BRPI0714553B1

BRPI0714553B1 - derivados de camptotecina, processo para preparação dos mesmos, composição farmacêutica e seu uso

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Publication number: BRPI0714553B1
Application number: BRPI0714553-5A
Authority: BR
Inventors: Gabriele Fontana; Ezio Bombardelli; Carla Manzotti; Arturo Battaglia; Cristian Samori
Original assignee: Indena S.P.A
Priority date: 2006-07-26
Filing date: 2007-07-13
Publication date: 2020-11-17
Also published as: CN101495486A; AU2007278500A2; PT2044079E; RU2009102243A; US8217053B2; NO20090251L; PL2044079T3; AU2007278500B2; KR101412157B1; CA2658900C; AU2007278500A1; JP2009544634A; SI2044079T1; ES2561356T3; DK2044079T3; HUE027890T2; MX2009000827A; JP5313894B2; HK1135691A1; BRPI0714553A2

Abstract

COMPOSTOS DERIVADOS DE CAMPTOTECINA, PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DOS MESMOS, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, BEM COMO O USO DOS REFERIDOS COMPOSTOS. A presente invenção refere-se a derivados de tio-camptotecina 5-substituído tendo uma atividade antitumor, o processo para a preparação dos mesmos, o uso dos mesmos como fármacos antitumor e composições contendo os mesmos.

Description

[0001] A presente invenção refere-se a novos derivados de camptotecina tendo atividade antitumor, a processos para a preparação dos mesmos como fármacos antitumor e composição farmacêutica contendo os mesmos.

Antecedentes da Invenção

[0002] Camptotecina é um alcalóide extraído de Camptotheca acuminata (Nyssaceae), primeiramente descrito por Wall e Wani em 1966(J. Am. Chem. Soc. 1966. 88, 3888-3890).Camptotecina, embora favorecido com ampla atividade antitumor espectral, especialmente contra tumor de cólon e outros tumores sólidos e leucemias, não é usada em terapia devido a sua alta toxicidade, que é particularmente manifestada na forma de cistite hemorrágica, toxicidade gastrointestinal e mielossupressão.

[0003] Um número de análogos de camptotecina tem sido sintetizado a fim de obter compostos tendo baixa toxicidade e alta solubilidade. No presente, dois fármacos são usados em prática clínica, a saber CTP-11 e topotecan. Outros derivados, tais como belotecan, rubitecan, exatecan, gimatecan, pegamotecan, lurtotecan, caranicetina, afeletecan, homocamptotecina, diflomotecan, e muitos outros, são experimentações clínicas experimentadas. Composto CTP-11 é um pró- fármaco altamente solúvel para 10-hidróxi-7-etilcamptotecina (comumente conhecido como SN-38), aprovado para o tratamento de muitos tumores sólidos e ascites (colorretal, pele, estômago, pulmão, cérvice, ovário, linfoma não Hodgkin).

[0004] Topotecan é um composto solúvel em solução fisiológica, ativo contra os tumores do pulmão, estômago, fígado, ovário, mama, próstata, esôfago, reto, sarcomas de tecidos moles, cabeça e pescoço, glioblastoma, leucemias mielocíticas crônicas e agudas. Topotecan mostra, entretanto, efeitos colaterais importantes tais como neutropenia e trombocitopenia.

[0005] Lurtotecan é um derivado solúvel, tendo atividade em tumores do pescoço, ovário, mama, colorretal, e microcitoma pulmonar. Entretanto, lurtotecan também toxicidade hemática.

[0006] Rubitecan é um pró-fármaco para o uso oral eficaz contra tumores do pâncreas, ovário e mama.

[0007] Camptotecina é seu análogo, como o caso com todos os inibidores de topoisomerases I, são eficazes contra tumores resistentes a fármacos convencionais, incluindo inibidores de topoisomerase II; mantêm altos níveis de topoisomerase durante o ciclo celular completo; não induzem resistência multifármaco (Pgo dou MRP) ou desentoxicando o metabolismo mediado pela enzima.

[0008] Pesquisas são agora focadas em novos inibidores da topoisomerase I tendo menos toxicidade do que os fármacos atualmente usados.

[0009] Derivados de camptotecina de anel aberto mostram alta ligação de proteína (em particular com albumina) e baixa distribuição nos tecidos de tumor. Como conseqüência, o produto se acumula no corpo e os tumores são fracamente afetados.

[00010] Inversamente, a alta lipofilicidade da forma de lactona promove a adesão de derivados de camptotecina em membranas celulares, particularmente eritrócitos, afetando a relação de distribuição tecido / plasma. Por esta razão, a pesquisa está sendo focada em duas abordagens alternativas: a) projeto de baixos produtos de ligação de proteína ainda tendo boa solubilidade; b) projeto de produtos altamente potentes tendo efeito terapêutico mesmo em doses extremamente baixas.

[00011] Modificações nas posições 7-, 9-, 10- e 11- normalmente provaram ser bem-toleradas enquanto não afetam a estabilidade do complexo ternário de camptotecina de DNA topoisomerase I, a formação da qual é responsável pela atividade antitumor compostos.

[00012] Produtos com configuração 20R provaram atividade menor ou inatividade do que os produtos com configuração 20S - que coincidem com a configuração natural.

[00013] Como uma regra, modificações na posição 5- são consideradas desfavoráveis para a formação do complexo ternário, enquanto modificações nos anéis DE piridona D e E têm sido relatas como prejudiciais à atividade do produto.

Descrição da Invenção

[00014] Em um primeiro aspecto, a invenção refere-se a derivados de camptotecina da fórmula geral I:

em que:

[00015] R é F, Cl, Br, I, -N3, NH2, -NR’R”, -COOR’, -CONR’R”, - NHR”’-NR’R” em que R’, R” e R’” podem ser H, alquila, arila, arilaquila, acila, alcoxicarbonila, ariloxicarbonila;

[00016] R1 é alquila, aminoalquila, hidroxialquila, nitrila, al∞ximino, ariloximino, sililalquila;

[00017] R2 é hidrogênio, hidroxila, alcóxi, aminoalquila;

[00018] R3 é hidrogênio, hidroxila opcionalmente protegida, alcóxi, aminoalquila,

[00019] em que os grupos alquila, acila, alcóxi, aminoalquila, ou alcoximino podem conter de 1 a 8, preferivelmente de 1 a 4, átomos de carbono, em uma cadeia reta ou ramificada, e os grupos arila e arilóxi podem conter de 5 a 10 átomos de carbono;

[00020] os sais farmaceuticamente aceitáveis, isômeros, enaciô- meros, diastereômeros dos mesmos e misturas correspondentes.

[00021] Os compostos da invenção mostram baixa ligação de proteína e têm boa solubilidade e alta potência mesmo em doses muito baixas.

[00022] A via preferida para a preparação dos compostos da invenção é ilustrada no esquema I em que: a) proteção dos grupos hidróxi precursores; b) conversão do anel de piridona para anela de tiopiridona c) remoção dos grupos protetores.

b)

[00023] No esquema I, R, R1, R2 e R3 têm os significados descritos acima, e PG é um grupo de proteção hidróxi.

[00024] Precursores podem ser comercialmente disponíveis ou obtidos com descrito na literatura. Para a preparação dos produtos derivados na posição 5-, a abordagem descrita no esquema II pode ser seguida, que compreende: a) proteção dos grupos hidróxi precursores; b) derivação em 5 através da formação de uma carbaniona e reação com uma reagente eletrolítico; c) transformação da carbonila 16a em tiocarbonila; d) desproteção dos grupos hidróxi.

[00025] Em que as etapas b) e c) podem ser revertidas.

[00026] No esquema II, R, R1, R2, e R3 têm os significados descritos acima, e PG é um grupo de proteção OH.

[00027] A formação de carbaniona em 5 pode ser obtida através do precursor com uma base orgânica forte, preferivelmente LiHMDS.

[00028] O carbaniona é reagido in situcom um eletrófilo, tal como uma fonte de halogênio, um azadicarboxilato, isocianato, derivados de clorocarbonila, tosilazida.

[00029] Conversão do anel de piridona para anel de tiopiridona pode ser obtida por reação com 2,4-bis(4-metoxifenil)-1,2,3,4-ditiafosfetano- 2,4-dissulfeto (comumente conhecido como reagende de Lawesson) (Cava P.M. et al., Tetrahedron 1985, 41, 5061; Cherkasov RA et al Tetrahedron 1985 41,2567; Ghattas AAG et al, Sulfur Lett. 1982, 1, 69; Yde B et al, Tetrahedron 1984, 40. 2047) ou com um reagente equivalente. Reagente de Lawesson é preferido.

[00030] Silils e carbamatos ou uma combinação dos mesmos são preferidos como grupos de proteção hidróxi.

[00031] Os compostos da invenção froam testados em um ensaio de citotoxidade em um espectro amplo de céluklas tumorais. No exemplo, os dados de citotoxicidade na linhagem celular NCL-H460 (câncer NSCL) referem-se a dois compostos da fórmula (I) que são reportados, usando-se camptotecina e os fármacos Topotecan e SN-38 como referências:

[00032] Os testes de citoxicidade mostraram que derivados sulfurados de camptotecina estão em média 10 vezes mais potentes do que análogos não-sulfurados.

[00033] Os compostos mais ativos foram avaliados em um ensaio de clivagem de DNA medindo a concentração ativa e a persistência de dano (vide a seção "exemplos"). Os derivados da fórmula (i) surpreendentemente mostram persistência maior em bloquear replicação de DNA do que os padrões de referência (particularmente topotecan e camptotecina), enquanto mantêm um efeito de atividade de citotoxicidade.

[00034] Além do mais, derivados sulfurados provaram mais atividades do que análogos não-sulfurados também neste caso, assim como eles induziram danos de DNA em concentrações inferiores com persistência mais longa na hora.

[00035] O composto tio-SN38 (IDN6156) foi transformado em tio- CPT11 (tio-irinotecan) de acordo com procedimentos para a conversão de SN38 para CPT11 (irinotecan) relatado na literatura. O composto resultantes tio-irinotecan foi comparado in vivo com análogos não- sulfurados próximos em uso clínico (CPT11 )em um modelo de tumor de pulmão altamente sensível às referências-padrão.

[00036] Os dados relatados na tabela seguinte mostram que o composto sulfurado tio-CPT11 é mais potente do que um não-análogo não-sulfurado CPT11, enquanto mantém o mesmo nível de eficácia e índice terapêutico.

[00037] Em um aspecto adicional, a invenção refere-se a composições farmacêuticas contendo um composto de fórmula (I) juntamente com veículos farmaceuticamente eficazes e excipientes. As formas farmacêuticas adequadas para administração oral ou parenteral dos compostos (I) podem ser sólidas, preferivelmente cápsulas, comprimidos e grânulos, ou líquidos, preferivelmente injetáveis ou soluções por infusão.

[00038] Os compostos formulados adequadamente da invenção podem ser usados para o tratamento de tumores sólidos e leucemias, em particular tumores do pulmão, ovário, mama, estômago, fígado, próstata, sarcoma de tecido macio, cabeça e pescoço, esôfago, pâncreas, colo, reto, glioblastoma, leucemias mielocíticas crônicas e agudas.

Exemplos Exemplo I - 20-QTES-camptotecina

[00039] Camptotecina (0,100g 0,287 mmol) é suspensa em dimetilformamida anidrido (3 ml), sob atmosfera inerte, e a suspensão resultante é adicionada com imidazol(0,980 g, 1,44 mmol). A mistura é agitada por 10’ minutos, subsequentemente cloreto de trietilsilil (TES- Cl) (0,193 ml_, 1,15 mmol) é desprendido do mesmo, seguido por adição de 4-dimetilamino piridina (DMAP) (0,040 g, 0,287 mmol). Após 46 h, a mistura de reação é evaporada a vácuo, (controle TLC do desaparecimento completo do reagente, eluente CH2CL2 / MeOH = 30/1). O sólido é subsequentemente redissolvido em CH2CI2, e lavado com H2O e NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (2 x 10 ml). As fases orgânicas são combinadas e secas sobre NaSCU, filtradas e concentradas a vácuo, desse modo obtendo o produto desejado (0,133 g, 0,287 mmol) como um sólido amarelo pálido.

[00040] 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.37 (s, 1H, Ar, H-7), 8.25 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.92 (d, 1H, J = 8.0 Hz, Ar), 7.82 (t, 1H, J = 8.0 Hz, Ar), 7.65 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.57 (s, 1H, H-14), 5.67 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17), 5.29 (s, 2H, H-5), 5.25 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17), 2.00-1.84 (m, 2H, H-19), 1.03-0.93 (m, 12 H), 0.80-0.71 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.7, 157.6, 152.5, 151.5, 149.0. 145.9, 130.9, 130.4, 130.0. 128.4, 128.1, 128.0. 127.9, 118.9, 94.4, 75.3, 66.0. 50.0. 33.2, 7.9, 7.2, 6.4.

Exemplo II - 20otes-Tio-camptotecina

[00041] Camptotecina 20-OTES (0,664 g, 1,44 mmol) é dissolvida em xileno anidrido (20 ml_) com agitação sob atmosfera inerte. Subsequentemente reagente de Lawesson (LR), (0,523 g, 1,29 mmol) é adicionado e a reação é aquecida a 90°C. A mistura de reação é reagida por 18 h a 90°C, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano / AcOEt = 1/1). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 4/1 em seguida 7/2), desse modo obtendo o produto desejado (0,578 g, 1,21 mmol, 84%) como um sólido amarelo intenso.

[00042] 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.46 (s, 1H, Ar, H-7) 8.29 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 8.03 (s, 1H, H-14), 7.97 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.86 (t, 1H, J = 21.8 Hz, Ar), 7.69 (t, 1H, J=8.4 Hz, Ar), 6.15 (d, 1H, J=16.9 Hz, H-17), 5.62 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.57 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.34 (d, 1H, J = 16.9 Hz, H-17), 1.94 (d, 1H, J = 7.6 Hz, H-19), 1.90 (d, 1H, J= 7.6 Hz, H-19), 1.05-0.91 (m, 12 H), 0.82-0.71 (m, 6 H). 13C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 172.3, 171.5, 151.9, 149.1, 148.3, 147.2, 130.8, 130.6, 130.6, 130.1, 128.3, 128.2, 128.2, 128.0. 104.5, 75.0. 68.8, 56.3, 33.5, 7.7, 7.2, 6.4.

Exemplo III- Preparação de Tio-camptotecina (IDN 6070)

[00043] 20-OTES Tio-camptotecina (0,150 g, 0,314 mmol) é dissolvida em THF anidrido (10mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente EtsNOHF (0,140 mL, 0,816 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 48 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano /AcOEt = 1/1. O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SiO2, Hexano/AcOET = 2/1 em seguida 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,112 g, 0,307 mmol, 98%) como um sólido amarelo intenso.

[00044] 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.46 (s, 1H, Ar, H-7), 8.27 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 8.13 (s, 1H, H-14), 7.97 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.86 (t, 1H, J = 21.8 Hz, Ar), 7.70 (t, 1H, J =8.4 Hz, Ar), 6.25 (d, 1H, J =16.9 Hz, H-17), 5.62 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.58 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.37 (d, 1H, J = 16.9 Hz, H-17), 3.80 (s, 1H, OH), 1.90 (q, 2H, H-19), 1.03 (t, 3 H, J = 7.2 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.5, 172.6, 151.8, 149.1, 148.7, 145.5, 130.9, 130.8, 130.5, 129.9, 128.3 (2 C), 128.2, 128.0. 104.3, 72.3, 69.2, 56.3, 32.0. 7.8.

Exemplo IV - 20-OTES SN-38

[00045] SN-38 (0,100 g, 0,255 mmol) é suspenso em dimetilformamida anidrido (5 ml_), sob atmosfera inerte e a suspensão resultante é adicionada com imidazol (0,087 g, 1,28 mmol). A mistura é agitada por 10’ minutos, subsequentemente cloreto de trietila (TES-CI), (0,171 ml_, 1,02 mmol) é desprendido do mesmo, seguido por adição de 4-dimetilamino piridina (DMAP) (0,031 g, 0,255 mmol). Após 52 h, a mistura de reação é evaporada a vácuo, monitorando por TLC (CH2Cl2/MeOH = 10/1) o desaparecimento completo do reagente. O sólido é subsequentemente redissolvido em CH2CI2 e lavado com h H2O e NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (2X10 ml_). As fases orgânicas são combinadas e secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo, desse modo obtendo o produto desejado (0,121 g, 0,240 mmol, 94%) como um sólido amarelo pálido.

[00046] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 9.26 (br s, 1H,OH), 8.14 (d, 1H, J = 9.2 Hz, Ar, H-12), 7.58 (s, 1H, H-14), 7.49 (dd, 1H, Ji = 9.2 Hz J2 = 2.2Hz, H-11), 7.46 (d, 1H, J = 2.2 Hz, H-9), 5.70 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H- 17), 5.28 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 5.23 (s, 2H, H-5), 3.05 (q, 2H, J = 7.5 Hz), 1.97-1.81 (m, 2H, H-19), 1.32 (t, 3 H, J = 7.5 Hz, Me), 0.98-0.88 (m, 12 H), 0.77-0.68 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.1, 157.9, 156.6, 152.1, 149.0. 146.7, 144.6, 143.6, 131.9, 128.7, 126.9, 122.8,117.9,105.5, 98.5, 75.4, 65.9, 49.5, 32.9, 23.2,13.5, 7.8, 7.2, 6.4. Exemplo V- 10-OTBDMS-20-OTES SN-38

[00047] 20-OTES SN-38 (0,121 g, 0,240 mmol) é dissolvido em urn mistura anididrida de CH2CI2/THF = 1:1 (8 ml_) sob atmosfera inerte. Imidazol (0.081 g, 1.20 mmol) é adicionado à mesma seguido de, após 10’ minutos, cloreto de terc-butildimetilsilil (TBDMS-CI), (0,144 mg, 0,957 mmol), então por 4-dimetilamino piridina (DMAP), (0,029 g 0,240 mmol). Após 18 h, a mistura de reação é evaporada a vácuo, monitorando por TLC TLC (Hexano/AcOEt = 1/1) o desaparecimento do reagente. O sólido é subsequentemente redissolvido em CH2CI2 e lavado com H2O e NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (2X10 ml_) e as fases orgânicas são combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo 0 produto desejado (0.127 g, 0.205 mmol, 85%) como um sólido amarelo pálido.

[00048] 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.14 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H- 12), 7.49 (s, 1H, H-14), 7.40 (d, 1H, J = 2.2 Hz, H-9), 7.38 (dd, 1H, Ji = 8.8 Hz J2 = 2.5 Hz, H-11), 5.67 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H-17), 5.25 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H-17), 5.23 (s, 2H, H-5), 3.11 (q, 2H, J = 7.6 Hz), 1.99-1.82 (m, 2H, H-19), 1.38 (t, 3 H, J= 7.6 Hz, Me), 1.04 (s, 9 H), 1.00-0.92 (m, 12 H), 0.78-0.69 (m, 6 H), 0.30 (s, 6 H). 13C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 171.9, 157.7, 155.1, 151.5, 150.1, 146.8, 145.6, 143.5, 132.2, 128.2, 126.9, 125.9, 118.0. 110.5, 97.7, 75.4, 66.0. 49.3, 33.2, 25.6, 23.1, 18.3, 13.7, 7.9, 7.2, 6.4, -4.3.

Exemplo VI - 10-OTBDMS 20-OTES TioSN-38

[00049] SN-38 10-OTBDMS 20-OTES (0,127 g, 0,205 mmol) é dissolvido em xileno anidrido (6 ml_) com agitação sob atmosfera inerte. Subsequentemente reagente de Lawesson (LR), (0,075 g, 0,184 mmol) é adicionado e a reação é aquecida a 90°C. A mistura de reação é reagida por 23 h a 90°C, monitorando por TLC (Hexano/AcOEt = 2/1) o desaparecimento do reagente. O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 5/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,042 g, 0,066 mmol, 32%) como um sólido amarelo intenso.

[00050] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.17 (d, 1H, J = 8.9 Hz, Ar, H- 12), 7.96 (s, 1H, H-14), 7.43 (d, 1H, J = 2.6 Hz, H-9), 7.41 (dd, 1H, Ji = 8.8 Hz J2 = 2.6 HZ, H-11), 6.16 (d, 1H, J= 17.1 Hz, H-17), 5.56 (d, 1H, J = 20.0 Hz, H-5), 5.50 (d, 1H, J= 20.0 Hz, H-5), 5.33 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 3.18 (q, 2H, J = 7.6 Hz), 1.91 (q, 2H, J = TA Hz, H-19), 1.41 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me), 1.05 (s, 9 H), 1.03-0.92 (m, 12 H), 0.81-0.72 (m, 6 H), 0.31 (s, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.1, 171.5, 155.4, 149.4, 149.3, 147.4, 145.7, 143.6, 132.4, 129.9, 128.5, 126.5, 126.2, 110.5, 104.1, 75.0. 68.8, 55.8, 33.5, 25.7, 23.2, 18.4, 13.9, 7.8, 7.2, 6.5, -4.3.

Exemplo VII - 20-QTES TioSN-38

[00051] 10-OTBDMS 20-OTES TioSN-38 (0,042 g, 0,066 mmol) é dissolvido em THF anidrido (4 ml_) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N«3HF (0.013 ml_, 0.080 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 3 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC 0 desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 2/1). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 2/1 em seguida 1/1), desse modo obtendo 0 produto desejado (0,034 g, 0,065 mmol, 99%) como um sólido amarelo intenso.

[00052] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.19 (d, 1H, J = 9.2 Hz, Ar, H- 12), 7.96 (s, 1H, H-14), 7.44 (dd, 1H, Ji = 8.8 Hz J2 = 2.6 Hz, H-11), 7.43 (d, 1H, J = 2.6 Hz, H-9), 6.16 (d, 1H, J= 17.1 Hz, H-17), 6.02 (brs, 1H, OH), 5.55 (d, 1H, J= 19.7 Hz, H-5), 5.49 (d, 1H, J= 19.7 Hz, H-5), 5.33 (d, 1H, J= 16.9 Hz, H-17), 3.16 (q, 2H, J = 7.8 Hz), 1.91 (q, 2H, J= 7.6 Hz, H-19), 1.39 (t, 3 H, J = 7.9 Hz, Me), 1.03-0.92 (m, 12 H), 0.81-0.72 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.0. 171.7, 155.6, 149.1, 149.0. 147.3, 145.2, 143.7, 132.5, 130.0. 128.7, 126.7, 122.4, 105.5, 104.2, 75.1,68.9, 55.8, 33.5, 23.1, 13.7, 7.7, 7.2, 6.4.

Exemplo VIII - TioSN-38 (IDN 6156)

[00053] 20-OTES TioSN-38 (0.034 g, 0.065 mmol) é dissolvido em THF anidrido (4 ml_) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N*3HF (0.025 ml_, 0.150 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 40 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 1/1). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/3), desse modo obtendo 0 produto desejado (0,026 g, 0,064 mmol, 98%) como um sólido amarelo intenso.

[00054] 1H NMR (THF-de, 400 MHz) δ 9.23 (br s, 1H, OH), 8.06 (d, 1H, J = 9.2 Hz, Ar, H-12), 7.88 (s, 1H, H-14), 7.41 (d, 1H, J = 2.8 Hz, H- 9), 7.38 (dd, 1H, Ji = 9.2 Hz J2 = 2.8 Hz, H-11), 6.08 (d, 1H, J = 17.2 Hz, H-17), 5.67 (br s, 1H, OH), 5.50 (s, 2H, H-5), 5.33 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 3.22 (q, 2H, J = 7.8 Hz), 1.90 (q, 2H, J = 7.6 Hz, H-19), 1.42 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me), 0.97 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13c NMR (THF-de, 100 MHz) δ 173.0. 172.1, 157.5, 149.6, 149.2, 146.1, 145.0. 142.6, 132.3, 130.1, 128.9, 127.6, 122.3, 104.9, 102.3, 72.3, 68.5, 55.8, 31.7, 22.7, 13.1,7.3.

Exemplo IX - 20-OTES Topotecan

[00055] Topotecan (0.100 g, 0.238 mmol) é suspenso em dimetilformamida anidrido (5 mL), sob atmosfera inerte e a suspensão resultante é adicionada com imidazol (0,081 g, 1,19 mmol). A mistura é agitada por 10’ minutos, subsequentemente cloreto de trietil silila (TES- Cl), (0,160 mL, 0,952 mmol) é desprendido do mesmo, seguido pela adição de 4-dimetilaminopiridina, (DMAP), (0,029 g 0,238 mmol). Após 52 h, a mistura de reação é evaporada a vácuo, monitorando por TLC (CH2Cl2/MeOH = 10/1) o completo desaparecimento do reagente. O sólido é subsequentemente redissolvido em CHCI3 e H2O e NH4CI saturado, a fase aquosa é extraída com CHCh (2X15 ml_). As fases orgânicas são combinadas e secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo, desse modo obtendo o produto desejado (0,120 g, 0,224 mmol, 94%) como um sólido amarelo pálido.

[00056] 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 9.65 (br s, 1H), 8.26 (s, 1H, Ar, H-7), 8.14 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-12), 7.80 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H- 11), 7.58 (s, 1H, H-14), 5.67 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 5.25 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H-17), 5.20 (s, 2H, H-5), 4.71 (s, 2 H), 2.81 (s, 6H, 2 Me), 1.97- 1.81 (m, 2H, H-19), 0.98-0.88 (m, 12 H), 0.77-0.68 (m, 6 H). 13C NMR (CDCI3, 100 MHz) δ 172.1, 157.9, 156.6, 152.1, 150.8, 146.8, 144.3, 134.3, 131.2 129.9, 127.9, 123.0. 118.9, 110.1, 98.5, 75.4, 65.9, 51.1, 50.0. 43.1,32.9, 7.8, 7.2, 6.4.

Exemplo X - 10-OTBDMS 20-OTES Topotecan

[00057] 20-OTES Topotecan (0.120 g, 0,224 mmmol) é dissolvido em uma mistura de CH2CI2/THF = 1:1 anidrido (8 mL) sob atmosfera inerte. Imidazol (0,076 g, 1,12 mmol) é adicionado seguido, após 10’ minutos, de cloreto de terc-butildimetilsilila (TBDMS-CI), (0,135 mg, 0,896 mmol), então por 4-dimetilamino piridina (DMAP), (0,027 g 0,224 mmol). Após 21 h, a mistura de reação é evaporada a vácuo, monitorando por TLC (Hexano/AcOEt = 1/1) o desaparecimento do reagente. O sólido é subsequentemente redissolvido em CHCh e H2O e NH4CI saturado, a fase aquosa é extraída com CHCh (2X15 mL). As fases orgânicas são combinadas e secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,116 g, 0,179 mmol, 80%) como um sólido amarelo pálido.

[00058] 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.26 (s, 1H, Ar, H-7), 8.14 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-12), 7.81 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-11), 7.59 (s, 1H, H-14), 5.64 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H-17), 5.22 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H-17), 5.19 (s, 2H, H-5), 4.71 (s, 2 H), 2.81 (s, 6H, 2 Me), 1.97-1.81 (m, 2H, H- 19), 1.04 (s, 9 H), 0.98-0.88 (m, 12 H), 0.77-0.68 (m, 6 H), 0.30 (s, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.7, 157.7, 155.1, 151.5, 150.0. 146.8, 144.3, 134.3, 131.2 129.9, 127.9, 123.0. 118.9, 110.1, 98.5, 75.4, 65.9, 51.1, 50.0. 43.9, 32.9, 25.6, 18.3, 7.8, 7.2, 6.4, -4.3.

Exemplo XI - 10-QTBDMS 20-QTES Tio-Topotecan

[00059] 10-OTBDMS 20-OTES Topotecan (0,116 g, 0,179 mmmol) é dissolvido em xileno anidrido (6 mL) com agitação, sob atmosfera inerte. Subsequentemente reagente de Lawesson (LR), (0.065 g, 0.161 mmol) é adicionado e a reação é aquecida a 90°C. A mistura de reação é reagida por 23 h a 90°C, monitorando por TLC (Hexano/AcOEt = 2/1) o desaparecimento do reagente. O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 5/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,047 g, 0,072 mmol, 40%) como um sólido amarelo intenso.

[00060] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.35 (s, 1H, Ar, H-7), 8.17 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-12), 7.96 (s, 1H, H-14), 7.85 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-11), 6.16 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 5.52 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.48 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.33 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 4.73 (s, 2 H), 2.81 (s, 6H, 2 Me), 1.92 (q, 2H, J = 7.6 Hz, H-19), 1.04 (s, 9 H), 0.98-0.88 (m, 12 H), 0.77-0.68 (m, 6 H), 0.30 (s, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.5, 171.5, 155.1, 149.9, 149.4, 147.2, 144.3, 134.3, 132.1 129.9, 127.9, 126.5, 123.0. 110.1, 104.2, 75.4, 67.9, 55.1, 50.0. 43.9, 32.9, 25.6, 18.3, 7.8, 7.2, 6.4, -4.3.

Exemplo XII - 20-OTES Tio-Topotecan

[00061 ] 10-OTBDMS 20-OTES Tio-Topotecan (0.047 g, 0.072 mmol) é dissolvido em THF anidrido (4 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N«3HF (0.014 mL, 0.086 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 4 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 2/1). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 2/1 em seguida 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0.039 g, 0.071 mmol, 99%) como um sólido amarelo intenso.

[00062] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.36 (s, 1H, Ar, H-7), 8.17 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-12), 7.96 (s, 1H, H-14), 7.85 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-11), 6.16 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 6.02 (brs, 1H, OH), 5.52 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.48 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.33 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H-17), 4.73 (s, 2 H), 2.81 (s, 6H, 2 Me), 1.92 (q, 2H, J = 7.2 Hz, H- 19), 0.98-0.88 (m, 12 H), 0.77-0.68 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.5, 171.5, 155.1, 149.9, 149.4, 147.2, 144.3, 134.3, 132.1 129.9, 127.9, 126.5, 123.0. 110.1, 104.2, 75.4, 67.9, 55.1,50.0. 43.9, 32.9, 7.8, 7.2, 6.4.

Exemplo XIII - Tio-Topotecan (IDN 6180)

[00063] Tio-Topotecan 10-OH 20-OTES (0,039 g, 0,071 mmol) é dissolvido em THF anidrido (4 ml_) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N*3HF (0,026 ml_, 0,163 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 40 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC 0 desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 1/2). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/3), desse modo obtendo 0 produto desejado (0,030 g, 0,069 mmol, 98%) como um sólido amarelo intenso.

[00064] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.36 (s, 1H, Ar, H-7), 8.17 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-12), 7.96 (s, 1H, H-14), 7.85 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-11), 6.16 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 6.02 (brs, 1H, OH), 5.52 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.48 (d, 1H, J = 21.0 Hz, H-5), 5.33 (d, 1H, J = 16.5 Hz, H-17), 4.73 (s, 2 H), 3.84 (brs, 1H, OH), 2.81 (s, 6H, 2 Me), 1.92 (q, 2H, J = 7.6, Hz H-19), 1.03 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.5, 171.5, 155.1, 149.9, 149.4, 147.2, 144.3, 134.3, 132.1 129.9, 127.9, 126.5, 123.0. 110.1, 104.2, 72.4, 67.9, 55.1, 50.0. 43.9, 32.9, 7.8.

Exemplo XIV - Preparação de 20-QTES IQ-hidroxicamptotecina

[00065] 10-hidroxicamptotecina (0,100 g, 0,275 mmol) é suspensa em dimetilformamida anidrido (5 mL), sob atmosfera inerte e a suspensão resultante é adicionada com imidazol (0,225 g, 3,31 mmols). A mistura é agitada por 10’ minutos, subsequentemente cloreto de trietilsilil (TES-CI), (0,460 mL, 2,75 mmols) é desprendido do mesmo, seguido pela adição de 4-dimetilamino piridina (DMAP) (0,068 g, 0,550 mmol). Após 24 h a mistura de reação é evaporada a vácuo, monitorando por TLC o completo desaparecimento do reagente (CFWh/MeOH = 20/1). O sólido é subsequentemente redissolvido em CH2CI2 e lavado com H2O e NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (2X10 mL). As fases orgânicas são combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo, desse modo obtendo o produto desejado (0,124 g, 0,259 mmol, 94%) como um sólido amarelo pálido.

[00066] 1H NMR (CDCI3 + 5% CD3OD, 400 MHz) δ 8.10 (s, 1H, Ar, H-7), 8.05 (d, 1H, J = 9.2 Hz, Ar), 7.50 (s, 1H, H-14), 7.39 (dd, 1H, Ji = 9.2 Hz J2 = 2.4 Hz, H-11), 7.11 (d, 1H, J = 2.2Hz, H-9), 5.60 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H-17), 5.21 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17), 5.15 (s, 2H, H-5), 1.97- 1.81 (m, 2H, H-19), 0.98-0.88 (m, 12 H), 0.76-0.68 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh + 5% CD3OD, 100 MHz) δ 172.2, 157.8, 156.7, 151.8, 149.2, 146.1,144.1,130.9,129.8,129.0,128.6,123.2,117.8,108.8, 98.1,75.4, 65.8, 50.0. 32.9, 7.7, 7.1,6.3.

Exemplo XV - 10-OTBDMS-20-QTES Camptotecina

[00067] 10-hidróxi-20-OTES-Camptotecina (0,105 g, 0,219 mmol) é dissolvido em uma mistura de CH2CI2/THF = 1:1 anidrido (4 mL) e sob atmosfera inerte. Imidazol (0,097 g, 1,42 mmol) é adicionado seguido, após 10’ minutos, de cloreto de terc-butildimetilsilil (TBDMS-CI), (0,164 mg, 1,10 mmol), então por 4-dimetilamino piridina (DMAP) (0,040 g, 0,329 mmol). Após 18 h, a mistura de reação é evaporada a vácuo, monitorando por TLC o completo desaparecimento do reagente (Ciclohexano/AcOEt = 1/3). O sólido é subsequentemente redissolvido em CH2CI2 e lavado com H2O e NH4CI saturado, a fase aquosa é extraída com CH2CI2 (2X10 mL). As fases orgânicas são combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Ciclohexano/AcOEt = 1/3), desse modo obtendo o produto desejado (0,117 g, 0,197 mmol, 90%) como um sólido amarelo pálido.

[00068] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.22 (s, 1H, Ar, H-7), 8.13 (d, 1H, J = 9.2 Hz, Ar, H-12), 7.51 (s, 1H, H-14), 7.39 (dd, 1H, Ji = 9.2 Hz J2 = 2.8 Hz, H-11), 7.22 (d, 1H, J = 2.8 Hz, H-9), 5.66 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 5.25 (s, 2H, H-5), 5.24 (d, 1H, J= 16.5 Hz, H-17), 1.99-1.82 (m, 2H, H-19), 1.03 (s, 9 H), 1.00-0.92 (m, 12 H), 0.78-0.69 (m, 6 H), 0.29 (s, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.0. 157.7, 155.1, 151.5, 150.6, 146.1, 145.1, 131.4, 129.4, 129.3, 128.7, 126.7, 118.3, 114.5, 97.7, 75.3, 66.0. 49.9, 33.1, 25.6, 18.3, 7.9, 7.2, 6.4, -4.3.

Exemplo XVI - 10-OTBDMS-20-QTES Tio-Camptotecina

[00069] 10-OTBDMS 20-OTES Camptotecina (0.350 g, 0.589 mmol) é dissolvido em xileno anidrido (10 mL) com agitação sob atmosfera inerte. Subsequentemente reagente de Lawesson (LR), (0,590 g, 1,47 mmol) e adicionado e a reação é aquecida a 90°C. A mistura de reação é reagida por 18 h a 95°C, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Ciclohexano/AcOEt = 1/1). O solvente é evaporado a vácuo e 0 resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Ciclohexano/AcOEt = 4/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,323 g, 0,530 mmol, 90%) como um sólido amarelo intenso.

[00070] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.28 (s, 1H, Ar, H-7), 8.16 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar, H-12), 7.97 (s, 1H, H-14), 7.40 (dd, 1H, Ji = 9.2 Hz J2 = 2.8 Hz, H-11), 7.26 (d, 1H, J = 2.8 Hz, H-9), 6.15 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 5.58 (d, 1H, J = 20.0 Hz, H-5), 5.53 (d, 1H, J = 20.0 Hz, H-5), 5.33 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 1.91 (q, 2H, J = 7.4 Hz, H-19), 1.04 (s, 9 H), 1.02-0.92 (m, 12 H), 0.82-0.72 (m, 6 H), 0.30 (s, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.1, 171.5, 155.5, 149.8, 148.6, 147.3, 145.3, 131.5, 130.1, 129.8, 129.1, 128.3, 127.0. 114.5, 104.0. 75.0. 68.8, 56.3, 33.5, 25.6, 18.3, 7.8, 7.2, 6.4, -4.3.

Exemplo XVII - Preparação de 10-hidróxi-Tio-Camptotecina (IDN 6181)

[00071] Tio-camptotecina 10-OTBDMS 20-OTES (0,320 g, 0,524 mmol) é dissolvida em THF anidrido (8 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N»3HF (0,670 mL, 4,19 mmols) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 20 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (CH2Cl2/MeOH = 25/1). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, CH2Cl2/MeOH = 25/1 em seguida 20/1), desse modo obtendo 0 produto desejado (0,189 g, 0,498 mmol, 95%) como um sólido amarelo intenso.

[00072] 1H NMR (THF-de, 400 MHz) δ 9.20 (br s, 1H, OH), 8.37 (s, 1H, Ar, H-7), 8.05 (d, 1H, J = 9.2 Hz, Ar, H-12), 7.89 (s, 1H, H-14), 7.39 (dd, 1H, Ji = 9.2 Hz J2 = 2.8 Hz, H-11), 7.22 (d, 1H, J = 2.8 Hz, H-9), 6.07 (d, 1H, J= 17.2 Hz, H-17), 5.70 (br s, 1H, OH), 5.47 (s, 2H, H-5), 5.33 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 1.89 (q, 2H, J = 7.6 Hz, H-19), 0.97 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (THF-de, 100 MHz) δ 173.0. 172.1, 157.4, 149.7, 149.0. 146.1, 144.5, 131.3, 130.5, 130.2, 129.7, 128.6, 123.0. 108.9, 102.3, 72.3, 68.5, 56.5, 31.7, 7.3.

Exemplo XVIII - Cloridrato de Tio-topotecan (IDN 6180)

[00073] 10-Hidróxi-Tio-Camptotecina (0,150 g, 0,421 mmol) é dissolvido em uma mistura de CH2CI2 anidrido (3.5 mL) e n-propanol (1.8 mL) com agitação sob atmosfera inerte. Subsequentemente, bis(dimetilamino)metano (0,092 g, 0,905 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 4 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (ChWh/MeOH = 25/1). Após cerca de 5 h, uma mistura de 0,125 g de HCI concentrado em 1 ml de n-propanol é adicionada e a mistura é reagida por outras 16 h. O produto é filtrado e repetidamente lavado com CH2CI2 e Et2O, desse modo obtendo o produto desejado (0,168 g, 0,370 mmol, 88%) como um sólido vermelho-laranja. 1H NMR (DMSO-de, 400 MHz) δ 11.51 (br s, 1H, OH), 9.78 (br s, 1H, OH), 9.06 (s, 1H, Ar, H-7), 8.21 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Ar), 7.76 (s, 1H, H- 14), 7.72 (d, 1H, J =8.8 Hz, Ar), 5.91 (d, 1H, J =16.4 Hz, H-17), 5.50 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H-17), 5.49 (s, 2H, H-5), 4.73 (s, 1H, CH2NMe2), 4.72 (s, 1H, CH2NMe2), 2.83 (s, 3 H, Me), 2.82 (s, 3 H, Me), 1.87 (q, 2H, J = 7.6 Hz, H-19), 0.85 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (DMSO-dθ, 100 MHz) δ 172.7, 172.1, 158.8, 149.6, 148.8, 147.0. 144.2, 133.7, 130.6, 130.6, 129.9, 127.5, 123.2, 109.1, 103.6, 72.8, 68.6, 57.4, 51.1, 43.1, 31.2, 8.3.

Exemplo XIX - 5-F-20-OTES-Camptotecina

[00074] Camptotecina 20-OTES (0,100 g, 0,216 mmol) é dissolvida em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, em seguida resfriada para uma temperatura de -78°C e uma solução de LiHMDS a 1,0 M em THF (0,260 mL, 0,260 mmol) é desprendida da mesma. Após 20’, NFSI (0,089 g, 0,281 mmol) em THF anidrido (2 mL) é adidionado. Após 2 h a -78°C, temperatura é deixada subir 25°C e 0 desaparecimento do reagente é monitorado por TLC (Hexano/AcOEt = 1/2). Formação de dois diastereisômeros é observada. Após 3 h em temperatura ambiente, a reação é resfriada bruscamente pela adição de NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3x15 mL) e as fases orgânicas são combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 3/1, em seguida 2/1 e finalmente 1/1), desse modo obtendo uma mistura dos dois isômeros (0,101 g, 0,210 mmol, 97%,) (1:1 razão isomérica) como um sólido amarelo pálido. Os dois isômeros são separados por cromatografia adicional. A fim de precipitação: 1o diastereômero: 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.52 (s, 1H, Ar, H-7), 8.25 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.96 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.87 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.69 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.47 (d, 1H, 1JHF = 61.2 Hz, H- 5), 7.45 (s, 1H, H-14), 5.62 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 5.22 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 2.02-1.84 (m, 2H, H-19), 1.03-0.93 (m, 12 H), 0.80-0.71 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.4,157.5,152.3,151.1, 150.2 (d, J= 1.5 Hz), 150.3 (d, J= 1.5 Hz), 143.6 (d, J = 5.3 Hz), 133.7, 131.7, 130.2,128.9,128.4, 127.9 (d, J= 15.0 Hz), 126.3 (d, J= 15.0 Hz), 121.8, 98.9, 93.8 (d, 1JCF = 213.2 Hz, C-5), 75.1, 65.7, 33.1, 7.8, 7.2, 6.4.

[00075] 2o diastereômero: 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.51 (s, 1H, Ar, H-7), 8.25 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.96 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.87 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.68 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.51 (d, 1H, 1JHF = 60.8 Hz, H-5), 7.42 (s, 1H, H-14), 5.62 (d, 1H, J= 17.2 Hz, H-17), 5.20 (d, 1H, J = 17.2 Hz, H-17), 2.02-1.82 (m, 2H, H-19), 1.04-0.93 (m, 12 H), 0.80-0.71 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.2, 157.8, 152.5, 151.2, 150.3, 143.7, 133.7 (d, J = 2.4 Hz), 131.7, 130.2, 128.9, 128.3, 127.9 (d, J = 2.3 Hz), 126.3 (d, J= 16.7 Hz), 121.8 (d, J= 1.5 Hz), 99.0. 93.8 (d, 1JCF = 214.8 Hz, C-5), 75.0, 65.8, 33.3, 7.9, 7.1,6.4.

Exemplo XX - Preparação de 5-F-20-QH-camptotecina 1o diastereômero

[00076] O primeiro diastereômero de 5-F-20-OTES-camptotecina (0,025 g, 0,052 mmol) é dissolvido em THF anidrido (5 mL) com agitação sob atmosfera inerte. Subsequentemente Et3N*3HF (0,060 mL, 0,368 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 28 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 1/2). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é cromatografado (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,019 g, 0,051 mmol, 98%) como um sólido amarelo pálido.

[00077] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.52 (s, 1H, Ar, H-7), 8.25 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.96 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.87 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.69 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.59 (s, 1H, H-14), 7.46 (d, 1H, 1JHF = 61.2 Hz, H-5), 5.69 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 5.26 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 3.87 (brs, 1H, OH), 2.01-1.81 (m, 2H, H-19), 1.05 (t, 3 H, J= 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.5,157.6,151.1,151.0.150.2, 144.1, 133.9, 131.9, 130.0. 129.0. 128.5, 127.8, 126.4, 121.7, 98.8, 93.8 (d, 1JCF = 214.0 Hz, C-5), 72.5, 66.0, 31.5, 7.8.

Exemplo XXI - Preparação de 5-F-20-QH-camptotecina 2o diastereõmero

[00078] O segundo diastereõmero de 5-F-20-OTES-camptotecina (0,025 g, 0,052 mmol) é dissolvido em THF anidrido (5 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N«3HF (0,060 mL, 0,368 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 28 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 1/2). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é cromatografado (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,018 g, 0,050 mmol, 97%) como um sólido amarelo pálido.

[00079] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.52 (s, 1H, Ar, H-7), 8.24 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.96 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.88 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.69 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.56 (s, 1H, H-14), 7.51 (d, 1H, 1JHF = 60.4 Hz, H-5), 5.69 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17), 5.25 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17), 3.87 (brs, 1H, OH), 1.98-1.78 (m, 2H, H-19), 1.04 (t, 3 H, J= 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.3,157.7,151.2,151.2,150.2, 144.2, 133.8, 131.9, 130.0, 129.0, 128.5, 127.8, 126.4, 121.6, 98.9, 93.7 (d, 1JCF = 214.0 Hz, C-5), 72.5, 66.1,31.6, 7.8.

Exemplo XXII - Preparação de 5-N3-20-QTES-camptotecina

[00080] Camptotecina 20-OTES (0,100 g, 0.216 mmol) é dissolvida em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, em seguida resfriada para uma temperatura de -78°C e uma solução de LiHMDS a 1,0 M em THF (0,260 mL, 0,260 mmol) é desprendida da mesma. Após 20 min, tosil azida (TsNs) (0,055 g, 0,281 mmol) em THF anidrido (2 mL) é adicionada. Após 2 h a -78°C, temperatura é deixada subir para 25°C e o desaparecimento do reagente é monitorado por TLC (Hexano/AcOEt = 2/1). Formação de dois diastereisômeros é observada. Após 2h 30 min em temperatura ambiente, a reação é resfriada bruscamente pela adição de NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3 x 15 mL) e As fases orgânicas são combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo, consistindo em dois diastereoisômeros, é purificado por cromatografia (SÍO2, Hexano/AcOEt = 3/1, em seguida 2/1 e finalmente 1/1), desse modo obtendo (0,106 g, 0,210 mmol, 97%) de uma mistura dos dois isômeros (razão dos isômeros 1:1) como um sólido amarelo pálido. Os dois isômeros são separados por cromatografia adicional. A fim de precipitação:

[00081] 1o diastereômero: 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 8.45 (s, 1H, Ar, H-7), 8.25 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.95 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.86 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.68 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.49 (s, 1H, H-14), 6.97 (s, 1H, H-5), 5.65 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 5.26 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 2.01-1.84 (m, 2H, H-19), 1.03-0.94 (m, 12 H), 0.80-0.71 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.6, 158.3, 152.2, 150.8, 150.0. 144.0.132.9,131.4,130.1,128.6,128.3,128.2,128.1,120.8, 98.7, 75.4, 75.2, 65.7, 33.1,7.9, 7.2, 6.4.

[00082] 2o diastereômero: 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.45 (s, 1H, Ar, H-7), 8.24 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.95 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.86 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.68 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.46 (s, 1H, H-14), 6.99 (s, 1H, H-5), 5.66 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 5.22 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 2.02-1.84 (m, 2H, H-19), 1.03-0.94 (m, 12 H), 0.80-0.71 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.4, 158.4, 152.3, 150.9, 150.0, 144.0,132.9,131.4,130.1,128.6,128.3,128.2,128.1,120.8, 98.7, 75.3, 75.1,65.8, 33.3, 7.9, 7.2, 6.4.

Exemplo XXIII - Preparação de 5-N3-20-QH-camptotecina 1o diaste-reômero

[00083] O diastereômero 1 de 5-N3-20-OTES-camptotecina (0,070 g, 0,139 mmol) é dissolvido em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N«3HF (0,170 mL, 1,016 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 26 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt =1/1). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,053 g, 0,136 mmol, 98%) como um sólido amarelo pálido.

[00084] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.44 (s, 1H, Ar, H-7), 8.24 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.93 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.85 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.67 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.63 (s, 1H, H-14), 6.97 (s, 1H, H-5), 5.70 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 5.29 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 3.99 (br s, 1H, OH), 2.00-1.84 (m, 2H, H-19), 1.04 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.6, 158.3, 150.8, 150.7, 149.8, 144.4, 133.1, 131.5, 129.9, 128.6, 128.3, 128.3, 128.1, 120.6, 98.6, 75.4, 72.7, 66.0, 31.5, 7.8.

Exemplo XXIV - Preparação de 5-N3-camptotecina 2o diastereômero

[00085] O diastereômero 2 de 5-N3-20-OTES-camptotecina (0,055 g, 0,109 mmol) é dissolvido em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N«3HF (0,135 mL, 0,820 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 26 h em temperatura ambiente, monitorando o desaparecimento do reagente de partida por TLC (Hexano/AcOEt = 1/1). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0.042 g, 0.107 mmol, 98%) como um sólido amarelo pálido.

[00086] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.45 (s, 1H, Ar, H-7), 8.23 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.95 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.85 (t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.68 (t, 1H, J= 8.4 Hz, Ar), 7.60 (s, 1H, H-14), 7.00 (s, 1H, H-5), 5.74 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 5.28 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 3.86 (br s, 1H, OH), 1.98-1.82 (m, 2H, H-19), 1.04 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.4, 158.4, 150.9, 150.7, 149.8, 144.5, 133.0, 131.5, 129.9, 128.6, 128.4, 128.3, 128.1, 120.6, 98.6, 75.3, 72.6, 66.1, 31.6, 7.8.

Exemplo XXV - Preparação de 5-NH2-camptotecina

[00087] O diastereõmero 2 de 5-N3-20-OH-camptotecina (0,050 g, 0,129 mmol) é dissolvido em uma mistura de THF anidrido (1.5 mL) e MeOH anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente é adicionado com Pd/C (14 mg ~ 10%) e dois ciclos in vacuo/H2 (H2 pressão por balão) são realizados. A mistura de reação é reagida por 3 h em temperatura ambiente monitorando por TLC (Hexano/AcOEt = 1/3) 0 desaparecimento do reagente, em seguida filtrada através de Celite e lavada com CH2CI2 (2x15 mL). O solvente é evaporado a vácuo. Espectroscopia de H NMR do bruto da reação descreve a presença de produto desejado como uma mistura 1:1 de dois epímeros na posição C5. Cromatografia instantânea (SÍO2, C^Ch/MeOH = 35/1 em seguida 25/1) permite a recuperação da mistura dos dois diastereômeros (0,046 g, 0,126 mmol, 98%).

[00088] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.48 (s, 1H, Ar, H-7), 8.22-8.17 (m, 1H, Ar), 7.95-7.90 (m, 1H, Ar), 7.85-7.78 (m, 1H, Ar), 7.68-7.60 (m, 1H, Ar), 7.58 (s, 0.5 H, H-14), 7.54 (s, 0.5 H, H-14) 6.50 (s, 0.5 H, H-5), 6.47 (s, 0.5 H, H-5), 5.74-5.64 (m, 1H, H-17), 5.28-5.22 (m, 1H, H-17), 4.00-2.40 (brs, 3 H, OH + NH2), 1.98-1.82 (m, 2H, H-19), 1.07-1.01 (m, 3 H, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.8 (2 C), 158.5 (2 C), 151.2 (2 C), 150.4 (2 C), 149.7 (2 C), 144.5 (2 C), 132.7 (2 C), 131.0 (2 C), 129.8 (2 C), 128.5 (2 C), 128.3 (2 C), 128.0 (2 C), 127.8 (2 C), 120.2 (2 C), 113.8 (2 C), 97.7 (2 C), 72.7 (2 C), 66.3, 66.0, 31.5 (2 C), 7.8, 7.8.

Exemplo XXVI - 5-di-t-Butoxicarbonilhidrazino-20-OTES-camptotecina

[00089] Camptotecina 20-OTES (0,100 g, 0,216 mmol) é dissolvida em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, em seguida resfriada para uma temperatura de -78°C e uma solução de LiHMDS a 1,0 M em THF (0,281 mL, 0,281 mmol) é desprendida da mesma. Após 20’, dicarboxilato de di-terc-butilazo (DTBAC) (0,075 g, 0,324 mmol) em THF anidrido (2 mL) é adicionado. Após 4 h em -78°C, o desaparecimento do reagente é monitorado por TLC (Hexano/AcOEt = 3/1). Formação de dois diastereisômeros é observada. A reação é resfriada bruscamente pela adição de NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3x15 mL) e as fases orgânicas são combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 3/1), desse modo obtendo uma mistura dos dois isômeros (0.145 g, 0.210 mmol, 97%). Os dois isômeros são separados por cromatografia adicional. A fim de precipitação:

[00090] 1o diastereômero: 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.80 (br s, 1H, Ar), 8.23 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 8.01 (br d, 1H, Ar), 7.90-7.71 (m, 2H, Ar), 7.70-7.45 (m, 2H, Ar + H-14), 6.52 (brs, 1H, H-5), 5.61 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 5.23 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 2.03-1.81 (m, 2H, H- 19), 1.79-1.08 (brs, 18 H), 1.06-0.92 (m, 12 H), 0.80-0.70 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.7, 157.8, 155.5, 155.5, 152.0, 152.0, 151.2, 149.4, 145.0, 132.1, 130.6, 130.0, 128.7, 128.4, 127.9, 119.9, 98.2, 82.7, 81.5, 79.7, 75.2, 65.7, 33.2, 28.3, 27.6, 7.7, 7.2, 6.4.

[00091] 2o diastereômero: 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.79 (br s, 1 H, Ar), 8.23 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 8.01 (br d, 1H, Ar), 7.85-7.76 (m, 2H, Ar), 7.65 (br t, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.52 (s, 1H, H-14), 6.54 (br s, 1H, H-5), 5.61 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 5.22 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17), 2.03-1.82 (m, 2H, H-19), 1.76-1.08 (brs, 18 H), 1.04-0.92 (m, 12 H), 0.80-0.70 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.5, 157.9, 155.5, 155.5, 152.3, 152.0. 151.2,149.4,145.1,132.1,130.6,130.0,128.7,128.4,127.9,119.9, 98.2, 82.9, 81.5, 79.6, 75.2, 65.8, 33.3, 28.3, 27.4, 7.8, 7.2, 6.4.

Exemplo XXVII - Preparação de 5-di-t-butoxicarbonilhidrazino-20-QH- camptotecina 1o diastereômero

[00092] 5-di-f-Butoxicarbonilhidrazino-20-OTES-camptotecina (0,050 g, 0,072 mmol) primeiro diastereômero é dissolvido em THF anidrido (4 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N»3HF (0,088 mL, 0,542 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 35 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 3/2). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 3/2), desse modo obtendo o composto desejado (0.041 g, 0.071 mmol, 98%) como um sólido amarelo pálido.

[00093] O produto é adicionalmente purificado por cristalização a partir de CH2Cl2/Pentano = 1/50.

[00094] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.77 (br s, 1H, Ar), 8.16 (br d, 1H, J = 8.0 Hz, Ar), 7.97 (br s, 1H, Ar), 7.86-7.50 (m, 4 H, Ar), 6.51 (br s, 1H, H-5), 5.66 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H-17), 5.24 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H- 17), 3.86 (brs, 1H, OH), 2.00-1.80 (m, 2H, H-19), 1.79-1.13 (brs, 18 H), 1.03 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.7, 157.9, 155.5, 155.5, 152.1, 151.3, 150.7, 149.6, 145.7, 132.3, 130.7, 129.9, 128.7, 127.9, 127.6, 120.0, 97.9, 82.8, 81.6, 79.7, 72.7, 66.1, 31.8, 28.3, 27.7, 7.7.

Exemplo XXVIII - Preparação de 5-di-t-butoxicarbonilhidrazino-20-QH- camptotecina 2o diastereômero

[00095] 5-di-t-Butoxicarbonilhidrazino-20-OTES-camptotecina (0,050 g, 0,072 mmol) 2o diastereômero é dissolvido em THF anidrido (4,5 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente EtsN*3HF (0,088 mL, 0,542 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 35 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 3/2). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 3/2), desse modo obtendo o composto desejado (0,040 g, 0,069 mmol, 96%) como um sólido amarelo pálido.

[00096] O produto é adicionalmente purificado por cristalização a partir de CH2Cl2/Pentano = 1/50.

[00097] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.79 (br s, 1H, Ar), 8.22 (br d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar), 7.99 (br s, 1H, Ar), 7.88-7.50 (m, 4 H, Ar), 6.53 (br s, 1H, H-5), 5.65 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H-17), 5.26 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H- 17), 3.80 (brs, 1H, OH), 2.00-1.80 (m, 2H, H-19), 1.79-1.13 (brs, 18 H), 1.03 (t, 3 H, J = 7.2 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.6, 157.9, 155.4, 155.4, 152.1, 151.3, 150.8, 149.5, 145.6, 132.3, 130.8, 129.8, 128.7, 127.9, 127.8, 119.8, 98.0, 83.0, 81.5, 79.7, 72.7, 66.3, 31.8, 28.3, 27.7, 7.8.

Exemplo XXIX - Preparação de 5-dibenziloxicarbonilidrazino-20-QTES- camptotecina

[00098] Camptotecina 20-OTES (0,100 g, 0,216 mmol) é dissolvida em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, em seguida resfriada uma temperatura de -78°C e uma solução de 1.0 M LiHMDS em THF (0,281 mL, 0,281 mmol) é desprendida da mesma. Após 20’, dibenzyl azodicarboxylate (0.097 g, 0.324 mmol) em THF anidrido (2 mL) is added. Após 3 h em -78°C, temperatura é deixada subir para 25°C e 0 desaparecimento do reagente é monitorado por TLC (Hexano/AcOEt = 3/1). Formação de dois diastereisômeros é observada. Após 90 min em temperatura ambiente, a reação é resfriada bruscamente pela adição de NH4CI saturado. A fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3x15 mL) e as fases orgânicas são combinadas, secas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 4/1 then 7/2), desse modo obtendo um sólido amarelo pálido (0.161 g, 0.212 mmol, 98%). Os dois isômeros são separados por cromatografia adicional. A fim de precipitação:

[00099] 1o diastereômero: 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.70 (br s, 1H, Ar), 8.39 (br s 1 H, Ar), 8.22 (br d, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.95 (br d, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.83 (br t, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.65 (br t, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.64-7.00 (m, 11 H, Ar + H-14), 6.49 (br s, 1H, H-5), 5.57 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H-17), 5.47-4.44 (m, 5 H), 1.98-1.82 (m, 2H, H-19), 1.02- 0.89 (m, 12 H), 0.80-0.70 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.6, 158.0. 156.3, 156.3, 153.0, 152.2, 151.0, 149.6, 144.8, 135.3, 132.1, 130.6, 130.0, 128.6-127.8 (11 C), 119.9, 98.4, 79.5, 75.2, 68.4, 67.9, 65.6, 33.0. 7.9, 7.2, 6.4.

[000100] 2o diastereômero: 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.85 (br s, 1H, Ar), 8.58 (br s 1 H, Ar), 8.20 (br s, 1H, Ar), 7.93 (br s, Ar), 7.81 (br t, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.63 (br t, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.56-6.90 (m, 11 H, Ar + H-14), 6.52 (br s, 1H, H-5), 5.55 (d, 1H, J = 16.8 Hz, H-17), 5.44- 4.71 (m, 5 H), 1.98-1.80 (m, 2H, H-19), 1.05-0.90 (m, 12 H), 0.81-0.70 (m, 6 H). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.5, 157.9, 156.4, 156.4, 152.9, 152.4, 150.9, 149.4, 144.8, 135.3, 132.1, 130.6, 129.9, 128.6- 127.8 (11 C), 119.9, 98.5, 79.3, 75.2, 68.4, 67.8, 65.6, 32.9, 7.8, 7.2, 6.4.

Exemplo XXX - Preparação de 5-dibenziloxicarbonilhidrazino-20-QH- camptotecina 1o diastereômero

[000101] 5-Dibenziloxicarbonilidrazino-20-OTES-camptotecina 1o diastereômero (0.140 g, 0.184 mmol) é dissolvido em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente EhN«3HF (0.225 mL, 1,380 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 52 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 1/3). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1 então 2/3), desse modo obtendo (0.113 g, 0.175 mmol, 95%) como um sólido amarelo pálido. O produto é adicionalmente purificado por cristalização a partir de CH2Cl2/Pentano = 1/50.

[000102] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.67 (brs, 1H, Ar), 8.39 (br s 1 H, Ar), 8.12 (brd, 1H, J=7.6 Hz, Ar), 7.95 (brs, 1H, Ar), 7.74 (brt, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.65-6.66 (m, 12H, Ar + H-14), 6.48 (br s, 1H, H-5), 5.55 (d, 1H, J= 16.0 Hz, H-17), 5.42-4.44 (m, 5 H), 3.86 (brs, 1H, OH), 1.92- 1.72 (m, 2H, H-19), 0.95 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.5, 158.0, 156.2, 156.0, 153.0, 150.9, 150.9, 149.5, 145.3, 135.4, 132.2, 130.7, 129.8, 128.7-127.8 (11 C), 119.9, 98.2, 79.6, 72.7, 68.5, 68.0, 65.9, 31.6, 7.8. Exemplo XXXI - Preparação de 5-dibenziloxicarbonilhidrazino-20-QH- camptotecina 2o diastereômero 5-Dibenziloxicarbonilidrazino-20-OTES-camptotecina 2o diastereômero (0.140 g, 0.184 mmol) é dissolvido em THF anidrido (6 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente EhN»3HF (0.150 mL, 0.921 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 55 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC o desaparecimento do reagente (Hexano/AcOEt = 3/2). O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo 0 composto desejado (0.113 g, 0.175 mmol, 95%) como um sólido amarelo pálido. O produto é adicionalmente purificado por cristalização a partir de CH2Cl2/Pentano = 1/50.

[000103] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 8.71 (brs, 1H, Ar), 8.34 (br s 1 H, Ar), 8.18 (brs, 1H,Ar), 7.94 (brs, 1H, Ar), 7.79 (brt, 1H, J = 7.6 Hz, Ar), 7.70-6.70 (m, 12H, Ar + H-14), 6.52 (brs, 1H, H-5), 5.53 (d, 1H, J = 16.4 Hz, H-17), 5.44-4.48 (m, 5 H), 3.87 (br s, 1H, OH), 1.90-1.70 (m, 2H, H-19), 0.99 (t, 3 H, J = 7.6 Hz, Me). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.4, 158.0, 156.3, 156.1, 153.0. 151.0. 150.9, 149.6, 145.3, 135.5, 132.3, 130.8, 129.8, 128.7, 127.8 (11 C), 119.8, 98.4, 79.5, 72.7, 68.5, 67.8, 66.0. 31.6, 7.7.

Exemplo XXXII - Preparação de 20-QTES-Gimatecan

[000104] Gimatecan (0,040 g, 0,089 mmol) é dissolvido em dimetil formamida anidrido (4 mL), sob atmosfera inerte , e adicionado com imidazol (0,030 g, 0,445 mmol). A mistura é agitada por 10’ minutos, subsequentemente cloreto de trietil silila (TES-CI) (0,060 mL, 0,358 mmol) é desprendido do mesmo, seguido por 4-dimetilaminopiridina (DMAP) (0,01 1 g 0,089 mmol). Após 75 h, a mistura de reação é evaporada a vácuo, monitorando por TLC (Hexano/AcOEt = 1/1) o completo desaparecimento do reagente. O sólido é subsequentemente redissolvido em CH2CI2 e H2O e NH4CI saturado, a fase aquosa é extraída com CH2CI2 (3 X 10 mL). O resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 1/1), desse modo obtendo o produto desejado (0,048 g, 0,085 mmol, 95%) como um sólido amarelo, (mixture E/Z = 70130).

[000105] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 9.02 (s, 1H, CH=N E) 8.29 (d, 1H, J = 8.42 Hz, Ar, H-12E + H-12Z), 8.23 (d, 1H, J = 7.6 Hz, H-9E), 8.00 (s, 1H, C/7=N Z), 7.99 (d, 1H, J = 7.6 Hz, H-9Z), 7.83 (t, 1H, J = 7.4 Hz, H-11E + H-11Z), 7.68 (t, 1H, J = 7.4 Hz, H-1OE+ H-10Z), 7.57 (s, 1H, H-14E + H-14Z, 5.67 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17E+ H-17Z), 5.43 (s, 2H, H-5E), 5.26 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17E), 5.25 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17Z), 5.20 (s, 2H, H-5Z), 2.00-1.84 (m, 2H, H-19E+ H-19Z), 1.50 (s, 9 H, otBuE), 1.35 (s, 9 H, 0‘BUZ), 1.02-0.94 (m, 12H, E + Z), 0.80-0.70 (m, 6H, E + Z). 13NMR (CDCh, 100 MHz) δ 171.9 (E + Z, C- 21), 157.5 (E + Z, C-16a), 152.5 (E), 152.3 (Z), 151.3 (E + Z), 149.7 (E), 149.0 (Z), 145.7 (E + Z), 142.2 (CH=N E), 139.4 (CH=N Z), 132.9 (E), 132.1 (Z), 130.9 (E, CH, Ar), 130.6 (Z, CH, Ar), 130.3 (Z, CH; Ar), 130.1 (E, CH, Ar), 128.1 (E + Z, CH, Ar), 125.6 (Z), 125.4 (E), 124.7 (Z, CH, Ar), 122.8 (E, CH, Ar), 119.1 (Z), 118.9 (E), 98.3 (Z, C-14), 98.1 (E, C-14), 81.4 (E, OC(CH3)3), 81.2 (Z, OC(CH3)3), 75.3 (E + Z, C-20), 66.0 (E + Z, C-17), 52.7 (E, C-5), 51.2 (Z, C-5), 33.3 (E, C-19), 33.2 (Z, C- 19), 27.6 (OC(CH3)3 E), 27.5 (OC(CH3)3 Z), 7.9 (E+Z C- 18), 7.2 (E+Z), 6.4 (E+Z).

Exemplo XXXIII - Preparação de 20-QTES-Tio-Gimatecan

[000106] Gimatecan 20-OTES (0,080 g, 0,143 mmol) é dissolvido em xileno anidrido (6 mL) sob agitação e atmosfera inerte. Subsequentemente, Reagente de Lawesson (LR), (0,087 g, 0,214 mmol) é adicionado, e a reação é aquecida a 90°C. A mistura de reação é reagida por 18 h 90°C, monitorando por TLC (Hexano/AcOEt = 3/1) o desaparecimento do reagente. O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 4/1), desse modo obtendo 0 produto desejado (0,060 g, 0,102 mmol, 71%) como um sólido amarelo intenso.

[000107] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 9.06 (s, I H, CH=N E) 8.33 (d, 1H, J = 8.4 Hz, Ar, H-12E), 8.27 (d, 1H, J = 7.6 Hz, H-9E), 8.02 (s,l H, H-14 E), 7.87 (t, 1H, J= 7.4 Hz, H-11E), 7.73 (t, 1H, J = 7.4 Hz, H-10E), 7.57 (s, 1H, H-14E+ H-14Z), 6.18 (d, 1H, J= 17.2 Hz, H-17E), 5.73 (s, 2H, H-5E), 5.35 (d. 1 H, J= 17.2 Hz, H-17E), 1.93 (q, 2H, J = 7.2 Hz, H- 19E), 1.55 (s, 9 H, OteUE), 1.06-0.92 (m, 12H, E), 0.82-0.72 (m, 6H, E). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 172.4, 171.5, 151.8, 149.8, 148.0, 146.9, 141.9, 132.3, 131.0, 130.7, 130.3, 128.4, 125.6, 125.1, 122.9, 104.3, 81.8, 75.0, 68.9, 59.2, 33.6, 27.6, 7.8, 7.2, 6.5.

Exemplo XXXIV - Preparação de Tio-Gimatecan

[000108] Tio-Gimatecan 20-OTES (0,060 g, 0,104 mmol) é dissolvido em THF anidrido (8 mL) com agitação sob atmosfera inerte, subsequentemente Et3N*3HF (0,127 mL, 0,780 mmol) é desprendido do mesmo. A mistura de reação é reagida por 18 h em temperatura ambiente, monitorando por TLC (CH2CL2/MeOH = 25/1) o desaparecimento do reagente. O solvente é evaporado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia instantânea (SÍO2, Hexano/AcOEt = 211), desse modo obtendo o produto desejado (0.048 g, 0.102 mmol, 95%) como um sólido amarelo intenso.

[000109] 1H NMR (CDCh, 400 MHz) δ 9.02 (s, 1H, CH=N E) 8.28 (d, 1H, J = 8.42 Hz, Ar, H-12E + H-12Z), 8.23 (d, 1H, J = 7.6 Hz, H-9E), 8.09 (brs, 1H, H-14E+ H-14Z), 8.08 (s,1 H, CH=NZ), 8.04 (d, 1H, J = 7.6 Hz, H-9Z), 7.85 (t, 1H, J = 7.4 Hz, H-11E + H-11Z), 7.70 (t, 1H, J = 7.4 Hz, H-1OE+H-1OZ), 6.26 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17E), 6.24 (d, 1H, J= 16.8 Hz, H-17Z), 5.67 (s, 2H, H-5E), 5.51 (s, 2H, H-5Z), 5.37 (d, 1H, J= 16.4 Hz, H-17E+ H-17Z), 3.87 (brs, 1H, OH), 1.89 (q, 2H, H-19E + H-19Z), 1.55 (s, 9H, 0tBuZ), 1.42 (s, 9H, O‘Bu Z), 1.03 (t, 3 H, J = 7.2 Hz, H-18 Z), 1.02 (t, 3 H, J = 7.2 Hz, H-18 E). 13C NMR (CDCh, 100 MHz) δ 173.5, 172.5, 151.7, 149.7, 148.4, 145.2, 141.9 (CH=N E), 139.0 (CH=N Z), 132.3,130.8,130.6,130.5,128.5,125.5,125.0,122.9,104.0, 81.8, 72.3, 69.3, 59.2, 32.1,27.6, 7.7.

Exemplo XXXV - Ensaio de inibição de crescimento de célula

[000110] Células H460 de tumor de pulmão de célula grande de humano foicultivada em meio RPMI-1640 contendo 10% de soro de bezerro fetal. A sensibilidade da célula foi determinada pelo ensaio de inibição de crescimento de célula após 1 ou 72 h de exposição ao fármaco. As células em crescimento logarítmico foram coletadas e semeadas em duplicidade em placas de 6 cavidades. Vinte e quatro horas após semeadura, as células foram expostas aos fármacos e contadas com um contador Coulter 72 horas após exposição aos fármacos para a determinação de IC50S. IC50 é definido como a inibição de concentração por crescimento de célula de 50% comparada com crescimento de controles não tratados.

Exemplo XXXVI - Topoisomerase-I - Ensaio de ruptura dependente de DNA

[000111] Rupturas de DNA foram determinadas usando um gel purificado de DNA SV40 751-bp BamHI-EcoRI (Beretta GL, Binaschi M, Zagni E, Capuani L, Capranico G. Tethering a type IB topoisomerase to a DNA site by enzyme fusion to a heterologous site- selective DNA-binding protein domain. Cancer Res 1999; 59:3689- 97). Fragmentos de DNA foram apenas rotulados em 3’. A reação de ruptura de DNA (20,000 cpm/amostra) foi realizada em 20 ml de 10 mM Tris-HCL (pH 7,6), 150 mM KCI, 5 mM MgCh, 15 pg/mL BSA, 0,1 mM Tiotreitol, e a enzima recombinante humana (topo 1 de comprimento completo) por 30 min em 37°C. As reações foram bloqueadas usando 0,5% SDS e 0,3 mg/mL K de proteinase por 45 min. a 42°C. Persistência de dano de DNA foi testada em diferentes vezes adicionando NaCI a 0,6 M após 30 min. Incubação com 10 pM do fármaco. Após precipitação, DNA foi ressuspenso em tampão de desnaturação 80% formamida, NaOH a 10 mM, EDTA a 0,01 M e 1 mg/mL corante) antes de semear em gel de desnaturação (7% poliacrilamida em tampão TBE). Todos os níveis de rupture de DNA foram medidos por meio de um modelo PhosphoImager 425 (Molecular Dynamics) (Dallavalle S, Ferrari A, Biasotti B, et al. Novel 7-oxyiminomethyl camptotecina derivatives with potent in vitro e in vivo antitumor activity. J Med Chem 2001; 44:3264-74). Persistência de danos de DNA (%)

Claims

1. Compostos, caracterizados pelo fato de que apresentam a fórmula geral (I):

na qual: R é F, Cl, Br, I, -N3, NH2, -NR’R”, -COOR’, -CONR’R”, - NHR”’-NR’R”, em que R’, R” e R’” podem ser H, alquila, arila, arilaquila, acila, alcoxicarbonila, ariloxicarbonila; R1 é alquila, aminoalquila, hidroxialquila, nitrila, -NH-O- alquila, -NH-O-arila, sililalquila; R2 é hidrogênio, hidroxila, alcóxi, aminoalquila; R3 é hidrogênio, alcóxi, aminoalquila, em que os grupos alquila, acila, alcóxi, aminoalquila, ou -NH- O-alquila podem conter de 1 a 8 átomos de carbono, em uma cadeia linear ou ramificada, e os grupos arila e arilóxi podem conter de 5 a 10 átomos de carbono; os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos e misturas correspondentes.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os grupos alquila, acila, alcóxi, aminoalquila ou -NH-O- alquila contêm de 1 a 4 átomos de carbono.

3. Composto, caracterizado pelo fato de ser selecionado do grupo consistindo em: a) tio-camptotecina; b) tio-homocamptotecina; c) tioSN38; d) tio-topotecan; e) tioirinotecan; e f) tiogimatecan.

4. Processo para a preparação de compostos de fórmula (I), como definidos na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas mostradas no Esquema I; em que: a) proteção de grupos precursores hidróxi; b) conversão do anel de piridona em anel de tiopiridona; c) remoção dos grupos de proteção

em que R, R1, R2 e R3 têm os significados como definidos na reivindicação 1, e PG é um grupo protetor de OH-.

5. Processo para a preparação de compostos de fórmula (I), como definidos na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas mostradas no Esquema II; em que: a) proteção dos grupos precursores hidróxi; b) derivação em 5 através da formação de um carbanion e reação com um reagente eletrofílico; c) transformação da carbonila 16a em tiocarbonila; d) desproteção dos grupos hidróxi; em que as etapas b) e c) podem ser invertidas

em que R, R1, R2, e R3 têm os significados como definidos na reivindicação 1, e PG é um grupo protetor de OH-.

6. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que contém um composto da fórmula (I), como definido na reivindicação 1, junto com veículos e excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

7. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de estar em uma forma adequada para administração oral ou parenteral.

8. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou de uma composição, como definida na reivindicação 6 ou 7, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um fármaco para o tratamento de tumores.

9. Uso de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o dito fármaco é usado para o tratamento de tumores sólidos e leucemias.

10. Uso de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que os tumores sólidos e leucemias são selecionados dentre tumores do pulmão, ovário, mama, estômago, fígado, próstata, sarcomas de tecidos moles, esôfago, pâncreas, cabeça e pescoço, glioblastoma, leucemias mielocíticas crônicas e agudas.