CH616683A5 - Process for the preparation of cephalosporins - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung einer neuen Klasse von Cephalosporinen, die in Stellung 3 durch 5-Oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthiomethyl substituiert sind. Diese Verbindungen verfügen über eine hervorragende antibiotische Breitbandwirkung gegen grampositive und gramnegative Mikroorganismen.

Die erfindungsgemäss herstellbaren neuen Cephalosporine haben die Formel I

RNH

65

worin

Ri für Wasserstoff oder Niederalkyl steht,

R2 Wasserstoff, ein Alkalimetallkation oder eine leicht abspaltbare esterbildende Gruppe bedeutet und R Wasserstoff oder ein Rest der Formel

O

II

R'_C-ist,

worin

R' Wasserstoff, Ci-Ce-Alkyl, Ci-C3-Halogenalkyl, C1-C3-Cyanoalkyl, Ci-C3-Azidoalkyl, Ci-C3-Hydroxyalkyl, p-Ni-trobenzyloxy, 4-Amino-4-carboxybutyl oder 4-substituier-tes Amino-4-carboxybutylester der Formel

O

II

A-0-C-CH-(CH2)2-CH2-NH

I

A'

ist, worin

A Diphenylmethyl, p-Nitrobenzyl, Benzyl-2,2,2-trichlor-äthyl, tert.-Butyl oder p-Methoxybenzyl ist imd A! für C2-C4-Alkanoyl, C2-C4-Halogenalkanoyl, Benzoyl, Halogenbenzoyl, 2,4-Dinitrophenyl oder Phthalolyl steht, oder worin

R' einen Rest der Formel

< / >—(Z) -CH -

,.><L/ m 2

bedeutet, in der a und a' unabhängig voneinander Wasserstoff, Ci-Ct-Alkyl, Ci-C4-Alkoxy, Halogen, Hydroxy oder Aminomethyl sind, Z Sauerstoff oder Schwefel bedeutet und der Index m für 0 oder 1 steht,

5

616 683

oder worin

R' einen Rest der Formel

P-CH-O

bedeutet, worin

P für 2-Thienyl, 3-Thienyl, l-Tetrazyl oder Phenyl der Formel

».

•: >-

10

. \

e .»

steht, in der a und a' die oben angegebenen Bedeutungen haben und

Q Hydroxy, Formyloxy, Acetoxy, Carboxy, Sulfo, Amino oder -NHY ist, worin 20

Y Benzyloxycarbonyl, tert.-Butyloxycarbonyl,

O O R"

II II I

-C-NH-C-NH2 oder-C-N-

II

NH

O

II

- C—V bedeutet, worin

25

R'" Wasserstoff oder Ci-C3-Alkyl ist und V für Phenyl, Halogenphenyl, Furyl, Mono- oder Di-(Ci-C3-alkyl)amino, Mono- oder Diphenylamino steht, oder so worin die Substituenten R'" und V zusammen einen Hetero-cyclus bilden, wobei der Substituent R'" für eine Brücke der Formel -(CH2)n- steht, in der n den Wert 2 oder 3 besitzt, und V einen Rest der Formel -NR""- bedeutet,

in der R"" Wasserstoff, Methansulfonyl oder Ci-C3-Alkyl 35 ist, oder worin der Substituent R' ein Rest der Formel R"-CH2- bedeutet, in der R" für 2-Thienyl, 3-Thienyl,

2-Furyl, 2-Oxazyl, 2-Thiazyl, l-Tetrazyl, Benzotriazolyl, l,3,4-Thiadiazolyl-2-thio, l,2,5-Thiadiazolyl-3-thio, l,3,4-Oxadiazolyl-2-thia, Pyridylthia, l-(4-Cyano-1,2,3- 40 triazolyl oder l-(3-Cyano)-l,2,4-triazolyl steht.

Die erfindungsgemäss herstellbaren Cephalosporine der oben genannten Formel I werden erhalten, indem man ein 3-Acetoxymethylcephalosporin der Formel II

rn;

?

/\ T Î

"\/

0 !l

—CH -O-O-CH

II

50

00R

worin R und R2 die oben genannten Bedeutungen haben, mit einem Triazinylthioderivat der Formel

HS-®.

V^°

65

1

R

worin Ri obige Bedeutung besitzt, gegebenenfalls unter intermediärem Schutz der Amino- und/oder Carboxygruppen umsetzt.

Wenn es gewünscht wird, können die erfindungsgemäss erhaltenen Verbindungen, bei denen R für Wasserstoff steht und Q Amino bedeutet, zu in Anspruch 1 genannten Acylderi-vaten umgesetzt werden.

Bei der oben angegebenen Definition des Substituenten Ri steht die Angabe Niederalkyl für Alkyl mit 1 bis 4 Kohlen-'stoffatomen, wie Methyl, Äthyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, sec.-Butyl oder Isobutyl. Der Substituent Ri ist vorzugsweise Methyl oder Äthyl, und insbesondere Methyl.

Beispiele für den in Stellung 3 des Cephalosporins befindlichen Substituenten, bei dem Ri obige Bedeutung hat, sind 5-Oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthiomethyl, 4-Methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5 -dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthiomethyl, 4-Äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-l,2,4-triazin-3-ylthiomethyl, 4-n-Propyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthiomethyl, 4-Isopropyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-

3-ylthiomethyl, 4-n-Butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3~ylthiomethyI, 4-sec.-Butyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthiomethyl oder

4-Isobutyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthiomethyl.

Der Substituent R2 steht in obiger Formel I für Wasserstoff, ein Alkalimetallkation, wie Lithium, Natrium oder Kalium, oder eine leicht entfernbare esterbildende Gruppe. Unter einer leicht entfernbaren esterbildenden Gruppe werden die üblicherweise eingesetzten Carbonsäureschutzgruppen verstanden, durch die die in Stellung 4 des Cephalosporinmoleküls befindliche Carboxylgruppe blockiert wird. Derartige Gruppen lassen sich leicht durch bekannte Massnahmen abspalten, und solche Gruppen sind beispielsweise C4-C6-tert.-Alkyl, Cs-Cö-tert.-Alkenyl, Cs-Cö-tert.Alkinyl, Benzyl, Diphenylmethyl, p-Nitrobenzyl, p-Methoxybenzyl, 2,2,2-Trichloräthyl, Phenacyl, Trimethylsilyl, Ci-Cs-Alkanoyloxymethyl oder Phthalidyl.

Beispiele für C4-C6-tert.ATkylgruppen sind tert.-Butyl, tert.-Amyl oder tert.-Hexyl. Zu Cs-Cö-tert.Alkenylgruppen gehören beispielsweise tert.-Pentenyl oder tert.-Hexenyl. Beispiele für Cs-Q-tert.-Alkinylgruppen sind tert.-Pentinyl oder tert.-Hexinyl.

Steht der Substituent R2 für eine leicht abspaltbare esterbildende Gruppe, dann bedeutet dieser Substituent vorzugsweise tert.-Butyl, Diphenylmethyl, Benzyl, p-Nitrobenzyl, p-Meth-oxybenzyl, 2,2,2-Trichloräthyl, Trimethylsilyl, Acetoxymethyl, Pivaloyloxymethyl oder Phthalidyl.

Wenn der Substituent R2 eine leicht abspaltbare esterbildende Gruppe ist, dann steht er insbesondere für p-Nitroben-zyl, Acetoxymethyl oder Pivaloyloxymethyl.

Vor allem ist der Substituent R2 jedoch Wasserstoff oder ein Alkalimetallkation. Diese Substituenten R2 sind bei denjenigen Verbindungen der Formel I vorhanden, die über die stärkste antibiotische Wirkung verfügen.

Eine Abspaltung des Esterrestes unter Bildung der freien 4-Carboxyfunktion ist zur Bildung eines Cephalosporins erwünscht, bei dem der Substituent R2 Wasserstoff oder ein Alkalimetallkation ist. Diese Abspaltung lässt sich durch übliche Behandlung durchführen. Hierzu gehört beispielsweise eine Behandlung des Esters mit einer Säure, wie Trifluoressig-säure oder Salzsäure, oder auch mit Zink und Säure, wie Ameisensäure, Essigsäure oder Chlorwasserstoffsäure. Die Esterspaltung lässt sich auch durch Hydrieren des Esters in Gegenwart von Palladium, Rhodium oder einer entsprechenden Verbindung hiervon in Suspension oder auf einem Träger, wie Bariumsulfat, Kohle oder Aluminiumoxid, erreichen.

Bei der oben erwähnten Definition des Restes R' bezieht sich die Angabe C1-C6-Alkyl auf geradkettige oder verzweigte

616683

Alkylkohlenwasserstoffreste, wie Methyl, Äthyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, sec.-Butyl, n-Amyl, Isoamyl, n-Hexyl oder 2,3-Dimethylbutyl. Unter Ci-C3-Halogenalkyl werden Reste verstanden, wie Chlormethyl, Brommethyl, 2-Jodäthyl, 2-Chlorpropyl oder 3-Brompropyl. Die Angabe Ci-C3-Cyanoal-kyl bezieht sich auf Reste, wie Cyanomethyl, 2-Cyanoäthyl, 3-Cyanopropyl oder 2-Cyanopropyl. Unter Ci-C3-Azidoalkyl werden Gruppen verstanden, wie Azidomethyl, 2-Azidoäthyl, 3-Azidopropyl oder 2-Azidopropyl. Die Definition C1-C3-Hydroxyalkyl bezieht sich auf Gruppen, wie Hydroxymethyl, 2-Hydroxyäthyl, 3-Hydroxypropyl oder 2-Hydroxypropyl.

Bei der Definition der 4-substituiertes-Amino-4-carboxybu-tylestergruppe sind für den Substituenten A' unter anderem die Gruppen C2-C4-Alkanoyl, C2-C4-Halogenalkanoyl und Halogenbenzoyl genannt. Unter C2-C4-Alkanoyl werden dabei Acetyl, Propionyl oder Butyryl verstanden. Die Angabe C2-C4-Halogenalkanoyl bezieht sich auf Chloracetyl, Bromacetyl, 2-Chlorpropionyl oder 3-Brombutyryl. Unter Halogenbenzoyl werden durch Chlor und Brom substituierte Benzoylgruppen verstanden, wie 4-Chlorbenzoyl, 4-Brombenzoyl oder 2,4-Dichlorbenzoyl.

Die Angabe Halogen bezieht sich auf Fluor, Chlor, Brom oder Jod. Unter Ci-Ct-Niederalkyl werden geradkettige oder verzweigte Niederalkylkohlenwasserstoffgruppen verstanden, wie Methyl, Äthyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl oder tert.-Butyl. Zu Ci-Ct-Niederalkoxy gehören Methoxy, Äthoxy, Isopropoxy oder n-Butoxy.

Typische Beispiele für den Rest

R'-C-NH-

in obiger Formel I sind Formamido, Acetamido, Propion-amido, Butyramido, alpha-Methylpropionamido, Valeramido, alpha-Methylbutyramido, Trimethylacetamido, Caproamido, Heptylamido, Chloracetamido, Bromacetamido, Fluoracet-amido, Jodacetamido, ß-Chlorpropionamido, ß-Brompropion-amido, ß-Chlorbutyramido, 7-Fluorbutyramido, Cyanoacet-amido, alpha-Cyanopropionamido, ß-Cyanopropionamido, y-Cyanobutyramido, Azidoacetamido, ß-Azidopropionamido, Y-Azidobutyramido, ß-Azidobutyramido, Hydroxyacetamido, alpha-Hydroxypropionamido, ß-Hydroxybutyramido, p-Nitro-benzyloxycarbamido, 5-Amino-5-carboxyvaleramido, 5-(Di-phenylmethoxycarbonyl)-5-(acetamido)valeramido oder 5-(p-Nitrobenzyloxycarbonyl)-5-(2,4-dichlorbenzamido)valer-amido.

Typische Beispiele für den Rest

R'-C-NH-

in obiger Definition, wobei der Substituent R' einen Rest der Formel a.^~ V (z) ^ _ ,v / m 2

a' •==•

bedeutet, worin der Index m für 0 steht, sind Phenylacet-amido, 4-Methylphenylacetamido, 3-Äthylphenylacetamido, 4-Isopropylphenylacetamido, 2-Methylphenylacetamido, 4-Chlorphenylacetamido, 4-Nitrophenylacetamido, 4-Brom-phenylacetamido, 2,4-Dichlorphenylacetamido, 3-Bromphen-

ylacetamido, 4-Fluorphenylacetamido, 2-Fluorphenylacet-amido, 3,4-Dihydroxyphenylacetamido, 4-Hydroxyphenylacet-amido, 3-Hydroxyphenylacetamido, 2,6-DimethoxyphenyIacet-amido, 3-Methoxyphenylacetamido, 4-Isopropoxyphenylacet-amido, 3-Äthoxyphenylacetamido, 4-Methoxyphenylacetami-do-3,4-Dimethoxyphenylacetamido, 4-tert.-Butoxyphenylacet-amido, 2-Aminomethylphenylacetamido, 4-Aminomethylphe-nylacetamido, 3-n-Butoxyphenylacetamido, 3-Chlor-4-methyl-phenylacetamido oder 3-Nitrophenylacetamido. Falls in obiger Formel der Index m für 1 steht und Z Sauerstoff bedeutet, dann sind typische Gruppen hierfür Phenoxyacet-amido, 4-Methylphenoxyacetamido, 3-Äthylphenoxyacet-amido, 4-Isopropylphenoxyacetamido, 2-Methylphenoxyacet-amido, 4-Chlorphenoxyacetamido, 4-Nitrophenoxyacet-amido, 4-Bromphenoxyacetamido, 2,4-Dichlorphenoxyacet-amido, 3-Bromphenoxyacetamido, 4-Huorphenoxyacetamido, 2-Fluorphenoxyacetamido, 3,4-Dihydroxyphenoxyacetamido, 4-Hydroxyphenoxyacetamido, 3-Hydroxyphenoxyacetamido, 2,6-Dimethoxyphenoxyacetamido, 3-Äthoxyphenoxyacetami-do, 4-Methoxyphenoxyacetamido, 3,4-Dimethoxyphenoxyacet-amido, 4-tert.-Butoxyphenoxyacetamido, 2-n-Butoxyphenoxy-acetamido, 3-Chlor-4-methylphenoxyacetamido, 3-Nitro-phenoxyacetamido, 3-Hydroxy-4-methylphenoxyacetamido,

2-Chlorphenoxyacetamido, 3-Hydroxy-4-methylphenoxy-acetamido, 2-Chlorphenoxyacetamido, 4-Isopropoxyphenoxy-acetamido, 2-Aminomethylphenoxyacetamido oder 4-Amino-methylphenoxyacetamido. Falls in obiger Formel der Index m für 1 steht und Z Schwefel bedeutet, dann sind typische Gruppen hierfür Phenylmercaptoacetamido, 4-Methylphenylmercapto-acetamido, 3-Äthylphenylmercaptoacetamido, 4-Isopropyl-phenylmercaptoacetamido, 2-Methylphenylmercaptoacetamido, 4-Chlorphenylmercaptoacetamido, 4-Nitrophenylînercapto-acetamido, 4-Bromphenylmercaptoacetamido, 2,4-Dichlor-phenylmercaptoacetamido, 3-Bromphenylmercaptoacetamido, 4-Fluorphenylniercaptoacetamido, 2-Fluorphenylmercapto-acetamido, 3,4-Dihydroxyphenylmercaptoacetamido, 4-Hy-droxyphenylmercaptoacetamido, 3-Hydroxyphenylmercapto-acetamido, 2,6-Dimethoxyphenylmercaptoacetamido,

3-Äthoxyphenylmercaptoacetamido, 4-Methoxyphenylmer-captoacetamido, 3,4-Dimethylphenylmercaptoacetamido,

4-tert.-Butoxyphenylmercaptoacetamido, 3-n-Butoxyphenyl-mercaptoacetamido, 3-Chlor-4-methylphenylmercaptoacetami-do, 3-Nitrophenylmercapto acetamido, 3,4-Dimethylphenylmer-captoacetamido, 3,4-Dichlorphenylmercaptoacetamido, 2,5-Dichlorphenylmercaptoacetamido, 3-Fluor-4-chlorphenyl-mercaptoacetamido, 3-Chlor-4-fluorphenylmercaptoacet-amido, 2,6-Difluorphenylmercaptoacetamido, 3-Fluorphenyl-mercaptoacetamido, 2-Aminomethylphenylmercaptoacet-amido oder 4-Aminomethylphenylmercaptoacetamido.

Wenn der Substituent Ry ein Rest der Formel

Q

dann sind typische Gruppen hierfür mit der allgemeinen Formel

O

R'-C-NH- die Mandelamidogruppe der Formel

\ " »X CH-C-NH-

y i

6

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

616 683

die O-Formyl- und O-Acetylderivate hiervon mit der Formel a 9==* ®

\ »

°X . x®—CH—C—N H— ,

1 0

a- 0,11

U~T

worin T Wasserstoff oder Methyl bedeutet,

die alpha-Carboxyphenylacetamidogruppe der Formel a>^\ »

•v - /®~CH—C—N H— t

■VI/ '

3 C00H

die alpha-Sulfophenylacetamidogruppe der Formel

C O

i Ii

C-N-C-N-R"1

a/<r\ V / *

gl e •

0 il

—CH—C—NH"

SO H

3

die alpha-Aminophenylacetamidogruppe der Formel

0

©C >—CH-C-NH-

x~y 1

NH

2

20

25

oder die alpha-(substituiertes-Amino)phenylacetamidogruppe der Formel

0

'\ " . >-CH-C-NH-

XL/ !

3 NHY

worin Y Benzyloxycarbonyl, tert.-Butyloxycarbonyl, so

O O R'" O -C-NH-C-NH2 oder C N C V bedeutet, wobei V

II 55

NH

beispielsweise für Phenyl, Halogenphenyl, Furyl, Monomethyl-amino, Dimethylamino, Monoäthylamino, Diäthylamino, 60 Methyläthylamino, n-Propylamino, Di-n-propylamino, Diiso-propylamino, Phenylamino oder Diphenylamino steht. Darüber hinaus kann bei jedem oben angegebenen Rest der Susti-tuent R//; auch Wasserstoff oder Ci-C3-Alkyl bedeuten, und insbesondere für Methyl, Äthyl, n-Propyl oder Isopropyl ste- 65 hen. Die Substituenten R//; und V können zusammen mit der Gruppe, an die sie gebunden sind, einen Heterozyklus büden, so dass der Substituent Y die Bedeutung

(CH2)„

hat, worin n für 2 oder 3 steht und der Substituent R"" Wasserstoff, Methansulfonyl oder C1-C3-Alkyl bedeutet. Ferner gehören hierzu diejenigen alpha-substituierten 2-Thienylaceta-mido-, 3 -Thienyl acetamido - oder 1 -Tetrazylacetamidogrup -pen, bei denen in obigen Formeln die Phenylgruppe durch einen 2-Thienyl-, 3-Thienyl oder 1-Tetrazylring ersetzt ist.

Typische Beispiele für die oben angegebenen Acetamido-grappen sind 4-Methylmandelamido, 4-Hydroxymandelamido,

3-Hydroxymandelamido, 4-Methoxymandelamido, 3-Brom-mandelamido, Mandelamido, 4-Chlormandelamido, 3-Methyl-

4-fluormandelamido, 2-Fluormandelamido, 4-Fluormandel-amido, 4-Isopropylmandelamido, 3,4-Dimethyl-O-formylman-delamido, 4-Chlor-O-formylmandelamido, 3-Isopropoxy-O-formylmandelamido, 3-Brom-O-formylmandelamido, O-Formylmandelamido, 3,4-Dimethoxy-O-formylmandelamido, O-Acetylmandelamido, 4-Hydroxy-O-acetylmandelamido, alpha-Hydroxy-2-thienylacetamido, alpha-Hydroxy-3-thienyl-acetamido, alpha-Formyloxy-2-thienylacetamido, alpha-Acet-oxy-2-thienylacetamido, alpha-Formyloxy-3-thienylacetamido, alpha-Acetoxy-3-thienylacetamido, alpha-Hydroxy-2-tetra-zylacetamido, alpha-Formyloxy- 1-tetrazylacetamido,

alpha-Acetoxy-l-tetrazylacetamido, alpha-Carboxyphenyl-acetamido, alpha-Carboxy-4-methylphenylacetamido, alpha-Carboxy-4-hydroxyphenylacetamido, alpha-Carboxy-3-hydro-xyphenylacetamido, alpha-Carboxy-4-methoxy-phenylacet-amido, alpha-Carboxy-3-bromphenylacetamido, alpha-Carb-oxy-4-chlorphenylacetamido, alpha-Carboxy-3-methyl-4-fluorphenylacetamido, alpha-Carboxy-2-fluorphenylacet-amido, alpha-Carboxy-4-fluorphenylacetamido, alpha-Carb-oxy-4-isopropylphenylacetamido, alpha-Carboxy-3,4-di-methylphenylacetamido, alpha-Carboxy-3-isopropoxyphenyl-acetamido, alpha-Carboxy-3,4-dimethoxyphenylacetamido, alpha-Carboxy-2-thienylacetamido, alpha-Carboxy-3-thien-ylacetamido, alpha-Carboxy-1-tetrazylacetamido, alpha-Sulfophenylacetamido, alpha-Sulfo-4-methylphenylacet-amido, alpha-Sulfo-4-hydroxyphenylacetamido, alpha-Sulfo-3-hydroxyphenylacetamido, alpha-Sulfo-4-methoxy-phenylacetamido, alpha-Sulfo-3-bromphenylacetamido, alpha-Sulfo-4-chlorphenylacetamido, alpha-Sulfo-3-methyl-4-fluorphenylacetamido, alpha-Sulfo-2-fluorphenylacet-amido, alpha-Sulfo-4-fluorphenylacetamido, alpha-Sulfo-4-isopropylphenylacetamido, alpha-Sulfo-3,4-dimethyl-phenylacetamido, alpha-Sulfo-3-isopropoxyphenylacetamido, alpha-Sulfo-3,4-dimethoxyphenylacetamido, alpha-Sulfo-2-thienylacetamido, alpha-Sulfo-3-thienylacetamido, alpha-Sulfo-l-tetrazylacetamido, alpha-Aminophenylacet-amido, alpha-Amino-4-methylphenylacetamido, alpha-Amino-4-hydroxyphenylacetamido, alpha-Amino-3-hydroxyphenyl-acetamido, alpha-Amino-4-methoxyphenylacetamido, alpha-Amino-3-bromphenylacetamido, alpha-Amino-4-chlorphenyl-acetamido, alpha-Amino-3-chlor-4-hydroxyphenylacetamido, alpha-amino-2-fluorphenylacetamido, alpha-Amino-4-fluor-phenylacetamido, alpha-Amino-4-isopropylphenylacetamido, alpha-Amino-3,4-dimethylphenylacetamido, alpha-Amino-3-isopropoxyphenylacetamido, alpha-Amino-3,4-dimethoxy-phenylacetamido, alpha-Amino-2-thienylacetamido, alpha-Amino-3-thienylacetamido, alpha-Amino- 1-tetrazylacetamido, alpha-(3-Guanyl-l-ureido)phenylacetamido, alpha-(3-Meth-ylaminocarbonyl-l-ureido)phenylacetamido, alpha-(3-Di-methylaminocarbonyl-3-methyl-l-ureido)phenylacetamido, alpha-[N-(Imidazolidin-2-on-l-ylcarbonyl)amino]phenyl-

616 683

8

acetamido, alpha- [N-(3 -MethyIimidazolidin-2-on-1 -ylcar-bonyl)amino]phenylacetamido, alpha-[N-(3-Methansulfonyl-imidazolidin-2-on-l-ylcarbonyl)amino]phenylacetamido, alpha-[N-(Hexahydropyrimidin-2-on-1 -ylcarbonyl)amino] -phenylacetamido, alpha-[N-(3-Methylhexahydropyrimidin-

2-on-l-ylcarbonyl)amino]phenylacetamido, alpha-[N-(3-Methansulfonylhexahydropyrimidin-2-on-l-ylcarbonyl) amino]phenylacetamido, alpha-(3-Phenylacetaminocarbonyl-

3-propyl-l-ureido)phenylacetamido oder alpha-(3-Di-n-propylaminocarbonyl-l-ureido)phenylacetamido.

Typische Reste der Formel

'X

V

0 H

\ " 1

^a~(Z) m-CHm-0-N-

m

0

S

o

II

R'-C-NH-

in der obigen Definition, worin R' für R"-CH2- steht,

sind 2-ThienyIacetamido, 3-Thienylacetamido, 2-Furyl-acetamido, Oxazyl-2-acetamido, Thiazyl-2-acetamido, Tetrazyl-l-acetamido, Benzotriazolylacetamidoj 1,3,4-Thiadiazolyl-2-thioacetamido, l,2,5-Thiadiazolyl-3-thio-acetamido, l,3,4-Oxadiazolyl-2-thioacetamido, Pyridyl-thioacetamido, 4-(Cyano)-l,2,3-triazolyl-l-acetamido oder 3-(Cyano)-l,2,4-triazolyl-l-acetamido.

Eine bevorzugte Gruppe von Cephalosporinen der Formel I hat folgende Formel III

/\

'Î

-Il >—CH ~S—».

/\/0H

r.n;

III

00R

i

R

worin Ri, R2, a, a;, Z und m die oben angegebenen Bedeutungen haben. Beispiele für diese bevorzugten Verbindungen sind in Form ihrer jeweiligen freien Säuren folgende Verbindungen:

7-Phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbon-säure, 7-Phenoxyacetamido-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-(4-Hydroxyphenylacetamido)-3-(5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-ce-phem-4-carbonsäure, 7-(4-Chlorphenoxyacetamido)-3-(4-n-propyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-yl-thio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-(4-Methoxyphenoxy-acetamido)-3-(4-methyI-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-(2,5-Dichlorphenylthioacetamido)-3-(4-isopropyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-ce-phem-4-carbonsäure oder 7-Phenylthioacetamido-3-(4-n-butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

Eine andere bevorzugte Gruppe von Cephalosporinen der Formel I hat die folgende Formel IV

0 H Il S

R' 'CH ~ON-c

//

n er

■IvL /•—CH ~S" \/

/\/0H

?

00R

IV

V

i

R

worin R" für 2-Thienyl, 3-Thienyl, 2-Furyl oder l-Tetrazyl steht und die Substituenten R2 sowie R4 die oben angegebenen Bedeutungen haben. Beispiele solcher Verbindungen der Formel IV in Form ihrer jeweiligen freien Säuren sind folgende:

7-(2-Thienylacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-

30

40

4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-(2-Furylacetamido)-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthiomethyl)-3-cephem-4-carbonsäure,

7-(3-Thienylacetamido)-3-(4-sec.-butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-(l-Tetrazylacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-(l-Tetrazylacetamido)-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure oder

7-(2-Thienylacetamido)-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3 -ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

Eine andere bevorzugte Gruppe von Cephalosporinen der Formel I hat die folgende Formel V

0 H II !

P-CH-C-N-I

Q

er rY xî

* f'l. X—CH -s-'

\/

L

00R

f

V

N i

R

0

worin P für l-Tetrazyl, Phenyl oder substituiertes Phenyl der angegebenen Art steht und Q Hydroxy, Formyloxy, Acetoxy, 60 Carboxy oder Amino bedeutet. Beispiele solcher Verbindungen der Formel V sind in Form ihrer jeweiligen freien Säuren folgende:

7-Mandelamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-6S l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-(4-Chlormandelamido)-3-(5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-yIthio)methyI-3-cephem-4-carbonsäure, 7-(4-Hydroxymandelamido)-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-

616 683

4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-yIthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-(4-Methoxymandelamido)-3-(4-n-propyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[dpha-(Hydroxy)-l-tetrazylacetamido]-3-(4-methyl-5 -oxo-6-hydroxy-4,5 -dihydro- l,2,4-triazin-3 -ylthio) -methyI-3-cephem-4-carbonsäure, 7-(alpha-Formyloxyphenylacetamido)-3-(4-äthyl-5-oxo-

6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-(alpha-Acetoxyphenylacetamido)-3-(4-isobutyl-5-oxo-

6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-(alpha-CarboxyphenyIacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-

6-hydroxy-4,5-dihydro-l ,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[alpha(Carboxy)-4-hydroxyphenylacetamido]-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[alpha-(Carboxy)-4-chlorphenylacetamido]-3-(4-n-propyl-

5-oxo-6-hydroxy-4,5 -dihydro-1,2,4-triazin-3 -ylthio)meth-yl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[alpha-(Carboxy)-l-tetrazylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-

3-cephem-4-carbonsäure,

7-(alpha-Aminophenylacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-ce-phem-4-carbonsäure,

7-(alpha-Aminophenylacetamido)-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-

4-carbonsäure,

7-[alpha-(Amino)-l-tetrazylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-

6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-[alpha-(Amino)-4-hydroxyphenylacetamido]-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure oder 7-[alpha-(Amino)-4-chlorphenylacetamido]-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

Eine weitere bevorzugte Gruppe von Cephalosporinen der Formel I sind die Verbindungen der Formel VI

10

25

30

45

H N-

2

n î /-\/

-CH -S-

2

VI

.OH

0

00R

i

R

Diese Verbindungen stellen äusserst interessante Zwischenprodukte zur erfindungsgemässen Herstellung anderer Verbindungen dar. Sie lassen sich ohne weiteres in andere Verbindungen überführen, indem man die in Stellung 7 befindlichen freien Aminosubstituenten unter Einführung irgendeines der oben angegebenen Acylsubstituenten in üblicher Weise acyliert. Beispiele solcher Verbindungen der Formel VI in Form ihrer jeweiligen freien Säure sind folgende: 7-Amino-3-(5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

7-Amino-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-Amino-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-Amino-3-(4-n-propyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-Amino-3-(4-isopropyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-yltliio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-Amino-3-(4-n-butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 7-Amino-3-(4-sec.-butyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure oder 7-Amino-3-(4-isobutyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

Cephalosporinderivate, die den erfindungsgemäss hergestellten ähnlich sind, findet man vorgängig bereits von Smith, Kline und French in ihrem englischen Patent Nr. 1 328 340 beschrieben.

Die Verbindungen der Formel I können nach in der Cepha-Iosporinchemie bekannten Verfahren hergestellt werden. Sie sind ohne weiteres durch Austausch einer in Stellung 3 vorhandenen Acetoxyfunktion eines 3-Acetoxymethylcephalospo-rins zugänglich. Jedes Cephalosporin der Formel I kann daher aus den entsprechenden 3-Acetoxymethylcephalosporinen durch bekannte Austauschreaktion hergesteÜt werden. Eine typische Reaktionsfolge zur Herstellung von Verbindungen der Formel I aus der ohne weiteres zugänglichen 7-Aminocephalo-sporinsäure (7-ACA) läuft wie folgt ab:

H N—f

o

T I "

-—Jt—CHs0-C~CHs

00H

Austausch

616 683

10

Y

H N-

2

a.;

0

1

COOH

V ^

o il

R'-ONH

i

I

I

R

Schutz der Ca Carboxylgruppe (falls gewünscht) Einführung einer funktionellen Gruppe (falls gewünscht)

Pf Ì tl Î

*—k À—CH -s—• A

1 V

.OH

/-y

,OOR

I

R

Nach obigem Reaktionsschema wird die Acetoxyfunktion 35 von 7-ACA durch das angegebene Triazinylthioderivat ausgetauscht. Hierbei erhält man das entsprechende 7-Aminocepha-losporin, nämlich eine Verbindung der Formel I. Diese Verbindung lässt sich in bekannter Weise acylieren, wodurch man zu den 7-Acylamidocephalosporinen der Formel I gelangt. 40

Die obige Reaktionsfolge kann auch derart abgewandelt werden, dass man das 7-ACA zuerst in Stellung 7 acyliert, wodurch man die entsprechende 7-Acylamidocephalosporan-säure oder den jeweiligen Ester hiervon erhält. Falls es sich beim dabei erhaltenen Produkt um einen Ester handelt, dann 45 wird im allgemeinen von dieser Verbindung die am C4-Atom befindliche Esterschutzgruppe abgespalten, worauf man die erhaltene Säure zur Bildung der Verbindung der Formel I

(1)2NaOC2Hs

R1-NH-O-NH-NH2 + C2H5O-C-C-OC2H5 >

I (2) H+

einer Austauschreaktion unterzieht. Alle für derartige Umwandlungen geeigneten Verfahren sind an sich bekannt.

Die jweilige Verbindung, die zum Austausch der Acetoxyfunktion in Stellung 3 verwendet wird, ist ein 3-Mercapto-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin, das in Stellung 4 unsubstituiert oder entsprechend mit einer Niederalkylgruppe der angegebenen Art substituiert ist. Diese 3-Mercapto-l,2,4-triazine können nach dem in Bulletin de la Société Chimique de France (1970) Seiten 1590-1599 beschriebenen Verfahren hergestellt werden. Nach dieser Arbeitsweise erhält man das 1,2,4-Triazin durch Umsetzen eines Tiosemicarbazids mit Diäthyloxalat in Gegenwart von Natriumäthoxid. Die Reaktion läuft wie folgt ab:

O O

H I

I

I

R

In den oben angegebenen Formeln steht der Substituent Ri für Wasserstoff oder Niederalkyl der angegebenen Art. Wie ersichtlich kommt das Reaktionsprodukt in tautomeren Formen vor. Auf diese Tautomerie wird in Bulletin de la Société Chimique de France (1970) Seiten 1599-1606 näher eingegangen.

Die zur Herstellung der Verbindung der Formel I verwendete oben angegebene Austauschreaktion besteht in einer Umsetzung der entsprechenden 3-Acetoxymethylverbindung, vorzugsweise in einem polaren Medium, mit dem entsprechenden 3-Mercapto- 1,2,4-triazinderivat, wodurch die Acetoxy-gruppe ausgetauscht wird. Anschliessend wird das gewünschte und in Stellung 3 entsprechend substituierte Cephalosporinde-rivat gewonnen.

Die obige Umsetzung wird am besten durchgeführt, indem man die in einem geeigneten Lösungsmittel gelösten Reaktionspartner so lange auf einer Temperatur von beispielsweise etwa 15 bis etwa 100°C hält, bis das gewünschte Derivat in optimaler Ausbeute entstanden ist. Die Reaktionspartner werden zweckmässigerweise in einem Verhältnis von etwa 1 Moläquivalent 3-Acetoxymethylcephalosporin zu etwa einem bis etwa zehn Moläquivalent 3-Mercapto-l,2,4-triazin eingesetzt. Die Umsetzung wird vorzugweise unter Anwendung moläquivalenter Mengen dieser Reaktionsteilnehmer oder eines mässigen Überschusses des Triazins durchgeführt. Der pH-Wert der Reaktionslösung sollte zweckmässigerweise auf etwa 5,0 bis etwa 8,0 gehalten werden.

Die Umsetzung dürfte nach einem polaren oder ionischen Mechanismus ablaufen. Die Reaktion wird daher vorzugsweise in einem polaren Medium durchgeführt. Hierdurch wird der Beginn und Ablauf der gewünschten Reaktion erleichtert. Als polares Medium kann man Wasser verwenden, und dieses wird auch tatsächlich bevorzugt. Es lassen sich jedoch auch alle anderen typischen und bekannten polaren Lösungsmittel einsetzen. Als Trägermedium für die Umsetzung kann man auch einen Überschuss des für die Austauschreaktion massgeblichen 3-Mercapto-l,2,4-triazinderivats verwenden.

Das bei obiger Umsetzung erhaltene Reaktionsprodukt kann aus dem anfallenden Reaktionsgemisch nach einer Reihe von Verfahren abgetrennt werden, beispielsweise durch Kristallisation, Ionophorese, Papierchromatographie oder Chromatographie über Ionenaustauscherharze.

Die Austauschreaktion kann entweder auf die 7-Aminoce-phalosporansäure oder auf eine 7-Acylamidocephalosporan-säure angewandt werden. Geht man von 7-ACA aus, dann lässt sich das dabei erhaltene Produkt anschliessend acylieren. Die Acylierung der 7-Aminogruppe von Cephalosporinen stellt eine bekannte Umsetzung dar, und sie kann vorgenommen werden, indem man das Cephalosporin mit einem Säure-halogenid oder einem gemischten Säureanhydrid mit der jeweils gewünschten Acylfunktion umsetzt. Das zur Acylierung jeweils angewandte Verfahren ist erfindungsgemäss nicht wesentlich.

Die erfindungsgemäss erhaltenen Verbindungen der Formel I sind Heilmittel mit insbesondere antibiotischer Wirksamkeit und/oder Zwischenprodukte zur Herstellung von Heilmitteln, insbesondere von Verbindungen mit antibiotischer Wirkimg. Eine besonders ausgeprägte antibiotische Wirkung zeigen diejenigen erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen, bei denen der Substituent R2 Wasserstoff oder ein Alkalimetallkation ist. Die Verbindung, bei der der Substituent R2 eine andere Bedeutung als Wasserstoff oder ein Alkalimetallkation besitzt, kann durch die oben angegebenen Spaltverfahren ohne weiteres in derartige Verbindungen überführt werden.

In der folgenden Tabelle sind die Minimalinhibierkonzentrationen (MIC) in mg/ml von Verbindungen der Formel I gegenüber einem gramnegativen Organismus, nämlich Escherichia coli, und gegenüber einem grampositiven Organismus,

616 683

nämlich penicillinresistentem Staphylococcus aureus, angegeben. Die angeführten MIC-Werte sind nach dem von Bryson und Szybalski, in Science 116, 45 (1952) beschriebenen Gra-dienten-Platten-Verfahren ermittelt.

Tabelle Antibiotische Aktivität

IH~T Î T tl Î

,1 N. ,1—CH s S, À

✓ \/ 2 \/\>

C00H 'R

1

Minimale Inhibierungs-konzentration

(mg/ml)

R

R,

E. coli

S. aureus

C1H.H-

CHs

50

15

H-CO-

CHs

12,2

0,2

2,5 -Dichlorphenylthioacetyl

CH3

20,5

0,6

2,5-DichIorphenylthioacetyI

C2H5

22,5

0,7

alpha-Hydroxyphenylacetyl

CH3

4,0

0,7

alpha-Hydroxyphenylacetyl

CH3

4,5

0,9

(Na-Salz)

alpha-Formyloxyphenylacetyl

CH3

3,5

4,0

alpha-(tert.-Butyloxycarbonyl-

amino)phenylacetyl

CHs

130

0,5

alpha-Aminophenylacetyl

CH3

5,3

2,0

2-Thienylacetyl

CH3

1,5

0,3

2-Thienylacetyl

C2H5

3,0

0,5

4-Aminomethylphenylacetyl

CH3

3,0

0,5

alpha-[3-(4-Chlorbenzoyl)-

3-methyl-l-ureido]phenylacetyl

CH3

4,5

4,0

alpha-(3-Furoyl-l-ureido)phenyl-

acetyl

CHs

8,3

7,0

alpha-[3-(2-Chlorbenzoyl)-

3 -methyl-1 -ureido]phenylacetyl

CHs

5,7

5,5

lH-Tetrazolacetyl

CH3

0,8

0,5

alpha-Amino-4-hydroxyphenyl-

acetyl

CH3

3,0

4,0

alpha-(3-Methylaminocarbonyl-

3-methyl-l-ureido)phenylacetyl

CH3

15,5

3,0

alpha-(Imidazolidin-2-on-1 -yl-

carbonylamino)phenylacetyl

CHs

19,0

2,0

alpha-(3-MethansulfonylimidazoIi-

din-2-on-l-ylcarbonylamino)-

phenylacetyl

CHs

9,5

5,0

alpha-(Amino)thien-2-ylacetyl

CH3

6,5

6,0

alpha-(3-Methyl-3-methylamino-

carbonyl-l-ureido)thien-

2-ylacetyl

CH3

14,2

1,0

alpha-(3-Methansulfonylimidazoli-

din-2-on-l-ylcarbonylamino)-

thien-2-yl-acetyl

CH3

4,7

1,0

alpha-[3-(2-Chlorbenzoyl)-

3-methyl- l-ureido]-4-hydroxy-

phenylacetyl

CH3

11,1

0,7

alpha-(3-Methansulfonyl-

imidazolidin-2-on-l-ylcarbonyl-

amino)-4-hydroxyphenylacetyl

CH3

0,6

2,5

aIpha-(3-MethyIaminocarbonyl-

3-methyl-l-ureido)4-hydroxy-

phenylacetyl

CH3

4,4

2,2

11

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

616 683

Tabelle (Fortsetzung)

Minimale Inhibierungs-konzentration (mg/ml)

R Rt E. coli S. aureus alpha-(Imidazolidin-2-on-l-ylcarbonylamino)-4-

hydroxyphenylacetyl CH3 5,6 2,1

Das erfindungsgemässe Verfahren wird anhand der folgenden Beispiele näher erläutert.

Herstellung von 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin

In einem 22 Liter fassenden Kolben werden 12,5 Liter wasserfreies Äthanol unter Stickstoffatmosphäre langsam mit 230 g Natrium versetzt. Das Reaktionsgemisch wird über Nacht auf Raumtemperatur gehalten, wobei man in den Reaktionskolben langsam jedoch konstant Stickstoff einleitet. Anschliessend erhitzt man das Gemisch auf 50°C und versetzt das Ganze mit 1050 g (10 Mol) 4-Methylthiosemicarbazid. Die Temperatur des Gemisches fällt auf 40°C. Das Reaktionsgemisch wird dann über einen Tropftrichter mit 1530 g Diäthyl-oxalat versetzt. Die Zugabe erfolgt mit solcher Geschwindigkeit, dass das Reaktionsgemisch eine Temperatur von etwa 60 bis etwa 65°C annimmt. Die Temperatur des erhaltenen Gemisches steigt auf 65°C. Das Gemisch wird anschliessend unter Rühren 4 Stunden zum Rückfluss erhitzt, und während dieser Zeit bildet sich ein Niederschlag. Der Niederschlag ändert während des Rückflusskochens sein Aussehen. Sobald die Heizung abgestellt wird und man mit dem Rühren aufhört, setzt sich der weisse Feststoff allmählich auf den Boden des Kolbens ab, wobei eine klare hellgelbe überstehende Flüssigkeit zurückbleibt. Man lässt das Reaktionsgemisch über Nacht stehen. Die Hauptmenge der überstehenden klaren Flüssigkeit wird abgesaugt, worauf man das weisse kristalline Produkt in Form seines Natriumsalzes durch Filtrieren vom restlichen Gemisch trennt und dann mit trockenem Äthanol wäscht.

Das obige Produkt wird in Wasser gelöst, und den pH-Wert der Lösung stellt man auf 5,5 ein. Eine kleine Menge an ungelöstem Material wird abfiltriert und verworfen. Anschliessend wird der pH-Wert des Filtrats auf 1,5 eingestellt, und dann abgekühlt. Der dabei anfallende Niederschlag wird abfiltriert, wodurch man 211,5 g Produkt erhält, das bei 212 bis 216°C schmilzt.

Beispiel 1

36 ml Wasser werden unter Rühren mit 1,44 g 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin und 8,5 ml 1 n Natriumhydroxid versetzt. Das auf diese Weise erhaltene Gemisch hat einen pH-Wert von 8,3, und dieser pH-Wert wird durch Zugabe von verdünnter Säure auf 7,6 erniedrigt. Das Gemisch wird anschliessend unter Rühren mit 7-alpha-(tert.-Butoxycarbonylamino)phenylacetamido-3-acet-oxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure (4,5 g, 9 mMol) versetzt, worauf man den pH-Wert des erhaltenen Gemisches auf 6,9 einstellt, wobei die Cephemverbindung langsam in Lösung geht. Anschliessend wird das Gemisch bei 55°C gerührt. Nach 1,75 Stunden hat das Gemisch einen pH-Wert von 6,2, und dieser pH-Wert wird durch Zugabe von verdünnter Natriumhydroxidlösung auf 7,3 angehoben. Nach 17,5 Stunden hat das Gemisch einen pH-Wert von 6,1, und man stellt den pH-Wert dann mit verdünntem Natriumhydroxid auf 6,95 ein. Das Gemisch wird insgesamt 21 Stunden erhitzt. Anschliessend wird das Gemisch in Eis gekühlt und abfiltriert, worauf man das Filtrat auf pH 1,5 einstellt. Es fällt ein Feststoff aus. Der Feststoff wird abfiltriert, .mit verdünnter Säure (pH 1,5) gewaschen und an der Luft getrocknet, und hierbei erhält man ein hell-lederfarbenes Pulver (3,60 g). Dieses Pulver wird in 15 ml eines 2:1-Gemisches aus Wasser und Methanol bei einem pH-Wert von 6,5 gelöst. Anschliessend dampft man das Gemisch auf einen Rotationsverdampfer auf ein Ideines Volumen (etwa 3 ml) ein, wobei Isopropylalkohol zugegeben wird, um eine Schaumbildung am Ende des Eindampfens zu vermeiden. Die dabei zurückbleibende Lösung wird auf eine Sephadex G-10 (54 g)-Säule gegeben und mit Wasser eluiert, wobei die erste Fraktion 25 ml beträgt und alle anschliessenden Fraktionen etwa 15 ml ausmachen. Die Fraktionen 5 bis 8 werden vereinigt, und der pH-Wert dieses Gemisches wird durch Zugabe von verdünnter Chlorwasserstoffsäure auf 1,5 eingestellt. Das dabei ausfallende Produkt wird durch Fütrieren abgetrennt, mit verdünnter Säure (pH 1,5) gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man 2,19 g 7-alpha-(tert.-Butoxycarbo-nylamino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbon-säure in Form eines lederfarbenen Pulvers erhält.

NMR, DMSO de: 9,18 (d, 1H, 7ß-NH); 7,3 (bm, 5H, CeHs); 5,71 (q, 1H, 7alpha-H); 4,05 (m, 2H, 3-CH2); 3,55 (m, 2H, 2-CH2); 3,27 (s, 3H, Triazin N-CH3) und 1,36 ppm (b, 9H, t-CtHs).

Beispiel 2

Das nach Beispiel 1 erhaltene Produkt (404 mg) wird in 4,5 ml Acetonitril gerührt, wobei man jedoch keine vollständige Auflösung erhält. Sodann wird p-Toluolsulfonsäure (300 mg) zugesetzt, wobei man innerhalb von 5 Minuten eine saubere Lösung hat und sich dann ein Feststoff abzutrennen beginnt. Nach 1,5 Stunden wird Wasser (0,5 ml) zugegeben, und man stellt den pH-Wert des Gemisches durch Zusatz von gesättigter Ammoniumcarbonatlösung auf 5,0 ein. Ein grösserer Teil des Acetonitrils wird auf einem Rotationsverdampfer entfernt, und den dabei erhaltenen Rückstand versetzt man unter Rühren mit soviel Isopropylalkohol, bis sich ein leichter Niederschlag gebildet hat. Der Niederschlag wird unter Verwendung einer Filterhilfe abfiltriert. Während man die Lösung durch die Filterhilfe schickt, kommt es anscheinend zu einer weiteren Ausfällung. Das dabei erhaltene Filtrat wird gerührt und zur Bildung eines weiteren Niederschlags mit Isopropylalkohol verdünnt, und dieser Niederschlag wird abfiltriert, mit einem Gemisch aus Isopropylalkohol und Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man ein lederfarbenes Pulver (0,18 g) erhält. Dieses Pulver wird mit einem ähnlichen Material aus einem grösseren Ansatz (2,0 g) vermischt, wodurch man insgesamt 1,23 g Material erhält. Das Material wird in der Kälte in einem Gemisch aus 30 ml Wasser und 30 ml Methanol gerührt. Durch Zugabe von 1 n wässriger Natriumhydroxidlösung stellt man den pH-Wert des Gemisches langsam auf 7,0 ein. Eine geringe Menge an unlöslichem Material wird durch Filtrieren abgetrennt. Das Filtrat wird auf einem Rotationsverdampfer auf etwa 5 ml eingeengt, wobei man zum Ende des Eindampfens hin Isopropylalkohol verwendet, um eine Schaumbildung zu vermeiden. Die dabei zurückbleibende Lösung wird in eine Sephadex G-10-Säule (28 g, 1,5 cm) in Wasser gegeben, wobei man Fraktionen mit jeweils 25 ml auffängt und Wasser als Eluiermittel verwendet. Die Fraktionen 3 bis 9 werden vereinigt. Der pH-Wert der vereinigten Fraktionen wird auf 3,5 eingestellt, und das dabei ausfallende Produkt wird durch Fütrieren abgetrennt. Der erhaltene Feststoff wird mit Wasser gewaschen, das man vorher durch Zugabe von Chlorwasserstoffsäure auf pH 3,6 angesäuert hat, und dann an der Luft getrocknet, wodurch man 620 mg 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-

12

s

10

15

20

25

30

35

40

45

50

SS

60

65

13

616 683

6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-ce-phem-4-carbonsäure in Form eines hellbraunen Pulvers erhält.

NMR, TFA di: 7,58 (b, 5H, CeHs); 5,96 (d, 1H, 7alpha-H),

5.57 (s, 1H, CôHs-CH); 5,21 (d, 1H, 6alpha-H), s 4,43 (q, 2H, 3-CH2); 3,77 (b, 2H, 2-CH2) und

3.58 ppm (s, 3H, Triazin N—CH3).

Beispiel 3 10

45 ml Wasser werden mit 2,39 g 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin (15 mMol) versetzt. Das Gemisch, das einen pH-Wert von 2,8 hat, wird gerührt, und anschliessend stellt man den pH-Wert des Gemisches durch Zugabe von 13,4 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 15 7,25 ein. Sodann wird 7-Mandelamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure (6,79 g, 15 mMol) zugegeben. Das auf diese Weise erhaltene Gemisch hat einen pH-Wert von 3,2. Der pH-Wert des Gemisches wird anschliessend durch sorgfältige Zugabe von 14,8 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 7,2 20 erhöht. Das erhaltene Gemisch wird 4,25 Stunden auf 55°C erhitzt, und während dieser Zeit ändert sich der pH-Wert des Gemisches auf 5,85. Der pH-Wert wird dann durch Zusatz von 0,7 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 7,17 angehoben. Es wird 14,25 Stunden weiter erhitzt, und während dieser Zeit 2s fällt der pH-Wert des Gemisches auf 5,99. Das Gemisch wird anschliessend durch Zugabe von 1,45 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf pH 7,09 eingestellt. Nach insgesamt 20stündigem Erhitzen wird das Gemisch in einem Eisbad gekühlt und mit etwa 120 ml Wasser verdünnt, worauf man den pH-Wert 30 durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure unter starkem Rühren auf 1,5 einstellt. Der dabei anfallende Niederschlag wird abfiltriert, mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure (pH 1,5) gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man ein weissliches Pulver (5,28 g) erhält. 35

Das obige Material wird in Wasser (40 ml) gerührt, und während dieser Zeit stellt man den pH-Wert des Gemisches durch Zugabe von 1 n Natriumhydroxidlösung auf 6,7 ein. Die erhaltene Lösung wird unter Zusatz von Isopropylalkohol auf einem Rotationsverdampf er eingeengt, bis der Isopropylalko- 40 hol entfernt ist. Das Endvolumen des Gemisches beträgt etwa 10 ml. Das Gemisch wird dann auf eine Sephadex G-10-Säule (110 g, 2,5 cm) in Wasser gegeben. Die Säule wird mit Wasser eluiert, wobei Fraktionen mit jeweils 15 bis 16 ml gesammelt werden. Es werden 4 Fraktionen oder Kombinationen von Frak- 4s tionen hergestellt, nämlich die Fraktionen 5 bis 6, die Fraktionen 7 bis 8, die Fraktion 9 und die Fraktionen 10 bis 12. Jede dieser Fraktionen wird in der Kälte gerührt, wobei man den pH-Wert durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure jeweils auf 1,5 einstellt. Hierbei bildet sich in jeder Fraktion ein Niederschlag, so der jeweils durch Filtrieren gesammelt, mit verdünnter Säure (pH 1,5) gewaschen und an der Luft getrocknet wird, wodurch man weissliche Pulver erhält, nämlich 1,26 g Material aus den Fraktionen 5 bis 6,0,84 g Material aus den Fraktionen 7 bis 8, 0,31 g Material aus der Fraktion 9 und 0,41 g aus den Fraktio- ss nen 10 bis 12. Die dünnschichtchromatographische Untersuchung (TLC) zeigt, dass die einzelnen Produkte miteinander identisch sind, und sie werden daher vereinigt, wodurch man 2,82 g eines weisslichen Pulvers erhält.

Dieses Material wird in Wasser gelöst, worauf man die 60 Lösung auf pH 1,5 ansäuert. Der dabei entstandene Niederschlag wird abfiltriert und an der Luft getrocknet. Man erhält ein weissliches Pulver. Das Pulver wird in 25 ml Tetrahydrofu-ran gelöst, und unter Rühren wird dann soviel Isopropylalkohol zugesetzt, bis man ein Gesamtvolumen von 200 ml hat. 65 Das erhaltene Gemisch wird filtriert. Das Filtrat versetzt man mit 50 ml Isopropylalkohol. Das Gemisch wird anschliessend gerührt und erneut filtriert. Das Filtrat wird zur Trockne eingedampft, und den Rückstand löst man in Wasser bei pH 7. Die Lösung wird auf pH 1,5 angesäuert, filtriert und an der Luft getrocknet, wodurch man 7-Mandelamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure als das gewünschte Produkt erhält.

NMR, DMSO de: 8,69 (d, 1H, 7ß-NH); 7,42 (m, 5H, CeHs);

5,75 (q, 1H, 7alpha-H); 5,15 (s, IH, CHOH); 4,13 (m, 2H, 3-CH2) und 3,31 (s, 3H,

Triazin N-CH3).

Beispiel 4

20 ml Wasser werden mit 3,46 g 7-Formamido-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure (12,0 mMol) und 2,0 g 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin (12,55 mMol) versetzt. Das erhaltene Gemisch wird gerührt und langsam mit 1 n Natriumhydroxidlösung versetzt, bis der pH-Wert konstant bei 7,0 bleibt. Hierauf wird das erhaltene Gemisch bei etwa 55°C über eine Zeitspanne von 26 Stunden gerührt. Die erhaltene Lösung wird auf 20 ml eingeengt und durch Zugabe von 3 n Chlorwasserstoffsäure unter Kühlen auf pH 1,2 angesäuert. Der dabei anfallende Niederschlag wird abfiltriert und zum Trocknen unter Vakuum sofort in einen Exsikkator gegeben. Das getrocknete Material (2,75 g) wird in einem Mörser vermählen und dreimal mit je 150 ml siedendem Isopropylalkohol behandelt. Die Isopropyl-alkohollösung wird zur Trockne eingedampft, worauf man den Rückstand zweimal mit je 30 ml Äthylacetat behandelt. Das unlösliche Material wird abfiltriert, mit Äthylacetat gewaschen und getrocknet, wodurch man 1,56 g 7-Formamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält.

NMR, DMSO dô-DzO: 8,24 (s, IH, OC-H); 5,79 (d, 1H, 7aIpha-H); 5,14 (d, 1H, 6alpha-H); 3,73 (b, 2H, 2-CH2) und 3,40 ppm (s, 3H, Triazin N-CHa).

Beispiel 5

Das nach Beispiel 4 erhaltene Produkt (0,74 g) wird in 12 ml trockenem Methanol gerührt und es werden 1,5 ml konzentrierte Chlorwasserstoffsäure zugegeben, wobei es zu einer völligen Auflösung kommt. Nach kurzer Zeit beginnt ein weisser Feststoff auszufallen. Es wird 1,7 Stunden weitergerührt, wobei sich das Gemisch unter Bildung eines weissen Niederschlags verdickt. Der Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet. Bei dem auf diese Weise erhaltenen Produkt (0,346 g) handelt es sich der dünnschichtchromatographischen Analyse zufolge um hochreines 7-Amino-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-ce-phem-4-carbonsäure-Hydrochlorid.

NMR, DMSO Dê: 5,19 (q, 2H, 7alpha-H und 6alpha-H);

4,19 (m, 2H, 3-CH2); 3,77 (b, 2H, 2-CH2) und 3,31 ppm (s, 3H, Triazin N—CH3).

Beispiel 6

36 ml Wasser werden mit 1,44 g (9 mMol) 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin versetzt. Der pH-Wert des dabei erhaltenen Gemisches beträgt 2,9, und er wird durch Zugabe von 8,7 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 7,20 erhöht. Das Gemisch versetzt man anschliessend mit 3,77 g (9 mMol) 7-(2-Thienyl)acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure-Natriumsalz. Das auf diese Weise erhaltene Gemisch hat einen pH-Wert von 6,8, und dieser pH-Wert wird durch Zusatz von 2 Tropfen 1 n Natriumhydroxid

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lösung auf 7,12 angehoben. Das Gemisch wird 4,25 Stunden bei 55°C gerührt, wobei der pH-Wert auf 6,03 fällt. Durch Zugabe von 0,3 ml 1 n Natriumhydroxidlösung wird der pH-Wert auf 7,10 angehoben. Das Gemisch wird weitere 14,25 Stunden auf eine Temperatur von 55°C erhitzt, und während dieser Zeit fällt der pH-Wert auf 6,02. Anschliessend stellt man den pH-Wert durch Zugabe von 0,8 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 7,09 ein und erhitzt weitere 1,5 Stunden (die gesamte Erhitzungszeit bei 55°C beträgt 20 Stunden). Das auf diese Weise erhaltene Reaktionsgemisch wird dann in Eis-Wasser eingerührt, und man senkt den pH-Wert dieses Gemisches durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf 1,5. Der dabei entstehende Feststoff wird abfiltriert, mit verdünnter Säure (pH 1,5) gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man ein lederfarbenes Pulver (3,51 g) erhält.

Der obige Feststoff wird in 25 ml Wasser eingerührt, worauf langsam 7 ml Methanol zugegeben werden. Der pH-Wert des erhaltenen Gemisches wird durch portionsweise Zugabe von 1 n Natriumhydroxidlösung auf 6,8 eingestellt, wobei man das erhaltene Gemisch beschallt. Die erhaltene Lösung wird auf einem Rotationsverdampfer auf etwa 5 ml eingeengt, wodurch das Methanol aus dem Gemisch entfernt wird, und das dabei anfallende Konzentrat wird auf eine Sephadex G-10-Säule (70 g, 2 cm, in Wasser) gegeben. Die Säule wird mit Wasser eluiert, wobei Fraktionen mit jeweils 10 bis 12 ml gesammelt werden. Die Fraktionen 3 bis 5, Fraktionen 6 bis 7 und Fraktionen 8 bis 10 werden jeweils vereinigt, und die dabei erhaltenen drei Teilmengen werden in der Kälte gerührt, wobei man den pH-Wert durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure jeweils auf 1,5 einstellt. Die dabei in den einzelnen Fraktionen jeweüs anfallenden drei Niederschläge werden durch Filtrieren abgetrennt, mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure (pH 1,5) gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man weiss-liche Pulver erhält, und zwar in Mengen von 2,13 g, 0,69 g und 0,17 g. Die dünnschichtchromatographische Untersuchung eines jeden Produkts zeigt, dass sie miteinander identisch sind. Die einzelnen Produkte werden daher vereinigt und unter Rühren und Kochen in einem grossen Volumen (etwa 1200 ml) Aceton gelöst, worauf man die erhaltene Lösung verdampfen lässt. Hierbei erhält man 1,943 g kristalline 7-(2-Thienyl)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

NMR, DMSO De: 9,1 (d, 1H, 7ß-NH); 7,36 und 6,95 (m, 3H, Thienyl); 5,70 (d, 1H, 7alpha-H); 5,12 (d, 1H, 6alpha-H); 4,14 (m, 2H, 3-CH2); 3,79 (bs, 2H, 7-CH2); 3,68 (m, 2H, 2-CHz) und 3,33 ppm (s, 3H, Triazin N-CH3).

Beispiel 7

20 ml Wasser werden mit 0,96 g 3-Mercapto-4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin versetzt. Der pH-Wert der erhaltenen Lösung liegt bei 2,3, und er wird durch Zugabe von 5 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 6,5 angehoben. Das Gemisch wird anschliessend mit 2,09 g (5 mMol) 7-(2-Thienyl)-acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbon-säure-Natriumsalz versetzt. Der pH-Wert der erhaltenen Lösung liegt bei 5,7, und er wird dann durch Zugabe von 1 n Natriumhydroxidlösung auf 7,2 erhöht. Die dabei erhaltene Lösung wird über insgesamt 18 Stunden bei einer Temperatur von 60°C gerührt, wobei ihr End-pH-Wert bei 5,9 liegt. Das Gemisch wird dann in Eis gekühlt, gerührt und auf etwa 10 ml verdünnt. Sodann stellt man den pH-Wert des erhaltenen Gemisches durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf 1,5 ein. Der dabei ausfallende Feststoff wird abfiltriert, mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure (pH 1,5) gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man ein weissliches Pulver

(2,01 g) erhält. Dieses Material wird bei einem pH-Wert von 6,8 in 20 ml eines l:l-Gemisches aus Wasser und Methanol gelöst. Die Lösung wird auf einem Rotationsverdampfer auf ein geringes Volumen (etwa 3 ml) eingedampft, und die dabei erhaltene restliche Lösung gibt man auf eine Sephadex G-10-Säule (40 g, 1,6 cm Säulendurchmesser). Die Säule wird mit Wasser eluiert, wobei die erste Fraktion etwa 18 ml beträgt und die nachfolgenden Fraktionen etwa 5 ml ausmachen. Die Fraktionen 4 bis 11 werden vereinigt, worauf man den pH-Wert dieses Gemisches durch Zugabe verdünnter Chlorwasserstoffsäure auf 1,5 erniedrigt und auf diese Weise 1,171 g Feststoff erhält. Der Feststoff wird in etwa 30 ml eines 3:1-Gemi-sches aus Aceton und Methanol gelöst. Zinn Eindampfen der Lösung bläst man dann über die Lösungsoberfläche Luft. Die auf diese Weise anfallenden Kristalle von 7-(2-Thienyl)aceta-mido-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure werden abfiltriert und in Aceton gewaschen.

NMR, DMSO D6-D2O: 7,46 und 6,96 (m, 3H, Thienyl);

5,67 (d, 1H, 7alpha-H); 5,08 (d, 1H, 6alpha-H); 4,5-3,5 (bm, 8H, 7-CH2, 2-CH2,3-CH2 und Triazin N-CH2) und 1,21 ppm (m, 3H, CH2—CH3).

Beispiel 8

12 ml Wasser werden unter Rühren mit 531 mg (3 mMol) 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin versetzt. Der pH-Wert des erhaltenen Gemisches liegt bei 2,3, und er wird durch Zugabe von 2,9 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 6,5 eingestellt. Sodann gibt man unter Rühren 7-(2,5-Dichlorphenylthio)acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure (1,54 g, 3 mMol) zu, wodurch eine gelatineartige Masse entsteht. Das Gemisch wird auf 60°C erhitzt, wodurch alles in Lösung geht. Anschliessend stellt man den pH-Wert des Gemisches bei dieser Temperatur auf 7,0 ein und hält das Gemisch weitere 19 Stunden bei diesen Bedingungen. Nach Ablauf der ersten 16 Stunden ist das Gemisch zäh und gelatineartig geworden, so dass der Rührer blockiert. Das Gemisch wird daher mit einem Spatel gründlich durchmischt, wobei man ohne weiteres Rühren über die restlichen 3 Stunden erhitzt. Nach beendetem Erhitzen wird das Gemisch in einem Eisbad gekühlt und auf pH 1,5 angesäuert. Das Gemisch wird durch Zugabe von etwa 100 ml Wasser in fliess-fähigem Zustand gehalten. Es wird anschliessend bei einem pH-Wert von 1,5 bei Raumtemperatur etwa 1,5 Stunden gerührt, worauf man das Gemisch filtriert, den Rückstand mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure (pH 1,5) wäscht und schliesslich an der Luft trocknet, wodurch ein cremefarbenes Pulver anfällt. Das Pulver wird in Tetrahydrofuran (THF) gelöst, worauf man das Ganze filtriert und dann mit Äthanol verdünnt. Die erhaltene Lösung wird in einen Luftstrom gebracht, wodurch zuerst ein Feststoff und dann ein gelber Gummi ausfällt. Der Gummi wird mit einem Spatel entfernt. Das erhaltene Konzentrat wird filtriert, und nach Waschen des dabei anfallenden Produkts mit Äthanol und Trocknen an der Luft erhält man einen weisslichen Feststoff (861 mg). Durch Wiederholung des Umkristallisationsverfahrens erhält man 707 mg 7-(2,5-Dichlorphenylthio)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure in Form eines weisslichen Pulvers.

NMR, DMSO d6-D20: 7,4 (bm, 4H, 2,5-Dichlorphenyl);

5,70 (d, 1H, 7alpha-H); 5,11 (d, 1H, 6alpha-H); 4,15 (b, 2H, 3-CH2); 3,92 (b, 2H, 7-CH2); 3,69 (b, 2H, 2-CH2) und 3,33 (s, 3H, Triazin N-CH3).

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Beispiel 9

12 ml Wasser werden unter Rühren mit 571 mg 3-Mer-capto-4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin versetzt. Das dabei erhaltene Gemisch hat einen pH-Wert von 2,3, und dieser wird durch Zugabe von 2,9 ml 1 n Natriumhydroxidlösung auf 6,6 angehoben. Sodann wird 7-(2,5-Dichlorphenylthio)acetamido-3-acetoxymethyl-3-ce-phem-4-carbonsäure-Natriumsalz (1,54 g, 3 mMol) zugegeben, und durch Behandeln des dabei erhaltenen Gemisches nach dem in Beispiel 8 beschriebenen Verfahren gelangt man zur 7-(2,5-Dichlorphenylthio)acetamido-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-

3-cephem-4-carbonsäure.

NMR, DMSO de-D20: 7,4 (bm, 4H, 2,5-Dichlorphenyl);

5,68 (d, 1H, 7alpha-H), 5,10 (d, 1H, 6alpha-H) und 4,5-3,5 ppm (bm, 8H, 7-CH2,2-CH2, 3-CH2 und CH3-CH2).

Beispiel 10

12 ml trockenes Tetrahydrofuran werden mit 350 mg (0,695 mMol) 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-yl-thio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure und dann mit 917 mg (7 mMol) N-Trimethylsilylacetamid versetzt. Sobald alles in Lösung gegangen ist, werden 1 ml Propylenoxid und dann 75 mg (0,75 mMol) N-(p-Chlorbenzoyl)-N-(chlorformyl)me~ thylamin in 2 ml trockenem THF zugegeben. Diese Zugabe erfolgt bei einer Temperatur von -10°C. Das erhaltene Gemisch wird dann 10 Minuten bei -10°C und anschliessend 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird dann mit Wasser (1 ml) und schliesslich mit 30 ml wässriger Natriumbicarbonatlösung versetzt. Hierauf wäscht man das Gemisch mit 50 ml eines 6:1-Gemisches aus Äthylacetat und THF. Der pH-Wert der wässrigen Schicht wird durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure in Gegenwart von 50 ml eines 6:1 -Gemisches aus frischem Äthylacetat und THF auf pH 2,0 abgesenkt. Die organische Schicht wird abgetrennt und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Gemisch wird anschliessend filtriert und dann zur Trockne eingedampft. Der dabei erhaltene pulverförmige Rückstand wird in warmem Äthylacetat gelöst, worauf man die Äthylacetatlösung bis zum Trübwerden konzentriert. Im Anschluss daran wird Isopropylalkohol zugegeben, wobei man eine saubere Lösung erhält, und das Gemisch wird dann erneut bis zum Trübwerden der Lösimg konzentriert. Die konzentrierte Lösung wird über Nacht im Kühlschrank aufgehoben, wodurch man 234 mg 7-alpha-[3-(4-Chlorbenzoyl) -3 -methyl-1 -ureido]phenylacetamido- 3 - (4-me-thyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)me-thyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält.

NMR, DMSO d6-D20: 7,60 und 7,45 (zwei b, 9H, aromatisch); 5,77 (d, 1H, 7alpha-H); 5,63 (s, 1H, 7—CH); 5,05 (d, 1H, 6alpha-H); 3,66 (m, 2H, 2-CH2); 3,40 (s, 3H, Triazin N-CH3) und 3,17 ppm (s, 3H, CON(CH3)CO).

Beispiel 11

10 ml trockenes THF werden mit 379 mg (0,75 mMol) 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydro-xy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-

4-carbonsäure und 586 mg (4,5 mMol) N-Trimethylsilylacet-amid versetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nachdem alles in Lösung gegangen ist, wird 1 ml Propylenoxid zugegeben, worauf man die Lösung auf 0°C kühlt. Im Anschluss daran gibt man tropfenweise N-(o-Chlor-

benzoyl)-N-(chlorformyl)methylamin (239 mg, 1,03 mMol) zu, das in 5 ml trockenem THF gelöst ist, und das dabei erhaltene Reaktionsgemisch wird dann 3 0 Minuten bei 00 C und anschliessend 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Sodann werden 5 ml Wasser zugesetzt, worauf man das THF im Vakuum entfernt. Der dabei erhaltene Rückstand wird mit 50 ml einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung versetzt. Das dabei erhaltene Reaktionsgemisch wird mit Äthylacetat gewaschen, worauf man den pH-Wert der wässrigen Schicht durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf 2,0 absenkt. Das angesäuerte wässrige Gemisch wird anschliessend mit 100 ml eines 6:1-Gemisches aus Äthylacetat und Tetrahydrofuran extrahiert. Die organische Schicht wird abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und zur Trockne eingedampft. Der dabei erhaltene schaumartige Rückstand wird in Äthylacetat gelöst, und diese Lösung versetzt man dann mit Äther, wodurch 140 mg 7-alpha-[3-(2-Chlorbenzoyl)-

3-methyl-l-ureido]phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-

4-carbonsäure ausfallen, die durch Filtrieren gesammelt werden.

NMR, DMSO ds-D2 O: 7,54 und 7,41 (zwei b, 9H, aromatisch); 5,73 (d, 1H, 7alpha-H) 5,59 (s, 1H, 7—CH); 4,07 (m, 2H, 3-CH2); 3,58 (m, 2H, 2-CH2); 3,28 (s, 3H, Triazin N-CH3) und 2,94 ppm (s, 3H, CON(CH3)CO).

Beispiel 12

20 ml trockenes THF versetzt man mit 350 mg (0,695 mMol) 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-yIthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure und dann mit 786 mg (6 mMol) N-Trimethylsilylacetamid. Das erhaltene Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wodurch alles in Lösung geht. Sodann wird Furoyl-2-isocyanat (97,5 mg, 0,71 mMol) zugegeben, und das Reaktionsgemisch rührt man 1 Stunde bei Raumtemperatur. Die Lösung versetzt man anschliessend mit Wasser (20 ml). Das Gemisch wird bis zur beginnenden Trübung eingeengt und dann mit 40 ml wässriger Natriumbicarbonatlösung versetzt. Die Lösung wird klar, und man wäscht sie zweimal mit je 50 ml Äthylacetat. Die wässrige Schicht wird abgetrennt und durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,0 eingestellt. Die Schicht wird anschliessend zweimal mit je 50 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatextrakte werden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und zu einem schaumartigen Rückstand eingedampft. Der Rückstand wird in warmem Äthanol gelöst, und die erhaltene Äthanollösung konzentriert man bis zum Trübwerden. Die auf diese Weise konzentrierte Äthanollösung wird dann in einem Kühlschrank gekühlt und anschliessend filtriert, wodurch man 152 mg 7-aIpha-(3-FuroyI-l-ureido)phenyIacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält.

NMR, DMSO dfi: 8,03, 7,71 und 6,73 (je 1H, Furoyl);

7,46 (b, 5H, Phenyl); 5,78 (bm, 2H, 7alpha-H und 7-CH); 5,07 (d, 1H, 6alpha-H); 4,14 (b, 2H, 3—CH2); 3,61 (b, 2H, 2-CH2) und 3,32 ppm (s, 3H, Triazin N-CH3).

Beispiel 13

Aus 381 mg (1 mMol) 7-(lH-Tetrazolacetamido)-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure, 200 mg (1,2 mMol) 3-Mer-capto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin und 1,25 mMol Natriumbicarbonat in 30 ml eines Puffers vom

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pH 7 wird ein Gemisch hergestellt. Im Gemisch bleibt eine kleine Menge eines unlöslichen Feststoffs zurück, und der pH-Wert des erhaltenen Gemisches liegt bei etwa 6,6. Das Gemisch wird auf etwa 64°C erwärmt. Während der ersten Stunde steigt der pH-Wert des Gemisches auf 7,5 und er fällt dann allmählich auf 6,7. Es wird 5 Stunden weiter erhitzt, und während dieser Zeit ändert sich der pH-Wert nicht mehr. Das erhaltene Gemisch wird dann abgekühlt und mit Äthylacetat überschichtet, worauf man den pH-Wert des Gemisches durch Zusatz von 20-prozentiger Chlorwasserstoffsäure auf 2,7 erniedrigt. Die organische Schicht wird abgetrennt, und die wässrige Schicht wäscht man mit weiterem Äthylacetat. Die ursprüngliche Äthylacetatschicht und die Äthylacetatwaschlau-gen werden vereinigt, und das gesamte Gemisch wird über Magnesiumsulfat getrocknet, abfiltriert und eingedampft, wodurch man 100 mg 7-(lH-Tetrazolacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält, die bei 192-194°C schmilzt.

UV Xmax 273 (Epsilon = 14 900).

Analyse für C15H15N9O6S2:

C

H

N

Berechnet:

37,42

3,14

26,18

Gefunden:

37,20

3,26

25,96

In analoger Weise werden auch die Verbindungen 7-(p-Aminomethylphenyl)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure und

7-(alpha-Formyloxy)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-ce-phem-4-carbonsäure hergestellt.

Beispiel 14

50 ml trockenes Tetrahydrofuran werden mit 1,85 g (5 mMol) 7-Amino-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure und 3,6 ml (15 mMol) N,0-Bis-trimethylsilylacetamid versetzt. Das Gemisch wird so lange gerührt, bis alles in Lösung gegangen ist. Die Lösung wird dann auf -20°C gekühlt.

Getrennt von obigem Ansatz werden 1,97 g (5,5 mMol) N-(2-Methoxy-carbonyl-l-methyläthenyl)-4-trimethylsiloxy-phenylglycin-Natriumsalz zu einer Lösung von 0,085 g (0,5 mMol) N-Trimethylsilylsuccinimid in 75 ml trockenem Tetrahydrofuran gegeben. Das erhaltene Gemisch wird mit 6 Tropfen N,N-Dimethylbenzylamin versetzt. Die dabei erhaltene Suspension wird auf —15°C gekühlt und dann unter Rühren mit 0,52 g (5,5 Mol) Methylchlorformiat versetzt. Das Gemisch wird 15 Minuten bei einer Temperatur von -15°C gerührt und dann mit der oben hergestellten Lösung, die den Cephalospo-rinkern enthält, versetzt. Das erhaltene Reaktionsgemisch wird 2 Stunden bei einer Temperatur von -20°C und dann 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Durch Hochdruck-Flüssig-Chromatographie des obigen Reaktionsgemisches ergibt sich, dass dieses etwa 60% des gewünschten Produkts und 40% des als Ausgangsmaterial verwendeten Cephalosporinkerns enthält.

Zar Aufarbeitung des Reaktionsgemisches werden 10 ml Methanol zugegeben. Der dabei entstehende Niederschlag wird abfiltriert. Das Filtrat wird dann mit 10 ml Wasser versetzt. Das Gemisch wird anschliessend 15 Minuten gerührt, worauf man den erhaltenen Niederschlag abfiltriert. Das Filtrat wird im Vakuum auf etwa 40 ml eingedampft, und das konzentrierte Gemisch kühlt man dann über Nacht in einem

Gefrierschrank. Der hierbei entstandene Niederschlag wird abfiltriert. Der auf diese Weise erhaltene Feststoff wird in 15 ml Wasser gerührt. Durch Zugabe von 3 Tropfen konzentrierter Chlorwasserstoffsäure stellt man dann den pH-Wert des Gemisches auf 1,1 ein. Das saure Gemisch wird anschliessend 5 Minuten gerührt und dann von unlöslichem Material abfiltriert. Der pH-Wert des Fütrats wird durch Zusatz von Natriumhydroxidlösung auf 3,0 angehoben, worauf man das erhaltene Gemisch 10 Minuten bei Eisbadtemperatur rührt. Der dabei anfallende Niederschlag wird abfiltriert. Das erhaltene Filtrat wird mit einem Volumen Isopropylalkohol versetzt, worauf man das Gemisch im Vakuum auf etwa 10 ml eindampft. Die konzentrierte Lösung wird 15 Minuten in einem Eisbad gerührt und dann filtriert. Hierbei erhält man 73 mg 7-(alpha-Amino-4-hydroxyphenyl)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbsonsäure.

NMR, TFA di: 7,29 (q, 4H, p-Hydroxyphenyl); 5,86 (d, 1H, 7alpha-H); 5,52 (s, IH, 7-CH); 4,48 (q, 2H, 3-CH2) und 3,8—3,54 ppm (b, 5H, Triazin N-CHs und 2-CH2).

Beispiel 15

25 ml trockenes THF werden mit 252 mg (0,5 mMol) 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure und 650 mg (5 mMol) N-Trimethylsilylacetamid versetzt. Das Gemisch wird etwa 3 Stunden gerührt, worauf alles in Lösung gegangen ist. Die Lösung wird dann auf 0°C gekühlt und mit 76 mg (0,5 mMol) N,N'-Dimethyl-N-(chlor-formyl)harnstoff versetzt. Das erhaltene Gemisch wird 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt und dann im Vakuum zu einem Öl eingedampft. Das erhaltene Öl wird mit Wasser (20 ml) versetzt, worauf man den pH-Wert des erhaltenen Gemisches durch Zugabe von wässriger Natriumbicarbonatlösung auf 8,0 einstellt. Das dabei anfallende Gemisch wird mit Äthylacetat gewaschen, und die wässrige Schicht stellt man anschliessend durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf pH 2,0 ein. Der hierbei anfallende Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet, wodurch man 118 mg 7-alpha-[3-(N-Methylcarbonylamino)-3-methyl-l-ureido]phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält.

NMR, DMSO dfr-CDaOD: 7,43 (b, 5H, CeHs); 5,76 (d, 1H,

7alpha-H); 5,61 (s, 1H, CeHs-CH); 5,05 (d, 1H, 6alpha-H); 4,16 (m, 2H, 3-CH2); 3,64 (b, 2H, 2-CH2); 3,39 (s, 3H, Triazin N-CHa); 3,15 (s, 3H, CO-N(CH3)-CO)

und 2,75 ppm (s, 3H, CONH(CH3)).

Beispiel 16

25 ml trockenes THF werden mit 554 mg (1,1 mMol) 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyI-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure und 650 mg (5 mMol) N-Trimethylsilylacetamid versetzt. Das Gemisch wird 3 Stunden gerührt bis alles in Lösung gegangen ist. Die Lösung wird dann auf 0°C gekühlt und mit 650 mg (5 mMol) l-Chlorformylimidazolidin-2-on versetzt. Das erhaltene Gemisch wird 30 Minuten bei 0°C und anschliessend 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird dann mit Wasser (2 ml) versetzt. Anschliessend wird das Gemisch im Vakuum zu einem Öl eingedampft. Das dabei erhaltene öl versetzt man mit Wasser (25 ml) und stellt den pH-Wert schliesslich mit Natriumbicarbonatlösung auf 7,5 ein. Die Lösung wird mit Äthylacetat gewaschen, und die s

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wässrige Schicht säuert man anschliessend durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,8 an. Der erhaltene Feststoff wird abfiltriert und mit Methanol behandelt, worauf die in Methanol unlöslichen Stoffe abfiltriert werden. Die hierbei anfallende Methanollösung wird im Vakuum langsam zu einem öl eingedampft. Das Öl wird mit Wasser (25 ml) versetzt, worauf man den pH-Wert durch Zugabe von Natriumbicarbonatlösung auf 7,5 einstellt. Die Lösung wird mit Äthylacetat gewaschen, und die wässrige Schicht säuert man anschliessend durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,8 an. Der hierbei anfallende Feststoff wird abfiltriert und mit Methanol behandelt, worauf man die in Methanol unlöslichen Stoffe abfiltriert. Die erhaltene Lösung wird anschliessend im Vakuum bis zur Ausfällung langsam eingedampft. Dieser Niederschlag wird abfiltriert und getrocknet, wodurch man 92 mg 7-aIpha-(Imidazolidin-2-on-l-yIcarbonylamino)phenyl-acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält.

NMR, DMSO d6-D20: 7,50 (b, 5H, CeHs); 5,75 (d, 1H, 7alpha-H); 5,60 (s, 1H, CeHsCH); 5,02 (d, 1H, 6alpha-H)

und 3,36 ppm (s, 3H, Triazin N-CH3).

Beispiel 17

20 ml trockenes THF werden mit 554 mg (1,1 mMol) 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4 carbonsäure und 650 mg (5 mMol) N-Trimethylsilylacetamid versetzt. Das Gemisch wird etwa 3 Stunden gerührt, worauf alles in Lösung gegangen ist. Die Lösung wird auf 0°C gekühlt und mit 339 mg (1,5 mMol) l-Chlorformyl-3-methansulfonyl-imidazolidin-2-on versetzt. Das Reaktionsgemisch wird etwa 30 Minuten bei 0°C und dann etwa 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird mit Wasser (2 ml) versetzt. Die Lösung wird anschliessend im Vakuum zu einem Öl eingedampft. Sodann wird Wasser (25 ml) zugegeben und der pH-Wert des Gemisches durch Zugabe von Natriumbicarbonat auf 7,5 eingestellt. Die Lösung wird anschliessend mit Äthylacetat gewaschen, worauf man die wässrige Schicht abtrennt und mit 1 n Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,8 ansäuert. Der dabei ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und getrocknet, wodurch man 416 mg 7-alpha-(3-Methansulfonylimidazolidin-2-on-l-ylcarbonylamino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält.

NMR, DMSO d6-D20: 7,47 (b, 5H, CeHs); 5,75 (d, 1H, 7alpha-H); 5,71 (s, 1H, CsHsCH); 5,02 (d, 1H, 6alpha—H); 3,87 (b, 4H, N-CH2-CH2-N) und 3,37 ppm (b, 6H, Triazin N-CH3 und SO2CH3).

Beispiel 18

20 ml trockenes Tetrahydrofuran werden mit 1,53 g (10 mMol) Hydroxybenzotriazol und 2,57 g (10 mMol) alpha-(tert.-Butoxycarbonylamino)thien-2-ylessigsäure versetzt. Das Gemisch wird auf 0°C gekühlt und dann mit 2,06 g (10 mMol) NjN'-Dicyclohexylcarbodiimid versetzt. Das Gemisch wird über eine Zeitspanne von 2,75 Stunden unter Rühren in einem Eisbad gekühlt. Anschliessend wird das Gemisch rasch filtriert, und die dabei erhaltenen Feststoffe werden mit 10 ml trockenem Tetrahydrofuran gewaschen. Das dabei anfallende Filtrat wird in einem Eisbad aufgehoben.

60 ml trockenes Tetrahydrofuran, das 9,8 g (75 mMol) N-Tri-methylsilylacetamid enthält, werden mit 3,73 g (10 mMol) 7-Amino-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure versetzt. Das

Gemisch wird etwa 1 Stunde beschallt, und während dieser Zeit kommt es zu einer praktisch vollständigen Auflösung. Die erhaltene Lösung wird in einem Eisbad gerührt, und nach 15 Minuten gibt man diese Lösung rasch zu dem oben hergestellten Filtrat, das das Acyliermittel enthält. Das erhaltene Gemisch wird unter Kühlen in einem Eisbad 30 Minuten und anschliessend bei einer Temperato: von 32°C 3 Stunden gerührt. Die erhaltene braune Lösung wird rasch unter Rühren in Eiswasser gegossen. Anschliessend gibt man Äther zu und stellt den pH-Wert der wässrigen Phase auf 8,2 ein. Die Phasen werden voneinander getrennt, und die wässrige Phase wäscht man mit einem weiteren Volumen Äther. Die wässrige Phase wird dann zur Entfernung von restlichem Äther im Rotationsverdampfer behandelt. Die hierbei anfallende wässrige Lösung versetzt man mit Eis, und dieses Gemisch wird dann durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure unter Rühren rasch auf pH 1,8 eingestellt. Das erhaltene Gemisch wird filtriert, worauf man den angefallenen Feststoff mit verdünnter Chlorwasserstoffsäure (pH 1,8) wäscht, zuerst an der Luft und anschliessend im Vakuum trocknet. Hierbei erhält man 4,16 g 7-[alpha-(tert.-Butoxycarbonylamino)thien-2-ylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure in Form eines fahlgelbbraunen Feststoffes.

NMR, TFA di: 7,97,7,48 und 7,17 (n, 3H, Thienyl);

5,86 (b, 2H, 7alpha-H und 7-CH);

5,21 (b, 1H, 6alpha-H); 4,44 (q, 2H,

3-CH2) und 3,7—3,5 ppm

(b, 5H, 2-CH2 und Triazin N-CHs).

Beispiel 19

Das nach Beispiel 18 erhaltene Produkt (1,60 g) wird in einen mit einem Rührstab versehenen Kolben gegeben. Der Kolben wird dann in einem Eis-Aceton-Bad gekühlt. Anschliessend versetzt man den Kolbeninhalt rasch mit 60 ml Trifluoressigsäure, die man vorher in einem Eis-Aceton-Bad gekühlt hat. Das erhaltene Gemisch wird 15 Minuten gerührt, worauf es zu einer vollständigen Auflösung kommt. Durch dünnschichtchromatographische Analyse (TLC) des Gemisches zeigt sich, dass die Reaktion beendet ist. Das Reaktionsgemisch wird dann in einem Rotationsverdampfer zu einem Gummi eingedampft. Der dabei erhaltene Gummi wird mit Ähtylacetat (60 ml) versetzt, worauf man das Gemisch beschallt und so zu einem Pulver gelangt. Dieses Pulver wird abfiltriert, mit Äthylacetat gewaschen und an der Luft getrocknet. Hierbei erhält man 1,55 g eines hellbraunen Pulvers. Das Pulver wird mit einem Gemisch aus 75 ml Wasser und 10 ml Äthanol versetzt. Das erhaltene Gemisch wird beschallt, und den pH-Wert dieses Gemisches stellt man auf 1,4 ein. Das Gemisch wird filtriert, worauf man den pH-Wert des Filtrats auf 3,7 einstellt. Das dabei anfallende Gemisch wird erneut filtriert, und der erhaltene Feststoff wird mit verdünnter Säure (pH 3,8) gewaschen, die man dem Filtrat zusetzt. Das Filtrat wird dann mit Isopropylalkohol versetzt, worauf man das Ganze auf einem Rotationsverdampfer auf ein kleines Volumen einengt. Zum Rückstand wird weiterer Isopropylalkohol gegeben, und das Gemisch wird anschliessend filtriert. Der gesammelte Feststoff wird mit einem l:l-Gemisch aus Wasser und Isopropylalkohol gewaschen, das man auf einem pH-Wert von 3,8 hält. Durch Trocknen des dabei anfallenden Feststoffes erhält man 280 mg 7-[alpha-(Amino)thien-2-ylacetamido]-3 -(4-methyl-5 -oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

NMR, DMSO d6-D20: 7,59, 7,25 und 7,08 (m, 3H, Thienyl);

5,66 (d, 1H, 7alpha-H); 5,38 (s, 1H,

7-CH); 4,99 (d, 1H, 6alpha-H) und

3,28 ppm (bs, 3H, Triazin N-CH3).

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Beispiel 20

24 ml trockenes Tetrahydrofuran werden mit 408 mg (0,8 mMol) des Produkts gemäss Beispiel 19 sowie mit 917 mg (7 mMol) N-Trimethylsilylacetamid versetzt. Innerhalb von 10 Minuten hat man eine saubere Lösung, und diese Lösung wird nach 15 Minuten in ein Eisbad gegeben. Sodann werden Propylenoxid (1,6 ml) und Natriumbicarbonat (65 mg) und anschliessend 145 mg (0,96 mMol, 1,2 Moläquivalent) N-Chlorformyl-NjN'-dimethylharnstoff zugegeben. Das erhaltene Gemisch wird aus dem Eisbad entfernt und 20 Minuten bei Raumtemperatur aufgehoben. Anschliessend wird das Gemisch im Rotationsverdampfer auf ein kleines Volumen (etwa 10 ml) eingeengt und mit Eiswasser versetzt. Die erhaltene Suspension wird gerührt, und den pH-Wert stellt man auf 6,5 ein. Die Lösung wird dann mit 2 Volumina Äther gewaschen, worauf man die wässrige Phase zur Entfernung des Äthers auf dem Rotationsverdampfer einengt. Das wässrige Gemisch wird auf pH 1,7 angesäuert, worauf man den dabei anfallenden Feststoff abfiltriert und auf dem Filter teilweise trocknet. Das feuchte Produkt wird anschliessend im Vakuum getrocknet, wodurch man 96 mg 7-[alpha-3-Methyl-3-methyl-aminocarbonyl-l-ureido)thien-2-ylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-2-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure in Form eines fahlgelbbraunen Pulvers erhält.

NMR, DMSO d&-D2O: 7,43, 7,10 und 7,01 (m, 3H, Thienyl);

5,79 (s, 1H, 7-CH); 5,70 (d, 1H, 7alpha-H); 5,05 (d, 1H, 6alpha-H); 3,65 (m, 2H, 2-CH2); 3,27 (s, 3H, Triazin N-CH3); 3,08 (s, 3H, CO-N(CH3)-CO) und 2,67 ppm (s, 3H, CONH(CH3)).

Beispiel 21

Das in Beispiel 20 beschriebene Verfahren wird wiederholt, wobei man anstelle des N-Chlorformyl-N,N'-dimethyl-harnstoffs jedoch 217 mg (0,96 mMol) l-Chlorformyl-3-methansulfonylimidazolidin-2-on verwendet. Hierbei erhält man als Produkt 242 mg 7-[alpha-(3-Methansulfonyl-imidazolidin-2-on-l-yl-carbonylamino)thienyl-2-ylacet-amido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-tri-azin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

NMR, DMSO de: 9,52 (d, 1H, NH); 8,72 (d, 1H, NH);

7,45,7,10 und 6,99 (m, 3H, Thienyl); 5,88 (d, 1H, 7-CH); 5,74 (q, 1H, 7alpha-H); 5,08 (d, 1H, 6alpha-H), 4,08 (m, 2H, 3-CH2), 3,78 (b, 4H, N-CH2-CH2-N), 3,60 (m, 2H, 2-CH2); 3,34 und 3,28 ppm (zwei s, 6H Triazin, N-CH3 und SO2CH3).

Beispiel 22

15 ml trockenes Tetrahydrofuran werden mit 317 mg (0,5 mMol) 7-(alpha-Amino-4-hydroxyphenylacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-Trifluoracetatsalz versetzt. Zur erhaltenen Suspension wird N-Trimethylsilylacetamid (0,59 g) gegeben. Das Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wobei sich eine saubere Lösung bildet. Anschliessend wird das Gemisch auf 0°C gekühlt und mit 50 mg Triäthylamin sowie 1 ml Propylenoxid versetzt. Hierauf werden zu dem Gemisch 123 mg (0,5 mMol) N-(o-Chlorben-zoyl)-N-(chlorformyl)-methylamin gegeben. Die erhaltene Lösung wird 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann filtriert. Das Filtrat wird mit Wasser (1 ml) versetzt, wobei sich jedoch kein Niederschlag bildet. Das Gemisch wird dann im Vakuum auf etwa 10 ml eingeengt und dann mit 50 ml Äthylacetat sowie anschliessend mit 50 ml Wasser versetzt. Der pH-Wert des Gemisches wird durch Zugabe von Natriumbicarbonat auf 7,5 angehoben. Die Äthylacetatschicht wird von der wässrigen Schicht getrennt. Die wässrige Schicht wird mit frischem Äthylacetat (50 ml) und THF (15 ml) versetzt, worauf man den pH-Wert der wässrigen Schicht durch Zugabe von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf 2,5 erniedrigt. Die organische Schicht wird von der wässrigen Schicht getrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Das dabei erhaltene Filtrat wird im Vakuum auf etwa 10 ml eingeengt, und hierzu werden dann 20 ml Äther gegeben. Durch Filtrieren des Reaktionsgemisches erhält man 150 mg 7-[alpha-[3-(2-Chlorbenzoyl)-3-methyl-l-ureido]-4-hydroxyphenylaceta-mido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-tria-zin-3-ylthio)methyI-3-cephem-4-carbonsäure.

NMR, DMSO d6: 7,35 (b, 4H, o-Chlorbenzyl); 6,96 (q,

4H,p-Hydroxyphenyl); 5,83 (q, 1H, 7alpha-H); 5,47 (d, 1H, 7-CH); 4,99 (d, 1H, 6alpha-H); 4,13 (m, 2H, 3-CH2), 3,56 (m, 2H, 2-CH2) und 3,3 ppm (b, 6H, Triazin N-CBb und CO-N(CHs)-CO).

Beispiel 23

25 ml trockenes THF, die 1,18 g (9 mMol) N-Trimethylsilylacetamid enthalten, werden mit 634 mg (1,0 mMol) 7-(alpha-Amino-4-hydroxyphenylacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure-Trifluoracetatsalz versetzt. Das zugesetzte Cephalosporin löst sich vollständig innerhalb von 15 Minuten. Die erhaltene Lösung wird in Eis/Aceton auf 0°C gekühlt und mit 84 mg (1 mMol) Natriumbicarbonat und anschliessend mit 1 ml Propylenoxid versetzt. Zur erhaltenen Lösung werden dann 226 mg (1 mMol) l-Chlorformyl-3-methansulfonylimidazolidin-2-on gegeben. Das Reaktionsgemisch wird auf Raumtemperatur erwärmt und 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Sodann wird das Reaktionsgemisch filtriert und das Filtrat mit 1 ml Wasser versetzt. Es kommt zu keiner Ausfällung. Das Gemisch wird anschliessend im Vakuum auf etwa 10 ml eingeengt, worauf man 100 ml eines 6:1-Gemisches aus Äthylacetat und THF zusammen mit 50 ml Wasser zugibt. Der pH-Wert des Gemisches wird durch Zugabe von Natriumbicarbonat auf 7,0 angehoben. Die wässrige Schicht wird von der organischen Schicht getrennt, worauf man den pH-Wert der wässrigen Schicht durch Zusatz von 1 n Chlorwasserstoffsäure auf 2,0 erniedrigt. Das Gemisch wird filtriert, worauf man den dabei erhaltenen Feststoff mit Isopropylalkohol wäscht und trocknet. Auf diese Weise erhält man 382 mg 7-[alpha-(3-Methansulfonylimidazolidin-2-on-l-ylcarbonylamino)-4-hydroxyphenylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

NMR, TFA di: 7,27 (q, 4H, p-Hydroxyphenyl); 5,90

(d, 1H, 7alpha-H); 5,73 (s, 1H, 7-CH); 5,19 (d, 1H, 6alpha-H); 4,46 (q, 2H, 3-CH2); 4,08 (b, 4H, N-CH2-CH2-N); 3,7-3,5 (b, 5H, 2—CH2 und Triazin N-CH3) und 3,44 ppm (s, 3H, SO2CH3).

Beispiel 24

Nach dem in Beispiel 22 beschriebenen Verfahren setzt man 1 mMol Cephalosporin mit 151 mg (1 mMol) N-Chlor-formyl-NjN'-dimethylharnstoff in Gegenwart von Natrium-

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bicarbonat anstelle des bei Beispiel 22 verwendeten Triäthyl-amins um, wodurch man 154 mg 7-[alpha-(3-Methylamino-carbonyl-3-methyl-l-ureido)-4-hydroxyphenylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhält.

NMR, DMSO d6-D20: 7,08 (q, 4H, p-Hydroxyphenyl); 5,72 (d, 1H, 7alpha-H); 5,41 (s, 1H, 7-CH); 5,03 (d, 1H, 6alpha-H); 4,1 (m, 3-CH2); 3,36 (s, 3H, Triazin N-CHs); 3,13 (s, 3H, CO-N (CH3)CO) und 2,73 ppm (s, 3H, CONH(CH3)).

Beispiel 25

Nach dem in Beispiel 24 beschriebenen Verfahren, wobei man als Acyliermittel jedoch 1-Chlorformylimidazolidin-2-on verwendet, erhält man 120 mg 7-[alpha-(Imidazolidin-s 2-on-l-ylcarbonylamino)-4-hydroxyphenylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure.

NMR, DMSO dô-D20: 7,13 (q, 4H, p-Hydroxyphenyl); 5,79 10 (d, 1H, 7alpha-H); 5,51 (s, 1H,

7-CH); 5,06 (d, 1H, 6alpha-H) und 3,39 ppm (s, 3H, Triazin N-CH3).

B

Claims (28)

616 683

1,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene Verbindung mit l-Qilorformylimidazolidin-2-on acyliert.

1,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene 7-(alpha-Amino)phenylacetamidoverbindung mit l-Chlorformyl-3-methansulfonylimidazolidin-2-on acyliert.

1 I

I

R

worin Ri obige Bedeutung besitzt, gegebenenfalls unter inter-60 mediärem Schutz der Amino- und/oder Carboxygruppen umsetzt.

2-ylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)thien-2-ylacetamido-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure mit

2. Verfahren nach Ansprach 1, dadurch gekennzeichnet, dass man die erhaltenen Verbindungen der Formel I, bei denen R für Wasserstoff steht oder Q Amino bedeutet, zu

«s Acylderivaten umsetzt, die in Anspruch 1 genannt sind.

/—(2^-ch8-

worin R und R2 die oben genannten Bedeutungen haben, mit einem Triazinylthioderivat der Formel

50

bedeutet, in der a und a' unabhängig voneinander Wasserstoff, Ci-Gt-Alkyl, Ci-C»-Alkoxy, Halogen, Hydroxy oder Aminomethyl sind, Z Sauerstoff oder Schwefel bedeutet und der Index m für 0 oder 1 steht,

oder worin

R' einen Rest der Formel

P-CH-

I

O

bedeutet, worin

P für 2-Thienyl, 3-Thienyl, l-Tetrazyl oder Phenyl der Formel

HS*

/\/°H

2 3 J-J-

$:

2

A

Lor

N 1

R

.OH

0

worin

Ri für Wasserstoff oder Niederalkyl steht,

R2 Wasserstoff, ein Alkalimetallkation oder eine leicht abspaltbare esterbildende Gruppe bedeutet und R Wasserstoff oder ein Rest der Formel

O

II

R'-C- ist,

worin

R' Wasserstoff, Ci-C6-Alkyl, Ci-C3-Halogenalkyl, C1-C3-Cyanoalkyl, Ci-C3-Azidoalkyl, Ci-C3-Hydroxyalkyl, p-Nitro-benzyloxy, 4-Amino-4-carboxybutyl oder 4-substituiertes Amino-4-carboxybutylester der Formel

O

II

A-0-C-CH-(CH2)2-CH2-NH

I

A'

worin

A Diphenylmethyl, p-Nitrobenzyl, Benzyl, 2,2,2-Trichlor-äthyl, tert.-Butyl oder p-Methoxybenzyl ist und A' für C2-C4-Alkanoyl, C2-C4-Halogenalkanoyl, Benzoyl, Halogenbenzoyl, 2,4-Dinitrophenyl oder Phthaloyl steht,

oder worin

R' einen Rest der Formel

-TV

steht, in der a und a' die oben angegebenen Bedeutungen haben und

Q Hydroxy, Formyloxy, Acetoxy, Carboxy, Sulfo, Amino oder io -NHY ist, worin

Y Benzyloxycarbonyl, tert.-Butyloxycarbonyl,

O O R'" o

II II I II

-C-NH-C-NH2 oder-C-N C-V

II

NH

IS

bedeutet, worin 20 R'" Wasserstoff oder Ci-C3-Alkyl ist und

V für Phenyl, Halogenphenyl, Furyl, Mono- oder Di-(Ci-C3-alkyl)amino, Mono- oder Diphenylamino steht, oder worin die Substituenten R'" und V zusammen einen Heterocyclus bilden, wobei der Substituent R'" für eine Brücke der Formel 25 -(CH2)n- steht, in der n den Wert 2 oder 3 besitzt, und V einen Rest der Formel -NR""- bedeutet, in der R';// Wasserstoff, Methansulfonyl oder Ci-C3-Alkyl ist,

oder worin der Substituent R' einen Rest der Formel R//-CH2- bedeutet, in der R" für 2-Thienyl, 3-Thienyl, 30 2-Furyl, 2-Oxazyl, 2-Thiazyl, l-Tetrazyl, Benzotriazolyl, l,3,4-Thiadiazolyl-2-thio, l,2,5-Thiadiazolyl-3-thio, l,3,4-Oxadiazolyl-2-thia, Pyridylthia, l-(4-Cyano-1,2,3-triazolyl oder l-(3-Cyano)-l,2,4-triazolyl steht,

dadurch gekennzeichnet, dass man ein 3-Acetoxymethylcepha-3s losporin der Formel II

40

RNH-f ¥

/-ch -

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« N. À—CH -O-C-CH TT

2

PATENTANSPRÜCHE 1. Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinen der Formel I

RNH-

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3

s i«

3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-tri-azin umsetzt und die dabei erhaltene Verbindung mit N-Chlorformyl-N,N/-dimethylharnstoff acyliert.

3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-

3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-

3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-Amino-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-

Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt, die dabei erhaltene 7-Aminoverbindung mit einem aktiven Derivat von 4-Hydroxyphenylglycin acyliert und anschliessend die Aminoschutzgruppe abspaltet.

3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in den erhaltenen Verbindungen der Formel IR Formyl bedeutet.

4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene Verbindung mit N-Chlorformyl-N,N'-dimethylharnstoff acyliert

4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)thien-2-ylacetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-

4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene 7-(alpha-Amino)-phenyIacet-amidoverbindung mit l-Chlorformylimidazolidin-2-on acyliert.

4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene 7-(alpha-Amino)phenylacet-amidoverbindung mit N-(o-Chlorbenzoyl)-N-(chlorformyl)-methylamin acyliert.

4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Formyloxy)phenylacetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin umsetzt.

4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-car-bonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-alpha-(tert.-Butoxycarbonylamino)phenylacetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und anschliessend die Aminoschutzgruppe entfernt.

4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(2,5-Di-chlorphenylthio)acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-l,2,4-triazin umsetzt.

4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in den erhaltenen Verbindungen der Formel IR Formyl und Ri Methyl bedeuten.

5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)-phenylacetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene 7-(alpha-Amino)phenylacetamidoverbindung mit Furoyl-2-isocyanat acyliert.

5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt.

5. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-Amino-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-Amino-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-

6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man

6. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(2,5-Dichlorphenylthio)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(2,5-Di-chlorphenylthio)acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-car~ bonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-l,2,4-triazin umsetzt.

6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt.

7-Amino-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt, die dabei erhaltene Verbindung mit alpha-(tert.-Butoxycarbonylamino)thien-2-ylessigsäure acyliert und anschliessend die Aminoschutzgruppe entfernt.

7-Mandelamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure,

dadurch gekennzeichnet, dass man 7-Mandelamido-3-acetoxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-

7. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(2,5-Dichlorphenylthio)acetamido-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hy-ckoxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-

8. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-

9. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von

10. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-(alpha-Amino-4-hydroxyphenyl)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-

11. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-[alpha-(Amino)thien-2-ylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-

12. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(alpha-Formyloxy)phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-

13. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-alpha-[3-(4-Chlorbenzoyl)-3-methyl-l-ureido]phenylacet-amido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-tri-azin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekeimzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-

616 683

methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-verbindung mit N-(p-Chlorbenzoyl)-N-(chlorformyl)methyl-amin acyliert.

14. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-alpha-[3-(2-Chlorbenzoyl)-3-methyl-l-ureido]phenylacet-amido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-tri-azin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-

15

15. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-alpha-(3-Furoyl-l-ureido)-phenylacetamido-3-(4-methyl-

16. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-alpha-[3-(N-Methylcarbonylamino)-3-methyl-l-ureido]-phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)phenylacet-amido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mer-capto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene 7-(alpha-Amino)phenylacet-amidoverbindung mit N,N'-Dimethyl-N-chlorformylharnstoff acyliert.

17. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-alpha-(Imidazolidin-2-on-l-ylcarbonylamino)phenylacet-amido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-tri-azin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)phenylacetamido-

18. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-alpha-(3-Methansulfonyl-imidazolidin-2-on-l-ylcarbonyl-amino)-phenylacetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbon-säure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino)-phenylacetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-

19. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-[alpha-(3-Methyl-3-methylaminocarbonyl-l-ureido)thien-

20

20. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 7-[alpha-(3-Methansulfonylimidazolidin-2-on-l-ylcarbonyl-amino)thien-2-ylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-

21. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von s 7-[alpha-[3-(2-Chlorbenzoyl)-3-methyl-l-ureido]-4-hydro-xyphenylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbon-

säure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino-4-hydroxyphenyl)-acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-car- io bonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene Verbindung mit N-(o-Chlorbenzoyl)-N-chlorformyl)methylamin acyliert.

22. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von is 7-[alpha-(3-methansulfonylimidazolidin-2-on-l-ylcarbonyl-amino)-4-hydroxyphenylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hy-droxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-2-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino-4-hydroxyphenyl)acetamido-3-acetoxymethyl-3-ce- 20 phem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydr-oxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene Verbindung mit l-Chlorformyl-3-methansulfonylimidazoli-din-2-on acyliert.

23. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 25 7-[aIpha-(3-MethylaminocarbonyI-3-methyl-l-ureido)-4-hy-droxyphenylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)-methyl-3-cephem-4-carbon-säure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino-4-hydroxyphenyl)-acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4- 30 carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-

24. Verfahren nach Anspruch 1 und 2 zur Herstellung von 35 7-[alpha-(Imidazolidin-2-on-l-ylcarbonylamino)-4-hydroxy-phenylacetamido]-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(alpha-Amino-4-hydroxy-phenyI)acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure 40 mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-

25. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(2-Thienyl)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di- 4S hydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbon-säure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(2-Thienyl)acet-amido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mer-capto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt. so

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carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-1,2,4-triazin umsetzt und die dabei erhaltene Verbindung mit l-Chlorformyl-3-methansuIfonyIimidazoI-idin-2-on acyliert.

26. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(2-Thienyl)acetamido-3-(4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-di-hydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbon-säure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(2-Thienyl)acet-amido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsävire mit 3-Mer- ss capto-4-äthyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt.

27. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(lH-Tetrazolacetamido)-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbon- «« säure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(lH-Tetrazolacet-amido)-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mer-capto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt.

28. Verfahren nach Anspruch 1 zur Herstellung von 7-(p-Aminomethylphenyl)acetamido-3-(4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin-3-ylthio)methyl-3-cephem-4-carbonsäure, dadurch gekennzeichnet, dass man 7-(p-

Aminomethylphenyl)acetamido-3-acetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure mit 3-Mercapto-4-methyl-5-oxo-6-hydroxy-4,5-dihydro-l,2,4-triazin umsetzt.