BR112021008361A2 - 6,7-di-hidro-4h-pyrazolo[1,5-a]pirazina indol-2-carboxamidas ativas inovadoras contra o vírus da hepatite b (hbv) - Google Patents

Abstract

6,7-DI-HIDRO-4H-PYRAZOLO[1,5-A]PIRAZINA INDOL-2-CARBOXAMIDAS ATIVAS INOVADORAS CONTRA O VÍRUS DA HEPATITE B (HBV). A presente invenção se refere, em geral, a agentes antivirais inovadores. Especificamente, a presente invenção se refere a compostos que podem inibir a(s) proteína(s) codificada(s) por vírus da hepatite B (HBV) ou interferir com a função do ciclo de replicação de HBV, composições que compreendem tais compostos, métodos para inibir replicação viral de HBV, métodos para tratar ou prevenir infecção por HBV, e processos e intermediários para correlacionar os compostos.

Description

“6,7-DI-HIDRO-4H-PIRAZOLO[1,5-A]PIRAZINA INDOL-2-

CARBOXAMIDAS ATIVAS INOVADORAS CONTRA O VÍRUS DA HEPATITE B (HBV)” Campo Técnico

[0001] A presente invenção se refere, em geral, a agentes antivirais inovadores. Especificamente, a presente invenção se refere a compostos que podem inibir a(s) proteína(s) codificada(s) por vírus da hepatite B (HBV) ou interferir com a função do ciclo de replicação de HBV, composições que compreendem tais compostos, métodos para inibir replicação viral de HBV, métodos para tratar ou prevenir infecção por HBV e processos para produzir os compostos. Antecedentes da Invenção

[0002] A infecção por HBV crônica é um problema de saúde global significativo, que afeta cerca de 5 % da população mundial (cerca de 350 milhões de pessoas no mundo todo e 1,25 milhões de indivíduos nos EUA). Apesar da disponibilidade de uma vacina contra HBV profilática, o ônus da infecção por HBV crônica continua a ser um problema médico mundial não atendido, devido às opções de tratamento subideal e taxas sustentadas de novas infecções na maior parte do mundo em desenvolvimento. Os tratamentos atuais não fornecem uma cura e se limitam apenas a duas classes de agentes (interferon alfa e análogos/inibidores de nucleosídeo da polimerase viral); a resistência ao fármaco, baixa eficácia e problemas de tolerabilidade limitam seu impacto.

[0003] As taxas de cura baixas de HBV são atribuídas pelo menos em parte ao fato de que a supressão completa de produção de vírus é difícil de alcançar com um único agente antiviral, e à presença e à persistência de DNA circular covalentemente fechado (cccDNA) no núcleo de hepatócitos infectados. Entretanto, a supressão persistente de DNA de HBV mostra progressão de doença hepática e ajuda a prevenir carcinoma hepatocelular (HCC).

[0004] Os objetivos de terapia atuais para pacientes infectados por HBV são direcionados para reduzir DNA de HBV sérico em níveis baixos ou indetectáveis, e para reduzir ou prevenir por fim o desenvolvimento de cirrose e HCC.

[0005] O HBV é um vírus de DNA parcialmente de fita dupla envelopado (dsDNA) da família de hepadnavírus (Hepadnaviridae). A proteína de capsídeo de HBV (HBV-CP) desempenha papéis essenciais em replicação de HBV. A função biológica predominante de HBV-CP é atuar como uma proteína estrutural para encapsidar RNA pré-genômico e formar partículas de capsídeo imaturas, que se assemelham espontaneamente com muitas cópias de dímeros de proteína de capsídeo no citoplasma.

[0006] A HBV-CP também regula a síntese de DNA viral através de estados de fosforilação diferenciais de seus sítios de fosforilação de C-terminal. Ademais, a HBV-CP pode facilitar a translocação nuclear de genoma circular relaxado viral por meio dos sinais de localização nuclear localizados no domínio rico em arginina da região de C- terminal de HBV-CP.

[0007] No núcleo, como um componente do minicromossomo de cccDNA viral, a HBV-CP poderia desempenhar um papel estrutural e regulatório na funcionalidade de minicromossomos de cccDNA. A HBV-CP também interage com proteína de envelope grande viral no retículo endoplasmático (ER) e dispara a liberação de partículas viral intactas de hepatócitos.

[0008] Compostos anti-HBV relacionados à HBV-CP foram relatados. Por exemplo, os derivados de fenilpropenamida, incluindo os compostos chamados de AT-61 e AT-130 (Feld J. et al. Antiviral Res. 2007, 76, 168), e uma classe de tiazolidin-4-onas de Valeant (documento WO2006/033995), demonstraram inibição de empacotamento de RNA pré-genômico (pgRNA).

[0009] F. Hoffmann-LA Roche AG revelou uma série de tetra-hidro-pirazolo[1,5-a]pirazinas 3-substituídas para a terapia de HBV (documentos WO2016/113273, WO201H198744, WO2018/011162, WO2018/011160, WO2018/011163).

[0010] Heteroarildi-hidropirimidinas (HAPs) foram descobertas em uma triagem à base de cultura de tecido (Weber et al., Antiviral Res. 2002, 54, 69). Esses análogos de HAP atuam como ativadores alostéricos sintéticos e são capazes de induzir formação de capsídeo anormal que leva à degradação de HBV-CP (documentos WO 99/54326, WO 00/58302, WO 01/45712, WO 01/6840). Análogos de HAP adicionais também foram descritos (J. Med. Chem. 2016, 59 (16), 7651-7666).

[0011] Uma subclasse de HAPs de F. Hoffmann-La Roche também mostra atividade contra HBV (documentos WO2014/184328, WO2015/132276 e WO2016/146598). Uma subclasse similar de Sunshine Lake Pharma também mostra atividade contra HBV (documento WO2015/144093). HAPs adicionais também demonstraram possuir atividade contra HBV (documento WO2013/102655, Bioorg. Med. Chem. 2017, 25(3)

pp. 1042-1056, e uma subclasse similar da Enanta Therapeutics mostra atividade similar (documento WO2017/011552). Uma subclasse adicional da Medshine Discovery mostra atividade similar (documento WO2017/076286). Uma subclasse adicional (Janssen Pharma) mostra atividade similar (documento WO2013/102655).

[0012] Uma subclasse de piridazonas e triazinonas (F. Hoffman-La Roche) também mostrou atividade contra HBV (documento WO2016/023877), como uma subclasse de tetra- hidropiridopiridinas (documento WO2016/177655). Uma subclasse de derivados de ácido 4-piridona-3-carboxílico tricíclico da Roche também mostra atividade anti-HBV similar (documento WO2017/013046).

[0013] Uma subclasse de sulfamoil-arilamidas da Novira Therapeutics (agora parte da Johnson & Johnson Inc.) também mostra atividade contra HBV (documentos WO2013/006394, WO2013/096744, WO2014/165128, WO2014/184365, WO2015/109130, WO2016/089990, WO2016/109663, WO2016/109684, WO2016/109689, WO2017/059059). Uma subclasse similar de tioéter-arilamidas (também da Novira Therapeutics) mostra atividade contra HBV (documento WO2016/089990). Adicionalmente, uma subclasse de aril-azepanos (também da Novira Therapeutics) mostra atividade contra HBV (documento WO2015/073774). Uma subclasse similar de arilamidas da Enanta Therapeutics mostra atividade contra HBV (documento WO2017/015451).

[0014] Os derivados de sulfamoíla da Janssen Pharma também demonstraram possuir atividade contra HBV (documentos WO2014/033167, WO2014/033170, WO2017001655, J. Med. Chem, 2018, 61(14) 6247-6260)

[0015] Uma subclasse de derivados de pirrolamida substituída por glioxamida também da Janssen Pharma também demonstrou possuir atividade contra HBV (documento WO2015/011281). Uma classe similar de pirrolamidas substituídas por glioxamida (Gilead Sciences) também foi descrita (documento WO2018/039531).

[0016] Uma subclasse de sulfamoil- e oxalil- heterobiarilas da Enanta Therapeutics também mostra atividade contra HBV (documentos WO2016/161268, WO2016/183266, WO2017/015451, WO2017/136403 & US20170253609).

[0017] Uma subclasse de anilina-pirimidinas da Assembly Biosciences também mostra atividade contra HBV (documentos WO2015/057945, WO2015/172128). Uma subclasse de triciclos fusionados da Assembly Biosciences (dibenzo-tiazepinonas, dibenzo-diazepinonas, dibenzo-oxazepinonas) mostra atividade contra HBV (documentos WO2015/138895, WO2017/048950).

[0018] Uma série de sulfamidas cíclicas foi descrita como moduladores de função de HBV-CP pela Assembly Biosciences (documento WO2018/160878).

[0019] Arbutus Biopharma revelou uma série de benzamidas para a terapia de HBV (documentos WO2018/052967, WO2018/172852).

[0020] Foi também mostrado que a bis-ANS de molécula pequena atua como uma “cunha” molecular e interfere com a geometria de capsídeo-proteína normal e formação de capsídeo (Zlotnick A et al. J. Virol. 2002, 4848).

[0021] Os problemas que os antivirais que atuam diretamente em HBV podem encontrar são toxicidade, mutagenicidade, falta de seletividade, eficácia fraca,

biodisponbilidade deficiente, baixa solubilidade e dificuldade de síntese. Assim, há uma necessidade de inibidores adicionais para o tratamento, melhora ou prevenção de HBV que possam superar pelo menos uma dessas desvantagens ou que tenham vantagens adicionais como potência aumentada ou uma janela de segurança aumentada.

[0022] A administração de tais agentes terapêuticos a um paciente infectado com HBV, como monoterapia ou em combinação com outros tratamentos de HBV ou tratamentos auxiliares, levará à carga viral significativamente reduzida, prognóstico melhorado, progressão diminuída da doença e/ou taxas de seroconversão acentuadas. Sumário da invenção

[0023] São fornecidos no presente documento compostos úteis para o tratamento ou a prevenção de infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, e intermediários úteis em sua preparação. A matéria da invenção é um composto da Fórmula I: em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-

Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3,I, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3 - R5 é H ou metila - Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1- C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6-alquila, SO2-C3-C7- cicloalquila, SO2-C3-C7- heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6- alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila, NH-C6-arila, C1-C6- hidroxialquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N, e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila e C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C6-arila, heteroarila, C1-C6- alquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-NH-C1-C6-

haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila C1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N, em que C3-C7-heterocicloalquila é opcionalmente substituída com 1 ou 2 grupos amino - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis C3- C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio, O-C1-C6- haloalquila e C≡N.

[0024] Em uma modalidade da invenção, a matéria da invenção é um composto da Fórmula I em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3,I, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3 - R5 é H ou metila - Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1- C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6-alquila, SO2-C3-C7- cicloalquila, SO2-C3-C7- heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6- alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila, NH-C6-arila, C1-C6- hidroxialquila, C1-C6-

alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N, e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila, C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C6-arila, heteroarila, C1-C6- alquila, C1- C6-haloalquila, C1-C6-alquil-NH-C1-C6- haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6- alquil-SO2-C1-C6- alquila, e C1-C6-alquil-C≡N, em que C3-C7- heterocicloalquila é opcionalmente substituída com 1 ou 2 grupos amino - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis C3- C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio, O-C1-C6- haloalquila e C≡N.

[0025] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que R1, R2, R3 e

R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3, I, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3.

[0026] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0027] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6- alquila, SO2-C3-C7-cicloalquila, SO2-C3-C7- heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6-alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila, NH-C6-arila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6- alquil-S-C1-C6- alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo.

[0028] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que R a e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C3-C6-

cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila, e C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C6-arila, heteroarila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1- C6-alquil-NH-C1-C6-haloalquila, C1- C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, e C1-C6-alquil-C≡N, em que C3-C7-heterocicloalquila é opcionalmente substituída com 1 ou 2 grupos amino.

[0029] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7- heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis C3-C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio, O-C1-C6-haloalquila e C≡N.

[0030] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0031] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0032] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0033] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3,I, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3 - R5 é H ou metila - Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1- C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6-alquila, SO2-C3-C7- cicloalquila, SO2-C3-C7- heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6- alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila, NH-C6-arila, C1-C6- hidroxialquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N, e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila e C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila C1-C6-alquil-S-C1-C6- alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6- alquil-C≡N - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis C3- C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0034] Em uma modalidade da invenção, a matéria da invenção é um composto da Fórmula I em que

- R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3,I, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3 - R5 é H ou metila - Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1- C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6-alquila, SO2-C3-C7- cicloalquila, SO2-C3-C7- heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6- alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila, NH-C6-arila, C1-C6- hidroxialquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N, e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila, C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-S-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6- alquil-C≡N - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis C3- C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0035] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3,1, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3.

[0036] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0037] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6- alquila, SO2-C3-C7-cicloalquila, SO2-C3-C7- heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6-alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila,

C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila, NH-C6-arila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6- alquil-S-C1-C6- alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo.

[0038] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que R a e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6- cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1- C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N.

[0039] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula I em que Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7- heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis C3-C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0040] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0041] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0042] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0043] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula II ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-

Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - n é 1, 2 ou 3.

[0044] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula II em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D e CH2OH, preferencialmente H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, CH3 e Et.

[0045] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula II em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0046] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula II em que n é 1, 2 ou

3.

[0047] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula II ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0048] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula II ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0049] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula II ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0050] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula III ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo.

em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H, metila - m é 0, 1, 2 ou 3.

[0051] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula III em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D e CH2OH, preferencialmente H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, CH3 e Et.

[0052] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula III em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0053] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula III em que m é 0, 1, 2 ou 3.

[0054] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula III ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0055] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula III ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0056] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula III ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0057] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula IV ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo.

em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N; - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0058] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula IV em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D e CH2OH, preferencialmente H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, CH3 e Et.

[0059] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula IV em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0060] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula IV em que Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C3-C6- cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, G3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1- C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N.

[0061] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula IV em que Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7- heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0062] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula IV ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0063] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula IV ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0064] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula IV ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0065] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula V ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Z é selecionado a partir de C6-C12-arila e C1-C9- heteroarila, opcionalmente substituídas com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de -OH, halo, C1-C6-alquila, C3-C7- cicloalquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-alcóxi, C1-C6- hidroxialquila e C≡N.

[0066] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula V em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D e CH2OH, preferencialmente H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, CH3 e Et.

[0067] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula V em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0068] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula V em que Z é selecionado a partir de C6-C12-arila e C1-C9-heteroarila, em que arila e heteroarila são opcionalmente substituídas com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de -OH, halo, C1-C6-alquila, C3-C7- cicloalquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-alcóxi, C1-C6- hidroxialquila e C≡N.

[0069] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula V ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0070] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula V ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0071] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula V ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0072] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula VI ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo.

em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila e C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-S-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6- alquil-C≡N

- Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0073] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VI em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D e CH2OH, preferencialmente H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, CH3 e Et.

[0074] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VI em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0075] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VI em que Ra e Rb são selecionado a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila e C2-C6-alquil-O- C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6- alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-S- C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6- alquil-C≡N.

[0076] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VI em que Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7- heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0077] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula VI ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0078] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula VI ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0079] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula VI ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0080] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula VII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição,

independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Y é oxo-oxadiazabiciclo[3.3.1]nonanila substituída por C1-C6-carboxialquila; ou oxopirrolidinila, em que a dita oxopirrolidinila é opcionalmente substituída uma vez por N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), carboxifenila, carboxipiridinila, carboxifenilamino, halocarboxifenila ou carboxipirrolidinila, ou substituída duas vezes por carboxipirrolidinila e C1- C6-alquila.

[0081] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VII em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i-Pr, c-Pr, D e CH2OH, preferencialmente H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, CH3 e Et.

[0082] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VII em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0083] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VII em que Y é oxo- oxadiazabiciclo[3.3.1]nonanila substituída por C1-C6- carboxialquila; ou oxopirrolidinila, em que a dita oxopirrolidinila é opcionalmente substituída uma vez por N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), carboxifenila, carboxipiridinila, carboxifenilamino, halocarboxifenila ou carboxipirrolidinila, ou substituída duas vezes por carboxipirrolidinila e C1-C6-alquila.

[0084] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula VII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0085] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula VII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0086] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula VII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0087] Uma modalidade adicional da invenção é um composto da Fórmula VIII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo em necessidade do mesmo em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição,

independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila, G1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0088] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VIII em que R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et e i-Pr, preferencialmente H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, CH3 e Et.

[0089] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VIII em que R5 é selecionado a partir do grupo que compreende H e metila.

[0090] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VIII em que Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6- cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1- C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N.

[0091] Em uma modalidade, a matéria da presente invenção é um composto de acordo com a Fórmula VIII em que Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7- heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N.

[0092] Uma modalidade da invenção é um composto da Fórmula VIII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a invenção, para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

[0093] Uma modalidade da invenção é uma composição farmacêutica que compreende um composto da Fórmula VIII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0094] Uma modalidade da invenção é um método de tratamento de uma infecção por HBV Em um Indivíduo Em necessidade do mesmo, que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da Fórmula VIII ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a presente invenção.

[0095] Em algumas modalidades, a dose de um composto da invenção é de cerca de 1 mg a cerca de 2.500 mg. Em algumas modalidades, uma dose de um composto da invenção usado em composições descritas no presente documento é menos que cerca de 10.000 mg, ou menos que cerca de 8.000 mg, ou menos que cerca de 6.000 mg, ou menos que cerca de 5.000 mg, ou menos que cerca de 3.000 mg, ou menos que cerca de

2.000 mg, ou menos que cerca de 1.000 mg, ou menos que cerca de 500 mg, ou menos que cerca de 200 mg, ou menos que cerca de 50 mg. Similarmente, em algumas modalidades, uma dose de um segundo composto (isto é, outro fármaco para tratamento de HBV) como descrito no presente documento é menos que cerca de 1.000 mg, ou menos que cerca de 800 mg, ou menos que cerca de 600 mg, ou menos que cerca de 500 mg, ou menos que cerca de 400 mg, ou menos que cerca de 300 mg, ou menos que cerca de 200 mg, ou menos que cerca de 100 mg, ou menos que cerca de 50 mg, ou menos que cerca de 40 mg, ou menos que cerca de 30 mg, ou menos que cerca de 25 mg, ou menos que cerca de 20 mg, ou menos que cerca de 15 mg, ou menos que cerca de 10 mg, ou menos que cerca de 5 mg, ou menos que cerca de 2 mg, ou menos que cerca de 1 mg, ou menos que cerca de 0,5 mg, e quaisquer e todos os incrementos integrais ou parciais da mesma. Todas as doses mencionadas anteriormente se referem a doses diárias por paciente.

[0096] Em geral, contempla-se que uma quantidade diária eficaz antiviral seria de cerca de 0,01 a cerca de 50 mg/kg ou cerca de 0,01 a cerca de 30 mg/kg de peso corporal. Pode ser apropriado administrar a dose requerida como duas, três, quatro ou mais subdoses em intervalos apropriados ao longo do dia. As ditas subdoses podem ser formuladas como formas de dosagem unitárias, por exemplo, contendo cerca de 1 a cerca de 500 mg, ou cerca de 1 a cerca de 300 mg ou cerca de 1 a cerca de 100 mg, ou cerca de 2 a cerca de 50 mg de ingrediente ativo por forma de dosagem unitária.

[0097] Os compostos da invenção podem, dependendo de sua estrutura, existem como sais, solvatos ou hidratos. Portanto, a invenção também abrange os sais, solvatos ou hidratos e respectivas misturas dos mesmos.

[0098] Os compostos da invenção podem, dependendo de sua estrutura, existir em formas tautoméricas ou estereoisoméricas (enantiômeros, diastereômeros). Portanto, a invenção também abrange os tautômeros, enantiômeros ou diastereômeros e respectivas misturas dos mesmos. Os constituintes estereisomericamente uniformes podem ser isolados de uma maneira conhecida a partir dessas misturas de enantiômeros e/ou diastereômeros. Definições

[0099] São listadas abaixo definições de vários termos usados para descrever esta invenção. Essas definições se aplicam aos termos conforme são usados ao longo deste relatório descritivo e reivindicações salvo se limitado de outro modo em casos específicos individualmente ou como parte de um grupo maior.

[0100] Salvo se definido de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados no presente documento têm, de modo geral, o mesmo significado como comumente entendido por aqueles elementos de habilidade comum na técnica ao qual esta invenção pertence. De modo geral, a nomenclatura usada no presente documento e os procedimentos laboratoriais em cultura celular, genética molecular, química orgânica e química peptídeo são aqueles conhecidos e empregados na técnica.

[0101] Como usado no presente documento, os artigos “um” e “uma” se referem a um ou a mais que um (isto é, pelo menos um) do objeto gramatical do artigo. Por meio de exemplo, “um elemento” significa um elemento ou mais que um elemento. Adicionalmente, o uso do termo “que inclui”, bem como outras formas, como “incluir”, “inclui” e “incluído”, não é limitante.

[0102] Como usado no presente documento, o termo “modulador de montagem de capsídeo” se refere a um composto que interrompe ou acelera ou inibe ou prejudica ou atrasa ou reduz ou modifica a montagem de capsídeo normal (por exemplo, durante a maturação) ou desmontagem de capsídeo normal (por exemplo, durante a infectividade) ou perturba a estabilidade de capsídeo, induzindo, por meio disso, morfologia de capsídeo anormal ou função de capsídeo anormal. Em uma modalidade, um modulador de montagem de capsídeo acelera a montagem ou a desmontagem de capsídeo induzindo, por meio disso, a morfologia de capsídeo anormal. Em outra modalidade, um modulador de montagem de capsídeo interage (por exemplo, se liga em um sítio ativo, se liga em um sítio alostérico ou modifica e/ou prejudica o enovelamento e similares), com a proteína de montagem de capsídeo principal (HBV-CP), interrompendo, por meio disso, a montagem ou desmontagem de capsídeo. Ainda em outra modalidade, um modulador de conjunto de capsídeo provoca uma perturbação na estrutura ou função de HBV-CP (por exemplo, a capacidade de HBV-CP em montar, desmontar, se ligar a um substrato, enovelar em uma conformação adequada ou similares que atenua a infectividade viral e/ou é letal para o vírus).

[0103] Como usado no presente documento, o termo “tratamento” ou “tratar” é definido como a aplicação ou administração de um agente terapêutico, isto é, um composto da invenção (em separado ou em combinação com outro agente farmacêutico) a um paciente, ou aplicação ou administração de um agente terapêutico a um tecido ou linhagem celular isolada de um paciente (por exemplo, para diagnóstico ou aplicações ex vivo) que tem uma infecção por HBV, um sintoma de infecção por HBV, ou o potencial de desenvolver uma infecção por HBV com o propósito de curar, sanar, aliviar, atenuar, alterar, remediar, melhorar, aprimorar ou afetar a infecção por HBV, os sintomas de infecção por HBV ou o potencial de desenvolver uma infecção por HBV. Tais tratamentos podem ser especificamente personalizados ou modificados com base no conhecimento obtido a partir do campo da farmacogenômica.

[0104] Como usado no presente documento, o termo “prevenir” ou “prevenção” significa nenhum desenvolvimento de transtorno ou doença se nenhum tiver ocorrido ou nenhum desenvolvimento de transtorno ou doença adicional se já tiver havido desenvolvimento do transtorno ou doença. Também é considerada a capacidade de prevenir alguns ou todos os sintomas associados ao transtorno ou doença.

[0105] Como usado no presente documento, o termo "paciente", “indivíduo” ou "sujeito” se refere a um mamífero não humano ou não humano. Mamíferos não humanos incluem, por exemplo, gado e animais de estimação como mamíferos ovinos, bovinos, suínos, felinos e murinos. Preferencialmente, o paciente, sujeito ou indivíduo é um ser humano.

[0106] Como usado no presente documento, os termos "quantidade eficaz”, "quantidade farmaceuticamente eficaz” e "quantidade terapeuticamente eficaz” se referem a uma quantidade suficiente, mas não tóxica de um agente para fornecer o resultado biológico desejado. Esse resultado pode ser redução e/ou alívio dos sinais, sintomas ou causas de uma doença ou qualquer outra alteração desejada de um sistema biológico. Uma quantidade terapêutica apropriada em qualquer caso individual pode ser determinada por um técnico no assunto usando experimentação de rotina.

[0107] Como usado no presente documento, o termo “farmaceuticamente aceitável” se refere a um material como um carreador ou diluente que não anula a atividade ou propriedades biológicas do composto e é relativamente não tóxico, isto é, o material pode ser administrado a um indivíduo sem causar efeitos biológicos indesejáveis ou interagir de uma maneira prejudicial com qualquer um dos componentes da composição em que o mesmo está contido.

[0108] Como usado no presente documento, o termo "sal farmaceuticamente aceitável” se refere a derivados dos compostos revelados em que o composto original é modificado ao converter uma fração ácida ou básica existente em sua forma de sal. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não são limitados a, sais de ácido mineral ou orgânico de resíduos básicos, como aminas; sais alcalinos ou orgânicos de resíduos ácidos, como ácidos carboxílicos; e similares. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente Invenção incluem os sais não tóxicos convencionais do composto original formado, por exemplo, a partir de ácidos inorgânicos ou orgânicos não tóxicos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto parental que contém uma fração básica ou ácida por métodos químicos convencionais. De modo geral, tais sais podem ser preparados reagindo-se o ácido livre ou as formas de base desses compostos com uma quantidade estequiométrica da base ou do ácido apropriado em água ou em um solvente orgânico ou em uma mistura dos dois; meios geralmente não aquosos como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol ou acetonitrila são preferenciais. As listas de sais adequados são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences 17ª ed. Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985 p.1418 e Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977), cada um dos quais é incorporado em sua totalidade a título de referência no presente documento.

[0109] Como usado no presente documento, o termo “composição” ou “composição farmacêutica” se refere a uma mistura de pelo menos um composto útil na invenção com um carreador farmaceuticamente aceitável. A composição farmacêutica facilita a administração do composto a um paciente ou indivíduo. Múltiplas técnicas de administrar um composto existem na técnica, incluindo, mas sem limitação a, administração intravenosa, oral, aerossol, retal, parenteral, oftálmica, pulmonar e tópica.

[0110] Como usado no presente documento, o termo “carreador farmaceuticamente aceitável” significa um material, composição ou carreador farmaceuticamente aceitável como uma carga líquida ou sólida, estabilizador, agente dispersante, agente de suspensão, diluente, excipiente, agente espessante, solvente ou material de encapsulamento envolvido no carregamento ou transporte de um composto útil na invenção em ou para o paciente de modo que possa realizar sua função destinada.

Tipicamente, tais construtos são carregados ou transportados a partir de órgão, ou porção do corpo, para outro órgão ou porção do corpo.

Cada carreador precisa ser “aceitável" no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação incluindo o uso de composto na invenção e não ser prejudicial ao paciente.

Alguns exemplos de materiais que podem servir como carreadores farmaceuticamente aceitáveis incluem: açúcares, como lactose, glicose e sacarose; amidos, como amido de milho e amido de batata; celulose e seus derivados, como carboximetilcelulose sódica, etilcelulose e acetato de celulose; tragacanto em pó; malte, gelatina, talco; excipientes, como manteiga de cacau e ceras de supositório; óleos como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de cártamo, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja; glicóis, como propileno glicol; polióis, como glicerina, sorbitol, manitol e polietileno glicol; ésteres, como oleato de etila e laurato de etila; ágar; agentes de tamponamento, como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; agentes tensoativos; ácido algínico; água livre de pirogênio; solução salina isotônica; solução de Ringer; álcool etílico; soluções de tampão de fosfato e outras substâncias compatíveis não tóxicas empregadas em formulações farmacêuticas.

[0111] Como usado no presente documento, "carreador farmaceuticamente aceitável” também inclui todos e quaisquer revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos e agentes de retardamento de absorção e similares que são compatíveis com a atividade do composto útil na invenção e são fisiologicamente aceitáveis para o paciente. Compostos ativos suplementares também podem ser incorporados nas composições. O "carreador farmaceuticamente aceitável” pode incluir adicionalmente um sal farmaceuticamente aceitável do composto útil na invenção. Outros ingredientes adicionais que podem ser incluídos nas composições farmacêuticas usadas na prática da invenção são conhecidos na técnica e descritos, por exemplo, em Remington's Pharmaceutical Sciences (Genaro, Ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985) que é incorporado a título de referência no presente documento.

[0112] Como usado no presente documento, o termo "substituído” significa que um átomo ou grupo de átomos substituiu hidrogênio como o substituinte ligado a outro grupo.

[0113] Como usado no presente documento, o termo "que compreende” também abrange a opção “que consiste em".

[0114] Como usado no presente documento, o termo "alquila" por si só ou como parte de outro substituinte significa, salvo se apresentado de outro modo, um hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificado que tem o número de átomos de carbono designado (isto é, C1-C6- alquila significa um a seis átomos de carbono) e inclui cadeias lineares e ramificadas. Exemplos incluem metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, terc-butila,

pentila, neopentila e hexila. Além disso, o termo “alquila” por si só ou como parte de outro substituinte também pode significar um C1-C3 hidrocarboneto de cadeia linear substituída com um C3-C5-anel carbocílico. Exemplos incluem (ciclopropil)metila, (ciclobutil)metila e (ciclopentil)metila. Para evitar dúvidas, onde duas frações de alquila estão presentes em um grupo, as frações podem ser iguais ou diferentes.

[0115] Como usado no presente documento, o termo "alquenila" denota um grupo monovalente derivado de uma fração de hidrocarboneto contendo pelo menos dois átomos de carbono e pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono de estereoquímica E ou Z. A ligação dupla pode ser ou não o ponto de ligação a outro grupo. Os grupos alquenilas (por exemplo, C2-C8-alquenila) incluem, mas não se limitam a, por exemplo, etenila, propenila, prop-1-en-2-ila, butenila, metil-2-buten-1-ila, heptenila e octenila. Para evitar dúvidas, onde duas frações de alquenila estão presentes em um grupo, as frações de alquila podem ser iguais ou diferentes.

[0116] Como usado no presente documento, um grupo ou fração de C2-C6-alquinila é um grupo ou fração de alquinila linear ou ramificado contendo de 2 a 6 átomos de carbono, por exemplo, um grupo ou fração de C2-C4 alquinila contendo de 2 a 4 átomos de carbono. Grupos alquinila exemplificativos incluem -C≡CH ou -CEh-C≡C, bem como 1- e 2-butinila, 2-pentinila, 3-pentinila, 4-pentinila, 2- hexinila, 3-hexinila, 4-hexinila e 5-hexinila. Para evitar dúvidas, onde duas frações de alquinila estão presentes em um grupo, as mesmas podem ser iguais ou diferentes.

[0117] Como usado no presente documento, o termo "halo” ou "halogênio” sozinho ou como parte de outro substituinte significa, salvo se apresentado de outro modo, um átomo flúor, cloro, bromo ou iodo, preferencialmente, flúor, cloro ou bromo, mais preferencialmente, flúor ou cloro. Para evitar dúvidas, onde duas frações de halo estão presentes em um grupo, as mesmas podem ser iguais ou diferentes.

[0118] Como usado no presente documento, um grupo C1-C6- alcóxi ou grupo C2-C6-alquenilóxi é tipicamente um dito grupo C1-C6-alquila (por exemplo, uma C1-C4 alquila) ou um dito grupo C2-C6-alquenila (por exemplo, uma C2-C4 alquenila) respectivamente que é ligado a um átomo de oxigênio.

[0119] Como usado no presente documento, o termo "arila" empregado em separado ou em combinação com outros termos significa, salvo se apresentado de outro modo, um sistema aromático carbocíclico contendo um ou mais anéis (tipicamente um, dois ou três anéis) em que tais anéis podem ser ligados juntamente de uma maneira pendente como uma bifenila, ou pode ser fusionado, como naftaleno. Exemplos de grupos arila incluem fenila, antracila e naftila. Exemplos preferenciais são fenila (por exemplo, C6-arila) e bifenila (por exemplo, C2-arila). Em algumas modalidades, os grupos arila têm de seis a dezesseis átomos de carbono. Em algumas modalidades, os grupos arila têm de seis a doze átomos de carbono (por exemplo, C6-C12-arila). Em algumas modalidades, os grupos arila têm seis átomos de carbono (por exemplo, C6-arila).

[0120] Como usado no presente documento, os termos

"heteroarila" e "heteroaromático” se referem a um heterociclo que tem caráter aromático contendo um ou mais anéis (tipicamente um, dois ou três anéis). Os substituintes heteroarila podem ser definidos pelo número de átomos de carbono, por exemplo, C1-C9-heteroarila indica o número de átomos de carbono contido no grupo heteroarila sem incluir o número de heteroátomos. Por exemplo, uma C1- C9-heteroarila incluirá um a quatro heteroátomos adicionais. Uma heteroarila policíclica pode incluir um ou mais anéis que são parcialmente saturados. Exemplos não limitantes de heteroarilas incluem:

[0121] Exemplos não limitantes de grupos heteroarila grupos incluem piridila, pirazinila, pirimidinila (incluindo, por exemplo, 2- e 4-pirimidinila), piridazina tienila, furila, pirrolila (incluindo, por exemplo, 2- pirrolila), imidazolila, tiazolila, oxazolila, pirazolila (incluindo, por exemplo, 3- e 5-pirazolila), isotiazolila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4-triazolila, 1,3,4-triazolila, tetrazolila, 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,3- oxadiazolila,

1,3,4-tiadiazolila e 1,3,4-oxadiazolila. Exemplos não limitantes de heterociclos policíclicos e heteroarilas incluem indolila (incluindo 3-, 4-, 5-, 6- e 7-indolila), indolinila, quinolila, tetra-hidroquinolila, Isoquinolila (incluindo, por exemplo, 1- e 5-Isoquinolila), 1,2,3,4- tetra-hidroisoquinolila, cinolinila, quinoxalinila (incluindo, por exemplo, 2- e 5-quinoxalinila), quinazolinila, ftalazinila, 1,8-naftoridinila, 1,4- benzodioxanila, cumarina, di-hidrocumarina, 1,5- naftiridinila, benzofurila (incluindo, por exemplo, 3-, 4-, 5-, 6-, e 7- benzofurila), 2,3-di-hidrobenzofurila, 1,2- benzisoxazolila, benzotienila (incluindo, por exemplo, 3-, 4-, 5-, 6- e 7-benzotienila), benzoxazolila, benzotiazolila (incluindo, por exemplo, 2-benzotiazolila e 5- benzotlazolila), purinila, benzimidazolila (incluindo, por exemplo, 2-benzimidazolila), benzotriazolila, tioxantinila, carbazolila, carbolinila, acridinila, pirrolizidinila e quinolizidinila.

[0122] Como usado no presente documento, o termo "haloalquila” é tipicamente um dito grupo alquila, alquenila, alcóxi ou alquenóxi, respectivamente, em que quaisquer um ou mais dos átomos de carbono são substituídos com um ou mais ditos átomos de halo conforme definido abaixo. A haloalquila abrange radicais mono-haloalquila, di-haloalquila e poli-haloalquila. O termo "haloalquila” inclui, mas não se limita a fluorometila, 1-fluoroetila, difluorometila, 2,2-difluoroetila, 2,2,2-trifluoroetila, trifluorometila, clorometila, diclorometila, triclorometila, pentafluoroetila, difluorometóxi e trifluorometóxi.

[0123] Como usado no presente documento, um grupo C1-C6- hidroxialquila é um dito grupo C1-C6 alquila substituído por um ou mais grupos hidróxi. Tipicamente, o mesmo é substituído por um, dois ou três grupos hidroxila. Preferencialmente, o mesmo é substituído por um único grupo hidróxi.

[0124] Como usado no presente documento, um grupo C1-C6- aminoalquila é um dito grupo C1-C6 alquila substituído por um ou mais grupos amino. Tipicamente, o mesmo é substituído por um, dois ou três grupos amino. Preferencialmente, o mesmo é substituído por um único grupo amino.

[0125] Como usado no presente documento, um grupo C1-C6- carboxialquila é um dito grupo C1-C4 alquila substituído por grupo carboxila.

[0126] Como usado no presente documento, um grupo C1-C4- carboxamidoalquila é um dito grupo C1-C4 alquila substituído por um grupo carboxamida substituído ou não substituído.

[0127] Como usado no presente documento, um grupo C1-C4- acilsulfonamido-alquila é um dito grupo C1-C4 alquila substituído por um grupo acilsulfonamida de fórmula geral C(=O)NHSO2CH3 ou C(=O)NHSO2-c-Pr.

[0128] Como usado no presente documento, o termo "cicloalquila" se refere a um grupo não aromático monocíclico ou policíclico em que cada um dos átomos que forma o anel (isto é, átomos estruturais) é um átomo de carbono. Em uma modalidade, o grupo cicloalquila é saturado ou parcialmente insaturado. Em outra modalidade, o grupo cicloalquila é fusionado com um anel aromático. Os grupos cicloalquila incluem grupos que têm 3 a 10 átomos no anel

(C3-C10-cicloalquila), grupos que têm 3 a 8 átomos no anel (C3-C8-cicloalquila), grupos que têm 3 a 7 átomos no anel (C3-C7-cicloalquila) e grupos que têm 3 a 6 átomos no anel (C3-C6-cicloalquila). Exemplos ilustrativos de grupos cicloalquila incluem, mas não se limitam às seguintes frações:

[0129] As cicloalquilas monocíclicas incluem, mas não se limitam a ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo- hexila, ciclo-heptila e ciclo-octila. As cicloalquilas dicíclicas incluem, mas não se limitam a tetra- hidronaftila, indanila e tetra-hidropentaleno. As cicloalquilas policíclicas incluem adamantina e norbomano. O termo cicloalquila inclui tanto grupos "carbociclila não aromática insaturada” quanto "carbociclila insaturada não aromática" que se referem a um carbociclo não aromático como definido no presente documento que contém pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono ou uma ligação tripla de carbono-carbono.

[0130] Como usado no presente documento, o termo “espirocíclico” se refere a qualquer composto contendo dois ou mais anéis em que dois dos anéis têm um carbono de anel em comum.

[0131] Como usado no presente documento, os termos

"heterocicloalquila" e "heterociclila” se referem a um grupo heteroalicíclico contendo um ou mais anéis (tipicamente um, dois ou três anéis) que contêm um a quatro heteroátomos de anel, cada um selecionado a partir de oxigênio, enxofre e nitrogênio.

Em uma modalidade, cada grupo heterociclila tem de 3 a 10 átomos em seu sistema de anel com a condição de que o anel do dito grupo não contenha dois oxigênio ou enxofre adjacentes.

Em uma modalidade, cada grupo heterociclila tem um sistema de anel bicíclico fusionado com 3 a 10 átomos no sistema de anel, novamente com a condição de que o anel do dito grupo não contenha dois átomos de oxigênio ou enxofre adjacentes.

Em uma modalidade, cada grupo heterociclila tem um sistema de anel bicíclico em ponte com 3 a 10 átomos no sistema de anel, novamente com a condição de que o anel do dito grupo não contenha dois átomos de oxigênio ou enxofre adjacentes.

Em uma modalidade, cada grupo heterociclila tem um sistema de anel espirobicíclico com 3 a 10 átomos no sistema de anel, novamente com a condição de que o anel do dito grupo não contenha dois átomos de oxigênio ou enxofre adjacentes.

Os substituintes de heterociclila podem ser definidos alternativamente pelo número de átomos de carbono, por exemplo, C2-C8-heterociclila indica o número de átomos de carbono contidos no grupo heterocíclico sem incluir o número de heteroátomos.

Por exemplo, uma C2-C8- heterociclila incluirá um a quatro heteroátomos adicionais.

Em outra modalidade, o grupo heterocicloalquila é fusionado com um anel aromático.

Em outra modalidade, o grupo heterocicloalquila é fusionado com um anel de heteroarila.

Em uma modalidade, os heteroátomos de nitrogênio e enxofre podem ser oxidados opcionalmente e o átomo de nitrogênio pode ser quaternizado opcionalmente. O sistema heterocíclico pode estar ligado, salvo se apresentado de outro modo, em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que produz uma estrutura estável. Um exemplo de um grupo heterociclila de 3 membros inclui e não se limita à aziridina. Exemplos de grupos heterocicloalquila de 4 membros incluem, e não se limitam à azetidina e a uma beta- lactama. Exemplos de grupos heterociclila de 5 membros incluem, e não se limitam à pirrolidina, oxazolidina e tiazolidinadiona. Exemplos de grupos heterocicloalquila de 6 membros incluem, e não se limitam a, piperidina, morfolina, piperazina, N-acetilpiperazina e N- acetilmorfolina. Outros exemplos não limitantes de grupos heterociclila são

[0132] Exemplos de heterociclos incluem grupos monocíclicos, como aziridina, oxirano, ti-irano, azetidina,

oxetano, tietano, pirrolidina, pirrolina, pirazolidina, imidazolina, dioxolano, sulfolano, 2,3-di-hidrofurano, 2,5- di-hidrofurano, tetra-hidrofurano, tiofano, piperidina, 1,2,3,6- tetra-hidropiridina, 1,4-di-hidropiridina, piperazina, morfolina, tiomorfolina, pirano, 2,3- di- hidropirano, tetra-hidropirano, 1,4-dioxano, 1,3-dioxano, 1,3-dioxolano, homopiperazina, homopiperidina, 1,3- dioxepano, 47-di-hidro-1,3-dioxepin e óxido de hexametileno. Os termos “C3-C7-heterocicloalquila” inclui, mas não se limita à tetra-hidrofuran-2-ila, tetra- hidrofuran-3- ila, 3-oxabiciclo[3.1.0]hexan-6-ila, 3- azabiciclo[3.1.0]hexan-6-ila, tetra-hidropiran-4-ila, tetra-hidropiran-3-ila, tetra-hidropiran-2-ila e azetidin- 3-ila.

[0133] Como usado no presente documento, o termo "aromático” se refere a um carbociclo ou heterociclo com um ou mais anéis poli-insaturados e que tem caráter aromático, isto é, tem (4n + 2) elétrons π(pi) deslocalizados em que n é um número inteiro.

[0134] Como usado no presente documento, o termo “acila” empregado em separado ou em combinação com outros termos significa, salvo se apresentado de outro modo, um grupo alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, arila ou heteroarila ligado a um grupo carbonila.

[0135] Como usado no presente documento, os termos “carbamoíla” e “carbamoíla substituída” empregados sozinhos ou em combinação com outros termos significa que, salvo se apresentado de outro modo, um grupo carbonila ligado a um grupo amino opcionalmente mono ou dissubstituído por hidrogênio, alquila, cicloalquila, heterocicloalquila,

arila ou heteroarila. Em algumas modalidades, os substituintes de nitrogênio serão conectados para formar um anel de heterociclila como definido acima.

[0136] Como usado no presente documento, o termo "carbóxi" por si só ou como parte de outro substituinte significa, salvo se apresentado de outro modo, um grupo de fórmula C(=O)OH.

[0137] Como usado no presente documento, o termo “éster carboxílico” por si só ou como parte de outro substituinte significa, salvo se apresentado de outro modo, um grupo de fórmula C(=O)OX, em que X é selecionado a partir do grupo que consiste em C1-C6-alquila, C3-C7-cicloalquila e arila.

[0138] Como usado no presente documento, o termo “pró- fármaco” representa um derivado de um composto da Fórmula I ou Fórmula II ou Fórmula III ou Fórmula IV ou Fórmula V ou Fórmula VI ou Fórmula VII ou Fórmula VIII que é administrado em uma forma que, uma vez administrada, é metabolizada in vivo em um metabólito ativo também da Fórmula I ou Fórmula II ou Fórmula III ou Fórmula IV ou Fórmula V ou Fórmula VI ou Fórmula VII ou Fórmula VIII.

[0139] Várias formas de pró-fármaco são conhecidas na técnica. A título de exemplos de tais pró-fármacos, consulte: Design of Prodrugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) e Methods in Enzymology, Volume 42, p. 309-396, editado por K. Widder, et al. (Academic Press, 1985); A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krogsgaard-Larsen e H. Bundgaard, Capítulo 5 “Design and Application of Prodrugs” de H. Bundgaard p. 113-191 (1991); H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews 8, 1- 38 (1992); H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical

Sciences, 77, 285 (1988); e N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984).

[0140] Exemplos de pró-fármacos incluem ésteres cliváveis dos compostos das Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII e VIII.

[0141] Um éster clivável in vivo de um composto da invenção contendo um grupo carbóxi é, por exemplo, um éster farmaceuticamente aceitável que é clivado no corpo humano ou animal para produzir o ácido original. Ésteres farmaceuticamente aceitáveis adequados para carbóxi incluem éster C1-C6 alquílico, por exemplo, ésteres metílicos ou etílicos; ésteres C1-C6 alcoximetílicos, por exemplo, éster metoximetílico; ésteres C1-C6 aciloximetílicos; ésteres ftalidílicos; ésteres de C3-C8 cicloalcoxicarbonilóxi, ésteres C1-C6 alquílicos, por exemplo, 1-ciclo-hexil carboniloxietila; ésteres 1-3- dioxolan-2-ilmetílicos, por exemplo, 5-metil-1,3-dioxolan-2-ilmetila; ésteres C1-C6 alcoxicarboniloxietílicos, por exemplo, 1- metoxicarboniloxietila; ésteres aminocarbonilmetílicos e versões mono-ou di-N-(C1-C6 alquila) dos mesmos, por exemplo, ésteres N,N-dimetilaminocarbonílicos e ésteres N- etilaminocarbonilmetílicos; e podem ser formados em qualquer grupo carbóxi nos compostos da invenção.

[0142] Um éster clivável in vivo de um composto da invenção contendo um grupo hidróxi é, por exemplo, um éster farmaceuticamente aceitável que é clivado no corpo humano ou animal para produzir o grupo hidróxi original. Ésteres farmaceuticamente aceitáveis adequados para hidróxi incluem ésteres C1-C6-acílicos, por exemplo, ésteres acetílicos; e ésteres de benzoíla em que o grupo fenila pode ser substituído com aminometila ou mono-ou di-C1-C6 alquil aminometila substituído com N, por exemplo, ésteres de 4- aminometilbenzoíla e ésteres de 4-N,N- dimetilaminometilbenzoíla.

[0143] Os pró-fármacos preferenciais da invenção incluem acetilóxi e derivados de carbonato. Por exemplo, um grupo hidróxi dos compostos da Fórmula I, II, III, IV, V, VI, VII e VIII pode estar presente em um pró-fármaco como -O-COR1 ou -O-C(O)ORi em que Ri é C1-C4 alquila não substituída ou substituída. Os substituintes nos grupos alquila são como definido anteriormente. Preferencialmente, os grupos alquila em Ri são não substituídos, preferencialmente, metila, etila, isopropila ou ciclopropila.

[0144] Outros pró-fármacos preferenciais da invenção incluem derivados de aminoácido. Os aminoácidos adequados incluem α-aminoácidos ligados a compostos das Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII e VIII através de seu grupo C(O)OH. Tais pró-fármacos clivam in vivo para produzir compostos da Fórmula I que portam um grupo hidróxi. Consequentemente, tais grupos aminoácido são, preferencialmente, posições empregadas das Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII e VIII em que um grupo hidróxi é exigido eventualmente. Pró- fármacos exemplificativos dessa modalidade da invenção são, portanto, compostos das Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII e VIII que portam um grupo da Fórmula -OC(O)-CH(NH2)Rii em que Rii é uma cadeia lateral de aminoácido. Aminoácidos preferenciais incluem glicina, alanina, valina e serina. O aminoácido também pode ser funcionalizado, por exemplo, o grupo amino pode ser alquilado. Um aminoácido funcionalizado adequado é N,N-dimetilglicina.

Preferencialmente, o aminoácido é valina.

[0145] Outros pró-fármacos preferenciais da invenção incluem derivados de fosforamidato. Várias formas de pró- fármacos de fosforamidato são conhecidas na técnica. A título de exemplo de tais pró-fármacos, consulte Serpi et al., Curr. Protoc. Nucleic Acid Chem. 2013, Capítulo 15, Unidade 15.5 e Mehellou et al., ChemMedChem, 2009, 4 pp. 1779-1791. Os fosforamidatos adequados incluem (fenoxi)-α- aminoácidos ligados a compostos das Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII e VIII através de seu grupo -OH. Tais pró- fármacos clivam in vivo para produzir compostos da Fórmula I que portam um grupo hidróxi. Consequentemente, tais grupos de fosforamidato são preferencialmente empregados em posições das Fórmulas I, II, III, IV, V, VI, VII e VIII onde um grupo hidróxi é eventualmente requerido. Os pró- fármacos exemplificativos dessa modalidade da invenção são, portanto, compostos da Fórmula I que portam um grupo da Fórmula -OP(O)(ORiii)Riv em que Riii é alquila, cicloalquila, arila ou heteroarila, e Riv é um grupo da Fórmula -NH- CH(Rv)C(O)ORvi. em que Rv é uma cadeia lateral de aminoácido e Rvi é alquila, cicloalquila, arila ou heterociclila. Aminoácidos preferenciais incluem glicina, alanina, valina e serina. Preferencialmente, o aminoácido é alanina. Rv é, preferencialmente, alquila, com máxima preferência, isopropila.

[0146] A matéria da presente invenção também é um método de preparação dos compostos da presente invenção. A matéria da invenção é, assim, um método para a preparação de um composto da Fórmula I de acordo com a presente invenção ao reagir um composto da Fórmula IX em que R1, R2, R3 e R4 são como definido acima com um composto da Fórmula X em que Q é como definido acima. Exemplos

[0147] A invenção é agora descrita em referência aos seguintes Exemplos. Esses Exemplos são fornecidos apenas com o propósito de ilustração, e a invenção não é limitada a esses Exemplos, mas, de preferência, abrange todas as variações que são evidentes como um resultado dos ensinamentos fornecidos no presente documento.

[0148] Os ácidos indol-2-carboxílicos substituídos exigidos podem ser preparados de diversas formas; sendo as principais vias empregadas destacadas nos Esquemas 1-4. Para o químico técnico no assunto, estará evidente que há outras metodologias que também alcançarão a preparação desses intermediários.

[0149] Os ácidos indol-2-carboxílicos substituídos podem ser preparados através da reação Hemetsberger-Knittel

(Organic Letters, 2011, 13(8) pp. 2012-2014, Journal of the American Chemical Society, 2007, pp. 7500-7501, e Monatshefte fur Chemie, 103(1), pp. 194-204) (Esquema 1).

Esquema 1: Indóis de vinil azidas

[0150] Os indóis substituídos também podem ser preparados usando o método Fischer (Berichte der Deutschen Chemischen Gesellschaft. 17 (1): 559-568) (Esquema 2).

Esquema 2: A síntese de indol de Fischer

[0151] Um método adicional para a preparação de indóis substituídos é a reação de anulação de alcino catalisada com paládio (Journal of the American Chemical Society, 1991, pp. 6690-6692) (Esquema 3).

Esquema 3: Preparação de indóis através de anulação de alcino

[0152] Adicionalmente, os indóis podem ser preparados a partir de outros indóis adequadamente funcionalizados (halogenados) (por exemplo, através de acoplamento cruzado catalisado com paládio ou reações de substituição nucleofílica) como ilustrado no Esquema 4.

Esquema 4: Funcionalização catalisada com paládio de indóis halogenados

[0153] Os químicos versados na técnica observarão que outros métodos estão disponíveis para a síntese de ácidos indol-2-carboxílicos adequadamente funcionalizados e ésteres ativados dos mesmos.

[0154] Os moduladores de proteína de núcleo de HBV podem ser preparados de diversas formas. Os esquemas 5-12 ilustram as principais vias empregadas para sua preparação para o propósito dessa aplicação. Para o químico técnico no assunto, estará evidente que há outras metodologias que alcançarão a preparação desses intermediários e Exemplos.

Esquema 5: Síntese dos compostos da Fórmula I

[0155] O grupo de proteção de nitrogênio do composto 1 no Esquema 5 está desprotegido na etapa 1 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al, Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para gerar uma amina de estrutura geral 2. Um acoplamento de amida na etapa 2 com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557- 6602), por exemplo, com resultados de HATU em compostos da Fórmula I.

Esquema 6: Síntese dos compostos da Fórmula II

[0156] O composto 1 descrito no Esquema 6 (estabelecido como, mas sem limitação a um compostos aromático substituído com bromo) é acoplado na etapa 1 a um organometalato (estabelecido como, mas sem limitação a um di-hidrofi-iran-2-il tributil estanho) em catálise de paládio, por exemplo, com Pd(PPh3)4 para gerar compostos de estrutura geral 2. A redução da ligação dupla, por exemplo, com H2 e paládio em carbono gera compostos de estrutura geral 3. O grupo de proteção de nitrogênio de 3 no Esquema 6 está desprotegido na etapa 3 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al, Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para gerar uma amina de estrutura geral 4. Um acoplamento de amida na etapa 4 com métodos conhecidos na literatura (A, El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557- 6602), por exemplo, com resultados de HATU em compostos da Fórmula II.

Esquema 7: Síntese dos compostos da Fórmula III

[0157] O composto 1 descrito no Esquema 7 (estabelecido como, mas sem limitação a um composto aromático substituído com iodo) é acoplado na etapa 1 a, por exemplo, um éster de pinacol de ácido borônico em catálise de paládio, por exemplo, com Pd(PPh3)4 para gerar compostos de estrutura geral 2. O grupo de proteção de nitrogênio de composto de estrutura geral 2 no Esquema 7 está desprotegido na etapa 2 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al., Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para gerar uma amina de estrutura geral 3. Um acoplamento de amida na etapa 3 com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557-6602), por exemplo, com resultados de HATU em compostos da Fórmula III.

Esquema 8: Síntese dos compostos da Fórmula IV

[0158] O composto 1 descrito no Esquema 8 é acoplado na etapa 1 a uma amina com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557- 6602), por exemplo, com HATU para gerar um composto com a estrutura geral 2. O grupo de proteção de nitrogênio de composto 2 no Esquema 8 está desprotegido na etapa 2 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al., Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para gerar uma amina de estrutura geral 3. Um acoplamento de amida na etapa 3 com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557-6602), por exemplo,

com resultados de HATU em compostos da Fórmula IV.

Esquema 9: Síntese dos compostos da Fórmula V

[0159] O composto 1 descrito no Esquema 9 (estabelecido como, mas sem limitação a um composto aromático substituído com iodo) é acoplado na etapa 1 a, por exemplo, um éster de pinacol de ácido borônico de arila em catálise de paládio, por exemplo, a Pd(PPh3)4 para gerar um composto de estrutura geral 2. O grupo de proteção de nitrogênio de composto 2 no Esquema 9 está desprotegido na etapa 2 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al., Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para gerar uma amina de estrutura geral 3. Um acoplamento de amida na etapa 3 com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557-6602), por exemplo, com resultados de HATU em compostos da Fórmula V.

Esquema 10: Síntese dos compostos da Fórmula VI

[0160] O composto 1 descrito no Esquema 10 (estabelecido como, mas sem limitação a um composto aromático substituído por iodo) é acoplado na etapa 1 a, por exemplo, uma amina em catálise de cobre, por exemplo, a CuI para gerar os compostos da estrutura geral 2 (documento WO2016/113273). O grupo de proteção de nitrogênio do composto 2 no Esquema 10 está desprotegido na etapa 2 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al, Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para uma amina de estrutura geral 3. Um acoplamento de amida na etapa 3 com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557- 6602), por exemplo, com resultados de HATU em compostos da Fórmula VI.

Esquema 11: Síntese dos compostos da Fórmula VII

[0161] O composto 1 descrito no Esquema 11 (estabelecido como, mas sem limitação a um composto aromático substituído por iodo) é acoplado na etapa 1 a, por exemplo, uma amida em catálise de cobre, por exemplo, a CuI para gerar compostos de estrutura geral 2 (documento WO2018/011162). O grupo de proteção de nitrogênio de composto 2 no Esquema 11 está desprotegido na etapa 2 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al., Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para uma amina de estrutura geral 3. Um acoplamento de amida na etapa 3 com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557- 6602), por exemplo, com resultados de HATU em compostos da Fórmula VII.

Esquema 12: Síntese dos compostos da Fórmula VIII

[0162] O composto 1 descrito no Esquema 12 é acoplado na etapa 1 a uma amina para gerar compostos de estrutura geral 2 (documento WO2018/011162). O grupo de proteção de nitrogênio de composto 2 no Esquema 12 está desprotegido na etapa 2 (documento WO2018/011162, A. Isidro-Llobet et al., Chem. Rev., 2009, 109, 2455-2504), estabelecido como, mas sem limitação a Boc, por exemplo, com HCl para gerar uma amina de estrutura geral 3. Um acoplamento de amida na etapa 3 com métodos conhecidos na literatura (A. El-Faham, F. Albericio, Chem. Rev. 2011, 111, 6557-6602), por exemplo, com resultados de HATU em compostos da Fórmula VIII.

[0163] Os seguintes exemplos ilustram a preparação e as propriedades de alguns compostos específicos da invenção.

[0164] As seguintes abreviaturas são usadas: A - adenina de nucleobase de DNA ACN - acetonitrila Ar - argônio BODIPY-FL - ácido 4,4-difluoro-5,7-dimetil-4-bora- 3a,4a-diaza-s-indaceno-3-propiônico (corante fluorescente)

Boc - terc-butoxicarbonila BnOH - álcool benzílico n-BuLi - n-butil lítio t-BuLi - t-butil lítio C - citosina de nucleobase de DNA CC50 - metade de concentração citotóxica máxima CO2 - dióxido de carbono CuCN - cianeto de cobre (I) DCE - dicloroetano DCM - diclorometano Periodinano de Dess-Martin - 1,1,1-triacetoxi-1,1-di- hidro-1,2-benziodoxol-3(1H)-ona DIPEA - di-isopropiletilamina DIPE - éter di-isopropílico DMAP - 4-dimetilaminopiridina DMF - N,N-dimetilformamida DMP - Periodinano de Dess-Martin DMSO - sulfóxido de dimetila DNA - ácido desoxirribonucleico DPPA - difenilfosforil azida DTT - ditiotreitol EC50 - metade de concentração eficaz máxima EDCI - cloridrato de N-(3-dimetilaminopropil)-N'- etilcarbodi-imida Et2O - éter dietílico EtOAc - acetato de etila EtOH - etanol FL-- extremidade cinco prime apresentada com fluoresceína NEt3 - trietilamina

ELS - Espalhamento de Luz Evaporativa g - grama (ou gramas) G - guanina de nucleobase de DNA HBV - vírus de hepatite B HATU - ácido clorídrico HCl de hexafluorofosfato de 2- 1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil urânio HEPES - ácido 4-(2-hidroxietil)-1- piperazinaetanossulfônico HOAt - 1-hidroxi-7-azabenzotriazol HOBt - 1-hidroxibenzotriazol HPLC - cromatografia líquida de alta eficiência IC50 - metade da concentração inibitória máxima LC640- - modificação de extremidade 3 prime com corante fluorescente LightCycler® Red 640 LC/MS - cromatografia líquida/espectrometria de massa LiAlH4 - hidreto de alumínio e lítio LiOH - hidróxido de lítio MeOH - metanol MeCN - acetonitrila MgSO4 - sulfato de magnésio mg - miligrama (ou miligramas) min - minutos mol - mol mmol - milimol ml - mililitro (ou mililitros) MTBE – metil terc-butil éter N2 - nitrogênio Na2CO3 - carbonato de sódio NaHCO3 - hidrogenocarbonato de sódio Na2SO4 - sulfato de sódio

Ndel - enzima de restrição reconhece sítios CAΛTATG NEt3 - trietilamina NaH - hidreto de sódio NaOH - hidróxido de sódio NH3 - amônia NH4Cl - cloreto de amônio RMN - ressonância magnética nuclear PAGE - eletroforese em gel de poliacrilamida PCR - reação em cadeia de polimerase qPCR - PCR quantitativo Pd/C - paládio em carbono -PH - modificação de fosfato de extremidade 3 pTSA - ácido 4-tolueno-sulfônico Rt - tempo de retenção t.a. - temperatura ambiente sat. - solução aquosa saturada SDS - sulfato de sódio dodecila SI - índice de seletividade (= CC50/ EC50) STAB – triacetoxiboro-hidreto de sódio T - timina de nucleobase de DNA TBAF - fluoreto de tetrabutilamônio TFA - ácido trifluoroacético THF - tetra-hidrofurano TLC - cromatografia de camada fina Tris - tris(hidroximetil)-aminometano XhoI - enzima de restrição reconhece sítios CΛTCGAG Identificação de composto - RMN

[0165] Para diversos compostos, espectros de RMN foram gravados usando um espectrômetro Broker DPX400 equipado com uma cabeça de sonda de ressonância tripla inversa de 5 mm que opera a 400 MHz para próton e 100 MHz para carbono. Os solventes deuterados foram clorofórmio-d (clorofórmio deuterado, CDCl3) ou d6-DMSO (DMSO deuterado, d6- dimetilssulfóxido). Os deslocamentos químicos são relatados em partes por milhão (ppm) em relação a tetrametilssilano (TMS) que foi usado como padrão interno. Identificação de composto - HPLC/MS

[0166] Para diversos compostos, espectros de LC-MS foram gravados usando os seguintes métodos analíticos. Método A

[0167] Coluna - Waters Xselect CSH C18 de fase Reversa (50 x 2,1 mm, 3,5 mícrons) Fluxo - 0,8 ml/min, 25 graus Celsius Eluente A – 95 % de acetonitrila + 5 % de carbonato de amônio a 10 mM em água (pH 9) Eluente B – carbonato de amônio a 10 mM em água (pH 9) Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=3,5 min 98 % de A. t=6 min 98 % de A Método A2

[0168] Coluna - Waters Xselect CSH C18 de fase Reversa (50 x 2,1 mm, 3,5 mícrons) Fluxo - 0,8 ml/min, 25 graus Celsius Eluente A – 95 % de acetonitrila + 5 % de carbonato de amônio a 10 mM em água (pH 9) Eluente B – carbonato de amônio a 10 mM em água (pH 9) Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=4,5 min 98 % de A. t=6 min 98 % de A Método B

[0169] Coluna - Waters Xselect CSH C18 de fase Reversa (50 x 2,1 mm, 3,5 mícrons)

Fluxo - 0,8 ml/min, 35 graus Celsius Eluente A – 0,1 % de ácido fórmico em acetonitrila Eluente B – 0,1 % de ácido fórmico em água Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=3,5 min 98 % de A. t=6 min 98 % de A Método B2

[0170] Coluna - Waters Xselect CSH C18 de fase Reversa (50 x 2,1 mm, 3,5 mícrons) Fluxo - 0,8 ml/min, 40 graus Celsius Eluente A – 0,1 % de ácido fórmico em acetonitrila Eluente B – 0,1 % de ácido fórmico em água Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=4,5 min 98 % de A. t=6 min 98 % de A Método C

[0171] Coluna - Waters Xselect CSH C18 de fase Reversa (50 x 2,1 mm, 3,5 mícrons) Fluxo - 1 ml/min, 35 graus Celsius Eluente A – 0,1 % de ácido fórmico em acetonitrila Eluente B – 0,1 % de ácido fórmico em água Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=1,6 min 98 % de A. t=3 min 98 % de A Método D

[0172] Coluna - Phenomenex Gemini NX C18 (50 x 2,0 mm, 3,0 mícrons) Fluxo - 0,8 ml/min, 35 graus Celsius Eluente A - 95 % acetonitrila + 5 % de bicarbonato de amônio a 10 mM em água Eluente B - bicarbonato de amônio a 10 mM em água pH=9,0 Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=3,5 min 98 % de

A. t=6 min 98 % de A Método E

[0173] Coluna - Phenomenex Gemini NX C18 (50 x 2,0 mm, 3,0 mícrons) Fluxo - 0,8 ml/min, 25 graus Celsius Eluente A - 95 % acetonitrila + 5 % de bicarbonato de amônio a 10 mM em água Eluente B - bicarbonato de amônio a 10 mM em água (pH 9) Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=3,5 min 30 % de A. t=7 min 98 % de A, t=10 min 98 % de A Método F

[0174] Coluna - Waters XSelect HSS C18 (150 x 4,6 mm, 3,5 mícrons) Fluxo – 1,0 ml/min, 25 graus Celsius Eluente A – 0,1 % de TFA em acetonitrila Eluente B – 0,1 % de TFA em água Gradiente linear t=0 min 2 % de A, t=1 min 2 % de A, t=15 min 60 % de A, t=20 min 60 % de A Método G

[0175] Coluna - Zorbax SB-C18 1,8 µm 4,6 x 15 mm cartucho de Resolução Rápida (PN 821975-932) Fluxo - 3 ml/min Eluente A – 0,1 % de ácido fórmico em acetonitrila Eluente B – 0,1 % de ácido fórmico em água Gradiente linear t=0 min 0 % de A, t=1,8 min 100 % de

A Método H

[0176] Coluna - Waters Xselect CSH C18 (50 x 2,1 mm, 2,5 mícrons)

Fluxo - 0,6 ml/min Eluente A – 0,1 % de ácido fórmico em acetonitrila Eluente B – 0,1 % de ácido fórmico em água Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=2,0 min 98 % de A, t=2,7 min 98 % de A Método J

[0177] Coluna - Waters Xselect CSH C18 de fase Reversa (50 x 2,1 mm, 2,5 mícrons) Fluxo -0,6 ml/min Eluente A - 100 % de acetonitrila Eluente B – bicarbonato de amônio a 10 mM em água (pH 7,9) Gradiente linear t=0 min 5 % de A, t=2,0 min 98 % de A, t=2,7 min 98 % de A Preparação de ácido 4-cloro-7-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0178] Etapa A: Uma mistura de composto 1, HCl (17,0 g, 86,2 mmol), acetato de sódio (7,10 g, 86,6 mmol) e piruvato de etila (10,0 g, 86,1 mmol) em etanol (100 ml) foi submetida a refluxo por 1 h, resfriada até a t.a. e diluída com água (100 ml). O sólido precipitado foi coletado por filtragem e seco para obter 20,0 g (77,3 mmol, 90 %) de composto 2 como uma mistura de cis- e trans-isômeros.

[0179] Etapa B: Uma mistura de composto 2 (20,0 g, 77,3 mmol), obtida na etapa anterior, e BF3·Et2O (50,0 g, 352 mmol) em ácido acético (125 ml) foi submetida a refluxo por 18 h e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com água (100 ml) e extraído com MTBE (2x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4 e evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para gerar 3,00 g (12,4 mmol, 16 %) de composto 3.

[0180] Etapa C: Uma mistura de composto 3 (3,00 g, 12,4 mmol) e NaOH (0,500 g, 12,5 mmol) em etanol (30 ml) foi submetida a refluxo por 30 min e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com água (30 ml) e o material insolúvel foi filtrado. O filtrado foi acidificado com ácido clorídrico concentrado (5 ml). O sólido precipitado foi coletado por filtragem, lavado com água (3 ml), e seco para obter 2,41 g (11,3 mmol, 91 %) de ácido 4-cloro-7-fluoro-1H-indol-2-carboxílico.

[0181] Rt (Método G) 1,24 min, m/z 212 [M-H]- Preparação de ácido 7-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carboxílico

[0182] Etapa D: A uma solução de metóxido de sódio (21.6 g, 400 mmol) em metanol (300 ml) a -10 °C adicionou- se por gotejamento uma solução de composto 4 (26,4 g,

183 mmol) e compostos (59,0 g, 457 mmol) em metanol (100 ml). A massa de reação foi agitada por 3 h, mantendo- se a temperatura abaixo de 5 °C e, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min, filtrada, e lavada com água para gerar 35,0 g (156 mmol, 72 %) de composto 6 como um sólido branco.

[0183] Etapa E: Uma solução, de composto 6, obtida na etapa anterior, (35,0 g, 156 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de mistura de acetato de hexano- etila (60:40) para gerar 21,0 g (103 mmol, 60 %) de composto 7.

[0184] Etapa F: A uma solução de composto 7 (21,0 g, 101 mmol) em etanol (200 ml) adicionou-se solução de hidróxido de sódio aquoso a 2 N (47 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. O solvente foi preparado e o resíduo foi acidificado com ácido clorídrico aquoso ao pH 5-6. O precipitado resultante foi filtrado, lavado com água, e seco para obter 18,0 g (93,2 mmol, 92 %) de ácido 7-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carboxílico.

[0185] Rt (Método G) 1,12 min, m/z 192 [M-H]- Preparação de ácido 6,7-difluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0186] Etapa G: Uma mistura de composto 8 (5,00 g, 34,7 mmol), ácido acético (1 ml) e piruvato de etila (5,00 g, 43,1 mmol) em etanol (20 ml) foi submetida a refluxo por 1 h, resfriada até a t.a., e diluída com água (20 ml). O sólido precipitado foi coletado por filtragem e seco para obter 5,50 g (22,7 mmol, 66 %) de composto 9 como uma mistura de cis- e trans-isômeros.

[0187] Etapa H: Uma mistura de composto 9 (5,50 g, 22,7 mmol), obtida na etapa anterior, e BF3·Et2O (10,0 g, 70,5 mmol) em ácido acético (25 ml) foi submetida a refluxo por 18 h e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com água (30 ml) e extraído com MTBE (2× 30 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4 e evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para gerar 0,460 g (2,04 mmol, 9 %) de composto 10.

[0188] Etapa I: Uma mistura de composto 10 (0,450 g, 2,00 mmol) e NaOH (0,100 g, 2,50 mmol) em etanol (10 ml) foi submetida a refluxo por 30 min e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi misturado com água (10 ml) e o material insolúvel foi filtrado. O filtrado foi acidificado com ácido clorídrico concentrado (1 ml). O sólido precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3 ml) e seco para obter 0,38 g (1,93 mmol, 95 %) de ácido 6,7- difluoro-1H-indol-2-carboxílico.

[0189] Rt (Método G) 1,10 min, m/z 196 [M-H]- Preparação de ácido 4-ciano-1H-indol-2-carboxílico

[0190] Etapa J: A uma solução agitada de composto 11 (5,00 g, 19,7 mmol) em DMF (50 ml) foi adicionado CuCN (3,00 g, 33,5 mmol). A mistura foi agitada por 4 h a 150 °C. A mistura foi, então, resfriada até a t.a., e água (100 ml) adicionada. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (4×100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (50 ml) e salmoura (50 ml), secos em Na2SO4, e evaporados sob pressão reduzida para gerar 2,50 g (12,5 mmol, 63 %) de composto 12, puro o suficiente para a próxima etapa.

[0191] Etapa K: A uma solução de composto 12 (2,50 g, 12,5 mmol) em etanol (30 ml) foi adicionado LiOHH2O (0,600 g, 13,0 mmol). A mistura foi submetida a refluxo por 10 h. O solvente foi preparado sob pressão reduzida e o resíduo diluído com água (50 ml). A camada aquosa foi acidificada ao pH 6 com ácido clorídrico aq. a 10 % e o sólido precipitado foi coletado por filtração. O resíduo foi lavado com água e seco sob vácuo para gerar 1,20 g (6,45 mmol, 52 %) de ácido 4-ciano-1H-indol-2-carboxílico como um sólido branco.

[0192] Rt (Método G) 1,00 min, m/z 197 [M+H]+

Preparação de ácido 4-ciano-7-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0193] Etapa L: A uma solução agitada de composto 13 (5,00 g, 18,4 mmol) em DMF (50 ml) foi adicionado CuCN (2,80 g, 31,2 mmol). A mistura foi agitada por 4 h a 150 °C. A mistura foi, então, resfriada até a t.a., e água (100 ml) adicionada. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (4 x 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (50 ml) e salmoura (50 ml), secos em Na2SO4, e evaporados sob pressão reduzida para gerar 1,50 g (6,87 mmol, 37 %) de composto 14, puro o suficiente para a próxima etapa.

[0194] Etapa M: A uma solução de composto 14 (1,50 g, 6,87 mmol) em etanol (20 ml) foi adicionado LiOH·H2O (0,400 g, 9,53 mmol). A mistura foi submetida a refluxo por 10 h. O solvente foi preparado sob pressão reduzida e o resíduo diluído com água (40 ml). A camada aquosa foi acidificada ao pH 6,0 com ácido clorídrico aq. a 10 % e o precipitado foi coletado por filtração. O resíduo foi lavado com água e seco sob vácuo para gerar 0,400 g (1,95 mmol, 28 %) de ácido 4-ciano-7-fluoro-1H-indol-2-carboxílico como um sólido branco.

[0195] Rt (Método G) 1,02 min, m/z 203 [M-H]- Preparação de ácido 4-ciano-5-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0196] Etapa N: A uma solução de composto 15 (5,00 g, 19,4 mmol) em DMF (50 ml) foram adicionados NaHCO3 (1,59 g, 18,9 mmol) e iodometano(3 ml). A mistura resultante foi agitada durante a noite à t.a., então, diluída com água (50 ml) e extraída com éter dietílico (3x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4 e evaporados sob pressão reduzida para obter 4,90 g (18,0 mmol, 90 %) de composto 16 como sólido branco.

[0197] Etapa O: A uma solução agitada de composto 16 (4,80 g, 17,6 mmol) em DMF (50 ml) foi adicionado CuCN (2,70 g, 30,1 mmol). A mistura foi agitada por 4 h a 150 °C. A mistura foi, então, resfriada até a t.a., água (100 ml) foi adicionada. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (4 x 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (50 ml) e salmoura (50 ml), secos em Na2SO4, e evaporados sob pressão reduzida para gerar 1,40 g (6,42 mmol, 36 %) de composto 17, puro o suficiente para a próxima etapa.

[0198] Etapa P: A uma solução de composto 17 (1,40 g, 6,42 mmol) em etanol (20 ml) foi adicionado LiOH·H2O (0,350 g, 8,34 mmol). A mistura foi submetida a refluxo por 10 h. O solvente foi preparado sob pressão reduzida e o resíduo diluído com água (30 ml). A camada aquosa foi acidificada ao pH 6,0 com ácido clorídrico aq. a 10 % e o precipitado coletado por filtração. O resíduo foi lavado com água e seco sob vácuo para gerar 0,500 g (2,45 mmol, 38 %) de ácido 4-ciano-5-fluoro-1H-indol-2-carboxílico como um sólido branco.

[0199] Rt (Método G) 1,10 min, m/z 203 [M-H]- Preparação de ácido 4,5,6-trifluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0200] Etapa Q: A uma solução de metóxido de sódio (23,0 g, 426 mmol) em metanol (200 ml) a -10 °C adicionou- se por gotejamento uma solução de composto 18 (15,0 g, 93,7 mmol) e composto 5 (26,0 g, 201 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h, mantendo-se a temperatura abaixo de 5 °C e, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min, e o precipitado coletado por filtração. O sólido foi lavado com água e seco para gerar 12,0 g (46,7 mmol, 72 %) de composto 19 como um sólido branco.

[0201] Etapa R: Uma solução de composto 19, obtida na etapa anterior, (12,0 g, 46,7 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de mistura de acetato de hexano- etila (60:40) para gerar 7,00 g (30,5 mmol, 65 %) de composto 20.

[0202] Etapa S: A uma solução de composto 20 (7,00 g, 30,5 mmol) em etanol (50 ml) adicionou-se solução de hidróxido de sódio aquoso a 2 N (18 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. O solvente foi preparado e o resíduo foi acidificado ao pH 5-6 com ácido clorídrico aquoso. O precipitado resultante foi coletado por filtração, lavado com água, e seco para obter 5,00 g (23,2 mmol, 76 %) de ácido 4,5,6-trifluoro-1H-indol-2- carboxílico.

[0203] 1H RMN (400 MHz, d6-dmso) 7,17 (1H, s), 7,22 (1H, dd), 12,3 (1H, s l), 13,3 (1H, s l) Preparação de ácido 4,6,7-trifluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0204] Etapa T: A uma solução de metóxido de sódio (23,0 g, 426 mmol) em metanol (200 ml) a -10 °C adicionou- se por gotejamento uma solução de composto 21 (15,0 g, 90,3 mmol) e composto 5 (26,0 g, 201 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h, mantendo-se a temperatura abaixo de 5 °C e, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por

10 min. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e seco para gerar 10,0 g (38,0 mmol, 42 %) de composto 22 como um sólido branco.

[0205] Etapa U: Uma solução de composto 22, obtida na etapa anterior, (10,0 g, 38,0 mmol) em xileno (200 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de mistura de acetato de hexano- etila (60:40) para gerar 6,00 g (26,2 mmol, 69 %) de composto 23.

[0206] Etapa V: A uma solução de composto 23 (7,00 g, 30,5 mmol) em etanol (40 ml) adicionou-se solução de hidróxido de sódio aquoso a 2 N (16 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. O solvente foi preparado e o resíduo foi acidificado ao pH 5-6 com ácido clorídrico aquoso. O precipitado resultante foi coletado por filtração, lavado com água, e seco para obter 4,10 g (19,1 mmol, 62 %) de ácido 4,6,7-trifluoro-1H-indol-2- carboxílico.

[0207] Rt (Método G) 1,16 min, m/z 214 [M-H]- Preparação de ácido 4-ciano-6-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0208] Etapa W: A uma solução de metóxido de sódio

(65,0 g, 1203 mmol) em metanol (500 ml) a -10 °C adicionou- se por gotejamento uma solução de composto 24 (60,0 g, 296 mmol) e composto 5 (85,0 g, 658 mmol) em metanol (200 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h, mantendo-se a temperatura abaixo de 5 °C e, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e seco para gerar 45,0 g (143 mmol, 48 %) de composto 25.

[0209] Etapa X: Uma solução de composto 25, obtida na etapa anterior, (35,0 g, 111 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de mistura de acetato de hexano- etila (60:40) para gerar 11,0 g (38,4 mmol, 35 %) de composto 26.

[0210] Etapa Y: A uma solução agitada de composto 26 (11,0 g, 38,4 mmol) em DMF (20 ml) foi adicionado CuCN (6,60 g, 73,7 mmol). A mistura foi agitada por 4 h a 150 °C. A mistura foi, então, resfriada até a t.a., e água (70 ml) adicionada. A mistura foi extraída com acetato de etila (4x 50 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (50 ml) e salmoura (50 ml), secos em Na2SO4, e evaporados sob pressão reduzida para gerar 2,40 g (10,3 mmol, 27 %) de composto 27, puro o suficiente para a próxima etapa.

[0211] Etapa Z: A uma solução de composto 27 (2,40 g, 6,42 mmol) em etanol (30 ml) foi adicionado LiOH·H2O (0,600 g, 14,3 mmol). A mistura foi submetida a refluxo por 10 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo diluído com água (50 ml). A camada aquosa foi acidificada ao pH 6 com ácido clorídrico aq. a 10 % e o precipitado foi coletado por filtração. O sólido foi lavado com água e seco a vácuo para produzir 1,20 g (5,88 mmol, 57 %) de ácido 4- ciano-6-fluoro-1H-indol-2-carboxílico como um sólido branco.

[0212] Rt (Método G) 1,06 min, m/z 203 [M-H]- Preparação de ácido 4-etil-1H-indol-2-carboxílico

[0213] Etapa AA: Uma solução de composto 28 (70,0 g, 466 mmol) em THF seco (500 ml) foi tratada com solução de BH3 a 10 M em THF (53 ml, 53,0 mmol de BH3) a 0 °C. A massa de reação foi agitada à t.a. por 24 h antes de se adicionar lentamente metanol (150 ml) à mesma. A mistura resultante foi agitada por 45 min, e evaporada sob pressão reduzida para produzir 55,0 g (404 mmol, 87 %) de composto 29, puro o suficiente para a próxima etapa.

[0214] Etapa AB: A uma solução resfriada (0 °C) de composto 29 (55,0 g, 404 mmol) em CH2Cl2 (400 ml) foi adicionado periodinano de Dess-Martin (177 g, 417 mmol) em porções. Após a agitação por 1 h à t.a., a mistura de reação foi extinta com Na2S2O3 aquoso saturado (300 ml) e

NaHCO3 aquoso saturado (500 ml). A mistura foi extraída com CH2Cl2 (3x 300 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água e salmoura, secos em Na2SO4 e concentrados para produzir 51,0 g de composto bruto 30 como um sólido amarelo.

[0215] Etapa AC: A uma solução de metóxido de sódio (107 g, 1981 mmol) em metanol (600 ml) a -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de composto 30 obtida na etapa anterior (51,0 g) e de composto 5 (126 g, 976 mmol) em metanol (300 ml). A mistura de reação foi agitada por 4 h mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min, e o precipitado coletado por filtração. O sólido foi lavado com água e seco para produzir 35,0 g (151 mmol, 37 % em 2 etapas) de composto 31.

[0216] Etapa AD: Uma solução de composto 31 obtida na etapa anterior (35,0 g, 151 mmol) em xileno (500 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de mistura de acetato de hexano- etila (60:40) para gerar 21,0 g (103 mmol, 68 %) de composto 32.

[0217] Etapa AE: A uma solução de composto 32 (21,0 g, 103 mmol) em etanol (200 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio aquosa a 2 N (47 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo acidificado em pH 5-6 com ácido clorídrico aquoso. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água, e seco para obter 19 g (100 mmol, 97 %) de ácido 4-etil-1H-indol-2-carboxílico.

[0218] Rt (Método G) 1,20 min, m/z 188 [M-H]-

[0219] 1H RMN (400 MHz, d6-dmso) δ 1,25 (t, 3H), 2,88 (q, 2H), 6,86 (1H, d), 7,08-7,20 (2H, m), 7,26 (1H, d), 11,7 (1H, s l), 12,9 (1H, s l) Preparação de ácido 4-ciclopropil-1H-indol-2-carboxílico

[0220] Etapa AF: A uma suspensão desgaseificada de composto 33 (2,00 g, 7,80 mmol), ácido ciclopropilborônico (0,754 g, 8,78 mmol), K3PO4 (5,02 g, 23,6 mmol), triciclo- hexil fosfina (0,189 g, 0,675 mmol), e água (2,0 ml) em tolueno (60,0 ml) foi adicionado acetato de paládio (II) (0,076 g, 0,340 mmol). A mistura de reação foi agitada a 100 °C por 4 h. O progresso de reação foi monitorado ao diluir uma alíquota da mistura de reação com água e extrair com acetato de etila. A camada orgânica foi espalhada sobre uma placa de TLC de gel de sílica analítica e visualizada usando luz UV de 254 nm. A reação progrediu para conclusão com a formação de um ponto polar. Os valores de Rf do material inicial e do produto foram respectivamente 0,3 e 0,2. A mistura de reação foi deixada em resfriamento até a t.a. e filtrada através de um bloco de celite. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por coluna flash usando gel de sílica de malha de 230-400 e eluído com acetato de etila a 10 % em éter de petróleo para produzir 1,10 g (5,11 mmol, 63 %) de composto 34 como um líquido marrom. Sistema de TLC: acetato de etila a 5 % em éter de petróleo.

[0221] Etapa AG: Uma mistura de composto 34 (1,10 g, 5,11 mmol) em etanol (40 ml) e hidróxido de sódio aquosa a 2 N (15 ml) foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo acidificado em pH 5-6 com ácido clorídrico aquoso. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água, e seco para produzir 1,01 g (5,02 mmol, 92 %) de ácido 4-ciclopropil- 1H-indol-2-carboxílico.

[0222] Rt (Método G) 1,17 min, m/z 200 [M-H]- Preparação de ácido 4-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0223] Etapa AH: A uma solução de metóxido de sódio (39,9 g, 738 mmol) em metanol (300 ml) a -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de composto 36 (28,8 g, 182 mmol) e azidoacetato de metila (52,1 g, 404 mmol) em metanol (150 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e seco para gerar 20,0 g (78,2 mmol, 43 %) de composto 37.

[0224] Etapa Al: Uma solução de composto 37 (19,4 g, 76,0 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de hexano-acetato de etila (50:50) para gerar 9,00 g (39,5 mmol, 52 %) de composto 38.

[0225] Etapa AJ: A uma solução de composto 38 (8,98 g, 39,4 mmol) em etanol (100 ml) adicionou-se solução de hidróxido de sódio aquoso a 2 N (18 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo acidificado em pH 5-6 com ácido clorídrico aquoso. O precipitado resultante foi coletado por filtração, lavado com água, e seco para obter 7,75 g (36,3 mmol, 92 %) de ácido 4-cloro-5-fluoro-1H- indol-2-carboxílico.

[0226] Rt (Método G) 1,15 min, m/z 212 [M-H]-

[0227] 1H RMN (400 MHz, d6-dmso) 7,08 (1H, s), 7,28 (1H, dd) 7,42 (1H, dd), 12,2 (1H, s l), 13,2 (1H, s l) Preparação de ácido 5-fluoro-4-(1-hidroxietil)-1H-indol-2- carboxílico

[0228] Etapa AK: A uma solução de metóxido de sódio (50,0 g, 926 mmol) em metanol (300 ml) a -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de composto 39 (45,0 g, 222 mmol) e azidoacetato de metila (59,0 g, 457 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e seco para gerar 35,0 g (133 mmol, 60 %) de composto 40 como um sólido branco.

[0229] Etapa AL: Uma solução de composto 40 obtida na etapa anterior (35,0 g, 133 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de hexano-acetato de etila (60:40) para gerar 21,0 g (77,2 mmol, 58 %) de composto 41.

[0230] Etapa AM: A uma solução desgaseificada de composto 41 (4,00 g, 14,7 mmol) e tributil(1- etoxivinil)estanano (5,50 g, 15,2 mmol) em tolueno (50 ml) sob nitrogênio foi adicionado dicloreto de bis(trifenilfosfina) paládio(II) (1,16 g, 1,65 mmol). A mistura de reação foi agitada a 60 °C por 20 h. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em gel de sílica para produzir 2,50 g (9,50 mmol, 65 %) de composto 42 como um sólido amarelo pálido.

[0231] Etapa AN: A uma solução de composto 42 (2,40 g, 9,12 mmol) em 1,4-dioxano (30 ml) foi adiciona ácido clorídrico a 2 M (15 ml). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A mistura foi concentrada a vácuo e o resíduo dividido entre acetato de etila e água. O extrato orgânico foi lavado com água e salmoura, seco em sulfato de sódio, filtrado e evaporado. O resíduo foi triturado com éter a 5 % em iso-hexano e seco para produzir 1,80 g (7,65 mmol, 84 %) de composto 43 como um sólido branco.

[0232] Etapa AO: Uma suspensão de composto 43 (1,70 g, 7,23 mmol) e NaBH4 (2,50 g, 66,1 mmol) em etanol (13 ml) foi submetida a refluxo por 2 h, então, resfriada à temperatura ambiente, e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo dissolvido em acetato de etila. A solução foi lavada com ácido clorídrico a 1 N e salmoura, seca em Na2SO4, e evaporada sob pressão reduzida para gerar 1,60 g (6,74 mmol, 93 %) de composto 44 as um óleo incolor.

[0233] Etapa AP: A uma solução de composto 44 (1,50 g, 6,32 mmol) em metanol (40 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (10 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo acidificado em pH 5-6 com ácido clorídrico a 10 %. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3x15 ml), e seco para obter 1,30 g (5,82 mmol, 92 %) de ácido 5-fluoro-4-(1-hidroxietil)-1H-indol-2-carboxílico.

[0234] Rt (Método G) 1,00 min, m/z 222 [M-H]- Preparação de ácido 4-etil-5-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0235] Etapa AQ: A uma solução aquecida (90 °C) de composto 41 (4,00 g, 14,7 mmol) em DMF anidra sob nitrogênio (10 ml) foram adicionados tri-n- butil(vinil)estanho (3,60 g, 11,4 mmol) e Pd(PPh3)2Cl2 (0,301 g, 0,757 mmol). A mistura resultante foi agitada a 90 °C por 1 h. A mistura foi, então, resfriada à temperatura ambiente e purificada por cromatografia em coluna de gel de sílica (acetato de etila a 60-80 % em hexano) para gerar 2,20 g (10,0 mmol, 68 %) de composto 45 como sólido amarelo.

[0236] Etapa AR: Uma mistura de composto 45 (1,50 g, 6,84 mmol) e Pd/C (0,300 g, 10 % em peso) em metanol (20 ml) foi agitada em uma atmosfera de hidrogênio à temperatura ambiente por 16 h. A mistura foi filtrada, então, concentrada sob pressão reduzida para gerar 1,45 g (6,55 mmol, 96 %) de composto 46.

[0237] Etapa AS: A uma solução de composto 46 (1,40 g, 6,33 mmol) em metanol (40 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (10 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada a vácuo, então, o resíduo foi acidificada em pH 5-6 com ácido clorídrico a 10 %. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3×15 ml), e seco para obter 1,20 g (5,79 mmol, 91 %) de composto ácido 4-etil-5-fluoro-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0238] Rt (Método G) 1,33 min, m/z 206 [M-H]- Preparação de ácido 4-etil-6-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0239] Etapa AT: A uma solução de metóxido de sódio (50,0 g, 926 mmol) em metanol (300 ml) a -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de composto 47 (45,0 g, 202 mmol) e azidoacetato de metila (59,0 g, 457 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e seco para gerar 38,5 g (128 mmol, 63 %) de composto 48 como um sólido branco.

[0240] Etapa AU: Uma solução de composto 48 obtida na etapa anterior (38,5 g, 128 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de hexano-acetato de etila (60:40) para gerar 18,0 g (67,3 mmol, 53 %) de composto 49.

[0241] Etapa AV: A uma solução aquecida (90 °C) de composto 49 (4,00 g, 14,7 mmol) em DMF anidra sob nitrogênio (10 ml) foram adicionados tri-n- butil(vinil)estanho (3,60 g, 11,4 mmol) e Pd(PPh3)2Cl2 (0,301 g, 0,757 mmol). A mistura resultante foi agitada a 90 °C por 1 h. A mistura foi, então, resfriada à temperatura ambiente e purificada por cromatografia em coluna de gel de sílica (acetato de etila a 60-80 % em hexano) para gerar 2,00 g (9,12 mmol, 62 %) de composto 50 como sólido amarelo.

[0242] Etapa AW: Uma mistura de composto 50 (1,50 g, 6,84 mmol) e Pd/C (0,300 g, 10 % em peso) em metanol (20 ml) foi agitada em uma atmosfera de hidrogênio à temperatura ambiente por 16 h. A mistura foi filtrada e concentrada para gerar 1,40 g (6,33 mmol, 93 %) de composto

51.

[0243] Etapa AX: A uma solução de composto 51 (1,10 g, 4,97 mmol) em metanol (40 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (10 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, então, acidificada em pH 5-6 com ácido clorídrico a 10 %. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3x15 ml), e seco para obter 0,900 g (4,34 mmol, 87 %) de composto ácido 4-etil-6-fluoro-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0244] Rt (Método G) 1,29 min, m/z 206 [M-H]- Preparação de ácido 6-fluoro-4-(1-hidroxietil)-1H-indol-2- carboxílico

[0245] Etapa AY: A uma solução desgaseificada de composto 49 (4,00 g, 14,7 mmol) e tributil(1- etoxivinil)estanano (5,50 g, 15,2 mmol) em tolueno (50 ml) sob nitrogênio foi adicionado dicloreto de bis(trifenilfosfina) paládio (II) (1,16 g, 1,65 mmol). A mistura de reação foi agitada a 60 °C por 20 h. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em gel de sílica para gerar 2,10 g (7,98 mmol, 54 %) de composto 52 como um sólido amarelo pálido.

[0246] Etapa AZ: A uma solução de composto 52 (2,10 g, 7,98 mmol) em 1,4-dioxano (30 ml) foi adiciona ácido clorídrico a 2 M (15 ml). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente para 30 min. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e resíduo dividido entre acetato de etila e água. O extrato orgânico foi lavado com água e salmoura, seco em sulfato de sódio, filtrada e concentrado. O resíduo foi triturado com éter a 5 % em iso- hexano e seco para produzir 1,70 g (7,23 mmol, 91 %) de composto 53 como um sólido branco.

[0247] Etapa BA: Uma suspensão de composto 53 (1,70 g,

7,23 mmol) e NaBH4 (2,50 g, 66,1 mmol) em etanol (13 ml) foi submetida a refluxo por 2 h, resfriada à temperatura ambiente, e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila. A solução foi lavada com ácido clorídrico a 1 N e salmoura, seca em Na2SO4, e concentrado sob pressão reduzida para gerar 1,60 g (6,74 mmol, 93 %) de composto 54 como um óleo incolor.

[0248] Etapa BB: A uma solução de composto 54 (1,40 g, 5,90 mmol) em metanol (40 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (10 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada e o resíduo acidificada em pH 5-6 com ácido clorídrico a 10 %. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3x15 ml), e seco para obter 1,10 g (4,93 mmol, 48 %) de composto ácido 6-fluoro-4-(1- hidroxietil)-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0249] Rt (Método G) 1,00 min, m/z 222 [M-H]- Preparação de ácido 4-etil-7-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0250] Etapa BC: A uma solução de metóxido de sódio (50,0 g, 926 mmol) em metanol (300 ml) -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de composto 55 (45,0 g, 222 mmol) e azidoacetato de metila (59,0 g, 457 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e seco para gerar 33,0 g (110 mmol, 50 %) de composto 56 como um sólido branco.

[0251] Etapa BD: Uma solução de composto 56 obtida na etapa anterior (33,0 g, 110 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de hexano-acetato de etila (60:40) para gerar 21,5 g (79,0 mmol, 72 %) de composto 57.

[0252] Etapa BE: A uma solução aquecida (90 °C) de composto 57 (4,00 g, 14,7 mmol) em DMF anidra sob nitrogênio (10 ml) foram adicionados tri-n- butil(vinil)estanho (3,60 g, 11,4 mmol) e Pd(PPh3)2Cl2 (0,301 g, 0,757 mmol). A mistura resultante foi agitada a 90 °C por 1 h. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e purificada por cromatografia em coluna de gel de sílica (EtOAc a 60-80 % em hexano). As frações de produto combinado do produto foram concentradas, lavadas com água (3 x 100 ml), secas em Na2SO4, e concentradas para gerar 1,80 g (8,21 mmol, 56 %) de composto 58 como sólido amarelo.

[0253] Etapa BF: Uma mistura de composto 58 (1,50 g, 6,84 mmol) e Pd/C (0,300 g, 10 % em peso) em metanol (20 ml) foi agitada sob atmosfera de hidrogênio à temperatura ambiente por 16 h. A mistura foi filtrada e concentrada para gerar 1,25 g (5,65 mmol, 83 %) de composto 59.

[0254] Etapa BG: A uma solução de composto 59 (1,40 g,

6,33 mmol) em metanol (40 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (10 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo acidificado em pH 5-6 com ácido clorídrico a 10 %. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3x15 ml), e seco para obter 1,25 g (6,03 mmol, 95 %) de composto ácido 4-etil-7-fiuoro-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0255] Rt (Método G) 1,27 min, m/z 206 [M-H]- Preparação de ácido 7-fluoro-4-(1-hidroxietil)-1H-indol-2- carboxílico

[0256] Etapa BH: A uma solução desgaseificada de composto 57 (4,00 g, 14,7 mmol) e tributil(1- etoxivinil)estanano (5,50 g, 15,2 mmol) em tolueno (50 ml) sob nitrogênio foi adicionado dicloreto de bis(trifenilfosfina) paládio(II) (1,16 g, 1,65 mmol). A mistura de reação foi agitada a 60 °C por 20 h. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo purificado por cromatografia em gel de sílica para produzir 2,70 g (10,3 mmol, 70 %) de composto 60 como um sólido amarelo pálido.

[0257] Etapa BI: A uma solução de composto 60 (2,40 g,

9,12 mmol) em 1,4-dioxano (30 ml) foi adiciona ácido clorídrico a 2 M (15 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 min. A maior parte do solvente foi evaporada e o resíduo foi dividido entre acetato de etila e água. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água e salmoura, secos em sulfato de sódio, filtrados e evaporados. O resíduo foi triturado com éter a 5 % em iso-hexano e seco para produzir 1,90 g (8,08 mmol, 86 %) de composto 61 como um sólido branco.

[0258] Etapa BJ: Uma suspensão de composto 61 (1,70 g, 7,23 mmol) e NaBH4 (2,50 g, 66,1 mmol) em etanol (13 ml) foi submetida a refluxo por 2 h, resfriada à temperatura ambiente, e filtrada. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila. A solução foi lavada com ácido clorídrico a 1 N e salmoura, seca em Na2SO4, e evaporada sob pressão reduzida para gerar 1,50 g (6,32 mmol, 87 %) de composto 62 as um óleo incolor.

[0259] Etapa BK: A uma solução de composto 62 (1,50 g, 6,32 mmol) em metanol (40 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (10 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo acidificado em pH 5-6 com ácido clorídrico a 10 %. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3x15 ml), e seco para obter 1,35 g (6,05 mmol, 96 %) de composto ácido 7-fluoro-4-(1-hidroxietil)-1H-indol-2- carboxílico alvo.

[0260] Rt (Método G) 0,90 min, m/z 222 [M-H]- Preparação de ácido 4-(hidroximetil)-1H-indol-2-carboxílico

[0261] Etapa BL: A uma solução de composto 33 (10,0 g, 39,4 mmol) em uma mistura de dioxano (200 ml) e água (50 ml) foram adicionados viniltrifluoroborato de potássio (11,0 g, 82,1 mmol), trietilamina (30 ml, 248 mmol) e Pd(dppf)Cl2 (1,0 g, 1,37 mmol). A mistura foi agitada a 80 °C por 48 h. A mistura foi concentrada a vácuo, e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila. A solução foi lavada com água e concentrada sob pressão reduzida. O material obtido foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para gerar 2,50 g (12,4 mmol, 38 %) de composto 63.

[0262] Etapa BM: A uma mistura de composto 63 (2,50 g, 12,4 mmol), acetona (200 ml) e água (40 ml) foram adicionados OsO4 (0,100 g, 0,393 mmol) e NaIO4 (13,4 g, 62,6 mmol). A reação foi agitada por 10 h à temperatura ambiente. A acetona foi removida por destilação e a solução aquosa restante extraída com diclorometano. A camada orgânica foi lavada com solução de NaHCO3 saturada (2 x 50 ml) e salmoura (2 x 50 ml), seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida para obter 1,50 g (7,40 mmol, 60 %) de composto 64.

[0263] Etapa BN: A uma solução resfriada (0 °C) de composto 64 (1,50 g, 7,38 mmol) em mistura de THF/metanol

(100 ml) foi adicionado NaBH4 (0,491 g, 13,0 mmol). A mistura de reação foi agitada por 12 h à temperatura ambiente. Então, a mistura foi resfriada a 0 °C, tratada com ácido clorídrico a 2 N (40 ml), e concentrada. O resíduo foi extraído com acetato de etila. O extrato orgânico foi lavado com água, seco em Na2SO4, e concentrado sob pressão reduzida para obter 1,00 g (4,87 mmol, 65 %) de composto 65, puro o suficiente para a próxima etapa.

[0264] Etapa BO: A uma solução de composto 65 obtida na etapa anterior (1,00 g, 4,87 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado LiOH aquoso a 1 N (9 ml). A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente, então, concentrada e diluída com NaHSO4 aquoso a 1 N (9 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em Na2SO4, e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter 0,250 g (1,30 mmol, 27 %) de composto ácido 4- (hidroximetil)-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0265] Rt (Método G) 0,98 min, m/z 190 [M-H]- Preparação de ácido 4-(2-hidroxipropan-2-il)-1H-indol-2- carboxílico

[0266] Etapas BP e BQ: A uma solução desgaseificada de composto 33 (1,00 g, 3,94 mmol) e tributil-(1- etoxivinil)estanano (1,58 g, 4,37 mmol) em DMF (25 ml) em argônio foi adicionado dicloreto de bis(trifenilfosfina)paládio(II) (0,100 g, 0,142 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente até que a TLC relevou a conclusão da reação (aproximadamente 7 dias). A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo dividido entre acetato de etila e água. A camada orgânica foi filtrada através de um tampão de gel de sílica, seca em MgSO4, e concentrada sob pressão reduzida. O óleo preto resultante foi dissolvido em metanol (100 ml), tratado com ácido clorídrico a 5 N (100 ml), e agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo dissolvido em acetato de etila. A solução foi lavada com água, seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para gerar 0,500 g (2,30 mmol, 58 %) de composto 67.

[0267] Etapa BR: A uma solução de composto 67 (1,00 g, 4,60 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado LiOH aquoso a 1 N. (7 ml). A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente, então, concentrado sob pressão reduzida e diluída com NaHSO4 aquoso a 1 N (7 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em MgSO4, e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter 0,900 g (4,43 mmol, 96 %) de composto 68.

[0268] Etapa BS: A uma solução resfriada (0 °C) de composto 68 (0,900 g, 4,43 mmol) em THF (50 ml) em argônio foi adicionada uma solução de MeMgCl a 1 N (16 ml) em hexano. A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente. A mistura foi extinta com cuidado com NaHSO4 a 1 N e extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em Na2SO4, e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter 0,250 g (1,14 mmol, 26 %) de composto ácido 4- (2-hidroxipropan-2-il)-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0269] Rt (Método G) 0,99 min, m/z 202 [M-H]- Preparação de ácido 4-(1-hidroxietil)-1H-indol-2- carboxílico

[0270] Etapa BS-2: A uma solução resfriada (0 °C) de composto 67 (1,00 g, 4,60 mmol) em mistura de THF/metanol (50 ml) foi adicionado NaBH4 (0,385 g, 10,2 mmol). A mistura de reação foi agitada por 12 h à temperatura ambiente. A mistura foi resfriada a 0 °C, tratada com ácido clorídrico a 2 N (20 ml), e concentrada. O resíduo foi extraído com acetato de etila. O extrato orgânico foi lavado com água, seco em Na2SO4, e evaporado sob pressão reduzida para obter 0,800 g (3,65 mmol, 79 %) de composto 69, puro o suficiente para a próxima etapa.

[0271] Etapa BT: A uma solução de composto 69 obtida na etapa anterior (0,800 g, 3,65 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado LiOH aquoso a 1 N (6 ml). A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente, então, concentrada e diluída com NaHSO4 aquoso a 1 N (6 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em MgSO4, e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter 0,300 g (1,46 mmol, 40 %) de composto ácido 4- (1-hidroxietil)-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0272] Rt (Método G) 0,82 min, m/z 204 [M-H]- Preparação de ácido 4-(propan-2-il)-1H-indol-2-carboxílico

[0273] Etapa BU: A uma solução de metóxido de sódio (10,0 g, 185 mmol) em metanol (150 ml) a -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de composto 70 (15,0 g, 101 mmol) e azidoacetato de metila (12,0 g, 104 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min. O precipitado foi, então, coletado por filtração, lavado com água e seco para produzir 7,00 g (23,3 mmol, 23 %) de composto 71 como um sólido branco.

[0274] Etapa BV: Uma solução de composto 71 obtida na etapa anterior (7,00 g, 23,3 mmol) em xileno (200 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de hexano-acetato de etila (60:40) para gerar 3,50 g (16,1 mmol, 69 %) de composto 72.

[0275] Etapa BW: A uma solução de composto 72 (3,50 g, 16,1 mmol) em metanol (100 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 2 N (40 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 60 °C. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e, então, o resíduo acidificado em pH 5-6 com ácido clorídrico a 10 %. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (3 x 50 ml), e seco para obter 2,70 g (13,3 mmol, 83 %) de composto ácido 4-(propan-2-il)-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0276] Rt (Método G) 1,32 min, m/z 202 [M-H]- Preparação de ácido 4-etenil-1H-indol-2-carboxílico

[0277] Etapa BX: A uma solução de composto 63 (0,900 g, 4,47 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado LiOH aquoso a 1 N (8 ml). A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente, então, concentrado sob pressão reduzida e diluída com NaHSO4 aquoso a 1 N (8 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em MgSO4 e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter 0,500 g (2,67 mmol, 59 %) de composto ácido 4- etenil-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0278] Rt (Método G) 1,14 min, m/z 186 [M-H]- Preparação de ácido 4-etinil-1H-indol-2-carboxílico

[0279] Etapa BY: A uma solução de composto 33 (1,00 g, 3,94 mmol) em THF (50 ml) em argônio foram adicionados TMS- acetileno (0,68 ml, 4,80 mmol), CuI(0,076 g, 0,399 mmol), trietilamina (2,80 ml, 20,0 mmol), e Pd(dppf)Cl2 (0,100 g, 0,137 mmol). A mistura foi agitada a 60 °C até que a TLC revelou a conclusão da reação (aproximadamente 5 dias). A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo dissolvido em acetato de etila. A solução foi lavada com água, seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para gerar 0,600 g (2,14 mmol, 56 %) de composto

73.

[0280] Etapa BZ: A uma solução de composto 73 (0,840 g, 3,10 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado LiOH aquoso a 1 N (7 ml). A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente, então, concentrada sob pressão reduzida e diluída com NaHSO4 aquoso a 1 N (7 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em MgSO4 e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter 0,400 g (2,17 mmol, 70 %) de composto ácido 4- etinil-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0281] Rt (Método G) 1,12 min, m/z 184 [M-H]- Preparação de ácido 4-(1,1-difluoroetil)-1H-indol-2- carboxílico

[0282] Etapa CA: A uma mistura de 2-bromoacetofenona (63,0 g, 317 mmol), água (0,5 ml) e diclorometano (100 ml) foi adicionado Morph-DAST (121 ml, 992 mmol). A mistura resultante foi agitada por 28 dias à temperatura ambiente. A mistura de reação foi, então, vertida em NaHCO3 aquoso saturado (1000 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 500 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para gerar 16,8 g (76,0 mmol, 12 %) de composto 74.

[0283] Etapa CB: A uma solução resfriada (-85 °C) de composto 74 (16,8 g, 76,0 mmol) em THF (300 ml) sob Ar foi adicionada solução de n-BuLi a 2,5 M em hexanos (36,5 ml, 91,5 mmol) por 30 min. A mistura resultante foi agitada por 1 h a -85 °C. DMF (8,80 ml, 114 mmol) foi, então, adicionada (mantendo a temperatura abaixo de -80 °C) e a reação agitada por mais 45 min. A reação foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (100 ml) e diluída com água (600 ml). A mistura obtida foi extraída com acetato de etila (2 x 500 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em

Na2SO4, e concentrados sob pressão reduzida para obter 12,5 g (73,6 mmol, 97 %) de composto 75 (suficientemente puro para a próxima etapa).

[0284] Etapa CC: A uma mistura resfriada (-30 °C) de composto 75 (12,5 g, 73,5 mmol), etanol (500 ml) e azidoacetato de etila (28,5 g, 221 mmol) foi adicionada uma solução de metóxido de sódio recentemente preparada (preparada ao misturar Na (5,00 g, 217 mmol) e metanol (100 ml)) em porções sob Ar (mantendo a temperatura abaixo de - 25 °C). A mistura de reação foi aquecida a 15 °C e agitada por 12 h. A mistura obtida foi vertida em NH4Cl aquoso saturado (2500 ml) e agitada por 20 min. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água, e seco para obter 10,0 g (35,6 mmol, 51 %) de composto 76.

[0285] Etapa CD: Uma solução de composto 76 (10,0 g, 35,6 mmol) em xileno (500 ml) foi submetida a refluxo até cessar a evolução gasosa (aproximadamente 2 h) e, então, concentrada sob pressão reduzida. O óleo laranja obtido foi triturado com hexano/acetato de etila (5:1), coletado por filtração, e seco para obter 1,53 g (6,04 mmol, 17 %) de composto 77.

[0286] Etapa CE: A uma solução de composto 77 (1,53 g, 6,04 mmol) em mistura de THF/água de 9:1 (100 ml) foi adicionado LiOH·H2O (0,590 g, 14,1 mmol). A mistura resultante foi agitada durante a noite à t.a. Os voláteis foram evaporados e o resíduo misturado com água (50 ml) e ácido clorídrico a 1 N (10 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos em Na2SO4, e concentrados sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica para gerar 0,340 g (1,33 mmol, 24 %) de ácido 4-(1,1-difluoroetil)-1H-indol-2- carboxílico.

[0287] Rt (Método G) 1,16 min, m/z 224 [M-H]- Preparação de ácido 4-(trimetilssilil)-1H-indol-2- carboxílico

[0288] Etapa CF: A uma solução resfriada (-78 °C) de 4- bromo-1H-indol (5,00 g, 25,5 mmol) em THF (100 ml) sob Ar foi adicionada uma solução de n-BuLi a 2,5 M em hexanos (23 ml, 57,5 mmol). A mistura resultante foi agitada por 30 min. TMSCl (16 ml, 126 mmol) foi adicionado e a mistura de reação aquecida à temperatura ambiente. Após 1 h, a mistura foi diluída com MTBE (250 ml), lavada com água (2 x 200 ml) e salmoura (200 ml), então, seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi refluxado em metanol (100 ml) por 1 h. O solvente foi, então, removido por destilação para obter 3,60 g (19,0 mmol, 74 %) de composto

78.

[0289] Etapa CG: A uma solução resfriada (-78 °C) de composto 78 (1,50 g, 7,92 mmol) em THF (50 ml) sob Ar foi adicionada uma solução de n-BuLi a 2,5 M em hexanos (3,8 ml, 9,5 mmol). A mistura resultante foi agitada por 20 min. CO2 (2 l) foi, então, borbulhado através da mistura por 10 min, e a mistura de reação aquecida à temperatura ambiente. Os voláteis foram evaporados e o resíduo dissolvido em THF

(50 ml). A solução foi resfriada a -78 °C, e uma solução de t-BuLi a 1,7 M (5,6 ml, 9,50 mmol) foi adicionada. A mistura foi aquecida a -30 °C, então, resfriada novamente a -78 °C. CO2 (2 l) foi borbulhado através da solução por 10 min. A solução obtida foi deixada em aquecimento lento até a t.a., então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água (50 ml), lavado com MTBE (2 x 50 ml), então, acidificado em pH 4, e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). O extrato orgânico foi lavado com água (2 x 50 ml) e salmoura (50 ml), seco em Na2SO4, e evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi lavado com hexano e seco para obter 1,24 g (5,31 mmol, 67 %) de composto ácido 4-(trimetilssilil)-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0290] Rt (Método G) 1,47 min, m/z 232 [M-H]- Preparação de ácido 6-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carboxílico

[0291] Etapa CH: A uma solução de (3-cloro-4- fluorofenil)hidrazina (80,0 g, 498 mmol) em etanol (200 ml) foi adicionado piruvato de etila (58,0 g, 499 mmol). A mistura foi submetida a refluxo por 1 h, então, concentrada sob pressão reduzida, e diluída com água (300 ml). O sólido foi coletado por filtração, então, seco para obter 122 g (472 mmol, 95 %) de composto 79.

[0292] Etapa CI: Uma suspensão de composto 79 (122 g,

472 mmol) e pTSA (81,5 g, 473 mmol) em tolueno (500 ml) foi refluxado por 48 h, então, resfriada à temperatura ambiente. O precipitado foi coletado por filtração e purificado por cristalização fracionada a parir de tolueno para obter 4,00 g (16,6 mmol, 4 %) de composto 80.

[0293] Etapa CJ: A uma solução em refluxo de composto 80 (4,00 g, 16,6 mmol) em etanol (30 ml) foi adicionado NaOH (0,660 g, 16,5 mmol). A mistura foi submetida a refluxo por 1 h, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com água quente (80 °C, 50 ml) e a solução acidificada (pH 2) com ácido clorídrico concentrado. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com água (2 x 10 ml), e seco para obter 3,18 g (14,9 mmol, 90 %) de composto ácido 6-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carboxílico alvo.

[0294] Rt (Método G) 1,23 min, m/z 212 [M-H]- Preparação de ácido 4-(difluorometil)-6-fluoro-1H-indol-2- carboxílico

[0295] Etapa CK: A uma solução de metóxido de sódio

(50,0 g, 926 mmol) em metanol (300 ml) a -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de 2-bromo-4- fluorobenzaldeído (222 mmol) e azidoacetato de metila (59,0 g, 457 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h, mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min e o sólido coletado por filtração. O sólido foi lavado com água para produzir o composto 81 como um sólido branco (62 % de rendimento).

[0296] Etapa CL: Uma solução de composto 81 (133 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de mistura de hexano-acetato de etila (60:40) para gerar composto 82 (58 % de rendimento).

[0297] Etapa CM: A uma solução aquecida (90 °C) de composto 82 (14,7 mmol) em DMF anidra (10 ml), tri-n- butil(vinil)estanho (3,60 g, 11,4 mmol) e Pd(PPh3)2C12 (0,301 g, 0,757 mmol) foram adicionados sob nitrogênio e a mistura resultante foi agitada a 90 °C por 1 h. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e purificada por cromatografia em coluna de gel de sílica (acetato de etila a 60-80 % em hexano). As frações de produto combinado foram concentradas, lavadas com água (3 x 100 ml), secas em Na2SO4, e concentradas sob pressão reduzida para produzir composto 83 como um sólido amarelo (60 % de rendimento).

[0298] Etapa CN: A uma mistura de composto 83 (12,4 mmol), acetona (200 ml) e água (40 ml), OsO4 (0,100 g, 0,393 mmol) e NaIO4 (13,4 g, 62,6 mmol) foram adicionados e a reação foi agitada por 10 h à temperatura ambiente. A acetona foi removida por destilação e a solução aquosa foi extraída com diclorometano. A camada orgânica combinada foi lavada com solução de NaHCO3 saturada (2 x 50 ml) e salmoura (2 x 50 ml), seca em Na2SO4, e concentrada sob pressão reduzida para produzir composto 84 (33 % de rendimento).

[0299] Etapa CO: A uma solução de composto 84 (11,0 mmol) em diclorometano (50 ml) foi adicionado Morph-DAST (4,10 ml, 33,6 mmol). A mistura resultante foi agitada até que a RMN de uma alíquota revelou a conclusão da reação (2- 5 dias). A mistura de reação foi adicionada por gotejamento a uma solução de NaHCO3 saturada fria (1000 ml). A mistura obtida foi extraída com acetato de etila. A camada orgânica foi seca com MgSO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar composto 85 como sólido amarelo (48 % de rendimento).

[0300] Etapa CP: A uma solução de composto 85 (4,50 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado LiOH aquoso a 1 N (8 ml). A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente, então, concentrada sob pressão reduzida e diluída com NaHSO4 aquoso a 1 N (8 ml). A mistura obtida foi extraída com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em MgSO4 e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter ácido 4-(difluorometil)-6-fluoro-1H-indol-2- carboxílico (87 %).

[0301] Rt (Método G) 1,22 min, m/z 228 [M-H]- Preparação de ácido 4-(difluorometil)-7-fluoro-1H-indol-2- carboxílico

[0302] Preparado como descrito para ácido 4- (difluorometil)-6-fluoro-1H-indol-2-carboxílico, partindo de 2-bromo-5-fluorobenzaldeído (2,5 % de rendimento geral).

[0303] Rt (Método G) 1,13 min, m/z 228 [M-H]- Preparação de ácido 4-(1,1-difluoroetil)-6-fluoro-1H-indol- 2-carboxílico

[0304] Etapa CQ: A uma solução de 2-bromo-5- fluorobenzonitrila (10,0 g, 48,5 mmol) em tetra-hidrofurano anidro (100 ml) sob nitrogênio foi adicionado brometo de metilmagnésio (3,2 M em éter, 19 ml, 60,0 mmol). A mistura resultante foi aquecida para refluxar por 4 h. A mistura de reação foi, então, resfriada, vertida em ácido clorídrico a

2 N (100 ml), e diluída com metanol (100 ml). Os solventes orgânicos foram removidos e o produto bruto removidos por precipitação. A mistura de reação foi extraída com acetato de etila, seca em MgSO4, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (heptano/diclorometano) para gerar 4,88 g (21,9 mmol, 45 %) de composto 86 como um óleo rosa.

[0305] Etapa CR: A uma solução de composto 86 (110 mmol) em diclorometano (50 ml) à temperatura ambiente foi adicionado Morph-DAST (41 ml, 336 mmol) e algumas gotas de água. A mistura resultante foi agitada por 48 dias à temperatura ambiente; a cada 7 dias, uma porção adicional de Morph-DAST (41 ml, 336 mmol) foi adicionada. Após a reação ser concluída, a mistura foi adicionada por gotejamento com cuidado ao NaHCO3 aquoso saturado frio. O produto foi extraído com acetato de etila e o extrato orgânico seco em MgSO4 e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar 87 como um líquido incolor (37 % de rendimento).

[0306] Etapa CS: A uma solução resfriada (-80 °C) de composto 87 (21,0 mmol) em THF (150 ml) foi adicionada lentamente uma solução de n-BuLi a 2,5 M em hexanos (10,0 ml, 25,0 mmol de n-BuLi). A mistura foi agitada por 1 h, então, DMF (2,62 ml, 33,8 mmol) foi adicionada e a mistura agitada por mais 1 h. A reação foi extinta com NH4Cl aquoso saturado (250 ml) e extraída com Et2O (3 x 150 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etila/hexano 1:9) para gerar composto 88 (52 % de rendimento).

[0307] Etapa CT: A uma solução de metóxido de sódio (50,0 g, 926 mmol) em metanol (300 ml) a -10 °C foi adicionada por gotejamento uma solução de composto 88 (222 mmol) e azidoacetato de metila (59,0 g, 457 mmol) em metanol (100 ml). A mistura de reação foi agitada por 3 h, mantendo a temperatura abaixo de 5 °C, então, extinta com água gelada. A mistura resultante foi agitada por 10 min. O sólido obtido foi coletado por filtração, e lavado com água para produzir composto 89 como um sólido branco (66 % de rendimento).

[0308] Etapa CU: Uma solução de composto 89 (120 mmol) em xileno (250 ml) foi submetida a refluxo por 1 h sob uma atmosfera de argônio e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de hexano- acetato de etila para gerar composto 90 (70 % de rendimento).

[0309] Etapa CV: A uma solução de composto 90 (4,40 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado LiOH aquoso a 1 N (8 ml). A mistura resultante foi agitada por 48 h à temperatura ambiente, então, concentrada sob pressão reduzida e diluída com NaHSO4 aquoso a 1 N (8 ml). O resíduo obtido foi extraído com acetato de etila. O extrato orgânico foi seco em MgSO4 e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi recristalizado a partir de MTBE para obter composto ácido 4-(1,1-difluoroetil)-6-fluoro-1H- indol-2-carboxílico alvo (95 % de rendimento).

[0310] Rt (Método G) 1,26 min, m/z 242 [M-H]- Preparação de 6,6-difluoro-4-azaspiro[2,4] heptano

[0311] Etapa 1: A uma solução de anidrido succínico (100 g, 1000 mmol) em tolueno (3000 ml) foi adicionada benzilamina (107 g, 1000 mmol). A solução foi agitada à temperatura ambiente por 24 h, então, aquecida em refluxo com um aparelho Dean-Stark por 16 horas. A mistura foi, então, concentrada sob pressão reduzida para gerar 1- benzilpirrolidina-2,5-diona (170 g, 900 mmol, 90 % de rendimento).

[0312] Etapa 2: A uma mistura resfriada (0 °C) de 1- benzilpirrolidina-2,5-diona (114 g, 600 mmol) e Ti(Oi-Pr)4 (170,5 g, 600 mmol) em THF seco (2000 ml) sob atmosfera de argônio foi adicionada por gotejamento uma solução de brometo de etilmagnésio a 3,4 M em THF (1200 mmol). A mistura foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 4 h. BF3,Et2O (170 g, 1200 mmol) foi, então, adicionado por gotejamento e a solução agitada por 6 h. A mistura foi resfriada (0 °C) e ácido clorídrico a 3 N (500 ml) foi adicionado. A mistura foi extraída com Et2O, e os extratos orgânicos combinados lavados com salmoura, secos e concentrados sob pressão reduzida para gerar 4- benzil-4- azaspiro[2.4]heptan-5-ona (30,2 g, 150 mmol, 25 % de rendimento).

[0313] Etapa 3: A uma solução resfriada (-78 °C) de 4- benzil-4-azaspiro[2.4]heptan-5-ona (34,2 g, 170 mmol) em THF seco (1000 ml) em argônio foi adicionado LiHMDS em THF (solução a 1,1 M, 240 mmol). A mistura foi agitada por 1 h, então, uma solução de N-fluorobenzenossulfonimida (75,7 g, 240 mmol) em THF (200 ml) foi adicionada por gotejamento. A mistura foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 6 h. A mistura foi, então, resfriada novamente (-78 °C) e LiHMDS adicionado (solução a 1,1 M em THF, 240 mmol).

[0314] A solução foi agitada por 1 h, então, N- fluorobenzenossulfonimida (75,7 g, 240 mmol) em THF (200 ml) foi adicionada por gotejamento. A mistura foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 6 h. A mistura foi vertida em uma solução de NH4Cl saturada (300 ml) e extraída duas vezes com Et2O. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura e concentrados sob pressão reduzida. O produto foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 4-benzil-6,6- difluoro-4- azaspiro[2.4]heptan-5-ona (18 g, 75,9 mmol, 45 % de rendimento).

[0315] Etapa 4: A uma solução aquecida (40 °C) de BH3,Me2S (3,42 g, 45 mmol) em THF (200 ml) foi adicionado por gotejamento 4-benzil-6,6-difluoro-4- azaspiro[2.4]heptan-5-ona (11,9 g, 50 mmol). A mistura foi agitada por 24 h a 40 °C, então, resfriada à temperatura ambiente. A água (50 ml) foi adicionada por gotejamento, e a mistura extraída com Et2O (2 x 200 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, diluídos com solução de HCl a 10 % em dioxano (50 ml) e evaporados sob pressão reduzida para gerar 4-benzil-6,6-difluoro-4- azaspiro[2.4]heptano (3 g, 13,4 mmol, 27 % de rendimento).

[0316] Etapa 5: 4-benzil-6,6-difluoro-4- azaspiro[2,4]heptano (2,68 g, 12 mmol) e hidróxido de paládio (0,5 g) em metanol (500 ml) foram agitados à temperatura ambiente sob uma atmosfera de H2 por 24 h. A mistura foi filtrada e, então, o filtrado concentrado sob pressão reduzida para obter 6,6-difluoro-4- azaspiro[2.4]heptano (0,8 g, 6,01 mmol, 50 % de rendimento). Preparação de 7,7-difluoro-4-azaspiro[2,4]heptano

[0317] Etapa 1: A uma solução resfriada (0 °C) de 1- benzilpirrolidina-2,3-diona (8 g, 42,3 mmol) em DCM (100 ml) foi adicionado por gotejamento por 30 minutos DAST

(20,4 g, 127 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite, então, extinta por adição por gotejamento de NaHCO3 saturado. A camada orgânica foi separada, e a fração aquosa extraída duas vezes com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para produzir 1- benzil-3,3-difluoropirrolidin-2-ona (26,0 mmol, 61 % de rendimento), que é usada na próxima etapa sem purificação adicional.

[0318] Etapa 2: A uma solução de 1-benzil-3,3- difluoropirrolidin-2-ona bruto (5,5 g, 26 mmol) e Ti(Oi- Pr)4 (23,4 ml, 78 mmol) em THF (300 ml) foi adicionada por gotejamento sob atmosfera de argônio a solução de EtMgBr a 3,4 M em 2-MeTHF (45,8 ml, 156 mmol). Após a agitação por 12 h, a água (10 ml) foi adicionada para obter um precipitado branco. O precipitado foi lavado com MTBE (3 x 50 ml). As frações orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, concentradas e purificadas por cromatografia (hexanos-EtOAc de 9:1) para obter 4-benzil-7,7-difluoro-4- azaspiro[2.4]heptano (1,3 g, 5,82 mmol, 22 % de rendimento) como um óleo amarelo pálido.

[0319] Etapa 3: 4-benzil-7,7-difluoro-4- azaspiro[2.4]heptano (0,55 g, 2,46 mmol) foi dissolvido em solução de CHCl (1 ml) e MeOH (20 ml) e Pd/C (0,2 g, 10 %) foi adicionado. Essa mistura foi agitada sob e em uma atmosfera de H2 por 5 h, então, filtrada. O filtrado foi concentrado para gerar 7,7-difluoro-4-azaspiro[2,4]heptano (0,164 g, 1,23 mmol, 50 % de rendimento) Síntese de 1-[(difluorometoxi)metil]-N-metilciclopropan-1- amina

[0320] Etapa 1: A uma solução de 1- ((tercbutoxicarbonil)(metil)amino)ciclopropano-1- carboxilato de metila (1,05 g, 4,58 mmol) em THF seco (5 ml) sob N2 foi adicionado boro-hidreto de lítio (1,259 ml, 4 M em THF, 5,04 mmol). A mistura foi agitada à ta por 4 dias. Sulfato de sódio e água foram adicionados, a mistura foi filtrada em um bloco de sulfato de sódio que foi lavado com diclorometano. O filtrado foi concentrado para gerar (1-(hidroximetil)ciclopropil)(metil)carbamato de terc- butila como um sólido branco (0,904 g, 95 % de rendimento).

[0321] Etapa 2: A uma solução de (1- (hidroximetil)ciclopropil)(metil)carbamato de terc-butila (0,100 g, 0,497 mmol) e (bromodifluorometil)trimetilssilano (0,155 ml, 0,994 mmol) em diclorometano(0,5 ml) foi adicionada uma gota de uma solução de acetato de potássio (0,195 g, 1,987 mmol) em água (0,5 ml). A mistura foi agitada por 40 h. A mistura foi diluída com diclorometano e água, a camada orgânica foi separada e concentrada. A purificação por cromatografia flash (acetato de etila a 20 % em heptano) gerou um N- {1[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-N-metilcarbamato de terc-butila como óleo incolor (0,058 g, 46 % de rendimento)

[0322] Etapa 3: A (1- ((difluorometoxi)metil)ciclopropil)(metil)carbamato de terc-butila (0,058 g, 0,231 mmol) foi adicionado HCl em dioxano (solução a 4 M, 2 ml, 8,00 mmol). A mistura foi agitada por 30 min à ta, então, concentrada para produzir o produto desejado que foi usado sem purificação adicional

[0323] LC-MS: m/z 152,2 (M+H)+ Síntese de 3-{biciclo[3.1.0]hexano-2-carbonil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0324] A uma solução agitada de ácido 5-[(terc- butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxílico (535,0 mg, 2,0 mmol) e trietilamina (445,37 mg, 4,4 mmol, 610,0 µl) em DMF seco (20 ml) foi adicionado HATU (836,76 mg, 2,2 mmol) em uma porção. A mistura resultante foi agitada por 10 min, então, cloridrato de 2- azabiciclo[3.1.0]hexano (239,26 mg, 2,0 mmol) foi adicionado e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (70 ml) e água (150 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 50 ml), e salmoura, então, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida para gerar um resíduo que foi purificado por HPLC para gerar 3-2-azabiciclo[3.1.0]hexano- 2-carbonil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carboxilato de terc-butila (286,4 mg, 861,62 µmol, 43,1 % de rendimento).

[0325] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,63 (m, 1H), 0,98 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,75 (ra, OH), 1,87 (m, 1H), 2,07

(m, OH), 3,32 (m, 1H), 3,69 (m, 4H), 4,12 (s, 3H), 4,75 (m, 3H), 7,89 (m, 1H). Síntese de 3-{6,6-difluorobiciclo[3.1.0]hexano-2-carbonil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0326] A uma solução resfriada (-5 °C) de ácido 5- [(terc-butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxílico (45,86 mg, 171,56 µmol) e 2-cloro- 4,6-dimetoxi-1,3,5-triazina (30,12 mg, 171,56 µmol) em DCM seco (5 ml) foi adicionada 4-metilmorfolina (17,7 mg, 174,99 µmol, 20,0 µl). A mistura foi agitada a 0 °C por 2 h. 4-metilmorfolina (17,7 mg, 174,99 µmol, 20,0 µl) e 4- metilbenzeno-1-sulfonato de 6,6-difluoro-2- azabiciclo[3.1.0]hexano (50,0 mg, 171,64 µmol) foram adicionados à mistura de reação. A agitação continuou por 1 h, então, a mistura deixada à t.a. por 10 h. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (70 ml) e água (150 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 50 ml), e salmoura, então, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida para gerar um resíduo que foi purificado por HPLC para gerar 3-{6,6-difluorobiciclo[3.1.0]hexano-2-carbonil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila.

[0327] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO), δ 3,02 (d, 3H), 7,27 (t, 1H), 7,37 (d, 1H), 7,83 (d, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,57 (d, 1H), 8,72 (d, 1H), 12,50 (s,

1H), 12,86 (s, 1H).

[0328] LCMS (m/z): 268,2 Síntese de 3-{biciclo[3.1.0]hexano-3-carbonil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0329] Ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (250,0 mg, 935,34 µmol), HATU (391,22 mg, 1,03 mmol) e trietilamina (236,62 mg, 2,34 mmol, 330,0 µl) foram misturados em DMF seco (5 ml) à t.a. e a mistura resultante foi agitada por 10 minutos. Cloridrato de 3-azabiciclo[3.1.0]hexano (123,05 mg, 1,03 mmol) foi adicionado a isso e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura resultante foi dividida entre água (50 ml) e EtOAc (50 ml). A fase orgânica foi separada, seca em Na2SO4, e evaporada. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-3- azabiciclo[3.1.0]hexano-3-carbonil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (152,0 mg, 457,28 µmol, 48,9 % de rendimento) como sólido branco.

[0330] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,03 (m, 1H), 0,69 (m, 1H), 1,42 (s, 9H), 1,55 (m, 1H), 1,63 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,80 (m, 4H), 4,10 (m, 2H), 4,68 (m, 1H), 4,74 (m, 2H), 7,81 (s, 1H). LCMS (m/z): 333,2 3-{6,6-difluoro-3-azabiciclo [3.1.0] hexano-3-carbonil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0331] Ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (250,0 mg, 935,34 µmol), HATU (391,26 mg, 1,03 mmol) e trietilamina (236,65 mg, 2,34 mmol, 330,0 µl) foram misturados em DMF seco (5 ml) à t.a. e a mistura resultante foi agitada por 10 minutos. Cloridrato de 6,6-difluoro-3- azabiciclo[3.1.0]hexano (160,08 mg, 1,03 mmol) foi adicionado a isso e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura resultante foi dividida entre água (50 ml) e EtOAc (50 ml). A fase orgânica foi separada, seca em Na2SO4 e evaporada. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-6,6- difluoro-3-azabiciclo[3.1.0]hexano- 3-carbonil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carboxilato de terc-butila (173,0 mg, 469,63 µmol, 50,2 % de rendimento) como sólido branco.

[0332] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,43 (s, 9H), 2,67 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,80 (m, 2H), 3,98 (m, 2H), 4,11 (m, 3H), 4,69 (m, 1H), 4,75 (m, 1H), 7,87 (s, 1H).

[0333] LCMS: m/z 369,2 Síntese de 3-{metil[1-(piridin-3-il)ciclopropil]carbamoil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0334] Etapa 1: A uma solução de cloridrato de ácido 1- (piridin-3-il)ciclopropano-1-carboxílico (498,46 mg, 2,5 mmol) em uma mistura de tolueno (30 ml) e t-BuOH (10 ml) foram adicionadas difenilfosforil azida (687,14 mg, 2,5 mmol) e trietilamina (631,62 mg, 6,24 mmol, 870,0 µl). A mistura de reação foi aquecida em refluxo durante a noite. A mistura de reação foi resfriada e filtrada. O filtrado foi lavado com água (3x10 ml), seco em Na2SO4 e concentrado em vácuo para gerar N-[1-(piridin-3- il)ciclopropil]carbamato de terc-butila e (250,0 mg, 95,0 % de pureza, 1,01 mmol, 40,6 % de rendimento) como óleo castanho claro.

[0335] Etapa 2: Hidreto de sódio (154,24 mg, 6,43 mmol) foi suspensa em DMF seco (5 ml) e, então, resfriado a 0 °C. Uma solução de N-[1-(piridin-3-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (1,51 g, 6,43 mmol) em DMF seco (5 ml) foi adicionada por gotejamento. A mistura resultante foi agitada até cessar a evolução gasosa. Iodometano (1,0 g, 7,07 mmol, 440,0 µl) foi adicionado por gotejamento na mesma temperatura; a mistura resultante foi aquecida até a t.a. e, então, agitada durante a noite. Após o consumo do material inicial (controle de 1H RMN), a mistura de reação foi vertida em água. A mistura resultante foi extraída duas vezes com MTBE (2 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com água, secas em sulfato de sódio e concentradas para gerar N-metil-N-[1-(piridin-3- il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (1,1 g, 4,43 mmol, 68,9 % de rendimento). O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0336] Etapa 3: A uma solução de N-metil-N-[1-(piridin- 3-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (1,1 g, 4,43 mmol) em metanol (10 ml) foi adicionada a solução de HCl a 4 M em dioxano (2 ml). A solução resultante foi agitada por 12 h a 25 °C. Após a conclusão da reação (monitorada por 1H RMN ou LCMS), a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto foi triturado com MTBE e coletado por filtração, então, seco em vácuo a 400 °C para gerar dicloridrato de N-metil-1-(piridin-3-il)ciclopropan- 1-amina (900,0 mg, 95,0 % de pureza, 3,87 mmol, 87,2 % de rendimento).

[0337] Etapa 4: A uma solução agitada de dicloridrato de N-metil-1-(piridin-3-il)ciclopropan-1-amina (398,89 mg, 1,8 mmol) e ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (482,15 mg, 1,8 mmol) em DMF (2 ml) foram adicionados HATU (891,67 mg, 2,35 mmol) e trietilamina (638,88 mg, 6,31 mmol, 880,0 µl). A mistura foi agitada durante a noite à t.a. e, então, vertida em água e extraída com MTBE (2x15 ml). As frações orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com água, secas em sulfato de sódio anidro, e o solvente foi removido em vácuo. O produto bruto foi purificado por HPLC para gerar 3- metil[ 1 -(piridin-3 -il)ciclopropil] carbamoil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (230,0 mg, 82,0 % de pureza, 474,5 µmol, 26,3 % de rendimento).

[0338] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,41 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,56 (m, 2H), 3,07 (m, 3H), 3,82 (m, 2H), 4,07 (m, 2H), 4,75 (m, 2H), 6,99 (m, 1H), 7,37 (m, 1H), 7,48 (d, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,44 (s, 1H).

[0339] LCMS: m/z 398,2 Síntese de 3-{metil[1-(piridin-4-il)ciclopropil]carbamoil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0340] Etapa 1: Cloridrato de ácido 2-(piridin-4- il)acético (5,0 g, 28,8 mmol) foi dissolvido em MeOH (20 ml), então, H2SO4 (0,5 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 85 °C durante a noite. O MeOH foi removido para gerar um resíduo que foi neutralizado com cuidado com solução de NaHCO3 aquosa saturada e, então, extraído com EtOAc (3 x 100 ml). Os extratos orgânicos foram combinados, secos e concentrados para gerar 2- (piridin-4-il)acetato de metila (4,0 g, 95,0 % de pureza, 25,14 mmol, 87,3 % de rendimento) como um óleo amarelo, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0341] Etapa 2: 2-(piridin-4-il)acetato de metila (4,0 g, 26,46 mmol) foi dissolvido em DMF (5 ml) e adicionado a uma suspensão resfriado (0 °C) de hidreto de sódio (825,52 mg, 34,4 mmol) em DMF (5 ml). A mistura resultante foi agitada a 0 °C por 30 min e, então, tratada com 1,2- dibromoetano (6,46 g, 34,4 mmol) na mesma temperatura. A mistura de reação foi agitada à t.a. por 12 h. A mistura de reação foi, então, diluída com acetato de etila e lavada com água e salmoura. A fase orgânica foi separada, seca em Na2SO4 e filtrada; o filtrado foi concentrado. O óleo resultante foi triturado com hexano para gerar 1-(piridin- 4- il)ciclopropano-1-carboxilato de metila (2,3 g, 12,98 mmol, 49,1 % de rendimento) como um sólido.

[0342] Etapa 3: 1-(piridin-4-il)ciclopropano-1- carboxilato de metila (2,3 g, 12,98 mmol) foi dissolvido em MeOH (20 ml), ao qual foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (778,67 mg, 19,47 mmol) em água (20 ml). A mistura foi agitada a 20 °C por 20 h. MeOH foi removido por evaporação e o resíduo aquoso foi neutralizado em resfriamento de gelo com ácido clorídrico (em pH 7). A mistura foi concentrada até secura, o resíduo foi triturado três vezes com CHCl3, e os filtrados combinados concentrados até secura para gerar cloridrato de ácido 1- (piridin-4-il)ciclopropano-1-carboxílico (2,0 g, 10,02 mmol, 77,2 % de rendimento).

[0343] Etapa 4: À solução de ácido 1-(piridin-4- il)ciclopropano-1-carboxílico (599,43 mg, 3,67 mmol) em mistura de tolueno (30 ml) e t-BuOH (10 ml) foram adicionadas difenilfosforil azida (1,01 g, 3,67 mmol) e trietilamina (929,28 mg, 9,18 mmol, 1,28 ml). A mistura de reação foi submetida a refluxo durante a noite, então, resfriada e filtrada. O filtrado foi lavado com água (3x10 ml), seco em Na2SO4 e concentrado para gerar N-[1-(piridin- 4-il)ciclopropil] carbamato de terc-butila (300,0 mg, 1,28 mmol, 34,9 % de rendimento) como óleo castanho claro. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0344] Etapa 5: Hidreto de sódio (94,22 mg, 3,93 mmol) foi suspenso em DMF (5 ml) e, então, resfriado a 0 °C. Uma solução de N-[1-(piridin-4-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (919,93 mg, 3,93 mmol) em DMF (5 ml) foi, então, adicionada por gotejamento. A mistura resultante foi agitada até cessar a evolução gasosa. Iodometano (613,04 mg, 4,32 mmol) foi adicionado por gotejamento na mesma temperatura; a mistura resultante foi aquecida até a t.a. e, então, agitada durante a noite. Após o consumo do material inicial (controle de 1H RMN), a mistura de reação foi vertida em água. A mistura foi extraída duas vezes com MTBE (50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com água, secas em sulfato de sódio e concentradas para gerar N-metil-N-[1-(piridin-4-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (900,0 mg, 98,0 % de pureza, 3,55 mmol, 90,5 %

de rendimento). O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0345] Etapa 6: A uma solução de N-metil-N-[1-(piridin- 4-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (900,0 mg, 3,62 mmol) em metanol (10 ml) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (2 ml) e a solução resultante foi agitada por 12 h a 25 °C. Após a conclusão da reação (monitorada por RMN), a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto foi tratado com MTBE e coletado por filtração, então, seco em vácuo a 40 °C para gerar dicloridrato de N- metil-1-(piridin-4- il)ciclopropan-1-amina (600,0 mg, 2,71 mmol, 74,9 % de rendimento).

[0346] Etapa 7: A uma solução agitada de dicloridrato de N-metil-1-(piridin-4-il)ciclopropan-1-amina (600,0 mg, 2,71 mmol) e ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (724,91 mg, 2,71 mmol) em DMF (5 ml) foram adicionados HATU (1,34 g, 3,53 mmol) e trietilamina (960,55 mg, 9,49 mmol, 1,32 ml). A mistura foi agitada durante a noite à t.a. e, então, vertido em água e extraída com MTBE (3 x 15 ml). As frações orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com água, secas em sulfato de sódio anidro e concentrados. O produto bruto foi purificado por HPLC para gerar 3-metil[1- (piridin-4- il)ciclopropil] carbamoil-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (169,0 mg, 425,19 µmol, 15,7 % de rendimento).

[0347] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,38 (m, 1H), 1,44 (s, 9H), 1,60 (m, 3H), 3,03 (m, 3H), 3,71 (m, 1H), 3,84 (m, 1H), 4,06 (m, 2H), 4,75 (m, 2H), 6,92 (m, 1H), 7,07 (m, 2H), 8,52 (m, 2H).

[0348] LCMS: m/z 398,4 Síntese de 3-{metil[1-(pirimidin-2- il)ciclopropil]carbamoil}-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0349] Etapa 1: A uma suspensão resfriada (0 °C) de cloridrato de 1-(pirimidin-2-il)ciclopropan-1-amina (996,43 mg, 5,81 mmol) em DCM seco (30 ml) foi adicionado dicarbonato de di-terc-butila (1,27 g, 5,81 mmol). Trietilamina (646,14 mg, 6,39 mmol, 890,0 µl) foi, então, adicionada por gotejamento. A mistura de reação foi agitada durante a noite à t.a e diluída com água (5 ml). A fase orgânica foi separada, lavada com água, seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para produzir N-[1- (pirimidin-2-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (1,17 g, 4,97 mmol, 85,7 % de rendimento) como um sólido amarelo claro.

[0350] Etapa 2: A uma solução agitada de n-[1- (pirimidin-2-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (499,99 mg, 2,13 mmol) em DMF seco (4 ml) foi adicionado hidreto de sódio (127,49 mg, 5,31 mmol). A mistura de reação foi agitada à t.a. por 1 h, então, resfriada a 0 °C. Iodometano (603,26 mg, 4,25 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura foi vertida em salmoura; então, extraída com EtOAc (2x10 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir N-metil-N- [1-(pirimidin-2- il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (400,0 mg, 1,6 mmol, 75,5 % de rendimento) como sólido amarelo.

[0351] Etapa 3: A uma solução agitada de N-metil-N-[1- (pirimidin-2-il)ciclopropil]carbamato de terc-butila (400,0 mg, 1,6 mmol) em DCM seco (5 ml) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (2 ml, 8 mmol). A mistura de reação foi agitada à t.a. por 5 h. A mistura foi concentrada, o resíduo foi triturado com hexano e removido por filtração para produzir cloridrato de N-metil-1-(pirimidin-2-il)ciclopropan-1- amina (280,0 mg, 1,51 mmol, 94 % de rendimento) como sólido cinza.

[0352] Etapa 4: A uma solução resfriada (0 °C) de HATU (573,46 mg, 1,51 mmol) e ácido 5-[(tercbutoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (403,11 mg, 1,51 mmol) em DMF (3 ml) foram adicionados sucessivamente por gotejamento cloridrato de N-metil-1- (pirimidin-2-il)ciclopropan-1- amina (280,0 mg, 1,51 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (779,69 mg, 6,03 mmol). A mistura de reação foi agitada à t.a. durante a noite e diluída com salmoura. A mistura foi extraída com EtOAc (2x10 ml), as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-metil[ 1 -(pirimidin-2-

il)ciclopropil]carbamoil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (332,9 mg, 835,47 µmol, 55,4 % de rendimento) como sólido amarelo.

[0353] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,43 (s, 9H), 1,57 (m, 2H), 1,89 (m, 1H), 3,31 (m, 2H), 3,71 (m, 1H), 3,83 (m, 2H), 4,03 (m, 2H), 4,12 (m, 1H), 4,69 (m, 1H), 4,78 (m, 1H), 6,78 (s, 1H), 7,36 (t, 1H), 8,78 (d, 2H).

[0354] LCMS: m/z 399,2 Síntese de 3-{metil[1-(pirimidin-4- il)ciclopropil]carbamoil}-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0355] A uma solução de 3-[1-(pirimidin-4- il)ciclopropil]carbamoil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (58,0 mg, 150,87 µmol) em DMF (5 ml) foi adicionado hidreto de sódio (12,07 mg, 502,94 µmol) em uma porção. Após cessar a evolução gasosa, iodometano (22,49 mg, 158,43 µmol, 10,0 µl) foi adicionado e a mistura resultante foi deixada em agitação durante a noite à t.a. A mistura de reação foi vertida em água (50 ml) e extraída com EtOAc (2 x 30 ml). As fases orgânicas foram lavadas com água (30 ml) e salmoura, secas em Na2SO4 e concentradas em vácuo para gerar produto bruto, que foi purificado por HPLC para gerar 3-metil[1- (pirimidin-4-il)ciclopropil]carbamoil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (20,0 mg, 50,19 µmol, 33,3 % de rendimento).

[0356] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,96 (s, 2H), 7,52 (m,

1H), 7,69 (m, 2H), 7,78 (m, 1H).

[0357] LCMS: m/z 399,2 Síntese de ácido 2-(1-{5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazin-3-il}-5- oxopirrolidin- 3-il)benzoico

[0358] Etapa 1: 2-Bromobenzaldeído (10,0 g, 54,05 mmol) e 2-(trifenil-lambda5-fosfanilideno)acetato de metila (18,07 g, 54,05 mmol) foram misturados em DCM (10 ml) e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura resultante foi evaporada até secura. O resíduo foi triturado com hexano. Todos os materiais insolúveis foram removidos por filtração e o filtrado foi evaporado até secura para obter (2E)-3-(2-bromofenil)prop-2-enoato de metila bruto (12,5 g, 51,85 mmol, 95,9 % de rendimento) que foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0359] Etapa 2: A uma solução de (2E)-3-(2- bromofenil)prop-2-enoato de metila (12,5 g, 51,85 mmol) em nitrometano(50 ml) foi adicionado 1,1,3,3- tetrametilguanidina (1,19 g, 10,37 mmol) e a mistura resultante foi agitada à t.a. Após o consumo do material inicial (controle de 1H RMN), a mistura resultante foi evaporada até secura para obter 3-(2-bromofenil)-4- nitrobutanoato de metila bruto (13,0 g, 43,03 mmol, 83 % de rendimento) que foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0360] Etapa 3: 3-(2-bromofenil)-4-nitrobutanoato de metila (18,0 g, 59,58 mmol) foi dissolvido em ácido acético (150 ml). Zinco (19,48 g, 297,89 mmol) foi adicionado em porções ao mesmo com resfriamento de banho de água. A mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. Todos os materiais insolúveis foram removidos por filtração. O filtrado foi concentrado até secura para gerar 4-amino-3-(2- bromofenil)butanoato de metila bruto (10,0 g, 30,1 mmol, 50,5 % de rendimento) que foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0361] Etapa 4: O produto da etapa anterior (10,0 g, 30,1 mmol) foi misturado com hidrogenocarbonato de sódio (12,64 g, 150,52 mmol) em metanol (100 ml) e a mistura resultante foi aquecida em refluxo durante a noite. Após o consumo do material inicial, a mistura resultante foi resfriada até a t.a. e concentrada. O resíduo foi dividido entre H2O (100 ml) e EtOAc (100 ml). A camada orgânica foi separada, seca em Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar 4-(2- bromofenil)pirrolidin-2-ona (4,3 g, 17,91 mmol, 59,5 % de rendimento).

[0362] Etapa 5: 4-(2-Bromofenil)pirrolidin-2-ona (4,3 g, 17,91 mmol) foi carbonilado em MeOH (100 ml) a 130 °C e 50 atm. A pressão de CO com Pd(dppf)Cb como catalisador. Após o consumo do material inicial (controle de TLC), a mistura resultante foi evaporada e o resíduo foi dividido entre água (100 ml) e EtOAc (100 ml). A camada orgânica foi coletada, seca em Na2SO4 e concentrada para gerar 2-(5- oxopirrolidin-3-il)benzoato de metila (2,5 g, 11,4 mmol, 63,7 % de rendimento).

[0363] Etapa 6: 2-(5-Oxopirrolidin-3-il)benzoato de metila (999,9 mg, 4,56 mmol), 3-iodo-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (1,59 g, 4,56 mmol), fosfato de tripotássio (2,42 g, 11,4 mmol), 1-N,2-N-dimetila ciclo-hexano-1,2-diamina (32,44 mg, 228,04 µmol) e iodeto de cobre(I) (21,72 mg, 114,02 µmol) foram colocados no tubo com um agitador magnético. Dioxano seco (20 ml) foi adicionado a isso. Argônio foi borbulhado através da mistura por 5 minutos. O tubo foi vedado e a mistura resultante foi aquecida a 110 °C por 12 h. A solução resultante foi concentrada até secura e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para gerar 3-4- [2-(metoxicarbonil)fenil]-2-oxopirrolidin-1-il-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (570,0 mg, 1,29 mmol, 28,4 % de rendimento).

[0364] Etapa 7: 3-4-[2-(metoxicarbonil)fenil]-2- oxopirrolidin-1-il-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-

carboxilato de terc-butila (570,16 mg, 1,29 mmol) foi dissolvido em MeOH seco (5 ml). Hidróxido de lítio mono- hidratado (271,58 mg, 6,47 mmol) foi adicionado a isso e a mistura resultante foi agitada à t.a. até a conclusão (monitorada por LCMS). A mistura resultante foi concentrada até secura. O resíduo foi dissolvido em H2O (5 ml) e extraído com EtOAc (3 x 10 ml). A camada aquosa foi coletada e acidificada com NaHSO4 aquoso em pH 5. A mistura resultante foi extraída com EtOAc (2 x 15 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos em Na2SO4 e concentrados para gerar ácido 2-(1-5- [(tercbutoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazin- 3-il-5-oxopirrolidin-3-il)benzoico (156,4 mg, 366,73 µmol, 28,3 % de rendimento).

[0365] 1H RMN (500 MHz, d6-DMSO) δ 1,42 (m, 9H), 2,57 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,80 (m, 2H), 4,07 (m, 3H), 4,43 (m, 1H), 4,60 (m, 2H), 7,37 (m, 1H), 7,56 (m, 3H), 7,79 (m, 1H), 12,86 (brs, 1H).

[0366] LCMS: m/z 427,2 Síntese de ácido 2-(1-{5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazoIo[1,5-a]pirazin-3-il}-5- oxopirrolidin- 3-il)-3-fluorobenzoico

[0367] Etapa 1: 2-Bromo-6-fluorobenzaldeído (10,0 g, 49,26 mmol) e 2-(trifenil-lambda5-fosfanilideno)acetato de metila (17,29 g, 51,72 mmol) foram misturados em DCM (200 ml) e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite, então, concentrada até secura. O resíduo foi triturado com hexano. Todos os materiais insolúveis foram removidos por filtração e o filtrado foi evaporado até secura para obter (2E)-3-(2-bromo-6-fluorofenil)prop-2- enoato de metila bruto (13,0 g, 50,18 mmol, 101,9 % de rendimento) que foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0368] Etapa 2: A uma solução de (2E)-3-(2-bromo-6-

fluorofenil)prop-2-enoato de metila (13,0 g, 50,18 mmol) em nitrometano (50 ml) foi adicionado 1,1,3,3- tetrametilguanidina (577,95 mg, 5,02 mmol) e a mistura resultante foi agitada à t.a. Após o consumo do material de partida (controle de 1H RMN), a mistura resultante foi evaporada até secura para obter 3-(2- bromo-6-fluorofenil)- 4-nitrobutanoato de metila bruto (17,0 g, 53,11 mmol, 105,8 % de rendimento) que foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0369] Etapa 3: 3-(2-Bromo-6-fluorofenil)-4- nitrobutanoato de metila (16,0 g, 49,98 mmol) foi dissolvido em ácido acético (150 ml). Zinco (16,35 g, 249,91 mmol) foi adicionado em porções a isso com resfriamento de banho de água. A mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. Todos os materiais insolúveis foram removidos por filtração. O filtrado foi evaporado até secura para obter produto bruto (15,0 g, 42,83 mmol, 85,7 % de rendimento) que foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0370] Etapa 4: O produto da etapa anterior (15,0 g, 42,84 mmol) foi misturado com hidrogenocarbonato de sódio em metanol (100 ml) e a mistura resultante foi aquecida em refluxo durante a noite. Após o consumo do material inicial, a mistura resultante foi resfriada até a t.a. e evaporada. O resíduo foi dividido entre H2O (100 ml) e EtOAc (100 ml). A camada orgânica foi separada, seca em Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia flash para gerar 4-(2-bromo-6- fluorofenil)pirrolidin-2-ona (3,5 g, 13,56 mmol, 31,7 % de rendimento).

[0371] Etapa 5: 4-(2-Bromo-6-fluorofenil)pirrolidin-2- ona (3,5 g, 13,56 mmol) foi carbonilado em MeOH (100 ml) a 130 °C e 50 atm. A pressão de CO com Pd(dppf)Ch como catalisador. Após o consumo do material inicial (controle de TLC), a mistura resultante foi concentrada e o resíduo foi dividido entre água (100 ml) e EtOAc (100 ml). A camada orgânica foi coletada, seca em Na2SO4 e concentrada para gerar uma mistura de 3-fluoro-2-(5- oxopirrolidin-3- il)benzoato de metila (1,5 g, 6,32 mmol, 46,6 % de rendimento) e ácido benzoico correspondente que foi usado sem purificação.

[0372] Etapa 6: 3-fluoro-2-(5-oxopirrolidin-3- il)benzoato de metila (1,0 g, 4,22 mmol), 3-iodo- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (1,47 g, 4,22 mmol), fosfato de tripotássio (2,24 g, 10,54 mmol), 1-N,2-N-dimetilciclo-hexano-1,2-diamina (29,99 mg, 210,8 µmol) e iodeto de cobre(I) (20,07 mg, 105,4 µmol) foram colocados em um tubo com um agitador magnético. Dioxano seco (20 ml) foi adicionado a isso. Argônio foi borbulhado através da mistura por 5 minutos. O tubo foi vedado e a mistura resultante foi aquecida a 110 °C por 12 h. A solução resultante foi evaporada até secura e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para obter 3-4-[2-fluoro-6-(metoxicarbonil)fenil]-2- oxopirrolidin-1-il-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carboxilato de terc-butila (650,0 mg, 1,42 mmol, 33,6 % de rendimento).

[0373] Etapa 7: 3-4-[2-fluoro-6-(metoxicarbonil)fenil]- 2-oxopirrolidin-1-il-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carboxilato de terc-butila (649,88 mg, 1,42 mmol) foi dissolvido em MeOH seco (5 ml). Hidróxido de lítio mono- hidratado (297,41 mg, 7,09 mmol) foi adicionado a isso e a mistura resultante foi agitada à t.a. Após o consumo de material inicial, a mistura foi evaporada até secura. O resíduo foi dissolvido em H2O (5 ml) e extraído com EtOAc (3 x 10 ml). A camada aquosa foi coletada e acidificada com NaHSO4 aq. sat. ao pH 5. A mistura resultante foi extraída com EtOAc (2 x 15 ml). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos em Na2SO4 e concentrados para gerar ácido 2-(1-5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazin-3-il-5-oxopirrolidin-3- il)-3-fluorobenzoico (123,0 mg, 276,74 µmol, 19,5 % de rendimento).

[0374] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 1,44 (s, 9H), 2,61 (m, 1H), 2,86 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,81 (m, 2H), 4,08 (m, 3H), 4,56 (m, 1H), 4,59 (m, 2H), 7,43 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 13,46 (s, 1H).

[0375] LCMS: m/z 445,0 Síntese de 3-{6-oxo-5-azaspiro[2,4]heptan-5-il}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0376] Uma mistura de 3-iodo-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (1,0 g, 2,86 mmol), 5-azaspiro[2,4]heptan-6-ona (477,47 mg, 4,3 mmol), iodeto de cobre(I) (38,18 mg, 200,48 µmol), fosfato de tripotássio (1,22 g, 5,73 mmol) e metil[2-(metilamino)etil]amina (35,35 mg, 400,97 µmol) em dioxano (10 ml) em argônio foi aquecida a 130 °C por 8 horas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (20 ml) e lavada com água e salmoura. A camada orgânica foi concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC para gerar 3-6-oxo-5- azaspiro[2,4]heptan-5-il- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (800,0 mg, 12,0 % de pureza, 288,81 µmol, 10,1 % de rendimento).

[0377] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,68 (s, 4H), 1,43 (s, 9H), 2,45 (s, 2H), 3,61 (s, 2H), 3,79 (t, 2H), 4,07 (t, 2H), 4,58 (s, 2H), 7,54 (s, 1H).

[0378] LCMS: m/z 333,4 Síntese de 3-{4-oxo-5-azaspiro[2,4]heptan-5-il}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0379] Etapa 1: Hidreto de sódio (7,01 g, 291,96 mmol) foi suspenso em THF (150 ml) sob uma atmosfera de argônio. 2-(dietila fosfono)acetato de etila (30,0 g, 133,81 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado à t.a.

Após mais 90 min, a solução se tornou homogênea e acrilato de terc-butila (17,15 g, 133,81 mmol) em THF (50 ml) foi adicionado lentamente.

Após a adição ser concluída, a mistura de reação foi submetida a refluxo por 5 h.

A reação foi, então, resfriada até a t.a., extinta com cuidado com NH4Cl aquoso (10 ml) e concentrada.

O resíduo foi dividido entre H2O (25 ml) e MTBE (50 ml), e a camada aquosa foi extraído com MTBE (3 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 ml), secas e concentradas para gerar 2-(dietila fosfono)pentanodioato de 5-tercbutila 1-

etila (43,0 g, 80,0 % de pureza, 97,63 mmol, 73 % de rendimento). O produto foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0380] Etapa 2: Hidreto de sódio (7,99 g, 332,82 mmol) foi suspenso em tolueno seco (150 ml) sob uma atmosfera de argônio no frasco equipado com um condensador do tipo Dewar, 1-etil 2-(dietil fosfono)pentanodioato de 5-terc- butila (43,0 g, 122,03 mmol) em tolueno (120 ml) foi adicionado por meio de seringa por 20 min com evolução gasosa acompanhante. Após 2 h de agitação a 23 °C, a mistura de reação se tornou homogênea e foi resfriada em um banho de gelo por 30 min antes de adição de oxirano. O condensador do tipo Dewar foi carregado com gelo seco e acetona, e óxido de etileno (11,83 g, 268,47 mmol), anteriormente condensado em um frasco separado, foi canulado na mistura de reação. O conteúdo do frasco foi colocado em um refluxo suave (temperatura de banho de 40 °C) por 3 h e, então, resfriado a 230 °C e extinto por adição cuidadosa de NH4Cl aquoso (70 ml, IN) e H2O (50 ml). As camadas aquosas foram extraídas com MTBE (3 x 70 ml), as camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secas (Na2SO4), filtradas e concentradas em vácuo, e o produto bruto foi destilado sob pressão reduzida (60-65 °C em 0,5 mmHg) para gerar 1-[3-(terc-butoxi)-3- oxopropil]ciclopropano-1-carboxilato de etila (5,0 g, 50,0 % de pureza, 10,32 mmol, 8,5 % de rendimento).

[0381] Etapa 3: 1-[3-(terc-butoxi)-3- oxopropil]ciclopropano-1-carboxilato de etila (3,0 g, 12,38 mmol) foi dissolvido em ácido 2,2,2-trifluoroacético (16,94 g, 148,55 mmol, 11,47 ml) e aquecida em refluxo para 12 h.

Após a mistura foi resfriado até a t.a. o CF3COOH foi removida em vácuo. Após a evaporação até secura, o resíduo foi dissolvido em NaHCO3 sat. (15 ml), lavado com CH2C12 (2 x 25 ml), acidificado (pH 2) com ácido cítrico, e extraído duas vezes com CH2C12 (25 ml). A camada orgânica foi lavada com água (30 ml), seca (em Na2SO4) e evaporada sob pressão reduzida para produzir ácido 3-[1- (etoxicarbonil)ciclopropil]propanoico (1,3 g, 80,0 % de pureza, 5,59 mmol, 45,1 % de rendimento).

[0382] Etapa 4: Ácido 3-[1- (etoxicarbonil)ciclopropil]propanoico (1,3 g, 6,96 mmol) em tolueno seco (30 ml) e trietilamina (704,22 mg, 6,96 mmol, 970,0 µl) foram misturados à t.a. sob uma atmosfera de argônio. Difenilfosforil azida (1,92 g, 6,96 mmol) em tolueno (5 ml) foi adicionada por meio de seringa, e os conteúdos do frasco foram aquecidos a 75 °C (temperatura de banho) para 4 h. EtOH (10 ml) foi adicionado, e a mistura de reação foi mantida em refluxo por 12 h, a mistura de reação foi resfriada até a t.a., e o EtOH restante foi removido em vácuo. A água (50 ml) foi adicionada ao resíduo orgânico, as camadas foram separadas, a camada aquosa foi extraída com MTBE (2 x 50 ml); As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas (em Na2SO4), filtradas, e concentradas em vácuo para gerar 1-2- [(etoxicarbonil)amino]etilciclopropano-1-carboxilato de etila (1,4 g, 70,0 % de pureza, 4,27 mmol, 61,4 % de rendimento). O produto foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0383] Etapa 5: 1-2- [(etoxicarbonil)amino]etilciclopropano-1-carboxilato de etila (1,0 g, 4,36 mmol) foi dissolvido em CH3OH (10 ml) e hidróxido de bário octa-hidratado (1,42 g, 4,49 mmol) foi adicionado. A solução foi aquecida em refluxo por 14 h, resfriada com gelo, e acidificada com H2SO4 concentrado, e o precipitado de BaSO4 resultante foi removido por filtração. O filtrado aquoso foi extraído com EtOAc (3 x 30 ml), e o extrato orgânico foi seco e concentrado em vácuo para gerar 5-azaspiro[2.4]heptan-4-ona(1,0 g, 55,0 % de pureza, 4,95 mmol, 113,4 % de rendimento). O produto foi usado na próxima etapa sem purificação.

[0384] Etapa 6: Uma mistura de 3-iodo-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (1,01 g, 2,89 mmol), 5-azaspiro[2.4]heptan-4-ona(700,34 mg, 6,3 mmol), (1R,2R)-N1,N2- dimetilciclo-hexano-1,2-diamina (41,08 mg, 288,81 µmol), iodeto de cobre(I) (55,0 mg, 288,81 µmol) e carbonato de potássio (1,2 g, 8,66 mmol) em DMSO (10 ml) em argônio foi aquecido a 130 °C por 16 horas. A mistura de reação foi resfriada e diluída com MTBE (20 ml), então, lavada com água e salmoura. A camada orgânica foi concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC para gerar 3-4-oxo-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (200,0 mg, 601,69 µmol, 20,8 % de rendimento).

[0385] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,83 (m, 2H), 0,91 (m, 2H), 1,42 (s, 9H), 2,20 (t, 2H), 3,78 (m, 4H), 4,07 (t, 2H), 4,56 (s, 2H), 7,57 (s, 1H).

[0386] LCMS: m/z 332,4 Síntese de ácido 5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico

[0387] Etapa 1: A uma solução de ácido 5-[(terc- butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxílico (15,4 g, 57,62 mmol) em MeCN (500 ml) foi adicionado carbonato de potássio (10,35 g, 74,9 mmol) em uma porção à t.a., seguido por adição em porções de (bromometil)benzeno (9,56 g, 55,89 mmol, 6,65 ml). A pasta aquosa viscosa resultante foi agitada durante a noite à t.a., e o progresso da reação foi monitorado por 1H RMN. Uma vez concluída, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi retomado em MTBE (200 ml), a suspensão resultante foi lavada com água (3 x 200 ml), salmoura, seca em Na2SO4 e evaporada em vácuo para gerar 5- terc-butil 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3,5- dicarboxilato de 3-benzila (17,0 g, 47,57 mmol, 82,6 % de rendimento) como sólido incolor.

[0388] Etapa 2: 5-terc-Butil 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3,5-dicarboxilato de 3-benzila (17,0 g, 47,57 mmol) foi dissolvido em HCl a 4 M/dioxano (500 ml) à t.a. e a mistura resultante foi agitada durante a noite. Após a conclusão da reação (monitorada por RMN), a mistura resultante foi evaporada até secura para obter 4H,5H,6H,7H-

pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxilato de benzila (10,0 g, 38,87 mmol, 71,6 % de rendimento) como resíduo sólido amarelo claro.

[0389] Etapa 3: A uma solução de ácido indol-2- carboxílico (6,1 g, 37,82 mmol) e trietilamina (9,57 g, 94,56 mmol, 13,18 ml) em DMF seco (200 ml) à t.a. foi adicionado HATU (15,1 g, 39,72 mmol) em uma porção. A mistura resultante foi agitada por 10 min antes de cloridrato de 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxilato de benzila (10,0 g, 34,04 mmol) ter sido adicionado e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi vertida em 1000 ml de água agitada e a mistura resultante foi filtrada. A torta de filtro foi lavada com MeOH/H2O (1:2 v:v, 3 x 100 ml), seca sob pressão reduzida para gerar 5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxilato de benzila (13,0 g, 32,47 mmol, 85,8 % de rendimento) como pó amarelo claro.

[0390] Etapa 4: 5-(1H-Indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxilato de benzila (12,75 g, 31,84 mmol) foi dissolvido em DMF (2500 ml),então, Pd a 10 % em carbono (2 g) foi adicionado. Todo o sistema foi nivelado com gás hidrogênio e um balão com hidrogênio foi conectado ao gargalo do frasco. A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante a noite. Quando a 1H RMN indicou ausência de material inicial, a mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida até volume total de cerca de 100-150 ml. Esse resíduo foi diluído com MeOH (500 ml) e filtrado. A torta de filtro foi lavada com MeOH (2 x 20) e seca sob pressão reduzida para gerar ácido 5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-

pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (9,57 g, 30,84 mmol, 96,9 % de rendimento) como pó amarelo claro.

[0391] 1H RMN (500 MHz, d6-DMSO) δ 4,25 (m, 2H), 4,33 (m, 2H), 5,17 (bus, 2H), 6,96 (s, 1H), 7,07 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,45 (dd, J= 8,2, 2,9 Hz, 1H), 7,64 (dd, J= 8,1, 2,5 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 11,66 (s, 1H), 12,42 (s, 1H). Síntese de 3-({1-[(2- hidroxietoxi)metil]ciclopropil}(metil)carbamoil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0392] Etapa 1: A uma solução de N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metilcarbamato de terc-butila

(2,0 g, 9,94 mmol) e [(2-bromoetoxi)metil]benzeno (2,35 g, 10,93 mmol, 1,73 ml) em DMF seco (40 ml) foi adicionado hidreto de sódio (476,9 mg, 19,87 mmol) em pequenas porções, mantendo a temperatura abaixo de 15 °C. A mistura resultante foi deixada em agitação durante a noite à t.a., então, a mistura de reação foi vertida em água (400 ml) e extraída com EtOAc (100 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 50 ml), salmoura, seca em Na2SO4 e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (80 g de sílica, gradiente de éter de petróleo/MTBE de 0 a 70 %) para gerar N-(1-[2- (benziloxi)etoxi]metilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc-butila (1,05 g, 3,13 mmol, 31,5 % de rendimento).

[0393] Etapa 2: N-(1-[2- (Benziloxi)etoxi]metilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc-butila (1,0 g, 2,98 mmol) foi dissolvido em HCl a 4 M em dioxano (30 ml) à t.a. e a mistura resultante foi agitada durante a noite. Após a conclusão da reação (monitorada por 1H RMN), a mistura foi evaporada até secura para obter cloridrato de 1-[2-(benziloxi)etoxi]metil-N- metilciclopropan-1-amina (800,0 mg, 2,94 mmol, 98,8 % de rendimento) como resíduo sólido que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0394] Etapa 3: A uma solução de ácido 5-[(terc- butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxílico (943,84 mg, 3,53 mmol) e trietilamina (744,43 mg, 7,36 mmol, 1,03 ml) em DMF (20 ml) à t.a. foi adicionado HATU (1,68 g, 4,41 mmol). A mistura resultante foi agitada por 10 min, então, cloridrato de 1-[2- (benziloxi)etoxi]metil-N-metilciclopropan-1-amina (800,0 mg, 2,94 mmol) foi adicionado e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (50 ml) e água (200 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 30 ml), salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de sílica, clorofórmio/acetonitrila com acetonitrila de 0-30 %) para gerar 3-[(1-[2- (benziloxi)etoxi]metilciclopropil)(metil)carbamoil] - 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (800,0 mg, 1,65 mmol, 56,1 % de rendimento).

[0395] Etapa 4: 3-[(1-[2- (Benziloxi)etoxi]metilciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (800,0 mg, 1,65 mmol) e paládio em carbono (5 %, 100 mg) foram misturados juntamente em MeOH seco (20 ml). O frasco foi evacuado e preenchido com gás hidrogênio a partir de um balão conectado. A mistura de reação foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-(1-[(2- hidroxietoxi)metil]ciclopropil(metil)carbamoil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (450,0 mg, 1,14 mmol, 69,1 % de rendimento).

[0396] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 7,67 (m, 1H), 8,50 (d, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,79 (d, 2H), 9,21 (s, 1H), 9,33 (s, 1H).

[0397] LCMS: m/z 395,2 Síntese de 3-({1-[(3- hidroxipropoxi)metil]ciclopropil}(metil)carbamoil)-

4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0398] Etapa 1: A uma solução de N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metilcarbamato de terc-butila (1,57 g, 7,8 mmol) e [(3-bromopropoxi)metil]benzeno (1,97 g, 8,58 mmol, 1,51 ml) em DMF (30 ml), hidreto de sódio (374,39 mg, 15,6 mmol) foi adicionado em algumas porções, mantendo a temperatura abaixo de 15 °C e a mistura resultante foi deixada em agitação durante a noite à t.a. A mistura de reação foi vertida em água (300 ml) e extraída com EtOAc (50 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 30 ml), salmoura, seca em Na2SO4 e concentrada em vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de sílica, éter de petróleo/MTBE a 0-35 %) para gerar N-(1-[3- (benziloxi)propoxi]metilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc-butila (320,0 mg, 915,69 µmol, 11,7 % de rendimento).

[0399] Etapa 2: N-(1-[3- (Benziloxi)propoxi]metilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc-butila (320,0 mg, 915,69 µmol) foi dissolvido em HCl a 4 M em dioxano (20 ml) à t.a. e a mistura resultante foi agitada durante a noite. A mistura resultante foi evaporada até secura para obter cloridrato de 1-[3- (benziloxi)propoxi]metil-N-metilciclopropan-1-amina (350,0 mg, 60,0 % de pureza, 734,75 µmol, 92,1 % de rendimento) como resíduo sólido que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0400] Etapa 3: A uma solução de ácido 5-[(terc- butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxílico (228,36 mg, 854,37 µmol) e trietilamina (216,13 mg, 2,14 mmol, 300,0 µl) em DMF (20 ml) foi adicionado hexafluorofosfato de (1H-1,2,3-benzotriazol-1- iloxi)tris(dimetilamino)fosfônio (415,66 mg, 939,8 µmol). A mistura resultante foi agitada por 10 min, então, cloridrato de 1-[3-(benziloxi)propoxi]metil-N- metilciclopropan-1-amina (220,0 mg, 769,74 µmol) foi adicionado e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (50 ml) e água (200 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 30 ml), salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (40 g de sílica, clorofórmio/acetonitrila de 0-50 %) para gerar 3-[(1-[3- (benziloxi)propoxi]metilciclopropil)(metil)carbamoil]-

4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (200,0 mg, 401,11 µmol, 46,9 % de rendimento).

[0401] Etapa 4: 3-[(1-[3- (Benziloxi)propoxi]metilciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (200,0 mg, 401,11 µmol) e paládio em carbono (5 %, 50 mg) foram misturados juntamente em MeOH seco (20 ml). O frasco foi evacuado e preenchido com gás hidrogênio a partir de um balão conectado. A mistura de reação foi agitada à t.a. durante a noite, então, filtrada. O filtrado foi concentrado em vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-(1-[(3- hidroxipropoxi)metil]ciclopropil(metil)carbamoil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (120,0 mg, 293,76 µmol, 73,2 % de rendimento).

[0402] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 8 0,93 (m, 4H), 1,47 (s, 9H), 1,80 (p, 2H), 1,93 (m, 1H), 3,16 (m, 3H), 3,62 (m, 4H), 3,71 (t, 2H), 3,87 (m, 2H), 4,14 (s, 2H), 4,86 (s, 2H), 7,90 (m, 1H).

[0403] LCMS: m/z 408 Síntese de 3-[(1-{[(2-2- difluoroetil)amino]metil}ciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0404] Etapa 1: A uma solução agitada de N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metilcarbamato de terc-butila (2,25 g, 11,18 mmol) em DCM seco (30 ml) à t.a. foi adicionada em porções 1,1,1-tris(acetoxi)-1,1-di-hidro-1,2- benziodoxol-3(1H)-ona(4,74 g, 11,18 mmol). A mistura de reação foi agitada à t.a.

Por 1 h e, então, resfriada a 0 °C.

Uma solução de hidróxido de sódio (2,01 g, 50,3 mmol)

em água (5 ml) foi, então, adicionada por gotejamento e a mistura foi agitada à t.a. por 15 min. A fase orgânica foi separada, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para produzir N-(1-formilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc- butila (2,2 g, 11,04 mmol, 98,8 % de rendimento) como óleo amarelo.

[0405] Etapa 2: A uma solução agitada de N-(1- formilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc-butila (2,2 g, 11,04 mmol) em DCM seco (50 ml) foi adicionada fenilmetanamina (1,18 g, 11,04 mmol). A mistura foi agitada à t.a. Por 5 h. A uma mistura de reação resfriada foi adicionado acetato de sódio bis(acetiloxi)boramidila (7,02 g, 33,12 mmol) em uma porção e a agitação continuou por 5 h. A mistura foi resfriada a 0 °C e solução de NaOH aq. A 15 % (20 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada por 30 min e a fase orgânica foi separada, seca em Na2SO4, filtrada e concentrada para produzir N-1- [(benzilamino)metil]ciclopropil-N-metila carbamato de terc- butila (2,75 g, 85 % de rendimento) como óleo amarelo.

[0406] Etapa 3: A uma solução resfriada (0 °C) e agitada de N-1-[(benzilamino)metil]ciclopropil-N-metilcarbamato de terc-butila (1,75 g, 6,02 mmol) em acetonitrila seca (10 ml) foi adicionado carbonato de potássio (1,67 g, 12,05 mmol) seguido por adição por gotejamento de trifluorometanossulfonato de 2,2-difluoroetila (1,68 g, 7,83 mmol). A mistura de reação foi aquecida à t.a. e agitada durante a noite. A mistura foi vertida em água (30 ml) e extraída com DCM (3x10 ml). As fases orgânicas combinadas foram secas em Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash em sílica com hexano-MTBE (4:1) como eluente para produzir N-(1-[benzil(2,2-difluoroetil)amino]metilciclopropil)-N- metilcarbamato de terc-butila (900,0 mg, 2,54 mmol, 42,2 % de rendimento) como óleo incolor.

[0407] Etapa 4: A uma solução de N-(1-[benzil(2,2- difluoroetil)amino]metilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc-butila (199,9 mg, 564,0 µmol) em CH2Cl2 (3 ml) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (1 ml). A solução resultante foi agitada por 12 h à t.a., então, concentrada. A resíduo foi triturada com hexano e coletada por filtração para gerar dicloridrato de 1-[benzil(2,2- difluoroetil)amino]metil-N-metilciclopropan-1-amina (156,0 mg, 95,1 % de rendimento) como sólido branco.

[0408] Etapa 5: A uma solução de dicloridrato de 1- [benzil(2,2-difluoroetil)amino]metil-N-metilciclopropan-1- amina (155,96 mg, 476,58 µmol) e [(dimetilamino)(3H- [1,2,3]triazolo[4,5- b]piridin-3- iloxi)metilideno]dimetilazânio; hexafluoro-lambda5- fosfamida (181,21 mg, 476,58 µmol) em DMF (2 ml) foi adicionada trietilamina (241,13 mg, 2,38 mmol). A mistura foi agitada à t.a. por 15 min. Ácido 5-[(terc- butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxílico (127,38 mg, 476,58 µmol) foi adicionado, e a reação agitada à t.a. por 24 h, então, diluída com salmoura. A mistura foi extraída com EtOAc (2 x 20 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir 3- [(1-[benzil(2,2- difluoroetil)amino]metilciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-

butila bruto (200,0 mg, 397,15 µmol, 83,3 % de rendimento) como óleo castanho que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0409] Etapa 6: A uma solução agitada de 3-[(1- [benzil(2,2- difluoroetil)amino]metilciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (200,0 mg, 397,15 µmol) em MeOH (5 ml) foi adicionado paládio em carbono (10 %, 0,05 g). A mistura foi agitada à t.a. em hidrogênio (balão) por 48 h. A mistura foi purgada com nitrogênio, então, filtrada, e o filtrado concentrado. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-[(1-[(2,2- difluoroetil)amino]metilciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (70,0 mg, 42,7 % de rendimento) como óleo incolor.

[0410] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,76 (m, 3H), 1,43 (s, 9H), 2,26 (m, 1H), 2,90 (m, 4H), 3,05 (s, 3H), 3,80 (s, 2H), 4,10 (d, 2H), 4,71 (s, 2H), 5,96 (tt, 1H), 7,84 (s, 1H).

[0411] LCMS: m/z 414,1 Síntese de 3-[metil(1-{[(2,2,2- trifluoroetil)amino]metil}ciclopropil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0412] Etapa 1: A uma solução agitada de N-1- [(benzilamino)metil]ciclopropil-N-metilcarbamato de terc- butila (537,25 mg, 1,85 mmol) em acetonitrila seca (10 ml) foi adicionado carbonato de potássio (767,06 mg, 5,55 mmol) seguido por trifluorometanossulfonato de 2,2,2- trifluoroetila (644,56 mg, 2,78 mmol, 400,0 ml). A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante a noite.

A mistura foi, então, resfriada, concentrada, e o resíduo obtido foi dissolvido em DCM (10 ml). A fase orgânica foi lavada com água (3 ml), seca em Na2SO4 e concentrada.

O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash em hexano-MTBE (10:1) para produzir N-(1-[benzil(2,2,2-

trifluoroetil)amino]metilciclopropil)-N-metilcarbamato de terc-butila (410,0 mg, 1,1 mmol, 59,5 % de rendimento) como óleo incolor.

[0413] Etapa 2: A uma solução agitada de N-(1- [benzil(2,2,2-trifluoroetil)amino]metilciclopropil)-N- metilcarbamato de terc-butila (410,0 mg, 1,1 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (3 ml, 12 mmol). A mistura resultante foi agitada durante a noite, então, evaporada até secura para gerar dicloridrato de 1- [benzil(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil-N-metilciclopropan- 1-amina (330,0 mg, 955,88 µmol, 86,8 % de rendimento) como óleo amarelo.

[0414] Etapa 3: A uma solução de HATU (381,96 mg, 1,0 mmol) em DMF (3 ml) foram adicionados trietilamina (484,05 mg, 4,78 mmol) e ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (255,71 mg, 956,72 µmol). A mistura de reação foi agitada à t.a. por 30 min, então, uma solução de dicloridrato de 1- [benzil(2,2,2-trifluoroetil)amino]metil-N-metilciclopropan- 1-amina (330,29 mg, 956,72 µmol) em DMF (1 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada à t.a. durante a noite e vertida em água (5 ml). A mistura foi extraída com EtOAc (2 x 5 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com água, NaHCO3 aq., secas em Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir 3-[(1-[benzil(2,2,2- trifluoroetil)amino]metilciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila bruto (600,0 mg, 77,0 % de pureza, 885,78 µmol, 92,6 % de rendimento) como óleo castanho que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0415] Etapa 4: A uma solução agitada de 3-[(1- [benzil(2,2,2- trifluoroetil)amino]metilciclopropil)(metil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (600,0 mg, 1,15 mmol) em MeOH (10 ml) foi adicionado paládio em carbono (10 %, 70 mg). A mistura foi agitada sob H2 (balão) por 5 dias. A mistura foi filtrada, concentrada e purificada por HPLC para gerar 3-[metil(1-[(2,2,2- trifluoroetil)amino]metilciclopropil)carbamoil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (218,5 mg, 506,43 µmol, 44,1 % de rendimento) como óleo castanho.

[0416] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,76 (s, 3H), 1,43 (s, 9H), 2,65 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 3,11 (m, 3H), 3,27 (m, 3H), 3,80 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), 4,71 (m, 2H), 7,83 (m, 1H).

[0417] LCMS: m/z 432,2 Síntese de 4-{4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carbonil}-8-oxa-4-azaspiro [2,6] nonano

[0418] Etapa 1: A uma solução agitada de ácido 5-[(terc- butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxílico (489,9 mg, 1,83 mmol) e cloridrato de 8-oxa-4- azaspiro[2,6]nonano (300,0 mg, 1,83 mmol) em DMF (5 ml) foram adicionados HATU (906,01 mg, 2,38 mmol) e trietilamina (649,15 mg, 6,42 mmol, 890,0 µl). Então, a mistura foi agitada durante a noite à t.a. e, então,

vertida em água e extraída com MTBE (2 x 15 ml). As frações orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com água (20 ml), secas em Na2SO4, e concentradas para gerar 3-8-oxa-4- azaspiro[2.6]nonano-4-carbonil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (500,0 mg, 91,0 % de pureza, 1,21 mmol, 65,9 % de rendimento).

[0419] Etapa 2: A uma solução de 3-8-oxa-4- azaspiro[2.6]nonano-4-carbonil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (500,0 mg, 1,33 mmol) em MeOH (10 ml) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (2 ml, 8 mmol). A solução resultante foi agitada por 12 h, e, então, concentrada sob pressão reduzida. O produto foi tratado com MTBE (50 ml) e coletada por filtração, então, seco em vácuo a 40 °C para gerar cloridrato de 4- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil-8-oxa-4- azaspiro[2.6]nonano (220,0 mg, 90,0 % de pureza, 633,0 µmol, 54 % de rendimento).

[0420] 1H RMN (500 MHz, d6-DMSO) δ 0,90 (m, 4H), 1,95 (m, 2H), 3,50 (m, 3H), 3,64 (m, 5H), 4,37 (m, 2H), 4,47 (m, 2H), 7,77 (s, 1H), 10,09 (m, 2H).

[0421] LCMS: m/z 277,2 Síntese de 4-{4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carbonil}-7-oxa-4- azaspiro [2.6] nonano

[0422] Etapa 1: A uma solução agitada de ácido 5-[(terc- butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-

carboxílico (489,9 mg, 1,83 mmol) e cloridrato de 7-oxa-4- azaspiro[2.6]nonano (300,0 mg, 1,83 mmol) em DMF (5 ml) foram adicionados HATU (906,01 mg, 2,38 mmol) e trietilamina (649,15 mg, 6,42 mmol, 890,0 µl). A mistura foi agitada durante a noite à t.a. e, então, vertida em água e extraída com MTBE (2 x 15 ml). As frações orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com água, secas em sulfato de sódio anidro e concentradas para gerar 3-7-oxa- 4-azaspiro[2.6]nonano-4-carbonil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (350,0 mg, 95,0 % de pureza, 883,25 µmol, 48,2 % de rendimento).

[0423] Etapa 2: A uma solução de 3-7-oxa-4- azaspiro[2.6]nonano-4-carbonil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (350,0 mg, 929,74 µmol) em metanol (10 ml) foi adicionado solução de HCl a 4 N em dioxano (2 ml) e a solução resultante foi agitada por 12 h a 25 °C. Após a conclusão da reação (monitorada por HRMN), a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto foi tratado com MTBE e coletada por filtração, então, seco em vácuo a 40 °C para gerar cloridrato de 4-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carbonil-7-oxa-4-azaspiro[2.6]nonano (110,0 mg, 91,0 % de pureza, 320,02 µmol, 34,4 % de rendimento).

[0424] 1H RMN (400 MHz, D2O) δ 0,87 (m, 4H), 1,73 (m, 1H), 3,71 (ra, 5H), 3,93 (m, 2H), 4,39 (m, 2H), 4,55 (m, 3H), 7,82 (m, 1H).

[0425] LCMS: m/z 277,2 Síntese de 2,2-difluoro-4- {4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a] pirazina-3-carbonil} morfolina

[0426] Etapa 1: A uma solução agitada de cloridrato de 2,2-difluoromorfolina (500,0 mg, 3,13 mmol) e ácido 5- [(terc-butoxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxílico (837,66 mg, 3,13 mmol) em DMF (5 ml) foram adicionados HATU (1,55 g, 4,07 mmol) e trietilamina (1,05 g, 10,34 mmol, 1,44 ml). A mistura foi agitada à t.a. durante a noite e, então, vertida em água (50 ml). O produto foi extraído com MTBE (2 x 50 ml). As frações orgânicas combinadas foram lavadas três vezes com água, secas em sulfato de sódio anidro, e o solvente foi removido a vácuo. O produto foi purificado por HPLC para gerar 3-(2,2-difluoromorfolina-4-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (315,0 mg, 98,0 % de pureza, 829,02 µmol, 26,5 % de rendimento) como óleo amarelo.

[0427] Etapa 2: Ao 3-(2,2-difluoromorfolina-4-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (315,0 mg, 845,94 µmol) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (4 ml, 16 mmol). A mistura resultante foi agitada durante a noite, então, concentrada até secura para gerar cloreto de 3-(2,2- difluoromorfolina-4-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazin-5-ium (185,0 mg, 98,0 % de pureza, 587,28 µmol, 69,5 % de rendimento) como um sólido.

[0428] 1H RMN (500 MHz, d6-DMSO) δ 3,64 (m, 2H), 3,80 (m, 2H), 4,04 (m, 2H), 4,13 (m, 2H), 4,38 (m, 2H), 4,45 (m,

2H), 7,91 (s, 1H), 10,21 (s, 2H).

[0429] LCMS: m/z 273 Síntese de N-{1-[(difluorometoxi) metil] ciclopropil} - 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0430] Etapa 1: A uma solução de dicloridrato de ácido 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (5,0 g, 20,83 mmol) em THF/H2O (9:1) (100 ml) foi adicionada trietilamina (9,48 g, 93,72 mmol, 13,06 ml). A mistura resultante foi agitada por 5 min, então, N- (benziloxicarboniloxi)succinimida (5,71 g, 22,91 mmol) foi adicionada e a mistura resultante agitada durante a noite. A mistura foi, então, concentrada e o resíduo foi dividido entre EtOAc (50 ml) e água (50 ml), a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada para gerar ácido 5-[(benziloxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico bruto (6,5 g) como um sólido amarelo.

[0431] Etapa 2: 1-[(Difluorometoxi)metil]ciclopropan-1 - amina (796,69 mg, 5,81 mmol), HATU (971,99 mg, 2,56 mmol) e trietilamina (352,74 mg, 3,49 mmol, 490,0 µl) foram misturados em DMF seco (10 ml) e a mistura resultante foi agitada à t.a. por 10 minutos. Ácido 5- [(benziloxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 3-carboxílico (700,0 mg, 2,32 mmol) foi, então, adicionado, e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura foi, então, vertida em água (60 ml). O precipitado resultante foi coletado por filtração, lavado com H2O (2 x 10 ml) e seco. O material resultante foi purificado por HPLC para gerar 3-(1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropilcarbamoil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de benzila (630,0 mg, 1,5 mmol, 64,5 % de rendimento).

[0432] Etapa 3: A uma solução de 3-(1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropilcarbamoil)- 4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazine-5-carboxilato de benzila (630,0 mg, 1,5 mmol) em MeOH seco (5 ml) foi adicionado paládio a 10 % em carbono (20 mg). A mistura resultante foi hidrogenada à pressão de 1 atm. Após o consumo do material inicial (controle de 1H RMN), a mistura foi filtrada. O filtrado foi evaporado até secura para obter N-1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (330,0 mg, 1,15 mmol, 76,9 % de rendimento).

[0433] 1H RMN (500 MHz, d6-DMSO) δ 1,95 (s, 3H), 4,42 (s, 2H), 6,56 (s, 1H), 6,73 (s, 1H), 8,88 (s, 1H).

[0434] LCMS: m/z 287,2 Síntese de 3-{7-hidroxi-4-azaspiro[2,5]octano-4-carbonil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0435] A uma solução de ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (1,13 g, 4,22 mmol) e trietilamina (1,07 g, 10,55 mmol, 1,47 ml) em MeCN (20 ml) foi adicionado HATU (1,77 g, 4,64 mmol). A mistura resultante foi agitada por 10 min, então, cloridrato de 4- azaspiro[2,5]octan-7-ol (760,0 mg, 4,64 mmol) foi adicionado e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (50 ml) e água (100 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 20 ml), salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O produto foi purificado por HPLC para gerar 3-7-hidroxi-4-azaspiro[2.5]octano-4-carbonil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (275,0 mg, 730,51 µmol, 17,3 % de rendimento).

[0436] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 0,56 (m, 2H), 0,82 (m, 1H), 0,92 (m, 1H), 1,20 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,81 (m, 2H), 3,75 (m, 1H), 3,83 (m, 3H), 4,11 (m, 4H), 4,62 (m, 1H), 4,71 (m, 1H), 4,76 (m, 1H), 7,70 (s, 1H).

[0437] LCMS: m/z 377,2 Síntese de 3-{[(2R)-1,1)1trifluoropropan-2-il]carbamoil}- 4H115H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila

[0438] A uma solução de ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (804,39 mg, 3,01 mmol) e trietilamina (609,07 mg, 6,02 mmol, 840,0 µl) em DMF seco (30 ml) foi adicionado HATU (1,22 g, 3,21 mmol). A mistura resultante foi agitada por 10 min, então, cloridrato de (2R)-1,1,1-trifluoropropan-2-amina (300,0 mg, 2,01 mmol) foi adicionado e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (50 ml) e H2O (300 ml). A fase orgânica foi lavada com H2O (2 x 50 ml), salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida para gerar um resíduo castanho viscoso, que foi purificado por HPLC para gerar 3-[(2R)-1,1,1- trifluoropropan-2-il]carbamoil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (353,2 mg, 974,76 µmol, 48,6 % de rendimento).

[0439] 1H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 1,40 (d, 3H), 1,50 (s, 9H), 3,86 (m, 1H), 3,94 (m, 1H), 4,19 (m, 2H), 4,92 (m, 3H), 5,85 (m, 1H), 7,70 (s, 1H).

[0440] LCMS: m/z 363,4 Síntese de 3-{[2-(difluorometoxi)etil]carbamoil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a] pirazina-5-carboxilato de benzila

[0441] 2-(difluorometoxi)etan-1-amina (368,45 mg, 3,32 mmol), HATU (693,6 mg, 1,82 mmol) e trietilamina (184,59 mg, 1,82 mmol, 250,0 µl) foram misturados em DMF seco (5 ml) à t.a. e a mistura resultante foi agitada por 10 minutos. Ácido 5-[(benziloxi)carbonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (500,0 mg, 1,66 mmol) foi adicionado a isso e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura resultante foi dividida entre H2O (50 ml) e EtOAc (50 ml). A fase orgânica foi separada, seca em sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-[2- (difluorometoxi)etil]carbamoil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carboxilato de benzila (437,6 mg, 1,11 mmol, 66,9 % de rendimento) como sólido branco.

[0442] 1H RMN (400 MHz, d6-DMSO) δ 3,42 (m, 2H), 3,89 (m, 4H), 4,13 (t, 2H), 4,86 (m, 2H), 5,15 (s, 2H), 6,67 (t, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,39 (m, 4H), 7,98 (s, 1H), 8,28 (t, 1H).

[0443] LCMS: m/z 395,2 Síntese de 3-{[1-(trifluorometil)ciclopropil]carbamoil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0444] A uma solução de ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (827,49 mg, 3,1 mmol) em DMF seco (3 ml) foi adicionado HATU (1,29 g, 3,41 mmol). A mistura resultante foi agitada por 30 min, então, cloridrato de 1-(trifluorometil)ciclopropanamina (750,0 mg, 4,64 mmol) e trietilamina (1,25 g, 12,38 mmol, 1,73 ml) foram adicionados e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (50 ml) e água (30 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 20 ml), salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-[1-(trifluorometil)ciclopropil]carbamoil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (439,1 mg, 1,17 mmol, 37,9 % de rendimento) como sólido amarelo.

[0445] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,18 (m, 2H), 1,37 (m, 2H), 1,47 (s, 9H), 3,85 (t, 2H), 4,14 (t, 2H), 4,88 (s, 2H), 6,32 (s, 1H), 7,63 (s, 1H).

[0446] LCMS: m/z 375,2 Síntese de 3-{[1-(trifluorometil)ciclobutil]carbamoil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a] pirazina-5-carboxilato de terc-butila

[0447] A uma solução de ácido 5-[(terc-butoxi)carbonil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (761,13 mg, 2,85 mmol) em DMF seco (3 ml) foi adicionado HATU (1,19 g, 3,13 mmol). A mistura resultante foi agitada por 30 min, então, cloridrato de 1-(trifluorometil)ciclobutan-1-amina (750,0 mg, 4,27 mmol) e trietilamina (1,15 g, 11,39 mmol) foram adicionados e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtOAc (50 ml) e água (30 ml). A fase orgânica foi lavada com água (2 x 20 ml), salmoura, seca em sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC para gerar 3-[1-(trifluorometil)ciclobutil]carbamoil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (448,2 mg, 1,15 mmol, 40,5 % de rendimento) como sólido amarelo.

[0448] 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 1,46 (s, 9H), 2,01 (m, 2H), 2,58 (m, 4H), 3,85 (t, 2H), 4,15 (t, 2H), 4,88 (s, 2H), 5,83 (s, 1H), 7,63 (s, 1H).

[0449] LCMS: m/z 389,2 Exemplo 1 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(metoximetil)ciclopropil]-N,6- dimetil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0450] Rt (Método A) 3,03 min, m/z 422 [M+H]+

[0451] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,68 (s, 1H), 8,13 - 7,79 (m, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,82 - 5,36 (m, 1H), 5,32 - 5,23 (m, 1H), 4,98 - 4,54 (m, 1H), 4,46 - 4,25 (m, 1H), 4,18 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 3,62 - 3,48 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,20 - 2,88 (m, 3H), 1,32 - 0,67 (m, 7H). Exemplo 2 N-ciclopropil-5-(1H-indol-2-carbonil)-N,6-dimetil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (racemato)

[0452] Rt (Método A) 2,96 min, m/z 378 [M+H]+

[0453] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,68 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,66 (d, 3 = 7,9 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 1H), 6,96 - 6,91 (m, 1H), 5,57 (d, J = 18,5 Hz, 1H), 5,34 - 5,24 (m, 1H), 4,90 - 4,60 (m, 1H), 4,42 - 4,31 (m, 1H), 4,19 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,13 - 3,04 (m, 1H), 2,94 (s, 3H), 1,24 (d, J =

6,9 Hz, 3H), 0,85 - 0,77 (m, 2H), 0,64 - 0,56 (m, 2H). Exemplo 3 2-{3-ciclobutil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carbonil} -4,5-difluoro-1H-indol

[0454] Rt (Método A) 3,44 min, m/z 357 [M+H]+

[0455] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,09 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,31 - 7,20 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 5,11 - 4,70 (m, 2H), 4,30 - 4,12 (m, 4H), 3,40 - 3,34 (m, 1H), 2,29 - 2,17 (m, 2H), 2,09 - 1,86 (m, 3H), 1,85 - 1,76 (m, 1H). Exemplo 4 2-{3-ciclobutil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carbonil}-6-fluoro-4-metil-1H-indol

[0456] Rt (Método A) 3,5 min, m/z 353 [M+H]+

[0457] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 7,00 - 6,94 (m, 1H), 6,80 - 6,73 (m, 1H), 5,01 - 4,81 (m, 2H), 4,27 - 4,16 (m, 4H), 3,41 - 3,34 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 2,30 - 2,19 (m, 2H), 2,09 - 1,87 (m, 3H), 1,86 - 1,76 (m, 1H).

Exemplo 5 2-{3 -ciclobutil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carbonil}-4,6-difluoro-1H-indol

[0458] Ao ácido 4,6-difluoro-1H-indol-2-carboxílico (22,24 mg, 0,113 mmol) foi adicionada uma solução de HATU (47,2 mg, 0,124 mmol) em DMSO seco (400 µl) e a mistura foi agitada por 10 min, então, uma solução de 3-ciclobutil- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina (20 mg, 0,113 mmol) em DMSO seco (400 µl) foi adicionada seguida por trietilamina (100 µl, 0,717 mmol). A mistura foi agitada por 1 h, então, algumas gotas de água foram adicionadas e a mistura foi purificada diretamente por cromatografia em coluna de fase reversa para gerar o produto como um sólido branco (0,0141 g, 35 % de rendimento).

[0459] Rt (Método A) 3,47 min, m/z 357 [M+H]+

[0460] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,10 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,09 - 7,02 (m, 2H), 6,92 (td, J = 10,4, 1,9 Hz, 1H), 5,06 - 4,75 (m, 2H), 4,29 - 4,12 (m, 4H), 3,41 - 3,33 (m, 1H), 2,24 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 2,05 - 1,87 (m, 3H), 1,85 - 1,73 (m, 1H). Exemplo 6 2-{3-ciclobutil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carbonil}-1H-indol

[0461] Rt (Método A) 3,32 min, m/z 321 [M+H]+

[0462] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,67 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,47 - 7,41 (m, 2H), 7,21 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,06 - 4,77 (m, 2H), 4,33 - 4,11 (m, 4H), 3,41 - 3,34 (m, 1H), 2,29 - 2,18 (m, 2H), 2,08 - 1,86 (m, 3H), 1,85 - 1,77 (m, 1H). Exemplo 7 5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (metoximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0463] Rt (Método A) 3,27 min, m/z 442 / 444 [M+H]+

[0464] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,09 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,42 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,49 - 4,78 (m, 2H), 4,50 - 3,93 (m, 4H), 3,65 - 3,43 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,27 - 0,52 (m, 4H). Exemplo 8

5-(4,6-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (metoximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0465] Rt (Método A) 3,23 min, m/z 444 [M+H]+

[0466] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,14 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,13 - 6,99 (m, 2H), 6,93 (t, J = 10,2 Hz, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,53 - 3,97 (m, 4H), 3,65 - 3,43 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,18-0,47 (m, 4H). Exemplo 9 5-( 1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(metoximetil)ciclopropil]-N- metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0467] Rt (Método A) 3,04 min, m/z 408 [M+H]+

[0468] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,49 - 3,98 (m, 4H), 3,67 - 3,42 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 1,33 - 0,59 (m, 4H). Exemplo 10

5-(1H-indol-2-carbonil)-N-{[1- (metoximetil)ciclopropil]metil}-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0469] Rt (Método A) 3,03 min, m/z 408 [M+H]+

[0470] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 8,02 - 7,98 (m, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,26 (d, J = 24,2 Hz, 4H), 3,27 - 3,15 (m, 7H), 0,49 (s, 2H), 0,35 (q, J = 4,1 Hz, 2H). Exemplo 11 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-{1 -[(propan-2- iloxi)metil]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0471] Rt (Método J) 1,42 min, m/z 436 [M+H]+

[0472] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,21 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,2 Hz, 1H), 7,07 (ddd, J =

7,9, 6,8, 1,0 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,14 (m, 2H), 4,29 (m, 4H), 3,54 (m, 3H), 3,00 (m, 3H), 1,16 - 0,92 (m, 7H), 0,81 (m, 3H). Exemplo 12 N-[1-(etoximetil)ciclopropil]-5-(1H-indol-2-carbonil)-N- metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0473] Rt (Método J) 1,33 min, m/z 422 [M+H]+

[0474] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,21 (dd, J = 8,1, 6,8 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,40 - 4,89 (m, 2H), 4,30 (m, 4H), 3,57 (m, 2H), 3,49 - 3,41 (m, 2H), 3,02 (m, 3H), 1,09 (m, 4H), 0,82 (m, 3H). Exemplo 13 5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0475] Rt (Método A) 2,89 min, m/z 428 / 430 [M+H]+

[0476] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,08 (s, 1H), 8,13 - 7,80 (m, 1H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 5,42 - 4,85 (m, 3H), 4,40 - 4,05 (m, 4H), 3,77 - 3,53 (m, 2H), 3,14 - 2,84 (m, 3H), 1,30 - 0,58 (m, 4H). Exemplo 14 5-(4-etil-6-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0477] Rt (Método A) 3,01 min, m/z 440 [M+H]+

[0478] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,74 (s, 1H), 8,21 - 7,74 (m, 1H), 7,02 (s, 1H), 7,01 - 6,95 (m, 1H), 6,78 (dd, J = 10,8, 1,8 Hz, 1H), 5,36 - 4,72 (m, 3H), 4,41 - 4,05 (m, 4H), 3,78 - 3,46 (m, 2H), 3,20 - 2,80 (m, 5H), 1,28 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,20 - 0,61 (m, 4H). Exemplo 15 N-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-5-(1H-indol-2-carbonil)-N- metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0479] Rt (Método A) 2,68 min, m/z 394 [M+H]+

[0480] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 8,13 - 7,80 (m, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,41 - 4,67 (m, 3H), 4,45 - 4,00 (m, 4H), 3,79 - 3,51 (m, 2H), 3,19 - 2,81 (m, 3H), 1,29 - 0,60 (m, 4H). Exemplo 16 N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0481] Rt (Método B) 3,11 min, m/z 444 [M+H]+

[0482] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,22 (ddd, J = 8,2, 6,9, 1,1 Hz, 1H), 7,07 (ddd, J = 7,9, 6,8, 1,0 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,70 (t, J = 75,8 Hz,

1H), 5,41 - 4,88 (m, 2H), 4,38 - 4,14 (m, 4H), 4,11 - 3,94 (m, 2H), 3,21 - 2,93 (m, 3H), 1,21 - 0,79 (m, 4H). Exemplo 17 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(metoximetil)ciclopropil]-N,6- dimetil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (Enantiômero 2, configuração absoluta desconhecida)

[0483] Rt (Método A) 3,02 min, m/z 422 [M+H]+

[0484] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,67 (s, 1H), 8,07 - 7,83 (m, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (ra, 1H), 7,13 - 7,03 (m, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,80 - 5,36 (m, 1H), 5,36 - 5,20 (m, 1H), 4,90 - 4,49 (m, 1H), 4,43 - 4,28 (m, 1H), 4,18 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,65 - 3,47 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,20 - 2,89 (m, 3H), 1,42 - 0,64 (m, 7H).

[0485] O material estereoquimicamente puro foi obtido por separação do racemato (Exemplo 1) por SFC quiral, usando uma coluna Phenomenex Cellulose-1 (250 x 21,2 mm, 5 µm), taxa de fluxo de 70 ml/min, temperatura de coluna 35 °C, 17 MPa (170 bar). Eluente A - CO2, Eluente B - metanol/amônia a 20 mM, gradiente de eluição linear t = 0 min 10 % de B, t = 6,5 min 40 % de B, t = 8 min, 40 % de B. Exemplo 18 N-ciclopropil-5-(1H-indol-2-carbonil)-N,6-dimetil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (Enantiômero 2, configuração absoluta desconhecida)

[0486] Etapa 1: Ácido 5-(terc-butoxicarbonil)-6-metil- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (100 mg, 0,355 mmol) foi dissolvido em DMSO seco (3 ml) e HATU (149 mg, 0,391 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada por 10 min. Trietilamina (0,248 ml,1,777 mmol) foi adicionada seguida por uma solução de cloridrato de N- metilciclopropanamina (38,2 mg, 0,355 mmol) em DMSO seco (1 ml) e a mistura de reação foi agitada por 1 h. A reação foi extinta com algumas gotas de água e purificada usando cromatografia em coluna de fase reversa para gerar 3- [ciclopropil(metil)carbamoil]-6-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila como um óleo incolor (0,109 g, 83 % de rendimento.

[0487] Etapa 2: 3-(ciclopropil(metil)carbamoil)-6-metil- 6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina5(4H)-carboxilato de terc-butila (109 mg, 0,293 mmol) foi dissolvido em HCl (4 M em dioxano) (1 ml, 4,00 mmol). A mistura foi agitada durante a noite, então, concentrada e extraída com DCM para gerar cloridrato de N-ciclopropil-N,6-dimetil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional (0,076 g, 90 % de rendimento).

[0488] Etapa 3: Ácido indol-2-carboxílico (13,99 mg, 0,087 mmol) foi dissolvido em DMSO seco (0,4 ml) e HATU (36,3 mg, 0,095 mmol) foi adicionado. Em um recipiente separado, cloridrato de N-ciclopropil N,6-dimetil-4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (25 mg, 0,087 mmol) foi suspenso em DMSO seco (0,4 ml) e trietilamina (0,060 ml, 0,434 mmol) foi adicionada. As duas misturas foram combinadas e agitadas por 1 h. Algumas gotas de água foram adicionadas e a mistura de reação foi purificada diretamente por cromatografia em coluna de fase reversa para gerar o produto como um sólido branco (0,0183 g, 56 % de rendimento)

[0489] Rt (Método A) 2,97 min, m/z 378 [M+H]+

[0490] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,67 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,56 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 5,36 - 5,21 (m, 1H), 4,87 - 4,64 (m, 1H), 4,47 - 4,31 (m, 1H), 4,19 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 3,16 - 3,02 (m, 1H), 2,94 (s, 3H), 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,90 - 0,74 (m, 2H), 0,67 - 0,51 (m, 2H).

[0491] O material estereoquimicamente puro foi obtido por separação do racemato (Exemplo 2) por SFC quiral, usando uma coluna Phenomenex Cellulose-1 (250 x 21,2 mm, 5 µm), taxa de fluxo de 70 ml/min, temperatura de coluna 35 °C, 17 MPa (170 bar). Eluente A - CO2, Eluente B - metanol/amônia a 20 mM, gradiente de eluição linear t = 0 min 10 % de B, t = 6,5 min 40 % de B, t = 8 min, 40 % de B. Exemplo 19 2-(3-{6,6-difluoro-4-azaspiro[2,4]heptano-4-carbonil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil)-1H-indol

[0492] Rt (Método A) 1,39 min, m/z 426 [M+H]+

[0493] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,09 (m, 2H), 4,43 - 4,09 (m, 6H), 2,47 - 2,37 (m, 2H), 1,94 - 1,73 (m, 2H), 0,72 - 0,54 (m, 2H). Exemplo 20 N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-N,6-dimetil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 3-carboxamida

[0494] Rt (Método B) 3,23 min, m/z 458 [M+H]+

[0495] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,68 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 6,71 (t, 3 = 75,9 Hz, 1H), 5,76 - 5,41 (m, 1H), 5,37 - 5,21 (m, 1H), 4,89 - 4,51 (m, 1H), 4,48 - 4,28 (m, 1H), 4,18 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,14 - 3,93 (m, 2H),

3,23 - 2,87 (m, 3H), 1,24 (d, 3 = 6,7 Hz, 3H), 1,19 - 0,75 (m, 4H). Exemplo 21 5-(4,5-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0496] Rt (Método B) 3,27 min, m/z 480 [M+H]+

[0497] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,12 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,33 - 7,19 (m, 2H), 7,06 (s, 1H), 6,69 (t, J = 75,8 Hz, 1H), 5,48 - 4,77 (m, 2H), 4,51 - 4,14 (m, 4H), 4,14 - 3,93 (m, 2H), 3,21 - 2,90 (m, 3H), 1,41 - 0,71 (m, 4H). Exemplo 22 N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(4-etil-6- fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0498] Rt (Método B) 3,43 min, m/z 490 [M+H]+

[0499] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,74 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,01 - 6,95 (m, 1H), 6,92 - 6,46 (m, 2H), 5,37 - 4,92 (m, 2H), 4,38 - 4,15 (m, 4H), 4,13 - 3,95 (m, 2H), 3,23 - 2,95 (m, 3H), 2,90 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 1,28 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,15 - 0,73 (m, 4H). Exemplo 23 5-(6-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0500] Rt (Método B) 3,36 min, m/z 396 / 398 [M+H]+

[0501] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,93 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,66 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,69 (t, J = 76,0 Hz, 1H), 5,38 - 4,91 (m, 2H), 4,37 - 4,13 (m, 4H), 4,11 - 3,92 (m, 2H), 3,21 -

2,89 (m, 3H), 1,21 - 0,78 (m, 4H). Exemplo 24 5-(4,7-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0502] Rt (Método B) 3,25 min, m/z 480 [M+H]+

[0503] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,52 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,06 - 6,93 (m, 2H), 6,93 - 6,44 (m, 2H), 5,38 - 4,84 (m, 2H), 4,42 - 3,88 (m, 6H), 3,21 - 2,83 (m, 3H), 1,22 - 0,71 (m, 4H). Exemplo 25 5-(4-cloro-6-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0504] Rt (Método B) 3,4 min, m/z 396 / 498 [M+H]+

[0505] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,17 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,22 - 7,14 (m, 2H), 6,95 (s, 1H), 6,70 (t, J = 75,9 Hz, 1H), 5,42 - 4,91 (m, 2H), 4,46 - 4,15 (m, 4H), 4,14 - 3,92 (m, 2H), 3,21 - 2,88 (m, 3H), 1,31 - 0,71 (m, 4H). Exemplo 26 5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-sulfonamida

[0506] Rt (Método H) 1,05 min, m/z 346 [M+H]+ Exemplo 27 N-[(1-hidroxiciclobutil)metil]-5-(1H-indol-2-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3 -sulfonamida

[0507] Rt (Método H) 1,18 min, m/z 430 [M+H]+ Exemplo 28 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-(1,1,1-trifluoropropan-2-il)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonamida

[0508] Rt (Método H) 1,38 min, m/z 442 [M+H]+ Exemplo 29 N-(2-hidroxietil)-5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonamida

[0509] Rt (Método H) 1,03 min, m/z 390 [M+H]+

[0510] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,73 (s, 1H), 8,01 - 7,16 (m, 5H), 7,08 (dd, J = 8,0, 6,8 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 5,41 - 4,92 (m, 2H), 4,89 - 4,48 (m, 1H), 4,46 - 4,01 (m, 4H), 3,44 - 3,37 (m, 2H), 2,83 (t, J = 6,3 Hz, 2H). Exemplo 30 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-(oxolan-3-il)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonamida

[0511] Rt (Método H) 1,15 min, m/z 416 [M+H]+ Exemplo 31 N-(2-hidroxietil)-5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonamida

[0512] Rt (Método H) 1,09 min, m/z 404 [M+H]+ Exemplo 32 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(metoximetil)ciclopropil]-N- metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-3-sulfonamida

[0513] Rt (Método H) 1,36 min, m/z 444 [M+H]+ Exemplo 33 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[(oxolan-3-il)metil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonamida

[0514] Rt (Método H) 1,17 min, m/z 430 [M+H]+ Exemplo 34 2-{3-[(4,4-difluoropiperidin-1-il)sulfonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil}-1H-indol

[0515] Etapa 1: Ao 3-[(4,4-difluoropiperidin-1- il)sulfonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carboxilato de terc-butila (0,036 g, 0,09 mmol) foi adicionado HCl em dioxano (0,5 ml, 2 mmol). A mistura foi agitada por 2 h, então, concentrada a vácuo para gerar cloridrato de 4,4-difluoro-1- {4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-sulfonil}piperidina como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0516] Etapa 2: Uma mistura de ácido indol-2-carboxílico (0,232 g, 1,440 mmol) e HATU (0,546 g, 1,436 mmol) em DMF (16 ml) foi agitada à t.a. por 5 minutos. Um décimo sexto dessa mistura foi, então, adicionado ao cloridrato de 4,4- difluoro-1-{4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- sulfonil}piperidina (0,09 mmol). DIPEA (0,047 ml, 0,270 mmol) foi, então, adicionada, e a mistura agitada à t.a. por 2 horas. A mistura foi concentrada em vácuo e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,016 g, 40 % de rendimento).

[0517] Rt (Método H) 1,44 min, m/z 450 [M+H]+ Exemplo 35 1-{[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-

a]pirazin-3-il]sulfonil}piperidin-4-ol

[0518] Rt (Método H) 1,14 min, m/z 430 [M+H]+ Exemplo 36 2-{3-[(4-metilpiperazin-1-il)sulfonil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil}-1H-indol

[0519] Rt (Método H) 0,77 min, m/z 429 [M+H]+ Exemplo 37 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-(propan-2-il)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonamida

[0520] Rt (Método H) 1,28 min, m/z 388 [M+H]+ Exemplo 38 2-[3-(morfolina-4-sulfonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carbonil]-1H-indol

[0521] Rt (Método H) 1,25 min, m/z 416 [M+H]+ Exemplo 39 2-[3 -(pirrolidina-1 -sulfonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-5-carbonil]-1H-indol

[0522] Etapa 1: Ao 3-(pirrolidina-1-sulfonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila (0,0321 g, 0,09 mmol) foi adicionado HCl em dioxano

(0,5 ml, 2 mmol). A mistura foi agitada por 2 h, então, concentrada a vácuo para gerar cloridrato de 1- {4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonil}pirrolidina como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0523] Etapa 2: Uma mistura de ácido indol-2-carboxílico (0,232 g, 1,440 mmol) e HATU (0,546 g, 1,436 mmol) em DMF (16 ml) foi agitada à t.a. por 5 minutos. Um décimo sexto dessa mistura foi, então, adicionado ao cloridrato de 1- {4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-sulfonil}pirrolidina (0,09 mmol). DIPEA (0,047 ml, 0,270 mmol) foi, então, adicionada, e a mistura agitada à t.a. por 2 horas. A mistura foi concentrada em vácuo e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,019 g, 53 % de rendimento).

[0524] Rt (Método H) 1,33 min, m/z 400 [M+H]+ Exemplo 40 5-(1H-indol-2-carbonil)-N,N-dimetil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3 -sulfonamida

[0525] Rt (Método H) 1,26 min, m/z 374 [M+H]+

[0526] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,78 - 7,61 (m, 1H), 7,51 - 7,39 (m, 1H), 7,32 - 7,17 (m, 1H), 7,17 - 7,03 (m, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,40 -

4,91 (m, 2H), 4,62 - 4,09 (m, 4H), 2,60 (s, 6H). Exemplo 41 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-sulfonamida

[0527] Rt (Método H) 1,14 min, m/z 360 [M+H]+ Exemplo 42 2-(3-{6,6-difluoro-3-azabiciclo[3.1.0]hexano-3-carbonil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil)-1H-indol

[0528] Rt (Método A) 2,98 min, m/z 412 [M+H]+

[0529] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,73 - 11,66 (m, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,22 (ddd, J = 8,3, 6,8, 1,2 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 4,28 (d, J = 25,9 Hz, 4H),

4,09 (s, 1H), 4,04 - 3,92 (ra, 2H), 3,72 (s, 1H), 2,54 (s, 2H). Exemplo 43 2-(3-{3-azabiciclo[3.1.0]hexano-3-carbonil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil)-1H-indol

[0530] Rt (Método A) 2,89 min, m/z 376 [M+H]+

[0531] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 4,37 - 4,16 (m, 4H), 3,79 (m, 3H), 1,60 (m, 2H), 0,68 (m, 1H), 0,06 (m, 1H). Exemplo 44 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-[(piridin-2-il)metil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0532] Rt (Método A) 2,79 min, m/z 415 [M+H]+

[0533] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,59 - 8,43 (m, 1H), 7,83 (m, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,45 (d, 3 = 8,2 Hz, 1H), 7,25 (dt, J = 22,0, 6,7 Hz, 2H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,16 (s, 1H), 4,74 (s, 1H), 4,28 (m, 2H), 2,93 (s, 2H). Exemplo 45 1-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazin-3-il]ciclobutan-1-ol

[0534] Rt (Método A) 2,82 min, m/z 337 [M+H]+

[0535] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,67 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,4 Hz, 1H),

6,94 (s, 1H), 5,36 (s, 1H), 5,25 - 4,75 (m, 2H), 4,30 - 4,16 (m, 4H), 2,35 - 2,16 (m, 4H), 1,80 - 1,66 (m, 1H), 1,62 - 1,47 (m, 1H). Exemplo 46 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-[1-(piridin-4- il)ciclopropil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0536] Etapa 1: 3-(metil(1-(piridin-4- il)ciclopropil)carbamoil)-6,7-di-hidropirazolo[1,5- a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc-butila (102 mg, 0,257 mmol) foi dissolvido em HCl a 4 M em dioxano (1,5 ml, 6,00 mmol) e a solução resultante foi agitada à t.a. Por 4 h. A mistura de reação foi diluída com dioxano (4 ml) e concentrada, então, coevaporada com tolueno (2 x 10 ml) para gerar cloridrato de N-metil-N-[ 1 -(piridin-4- il)cicloρropil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida como um sólido esbranquiçado (0,098 g, 100 % de rendimento).

[0537] Etapa 2: A uma solução de ácido 1H-indol-2- carboxílico (20,63 mg, 0,128 mmol) em DMSO (0,6 ml) foi adicionado HATU (53,5 mg, 0,141 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, uma mistura de cloridrato de

N-metil-N-(1-(piridin4-il)ciclopropil)-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (42,7 mg, 0,128 mmol) e trietilamina (0,089 ml, 0,640 mmol) em DMSO (0,7 ml) foi adicionada e a reação foi agitada à t.a. por 1 h. A mistura foi filtrada e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,024 g, 42 % de rendimento).

[0538] Rt (Método A) 2,83 min, m/z 441 [M+H]+

[0539] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 8,61 - 8,28 (m, 2H), 7,75 - 7,57 (m, 1H), 7,51 - 7,34 (m, 1H), 7,29 - 7,15 (m, 1H), 7,15 - 6,83 (m, 5H), 5,43 - 4,96 (m, 2H), 4,45 - 3,97 (m, 4H), 3,26 - 2,93 (m, 3H), 1,80 - 1,32 (m, 4H). Exemplo 47 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-[ 1 -(pirimidin-2- il)ciclopropil] -4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0540] Etapa 1: Ao 3-(metil(1-(pirimidin-2- il)ciclopropil)carbamoil)-6,7-di-hidropirazolo[1,5- a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc-butila (100 mg, 0,251 mmol) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (1,4 ml, 5,60 mmol). Após um curto período, a mistura de reação foi diluída com dioxano (0,6 ml). HCl a 4 M adicional em dioxano (3,2 ml, 12,8 mmol) foi adicionado e a agitação continuou à t.a. por 48 h. A mistura foi concentrada para gerar cloridrato de N-metil-N-[1-(pirimidin- 2il)ciclopropil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional (0,160 g).

[0541] Etapa 2: A uma solução de ácido 1H-indol-2- carboxílico (38,5 mg, 0,239 mmol) em DMSO seco (0,7 ml) foi adicionado HATU (100 mg, 0,263 mmol). A solução resultante foi agitada à t.a. por 45 min, então, uma mistura de cloridrato de N-metil-N-(1-(pirimidin-2-il)ciclopropil)- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (80 mg, 0,239 mmol) e trietilamina (0,167 ml, 1,195 mmol) em DMSO (0,7 ml) foi adicionada e a reação foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado purificado diretamente por cromatografia para gerar 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-[1-(pirimidin-2- il)ciclopropil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida como um sólido branco macio (0,051 g, 48 % de rendimento).

[0542] Rt (Método A) 2,86 min, m/z 442 [M+H]+

[0543] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 11,71 (s, 1H), 8,85 - 8,48 (m, 2H), 7,75 - 7,58 (m, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,37 (t, J = 4,9 Hz, 1H), 7,30 - 7,13 (m, 1H), 7,13 - 7,02 (m, 1H), 7,02 - 6,87 (m, 1H), 6,80 (s, 1H), 5,46 - 4,90 (m, 2H), 4,45 - 3,94 (m, 4H), 3,30 - 2,98 (m, 3H), 1,95 - 1,30 (m,4H). Exemplo 48 2-(3-{2-azabiciclo[3.1.0]hexano-2-carbonil}-4H,5H,6H,7H-

pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil)-1H-indol

[0544] Rt (Método A) 2,89 min, m/z 376 [M+H]+

[0545] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,17 - 7,71 (m, 1H), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,15 - 7,02 (ra, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,27 (s, 2H), 4,30 (d, J = 30,9 Hz, 4H), 3,75 (d, 3 = 117,4 Hz, 2H), 3,27 (m, 1H), 2,19 - 1,44 (m, 3H), 0,84 (d, 3 = 141,0 Hz, 2H). Exemplo 49 5-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazin-3-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-6-ona

[0546] Etapa 1: Ao 3-(6-oxo-5-azaspiro[2.4]heptan-5-il)- 6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc-butila (21 mg, 0,063 mmol) foi adicionado HCl (4 M em dioxano) (395 µl, 1,579 mmol). A solução resultante foi agitada à t.a. por 2 h. HCl adicional foi adicionado (4 M em dioxano) (95 µl, 0,379 mmol) e a mistura agitada por 45 minutos. A mistura de reação foi diluída com dioxano (6 ml) e concentrada, então, coevaporada com tolueno (2 x 6 ml) para gerar cloridrato de 5- {4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazin-3-il}-5-azaspiro[2.4]heptan-6-ona como um sólido esbranquiçado que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0547] Etapa 2: A uma solução de ácido 1H-indol-2- carboxílico (5,16 mg, 0,032 mmol) em DMSO (213 µl) foi adicionado HATU (13,38 mg, 0,035 mmol). A solução resultante foi agitada à t.a. por 40 min. Então, uma mistura de cloridrato de 5-(4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin3-il) 5-azaspiro[2.4]heptan-6- ona (8,60 mg, 0,032 mmol) e Et3N (22,30 µl, 0,160 mmol) em DMSO (213 µl) foi adicionada e a reação foi agitada à ta. A mistura de reação foi, então, filtrada e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,0029 g, 24 % de rendimento).

[0548] Rt (Método A) 2,91 min, m/z 376 [M+H]+

[0549] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,68 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,27 - 7,15 (m, 1H), 7,11 - 7,02 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,14 - 4,80 (m, 2H), 4,37 - 4,10 (m, 4H), 3,65 (s, 2H), 2,47 (s, 2H), 0,72 - 0,64 (m, 4H). Exemplo 50 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(metoximetil)ciclopropil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0550] Rt (Método A) 2,82 min, m/z 337 [M+H]+

[0551] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,22 (ddd, J = 8,1, 6,8, 1,2 Hz, 1H), 7,08 (ddd, J = 8,2, 6,9, 0,9 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,48 - 4,95 (m, 2H), 4,41 - 4,09 (m, 4H), 3,41 (s, 2H), 3,24 (s, 3H), 0,82 - 0,61 (m, 4H). Exemplo 51 1-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazin-3-il]-3-fenilciclobutan-1-ol

[0552] Rt (Método A) 3,27 min, m/z 413 [M+H]+

[0553] 1H RMN (400-MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 7,68 - 7,60 (m, 2H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,35 - 7,23 (m, 4H), 7,25 - 7,13 (m, 2H), 7,07 (t, 3 = 7,4 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,51 (s, 1H), 5,37 - 4,72 (m, 2H), 4,46 - 4,03 (m, 4H), 3,10 - 2,97 (m, 1H), 2,83 - 2,71 (m, 2H), 2,41 - 2,31 (m, 2H).

Exemplo 52 5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-N-(2-hidroxietil)-N-metil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0554] Rt (Método A) 2,8 min, m/z 402 / 404 [M+H]+ Exemplo 53 N-(1-{[(2,2-difluoroetil)amino]metil}ciclopropil)-5-(1H- indol-2-carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0555] Rt (Método A) 2,97 min, m/z 457 [M+H]+

[0556] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 8,09 - 7,74 (m, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,21 (ddd, J = 8,2, 6,9, 1,2 Hz, 1H), 7,07 (ddd, J = 8,0, 6,9, 1,0 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,95 (t, J = 56,3 Hz, 1H), 5,36 - 4,78 (m, 2H), 4,46 - 3,99 (m, 4H), 3,26 - 2,70 (m, 7H), 2,24 (s, 1H), 1,19 - 0,67 (m, 4H). Exemplo 54 N-[2-(difluorometoxi)etil]-5-(1H-indol-2-carbonil)-

4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0557] Rt (Método A2) 3,18 min, m/z 404 [M+H]+

[0558] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,32 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,67 (t, J = 76,0 Hz, 1H), 5,40 - 4,96 (m, 2H), 4,41 - 4,12 (m, 4H), 3,89 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,47 - 3,39 (m, 3H). Exemplo 55 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-[(1-metil-1H-pirazol-5- il)metil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0559] Rt (Método A) 2,7 min, m/z 418 [M+H]+

[0560] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 7,84

(s, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,27 - 7,16 (m, 1H), 7,14 - 7,04 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,23 - 6,11 (m, 1H), 5,33 - 4,94 (m, 2H), 4,78 - 4,63 (m, 2H), 4,38 - 4,15 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 3,08 (s, 3H). Exemplo 56 2-(3-{7,7-difluoro-4-azaspiro[2.4]heptano-4-carbonil}- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil)-1H-indol

[0561] Rt (Método A) 3,2 min, m/z 426 [M+H]+

[0562] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 7,13 - 7,03 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,21 - 4,92 (m, 2H), 4,38 - 4,15 (m, 4H), 4,01 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,07 -1,91 (m, 2H), 0,94 - 0,78 (m, 2H). Exemplo 57 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-[1-(1,3-oxazol-4- il)ciclopropil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0563] A uma solução de ácido 5-(1H-indol-2-carbonil)- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (0,050 g, 0,161 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi adicionado HATU (61,3 mg, 0,161 mmol). A solução resultante foi agitada sob uma atmosfera de N2 por 30 min, posteriormente, uma solução de cloridrato de N-metil-1-(oxazol-4- il)ciclopropan-1-amina (28,1 mg, 0,161 mmol) e Et3N (0,074 ml, 0,532 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada por 1 h, então, filtrada e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,032 g, 46 % de rendimento).

[0564] Rt (Método A) 2,85 min, m/z 431 [M+H]+

[0565] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,40 - 7,14 (m, 2H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,45 - 4,90 (m, 2H), 4,43 - 3,97 (m, 4H), 3,03 (s, 3H), 1,65 -1,17 (m, 4H). Exemplo 58 4-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carbonil]-4- azaspiro [2,5] octan-7-ol

[0566] Rt (Método A) 2,64 min, m/z 420 [M+H]+

[0567] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,44 - 4,88 (m, 2H), 4,84,4,64 (m, 1H), 4,46 - 4,04 (m, 5H), 3,91 - 3,73 (m, 1H), 3,18 - 2,76 (m, 1H), 1,94 - 1,65 (m, 2H), 1,58 - 1,07 (m, 2H), 1,00 - 0,74 (m, 2H), 0,67 - 0,45 (m, 2H). Exemplo 59 2-{3-[7-(difluorometoxi)-4-azaspiro [2,5]octano-4- carbonil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil} - 1H-indol

[0568] A uma solução de ácido 5-(1H-indol-2-carbonil)- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (0,050 g, 0,161 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi adicionado HATU (61,3 mg, 0,161 mmol). A solução resultante foi agitada sob atmosfera de N2 por 30 min, posteriormente, uma solução de 7-(difluorometoxi)-4-azaspiro[2.5]octano (28,6 mg, 0,161 mmol) e Et3N (0,074 ml, 0,532 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada por 1 h, então, filtrada e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,037 g, 26 % de rendimento).

[0569] Rt (Método A) 3,16 min, m/z 470 [M+H]+

[0570] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,29 -7,18 (m, 1H), 7,07 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,99 - 6,53 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,54 - 4,02 (m, 6H), 2,06 - 1,33 (m, 4H), 1,03 - 0,51 (m, 4H). Exemplo 60 N,N-diciclopropil-5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-

pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0571] Rt (Método A) 2,95 min, m/z 390 [M+H]+

[0572] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,28 - 7,15 (m, 1H), 7,12 - 7,01 (m, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,39 - 4,97 (m, 2H), 4,38 - 4,10 (m, 4H), 2,86 - 2,69 (m, 2H), 0,83 - 0,56 (m, 8H). Exemplo 61 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(piridin-2-il)ciclopropil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0573] Rt (Método A) 2,82 min, m/z 427 [M+H]+

[0574] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,47 - 8,36 (m, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,72 - 7,56 (m, 2H), 7,43 (d, 1H), 7,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,26 - 7,01 (m, 3H), 6,94 (s, 1H), 5,39 - 4,99 (m, 2H), 4,42 - 4,11 (m, 4H), 1,58-1,41 (m, 2H), 1,28 -1,11 (m, 2H). Exemplo 62 N-[2-(difluorometoxi)etil]-5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3 - carboxamida

[0575] Rt (Método A) 2,91 min, m/z 418 [M+H]+

[0576] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,91 - 7,74 (m, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,68 (t, J = 75,7 Hz, 1H), 5,27 - 4,94 (m, 2H), 4,38 - 4,17 (m, 4H), 4,06 - 3,94 (m, 2H), 3,75 - 3,60 (m, 2H), 3,29, 2,80 (m, 3H). Exemplo 63 N-benzil-5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0577] Rt (Método A) 3,14 min, m/z 414 [M+H]+

[0578] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 8,03 - 7,75 (m, 1H), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,39 - 7,17 (m, 6H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,42 - 4,90 (m, 2H), 4,80 - 4,55 (m, 2H), 4,37 - 4,19 (m, 4H), 3,26 - 2,73 (m, 3H). Exemplo 64 N-{1-[(2-hidroxietoxi)metil] ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0579] Etapa 1: A uma solução de 3-((1-((2- hidroxietoxi)metil)ciclopropil)(metil)carbamoil)-6,7-di- hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc-

butila (100 mg, 0,254 mmol) em DCM (0,5 ml) foi adicionado HCl (4 M em dioxano) (2 ml, 8,00 mmol). A mistura de reação foi agitada por 90 min, então, concentrada e extraída com DCM para produzir N-{1-[(2-hidroxietoxi)metil]ciclopropil}- N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido rosa que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0580] Etapa 2: Ácido indol-2-carboxílico (20,46 mg, 0,127 mmol) foi dissolvido em DMSO seco (0,4 ml) e HATU (57,9 mg, 0,152 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada por 10 min. Em um recipiente separado, cloridrato de N-( 1 -((2-hidroxietoxi)metil)ciclopropil)-N-metil-4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (42 mg, 0,127 mmol) foi dissolvido em DMSO seco (0,4 ml) e trietilamina (0,088 ml, 0,635 mmol) foi adicionada. Algumas gotas de água foram adicionadas para gerar uma solução quase clara. As misturas foram combinadas e agitadas por 1 h, então, filtradas, lavadas com metanol (0,1 ml). O filtrado foi purificado diretamente por cromatografia para gerar o produto como um pó branco (0,0387 g, 70 % de rendimento).

[0581] Rt (Método B) 2,68 min, m/z 438 [M+H]+

[0582] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,10 - 7,78 (m, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,43 - 4,84 (hi, 2H), 4,59 (s, 1H), 4,38 - 4,01 (m, 4H), 3,69 - 3,55 (m, 2H), 3,55 - 3,40 (m, 4H), 3,25 - 2,83 (m, 3H), 1,30 - 0,59 (m, 4H). Exemplo 65 N-{1-[(3-hidroxipropoxi)metil] ciclopropil}-5-(1H-indol-2-

carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0583] Rt (Método B) 2,76 min, m/z 452 [M+H]+ Exemplo 66 2-[3-(1,3-tiazol-4-il)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 5-carbonil]-1H-indol

[0584] A uma solução de cloridrato de 4-{4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazin-3-il}-1,3-tiazol (0,0291 g, 0,12 mmol) em DMSO (0,4 ml) foi adicionada uma gota de água. NEt3 (0,075 ml, 0,538 mmol) foi, então, adicionada. Em um recipiente separado, ácido indol-2-carboxílico (0,212 g) e HATU (0,600 g) foram dissolvidos em DMSO (3,8 ml). Após 10 minutos, 0,4 ml dessa solução foram adicionados à solução de amina, e essa mistura agitada por 48 h. A mistura foi, então, filtrada, e o filtro lavado com metanol (0,1 ml). O filtrado foi purificado diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,0275 g, 66 % de rendimento).

[0585] Rt (Método B) 3,02 min, m/z 350 [M+H]+ Exemplo 67

4-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carbonil]-8-oxa-4-azaspiro[2.6]nonano

[0586] A uma solução ácido de indol-2-carboxílico (0,019 mg, 0,12 mmol) em DMSO (0,4 ml) foi adicionado HATU (0,054 g, 0,144 mmol). Uma solução de trietilamina (0,075 ml, 0,538 mmol) e 8-oxa-4-azaspiro[2.6]nonano (0,0375 g, 0,12 mmol) em DMSO (0,4 ml) foi adicionada, e a mistura foi agitada por 48 h. A mistura foi, então, filtrada, enxaguada com metanol (0,1 ml) e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um pó branco (0,035 g, 65 % de rendimento).

[0587] Rt (Método B) 2,81 min, m/z 420 [M+H]+ Exemplo 68 4-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carbonil]-7-oxa-4-azaspiro[2.6]nonano

[0588] A uma solução ácido de indol-2-carboxílico (0,019 mg, 0,12 mmol) em DMSO (0,4 ml) foi adicionado HATU (0,054 g, 0,144 mmol). Uma solução de trietilamina (0,075 ml, 0,538 mmol) e 7-oxa-4-azaspiro[2.6]nonano (0,0370 g, 0,12 mmol) em DMSO (0,4 ml) foi adicionada, e a mistura foi agitada por 48 h. A mistura foi, então, filtrada, enxaguada com metanol (0,1 ml) e purificada diretamente por cromatografia para gerar o produto como um pó branco (0,026 g, 53 % de rendimento).

[0589] Rt (Método B) 2,81 min, m/z 420 [M+HJ+ Exemplo 69 2-[3-(2,2-difluoromorfolina-4-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil]-1H-indol

[0590] Rt (Método B) 3,01 min, m/z 416 [M+H]+ Exemplo 70 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(metoximetil)ciclopropil]-N,6- dimetil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (Enantiômero 1, configuração absoluta desconhecida)

[0591] Rt (Método A) 3,03 min, m/z 422 [M+H]+

[0592] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,67 (s, 1H), 8,04 - 7,88 (m, 1H), 7,68 - 7,62 (m, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 1H),

7,26 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,83 - 5,38 (m, 1H), 5,38 - 5,19 (m, 1H), 5,02 - 4,55 (m, 1H), 4,50 - 4,26 (m, 1H), 4,17 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 3,64 - 3,46 (m, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,15 - 2,90 (m, 3H), 1,34 - 0,64 (m, 7H).

[0593] O material estereoquimicamente puro foi obtido por separação do racemato (Exemplo 1) por SFC quiral, usando uma coluna Phenomenex Cellulose-1 (250 x 21,2 mm, 5 µm), taxa de fluxo de 70 ml/min, temperatura de coluna 35 °C, 17 MPa (170 bar). Eluente A - CO2, Eluente B - metanol/amônia a 20 mM, gradiente de eluição linear t = 0 min 10 % de B, t = 6,5 min 40 % de B, t = 8 min, 40 % de B. Exemplo 71 N-ciclopropil-5-(1H-indol-2-carbonil)-N,6-dimetil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (Enantiômero 2, configuração absoluta desconhecida)

[0594] Etapa 1: Ácido 5-(terc-butoxicarbonil)-6-metil- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (100 mg, 0,355 mmol) foi dissolvido em DMSO seco (3 ml) e HATU (149 mg, 0,391 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada por 10 min. Trietilamina (0,248 ml,1,777 mmol) foi adicionada seguida por uma solução de cloridrato de N- metilciclopropanamina (38,2 mg, 0,355 mmol) em DMSO seco (1 ml) e a mistura de reação foi agitada por 1 h. A reação foi extinta com algumas gotas de água e purificada usando cromatografia em coluna de fase reversa para gerar 3- [ciclopropil(metil)carbamoil]-6-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila como um óleo incolor (0,109 g, 83 % de rendimento.

[0595] Etapa 2: 3-(ciclopropil(metil)carbamoil)-6-metil- 6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina5(4H)-carboxilato de terc-butila (109 mg, 0,293 mmol) foi dissolvido em HCl (4 M em dioxano) (1 ml, 4,00 mmol). A mistura foi agitada durante a noite, então, concentrada e extraída com DCM para gerar cloridrato de N-ciclopropil-N,6-dimetil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional (0,076 g, 90 % de rendimento).

[0596] Etapa 3: Ácido indol-2-carboxílico (13,99 mg, 0,087 mmol) foi dissolvido em DMSO seco (0,4 ml) e HATU (36,3 mg, 0,095 mmol) foi adicionado. Em um recipiente separado, cloridrato de N-ciclopropil N,6-dimetil-4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (25 mg, 0,087 mmol) foi suspenso em DMSO seco (0,4 ml) e trietilamina (0,060 ml, 0,434 mmol) foi adicionada. As duas misturas foram combinadas e agitadas por 1 h. Algumas gotas de água foram adicionadas e a mistura de reação foi purificada diretamente por cromatografia em coluna de fase reversa para gerar o produto como um sólido branco (0,0183 g, 56 % de rendimento).

[0597] Rt (Método A) 2,97 min, m/z 378 [M+H]+

[0598] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,67 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 1H), 6,93 (s, 1H), 5,56 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 5,36 - 5,21 (m, 1H), 4,87 -

4,64 (m, 1H), 4,47 - 4,31 (m, 1H), 4,19 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 3,16 - 3,02 (m, 1H), 2,94 (s, 3H), 1,24 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,90 - 0,74 (m, 2H), 0,67 - 0,51 (m, 2H).

[0599] O material estereoquimicamente puro foi obtido por separação do racemato (Exemplo 2) por SFC quiral, usando uma coluna Phenomenex Cellulose-1 (250 x 21,2 mm, 5 µm), taxa de fluxo de 70 ml/min, temperatura de coluna 35 °C, 17 MPa (170 bar). Eluente A - CO2, Eluente B - metanol/amônia a 20 mM, gradiente de eluição linear t = 0 min 10 % de B, t = 6,5 min 40 % de B, t = 8 min, 40 % de B. Exemplo 72 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-[ 1 -(piridin-3 - il)ciclopropil] -4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0600] Rt (Método B) 2,36 min, m/z 441 [M+H]+ Exemplo 73 2-[3-(oxolan-2-il)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5- carbonil]-1H-indol

[0601] Etapa 1: A uma solução de 3-(tetra-hidrofuran-2- il)-6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc-butila (35 mg, 0,119 mmol) em DCM (0,2 ml) foi adicionado HCl (4 M em dioxano) (1 ml, 4,00 mmol). Após 1 h, a mistura de reação foi concentrada e extraída com DCM para gerar cloridrato de 3-(oxolan-2-il)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina como um sólido esbranquiçado que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0602] Etapa 2: A uma solução de cloridrato de 3- (oxolan-2-il)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina (0,0276 g, 0,12 mmol) em DMSO (0,4 ml) foi adicionada uma gota de água. NEt3 (0,075 ml, 0,538 mmol) foi, então, adicionada. Em um recipiente separado, ácido indol-2-carboxílico (0,212 g) e HATU (0,600 g) foram dissolvidos em DMSO (3,8 ml). Após 10 minutos, 0,4 ml dessa solução foram adicionados à solução de amina, e essa mistura agitada por 48 h. A mistura foi, então, filtrada, e o filtro lavado com metanol (0,1 ml). O filtrado foi purificado diretamente por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,0042 g, 10 % de rendimento).

[0603] Rt (Método B) 2,93 min, m/z 337 [M+H]+ Exemplo 74 N-ciclopropil-5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0604] Rt (Método B) 2,86 min, m/z 346 [M+H]+

[0605] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,25 - 7,17 (m, 1H), 7,11 - 7,03 (m, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,44 - 4,88 (m, 2H), 4,37 - 4,17 (m, 4H), 3,13 - 3,03 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 0,84 - 0,75 (m, 2H), 0,63 - 0,54 (m, 2H). Exemplo 75 N-(2-hidroxietil)-N-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-5-(1H- indol-2-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0606] Rt (Método B) 2,59 min, m/z 424 [M+H]+

[0607] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,10 - 7,04 (m, 1H), 6,94 (s, 1H), 5,36 - 4,98 (m, 3H), 4,91 - 4,74 (m, 1H), 4,51 - 3,99

(m, 4H), 3,82 - 3,38 (m, 6H), 1,35 - 0,59 (m, 4H). Exemplo 76 5-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazin-3-il]-5-azaspiro[2.4]heptan-4-ona

[0608] Etapa 1: A uma solução de 3-(4-oxo-5- azaspiro[2.4]heptan-5-il)-6,7-di-hidropirazolo[1,5- a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc-butila (80 mg, 0,241 mmol) em DCM (0,4 ml) foi adicionado HCl (4 M em dioxano) (2 ml, 8 mmol). A mistura foi agitada por 1 hora, então, concentrada e extraída com DCM para gerar cloridrato de 5- {4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazin-3-il}-5- azaspiro[2.4]heptan-4-ona como um sólido esbranquiçado que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0609] Etapa 2: A uma solução de ácido indol-2- carboxílico (19,19 mg, 0,119 mmol) em DMSO (400 µl) foi adicionado HATU (54,3 mg, 0,143 mmol). A mistura foi agitada por 10 min. Em um recipiente separado, cloridrato de 5-(4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)-5- azaspiro[2.4]heptan-4-ona (32 mg, 0,119 mmol) foi dissolvido em DMSO (400 µl). Uma gota de água e trietilamina (83 µl, 0,595 mmol) foram adicionadas. As misturas foram combinadas e agitadas por 1 hora, então, filtradas e purificadas por cromatografia para gerar o produto como um sólido branco (0,288 g, 65 % de rendimento).

[0610] Rt (Método B) 2,91 min, m/z 374 [M+H]+

[0611] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,67 (s, 1H), 7,67 - 7,56 (m, 2H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,10 - 7,03 (m, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,11 - 4,81 (m, 2H), 4,36 - 4,15 (m, 4H), 3,80 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,21 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 0,96 - 0,81 (m, 4H). Exemplo 77 N-(2-hidroxietil)-5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0612] Rt (Método A) 2,6 min, m/z 368 [M+H]+ Exemplo 78 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[(2S)-1,1,1-trifluoropropan-2- il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0613] Rt (Método A) 3,07 min, m/z 406 [M+H]+

[0614] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 11,71 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,5 Hz, 1H),

7,08 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,50 - 4,91 (m, 2H), 4,89 - 4,69 (m, 1H), 4,46 - 4,04 (m, 4H), 1,32 (d, J = 7,1 Hz, 3H). Exemplo 79 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[(2R)-1, 1,1 -trifluoropropan-2- il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0615] A uma solução de ácido 5-(1H-indol-2-carbonil)- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (50 mg, 0,161 mmol) em DMF seco (0,6 ml) foi adicionado HATU (61,3 mg, 0,161 mmol). A mistura foi agitada à t.a. por 40 min, então, uma solução de cloridrato de (R)-1,1,1- trifluoropropan-2-amina (24,10 mg, 0,161 mmol) em DMF seco (0,6 ml) foi adicionada, seguida por trietilamina (0,074 ml, 0,532 mmol). O coquetel resultante foi agitado à t.a. por 2 h, então, filtrado e purificado diretamente por cromatografia para gerar o produto como um pó branco (0,030 g, 46 % de rendimento).

[0616] Rt (Método A) 3,07 min, m/z 406 [M+H]+

[0617] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,44 - 4,99 (m, 2H), 4,89 - 4,68 (m, 1H), 4,44 - 4,04 (m, 4H), 1,32 (d, J =

7,1 Hz, 3H). Exemplo 80 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-(1-{[(2,2,2- trifluoroetil)amino]metil}ciclopropil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0618] Rt (Método A) 3,1 min, m/z 475 [M+H]+

[0619] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,02 - 7,72 (m, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,50 - 7,36 (m, 1H), 7,32 - 7,13 (m, 1H), 7,13 - 7,01 (m, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,45 - 4,80 (m, 2H), 4,45 - 4,01 (m, 4H), 3,30 - 2,55 (m, 8H), 1,32 - 0,60 (m, 4H). Exemplo 81 5-(4,5-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0620] Etapa 1: Ao 3-((1- (hidroximetil)ciclopropil)(metil)carbamoil)-6,7-di- hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc- butila (0,300 g, 0,856 mmol) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (10 ml, 40,0 mmol). Metanol (2 ml) foi, então, adicionado e a mistura de reação foi agitada por 2 h. A mistura foi concentrada e coevaporada com MeCN (50 ml) e DIPE (2 x 50 ml) a 40 °C sob pressão reduzida para obter um resíduo semissólido/oleoso esbranquiçado que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0621] Etapa 2: A uma solução agitada de ácido 4-5- difluoroindol-2-carboxílico (0,0306 mg, 0,155 mmol) em DMF (0,4 ml) foi adicionado HATU (0,062 g, 0,162 mmol). A mistura foi agitada por 30 min, então, uma mistura de cloridrato de N-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (0,050 g, 0,155 mmol)) e NEt3 (0,108 ml, 0,773 mmol) em DMF (0,4 ml) foi adicionada e a mistura agitada durante a noite. A mistura foi filtrada e o filtro enxaguado com MeCN (0,2 ml). A mistura foi purificada por cromatografia para gerar 5-(4,5- difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido branco (0,013 g, 20 % de rendimento).

[0622] Rt (Método A2) 3,08 min, m/z 430 [M+H]+

[0623] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,13 (s, 1H), 8,23 - 7,58 (m, 1H), 7,36 - 7,16 (m, 2H), 7,06 (s, 1H), 5,82 - 4,60 (m, 3H), 4,54 - 3,99 (m, 4H), 3,85 - 3,48 (m, 2H), 3,20 - 2,76 (m, 3H), 1,20 - 0,43 (m, 4H). Exemplo 82

5-(4,7-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0624] Rt (Método A2) 3,03 min, m/z 430 [M+H]+

[0625] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,53 (s, 1H), 8,21 - 7,64 (m, 1H), 7,15 - 6,93 (m, 2H), 6,82 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 5,54 - 4,73 (m, 3H), 4,51 - 3,97 (m, 4H), 3,82 - 3,46 (m, 2H), 3,24 - 2,77 (m, 3H), 1,21 -0,50 (m, 4H). Exemplo 83 5-(6-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0626] Rt (Método A2) 3,13 min, m/z 426 [M+H]+

[0627] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,75 (s, 1H), 8,23 - 7,62 (m, 1H), 7,07 - 6,90 (m, 2H), 6,82 - 6,73 (m, 1H), 5,67 - 4,57 (m, 3H), 4,56 - 4,01 (m, 4H), 3,85 - 3,47 (m, 2H), 3,22 - 2,76 (m, 3H), 1,26 - 0,60 (m, 4H) - um sinal (3H) coincide com sinal de DMSO.

Exemplo 84 5-(6-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0628] Etapa 1: Ao 3-((1- (hidroximetil)ciclopropil)(metil)carbamoil)-6,7-di- hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc- butila (0,300 g, 0,856 mmol) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (10 ml, 40,0 mmol). Metanol (2 ml) foi, então, adicionado e a mistura de reação foi agitada por 2 h. A mistura foi concentrada e coevaporada com MeCN (50 ml) e DIPE (2 x 50 ml) a 40 °C sob pressão reduzida para obter um resíduo semissólido/oleoso esbranquiçado que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0629] Etapa 2: A uma solução agitada de ácido 5-fluoro- 6-cloro-indol-2-carboxílico (0,0331 mg, mmol) em DMF (0,4 ml) foi adicionado HATU (0,062 g, 0,162 mmol). A mistura foi agitada por 30 min, então, uma mistura de cloridrato de N-[1-(hidroximetil)ciclopropil]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida (0.050 g, 0,155 mmol)) e NEt3 (0,108 ml, 0,773 mmol) em DMF (0,4 ml) foi adicionada e a mistura agitada durante a noite. A mistura foi filtrada e o filtro enxaguado com MeCN (0,2 ml). A mistura foi purificada por cromatografia para gerar 5-(6-cloro-5-

fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido branco (0,010 g, 14 % de rendimento).

[0630] Rt (Método A2) 3,21 min, m/z 446 / 448 [M+H]+

[0631] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,94 (s, 1H), 8,17 - 7,82 (m, 1H), 7,67 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,82 - 4,56 (m, 3H), 4,52 - 3,91 (m, 4H), 3,78 - 3,48 (m, 2H), 3,24 - 2,73 (m, 3H), 1,21 - 0,54 (m, 4H). Exemplo 85 5-(4-cloro-6-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0632] Rt (Método A2) 3,24 min, m/z 446 / 448 [M+H]+

[0633] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,23 (s, 1H), 8,21 - 7,74 (m, 1H), 7,19 (d, J = 9,4 Hz, 2H), 6,96 (s, 1H), 5,75 - 4,61 (m, 3H), 4,54 - 4,01 (m, 4H), 3,86 - 3,51 (m, 2H), 3,24 - 2,78 (m, 3H), 1,34-0,59 (m, 4H). Exemplo 86 Ácido 2-{1-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazin-3-il]-5-oxopirrolidin-3-il}benzoico

[0634] Etapa 1: A uma solução de ácido 2-(1-(5-(terc- butoxicarbonil)-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin- 3-il)-5-oxopirrolidin-3-il)benzoico (50 mg, 0,117 mmol) em diclorometano(0,2 ml) foi adicionado HCl (4 M em dioxano) (1 ml, 4,00 mmol). A mistura foi agitada por 90 min, então, concentrada e extraída com DCM para gerar cloridrato de ácido 2-(5-oxo-1-(4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazin3-il)pirrolidin-3-il)benzoico como um sólido amarelo que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0635] Etapa 2: A uma solução de ácido indol-2- carboxílico (18,88 mg, 0,117 mmol) em DMSO (400 µl) foi adicionado HATU (44,5 mg, 0,117 mmol). A mistura foi agitada por 1 hora, então, trietilamina (82 µl, 0,586 mmol) foi adicionada. Essa mistura foi, então, adicionada a uma solução de cloridrato de ácido 2-(5-oxo-1-(4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)pirrolidin-3-il)benzoico (42,5 mg, 0,117 mmol) em DMSO (400 µl). A mistura foi agitada durante a noite, então, purificada diretamente por cromatografia em coluna de fase reversa para gerar o produto como um sólido branco (0,017 g, 31 % de rendimento).

[0636] Rt (Método B2) 3,28 min, m/z 470 [M+H]+

[0637] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,68 (s, 1H), 7,72 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,55 - 7,34 (m, 3H), 7,29 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,22 - 4,85 (m, 2H), 4,50 - 4,40 (m, 1H), 4,34 - 4,15 (m, 4H), 4,10 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 9,5, 6,4 Hz, 1H), 2,85 (dd, J = 16,8, 8,9 Hz, 1H), 2,58 (dd, J = 17,0, 7,6 Hz, 1H). um sinal (1H) coincide com sinal de água. Exemplo 87 N-terc-butil-5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0638] Rt (Método A) 3,03 min, m/z 366 [M+H]+

[0639] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 7,12 - 7,03 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,39 - 4,95 (m, 2H), 4,33 -4,16 (m, 4H), 1,34 (s, 9H). Exemplo 88 Ácido 3-fluoro-2-{1-[5-(1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-

pirazolo[1,5-a]pirazin-3 -il]-5-oxopirrolidin-3-il}benzoico

[0640] Rt (Método A) 2,33 min, m/z 488 [M+H]+

[0641] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,75 - 11,64 (m, 1H), 7,70 - 7,56 (m, 2H), 7,54 - 7,42 (m, 2H), 7,42 - 7,16 (m, 3H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,02 - 6,91 (m, 1H), 5,16 - 4,84 (m, 2H), 4,62 - 4,45 (m, 1H), 4,40 - 4,13 (m, 4H), 4,13 - 3,99 (m, 1H), 3,87 - 3,67 (ra, 1H), 2,93 - 2,79 (m, 1H), 2,64 - 2,52 (m, 2H). Exemplo 89 N-[1-(difluorometoxi)propan-2-il]-5-(1H-indol-2-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0642] Rt (Método A2) 3,34 min, m/z 418 [M+H]+

[0643] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,09 - 7,90 (m, 2H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3

Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,67 (t, J = 75,8 Hz, 1H), 5,44 - 4,92 (m, 2H), 4,44 - 4,08 (m, 5H), 3,91 - 3,67 (m, 2H), 1,15 (d, J = 6,7 Hz, 3H). Exemplo 90 N-ciclopropil-N-[2-(difluorometoxi)etil]-5-(1H-indol-2- carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0644] Rt (Método A2) 3,44 min, m/z 444 [M+H]+

[0645] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,68 (t, J = 75,8 Hz, 1H), 5,39 - 4,85 (m, 2H), 4,43 - 4,11 (m, 4H), 4,08 - 3,90 (m, 2H), 3,75 - 3,53 (m, 2H), 3,18 - 2,97 (m, 1H), 0,96 - 0,74 (m, 2H), 0,69 - 0,48 (m, 2H). Exemplo 91 N-{1-[4-(hidroximetil)fenil]ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0646] Rt (Método J) 1,37 min, m/z 470 [M+H]+

[0647] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 11,72 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,37 - 7,26 (m, 2H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,05 - 6,90 (m, 4H), 5,16 (s, 3H), 4,47 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 4,40 - 3,92 (m, 4H), 3,27 - 2,93 (m, 3H), 1,58- 1,18 (m, 4H). Exemplo 92 5-(6-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0648] A uma solução de ácido 5-fluoro-6-cloro-indol-2- carboxílico (0,0269 g, 0,126 mmol) em DMF (0,4 ml) foi adicionado HATU (0,050 g, 0,132 mmol) e NEt3 (0,088 ml,

0,629 mmol). A mistura foi agitada por 30 min, então, uma solução de N-(1-((difluorometoxi)metil)ciclopropil)- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (0,036 g, 0,126 mmol) em DMF seco (0,4 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada, enxaguando com metanol (0,2 ml). A mistura foi, então, purificada diretamente por HPLC para gerar 5-(6-cloro-5- fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difiuorometoxi)metil]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um pó branco (0,027 g, 44 % de rendimento).

[0649] Rt (Método A2) 3,60 min, m/z 482 / 484 [M+H]+

[0650] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,97 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,76- 7,64 (m, 1H), 7,58 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,67 (t, J = 76,3 Hz, 1H), 5,69- 4,81 (m, 2H), 4,47- 4,06 (m, 4H), 3,94 (s, 2H), 0,94- 0,69 (m, 4H). Exemplo 93 5-(6-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-6-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0651] Rt (Método H) 1,59 min, m/z 496 / 498 [M+H]+

[0652] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Î' 11,93 (s, 1H), 8,49

(s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,75 - 7,66 (m, 1H), 7,60 - 7,54 (m, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,67 (t, J = 76,2 Hz, 1H), 5,64 - 5,54 (m, 1H), 5,31 - 5,18 (m, 1H), 4,91 - 4,64 (m, 1H), 4,38 - 4,25 (m, 1H), 4,20 - 4,12 (m, 1H), 4,00 - 3,88 (m, 2H), 1,22 (d, J = 6,9 Hz, 3H), 0,90 - 0,73 (m, 4H). Exemplo 94 5-(5,6-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-6-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0653] Rt (Método H) 1,52 min, m/z 480 [M+H]+

[0654] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) Î' 11,89 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,77 - 7,66 (m, 1H), 7,38 (dd, J = 11,0, 7,0 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,67 (t, J = 76,3 Hz, 1H), 5,64 - 5,55 (m, 1H), 5,31 - 5,20 (m, 1H), 4,95 - 4,62 (m, 1H), 4,39 - 4,26 (m, 1H), 4,20 - 4,13 (m, 1H), 4,01 - 3,87 (m, 2H), 1,22 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,90 - 0,72 (m, 4H). Exemplo 95 5-(4-etil-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0655] Rt (Método A2) 3,22 min, m/z 422 [M+H]+

[0656] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,66 (s, 1H), 8,20 - 7,62 (m, 1H), 7,27 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 8,3, 7,1 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,89 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 5,56- 4,56 (m, 3H), 4,53 - 4,01 (m, 4H), 3,85 - 3,53 (m, 2H), 3,19 - 2,93 (m, 3H), 2,89 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,29 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,19-0,53 (m, 4H). Exemplo 96 5-(4-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[1- (hidroximetil)ciclopropil]-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0657] Rt (Método A2) 3,19 min, m/z 446 / 448 [M+H]+

[0658] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,18 (s, 1H), 8,26 - 7,71 (m, 1H), 7,43 (dd, J = 9,0, 3,9 Hz, 1H), 7,26 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,53 - 4,63 (m, 3H), 4,50 - 4,07 (m, 4H), 3,79 - 3,58 (m, 2H), 3,20-2,86 (m, 3H), 1,20-0,52 (m, 4H). Exemplo 97

N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0659] Rt (Método A2) 3,32 min, m/z 430 [M+H]+

[0660] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,14 - 7,03 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,66 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,40 - 4,97 (m, 2H), 4,37 - 4,07 (m, 4H), 3,93 (s, 2H), 0,90 - 0,69 (m, 4H). Exemplo 98 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(piridin-4-il)ciclopropil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0661] Rt (Método A2) 2,97 min, m/z 427 [M+H]+

[0662] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 8,90 (s, 1H), 8,43 -8,36 (m, 2H), 8,12 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,11 -7,02 (m, 3H), 6,94 (s, 1H), 5,40 -4,93 (m, 2H),

4,40 -4,13 (m, 4H), 1,40 -1,29 (m, 4H). Exemplo 99 4-cloro-2-[3-(3,3-ditioropirrolidina-1-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil]-1H-indol

[0663] Rt (Método A) 3,25 min, m/z 434 / 436 [M+H]+ Exemplo 100 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0664] Rt (Método A2) 2,80 min, m/z 324 [M+H]+

[0665] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,14 - 8,00 (m, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,41 - 4,97 (m, 2H), 4,40 - 4,08 (m, 4H), 2,75 - 2,65 (m, 3H). Exemplo 101 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(trifluorometil)ciclopropil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0666] Etapa 1: Ao 3-((1- (trifluorometil)ciclopropil)carbamoil)-6,7-di- hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc- butila (100 mg, 0,267 mmol) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (2 ml, 8,00 mmol) e a solução resultante foi agitada à t.a. por 1 h. Dioxano (1 ml) foi adicionado e a agitação continuou durante a noite. A mistura de reação foi diluída com mais dioxano e concentrada, o resíduo foi coevaporado com tolueno (2 x 10 ml) para gerar cloridrato de N-[1(trifluorometil)ciclopropil]-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional (0,094 g, 100 % de rendimento).

[0667] Etapa 2: Uma mistura de ácido 1H-indol-2- carboxílico (21,60 mg, 0,134 mmol) e HATU (51,0 mg, 0,134 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi agitada à t.a. por 30 min. NEt3 (0,093 ml, 0,670 mmol) foi adicionada, seguida por uma solução de cloridrato de N-(1-(trifluorometil)ciclopropil)- 4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (41,6 mg, 0,134 mmol) em DMSO (0,600 ml). A solução amarela resultante foi agitada à t.a. por 1 h, filtrada e o filtrado purificado por HPLC para gerar 5-(1H-indol-2- carbonil)-N-[1-(trifluorometil)ciclopropil]- 4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido branco

(0,030 g, 54 % de rendimento).

[0668] Rt (Método A2) 3,37 min, m/z 418 [M+H]+

[0669] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,67 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, 3 = 7,5 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,26 (d, J = 26,6 Hz, 4H), 1,36 - 1,20 (m, 2H), 1,19 -1,01 (m, 2H). Exemplo 102 N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(6-fluoro-4- metil-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0670] Rt (Método A2) 3,53 min, m/z 462 [M+H]+

[0671] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,77 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 7,01 - 6,96 (m, 1H), 6,91 - 6,44 (m, 2H), 5,39 - 4,99 (m, 2H), 4,44 - 4,15 (m, 4H), 3,95 (s, 2H), 2,54 (s, 3H), 0,93 - 0,72 (m, 4H). Exemplo 103 N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(5-fluoro-4- metil-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0672] Rt (Método A2) 3,51 min, m/z 462 [M+H]+

[0673] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,78 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,27 (dd, J = 8,8, 4,2 Hz, 1H), 7,09 - 7,00 (m, 2H), 6,68 (t, J = 76,3 Hz, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,48 - 4,11 (m, 4H), 3,95 (s, 2H), 2,44 (s, 3H), 0,92 - 0,71 (m, 4H). Exemplo 104 5-(4,5-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil] ciclopropil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0674] A uma solução de ácido 4,5-difluoro-indol-2- carboxílico (0,0248 g, 0,126 mmol) em DMF (0,4 ml) foi adicionado HATU (0,050 g, 0,132 mmol) e NEt3 (0,088 ml, 0,629 mmol). A mistura foi agitada por 30 min, então, uma solução de N-(1-((difluorometoxi)metil)ciclopropil)- 4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (0,036 g, 0,126 mmol) em DMF seco (0,4 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada,

enxaguando com metanol (0,2 ml). A mistura foi, então, purificada diretamente por HPLC para gerar 5-(4,5-difluoro- 1H-indol-2-carbonil)- N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um pó branco (0,037 g, 63 % de rendimento).

[0675] Rt (Método A2) 3,49 min, m/z 466 [M+H]+

[0676] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,15 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,33 - 7,22 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 6,67 (t, 3 = 76,3 Hz, 1H), 5,49 - 4,93 (m, 2H), 4,43 - 4,11 (m, 4H), 3,95 (s, 2H), 0,91 - 0,73 (m, 4H). Exemplo 105 5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0677] Rt (Método A2) 3,55 min, m/z 464/466 [M+H]+

[0678] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,11 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,44 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,23 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,67 (t, J = 76,3 Hz, 1H), 5,55 - 4,94 (m, 2H), 4,41 - 4,15 (m, 4H), 3,95 (s, 2H), 0,91 - 0,72 (m, 4H). Exemplo 106 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-[1-(trifluorometil)ciclobutil]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0679] Rt (Método A2) 3,56 min, m/z 432 [M+H]+

[0680] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,72 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,43 - 4,92 (m, 2H), 4,43 - 4,14 (m, 4H), 2,01 - 1,82 (m, 2H). Exemplo 107 4-[5-(6-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-8-oxa-4- azaspiro[2,6]nonano

[0681] Rt (Método A2) 3,29 min, m/z 452 [M+H]+

[0682] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,75 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,09 - 6,87 (m, 2H), 6,87 - 6,63 (m, 1H), 5,39 - 4,88 (m, 2H), 4,46 - 3,35 (m, 10H), 2,52 (s, 3H), 2,05 - 1,84 (m, 2H), 1,17 - 0,61 (m, 4H).

Exemplo 108 4-[5-(5-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-8-oxa-4- azaspiro[2,6]nonano

[0683] Rt (Método A2) 3,28 min, m/z 452 [M+H]+

[0684] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,76 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,34 - 7,15 (m, 1H), 7,12 - 6,87 (m, 2H), 5,35 - 4,84 (m, 2H), 4,51 - 3,41 (m, 10H), 2,42 (d, J = 1,9 Hz, 3H), 2,03 - 1,82 (m, 2H), 1,06-0,76 (m, 4H). Exemplo 109 4-[5-(4,5-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-8-oxa-4-azaspiro [2,6] nonano

[0685] Ao ácido 4,5-difluoro-indol-2-carboxílico (0,0315 g, 0,16 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (66,9 mg, 0,176 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, NEt3 (0,111 ml, 0,799 mmol) e uma solução de cloridrato de (8-oxa-4-azaspiro[2.6]nonan-4- il)(4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3- il)metanona(50 mg, 0,16 mmol) em DMSO (0,8 ml) foram adicionadas. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0151 g, 21 % de rendimento).

[0686] Rt (Método A2) 3,25 min, m/z 456 [M+H]+

[0687] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,13 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,36 - 7,18 (m, 2H), 7,07 (s, 1H), 5,53 - 4,74 (m, 2H), 4,52 - 3,42 (m, 10H), 2,04 - 1,82 (m, 2H), 1,21 - 0,60 (m, 4H). Exemplo 110 4-[5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-8-oxa-4- azaspiro[2.6]nonano

[0688] Rt (Método A2) 3,31 min, m/z 454 / 456 [M+H]+

[0689] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,10 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,28 - 7,09 (m, 2H), 6,93 (s, 1H), 5,44 - 4,86 (m, 2H), 4,51 - 3,41 (m, 10H),

2,05 - 1,83 (m, 2H), 1,18 - 0,63 (m, 4H). Exemplo 111 4-[5-(5-cloro-6-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-8-oxa-4- azaspiro[2,6]nonano

[0690] Etapa 1: A uma solução agitada de 3-(8-oxa-4- azaspiro[2.6]nonano-4-carbonil)-6,7-di-hidropirazoio[1,5- a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc-butila (393 mg, 1,044 mmol) em 1,4-dioxano (0,6 ml) foi adicionado HCl a 4 M em dioxano (4 ml, 16,00 mmol). A solução resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura de reação foi diluída com dioxano e concentrada e coevaporada com tolueno (2 x 10 ml) para gerar cloridrato de 4-{4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil}-8-oxa-4- azaspiro[2,6]nonano como um sólido esbranquiçado (354 mg, 100 % de rendimento).

[0691] Etapa 2: Ao ácido 5-fluoro-6-cloro-indol-2- carboxílico (0,0342 g, 0,16 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (66,9 mg, 0,176 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, Net3 (0,111 ml, 0,799 mmol) e uma solução de cloridrato de (8-oxa-4- azaspiro[2.6]nonan-4-il)(4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-

a]pirazin-3-il)metanona (50 mg, 0,16 mmol) em DMSO (0,8 ml) foram adicionados. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0267 g, 35 % de rendimento).

[0692] Rt (Método A2) 3,37 min, m/z 472 / 474 [M+H]+

[0693] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,95 (s, 1H), 7,70 (d, J = 34,4 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,44 - 3,36 (m, 10H), 1,94 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 0,88 (s, 4H). Exemplo 112 5-(6-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-N-[(2R)-1,1,1- trifluoropropan-2-il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 3-carboxamida

[0694] Rt (Método A2) 3,63 min, m/z 438 [M+H]+

[0695] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,76 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,09 - 6,89 (m, 2H), 6,78 (dd, J = 10,9, 2,2 Hz, 1H), 5,35 - 4,99 (m, 2H), 4,89 - 4,68 (m, 1H), 4,43 - 4,04 (m, 4H), 2,52 (s, 3H), 1,32 (d, J = 7,1 Hz, 3H). Exemplo 113 5-(5-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-N-[(2R)-1,1,1-

trifluoropropan-2-il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 3-carboxamida

[0696] Ao ácido 4-metil-5-fluoro-indol-2-carboxílico (0,0315 g, 0,167 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (70,0 mg, 0,184 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, uma mistura de NEt3 (0,117 ml, 0,837 mmol) e cloridrato de (R)-N-(1,1,1- trifluoropropan-2-il)-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida (50 mg, 0,167 mmol) em DMSO (0,8 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0338 g, 48 % de rendimento).

[0697] Rt (Método A2) 3,61 min, m/z 438 [M+H]+

[0698] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,77 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,26 (dd, J = 8,8, 4,2 Hz, 1H), 7,16 - 6,76 (m, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,79 (h, J = 7,7 Hz, 1H), 4,48 - 3,94 (m, 4H), 2,42 (m, 3H), 1,32 (d, J = 7,3 Hz, 3H). Exemplo 114 5-(4,5-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[(2R)-1,1,1- trifluoropropan-2-il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-

3-carboxamida

[0699] Ao ácido 4,5-difluoro-indol-2-carboxílico (0,0315 g, 0,167 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (70,0 mg, 0,184 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, uma mistura de NEt3 (0,117 ml, 0,837 mmol) e cloridrato de (R)-N-(1,1,1-trifluoropropan-2- il)-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida (50 mg, 0,167 mmol) em DMSO (0,8 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0437 g, 62 % de rendimento).

[0700] Rt (Método A2) 3,58 min, m/z 442 [M+H]+

[0701] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,14 (s, 1H), 8,48 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,36 - 7,17 (m, 2H), 7,07 (s, 1H), 5,60 - 4,91 (m, 2H), 4,79 (q, J = 7,8 Hz, 1H), 4,52 - 3,90 (m, 4H), 1,32 (d, J = 7,1 Hz, 3H). Exemplo 115 5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-N-[(2R)-1,1,1- trifluoropropan-2-il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 3-carboxamida

[0702] Ao ácido 4-cloro-indol-2-carboxílico (0,0315 g, 0,167 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (70,0 mg, 0,184 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, uma mistura de Et3N (0,117 ml, 0,837 mmol) e cloridrato de (R)-N-(1,1,1-trifluoropropan-2-il)- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (50 mg, 0,167 mmol) em DMSO (0,8 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0455 g, 65 % de rendimento).

[0703] Rt (Método A2) 3,65 min, m/z 440 / 442 [M+H]+

[0704] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,10 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,28 - 7,10 (m, 2H), 6,94 (s, 1H), 5,55 - 4,91 (m, 2H), 4,79 (q, 1H), 4,47 - 4,04 (m, 4H), 1,32 (d, J = 7,1 Hz, 3H). Exemplo 116 5-(5-cloro-6-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-[(2R)-1,1,1- trifluoropropan-2-il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 3-carboxamida

[0705] Etapa 1: (R)-3-((1,1,1-trifluoropropan-2- il)carbamoil)-6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)- carboxilato de terc-butila (353 mg, 0,974 mmol) foi dissolvido em HCl a 4 M em dioxano (4 ml, 16,00 mmol) e a suspensão pegajosa resultante foi agitada à t.a. por 30 min. A mistura de reação foi diluída com dioxano (4 ml) e agitada por mais 30 min. A mistura de reação foi, então, diluída com 1,4-dioxano (8 ml) e concentrada, e o resíduo foi coevaporado com tolueno (2 x 10 ml) para gerar cloridrato de N-[(2R)-1,1,1-trifluoropropan-2-il]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido esbranquiçado (0,280 g, 96 % de rendimento).

[0706] Etapa 2: Ao ácido 5-cloro-6-fluoro indol-2- carboxílico (0,0342 g, 0,167 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (70,0 mg, 0,184 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, uma mistura de NEt3 (0,117 ml, 0,837 mmol) e cloridrato de (R)-N- (1,1,1- trifluoropropan-2-il)-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (50 mg, 0,167 mmol) em DMSO (0,8 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0387 g, 53 % de rendimento).

[0707] Rt (Método A2) 3,70 min, m/z 458 / 460 [M+H]+

[0708] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,95 (s, 1H), 8,48 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,67 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 5,52 - 4,91 (m, 2H), 4,78 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 4,45 - 3,95 (ra, 4H), 1,32 (d, J = 7,1 Hz, 3H). Exemplo 117 4-[5-(6-cloro-5-fluoro-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-4-azaspiro[2.5]octan-7- ol

[0709] Etapa 1: 3-(7-Hidroxi-4-azaspiro[2.5]octano-4- carbonil)-6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)- carboxilato de terc-butila (275 mg, 0,730 mmol) foi dissolvido em HCl a 4 M em dioxano (4 ml, 16,00 mmol) e a suspensão semelhante a gel resultante foi agitada à t.a. por 3 h, então, diluída com dioxano (4 ml) e concentrada, posteriormente, o resíduo foi coevaporado com tolueno (2x10 ml) para gerar cloridrato de 4-{4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carbonil}-4-azaspiro[2.5]octan-7-ol como um sólido branco (0,235 g, 100 % de rendimento).

[0710] Etapa 2: Ao ácido 5-cloro-6-fluoro indol-2- carboxílico (0,0273 g, 0,128 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (53,5 mg, 0,141 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, uma mistura de NEt3 (0,89 ml, 0,837 mmol) e cloridrato de (7-hidroxi-4- azaspiro[2.5]octan-4-il)(4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazin-3-il)metanona (40 mg, 0,128 mmol) em DMSO (0,8 µl) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0196 g, 32 % de rendimento).

[0711] Rt (Método A2) 3,19 min, m/z 472 / 474 [M+H]+

[0712] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,95 (s, 1H), 7,81 - 7,61 (m, 2H), 7,56 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,40 - 4,86 (m, 2H), 4,85 - 4,68 (m, 1H), 4,46 - 4,05 (m, 5H), 3,91 - 3,72 (m, 1H), 3,22 - 2,80 (m, 1H), 1,92 - 1,68 (m, 2H), 1,52 - 1,34 (m, 1H), 1,32 - 1,08 (m, 1H), 1,02 - 0,76 (m,2H), 0,68-0,41 (m, 2H). Exemplo 118 4-[5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-4-azaspiro[2,5]octan-7- ol

[0713] Ao ácido 4-cloro-indol-2-carboxílico (0,0250 g, 0,128 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (53,5 mg, 0,141 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, uma mistura de NEt3 (0,89 ml, 0,837 mmol) e cloridrato de (7-hidroxi-4-azaspiro[2.5]octan-4- il)(4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)metanona (40 mg, 0,128 mmol) em DMSO (0,8 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0225 g, 39 % de rendimento).

[0714] Rt (Método A2) 3,11 min, m/z 454 / 456 [M+H]+

[0715] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,09 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,42 (d, 3 = 8,1 Hz, 1H), 7,27 - 7,08 (m, 2H), 6,92 (s, 1H), 5,41 - 4,86 (m, 2H), 4,86 - 4,67 (m, 1H), 4,47 - 4,02 (m, 5H), 3,93 - 3,73 (m, 1H), 3,18 - 2,78 (m, 1H), 1,98 - 1,68 (m, 2H), 1,58 - 1,10 (m, 2H), 1,02 - 0,73 (m, 2H), 0,67 - 0,44 (m, 2H). Exemplo 119 4-[5-(4,5-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-4-azaspiro [2,5] octan-

7-ol

[0716] Ao ácido 4,5-difluoro-indol-2-carboxílico (0,0252 g, 0,128 mmol) em DMSO (0,5 ml) foi adicionado HATU (53,5 mg, 0,141 mmol). A mistura resultante foi agitada à t.a. por 30 min, posteriormente, uma mistura de NEt3 (0,89 ml, 0,837 mmol) e cloridrato de (7-hidroxi-4- azaspiro[2.5]octan-4- il)(4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazin-3-il)metanona (40 mg, 0,128 mmol) em DMSO (0,8 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro, diluída com DMSO (0,5 ml) e purificada diretamente por HPLC para gerar o produto como um sólido branco (0,0242 g, 42 % de rendimento).

[0717] Rt (Método A2) 3,06 min, m/z 456 [M+H]+

[0718] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,13 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,32 - 7,16 (m, 2H), 7,06 (s, 1H), 5,49 - 4,84 (m, 2H), 4,85 - 4,66 (m, 1H), 4,49 - 4,01 (m, 5H), 3,92 - 3,72 (m, 1H), 3,18 - 2,85 (m, 1H), 1,95 - 1,63 (m, 2H), 1,57 -- 1,10 (m, 2H), 1,04 - 0,75 (m, 2H), 0,66 - 0,45 (m, 2H). Exemplo 120

4-[5-(5-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-4-azaspiro[2,5]octan-7- ol

[0719] Rt (Método A2) 3,10 min, m/z 452 [M+H]+

[0720] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,77 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,34 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 6,92 (m, 2H), 5,38 - 4,88 (m, 2H), 4,88 - 4,64 (m, 1H), 4,47 - 4,04 (m, 5H), 3,91 - 3,73 (m, 1H), 3,20 - 2,72 (m, 1H), 2,42 (s, 3H), 1,99 - 1,64 (m, 2H), 1,59 - 1,08 (m, 2H), 1,01 - 0,71 (m, 2H), 0,68 - 0,45 (m, 2H). Exemplo 121 4-[5-(6-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil]-4-azaspiro[2,5]octan-7- ol

[0721] Rt (Método A2) 3,11 min, m/z 452 [M+H]+

[0722] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,76 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,10 - 6,88 (m, 2H), 6,83 - 6,69 (m, 1H), 5,35 - 4,90 (m, 2H), 4,87 - 4,64 (m, 1H), 4,45 - 4,01 (m, 5H), 3,89 - 3,76 (m, 1H), 3,22 - 2,73 (m, 1H), 1,94 - 1,67 (m, 2H), 1,58 - 1,07 (m, 2H), 1,02 - 0,73 (m, 2H), 0,67 - 0,41 (m, 2H). Exemplo 122 2-[3-(3,3-difluoropirrolidina-1-carbonil)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil]-1H-indol

[0723] Rt (Método A) 3,04 min, m/z 400 [M+H]+ Exemplo 123 N-{1-[2-(difluorometoxi)etil]ciclobutil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0724] Rt (Método A2) 3,62 min, m/z 458 [M+H]+

[0725] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,03 (d, J = 22,9 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,61 (t, J = 76,4 Hz, 1H), 5,41 - 4,92 (m, 2H), 4,35 - 4,15 (m, 4H), 3,82 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,29 - 2,04 (m, 6H), 1,89 - 1,75 (m, 2H). Exemplo 124 N-{1-[2-(difluorometoxi)etil]ciclopentil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0726] Rt (Método A2) 3,78 min, m/z 472 [M+H]+ Exemplo 125 N-{4-[2-(difluorometoxi)etil]oxan-4-il}-5-(1H-indol-2- carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0727] Rt (Método A2) 3,35 min, m/z 488 [M+H]+

Exemplo 126 N-{1-[2-(difluorometoxi)etil]ciclobutil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0728] Rt (Método A2) 3,68 min, m/z 472 [M+H]+ Exemplo 127 N-{1-[2-(difluorometoxi)etil]ciclopentil}-5-(1H-indol-2- caτbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0729] Rt (Método A2) 3,84 min, m/z 448 [M+H]+ Exemplo 128 N-{1-[2-(difluorometoxi)etil]ciclopentil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0730] Rt (Método A2) 3,41 min, m/z 502 [M+H]+ Exemplo 129 5-(4,6-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-(2-hidroxietil)-N- metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0731] Rt (Método A) 2,77 min, m/z 404 [M+H]+ Exemplo 130 N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-6-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida (mistura racêmica)

[0732] Rt (Método B2) 3,44 min, m/z 444 [M+H]+

[0733] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 8,49

(s, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,67 (t, J = 7,64 Hz, 1H), 5,62 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 5,33 - 5,22 (m, 1H), 5,00 - 4,51 (m, 1H), 4,41 - 4,27 (m, 1H), 4,16 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,98 - 3,89 (m, 2H), 1,23 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,87 - 0,74 (m, 4H). Exemplo 131 N-{1-[(difluorometoxi)metil] ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-6-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida (Enantiômero 1, configuração absoluta desconhecida)

[0734] Rt (Método B2) 3,44 min, m/z 444 [M+H]+

[0735] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 7,12 - 7,04 (m, 1H), 6,99 - 6,92 (m, 1H), 6,67 (t, J = 7,63 Hz, 1H), 5,62 (d, J = 18,7 Hz, 1H), 5,35 - 5,23 (m, 1H), 5,04 - 4,55 (m, 1H), 4,42 - 4,25 (m, 1H), 4,16 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,02 - 3,85 (m, 2H), 1,23 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,92 - 0,71 (m, 4H).

[0736] O material estereoquimicamente puro foi obtido por separação do racemato (Exemplo 130) por SFC quiral, usando uma coluna Phenomenex Cellulose-1 (250 x 21,2 mm, 5 µm), taxa de fluxo de 70 ml/min, temperatura de coluna 35

°C, 17 MPa (170 bar). Eluente A - CO2, Eluente B - metanol/amônia a 20 mM, gradiente de eluição linear t = 0 min 10 % de B, t = 6,5 min 40 % de B, t = 8 min, 40 % de B. Exemplo 132 N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-5-(1H-indol-2- carbonil)-6-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida (Enantiômero 2, configuração absoluta desconhecida)

[0737] Etapa 1: A uma solução de ácido 5-(terc- butoxicarbonil)-6-metil-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxílico (100 mg, 0,355 mmol) em DMF (3 ml) foi adicionada trietilamina (0,248 ml, 1,777 mmol), seguida por HATU (149 mg, 0,391 mmol). Após 10 min, cloridrato de 1-((difluorometoxi)metil)ciclopropan-1-amina (73,2 mg, 0,422 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada durante a noite. A mistura de reação foi dividida entre EtAOc (20 ml) e salmoura (20 ml). Algum NaCl sólido e alguma salmoura foram adicionados para ajudar na separação de fase. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (10 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (4 xl5 ml), secas em Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi dissolvido em 1 ml de DCM e purificado por cromatografia em coluna para gerar 3-({1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}carbamoil)-

6-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc-butila (0,111 g, 78 % de rendimento).

[0738] Etapa 2: Ao 3-((1- ((difluorometoxi)metil)ciclopropil)carbamoil)-6-metil-6,7- di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)-carboxilato de terc- butila (27,8 mg, 0,069 mmol) foi adicionado HCl (4 M em dioxano) (0,5 ml, 2 mmol). A mistura foi agitada por 2 h, então, concentrada e extraída com DCM para gerar cloridrato de N-{1-[(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-6-metil- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um sólido branco que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0739] Etapa 3: A uma solução de ácido indol-2- carboxílico (11,20 mg, 0,069 mmol) em DMSO foi adicionado HATU (29,1 mg, 0,076 mmol). A mistura foi agitada por 10 min. Em um recipiente separado, cloridrato de N-(1- ((difluorometoxi)metil)ciclopropil)-6-metil-4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (23,4 mg, 0,069 mmol) foi dissolvido em DMSO e trietilamina (48,4 µl, 0,347 mmol) foi adicionada. As misturas foram combinadas e agitadas durante a noite. A mistura foi purificada diretamente por cromatografia de fase reversa para gerar o produto como um sólido branco (0,0199 g, 64 % de rendimento).

[0740] Rt (Método B2) 3,44 min, m/z 444 [M+H]+

[0741] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,69 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,06 (s, 1H), 7,67 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,49 - 7,41 (m, 1H), 7,27 - 7,17 (m, 1H), 7,12 - 7,04 (m, 1H), 6,99 - 6,92 (m, 1H), 6,67 (t, J = 76,3 Hz, 1H), 5,62 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 5,35 - 5,20 (m, 1H), 4,97 - 4,58 (m, 1H),

4,40 - 4,26 (m, 1H), 4,16 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 4,01 - 3,86 (m, 2H), 1,23 (d, 3 = 6,8 Hz, 3H), 0,91 - 0,66 (m, 4H).

[0742] O material estereoquimicamente puro foi obtido por separação do racemato (Exemplo 130) por SFC quiral, usando uma coluna Phenomenex Cellulose-1 (250 x 21,2 mm, 5 µm), taxa de fluxo de 70 ml/min, temperatura de coluna 35 °C, 17 MPa (170 bar). Eluente A - CO2, Eluente B - metanol/amônia a 20 mM, gradiente de eluição linear t = 0 min 10 % de B, t = 6,5 min 40 % de B, t = 8 min, 40 % de B. Exemplo 133 N-ciclobutil-5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0743] Rt (Método A2) 3,31 min, m/z 378 [M+H]+

[0744] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,17 (m, 1H), 7,11 - 7,03 (m, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,30 - 4,88 (m, 2H), 4,77 - 4,64 (m, 1H), 4,43 - 4,13 (m, 4H), 2,98 (s, 3H), 2,30 - 2,15 (m, 2H), 2,13 - 2,01 (m, 2H), 1,69 - 1,49 (m, 2H). Exemplo 134 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-(oxetan-3-il)-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0745] Rt (Método A2) 2,80 min, m/z 366 [M+H]+

[0746] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 8,76 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,41 - 5,03 (m, 2H), 5,00 - 4,88 (m, 1H), 4,74 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 4,53 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,37- 4,14 (m, 4H). Exemplo 135 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-(oxetan-3-il)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0747] Rt (Método A2) 2,82 min, m/z 380 [M+H]+

[0748] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,65 (d, J - 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,07 (t, J - 7,5 Hz, 1H),

6,95 (s, 1H), 5,30 - 4,93 (m, 3H), 4,76 - 4,60 (m, 4H), 4,36 - 4,18 (m, 4H), 3,16 (s, 3H). Exemplo 136 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-(3-metiloxetan-3-il)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0749] Rt (Método A2) 2,95 min, m/z 394 [M+H]+

[0750] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,71 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,28 - 7,13 (m, 1H), 7,12 - 6,80 (m, 2H), 5,36 - 4,85 (m, 2H), 4,72 - 4,49 (m, 2H), 4,48 - 3,94 (m, 6H), 2,97 (s, 3H), 1,57 (s, 3H). Exemplo 137 N-[(1-hidroxiciclobutil)metil]-5-(1H-indol-2-carbonil)-N- metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0751] Rt (Método A2) 3,00 min, m/z 408 [M+H]+

[0752] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,18 (m, 1H), 7,11 - 7,03 (m, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,34 - 4,93 (m, 3H), 4,38 - 4,16 (m, 4H), 3,60 (s, 2H), 3,30 - 2,87 (m, 3H), 2,01 - 1,81 (m, 4H), 1,67 - 1,21 (m, 2H). Exemplo 138 N-[1-(1,3-dioxolan-2-il)ciclopropil]-5-(1H-indol-2- carbonil)-N-metil-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxamida

[0753] Rt (Método A2) 3,22 min, m/z 436 [M+H]+

[0754] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,42 - 4,73 (m, 3H), 4,44 - 4,03 (m, 4H), 4,02 - 3,70 (m, 4H), 3,21 - 2,84 (m, 3H), 1,30 - 0,72 (m, 4H). Exemplo 139 5-(5,6-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}- 4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0755] A uma solução de ácido 5,6-difluoroindol-2- carboxílico (0,0248 g, 0,126 mmol) em DMF (0,4 ml) foram adicionados HATU (0,050 g, 0,132 mmol) e NEt3 (0,088 ml, 0,629 mmol). A mistura foi agitada por 30 min, então, uma solução de N-(1-((difluorometoxi)metil)ciclopropil)- 4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (0,036 g, 0,126 mmol) em DMF seco (0,4 ml) foi adicionada. A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada, enxaguando com metanol (0,2 ml). A mistura foi, então, purificada diretamente por HPLC para gerar 5-(5,6-difluoro- 1H-indol-2-carbonil)- N-{1- [(difluorometoxi)metil]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida como um pó branco (0,027 g, 46 % de rendimento).

[0756] Rt (Método A2) 3,46 min, m/z 466 [M+H]+

[0757] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,93 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,79- 7,62 (m, 1H), 7,39 (dd, J = 11,0, 7,0 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,68 (t, J = 76,3 Hz, 1H), 5,59- 4,95 (m, 2H), 4,39- 4,11 (m, 4H), 3,94 (s, 2H), 0,97- 0,67 (m, 4H). Exemplo 140 4-cloro-2-[3-(3,3-difluoropirrolidina-1-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carbonil]-6-fluoro-

1H-indol

[0758] Etapa 1: Ácido 5-(terc-butoxicarbonil)-4,5,6,7- tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxílico (160 mg, 0,599 mmol) foi suspenso em DMF seco (3 ml) e HATU (273 mg, 0,718 mmol) foi adicionado. Cloridrato de 3,3- difluoropirrolidina (86 mg, 0,599 mmol) foi adicionado, seguido por trietilamina (0,417 ml, 2,99 mmol). A mistura foi agitada por 30 min, então, a suspensão foi filtrada e purificada diretamente por cromatografia em coluna de fase reversa. O resíduo foi extraído com tolueno e DCM para produzir 3-(3,3-difluoropirrolidina-1-carbonil)- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-5-carboxilato de terc- butila como um sólido branco (0,195 g, 91 % de rendimento).

[0759] Etapa 2: Ao 3-(3,3-difluoropirrolidina-1- carbonil)-6,7-di-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-5(4H)- carboxilato de terc-butila (195 mg, 0,547 mmol) foi adicionado HCl (4 M em dioxano) (5 ml, 20,00 mmol). A suspensão foi agitada por 40 min. A mistura de reação foi concentrada e extraída com tolueno e DCM para produzir 3,3- difluoro-1-{4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carbonil} pirrolidina como um sólido branco (162 mg, 100 % de rendimento) que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.

[0760] Etapa 3: A uma solução de ácido 4-cloro-6-fluoro- 1H-indol-2-carboxílico (21,89 mg, 0,102 mmol) em DMF seco (0,4 ml) foi adicionado HATU (46,8 mg, 0,123 mmol). A solução foi agitada por 10 minutos. Uma mistura de cloridrato de (3,3- difluoropirrolidin-1-il)(4,5,6,7-tetra- hidropirazolo[1,5-a]pirazin-3- il)metanona (10 mg, 0,102 mmol), trietilamina (0,071 ml, 0,512 mmol) e uma gota de água em DMF seco (1 ml) foi, então, adicionada ao ácido ativado e a solução resultante foi agitada durante a noite. A suspensão foi filtrada e o filtro foi lavado com DMSO. O filtrado foi purificado por cromatografia de fase reversa para gerar o produto como um sólido branco (0,0256 g, 55 % de rendimento).

[0761] Rt (Método A) 3,33 min, m/z 452 / 454 [M+H]+

[0762] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,17 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,22-7,16 (m, 2H), 6,96 (s, 1H), 5,43-4,98 (m, 2H), 4,46-4,04 (m, 5H), 4,04-3,55 (m, 3H), 2,48-2,35 (m, 2H). Exemplo 141 5-(1H-indol-2-carbonil)-N-metil-N-{1-[(2r,5r)-5-amino-1,3- dioxan-2-il]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0763] Etapa 1: A uma solução de ácido 5-(1H-indol-2-

carbonil)-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5-a]pirazina-3- carboxílico (49,6 mg, 0,160 mmol) em DMF seco (0,5 ml) foi adicionado HATU (60,7 mg, 0,160 mmol). A suspensão resultante foi agitada à t.a. por 30 min., então, NEt3 (0,051 ml, 0,367 mmol) foi adicionada, seguida por uma suspensão de 2-((2r,5r)-2-(1-(metilamino)ciclopropil)-1,3- dioxan-5-il)isoindolina-1,3-diona (48,3 mg, 0,160 mmol) em DMF seco (0,6 ml). A mistura foi agitada durante a noite, então, filtrada através de um microfiltro e purificada diretamente por HPLC para gerar 5-(1H-indol-2-carbonil)-N- metil-N-{1-[(2r,5r)-5-(1,3-dioxo-2,3-di-hidro-1H-isoindol- 2-il)-1,3-dioxan-2-il]ciclopropil}-4H,5H,6H,7H- pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida (0,046 g. 48 % de rendimento).

[0764] Etapa 2: A uma solução de N-(1-((2r,5r)-5-(1,3- dioxoisoindolin-2-il)-1,3-dioxan-2-il)ciclopropil)- 5-( 1H- indol-2-carbonil)-N-metil-4,5,6,7-tetra-hidropirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida (46 mg, 0,077 mmol) em etanol absoluto (2 ml) foi adicionado hidrazina mono-hidratado (10 µl, 0,205 mmol). A suspensão foi agitada a 40 °C por 2 h, 50 °C por 6 h, então, 60 °C durante a noite. Hidrazina mono-hidratada adicional (9,98 µl, 0,205 mmol) foi adicionado e a agitação continuou a 60 °C. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi coevaporado com EtOH (2 x 10 ml). Os sólidos esbranquiçados resultantes foram suspensos em DCM (15 ml) e agitados por 15 min, posteriormente, posteriormente, o precipitado foi removido por filtração e lavado com DCM (15 ml). O filtrado foi concentrado, dissolvido em DMSO (1,5 ml), filtrado através de um microfiltro e purificado por HPLC para gerar o produto como um pó branco (0,005 g, 14 % de rendimento).

[0765] Rt (Método A2) 2,87 min, m/z 465 [M+H]+

[0766] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,70 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,41 - 4,93 (m, 2H), 4,94 - 4,62 (m, 1H), 4,51 - 4,07 (m, 4H), 4,07 - 3,82 (m, 2H), 3,11 - 2,87 (m, 3H), 2,85 - 2,68 (m, 1H), 1,73 - 0,52 (m, 6H). Exemplo 142 5-(1H-indol-2-carbonil)-6-metil-N-[(2R)-1,1,1- trifluoropropan-2-il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina- 3-carboxamida

[0767] Rt (Método B2) 3,56 min, m/z 420 [M+H]+

[0768] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 6 11,70 (s, 1H), 8,49 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,22 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,08 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 5,63 (d, J = 18,7 Hz, 1H), 5,35- 5,25 (m, 1H), 4,91- 4,69 (m, 2H), 4,41- 4,30 (m, 1H), 4,23- 4,15 (m, 1H), 1,37- 1,28 (m, 3H), 1,28-1,18 (m, 3H). Exemplo 143 5-(4,5-difluoro-1H-indol-2-carbonil)-6-metil-N-[(2R)-1,1,1 -trifluoropropan-2-il]- 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-

a]pirazina-3-carboxamida

[0769] Rt (Método B2) 3,73 min, m/z 456 [M+H]+

[0770] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,12 (s, 1H), 8,52- 8,46 (m, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,31- 7,21 (m, 2H), 7,08- 7,04 (m, 1H), 5,59 (dd, J = 18,6, 5,2 Hz, 1H), 5,32- 5,22 (m, 1H), 4,97- 4,65 (m, 2H), 4,43- 4,31 (m, 1H), 4,22- 4,14 (m, 1H), 1,36- 1,28 (m, 3H), 1,27- 1,19 (m, 3H). Exemplo 144 5-(5-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-6-metil-N-[(2R)- 1,1,1 -trifluoropropan-2-il] - 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0771] Rt (Método B2) 3,74 min, m/z 452 [M+H]+

[0772] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,75 (s, 1H), 8,52- 8,43 (m, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,26 (dd, J = 8,7, 4,2 Hz, 1H), 7,07- 6,98 (m, 2H), 5,60 (dd, J = 18,8, 7,6 Hz, 1H), 5,28 (p, 3 = 8,2, 7,3 Hz, 1H), 4,87- 4,66 (m, 2H), 4,45- 4,33

(m, 1H), 4,23- 4,14 (m, 1H), 2,45- 2,39 (m, 3H), 1,36- 1,29 (m, 3H), 1,28-1,21 (ra, 3H). Exemplo 145 5-(4-cloro-1H-indol-2-carbonil)-6-metil-N-[(2R)-1,1,1- trifluoropropan-2-il]-4H,5H,6H,7H-pirazolo [1,5-a]pirazina- 3-carboxamida

[0773] Rt (Método B2) 3,79 min, m/z 454 / 456 [M+H]+

[0774] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 12,08 (s, 1H), 8,54- 8,43 (m, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,43 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,25- 7,14 (m, 2H), 6,96- 6,93 (m, 1H), 5,60 (dd, J = 18,6, 7,1 Hz, 1H), 5,33- 5,21 (m, 1H), 4,93- 4,71 (m, 2H), 4,44- 4,30 (m, 1H), 4,24- 4,15 (m, 1H), 1,36- 1,29 (m, 3H), 1,28- 1,20 (m, 3H). Exemplo 146 5-(6-fluoro-4-metil-1H-indol-2-carbonil)-6-metil-N-[(2R)- 1,1,1 -trifluoropropan-2-il] - 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0775] Rt (Método B2) 3,78 min, m/z 452 [M+H]+

[0776] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,74 (s, 1H), 8,52- 8,44 (m, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,06- 6,92 (m, 2H), 6,78 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 5,61 (dd, J = 18,8, 7,2 Hz, 1H), 5,29 (p, J = 6,9, 6,1 Hz, 1H), 4,90- 4,68 (m, 2H), 4,45- 4,32 (m, 1H), 4,23- 4,15 (m, 1H), 2,52 (s, 3H), 1,37- 1,29 (m, 3H), 1,28- 1,20 (m, 3H). Exemplo 147 5-(6-cloro-5 -fluoro-1H-indol-2-carbonil)-6-metil-N-[(2R)- 1,1,1 -trifluoropropan-2-il] - 4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5- a]pirazina-3-carboxamida

[0777] Rt (Método B2) 3,85 min, m/z 472 / 474 [M+H]+

[0778] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,93 (s, 1H), 8,53- 8,45 (m, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,68 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 5,64- 5,53 (m, 1H), 5,31- 5,20 (m, 1H), 4,93- 4,67 (m, 2H), 4,41- 4,27 (m, 1H),

4,23- 4,14 (m, 1H), 1,37- 1,28 (m, 3H), 1,27- 1,18 (m, 3H). Exemplo 148 N-{3-[2-(difluorometoxi)etil]oxetan-3-il}-5-(1H-indol-2- carbonil)-4H,5H,6H,7H-pirazolo[1,5-a]pirazina-3-carboxamida

[0779] Rt (Método A2) 3,20 min, m/z 460 [M+H]+ Ensaio de montagem de capsídeo bioquímico

[0780] A triagem para atividade efetora de montagem foi feita com base em um ensaio de extinção de fluorescência publicado por Zlotnick et al. (2007). A proteína de núcleo truncada de terminal C contendo 149 aminoácidos do domínio de montagem de terminal N fusionado a um único resíduo de cisteína na posição 150 e foi expressa em E. coli usando o sistema de expressão de pET (Merck Chemicals, Darmstadt). A purificação de proteína dimérica de núcleo foi realizada usando uma sequência de etapas de cromatografia por exclusão de tamanho. Resumindo, o pélete celular de 1 l de cultura BL21 (DE3) Rosetta2 que expressa a sequência de codificação de proteína de núcleo clonada Ndel/Xhol em plasmídeo de expressão pET21b foi tratado por 1 h em gelo com um tampão de lise nativa (Qproteome Bacterial Protein Prep Kit; Qiagen, Hi Wen). Após uma etapa de centrifugação,

o sobrenadante foi precipitado durante 2 h de agitação em gelo com 0,23 g/ml de sulfato de amônio sólido. Após a centrifugação adicional, o pélete resultante foi resolvido em um tampão A (l100 mM Tris, pH 7,5; NaCl a 100 mM; DTT a 2 mM) e foi carregado subsequentemente em um tampão em uma coluna CaptoCore 700 equilibrada (GE Healthcare, Frankfurt). O fluxo de coluna contendo o capsídeo de HBV montado foi dialisado contra tampão N (NaHCO3 a 50 mM com pH 9,6; DTT a 5 mM) antes de a ureia ter sido adicionada a uma concentração final de 3 M para dissociar o capsídeo em dímeros centrais por 1,5 h em gelo. A solução proteica foi, então, carregada em uma coluna IL Sephacrila S300. Após a eluição com tampão, as frações contendo dímero de núcleo contendo frações foi identificado por SDS-PAGE e agrupado subsequentemente e dialisado contra HEPES a 50 mM com pH 7,5; DTT a 5 mM. Para aprimorar a capacidade de montagem dos dímeros centrais purificados, foi realizada uma segunda rodada de montagem e desmontagem que inicia com a adição de NaCl a 5 M e incluindo as etapas de cromatografia por exclusão de tamanho descritas acima. A partir da última etapa de cromatografia, as frações contendo dímero principal foram agrupadas e armazenadas em alíquotas em concentrações entre 1,5 a 2,0 mg/ml a -80 °C.

[0781] Logo antes da marcação, a proteína de núcleo foi reduzida ao adicionar DTT recentemente preparado em uma concentração final de 20 mM. Após 40 min de incubação em tampão de armazenamento em gelo e DTT foi removido com o uso de uma coluna Sephadex G-25 (GE Healthcare, Frankfurt) e HEPES a 50 mM, pH 7,5. Para a marcação, 1,6 mg/ml de proteína de núcleo foi incubada a 4 °C e no escuro durante a noite com maleimida BODIPY-FL (Invitrogen, Karlsruhe) em uma concentração final de 1 mM.

Após a marcação, o corante livre foi removido por uma etapa de dessalinização adicional com o uso de uma coluna Sephadex G-25. Os dímeros de núcleo marcados foram armazenados em alíquotas a 4 °C.

No estado dimérico o sinal de fluorescência da proteína de núcleo marcada é alto e é extinto durante a montagem dos dímeros de núcleo a altas estruturas de capsídeo moleculares.

O ensaio de triagem foi realizado em placas de microtitulação de 384 poços pretas em um volume de ensaio total de 10 µl com o uso de HEPES a 50 mM, pH 7,5 e 1,0 a 2,0 µM de proteína de núcleo marcada.

Cada composto de triagem foi adicionado em 8 concentrações diferentes com o uso de uma diluição de diluição em série de unidade de log de 0,5 começando em uma concentração final de 100 µM, 31,6 µM ou 10 µM.

Em qualquer caso, a concentração de DMSO ao longo da placa de microtitulação inteira foi de 0,5 %. A reação de montagem foi iniciada pela injeção de NaCl a uma concentração final de 300 µM que induz o processo de montagem a aproximadamente 25 % do sinal extinto máximo. 6 min após o início da reação o sinal de fluorescência foi medido com o uso de um leitor de placa Clariostar (BMG Labtech, Ortenberg) com uma excitação de 477 nm e uma emissão de 525 nm.

Como 100 % e 0 % de controle de montagem tampão HEPES que contém NaCl a 2,5 M e 0 M foi usado.

Os experimentos foram realizados três vezes em triplicatas.

Os valores de EC50 foram calculados por análise de regressão não linear usando o software Graph Pad Prism 6 (GraphPad Software, La Jolla, EUA). Determinação de DNA de HBV dos sobrenadantes de células de

HepAD38

[0782] A atividade anti-HBV foi analisada na linhagem celular transfectada estável HepAD38, que foi descrita por secretar altos níveis de partículas de vírion de HBV (Ladner et al., 1997). Resumindo, as células de HepAD38 foram cultivadas a 37 °C a 5 % de CO2 e 95 % de umidade em 200 µl de meio de manutenção, que foi meio Eagle modificado Dulbecco/Nutrient Mixture F-12 (Gibco, Karlsruhe), 10 % de soro fetal bovino (PAN Biotech Aidenbach) complementado com 50 µg/ml de penicilina/estreptomicina (Gibco, Karlsruhe), L-glutamina a 2 mM (PAN Biotech, Aidenbach), 400 µg/ml de G418 (AppliChem, Darmstadt) e 0,3 µg/ml de tetraciclina. As células foram subcultivadas uma vez por semana em razão de 1:5, mas normalmente não foram passadas mais que dez vezes. Para o ensaio, 60.000 células foram semeadas em meio de manutenção sem qualquer tetraciclina em cada poço de uma placa de 96 poços e tratadas com diluições de meio log em série de composto de teste. Para minimizar efeitos de borda, os 36 poços da placa não foram usados, mas foram preenchidos com meio de ensaio. Em cada placa de ensaio seis poços para o controle de vírus (células não tratadas de HepAD38) e seis poços para o controle celular (células de HepAD38 tratadas com 0,3 µg/ml de tetraciclina) foram alocados, respectivamente. Além disso, um conjunto de placas com referência a inibidores como BAY 41-4109, entecavir e lamivudina em vez de triar compostos foi preparada em cada experimento. De modo geral, os experimentos foram realizados três vezes em triplicatas. No dia 6 DNA de HBV de 100 µl de sobrenadante de cultura celular filtrada (Placa de Filtro AcroPrep Advance 96,

0,45 µM de membrana Supor, PALL GmbH, Dreieich) foram automaticamente purificadas no instrumento MagNa Pure LC com o uso do Kit de Volume Pequeno de DNA e NA Viral MagNA Pure 96 (Roche Diagnostics, Mannheim) de acordo com as instruções do fabricante. Os valores EC50 foram calculados a partir de números relativos de cópias de DNA de HBV. Resumindo, 5 µl dos 100 µl de eluato que contém DNA de HBV foram submetidos a Kit Principal de Sondas PCR LC480 (Roche) em conjunto com 1 µM de iniciador antissenso tgcagaggtgaagcgaagtgcaca, 0,5 µM de iniciador senso gacgtcctttgtttacgtcccgtc, 0,3 µM de hybprobes acggggcgcacctctctttacgcgg-FL e LC640- ctccccgtctgtgccttctcatctgc-PH (TIBMolBiol, Berlin) a um volume final de 12,5 µl. O PCR foi realizado no sistema em tempo real Light Cycler 480 (Roche Diagnostics, Mannheim) com o uso do seguinte protocolo: Pré-incubação por 1 min a 95 °C, amplificação: 40 ciclos x (10 seg a 95 °C, 50 seg a 60 °C, 1 seg a 70 °C), resfriamento por 10 seg a 40 °C. A carga viral foi quantificada contra padrões conhecidos com o uso de DNA plasmidal de HBV de pCH-9/3091 (Nassal et al., 1990, Cell 63: 1357-1363) e o software LightCycler 480 SW

1.5 (Roche Diagnostics, Mannheim) e os valores EC50 foram calculados com o uso de regressão não linear com GraphPad Prism 6 (GraphPad Software Inc., La Jolla, EUA). Ensaio de Viabilidade Celular

[0783] Com o uso do ensaio de viabilidade AlamarBlue a citotoxicidade foi avaliada em células de HepAD38 na presença de 0,3 µg/ml de tetraciclina, que bloqueia a expressão do genoma de HBV. A condição de ensaio e o projeto de placa foram em analogia ao ensaio anti-HBV, no entanto, outros controles foram usados. Em cada placa de ensaio, seis poços que contém células não tratadas de HepAD38 foram usadas como o controle de viabilidade de 100 %, e seis poços foram preenchidas com meio de ensaio apenas após serem usadas como controle de viabilidade de 0 %. Além disso, uma série de concentrações geométricas de ciclo-heximida que começa em concentração de final ensaio de 60 µM foi usada como controle positivo em cada experimento. Após período de seis dias de incubação, o reagente de viabilidade celular Alamar Blue Presto (ThermoFisher, Dreieich) foi adicionado em 1/11 de diluição a cada poço da placa de ensaio. Após uma incubação por 30 a 45 min a 37 °C, o sinal de fluorescência, que é proporcional ao número de células vivas, foi lido com o uso de um leitor de placa Tecan Spectrafluor Plus com um filtro de excitação de 550 nm e filtro de emissão 595 nm, respectivamente. Os dados foram normalizados em porcentagens do controle não tratado (100 % de viabilidade) e meio de ensaio (0 % de viabilidade) antes de os valores CC50 serem calculados com o uso de regressão não linear e o GraphPad Prism 6.0 (GraphPad Software, La Jolla, EUA). Os valores de EC50 e CC50 médios foram usados para calcular o índice de seletividade (SI = CC50/EC50) para cada composto de teste. Modelos de eficácia in vivo

[0784] A pesquisa de HBV e o teste pré-clínico de agentes antivirais são limitados pelo tropismo de espécies e tecido curto do vírus, a paucidade de modelos de infecção disponíveis e as restrições impostas pelo uso de chimpanzés, os únicos animais completamente suscetíveis à infecção por HBV.

Modelos animais alternativos tem como base o uso de hepadnavírus relacionados ao HBV e vários compostos antivirais forma testados em marmotas infectadas com vírus de hepatite de marmota (WHV) ou em patos infectados com vírus de hepatite B de pato (DHBV) ou em macaco lanoso HBV (WM-HBV) tupaia infectado (visão geral em Dandri et al., 2017, Best Pract Res Clin Gastroenterol 31, 273-279). No entanto, o uso de substitutos de vírus possui diversas limitações.

Por exemplo, é a homologia de sequência entre o DHBV mais distantemente relacionado e HBV é apenas cerca de 40 % e esse é o porquê de modificadores de montagem de proteína de núcleo da família HAP parecerem inativos em DHBV e WHV, mas eficientemente suprimidos em HBV (Campagna et al., 2013, J.

Virol. 87, 6931-6942). Os camundongos não são permissivos de HBV, mas esforços grandes foram focados no desenvolvimentos de modelos de camundongo de replicação e infecção de HBV, como a geração de camundongos transgênicos para o HBV humano (camundongos tg HBV), a injeção hidrodinâmica (HDI) de genomas de HBV em camundongos ou a geração de camundongos que têm fígados humanizados e/ou sistemas imunológicos humanizados e a injeção intravenosa de vetores virais com base em adenovírus que contêm genomas de HBV (Ad-HBV) ou o vírus adenoassociado (AAV-HBV) em camundongos competentes imunes (visão geral em Dandri et al., 2017, Best Pract Res Clin Gastroenterol 31, 273-279). Com o uso de camundongos transgênicos opara o genoma de HBV completo a habilidade de hepatócitos murinos para produzir vírions de HBV infecciosos pode ser demostrada (Guidotti et al., 1995, J.

Virol., 69: 6158-6169). Visto que camundongos transgênicos são imunologicamente tolerantes a proteínas virais e nenhum dano ao fígado foi observado em camundongos que produzem HBV, esses estudos demonstraram que o próprio HBV não é citopático. Camundongos transgênicos de HBV foram empregados para testar a eficácia de vários agentes anti- HBV, como os inibidores de polimerase e modificadores de montagem de proteína de núcleo (Weber et al., 2002, Antiviral Research 54 69-78; Julander et al., 2003, Antivir. Res., 59: 155- 161), provando, assim, que camundongos transgênicos de HBV são bem adequados para muitos tipos de teste antiviral pré-clínico in vivo.

[0785] Como descrito em Paulsen et al., 2015, PLOSone, 10: e0144383 camundongos transgênicos de HBV (Tg [HBV1,3 fsX'3’5’]) que carregam uma mutação por mudança de matriz de leitura (GC) na posição 2916/2917 poderiam ser usados para demonstrar atividade antiviral de modificadores de montagem de proteína de núcleo in vivo. Resumindo, os camundongos transgênicos com HBV foram verificados quanto a DNA específico de HBV no soro por qPCR antes dos experimentos (consultar a seção “Determinação de DNA de HBV a partir dos sobrenadantes de células de HepAD38”). Cada grupo de tratamento consistiu em cinco animais machos e cinco animais fêmeas de aproximadamente 10 semanas de idade com um titulador de 107-108 vírions por ml de soro. Os compostos foram formulados como uma suspensão em um veículo adequado, como 2 % de DMSO / 98 % de tilose (0,5 % de Metilcelulose / 99,5 % de PBS) ou 50 % de PEG400 e administrados por os aos animais uma a três vezes/dia por um período de 10 dias. O veículo serviu como controle negativo, enquanto 1 µg/kg de entecavir em um veículo adequado foi o controle positivo.

O sangue foi obtido por amostragem sanguínea retrobulbar com o uso de um Vaporizador de Isoflurano.

Para a coleta de perfuração cardíaca terminal seis horas após o último sangue e órgãos de tratamento, os camundongos foram anestesiados com isoflurano e subsequentemente sacrificados por exposição a CO2. As amostras sanguíneas retrobulbares (100-150 µl) e de punção cardíaca (400-500 µl) foram coletadas em um Microvette 300 LH ou Microvette 500 LH, respectivamente, seguido por separação de plasma através de centrifugação (10 min, 2000 g, 4 °C). Tecido hepático foi coletado e congelado rapidamente em N2 líquido.

Todas as amostras foram armazenadas a -80 °C até o uso adicional.

O DNA viral foi extraído de 50 µl de plasma ou 25 mg de tecido hepático e eluído em 50 µl de tampão de AE (plasma) com o uso do Kit de Sangue e Tecido DNeasy 96 (Qiagen, Hilden) ou 320 µl de tampão de AE (tecido hepático) com o uso do Kit de Tecido DNeasy (Qiagen, Hilden) de acordo com as instruções do fabricante.

O DNA viral eluído foi submetido a qPCR com o uso do kit PCR Principal de Sondas LightCycler 480 (Roche, Mannheim) de acordo com as instruções do fabricante para determinar o número de cópias de HBV.

Os iniciadores específicos de HBV usados incluíram o iniciador direto 5’- CTG TAC CAA ACC TTC GGA CGG-3’, o iniciador reverso 5’- AGG AGA AAC GGG CTG AGG C-3’ e a sonda marcada com FAM FAM-CCA TCA TCC TGG GCT TTC GGA AAA TT-BBQ.

Uma amostra de reação de PCR com um volume total de 20 µl continha 5 µl de eluato de DNA e 15 µl de mistura principal (compreendendo 0,3 µM do iniciador direto, 0,3 µM do iniciador reverso, 0,15 µM da sonda marcada com FAM). O qPCR foi executado no Roche

LightCycler1480 usando o seguinte protocolo: Pré-incubação por 1 min a 95 °C, amplificação: (10 s a 95 °C, 50 s a 60 °C, 1 s a t 70 °C) x 45 ciclos, resfriamento por 10 s a 40 °C. Curvas padrão foram geradas como descrito acima. Todas as amostras foram testadas em duplicata. O limite de detecção do ensaio é ~50 de cópias de DNA de HBV (usando padrões que variam de 250-2,5 x 107 de números de cópia). Os resultados são expressos como cópias de DNA de HBV/10 µl plasma ou cópias de DNA de HBV /100 mg de DNA hepático total (normalizado como controle negativo).

[0786] Mostrou-se em múltiplos estudos que camundongos transgênicos não são apenas um modelo adequado para provar a atividade antiviral de novas entidades químicas in vivo, o uso de injeção hidrodinâmica de genomas de HBV em camundongos bem como o uso de camundongos quiméricos de fígado humano imunodeficiente infectados com soro de paciente positivo para HBV também foram frequentemente usados para perfilar fármacos direcionados para HBV (Li et al., 2016, Hepat. Mon. 16: e34420; Qiu et al., 2016, J. Med. Chem. 59: 7651-7666; Lutgehetmann et al., 2011, Gastroenterology, 140: 2074-2083). Além disso, a infecção crônica por HBV também foi estabelecida com sucesso em camundongos imunocompetentes ao inocular baixas doses de vetores de adenovírus-(Huang et al., 2012, Gastroenterology 142: 1447-1450) ou vírus adenoassociado (AAV) contendo genoma de HBV (Dion et al., 2013, J Virol. 87: 5554-5563). Esses modelos também poderiam ser usados para demonstrar a atividade antiviral in vivo de agentes anti-HBV inovadores. Tabela 1: Bioquímica e atividades antivirais

[0787] Na Tabela 1, "+++" representa uma EC50 < 1 µM;

"++" representa 1 µM < EC50 <10 µM; "+" representa EC50 <100 µM (Ensaio de atividade celular)

[0788] Na Tabela 1, "A " representa uma IC50 < 5 µM; "B" representa 5 µM < IC50 <10 µM; "C" representa IC50 <100 µM (Atividade de ensaio de montagem)

[0789] Na Tabela 1, “solubilidade” indica que o composto foi insuficientemente solúvel no tampão de ensaio para determinar uma IC50.

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem Exemplo 1 > 10 A Exemplo 2 > 10 A Exemplo 3 > 10 A Exemplo 4 > 10 A Exemplo 5 > 10 A Exemplo 6 > 10 A Exemplo 7 > 10 A Exemplo 8 > 10 A Exemplo 9 > 10 A Exemplo 10 > 10 B Exemplo 11 > 10 A Exemplo 12 > 10 A Exemplo 13 > 10 A Exemplo 14 > 10 A

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem Exemplo 15 > 10 A

Exemplo 16 > 10 A

Exemplo 17 > 10 B

Exemplo 18 > 10 C

Exemplo 19 > 10 A

Exemplo 20 > 10 A

Exemplo 21 > 10 A

Exemplo 22 > 10 A

Exemplo 23 > 10 A

Exemplo 24 > 10 A

Exemplo 25 > 10 A

Exemplo 26 > 10 A

Exemplo 27 > 10 B

Exemplo 28 > 10 A

Exemplo 29 > 10 A

Exemplo 30 > 10 A

Exemplo 31 > 10 A

Exemplo 32 > 10 A

Exemplo 33 > 10 B

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem

Exemplo 34 > 10 solubilidade

Exemplo 35 > 10 A

Exemplo 36 > 10 B

Exemplo 37 > 10 A

Exemplo 38 > 10 A

Exemplo 39 > 10 A

Exemplo 40 > 10 A

Exemplo 41 > 10 A

Exemplo 42 > 10 A

Exemplo 43 > 10

Exemplo 44 > 10 A

Exemplo 45 > 10 B

Exemplo 46 > 10 A

Exemplo 47 > 10 A

Exemplo 48 > 10 A

Exemplo 49 > 10 A

Exemplo 50 > 10 A

Exemplo 51 > 10 B

Exemplo 52 > 10 A

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem Exemplo 51 > 10 A

Exemplo 54 > 10 A

Exemplo 55 > 10 A

Exemplo 56 > 10 A

Exemplo 57 > 10 A

Exemplo 58 > 10 A

Exemplo 59 > 10 A

Exemplo 60 > 10 A

Exemplo 61 > 10 A

Exemplo 62 > 10 > 10 A

Exemplo 63 > 10 A

Exemplo 64 > 10 A

Exemplo 65 > 10 A

Exemplo 66 > 10 A

Exemplo 67 > 10 A

Exemplo 68 > 10 A

Exemplo 69 > 10 A

Exemplo 70 > 10 A

Exemplo 71 > 10 A

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem Exemplo 72 >10 A

Exemplo 73 > 10 A

Exemplo 74 > 10 A

Exemplo 75 > 10 A

Exemplo 76 > 10 B

Exemplo 77 > 10 A

Exemplo 78 > 10 A

Exemplo 79 > 10 A

Exemplo 80 > 10 A

Exemplo 81 > 10 A

Exemplo 82 >10 A

Exemplo 83 > 10 A

Exemplo 84 > 10 A

Exemplo 85 > 10 A

Exemplo 86 > 10 A

Exemplo 87 > 10 A

Exemplo 88 > 10 > 10 A

Exemplo 89 > 10 A

Exemplo 90 > 10 A

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem

Exemplo 91 > 10 A

Exemplo 92 > 10 A

Exemplo 93 > 10 A

Exemplo 94 > 10 A

Exemplo 95 > 10 A

Exemplo 96 > 10 A

Exemplo 97 > 10 A

Exemplo 98 > 10 A

Exemplo 99 > 10 solubilidade

Exemplo 100 > 10 B

Exemplo 101 > 10 A

Exemplo 102 > 10 A

Exemplo 103 > 10 A

Exemplo 104 > 10 A

Exemplo 105 > 10 A

Exemplo 106 > 10 A

Exemplo 107 > 10 A

Exemplo 108 > 10 A

Exemplo 109 > 10 A

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem Exemplo 110 > 10 A

Exemplo 111 > 10 A

Exemplo 112 > 10 A

Exemplo 113 > 10 A

Exemplo 114 > 10 A

Exemplo 115 > 10 A

Exemplo 116 > 10 A

Exemplo 117 > 10 A

Exemplo 118 > 10 A

Exemplo 119 > 10 A

Exemplo 120 > 10 A

Exemplo 121 > 10 A

Exemplo 122 > 10 A

Exemplo 123 > 10 A

Exemplo 124 > 10 A

Exemplo 125 > 10 A

Exemplo 126 > 10 A

Exemplo 127 > 10 A

Exemplo 128 > 10 A

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem Exemplo 129 > 10 A

Exemplo 130 > 10 A

Exemplo 131 > 10 A

Exemplo 132 > 10 A

Exemplo 133 > 10 A

Exemplo 134 > 10 A

Exemplo 135 > 10 A

Exemplo 136 > 10 A

Exemplo 137 > 10 A

Exemplo 138 >10 A

Exemplo 139 >10 A

Exemplo 140 > 10 solubilidade

Exemplo 141 > 10 A

Exemplo 142 > 10 A

Exemplo 143 > 10 A

Exemplo 144 > 10 A

Exemplo 145 > 10 A

Exemplo 146 > 10 A

Exemplo 147 > 10 A

Atividade Atividade de Exemplo CC50 (µM) Celular Montagem Exemplo 148 > 10 A

Claims (15)

REIVINDICAÇÕES

1. Composto da Fórmula I caracterizado pelo fato de que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3,I, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3 - R5 é H ou metila - Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1- C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6-alquila, SO2-C3-C7- cicloalquila, SO2-C3-C7-heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6- alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila, NH-C6-arila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila,

C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila e C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C6-arila, heteroarila, C1-C6- alquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1- C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6- haloalquila, C1-C6-alquil-NH-C1-C6-haloalquila, C1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N, em que C3-C7-heterocicloalquila é opcionalmente substituída com 1 ou 2 grupos amino - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis de C3-C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio, O-C1-C6- haloalquila e C≡N ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula I ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

2. Composto da Fórmula I, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D, CH2OH, CH(CH3)OH, CH2F, CH(F)CH3,I, C=C, C≡C, C≡N, C(CH3)2OH, SCH3, OH e OCH3 - R5 é H ou metila - Q é selecionado a partir do grupo que compreende C1- C6-alquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, SO2-C1-C6-alquila, SO2-C3-C7- cicloalquila, SO2-C3-C7-heterocicloalquila, arila, heteroarila, N(Ra)(Rb), C(=O)N(Ra)(Rb), O(Ra) e SO2N(Ra)(Rb) opcionalmente substituídos com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C≡N, C3-C7-cicloalquila, C1-C6- alcóxi, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1- C6-haloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6- arila, NH-C6-arila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-S-C1-C6-alquila,

C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-C≡N e N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), em que C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-carboxialquila, heteroarila, C6-arila e NH-C6-arila são opcionalmente substituídas com 1 ou 2 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de carbóxi e halo - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7- heterocicloalquila, C2-C6-hidroxialquila e C2-C6- alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7- heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C1-G6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquil C1-C6-alquil-S-C1-C6- alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6- alquil-C≡N - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila ou sistema heteroespirocíclico que consiste em 2 ou 3 anéis de C3-C7, opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula I ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

3. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a arila é C6-arila e/ou a heteroarila é C1-C9-hereroarila e em que heteroarila e heterocicloalquila têm, cada uma, 1 a 4 heteroátomos cada um independentemente selecionado a partir de N, O e S, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula I ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

4. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula I ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo, caracterizado pelo fato de que o pró-fármaco é selecionado a partir do grupo que compreende ésteres, carbonatos, derivados de acetilóxi, derivados de aminoácido e derivados de fosforamidato.

5. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser um composto da Fórmula II em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - n é 1, 2 ou 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula II ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula II ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

6. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser um composto da Fórmula III em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - m é 0, 1, 2 ou 3 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula III ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula III ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

7. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser um composto da Fórmula IV em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1-

C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquil C1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula IV ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula IV ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

8. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser um composto da Fórmula V em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Z é selecionado a partir de C6-C12-arila e C1-C9-

heteroarila, opcionalmente substituídas com 1, 2, 3 ou 4 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de -OH, halo, C1-C6-alquila, C3-C7- cicloalquila, C1-C6-haloalquila, C1-C6-alcóxi, C1-C6- hidroxialquila e C≡N ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula V ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula V ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

9. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser um composto da Fórmula VI em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição, independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6-

hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquil C1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula VI ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula VI ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

10. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser um composto da Fórmula VII em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição,

independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Y é oxo-oxadiazabiciclo[3.3.1]nonanila substituída por C1-C6-carboxialquila; ou oxopirrolidinila, em que a dita oxopirrolidinila é opcionalmente substituída uma vez por N(C1-C6-carboxialquil)(C1-C6-alquil), carboxifenila, carboxipiridinila, carboxifenilamino, halocarboxifenila ou carboxipirrolidinila; ou duas vezes substituída por carboxipirrolidinila e C1-C6- alquila ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula VII ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula VII ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

11. Composto da Fórmula I, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser um composto da Fórmula VIII em que - R1, R2, R3 e R4 são, para cada posição,

independentemente selecionados a partir do grupo que compreende H, CF2H, CF3, CF2CH3, F, Cl, Br, CH3, Et, i- Pr, c-Pr, D e CH2OH - R5 é selecionado a partir de H e metila - Ra e Rb são independentemente selecionados a partir do grupo que compreende C1-C6-alquila, C1-C6-haloalquila, C3-C6-cicloalquila, C3-C7-heterocicloalquila, C2-C6- hidroxialquila e C2-C6-alquil-O-C1-C6-alquila, opcionalmente substituídas com 1, 2 ou 3 grupos, cada um independentemente selecionado a partir de OH, halo, C3-C7-heterocicloalquila, C1-C6-alquila, C1-C6- haloalquila, C1-C6-hidroxialquila, C1-C6-alquil-O-C1- C6-alquila, C1-C6-alquil-O-C1-C6-haloalquila, C1-C6- alquil-S-C1-C6-alquila, C1-C6-alquil-SO2-C1-C6-alquila e C1-C6-alquil-C≡N - Ra e Rb são opcionalmente conectados para formar um anel de C3-C7-heterocicloalquila, opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 grupos selecionados a partir de OH, halogênio e C≡N ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato de um composto da Fórmula VIII ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco de um composto da Fórmula VIII ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato do dito composto ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco do dito composto ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo caracterizado por ser para uso na prevenção ou no tratamento de uma infecção por HBV no indivíduo.

13. Composição farmacêutica caracterizada por compreender um composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato do dito composto ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco do dito composto ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo, juntamente com um carreador farmaceuticamente aceitável.

14. Método de tratamento de uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo caracterizado por compreender administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato ou um hidrato do dito composto ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um pró-fármaco do dito composto ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato do mesmo.

15. Método para a preparação de um composto da Fórmula I conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 caracterizado por ser pela reação de um composto da Fórmula IX em que R1, R2, R3 e R4 são conforme definidos na reivindicação 1, com um composto da Fórmula X em que R5 e Q são conforme definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 4.