BRPI0813948B1 - Composição líquida farmacêutica de toxina botulínica com estabilidade melhorada - Google Patents
Composição líquida farmacêutica de toxina botulínica com estabilidade melhorada Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0813948B1 BRPI0813948B1 BRPI0813948-2A BRPI0813948A BRPI0813948B1 BR PI0813948 B1 BRPI0813948 B1 BR PI0813948B1 BR PI0813948 A BRPI0813948 A BR PI0813948A BR PI0813948 B1 BRPI0813948 B1 BR PI0813948B1
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- botulinum toxin
- polysorbate
- pharmaceutical composition
- liquid pharmaceutical
- methionine
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
- A61K38/4893—Botulinum neurotoxin (3.4.24.69)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/40—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
- A61K8/44—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
- A61K8/447—Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof containing sulfur
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/46—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing sulfur
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4993—Derivatives containing from 2 to 10 oxyalkylene groups
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
- A61K8/66—Enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q15/00—Anti-perspirants or body deodorants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/52—Stabilizers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Birds (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Neurology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
composição líquida farmacêutica de toxina botulínica com estabilidade melhorada a farmacêutica estabilidade invenção líquida se de aperfeiçoada. refere toxina ela a uma botulínica compreende composição que tem toxina botulínica, polissorbato 20, e metionina e, opcionalmente, isoleucina. empregando, em vez de proteína albumina derivada de animal ou gelatina, uma combinação de polissorbato 20 e metionina e, opcionalmente, isoleucina, como estabilizantes de toxina botulínica, a composição farmacêutica líquida elimina o risco de contaminar o corpo com patógenos derivados de soro ou micro-organismos e pode ser administrada de forma segura ao corpo. além disso, a composição é conveniente para uso como uma injeção direta para pacientes. superiores às composições convencionais que empregam detergentes ou aminoácidos em termos da estabilidade de armazenagem de toxina botulínica a 25 37 °c, bem como em temperaturas refrigeradas, a composição farmacêutica líquida da presente invenção é muito útil para armazenar toxina botulínica sob uma condição de emergência, tal como um ambiente sem manter temperatura baixa. a composição farmacêutica líquida pode ser facilmente preparada, porque emprega um detergente e aminoácido(s) sem um processo de liofilização.
Description
COMPOSIÇÃO LÍQUIDA FARMACÊUTICA DE TOXINA BOTULÍNICA COM ESTABILIDADE MELHORADA
Campo técnico
A presente invenção se refere, em geral, a uma composição farmacêutica líquida de toxina botulínica, mais estável, e, mais particularmente, a uma composição farmacêutica líquida, que compreende uma toxina botulínica em combinação com polissorbato 20 e metionina e, opcionalmente, isoleucina.
Fundamentos da Técnica
A toxina botulínica é uma proteína neurotoxina produzida pela bactéria Clostridium botulinum. Essa toxina bloqueia a liberação pré-sináptica de acetilcolina na articulação neuromuscular, causando paralisia flácida (ação de queda) de músculos em mamíferos. A toxina provou ser eficaz para tratar estrabismo, blefaroespasmo idiopático e espasmo hemifacial. Além disso, verificou-se recentemente que ela fornece alívio para diversos distúrbios motores de músculos involuntários, incluindo torcicolo espasmódico, distonia oromandibular e difonia espasmódica. Além disso, a toxina botulínica recebeu aprovação da FDA para melhora temporária na aparência facial de linhas de franzimento moderadas a severas e para o tratamento não cirúrgico de hiperidrose (suor excessivo nas axilas).
As proteínas de toxina botulínica sorotipo A e B são agora formuladas em formas de dosagem para uso em aplicações médicas, tais como no tratamento de torcicolo, blefaroespasmo, hiperidrose, etc., bem como em aplicações cosméticas, como redução de rugas. Drogas de proteína, incluindo proteínas de toxina botulínica, entretanto, apresentam muitos problemas durante a sua preparação. Os problemas, a maioria deles sendo atribuída à instabilidade
2/23 da proteína, são particularmente acentuados para as drogas de proteína que são formuladas com concentrações muito baixas de proteínas ativas, tais como as toxinas botulínicas.
Ao aderirem sobre superfícies sólidas, as proteínas de toxina botulínica, quando encerradas em recipientes, são aptas a aderirem às paredes internas dos recipientes, resultando em perda do ingrediente ativo. Um agente de estabilização também é necessário para evitar que as proteínas sejam oxidadas ou degradadas em fragmentos.
A albumina é selecionada na maioria dos casos para uso como estabilizante na formulação de toxina botulínica. Além de estabilizar os ingredientes de proteína ativa em composições farmacêuticas, a albumina desfruta da vantagem de mostrar imunogenicidade desprezível mesmo quando injetada no corpo. Entretanto, produtos de soro, como albumina, não estão totalmente livres da possibilidade de serem contaminados com patógenos ou com microorganismos e, desse modo, atuando como mediadores de doença, particularmente doenças virais ou doença de CreutzfeldtJakob.
Frequentemente, a gelatina é empregada ao invés de albumina. Recomenda-se que a gelatina, entretanto, não seja utilizada como estabilizante para formulação de droga, porque essa proteína, similarmente à albumina, também é | obtida de animais e pode mediar doenças.(
Um estabilizante derivado de fontes não-animais éi fornecido para a formulação farmacêutica de toxina!
botulínica pela patente coreana No. KR 10-0799400, na qual» albumina de soro recombinante (rSA), produzida em levedura, * é aplicada para formulação farmacêutica. Entretanto, não se?
pode evitar totalmente que haja a possibilidade de que um| neoepítopo, uma nova estrutura antigênica, possa ser gerada β 0 is ü
3/23 no curso da produção, isolamento e recuperação de albumina de soro recombinante (rSA), provocando uma imuno resposta do recipiente da droga. A patente coreana No. KR 10-0665469 revela uma composição farmacêutica que compreende uma toxina botulinica, polissacarideos (incluindo amido de hidróxi-etila) e um aminoácido, tal como lisina, glicina, histidina ou arginina. Essa composição farmacêutica é fornecida em uma forma de dosagem preparada por liofilização e deve ser infelizmente armazenada em baixa temperatura em um refrigerador ou congelador. A exigência de que a toxina botulinica liofilizada seja descongelada ou diluída pouco antes do uso pode causar um erro na proteína. Além de serem inconvenientes para uso, as toxinas botulinicas liofilizadas são difíceis de progredir em um tipo de administração em seringa de enchimento prévio.
Uma composição para estabilização de agentes de proteína em produtos farmacêuticos é sugerida no pedido de patente US 2007-0134199. A composição compreende um detergente não-iônico, preferivelmente polissorbato, e uma combinação de glutamina e ácido glutâmico ou asparagina e ácido aspártico. Uma diluição de toxina botulinica na composição líquida foi observada como sendo estável por 8 meses, quando armazenada a 4°C. Entretanto, como a armazenagem a 37 °C diminuiu a atividade da diluição em um mês, a composição tem uso limitado para a estabilização de agentes de proteína, como toxina botulinica, em produtos farmacêuticos a serem armazenados em temperatura ambiente. Esse déficit é, na opinião dos presentes inventores, atribuído à presença dos aminoácidos polares e, particularmente, dos aminoácidos ácidos, tais como ácido glutâmico ou ácido aspártico.
Descrição da Invenção
Problema técnico
Sendo assim, a presente invenção foi desenvolvida tendo em mente os problemas acima mencionados que ocorrem na técnica anterior, e um objetivo da presente invenção é fornecer uma composição farmacêutica que possa manter a atividade de toxina botulinica mesmo após ser armazenada por um longo período de tempo em temperatura ambiente, bem como em uma temperatura refrigerada e estar em uma forma líquida mais conveniente para uso do que em uma forma liofilizada.
Um outro objetivo da presente invenção é fornecer uma composição farmacêutica líquida, na qual a atividade da toxina botulinica pode ser mantida estavelmente sob uma condição de temperatura elevada ou refrigerada sem o uso de proteína derivada de animal, tal como a albumina ou a gelatina, ou de um estabilizador para toxina botulinica, ou de aminoácidos polares ou ácidos, tais como glutamina, ácido glutâmico, asparagina ou ácido aspártico.
Solução técnica
Para se chegar à presente invenção, uma pesquisa intensa e completa foi realizada pelos presentes inventores com muitos detergentes e aminoácidos, na preservação estável de toxina botulinica, sob uma condição de temperatura elevada, e resultou na verificação de que uma combinação de polissorbato 20 e metionina e, opcionalmente, isoleucina é capaz de melhorar muito a estabilidade de toxina botulinica em temperatura ambiente ou mais elevada.
De acordo com um aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição farmacêutica líquida que compreende toxina botulinica, polissorbato 20 e metionina.
De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecida uma composição farmacêutica líquida que compreende toxina botulinica, polissorbato 20, metionina e isoleucina.
5/23
Na composição farmacêutica líquida, a metionina está presente em uma quantidade de 0,5 a 100 μπιοί por 100 unidades de toxina botulínica, e, preferivelmente, sua concentração varia de 0,5 a 100 mM e mais preferivelmente de 25 a 75 mM.
Na composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção, o polissorbato 20 está presente em uma quantidade de 0,01 a 50 mg por 100 unidades de toxina botulínica e sua concentração varia preferivelmente de 0,01 a 50 mg/mL, e mais preferivelmente de 0,1 a 2,5 mg/mL.
Na composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção, a toxina botulínica é selecionada de um grupo que consiste em toxina botulínica sorotipos A, B, C, D, E, F e G e pode estar em uma forma não-complexa ou em uma forma complexa com uma proteína. Preferivelmente, a toxina botulínica está numa concentração que varia de 50 a 5.000 unidades/mL.
A composição farmacêutica líquida, de acordo com a presente invenção, tem preferivelmente um pH que varia de 5,5 a 7,0.
Efeitos vantajosos
Empregando como estabilizadores de toxina botulínica, ao invés da proteína derivada de animal albumina ou gelatina, uma combinação de polissobarto 20 e metionina, opcionalmente com isoleucina, a composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção elimina o risco de contaminação do corpo com patógenos derivados de soro ou microorganismos e pode ser administrada de forma segura.
Além disso, a composição farmacêutica líquida da presente invenção pode ser conveniente para uso como injeção direta para pacientes. Além disso, bem como em temperaturas refrigeradas, em termos da estabilidade de
armazenagem de toxina botulínica a 25-37°C, a composição farmacêutica líquida da presente invenção é muito útil para armazenar toxina botulínica sob uma condição de emergência, tal como em um ambiente sem manutenção de baixa temperatura, sendo, desse modo, superior às composições farmacêuticas líquidas convencionais que empregam detergentes ou aminoácidos.
A composição farmacêutica líquida da presente invenção pode ser facilmente preparada porque emprega um detergente e aminoácidos sem um processo de liofilização.
Melhor modo para realizar a invenção
Uma composição farmacêutica liquida com aperfeiçoamento na estabilidade da toxina botulínica é fornecida de acordo com presente invenção.
Particularmente, composição liquida compreende uma toxina botulínica, polissorbato 20 e metionina e, uma toxina opcionalmente, isoleucina.
composição farmacêutica liquida que compreende botulínica, polissorbato 20 e metionina, ou alternativamente, uma toxina botulínica, polissorbato 20, metionina e isoleucina de acordo com a presente invenção é muito aperfeiçoada em relação à estabilidade da toxina botulínica.
Com o emprego de polissorbato 20, metionina e opcionalmente isoleucina, ao invés de uma proteína derivada de animal, como albumina ou gelatina, como estabilizantes para toxina botulínica, a composição farmacêutica líquida da presente invenção exclui o risco potencial de infectar o í receptor com patógenos derivados de soro ou microorganismosí e é desse modo segura para ingestão no corpo. Além disso, o uso dos estabilizadores polissorbato 20, metionina es opcionalmente isoleucina em combinação garante estabilidades mais elevada à toxina botulínica a 25-27°C do que o faz og
I
7/23 uso dos mesmos de um modo separado.
A toxina botulinica, um constituinte da composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção, pode ser uma selecionada dentre os sorotipos A, B, C, D, E, F e G. 0 termo toxina botulinica é um termo genérico que abrange a família de toxinas produzidas pela bactéria anaeróbica Clostridium botulinum e, até a presente data, sete sorotipos de neurotoxinas imunologicamente distintos foram identificados. Esses receberam as designações A, B, C, D, E, F e G, que diferem entre si em seus efeitos sobre animais alvo, e a extensão e duração da paralisia. Todos os sorotipos de toxina botulinica são conhecidos por atuarem como uma neurotoxina pela inibição do neurotransmissor acetilcolina nas junções neuromusculares.
A toxina botulinica da composição farmacêutica líquida, de acordo com a presente invenção, pode estar em uma forma não-complexa ou em uma forma complexa com uma outra proteína. A toxina botulinica sorotipo A, B, C, D, E, F ou G sozinha, sintetizada por Clostridium botulinum, possui um peso molecular de aproximadamente 150 kDa. Quando expressada em Clostridium botulinum, a toxina botulinica forma vários complexos com proteínas de hemaglutinina e proteínas não-hemaglutinina que auxiliam e protegem a atividade dos mesmos. Complexos de botulina tipo A de ocorrência natural têm um peso molecular de aproximadamente 900 kDa, 500 kDa ou 300 kDa. Os pesos moleculares são medidos como sendo aproximadamente 500 kDa para complexos de toxina botulinica tipo B e complexos tipo C, e aproximadamente 300 kDa ou 500 kDa para complexos tipo D, e aproximadamente 300 kDa para complexos tipo E e tipo F.
Embora não radicalmente limitada, a concentração da toxina botulinica na composição farmacêutica líquida da
8/23 presente invenção varia, preferivelmente, de 50 a 5.000 unidades/mL, dependendo do uso geral da mesma.
A metionina está presente em uma quantidade de 0,5 a 100 μιηοΐ por 100 unidades de toxina botulinica, e varia, preferivelmente, em concentração de 0,5 a 100 mM, e, mais preferivelmente, de 25 a 75 mM da composição farmacêutica líquida da presente invenção.
Uma unidade (U) de toxina botulinica é definida como LD50 após injeção intraperitoneal em camundongos Swiss Webster fêmeas que pesam 18 a 20 gramas cada. O LD50 de toxina botulinica em camundongos corresponde a aproximadamente 50 picogramas.
Um teor de metionina menor do que 0,5 μιηοΐ por 100 unidades de toxina botulinica não pode garantir a estabilização da toxina botulinica a um nível desejável durante armazenagem por longo prazo em temperatura ambiente. Por outro lado, quando a metionina é utilizada em uma quantidade acima de 100 μιηοΐ por 100 unidades de toxina botulinica, o incremento adicional não pode garantir um efeito de estabilização adicional, além de incorrer em uma desvantagem econômica. Na composição farmacêutica líquida da presente invenção, a metionina varia adequadamente em concentração de 0,5 a 100 mM quando a toxina botulinica tem uma concentração de 100 unidades/mL. Sua concentração adequada é ajustada para 25 - 75 mM em consideração à faixa de concentração de polissorbato 20. Quando a concentração de metionina está abaixo de 25 mM na composição farmacêutica liquida da presente invenção, seu efeito de estabilização a longo prazo sobre toxina botulinica em temperatura ambiente não atinge o nível desejável, que é i
j s
I a
obtido na faixa de concentração adequada de toxina botulinica.
Por outro lado, uma concentração de metionina
9/23 acima 75 mM não prove nenhum efeito adicional.
Na composição farmacêutica líquida da presente invenção, o polissorbato 20 está presente em uma quantidade de 0,01 a 50 mg por 100 unidades de toxina botulinica e, preferivelmente, sua concentração varia de 0,01 a 50 mg/mL, e mais preferivelmente de 0,1 a 2,5 mg/mL.
Os polissorbatos são uma classe de emulsificantes utilizados em alguns produtos farmacêuticos e na preparação de alimentos. Eles são frequentemente utilizados em cosméticos para dissolver óleos essenciais em produtos à base de água (óleo-em-água). Há muitos tipos de polissorbatos que são classificados por um número que se refere ao número total de grupos de oxietileno, tais como polissorbato 20, 40, 60 e 80. A composição farmacêutica líquida da presente invenção emprega polissorbato 20 (comercialmente disponível pelo nome comercial Tween 20) como um estabilizador para toxina botulinica.
Se a composição farmacêutica líquida da presente invenção contiver polissorbato 20 em uma quantidade menor do que 0,01 mg por 100 unidades de toxina botulinica, seu efeito de estabilização de longa duração sobre a toxina botulinica em temperatura ambiente não atinge um nível desejável. Por outro lado, uma concentração de polissorbato 20 acima de 50 mg/mL não provê nenhum efeito adicional além de incorrer em uma desvantagem econômica. Em uma concentração de 100 unidades/mL de toxina botulinica na composição farmacêutica líquida da presente invenção, o polissorbato 20 está adequadamente presente em uma quantidade de 0,01 - 50 mg/mL e, preferivelmente, em uma quantidade de 0,1 - 2,5 mg/mL quando a concentração de metionina é levada em consideração. Quando a concentração de polissorbato 20 na composição farmacêutica líquida da presente invenção é menor do que 0,1 mg/mL, seu efeito de
10/23 estabilização a longo prazo sobre a toxina botulinica em temperatura ambiente não atinge um nível desejado, que é obtido pela concentração alvo de polissorbato 20. Por outro lado, uma concentração de polissorbato 20 acima de 2,5 mg/mL não provê nenhum efeito adicional.
De acordo com a presente invenção, a composição farmacêutica líquida tem um pH de 5,5 a 7,0. Na composição farmacêutica líquida da presente invenção ajustada a um pH de 5,5 a 7,0, a toxina botulinica é estavelmente mantida em temperatura ambiente (particularmente 40°C) por um longo período de tempo.
Modalidade da Invenção
Uma melhor compreensão da presente invenção pode ser obtida através dos seguintes exemplos que são expostos para ilustrar, porém não devem ser interpretados como o limite da presente invenção.
1. Método Experimental.
(1) Preparação de composição líquida de toxina botulinica.
Uma toxina botulinica foi diluída até uma concentração final de 100 unidades/mL em uma solução de estabilização.
(2) Ensaio de estabilidade de toxina botulinica.
Embora a composição de toxina botulinica líquida preparada tenha sido armazenada a uma certa temperatura, amostras de 1 mL foram tiradas da mesma em intervalos predeterminados. Uma quantidade de 1 mL da composição j líquida amostrada foi diluída 10 vezes utilizando 9 mL deI i uma solução de injeção. A amostra diluída foi injetada porj t via intraperitoneal em cinco camundongos fêmeas ICR (Institute of Câncer Research, EUA) (a uma dose de 0,3 mL por camundongo, isto é, 3 unidades/camundongo). Embora os camundongos tenham sido observados 3 dias após a injeção l
11/23 intraperitoneal, o número de mortes e a taxa de mortalidade foram analisados. A composição de toxina botulinica líquida foi avaliada quanto à manutenção da atividade de toxina botulinica quando a taxa de mortalidade foi de 50% ou mais elevada.
2. Seleção de estabilizante de toxina botulinica
Composições de toxina botulinica líquidas contendo vários candidatos de estabilizantes de toxina botulinica foram preparadas e analisadas em relação à estabilidade da toxina botulinica com o passar do tempo durante armazenagem a 25°C ou 37°C.
Os resultados dos experimentos de estabilidade a 25°C e
37°C são resumidos nas Tabelas e 2, respectivamente. Nas
Tabelas 1 e 2, HSA quer dizer albumina de soro humano e
PEG8000 representa polietileno glicol 8000.
25°C, como visto na Tabela
1, a atividade de toxina botulinica foi mantida por um longo período de tempo em uma composição líquida compreendendo L-metiona (20 polissorbato 20 (2mg/mL) + toxina botulinica unidades/mL) , HSA (5 mg/mL) + polissorbato 20 (2 mg/ML) + toxina botulinica (100 unidades/mL), L-Isoleucina (50 mM) + polissorbato (2 mg/mL) + toxina botulinica unidades/mL), um amido de hidróxi-etila (10 mg/mL) + polissorbato (2 mg/ML) + toxina botulinica (100 unidades/mL).
A 37°C, verificou-se que a composição líquida compreendendo L-metiona (20 mM) + polissorbato 20 (2mg/mL) + toxina botulinica unidades/mL) ou HSA (5 mg/mL) + polissorbato 20 (2 mg/mL) + toxina botulinica (100 unidades/mL) mantém a atividade de toxina botulinica por um longo período de tempo como visto na Tabela 2.
Pelos resultados, verifica-se que uma combinação tí de metionina e polissorbato 20 atua substituível por uma combinação de HAS e como estabilizante polissorbato 20 ou
12/23 uma combinação de amido de hidróxi-etila e polissorbato 20. Também, uma combinação de isoleucina e polissorbato 20 emergiu como um candidato estabilizante substituível em relação aos estabilizadores convencionais.
Tabela 1
| Ex. nos. | Composição de toxina botulínica | Taxa de mortalidade | (%) | |||||
| Estabilizante (conc.) | Polisor. 20 (mg/mL) | Toxina B. (unidades/mL) | Dia 0 | Dia 6 | Dia 14 | Dia 23 | Dia 35 | |
| 1 | L-met (20mM) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| C.l | - | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C.2 | HAS (5mg/mL) | - | 100 | 100 | 100 | 0 | - | - |
| C.3 | HAS (5mg/mL) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| C.4 | L-Arg(50 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C.5 | L-Ile(50 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 80 | 100 | 60 | 80 |
| C.6 | L-Glu(50 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 0 | - | - |
| C.7 | His (lOmM) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | |
| C.8 | Glu (8mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 60 | 0 | - |
| C.9 | Gli(2mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C.10 | NaGlm(10 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 0 | - | — |
| C.ll | Amido de hidróxi-etila (10 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 80 | 80 | 60 |
| C.12 | Manitol (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C.13 | Sorbitol (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 60 | 0 | ||
| C.14 | C8-glicose (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C.15 | C8-trehalose (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C.16 | Sacarose (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 |
13/23
| C. 17 | Lactose (50 mg/ml) | 2, 0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C. 18 | PEG8000 (100 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C. 19 | Ácido hialurônico (10 mg/mL) | 2,0 | 100 | 100 | 0 |
Tabela 2
| Ex. nos. | Composição de toxina botulínica | Taxa de mortalidade | (%) | |||||
| Estabili- zante (conc.) | Polisor. 20 (mg/mL) | Toxina B. (unidades/mL) | Dia 0 | Dia 6 | Dia 14 | Dia 23 | Dia 35 | |
| 1 | L-met (20mM) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| C. 1 | - | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | |
| C. 2 | HAS(5mg/mL) | - | 100 | 100 | 100 | 0 | - | - |
| C. 3 | HAS(5mg/mL) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 80 | 100 | 100 |
| C. 4 | L-Arg(50 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C.S | L-Ile(50 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | |
| C. 6 | L-Glu(50 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C. 7 | His (10 mM) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C. 8 | Glu (8mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C. 9 | Gli(2 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C. 10 | NaGlmdO mM) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - | - | - |
| C. 11 | Amido de hidróxi-etila(10 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 100 | 0 | ||
| C. 12 | Manitol (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C. 13 | Sorbitol (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C. 14 | C8-glicose (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C. 15 | C8-trehalose | 2,0 | 100 | 100 | 0 | - |
14/23
| (50 mg/ml) | ||||||||
| C. 16 | Sacarose (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C. 17 | Lactose (50 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C.18 | PEG8000 (100 mg/ml) | 2,0 | 100 | 100 | 0 | |||
| C. 19 | Ácido hialurônico (10 mg/mL) | 2,0 | 100 | 100 | 0 |
3. Estabilidade de toxina botulínica em várias concentrações de metionina
As composições de toxina botulínica líquidas compreendendo várias concentrações de metionina em combinação com polissorbato 20 como estabilizantes de toxina botulínica foram testadas em relação à capacidade de manter a atividade da toxina botulínica sob condições de armazenagem a 37°C. Os resultados experimentais da estabilidade da toxina botulínica de acordo com uma alteração na concentração de metionina estão resumidos na Tabela 3 abaixo.
15/23
Tabela
| 70 | ο | 100 | Ο | 100 | ο ο 1—1 | 1 | |||||
| ο | ο | ο | ο | ||||||||
| ο | ο | ο | ο | ο | |||||||
| LO | <Ώ | I— | 1— | Τ---- | χ— | 1 | |||||
| Ο | ο | ο | ο | ο | |||||||
| Ο | ο | ο | ο | ο | |||||||
| ι— | <— | τ— | ϊ— | τ— | 1 | ||||||
| ο | ο | ο | ο | ο | |||||||
| ΟΛ | ο | ο | ο | ο | ο | ||||||
| οι | τ— | γΗ | τ— | (— | 1— | 1 | |||||
| ο | ο | ο | ο | ο | |||||||
| ο | ο | ο | ο | ο | |||||||
| ο\° | ΟΙ | τ— | τ— | τ— | 5— | τ— | 1 | ||||
| Φ | |||||||||||
| Ό ω Τ5 Ή | ο | ο | Ο | ο | ο | ||||||
| CO | ο | ο | ο | ο | ο | ||||||
| <— | <— | 1— | τ— | 1— | τ— | 1 | |||||
| ι—1 | |||||||||||
| -Ρ | |||||||||||
| Μ ο | ο | ο | ο | ο | ο | ||||||
| £ | ο | ο | ο | ο | ο | ο | |||||
| Φ | τ—1 | <— | 1— | 1— | t— | τ— | 1 | ||||
| Ό | |||||||||||
| <Ό | |||||||||||
| X | <15 | ο | ο | ο | ο | ο | |||||
| φ | •Η | ο | ο | ο | ο | ο | |||||
| Εη | Q | r-l | ϊ— | t—1 | 1—1 | τ—1 | ο | ||||
| Φ | , | '__ | |||||||||
| C | CQ | ||||||||||
| -Η | g | ||||||||||
| X | |||||||||||
| ο | m | ||||||||||
| Ρ> | Φ | ||||||||||
| Ό | |||||||||||
| m | 05 | ||||||||||
| Ό | |||||||||||
| Η | Ή | ||||||||||
| X | C | ο | ο | ο | ο | Ο | ο | ||||
| φ τί | ο | Ρ | ο | ο | ο | ο | ο | ο | |||
| Η | -—1 | Γ—1 | ι—1 | ι—1 | τ—1 | 1—1 | <—1 | ||||
| ο | |||||||||||
| CN | |||||||||||
| I | g | ||||||||||
| Ή | • | ||||||||||
| ο irü Ο | σ5 Ο •Η | οΐ | Μ Ο | θ' g | ο | ο | Ο | ο | ο | ο | |
| CU | ω | οι | οι | οι | οι | οι | Ο! | ||||
| •Η | £ | ||||||||||
| ω | Ή | ||||||||||
| ο | γ—4 | ||||||||||
| α, | • | χ—. | |||||||||
| g | Ρ | Ρ> | LD | ο | ο | ||||||
| ο | ο | φ | ο | ο | ο | ||||||
| ω | Λ | S | ο | 1—1 | Οχ] | Ι_Ω | χ—1 | 1 | |||
| Ο | |||||||||||
| • | ω | ΟΙ | |||||||||
| X | Ο | • | |||||||||
| ω | C | οι | ω | LO | ο |
16/23
Como visto na Tabela 3, a atividade da toxina botulinica foi mantida estavelmente por 56 dias em concentrações de metionina de 0,5 a 20 mM e por 70 dias em uma concentração de metionina de 50 a 100 mM. A composição empregando tanto metionina como polissorbato 20 melhorou muito a estabilidade de toxina botulinica em comparação com a composição que emprega polissorbato 20 individualmente.
4. Estabilidade de toxina botulinica em várias concentrações de polissorbato 20
As composições de toxina botulinica líquidas compreendendo metionina em combinação com várias concentrações de polissorbato 20 como estabilizantes de toxina botulinica foram testadas em relação à capacidade de manter a atividade da toxina botulinica sob uma condição de armazenagem a 37°C. Os resultados experimentais da estabilidade da toxina botulinica de acordo com uma alteração em concentração de polissorbato estão resumidos na Tabela 4, abaixo.
17/23
Tabela
| 202 | o | 100 | 100 | O | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | |||||
| Γ | ||||||||||||||
| <Ώ | o | o | o | o | ||||||||||
| i— | CO | 00 | CO | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | ||||||
| O | o | o | o | o | ||||||||||
| Cs) | o | o | o | o | ||||||||||
| v—4 | x— | 1---- | X— | X---- | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | |||||
| o\° | ||||||||||||||
| o | o | |||||||||||||
| <U b | O | o | o | o | o | |||||||||
| x—1 | x— | CO | CO | 1 | 1 | 1 | l | 1 | ||||||
| 05 | ||||||||||||||
| b | ||||||||||||||
| •H | ||||||||||||||
| 1—| | ||||||||||||||
| 05 | ||||||||||||||
| 4-> | o | o | o | |||||||||||
| S-l | O | o | o | o | o | |||||||||
| 0 | <D | CO | ,—I | o | 1 | 1 | 1 | 1 | ||||||
| g | ||||||||||||||
| (D | ||||||||||||||
| b | ||||||||||||||
| 05 | ||||||||||||||
| X | 05 | o | o | O | o | o | ||||||||
| 05 | -H | O | o | o | O | o | o | |||||||
| Η | Q | cn | t—1 | 1— | x—1 | x—1 | X------1 | o | o | o | o | |||
| ica | CQ | b g | ||||||||||||
| cn | ||||||||||||||
| Φ | ||||||||||||||
| b | ||||||||||||||
| •P | ttj | 05 | ||||||||||||
| o | C | b | ||||||||||||
| b | H | • r-| | ||||||||||||
| X | c | o | o | o | o | o | o | o | o | o | ||||
| o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | |||||
| c | --—' | x—1 | x—1 | t—1 | X------1 | X------1 | X------1 | X------1 | x—1 | x—1 | ||||
| Ή | ||||||||||||||
| X | ||||||||||||||
| 0 | —- | |||||||||||||
| -P | o | b | ||||||||||||
| 1 | CM | g | ||||||||||||
| (D | -1—I | 1—1 | ||||||||||||
| b | 1—1 | Cd | o | lO | o | |||||||||
| o | O | e | o | o | ||||||||||
| o b o | CL| | CO | o | o | CM | V-H | LO | 1 | 1 | 1 | 1 | |||
| •H | ||||||||||||||
| ω | ||||||||||||||
| 0 | ||||||||||||||
| • | ||||||||||||||
| g | 4-> | s | ||||||||||||
| 0 | O | e | o | o | o | o | o | o | o | |||||
| o | s | CN | CM | Csl | CM | Csl | X------1 | lO | X----1 | CS) | ||||
| T—1 | Csl | n | ||||||||||||
| w | Csl | Cs) | Csl | Ol | ||||||||||
| X | 0 | o | X------1 | • | • | • | • | |||||||
| ω | c | r- | CO | <y> | X------1 | x—1 | o | o | Q | Q |
18/23
Como visto na Tabela 4, a atividade da toxina botulínica foi mantida estavelmente por 202 dias em concentrações de polissorbato 20 de 0,5 a 2,0 mg/mL, por 167 dias em uma concentração de polissorbato 20 de 0,01 mg/mL e por 120 dias em uma concentração de polissorbato 20 de 10 mg/mL. A composição que emprega tanto metionina como polissorbato 20 teve um estabilidade da toxina botulínica muito melhor em comparação com a composição que emprega metionina individualmente.
5. Estabilidade da toxina botulínica em várias concentrações de metionina e polissorbato 20
As composições de toxina botulínica líquidas compreendendo várias concentrações de uma combinação de metionina e polissorbato 20 como estabilizantes de toxina botulínica foram testadas em relação à sua capacidade manter a atividade da toxina botulínica sob uma condição de de armazenagem a 37°C. Os resultados experimentais (taxa de toxina botulínica após armazenagem por 30 e 60 dias em várias concentrações de metionina e polissorbato 20 (Exemplo
12) estão resumidos nas Tabelas e 6, respectivamente.
Nas composições de toxina botulínica líquidas utilizadas nos experimentos, toxina botulínica tinha uma concentração de
100 unidades/mL.
A análise estatística dos dados das Tabelas sugere que uma combinação de 25 a mM de metionina e de
0,2 a 2,5 mg/mL de polissorbato estabiliza a toxina botulínica com uma eficiência mais elevada.
19/23
Tabela 5
| Cone. de polissorbato 20/Met. | Met. (mM) | |||||||
| 1 | 5 | 10 | 25 | 50 | 75 | 100 | ||
| Polissorbato 20 (mg/mL) | 0,1 | 100 | 100 | 80 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 0,5 | 100 | 100 | 80 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 2,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 10 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 25 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 50 | 80 | 100 | 100 | 80 | 80 | 100 | 100 |
Tabela 6
| Cone, de polissorbato 20/Met. | Met. (mM) | |||||||
| 1 | 5 | 10 | 25 | 50 | 75 | 100 | ||
| Polissorbato 20 (mg/mL) | 0,1 | 100 | 100 | 80 | 100 | 100 | 80 | 100 |
| 0,5 | 100 | 100 | 80 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 2,5 | 100 | 100 | 100 | 80 | 100 | 100 | 100 | |
| 10 | 0 | 40 | 0 | 100 | 100 | 100 | 40 | |
| 25 | 0 | 80 | 80 | 100 | - | 100 | 60 | |
| 50 | 0 | 0 | 0 | 0 | 80 | - | 0 |
6. Estabilidade da toxina botulinica em composições de toxina botulinica líquidas com vários pHs.
Várias composições de toxina botulinica líquidas (Exemplo 13) com um pH de 5,5 a 7,0, nas quais metionina e polissorbato 20 foram combinados em suas respectivas faixas de concentração ótimas para a estabilização da toxina botulinica, foram preparadas e testadas em relação à capacidade de manter a atividade da toxina botulinica sob uma condição de armazenagem a 40°C. O pH das composições de
20/23 toxina botulínica líquidas foi ajustado com HC1 ou NaOH. Cada uma das composições tinha uma concentração de toxina botulínica de 100 unidades/mL. Os resultados da estabilidade de toxina botulínica de acordo com o pH da composição líquida estão resumidos na Tabela 7, abaixo.
Como visto na Tabela 7, a atividade da toxina botulínica foi mantida estavelmente por 90 dias em composições de toxina botulínica líquidas contendo de 25 a 75 mM de metionina em combinação com 0,25 a 0,75 mg/mL de polissorbato 20 com o pH das mesmas variando de 5,5 a 7,0 sob uma condição de armazenagem a 40°C.
Tabela 7
| Composição botulínica | de | toxina | Taxa de mortalidade | (%) | ||||
| Met. (mM) | Polissorbato 20 (mg/mL) | pH | Dia | |||||
| 7 | 15 | 30 | 60 | 90 | ||||
| 25 | 0,25 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 6, 0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 6,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 0,5 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 6,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 6,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 0,75 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 6, 0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 6, 5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 50 | 0,25 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 6, 0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |||
| 6, 5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
21/23
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 0,5 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 6, 0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 6, 5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 0,75 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 6, 0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 6, 5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 75 | 0,25 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 6,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 6, 5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 0,5 | 5,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 6, 0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 6, 5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 0,75 | 5, 5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
| 6, 0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 6,5 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | ||
| 7,0 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
7. Estabilidade da toxina botulinica em composição farmacêutica líquida contendo uma combinação de metionina, isoleucina e polissorbato
Como descrito acima, uma combinação de isoleucina e polissorbato 20, bem como uma combinação de metionina e polissorbato 20, foram identificadas como candidatas para estabilizar toxina botulinica. Com base nesse resultado, uma combinação de metionina, isoleucina e polissorbato 20 foi testada em relação à capacidade de estabilizar toxina 10 botulinica sob uma condição de armazenagem a 37°C. Na composição líquida, toxina botulinica tinha uma
22/23 concentração de 100 unidades/mL.
Tabela 8
| Ex. | Composição | de toxina | Taxa de mortalidade (% | ) | |||||
| nos. | botulínica | ||||||||
| Met | Ile | Polissorbato | Dia | ||||||
| (mM) | (mg/mL) | 20 (mg/mL) | |||||||
| 30 | 60 | 90 | 120 | 167 | 202 | ||||
| 14 | 20 | 10 | 0,5 | 100 | 100 | 80 | 100 | 100 | 100 |
| 15 | 20 | 10 | 2,0 | 100 | 80 | 80 | 100 | 100 | 0 |
| 16 | 20 | 10 | 10 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| C.25 | — | 10 | - | 80 | 0 | - | - | - | - |
| C.26 | 20 | 10 | - | 0 | - | - | - | - | - |
| C.27 | — | 10 | 0,5 | 0 | - | - | - | - | - |
| C.28 | - | 1 | 2,0 | 0 | - | - | - | - | - |
| C.29 | — | 10 | 2,0 | 0 | - | - | - | - | - |
| C.30 | — | 30 | 2,0 | 0 | - | - | - | - | - |
| C. 31 | — | 50 | 2,0 | 0 | - | - | - | - | - |
| C. 32 | - | 100 | 2,0 | 0 | - | - | - | - | - |
| C. 33 | — | 10 | 10 | 0 | - | - | - | - |
Como visto na Tabela 8, a atividade de toxina botulínica foi mantida por um longo período de tempo 5 (aproximadamente 200 dias) sob uma condição de armazenagem a 37°C, por uma combinação de metionina, isoleucina e polissorbato 20, porém, verificou-se que praticamente desapareceu antes de decorridos 30 dias no caso das composições líquidas contendo isoleucina individualmente ou 10 em combinação com metionina ou polissorbato 20.
Aplicabilidade industrial
Como descrito aqui acima, a composição de toxina botulínica farmacêutica líquida, de acordo com a presente invenção, mostra uma estabilidade da toxina botulínica 15 muitíssimo melhor. Isto é útil no tratamento de distonia,
23/23 espasmo de músculo rígido, distúrbios neurológicos (enxaqueca, lumbago, distúrbio da coluna cervical, etc.), bem como na aplicação cosmética para tratamento de hiperidrose e redução de rugas. Além disso, a composição de 5 toxina botulínica farmacêutica líquida da presente invenção pode ser diretamente usada como uma injeção e assegura a atividade da toxina botulínica por um longo período de tempo mesmo de 25 a 37 °C, bem como em uma temperatura refrigerada, que é muito vantajosa para o transporte e a venda.
Claims (10)
1. Composição farmacêutica líquida caracterizada pelo fato de que compreende toxina botulínica, polissorbato 20 em uma quantidade de 0,01 a 50 mg por 100 unidades de toxina botulínica e metionina em uma quantidade de 0,5 a 100 μmol por 100 unidades de toxina botulínica.
2. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a concentração de metionina varia de 0,5 a 100 mM.
3. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que a concentração de metionina varia de 25 a 75 mM.
4. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a concentração do polissorbato 20 varia de 0,01 a 50 mg/mL.
5. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que a concentração do polissorbato 20 varia de 0,1 a 2,5 mg/mL.
6. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que as toxinas botulínicas são selecionadas de um grupo que consiste em toxinas botulínicas dos sorotipos A, B, C, D, E, F e G.
7. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a toxina botulínica está em uma forma não-complexa ou em uma forma complexa com uma proteína.
8. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o pH da composição farmacêutica líquida varia de 5,5 a 7,0.
9. Composição farmacêutica líquida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreendendo adicionalmente isoleucina.
Petição 870190000171, de 02/01/2019, pág. 6/7
2/2
10. Composição farmacêutica líquida, de com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de concentração da toxina botulínica varia de 50 a unidades/mL.
acordo que a
5.000
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20070069363 | 2007-07-10 | ||
| KR10-2007-0069363 | 2007-07-10 | ||
| PCT/KR2008/002975 WO2009008595A1 (en) | 2007-07-10 | 2008-05-28 | Pharmaceutical liquid composition of botulinum toxin with improved stability |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0813948A2 BRPI0813948A2 (pt) | 2016-06-28 |
| BRPI0813948B1 true BRPI0813948B1 (pt) | 2019-08-06 |
| BRPI0813948B8 BRPI0813948B8 (pt) | 2021-05-25 |
Family
ID=40228747
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0813948A BRPI0813948B8 (pt) | 2007-07-10 | 2008-05-28 | composição líquida farmacêutica de toxina botulínica com estabilidade melhorada |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US8617568B2 (pt) |
| EP (1) | EP2170400B1 (pt) |
| JP (1) | JP5259710B2 (pt) |
| KR (1) | KR101087017B1 (pt) |
| CN (1) | CN101687046B (pt) |
| BR (1) | BRPI0813948B8 (pt) |
| CA (1) | CA2690773C (pt) |
| ES (1) | ES2391798T3 (pt) |
| RU (1) | RU2440825C2 (pt) |
| WO (1) | WO2009008595A1 (pt) |
Families Citing this family (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7780967B2 (en) * | 2000-02-08 | 2010-08-24 | Allergan, Inc. | Reduced toxicity Clostridial toxin pharmaceutical compositions |
| US8168206B1 (en) * | 2005-10-06 | 2012-05-01 | Allergan, Inc. | Animal protein-free pharmaceutical compositions |
| EP2170400B1 (en) * | 2007-07-10 | 2012-07-25 | Medy-Tox, INC. | Pharmaceutical liquid composition of botulinum toxin with improved stability |
| US9161970B2 (en) | 2007-12-12 | 2015-10-20 | Allergan, Inc. | Dermal filler |
| EP2248518B1 (en) | 2009-04-17 | 2013-01-16 | Merz Pharma GmbH & Co. KGaA | Formulation for stabilizing proteins, peptides or mixtures thereof. |
| AU2010265888A1 (en) * | 2009-06-25 | 2012-01-19 | Revance Therapeutics, Inc. | Albumin-free botulinum toxin formulations |
| AU2011316111B2 (en) * | 2010-10-12 | 2015-05-28 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Formulation suitable for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipients |
| SG10202013124XA (en) * | 2011-03-31 | 2021-02-25 | Medy Tox Inc | Lyophilized preparation of botulinum toxin |
| CN103874481B (zh) * | 2011-07-13 | 2016-09-28 | 铸造有限责任公司 | 用于向鼻咽粘膜靶递送治疗剂的方法及装置 |
| US9480731B2 (en) | 2013-12-12 | 2016-11-01 | Medy-Tox, Inc. | Long lasting effect of new botulinum toxin formulations |
| US11357857B2 (en) | 2014-06-20 | 2022-06-14 | Comera Life Sciences, Inc. | Excipient compounds for protein processing |
| US10478498B2 (en) | 2014-06-20 | 2019-11-19 | Reform Biologics, Llc | Excipient compounds for biopolymer formulations |
| WO2015196091A1 (en) | 2014-06-20 | 2015-12-23 | Reform Biologics, Llc | Viscosity-reducing excipient compounds for protein formulations |
| TWI669129B (zh) | 2014-12-23 | 2019-08-21 | 德商梅茲製藥有限兩合公司 | 預填充式玻璃容器及其套組與使用 |
| KR102627068B1 (ko) | 2015-02-03 | 2024-01-18 | 메르츠 파마 게엠베하 운트 코. 카가아 | 보툴리눔 독소 사전충전된 용기 |
| WO2017188618A1 (en) * | 2016-04-26 | 2017-11-02 | Korea Prime Pharm Co., Ltd. | A novel composition comprising botulinum toxin |
| RS62832B1 (sr) | 2016-05-27 | 2022-02-28 | Ipsen Biopharm Ltd | Tečna neurotoksin formulacija stabilizovana sa triptofanom ili tirozinom |
| WO2018038585A1 (ko) * | 2016-08-26 | 2018-03-01 | 주식회사 에이비바이오 | 보툴리눔 독소 및 안정화제를 포함하는 액상 제형 및 이의 제조방법 |
| WO2018038301A1 (en) | 2016-08-26 | 2018-03-01 | Hugel Inc. | Stabilized liquid formulation of botulinum toxin and preparation method thereof |
| MX2019002835A (es) * | 2016-09-13 | 2019-09-04 | Allergan Inc | Composiciones no proteínicas de toxina clostridial. |
| KR101744900B1 (ko) * | 2017-01-20 | 2017-06-08 | 주식회사 대웅 | 보툴리눔 독소를 포함하는 안정한 액상 조성물 |
| EP3641746A4 (en) | 2017-06-19 | 2021-03-17 | President And Fellows Of Harvard College | METHODS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF MICROBIAL INFECTION |
| CN107540732B (zh) * | 2017-08-31 | 2020-07-14 | 青海省畜牧兽医科学院 | 一种d型肉毒毒素的仿生矿化加工方法及应用 |
| WO2020111852A1 (ko) * | 2018-11-30 | 2020-06-04 | 주식회사 휴온스글로벌 | 보툴리눔 독소의 안정화 액상 조성물 |
| KR102259423B1 (ko) * | 2018-11-30 | 2021-06-02 | 주식회사 휴온스바이오파마 | 보툴리눔 독소의 안정화 액상 조성물 |
| BR112022020327A2 (pt) * | 2020-04-08 | 2022-12-13 | Medytox Inc | Formulação de seringa pré-carregada com toxina botulínica |
| KR102324855B1 (ko) * | 2020-05-20 | 2021-11-11 | 오스템임플란트 주식회사 | 보툴리눔 독소를 포함하는 약제학적 액상 조성물 |
| EP4186520A4 (en) | 2020-07-23 | 2024-05-01 | Medytox Inc. | THERAPEUTIC AGENT AGAINST CANCER |
| KR102414997B1 (ko) | 2020-09-29 | 2022-06-29 | 주식회사 엘지생활건강 | 안정성이 개선된 재조합 보툴리눔 독소 경쇄 단백질 조성물 |
| KR102710632B1 (ko) | 2020-10-07 | 2024-09-27 | 주식회사 프로톡스 | 보툴리눔 독소의 진공 건조 방법 |
| KR20230001254A (ko) | 2021-06-28 | 2023-01-04 | (주)메디톡스 | 재조합 보툴리눔 독소 타입 a 경쇄, 재조합 보툴리눔 독소 및 이의 조성물, 용도 및 방법 |
| KR20230001260A (ko) | 2021-06-28 | 2023-01-04 | (주)메디톡스 | 재조합 보툴리눔 독소 타입 a 경쇄, 재조합 보툴리눔 독소 및 이의 조성물, 용도 및 방법 |
| WO2023085849A1 (ko) * | 2021-11-15 | 2023-05-19 | (주)메디톡스 | 보툴리눔 독소 조성물 |
| CN116440281A (zh) * | 2022-01-07 | 2023-07-18 | 重庆誉颜制药有限公司 | 一种肉毒毒素蛋白组合物 |
| KR20240060314A (ko) * | 2022-10-28 | 2024-05-08 | 주식회사 파마리서치바이오 | 보툴리눔 독소를 포함하는 안정한 액상 제제 |
Family Cites Families (55)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US656730A (en) * | 1899-08-25 | 1900-08-28 | Farbenfabriken Of Elberfeld Company | Blue chrysazin dye and process of making same. |
| IL107887A (en) * | 1992-12-08 | 2003-07-06 | Ambi Inc | Stabilized lanthionine containing bacteriocin compositions |
| US5358708A (en) * | 1993-01-29 | 1994-10-25 | Schering Corporation | Stabilization of protein formulations |
| GB9418092D0 (en) * | 1994-09-08 | 1994-10-26 | Red Cross Found Cent Lab Blood | Organic compounds |
| US5512547A (en) * | 1994-10-13 | 1996-04-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Pharmaceutical composition of botulinum neurotoxin and method of preparation |
| US5756468A (en) * | 1994-10-13 | 1998-05-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Pharmaceutical compositions of botulinum toxin or botulinum neurotoxin and methods of preparation |
| US5656730A (en) * | 1995-04-07 | 1997-08-12 | Enzon, Inc. | Stabilized monomeric protein compositions |
| JP2000247903A (ja) | 1999-03-01 | 2000-09-12 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 長期安定化製剤 |
| AU4001400A (en) | 1999-03-01 | 2000-09-21 | Rexam Industries Corp. | Decorative sheet material with chlorinated polyolefin adhesive layer |
| US20030118598A1 (en) * | 2000-02-08 | 2003-06-26 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin pharmaceutical compositions |
| US8632785B2 (en) * | 2000-02-08 | 2014-01-21 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin pharmaceutical composition containing a gelatin fragment |
| EP1398038B2 (en) | 2000-02-08 | 2011-01-26 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin pharmaceutical compositions |
| US7780967B2 (en) * | 2000-02-08 | 2010-08-24 | Allergan, Inc. | Reduced toxicity Clostridial toxin pharmaceutical compositions |
| US20060269575A1 (en) * | 2000-02-08 | 2006-11-30 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin pharmaceutical compositions formulated with recombinant albumin |
| AU8260701A (en) | 2000-09-01 | 2002-03-13 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Solution preparations stabilized over long time |
| US7140371B2 (en) * | 2002-03-14 | 2006-11-28 | Allergan, Inc. | Surface topography method for determining effects of a botulinum toxin upon a muscle and for comparing botulinum toxins |
| JP2006502116A (ja) * | 2002-07-12 | 2006-01-19 | メダレックス， インク． | タンパク質の酸化分解を防ぐ方法及び組成物 |
| US6803046B2 (en) | 2002-08-16 | 2004-10-12 | Bracco International B.V. | Sincalide formulations |
| US20060002862A1 (en) * | 2002-12-17 | 2006-01-05 | Medimmune Vaccines, Inc. | High pressure spray-dry of bioactive materials |
| EP1610808A4 (en) * | 2003-03-26 | 2011-04-06 | Sudhir Paul | COVALENT BINDING OF LIGANDS TO NUCLEOPHILIC PROTEINS UNDER GUIDANCE BY NONCOVALENT BINDING |
| DE10333317A1 (de) * | 2003-07-22 | 2005-02-17 | Biotecon Therapeutics Gmbh | Formulierung für Proteinarzneimittel ohne Zusatz von humanem Serumalbumin (HSA) |
| GB2416122A (en) * | 2004-07-12 | 2006-01-18 | Ipsen Ltd | Botulinum neurotoxin composition |
| ES2479515T3 (es) * | 2004-07-26 | 2014-07-24 | Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa | Composición terapéutica con una neurotoxina botulínica |
| DE102004043009A1 (de) * | 2004-09-06 | 2006-03-23 | Toxogen Gmbh | Transportprotein zum Einbringen chemischer Verbindungen in Nervenzellen |
| US7399607B2 (en) * | 2004-09-22 | 2008-07-15 | Allergan, Inc. | Fluorescence polarization assays for determining clostridial toxin activity |
| CA2556796C (en) * | 2005-03-03 | 2018-01-23 | Allergan, Inc. | Animal product free system and process for purifying a botulinum toxin |
| DE102005019302A1 (de) * | 2005-04-26 | 2006-11-16 | Toxogen Gmbh | Carrier zum Targeting von Nervenzellen |
| US8323666B2 (en) * | 2005-08-01 | 2012-12-04 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin compositions |
| KR101105871B1 (ko) * | 2005-09-27 | 2012-01-16 | 주식회사 엘지생명과학 | 인 난포자극호르몬의 안정한 용액 제형 |
| US8137677B2 (en) | 2005-10-06 | 2012-03-20 | Allergan, Inc. | Non-protein stabilized clostridial toxin pharmaceutical compositions |
| US8168206B1 (en) * | 2005-10-06 | 2012-05-01 | Allergan, Inc. | Animal protein-free pharmaceutical compositions |
| WO2007044693A2 (en) * | 2005-10-07 | 2007-04-19 | The University Of Alabama | Multi-functional ionic liquid compositions |
| WO2007044809A2 (en) * | 2005-10-11 | 2007-04-19 | Botulinum Toxin Research Associates, Inc. | Albumin-free botulinum toxin based pharmaceutical compositions containing a hyaluronidase and methods of use |
| MX2008006750A (es) * | 2005-12-01 | 2008-09-03 | Univ Massachusetts Lowell | Nanoemulsiones de botulinum. |
| US9486408B2 (en) * | 2005-12-01 | 2016-11-08 | University Of Massachusetts Lowell | Botulinum nanoemulsions |
| US20070264355A1 (en) * | 2005-12-14 | 2007-11-15 | Binary, Llc | Binary compositions and methods for sterilization |
| CA2645073A1 (en) * | 2006-03-08 | 2007-09-13 | Nuviance, Inc. | Transdermal drug delivery compositions and topical compositions for application on the skin |
| CA2671447A1 (en) * | 2006-12-01 | 2008-06-12 | Anterios, Inc. | Amphiphilic entity nanoparticles |
| GB0700523D0 (en) * | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Insense Ltd | The Stabilisation Of Proteins |
| JP2009008595A (ja) * | 2007-06-29 | 2009-01-15 | Kenwood Corp | ナビゲーション装置、ナビゲーション方法、および、ナビゲーションプログラム |
| EP2170400B1 (en) * | 2007-07-10 | 2012-07-25 | Medy-Tox, INC. | Pharmaceutical liquid composition of botulinum toxin with improved stability |
| CN101969971A (zh) * | 2007-11-30 | 2011-02-09 | 雅培制药有限公司 | 蛋白制剂及其制备方法 |
| US8883146B2 (en) * | 2007-11-30 | 2014-11-11 | Abbvie Inc. | Protein formulations and methods of making same |
| KR20090120222A (ko) * | 2008-05-19 | 2009-11-24 | (주)메디톡스 | 식물 유래 성분 함유 배지 및 가요성 폐쇄 용기를 이용하여클로스트리디움 보툴리눔 독소를 생산하는 방법 |
| US9155772B2 (en) * | 2008-12-08 | 2015-10-13 | Philip Morris Usa Inc. | Soft, chewable and orally dissolvable and/or disintegrable products |
| KR101135449B1 (ko) * | 2009-03-10 | 2012-04-13 | 한국과학기술연구원 | 헤파라나제 활성 측정용 이온 복합체 나노 입자 및 그 제조방법 |
| US20120107431A1 (en) * | 2009-06-30 | 2012-05-03 | Dong Hyun Kim | Cosmetic composition containing a rubus coreanus extract for diminishing skin wrinkles |
| KR101303388B1 (ko) * | 2010-10-26 | 2013-09-03 | 한미사이언스 주식회사 | 지속형 인터페론 알파 결합체의 액상 제제 |
| SG10202013124XA (en) * | 2011-03-31 | 2021-02-25 | Medy Tox Inc | Lyophilized preparation of botulinum toxin |
| KR101135486B1 (ko) * | 2011-05-25 | 2012-04-13 | 함종욱 | 보툴리눔 에이형 독소의 액상제품 |
| US20140120077A1 (en) * | 2012-10-28 | 2014-05-01 | Revance Therapeutics, Inc. | Compositions and Methods for Safe Treatment of Rhinitis |
| AU2014329606B2 (en) * | 2013-10-01 | 2020-02-06 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Methods for the identification, assessment, prevention, and treatment of neurological disorders and diseases using Fndc5 |
| US9480731B2 (en) * | 2013-12-12 | 2016-11-01 | Medy-Tox, Inc. | Long lasting effect of new botulinum toxin formulations |
| EP3504226A1 (en) * | 2016-08-24 | 2019-07-03 | President and Fellows of Harvard College | Engineered botulinum neurotoxin |
| KR102463881B1 (ko) * | 2016-10-04 | 2022-11-07 | (주)메디톡스 | 보툴리눔 독소 함유 용액으로부터 보툴리눔 독소를 분리하는 방법 |
-
2008
- 2008-05-28 EP EP08765945A patent/EP2170400B1/en active Active
- 2008-05-28 BR BRPI0813948A patent/BRPI0813948B8/pt active IP Right Grant
- 2008-05-28 ES ES08765945T patent/ES2391798T3/es active Active
- 2008-05-28 WO PCT/KR2008/002975 patent/WO2009008595A1/en active Application Filing
- 2008-05-28 US US12/666,592 patent/US8617568B2/en active Active
- 2008-05-28 RU RU2009148286/15A patent/RU2440825C2/ru active
- 2008-05-28 CN CN2008800230010A patent/CN101687046B/zh active Active
- 2008-05-28 JP JP2010515962A patent/JP5259710B2/ja active Active
- 2008-05-28 CA CA2690773A patent/CA2690773C/en active Active
- 2008-05-28 KR KR1020080049914A patent/KR101087017B1/ko active IP Right Grant
-
2013
- 2013-11-25 US US14/088,821 patent/US9220780B2/en active Active
-
2015
- 2015-12-28 US US14/980,285 patent/US10293034B2/en active Active
-
2019
- 2019-05-20 US US16/416,758 patent/US20190298813A1/en not_active Abandoned
-
2021
- 2021-05-21 US US17/326,797 patent/US20210379165A1/en active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US10293034B2 (en) | 2019-05-21 |
| RU2440825C2 (ru) | 2012-01-27 |
| US20190298813A1 (en) | 2019-10-03 |
| KR20090005963A (ko) | 2009-01-14 |
| JP2010532784A (ja) | 2010-10-14 |
| US20160206710A1 (en) | 2016-07-21 |
| WO2009008595A1 (en) | 2009-01-15 |
| CA2690773C (en) | 2013-09-17 |
| CN101687046A (zh) | 2010-03-31 |
| CA2690773A1 (en) | 2009-01-15 |
| US20210379165A1 (en) | 2021-12-09 |
| US8617568B2 (en) | 2013-12-31 |
| BRPI0813948A2 (pt) | 2016-06-28 |
| EP2170400B1 (en) | 2012-07-25 |
| RU2009148286A (ru) | 2011-06-27 |
| EP2170400A4 (en) | 2010-09-08 |
| BRPI0813948B8 (pt) | 2021-05-25 |
| JP5259710B2 (ja) | 2013-08-07 |
| US9220780B2 (en) | 2015-12-29 |
| CN101687046B (zh) | 2012-12-26 |
| EP2170400A1 (en) | 2010-04-07 |
| US20140161783A1 (en) | 2014-06-12 |
| ES2391798T3 (es) | 2012-11-30 |
| KR101087017B1 (ko) | 2011-12-09 |
| US20100291136A1 (en) | 2010-11-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| BRPI0813948B1 (pt) | Composição líquida farmacêutica de toxina botulínica com estabilidade melhorada | |
| US11590212B2 (en) | Long lasting effect of new botulinum toxin formulations | |
| ES2479515T3 (es) | Composición terapéutica con una neurotoxina botulínica | |
| ES2580010T3 (es) | Composiciones farmacéuticas no proteicas de toxina clostridial estabilizadas | |
| RU2640922C1 (ru) | Лиофилизированный препарат ботулотоксина | |
| US9198856B2 (en) | Formulation for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipient | |
| US9173944B2 (en) | Formulation suitable for stabilizing proteins, which is free of mammalian excipients | |
| EA038124B1 (ru) | Жидкая композиция нейротоксина, стабилизированная триптофаном или тирозином | |
| BRPI0613001B1 (pt) | Composições farmacêuticas de toxina clostrídica estabilizada por uma não-proteína |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B07D | Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette] | ||
| B07E | Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette] | ||
| B06F | Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette] | ||
| B06A | Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette] | ||
| B09A | Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette] | ||
| B16A | Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 06/08/2019, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. (CO) 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 06/08/2019, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS |
|
| B16C | Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 28/05/2008 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF |
|
| B15V | Prolongation of time limit allowed |