BR112020026106A2 - Composição, formulação veterinária, uso de uma composição, regime de alimentação, e, método para criar um animal . - Google Patents

Abstract

composição, formulação veterinária, uso de uma composição, regime de alimentação, e, método para criar um animal. a presente invenção está geralmente relacionada com o cuidado de animais, particularmente animais destinados à nutrição humana, por exemplo animais usados na agricultura e aquicultura, e também está particularmente relacionada com o cuidado de animais de estimação. neste contexto, a invenção refere-se a composições, em particular composições para rações, formulações veterinárias e composições antimicrobianas para a prevenção, tratamento e/ou melhoria de infecções por microrganismos parasitas ou patogênicos. a invenção também provê usos de tais composições, regimes de alimentação e métodos para criar ou tratar animais. a invenção refere-se também a composições e usos das mesmas para melhorar características agronômicas e parâmetros de saúde animal.

Description

1 / 49 COMPOSIÇÃO, FORMULAÇÃO VETERINÁRIA, USO DE UMA COMPOSIÇÃO, REGIME DE ALIMENTAÇÃO, E, MÉTODO PARA

CRIAR UM ANIMAL

[001] A presente invenção está geralmente relacionada com o cuidado de animais, particularmente animais destinados à nutrição humana, por exemplo animais usados na agricultura e aquicultura, e também está particularmente relacionada com o cuidado de animais de estimação. Neste contexto, a invenção refere-se a composições, em particular composições para rações, formulações veterinárias e composições antimicrobianas para a prevenção, tratamento e/ou melhoria de infecções por microrganismos parasitas ou patogênicos. A invenção também provê usos de tais composições, regimes de alimentação e métodos para criar ou tratar animais. A invenção refere-se também a composições e usos das mesmas para melhorar características agronômicas e parâmetros de saúde animal.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002] As infecções por microrganismos são uma das principais causas da lucratividade na agricultura terrestre e na aquicultura. Em particular, as doenças entéricas causadas por protozoários e/ou bactérias são prevalentes e difíceis de prevenir e tratar. Muitas dessas doenças são transmissíveis através de produtos agrícolas, em particular carne e ovos, mas também resíduos agrícolas, como estrume e vísceras, a animais selvagens que servem de reservatório para agentes patogênicos. Particularmente preocupantes são as doenças transmissíveis aos humanos. Entre estas, por exemplo Campylobacter foi reconhecido como uma das principais causas de doenças diarreicas transmitidas por alimentos em todo o mundo.

[003] A prevenção de infecções em animais de criação é difícil devido à diversidade de potenciais portadores de patógenos animais. Em particular, alimentos e água potável são difíceis de manter livres de patógenos durante toda a vida dos animais de criação. Mas mesmo que essa via de

2 / 49 infecção pudesse ser controlada, as infecções ainda são possíveis pelo contato de animais de criação com material infectado produzido por patógenos que transportam animais selvagens, por exemplo, fezes de pássaros. Assim, tentou-se aumentar a resistência dos animais contra infecções por patógenos. No entanto, a aplicação de antibióticos como uma medida profilática foi amplamente proibida para prevenir o acúmulo de resistência aos antibióticos em patógenos. Existe, portanto, a necessidade de prover composições eficazes para a profilaxia e tratamento de infecções em animais de criação, incluindo a promoção da resiliência. Além disso, é necessário prover métodos de criação para diminuir as chances e a gravidade das infecções nos animais de criação.

[004] Neste contexto, a EP1314358B1 divulga composições para o tratamento de patógenos entéricos. As composições compreendem um componente de ácido graxo de cadeia média (MCFA) e um denominado componente de promoção de crescimento selecionado de ácidos orgânicos, ácidos inorgânicos, antibióticos para alimentação animal, promotores de crescimento convencionais e extratos de plantas. O componente de ácido graxo de cadeia média consiste essencialmente em ácidos graxos de cadeia média com 6 a 14 átomos de carbono e sais ou derivados ou misturas dos mesmos. Particularmente preferidos são os ácidos graxos saturados de cadeia média, em particular os ácidos graxos saturados caproico, caprílico, cáprico, láurico ou mirístico. Os derivados de MCFA podem compreender mono-, di- e triglicerídeos. Quando o componente promotor de crescimento compreende ácidos orgânicos individuais ou uma mistura de ácidos orgânicos, os ácidos orgânicos podem ser, por exemplo, ácidos carboxílicos C1-8 na forma substituída ou não substituída. O documento não divulga a presença de glicerol em nenhuma das composições e é igualmente omisso quanto a qualquer efeito benéfico alcançado pela presença de glicerol.

[005] A presente invenção, no entanto, não está limitada à prevenção ou tratamento de infecções animais por parasitas. A invenção também se

3 / 49 preocupa em melhorar os parâmetros de animais com eficácia de vendas, em particular aqueles ligados ao crescimento e engorda de animais, mesmo na ausência de infecções parasitárias.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[006] Consequentemente, a presente invenção provê composições compreendendo - ácido fórmico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, - glicerol e - um ou mais glicerídeos de ácido butírico e, opcionalmente, ácido butírico, em que a) ácido fórmico, glicerol e um ou mais glicerídeos de ácido butírico estão presentes em quantidades sinérgicas e/ou b) a razão em peso de glicerol para o total de glicerídeos de ácido butírico é de 1:10 a 10:1, e/ou c) a razão em peso de ácido fórmico para o total de glicerídeos de ácido butírico e glicerol é de 1:15 a 20: 1, e/ou d) a quantidade total de ácido fórmico, glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 10% em peso a 100% em peso da composição total.

[007] As composições de acordo com a presente invenção são preferencialmente aditivos para rações, são usadas como ou estão incluídas em composições de ração para animais.

[008] Ainda de preferência, a composição de acordo com a presente invenção, em particular uma composição de ração da presente invenção, é preferencialmente para uso no tratamento ou prevenção de infecções microbianas ou distúrbios associados a infecções microbianas em um animal. A invenção, portanto, provê preferencialmente composições para uso como um medicamento, preferencialmente um medicamento veterinário. As

4 / 49 composições de acordo com a presente invenção, incluindo, por exemplo, aditivos para rações e composições para rações, preferencialmente são composições antimicrobianas para o tratamento de um animal.

[009] A invenção também provê regimes de alimentação e métodos para criação e/ou engorda de animais compreendendo a administração de uma composição da presente invenção a um animal ou a preparação de tais composições para administração animal. Neste contexto, a invenção também provê usos das composições da presente invenção.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0010] Foi agora verificado que o ácido fórmico e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem ser combinados sinergicamente com glicerol e glicerídeos de ácido butírico. Tais composições provêm, em uma variedade inesperada de animais, efeitos benéficos conforme descrito neste documento.

[0011] Para os fins da presente invenção, o termo “animal” refere-se a qualquer membro não humano da classificação taxonômica Bilateria. Como será mostrado nos exemplos a seguir, a aplicação de uma composição da presente invenção à ração de animais tão diversos como, por exemplo, camarões, galinhas e porcos resultou em uma melhora acentuada dos parâmetros de saúde animal, mesmo em condições severamente desafiadoras. Assim, o termo “animal” no contexto da presente invenção exclui qualquer membro dos reinos taxonômicos Archaea e Bacteria, e entre os Eukaryota exclui por exemplo Alveolata, Fungi e Viridiplantae. Em particular, o termo “animal” está de acordo com a presente invenção, entendido como, de preferência, indicar animais monogástricos. Os ruminantes de acordo com a invenção são preferencialmente incluídos apenas na medida em que o seu sistema digestivo ainda não se tenha desenvolvido tão completamente que o animal possa viver apenas de material vegetal celulósico. Assim, o termo “animal” de acordo com a presente invenção inclui preferencialmente

5 / 49 ruminantes juvenis, em particular lactentes, tais como vitelos, cordeiros e cabritos.

[0012] Os animais de acordo com a presente invenção são preferencialmente aqueles criados para eventual consumo humano e animais de estimação. Os animais preferidos de acordo com a presente invenção são: i) animais aquáticos, tais como peixes ósseos e crustáceos, de preferência escamudo do Alasca, sável americano, peixe ártico, Zeus faber, anchova, barracuda, robalo, amia, carpa, bagre, bagre, cobia, bacalhau, corvina, brosme brosme, enguia, linguado, corvina de água doce, garoupa, arinca, pescada, halibute, arenque, hoki (Macruronus novaezelandiae), maruca-da-áfrica-do-sul, corégono-de-lago, Ophiodon elongatus, cavalinha, mahi-mahi, tubarão mako, marlim, moi, tamboril, tainha, Lampris, peixe- relógio, perca, perca, pampo, peixe-carvão-do-pacífico, salmão, dourada, raia, peixe-rei, pargo, esturjão, peixe-espada, tilápia, peixes-paleta (Malacanthidae), atum, pregado, cavala-wahoo, picão-verde, peixe-lobo, orelha-do-mar, cracas, mariscos, berbigão, conchas, copépodes, caranguejo, lagostim, lagosta, mexilhão, polvo, ostras, caracóis, camarões, lulas e búzios, ainda mais preferencialmente ii) como peixes ósseos: carpa, por exemplo, carpa-comum, carpa asiática, carpa indiana, carpa preta, carpa-do-limo, carpa-prateada e carpa-cabeçuda, bagre, por exemplo, bagre-de-canal, cascudo, bagre banjo, peixe-panga, bagre azul, Corydoras, Sperata aor, bagre tubarão, bagre espinhoso e bagre ambulante, pargo do mar, por exemplo dourada, goraz, Calamus calamus, sargo-da-américa-do-norte, shead e pargo amarelo, salmão, por exemplo salmão-do-atlântico, salmão-real, salmão-keta, salmão- prateado, salmão-japonês, salmão-rosa e salmão-vermelho, tilápia, por exemplo Oreochromis aureus, tilápia-de-moçambique, tilápia-do-niloe ciclídeos tilapiína; i-ii) como crustáceos: camarão ou camarão de água doce, por

6 / 49 exemplo camarão branco chinês, camarão-akiami, camarão-banana, camarão- tigre-preto, camarão-carnudo, camarão de água doce, camarão-tigre-gigante, camarão do golfo, Pandalus borealis, camarão-branco-do-pacífico, camarão- boreal, camarão-da-pedra, Trachysalambria curvirostris, camarão-de-patas- brancas, mexilhão, por exemplo mexilhão verde asiático, mexilhão do Báltico, mexilhão-azul, mexilhão de água doce, Perna canaliculus, mexilhão- do-mediterrâneo, ostras, por exemplo, ostra-plana-europeia, ostra-gigante, ostra-portuguesa, ostra-da-rocha, moluscos e vieiras, por exemplo Aequipecten opercularis, Aequipecten tehuelchus, Amusium balloti, Amusium pleuronectes, Argopecten irradians, Argopecten opercularis, Argopecten purpuratus, Argopecten ventricosus, Chlamys farreri, Chlamys islandica, Chlamys islandica, Chlamys islandica, Chlamys nobilis, Chlamys varia, Crassedoma giganteum, Euvola vogdesi, Euvola ziczac, Euvola ziczac, Flexopecten flexosus, Mizuhopecten yessoensis, Nodipecten nodosus, Nodipecten nodosus, Nodipecten subnodosus, Patinopecten caurinus, Patinopecten yessoensis, Pecten fumatus, Pecten maximus, Pecten maximus, Placopecten magellanicus,, orelha-do-mar, por exemplo, Haliotis asinina, Haliotis discus, Haliotis discus hannai, Haliotis diversicolor supertexta, Haliotis fulgens, Haliotis iris, Haliotis kamtschatkana, Haliotis laevigata, Haliotis laevigata, Haliotis midae, Haliotis rubra, Haliotis rubra, Haliotis rufescens and Haliotis tuberculata; ii) animais terrestres, tais como gado, aves domésticas, caça e animais de estimação, de preferência gamo, rena, ádax, alpaca, gado de Bali, camelo, gado, vacas, burro, elande, gaial, cabra, porquinho-da-índia, cavalo, lhama, alce, mula, boi-almiscarado, porco, coelho, órix, ovelha, cervo-sika, búfalo-d’água, iaque, zebu, bisão, capivara, caititu, cervo, alce, ratazana-do- capim, cudu maior, cervo de Thorold, cariacu, galinha, pato, ganso-do-egito, emu, faisão-dourado, ganso, ema, francolim-cinzento, galinha-d'angola, pavão-indiano, cisne-branco, avestruz, perdiz, faisão, pombo, codorna,

7 / 49 inhambu-chororó e peru, gato, cachorro, roedores e papagaio de companhia, pombo, pomba e passeriformes, ainda mais preferencialmente ii-i) ruminantes, principalmente até o final do desmame: preferencialmente camelo, gado, vaca, burro, cabra, lhama, alce, rena e ovelha; ii-ii) outros mamíferos produtores de carne: de preferência cavalo, porco ou coelho, ii-iii) aves domésticas: de preferência frango, pato, ganso, peru, emu, avestruz, faisão e pombo ii-iv) animais de estimação (desde que não mencionados em outra categoria): gato, cachorro, rato, camundongo, hamster, porquinho-da- índia, gerbil, chinchilas, periquito, calopsita, pombo, pomba e canários.

[0013] A presente invenção provê uma composição. A composição compreende - ácido fórmico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, - glicerol e - um ou mais glicerídeos de ácido butírico e, opcionalmente, ácido butírico.

[0014] No contexto da presente invenção, o termo “ácido butírico” denota ácido n-butírico.

[0015] As composições compreendendo glicerídeos de ácido butírico e glicerol são conhecidas, por exemplo, de EP2410871B1. Este documento atribui uma eficácia particular às misturas de glicerol e monoglicerídeos de ácido butírico para melhorar a resistência de animais contra infecções por patógenos microbianos. No entanto, a presente invenção também faz uso da verificação de que não apenas os monoglicerídeos de ácido butírico, mas também outros glicerídeos são úteis para obter os efeitos benéficos providos pela presente invenção e aqui descritos.

8 / 49

[0016] A composição da presente invenção provê, assim, composições compreendendo glicerol e um ou mais glicerídeos de ácido butírico selecionados de 1-monoglicerídeo de ácido butírico, 2- monoglicerídeode ácido butírico, 1,2-diglicerídeo de ácido butírico, 1,3- diglicerídeo de ácido butírico e triglicerídeos de ácido butírico. De preferência, os glicerídeos de ácido butírico em uma composição de acordo com a presente invenção compreendem um total de monoglicerídeos de ácido butírico de 25-57% em peso em relação ao total de todos os glicerídeos de ácido butírico e glicerol, mais preferencialmente 30-60% em peso, ainda mais preferencialmente 38- 52% em peso e/ou compreende um total de diglicerídeos de ácido butírico de 8-22% em peso em relação ao total de todos os glicerídeos de ácido butírico e glicerol, mais preferencialmente 10-20% em peso, ainda mais preferencialmente 11-15% em peso, e/ou compreende um total de 1-monoglicerídeo de ácido butírico de 25-57% em peso em relação ao total de todos os glicerídeos de ácido butírico e glicerol, mais preferencialmente 30-60% em peso, ainda mais preferencialmente 34- 51% em peso, e/ou compreende um total de 2-monoglicerídeo de ácido butírico de 0-12% em peso em relação ao total de todos os glicerídeos de ácido butírico e glicerol, mais preferencialmente 1-8% em peso, ainda mais preferencialmente 3-6% em peso, e/ou compreende um total de glicerol de 20-60% em peso em relação ao total de todos os glicerídeos de ácido butírico e glicerol, mais preferencialmente 30- 52% em peso, ainda mais preferencialmente 35-45% em peso e/ou compreende uma razão de total de monoglicerídeos de ácido butírico para glicerol de 10:1 a 1:10, mais preferencialmente 2:1 a 1:2, ainda mais

9 / 49 preferencialmente 1,5:1 a 1: 1,5, e/ou compreende uma razão de total de monoglicerídeos de ácido butírico para total de diglicerídeos de ácido butírico de 1: 5 a 15: 1, mais preferencialmente de 1: 1 a 10: 1, ainda mais preferencialmente de 1: 2 a 1: 4, e/ou compreende uma razão de total de monoglicerídeos de ácido butírico para total de di- e triglicerídeos de ácido butírico de 1:5 a 15:1, mais preferencialmente 1:1 a 10:1, ainda mais preferencialmente 1:2 a 1:4, e/ou compreende uma razão de 1-monoglicerídeo de ácido butírico para 2- monoglicerídeo de ácido butírico de 14:1 a 1:2, mais preferencialmente 11:1 a 2:1, ainda mais preferencialmente 9:1 a 6:1, e/ou uma razão de 1-monoglicerídeo de ácido butírico para glicerol de 10:1 a 1:10, mais preferencialmente 2:1 a 1:2, ainda mais preferencialmente 1,5:1 a 1:1,5.

[0017] De preferência, a composição da presente invenção compreende ácido butírico livre em uma quantidade de 0-10% em peso em relação ao total de todos os glicerídeos de ácido butírico, glicerol e ácido fórmico, ainda mais preferencialmente 0-5% em peso e ainda mais preferencialmente 0-2 % em peso.

[0018] A composição de acordo com a presente invenção compreende ácido fórmico. O ácido fórmico pode estar na forma de um ácido livre e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles formados com cátions inorgânicos, tais como, por exemplo, sódio, potássio, lítio, amônio, cálcio ou hidróxidos férricos e cátions orgânicos tais como isopropilamina, trimetilamina, 2-aminoetanol, histidina, procaína e semelhantes.

[0019] De preferência, a razão em peso de ácido fórmico e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos para o total de glicerídeos de ácido butírico e glicerol é de 1:15 a 20:1, ainda mais preferencialmente 1:10 a 15:1,

10 / 49 ainda mais preferencialmente 1:5 a 10:1, ainda mais preferivelmente 1:1 a 5:1.

[0020] Na composição de acordo com a presente invenção, a quantidade total do ácido fórmico e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 10% em peso a 100% em peso da composição total, mais preferencialmente 15-100%, mesmo mais preferencialmente pelo menos 30%.

[0021] De preferência, a concentração de ácido fórmico é de 1-15 g por kg da composição total da presente invenção, de preferência 3-8 g/kg, e/ou a concentração do total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 0,5-30 g por kg da composição total, de preferência 0,8-20 g/kg.

[0022] A invenção também provê uma composição de ração para alimentar um animal, em que a composição de ração compreende uma composição de acordo com a presente invenção. Os animais preferidos estão listados acima e compreendem, como indicado, peixes ósseos, crustáceos, gado, aves domésticas, caça e animais de estimação. As composições mais preferidas de acordo com a presente invenção são composições de ração para alimentação de salmão, camarão ou camarão de água doce, vitelos, galinhas, cães, gatos, cavalos, hamsters, porquinhos-da-índia e canários.

[0023] A composição de ração de acordo com a presente invenção pode estar na forma líquida, semissólida ou sólida. Uma composição de ração líquida de acordo com a presente invenção compreende água e, como indicado acima, uma composição de acordo com a presente invenção compreendendo ácido fórmico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, glicerol e um ou mais glicerídeos de ácido butírico e, opcionalmente, ácido butírico. Em uma ração líquida de acordo com a presente invenção, o teor de água é de preferência 30-99,999% em peso em relação à ração líquida total. É uma vantagem particular que a composição da presente invenção seja eficaz mesmo em uma dosagem muito baixa. De preferência, o total de ácido

11 / 49 fórmico, glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 1 g por 1000 g de ração líquida total, ainda mais preferencialmente 1,5-30 g por 1000 g, ainda mais preferencialmente 2-20 g por 1000 g, ainda mais preferencialmente 2-10 g por 1000 g de ração líquida total. Uma composição de ração sólida ou semissólida de acordo com a presente invenção compreende um carreador sólido ou semissólido aceitável para ração e, como indicado acima, uma composição de acordo com a presente invenção compreendendo ácido fórmico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, glicerol e um ou mais glicerídeos de ácido butírico e, opcionalmente, ácido butírico. De preferência, o total de ácido fórmico, glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 1 g por 1000 g de ração total (sólida ou semissólida), ainda mais preferencialmente 1,5-30 g por 1000 g, ainda mais preferencialmente 2-20 g por 1000 g, ainda mais preferencialmente 2-10 g por 1000 g de ração total.

[0024] De preferência, a composição de ração de acordo com a presente invenção compreende um ou mais aditivos ou carreadores selecionados a partir de carboidratos, lipídeos, proteínas, aminoácidos, sais (exceto sais de ácido fórmico) e minerais, vitaminas, prebióticos e probióticos, por exemplo, farinha de peixe, óleo de peixe, farinha de sangue, farinha de penas, farinha de ave doméstica, farinha de frango e/ou outros tipos de farinha produzidas a partir de outros resíduos de matadouro, gordura animal, por exemplo óleo de ave doméstica, farinha de vegetais, por exemplo farinha de soja, farinha de tremoço, farinha de ervilha, farinha de feijão, farinha de colza, farinha de camelina e/ou farinha de girassol, óleo vegetal, por exemplo óleo de colza, óleo de soja, óleo de linhaça, óleo de palma, banha de porco, glúten, por exemplo, glúten de trigo ou glúten de milho, aminoácidos, por exemplo lisina, metionina, treonina, cisteína, arginina, triptofano, vitaminas, por exemplo, vitaminas A, C, E, B12, D3, ácido fólico, D-biotina, cianocobalamina, niacinamida, tiamina, riboflavina, piridoxina, menadiona, pentotenato de cálcio, colina e carotenoides, por exemplo, beta-

12 / 49 caroteno, minerais, por exemplo, fosfato, zinco, selênio e sais inorgânicos ou orgânicos dos mesmos, e pré- ou probióticos. O especialista está ciente das formulações para lidar com as necessidades alimentares de diferentes animais em diferentes estágios de desenvolvimento.

[0025] Dentro do contexto da presente invenção, o termo “prebióticos” significa um ingrediente alimentar não digerível que afeta beneficamente o hospedeiro ao estimular seletivamente o crescimento e/ou a atividade de uma ou de um número limitado de bactérias benéficas. Os prebióticos preferidos são produtos de fibra vegetal e subprodutos de cervejaria contendo levedura. O termo “probióticos”, tal como aqui usado, significa microrganismos vivos ou partes dos mesmos que, quando por exemplo ingeridos ou aplicados localmente em número suficiente, conferem benefícios de saúde demonstráveis ao animal. probióticos preferidos são microrganismos dos gêneros Aspergillus, Bacillus, Bifidobacterium, Clostridium, Debaryomyces, Enterococcus, Hanseniaspora, Kluyveromyces, Lactobacillus, Lactococcus, Megasphaera, Pediococcus, Pichia, Propionibacterium e Saccharomyces, e ainda mais preferencialmente qualquer de Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus cereus, Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium bifidum, Clostridium butyricum, Enterococcus faecium, Kluyveromyces lactis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus salivarius, Lactococcus lactis, Pediococcus acidilado e Saccharomyces cerevisiae, mais de preferência Bacillus sp., Lactococcus lactis, Lactobacillus sp., e Clostridium butyricum.

[0026] Uma composição de ração sólida de acordo com a presente invenção pode ser um pó, farinha ou na forma granular ou pode ser extrudada para formar grânulos. As propriedades dos grânulos extrudados, em particular a forma e a consistência, são influenciadas pela velocidade da rosca da extrusora e pelo perfil do cilindro, pela temperatura de extrusão e pela

13 / 49 composição e teor de umidade do material de alimentação que entra na extrusora. É uma vantagem particular da presente invenção que a eficácia (em termos de propriedades benéficas para a saúde animal como aqui descrito) da composição e ração da presente invenção não é substancialmente afetada pelas condições típicas de mistura e extrusão. Por exemplo, para produzir um ração sólida, de preferência uma ração para peixes ou crustáceos, uma composição da presente invenção compreendendo ácido fórmico (ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo), glicerol e um ou mais glicerídeos de ácido butírico é misturado com um carreador de soja e farinha de peixe, a mistura pode ser pré-condicionada a uma temperatura de até 95°C para permitir a adição de vapor de água para atingir um teor de umidade de 5-30% em peso em relação à composição de ração total, seguido por extrusão de parafuso simples ou duplo em grânulos sólidos ou porosos. Na cabeça de molde da extrusora, a massa extrudada pode ter uma temperatura de mais de 100°C, por exemplo, até 130°C, e mais do que a pressão ambiente. Se o teor de umidade da massa a ser extrudada for alto, então, imediatamente após deixar a cabeça de molde da extrusora, parte da umidade evaporará e o produto extrudado se tornará poroso. As cordas são cortadas em grânulos por uma faca rotativa. O produto extrudado pode ser revestido, por exemplo revestido a vácuo, por exemplo, para melhorar ainda mais a estabilidade de armazenamento e/ou palatabilidade.

[0027] É uma vantagem particular da presente invenção que a ração (sólida, semissólida ou líquida) como tal já seja palatável para os animais, apesar de seu teor de ésteres de ácido butírico, de modo que as melhorias na palatabilidade serão mais ou menos responsáveis apenas pela palatabilidade causados por outros ingredientes da ração além da composição da presente invenção.

[0028] A invenção também provê composições de ração especiais. Por exemplo, de acordo com a invenção, é provida uma composição de ração

14 / 49 inicial compreendendo ácido fórmico (de preferência na forma do sal de Na do mesmo) em uma concentração de 1-8 g/kg, e glicerol e glicerídeo de ácido butírico, em que a razão de ácido fórmico para o total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 1:10 a 10:1 e/ou em que a concentração total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 1-8 g/kg. Tal composição de ração é particularmente útil em um regime de alimentação para alimentação de aves domésticas, mais preferencialmente para alimentação de frangos. Para alimentar frangos, a energia metabolizável total da ração inicial é preferencialmente de 3000-3200 kcal/kg de ração, mais preferencialmente de 3000-3100 kcal/kg de ração.

[0029] Também de acordo com a invenção é provida uma composição de ração produtora compreendendo ácido fórmico (de preferência na forma do sal de Na do mesmo) em uma concentração de 1-6 g/kg, e glicerol e glicerídeo de ácido butírico, em que a razão de ácido fórmico para o total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 1:10 a 10:1 e/ou em que a concentração total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 0,1 - 6 g/kg. Tal composição de ração também é particularmente útil em um regime de alimentação para alimentação de aves domésticas, mais preferencialmente para alimentação de frangos. Para alimentar os frangos, a energia metabolizável total da ração do produtor é de preferência 3100-3200 kcal/kg de ração, mais preferencialmente 3100-3180 kcal/kg de ração.

[0030] E, de acordo com a invenção, é provida uma composição de ração finalizadora compreendendo ácido fórmico (de preferência na forma do sal de Na do mesmo) em uma concentração de 1-4 g/kg, e glicerol e glicerídeo de ácido butírico, em que a razão de ácido fórmico para o total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 1:10 a 10:1 e/ou em que a concentração total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 0,1 - 4 g/kg. Tal composição de ração é novamente particularmente útil em um regime de alimentação para alimentação de aves domésticas, mais preferencialmente

15 / 49 para alimentação de frangos. Para alimentar frangos, a energia metabolizável total da ração finalizadora é de preferência 3000-3400 kcal/kg de ração, mais preferencialmente 3180-3300 kcal/kg de ração.

[0031] Correspondentemente, a invenção provê um regime de alimentação, compreendendo as etapas de administração a um animal a) uma composição de ração inicial de acordo com a presente invenção por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração produtora de acordo com a presente invenção por um segundo período de tempo, b) uma composição de ração inicial de acordo com a presente invenção por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração finalizadora de acordo com a presente invenção por um segundo período de tempo, c) uma composição de ração inicial de acordo com a presente invenção por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração produtora de acordo com a presente invenção por um segundo período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração finalizadora de acordo com a presente invenção por um terceiro período de tempo, ou d) uma composição de ração produtora de acordo com a presente invenção por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração finalizadora de acordo com a presente invenção por um segundo período de tempo, ou e) uma composição de ração inicial de acordo com a presente invenção por um primeiro período de tempo e, opcionalmente, depois disso, uma ração probiótica.

[0032] Em regimes de alimentação preferidos para aves domésticas, em particular para frangos, uma composição inicial como indicada acima é administrada por um (primeiro) período de 21 dias após a eclosão; a

16 / 49 alimentação é posteriormente continuada pela administração de uma composição produtora como indicado acima para o período até e incluindo o dia 35 após a eclosão (isto é, segundo período: dias 22-35). O frango pode então ser abatido, principalmente para a produção de frangos machos. Para quaisquer animais restantes, uma composição finalizadora conforme indicado acima pode ser provida após o dia 35 até o dia da ceifa do frango, tipicamente no dia 42.

[0033] Os regimes de alimentação de acordo com a presente invenção são particularmente adequados para reagir a qualquer desenvolvimento de problemas de saúde durante a vida dos animais; os regimes também são adaptados de forma benéfica às diferentes necessidades nutricionais em cada respectivo estágio de crescimento. Por exemplo, a energia metabolizável de uma ração inicial (expressa como kcal/kg de ração) pode ser inferior à de uma ração produtora, cuja energia metabolizável, por sua vez, pode ser menor do que a de uma ração finalizadora.

[0034] É particularmente vantajoso que a presente invenção provenha uma formulação veterinária que compreende uma quantidade eficaz de ácido fórmico ou um sal farmaceuticamente do mesmo, glicerol e um ou mais glicerídeos de ácido butírico e opcionalmente ácido butírico. Em particular, uma formulação veterinária de acordo com a presente invenção pode compreender ou consistir em uma composição de acordo com a presente invenção, por exemplo, na forma de uma composição de ração como aqui descrito. Uma composição de acordo com a presente invenção para uso como um medicamento, de preferência um medicamento veterinário, é assim provida.

[0035] Em particular, a invenção provê uma composição de acordo com a invenção para uso no tratamento ou prevenção de infecções microbianas ou distúrbios associados a infecções microbianas em um animal. Os animais preferidos a serem tratados são descritos acima.

17 / 49

[0036] O termo “infecção microbiana” no contexto da presente invenção significa qualquer forma de colonização ou outra presença sobre ou dentro de um animal, por exemplo sobre ou dentro da pele, dentes, carne, osso, sangue ou conteúdo intestinal. Um micróbio implicado em uma infecção de acordo com a presente invenção pode ser qualquer microrganismo, em particular um microrganismo Gram-negativo ou Gram-positivo ou um membro do filo Apicomplexa. No contexto da presente invenção, um microrganismo capaz de infectar um animal como listado acima e desencadear sintomas de doença também é chamado de “parasita” ou “patógeno.

[0037] A invenção, em particular, provê composições, incluindo composições veterinárias, para a prevenção ou tratamento de infecções de alveolato, de preferência por um microrganismo da classe Aconoidasida ou Conoidasida, ainda mais preferencialmente da ordem Haemosporida ou Piroplasmida ou da subclasse Coccidia ou Gregarinasina, e ainda mais preferencialmente de ordem Agamococcidiorida ou Eucoccidiorida ou da ordem Archigregarinorida, Eugregarinorida, Nematopsis ou Neogregarinorida. De preferência, a composição, composição veterinária ou ração é usada ou arranjada para prevenir, tratar ou melhorar os sintomas de infecções por um microrganismo da família Cryptosporidiidae, Sarcocystidae ou Eimeriidae, ainda mais preferencialmente do gênero Cryptosporidium, Besnoitia, Cystoisospora, Frenkelia, Hammondia, Hyaloklossia, Neospora, Nephroisospora, Sarcocystis, Toxoplasma, Acroeimeria, Atoxoplasma, Caryospora, Choleoeimeria, Cyclospora, Eimeria, Goussia, Isospora ou Margolisiella, ainda mais preferencialmente do gênero Cryptosporidium, Cyclospora ou Eimeria.

[0038] A invenção em particular provê composições, incluindo composições veterinárias, para a prevenção ou tratamento de microrganismos (geralmente Gram-negativos) da ordem Enterobacterales, Vibrionales,

18 / 49

Desulfovibrionales, Pseudomonadales, Burkholderiales e ordem Campylobacterales, ainda mais preferencialmente de qualquer família selecionada de Budviciaceae, Enterobacteriaceae, Erwiniaceae, Hafniaceae, Morganellaceae, Pectobacteriaceae, Thorselliaceae, Yersiniaceae, Vibrionaceae, Desulfohalobiaceae, Desulfomicrobiaceae, Desulfonatronaceae, Desulfovibrionaceae, Moraxellaceae, Pseudomonadaceae, Ventosimonadaceae, Alcaligenaceae, Burkholderiaceae, Comamonadaceae, Oxalobacteraceae, Sutterellaceae, Campylobacteraceae, Helicobacteraceae, e Hydrogenimonaceae, ainda mais preferencialmente de um gênero selecionado de Budvicia, Leminorella, Pragia, Atlantibacter, Biostraticola, Buttiauxella, Cedecea, Citrobacter, Cronobacter, Enterobacillus, Enterobacter, Escherichia, Franconibacter, Gibbsiella, Izhakiella, Klebsiella, Kluyvera, Kosakonia, Leclercia, Lelliottia, Limnobaculum, Mangrovibacter, Metakosakonia, Pluralibacter, Pseudescherichia, Pseudocitrobacter, Raoultella, Rosenbergiella, Salmonella, Shigella, Shimwellia, Siccibacter, Trabulsuella, Yokenella, Buchnera, Erwinia, Pantoea, Phaseolibacter, Tatumella, Wigglesworthia, Edwardsiella, Hafniam Obesumbacterium, Arsenophonus, Cosenzaea, Moellerella, Morganella, Photorhabdus, Proteus, Providencia, Xenorhabdus, Brenneria, Dickeya, Lonsdalea, Pectobacterium, Sodalis, Coetzeea, Thorsellia, Chania, Ewingella, Nissabacter, Rahnella, Rouxiella, Samsonia, Serratia, Yersinia, Aliivibrio, Allomonas, Catenococcus, Echinimonas, Enterovibrio, Grimontia, Paraphotobacterium, Photobacterium, Photococcus, Salinivibrio, Thaumasiovibrio, Vibrio, Desulfohalobium, Desulfohalophilus, Desulfonatronospira, Desulfonatronovibrio, Desulfonauticus, Desulfothermus, Desulfovermiculus, Desulfomicrobium, Desulfoplanes, Desulfonatronum, Bilophila, Desulfobaculum, Desulfocurvus , Desulfovibrio, Halodesulfovibrio, Lawsonia, Mailhella, Pseudodesulfovibrio, Acinetobacter, Alkanindiges, Cavicella, Faucicola, Fluviicoccus, Moraxella, Paraperlucidibaca,

19 / 49

Perlucidibaca, Psychrobacter, Grupo de Azotobacter, Mesophilobacter, Oblitimonas, Permianibacter, Pseudomonas, Rugamonas, Thiopseudomonas, Ventosimonas, Achromobacter, Advenella, Alcaligenes, ampullimonas, Azohydromonas, Basilea, Bordetella, Brackiella, Caenimicrobium, Candidimonas, Castellaniella, Derxia, Eoetvoesia, Kerstersia, Oligella, Orrell, Paenalcaligenes, Paracandidimonas, Paralcaligenes, Parapusillimonas, Parvibium, Pelistega, Pigmentiphaga, Pusillimonas, Saccharedens, Taylorella, Verticiella, Burkholderia, Caballeronia, Chitinimonas, Cupriavidus, Formosimonas, Hydromonas, Lautropia, Limnobacter, Mycoavidus, Pandoraea, Paraburkholderia, Paucimonas, Polynucleobacter, Quisquiliibacterium, Ralstonia, Robbsia, Thermothrix, Acidovorax, Alicycliphilus, Brachymonas, Caenimonas, Caldimonasm Comamonas, Corticibacter, Curtibacter, Delftia, Diaphorobacter,Doohwaniella, Extensimonas, Glesbergeria, Hydrogenophaga, Hylemonella, Kinneretia, Lampropedia, Limnohabitans, Macromonas, Maliki, Melaminivora, Oryzisolibacter, Ottowia, Pelomonas, Polaromonas, Pseudacidovorax, Pseudorhodoferax, Ramlibacter,Rhodoferax, Schlegelella, Simplicispira, Tibeticola, Variovorax, Verminephrobacter, Xenophilus, Zhizhongheella, Actimicrobium, Candidatus Zinderia, Collimonas, Duganella, Glaciimonas, Herbaspirillum, Herminiimonas, Janthinobacterium, Marsillia, Noviherbaspirillum, Oxalicibacterium, Oxalobacter, Paraherbaspirillum, Pseudoduganella, Telluria, Undibacterium, Dakarella, Duodenibacillus, Parasutterella, Suterella, Turicimonas, Arcobacter, Campylobacter, Sulfurospitillum, Flaxispira, Heliobacter, Sulfuricurvum, Sulfurimonas, Thiovulum Wolinella, Hydrogenimonas, Nitratifractor, e Thiofractor, ainda mais preferivelmente de uma gênero selecionado de Escherichia, Salmonella, Yersinia, Vibrio, Lawson, Acinetobacter, Pseudomonas, Campylobacter, e Helicobacter e mais preferencialmente de uma gênero selecionado de Salmonella, Campylobacter e Vibrio.

20 / 49

[0039] E a invenção provê composições, incluindo composições veterinárias, para a prevenção ou tratamento de microrganismos (geralmente Gram-positivos) da ordem Clostridiales, Bacillales e Lactobacillales, mais preferencialmente de uma família taxonômica selecionada de Caldicoprobacteraceae, Catabacteriaceae, Christensenellaceae, Clostridiaceae, Defluviitaliaceae, Eubacteriaceae, Gracilibacteraceae, Heliobacteriaceae, Lachnospiraceae, Oscillospiraceae, Peptococcaceae, Peptostreptococcaceae, Proteinivoraceae, Ruminococcaceae, Symbiobacteriaceae, Syntrophomonadaceae, Alicyclobacillaceae, Bacillaceae, Listeriaceae, Paenibacillaceae, Pasteuriaceae, Planococcaceae, Sporolactobacillaceae, Staphylococcaceae, Thermoactinomycetaceae, Aerococcaceae, Carnobacteriaceae, Enterococcaceae, Lactobacillaceae, Leuconostocaceae, Streptococcaceae , ainda mais preferencialmente de um gênero selecionado de Caldicoprobacter, Catabacter, Beduinibacterium, Christensenella, Alkaliphilus, Anaeromicrobium, Anaerosolibacter, Anoxynatronum, Beduinibacterium, Brassicibacter, Butyricicoccus, Caldanaerocella, Caldisalinibacter, Caloramator, Caloranaerobacter, Caminicella, Cellulosibacter, Clostridiisalibacter, Clostridium, Crassaminicella, Desnuesiella, Falcatimonas, Fervidicella, Fonticella, Geosporobacter, Haloimpatiens, Hathewaya, Hungatella, Inediibacterium, Keratinibaculum, Khelaifiella, Lactonifactor, Linmingia, Lutispora, Maledivibacter, Marinisporobacter, Massilioclostridium, Mordavella, Natronincola, Oceanirhabdus, Oxobacter, Paramaledivibacter, Proteiniclasticum, Salimesophilobacter, Sarcina, Senegalia, Serpentinicella, Sporosalibacterium, Thermobarchium, Thermohalobacter, Thermotalea, Tindalia, Wukongibacter, Younglibacter, Defluviitalea, Vallitalea, Acetobacterirum, Alkalibacter, Alkalibaculum, Aminicella, Anaerofustis, Eubacterium, Garciella, Intestinibacillus, Irregularibacter, Pseudoramibacter, Rhabdanaerobium, Gracilibacter, Heliobacillus, Heliobacterium, Heliophilum, Heliorestis,

21 / 49

Abyssivirga, Acetatifactor, Acetitomaculu, Agathobacter, Anaerobium, Anaerocolumna, Anaerosporobacter, Anaerostipes, Anaerotaenia, Anaerotignum, Bariatricus, Blautia, Butyrivibrio, Caecibacterium, Catonella, Cellulosilyticum, Coprococcus, Cuneatibactere, Dorea, Eisenbergiella, Extibacter, Faecalicatena, Faecalimonas, Frisinicoccus, Fusincatenibacter, Glucerabacter, Herbinix, Hespellia, Johnsonella, Kineothrix, Lachnoanaerobaculum, Lachnobacterium, Lachnoclostridium, Lachnospira, Lachnotalea, Marvinbryantia, Merdimonas, Mobilisporobacter, Mobilitalea, Moryella, Muricomes, Murimonas, Niameybacter, Oribacterium, Parasporobacterium, Pseudobutyrivibrio, Robinsoniella, Roseburia, Sellimonas, Shuttleworthia, Sporobacterium, Stomatobaculum, Syntrophococcus, Tyzzerella, Marseillibacter, Oscillibacter, Cryptanaerobacter, Dehalobacter, Dehalobacterium, Desulfitibacter, Desulfitispora, Desulfitobacterium, Desulfocucumis, Desulfonispora, Desulfosporosinus, Desulfotomaculum, Desulfurispora, Pelotomaculum, Peptococcus, Sporomaculum, Syntrophobotulus, Thermincola, Acetoanaerobium, Asaccharospora, Clostridioides, Criibacterium, Filifactor, Intestinibacter, Paeniclostridium, Paraclostridium, Peptoanaerobacter, Peptoclostridium, Peptostreptococcus, Proteocatella, Romboutsia, Sporacetigenium, Tepidibacter, Terrisporobacter, Anaerobranca, Proteinivorax, Acetanaerobacterium, Acetivibrio, Acutalibacter, Agathobaculum, Anaerobacterium, Anaerofilum, Anaeromassilibacillus, Anaerotruncus, Angelakisella, Bittarella, Caproiciproducens, Drancourtella, Ercella, Ethanoligenens, Faecalibacterium, Fastidiosipila, Fournierella, Gemmiger, Gorbachella, Harryflintia, Herbivorax, Hydrogenoanaerobacterium, Mageeibacillus, Marasmitruncus, Massilimaliae, Negativibacillus, Neglecta, Neobitarella, Oscillospira, Paludicola, Papillibacter, Phocea, Provencibacterium, Pseudobacteroides, Pygmaiobacter, Ruminiclostridium, Ruminococcus, Ruthenibacterium, Saccharofermentans,

22 / 49

Sporobacter, Subdoligranulum, Caldinitratiruptor, Symbiobacterium, Dethiobacter, Pelospora, Syntrophomonas, Syntrophothermus, Thermohydrogenium, Thermosyntropha, Alicyclobacillus, Effusibacillus, Kyrpidia, Tumebacillus, Aeribacillus, Alkalibacillus, Alkalicoccus, Allobacillus, Alteribacillus, Amphibacillus, Amylobacillus, Anaerobacillus, Anoxybacillus, Aquibacillus, Aquisalibacillus, Aureibacillus, Bacillus, Caldalkalibacillus, Caldibacillus, Calditerricola, Cerasibacillus, Compostibacillus, Desertibacillus, Domibacillus, Edaphobacillus, Falsibacillus, Fermentibacillus, Fictibacillus, Filobacillus, Geobacillus, Gracilibacillus, Halalkalibacillus, Halobacillus, Halolactibacillus, Hydrogenibacillus, Lentibacillus, Lysinibacillus, Marinococcus, Massilibacterium, Melghiribacillus, Microaerobacter, Natribacillus, Natronobacillus, Numidum, Oceanobacillus, Ornithinibacillus, Parageobacillus, Paraliobacillus, Paralkalibacillus, Paucisalibacillus, Pelagirhabdus, Piscibacillus, Polygonibacillus, Pontibacillus, Pseudogracilibacillus, Psychrobacillus, Quasibacillus, Rubeoparvulum, Saccharococcus, Salibacterium, Salimicrobium, Salinibacillus, Salipaludibacillus, Salirhabdus, Salisediminibacterium, Saliterribacillus, Salsuginibacillus, Sediminibacillus, Sinibacillus, Streptohalobacillus, Swionibacillus, Tenuibacillus, Tepidibacillus, Terribacillus, Terrilactibacillus, Texcoconibacillus, Thalassobacillus, Thermolongibacillus, Virgibacillus, Vulcanibacillus, Brochothrix, Listeria, Ammoniibacillus, Aneurinibacillus, Brevibacillus, Chengkuizengella, Cohnella, Fontibacillus, Gorillibacterium, Marinicrinis, Brevibacillus, Saccharibacillus, Thermobacillus, Xylanibacillus, Pasteuria, Bhargavaea, Caryophanon, Chryseomicrobium, Crocinobacterium, Filibacter, Jeotgalibacillus, Kurthia, Paenisporosarcina, Planococcus, Planomicrobium, Rummeliibacillus, Savagea, Solibacillus, Sporosarcina, Tetzosporium, Ureibacillus, Viridibacillus, Caenibacillus, Camelliibacillus, Pullulanibacillus, Scopulibacillus, Sinobaca, Sporolactobacillus,

23 / 49 Tuberibacillus, Abyssicoccus, Auricoccus, Corticicoccus, Jeotgalicoccus, Macrococcus, Nosocomiicoccus, Salinicoccus, Staphylococcus, Baia, Croceifilum, Desmospora, Geothermomicrobium, Hazenella, Kroppenstedtia, Laceyella, Lihuaxuella, Marininema, Marinithermofilum, Mechercharimyces, Melghirimyces, Novibacillus, Paludifilum, Planifilum, Polycladomyces, Risungbinella, Salinithrix, Seinonella, Shimazuella, Thermoactinomyces, Thermoflavimicrobium, Abiotrophia, Aerococcus, Dolosicoccus, Eremococcus, Facklamia, Globicatella, Ignavigranum, Agitococcus, Alkalibacterium, Allofustis, Alloiococcus, Atopobacter, Atopococcus, Atopostipes, Carnobacterium, Desemzia, Dolosigranulum, Granulicatella, Isobaculum, Jeotgalibaca, Lacticigenium, Marinilactibacillus, Pisciglobus, Trichococcus, Bavariicoccus, Catellicoccus, Enterococcus, Melissococcus, Pilibacter, Tetragenococcus, Vagococcus, Lactobacillus, Pediococcus, Sharpea, Convivina, Fructobacillus, Leuconostoc, Oenococcus, Weissella, Floricoccus, Lactobacillus (streptococci láctico), Lactovum, Okadaella Streptococcus e mais preferencialmente de um gênero selecionado a partir de Clostridium (mais preferencialmente Clostridium perfringens), Bacillus, Listeria, Staphylococcus, Enterococcus e Streptococcus.

[0040] Tendo em vista os microrganismos acima, é uma vantagem particular da presente invenção que as composições incluindo rações e composições antimicrobianas veterinárias tenham propriedades de melhoria da saúde intestinal. Em particular, eles são úteis para a prevenção, melhoria, tratamento ou cura de enterite e/ou coccidiose em animais.

[0041] A invenção provê assim uma composição para uso em animais para reduzir, em comparação com um controle não tratado, (i) a pontuação da lesão do intestino delgado (ii) a contagem de oocistos coccidiais do intestino delgado, (ii) no ceco, intestino delgado, carne de peito; carne da asa e/ou pele do pescoço: a incidência de um microrganismo conforme indicado acima, o título do microrganismo conforme indicado acima e o APC.

24 / 49

[0042] A redução da pontuação da lesão do intestino delgado e/ou contagem de oocistos coccidiais é particularmente vantajosa para a avicultura. A pontuação da lesão é determinada de acordo com a publicação “Técnicas de pontuação da lesão em experimentos de bateria e cercados no chão com frangos”, Exp. Parasitol. 28: 30–36 em uma escala de 0 - sem lesões a 4 - lesões mais graves. É uma vantagem particular da presente invenção que as composições aqui providas, incluindo rações, composições antimicrobianas e veterinárias, podem reduzir a pontuação da lesão em ordem de magnitude 1 e/ou podem reduzir a pontuação da lesão para 1 ou menos. Surpreendentemente, as composições aqui providas, incluindo rações, composições antimicrobianas e veterinárias, podem reduzir a pontuação da lesão para ou abaixo da ordem obtida por um coccidiostático combinado e tratamento com antibiótico e/ou podem reduzir a pontuação da lesão a tal nível que nenhuma diferença estatisticamente significativa para uma população saudável dos respectivos animais é observada com um nível de significância ρ<0,05. A redução na pontuação da lesão é preferencialmente obtida para aves domésticas dentro de 42 dias após a infecção, ainda mais preferencialmente com 22 dias após a infecção, e é assim alcançada surpreendentemente rápido dada a ausência de coccidiostáticos e antibióticos.

[0043] A contagem de oocistos coccidiais do intestino delgado de acordo com a invenção é determinada pela contagem de oocistos coccidiais de amostras de intestino. É uma vantagem particular da presente invenção que as composições aqui providas, incluindo rações, composições antimicrobianas e veterinárias, podem reduzir a contagem de oocistos coccidianos do intestino delgado por um fator de pelo menos 1,5 em 42 dias após a infecção, ainda mais preferencialmente em 22 dias pós-infecção.

[0044] De acordo com outra vantagem da presente invenção, as composições aqui providas, incluindo rações, composições antimicrobianas e veterinárias, podem reduzir, no ceco, intestino delgado, carne de peito, carne

25 / 49 de asa e/ou pele do pescoço, um ou mais dos seguintes: a incidência de um microrganismo como indicado acima, o título de um microrganismo como indicado acima e a contagem de placa aeróbia (“APC”) ou unidades formadoras de colônia (“cfu”) em meio de crescimento adequado para o referido patógeno de microrganismo em condições aeróbicas ou anaeróbicas. De preferência, as composições aqui providas, incluindo rações, composições antimicrobianas e veterinárias, podem reduzir, no ceco, intestino delgado, carne de peito, carne de asa e/ou pele do pescoço, a incidência ou título de alveolatos, patógenos Gram-negativos e/ou Gram-positivos, mais preferencialmente de qualquer um dos gêneros Escherichia, Salmonella, Campylobacter, Vibrio, Clostridium, Bacillus, Listeria, Staphylococcus, Enterococcus e Streptococcus. No contexto da presente invenção, o termo “incidência” significa a fração de animais infectados em relação ao tamanho total da população, o termo “título” significa a contagem do respectivo patógeno no respectivo tecido ou material intestinal.

[0045] A invenção, no entanto, não está limitada à prevenção, melhoria, redução ou cura de infecções por patógenos. Vantajosamente, a invenção provê composições, incluindo rações, composições antimicrobianas e veterinárias, que, quando fornecidas a um animal, resultam em uma melhoria particular em qualquer parâmetro selecionado do grupo que consiste em ganho de peso corporal, coeficiente de variação do peso corporal, taxa de conversão alimentar, porcentagem de sobreviventes, consumo de ração, taxa de natalidade, qualidade dos ovos e eclodibilidade.

[0046] A invenção é adiante descrita adicionalmente por meio de exemplos. O especialista compreende que a invenção não se limita ao conteúdo dos exemplos; em particular, as reivindicações não devem ser restritas ao escopo de qualquer exemplo particular, a menos que as reivindicações compreendam todas as características do referido exemplo.

EXEMPLOS

26 / 49 Exemplo 1: Aves domésticas com desafio leve e severo por Coccidia e Campylobacter

[0047] Um total de 4.680 aves domésticas de uma cepa de pintinhos são alojados na eclosão (um dia de idade, ou dia de teste 0) para iniciar o período de alimentação de teste e alimentados com os seguintes grupos: Número do Inicial Produtora Finalizadora tratamento T1 1-PC 1-PC 1-PC T2 2-NC (com desafio) 2-NC (com desafio) 2-NC (com desafio) T3 3-NC + 1,5 kg/MT 3-NC + 1,5 kg/MT 3-NC + 1,5 kg/MT Monobutirato Monobutirato Monobutirato T4 4-NC + 2,5 kg/MT 4-NC + 2,5 kg/MT 4-NC + 2,5 kg/MT Monobutirato Monobutirato MONOBUTIRATO T5 5-NC + 4,0 kg/MT 5-NC + 4,0 kg/MT-5-NC + 4,0 kg/MT Monobutirato Monobutirato MONOBUTIRATO T6 6-NC + 4 0 kg/MT 6-NC +2,5 kg/MT 6-NC +1,5 kg/MT Monobutirato MONOBUTIRATO MONOBUTIRATO T7 7-NC + 2,5 kg/MT 7-NC 1,5 kg/MT Monobutirato 7-NC 0,75 kg/MT Monobutirato em INICIAL em PRODUTORA MONOBUTIRATO em

FINALIZADORA T8 8-NC + 8 kg/MT Amasil 8-NC + 8 kg/MT Amasil NA 8-NC + 8 kg/MT Amasil NA

NA T9 9-NC + 2.5 kg/MT 9-NC + 2.5 kg/MT 9-NC + 2.5 kg/MT Monobutirato Monobutirato + 4kg/MT MONOBUTIRATO + 4 kg/MT + 4 kg/MT Amasil NA Amasil NA Amasil NA T10 10-NC coccidiostático 10-NC coccidiostático padrão e 10-NC coccidiostático padrão e padrão e programa de programa de antibióticos programa de antibióticos antibióticos

[0048] PC: controle não tratado e incontestado; NC: controle não tratado, mas desafiado; MT: tonelada métrica; Monobutirato: uma composição que compreende 37,5-41% em peso de 1-monoglicerídeo de ácido butírico, 4,5-5,5% em peso de 2-monoglicerídeo de ácido butírico, 8,5- 9% em peso de 1,3-diglicerídeo de ácido butírico, 4,8-5,2% em peso de 1,2 - diglicerídeo de ácido butírico, 1,0-1,3% em peso de triglicerídeo de ácido butírico, 39,5-43,5% em peso de glicerol, 0-1% em peso de ácido butírico livre; Amasil NA: ácido fórmico (61% em peso), formato de Na (20,5% em peso) em água; coccidiostático padrão e programa de antibióticos: avilamicina, monensina sódica e dissalicilato de metileno bacitracina.

[0049] Assim, por exemplo, no tratamento T9 os frangos são tratados como no tratamento de controle negativo T2, ou seja, eles recebem uma exposição desafiadora a coccídios e Clostridium perfringens de acordo com o

27 / 49 experimento de desafio leve ou severo conforme descrito abaixo, enquanto são alimentados com a respectiva ração iniciadora, cultivadora e finalizadora do ensaio T2 aumentada pela adição de Monobutirato e Amasil conforme indicado na tabela.

[0050] A composição da respectiva ração inicial, produtora e finalizadora são:

28 / 49 Inicial T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Produto % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado Amasil 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,80 0,40 0,00 Monobutirina 0,00 0,00 0,15 0,25 0,40 0,40 0,25 0,00 0,25 0,00 Sal 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,00 0,07 0,12 Milho 0,95 0,95 1,05 1,10 1,18 1,18 1,10 0,00 0,60 0,95 Óleo 0,63 0,63 0,38 0,23 0,00 0,00 0,23 0,90 0,38 0,63

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 38/66 Total (%) 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 Produtora T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Produto % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado Amasil 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,80 0,40 0,00 Monobutirina 0,00 0,00 0,15 0,25 0,40 0,40 0,25 0,00 0,25 0,00 Sal 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,00 0,07 0,12 Milho 0,95 0,95 1,05 1,10 1,18 1,18 1,10 0,00 0,60 0,95 Óleo 0,63 0,63 0,38 0,23 0,00 0,23 0,38 0,90 0,38 0,63 Total (%) 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 Finalisadora T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Produto % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado % adicionado 28 / 49

Amasil 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,08 0,40 0,00 Monobutirina 0,00 0,00 0,15 0,25 0,40 0,15 0,075 0,00 0,25 0,00 Sal 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,12 0,00 0,07 0,12 Milho 0,95 0,95 1,05 1,10 1,18 1,05 1,00 0,00 0,60 0,95 Óleo 0,63 0,63 0,38 0,23 0,00 0,38 0,50 0,90 0,38 0,63 Total (%) 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70 1,70

29 / 49

[0051] Todas as razões são isocalóricas e isossódicas. Uma dieta basal consiste nos níveis de energia recomendados menos o nível de tratamento de energia mais alto de Monobutirato e Amasil NA, e menos o nível de tratamento de sódio mais alto de Amasil NA, com espaço restante para a adição de milho, óleo e sódio conforme necessário para cada um os tratamentos. Um desenho de blocos aleatórios é usado para alocar pintinhos para baias e baias para grupos de tratamento. Os frangos são distribuídos aleatoriamente em blocos separados. Todas as médias de tratamento são separadas usando a diferença menos significativa. Antes do início do tratamento, os grupos são avaliados para garantir uma distribuição igual com base no peso. Os pesos corporais médios dos grupos de tratamento são comparados com o grupo de controle. Os grupos com pesos médios maiores ou menores do que um desvio padrão do grupo de controle médio passam por outra randomização para garantir distribuição igual de peso.

[0052] Os frangos são criados em camas de baias de piso, alojados em uma sala de estrutura de madeira/bloco de concreto com telhado metálico e teto baixo isolado no valor de R de 12 para o telhado e 12 para as paredes laterais. A casa possui um sistema de ventilação cruzada e ventiladores de teto uniformemente espaçados. A incubação em sala quente é provida com aquecedores de ar forçado (dias de teste 0 a 42 dias). A fonte de calor inclui o calor do ar forçado. Frangos de corte alojados em camas de baias de piso medindo 1,5 m x 3 m. Cada baia serve como uma unidade experimental, um total de 90 baias são usadas para fins de teste. As baias, comedouros e bebedouros são higienizados antes da colocação das aves domésticas no Dia do Teste 0.

[0053] Os pintinhos são observados pelo menos duas vezes ao dia, começando no dia 0 do teste para determinar a mortalidade ou o início, a gravidade e a duração de quaisquer mudanças comportamentais ou evidências de toxicidade, incluindo condição do material fecal, presença de diarreia,

30 / 49 nervosismo, acessibilidade à água e ração, aparência da ave geral e quaisquer condições adversas que devam afetar o desempenho. O sexo da pena é usado para determinar o sexo e os frangos de corte são colocados no cercado usando todos os frangos de corte. Observações incomuns são registradas e confirmadas por um veterinário. Todos os procedimentos de manejo são consistentes com as práticas comerciais avícolas. Os exames de saúde são realizados aos 21 e 42 dias de idade:

[0054] Os pesos corporais são obtidos pesando pintinhos individuais em um cercado e registrados para os dias de teste 0, 14, 21, 35 e 42. O ganho de peso corporal é calculado determinando o ganho de peso corporal real (terminando menos os pesos iniciais) durante os períodos dos dias de teste 0- 14, 0-21, 0-35, 0-42, 15-21, 22-35 e 36-42. Pesos corporais também são medidos em aves moribundas e animais de teste que são encontrados mortos durante o estudo. A uniformidade do peso corporal (CV ou Coeficiente de Variação) é determinada nos Dias de Teste 14, 21, 35 e 42.

[0055] As pesagens de alimentação são tomadas nos Dias de Teste 14, 21, 35 e 42. O consumo de alimentos é avaliado para cada cercado nos dias de teste 0-14, 0-21, 0-35, 0-42, 15-21, 22-35 e 36-42. Um recipiente separado (comedouro) é designado para cada cercado. O peso da tara inicial para cada sistema de alimentação é registrado no Dia de Teste 0. A ração é adicionada e o peso registrado. Adicionando ração: Antes de adicionar ração, o sistema de alimentação é pesado e o peso registrado (Peso fora). Alimentação fora significa ração que é removida e retirada dos cálculos. Nova ração é adicionada e o peso registrado (Peso dentro). A ração derramada deve ser pesada (pesos registrados em formulários apropriados) e é descartada (ou seja, não é usada para consumo posterior). A conversão de ração é determinada nos Dias de Teste 0-14, 0-21, 0-35, 0-42, 15-21, 22-35 e 36-42. A mortalidade é tomada diariamente e relatada como porcentagem por período de tempo para os Dias de Teste 0-14, 0-21, 0-35, 0-42, 15-21, 22-35 e 36-42. A incidência e

31 / 49 o título de bactérias intestinais são determinados aos 21 (3 machos e 3 fêmeas em cada unidade experimental) e 42 dias de idade (10 aves domésticas por unidade experimental). As avaliações das bactérias intestinais incluem: níveis cecais de Campylobacter log10, incidência cecal de Salmonella spp., níveis cecais de Clostridium perfringens log10, níveis cecais de Campylobacter log10, níveis cecais de E. coli log10, níveis cecais de contagem em placa aeróbica log10, níveis de Campylobacter log10 no intestino delgado, incidência de Salmonella spp. no intestino delgado, níveis de Clostridium perfringens log10 no intestino delgado, níveis de Campylobacter log10 no intestino delgado, níveis de E. coli log10 no intestino delgado e níveis de contagem em placa aeróbia log10 no intestino delgado. As contagens de oocistos coccidianos fecais são realizadas em 21 (3 machos e 3 fêmeas em cada unidade experimental) e 42 dias de idade (10 aves domésticas por unidade experimental).

[0056] Aos 43-45 dias de idade, 10 aves (5 machos e 5 fêmeas) são processadas de cada replicado, a partir de 9 replicados, para determinar as contagens de microrganismos (Clostridium perfringens e Campylobacter) no peito, pele no pescoço e pele abaixo da área da asa. Incidência de Salmonella spp. e a contagem são determinadas nas mesmas partes.

[0057] Todas as aves foram sacrificadas no Dia de Teste 42. Exames de necropsia completos são realizados em todos os pintinhos encontrados mortos ou moribundos durante o estudo. Todos os animais colocados no estudo são necropsiados e as observações são registradas.

[0058] Os dados gerados durante o estudo são submetidos aos seguintes testes estatísticos: Para todos os parâmetros, o procedimento multifatorial é usado para comparar as médias dos grupos de tratamento, usando ANOVA (Análise de Variância). As médias são posteriormente separadas usando a diferença menos significativa. As diferenças significativas relatadas no nível de ρ<0,05 são indicadas nas figuras. Os dados incluem:

32 / 49 peso corporal, consumo de alimentos e mortalidade. Desafios:

[0059] LIGEIRO: No dia 5 pós-eclosão para todos os tratamentos, com exceção do Tratamento 1, cada baia é coberta com aproximadamente 2,5 milhões de oocistos totais de Eimeria acervulina e Eimeria maxima (ou

50.000 por ave) e Clostridium perfringens (inoculado por meio de ninhada usada) para gerar mortalidade de 5-8%

[0060] GRAVE: No dia 5 pós-eclosão para todos os tratamentos, com exceção do Tratamento 1, cada baia é coberta com aproximadamente 5 milhões de oocistos totais de Eimeria acervulina e Eimeria maxima (ou

100.000 por ave doméstica) e Clostridium perfringens (inoculado por meio de ninhada usada) para gerar mortalidade de 8-10%. Resultados:

33 / 49

Desafio leve: Dias 0-14 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 0 41,93 41,79 42,01 42,18 41,76 41,80 41,81 41,81 41,88 42,17 Significado (P<0,05) a a a a a a a a a a Peso médio corporal (g) Dia 14 388,32 372,85 375,02 378,74 382,06 381,87 378,02 385,42 386,26 383,54 Significado (P<0,05) a d d cd abc bc cd ab ab abc Conversão de ração conectada 1,04 1,07 1,06 1,07 1,05 1,05 1,06 1,04 1,04 1,05

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 43/66 Dia 0-14 a c bc abc abc abc abc ab ab ab Significado (P<0,05) % Mortalidade Dia 0-14 1,07 4,27 2,99 2,56 1,92 2,35 1,28 1,07 1,71 Significado (P<0,05) a c bc abc ab ab ab ab a ab Ganho em peso médio corporal 346,39 331,06 333,00 336,56 340,29 240,07 336,20 343,62 344,38 341,37 (g) Dia 0-14 a c c bc ab ab bc a a ab Significado (P<0,05) Coeficiente de variação do 10,59 11,08 11,02 10,70 10,53 10,35 10,15 10,96 10,50 10,91 peso corporal Dia 14 abc c bc abc abc ab a bc abc bc Significado (P<0,05) Ingestão de ração (g) Dia 0-14 18541 18004 18043 18239 18346 18318 18236 18475 18488 18365 Significado (P<0,05) a a a a a a a a a a 33 / 49

Dias 0-21 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 21 831,77 793,42 800,57 808,42 816,92 817,13 806,40 823,38 829,04 819,95 Significado (P<0,05) a d cd bc ab ab bcd a a ab Conversão de ração conectada 1,28 1,33 1,32 1,32 1,30 1,30 1,32 1,29 1,29 1,30 Dia 0-21 a c bc bc abc abc bc ab ab ab Significado (P<0,05) % Mortalidade Dia 0-21 1,50 4,91 3,85 3,21 2,78 2,56 3,42 1,92 1,28 2,14 Significado (P<0,05) ab e de bcde abcd abcd cde abc a abcd Ganho em peso médio corporal 789,84 751,62 758,56 766,24 775,16 775,32 764,59 781,57 787,17 777,78 (g) Dia 0-21 a c c bc ab ab bc a a ab Significado (P<0,05) Coeficiente de variação do 13,59 14,53 14,52 14,27 14,36 14,42 14,72 13,83 14,45 14,09 peso corporal Dia 21 a bc bc abc abc bc c ab bc abc Significado (P<0,05) Ingestão de ração (g) Dia 0-21 52158 50203 50576 51256 51573 51499 51150 51911 5224 51999 Significado (P<0,05) a b ab ab ab ab ab ab a ab

34 / 49 Dias 0-35 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 35 1926,860 1827,598 1830,144 1865,543 1891,042 1888,158 1862,322 1905,514 1915,651 1897,583 Significado (P<0,05) a e de cd abc ab bc ab ab abc Conversão de ração conectada 1,639 1,714 1,693 1,686 1,666 1,667 1,686 1,654 1,647 1,662 Dia 0-35 a d cd bcd abc abc abc abc ab abc Significado (P<0,05) % Mortalidade Dia 0-35 1,932 6,280 5,072 4,348 3,623 3,865 4,106 2,657 1,932 2,899 Significado (P<0,05) a d cd bc abc abcd bc ab a ab

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 44/66 Ganho em peso médio corporal 1884,929 1785,804 1808,129 1823,364 1849,281 1846,357 1820,507 1863,708 1873,775 1855,412 (g) Dia 0-35 a e de cd abc ab cde ab ab abc Significado (P<0,05) Coeficiente de variação do 11,529 12,896 12,767 12,429 12,670 12,298 12,418 12,003 12,068 12,419 peso corporal Dia 35 a b b ab b bc ab ab ab ab Significado (P<0,05) Ingestão de ração (g) Dia 0-35 147571 141148 142648 144333 145558 144711 144080 147021 147890 146868 Significado (P<0,05) a b ab ab ab ab ab a a a Dias 0-42 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 42 2482,767 2362,240 2384,678 2402,050 2436,342 2436,583 2402,974 2457,695 2475,534 2451,247 Significado (P<0,05) a d d cd bc bc cd ab ab ab Conversão de ração conectada 1,761 1,840 1,823 1,811 1,792 1,791 1,814 1,776 1,768 1,786 34 / 49

Dia 0-42 Significado (P<0,05) a d cd bcd abc abc bcd ab a abc % Mortalidade Dia 0-42 1,932 6,763 5,556 4,589 3,865 3,865 4,589 2,657 2,174 3,140 Significado (P<0,05) a e de cd bcd bcd cd ab ab ab Ganho em peso médio corporal 2442,836 2320,445 2342,663 2359,871 2394,580 2394,782 2361,159 2415,889 2433,478 2409,076 (g) Dia 0-42 Significado (P<0,05) a d d cd bc bc bc ab ab ab Coeficiente de variação do 13,118 13,621 14,004 13,568 13,524 13,436 13,780 13,062 13,554 13,582 peso corporal Dia 42 Significado (P<0,05) a a a a a a a a a a Ingestão de ração (g) Dia 0-42 202810 193852 196062 197597 199747 198890 198244 201666 203513 202059 Significado (P<0,05) a c bc abc abc abc abc ab a ab

35 / 49 Dias 15-21 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 15-21 corrigido da 1,395 1,497 1,416 1,423 1,410 1,407 1,422 1,406 1,398 1,402 conversão da ração Significância (ρ<0,05) a a a a a a a a a a % Mortalidade Dia 15-21 0,427 0,641 0,855 0,641 0,855 0,641 1,068 0,641 0,214 0,427 Significância (ρ<0,05) a a a a a a a a a a Ganho em peso médio corporal 443,450 420,564 425,557 429,680 434,862 435,257 428,381 437,954 442,784 436,413 (g) Dia 15-21 a c bc abc abc abc abc ab a abc

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 45/66 Significância (ρ<0,05) Ingestão de ração (g) Dia 15- 31746 29791 30164 30645 31161 31088 30738 31499 31812 31187 21 a b ab ab ab ab ab ab a ab Significância (ρ<0,05) Dias 22-35 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 22-35 corrigido da 1,794 1,840 1,820 1,826 1,810 1,815 1,826 1,806 1,805 1,812 conversão da ração Significância (ρ<0,05) a a a a a a a a a a % Mortalidade Dia 22-35 0,437 1,366 1,226 1,143 0,845 1,301 0,687 0,734 0,650 0,762 Significância (ρ<0,05) a a a a a a a a a a Ganho em peso médio corporal 1095,093 1034,183 1049,571 1057,120 1074,124 1073,033 1055,921 1082,135 1086,609 1077,629 (g) Dia 22-35 Significância (ρ<0,05) a c bc abc ab ab ab a a abc 35 / 49

Ingestão de ração (g) Dia 22- 88604 82181 83681 85366 86591 85744 85113 88054 88923 87901 35 a b ab ab ab ab ab ab a ab Significância (ρ<0,05) Dias 36-42 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 36-42 corrigido da 2,226 2,297 2,295 2,290 2,247 2,246 2,276 2,213 2,197 2,244 conversão da ração a a a a a a a a a a Significância (ρ<0,05) % Mortalidade Dia 36-42 0,000 0,483 0,483 0,242 0,242 0,000 0,483 0,000 0,242 0,242 Significância (ρ<0,05) a a a a a a a a a a Ganho em peso médio corporal 557,907 534,642 534,534 536,507 545,300 548,425 540,652 552,181 559,703 553,664 (g) Dia 36-42 a a a a a a a a a a Significância (ρ<0,05) Ingestão de ração (g) Dia 36- 55239 52704 53414 53264 54189 54180 54163 54646 55623 55191 42 a b a a a a a a a a Significância (ρ<0,05)

36 / 49

Pontuações de lesões e T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 oocistos Pontuações de lesões Dia 21 0,204 1,667 1,407 1,278 1,019 1,037 1,333 0,778 0,667 0,796 Significância (ρ<0,05) a e de cd bc bcd cde b b b Pontuações de lesões Dia 42 0,178 1,233 1,022 0,844 0,656 0,722 0,889 0,556 0,456 0,644 Significância (ρ<0,05) a f ef de bcd cd de bc b bcd

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 46/66 Oocistos coccidianos (log10) 4,820 5,423 5,294 5,243 5,125 5,138 5,286 5,046 5,116 5,042 Dia 21 a d cd bcd bc bc bcd abc bc ab Significância (ρ<0,05) Oocistos coccidianos (log10) 3,896 4,352 4,354 4,356 4,359 4,190 4,296 3,991 3,965 4,115 Dia 42 a d d d d cd d ab ab bc Significância (ρ<0,05) Bactéria intestinal T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 21 Incidência cecal de 7,407 72,222 75,926 62,963 59,259 51,852 59,259 40,741 33,333 53,704 Salmonella (%) Dia 21 a e e de de cd de bc b cd Significância (ρ<0,05) Cecal de APC cecal (log10) 8,303 10,821 10,139 9,872 9,344 9,115 9,385 8,919 8,886 9,131 Dia 21 36 / 49 a e de cd bc b bc ab ab bc Significância (ρ<0,05) Cecal de E.coli (log10) Dia 6,036 8,912 8,037 7,706 7,269 7,054 7,255 7,109 6,837 7,194 21 a e d cd bc bc bc bc b bc Significância (ρ<0,05) Cecal de Clostridium (log10) 3,522 4,560 4,404 4,307 4,216 4,121 4,390 3,969 3,636 3,967 Dia 21 a e de cde cd cd de bc ab cd Significância (ρ<0,05) Cecal de Campylobacter 3,400 4,455 4,281 4,281 4,168 4,023 4,340 3,696 3,636 3,967 (log10) Dia 21 a g efg efg def de fg bc ab cd Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmonela no 7,407 72,222 75,926 62,963 59,259 51,852 59,259 40,741 33,333 53,704 intestino delgado (%) Dia 21 a e e de de cd de bc b cd Significância (ρ<0,05) APC do Intestino Delgado 8,289 10,827 10,116 9,907 9,337 9,063 9,310 8,899 8,907 9,166 (log10) Dia 21 a e de cd bc b bc ab ab b Significância (ρ<0,05)

37 / 49 Bactéria intestinal T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 21 E. coli no Intestino Delgado 6,057 8,875 8,110 7,603 7,320 7,127 7,195 7,166 6,808 7,189 (log10) Dia 21 a e de cd bc bc bc bc ab bc Significância (ρ<0,05) Clostridium no Intestino 3,595 4,519 4,398 4,312 4,209 4,136 4,388 3,954 3,683 4,362 Delgado (log10) Dia 21 a e de de cde cd de bc ab de Significância (ρ<0,05)

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 47/66 Campylobacter no Intestino 3,343 4,489 4,390 4,425 4,243 4,074 4,414 3,834 3,576 3,956 Delgado (log10) Dia 21 a e e e de cd e bc ab c Significância (ρ<0,05) Bactéria intestinal T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 42 Incidência cecal de 10,000 78,889 80,000 75,556 56,667 71,111 75,556 41,111 28,889 48,889 Salmonella (%) Dia 42 a f f f de ef f bc b cd Significância (ρ<0,05) Cecal de APC (log10) Dia 42 8,231 10,679 10,098 9,505 9,750 9,370 9,647 8,946 9,322 9,407 Significância (ρ<0,05) a e de cd bc b bc ab ab bc Cecal de E.coli (log10) Dia 6,201 8,556 8,026 7,528 7,704 7,254 7,508 6,835 7,350 7,431 42 a e d bc cd bc cd b bc bc Significância (ρ<0,05) 37 / 49

Cecal de Clostridium (log10) 3,480 4,485 4,203 4254 4,277 4,059 4,165 3,975 3,678 4,042 Dia 42 a e de cde cd cd de bc ab cd Significância (ρ<0,05) Cecal de Campylobacter 3,330 4,243 4,343 4,096 3,940 3,950 4,055 3,778 3,521 3,930 (log10) Dia 42 a de e cd bc bc cd b a bc Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmonela no 10,000 78,889 80,000 75,556 56,667 71,111 75,556 41,111 28,889 48,889 intestino delgado (%) Dia 42 a f f f de ef f bc b cd Significância (ρ<0,05) APC do Intestino Delgado 8,248 10,705 10,131 9,499 9,807 9,393 9,663 8,985 9,316 9,420 (log10) Dia 42 a e d bc cd bc cd b bc cd Significância (ρ<0,05) E. coli no Intestino Delgado 6,200 8,598 8,044 7, 507 7,789 7, 254 7, 558 7, 840 7,356 7,472 (log10) Dia 42 a e de cd cd bc cd b bc cd Significância (ρ<0,05) Clostridium no Intestino 3,536 4,534 4,354 4,256 4,299 4,074 4,168 3,973 3,733 4,035

38 / 49 Bactéria intestinal T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 42 Delgado (log10) Dia 42 a e de cd bcd bc bcd b a bc Significância (ρ<0,05) Campylobacter no Intestino 3,339 4,276 4,384 4,106 3,930 3,957 4,088 3,829 3,531 4,002 Delgado (log10) Dia 42 a de a cd bc bc cd b a bc Significância (ρ<0,05) Dados do processamento

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 48/66 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 45 Incidência de Salmonella no 1,111 25,556 11,111 21,111 13,333 18,889 15,556 10,000 7,778 6,667 peito (%) Dia 45 a e bc de bcd cde bcd abc ab ab Significância (ρ<0,05) Clostridium no peito (log10) 1,984 3,200 3,208 2,870 2,979 2,660 2,683 2,599 2,724 2,937 Dia 45 a c c bc bc b b b b bc Significância (ρ<0,05) Campylobacter no peito 1,482 2,850 2,881 2,759 2,496 2,655 2,482 2,094 1,920 2,753 (log10) Dia 45 a d d d cd d cd bc ab d Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmonella na 2,222 24,444 11,111 22,222 13,333 20,000 15,556 10,000 11,111 7,778 Pele do Pescoço% Dia 45 a e abc de bcd cde bcde abc abc ab Significância (ρ<0,05) 38 / 49

Clostridium (log10) na pele 2,006 3,179 3,204 2,901 2,967 2,690 2,711 2,580 2,672 2,979 do pescoço Dia 45 a c c bc bc b b b b bc Significância (ρ<0,05) Campylobacter (log10) na 1,555 2,880 2,891 2,772 2,590 2,680 2,537 2,165 1,975 2,776 pele do pescoço Dia 45 a d d d cd d cd bc ab d Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmonella na 3,333 24,444 11,111 22,222 15,556 20,000 16,667 12,222 11,111 7,778 pele de asa (%) Dia 45 a e abc de bcde cde bcde abcd abc ab Significância (ρ<0,05) Clostridium (log10) na pele 2,068 3,170 3,173 2,880 3,007 2,697 2,694 2,610 2,756 2,937 da asa Dia 45 a d d bcd cd bc bc b bc bcd Significância (ρ<0,05) Campylobacter (log10) na 1,588 2,899 2,875 2,787 2,523 2,704 2,534 2,175 2,011 2,730 pele da asa Dia 45 a d d d cd d cd bc ab d Significância (ρ<0,05) NOTA: “Significância ρ<0,05” refere-se a média dentro de uma linha sem um sobrescrito comum são significativamente diferente (ρ<0,05)

39 / 49

Desafio severo: Dias 0-14 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 0 42,88 43,12 42,92 43,25 43,19 43,02 43,00 42,79 43,32 42,99 Significância (ρ<0,05) a a a a a a a a a a Peso médio corporal (g) Dia 14 385,37 363,45 367,14 372,08 376,88 377,89 371,29 380,80 383,01 378,50 Significância (ρ<0,05) a f ef cde bcd bc de ab ab bc Conversão de ração corrigida 1,03 1,09 1,08 1,07 1,05 1,06 1,07 1,04 1,04 1,05

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 49/66 Dia 0-14 a s cd bc ab ab bc ab a ab Significância (ρ<0,05) % Mortalidade Dia 0-14 1,28 5,34 4,06 3,21 2,56 2,35 2,99 1,92 1,28 1,92 Significância (ρ<0,05) a d cd bc ab ab bc ab a ab Ganho médio de peso corporal 342,49 320,33 324,22 328,83 333,69 334,87 328,29 338,01 339,68 335,51 (g) Dia 0-14 a e de cd bc bc cd ab ab b Significância (ρ<0,05) Coeficiente de variação do 10,36 10,64 10,68 10,31 10,83 10,26 10,82 10,21 10,58 10,75 peso corporal (Dia 14) a a a a a a a a a a Significância (ρ<0,05) abIngestão da ração (g) Dia 0- 18248 17505 17647 17874 17982 18127 17890 18119 18176 18037 14 Significância (ρ<0,05) a b ab ab ab a ab ab a 39 / 49

Dias 0-21 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 21 818,49 756,87 764,83 778,73 795,44 794,27 779,46 805,98 812,15 799,48 Significância (ρ<0,05) a f ef de c cd de abc ab bc Conversão de ração corrigida 1,25 1,33 1,32 1,30 1,28 1,28 1,30 1,26 1,25 1,27 Dia 0-21 a d d cd abc abc bcd a a ab Significância (ρ<0,05) % Mortalidade Dia 0-21 1,71 7,48 5,77 4,49 3,63 3,42 4,27 2,56 1,71 2,78 Significância (ρ<0,05) a e d cd bc bc c ab a ab Ganho médio de peso corporal 775,61 713,76 721,91 735,48 752,25 751,25 736,47 763,19 768,83 756,49 (g) Dia 0-21 a g fg ef cd cde def abc ab bc Significância (ρ<0,05) Coeficiente de variação do 14,28 15,97 15,26 15,01 15,08 14,56 15,32 14,10 13,97 14,71 peso corporal (Dia 21) abc e de bcd cde abcd de ab a abcd Significância (ρ<0,05) Ingestão da ração (g) Dia 0-21 49701 46959 47367 48342 48726 48844 48570 49215 49533 49015 Significância (ρ<0,05) a c bc abc ab ab abc a a ab

40 / 49 Dias 0-35 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 35 1941,558 1787,364 1809,321 1840,568 1884,889 1881,766 1841,616 1912,406 1927,171 1892,40 Significância (ρ<0,05) a e de d c c d abc ab bc Conversão de ração corrigida 1,634 1,754 1,732 1,715 1,681 1,680 1,711 1,658 1,644 1,666 Dia 0-35 a e de cde bc bc cd ab ab ab Significância (ρ<0,05) % Mortalidade Dia 0-35 2,174 9,179 7,005 5,556 4,348 4,106 5,314 3,140 2,415 3,623 Significância (ρ<0,05) a e d cd bc bc c ab a ab

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 50/66 Ganho médio de peso corporal 1898,677 1744,248 1766,398 1797,322 1841,695 1838,743 1798,618 1869,615 1883,849 1849,409 (g) Dia 0-35 a e de d c c d abc ab bc Significância (ρ<0,05) Coeficiente de variação do 11,297 12,392 12,574 12,401 11,933 11,813 12,109 11,769 12,040 12,067 peso corporal (Dia 35) a b b b ab ab ab ab ab ab Significância (ρ<0,05) Ingestão da ração (g) Dia 0-35 147801 137745 139767 142530 144959 144770 142986 146539 148063 144907 Significância (ρ<0,05) a d cd bcd abc abc abc ab a abc Dias 0-42 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Peso médio corporal (g) Dia 42 2499,686 2297,209 1220,995 2375,700 2422,914 2422,228 2375,662 2461,680 2482,201 2440,941 Significância (ρ<0,05) a e e d c c d abc ab bc Conversão de ração corrigida 1,782 1,913 1,899 1,868 1,831 1,828 1,870 1,807 1,794 1,819 40 / 49

Dia 0-42 a e de cd bc bc cde ab ab ab Significância (ρ<0,05) % Mortalidade Dia 0-42 2,174 9,662 7,488 5,797 4,348 4,589 5,556 3,382 2,415 3,865 Significância (ρ<0,05) a f e d cd cd d abc ab bc Ganho médio de peso corporal 2456,805 2254,094 2288,072 2332,454 2379,720 2379,204 2332,665 2418,890 2438,879 2397,949 (g) Dia 0-42 a e e d c c d abc ab bc Significância (ρ<0,05) Coeficiente de variação do 13,080 14,238 13,613 13,401 13,825 12,999 13,514 12,734 12,284 13,219 peso corporal (Dia 42) bc e cde bcd de bc cd ab a bcd Significância (ρ<0,05) Ingestão da ração (g) Dia 0-42 205959 190792 194529 198749 201234 2-1072 199809 203887 206132 202620 Significância (ρ<0,05) ab d cd bc abc abc abc ab a ab Dias 15-21 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Conversão de ração corrigida 1,318 1,384 1,375 1,373 1,343 1,352 1,372 1,331 1,325 1,341 Dia 15-21 a b ab ab ab ab ab ab ab ab Significância (ρ<0,05)

41 / 49 Dias 15-21 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 % Mortalidade Dia 15-21 0,427 2,137 1,709 1,282 1,068 1,068 1,282 0,641 0,427 0,855 Significância (ρ<0,05) a c bc abc abc abc abc ab a ab Ganho médio de peso corporal 433,121 393,424 397,687 406,651 418,562 416,377 408,177 425,174 429,148 420,980 (g) Dia 15-21 a d d cd abc bc cd ab ab abc Significância (ρ<0,05) Ingestão da ração (g) Dia 15- 29289 26547 26955 27930 28315 28433 28158 28803 29122 28604 21 Significância (ρ<0,05) a c bc abc av ab abc a a ab

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 51/66 Dias 22-35 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Conversão de ração corrigida 1,756 1,823 1,807 1,827 1,789 1,790 1,815 1,775 1,763 1,777 Dia 22-35 a a a a a a a a a a Significância (ρ<0,05) % Mortalidade Dia 22-35 0,465 1,700 1,236 1,068 0,715 0,687 1,041 0,576 0,706 0,845 Significância (ρ<0,05) a b ab ab a a ab a a a Ganho médio de peso corporal 1123,070 1030,491 1044,489 1061,839 1089,445 1087,497 1062,153 1106,429 1115,016 1092,922 (g) Dia 22-35 a c c bc ab ab bc a a a Significância (ρ<0,05) Ingestão da ração (g) Dia 22- 88834 78778 80800 83563 85992 85803 84019 87572 89096 85940 35 Significância (ρ<0,05) a d cd bcd abc abc abc ab a abc Dias 36-42 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 41 / 49

Conversão de ração corrigida 2,318 2,497 2,474 2,434 2,377 2,380 2,449 2,351 2,324 2,362 Dia 36-42 a a a a a a a a a a Significância (ρ<0,05) % Mortalidade Dia 36-42 0,000 0,483 0,483 0,242 0,000 0,483 0,242 0,242 0,000 0,242a Significância (ρ<0,05) a a a a a a a a a a Ganho médio de peso corporal 558,128 509,846 521,675 535.132 538,021 540,462 534,046 549,275 555,030 548,541 (g) Dia 36-42 a a a a a a a a a a Significância (ρ<0,05) Ingestão da ração (g) Dia 36- 58159 53047 54762 56219 56275 56303 56824 57348 58069 57714 42 a a a a a a a a a a Significância (ρ<0,05) Pontuação de lesões e T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 oocistos Pontuação de lesões Dia 21 0,389 2,093 1,611 1,463 1,037 1,185 1,333 0,778 0,519 0,907 Significância (ρ<0,05) a g f ef cde cdef def abc ab bcd Pontuação de lesões Dia 42 0,167 1,733 1,444 1,244 1,078 0,956 1,178 0,500 0,378 0,711

42 / 49 Pontuação de lesões e T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 oocistos Significância (ρ<0,05) a g fg ef e de ef bc ab cd Oocitos coccidianos (log10) 4,925 5,497 5,410 5,317 5,215 5,222 5,379 5,124 4,923 5,191 Dia 21 Significância (ρ<0,05) a e de bcde bcd bcd cde ab a bc Oocitos coccidianos (log10) 4,054 4,563 4,411 4,447 4,285 4,420 4,396 4,224 4,135 4,254 Dia 42 Significância (ρ<0,05) a e cde de bcd cde cde abc ab abcd Bactéria intestinal Dia 21 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 52/66 Incidência cecal de 14,815 70,370 87,037 77,778 57,407 66,667 72,222 42,593 14,815 57,407 Salmolnella (%) Dia 21 a cde e de bc cd cde b a bc Significância (ρ<0,05) Incidência cecal de APC (log 8,328 10,562 10,739 9,839 9,926 9,874 10,100 9,316 9,511 9,352 10) Dia 21 Significância a de e bc bcd bc cde b bc b (ρ<0,05) Incidência cecal de E. coli 6,065 8,557 8,751 7,708 7,940 7,743 8,001 7,175 7,222 7,223 (log 10) Dia 21 Significância a de e bc cd bc cd b b b (ρ<0,05) Incidência cecal de 3,677 4,705 4,453 4,403 4,399 4,513 4,471 4,020 3,784 4,219 Clostridium (log 10) Dia 21 a e de de de de de bc ab cd Significância (ρ<0,05) Incidência cecal de 3,517 4,717 4,440 4,406 4,222 4,073 4,161 3,819 3,757 4,142 42 / 49

Campylobacter (log 10) Dia a f ef e de cd de bc ab cd 21 Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmolnella no 14,815 70,370 87,037 77,778 57,407 66,667 72,222 42,593 14,815 57,407 intestino delgado (%) Dia 21 a cde e de bc cd cde b bc bc Significância (ρ<0,05) APC (log 10) no intestino 8,344 10,552 10,824 9,839 9,983 9,850 10,144 9,292 9,519 9,493 delgado Dia 21 Significância a de e bc cd bc cd b bc bc (ρ<0,05) E. coli (log 10) no intestino 6,041 8,460 8,719 7,650 7,944 7,745 8,032 7,213 7,224 7,264 delgado Dia 21 Significância a de e bc bcd bcd cde b b b (ρ<0,05) Clostridium (log 10) no 3,742 4,719 4,389 4,426 4,343 4,517 4,397 4,057 3,779 4,165 intestino delgado Dia 21 a e bcde cde bcd de cde ab a bc Significância (ρ<0,05) Campylobacter (log 10) no 3,547 4,691 4,423 4,350 4,160 4,162 4,183 3,741 3,670 4,174

43 / 49 intestino delgado Dia 21 a c bc b b b b a a b Significância (ρ<0,05) Bactéria intestinal Dia 42 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Incidência cecal de 13,333 84,444 78,889 74,444 66,667 56,667 72,222 38,889 20,000 52,222 Salmolnella (%) Dia 42 a f ef ef de cd ef b a c Significância (ρ<0,05) Incidência cecal de APC (log 9,079 11,088 10,585 10,465 9,779 9,658 9,785 9,517 9,792 10,013 10) Dia 42 Significância

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 53/66 a e de cd b b b ab b bc (ρ<0,05) Incidência cecal de E. coli 7,050 9,108 8,371 8,386 7,795 7,507 7,663 7,369 7,712 7,774 (log 10) Dia 42 Significância a e cd d bc ab b ab b b (ρ<0,05) Incidência cecal de 3,502 4,576 4,465 4,415 4,255 4,218 4,257 4,140 3,866 4,103 Clostridium (log 10) Dia 42 a f ef def cde cd cde c b bc Significância (ρ<0,05) Incidência cecal de 3,574 4,371 4,427 4,339 4,356 4,046 4,220 4,044 3,866 4,103 Campylobacter (log 10) Dia a cd d cd cd b bcd b a bc 42 Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmolnella no 13,333 84,444 78,889 74,444 66,667 56,667 72,222 38,889 20,000 52,222 intestino delgado (%) Dia 42 a f ef ef de cd ef b a c Significância (ρ<0,05) 43 / 49

APC (log 10) no intestino 9,111 11,110 10,575 10,357 9,773 9,686 9,747 9,538 9,824 10,025 delgado Dia 42 Significância a e d cd bc ab b ab b bcd (ρ<0,05) E. coli (log 10) no intestino 6,997 9,089 8,440 8,400 7,823 7,531 7,665 7,382 7,730 7,884 delgado Dia 42 Significância a e d cd bc ab b ab b bcd (ρ<0,05) Clostridium (log 10) no 3,486 4,606 4,505 4,452 4,278 4,168 4,290 4,168 3,989 4,205 intestino delgado Dia 42 a f ef def cde bc cde bc b bcd Significância (ρ<0,05) Campylobacter (log 10) no 3,549 4,434 4,418 4,421 4,277 4,119 4,313 4,023 3,657 4,079 intestino delgado Dia 42 a d d d cd bc cd b a bc Significância (ρ<0,05) Dados do processamento T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 45 Incidência de Salmonella no 0,000 20,000 13,333 13,333 11,111 11,111 22,222 10,000 10,000 15,556

44 / 49 Dados do processamento T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 Dia 45 peito (%) Dia 45 a cd bcd bcd bc bc d bcd b bcd Significância (ρ<0,05) Clostridium no peito (log10) 2,038 3,391 3,088 3,068 3,085 3,066 3,005 2,605 2,448 2,958 Dia 45 a e de de de de d bc b cd Significância (ρ<0,05) Campylobacter no peito 1,646 3,175 2,879 2,806 2,437 2,809 2,600 2,337 1,857 2,324

Petição 870200158946, de 18/12/2020, pág. 54/66 (log10) Dia 45 a d c c b c bc b a b Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmonella na 1,111 20,000 14,444 15,556 12,222 13,333 22,222 15,556 13,333 15,556 Pele do Pescoço% Dia 45 a bc bc bc b bc c bc bc bc Significância (ρ<0,05) Clostridium (log10) na pele 2,051 3,387 3,123 3,080 3,074 3,017 3,049 2,628 2,471 2,995 do pescoço Dia 45 a e de de de d de bc b cd Significância (ρ<0,05) Campylobacter (log10) na 1,697 3,258 2,862 ,2844 2,520 2,828 2,638 2,336 1,820 2,381 pele do pescoço Dia 45 a e d cd bc cd bcd b a b Significância (ρ<0,05) Incidência de Salmonella na 1,111 20,000 14,444 16,667 13,333 14,444 24,444 15,556 13,333 16,667 pele de asa (%) Dia 45 a bc b bc b b c bc b bc 44 / 49

Significância (ρ<0,05) Clostridium (log10) na pele 2,121 3,374 3,091 3,065 3,051 3,015 2,984 2,628 2,512 3,014 da asa Dia 45 a e de de de de cd bc b de Significância (ρ<0,05) Campylobacter (log10) na 1,702 3,214 2,943 2,800 2,481 2,831 2,654 2,383 1,867 2,357 pele da asa Dia 45 a e de cd bc cd bcd b a b Significância (ρ<0,05) NOTA: “Significância (ρ<0,05)” refere-se a médias dentro de uma linha sem um sobrescrito comum são significativamente diferentes (ρ<0,05) conforme determinado pela Diferença Menos Significativa

45 / 49 Exemplo 2: Porcos desafiados com E. coli

[0061] Leitões desmamados precocemente (18 dias de idade) foram tratados em 8 repetições por 21 dias. Os animais de estudo ficaram sem um antimicrobiano terapêutico por qualquer via de 8 dias antes do desafio e sem história de vacinação contra os patógenos de desafio. Os suínos podem ser vacinados contra circovírus e M. hyo ao desmame.

[0062] Os porcos recebem ração e água ad libitum ao longo do estudo.

[0063] Os porcos são alimentados com ração lenta e ração de berçário. “Ração lenta” é um alimento que contém o artigo de teste, antibiótico (Avilamicina, 80 ppm) ou nenhum artigo de teste e é provido como alimentação lenta de aproximadamente 10 dias de idade (dia de teste -8 do estudo até o desmame) até um peso alvo de 4-5 kg. A “ração de berçário” é uma ração que contém o artigo de teste, antibiótico (Avilamicina, 80 ppm) ou nenhum artigo de teste e é provido a partir do dia 0 (desmame) ao 21.

[0064] No Dia de Estudo 5, porcos do estudo dos grupos de tratamento 2, 3 e 5 são desafiados oralmente com desafio de E. coli de acordo com o seguinte esquema: Descrição do Grupo de Nº de Administração do Via de Via do desafio/Dia de tratamento animais tratamento/Dia de Estudo tratamento desafio/Volume Estudo Dieta de ração lenta e de T1 32 Oral na ração Nenhum Não aplicável berçário sem Monobutirina Escherichia coli, Dieta de ração lenta e de T2 32 Oral na ração ca. 10^4 cfu/ml, Oral, 5 ml berçário sem Monobutirina Dia 5 Dieta de ração lenta e de Escherichia coli, berçário com Monobutirina T3 32 Oral na ração ca. 10^4 cfu/ml, Oral, 5 ml 3 kg/MT Pré- & Pós- Dia 5 desmame Dieta de ração lenta sem Monobutirina Pré- T4 32 desmame; Dieta de berçário Oral na ração Nenhum Não aplicável com Monobutirina3 kg/MT Pós-desmame Dieta de ração lenta e de Escherichia coli, T5 32 berçário com Avilamicina Oral na ração ca. 10^4 cfu/ml, Oral, 5 ml 80 ppm Pré- e Pós-desmame Dia 5

46 / 49 Dia Descrição Observações Gerais de Saúde 2x por dia; Marcas auriculares duplicadas; Questão de alimentação -8 a 0 lenta Observações Gerais de Saúde 2x por dia; Necropsia, peso corporal e pontuação do íleo em 0 a 21 quaisquer remoções; Questão de alimentação de berçário conforme necessário Designar porcos aleatoriamente para cercados do berçário; Coleta de peso corporal; Coleção fecal 0 2 porcos/baia Desafio prévio de coleta de peso corporal; Coleção fecal, 2 porcos/ baia; Pontuação clínica e fecal 5 antes do desafio; Desafio de E. Col 5 a 21 Pontuação clínica e fecal diária; 7 Coleta de peso corporal; Questão de alimentação e pesagem; Coleção fecal 2 porcos/baia Coleta de peso corporal; Problema de ração e pesagem; Coleta fecal 2 porcos/baia; Pontuação de 14 necropsia e íleo de 1 marrã por baia Coleta de peso corporal; Questão de alimentação e pesagem; Eutanásia em todos os porcos 21 restantes; Pontuação de necropsia e íleo em todos os porcos restantes; Disposição de Animais; Disposição de alimentação

[0065] Para todos os ensaios, o peso corporal médio no dia 0 foi de aproximadamente 5 kg e o coeficiente de variação do peso corporal médio não foi significativamente diferente (ρ <0,05).

[0066] No dia 5, os pesos corporais para os tratamentos T3 e T5 foram significativamente (ρ<0,05) maiores do que para T1 e T2, o coeficiente de variação do peso corporal médio não foi significativamente diferente (ρ<0,05) para todos os tratamentos.

[0067] O ganho de peso corporal (g por porco e dia) no período dos dias de ensaio 0-5 foi significativamente maior para os tratamentos T3, T4 e T5 em comparação com T1 e T2 (ρ<0,05). O consumo de ração (g por porco e dia) e a mortalidade não foram significativamente diferentes (ρ<0,05) para todos os tratamentos durante os dias 0-5.

[0068] No dia 14, o peso corporal médio para o tratamento T2 foi significativamente (ρ<0,05) menor (cerca de 8 kg) do que para todos os outros tratamentos; os pesos corporais médios dos tratamentos T1 e T4 não foram significativamente (ρ<0,05) diferentes (cerca de 8,8 kg vs. cerca de 9,1 kg), os pesos corporais médios dos tratamentos T1 e T3 e T5 não foram significativamente (ρ<0,05) diferentes (cerca de 8,8 kg vs. cerca de 8,7 e cerca de 8,7 kg). Os pesos corporais médios dos tratamentos T3 e T5 foram significativamente (ρ<0,05) maiores do que para o tratamento T2. O coeficiente de variação do peso corporal médio não foi significativamente

47 / 49 diferente (ρ<0,05) para os tratamentos T1, T3, T4 e T5; o coeficiente de variação do peso corporal médio foi significativamente maior (ρ<0,05) para o tratamento T2 em comparação com todos os outros tratamentos.

[0069] O ganho de peso corporal (g por porco e dia) no período dos dias de ensaio 0-14 foi significativamente maior para os tratamentos T1, T3, T4 e T5 em comparação com T2 (ρ<0,05) e não diferiu significativamente (ρ<0,05) entre os tratamentos T1, T3 e T5. O ganho de peso corporal (g por porco e dia) no período dos dias 0-14 do ensaio foi significativamente maior para o tratamento T4 em comparação com todos os outros tratamentos (ρ<0,05). O consumo de ração (g por porco e dia) não foi significativamente diferente (ρ<0,05) para todos os tratamentos durante os dias 0-14. A mortalidade para o tratamento T2 foi significativamente maior (ρ<0,05) em comparação com todos os outros tratamentos; nenhuma diferença significativa na mortalidade foi observada entre os tratamentos T1, T3, T4 e T5 (ρ<0,05).

[0070] No dia 21, o peso corporal médio para o tratamento T2 foi significativamente (ρ<0,05) menor (cerca de 14,5 kg) do que para todos os outros tratamentos; os pesos corporais médios dos tratamentos T1, T3, T4 e T5 não foram significativamente (ρ<0,05) diferentes (cerca de 16 kg, cerca de 16 kg, cerca de16,2 kg e cerca de 16 kg, respectivamente). O coeficiente de variação do peso corporal médio não foi significativamente diferente (ρ<0,05) para os tratamentos T1, T3, T4 e T5; o coeficiente de variação do peso corporal médio foi significativamente maior (ρ<0,05) para o tratamento T2 em comparação com todos os outros tratamentos.

[0071] O ganho de peso corporal (g por porco e dia) no período dos dias de ensaio 0-21 foi significativamente maior para os tratamentos T1, T3, T4 e T5 em relação ao T2 (ρ<0,05); no mesmo período, o ganho de peso corporal foi significativamente (ρ<0,05) maior para o tratamento T4 em comparação aos tratamentos T3 e T5 e não diferiu significativamente (ρ<0,05) do tratamento T1. O consumo de ração (g por porco e dia) não foi

48 / 49 significativamente diferente (ρ<0,05) para todos os tratamentos durante os dias 0-21. A mortalidade para o tratamento T2 foi significativamente maior (ρ<0,05) em comparação com todos os outros tratamentos; nenhuma diferença significativa na mortalidade foi observada entre os tratamentos T1, T3, T4 e T5 (ρ<0,05). Exemplo 3: Camarão

[0072] Este ensaio foi desenvolvido para testar a eficácia dos aditivos alimentares Amasil NA e dietas suplementadas com monobutirina que foram alimentados a Penaeus vannamei (cria de Konabay Hawaii) por 10 dias. Após 10 dias de alimentação (pré-desafio), os camarões experimentais foram submetidos a um teste de desafio com EMS/AHPND causando Vibrio parahaemolyticus e as taxas de sobrevivência foram registradas diariamente até 10 dias.

[0073] A ração usada neste experimento é uma ração comercial “ração para camarão LOTUS” fabricada pela CP Foods (Vietnã) e é misturada com Monobutirina (6 kg/MT e 6 kg/MT), Amasil NA (3kg/MT) e Monobutirina e Amasil NA (cada 3 kg/MT) usando um método de extrusão a frio. Os aditivos para ração são misturados com a ração de tamanho nº 0 para camarão (ração em pó, partículas finas) e ligados com carboximetilcelulose (CMC) e umidade antes de serem extrudados usando um moedor de carne pressurizado. A mistura extrudada é então seca a 50°C durante 6 horas. A umidade final da ração não ultrapassou 11%. A ração é amassada em grânulos com cerca de 1,5-2 mm de comprimento. As rações em grânulos acabados são armazenados em recipientes plásticos a 4°C até o uso.

[0074] Um dia antes do início do estudo, trinta e cinco pós-larvas de P. vannamei SPF pesando ~ 1,5 g foram transferidas para 48 tanques de 120 l contendo 90 l de água do mar (salinidade a 15 ppt). Os tanques são aerados continuamente para manter níveis ideais de oxigênio. Todos os aquários são equipados com um filtro submerso coberto com plástico para reduzir o risco

49 / 49 de contaminação cruzada. Ao longo do experimento, um regime de alimentação de saciedade é adotado para todos os tanques. Todos os tanques são alimentados até a saciedade quatro vezes por dia.

[0075] Uma cepa virulenta de Vibrio parahaemolyticus é inoculada em Caldo de Soja Tríptico + cloreto de sódio a 2% (TSB+). As culturas são incubadas durante 24 horas a 28°C a 150 rpm. A densidade bacteriana é medida por absorbância de densidade óptica (OD600 nm). Um volume suficiente de suspensão bacteriana é adicionado diretamente aos tanques de desafio para matar 80-100% dos camarões no controle positivo em cinco dias.

[0076] As mortes do camarão começaram no segundo dia após o desafio. Os sinais clínicos incluíram: camarão sem alimentação, intestino e estômago vazios, hepatopâncreas pálido atrofiado. Os tanques de controle positivo pareciam estar infectados e sofreram uma rápida mortalidade. O pico de mortalidade aconteceu no dia 3 após o desafio, após o qual os resultados dos mortais se equilibraram e permaneceram planos para o resto do desafio. Maior porcentagem de sobrevivência é observada para camarões alimentados com AMASIL NA ou Monobutirina e maior porcentagem de sobrevivência é esperada para camarões alimentados com AMASIL NA e Monobutirina.

[0077] A alimentação pré-desafio não teve efeito significativo na mortalidade dos camarões antes do desafio.

Claims (16)

REIVINDICAÇÕES

1. Composição, caracterizada pelo fato de compreende - ácido fórmico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, - glicerol e - um ou mais glicerídeos de ácido butírico e, opcionalmente, ácido butírico, em que a) ácido fórmico, glicerol e um ou mais glicerídeos de ácido butírico estão presentes em quantidades sinérgicas e/ou b) a razão em peso de glicerol para o total de glicerídeos de ácido butírico é de 1:10 a 10:1, e/ou c) a razão em peso de ácido fórmico para o total de glicerídeos de ácido butírico e glicerol é de 1:15 a 20:1, e/ou d) a quantidade total de ácido fórmico, glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 10% em peso a 100% em peso da composição total.

2. Composição de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a) a concentração de ácido fórmico é de 1 a 15 g por kg da composição total, de preferência 3 a 8 g/kg, e/ou b) a concentração do total de glicerol e glicerídeos de ácido butírico é de 0,5 a 30 g por kg da composição total, de preferência de 0,8 a 20 g/kg.

3. Composição de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a composição é uma composição de ração para aves domésticas, ruminantes, porcos, peixes ósseos e/ou camarões, peixes ósseos, incluindo ovos, alevinos, peixes juvenis e peixes adultos,

moluscos, incluindo ovos, larvas, moluscos juvenis e adultos.

4. Composição de ração de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que compreende ainda um ou mais dentre: i) carboidratos ii) lipídios iii) proteínas iv) aminoácidos, v) sais (exceto sais de ácido fórmico) e/ou minerais, vi) vitaminas, vii) prebióticos, viii) probióticos.

5. Composição de ração de acordo com a reivindicação 3 ou 4, caracterizada pelo fato de que a composição de ração é uma a) composição de ração inicial que compreende - ácido fórmico (de preferência sal de Na do mesmo) em uma concentração de 1 a 8 g/kg, e - glicerol e glicerídeo de ácido butírico - em uma razão em peso de 1:10 a 10:1 e/ou - em uma concentração total de 1 a 8 g/kg; b) composição de ração produtora que compreende - ácido fórmico (de preferência sal de Na do mesmo) em uma concentração de 1 a 6 g/kg, e - glicerol e glicerídeo de ácido butírico - em uma razão de peso de 1:10 a 10:1, e/ou - em uma concentração total de 0,1 a 6 g/kg; c) composição de ração finalizadora que compreende - ácido fórmico (de preferência seu sal de Na) em uma concentração de 1 a 4 g/kg, e - glicerol e glicerídeo de ácido butírico

- em uma razão em peso de 1:10 a 10:1, e/ou - em uma concentração total de 0,1 a 4 g/kg.

6. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de que a composição é - uma composição sólida, de preferência na forma de um grânulo ou extrudado ou farinha, ou - uma composição líquida, de preferência compreendendo 30 a 99,999% em peso de água.

7. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento ou prevenção de infecções microbianas ou distúrbios associados a infecções microbianas em um animal.

8. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de ser para uso como medicamento, de preferência um medicamento veterinário.

9. Formulação veterinária, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade eficaz de - ácido fórmico e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, - glicerol e - um ou mais glicerídeos de ácido butírico e, opcionalmente, ácido butírico.

10. Composição antimicrobiana para o tratamento de um animal, caracterizada pelo fato de que compreende ou consiste em uma composição como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 9.

11. Composição antimicrobiana para a prevenção ou tratamento de infecções por um microrganismo selecionado do grupo que consiste em i) alveolatos, de preferência por um microrganismo da classe

Aconoidasida ou Conoidasida, ainda mais preferencialmente da ordem Haemosporida ou Piroplasmida ou da subclasse Coccidia ou Gregarinasina, ii) microrganismos da ordem Enterobacterales, Vibrionales, Desulfovibrionales, Pseudomonadales, Burkholderiales ou Campylobacterales, iii) microrganismos da ordem Clostridiales, Bacillales ou Lactobacillales em um animal, caracterizada pelo fato de que compreende ou consiste em uma composição como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 10.

12. Composição antimicrobiana, caracterizada pelo fato de ser para uso em um animal para reduzir, em comparação com um controle não tratado, i) a pontuação da lesão do intestino delgado, ii) a contagem de oocistos coccidiais do intestino delgado e/ou iii) no ceco, intestino delgado, carne de peito, carne de asa e/ou pele do pescoço qualquer um dos: a incidência de um microrganismo como definido na reivindicação 11, o título de um microrganismo como definido na reivindicação 11, e a APC.

13. Uso de uma composição como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de ser para melhorar um ou mais de - ganho de peso corporal - coeficiente de variação do peso corporal - taxa de conversão alimentar - porcentagem de sobreviventes - ingestão de ração - taxa de natalidade - qualidade do ovo

- eclodibilidade em um animal.

14. Regime de alimentação, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de administração a um animal a) uma composição de ração inicial como definida na reivindicação 5 por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração produtora como definida na reivindicação 5 por um segundo período de tempo, b) uma composição de ração inicial como definida na reivindicação 5 por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração finalizadora como definida na reivindicação 5 por um segundo período de tempo, c) uma composição de ração inicial como definida na reivindicação 5 por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração produtora como definida na reivindicação 5 por um segundo período de tempo e, posteriormente, uma composição de ração finalizadora como definida na reivindicação 5 por um terceiro período de tempo, ou d) uma composição de ração produtora como definida na reivindicação 5 por um primeiro período de tempo e, posteriormente, uma composição finalizadora como definida na reivindicação 5 por um segundo período de tempo, ou e) uma composição de ração inicial de acordo com a reivindicação 5 para um primeiro período de tempo e opcionalmente, posteriormente, uma ração probiótica.

15. Regime de alimentação de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que o animal é selecionado a partir de i) animais aquáticos, preferencialmente peixes ósseos ou crustáceos,

ii) animais terrestres, por exemplo gado, aves domésticas, caça e animais de estimação, de preferência ruminantes, cavalos, porcos, coelhos, aves domésticas ou animais de estimação.

16. Método para criar um animal, caracterizado pelo fato de que compreende alimentar o animal com a composição como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 12.