BR112021008176A2 - compostos, composições, e métodos para a modulação da atividade da cdk9. - Google Patents

Abstract

Inibidores da CDK9 os quais são derivados de pirazolo [1,5-a] pirimidina e sais dos mesmos, correspondendo à fórmula (I):

Description

COMPOSTOS, COMPOSIÇÕES, E MÉTODOS PARA A MODULAÇÃO DA ATIVIDADE DA CDK9

REFERÊNCIA CRUZADA AOS PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica o benefício dos pedidos de patente provisórios norte-americanos nos. 62/752.635, 62/884.993 e 62/910.058; depositado em 30 de outubro de 2018, 9 de agosto de 2019 e 3 de outubro de 2019, respectivamente, os quais são aqui incorporados por referência em sua totalidade.

CAMPO

[002] A divulgação fornece compostos que modulam a atividade da quinase 9 dependente de ciclina (CDK9), composições farmacêuticas compreendendo os referidos compostos, e métodos de uso dos compostos e / ou das composições farmacêuticas para o tratamento, a melhora e / ou a prevenção de doenças decorrentes da atividade da CDK9, por exemplo, doenças hiper proliferativas, doenças infecciosas induzidas por vírus e doenças cardiovasculares.

ANTECEDENTES

[003] A família de proteínas quinase dependentes de ciclina (CDK) são os principais reguladores do ciclo celular e da transcrição do gene. O ciclo celular é um mecanismo celular regulador para o tempo de crescimento e divisão celular. O ciclo celular é um processo multifacetado que direciona a proliferação celular por meio de uma série de pontos de verificação que corrigem danos ao DNA, desarranjos genéticos e outros erros. Nonhuman Primates in Biomedical Research (segunda edição, 2012). Cada estágio é controlado por uma combinação de ciclinas e CDKs, em que as CDKs fosforilam um conjunto específico de ciclinas para acionar a entrada no próximo estágio do ciclo celular. Cell Cycle Merri Lynn Casern BA, PhD, em Case Studies in Cell Biology,

2016. Accumulation of cyclin proteins through regulation of cyclin mRNA transcription function as “biological switches” to turn CDKs on and off and move the cell from one stage to the next. Id.

[004] As CDKs 1, 2, 3, 4 e 6 regulam o tempo do ciclo de divisão celular enquanto as CDK 7 e CDK 9 regulam a atividade de transcrição através da regulação da RNA polimerase II via fosforilação do seu domínio carboxi terminal. Lucking, et al., Chem Med Chem 2017, 12, 1776 -

1793.

[005] A CDK9 controla a atividade transcricional de proteínas oncogênicas importantes, tal como AR, MYC, MCL-1, e BCL-2 e estimula fatores de transcrição pró-inflamatórios, tais como NFkB e STAT3. Gregory et al., Leukemia. 2015 Jun; 29(6): 1437 - 1441; Krystof, et al., Curr Pharm Des. 2012 Jul; 18(20): 2883 - 2890. A CDK9 forma um heterodímero com um dos quatro parceiros da ciclina (ciclina T1, ciclina K, ciclina T2a, ou ciclina T2b) chamado fator de alongamento de transcrição positivo (P-TEFb). A RNA polimerase II pausa a transcrição do mRNA após 20 - 40 nucleotídeos ao longo do molde de DNA devido à interação de fatores de alongamento negativos os quais servem como um importante mecanismo de controle regulatório para a transcrição de genes induzidos rapidamente. P-TEFb supera a pausa da RNA polimerase II por fosforilação do domínio carboxi terminal da RNA polimerase II, e inativação de fatores de alongamento negativos. Os compostos que direcionam para CDK9 e P-TEFb estão atualmente em estudo clínico. A atividade enzimática da CDK9 é importante para estimular o alongamento da transcrição da maioria dos genes codificadores de proteínas. Krystof, et al., Curr Pharm Des. 2012 Jul; 18(20): 2883 - 2890.

[006] Diversos inibidores da CDK com estruturas centrais heterocíclicas foram desenvolvidos. Por exemplo, scaffolds de purina têm sido a fonte de inibidores da CDK desenvolvidos para o tratamento de câncer, incluindo seliciclib (Cyclacel Pharmaceuticals, Inc) e outros derivados da purina. S.C. Wilson et al., Bioorg & Med Chem 2011 Nov; 19 (22): 6949 - 6965. Além da CDK9, esses derivados de purina também direcionam para CDK7 e CDK2, enquanto a inibição da CDK2 causa problemas de segurança e toxicidade. Os inibidores da CDK9 com base em um núcleo de triazina também foram desenvolvidos, por exemplo, Atuveciclib. Lucking et al., Chem Med Chem 2017, 12, 1776 - 1793. Infelizmente, o tratamento com inibidores da CDK9 permanece relativamente malsucedido e envolve muitos efeitos adversos. Morales et al., Cell Cycle 2016, vol. 15, no. 4, 519 - 527. Portanto, existe uma necessidade de novos inibidores da CDK9 para o tratamento de doenças mediadas por CDK9.

SUMÁRIO

[007] Em uma modalidade, a divulgação fornece pirazolo [1, 5-a] pirimidinas, e derivados dos mesmos, os quais são inibidores da CDK9.

[008] Em uma modalidade, a divulgação fornece para um composto de fórmula (I): ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

R1 é alquil C1-C6, cicloalquil C3-C6, tetrahidrofuranil, ou tetrahidropiranil, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, R7CO2R8, CO2R8, CO2H, R7CO2H, NH2, NHR8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, SO2NHR8, ou R1 é NH2, NHR8, OH, OR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, SO2NHR8, ou R1 e R2 juntos formam um cicloaril C5-C6 fundido, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8; R2, R3, R4 e R5 são independentemente H, D, halo, ou alquil C1-C5 ou cicloalquil C3-C6 opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8, ou R3 e R4 juntos formam um cicloaril C5-C6 fundido, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8, ou R2 e R5 juntos formam um cicloaril C5-C6 fundido, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8; R6 é H ou D; R7 é (CH2)n em que n é um número inteiro de 1 a 6; e R8 é alquil C1-C6 ou cicloalquil C3-C6, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, OH, SH, ou NH2.

[009] Em outra modalidade, no composto ou sal do mesmo de fórmula (I), R1 é alquil C1-C6 ou cicloalquil C3-

C6, opcionalmente substituído em qualquer posição com NH2, ou R1 é NHCOR8; R2, R3, R4, e R6 são H; R5 é ciclobutil, ciclopentil, ou ciclohexil, opcionalmente substituído em qualquer posição com D, NH2, OH, NHR8, OR8, ou combinações dos mesmos; e R8 é alquil C1-C4.

[0010] Em outra modalidade, no composto ou sal do mesmo de fórmula (I), R1 é metil, etil, isopropil, sec-butil, 3-pentil, ciclopropil, ciclopentil, ou NHCOCH3; R2, R3, R4, e R6 são H; e R5 é ciclobutil, ciclopentil, ou ciclohexil, opcionalmente substituído em qualquer posição com NH2.

[0011] O composto pode estar na forma de uma composição incluindo um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0012] Em outra modalidade, a divulgação fornece métodos para tratar, prevenir ou melhorar doenças mediadas por CDK9 tais como doenças hiper proliferativas (por exemplo, câncer), doenças infecciosas induzidas por vírus, e doenças cardiovasculares, pela administração de uma quantidade eficaz de um derivado de pirazolo [1,5-a] pirimidina aqui descrito a um indivíduo em necessidade do mesmo.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0013] Em uma modalidade, um composto aqui descrito capaz de uso em composições ou métodos aqui descritos compreende, consiste em, ou consiste essencialmente em um composto de fórmula (I) ou um sal do mesmo. Em um aspecto, a composição é formulada em uma composição ou forma farmacêutica.

[0014] Qualquer um dos compostos descritos por meio da fórmula (I) ou mostrados como compostos específicos podem ser um único estereoisômero ou uma mistura de possíveis estereoisômeros. Por exemplo, se um único carbono quiral estiver presente, o composto pode ser o estereoisômero (S) ou (R), em relação ao carbono quiral, ou o composto pode ser uma mistura não racêmica dos isômeros (S) e (R), ou o composto pode ser o isômero (S) sozinho ou o isômero (R) sozinho. Se o composto contém mais de um carbono quiral, o composto pode ser um único diastereômero ou uma mistura de diastereômeros.

[0015] Por “sal” significa um sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, um sal cloridrato. Um “sal farmaceuticamente aceitável” é um sal o qual retém a atividade do composto sem efeitos adversos significativos. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de ácidos orgânicos ou inorgânicos, por exemplo, ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido metanossulfônico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido succínico, ácido acético, ácido benzóico, ácido oxálico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido carbônico, ácido fosfórico, ácido trifluoroacético e ácido fórmico. O sal pode conter um ou mais equivalentes de ácido por composto, isto é, o composto pode estar na forma de um sal de dicloreto.

[0016] Os compostos ativos divulgado pode também estar na forma dos seus hidratos. O termo "hidrato" inclui, por exemplo, hemi-hidrato, monoidrato, diidrato, triidrato e tetraidrato.

[0017] Os compostos desta divulgação podem exibir suas abundâncias isotópicas naturais, ou um ou mais dos átomos podem ser artificialmente enriquecidos em um isótopo particular apresentando o mesmo número atômico, mas uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa predominantemente encontrado na natureza. A presente divulgação inclui todos as variações isotópicas adequadas dos compostos aqui descritos.

[0018] “Alquil” significa hidrocarbonetos alifáticos saturados de cadeia linear e ramificada, e especificando o número de átomos de carbono como em "alquil C1-C6" significa todos os seus isômeros que apresentam 1, 2, 3, 4, 5, ou 6 carbonos em um arranjo linear ou ramificado. Assim, "alquil C1-C6" inclui metil, etil, n-propil, i-propil, n-butil, t-butil, i-butil, etc.

[0019] “Cicloalquil” significa hidrocarbonetos alifáticos saturados cíclicos com o número especificado de carbonos.

[0020] “D” é deutério.

[0021] “Halo” significa um substituinte halogênio, por exemplo, F, Cl, ou Br.

[0022] Exemplos de compostos de fórmula (I) incluem:

[0023] Uma “quantidade eficaz” ou “quantidade terapeuticamente eficaz” é uma quantidade do composto ou composição que é suficiente para efetuar resultados benéficos ou desejados tais como aqui descritos quando administrado a um indivíduo.

As formas de dosagem eficazes, modos de administração e quantidades de dosagem podem ser determinadas empiricamente, e fazer tais determinações está dentro da habilidade na técnica.

É entendido por aqueles versados na técnica que a quantidade de dosagem irá variar de acordo com a via de administração, a taxa de excreção, a duração do tratamento, a identidade de quaisquer outros fármacos sendo administrados, a idade, tamanho e espécies de mamífero, por exemplo, paciente humano, e fatores similares bem conhecidos nas artes da medicina e veterinária. Em geral, uma dose adequada será aquela quantidade de composto a qual é a menor dose eficaz para produzir o efeito desejado sem efeitos colaterais ou com mínimos efeitos colaterais.

[0024] Um exemplo adequado e não limitativo de uma dosagem dos compostos de acordo com a presente divulgação é de cerca de 1 ng / kg a cerca de 1000 mg / kg, tal como de cerca de 1 mg / kg a cerca de 100 mg / kg, incluindo de cerca de 5 mg / kg a cerca de 50 mg / kg. Outras dosagens representativas de um inibidor de PI3K incluem cerca de 1 mg / kg, 5 mg / kg, 10 mg / kg, 15 mg / kg, 20 mg / kg, 25 mg / kg, 30 mg / kg, 35 mg / kg, 40 mg / kg, 45 mg / kg, 50 mg / kg, 60 mg / kg, 70 mg / kg, 80 mg / kg, 90 mg / kg, 100 mg / kg, 125 mg / kg, 150 mg / kg, 175 mg / kg, 200 mg / kg, 250 mg / kg, 300 mg / kg, 400 mg / kg, 500 mg / kg, 600 mg / kg, 700 mg / kg, 800 mg / kg, 900 mg / kg, ou 1000 mg / kg.

[0025] Ainda outra modalidade da presente divulgação é uma composição farmacêutica para o tratamento de uma doença mediada por CDK9. A doença mediada por CDK9 pode ser uma doença hiper proliferativa (por exemplo, câncer), doenças infecciosas induzidas por vírus, ou uma doença cardiovascular. Exemplos incluem leucemia mieloide aguda, carcinoma peritoneal primário, leucemia linfocítica crônica, mieloma múltiplo recidivante, linfoma não-Hodgkin, leucemia linfoblástica aguda, leucemia fenotípica aguda, câncer de mama avançado, câncer de pulmão de células não pequenas, câncer de fígado, tal como carcinoma hepatocelular, e tumores sólidos avançados. Em particular, os compostos podem ser usados para tratar um câncer causado pela expressão aberrante de MYC- ou MCL-1, uma malignidade hematológica, ou um tumor sólido.

[0026] A composição farmacêutica compreende um carreador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade eficaz dos compostos aqui descritos.

[0027] Uma composição farmacêutica da presente divulgação pode ser administrada de qualquer maneira desejada e eficaz: para ingestão oral, ou como uma pomada ou colírio para administração local nos olhos, ou para administração parenteral ou outra administração de qualquer maneira apropriada como intraperitoneal, subcutânea, tópica, intradérmica, inalação, intrapulmonar, retal, vaginal, sublingual, intramuscular, intravenosa, intra-arterial, intratecal, ou intralinfática. Além disso, uma composição farmacêutica da presente divulgação pode ser administrada em conjunto com outros tratamentos. Uma composição farmacêutica da presente divulgação pode ser encapsulada ou de outra forma protegida contra secreções gástricas ou outras secreções, se desejado.

[0028] As composições farmacêuticas da divulgação são farmaceuticamente aceitáveis e compreendem um ou mais ingredientes ativos em mistura com um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis e, opcionalmente, um ou mais outros compostos, fármacos, ingredientes e / ou materiais. Independentemente da via de administração selecionada, os agentes / compostos da presente divulgação são formulados em formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis por métodos convencionais conhecidos pelos versados na técnica usando carreadores farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos na técnica (vide, por exemplo, Remington, The Science and

Practice of Pharmacy (21ª Edição, Lippincott Williams and Wilkins, Philadelphia, Pa.) e The National Formulary (American Pharmaceutical Association, Washington, D.C.)) inclui açúcares (por exemplo, lactose, sacarose, manitol, e sorbitol), amidos, preparações de celulose, fosfatos de cálcio (por exemplo, fosfato de dicálcio, fosfato de tricálcio e hidrogenofosfato de cálcio), citrato de sódio, água, soluções aquosas (por exemplo, salina, injeção de cloreto de sódio, injeção de Ringer, injeção de dextrose, injeção de dextrose e cloreto de sódio, injeção de Ringer com lactato), álcoois (por exemplo, álcool etílico, álcool propílico e álcool benzílico), poliois (por exemplo, glicerol, propileno glicol, e polietileno glicol), ésteres orgânicos (por exemplo, etil oleato e triglicerídeos), polímeros biodegradáveis (por exemplo, poli lactídeo - poli glicolídeo, poli (ortoésteres) e poli (anidridos)), matrizes elastoméricas, lipossomas, microesferas, óleos (por exemplo, milho, gérmen, azeitona, mamona, gergelim, semente de algodão e amendoim), manteiga de cacau, ceras (por exemplo, ceras de supositório), parafinas, silicones, talco, silicilato, etc. Cada carreador farmaceuticamente aceitável usado em uma composição farmacêutica da divulgação é “aceitável” no sentido de ser compatível com os demais ingredientes da formulação e não prejudicial ao indivíduo. Os carreadores adequados para uma forma de dosagem selecionada e a via de administração pretendida são bem conhecidos na técnica, e os carreadores aceitáveis para a forma de dosagem e o método de administração escolhidos podem ser determinados usando habilidades comuns na técnica.

[0029] As composições farmacêuticas da divulgação podem, opcionalmente, conter ingredientes e / ou materiais adicionais comumente utilizados nas referidas composições farmacêuticas.

Estes ingredientes e materiais são bem conhecidos na técnica e incluem (1) enchimentos ou extensores, tais como amidos, lactose, sacarose, glicose, manitol e ácido silícico; (2) ligantes, tais como carboximetil celulose, alginatos, gelatina, polivinil pirrolidona, hidroxi propil metil celulose, sacarose e acácia; (3) umectantes, tais como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tais como ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, certos silicatos, glicolato de amido de sódio, carboximetil celulose de sódio reticulada e carbonato de sódio; (5) agentes retardadores de solução, tal como a parafina; (6) aceleradores de absorção, tais como compostos de amônio quaternário; (7) agentes molhantes, tais como álcool cetílico e monoestearato de glicerol; (8) absorventes, tais como caulim e argila bentonita; (9) lubrificantes, tais como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietilenoglicóis sólidos, e laurilsulfato de sódio; (10) agentes de suspensão, tais como álcoois isoestearílicos etoxilados, polioxietileno sorbitol e ésteres de sorbitano, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio, bentonita, ágar-ágar e tragacanto; (11) agentes tamponantes; (12) excipientes, tais como lactose, açúcares do leite, polietilenoglicóis, gorduras animais e vegetais, óleos, ceras, parafinas, manteiga de cacau, amidos, tragaeante, derivados de celulose, polietilenoglicol, silicones, bentonitas, ácido silícico, talco, salicilato, óxido de zinco, hidróxido de alumínio, silicatos de cálcio, e pó de poliamida; (13) diluentes inertes, tais como água ou outros solventes; (14) preservantes; (15) agentes tensoativos; (16) agentes dispersantes; (17) agentes de liberação ou retardadores da absorção, tais como hidroxi propil metil celulose, outras matrizes poliméricas, polímeros biodegradáveis, lipossomas, microesferas, monoesterato de alumínio, gelatina, ceras e; (18) agentes opacificantes; (19) adjuvantes; (20) agentes molhantes; (21) emulsionantes e agentes de suspensão; (22) agentes solubilizantes e emulsionantes, tais como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, propilenoglicol, 1,3-butilenoglicol, óleos (em particular, óleos de semente de algodão, amendoim, milho, gérmen, azeitona, mamona e gergelim), glicerol, álcool tetrahidrofurílico, polietilenoglicóis e ésteres de ácidos graxos de sorbitano; (23) propelentes, tais como clorofluoro hidrocarbonetos e hidrocarbonetos voláteis não substituídos, como butano e propano; (24) antioxidantes, (25) agentes os quais tornam a formulação isotônica com o sangue do destinatário pretendido, como açúcares e cloreto de sódio; (26) agentes espessantes; (27) materiais de revestimento, tal como a lecitina; e (28) agentes adoçantes, aromatizantes, corantes, perfumantes e conservantes.

Cada um dos referidos ingredientes ou materiais deve ser “aceitável” no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudicar o indivíduo.

Ingredientes e materiais adequados para uma forma de dosagem selecionada e via de administração pretendida são bem conhecidos na técnica, e ingredientes e materiais aceitáveis para uma forma de dosagem e método de administração escolhidos podem ser determinados usando habilidades comuns na técnica.

[0030] As composições farmacêuticas adequadas para administração oral podem estar na forma de cápsulas, hóstias, pílulas, comprimidos, pós, grânulos, uma solução ou uma suspensão em um líquido aquoso ou não aquoso, uma emulsão líquida óleo-em-água ou água-em-óleo, um elixir ou xarope, uma pastilha, um bólus, um eletuário ou uma pasta. Estas formulações podem ser preparadas por métodos conhecidos na técnica, por exemplo, por meio de processos convencionais de revestimento em panela, mistura, granulação ou liofilização.

[0031] As formas de dosagem sólidas para administração oral (cápsulas, comprimidos, pílulas, drágeas, pós, grânulos e similares) podem ser preparadas, por exemplo, misturando o(s) ingrediente(s) ativo(s) com um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis e, opcionalmente, um ou mais agentes de enchimento, extensores, ligantes, umectantes, agentes desintegrantes, agentes retardadores de solução, aceleradores de absorção, agentes umectantes, absorventes, lubrificantes e / ou agentes corantes. As composições sólidas de um tipo similar podem ser empregadas como enchimentos em cápsulas de gelatina mole e dura usando um excipiente adequado. Um comprimido pode ser feito por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos podem ser preparados usando um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, conservante, desintegrante, agente tensoativo ou dispersante adequados. Os comprimidos moldados podem ser feitos por moldagem em uma máquina adequada. Os comprimidos, e outras formas de dosagem sólidas, tais como drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos, podem ser opcionalmente marcados ou preparados com revestimentos e conchas, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Eles também podem ser formulados de modo a fornecer a liberação lenta ou controlada do ingrediente ativo dos mesmos. Eles podem ser esterilizados, por exemplo, por filtração através de um filtro de retenção de bactérias. Estas composições podem também conter opcionalmente agentes opacificantes e podem ser de uma composição tal que libere o ingrediente ativo apenas, ou preferencialmente, em uma determinada parte do trato gastrointestinal, opcionalmente, de forma retardada. O ingrediente ativo também pode estar na forma micro encapsulada.

[0032] As formas de dosagem líquidas para administração oral incluem emulsões, microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. As formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes adequados comumente usados na técnica. Além dos diluentes inertes, as composições orais também podem incluir adjuvantes, tais como agentes umectantes, agentes emulsionantes e de suspensão, edulcorantes, aromatizantes, corantes, perfumantes e conservantes. As suspensões podem conter agentes de suspensão.

[0033] As composições farmacêuticas para administração retal ou vaginal podem ser apresentadas como um supositório, o qual pode ser preparado pela mistura de um ou mais ingrediente(s) ativo(s) com um ou mais carreadores não irritantes adequados os quais são sólidos em temperatura ambiente, porém líquido na temperatura corporal e, assim, irá derreter no reto ou na cavidade vaginal e liberar o composto ativo. As composições farmacêuticas as quais são adequadas para administração vaginal também incluem pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas ou formulações em spray contendo os referidos veículos farmaceuticamente aceitáveis tais como são conhecidos na técnica como sendo apropriados.

[0034] As formas de dosagem para administração tópica ou transdérmica incluem pós, sprays, pomadas, pastas, cremes, loções, géis, soluções, adesivos, colírios e inalantes. O(s) agente(s) ativo(s) / composto(s) podem ser misturados sob condições estéreis com um veículo farmaceuticamente aceitável adequado. As pomadas, pastas, cremes e géis podem conter excipientes. Pós e sprays podem conter excipientes e propelentes.

[0035] As composições farmacêuticas adequadas para administrações parenterais compreendem um ou mais agente(s) / composto(s) em combinação com uma ou mais soluções, dispersões, suspensões ou emulsões aquosas ou não aquosas isotônicas estéreis farmaceuticamente aceitáveis ou pós estéreis os quais podem ser reconstituídos em estéreis soluções ou dispersões injetáveis imediatamente antes do uso, que podem conter antioxidantes adequados, tampões, solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do destinatário pretendido, ou agentes de suspensão ou espessantes. A fluidez adequada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de materiais de revestimento, pela manutenção do tamanho de partícula necessário no caso de dispersões, e pelo uso de surfactantes. Estas composições também podem conter adjuvantes adequados, tais como agentes molhantes, agentes emulsionantes e agentes dispersantes. Também pode ser desejável incluir agentes isotônicos. Além disso, a absorção prolongada da forma farmacêutica injetável pode ser provocada pela inclusão de agentes que retardam a absorção.

[0036] Em alguns casos, para prolongar o efeito de um arraste (por exemplo, formulação farmacêutica), é desejável retardar sua absorção por injeção subcutânea ou intramuscular. Isso pode ser alcançado pelo uso de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo com baixa solubilidade em água.

[0037] A taxa de absorção do agente ativo / fármaco depende então da sua taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho do cristal e da forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada de um agente / fármaco administrado por via parenteral pode ser realizada pela dissolução ou suspensão do agente ativo / arraste em um veículo oleoso. As formas de depósito injetáveis podem ser feitas formando matrizes de microencapsulação do ingrediente ativo em polímeros biodegradáveis. Dependendo da proporção do ingrediente ativo para o polímero, e da natureza do polímero particular empregado, a taxa de liberação do ingrediente ativo pode ser controlada. As formulações de depósito injetáveis são também preparadas pelo encapsulamento do fármaco em lipossomas ou microemulsões que são compatíveis com o tecido corporal. Os materiais injetáveis podem ser esterilizados, por exemplo, por filtração através de um filtro de retenção de bactérias.

[0038] As formulações podem ser apresentadas em recipientes selados de dose unitária ou multidose, por exemplo, ampolas e frascos, e podem ser armazenadas em uma condição liofilizada exigindo apenas a adição do carreador líquido estéril, por exemplo, água para injeção,

imediatamente antes de usar. Soluções e suspensões de injeção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós estéreis, grânulos e comprimidos do tipo descrito acima.

[0039] Tal como aqui utilizado, um “indivíduo” é um mamífero, preferencialmente, um humano. Além dos humanos, as categorias de mamíferos dentro do escopo da presente divulgação incluem, por exemplo, animais agrícolas, animais domésticos, animais de laboratório, etc. Alguns exemplos de animais agrícolas incluem vacas, porcos, cavalos, cabras, etc. Alguns exemplos de animais domésticos incluem cães, gatos, etc. Alguns exemplos de animais de laboratório incluem ratos, camundongos, coelhos, porquinhos-da-índia, etc..

[0040] Tal como aqui utilizado, os termos “tratar”, “tratando”, “tratamento” e variações gramaticais dos mesmos significam submeter um indivíduo individual a um protocolo, regime, processo ou remédio, no qual é desejado obter uma resposta fisiológica ou resultado no qual o indivíduo, por exemplo, um paciente. Em particular, os métodos e composições da presente divulgação podem ser usados para diminuir o desenvolvimento de sintomas da doença ou retarda o início de uma doença ou condição, ou interrompe a progressão do desenvolvimento da doença. No entanto, como cada indivíduo tratado pode não responder a um determinado protocolo de tratamento, regime, processo ou remédio, o tratamento não requer que a resposta fisiológica ou resultado desejado seja alcançado em cada um e todos os indivíduos ou sujeitos, por exemplo, paciente, população. De acordo com isto, um determinado indivíduo ou sujeito, por exemplo, paciente, população pode falhar em responder ou responder de forma inadequada ao tratamento.

[0041] Tal como aqui utilizado, os termos “melhora”, “melhorar” e variações gramaticais dos mesmos significam diminuir a gravidade dos sintomas de uma doença em um indivíduo.

[0042] Tal como aqui utilizado, os termos “prevenir”, “prevenção” e variações gramaticais dos mesmos significam administrar um composto ou composição da presente divulgação a um indivíduo o qual não foi diagnosticado como tendo a doença ou condição no momento da administração, porém o qual se espera desenvolver a doença ou condição ou estar em maior risco da doença ou condição. Prevenir também inclui a administração de pelo menos um composto ou uma composição da presente divulgação àqueles indivíduos que são considerados predispostos a uma doença ou condição devido à idade, histórico familiar, anormalidades genéticas ou cromossômicas, devido à presença de um ou mais marcadores biológicos de doença ou condição e / ou devido a fatores ambientais.

[0043] Os exemplos a seguir servem para ilustrar determinados aspectos da divulgação e não pretendem limitar a divulgação.

EXEMPLOS

[0044] Os exemplos a seguir descrevem a preparação e o teste de compostos representativos. Exemplo 1: N-ciclopentil-5-metil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (1)

[0045] À solução agitada de 7-cloro-5-metil-pirazolo

[1,5-a] pirimidina (50.0 mg, 0.3000 mmol), ciclopentanamina (30.48 mg, 0.3600 mmol) e K2CO3 (82.34 mg, 0.6000 mmol) em MeCN (4 mL) foi aquecida até o refluxo por 4 h. A mistura reacional foi filtrada, concentrada sob pressão reduzida e purificada por coluna cromatográfica, eluente 30% de acetato de etila em hexano, para fornecer N-ciclopentil-5-metil- pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (51.58 mg, 0.2358 mmol,

79.05% de rendimento) (1) como um sólido amorfo, amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (40 % de acetato de etila em hexanos; Rf do produto = 0.4, Rf do SM = 0.6). Exemplo 2: N-ciclopentil-5-isopropil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (2)

[0046] A uma solução agitada de 7-cloro-5-isopropil- pirazolo [1,5-a] pirimidina (65.0 mg, 0.3300 mmol), ciclopentanamina (0.04 mL, 0.4000 mmol) e K2CO3 (91.69 mg,

0.6600 mmol) em MeCN (4 mL) foram aquecidos até o refluxo por 4 h. A mistura reacional foi filtrada, concentrada sob pressão reduzida e purificada por coluna cromatográfica, eluente 15 % de acetato de etila em hexano para fornecer N- ciclopentil-5-isopropil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (48.02 mg, 0.1953 mmol, 58.79 % de rendimento) (2) como um sólido amorfo, amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (20 % de acetato de etila em hexanos; Rf do produto = 0.3, Rf do SM = 0.6).

Exemplo 3: N-ciclopentil-5-sec-butil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (3)

[0047] A uma solução agitada de 7-cloro-5-sec-butil- pirazolo [1,5-a] pirimidina (50 mg, 0.2400 mmol), ciclopentanamina (24.37 mg, 0.2900 mmol) e K2CO3 (82.28 mg,

0.6000 mmol) em MeCN (5 mL) foram aquecidos até o refluxo por 4 h. A mistura reacional foi filtrada, concentrada sob pressão reduzida e purificada por coluna cromatográfica para fornecer N-ciclopentil-5-sec-butil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (21.27 mg, 0.0823 mmol, 34.52 % de rendimento) (3) como um sólido amorfo, amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (30 % de acetato de etila em hexanos;, Rf do produto = 0.4, Rf do SM = 0.5). Exemplo 4: Dicloreto de [4-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclohexil] amônio (4)

[0048] Ao carbamato de terc-butil N-[4-[(5- metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclohexil] (60.0 mg, 0.1700 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.1700 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [4-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-

il) amino] ciclohexil] amônio (39.89 mg, 0.1247 mmol, 71.80 % de rendimento) (4) como um sólido branco. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 5: N,5-diciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (5)

[0049] À solução agitada de 7-cloro-5-ciclopentil- pirazolo [1,5-a] pirimidina (50.0 mg, 0.2300 mmol), ciclopentanamina (23.05 mg, 0.2700 mmol) e K2CO3 (77.81 mg,

0.5600 mmol) em MeCN (5 mL) foi aquecida até o refluxo por 4 h. A mistura reacional foi filtrada, concentrada sob pressão reduzida e purificada por coluna cromatográfica para fornecer N,5-diciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7- amina (33.17 mg, 0.1227 mmol, 54.40 % de rendimento) (5) como um sólido amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (30 % de acetato de etila em hexanos; Rf do produto = 0.4, Rf do SM = 0.5). Exemplo 6: Dicloreto de [4-[(5-isopropilpirazolo [1,5- a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclohexil] amônio (6)

[0050] Ao carbamato de terc-butil N-[4-[(5- isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclohexil]

(80.0 mg, 0.2100 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2100 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [4-[(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4- io-7-il) amino] ciclohexil] amônio (64.82 mg, 0.1796 mmol,

83.87 % de rendimento) (6) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 7: Dicloreto de [4-[(5-sec-butilpirazolo [1,5- a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclohexil] amônio (7)

[0051] Ao carbamato de terc-butil N-[4-[(5-sec- butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclohexil] (65.0 mg, 0.1700 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.1700 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [4-[(5-sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4- io-7-il) amino] ciclohexil] amônio (46.75 mg, 0.1297 mmol,

77.35 % de rendimento) (7) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.78). Exemplo 8: Dicloreto de [4-[(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclohexil] amônio (8)

[0052] Ao carbamato de terc-butil N-[4-[(5- ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclohexil] (72.17 mg, 0.1800 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL,

0.1800 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [4-[(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclohexil] amônio (59.36 mg,

0.1594 mmol, 88.26 % de rendimento) (8) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM =

0.8). Exemplo 9: Dicloreto de [(1S,3S)-3-[(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclopentil] amônio (9)

[0053] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3S)-3-[(5- ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (105 mg, 0.2700 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL,

0.2700 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [(1S,3S)-3-[(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclopentil] amônio (51.28 mg, 0.1431 mmol, 52.54 % de rendimento) (9) como um sólido amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do

SM = 0.8). Exemplo 10: Dicloreto de [(1S,3R)-3-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclopentil] amônio (10)

[0054] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3R)-3-[(5- metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (100.0 mg, 0.3000 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.3000 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [(1S,3R)-3-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin- 4-io-7-il) amino] ciclopentil] amônio (84.11 mg, 0.2685 mmol,

88.98 % de rendimento) (10) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 11: Dicloreto de [3-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclobutil] amônio (11)

[0055] Ao carbamato de terc-butil N-[3-[(5- metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclobutil] (90 mg, 0.2800 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2800 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [3-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7- il) amino] ciclobutil] amônio (65.42 mg, 0.2240 mmol, 79.01 % de rendimento) (11) como um sólido marrom claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 12: Dicloreto de [(1R,3S)-3-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-4-io-7-il) amino] ciclopentil] amônio (12)

[0056] Ao carbamato de terc-butil N-[(1R,3S)-3-[(5- metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (80.0 mg, 0.2400 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2400 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo para fornecer dicloreto de [(1R,3S)-3-[(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin- 4-io-7-il) amino] ciclopentil] amônio (61.39 mg, 0.1993 mmol,

82.57 % de rendimento) (12) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 13: (1S,3R)-N3-(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (13)

[0057] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3R)-3-[(5- isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (80.0 mg, 0.2200 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2200 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1S,3R)- N3-(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (26.03 mg, 0.0978 mmol, 43.97 % de rendimento) (13) como um sólido amorfo amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 14: (1S,3R)-N3-(5-sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (14)

[0058] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3R)-3-[(5- sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (100.0 mg, 0.2700 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2700 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1S,3R)- N3-(5-sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (34.04 mg, 0.1245 mmol, 46.51 % de rendimento) (14) como um sólido amorfo verde claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8).

Exemplo 15: Carbamato de terc-butil N-[(1S,3R)-3-[(5- ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (15)

[0059] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3R)-3-[(5- ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (100.0 mg, 0.2600 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2600 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1S,3R)-N3-(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (31.91 mg, 0.1118 mmol, 43.10 % de rendimento) (15) como um sólido amorfo amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila, Rf do produto = 0.1, Rf do SM =

0.8). Exemplo 16: (1R,3S)-N3-(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (16)

[0060] Ao carbamato de terc-butil N-[(1R,3S)-3-[(5-

isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (75.0 mg, 0.2100 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2100 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1R,3S)- N3-(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (30.78 mg, 0.1158 mmol, 55.49 % de rendimento) (16) como um sólido amorfo amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 17: (1S,3S)-N3-(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (17)

[0061] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3S)-3-[(5- isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (80.0 mg, 0.2200 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2200 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1S,3S)- N3-(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (31.02 mg, 0.1160 mmol, 52.14 % de rendimento) (17) como uma goma amarela clara. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 18: (1S,3S)-N3-(5-sec-butilpirazolo [1,5-a]

pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (18)

[0062] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3S)-3-[(5- sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (105.0 mg, 0.2800 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2800 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1S,3S)- N3-(5-sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (20.55 mg, 0.0752 mmol, 26.74 % de rendimento) (18) como um sólido amorfo amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 19: N1-(5-sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin- 7-il) ciclobutano-1,3-diamina (19)

[0063] Ao carbamato de terc-butil N-[3-[(5-sec- butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino]ciclobutil] (85.0 mg, 0.2400 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2400 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer N1-(5- sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclobutano-1,3- diamina (30.61 mg, 0.1180 mmol, 49.91 % de rendimento) (19) como um sólido amorfo amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 20: N1-(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclobutano-1,3-diamina (20)

[0064] Ao carbamato de terc-butil N-[3-[(5- ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclobutil] (80.0 mg, 0.2200 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL,

0.2200 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por Cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer N1-(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclobutano-1,3-diamina (29.52 mg, 0.1088 mmol, 50.51 % de rendimento) (20) como uma goma amarela clara. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 21: N1-(5-isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin- 7-il) ciclobutano-1,3-diamina (21)

[0065] Ao carbamato de terc-butil N-[3-[(5- isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclobutil] (75.0 mg, 0.2200 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2200 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer N1-(5- isopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclobutano-1,3- diamina (32.01 mg, 0.1251 mmol, 57.62 % de rendimento) (21) como um sólido amorfo, amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 22: (1R,3S)-N3-(5-sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (22)

[0066] Ao carbamato de terc-butil N-[(1R,3S)-3-[(5- sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (100.0 mg, 0.2700 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2700 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1R,3S)- N3-(5-sec-butilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (28.39 mg, 0.1038 mmol, 38.79 % de rendimento) (22) como um sólido amorfo amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8).

Exemplo 23: (1R,3S)-N3-(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (23)

[0067] Ao carbamato de terc-butil N-[(1R,3S)-3-[(5- ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (100.0 mg, 0.2600 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2600 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo e neutralizada por cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML para fornecer (1R,3S)-N3-(5-ciclopentil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (33.05 mg, 0.1158 mmol, 44.64 % de rendimento) (23) como um sólido amorfo amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM =

0.8). Exemplo 24: (1S,3S)-N3-(5-metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (24)

[0068] Ao carbamato de terc-butil N-[(1S,3S)-3-[(5- metilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil]

(80.0 mg, 0.2400 mmol), HCl em dioxano (2.0 mL, 0.2400 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi evaporada em vácuo, neutralizada por Cartuxo de PL-HCO3 MP SPE 200MG / 6ML e purificada por HPLC preparatório para fornecer (1S,3S)-N3-(5-metilpirazolo [1,5- a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (21.15 mg,

0.0899 mmol, 37.26 % de rendimento) (24) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM =

0.8). Exemplo 25: (1R,3R)-N3-(5-etilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (25)

[0069] A uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1R,3R)-3-[(5-etilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (62.0 mg, 0.1800 mmol) em DCM (3.5896 mL) a 0 °C foi adicionado ácido trifluoroacético (0.34 mL,

4.49 mmol). A reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e continuamente agitada durante 2 horas, após a qual a LC-MS revelou reação completa. A reação foi diretamente concentrada, lavada com pentano e secada para produzir (1R,3R)-N3-(5-etilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (35 mg, 0.1427 mmol, 79.49 % de rendimento) (25). A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM =

0.8).

Exemplo 26: (1R,3R)-N3-(5-propilpirazolo[1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (26)

[0070] A uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1R,3R)-3-[(5-propilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7- il) amino] ciclopentil] (41.0 mg, 0.1100 mmol) em DCM (2.2811 mL) a 0 °C foi adicionado ácido trifluoroacético (0.22.0 mL,

2.85 mmol). A reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e continuamente agitada durante 2 horas, após a qual a LC-MS revelou reação completa. A reação foi diretamente concentrada, lavada com pentano e secada para produzir (1R,3R)-N3-(5-propilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7- il) ciclopentano-1,3-diamina (16 mg, 0.0617 mmol, 54.09 % de rendimento) (26). A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM =

0.8) Exemplo 27: (1S,3S)-N3-(5-propilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (27)

[0071] A uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1S,3S)-3-[(5-propilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-

il)amino] ciclopentil] (47.0 mg, 0.1300 mmol) em DCM (2.615 mL) a 0 °C foi adicionado ácido trifluoroacético (0.25 mL,

3.27 mmol). A reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e continuamente agitada em temperatura ambiente durante 2 horas, após a qual a LC-MS revelou reação completa. A reação foi diretamente concentrada, lavada com pentano e secada para produzir (1S,3S)-N3-(5-propilpirazolo[1,5- a]pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (33 mg, 0.1272 mmol, 97.32 % de rendimento) (27). A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 28: (1S,3S)-N3-(5-etilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (28)

[0072] A uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1S,3S)-3-[(5-etilpirazolo [1,5-a] pirimidin- 7- il)amino] ciclopentil] (64.0 mg, 0.1900 mmol) em DCM (3.7054 mL) a 0 °C foi adicionado ácido trifluoroacético (0.35 mL,

4.63 mmol). A reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e continuamente agitada durante 2 horas, após a qual a LC-MS revelou reação completa. A reação foi diretamente concentrada, lavada com pentano e secada para produzir (1S,3S)-N3-(5-etilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) ciclopentano-1,3-diamina (17 mg, 0.0693 mmol, 37.40 % de rendimento) (28). A mistura reacional foi monitorada por CCF

(100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM =

0.8). Exemplo 29: N-ciclohexil-5-isopropil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (29)

[0073] Uma solução agitada de 7-cloro-5-isopropil- pirazolo [1,5-a] pirimidina (100.0 mg, 0.4800 mmol), ciclohexanamina (56.76 mg, 0.5700 mmol) e K2CO3 (197.44 mg,

1.43 mmol) em MeCN (10 mL) foi aquecida até o refluxo por 16 h. A mistura reacional foi monitorada por CCF (20 % de acetato de etila em hexanos; Rf do produto = 0.3, Rf do SM = 0.6). Após a conclusão, a mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida. A água foi então adicionada (50 ml) e extraída com acetato de etila (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram combinadas, secadas usando Na2SO4 anidro, filtradas, concentradas e purificadas por meio de cromatografia em coluna (20 % de acetato de etila em hexanos) para fornecer N-ciclohexil-5-isopropil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (110 mg, 0.4216 mmol, 88.40 % de rendimento) (29) como um sólido esbranquiçado. Exemplo 30: 5-isopropil-N-[(3R)-tetrahidrofuran-3-il] pirazolo [1,5-a] pirimidin-7- amina (30)

[0074] Uma solução agitada de 7-cloro-5-isopropil-

pirazolo [1,5-a] pirimidina (100.0 mg, 0.4800 mmol), (3R)- tetrahidrofuran-3-amina (49.86 mg, 0.5700 mmol) e K2CO3 (197.44 mg, 1.43 mmol) em MeCN (10 mL) foi aquecida até o refluxo por 16 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, água foi então adicionada (50 ml) e extraída com acetato de etila (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secadas usando Na2SO4 anidro e concentradas. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna (20 % de acetato de etila em hexano) para fornecer 5-isopropil-N-[(3R)-tetrahidrofuran-3-il] pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (50 mg, 0.2016 mmol,

42.28 % de rendimento) (30) como um líquido espesso e incolor. Exemplo 31: N-ciclobutil-5-isopropil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (31)

[0075] A uma solução agitada de 7-cloro-5-isopropil- pirazolo [1,5-a] pirimidina (100.0 mg, 0.4800 mmol), ciclobutanamina (40.7 mg, 0.5700 mmol) e K2CO3 (197.44 mg,

1.43 mmol) em MeCN (10 mL) foram aquecidos até o refluxo por 16 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, água foi então adicionada (50 ml) e extraída com acetato de etila (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secadas usando Na2SO4 anidro. O produto bruto foi purificado por meio de cromatografia em coluna (20% de acetato de etila em hexano) para fornecer N-ciclobutil-5- isopropil-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (50 mg,

0.2135mmol, 44.77 % de rendimento) (31) como um sólido esbranquiçado. Exemplo 32: [(1R,3R)-3-[(5-ciclopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] amônio; 2,2,2- trifluoroacetato (32)

[0076] A uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1R,3R)-3-[(5-ciclopropilpirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (110.0 mg, 0.3100 mmol) em HFIP (51.71 mg, 0.3100 mmol), carbamato de terc-butil N- [(1R,3R)-3-[(5-ciclopropil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (110.0 mg, 0.3100 mmol) e ácido trifluoroacético (0.12 mL, 1.54 mmol) foram adicionados e agitados em temperatura ambiente durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada e o sólido resultante foi triturado com éter para fornecer [(1R,3R)-3-[(5-ciclopropil pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il)amino] ciclopentil] amônio; 2,2,2- trifluoroacetato (58.37 mg, 0.1572 mmol, 51.08 % de rendimento) como um sólido amorfo marrom claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Esquema sintético representativo para os compostos 33 e 34:

Exemplo 33a

[0077] A uma solução de 5,7-dicloropirazolo [1,5-a] pirimidina (200.0 mg, 1.06 mmol) em MeCN (5 mL) foi adicionado N-clorosuccinimida (149.15 mg, 1.12 mmol) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada sob pressão reduzida, purificada por meio de cromatografia em coluna para fornecer 3,5,7-tricloropirazolo [1,5-a] pirimidina (175 mg, 0.7867 mmol, 73.95 % de rendimento) como um sólido amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (20% de acetato de etila em hexanos; Rf do produto = 0.6, Rf do SM = 0.5). Exemplo 33b

[0078] Uma solução agitada de 3,5,7-tricloropirazolo [1,5-a] pirimidina (0.4 g, 1.8 mmol), carbamato de terc- butil N-[(1R,3R)-3-aminociclopentil] (0.4 g, 1.98 mmol) e K2CO3 (0.74 g, 5.39 mmol) em MeCN (20 mL) foi aquecida até o refluxo por 16 h. A mistura reacional foi filtrada, concentrada, e purificada por meio de cromatografia em coluna (30 % de acetato de etila em hexanos) para fornecer carbamato de terc-butil N-[(1R,3R)-3-[(3,5-dicloropirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (0.5500 g, 1.4238 mmol,

79.187 % de rendimento) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (40 % de acetato de etila em hexanos; Rf do produto = 0.5, Rf do SM = 0.8). Exemplo 33c

[0079] Uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1R,3R)-3-[(3,5-dicloropirazolo [1,5-a] pirimidin- 7-il) amino] ciclopentil] (100.0 mg, 0.2600 mmol), acetamida (22.94 mg, 0.3900 mmol), Cs2CO3 (252.41 mg, 0.7800 mmol), Pd2(dba)3 (23.71 mg, 0.0300 mmol) e Xantphos (43.83 mg,

0.0500 mmol) em dioxano (5 mL) foram aquecidos a 100 °C em um tubo selado por 10 h. A mistura reacional foi filtrada através de uma pastilha de celite, concentrada sob pressão, reduzida e purificada por coluna cromatográfica para fornecer carbamato de terc-butil N-[(1R,3R)-3-[(5-acetamido- 3-cloro-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (70 mg, 0.1712 mmol, 66.13 % de rendimento) como um líquido marrom. A mistura reacional foi monitorada por CCF (30 % de acetato de etila em hexanos; Rf do produto = 0.4, Rf do SM = 0.6). Exemplo 33: [(1R,3R)-3-[(5-acetamido-3-cloro-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] amônio; 2,2,2- trifluoroacetato (33)

[0080] A uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1R,3R)-3-[(5-acetamido-3-cloro-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] (65.0 mg, 0.1600 mmol) em HFIP (1.1 mL, 0.1600 mmol), ácido trifluoroacético (0.06 mL, 0.7900 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente por 2 h. A mistura reacional foi concentrada e o sólido resultante foi triturado com éter para fornecer [(1R,3R)-3-[(5-acetamido-3-cloro-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] amônio; 2,2,2- trifluoroacetato (47.21 mg, 0.1117 mmol, 70.24 % de rendimento) (33) como um sólido amorfo esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 34: [(1R,3R)-3-[(5-acetamidopirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] amônio; 2,2,2- trifluoroacetato (34)

[0081] A uma solução agitada de carbamato de terc- butil N-[(1R,3R)-3-[(5-acetamidopirazolo [1,5-a] pirimidin- 7-il) amino] ciclopentil] (65.0 mg, 0.1700 mmol) em HFIP (29.17 mg, 0.1700 mmol), ácido trifluoroacético (0.07 mL,

0.8700 mmol) foi adicionado e agitado a temperatura ambiente durante 2 h. A mistura reacional foi concentrada e o sólido resultante foi triturado com éter para fornecer[(1R,3R)-3- [(5-acetamidopirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il) amino] ciclopentil] amônio; 2,2,2-trifluoroacetato (19.5 mg, 0.0502 mmol, 28.93 % de rendimento) como um sólido marrom. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila; Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). Exemplo 35: (1S,3S)-N3-[5-(1-etilpropil) pirazolo [1,5- a] pirimidin-7il] ciclopentano-1,3-diamina (35).

Etapa 1

[0082] Ácido 2-etil butanoico (7.5 g, 64.57 mmol) foi dissolvido em THF (150 mL) e resfriado até 0 °C.

Dentro de 20 min, CDI (16.23 g, 100.08 mmol) foi adicionado porção a porção.

A reação foi aquecida à temperatura ambiente (rt) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite (Solução A). Em outro frasco, MgCl2 (6,14 g, 64,57 mmol) e 3-etoxi-3-oxo-propanoato de potássio (17 g, 100,1 mmol) foram misturados com THF (150 mL) e agitados sob argônio durante a noite a 50 °C.

A suspensão branca resultante foi resfriada para a temperatura ambiente e a solução A foi adicionada gota a gota durante 10 min e a mistura reacional (RM) foi agitada por 16h a temperatura ambiente.

Após diversos minutos, um sólido pegajoso e amorfo apareceu, ao que, após diversas horas a mistura reacional se tornou homogênea em aparência.

A mistura reacional foi concentrada a cerca de um terço, tomada em solução meio saturada de bissulfato de potássio e extraída duas vezes com acetato de etila.

As camadas orgânicas foram subsequentemente lavadas com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas e evaporadas.

A purificação por cromatografia em coluna forneceu etil 4-etil-3-oxo-hexanoato (4.3 g, 23.087 mmol, 35.8 % de rendimento) como um líquido transparente.

A mistura reacional foi monitorada por CCF (10% de acetato de etila em hexano, Rf do produto = 0.6, Rf do SM = 0.1). Etapa 2

[0083] A uma suspensão de etil 4-etil-3-oxo- hexanoato (4.4 g, 23.62 mmol) em ácido acético (11 mL) a 70 °C foi adicionado 1H-pirazol-5-amina (4.71 g, 56.7 mmol) em duas porções (a segunda porção foi adicionada após 2 horas de agitação da primeira porção) durante um período de 4 horas. Após o consumo de SM conforme indicado por CCF, a reação foi resfriada para a temperatura ambiente e o solvente foi evaporado em um evaporador rotativo. O resíduo foi tratado com acetato de etila e filtrado para fornecer 5-(1- etilpropil)-4H-pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-ona (3.7 g, 17.7 mmol, 74.9 % de rendimento) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (5 % de metanol em diclorometano, Rf do produto = 0.3, Rf do SM = 0.8). Etapa 3

[0084] À solução agitada de 5-(1-etilpropil)-4H- pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-ona (3.7 g, 18.03 mmol) in POCl3 (33.7 mL, 360.52 mmol) foi aquecida até o refluxo por 4 horas. A mistura reacional foi resfriada para a temperatura ambiente, o excesso de reagente foi evaporado em um evaporador rotatório, e o resíduo foi tratado com água gelada. O produto clorado foi extraído da mistura aquosa por DCM. A camada orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4 anidro, filtrada e purificada por coluna cromatográfica para fornecer 7- cloro-5-(1-etilpropil) pirazolo [1,5-a] pirimidina (3.1 g,

13.9 mmol, 76.9 % de rendimento) como um líquido amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (20 % de acetato de etila em hexano, Rf do produto = 0.6, Rf do SM =

0.1). Etapa 4

[0085] A uma solução agitada de 7-cloro-5-(1- etilpropil) pirazolo [1,5-a] pirimidina (2.3 g, 10.28 mmol), carbamato de terc-butil ((1S,3S)-3-aminociclopentil) (2.27 g, 11.31 mmol) e K2CO3 (4.26 g, 30.84 mmol) em MeCN (20 mL) foram aquecidos até o refluxo por 16 horas. A mistura reacional foi filtrada, concentrada sob pressão reduzida e purificada por coluna cromatográfica, eluente 30 % de acetato de etila em hexano para fornecer carbamato de terc-butil N- [(1S,3S)-3-[[5-(1-etilpropil) pirazolo [1,5-a] pirimidin-7- il]amino] ciclopentil] (4.5 g, 11.6 mmol, 112.8 % de rendimento) como um sólido esbranquiçado. A mistura reacional foi monitorada por CCF (40 % de acetato de etila em hexano, Rf do produto = 0.5, Rf do SM = 0.7). Etapa 5

[0086] Ao carbamato de terc-butil N-[(1 S,3S)-3-[[5- (1-etilpropil)pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il]amino] ciclopentil] (1.0 g, 2.58 mmol) em l,4-dioxano (0.2.0 mL),

4 M de HCl em dioxano (3.22.0 mL, 12.9 mmol) foi adicionado e agitado em temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reacional foi evaporada em vácuo, triturado com pentano e liofilizado a partir de MeCN:H20 para fornecer dicloreto de [(1S,3S)-3-[[5-(1-etilpropil) pirazolo [1,5-a] pirimidin-4- io-7-il] amino] ciclopentil] amônio (0.9 g, 2.5 mmol, 96.8 % de rendimento) como um sólido pegajoso amarelo pálido. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila, Rf do produto = 0.l, Rf do SM = 0.8). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 15.00 (s, 1H), 9.93 - 9.86 (m, 1H), 8.51 (s, 3H), 8.30 (s, 1H), 6.84 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 4.95 (q, J =

7.8 Hz, 1H), 3.77 - 3.66 (m, 1H), 2.84 - 2.71 (m, 1H), 2.29 - 2.05 (m, 4 h), 1.94 - 1.63 (m, 6H), 0.81 (t, J = 7.4 Hz, 6H). LC-MS (m / z 287.21, encontrado 288.0 [M+H+]) Etapa 6

[0087] Ao dicloreto de [(1S,3S)-3-[[5-(1-etilpropil) pirazolo [1, 5-a] pirimidin-4-io-7-il] amino] ciclopentil] amônio (0.2 g, 0.5600 mmol) em NH3 aquoso (4.0 mL, 0.56 mmol) foi adicionado e agitado a temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura reacional foi evaporada em vácuo, triturado com pentano e liofilizado a partir de MeCN:H20 para fornecer (1S,3S)-N3-[5-(1-etilpropil)pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-il] ciclopentano-l,3-diamina (140 mg, 0.49 mmol, 87.8 % de rendimento) como um sólido pegajoso amarelo claro. A mistura reacional foi monitorada por CCF (100 % de acetato de etila, Rf do produto = 0.1, Rf do SM = 0.8). 1H NMR (400 MHz, DMSO- d6) d 7.95 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.29 (d, J =

2.2 Hz, 1H), 5.95 (s, 1H), 4.31 - 4.19 (m, 1H), 3.57 - 3.44 (m, 1H), 2.52 - 2.44 (m, 1H), 2.36 - 2.22 (m, 1H), 2.09 –

1.79 (m, 3H), 1.80 - 1.59 (m, 5H), 1.58 – 1.24 (m, 3H), 0.83 (t, J = 7.4 Hz, 6H). LC-MS (m / z 287.21, encontrado 288.5 [M+H+]). Tabela: Dados do composto Fórmula Massa Composto Massa [M+X] molecular encontrada 1 C12H16N4 216.1375 [M+H] 216.8 2 C14H20N4 244.1688 [M+H] 244.7 3 C15H22N4 258.1844 [M+H] 258.7 4 C13H19N5 245.164 [M+H] 246 5 C16H22N4 270.1844 [M+H] 270.7 6 C15H23N5 273.1953 [M+H] 274.2 7 C16H25N5 287.211 [M+H] 287.7 8 C17H25N5 299.211 [M+H] 299.8 9 C16H23N5 285.1953 [M+H] 285.8 10 C12H17N5 231.1484 [M+H] 232.2 11 C11H15N5 217.1327 [M+H] 218.3 12 C12H17N5 231.1484 [M+H] 232.3 13 C14H21N5 259.1797 [M+H] 259.8 14 C15H23N5 273.1953 [M+H] 273.9 15 C16H23N5 285.1953 [M+H] 286.4 16 C14H21N5 259.1797 [M+H] 259.8 17 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260.2 18 C15H23N5 273.1953 [M+H] 273.8

19 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260 20 C15H21N5 271.1797 [M+H] 372 21 C13H19N5 245.164 [M+H] 245.9 22 C15H23N5 273.1953 [M+H] 274.3 23 C16H23N5 285.1953 [M+H] 286.2 24 C12H17N5 231.1484 [M+H] 231.7 25 C13H19N5 245.164 [M+H] 246.2 26 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260.2 27 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260.2 28 C13H19N5 245.164 [M+H] 246.2 29 C15H22N4 258.1844 [M+H] 259 30 C13H18N4O 246.1481 [M+H] 246.9 31 C13H18N4 230.1531 [M+H] 231 32 C14H19N5 257.164 [M+H] 257.7 33 C13H17ClN6O 308.1152 [M+H] 308.9 34 C13H18N6O 274.1542 [M+H] 275.7 35 C16H25N5 287.211 [M+H] 288 36 C13H17ClN6O 308.1152 [M+H] 308.9 37 C13H18N6O 274.1542 [M+H] 275.3 38 C15H23N5 273.1953 [M+H] 274.4 39 C15H23N5 273.1953 [M+H] 273.7 40 C14H20ClN5 293.1407 [M+H] 293.8 41 C13H19N5 245.164 [M+H] 245.9 42 C15H21N5 271.1797 [M+H] 271.9 43 C14H19N5 257.164 [M+H] 257.7 44 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260.1 45 C14H20ClN5 293.1407 [M+H] 293.8 46 C15H21N5O 287.1746 [M+H] 288.3 47 C13H19N5 245.164 [M+H] 246.4

48 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260 49 C18H27N5O2 345.2165 [M+H] 346.3 50 C22H27N5O2 393.2165 [M+H] 394.5 51 C15H19N5O 285.159 [M+H] 285.8 52 C16H23N5O 301.1903 [M+H] 301.8 53 C15H23N5 273.1953 [M+H] 273.9 54 C16H23N5O2 317.1852 [M+H] 318 55 C16H23N5O 301.1903 [M+H] 301.8 56 C16H24N6O 316.2012 [M+H] 317 57 C22H29N7O 407.2434 [M+H] 408 58 C21H28N6 364.2375 [M+H] 265.4 59 C17H27N5O 317.2216 [M+H] 318.1 60 C15H22N6O2 318.1804 [M+H] 319 61 C18H19N5O2 337.1539 [M+H] 338 62 C20H33N5O 359.2685 [M+H] 360 63 C17H24N8 340.2124 [M+H] 340.9 64 C15H20N6 284.1749 [M+H] 285.2 65 C16H24N6 300.2062 [M+H] 301 66 C15H23N7 301.2015 [M+H] 302 67 C22H26ClN5O2 427.1775 [M+H] 428.2 68 C18H26ClN5O2 379.1775 [M+H] 380.2 69 C21H21N5 343.1797 [M+H] 344.5 70 C19H23N5O 337.1903 [M+H] 338.3 71 C21H22N6 358.1906 [M+H] 359.3 72 C15H22N6O 302.1855 [M+H] 303.2 73 C18H21N5 307.1797 [M+H] 308.3 74 C18H20ClN5O 357.1356 [M+H] 357.8 75 C17H18ClN5 327.1251 [M+H] 327.8 76 C15H22ClN5 307.1564 [M+H] 307.8

77 C12H17N5O 247.1433 [M+H] 248.1 78 C16H19N7O 325.1651 [M+H] 326.3 79 C15H24N6 288.2062 [M+H] 288.9 80 C21H22N6 358.1906 [M+H] 358.9 81 C21H21N5 343.1797 [M+H] 344.1 82 C17H17Cl2N5 361.0861 [M+H] 362.3 83 C15H19N7 297.1702 [M+H] 298.2 84 C22H25N5O2 391.2008 [M+H] 392 85 C19H29N5O2 359.2321 [M+H] 360.3 86 C15H24N6 288.2062 [M+H] 289.3 87 C23H29N5O2 407.2321 [M+H] 408.4 88 C14H22N60 290.1855 [M+H] 291.2 89 C16H21N5O2 315.1695 [M+H] 316.3 90 C14H22N6O 290.1855 [M+H] 291.5 91 C13H19N5O 261.159 [M+H] 262.3 92 C14H22N6 274.1906 [M+H] 275.2 93 C16H25N5 287.211 [M+H] 288.3 94 C18H21N5O 323.1746 [M+H] 324 95 C18H21N5O 323.1746 [M+H] 324.2 96 C18H21N5O 323.1746 [M+H] 324.4 97 C19H24N6 336.2062 [M+H] 337.4 98 C13H20N6 260.1749 [M+H] 261.3 99 C16H25N7 315.2171 [M+H] 316.4 100 C17H20N6 308.1749 [M+H] 309.1 101 C17H20N6O 324.1699 [M+H] 325.1 102 C16H23N7O 329.1964 [M+H] 330.3 103 C16H19N7 309.1702 [M+H] 310.3 104 C18H18ClN5O2 371.1149 [M+H] 372.3 105 C19H23N5 321.1953 [M+H] 322.4

106 C16H24ClN5 321.172 [M+H] 322.4 107 C17H18FN5 311.1546 [M+H] 312.1 108 C20H25N5 335.211 [M+H] 336.2 109 C17H23N5 297.1953 [M+H] 298.2 110 C16H21N5O 299.1746 [M+H] 300.2 111 C17H18FN5 311.1546 [M+H] 312.1 112 C16H21N5O 299.1746 [M+H] 300.2 113 C21H24N6 360.2062 [M+H] 361.3 114 C20H23N5 333.1953 [M+H] 334.3 115 C17H25N5 299.211 [M+H] 300.1 116 C15H19N7 297.1702 [M+H] 298.2 117 C16H23N5 285.1953 [M+H] 286.2 118 C19H19N5 317.164 [M+H] 318 119 C19H25N5 323.211 [M+H] 324.1 120 C16H19N5 281.164 [M+H] 282.1 121 C20H25N5 335.211 [M+H] 336.1 122 C18H27N5 313.2266 [M+H] 314.1 123 C15H21N5 271.1797 [M+H] 272.1 124 C15H21N5O 287.1746 [M+H] 288.3 125 C17H23F2N5 335.1922 [M+H] 336.1 126 C15H19N5O 285.159 [M+H] 286 127 C13H17ClN6O 308.1152 [M+H] 308.9 128 C13H18N6O 274.1542 [M+H] 275.3 129 C15H23N5 273.1953 [M+H] 274.4 130 C15H23N5 273.1953 [M+H] 273.7 131 C14H20ClN5 293.1407 [M+H] 293.8 132 C13H19N5 245.164 [M+H] 245.9 133 C15H21N5 271.1797 [M+H] 271.9 134 C14H19N5 257.164 [M+H] 257.7

135 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260.1 136 C14H20ClN5 293.1407 [M+H] 293.8 137 C15H21N5O 287.1746 [M+H] 288.3 138 C13H19N5 245.164 [M+H] 246.4 139 C14H21N5 259.1797 [M+H] 260 140 C18H27N5O2 345.2165 [M+H] 346.3 141 C22H27N5O2 393.2165 [M+H] 394.5 142 C15H19N5O 285.159 [M+H] 285.8 143 C16H23N5O 301.1903 [M+H] 301.8 144 C15H23N5 273.1953 [M+H] 273.9 145 C16H23N5O2 317.1852 [M+H] 318 146 C16H23N5O 301.1903 [M+H] 301.8 147 C16H24N6O 316.2012 [M+H] 317 148 C22H29N7O 407.2434 [M+H] 408 149 C21H28N6 364.2375 [M+H] 265.4 150 C17H27N5O 317.2216 [M+H] 318.1 151 C15H22N6O2 318.1804 [M+H] 319 152 C18H19N5O2 337.1539 [M+H] 338 153 C20H33N5O 359.2685 [M+H] 360 154 C17H24N8 340.2124 [M+H] 340.9 155 C15H20N6 284.1749 [M+H] 285.2 156 C16H24N6 300.2062 [M+H] 301 157 C15H23N7 301.2015 [M+H] 302 158 C22H26ClN5O2 427.1775 [M+H] 428.2 159 C18H26ClN5O2 379.1775 [M+H] 380.2 160 C21H21N5 343.1797 [M+H] 344.5 161 C19H23N5O 337.1903 [M+H] 338.3 162 C21H22N6 358.1906 [M+H] 259.3 163 C15H22N6O 302.1855 [M+H] 303.2

164 C18H21N5 307.1797 [M+H] 308.3 165 C18H20ClN5O 357.1356 [M+H] 357.8 166 C17H18ClN5 327.1251 [M+H] 327.8 167 C15H22ClN5 307.1564 [M+H] 307.8 168 C12H17N5O 247.1433 [M+H] 248.1 169 C16H19N7O 325.1651 [M+H] 326.3 170 C15H24N6 288.2062 [M+H] 288.9 171 C21H22N6 358.1906 [M+H] 358.9 172 C21H21N5 343.1797 [M+H] 344.1 173 C17H17Cl2N5 361.0861 [M+H] 362.3 174 C15H19N7 297.1702 [M+H] 298.2 175 C22H25N5O2 391.2008 [M+H] 392 176 C19H29N5O2 359.2321 [M+H] 360.3 177 C15H24N6 288.2062 [M+H] 289.3 178 C23H29N5O2 407.2321 [M+H] 408.4 179 C14H22N60 290.1855 [M+H] 291.2 180 C16H21N5O2 315.1695 [M+H] 316.3 181 C14H22N6O 290.1855 [M+H] 291.5 182 C13H19N5O 261.159 [M+H] 262.3 183 C14H22N6 274.1906 [M+H] 275.2 184 C16H25N5 287.211 [M+H] 288.3 185 C18H21N5O 323.1746 [M+H] 324 186 C18H21N5O 323.1746 [M+H] 324.2 187 C18H21N5O 323.1746 [M+H] 324.4 188 C19H24N6 336.2062 [M+H] 337.4 189 C13H20N6 260.1749 [M+H] 261.3 190 C16H25N7 315.2171 [M+H] 316.4 191 C17H20N6 308.1749 [M+H] 309.1 192 C17H20N6O 324.1699 [M+H] 325.1

193 C16H23N7O 329.1964 [M+H] 330.3 194 C16H19N7 309.1702 [M+H] 310.3 195 C18H18ClN5O2 371.1149 [M+H] 372.3 196 C19H23N5 321.1953 [M+H] 322.4 197 C16H24ClN5 321.172 [M+H] 322.4 198 C17H18FN5 311.1546 [M+H] 312.1 199 C20H25N5 335.211 [M+H] 336.2 200 C17H23N5 297.1953 [M+H] 298.2 201 C16H21N5O 299.1746 [M+H] 300.2 202 C17H18FN5 311.1546 [M+H] 312.1 203 C16H21N5O 299.1746 [M+H] 300.2 204 C21H24N6 360.2062 [M+H] 361.3 205 C20H23N5 333.1953 [M+H] 334.3 206 C17H25N5 299.211 [M+H] 300.1 207 C15H19N7 297.1702 [M+H] 298.2 208 C16H23N5 285.1953 [M+H] 286.2 Exemplo 36: inibição da CDK9 / ciclina T1

[0088] Exemplos de compostos da invenção (1 - 34) foram testados para a inibição da CDK9 / ciclina T1. Usando um ensaio radiométrico (tempo de reação de 60 minutos), os compostos foram testados em modo duplicado de IC50 de 10 doses com uma diluição em série de 3 vezes começando em 10 mM. Um composto controle (Estaurosporina) foi testado em modo de IC50 de 10 doses com uma diluição em série de 3 vezes começando em 10 pM. As reações foram realizadas a 10 pM de ATP. Os resultados para os compostos testados são mostrados na Tabela abaixo. Os dados foram normalizados para controles positivo e negativo e ajustes da curva foram executados com o software GraphPad e foram realizados em que as atividades da enzima na concentração mais alta dos compostos foram menores do que 65 %.

[0089] Exemplos de compostos da invenção (35 - 126) foram testados para a inibição da CDK9 / ciclina T1 quinase. Usando um ensaio LANCE (tempo de reação de 60 minutos), os compostos foram testados em modo duplicado de IC50 de 10 doses com uma diluição em série de 3 vezes começando em 4.3 mM. Um composto controle (SNS-032) foi testado em modo de IC50 de 10 doses com uma diluição em série de 3 vezes começando em 10 mM. As reações foram realizadas a 10 mM de ATP. Os resultados para os compostos testados são mostrados na Tabela abaixo. Os dados foram normalizados para controles positivo e negativo e ajustes da curva foram analisados com XLFIT5 como % de inibição vs. log da [concentração do composto] usando um modelo logístico de 4 parâmetros 205. Fit = (A+((B-A)/(1+((C/x)^D)))); Res = (y-fit) Tabela: Resultados da inibição ciclina T1 Grau de potência: A = 1 - 500 nM; B = 501 — 1000 nM; C > 1001 nM Grau de potência da Composto CDK9 / ciclina T1 1 C 2 A 3 A 4 B 5 A 6 A 7 A 8 A 9 A 10 C

11 B 12 B 13 A 14 A 15 A 16 A 17 A 18 A 19 A 20 A 21 A 22 A 23 A 24 B 25 B 26 N/A 27 N/A 28 A 29 A 30 C 31 A 32 A 33 A 34 C 35 A 36 A 37 C 38 N/A 39 A

40 A 41 A 42 A 43 A 44 C 45 A 46 A 47 A 48 A 49 A 50 A 51 A 52 A 53 A 54 A 55 A 56 A 57 A 58 A 59 A 60 A 61 A 62 A 63 A 64 A 65 A 66 A 67 A 68 B

69 B 70 A 71 A 72 A 73 A 74 A 75 A 76 A 77 B 78 B 79 A 80 A 81 A 82 A 83 A 84 C 85 A 86 A 87 A 88 B 89 C 90 A 91 B 92 C 93 A 94 A 95 A 96 A 97 A

98 A 99 C 100 A 101 A 102 A 103 B 104 A 105 A 106 A 107 A 108 A 109 A 110 B 111 A 112 A 113 A 114 A 115 A 116 A 117 A 118 A 119 A 120 A 121 A 122 A 123 A 124 B 125 A 126 B

127 A 128 C 129 N/A 130 A 131 A 132 A 133 A 134 A 135 C 136 A 137 A 138 A 139 A 140 A 141 A 142 A 143 A 144 A 145 A 146 A 147 A 148 A 149 A 150 A 151 A 152 A 153 A 154 A 155 A

156 A 157 A 158 A 159 B 160 B 161 A 162 A 163 A 164 A 165 A 166 A 167 A 168 B 169 B 170 A 171 A 172 A 173 A 174 A 175 C 176 A 177 A 178 A 179 B 180 C 181 A 182 B 183 C 184 A

185 A 186 A 187 A 188 A 189 A 190 C 191 A 192 A 193 A 194 B 195 A 196 A 197 A 198 A 199 A 200 A 201 B 202 A 203 A 204 A 205 A 206 A 207 A 208 A Estaurosporina A

[0090] Os dados de teste mostram que os compostos aqui divulgados são eficazes como inibidores da CDK9 e seriam candidatos adequados para a terapia relacionada a disfunções mediadas por CDK9.

[0091] O conteúdo de todas as referências, pedidos de patentes pendentes e patentes publicadas, citados ao longo deste pedido são aqui expressamente incorporados por referência.

[0092] As modalidades anteriores são apresentadas apenas para fins de exemplo. Uma pessoa com habilidade comum no campo relevante entenderia que diversas modificações podem ser feitas sem se desviar do âmbito e escopo da presente invenção.

Claims (11)

REIVINDICAÇÕES

1. Composto CARACTERIZADO por ser de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é alquil C1-C6, cicloalquil C3-C6, tetrahidrofuranil, ou tetrahidropiranil, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, R7CO2R8, CO2R8, CO2H, R7CO2H, NH2, NHR8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, SO2NHR8, ou R1 é NH2, NHR8, OH, OR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, SO2NHR8, ou R1 e R2 juntos formam um cicloaril C5-C6 fundido, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8; R2, R3, R4 e R5 são independentemente H, D, halo, ou alquil C1-C5 ou cicloalquil C3-C6 opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8, ou R3 e R4 juntos formam um cicloaril C5-C6 fundido, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8, ou R2 e R5 juntos formam um cicloaril C5-C6 fundido, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, NH2, NHR8, NR7R8, OH, OR8, SH, SR8, NHCOR8, NHSO2R8, SO2NH2, ou SO2NHR8; R6 é H ou D; R7 é (CH2)n em que n é um número inteiro de 1 a 6; e R8 é alquil C1-C6 ou cicloalquil C3-C6, opcionalmente substituído em qualquer posição com um ou mais de D, halo, OH, SH, ou NH2.

2. Composto ou sal do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é alquil C1-C6 ou cicloalquil C3-C6, opcionalmente substituído em qualquer posição com NH2, ou R1 é NHCOR8; R2, R3, R4, e R6 são H; R5 é ciclobutil, ciclopentil, ou ciclohexil, opcionalmente substituído em qualquer posição com D, NH2, OH, NHR8, OR8, ou combinações dos mesmos; e R8 é alquil C1- C4.

3. Composto ou sal do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é metil, etil, isopropil, sec-butil, 3-pentil, ciclopropil, ciclopentil, ou NHCOCH3; R2, R3, R4, e R6 são H; e R5 é ciclobutil, ciclopentil, ou ciclohexil, opcionalmente substituído em qualquer posição com NH2.

4. Composto CARACTERIZADO pelo fato de ser uma das estruturas a seguir ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

5. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o composto ou sal é uma mistura racêmica ou não racêmica de estereoisômeros opticamente ativos.

6. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o composto ou sal é um único enantiômero ou diastereômero substancialmente puro.

7. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de ser como um sal de dicloreto.

8. Composição CARACTERIZADA pelo fato de compreender um composto ou sal, conforme definido na reivindicação 1, e um carreador farmaceuticamente aceitável.

9. Composto CARACTERIZADO por ter a estrutura 35 como mostrado: .

10. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de ser como um sal de dicloreto.

11. Composição CARACTERIZADA pelo fato de compreender um composto ou sal, conforme definido na reivindicação 9, e um carreador farmaceuticamente aceitável.