BRPI1015932B1

BRPI1015932B1 - composição de cuidados com a pele e seu uso.

Info

Publication number: BRPI1015932B1
Application number: BRPI1015932A
Authority: BR
Inventors: H Maes Daniel; F Collins Donald; Pelle Edward; Timothy Mccarthy James; Goldgraben Kerri; Slutsky Lenney; A Pernodet Nadine; Mammone Thomas
Original assignee: Elc Man Llc
Priority date: 2009-06-23
Filing date: 2010-06-09
Publication date: 2019-10-22
Also published as: CA2761967A1; RU2494756C1; AU2010271088B2; HK1178798A1; EP2445511B1; BRPI1015932A2; EP2445511A2; CN102802656A; US8703161B2; CN102802656B; CA2761967C; AU2010271088A1; JP2015129138A; JP5715623B2; KR20120024822A; US20100028317A1; EP2445511A4; KR101393960B1; RU2012102050A; ES2605623T3

Abstract

composição de cuidados com a pele e seu uso a presente invenção refere-se a composições e a métodos para intensificar a reparação de dna danificado em células da pele. as composições tópicas que compreendem pelo menos um agente que induz expressão de genes circadianos em células da pele e pelo menos um agente não circadiano que retarda mitose em células da pele. preferencialmente, tais composições compreendem um ou mais ativadores dos genes clock e per1 de queratinócitos, juntamente com sirt1 ou um ou mais ativadores de sirt1. mais preferencialmente, o ativador de sirt1 é uma combinação sinérgica de ativadores peptídicos específicos de sirt1 e resveratrol. preferencialmente, tais composições são fáceis de usar, eficazes, cosmeticamente aceitáveis, química e termodinamicamente estáveis à ação da luz, seguras para uso tópico, apresentam pouco ou nenhum efeito colateral e são comercialmente viáveis em um mercado de cuidados pessoais.

Description

[001] O presente pedido é uma continuação em parte do pedido em andamento US 11/837.658, depositado em 13 de agosto de 2007, e uma continuação em parte do pedido em andamento US12/367.705, depositado em 9 de fevereiro de 2009, ambos incorporados aqui como referência, na íntegra.

Campo Técnico [002] A invenção situa-se no campo do tratamento de pele. Mais particularmente, a invenção pertence a composições e métodos para melhorar a reparação de DNA danificado em células da pele. Antededente da Invenção [003] Entende-se bem agora que a pele está sob ataque diário de vários fatores ambientais e de estilo de vida. Uma breve lista desses fatores inclui radiação UVA, radiação UVB, poluição, fumaça de cigarros, dieta pobre, descanso insuficiente e tensão psicológica. Esse ataque manifesta-se como dano ao DNA de células e proteínas da pele. Linhas e rugas na pele estão entre as consequências menos graves de dano a células da pele, enquanto melanoma é uma das mais graves. Dano ao DNA [004] Alguns fatores ambientais e de estilo de vida interagem diretamente com DNA de células e/ou proteínas da pele causando dano, alguns fatores causam dano indiretamente e outros podem atuar de ambos os modos. Um exemplo de dano direto ao DNA seria quando DNA de células da pele absorve fótons da parte UVB do espectro. A absorção de fótons pode causar mutações na sequência do DNA. Por exemplo, cerca de 8% de toda ocorrência de melanoma são devido à mutação direta do DNA.

[005] Um exemplo de dano indireto ao DNA de células e proteínas da pele é observado quando fótons ultravioleta penetram na pele e são

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2/50 absorvidos por cromóforos. Em um estado excitado, cromóforos entram em reações que levam à formação de espécies de oxigênio reativo. Por exemplo, na pele humana, exposição a UVB é associada à produção de peróxido de hidrogênio, enquanto UVA é associado a produção de oxigênio singleto. Se a pele é incapaz de manter homeostase mediante neutralização das espécies reativas, por conseguinte as espécies reativas danificarão DNA de células proteínas da pele, por meio de oxidação. Esse dano ao DNA e proteínas é chamado tensão oxidante e é a principal causa de envelhecimento da pele. Também, cerca de 92% de toda ocorrência de melanoma são devidos a dano oxidante indireto ao DNA.

Dano ao DNA: Prevenção e Contenção Versus Reparação [006] Células da pele que contêm DNA incluem células-tronco de queratinócitos e melanócitos. Estima-se que uma única queimadura solar resulte em centenas de milhares de modificações mutagênicas em base do DNA tais como dímeros T-T (tiamina-tiamina); 8-oxo-7,8-dihidro-2’-desoxiguanosina (8-oxo-DG); 06MeG (06-metilguanina);

dímeros ciclobutano-pirimidina (CPD); e 6-4 fotoprodutos (6-4PP) em células afetadas. Essas mutações desencadeiam várias respostas nas células da pele, as quais podem levar a prevenção de dano ulterior ao DNA ou apoptose da célula. Por exemplo, sabe-se que produção de melanina em melanócitos é induzida por radiação UV, como medida protetora. Para lidar com a ameaça de UV, melanina é produzida por melanócitos na epiderme inferior, e, com a ajuda de queratinócitos que migram para fora, distribuída pela epiderme superior e inferior. No primeiro caso, melanina parece prevenir dano ulterior ao DNA induzido por UV ao atuar como um filtro de UV que limita a quantidade de UV que penetra na epiderme inferior, onde melanócitos e células-tronco de queratinócito estão localizados. Entretanto, como segunda linha de defesa, melanina contém dano no DNA devido a radiação UV ao induzir

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3/50 apoptose de queratinócitos. Ao promover apoptose, DNA danificado é contido, tendo menos possibilidade de ser passado para células filhas (ver, por exemplo, Yamaguchi e colaboradores, Melanin mediated apoptosis of epidermal cells damaged by ultraviolet radiação: factors influencing the incidence of skin cancer; Arch Dermatol Res., 2008 Abril; 300 Suppl 1: S43-S50).

[007] Além de prevenir e conter dano ao DNA, queratinócitos e melanócitos saudáveis apresentam mecanismos internos naturais para reparar lesões no DNA. Esses mecanismos são diferentes daqueles de prevenção e contenção, que envolvem diferentes cascatas de reação (embora às vezes sobrepostas). Composições e métodos da presente invenção preocupam-se acima de tudo com reparação de dano ao DNA. [008] Existem mecanismos de reparação celular para reparar lesões ao DNA de várias causas, não só o dano induzido por UV que foi discutido acima. No entanto, reparação de lesões ao DNA leva tempo. Por exemplo, reparação de dímeros TT e dano por 6-4PP formados por exposição a UVB poderá levar até 48 e 8 horas, respectivamente, se não for acelerado por uma influência exógena. Reparação de lesões por 8-oxo-dG e 06MeG devido a exposição a UVA ou UVB, ozônio ou fumaça e poluição poderá levar até duas horas. Idealmente, lesões ao DNA são reparadas antes de ocorrer divisão celular. Pelo contrário, o resultado preferencial é apoptose. Porém, se o dano ao DNA acontece de modo a afetar adversamente a indução de apoptose, ou se a mutação segue não detectada, por conseguinte o DNA danificado poderá ser passado para a geração seguinte. Composições e métodos da presente invenção preocupam-se acima de tudo com maximização da reparação de dano ao DNA antes de ocorrer divisão celular.

Mecanismos de Prevenção e Reparação de uma Célula são Controlados por Meio de um Relógio Circadiano [009] Sob condições normais, funções celulares, incluindo

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4/50 expressão e reparação de DNA, não ocorrem em tempos aleatórios com igual probabilidade. Preferencialmente, cada célula possui um ciclo (ou relógio) endógeno de cerca de 24 horas (isto é, um ritmo circadiano), e as atividades da célula são reguladas por esse ciclo endógeno. Na ausência de algum estímulo externo, cada célula seguiria seu curso livre conforme seu relógio endógeno. Entretanto, os relógios endógenos das células em todo o corpo são sincronizados. A fim de sincronizar as atividades das células umas com as outras e com o ambiente, o corpo é capaz de aceitar sinais do ambiente. O sinal ambiental mais notável é a ausência de luz do dia. Assim, o ciclo circadiano consiste de fases de luz e escuridão que coincidem aproximadamente com as fases do dia solar.

[0010] Entende-se agora que ritmos circadianos permitem que as células antecipem mudanças no ambiente que poderiam afetá-las e se adaptem a essas mudanças em tempo hábil. Logo que a maquinaria genética dos ritmos circadianos celulares esteja funcionando apropriadamente, as células realizam cada uma de suas muitas funções de uma maneira sincronizada, em um momento que é ótimo para viabilidade celular e/ou homeostase. Por exemplo, como abordagens de luz do dia (ainda que antes de a pele estar sob ataque de UV), certos genes são ativados para produzir proteínas que protegem as células contra dano antecipado por radiação UV. Por conseguinte, à medida que a luz do dia diminui, esses genes são desligados. Por outro lado, os genes circadianos podem eles próprios ser submetidos a ataque por fatores ambientais. Dano a um ou mais genes que regulam o ritmo circadiano de uma célula pode tirar uma célula de sincronia co m o ambiente e com outras células.

Mecanismo Circadiano do Núcleo [0011] Fatores de transcrição são proteínas que se ligam a sequências específicas de DNA para controlar a transferência de

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5/50 informação genética de DNA para RNA. O mecanismo circadiano do núcleo, ou relógio celular, é compreendido de fatores de transcrição que participam em ciclos de retroalimentação fora de fase, negativos e positivos, que levam a transcrição oscilante de genes.

[0012] No principal ciclo de retroalimentação negativo de mamíferos, um heterodímero de fatores de transcrição CLOCK e BMAL1 ativa transcrição dos genes para período (per) e criptocromo (cry). Em humanos, o gene para período é na verdade uma família de três genes per1, per2 e per3 e a família de genes cry inclui cry1 e cry2. Após sua tradução, as proteínas PER e CRY migram para o citoplasma e formam complexos PER/CRY. Regulação de pós-tradução cria um retardo intencional após o qual os complexos PER/CRY relocam-se para o núcleo celular. As concentrações de PER e CRY no núcleo atingem o ponto máximo no fim do dia circadiano, tempo este em que as proteínas CRY atuam então de modo a inibir atividade de transcrição do heterodímero CLOCK/BMAL1. Assim, CRY parece desligar sua própria transcrição.

[0013] Por outro lado, em um ciclo de retroalimentação positivo,

PER2 após translocação para o núcleo parece induzir a transcrição de BMAL1, eventualmente levando à transcrição dos genes period e cry. Também, o dímero CLOCK/BMAL1 parece induzir os genes rev-erba e rora. Rora ativa transcrição de BMAL1, enquanto rev-erba suprime CLOCK e BMAL1. As atividades de pico dos chamados genes canônicos relógio (clock, bmal1, per1, per2, per3, cry1 e cry2) estão fora de fase, tal que resulta um ciclo autossustentável, apresentando um período de aproximadamente 24 horas.

Ciclo Celular [0014] O ciclo celular refere-se à série de eventos que ocorre em uma célula levando a divisão e replicação da célula. O ciclo é usualmente descrito como quatro ou cinco fases sequenciais que

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6/50 exigem cerca de 24 horas para completar-se. Em cada fase do ciclo celular, há pontos de inspeção que asseguram que todos os processos requisitados de uma dada fase sejam completados antes do início da fase seguinte. Em células humanas, a primeira fase é a fase de Síntese (S) em que o DNA de uma célula é copiado e sintetizado. A fase S poderá normalmente durar de 6 a 8 horas. Na fase G2, que dura 3 a 4 horas, proteínas são sintetizadas e a célula dobra de tamanho. Durante Mitose (M), o invólucro nuclear rompe-se de modo que cada cópia do material genético possa separar-se em polos opostos da célula. Em seguida à formação de um novo invólucro nuclear em torno de cada conjunto de cromossomos, a célula divide-se em duas (citocinese). A fase M é de cerca de 1 hora de duração. A quarta e mais longa fase (6 a 12 horas) é G1, que se caracteriza por síntese de RNA e proteínas. Da fase G1, a célula pode novamente entrar na fase S ou entrar na fase G0. Em G0, a célula está em repouso. G0 pode durar dias ou anos. Células-tronco podem retornar da fase G0, entrando em G1. Células diferenciadas geralmente não retornam de G0. Do mesmo modo, células com DNA danificado poderão entrar em G0, em vez de apoptose.

Pontos de Inspeção do Ciclo Celular Inibem DNA Danificado de Passar Adiante [0015] Durante divisão celular, são usados pontos de inspeção para regular o progresso da célula através do ciclo celular. Pontos de inspeção impedem a célula de progredir até a fase seguinte até conclusão de todos os processos necessários, incluindo qualquer reparação de DNA danificado. Dessa maneira, pontos de inspeção asseguram que DNA danificado ou incompleto não seja passado para células filhas. Existem diversos pontos de inspeção. O ponto de inspeção G1/S (o ponto de inspeção de Restrição) interrompe o ciclo celular de modo que a decisão possa ser realizada para entrar ou não

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7/50 na fase de repouso. No ponto de inspeção G2/M o ciclo celular é parado se DNA danificado é detectado, o que não é incomum. O ponto de inspeção de pós-replicação refere-se a DNA danificado que foi replicado na fase de síntese. A replicação de DNA danificado desencadeia uma resposta celular que impede progressão de ciclo celular até processos de reparação pós-replicação completarem-se. Em células humanas, o ponto de inspeção de pós-replicação leva tempo para reparação retardando o início da fase mitose. O gene chk1 exerce controle sobre o ponto de inspeção de pós-replicação, enquanto o gene p53 desempenha um importante papel no disparo dos mecanismos de controle em ambos os pontos de inspeção G1/S e G2/M. Relógio Circadiano Também Regula Proliferação Celular [0016] Nos últimos anos, a importância do relógio circadiano na regulação de proliferação celular foi entendida. Por exemplo:

[0017] Rompimento da temporização circadiana ... tem consequências de longo alcance na regulação normal da divisão celular. (Reddy e colaboradores, 2005 Circadian clocks: neural and peripheral pacemakers que impact upon the cell division cycle. Mutation Research 574 76 a 91).

[0018] Visão detalhada dos mecanismos pelos quais componentes do relógio interagem com a maquinaria reguladora do ciclo celular vem de estudos recentes com camundongos. Por exemplo, ... o retardo entre remoção de tecido do fígado (hepatectomia parcial) e a subsequente primeira onda de mitose depende da hora do dia em que a cirurgia foi realizada. (Vallone e colaboradores, 2007 Start the clock! Circadian rhythms and development. Developmental Dynamics 236 142 a 155). [0019] De cianobactérias a vertebrados superiores, há muitos exemplos do relógio circadiano “bloqueando’ a fase S e mitose do ciclo celular de modo a ocorrer durante o período noturno. (Vallone e colaboradores). [Presumivelmente, síntese de DNA e mitose ocorrem à

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8/50 noite para proteger DNA de UV prejudicial ou outra radiação ionizante proveniente do sol.] [0020] Desse modo, o relógio circadiano exerce uma influência dominante sobre o ciclo celular da síntese, mitose e citocinese de DNA e proteínas, síntese e reparação de RNA. Portanto, quando fatores ambientais interferem no mecanismo circadiano de uma célula, a função celular é comprometida. Postulamos que quando tratamento pode acertar ou ressincronizar o relógio circadiano de uma célula, ou quando tratamento pode restaurar níveis normais de expressão de genes circadianos, por conseguinte o funcionamento celular pode ser melhorado, dano celular pode ser reparado de modo acelerado ou apoptose poderá ocorrer de forma mais oportuna.

Ambiente Pode Colocar o Ritmo Circadiano Fora de Sincronia [0021] Agentes que interferem em um ou mais genes que regulam o ritmo circadiano de uma célula podem colocar uma célula fora de sincronia com o ambiente e com outras células. Por exemplo, nas horas seguintes a exposição a UV, talvez até 20 horas, os níveis de expressão dos genes clock, bmal1 e per1 em queratinócitos humanos diminuem significativamente (ver figura 1). Por significativamente diminuído entendemos abaixo da expressão mínima que esses genes experimentam em seu ciclo circadiano normal, conforme descrito acima. Além disso, após exposição a UV, o padrão normal de expressão gênica, que pode ser descrito como aproximadamente sinusoidal, perde-se.

[0022] Na figura 1, uma linha horizontal marca o nível em média usual de expressão do gene clock e, partindo de cerca de 44 horas após exposição a UV, mostra variação circadiana típica em torno dessa linha. Em contrapartida, imediatamente após exposição a UVB, os níveis de expressão gênica caíram bem abaixo do normal, e não retornaram a níveis normais por cerca de 20 horas. Durante essas 20 horas, o padrão

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9/50 normal de expressão gênica perdeu-se para todos os três genes, e mesmo quando os níveis de expressão gênica retornaram aproximadamente a níveis normais, o período de cerca de 20 horas a cerca de 44 horas foi exigido para o padrão sinusoidal normal de expressão retornar. Assim, exposição a UV realmente teve dois efeitos. Um efeito é o declínio dramático no nível de expressão de genes circadianos e o outro é o padrão, ou seja, o tempo de sua expressão. De 0 a cerca de 44 horas após exposição a UV, o tempo de síntese, mitose e citocinese de DNA e proteínas, síntese e reparação de RNA e morte celular programada (apoptose) estão todos comprometidos.

[0023] Naturalmente, exposição a UV ocorre durante o dia, especialmente durante a janela crítica de dez horas da manhã a duas horas da tarde. Como já observado, a concentração de proteínas PER e CRY no núcleo atinge o ponto máximo no fim do dia circadiano, em cujo tempo as proteínas CRY atuam de modo a inibir transcrição do heterodímero CLOCK/BMAL1. Qualquer retardo em atingir a concentração crítica que desliga expressão de clock e bmal1 ampliará o ciclo circadiano. Assim, exposição a UV tende a estender o ciclo circadiano. Isso lança o ciclo celular for a de sincronia com o ambiente. Replicação e mitose de DNA poderão não ocorrer à noite, o que é ótimo para replicação celular. Igualmente, a influência de bloqueio que genes circadianos exercem sobre o ciclo celular poderá ser comprometida, de modo que dano ao DNA pode não ser detectado ou pode não ser reparado, e poderá ser deixado passar para células filhas.

Há Registro de que Sirtuínas Retardam o Início de Mitose [0024] Sirtuína 1 (também conhecida como SIRT1 ou Regulador de

Informação Silenciosa Dois Ortólogo 1) é uma enzima que regula metabolismo e sobrevida celular em resposta a tensão. É associada à longevidade celular. O gene sirt1, que codifica a enzima SIRT1, não é um gene circadiano. Chua e colaboradores sugerem que SIRT1

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10/50 promove senescência replicativa ao deter o ciclo celular (Chua e colaboradores (2005) Mammalian SIRT1 limits replicative life span in response to chronic genotoxic stress. Cell Metabolism 2, 67 a 76).

[0025] US 2009-0082278 (aqui incorporado como referência, na íntegra) descreve adicionalmente esse gene e composições tópicas para a pele que podem induzi-lo. Ler parágrafos 8 a 13:

[0026] Os requerentes verificaram recentemente o envolvimento de uma nova proteína nos mecanismos de células da pele que tem um significativo papel no processo de envelhecimento e proteção das células.

[0027] Os requerentes demonstraram que a proteína SIRT, e mais precisamente a proteína SIRT1, foi expressa em células da pele e que sua expressão estava relacionada com diferentes tensões células cutâneas encontram. Eles demonstraram em particular que a indução dessa expressão da proteína, usando diferentes agentes, permitiu a proteção de células e ajudá-las de maneira melhor a lutar contra tensão e envelhecimento intrínsico.

[0028] Proteínas SIRT são parte da família das Sirtuínas e são proteínas nucleares dependentes de NAD+ que desempenham um significativo papel na desacetilação de histonas. Genes SIR (Reguladores de Informação Silenciosa), que codificam proteínas SIR, foram descritos pela primeira vez em S. cerevisiae em 1979 (Rine J e A l., Genetics 1979). Mais tarde, demonstrou-se que uma superexpressão da proteína SIR2P, em C. elegans, permitiu aumentar o tempo de vida do organismo (Tissenbaum e A l., Nature 2001). Esse estudo permitiu a hipótese de que essas proteínas são relacionadas com longevidade. [0029] A proteína SIRT1 é a sirtuína humana mais bem caracterizada e interage com numerosos reguladores de transcrição. A proteína humana SIRT1 tem sido descrita como sendo envolvida na regulação de p53 (Cheng H L e A l. Proc Natl Acad Sci USA. 2003), e

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11/50 mais recentemente como moduladora de senescência celular (Langley E e A l., EMBO J. 2002). Outras proteínas humanas SIRT foram descobertas (SIRT2, SIRT3, SIRT4 a 7). A proteína humana SIRT2 tem sido muito pouco estudada; entretanto, alguns estudos têm demonstrado seu papel no controle de atividade mitótica (Dryden S C e A l. Mol Cell Bio. 2003), bem como seu envolvimento na regulação da proteína p53 (Vaziri H e A l., Cell. 2001). Até o momento, desacetilase sirtuínas são consideradas uma família de enzimas que desempenham um importante papel na regulação de morte celular e em seu ciclo de vida (Porcu M. e Chiarugi A, Trends Pharmacol Sci., 2005).

[0030] A presente invenção [isto é, US 2009-0082278] refere-se a uma composição cosmética ou farmacêutica que compreende, em um meio cosmética ou farmaceuticamente aceitável, pelo menos um composto que provavelmente ativa a síntese de proteínas SIRT em células da pele. Preferencialmente, de acordo com a invenção, os compostos ativarão uma classe particular proteínas SIRT, as proteínas SIRT1.

[0031] Até agora, nenhum uso de compostos que servem como indutores da síntese da família de proteínas SIRT, em células da pele, foi descrito.

[0032] O presente relatório descritivo aponta que, até aqui, nenhum uso de composições que compreendem ativadores de sirt1 em conjunto com ativadores de genes circadianos, foi descrito, mesmo no US20090082278. Até onde é de conhecimento dos requerentes, não é conhecida uma composição tópica que se destine a níveis reduzidos de proteínas CLOCK e PER1 em queratinócitos de epiderme humana, compreendendo um ou mais agentes não circadianos retardadores de mitose.

Composições Tópicas Para Reparação de DNA [0033] Produtos tópicos para aplicação na pele a fim de promover o

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12/50 processo de reparação celular são conhecidos. Por exemplo, tais produtos podem incluir enzimas de reparo de DNA para melhorar a eficácia de reparação natural de DNA celular, ingredientes umectantes para manter hidratação dos queratinócitos, ingredientes hidratantes para melhorar a função de barreira da pele, e similares. Embora esses ingredientes possam melhorar a capacidade de queratinócitos autorreparar-se, há sempre espaço para melhorias. Em contrapartida ao estado da técnica, a presente invenção proporciona meios de restaurar os níveis de proteínas circadianas não danificadas em células da pele e meios de restaurar o padrão normal de expressão de genes circadianos, combinados com um meio de inibir que DNA danificado passe para células filhas.

Objetivos da Invenção [0034] Trata-se de um objetivo da invenção proporcionar uma composição tópica que, quando aplicada, restaure os níveis normais de proteínas circadianas em células da pele e restaure o padrão normal de expressão de genes circadianos, de uma maneira acelerada.

[0035] Trata-se de um objetivo da invenção proporcionar uma composição tópica que repare pele fotodanificada e/ou oxidantemente danificada mediante indução da expressão dos genes clock e per1 e retardamento de mitose de células da pele.

[0036] Trata-se de um objetivo da invenção proporcionar uma composição tópica que reduza a oportunidade de proliferação de DNA danificado de células da pele.

[0037] Trata-se de um objetivo da invenção proporcionar uma composição tópica que reduza a oportunidade de proliferação de DNA de células da pele que foi danificado por agressores externos, particularmente por exposição a UV.

[0038] T rata-se de um objetivo ainda da invenção proporcionar uma composição para tratar pele, compreendendo pelo menos um ativador

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13/50 dos genes clock ou perl de queratinócitos, pelo menos um agente não circadiano retardador de mitose e, opcionalmente, pelo menos uma enzima de reparo de DNA.

Sumário [0039] Toda a descrição precedente é satisfeita por uma composição tópica que compreende pelo menos um agente que induz expressão de genes circadianos em células da pele e pelo menos um agente não circadiano que retarda mitose em células da pele. Verificase que composições que compreendem agentes que induzem (ou ativam) genes clock e genes per1, ao mesmo tempo em que aumentam também os níveis de SIRT1, promovem sinergicamente viabilidade celular e longevidade celular, inibem dano celular devido a agressores externos, melhoram reparação de dano ao DNA e reduzem sinergicamente a oportunidade de proliferação de DNA danificado de células da pele. Opcionalmente, a composição compreende ums ou mais enzimas de reparo de DNA.

[0040] As modalidades preferidas da presente invenção são composições tópicas para a pele que manifestam os efeitos descritos acima. Preferencialmente, essas composições compreendem um ou mais ativadores dos genes clock e per1 de queratinócitos, juntamente com SIRT1 ou um ou mais ativadores de sirt1. Preferencialmente, essas composições são fáceis de usar, eficazes, cosmeticamente aceitáveis, química e termodinamicamente estáveis à ação da luz, seguras para uso tópico, apresentam pouco ou nenhum efeito colateral e são comercialmente viáveis em um mercado de cuidados pessoais. Descrição das Figuras [0041] A figura 1 mostra os níveis de expressão dos genes clock, bmal1 e per1 em queratinócitos humanos por 72 horas após exposição a UV.

[0042] A figura 2 mostra o efeito dos ativadores de sirt1, Orsirtine™

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14/50 e resveratrol, na sobrevida de queratinócitos humanos.

[0043] A figura 3 mostra o efeito de Ativadores de Genes

Circadianos em combinação com ativadores de sirt1, Orsirtine™ e resveratrol.

Descrição Detalhada [0044] Até onde é de conhecimento dos requerentes, não há descrição de nenhum uso de composições tópicas que compreendam ativadores de sirt1 para promover contenção de ciclo celular, em conjunto com aplicação tópica de ativadores de genes circadianos para restaurar ciclo circadiano normal.

Definições [0045] T odas as porcentagens mencionadas aqui são porcentagens em peso, a menos que indicado em contrário. Em relação a genes, os termos ativar e induzir ou termos etimologicamente relacionados, significam um ingrediente que causa a expressão de uma ou mais proteínas codificadas pelo gene.

[0046] O termo Gene relógio é às vezes usado na literatura para referir-se a qualquer dos chamados genes circadianos canônicos, incluindo os genes clock, bmal1, period e cryptochrome. Neste relatório descritivo, clock' (em itálico) sempre se refere ao gene que codifica proteínas CLOCK. Coletivamente, os genes clock, bmall, period e cryptochrome são aqui referidos como genes circadianos.

[0047] O termo enzima de reparo de DNA significa uma enzima que é capaz de reparar dano mutagênico em base do DNA. Tais enzimas são frequentemente classificadas pelo tipo de dano ao DNA que elas reparam. Por exemplo, enzimas BER (reparação de excisão de base), enzimas de reparo de excisão de nucleotídeo (NER); enzimas de reparo de imperfeição (MMR); DNA helicases; DNA polimerases e similares. Por exemplo, mutações tal como 8-oxo-7,8-di-hidro-2’desoxiguanosina podem ser reparadas por OGG1 (8-oxoGuanina

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15/50 glicosilase. Dímeros T-T podem ser reparados por enzima de reparo de excisão de nucleotídeo, Fotoliase. 6 a 4 fotoprodutos poderão ser reparados por NER. 06-metilguanina pode ser reparada por 06alquilguanina transferase (AGT).

[0048] Reparação, com relação à pele ou células da pele, significa que viabilidade, vigor e longevidade de queratinócitos são geralmente melhorados. Exemplos de reparação incluem reparar DNA de queratinócito danificado e reverter uma perda de hidratação celular devido à luz UV, fumaça ou outros agressores externos.

[0049] Segurança para uso tópico significa cumprir todos os regulamentos regionais e locais que governam a segurança de produtos cosméticos. Cosmeticamente aceitável significa que a aparência, tato e cheiro de uma composição estão dentro dos limites de aceitabilidade de um consumidor, conforme entendido por aquele habilitado no estado da técnica. Quimicamente estável, termodinamicamente estável e estável à ação da luz significam que da produção até um período de pelo menos seis meses (mais preferencialmente três anos), uma composição permanece cosmeticamente aceitável. Comercialmente viável em um mercado de cuidados pessoais significa que o custo de produção e distribuição de uma composição não deve ser maior do que aquele já praticado na indústria de cuidados pessoais.

Indução de CLOCK e PERIOD1 [0050] A composição da invenção contém pelo menos um agente que induz os genes clock e/ou per1 de queratinócitos. Concentrações sugeridas desses agentes, no total, variam de cerca de 0,000001 a cerca de 40%, preferencialmente de cerca de 0,000005 a 35%, mais preferencialmente de cerca de 0,00001 a 25%, com relação ao peso total da composição final. Em geral, essas faixas podem ser entendidas como sendo quantidades eficazes. Por quantidade eficaz, entendemos que a concentração desses agentes, em uma composição

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16/50 tópica aplicada na pele humana sob ataque ambiental, é suficiente para melhorar a taxa de sobrevida de queratinócitos em torno de pelo menos 5%. Ativadores adequados de clock ou per1 podem estar presentes na forma de extractos botânicos, polipeptídeos, peptídeos, aminoácidos e similares.

[0051] Um ativador do gene clock e/ou per1 particularmente preferido compreende um peptídeo de fórmula (I):

R1-(AA)n- Xi -S - T - P - X2 - (AA)p - R2 [0052] onde (AA)n- Xi -S - T - P - X2 - (AA)p é (SEQ ID No. 1) e:

[0053] Xi representa treonina ou serina, ou é igual a zero, [0054] X2 representa isoleucina, leucina, prolina, valina, alanina ou glicina, ou é igual a zero, [0055] AA representa qualquer aminoácido ou derivado deste, e n e p são números inteiros entre 0 e 4 (0 e 4, inclusive) [0056] R1 representa a função amina primária do aminoácido de término N, quer livre ou substituído por um grupamento protetor que pode ser escolhido de um grupo acetila, um grupo benzoíla, um grupo tosila ou um grupo benziloxicarbonila, [0057] R2 representa o grupo hidroxila da função carboxila do aminoácido de término C, substituído por um grupamento protetor que poderá ser escolhido de uma cadeia C1 a C20 alquila ou um grupo NH2, NHY ou NYY, com Y representando uma cadeia C1 a C4 alquila, [0058] e na qual a sequência de fórmula geral (I) compreende de cerca de 3 a 13 resíduos aminoácido.

[0059] A sequência de fórmula geral (I) poderá conter substituições de aminoácidos Xi e X2 por outros aminoácidos quimicamente equivalentes, em que os aminoácidos são: Alanina (A), Arginina (R), Asparagina (N), Ácido Aspártico (D), Cisteína (C), Ácido Glutâmico (E), Glutamina (Q), Glicina (G), Histidina (H), Isoleucina (I), Leucina (L), Lisina (K), Metionina (M), Fenilalanina (F), Prolina (P), Serina (S),

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T reonina (T), T riptofano (W), Tirosina (Y) e Valina (V).

[0060] Versões mais preferidas de fórmula I são peptídeos, como seguem:

(SEQ ID No. 2) Y - V - S -T -P - Y- N- NH2 Tyr-Val-Ser-Thr-Pro-Tyr-Asn-NH2 (SEQ ID No. 3) NH2 -V -S -T -P -E - NH2 NH2-Val-Ser-Thr-Pro-Glu-NH2

S -T -P - NH2

Ser-Thr-Pro-NH2 (SEQ ID No. 4) NH2 -L -H -S -T- P - P - NH2 NH2-Leu-His-Ser-Thr-Pro-Pro-NH2 (SEQ ID No. 5) CH3NH -R -H -S -T -P -E - NH2 CH3-NH-Arg-His-Ser-Thr-Pro-Glu-NH2 (SEQ ID No. 6) CH3NH - H -S -T -P -E - CH3NH CH3-NH-His-Ser-Thr-Pro-Glu-CH3-NH [0061] Mais preferido é o peptídeo S-T-P-NH2, SEQ ID No. 4, ou misturas deste. Mais preferido é um peptídeo produzido por ISPVinscience sob a marca registrada Chronolux® apresentando o nome INCI Tripeptídeo-32.

[0062] As Figuras 1, 2 e 3 do pedido correlato US12/367.705, e o texto que descreve essas figuras, demonstram a capacidade de Chronolux® melhorar a sobrevida de queratinócitos contra tensão induzida por UV, especialmente quando combinado com pelo menos uma enzima de reparo de DNA.

[0063] Não é imediatamente óbvio que aplicar simultaneamente ativadores dos genes clock e per1 produziria um resultado benéfico. Afinal de contas, em ritmo circadiano normal, concentrações celulares de proteínas CLOCK e Period1 estão foram de fase. Todavia, um resultado benéfico é obtido. Pode-se sugerir que células da pele sob ataque ambiental são então exauridas em níveis das proteínas CLOCK

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18/50 e PERIOD1 e que um benefício é obtido por indução de ambas as proteínas o mais rápido possível.

Indução de SIRTUÍNA1 [0064] Verificamos inesperadamente que os resultados benéficos obtidos pela aplicação de ativadores dos genes clock e per1 de queratinócitos são modificados, às vezes significativamente melhorados, quando combinados com um ativador de queratinócitos sirt1. SIRT1 tende a induzir contenção do ciclo celular. Dada a complexidade do mecanismo circadiano e sua interação reguladora com o ciclo celular, pode não ter sido esperado do estado da técnica que seria benéfico induzir contenção do ciclo celular ao mesmo tempo em que simultaneamente se restauram níveis normais de proteínas circadianas.

[0065] Embora não desejando estar vinculado a qualquer teoria, será entendido que PER1 tem efeitos diretos no ciclo celular, que não através de supervisão circadiano. Por exemplo, PER1, além de seu papel como componente nuclear do ciclo circadiano, é alegadamente capaz de ativar o caminho ATM quinase que leva a contenção do ciclo celular. ATM (Ataxia Telangiectasia Mutante) quinase é uma proteína quinase nuclear que é recrutada em resposta a rompimento da fita dupla de DNA. ATM quinase fosforila CHK1 e CHK2, reguladores de pontos de inspeção do ciclo celular, que são envolvidos na contenção do ciclo celular e entrada retardada em mitose. Quando PER1 é subexpresso, como resultado de alguma tensão ambiental, contenção do ciclo celular poderá não ocorrer ou poderá ser retardada. Assim, poderá haver tempo insuficiente para efetuar reparações a DNA danificado antes de mitose ou citocinese. Ao mesmo tempo, redução na expressão de PER1 tem sido associada à diminuição de apoptose. Assim, uma célula danificada que deve morrer, poderá sobreviver e dividir-se. Portanto, dado que tensão ambiental leva a uma diminuição anormal nos níveis de PER1,

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19/50 que conduz a falha em conter o ciclo celular e diminuição de apoptose, que conduz a propagação de DNA danificado, poder-se-ia esperar que ativação de per1 corrigiria o problema. No entanto, temos observado que a viabilidade de queratinócitos é significativamente melhorada quando um ativador de gene sirt1 é usado em combinação com ativadores dos genes clock e per1. Embora não desejando estar vinculado a qualquer teoria, essa observação poderá implicar que ativação de per1 por si só falha em restaurar os níveis de PER1 rápido o suficiente para efetuar reparações antes que DNA danificado possa propagar-se para células filhas.

[0066] Por ativador de SIRT1 entendemos qualquer composto que é passível de sustentar a produção endógena de proteínas SIRT1, particularmente as moléculas envolvidas no controle positivo de precursores tal como DNA ou RNA. Entre esses compostos, que são passíveis de ativar a síntese de proteínas SIRT1 em células da pele, diferentes moléculas, tais como polifenóis, são descritas. Mais particularmente, derivados de trans-estilbeno (tais como resveratrol e piceatanol), derivados de chalconas (tais como isoliquiritigenina e buteína) e derivados de flavonas (tais como fisteína, luteolina e quercetina) podem ser mencionados. A eficácia de derivado de resveratrol ou resveratrol, em combinação com pelo menos uma enzima de reparo de DNA, é mostrada em pedido correlato, US 11/837.658. Entretanto, certos peptídeos, devido às suas similaridades estruturais inerentes com peptídeos na pele, são ativadores preferidos de sirt1. Mais preferida ainda é uma combinação sinérgica de ativador(es) peptídico(s) e resveratrol (mais sobre isso, abaixo).

Ativadores Peptídicos de sirt1 [0067] Peptídeos, devido às suas similaridades estruturais inerentes com peptídeos na pele, são ativadores preferidos de sirt1. Entre os compostos de natureza peptídica, fragmentos de proteína,

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20/50 fragmentos peptídicos e polipeptídicos, peptídeos, bem como todas as sequências de dois ou mais aminoácidos ligados por ligações peptídicas, podem ser mencionados. Em uma modalidade preferida da presente invenção, os fragmentos de peptídeo variam em tamanho de 3 a 50 aminoácidos, mais particularmente de 3 a 10 aminoácidos. Todos esses fragmentos de peptídeos apresentam atividade biológica. Um peptídeo preferido é:

(SEQ ID No. 7) (AA)n- G-L-Y-D-N-L-E - (AA)_n (AA)n- Gly - Leu - Tyr- Asp - Asn - Leu- Glu - (AA)_n [0068] em que (AA) é qualquer aminoácido particular ou derivado deste, e n é um número inteiro entre 0 e 3 (0 e 3, inclusive). Um peptídeo particularmente preferido é:

(SEQ ID No. 8) G - L - Y - D - N - L- E Gly-Leu-T yr-Asp-Asn-Leu-Glu.

[0069] Esse peptídeo é disponível como Orsirtine™ GL (nome INCI: Água (e) Glicerina (e) Extrato de Oryza sativa (Arroz)), disponível a partir de /SP Vincience. Em composições da presente invenção, ativadores peptídicos de SIRT1 estão presentes em uma quantidade entre cerca de 0,000001% e 20%, e preferencialmente em uma quantidade entre cerca de 0,0001 e 5% co relação ao peso total da composição final. Resveratrol e Derivados Deste [0070] Resveratrol, também referido como 3,5,4’-trihidroxiestilbeno, é um composto de estilbeno poli-hidroxissubstituído presente em uvas vermelhas, framboesas, mirtilos e certas outras bagas de plantas ou extratos, composto este que apresenta a fórmula geral:

OH

[0071] Resveratrol tem mostrado ser um antioxidante eficaz e também exibe fortes propriedades antiproliferativas e anti-inflamatórias.

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Recentemente, foi relatado que resveratrol pode imitar restrição calórica (RC) em vários organismos, tais como levedura, lombrigas, moscasdas-frutas, peixes de vida curta e camundongos, desacelera o processo de envelhecimento nesses organismos e aumenta significativamente seu tempo de vida. Embora não desejando estar vinculado a qualquer teoria específica, os inventores da presente invenção acreditam que resveratrol pode reduzir proliferação celular e retardar o processo de apoptose, permitindo desse modo mais tempo para reparação de dano de DNA nas células. Postula-se que resveratrol, quando combinado com uma enzima de reparo de DNA, pode resultar em um efeito sinérgico intensificado ou de outro modo aumentar a capacidade natural de reparação de DNA das células.

[0072] Contudo, resveratrol pode ser potencialmente instável em certas formulações cosméticas. Especificamente, resveratrol é suscetível à hidrólise em formulações de base aquosa e poderá levar tais formulações a se tornarem descoloridas. Uma maneira de resolver a instabilidade de resveratrol em formulações de base aquosa é modificar o resveratrol substituindo os grupos hidróxi nas posições 3, 5, e 4' por outros grupos funcionais para formar derivados de resveratrol que são mais estáveis em fórmulas cosméticas. Tais derivados são preferidos a resveratrol. Verificou-se que derivados de ácidos inorgânicos, ácidos carboxílicos orgânicos, mono, di ou polissacarídeos, ou outros grupos funcionais, com resveratrol são mais estáveis em formulações de base aquosa. Os grupos de substituição funcionam de modo a proteger e estabilizar os grupos fenol de resveratrol e tornar o derivado de resveratrol mais adequado para uso em formulações cosméticas de base aquosa. Os grupos de substituição podem também ser hidrolisados facilmente, a partir do composto após aplicação na pele, preferencialmente por enzimas e outros ingredientes na superfície da pele, para liberar uma forma ativa de resveratrol na pele. Os derivados

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22/50 de resveratrol da presente invenção possuem a fórmula geral de:

OY

[0073] em que X, Y e Z são hidrogênio ou um grupo protetor, contanto que pelo menos um de X, Y e Z seja o grupo protetor. Derivados de resveratrol exemplares adequados para uso nas composições cosméticas ou tópicas da presente invenção são descritos em maior detalhe adiante.

A. Ésteres de Ácidos Inorgânicos ou Orgânicos de Resveratrol [0074] Ésteres de ácidos inorgânicos de resveratrol, em que um ou mais de X, Y e Z são grupos funcionais ácidos inorgânicos tais como fosfates, nitratos, sulfonatos e carbonates, podem ser usados na presente invenção. Segue-se uma lista de ésteres de ácidos inorgânicos

5-fosfato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3,5-difosfato-4’-hidroxiestilbeno

4’,5-difosfato-3-hidroxiestilbeno

3-nitrato-5,4’-di-hidroxiestilbeno

4’-nitrato-3,5-di-hidroxiestilbeno exemplares que são particularmente adequados para praticar a presente invenção:

3-fosfato-5,4’-di-hidroxiestilbeno

4’-fosfato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-difosfato-5-hidroxiestilbeno

3,5,4’-trifosfato estilbeno

5-nitrato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3,5-dinitrato-4’-hidroxiestilbeno

4’,5-dinitrato-3-hidroxiestilbeno

3-sulfonato-5,4’-di-hidroxiestilbeno

4’-sulfonato-3,5-di-hidroxiestilbeno

3,4’-dinitrato-5-hidroxiestilbeno

3,5,4’-trinitrato estilbeno

5-sulfonato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3,5-dissulfonato-4’-hidroxiestilbeno

3,4’-dissulfonato-5-hidroxiestilbeno

3,5,4’-trissulfonato estilbeno

4’, 5-d issulf onato-3-hid roxiest i I be no

3-carbonato-5,4’-di-hidroxiestilbeno

5-carbonato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3,5-dicarbonato-4’-hidroxiestilbeno

4’,5-dicarbonato-3-hidroxiestilbeno [0075]

4’-carbonato-3,5-di-hidroxiestilbeno

3,4’-dicarbonato-5-hidroxiestilbeno

3,5,4’-tricarbonato estilbeno.

Sais farmaceuticamente aceitáveis dos ésteres de

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23/50 resveratrol acima listados podem também ser usados nas composições cosméticas da presente invenção. Esses sais poderão incluir um ou mais cátions monovalentes ou divalentes selecionados do grupo que consiste de Na, K, Mg, Ca, Fe e NH₄. Os sais podem ser formados adicionando bases correspondentes, tais como hidróxido de sódio, hidróxido de potássio e similares, em uma solução que contém os ésteres de resveratrol.

[0076] Os ésteres de ácidos inorgânicos de resveratrol podem ser imediatamente formados por meio de processos químicos bem conhecidos que substituem os grupos hidroxila de fenóis ou polifenóis pelos grupos funcionais fosfato, sulfonato e carbonato. Por exemplo, a Patente dos Estados Unidos N° 4003966 descreve um processo de etapa única para fosforilar seletivamente fenóis a fim de formar ésteres de fosfato desses fenóis, cujo conteúdo é incorporado aqui como referência na íntegra para todos os fins.

[0077] Um derivado de resveratrol particularmente preferido para prática da presente invenção é o 3,4’,5-trifosfato estilbeno, também referido como um éster trifosfato de resveratrol que apresenta a fórmula:

HO — P — ONa

CH = GH

Ό — P — ONa

OH resveratrol. incluindo trifosfato de

NaO — P — O'

OH [0078] Ésteres fosfato de resveratrol, são descritos na Publicação Internacional de Pedido de Patente N° WO 2006/029484A1, que é incorporada aqui como referência na íntegra. Trifosfato de resveratrol pode ser sintetizado pelo

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24/50 método apresentado no Exemplo 2 de WO 2006/029484A1. Mais especificamente, uma solução de resveratrol (3,4,5-tri-hidroxiestilbeno) (25 mmoles; 5,7 gramas) e dimetilaminopiridina (7,5 mmoles; 0,93 gramas) em 100 ml acetonitrila é resfriada sob nitrogênio a -10°C. Após 10 minutos, tetracloreto de carbono (375 mmoles; 36,2 ml) e DIEA (159 mmoles; 27,7 ml) são adicionados e a mistura mantida sob agitação por 30 minutos. Fosfato de dibenzila (113 mmoles; 25,0 ml) é adicionado e a mistura agiticionado e a mistura agitada por 12 horas adicionais a temperatura ambiente. O curso da reação é monitorado por TLC (sílica F254, eluente acetato de etila/n-hexano 80/20 v/v). Um litro de KH2PO4 0,5 M é adicionado e a mistura é então extraída com acetato de etila. O produto resultante, tri(dibenzilfosfato) de resveratrol, é purificado por filtração sobre uma sílica-gel, lavagem primeiro com uma mistura de acetato de etila/n-hexano (80/20 v/v) para remover qualquer resveratrol não-reagido remanescente, e, em seguida, com metanol, para obter um óleo amarelo.

[0079] Ao tri(dibenzilfosfato) de resveratrol (12,5 mmoles) em 200 mL de DCM anidro a 0°C é adicionado bromometilsilano (79 mmoles; 10,4 mL). Após 2 horas, 300 mL de H₂O são adicionados e a mistura reacional é agitada por 1 hora. A fase aquosa é lavada novamente com acetato de etila, em seguida liofilizada para obter um óleo laranja.

[0080] Ao produto obtido acima, solubilizado em 400 mL de etanol, é adicionado CHaONa (37 mmol; 2,03 g) e a reação agitada por 12 horas a temperatura ambiente. O etanol é evaporado em um rotavapor, e o resíduo solubilizado em H₂O. A fase aquosa é lavada com acetato de etila e liofilizada. O espectro de massa do sólido branco resultante mostra a presença de trifosfato de resveratrol (PM = 468,1), com um rendimento total > 90% com respeito à resveratrol.

[0081] Se desejado, o trifosfato de resveratrol poderá ser neutralizado com bases orgânicas ou inorgânicas tais como hidróxido

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25/50 de sódio, hidróxido de potássio e similares. Particularmente preferido é o caso em que o trifosfato de resveratrol é neutralizado com hidróxido de sódio para formar trifosfato trissódico de resveratrol. Trifosfato de resveratrol pode também ser comprado da Ajinomoto na forma neutralizada, apresentando o trifosfato trissódico de resveratrol CTFA.

B. Ésteres de Ácidos Carboxílicos de Resveratrol [0082] Outro grupo de derivados de resveratrol que pode ser usado na presente invenção são ésteres de resveratrol e ácidos carboxílicos alifáticos ou aromáticos em que um ou mais de X, Y e Z é um grupo C(O)-Ri, em que Ri é selecionado do grupo que consiste de C1-C40 alquila linear, ramificada, saturada ou insaturada, ou cíclica, C1-C40 alquila substituída, C1-C40 alquenila, C1-C40 alquenila substituída, C1-C40 alquinila, C1-C40 alquinila substituída, arila, C1-C40 arila e C1-C40 arila substituída. Em uma modalidade preferida, o grupo R é uma cadeia normal ou ramificada graxa, ou C6-30, grupo alquila saturado ou insaturado. Os substituintes podem ser selecionados de cadeia C1-40 normal ou ramificada, alquila saturada ou insaturada, halogênio (tal como flúor), hidrogênio, alcóxi, hidroxila e similares.

[0083] Ácidos carboxílicos exemplares que podem ser usados para formar ésteres de resveratrol incluem, mas sem se limitar aos mesmos: ácidos monocarboxílicos saturados, tais como ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico (C4), ácido valérico, ácido hexanoico, ácido caprílico (C8), ácido láurico, ácido esteárico (C18), ácido isosteárico (C18 ramificado), ácido linoleico, ácido linolênico, ácido mirístico (C14), ácido araquídico (C20), ácido araquidônico, ácido erúcico, ácido beênico (C22), ácido láurico (C12), ácido cáprico (C10), ácido caproico (C6) e ácido palmítico (C16); ácidos monocarboxílicos insaturados, tais como ácido acrílico, ácido metacrílico, ácido sórbico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido linolênico, ácido docosa-hexaenoico e ácido eicosapentaenoico; amino ácidos, tais como arginina, glutamina e

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26/50 tirosina; cetoá acidos, tais como ácido pirúvico e ácido acetoacético; ácidos carboxílicos aromáticos, tais como ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido salicílico e ácido ferúlico; ácidos di e tricarboxílicos, tais como ácido oxálico, ácido malônico, ácido málico, ácido succínico e ácido glutárico. A designação C seguida de um número indica o número de átomos de carbono na cadeia alquila.

[0084] Segue-se uma lista de ésteres de ácidos carboxílicos de resveratrol exemplares que são particularmente adequados para prática da presente invenção:

3-acetato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-acetato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-diacetato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triacetato estilbeno 5-propionato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dipropionato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dipropionato-3-hidroxiestilbeno 3-butirato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-butirato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dibutirato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tributirato estilbeno 5-valerato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- divalerato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-divalerato-3-hidroxiestilbeno 3-hexanoato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-hexanoato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-di-hexanoato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tri-hexanoato estilbeno 5-caprilato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dicaprilato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dicaprilato-3-hidroxiestilbeno 3-laurato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-laurato-3,5-di-hidroxiestilbeno

5-acetato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diacetato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-diacetato-3-hidroxiestilbeno 3-propionato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-propionato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dipropionato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tripropionato estilbeno 5-butirato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dibutirato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dibutirato-3-hidroxiestilbeno 3-valerato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-valerato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-divalerato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trivalerato estilbeno 5-hexanoato -3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- di-hexanoato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-di-hexanoato-3-hidroxiestilbeno 3-caprilato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-caprilato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dicaprilato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tricaprilato estilbeno 5-laurato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dilaurato-4’-hidroxiestilbeno

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3,4’-dilaurato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trilaurato estilbeno 5-estearato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diestearato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-diestearato-3-hidroxiestilbeno 3-palmitato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-palmitato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dipalmitato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tripalmitato estilbeno 5-acrilato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diacrilato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-diacrilato-3-hidroxiestilbeno 3-metacrilato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-metacrilato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dimetacrilato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trimetacrilato estilbeno 5-sorbato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dissorbato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dissorbato-3-hidroxiestilbeno 3-oleato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-oleato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dioleato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trioleato estilbeno 5-linoleato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dilinoleato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dilinoleato-3-hidroxiestilbeno 3-linolenato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-linolenato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dilinolenato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trilinolenato estilbeno

5-docosa-hexaenoato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

4’,5-dilaurato-3-hidroxiestilbeno

3-estearato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-estearato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-diestearato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triestearato estilbeno 5-palmitato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dipalmitato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dipalmitato-3-hidroxiestilbeno 3-acrilato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-acrilato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-diacrilato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triacrilato estilbeno 5-metacrilato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dimetacrilato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dimetacrilato-3-hidroxiestilbeno 3-sorbato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-sorbato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dissorbato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trissorbato estilbeno 5-oleato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dioleato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dioleato-3-hidroxiestilbeno 3-linoleato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-linoleato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dilinoleato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trilinoleato estilbeno 5-linolenato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dilinolenato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dilinolenato-3-hidroxiestilbeno 3-docosa-hexaenoato-5,4’-dihidroxiestilbeno

4'-docosa-hexaenoato-

3,5-di-hidroxiestilbeno

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3,5-didocosa-hexaenoato-4’-hidroxiestilbeno	3,4’-didocosa-hexaenoato-5- hidroxiestilbeno
4’ ,5-d idocosa-hexaenoato-3-hidroxi estilbeno	3,5,4’-tridocosa-hexaenoato estilbeno
3-eicosapentaenoico-5,4’-di-hidroxiestilbeno	5-eicosapentaenoico-3,4’di-hidroxiestilbeno
4’-eicosapentaenoico-3,5-di-hidroxiestilbeno	3,5-dieicosapentaenoico-4’- hidroxiestilbeno
3,4’-dieicosapentaenoico-5-hidroxiestilbeno	4’,5-dieicosapentaenoico-3- hidroxiestilbeno

3,5,4’-trieicosapentaenoico estilbeno 5-arginato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diarginato-4’-hidroxiestilbeno

4’,5-diarginato-3-hidroxiestilbeno 3-glutamato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-glutamato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-diglutamato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triglutamato estilbeno 5-tirosato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- ditirosato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-ditirosato-3-hidroxiestilbeno 3-piruvato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-piruvato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dipiruvato-5-hidroxiestilbeno

3-arginato-5,4’-di-hidroxiestilbeno

4’-arginato-3,5-dihidroxiestilbeno 3,4’-diarginato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triarginato estilbeno 5-glutamato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diglutamato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-diglutamato-3-hidroxiestilbeno 3-tirosato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-tirosato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-ditirosato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tritirosato estilbeno 5-piruvato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dipiruvato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dipiruvato-3-hidroxiestilbeno

3,5,4’-tripiruvato estilbeno 3-acetoacetato-5,4’-di-hidroxiestilbeno

5-acetoacetato-3,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-acetoacetato-3,5-dihidroxiestilbeno

3,5-diacetoacetato-4’-hidroxiestilbeno 3,4’-diacetoacetato-5- hidroxiestilbeno

4’,5-diacetoacetato-3-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triacetoacetato estilbeno

3-ascorbato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 5-ascorbato-3,4’-dihidroxiestilbeno

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4’-ascorbato-3,5-di-hidroxiestilbeno

3,4’-diascorbato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triascorbato estilbeno 5-benzoato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dibenzoato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dibenzoato-3-hidroxiestilbeno 3-salicilato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-salicilato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dissalicilato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trissalicilato estilbeno 5-ferulato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diferulato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-diferulato-3-hidroxiestilbeno 3-oxalato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-oxalato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dioxalato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trioxalato estilbeno 5-malonato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dimalonato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dimalonato-3-hidroxiestilbeno 3-malato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-malato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dimalato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trimalato estilbeno 5-succinato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dissuccinato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dissuccinato-3-hidroxiestilbeno 3-glutarato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-glutarato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-diglutarato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triglutarato estilbeno 5-glutarato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3,5-diascorbato-4’hidroxiestilbeno 4’,5-diascorbato-3-hidroxiestilbeno 3-benzoato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-benzoato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dibenzoato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tribenzoato estilbeno 5-salicilato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dissalicilato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dissalicilato-3-hidroxiestilbeno 3-ferulato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-ferulato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-diferulato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triferulato estilbeno 5-oxalato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dioxalato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dioxalato-3-hidroxiestilbeno 3-malonato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-malonato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dimalonato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trimalonato estilbeno 5-malato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dimalato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dimalato-3-hidroxiestilbeno 3-succinato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-succinato-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dissuccinato-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trissuccinato estilbeno 5-glutarato-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diglutarato-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-diglutarato-3-hidroxiestilbeno 3-glutarato-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-glutarato-3,5-di-hidroxiestilbeno

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3,5-diglutarato-4’-hidroxiestilbeno 3,4’-diglutarato-5-hidroxiestilbeno

4’,5-diglutarato-3-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triglutarato estilbeno.

[0085] Um grupo particularmente preferido de ésteres de ácidos carboxílicos de resveratrol são ésteres de ácidos graxos saturados ou insaturados de resveratrol, tais como butiratos de resveratrol, valeratos de resveratrol, hexanoatos de resveratrol, sorbatos de resveratrol, lauratos de resveratrol, estearatos de resveratrol, palmitatos de resveratrol, oleatos de resveratrol, linoleatos de resveratrol, linolenatos de resveratrol, eicosapentaenoatos de resveratrol e docosa-hexanoatos de resveratrol. Esses ésteres de ácidos graxos de resveratrol podem ser imediatamente formados por esterificação de resveratrol com derivados de ácidos de acordo com a reação de Schotten-Baumann em meio aquoso alcalino, conforme descrito pela Patente dos Estados Unidos N° 6.572.882, cujo conteúdo é incorporado aqui como referência na íntegra para todos os fins.

[0086] Outro grupo particularmente preferido de ésteres de ácidos carboxílicos de resveratrol são os ésteres de ácidos carboxílicos aromáticos de resveratrol, tais como ferulatos de resveratrol, que podem ser formados reagindo resveratrol com ácido ferúlico em meio aquoso.

C. Derivados de Éteres de Resveratrol [0087] Ainda outro grupo de derivados de resveratrol que pode ser usado na presente invenção são éteres de resveratrol, em que um ou mais de X, Y e Z é -R2, em que R2 é selecionado do grupo que consiste de C1-C40 alquila linear, ramificada ou cíclica, C1-C40 alquila substituída, C1-C40 alquenila, C1-C40 alquenila substituída, C1-C40 alquinila, C1-C40 alquinila substituída, C1-C40 arila, C1-C40 arila substituída e mono, di, oligo e polissacarídeos. Segue-se uma lista de ésteres de resveratrol exemplares que são particularmente adequados para prática da presente invenção:

3-metóxi-5,4’-di-hidroxiestilbeno 5-metóxi-3,4’-di-hidroxiestilbeno

4’-metóxi-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,5-dimetóxi-4’-hidroxiestilbeno

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3,4’-dimetóxi-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trimetoxiestilbeno 5-etóxi-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dietóxi-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dietóxi-3-hidroxiestilbeno 3-propilóxi-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-propilóxi-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dipropilóxi-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-tripropiloxiestilbeno 5-fenilóxi-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- difenilóxi-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-difenilóxi-3-hidroxiestilbeno 3-glicosídeo-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-glicosídeo-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-diglicosídeo-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-triglicosídeo estilbeno.

4’,5-dimetóxi-3-hidroxiestilbeno

3-etóxi-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-etóxi-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-dietóxi-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trietoxiestilbeno 5-propilóxi-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- dipropilóxi-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-dipropilóxi-3-hidroxiestilbeno 3-fenilóxi-5,4’-di-hidroxiestilbeno 4’-fenilóxi-3,5-di-hidroxiestilbeno 3,4’-difenilóxi-5-hidroxiestilbeno 3,5,4’-trifeniloxiestilbeno 5-glicosídeo-3,4’-di-hidroxiestilbeno

3.5- diglicosídeo-4’-hidroxiestilbeno 4’,5-diglicosídeo-3-hidroxiestilbeno [0088] Em uma modalidade específica da presente invenção, é usado um derivado de resveratrol metoxissubstituído. Por exemplo, as composições da presente invenção poderão compreender 3,5-dimetóxi4’-hidroxiestilbeno, que pode ser extraído da árvore de kino indiana (Pterocarpus marsupium) e é comercialmente disponível sob o nome comercial PTEROESTILBENO da Sigma-Aldrichem St. Louis, MO.

[0089] Em outra modalidade específica da presente invenção, o derivado de resveratrol contém um ou mais grupos protetores contendo sacarídeos, tais como glicose, galactose, manose, frutose, sacarose, lactose, maltose, trealose e similares. Por exemplo, glicosídeo de resveratrol, que pode ser obtido por extração de plantas ou de material vegetal tal como tecido de Polygonum cuspidatum ou de culturas in vitro de células Vitis vinifera, é usado nas composições cosméticas da presente invenção.

D. Derivados de Resveratrol que Contêm Nitrogênio [0090] Os derivados de resveratrol usados nas composições da

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32/50 presente invenção poderão também conter um ou mais grupos funcionais que contêm nitrogênio, isto é, um ou mais de A, B e C na fórmula acima são selecionados do grupo que consiste de amidas, aminas, iminas, amidinas e carboxamidinas. Segue-se uma lista de éteres de resveratrol exemplares que são particularmente adequados para prática da presente invenção:

3-amida-5,4’-di-hidroxiestilbeno	5-amida-3,4’-di-hidroxiestilbeno
4’-amida-3,5-di-hidroxiestilbeno	3,5-diamida-4’-hidroxiestilbeno
3,4’-diamida-5-hidroxiestilbeno	4’,5-diamida-3-hidroxiestilbeno
3,5,4’-triamida estilbeno	3-amino-5,4’-di-hidroxiestilbeno
5-amino-3,4’-di-hidroxiestilbeno	4’-amino-3,5-di-hidroxiestilbeno
3,5-diamino-4’-hidroxiestilbeno	3,4’-diamino-5-hidroxiestilbeno
4’,5-diamino-3-hidroxiestilbeno	3,5,4’-triamino estilbeno
3-imino-5,4’-di-hidroxiestilbeno	5-imino-3,4’-di-hidroxiestilbeno
4’-imino-3,5-di-hidroxiestilbeno	3,5-di-imino-4’-hidroxiestilbeno
3,4’-di-imino-5-hidroxiestilbeno	4’,5-di-imino-3-hidroxiestilbeno
3,5,4’-tri-imino estilbeno	3-amidino-5,4’-di-hidroxiestilbeno
5-amidino-3,4’-di-hidroxiestilbeno	4’-amidino-3,5-di-hidroxiestilbeno
3,5-diamidino-4’-hidroxiestilbeno	3,4’-diamidino-5-hidroxiestilbeno
4’,5-diamidino-3-hidroxiestilbeno	3,5,4’-triamidino estilbeno.

[0091] Preferencialmente, mas não necessariamente, os derivados

de resveratrol da presente

invenção, quando presentes, são

encapsulados em lipossomos, seja isoldamente ou em combinação com a enzima de reparo de DNA e/ou um ou mais ingredientes ativos adicionais para cuidados com a pele, para transferência mais eficaz para a derme. Os derivados de resveratrol poderão estar presentes nas composições cosméticas da presente invenção em uma quantidade que varia de cerca de 0,001% a cerca de 95%, preferencialmente de cerca de 0,005% a cerca de 90%, mais preferencialmente de cerca de 0,1% a cerca de 20%, em peso total da composição total.

Enzima de reparo de DNA [0092] Composições da presente invenção opcionalmente contêm

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33/50 pelo menos uma enzima de reparo de DNA. Isso difere de US 11/837.658, em que pelo menos uma enzima de reparo de DNA é exigida e em que não se considera o uso de um ativador de sirt1. Concentrações sugeridas da enzima opcional de reparação de DNA são de cerca de 0,00001 a cerca de 35%, preferencialmente de cerca de 0,00005 a cerca de 30%, mais preferencialmente de cerca de 0,0001 a cerca de 25%, com respeito ao peso total da composição final.

[0093] Enzimas de reparo de DNA conforme descritas nas Patentes

U.S N°. 5.077.211, 5.190.762, 5.272.079 e 5.296.231, as quais são incorporadas aqui como referência na íntegra, são adequadas para uso nas composições e método da invenção. Um exemplo dessas enzimas de reparo de DNA pode ser adquirido de AGI/Dermatics sob o nome comercial Roxisomes® e apresenta o nome INCI extrato de Arabidopsis Thaliana. Ela pode estar presente isoladamente ou em mistura com lecitina e água. Essa enzima de reparo de DNA é sabida ser eficaz na reparação de dano de mutação na base 8-oxo-diguanina.

[0094] Outro tipo de enzima de reparo de DNA que pode ser usado é um tipo que é sabido ser eficaz na reparação de dano de mutação na base 06-metilguanine. A enzima é vendida por AGI/Dermatics sob o nome commercial Adasomes® e apresenta o nome INCI fermento de Lactobacillus, que pode ser adicionado à composição da invenção isoladamente ou em mistura com lecitina e água.

[0095] Outro tipo de enzima de reparo de DNA que pode ser usado é um tipo que é sabido ser eficaz na reperação de dímeros T-T. As enzimas estão presentes em misturas de materiais biológicos ou botânicos. Exemplos de tais ingredientes são vendidos por AGI/Dermatics sob os nomes comerciais Ultrasomes® ou Photosomes®. Ultrasomes® compreende uma mistura de lisado de Micrococcus (um produto final da lise controlada de várias espécies de micrococos), lecitina e água. Photosomes® compreende uma mistura

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34/50 de extrato de plânctons (que é o extrato de biomassa marinha que inclui um ou mais dos seguintes organismos: talassoplâncton, microalgas verdes, diátomos, algas azul-esverdeadas e algas fixadoras de nitrogênio), água e lecitina.

[0096] Outro tipo de enzima de reparo de DNA pode ser um componente de vários lisados bacterianos inativados tal como lisado de Bifida ou lisado de fermento de Bifida, este um lisado de bactérias Bifido que contêm os produtos metabólicos e frações citoplasmáticas quando bactérias Bifido são cultivadas, inativadas e, em seguida, desintegradas. Esse material apresenta o nome INCI Lisado de Fermento de Bifida.

[0097] Outras enzimas de reparo de DNA adequados incluem

Endonuclease V, que poderá ser produzida pelo gene denV do bacteriófago T4. Também adequadas são T4 endonuclease; O⁶metilguanina-DNA metiltransferases; fotoliases tais como uracil- e hipoxantina-DNA glicosilases; endonucleases apirimidínicas/apurínicas; DNA exonucleases, glicosilases com bases danidifcadas(por exemplo, 3-metiladenina-DNA glicosilase); correndonucleases isoladamente ou em complexos (por exemplo, complexo E. coli uvrA/uvrB/uvrC endonuclease); APEX nuclease, que é uma enzima de reparo de DNA multifuncional frequentemente referida como APE; di-hidrofolato reductase; transferase terminal; topoisomerase; O⁶ benzilguanina; DNA glicosilases.

[0098] Outros tipos de enzimas de reparo de DNA adequados poderão ser classificados pelo tipo de reparação facilitada e incluem BER (reparação de excisão de base) ou enzimas de fator BER tal como uracil-DNA glicosilase (UNG); uracil DNA glicosilase monofuncional seletiva a uma fita (SMUG1); 3,N(4)-etenocitosina glicosilase (MBD4); timina DNA-glicosilase (TDG); adenina DNA glicosilase específica a A/G (MUTYH); 8-oxoguanina DNA glicosilase (OGG1); similar à

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35/50 endonuclease III (NTHL1); 3-metiladenina DNA glicosidase (MPG); DNA glicosilase/AP liase (NEIL1 ou 2); AP endonuclease (APEX 1 e 2), DNA ligase (LIG3), fator acessório de ligase (XRCC1); DNA 5'-quinase/3'fosfatase (PNKP); ADP-ribosiltransferase (PARP1 ou 2).

[0099] Outra categoria de enzimas de reparo de DNA inclui aquelas enzimas que se acredita revertem diretamente dano tal como O6-MeG alquil transferase (MGMT); 1-meA dioxigenase (ALKBH2 ou ALKBH3). [00100] Ainda outra categoria de enzimas operáveis para reparar reticulações DNA/proteína inclui Tyr-DNA fosfodiesterase (TDP1).

[00101] Também adequadas são enzimas de reparo de DNA MMR (reparação de excisão imperfeita) tal como homólogo da proteína MutS (MSH2); proteína de reparação de imperfeição (MSH3); homólogo 4 de mutS (MSH4); homólogo 5 de MutS (MSH5); ou proteína de ligação imperfeita G/T (MSH6); proteína de reparação de imperfeição no DNA (PMS1, PMS2, MLH1, MLH3); proteína similar a de aumento de segregação pós-meiótica 2 (PMS2L3); ou 4 pseudogene similar a de aumento de segregação pós-meiótica 2 (PMS2L4).

[00102] Também adequadas são enzimas de reparo de DNA conhecidas como enzimas de reparo de excisão de nucleotídeos (NER) e incluem proteína complementar do grupo C Xeroderma pigmentosum (XPC); homólogo (RAD23B) de RAD23 (S. cerevisiae); isoforma de caltractina (CETN2); Proteína 1, 2 de 3 (RPA1,2, ou 3) de RFA; 3' a 5' DNA helicase (ERCC3); 5' a 3' DNA helicase (ERCC2); fator de transcrição básica (GTF2H1, GTF2H2, GTF2H3, GTF2H4, GTF2H5); quinase de ativação de CDK (CDK7, CCNH); proteína de interação com ciclina G1 (MNAT1); proteína de reparação de excisão de DNA ERCC5l; complementação cruzada 1 de reparação de excisão (ERCC1); DNA ligase 1 (LIG1); helicase dependente de ATP (ERCC6); e similares.

[00103] Também adequadas podem ser enzimas de reparo de DNA na categoria que facilita recombinação homóloga e incluem, mas sem

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36/50 se limitar às mesmas, homólogo da proteína de reparação de DNA RAD51 (RAD51, RAD51L1, RAD51B, etc.); proteína de reparação de DNA XRCC2; proteína de reparação de DNA XRCC3; proteína de reparação de DNA RAD52; ATPase (RAD50); 3' exonuclease (MRE11A); e similares.

[00104] Enzimas de reparo de DNA que são DNA polimerases são também adequadas e incluem subunidade de DNA polimerase beta (POLB); DNA polimerase gama (POLG); subunidade delta de DNA polimerase (POLD1); subunidade A de DNA polimerase II (POLE); proteína auxiliar de DNA polimerase delta (PCNA); DNA polimerase zeta (POLZ); homólogo de MAD2 ((REV7); DNA polimerase eta (POLH): DNA polimerase capa (POLK): e similares.

[00105] Vários tipos de enzimas de reparo de DNA que são com freqüência referidos como nucleases editáveis e processáveis incluem 3'-nuclease; 3'-exonuclease; 5'-exonuclease; endonuclease; e similares. Outros exemplos de enzimas de reparo de DNA incluem DNA helicases, incluindo enzimas tal como ATP DNA helicase e similares. As enzimas de reparo de DNA poderão estar presentes como componentes de extratos botânicos, lisados bacterianos, materiais biológicos e similares. Por exemplo, extratos botânicos poderão conter enzimas de reparo de DNA.

Exemplo 1: Ativadores de Sirt1 (Orsirtine™ e Resveratrol) Melhoram a Sobrevivência de Queratinócitos Sinergicamente [00106] Orsirtine™ ((SEQ ID No. 8) G - L - Y - D - N - L- E) e resveratrol, agents de retardamento de mitose, foram testados em relação à sua capacidade de melhorar a sobrevivência de queratinócitos humanos irradiados por UVB.

Métodos:

[00107] Queratinócitos humanos normais foram cultivados em Meio Epilife com Suplemento de Crescimento de Queratinócito Humanos. As

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37/50 células foram subcultivadas em places de 96 poços (Costaf). Queratinócitos foram pré-tratados com resveratrol (25μM) e Orsirtine (1%, 3%) isoladamene e em um complexo de resveratrol (25μΜ) e Orsirtine™ (3%). Queratinócitos foram tratados com o complexo não diluído e com diluições de 1:2, 1:4 e 1:8 (complexo : meio Epilife).

[00108] Queratinócitos foram incubados com esses tratamentos de um dia para o outro a 37°C; 5% de CO2. Após 24 horas, o tratamento foi aspirado e os queratinócitos foram lavados uma vez em D-PBS. 100μl de D-PBS foram adicionados para a irradiação. As células foram submetidas à irradiação UVB a 0, 45, 90 e 135 mJ/cm² de UVB. Após a irradiação, D-PBS foi removido. Queratinócitos foram pós-tratados apropriadamente e incubados de um dia para o outro a 37°C; 5% de CO2. No dia seguinte, células foram ensaiadas em relação a viabilidade, utilizando reagente MTS (CellTiter96, Promega). Leituras de absorbância foram tomadas no espectrofotômetro SpectraMax190 (Molecular Devices) a 490nm após uma incubação de aproximadamente duas horas a 37°C; 5% de CO2.

Resultados e Conclusão:

[00109] Referindo-se à figura 2, sob baixa irradiação de UV (45 mJ/cm²) registra-se que as células não exibem dano intenso, de modo que se esperava serem desprezíveis melhorias na sobrevivência. O que se observa, contudo, é que células tratadas com apenas resveratrol mostram uma taxa de sobrevida diminuída de 20%, e células tratadas com apenas Orsitine™ 3% mostram uma taxa de sobrevida diminuída de 8%. No entanto, células tratadas com complexo diluído 1:2 (resveratrol 25μΜ e Orsirtine™ 3%) ou com o complexo não diluído apresentaram o mesmo resultado do controle. Do mesmo modo, quando o complexo é diluído 1:4 e em seguida 1:8, a sobrevivência diminui. Assim, resveratrol isoladamente e Orsirtina 3% também isoladamente diminuem sobrevivência celular. Entretanto, a combinação de

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38/50 resveratrol e Orsirtina 3% não reduzem sobrevivência celular. Mas a combinação pode melhorar a taxa de sobrevivência celular, em relação ao controle?

[00110] A 90 mJ/cm² de irradiação UV, as taxas de sobrevivência de células não tratadas foram de 47%. Em comparação, sobrevivência de células tratadas com o complexo não diluído e diluído (resveratrol 25 μΜ e Orsirtine™ 3%) abedeceram a uma relação dependente de dose, como segue:

Diluição de complexo	1:8	1:4	1:2	não diluído
Aumento de sobrevida após 90 mJ/cm² de UV	28%	34%	60%	64%

[00111] enquanto sobrevivência de células tratadas com apenas

Orsirtine™ ou apenas resveratrol foi como segue:

	Orsirtine™ 3%	Orsirtine™ 1%	Resveratrol 25 μΜ
Aumento de sobrevida após 90 mJ/cm² de UV	11%	-17%	-15%

[00112] A 135 mJ/cm² de irradiação de UV, a taxa de sobrevivência de células não tratadas foi de 19%. Em comparação, sobrevivência de células tratadas com o complexo não diluído e diluído obedeceu a uma relação dependente de quase dose, como segue:

Diluição de complexo	1:8	1:4	1:2	não diluído
Aumento de sobrevida após 135 mJ/cm² de UV	11%	5%	56%	131%

[00113] enquanto sobrevivência de células tratadas com apenas

Orsirtine™ ou apenas resveratrol foi como segue:

	Orsirtine™ 3%	Orsirtine™ 1%	Resveratrol 25 μΜ
Aumento de sobrevida após 135 mJ/cm² de UV	26%	5%	22%

[00114] Pode-se concluir que o complexo (resveratrol 25 μΜ e

Orsirtine™ 3%) fornece significativa proteção contra citotoxicidade

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39/50 induzida por UVB e aumento de sobrevivência celular sobre o resveratrol e Orsirtine™ isoladamente.

[00115] Esses números pareceriam também sugerir que o efeito da combinação de Orsirtine™ e Resveratrol sobre sobrevivência de queratinócitos é sinérgico. Por exemplo, Orsirtine™ 3%, por si só, eleva a sobrevivência em torno de 11% (para UVB de 90 mJ/cm²) e em torno de 26% (para UVB de 135 mJ/cm²). Resveratrol 25 μΜ, por si só, reduziu a sobrevivência em torno de 15% (para UVB de 90 mJ/cm²) e a elevou em torno de 22% (para UVB de 135 mJ/cm²). Entretanto, a combinação não diluída de Orsirtine™ 3% e Resveratrol 25 μΜ elevou a sobrevivência de queratinócitos em cerca de enormes e inesperados 64% (para UVB de 90 mJ/cm²) e 131% (para UVB de 135 mJ/cm²). Mesmo quando diluída até 1:8, a combinação ainda aumenta a sobrevivência de queratinócitos em torno de 28% (para UVB de 90 mJ/cm²) e 11% (para UVB de 135 mJ/cm²). Isso é totalmente inesperado. Uma vez que Orsirtine™ é um conhecido ativador de sirtuína e Resveratrol um suspeito ativador de sirtuína, a tremenda melhoria na sobrevivência de queratinócitos não seria esperada por aquele versado na técnica. No máximo, um efeito aditivo poderia ser esperado, mas não um efeito sinérgico.

[00116] Que concentrações relativas de (SEQ ID No. 8) G - L - Y - D - N - L- E e resveratrol produziriam um substancial efeito sinérgico sobre sobrevivência de queratinócitos? Que pergunta pode ser respondida por experimentação de rotina, agora que o efeito foi identificado? Por combinação sinérgica de ativador de sirt1 e resveratrol entendemos uma combinação de (SEQ ID No. 7) (AA)n- G - L - Y - D - N - L- E - (AA)n e resveratrol ou derivados destes, o que aumenta a taxa de sobrevida de queratinócitos (tais taxas são medidas por métodos conhecidos no estado da técnica), por uma quantidade que é superior à soma do efeito de cada material individualmente.

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40/50

Exemplo 2: Ativadores de SIRT1, nas Concentrações Corretas, Melhoram a Eficácia de Ativadores de Genes Circadianos e Enzimas de reparo de DNA com Relação a Exposição a UVB [00117] De acordo com métodos descritos no Exemplo 1, dois complexos foram testados sob várias diluições, em relação a seu efeito sobre sobrevivência de queratinócitos, após exposição a UV. Complexo I consistiu de Meio Epilife com Suplemento de Crescimento de Queratinócitos Humanos e Chronolux (0,1%), extrato de Bifidus (12,4%), Adasome (0,05%) e Roxisome (0,05%). Complexo II consistiu de Complexo I mais Orsirtine™ (0,08%) e Resveratrol (25 μΜ).

Complexo I foi testado sob forma não diluída e sob diluições de 1:2 e 1:4 (complexo : meio Epilife). Complexo II foi testado sob forma não diluída e sob diluições de 1:2, 1:4 e 1:8. O meio foi usado como controle. Queratinócitos foram expostos a UVB sob níveis de 100, 150 e 200 mL/cm².

Resultados e Conclusão:

[00118] Referindo-se à figura 3, e comparando Complexo II com

Complexo I dentro da mesma exposição a UVB,

Melhoria: Complexo II comparado com Complexo I
Diluição de ambos os complexos	100 mJ/cm²	150 mJ/cm²	200 mJ/cm²
1:4	10,2%	4,7%	3,8%
1:2	3,2%	7,2%	9,6%
Não diluído	-5,7%	-3,0%	3,6%

[00119] Em todos os casos, pelo menos dois, Orsirtine™ e Resveratrol, melhoram a sobrevivência de queratinócitos após exposição a UVB em comparação com ativadores de genes circadianos isoladamente. No entanto, deslocando-se para baixo nas duas primeiras colunas (100 mJ/cm²), esses dados parecem sugerir que quanto menos ativador de sirt1 em combinação com ativador de genes circadianos, melhor. No entanto, esse padrão é quebrado nas colunas 2 e 3 (150 mJ/cm² e 200 mJ/cm²), sugerindo que uma combinação ótima de

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41/50 ativadores de sirtl e de genes circadianos depende da quantidade de UVB a que os queratinócitos são expostos. De fato, deslocando-se através da fila 3 (não diluído) da esquerda para a direita, os dados sugerem que a adição de Orsirtine™ e Resveratrol é garantida por quantidades maiores de exposição a UVB. Esse padrão é também observado nas amostras sob diluição 1:2, mas é invertido nas amostras sob diluição 1:4, sugerindo que sob exposição menor a UVBs, menos ativação de sirt1 é necessária. Assim, tomados como um todo, os resultados desses experimentos sugerem que as concentrações ótimas relativas de ativadores de genes circadianos e ativadores de sirt1 dependem da quantidade de exposição a UVB. Entretanto, todas as amostras de testes de Complexo II (ativador circadiano mais ativador de sirt1) mostraram melhoria na sobrevivência de queratinócitos com relação aos controles. Determinar concentrações ótimas relativas de ativadores de genes circadianos e ativadores de sirt1 pode exigir somente experimentação de rotina, agora que aquele habilitado no estado da técnica sabe que concentração relativa é uma variável eficaz em termos de resultados, o que era até aqui desconhecido. Composições [00120] A forma de uma composição da presente invenção não é geralmente limitada. Por exemplo, composições da invenção podem ser na forma de emulsões, soluções ou dispersões aquosas, géis ou sistemas anidros. Se na forma de uma emulsão, uma composição poderá ser uma emulsão água em óleo ou óleo em água. Se na forma de uma emulsão, a composição poderá conter cerca de 1 a 99%, preferencialmente cerca de 5 a 90%, mais preferencialmente cerca de 10 a 85% água e cerca de 1 a 99%, preferencialmente cerca de 5-90%, mais preferencialmente cerca de 5 a 75%, de óleo. Se na forma de uma suspensão ou dispersão aquosa, a composição poderá em geral conter cerca de 1 a 99,9%, preferencialmente cerca de 5 a 95%, mais

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42/50 preferencialmente cerca de 10 a 90%, de água, com os ingredientes restantes sendo os ingredientes ativos ou outros ingredientes da fórmula.

[00121] Preferencialmente, a composição contém outros ingredientes que proporcionarão um produto cosmética ou farmaceuticamente aceitável. Classes de tais ingredientes podem incluir umectantes, filtros solares de UVA e UVB, surfactantes, extratos botânicos, materiais biológicos, agentes de estruturação de fase aquosa (isto é, polissacarídeos, polímeros de acrilato, PEG ou poliglicerinas de alto peso molecular), óleos voláteis e não voláteis (incluindo silicones), vitaminas e antioxidantes.

[00122] É também possível que os ativadores de genes circadianos e os ativadores de sirt1 estejam em composições separadas, que podem ser aplicadas na mesma área da pele em sucessão ou que podem ser aplicadas distribuindo uma quantidade eficaz de cada composição, misturando as composições e, em seguida, aplicando a mistura na pele.

Composições Preferidas [00123] Composições preferidas estão na forma de solução ou emulsão aquosa e contêm pelo menos um tensoativo orgânico não iônico, pelo menos um filtro solar químico, pelo menos um ativador dos genes clock ou per1, pelo menos um ativador peptídico de sirt1 e pelo menos uma enzima de reparo de DNA. Pelo menos um extrato botânico e pelo menos um óleo poderão também ser preferidos.

[00124] Mais preferida é uma composição em que o tensoativo orgânico não iônico é um álcool alcoxilado, o filtro solar químco é um filtro solar de UVB, o ativador dos genes clock ou per1 de queratinócitos é Tripeptídeo-32, o ativador de sirt1 é uma combinação de moléculas de Orsirtine™-like e Resveratrol, a enzima de reparo de DNA é uma mistura de extrato de Arabidopsis Thaliana, lisado de Micrococcus,

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43/50 lisado de Fermento de Bifida, fermento de Lactobacillus e extrato de Plânctons, e o denominado pelo menos um óleo é um éster orgânico ou hidrocarboneto.

Métodos da Invenção [00125] Os métodos da invenção são principalmente dirigidos à reparação de dano a queratinócitos humanos, preferencialmente queratinócitos faciais, dano este que ocorre em resposta a agressores externos. Um método consiste em aplicar à pele humana danificada uma composição ou composições que compreendem pelo menos um ativador dos genes clock ou per1 de queratinócitos e pelo menos um ativador de sirt1. Opcionalmente, a(s) composição(ões) do método poderá(ão) compreender pelo menos uma enzima de reparo de DNA. Ao aplicar a composição após dano ter ocorrido, o ciclo circadiano normal será restaurado mais rapidamente. Contudo, a retenção do ciclo celular antes de mitose permitirá mais tempo para reparação de DNA. Por esse método, dano celular substancial será revertido e/ou controlado de passar para células filhas. O método melhorará também a viabilidade e longevidade de queratinócitos.

[00126] A invenção é também dirigida a um método de prevenção ou inibição de dano a queratinócitos humanos, preferencialmente queratinócitos facais, dano este que ocorreria em resposta a agressores externos. O método consiste em aplicar à pele humana sob risco de experimentar dano ambiental uma composição ou composições que compreendem pelo menos um ativador dos genes clock ou per1 de queratinócitos e pelo menos um ativador de sirt1. Opcionalmente, a(s) composição(ões) do método pode(m) compreender pelo menos uma enzima de reparo de DNA. Ao aplicar a composição antes de dano ter ocorrido, o ciclo circadiano normal poderá ser mais rigorosamente mantido e o processo de reparação de ciclo celular normal poderá ser mais rigorosamente mantido. Por esse método, dano celular substancial

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44/50 será impedido e/ou controlado de passar para células filhas. O método melhorará também a viabilidade e longevidade de queratinócitos. [00127] Nos métodos da invenção, a(s) composição(ões) poderá(ão) ser aplicada(s) à pele uma ou mais vezes ao dia. Por exemplo, a(s) composição(ões) poderá(ão) ser aplicada(s) à pele de manhã antes de começar as atividades diárias e/ou à noite, imediatamente antes de descansar. Esses períodos são preferidos, porque a pele está geralmente sob a menor quantidade de ataque ambiental, significando que a reparação de células da pele pode ser maximizada. Nesse momentos. Imediatamente antes de descansar ou imediatamente antes de descanso noturno significam dentro de uma hora antes de ir para a cama, mais preferencialmente, dentro de 30 minutos de ir para a cama. Pela manhã é mais uma abordagem preventiva, enquanto imediatamente antes de descansar ou à noite é mais uma abordagem de reparação. A(s) composição(ões) pode(m) ser aplicada(s) como parte de um regime, isto é, a pele é limpa e tratada com toner, após o que a(s) composição(ões) da invenção é(são) aplicada(s). A(s) composição(ões) poderá(ão) ser parte de um kit que contém um produto de limpeza, um toner e a(s) composição(ões) da invenção.

[00128] Preferencialmente, a(s) composição(ões) é(são) aplicada(s) à pele do rosto e/ou pescoço e decote imediatamente antes de descansar, para reparar queratinócitos de DNA danificado e proporcionar melhoria geral da pele. Combinando os ativadores dos genes clock e per1 com ativadores de sirt1 (e preferencialmente, enzimas de reparo de DNA) em uma composição usada para tratar pele facial à noite, imediatamente antes de descansar, maximiza a reperação de de dano de DNA de queratinócitos e também promove viabilidade, longevidade e saúde celular.

[00129] Como observado acima, é também possível que os ativadores de genes circadianos e os ativadores de sirt1 estejam em

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45/50 composições separadas. Nesse caso, métodos da invenção inclum etapas de aplicar cada composição na mesma área da pele em sucessão ou distribui uma quantidade eficaz de cada composição, misturar as composições e, em seguida, aplicar a mistura à pele. Exemplos [00130] A invenção será adicionalmente descrita em conjunto com os exemplos seguintes que são apresentados para fins de ilustração somente. Composições de tratamento da pele podem ser preparadas como segue.

Exemplo 1

Ingrediente	p/p%	p/p%
Oleth-3 fosfato	0,45	0,45
Oleth-3	0,35	0,35
Oleth-5	0,24	0,24
Butileno glicol	0,20	0,20
Esqualano	0,50	0,50
BHT	0,10	0,10
Metoxicinamato de Etil-hexila	0,10	0,10
Choleth-24/ceteth-24	0,10	0,10
Trietanolamina	0,11	0,11
Palmitato de retinila/óleo de Zea mays (milho)/BHT/BHA	0,10	0,10
Butileno glicol	1,10	1,10
Camomila	0,03	0,03
Bisabolol	0,10	0,10
Metil parabeno	0,46	0,46
PEG-75	4,00	4,00
Bis-PEG-18 éter metílico dimetilsilano	2,00	2,00
Glycereth-26	1,00	1,00
Metil gluceth-20	4,00	4,00
EDTA trissódico	0,10	0,10
Pantetina	0,14	0,14
Cafeína	0,05	0,05
Goma xantana	0,075	0,075
Carbômero	0,26	0,26
Trietanolamina	0,50	0,50

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46/50

Ingrediente	p/p%	p/p%
Fenoxietanol	0,70	0,70
Álcool benzílico	0,10	0,10
Lisado de fermento de Bifida	9,40	9,40
Água/lisado de fermento de Bifida/lecitina hidrogenado	3,00	3,00
Butilenoglicol/água/extrato de Cola acuminata	3,00	3,00
Ácido ribonucleico sódico	0,01	0,01
Água/butilenoglicol/tripeptídeo-32	0,10	0,10
Fermento de Lactobacillus/lecitina/água	0,05	0,05
Água/Extrato de Arabidopsis thaliana/lecitina	0,05	0,05
Orsirtina 10x	0,08	0,08
Resveratrol	-------	25 μΜ
Fenoxietanol	0,02	0,02
Hialuronato de sódio	0,01	0,01
Vermlho N°, 4 FD&C (solução aquosa a 1% com butilenoglicol)	0,04	0,04
Amarelo N°, 5 FD&C (1% solução aquosa com butileno glicol)	0,09	0,09
Verde N°, 5 FD&C (solução a 0,1% com butileno glicol)	0,001	0,001
Água	QS	QS

Exemplos 2 a 4 [00131] Uma primeira composição de tratamento da pele contendo ativador do gene clock (Chronolux®, tripeptídeo-32), mas não ativador(es) de sirt1, pode ser preparada de acordo com a fórmula A (exemplo 2). Uma segunda composição de tratamento da pele contendo ativador do gene clock (Chronolux® e ativadores de sirt1 (Orsirtine™ e Resveratrol) pode ser preparada de acordo com a fórmula B (exemplo 3). Uma terceira composição de tratamento da pele compreendendo ativador de sirt1 (Orsirtine™), mas não ativador de genes circadianos, pode ser preparada de acordo com a fórmula C (exemplo 4). As composições são preparadas combinando os ingredientes e misturando bem para formar um líquido. As composições poderão ser armazenadas em frascos de vidro marrons.

[00132] A Composição A compreende ativadores de genes

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47/50 circadianos e ativadores de sirt1, Orsirtine™ e resveratrol. Assim, a composição A destina-se a uso por si só. A Composição B compreende Chronolux® (ativador de genes circadianos), mas não ativadores de genes sirt1. Desse modo, a composição B destina-se a uso com uma composição separada que apresenta caesenta capacidade de ativar genes sirt1, tal como a composição C.

Ingrediente	A (p/p%)	B (p/p%)
Oleth-3 fosfato	0,45	0,45
Oleth-3	0,35	0,35
Oleth-5	0,24	0,24
Butilenoglicol	0,20	0,20
Esqualano	0,50	0,50
BHT	0,10	0,10
Metoxicinamato de etil-hexila	0,10	0,10
Choleth-24/ceteth-24	0,10	0,10
Trietanolamina	0,11	0,11
Palmitato de retinila /óleo de Zea mays (milho) /BHT/BHA	0,10	0,10
Butileno glicol	1,10	1,10
Camomila	0,03	0,03
Bisabolol	0,10	0,10
Água	QS	QS
Metil parabeno	0,46	0,46
PEG-75	4,00	4,00
Bis-PEG-18 éter metílico dimetilsilano	2,00	2,00
Glycereth-26	1,00	1,00
Metil gluceth-20	4,00	4,00
EDTA trissódico	0,10	0,10
Pantetina	0,14	0,14
Cafeína	0,05	0,05
Goma xantana	0,075	0,075
Carbômero	0,26	0,26
Trietanolamina	0,50	0,50
Fenoxietanol	0,70	0,70
Álcool benzílico	0,10	0,10

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48/50

Ingrediente	A (p/p%)	B (p/p%)
Lisado de fermento de Bifida	9,40	9,40
Água/lisado de fermento de Bifida/lecitina hidrogenada	3,00	3,00
Butilenoglicol/água/extrato de Cola acuminata	3,00	3,00
Ácido ribonucleico sódico	0,01	0,01
Água/butilenoglicol/tripeptídeo-32 (Chronolux®)	0,20	0,20
Água/butilenoglicol/extrato de arroz hidrolisado (Orsirtine™)	0,08	------
Resveratrol	25 μΜ	—
Fermento de Lactobacillus/lecitina/água	0,05	0,05
Água/extrato de Arabidopsis thaliana/lecitina	0,05	0,05
Fenoxietanol	0,02	0,02
Hialuronato de sódio	0,01	0,01
Vermelho N° 4 FD&C (solução aquosa a 1% com butilenoglicol)	0,04	0,04
Amarelo N° 5 FD&C (solução aquosa a 1% com butilenoglicol)	0,09	0,09
Verde N° 5 FD&C (solução a 0,1 % com butilenoglicol)	0,001	0,001
Ingrediente	C (p/p%)
CREATINA	0,08
TREALOSE	0,50
ACETIL GLICOSAMINA	0,50
CAFEÍNA	0,20
CARBÔMERO	0,15
CROSPOLÍMERO ACRILATOS/C10-30 ACRILATO DE ALQUILA/FENOXIETANOL	0,108
ACRILOILDIMETILTAURATO DE AMÔNIO/COPOLÍMERO VP	0,50
BUTILENOGLICOL	1,00
GOMA XANTANA	0,08
HIDRÓXIDO DE SÓDIO	0,03
ÁLCOOL CETÍLICO	2,00
C12 a 20 ÁCIDO PEG-8 ÉSTER	3,00
TRIGLICERÍDEO CAPRÍLICO/CÁPRICO	5,90
DIMETICONA	0,50
CETIL FOSFATO DE POTÁSSIO	0,20
ÓLEO DE COCOS NUCIFERA (COCO)/EXTRATO DE FOLHA DE ALOE BARBADENSIS	1,60

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Ingrediente A B (p/p%) (p/p%)
COLESTEROL/SULFATO DE POTÁSSIO	0,05
PEG-100 ESTEARATO	0,75
FITANTRIOL	0,50
EXTRATO DE TRITICUM VULGARE (FARELO DE TRIGO)/EXTRATO DE FOLHA DE OLEA EUROPAEA (OLIVA)	0,20
ESTERÓIS DE PUNICA GRANATUM (POMEGRANATO)	0,50
PENTILENOGLICOL	1,00
FENOXIETANOL	0,30
GLICERINA USP99% (vegetal)	2,00
ETIL-HEXILGLICERINA	1,00
EXTRATO DE FERMENTO DE LEVEDURA (EXTRATO DE RAÍZ DE POLIGONUM CUSPIDATUM (resveratrol) / EXTRATO DE HUMULUS LUPULUS / ÁCIDO LINOLEICO / ÁCIDO LINOLÊNICO / EXTRATO DE SEMENTE DE VITIS VINIFERA / EXTRATO DE ROSMARINUS OFFICINALIS / EXTRATO DE SELAGINELLA TAMARISCINA / CICLODEXTRINA / ETILBISIMINOMETILGUAIACOL CLORETO DE MANGANÊS / EXTRATO DE CASCA DE CITRUS RETICULATA / EXTRATO DE DE SUCO DE PUNICA GRANATUM / ÁCIDO NORDI-HIDROGUAIARÉTICO / SIMETICONA)	0,50
EXTRATO DE MADEIRA DE LARIX SIBIRICA	0,10
EXTRATO DE LAMINARIA SACCHARINA	0,50
SOLUÇÃO DE EXTRATO DE LEVEDURA (ADENOSINA FOSFATO/FENOXIETANOL/SIMETICONA	0,50
ACETIL HEXAPEPTÍDEO-8	0,50
PCA SÓDICO	0,50
EXTRATO DE SIGESBECKIA ORIENTALIS (ERVA DE SÃO PAULO)	0,50
GLICERINA/ EXTRATO DE PADINA PAVONICA THALLUS	0,10
EXTRATO DE FOLHA DE ARGANIA SPINOSA	0,10
ÁGUA/BUTILENOGLICOL/EXTRATO DE SEMENTE DE TAMARINDUS INDICA	0,10
PROPILENOGLICOL DICAPRATO/BAGAÇO DE SEMENTES DE HELIANTHUS ANNUUS (GIRASSOL)/EXTRATO DE HORDEUM VULGARE (CEVADA)/EXTRATO DO FRUTO DE CUCUMIS SATIVUS (PEPINO)	0,50
BUTILENOGLICOL/EXTRATO DE CENTAURIUM ERYTHRAEA (CENTÁUREA)	0,50

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Ingrediente A B (p/p%) (p/p%)
Água/butilenoglicol/extrato de arroz hidrolisado (Orsirtine™)	0,08
HIALURONATO DE SÓDIO	2,50
ÁCIDO HIALURÔNICO	0,02
FRAGRÂNCIA (PERFUME)	0,125
COPOLÍMERO ACRILATO DE SÓDIO/ACRILOILDIMETIL TAURATO DE SÓDIO / POLIDECENO HIDROGENADO / LAURETH- 8	0,001
ÁGUA	Q.S.

[00133] Embora a invenção tenha sido descrita em conjunto com a modalidade preferida, não se pretende limitar o escopo da invenção a uma forma particular apresentada. Pelo contrário, pretende-se que essa descrição cubra alternativas, modificações e equivalentes tais como possam ser incluídas no espírito e escopo da invenção, conforme definida pelas reivindicações anexas.

Claims

1. Composição de cuidados com a pele, caracterizada pelo fato de que compreende o peptídeo:

S-T-P-NH2 (Ser-Thr-Pro-NH2) e uma combinação sinérgica de resveratrol e o peptídeo:

(SEQ ID No. 8) G - L - Y - D - N - L- E Gly-Leu-Tyr-Asp-Asn-Leu-Glu.

2. Composição de cuidados com a pele, caracterizada pelo fato de que compreende:

S-T-P-NH2 (Ser-Thr-Pro-NH2), entre 0,00001 e 25%, com relação ao peso total da composição final;

(SEQ ID No. 8) G - L - Y - D - N - L- E, entre 0,0001% e 5%, com relação ao peso total da composição final; e resveratrol, entre 0,001% e cerca de 95%, com relação ao peso total da composição final.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente pelo menos uma enzima de reparo de DNA entre 0,0001% e 25%, com relação ao peso total da composição final.

4. Composição, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a enzima de reparo de DNA é selecionada do grupo que consiste em enzimas de reparo de excisão de base (BER), enzimas de reparo de excisão de nucleotídeo (NER), DNA polimerases, DNA helicases, enzimas de reparo de imperfeição (MMR) e misturas das mesmas.

5. Composição, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que a enzima de reparo de DNA é selecionada do grupo que consiste em extrato de Arabidopsis Thaliana, fermento de Lactobacillus, lisado de Micrococcus, extrato de plânctons,

Petição 870190080829, de 20/08/2019, pág. 55/60

2/2 lisado de fermento de Bifida e misturas dos mesmos.

6. Uso do peptídeo S-T-P-NH2 (Ser-Thr-Pro-NH2) e uma combinação sinérgica de resveratrol e o peptídeo (SEQ ID No. 8) G - L - Y - D - N - L- E (Gly-Leu-Tyr-Asp-Asn-Leu-Glu), como definidos na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é para o preparo de uma composição de cuidados com a pele para inibir ou reparar danos a queratinócitos humanos devido a agressores externos ou reparar danos de UVB a queratinócitos humanos.

7. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente:

pelo menos um agente de estruturação de fase aquosa que compreende um polissacarídeo, um polímero acrílico ou misturas dos mesmos;

pelo menos um tensoativo orgânico não iônico que é um álcool alcoxilado; e pelo menos um umectante que é um C2-4 alquilenoglicol ou glicerina.