CH626088A5

CH626088A5 - Process for the preparation of new oximes derived from 3-carbamoyloxymethyl-7-(aminothiazolylacetamido)cephalosporanic acid

Info

Publication number: CH626088A5
Application number: CH1022777A
Authority: CH
Inventors: Michel Vignau; Andre Dr Lutz
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1976-08-20
Filing date: 1977-08-19
Publication date: 1981-10-30
Also published as: DK369677A; SE7708626L; ATA601677A; SU700065A3; IL52709A0; PT66944B; IE45865B1; IE45865L; AT357671B; DE2737504A1; IL52709A; NL7709258A; LU77993A1; BE857933A; PT66944A; AU2806277A; JPS5325595A; ES461764A1; GB1584398A; FR2361895A1

Description

La présente invention a pour objet la préparation des isomères syn de nouvelles oximes dérivées de l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-aminothiazolylacétamidocéphalosporanique, de formule générale:

NH.

dans laquelle Ri représente un radical alkyle saturé ou insaturé,

ayant de 1 à 4 atomes de carbone, et A représente soit un atome d'hydrogène, soit un équivalent de métal alcalin, alcalino-terreux, de magnésium ou d'une base organique aminée.

Parmi les significations de R1; on peut citer les radicaux méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, sec-butyle, tert-butyle, vinyle, propényle, butényle, éthynyle et propargyle.

Parmi les significations de A, on peut citer notamment un équivalent de sodium, de potassium, de lithium, de calcium ou de magnésium; parmi les bases organiques qui peuvent être représentées par A, on peut citer la diéthylamine, la triméthylamine, la triéthyl-amine, la méthylamine, la propylamine, la N,N-diméthyléthanol-amine ou le tris(hydroxyméthyl)aminométhane.

L'invention a plus particulièrement pour objet la préparation des produits de formule I, dans laquelle Rj représente un radical méthyle et A représente un atome d'hydrogène ou de sodium.

Parmi les produits de formule générale I, on peut citer particulièrement l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique isomère syn, l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl)

2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, tel qu'obtenu selon le procédé décrit à l'exemple 2 et le sel de sodium de l'acide

3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)-acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn.

Il est entendu que les produits de formule I précédemment cités peuvent exister:

— soit sous la forme indiquée par ladite formule I;

— soit sous la forme de composés de formule Iz:

NH

\=.

dans laquelle Rx et A ont la signification précitée.

Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que Ton traite un produit de formule:

NHR"

*N*H

isomère syn, dans laquelle R" représente ou bien R', R' étant un groupement éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, ou bien R" représente un radical chloro acétyle et Rï a la signification

2

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

3

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indiquée ci-dessus, soit, lorsque R" représente R', par un agent d'hydrolyse acide ou par un agent d'hydrogénolyse, soit, lorsque R" représente un radical chloro acétyle, par la thio-urée, pour obtenir un produit de formule:

(I')

isomère syn, correspondant aux produits de formule I, dans laquelle A représente un atome d'hydrogène, produits de formule l'que l'on salifie si désiré, pour obtenir les produits de formule I, dans laquelle A représente un équivalent de métal alcalin, alcalino-terreux, de magnésium ou d'une base organique aminée.

Comme groupement facilement éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse que peut représenter R', on peut citer les groupements tert-butoxycarbonyle, trityle, benzyle, dibenzyle, tri-chloroéthyle, carbobenzyloxyformyle ou phtaloyle.

L'invention a notamment pour objet la préparation des produits de formule I à partir de composés de formule II dans lesquels R' est un groupement tert-butoxycarbonyle, trityle, dibenzyle, trichloro-éthyle ou carbobenzyloxy.

On peut obtenir le produit de départ de formule II en traitant un produit de formule:

i.'HR'

CH,0H

dans laquelle r' représente un groupement éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, A' représente un atome de métal alcalin et Rj a la signification indiquée précédemment, par un isocyanate de formule:

r2-n=c=o dans laquelle r2 représente un substituant éliminable par hydrolyse.

Dans un mode préféré de préparation du produit de départ, l'action de l'isocyanate de formule:

r2 — N = C = O

sur le produit de formule IV, est réalisée, notamment, dans un solvant ou un mélange de solvants inertes. On utilise de préférence le chlorure de méthylène ou le chloroforme, mais on peut également utiliser le diméthylformamide, le tétrahydrofuranne ou la pyridine. On peut également opérer dans l'isocyanate pur.

L'hydrolyse du produit de formule II est ensuite effectuée de préférence en milieu basique, par du carbonate acide de sodium dans l'eau. On peut cependant utiliser du carbonate acide de potassium ou un carbonate de métal alcalin dans l'eau ou dans un mélange alcool/eau. On traite ensuite de préférence le sel obtenu par l'acide chlorhydrique dilué, pour obtenir l'acide de formule I (A = H). On peut également utiliser l'acide sulfurique ou phosphorique.

On peut cependant également hydrolyser le produit de formule II en milieu acide, pour obtenir directement un acide de formule I. On utilise alors un milieu tamponné légèrement acide.

Comme agent d'hydrolyse acide auquel on soumet, le cas

échéant, les produits de formule II, on peut citer l'acide trifluoro-acétique, l'acide formique ou l'acide acétique. Ces acides peuvent être employés anhydres ou en présence d'eau. Comme agent d'hydrogénolyse, on peut citer notamment le système zinc/acide acétique.

On utilise, de préférence, un agent d'hydrolyse acide, tel que l'acide trifluoroacétique anhydre ou les acides formique ou acétique aqueux, pour éliminer les groupements tert-butoxycarbonyle ou trityle.

On utilise, de préférence, le système zinc/acide acétique, pour éliminer le groupe trichloroéthyle et l'hydrogénation catalytique, pour éliminer les groupes benzyle, dibenzyle et carbobenzyloxy.

Les produits de formule I avec A=H peuvent être salifiés selon les méthodes usuelles. La salification peut, par exemple, être obtenue par action sur ces acides d'une base minérale, telle que, par exemple, l'hydroxyde de sodium ou de potassium ou le carbonate ou le carbonate acide de sodium ou d'une base organique comme la triéthylamine.

Cette salification est réalisée, de préférence, dans un solvant ou un mélange de solvants, tels que l'eau, le méthanol, l'éthanol, l'acétone ou le dioxanne.

Les produits de formule IV peuvent être préparés:

— soit en traitant l'acide 7-aminocéphalosporanique de formule

II:

(II)

(IV)

CH-OC-CH.,

2 II 3

O

d'abord par un alcoolate de métal alcalin dans un alcool inférieur, puis par un acide de formule III:

(III)

ou par un dérivé fonctionnel de cet acide de formule III, formule so dans laquelle R' et R! ont la signification indiquée précédemment, pour obtenir un produit de formule IV;

— soit en traitant un produit de formule V :

N'HR'

(V)

dans laquelle A a la signification indiquée précédemment, par un 65 alcoolate de métal alcalin dans un alcool inférieur, pour obtenir un produit de formule IV.

On utilise, pour la mise en œuvre du procédé ci-dessus, des produits de départ dans lesquels le groupe ORt est dans la position syn.

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4

Dans un mode préféré d'exécution de ce procédé, pour obtenir les produits de formule IV, on traite le produit de formule II par le méthylate de sodium dans le méthanol, mais on peut également utiliser d'autres alcoolates de métaux alcalins, tels que le tert-butylate de potassium. On peut également utiliser un alcool comportant de 1 à 3 atomes de carbone.

Dans un mode préféré d'exécution du procédé, on traite le composé amino II par un dérivé fonctionnel de l'acide de formule générale III, tel que le chlorure ou l'anhydride d'acide, ce dernier pouvant être formé in situ par action du chloroformiate d'isobutyle sur l'acide. On peut également utiliser d'autres halogénures ou encore d'autres anhydrides formés in situ par action d'autres chloro-formiates d'alcoyle, d'un dialcoylcarbodiimide ou d'un dicyclo-alcoylecarbodiimide, tel que le dicyclohexylcarbodiimide. On peut également utiliser d'autres dérivés d'acides, tels que l'azide d'acide, l'amide d'acide ou un ester d'acide formé, par exemple, avec l'hydroxysuccinimide, le paranitrophénol ou le 2-4 di-nitrophénol. Dans le cas où la réaction s'effectue avec un halogénure de l'acide de formule générale III ou avec un anhydride, on procède, de préférence, en présence d'un agent basique.

Le produit de formule IV peut également être obtenu en traitant le produit de formule V par un alcoolate de métal alcalin, tel que le méthylate de sodium dans un alcool comportant de 1 à 3 atomes de carbone.

Le substituant R2 éliminable par hydrolyse est choisi de préférence dans le groupe formé par les radicaux trichloroacétyle, benzyle, p-méthoxybenzyle, chlorosulfonyle.

L'invention a également pour objet une variante du procédé selon laquelle on obtient des composés de formule:

(Ib)

dans laquelle R2 représente un substituant éliminable par hydrolyse, pour obtenir un produit de formule:

(X)

CH2-0-C-KHR2

produit que l'on traite par un agent d'hydrolyse, puis par un acide lorsque l'on a utilisé un agent d'hydrolyse basique, pour obtenir un 15 produit de formule:

(XI)

à partir de composés de formule II dans laquelle R" représente un radical chloroacétyle. Dans ce cas, on peut préparer le produit de départ de manière avantageuse comme suit. On fait réagir un composé de formule:

(VIII)

H--0-C-ÏÏH-<= Il 2

produit que, selon l'invention, on traite par la thio-urée, pour obtenir un produit de formule Ib.

Les produits de formule Ib correspondent aux produits de formule I dans laquelle R et A représentent un atome d'hydrogène. 30 On utilise pour la mise en œuvre du procédé des produits de formule VIII dans lesquels le groupe OR, est dans la position syn.

Dans un mode préféré d'exécution du procédé ci-dessus décrit, l'enzyme que l'on fait agir sur le produit de formule VIII est un enzyme de germe de blé. On opère de préférence à une température 35 de l'ordre de 37° C et à pH voisin de la neutralité.

L'action de la thio-urée sur le produit de formule XI est réalisée de préférence en milieu neutre ou acide. Ce type de réaction est décrit par Masaki, «J. A. C. S.», 90,4508 (1968).

Les autres conditions opératoires sont identiques à celles qui sont 40 décrites précédemment pour la préparation des produits de formule I.

Dans la formule R2 — N = C = O, R2 est de préférence choisi dans le groupe formé par les radicaux trichloroacétyle, benzyle, p-méthoxybenzyle et chlorosulfonyle.

45 On peut d'ailleurs préparer aussi les autres produits de formule II de façon analogue, en traitant un produit de formule:

MHR'

s n

"S

(V')

UN

avec un enzyme de désacétylation, pour obtenir un produit de formule:

*

OR, 0^ ^

^CHo-0-C-CH,

8 5

dans laquelle R' et R, ont la signification indiquée ci-dessus, par un enzyme de désacétylation pour obtenir un produit de formule:

(IX)

HHR'

dans laquelle R, a la signification précédente, produit de formule IX que l'on traite par un isocyanate de formule:

(IV')

5

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dans laquelle R' et R! ont la signification indiquée ci-dessus, produit de formule IV' que l'on traite par un isocyanate de formule R2—N=C=0, dans laquelle R2 représente un substituant éliminable par hydrolyse, pour obtenir un produit de formule:

co2h o dans laquelle R', R! et R2 ont la signification indiquée ci-dessus, produit que l'on traite par un agent d'hydrolyse, puis par un acide lorsque l'on a utilisé un agent d'hydrolyse basique, pour obtenir un produit de formule:

dans laquelle R' et R! ont la signification indiquée ci-dessus.

Le substituant R' est choisi de préférence dans le groupe formé par les radicaux tert-butoxycarbonyle, trityle, benzyle, dibenzyle, 30 trichloroéthyle, carbobenzyloxy, formyle ou phtaloyle.

Dans la formule R2—N=C=O, R2 a les mêmes significations préférées que précédemment.

Dans un mode préféré d'exécution du procédé ci-dessus, on opère comme précédemment, avec un enzyme de germe de blé, à une 35

température de l'ordre de 37° C et à un pH voisin de la neutralité.

Dans le cas des produits de formule V', on opère à une dilution plus grande que pour les produits de formule VIII.

L'action de l'isocyanate de formule R2—N=C = O sur le produit de formule IV' et l'hydrolyse du produit VI' sont réalisées dans les 40 mêmes conditions que celles décrites précédemment.

La transformation des produits de formule la en produits de formule Ib ainsi que la salification éventuelle des produits Ib sont réalisées de la même manière que celle indiquée précédemment.

On utilise pour la mise en œuvre du procédé des produits de 45 formule V' dans lesquels le groupe OR! est dans la position syn.

On connaissait déjà (brevets français Nos 2123545 et 2137899,

Glaxo) certaines oximes de l'acide 7-acétamidocéphalosporanique ou de ses dérivés en position 3. Ainsi, le second brevet mentionné décrit notamment l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-furyl) 2-méthoxy- 50 iminoacétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, dont le sel de sodium est commercialisé sous le nom de Céfuroxime.

Les produits de formule générale I possèdent une très bonne activité antibiotique, d'une part, sur les bactéries Gram (+), telles que les staphylocoques, les streptocoques et notamment sur les 55

staphylocoques pénicillino-résistants et, d'autre part, sur les bactéries Gram (—), notamment sur les bactéries coliformes, les Klebsiella, les Proteus et les Salmonella.

Ces propriétés rendent aptes lesdits produits pharmaceutique-ment acceptables à être utilisés comme médicaments dans le go traitement des maladies à germes sensibles et plus particulièrement dans celui des staphylococcies, telles que septicémies à staphylocoques, staphylococcies malignes de la face ou cutanée, pyodermites,

plaies septiques ou suppurantes, anthrax, phlegmons, érésipèles, staphylococcies aiguës primitives ou postgrippales, broncho- 65

pneumonies, suppurations pulmonaires.

Ces produits peuvent également être utilisés comme médicaments dans le traitement des colibacilloses et infections associées, dans les infections à Proteus, à Klebsiella et à Salmonella et dans d'autres affections provoquées par des bactéries Gram (—).

Parmi ces médicaments, on retient de préférence ceux constitués par les produits de formule I, dans laquelle R! représente un radical méthyle et A représente un atome d'hydrogène ou de sodium.

Parmi ceux-ci, on citera de préférence:

— l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimmo)acétamido]cêph-3-èmè 4-carboxylique, isomère syn,

— l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, tel qu'obtenu selon le procédé décrit à l'exemple 2, et

— le sel de sodium de l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn.

Les nouvelles oximes de formule I peuvent ainsi être employées pour préparer des compositions pharmaceutiques renfermant, à titre de principe actif, l'une au moins desdites oximes.

Ces compositions peuvent être administrées par voie buccale, rectale, parentérale ou par voie locale en application topique sur la peau et les muqueuses.

Elles peuvent être solides ou liquides et se présenter sous les formes pharmaceutiques couramment utilisées en médecine humaine, comme, par exemple, les comprimés, simples ou dragéifiés, les gélules, les granulés, les suppositoires, les préparations injectables, les pommades, les crèmes, les gels; elles sont préparées selon les méthodes usuelles. Le ou les principes actifs peuvent y être incorporés à des excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, l'amidon, le stéarate de magnésium, le beurre de cacao, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les divers agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs.

La dose administrée est variable selon l'affection traitée, le sujet en cause, la voie d'administration et le produit considéré. Elle peut être, par exemple, comprise entre 0,250 g et 4 g/j, par voie orale, chez l'homme avec le produit décrit à l'exemple 2 ou encore comprise entre 0,500 g et 1 g, trois fois par jour, par voie intramusculaire, avec les produits décrits aux exemples 2 et 5.

Sont des composés nouveaux:

1. Les produits de formule:

co2a'

dans laquelle r' représente un groupement éliminable par hydrolyse acide ou hydrogénolyse, A' représente un atome de métal alcalin, B représente un atome d'hydrogène ou un radical:

-c-nh-r2 I

o dans lequel r2 représente un groupement éliminable par hydrolyse et Ri représente un radical alkyle saturé ou insaturé ayant de 1 à 4 atomes de carbone.

2. Les produits de formule:

iniR'

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dans laquelle R' représente un groupement éliminable par hydrolyse acide ou hydrogénolyse, R! représente un radical alkyle, saturé ou insaturé ayant de 1 à 4 atomes de carbone et B représente un atome d'hydrogène ou un radical

-C-NHR2 O

dans lequel R2 représente ungroupement éliminable par hydrolyse. 3. Les produits de formule:

HECOCHgCl

V

s ;?

\

OR,

~CH20 D

Cl-CH--C-C-CO_alc 2 II II 2

O N

produit que l'on traite par une base, telle que la soude, puis par un acide, tel que l'acide chlorhydrique dilué, pour obtenir un produit de formule III.

Les produits de formule VIII sont décrits dans la demande de brevet français N° 77.01713. Cette demande décrit également leur mode de préparation qui est le suivant:

On prépare le produit de formule D comme ci-dessus, puis le traite par un dérivé fonctionnel du groupement chloracétyle, tel que l'anhydride chloracétique ou le chlorure de monochloracétyle, pour obtenir un produit de formule F :

dans laquelle Rj représente un radical alkyle, saturé ou insaturé ayant de 1 à 4 atomes de carbone, et D représente un atome d'hydrogène ou un radical

-C-NH-R'2 O

dans lequel R'2 représente un atome d'hydrogène ou un groupement éliminable par hydrolyse.

Les produits de formule III peuvent être préparés par le procédé décrit par la titulaire dans la demande N° 76.01834 déposée en France le 23 janvier 1976. Ce procédé est caractérisé en ce que l'on fait agir la thio-urée sur un produit de formule C:

(C)

Niï-Ç-CÏÏ0Ci

6

^O°02aic

II

jff s

(F)

OP

produit que l'on traite par une base telle que la soude, puis par un acide tel que l'acide chlorhydrique dilué, pour obtenir un produit de formule G:

.Hü~ __

R

(G)

dans laquelle R] représente un radical alkyle saturé ou insaturé ayant de 1 à 4 atomes de carbone et aie représente un radical alkyle ayant de 1 à 4 atomes de carbone, pour obtenir après traitement par une base, telle que l'acétate de potassium, un produit de formule D:

NH,

W

(D)

CC^alc

GP-y,

produit que l'on fait réagir avec l'acide 7-aminocéphalosporanique de formule:

hp;I

o

)R,

produit que l'on traite par un dérivé fonctionnel d'un groupement facilement éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, pour obtenir un produit de formule E:

(E)

CC^alc

-ÎL ^ „

Y CH«0-C-CH,

co-jK ^ ;! p z o pour obtenir le produit de formule VIII cherché.

On traite de préférence l'acide 7-aminocéphalosporanique par un dérivé fonctionnel du produit G. Ce dérivé peut être, par exemple, l'anhydride formé in situ par action du chloroformiate d'isobutyle ou le chlorure d'acide formé à l'aide du chlorure de thionyle.

Les produits de formule C, qui ne sont pas connus, peuvent être préparés à partir du y-chloro a-oximinoacétylacétate d'éthyle décrit dans «J. of Médicinal Chemistry», 1973, vol. 16. No 9, par action des halogénures ou des sulfates d'alcoyle correspondant à R,.

Un exemple de la préparation d'un produit de formule III est décrit dans la partie expérimentale.

La demande No 76.01834 décrit également le mode de préparation des produits de formules V et V'.

Ce procédé est caractérisé en ce que l'on traite l'acide 7-aminocéphalosporanique par un acide de formule III ou un dérivé fonctionnel de cet acide, tel que l'anhydride formé in situ avec le dicyclohexylcarbodiimide, puis salifie éventuellement l'acide obtenu.

7

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Un exemple d'une telle préparation est décrit plus loin dans la partie expérimentale.

Le produit de formule VII est décrit dans la demande de brevet allemand N° 2203653.

On obtient les produits de formules III, IV, V, VIII ou V' dans lesquels le groupe ORx est dans la position syn, lorsque l'addition de la thio-urée sur les produits C est effectuée:

— soit dans un solvant aqueux,

— soit si l'on opère à température ambiante, en présence d'une quantité sensiblement stœchiométrique de thio-urée et dans un temps limité à quelques heures,

— soit en réunissant toutes les conditions ci-dessus.

On obtient ainsi des produits de formule D possédant la configuration syn, configuration qui peut être maintenue au cours des réactions suivantes.

Des exemples de telles préparations de produits de formules VIII et V' sont données plus loin dans la partie expérimentale.

Les exemples suivants illustrent l'invention.

Exemple 1:

Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2- (2-amino 4-thiazolyl) 2- (méthoxy-

imino ) acétamido ] céph-3-ème 4-carboxylique

Stade A: Sel de sodium de l'acide 3-hydroxymèthyl 7-[2-(2-trityl-

amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamidoJcéph-3-ème

4-carboxylique

On mélange sous azote 85 cm3 de méthanol et 1,7 g de sel de diêthylamine de l'acide 3-acétoxyméthyl 7-[2-(2-tritylamino 4-thia-zolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique. On amène la solution à —25°C et ajoute, en 2 mn, 380 mg de méthylate de sodium. On agite à — 20°C pendant 4 lA h, ajoute 126 mg de méthylate de sodium et agite pendant 4 h. On sature le milieu de carboglace, puis on verse à —20°C dans 680 cm3 d'éther.

Après une nuit au réfrigérateur, on essore et lave à l'éther. On obtient 1,89 g de produit blanc. F = 210-230°C avec décomposition.

Stade B: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-tritylamino 4-thiazo-lyl) 2-méthoxyimino) acétamido]cèph-3-ème 4-carboxylique

On mélange sous azote 30 cm3 de chlorure de méthylène et 0,75 cm3 d'isocyanate de trichloroacétyle. On amène entre 0 et + 5°C et ajoute, en 4 mn, 1,5 g de produit obtenu au stade A.

A la demi-introduction, on rajoute 0,25 cm3 d'isocyanate de trichloroacétyle, puis de nouveau 0,25 cm3 à la fin de l'introduction.

Après 10 mn d'agitation entre 0 et +5°C, on ajoute 1 cm3 de méthanol et concentre presque à sec sous vide. On redissout dans 30 cm3 de méthanol et on ajoute une solution de 915 mg de carbonate acide de sodium dans 22,5 cm3 d'eau. On agite 3 h à température ambiante, décante, concentre, acidifie à pH 2 par de l'acide chlorhydrique normal, essore le précipité, lave à l'eau, puis à l'éther, empâte dans l'éther et sèche sous vide.

On obtient 600 mg d'un solide. F = 210°C environ avec décomposition. Rf = 0,28 (acétate d'éthyle/éthanol/eau 7/2/1).

Le sel de diêthylamine de l'acide 3-acétoxyméthyl 7-[2-(2-trityl-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique a été préparé comme suit:

2-{2-Amino 4-thiazolyl) 2-méthoxyiminoacétate d'éthyle:

On place 1 g de y-chloro a-méthoxyiminoacétylacétate d'éthyle, 3 cm3 d'éthanol absolu et 0,42 g de thio-urée broyée. On agite à température ambiante 2 h environ. On dilue avec 60 cm3 d'éther, le chlorhydrate obtenu cristallise, on agite, essore, lave, sèche et obtient 685 mg de chlorhydrate. On les dissout dans 4 cm3 d'eau à 50 'C, ajoute de l'acétate de potassium jusqu'à pH 6, l'amine libérée cristallise. On refroidit, essore, lave à l'eau, sèche et obtient 270 mg de produit attendu. F= 161 C.

2-(2-Tritylamino 4-thiazolyl) 2-méthoxyiminoacétate d'éthyle:

4,6 g de produit préparé selon le stade précédent sont dissous à 30 C dans 92 cm3 de chlorure de méthylène. On refroidit à — 10 C,

ajoute 2,9 cm3 de triéthylamine, refroidit encore jusqu'à — 35°C, ajoute en 15 mn 6,1 g de chlorure de trityle, laisse revenir à température ambiante, soit en tout 2 Vi h. On lave à l'eau, puis à l'acide chlorhydrique 0,5N et à l'acétate de sodium dans l'eau. On sèche, concentre, reprend à l'éther, concentre de nouveau, dissout dans le méthanol, ajoute de l'eau et de l'éther, laisse cristalliser, essore, lave à l'éther et obtient 6,15 g de produit attendu. F=120°C.

Acide 2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) 2-méthoxyiminoacétique:

7,01 g d'ester obtenu comme précédemment sont dissous dans 35 cm3 de dioxanne. On porte à 110CC au bain d'huile et ajoute en 5 mn 9 cm3 de soude 2N, laisse 30 mn au reflux sous agitation. Le sel de sodium cristallise. On refroidit, essore, lave au dioxanne, puis à l'éther et obtient un premier jet de 5,767 g de sel. On concentre la solution mère et obtient un second jet de 1,017 g, soit en tout 6,784 g de sel.

On place 3,06 g de sel dans 65 cm3 de chlorure de méthylène et 6,5 cm3 d'acide chlorhydrique 2N, lave à l'eau, sèche et concentre à sec, pour obtenir quantitativement l'acide libre.

Sel de diêthylamine de l'acide 3-acétoxyméthyl 7-[2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) 2-méthoxyiminoacétamidoJcéph-3-éme 4-carboxylique:

L'acide, obtenu comme à l'étape précédente à partir de 153,6 g de sel de sodium, est dissous dans 450 cm3 de chlorure de méthylène sous atmosphère inerte. On refroidit par un bain de glace. A + 5°C, on ajoute 36 g de dicyclohexylcarbodiimide. On agite 40 mn à + 5°C et 30 mn à +20°C. On essore la dicyclohexylurée précipitée. On refroidit entre —10 et — 15°C la solution précédente et introduit une solution à — 10°C de 40,8 g d'acide 7-aminocéphalosporanique dans 600 cm3 de chlorure de méthylène et 41 cm3 de triéthylamine. On laisse revenir à température ambitante, agite, lave deux fois à l'acide chlorhydrique normal et trois fois à l'eau. On sèche, concentre, reprend à l'acétate d'éthyle, évapore à sec. Le produit est dissous dans 350 cm3 de dioxanne et on ajoute lentement 350 cm3 d'éther, puis 33 cm3 de diêthylamine, on agite 20 mn, filtre, concentre le filtrat et ajoute environ 2,51 d'éther. On agite et essore et obtient 110,3 g de sel attendu.

Le y-chloro a-méthoxyiminoacétylacétate d'éthyle utilisé au départ de cette préparation a été préparé comme suit:

On place 22,5 g de y-chloro a-oxyiminoacêtylacétate d'éthyle dans 100 cm3 de chlorure de méthylène.

On place sur un bain de glace et ajoute lentement sous agitation une solution fraîche de diazométhane (à 21,6 g/1), soit 275 cm3. On laisse 5 mn en contact et détruit l'excès de diazométhane par un peu d'alumine. On concentre, puis purifie par élution sur silice au chlorure de méthylène. On obtient 11,93 g de produit attendu.

Stade C: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2- (2-amino 4-thiazolyl) 2- ( méthoxyimino ) acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique

On mélange 500 mg de produit obtenu au stade B et 5 cm3 d'acide acétique à 8% dans l'eau. On agite 2 lA h à 50°C, refroidit à température ambiante et précipite par addition de 40 cm3 d'éther.

On essore, rince à l'éther et obtient 290 mg de solide crème impur.

On met en solution 270 mg du produit précédent dans 4 cm3 d'acide acétique à 8% dans l'eau.

On ajoute 4 cm3 d'acétate d'éthyle, filtre, lave avec un mélange acide acétique à 8% dans l'eau/acétate d'éthyle (1/1), agite le filtrat avec 270 mg de silice. Après filtration et lavage, on précipite par addition d'éther, on essore et lave à l'éther. On obtient 136 mg de produit. F> 260°C. Rf=0,35 (acétate d'éthyle/éthanol/eau 6/2/2).

Exemple 2: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) 2- (méthoxyimino) acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique Stade A: Sel de sodium de l'acide 3-hydroxyméthyl 7-[2-(2-trityl-amino 4-thiazolyl) 2- (méthoxyimino)acétamidoJcéph-3-ème 4-carboxylique:

a) On mélange sous azote 15 cm3 de méthanol sec et 272 mg d'acide 7-aminocéphalosporanique. On amène à — 20°C et ajoute en

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trois fois 136 mg de méthylate de sodium. On agite 7 'A h à — 15°C, puis on utilise le produit immédiatement dans la suite de la synthèse.

b) On introduit 1 g de sel de sodium de l'acide 2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) 2-méthoxyiminoacétique dans 8 cm3 de chlorure de méthylène, 1 cm3 d'éther et 4 cm3 d'acide chlorhydrique normal. On agite jusqu'à dissolution, décante et réextrait au chlorure de méthylène. On lave à l'eau, sèche et évapore à sec.

Le produit obtenu est redissous dans 4 cm3 de chlorure de méthyle sec, on ajoute 235 mg de dicyclohexylcarbodiimide, agite 30 mn à température ambiante, essore la dicyclohexylurée formée et rince au chlorure de méthylène.

c) La solution préparée en b) est ajoutée au milieu a) préalablement saturé de carboglace. On agite 30 mn à — 15°C, puis laisse la nuit à + 5°C. On précipite le produit par addition d'éther isopropyli-que. On obtient 800 mg de produit identique à celui obtenu au stade A de l'exemple 1.

Stade B: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]cèph-3-ème 4-carboxylique:

On opère comme au stade B de l'exemple 1, pour obtenir le produit attendu.

Exemple 3: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) 2- (méthoxyimino)acétamidoJcéph-3-ème 4-carboxylique

L'acide 2-(2-tritylamino 4-thiazolyl) 2-méthoxyiminoacétique obtenu comme décrit précédemment à partir de 1,81 g de son sel de sodium est dissous dans 20 cm3 de chloroforme sec; on ajoute 0,48 g de dicyclohexylcarbodiimide et agite 45 mn à température ambiante. On essore l'urée formée, refroidit à — 10°C et ajoute une solution de 0,5 g d'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-aminocéph-3-ème 4-carboxylique dans 8 cm3 de chloroforme et 0,5 cm3 de triéthylamine.

Après une nuit à +5°C, le mélange est extrait à l'aide d'une solution de bicarbonate à 4%. La solution aqueuse est lavée à l'éther, on acidifie ensuite à pH 2, essore le précipité, lave à l'eau et à l'éther, sèche et obtient un produit identique à celui obtenu à l'exemple 1.

Exemple 4: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino) acétamidoJcéph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn. Stade A: Acide 3-hydroxyméthyl 7-[2-(2-chloracétamido 4-thiazolyl)2-( méthoxyimino ) acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn

On mélange 240 cm3 d'eau distillée à 37°C et 40 g de germe de blé dégraissé. On agite 30 mn à 37° C, centrifuge à + 5°C et obtient un surnageant de 205 cm3 à pH 6,6. On introduit, d'autre part, dans 96 cm3 d'eau distillée, 1,6 g d'acide 3-acétoxyméthyl 7-[2-(2-chloracétamido 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]-céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn. On obtient une suspension à pH 4,3 que l'on ramène à pH 6,7 par adjonction de 11,9 cm3 de potasse 0,2N. La solution devient limpide.

On introduit, sous agitation à 37°C et en atmosphère d'azote, 192 cm3 de la solution enzymatique fraîche décrite précédemment, puis la solution d'acide à pH 6,7 précédente. Le pH est maintenu à 6,5 par adjonction automatique de potasse 0,2N. On suit la réaction par chromatogrphie sur couche mince. On arrête la réaction au bout de 4 h, centrifuge à + 5°C, triture le culot par 19 cm3 d'eau glacée, puis centrifuge à 5''C pendant 30 mn. Les surnageants sont réunis et concentrés à 67 cm3. On ajoute 168 cm3 d'acétone pour précipiter les protéines, filtre, lave par empâtage par 3 fois 16 cm3 d'une solution eau/acétone (1/2,5). On réunit filtrat et eaux de lavage et ajoute 640 mg de noir de carbone, agite 1 h à température ambiante, puis filtre, lave avec un mélange eau/acétone, joint les eaux de lavage et filtrat, concentre au bain-marie, puis ajoute 5 cm3 d'acide formique; il y a cristallisation. On garde une nuit à 5°C et essore les cristaux, lave à l'eau et obtient 76,1 g de produit attendu qui est recristallisé comme suit:

On ajoute 727,4 mg de produit obtenu ci-dessus à 28 cm3 d'eau distillée. On ajoute 134 mg de carbonate acide de sodium, agite,

sépare l'insoluble, rajoute 50 mg de carbonate acide de sodium, agite 15 mn, ajoute 142 mg de noir de carbone, agite 30 mn à température ambiante, filtre, lave par 3 fois 2 cm3 d'eau. On réunit les eaux de lavage et le filtrat, ajoute 1 cm3 d'eau. On réunit les eaux de lavage et le filtrat, ajoute 1 cm3 d'acide acétique, puis 0,5 cm3 d'acide formique, le produit cristallise lentement. On essore, lave à l'eau distillée et obtient 635,9 mg de produit après séchage.

[a]D= + 63,4° à 0,5% dans le carbonate acide de sodium 0,5M. RMN (DMSO 60 MHz) 7,48 ppm proton du cycle thiazolique, 3,91 ppm méthoxy de l'oxime, 4,28 ppm méthylène du groupement

-ch2oh.

Stade B: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-chloracétamido 4-thiazolyl) 2- (méthoxyimino)acétamidoJcéph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn.

On mélange 1,56 g d'acide 3-hydroxyméthyl 7-[2-(2-chlor-acétamido 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn, préparé au stade A, 18 cm3 de pyridine et 60 cm3 de tétrahydrofuran. On amène à —25aC et ajoute en une fois 3 cm3 d'isocyanate de trichloroacétyle. La température monte à — 18°C, puis redescend. On verse alors 600 cm3 d'une solution saturée de carbonate acide de sodium dans l'eau diluée au demi. On agite à température ambiante, extrait avec 4 fois 25 cm3 d'acétate d'éthyle. On lave chaque extrait par 125 cm3 d'une solution de carbonate acide de sodium saturée et diluée au demi. On rassemble toutes les phases aqueuses basiques, les amène à neutralité à l'aide d'acide chlorhydrique 2N, extrait avec deux fois 250 cm3 d'acétate d'éthyle, lave à l'aide d'une solution saturée de chlorure de sodium et réextrait au tétrahydrofuran et lave de nouveau. On réunit les phases organiques, les lave à l'eau salée, sèche, évapore sous pression réduite, triture la gomme obtenue à l'éther, agite à température ambiante, essore, rince, sèche et obtient 1,020 g de poudre blanche, F=246°C (décomposition) Rf = 0,37 (acétate d'éthyle/acide acétique/eau 80/15/5).

Stade C: Acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino) acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn.

On introduit 950 mg de produit obtenu au stade B précédent et 171 mg de thio-urée dans 2 cm3 d'eau distillée. On place dans un bain de glace et introduit en plusieurs fois 190 mg de carbonate acide de potassium. On laisse revenir à température ambiante et laisse 5 'A h sous agitation, puis ajoute 6,7 cm3 d'eau et ajoute de l'acide formique jusqu'à neutralité. On triture dans un bain de glace, essore, rince par 3,8 cm3 d'eau à 10% d'acide formique, reprend par 5,7 cm3 d'eau, maintient dans la glace et ajoute de la triéthylamine de manière à avoir une bonne solubilisation. On ajoute 0,6 cm3 d'acide formique, essore à l'aide de 2 fois 3,8 cm3 d'eau à 10% d'acide formique et élimine une gomme brun foncé. On réunit les phases aqueuses, les traite par 10,25 g de sulfate d'ammonium, essore le précipité, empâte à l'eau, puis à l'éther, sèche et obtient un premier jet de 470 mg. En saturant les liqueurs mères par le sulfate d'ammonium, on obtient un deuxième jet de 52 mg.

Le produit est purifié comme suit:

On agite 2 h à température ambiante 46 mg de produit brut contenant de l'acide formique et 0,12 cm3 d'éthanol absolu à 0,1 mmol de pyridine. On essore, rince à I'éthanol absolu, sèche et obtient 32 mg de poudre blanche purifiée.

RMN (60 MHz DMSO) ppm: 6,75, proton du cycle thiazole, 6,58: OCO NH2.

L'acide 3-acétoxyméthyl 7-[2-(2-chloracétamido 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn utilisé au départ de l'exemple 1 a été préparé comme suit:

2-(2-Amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétate d'éthyle, isomère syn:

On mélange 1 g de y-chloro a-méthoxyiminoacétylacétate d'éthyle (séparé comme indiqué à l'exemple 1), 3 cm3 d'éthanol absolu et 0,42 g de thio-urée broyée. On agite à température

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ambiante 2 h environ. On dilue avec 60 cm3 d'éther, le chlorhydrate obtenu cristallise, on agite, essore, lave, sèche et obtient 685 mg de chlorhydrate. On les dissout dans 4 cm3 d'eau à 50° C, ajoute de l'acétate de potassium jusqu'à pH 6, l'amine libérée cristallise. On refroidit, essore, lave à l'eau, sèche et obtient 270 mg de produit s attendu. F = 161°C.

2-(2-Chloracétamido 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétate d'éthyle, isomère syn:

io

On mélange 45,8 g de 2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)-acétate d'éthyle, isomère syn, dans 200 cm3 de chlorure de méthylène. On en distille 20 cm3 pour sécher, refroidit à 10"C et ajoute 50 cm3 de pyridine. On ajoute 41 g d'anhydride monochloracétique et chauffe légèrement jusqu'à dissolution. On laisse 6 h à 20° C sous azote, ajoute 5 cm3 d'eau, agite et verse dans 300 cm3 d'acide chlorhydrique 2N glacé. On décante, extrait au chlorure de méthylène, lave à l'eau, au carbonate acide de sodium, à l'eau, sèche, passe au charbon actif, concentre et ajoute 300 cm3 d'éther isopropylique. Le produit cristallise. On concentre jusqu'à obtention d'une pâte 2g épaisse, glace, essore, lave à l'éther isopropylique, sèche et obtient 45,4 g de produit. F= 113°C.

On obtient un échantillon pur par recristallisation dans un mélange de chlorure de méthylène et d'éther isopropylique.

F = 118°C. 25

Acide 2-(2-chloracétamido 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétique, isomère syn:

On introduit 46 g de produit obtenu au stade précédent dans 230 cm3 d'éthanol absolu. On ajoute à 20°C sous azote, 30 cm3 de 30 lessive de soude pure. Le produit se dissout, le sel de sodium commence à cristalliser, puis le milieu prend en masse. Après 16 h, on essore et lave à l'éthanol. Le sel obtenu est dissous dans l'eau, on glace, ajoute 100 cm3 d'acide chlorhydrique 2N, sature au chlorure de sodium, extrait à l'acétate d'éthyle contenant 10% d'éthanol. On 35 sèche, passe au charbon actif, distille sous vide, entraîne l'eau par du benzène, reprend au chlorure de méthylène, distille à sec, reprend au chlorure de méthylène, glace, essore, lave au chlorure de méthylène, sèche et obtient 34,5 g de produit attendu. F=200°C environ. On purifie le produit par recristallisation dans un mélange acétone/éther 40 isopropylique.

Analyse: C8H804N3C1S = 277,68

Calculé: C 34,60 H 2,90 N 15,13 Cl 12,77 S 11,55% Trouvé: C 34,80 H 2,80 N 14,80 Cl 12,60 S 11,50%

Acide 3-acétoxyméthyl 7-[2-(2-chloracétamido 4-thiazolyl)

2- (méthoxyimino) acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn :

On introduit 15,3 g de produit obtenu au stade précédent dans 80 cm3 de chlorure de méthylène. A 5°C, on ajoute 8 cm3 de triéthylamine. A 0°C sous azote, on introduit 3,8 cm3 de chlorure de thionyle et 26 cm3 de chlorure de méthylène. On laisse 15 mn à 0°C, puis ajoute 7 cm3 de triéthylamine. On introduit à 0°C sous azote, 13,6 g d'acide 7-aminocéphalosporanique dans 100 cm3 de chlorure de méthylène et 14 cm3 de triéthylamine. On laisse remonter à 20°C, puis agite 1 h. Cette solution est distillée à sec sous vide vers 30-35°C. On dissout le résidu dans 250 cm3 d'eau, passe au charbon actif,

ajoute 50 cm3 d'acide chlorhydrique 2N. On essore le précipité, lave à l'eau, le produit brut obtenu est mis en suspension dans 80 cm3 d'éthanol. A +5°C, on ajoute 7 cm3 de triéthylamine. On ajoute d'un seul coup, sous agitation à +5°C, 15 cm3 d'acide sulfurique 4N, le produit cristallise. Après 15 mn, on essore, lave à l'éthanol par empâtage, puis à l'éther, sèche sous vide et obtient 18,6 g de produit attendu. [<x]20-D* = +26° +1° (1% dans le diméthylformamide).

Exemple 5: Sel de sodium de l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino) acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn.

On introduit 92 mg d'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-£2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, isomère syn, préparé à l'exemple 4, dans 0,2 cm3 d'eau distillée. On rajoute par petites quantités 12 mg de carbonate acide de sodium. La solution se solubilise progressivement. On reprend par 2,4 cm3 d'acétone et triture. On observe une formation de gomme que l'on décante et que l'on reprend par 2,4 cm3 d'acétone, triture et agite 10 mn à température ambiante. On obtient la fraction A. On ajoute 2,4 cm3 d'acétone aux liqueurs mères, triture et agite 10 mn à température ambiante. On obtient ainsi la fraction B. On réunit A et B et empâte successivement avec 0,2 cm3 d'éthanol, 0,2 cm3 d'éther isopropylique et 0,2 cm3 d'acétone. On place au dessiccateur jusqu'à poids constant et obtient 65 mg d'une poudre blanc crème.

F>272°C.

Rf=0,16 (éluant: acétate d'éthyle/acide acétique/eau 80/15/5).

R

Claims

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REVENDICATIONS 1. Procédé de préparation des produits de formule générale:

NH.

isomère syn, dans laquelle Rj représente un radical alkyle saturé ou insaturé, ayant de 1 à 4 atomes de carbone, et A représente soit un atome d'hydrogène, soit un équivalent de métal alcalin, alcalino-terreux, de magnésium oud'une base organique aminée, caractérisé en ce que l'on traite un produit de formule:

NHR"

-NH

isomère syn, dans laquelle R" représente ou bien R', R' étant un groupement éliminable par hydrolyse acide ou par hydrogénolyse, ou bien R" représente un radical chloroacétyle et Rj a la signification indiquée ci-dessus, soit, lorsque R" représente R', par un agent d'hydrolyse acide ou par un agent d'hydrogénolyse, soit, lorsque R" représente un radical chloro acétyle, par la thio-urée, pour obtenir un produit de formule:

•OR.

isomère syn, correspondant aux produits de formule I, dans laquelle A représente un atome d'hydrogène, produits de formule l'que l'on salifie si désiré, pour obtenir les produits de formule I, dans laquelle A représente un équivalent de métal alcalin, alcalino-terreux, de magnésium ou d'une base organique aminée.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l'on met en œuvre le procédé à partir de produits de formule II dans laquelle R" représente R'.
3-carbamoyloxyméthyl-7-[2-(2-amino 4-thiazolyl) 2-(méthoxy-imino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique, caractérisé en ce que l'on soumet l'acide 3-carbamoyloxyméthyl 7-[2-(2-tritylamino

3. Procédé, selon la revendication 2, de préparation du 3-carbamoyloxyméthyl-7-[2-(2-amino 4-thiazolyl)-2-(méthoxy-imino)-acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique isomère syn, caractérisé en ce que l'on met en œuvre le procédé au départ d'un produit de formule II dans laquelle R" représente un groupement trityle et R] représente un radical méthyle.

4. Procédé, selon la revendication 1, de préparation de l'acide
4-thiazolyl) 2-(méthoxyimino)acétamido]céph-3-ème 4-carboxylique à une hydrolyse par action d'une solution aqueuse d'acide acétique.