base-.ester Vili dans la gamme allant d'environ 1:1 à 1,1:1. On obtient ainsi le sel de métal alcalin correspondant

0 il

VIIIA R-P-CH -CH-CH -CO métal alcalin

1 2 z 2 2 X OH

i

(CH }

i 2 n Z

où R est un alkyl inférieur substitué ou non substitué ou un aikoxy inférieur.

Le composé VIIIA peut ensuite être traité avec un acide fort tel que HCl pour former l'acide VllIB correspondant

0 ii

VIIIB R-P-CH -CH-CH -CO H

1 2 = 2 2 X OH

l

(CH )

I 2 n Z

L'ester VIII où R est un aikoxy inférieur peut être transformé pour obtenir le di-sel de métal alcalin correspondant. Pour cela, on traite l'ester VIII avec une base forte à 50-60°C en utilisant un rapport molaire baserester Vili dans la gamme allant de 2:1 à environ 4:1, ce qui permet d'obtenir VIlIC

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0 11

VIIIC métal alcalin-O-P-CH -CH-CH -CO Taëtal alcalin

12= 22 X OH

1

(CH )

l 2 n z

Le di-sel de métal alcalin VIIIC peut être converti en acide correspondant (R = OH) par un traitement avec un acide fort tel que HCl. On obtient alors

0 M

VIIID HO-P-CH -CH-CH -CO H

1 2 = 2 2 X OH

!

(CH )

1 2 n Z

L'iodure de départ A peut être préparé à partir du bromure C

OH 1

C Br-CH -CH-CH CO alkyl

2 2 2

[préparé selon les méthodes décrites dans Tetrahedron Lett. 26, 2951 (1985)]. Pour cela on le dissout dans du diméthylformamide (DMF), de l'imidazole et de la diméthylamino-4 pyridine. La solution obtenue est traitée avec du t-butyldiphénylsilyle chlorure sous une atmosphère inerte (par exemple sous argon) pour former le silyle éther D

C H C H 6 SS/ 6 5 D OSi-C(CH )

• l 3-3

Br-CH -CH-CH CO alkyl 2 2 2

Une solution du silyle éther D dans un solvant organique inerte tel que la méthyléthylcétone ou le DMF est traitée avec de l'iodure de sodium sous une atmosphère inerte (par exemple sous argon) pour former l'iodure A.

Le composé de départ B

B Z-(CH2)n-XH

peut être préparé comme décrit ci-dessous. La synthèse dépend de la nature de Z et de celle de X.

Ainsi, le composé de la formule B où Z est

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to

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N R

et X est un O, et qui a par conséquent la structure suivante

Bl peut être préparé en traitant l'aldéhyde E

R2a"€$7 (CVn~°H

la

E R ~\( )) (CH > -CHO

r2 2 n-1

avec un agent réducteur tel que l'hydrure de lithium et d'aluminium ou le borohydrure de sodium. Les composés de la formule B où Z est et X est N, c'est-à-dire les composés de la structure

2a

(CH ) ~NH 2 2 n 2

peuvent être préparés en oxydant l'aldéhyde E en solution acétonique avec, par exemple, le réactif de Jones pour former l'acide F

y R

(CH ) -COOH 2 2 n-1

Ce dernier est traité en suspension dans du chlorure de méthylène avec de l'oxatyie chlorure pour former le chlorure d'acide correspondant. Celui-ci est dissous dans un solvent organique inerte tel que le tétrahydrofurane et traité avec un mélange d'hydroxyde d'ammonium concentré dans du tétrahydrofurane pour former un amide ayant pour structure

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CH 676 984 AS

O 11

(CH ) -C-NH 2 2 n-1 2

Pour obtenir l'amine B2, l'amide G est traité avec un agent réducteur tel que l'hydrure de lithium et d'aluminium.

Les composés de départ de la formule B où Z est

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R

q et X est un O ou un -NH-, c'est-à-dire des composés ayant la structure

(CH ) -XH 2 n

6a alkyl

(R )

q où X est un O sont décrits par C. H. Heathcock et col. dans J. Org. Chem. 50,1190 (1985). Les composés de la formule H' où X est un NH peuvent être préparés par l'amination réductrice de

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alkyl

(préparé selon C. H. Heathcock et col., voir ci-dessus) en traitant J avec de l'acétate d'ammonium et du cyanoborohydrure de sodium en présence d'un alcool tel que le méthanol comme solvant.

Les composés de départ de la formule B où Z est et X est O, c'est-à-dire les composés de la structure

M

(CH } -OH 2 2 n sont décrits dans WO 8402-903-A et GB 2 162 179A tous deux déposés par Sandoz. Les composés de départ de la formule B, où Z est et X est un NH, c'est-à-dire des composés de la structure

N

R R

peuvent être préparés par l'amination réductrice de l'aldéhyde O

) -NH 2 n 2

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2a

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O

R

R

2b

R R

(CH ) CHO 2 2 n-1

en traitant O avec de l'acétate d'ammonium et du cyanoborohydrure de sodium en présence d'un alcool tel que le méthanol comme solvant.

Les composés de l'invention peuvent être préparés comme des mélanges racémiques et séparés ensuite pour l'obtention de l'isomère préféré (isomère S). Toutefois, les composés de l'invention peuvent être préparés directement sous la forme de l'isomère S comme décrit dans les exemples concrets ci-des-sous.

Les composés de l'invention sont des inhibiteurs de Phydroxy-3 méthyl-3 glutaryl coenzyme-A (HMG-CoA) réductase et sont par conséquent utiles pour l'inhibition de la biosynthèse du cholestérol, comme cela est démontré par les essais qui suivent.

1) HMG-CoA réductase hépatique du rat

L'activité de la HMG-CoA réductase hépatique du rat est mesurée en utilisant une modification de la méthode décrite par Edwards (Edwards, P.A. et col., J. Lipid Res. 20:40, 1979). Les microsomes hépatiques du rat sont utilisés comme source d'enzyme, et l'activité enzymatique est déterminée en mesurant la conversion de «C-HMG-CoA (substrat) en acide "C mévalonique.

a. Préparation de microsomes

On enlève le foie à 2-4 rats Sprague Dawley alimentés avec de la cholestyramine et tués par décapitation. Les foies sont homogénéisés dans un tampon phosphate A (phosphate de potassium 0,04 M, pH 7,2; KCl, 0,05 M; saccharose, 0,1 M; EDTA, 0,03 M: aprotinine 500 unités Kl/ml). Les foies homogénéisés sont centrifugés à 16 000 g pendant 15 minutes à 4°C. Le surnageant est séparé et centrifugé dans les mêmes conditions une seconde fois. Le surnageant de la seconde centrifugation à 16 000 g est centrifugé à 100 000 g pendant 70 minutes à 4°C. Le culot de microsomes est remis en suspension dans un minimum de tampon A (3-5 ml par foie) et homogénéisé dans un homogénéisateur verre/verre. On ajoute ensuite du dithiothréitol (10 mM). La solution est partagée en fractions aliquotes qui sont rapidement congelées dans un mélange acétone/neige carbonique et mises en conservation à -80°C. L'activité spécifique de la première préparation microsomale était de 0,68 nmoles d'acide mévalonique/mg de protéine/minute.

b. Tests enzymatiques

On dose la réductase dans 0,25 ml d'une solution contenant les composantes suivantes, données en concentration finale:

Les mélanges sont incubés à 37°C. Dans les conditions décrites, l'activité enzymatique augmente d'une manière linéaire jusqu'à 300 jig de protéine microsomale dans le mélange réactionnel. La réaction est également linéaire en fonction du temps d'incubation jusqu'à 30 minutes. Le temps d'incubation standard choisi pour l'étude des médicaments est de 20 minutes, ce qui correspond à une conversion de 12-15% du substrat HMG-CoA en acide mévalonique. Le substrat [DL-]HMG-CoA est utilisé à raison de 100 nM, ce qui correspond au double de la concentration nécessaire pour saturer l'enzyme dans les con-

Phosphate de potassium pH 7,0 KCl

Saccharose EDTA

Dithiothréitol NaCl

Diméthylsulfoxyde Protéines microsomales

14n_rm /n ru; on.

14C-[DL]HMG-CoA (0,05 nCi 30-60 mCi/mmole) 100 |xl

NADPH (nicotinamide adénine dinucléotide phosphate) 2,7 nM

0,04 M 0,05 M 0,10 M 0,03 M 0,01 M 3,5 mM 1%

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ditions décrites. NADPH est utilisé en excès à 2,7 fois la concentration nécessaire pour avoir fa vitesse de réaction enzymatique maximale.

Les essais standardisés pour évaluer les inhibiteurs sont effectués selon la procédure suivante. L'enzyme microsomal est incubé en présence de NADPH à 37°C pendant 15 minutes. Du DMSO est ajouté avec ou sans le composé testé, et l'incubation est poursuivie pendant 15 minutes à 37°C, La réaction enzymatique commence avec l'addition du substrat 14C-HMG-CoA. Après 20 minutes d'incubation a 37°C, on arrête la réaction par l'addition de 25 fil de KOH 33%. On ajoute de l'acide 3H-mévalonique (0,05 fiCi) et on laisse reposer à la temperature ambiante pendant 30 minutes. On ajoute à ce moment cinquante ni de HCl 5N pour provoquer la lactonisation de l'acide mévalonique. Du bleu de bromophénol est ajouté pour servir d'indicateur de pH pour bien suivre la diminution du pH. La lactonisation s'effectue en 30 minutes à la température ambiante. Le mélange réactionnel est centrifugé pendant 15 minutes à 2800 tours/min. Les surnageants sont mis sur 2 grammes de résine anionique AG 1-X8 (Biorad, forme formiate) et le tout est versé dans des colonnes de verre de 0,7 cm de diamètre. L'élution se fait avec 2,0 ml d'eau. Les premiers 0,5 ml sont jetés, et les 1,5 ml suivants sont collectés et leur radiactivités 3H et 14C sont mesurées dans 10 ml de liquide scintillant Opti-fluor. Les résultats sont donnés en nmoles d'acide mévalonique produit en 20 minutes et corrigés à 100% de récupération du tritium. L'effet du médicament est exprimé par I50, qui est la concentration du médicament provoquant une réduction de 50% de l'activité enzymatique. Les résultats sont obtenus à partir des plusieurs courbes de réponse en fonction de la dose. On donne l'intervalle de confiance 95%.

La transformation des médicaments sous forme de lactones en sels de sodium correspondants s'effectue en dissolvant la lactone dans du DMSO, en ajoutant un excès de soude correspondant à 10 fois la quantité molaire de lactone présente et en laissant réagir à la température ambiante pendant 15 minutes. Le mélange est alors partiellement neutralisé (pH 7,5-8,0) avec du HCl 1N et ajouté au mélange de réaction contenant l'enzyme.

2) Synthèse du cholestérol dans des hépatocytes de rat fraîchement préparés.

Les composés montrant un effet d'inhibition sur la HMG-CoA réductase ont été évalués pour leur capacité à inhiber l'incorporation de i^C-acétate dans le cholestérol des suspensions d'hépatocytes de rat fraîchement préparés. La méthode utilisée est celle initialement décrite par Capuzzi et col. (Cappuzzi D. M. et Margolis S., Lîpids, 6:602,1971).

a. Préparation des hépatocytes de rat

Des rats Sprague Dawley (180-220 g) sont anesthésiés avec du Nembutol (50 mg/kg). L'abdomen est ouvert et ta première branche de la veine porte est fermée. De l'héparine (100-200 unités) est injectée directement dans la veine cave inférieure. Une ligature est placée sur la section distale de la veine porte et une canule est placée entre cette ligature et la première branche de veine. On perfuse alors le foie à la vitesse de 20 ml/minutes avec du tampon A oxygéné et préchauffé à 37°C (HBSS sans calcium ou magnésium contenant 0,5 mM d'EDTA), après avoir sectionné la veine cave pour permettre l'évacuation de l'effluent Le foie est ensuite perfusé avec 200 ml de tampon préchauffé B (HBSS contenant 0,5% de collagénase bactérienne). Après la perfusion avec le tampon B, le foie est excisé et décapsulé dans 60 ml de milieu de Waymouth, permettant ainsi aux cellules libres de se disperser dans la solution. Le hépatocytes sont recueillis par une centrifugation de 3 minutes à faible vitesse (50 g) et à la température ambiante. Le culot d'hépatocytes est lavé avec le milieu de Waymouth. On effectue ensuite un comptage et un test de viabilité par l'exclusion du bleu trypane. Les hépatocytes de ces suspensions cellulaires ont habituellement une viabilité de 70-90%.

b. Incorporation de ^C-acétate dans le cholestérol

Les hépatocytes sont mis en suspension à raison de 5 x 106 cellules par 2,0 ml de milieu d'incubation (Ml) [Tris-HCI 0,02 M (pH 7,4), KCl 0,1 M, citrate de sodium 3,3 mM, nicotinamide 6,7 mM, NADP 0,23 mM, glucose-6-phosphate 1,7 nMj.

Les composés testés sont normalement dissous dans du DMSO ou du DMSO:HaO (1:3), puis ajoutés au MI. La concentration finale en DMSO dans le Ml est inférieure ou égale à 1,0% et n'a pas d'effet significatif sur la synthèse du cholestérol.

L'incubation commence au moment où on ajoute le "^C-acétate (58 mCi/mmoIes, 2 nCi/ml) et où l'on place la suspension cellulaire (2,0 ml) dans des cupules pour la culture de tissus de 35 mm. L'incubation se fait à 37°C et elle dure 2,0 heures. Après l'incubation, les suspensions cellulaires sont transférées dans des tubes de centrifugation en verre et centrifugées pendant 3 minutes à 50 g à la température ambiante. Les culots de cellules sont remis en suspension, lysés dans 1,0 ml H2O et placés dans de la glace.

Les lipides sont extraits comme décrit par Blight E. G. et W. J. Dyer, Can. J. Biochem. and PhysioL, 37:911, 1959. La phase organique inférieure est séparée et séchée sous un flux d'azote et le résidu est mis en suspension dans 100 ni de chloroforme:méthanol (2:1). L'échantillon est déposé en totalité sur des plaques de gel de silice pour Chromatographie en couche mince LK6D. Le développement se fait avec un

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mélange héxane: éther éthylique: acide acétique (75:25:1). La radioactivité des plaques est déterminée en utilisant le système de lecture à balayage automatique BioScan. La radioactivité totale de la tache de cholestérol (Rf 0,28) est exprimée par rapport à la radioactivité totale de l'extrait lipidique. Les taches de cholestérol dans les cultures de référence contenaient 800-1000 cpm et cette radioactivité correspondait à 9-20% de la radioactivité totale de l'extrait lipidique. Ces résultats sont comparables à ceux de Capuzzi et col., qui indique que le cholestérol contient 9% de la radioactivité de l'extrait lipidique.

L'effet des médicaments (% d'inhibition de la synthèse du cholestérol) est déterminé en comparant le % de la radioactivité incorporée dans le cholestérol dans les cultures de références et dans les cultures traitées avec le médicament. Les courbes de réponse sont élaborées par combinaison des résultats de deux essais ou davantage. Les résultats sont exprimés par I50 accompagné par la valeur de l'intervalle de confiance 95%.

3) Synthèse du cholestérol dans les fibroblastes de peau humaine

L'effet inhibiteur de la biosynthèse du cholestérol dans le tissu hépatique constitue un critère de sélection possible. En plus de l'examen de l'effet inhibiteur sur la biosynthèse du cholestérol dans les hépatocytes, les composés de l'invention sont testés pour leur action inhibitrice de la biosynthèse du cholestérol dans des fibroblastes de culture.

a. Culture de fibroblastes de peau humaine

Des fibroblastes de peau humaine sont cultivés sur le milieu essentiel minimum d'Eagle (ME) contenant 10% de sérum de foetus de veau. Dans chaque essai, les monocouches des cultures cellulaires sont dispersées par ultra-sons. Les cellules sont ensuite comptées et mises dans des cupules de 35 mm pour culture de tissus (5 x 105 cellules/2,0 ml). Les cellules sont incubées pendant 18 heures à 37°C dans une chambre sous de l'air humide contenant 5% de CO2. L'induction des enzymes de biosynthèse du cholestérol est faite en enlevant le milieu enrichi au sérum, en lavant les monocouches cellulaires et en ajoutant 1,0 ml de ME contenant 1,0% de sérumalbumine bovine sans acides gras libres. L'incubation est ensuite prolongée de 24 heures.

b. Incorporation de 14C-acétate dans le cholestérol

Les cellules de fibroplastes induites sont lavées avec du MEME100 (milieu essentiel minimum d'Earie). Les composés testés sont dissous dans du DMSO ou du DMSO:ME (1:3) et ajoutés à la culture de cellules (la concentration finale en DMSO dans le milieu de culture des cellules est égale ou inférieure à 1,0%). Après une préincubation de 30 minutes à 37°C sous un air humidifié contenant 5% de CO2 et présence du médicament, on ajoute le [1-14C] acétate dê sodium (2,0 (j.Ci/ml, 58 mCi/mmole). L'incubation est ensuite poursuivie pendant 4 heures. Le milieu de culture est enlevé après l'incubation et la monocouche de cellules (200 ng de protéines cellulaires par culture) est râclée dans 1,0 ml d'eau. Les lipides sont extraits de la suspension cellulaire lysée par du chloroforme:méthanol comme cela a été décrit à propos des suspensions d'hépatocytes. La phase organique est séchée sous de l'azote et le résidu est mis en suspension dans 100 (il de chloroforme:méthanol (2:1). La totalité de l'échantillon est appliquée sur une plaque de gel de silice pour Chromatographie en couche mince (LK6D). Les plaques sont analysées comme décrit à propos des hépatocytes.

L'inhibition de la synthèse du cholestérol est déterminée en comparant te pourcentage de radioactivité retrouvé dans la tache de cholestérol des cultures traitées et des cultures de référence. Les courbes de réponse sont obtenues par la combinaison des résultats de deux essais ou davantage. Les résultats sont exprimés par I50 accompagné par la valeur de l'intervalle de confiance 95%.

Un autre aspect de la présente invention concerne des compositions pharmaceutiques comprenant au moins 1 composé de la formule I en association avec un véhicule pharmaceutique ou un diluant. La composition pharmaceutique peut être formulée en utilisant des véhicules conventionnels liquides ou solides d'un type adapté au mode d'administration souhaité. L'administration peut être orale, par exemple sous la forme de tablettes, de capsules, de granulés ou de poudres, ou elle peut aussi être parentérale sous la forme de préparations injectables, de telles formes galéniques contenant de 1 à 2000 mg de composé actif par dose unitaire utilisée dans le traitement. Les quantités administrées dépendent de la dose unitaire, des symptômes, de l'âge et du poids du patient.

Les composés de formule I peuvent être administrés de la même façon que les composés connus tels que la lovastatine utilisés pour l'inhibition de la biosynthèse du cholestérol chez les mammifères, et en particulier chez l'homme, le chien, le chat, etc. Ainsi, les composés de l'invention peuvent être administrés à raison de 4 à 2000 mg en une dose unique journalière ou en 1-4 doses réparties sur la journée, avec une préférence pour une administration de 4 à 200 mg par jour répartis en plusieurs doses de 1 à 100 mg, ou encore mieux une administration en 2-4 fois par jour de doses allant de 0,5 à 50 mg; on peut également utiliser des formes galéniques à effet persistant.

Les Exemples pratiques qui suivent constituent des formes préférées de la présente invention. A moins d'une indication contraire, toutes les températures sont exprimées en degrés centigrade. La chro-

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matographie rapide a été effectuée soit sur du gel de silice Merck 60, soit sur du gel de silice Whatmann LPS-l. La Chromatographie en phase inversée a été effectuée sur du gel de résine CHP-20 MCI fourni par Mitsubishi Ltd.

Exemple 1

Sel de mono-lithium de l'acide (S)-[[[fluoro-4'triméthyl-3,3',5[biphényl-1,1']yl-2]méthoxy]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

A. N-(diméthyl-2,4 benzylidène)benzéneamine.

(Réf. brevet US No 4 375 475 accordé à Merck, p. 39).

Une solution de diméthyl-2,4 benzaldéhyde fraîchement distillé (Aldrich, 6,97 ml, 50 mmoles) et d'aniline distillée (Aldrich, 4,56 ml, 50 mmoles) dans du toluène sec (80,0 ml) était chauffée au reflux pendant trois heures sous argon dans un ballon pourvu d'un dispositif Dean-Stark. Le mélange a été refroidi et évaporé sous vide jusqu'à l'obtention d'une huile jaune. L'huile brute a été purifiée par une distillation de Kugelrohr (0,5 mm Hg, 160-180°C) pour obtenir 8,172 g (78,1%) de la benzéneimine recherchée sous la forme d'une huile jaune clair qui cristallise au repos pour fournir un solide à bas point de fusion.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (4:1 ) Rf = 0,67 et 0,77 (isomères géométriques), UV et h.

(Réf. brevet US No 4 375 475 de Merck, p. 39).

La benzénîmine A (6,0 g, 28,7 mmoles) dans de l'acide acétique glacial (144 ml) a été traitée par de l'acétate de palladium (II) (6,44 g, 28,7 mmoles) et la solution homogène, limpide et dé couleur rouge a été chauffée au reflux sous argon pendant une heure. Le mélange trouble obtenu a été filtré à chaud sur un lit compact de 1/2 pouce de cellite et recueilli dans 900 ml de H2O. Les matières solides oranges précipitées ont été recueillies par filtration et séchées pendant 16 heures sous vide à 65°C en présence de P2O5. On a ainsi obtenu 10,627 g (85,5%) du complexe de palladium recherché qui se présentait sous la forme d'un produit solide orange avec un point de fusion de 194°-196° (le point de fusion d'un échantillon analytique recristallisé donné par la littérature est de 203-205°C).

C. Fluoro-4'triméthyl-3,3')5[biphényl-1,1']-2 carboxaldéhyde

(1) Bromo[fluoro-4 méthyl-3 phényl] magnésium

(Réf. brevets US No 4 375 475 accordé à Merck, p. 37 et 38).

Le réactif de Grignard C (1 ) a été préparé en ajoutant du bromo-5 fluoro-2 toluène (22,5 g, 60,9 mmole, Fairfîeld Chemical Co.) goutte à goutte et à une vitesse suffisante pour maintenir le milieu réactionnel au reflux à des tournures de magnésium (1,35 g, 55,4 mmoles, 8,0 éq) dans du EfeO anhydre (70,0 ml). Le démarrage de la réaction a été réalisé grâce à un dispositif à ultra-sons. Lorsque l'addition du bromure était terminée, le mélange était encore agité pendant 1 heure à la température ambiante, puis chauffé au reflux pendant 15 minutes et enfin laissé à refroidir à la température ambiante.

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(2) FIuoro-4'triméthyl-3,3',5[biphényl-1,1']-2 carboxaldéhyde

Dans un second récipient, on a mélangé pendant 30 minutes à la température ambiante et sous argon le complexe de palladium B (3,0 g, 6,92 mmole) et de latriphénylphosphine (14,52 g, 55,4 mmoles, 8,0 éq) dissous dans du benzène sec (100 ml). Le composé C (1) fraîchement préparé et filtré sur de la laine de verre a été ajouté à cette solution en une seule fois au moyen d'une burette, et le mélange a été agité pendant 1,5 heures à la température ambiante et sous argon. De l'acide chlorhydrique 6,0 N (35 ml) a été alors ajouté, et le mélange a été agité pendant une heure de plus à la température ambiante, puis filtré à travers un lit compact (1/2 pouce) de cellite. Le filtrat a été extrait avec du Et20 (250 ml), l'extrait lavé avec une solution salée (2 fois 100 ml), séché sur du MgSCH anhydre et évaporé sous vide pour fournir 13,35 g d'une huile orange visqueuse qui cristallise au repos. Le solide orange brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (700 g) avec une élution par de l'héxane, suivi par de I'héxane-Ët20 (95:5). Les fractions contenant le produit ont été évaporées pour fournir 1,507 g (89,9%) de l'aldéhyde recherchée se présentant comme un solide jaune-clair ayant un point de fusion de 72-75°C. (Le point de fusion selon la littérature est de 73-74°C).

Chromatographie sur couche mince héxane-EtgO (95:5) Rf = 0,40, UV et APM.

D. Fluoro-4'triméthyl-3,3',5[biphényl-1,l']-2 méthanol

Une solution froide (0°C, bain de glace) d'EfeO sec (15,0 ml) a été traitée avec du LÌAIH4 (259 mg, 6,82 mmoles, 0,55 éq). On a ensuite ajouté goutte à goutte et en 15 minutes l'aldéhyde C (3,0 g, 12,4 mmoles) en solution dans du Et2Û sec (15 ml) à la suspension grise obtenue. Le mélange a été agité à la température ambiante sous argon pendant 30 minutes, puis il a été refroidi à 0°C et la réaction bloquée par l'addition goutte à goutte de 260 |il de H2O, suivis de 260 (xi de NaOH 15% et enfin de 780 ni de H2O. La suspension a été diluée avec du EtOAc, filtrée sur un lit compact de cellite de 1/4 de pouce d'épaisseur et le filtrat incolore a été évaporé sous vide pour donner 2,99 g (98,8%) d'un solide blanc. La trituration de ce solide brut avec de l'héxane froid et un séchage sous vide ont permis de recueillir 2,467 g (81,6%) de l'alcool recherché sous la forme d'un solide blanc ayant un point de fusion de 102-103°C.

Chromatographie sur couche mince héxane-EtOAc (9:1) Rf = 0,24, UV et APM.

E. Ester méthylique de l'acide (S)-[[(diméthyl-1,1éthyl)diphénylsilyl]oxy]-3 (hydroxymethoxyphosphilyl)-4 butyrique

(1) Ester méthylique de l'acide (S)-bromo-4 hydroxy-3 butyrique

(1) (a) Sel de calcium hydraté de l'acide [R-(R*,R*)]-trihydroxy-2,3,4 butyrique (Réf. Carbohydrate Research 72, p. 301-304 (1979)).

Du carbonate de calcium (50 g) a été ajouté à une solution d'acide D-isoascorbîque (44,0 g, 250 mmoles) dans de l'eau (625 ml). La suspension a été refroidie à 0°C dans de la glace et traitée par des portions successives de H2O2 30% (100 ml). Le mélange a ensuite été agité à 30-40°C (bain d'huile) pendant 30 minutes. Du charbon actif «Darco» (10 g) a été ajouté et la suspension noire a été chauffée sur un bain-marie à l'ébullition jusqu'à l'arrêt de la production de O2. La suspension a ensuite été filtrée sur de la cellite, évaporée sous vide (température du bain, 40°C). Le résidu était repris dans de l'eau (50 ml), chauffé sur un bain-marie à l'ébullition et du CH3OH était ajouté jusqu'à ce que la solution devienne trouble. Le précipité caoutchouteux a été recueilli par filtration et séché à l'air pour donner 30,836 g (75,2%) du sel de calcium recherché sous la forme d'une substance solide poudreuse.

Chromatographie sur couche mince iPrOH-NI-UOH-hfeO (7:2:1) Rf = 0,19, APM).

(1) (b) Ester méthylique de l'acide [S-(R*,S*)j dibromo-2,4 hydroxy-3 butyrique (Réf. Bock, K. et col., Acta Scandinavia (B) 37 p. 341-344 (1983))

Le sel de calcium (1) (a) (30 g) a été dissous dans de l'acide acétique contenant 30-32% de HBr (210 ml) et agité à température ambiante pendant 24 heures. Du méthanol (990 ml) a alors été ajouté à la solution brune qui a ensuite été agité pendant une nuit. Le mélange a été évaporé, et on a obtenu une huile orange. Celle-ci a été reprise dans du GH3OH (75 ml), chauffée au reflux pendant 2,0 heures et évaporée. Le résidu a été repris dans un mélange de EtOAc (100 ml) et de H2O. La phase organique a été lavée deux fois avec de l'eau et une solution salée pour être ensuite séchée sur du NaaSO* anhydre et évaporée, ce qui a donné 22,83 g (90,5%) de dibromure brut se présentant sous la forme d'une huile orange clair.

Chromatographie sur couche mince EtOAc-héxane (1:1) Rf = 0,69, UV et APM.

(1 ) (c) Ester méthylique de l'acide (S)- bromo-4 hydroxy-3 butyrique (Réf. Voir produit (1 ) (b)).

Une solution d'EtOAc (370 ml) et de HOAc anhydre (37 ml) purgée par de l'argon contenant du dibro-

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mure (20,80 g, 75,4 mmoles) et du NaOc anhydre (21,0 g) a été traitée avec du Pd/C 5% (1,30 g) et la suspension noire a été agitée sous hydrogène (1 atmosphère). L'absorption de l'hydrogène était suivie. Au bout de 2,0 heures, l'absorption de l'hydrogène était terminée. Le mélange a alors été filtré sur de la cellite, et te filtrat lavé avec une solution saturée en NaHC03 et avec une solution salée, puis séché sur du MgSC>4 anhydre et finalement évaporé pour obtenir le dibromoester brut sous la forme d'une huile brune. L'huile brute a été réunie avec une autre préparation (faite en partant de 36,77 g de dibromure) et distillée sous vide, pour obtenir 25,77 g (61,3%) du bromoester recherché sous la forme d'une huile Claire ayant un point d'ébullition de 79-80°C (1,0 mm Hg).

Chromatographie sur couche mince EtOAc-héxane (1:1) Rf = 0,44, APM.

Composition calculée pour C5H9O3 Br:C, 30,48; H, 4,60; Br, 40,56.

Composition trouvée: C, 29,76; H, 4,50; Br, 39,86.

(2) Ester méthylique de l'acide (S)-bromo-4 [[(diméthyl-1,1 éthyl) diphénylsilyl]oxy}-4 butyrique

Une solution de la bromohydrine E (1 ) (4,0 g, 20,4 mmoles), d'imidazole (6,94 g, 5,0 éq) et de diméthyi-amino-4 pyridine (4-DMAP) (12 mg, 0,005 éq) dans du DMF sec (40 ml) a été traitée avec du t-butyldi-phénylesiiyle chlorure (5,84 ml, 1,1 éq) et le mélange homogène a été mélangé pendant une nuit sous argon à la température ambiante. Le mélange a été repris dans un mélange de EtOAc et d'une solution à 5% de KHSÖ4. La phase organique a été lavé avec de l'eau et une solution salée, séchée sur du Na2SÛ4 anhydre et évaporée pour donner 9,32 g (100%) du silyle éther brut sous la forme d'une huile claire et visqueuse.

Chromatographie sur couche mince héxane-EtOAc (3:1), Rf = 0,75, UV et APM.

(3) Ester méthylique de l'acide (S) -iodo-4 [[(diméthyl-1,1 éthyl) diphénylsilyljoxyj-3 butyrique.

Une solution du bromure brut E (2) (9,32 g, 201 mmoles) dans de la méthyléthylcétone (60 ml> séché sur tamis moléculaire de 4 Â) a été traitée avec de l'iodure de sodium (15,06 g, 100,5 mmoles, 5,0 éq) et la suspension jaune a été chauffée sous reflux pendant 5 heures sous argon. Le mélange a été refroidi, dilué avec du EtOAc, filtré, et le filtrat lavé avec du NaHSOs dilué (jusqu'à la décoloration) et une solution salée, et enfin séché sur Na2S04 anhydre et évaporé sous vide pour donner 10,17 g d'une huile jaune. Cette huile brute a été purifiée par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (600 g) en éluant avec de l'héxane-C^Clz (3:1). Les fractions de produit ont été réunies et évaporées pour donner 7,691 g (rendement global pour les deux étapes: 74,2%) de l'iodure recherché sous la forme d'une huile incolore et visqueuse,

Chromatographie sur couche mince héxane-EtOAc (3:1) Rf = 0,75, UV et APM. (Note: l'iodure et le bromure de départ migrent de la même façon).

(4) Ester méthylique de l'acide (S)-(diéthoxyphosphinyl)-4 [[(diméthyl-1,1 éthyl)diphénylsiIyl]oxy]-3 butyrique.

Une solution de l'iodure (7,691 g) dans du triéthyle phosphite (20 ml) a été chauffée à 155°C (bain d'huile) pendant 3,5 heures sous argon. Le mélange a été refroidi et l'excès de phosphite éliminé par distillation sous vide (0,5 mm Hg, 75°C) pour laisser une huile jaune (environ 8,0 g). L'huile brute a été purifiée par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (400 g), l'élution se faisant avec de l'héxane-acétone (4:1). Les fractions contenant le produit ont été évaporées pour donner 3,222 g (41,1%) du phos-phonate recherché sous la forme d'une huile incolore et visqueuse.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (1:1 ) Rf = 0,51, UV et APM. En outre, on a récupéré 2,519 g de l'iodure (3) de départ, ce qui donne un rendement corrigé de 61,1%.

(5) Ester méthylique de l'acide (S)-[[(diméthyl-1,1 éthyl)diphénylsilyi]oxy]-3 phosphono-4 butyrique.

Une solution du phosphonate (4) (9,85 g, 20,0 mmoles) dans du CH2CI2 sec (60 ml) a été traitée successivement avec du bistriméthylsilyltrifluoroacetamide (BSTFA) (5,31 ml, 32,0 mmoles, 1,6 éq) et du tri-méthylsilyle bromure (TMSBr) (6,60 ml, 50,0 mmoles, 2,5 éq) et le mélange clair a été agité pendant une nuit sous argon à la température ambiante. On a ensuite ajouté une solution à 5% de KHSO4 (80 ml) et le mélange a été extrait avec du EtOAc. La phase aqueuse a été saturée avec du NaCI et re-extraîte avec du EtOAc. Les couches organiques réunies ont été lavées avec une solution salée, séchées sur du Na2S04 anhydre et évaporées sous vide pour donner l'acide phosphonique recherché sous la forme d'une huile visqueuse.

Chromatographie sur couche mince iPr0H-NH40H-H20 (7:2:1) Rf = 0,30, UV et APM,

(6) Ester méthylique de l'acide (S)-[[(diméthyl-1,1 éthyl)diphényisily!]oxy]-3 (hydroxymethoxyphosphinyl)-4 butyrique

L'acide phosphonique brut (5) (environ 20,0 mmoles) a été traité en solution dans de la pyridine sèche

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(25 ml) avec du CH3OH séché (tamis moléculaire de 3 Â, 1,62 ml, 40,0 mmoles, 2,0 éq) et de la dicyclohéxyle carbodiimide (DCC) (4,54 g, 22,0 mmoles, 1,10 éq). La suspension blanche ainsi obtenue a été agitée sous argon à la température ambiante pendant une nuit. La pyridine a été enlevée sous vide et on a ensuite procédé à une distillation azéotropique avec du benzène (2 fois 15 ml). L'huile résiduelle a été dissoute dans du EtOAc et cette solution a été filtrée et lavée avec du HCl 1,0 N et une solution salée, sé-chée sur du NaaSO* anhydre et finalement évaporée sous vide pour donner 8,272 g de l'ester recherché. Ce produit brut était une huile contenant une petite quantité de dicyclohexylurée (DCU) précipitée.

Chromatographie sur couche mince iPr0H-NH40H-0H2 (7:2:1) Rf = 0,60, UV et APM.

F. Ester méthylique de l'acide (S)-[[[fluoro-4'triméthyl-3,3',-5 [bïphény 1-1,1 ']yI-2] méthoxyphosphinyi]-4 t-butyldiphénylsilyloxy-3 butyrique

L'ester monométhylique de l'acide phosphonique brut (E) (6,595 g, environ 14,7 mmoles) a été dissous dans du CH2CI2 sec (30 ml), traité avec de la trîméthylsilyldiéthylamine (5,60 ml, 29,4 mmoles, 2,0 éq) et agité sous argon à la température ambiante pendant 1 heure. Le mélange a été évaporé sous vide, chassé avec du benzène (1 fois 30 ml) et séché sous vide. L'huile visqueuse jaune claire a été dissoute dans du CH2CI2 sec (30 ml) et du DMF (séché sur tamis moléculaire de 4 Â, 2 gouttes). La solution claire a été refroidie à -10°C (sel/glace) et on lui a ajouté goutte à goutte avec une seringue de l'oxalyle chlorure distillé (1,41 ml, 16,2 mmoles, 1,1 éq). Une émission Importante de gaz s'est produite et la solution a pris une couleur jaune sombre. Le mélange a été agité pendant 15 minutes sous argon à—10°C et ensuite pendant 1 heure à la température ambiante. Le mélange a été évaporé sous vide, chassé avec du benzène (1 fois 30 ml) et séché sous vide pour donner le phosphonochloridate brut sous la forme d'une huile jaune.

A une solution du phosphonochloridate brut (environ 14,7 mmoles) dans du CH2CI2 sec (10 ml), on a ajouté goutte à goutte une solution du biphenyle alcool D (2,06 g, 8,43 mmoles) dans de la pyridine sèche (15 ml). Le mélange obtenu a été agité à la température ambiante sous argon pendant 16 heures. Le mélange a été évaporé à sec et le résidu repris dans un mélange de EtOAc et d'une solution à 5% de KHSO4. La phase organique a été lavée avec une solution saturée en NaHCOg et avec une solution salée, puis séchée sur du Na2S04 et évaporée sous vide pour donner 8,290 g d'une huile brune. Le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (370 g) avec une élution par de l'héxane-acétone (70:30). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 3,681 g (66%) du phosphonate recherché sous la forme d'une huile jaune pâle.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (3:2) Rf = 0,59, UV et AMP.

G. Ester méthylique de l'acide (S)-[[[fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,1 ']yl-2][méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Un mélange du silyle éther F (1,103 g, 1,66 mmoles) et de THF sec (20,0 ml) a été traité avec de l'acide acétique glacial (380 jil, 6,64 mmoles, 4,0 éq) et avec une solution 1,0 M de fluorure de tétrabutylammo-nium (4,98 ml, 4,98 mmoles, 3,0 éq). La solution jaune clair obtenue a été agitée pendant une nuit à la température ambiante et sous argon, puis reprise dans un mélange froid d'EtOAc et de H2O. Ensuite, la phase organique a été lavée avec une solution saturée en NaHCOa et avec une solution salée, séchée sur du NagS04 anhydre, puis évaporée pour obtenir une huile visqueuse jaune (1,174 g). L'huile brute a été purifiée par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (47 g) et une élution avec du CH2CI2 -acétone (85:15). Les fractions contenant le produit ont été évaporées pour obtenir 679 mg (93,1 %) de l'alcool recherché sous la forme d'une huile visqueuse.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (1:1) Rf = 0,41, UV et APM.

H. Sel de mono-lithium de l'acide (S)-[[[fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-

I.1']yI-2]méthoxy]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution de l'ester méthylique G (184 mg, 0,420 mmoles) dans du dioxane (5,0 ml) a été traitée avec du LiOH 1,0 N (0,50 ml, 1,2 éq) et le mélange a été agité à la température ambiante sous argon pendant 3 heures.

Le mélange a été dilué avec H2O, filtré sur une membrane en polycarbonate 0,4 um et évaporé sous vide. Le résidu a été dissous dans H2O (75 ml), congelé et lyophilisé. L'acide brut a été dissous dans une quantité minimale d'eau et chromatographié sur 100 ml d'un lit de résine CHP-20, l'élution se faisant avec un système de gradient linéaire H2O/CH3CN. Les fractions contenant le produit ont été évaporées, et celui-ci a été dissous dans du H2O (50 ml), et la solution a été filtrée sur une membrane en polycarbonate 0,4 p.m et lyophilisée pour obtenir 174 mg (89,1% sur la base du poids de l'hydrate) du sel du mono-lithium recherché.

Chromatographie sur couche mince iPr0H-NH40H-H20 (7:2:1) Rf = 0,58, UV et APM.

Composition calculée pour C21H25O6PFLÌ + 1,95 moles de H2O (PM, 465,46): C, 54,19; H, 6,26; F, 40,8; P, 6,65,

Composition trouvée: C, 54,19; H, 6,21; F, 4,29; P, 6,43.

RMN H1 (400 MHz:

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S 1,74-2,08 ppm (2H, m, -PO(OCH3)CH2-)

2,30 (3H, s, méthyl aromatique)

2,32 (3H, d, méthyl aromatique en a par rapport à un fluor, Jhf 2,2 Hz)

2,35-2,62 (2H, m, -CH2C02Li)

2,46 (3H, s, méthyl aromatique)

3,57 & 3,63 (3H, 2 doublets, -OP(OCH3)- 2 diastéréomères, Jh-p = 10,3 Hz)

4,28 (1H, m, -CH2CH(0H)CH2C02Li)

O II

4,97 (2H, m, PhCH OP (OCH ) R)

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6,87-7,2 (5H, m, H aromatiques)

Exemple 2

Sel de di-lithium de l'acide (S)-[[[fluoro-4' triméthyl- 3,3',5[biphényl-1,1']yl-2]méthoxy]hydroxyphosphinyi]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution du diester de l'Exemple 1 (374 mg, 0,853 mmoles) dans du dioxane (8,0 ml) a été traitée avec du LiOH 1,0 N (2,6 ml, 3,0 éq) et chauffée à 50°C (bain d'huile) pendant 5,0 heures sous argon. Un précipité blanc est apparu. Le mélange a été dilué avec H20 et filtré. La solution aqueuse a été extraite une fois avec du Et20, filtrée sur une membrane en polycarbonate 0,4 um et concentrée sous vide. Le produit brut a été chromatographié sur un lit de 100 ml de résine CHP-20, en éluant avec un système de gradient linéaire H2O/CH3CN. Les fractions contenant le produit ont été évaporées sous vide, le résidu a été repris dans H20 (50 ml), et la solution a été filtrée sur une membrane en polycarbonate 0,4 um et lyophilisée pour obtenir 260 mg (67,1% sur la base du poids de l'hydrate) du sel de di-lithium recherché sous la forme d'un solide blanc.

Chromatographie sur couche mince Pr0H-NH40H-H20 (7:2:1) Rf = 0,47, UV et APM.

Composition calculée pour C2oH2206PFLi + 1,77 moles d'eau: C, 52,88: H, 5,67; F, 4,18; P, 6,82. Composition trouvée: G, 52,88; H, 5,26; F, 4,24; P, 6,43.

RMN H1 (400 MHZ, CD3OD):

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51,69 ppm {2H, m, -OPCH CH(OH)-)

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2,26-2,42 (2H, m, CH2C02Li)

2.30 (3H, s, méthyl aromatique)

2.31 (3H, d, méthyl aromatique en a par rapport au F, Jhf = 1,9 Hz)

2,38 (3H, s, méthyl aromatique)

4,22 (1H, m, -CH(OH)CH2-)

O

U

4,75 (2H, m, PhCH OP-)

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6,86-7,23 (5H, m; protons aromatiques)

Exemple 3

Sels de mono-lithium de l'acide (3S)-[[[fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,1']yl-2]méthoxy][méthylphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

A. Ester méthylique de l'acide (S)-[(chloro)méthylphosphinyl]-4 [[(diméthyl-1,1 éthyl)diphényIsilyl]-oxy]-3 butyrique

Ce phosphinochloridate a été préparé comme décrit dans l'Exemple 6, partie B, trois premiers paragraphes.

B. Ester méthylique de l'acide (3S)-[[[fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,1'Jyl-2]méthûxy]méthylphosphinyl]-4 t-butyldiphénylsilyloxy-3 butyrique

Une solution refroidie (0°C, bain de glace) de phosphinochloridate A (environ 2,2 mmoles) et de biphé-

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nyle alcool C(2) de l'Exemple 1 (429 mg, 2,2 mmoles, 1,0 éq) dans du CH2CI2 sec (10 ml) a été traitée avec du Et3N (425 ni, 3,04 mmoles, 1,4 éq) et de la 4-DMAP (27 mg, 0,22 mmoles) et la solution orange obtenue a été agitée à la température ambiante sous argon pendant une nuit. Le mélange a été repris dans un mélange de EtOAc et d'une solution à 5 % de KHSO. La couche organique a été lavée avec une solution salée, séchée sur du Na2SÛ4 anhydre et évaporée pour obtenir 1,1 g d'une huile orange. L'huile brute a été purifiée par une Chromatographie rapide sur du gel de silice LPS-1 (44 g) avec une élution avec de PEtOAc:héxane (1:1). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 298 mg (21%) du produit recherché sous la forme d'une huile jaune pâle. On a également recueilli 460 mg du biphényle alcool C(2) de l'Exemple 1 de départ, ce qui donne un rendement corrigé de 67%. Chromatographie sur couche mince EtOAc:héxane (1:1) Rf = 0,18, UV et APM,

C. Ester méthylique de l'acide (3S)-[[[fIuoro-4'triméthyl-3,3',5 [biphényI-1,1'jyl-2]méthoxy]méthylphosphînyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution de silyle éther B (298 mg, 0,46 mmoles) dans du THF sec (6,0 ml) a été traitée avec du HOAc glacial (110 fil, 1,84 mmoles, 4,0 éq) et avec une solution 1,0 M de fluorure de tétrabutylammonium (1,43 ml, 3,1 éq). La solution résultante a été agitée pendant une nuit sous argon à la température ambiante, puis reprise dans un mélange froid de H2O et de EtOAc. La phase organique a ensuite été lavée avec une solution saturée en NaHCOa et par une solution salée, puis séchée sur du Na2S04 anhydre et évaporée pour obtenir une huile jaune (273 mg). L'huile brute a été purifiée par une Chromatographie rapide sur du gel de silice LPS-1 (11 g), Pélution se faisant avec de l'héxane-acétone (3:2). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour obtenir 150 mg (80%) de l'alcool recherché sous la forme d'une huile visqueuse.

Chromatographie sur couche mince héxane:acétone (1:1) Rf = 0,23, UV et APM.

D. Sel de mono-lithium de l'acide (3S)-[[[fIuoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,1']yl-2][methoxy]méthylphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution de l'ester méthylique C (150 mg, 0,367 mmoles) dans du dioxane (3,0 ml) a été traitée par du LiOH 1,0 N (0,44 ml, 1,2 éq) et la suspension blanche résultante agitée à la température ambiante sous argon pendant 2 heures. Le mélange a été dilué avec H2O, filtré sur une membrane de polycarbonate de 0,4 jim et évaporé sous vide pour obtenir un produit solide incolore.

Le produit brut a été repris dans une quantité minimale de H2O et chromatographié sur un lit de HP-20 (100 ml), en éluant avec un système de gradient linéaire H2O/CH3CN. Les fractions contenant le produit ont été évaporées, le résidu a été repris dans H20 (50 ml), et la solution a été filtrée sur une membrane en polycarbonate de 0,4 p.m et lyophilisée pour obtenir 130 mg (79% sur la base du poids de l'hydrate) du sel de lithium recherché sous la forme d'un solide blanc.

Chromatographie sur couche mince CH2CI2-CH3OH-HOAC (8:1:1) Rf = 0,52, UV et APM.

Composition calculée pour C21H25O5FLÎP + 1,73 moles de H2O (PM, 445,49): C, 56,61 ; H, 6,44; F, 4,26: P, 6,95.

Trouvé: C, 56,67; H, 6,36; F, 4,31 ; P, 7,43 H1 RMN (400 MHz):

o

1,49 ppm (3H, d, -OP C CHs ) -, jh-p = 14,7 Hz)

O

1,83-2,00 ppm (2H, m, p - ( CH3 ) CH«->

2,27-2,40 ppm (2H, m, CH2CO2LÌ)

2,30 ppm (6H, s, 2 méthyles aromatiques)

2,44 ppm (3H, s, 1 méthyle aromatique)

4,26 ppm (1 H, m, -CH2ÇH(0H)CH2C02U)

O

il

4,87ppm (2H, m, ArCHoOP <CH, ) - >

6,90-7,20 ppm (5H, m, hydrogènes aromatiques)

Exemple 4

Sel de mono-lithium de l'acide (S)-[[[dichloro-2,4 [(fluoro-4 phényl) méthoxy-6 phényljmethoxyjmethoxy phosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

A. Dichloro-2,4 (fluoro-4 phénylméthoxy)-6 benzaldéhyde (Réf.: J. Med. Chem.. 1986,29,167)

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CH 676 984 A5

A une solution de 13,77 g (72,5 mmol) de dichloro-4,6 hydroxy-2 benzaldéhyde dans 100 ml de DMF sous agitation, on ajoute 12,02 g (87 mmol) de K2CO3. On chauffe le mélange à environ 70°C pendant 60 minutes, puis on ajoute 11,7 ml de bromure de fluoro-4 benzyle. On agite le mélange à 70°C pendant 3,5 heures, on le verse dans un mélange glace/eau (1,5 I), on le filtre, puis on a procédé à un lavage avec H2O et à une recristallisation dans du EfeO/éther de pétrole. Rendement: 17,88 g (83%) de cristaux blanchâtres, point de fusion 1Q7-108°C.

B. DichIoro-2,4 [(fluoro-4 phényl)méthoxy]-6 benzène méthanol.

On a traité du Et20 sec (10,0 ml) et froid (0°C, bain de glace) avec du L1AIH4 (158 mg, 4,16 mmoles, 0,6 éq) et la suspension grise a été traitée goutte à goutte avec une solution de l'aldéhyde A (2,06 g, 6,93 mmoles) dans 10 ml de THF sec. Le mélange a été chauffé à la température ambiante et agité pendant une heure sous argon. Le mélange a été refroidi à 0°C (bain de glace) et la réaction a été bloquée par l'addition suócesive au goutte à goutte de H2O (160 (il) de NaOH 15% (160 ni) et de H2O (475 ni). Les sels précipités ont été séparés par filtration sur du Na2S04 anhydre disposé sur de la cellite compacte (lit de 1/4 de pouce). Le filtrat clair a été évaporé pour donner 2,052 g (98,9%) d'alcool brut sous la forme de cristaux blancs. La trituration avec de l'héxane froid a permis d'obtenir 1,892 g (91,2%) de l'alcool recherché pur sous la forme d'un solide cristallin ayant un point de fusion de 72-73°C.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (4:1 ) Rf = 0,31, UV et APM.

Composition calculée pour C14H11O2CI2F (PM, 301,142): C, 55,84; H, 3,68; Cl, 23,55; F, 6,31,

Composition trouvée: C, 55,97; H, 3,71 ; Cl, 23,42; F, 6,30.

C. Ester méthylique de l'acide (S)-[[[dichloro-2,4 [(fluoro-4 phényl)méthoxyj-6 phény]]méthoxy]méthoxyphosphinyl]-4 t-butyldiphénylsilyloxy-3 butyrique

Une solution de l'ester méthylique E(6) de l'Exemple 1 (environ 3,84 mmoles) dans du CH2CI2 sec (10 ml) a été traitée avec du triméthylsilyle diéthylamine distillé (1,46 ml, 7,68 mmoles, 2,0 éq) et la solution obtenue a été agitée à la température ambiante sous argon pendant 1,0 heure. Le mélange a été évaporé sous vide, chassé avec du benzène (1 fois 20 ml) et séché sous vide pour donner l'ester mono-méthy-lique de l'acide phosphonique silylé brut sous la forme d'une huile incolore.

Une solution de l'ester brut (environ 3,84 mmoles) dans du CH2CI2 sec (10 ml) et du DMF sec (1 goutte) a été refroidie à -10°C (sel/ glace) et traitée goutte à goutte avec de l'oxalyle chlorure distillé (368 fil) 4,22 mmoles, 1,1 éq). Le mélange jaune a produit une émission de gaz. Le mélange a été agité à la température ambiante sous argon pendant une heure, évaporé sous vide, chassé avec du benzène (2 fois 20 ml) pour donner le phosphonochloridate brut sous la forme d'une huile jaune visqueuse.

Le phosphonochloridate brut (environ 3,84 mmoles) a été traité dans du ChfeCfe sec (10 ml) à 0°C (bain de glace) par l'alcool B (1,15 g, 3,84 mmoles, 1,0 éq), puis par du Et3N (805 (il, 5,76 mmoles, 1,5 éq) et de la 4-DMAP (47 mg, 0,384 mmoles, 0,1 éq). Le mélange brun a été agité pendant une nuit à la température ambiante sous argon, puis il a été repris dans un mélange de EtOAc et d'une solution à 5% de KHSO4. La phase organique a été lavée avec une solution salée, séchée avec du Na2S04 anhydre et évaporée pour donner 3,197 g d'une huile brun sombre. Le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (160 g) avec une élution par de l'héxane-EtOAc (7:3). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 594 mg (21,1%) du phosphonate recherché sous la forme d'une huile jaune. En outre, on a recueilli 688 mg de l'alcool de départ B, ce qui donne un rendement corrigé de 52,4%.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (1:1 ) Rf = 0,29, UV et APM.

D. Ester méthylique de l'acide (S)-[[[dichloro-2,4[(fluoro-4 phényl)méthoxyl-6 phényllméthoxylméthoxy-phosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution du silyle ester C (578 mg, 0,788 mmoles) dans du THF sec (8 ml) a été traitée par du HOAc glacial (180 ni, 3,2 mmoles, 4,0 éq), puis par une solution 1,0 M de n-Bu4NF dans du THF (2,36 ml, 2,36 mmoles, 3,0 éq). La solution jaune pâle obtenue a été agitée pendant une nuit sous argon à la température ambiante. Le mélange a été versé sur du H20 froid et extrait avec du EtOAc (2 fois). La phase organique a été lavée avec une solution saturée en NaHC03 et avec une solution salée, puis séchée avec du Na2S04 anhydre et évaporée pour donner 625 mg d'une huile jaune. Le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (31 g), en éluant avec de Phéxane-acétone (7:3). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 339 mg (86,9%) de l'alcool recherché sous la forme d'une huile incolore et visqueuse.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (1:1) Rf = 0,25, UV et APM.

E. Sel de mono-lithium de l'acide (S)-[[[dichloro-2,4 [(fluoro-4 phényl)méthoxy]-6 phényl]méthoxy]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique.

Une solution du phosphonate D (132 mg, 0,267 mmoles) dans du dioxane (2,5 ml) a été traitée avec du

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LiOH 1,0 N (0,32 ml, 1,2 éq) et le mélange a été agité sous argon à la température ambiante pendant 4,0 heures. Un précipité blanc a été observé. Le mélange a été dilué avec H2O, filtré et le filtrat évapore à sec sous vide. Le résidu a été chromatographié sur de la resine HP-20 (lit de 100 ml), l'élution se faisant avec un système de gradient linéaire H2O/CH3CN. Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées, puis reprises dans du H?0 et la solution obtenue filtrée sur une membrane en poly-çarbonate 0,4 |im pour donner 108 mg (79% sur la base du poids de l'hydrate) du sel de lithium recherché sous la forme d'un solide blanc.

Chromatographie sur couche mince CH2CI2-CH30H-H0Ac (20:1 :!) Rf = 0,41, UV et APM.

Composition calculée pour C19H18O7CI2FIÌ2P + 1,41 moles de H2O (PM, 511,72): C, 44,59: H, 4,10; Cl, 13,86; F, 3,71 ;P, 6,05.

Composition trouvée: C, 44,22; H, 4,09, Cl, 13,91; F, 3,72: P, 6,11. RMN H1 (400 MHz);

. O il

1,98-2,11 ppm {2H, m, OP (OCH ) CH CH (OH) -

3 2

2,26-2,45 ppm (2H, m -CH(0H)CH2C02Li)

3,63 & 3,62 (3H, 2 doublets, 2 diastéréomères)

O

11

OP {OCH ) CH -, JHP-11 HZ)

3 2

4.23 (1H, m, (-CH2CH(0H)CH2C02Li)

5,16 (2H, s, F-PhCHaO)

5.24 (2H, d, ArCH2OP, J = 6,2 Hz)

7,13-7,53 (6H, m, H aromatiques)

Exemple 5

Sel de di-lithium de l'acide (3S)-[[[dichloro-2,4[(fluoro-4 phényl)méthoxy]-6 phényl]méthoxy]hydroxyphosphînyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Un mélange du diester D de l'Exemple 4 (210 mg, 0,424 mmoles) et de dioxane (4,0 ml) a été traité avec LiOH 1,0 N (1,30 ml, 3,0 éq) et la solution incolore a été chauffée à 50 °C (bain d'huile) sous argon pendant 3,5 heures. Un précipité blanc est apparu au bout de 15 minutes. Le mélange a été dilué avec H2O, filtré et le filtrat évaporé sous vide. Le résidu a été dissous dans une quantité minimale de H2O et chromatographié sur de la résine HP-20 (lit de 100 ml), l'élution se faisant avec un système de gradient linéaire H2O/CH3CN. Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées. Le résidu a été repris dans du H2O (50 ml), et la solution a été filtrée sur une membrane en polycarbonate 0,4 nm et lyophilisée pour donner 175 mg (rendement de 81 % sur la base du poids de l'hydrate) du sel de di-lithium recherché sous la forme d'un solide blanc.

Chromatographie sur couche mince CH2CI2-CH3OH-HOAC (8:1:1) Rf = 0,07 UV et APM.

Composition calculée pour C18H18O7CI2FU2P + 1,70 moles d'eau (PM, 509,62): C, 42,42; H, 3,84; F, 3,73; Cl, 13,91; P, 6,08.

Composition trouvée: C, 42,46; H, 3,90; F, 3,93; Cl, 13,42; P, 5,66.

RMN ""H (400 MHz):

O 11

S 1,73-1,92 ppm (2H, m, —OP (OLi) -CH CH(OH)-

2

2,27 (1 H, dd, -CH(0H)CH2C02Lî, Jhh = 8,8 Hz)

2,39 (1 H, dd, -CH(0H)CH2C02Li, Jhh = 4,4 Hz)

4,26 (1H, m, CH2CH(0H)CH2C02Li)

5,08 (2H, s, F-Ph-CH2OAr)

7,03-7,53 (6H, m, H aromatiques)

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Exemple 6

Ester méthylique de l'acide (3S)-[[dichloro-2,4 [(fluoro-4 phényl)méthoxyj-6 phényl]méthoxy]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

A. Ester méthylique de l'acide (S)-[[(diméthyl-1,1 éthyl)diphénylsilyl]oxy]-3(éthoxyméthylphosphinyl)-4 butyrique

Un mélange de l'iodure E(3) de l'Exemple 1 (4,68 g, 9,18 mmoles) et de méthyldiéthoxyphosphine (Strem Chemicals, 5,0 g, 36,7 mmoles) a été chauffé sous argon à 100°C (bain d'huile) pendant 2,5 heures, puis à 15Q°C pendant trois heures de plus. Un précipité blanc s'est progressivement formé dans la solution jaune. L'excès de phosphîne a été éliminé par distillation sous vide (0,5 mm Hg) et le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur un gel de silice, l'élution se faisant avec de l'héxane-acétone (65:35). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 1,590 g (38%) de l'ester phosphinique recherché (un mélange de diastéréomères) sous la forme d'une huile visqueuse claire.

Chromatographie sur couche mince hexane-acétone (3:2) Rf (2 diastéréomères) « 0,19 et 0,22, UV et AMP.

B. Ester méthylique de l'acide (3S)-[[dichloro-2,4 [(fluoro-4 phényI)méthoxy]-6 phényljméthoxyjméthylphosphinyl-4 t-butyldiphénylsilyl-3 butyrique

Une solution de l'ester phosphinique A (605 mg, 1,3 mmoles) dans du CH2CI2 sec (6,0 ml) a été traitée avec du bis(triméthylsUyl)trifluoroacétamide (BSTFA) (280 (il. 1,05 mmoles, 0,8 éq) et du triméthyisilyle bromure (TMSBr) (210 ni, 1,57 mmoles, 1,2 éq). La solution obtenue a été agitée à la température ambiante sous argon pendant une nuit. Une solution à 5% de KHSO4 (15 ml) a été ajoutée, et le mélange a été extrait avec de l'EtOAc. La phase organique a été lavée avec une solution salée, séchée sur du [\Ia2SO4 anhydre et évaporée sous vide pour donner l'acide phosphinique brut sous la forme d'une huile incolore.

Une solution de l'acide phosphinique brut (environ 1,3 mmoles) dans du CH2CI2 sec (6,0 ml) a été traitée avec de latriméthylsilyl diéthylamine distillée (270 ni, 1,44 mmoles, 1,1 éq) et le mélange clair a été agité à la temperature ambiante sous argon pendant 1,0 heure. Le mélange a été évaporé sous vide, chassé avec du benzène (1 fois 15 ml) et séché sous vide.

Une solution refroidie (0°C, bain de glace) de l'acide phosphinique silylé brut (environ 1,3 mmoles) dans du CH2CI2 sec (6,0 ml) et du DMF (1 goutte) a été traitée goutte à goutté au moyen d'une seringue avec de l'oxalyle chlorure distillé (130 ni. 1,44 mmoles, 1,1 éq). Une émission de gaz s'est produite. Le mélange a été agité à la température ambiante sous argon pendant une heure, puis évaporé sous vide, chassé avec du benzène (2 fois 15 mi) et séché sous vide pour donner le phosphinochloridate brut sous la forme d'une huile jaune.

Une solution refroidie (0°C, bain de glace) du phosphinochloridate (environ 1,3 mmoles) et de l'alcool E(6) de l'Exemple 1 (392 mg, 1,3 mmoles) dans du CH2CI2 sec (6,0 ml) a été traitée avec du ÊfeN (275 nl> 1,97 mmoles, 1,5 éq) et de la 4-DMAP (16 mg, 0,13 mmoles, 0,1 éq). Le mélange jaune obtenu a été agité sous argon à la température ambiante pendant une nuit et il a ensuite été repris dans un mélange d'une solution à 5% de KHSO4 et de EtOAc. La phase organique a été lavée avec une solution salée, séchée sur du Na2S04 anhydre et évaporée pour donner 908 mg de produit brut sous la forme d'une huile jaune sombre. Le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (45 g), l'élution se faisant avec de l'héxane-EtOAc (3:2). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 266 mg (28,3%) du produit recherché sous la forme d'une huile incolore. On a également récupéré 197 mg de l'alcool de départ (ce qui donne un rendement corrigé de 57%).

C. Ester méthylique de l'acide (3S)-[[dichloro-2,4[(fluoro-4 phény!)méthoxyj-6 phényljméthoxy]méthylphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution du silyle ester B (275 mg, 0,38 mmoles) dans du THF sec (6,0 ml) a été traitée avec du AcOH glacial (90 ni, "1,53 mmoles, 4,0 éq) et une solution 1,0 M de fluorure de tétrabutylammonium dans du THF (1,2 ml, 3,1 éq). La solution obtenue a été agitée pendant une nuit sous argon à la température ambiante, et elle a ensuite été reprise dans un melange froid de H20 et de EtOAc. La phase organique a été lavée avec une solution saturée en NaHCOa et avec une solution salée, séchée sur du Na2SC>4 anhydre et évaporée pour donner 258 mg d'une huile jaune. Le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice LPS-1 (8 g), l'élution se faisant avec de l'héxane-acétone (1 rl). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 142 mg (77%) de l'alcool recherché sous la forme d'une huile incolore.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (1:1 ) Rf = 0,20, UV et APM.

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D. Sel de mono-lithium de l'acide (3S)-[[dichloro-2,4 [(fluoro-4 phényl)méthoxyj-6 phényl]méthoxy]méthylphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution de l'ester méthylique C (142 mg, 0,296 mmoles) dans du dioxane (3,0 ml) a été traitée avec une solution de LiOH 1,0 N (0,36 ml, 1,2 éq) et la suspension blanche obtenue a été agitée sous argon à la température ambiante pendant 2,0 heures. Le mélange a été dilué avec HsO, filtré sur une membrane de polycarbonate de 0,4 p.m et le filtrat a été évaporé sous vide. Le produit brut a été dissous dans une quantité minimaie de H2O et Chromatographie sur un lit de 100 ml de résine HP-20, l'élution se faisant avec un système de gradient linéaire de H2O/CH3CN. Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées. Le résidu a été repris dans du H2O, filtré sur une membrane de polycarbonate et lyophilisé pour donner 93 mg (rendement de 63% sur la base du poids de l'hydrate) du sel de lithium recherché sous la forme d'un solide blanc,

Chromatographie sur couche mince CH2CI2-GH3OH-HOAC (8:1:1 ) Rf = 0,51, UV et APM,

Composition calculée pour CigHtìOzCfeFLiP + 1,38 moles d'eau (PM, 495,94): G,46,01; H,4,42; F, 3,83; Cl, 14,30; P, 6,24.

Composition trouvée: C, 46,10; H, 4,49; F, 3,82; Cl, 14,32, P, 6,43.

RMN 1H (400 MHZ):

O 11

81,53 ppm (3H, d, -OP{CH ) CH - , J H-p = 14,6 Hz)

3 2

O 11

1,87-2,10 (2H, m,-OP (OCH ) CH -J

3 2

2,27 (1H, dd, -CH(0H)CH2C02Li, Jh-H = 8,4 Hz, Jp_h = 1,1 Hz)

2,38 (1 H, dd, -CH(0H)CH2C02Li, JH-H = 4,7 Hz, Jh-p = 1,1 HZ)

4,29 (1H, m,-CH2CH(0H)CH2C02Li)

5,16-5,18 (4H, m, ArCH2OP et F-PhCH20)-7,11-7,52 (6H, m, aromatique)

Exemple 7

Sel de mono-lithium de l'acide (S) [[[fluoro-4'triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,1']yl-2 méthyl]amîno]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

A. Acide fluoro-4'triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,1']-2 carboxylique

Une solution de l'aldéhyde C(2) de l'Exemple 1 (1,0 g, 4,13 mmoles) dans de l'acétone (10,0 ml) à 0°C (bain de glace) a été traitée goutte à goutte avec du réactif de Jones 8,0 N (4,1 ml, excès) et la suspension brun-vert obtenue a été mélangée une nuit sous argon à température ambiante. L'excès d'oxydant a été détruit en ajoutant de l'isopropanol (10,0 ml) et les sels de chrome précipités ont été éliminés parfiltra-tion à travers une couche de 1/4 de pouce de cellite. Le filtrat a été évaporé et repris dans du EtOAc, puis lavé avec du HCl 1 N (2 fois), une solution saturée en NH4CI (2 fois) et une solution salée, puis séché sur du Na2S04 anhydre et évaporé pour donner 1,011 g d'un solide vert avec un point de fusion de 153-154°C.

L'acide brut a été purifié par l'intermédiaire du sel de dicyclohéxylamine. On a ajouté à une solution de l'acide brut dans du EtOAc (5,0 ml) de la dicyclohexylamine (DCHA) (823 jxl, 1,0 éq). La solution a été diluée avec de l'héxane et le sel cristallisé a été recueilli pour donner 997 mg (55% par rapport à l'aldéhyde, point de fusion 181-183°C) du produit recherché se présentant sous forme d'un sel blanchâtre et cristallin de DCHA.

L'acide libre a été régénéré a partir du DCHA en reprenant le sel dans un mélange d'une solution à 5% de KHSO4 et de EtOAc. La phase organique a été lavée avec une solution salée, séchée sur du Na2S04 anhydre et évaporée sous vide pour donner 554 mg (52% par rapport à l'aldéhyde) de l'acide recherché.

Chromatographie sur couche mince CH2CI2-CH3OH (9:1 ) Rf = 0,37, UV et APM.

B. Fluoro-4'triméthyi-3,3',5 [biphényl-1,1']-2 carboxamide

Une suspension de l'acide A (554 mg, 2,14 mmoles) dans du CH2CI2 sec (6,0 ml) et du DMF sec (1 goutte) à 0°C (bain de glace) a été traitée goutte à goutte au moyen d'une seringue avec de l'oxalyle chlorure (205 jxl. 2,35 mmoles, 1,1 éq) et la solution jaune-clair a été agitée sous argon à la température

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ambiante pendant une heure. Le mélange a été évaporé sous vide, chassé avec du benzène (2 fois) et séché sous vide pour donner un chlorure d'acide se présentant sous la forme d'une huile jaune.

Un mélange refroidi (0°C, bain de glace) de THF (3,0 ml) et de NH4OH concentré (2,0 mi, excès) a été traité goutte à goutte avec une solution du chlorure d'acide brut dans du THF (3,0 ml). La solution orange brillant obtenue a été agitée sous argon pendant 1,0 heure. Cette solution a été reprise par un mélange de H2O et de EtOAc et la phase organique a été lavée aveG une solution saturée en NaHGOs, puis par H2O et par une solution salée pour être finalement séchée sur du Na2S04 anhydre et évaporée, ce qui a donné 528 mg (96,1%) d'amide brute sous la forme d'un solide orange clair. Une recristailisation dans un système EtOAc-héxane a fourni 435 mg (79,1%) d'amide purifié sous la forme d'aiguilles jaunes ayant un point de fusion 197-1989G.

Chromatographie sur couche mince ET20-acétone (1:1 ) Rf = 0,83, UV et AMP

C. Fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [l,l'biphényl]-2 méthanamine

Une solution refroidie (0°C, bain de glace) de THF sec (5,0 ml) a été traitée par du LÌAIH4 solide (125 mg, 3,3 mmoles) et la suspension grise traitée goutte à goutte en cinq minutes avec une solution de l'amide B (424 mg, 165 mmoles) dans du THF (5,0 ml). La suspension obtenue a été agitée à la température ambiante sous argon pendant 2,5 heures et portée au reflux pendant 45 minutes. Le mélange a été refroidi à 0°C (bain de glace) et la réaction bloquée par l'addition successive de 125 |xl de H20,125 |il de NaOH 15% et de 375 ni de H20. Les sels d'aluminium précipités ont été enlevés par filtration sur du Na2S04 anhydre disposé au-dessus d'une couche compacte de cellite. Le filtrat clair a été évaporé sous vide pour donner ramine brute sous la forme d'une huile claire.

Chromatographie sur couche mince Et20-acétone (7:3) Rf = 0,60, UV et APM. L'amine a été purifié par la formation de son sel avec HCl.

Une solution de l'amine brute (environ 1,65 mmoles) dans de l'éthanol absolu (8,0 ml) a été traitée avec du HCl concentré (152 jxl, 1,82 mmoles) et le mélange a été agité pendant 15 minutes à la température ambiante sous argon. Le mélange a été évaporé sous vide pour donner un solide cristallin blanc. Le solide a été trituré dans du Et2Ö froid, séparé par filtration et séché sous vide pour donner 426 mg (92,4%) du complexe amîne-HCI recherché sous la forme de cristaux blancs.

D. Ester méthylique de l'acide (S)-[[[[fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-

1,1 ']yt-2]méthyl]amino]méthoxyphosphinyl]-4 t-butyldiphényljsilyloxy-3 butyrique

Une solution de l'ester méthylique E (6) de l'Exemple 1 (environ 2,0 mmoles) dans du GH2CI2 sec (5,0 ml) a été traitée avec de la triméthylsilyle diéthylamine distillée (758 ni, 4,0 mmoles, 2,0 éq) et le mélange clair a été agité à la température ambiante sous argon pendant une heure. Le mélange a été évaporé sous vide, chassé avec du benzène (1 fois 15 ml) et séché sous vide.

Une solution refroidie (0°C) du silyle phosphonate brut dans du CH2CÌ2 sec (7,0 ml) et du DMF (1 goutte) a été traitée au goutte à goutte avec de l'oxalyle chlorure distillé (192 pi, 2,2 mmoles, 1,1 éq). Une émission de gaz s'est produite dans le mélange jaune clair. La solution a été agitée à la température ambiante pendant une heure, évaporée sous vide, chassée avec du benzène (2 fois 15 mi) et séchée sous vide pour donner le phosphonochloridate brut sous la forme d'une huile jaune et visqueuse.

Une solution refroidie (0°C) du phosphonochloridate et du complexe biphénylamine. HCl C (416 mg, 1,49 mmoles) dans du CH2CI2 sec (10 ml) a été traitée avec du Et3N (641 jd, 4,6 mmoles, 2,3 éq) et de la 4-DMAP (24 mg, 0,2 mmoles, 0,1 éq) et le mélange clair a été agité pendant une nuit sous argon à la température ambiante. Le mélange a été repris dans un mélange de EtOAc et d'une solution à 5% de KHSO4 et la phase organique a été lavée avec une solution salée, séchée sur du Na2$04 anhydre et évaporée sous vide pour donner 1,19 g d'une huile jaune. Le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (60 g) en éluant avec de l'héxane-acétone (7:3). Les fractions contenant le produit ont été évaporées pour donner 588 mg (59,5%) du phosphonamide recherché sous la forme d'une huile jaune pâle et visqueuse.

Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (7:3) Rf = 0,20, UV et APM,

E. Ester méthylique de l'acide (S)-[[[[fiuoro-4'triméthyl-3,3',5 [biphényi-1,1']yl-2lméthyl]amino]méthoxyphosphinyi]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution du silyle éther D (588 mg, 0,888 mmoles) dans du THF sec (10,0 ml) a été traitée par du HOAc glacial (203 ni, 3,55 mmoles, 4,0 éq) et par une solution 1,0 M de fluorure de tétrabutylammonium dans du THF (2,66 ml, 2,66 mmoles, 3,0 éq) et la solution obtenue a été agitée pendant une nuit sous argon à température ambiante. Le mélange a été versé sur du H2O froid et extrait avec de l'EtOAc. La phase organique a été lavée avec une solution saturée en NaHC03 et par une solution salée, séchée sur du Na2S04 anhydre et évaporée sous vide pour donner 605 mg d'une huile orange. Le produit brut a été purifié par une Chromatographie rapide sur du gel de silice (36 g), l'élution se faisant avec de l'héxane-acétone (1:1). Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées pour donner 196 mg (50,4%) de l'alcool recherché sous la forme d'une huile orange clair.

36

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10

15

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Chromatographie sur couche mince héxane-acétone (1:1 ) Rf = 0,16, UV et APM.

F. Sel de mono-lithium de l'acide (S)-[[[[fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,11yl-2]méthyl]amino]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique

Une solution du diester E (105 mg 0,240 mmoles) dans du dioxane (2,0 ml) a été traitée avec une solution 1,0 N de LiOH (288 jxl, 1,2 éq) et la suspension blanche a été agitée sous argon à la température ambiante pendant 4,0 heures. Le mélange a été dilué avec du H2Ó, filtré et le filtrat évaporé sous vide. Le résidu a été chromatographié sur de la résine HP-20 (lit de 100 ml), l'élution se faisant avec un gradient linéaire H2O/CH3CN. Les fractions contenant le produit ont été réunies et évaporées. Le résidu a été repris dans du H2O (50 ml), filtré sur une membrane de polycarbonate de 0,4 |im et lyophilisé pour donner 70 mg (62,7% sur la base du poids de l'hydrate) du sel de lithium recherché sous la forme d'un solide blanc.

Chromatographie sur couche mince CH2CI2-CH3OH-HOAC (20:1:1 ) Rf = 0,19 UV et APM.

Composition calculée pour C21H26NO5PFLÌ + 2,41 moles de H2O (PM 472,75): C, 53,35; H, 6,57; N, 2,96; F, 4,02; P, 6,55.

Composition trouvée: C, 53,35; H, 6,52; N, 2,98; F, 4,05; P, 6,59.

RMN 1H (400 MHz):

O II

81,79-1,97 ppm (2H, m, -P (OCH ) CH -}

3 2

2,26-2,44 ppm (2H, m, -CH2COgLi)

2,29 (3H, s, méthyl aromatique)

2,31 (3H, d, méthyl aromatique en a par raport au fluor, Jhf = 1,4 Hz)

2,47 (3H, méthyl aromatique)

3,46 & 3,50 (3H, 2 doublets, 2 diastéréomères, Jhp = 10,5 Hz)

O il

3,96 (2H, m, -PhCH ÎJHP (OCH ) -

4,17 (1H, m, (-CH2CH(0H)CH2C02Li)

6,84-7,21 (5H, m, protons aromatiques)

Exemples 8 à 20

Conformément aux procédures telles qu'elles ont été exposées précédemment et en particulier dans les exemples pratiques, les composés additionnels suivants peuvent être préparés

2

3

O H

11 i

X

R-P-CH_-C

■C-CH -CO -R = 22 OH

(CH ì l 2 z Z

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CH 676 984 AS

Ex. No.

n X

1 4.

C-H,,

<§>"

ch2-o

C H_ 2 5

1 NH CH.

LS. OK

"CK, I -

:,H--cö

C=C

I

O

I I

-CH.

*5 ^

OK

©Sa

i • t i-f.

CH.O

f-\OVch„-s •

>—f ~ | t m n

HC

H

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5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

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65

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2e.

\±/

1 NH H

Exempte 21

Ester méthylique de l'acide (S)-(diisopropyloxyphosphinyl-4 [[(diméthyl-1,1 éthyt)diphénylsilyl]oxy]-3 butyrique

L'iodure E(3) de l'Exemple 1 (45,1 mmoles, 21,70 g) a été agité sous vide poussé pendant 30 minutes. Du triisopropyle phosphite fraîchement distillé (0,451 moles, 93,92 g, 113,37 ml) a été ajouté en une fois et te mélange réactionnel a été agité à 155°C (bain d'huile chauffé) sous argon pendant 16,5 heures. Le mélange a ensuite été refroidi à la température ambiante. Le triisopropyle phosphite en excès et les produits de réaction volatiles ont été enlevés par une distillation à chemin court (10 mm Hg), suivie par une distillation de Kugelrohr (0,50 mm Hg, 100°C, 8 heures). Le produit obtenu a été purifié par une Chromatographie rapide [colonne de 95 mm de diamètre, 6 pouces de gel de silice Merck, éluant héxane - acétone - toluène (6:3:1), vitesse 2 pouces par minutes, fractions de 50 ml] pour donner 17,68 g (33,96 mmoles, rendement 75%) de l'isopropyle phosphonate recherché sous la forme d'une huile visqueuse et claire.

Chromatographie sur gel de silice héxane-acétone-toluène (6.3:1) Rf = 0,32.

RMN 1H (270 MHz, CDCI3)

7,70-7,65 (m, 4H)

7,45-7,65 (m, 6H)

4,57-4,44 (m, 3H)

3,59 (s, 3H)

2,94 et 2,88 (2xd, 1H J = 3,7 Hz)

2,65 et 2,60 (2xd, 1H J = 7,4 Hz)

2,24-1,87 (série de m, 2H)

1,19 et 1,12 (2xd, 12H J = 6,3 Hz)

1,01 (s, 9H)

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5

10

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30

35

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65

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Exemple 22

Sel (1:1) de dicyclohéxylamine de l'acide (S)-(hydroxyméthoxyphosphinyl)-4 [[(dlméthyl-

1.1 éthyl)diphénylsilyl]oxy]-3 butyrique.

L'isopropyle phosphonate de l'Exemple 21 (30,5 mmoles, 10,66 g) a été agité sous argon à température ambiante dans 80 ml de CH2CI2 sec. Cette solution a été traitée goutte à goutte en 5 minutes par du bis-triméthylsilyltrifluoroacétamide (BSTFA) (32,8 mmoles, 8,44 g, 8,71 ml), puis par du triméthylsilyle bromure (TMSBr) en 10 minutes (51,3 mmoles, 7,84 g, 6,75 ml). Après une agitation de 20 heures à la température ambiante, la réaction a été bloquée par l'addition de 200 ml d'une solution aqueuse à 5% de KH-SO4, suivie d'une agitation vigoureuse de 15 minutes. La phase aqueuse a été extraite 3 fois par de l'acétate d'éthyle. Les extraits organiques ont été réunis, lavés une fois avec une solution salée, séchés sur du Na2S04 et concentrés sous vide. Le résidu a été soumis à deux distillations azéotropiques avec 50 ml de toluène. Le précipité formé a été mis en suspension dans du toluène et filtré. Le filtrat a été concentré et le processus de distillation azéotropique/filtration répété. Le filtrat obtenu a été évaporé sous vide et ensuite on lui a appliqué un vide poussé par l'intermédiaire d'une pompe à vide pendant 5 heures. L'huile visqueuse et claire a été agitée sous argon et à la température ambiante dans 50 ml de pyridine sèche. Cette solution a été traitée avec du dicyclohexylcarbodlimide (DCC) (22,6 mmoles, 4,65 g) ajouté en une fois, puis par du méthanol (41,0 mmoles, 1,31 g, 1,67 ml). Après 20 heures d'agitation à la température ambiante, ce mélange réactionnel a été filtré sur une couche de cellite disposée dans un filtre en verre fritté. La cellite a été lavée avec de l'acétate d'éthyle et les filtrats ont été réunis pour être évaporés sous vide. Le résidu a été redissous dans de l'acétate d'éthyle et lavé 2 fois avec une solution aqueuse à 5% de KHSO4 et une fois avec de l'eau salée. L'extrait organique a été séché sur du Na2S04, filtré, concentré et soumis à deux distillations azéotropiques avec du toluène, remis en suspension dans du toluène et filtré. Le filtrat obtenu a été concentré à nouveau, soumis à une distillation azéotropique, filtré et évaporé sous vide. Au résidu on a appliqué un vide poussé par l'intermédiaire d'une pompe à vide durant 6 heures. On a ainsi obtenu le monoester phosphonate sous la forme d'un liquide visqueux clair (10,2 g, rendement supérieur à 100%). Chromatographie sur couche mince nPrOH-NhUOH-HaO (7:2:1) Rf = 0,50. On a appliqué au monoester phosphonate (1,21 g) un vide poussé par l'intermédiaire d'une pompe à vide pendant 4 heures. Le produit obtenu (1,16 g, 2,57 mmoles) a été dissous dans 10 ml d'éther éthylique sec et traité goutte à goutte avec de la dicyclohexylamîne (2,65 mmoles, 0,481 g, 0,528 ml). La solution homogène obtenue a été laissée-à reposer à température ambiante pendant 7 heures, ce qui a abouti à une importante formation de cristaux. Le mélange a ensuite été placé à -20°C pendant 16 heures, puis il a été rechauffé à la température ambiante et filtré. Les cristaux ont été lavés avec de i'éther éthylique froid et sec. Ensuite, on leur a appliqué un vide poussé par l'intermédiaire d'une pompe à vide en présence de P2O5 pendant 18 heures, suivi de l'application d'un vide poussé à 45°C pendant 4 heures. On a ainsi obtenu 1,25 g (1,98 mmoles, rendement 77%) du sel de la dicyclohéxylamine sous la forme d'un solide blanc pulvérulant dont le point de fusion était de 155-156°C.

Chromatographie sur gel de silice (MeOH 20%/CH2Cl2) Rf = 0,57.

RMN iH: (270 MHz, GDCI3)

5 7,71-7,65 (m, 4H)

7,40-7,32 (m, 6H)

4.02 (m, 1 H)

3,52 (s, 3H)

3,28 et 3,22 (m, 1H)

3,11 (d, 3H J = 11 Hz)

2,77-2,64 (m, 2H)

2,62-2,56 (m, 1H)

1,92-1,08 (série de m, 22H)

1,00 (S, 9H)

Spec. Masse: 632 (M&H)+

IR (KBr) 3466-3457 (large)

3046, 3016, 2997, 2937, 2858, 2836, 2798, 2721, 2704, 2633, 2533, 2447,1736, 1449,1435,1426,1379, 1243,1231,1191,1107,1074,1061,1051, 820 cm-1 Composition calculée pour Ó22H31OPSÌ.C12H23N:

C, 64,63; H, 8,61; N, 2,22.

Composition trouvée: C, 64,51 : H, 8,49; N, 2,18.

Claims (6)

Revendications 1. Composé comme agent d'inhibition de l'enzyme hydroxy-3 méthyI-3 glutaryl coenzyme A réductase désigné ci-après par l'abréviation HMG Co A possédant le groupe: 41 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 CH 676 984 A5 0 il -P-CH -CH-CH -CO- 1 2 » 2 X OH I (CH ) l 2 n Z où X est un -O- ou un -NH-, n est égal à 1 ou 2 et Z est un groupe lipophile. 2. Composé selon la revendication 1 ayant pour structure 0 « . R-P-CH CH-CH CO„ | *5- -1 <É- X

1

(CH )

i 2 n Z

2 = OH

où R est un OH, un aikoxy inférieur ou un alkyl inférieur substitué ou non substitué et Rx est un H ou un alkyl inférieur substitué ou non substitué et où X est un -O- ou un -NH-;

n est égal à 1 ou 2;

Z est un groupe lipophile qui est ou

- Alkyl où les pointillés représentent des doubles liaisons facultatives,

où R1, R2, R2a et R2b identiques ou différents sont choisis dans le groupe constitué par H, les halogènes, trifluorométhyie les alkyls inférieurs substitués ou non substitués, les halogénoalkyls, le groupe phényl, les phényls substitués ou ORy, où Ry est un H, un alkanoyl, le groupe benzoyl, le groupe phényl, un halogénophényl, un phényl-(alkyl inférieur substitué ou non substitué, un alkyl inférieur substitué ou non substitué, le groupe cinnamyl, un halogénoalkyl, le groupe allyl, un (cycioalkyl substitué ou non substi-tué)-(alkyl inférieur substitué ou non substitué), un adamantyl-(alkyl inférieur substitué ou non substitué) ou un phényl substitué-(alkyl inférieur substitué ou non substitué); où RS et R5' sont identiques ou différents et sont choisis dans le groupe constitué par H, les alkyls inférieurs substitués ou non substi42

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

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tués et OH, un des groupes R5 et R5' étant présents lorsque le carbone auguel il est lié a une double liaison,

O ii

R6 est un (alkyl substitué ou non substitué) -C— ou un arylCH2-,

R6a est un alkyl inférieur substitué ou non substitué, un hydroxy, un oxo, un halogène ou un trifluorométhyie, et q est égal à 1, 2 ou 3; ainsi que ses sels.

3. Composé selon la revendication 2, où X est un -O-, R est un aikoxy, et Z est

4. Composé selon la revendication 2, où X est un -NH-, R est un aikoxy et (CH2)n est un CH2 et Z est

5. Composé selon la revendication 2 choisi parmi les composés suivants:

Ester méthylique ou sel de mono-lithium de l'acide (S)-{[[fluoro-4' triméthyl-3,3',5 [biphényl-1,1']yI-2]méthoxy]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique,

Sel de di-lithium de l'acide (S)-[[[fluoro-4'triméthyl-

3,3',5 [biphényl-1,1']yl-2]méthoxy]hydroxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique,

Sel de mono-lithium de l'acide (3S)-[[[fluoro-4' triméthyl-

3,3',5 [biphényI-1,1']yl-2]méthoxy]methylphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique,

Sel de mono-lithium de l'acide (S)-[[[dichloro-2,4[(fluoro-

4 phényl)méthoxy-6]phényl]méthoxy]méthoxyphosphiny!]-4 hydroxy-3 butyrique,

Sel de di-lithium de l'acide (3S)-[[[dichloro-2,4[(fluoro-

4 phényl)méthoxy-6]phényl]méthoxy]hydroxyphosphînyl]-4 hydroxy-3 butyrique,

Acide (3S)-[[dichloro-2,4 [(fluoro-4 phényl)méthoxy-6]phényl]méthoxy]méthylphosphinyl]-4

hydroxy-3 butyrique ou son ester méthylique ou

Sel de mono-lithium de l'acide (S)-[[[[fluoro-4' triméthyl-

3,3',5 [biphényJ-1,1']yl-2]méthyl]amîno]méthoxyphosphinyl]-4 hydroxy-3 butyrique.

6. Composition hypocholestérolémique ou hypolipidémique comprenant un composé défini dans la revendication 2 et un véhicule de ce composé qui soit acceptable sur la plan pharmaceutique.

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