BRPI0717063A2 - Derivados de catarantina fluorada, sua preparação e sua utilização como precursores alcalóides diméricos de vinca - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOS DE CATARANTINA FLUORADA, SUA PREPARAÇÃO E SUA UTILIZA- ÇÃO COMO PRECURSORES ALCALÓIDES DIMÉRICOS DE VINCA".

A presente invenção refere-se a derivados fluorados de cataran- tina, sua preparação e seu uso como precursores alcalóides diméricos de Vinca fluorados, e vinflunina em particular.

Vinflunina 1 é um agente anticâncer de amplo espectro desen- volvido por Pierre Fabre laboratories. Esta molécula é um análogo fluorado de vinorelbina 5 (Navelbine®) que é o fármaco de referência para o tratamen- to de câncer de mama e pulmão. A estrutura de vinflunina é muito similar àquela de vinorelbina, da qual ela difere-se apenas pela presença de um grupo gem-difluorado em C2Oi, e pela ausência da ligação dupla C3-C4'. Vin- flunina 1 (Javlor®) é o composto fluorado mais ativo descoberto nos últimos anos. Ela está atualmente na fase Ill de testes clínicos no tratamento de câncer de mama, bexiga e pulmão, e é anunciada hoje como a molécula mais promissora por ter originado-se da família de Alcalóides de Vinca.

Vinflunina pode ser preparada de precursor de 3',4'- anidrovinblastina 4 que é obtida pelo acoplamento de duas sub-unidades catarantina 2 e vindolina 3, que são extraídas diretamente dos níveis da per- vinca Madagascar (Diagrama 1). Alternativamente vinflunina pode ser prepa- rada por fluoração direta de vinorelbina. Diagrama 1

1 /"IJi J-aV, f'%__/ /'"

2 H ί \ N * ..

COjMe Acoplamento H / \ Γ~Ν H \

+ —— we0Jc

/-Nm \\ \s=< L. V ^"OCCMe

MeO-A _ OhV «e

M Λ *. 3 ώβΗ 'C0,Me

3', 4' -AnidrovinbIastina 4

A 3',4' -AnidrovinbIastina 4 pode ser em seguida transformada em vinorelbina 5 por contração de anel, ou em vinflunina 1 por introdução de dois átomos de flúor na cadeia lateral do fragmento "norte" seguido por con- tração de anel (Diagrama 2). Esta operação de fluoração ocorre em um meio 10

15

20

superácido (HF-SbF5) na presença de um solvente clorado. Estas condições de reação são particularmente drásticas, resultando e, degradação parcial do alcalóide dimérico 4 e desse modo em uma gota na química total produ- zida na transformação. A gem-difluoração em C20' prossegue com redução concomitante da ligação dupla C3-C4. O Estereocentro formado em 4' tem uma configuração absoluta (R). Vinflunina pode também ser preparada por fluoração de vinorelbina 5 (Navelbine®). A síntese desta é realizada por con- tração de anel de 3',4'-anidrovinblastina 4. Diagrama 2

contração

(X

fi

MeO-'

Μ, H "CO3Me

fluorinação

3", 4' -anidrovinblastina 4 contração

■■/■·■.. rf Η % V L —.

rv wvV

N / MeOjC ,,

vinorelbina

N H

- í ohC

"W'ViOCOM*

^H CiO3Me

^ fluorinação

25

A 3',4 '-anidrovinblastina 4 é um produto com alto valor adiciona- do. O estágio de fluoração, desse modo, causa o sacrifício de uma quanti- dade considerável deste precioso intermediário. Esta situação arrisca resul- tar às vezes em um forte aumento na demanda para os níveis de pervinca. Diversas estratégias estão sendo estudadas para continuar o desenveolvi- mento de vinflunina 1.

Com base na observação que a fluoração de 3', 4- anidrovin- blastina em uma mistura superácida modifica apenas seu fragmento "norte" que origina-se de catarantina, uma solução consistindo em introduzir átomos de flúor diretamente ao esqueleto de catarantina 2 foi defendida, no escopo da presente invenção. Este método tem diversas vantagens: ele introduz flúor a montante na síntese para um produto com um valor adicionado menor do que 3', 4'- anidrovinblastina 4. A síntese de vinflunina pode em seguida ser acessada por meio de um acoplamento biomimético com vindolina 3. De fato, a 20',20'-difluorocatarantina 6 pode em seguida ser acoplada à vindoli- na 3 para obter 3',4'-anidro-20,,20,-difluorovinblastina 7. 0 último é finalmen- te convertido em vinflunina 1, em um processo familiar ao especialista, por reação de contração de anel seguido pela redução da ligação dupla de C3 - C4 não saturada (Diagrama 3). Diagrama 3

H

N

6 M

N

CO2Me

F F

Acoplamento

MeOΓΛ OHV

'^OCOMe

3 1H CO2M.

^5T

MeO2C

MeO-J< Fv.

J/

-η, Η \\

contraçáo

/ V OHL V ,^-i/^OCOMe

1H fc°>Me

3',4'-difluoro-3',4'-anidrovinblastina 7

O- 4 ~

N V

H Ζ ' . TrI-H W MeO^C /T\V/ ,,

W, OCOMe

Ih ''co^e

20',20'-<Jifluorovinorelbina 8

redução

MeO-K

uri

N f, ν

MeO2C MeO-

OCOMe

Me H 00^e

vinflunina, 1

Este método também permite acessar a outros derivados difluo- rados originais (3' , 4' -anidro-20' , 20' - difluorovinblastina 7, 20' , 20' - difluorovinorelbina 8) que não são acessíveis sob condições superácidas convencionais. Estas moléculas são todas de maior interesse visto que o estudo da relação de atividade da estrutura mostrou que a região 4' e 20' dos alcalóides de Vinca é fortemente associada com sua atividade anti- tumoral. Também, o acoplamento de intermediários de síntese (e derivados) de catarantina fluorada igualmente produz outros derivados fluorados origi- nais de alcalóides diméricos de Vinca. Portanto, a presente invenção refere-se a derivados fluorados de

catarantina respondendo à Fórmula Geral I: em que: a linha pontilhada expressa a possibilidade da presença de uma ligação dupla quando a substituição -X for ausente ou diferente de uma liga- ção dupla quando - X designar uma substituição para um grupo:

dentemente um do outro um átomo de hidrogênio ou um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C6,

Ri, R2 e R3 representam independentemente um do outro um átomo de hidrogênio, flúor ou um grupo metilado, na condição mesmo assim que pelo menos um dos radicais Ri e R2 represente um átomo de flúor, e η = 1 ou 2.

A presente invenção igualmente refere-se à utilização destes

derivados fluorados como intermediários de síntese úteis na preparação de alcalóides diméricos fluorados de Vinca, em particular como parceiros reati- vos em reações de acoplamento com vindolina ou com um derivado de vin- dolina. Em particular, vinflunina será obtida acoplando-se vindolina e 20, 20- 20,20-difluorocatarantina, resultando em 20', 20'- diflúor-3',4'- anidrovinblastina que, sucessivamente, será submetida a uma reação de contração de anel seguido por uma reação de redução da ligação dupla en- docíclica em posição C31 - C4'.

derada por meio de oxidação da cadeia lateral de catarantina e fluoração. Diagrama 4

5

-H, -OR,

- NR', R",

- SR, ou

- um átomo de halogênio com R, R1 e R" designando indepen-

A introdução dos átomos de flúor à catarantina 2 pode ser consi-

Hl \

CO2Me

CO2We Jf O

Catarantina 2

20-oxocatarantina 9

20,20-difluorocatarantina 6

A preparação dos derivados de catarantina fluorados da inven- ção envolve desse modo, uma etapa de oxidação da cadeia lateral de cata- rantina, que é realizada em condições induzindo a um derivado oxidado de catarantina respondendo à Fórmula Geral II:

em que:

- η = 1 ou 2,

- X designa um grupo C=O ou C=S1

- Y designa um grupo CO2R1 SO2R ou COR com R designando um grupo arila ou um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C4, e

- Z designa um grupo CH-OH ou C=O.

Portanto, a presente invenção refere-se também a derivados oxidados de catarantina respondendo à Fórmula Geral II:

em que:

- η = 1 ou 2,

- X designa um grupo C=O ou C=S,

- Y designa um grupo CO2R1 SO2R ou COR com R designando um grupo arila ou um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C4, e

- Z designa um grupo CH-OH ou C=O .

Um derivado oxidado preferido de catarantina de acordo com a Fórmula Il é um derivado em que:

- η = 2,

- X designa um grupo C=O,

- Y designa um grupo CO2R com R designando um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C4, e

- Z designa um grupo CH-OH ou C=O.

A presente invenção igualmente refere-se ao uso destes deriva- dos oxidados como intermediários de síntese úteis para a preparação de alcalóides diméricos fluorados de Vinca, em particular vinflunina. Esta prepa- ração envolve uma fluoração do derivado oxidado de catarantina seguido pela desproteção dos dois átomos de nitrogênio, resultando em um derivado fluorado de catarantina da invenção. A preparação também envolve uma reação de acoplamento entre o referido derivado fluorado e vindolina ou um derivado de vindolina. Em particular, vinflunina será obtida acoplando-se vindolina e 20,20-diflúor-catarantina, obtida por fluoração e desproteção dos dois átomos de nitrogênio de um derivado oxidado de catarantina como aci- ma definido para cujo η = 2, X = C=O1 Y = CO2R com R como acima definido e Z = C=O, resultando em 20',20'-diflúor-3',4'-anidrovinblastina que, sucessi- vamente, será submetida a uma reação de contração de anel seguido por uma reação de redução da ligação dupla endocíclica em posição C3-C4·.

O termo "arila" refere-se aqui a um grupo aromático cíclico de 5 a 7 átomos de carbono, compreendendo opcionalmente um heteroátomo, em particular um oxigênio ou um nitrogênio, tal como, por exemplo, um gru- po fenila ou piridinila.

Desse modo, como um exemplo, 20, 20-difluorocatarantina pode ser sintetisada como segue. A ativação da cadeia lateral pode ser obtida por isomerisação da

ligação dupla endocíclica à posição endocíclica antes de outra funcionaliza- ção. A reação de isomerisação de 2 em 10 é realizada sob pressão de hi- drogênio parcial na presença de paládio sob carbono. O anel indol é em se- guida protegido na forma de carbamato de metila 11 e nitrogênio terciário na forma de amida 12. Diagrama 5

MeOjC COjM· 0^Ss0

1) Deoxoflúor 2} K2CO3, MeOH 43% *

Acoplamento Vindolina

CO2Me _Λ

17

contração

20',20'-difluoroanidrovinblastina 7

Λ.η CO3Me

η /\ γ*ΓΜ ^

MeO2C 'f\

20',20'-difluorovinorelbina 8

H "fcOsMa

10

Redução

Nh%

~ Yx

MeO2C MeO

vinflunina 1

Ih

OMe

A ligação dupla de 12 é em seguida di-hidroxilada por OSO4 e o diol resultante 13 é ativado duas vezes na forma de sulfato cíclico 14. O ál- cool alílico 15 é obtido por ação do fluoreto de amônio de tetrabutila, seguido por tratamento com ácido sulfúrico. A função de álcool é em seguida oxidada por MnÜ2 e a enona resultante 16 é difluorada por ação de Deoxoflúor® (bis trifluoreto de (2-metoxietil)aminossulfeto). O grupo protetor de indol (carba- mato) é eliminado pela ação de carbonato de potássio em metanol. O grupo amida de 17 é finalmente reduzido para resultar em 20,20-difluorocatarantina 6. O ultimo pode, da mesma maneira como catarantina de origem natural, ser acoplado à vindolina para fornecer o análogo fluorado de 3' , 4' - anidrovinblastina (7) que, após a contração de anel, resulta no análogo fluo- rado de vinorelbina (8). Finalmente, a redução seletiva da ligação dupla do fragmento norte resulta na formação de vinflunina 1.

De acordo com uma rota de síntese variante, o álcool alílico 15 pode também ser obtido por uma proteção inicial do anel indol de catarantina 2 por um carbamato de metila (composto 26) e de nitrogênio terciário na forma de amida 27. O último pode em seguida ser oxidado diretamente em álcool alílico 15 por SeO2 (Diagrama 6). Diagrama 6

QCO2Me. KH m

MeOilC COjMe

l,} H3O «2%

SeOi 67%,

MeO2C COiMe I

26

MeOrC CQiMe 27

Os intermediários de síntese para 20,20-difluorocatarantina 6 podem ser explorados por disposições funcionais que não resultam em 20,20- difluorocatarantina porém em análogos estruturais. Estes análogos podem, do mesmo modo da catarantina de origem natural, ser acoplados à vindolina para resultar nos alcalóides diméricos fluorados correspondentes.

Consequentemente, partindo do intermediário 13, a oxidação da função de álcool secundário dá acesso à cetona 18. A fluoração do cetoál- cool 18 por DAST (trifluoreto de dietilaminossulfeto) gera diflúor-álcool 19. O último pode após os estágios usuais de desproteção (—► 20) ser acoplado à vindolina para formar o análogo difluorado 21 de vinblastina que é igualmen- te um alcalóide tendo propriedades anticâncer notáveis (Diagrama 7). Diagrama 7

ΟίΓΧ ρ

MpOjC COJUe 13

Desproteções

Oxidação Swem

. . - J Γ- . . >HJ

IteO5C

CO1Me «

JJA3T SS*

^iiii.....^ W

VieO--C CCVMlI

OH

1»

\ —j' H

M CO5M.0" M

""ry.r

MoO<f,

MeO-I r

M H

20',20'-difluorivinblastina 21

lT-OCOM· fcOjM» Entretanto, a introdução de um único átomo de flúor ao esquele- to de catarantina é possível do intermediário 15 (Diagrama 8). Quando o úl- timo é tratado por DAST, o produto mono-fluorado da cadeia lateral (22) é formado. Como anteriormente mencionado aqui acima, este produto resulta nos análogos de monoflúor 3',4'-anidro-20'-fluorovinblastina 24 e 20'- fluorovinorelbina 25 que podem induzir ao análogo monofluorado de vinfluni- na por um estágio adicional de redução da ligação dupla. Diagrama 8

P

'"=X /~"V M

JUL,

M

N

SfcO2C

ΟΛδΤ *#K

C

COsMe

hó

MeO-C

IS

Acoplamento vindotina

O Nl

COjMe

F

K

Desproteções

3^v/^^"—^ η /X rvT|

MeO-jS ' \ OHL

Ih bo^e

20'-fluoro-3',4'-anidrovinblastina 24

Contração

N-V 7

B / r^l

fteo-x Γ λ

20'-difluovinorelbina 25

Finalmente, isocatarantina 10 pode também ser utilizada como um intermediário de síntese na preparação de alcalóides diméricos fluorados de Vinca, e em particular vinflunina. Esta preparação envolve uma reação de acoplamento entre a referida isocatrantina e vindolina ou um derivado de vindolina.

Desse modo, vinflunina 1 pode ser obtida acoplando-se vindolina 3 e isocatarantina, resultando em 4',20'-anidrovinblastina 28. Este intermedi- ário pode em seguida ser difluorado utilizando as condições descritas para a fluoração de 3' , 4' -anidrovinblastina 4 (J. -C. Jacquesy e outro, Journal of Fluorine Chemistry, 2002, 114, 139). O produto obtido, (4' R) -4' -deóxi-20', 20' -difluorovinblastina 30, é idêntico ao produto formado por fluoração de 3' , 4 ' -anidrovinblastina 4. Transformação de 30 em vinflunina 1 por contração de anel é descrito na literatura (J. -C. Jacquesy e outro, Journal of Fluorine Chemistry, 2002, 114, 139) (Diagrama 9).

Alternativamente, vinflunina 1 pode ser também obtido por con- tração de anel de 4', 20'- anidrovinblastina 28, resultando em 29, seguido por uma gem-difluoração de acordo com os mesmo método como acima descri- to.

Diagrama 9

9¾

H COrVt« Iso-catarantina 10

FeCI3 vindolina

4',20-anidrovinblastina 28

j Meio I superácido

/Vor-7'-4',20'-anidrovinblastina 29

| Meio | superácido

I Zw1^

OlO /T\S. /

(4'R)-4'-deóxi-20',20'-difluorovinblastina 30

Parece que a presente invenção oferece uma estratégia alterna- tive para a clássica síntese de vinflunina, permitindo o uso de um processo mais eficaz e desse modo, mais econômico. Além disso, a utilização de in- termediários fluorados de catarantina de acordo com a invenção, por exem- plo: 20-fluorocatarantina 23 e 20, 20-diflúor-3-hidro- 4-hidroxicatarantina 20, em reações de acoplamento com vindolina 3, permite a preparação de novos alcalóides diméricos tendo atividades anticâncer potenciais. Outros análogos estruturais específicos de vinorelbina e vinflunina são facilmente acessados por este método.

Todos os métodos de preparação e diagramas de reação descri- tos aqui acima foram detalhados no caso de preparação de derivados fluo- rados de catarantina respondendo à Fórmula Geral (I) em que η = 2. Todos os derivados correspondentes respondendo à Fórmula Geral (I) em que η = 1 podem ser facilmente obtidos por um processo de contração de anel do norte, catarantina derivada, porção dos dímeros, pelas técnicas familiares à especialista e em particular aquelas decritas por Andriamialisoa, R. Z.; Lan- glois, N.; Langlois Y.; Potier P. Tetrahedron, 1980, 36, 3053-3060. A presente invenção atualmente será descrita com maiores deta-

lhes por meios de exempos de preparação mencionados aqui abaixo por meio de ilustração dos principais estágios resultando nos derivados fluora- dos de catarantina, e em particular em 20, 20-difluorocatarantina. Isocatarantina (10)

A uma suspensão de paládio (10% em massa) sob carbono (5,7 g, 5,4 mmol, 0,2 equivalente) previamente ativado por hidrogênio em MeOH (150 ml_) é adicionada (+ ) -catarantina 2 (9,0 g, 26,8 mmol, 1 equivalente) em solução em MeOH (100 mL). A mistura reacional é colocada sob pressão reduzida em hidrogênio (30 kPa (0,3 bar)), em seguida isolada e deixada sob agitação reduzida em temperatura ambiente. A reação é seguida por 1H RMN até o produto de partida desaparecer (cerca de 2 horas). A mistura re- acional é em seguida filtrada sob celita 545, em seguida recristalizada em MeOH para fornecer o composto 10 (6,5 g, 19.3 mmols, 72%) na forma de cristais translúcidos.

fórmula química: C21H24N2O2 - M = 336 g.mol"1

Rf = 0.35 (Hexano / AcOEt - 3/7) F = 78°C - 810C

1H RMN (CDCI3): 8,08 (s, 1H, NH); 7,53 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H- 11); 7,26 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-14); 7,22 - 7,10 (m, 2 H, H- 12 e H-13); 5,48 - 5,32 (m, 1H, H-20); 4,05 (s, 1H, H-5); 3,73 (s, 3H, CO2CH3); 3,62 - 3,46 (m, 1H, H-7); 3,44 - 3,24 (m, 2 Η, H-7 e H-8); 3,18 - 3,10 (m, 1H, H-19); 3,08 - 2,92 (m, 2 H, H-19 e H-8); 2,88 - 2,74 (m, 1H, H-1); 2,44 - 2,26 (m, 2H, H- 3); 2,20 - 2,08 (m, 1H, H-2); 1,90 - 1,78 (m, 1H, H-1); 1,62 (d, J = 6,7 Hz, 3 H, H- 21),

13C RMN (CDCI3): 175,2; 137,7; 135,9; 129,5; 122,6; 120,1; 119,4; 119,0; 111,2; 111,1; 64,2; 56,1; 53,8; 53,3; 51,1; 38,0; 30,3; 27,9; 22,0; 13,4.

IR (película): 3368, 2916, 2855, 1714, 1461, 1264, 740 cm-1.

MS (ESI TOF): 337 [M+H+] (100).

[a]d20 = + 35 (c = 2.3; CHCI3) Na-carbometóxi-isocatarantina (11)

A uma suspensão de hidreto de potássio (0,72 g, 6,3 mmol, 1,5 equivalente) em THF (10 mL) a O0C é adicionada gota a gota uma solução de 10 (1,35 g, 4 mmol, 1 equivalente) em THF (20 mL). Após 30 minutos sob agitação a 0 0C, cloroformiato de metila (0,5 mL, 6.3 mmol, 1,5 equivalente) é adicionado gota a gota. Após 1 hora sob agitação a 0 °C, o meio de reação é levado para temperatura ambiente e a agitação é mantida durante 18 ho- ras. Uma solução aquosa de K2CO3 saturado (10 mL) é adicionada. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3x20 mL), as fases orgânicas são coletadas, secadas em Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em se- guida purificado por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2/MeOH 97/3) para fornecer 11 (1,3 g, 3,3 mmol, 82%) na forma de um sólido branco, fórmula química: C23H26N2O4 - M = 394 g.mol"1 Rf = 0,4 (CH2CI2/ MeOH - 94/6) F = 62°C - 64°C

1H RMN (CDCI3): 8,08 (d, J = 7,9 Hz, 1H, H-11); 7,48 (d, J = 7,3 Hz, 1 H, H-14); 7,38 - 7,16 (m, 2 Η, H-12 e H-13); 5,32 - 5,18 (m, 1H, H-20); 4,06 (s, 1H, H-5); 3,86 (s, 3 H, CO2CH3); 3,68 (m, 1H, H-7); 3,54 (s, 3 H, CO2CH3); 3,40 - 3,12 (m, 2 H, H-7 e H-8); 2,99 (m, 1H, H-19); 2,86 (m, 1H, H-19); 2,80 - 2,65 (m, 2 H, H-8 e H-1); 2,44 (d, J = 16 Hz, 1H, H-3); 2,30 (d, J = 16 Hz, 1H, H-3); 2,06 (m, 1H, H-2); 1,76 (d, J = 14 Hz1 1 H, H-1); 1,56 (d, J = 6,7 Hz, 3H, H-21), 13C RMN (CDCI3): 173,4; 151,8; 138,1; 135,8; 129,5; 124,6; 122,7; 119,7; 118,2; 115,5; 60,6; 57,9; 54,1; 53,0; 52,0; 37,5; 29,7; 27,9; 21,8; 12,6. MS (ESI TOF): 395 [M+H+] (100).

HRMS (TOF MS ES+): Valor calculado para C23H27N2O4 - 395.1971 Valor encontrado - 395.1956 [q]d20 = + 48 (c = 1.0; CHCI3) Na-carbometóxi-l 9-oxoisocatarantina (12)

A 5 mL de uma solução aquosa de Na2CO3 (675 mg, 6.4 mmol, 9,3 equivalentes) é adicionada uma solução de 11 (270 mg, 0,69 mmol, 1 equivalente) em THF (10 mL). lodo (800 mg, 3,2 mmol, 4,6 equivalentes) em solução em THF (12 mL) é adicionado gota a gota a 0 °C. A mistura reacio- nal é em seguida apresentada em temperatura ambiente e agitada durante 18 horas. A seguir uma solução aquosa saturada em Na2S2O3 (15 mL) é adi- cionada e a mistura reacional é deixada sob agitação durante 30 minutos. A fase aquosa é em seguida extraída com CH2CI2 (3x20 mL). As fases orgâni- cas são combinadas, secadas em Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2/MeOH 98/2) para fornecer 12 (230 mg, 0,56 mmol, 82%) na forma de um sólido branco.

fórmula química: C23H24N2O5 -M = 408 g.mol"1 Rf = 0,4 (CH2CI2 / MeOH - 94/6)

F = 94°C - 96°C

1H RMN (CDCI3): 8,04 - 7,97 (m, 1H, H-11); 7,52 - 7,43 (m, 1H, H- 14); 7,36 - 7,21 (m, 2H, H-12 e H-13); 5,53 - 5,41 (m, 1H, H- 20); 4,66 (s, 1H, H-5); 4,32 - 4,17 (m, 1H, H-7); 3,93 (s, 3H, CO2CH3); 3,60 (s, 3 H, CO2CH3); 3,28 - 3,15 (m, 3 H, H-7 e H-8); 2,97 (dd, J = 14 Hz e J = 1,8 Hz, 1H, H-1); 2,84 - 2,76 (m, 1H, H-2); 2,56 - 2,48 (m, 2 H, H-3); 2,00 - 1,89 (m, 1H, H-1); 1,59 (d, J = 6,7 Hz, 3 Η, H-21).

13C RMN (CDCI3): 174,6; 172,0; 151,6; 136,4; 135,1; 132,5; 129,2; 124,9; 122,8; 120,9; 118,1; 117,0; 115,6; 61,5; 60,1; 58,7; 53,2; 52,1; 40,3; 38,9; 37,2; 28,5; 21,2; 20,8; 13,9; 13.1.

MS (ESI TOF): 409 [M+H+] (100); 817 [2M+H+] (34). [a]D20 = + 255 (c = 0,4; CHCI3) (4R.20R)-Ng-carbometóxi-3-hidro-4,20-di-hidróxi-19-oxocatarantina (13) A uma solução de 12 (1,26 g, 3,08 mmol, 1 equivalente ) em uma mistura de acetona / água (8/1) (27 mL) a 0 0C são adicionados OsO4 em solução em t-BuOH (2,5%, 1,9 mL, 0,154 mmol, 0,05 equivalente), em seguida por porção em 15 minutos NMO (0,72 g, 6,2 mmol, 2 equivalente).

Após 15 minutos a 0 °C, a mistura reacional é deixada sob agitação em tem- peratura ambiente durante 18 horas. A reação é interrompida adicionando-se uma solução aquosa saturada de Na2S2O3 (15 mL) e água (15 mL) e deixa- da sob agitação durante 20 minutos. A mistura reacional é extraída com CH2CI2 (4 χ 30 mL). As fases orgânicas são combinadas, secadas em Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2/ MeOH 97/3) para fornecer 13 (1,16 g, 2,61 mmol, 85%) na forma de um sólido branco.

fórmula química: C23H26N2O7 - M = 442 g.mol"1 Rf= 0,5 (CH2CI2/MeOH 9/1) F= 102°C-104°C

1H RMN (CDCI3): 7,98 (d, J = 7,9 Hz, 1H, H-11); 7,44 (d, J = 7,9 Hz1 1H, H-14); 7,35 - 7,20 (m, 2H, H-12 e H-13); 4,77 (s, 1H, H-5); 4,30 - 4,18 (m, 1H, H-7); 4,05 - 3,93 (m, 1H, H- 20); 3,92 (s, 3 H, CO2CH3); 3,63 (s, 3H, CO2CH3); 3,34 - 3,08 (m, 3 H, H-7 e H-8); 2,88 (dd, J = 14,0 Hz, J = 1,8 Hz, 1H, H-1); 2,65 - 2,60 (m, 1H, H-2); 2,02 - 1,74 (m, 3 Η, H-1 e H-3); 1,16 (d, J = 6,1 Hz, 3H, H-21).

13C RMN (CDCI3): 174,1; 172,5; 151,7; 135,3; 129,0; 125,1; 123,0; 118,2; 117,2; 115,6; 69,8; 59,2; 55,9; 53,4; 53,3; 52,9; 42,1; 38,5; 37,5; 36,7; 21,1; 17,8, IR (comprimido KBr): 3402, 2954, 1741, 1657, 1458, 760 cm"1

MS (ESI TOF): 443 [M+H+] (11); 465 [M+Na+] (100); 907 [2M+Na+] (36).

HRMS (TOF MS ES+):

Valor calculado para C23H26N2O7Na - 465.1638 Valor encontrado - 465.1631

[a]D20 = + 97 (c = 0,5; CHCI3) (4R.20R)-Na-carbometóxi-3-hidro-4.20-di-hidroxissulfato-19-oxocatarantina

ü4)

CH2CI2 (5 mL) a 0 0C são adicionados trietilamina (0,15 mL, 1,04 mmol, 2.3 equivalente) em seguida, gota a gota, cloreto de tionila (43 μΐ_, 0,59 mmol, 1,3 equivalente). Após 30 minutos a 0 °C, a reação é interrompida adicio- nando-se uma solução saturada em NaCI (5 mL) e água (5 mL). A fase a- quosa é extraída com CH2CI2 (3x10 mL). As fases orgânicas são combina- das, secadas em Na2SO4 e concentradas sob vácuo.

O produto bruto é em seguida colocado diretamente em uma mistura de 7,5 mL CH3CN e 6,5 mL de H2O e é agitada vigorosamente. Ru- Cl3 (5 mg, 0,023 mmol, 0,05 equivalente) e NaIO4 (242 mg, 1,13 mmol, 2,5 equivalentes) são em seguida adicionados successivamente e após 1:30 horas Et2O (12 mL) é adicionado. A agitação é prolongada durante 10 minu- tos. A fase aquosa é extraída por 3x10 mL Et2O em seguida as fases orgâni- cas combinadas são lavadas com água (30 mL), uma solução saturada em NaHCO3 (30 mL) e uma solução saturada em NaCI (30 mL). A fase orgânica é em seguida secada em Na2SO4 e concentrada sob vácuo. A purificação por cromatografia em sílica (eluente CH2CI2/MeOH 98/2) resulta em 14 (137 mg, 0,27 mmol, 60%) na forma de um sólido branco.

fórmula química: C23H24N2O9S -M = 504 g.mol"1 Rf = 0,5 (CH2CI2/ MeOH - 95/5) F = 140°C - 142°C

1H RMN (CDCI3): 7.98 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-11); 7,44 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-14); 7,37 - 7,30 (m, 2 Η, H-12 e H-13); 5,12 (s, 1H, H-5); 4,75 (q, J = 6,7 Hz, 1H, H-20); 4,24 - 4,13 (m, 1H, H-5); 3,99 (s, 3H, CO2CH3); 3,68 (s, 3H, CO2CH3); 3,53 - 3,47 (m, 1H, H-7); 3,35 - 2,95 (m, 2H, H-8); 2,97 (dd, J =

o

5

A uma solução de diol 13 (200 mg, 0,45 mmol, 1 equivalente) em 14,0 Hz e J = 1,6 Hz1 1 Η, H-1); 2,90 - 2,85 (m, 1H, H-2); 2,45 - 2,38 (m, 2H, H-3); 2,02 - 1,96 (m, 1 H, H-1); 1,64 (d, J = 6,7 Hz, 3 Η, H-21).

13C RMN (CDCI3): 173,2; 171,5; 152,4; 136,1; 134,8; 129,3; 125,6; 123,5; 118,8; 117,5; 116,0; 94,8; 84,9; 56,9; 55,1; 54,0; 53,4; 40,9; 38,4; 37,7; 32,3; 21,2; 15,8.

IR (comprimido KBr): 1735, 1687, 1459, 1382, 1215, 904 cm-1. MS (ESI TOF): 505 [M+H+] (100); 1009 [M+Na+] (13). [a]D20 = + 165 (c = 0,3; CHCI3) (20R) -Na-carbometóxi-20-hidróxi-19-oxocatarantina (15)

A uma solução de sulfato 14 (1,59 g, 3,16 mmol, 1 equivalente)

em THF (25 ml_) é adicionada gota a gota uma solução de NBu4F (1M em THF, 6,3 ml_, 6,3 mmol, 2 equivalente). Após 18 horas de agitação em tem- peratura ambiente, uma solução de H2SO4 de 2M em THF (37 ml_) e 3,7 mL água são adicionados. Após 48 horas de agitação em temperatura ambiente, uma solução saturada em NaHCO3 é adicionada (200 mL).

A fase aquosa é extraída com AcOEt (4x50 mL), as fases orgâ- nicas são combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e em seguida concen- tradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica e 15 (828 mg, 1,95 mmol, 62%) é isolado na forma de um sólido branco.

fórmula química: C23H24N2Oe -M = 424 g.mol"1

Rf = 0,3 (CH2CI2/ MeOH - 95/5)

F= 188°C - 190°C

1H RMN (CDCI3): 7,98 (d, J = 7,9 Hz, 1H, H-11); 7,44 (d, J = 7,9 Hz, 1H, H-14); 7,35 - 7,20 (m, 2 Η, H-12 e H-13); 6,43 (d, J = 6,3 Hz1 1H, H- 3); 5,24 (d, J = 1,7 Hz1 1H, H-5); 4,41 - 4,33 (m, 1H, H-20); 4,17 - 4,03 (m, 1H, H-7); 3,94 (s, 3H, CO2CH3); 3,57 (s, 3H, CO2CH3); 3,47 - 3,17 (m, 4 H, H-8, H-2 e H-7); 2,88 (dd, J = 14,0 Hz e J = 1,8 Hz, 1H, H-1); 2,02 (dd, J = 14,0 Hz e J = 1,8 Hz1 1Η, H-1); 1,33 (d, J = 6,1 Hz, 3H, H-21).

13C RMN (CDCI3): 174,1; 173,8; 152,0; 145,3; 136,6; 135,3; 129,3; 128,5; 125,1; 123,1; 118,4; 116,7; 115,8; 67,1; 58,0; 54,3; 53,6; 52,8; 44,0; 40,7; 38,4; 21,3; 21,1.

IR (comprimido KBr): 3414, 2944, 1743, 1653, 1458, 1437, 1327, 1242, 754 cm"1.

MS (ESI TOF): 447 [M+Na+] (100); 871 [2M+Na+] (64). [a]D20 = +181 (c = 0,7; CHCI3) Na-carbometóxi-19,20-dioxocatarantina (16)

Uma solução de álcool alílico 15 (100 mg, 0,236 mmol, 1 equiva- lente) em 8 mL de diclorometano é resfriada para 0°C. 140 mg de dióxido de manganês (16 mmols, 70 equivalentes) são adicionados á esta de uma vez. A suspensão preta obtida é agitada a 0 0C durante 1:30 hora sob atmosfera de nitrogênio em seguida apresentada em temperatura ambiente .

A mistura reacional é filtrada sob celita 545 em seguida lavada completamente utilizando diclorometano. O filtrado é concentrado sob pres- são reduzida para fornecer a enona 16 (85 mg, 0,201 mmol, 85%) na forma de um sólido branco.

fórmula química: C23H22N20 6 ~ M — 422 g.mol Rf = 0,4 (EtOAc) F = 108°C-110X

1H RMN (CDCI3): 8,01 (d, J = 8,5 Hz1 1H, H-11); 7,49 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-14); 7,45 (d, J = 6,7 Hz, 1 H, H-3); 7,37 - 7,23 (m, 2 Η, H-12 e H- 13); 5,80 (d, J= 1,8 Hz, 1 H, H-5); 4,18 - 4,02 (m, 1H, H-7); 3,91 (s, 3H, CO2CH3); 3,65 (m, 1 H, H-2); 3,49 (s, 3H, CO2CH3); 3,48 - 3,34 (m, 1H, H-8); 3,32 - 3,16 (m, 2 H, H-7 e H-8); 2,82 (dd, J = 12,8 Hz e J = 2,4 Hz, 1H, H-1); 2,35 (s, 3 H, H-21); 2,07 (dd, J = 13,4 Hz e J = 3,0 Hz, 1H, H-I).

13C RMN (CDCI3): 193,3; 172,2; 171,6; 151,9; 143,6; 142,3; 135,8; 135,3; 129,2; 125,2; 123,1; 118,4; 117,0; 115,8; 57,3; 53,5; 52,6; 52,5; 45,5; 41,3; 37,4; 24,6; 20,9.

IR (comprimido KBr): 1740, 1668, 1252, 751 cm'1. MS (ES I TOF ): 423 [ M+H+ ] ( 10 ); 445 [M+Na+ ] ( 100 ); 867 [ 2M+Na+ ] ( 32 ).

HRMS (TOF MS ES+ ):

Valor calculado para C23H22N2O6Na - 445.1376 Valor encontrado - 445.1357 [a] d20 = + 183 ( c = 1,8; CHCI3) 20.20-diflúor-19-oxocatarantina (17)

Fluoracão: Ng-carbometóxi-20,20-diflúor-19- oxocatarantina

H3(X)2C

A enona 16 (300 mg, 0,71 mmol, 1 equivalente ) é colocado em solução em Deoxofluor® (3 mL, 16,4 mmol, 23 equivalente). Três gotas de etanol são em seguida adicionadas e a mistura reacional é deixada sob agi- tação a 80°C durante 24 horas. 0,6 mL de Deoxofluor® (3,3 mmols, 5 equiva- lente) e duas gotas de etanol são em seguida adicionadas e agitação é con- tinuada nesta temperatura durante mais 48 horas (a reação é seguida por 1H RMN até o produto de partida desaparecer). O meio de reação é diluído em 200 mL de diclorometano e 100 mL de uma solução aquosa saturada em K2CO3 são em seguida adicionados. A mistura é deixada durante 15 minutos sob agitação em temperatura ambiente, em seguida a fase aquosa é extraí- da por 3x50 mL de diclorometano. As fases orgânicas são combinadas, se- cadas em Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por duas filtragens sob sílica-gel (CH2CI2 / MeOH - 98/2 e C6H12AcOEt 6/4) e o resíduo entra no estágio seguinte.

fórmula química: C23H22N2O5F2 - M = 444 g.mol"1 Rf = 0,3 (Hexano / AcOEt - 40/60)

1H RMN (CDCI3): 8,01 - 7,99 (m, 1H, H-11); 7,53 - 7,47 (m, 1H, 10

15

20

H- 14); 7,38 - 7,28 (m, 2Η, H-12 e H-13); 6,87 - 6,77 (m, 1 Η, H- 3); 5,36 (d, J = 1,8 Hz, 1 Η, H-5); 4,20 - 4,03 (m, 1H, H-7); 3,93 (s, 3H, CO2CH3); 3,61 - 3,54 (m, 1H, H-2); 3,57 (s, 3 H, CO2CH3); 3,45 - 3,20 (m, 3H, H-8 e H-7); 2,93 - 2,83 (m, 1 H, H-1); 2,09 - 1,98 (m, 1 H, H-1); 1,81 (dd, J = 18 Hz, J = 18 Hz1 3H, H-21).

Desprotecão de indol: 20.20-diflúor-19-oxocatarantina (17)

A uma solução da 20,20-difluorocatarantina acima protegida em 100 mL de metanol são adicionados de uma vez 2 g de carbonato de potás- sio (14,5 mmol) e a suspensão é agitada em temperatura ambiente durante 18 horas. 50 mL de água são em seguida adicionados ao meio de reação agora límpido e a mistura é extraída por 3x50 mL didiclorometano. As fases orgânicas combinadas são secadas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo obtido é precipitado em uma mistura de cicloexa- no/acetato de etila 7/3 para fornecer 17 (118 mg, 0.307 mmol, 43% em duas etapas) na forma de um sólido branco.

fórmula química: C2iH2oF2N203 -M- 386 g.mol Rf = 0,3 (CH2CI2/ MeOH - 95/5)

1H RMN (CDCI3): 7,95 (s, 1H, NH); 7,52 (d, J = Hz, 1H, H- 11); 7,26 (d, J = Hz, 1 H, H-14); 7,16 - 7,11 (m, 2 H, H-12 e H-13); 6,83 (m, 1H, H-3); 5,55 (d, J = I Hz, 1H, H-5); 4,24 (m, 1H, H-7); 3,67 (s, 3H, CO2CH3); 3,58 (m, 1 H, H-2); 3,36 - 3,24 (m, 3H, H-8 e H-7); 2,82 (dd, J = 13 Hz, J = 2 Hz, 1 H, H-1); 2,27 (dd, J = 13 Hz, J = 2 Hz, 1H, H-1); 1,82 (dd, J = 18 Hz, J = 18 Hz, 3H, H-21).

13C RMN (CDCI3): 172,8; 171,6; 139,5 (t, J = 30 Hz); 135,8; 135,2 (t, J = 9 Hz); 133,8; 127,7; 122,4; 119,7; 119,1 (t, J = 233 Hz); 118,4; 110,6; 108,8; 56,3; 53,6; 53,0 44,0; 42,8; 35,6; 22,4 (t, J = 28 Hz); 20,7.

[a]D20 = + 155 (c = 0,4; CHCI3). 20,20-difluorocatarantina (6)

P A uma solução de 17 (140 mg, 0,36 mmol, 1 equivalente ) em 50 mL de tetra-hidrofurano são adicionados de uma vez 360 mg de boroidreto de sódio (9,5 mmol, 26,5 equivalente). A suspensão resultante é resfriada para 0°C e colocado sob agitação e atmosfera de nitrogênio. 1,9 mL (14,6 mmol, 40,5 equivalente) de eterato dietílico de trifluoroborano é adicionado gota a gota, em seguida a mistura reacional é apresentada em temperatura ambiente e agitada durante 3 horas. O solvente é evaporado sob vácuo e substituído por 30 mL de metanol aos quais são adicionados 6 mL de água e 4,5 mL de uma solução de ácido clorídricoa 10%. O total é agitado em tem- peratura ambiente durante 15 horas. O metanol é evaporado e substituído por 20 mL de diclorometano. O meio é neutralizado por adição de 40 mL de uma solução aquosa saturada em hidrogenocarbonato de sódio em seguida extraída por 3x20 mL de diclorometano. As fases orgânicas combinadas, secadas em Na2SO4, são concentradas sob pressão reduzida. A purificação do resíduo por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2ZMeOH 98/2) produz 74 mg (0,2 mmol, 55%) de 6 na forma de um sólido branco.

fórmula química: C2xH22F2N2O2 - M = 372 g.mol"1 Rf = 0,5 (CH2CI2/ MeOH 95/5)

1H RMN (CDCI3): 7,68 (s, 1H, NH); 7,53 (d, J = 7,5 Hz, 1 H, H- 11); 7,27 (d, J = 7,5 Hz, 1H, H-14); 7,20 (td, J = 7,5 Hz, J = 1,5 Hz, 1H, H- 13); 7,14 (td, J = 7,5 Hz, J = 1,5 Hz, 1H, H-12); 6,61 (m, 1H, H-3); 4,64 (d, J = 2 Hz, 1 H, H-5); 3,72 (s, 3H, CO2CH3); 3,63 (ddd, J = 14 Hz, J = 10 Hz, J = Hz, 1H, H-7); 3,43 (ddd, J = 14 Hz, J = 5 Hz, J = 5 Hz, 1H, H-7); 3,32 (ddd, J = 17 Hz, J = 10 Hz, J = 5 Hz, 1 H, H-8); 3,01 (ddd, J = 17 Hz, J = 5 Hz, J = 5 Hz, 1 H, H-8); 2,88 (m, 3 Η, H-2 e H-19); 2,81 (dd, J = 13 Hz1 J = 2 Hz, 1 H, H-1); 1,84 (dd, J = 18 Hz, J = 18 Hz, 3H, H-21); 1,81 (d, J = 13 Hz, 1H, H-1).

13C RMN (CDCI3): 173,4; 143,3 (t, J = 28 Hz); 136,1; 135,3; 132,1 (t, J = 9 Hz); 128,8; 122,1; 119,7 (t, J = 232 Hz); 119,4; 118,3; 110,6; 110,4; 57,0; 55,3; 52,7; 52,3; 47,0; 37,0; 30,8; 22,6 (t, J = 28 Hz); 21,6, SM (ESI TOF): 353 [M-HF+H+] (6); 373 [M+H+] (100). [a]D20 = + 43 (c = 0,4; CHCI3).

A uma solução de cloreto de oxalila (0,56 mL, 6,47 mmol, 2,2

equivalentes) em CH2CI2 (25 mL) mantida a -65°C (temperatura interna) é adicionada gota a gota DMSO (1,15 mL, 16,2 mmol, 5,5 equivalentes) em solução em CH2CI2 (0,850 mL). A mistura é agitada durante 20 minutos, em seguida uma solução de diol 13 (1,3 g, 2,94 mmol, 1 equivalente) em CH2CI2 (25 mL) é adicionada gota a gota quando a temperatura é regulada entre - 60°C e -65°C. Após 45 minutos de agitação, trietilamina (3,7 mL, 26,5 mmol, 9,0 equivalentes) é adicionada, em seguida a temperatura da mistura é a- presentada em temperatura ambiente durante um período de 45 minutos. Água (20 mL) e salmoura (10 mL) são adicionadas, em seguida a mistura reacional é extraída com CH2CI2 (3x50 mL). As fases orgânicas são combi- nadas, secadas em Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia instantânea em sílica (Eluente: CH2CI2 / MeOH - 97/3) para fornecer ceto-álcool 18 (647 mg, 1,47 mmol, 50%) na forma de um sólido branco e 13 (520 mg, 1,17 mmol, 40%). fórmula química: C23H24N2O7 - M = 440 g.mol"1

F= 123°C - 125°C Rf = 0,2 (AcOEt)

1H RMN (CDCI3): 7,97 (d, J = 8,5 Hz, 1H, H-11); 7,44 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-14); 7,35 - 7,20 (m, 2 Η, H-12 e H-13); 5,16 (s, 1H, OH); 5,04 (s, 1 H, H-5); 4,23 - 4,04 (m, 1H, H-7); 3,91 (s, 3H, CO2CH3); 3,48 (s, 3H, CO2CH3); 3,41 - 3,35 (m, 2 H, H-7 e H-8); 3,35 - 3,11 (m, 1H, H-8); 2,85 (dd, J = 14,0 Hz e J = 1,8 Hz, 1 H, H-1); 2,79 - 2,71 (m, 1H, H-2); 2,59 (d, J = 14,0 Hz, 1H, H-3); 2,25 (s, 3H, H-21); 2,26 - 2,15 (m, 1H, H-3); 1,91 - 1,79 (m, 1H1 H-I).

13C RMN (CDCI3): 204,5; 174,3; 173,0; 151,9; 137,1; 135,0; 129,3; 125,1; 123,1; 118,4; 116,6; 115,8; 57,6; 54,9; 53,5; 52,7; 42,1; 38,9; 38,6; 34,9; 24,7; 21,2.

IR (comprimido KBr): 3270, 2953, 1732, 1652, 1461, 759.747

[q]d° = + 121 (c = 0,4; CHCI3) (4R)-Na-carbometóxi-20,20-diflúor-3-hidro-4-hidróxi-19-oxocatarantina (19)

A uma solução de ceto-álcool 18 (44 mg, 0,1 mmol, 1 equivalen-

te) em CH2CI2 (1 ml_) a -78°C é adicionada DAST (67 μΙ_, 0,5 mmol, 5 eq). A mistura reacional é em seguida deixada sob agitação em temperatura ambi- ente durante 18 horas. Em seguida, uma solução aquosa de NaHCO3 a 10% (5 ml_) é adicionada gota a gota a 0 0C1 a mistura é deixada durante 15 mi- nutos sob agitação em temperatura ambiente, em seguida a fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3x10 ml_). As fases orgânicas são combinadas, seca- das em Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica (Eluente: Hexano / AcOEt - 6/4) para fornecer 19 (26 mg, 0,056 mmol, 56%).

fórmula química: C22H24F2N2O6 - M = 462 g.mol"1 Rf = 0,3 (EtOAc)

1H RMN (CDCI3): 7,98 (d, J = 8,5 Hz, 1H, H-11); 7,49 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-14); 7,36 - 7,26 (m, 2 Η, H-12 e H-13); 5,74 (s, 1H, H-5); 4,21 - 4,05 (m, 1H, H-7); 3,97 (s, 3H, CO2CH3); 3,66 (s, 3H, CO2CH3); 3,30 - 3,15 (m, 4 Η, H-8, H-7 e H-1); 2,73 (m, 1 H, H-2); 2,62 - 2,52 (m, 1H, H-1); 2,15 -

cm"1.

MS (ESI TOF): 441 [M+H+] (100). HRMS (TOF MS ES+):

Valor calculado para C23H24N2O7Na - 463.1481 Valor encontrado - 463.1472 2,05 (m, 1 Η, H-3); 1,83 (d, J = 14 Hz, 1 Η, H-1); 1,66 (dd, J = 19 Hz, J = 19 Hz, 3H, H-21), MS (ESI TOF): 485 [M+Na+] (100). Na-carbometóxi-20-f luoro-19-oxocatarantina (22 )

CH2CI2 (0,1 mL) é adicionado álcool alílico 15 (20 mg, 0.05 mmol, 1 equiva- lente) em CH2CI2 (0.7 mL). A mistura reacional é em seguida deixada sob agitação em temperatura ambiente durante 15 minutos. Em seguida, uma solução aquosa saturada de K2CO3 (2 mL) é adicionada gota a gota a 0 °C, a mistura é deixada durante 15 min sob agitação em temperatura ambiente, em seguida a fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3x2 mL). As fases orgâni- cas são combinadas, secadas sobre Na2SO4 e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado sobre uma placa de sílica preparativa (eluente CH2CI2/ MeOH - 98/2) para fornecer 22 (10 mg, 0,023 mmol, 49%) na forma de dois epímeros AeB (sólido branco). fórmula química: C23H23FN2O5 - M = 426 g.mol"1

1H RMN (CDCI3): 8,02 (d, J = 7,9 Hz, 1H, H-11); 7,49 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-14); 7,35 - 7,20 (m, 2 Η, H-12 e H-13); 6,53 - 6,48 (m, 1 H, H-3); 5,26 (d, J = 1,8 Hz1 1H A, H-5); 5,22 (d, J = 1,8 Hz, 1H B, H-5); 4,98 (dq, J = 47,6 Hz e J = 6,1 Hz, 1 H, H-20); 4,20 - 4,04 (m, 1H, H-7); 3,93 (s, 3H, CO2CH3); 3,59 (s, 3H, CO2CH3); 3,53 - 3,48 (m, 1H, H-7); 3,43 - 3,19 (m, 3H, H-8 e H-2); 2,89 - 2,77 (m, 1H, H-1); 1,90 (d, J = 13,4 Hz, 1 H, H-1); 1,51 (dd, J = 23,8 Hz, J = 6,7 Hz, IH A, H-21); 1,46 (dd, J = 23,8 Hz, J = 6,7 Hz, 1H B, H-21).

13C RMN (CDCI3): 173,5; 171,8; 171,6; 151,9; 142,1; 141,9;

136,5; 136,4; 135,3; 130,0; 129,3; 125,1; 123,1; 118,3; 116,8; 115,8; 87,7 (d, J = 161 Hz); 87,6 (d, J = 161 Hz); 57,9; 57,7; 55,2; 54,7; 53,4; 53,3; 52,6; 44,3; 41,1; 40,9; 40,6; 38,7; 37,4; 29,6; 21,5; 21,1; 19,1 (d, J = 23 Hz); 18,4

P

A uma solução de DAST (8 pL, 0,06 mmol, 1,2 equivalente) em

Rf = 0,4 (CH2CI2/ MeOH 95/5) (d, J = 23 Hz).

MS (ESI TOF): 465 [M + K+] (100), 891 [2 M + K+] (33).

Uma solução de (+)-catarantina 2 (1,0 g, 3,0 mmol, 1 equivalen- te) em THF (6 mL) é adicionada gota a gota a uma suspensão de hidreto de potássio a 0 0C (510 mg, 4,5 mmol, 1,5 equivalente) em THF (5 mL). Após 1 hora sob agitação a 0 °C, cloroformiato de metila (0,35 mL, 4,5 mmol, 1,5 equivalente) é adicionado gota a gota. Após 30 minutos sob agitação a 0 °C, uma solução aquosa de K2CO3 saturado (10 mL) é adicionada. A fase aquo-

sa é extraída com CH2CI2 (3 χ 10 mL), as fases orgânicas são coletadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2/ MeOH - 97/3) para fornecer 26 (280 mg, 2,1 mmol, 70%) na forma de um sólido branco.

fórmula química: C23H2GN2O4 - M = 394 g.mol"1

1H RMN (CDCI3): 8,10 (d, J = 7,3 Hz, 1H, H-11); 7,49 (d, J = 7,3 Hz1 1 H, H-14); 7,33 - 7,24 (m, 2 Η, H-12 e H-13); 5,99 (m, 1 H, H-3); 4,21 (s, 1H, H-5); 3,87 (s, 3H, CO2CH3); 3,65 (m, 1H, H-7); 3,54 (s, 3H, CO2CH3); 3,23 (m, 1H, H-8); 3,03 - 2,85 (m, 3 H, H-7 e H-19); 2,47 (m, 2 Η, H-2 e H-8);

2,48 (d, J = 8,5 Hz, 1H, H-1); 2,24 (m, 1H, H-20); 1,91 (m, 1H, H-20); 1,71 (d, J = 10,3 Hz, 1H, H-1); 1,08 (d, J = 7,3 Hz1 3 Η, H-21).

13C RMN (CDCI3): 172,9; 151,7; 147,3; 138,6; 135,9; 129,5; 124,5; 123,3; 122,7; 119,6; 118,2; 115,4; 58,5; 55,9; 55,8; 52,9; 52,7; 52,0; 38,2; 31,5; 26,7; 21,9; 10,3.

Ng-carbometóxi-9-oxocatarantina (27) A 15 mL de uma solução aquosa de Na2CO3 (2,07 g, 19,5 mmol, 9,3 equivalentes) é adicionada uma solução de 26 (820 mg, 2,1 mmol, 1 e- quivalente) em THF (30 mL). lodo (2,46 g, 9,7 mmol, 4,6 equivalentes) em solução em THF (40 mL) é adicionada gota a gota a 0 °C. A mistura reacio- nal é em seguida apresentada em temperatura ambiente e agitada durante 18 horas. Em seguida, uma solução aquosa saturada em Na2S2Oa (30 mL) é adicionada e a mistura reacional é deixada sob agitação durante 30 minutos. A fase aquosa é em seguida extraída com CH2CI2 (3 χ 30 mL). As fases or- gânicas são combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2/ MeOH - 98/2) para fornecer 27 (787 mg, 1,93 mmol, 92%) na forma de um sólido branco.

fórmula química: C23H24N2O5 - M = 408 g.mol"1 1H RMN (CDCI3): 8,06 - 7,98 (m, 1H, H-11); 7,53 - 7,44 (m, 1H, H-14); 7,36 - 7,22 (m, 2H, H-12 e H-13); 6,23 - 6,17 (m, 1 H, H- 3); 4,84 (d, J = 1,8 Hz1 1H, H-5); 4,19 - 4,03 (m, 1H, H-7); 3,92 (s, 3 H, CO2CH3); 3,60 (s, 3H, CO2CH3); 3,47 - 3,37 (m, 1H, H-2); 3,36 - 3,15 (m, 3H, H-8 e H-7); 2,83 - 2,73 (m, 1 H, H-1); 2,24 - 1,89 (m, 3 Η, H-20 e H-1); 1,08 (t, J = 7,3 Hz, 3H, H-21).

13C RMN (CDCI3): 174,5; 171,9; 151,8; 144,1; 136,8; 135,3;

129,3; 125,6; 125,0; 123,0; 118,2; 116,8; 115,7; 59,0; 57,7; 53,4; 52,4; 44,1; 41,0; 37,8; 26,5; 21,1; 11,0.

IR (película): 2996, 2959, 2881, 1739, 1681, 1461, 1443 cm"1. MS (IC): 409 [M+H+] (100). [a]D20 = + 141 (c= 1,9; CHCI3). Oxidacão alílica de catarantina protegida (27) para fornecer (20R)-Na- carbometóxi-20-hidróxi-19-oxocatarantina (15)

Em um tubo de pressão de 25 mL, 50 mg de catarantina 27 pro- tegida (0,123 mmol, 1 equivalente) são dissolvidos em 1,5 mL de etanol 95%. 51 mg de dióxido de selênio (0,459 mmol, 3,7 equivalentes) em solu- ção em 2,5 mL de etanol 95% é adicionada. 0 tubo é hermeticamente sela- do com uma cortiça de Teflon (equipado com uma articulação) e colocado a 120°C (temperatura do banho de óleo) sob agitação magnética. Após 24 ho- ras, 40 mg (0,36 mmol, 2,9 equivalente) de SeO2 são adicionados em uma porção (em uma forma sólida). Esta operação é repetida a cada 24 horas durante 4 dias (antes de cada adição, o tubo é levado para temperatura am- biente para ser seguramente aberto). Após 5 dias de reação, o material de partida é completamente consumido. A mistura reacional é apresentada em temperatura ambiente e diluída com Et2O. Ela é lavada com 20 mL de sal- moura. A fase aquosa é extraída com Et2O (3 χ 20 mL). As fases orgânicas são combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica (Eluen- te: CH2CI2 / MeOH - 98/2 em seguida 95/5) para fornecer 35 mg (0,083 mmol, 67%) de um sólido branco correspondendo ao álcool alílico 15, carac- terísticas espectrais do qual são idênticos àquelas do álcool alílico obtido pelo protocolo utilizando isocatarantina .

Desse modo, 20,20-diflúor-catarantina (6), (4R)-Na-carbometóxi- 20,20-diflúor-3-hidro-4-hidróxi-19- oxocatarantina (19) após desproteções e Na-carbometóxi-20-flúor-19-oxocatarantina (22) após desproteções, podem ser acopladas, de uma maneira bem conhecida por si na técnica anterior, com vindolina, em seguida submetida a uma reação de contração de anel e se requerido a uma redução da ligação dupla endocíclica C3'- C4', a fim de que respectivamente resulte em vinflunina (1), 20',20'- difluorovinblastina (21) e 20' -fluorovinorelbina (25), que sucessivamente pode ser submetida a uma etapa adicional de redução da ligação dupla para resultar no análogo de vinflunina monofluorado.

A uma mistura de 60 mL de um tampão de glicina e de 100 mL de uma solução aquosa de ácido hidroclórico de 0,1 M é adicionado de uma só vez 1 g (2,98 mmol, 1 equivalente) de isocatarantina 10. Após dissolução completa, 1,36 g (1 equivalente) de vindolina, em seguida 2,43 g (5 equiva- lentes) de FeCb são adicionados. A mistura reacional, colocada sob atmos- fera de nitrogênio, é agitada em temperatura ambiente durante 15 horas. A reação é interrompida por uma adição gota a gota de uma solução de 172 mg (1,5 equivalente) de NaBH4 em 15 mL de uma solução aquosa de NH3 de 28%. Após 10 minutos de agitação em temperatura ambiente, 30 mL de CH2Cb e 30 mL de uma solução de sal Rochelle são adicionados e a mistura é vigorosamente agitada durante 4 horas. Ela é em seguida extraída com CH2CI2 (4 χ 80 mL). As fases orgânicas são combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto bruto é em seguida purificado por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2 / MeOH - 95/5) para fornecer 28 (1,18 g, 1,49 mmol, 50%). fórmula química! C4GHssN4Oe -M- 792 g.mol

1H RMN (CDCI3): 9,82 (s, 1H); 7,99 (s, 1H); 7,45 (d, J = 7,6 Hz, 1H); 7,20 - 7,05 (m, 3H); 6,52 (s, 1H); 6,10 (s, 1H); 5,85 (dd, J = 4 e 10 Hz, 1H); 5,57 (q, J = 6,4 Hz, 1H); 5,43 (s, 1H); 5,28 (d, J = 12 Hz, 1H); 3,81 (s, 3H); 3,78 (s, 3H); 3,76 (s, 1H); 3,61 (s, 3H); 3,60 - 3,08 (m, 10H); 2,91 - 2,79 (m, 2H); 2,72 (s, 3H); 2,65 (s, 1H); 2,45 - 2,31 (m, 3H); 2,16 - 2,05 (m, 5H); 1,84 - 1,71 (m, 2H); 1,67 (d, J = 6,4 Hz, 3H); 1,35 - 1,29 (m, 1H); 1,24 - 1,18 (m, 1H); 0,78 (t, J = 7,6 Hz, 3H).

13C RMN (CDCI3): 8,3; 12,8; 21,1; 24,6; 30,7; 31,8; 33,3; 34,7; 38,2; 42,6; 44,6; 47,5; 50,0; 50,2; 52,2; 52,4 ; 53,2; 55,2; 55,8; 56,9; 59,9; 65,2; 76,4; 79,7; 83,2; 94,0; 110,5; 116,8; 118,2; 119,0; 119,8; 120,6; 122,5; 122,7; 123,3; 124,6; 129,0; 129,9; 130,0; 133,1; 135,1; 152,8; 158,0; 170,9; 171,6; 174,6, MS (ESI-TOF): 793 [M+H+] (100). f7or-7'-4',20'-Anidrovinblastina (29) A O0C1 uma solução de 30 μΙ_ (1 equivalente ) de ácido trifluoacé- tico em 3 ml_ de CH2CI2 é adicionada gota a gota a uma solução de 296 mg (0,374 mmol, 2 equivalentes) de 4', 20'- anidrovinblastina 28 diluída em 3 mL de CH2CI2 anidroso. Após 10 minutos de agitação, a mistura é resfriada a -78°C e 67 mg (1 equivalente) de NBS em solução em 3 mL de CH2CI2 são adicionados gota a gota. Após 20 minutos a -78 °C, o banho frio é removido e após 15 minutos, 15 mL de uma solução aquosa a 10% de K2CO3 são adi- cionados. A mistura é extraída com CH2CI2 (3x15 mL). As fases orgânicas são combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob vácuo. O produto bruto é dissolvido em 40 mL de uma mistura de THF/água 1/1 e 182 mg (2,5 equivalentes) de tetrafluoroborato de prata são adicionados de uma vez. A mistura é apresentada em temperatura ambiente e 30 mL de uma solução aquosa a 10% de Na2CO3 são adicionados. A mistura é extraí- da com Et2O (2 χ 30 mL), em seguida com CH2CI2 (2 χ 30 mL). As fases or- gânicas são combinadas, secadas em Na2SO4, filtradas e concentradas sob purificação a vácuo por cromatografia em sílica (Eluente: CH2CI2 / MeOH 93/7) fornecem 29 (58 mg, 0,075 mmol, 20%) na forma de um sólido bege. fórmula química: C45H54N4O8 - M = 778 g.mol"1 1H RMN (CDCI3): 9,81 (s, 1H); 8,40 (s, 1H); 7,81 (d, J = 8 Hz, 1H); 7,18 - 7,09 (m, 3H); 6,28 (s, 1H); 6,09 (s, 1H); 5,84 (dd, J = 4 e 10,4 Hz, 1H); 5,74 (q, J = 6,4 Hz, 1H); 5,38 (s, 1H); 5,26 (d, J = 10,8 Hz, 1H); 4,55 - 4,45 (m, 2H); 3,86 (d, J = 13,6 Hz, 1H); 3,82 (s, 3H); 3,77 (s, 3H); 3,71 (s, 1H); 3,68 (s, 3 H); 3,50 - 3,21 (m, 5H); 2,81 - 2,71 (m, 6H); 2,63 - 2,45 (m, 4H); 2,12 - 2,05 (m, 4H); 1,83 (m, 12 H); 1,77 (d, J = 6,4 Hz1 3H); 1,91 (m, 1H); 1,41 (m, 1H); 1,23 (m, 1H); 0,69 (t, J = 7,6 Hz1 3H).

13C RMN (CDCI3): 8,1; 13,0; 21,0; 30,0; 30,6; 32,4; 33,5; 38,1 42,6; 44,5; 45,4; 47,5; 49,7; 50,2; 52,1; 52,7; 53,2; 55,0; 55,7; 59,8; 65,0 76,3; 79,6; 83,0; 93,9; 110,4; 118,9; 119,8; 120,6; 122,2; 122,9; 123,3; 124,8 128,4; 129,7; 133,5; 134,5; 152,9; 157,9; 170,8; 171,5; 174,0. MS (ESI-TOF): 779 [M+H+] (100).

Claims (26)

1. Derivados de catarantina fluorados respondendo à Fórmula <formula>formula see original document page 30</formula> em que : - a linha pontilhada expressa a possibilidade da presença de uma ligação dupla quando a substituição -X for ausente ou diferente de uma ligação dupla quando - X designar uma substituição para um grupo: -Hj -OR1 - NR'RM, - SR, ou - um átomo de halogênio com R1 R' e R" designam independen- temente um do outro um átomo de hidrogênio ou um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C6, - Ri, R2 e R3 representam independentemente um do outro um átomo de hidrogênio, flúor ou um grupo metilado, na condição mesmo assim que pelo menos um dos radicais Ri e R2 represente um átomo de flúor, e η =1 ou 2.

2. 20,20-Difluorocatarantina como apresentada na fórmula de acordo com a reivindicação 1, em que a ligação dupla em linhas pontilhadas é presente, R1 representa um grupo metilado, R2, R3 cada qual representa um átomo de flúor, e η = 2.

3. 20-Fluorocatarantina como apresentada na fórmula de acordo com a reivindicação 1, em que a ligação dupla em linhas pontilhadas está presente, R1, R2 e R3 representam respectivamente um hidrogênio, um flúor e um grupo metilado, e η = 2.

4. 20,20-diflúor-4-hidroxicatarantina como apresentada na fórmu- la de acordo com a reivindicação 1, em que a ligação em linhas pontilha- das está ausente, -X representa o grupo -OH1 Ri é o grupo metilado, R2, R3 cada qual representam um átomo de flúor, e η = 2.

5. Uso de um derivado fluorado de catarantina como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 como um intermediário de síntese útil na preparação de alcalóides diméricos fluorados de Vinca, e em particular vinflunina.

6. Uso de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que a preparação do alcalóide dimérico envolve uma reação de acopla- mento com vindolina ou então com um derivado de vindolina.

7. Uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que vinflunina é preparada acoplando-se vindolina com 20,20- difluorocatarantina, resultando em 20,,20'-diflúor-3',4'-anidrovinblastina .

8. Uso de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a 20',20'-diflúor-3',4'-anidrovinblastina resultando do referido acopla- mento é submetida a uma reação de contração de anel, seguido por uma reação de redução da ligação dupla endocíclica em posição C3 - C4'.

9. Processo para a preparação de um derivado fluorado de cata- rantina como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracteri- zado pelo fato de que ele envolve oxidação da cadeia lateral de catarantina antes da reação de fluoração.

10. Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a referida oxidação é precedida por um estágio de ativação da cadeia lateral por isomerisação da ligação dupla endocíclica para a posi- ção endocíclica por hidogenação catalítica.

11. Processo de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que a referida ligação dupla exocílica é submetida a uma reação de di-hidroxilação, após proteção dos dois átomos de nitrogênio, resultando na formação de um diol.

12. Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o diol obtido é ativado na forma de um sulfato cíclico, trans- formado em álcool alílico, em seguida oxidado na enona correspondente que é submetida a uma reação de difluoração, em seguida desproteção do indol e redução do grupo amídico para resultar em 20,20-difluorocatarantina.

13. Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que ele envolve a proteção dos dois átomos de nitrogênio de catarantina, seguido por oxidação alílica da cadeia lateral de catarantina em álcool ou em cetona antes da reação de fluoração.

14. Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a etapa de oxidação é realizada em condições induzindo à formação de um derivado de catarantina oxidado respondendo à Fórmula Geral Il : <formula>formula see original document page 32</formula> em que: - η = 1 ou 2 , - X designa um grupo C=O, ou C=S, - Y designa um grupo CO2R1 SO2R ou COR com R designando um grupo arila ou um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C4 e -ZdesignaumgrupoCH-OHouC=O.

15. Derivado de catarantina oxidado respondendo à Fórmula Geral II: <formula>formula see original document page 32</formula> em que: - η = 1 ou 2, - X designa um grupo C=O1 ou C=S, - Y designa um CO2R1 SO2R ou COR com R designando um grupo arila ou um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C4 e Z designa um grupo CH-OH ou C=O.

16. Derivado de catarantina oxidado de acordo com a Fórmula Il como definido na reivindicação 15, em que -n=2 - X designa um grupo C=O - Y designa um grupo CO2R com R designando um grupo alquila linear ou ramificado em Ci a C4, - Z designa um CH-OH ou grupo C=O.

17. Uso de um derivado oxidado de catarantina de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 e 16 como um intermediário de síntese útil na preparação de alcalóides diméricos fluorados de Vinca, e em particu- lar vinflunina.

18. Uso de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que a preparação do alcalóide dimérico envolve uma reação de flora- ção do derivado oxidado de catarantina, seguido por desproteção dos dois átomos de nitrogênio, resultando em um derivado fluorado de catarantina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4.

19. Uso de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que a preparação do alcalóide dimérico também envolve uma reação de acoplamento entre o referido derivado fluorado de catarantina, resultando de reações de fluoração e desproteção, e vindolina ou um derivado de vindo- lina.

20. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 a19, caracterizado pelo fato de que vinflunina é preparada acoplando-se vin- dolina com 20, 20-difluorocatarantina, obtida por fluoração e desproteção dos dois átomos de nitrogênio do derivado oxidado de catarantina de acordo com a reivindicação 16 para que Z = C=O, resultando em 20',20'-diflúor-3,,4'- anidrovinblastina .

21. Uso de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a 20',20'-diflúor-3',4'-anidrovinblastina resultando do referido a- coplamento é submetida a uma reação de contração de anel, seguido por uma reação de redução da ligação dupla endocíclica em posição C3- C4·.

22. Isocatarantina respondendo à seguinte Fórmula (10):

23. Uso de isocatarantina como um intermediário de síntese útil na preparação de alcalóides diméricos fluorados de Vinca, e em particular vinflunina.

24. Uso de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato de que a preparação do alcalóide dimérico envolve uma reação de aco- plamento com vindolina ou mesmo com um derivado de vindolina.

25. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 e24, caracterizado pelo fato de que vinflunina é preparada acoplando-se vin- dolina com isocatarantina, resultando em 4',20'-anidrovinblastina.

26. Uso de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que 4',20'-anidrovinblastina resultando do referido acoplamento é submetida a uma reação de contração de anel, seguido por uma reação de gem-difluoração, a ordem destas duas estapas sendo invertível.