BR112020017561A2 - Compostos com atividade indutora de ferroptose e métodos de seu uso - Google Patents

Compostos com atividade indutora de ferroptose e métodos de seu uso Download PDF

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BR112020017561A2
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c6alkenyl
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halo
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BR112020017561-7A
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Chun Jiang
Ruihong Chen
Anjali Pandey
Biswajit KALITA
Athisayamani Jeyaraj Duraiswamy
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Ferro Therapeutics, Inc.
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Abstract

a presente invenção refere-se a compostos com atividade indutora de ferroptose, um método de tratamento de um sujeito com câncer com compostos e tratamentos de combinação com um segundo agente terapêutico.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “COMPOSTOS COM ATIVIDADE INDUTORA DE FERROPTOSE E MÉTODOS DE USO DOS MESMOS”.
REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS
[001] Este pedido reivindica o benefício disposto no Título do 35 USC §119(e) do Pedido Provisório nº U.S. 62/636.614, depositado em 28 de fevereiro de 2018, a totalidade do qual é aqui incorporado por referência.
ANTECEDENTES
[002] A radioterapia e a terapia de fármaco representam dois dos tipos mais comuns de tratamentos contra o câncer. Alguns tipos de radioterapia usam feixes de fótons focalizados de alta energia para destruir células cancerosas. A radiação de fótons inclui raios X e raios gama. A radioterapia também pode empregar radiação de partículas, que inclui feixes de elétrons, prótons e nêutrons. A radiação pode ser usada como uma terapia curativa para uma série de tipos de câncer, ou usada em combinação com outros tratamentos, por exemplo, antes da cirurgia ou quimioterapia para reduzir a carga tumoral inicial e para destruir qualquer célula cancerosa remanescente após essa terapia. A radioterapia atua danificando o DNA das células cancerosas, seja por ionização direta ou indireta dos átomos que compõem a cadeia de DNA. A ionização indireta ocorre através da geração de espécies reativas de oxigênio (ROS), particularmente radicais hidroxila, que, então, danificam o DNA. No entanto, os mecanismos pelos quais o dano ao DNA leva à morte celular parecem ser complexos, atuando por meio de uma infinidade de vias de sinalização celular que regulam diferentes processos de morte celular. Esses processos incluem apoptose, catástrofe mitótica, necrose, senescência e autofagia. Vários genes e vias intracelulares foram relatados como estando envolvidos nos diferentes tipos de morte celular induzida por radiação. A apoptose foi associada aos componentes celulares ATM, p53, Bax, Citocromo C e Caspases, enquanto a catástrofe mitótica parece implicar os componentes celulares p53, Caspases e Citocromo c. A necrose tem sido associada a TNF (alfa), PAR, JNK e Caspases, enquanto a senescência está associada, entre outros, aos componentes celulares MYC, INK4A, ARF, p53 e p21. Com a autofagia, as moléculas celulares PI3K, Akt e mTOR podem estar envolvidas.
[003] A quimioterapia pode ter como alvo diferentes componentes da maquinaria celular e pode ter efeitos terapêuticos sinérgicos quando usada em combinação com a radioterapia. A quimioterapia pode ser inespecífica, hormonal ou direcionada. Os agentes quimioterapêuticos inespecíficos são geralmente agentes citotóxicos que tipicamente afetam a divisão celular e incluem, entre outros, classes de agentes, tais como agentes alquilantes, antimetabólitos, agentes antimicrotúbulos, inibidores de topoisomerase, antibióticos citotóxicos e complexos de coordenação à base de platina. A terapia contra câncer à base de hormônios é usada para tratar cânceres sensíveis aos hormônios (por exemplo, câncer de próstata e câncer de mama), direcionando o sistema endócrino usando hormônios específicos ou fármacos que inibem a produção ou atividade de tais hormônios (antagonistas hormonais). Os agentes quimioterapêuticos hormonais incluem, entre outros, inibidores de aromatase, análogos de GnRH, moduladores seletivos do receptor de estrogênio, antiandrogênios, estrogênios e progestogênios. A quimioterapia direcionada tenta superar o extermínio não discriminatório de células não cancerosas por agentes quimioterapêuticos citotóxicos tradicionais, agindo em alvos celulares específicos. Tipos de agentes quimioterapêuticos direcionados incluem agentes antiangiogênese, agentes indutores de apoptose, agentes de diferenciação e inibidores de transdução de sinal. Algumas formas de terapia direcionada usam agentes citotóxicos não específicos tradicionais, mas formulados para entrega específica às células cancerosas ou entregues de forma a localizar o fármaco no local do tumor. No entanto, a maior parte da quimioterapia, seja não específica ou direcionada, em última análise envolve processos de extermínio celular que também estão implicados no extermínio induzido por radiação de células cancerosas. Outros agentes quimioterapêuticos que, indiretamente ou diretamente, induzam a morte de células cancerosas são desejáveis.
SUMÁRIO
[004] A presente divulgação se refere a compostos com atividade indutora de ferroptose e métodos de uso dos compostos para tratamento de câncer. Em certas modalidades, é fornecido aqui um composto de fórmula (I): (I)
[005] ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[006] o anel A é C4-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila;
[007] X é NR5, O ou S;
[008] p é 0, 1, 2 ou 3;
[009] q é 0, 1, 2 ou 3;
[010] R1 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1- C6haloalquila, C3-C10cicloalquila, -CN, -OH,-C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, - OC(O)R6, -S(O)2R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -S(O)R8, -NH2, -NHR8, - N(R8)2, -NO2, -OR8, -C1-C6alquil-OH, -C1-C6alquil-OR8, ou -Si(R15)3;
[011] R2 é -C(O)R9;
[012] cada R3 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, - Si(R12)3, -SF5, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, - OC(O)N(R7)2, -OC(O)R8, -C(O)R6, -OC(O)CHR8N(R12)2, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1- C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1- C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila de R3 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10;
[013] cada R4 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, - Si(R15)3, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -OC(O)R8, -C(O)R6, - NR12C(O)OR8, -OC(O)N(R7)2, -OC(O)CHR8N(R12)2, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1- C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1- C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila de R4 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10;
[014] R5 é hidrogênio ou C1-C6alquila;
[015] cada R6 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila, C2-
C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada R6 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R11;
[016] cada R7 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C6cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C6cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, -C1-C6alquil-heteroarila, -C2- C6alquenil-heteroarila, ou dois R7 juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, formam uma heterociclila de 4 a 7 membros; em que cada R7 ou anel formado desse modo é, independentemente, adicionalmente substituído por um a três R11;
[017] cada R8 é, independentemente, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1- C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1- C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, -C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila; em que cada R8 é, independentemente, adicionalmente substituído por um a três R11;
[018] R9 é -C1-C2haloalquila, -C2-C3alquenila, -C2-C3haloalquenila, C2alquinila ou -CH2OS(O)2-fenila, em que C1-C2alquil-halo e -C2- C3alquenil-halo são opcionalmente substituídos por um ou dois -CH3, e a C2alquinila e fenila são opcionalmente substituídas por um -CH3;
[019] cada R10 é, independentemente, halo, -CN, -OR12, -NO2, - N(R12)2, -S(O)R13, -S(O)2R13, -S(O)N(R12)2, -S(O)2N(R12)2, -Si(R12)3, - C(O)R12, -C(O)OR12, -C(O)N(R12)2, -NR12C(O)R12, -OC(O)R12, - OC(O)OR12, -OC(O)N(R12)2, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1-
C6alquila, C1-C6haloalquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila, em que cada C1- C6alquila, C1-C6halogenoalquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila de R10 é opcionalmente independentemente substituído por um a três R11;
[020] cada R11 é, independentemente, halo, -CN, -OR12, -NO2, - N(R12)2, -S(O)R13, -S(O)2R13, -S(O)N(R12)2, -S(O)2N(R12)2, -Si(R12)3, - C(O)R12, -C(O)OR12, -C(O)N(R12)2, -NR12C(O)R12, -OC(O)R12, - OC(O)OR12, -OC(O)N(R12)2, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1- C6alquila, C1-C6haloalquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila;
[021] cada R12 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila;
[022] cada R13 é, independentemente, C1-C6alquila ou C3- C10cicloalquila; e
[023] cada R15 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, -C1- C6alquil-heteroarila, e -C2-C6alquenil-heteroarila.
[024] Em certas modalidades, os compostos são usados em um método de inibir GPX4 em uma célula, compreendendo o contato de uma célula com uma quantidade eficaz do composto aqui descrito para inibir GPX4 na célula. Em certas modalidades, a célula é uma célula cancerosa.
[025] Em certas modalidades, os compostos são usados em um método de tratamento de câncer em um sujeito, compreendendo a administração a um sujeito com câncer de uma quantidade terapeuticamente eficaz dos compostos indutores de ferroptose. Vários cânceres para tratamento com os compostos incluem, mas não estão limitados a, câncer adrenocortical, câncer anal, câncer biliar, câncer de bexiga, câncer ósseo, gliomas, astrocitoma, neuroblastoma, câncer de mama, câncer cervical, câncer de cólon, câncer endometrial, câncer de esôfago, câncer de cabeça e pescoço, câncer intestinal, câncer de fígado, câncer de pulmão, câncer oral, câncer de ovário, câncer de pâncreas, câncer renal, câncer de próstata, câncer de glândula salivar, câncer de pele, câncer de estômago, câncer testicular, câncer de garganta, câncer de tireoide, câncer uterino, câncer vaginal, sarcoma e carcinomas de tecidos moles. Em certas modalidades, o composto é usado para tratar câncer pancreático.
[026] Em certas modalidades, é fornecido um método para tratar um câncer em um paciente em necessidade, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida. Em certas modalidades, o câncer é carcinoma de células renais (RCC), câncer pancreático, câncer de pulmão, câncer de mama ou câncer de próstata. Em certas modalidades, é fornecido um método para o tratamento de carcinoma de células renais (RCC) em um paciente em necessidade, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida. Em certas modalidades, é fornecido um método para tratar um câncer pancreático em um paciente em necessidade, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida. Em certas modalidades, é fornecido um método para tratar um câncer de pulmão em um paciente em necessidade, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida. Em certas modalidades, é fornecido um método para o tratamento do câncer de mama em um paciente em necessidade, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida. Em certas modalidades, é fornecido um método para o tratamento do câncer de próstata em um paciente em necessidade, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida.
[027] Em certas modalidades, é fornecido um método para o tratamento de um tumor sólido maligno em um paciente em necessidade, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida ao paciente. Em certas modalidades, o tumor sólido maligno é um sarcoma, carcinoma ou linfoma.
[028] Em certas modalidades, o câncer para tratamento é um câncer hematológico, por exemplo, leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), linfoma (por exemplo, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de Burkitt), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia mieloide crônica de células pilosas (CML) e mieloma múltiplo.
[029] Em certas modalidades, os compostos aqui são usados para tratar cânceres resistentes a ou previamente tratados com um agente quimioterapêutico ou radiação ionizante. Em certas modalidades, o câncer para tratamento é determinado como tendo, ou identificado como tendo, resistência a um agente quimioterapêutico ou radiação ionizante. Em certas modalidades, o câncer selecionado para tratamento com o indutor de ferroptose é identificado como sendo tratado anteriormente com um agente quimioterapêutico ou radiação ionizante. Em certas modalidades, o câncer selecionado para tratamento foi previamente tratado ou é resistente a um agente quimioterapêutico selecionado a partir de agentes alquilantes, agentes antibióticos, agentes antimetabólicos (por exemplo, antagonistas de folato, análogos de purina, análogos de pirimidina, etc.), agentes inibidores de topoisomerase, agentes antimicrotúbulos, inibidores de aromatase, agentes antiangiogênicos, agentes indutores de diferenciação, agentes indutores de parada de crescimento celular, agentes indutores de apoptose, agentes citotóxicos, agentes biológicos (por exemplo,
anticorpos monoclonais), inibidores de quinase e inibidores de fatores de crescimento e seus receptores. Em certas modalidades, o câncer selecionado para tratamento foi previamente tratado ou é resistente à radiação ionizante.
[030] Em certas modalidades, o câncer selecionado para tratamento com os compostos é determinado como tendo ou identificado como tendo uma atividade RAS ativadora ou oncogênica. Em certas modalidades, a atividade RAS de ativação ou oncogênica é uma mutação de RAS oncogênica ou de ativação. Em certas modalidades, a atividade de ativação ou oncogênica de RAS é uma atividade de ativação ou ativação de K-RAS, particularmente uma mutação de ativação ou oncogênica de K-RAS. Em certas modalidades, a atividade de RAS de ativação ou oncogênica é uma atividade de N- RAS de ativação ou ativação, particularmente uma mutação de N-RAS de ativação ou oncogênica. Em certas modalidades, a atividade de RAS de ativação ou oncogênica é uma atividade de H-RAS de ativação ou ativação, particularmente uma mutação de H-RAS de ativação ou oncogênica.
[031] Em certas modalidades, os compostos são usados em combinação com um segundo agente terapêutico, como agentes de platinação, agentes alquilantes, agentes antibióticos, agentes antimetabólicos (por exemplo, antagonistas de folato, análogos de purina, análogos de pirimidina, etc.), agentes inibidores de topoisomerase I, agentes inibidores da topoisomerase II, agentes antimicrotúbulos, inibidores da aromatase, agentes antiangiogênicos, agentes indutores da diferenciação, agentes indutores da parada do crescimento celular, agentes indutores da apoptose, agentes citotóxicos, agentes que afetam a bioenergética celular, agentes biológicos, por exemplo, anticorpos monoclonais, inibidores e inibidores da quinase de fatores de crescimento e seus receptores.
[032] Em certas modalidades do tratamento de combinação, o segundo agente terapêutico pode ser administrado antes, simultaneamente ou após a administração dos compostos neste documento. Em certas modalidades, o composto e o segundo agente terapêutico podem ser fornecidos como uma única composição quando apropriado para facilidade de administração e aumentar a conformidade com o regime de tratamento de combinação. Em certas modalidades, o uso do composto em combinação com um segundo agente terapêutico é usado para tratar um câncer resistente a ou previamente tratado com um agente quimioterapêutico ou radiação ionizante, conforme descrito aqui.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[033] Conforme usado neste relatório descritivo e nas reivindicações anexas, as formas singulares “um”, “uma”, “o” e “a” incluem as mesmas no plural, a menos que o contexto indique claramente o contrário. Assim, por exemplo, a referência a “uma proteína” inclui mais de uma proteína e a referência a “um composto” refere-se a mais de um composto.
[034] Além disso, o uso de “ou” significa “e/ou”, a menos que indicado de outra forma. Da mesma forma, “compreende”, “compreende”, “compreende”, “inclui”, “inclui” e “incluindo” são intercambiáveis e não se destinam a ser limitantes.
[035] Vale frisar ainda que quando as descrições das várias modalidades adotarem o verbo “compreender”, os versados na técnica entenderão que, em alguns casos específicos, a modalidade pode ser descrita, como alternativa, usando-se os sintagmas “consistir essencialmente em” ou “consistir em”.
[036] Deve ser entendido que tanto a descrição geral anterior, incluindo os desenhos, quanto a seguinte descrição detalhada são apenas exemplificativas e explicativas e não são restritivas desta divulgação. Os títulos das seções usados neste documento servem somente para fins de organização e não devem ser interpretados de modo a limitar a matéria inventiva descrita.
1. DEFINIÇÕES
[037] Em referência à presente divulgação, os termos técnicos e científicos usados nas descrições neste documento terão os significados comumente entendidos por alguém versado na técnica, a menos que especificamente definido de outra forma. Consequentemente, os termos a seguir pretendem ter os significados descritos abaixo.
[038] “Ferroptose” refere-se a uma forma de extermínio celular entendida na técnica como envolvendo a geração de espécies reativas de oxigênio mediada por ferro e caracterizada por, em parte, peroxidação lipídica.
[039] “Indutor de ferroptose” ou “ativador de ferroptose” refere-se a um agente que induz, promove ou ativa a ferroptose.
[040] “K-RAS” refere-se ao homólogo do oncogene viral do sarcoma de rato Kirsten, uma pequena GTPase e um membro da família RAS de proteínas envolvidas na transdução de sinal. As sequências de ácido nucleico e de proteína de K-RAS humano exemplares são fornecidas no GenBank nº M54968.1 e AAB414942.1, respectivamente. “K-RAS”, tal como utilizado neste documento engloba variantes, incluindo ortólogos e homólogos interespécies, da proteína K-RAS humana.
[041] “Polipeptídeo K-RAS mutante”, proteína K-RAS mutante” e “K-RAS mutante” são usados de forma intercambiável e referem-se a um polipeptídeo K-RAS que compreende pelo menos uma mutação K- RAS em comparação com sequência K-RAS do tipo selvagem correspondente. Certos polipeptídeos K-RAS mutantes exemplares incluem, mas não estão limitados a, variantes alélicas, variantes splice,
variantes derivadas, variantes de substituição, variantes de deleção, variantes de inserção e polipeptídeos de fusão.
[042] “N-RAS” refere-se ao homólogo de oncogene Neuroblastoma RAS Viral (V-RAS), uma pequena GTPase e um membro da família RAS de proteínas envolvidas na transdução de sinal. Sequências de proteína e ácido nucleico N-RAS humano exemplares são fornecidos no número de acesso NCBI NP_002515 e no número de acesso GenBank X02751, respectivamente. “N-RAS” tal como utilizado neste documento engloba variantes, incluindo ortólogos e homólogos interespécies, da proteína N-RAS humana.
[043] “Polipeptídeo N-RAS mutante”, proteína N-RAS mutante” e “N-RAS mutante” são usados de forma intercambiável e referem-se a um polipeptídeo N-RAS que compreende pelo menos uma mutação N- RAS em comparação com sequência N-RAS do tipo selvagem correspondente. Certos polipeptídeos N-RAS mutantes exemplares incluem, mas não estão limitados a, variantes alélicas, variantes splice, variantes derivadas, variantes de substituição, variantes de deleção, variantes de inserção e polipeptídeos de fusão.
[044] “H-RAS” refere-se ao homólogo do oncogene viral do Sarcoma de Harvey Rat, uma pequena GTPase e um membro da família RAS de proteínas envolvidas na transdução de sinal. Sequências de proteína e ácido nucleico H-RAS humano exemplares são fornecidos no número de acesso NCBI P01112 e no número de acesso GenBank NM_176795, respectivamente. “H-RAS” tal como utilizado neste documento engloba variantes, incluindo ortólogos e homólogos interespécies, da proteína H-RAS humana.
[045] “Polipeptídeo H-RAS mutante”, proteína H-RAS mutante” e “H-RAS mutante” são usados de forma intercambiável e referem-se a um polipeptídeo H-RAS que compreende pelo menos uma mutação H- RAS em comparação com sequência H-RAS do tipo selvagem correspondente. Certos polipeptídeos H-RAS mutantes exemplares incluem, mas não estão limitados a, variantes alélicas, variantes splice, variantes derivadas, variantes de substituição, variantes de deleção, variantes de inserção e polipeptídeos de fusão.
[046] “Ativando K-RAS” refere-se a uma forma de K-RAS que possui atividade aumentada em comparação com K-RAS de tipo selvagem. A ativação de atividade de K-RAS pode resultar de uma mutação ou em certas modalidades, a superexpressão da proteína K- RAS.
[047] “Ativando N-RAS” refere-se a uma forma de N-RAS que possui atividade aumentada em comparação com N-RAS de tipo selvagem. A ativação de atividade de N-RAS pode resultar de uma mutação ou em certas modalidades, a superexpressão da proteína N- RAS.
[048] “Ativando H-RAS” refere-se a uma forma de H-RAS que possui atividade aumentada em comparação com H-RAS de tipo selvagem. A ativação de atividade de H-RAS pode resultar de uma mutação ou em certas modalidades, a superexpressão da proteína H- RAS.
[049] “Mutação” ou “mutante” refere-se a uma sequência de aminoácido ou polinucleotídeo que foi alterada por substituição, inserção e/ou deleção. Em certas modalidades, uma sequência mutante ou variante pode ter atividades ou propriedades aumentadas, diminuídas ou substancialmente semelhantes em comparação com a sequência parental.
[050] “Identificado” ou “determinado” refere-se à análise, detecção ou realização de um processo quanto à presença ou ausência de uma ou mais características especificadas.
[051] “Tipo selvagem” ou “ocorrência natural” refere-se à forma encontrada na natureza. Por exemplo, um polipeptídeo ou sequência polinucleotídica de ocorrência natural ou de tipo selvagem é uma sequência presente em um organismo que pode ser isolada de uma fonte na natureza e que não foi intencionalmente modificada por manipulação humana.
[052] “Controle” ou “amostra de controle” ou “grupo de controle” refere-se a uma amostra ou grupo que é comparado a outra amostra ou grupo, em que, geralmente, a amostra ou grupo de controle são os mesmos que um grupo de comparação, exceto por um ou mais fatores sendo comparados.
[053] “Seleção” refere-se ao processo de determinação de que um sujeito receberá um agente para tratar a ocorrência de uma condição. A seleção pode ser baseada em uma suscetibilidade individual a uma doença ou condição específica devido, por exemplo, à presença de um fator ou fatores celulares, fisiológicos ou ambientais de identificação. Em certas modalidades, a seleção pode ser baseada na determinação ou identificação de se esse sujeito responderá a um agente, por exemplo, conforme avaliado pela identificação da presença de um biomarcador e/ou marcador de alvo de fármaco que torna o sujeito sensível, insensível, responsivo ou que não responde a um agente ou tratamento.
[054] “Amostra biológica” refere-se a qualquer amostra, incluindo uma biomolécula, como uma proteína, um peptídeo, um ácido nucleico, um lipídio, um carboidrato ou uma combinação dos mesmos, que é obtida de um organismo, particularmente um mamífero. Exemplos de mamíferos incluem humanos; animais veterinários como gatos, cães, cavalos, gado e suínos; e animais de laboratório como camundongos, ratos e primatas. Em certas modalidades, um sujeito humano no ambiente clínico é referido como um paciente. As amostras biológicas incluem amostras de tecido (como seções de tecido e biópsias de agulha de tecido), amostras de células (por exemplo, esfregaços citológicos, como Papanicolaou ou esfregaços de sangue ou amostras de células obtidas por microdissecção), ou frações celulares, fragmentos ou organelas (como obtido por lise de células e separação de seus componentes por centrifugação ou de outra forma). Outros exemplos de amostras biológicas incluem sangue, soro, urina, sêmen, matéria fecal, líquido cefalorraquidiano, líquido intersticial, muco, lágrimas, suor, pus, tecido biopsiado (por exemplo, obtido por biópsia cirúrgica ou biópsia de agulha), aspirados de mamilo, leite, fluido vaginal, saliva, esfregaços (como esfregaços bucais) ou qualquer material contendo biomoléculas derivado de uma primeira amostra biológica. Em certas modalidades, a amostra biológica é uma “amostra livre de células”, como polinucleotídeos livres de células ou extracelulares e proteínas livres de células ou extracelulares. Em certas modalidades, o DNA livre de células ou cfDNA refere-se ao DNA extracelular obtido do sangue, particularmente o soro.
[055] “Sujeito”, conforme usado neste documento, refere-se a um mamífero, por exemplo, um cachorro, um gato, um cavalo ou um coelho. Em certas modalidades, o sujeito é um primata não humano, por exemplo, um macaco, chimpanzé ou gorila. Em certas modalidades, o sujeito é um humano, às vezes referido aqui como um paciente.
[056] “Tratar” ou “tratamento” de uma doença, distúrbio ou síndrome, tal como aqui utilizado, inclui (i) prevenir a doença, distúrbio ou síndrome de ocorrer em um sujeito, ou seja, causar os sintomas clínicos da doença, distúrbio ou não se desenvolva a síndrome em um animal que pode estar exposto ou predisposto à doença, distúrbio ou síndrome, mas ainda não apresenta ou exibe sintomas da doença, distúrbio ou síndrome; (ii) inibir a doença, distúrbio ou síndrome, ou seja, interromper seu desenvolvimento; e (iii) aliviar a doença, distúrbio ou síndrome, isto é, causar a regressão da doença, distúrbio ou síndrome. Como é conhecido na técnica, os ajustes para distribuição sistêmica versus localizada, idade, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta, tempo de administração, interação de fármaco e a gravidade da condição podem ser necessários e serão verificáveis com experimentação de rotina por aquele versado na técnica, particularmente em vista da orientação fornecida na presente divulgação.
[057] “Quantidade terapeuticamente eficaz” refere-se à quantidade que, quando administrada a um animal (por exemplo, ser humano) para o tratamento de uma doença, é suficiente para efetuar esse tratamento para a doença, distúrbio ou condição. Em certas modalidades, o tratamento fornece um benefício terapêutico, como melhora dos sintomas ou desaceleração da progressão da doença. Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz pode ser uma quantidade suficiente para diminuir um sintoma de uma doença ou condição conforme aqui descrito.
[058] “Alquila” refere-se a um grupo de hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada de 1 a 20 átomos de carbono (C1-C20 ou C1-20), por exemplo, 1 a 12 átomos de carbono (C1-C12 ou C1-12), ou 1 a 8 átomos de carbono (C1-C8 ou C1-8). “Alquila” exemplar inclui, mas não está limitado a, metila, etila, n-propila, i-propila, n-butila, s-butila, t-butila, n- pentila e s-pentila e semelhantes.
[059] “Alquenila” refere-se a um grupo hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada de 2 a 20 átomos de carbono (C2-C20 ou C2-20), por exemplo, 2 a 12 átomos de carbono (C2-C12 ou C2-12), ou 2 a 8 átomos de carbono (C2-C8 ou C2-8), tendo pelo menos uma ligação dupla. A “alquenila” exemplar inclui, mas não está limitado a, vinil etenila, alila, isopropenila, 1-propenila, 2-metil-1-propenila, 1-butenila, 2-butenila, 3- butenila, 2-etil-1-butenila, 3-metil-2-butenila, 1-pentenila, 2-pentenila, 3- pentenila, 4-pentenila, 4-metil-3-pentenila, 1-hexenila, 2-hexenila, 3- hexenila, 4-hexenila e 5 -hexenila e semelhantes.
[060] “Alquinila” refere-se a um grupo hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada de 2 a 12 átomos de carbono (C2-C12 ou C2-12), por exemplo, de 2 a 8 átomos de carbono (C2-C8 ou C2-8), contendo pelo menos uma ligação tripla. “Alquinila” exemplar inclui etinila, 1-propinila, 2-propinila, 1-butinila, 2-butinila, 3-butinila, 1-pentinila, 2-pentinila, 3- pentinila, 4-pentinila, 1-hexinila, 2-hexinila, 3-hexinila, 4-hexinila e 5- hexinila e semelhantes.
[061] “Alquileno”, “alquenileno” e “alquinileno” referem-se a um radical de hidrocarboneto divalente de cadeia linear ou ramificada da alquila, alquenila e alquinila correspondentes, respectivamente. O “alquileno”, “alquenileno” e “alquinileno” podem ser opcionalmente substituídos, por exemplo, com alquila, alquilóxi, hidroxila, carbonila, carboxila, halo, nitro e semelhantes. Em certas modalidades, “alquila”, “alquenila” e “alquinila” podem representar o “alquileno”, “alquenileno” e “alquinileno” correspondente, tal como, a título de exemplo e sem limitação, cicloalquilalquil-, heterocicloalquilalquil-, arilalquil-, heteroarilalquil-, cicloalquilalquenil-, heterocicloalquilalcenil-, arilalquenil-, heteroarilalcenil-, cicloalquilalquinil-, heterocicloalquilalcinil-, arilalquinil-, heteroarilalquinil-, e semelhantes, em que o grupo cicloalquilalquinil-, heterocicloalquilalcinil-, arilalquinil-, heteroarilalquinil-, e semelhantes, em que o grupo cicloalquilalquinil-, heterocicloalquilalquinil-, arilalquinil-, heteroarilalquinil- e semelhantes, em que o grupo cicloalquilalquinila e por meio do grupo alquileno, alquenileno ou alquinileno correspondente.
[062] “Alifático” refere-se a um composto orgânico caracterizado por arranjos de cadeia substituída ou não substituída, linear ou ramificada e/ou cíclica de átomos de carbono constituintes. Os compostos alifáticos não contêm anéis aromáticos como parte da estrutura molecular dos compostos. O composto alifático pode ter 1 a 20 (C1-C20 ou C1-20) átomos de carbono, 1 a 12 (C1-C12 ou C1-12) átomos de carbono ou 1 a 8 (C1-C8 ou C1-8) átomos de carbono.
[063] “Inferior” em referência a substituintes se refere a um grupo tendo entre um e seis átomos de carbono.
[064] “Alquil-halo” ou “haloalquila” refere-se a um grupo de hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada de 1 a 20 átomos de carbono (C1-C20 ou C1-20), por exemplo, 1 a 12 átomos de carbono (C1- C12 ou C1-12), ou 1 a 8 átomos de carbono (C1-C8 ou C1-8) em que um ou mais (por exemplo, um a três, ou um) átomo de hidrogênio é substituído por um halogênio (por exemplo, Cl, F, etc.). Em certas modalidades, o termo “alquil-halo” refere-se a um grupo alquila conforme definido neste documento, em que um átomo de hidrogênio é substituído por um halogênio (por exemplo, Cl, F, etc.). Em certas modalidades, o termo “alquil-halo” refere-se a um cloreto de alquila.
[065] “Alquenil-halo” ou “haloalquenila” refere-se a um grupo hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada de 2 a 20 átomos de carbono (C2-C20 ou C2-20), por exemplo, 2 a 12 átomos de carbono (C2- C12 ou C2-12), ou 2 a 8 átomos de carbono (C2-C8 ou C2-8), tendo pelo menos uma ligação dupla, em que um ou mais (por exemplo, um a três, ou um) átomo de hidrogénio é substituído por um halogênio (por exemplo, Cl, F, etc.). Em certas modalidades, o termo “alquenil-halo” refere-se a um grupo alquenila conforme definido neste documento, em que um átomo de hidrogênio é substituído por um halogênio (por exemplo, Cl, F, etc.). Em certas modalidades, o termo “alquenil-halo” refere-se a um alquenilcloreto.
[066] “Cicloalquila” refere-se a qualquer sistema monocíclico ou policíclico estável que consiste em átomos de carbono, qualquer anel sendo saturado. “Cicloalquenila” refere-se a qualquer sistema monocíclico ou policíclico estável que consiste em átomos de carbono, com pelo menos um anel do mesmo sendo parcialmente insaturado. Exemplos de cicloalquilas incluem, mas não estão limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila, ciclo- octila, bicicloalquila e tricicloalquila (por exemplo, adamantila).
[067] “Heterocicloalquila” ou “heterociclila” refere-se a um anel de hidrocarboneto não aromático substituído ou não substituído de 4 a 14 membros, mono ou policíclico (por exemplo, bicíclico), em que 1 a 3 átomos de carbono são substituídos por um heteroátomo. Heteroátomos e/ou grupos heteroatômicos que podem substituir os átomos de carbono incluem, mas não estão limitados a, -O-, -S-, -S-O-, -NR40-, -PH-, -C(O)-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)NR40-, -S(O)2NR40-, e semelhantes, incluindo combinações dos mesmos, em que cada R40 é independentemente hidrogênio ou alquila inferior. Exemplos incluem tiazolidinila, tiadiazolila, triazinila, morfolinila, pirrolidinonila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, 2,3-di-hidrofuranila, di-hidropiranila, hidantoinila, valerolactamila, oxiranila, oxetanila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, di-hidropiridinila, tetra-hidropiridinila, tetra- hidropirimidinila, tetra-hidrotiofenila, tetra-hidrotiopiranila, e semelhantes. Em certas modalidades, a “heterocicloalquila” ou “heterociclila” é um anel monocíclico de 4 a 7 membros substituído ou não substituído, em que 1 a 3 átomos de carbono são substituídos por um heteroátomo, conforme descrito acima.
[068] Em certas modalidades, a “heterocicloalquila” ou “heterociclila” é um anel mono- ou policíclico (por exemplo, bicíclico) substituído ou não substituído de 4 a 10, ou 4 a 9, ou 5 a 9, ou 5 a 7, ou 5 a 6 membros, em que 1 a 3 átomos de carbono são substituídos por um heteroátomo como descrito acima. Em certas modalidades, quando a “heterocicloalquila” ou “heterociclila” é um anel bicíclico substituído ou não substituído, um anel pode ser aromático, desde que pelo menos um anel seja não aromático, independentemente do ponto de ligação ao restante da molécula (por exemplo, indolinila, isoindolinila e semelhantes).
[069] “Carbociclo”, “carbociclila” e “carbocíclico”, conforme usado neste documento, referem-se a um anel saturado ou insaturado não aromático no qual cada átomo do anel é carbono. O anel pode ser monocíclico, bicíclico, tricíclico ou mesmo de ordem superior. Assim, os termos “carbociclo”, “carbociclila” e “carbocíclico” abrangem sistemas fundidos, em ponte e espirocíclicos. De preferência, um anel carbociclo contém de 3 a 14 átomos, incluindo 3 a 8 ou 5 a 7 átomos, como por exemplo, 5 ou 6 átomos.
[070] “Arila” refere-se a um anel mono- ou bicarbocíclico de 6 a 14 membros, em que o anel monocíclico é aromático e pelo menos um dos anéis no anel bicíclico é aromático. Salvo indicação em contrário, a valência do grupo pode estar localizada em qualquer átomo de qualquer anel dentro do radical, permitindo as regras de valência. Exemplos de grupos “arila” incluem fenila, naftila, indenila, bifenila, fenantrenila, naftacenila e semelhantes.
[071] “Heteroarila” significa um anel heterocíclico aromático, incluindo sistemas de anel monocíclico e policíclico (por exemplo, bicíclico), em que pelo menos um átomo de carbono de um ou ambos os anéis é substituído por um heteroátomo independentemente selecionado de nitrogênio, oxigênio e enxofre, ou pelo menos dois átomos de carbono de um ou ambos os anéis são substituídos por um heteroátomo selecionado independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Em certas modalidades, a heteroarila pode ser um sistema de anel monocíclico de 5 a 6 membros ou bicíclico de 7 a 11 membros. Exemplos de grupos “heteroarila” incluem pirrolila, pirazolila, imidazolila, pirazinila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, furila, tienila, piridila, pirimidila, benzotiazolila, purinila, benzimidazolila, indolila, isoquinolila, quinoxalinila, quinolila e semelhantes.
[072] “Bicíclico em ponte” refere-se a qualquer sistema de anel bicíclico, ou seja, carbocíclico ou heterocíclico, saturado ou parcialmente insaturado, tendo pelo menos uma ponte. Conforme definido pela IUPAC, uma “ponte” é uma cadeia não ramificada de átomos ou um átomo ou uma ligação de valência conectando duas cabeças de ponte, em que uma “cabeça de ponte” é qualquer átomo do esqueleto do sistema de anéis que está ligado a três ou mais átomos do esqueleto (excluindo hidrogênio). Em certas modalidades, um grupo bicíclico em ponte tem 5 a 12 membros no anel e 0 a 4 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Esses grupos bicíclicos em ponte incluem aqueles grupos apresentados abaixo, em que cada grupo está ligado ao resto da molécula em qualquer átomo de carbono ou nitrogênio substituível. A menos que especificado de outra forma, um grupo bicíclico em ponte é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes conforme estabelecido para grupos alifáticos. Adicional ou alternativamente, qualquer nitrogênio substituível de um grupo bicíclico em ponte é opcionalmente substituído. Os exemplos de bicíclicos em ponte incluem, mas não estão limitados a: , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,e .
[073] “Anel fundido” refere-se a um sistema de anel com dois ou mais anéis tendo pelo menos uma ligação e dois átomos em comum. Uma “arila fundida” e uma “heteroarila fundida” referem-se a sistemas de anel tendo pelo menos uma arila e heteroarila, respectivamente, que compartilham pelo menos uma ligação e dois átomos em comum com outro anel.
[074] “Carbonila” refere-se a -C(O)-. O grupo carbonila pode ser ainda substituído por uma variedade de substituintes para formar diferentes grupos carbonila, incluindo ácidos, halogenetos de ácido, aldeídos, amidas, ésteres e cetonas. Por exemplo, um -C(O)R41, em que R41 é uma alquila é referido como um alquilcarbonila. Em certas modalidades, R41 é selecionado a partir de uma alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila opcionalmente substituída.
[075] “Halogênio” ou “halo” refere-se a flúor, cloro, bromo e iodo.
[076] “Hidróxi” refere-se a -OH.
[077] “Óxi” refere-se ao grupo -O-, que pode ter vários substituintes para formar diferentes grupos óxi, incluindo éteres e ésteres. Em certas modalidades, o grupo óxi é um –OR42, em que R42 é selecionado a partir de uma alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila opcionalmente substituída.
[078] “Aquila” refere-se a -C(O)R43, em que R43 é hidrogênio, ou uma alquila, heteroalquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila opcionalmente substituída, conforme definido neste documento. Grupos aquila exemplares incluem, mas não estão limitados a, formila, acetila, ciclo-hexilcarbonila, ciclo- hexilmetilcarbonila, benzoíla, benzilcarbonila e semelhantes.
[079] “Alquilóxi” ou “alcóxi” refere-se a –OR44, em que R44 é uma alquila opcionalmente substituída.
[080] “Arilóxi” refere-se a –OR45, em que R45 é uma arila opcionalmente substituída.
[081] “Carbóxi” refere-se a –COO- ou COOM, em que M é H ou um contra-íon (por exemplo, um cátion, como Na+, Ca2+, Mg2+, etc.).
[082] “Carbamoíla” refere-se a -C(O)NR46R46, em que cada R46 é independentemente selecionado a partir de H ou uma alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila,
heterocilcoalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila opcionalmente substituída.
[083] “Ciano” refere-se a -CN.
[084] “Éster” refere-se a um grupo como -C(=O)OR47, alternativamente ilustrado como –C(O)OR47, em que R47 é selecionado a partir de uma alquila opcionalmente substituída, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterociclolalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila.
[085] “Tiol” refere-se a -SH.
[086] “Sulfanila” refere-se a -SR48, em que R48 é selecionado a partir de uma alquila opcionalmente substituída, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila. Por exemplo, -SR48, em que R48 é uma alquila, é uma alquilsulfanila.
[087] “Sulfonila” refere-se a -S(O)2-, que pode ter vários substituintes para formar diferentes grupos sulfonila, incluindo ácidos sulfônicos, sulfonamidas, ésteres de sulfonato e sulfonas. Por exemplo, -S(O)2R49, em que R49 é um grupo alquila refere-se a um alquilsulfonila. Em certas modalidades de -S(O)2R49, R49 é selecionado de uma alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila opcionalmente substituída.
[088] “Sulfinila” refere-se a -S(O)-, que pode ter vários substituintes para formar diferentes grupos sulfinila, incluindo ácidos sulfínicos, sulfinamidas e ésteres de sulfinila. Por exemplo, -S(O)R50, em que o símbolo R50 representa um grupo alquila refere-se a um alquilsulfinila. Em certas modalidades de -S(O)R50, R50 é selecionado a partir de uma alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila opcionalmente substituída.
[089] “Silila” refere-se a Si, que pode ter vários substituintes, por exemplo –SiR51R51R51, em que cada R51 é independentemente selecionado a partir de alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila. Conforme definido neste documento, qualquer grupo heterocicloalquila ou heteroarila presente em um grupo silila tem de 1 a 3 heteroátomos selecionados independentemente a partir de O, N e S.
[090] “Amino” ou “amina” refere-se ao grupo –NR52R52 ou – N+R52R52R52, em que cada R52 é independentemente selecionado a partir de hidrogênio e uma alquila, cicloalquila, heterocicloalquila, alquilóxi, arila opcionalmente substituída, heteroarila, heteroarilalquila, aquila, alquiloxicarbonila, sulfanila, sulfinila, sulfonila e semelhantes. Grupos amina exemplares incluem, mas não estão limitados a, dimetilamino, dietilamino, trimetilamônio, trietilamônio, metilsulfonilamino, furanil-óxi-sulfamino e semelhantes.
[091] “Amida” refere-se a um grupo tal como, -C(=O)NR53R53, em que cada R53 é independentemente selecionado a partir de H e uma alquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila e heteroarilalquila opcionalmente substituída.
[092] “Sulfonamida” refere-se a –S(O)2NR54R54, em que cada R54 é independentemente selecionado a partir de H e uma alquila, heteroalquila, heteroarila, heterociclo, alquenila, alquinila, arilalquila, heteroarilalquila, heterociclilalquila, -alquilenocarbonil-, ou alquileno-O- C(O)-OR55, em que R55 é selecionado a partir de H, alquila, heteroalquila, cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, alquenila, alquinila, arilalquila, heterocicloalquila, heteroarilalquila, amino e sulfinila.
[093] “Adamantila” refere-se a um composto de fórmula estrutural:
[094] em que substituições opcionais podem estar presentes em um ou mais de Ra, Rb, Rc, e Rd. Adamantila inclui adamantila substituída, por exemplo, 1- ou 2-adamantila, substituído por um ou mais substituintes, incluindo alquila, halo, OH, NH2 e alcóxi. Derivados exemplares incluem metiladamatano, haloadamantila, hidroxiadamantila e aminoadamantano (por exemplo, amantadina).
[095] “Grupo protetor de N”, tal como aqui utilizado, refere-se aos grupos destinados a proteger um átomo de nitrogênio contra reações indesejáveis durante os procedimentos sintéticos. Grupos protetores de N exemplares incluem, mas não estão limitados a, grupos aquila, tais como acetila e t-butilacetila, pivaloíla, grupos alcoxicarbonila, tais como metiloxicarbonila e t-butiloxicarbonila (Boc), grupos ariloxicarbonila, tais como benziloxicarbonila (Cbz) e fluorenilmetoxicarbonila (Fmoc) e grupos aroíla como benzoíla. Os grupos protetores de N são descritos em Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, 5ª Edição, PGM Wuts, ed., Wiley (2014).
[096] “Opcional” ou “opcionalmente” refere-se a um evento ou circunstância descrito que pode ou não ocorrer, e que a descrição inclui casos em que o evento ou circunstância ocorre e casos em que o evento ou circunstância não. Por exemplo, “alquila opcionalmente substituída” refere-se a um grupo alquila que pode ou não ser substituído e que a descrição abrange tanto o grupo alquila substituído quanto o grupo alquila não substituído.
[097] “Substituída”, conforme usado neste documento, significa que um ou mais átomos de hidrogênio do grupo são substituídos por um átomo ou grupo substituinte comumente usado em química farmacêutica. Cada substituinte pode ser igual ou diferente. Exemplos de substituintes adequados incluem, mas não estão limitados a, alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, arila, arilalquila, heterocicloalquila, heteroarila, -OR56 (por exemplo, hidroxila, alquilóxi (por exemplo, metóxi, etóxi e propóxi), arilóxi, heteroarilóxi, arilalquilóxi, éter, éster, carbamato, etc.), hidroxialquila, alquiloxicarbonila, alquiloxialquilóxi, per- haloalquila, alquiloxialquila, SR56 (por exemplo, tiol, alquiltio, ariltio, heteroariltio, arilalquiltio, etc.), S+R562, S(O)R56, SO2R56, NR56R57 (por exemplo, amina primária (isto é, NH2), amina secundária, amina terciária, amida, carbamato, ureia, etc.), hidrazida, halo, nitrila, nitro, sulfeto, sulfóxido, sulfona, sulfonamida, tiol, carbóxi, aldeído, ceto, ácido carboxílico, éster, amida, imina e imida, incluindo seleno e derivados tio dos mesmos, em que cada R56 e R57 são independentemente alquila, alquenila, alquinila, heteroalquila, cicloalquila, cicloalquilalquila, heterocicloalquila, heterocicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila ou heteroarilalquila, e em que cada um dos substituintes pode ser opcionalmente adicionalmente substituído. Em modalidades nas quais um grupo funcional com um anel de carbono aromático é substituído, tais substituições terão normalmente em um número inferior a cerca de 10 substituições, mais preferencialmente, cerca de 1 a 5, em que cerca de 1 ou 2 substituições são preferidas.
[098] “Sal farmaceuticamente aceitável” se destina a incluir sais dos compostos ativos que são preparados com ácidos ou bases relativamente não tóxicos, dependendo dos substituintes particulares encontrados nos compostos descritos neste documento. Quando os compostos aqui divulgados contêm funcionalidades relativamente ácidas, os sais de adição de base podem ser obtidos colocando a forma neutra de tais compostos em contato com uma quantidade suficiente da base desejada, seja pura ou em um solvente inerte adequado. Exemplos de sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis incluem sódio, potássio, cálcio, amônio, amino orgânico ou sal de magnésio ou um sal semelhante. Quando os compostos como aqui divulgados contêm funcionalidades relativamente básicas, os sais de adição de ácido podem ser obtidos colocando-se em contato a forma neutra de tais compostos com uma quantidade suficiente do ácido desejado, puro ou em um solvente inerte adequado. Exemplos de sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles derivados de ácidos inorgânicos como ácidos clorídrico, bromídrico, nítrico, carbônico, fosfórico, fosfórico parcialmente neutralizado, sulfúrico, sulfúrico parcialmente neutralizado, ácido iodídrico ou fosforoso e semelhantes, bem como os sais derivados de ácidos orgânicos relativamente não tóxicos como acético, propiônico, isobutírico, maleico, malônico, benzoico, succínico, suberico, fumárico, mandélico, ftálico, benzenossulfônico, p-tolilsulfônico, cítrico, tartárico, metanossulfônico e semelhantes. Também estão incluídos sais de aminoácidos, tal como arginato e similares, e sais de ácidos orgânicos como os ácidos glucurônico ou galactunôrico e similares. Certos compostos específicos da presente divulgação podem conter ambas as funcionalidades básicas e ácidas que permitem que os compostos sejam convertidos em quaisquer sais de adição de base ou ácido. Listas de sais adequados são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences, 17ª Ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985) e Journal of Pharmaceutical Science, 66: 2 (1977), cada um dos quais é aqui incorporado por referência em sua totalidade.
[099] “Carreador farmaceuticamente aceitável” ou “excipiente farmaceuticamente aceitável” refere-se a um excipiente, carreador ou adjuvante que pode ser administrado a um sujeito, juntamente com pelo menos um agente terapêutico, e que não destrói a atividade farmacológica do mesmo e é geralmente seguro, não tóxico e nem biologicamente nem de outra forma indesejável quando administrado em doses suficientes para entregar uma quantidade terapêutica do agente.
[100] Qualquer composto ou estrutura fornecida aqui, também se destina a representar formas não marcadas, bem como formas marcadas isotopicamente dos compostos. Essas formas de compostos também podem ser referidas como “análogos isotopicamente enriquecidos”. Os compostos marcados isotopicamente têm estruturas aqui representadas, exceto que um ou mais átomos são substituídos por um átomo com uma massa atômica ou número de massa selecionado. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos divulgados incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, flúor, cloro e iodo, tais como 2H, 3H, 11 C, 13 14 13 15 15 17 18 31 32 35 18 36 123 125 C, C, N, N, O, O, O, P, P, S, F, Cl, I, e I, respectivamente. Vários compostos isotopicamente marcados da presente divulgação, por exemplo aqueles nos quais isótopos radioativos, tais como 3H, 13 Ce 14 C são incorporados. Tais compostos isotopicamente marcados podem ser úteis em estudos metabólicos, estudos de cinética de reação, detecção ou técnicas de imagem, tais como tomografia por emissão de pósitrons (PET) ou tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), incluindo ensaios de distribuição de droga ou substrato em tecido ou em tratamento radioativo de pacientes.
[101] O termo “análogos isotopicamente enriquecidos” inclui “análogos deuterados” de compostos aqui descritos em que um ou mais hidrogênios são substituídos por deutério, como um hidrogênio em um átomo de carbono. Tais compostos exibem resistência aumentada ao metabolismo e, portanto, são úteis para aumentar a meia-vida de qualquer composto quando administrado a um mamífero, por exemplo, um humano. Consultar, por exemplo, Foster, “Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism,” Trends Pharmacol. Sci. 5(12): 524 a 527 (1984). Tais compostos são sintetizados por meios bem conhecidos na técnica, por exemplo, empregando materiais de partida em que um ou mais hidrogênios foram substituídos por deutério.
[102] Os compostos terapêuticos marcados ou substituídos por deutério da divulgação podem ter propriedades de DMPK (metabolismo e farmacocinética do fármaco) melhoradas, relacionadas à distribuição, metabolismo e excreção (ADME). A substituição por isótopos mais pesados, como o deutério, pode proporcionar certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por exemplo, meia-vida in vivo aumentada, requisitos de dosagem reduzidos e/ou uma melhora no índice terapêutico. Um composto marcado com 18F, 3H, 11 C pode ser útil para PET ou SPECT ou outros estudos de imagem. Os compostos marcados isotopicamente desta divulgação e profármacos dos mesmos podem geralmente ser preparados realizando os procedimentos divulgados nos esquemas ou nos exemplos e preparações descritos abaixo, substituindo um reagente isotopicamente marcado prontamente disponível por um reagente não marcado isotopicamente. Entende-se que o deutério, nesse contexto, é considerado um substituinte em um composto aqui descrito.
[103] A concentração de tal isótopo mais pesado, especificamente deutério, pode ser definida por um fator de enriquecimento isotópico. Nos compostos desta divulgação, qualquer átomo não especificamente designado como um isótopo particular pretende representar qualquer isótopo estável desse átomo. A menos que indicado de outra forma, quando uma posição é designada especificamente como “H” ou “hidrogênio”, a posição é entendida como tendo hidrogênio em sua composição isotópica de abundância natural. Por conseguinte, nos compostos desta divulgação, qualquer átomo especificamente designado como deutério (D) pretende representar deutério.
[104] Alguns dos compostos existem como tautômeros. Os tautômeros estão em equilíbrio uns com os outros. Por exemplo,
compostos contendo amida podem existir em equilíbrio com tautômeros de ácido imídico. Independentemente de qual tautômero é mostrado e independentemente da natureza do equilíbrio entre os tautômeros, os compostos são entendidos por um versado na técnica como compreendendo tautômeros de amida e de ácido imídico. Assim, os compostos contendo amida são entendidos como incluindo seus tautômeros de ácido imídico. Da mesma forma, os compostos contendo ácido imídico são entendidos como incluindo seus tautômeros de amida.
[105] Os compostos como aqui divulgados, ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis incluem um centro assimétrico e podem, assim, dar origem a enantiômeros, diastereômeros e outras formas estereoisoméricas que podem ser definidas, em termos de estereoquímica absoluta, como (R)- ou (S)- ou, como (D)- ou (L)- para aminoácidos. A presente divulgação se destina a incluir todos esses isômeros possíveis, bem como suas formas racêmicas e opticamente puras. Os isômeros opticamente ativos (+) e (-), (R)- e (S)-, ou (D)- e (L)- podem ser preparados usando sintons quirais ou reagentes quirais, ou resolvidos usando técnicas convencionais, por exemplo, cromatografia e cristalização fracionada. As técnicas convencionais para a preparação/isolamento de enantiômeros individuais incluem síntese quiral a partir de um precursor opticamente puro adequado ou resolução do racemato (ou o racemato de um sal ou derivado) usando, por exemplo, cromatografia líquida de alta pressão quiral (HPLC). Quando os compostos descritos neste documento contêm ligações duplas olefínicas ou outros centros de assimetria geométrica, e a menos que especificado de outra forma, pretende-se que os compostos incluam ambos os isômeros geométricos E e Z.
[106] Um “estereoisômero” refere-se a um composto produzido a partir dos mesmos átomos ligados pelas mesmas ligações, mas com estruturas tridimensionais diferentes, que não são intercambiáveis. A presente divulgação contempla vários estereoisômeros e misturas dos mesmos e inclui “enantiômeros”, que se refere a dois estereoisômeros cujas moléculas são imagens espelhadas não sobreponíveis uma da outra.
[107] “Diastereômeros” são estereoisômeros que têm pelo menos dois átomos assimétricos, mas que não são imagens espelhadas um do outro.
[108] Centros relativos dos compostos conforme representados neste documento são indicados graficamente usando o estilo de “ligação espessa” (linhas em negrito ou paralelas) e a estereoquímica absoluta é representada usando ligações em cunha (linhas em negrito ou paralelas).
[109] “Profármacos” significa qualquer composto que libera um fármaco original ativo de acordo com uma estrutura aqui descrita in vivo quando tal profármaco é administrado a um sujeito mamífero. Os profármacos de um composto aqui descrito são preparados por modificação de grupos funcionais presentes no composto aqui descrito, de modo que as modificações possam ser clivadas in vivo para liberar o composto original. Os profármacos incluem compostos descritos neste documento em que um grupo hidróxi, amino, carboxila ou sulfidrila em um composto aqui descrito está ligado a qualquer grupo que pode ser clivado in vivo para regenerar o grupo livre de hidróxi, amino ou sulfidrila, respectivamente. Exemplos de profármacos incluem, mas não estão limitados a ésteres (por exemplo, derivados de acetato, formato e benzoato), amidas, guanidinas, carbamatos (por exemplo, N,N- dimetilaminocarbonila) de grupos funcionais hidróxi em compostos aqui descritos e semelhantes. Os profármacos específicos podem incluir, mas não estão limitados a, compostos fornecidos neste documento, em que uma fração de aumento da solubilidade foi anexada aos mesmos. Por exemplo, um composto pode ser modificado para incluir um grupo de polietilenoglicol (por exemplo, -(OCH2CH2)u-OH, em que u é de cerca de 2 a cerca de 6 ou mais) em ou fora de um grupo funcional adequado (por exemplo, uma porção éster, amida, sulfonil ou sulfonamida) em R1, R3 ou R4, tal como no Exemplo 189 (abaixo): .
[110] A preparação, a seleção e o uso de profármacos são discutidos em T. Higuchi e V. Stella, “Pro-drugs as Novel Delivery Systems”, vol. 14 da série ACS Symposium; "Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985; e em Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987, em que cada um dos quais são aqui incorporados por referência na sua totalidade.
2. COMPOSTOS
[111] O extermínio celular é crucial para o desenvolvimento normal, a homeostase e a prevenção de doenças proliferativas como o câncer (Fuchs e Steller, 2011, Cell 147 (4): 742 a 758; Thompson, CB, 1995, Science. 1995 267 (5203): 1456 a 1462). O extermínio celular programado (PCD) pode assumir diferentes formas, como apoptose, catástrofe mitótica, necrose, senescência e autofagia. Embora cada um desses processos acabe levando ao extermínio celular, as vias e os mecanismos parecem ser únicos, tanto em nível molecular quanto celular.
[112] A ferroptose foi identificada como outra via celular que pode levar ao extermínio das células. A ferroptose não exibe as características clássicas da apoptose, como liberação de citocromo c mitocondrial, ativação de caspase e fragmentação da cromatina (Dolma et al., 2003, Cancer Cell, 2003, 3(3):285 a 296; Yagoda et al., 2007, Nature. 447(7146):864 a 868.; Yang and Stockwell, 2008, Chem Biol. 15(3):234 a 245). A ferroptose não parece ser sensível a inibidores de caspases, catepsina ou proteases de calpaína, RIPK1 (necrostatina-1), ciclofilina D (ciclosporina A) ou função lisossomal/autofagia que estão envolvidas em formas de apoptose, necrose e extermínio celular autofágico.
A ferroptose é caracterizada por níveis aumentados de espécies reativas de oxigênio intracelular (ROS) e é evitada por quelação de ferro ou inibição genética da absorção celular de ferro.
A adição de ferro, mas não por outros íons de metais de transição divalentes, pode potencializar a ferroptose.
Os componentes celulares implicados em e regulando a ferroptose incluem, entre outros, antiporter cisteína-glutamato (sistema X-c), glutationa peroxidase 4 (GPX4), p53 e receptor de carga NCOA4. A inativação ou inibição de algumas dessas moléculas, por exemplo, sistema X-c ou GPX4, leva ao extermínio celular dependente de ferro (consultar, por exemplo, Gao et al., 2016, Cell Res. 26: 1021 a 1032). Uma característica morfológica distinta da ferroptose é a redução do tamanho mitocondrial e o aumento da densidade da membrana.
A prevenção do extermínio celular por quelação de ferro foi sugerida como um fenômeno raro, tendo apenas um número limitado de gatilhos que podem induzir este mecanismo de extermínio celular dependente de ferro (consultar, por exemplo, Wolpaw et al., 2011, Proc Natl Acad Sci USA. 108(39): E771 a E780). Isso sugere que a ferroptose pode não estar sujeita às pressões de seleção significativas para o acúmulo de mutações que inativam outras vias de extermínio celular em células cancerosas, proporcionando assim uma via alternativa para induzir o extermínio celular em células cancerosas, ignorando mutações que inativam ou atenuam outras vias de extermínio celular.
[113] RSL3, um composto da seguinte estrutura; RSL3 (K601)
[114] foi identificado em uma tela letal sintética de RAS oncogênica (Yang et al., 2008, Chemistry & Biology 15: 234 a 245). O composto RSL3, também denotado como K601 na presente divulgação, liga-se e inativa glutationa peroxidases (GPXs), ao contrário de outro indutor de ferroptose, erastina, que inativa GPX4 pela depleção de glutationa (Yang et al., 2014, 156 (1–2): 317 a 333). O composto RSL3 exibe propriedades de inibição do crescimento contra várias linhas de células cancerosas. Outros compostos semelhantes a RSL3 são descritos no pedido de patente US US2010-0081654. No entanto, RSL3 pode ser rapidamente hidrolisado sob condições biológicas, e suas propriedades farmacocinéticas pobres podem prejudicar seu uso como terapêutico (consultar, por exemplo, Hangauer et al., 2017, Nature 551 (7679): 247 a 250). Além disso, com base na análise da estrutura cristalina de GPX4, sugere-se que a enzima tenha uma superfície molecular redonda sem bolsões aparentes de fármaco e, embora a enzima tenha um local catalítico, seu local ativo é considerado insuficiente para acomodar pequenas moléculas. Consultar, por exemplo, Sakamoto et al., 2016, Biochem Biophy Res Commun. 482 (2): 195 a 201.
[115] Estudos demonstraram que antioxidantes lipofílicos, como a ferrostatina, podem resgatar células da ferroptose induzida por inibição do GPX4. Por exemplo, as células knockout do GPX4 do estado mesenquimal podem sobreviver na presença de ferrostatina, no entanto, quando o fornecimento de ferrostatina é encerrado, essas células sofrem ferroptose (consultar, por exemplo, Viswanathan et al., Nature 547: 453 a 457, 2017). Consequentemente, a capacidade de uma molécula de induzir o extermínio de células cancerosas ferroptóticas, e que essa capacidade é advertida pela adição de ferrostatina, é uma indicação clara de que a molécula é um inibidor de GPX4. Em vista do exposto, a presente divulgação fornece compostos com atividade de inibição de GPX4 e, em certas modalidades, compostos com estabilidade alterada ou aprimorada (por exemplo, estabilidade metabólica) e/ou atividade aprimorada ou outras características em comparação com outros inibidores de GPX4. Em certas modalidades, os compostos descritos neste documento são seletivos para GPX4 em relação a outros GPXs.
[116] Em certas modalidades, é fornecido aqui um composto de fórmula (I): (I)
[117] ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[118] o anel A é C4-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila;
[119] X é NR5, O ou S;
[120] p é 0, 1, 2 ou 3;
[121] q é 0, 1, 2 ou 3;
[122] R1 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1- C6haloalquila, C3-C10cicloalquila, -CN, -OH, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, - OC(O)R6, -S(O)2R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -S(O)R8, -NH2, -NHR8, - N(R8)2, -NO2, -OR8, -C1-C6alquil-OH, -C1-C6alquil-OR8, ou -Si(R15)3;
[123] R2 é -C(O)R9;
[124] cada R3 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, - Si(R12)3, -SF5, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, - OC(O)N(R7)2, -OC(O)R8, -C(O)R6, -OC(O)CHR8N(R12)2, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1- C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila de R3 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10;
[125] cada R4 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, - Si(R15)3, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -OC(O)R8, -C(O)R6, - NR12C(O)OR8, -OC(O)N(R7)2, -OC(O)CHR8N(R12)2, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1- C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila de R4 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10;
[126] R5 é hidrogênio ou C1-C6alquila;
[127] cada R6 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada R6 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R11;
[128] cada R7 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C6cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C6cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, -C1-C6alquil-heteroarila, -C2- C6alquenil-heteroarila, ou dois R7 juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, formam uma heterociclila de 4 a 7 membros; em que cada R7 ou anel formado desse modo é, independentemente, adicionalmente substituído por um a três R11;
[129] cada R8 é, independentemente, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1- C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1- C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, -C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila; em que cada R8 é, independentemente, adicionalmente substituído por um a três R11;
[130] R9 é -C1-C2haloalquila, -C2-C3alquenila, -C2-C3haloalquenila, C2alquinila ou -CH2OS(O)2-fenila, em que C1-C2alquil-halo e -C2- C3alquenil-halo são opcionalmente substituídos por um ou dois -CH3, e a C2alquinila e fenila são opcionalmente substituídas por um -CH3;
[131] cada R10 é, independentemente, halo, -CN, -OR12, -NO2, - N(R12)2, -S(O)R13, -S(O)2R13, -S(O)N(R12)2, -S(O)2N(R12)2, -Si(R12)3, - C(O)R12, -C(O)OR12, -C(O)N(R12)2, -NR12C(O)R12, -OC(O)R12, -
OC(O)OR12,-OC(O)N(R12)2, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1- C6alquila, C1-C6haloalquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila, em que cada C1- C6alquila, C1-C6halogenoalquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila de R10 é opcionalmente independentemente substituído por um a três R11;
[132] cada R11 é, independentemente, halo, -CN, -OR12, -NO2, - N(R12)2, -S(O)R13, -S(O)2R13, -S(O)N(R12)2, -S(O)2N(R12)2, -Si(R12)3, - C(O)R12, -C(O)OR12, -C(O)N(R12)2, -NR12C(O)R12, -OC(O)R12, - OC(O)OR12, -OC(O)N(R12)2, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila, C1- C6haloalquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila;
[133] cada R12 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila;
[134] cada R13 é, independentemente, C1-C6alquila ou C3- C10cicloalquila; e
[135] cada R15 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, -C1- C6alquil-heteroarila, e -C2-C6alquenil-heteroarila.
[136] Em certas modalidades, quando X é NR5, então, R9 é C2alquinila.
[137] Em certas modalidades, quando X é NR5, e R9 é -C1- C2haloalquila, -C2-C3alquenila, -C2-C3haloalquenila, ou -CH2OS(O)2- fenila, em que C1-C2alquil-halo e -C2-C3alquenil-halo são opcionalmente substituídos por um ou dois -CH3, e a fenila é opcionalmente substituída por -CH3, então, R1 é diferente de -C(O)OR6 e -C(O)N(R7)2.
[138] Em certas modalidades, quando X é NR5, então, (i) R9 é C2alquinila; ou (ii) R9 é -C1-C2haloalquila, -C2-C3alquenila, -C2- C3haloalquenila, ou -CH2OS(O)2-fenila, em que C1-C2alquil-halo e
-C2-C3alquenil-halo é opcionalmente substituído por um ou dois -CH3, e a fenila é opcionalmente substituída por -CH3, e R1 é diferente de - C(O)OR6 e -C(O)N(R7)2.
[139] Em certas modalidades, quando X é NH, R1 é -C(O)OR6, R2 é -C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F, q é 1, p é 0 e anel A com o R3 é ; então, (i) R3 e R6 não são simultaneamente -NO2 e -CH3, respectivamente, e (ii) quando R6 é -CH3, então, R3 é diferente de H, halo e -NO2.
[140] Em certas modalidades, quando X é NH, R1 é –C(O)OR6, R2 é –C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F, q é 1, p é 0, anel A com o R3 é , e R3 é -C(O)OR6; então, ambos R6 não são simultaneamente
[141] (i) -CH3;
[142] (ii) CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; ou
[143] (iii) -CH2CH3 e -CH3, respectivamente.
[144] Em certas modalidades, quando X é NH, R1 é -C(O)OCH3, R2 é -C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F, q é 1, p é 0, e R3 é H; então, o anel A é diferente de fenila.
[145] Em certas modalidades, e quando X é NH, R1 é -C(O)N(R7)2, em que R7 é H, R2 é -C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F, q é 0, ou 1, p é 0, e o anel A é fenila; então, q não é 0, ou, quando q é 1, R3 é diferente de halo.
[146] Em certas modalidades, o composto não é:
, , ,
O O O
N Cl
N H O
O , , , ou , ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[147] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (I’), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (I’)
[148] em que cada um dos anéis A, p, q, R1, R3, R4 e R9 são como aqui definidos.
[149] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (II), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (II)
[150] em que cada um dos anéis A, p, q, R1, R3, R4 e R9 são como aqui definidos.
[151] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (II’), ou um tautômero, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (II’)
[152] em que cada um dos anéis A, p, q, R1, R3, R4 e R9 são como aqui definidos.
[153] Em certas modalidades, R9 é C2alquinila. Em certas modalidades, X é NR5 e R9 é C2alquinila.
[154] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (III), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (III)
[155] em que cada um dos anéis A, p, q, R1, R3, e R4 são como aqui definidos.
[156] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (III’), ou um tautômero, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (III’)
[157] em que cada um dos anéis A, p, q, R1, R3, e R4 são como aqui definidos.
[158] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (IIIa), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIIa)
[159] em que cada um de p, q, R1, R3, e R4 são como aqui definidos.
[160] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (IIIa’), ou um tautômero, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIIa’)
[161] em que cada um de p, q, R1, R3, e R4 são como aqui definidos.
[162] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (IIIb), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIIb)
[163] em que cada um de p, q, R1, R3, R4, e R7 são como aqui definidos.
[164] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (IIIb’), ou um tautômero, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIIb’)
[165] em que cada um de p, q, R1, R3, R4, e R7 são como aqui definidos.
[166] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (IIIc), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIIc)
[167] em que cada um de p, q, R1, R3, R4, e R7 são como aqui definidos.
[168] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (IIIc’), ou um tautômero, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIIc’)
[169] em que cada um de p, q, R1, R3, R4, e R7 são como aqui definidos.
[170] Em certas modalidades de fórmula (IIIb), (IIIb’), IIIc) ou (IIIc’), os dois grupos R11 juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada por dois grupos R11 é opcionalmente substituída por uma heterociclila de 4 a 6 membros ou -N(C1-C6alquila)2, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N. Em certas modalidades, a heterociclila de 4 a 7 membros é selecionada a partir de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, imidazolidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3-oxazinanila, 1,3-tiazinanila, di-hidropiridinila, tetra- hidropiranila, 1,3-tetra-hidropirimidinila, di-hidropirimidinila, azepanila e 1,4-diazepanila. Em certas modalidades, a heterociclila de 4 a 6 membros, quando presente como um substituinte, é selecionada a partir de azetidinila, oxetanila, tietanila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piranila, dioxanila, 1,3-dioxolanila, di-hidropiranila, di- hidrotienila, di-hidrofuranila, imidazolinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3-oxazinanila, 1,3-thiazinanila, di- hidropiridinila, 1,3-tetra-hidropirimidinila, e di-hidropirimidinila. Em certas modalidades, o grupo protetor de N quando presente é t-Boc.
[171] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (IIId), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIId)
[172] em que cada um de p, q, R1, R3, e R4 são como aqui definidos.
[173] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (IIId’), ou um tautômero, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIId’)
[174] em que cada um de p, q, R1, R3, e R4 são como aqui definidos.
[175] Em certas modalidades, R1 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1-C6haloalquila, C3-C10cicloalquila, -CN, -C(O)OR6, - C(O)N(R7)2, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -OH, -OR8, -C1-C6 alquil-OH ou -C1-C6alquil-OR8. Em certas modalidades, R1 é C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C1-C6haloalquila, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, - NH2, -NHR8, -N(R8)2, -OH, -OR8, -C1-C6 alquil-OH ou -C1-C6alquil-OR8.
[176] Em certas modalidades, R1 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1-C6haloalquila, -CN, C3-C10cicloalquila, -NH2, -NHR8, - N(R8)2, -OH, -OR8, -C1-C6alquil-OH ou -C1-C6alquil-OR8. Em certas modalidades, R1 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1- C6haloalquila, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -OH, -OR8, -C1-C6alquil-OH ou -C1- C6lquil-OR8.
[177] Em certas modalidades, R1 é -C(O)OR6 ou -C(O)N(R7)2. Em certas modalidades, R1 é C1-C6alquila. Em certas modalidades, R1 é C3- C10cicloalquila.
[178] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (IV), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IV)
[179] em que cada um de anel A, p, q, R3, e R4 são como aqui definidos.
[180] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (IV’), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IV’)
[181] em que cada um de anel A, p, q, R3, e R4 são como aqui definidos.
[182] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (IVa), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
(R4)p O
N N
H (R3)q (IVa)
[183] em que cada um de anel A, p, q, R3, e R4 são como aqui definidos.
[184] Também é fornecido aqui um composto de fórmula (IVa’), ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo enriquecido isotopicamente ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (R4)p O
N N
H (R3)q (IVa’)
[185] em que cada um de anel A, p, q, R3, e R4 são como aqui definidos.
[186] Em certas modalidades, p é 1, 2 ou 3. Em certas modalidades, p é 1. Em certas modalidades, p é 2. Em certas modalidades, p é 3.
[187] Em certas modalidades, p é 0. Em certas modalidades, p é 0 ou 1. Em certas modalidades, p é 1 ou 2.
[188] Em certas modalidades, q é 1, 2 ou 3. Em certas modalidades, q é 1. Em certas modalidades, q é 2. Em certas modalidades, q é 3. Em certas modalidades, q é 0.
[189] Em certas modalidades, X é NR5 ou S.
[190] Em certas modalidades, R1 é C1-C6alquila, C1-C6haloalquila, C3-C10cicloalquila, -CN, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -C1-C6alquil-OH ou -C1- C6alquil-OR8.
[191] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é halo, -NH2, -
NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, - Si(R12)3, -SF5, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, - OC(O)R8, -C(O)R6, ou -OC(O)CHR8N(R12)2.
[192] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é halo.
[193] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -NHR8. Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -N(R8)2. Em certas modalidades, q é 2 e um R3 é halo e o outro R3 é -N(R8)2. Em certas modalidades, q é 3, e dois de R3 são independentemente halogênio e um R3 é -N(R8)2.
[194] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -C(O)OR6 ou - C(O)R6.
[195] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -S(O)2N(R7)2, - S(O)N(R7)2, ou -C(O)N(R7)2.
[196] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -S(O)2R8, - S(O)R8, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, -OC(O)R8, ou - OC(O)CHR8N(R12)2.
[197] Em certas modalidades, cada R3 é independentemente halo, -CN, -OR8, -NHR8, -S(O)2R8, -S(O)2N(R7)2, -NO2, -Si(R12)3, -SF5, - C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, -OC(O)R8, - OC(O)CHR8N(R12)2, C1-C6alquila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, ou -C1-C6alquil-heterociclila; em que cada C1-C6alquila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, ou -C1-C6alquil-heterociclila de R3 é independentemente opcionalmente substituída por um a três R10.
[198] Em certas modalidades, cada R3 é independentemente halo, -CN, -OR8, -NHR8, -S(O)2R8, -S(O)2N(R7)2, -NO2, -Si(R12)3, -SF5, - C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, -OC(O)R8, -OC(O)CHR8N(R12)2, C1-C6alquila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, ou -C1-C6alquil-heterociclila; em que cada C1-C6alquila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, ou -C1-C6alquil-heterociclila é independentemente opcionalmente substituída por um a três substituintes selecionados independentemente dentre -OR12, -N(R12)2, - S(O)2R13, -OC(O)CHR12N(R12)2, e C1-C6alquila opcionalmente substituída por um a três halo, -OR12, -N(R12)2, -Si(R12)3, -C(O)OR12, - NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila ou heterociclila; em que
[199] cada R12 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila; e
[200] cada R13 é independentemente C1-C6alquila ou C3- C10cicloalquila.
[201] Em certas modalidades, cada R4 é independentemente halo, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, - S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, -Si(R15)3, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, - NR12C(O)R8, -OC(O)R8, -C(O)R6, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, ou C3-C10cicloalquila; em que cada C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, ou C3-C10cicloalquila de R4 é independentemente opcionalmente substituída por um a três R10. Em certas modalidades, cada R4 é independentemente halo,-CN, -OH, - OR8, C1-C6alquila, C2-C6alquinila, ou C3-C10cicloalquila; em que cada C1-C6alquila, C2-C6alquinila, ou C3-C10cicloalquila de R4 é independentemente opcionalmente substituído por um a três R10.
[202] Em certas modalidades, cada R4 é independentemente halo, -CN, -OH, -OR8, C1-C6alquila, ou C2-C6alquinila; em que a C1-C6alquila de R4 está opcionalmente substituído por um a três R10.
[203] Em certas modalidades, cada R4 é independentemente halo, -CN, -OH, -OR8, C1-C6alquila, C2-C6alquinila; em que a C1-C6alquila de R4 está opcionalmente substituída por um a três substituintes independentemente selecionados a partir de -OR12, -N(R12)2, -S(O)2R13, -OC(O)CHR12N(R12)2, e C1-C6alquila opcionalmente substituída por um a três halo, -OR12, -N(R12)2, -Si(R12)3, -C(O)OR12, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila, ou heterociclila; em que
[204] cada R12 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila; e
[205] cada R13 é independentemente C1-C6alquila ou C3- C10cicloalquila.
[206] Em certas modalidades, cada R6 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, ou -C1-C6alquilC3- C10cicloalquila; em que cada R6 é independentemente adicionalmente substituído por um a três R11.
[207] Em certas modalidades, cada R6 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, ou -C1-C6alquilC3- C10cicloalquila; em que cada R6 é independentemente substituído adicionalmente por um a três halo, -OR12, -N(R12)2, -Si(R12)3, -C(O)OR12, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila, ou heterociclila; em que
[208] cada R12 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila.
[209] Em certas modalidades, cada R7 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, - C1-C6alquilC3-C6cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, formam uma heterociclila com 4 até 7 membros; em que cada R7 ou anel assim formado é independentemente substituído adicionalmente com um a três R11.
[210] Em certas modalidades, cada R7 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, - C1-C6alquilC3-C6cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, formam uma heterociclila com 4 até 7 membros; em que cada R7 ou anel assim formado é independentemente substituído adicionalmente com um a três halo, -OR12, -N(R12)2, -Si(R12)3, -C(O)OR12, -NR12C(O)OR12, -
OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila, ou heterociclila; em que
[211] cada R12 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila.
[212] Em certas modalidades, cada R8 é independentemente C1- C6alquila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, -C1-C6alquilC3- C10cicloalquila, ou -C1-C6alquilarila; em que cada R8 é independentemente adicionalmente substituído por um a três R11.
[213] Em certas modalidades, cada R8 é independentemente C1- C6alquila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, -C1-C6alquilC3- C10cicloalquila, ou -C1-C6alquilarila; em que cada R8 é independentemente substituído adicionalmente com um a três halo, - OR12, -N(R12)2, -Si(R12)3, -C(O)OR12, -NR12C(O)OR12, - OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila, ou heterociclila; em que
[214] cada R12 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila.
[215] Em certas modalidades, cada R10 é independentemente - OR12, -N(R12)2, -S(O)2R13, -OC(O)CHR12N(R12)2, ou C1-C6alquila, em que a C1-C6alquila, de R10 é opcionalmente independentemente substituída por um a três R11;
[216] cada R11 é independentemente halo, -OR12, -N(R12)2, - Si(R12)3, -C(O)OR12, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1- C6alquila ou heterociclila;
[217] cada R12 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila; e
[218] cada R13 é independentemente C1-C6alquila ou C3- C10cicloalquila.
[219] Em certas modalidades, o anel A é C4-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila;
[220] X é NR5 ou S;
[221] p é 0, 1, 2 ou 3;
[222] q é 0, 1, 2 ou 3;
[223] R1 é C1-C6alquila, C1-C6haloalquila, C3-C10cicloalquila, -CN, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -C1-C6alquil-OH ou -C1-C6alquil-OR8;
[224] R2 é -C(O)R9;
[225] cada R3 é independentemente halo, -CN, -OR8, -NHR8, - S(O)2R8, -S(O)2N(R7)2, -NO2, -Si(R12)3, -SF5, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, - NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, -OC(O)R8, -OC(O)CHR8N(R12)2, C1- C6alquila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, ou -C1-C6alquil- heterociclila; em que cada C1-C6alquila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, ou -C1-C6alquil-heterociclila de R3 é independentemente opcionalmente substituída por um a três R10;
[226] cada R4 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, C1- C6alquila ou C2-C6alquinila; em que na C1-C6alquila de R4 é opcionalmente independentemente opcionalmente substituída por um a três R10;
[227] R5 é hidrogênio ou C1-C6alquila;
[228] cada R6 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila, C2- C6alquenila ou -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila; em que cada R6 é independentemente adicionalmente substituída por um a três R11;
[229] cada R7 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C6cicloalquila, - C1-C6alquil-heterociclila, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados, formam uma heterociclila com 4 até 7 membros; em que cada R7 ou anel assim formado é independentemente substituído adicionalmente com um a três R11;
[230] cada R8 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, ou -C1-C6alquilarila; em que cada R8 é independentemente adicionalmente substituído por um a três R11;
[231] R9 é -C1-C2haloalquila, -C2-C3alquenila, -C2-C3haloalquenila,
C2alquinila ou -CH2OS(O)2-fenila, em que C1-C2alquil-halo e -C2- C3alquenil-halo são opcionalmente substituídos por um ou dois -CH3, e a C2alquinila e fenila são opcionalmente substituídas por um -CH3;
[232] cada R10 é independentemente -OR12, -N(R12)2, -S(O)2R13, - OC(O)CHR12N(R12)2, ou C1-C6alquila, em que a C1-C6alquila, de R10 é opcionalmente independentemente substituída por um a três R11;
[233] cada R11 é independentemente halo, -OR12, -N(R12)2, - Si(R12)3, -C(O)OR12, -NR12C(O)OR12, -OC(O)CHR12N(R12)2, C1- C6alquila ou heterociclila;
[234] cada R12 é independentemente hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila; e
[235] cada R13 é independentemente C1-C6alquila ou C3- C10cicloalquila.
[236] Em certas modalidades, cada R15 é independentemente C1- C6alquila.
[237] Em certas modalidades, o composto tem uma estrutura de fórmula (V): (V)
[238] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[239] X é N, O ou S;
[240] A é uma cicloalquila de 4 a 7 membros, heterociclila de 4 a 7 membros, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos independentemente selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre;
[241] R1 é H, C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, –C(O)OR6, - C(O)N(R7)2, -OC(O)R6, -SO2R8, -SOR8, NO2, -OR8, -C1-C6alquil-OR12,
ou -Si(R15)3;
[242] R2 é -C(O)R9;
[243] R3 é H, halo, -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0- C6alquilC3-C8cicloalquila, -C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, -SO2R8, - SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3;
[244] R4 é, independentemente, halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[245] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[246] p é 0, 1, 2 ou 3;
[247] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[248] cada R7 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[249] cada R8 é, independentemente, C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila,
heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2N-, R14C0-C6alquil-;
[250] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todos H são substituídos por deutério;
[251] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-;
[252] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contendo 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N;
[253] cada R12 é, independentemente, H ou C1-C6alquila;
[254] cada R13 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[255] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[256] cada R15 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[257] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são, independentemente, opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[258] Também é fornecido neste documento um composto de fórmula (V): (V)
[259] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[260] X é N, O ou S;
[261] A é uma cicloalquila de 4 a 7 membros, heterociclila de 4 a 7 membros, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos independentemente selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre;
[262] R1 é H, C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, –C(O)OR6, - C(O)N(R7)2, -OC(O)R6, -SO2R8, -SOR8, NO2, -OR8, -C1-C6alquil-OR12, ou -Si(R15)–;
[263] R2 é -C(O)R9;
[264] R3 é H, halo, -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0- C6alquilC3-C8cicloalquila, -C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, -SO2R8, - SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3;
[265] R4 é, independentemente, halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[266] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[267] p é 0, 1, 2 ou 3;
[268] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[269] cada R7 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[270] cada R8 é, independentemente, C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2N-, ou R14C0-C6alquil-;
[271] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todos H são substituídos por deutério;
[272] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-;
[273] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R16)2NC1-C6alquil-, (R16)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-
C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R16)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contendo 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N;
[274] cada R12 é, independentemente, H ou C1-C6alquila;
[275] cada R13 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[276] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[277] cada R15 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[278] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são, independentemente, opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-;
[279] cada R16 é independentemente H, C1-C6alquila, C2-
C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R13)2NC1-C6alquil-, (R13)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R16 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada por dois grupos R16 possuem adicionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados dentre nitrogênio, oxigênio e enxofre e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1- C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R13)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[280] com a condição de que:
[281] (a) quando
[282] X for N;
[283] R1 for –C(O)OR6
[284] R2 for –C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F;
[285] A com R3 seja ;
[286] p seja 0; e
[287] R5 seja H;
[288] então, (i) R3 e R6 não são simultaneamente -NO2 e –CH3, respectivamente, e (ii) quando R6 for –CH3, então, R3 será diferente de
H, halo, e –NO2; e
[289] (b) quando
[290] X for N;
[291] R1 for –C(O)OR6
[292] R2 for –C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F;
[293] A com R3 seja ;
[294] R3 seja -C(O)OR10;
[295] p seja 0; e
[296] R5 seja H;
[297] então, R6 e R10, não são simultaneamente
[298] (i) -CH3;
[299] (ii) -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; e
[300] (iii) -CH2CH3 e –CH3, respectivamente; e
[301] (c) quando
[302] X for N;
[303] R1 seja –C(O)OR6, em que R6 é –CH3;
[304] R2 é –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F;
[305] p é 0;
[306] R3 é H; e
[307] R5 é H;
[308] então, o anel A é diferente de fenila; e
[309] (d) quando
[310] X for N;
[311] R1 seja -C(O)N(R7)2, em que R7 é H;
[312] R2 é –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F;
[313] p é 0;
[314] R5 é H; e
[315] anel A é fenila;
[316] então, R3 é diferente de H ou halo.
[317] Em certas modalidades, o composto tem uma estrutura de fórmula (V): (V)
[318] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[319] X é N, O ou S;
[320] o anel A é uma cicloalquila de 4 a 7 membros, heterociclila de 4 a 7 membros, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos independentemente selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre;
[321] R1 é H, C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, –C(O)OR6, - C(O)N(R7)2, -OC(O)R6, -SO2R8, -SOR8, NO2, -OR8, -C1-C6alquil-OR12, ou -Si(R15)–;
[322] R2 é -C(O)R9;
[323] R3 é H, halo, -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0- C6alquilC3-C8cicloalquila, -C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, -SO2R8, - SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3;
[324] R4 é, independentemente, halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[325] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[326] p é 0, 1, 2 ou 3;
[327] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-
C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[328] cada R7 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[329] cada R8 é, independentemente, C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2N- ou R14C0-C6alquil-;
[330] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todos H são substituídos por deutério;
[331] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-
C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-;
[332] cada R11 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contendo 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[333] cada R12 é, independentemente, H ou C1-C6alquila;
[334] cada R13 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[335] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[336] cada R15 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[337] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são, independentemente, opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-;
[338] com a condição de que:
[339] (a) quando
[340] X for N;
[341] R1 seja –C(O)OR6
[342] R2 seja –C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F;
[343] A com R3 seja ;
[344] p seja 0; e
[345] R5 seja H;
[346] então, (i) R3 e R6 não são simultaneamente -NO2 e –CH3, respectivamente, e (ii) quando R6 for –CH3, então, R3 será diferente de H, halo, e –NO2; e
[347] (b) quando
[348] X for N;
[349] R1 for –C(O)OR6
[350] R2 for –C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F;
[351] A com R3 seja ;
[352] R3 seja -C(O)OR10;
[353] p seja 0; e
[354] R5 seja H;
[355] então, R6 e R10, não são simultaneamente
[356] (i) -CH3;
[357] (ii) -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; e
[358] (iii) -CH2CH3 e –CH3, respectivamente; e
[359] (c) quando
[360] X for N;
[361] R1 seja –C(O)OR6, em que R6 é –CH3;
[362] R2 é –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F;
[363] p é 0;
[364] R3 é H; e
[365] R5 é H;
[366] então, o anel A é diferente de fenila; e
[367] (d) quando
[368] X for N;
[369] R1 seja -C(O)N(R7)2, em que R7 é H;
[370] R2 é –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F;
[371] p é 0;
[372] R5 é H; e
[373] anel A é fenila;
[374] então, R3 é diferente de H ou halo.
[375] Em certas modalidades, o anel A é arila ou heteroarila. Em certas modalidades, o anel A é uma arila monocíclica ou heteroarila monocíclica. Em certas modalidades, o anel A é heterociclila. Em certas modalidades, o anel A é uma heterociclila de 4 a 7 membros. Em certas modalidades, o anel A é arila. Em certas modalidades, o anel A é fenila. Em certas modalidades, o anel A é heteroarila. Em certas modalidades, o anel A é piridila. Em certas modalidades, o anel A é fenila, piridila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila.
[376] Em certas modalidades, o anel A é arila ou heteroarila, cada um dos quais é substituído por um a três R3. Em certas modalidades, o anel A é arila ou heteroarila, cada um dos quais é substituído por um a três de R3, em que pelo menos um R3 é C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila; em que cada C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila e heteroarila de R3 é opcionalmente substituído por um a três R10.
[377] Em certas modalidades, o anel A é arila ou heteroarila, cada um dos quais é substituído por dois ou três R3. Em certas modalidades, o anel A é arila ou heteroarila, cada um dos quais é substituído por dois ou três R3; em que pelo menos um R3 é halo.
[378] Em certas modalidades, o anel A é:
[379] em que 0 a 3 de U, V, W, X, Y e Z são independentemente N, S ou O, e cada representa independentemente uma ligação simples ou dupla, que cumpre os requisitos de valência baseados em U, V, W, X, Y e Z.
[380] Em certas modalidades, o anel A é: ou
[381] em que 1 a 3 de U, W, X, Y e Z é N, S ou O, e representa uma ligação simples ou dupla, que cumpre os requisitos de valência baseados em U, W, X, Y e Z.
[382] Em certas modalidades, o anel A é ciclo-hexila. Em certas modalidades, o anel A é C4-C10cicloalquila, substituído por um a três R3. Em certas modalidades, o anel A é uma C4-C7cicloalquila, substituído por um a três R3. Em certas modalidades, o anel A é biciclo[1.1.1]pentanila, substituído por um a três R3. Em certas modalidades, o anel A é selecionado dentre ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila e ciclo-heptila, em que cada um é substituído por um a três R3.
[383] Em certas modalidades, o anel A é ciclo-hexila. Em certas modalidades, o anel A é C4-C10cicloalquila. Em certas modalidades, o anel A é uma C4-C7cicloalquila. Em certas modalidades, o anel A é biciclo[1.1.1]pentanila. Em certas modalidades, o anel A é selecionado dentre ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila e ciclo-heptila.
[384] Em certas modalidades, o anel A é: , , , , , , , , , , , , , , , ou , em que q e cada R3 é independentemente como aqui definido.
[385] Em certas modalidades, o anel A é selecionado a partir de: e .
[386] Em certas modalidades, o anel A é um anel bicíclico em ponte selecionado a partir de: , , , , , , , , , , , , , e , em que cada um é substituído por um a três R3. Em certas modalidades, o anel A é um anel bicíclico em ponte selecionado a partir de: , , , , e , em que cada R3 está ligado a um átomo de carbono no anel bicíclico em ponte.
[387] Em certas modalidades, o anel A é um anel bicíclico em ponte selecionado de: , , , , , , , , , , , , ,e , em que R3 está ligado a um átomo de carbono no anel bicíclico em ponte. Em certas modalidades, o anel A é um anel bicíclico em ponte selecionado de: , , , ,e .
[388] Em certas modalidades, o anel A é: ou .
[389] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -NH2, -NHR8, - N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, -Si(R12)3, - SF5, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, -OC(O)R8, - C(O)R6, ou -OC(O)CHR8N(R12)2.
[390] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -NHR8 ou -
N(R8)2.
[391] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -C(O)OR6 ou - C(O)R6.
[392] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -S(O)2N(R7)2, - S(O)N(R7)2, ou -C(O)N(R7)2.
[393] Em certas modalidades, pelo menos um R3 é -S(O)2R8, - S(O)R8, -NR12C(O)R8, -NR12C(O)OR8, -OC(O)R8, ou - OC(O)CHR8N(R12)2.
[394] Em certas modalidades, o composto de fórmula (V) tem a estrutura estereoquímica (V'): (V')
[395] ou um enantiômero ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[396] Em certas modalidades, cada um dos compostos descritos neste documento pode ter a estrutura estereoquímica representada para a fórmula (V').
[397] Em certas modalidades, o composto tem uma estrutura de fórmula (Va): (Va),
[398] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[399] X é N, O ou S;
[400] R1 é H, C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, –C(O)OR6, - C(O)N(R7)2, -OC(O)R6, -SO2R8, -SOR8, NO2, -OR8, -C1-C6alquil-OR12, ou -Si(R15)3;
[401] R2 é -C(O)R9;
[402] R3 é -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0-C6alquilC3- C8cicloalquila, -C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, -SO2R8, -SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3;
[403] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[404] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[405] p é 0, 1, 2 ou 3;
[406] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[407] cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N;
[408] cada R8 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2N-, ou R14C0-C6alquil-;
[409] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H é substituído por deutério;
[410] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-;
[411] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo,
C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[412] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[413] cada R13 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[414] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[415] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[416] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-;
[417] com a condição que:
[418] (a) quando
[419] X for N;
[420] R1 seja –C(O)OR6
[421] R2 seja –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F;
[422] p seja 0; e
[423] R5 seja H;
[424] então, (i) R3 e R6 não sejam simultaneamente -NO2 e –CH3, respectivamente;
[425] (b) quando
[426] X for N;
[427] R1 seja –C(O)OR6
[428] R2 seja –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F;
[429] R3 seja -C(O)OR10;
[430] p seja 0; e
[431] R5 seja H;
[432] então, R6 e R10 não sejam simultaneamente
[433] (i) -CH3;
[434] (ii) -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; e
[435] (iii) -CH2CH3 e –CH3, respectivamente.
[436] Em certas modalidades, o composto de fórmula estrutural (Va) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Va’): (Va’)
[437] ou um enantiômero ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[438] Em certas modalidades, a arila, quando usada sozinha ou como parte de uma porção química maior, por exemplo, arilC1-C6alquila, é selecionada a partir de fenila, naftila e bifenila.
[439] Em certas modalidades, a heteroarila, quando usada sozinha ou como parte de uma porção química maior, por exemplo, heteroarilC1- C6alquila, é selecionada a partir de furanila imidazolila benzimidazolila isoxazolila oxazolila pirrolila piridila, pirimidinila, piridazinila, tiazolila, tienila, 3-tienila, benzofurila, indolila, pirazolila, isotiazolila,
oxadiazolilpurinila, pirazinila e quinolinila.
[440] Em certas modalidades, a heterociclila de 4 a 7 membros é selecionada a partir de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, imidazolidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3-oxazinanila, 1,3-tiazinanila, di- hidropiridinila, 1,3-tetra-hidropirimidinila, di-hidropirimidinila, azepanila e 1,4-diazepanila.
[441] Em certas modalidades, a heterociclila de 4 a 6 membros, quando presente é selecionada a partir de azetidinila, oxetanila, tietanila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra-hidropiridinila, piranila, tetra- hidropiranila, dioxanila, 1,3-dioxolanila, di-hidropiranila, di-hidrotienila, di-hidrofuranila, imidazolinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3-oxazinanila, 1,3-thiazinanila, di-hidropiridinila, 1,3- tetra-hidropirimidinila, e di-hidropirimidinila.
[442] Em certas modalidades, R4 é halo. Em certas modalidades, R4 é Br, Cl ou F e p é 1 ou 2.
[443] Em certas modalidades, R9 é -C1-C2alquil-halo. Em certas modalidades, R9 é -C1-C2alquilCl ou -C1-C2alquilF. Em certas modalidades, R9 é -CH2CH2Cl. Em certas modalidades, R9 é - CD2CD2Cl. Em certas modalidades, R9 é -CH2Cl ou -CH2F. Em certas modalidades, R9 é -CH2Cl. Em certas modalidades, R9 é -CD2Cl ou - CD2F. Em certas modalidades, R9 é -CD2Cl.
[444] Em certas modalidades, R1 é -C(O)OR6, em que R6 é uma C1-C6alquila, C1-C4alquila ou C3-C6alquila. Em certas modalidades, o R6 de -C(O)OR6 é metila, etila, n-propila, n-butila, isopropila, t-butila, pentila ou hexila.
[445] Em certas modalidades, R3 é -C(O)OR10, em que R10 é uma C1-C6alquila, C1-C4alquila ou C3-C6alquila. Em certas modalidades, o R10 de -C(O)OR10 é metila, etila, n-propila, n-butila, isopropila, t-butila,
pentila ou hexila.
[446] Conforme observado para os compostos de fórmula (Va) e (Va’), quando R1 é -C(O)OR6, R2 é -C(O)CH2Cl; e R3 é -C(O)OR10, então, R6 e R10 não são simultaneamente: (i) -CH3, (ii) -CH3 e C2- C6alquinila, respectivamente; e (iii) -CH2CH3 e -CH3, respectivamente.
[447] Em certas modalidades, o composto tem a seguinte fórmula estrutural (Vb): (Vb)
[448] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[449] X é N, O ou S;
[450] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[451] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[452] p é 0, 1, 2 ou 3;
[453] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[454] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H é substituído por deutério;
[455] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-
C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-;
[456] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N;
[457] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[458] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-,
adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[459] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[460] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil- e heteroarilC2-C6alquenil-;
[461] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-;
[462] com a condição de que quando
[463] X for N;
[464] R9 seja –CH2Cl, –CH2F, –CD2Cl, ou –CD2F;
[465] p seja 0; e
[466] R5 seja H, então, R6 e R10 não serão simultaneamente
[467] (i) -CH3;
[468] (ii) -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; e
[469] (iii) -CH2CH3 e –CH3, respectivamente.
[470] Em certas modalidades, o composto de fórmula estrutural (Vb) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vb’); (Vb’)
[471] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[472] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) ou (Vb’),
[473] X é N, O ou S;
[474] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[475] R5 é H, C1-C6alquila ou é ausente quando X é S ou O;
[476] R6 é C1-C6alquila;
[477] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[478] R10 é C2-C6alquila, C3-C6cicloalquila ou C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-;
[479] R12 é H ou C1-C6alquila; e
[480] p é 0, 1, 2 ou 3.
[481] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) ou (Vb’), X é N. Em certas modalidades de fórmula (Vb) ou (Vb’), R4 é halo ou ausente. Em certas modalidades, R4 é Br, Cl ou F e p é 1 ou 2. Em certas modalidades da fórmula (Vb) ou (Vb’), R6 é C3-C6alquila. Em certas modalidades da fórmula (Vb) ou (Vb’), R10 é C3-C6alquila. Em certos enquadramentos da fórmula (Vb) ou (Vb’), X é N, R4 é halo ou ausente, e R6 é C3-C6alquila. Em certos enquadramentos da fórmula (Vb) ou (Vb’), X é N, R4 é halo ou ausente, e R10 é C3-C6alquila.
[482] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) ou (Vb’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[483] X é N, O ou S;
[484] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[485] R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O;
[486] R6 é C3-C6alquila;
[487] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[488] R10 é C1-C6alquila;
[489] R12 é H ou C1-C6 alquila; e
[490] p é 0, 1, 2 ou 3.
[491] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) e (Vb’), R6 é t-butila e R10 é C1-C6alquila.
[492] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) e (Vb’), R6 é C3-C6alquila; e R10 é –CH3. Em certas modalidades, R6 é t-butila.
[493] Em certas modalidades, R10 é t-butila.
[494] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) ou (Vb’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[495] X é N, O ou S;
[496] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8 alquila, –OR12, -C1-C6 alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[497] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[498] R6 é C1-C6alquila;
[499] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[500] R10 é C3-C6alquila;
[501] R12 é H ou C1-C6alquila; e
[502] p é 0, 1, 2 ou 3.
[503] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) e (Vb’), R6 é C1-C6alquila e R10 é t-butila.
[504] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) e (Vb’), R6 é –CH3; e R10 é C3-C6alquila. Em certas modalidades, R6 é –CH3 e R10 é t-butila.
[505] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) e (Vb’), R6 é etila; e R10 é t-butila.
[506] Em certas modalidades do composto de fórmula estrutural
(Vb) ou (Vb’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[507] X é N, O ou S;
[508] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[509] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[510] R6 é C1-C6alquila;
[511] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; e
[512] R10 é adamantila ou adamantilC1-C6alifático-;
[513] R12 é H ou C1-C6alquila; e
[514] p é 0, 1, 2 ou 3.
[515] Em certas modalidades, o adamantil é selecionado a partir do seguinte:
[516] Em certas modalidades do composto de fórmula (V), (V’), (Va), (Va’), (Vb) e (Vb’), R6 é metila, etila, n-propila, n-butila, isopropila, t-butila, pentila ou hexila; e R10 é adamantilC1-C6alifático-.
[517] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) ou (Vb’), X é N. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) ou (Vb’), X é N; e R5 é H.
[518] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vb) ou (Vb’), R4 é halo. Em certas modalidades da fórmula (Vb) ou (Vb’), p é 0.
[519] Em certas modalidades do composto de fórmula (V), (V’), (Va) ou (Va’), R1 é -C(O)N(R7)2 ou -OC(O)R6; e R3 é -C(O)OR10. Em certas modalidades, R1 é -C(O)N(R7)2.
[520] Em certas modalidades do composto de fórmula (V), (V’), (Va) ou (Va’), R1 é -C(O)OR6; e R3 é -C(O)N(R11)2, ou -OC(O)R10. Em certas modalidades, R3 é -C(O)N(R11)2.
[521] Em certas modalidades, o composto tem a seguinte fórmula estrutural (Vc): (Vc)
[522] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[523] X é N, O ou S;
[524] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[525] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[526] p é 0, 1, 2 ou 3;
[527] cada R6 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[528] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[529] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-
C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenill-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[530] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[531] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[532] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[533] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquila-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[534] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila,
heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- e R12O(O)C-.
[535] Em certas modalidades, o composto tem a seguinte fórmula estrutural (Vd): (Vd)
[536] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[537] X é N, O ou S;
[538] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[539] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[540] p é 0, 1, 2 ou 3;
[541] cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[542] R9 é C1-C6alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais halo, um ou mais –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério;
[543] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-;
[544] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[545] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[546] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[547] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[548] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[549] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[550] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vc) e (Vd) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vc’) e (Vd’), respectivamente: (Vc’) (Vd’)
[551] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[552] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vc) ou (Vc’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[553] X é N, O ou S;
[554] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, -OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[555] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[556] R6 é C1-C6 alquila;
[557] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[558] R11 são conforme definidos para a fórmula (V) acima;
[559] R12 é H ou C1-C6alquila; e
[560] p é 0, 1, 2 ou 3.
[561] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vc) e (Vc’), cada R11 é uma C1-C6alquila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vc) e (Vc'), cada R11 é –CH3. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vc) e (Vc’), um de R11 é R12O(O)C-C1-C6alquil- ou R12O-C1-C6alquil-, em que C1-C6 alquila é opcionalmente substituída por C1-C6alquila ou -NH2, e R12 é H ou C1-C6alquila.
[562] Em certas modalidades de fórmula (Vc) e (Vc’), os dois grupos R11 juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada por dois grupos R11 é opcionalmente substituída por uma heterociclila de 4 a 6 membros ou -N(C1-C6alquil)2, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N. Em certas modalidades, a heterociclila de 4 a 7 membros é selecionada a partir de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, imidazolidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3-oxazinanila, 1,3-tiazinanila, di-hidropiridinila, tetra- hidropiranila, 1,3-tetra-hidropirimidinila, di-hidropirimidinila, azepanila e 1,4-diazepanila. Em certas modalidades, a heterociclila de 4 a 6 membros, quando presente como um substituinte, é selecionada a partir de azetidinila, oxetanila, tietanila, piperidinila, 1,2,3,6-tetra- hidropiridinila, piranila, dioxanila, 1,3-dioxolanila, di-hidropiranila, di- hidrotienila, di-hidrofuranila, imidazolinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3-oxazinanila, 1,3-thiazinanila, di- hidropiridinila, 1,3-tetra-hidropirimidinila, e di-hidropirimidinila. Em certas modalidades, o grupo protetor de N quando presente é t-Boc.
[563] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vd) ou (Vd’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[564] X é N, O ou S;
[565] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[566] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[567] R7 é conforme definido pela fórmula (V) acima;
[568] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[569] R10 é C1-C6alquila;
[570] R12 é H ou C1-C6alquila; e
[571] p é 0, 1, 2 ou 3.
[572] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vd) e (Vd’), cada R7 é um H ou C1-C6alquila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vd) e (Vd’), R7 é uma C1-C6alquila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vd) e (Vd’), R7 é C1-C6alquila e R10 é C1- C6alquila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vd), R7 é R12O(O)C-C1-C6alquil-, em que C1-C6 alquila é opcionalmente substituída por C1-C6alquila ou NH2, e cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila.
[573] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vd) ou
(Vd’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[574] X é N, O ou S;
[575] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6 alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[576] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[577] R7 é C1-C6alquila;
[578] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[579] R10 é C1-C6alquila;
[580] R12 é H ou C1-C6alquila; e
[581] p é 0, 1, 2 ou 3.
[582] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vd) ou (Vd’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, R10 é t-butila.
[583] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vc), (Vc’), (Vd), e (Vd’), X é N. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vc), (Vc’), (Vd), e (Vd’), X é N; e R5 é H.
[584] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vc), (Vc’), (Vd) e (Vd’), R4 é halo. Em certas modalidades da fórmula (Vc), (Vc’), (Vd) e (Vd’), p é 0.
[585] Em certas modalidades, o composto tem a fórmula: (Ve) ou (Vf)
[586] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[587] X é N, O ou S;
[588] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[589] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[590] p é 0, 1, 2 ou 3;
[591] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[592] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério;
[593] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-;
[594] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N;
[595] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[596] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[597] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[598] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[599] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[600] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Ve) ou (Vf) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Ve’) e (Vf’), respectivamente:
(Ve’) (Vf’)
[601] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[602] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Ve), (Ve’), (Vf) e (Vf’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[603] X é N, O ou S;
[604] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[605] R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O;
[606] R6 é C1-C6alquila;
[607] R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; e
[608] R10, R12 e R13 são como definidos para o composto de fórmula (Ve) ou (Vf) acima.
[609] Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve) ou (Ve’), R6 é metila, etila, n-propila, n-butila, isopropila, t-butila, pentila ou hexila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve) ou (Ve’), R6 é t-butila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve) ou (Ve’), R10 é uma C1-C6alquila.
[610] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vf) ou (Vf’), R13 é uma C1-C6alquila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, ou heteroarilC2- C6alquenil-, em que a C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, e heteroarila são opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados do grupo que consiste em OH, halo, C1-C6alquila, e C1-C6alquil-O-, HOCH2(O)C-, R12O(O)C-, em que R12 é como definido para a fórmula (V).
[611] Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve), (Ve’), (Vf) ou (Vf’), R6 é t-butila.
[612] Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve), (Ve'), (Vf) ou (Vf’) acima, a arila, quando presente, é selecionada de fenila e naftila. Em certas modalidades do composto de (Ve), (Ve’), (Vf) ou (Vf’) acima, a heteroarila, quando presente, é selecionada de furanila, imidazolila, benzimidazolila, isoxazolila, oxazolila, pirrolila, piridila, pirimidinila, piridazinila, tiazolila, tienila, 3-tienila, benzofurila, indolila, pirazolila, isotiazolila, oxadiazolilpurinila, pirazinila e quinolinila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve), (Ve’), (Vf) ou (Vf’) acima, a heterociclila, quando presente, é selecionada de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, imidazolidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3- oxazinanila, 1,3-tiazinanila, di-hidropiridinila, 1,3-tetra-hidropirimidinila, di-hidropirimidinila, azepanila e 1,4-diazepanila.
[613] Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve), (Ve’), (Vf) e (Vf’), X é N. Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve), (Ve’), (Vf), e (Vf’), X é N; e R5 é H.
[614] Em certas modalidades do composto de fórmula (Ve), (Ve’), (Vf) e (Vf’), R4 é halo. Em certas modalidades da fórmula (Ve), (Ve’), (Vf) e (Vf’), p é 0.
[615] Em certas modalidades, o composto tem a seguinte fórmula estrutural (Vg):
(Vg)
[616] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[617] X é N, O ou S;
[618] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[619] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[620] p é 0, 1, 2 ou 3;
[621] cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[622] R9 é C1-C6alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais halo, um ou mais –CH3, ou um ou até todos H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[623] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[624] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[625] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[626] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[627] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-
C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[628] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[629] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vg) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vg’): (Vg’)
[630] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[631] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vg) e (Vg’), X é N. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vg) e (Vg’), X é N; e R5 é H.
[632] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vg) e (Vg’), R4 é halo. Em certas modalidades da fórmula (Vg) e (Vg’), p é 0.
[633] Em certas modalidades, o composto tem a seguinte fórmula estrutural (Vh): (Vh)
[634] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[635] X é N, O ou S;
[636] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[637] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[638] p é 0, 1, 2 ou 3;
[639] R6 é C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[640] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[641] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[642] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[643] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[644] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[645] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquila-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[646] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- e R12O(O)C-.
[647] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vh) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vh’): (Vh’)
[648] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[649] Em certas modalidades do composto de fórmula estrutural (Vh) ou (Vh’), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[650] X é N, O ou S;
[651] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[652] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[653] R6 é C3-C6alquila;
[654] R9 é -C1-C2alquil-halo, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[655] R12 é H ou C1-C6alquila; e
[656] p é 0, 1, 2 ou 3.
[657] Em certas modalidades, R6 é t-butila.
[658] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vh) e (Vh’), X é N. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vh) e (Vh’), X é N; e R5 é H.
[659] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vh) e (Vh’), R4 é halo. Em certas modalidades da fórmula (Vh) e (Vh’), p é 0.
[660] Em certas modalidades, o composto tem a fórmula estrutural (Vi): (Vi)
[661] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[662] X é N, O ou S;
[663] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[664] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[665] p é 0, 1, 2 ou 3;
[666] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[667] R8 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2N-;
[668] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais halo, um ou mais –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério;
[669] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[670] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[671] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[672] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[673] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[674] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[675] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vi) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vi’):
(Vi’)
[676] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em certas modalidades do composto, ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de fórmula estrutural (Vi) ou (Vi’):
[677] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, heterociclilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquil-, ou heteroarilC1-C6alquil-;
[678] R8 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2N-;
[679] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3 ou um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituída por deutério;
[680] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, ou (R11)2NC1-C6alquil-; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados formam uma heterociclila com 4 até 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 está opcionalmente substituído por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros seja substituída opcionalmente por OH, halo, ou C1-C6 alquila com 6 membros, ou quando contendo dois ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N;
[681] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; e
[682] em que a C1-C6alquila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, e heteroarila, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[683] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vi) e (Vi’),
[684] X é N, O ou S;
[685] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[686] R5 é H, C1-C6alquila ou é ausente quando X é S ou O;
[687] p é 0, 1, 2 ou 3;
[688] R6 é C1-C6alquila;
[689] R8 é (R11)2N-;
[690] R9 é -C1-C2alquil-halo, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[691] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, adamantila ou adamantilC1-C6alifático; e
[692] R12 é H ou C1-C6alquila.
[693] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vi) e (Vi’),
[694] X é N, O ou S;
[695] R4 é independentemente halo ou C1-C8alquila;
[696] R5 é H, C1-C6 alquila, ou está ausente quando X é S ou O;
[697] p é 0, 1, 2 ou 3;
[698] R6 é C1-C6alquila;
[699] R8 é (R11)2N-;
[700] R9 é -C1-C2alquil-halo, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; e
[701] R11 é H, e adamantila ou adamantilC1-C6alifático-.
[702] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vi) e (Vi’),
[703] X é N, O ou S;
[704] R4 é independentemente halo ou C1-C8alquila;
[705] R5 é H, C1-C6 alquila, ou está ausente quando X é S ou O;
[706] p é 0, 1, 2 ou 3;
[707] R6 é C1-C6alquila;
[708] R8 é (R11)2N-;
[709] R9 é -C1-C2alquil-halo, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; e
[710] dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual eles estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterocilila de 4 a 6 membros ou (R11)2N-, em que a heterocilila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N.
[711] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vi) e (Vi’), X é N. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vi) e (Vi’), X é N; e R5 é H.
[712] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vi) e (Vi’), R4 é halo. Em certas modalidades da fórmula (Vi) e (Vi’), p é 0.
[713] Em certas modalidades, o composto tem a fórmula estrutural (Vj):
(Vj)
[714] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[715] X é N, O ou S;
[716] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[717] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[718] p é 0, 1, 2 ou 3;
[719] cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[720] R8 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-,
arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2N-;
[721] R9 é C1-C6alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais halo, um ou mais –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério;
[722] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[723] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[724] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-,
heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[725] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[726] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[727] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[728] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vj) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vj’): (Vj’)
[729] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[730] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vj) e (Vj’), X é N. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vj) e (Vj’), X é N; e R5 é H.
[731] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vj) e (Vj’), R4 é halo. Em certas modalidades da fórmula (Vj) e (Vj’), p é 0.
[732] Em certas modalidades, o composto tem a fórmula estrutural (Vk):
(Vk)
[733] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[734] X é N, O ou S;
[735] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[736] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[737] p é 0, 1, 2 ou 3;
[738] R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-;
[739] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[740] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenill-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-
C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[741] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[742] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[743] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[744] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquila-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[745] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- e R12O(O)C-.
[746] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vk) e (Vk’),
R6 é uma C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, ou C2-C6alquinila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vk), R6 é C1-C6alquila. Em certas modalidades, R6 é metila, etila, n-propila, n-butila, isopropila, t-butila, pentila ou hexila. Em certas modalidades do composto de fórmula (Vk), R6 é C3-C6alquila, tal como t-butila.
[747] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vk), um de R11 é H e o outro de R11 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N.
[748] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vk), um de R11 é H e o outro de R11 é C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático- ou um grupo protetor de N.
[749] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vk), R4 é halo ou ausente. Em certas modalidades, R4 é Br, Cl ou F.
[750] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vk) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vk’): (Vk’)
[751] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[752] Em certas modalidades, o composto tem a fórmula estrutural (Vm): (Vm)
[753] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[754] X é N, O ou S;
[755] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[756] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[757] p é 0, 1, 2 ou 3;
[758] cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[759] R9 é C1-C6alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais halo, um ou mais –CH3, ou um ou até todos H em -C1-C2alquila é substituído por deutério;
[760] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[761] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[762] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[763] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[764] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[765] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[766] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vm), cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila. Em certas modalidades, cada R7 é C1-C6alquila. Em certas modalidades, em que R7 é uma alquila, R7 é metila, etila, n-propila, n-butila, isopropila, t-butila, pentila ou hexila.
[767] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vm), um de R11 é H e o outro de R11 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N.
[768] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vm), um de R11 é H e o outro de R11 é C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático- ou um grupo protetor de N.
[769] Em certas modalidades do composto de fórmula (Vm), R4 é halo ou ausente. Em certas modalidades, R4 é Br, Cl ou F.
[770] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vm) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vm’): (Vm’)
[771] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[772] Em certas modalidades, o composto tem uma estrutura de fórmula (Vn): (Vn),
[773] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[774] X é N, O ou S;
[775] R1 é C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, ou -C1-C6alquil-OR12;
[776] R2 é -C(O)R9;
[777] R3 é -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0-C6alquilC3- C8cicloalquila, -C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, -SO2R8, -SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3;
[778] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[779] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[780] p é 0, 1, 2 ou 3;
[781] R8 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2N-, ou R14C0-C6alquil-;
[782] R9 é C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou mais halo, um ou mais –CH3, ou um ou até todos de H são substituídos por deutério;
[783] R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-;
[784] cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1- C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0- C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1-C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
[785] cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[786] cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N;
[787] R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e
[788] cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2-C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1- C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-;
[789] em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado à outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[790] Em certas modalidades, o composto tem uma estrutura de fórmula (Vp):
(Vp)
[791] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
[792] X é N, O ou S;
[793] R1 é C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, ou -C1-C6alquil-OR12;
[794] R3 é -C0-C6alquilC3-C8cicloalquila ou -C0-C6alquil- heterociclila;
[795] R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12;
[796] R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
[797] p é 0, 1, 2 ou 3;
[798] R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halo, um ou mais –CH3, ou um ou até todos os H são substituídos por deutério;
[799] R12 é independentemente H ou C1-C6alquila;
[800] em que a C0-C6alquila ou -C3-C8cicloalquila são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1- C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
[801] Em certas modalidades, o composto de fórmula (Vn) e (Vp) tem a seguinte estrutura estereoquímica (Vn’):
(Vn’)
[802] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[803] Em certas modalidades dos compostos de fórmula (Vn), (Vp) e (Vn’), R9 é -C1-C2alquil-halo. Em certas modalidades, R9 é -C1- C2alquilCl ou -C1-C2alquilF. Em certas modalidades, R9 é -CH2CH2Cl. Em certas modalidades, R9 é -CD2CD2Cl. Em certas modalidades, R9 é -CH2Cl ou -CH2F. Em certas modalidades, R9 é - CH2Cl. Em certas modalidades, R9 é -CD2Cl ou -CD2F. Em certas modalidades, R9 é -CD2Cl.
[804] Em certas modalidades dos compostos de fórmula (Va), (Vn), (Vp) e (Vn’), o grupo C3-C8cicloalquila da -C0-C6alquilC3- C8cicloalquila é ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo- heptila ou ciclo-octila. Em certas modalidades, a C3-C8cicloalquila é ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila ou ciclo-hexila.
[805] Em certas modalidades dos compostos de fórmula (Va), (Vn), (Vp) e (Vn’), o grupo heterociclila do grupo -C0-C6alquil- heterociclila é um anel heterocíclico de 4 a 7 membros contendo 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados de S, N e O, em que o anel heterocíclico é opcionalmente substituído por 1, 2 ou 3 substituintes selecionados de OH, halo, -NH 2 e C1-C6alquila ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N. Em certas modalidades, o anel heterocíclico é selecionado a partir de azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, pirazolidinila, isoxazolidinila, oxazolidinila, tiazolidinila, imidazolidinila, tetra-hidropiranila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, 1,3-oxazinanila, 1,3-tiazinanila, di-hidropiridinila, 1,3-tetra-
hidropirimidinila, di-hidropirimidinila, azepanila e 1,4-diazepanila. Em certas modalidades, a heterocicloalquila é tetra-hidropiranila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila.
[806] Em certas modalidades, o composto é selecionado a partir do grupo que consiste nos compostos da Tabela 1. TABELA 1
[807] ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
3. MÉTODOS DE PREPARAÇÃO
[808] Os compostos da presente divulgação podem ser sintetizados em vista da orientação fornecida neste documento, incorporando reações químicas conhecidas e procedimentos relacionados, tais como separação e purificação. Métodos e procedimentos representativos para a preparação dos compostos nesta divulgação são descritos abaixo e nos Exemplos. Acrônimos são abreviações usadas por convenção, que podem ser encontradas na literatura e em revistas científicas.
[809] Entende-se que os materiais de partida e as condições de reação podem ser variados, a sequência das reações alterada e etapas adicionais empregadas para produzir compostos abrangidos pela presente divulgação, conforme demonstrado pelos exemplos a seguir. Referências gerais para reações químicas conhecidas úteis para sintetizar os compostos divulgados estão disponíveis (consultar, por exemplo, Smith e March, March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure, Quinta Edição, Wiley Interscience, 2001; ou Carey e Sundberg, Advanced Organic Química, Part B. Reaction and Synthesis; Quinta Edição, Springer, 2007; ou Li, JJ Name Reactions, A Collection of Detailed Mechanisms and Synthetic Applications; Quinta Edição, Springer, 2014).
[810] Os materiais de partida podem ser obtidos a partir de fontes comerciais ou preparados por reações conhecidas e métodos da literatura, tais como jornais científicos, que são conhecidos pelos versados na técnica.
[811] Em certas modalidades, a síntese dos compostos pode usar os seguintes esquemas. Por exemplo, os compostos de Fórmula (I) podem ser preparados de acordo com as sínteses gerais descritas abaixo no Esquema 1, em que reagentes adequados podem ser adquiridos de fontes comerciais ou sintetizados por meio de métodos conhecidos ou métodos adaptados dos exemplos aqui fornecidos. No Esquema 1, cada um dos anéis A, X, R1, R2, R3, R4, p e q são independentemente como aqui definidos, e LG é um grupo de saída (por exemplo, halo). ESQUEMA 1
[812] No Esquema 1, o composto 1-A3 pode ser fornecido ciclizando uma amina 1-A1 com aldeído 1-A2. Os compostos de fórmula (I) podem, então, ser fornecidos por acoplamento de 1-A3 com 1-A4 sob condições de reação adequadas para fornecer compostos de fórmula (I). Outras sínteses exemplares são mostradas nos esquemas abaixo.
[813] Para a síntese de compostos aqui descritos possuindo ésteres em R1 e R3, um exemplo de síntese é mostrado no Esquema 1A. ESQUEMA 1A
[814] Em certas modalidades, R6 e R10 são grupos alquila. O uso de diferentes álcoois HO-R10 na reação com 1-B2 pode produzir composto de alquil 4-formilbenzoato diferente (1-B1) para a reação de ciclização com o composto 1-A para se obter o composto 1-4. A reação com cloreto de 2-cloroacetila resulta no composto IE, em que os ésteres estão presentes em R1 e R3.
[815] Em certas modalidades, a síntese de compostos com outros ésteres em R3 pode usar a síntese mostrada no Esquema 1B a partir do composto IE*: ESQUEMA 1B
[816] Em certas modalidades, o composto 1-5 também pode ser usado para a síntese de amidas em R3 como mostrado no Esquema 1C. ESQUEMA 1C
[817] O uso de diferentes grupos alquilamino pode ser usado para introduzir diferentes amidas alquil substituídas, por exemplo NH(CH3)2, ou NH2-t-butila como mostrado no Esquema 1D ESQUEMA 1D
[818] A síntese de ésteres reversos na posição R3 pode usar a via sintética do Esquema 1, mas substituindo o alquil 4-formilbenzoato por um material de partida substituído, por exemplo, acetato de 4-formilfenil) como mostrado no Esquema 1E:
ESQUEMA IE O O
O R10 C OR6 C OR6
OHC O NH N Cl
O 1-B2 ClCOCH2Cl
N N O OR6 H H NaHCO3, CHCl3 NH2
N
H R10 R10
O O 1-A I-RE O
O
[819] O composto de acetato de 4-formilfenil substituído, por exemplo 4-formil t-butilacetato, pode ser preparado como abaixo, e o produto 1-B3 resultante acoplado ao composto 1-A tendo um éster metílico como mostrado no Esquema 1F: ESQUEMA 1F
[820] Para a síntese de compostos em que o anel A é fenila substituída por um grupo sulfonila, por exemplo, uma sulfonamida, a via sintética do Esquema 1G pode ser usada. ESQUEMA 1G
[821] No Esquema 1G, o 4-(clorossulfonil)benzoato de etila com uma amina NH(R11)2 para formar o composto 1-SA1, 4- formilbenzenossulfonamida N-substituída. O composto 1-SA1 é acoplado ao composto 1-A e depois de reagir com 2 acetato de cloroacetila como mostrado no Esquema 1A acima para formar o composto IV-S. Um método semelhante pode ser usado para fornecer compostos em que R3 é –SO2-alquila e semelhantes.
[822] Para a síntese de compostos em que R1 é cicloalquila, por exemplo, uma ciclo-hexila, uma via sintética de acordo com o Esquema 1H pode ser usada: ESQUEMA 1H
[823] No Esquema 1H, o composto 5-1 é reduzido, ciclizado e oxidado para fornecer o composto 5-4. O composto 5-4 é reagido com etiniltrimetilsilano para fornecer o alcino 5-5. A ciclização com uma 2- iodoanilina opcionalmente substituída fornece o composto 5-6, que pode, então, ser desprotegido e acoplado a um benzaldeído opcionalmente substituído, fornece o composto 5-9, que após reação, com um ácido desejado, produz o composto 5-10.
[824] Para a síntese de compostos tendo vários substituintes R4, uma via de síntese tal como no Esquema 1I pode ser utilizado. ESQUEMA 1I
[825] No Esquema 1I, o composto 6-1 pode ser funcionalizado através do correspondente éster 6-2, para fornecer o composto 6-3, que pode, então, ser convertido em um indol protegido 6-4. A desproteção fornece o composto 6-6, que pode, então, ser acoplado com um benzaldeído opcionalmente substituído para fornecer o composto 6-7. A redução do éster produz o composto 6-8, que pode, então, ser acoplado a uma porção química de ácido (por exemplo, um aminoácido, como a valina) para fornecer o composto 6-9. A reação do composto 6- 9 com um ácido adequado fornece o composto 6-10, que pode ser opcionalmente reagido com um ácido para fornecer o sal correspondente, como no composto 6-11.
[826] Outros compostos da divulgação podem ser sintetizados usando as vias sintéticas acima e adaptando procedimentos de síntese química disponíveis para o versado na técnica. Métodos exemplares de síntese são fornecidos nos Exemplos. Deve ser entendido que cada um dos Procedimentos que descrevem a síntese de compostos exemplares são parte do relatório descritivo e, portanto, incorporados aqui na Descrição Detalhada desta divulgação.
4. MÉTODOS DE USO
[827] Em certas modalidades, os compostos descritos neste documento são usados em um método de tratamento de câncer. Em certas modalidades, o método de tratamento do câncer compreende a administração a um sujeito em necessidade de uma quantidade terapeuticamente eficaz de qualquer um dos compostos aqui descritos.
[828] Em certas modalidades, os compostos podem ser usados como monoterapia, ou conforme fornecido abaixo, em uma terapia de combinação com um ou mais tratamentos terapêuticos, particularmente em combinação com um ou mais agentes quimioterapêuticos. Em certas modalidades, os compostos são usados em combinação com um segundo agente terapêutico, em que os compostos são usados em níveis que sensibilizam o câncer ou a célula cancerosa para o segundo agente terapêutico, por exemplo, em níveis do composto que não causam morte celular significativa. Em certas modalidades, os compostos podem ser usados em combinação com terapia de radiação, seja para sensibilizar as células à radioterapia ou como um complemento à radioterapia (por exemplo, em doses suficientes para ativar a via de morte celular).
[829] Em certas modalidades, é fornecido um método para tratar um câncer em um paciente em necessidade, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida.
[830] Em certas modalidades, é fornecido um método para o tratamento de um tumor sólido maligno em um paciente em necessidade, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto ou composição aqui fornecida ao paciente. Em certas modalidades, o tumor sólido maligno é um carcinoma. Em certas modalidades, o tumor sólido maligno é um linfoma. Em certas modalidades, o tumor sólido maligno é um sarcoma.
[831] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com o composto pode ser selecionado a partir de, entre outros, câncer adrenocortical, câncer anal, câncer biliar, câncer de bexiga, câncer ósseo (por exemplo, osteossarcoma), câncer de cérebro (por exemplo, gliomas, astrocitoma, neuroblastoma, etc.), câncer de mama, câncer cervical, câncer de cólon, câncer endometrial, câncer de esôfago, câncer de cabeça e pescoço, câncer hematológico (por exemplo, leucemia e linfoma), câncer intestinal (intestino delgado), câncer de fígado, câncer de pulmão (por exemplo, câncer brônquico, câncer de pulmão de células pequenas, câncer de pulmão de células não pequenas, etc.), câncer oral, câncer de ovário, câncer de pâncreas, câncer renal, câncer de próstata, câncer de glândula salivar, câncer de pele (por exemplo, carcinoma basocelular, melanoma), câncer de estômago, câncer testicular, câncer de garganta, câncer de tireoide,
câncer uterino, câncer vaginal, sarcoma e carcinomas de tecidos moles. Em certas modalidades, o câncer é carcinoma de células renais (RCC). Em certas modalidades, o câncer é câncer pancreático. Em certas modalidades, o câncer é câncer de pulmão. Em certas modalidades, o câncer é câncer de mama. Em certas modalidades, o câncer é câncer de próstata.
[832] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com o composto é câncer pancreático. Em certas modalidades, o câncer pancreático para tratamento com os compostos é adenocarcinoma pancreático ou câncer pancreático metastático. Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é adenocarcinoma pancreático em estágio 1, estágio II, estágio III ou estágio IV.
[833] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é câncer de pulmão. Em certas modalidades, o câncer de pulmão para tratamento com os compostos é câncer de pulmão de células pequenas ou câncer de pulmão de células não pequenas. Em certas modalidades, o câncer de pulmão de células não pequenas para tratamento com os compostos é um adenocarcinoma, carcinoma de células escamosas ou carcinoma de células grandes. Em certas modalidades, o câncer de pulmão para tratamento com os compostos é câncer de pulmão metastático.
[834] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é um câncer hematológico. Em certas modalidades, o câncer hematológico é selecionado de leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), linfoma (por exemplo, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de Burkitt), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia mieloide crônica de células pilosas (CML) e mieloma múltiplo.
[835] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é uma leucemia selecionada de leucemia linfoblástica aguda
(ALL), leucemia mieloide aguda (AML), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia mieloide crônica de células pilosas (CML) e mieloma múltiplo.
[836] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com o composto é um linfoma selecionado de linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin e linfoma de Burkitt.
[837] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com o composto é um câncer caracterizado por características mesenquimais ou fenótipo mesenquimal. Em alguns cânceres, o ganho de características mesenquimais está associado à migração (por exemplo, intravasamento) e invasividade dos cânceres. As características mesenquimais podem incluir, entre outras, capacidade migratória aumentada, invasividade, resistência elevada à apoptose e produção aumentada de componentes da matriz extracelular (ECM). Além dessas características fisiológicas, as características mesenquimais podem incluir a expressão de certos biomarcadores, incluindo, entre outros, E- caderina, N-caderina, integrinas, FSP-1, α-SMA, vimentina, β-catenina, colágeno I, colágeno II, colágeno III, colágeno IV, fibronectina, laminina 5, SNAIL-1, SNAIL-2, Twist-1, Twist-2 e Lef-1. Em certas modalidades, o câncer selecionado para tratamento com os compostos deste documento inclui, entre outros, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de cabeça e pescoço, câncer de próstata e câncer de cólon. Em certas modalidades, as características mesenquimais podem ser inerentes ao tipo de câncer ou induzidas ou selecionadas por tratamento de cânceres com quimioterapia e/ou radioterapia.
[838] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com o composto é identificado como tendo ou tendo uma atividade RAS de ativação ou oncogênica. Em certas modalidades, o RAS é K-RAS, H- RAS ou N-RAS. Em certas modalidades, a ativação ou oncogênica RAS é uma mutação RAS de ativação ou oncogênica.
[839] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é identificado como tendo ou determinado a ter uma mutação K-RAS de ativação ou oncogênica. Em certas modalidades, o câncer selecionado para tratamento é identificado como tendo ou determinado a ter uma mutação de ativação ou oncogênica em K-RAS humano em um ou mais dentre códon 5, códon 9, códon 12, códon 13, códon 14, códon 18, códon 19, códon 22, códon 23, códon 24, códon 26, códon 33, códon 36, códon 57, códon 59, códon 61, códon 62, códon 63, códon 64, códon 68, códon 74, códon 84, códon 92, códon 35, códon 97, códon 110, códon 115, códon 117, códon 118, códon 119, códon 135, códon 138, códon 140, códon 146, códon 147, códon 153, códon 156, códon 160, códon 164, códon 171, códon 176, códon 185 e códon
188.
[840] Em certas modalidades, a mutação de K-RAS de ativação ou oncogênica pode ser uma mutação em que o códon 5 é K5E; o códon 9 é V91; o códon 12 é G12A, G12C, G12D, G12F, G12R, G12S, G12V ou G12Y; o códon 13 é G13C, G13D ou G13V; o códon 14 é V14I ou V14L; o códon 18 é A18D; o códon 19 é L19F; o códon 22 é Q22K; o códon 23 é L23R; o códon 24 é I24N; o códon 26 é N26K; o códon 33 é D33E; o códon 36 é I36L ou I36M; o códon 57 é D57N; o códon 59 é A59E, A59G ou A59T; o códon 61 é Q61H, Q61K, Q61L ou Q61R; o códon 62 é E62G ou E62K; o códon 63 é E63K; o códon 64 é Y64D, Y64H ou Y64N; o códon 68 é R68S; o códon 74 é T74P; o códon 84 é I84T; o códon 92 é D92Y; o códon 97 é R97I; o códon 110 é P110H ou P110S; o códon 115 é G115E; o códon 117 é K117N; o códon 118 é C118S; o códon 119 é D119N; o códon 135 é R135T; o códon 138 é G138V; o códon 140 é P140H; o códon 146 é A146T ou A146V; o códon 147 é K147N; o códon 153 é D153N; o códon 156 é F156L; o códon 160 é V160A; o códon 164 é R164Q; o códon 171 é I117M; o códon 176 é K176Q; o códon 185 é C185R ou C185S; e o códon 188 é M188V.
[841] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com o composto é identificado como tendo ou determinado a ter mutações K- RAS de ativação ou oncogênica no códon 12, códon 13 e/ou códon 61. Em certas modalidades, a mutação K-RAS de ativação ou oncogênica no códon 12 é G12A, G12C, G12D, G12F, G12R, G12S, G12V ou G12Y; no códon 13 é G13C, G13D ou G13V; e no códon 61 é Q61H, Q61K, Q61L ou Q61R. Em certas modalidades, a mutação K-RAS de ativação ou oncogênica é uma combinação de mutações K-RAS de ativação ou oncogênica no códon 12 e no códon 13; códon 12 e códon 61; codões 13 e 61; ou códon 12, códon 13 e códon 61.
[842] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é identificado como tendo ou determinado a ter uma mutação N-RAS de ativação ou oncogênica. Em certas modalidades, o câncer é identificado como tendo ou determinado a ter uma mutação de ativação ou oncogênica em N-RAS humano em um ou mais do códon 12, códon 13 e códon 61. Em certas modalidades, a mutação N-RAS de ativação ou oncogênica no códon 12 é G12A, G12C, G12D, G12R, G12S ou G12V. Em certas modalidades, a mutação N-RAS de ativação ou oncogênica no códon 13 é G13A, G13C, G13D, G13R, G13S ou G13V. Em certas modalidades, a mutação N-RAS de ativação ou oncogênica no códon 61 é Q61E, Q61H, Q61K, Q61L, Q61P ou Q61R. Em certas modalidades, a mutação N-RAS de ativação ou oncogênica é uma combinação de mutações N-RAS de ativação ou oncogênica no códon 12 e no códon 13; códon 12 e códon 61; códons 13 e 61; ou códon 12, códon 13 e códon 61.
[843] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é identificado como tendo ou determinado a ter uma mutação H-RAS de ativação ou oncogênica. Em certas modalidades, o câncer selecionado para tratamento é identificado como tendo uma mutação de ativação ou oncogênica em H-RAS humano em um ou mais do códon 12, códon 13 e códon 61. Em certas modalidades, a mutação H-RAS de ativação ou oncogênica no códon 12 é G12A, G12C, G12D, G12R, G12S ou G12V. Em certas modalidades, a mutação H-RAS de ativação ou oncogênica no códon 13 é G13A, G13C, G13D, G13R, G13S ou G13V. Em certas modalidades, a mutação H-RAS de ativação ou oncogênica no códon 61 é Q61E, Q61H, Q61K, Q61L, Q61P ou Q61R. Em certas modalidades, a mutação H-RAS de ativação ou oncogênica é uma combinação de mutações H-RAS de ativação ou oncogênica no códon 12 e no códon 13; códon 12 e códon 61; códons 13 e 61; ou códon 12, códon 13 e códon 61.
[844] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos pode ser um câncer com prevalência (por exemplo, pelo menos cerca de 10% ou mais, ou cerca de 15% ou mais dos cânceres), de uma mutação RAS de ativação ou oncogênica, como câncer do trato biliar, câncer cervical, câncer endometrial, câncer pancreático, câncer de pulmão, câncer colorretal, câncer de cabeça e pescoço, câncer de estômago (gástrico), câncer hematológico (por exemplo, leucemia, linfomas, etc.), câncer de ovário, câncer de próstata, câncer de glândula salivar, câncer de pele, câncer de intestino delgado, câncer de tireoide, câncer do trato aerodigestivo, câncer do trato urinário e câncer de bexiga.
[845] Em certas modalidades, os compostos podem ser usados para tratar um câncer que é refratário a um ou mais outros agentes quimioterapêuticos, particularmente agentes quimioterapêuticos citotóxicos; ou tratar um câncer resistente ao tratamento de radiação. Em certas modalidades, os compostos são usados para tratar cânceres que desenvolveram tolerância a agentes quimioterapêuticos que ativam outras vias de morte celular, como apoptose, catástrofe mitótica, necrose, senescência e/ou autofagia.
[846] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é identificado como refratário ou resistente à quimioterapia. Em certas modalidades, o câncer é refratário ou resistente a um ou mais dos agentes alquilantes, agentes antibióticos anticâncer, agentes antimetabólicos (por exemplo, antagonistas de folato, análogos de purina, análogos de pirimidina, etc.), agentes inibidores de topoisomerase, agentes antimicrotúbulos (por exemplo, taxanos, alcaloides de vinca), agentes hormonais (por exemplo, inibidores da aromatase), agentes derivados de plantas e seus derivados sintéticos, agentes antiangiogênicos, agentes indutores de diferenciação, agentes indutores de interrupção do crescimento celular, agentes indutores de apoptose, agentes citotóxicos, agentes que afetam a bioenergética celular, isto é, que afetam os níveis de ATP celular e as moléculas/atividades que regulam esses níveis, agentes biológicos, por exemplo, anticorpos monoclonais, inibidores de quinase e inibidores de fatores de crescimento e seus receptores.
[847] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é um câncer identificado como refratário ou resistente a um ou mais dentre afatinibe, afuresertibe, alectinibe, alisertibe, alvocidibe, amsacrina, amonafida, amuvatinibe, axitinibe, azacitidina, azatioprina, bafetinibe, barasertib, bendamustina, bleomicina, bosutinibe, bortezomibe, busulfan, cabozantinibe, camptotecina, canertinibe, capecitabina, cabazitaxel, carboplatina, carmustina, cenisertibe, ceritinibe, clorambucila, cisplatina, cladribina, clofarabina, crenolanib, crizotinib, ciclofosfamida, citarabina, dabrafenib, dacarbazina, dacomitinib, dactinomicina, danusertib, dasatinib, daunorubicina, decitabina, dinaciclib, docetaxel, dovitinib, doxorrubicina, epirrubicina, epitinib, mesilato eribulin, etirinotecan, etoposido, everolimus, exemestano, floxuridina, fludarabina, fluorouracila, gefitinib, gemcitabina, hidroxiureia, ibrutinib, icotinib, idarrubicina, ifosfamida, imatinib, imetelstat, ipatasertib, irinotecano, ixabepilona, lapatinibe,
lenalidomida, lestaurtinibe, lomustina, lucitanibe, masitinibe, mecloretamina, melfalano, mercaptopurina, metotrexato, midostaurina, mitomicina, mitoxantrona, mubritinibe, nelarabina, neratinib, nilotinib, nintedanib, mepesuccinato de omacetaxina, orantinib, oxaliplatina, paclitaxel, palbociclib, palifosfamide tris, pazopanib, pelitinib, pemetrexed, pentostatina, plicamicina, ponatinibe, poziotinib, pralatrexato, procarbazina, quizartinib, raltitrexed, regorafenib, ruxolitinib, seliciclib, sorafenibe, estreptozocina, sulfatinibe, sunitinibe, tamoxifeno, tandutinibe, temozolomida, temsirolimus, teniposídeo, teliatinibe, tioguanina, tiotepa, topotecano, uramustina, valrubicina, vandetanibe, vemurafenibe (Zelborae), vincristina, vinblastina, vinorelbina e vindesina.
[848] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com o composto é identificado como sendo refratário ou resistente a um ou mais agentes quimioterapêuticos selecionados dentre ciclofosfamida, clorambucila, melfalano, mecloretamina, ifosfamida, busulfan, lomustina, estreptozocina, temozolomida, dacarbazina, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina, procarbazina, uramustina, metotrexato, pemetrexado, fludarabina, citarabina, fluorouracila, floxuridina, gemcitabina, capecitabina, vinblastina, vincristina, vinorelbina, etoposido, paclitaxel, docetaxel, doxorrubicina, daunorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, mitoxantrona, bleomicina, mitomicina, hidroxiureia, topotecano, irinotecano, amsacrina, teniposido e erlotinib.
[849] Em certas modalidades, o câncer para tratamento com os compostos é um câncer resistente à radioterapia ionizante. A radiorresistência do câncer pode ser inerente ou resultante da radioterapia. Em certas modalidades, os cânceres para tratamento com o composto é, entre outros, um câncer adrenocortical radiorresistente, câncer anal, câncer biliar, câncer de bexiga, câncer ósseo (por exemplo, osteossarcoma), câncer de cérebro (por exemplo, gliomas, astrocitoma,
neuroblastoma, etc.), câncer de mama, câncer cervical, câncer de cólon, câncer endometrial, câncer de esôfago, câncer de cabeça e pescoço, câncer hematológico (por exemplo, leucemia e linfoma), câncer intestinal (intestino delgado), câncer de fígado, câncer de pulmão (por exemplo, câncer brônquico, câncer de pulmão de células pequenas, câncer de pulmão de células não pequenas, etc.), câncer oral, câncer de ovário, câncer de pâncreas, câncer renal, câncer de próstata, câncer de glândula salivar, câncer de pele (por exemplo, carcinoma basocelular, melanoma), câncer de estômago, câncer testicular, câncer de garganta, câncer de tireoide, câncer uterino, ou câncer vaginal. Em certas modalidades, o câncer é câncer pancreático, câncer de mama, glioblastoma, câncer de pulmão de células não pequenas avançado, câncer de bexiga, sarcoma ou carcinoma de tecidos moles.
5. TRATAMENTOS EM COMBINAÇÃO
[850] Em certas modalidades, os compostos descritos neste documento são usados em combinação com um ou mais de outros (por exemplo, segundo agente terapêutico) tratamentos terapêuticos para o câncer.
[851] Em certas modalidades, um sujeito com câncer é tratado com uma combinação de um composto aqui descrito e terapia de radiação. Em certas modalidades, o método compreende a administração a um sujeito com câncer de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da divulgação e o tratamento adjuvante do sujeito com uma quantidade eficaz de radioterapia. Em certas modalidades, o composto é administrado ao sujeito em necessidade antes, simultaneamente ou após o tratamento com radiação.
[852] Em certas modalidades, o método compreende a administração de uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito a um sujeito com câncer para sensibilizar o câncer ao tratamento de radiação e a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de terapia de radiação para tratar o câncer. Em certas modalidades, uma quantidade eficaz de raios-X e raios gama é administrada ao sujeito. Em certas modalidades, uma quantidade eficaz de radiação de partícula é administrada ao sujeito, em que a radiação de partícula é selecionada de feixe de elétrons, feixe de prótons e radiação de feixe de nêutrons. Em certas modalidades, a radioterapia é fracionada.
[853] Em certas modalidades, um sujeito com câncer é administrado com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto aqui descrito, ou uma primeira composição farmacêutica do mesmo, e administrada em conjunto com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um segundo agente quimioterapêutico ou uma segunda composição farmacêutica do mesmo.
[854] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é selecionado a partir de um agente platinante, agente alquilante, agente antibiótico anticâncer, agente antimetabólico (por exemplo, antagonistas de folato, análogos de purina, análogos de pirimidina, etc.), agente inibidor de topoisomerase I, agente inibidor da topoisomerase II agente antimicrotúbulo (por exemplo, taxanos, alcaloides de vinca), agente hormonal (por exemplo, inibidores de aromatase), agente derivado de planta e seus derivados sintéticos, agente antiangiogênico, agente indutor de diferenciação, agente indutor de parada de crescimento celular, agente indutor de apoptose, agente citotóxico, agente que afeta a bioenergética celular, isto é, que afeta os níveis de ATP celular e moléculas/atividades que regulam esses níveis, agente biológico anticâncer (por exemplo, anticorpos monoclonais), inibidores de quinase e inibidores de fatores de crescimento e seus receptores.
[855] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é um inibidor da angiogênese, tal como, mas não limitado a, um inibidor de VEGFR-1 solúvel, NRP-1, angiopoietina 2, TSP-1, TSP-2, angiostatina e moléculas relacionadas, endostatina, vasostatina, calreticulina, fator de plaquetas 4, TIMP, CDAI, Meth-1, Meth-2, IFN-α, IFN-β, IFN-γ, CXCL10, IL-4, IL-12, IL-18, protrombina (domínio kringle 2), fragmento de antitrombina III, prolactina, VEGI, SPARC, osteopontina, maspina, canstatina (um fragmento de COL4A2) ou proteína relacionada à proliferina. Em certas modalidades, o inibidor da angiogênese é bevacizumabe (Avastin), itraconazol, carboxiamidotriazol, TNP-470 (um análogo de fumagilina), CM101, IFN- α, IL-12, fator de plaquetas 4, suramina, SU5416, trombospondina, um antagonista VEGFR, um esteroide angiostático mais heparina, fator inibidor da angiogênese derivado da cartilagem (CDAI), um inibidor de metaloproteinase de matriz, angiostatina, endostatina, 2- metoxiestradiol, tecogalan, tetratiomolibdato, talidomida, trombospondina, prolactina, um inibidor αVβ3, linomida, ramucirumab, tasquinimod, ranibizumab, sorafenib (Nexavar), sunitinib (Sutent), pazopanib (Votrient) ou everolimus (Afinitor).
[856] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é um inibidor da quinase dependente de ciclina (CDK) (por exemplo, um inibidor de CDK4/CDK6). Os exemplos incluem, mas não estão limitados a, palbociclib (Ibrance), Ribociclib (opcionalmente ainda em combinação com letrozol), abemaciclib (LY2835219; Verzenio), P1446A-05 e Trilaciclib (G1T28).
[857] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é um inibidor da tirosina quinase de Bruton (BTK), tal como, mas não se limitando a, Ibrutinibe (PCI-32765), acalabrutinibe, ONO-4059 (GS-4059), spebrutinibe (AVL-292, CC-292), BGB-3111 e HM71224.
[858] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é um inibidor de BRAF. Os exemplos incluem, mas não estão limitados a, BAY43-9006 (Sorafenib, Nexavar), PLX-4032 (Vemurafenib), GDC-0879, PLX-4720, dabrafenib e LGX818.
[859] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é um inibidor de EGFR. Os exemplos incluem, mas não estão limitados a, gefitinibe, erlotinibe, afatinibe, brigatinibe, icotinibe, cetuximabe, osimertinibe, panitumumabe, brigatinibe, lapatinibe, cimaVax-EGF e veristrat.
[860] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é um inibidor do receptor 2 do fator de crescimento epidérmico humano (HER2). Os exemplos incluem, mas não estão limitados a, trastuzumabe, pertuzumabe (opcionalmente em combinação com trastuzumabe), margetuximabe e NeuVax
[861] Em certas modalidades, é divulgado aqui um método para aumentar a responsividade de um sujeito a um agente imunoterapêutico ou quimioterapêutico imunogênico, o método que compreende a administração ao sujeito em necessidade de uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito e uma quantidade eficaz de um agente imunoterapêutico e/ou um agente quimioterapêutico imunogênico. Em certas modalidades, o método inclui ainda a administração ao sujeito de um inibidor da lipoxigenase. Em certas modalidades, o sujeito tem um tumor cujo microambiente celular é rico em células do estroma. Em certas modalidades, a administração do composto aqui descrito resulta na morte de uma ou mais células estromais no microambiente das células tumorais. Em certas modalidades, a administração de uma quantidade eficaz de um agente imunoterapêutico e/ou um agente quimioterapêutico imunogênico resulta na morte de uma ou mais células tumorais. Também é fornecida aqui uma combinação que compreende um composto aqui descrito e um agente imunoterapêutico, inibidor da lipoxigenase ou agente quimioterapêutico imunogenase. Em certas modalidades, o agente imunoterapêutico é selecionado a partir de um inibidor de CTLA4, PDL1 ou PD1. Em certas modalidades, o agente imunoterapêutico pode ser selecionado a partir do inibidor de CTLA4, como ipilimumabe, um inibidor de PD1, como pembrolizumabe ou nivolumabe, ou um inibidor de PDL1, como atezolizumabe ou durvalumabe. Em certas modalidades, o agente imunoterapêutico é pembrolizumabe. Em outras modalidades, o agente quimioterapêutico imunogênico é um composto selecionado de antraciclina, doxorrubicina, ciclofosfamida, paclitaxel, docetaxel, cisplatina, oxaliplatina ou carboplatina. Em certas modalidades, é fornecida aqui uma combinação que compreende um composto aqui descrito e um inibidor da lipoxigenase. Em certas modalidades, o inibidor da lipoxigenase é selecionado de PD147176 e/ou ML351. Em certas modalidades, o inibidor da lipoxigenase pode ser um inibidor da 15-lipoxigenase (consultar, por exemplo, Sadeghian et al., Expert Opinion on Therapeutic Patents, 2015, 26: 1, 65 a 88).
[862] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é selecionados a partir de um agente alquilante, incluindo, mas não limitado a, adozelesina, altretamina, bendamustina, bizelesina, bussulfano, carboplatina, carboquona, carmofur, carmustina, clorambucila, cisplatina, ciclofosfamida, dacarbazina, estramustina, etoglucida, fotemustina, hepsulfam, ifosfamida, improsulfano, irofulven, lomustina, manosulfano, mecloretamina, melfalano, mitobronitol, nedaplatina, nimustina, oxaliplatina, pipossulfano, prednimustina, procarbazina, ranimustina, satraplatina, semustina, estreptozocina, temozolomida, tiotepa, treosulfano, triaziquona, trietilenemelamina, tetranitrato de triplatina, trofosfamida e uramustina; um antibiótico, incluindo, mas não limitado a, aclarubicina, amrubicina, bleomicina, dactinomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, elsamitrucina, epirrubicina, idarubicina, menogarila, mitomicina, neocarzinostatina, pentostatina, pirarubicina, plicamicina, valrubicina e zorubicina; um antimetabolito, incluindo, mas não limitado a, aminopterina, azacitidina, azatioprina, capecitabina, cladribina, clofarabina, citarabina, decitabina, floxuridina, fludarabina, 5-fluorouracila, gencitabina, hidroxiureia, mercaptopurina, metotrexato, nelarabina, pemetrexed, raltitrexed, tegafur-uracila, tioguanina, trimetoprim, trimetrexato e vidarabina; uma imunoterapia, uma terapia de anticorpos, incluindo, mas não limitada a, alemtuzumabe, bevacizumabe, cetuximabe, galiximabe, gemtuzumabe, panitumumabe, pertuzumabe, rituximabe, brentuximabe, tositumomabe, trastuzumabe, tiuxetano ibritumomab 90 Y, ipilimumabe, tremelimumabe e anticorpos anti-CTLA-4; um hormônio ou antagonista de hormônio, incluindo, mas não limitado a, anastrozol, andrógenos, buserelina, dietilestilbestrol, exemestano, flutamida, fulvestrant, goserelina, idoxifeno, letrozol, leuprolide, magestrol, raloxifeno, tamoxifeno e toremifeno; um taxano, incluindo, mas não limitado a, DJ- 927, docetaxel, TPI 287, larotaxel, ortataxel, paclitaxel, DHA-paclitaxel e tesetaxel; um retinoide, incluindo, mas não limitado a, alitretinoína, bexaroteno, fenretinida, isotretinoína e tretinoína; um alcaloide, incluindo, mas não limitado a, demecolcina, homoharringtonina, vinblastina, vincristina, vindesina, vinflunina e vinorelbina; um agente antiangiogênico, incluindo, mas não limitado a, AE-941 (GW786034, Neovastat), ABT-510, 2-metoxiestradiol, lenalidomida e talidomida; um inibidor da topoisomerase, incluindo, mas não limitado a, amsacrina, belotecano, edotecarina, etoposídeo, fosfato de etoposídeo, exatecano, irinotecano (também metabolito ativo SN-38 (7-etil-10-hidróxi- camptotecina)), lucantona, mitoxantrona, pixantrona, rubitecano, teniposídeo, topotecano e 9-aminocamptotecina; um inibidor de quinase, incluindo, mas não limitado a, axitinibe (AG 013736), dasatinibe (BMS 354825), erlotinibe, gefitinibe, flavopiridol, mesilato de imatinibe, cabozantinibe, lapatinibe, difosfato de motesanibe (AMG 706), nilotinibe (AMN107), seliciclibe, sorafenibe, malato de sunitinibe,
AEE-788, BMS-599626, UCN-01 (7-hidroxistaurosporina), vemurafenibe, dabrafenibe, selumetinibe, disjuntores de paradoxo (como PLX8394 ou PLX7904), LGX818, BGB-283, pexidartinib (PLX3397) e vatalanibe; um inibidor de transdução de sinal direcionado incluindo, mas não limitado a, bortezomibe, geldanamicina e rapamicina; um modificador de resposta biológica, incluindo, mas não limitado a, imiquimod, interferon-α e interleucina-2; e outros quimioterapêuticos, incluindo, mas não limitado a, 3-AP (3-amino-2- carboxialdeído-tiossemicarbazona), altrasentan, aminoglutetimida, anagrelida, asparaginase, briostatina-1, cilengitida, elesclomol, mesilato de eribulina (E7389), ixabepilona, lonidamina, masoprocol, mitoguanazona, oblimersen, sulindac, testolactona, tiazofurina, inibidores de mTOR (por exemplo, inibidores sirolimus, temsirolimus, everolimus, deforolimus, INK28, AZD8055 e PI3K (por exemplo, BEZ235, GDC-0941, XL147, XL765, BMK120), inibidores de quinase dependente de ciclina (CDK) (por exemplo, um inibidor CDK4 ou um inibidor CDK6, tal como Palbociclib (PD-0332991), Ribociclib (LEE011), Abemaciclib (LY2835219), P1446A-05, Abemaciclib (LY2835219), Trilaciclib (G1T28), etc.), inibidores AKT, inibidores Hsp90 (por exemplo, geldanamicina, radicicol, tanespimicina), inibidores da farnesiltransferase (por exemplo, tipifarnib), inibidores da aromatase (anastrozol letrozol exemestano); um inibidor MEK incluindo, mas não está limitado a, AS703026, AZD6244 (Selumetinib), AZD8330, BIX 02188, CI-1040 (PD184352), GSK1120212 (também conhecido como trametinib ou JTP-74057), cobimetinib, PD0325901, PD318088, PD98059, RDEA119(BAY 869766), TAK-733 e U0126-EtOH; inibidores de tirosina quinase, incluindo, mas não estão limitados a, AEE788, AG- 1478 (Tyrphostin AG-1478), AG-490, Apatinib (YN968D1), AV-412, AV- 951 (Tivozanib), Axitinib, AZD8931, BIBF1120 (Vargatef), BIBW2992 (Afatinib), BMS794833, BMS-599626, Brivanib (BMS-540215), Brivanib alaninate (BMS-582664), Cediranib (AZD2171), Ácido crisofânico (Crisofanol), Crenolanib (CP-868569), CUDC-101, CYC116, Ácido dilático dovitinibe (ácido dilático TKI258), E7080, Cloridrato de erlotinibe (Tarceva, CP-358774, OSI-774, NSC-718781), Foretinibe (GSK1363089, XL880), Gefitinibe (ZD-1839 ou Iressa), Imatinib (Glivec), Mesilato de imatinibe, Ki8751, KRN 633, Lapatinibe (Tykerb), Linifanibe (ABT-869), Masitinibe (Masivet, AB1010), MGCD-265, Motesanibe (AMG-706), MP-470, Mubritinibe (TAK 165), Neratinibe (HKI-272), NVP-BHG712, OSI-420 (Desmetil Erlotinibe, CP-473420), OSI-930, Pazopanibe HCl, PD-153035 HCl, PD173074, Pelitinibe (EKB- 569), PF299804, Ponatinibe (AP24534), PP121, RAF265 (CHIR-265), derivado de Raf265, Regorafenibe (BAY 73-4506), Tosilato de Sorafenibe (Nexavar), Malato de Sunitinibe (Sutent), Telatinibe (BAY 57-9352), TSU-68 (SU6668), Vandetanibe (Zactima), Dicloridrato de Vatalanibe (PTK787), WZ3146, WZ4002, WZ8040, quizartinib, Cabozantinib, XL647, EGFR siRNA, FLT4 siRNA, KDR siRNA, Agentes antidiabéticos, tais como metformina, agonistas PPAR (rosiglitazona, pioglitazona, bezafibrato, ciprofibrato, clofibrato, gemfibrozila, fenofibrato, indeglitazar), inibidores de DPP4 (sitagliptina, vildagliptina, saxagliptina, dutogliptina, gemigliptina, alogliptina) ou um inibidor de EGFR, incluindo, mas não limitado a, AEE-788, AP-26113, BIBW-2992 (Tovok), CI-1033, GW-572016, Iressa, LY2874455, RO-5323441, Tarceva (Erlotinib, OSI-774), CUDC-101 e WZ4002.
[863] Em certas modalidades, o segundo agente quimioterapêutico é selecionado a partir de afatinibe, afuresertibe, alectinibe, alisertibe, alvocidibe, amsacrina, amonafida, amuvatinibe, axitinibe, azacitidina, azatioprina, bafetinibe, barasertibe, bendamustina, bleomicina, bosutinibe, bortezomibe, busulfan, cabozantinibe, camptotecina, canertinibe, capecitabina, cabazitaxel, carboplatina, carmustina, cenisertibe, ceritinibe, clorambucila, cisplatina, cladribina,
clofarabina, crenolanib, crizotinibe, ciclofosfamida, citarabina, dabrafenib, dacarbazina, dacomitinib, dactinomicina, danusertib, dasatinib, daunorubicina, decitabina, dinaciclib, docetaxel, dovitinib, doxorrubicina, epirrubicina, epitinib, mesilato eribulin, errlotinib, etirinotecan, etoposido, everolimus, exemestano, floxuridina, fludarabina, fluorouracila, gefitinib, gemcitabina, hidroxiureia, ibrutinib, icotinib, idarubicina, idelalisib, ifosfamida, imatinib, imetelstat, ipatasertib, irinotecano, ixabepilona, lapatinib, lenalidomida, lestaurtinib, lomustina, lucitanib, masitinib, mecloretamina, melfalano, mercaptopurina, metotrexato, midostaurina, mitomicina, mitoxantrona, mubritinib, nelarabina, neratinib, nilotinib, nintedanib, mepesuccinato de omacetaxina, olaparib, orantinib, oxaliplatina, paclitaxel, palbociclanib, palifosfamida tris, pazopanibe, pelitinibe, pemetrexedo, pentostatina, plicamicina, ponatinibe, poziotinibe, pralatrexato, procarbazina, quizartinibe, raltitrexed, regorafenibe, ruxolitinibe, seliciclibe, sorafenibe, estreptozocina, sulfatinibe, sunitinibe, tamoxifeno, tandutinibe, temozolomida, temsirolimus, teniposídeo, teliatinibe, tioguanina, tiotepa, topotecano, uramustina, valrubicina, vandetanibe, vemurafenib (Zelboraf), vincristina, vinblastina, vinorelbina, vindesina e semelhantes. Em certas modalidades, os compostos aqui são administrados antes, simultaneamente ou após o tratamento com o agente quimioterapêutico.
[864] Em certas modalidades, o método de tratamento de um câncer compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto aqui descrito e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um agente biológico usado para tratar o câncer. Em certas modalidades, o agente biológico é selecionado dentre anti-BAFF (por exemplo, belimumab); anti-CCR4 (por exemplo, mogamulizumab); anti-CD19/CD3 (por exemplo, blinatumomab); anti-CD20 (por exemplo, obinutuzumabe, rituximabe, ibritumomabe tiuxetano, ofatumumabe, tositumomabe); anti-CD22 (por exemplo, pasudotox moxetumomab); anti-CD30 (por exemplo, brentuximab vedotin); anti-CD33 (por exemplo, gemtuzumab); anti- CD37 (por exemplo, otlertuzumab); anti-CD38 (por exemplo, daratumumab); anti-CD52 (por exemplo, alemtuzumab); anti-CD56 (por exemplo, lorvotuzumab mertansina); anti-CD74 (por exemplo, milatuzumab); anti-CD105; anti-CD248 (TEM1) (por exemplo, ontuxizumab); anti-CTLA4 (por exemplo, tremelimumab, ipilimumab); anti-EGFL7 (por exemplo, parsatuzumab); anti-EGFR (HER1/ERBB1) (por exemplo, panitumumabe, nimotuzumabe, necitumumabe, cetuximabe, imgatuzumabe, futuximabe); anti-FZD7 (por exemplo, vantictumab); anti-HER2 (ERBB2/neu) (por exemplo, margetuximabe, pertuzumabe, ado-trastuzumabe emtansina, trastuzumabe); anti-HER3 (ERBB3); anti-HGF (por exemplo, rilotumumab, ficlatuzumab); anti-IGF- 1R (por exemplo, ganitumab, figitumumab, cixutumumab, dalotuzumab); anti-IGF-2R; anti-KIR (por exemplo, lirilumab, onartuzumab); anti- MMP9; anti-PD-1 (por exemplo, nivolumabe, pidilizumabe, lambrolizumabe); anti-PD-L1 (por exemplo, Atezolizumab); anti- PDGFRa (por exemplo, ramucirumab, tovetumab); anti-PD-L2; anti- PIGF (por exemplo, ziv-aflibercept); anti-RANKL (por exemplo, denosumab); anti-TNFRSF 9 (CD 137/4-1 BB) (por exemplo, urelumabe); anti-TRAIL-RI/DR4, R2/D5 (por exemplo, dulanermina); anti-TRAIL-R1/D4 (por exemplo, mapatumumab); anti-TRAIL-R2/D5 (por exemplo, conatumumab, lexatumumab, apomab); anti-VEGFA (por exemplo, bevacizumab, ziv-aflibercept); anti-VEGFB (por exemplo, ziv- aflibercept); e anti-VEGFR2 (por exemplo, ramucirumab).
[865] Para os métodos aqui descritos, as mutações em K-RAS, N- RAS e H-RAS podem ser identificadas usando várias técnicas disponíveis para o versado na técnica. Em várias modalidades, a presença ou ausência de uma mutação pode ser determinada por métodos de detecção de DNA ou RNA conhecidos, por exemplo,
sequenciamento de DNA, hibridização de oligonucleotídeo, amplificação de reação em cadeia da polimerase (PCR) com iniciadores específicos para a mutação ou métodos de detecção de proteína, por exemplo, imunoensaios ou ensaios bioquímicos para identificar uma proteína mutada, como K-RAS, N-RAS e H-RAS mutados. Em certas modalidades, o ácido nucleico ou RNA em uma amostra pode ser detectado por quaisquer métodos ou técnicas adequadas de detecção de sequências de genes. Tais métodos incluem, mas não estão limitados a, PCR, transcriptase reversa-PCR (RT-PCR), PCR in situ, hibridização in situ, Southern blot, Northern blot, análise de sequência, análise de microarranjo ou outras plataformas de hibridização de DNA/RNA (consultar, por exemplo, Taso et al., 2010, Lung Cancer 68 (1): 51 a 57). Em certas modalidades, a detecção de mutações pode usar amostras obtidas de forma não invasiva, como ácido nucleico livre de células (por exemplo, cfDNA) do sangue.
[866] Em certas modalidades, as mutações podem ser detectadas usando várias técnicas de sequenciamento Next-Gen (NGS), particularmente técnicas de NGS de alto rendimento. Técnicas NGS exemplares incluem, entre outros, sequenciamento Polony (consultar, por exemplo, Shendure et al., 2005, Science 309(5741): 1728 a 1732), sequenciamento IonTorrent (consultar, por exemplo, Rusk, N., 2011, Nat Meth 8 (1): 44-44), pirosequenciamento (consultar, por exemplo, Marguiles et al., 2005, Nature 437 (7057): 376 a 380), sequenciamento de corante reversível com sequenciamento de colônia (Bentley et al., 2008, Nature 456 (7218): 53 a 59; Illumina, CA, EUA), sequenciamento por ligação (por exemplo, SOLid systems of Applied Biosystems; Valouev et al., 2008, Genome Res. 18 (7): 1051 a 1063), sequenciamento "nanoball" de círculo rolante de alto rendimento (consultar, por exemplo, Drmanac et al., 2010, Science 327 (5961): 78 a 81; Porreca, GJ, 2010, Nature Biotech. 28 (1): 43 a 44), e sequenciamento baseado em guia de onda em modo zero (consultar, por exemplo, Chin et al., 2013, Nat Methods 10 (6): 563 a 569); todas as publicações aqui incorporadas por referência. Em certas modalidades, o sequenciamento maciçamente paralelo de genes alvo, como genes que codificam K-RAS, N-RAS, H-RAS.
[867] Em certas modalidades, a detecção de mutações pontuais em ácidos nucleicos alvo pode ser realizada por clonagem molecular das moléculas de ácido nucleico alvo e sequenciamento das moléculas de ácido nucleico usando técnicas disponíveis. Alternativamente, as técnicas de amplificação, como PCR, podem ser usadas para amplificar sequências de ácido nucleico alvo diretamente de uma preparação de DNA genômico de um tecido tumoral, amostra de células ou amostra livre de células (por exemplo, plasma livre de células do sangue). A sequência de ácido nucleico das moléculas amplificadas pode então ser determinada para identificar mutações. O design e a seleção de iniciadores apropriados estão dentro das habilidades de um versado na técnica. Outros métodos de detecção de mutações que podem ser usados incluem, entre outros, reação em cadeia de ligase, polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição PCR específico de alelo, análise de polimorfismo de conformação de fita simples, proteínas de detecção de incompatibilidade (por exemplo, GRIN2A ou TRRAP), proteção de RNase (por exemplo, Winter et al., 1985, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 7575 a 7579), clivagem enzimática ou química (Cotton et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 4397; Shenk et al., 1975, Proc. Natl. Acad. Sei. USA 72: 989).
[868] Em certas modalidades, as mutações em moléculas de ácido nucleico também podem ser detectadas por triagem de alterações da proteína correspondente. Por exemplo, anticorpos monoclonais imunorreativos com um produto do gene alvo podem ser usados para rastrear um tecido, por exemplo, um anticorpo que é conhecido por se ligar a uma posição mutada particular do produto do gene (proteína). Por exemplo, um anticorpo adequado pode ser aquele que se liga a um exon deletado ou que se liga a um epítopo conformacional que compreende uma porção deletada da proteína alvo. A falta de antígeno cognato indicaria uma mutação. Tais ensaios imunológicos podem ser realizados usando qualquer formato conveniente conhecido na técnica, tal como Western blot, ensaio imuno-histoquímico e ELISA. Por exemplo, a detecção baseada em anticorpos de mutações K-ras é descrita em Elisabah et al., 2013, J Egypt Natl Cancer Inst. 25 (1): 51 a 56).
[869] A expressão de mRNA ou proteínas, tal como expressão de RAS, pode usar técnicas padrão disponíveis para o versado na técnica, incluindo alguns dos métodos descritos acima. Por exemplo, o mRNA que codifica uma proteína de interesse pode ser detectado por hibridização com sondas de ácido nucleico, transcrição reversa, reação em cadeia da polimerase e suas combinações (por exemplo, RT-qPCR). Em certas modalidades, podem ser usados microarranjos baseados em chips ou baseados em grânulos contendo sondas de ácido nucleico que hibridizam com a sequência alvo. Em certas modalidades, a expressão de mRNA pode ser detectada diretamente nas células alvo, como por hibridização in situ.
[870] Em certas modalidades, os produtos proteicos podem ser detectados diretamente. A detecção direta pode usar um agente de ligação que se liga especificamente à proteína, como anticorpos ou proteínas que interagem com o alvo ou reagentes de moléculas pequenas que se ligam especificamente com a proteína alvo de interesse (consultar, por exemplo, Current Protocols in Immunology, Coligan et al., eds., John Wiley & Sons (atualizações em 2015); Immunoassays: A Practical Approach, Gosling, ed., Oxford University Press (2000)). Em certas modalidades, o produto de proteína pode ser detectado por métodos imunológicos, incluindo, a título de exemplo, imunoensaios enzimáticos, imunoensaios ligados a enzima, imunoensaio de polarização de fluorescência e ensaio de quimioluminescência.
[871] Amostras biológicas para o método neste documento incluem quaisquer amostras passíveis de análise aqui, como tecido ou amostras de biópsia contendo células cancerosas, ou quaisquer fluidos biológicos que contenham o material de interesse (por exemplo, DNA), como sangue, plasma, saliva, cotonetes de tecido e fluidos intestinais. Em certas modalidades, os exossomos extrudados por células cancerosas e obtidos do sangue ou outros fluidos corporais podem ser usados para detectar ácidos nucleicos e proteínas produzidas pelas células cancerosas.
[872] Métodos biológicos gerais, bioquímicos, imunológicos e biológicos moleculares aplicáveis à presente divulgação são descritos em Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 2ª Ed. (1989) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel et al., Ed., John Wiley & Sons (2015); Current Protocols in Immunology, Coligan, JE ed., John Wiley & Sons (2015); and Methods in Enzymology, Vol. 200, Abelson et al., Ed., Academic Press (1991). Todas as publicações são incorporadas aqui por referência.
6. FÓRMULAS E ADMINISTRAÇÃO
[873] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas dos agentes terapêuticos podem ser formuladas por técnicas padrão com o uso de um ou mais carreadores ou excipientes fisiologicamente aceitáveis. Os carreadores farmacêuticos adequados são descritos aqui e em Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21ª Ed. (2005). Os compostos terapêuticos e seus sais, hidratos e solvatos fisiologicamente aceitáveis podem ser formulados para administração por qualquer via adequada, incluindo, entre outras, topicamente, por via nasal, oral, parenteral, retal ou por inalação. Em certas modalidades, a administração da composição farmacêutica pode ser feita por injeção intradérmica, subdérmica, intravenosa, intramuscular, intranasal, intracerebral, intratraqueal, intra-arterial, intraperitoneal, intravesical, intrapleural, intracoronária ou intratumoral, com uma seringa ou outros dispositivos. A administração transdérmica também é contemplada, assim como a inalação ou a administração de aerossol. Os comprimidos, cápsulas e soluções podem ser administrados por via oral, retal ou vaginal.
[874] Para administração oral, uma composição farmacêutica pode assumir a forma de, por exemplo, um comprimido ou uma cápsula preparada por meios convencionais com um excipiente farmaceuticamente aceitável. Os comprimidos e cápsulas que compreendem o ingrediente ativo podem ser preparados juntamente com excipientes, tais como: (a) diluentes ou enchimentos, por exemplo, lactose, dextrose, sacarose, manitol, sorbitol, celulose (por exemplo, etilcelulose, celulose microcristalina), glicina, pectina, poliacrilatos e/ou hidrogenofosfato de cálcio, sulfato de cálcio; (b) lubrificantes, por exemplo, sílica, talco, ácido esteárico, seu sal de magnésio ou cálcio, estearatos metálicos, dióxido de silício coloidal, óleo vegetal hidrogenado, amido de milho, benzoato de sódio, acetato de sódio e/ou polietilenoglicol; (c) aglutinantes, por exemplo, silicato de magnésio e alumínio, pasta de amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, polivinilpirrolidona e/ou hidroxipropilmetilcelulose; (d) desintegrantes, por exemplo, amidos (incluindo amido de batata ou amido de sódio), glicolato, ágar, ácido algínico ou o seu sal de sódio ou misturas efervescentes; (e) agentes umectantes, por exemplo, laurilsulfato de sódio e/ou (f) absorventes, corantes, aromatizantes e adoçantes. As composições são preparadas de acordo com métodos convencionais de mistura, granulação ou revestimento.
[875] Em certas modalidades, o carreador é uma ciclodextrina, de modo a aumentar a solubilidade e/ou biodisponibilidade dos compostos aqui. Em certas modalidades, a ciclodextrina para uso nas composições farmacêuticas pode ser selecionada a partir de α-ciclodextrina, β- ciclodextrina, γ-ciclodextrina, seus derivados e combinações dos mesmos. Em certas modalidades, a ciclodextrina é selecionada a partir de β-ciclodextrina, γ-ciclodextrina, seus derivados e combinações dos mesmos.
[876] Em certas modalidades, os compostos podem ser formulados com uma ciclodextrina ou seu derivado selecionado de ciclodextrina de carboxialquila, ciclodextrina de hidroxialquila, ciclodextrina de sulfoalquiléter e uma ciclodextrina de alquila. Em várias modalidades, o grupo alquila na ciclodextrina é metila, etila, propila, butila ou pentila.
[877] Em certas modalidades, a ciclodextrina é α-ciclodextrina ou um derivado desta. Em certas modalidades, a α-ciclodextrina ou seu derivado é selecionado a partir de carboxialquil-α-ciclodextrina, hidroxialquil-α-ciclodextrina, sulfoalquiléter-α-ciclodextrina, alquil-α- ciclodextrina e combinações dos mesmos. Em certas modalidades, o grupo alquila no derivado de α-ciclodextrina é metila, etila, propila, butila ou pentila.
[878] Em certas modalidades, a ciclodextrina é β-ciclodextrina ou um derivado desta. Em certas modalidades, a β-ciclodextrina ou seu derivado é selecionado a partir de carboxialquil-β-ciclodextrina, hidroxialquil-β-ciclodextrina, sulfoalquiléter-β-ciclodextrina, alquil-β- ciclodextrina e combinações dos mesmos. Em certas modalidades, o grupo alquila no derivado de β-ciclodextrina é metila, etila, propila, butila ou pentila.
[879] Em certas modalidades, a β-ciclodextrina ou um derivado desta é hidroxialquil-β-ciclodextrina ou sulfoalquiléter-β-ciclodextrina. Em certas modalidades, a hidroxialquil-β-ciclodextrina é hidroxipropil-β- ciclodextrina. Em certas modalidades, o sulfoalquiléter-β-ciclodextrina é sulfobutiléter-β-ciclodextrina. Em certas modalidades, β-ciclodextrina ou um derivado desta é alquil-β-ciclodextrina ou metil-β-ciclodextrina. Em certas modalidades, com o uso de metil-β-ciclodextrina, a β- ciclodextrina é β-ciclodextrina metilada aleatoriamente.
[880] Em certas modalidades, a ciclodextrina é γ-ciclodextrina ou um derivado da mesma. Em certas modalidades, a γ-ciclodextrina ou seu derivado é selecionado a partir de carboxialquil-γ-ciclodextrina, hidroxialquil-γ-ciclodextrina, sulfoalquiléter-γ-ciclodextrina e alquil-γ- ciclodextrina. Em certas modalidades, o grupo alquila no derivado de γ- ciclodextrina é metila, etila, propila, butila ou pentila. Em certas modalidades, a γ-ciclodextrina ou seu derivado é hidroxialquil−γ- ciclodextrina ou sulfoalquiléter-γ-ciclodextrina. Em certas modalidades, a hidroxialquil−γ-ciclodextrina é hidroxipropil−γ-ciclodextrina.
[881] Quando usada em uma formulação com o composto da presente divulgação, a ciclodextrina pode estar presente em cerca de 0,1 p/v a cerca de 30% p/v, cerca de 0,1 p/v a cerca de 20% p/v, cerca de 0,5% p/v a cerca de 10% p/v, ou cerca de 1% p/v a cerca de 5% p/v. Em certas modalidades, a ciclodextrina está presente em cerca de 0,1% p/v, cerca de 0,2% p/v, cerca de 0,5% p/v, cerca de 1% p/v, cerca de 2% p/v, cerca de 3% p/v, cerca de 4% p/v, cerca de 5% p/v, cerca de 6% p/v, cerca de 7% p/v, cerca de 8% p/v, cerca de 9% p/v, cerca de 10% p/v, cerca de 12% p/v, cerca de 14% p/v, cerca de 16% p/v, cerca de 18% p/v, cerca de 20% p/v, cerca de 25% p/v, ou cerca de 30% p/v ou mais.
[882] Os comprimidos podem ser revestidos por película ou revestidos entericamente de acordo com métodos conhecidos na técnica. As preparações líquidas para administração oral podem assumir a forma de, por exemplo, soluções, xaropes ou suspensões, ou podem ser apresentadas como um produto seco para reconstituição com água ou outro veículo adequado antes do uso. Essas preparações líquidas podem ser preparadas por meios convencionais com carreadores e aditivos farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, agentes de suspensão, por exemplo, xarope de sorbitol, derivados de celulose ou gorduras hidrogenadas comestíveis; agentes emulsionantes, por exemplo, lecitina ou acácia; veículos não aquosos, por exemplo, óleo de amêndoa, ésteres oleosos, álcool etílico ou óleos vegetais fracionados; e conservantes, por exemplo, metila ou propil-p- hidroxibenzoatos ou ácido sórbico. As preparações também podem conter sais tampão, aromatizantes, corantes e/ou adoçantes conforme apropriado. Se desejado, as preparações para administração oral podem ser formuladas adequadamente para fornecer a liberação controlada do composto ativo.
[883] Os agentes terapêuticos podem ser formulados para administração parenteral, por exemplo, por injeção em bolus ou infusão contínua. As formulações para injeção podem ser apresentadas na forma de dosagem unitária, por exemplo, em ampolas ou em recipientes multidose, com um conservante opcionalmente adicionado. As composições injetáveis podem ser soluções ou suspensões isotônicas aquosas. Em certas modalidades para administração parenteral, os agentes terapêuticos podem ser preparados com um tensoativo, como Cremaphor, ou solventes lipofílicos, como triglicerídeos ou lipossomas. As composições podem ser esterilizadas e/ou conter adjuvantes, tais como agentes conservantes, estabilizantes, umectantes ou emulsionantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Alternativamente, o agente terapêutico pode estar na forma de pó para reconstituição com um veículo adequado, por exemplo, água estéril apirogênica, antes do uso. Além disso, eles também podem conter outras substâncias terapeuticamente eficazes.
[884] Para administração por inalação, o agente terapêutico pode ser convenientemente distribuído na forma de uma apresentação de spray de aerossol a partir de embalagens pressurizadas ou um nebulizador, com o uso de um propelente adequado, por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono ou outro gás adequado. No caso de um aerossol pressurizado, a unidade de dosagem pode ser determinada que fornece uma válvula para distribuir uma quantidade medida. Cápsulas e cartuchos de, por exemplo, gelatina para uso em um inalador ou insuflador podem ser formulados contendo uma mistura de pó do composto e uma base de pó adequada, por exemplo, lactose ou amido.
[885] As formulações adequadas para aplicação transdérmica incluem uma quantidade eficaz de um agente terapêutico com um carreador. Os carreadores preferidos incluem solventes absorvíveis farmacologicamente aceitáveis para ajudar a passagem através da pele do sujeito. Por exemplo, os dispositivos transdérmicos estão na forma de uma bandagem ou adesivo compreendendo um membro de suporte, um reservatório contendo o agente terapêutico, opcionalmente com carreadores, opcionalmente, uma barreira de controle de taxa para entregar o composto à pele do hospedeiro a uma taxa controlada e predeterminada durante um período de tempo prolongado e um meio para fixar o dispositivo à pele. Também podem ser utilizadas formulações de matriz transdérmica.
[886] As formulações adequadas para aplicação tópica, por exemplo, na pele e nos olhos, são de preferência soluções aquosas, pomadas, cremes ou géis bem conhecidos na técnica. As formulações podem conter solubilizantes, estabilizantes, agentes de aumento da tonicidade, tampões e conservantes.
[887] Em certas modalidades, o agente terapêutico também pode ser formulado como uma composição retal, por exemplo, supositórios ou enemas de retenção, por exemplo, contendo bases de supositório convencionais, por exemplo, manteiga de cacau ou outros glicerídeos, ou agentes formadores de gel, como carbômeros.
[888] Em certas modalidades, o agente terapêutico pode ser formulado como uma preparação de depósito. Essas formulações de ação prolongada podem ser administradas por implantação (por exemplo, por via subcutânea ou intramuscular) ou por injeção intramuscular. O agente terapêutico pode ser formulado com materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados (por exemplo, como uma emulsão em um óleo aceitável), resinas de troca iônica, polímeros biodegradáveis ou como derivados moderadamente solúveis, por exemplo, como um sal moderadamente solúvel.
[889] As composições farmacêuticas podem, se desejado, ser apresentadas em uma embalagem ou dispositivo dispensador que pode conter uma ou mais formas de dosagem unitária contendo o ingrediente ativo. A embalagem pode, por exemplo, compreender uma folha de metal ou plástico, por exemplo, uma embalagem de bolha. A embalagem ou dispositivo dispensador podem ser acompanhados de instruções para administração.
7. QUANTIDADE EFETIVA E DOSAGEM
[890] Em certas modalidades, uma composição farmacêutica do agente terapêutico é administrada a um sujeito, de preferência um humano, em uma dose terapeuticamente eficaz para prevenir, tratar ou controlar uma condição ou doença como aqui descrito. A composição farmacêutica é administrada a um sujeito em uma quantidade suficiente para desencadear uma resposta terapêutica eficaz no sujeito. Uma resposta terapêutica eficaz é uma resposta que, pelo menos parcialmente, interrompe ou retarda os sintomas ou complicações da condição ou doença. Uma quantidade adequada para conseguir isso é definida como “dose terapeuticamente eficaz” ou “quantidade terapeuticamente eficaz”. A dosagem de agentes terapêuticos pode levar em consideração, entre outros, a espécie de animal de sangue quente (mamífero), o peso corporal, idade, condição a ser tratada, a gravidade da condição a ser tratada, a forma de administração, via de administração. O tamanho da dose também será determinado pela existência, natureza e extensão de quaisquer efeitos adversos que acompanham a administração de um composto terapêutico particular em um sujeito particular.
[891] Em certas modalidades, uma dosagem adequada dos compostos da divulgação ou uma composição dos mesmos é de cerca de 1 ng/kg a cerca de 1.000 mg/kg, de 0,01 mg/kg a 900 mg/kg, 0,1 mg/kg a 800 mg/kg, de cerca de 1 mg/kg a cerca de 700 mg/kg, de cerca de 2 mg/kg a cerca de 500 mg/kg, de cerca de 3 mg/kg a cerca de 400 mg/kg, 4 mg/kg a cerca de 300 mg/kg, ou de cerca de 5 mg/kg a cerca de 200 mg/kg. Em certas modalidades, as dosagens adequadas do composto podem ser cerca de 1 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg, 15 mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 35 mg/kg, 40 mg/kg, 45 mg/kg, 50 mg/kg, 60 mg/kg, 70 mg/kg, 80 mg/kg, 90 mg/kg, 100 mg/kg, 125 mg/kg, 150 mg/kg, 175 mg/kg, 200 mg/kg, 250 mg/kg, 300 mg/kg, 400 mg/kg, 500 mg/kg, 600 mg/kg, 700 mg/kg, 800 mg/kg, 900 mg/kg ou 1.000 mg/kg. Em certas modalidades, a dose do composto pode ser administrada uma vez por dia ou dividida em subdoses e administrada em doses múltiplas, por exemplo, duas, três vezes ou quatro vezes por dia.
[892] Em certas modalidades, os compostos podem ser administrados com um ou mais de um segundo agente terapêutico, sequencialmente ou simultaneamente, pela mesma via ou por diferentes vias de administração. Quando administrado sequencialmente, o tempo entre as administrações é selecionado para beneficiar, entre outros, a eficácia terapêutica e/ou segurança do tratamento de combinação. Em certas modalidades, os compostos aqui podem ser administrados primeiro, seguidos por um segundo agente terapêutico ou, alternativamente, o segundo agente terapêutico administrado primeiro seguido pelos compostos da presente divulgação. A título de exemplo e não de limitação, o tempo entre as administrações é de cerca de 1 hora, cerca de 2 horas, cerca de 4 horas, cerca de 6 horas, cerca de 12 horas, cerca de 16 horas ou cerca de 20 horas. Em certas modalidades, o tempo entre as administrações é de cerca de 1, cerca de 2, cerca de 3, cerca de 4, cerca de 5, cerca de 6 ou cerca de mais 7 dias. Em certas modalidades, o tempo entre as administrações é de cerca de 1 semana, 2 semanas, 3 semanas ou 4 semanas ou mais. Em certas modalidades, o tempo entre as administrações é de cerca de 1 mês ou 2 meses ou mais.
[893] Quando administrado concomitantemente, o composto pode ser administrado separadamente ao mesmo tempo que o segundo agente terapêutico, pela mesma ou por vias diferentes, ou administrado em uma única composição pela mesma via. Em certas modalidades, a quantidade e frequência de administração do segundo agente terapêutico podem usar dosagens padrão e frequências de administração padrão usadas para o agente terapêutico particular. Consultar, por exemplo, Physicians 'Desk Reference, 70ª Ed., PDR Network, 2015; incorporado neste documento por referência.
[894] Em certas modalidades em que os compostos da presente divulgação são administrados em combinação com um segundo agente terapêutico, a dose do segundo agente terapêutico é administrada em uma dose terapeuticamente eficaz. Em certas modalidades, uma dose adequada pode ser de cerca de 1 ng/kg a cerca de 1.000 mg/kg, de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 900 mg/kg, de cerca de 0,1 mg/kg a cerca de 800 mg/kg, de cerca de 1 mg/kg a cerca de 700 mg/kg, de cerca de 2 mg/kg a cerca de 500 mg/kg, de cerca de 3 mg/kg a cerca de 400 mg/kg, de cerca de 4 mg/kg a cerca de 300 mg/kg, ou de cerca de 5 mg/kg a cerca de 200 mg/kg. Em certas modalidades, as dosagens adequadas do segundo agente terapêutico podem ser cerca de 1 mg/kg, 5 mg/kg, 10 mg/kg, 15 mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 35 mg/kg, 40 mg/kg, 45 mg/kg, 50 mg/kg, 60 mg/kg, 70 mg/kg, 80 mg/kg, 90 mg/kg, 100 mg/kg, 125 mg/kg, 150 mg/kg, 175 mg/kg, 200 mg/kg, 250 mg/kg, 300 mg/kg, 400 mg/kg, 500 mg/kg, 600 mg/kg, 700 mg/kg, 800 mg/kg, 900 mg/kg ou 1.000 mg/kg. Em certas modalidades, a orientação para as dosagens do segundo agente terapêutico é fornecida em Physicians’ Desk Reference, 70ª Ed, PDR Network (2015), incorporado neste documento por referência.
[895] Deve ser entendido que as dosagens ótimas, toxicidade e eficácia terapêutica de tais agentes terapêuticos podem variar dependendo da potência relativa do agente terapêutico individual e podem ser determinadas por procedimentos farmacêuticos padrão em culturas de células ou animais experimentais, por exemplo, determinando o LD50 (a dose letal para 50% da população) e o ED50 (a dose terapeuticamente eficaz em 50% da população). A proporção da dose entre os efeitos tóxicos e terapêuticos é o índice terapêutico e pode ser expressa como a proporção, LD50/ED50. Os agentes terapêuticos ou combinações dos mesmos que exibem grandes índices terapêuticos são preferidos. Embora certos agentes que exibem efeitos colaterais tóxicos possam ser usados, deve-se ter cuidado para projetar um sistema de entrega que direcione tais agentes ao local do tecido afetado para minimizar o dano potencial às células normais e, assim, reduzir os efeitos colaterais.
[896] Os dados obtidos a partir de, por exemplo, ensaios de cultura de células e estudos em animais podem ser usados para formular uma faixa de dosagem para uso em humanos. A dosagem de tais compostos de moléculas pequenas encontra-se preferencialmente dentro de uma faixa de concentrações que incluem a ED50 com pouca ou nenhuma toxicidade. A dosagem pode variar dentro desta faixa dependendo da forma de dosagem empregue e da via de administração. Para quaisquer compostos usados nos métodos aqui divulgados, a dose terapeuticamente eficaz pode ser estimada inicialmente a partir de ensaios de cultura de células. Uma dose pode ser formulada em modelos animais para atingir uma faixa de concentração plasmática circulante que inclui a IC50 (a concentração do composto de teste que atinge uma inibição semimáxima dos sintomas) como determinado na cultura celular. Essas informações podem ser usadas para determinar com mais precisão as doses úteis em humanos. Os níveis no plasma podem ser medidos, por exemplo, por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC).
[897] Os exemplos a seguir são fornecidos para ilustrar ainda mais os métodos da presente divulgação e os compostos e composições para uso nos métodos. Os exemplos descritos são apenas ilustrativos e não se destinam a limitar o âmbito da(s) invenção(ões) de forma alguma. As divulgações de todos os artigos e referências mencionados neste pedido, incluindo patentes, são incorporados neste documento por referência em sua totalidade.
EXEMPLOS SINTÉTICOS PROCEDIMENTO AA: SÍNTESE DO COMPOSTO K601
[898] Uma solução de AA-1 (8,50 g, 33,37 mmol, 1,00 eq, HCl) em tolueno (100,00 ml) foi misturada com TEA (4,05 g, 40,04 mmol, 5,55 ml, 1,20 eq) e agitada a 20 °C durante 18 horas. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para fornecer a forma livre de AA-1.
[899] A uma solução de estado livre de AA-1 (5,52 g, 25,29 mmol, 1,00 eq) e AA-2 (4,57 g, 27,82 mmol, 1,10 eq) em tolueno (80,00 ml) foram adicionados TFA (7,70 g, 67,52 mmol, 5,00 ml, 2,67 eq) e peneiras moleculares 4A (0,2 g). A mistura de reação foi agitada a 120°C durante 4 horas, mantendo um refluxo suave, para fornecer uma mistura amarela. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A mistura era diluído com H2O (100 ml) e 30% NaOH aq. adicionado até a solução atingir pH 7 e depois extraído com EtOAc (50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, e concentradas sob pressão reduzida para fornecer AA-3. Cerca de metade do produto (4,5 g) foi usado diretamente para a próxima etapa. O resto foi purificado e usado para a próxima etapa.
[900] A uma solução de AA-3 (4,50 g, 12,35 mmol, 1,00 eq) e NaHCO3 (1,25 g, 14,82 mmol, 576,40 µl, 1,20 eq) em CHCl3 (50,00 ml) foi adicionado lentamente cloreto de 2-cloroacetil (3,35 g, 29,64 mmol, 2,36 ml, 2,40 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 4 horas para fornecer uma mistura preta. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A mistura de reação foi diluída com DCM (20 ml), lavada com uma solução saturada de NaHCO3 e salmoura (10 ml cada) em sequência. A camada orgânica foi seca com Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida. O produto foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 4: 1) para fornecer K601. LC-MS (m/z): 441,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO, T = 80 °C) δ 10,80 (s, 1H), 7,88 a 7,86 (m, 2H), 7,60 a 7,58 (m, 2H), 7,47 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,06 a 7,02 (m, 1H), 7,01 a 6,96 (m, 1H), 6,19 (s, 1H), 5,27 (s, 1H), 4,60 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 4,27 a 4,24 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,49 - 3,48 (m, 1H), 3,36-3,32 (m, 1H).
PROCEDIMENTO AB: SÍNTESE DO COMPOSTO 1 E COMPOSTO 4
[901] Preparação do composto AB-3. Uma solução de AA-1 (5 g, 19,63 mmol, 1 eq, HCl) em tolueno (50 ml) foi adicionado TEA (2,38 g, 23,56 mmol, 3,28 ml, 1,2 eq) e a mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora para obter uma mistura amarela. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para fornecer um estado livre de AA-1.
[902] Para preparar AB-3, uma solução de AB-2 (10 g, 66,61 mmol, 1 eq) em álcool terc-butílico (200 ml) foi adicionado carbonato de terc-butoxicarbonil terc-butil (15,26 g, 69,94 mmol, 16,07 ml, 1,05 eq) e DMAP (406,87 mg, 3,33 mmol, 0,05 eq). A mistura foi agitada a 30 °C durante 14 horas para obter uma mistura branca. TLC (PE/EtOAc = 1/1,
SiO2) mostrou que a reação estava completa. A solução de reação foi diluída com DCM (300 ml), lavada com HCl (1 M 200 ml) e, em seguida, lavada com NaHCO3 aq. (200 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro filtrado, e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 0/1 a 10: 1) para fornecer AB-3.
[903] A uma solução resfriada (0 °C) de AA-1 (1 g, 4,58 mmol, 1 eq) em DCM (30 ml) foram adicionados AB-3 (1,13 g, 5,50 mmol, 1,2 eq) e TFA (783,64 mg, 6,87 mmol, 508,86 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 24 horas para obter uma solução amarela. A conclusão da reação foi analisada por TLC. A solução da reação foi diluída com H2O (8 ml), neutralizada com solução sat. aq. NaHCO3, e extraído com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro filtrada, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 5: 1) para fornecer AB-4.
[904] Preparação do composto 1. Uma solução de 601-4A (35 mg, 86,11 µmol, 1 eq) e NaHCO3 (8,68 mg, 103,33 µmol, 4,02 µl, 1,2 eq) em CHCl3 (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetil (23,34 mg, 206,66 µmol, 16,44 µl, 2,4 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 14 horas para fornecer uma solução verde. LCMS mostrou o MS desejado. A solução de reação foi diluída com DCM (10 ml), lavada com NaHCO3 aquoso saturado (20 ml) e extraída com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro filtrada, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE:EA = 2:1) para resultar no Composto 1. LC-MS (m/z): 505,0 [M+Na]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,10 a 7,70 (m, 3H), 7,53 a 7,51 (m, 1H), 7,38 a 7,26 (m, 2H), 7,20 a 7,14 (m, 1H), 7,12 a 7,10 (m, 2H), 6,23-6,10 (m, 1H), 5,26 (s, 1H), 4,11 a 3,28 (m, 7H), 1,61 a 1,55 (m, 9H).
[905] Preparação do composto 4. Uma solução do Composto 1 (40 mg, 82,82 µmol, 1 eq) em DCM (1 ml) foi misturada com TFA (154,00 mg, 1,35 mmol, 0,1 ml, 16,31 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas para obter uma solução preta. LCMS mostrou o MS desejado. A solução de reação foi concentrada sobre N2. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl) -ACN]; B%: 38% -68%, 10 min) para fornecer o Composto 4. LC-MS (m/z): 426,9 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO) δ 10,93 (s, 1H), 7,82 a 7,80 (m, 2H), 7,53 a 7,46 (m, 3H), 7,23 a 7,21 (m, 1H), 7,04 a 6,96 (m, 2H), 6,02 (s, 1H), 5,39 (s, 1H), 4,74 a 4,71 (m, 1H), 4,44 a 4,40 (m, 1H), 3,59 a 3,51 (m, 5H). PROCEDIMENTO AC: SÍNTESE DO COMPOSTO 2 E COMPOSTO 3
[906] Fez-se reagir uma solução de AC-1 com Ac-t-butila na presença de HClO4 em DCM até à conclusão da reação para formar AC- 2, como mostrado no esquema acima.
[907] A uma solução resfriada (0 °C) de AC-2 (200 mg, 768,25 µmol, 1 eq) em DCM (1,5 ml) foram adicionados AA-2 (151,34 mg, 921,90 µmol, 1,2 eq) e TFA (131,40 mg, 1,15 mmol, 85,32 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 16 h para obter uma solução vermelha. A conclusão da reação foi detectada por TLC e LCMS. A solução da reação foi diluída com H2O (10 ml), neutralizada com solução sat. aq. NaHCO3 até pH 7, e extraído com DCM (10 ml x 3).As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro, filtrado, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE: EA = 3: 1) para fornecer AC-4.
[908] Preparação do composto 2. A uma solução de AC-4 (80 mg, 196,81 µmol, 1 eq) e NaHCO3 (19,84 mg, 236,18 µmol, 9,19 µl, 1,2 eq) em CHCl3 (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetil (53,35 mg, 472,36 µmol, 37,57 µl, 2,4 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 14 horas para obter uma solução preta. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A solução de reação foi diluída com DCM (10 ml), lavada com sat. aq. NaHCO3 (10 ml), extraído com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro, filtradas, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE:EA = 2:1) para resultar no Composto 2. LC-MS (m/z): 483,1[M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,00 a 7,92 (m, 2H), 7,77 (s, 1H), 7,53 a 7,51 (m, 1H), 7,42 (s, 2H), 7,24 a 7,16 (m, 1H), 7,15 a 7,10 (m, 2H), 6,21 a 6,09 (m, 1H), 5,30 a 5,10 (m, 1H), 4,17 a 4,11 (m, 1H), 4,07 a 3,98 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,73 a 3,65 (m, 1H), 3,49 a 3,39 (m, 1H), 1,25 a 1,21 (m, 9H).
[909] Preparação do composto 3. A uma solução do Composto 2 (35 mg, 72,47 µmol, 1 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado TFA (154,00 mg, 1,35 mmol, 0,1 ml, 18,64 eq). A solução de reação foi agitada a 20 °C durante 14 horas para obter uma solução preta. A conclusão da reação foi detectada por LCMS. A solução de reação foi diluída com DCM (10 ml) e, em seguida, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA) -ACN]; B%: 40% -70%, 10 min) para fornecer o Composto 4. LC-MS (m/z):
426,9[M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO) δ 10,95 (s, 1H), 7,85 a 7,82 (m, 2H), 7,57 a 7,54 (m, 2H), 7,48 a 7,46 (m, 1H), 7,24 a 7,21 (m, 1H), 7,04 a 6,94 (m, 3H), 6,02 (s, 1H), 5,29 (s, 1H), 4,74 a 7,71 (m, 1H), 4,36 a 4,32 (m, 1H), 3,80 (s, 4H), 3,59 a 3,55 (m, 1H). PROCEDIMENTO AD: SÍNTESE DO COMPOSTO 273
[910] A uma solução de AD-1 (200 mg, 1,21 mmol, 1 eq, HCl) em THF (8 ml) foram adicionados DMF (31,67 mg, 433,23 µmol, 33,33 µl, 3,59e-1 eq) e dicloreto de oxalila (145,61 mg, 1,15 mmol, 100,42 µl, 0,95 eq) a 0 °C com banho de gelo. A solução de reação foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma mistura laranja. A reação foi completada conforme detectado por TLC. A solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida para resultar AD-2. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[911] Preparação do composto 273. A uma solução de AA-3 (50 mg, 137,21 µmol, 1 eq) e TEA (83,31 mg, 823,28 µmol, 114,59 µl, 6 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado AD-2 (101,02 mg, 548,85 µmol, 4 eq, HCl). A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas para obter uma solução preta. A reação foi concluída conforme detectado por LCMS. A solução da reação foi diluída com H2O (30 ml), extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, e concentradas sob pressão reduzida. O produto foi purificado por HPLC prep (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 25% a 55%, 10 min) para resultar no composto 273. LC-MS (m/z): 476,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO) δ 11,23 a 10,92 (m, 1H), 9,84 (m, 1H), 7,93 a 7,95 (m, 1H), 7,82 a 7,84 (m, 1H), 7,65 a 7,67 (m, 1H), 7,55 a 7,57 (m, 1H), 7,47 a 7,49 (m, 1H), 7,35 a 7,20 (m, 1H), 7,12 a 6,92 (m, 3H), 6,51 a 6,55 (m, 1H), 6,13 (s, 1H), 5,64 (s, 1H), 5,04 (s, 1H), 3,86 (s, 1H), 3,79 a 3,82 (m, 4H), 3,55 (s, 1H), 3,49 (s, 3H), 2,82 a 2,69 (m, 5H), 2,66 a 2,67 (m, 2H). PROCEDIMENTO AE: SÍNTESE DO COMPOSTO 6
[912] A uma solução do Composto 4 (25 mg, 58,57 µmol, 1 eq; consultar Procedimento AA) e AE-1 (9,74 mg, 58,57 µmol, 1 eq) em DCM (1 ml) foram adicionados EDCI (22,46 mg, 117,14 µmol, 2 eq) e DMAP (14,31 mg, 117,14 µmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 14 horas para obter uma solução amarela. A conclusão da reação foi detectada por LCMS. A solução da reação foi diluída com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro filtrada, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl) -ACN]; B%: 80% a 90%, 10 min) para resultar no Composto
6. LC-MS (m/z): 575,1[M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO) δ 11,22 a 11,04 (m, 1H), 7,96 a 7,83 (m, 2H), 7,69 a 7,56 (m, 2H), 7,48 a 7,46 (M, 1H), 7,32 a 7,21 (m, 1H), 7,04 a 6,94 (m, 2H), 6,03 (s, 1H), 5,41 (s, 1H), 4,75 a 4,71 (m, 1H), 4,44 a 4,41 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 1,94 (s, 3H), 1,75 a 1,60 (m, 6H), 1,55 (s, 5H), 1,46 a 1,39 (m, 1H), 1,23 (s, 3H). PROCEDIMENTO AF: SÍNTESE DO COMPOSTO 7
[913] Preparação do Composto 7. Para uma solução de Composto 4 (100 mg, 234,27 µmol, 1 eq; consultar Procedimento AA), metanamina (31,64 mg, 468,55 µmol, 2 eq, HCl), EDCI (67,37 mg, 351,41 µmol, 1,5 eq) e HOBt (31,66 mg, 234,27 µmol, 1 eq) em DMF (1 ml) foi adicionado NMM (94,79 mg, 937,10 µmol, 103,03 µl, 4 eq) a 0 °C.
A mistura foi agitada a 20 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela.
A conclusão da reação foi detectada por LCMS.
A solução de reação foi diluída com EA (20 ml), lavada com 1N HCl (15 ml), lavada com solução sat. aq.
NaHCO3 (20 ml) e, em seguida, com salmoura (15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida.
O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 25% -55%, 7 min) para fornecer o Composto 7. LC-MS (m/z): 462,0[M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,12 a 10,94 (m, 1H), 8,43 a 8,31 (m, 1H), 7,82 a 7,67 (m, 2H), 7,60 a 7,41 (m, 3H), 7,34 a 7,21 (m, 1H), 7,04 a 6,94 (m, 2H), 6,01 (s, 1H), 5,39 (s, 1H), 4,97 a 4,71 (m, 1H), 4,44 a 4,09 (m, 1H), 3,58 a 3,38 (m, 5H), 2,83 a 2,70 (m, 3H). PROCEDIMENTO AG: SÍNTESE DO COMPOSTO 8
[914] Para uma solução de AB-2 (1 g, 6,66 mmol, 1 eq), EDCI (1,53 g, 7,99 mmol, 1,2 eq), HOBt (900,03 mg, 6,66 mmol, 1 eq) e DIEA (3,44 g, 26,64 mmol, 4,64 ml, 4 eq) em DCM (15 ml) foi adicionada N- metilmetanamina (814,73 mg, 9,99 mmol, 915,43 µl, 1,5 eq, HCl) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas para obter uma solução vermelha. A conclusão da reação foi detectada por TLC e LCMS. A solução de reação foi diluída com DCM (40 ml), depois lavada com NaHCO3 (30 ml) e salmoura (30 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 1: 1) para resultar AG-3.
[915] A uma solução de AA-1 (10 g, 39,26 mmol, 1 eq, HCl) em tolueno (200 ml) foi adicionado TEA (4,77 g, 47,11 mmol, 6,56 ml, 1,2 eq), e a mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora para resultar uma mistura amarela. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A mistura de reação filtrada, e o filtrado concentrado a pressão reduzida para obter uma forma livre de AG-1.
[916] A uma solução de AG-1 (923,75 mg, 4,23 mmol, 1 eq) e AG- 3 (900 mg, 5,08 mmol, 1,2 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado TFA (482,60 mg, 4,23 mmol, 313,38 µl, 1 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 40 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que AG-1 permaneceu; a solução de reação foi agitada a 40 °C durante mais 24 horas. A conclusão da reação foi detectada por LCMS. A solução de reação foi diluída com DCM (30 ml), depois lavada com sat. aq. NaHCO3 (15 ml) e salmoura (15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 1: 2) para resultar AG-4.
[917] Preparação do Composto 8. A uma solução de AG-4 (100 mg, 264,95 µmol, 1 eq) e NaHCO3 (44,51 mg, 529,89 µmol, 20,61 µl, 2 eq) em CHCl3 (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (59,85 mg, 529,89 µmol, 42,15 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 3 horas para obter uma suspensão amarela. A conclusão da reação foi detectada por LCMS. A solução de reação foi diluída com DCM (15 ml), lavada com sat. aq. NaHCO3 (20 ml) e salmoura, e depois extraída com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl) -ACN]; B%: 32% a 62%, 10 min) para fornecer o Composto 8. LC-MS (m/z): 475,9 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,82 (s, 1H), 7,53 a 7,50 (m, 1H), 7,48 a 7,32 (m, 2H), 7,26 (s, 3H), 7,11 a 7,07 (m, 2H), 6,22 a 5,97 (m, 1H), 5,20-5,07 (m, 1H), 4,13 a 3,72 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 3,46 a 3,24 (m, 1H), 3,24 a 2,73 (m, 6H). PROCEDIMENTO AH: SÍNTESE DO COMPOSTO 9
[918] Preparação do Composto 9. A uma solução do Composto 4 (100 mg, 234,27 µmol, 1 eq), EDCI (44,91 mg, 234,27 µmol, 1 eq) e HOBt (63,31 mg, 468,55 µmol, 2 eq) em DMF (1 ml) foi adicionado 2- metilpropan-2-amina - (34,27 mg, 468,55 µmol, 49,24 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas para obter uma solução vermelha. A conclusão da reação foi detectada por LCMS. A solução de reação foi diluída com EA (10 ml), lavada com 1N HCl (10 ml), depois lavada com solução sat. aq. NaHCO3 (15 ml) e salmoura. A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e, então, concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05%HCl)-ACN]; B%: 40% a 70%, 10 min) para fornecer o Composto
9. LC-MS (m/z): 504,1[M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD) δ 7,73 (s, 1H), 7,61 a 7,59 (m, 2H), 7,47 - 7,44 (m, 2H), 7,26 - 7,17 (m, 1H), 7,06 - 6,99 (m, 2H), 6,08 (s, 1H), 5,40 (s, 1H), 4,54 - 4,44 (m, 1H), 4,24 - 4,02 (m, 1H), 3,74 - 3,48 (m, 5H), 1,43 - 1,41 (m, 9H). PROCEDIMENTO AI: SÍNTESE DO COMPOSTO 10
[919] A uma solução de AI-1 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq) em DMF (5 ml) foram adicionados AI-2 (546,01 mg, 3,26 mmol, 9,78e-1 eq, HCl), DIEA (1,29 g, 9,99 mmol, 1,74 ml, 3 eq) e BOP (1,77 g, 4,00 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (20 ml) e extraiu-se com MTBE (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 5% a 50%) para fornecer AI-3.
[920] A uma solução de AA-1 (240 mg, 1,10 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados AI-3 (289,52 mg, 1,10 mmol, 1 eq) e TFA (62,69 mg, 549,82 µmol, 40,71 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: 100% de EtOAc) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (20 ml) e extraiu-se com DCM (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: EtOAc 100%) para resultar AI-5.
[921] Preparação do Composto 10. A uma solução de AI-5 (80 mg, 172,59 µmol, 1 eq) em THF (2 ml) foram adicionados Sat. de NaHCO3 (172,59 mol, 1 ml, 1 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (58,48 mg, 517,77 µmol, 41,18 ml, 3 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que nenhuma massa desejada foi encontrada e o AI-5 permaneceu. CHCl3 (3 ml) e Sat. de NaHCO3 (2 ml) foi adicionado e, em seguida, 0,03 ml de cloreto de 2- cloroacetila gota a gota. A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas novamente. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com HCl (12 N, 1 ml). A mistura foi agitada a 20 °C durante 0,5 horas. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi extraída com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1%TFA)-ACN]; B%: 43% a 73%, 10 min) para resultar dois produtos (pico 2 e pico 1, isto é, Composto 10). NOE mostrou que o pico 2 era o isômero cis e o pico 1 era o isômero trans. LC-MS (m/z): 540,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD): δ 7,84 a 7,47 (m, 5H), 7,22 a 7,01 (m, 3H), 7,51 a 7,35 (m, 2H), 6,39 a 6,11 (m, 1H), 5,42 (s, 1H), 4,56 a 4,47 (m, 2H), 4,27 a 4,07 (m, 1H), 3,76 a 3,33 (m, 5H), 1,09 (s, 9H). PROCEDIMENTO AJ: SÍNTESE DO COMPOSTO 11
[922] A uma solução de AJ-1 (0,5 g, 1,92 mmol, 1 eq) e 4- nitrobenzaldeído (348,18 mg, 2,30 mmol, 1,2 eq) em DCM (15 ml) foi adicionado TFA gota a gota (109,49 mg, 960,00 µmol, 71,10 µl, 0,5 eq) a 0 °C. A solução de reação foi aquecida a 40 °C em um tubo selado durante 16 h para resultar uma solução marrom. TLC (PE/EtOAc=2/1, SiO2) mostrou que dois novos pontos foram formados. A solução de reação foi lavada com solução aquosa de NaHCO3 (5 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por flash combi (PE/EtOAc = 10/1 a 2/1) para resultar AJ-2.
[923] Preparação do Composto 11. A uma mistura de AJ-2 (50 mg, 127,09 µmol, 1 eq) e NaHCO3 (12,81 mg, 152,50 µmol, 5,93 µl, 1,2 eq) em CHCl3 (0,5 ml) foi adicionada gota a gota uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (35,88 mg, 317,71 ol, 25,27 ml, 2,5 eq) em CHCl3 (0,5 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 15 °C durante 16 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou o MS desejado. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado diretamente por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 55% a 85%, 10 min) para resultar no Composto 11. LC-MS (m/z): 470,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,13 (d, J=8,3 Hz, 2H), 7,73 (brs, 1H), 7,58 a 7,45 (m, 3H), 7,24 - 7,19 (m, 1H), 7,19 - 7,10 (m, 2H), 6,13 (s, 1H), 5,12 (dd, J=2,6, 4,9 Hz, 1H), 4,17 (d, J=12,8 Hz, 1H), 4,06 (d, J=12,8 Hz, 1H), 3,70 (d, J=15,8 Hz, 1H), 3,41 (dd, J=4,6, 15,2 Hz, 1H), 1,21 (s, 9H). PROCEDIMENTO AK: SÍNTESE DO COMPOSTO 12
[924] A uma solução de AA-1 (500 mg, 2,29 mmol, 1 eq) e AK-2 (394,88 mg, 2,41 mmol, 1,05 eq) em DCM (7 ml) foi adicionado gota a gota TFA (261,21 mg, 2,29 mmol, 169,62 µl, 1 eq) a 0 °C. A solução de reação foi aquecida a 40 °C em um tubo selado durante 16 h para resultar uma solução marrom. TLC (PE/EtOAc = 1/1, SiO2) mostrou que quatro novos pontos foram formados. A solução de reação foi lavada com solução aquosa de NaHCO3 (5 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por flash combi (PE/EtOAc = 10/1 a 1/1) para resultar AK-3.
[925] Preparação do Composto 12. A uma mistura de AK-3 (50 mg, 137,21 µmol, 1 eq) e NaHCO3 (13,83 mg, 164,66 µmol, 6,40 µl, 1,2 eq) em CHCl3 (0,5 ml) foi adicionada gota a gota uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (38,74 mg, 343,04 ol, 27,28 ml, 2,5 eq) em CHCl3 (0,5 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 15 °C durante 2 horas para fornecer uma solução castanha. LCMS mostrou o MS desejado. A mistura filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado diretamente por flash combi (PE/EtOAc = 5/1 a 2/1) para resultar o Composto 12. LC-MS (m/z): 441,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,11 - 7,80 (m, 1H), 7,58 - 7,50 (m, 1H), 7,46 - 6,85 (m, 7H), 6,30 - 5,97 (m, 1H), 5,15 (brs, 1H), 4,17 - 4,07 (m, 1H), 4,07 - 3,84 (m, 1H), 3,77 - 3,09 (m, 5H), 2,27 (s, 3H). PROCEDIMENTO AL: SÍNTESE DO COMPOSTO 13 E COMPOSTO 13A
[926] A uma solução de AL-1 (1,5 g, 12,28 mmol, 1 eq) em DCM (20 ml) foram adicionados DMAP (4,50 g, 36,85 mmol, 3 eq) e cloreto de 2,2-dimetilpropanoil (2,22 g, 18,42 mmol, 2,27 ml, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (20 ml) e extraiu- se com DCM (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 20%) para resultar AL-2.
[927] A uma solução de AA-1 (500 mg, 2,29 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados AL-2 e TFA (770,00 mg, 6,75 mmol, 500,00 µl, 2,95 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 24 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com MBTE (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 20%) para fornecer AL-3a e AL-3.
[928] Preparação do Composto 13. A uma solução de AL-3 (30 mg, 73,81 µmol, 1 eq) em CHCl3 (2 ml) foi adicionado NaHCO3 (31,00 mg, 369,03 µmol, 14,35 µl, 5 eq), seguido por cloreto de 2-cloroacetila (10,00 mg, 88,57 µmol, 7,04 µl, 1,2 eq) adicionado gota a gota a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 60% a 90%, 8,8 min) para resultar o Composto 13.
[929] Preparação do Composto 13a. A uma solução de AL-3a (30,00 mg, 73,81 µmol, 1 eq) em CHCl3 (2 ml) foi adicionado NaHCO3 (31,00 mg, 369,03 µmol, 14,35 µl, 5 eq), seguido por cloreto de 2- cloroacetila (10,00 mg, 88,57 µmol, 7,04 µl, 1,2 eq) adicionado gota a gota a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi em seguida arrefecida bruscamente com H2O (20 ml). A mistura foi extraída com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 60% a 90%, 8,8 min) para resultar o Composto 13. 40,4 mg foram preparados. LC-MS (m/z): 431,0[M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,01 a 7,99 (m, 1H), 7,91 a 7,89 (m, 1H), 7,54 a 7,53 (m, 1H), 7,48 a 7,42 (m, 1H), 7,19 a 7,02 (m, 1H), 6,99 a 3,97 (m, 2H), 6,58 a 6,08 (m, 1H), 5,76 a 5,03 (m, 1H), 3,86 a 3,83 (m, 3H), 3,68 a 3,45 (m, 5H), 2,14 a 2,03 (m, 3H). PROCEDIMENTO AM: SÍNTESE DO COMPOSTO 14
[930] A uma solução de AA-1 (800 mg, 3,67 mmol, 1 eq) em DCM (20 ml) foram adicionados AM-1 (447,64 mg, 3,67 mmol, 1 eq) e TFA (208,98 mg, 1,83 mmol, 135,70 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a massa desejada foi encontrada; no entanto, AA-1 e AM-1 permaneceram. Assim, a mistura foi agitada a 50 °C durante 16 horas adicionais. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NaHCO3 (20 ml) sat. e extraída com DCM (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 30%) para resultar AM-3 e o isômero cis.
[931] A uma solução de AM-3 (50 mg, 155,11 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foram adicionados ácido (2S)-2-(1-adamantil)-2-(terc- butoxicarbonilamino)acético (57,59 mg, 186,13 µmol, 1,2 eq), DMAP (1,89 mg, 15,51 µmol, 0,1 eq), DIEA (60,14 mg, 465,32 µmol, 81,05 µl, 3 eq), HOBt (23,05 mg, 170,62 µmol, 1,1 eq) e EDCI (35,68 mg), 186,13 µmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 h para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) para resultar AM-4.
[932] A uma solução de AM-4 (110 mg, 179,23 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foram adicionados NaHCO3 (150,56 mg, 1,79 mmol, 69,71 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (60,73 mg, 537,68 µmol, 42,77 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer AM-5.
[933] Preparação do Composto 14. A uma solução de AM-5 (50 mg, 81,47 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado TFA (462,00 mg, 4,05 mmol, 0,3 ml, 49,74 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 33% a 63%, 10 min) para resultar o Composto 14. LC-
MS (m/z): 612,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD): δ9,16 (s, 1H), 7,55 a 7,51 (m, 3H), 7,26 a 7,06 (m, 5H), 6,08 a 5,23 (m, 1H), 4,45 a 4,41 (m, 1H), 4,24 a 4,21 (m, 1H), 3,85 (brs, 1H), 3,66 a 3,47 (m, 5H), 2,07 a 1,83 (m, 4H), 1,80 a 1,68 (m, 12H). PROCEDIMENTO AN: SÍNTESE DO COMPOSTO 15
[934] Para uma solução do composto AN-1 (1 g, 6,66 mmol, 1 eq) em DMF (30 ml), DIEA (1,29 g, 9,99 mmol, 1,74 ml, 1,5 eq) foi adicionado com agitação a 20 °C durante 30 min, em seguida, carbamato de terc-butila N-(2-aminoetila) (1,81 g, 11,32 mmol, 1,78 ml, 1,7 eq) foi adicionado com agitação a 20 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostrou que a reação estava completa. A mistura de reação foi particionada entre água (30 ml) e EtOAc (40 ml), e as camadas aquosas extraídas com EtOAc (30 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (30 ml), secas com sulfato de sódio e concentradas para fornecer o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1-1/1) para resultar AN-2.
[935] Para uma solução do composto AN-2 (2,2 g, 7,53 mmol, 1 eq) e (2R) -2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (1,81 g, 8,28 mmol, 1,1 eq) em DCM (25 ml) foi adicionado TFA gota a gota (858,11 mg, 7,53 mmol, 557,21 µl, 1 eq). A mistura de mistura foi agitada a 20°C durante 24 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e DCM (20 ml), e a camada aquosa extraída com DCM (20 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução saturada de bicarbonato de sódio (20 ml), secas com sulfato de sódio e concentradas para fornecer o produto bruto. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: EA: MeOH = 10: 1) para obter AN-3.
[936] Preparação do Composto 15. Para uma solução do composto AN-3 (1,00 g, 2,03 mmol, 1 eq) em CHCl3 (15 ml) foi adicionado NaHCO3 (341,10 mg, 4,06 mmol, 157,92 µl, 2 eq). Em seguida, cloreto de 2-cloroacetila (343,94 mg, 3,05 mmol, 42,21 µl, 1,5 eq) foi adicionado gota a gota a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 6 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS e TLC (eluindo com: EA/MeOH = 20/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05%HCl)-ACN]; B%: 18% a 38%, 10min) para resultar o Composto 15. LC-MS (m/z): 469,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 2,87 a 3,04 (m, 2H), 3,46 a 3,61 (m, 7H), 4,09 (d, J = 12,80 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 13,80 Hz, 1H), 4,75 (d, J = 13,80 Hz, 1H), 4,96 (s, 1H), 5,41 (s, 1H), 6,03 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,93 a 7,09 (m, 2H), 7,23 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,46 a 7,54 (m, 2H), 7,77 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,91 (s, 3H), 8,54 a 8,78 (m, 1H), 8,54 a 8,78 (m, 1H), 10,99 (s, 1H), 11,16 (s, 1H). PROCEDIMENTO AO: SÍNTESE DO COMPOSTO 19
[937] A uma solução de AJ-1 (300 mg, 1,15 mmol, 1 eq) em THF (5 ml) foram adicionados AB-3 (237,66 mg, 1,15 mmol, 1 eq) e TFA (65,70 mg, 576,19 µmol, 42,66 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 3 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (10 ml) e extraída com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 20%) para obter AO-3 e (1R,3R)-1-(4-terc-butoxicarbonilfenil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido [3,4-b]indol-3-carboxilato de terc-butila.
[938] Preparação do Composto 19. A uma solução de AO-3 (42 mg, 93,63 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (7,87 mg, 93,63 µmol, 3,64 µl, 1 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (52,88 mg, 468,17 µmol, 37,24 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado lavado com DCM (10 ml) e concentrado para resultar no produto bruto. O produto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 70% a 95%, 8,8 min) para resultar no Composto 19. LC-MS (m/z): 525,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD): δ 7,99 a 7,85 (m, 2H), 7,64 a 7,48 (m, 3H), 7,25 a 7,23 (m, 1H), 7,07 a 7,01 (m, 2H), 6,01 (s, 1H), 5,27 a 5,18 (m, 2H), 4,50 a 4,24 (m, 1H), 3,98 a 3,49 (m, 5H), 1,65 (s, 9H), 1,26 (s, 9H).
PROCEDIMENTO AP: SÍNTESE DO COMPOSTO 21 E COMPOSTO 21A
[939] A uma solução de AP-1 (1 g, 3,29 mmol, 1 eq) em THF (25 ml) foram adicionados Me2NH (321,53 mg, 3,94 mmol, 361,27 µl, 1,2 eq, HCl), DMAP (40,14 mg, 328,58 µmol, 0,1 eq,), DIEA (1,27 g, 9,86 mmol, 1,72 ml, 3 eq,), HOBt (443,99 mg, 3,29 mmol, 1 eq,) e EDCI (755,87 mg, 3,94 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. À mistura foi adicionada H2O (10 ml) e depois extraiu-se com MTBE (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4, filtradas e, em seguida, concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, Éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 para 1:1) para obter AP-2.
[940] Uma solução de AP-2 (592 mg, 1,79 mmol, 1 eq) em HCl/EtOAc (4 M, 10 ml, 22,39 eq) foi agitada a 25 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para obter um resíduo, que foi, em seguida, diluída com saturada de NaHCO3 aq. (10 ml) e DCM (10 ml). A mistura foi agitada durante 10 min e depois extraída com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4, filtradas e concentradas para obter AP-3.
[941] A uma solução de AP-3 (100 mg, 432,35 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados 4-formilbenzoato de terc-butila (89,17 mg, 432,35 µmol, 1 eq) e TFA (24,65 mg, 216,18 µmol, 16,01 µl, 0,5 eq). A mistura foi aquecida a 50 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: EtOAc: PE = 1: 2) mostraram que a reação foi completada. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e depois extraída com DCM (5 mlx 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4 concentradas para obter o produto bruto. O produto foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE: EtOAc = 1:2) coletando o ponto com polaridade mais alta. Foi confirmado por RMN e NOE como AP-4a (isômero cis). Este isômero é o produto principal e foi usado na próxima etapa antes da confirmação pela NOE.
[942] A uma solução de AP-4a (30,00 mg, 71,51 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foram adicionados cloreto de 2-cloroacetila (40,38 mg, 357,55 µmol, 28,44 µl, 5 eq) e NaHCO3 (60,07 mg, 715,11 µmol, 27,81 µl, 10 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para resultar no produto bruto. O produto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 55% a 85%, 10min) para resultar no Composto 21a.
[943] Para uma solução de AP-3 (100 mg, 432,35 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados 4-formilbenzoato de terc-butila (89,17 mg, 432,35 µmol, 1 eq) e TFA (24,65 mg, 216,18 µmol, 16,01 µl, 0,5 eq).
A mistura foi aquecida a 50 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: EtOAc: PE = 1: 2) mostraram que a reação foi completada. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e extraída com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4 e, então, concentradas para obter o produto bruto. O produto foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE: EtOAc = 1:2) para obter o AP-4.
[944] Preparação do Composto 21. A uma solução de AP-4 (48 mg, 114,42 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foram adicionados cloreto de 2- cloroacetila (64,61 mg, 572,09 µmol, 45,50 µl, 5 eq) e NaHCO3 (96,12 mg, 1,14 mmol, 44,50 µl, 10 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para resultar no produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 55% a 85%, 10 min) para resultar o Composto 21. LC-MS (m/z): 496,0 [M]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,49 - 8,20 (m, 1H), 8,05 - 7,83 (m, 2H), 7,52 - 7,37 (m, 3H), 7,08 - 6,79 (m, 3H), 6,45 (brs, 1H), 5,86 (brs, 1H), 3,48 - 3,28 (m, 2H), 3,19 - 2,95 (m, 2H), 2,94 - 2,82 (m, 4H), 1,56 (s, 9H). PROCEDIMENTO AQ: SÍNTESE DO COMPOSTO 24
[945] Uma solução de adamantan-1-amina (1 g, 6,61 mmol, 1,05 eq) e TEA (955,76 mg, 9,45 mmol, 1,31 ml, 1,5 eq) em DCM (30 ml) foi misturada com 4-clorossulfonilbenzoato de etila (1,57 g, 6,30 mmol, 1 eq) em porções a 15 °C. A mistura de reação foi agitada a 15 °C durante 16 horas para obter uma solução branca. TLC (PE/EtOAc = 3/1, SiO2) mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi diluída com solução de HCl 0,2 N (10 ml) e separada. A camada orgânica foi lavada com salmoura (5 ml), secou-se sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi diluído com um solvente misto de PE (30 ml) e EtOAc (10 ml) e agitado a 0 °C durante 10 minutos. O produto foi recolhido por filtração e seco in vacuo para obter AQ-2.
[946] A uma suspensão de LiAlH4 (75,18 mg, 1,98 mmol, 1,2 eq) em THF (6 ml) foi adicionada gota a gota uma solução de AQ-2 (0,6 g, 1,65 mmol, 1 eq) em THF (6 ml) a 0 °C. A solução de reação foi agitada a 15 °C durante 2 horas para obter uma mistura branca. TLC (PE/EtOAc = 2/1, SiO2) mostrou que a reação foi completada. À mistura foram adicionados 75 µl de água, 75 µl de solução de NaOH a 15%, 225 µl de água a 0 °C e agitada a 15 °C durante 10 minutos antes da filtração. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter AQ-3.
[947] A uma solução de AQ-3 (334 mg, 1,04 mmol, 1 eq) em CHCl3 (15 ml) foi adicionado MnO2 (100 mg, 1,15 mmol, 1,11 eq). A mistura foi agitada a 15 °C durante 16 horas para obter uma suspensão escura. TLC (PE/EtOAc = 2/1, SiO2) mostrou uma nova mancha, mas uma quantidade significativa de material de partida permaneceu. A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de Celite e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por Combi flash (PE/EtOAc = 10/1 a 1/1) para obter AQ-4 e material de partida recuperado.
[948] A uma solução de D-triptofanato de metila (43,05 mg, 197,23 µmol, 1 eq) e AQ-4 (63 mg, 197,23 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado TFA (11,24 mg, 98,62 µmol, 7,30 µl, 0,5 eq) a 0 °C. A solução de reação foi agitada a 40 °C durante 16 horas para fornecer uma solução límpida. TLC (PE/EtOAc = 1/1, SiO2) mostrou que o aldeído foi consumido e duas novas chances foram observadas. A solução de reação foi lavada com sat. aq. Solução de NaHCO3 (1 ml), seca com Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por Combi flash (PE/EtOAc = 3/1 a 1/1) para obter um composto menos polar e um composto mais polar. Para o composto mais polar, NOE mostrou que era o produto desejado.
[949] Preparação do Composto 24. A uma solução de AQ-5 (30 mg, 57,73 µmol, 1 eq) em CHCl3 (0,5 ml) foi adicionado NaHCO3 (10 mg, 119,03 µmol, 4,63 µl, 2,06 eq) seguido pela adição gota a gota de uma solução de 2 cloreto de cloroacetila (16,30 mg, 144,33 µmol, 11,48 ml, 2,5 eq) em CHCl3 (0,5 ml) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 15 °C durante 2 horas para obter uma suspensão marrom. TLC (PE/EtOAc = 1/1, SiO2) mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado e purificado diretamente por Combi flash (PE/EtOAc = 3/1 a 1/1) para obter o Composto 24. LC- MS (m/z): 618,0 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,92 a 7,72 (m, 2H), 7,54 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,51 a 7,35 (m, 2H), 7,26 a 7,21 (m, 1H), 7,20 a 7,07 (m, 2H), 6,33 a 6,08 (m, 1H), 5,29 a 5,04 (m, 1H), 4,52 a 4,34 (m, 1H), 4,21 a 3,91 (m, 2H), 3,65 (s, 4H), 3,53 a 3,20 (m, 1H), 2,03 a 1,95 (m, 3H), 1,80 a 1,74 (m, 6H), 1,61 a 1,50 (m, 6H).
[950] Um esquema sintético semelhante foi usado para sintetizar o Composto 23 e o Composto 23a por meio da reação de AQ-1 com cloridrato de dimetilamina. O Composto 35 e o Composto 37 também foram sintetizados por um processo semelhante.
[951] Composto 23: LC-MS (m/z): 489,9 [M+H]+ RMN de 1H (400
MHz, MeOD): δ 7,79 a 7,67 (m, 4H), 7,50 a 7,48 (m, 1H), 7,24 a 7,01 (m, 3H), 6,15 (s, 1H), 5,43 (s, 1H), 4,58 a 4,45 (m, 1H), 4,30 a 4,27 (m, 1H), 3,77 a 3,49 (m, 5H), 2,64 (s, 6H).
[952] Composto 23a: LC-MS (m/z): 490,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD): δ 7,74 a 7,72 (m, 2H), 7,59 a 7,57 (m, 1H), 7,48 a 7,46 (m, 2H), 7,32 a 7,30 (m, 1H), 7,16 a 7,04 (m, 2H), 5,25 a 5,24 (m, 1H), 4,74 a 4,64 (m, 2H), 4,41 a 4,38 (m, 1H), 3,70 a 3,66 (m, 1H), 3,24 a 3,18 (m, 1H), 3,08 (s, 6H), 2,69 (s, 6H).
[953] Composto 35: (LC-MS (m/z): 568,0 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d4) δ 7,78 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 7,73 a 7,63 (m, 3H), 7,48 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,13 a 7,00 (m, 2H), 6,14 (s, 1H), 5,43 (brs, 1H), 4,71 a 4,52 (m, 5H), 4,28 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 3,67 a 3,56 (m, 4H), 3,56 a 3,37 (m, 2H), 2,82 a 2,66 (m, 2H), 1,85 (ddd, J = 3,1, 6,2, 9,7 Hz, 2H), 1,61 a 1,49 (m, 2H).
[954] Composto 37: LC-MS (m/z): 517,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD) δ ppm 3,47 a 3,78 (m, 7H), 3,90 a 3,91 (br d, J = 6,02 Hz, 2H), 4,27 a 4,58 (m, 3H), 5,44 (br s, 1H), 6,17 (s, 1H), 7,00 a 7,09 (m, 2H), 7,23 a 7,25 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,70 a 7,88 (m, 4H). PROCEDIMENTO AR: SÍNTESE DO COMPOSTO 26
[955] Uma solução de AB-2 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq) em DMF (8 ml) foi misturado com morfolina (348,18 mg, 4,00 mmol, 351,69 µl, 1,2 eq), HOBt (495,02 mg, 3,66 mmol, 1,1 eq) e EDCI (766,14 mg, 4,00 mmol, 1,2 eq), e agitada a 30 °C durante 16 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi diluída com H2O (30 ml) e depois extraiu-se com MTBE (5 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4, filtradas e, em seguida, concentradas para obter produto bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 para 1:1) para obter AR-2.
[956] A uma solução de AA-1 (177,20 mg, 811,91 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados AR-2 (178 mg, 811,91 µmol, 1 eq) e TFA (46,29 mg, 405,96 µmol, 30,06 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 16 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que R1 permaneceu. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e extraída com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4 e, então, concentradas para obter o produto bruto. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE:EtOAc= 0:1) para obter AR-4.
[957] Preparação do Composto 26. Para uma solução de AR-4 (46 mg, 109,66 µmol, 1 eq) em CHCl3 (2 ml) foi adicionado NaHCO3 (92,12 mg, 1,10 mmol, 42,65 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (61,93 mg, 548,31 µmol, 43,61 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para resultar no produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 45% a 55%, 10 min) para resultar o Composto 26. LC-MS (m/z): 496,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,32 (br s, 1H), 7,53 (br d, J=7,5 Hz, 1H), 7,49 a 7,35 (m,
2H), 7,35 a 7,28 (m, 2H), 7,16 a 7,09 (m, 2H), 6,28 a 6,12 (m, 1H), 6,02 (br s, 1H), 5,27 a 5,11 (m, 1H), 4,19 a 4,01 (m, 1H), 3,86 a 3,69 (m, 4H), 3,66 (s, 5H), 3,64 a 3,57 (m, 2H), 3,57 a 3,38 (m, 3H). PROCEDIMENTO AS: SÍNTESE DO COMPOSTO 28
[958] Para uma solução de AB-2 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq), EDCI (702,29 mg, 3,66 mmol, 1,1 eq), HOBt (450,02 mg, 3,33 mmol, 1 eq) e NMM (842,16 mg, 8,33 mmol, 915,39 µl, 2,5 eq) em DMF (10 ml) foi adicionado adamantan-1-amina (503,72 mg, 3,33 mmol, 1 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 16 h para obter solução amarela.A conclusão da reação foi detectada por TLC. A solução de reação foi diluída com EA (20 ml), lavada com 1N HCl (15 ml), lavada com solução sat. aq. NaHCO3 (20 ml) e salmoura (20 ml), e extraída com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas a pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 1: 1) para obter AS-2.
[959] A uma solução de AA-1 (500 mg, 2,29 mmol, 1 eq) e AS-2 (775,71 mg, 2,74 mmol, 1,2 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado TFA (130,06 mg, 1,14 mmol, 84,45 µl, 0,5 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 40 °C durante 24 horas para obter mistura amarela. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A solução de reação foi diluída com DCM
(40 ml), depois lavada com NaHCO3 (40 ml) e salmoura (40 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 2: 1) para obter AS-4.
[960] Preparação do Composto 28. A uma solução de AS-4 (150 mg, 310,17 µmol, 1 eq) e NaHCO3 (52,11 mg, 620,35 µmol, 24,13 µl, 2 eq) em CHCl3 (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetil (84,08 mg, 744,42 µmol, 59,21 µl, 2,4 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C durante 3 horas para obter uma solução amarela. A conclusão da reação foi detectada por TLC. A solução de reação foi diluída com DCM (15 ml), lavada com sat. aq. NaHCO3 (15 ml) e salmoura (15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE: EA = 1: 1) para resultar no Composto 28. LC-MS (m/z): 560,1[M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,65 a 8,47 (m, 1H), 7,60 a 7,39 (m, 4H), 7,26 a 7,07 (m, 4H), 6,20 a 6,05 (m, 1H), 5,77 a 5,68 (m, 1H), 5,23 a 5,09 (m, 1H), 4,12 a 3,82 (m, 2H), 3,64 (s, 3H), 3,50 a 3,22 (m, 1H), 2,20 a 2,00 (m, 8H), 1,70 (s, 7H). PROCEDIMENTO AT: SÍNTESE DO COMPOSTO 29
[961] Uma solução do composto AT-1 (1,2 g, 9,91 mmol, 1,5 eq) e adamantan-1-amina (999,06 mg, 6,61 mmol, 1 eq)em DMSO (30 ml) foi misturado com K2CO3 (1,83 g, 13,21 mmol, 2 eq). A mistura de reação foi agitada a 120°C durante 16 horas para obter uma suspensão. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (30 ml), e as camadas aquosas extraídas com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (30 ml), secas com sulfato de sódio e concentradas para fornecer o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (eluindo com: PE/EtOAc = 20/1-10/1) para obter AT-2.
[962] Para uma solução do composto AT-2 340 mg, 1,35 mmol, 1 eq) em THF (15 ml) foi adicionado gota a gota DIBAL-H (228,31 mg, 1,62 mmol, 1,2 eq) a 0 °C, e a mistura de reação agitada a 0 °C durante 3 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (20 ml), secas com sulfato de sódio e concentradas para fornecer o produto bruto. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
[963] Uma solução de AT-3 (390 mg, 1,53 mmol, 1 eq) e (2R) -2- amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (400,00 mg, 1,83 mmol, 1,2 eq) em DCM (15 ml) foi misturado com TFA (174,15 mg, 1,53 mmol, 113,08 µl, 1 eq), e a mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 16 horas para obter uma solução vermelha escura. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml), extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4, concentradas para obter um produto bruto, e, em seguida, purificadas por cromatografia flash em coluna (eluindo com: PE/EA = 10/1-4/1) para obter AT-4.
[964] Preparação do Composto 29. Para uma solução de AT-4 (50 mg, 109,75 µmol, 1 eq) e Et3N (33,32 mg, 329,24 µmol, 45,83 µl, 3 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado gota a gota cloreto de 2-cloroacetila (24,79 mg, 219,50 µmol, 17,46 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE: EA = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4, concentradas para fornecer um produto bruto e, em seguida, purificadas por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 40% a 90%, 9,5 min) para dar o Composto 29. LC-MS (m/z): 532,1 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,80 (s, 9H), 2,10 (s, 6H), 3,50 - 3,59 (m, 3H), 4,27 (s, 1H), 4,42 (d, J = 11,80 Hz, 1H), 4,72 (d, J = 13,55 Hz, 1H), 5,39 (s, 1H), 6,05 (s, 1H), 6,93 - 7,02 (m, 2H), 7,05 (s, 2H), 7,25 (s, 4H), 7,49 (d, J = 7,53 Hz, 2H), 7,56 (s, 2H), 10,69 (s, 2H), 11,01 (s, 1H). PROCEDIMENTO AU: SÍNTESE DO COMPOSTO 31
[965] Para uma solução de AB-2 (1 g, 6,66 mmol, 1 eq) em DMF (20 ml) foram adicionados piperazina-1-carboxilato de terc-butila (1,49 g, 7,99 mmol, 1,2 eq), NMM (2,02 g, 19,98 mmol, 2,20 ml, 3 eq), HOBt
(990,04 mg, 7,33 mmol, 1,1 eq) e EDCI (2,55 g, 13,32 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi diluída com H2O (50 ml), e extraiu-se com MTBE (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4, filtradas e depois concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, Éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 para 1:1) para fornecer AU-2.
[966] Para uma solução de AU-2 (200 mg, 628,20 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados 1-A (137,11 mg, 628,20 µmol, 1 eq) e TFA (35,81 mg, 314,10 µmol, 23,26 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e extraída com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4, e concentradas o produto bruto. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, EtOAc:PE = 4:1) para obter AU-4.
[967] Para uma solução de AU-4 (80 mg, 154,26 µmol, 1 eq) em CHCl3 (2 ml) foi adicionado NaHCO3 (129,59 mg, 1,54 mmol, 59,99 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (87,11 mg, 771,30 µmol, 61,35 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi filtrada e concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 50% a 80%, 8 min) para obter AU-5.
[968] Preparação do Composto 31. Para uma solução de AU-5 (80 mg, 134,43 µmol, 1 eq) em HCl/EtOAc (4 M, 10 ml, 297,54 eq) foi agitado a 25 °C para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A solução de reação foi concentrada para fornecer o produto bruto, e produto bruto purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 20% a 50%, 7 min) para dar o Composto 31. LC-MS (m/z): 495,0 [M+H]. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,53 - 7,45 (m, 3H), 7,36 (br d, J=8,0 Hz, 2H), 7,24 (br d, J=7,8 Hz, 1H), 7,07 - 6,95 (m, 2H), 6,05 (s, 1H), 5,41 (br s, 1H), 4,73 (s, 1H), 4,44 (s, 1H), 3,80 - 3,53 (m, 6H), 3,50 (s, 4H), 3,30 - 3,02 (m, 4H).
[969] Um esquema semelhante foi usado para sintetizar o Composto 32 e o Composto 32a.
[970] Composto 32: LC-MS (m/z): 510,0 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, MeOD) δ 7,57 a 7,55 (m, 1H), 7,51 a 7,44 (m, 4H), 7,30 a 7,26 (m, 1H), 7,18 a 7,14 (m, 1H), 7,11 a 7,07 (m, 1H), 5,93 (s, 1H), 5,14 a 5,10 (m, 1H), 4,40 a 4,37 (m, 1H), 4,23 a 4,21 (m, 2H), 3,92 a 3,83 (m, 5H), 3,64 a 3,57 (m, 1H), 3,53 a 3,47 (m, 1H), 3,39 (s, 1H), 3,27 a 3,25 (m, 1H), 2,04 a 1,67 (m, 4H).
[971] Composto 32a: LC-MS (m/z): 510,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO) δ 7,84 a 7,54 (m, 5H), 7,29 a 7.27 (m, 1H), 7,13 a 7,10 (m, 1H), 7,06 a 7,03 (m, 1H), 5,97 (s, 1H), 5,06 a 5,03 (m, 1H), 4,76 (s, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,94 a 3,73 (m, 4H), 3,49 (s, 3H), 1,94 a 1,89 (m, 2H), 1,75 a 1,47 (m, 2H). PROCEDIMENTO AV: SÍNTESE DO COMPOSTO 38
[972] A uma solução de AV-1 (500 mg, 2,16 mmol, 1 eq) e 4-formil- N, N-dimetil-benzamida (574,59 mg, 3,24 mmol, 1,5 eq) em DCM (20 ml) foi adicionado TFA (246,49 mg, 2,16 mmol, 160,06 µl, 1 eq) a 20 °C, e a mistura de reação agitada a 40 °C durante 16 horas. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (10 ml) e DCM (10 ml), e a camada aquosa extraída com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 4% a 34%, 6,5 min) para obter AV-2.
[973] Preparação do Composto 38. A uma solução de AV-2 (130 mg, 332,93 µmol, 1 eq) e Et3N (101,07 mg, 998,78 µmol, 139,02 µl, 3 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado gota a gota cloreto de 2-cloroacetila (75,20 mg, 665,85 µmol, 52,96 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 16 horas. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa (DCM/MeOH = 10/1) para obter o Composto 38. LC-MS (m/z): 467,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,87 (s, 3H), 2,93 (s, 3H), 3,09 (s, 5H), 3,37 (t, J = 4,64 Hz, 2H), 3,90 (s, 1H), 4,11 a 4,19 (m, 1H), 5,70 (s, 1H), 6,39 (s, 1H), 7,07 (s, 2H), 7,35 a 7,49 (m, 5H), 8,20 (s, 1H). PROCEDIMENTO AW: SÍNTESE DO COMPOSTO 39
[974] A uma solução de AW-1 (1 g, 3,29 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foram adicionados HATU (1,87 g, 4,93 mmol, 1,5 eq) e DIEA (849,33 mg, 6,57 mmol, 1,14 ml, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min e, em seguida, N-isopropilpropan-2-amina (398,99 mg, 3,94 mmol, 557,24 µl, 1,2 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 20 °C durante 15,5 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi diluída com H2O (50 ml) e depois extraiu-se com MTBE (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 5: 1) para obter AW-2.
[975] Uma solução de terc-butila AW-2 (675 mg, 1,74 mmol, 1 eq) foi adicionado HCl/EtOAc (4 M, 10 ml, 22,96 eq) e agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada e o resíduo resultante diluído com MTBE (10 ml) e Sat. NaHCO3 aq. 20 ml). A mistura foi agitada 30 min e extraída com MTBE (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4, filtrada e concentradas para obter AW-3.
[976] A uma solução de AW-3 (150 mg, 521,92 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados 4-formil-N, N-dimetil-benzamida (92,48 mg, 521,92 µmol, 1 eq) e TFA (29,76 mg, 260,96 µmol, 19,32 µl, 0,5 eq), e a mistura aquecida a refluxo durante 16 horas para obter uma suspensão marrom. LCMS mostrou que o composto AW-3 não foi completamente consumido. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e extraída com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4 e concentradas para um produto bruto. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, EtOAc: PE = 1: 0) para obter AW-4.
[977] Preparação do Composto 39. A uma solução de AW-4 (32 mg, 71,66 µmol, 1 eq) em CHCl3 (2 ml) foram adicionados NaHCO3
(60,19 mg, 716,55 µmol, 27,87 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (40,46 mg, 358,28 µmol, 28,50 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi filtrada, concentrada para fornecer um produto bruto e o produto bruto purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 45 % a 75%, 7,8 min) para fornecer o Composto 39. LC-MS (m/z): 523,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d4) δ = 7,65 a 7,20 (m, 6H), 7,09 a 6,97 (m, 2H), 6,46 a 6,38 (m, 1H), 5,64 a 5,29 (m, 1H), 4,51 (brs, 1H), 4,24 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 3,95 a 3,56 (m, 1H), 3,43 a 3,33 (m, 2H), 3,06 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 1,35 a 0,75 (m, 12H). PROCEDIMENTO AX: SÍNTESE DO COMPOSTO 40A
[978] Para uma solução de AX-1 (200 mg, 864,70 µmol, 1 eq) e 4- fluorobenzaldeído (107,32 mg, 864,70 µmol, 90,95 µl, 1 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado TFA (49,30 mg, 432,35 µmol, 32,01 µl, 0,5 eq) a 20 °C e a solução foi agitada a 20 °C durante 16 horas para obter uma solução marrom. TLC (extinta com DCM e água, eluindo com: PE/EtOAc = 0/1) indicou que a reação foi concluída. A solução de reação foi diluída com DCM (20 ml), lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (20 ml x 3). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida.
[979] Preparação do Composto 40a. Para uma solução de AX-2 (140 mg, 414,95 µmol, 1 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (46,87 mg, 414,95 µmol, 33,00 µl, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TEA (83,98 mg, 829,90 µmol, 115,51 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C a
25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS e (eluindo com: PE/EtOAc = 0/1) mostraram que a reação foi concluída. A solução de reação foi diluída com DCM (10 ml), lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (10 ml x 3). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, 0% a 40% de EtOAc em éter de petróleo). O produto não era puro e foi combinado e purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 36% a 66%, 9,5 min) para obter o Composto 40a. LC-MS (m/z): 413,9[M]+. RMN de 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,01 a 7,99 (m, 1H), 7,91 a 7,89 (m, 1H), 7,54 a 7,53 (m, 1H), 7,48 a 7,42 (m, 1H), 7,19 a 7,02 (m, 1H), 6,99 a 3,97 (m, 2H), 6,58 a 6,08 (m, 1H), 5,76 a 5,03 (m, 1H), 3,86 a 3,83 (m, 3H), 3,68 a 3,45 (m, 5H), 2,14 a 2,03 (m, 3H). PROCEDIMENTO AY: SÍNTESE DO COMPOSTO 45
[980] Preparação do composto AY-2. Para uma solução de AB-2 (1 g, 6,66 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado DMF (38,00 mg, 519,88 µmol, 0,04 ml, 7,81e-2 eq) e (COCl)2 (1,27 g, 9,99 mmol, 874,59 µl, 1,5 eq) e agitada a 0 a 10 °C durante 3 horas para obter uma mistura branca. TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1, SiO2) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para obter cloreto de 4-formilbenzoíla.
[981] Para uma solução de piperidin-4-ol (672 mg, 6,64 mmol, 4,98e-1 eq) em dioxano (10 ml) foi adicionado NaHCO3 aq. (4,32 g, 2 ml), seguido por cloreto de 4-formilbenzoíla (2,25 g em bruto) em DCM (5 ml) adicionado gota a gota a 0 °C. A mistura foi deixada agitar a 20 °C durante 4 horas para obter uma solução amarela. TLC (acetato de etila = 100%, SiO2) mostrou que a reação foi concluída e extinta com MeOH. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com Sat. NaHCO3 e extraída com EtOAc (150 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 para 3/5) para fornecer AY-2.
[982] A uma solução de AY-2 (100 mg, 428,70 µmol, 1 eq) em DCM (6 ml) foram adicionados AP-3 (99,16 mg, 428,70 µmol, 1 eq) e TFA (24,44 mg, 214,35 µmol, 15,87 µl, 0,5 eq), e a mistura foi agitada a 45 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com Sat. NaHCO3 e extraída com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (acetato de etila: Metanol = 20: 1) para obter um produto bruto 1 e 2. Os produtos brutos 1 e 2 foram combinados juntos e depois purificados por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 4% a 34%, 9,5 min) para obter AY-3 e o isômero cis correspondente.
[983] Preparação do Composto 45. Para uma solução de AY-3 (33 mg, 73,90 µmol, 1eq, trans-) em CHCl3 (6 ml) foi adicionado NaHCO3 saturado (5 ml), seguido por uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (41,73 mg, 369,51 µmol, 29,39 µl, 5 eq) em CHCl3 (3 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas. A mistura foi agitada a 25 °C durante 1 hora para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que algum produto desejado foi formado. A mistura de reação foi filtrada e lavada com DCM (10 ml x 3). O filtrado foi concentrado para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 30% a 60%, 6,5 min) para obter o Composto 45. LC- MS (m/z): 523,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,07 (s, 1H), 1,43 a 1,50 (m, 1H), 1,80 a 2,02 (m, 2H), 2,88 (br s, 4H), 3,13 a 3,37 (m, 7H), 3,60 a 4,18 (m, 5H), 5,77 (br s, 1H), 6,40 (br s, 1H), 7,05 (br s, 3H), 7,37 a 7,46 (m, 6H), 8,37 (br s, 1H). PROCEDIMENTO AZ: SÍNTESE DO COMPOSTO 50
[984] Para uma solução de AP-3 (200 mg, 864,70 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado piridina-4-carbaldeído (92,62 mg, 864,70 µmol, 81,24 µl, 1 eq) e TFA (49,30 mg, 432,35 µmol, 32,01 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 30 °C durante 64 horas para obter uma suspensão marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e depois extraída com DCM (5 mlx 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4 e concentradas para preparar um produto bruto. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, EtOAc: MeOH = 10:1) para obter AZ-2.
[985] Preparação do composto 50. Para uma solução de AZ-2 (34 mg, 106,12 µmol, 1 eq) em CHCl3 (1 ml) foi adicionado TEA (53,69 mg, 530,61 µmol, 73,85 µl, 5 eq) e cloreto de 2-cloroacetil (59,93 mg, 530,61 µmol, 42,20 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 30 °C durante 2 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. Uma solução de Sat. NaHCO3 (10 ml) foi adicionado e a mistura extraída com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4, filtradas e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: YMC-Actus Pro C18 150 x 30 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 8% a 38%, 11 min) para fornecer Composto 50. LC-MS (m/z): 397,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, METANOL-d4) δ = 8,64 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 7,98 (brs, 2H), 7,48 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,12 a 6,98 (m, 2H), 6,43 (s, 1H), 5,73 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 4,58 - 4,41 (m, 1H), 4,38 a 4,28 (m, 1H), 3,71 a 3,44 (m, 2H), 3,31 (m, 3H), 2,82 (s, 3H). PROCEDIMENTO BA: SÍNTESE DO COMPOSTO 51
[986] Composto BA-1 (1g, 8,53 mmol, 1,15 ml, 1 eq) em DMF (10 ml) foi misturado com TBSCl (1,93 g, 12,80 mmol, 1,57 ml, 1,5 eq) e imidazol (1,16 g, 17,07 mmol, 2 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 18 horas até uma mistura turva. TLC (eluindo com: DCM/MeOH = 20/1) mostrou que a reação foi concluída. Foi adicionada água (100 ml) e a mistura extraída com EA (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com água (30 ml x 4) e a fase orgânica seca por Na2SO4. O solvente foi evaporado até à secura para proporcionar BA-2.
[987] Composto BB-1 (622,71 mg, 4,15 mmol, 1,2 eq) foi preparado em DCM (6 ml), dicloreto de oxalila (658,08 mg, 5,18 mmol, 453,85 µl, 1,5 eq) e DMF (27,29 mg, 373,30 µmol, 28,72 µl, 1,08e-1 eq) a 25 °C. A mistura foi agitada a 25 °C durante 0,5 h e depois agitada a 50 °C durante 5 horas para proporcionar uma mistura incolor. A mistura foi evaporada até a secura, o resíduo resultante suspenso em DCM (4 ml) seguido pela adição de TEA (699,52 mg, 6,91 mmol, 962,21 µl, 2 eq) e BA-2 (800 mg, 3,46 mmol, 1 eq) e deixou-se reagir a 25 °C durante 16 horas para se obter uma mistura marrom. TLC (eluindo com: PE: EA = 5: 1) mostrou que a reação foi concluída. H2O (80 ml) foi adicionado à mistura, a qual foi, em seguida, extraiu-se com EA (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas por Na2SO4 e concentradas para obter BA-3.
[988] Para uma mistura de AP-3 (300 mg, 1,30 mmol, 1 eq) e BA- 3 (471,56 mg, 1,30 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TFA (59,16 mg, 518,82 µmol, 38,41 µl, 0,4 eq) a 25 °C. A mistura resultante foi agitada a 50 °C durante 16 horas para proporcionar uma mistura marrom. LC-MS e HPLC mostraram que AP-3 não foi totalmente consumido. Como tal, BA-3 (50 mg) foi adicionado à mistura e agitado a 50 °C durante 48 horas. LC-MS e HPLC mostraram que a reação foi concluída. NaHCO3 aq. saturado. (30 ml) foi adicionado, e a mistura extraída com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas por Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa (DCM: MeOH = 20: 1) para proporcionar BA-5. NOE mostrou que o composto é o isômero trans.
[989] Para a mistura de BA-5 (31,3 mg, 54,26 µmol, 1 eq) e TEA (10,98 mg, 108,52 µmol, 15,10 µl, 2 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (9,19 mg, 81,39 µmol, 6,47 µl, 1,5 eq) a 0 °C e agitada durante 1 hora para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com EA) mostrou que a reação foi concluída. Água (30 ml) foi adicionada e a mistura extraída com DCM (10 ml x 3). A fase orgânica combinada foi seca por Na2SO4 e evaporada até à secura para proporcionar BA-6.
[990] Composto BA-6 (35,4 mg, 54,18 µmol, 1 eq) foi adicionado a TBAF (1 M, 108,37 µl, 2 eq) em THF (1 ml) e a mistura foi agitada a 25 °C durante 1 hora para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com EA) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por TLC preparativa (EA) para fornecer o Composto 51. LC- MS (m/z): 539,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,50 (s, 9H), 2,61 a 3,00 (m, 6H), 3,22 a 3,65 (m, 4H), 3,78 a 4,32 (m, 2H), 4,68 a 5,57 (m, 1H), 6,09 a 6,81 (m, 1H), 6,92 a 7,64 (m, 9H), 9,06 (br s, 1H).
[991] Um esquema semelhante foi usado para sintetizar o Composto 52: LC-MS (m/z): 575,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,52 (s, 9H), 2,87 (br s, 3H), 3,15 (s, 2H), 3,24 a 3,32 (m, 2H), 3,35 (br d, J = 5,52 Hz, 1H), 3,41 a 3,50 (m, 2H), 4,08 a 4,21 (m, 1H), 7,02 a 7,44 (m, 11H), 7,51 (br d, J = 9,03 Hz, 1H), 7,97 a 8,14 (m, 1H). PROCEDIMENTO BB: SÍNTESE DO COMPOSTO 54
[992] Para uma mistura de BB-1 (2 g, 13,32 mmol, 1 eq) em DCM foram adicionados dicloreto de oxalila (2,03 g, 15,99 mmol, 1,40 ml, 1,2 eq) e DMF (23,75 mg, 324,92 µmol, 25,00 µl, 2,44e-2 eq), e a mistura foi agitada a 25 °C durante 0,5 h. A mistura foi ainda agitada a 45 °C durante 5 horas para proporcionar uma mistura marrom. A mistura foi evaporada até à secura para proporcionar BB-2.
[993] Para uma mistura de BB-2 (300 mg, 1,78 mmol, 1 eq) em DCM, foi adicionado TEA (270,12 mg, 2,67 mmol, 371,55 µl, 1,5 eq) e BB-3 (358,24 mg, 1,78 mmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 18 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (PE: EA = 1: 2) mostrou que a reação foi concluída. NaHCO3 saturado aquoso a 40 ml foi adicionado, e a mistura foi extraída com DCM (15 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com Na2CO3 (aq.) (15 ml x 3), e a fase orgânica seca por Na2SO4. A mistura foi evaporada até à secura para proporcionar BB-4.
[994] Para uma mistura de AP-3 (65 mg, 281,03 µmol, 1 eq) e BB- 4 (93,70 mg, 281,03 µmol, 1 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado TFA (12,82 mg, 112,41 µmol, 8,32 µl, 0,4 eq) e a mistura foi agitada a 25 °C durante 18 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (EA) mostrou que a reação foi concluída. H2O (20 ml) foi adicionado à mistura, e a fase aquosa extraída com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas por Na2SO4. A mistura foi evaporada até à secura. O produto foi purificado por TLC preparativa (EA) para produzir BB-6.
[995] Preparação do Composto 54. Para uma mistura de BB-6 (10 mg, 18,29 µmol, 1 eq) e TEA (3,70 mg, 36,58 µmol, 5,09 µl, 2 eq) em DCM (0,5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (3,10 mg, 27,44 µmol, 2,18 µl, 1,5 eq) a 0 °C e a mistura foi agitada durante 4 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (EA) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por TLC preparativa (PE: EA = 2: 1)
para obter o Composto 54. LC-MS (m/z): 623,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,24 (br s, 9H), 1,45 (s, 9H), 2,18 a 2,37 (m, 2H), 2,63 a 2,99 (m, 5H), 3,06 a 3,34 (m, 2H), 3,34 a 3,53 (m, 2H), 3,73 a 4,15 (m, 2H), 5,11 a 5,58 (m, 1H), 6,27 (br s, 1H), 6,81 a 7,56 (m, 11H), 8,32 (s, 1H). PROCEDIMENTO BC: SÍNTESE DO COMPOSTO 55
[996] Para uma solução de BC-1 (200 mg, 622,30 µmol, 1 eq) e HATU (354,93 mg, 933,45 µmol, 1,5 eq) em DMF (4 ml) foi adicionado gota a gota DIEA (201,07 mg, 1,56 mmol, 270,98 µl, 2,5 eq) a 0 °C e a mistura foi agitada a 0 °C durante 30 minutos. Metanamina de n-metila (76,12 mg, 933,45 µmol, 85,53 µl, 1,5 eq, sal de HCl) foi adicionado e a mistura agitada a 0 °C para obter uma solução vermelha escura. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi particionada entre água (30 ml) e EtOAc (40 ml), e as camadas aquosas extraídas com EtOAc (30 ml x 2). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (30 ml), secas com sulfato de sódio e, em seguida, concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (eluindo com: PE/EtOAc = 10/1-5/1) para proporcionar BC-2.
[997] Composto BC-2 (200 mg, 573,95 µmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/EtOAc (5 ml) e a mistura foi agitada a 20 °C durante 4 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 0/1) mostrou que a reação foi completada. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraída com EtOAc (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: EA/MeOH = 10/1-5/1) para fornecer BC-3.
[998] Para uma solução de BC-3 (98 mg, 394,62 µmol, 1 eq) e 4- formil-N, N-dimetil-benzamida (104,89 mg, 591,92 µmol, 1,5 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado TFA (45,00 mg, 394,61 µmol, 29,22 µl, 1 eq), e a mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: EA/MeOH = 20/1) mostraram que a reação foi concluída. Após a têmpera com sábado. De NaHCO3 (15 ml), a mistura foi extraída com EtOAc (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4, e depois concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: acetato de etilo/metanol = 1: 0-5: 1) para proporcionar BC-4.
[999] Preparação do composto 55. Para uma solução de BC-4 (62,00 mg, 152,14 µmol, 1 eq) e Et3N (30,79 mg, 304,27 µmol, 42,35 µl, 2 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado gota a gota cloreto de 2-cloroacetila (34,37 mg, 304,27 µmol, 24,20 µl, 2 eq), e a mistura foi agitada a 0 °C durante 16 horas. TLC (eluindo com: EA/MeOH = 10/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml), e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com Na2SO4, e depois concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 30% a 60%, 9,5 min) para obter o Composto 55 e Composto 55a. LC-MS (m/z): 483,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 2,71 (s, 3H), 2,81 a 2,89 (m, 3H), 2,94 (s, 3H), 3,09 (s, 3H), 4,02 a 4,44 (m, 1H), 4,69 (d, J = 13,80 Hz, 1H), 5,61 (s, 1H), 6,58 (s, 1H), 7,28 a 7,42 (m, 4H), 7,44 a 7,61 (m, 2H), 7,81 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,03 Hz, 1H). PROCEDIMENTO BD: SÍNTESE DO COMPOSTO 56
[1000] A uma solução de AV-1 (0,1 g, 432,35 µmol, 1,1 eq) e BD-2 (86,96 mg, 393,05 µmol, 1 eq) em DCM (4 ml) foi adicionado TFA (44,82 mg, 393,05 µmol, 29,10 µl, 1 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 8 h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: EA/MeOH = 10/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (15 ml) e DCM (15 ml), e solução saturada de bicarbonato de sódio adicionada para ajustar o pH a 9. A camada aquosa foi extraída com DCM (15 ml x 2), e as camadas orgânicas combinadas e concentradas. O produto bruto foi purificado por Prep-HPLC (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 20% a 40%, 9,5 min) para obter BD-3. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,46 (s, 9H), 2,69 (s, 3H), 2,80 (s, 3H), 3,73 (d, J = 5,27 Hz, 1H), 5,13 (s, 1H), 6,95 a 7,00 (m, 1H), 7,01 a 7,09 (m, 3H), 7,26 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,36 a 7,47 (m, 3H), 9,30 (s, 1H), 10,73 (s, 1 H).
[1001] A uma solução BD-3 (60 mg, 138,08 µmol, 1 eq) e Et3N (27,94 mg, 276,16 µmol, 38,44 µl, 2 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetil (23,39 mg, 207,12 µmol, 16,47 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: EA/MeOH = 10/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (15 ml) e DCM (15 ml), as camadas aquosas foram extraídas com DCM (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 53%-53%, 9,5 min) para obter o Composto 56. LC-MS (m/z): 533,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,43 (s, 9H), 2,80 (s, 3H), 2,89 (s, 1H), 3,25 (s, 2H), 3,84 (s, 1H), 4,12 (d, J = 7,28 Hz, 1H), 5,36 a 5,63 (m, 1H), 6,25 (s, 1H), 6,43 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,20 a 7,32 (m, 4H), 7,37 a 7,49 (m, 1H), 8,01 (s, 1H). PROCEDIMENTO BE: SÍNTESE DO COMPOSTO 58
[1002] A uma solução agitada de AA-1 (3,04 g, 10 mmol, 1 eq), piridina (490,00 mg, 6,19 mmol, 0,5 ml, 6.19e-1 eq) e (Boc)2O (2,84 g, 13,00 mmol, 2,99 ml, 1,3 eq) em CH3CN (15 ml) foi adicionado NH4HCO3 (996,10 mg, 12,60 mmol, 1,04 ml, 1,26 eq). A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 16 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com: DCM/MeOH = 5/1) e LC-MS mostraram que a reação estava concluída. A mistura foi evaporada até à secura e, em seguida, H2O (60 ml) adicionado. A solução foi extraída com EA (20 ml x 3). A fase orgânica combinada foi evaporada até à secura para proporcionar BE-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,42 (s, 9H), 3,07 a 3,38 (m, 2H), 4,48 (br s, 1H), 5,20 (br s, 1H), 5,51 (br s, 1H), 5,84 (br s, 1H), 7,06 (d, J = 1,51 Hz, 1H), 7,09 a 7,16 (m, 1H), 7,16 a 7,23 (m, 1H), 7,36 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,59 a 7,75 (m, 1H), 8,31 (br s, 1H).
[1003] A uma mistura de BE-2 (1,26 g, 4,14 mmol, 1 eq) em DCM (8 ml), TFA (6,16 g, 54,02 mmol, 4 ml, 13,04 eq) foi adicionado a 25 °C. A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 16 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com: DCM/MeOH = 5/1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi evaporada até a secura para proporcionar BE-3.
[1004] Para uma mistura de BE-3 (400,0 mg, 1,97 mmol, 1 eq) e 4- formil-N, N-dimetil-benzamida (348,75 mg, 1,97 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TFA (89,76 mg, 787,25 µmol, 58,29 µl, 0,4 eq) a 25°C. A mistura resultante foi agitada a 50 °C durante 18 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (EA: MeOH = 40: 1) mostrou que a reação estava concluída. 30 ml de NaHCO3 saturado (aq.) foram adicionados à mistura de reação, e a mistura resultante foi extraída com DCM (10 ml x 3). Os extratos orgânicos combinados foram secos por Na2SO4 e o solvente evaporado até à secura para proporcionar o produto bruto. O produto foi purificado por Prep-HPLC (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 2% a 32%, 9,5 min) para proporcionar BE-4. RMN de 1H (400 MHz, DMSO- d6) δ ppm 2,90 (br s, 3H), 2,93 a 3,14 (m, 6H), 4,03 a 4,26 (m, 1H), 4,06 a 4,17 (m, 1H), 5,99 (br s, 1H), 7,05 a 7,12 (m, 1H), 7,13 a 7,20 (m, 1H), 7,27 a 7,39 (m, 3H), 7,48 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,70 (br s, 1H), 7,87 a 8,07 (m, 1H), 9,67 (br s, 1H), 10,37 (br s, 1H), 11,12 (s, 1H).
[1005] Preparação do Composto 58. A uma mistura de BE-4 (12,2 mg, 30,59 µmol, 1 eq, HCl) e TEA (6,19 mg, 61,17 µmol, 8,51 µl, 2 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (3,80 mg, 33,64 µmol, 2,68 µl, 1,1 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 2 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (EA: MeOH = 40: 1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi purificada por Prep-TLC (EA: MeOH = 40: 1) para fornecer o produto. Foi purificado por Prep-TLC novamente para gerar o Composto 58. LC- MS (m/z): 461,0 [M+Na]+. PROCEDIMENTO BF: SÍNTESE DO COMPOSTO 59
[1006] Preparação do composto BF-2. A uma solução de (2R)-2- amino-3-(1H-indol-3-il)-N,N-dimetil-propanamida (200 mg, 864,70 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foram adicionados 4-metilsulfonilbenzaldeído (159,29 mg, 864,70 µmol, 1 eq) e TFA (49,30 mg, 432,35 µmol, 32,01 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: EtOAc = 100%) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (5 ml) e extraído com DCM (15 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: EtOAc = 100%) para obter BF-2.
[1007] Preparação do Composto 59. A uma solução de BF-2 (40 mg, 100,63 µmol, 1 eq) em CHCl3 (2 ml) foram adicionados NaHCO3 (84,54 mg, 1,01 mmol, 39,14 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetil (34,10 mg, 301,89 µmol, 24,01 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada e lavada com DCM (30 ml). O filtrado foi concentrado para obter o produto bruto. O produto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 30% a 60%, 9,5 min) para fornecer o Composto 59. LC-MS (m/z): 473,9. PROCEDIMENTO BG: SÍNTESE DO COMPOSTO 61
[1008] Para uma mistura agitada de BG-1 (200 mg, 521,87 µmol, 1 eq), HATU (297,65 mg, 782,81 µmol, 1,5 eq) e DIEA (202,34 mg, 1,57 mmol, 272,70 µl, 3 eq) em DMF (2 ml) foi adicionada N-metilmetanamina (63,83 mg, 782,81 µmol, 71,72 µl, 1,5 eq, HCl) a 25 °C. A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 18 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostrou que a reação foi concluída. H2O (25 ml) foi adicionado e a mistura resultante foi extraída com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas por Na2SO4 e o solvente evaporado até à secura para proporcionar um produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash eluindo com 20% EA em PE a 50% EA em PE para proporcionar BG-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,42 (s, 9H), 2,68 (s, 3H), 2,84 (s, 3H), 3,10 (d, J = 6,53 Hz, 2H), 4,87 (q, J = 7,03 Hz, 1H), 5,53 (br d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,07 (s, 1H), 7,16 a 7,32 (m, 2H), 7,70 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,16 (s Ir, 1H).
[1009] A mistura de BG-2 (200 mg, 487,44 µmol, 1 eq) em HCl/EtOAc (4 M, 2,92 ml, 23,96 eq) foi agitada a 25 °C durante 3h para produzir uma mistura marrom. LC-MS mostrou que a reação foi concluída. A reação foi evaporada até à secura para proporcionar BG-
3. LC-MS (m/z): 309,9 [M+H]+.
[1010] À mistura de BG-3 (85,0 mg, 274,03 µmol, 1 eq, livre) e 4- formilbenzoato de terc-butila (56,51 mg, 274,03 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado TFA (12,50 mg, 109,61 µmol, 8,12 µl, 0,4 eq) a 25 °C. A mistura resultante foi agitada a 45 °C durante 18 horas para proporcionar uma mistura marrom. LC-MS e TLC (PE: EA = 1: 2) mostraram que a reação foi concluída. H2O (25 ml) foi adicionado e a mistura resultante foi extraída com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas por Na2SO4 e o solvente foi evaporado até à secura para proporcionar o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (PE: EA = 1: 2) para proporcionar BG-4 e o correspondente isômero cis 61a. BG-4 era o isômero trans e BG-4a era o isômero cis de acordo com a comparação de dois gráficos de RMN.
[1011] BG-4: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,58 (s, 9H), 2,79 (s, 3H), 2,84 a 3,05 (m, 5H), 3,85 (dd, J = 10,04, 4,77 Hz, 1H), 5,32 (s, 1H), 7,17 (d, J = 8,53 Hz, 1H), 7,24 a 7,32 (m, 3H), 7,67 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,92 (d, J = 8,03 Hz, 2H).
[1012] BG-4a: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,60 (s, 9H), 2,89 a 3,08 (m, 5H), 3,17 (s, 3H), 4,17 (dd, J = 9,66, 5,40 Hz, 1H), 5,30 (s, 1H), 7,06 a 7,14 (m, 1H), 7,20 a 7,27 (m, 1H), 7,37 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,46 a 7,58 (m, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,93 a 8,03 (m, 2H).
[1013] Preparação de 61. A uma mistura de BG-4 (50,0 mg, 100,32 µmol, 1 eq) e TEA (20,30 mg, 200,64 µmol, 27,93 µl, 2 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (17,00 mg, 150,48 µmol, 11,97 µl, 1,5 eq) a 0 °C e a mistura foi agitada durante 2 horas para proporcionar uma mistura castanha. LC-MS e TLC (PE: EA = 2: 1)
mostraram que a reação foi concluída. A reação foi purificada por prep- TLC (PE: EA = 2: 1) para fornecer 61. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,55 (s, 9H), 2,86 a 3,07 (m, 3H), 3,20 a 3,55 (m, 5H), 3,75 (br s, 1H), 3,84 a 4,31 (m, 2H), 5,98 a 6,29 (m, 1H), 6,47 (br s, 1H), 6,78 (br s, 1H), 7,32 a 7,65 (m, 3H), 7,93 (br d, J = 7,78 Hz, 2H), 9,07 (br s, 1H). LC-MS (m/z): 575,1 [M+H]+. PROCEDIMENTO BH: SÍNTESE DO COMPOSTO 62 E COMPOSTO 62A
[1014] A uma solução de BH-1 (300 mg, 1,76 mmol, 1 eq) em THF (20 ml) foi adicionado BH3-Me2S (10 M, 528,91 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 horas para obter uma solução incolor. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1, reagente de revelação de cor: I2) mostrou que a maior parte do material de partida foi consumido. HCl (1 M, 5 ml) foi adicionado gota a gota até que nenhuma bolha fosse produzida. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia em sílica gel
(PE: EA = 10: 1-3: 1) para obter BH-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,00 (s, 6H), 3,64 (s, 2H), 3,68 (s, 3H).
[1015] A uma solução de BH-2 (248 mg, 1,59 mmol, 1 eq) e NaHCO3 (266,80 mg, 3,18 mmol, 123,52 µl, 2 eq) em DCM (15 ml) foi adicionado periodinano de Dess-Martin (DMP; 808,20 mg, 1,91 mmol, 589,93 µl, 1,2 eq), e a mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 horas. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostrou que a maior parte do STM foi consumido. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (PE: EA = 10: 1-3: 1) para fornecer BH-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,31 (s, 6H), 3,70 (s, 3H), 9,60 (s, 1H).
[1016] Para uma solução de BH-3 (216 mg, 1,40 mmol, 1 eq) e (2R)- 2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (366,95 mg, 1,68 mmol, 1,2 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado TFA (79,88 mg, 700,56 µmol, 51,87 µl, 0,5 eq). A mistura de reação foi agitada a 40 °C durante 16 horas para obter uma suspensão amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostrou que a maior parte do STM foi consumido. Adicionou-se bicarbonato de sódio saturado para ajustar o pH a 7-8. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (20 ml x 2), e as camadas orgânicas combinadas secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto foi purificado por HPLC prep (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 9% a 39%, 9,5 min) para fornecer BH-4a e BH-4.
[1017] BH-4: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 2,07 a 2,29 (m, 6H), 3,05 a 3,21 (m, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,77 (s, 3H), 4,54 (t, J = 6,27 Hz, 1H), 4,79 a 4,90 (m, 1H), 7,01 a 7,07 (m, 1H), 7,14 (t, J = 7,28 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 10,06 (s, 1H), 10,56 a 10,88 (m, 1H), 10,99 a 11,10 (m, 1H).
[1018] BH-4a: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 2,14 (dd, J = 9,29, 1,25 Hz, 3H), 2,45 (d, J = 8,53 Hz, 3H), 3,08 - 3,20 (m, 1H), 3,22 - 3,32 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 4,54 (s, 1H), 4,83 (s, 1H), 7,01 a 7,08 (m, 1H), 7,15 (t, J = 7,28 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 8,91 Hz, 2H), 10,22 (s, 1H), 10,49 (s, 1H), 10,86 (s, 1H).
[1019] Preparação de 62. A uma solução de BH-4 (49 mg, 125,36 µmol, 1 eq, HCl) e Et3N (25,37 mg, 250,73 µmol, 34,90 µl, 2 eq) em DCM (4 ml) foi adicionado gota a gota cloreto de 2-cloroacetila (21,24 mg, 188,05 µmol, 14,96 µl, 1,5 eq) a 0 °C, a mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostrou que a maior parte do STM foi consumido. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por TLC preparativa (Diclorometano/Metanol = 10: 1)) para fornecer 62. LC- MS (m/z): 431,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,66 a 1,78 (m, 3,3H), 2,02 a 2,11 (m, 2,7H), 3,41 (s, 2H), 3,46 a 3,54 (m, 2H), 3,59 (s, 1H), 3,63 (s, 1H), 4,21 a 4,33 (m, 1H), 4,38 (d, J = 13,55 Hz, 0,46H), 4,54 (d, J = 13,30 Hz, 0,47H), 4,68 (d, J = 13,80 Hz, 0,56H), 5,15 (d, J = 8,53 Hz, 1H), 5,34 (s, 0,64H), 6,96 a 7,02 (m, 1H), 7,07 (q, J = 7,19 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 13,80, 8,03 Hz, 1H), 7,47 (t, J = 7,40 Hz, 1H), 10,94 (s, 0,38H), 11,08 (s, 0,55H).
[1020] Preparação de 62a. A uma solução de BH-4a (51,68 mg, 145,83 µmol, 1 eq, HCl) e Et3N (29,51 mg, 291,66 µmol, 40,60 µl, 2 eq) em DCM (4 ml) foi adicionado gota a gota cloreto de 2-cloroacetila (24,71 mg, 218,75 µmol, 17,40 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml)
e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (DCM) para fornecer 62a. LC-MS (m/z): 431,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,88 a 2,02 (m, 6H), 2,85 a 3,04 (m, 1H), 3,23 a 3,29 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,64 (s, 2H), 3,67 (s, 1H), 4,37 (d, J = 13,55 Hz, 0,34 H), 4,48 (d, J = 13,80 Hz, 0,66H), 4,74 (d, J = 13,80 Hz, 0,34 H), 4,82 (d, J = 13,80 Hz, 0,66 H), 4,88 (t, J = 7,65 Hz, 0,34 H), 5,20 (d, J = 5,77 Hz, 0,64 H), 5,25 (s, 0,34 H), 5,55 (s, 0,66 H), 6,96 a 7,03 (m, 1H), 7,09 (t, J = 7,53 Hz, 1H), 7,35 a 7,40 (m, 1H), 7,44 a 7,53 (m, 1H), 10,65 (s, 0,66 H), 11,02 (s, 0,34 H). PROCEDIMENTO BI: SÍNTESE DO COMPOSTO 63
[1021] A uma mistura de AA-1 (5 g, 19,63 mmol, 1 eq, HCl) e DIEA (8,88 g, 68,70 mmol, 11,97 ml, 3,5 eq) em DCM (20 ml), foi adicionado gota a gota bromometilbenzeno (7,39 g, 43,19 mmol, 5,13 ml, 2,2 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 48 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (50 ml) e extraída com EA (20 ml x 3). Os extratos orgânicos combinados foram secos por Na2SO4 e o solvente evaporado até à secura para proporcionar o produto bruto. O produto foi purificado por coluna flash (15% EA em PE a 50% EA em PE) para proporcionar BI-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,09 (dd, J = 14,31, 5,77 Hz, 1H), 3,38 (dd, J = 14,31, 9,29 Hz, 1H), 3,54 (d, J = 13,80 Hz, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,80 (dd, J = 9,16, 5,65 Hz, 1H), 4,01 (d, J = 13,80 Hz, 2H), 6,90 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 6,92 - 6,98 (m, 1H), 7,07 - 7,17 (m, 2H), 7,18 a 7,37 (m, 10H), 7,91 (br s, 1H).
[1022] A uma mistura de metila BI-2 (3,9 g, 9,79 mmol, 1 eq) e DMAP (239,13 mg, 1,96 mmol, 0,2 eq) em CH3CN (45 ml) foi adicionado Boc2O (3,20 g, 14,68 mmol, 3,37 ml, 1,5 eq). A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 16 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (PE: EA = 6: 1) mostrou que a reação estava concluída. H2O (120 ml) foi adicionado à mistura, e a fase aquosa extraída com acetato de etila (30 ml x 3). As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro, filtra e concentrada in vácuo para se obter BI-3. RMN de H1 (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,66 (s, 9H), 2,93 a 3,07 (m, 1H), 3,27 (dd, J = 14,43, 8,41 Hz, 1H), 3,33 - 3,33 (m, 1H), 3,53 (d, J = 13,80 Hz, 2H), 3,69 a 3,83 (m, 4H), 3,99 (d, J = 13,55 Hz, 2H), 6,95 a 7,07 (m, 2H), 7,15 a 7,36 (m, 12H), 8,02 a 8,29 (m, 1H).
[1023] A uma mistura de BI-3 (1,7 g, 3,41 mmol, 1 eq) em THF (15 ml) foi adicionado em porções LiBH4 (222,81 mg, 10,23 mmol, 3 eq) a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 16 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (PE: EA = 6: 1) mostrou BI-3 que algum permaneceu e, assim, a reação foi ainda agitada a 25 °C durante 5 horas. NaHCO3 (50 ml) sat. foi adicionado à mistura e, em seguida, a mistura foi extraída com EA (15 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas por Na2SO4 e o solvente foi evaporado até à secura para proporcionar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash eluindo com 5% EA em PE a 10% EA em PE para fornecer BI-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,70 (s, 9H), 2,63 (dd, J = 14,18, 9,91 Hz, 1H), 3,01 (br s, 1H), 3,19 (dd, J = 14,31, 3,76 Hz, 1H), 3,24 a 3,33 (m, 1H), 3,46 (dd, J = 10,79, 4,52 Hz, 1H), 3,52 a 3,67 (m, 3H), 4,01 (d, J = 13,30 Hz, 2H), 7,11 a 7,48 (m, 14 H), 8,13 (br s, 1H).
[1024] A uma mistura de BI-4 (2,6 g, 5,52 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foi adicionado NaH (331,46 mg, 8,29 mmol, 60% de pureza, 1,5 eq) e CH3I (1,57 g, 11,05 mmol, 687,89 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada durante 30 min a 0 °C, e então NaH (331,46 mg, 8,29 mmol, 60% de pureza, 1,5 eq) foi adicionado. A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 2 horas adicionais para proporcionar uma mistura castanha. LC-MS e TLC (PE: EA = 15: 1) mostraram que a reação foi concluída. H2O (150 ml) foi adicionado à mistura, e a fase aquosa extraída com acetato de etila (40 ml x 4). As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas in vácuo para se obter o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash eluindo com 5% EA em PE a 10% EA em PE para proporcionar BI-5. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,49 (s, 9H), 2,90 (br dd, J = 14,68, 9,16 Hz, 1H), 3,12 (br dd, J = 14,68, 5,14 Hz, 1H), 3,30 a 3,42 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,76 a 3,88 (m, 4H), 4,08 a 4,21 (m, 1H), 4,29 (dd, J = 11,29, 7,03 Hz, 1H), 6,71 (s, 1H), 6,98 (br t, J = 7,53 Hz, 1H), 7,03 a 7,50 (m, 13H).
[1025] Uma mistura de BI-5 (586,2 mg, 1,21 mmol, 1 eq) e Pd(OH)2 (254,80 mg, 362,88 µmol, pureza 20%, 0,3 eq) em MeOH (5 ml) sob H2 (15 psi) foi agitada a 25 °C durante 18 horas para produzir uma mistura preta. LC-MS mostrou que a reação foi concluída. A reação foi filtrada e o filtrado evaporado até a secura para fornecer o produto bruto. O produto foi purificado por coluna flash eluindo com 10% de MeOH em DCM para MeOH puro para fornecer BI-6. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,46 a 1,53 (m, 9H), 2,68 a 2,83 (m, 1H), 2,97 (dd, J = 14,31, 5,52
Hz, 1H), 3,39 a 3,48 (m, 1H), 3,71 a3,80 (m, 3H), 3,94 (dd, J = 10,42, 7,40 Hz, 1H), 4,06 a 4,21 (m, 1H), 6,89 a 6,96 (m, 1H), 7,07 a 7,15 (m, 1H), 7,23 (td, J = 7,65, 1,00 Hz, 1H), 7,28 a 7,33 (m, 1H), 7,55 a 7,66 (m, 1H).
[1026] BI-6 (300 mg, 985,60 µmol, 1 eq) em HCl/EtOAc (4 M, 4 ml, 16,23 eq) foi agitado a 25 °C durante 1 hora para produzir uma mistura branca. LC-MS mostrou que a reação foi concluída. A reação foi evaporada até à secura e De NaHCO3 (50 ml) aq. foi adicionado à mistura. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (20 ml x 3). As fases orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro, filtradas e concentradas em vácuo para fornecer BI-7. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,63 (br dd, J = 14,18, 8,16 Hz, 1H), 2,86 (br d, J = 12,30 Hz, 1H), 3,18 (br d, J = 5,27 Hz, 1H), 3,32 a 3,40 (m, 1H), 3,55 a 3,66 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 6,75 a 6,90 (m, 1H), 6,99 a 7,08 (m, 1H), 7,12 a 7,28 (m, 2H), 7,52 (d, J = 7,78 Hz, 1H).
[1027] A uma mistura de BI-7 (170,0 mg, 832,24 µmol, 1 eq) e 4- formilbenzoato de terc-butila (171,64 mg, 832,24 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado TFA (37,96 mg, 332,90 µmol, 24,65 µl, 0,4 eq) a 25°C. A mistura resultante foi agitada a 45 °C durante 42 horas para proporcionar uma mistura marrom. LC-MS e TLC (PE: EA = 1: 2) mostraram que a reação foi concluída. NaHCO3 sat. aq. (50 ml) foi adicionado à mistura e a fase aquosa extraída com DCM (15 ml x 3). A fase orgânica combinada foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada in vácuo para se obter o produto bruto. O produto foi purificado por perp-TLC (EA: PE = 2: 1) para fornecer BI-8 e BI-8a. NOE mostrou que BI-8a era o isômero cis. BI-8: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,58 (s, 9H), 2,47 a 2,64 (m, 1H), 2,84 (dd, J = 15,56, 4,27 Hz, 1H), 2,95 a 3,11 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 3,52 (dd, J = 10,54, 8,53 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 10,67, 3,64 Hz, 1H), 5,33 (s, 1H), 7,11 a 7,18 (m, 1H), 7,19 a 7,33 (m, 5H), 7,56 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,28 Hz, 2H). BI-
8a: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,59 (s, 9H), 2,55 - 2,72 (m, 1H), 2,80 a 2,92 (m, 1H), 3,14 (s, 3H), 3,18 a 3,30 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 10,79, 8,28 Hz, 1H), 3,88 (dd, J = 10,79, 3,76 Hz, 1H), 5,30 (s, 1H), 7,08 a 7,19 (m, 1H), 7,22 (d, J = 3,76 Hz, 2H), 7,35 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1028] Preparação do composto 63. Para uma mistura de BI-8 (40,0 mg, 101,91 µmol, 1 eq) e TEA (20,63 mg, 203,83 µmol, 28,37 µl, 2 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (17,27 mg, 152,87 µmol, 12,16 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 2 horas para proporcionar uma mistura marrom. LC-MS e TLC (PE: EA = 3: 1) mostraram que a reação foi concluída. A reação foi purificada por perp-TLC (PE: EA = 3: 1) para fornecer 63. RMN de 1H (400 MHz,) δ ppm 1,48 (s, 9H), 2,62 - 3,84 (m, 7H), 3,98 - 4,74 (m, 3H), 6,07 (br s, 1H), 6,99 - 7,41 (m, 6H), 7,45 - 7,58 (m, 1H), 7,84 (br s, 2H). LC-MS (m/z): 469,1 [M+H]+. PROCEDIMENTO BJ: SÍNTESE DO COMPOSTO 63
[1029] A uma solução de BJ-1 (500 mg, 2,63 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados 4-formilbenzoato de terc-butila (542,04 mg, 2,63 mmol, 1 eq) e TFA (149,84 mg, 1,31 mmol, 97,30 µl, 0,5 eq). A mistura foi aquecida a 25 °C durante 64 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi ajustada a pH 8 com NaHCO3 saturado e a mistura extraída com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto. O produto foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila =
1/0 a 2: 3) para obter BJ-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,99 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,52 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,47 a 7,37 (m, 2H), 7,25 a 7,08 (m, 3H), 5,27 (s, 1H), 4,12 (q, J = 7,3 Hz, 1H), 3,93 (dd, J = 3,5, 10,8 Hz, 1H), 3,69 (dd, J = 8,4, 10,7 Hz, 1H), 3,41 a 3,32 (m, 1H), 2,88 a 2,78 (m, 1H), 2,70 a 2,60 (m, 1H), 1,60 (s, 9H).
[1030] Preparação de 63. A uma solução de BJ-2 (53 mg, 140,04 µmol, 1 eq) em CH2Cl2 (2 ml) foram adicionados TEA (117,64 mg, 1,16 mmol, 161,82 µl, 8,30 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (79,08 mg, 700,20 µmol, 55,69 µl, 5 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma suspensão marrom. LCMS mostrou que nenhum MS desejado foi encontrado. NaHCO3 aq. saturado. (10ml) e THF (5ml) foram adicionados e a mistura agitada a 25 °C durante 24 horas para obter uma suspensão marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. Salmoura foi adicionada e a mistura extraída com EtOAc (5 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com NaSO4 filtradas e concentradas para obter um resíduo. O resíduo foi purificado por meio de HPLC prep (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 55% a 85%, 7,8 min) para fornecer
63. LC-MS (m/z): 477,0 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,94 (br d, J = 8,0 Hz, 3H), 7,54 (t, J = 6,5 Hz, 2H), 7,19 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,07 (s, 1H), 5,40 a 5,31 (m, 1H), 4,53 (br s, 1H), 4,43 (s, 1H), 4,28 (s, 1H), 3,61 a 3,46 (m, 2H), 3,26 (br dd, J = 6,5, 16,6 Hz, 1H), 2,92 (s, 1H), 2,08 - 1,93 (m, 1H), 1,45 - 1,17 (m, 9H). PROCEDIMENTO BK: SÍNTESE DO COMPOSTO 64
[1031] Preparação de 64. A uma mistura de BI-8 (15,0 mg, 38,22 µmol, 1 eq) e TEA (7,73 mg, 76,44 µmol, 10,64 µl, 2 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (6,47 mg, 57,33 µmol, 4,56 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 1 hora para proporcionar uma mistura marrom. TLC (PE: EA = 2: 1) mostrou que a reação estava completa. A reação foi purificada por prep-TLC (PE: EA = 2: 1) para fornecer 64. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,50 (s, 9H), 2,79 (br d, J = 16,31 Hz, 1H), 3,05 a 3,27 (m, 1H), 3,37 (s, 5H), 4,20 (br d, J = 12,30 Hz, 1H), 4,37 (br d, J = 12,30 Hz, 1H), 4,45 (br d, J = 8,03 Hz, 1H), 5,17 a 5,82 (m, 1H), 7,12 (br s, 2H), 7,17 a 7,32 (m, 2H), 7,40 (br s, 2H), 7,49 (br d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,86 (br d, J = 8,03 Hz, 2H). LC-MS (m/z): 469,0 [M+H]+. PROCEDIMENTO BL: SÍNTESE DO COMPOSTO 66 E COMPOSTO 66A
[1032] A uma solução de AA-2 (292 mg, 1,94 mmol, 1 eq) em DMF
(4 ml) foram adicionados DIEA (502,75 mg, 3,89 mmol, 677,56 µl, 2 eq) e HATU (1,11 g, 2,92 mmol, 1,5 eq). Adicionou-se trimetilsililmetanamina (200,79 mg, 1,94 mmol, 1 eq) e a mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas para fornecer uma solução amarela. TLC (eluindo com: EtOAc = 100%, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com H2O (40 ml) e extraiu-se com MTBE (25 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 1: 1) para obter BL-2. RMN de H1 (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,15 (s, 9H), 2,99 - 3,00 (d, J = 5,77 Hz, 2H), 6,00 (br s, 1H), 7,87 - 7,89 (m, 2H), 7,95 - 7,97 (m, 2H), 10,08 (s, 1H).
[1033] A uma solução de BL-2 (100 mg, 424,89 µmol, 1 eq) em DCM (6 ml) foram adicionados AP-3 (98,27 mg, 424,89 µmol, 1 eq) e TFA (24,22 mg, 212,45 µmol, 15,73 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 12 horas para fornecer uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com Sat. NaHCO3 e extraída com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (acetato de etila: metanol = 10: 1) para obter BL-3 e BL-3a.
[1034] BL-3: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,12 (s, 9H), 1,24 a 1,26 (m, 1H), 2,80 (s, 3H), 2,92 a 3,02 (m, 7H), 3,84- 3,88 (dd, J = 10,04, 5,02 Hz, 1H), 5,93 (br s, 1H), 7,13 a 7,22 (m, 2H), 7,29 a 7,33 (m, 3H), 7,55 a 7,57 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,64 a 7,66 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,91 (s, 1H).
[1035] BL-3a: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,13 a 0,15 (s, 9H), 1,25 a 1,28 (m, 1H), 2,95 a 2,97 (d, J = 5,77 Hz, 2H), 3,00 a 3,02 (m, 5H), 3,17 (s, 3H), 3,49 (s, 3H), 4,16 a 4,20 (t, J = 7,53 Hz, 1H), 5,30 (s, 1H), 5,97 a 6,00 (br t, J = 5,52 Hz, 1H), 7,11 a 7,17 (m, 2H), 7,11 a
7,20 (m, 1H), 7,38 a 7,40 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,52 a 7,54 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,69 a 7,71 (d, J = 8,03 Hz, 2H).
[1036] Preparação de 66. A uma solução de BL-3 (36 mg, 80,24 µmol, 1 eq, trans) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (67,41 mg, 802,44 µmol, 31,21 µl, 10 eq). Em seguida, uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (45,32 mg, 401,22 µmol, 31,91 µl, 5 eq) em DCM (0,5 ml) foi adicionada a 0 °C e a mistura agitada a 25 ° durante 2 horas para obter uma solução amarela. CCF (eluindo com: éter de petróleo: acetato de etilo = 2: 1, SiO2) indicou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para resultar no resíduo bruto. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para obter 66. LC-MS (m/z): 525,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,06 (m, 1H), 0,07 a 0,11 (s, 9H), 1,26 a 1,30 (m, 3H), 2,81 a 2,94 (m, 7H), 3,12 (br s, 1H), 3,37 a 3,44 (m, 2H), 4,08 a 4,13 (m, 1H), 5,89 (br s, 1H), 7,07 (br s, 2H), 7,46 (br s, 3H), 7,68 (br s, 2H), 8,04 (br s, 1H).
[1037] Preparação de 66a. A uma solução de BL-3-a (172 mg, 383,39 mol, 1 eq, cis em CHCl3 (5 ml) adicionou-se NaHCO3 (322,07 mg, 3,83 mmol, 149,11 µl, 10 eq). Em seguida, uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (216,51 mg, 1,92 mmol, 152,47 µl, 5 eq) em DCM (0,5 ml) foi adicionada a 0 °C e a mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas para fornecer uma solução amarela. TLC (eluindo com: Éter de petróleo: Acetato de etila = 2: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A solução foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para fornecer 66a. LC-MS (m/z): 525,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,09 a 0,13 (m, 9H), 2,41 (s, 3H), 2,86 (s, 3H), 2,94 a 3,01 (d, J = 5,77 Hz, 2H), 3,12 a 3,18 (dd, J = 15,69, 6,15 Hz, 1H), 3,34 a 3,38 (br, 1H), 4,20 a 4,33 (m, 2H), 5,44 (br s, 1H), 6,05 a 6,08 (br, 1H), 6,43 (br, 1H), 7,12 a 7,18 (m, 2H), 7,28 a 7,30 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,55 a 7,57 (br d, J =
7,03 Hz, 3H), 7,64 a 7,66 (m, 2H), 7,81 (s, 1H), 8,27 (s, 1H). PROCEDIMENTO BM: SÍNTESE DO COMPOSTO 67
[1038] Preparação do composto BM-2. A uma solução de BM-1 (100 mg, 560,84 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados AP-3 (129,72 mg, 560,84 µmol, 1 eq) e TFA (31,97 mg, 280,42 µmol, 20,76 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 12 horas para fornecer uma solução amarela. CCF (eluindo com: AcOEt/metanol = 10/1, SiO2) indicou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o resíduo bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (acetato de etila: Metanol = 20: 1) para obter BM-2 e BM-2a.
[1039] BM-2: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,22 a 0,27 (m, 9H), 2,80 a 2,96 (m, 1H), 2,81 a 2,94 (m, 6H), 2,97 a 3,06 (m, 2H), 3,92 a 3,96 (dd, J = 9,79, 5,02 Hz, 1H), 5,29 (s, 1H), 5,28 a 5,31 (m, 1H), 7,13 a 7,23 (m, 4H), 7,28 a 7,30 (m, 1H), 7,45 a 7,47 (d, J = 7,78 Hz, 2H), 7,55 a 7,57 (d, J = 7,53 Hz, 1H).
[1040] BM-2a: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,25 a 0,27 (s, 9H), 3,01 a 3,04 (m, 5H), 3,08 a 3,17 (s, 3H), 4,19 a 4,21 (dd, J = 9,66, 5,40 Hz, 1H), 5,27 (s, 1H), 7,15 a 7,16 (quind, J = 7,00, 7,00, 7,00, 7,00, 1,13 Hz, 2H), 7,24 a 7,30 (m, 3H), 7,50 a 7,55 (m, 3H), 7,55 a 7,58 (m, 1H).
[1041] Preparação de 67. A uma solução de BM-2 (29,3 mg, 74,83 µmol, 1 eq, trans) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (62,86 mg, 748,25 µmol, 29,10 µl, 10 eq). Em seguida, uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (42,25 mg, 374,13 µmol, 29,76 µl, 5 eq) em DCM (0,5 ml) foi adicionada a 0 °C e a mistura foi agitada a 0 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com; éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para obter um resíduo bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1) para fornecer 67. LC-MS (m/z): 468,1 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,07 (s, 1H), 0,23 (s, 9H), 1,25 a 1,30 (s, 3H), 2,87 (br s, 3H), 3,06 (br s, 2H), 3,35 (br s, 2H), 4,17 a 4,20 (br d, J = 11,04 Hz, 1H), 5,72 (s, 1H), 6,29 (br s, 1H), 7,11 (br s, 2H), 7,20 (br s, 1H), 7,33 a 7,35 (d, J = 7,78 Hz, 2H), 7,47 a 7,52 (m, 3H), 7,76 (br s, 1H).
[1042] Preparação de 67a. A uma solução de BM-2a (64 mg, 163,44 mol, 1 eq, cis) em CHCl3 (4 ml) adicionou-se NaHCO3 (137,30 mg, 1,63 mmol, 63,57 ml, 10 eq). Em seguida, uma solução de cloreto de 2- cloroacetila (92,30 mg, 817,20 µmol, 65,00 µl, 5 eq) em DCM (0,5 ml) foi adicionada a 0 °C e a mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com; éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para obter um resíduo bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1) para obter 67a. LC-MS (m/z): 468,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,23 (s, 10H), 2,30 (s, 3H), 2,77 (s, 3H), 3,05 a 3,11 (dd, J = 14,81, 6,53 Hz, 1H), 3,42 a 3,46 (br d, J = 15,56 Hz, 1H), 4,30 a 4,44 (m, 2H), 5,57 (br s, 1H), 6,36 (br s, 1H), 7,13 a 7,21 (m, 2H), 7,28 a 7,30 (m, 1H), 7,40 a 7,41 (d, J = 7,78 Hz, 2H), 7,49 a 7,51 (m, 2H), 7,58 a 7,60 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H).
PROCEDIMENTO BN: SÍNTESE DO COMPOSTO 68
[1043] A uma solução de BN-1 (3 g, 24,17 mmol, 2,54 ml, 1 eq) em DMSO (12 ml) foram adicionados 2-metil propano-2-tiol (2,40 g, 26,59 mmol, 2,99 ml, 1,1 eq) e K2CO3 (3,34 g, 24,17 mmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 100 °C durante 3 horas para obter uma solução amarela. CCF (eluindo com: PE/EtOAc = 10/1, SiO2) indicou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi arrefecida com H2O (120 ml) e extraiu-se com MTBE (60 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo = 100%) para obter BN-1. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,34 a 1,36 (s, 10H), 7,67 a 7,69 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,81 a 7,83 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 10,03 (s, 1 H).
[1044] A uma solução de BN-2 (500 mg, 2,57 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado MCPBA (1,15 g, 5,66 mmol, 39,96 µl, 85% de pureza, 2,2 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12 horas para obter uma solução branca. CCF (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1, SiO2) indicou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NaHCO3 (10 ml) sat. e extraído com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo = 100%) para obter BN-3. RMN de 1H (400 MHz,
CDCl3) δ ppm 1,37 (s, 9H), 8,07 (s, 4H), 10,15 (s, 1H).
[1045] A uma solução de BN-3 (320 mg, 1,41 mmol, 1 eq) em DCM (20 ml) foram adicionados AP-3 (327,07 mg, 1,41 mmol, 1 eq) e TFA (80,62 mg, 707,05 µmol, 52,35 µl, 0,5 eq). LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto (604 mg). O produto foi purificado por prep-TLC (acetato de etila = 100%) para fornecer BN-4 e BN-4a.
[1046] BN-4: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,29 a 1,36 (m, 9H), 2,80 (s, 3H), 2,92 a 3,04 (m, 5H), 3,79 a 3,83 (dd, J = 9,54, 5,52 Hz, 1H), 5,34 (s, 1H), 7,14 a 7,24 (m, 2H), 7,33 a 7,35 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,42 a 7,44 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,55 a 7,57 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,75 a 7,77 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 8,08 (s, 1H).
[1047] BN-4a: RMN de 1H 400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,22 a 1,28 (m, 2H), 1,34 (s, 9H), 2,78 a 3,09 (m, 1H), 2,96 a 3,09 (m, 4H), 3,17 (s, 3H), 3,69 a 3,74 (q, J = 7,11 Hz, 1H), 4,09 - 4,21 (m, 1H), 5,38 (s, 1H), 7,12 a 7,21 (dt, J = 19,51, 7,18 Hz, 2H), 7,28 a 7,30 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,52 a 7,55 (m, 3H), 7,82 a 7,84 (m, 3H), 7,95 a 7,96 (m, 1H).
[1048] Preparação de 68. A uma solução de BN-4 (50 mg, 113,75 µmol, 1 eq, trans) em CHCl3 (8 ml) foram adicionados NaHCO3 (95,56 mg, 1,14 mmol, 44,24 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetil (38,54 mg, 341,24 µmol, 27,14 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado para resultar no produto bruto. O produto foi purificado por TLC preparativa (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1) para obter 68. LC- MS (m/z): 516,0 [M+H]+. RMN de H1 (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,18 a 1,30 (m, 9H), 2,84 (s, 3H), 3,11 (br s, 3H), 3,29 a 3,39 (m, 2H), 3,77 a 4,09 (m, 2H), 5,28 (br s, 1H), 5,81 (br s, 1H), 6,53 a 6,66 (m, 1H), 6,90
(br s, 1H), 7,32 (br s, 1H), 7,45 a 7,55 (m, 2H), 7,71 (br s, 1H), 8,52 a 8,84 (m, 1H). PROCEDIMENTO BO: SÍNTESE DO COMPOSTO 69
[1049] Uma mistura de BO-1 (1 g, 5,29 mmol, 1 eq), BO-2 (1,02 g, 6,88 mmol, 737,17 µl, 1,3 eq) e K2CO3 (1,10 g, 7,93 mmol, 1,5 eq) foi dissolvida em DMF (20 ml), e a mistura de reação agitada a 25 °C durante 16 horas. TLC (eluindo com: PE) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (10 ml) e EtOAc (10 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). A camada orgânica combinada foi seca com sulfato de sódio e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica- gel (PE) para fornecer BO-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,49 a 1,60 (m, 4H), 1,65 a 1,76 (m, 2H), 1,93 a 2,03 (m, 2H), 3,50 (m, 1H), 7,14 (d, J = 8,53 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1050] A uma solução de BO-3 (2,44 g, 9,49 mmol, 1 eq) em THF (30 ml) foi adicionado gota a gota n-BuLi (2,5 M, 4,55 ml, 1,2 eq) a - 78°C. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 1 h. DMF (1,04 g, 14,23 mmol, 1,09 ml, 1,5 eq) foi então adicionado gota a gota, e a mistura de reação foi deixada subir até 25 °C em 5 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. MeOH (2 ml) foi adicionado para extinguir a reação. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (PE) para fornecer BO-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,61 a 1,71 (m, 4H), 1,74 a 1,88 (m, 2H), 2,08 a 2,25 (m, 2H), 3,68 a 3,82 (m, 1H), 7,37 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,75 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 9,91 (s, 1H).
[1051] A uma solução de BO-4 (1,54 g, 7,46 mmol, 1 eq) em DCM (20 ml), foi adicionado MCPBA (2,83 g, 16,42 mmol, 2,2 eq). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 horas para obter uma solução incolor. LCMS e TLC (eluindo com: EA/MeOH = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. Solução de Na2SO3 (15 ml) foi adicionada para arrefecer a reação, e a mistura de reação repartida entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (20 ml x 2), e as camadas orgânicas combinadas secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (EtOAc/MeOH = 10/1-3/1) para obter BO-5. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,59 - 1,67 (m, 2H), 1,74 a 1,82 (m, 2H), 1,84 a 1,93 (m, 2H), 2,04 a 2,12 (m, 2H), 3,45 a 3,57 (m, 1H), 8,07 (d, J = 2,01 Hz, 4H), 10,13 (s, 1H).
[1052] A uma solução de BO-5 (320,29 mg, 1,38 mmol, 1,1 eq) e AP-3 (300 mg, 1,26 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml), foi adicionado TFA (71,77 mg, 629,45 µmol, 46,61 µl, 0,5 eq), e a mistura de reação agitada a 45 °C durante 16 horas para obter uma suspensão. LCMS e TLC (eluindo com: EtOAc/MeOH = 20/1) mostraram que a reação foi concluída. Adicionou-se bicarbonato de sódio saturado para ajustar o pH a 7-8. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (20 ml x 2), e as camadas orgânicas combinadas secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto foi purificado por Prep-TLC (EtOAc/MeOH = 50/1) para obter BO-6. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,48 a 1,64 (m, 4H), 1,68 a 1,87 (m, 4H), 2,64 (s, 3H), 2,74 a 2,90 (m, 4H), 3,23 (dd, J = 11,92, 5,65 Hz, 1H), 3,63 a 3,80 (m, 2H), 5,32 (d, J = 5,27 Hz, 1H), 6,96 a 7,03 (m, 1H), 7,04 a 7,11 (m, 1H), 7,29 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,44 a 7,50 (m, 3H), 7,84 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 10,86 (s, 1H).
[1053] Preparação de 69. A uma solução de BO-6 (132 mg, 292,31 µmol, 1 eq) e Et3N (59,16 mg, 584,61 µmol, 81,37 µl, 2 eq) em DCM (8 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetil (49,52 mg, 438,46 µmol, 34,87 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: EA) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por Prep-TLC (DCM/MeOH = 10/1) para fornecer 69. LC-MS (m/z): 528,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO- d6) δ: 1,48 - 1,64 (m, 4H), 1,68 - 1,88 (m, 4H), 2,70 (s, 3H), 3,14 (s, 2H), 3,39 (s, 1H), 3,67 - 3,77 (m, 1H), 4,67 (d, J = 14,31 Hz, 1H), 5,31 (s, 1H), 5,62 (s, 1H), 6,15 a 6,44 (m, 1H), 6,93 - 6,99 (m, 1H), 7,00 - 7,06 (m, 1H), 7,25 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,65 - 7,86 (m, 4H), 10,99 (s, 1H). PROCEDIMENTO BP: SÍNTESE DO COMPOSTO 70
[1054] Preparação do composto BP-3. A mistura de BP-1 (248,22 mg, 2 mmol, 210,36 µl, 1 eq) e BP-2 (281,88 mg, 2,20 mmol, 1,1 eq) em DMSO (15 ml) foi agitada a 100 °C durante 48 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. H2O (100 ml) foi adicionado, e a fase aquosa extraída com acetato de etila (30 ml x 4). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (40 ml), secou-se com Na2SO4 anidro, filtrada e em seguida concentrada in vácuo para se obter BP-3. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,02 - 1,24 (m, 4H), 2,88 - 3,01 (m, 1H), 8,07 - 8,26 (m, 4H), 10,14 (s, 1H).
[1055] A uma mistura de AP-3 (300 mg, 1,30 mmol, 1 eq) e BP-3 (272,71 mg, 1,30 mmol, 1 eq) em DCM (4 ml) foi adicionado TFA (59,16 mg, 518,82 µmol, 38,41 µl, 0,4 eq) a 25 °C. A mistura resultante foi agitada a 45 °C durante 18 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 0/1) mostrou que a reação estava concluída. H2O (60 ml) foi adicionado, e a fase aquosa extraída com DCM (20 ml x 3). A fase orgânica combinada foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada in vácuo para se obter o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (EA: MeOH = 50: 1) para fornecer BP-4 e BP-4a.
[1056] BP-4: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,96 - 1,07 (m, 2H), 1,29 - 1,37 (m, 2H), 2,35 - 2,49 (m, 1H), 2,84 (s, 3H), 2,91 - 3,03 (m, 5H), 3,85 (t, J = 7,40 Hz, 1H), 5,35 (s, 1H), 7,13 - 7,19 (m, 1H), 7,22 (t, J = 7,40 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 8,00 (s, 1H).
[1057] BP-4a: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,95 - 1,12 (m, 2H), 1,31 - 1,39 (m, 2H), 2,35 - 2,52 (m, 1H), 2,92 - 3,08 (m, 5H), 3,17 (s, 3H), 4,19 (dd, J = 9,91, 5,14 Hz, 1H), 5,38 (br s, 1H), 7,09 - 7,36 (m, 4H), 7,42 - 7,66 (m, 3H), 7,88 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1058] Preparação de 70. A uma mistura de BP-4 (140,5 mg, 331,74 µmol, 1 eq) e TEA (67,14 mg, 663,48 µmol, 92,35 µl, 2 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (56,20 mg, 497,61 µmol, 39,58 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 2 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (PE: EA = 0: 1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi purificada por perp-
TLC (EA) para fornecer 70. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,99 (br d, J = 6,53 Hz, 2H), 1,19 - 1,38 (m, 2H), 2,31 - 2,47 (m, 1H), 2,92 (br s, 3H), 3,02 - 4,61 (m, 7H), 5,18 - 6,17 (m, 1H), 6,34 - 7,16 (m, 4H), 7,30 - 8,01 (m, 5H), 8,48 - 9,26 (m, 1H). LC-MS (m/z): 500,0 [M+H]+. PROCEDIMENTO BQ: SÍNTESE DO COMPOSTO 71 E COMPOSTO 71A
[1059] A uma solução de AP-3 (141,75 mg, 612,85 µmol, 1 eq) e N- (4-formilfenil) acetamida (100 mg, 612,85 µmol, 1 eq) em MeOH (3 ml) foi adicionado TFA (34,94 mg, 306,42 µmol, 22,69 µl, 0,5 eq) a 20 °C. A reação foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (extinta com água, eluindo com: EA/MeOH = 20/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi destilada (40 °C) para fornecer BQ-2. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,05 (s, 3H), 2,91 (s, 4H), 3,05 (s, 3H), 3,51 (br dd, J = 15,81, 5,02 Hz, 1H), 4,44 (br s, 1H), 5,87 (s, 1H), 7,07 (t, J = 7,15 Hz, 1H), 7,11 - 7,19 (m, 1H), 7,27 - 7,37 (m, 3H), 7,43 (d, J = 8,53 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,53 Hz, 2H), 9,49 (br s, 1H), 10,10-10,27 (m, 2H).
[1060] Preparação de 71 e 71a. A uma solução de BQ-2 (30 mg, 79,69 µmol, 1 eq) e Et3N (12,10 mg, 119,54 µmol, 16,64 µl, 1,5 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (13,50 mg, 119,54 µmol, 9,51 µl, 1,5 eq) a 0 °C e a mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para fornecer uma solução vermelha. LCMS e (eluindo com: PE/EA = 0/1) mostraram que a reação foi concluída. A solução de reação foi diluída com DCM (10 ml) e lavada com água (10 ml x 3). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A reação foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl) -ACN]; B%: 20%-50%, 9,5 min) para fornecer 71a e 71. LC-MS (m/z): 453,0 [M]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,12 (s, 3H), 2,46 - 2,76 (m, 1H), 2,78 - 3,12 (m, 5H), 3,33 (br s, 2H), 4,15 (br d, J = 13,80 Hz, 1H), 5,48 - 6,34 (m, 1H), 6,99 - 7,23 (m, 3H), 7,28 - 7,54 (m, 6H), 8,14 (br s, 1H). PROCEDIMENTO BR: SÍNTESE DO COMPOSTO 72 E COMPOSTO 73
[1061] A uma solução de BR-1 (200 mg, 916,38 µmol, 1 eq) em MeOH (5 ml) foram adicionados SOCl2 (109,02 mg, 916,38 µmol, 66,48 µl, 1 eq) em DCM (1 ml) e a mistura agitada a 30 °C durante 16 h para obter uma solução marrom. TLC (extinta com água, eluindo com: PE/EA = 0/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi evaporada (40 °C) para fornecer BR-2.
[1062] A uma solução de BR-2 (100 mg, 430,52 µmol, 1 eq) e 4- formilbenzoato de metil (70,67 mg, 430,52 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TFA (24,54 mg, 215,26 µmol, 15,94 µl, 0,5 eq) a 20 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução vermelha. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A solução de reação foi diluída com DCM (10 ml)
e lavada com água (20 ml x 3). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. A mistura foi purificada por prep-TLC para fornecer BR-3 e BR-3a. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,99 (dd, J = 15,06, 10,29 Hz, 1H), 3,20 - 3,34 (m, 4H), 3,67 - 3,81 (m, 4H), 3,91 (s, 3H), 4,05 - 4,17 (m, 1H), 5,42 (s, 1H), 7,11 - 7,19 (m, 1H), 7,21 - 7,25 (m, 2H), 7,27 - 7,31 (m, 1H), 7,58 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1063] Preparação de 72. A uma solução de BR-3 (90 mg, 237,83 µmol, 1 eq) e Et3N (36,10 mg, 356,75 µmol, 49,65 µl, 1,5 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (40,29 mg, 356,75 µmol, 28,37 µl, 1,5 eq) a 30 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi purificada por HPLC prep (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl) -ACN]; B%: 55% - 85%, 6,5 min) para obter 72. LC-MS (m/z): 455,3 [M]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,40 - 3,70 (m, 7H), 3,88 (br s, 3H), 4,05 (br s, 1H), 5,15 (br s, 1H), 6,27 (s, 1H), 7,10 - 7,24 (m, 2H), 7,44 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,93 (br s, 2H).
[1064] Preparação de 73. A uma solução de BR-3a (60,00 mg, 158,55 µmol, 1 eq) e Et3N (24,07 mg, 237,83 µmol, 33,10 µl, 1,5 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (26,86 mg, 237,83 µmol, 18,92 µl, 1,5 eq) a 30 °C, e a mistura foi agitada durante 1 h para fornecer uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi purificada por prep-TLC para obter 73. LC-MS (m/z): 455,4 [M]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,92 (s, 3H), 3,30 (s, 4H), 3,73 (br d, J = 16,06 Hz, 1H), 3,89 (s, 3H), 4,24 (d, J = 12,55 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 12,55 Hz, 1H), 4,96 (br d, J = 7,03 Hz, 1H), 7,10 (s, 1H), 7,15 - 7,23 (m, 1H), 7,28 - 7,33 (m, 4H), 7,63 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,28 Hz, 2H). PROCEDIMENTO BS: SÍNTESE DO COMPOSTO 74
[1065] A uma solução de AB-2 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foram adicionados Cs2CO3 (3,26 g, 9,99 mmol, 3 eq) e 3- bromoprop-1-eno (805,80 mg, 6,66 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada e aquecida a 80 °C durante 16 horas para obter uma suspensão marrom. TLC (PE: EtOAc = 2: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi diluída com H2O (50 ml) e extraiu-se com MTBE (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 10/1) para obter BS-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,11 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 8,13 (s, 1H), 8,00 - 7,85 (m, 2H), 6,15 - 5,93 (m, 1H), 5,53 - 5,18 (m, 3H), 4,96 - 4,74 (m, 3H).
[1066] A uma solução de AA-1 (100 mg, 458,19 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados BS-2 (87,14 mg, 458,19 µmol, 1 eq) e TFA (26,12 mg, 229,09 µmol, 16,96 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que AA-1 permaneceu. A mistura foi aquecida a 40 °C durante 24 horas para obter uma solução marrom. TLC (eluindo: PE: EtOAc = 2: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 e obtido com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e o produto bruto concentrado.
O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para obter dois produtos, um dos quais era BS-4a e o outro era BS-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,07 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,57 - 7,46 (m, 3H), 7,44 - 7,35 (m, 1H), 7,25 - 7,10 (m, 3H), 6,32 - 5,81 (m, 1H), 5,46 - 5,35 (m, 1H), 5,52 - 5,25 (m, 1H), 5,09 - 4,70 (m, 2H), 3,99 (dd, J = 4,3, 11,0 Hz, 1H), 3,83 (s, 2H), 3,87 - 3,70 (m, 1H), 3,30 - 3,19 (m, 1H), 3,11 - 2,94 (m, 1H).
[1067] Preparação de 74. A uma solução de BS-4 (43 mg, 110,13 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foram adicionados TEA (111,45 mg, 1,10 mmol, 153,29 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (62,19 mg, 550,67 µmol, 43,80 µl, 5 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para obter um produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para obter
74. LC-MS (m/z): 489,0 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,12 - 7,93 (m, 1H), 8,17 - 7,92 (m, 1H), 7,99 (br s, 1H), 7,85 - 7,66 (m, 1H), 7,58 - 7,33 (m, 3H), 7,23 - 7,05 (m, 1H), 7,19 - 7,05 (m, 1H), 7,25 - 7,05 (m, 1H), 6,07 - 5,91 (m, 1H), 5,99 (dt, J = 4,8, 11,0 Hz, 1H), 5,37 (br d, J = 18,1 Hz, 1H), 5,27 (br d, J = 9,0 Hz, 2H), 4,79 (br s, 2H), 4,22 - 3,77 (m, 2H), 3,67 - 3,45 (m, 1H), 3,46 (br s, 1H), 3,74 - 3,16 (m, 3H). PROCEDIMENTO BT: SÍNTESE DO COMPOSTO 75
[1068] A uma solução de AB-2 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foram adicionados Cs2CO3 (3,26 g, 9,99 mmol, 3 eq) e bromometilciclopropano (1,12 g, 8,33 mmol, 797,19 µl, 2,5 eq). A mistura foi aquecida a 80 °C durante 16 h para obter uma suspensão marrom. TLC (PE: EtOAc = 2: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi diluída com H2O (50 ml) e depois extraiu-se com MTBE (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1: 0) para obter BT-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,11 (s, 1H), 8,23 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,97 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 4,22 - 4,10 (m, 2H), 1,34 - 1,13 (m, 1H), 0,69 - 0,53 (m, 2H), 0,45 - 0,20 (m, 2H).
[1069] A uma solução de BT-2 (100 mg, 489,67 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados (2R) -2-amino-3-(1H-indol-3- il)propanoato de metila (106,87 mg, 489,67 µmol, 1 eq) e TFA (27,92 mg, 244,83 µmol, 18,13 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e depois extraída com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e o produto bruto concentrado. O resíduo foi purificado por TLC-prep (SiO2, EP: AcOEt = 2: 1) para fornecer dois produtos, um dos quais era a BT-4, e o outro dos quais era a cis- isômero. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,04 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,60 - 7,48 (m, 2H), 7,39 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,21 - 7,12 (m, 2H), 5,49 (s, 1H), 4,18 - 4,10 (m, 2H), 4,00 - 3,91 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,33 - 3,24 (m, 1H), 3,17 (ddd, J = 1,3, 6,4, 15,4 Hz, 1H), 2,05 (s, 1H), 0,65 - 0,59 (m, 2H), 0,40 - 0,34 (m, 2H).
[1070] Preparação de 75. A uma solução de BT-4 (15 mg, 37,09 µmol, 1 eq) em CH3Cl (2 ml) foram adicionados TEA (37,53 mg, 370,87 µmol, 51,62 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (20,94 mg, 185,43 µmol, 14,75 µl, 5 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para obter o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para obter
75. LC-MS (m/z): 481,1[M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,11 - 7,86 (m, 2H), 7,73 (br s, 1H), 7,57 - 7,37 (m, 3H), 7,24 - 7,10 (m, 3H), 6,11 (br s, 1H), 5,27 (br s, 1H), 4,19 - 4,09 (m, 2H), 4,09 - 3,88 (m, 1H), 3,87 - 3,68 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 1,33 - 1,15 (m, 1H), 0,59 (br d, J = 6,5 Hz, 2H), 0,34 (br d, J = 4,0 Hz, 2H). PROCEDIMENTO BU: SÍNTESE DO COMPOSTO 77 E COMPOSTO 77A
[1071] A uma solução de BU-1 (5 g, 14,78 mmol, 1 eq) e HOSu (2,04 g, 17,74 mmol, 1,2 eq) em THF (50 ml) foi adicionado DCC (3,35 g, 16,26 mmol, 3,29 ml, 1,1 eq) a 0 °C. A reação foi agitada a esta temperatura durante cerca de 1 h. O DCU precipitado foi filtrado e lavado com THF (3 x 10 ml). A camada orgânica combinada foi resfriada à temperatura do gelo e uma solução de sódio NaBH4 (1,12 g, 29,56 mmol, 2 eq) em água (10 ml) foi adicionada em uma porção, o que leva à evolução vigorosa de gás. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 0/1)
mostrou que a reação estava concluída. HCl 0,5 N (15 ml) foi adicionado para extinguir NaBH4. A mistura de reação foi extraída com EtOAc (3 x 50 ml) e a camada orgânica combinada foi lavada com 5% de Na2CO3 (3 x 20 ml), lavada com salmoura (3 x 20 ml), seca com Na2SO4 e concentrada in vacuo. O produto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (PE/EA = 10/1-1/1) para fornecer BU-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,99 (d, J = 6,53 Hz, 3H), 3,54 - 3,70 (m, 2H), 4,03 (s, 1H), 5,08 (s, 2H), 5,26 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,10 (t, J = 7,15 Hz, 1H), 7,18 (t, J = 7,40 Hz, 2H), 7,32 (d, J = 1,76 Hz, 6H), 7,65 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 8,39 (s, 1H).
[1072] A uma solução de BU-2 (2 g, 6,17 mmol, 1 eq) e Et3N (1,25 g, 12,33 mmol, 1,72 ml, 2 eq) em DCM (20 ml) foi adicionado TosCl (1,41 g, 7,40 mmol, 1,2 eq). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução incolor. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e depois concentradas. O produto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (DCM/EtOAc = 10/1-5/1) para obter BU-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,42 (s, 3H), 2,94 - 3,12 (m, 2H), 4,02 (d, J = 3,76 Hz, 2H), 4,20 (d, J = 4,77 Hz, 1H), 5,02 (d, J = 9,03 Hz, 1H), 5,06 (s, 2H), 6,97 (d, J = 1,76 Hz, 1H), 7,07 - 7,14 (m, 1H), 7,19 (t, J = 7,53 Hz, 1H), 7,27 - 7,38 (m, 8H), 7,60 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 8,07 (s, 1H).
[1073] A uma solução de BU-3 (1,06 g, 2,21 mmol, 1 eq) em etanol (15 ml) foi adicionado Pd(OH)2 (93,32 mg, 664,49 mol, 0,3 eq) a 25 °C sob H2 (15 psi) atmosfera. A mistura de reação foi agitada a 25 °C durante 2 horas. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 0/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado concentrado. O produto foi particionado entre EtOAc (15 ml) e bicarbonato de sódio saturado (15 ml), e as camadas aquosas extraídas com EtOAc (15 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (EtOAc/MeOH = 1/0-3/1) para obter BU-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,59 (dd, J = 14,05, 8,28 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 14,18, 4,89 Hz, 1H), 3,14 - 3,29 (m, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,01 - 7,06 (m, 1H), 7,09 - 7,15 (m, 1H), 7,29 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 8,16 (s, 1H).
[1074] A uma solução de BU-4 (200 mg, 1,15 mmol, 1 eq) e 4- formilbenzoato de metila (226,11 mg, 1,38 mmol, 1,2 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado TFA (65,44 mg, 573,91 µmol, 42,49 µl, 0,5 eq) a 40°C. A mistura de reação foi agitada a 40 °C para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostrou que a reação estava completa. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (PE/EA = 10/1- 1/1) para fornecer metila BU-5a e BU-5.
[1075] BU-5: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,14 (d, J = 6,27 Hz, 3H), 2,32 - 2,42 (m, 1H), 2,82 (dd, J = 15,18, 4,14 Hz, 1H), 2,99 (s, 1H), 3,84 (s, 3H), 5,26 (s, 1H), 6,96 - 7,00 (m, 1H), 7,02 - 7,08 (m, 1H), 7,27 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 10,77 (s, 1H).
[1076] BU-5a: RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,26 (d, J = 6,02 Hz, 3H), 2,38 - 2,48 (m, 1H), 2,70 - 2,80 (m, 1H), 3,14 (m, 1H), 3,86 (s, 3H), 5,25 (s, 1H), 6,85 - 7,03 (m, 2H), 7,18 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 7,28 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,96 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 10,23 (s, 1H).
[1077] Preparação de 77. A uma solução de BU-5 (22 mg, 68,67 µmol, 1 eq) e Et3N (20,85 mg, 206,00 µmol, 28,67 µl, 3 eq) dissolvido em DCM (10 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (11,63 mg, 103,00 µmol, 8,19 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 2 h para obter uma solução incolor. TLC (eluindo com: EA/MeOH = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto, que foi, então, purificado por Prep-TLC (DCM/MeOH = 10/1) para fornecer 77. LC-MS (m/z): 397,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,15 (d, J = 6,27 Hz, 3H), 2,92 (d, J = 14,31 Hz, 1H), 3,16 - 3,30 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 4,43 (s, 1H), 4,80 (s, 2H), 5,98 (s, 1H), 6,94 - 6,99 (m, 1H), 7,00 - 7,06 (m, 1H), 7,27 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,78 Hz, 2H), 7,84 (d, J = 7,78 Hz, 2H), 11,02 (s, 1H).
[1078] Preparação de 77a. A uma solução de BU-5a (69 mg, 215,37 µmol, 1 eq) e Et3N (65,38 mg, 646,10 µmol, 89,93 µl, 3 eq) dissolvido em DCM (10 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (36,49 mg, 323,05 µmol, 25,69 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 2 h para obter uma solução incolor. TLC (eluindo com: EA/MeOH = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (15 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). Camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter produto bruto. O produto bruto foi purificado por Prep-TLC (DCM/MeOH = 10/1) para fornecer 77a. LC-MS (m/z): 397,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,91 (d, J = 6,78 Hz, 3H), 2,73 (d, J = 15,81 Hz, 1H), 3,13 - 3,19 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 4,55 - 4,76 (m, 3H), 6,93 (s, 1H), 7,01 - 7,06 (m, 1H), 7,10 - 7,17 (m, 1H), 7,38 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 7,78, 2,76 Hz, 3H), 7,94 (d, J = 8,53 Hz, 2H), 11,16 (s, 1H). PROCEDIMENTO BV: SÍNTESE DO COMPOSTO 78
[1079] Preparação do composto BV-2. A uma solução de BV-1 (200 mg, 1,25 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado metil 4- formilbenzoato de metila (204,92 mg, 1,25 mmol, 1 eq) e TFA (71,17 mg, 624,16 µmol, 46,21 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 12 horas para obter uma solução marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer BV-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,82 - 2,98 (m, 1H), 3,13 - 3,19 (m, 1H), 3,33 - 3,39 (dt, J = 12,36, 4,74 Hz, 1H), 3,90 - 3,93 (m, 1H), 3,95 - 3,99 (m, 1H), 3,97 (s, 2H), 5,23 (s, 1H), 7,11 - 7,18 (qd, J = 7,15, 5,65 Hz, 1H), 7,39 - 7,41 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,52 - 7,58 (m, 1H), 7,95 - 8,02 (m, 3H), 8,20 - 8,22 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 10,10 (s, 1H).
[1080] Preparação de 78. A uma solução de BV-2 (150,00 mg, 489,62 µmol, 1 eq, bruto) em CHCl3 (10 ml) foram adicionados NaHCO 3 (411,33 mg, 4,90 mmol, 190,43 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (165,90 mg, 1,47 mmol, 116,83 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada e lavada com DCM (20 ml). O filtrado foi concentrado e o resíduo purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1) para obter 78. LC-MS (m/z): 382,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,94 - 3,15 (m, 2H), 3,44 - 3,541 (m, 1H), 3,91 - 3,94 (s, 3H), 3,94 - 4,00 (m, 1H), 4,15 - 4,23 (m, 2H), 6,97 (s, 1H),
7,16 - 7,23 (m, 2H), 7,33 - 7,35 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,40 - 7,42 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,52 - 7,57 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,96 - 7,98 (d, J = 8,28 Hz, 2H). PROCEDIMENTO BW: SÍNTESE DO COMPOSTO 79
[1081] A uma solução de AA-1 (10 g, 39,26 mmol, 1 eq, HCl) em DCM (100 ml) foram adicionados DIEA (17,76 g, 137,41 mmol, 23,93 ml, 3,5 eq) e BnBr (14,77 g, 86,37 mmol, 10,26 ml, 2,2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 15 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a massa desejada foi encontrada, mas que AA-1 permaneceu. A mistura foi agitada a 15 °C durante 14 h e, em seguida, agitada a 30 °C durante mais 12h. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi temperada com H2O (100 ml) e extraiu-se com DCM (50 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 30%) para obter BI-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,93 (s, 1H), 7,35 - 7,27 (m, 7H), 7,26 - 7,12 (m, 5H), 6,92 - 6,91 (m, 2H), 4,05 - 4,02 (m, 2H), 3,84 - 3,82 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,58 - 3,54 (m, 2H), 3,41 - 3,37
(m, 1H), 3,13 - 3,12 (m, 1H).
[1082] A uma solução de BI-2 (12 g, 30,11 mmol, 1 eq) em CH3CN (100 ml) foram adicionados DMAP (367,89 mg, 3,01 mmol, 0,1 eq) e Boc2O (9,86 g, 45,17 mmol, 10,38 ml, 1,5 eq). A mistura foi deixada a agitar 15 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi temperada com H2O (100 ml) e extraiu-se com EtOAc (100 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 20%) para obter BI-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,13 (brs, 1H), 7,47 - 7,25 (m, 12H), 7,06 - 7,04 (m, 2H), 4,03 - 4,00 (m, 2H), 3,81 - 3,77 (m, 4H), 3,57 - 3,54 (m, 2H), 3,32 - 3,30 (m, 1H), 3,05 - 3,02 (m, 1H), 1,68 (s, 9H).
[1083] A uma solução de BI-3 (10 g, 20,06 mmol, 1 eq) em THF (100 ml) foi adicionado LiBH4 (1,31 g, 60,17 mmol, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada agitar a 15 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a massa desejada foi encontrada e que BI- 3 permaneceu. A mistura de reação foi extinta com NaHCO3 (50 ml) sat. e extraiu-se com EtOAc (80 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 20%) para fornecer BI-4 e BI-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,13 (brs, 1H), 7,41 - 7,31 (m, 11H), 7,28 - 7,21 (m, 3H), 4,02 - 3,99 (m, 2H), 3,63 - 3,56 (m, 3H), 3,48 - 3,44 (m, 1H), 3,28 - 3,21 (m, 2H), 3,16 (brs, 1H), 2,66 - 2,60 (m, 1H), 1,65 (s, 9H).
[1084] A uma solução de BI-4 (1,5 g, 3,19 mmol, 1 eq) em DCM (20 ml) foi adicionado DAST (1,54 g, 9,56 mmol, 1,26 ml, 3 eq) a -78 °C. A mistura foi deixada a agitar 15 °C durante 1h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a massa desejada foi encontrada e BI-4 permaneceu. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NaHCO3 (50 ml) Sat. e extraído com DCM (80 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 20%) para obter BW-5. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,04 (brs, 1H), 7,35 - 7,16 (m, 14H), 4,93 - 4,39 (m, 1H), 3,84 - 3,60 (m, 4H), 2,92 - 2,70 (m, 4H), 1,56 (s, 9H).
[1085] A uma solução de BW-5 (1,2 g, 2,54 mmol, 1 eq) em MeOH (30 ml) foi adicionado Pd(OH)2 (100,00 mg, 7,12 µmol, 1% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgado com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15 °C durante 1,5 horas para obter uma suspensão preta. LCMS mostrou que a massa desejada foi encontrada e BW-5 permaneceu. A mistura foi agitada a 15°C durante 12 horas novamente. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi filtrada em celite e lavada com MeOH (50 ml). O filtrado foi concentrado para obter BW-6. O BW-6 foi usado para a próxima etapa sem purificação.
[1086] BW-6 (742 mg, 2,54 mmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/dioxano (4 M, 30 ml, 47,28 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 0,5 h para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada para fornecer um resíduo, que foi, então, ajustado para pH 8 com NaHCO3 sat. A camada de água foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi dissolvido em DCM/EtOH (30 ml, 5/1), a mistura filtrada e lavada com DCM (30 ml). O filtrado foi concentrado para obter BW-7 que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[1087] A uma solução de BW-7 (100 mg, 520,20 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foram adicionados 4-formilbenzoato de metila (85,40 mg, 520,20 µmol, 1 eq) e TFA (29,66 mg, 260,10 µmol, 19,26 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NaHCO3 (10 ml) sat. e extraído com DCM (15 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) para obter dois produtos, BW-8 e o isômero cis correspondente. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,94 - 7,92 (m, 2H), 7,66 (s, 1H), 7,49 - 7,47 (m, 1H), 7,24 - 7,20 (m, 3H), 7,09 - 7,02 (m, 2H), 5,24 (s, 1H), 4,50 - 4,35 (m, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,41 - 3,36 (m, 1H), 2,89 - 2,84 (m, 1H), 2,64 - 2,58 (m, 1H).
[1088] Preparação de 79. A uma solução de BW-8 (45 mg, 132,99 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foram adicionados NaHCO3 (111,72 mg, 1,33 mmol, 51,72 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (45,06 mg, 398,97 µmol, 31,73 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 2 horas para obter uma suspensão amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) para obter 79. LC-MS (m/z): 414,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,91 - 7,89 (m, 2H), 7,61 (brs, 1H), 7,45 - 7,43 (m, 1H), 7,36 - 7,34 (m, 2H), 7,16 - 7,06 (m, 3H), 5,90 (brs, 1H), 4,95 (brs, 1H), 4,53 - 4,38 (m, 3H), 3,98 - 3,84 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,39 - 3,30 (m, 1H), 3,01 - 2,98 (m, 1H). PROCEDIMENTO BX: SÍNTESE DOS COMPOSTOS BX E BXA
[1089] Preparação do composto BX-2. AB-2 (1 g, 6,66 mmol, 1 eq) e K2CO3 (1,01 g, 7,33 mmol, 1,1 eq) em DMF anidro (20 ml) foi agitado durante 30 min a 70 °C. A mistura de reação foi então resfriada a 0 °C, e 3-bromoprop-1-ino (871,61 mg, 7,33 mmol, 631,60 µl, 1,1 eq) foi adicionado gota a gota. A mistura foi novamente agitada a 70 °C durante 16 h até se tornar uma suspensão preta. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc (20 ml) e água (10 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml x 2), secas com sulfato de sódio e concentradas para obter o produto bruto. O produto foi obtido e depois purificado por uma coluna flash (PE/EtOAc = 7/1-3/1) para obter BX-2.
[1090] Preparação do composto BX-3 e BX-3a. Para uma mistura de (2R)-2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (640,44 mg, 2,93 mmol, 1,1 eq) e BX-2 (502 mg, 2,67 mmol, 1 eq) em DCM (20 ml) foi adicionado TFA (304,17 mg, 2,67 mmol, 197,51 µl, 1 eq) e a mistura foi agitada a 20 °C durante 72 h para obter uma suspensão amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi particionada entre DCM (10 ml) e água (10 ml). A camada orgânica foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (10 ml x 2). A camada aquosa foi extraída com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml), secas com sulfato de sódio e concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (PE/EtOAC = 4/1-3/1) para obter BX-3 e BX-3a.
[1091] BX-3: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,51 (t, J = 2,38 Hz, 1H), 3,31 (dd, J = 15,94, 7,65 Hz, 1H), 3,47 (dd, J = 16,19, 5,65 Hz, 1H), 3,75 (s, 3H), 4,14 - 4,22 (m, 1H), 4,90 (d, J = 2,26 Hz, 2H), 5,94 (s, 1H), 7,14 - 7,31 (m, 1H), 7,23 (td, J = 7,47, 1,13 Hz, 1H), 7,27 - 7,31 (m, 1H), 7,38 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 8,18 (s, 1H).
[1092] BX-3a: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,54 (t, J = 2,51 Hz, 1H), 3,15 - 3,26 (m, 1H), 3,36 (dd, J = 15,69, 3,64 Hz, 2H), 3,78 (s, 3H), 4,07 (dd, J = 11,29, 4,52 Hz, 1H), 4,92 (d, J=2,51 Hz, 2H), 5,70 (s, 1H), 7,15 - 7,26 (m, 3H), 7,45 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 8,00 (s, 1H).
[1093] A uma solução de BX-3 (225,4 mg, 580,31 µmol, 1 eq) e Et3N (129,19 mg, 1,28 mmol, 177,70 µl, 2,2 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (131,08 mg, 1,16 mmol, 92,31 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 4h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre DCM (10 ml) e água (10 ml). A camada orgânica foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (10 ml x 2) e a camada aquosa extraída com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (PE/EtOAC = 5: 1-2: 1) para fornecer BX. LC-MS (m/z): 486,9 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,43 - 2,55 (m, 1H), 3,37 - 3,56 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,72 (s, 1H), 3,95 - 4,19 (m, 2H), 4,88 (s, 2H), 5,26 (s, 1H), 6,06 - 6,32 (m, 1H), 7,08 - 7,26 (m, 3H), 7,37 - 7,59 (m, 3H), 7,84 (s, 1H), 7,90 - 8,15 (m, 2H).
[1094] A uma solução de BX-3a (276,20 mg, 711,09 µmol, 1 eq) e
Et3N (179,89 mg, 1,78 mmol, 247,44 µl, 2,5 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (160,63 mg, 1,42 mmol, 113,12 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 4h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre DCM (10 ml) e água (10 ml), e a camada orgânica lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (10 ml x 2). A camada aquosa foi extraída com DCM (10 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas para obter o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (PE/EtOAC = 5: 1-3: 1) para obter BXa. LC-MS (m/z): 486,9 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 2,52 (t, J = 2,38 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H), 3,20 - 3,30 (m, 1H), 3,71 (d, J = 15,81 Hz, 1H), 4,19 - 4,27 (m, 1H), 4,32 - 4,41 (m, 1H), 4,89 (d, J = 2,51 Hz, 2H), 4,97 (d, J = 2,26 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 7,15 - 7,25 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 7,53 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,94 (d, J = 7,78 Hz, 2H). PROCEDIMENTO BY: SÍNTESE DO COMPOSTO BY E COMPOSTO
BYA
[1095] BY-1 (100 mg, 265,73 µmol, 1 eq) em DMF anidro (2 ml) foram adicionados HATU (151,56 mg, 398,60 µmol, 1,5 eq) e DIEA (68,69 mg, 531,47 µmol, 92,57 µl, 2 eq). Após 0,5h, BY-2 (63,80 mg, 292,31 µmol, 1,1 eq) foi adicionado e a mistura foi agitada a 20 °C durante 12h para obter uma solução vermelha. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc (20 ml) e água (10 ml). Foi adicionado HCl 1M (5 ml) e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). Os extratos combinados foram secos sobre sulfato de sódio e concentrados para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (PE/EtOAc = 3: 1-1: 2) para obter BY-3 bruto. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,45 - 3,50 (m, 8H), 3,52 - 3,61 (m, 8H), 6,53 - 6,61 (m, 4H), 6,70 (t, J = 2,51 Hz, 2H), 8,76 (dd, J = 4,39, 0,88 Hz, 2H), 10,18 (s, 2H).
[1096] A uma solução de BY-3 (250 mg, 433,61 µmol, 1 eq) em piridina (4 ml) foi adicionado 2-metilpropanoato de 2-metilpropanoila (205,78 mg, 1,30 mmol, 215,71 µl, 3 eq) e agitado a 20 °C por 48h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 10/1) indicou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi particionada entre DCM (10 ml) e água (10 ml). A mistura de reação foi então particionada entre EtOAc (10 ml) e água (5 ml). Foi adicionado HCl 1M (10 ml) e a camada aquosa extraída com EtOAC (10 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml), secas com sulfato de sódio e concentradas para obter o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (PE: EtOAC = 3: 1-0: 1) para obter BY-4. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,24 (d, J = 6,78 Hz, 12H), 2,84 (dt, J = 13,93, 6,84 Hz, 2H), 3,47 (s, 8H), 3,51 - 3,61 (m, 8H), 6,91 - 6,97 (m, 3H), 7,30 (d, J = 4,27 Hz, 1,64H), 7,46 - 7,56 (m, 0,64H), 7,81 (s, 0,36H), 8,14 - 8,25 (m, 1H), 8,29 (d, J = 8,03 Hz, 0,36H), 8,48 - 8,56 (m, 1,64H), 8,71 - 8,81 (m, 1H), 8,93 (s, 0,36H).
[1097] Uma mistura de BY-4 (80 mg, 111,62 µmol, 1 eq), -BX (62,27 mg, 133,94 µmol, 1,2 eq), CuSO4-5H2O (2,79 mg, 11,16 µmol, 0,1 eq) e ascorbato de sódio (11,06 mg, 55,81 mol, 0,5 eq) foram dissolvidos em THF (3 ml) e H2O (0,5 ml) sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi agitada a 40 °C durante 16 h para fornecer uma solução amarela. TLC (eluindo comEtOAc) indicou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 60% - 90%, 9,5 min) para obter BYa (uma mistura de 5,6-isômero). LC-MS (m/z): 1181,4 [M+H]+
[1098] Uma mistura de BY-4 (50 mg, 69,76 µmol, 1 eq), BXa (38,92 mg, 83,71 µmol, 1,2 eq), CuSO4-5H2O (1,74 mg, 6,98 µmol, 0,1 eq) e ascorbato de sódio (6,91 mg, 34,88 µmol, 0,5 eq) foi dissolvido em THF (3 ml) e H2O (0,5 ml) sob atmosfera de N2 e a mistura agitada a 40 °C durante 16 h para fornecer uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 0/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi particionada entre água (20 ml) e EtOAc (20 ml), e a camada aquosa extraída com EtOAc (20 ml x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas com sulfato de sódio e concentradas. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (DCM: MeOH = 1: 0-20: 1), produto esse que foi posteriormente purificado por HPLC prep (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 65% - 95%, 7,8 min) para obter BYa (mistura de 5,6-isômero). LC-MS (m/z): 1181,4 [M+H]+. PROCEDIMENTO BZ: SÍNTESE DO COMPOSTO BZ
[1099] Uma solução de BZ-1 (120,0 mg, 2,00 mmol, 1 eq) em SOCl2 (3,28 g, 27,57 mmol, 2 ml, 13,80 eq) foi agitada a 70 °C durante 1 h, depois arrefecida a 25 °C. NCS (533,67 mg, 4,00 mmol, 2 eq) e HCl (12 M, 4,20 µl, 2,52e-2 eq) foram adicionados. A mistura resultante foi agitada a 80 °C durante 1,5 horas para proporcionar uma mistura marrom. A mistura de reação foi evaporada para proporcionar BZ-2. O produto bruto foi usado na etapa seguinte sem qualquer purificação.
[1100] A uma solução de AB-4 (32 mg, 78,73 µmol, 1 eq) em CHCl3 (2 ml) foi adicionado NaHCO3 (65 mg, 773,75 µmol, 30,09 µl, 9,83 eq) e BZ-2 (90,50 mg, 787,26 µmol, 10 eq). A mistura resultante foi agitada a 25 °C durante 10 min para produzir uma mistura lamacenta. A mistura foi purificada por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 4: 1) para fornecer BZ. LC- MS (m/z): 507,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,55 (br s, 9H), 3,15 - 3,77 (m, 5H), 5,15 - 5,46 (m, 1H), 5,91 - 6,35 (m, 1H), 7,05 - 7,24 (m, 3H), 7,33 - 7,60 (m, 3H), 7,66 - 8,10 (m, 3H). PROCEDIMENTO CA: SÍNTESE DO COMPOSTO CA
[1101] À mistura de CA-1 (350 mg, 1,71 mmol, 1 eq) foi adicionado SOCl2 (1,15 g, 9,65 mmol, 0,7 ml, 5,63 eq) em CD3OD (3 ml) a 25 °C. A mistura resultante foi agitada a 60 °C durante 40 min para produzir uma mistura preta. LC-MS mostrou que a reação foi concluída. A reação foi evaporada até à secura e foram adicionados tolueno (10 ml) e Et3N (1 ml). A mistura foi agitada durante 30 min para proporcionar uma mistura marrom. A mistura foi filtrada e o filtrado evaporado até à secura para proporcionar CA-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,99 (dd, J = 14,31, 7,53 Hz, 1H), 3,22 (dd, J = 14,43, 4,89 Hz, 1H), 3,76 (dd, J = 7,65, 4,89 Hz, 1H), 6,93 - 7,18 (m, 2H), 7,25 - 7,33 (m, 1H), 7,47 - 7,66 (m, 1H), 8,06 (br s, 1H).
[1102] A uma mistura de CA-2 (200,0 mg, 903,87 µmol, 1 eq) e 4- formilbenzoato de terc-butila (186,41 mg, 903,87 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado TFA (41,22 mg, 361,55 µmol, 26,77 µl, 0,4 eq) a 25°C. A mistura resultante foi agitada a 45 °C durante 18 h para proporcionar uma mistura marrom. LCMS e TLC (PE: EA = 3: 1) mostraram que a reação foi concluída. NaHCO3 sat. aq. (50 ml) foi adicionado à mistura. A fase aquosa foi extraída com DCM (15 ml x 3). A fase orgânica combinada foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada in vácuo para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por prep-TLC (PE: EA = 3: 1) para fornecer CA-3. RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,53 - 1,64 (m, 9H), 3,05 - 3,19 (m, 1H), 3,23 - 3,38 (m, 1H), 3,96 (t, J = 6,02 Hz, 1H), 5,47 (s, 1H), 7,03 - 7,29 (m, 2H), 7,35 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,50 - 7,66 (m, 2H), 7,95 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1103] Preparação do composto CA. A uma mistura de CA-3 (50,0 mg, 122,10 µmol, 1 eq) e TEA (24,71 mg, 244,21 µmol, 33,99 µl, 2 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (20,69 mg, 183,15 µmol, 14,57 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 2 horas para proporcionar uma mistura marrom. LC-MS e TLC (PE: EA = 3: 1) mostraram que a reação foi concluída. A reação foi purificada por prep-TLC (PE: EA = 3: 1) para fornecer o composto CA. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,37 - 1,56 (m, 9H), 2,92 - 4,17 (m, 4H), 5,10 - 5,28 (m, 1H), 5,87 - 6,27 (m, 1H), 6,95 - 7,16 (m, 2H), 7,21 - 7,53 (m, 3H), 7,66 - 8,41 (m, 3H). LC-MS (m/z): 488,1 [M+H]+. PROCEDIMENTO CB: SÍNTESE DO COMPOSTO 80
[1104] A uma solução de AA-1 (428,01 mg, 1,96 mmol, 1 eq) e N- (4-formilfenil)acetamida (320 mg, 1,96 mmol, 1 eq) em DCM (15 ml) foi adicionado TFA (111,81 mg, 980,55 µmol, 72,60 µl, 0,5 eq) a 30 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 5%-35%, 9,5 min) para fornecer CB-2. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,05 (s, 2H), 2,10 (s, 1H), 3,19 (br dd, J = 15,43, 7,91 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), 4,46 (br s, 1H), 5,93 (br s, 1H), 7,03 - 7,17 (m, 2H), 7,57 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,64 (br d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,78 - 7,87 (m, 2H), 10,21 (br d, J = 9,79 Hz, 1H), 10,44 (br s, 1H), 10,81 (br d,
J = 17,57 Hz, 1H), 11,04 (s, 1H).
[1105] Preparação de 80. A uma solução de CB-2 (50 mg, 137,59 µmol, 1 eq), Et3N (41,77 mg, 412,76 µmol, 57,45 µl, 3 eq) em DCM (3 ml) a 0 °C foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (23,31 mg, 206,38 µmol, 16,41 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi purificada por HPLC prep (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 32% - 62%, 9,5 min) para obter 80. LC-MS (m/z): 462,0 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,13 (br s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,78 - 3,93 (m, 1H), 4,11 (br d, J = 12,55 Hz, 1H), 5,28 (br d, J = 16,81 Hz, 1H), 6,11 (br s, 1H), 7,07 - 7,18 (m, 2H), 7,28 - 7,40 (m, 3H), 7,28 - 7,40 (m, 3H), 7,52 (br d, J = 8,03 Hz, 1H), 8,14 (br s, 1H). PROCEDIMENTO CC: SÍNTESE DO COMPOSTO CC
[1106] A uma mistura de CA-2 (200,0 mg, 903,87 µmol, 1 eq) e 4- formilbenzoato de metila (148,38 mg, 903,87 µmol, 1 eq) em DCM (4 ml) foi adicionado TFA (41,22 mg, 361,55 µmol, 26,77 µl, 0,4 eq) a 25 °C. A mistura resultante foi agitada a 45 °C durante 48 horas para proporcionar uma mistura marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta pela adição de NaHCO3 sat. aq. 50 ml a 25 °C, e depois extraída com EA 45ml (15 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NH4Cl sat. aq. 45 ml, seco sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi então purificado por prep-TLC (PE: EA = 3: 1) para proporcionar CC-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,05 - 3,22 (m, 1H), 3,22 - 3,38 (m, 1H), 3,23 (br s, 1H), 3,87 - 4,00 (m, 4H), 5,47 (s, 1H), 7,09 - 7,21 (m, 1H), 7,23 - 7,28 (m, 1H), 7,37 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,53 - 7,68 (m, 2H), 7,99 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1107] A uma mistura de CC-2 (40,0 mg, 108,87 µmol, 1 eq) e TEA (22,03 mg, 217,74 µmol, 30,31 µl, 2 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (18,44 mg, 163,30 µmol, 12,99 µl, 1,5 eq) a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 0 °C durante 1 hora para proporcionar uma mistura marrom. A reação foi purificada por prep-TLC (PE: EA = 3: 1) para fornecer CC. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,04 - 4,20 (m, 7H), 5,01 - 5,31 (m, 1H), 5,88 - 6,34 (m, 1H), 6,94 - 7,22 (m, 3H), 7,24 - 7,52 (m, 3H), 7,57 - 8,08 (m, 3H). LC-MS (m/z): 444,9 [M+H]+. PROCEDIMENTO CD: SÍNTESE DO COMPOSTO 81
[1108] Preparação do composto CD-2. A uma solução de AB-2 (1 g, 6,66 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foram adicionados DIEA (1,72 g, 13,32 mmol, 2,32 ml, 2 eq) e HATU (3,80 g, 9,99 mmol, 1,5 eq), seguido por ciclopropil metanamina (568,47 mg, 7,99 mmol, 1,2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: éter de petróleo: acetato de etilo = 1: 1, SiO2) indicou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi diluída com H2O (100 ml) e extraiu-se com MTBE (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto, que foi, então, purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 10/1 a 5/1) para obter CD-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) ppm 0,25 - 0,31 (q, J = 4,94 Hz, 2H), 0,54 - 0,62 (m, 2H), 1,05 - 1,09 (quint, J = 7,64, 7,64, 7,64, 7,64, 4,80, 4,80 Hz, 1H), 1,25 (t, J = 7,15 Hz, 1H), 3,32 - 3,35 (dd, J = 7,15, 5,40 Hz, 2H), 4,09 - 4,14 (q, J = 7,03 Hz, 1H), 6,36 (br s, 1H), 7,90 - 7,97 (m, 4H), 10,05 - 10,11 (m, 1H).
[1109] Preparação do composto CD-3. A uma solução de CD-2 (200 mg, 984,07 µmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foram adicionados (2R)-2- amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (214,78 mg, 984,07 µmol, 1 eq) e TFA (56,10 mg, 492,04 µmol, 36,43 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 10 h para fornecer uma solução amarela. TLC (eluindo com: éter de petróleo: acetato de etilo = 1: 2, SiO2) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 2) para fornecer CD-3 e o isômero cis correspondente.
[1110] CD-3 (isômero trans): RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,25 - 0,28 (q, J = 4,85 Hz, 2H), 0,53 - 0,57 (m, 2H), 0,99 - 1,10 (m, 1H), 1,22 - 1,28 (m, 3H), 2,80 (s, 3H), 3,11 - 3,26 (m, 2H), 3,28 - 3,31 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,93 (t, J = 6,02 Hz, 1H), 4,10 - 4,15 (q, J = 7,28 Hz, 1H), 6,23 (br t, J = 4,89 Hz, 1H), 7,13 - 7,17 (qd, J = 7,53, 6,02 Hz, 2H), 7,24 (s, 1H), 7,32 - 7,34 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,55 - 7,57 (d, J = 7,28 Hz, 1H), 7,69 - 7,71 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,88 (s, 1H).
[1111] CD-3a (isômero cis): RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,27 - 0,30 (q, J = 4,85 Hz, 2H), 0,55 - 0,60 (m, 2H), 1,01 - 1,12 (m, 1H), 1,25 (q, J = 7,03 Hz, 1H), 2,53 (br s, 1H), 2,98 - 3,28 (m, 2H), 3,29 - 3,35 (m, 2H), 3,72 (br d, J = 7,28 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,99 (dd, J = 11,04,
4,02 Hz, 1H), 4,12 (q, J = 7,11 Hz, 1H), 6,21 (br s, 1H), 7,14 (tt, J = 7,06, 5,36 Hz, 2H), 7,22 (br d, J = 7,03 Hz, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,55 (br d, J = 6,53 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,03 Hz, 2H).
[1112] Preparação de 81. A uma solução de CD-3 (50 mg, 123,92 µmol, 1 eq, trans) em CHCl3 (4 ml) foram adicionados NaHCO3 (104,10 mg, 1,24 mmol, 48,20 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (69,98 mg, 619,62 µmol, 49,28 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: éter de petróleo: acetato de etilo = 1: 1, SiO2) indicou que a reação foi completada. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e depois extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto, que foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 2) para obter 81. LC-MS (m/z): 502,1 [M+Na] +. RMN de 1H (400 MHz, MeOD) δ ppm 0,27 (br d, J = 4,52 Hz, 2H), 0,51 (br d, J = 6,78 Hz, 2H), 0,88 - 0,95 (m, 1H), 1,08 (br s, 1H), 3,22 (br d, J = 6,02 Hz, 2H), 3,50 (br d, J = 1,51 Hz, 1H), 3,61 (br s, 3H), 3,74 (br d, J = 14,56 Hz, 1H), 4,02 - 4,68 (m, 1H), 4,02 - 4,30 (m, 1H), 5,09 (br s, 1H), 5,42 (br s, 1H), 6,11 (br s, 1H), 6,38 (br s, 1H), 7,01 - 7,16 (m, 2H), 7,21 - 7,33 (m, 2H), 7,47 - 7,62 (m, 3H), 7,72 - 7,85 (m, 2H). PROCEDIMENTO CE: SÍNTESE DO COMPOSTO 82
[1113] Preparação do composto CE-2. A uma solução de ciclopropilmetanamina (300,29 mg, 4,22 mmol, 1,05 eq) e TEA (1,22 g, 12,06 mmol, 1,68 ml, 3 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado AQ-1 (1 g, 4,02 mmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (PE: EtOAc = 3: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com solução de HCl 1N (10 ml) e separada. A camada orgânica foi lavada com salmoura (5 ml), secou-se sobre Na2SO4, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 3: 1) para fornecer CE-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,20 - 8,16 (m, 2H), 7,97 - 7,93 (m, 2H), 4,68 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 4,42 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,87 (dd, J = 5,9, 7,2 Hz, 2H), 1,42 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 0,87 (tquin, J = 4,8, 7,6 Hz, 1H), 0,52 - 0,44 (m, 2H), 0,10 (q, J = 5,0 Hz, 2H).
[1114] Preparação do composto CE-3. A uma suspensão de LiAlH 4 (162,03 mg, 4,27 mmol, 2,4 eq) em THF (10 ml) foi adicionado CE-2 gota a gota (504 mg, 1,78 mmol, 1 eq) em THF (5 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 6h para fornecer uma suspensão branca. TLC (PE: EtOAc = 3: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi desativada com H2O (165ul) e 165 ml de solução de NaOH a 15% a 0 °C. A mistura foi agitada a 15 °C durante 10 minutos antes da filtração. O filtrado foi seco sobre Na2SO4 e concentrado sob pressão reduzida para obter CE-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,82 (m, 2H), 7,48 (m, 2H), 4,78 (s, 2H), 3,77 - 3,71 (m, 1H), 2,81 (m, 2H), 2,43 (s l, 1H), 0,87 (m, 1H), 0,49 - 0,39 (m, 2H), 0,14 - 0,05 (m, 2H).
[1115] Preparação do composto CE-4. A uma solução de CE-3 (282,3 mg, 1,17 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado MnO2 (508,53 mg, 5,85 mmol, 5 eq). A mistura foi aquecida a refluxo durante 16 h para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EtOAc = 2: 1) mostrou que a reação estava concluída. LCMS mostrou que nenhum MS desejado foi encontrado. A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para fornecer CE-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,11 (s, 1H), 8,08 - 8,01 (m, 4H), 4,83 (m, 1H), 2,89 (m, 2H), 1,74 - 1,59 (m, 3H), 0,95 - 0,81 (m, 1H), 0,51 - 0,45 (m, 2H), 0,16 - 0,07 (m, 2H).
[1116] Preparação do composto CE-5. A uma solução de CE-4 (87,71 mg, 366,55 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados (2R)- 2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (80 mg, 366,55 µmol, 1 eq) e TFA (20,90 mg, 183,27 µmol, 13,57 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 16 h para obter uma suspensão branca. TLC (PE: EtOAc = 1: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 saturado e depois extraída com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 3: 1) para fornecer dois produtos, um dos quais era CE- 5 e o outro era o isômero cis.
[1117] Preparação de 82. A uma solução de CE-5 (36,5 mg, 83,04 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foram adicionados TEA (25,21 mg, 249,13 µmol, 34,68 µl, 3 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (18,76 mg, 166,09 µmol, 13,21 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para fornecer um resíduo, que foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 1: 1) para dar 82. LC-MS (m/z): 538,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,95 (br s, 2H), 7,80 (br s, 1H), 7,59 - 7,37 (m, 3H), 7,24 - 7,10 (m, 3H), 6,12 (br s, 1H), 5,38 - 5,22 (m, 1H), 4,51 (br s, 2H), 4,20 - 3,92 (m, 2H), 3,91 - 3,69 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,57 - 3,30 (m, 1H), 2,07 (br s, 6H). PROCEDIMENTO CF: SÍNTESE DO COMPOSTO 83
[1118] Preparação do composto CF-2. A uma solução de CF-1 (500 mg, 4,06 mmol, 1 eq) em DCE (29 ml) foram adicionados ciclopropanocarbaldeído (284,57 mg, 4,06 mmol, 303,38 µl, 1 eq) e NaBH(OAc)3 (1,29 g, 6,09 mmol, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada a pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com EA (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 10: 1) para obter CF-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,19 - 7,02 (m, 2H), 6,75 - 6,59 (m, 2H), 4,55 (s, 2H), 2,97 - 2,92 (m, 2H), 1,28 - 1,09 (m, 1H), 0,57 - 0,54 (m, 2H), 0,26 - 0,23 (m, 2H).
[1119] Preparação do composto CF-3. A uma solução de CF-2 (1 g, 5,64 mmol, 1 eq) em MeCN (10 ml) foram adicionados Boc2O (2,46 g, 11,28 mmol, 2,59 ml, 2 eq) e TEA (570,91 mg, 5,64 mmol, 785,30 µl, 1 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12h para fornecer uma mistura incolor. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi extinta com H2O (50 ml) e extraída com EA (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto, o qual foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 5: 1) para obter CF-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,22 - 7,20 (m, 2H), 7,11 - 7,09 (m, 2H), 4,58 - 4,42 (m, 2H), 3,38 - 3,33 (m, 2H), 1,58 - 1,55 (m, 1H), 0,89 - 0,87 (m, 1H), 0,32 - 0,28 (m, 2H), 0,01 - 0,00 (m, 2H).
[1120] Preparação do composto CF-4. A uma solução de CF-3 (890 mg, 3,21 mmol, 1 eq) em DCM (25 ml) foi adicionado MnO2 (1,39 g, 16,04 mmol, 5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 12h para obter uma solução preta. LCMS mostrou que a reação foi concluída e filtrada por celite. As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 1: 0 a 5: 1) para obter CF-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 9,98 (s, 1H), 7,87 - 7,83 (m, 2H), 7,43 - 7,26 (m, 2H), 3,59 - 3,57 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,04 - 1,00 (m, 1H), 0,47 - 0,42 (m, 2H), 0,17 - 0,13 (m, 2H).
[1121] Preparação do composto CF-5. A uma solução de CF-4 (100 mg, 363,18 µmol, 1 eq) em DCM (8 ml) foram adicionados (2R)-2-amino- 3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (79,27 mg, 363,18 µmol, 1 eq) e TFA (20,71 mg, 181,59 µmol, 13,45ul, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para obter CF-5 (trans) e CF-5a (isômero cis). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,61 - 7,55 (m, 2H), 7,24 - 7,15 (m, 6H), 5,42 (s, 1H), 4,00 - 3,98 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,48 -3,46 (m, 2H), 3,26 - 3,18 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,01 - 0,99 (m, 1H), 0,44 - 0,41 (m, 2H), 0,16 - 0,12 (m, 2H).
[1122] Preparação de CF-6. A uma solução de CF-5 (50 mg, 105,14 µmol, 1 eq) em CHCl3 (6 ml) foi adicionado NaHCO3 (88,32 mg, 1,05 mmol, 40,89 µl, 10 eq), seguido por uma solução de cloreto de 2- cloroacetila (17,81 mg, 157,70 µmol, 12,54 ml, 1,5 eq) em CHCl3 (6 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 45 min para obter uma solução amarela. TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) e LCMS mostraram que a reação estava completa. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer CF-
6. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[1123] Preparação de 83. CF-6 (65 mg, 117,74 µmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/EtOAc (4 M, 10 ml, 339,73 eq) e a mistura foi agitada a 20 °C durante 2 h para obter uma solução rosa. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 3: 2) para fornecer 83. LC-MS (m/z): 474,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD): δ 7,24 - 7,22 (m, 1H), 7,03 - 6,96 (m, 1H), 6,94 - 6,85 (m, 2H), 6,80 - 6,76 (m, 2H), 6,42 - 6,40 (m, 2H), 5,93 (brs, 1H), 4,28 - 4,25 (m, 1H), 3,40 (s, 3H), 2,70 - 2,69 (m, 2H), 0,83 - 0,80 (m, 1H), 0,29 - 0,27 (m, 2H), 0,00 - 0,01 (m, 2H). PROCEDIMENTO CG: SÍNTESE DO COMPOSTO 84
[1124] Preparação do composto CG-2. A uma solução de GC-1 (200 mg, 2,00 mmol, 1 eq) em THF (10 ml) foi adicionado LiAlH4 (151,64 mg, 4,00 mmol, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2h para obter uma solução branca. TLC (eluindo com: Éter de petróleo: Acetato de etila = 1: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação adicionou-se H2O (0,15 ml) e NaOH (aq, 15%, 0,15 ml) e H2O (0,45 ml). As camadas orgânicas foram filtradas com terra de diatomáceas e secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer CG-2. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,30 - 0,43 (m, 4H), 1,15 (s, 3H), 1,26 (t, J = 7,15 Hz, 1H), 3,39 (s, 2H).
[1125] Preparação do composto CG-3. A uma solução de AB-2 ((250 mg, 1,67 mmol, 1 eq) em DMF (12 ml) foram adicionados DIEA (645,65 mg, 5,00 mmol, 870,15 µl, 3 eq) e HBTU (1,01 g, 2,66 mmol, 1,6 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 5 min, seguida pela adição de CG-2 (157,77 mg, 1,83 mmol, 177,87 µl, 1,1 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 h para obter uma solução marrom. TLC (eluindo com; éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com H2O (150 ml) e extraída com EA (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto, que foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 50/1 a 5/1) para obter CG-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,35 - 0,54 (m, 4H), 1,16 (s, 3H), 4,09 (s, 2H), 7,89 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 8,16 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 10,00 - 10,08 (m, 1H).
[1126] Preparação do composto CG-4. A uma solução de CG-3 (121 mg, 554,42 µmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foram adicionados (2R)- 2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (121,00 mg, 554,42 µmol, 1 eq) e TFA (31,61 mg, 277,21 µmol, 20,52 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 12h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: Éter de petróleo: Acetato de etila = 2: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto, que foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para obter CG-4 e CG-4a.
[1127] CG-4 (isômero trans): RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,40 - 0,58 (m, 4H), 1,20 (s, 3H), 3,12 - 3,33 (m, 2H), 3,70 - 3,76 (m, 3H), 3,94 - 4,00 (m, 1H), 4,09 - 4,15 (m, 2H), 5,49 (s, 1H), 7,16 (qd, J = 7,53, 6,02 Hz, 2H), 7,24 (s, 1H), 7,39 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,55 - 7,63 (m, 2H), 8,03 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1128] CG-4a (isômero cis): RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,40 - 0,60 (m, 4H), 1,21 (s, 3H), 2,99 - 3,29 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,96 - 4,04 (m, 1H), 4,13 (s, 2H), 5,33 (s, 1H), 7,10 - 7,19 (m, 2H), 7,20 - 7,24 (m, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,49 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,53 - 7,57 (m, 1H), 8,07 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1129] Preparação de 84. A uma solução de CG-4 (44 mg, 105,14 µmol, 1 eq) em CHCl3 (5 ml) foram adicionados NaHCO3 (88,33 mg, 1,05 mmol, 40,89 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (35,62 mg, 315,42 µmol, 25,09 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: Éter de petróleo: Acetato de etila = 2: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. Adicionou- se H2O (10 ml) à mistura de reação e depois extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto, que foi purificado por prep-TLC (eluindo com: Éter de petróleo: acetato de etila = 1: 2) para obter 84. LC-MS (m/z): 517,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,27 - 0,50 (m, 4H), 1,11 (s, 3H), 3,15 - 3,51 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,65 (br s, 1H), 4,01 (br s, 4H), 5,21 (br d, J = 12,55 Hz, 1H), 6,00 - 6,23 (m, 1H), 7,02 - 7,17 (m, 3H), 7,30 - 7,52 (m, 3H), 7,60 (s l, 1H), 7,93 (br s, 2H). PROCEDIMENTO CH: SÍNTESE DO COMPOSTO 85
[1130] Preparação do composto CH-2. A uma suspensão de AB-2 (1 g, 6,66 mmol, 1 eq) em DMF (40 ml) foram adicionados DIEA (2,58 g, 19,98 mmol, 3,48 ml, 3 eq) e HBTU (4,04 g, 10,66 mmol, 1,6 eq). A mistura de reação foi agitada a 25 °C durante 5 min, seguida pela adição de ciclobutilmetanol (631,08 mg, 7,33 mmol, 691,22 µl, 1,1 eq). A mistura de reação foi agitada a 25 °C durante 16 h para obter uma solução vermelha. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, de 0% a 30% de EtOAc em PE) para obter CH-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,81 - 2,00 (m, 4H), 2,07 - 2,19 (m, 2H), 2,76 (dquin, J = 14,79, 7,34, 7,34, 7,34, 7,34 Hz, 1H), 4,32 (d, J = 6,53 Hz, 2H), 7,92 - 7,96 (m, 2H), 8,18 (d, J = 8,28 Hz,
2H), 10,09 (s, 1H).
[1131] Preparação do composto CH-3. Para uma solução de (2R)- 2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanoato de metila (300,01 mg, 1,37 mmol, 1 eq) e CH-2 (300 mg, 1,37 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado TFA (78,37 mg, 687,29 µmol, 50,89 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h. TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi purificada por cromatografia em coluna (SiO2, 0 a 40% de EA em PE) para obter CH-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,26 (s, 1H), 1,80 - 2,00 (m, 5H), 2,05 (s, 1H), 2,07 - 2,15 (m, 2H), 2,74 (dt, J = 14,74, 7,31 Hz, 1H), 3,11 - 3,19 (m, 1H), 3,24 - 3,32 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,95 (t, J = 6,02 Hz, 1H), 4,12 (q, J = 7,28 Hz, 1H), 4,28 (d, J = 6,53 Hz, 2H), 5,46 (s, 1H), 7,11 - 7,20 (m, 2H), 7,24 (s, 1H), 7,36 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 7,28 Hz, 1H), 7,67 (br s, 1H), 7,99 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1132] Preparação de 85. A uma solução de CH-3 (50 mg, 119,48 µmol, 1 eq) e Et3N (36,27 mg, 358,44 µmol, 49,89 µl, 3 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (20,24 mg, 179,22 µmol, 14,25 µl, 1,5 eq). A reação foi agitada durante 0,5 h a 0 °C para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para obter 85. LC-MS (m/z): 495,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,80 - 1,36 (m, 1H), 1,77 - 1,98 (m, 4H), 1,99 - 2,14 (m, 2H), 2,65 - 2,77 (m, 1H), 3,13 - 3,55 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,68 - 3,90 (m, 1H), 4,09 (br dd, J = 16,31, 9,54 Hz, 2H), 4,25 (br s, 2H), 5,26 (br s, 1H), 6,05 - 6,31 (m, 1H), 7,07 - 7,24 (m, 3H), 7,41 (br s, 2H), 7,53 (br d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,71 - 7,86 (m, 1H), 7,96 (br s, 2H). PROCEDIMENTO CI: SÍNTESE DO COMPOSTO 86
[1133] Preparação do composto CI-2. A uma solução de AB-2 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foram adicionados Cs2CO3(1,09 g, 3,33 mmol, 1 eq) e bromometilciclopentano (1,36 g, 8,33 mmol, 2,5 eq). A mistura foi agitada aquecida a 80 °C durante 16 horas para obter uma suspensão marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi arrefecida com H2O (50 ml) e extraiu-se com MTBE (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto, que foi purificado por uma coluna flash (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 1: 1) para obter CI-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,22 - 10,01 (m, 1H), 8,20 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,95 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,25 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 2,36 (spt, J = 7,6 Hz, 1H), 2,05-1,76 (m, 2H), 1,67-1,25 (m, 6H).
[1134] Preparação do composto CI-3. A uma solução de CI-2 (100 mg, 430,53 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados metila 1-A (93,96 mg, 430,53 µmol, 1 eq) e TFA (24,54 mg, 215,26 µmol, 15,94 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 h. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostrou que a reação foi concluída. A solução de reação foi diluída com DCM (40 ml), depois lavada com NaHCO3 sat. aq. (40 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi,
então, purificado por uma coluna flash (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 1: 1) para obter CI-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,62 - 7,48 (m, 2H), 7,39 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,21 - 7,09 (m, 2H), 5,49 (s, 1H), 4,21 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 3,96 (s, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,33 - 3,12 (m, 2H), 2,34 (quin, J = 7,4 Hz, 1H), 1,82 (br d, J = 8,0 Hz, 2H), 1,63 (br dd, J = 7,2, 13,7 Hz, 4H), 1,42 - 1,23 (m, 1H).
[1135] Preparação de 86. A uma solução de CI-3 (73 mg, 168,78 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados TEA (170,79 mg, 1,69 mmol, 234,93 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (57,19 mg, 506,35 µmol, 40,27 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 0 °C a 25 °C durante 2 h para fornecer uma suspensão marrom. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostraram que a reação foi concluída. O produto bruto foi purificado por uma coluna flash (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 1: 1) para obter 86. LC-MS (m/z): 509,1 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, METANOL-d4) δ = 8,25 - 7,79 (m, 2H), 7,70 - 7,41 (m, 3H), 7,35 - 6,95 (m, 3H), 6,48 - 6,03 (m, 1H), 5,54 - 5,02 (m, 1H), 4,67 - 4,35 (m, 1H), 4,33 - 4,00 (m, 1H), 4,35 - 3,97 (m, 2H), 3,80 - 3,41 (m, 5H), 2,45 - 2,20 (m, 1H), 1,83 (br d, J = 6,3 Hz, 2H), 1,74 - 1,49 (m, 1H), 1,76 - 1,48 (m, 3H), 1,48 - 1,21 (m, 2H). PROCEDIMENTO CJ: SÍNTESE DO COMPOSTO 87
[1136] Para uma solução de BT-2 (54,98 mg, 269,23 µmol, 1 eq) e (2R)-2-amino-3-(5-bromo-1H-indol-3-il)propanoato de metila (80 mg, 269,23 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TFA (15,35 mg, 134,61 µmol, 9,97 µl, 0,5 eq). A mistura foi aquecida a 40 °C durante 16 h para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para fornecer dois produtos, um dos quais era CJ-2 e outro dos quais era o isômero cis. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,07 - 8,01 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,68 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,42 - 7,35 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,25 (dd, J = 2,0, 8,5 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 5,48 (s, 1H), 4,16 (m, 2H), 4,00 - 3,93 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,24 (ddd, J = 1,1, 5,5, 15,4 Hz, 1H), 3,13 (ddd, J = 1,4, 6,0, 15,4 Hz, 1H), 2,05 (s, 1H), 1,26 - 1,21 (m, 1H), 0,64 - 0,58 (m, 2H), 0,40 - 0,33 (m, 2H).
[1137] Preparação de 87. A uma solução de CJ-2 (25 mg, 51,72 µmol, 1 eq) e TEA (15,70 mg, 155,17 µmol, 21,60 µl, 3 eq) em CH2Cl2 (2 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (11,68 mg, 103,44 µmol, 8,23 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para obter um resíduo. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para obter 87. LC-MS (m/z): 582,9 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,13 - 7,88 (m, 3H), 7,66 (s, 1H), 7,53 - 7,33 (m, 2H), 7,23 (m, 1H), 7,07 (br d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,30 - 6,04 (m, 1H), 5,45 - 5,18 (m, 1H), 4,98 - 4,69 (m, 1H), 4,19 - 3,97 (m, 4H), 3,66 -3,4 (m, 4H), 1,26 (br s, 1H), 0,59 (m, 2H), 0,33 (m, 2H). PROCEDIMENTO CK: SÍNTESE DO COMPOSTO 88
[1138] Para uma solução de AA-2 (44,20 mg, 269,23 µmol, 1 eq) e
(2R)-2-amino-3-(5-bromo-1H-indol-3-il)propanoato de metila (80 mg, 269,23 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TFA (15,35 mg, 134,61 µmol, 9,97 µl, 0,5 eq). A mistura foi aquecida a 40 °C durante 16 h para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para fornecer dois produtos, um dos quais era CK-2, e o outro dos quais era o isômero cis. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,04 - 7,99 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,69 (m, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,40 - 7,36 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,25 (dd, J = 2,0, 8,8 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,48 (s, 1H), 3,99 - 3,91 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 3,24 (ddd, J = 1,3, 5,5, 15,3 Hz, 1H), 3,14 (ddd, J = 1,4, 6,0, 15,4 Hz, 1H).
[1139] Preparação de 88. A uma solução de CK-2 (28 mg, 63,16 µmol, 1 eq) em CH2Cl2 (2 ml) foram adicionados TEA (19,17 mg, 189,49 µmol, 26,38 µl, 3 eq) e cloreto de 2-cloroacetil (14,27 mg, 126,33 µmol, 10,05 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada até um resíduo, que foi então purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para obter 88. LC-MS (m/z): 549,2 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,13 - 7,88 (m, 3H), 7,66 (s, 1H), 7,53 - 7,33 (m, 2H), 7,23 (m, 1H), 7,07 (m, 1H), 6,30 - 6,04 (m, 1H), 5,45 - 5,18 (m, 1H), 4,98 - 4,69 (m, 1H), 4,19 - 3,75 (m, 5H), 3,66 - 3,4 (m, 3H). PROCEDIMENTO CL: SÍNTESE DO COMPOSTO 89
[1140] Preparação do composto CL-2. A uma solução de AB-2 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq) em DMF (20 ml) foram adicionados CS2CO3 (1,09 g, 3,33 mmol, 1 eq) e bromometilciclohexano (1,47 g, 8,33 mmol, 1,16 ml, 2,5 eq). A mistura foi agitada com aquecimento a 80 °C durante 16 horas para obter uma suspensão marrom. LCMS mostrou que o produto desejado foi encontrado, mas que AB-2 permaneceu. A agitação continuou a 80 °C por mais 16 horas. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (50 ml), extraída com MBTE (30 ml x 3), as camadas orgânicas secas com Na2SO4 e, em seguida, concentradas para obter o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 1: 1) para fornecer CL-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,10 (s, 1H), 10,28 - 9,84 (m, 1H), 10,59 - 9,77 (m, 1H), 8,27 - 7,91 (m, 4H), 4,17 (br d, J = 6,3 Hz, 2H), 1,98 - 0,96 (m, 11H).
[1141] Preparação do composto CL-3. A uma solução de CL-2 (151,6 mg, 615,51 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados TFA (35,09 mg, 307,75 µmol, 22,79 µl, 0,5 eq) e AA-1. A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 horas para obter uma suspensão marrom. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostrou que a reação foi concluída. A solução de reação foi diluída com DCM (40 ml) e, em seguida, lavada com NaHCO3 sat. aq. (40 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por TLC-prep (SiO2, PE: AcOEt = 2: 1) para obter CL-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,63 - 7,48 (m, 1H), 7,38 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,26 (s, 5H), 5,72 - 5,19 (m, 1H), 4,24 - 3,80 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 3,36 - 3,06 (m, 1H), 2,05 (s, 1H), 1,93-1,58 (m, 4H), 1,51 - 1,17 (m, 4H), 1,12 - 0,84 (m, 2H).
[1142] Preparação de 89. A uma solução de CL-3 (174,00 mg, 389,67 µmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foram adicionados TEA (394,30 mg, 3,90 mmol, 542,37 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (44,01 mg, 389,67 µmol), 30,99 µl, 1 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 2h. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostraram que a reação foi concluída. A solução de reação foi diluída com DCM (40 ml) e, em seguida, lavada com NaHCO3 sat. aq. (40 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto em bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EtOAc = 2: 1) para obter 89. LC-MS (m/z): 523,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,99 - 7,65 (m, 2H), 7,50 - 7,24 (m, 2H), 7,15 - 7,00 (m, 1H), 6,24 - 5,94 (m, 1H), 5,19 (br s, 1H), 4,16 - 3,70 (m, 3H), 3,66 - 3,53 (m, 3H), 1,85 - 1,49 (m, 6H), 1,29 - 0,82 (m, 5H). PROCEDIMENTO CM: SÍNTESE DO COMPOSTO 90
[1143] Preparação do composto BZ-2. Uma solução de BZ-1 (160 mg, 2,50 mmol, 1 eq) em SOCl2 (4,10 g, 34,46 mmol, 2,50 ml, 13,8 eq) foi agitada a 70 °C durante 1 h, em seguida, resfriada a 25 °C. NCS (666,87 mg, 4,99 mmol, 2 eq) e HCl (12 M, 5,24 µl, 2,52e-2 eq) foram adicionados e a mistura resultante agitada a 80 °C durante 1,5 h para produzir uma mistura marrom. A mistura de reação foi evaporada para proporcionar BZ-2. O produto foi usado na próxima etapa sem qualquer purificação.
[1144] Preparação do composto 90. A uma solução de BZ-2 (50 mg, 137,21 µmol, 1 eq) e Et3N (27,77 mg, 274,43 µmol, 38,20 µl, 2 eq) em DCM (3 m,) foi adicionado AB-4 (157,73 mg, 1,37 mmol, 10 eq). A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 16h para obter uma solução marrom, seguida de agitação a 25 °C durante 10 min para proporcionar uma mistura lamacenta. O produto bruto foi purificado por Prep-TLC (DCM/EA = 10/1) para obter 90. LC-MS (m/z): 443,4 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 3,51 - 3,57 (m, 3H), 3,81 (s, 3H), 4,90 (s, 1H), 4,71 (s, 1H), 5,41 (s, 1H), 5,99 - 6,46 (m, 1H), 6,94 - 7,10 (m, 2H), 7,19 - 7,34 (m, 1H), 7,49 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,53 - 7,72 (m, 2H), 7,81 - 8,00 (m, 2H), 10,91 - 11,19 (m, 1H). PROCEDIMENTO CN: SÍNTESE DO COMPOSTO 91
[1145] Preparação do composto CN-2. A uma solução de CN-1 (100 mg, 450,01 µmol, 1 eq) em MeOH (5 ml) foi adicionado SOCl2 (267,69 mg, 2,25 mmol, 163,23 µl, 5 eq) a 45 °C. A reação foi agitada a 45 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: `PE/EA = 0/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada e diluída com EA (10 ml) e lavada com solução de NaHCO3 (10 ml x 3). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob pressão reduzida para obter CN-2.
[1146] Preparação dos compostos CN-3 e CN-3a. A uma solução de CN-2 (50 mg, 211,65 µmol, 1 eq) e 4-formilbenzoato de metila (38,22 mg, 232,81 µmol, 1,1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado TFA (12,07 mg, 105,82 µmol, 7,84 µl, 0,5 eq) a 25 °C. A reação foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 15-45 (8 min)% - 45%, 9,5 min) para obter CN-3 e CN- 3a.
[1147] Preparação de 91a. A uma solução de CN-3a (10 mg, 26,15 µmol, 1 eq) e Et3N (7,94 mg, 78,46 µmol, 10,92 µl, 3 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (4,43 mg, 39,23 µmol, 3,12 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para fornecer 91a. LC-MS (m/z): 459,4[M+H]+
[1148] Preparação de 91. A uma solução de CN-3 (10 mg, 26,15 µmol, 1 eq) e Et3N (7,94 mg, 78,46 µmol, 10,92 µl, 3 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (4,43 mg, 39,23 µmol, 3,12 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para obter 91. LC-MS (m/z): 459,4 [M+H]+. PROCEDIMENTO CO: SÍNTESE DO COMPOSTO 93
[1149] Preparação do composto CO-2. A uma solução de CO-1 (100 mg, 418,99 µmol, 1 eq) em MeOH (5 m,) foi adicionado SOCl2 (249,24 mg, 2,09 mmol, 151,97 µl, 5 eq). A reação foi agitada a 45 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (extinta com água, eluindo com: PE/EA = 0/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada e depois diluída com EA (10 ml) e lavada com solução de NaHCO3 (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 anidro e concentradas sob pressão reduzida para obter CO-2.
[1150] Preparação dos compostos CO-3 e CO-3a. A uma solução de CO-2 (90 mg, 356,16 µmol, 1 eq) e 4-formilbenzoato de metila (64,31 mg, 391,78 µmol, 1,1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado TFA (20,31 mg, 178,08 µmol, 13,19 µl, 0,5 eq) a 25 °C. A reação foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A reação foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 17% - 47%, 9,5 min) para fornecer CO-3 e CO-3a.
[1151] Preparação de 93a. A uma solução de CO-3a (20 mg, 50,15 µmol, 1 eq) e Et3N (15,22 mg, 150,44 µmol, 20,94 µl, 3 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetil (8,50 mg, 75,22 µmol, 5,98 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para obter 93a. LC-MS (m/z): 475,4 [M+H]+
[1152] Preparação de 93. A uma solução de CO-3 (20 mg, 50,15 µmol, 1 eq) e Et3N (15,22 mg, 150,44 µmol, 20,94 µl, 3 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (8,50 mg, 75,22 µmol, 5,98 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep- TLC para obter 93. LC-MS (m/z): 475,4 [M+H]+. PROCEDIMENTO CP: SÍNTESE DO COMPOSTO 95
[1153] Preparação do composto CO-2. A uma solução de CO-1 (100,00 mg, 353,21 µmol, 1 eq) em MeOH (5 ml) foi adicionado SOCl 2 (210,10 mg, 1,77 mmol, 128,11 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A solução de reação foi concentrada, diluída com DCM (5 ml) e lavada com solução de NaHCO3 (5 ml x 3). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob pressão reduzida para obter CO-2.
[1154] Preparação do composto CO-3. A uma solução de CO-2 (75,00 mg, 252,40 µmol, 1 eq) e 4-formilbenzoato de metila (41,43 mg, 252,40 µmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado TFA (14,39 mg, 126,20 µmol, 9,34 µl, 0,5 eq) a 20 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi purificada por prep-TLC para obter CO-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,48 - 3,56 (m, 1H), 3,61 - 3,68 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,91 (s, 4H), 5,45 (s, 1H), 6,94 - 7,01 (m, 1H), 7,17 (d, J = 8,13 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,25 Hz, 2H), 7,63 (s, 1H), 8,01 (d, J = 8,25 Hz, 2H).
[1155] Preparação de 95. A uma solução de CO-3 (30 mg, 67,68 µmol, 1 eq) e Et3N (20,54 mg, 203,03 µmol, 28,26 µl, 3 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (11,47 mg, 101,51 µmol, 8,07 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (extinta com água, eluindo com: PE/EA = 2/1) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi purificada por prep- TLC para obter 95. LC-MS (m/z): 521,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,54 (br s, 3H), 3,80 (br s, 3H), 4,14 (br d, J = 15,51 Hz, 1H), 4,43 (br d, J = 14,13 Hz, 1H), 4,71 (d, J = 14,26 Hz, 1H), 5,40 (br s, 1H), 6,04 (br s, 1H), 6,88 - 7,02 (m, 1H), 7,09 - 7,37 (m, 2H), 7,57 (br d, J = 7,50 Hz, 2H), 7,84 (br d, J = 7,88 Hz, 2H), 11,39 - 11,66 (m, 1H). PROCEDIMENTO CQ: SÍNTESE DO COMPOSTO 96
[1156] Preparação de CQ-2. A uma solução de CQ-1 (100 mg, 353,21 µmol, 1 eq) em MeOH (5 ml) foi adicionado SOCl2 (210,10 mg, 1,77 mmol, 128,11 µl, 5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 16 h para obter uma solução azul. TLC (eluindo com: PE/EA = 0/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para obter CQ-2.
[1157] Preparação de CQ-3. A uma solução de CQ-2 (60 mg, 201,92 µmol, 1 eq) e 4-formilbenzoato de metila (33,15 mg, 201,92 µmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado TFA (11,51 mg, 100,96 µmol, 7,47 µl, 0,5 eq) a 20 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para obter CQ-3 e CQ-3a. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,51 (br s, 1H), 2,94 - 3,03 (m, 1H), 3,16 - 3,24 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,91 (s, 3H), 3,96 (dd, J = 11,04, 4,27 Hz, 1H), 5,26 (s, 1H), 7,22 (dd, J = 8,53, 1,76 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 1,51 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,28 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,58 (s, 1H), 8,00 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1158] Preparação de 96. A uma solução de CQ-3 (30 mg, 67,68 µmol, 1 eq) e Et3N (20,54 mg, 203,03 µmol, 28,26 µl, 3 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (11,47 mg, 101,51 µmol, 8,07 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para obter 96. LC-MS (m/z): 521,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,33 (d, J = 5,52 Hz, 1H), 3,49 (s, 1H), 3,65 (s, 4H), 3,88 (br s, 3H), 3,99 - 4,17 (m, 2H), 5,26 (br s, 1H), 6,02 - 6,28 (m, 1H), 7,19 - 7,24 (m, 1H), 7,38 (br d, J = 8,53 Hz, 3H), 7,76 - 8,16 (m, 3H). PROCEDIMENTO CR: SÍNTESE DO COMPOSTO 97
[1159] Preparação do composto CR-2. A uma solução de CR-1 (150 mg, 529,81 µmol, 1 eq) em MeOH (5 ml) foi adicionado SOCl2 (315,16 mg, 2,65 mmol, 192,17 µl, 5 eq) a 15 °C. A mistura foi agitada a 45 °C durante 3h. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A solução foi concentrada, diluída com DCM (5 ml) e, em seguida, lavada com salmoura (5 ml x 3). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob pressão reduzida para fornecer CR-2.
[1160] Preparação do composto CR-3. A uma solução de CR-2 (120 mg, 403,84 µmol, 1 eq) e 4-formilbenzoato de metila (66,29 mg, 403,84 µmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado TFA (23,02 mg, 201,92 µmol, 14,95 µl, 0,5 eq) a 10 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC para obter CR-3a e CR-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,97 - 3,07 (m, 1H), 3,18 - 3,25 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,93 (s, 3H), 3,97 (dd, J = 10,92, 4,14 Hz, 1H), 5,33 (s, 1H), 7,01 (t, J = 7,78 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,46 - 7,52 (m, 4H), 8,07 (d, J = 8,28 Hz, 2H).
[1161] Preparação de 97. A uma solução de CR-3 (19 mg, 42,86 µmol, 1 eq) e Et3N (13,01 mg, 128,58 µmol, 17,90 µl, 3 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (7,26 mg, 64,29 µmol, 5,11 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1)
mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep- TLC para obter 97. LC-MS (m/z): 521,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,21 - 3,57 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,89 (br s, 3H), 3,98 - 4,15 (m, 1H), 5,23 (br s, 1H), 6,15 (br s, 1H), 7,01 (t, J = 7,78 Hz, 1H), 7,31 (br d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,47 (br d, J = 8,03 Hz, 3H), 8,00 (br s, 2H). PROCEDIMENTO CS: SÍNTESE DO COMPOSTO 98 E COMPOSTO 98A
[1162] Preparação do composto CS-2. A uma solução de CS-1 (5 g, 42,68 mmol, 1 eq) e DMAP (521,43 mg, 4,27 mmol, 0,1 eq) em MeCN (60 ml) foi adicionada lentamente uma solução de Boc2O (13,97 g, 64,02 mmol, 14,71 ml, 1,5 eq) em MeCN (5 ml). A mistura foi agitada a 20 °C durante 18 h sob atmosfera de N2 para obter uma solução amarela. TLC (extinta com água, eluindo com: PE/EA = 4/1) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi concentrada e, em seguida, diluída com EA (10 ml) e lavada com HCl 1M, solução de NaHCO3, salmoura (10 ml x 3). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro e concentrada sob pressão reduzida para fornecer CS-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,70 (s, 9H), 6,59 (d, J = 3,76 Hz, 1H), 7,23 - 7,28 (m, 1H), 7,31 - 7,37 (m, 1H), 7,55 - 7,66 (m, 2H), 8,20 (br d, J = 7,78 Hz, 1H).
[1163] Preparação de CS-3. A uma solução de CS-2 (11 g, 50,63 mmol, 1 eq) em THF (400 ml) foi adicionado de uma só vez NBS (9,91 g, 55,69 mmol, 1,1 eq) a 20 °C. A reação foi agitada a 20 °C durante 18h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EA = 0/1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi purificada por cromatografia flash (SiO2, 100% de PE) para obter CS-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,68 (s, 11H), 7,30 - 7,42 (m, 2H), 7,54 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H), 8,16 (br d, J = 7,28 Hz, 1H).
[1164] Preparação de CS-4. A uma solução de CS-3 (2 g, 6,75 mmol, 1 eq) em THF (20 ml) foi adicionado gota a gota n-BuLi (2,5 M, 2,97 ml, 1,1 eq) a -78 °C. A mistura foi agitada a -78 °C durante 0,5 h. (2R)-2-etiloxirano (584,06 mg, 8,10 mmol, 1,2 eq) em THF (5 ml) foi adicionado gota a gota, seguido pela adição gota a gota de BF3.Et2O (766,41 mg, 5,40 mmol, 666,44 µl, 0,8 eq). A mistura foi agitada a -78 °C durante 1 h. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NH4Cl sat. (40 ml) e extraído com EtOAc (40 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto, que foi, então, purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 40%) para obter CS-4.
[1165] Preparação de CS-5. A uma solução de CS-4 (100 mg, 345,58 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados Et3N (69,94 mg, 691,16 µmol, 96,20 µl, 2 eq), DMAP (4,22 mg, 34,56 µmol, 0,1 eq) e MsCl (79,17 mg, 691,16 µmol, 53,50 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada agitar a 15 °C durante 1 hora para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter CS-5. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[1166] Preparação de CS-6. A uma solução de CS-5 (130 mg,
353,78 mol, 1 eq) em DMF (3 ml) foi adicionado NaN3 (92,00 mg, 1,42 mmol, 4 eq). A mistura foi agitada a 15 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (40 ml) e extraiu-se com MTBE (20 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o resíduo. Este produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[1167] Preparação de CS-7. A uma solução de CS-6 (110 mg, 349,89 mol, 1 eq) em H2O (2 ml)/THF (2 ml) foi adicionado PPh3 (275,32 mg, 1,05 mmol, 3 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi usada na próxima etapa sem purificação adicional.
[1168] Preparação de CS-8. HCl (2 M, 6 ml, 15,18 eq) foi adicionado CS-7 (228 mg, 790,61 µmol, 1 eq) de uma mistura de CS-7 e o correspondente (R)-isômero. A mistura foi agitada a 15 °C durante 1,5 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extraída com MBTE (15 ml x 3), e o pH da camada de água ajustado para pH 8 com NaHCO3 sat. A mistura foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi dissolvido em DCM/EtOH (10/1, 30 ml), a mistura filtrada e lavada com DCM (20 ml). O filtrado foi concentrado para obter CS-8.
[1169] Preparação de CS-9. A uma solução de CS-8 (80 mg, 424,93 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foram adicionados 4-formilbenzoato de metila (69,76 mg, 424,93 µmol, 1 eq) e TFA (24,23 mg, 212,46 µmol, 15,73 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 45 °C durante 60h para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (5 ml) e extraído com DCM (15 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) para obter CS-9 (trans) e CS-9a (cis).
[1170] CS-9 (trans): RMN de 1H (400 MHz, CDCl 3) δ 7,96 - 7,91 (m, 2H), 7,89 (brs, 1H), 7,50 - 7,48 (m, 1H), 7,26 - 7,21 (m, 3H), 7,12 - 7,07 (m, 2H), 5,23 (s, 1H), 3,86 (s, 3H), 2,94 - 2,85 (m, 2H), 2,50 - 2,44 (m, 1H), 1,49 - 1,46 (m, 2H), 0,89 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[1171] CS-9a (cis): RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,96 - 7,94 (m, 2H), 7,46 - 7,39 (m, 4H), 7,06 - 7,03 (m, 3H), 5,20 (s, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,01 - 3,00 (m, 1H), 2,88 - 2,83 (m, 1H), 2,53 - 2,49 (m, 1H), 1,63 - 1,59 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,6 Hz, 3H).
[1172] Preparação de 98. A uma solução de CS-9 (trans) (28 mg, 83,73 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foram adicionados NaHCO3 (70,34 mg, 837,29 µmol, 32,56 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (28,37 mg, 251,19 µmol, 19,98 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar a 15 °C durante 12h para obter uma suspensão amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (15 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por TLC preparativa (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) para obter 98. LC-MS (m/z): 411,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,87 - 7,85 (m, 2H), 7,69 (brs, 1H), 7,46 - 7,44 (m, 1H), 7,32 - 7,30 (m, 2H), 7,07 - 7,04 (m, 3H), 5,82 (s, 1H), 4,38 - 3,91 (m, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,24 - 3,22 (m, 1H), 3,06 - 3,02 (m, 1H), 1,60 - 1,58 (m, 2H), 0,90 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[1173] Preparação de 98a. A uma solução de CS-9a (cis) (40,00 mg, 119,61 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foram adicionados NaHCO3 (100,48 mg, 1,20 mmol, 46,52 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (40,53 mg, 358,84 µmol, 28,54 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar a 15 durante 12 horas. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (15 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o produto bruto, que foi processado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) para obter 99. LC-MS (m/z): 622,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,99 (brs, 1H), 7,86 - 7,84 (m, 2H), 7,49 - 7,46 (m, 3H), 7,31 - 7,29 (m, 1H), 7,17 - 7,10 (m, 2H), 6,97 (s, 1H), 4,24 - 4,12 (m, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,15 - 3,10 (m, 1H), 2,95 - 2,87 (m, 1H), 1,46 - 1,41 (m, 2H), 0,51 (t, J = 7,2 Hz, 3H). PROCEDIMENTO CT: SÍNTESE DO COMPOSTO 100
[1174] Preparação do composto CT-2. A uma solução de AA-1 (500 mg, 2,29 mmol, 1 eq) e 3-formilbenzoato de metila (376,08 mg, 2,29 mmol, 1 eq) em tolueno (15 ml) foi adicionado TFA (130,61 mg, 1,15 mmol, 84,81 µl, 0,5 eq) a 20 °C. A reação foi agitada a 80 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por cromatografia flash (SiO2, PE/EA = 3/1) para obter CT-
2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,14 - 3,22 (m, 1H), 3,26 - 3,34 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 4,00 (t, J = 5,77 Hz, 1H), 5,49 (s, 1H), 7,15 (quind, J = 7,15, 7,15, 7,15, 7,15, 1,25 Hz, 2H), 7,23 (s, 1H), 7,38 - 7,44 (m, 1H), 7,46 - 7,51 (m, 1H), 7,53 - 7,59 (m, 2H), 7,97 - 8,04 (m, 2H).
[1175] Preparação de 100. A uma solução de CT-2 (50 mg, 137,21 µmol, 1 eq) e Et3N (41,65 mg, 411,64 µmol, 57,30 µl, 3 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (23,25 mg, 205,82 µmol, 16,37 µl, 1,5 eq) a 0 °C. A reação foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi purificada por prep-TLC para obter 100. LC-MS (m/z): 441,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,64 (s, 3H), 3,90 (br s, 3H), 4,09 (br d, J = 19,83 Hz, 2H), 5,19 - 5,48 (m, 1H), 6,13 (br s, 1H), 7,08 - 7,19 (m, 2H), 7,35 (br s, 1H), 7,54 (br d, J = 7,78 Hz, 2H), 7,68 - 7,92 (m, 2H), 8,06 (br s, 1H). PROCEDIMENTO CU: SÍNTESE DO COMPOSTO 101
[1176] Preparação do composto CU-2. Para uma solução de AQ-4 (155,82 mg, 487,83 µmol, 1 eq) e (2S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (85 mg, 487,83 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TFA (27,81 mg, 243,91 µmol, 18,06 µl, 0,5 eq). A mistura foi aquecida a 45 °C durante 16 horas para obter uma suspensão marrom. TLC (PE: EA = 3: 2) e LCMS mostrou que o material de partida permaneceu. Assim, a mistura de reação foi aquecida a 45 °C durante mais 64 horas, o que resultou numa suspensão marrom. TLC (PE: EA = 1: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi diluída com NaHCO3 (10 ml) sat. e extraído com DCM (5 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 1: 1) para obter CU-2 e seu isômero cis. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,82 (m, 2H), 7,70 - 7,50 (m, 2H), 7,45 - 7,28 (m, 3H), 7,24 - 7,07 (m, 3H), 5,30 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 4,42 (m, 1H), 3,57 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,37 - 3,12 (m, 2H), 2,96 (m, 1H), 1,84 - 1,74 (m, 5H), 1,62 - 1,52 (m, 10H), 1,25 (br s, 3H).
[1177] Preparação de 101. A uma solução de CU-2 (10 mg, 21,02 µmol, 1 eq) em DCM (1 ml) foram adicionados TEA (8,51 mg, 84,10 µmol, 11,71 µl, 4 eq) e cloreto de 2-cloroacetil (4,75 mg, 42,05 µmol),
3,34 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para fornecer um resíduo, que foi processado por prep-HPLC (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 65% - 95 %, 6,5 min) para obter 101. LC- MS (m/z): 574,1 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,02 (br d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,70 (br d, J = 6,5 Hz, 2H), 7,56 (br d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,06 - 6,94 (m, 2H), 6,00 (br s, 1H), 4,86 - 4,65 (m, 2H), 3,03 - 2,81 (m, 1H), 1,87 (br s, 3H), 1,67 - 1,62 (m, 6H), 1,24 (br s, 6H), 1,15 (d, J = 6,4 Hz, 3H). PROCEDIMENTO CV: SÍNTESE DO COMPOSTO 102
[1178] Preparação do composto CV-2. Para uma solução de AB-2 (500 mg, 3,33 mmol, 1 eq), EDCI (702,29 mg, 3,66 mmol, 1,1 eq), NMM (842,16 mg, 8,33 mmol, 915,39 µl, 2,5 eq), HOBt (450,02 mg, 3,33 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foi adicionado adamantan-1-amina (503,72 mg, 3,33 mmol, 1 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 16 h para obter uma suspensão amarela. TLC (PE: EA = 2: 1) mostrou que a reação estava concluída. A solução de reação foi diluída com MTBE (20 ml), lavada com HCl 1 N (15 ml), lavada com NaHCO3 sat. (20 ml) e salmoura (20 ml), e então extraída com MTBE (10 ml x 5). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 anidro filtrada, e concentradas sob pressão reduzida. O resíduo foi processado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 5: 1) para obter CV-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,08 (s, 1H), 7,97 - 7,84 (m, 4H), 5,83 (br s, 1H), 2,15 (s, 9H), 1,74 (br s, 6H), 1,58 (s, 1H).
[1179] Preparação do composto CV-3. Para uma solução de CV-2 (120 mg, 423,48 µmol, 1 eq) e (2S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (73,79 mg, 423,48 µmol, 1 eq) em tolueno (3 ml) foi agitada a 105 °C durante 30 min. AcOH (378,00 mg, 6,29 mmol, 360,00 µl, 14,86 eq) foi adicionado à mistura e agitado a 105 °C durante 15,5 h para obter uma suspensão marrom. TLC (PE: EA = 2: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi diluída com NaHCO3 sat. (20 ml) e extraído com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 2: 3) para obter CV-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,72 (br s, 1H), 7,65 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,56 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,31 - 7,28 (m, 2H), 7,16 (m, 3H), 5,76 (s, 1H), 5,29 (m, 2H), 4,13 (m, 1H), 3,28 - 3,20 (m, 1H), 2,97 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 2,12 (s, 8H), 1,73 (m, 8H), 1,24 (m, 3H).
[1180] Preparação de 102. A uma solução de CV-3 (16 mg, 36,40 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foram adicionados TEA (11,05 mg, 109,19 µmol, 15,20 µl, 3 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (12,33 mg, 109,19 µmol, 8,68 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 15 °C durante 2h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada, o resíduo purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 1: 1) para obter 102. LC-MS (m/z): 557,6 [M+MeCN+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,99 (s, 1H), 7,62 - 7,48 (m, 3H), 7,32 (m, 2H), 7,24 - 7,07 (m, 3H), 5,92 (br s, 1H), 5,69 (s, 1H), 4,82 (br s, 1H), 4,25 (br s, 1H), 4,10 - 3,98 (m, 1H), 3,39 (m, 1H), 2,97 (m, 1H), 2,14 - 2,06 (m, 9H), 1,71 (br s, 6H), 1,35 (m, 3H).
PROCEDIMENTO CW: SÍNTESE DO COMPOSTO 103
[1181] Preparação do composto CW-2. Para uma solução de CW-1 (200 mg, 1,05 mmol, 1 eq) e (2S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (182,24 mg, 1,05 mmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi aquecida a 105 °C durante 30 min. AcOH (525,00 mg, 8,74 mmol, 0,5 ml, 8,36 eq) foi adicionado à mistura e agitado a 105 °C durante 20h para obter uma suspensão marrom. TLC (EA: MeOH = 20: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi extinta com NaHCO3 sat. (20 ml) e extraído com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, EA: MeOH = 20: 1) para obter CW-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,68 (br s, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,22 - 7,08 (m, 4H), 6,85 (m, 2H), 5,18 (s, 1H), 4,13 (m, 1H), 3,86 (m, 4H), 3,39 - 3,24 (m, 1H), 3,20 - 3,10 (m, 4H), 2,97 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 1,27 (m, 3H).
[1182] Preparação de 103. A uma solução de CW-2 (90 mg, 259,03 µmol, 1 eq) e TEA (52,42 mg, 518,06 µmol, 72,11 µl, 2 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (87,77 mg, 777,08 µmol, 61,81 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma suspensão marrom. TLC (PE: EA = 1: 2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi concentrada e o resíduo sujeito a purificação por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 1: 2) para obter 103. LC-MS (m/z): 424,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,69 (s, 1H), 7,52 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,26 - 7,19 (m, 3H), 7,18 - 7,10 (m, 2H), 6,81 (m, 2H), 5,90 (s, 1H), 5,05 - 4,77 (m, 1H), 4,26 - 4,02 (m, 1H), 4,02 - 3,88 (m, 1H), 3,82 (m, 4H), 3,42 - 3,23 (m, 1H), 3,11 (m, 4H), 3,01 - 2,87 (m, 1H), 1,32 (m, 3H).
PROCEDIMENTO CX: SÍNTESE DOS COMPOSTOS 104 E COMPOSTO 105
[1183] Preparação do composto CX-2. A uma solução de (2S)-1- (1H-indol-3-il)propan-2-amina (100 mg, 573,92 µmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado CX-1 (117,23 mg, 573,92 µmol, 1 eq), e a mistura aquecida a 105 °C durante 30 min. AcOH (525,00 mg, 8,74 mmol, 0,5 ml, 15,23 eq) foi adicionado e a mistura aquecida a 105 °C durante 16 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi diluída com NaHCO3 sat. (20 ml) e extraído com DCM (10 mx 5). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas para obter CX-2.
[1184] Preparação de 104. A uma solução de CX-2 (176 mg, 488,22 µmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foram adicionados TEA (148,21 mg, 1,46 mmol, 203,86 µl, 3 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (110,28 mg, 976,44 µmol, 77,66 µl, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora para obter uma suspensão marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada para fornecer um resíduo, que foi, então, sujeito a purificação por HPLC preparativa (coluna: Boston Green ODS 150 x 30 5u; fase móvel: [água (0,1% TFA)-ACN]; B%: 28% - 48%, 10min) para fornecer 2 produtos, um dos quais foi 104 e o outro 105.
[1185] Composto 104: LC-MS (m/z): 437,5 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,43 (m, 1H), 7,27 (m, 3H), 7,08 - 6,85 (m, 5H), 5,93 (br s, 1H), 4,86 - 4,58 (m, 2H), 4,03 - 3,91 (m, 1H), 3,27 - 3,01 (m, 1H), 2,95 - 2,85 (m, 1H), 2,82 - 2,82 (m, 1H), 2,76 (br s, 4H), 2,73 - 2,58 (m, 2H), 1,12 (m, 3H).
[1186] Composto 105: LC-MS (m/z): 437,5 [M+H]+. RMN de 1H
(400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,47 (m, 1H), 7,34 (m, 1H), 7,22 (m, 2H), 7,10 (m, 1H), 7,05 - 6,88 (m, 3H), 4,61 (m, 1H), 3,80 (br s, 2H), 3,20 - 3,06 (m, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,73 (m, 2H), 2,55 - 2,52 (m, 2H), 0,98 (m, 3H). PROCEDIMENTO CY: SÍNTESE DO COMPOSTO 106 E COMPOSTO 107
[1187] Preparação do composto CY-2. A uma solução de BM-1 (100 mg, 560,84 µmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foram adicionados (2S)-1-(1H- indol-3-il)propan-2-amina (195,45 mg, 1,12 mmol, 2 eq) e HOAC (33,68 mg, 560,84 µmol, 32,08 µl, 1 eq). A mistura foi agitada a 105 °C durante 12h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: Éter de petróleo: Acetato de etila = 2: 1, SiO2) mostrou a presença de algum produto desejado. O pH 8 foi ajustado para NaHCO3 sat. e extraída com DCM (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para obter CY-2.
[1188] Preparação de 106. A uma solução de CY-2 (105 mg, 313,87 µmol, 1 eq) em DMF (12 ml) foram adicionados DIEA (645,65 mg, 5,00 mmol, 870,15 µl, 3 eq) e HBTU (1,01 g, 2,66 mmol, 1,6 eq) em CHCl3 (5 ml), e NaHCO3 (263,69 mg, 3,14 mmol, 122,08 µl, 10 eq). A esta mistura foi adicionada uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (106,35 mg, 941,62 µmol, 74,89 µl, 3 eq) em DCM (0,5 ml) e a mistura agitada a 0 °C durante 2 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A reação foi arrefecida com H2O (10 ml) e extraiu-
se com DCM (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto, que foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 3: 1) para obter 106 e 107.
[1189] Composto 106: LC-MS (m/z): 411,0 [M+H] +. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,21 (s, 9H), 0,88 (br d, J = 11,29 Hz, 2H), 1,32 (br d, J = 6,53 Hz, 3H), 2,96 (br d, J = 15,81 Hz, 1H), 3,34 (br s, 1H), 4,13 (s, 2H), 4,93 (s, 1H), 5,93 (br s, 1H), 7,09 - 7,18 (m, 2H), 7,25 (br s, 1H), 7,31 (br d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,43 (br d, J = 7,53 Hz, 2H), 7,52 (br d, J = 7,53 Hz, 1H), 7,64 (br s, 1H).
[1190] Composto 107: LC-MS (m/z): 411,0 [M+H] +. RMN de 1H (400 MHz, DMSO) δ ppm 0,00 (s, 9H), 0,77 (d, J = 7,03 Hz, 3H), 2,43 - 2,55 (m, 1H), 2,84 - 2,95 (m, 1H), 4,33 - 4,46 (m, 3H), 6,61 (br s, 1H), 6,76 - 6,82 (m, 1H), 6,88 (t, J = 7,03 Hz, 1H), 7,11 (dd, J = 8,03, 3,51 Hz, 3H), 7,26 (br d, J = 5,52 Hz, 3H). PROCEDIMENTO CZ: SÍNTESE DO COMPOSTO 108
[1191] Preparação do composto CZ-2. A uma solução de CZ-1 (500 mg, 2,70 mmol, 1 eq) em dioxano (10 ml)/H2O (2 ml), ciclopropilborico/foram adicionado (348,20 mg, 4,05 mmol, 1,5 eq), Na2CO3 (859,29 mg, 8,11 mmol, 3 eq) e Pd(dppf)Cl2 (197,74 mg, 270,24 mol, 0,1 eq) sob N2. A mistura agitada a 110 °C durante 12 h sob N2 para obter uma solução preta. HPLC mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada para fornecer o produto bruto, que foi, então, purificado por uma coluna flash (eluindo com; Éter de petróleo: acetato de etila = 100% a 10%) para obter CZ-2. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,79 - 0,86 (m, 2H), 1,08 - 1,15 (m, 2H), 1,94 - 2,02 (m, 1H), 7,21 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,74 - 7,82 (m, 2H), 9,96 (s, 1H).
[1192] Preparação de CZ-3. A uma solução de CZ-2 ((100 mg, 684,06 µmol, 1 eq) em tolueno (4 ml) foi adicionado (2S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (143,03 mg, 820,87 µmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 15 °C durante 30 min. HOAc (420,00 mg, 6,99 mmol, 0,4 ml, 10,22 eq) foi então adicionado, e a mistura foi agitada a 105 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com EA (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto, que foi, então, purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 2) para obter CZ-3 e CZ-3a. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,57 - 0,63 (m, 2H), 0,89 (dd, J = 8,53, 1,76 Hz, 2H), 1,18 (s, 3H), 1,80 (td, J = 8,78, 4,27 Hz, 1H), 2,48 (br dd, J = 15,56, 8,28 Hz, 1H), 2,87 - 2,94 (m, 1H), 3,25 (br s, 1H), 5,18 (s, 1H), 6,94 (d, J = 8,03 Hz, 2H), 7,02 - 7,11 (m, 4H), 7,47 (d, J = 7,28 Hz, 1H), 7,53 (br s, 1H).
[1193] Preparação do Composto 108. A uma solução de CZ-3 (23 mg, 76,06 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (63,89 mg, 760,55 µmol, 29,58 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (25,77 mg, 228,17 µmol, 18,15 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para obter 108. LC-MS (m/z): 400,9 [M+Na] +. RMN de 1H (400 MHz, MeOD) δ ppm 0,62
(br d, J = 4,63 Hz, 2H), 0,91 (br d, J = 6,88 Hz, 2H), 1,23 - 1,35 (m, 3H), 1,78 - 1,94 (m, 1H), 2,98 (dd, J = 15,51, 2,00 Hz, 1H), 3,40 - 3,54 (m, 1H), 3,78 - 4,75 (m, 2H), 5,99 (br s, 1H), 6,95 - 7,10 (m, 4H), 7,21 - 7,32 (m, 3H), 7,45 (d, J = 7,75 Hz, 1H). PROCEDIMENTO DA: SÍNTESE DO COMPOSTO 109
[1194] Preparação do composto DA-2. Para uma solução de CZ-1 (223,78 mg, 1,21 mmol, 1 eq) e 2-(ciclopenten-1-il)-4, 4, 5, 5-tetrametil- 1, 3, 2-dioxaborolano (320 mg, 1,65 mmol, 1,36 eq) em dioxano (10 ml) e H2O (2 ml) foram adicionados de Na2CO3 (384,58 mg, 3,63 mmol, 3 eq) e Pd(PPh3)4 (69,88 mg, 60,47 µmol, 0,05 eq). A mistura foi aquecida a 90 °C durante 16 h para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 10: 1) mostrou que o CZ-1 permaneceu. A mistura de reação foi ainda aquecida a 90 °C durante 6 h adicionais para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 10: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi diluída com H2O (20 ml) e extraída com EA (10 ml x 5). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 10: 1) para obter DA-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,02 - 9,96 (m, 1H), 7,83 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,41 (m, 1H), 2,79 - 2,72 (m, 2H), 2,59 (m, 7,5 Hz, 2H), 2,06 (m, 2H).
[1195] Preparação de DA-3. A uma solução de DA-2 (237 mg, 1,38 mmol, 1 eq) em MeOH (5 ml) foi adicionado Pd/C (46 mg, 10% de pureza) (50% úmido, 10% Pd). A suspensão da reação foi desgaseificada sob vácuo e purgado com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 10 °C durante 3 horas para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 5: 1) e HPLC mostraram que a reação estava concluída. LCMS mostrou que nenhum MS desejado foi encontrado. A mistura de reação foi filtrada em celite e o filtrado concentrado para obter DA-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,27 - 7,12 (m, 4H), 4,58 (br s, 2H), 3,01 - 2,83 (m, 1H), 1,99 (br s, 2H), 1,74 (br s, 2H), 1,69 - 1,57 (m, 2H), 1,57 - 1,33 (m, 4H).
[1196] Preparação de DA-4. A uma suspensão de MnO2 (545,04 mg, 6,27 mmol, 5 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado DA-3 (221 mg, 1,25 mmol, 1 eq). A mistura foi aquecida a 45 °C durante 16 h para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 5: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada em celite e o filtrado concentrado para obter DA-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 9,98 (s, 1H), 7,83 - 7,78 (m, 2H), 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 3,13 - 2,96 (m, 1H), 2,17 - 2,03 (m, 2H), 1,87 - 1,80 (m, 2H), 1,77 - 1,69 (m, 2H), 1,66 - 1,59 (m, 2H).
[1197] Preparação de DA-5. Uma solução de DA-4 (50 mg, 286,96 µmol, 1 eq) e (2S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (50,00 mg, 286,96 µmol, 1 eq) foi preparada em tolueno (2 ml) sob atmosfera de N2. A mistura foi aquecida a 105 °C durante 30 min seguido pela adição de AcOH (210,00 mg, 3,50 mmol, 200,00 µl, 12,19 eq). A mistura foi aquecida a 105 °C durante 2h para obter uma suspensão marrom. LCMS e TLC (PE: EA = 3: 2) mostraram que a reação foi concluída. A mistura foi diluída com NaHCO3 sat. e extraído com EA (5 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 3: 2) para obter DA-5 e seu cis-isômero. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,56 (br s, 1H), 7,47 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,15 - 7,03 (m, 6H), 5,22 (m, 1H), 3,34 - 3,22 (m, 1H), 2,95 - 2,85 (m, 2H), 2,49 (m, 1H), 2,02 - 1,86
(m, 2H), 1,75 - 1,46 (m, 8H), 1,28 - 1,09 (m, 3H).
[1198] Preparação de 109. A uma solução de DA-5 (17 mg, 51,44 µmol, 1 eq) e TEA (15,62 mg, 154,33 µmol, 21,48 µl, 3 eq) em DCM (2 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (17,43 mg, 154,33 µmol, 12,27 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada e o resíduo resultante purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 2: 1) para obter 109. LC-MS (m/z): 407,5 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,66 (s, 1H), 7,52 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 8,5 Hz, 3H), 7,19 - 7,09 (m, 4H), 5,93 (s, 1H), 4,15 (m, 2H), 3,43 - 3,24 (m, 1H), 2,98 - 2,88 (m, 2H), 2,06 - 1,97 (m, 2H), 1,80 - 1,72 (m, 2H), 1,71 - 1,62 (m, 2H), 1,55 - 1,46 (m, 2H), 1,32 (m, 3H). PROCEDIMENTO DB: SÍNTESE DO COMPOSTO 110
[1199] Preparação de DB-2. A uma solução de CZ-1 (1 g, 5,40 mmol, 1 eq) e 2-(ciclo-hexen-1-il)-4,4,5, 5-tetrametil-1, 3,2- dioxaborolano (1,53 g, 7,35 mmol, 1,58 ml, 1,36 eq) em dioxano (50 ml) e H2O (10 ml) foram adicionados de Na2CO3 (1,72 g, 16,21 mmol, 3 eq) e paládio; trifenilfosfano (312,28 mg, 270,24 ol, 0,05 eq). A mistura foi agitada a 90 °C durante 12h para obter uma suspensão amarela. TLC (eluindo com: éter de petróleo: acetato de etila = 10: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. H2O (100 ml) foi adicionado à mistura de reação e extraiu-se com EA (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O resíduo foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 10/1) para obter DB-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,58 - 1,78 (m, 5H), 2,15 - 2,40 (m, 5H), 6,22 - 6,27 (m, 1H), 7,46 (d, J = 8,38 Hz, 2H), 7,72 - 7,78 (m, 2H), 9,91 (s, 1H).
[1200] Preparação de DB-3. A uma solução de DB-2 (246 mg, 1,32 mmol, 1 eq) em MeOH (10 ml) foi adicionado Pd/C (50 mg, 10% de pureza) e agitado a 25 °C durante 1 h sob H2 para obter um solução preta. TLC (eluindo com; éter de petróleo: acetato de etila = 10: 1, SiO2) mostrou que a reação estava completa. A mistura de reação foi filtrada por celite e as camadas orgânicas concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: Éter de petróleo/acetato de etila = 20/1 a 10/1) para obter DB-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,12 - 1,41 (m, 6H), 1,64 - 1,83 (m, 5H), 2,39 - 2,47 (m, 1H), 4,59 (d, J = 6,02 Hz, 2H), 7,12 - 7,17 (m, 2H), 7,21 - 7,25 (m, 2H).
[1201] Preparação de DB-4. A uma solução de DB-3 (136 mg, 714,73 µmol, 1 eq) em DCM (8 ml) foi adicionado MnO2 (310,68 mg, 3,57 mmol, 5 eq) e a mistura foi agitada a 45 °C durante 12h para obter uma solução negra. TLC (eluindo com: éter de petróleo: acetato de etila = 10: 1, SiO2) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada por celite, e as camadas orgânicas secas com Na2SO4 e concentradas para obter DB-4. Foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,17 - 1,43 (m, 5H), 1,66 - 1,85 (m, 5H), 2,46 - 2,57 (m, 1H), 7,29 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 7,73 (d, J = 8,28 Hz, 2H), 9,89 (s, 1H).
[1202] Preparação de DB-5. A uma solução de DB-4 (125 mg, 663,96 µmol, 1 eq) em tolueno (8 ml) foram adicionados (2S)-1-(1H- indol-3-il)propan-2-amina (138,83 mg, 796,75 µmol, 1,2 eq) e HOAc (840,00 mg, 13,99 mmol, 0,8 ml, 21,07 eq). A mistura foi agitada a 105°C durante 12h para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com EA (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto, que foi purificado por HPLC prep (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 35% - 55%, 6,5 min) para obter DB-5. RMN de 1H (400 MHz, MeOD) δ ppm 1,23 - 1,50 (m, 5H), 1,52 (d, J = 6,53 Hz, 3H), 1,73 - 1,92 (m, 5H), 2,59 (br s, 1H), 2,93 (dd, J = 15,81, 8,28 Hz, 1H), 3,14 - 3,29 (m, 1H), 3,50 (s, 1H), 3,82 - 3,92 (m, 1H), 5,89 (s, 1H), 7,08 - 7,14 (m, 1H), 7,18 (t, J = 7,03 Hz, 1H), 7,26 - 7,33 (m, 3H), 7,34 - 7,39 (m, 2H), 7,57 (d, J = 7,78 Hz, 1H).
[1203] Preparação de 110. A uma solução de DB-5 (24,7 mg, 71,70 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (60,23 mg, 717,00 µmol, 27,89 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (24,29 mg, 215,10 µmol, 17,11 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para obter
110. LC-MS (m/z): 443,0 [M+Na]+. RMN de H1 (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,17 - 1,32 (m, 8H), 1,60 - 1,78 (m, 5H), 2,36 (br s, 1H), 2,84 - 3,29 (m, 2H), 3,82 - 4,16 (m, 2H), 4,85 (br s, 1H), 5,86 (s, 1H), 7,01 - 7,10 (m, 4H), 7,13 - 7,18 (m, 3H), 7,44 (d, J = 7,38 Hz, 1H), 7,56 (s, 1H), 2H), 2,06 - 1,97 (m, 2H), 1,80 - 1,72 (m, 2H), 1,71 - 1,62 (m, 2H), 1,55 - 1,46 (m, 2H), 1,32 (m, 3H). PROCEDIMENTO DC: SÍNTESE DO COMPOSTO 112
[1204] Preparação de DC-2. A uma solução de CZ-1 (323,02 mg, 1,75 mmol, 1 eq) em dioxano (10 ml) foram adicionados 2-(3,6-dihidro- 2H-piran-4-il)-4, 4, 5, 5 -tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolano (500 mg, 2,38 mmol, 1,36 eq), H2O (2 ml), Na2CO3 (555,14 mg, 5,24 mmol, 3 eq) e paládio; trifenilfosfano (100,87 mg, 87,29 umol, 0,05 eq). A mistura foi aquecida a 90 °C durante 40h para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 10: 1) e HPLC mostraram que a reação estava concluída. A mistura foi diluída com H2O (20 ml) e extraída com EA (10 ml x 5). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 10: 1) para obter DC-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 10,01 (s, 1H), 7,87 (m, 2H), 7,56 (m, 2H), 6,32 (m, 1H), 4,37 (m, 2H), 3,96 (m, 2H), 2,67 - 2,49 (m, 2H),
[1205] Preparação de DC-3. A uma solução de DC-2 (280 mg, 1,49 mmol, 1 eq) em MeOH (5 ml) foi adicionado Pd/C (28 mg, 10% de pureza) (50% úmido, 10% Pd). A suspensão da reação foi desgaseificada sob vácuo e purgado com H2 várias vezes, e, em seguida, agitou-se sob H2 (15 psi) a 10 °C durante 3 horas para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 5: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada em celite e o filtrado concentrado para obter DC-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,26 - 7,22 (m, 2H), 4,68 (m, 2H), 4,12 - 4,06 (m, 2H), 3,58 - 3,49 (m, 2H), 2,81 - 2,73 (m, 1H), 1,88 - 1,74 (m, 4H).
[1206] Preparação de DC-4. A uma solução de DC-3 (114 mg, 592,97 µmol, 1 eq) em DCM (4 ml) foi adicionado MnO2 (257,75 mg, 2,96 mmol, 5 eq). A mistura foi aquecida a 40 °C durante 16 h para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 2: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada em celite e o filtrado concentrado para obter DC-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 9,99 (s, 1H), 7,88 - 7,81 (m, 2H), 7,43 - 7,37 (m, 2H), 5,31 (s, 1H), 4,11 (m, 2H), 3,55 (dt, J = 2,6, 11,5 Hz, 2H), 2,93 - 2,79 (m, 1H), 1,91 - 1,73 (m, 4H).
[1207] Preparação de DC-5. A uma solução de DC-4 (110 mg, 578,22 µmol, 1 eq) em tolueno (3 ml) foi adicionado (2S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (100,75 mg, 578,22 µmol, 1 eq) sob N2. A mistura foi aquecida a 105 °C durante 30 min e foi adicionado AcOH (315,00 mg, 5,25 mmol, 300,00 µl, 9,07 eq). A mistura foi aquecida a 105 °C durante 15,5 h para obter uma suspensão marrom. LCMS e TLC (PE: EA = 0: 1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura foi diluída com NaHCO3 sat. e extraído com EA (5 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 0: 1) para obter 2 produtos, um dos quais era DC-5 e outro dos quais era o isômero trans. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,71 - 7,59 (m, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,25 - 7,11 (m, 6H), 5,31 - 5,22 (m, 1H), 4,10 - 4,04 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 3,35 - 3,27 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 2,79 - 2,70 (m, 1H), 2,54 (m, 1H), 1,87 - 1,61 (m, 6H), 1,24 (d, J = 6,3 Hz, 3H).
[1208] Preparação de 112. A uma solução de DC-5 (40 mg, 115,45 µmol, 1 eq) em DCM (2 ml) foram adicionados TEA (35,05 mg, 346,36 µmol, 48,21 µl, 3 eq) e cloreto de 2-cloroacetil (39,12 mg, 346,36 µmol, 27,55 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas para obter uma suspensão marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada e o resíduo purificado por prep- TLC (SiO2, PE: EA = 1: 2) para obter 112. LC-MS (m/z): 423,1 [M+H]+.
RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,72 (br s, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,27 - 7,24 (m, 2H), 7,18 - 7,10 (m, 4H), 5,94 (s, 1H), 5,03 - 4,76 (m, 1H), 4,25 - 3,97 (m, 4H), 3,49 (m, 2H), 3,41 - 3,19 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 2,77 - 2,63 (m, 1H), 1,82 - 1,68 (m, 4H), 1,32 (m, 3H). PROCEDIMENTO DD: SÍNTESE DO COMPOSTO 113
[1209] Preparação de DD-8. A uma solução de PPh3 (65,86 g, 251,11 mmol, 2,2 eq) em DCM (500 ml) foi adicionado I2 (63,73 g, 251,11 mmol, 50,58 ml, 2,2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 15 min, em seguida, imidazol (19,43 g, 285,35 mmol, 2,5 eq) em DCM (50 ml) foi adicionado gota a gota a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 15 min. DD-7 (20 g, 114,14 mmol, 1 eq) em DCM (50 ml) foi adicionado gota a gota a 0 °C, e a mistura foi deixada a agitar a 10°C durante 12 h para obter uma suspensão amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com PE (500 ml), filtrada e o filtrado concentrado para obter o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% a 20%) para obter DD-8 impuro. O DD- 8 resultante foi triturado com hexano (70 ml) para obter DD-8. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3) δ 4,54 (brs, 1H), 3,54 (brs, 1H), 3,42 (brs, 1H), 3,33 - 3,29 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,22- 1,21 (d, J = 6,4 Hz, 1H).
[1210] Preparação de DD-9. Zinco (10 g) foi tratado com 1N HCl aquoso (30 ml) com agitação durante 10 min, filtrado e lavado com água (30 ml), EtOH (30 ml) e tolueno (30 ml) em sequência e depois seco em vácuo para fornecer o pó de zinco para a próxima etapa.
[1211] Uma mistura de Zn ativado (1,83 g, 28,06 mmol, 4 eq) e I2 (89,02 mg, 350,73 µmol, 70,65 µl, 0,05 eq) em DMA (20 ml) foi agitada a 10 °C durante 5 min, seguido por gota a gota adição de N-[(1S)-2- iodo-1-metil-etil]carbamato de terc-butila DD-9 (2 g, 7,01 mmol, 1 eq) em DMA (10 ml). A mistura de reação foi agitada a 10 °C durante 25 min para obter uma suspensão preta. A mistura de reação (0,233 mol/l) foi usada para a próxima etapa sem purificação adicional.
[1212] Preparação de DD-2. A uma solução de 5-metóxi-1H-indol - (5 g, 33,97 mmol, 1 eq) em DMF foram adicionados KOH (4,77 g, 84,93 mmol, 2,5 eq) e I2 (8,62 g, 33,97 mmol, 6,84 ml, 1 eq) em DMF (40 ml) a 15 °C. A mistura foi agitada a 15 °C durante 2 horas para fornecer uma solução castanha. TLC (PE: EA = 4: 1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi vertida em gelo e água (400 ml) contendo amônia (0,5%) e sulfito de sódio (solução aquosa a 0,1%) e, em seguida, extraída com MTBE (50 ml x 4). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas para obter DD-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,54 (br s, 1H), 7,20 - 7,12 (m, 2H), 6,85 - 6,75 (m, 2H), 3,81 (s, 3H).
[1213] Preparação de DD-3. A uma solução de DD-2 (9,28 g, 33,98 mmol, 1 eq) em DCM (40 ml) adicionou-se (Boc)2O (8,90 g, 40,78 mmol, 9,37 ml, 1,2 eq), DMAP (415,18 mg, 3,40 mmol, 0,1 eq) e TEA (5,16 g, 50,98 mmol, 7,10 ml, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 15 °C durante 16 h para obter uma suspensão preta. TLC (PE: EA = 5: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi extinta com H2O (40 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). A mistura foi seca com Na2SO4, filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a
5: 1) para obter DD-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,01 (m, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,98 (m, 1H), 6,85 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 1,67 (s, 9H).
[1214] Preparação de DD-4. A uma solução de DD-3 (1,5 g, 4,02 mmol, 1 eq) em DMA (5 ml) foram adicionados CuI (76,55 mg, 401,95 µmol, 0,1 eq), DD-9 (2,40 g, 6,83 mmol, 1,7 eq) e Pd(dppf)Cl2 (294,11 mg, 401,95 mol, 0,1 eq). A mistura foi agitada a 90 °C durante 2h para obter uma suspensão preta. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (50 ml) e extraiu-se com MTBE (40 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 20%) para obter DD-4.
[1215] Preparação de DD-5. DD-4 (300 mg, 741,66 µmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/MeOH (4 M, 10 ml, 53,93 eq) e agitado a 10 °C durante 12 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada para obter o produto bruto. O produto foi dissolvido em H2O (20 ml) e extraiu-se com MTBE (20 ml x 2). A camada de água foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e concentrou-se para obter o produto bruto. O produto foi dissolvido em DCM/EtOH (30 ml, 5/1), filtrado e lavado com DCM (20 ml). O filtrado foi concentrado para obter DD-5. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,95 (brs, 1H), 7,17 (s, 1H), 6,98 - 6,93 (m, 2H), 6,80 - 6,78 (m, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,24 - 3,20 (m, 1H), 2,79 - 2,74 (m, 1H), 2,59 - 2,53 (m, 1H), 1,11 - 1,09 (d, J = 6,4 Hz, 3H).
[1216] Preparação de DD-6. A uma solução de DD-5 (80 mg, 391,64 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foram adicionados 4-formilbenzoato de metila (64,29 mg, 391,64 µmol, 1 eq) e TFA (44,66 mg, 391,64 µmol, 29,00 µl, 1 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/2) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com Sat. NaHCO3 (10 ml) e extraída com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/2) para obter DD-6 (trans) e DD-6a (cis).
[1217] Preparação de 113. A uma solução de DD-6 (18 mg, 51,37 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (43,15 mg, 513,68 µmol, 19,98 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (17,41 mg, 154,11 µmol, 12,26 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 2h para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 2/1) para obter 113. LC-MS (m/z): 448,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,87 - 7,85 (m, 2H), 7,69 (brs, 1H), 7,46 - 7,44 (m, 1H), 7,32 - 7,30 (m, 2H), 7,07 - 7,04 (m, 3H), 5,82 (s, 1H), 4,38 - 3,91 (m, 3H), 3,84 (s, 3H), 3,24 - 3,22 (m, 1H), 3,06 - 3,02 (m, 1H), 1,60 - 1,58 (m, 2H), 0,90 (t, J = 7,2 Hz, 3H). PROCEDIMENTO DE: SÍNTESE DO COMPOSTO 114
[1218] Preparação do composto DE-2. A uma solução de DE-1 (10 g, 74,00 mmol, 1 eq) em DMF (100 ml) foram adicionados KOH (10,38 g, 185,00 mmol, 2,5 eq), seguido por I2 (18,78 g, 74,00 mmol, 14,91 ml, 1 eq) em DMF (100 ml) adicionado gota a gota. A mistura foi agitada a 5 °C durante 2h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi temperada com H2O (600 ml) e extraiu-se com MTBE (200 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o produto bruto, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[1219] Preparação de DE-3. A uma solução de DE-2 (19,32 g, 74,01 mmol, 1 eq) em CH3CN (200 ml) foram adicionados Boc2O (16,15 g, 74,01 mmol, 17,00 ml, 1 eq) e DMAP (452,10 mg, 3,70 mmol, 0,05 eq). A mistura foi agitada a 5 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi temperada com H2O (800 ml) e filtrada. O produto foi recolhido, seco sobre Na2SO4 e concentrado para obter DE-3. O produto foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,12 (br s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,13 - 7,09 (m, 2H), 1,69 (s, 9H).
[1220] Preparação de DE-4. A uma solução de DE-3 (9,3 g, 25,75 mmol, 1 eq) em THF (60 ml) foi adicionado gota a gota n-butil-lítio (2,5 M, 11,33 ml, 1,1 eq) a -70 °C. A mistura foi agitada a -70 °C durante 10 min. Uma solução de (2R)-2-metiloxirano (1,79 g, 30,90 mmol, 2,16 ml, 1,2 eq) em THF (5 ml) foi adicionada gota a gota, seguida pela adição gota a gota de BF3.Et2O (2,92 g, 20,60 mmol, 2,54 ml, 0,8 eq). A mistura foi agitada a -70 °C durante 2h 50 min para obter uma suspensão amarela. TLC (PE: EA = 3: 1) mostrou que a reação foi concluída, mas o DE-3 não foi completamente consumido. A mistura foi extinta com NH4Cl sat. (40 ml) e extraído com EA (20 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/01 a 5: 1) para obter DE-4. RMN de 1H (400
MHz, CDCl3) δ = 8,08 (br s, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,04 (m, 1H), 4,17 - 4,11 (m, 1H), 2,86 - 2,70 (m, 2H), 1,67 (s, 9H), 1,31 - 1,29 (m, 3H).
[1221] Preparação de DE-5. A uma solução de DE-4 (3 g, 10,23 mmol, 1 eq) em DCM (50 ml) foi adicionado TEA (2,07 g, 20,45 mmol, 2,85 ml, 2 eq), DMAP (124,94 mg, 1,02 mmol, 0,1 eq) e MsCl (2,34 g, 20,45 mmol, 1,58 ml, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 10 °C durante 1 h para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (20 ml) e extraiu- se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter DE-5.
[1222] Preparação de DE-6. A uma solução de DE-5 (4,23 g, 11,38 mmol, 1 eq) em DMF (40 ml) foi adicionado NaN3 (1,48 g, 22,76 mmol, 2 eq). A mistura foi aquecida a 50 °C durante 16 h para obter uma suspensão amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NaHCO3 sat. (20 ml) e diluiu-se com H2O (100 ml). A mistura foi extraída com MBTE (40 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4 e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, éter de petróleo/acetato de etila = 1/0 a 10: 1) para obter DE-6. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,14 - 7,96 (m, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,28 - 7,25 (m, 1H), 7,18 (m, 1H), 3,90 - 3,76 (m, 1H), 2,90 - 2,74 (m, 2H), 1,71 - 1,66 (m, 9H), 1,38 - 1,33 (m, 3H).
[1223] Preparação de DE-7. A uma solução de DE-6 (2,9 g, 9,11 mmol, 1 eq) em MeOH (30 ml) foi adicionado Pd/C (290 mg, 10% de pureza). A mistura foi agitada sob H2 a 10 °C durante 16 h para obter uma suspensão preta. TLC (EA: MeOH = 5: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi filtrada e concentrada para obter DE-7. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,13 - 7,98 (m, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,19 (m, 8,8 Hz, 1H), 7,03 (m, 1H), 3,48 (s, 1H), 3,33 - 3,16 (m, 1H), 2,78 -
2,71 (m, 1H), 2,57 (m, 1H), 1,66 (s, 9H), 1,18 (m, 3H).
[1224] Preparação do composto DE-8. DE-7 (2,36 g, 8,07 mmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/MeOH (4 M, 1,00 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 10 °C durante 16 h para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que DE-7 não foi completamente consumido. A mistura foi ainda agitada a 10 °C durante 24h para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. O resíduo foi arrefecido com MTBE (30 ml), extraiu-se com H2O (30 ml x 3). As camadas de água combinadas foram concentradas e ajustadas para pH 8 com NaHCO 3 sat. (50 ml), e depois concentrou-se para obter um resíduo. O resíduo foi lavado com DCM (50 ml) e MeOH (5 ml), filtrado e então concentrado para obter DE-8. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,59 (br s, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,06 (s, 1H), 3,33 - 3,20 (m, 1H), 2,95 - 2,76 (m, 1H), 2,61 (m, 1H), 1,20-1,13 (m, 3H).
[1225] Preparação de DE-9. A uma solução de DE-8 (100 mg, 520,20 µmol, 1 eq) em tolueno (3 ml) foi adicionado 4- morfolinobenzaldeído (99,48 mg, 520,20 µmol, 1 eq). A mistura foi aquecida a 105 °C durante 30 min, e seguida pela adição de AcOH (315,00 mg, 5,25 mmol, 0,3 ml, 10,08 eq). A mistura foi aquecida a 105 °C durante 15,5 h para obter uma suspensão marrom. TLC (EA: MeOH = 10: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi extinta com NaHCO3 sat. (20 ml), e extraída com EtOAc (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, EA: MeOH = 10: 1) para obter DE-9. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,93 - 7,65 (m, 1H), 7,20 - 7,09 (m, 4H), 6,95 - 6,76 (m, 3H), 5,21 (br s, 1H), 3,85 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,41 - 3,26 (m, 1H), 3,20 - 3,07 (m, 4H), 3,01 - 2,74 (m, 1H), 2,62 - 2,46 (m, 1H), 1,27 - 1,23 (m, 3H).
[1226] Preparação de 114. A uma solução de DE-9 (20 mg, 54,73 µmol, 1 eq) e TEA (16,61 mg, 164,18 µmol, 22,85 µl, 3 eq) em DCM (1 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (18,54 mg, 164,18 µmol, 13,06 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 10 °C durante 2 horas para obter uma solução marrom. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi concentrada e o resíduo purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 1: 1) para obter 114. LC-MS (m/z): 442,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,64 (s, 1H), 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,18 - 7,11 (m, 2H), 6,91 - 6,79 (m, 3H), 5,88 (s, 1H), 5,06 - 4,78 (m, 1H), 4,20 - 4,08 (m, 1H), 4,23 - 4,06 (m, 1H), 3,82 (m, 4H), 3,36 - 3,22 (m, 1H), 3,12 (m, 4H), 2,87 (m, 1H), 1,31 (m, 3H). PROCEDIMENTO DF: SÍNTESE DO COMPOSTO 115
[1227] Preparação de DF-2. Uma solução de DF-1 (250 mg, 1,25 mmol, 1 eq) e 4-morfolinobenzaldeído (239,93 mg, 1,25 mmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi agitada a 105 °C durante 30 min. AcOH (525,00 mg, 8,74 mmol, 0,5 ml, 6,97 eq) foi adicionado e a mistura agitada a 105 °C durante 15,5 h para obter uma solução marrom. LCMS e TLC (EA: MeOH = 10: 1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura foi diluída com NaHCO3 sat. (20 ml) e extraído com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por prep-TLC (SiO2, EA: MeOH = 10: 1) para obter DF-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,88 (s, 1H), 7,43 - 7,37 (m, 1H), 7,31 (s, 1H), 7 7,10 (m, 2H), 6,86 (m, 2H), 5,22 (br s, 1H), 3,91 - 3,80 (m, 4H), 3,38 - 3,25 (m, 1H), 3,21 - 3,08 (m, 4H), 2,95 (m, 1H), 2,54 (br s, 1H), 1,27 - 1,24 (m, 3H).
[1228] Preparação de 115. A uma solução de DF-2 (17 mg, 45,64 µmol, 1 eq) em DCM (1 ml) foram adicionados TEA (13,86 mg, 136,93 µmol, 19,06 µl, 3 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (15,46 mg, 136,93 µmol, 10,89 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 10 °C durante 2 horas para obter uma solução marrom. TLC (PE: EA = 0: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi concentrada e o resíduo resultante purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 0: 1) para obter 115. LC-MS (m/z): 449,1 [M +H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,99 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,39 (m, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,21 (m, 2H), 6,83 (m, 2H), 5,90 (s, 1H), 5,03 - 4,78 (m, 1H), 4,13 (m, 1H), 4,06 - 3,89 (m, 1H), 3,82 (m, 4H), 3,34 (m, 1H), 3,12 (m, 4H), 3,01 - 2,87 (m, 1H), 1,31 (d, J = 6,6 Hz, 3H). PROCEDIMENTO DG: SÍNTESE DO COMPOSTO 116
[1229] Preparação de DG-2. A uma solução de CF-4 (300 mg, 1,09 mmol, 1 eq) em tolueno (15 ml) foi adicionado (2S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (227,81 mg, 1,31 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 15 °C durante 30 min, seguida pela adição de HOAc (32,71 mg, 544,78 µmol, 31,16 µl, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 105 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com EA (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (acetato de etila = 100%) para obter DG-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm -0,02 - 0,04 (m, 2H), 0,27 - 0,33 (m, 2H), 0,81 - 0,93 (m, 1H), 1,11 (br d, J = 6,27 Hz, 3H), 1,31 (s, 9H), 2,40 (br dd, J = 14,93, 8,91 Hz, 1H), 2,83 (br d, J = 11,29 Hz, 1H), 3,18 (br s, 1H), 3,33 (d, J = 7,03 Hz, 2H), 5,10 (s, 1H), 6,96 - 7,07 (m, 7H), 7,15 (s, 1H), 7,41 (d, J =
7,53 Hz, 1H), 7,57 (br s, 1H).
[1230] Preparação do DG-3. A uma solução de DG-2 (23 mg, 53,29 umol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (44,77 mg, 532,94 ol, 20,73 ml, 10 eq). Uma solução de cloreto de 2-cloroacetila (9,03 mg, 79,94 µmol, 6,36 µl, 1,5 eq) em CHCl3 (1 ml) foi adicionada a 0 °C e a mistura foi agitada a 0 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (5 ml) e extraiu-se com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (éter de petróleo: acetato de etila = 2: 1) para obter DG-3.
[1231] Preparação de 116. DG-3 (13,8 mg, 27,16 µmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/EtOAc (4 M, 2ML ml, 294,52 eq) e a mistura agitada a 20 °C durante 1 h para obter uma solução rosa. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com EA (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por TLC preparativa (éter de petróleo: acetato de etila = 1: 1) para fornecer 116. LC-MS (m/z): 408,2 [M+H]+. PROCEDIMENTO DH: SÍNTESE DO COMPOSTO 117
[1232] Preparação de DH-2. A uma solução de CS-8 (100 mg, 531,16 µmol, 1 eq) em tolueno (3 ml) foi adicionado 4- morfolinobenzaldeído (101,57 mg, 531,16 µmol, 1 eq) e a mistura aquecida a 105 °C durante 30 min. AcOH (31,90 mg, 531,16 µmol, 30,38 µl, 1 eq) foi adicionado e agitado a 105 °C durante 15,5 h para obter uma suspensão marrom. TLC (EA: MeOH = 20: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi diluída com 20 ml de NaHCO3 sat. e extraído com EA (10 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secas com Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por TLC-prep (SiO2, EA: MeOH = 20: 1) para obter DH-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,59 (br s, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,12 - 7,03 (m, 4H), 6,77 (m, 2H), 5,10 (s, 1H), 3,78 (m, 4H), 3,12 - 3,03 (m, 4H), 3,02 - 2,87 (m, 2H), 2,47 (m, 1H), 1,55 - 1,46 (m, 2H), 0,89 (m, 3H).
[1233] Preparação de 117. A uma solução de DH-2 (50 mg, 138,32 µmol, 1 eq) em DCM (3 ml) foram adicionados TEA (41,99 mg, 414,96 µmol, 57,76 µl, 3 eq) e cloreto de 2-cloroacetil (46,87 mg, 414,96 µmol), 33,00 µl, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 10 °C durante 2 horas para obter uma solução marrom. TLC (PE: EA = 1: 1) mostrou que a reação estava concluída. A mistura foi concentrada e o resíduo resultante purificado por prep-TLC (SiO2, PE: EA = 1: 1) para obter 117. LC-MS (m/z): 438 [M+H]+. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3) δ = 7,63 (br s, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,25 - 7,20 (m, 3H), 7,17 - 7,09 (m, 2H), 6,81 (m, 2H), 5,86 (br s, 1H), 4,66 - 4,38 (m, 1H), 4,21 - 4,09 (m, 1H), 3,82 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,30 - 3,06 (m, 6H), 1,8 - 1,46 (m, 2H), 0,94 (m, 3H). PROCEDIMENTO DI: SÍNTESE DO COMPOSTO 118
[1234] Preparação do composto DI-2. A uma solução de DI-1 (10 g, 32,86 mmol, 1 eq) em DMF (150 ml) foram adicionados DIEA (12,74 g,
98,57 mmol, 17,17 ml, 3 eq) e HBTU (19,94 g, 52,57 mmol, 1,6 eq). A mistura de reação foi agitada a 10 °C durante 5 min, seguido pela adição de C2H7NO·HCl (6,41 g, 65,72 mmol, 2 eq, HCl). A mistura de mistura foi agitada a 10 °C durante 16 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, de 0% a 50% de EtOAc em PE) para obter DI-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,40 (s, 9H), 2,80 (s, 1H), 3,14 (br s, 3H), 3,19 - 3,27 (m, 2H), 3,64 (br s, 3H), 4,96 - 5,30 (m, 2H), 7,04 (s, 1H), 7,08 - 7,14 (m, 1H), 7,14 - 7,20 (m, 1H), 7,33 (br d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,59 (br d, J = 7,53 Hz, 1H), 8,11 (br s, 1H).
[1235] Preparação de DI-3. A uma solução de DI-2 (9 g, 25,91 mmol, 1 eq) em THF (20 ml) foi adicionado LiAlH4 (1,47 g, 38,86 mmol, 1,5 eq) lentamente a 0 °C durante 0,5 h para obter uma solução amarela. TLC (eluindo com: PE/EA = 1/1) mostrou que a reação estava concluída. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (SiO2, de 0% a 40% de EtOAc em PE) para obter DI-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,42 - 1,47 (m, 9H), 3,19 - 3,37 (m, 2H), 4,51 (br d, J = 6,27 Hz, 1H), 5,18 (br d, J = 4,52 Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 7,11 - 7,17 (m, 1H), 7,21 (t, J = 7,15 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,60 (br d, J = 7,78 Hz, 1H), 8,29 (br s, 1H), 9,63 (s, 1H).
[1236] Preparação de DI-4. A uma solução de brometo de etil(trifenil)fosfônio (4,02 g, 10,82 mmol, 1,2 eq) foi adicionado gota a gota LiHMDS (1 M, 13,53 ml, 1,5 eq) em THF (10 ml). A mistura foi agitada a 0 °C durante 40 min. A mistura foi resfriada a -78 °C, e DI-3 (2,6 g, 9,02 mmol, 1 eq) em tolueno (10 ml) adicionado durante 1 h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 3/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por cromatografia em coluna (SiO2, 0% a 50% de EtOAc em PE) para obter DI-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,42 (s, 9H), 1,58 (dd, J = 6,90, 1,63 Hz, 3H), 1,64 (d, J = 6,27 Hz, 1H), 2,91 - 3,01 (m, 2H),
4,39 - 4,60 (m, 1H), 4,74 (br s, 1H), 5,30 (ddd, J = 10,60, 8,85, 1,63 Hz, 1H), 5,45 - 5,57 (m, 1H), 7,02 (d, J = 2,01 Hz, 1H), 7,08 - 7,14 (m, 1H), 7,15 - 7,22 (m, 1H), 7,35 (d, J = 8,03 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 7,78 Hz, 1H), 8,07 (s Ir, 1H).
[1237] Preparação de DI-5. Uma solução de DI-4 (300 mg, 998,69 µmol, 1 eq) e Pd/C (50 mg, 50% de pureza) em MeOH (10 ml) foi agitada sob H2 a 10 °C durante 2h para obter uma solução amarela. TLC (arrefecida com água, eluindo com: PE/EA = 5/1) mostrou que a reação foi concluída. A mistura foi purificada por prep-TLC (PE/EA = 3/1) para obter DI-5. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,88 (t, J = 6,94 Hz, 3H), 1,28 - 1,38 (m, 4H), 1,42 (br s, 9H), 2,93 (br d, J = 4,88 Hz, 2H), 3,93 (br s, 1H), 4,38 (br d, J = 7,13 Hz, 1H), 7,02 (br s, 1H), 7,09 - 7,15 (m, 1H), 7,19 (t, J = 7,13 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,63 (br d, J = 7,75 Hz, 1H), 8,06 (br s, 1H).
[1238] Preparação de DI-6. DI-5 (250 mg, 826,69 µmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/MeOH (4 M, 10 ml, 48,39 eq) e agitado a 10 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi ajustado para pH 8 com NaHCO3 sat. e concentrado para obter um resíduo. O resíduo foi lavado com DCM/EtOH (10/1, 20 ml) para obter DI-6, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,01 (m, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,98 (m, 1H), 6,85 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 1,67 (s, 9H).
[1239] Preparação de DI-7. A uma solução de DI-6 (150 mg, 741,49 µmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foram adicionados 4-morfolinobenzaldeído (141,79 mg, 741,49 µmol, 1 eq) e TFA (126,82 mg, 1,11 mmol, 82,35 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 12h para fornecer uma solução verde. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NaHCO3 sat. (10 ml) e extraído com DCM (20 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 50%) para obter DI-7. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 7,66 - 7,42 (m, 3H), 7,10 - 7,02 (m, 4H), 6,78 - 6,76 (m, 2H), 5,09 (s, 1H), 3,79 - 3,76 (m, 4H), 3,10 - 2,85 (m, 6H), 2,46 - 2,44 (m, 1H), 1,46 - 1,41 (m, 2H), 1,34 - 1,28 (m, 2H), 0,82 - 0,76 (m, 3H).
[1240] Preparação de 118. A uma solução de DI-7 (70 mg, 186,42 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados NaHCO3 (156,60 mg, 1,86 mmol, 72,50 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (63,16 mg, 559,25 µmol, 44,48 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 2h para obter uma suspensão azul. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (10 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% a 30%) para obter
118. LC-MS (m/z): 474,0 [M+Na]+. RMN de 1H (400 MHz, MeOD): δ 7,45 - 7,43 (m, 1H), 7,28 - 7,24 (m, 3H), 7,05 - 7,01 (m, 2H), 6,99 - 6,90 (m, 2H), 6,01 (brs, 1H), 4,36 - 4,05 (m, 3H), 3,79 - 3,72 (m, 4H), 3,12 - 2,94 (m, 6H), 1,34 - 1,29 (m, 4H), 0,85 - 0,84 (m, 3H). PROCEDIMENTO DJ: SÍNTESE DO COMPOSTO 120
[1241] Preparação de DJ-2. A uma solução de DJ-1 (1 g, 6,60 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foi adicionado KOH (925,27 mg, 16,49 mmol, 2,5 eq) seguido pela adição gota a gota de I2 (1,67 g, 6,60 mmol, 1,33 ml, 1 eq) em DMF (10 ml). A mistura foi agitada a 10 °C durante 2h para obter uma solução castanho-avermelhada. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (60 ml) e extraiu-se com MTBE (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[1242] Preparação de DJ-3. A uma solução de DJ-2 (1,83 g, 6,59 mmol, 1 eq) em CH3CN (20 ml) foram adicionados Boc2O (2,16 g, 9,89 mmol, 2,27 ml, 1,5 eq) e DMAP (80,57 mg, 659,49 µmol, 0,1 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 12h para obter uma suspensão amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (50 ml) e extraiu-se com EtOAc (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% a 20%) para obter DJ-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,08 - 8,06 (m, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,35 - 7,33 (m, 1H), 7,32 - 7,31 (m, 1H), 1,67 (m, 9H).
[1243] Preparação de DJ-4. A uma solução de DJ-3 (8 g, 21,19 mmol, 1 eq) em THF (80 ml) foi adicionado gota a gota n-BuLi (2,5 M, 9,32 ml, 1,1 eq) a -78 °C, e a mistura foi agitada a -78 °C durante 0,5 h. (2R)-2-metiloxirano (1,48 g, 25,42 mmol, 1,78 ml, 1,2 eq) em THF (10 ml) foi adicionado gota a gota a -78 °C, seguido pela adição gota a gota de BF3.Et 2 O (2,41 g, 16,95 mmol, 2,09 ml, 0,8 eq). A mistura foi agitada a -78 °C durante 1 h para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com NH4Cl sat. (50 ml) e extraído com EtOAc (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% a 30%) para obter DJ-4.
[1244] Preparação de DJ-5. A uma solução de DJ-4 (3,8 g, 12,27 mmol, 1 eq) em DCM (40 ml) foram adicionados Et3N (3,10 g, 30,67 mmol, 4,27 ml, 2,5 eq) e MsCl (1,55 g, 13,49 mmol, 1,04 ml, 1,1 eq). A mistura foi agitada a 5 °C durante 1 hora para obter uma solução amarela. O TLC não mostrou novos pontos e que DJ-4 permaneceu. Adicionou-se mais 1,55 g de MsCl e a mistura foi agitada a 5 °C durante 1 h. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi temperada com H2O (100 ml) e extraiu-se com DCM (100 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter DJ-5, que foi usado sem purificação adicional.
[1245] Preparação de DJ-6. A uma solução de DJ-5 (4,76 g, 12,27 mmol, 1 eq) em DMF (50 ml) foi adicionado NaN3 (1,20 g, 18,41 mmol, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi temperada com H2O (200 ml) e extraiu-se com MTBE (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o produto bruto, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional.
[1246] Preparação de DJ-7. A uma solução de DJ-6 (4,11 g, 12,28 mmol, 1 eq) em THF (40 ml)/H2O (10 ml) foi adicionado PPh3(4,83 g, 18,41 mmol, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: 100% de EtOAc) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (20 ml) e extraiu-se com EtOAc (50 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% a 100% EtOAc) para obter DJ-7. RMN de 1H
(400 MHz, CDCl3): δ 7,98 (brs, 1H), 7,48 - 7,37 (m, 2H), 7,21 - 7,18 (m, 1H), 3,70 - 3,67 (m, 1H), 3,26 - 3,19 (m, 1H), 2,74 - 2,65 (m, 1H), 2,52 - 2,49 (m, 1H), 1,59 (m, 9H), 1,11 - 1,10 (m, 3H).
[1247] Preparação de DJ-8. DJ-7 (2 g, 6,48 mmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/MeOH (4 M, 30 ml, 18,53 eq) e agitado a 10 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada para obter o produto bruto. O produto foi dissolvido em H2O (20 ml) e extraiu-se com MTBE (20 ml x 2). A camada de água foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 e a mistura foi concentrada para obter o produto bruto. O produto foi dissolvido em DCM/EtOH (10/1, 30 ml), filtrado e lavado com DCM (30 ml). O filtrado foi concentrado para obter DJ-8. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,12 (brs, 1H), 7,50 - 7,49 (m, 2H), 7,22 - 7,19 (m, 1H), 7,08 - 7,00 (m, 2H), 3,24 - 3,16 (m, 1H), 2,78 - 2,74 (m, 1H), 2,57 - 2,52 (m, 1H), 1,16 - 1,10 (m, 3H).
[1248] Preparação de DJ-9. A uma solução de DJ-8 (200 mg, 958,37 µmol, 1 eq) em DCM (20 ml) foram adicionados 4- morfolinobenzaldeído (183,27 mg, 958,37 µmol, 1 eq) e TFA (163,91 mg, 1,44 mmol, 106,44 µl, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 24h para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: EtOAc = 100%) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com HCO3 sat. (30 ml) e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por uma coluna flash (eluindo com: PE/EtOAc = 100% PE a 50%) para obter DJ-9.
[1249] Preparação de 120. A uma solução de DJ-9 (70 mg, 183,30 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados NaHCO3 (153,98 mg, 1,83 mmol, 71,29 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (62,11 mg, 549,89 µmol, 43,74 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 12h para obter uma suspensão amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc =
1/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (15 ml x 2). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) para obter 120. LC-MS (m/z): 457,8 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, MeOD): δ 7,48 (s, 1H), 7,31 - 7,29 (m, 3H), 7,14 - 7,09 (m, 1H), 6,93 - 6,91 (m, 2H), 4,69 (brs, 1H), 4,50 - 4,44 (m, 2H), 3,85 - 3,81 (m, 4H), 3,19 - 3,13 (m, 5H), 2,83 - 2,79 (m, 1H), 1,17 - 1,13 (m, 3H). PROCEDIMENTO DK: SÍNTESE DO COMPOSTO 121
[1250] Preparação de DK-2. A uma solução de DD-5 (110 mg, 538,51 µmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionado 4- morfolinobenzaldeído (102,98 mg, 538,51 µmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 15 °C durante 30 min, seguida pela adição de HOAC (32,34 mg, 538,51 µmol, 30,80 µl, 1 eq). A mistura foi agitada a 105 °C durante 12h para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que algum produto desejado foi encontrado. A mistura de reação foi ajustada para pH 8 com NaHCO3 sat. e extraído com DCM (20 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer um produto bruto. O resíduo foi purificado por TLC-prep (Acetato de etila: metanol = 10: 1) para obter DK-2 e DK-2a. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3)
δ ppm 1,27 (d, J = 6,27 Hz, 3H), 2,48 (br s, 1H), 2,77 (br d, J = 12,55 Hz, 1H), 3,07 - 3,11 (m, 4H), 3,21 (br s, 1H), 3,76 - 3,82 (m, 7H), 5,08 (br s, 1H), 6,71 (dd, J = 8,78, 2,51 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,78 Hz, 2H), 6,90 (d, J = 2,26 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,78 Hz, 1H), 7,16 - 7,18 (m, 1H), 7,21 (br s, 1H).
[1251] Preparação de 121. A uma solução de DK-2 (61 mg, 161,60 µmol, 1 eq) em CHCl3 (3 ml) foi adicionado NaHCO3 (135,75 mg, 1,62 mmol, 62,85 µl, 10 eq) e cloreto de 2-cloroacetila (54,75 mg, 484,80 µmol, 38,56 µl, 3 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 2h para obter uma solução azul. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (10 ml) e extraiu-se com DCM (30 ml x 3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto foi purificado por HPLC (coluna: Xtimate C18 150 x 25 mm x 5 µm; fase móvel: [água (0,05% HCl)-ACN]; B%: 30% - 60%, 9,5 min) para obter 121. LC-MS (m/z): 476,0 [M+Na]. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,33 (d, J = 6,27 Hz, 3H), 2,91 (br d, J = 16,56 Hz, 1H), 3,13 (br s, 3H), 3,52 (d, J = 5,02 Hz, 5H), 3,84 (t, J = 4,64 Hz, 4H), 3,87 (s, 3H), 5,88 (s, 1H), 6,79 - 6,85 (m, 3H), 6,97 (s, 1H), 7,15 (d, J = 8,78 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 8,78 Hz, 2H), 7,49 (s, 1H). PROCEDIMENTO DL: SÍNTESE DO COMPOSTO 232
[1252] (metil-(3R)-1-(4-morfolinofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato): A uma solução de metil D-triptofanato (1,0 g, 4,58 mmol, 1 eq) e 4-morfolinobenzaldeído (0,96 g, 5,04 mmol, 1 eq) em DCE (10 ml) foi adicionado lentamente TFA (0,7 ml, 9,16 mmol, 2 eq) a 0 °C.
A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 16 h e TLC (70% de EtOAc em hexano) mostrou o desaparecimento do material de partida.
A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida, e o produto bruto diluído com EtOAc (50 ml), lavado com solução saturada de NaHCO3 (2 x 20 ml) e solução salina (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida.
O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 0-60% de EtOAc em hexano como eluente para obter (3R)-1-(4-morfolinofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-3-carboxilato de metila.
LC-MS (m/z) = 392,3 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,02 - 3,09 (m, 1H), 3,09 - 3,17 (m, 4H), 3,33 - 3,36 (m, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,83 - 3,85 (m, 5H), 3,97 - 3,98 (m, 1H), 5,17 (s, 1H), 6,86 - 6,92 (m, 2H), 7,13 - 7,16 (m, 5H), 7,51 - 7,53 (m, 2H).
[1253] Metil-(3R)-2-benzil-1-(4-morfolinofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato: Para uma solução de (3R)-1-(4- morfolinofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila (1,6 g, 4,09 mmol, 1 eq) em acetonitrila (16 ml) foi adicionado DIPEA (1,0 g, 8,06 mmol, 2 eq) e brometo de benzila (0,9 g, 5,31 mmol, 1,3 eq) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 80 °C durante 6 h. TLC (20% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 0 a 30% de EtOAc em hexano como um eluente para obter (3R)-2-benzil-1-(4- morfolinofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila. LC-MS (m/z) = 482,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,14 - 3,30 (m, 6H), 3,33 - 3,35 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,83 - 3,86 (m, 5H), 3,92 (bs, 1H), 5,38 (s, 1H), 6,87-7,02 (m, 2H), 7,05 - 7,06 (m, 2H), 7,08 - 7,11 (m, 2H), 7,18 - 7,28 (m, 5H), 7,32 - 7,34 (m, 2H), 7,49 (d, J = 7,6 Hz, 1H).
[1254] 9-(terc-butil)-3-metil-(3R)-2-benzil-1-(4-morfolinofenil)- 1,2,3,4-tetra-hidro-9H-pirido[3,4-b]indol-3,9-dicarboxilato: A uma solução de (3R)-2-benzil-1-(4-morfolinofenil)-2,3,4,9-tetrahidro-1H- pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila (2,0 g, 4,15 mmol, 1 eq) em acetonitrila (20 ml) foi adicionado DMAP (50 mg, 0,41 mmol, 0,1 eq) e BOC2O (1,17 g, 5,40 mmol, 1,3 eq) à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. TLC (20% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 0-15% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 9-(terc-butil) 3-metil(3R) -2-benzil-1-(4- morfolinofenil)-1,2,3,4-tetrahidro-9H-pirido [3,4-b] indol-3,9-
dicarboxilato. LC-MS (m/z) = 582,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,05 (s, 9H), 2,89 - 3,06 (m, 5H), 3,12 - 3,19 (m, 1H), 3,54 - 3,57 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,85 - 3,86 (m, 4H), 3,88 - 3,89 (m, 1H), 3,93 - 3,96 (m, 1H), 5,30 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,88 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,36 - 7,38 (m, 5H), 7,50 - 7,56 (m, 3H), 8,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H).
[1255] terc-butil-(3R)-2-benzil-3-(hidroximetil)-1-(4-morfolinofenil)- 1,2,3,4-tetra-hidro-9H-pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato: A uma solução de 9-(terc-butil)3-metil(3R)-2-benzil-1-(4-morfolinofenil)-1,2,3,4- tetrahidro-9H-pirido[3,4-b]indol-3,9-dicarboxilato (1,2 g, 2,06 mmol, 1 eq) em THF (12 ml) foi adicionado LiAlH4 solução 1M em THF (2,47 ml, 2,47 mmol, 1,2 eq) a -40 °C e agitado durante 4 h na mesma temperatura. Após este tempo, a mistura de reação foi deixada a agitar a 0 °C durante 5 h. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta com solução de salmoura (1,0 ml) a 0 °C e a porção sólida obtida foi removida por filtração. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 0 - 30% de EtOAc em hexano como um eluente para obter (3R)- 2-benzil-3-(hidroximetil)-1-(4-morfolinofenil)-1,2,3,4-tetra-hidro-9H- pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 554,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,03 (s, 9H), 2,58 - 2,69 (m, 2H), 2,78 (bs, 1H), 3,05 - 3,06 (m, 4H), 3,32 - 3,37 (m, 1H), 3,40 - 3,43 (m, 1H), 3,63 (bs, 1H), 3,80 - 3,84 (m, 4H), 3,98 - 4,01 (m, 1H), 4,24 - 4,25 (m, 1H), 5,37 (s, 1H), 6,69 - 6,78 (m, 4H), 7,30 - 7,34 (m, 4H), 7,36 - 7,40 (m, 3H), 7,50 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 8,0 Hz, 1H).
[1256] terc-butil-(3R)-2-benzil-3-(metoximetil)-1-(4-morfolinofenil)- 1,2,3,4-tetrahidro-9H-pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato: A uma solução de (3R)-2-benzil-3-(hidroximetil)-1-(4-morfolinofenil)-1,2,3,4-tetra-hidro- 9H-pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato de terc-butila (0,74 g, 1,33 mmol, 1 eq) em DMF (7,0 ml) foi adicionado NaH 60% de dispersão em óleo mineral (0,21 g, 5,35 mmol, 4,0 eq) a 0 °C e agitado por 30 min na mesma temperatura. Em seguida, iodeto de metila (0,94 g, 6,65 mmol, 5,0 eq) foi adicionado à mistura de reação acima a 0 °C. Finalmente, esta mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta com água gelada (5,0 ml) a 0°C. Em seguida, o produto foi extraído com acetato de etila (35 ml) e solução de salmoura lavada (10 ml), seco sobre Na2SO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 0- 40% de EtOAc em hexano como um eluente para obter o terc-butil(3R)- 2-benzil-3-(metoximetil)-1-(4-morfolinofenil)-1,2,3,4-tetrahidro-9H- pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 568,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,02 (s, 9H), 3,27 - 3,29 (m, 4H), 3,39 - 3,48 (m, 4H), 3,51 (bs, 1H), 3,58 - 3,67 (m, 3H), 3,68 - 3,71 (m, 1H), 3,81 (bs, 4H), 3,96 - 4,02 (m, 1H), 5,22 (s, 1H), 6,71 - 6,75 (m, 2H), 6,83 - 6,85 (m, 2H), 7,32 - 7,34 (m, 5H), 7,47 - 7,51 (m, 2H), 7,53 - 7,59 (m, 1H), 8,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H).
[1257] terc-butil-(3R)-3-(metoximetil)-1-(4-morfolinofenil)-1,2,3,4- tetra-hidro-9H-pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato: À solução agitada de (3R)-2-benzil-3-(metoximetil)-1-(4-morfolinofenil)-1,2,3,4-tetra-hidro- 9H-pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato de terc-butila (0,425 g, 0,75 mmol, 1 eq) em acetato de etila (5 ml) e metanol (5 ml) foi adicionado hidróxido de paládio sobre carbono (10 mg) sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi agitada sob atmosfera de hidrogênio (pressão de balão) à temperatura ambiente durante 5 h. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação foi concluída, então a mistura foi desgaseificada com nitrogênio e filtrada através de leito de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 0 - 30% de EtOAc em hexano como um eluente para fornecer (3R)-3-(metoximetil)-1-(4- morfolinofenil)-1,2,3,4-tetra-hidro-9H-pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z): 478,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,33 (s, 9H), 2,57 - 2,60 (m, 1H), 2,69 - 2,74 (m, 1H), 3,03 - 3,06 (m, 2H), 3,08 - 3,11 (m, 4H), 3,29 (s, 3H), 3,40 - 3,45 (m, 2H), 3,82 - 3,84 (m, 4H), 5,68 (s, 1H), 6,78 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,97 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,28 - 7,32 (m, 2H), 7,46 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,22 (d, J = 8,4 Hz, 1H).
[1258] Cloreto de hidrogênio de 4-(4-((3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina: Para a solução de (3R)-3-(metoximetil)-1-(4-morfolinofenil)-1,2,3,4-tetrahidro-9H- pirido[3,4-b]indol-9-carboxilato de terc-butila (0,125 g, 0,26 mmol, 1 eq) em DCM (2,0 ml) foi adicionado HCl 4 N em 1,4-dioxano (1,0 ml) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. LCMS e TLC (70% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava concluída. Após este tempo, a mistura de reação foi concentrada para obter cloreto de hidrogênio de 4-(4- ((3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)morfolina. LC-MS (m/z): 378,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 2,87 - 2,93 (m, 1H), 3,09 - 3,11 (m, 4H), 3,30 (s, 3H), 3,52 - 3,54 (m, 3H), 3,64 - 3,70 (m, 5H), 5,72 (s, 1H), 6,95 - 7,02 (m, 3H), 7,08 - 7,19 (m, 3H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,51 - 7,54 (m, 1H), 9,09 (bs, 1H), 10,00 (bs, 1H), 10,94 (s, 1H).
[1259] 2-cloro-1-((1S,3R)-3-(metoximetil)-1-(4-morfolinofenil)- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: A uma solução de cloreto de hidrogênio de 4-(4-((3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9- tetrahidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina (0,11 g, 0,46 mmol, 1 eq) em DCM (2,5 ml) foi adicionado trietilamina (0,078 g, 0,78 mmol, 3,0 eq) a 0 °C, seguido por cloreto de 2-cloroacetila (0,036 g, 0,31 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1,5 h sob atmosfera de N2.
TLC (70% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. Em seguida, a reação foi diluída com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e foi extraída com DCM (15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 60% de EtOAc em n-Hexano como fase móvel para obter 2-cloro-1-((1S, 3R)-3-(metoximetil)-1-(4-morfolinofenil)-1,3,4,9- tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona. (Isômero trans confirmado pelo experimento nOe). LC-MS (m/z) = 454,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,06 - 3,10 (m, 5H), 3,26 (s, 3H), 3,37 - 3,48 (m, 3H), 3,80 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 4,02 (bs, 1H), 4,50 (bs, 1H), 4,79 (bs, 1H), 5,81 (s, 1H), 6,79 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,08 - 7,14 (m, 2H), 7,21 - 7,23 (m, 3H), 7,50 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H). PROCEDIMENTO DM: SÍNTESE DO COMPOSTO 158 E 159
[1260] Tetra-hidro-2H-piran-4-il 4-metilbenzenossulfonato: A uma solução de tetra-hidro-2H-piran-4-ol (0,5 g, 4,90 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionada trietilamina (0,74 g, 7,35 mmol, 1,5 eq) seguido por cloreto de 4-metilbenzenossulfonila (1,0 g, 5,39 mmol, 1,1 eq) a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h.
TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. Em seguida, a mistura de reação foi diluída com DCM (30 ml) e solução aquosa saturada de NaHCO3 (10 ml). A camada orgânica foi separada, lavada com solução de salmoura (5 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 0 - 30% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-metilbenzenossulfonato de tetra-hidro-2H-piran-4-ila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,70 - 1,79 (m, 2H), 1,83 - 1,87 (m, 2H), 2,60 (s, 3H), 3,43 -3,49 (m, 2H), 3,83 - 3,89 (m, 2H), 4,66 - 4,72 (m, 1H), 7,33 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H).
[1261] 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-carbaldeído: A uma solução de tetra-hidro-2H-piran-4-il 4-metilbenzenossulfonato (0,6 g, 2,34 mmol, 1 eq) e 1H-pirazol-4-carbaldeído (0,225 g, 2,34 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foi adicionado Cs2CO3 (0,83 g, 2,57 mmol, 1,1 eq) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada a 90 °C durante 16 h. TLC (70% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi diluída com EtOAc (50 ml) e água (25 ml). A camada orgânica foi separada, lavada com água (3 x 25 ml), solução de salmoura (10 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 0 - 50% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-carbaldeído. LC-MS (m/z) = 181 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,03 - 2,15 (m, 4H), 3,54 (t, J = 11,6 Hz, 2H), 4,10 - 4,13 (m, 2H), 4,35 - 4,41 (m, 1H), 7,98 (s, 2H), 9,86 (s, 1H).
[1262] (3S)-3-metil-1-(1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-il)- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol: A uma solução de (S)-1-(1H- indol-3-il)propan-2-amina (0,24 g, 1,38 mmol, 1 eq) e 1-(tetrahidro-2H-
piran-4-il)-1H-pirazol-4-carbaldeído (0,26 g, 1,45 mmol, 1,05 eq) em DCE (5,0 ml) foi adicionado lentamente TFA (0,3 g, 2,76 mmol, 2 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 16 h. TLC 70% (EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida e, em seguida, o produto bruto obtido foi diluído com EtOAc (30 ml) e solução aquosa saturada de NaHCO3 (15 ml). A camada orgânica foi separada, lavada com solução de salmoura (10 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia flash usando 0-60% de EtOAc em hexano como um eluente para obter (3R)-1-(4-morfolinofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila. Nota: Os pontos polares e não polares foram coletados separadamente e levados adiante separadamente para a próxima etapa. LC-MS (m/z) = 337,2 [M+H]+
[1263] Para ponto não polar: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,25 - 1,26 (m, 3H), 1,98 - 2,08 (m, 4H), 2,47 - 2,55 (m, 1H), 2,84 - 2,91 (m, 1H), 3,23 - 3,26 (m, 1H), 3,46 - 3,54 (m, 2H), 4,02 - 4,14 (m, 2H), 4,21 - 4,33 (m, 1H), 5,26 (s, 1H), 7,08 - 7,18 (m, 2H), 7,42 (s, 1H), 7,43 - 7,52 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,71 (s, 1H). O próton NH não foi observado no RMN de 1H. Experimento nOe: concluído como isômero cis.
[1264] Para ponto polar: RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,26 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,95 - 2,04 (m, 4H), 2,45 - 2,51 (m, 1H), 2,84 - 2,90 (m, 1H), 3,25 (bs, 1H), 3,49 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 4,06 (d, J = 10,8 Hz, 2H), 4,21 - 4,29 (m, 1H), 5,27 (s, 1H), 7,09 - 7,16 (m, 2H), 7,25 - 7,28 (m, 2H), 7,42 (s, 1H), 7,51 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H). O próton NH não foi observado no RMN de 1H. Experimento nOe: - Concluído como isômero trans.
[1265] Preparação do composto 159.
[1266] 2-cloro-1-((3S)-3-metil-1-(1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H-
pirazol-4-il)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: A uma solução de (3S)-3-metil-1-(1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol- 4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol (0,18 g, 0,53 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionada trietilamina (0,133 g, 1,32 mmol, 2,5 eq) a 0 °C, seguida por cloreto de 2-cloroacetila (0,079 g, 0,69 mmol, 1,3 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1,0 h sob atmosfera de N2. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. Em seguida, a reação foi diluída com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e foi extraída com DCM (15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 70% de EtOAc em n-Hexano como fase móvel para obter 2- cloro-1-((3S)-3-metil-1-(1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-il)- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z) = 413,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 1,25 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 2,02 - 2,09 (m, 4H), 2,83 - 2,87 (m, 1H), 3,14 - 3,17 (m, 1H), 3,50 - 3,52 (m, 2H), 4,06 - 4,08 (m, 2H), 4,20 - 4,24 (m, 3H), 4,55 (bs, 1H), 6,63 (s, 1H), 7,15 - 7,16 (m, 2H), 7,33 - 7,36 (m, 2H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,93 (s, 1H).
[1267] Preparação do composto 158.
[1268] 2-cloro-1-((3S)-3-metil-1-(1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H- pirazol-4-il)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: Para uma solução de (3S)-3-metil-1-(1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) -1H- pirazol-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol (0,17 g, 0,50 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionada trietilamina (0,126 g, 1,25 mmol, 2,5 eq) a 0 °C, seguida por cloreto de 2-cloroacetila (0,074 g, 0,65 mmol, 1,3 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1,0 h sob atmosfera de N2. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. Em seguida, a reação foi diluída com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e foi extraída com DCM (15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 70% de EtOAc em n-Hexano como fase móvel para obter 2-cloro-1-((3S)-3-metil-1-(1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol- 4-il)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z) = 413,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 1,29 (s, 3H), 1,99 (m, 4H), 2,93 - 2,96 (m, 1H), 3,10 - 3,20 (m, 1H), 3,40 - 3,52 (m, 2H), 4,02 - 4,05 (m, 2H), 4,14 - 4,24 (m, 3H), 4,51 (bs, 1H), 6,18 (s, 1H), 7,14 - 7,19 (m, 3H), 7,31 - 7,33 (m, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,53 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,90 (s, 1H). PROCEDIMENTO DN: SÍNTESE DO COMPOSTO 211
[1269] (R)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(5-(prop-2-in-1-ilóxi)- 1H-indol-3-il)propanoato de metila: Para uma solução de (R)-2 -((terc- butoxicarbonil)amino)-3-(5-hidróxi-1H-indol-3-il)propanoato de metila (0,31 g, 0,93 mmol, 1 eq) em acetona (10 ml) foi adicionado carbonato de césio (0,33 g, 1,02 mmol, 1,1 eq) seguido por 3-bromoprop-1-ina (0,08 ml, 1,02 mmol, 1,1 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 5 h. Após o consumo do material de partida (TLC, 40% de EtOAc em hexano), a porção sólida foi removida por filtração através de celite; o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash em sílica gel usando EtOAc/hexano como eluente para produzir (R)-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-(5-(prop-2-in-1-ilóxi)-1H-indol-3- il)propanoato de metila. LC-MS (m/z) = 273,1 [M+H]+-100. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,29 (s, 9H), 2,89 - 3,04 (m, 2H), 3,48 (s, 1H), 3,58 (s, 3H), 4,16 (bs, 1H), 4,72 (s, 2H), 6,74 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 16 Hz, 2H), 7,21 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 10,71 (s, 1H).
[1270] Cloridrato de (R)-2-amino-3-(5-(prop-2-in-1-ilóxi)-1H-indol-3- il)propanoato de metila: a uma solução de (R)-2 -((terc- butoxicarbonil)amino)-3-(5-(prop-2-in-1-ilóxi)-1H-indol-3-il)propanoato de metila (0,3 g, 0,81 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado HCl 4N em 1,4-dioxano (4,0 ml) a 0. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. LCMS e TLC (5% MeOH em DCM) mostraram que a reação foi concluída. Após este tempo, a mistura de reação foi concentrada para obter cloridrato de (R)-2-amino-3-(5-(prop- 2-in-1-ilóxi)-1H-indol-3-il)propanoato de metila. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,21 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 3,45 (s, 1H), 3,66 (s, 3H), 4,23 (bs, 1H), 4,74 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 6,78 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,10 (s, 1H), 7,18 - 7,19 (m, 1H), 7,26 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,46 (bs, 3H), 10,95 (s, 1H).
[1271] (R)-2-amino-3-(5-(prop-2-in-1-ilóxi)-1H-indol-3-il)propanoato de metila: Para uma solução de Cloridrato (R)-2-amino-3-(5-(prop-2-in- 1-ilóxi)-1H-indol-3-il) propanoato de metila (0,17 g, 0,55 mmol, 1 eq) em EtOAc (30 ml) e água (5 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,23 g, 2,75 mmol, 5 eq) à temperatura ambiente e agitou-se esta massa de reação durante 30 min. Então a camada orgânica foi separada, seca com MgSO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o (R)-2- amino-3-(5-(prop-2-in-1-ilóxi)-1H-indol-3-il)propanoato de metila. LC- MS (m/z) = 273,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,51 (s,
1H), 3,00 - 3,06 (m, 1H), 3,22 - 3,27 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,82 - 3,86 (m, 1H), 4,73 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,07 (s, 1H), 7,16 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 8,00 (bs, 1H). Prótons de NH2 não foram observados em RMN de 1H.
[1272] Metil-(1S,3R)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1- il)carbamoil)fenil)-6-(prop-2-in-1-ilóxi)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-3-carboxilato: A uma solução de (R)-2-amino-3-(5-(prop-2-in-1- ilóxi)-1H-indol-3-il)propanoato de metila (130 mg, 0,47 mmol, 1 eq) e N- ((3s, 5s, 7s)-adamantan-1-il)-4-formilbenzamida (149 mg, 0,52 mmol, 1,1 eq) em DCE (3,0 ml) foi adicionado lentamente TFA (107 mg, 0,94 mmol, 2 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 5 h. TLC 5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida e, em seguida, o produto bruto obtido foi diluído com EtOAc (25 ml), lavado com solução saturada de NaHCO3 (2 x 7 ml) e solução salina (10 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro filtrado, e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 0 - 5% de MeOH em DCM como um eluente para obter (1S,3R)-1-(4-(((3R,5R,7R)- adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-6-(prop-2-in-1-ilóxi)-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila [Ponto polar no isômero TLC-Trans]) e ponto não polar em TLC, isto é, o isômero Cis também foi isolado separadamente. LC-MS (m/z) = 538,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,71 (s, 6H), 2,10 (s, 9H), 2,52 (s, 1H), 3,09 - 3,14 (m, 1H), 3,48 - 3,53 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,95 (bs, 1H), 4,92 (s, 2H), 5,43 (s, 1H), 5,74 (s, 1H), 6,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,09 - 7,16 (m, 2H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,51 (bs, 1H), 7,66 (d, J = 7,6 Hz, 2H). O próton NH não foi observado em RMN de 1H.
[1273] Preparação do composto 211.
[1274] Metil-(1S,3R)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-
il)carbamoil)fenil)-2-(2-cloroacetil)-6-(prop-2-in-1-ilóxi)-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato: A uma solução de (1S,3R)-1- (4-(((3R, 5R,7R)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-6-(prop-2-in-1-ilóxi)- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila (90 mg, 0,16 mmol, 1 eq) em DCM (2,0 ml) foi adicionado trietilamina (44 mg, 0,4 mmol, 2,5 eq) a 0 °C, seguido por cloreto de 2-cloroacetila (24 mg, 0,21 mmol, 1,3 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 1,0 h sob atmosfera de N2. TLC (45% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída.
Em seguida, a reação foi diluída com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e foi extraída com DCM (20 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida.
O produto bruto foi inicialmente purificado por TLC preparativa usando EtOAc em Hexano como fase móvel para obter o composto 211. LC-MS (m/z) = 614,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) registrado a 70 °C δ ppm 1,64 (s, 6H), 2,03 (s, 9H), 3,19 - 3,28 (m, 2H), 3,40 - 3,44 (m, 1H), 3,52 (s, 3H), 4,20 - 4,25 (m, 1H), 4,54 (d, J = 14 Hz, 1H), 4,70 (s, 2H), 5,20 (bs, 1H), 6,12 (bs, 1H), 6,72 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,13 - 7,15 (m, 2H), 7,44 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,63 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 10,61 (s, 1H). PROCEDIMENTO DO: SÍNTESE DO COMPOSTO 152
[1275] 4-(N-ciclobutilsulfamoil)-benzoato de metila: A uma solução agitada de ciclobutanamina (0,303 g, 4,26 mmol, 1,0 eq) em THF (15 ml) foi adicionada trietilamina (1,78 ml, 12,78 mmol, 3,0 eq) seguida por 4-(clorossulfonil)benzoato de metila (1,0 g, 4,26 mmol, 1,0 eq) a 0 °C. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. TLC (50% de EtOAc em n-Hexano) mostrou que a reação estava concluída. Após o consumo do material de partida, o solvente foi evaporado sob pressão reduzida, para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (eluindo com: Hexano/EtOAc = 50: 50) para obter 4-(N-ciclobutilsulfamoil)benzoato de metila. LC-MS (m/z) = 268,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,56 - 1,67 (m, 2H), 1,71 - 1,78 (m, 2H), 2,13 - 2,15 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,80 - 3,88 (m, 1H), 4,65 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 8,16 (d, J = 7,6 Hz, 2H).
[1276] N-ciclobutil-4-(hidroximetil)benzenossulfonamida: A uma solução de 4-(N-ciclobutilsulfamoil)benzoato de metila (1,0 mg, 3,713 mmol, 1,0 eq) em mistura de THF (15 ml) e metanol (15 ml) a 0 °C, NaBH4 (1,4 g, 37,13 mmol, 10,0 eq) foi adicionado. Em seguida, a mistura de reação foi submetida a refluxo durante 16 h. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente. TLC (40% de EtOAc em n- hexano) mostrou que a reação estava concluída. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto obtido foi extinto com cloreto de amônio saturado e extraído com acetato de etila (2 × 25 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com água (10 ml), seca com Na2SO4 anidro e concentrada para fornecer o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (eluindo com: 40% de EtOAc em n-Hexano) para obter N-ciclobutil-4- (hidroximetil)benzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 241,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1,49 - 1,61 (m, 2H), 1,8073 1,80 (m, 2H), 2,12 - 2,20 (m, 2H), 3,75 - 3,85 (m, 1H), 4,59 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,79 (s, 2H), 7,49 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,83 (d, J = 8,4 Hz, 2H).
[1277] N-ciclobutil-4-formilbenzenossulfonamida: A uma solução de N-ciclobutil-4-(hidroximetil)benzenossulfonamida (500 mg, 2,072 mmol, 1 eq) em DCM (15 ml) foi adicionado periodinano de Dess martin (1,318 g, 3,108 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 h. TLC (40% de EtOAc em n-hexano) mostrou que a reação estava concluída. Em seguida, a mistura de reação foi extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio e extraída com DCM (2 x 25 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com (10 ml) de água e solução de salmoura e seca com Na2SO4 e concentrada para fornecer o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash utilizando acetato de etila em hexano como eluente. As frações do produto foram recolhidas e concentradas sob pressão reduzida para obter N-ciclobutil-4- formilbenzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 238,1 [M-H]-. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,56 - 1,68 (m, 2H), 1,73 - 1,83 (m, 2H), 2,04 - 2,17 (m, 2H), 3,80 - 3,90 (m, 1H), 7,25 (s, 1H), 8,02 (s, 4H), 10,10 (s, 1H).
[1278] 4-((3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)- N-ciclobutilbenzenossulfonamida: Em um tubo selado, para uma solução do composto (S)-1-(1H-indol-3-il)hexan-2-amina (0,150 g, 0,693 mmol, 1,0 eq) em HFIPA (1,0 ml), composto N-ciclobutil-4- formilbenzenossulfonamida (0,199 g, 0,831 mmol, 1,2 eq) foi adicionado. Em seguida, a mistura de reação foi selada e aquecida a 80°C durante 12 h. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e diluída com DCM e foi evaporada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 45% de EtOAc em n-Hexano como fase móvel para obter o produto como isômero cis e trans de 4-((3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida em que o isômero trans foi caracterizado por experimento nOe e foi coletado separadamente e utilizado na próxima etapa.
[1279] Trans (ponto polar em TLC): 60 mg; Cis (não polar em TLC). Apenas o ponto polar foi levado adiante para a próxima etapa. LC-MS (m/z): 437,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0,86 - 0,96 (m, 3H), 1,25 - 1,40 (m, 4H), 1,42 - 1,62 (m, 4H), 1,73 - 1,80 (m, 2H), 2,01 - 2,13 (m, 2H), 2,47 - 2,59 (m, 1H), 2,92 - 2,95 (m, 2H), 3,13 (s, 1H), 3,79 - 3,81 (m, 1H), 4,61 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 7,13 - 7,23 (m, 3H), 7,29 - 7,31 (m, 1H), 7,38 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,55 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 7,68 (s, 1H), 7,78 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 7,6 Hz, 1H). Experimento nOe: - Concluído como isômero trans.
[1280] Preparação do composto 152.
[1281] 4-((1S,3S)-3-butil-2-(2-cloroacetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida: Para uma solução de 4-((3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)- N-ciclobutilbenzenossulfonamida (isômero polar (trans) foi usado como material de partida) (60 mg, 0,137 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml), foi adicionada trietilamina (0,05 ml, 0,411 mmol, 3,0 eq) a 0 °C, seguida por cloreto de 2-cloroacetila (0,015 ml, 0,191 mmol, 1,4 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 20 minutos sob atmosfera de N2. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. Em seguida, a reação foi diluída com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e foi extraída com DCM (15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 45% de EtOAc em n-hexano como fase móvel para obter o composto 152. LC-MS (m/z): 514,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,77 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,21 (s, 4H), 1,42 (m, 2H), 1,67 (t, 2H), 1,82 (d, 2H), 3,05 (s, 1H), 3,51 - 3,53 (m, 1H), 4,46 (s, 2H), 4,66 (s, 1H), 5,95 (bs, 1H), 6,93 - 7,01 (m, 2H), 7,24 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 7,62 (s, 2H), 7,85 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 10,89 (s, 1H).
PROCEDIMENTO DP: SÍNTESE DO COMPOSTO 220
H N O NH2
O NH H N
H O H K2CO3, DMF N N F N TFA, DCM NH N N
O O
O O Cl Cl Cl N TEA , DCM NH N
N
O 220
[1282] 6-morfolinonicotinaldeído: a uma solução de 6- fluoronicotinaldeído (0,5 g, 4 mmol, 1 eq) em DMF (15 ml) foi adicionado lentamente K2CO3 (0,82 g, 6 mmol, 1,5 eq) e morfolina (0,4 ml, 4,8 mmol, 1,2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 110 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida e, em seguida, o produto bruto foi diluído com EtOAc (150 ml) e lavado com água (2 x 15 ml). A camada orgânica foi seca com anidro Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash utilizando 20-25% de AcOEt em hexano como eluente para fornecer 6-morfolinonicotinaldeído. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,66 (s, 8H), 6,92 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,87 - 7,89 (m, 2H), 9,73 (s, 1H).
[1283] 4-(5-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)piridin-2-il)morfolina: Para uma solução de (S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (0,15 g, 0,860 mmol, 1 eq) em DCM (15,0 ml) foi adicionado 6-morfolinonicotinaldeído (0,19 g, 1,032 mmol, 1,2 eq) e TFA (0,14 ml, 1,72 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com acetato de etila (100 ml) e lavada com solução saturada de NaaHCO3 (10 ml) e água (2 x 5 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 3% de MeOH em DCM como um eluente para obter o produto 4-(5- ((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)piridin-2- il)morfolina. LC-MS (m/z) = 349 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO- d6) δ 1,11 - 1,20 (m, 3H), 2,30 - 2,48 (m, 2H), 2,65 - 2,69 (m, 1H), 3,02 - 3,07 (m, 1H), 3,37 - 3,39 (m, 4H), 3,60 - 3,66 (m, 4H), 4,99 (s, 1H), 6,76 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,88 - 6,96 (m, 2H), 7,14 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,35 - 7,39 (m, 2H), 8,08 (s, 1H).
[1284] Preparação do composto 220. 2-cloro-1-((1S,3S)-3-metil-1- (4-morfolinofenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-etan-1- ona: Para uma solução de 4-(5-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)piridin-2-il) morfolina (0,085 g, 0,24 mmol, 1 eq) em CH2Cl2 (10,0 ml) foi adicionado TEA (0,1 ml, 0,73 mmol, 3,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 min e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,03 ml, 0,36 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 hora. LCMS e TLC (40% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava completa. A mistura de reação foi diluída com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e foi extraída com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 2-cloro-1-((1S,3S)-3-metil-1-(4-morfolinofenil)- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona. A geometria trans foi confirmada por COSY e NOESY. LC-MS (m/z): 425 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO): δ 1,03-1,05 (m, 3H), 2,72-2,76 (m, 1H), 3,05- 3,10 (m, 1H), 3,37 - 3,40 (m, 4H), 3,64 - 3,66 (m, 4H), 4,57 (s, 3H), 6,65 (bs, 1H), 6,76 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,97 - 7,00 (m, 1H), 7,05 - 7,09 (m, 1H), 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,42 - 7,46 (m, 2H), 8,08 (s, 1H).
[1285] Um esquema sintético semelhante foi usado para sintetizar o Composto 123, Composto 124, Composto 202, Composto 212 e Composto 174.
[1286] Composto 123: LC-MS (m/z): 417,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,94 - 0,95 (m, 3H), 2,70 - 2,74 (m, 1H), 3,11 - 3,14 (m, 1H), 4,63 (bs, 3H), 6,86 (bs, 1H), 7,00 - 7,10 (m, 2H), 7,31 - 7,35 (m, 3H), 7,48 - 7,50 (m, 3H), 7,76 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 11,05 (s, 1H).
[1287] Composto 124: LC-MS (m/z): 424,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,02 - 1,04 (m, 3H), 1,11 - 1,13 (m, 3H), 2,85 - 2,89 (m, 2H), 3,16 - 3,20 (m, 2H), 3,31 - 3,38 (m, 6H), 3,62 - 3,65 (m, 8H), 4,34 (bs, 1H), 4,58 (s, 3H), 4,64 - 4,71 (m, 2H), 5,84 (bs, 1H), 6,65 - 6,76 (m, 2H), 6,78 - 6,92 (m, 1H), 7,00 - 7,09 (m, 3H), 7,10 - 7,19 (m, 1H), 7,20 - 7,22 (m, 1H), 7,24 - 7,29 (m, 1H), 7,31 - 7,46 (m, 3H), 8,07 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 10,86 (s, 1H), 10,95 (s, 1H).
[1288] Composto 202: LC-MS (m/z): 424,9 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,11 - 1,13 (m, 3H), 2,85 - 2,89 (m, 1H), 3,16 - 3,20 (m, 1H), 3,29 (s, 4H), 3,62 (s, 4H), 4,33 (bs, 1H), 4,64 - 4,71 (m, 2H), 5,84 (bs, 1H), 6,66 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,92 - 7,02 (m, 2H), 7,23 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,41 - 7,43 (m, 2H), 8,14 (s, 1H), 10,86 (s, 1H).
[1289] Composto 212: LC-MS (m/z): 452,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,21 - 1,25 (m, 6H), 1,29 - 1,31 (m, 3H), 2,36 (bs, 2H), 2,90 - 2,94 (m, 1H), 3,28 - 3,38 (m, 3H), 3,74 (bs, 2H), 3,95 (bs, 1H), 4,12 (bs, 1H), 4,90 (bs, 1H), 5,87 (s, 1H), 6,81 (bs, 2H), 7,08 - 7,15 (m, 2H), 7,19 - 7,25 (m, 3H), 7,50 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H).
[1290] Composto 174: LC-MS (m/z): 451,5 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,35 - 0,46 (m, 4H), 1,21 - 1,23 (m, 3H), 2,04 - 2,06 (m, 1H), 2,93 - 2,97 (m, 1H), 3,35 - 3,38 (m, 1H), 4,52 (bs, 1H), 5,19 (bs, 1H), 6,17 (s, 1H), 6,95 - 7,04 (m, 2H), 7,25 - 7,27 (m, 1H), 7,45 - 7,50 (m, 4H), 7,83 (s, 1H), 10,73 (s, 1H). PROCEDIMENTO DQ: SÍNTESE DO COMPOSTO 209
[1291] 4-(etilsulfonil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila: 1-Boc- piperazina comercial (3,0 g, 16,11 mmol, 1 eq) foi dissolvido em cloreto de metileno (30 ml), em seguida, à mistura de reação, que foi agitada a -40 °C, foi adicionada trietilamina (5,61 ml, 40,26 mmol, 2,5 eq) e cloreto de etanossulfonila (1,83 ml, 19,33 mmol, 1,2 eq). Toda a mistura foi aquecida gradualmente e agitada durante 14 horas. A mistura de reação foi vertida em água e extraída com acetato de etila. A camada orgânica do extrato foi lavada com ácido clorídrico diluído e solução salina saturada sucessivamente, e em seguida seca com sulfato de sódio. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado com cromatografia em coluna de sílica-gel para fornecer 4- (etilsulfonil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 1,34-1,38 (m, 3H), 1,45 (s, 9H), 2,91-2,97 (m, 2H), 3,23 - 3,25 (m, 4H), 3,49 - 3,51 (m, 4H).
[1292] Cloridrato de 1-(etilsulfonil)piperazina: 4- (etilsulfonil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila(3,82 g, 13,72 mmol, 1 eq) foi dissolvido no cloreto de metileno (30 ml), em seguida, à mistura de redação, que foi agitada à temperatura ambiente, foi adicionado ácido clorídrico 4N (solvente de dioxano) (15 ml). Toda a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 12 horas, em seguida, o produto resultante foi filtrado para obter4-(4-(etilsulfonil)piperazin-1- il)benzaldeído. RMN de 1H (DMSO-d6) δ: 1,19 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 3,13- 3,15 (m, 6H), 3,39 (bs, 4H), 9,1 (bs, 2H).
[1293] 4-(4-(etilsulfonil)piperazin-1-il)benzaldeído: A uma solução de 6-fluoronicotinaldeído (0,35 g, 2,8 mmol, 1 equiv) em água (15 ml) foi adicionado lentamente K2CO3 (0,97 g, 7,05 mmol, 2 eq) e cloridrato de 1-(etilsulfonil)piperazina (0,66 g, 3,10 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada a 100 °C durante 12 h sob atmosfera de N2. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida e, em seguida, o produto bruto foi diluído com EtOAc (150 ml) e lavado com água (2 x 15 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 30% de EtOAc em hexano como um eluente para fornecer 4-(4-(etilsulfonil)piperazin-1- il)benzaldeído. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,15 - 1,34 (m, 3H), 3,05 - 3,11 (m, 2H), 3,26 - 3,30 (m, 4H), 3,46 - 3,48 (m, 4H), 9,73 (s, 1H),7,07 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,69 (d, J = 9,6 Hz, 2H), 9,72 (s, 1H).
[1294] (3S)-1-(4-(4-(etilsulfonil)piperazin-1-il)fenil)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol e (cis e trans):A uma solução de (S)-1- (1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,090 g, 0,51 mmol, 1 eq) em HFIP (2,0 ml) foi adicionado 4-(4-(etilsulfonil)piperazin-1-il)benzaldeído (0,145 g, 0,51 mmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 h. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi resfriada até à temperatura ambiente e diluída com acetato de etila (10 ml) e lavada com solução saturada de NaaHCO3 (5 ml) e água (5 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 2 a 3% de MeOH em DCM como um eluente para obter o(1S,3S)-1-(4-(4- (etilsulfonil)piperazin-1-il)fenil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol (trans, polar por TLC) e (1R,3S)-1-(4-(4-(etilsulfonil)piperazin-1- il)fenil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol (Cis, não polar por TLC).
[1295] Dados analíticos do composto trans: LC-MS (m/z) = 439,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,11 - 1,10 (m, 3H), 1,19 - 1,22 (m, 3H), 2,58 (s, 1H), 2,76 - 2,79 (m, 1H), 3,04 - 3,08 (m, 3H), 3,10 -3,14 (m, 3H), 3,15 - 3,27 (m, 5H), 5,09 (bs, 1H), 6,88 - 6,99 (m, 3H), 7,01 - 7,06 (m, 2H), 7,21 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 10,60 (s, 1H).
[1296] Dados analíticos do composto cis: LC-MS (m/z) = 439,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,20 - 1,23 (m, 6H), 2,48 - 2,47 (m, 1H), 2,67 - 2,71 (m, 1H), 2,67 - 2,71 (m, 1H), 3,05 - 3,11 (m, 4H), 3,17 - 3,18 (m, 4H), 3,23 - 3,28 (m, 3H), 5,02 (bs, 1H), 6,87 - 6,95 (m, 4H), 7,15 - 7,20 (m, 3H), 7,34 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 10,11 (s, 1H).
[1297] Preparação do composto 209. 2-cloro-1-((1S,3S)-1-(4-(4- (etilsulfonil)piperazin-1-il)fenil)-3-metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4- b]indol-2-il)etan-1-ona: (1S,3S)-1-(4-(4-(etilsulfonil)piperazin-1-il)fenil)- 3-metil-2, 3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol (0,09 g, 0,20 mmol, 1 eq) em CHCl3 (15,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,03 g, 0,41 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitada durante 15 minutos e depois e cloreto de 2- cloroacetila (0,02 ml, 0,24 mmol, 1,2 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 horas. LCMS e TLC (5% MeOH em DCM) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi diluída com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e foi extraída com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 3% de MeOH em DCM como um eluente para obter 2-cloro-1-((1S,3S)-1-(4-(4- (etilsulfonil)piperazin-1-il)fenil)-3-metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4- b]indol-2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z): 515,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,11 - 1,09 (m, 3H), 1,20 - 1,21 (m, 3H), 2,88 - 3,02 (m, 1H), 3,09 - 3,11 (m, 3H), 3,18 - 3,22 (m, 4H), 3,23 - 3,24 (m, 4H),
3,28 - 3,38 (m, 2H), 4,62 (bs, 1H), 4,76 (bs, 1H), 5,89 (bs, 1H), 6,83 - 6,85 (m, 2H), 6,91 - 7,01 (m, 2H), 7,21 - 7,24 (m, 3H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 10,89 (s, 1H). PROCEDIMENTO DR: SÍNTESE DO COMPOSTO 171
[1298] (3S)-3-metil-1-(piridin-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol: Para uma solução de (S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,25 g, 0,94 mmol, 1 eq) em HFIP (3 ml) foi adicionado isonicotinaldeído (0,1 ml, 1,03 mmol, 1,1 eq). A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 16 h. TLC (5% de MeOH em DCM) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 2 - 3% de MeOH em DCM como um eluente para obter (3S)-3-metil-1-(piridin-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol. LC-MS (m/z) = 264,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,11 (s, 3H), 2,74 (d, J = 14,8 Hz, 2H), 2,87 (s, 1H), 5,08 (s, 1H), 7,02 - 6,94 (m, 2H), 7,22 (s, 3H), 7,39 (s, 1H), 8,47 (s, 2H), 10,76 (s, 1H).
[1299] Preparação do composto 171. 2-cloro-1-((3S)-3-metil-1- (piridin-4-il)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: Para uma solução de (3S)-3-metil-1-(piridin-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol (0,1 g, 0,38 mmol, 1 eq) em DCM (5,0 ml) foi adicionada trietilamina (0,1 ml, 0,95 mmol, 2,5 eq) a 0 °C, agitada durante 15 min e, em seguida, cloreto de 2-cloroacetila (0,04 ml, 0,49 mmol, 1,3 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h sob atmosfera de N2. TLC (5% de MeOH em DCM) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi diluída com água gelada (5 ml) e foi extraída com acetato de etila (25 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 2 - 4% de MeOH em DCM como um eluente para obter o produto. O composto foi ainda purificado por HPLC Prep (condição analítica: Coluna: Kinetex C18 (100 mm X 4,6 mm X 2,6 µm), fase móvel (A): 0,1% de TFA em água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 0,75 ml/min, para obter 2-cloro-1-((3S)- 3-metil-1-(piridin-4-il)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan- 1-ona. LC-MS (m/z) = 340,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,11 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 2,91 - 2,87 (m, 1H), 3,20 - 3,18 (m, 1H), 4,45 (s, 1H), 4,76 (s, 2H), 5,88 (s, 1H), 6,94 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,02 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,38 (s, 2H), 7,43 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,40 (s, 2H), 10,99 (s, 1H). PROCEDIMENTO DS: SÍNTESE DO COMPOSTO 127
[1300] 2-metil-4-(4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)morfolina: Para a mistura agitada de (S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (0,15 g, 0,860 mmol, 1 eq) e 4-(2- metilmorfolino)benzaldeído (0,19 g, 0,946 mmol, 1,1 eq) em diclorometano (5 ml) foi adicionado lentamente ácido trifluoroacético (0,13 ml, 1,721 mmol, 2,0 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 16 h sob atmosfera de N2. O progresso da reação foi monitorado por TLC (5% de metanol em diclorometano). A mistura de reação foi diluída com diclorometano (50 ml) e lavada com bicarbonato de sódio saturado (50 ml), salmoura (20 ml), seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para o produto bruto, que foi purificado por coluna flash cromatografia usando
5% de metanol em diclorometano como eluente para obter 2-metil-4-(4- ((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)morfolina. LC-MS (m/z) = 362,1 [M+H]+
[1301] Preparação do composto 127. 2-cloro-1-((1R,3S)-3-metil-1- (4-(2-metilmorfolino)fenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2- il)etan-1-ona: Para uma solução de 2-metil-4-(4-((3S)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina (0,08 g, 0,221 mmol, 1 eq) em diclorometano (5 ml) foi adicionada trietilamina (0,093 ml, 0,664 mmol, 3 eq) à temperatura ambiente, a mistura de reação foi deixada resfriar a 0 °C e cloreto de 2-cloroacetila (0,023 ml, 0,287 mml, 1,3 eq). A mistura resultante foi deixada aquecer lentamente até à temperatura ambiente e agitada durante 16 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC, após a conclusão da reação; a mistura foi diluída com DCM (50 ml), lavada com água (20 ml), salmoura (20 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 30% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 2-cloro-1-((3S)-3- metil-1-(4-(2-metilmorfolino)fenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido [3,4- b]indol-2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z) = 438,4 [M+H]+; RMN de H1 (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,82 – 0,83 (m, 1H), 0,97 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 1,11 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 1,22 (bs, 1H), 2,23 – 2,26 (m, 1H), 2,57 – 2,60 (m, 1H), 2,68 – 2,72 (m, 1H), 3,07 (m, 1H), 3,43 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,51 – 3,60 (m, 3H), 3,87 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,57 (m, 3H), 6,76 (s, 1H), 6,85 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,98 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 10,97 (s, 1H). PROCEDIMENTO DT: SÍNTESE ALTERNATIVA DO COMPOSTO 125 E COMPOSTO 103
[1302] 4-(4-((1R,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)morfolina e 4-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina: Para uma mistura agitada de (S)-1- (1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,7 g, 4,017 µmol, 1 eq) em tolueno (25 ml) foi adicionado 4-morfolinobenzaldeído (0,77 g, 4,017 µmol, 1 eq). A mistura foi deixada resfriar a 0 °C e ácido acético (0,23 ml, 4,017 µmol, 1 eq) foi adicionado.
A mistura resultante foi gradualmente deixada aquecer até à temperatura ambiente, depois aquecida a 120 °C e agitada durante 12 h para fornecer uma solução amarela.
O progresso da reação foi monitorado por TLC.
Após a conclusão da reação, a reação foi diluída com acetato de etila (500 ml), lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (2 x 200 ml), água (200 ml), salmoura (100 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para obter um produto bruto.
O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando metanol a 10% em diclorometano como eluente para obter a mistura de isômeros, posteriormente foi separado usando o método de HPLC quiral [Condições analíticas: Coluna: ChiralPak IA (100 mm x 4,6 mm x 3 µm), fase móvel: n-hexano:etanol com DEA 0,1% (90:10), taxa de fluxo: 1,0 ml/min] para obter 4-(4-((1R,3S)-3-metil-
2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina (ponto não polar por TLC em comparação com o correspondente a outro isômero) e 4-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)morfolina (ponto polar por TLC em comparação com o correspondente a outro isômero).
[1303] Dados analíticos de ponto não polar: LC-MS (m/z) = 348,1 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz,CDCl3) δ ppm 1,33 (d, J = 6,00 Hz, 3H), 2,54 – 2,60 (m, 1H), 2,85 – 2,89 (m, 1H), 3,15 (bs, 4H), 3,28 (br s, 1H), 3,85 (bs, 4H), 5,16 (s, 1H), 6,88 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,07 – 7,20 (m, 3H), 7,28 (m, 2H), 7,39 (s, 1H), 7,50 (d, J = 6,8 Hz, 1H). A elucidação da estrutura foi feita por meio de experimentos simples e aconchegantes.
[1304] Dados analíticos do ponto polar: LC-MS (m/z) = 348,2 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz,CDCl3) δ ppm 1,24 (d, J = 5,2 Hz, 3H), 2,51 – 2,56 (m, 1H), 2,96 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,13 (bs, 4H), 3,32 (bs, 1H), 3,83 (bs, 4H), 5,18 (s, 1H), 6,83 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,12 (m, 4H), 7,25 (m, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,66 (s, 1H). Elucidação da estrutura por experimento noe e cosy.
[1305] Preparação dos compostos 125 e 103. 2-cloro-1-((1R,3S)-3- metil-1-(4-morfolinofenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2- il)etan-1-ona (125) & 2-cloro-1-((1S,3S)-3-metil-1-(4-morfolinofenil)- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona (103): Para uma mistura agitada de 4-(4-((1R,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina (0,2 g, 575 mmol, 1 eq) e bicarbonato de sódio (0,096 g, 1,151 mmol, 2 eq) em clorofórmio (10 ml), foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,08 ml, 1,036 mmol, 1,8 eq) a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura resultante foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 4 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em diclorometano). Após a conclusão da reação, a mistura foi diluída com diclorometano (100 ml), lavada com água (2 x 50 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20% de acetato de etila em diclorometano como eluente para obter 2-cloro-1-((1R,3S)-3-metil-1-(4-morfolinofenil)- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona (125). LC-MS (m/z) = 424,3 [M+H]+; RMN de H1 (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,96 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,70 (d, J =16,0 Hz, 1H), 3,05 (bs, 5H), 3,69 (bs, 4H), 4,58 (m, 3H), 6,76 (s, 1H), 6,86 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,98 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,07 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 11,00 (s, 1H).
[1306] Procedimento semelhante ao acima forneceu 2-cloro-1- ((1S,3S)-3-metil-1-(4-morfolinofenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4- b]indol-2-il)etan-1-ona (103): LC-MS (m/z) = 424,3 [M+H]+; RMN de H1 (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,10 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,86 (d, J =15,2 Hz, 1H), 3,00 (s, 4H), 3,10 (bs, 1H), 3,66 (s, 4H), 4,31 (bs, 1H), 4,62 (bs, 1H), 4,76 (bs, 1H), 5,90 (bs, 1H), 6,82 (m, 2H), 6,92 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 6,99 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,20 – 7,24 (m, 3H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 10,88 (s, 1H). PROCEDIMENTO DU: SÍNTESE DO COMPOSTO 127 E COMPOSTO 215
[1307] metil-4-(4-((1R,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)morfolina e 2-metil-4-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina: Em um tubo de vedação, para uma mistura agitada de (S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,2 g, 1,147 mmol, 1 eq) e 4-(2-metilmorfolino)benzaldeído (0,23 g, 1,147 mmol, 1,0 eq) em 1,2 dicloro etano (10 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (0,17 ml, 2,295 mmol, 2 eq) a 0 °C sob atmosfera de N2. O tubo de vedação foi fechado e a mistura foi aquecida a 80 °C durante 12 h.
O progresso da reação foi monitorado por TLC (5% de metanol em diclorometano). Depois de concluída a reação, deixou-se arrefecer a mistura de reação até à temperatura ambiente e verteu-se sobre uma solução saturada de bicarbonato de sódio (50 ml). A mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com água (2 x 50 ml), salmoura (20 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida.
O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 6% de metanol em diclorometano como eluente para obter 2 isômeros puros,
2-metil-4-(4-((1R,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)morfolina (ponto não polar por TLC em comparação com o correspondente a outro isômero) e 2-metil-4-(4-((1S,3S)- 3-metil- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina (ponto polar por TLC em comparação com o correspondente a outro isômero). Dados analíticos de ponto não polar: LC-MS (m/z) = 362,1 [M+H]+; Dados analíticos do ponto polar: LC-MS (m/z) = 362,3 [M+H]+.
[1308] Preparação dos compostos 127 e 215. 2-cloro-1-((1R,3S)-3- metil-1-(4-(2-metilmorfolino)fenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4- b]indol-2-il)etan-1-ona: Para uma mistura agitada de 2-metil-4-(4- ((1R,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)morfolina (0,15 g, 0,465 mmol, 1 eq) e bicarbonato de sódio (0,078 g, 0,93 mmol, 2 eq) em clorofórmio (10 ml), foi adicionado 2- cloreto de cloroacetila (0,055 ml, 0,697 mmol, 1,5 eq) a 0 °C sob atmosfera de nitrogênio. A mistura resultante foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 3 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura foi diluída com diclorometano (100 ml), lavada com água (2 x 50 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 28% de acetato de etila em hexano como eluente para obter o composto do título 2-cloro-1-((1R,3S)-3-metil-1-(4-(2-metilmorfolino)fenil)-1,3,4,9- tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona (127). LC-MS (m/z) = 438,1 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ ppm 1,20-1,25 (m, 6H), 2,49 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 2,85 (d, J = 15,2 Hz, 2H), 3,16 - 3,21 (m, 1H), 3,39 - 3,47 (m, 2H), 3,80 (bs, 2H), 4,00 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,21 (s, 2H), 4,60 (bs, 1H), 6,80 (bs, 3H), 7,13 - 7,23 (m, 2H), 7,31 - 7,37 (m, 3H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H). Pureza por HPLC quiral 41,83: 55,88.
[1309] Um esquema sintético semelhante foi usado para sintetizar o composto 215. LC-MS (m/z): 438,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,21 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,30 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 2,44 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 2,78 - 2,81 (m, 1H), 2,92 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,28 - 3,42 (m, 3H), 3,70 - 3,76 (m, 2H), 3,95 - 3,98 (m, 2H), 4,12 (m, 1H), 4,91 (bs, 1H), 5,87 (s, 1H), 6,80 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,08 - 7,13 (m, 2H), 7,15 - 7,25 (m, 3H), 7,50 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H). PROCEDIMENTO DV: SÍNTESE DO COMPOSTO 172
[1310] (S)-(1-(5-cloro-1H-indol-3-il)propan-2-il)carbamato de terc- butila: O 5-cloro-1H-indol (0,3 g, 1,979 mmol, 1 eq) e cloreto cuproso (0,25 g, 2,572 mmol, 1,3 eq) foi tomado em balão de fundo redondo e foi purgado com argônio, em seguida, diclorometano (10 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada a 0 °C. Em seguida, MeMgCl (3M em THF) (0,85 ml, 2,572 mmol, 1,3 eq) foi adicionado gota a gota ao longo de um período de 5 min. A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C. Após 1 h, uma solução de 2,2-dióxido de (S)-4-metil- 1,2,3-oxatiazolidina-3-carboxilato de terc-butila (0,33 g, 1,385 mmol, 0,7 eq) em diclorometano (3 ml) foi adicionado gota a gota a -20 °C. A mistura resultante foi agitada durante 6 h a -20 °C. Após 6 h, a reação foi extinta com solução de ácido cítrico a 10% a -20 °C e a mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente, filtrou a mistura através de almofada de celite, lavou a almofada de celite com diclorometano. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (2 x 20 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20% de acetato de etil em hexano como um eluente para obter (S)-(1-(5-cloro-1H-indol-3-il)propan-2- il)carbamato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 253,1 [(M+H)+ - grupo t- butila]. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,98 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,32 (s, 9H), 2,62 - 2,65 (m, 1H), 2,73 - 2,78 (m, 1H), 3,62 - 3,69 (m, 1H), 6,72 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 10,97 (s, 1H).
[1311] (S)-1-(5-cloro-1H-indol-3-il)propan-2-amina: Para uma solução de (S)-(1-(5-cloro-1H-indol-3-il)propan-2-il)carbamato de terc- butila (0,2 g, 0,647 mmol, 1 eq) em diclorometano (2,0 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (0,5 ml) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 3 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC, após a conclusão da reação; a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto obtido foi dissolvido com água gelada (5 ml) e foi basificado por solução de hidróxido de sódio a 5% (pH ajustado para 9). O composto foi extraído com diclorometano (3 x 20 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (10 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados para obter (S)-1-(5-cloro-1H-indol-3-il)propan-2-amina. LC-MS (m/z) = 209,1 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,93 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 2,58 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 2,99 – 3,035 (m, 1H), 7,01 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,31 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 10,99 (s, 1H), (Nota: picos de NH2 não foram detectados em RMN).
[1312] 4-((1S,3S)-6-cloro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: Em um tubo de vedação, (S)-1-(5-cloro-1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,15 g, 0,718 mmol, 1 eq), N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzenossulfonamida (0,17 g, 0,178 mmol, 1,0 eq) e hexafluoro-2-propanol (HFIP) (2,0 ml) foram tomadas. O tubo de vedação fechou-se e a mistura foi aquecida a 80 °C e agitada durante 16 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (5% de metanol em diclorometano), a reação foi resfriada até a temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 4% de metanol em diclorometano como eluente para obter 4- ((1S,3S)-6-cloro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida. O produto isolado foi tratado com sequestrante de metal quadrasil TA (o composto foi dissolvido com THF (10 ml) e quadrasil TA (3 g) foi adicionado, a mistura foi agitada por 1 h, filtrada. Isso é repetido mais uma vez e concentrado). LC-MS (m/z) = 432,2 [M+H]+.
[1313] Preparação do composto 172. 4-((1S,3S)-6-cloro-2-(2- cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: Para uma solução agitada de 4-((1S,3S)-6-cloro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)- N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida (0,035 g, 0,080 mmol, 1 eq) e bicarbonato de sódio (0,02 g, 0,242 mmol, 3,0 eq) em clorofórmio foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,011 ml, 0,145 mmol, 1,8 eq) a 0°C. A mistura foi gradualmente deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 2,5 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (40% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi diluída com diclorometano (30 ml), lavada com água (2 x 20 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 40% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 4-((1S,3S)-6-cloro-2-(2-
cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 510,2 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,34 (d, J = 3,2 Hz, 2H), 0,44 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 1,13 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,02 (m, 1H), 2,92 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,23 (m, 1H), 4,43 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 4,69 – 4,76 (m, 2H), 6,14 (s, 1H), 7,02 (dd, J = 1,6 Hz, 8,8 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,39 – 7,45 (m, 2H), 7,50 – 7,54 (m, 2H), 7,97 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 11,04 (s, 1H). PROCEDIMENTO DX: SÍNTESE DO COMPOSTO 151
[1314] 4-((1S,3S)-6-cloro-3-metil-2-propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: Para uma mistura agitada de 4-((1S,3S)-6-cloro-3-metil-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3- fluorobenzenossulfonamida (0,04 g, 0,092 mmol, 1 eq), em diclorometano (3 ml) foi adicionada trietilamina (0,03 ml, 0,221 mmol, 2,4 eq), ácido propiólico (0,005 ml, 0,092 mmol, 1 eq) e seguido pela adição de iodeto de 2-cloro-1-metilpiridínio (0,028 g, 0,11 mmol, 1,2 eq) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada durante 10 min. O progresso da reação foi monitorado por TLC (40% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura foi diluída com diclorometano (20 ml), lavada com água (20 ml), salmoura (10 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por TLC preparativa usando 40% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 4-((1S,3S)-6-cloro-3-metil-2-propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-
b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 486,0 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6, a 70 °C): δ 0,36 (bs, 2H), 0,46 (m, 2H), 1,22 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,10 (s, 1H), 2,97 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 3,31 (bs, 1H), 4,51 (bs, 1H), 5,19 (bs, 1H), 6,18 (s, 1H), 7,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,46 – 7,52 (m, 4H), 7,81 (s, 1H), 10,94 (s, 1H). PROCEDIMENTO DY: SÍNTESE DO COMPOSTO 168
[1315] 5-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol- 1-il)isoindolin-1-ona: Em um tubo de vedação, (S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (0,3 g, 1,721 mmol, 1 eq), 1-oxoisoindolina-5- carbaldeído (0,27 g, 1,721 mmol, 1,0 eq) e hexafluoro-2-propanol (HFIP) (1,0 ml) foram retirados e o tubo de vedação foi fechado. A mistura foi aquecida a 80 °C e agitada por 16h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (metanol a 10% em diclorometano), a reação foi resfriada à temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando metanol a 15% em diclorometano como eluente para obter 5-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)isoindolin-1-ona. LC-MS (m/z) = 318,2 [M+H]+.
[1316] Preparação do composto 168. 5- (1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3- metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)isoindolin-1-ona: Para uma solução agitada de 5-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)isoindolin-1-ona (0,04 g, 0,126 mmol, 1,0 eq) e trietilamina (0,053 g, 0,378 mmol, 3,0 eq) em clorofórmio foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,02 ml, 0,252 mmol, 2,0 eq) a 0 °C. A mistura foi gradualmente deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 4 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (metanol a 10% em diclorometano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi diluída com diclorometano (30 ml), lavada com água (2 x 20 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. Este foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 6% de metanol em diclorometano como eluente. O produto isolado foi repurificado por HPLC preparativa [Condições Analíticas: coluna: Inertsil ODS 3V (150 mm X 4,6 mm X 5 µM), fase móvel (A): 0,1% de amônia em água, fase móvel (B): acetonitrila, taxa de fluxo: 1,0 ml/min. Composição de B: 0/20,3/20,7/80,17/80,18/20,20/20] para obter 5-((1S,3S)-2-(2- cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)isoindolin-1-ona. LC-MS (m/z): 394,3 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,13 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,90 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,32 (m, 1H), 4,22 - 4,32 (m, 2H), 4,42 (bs, 1H), 4,79 (bs, 2H), 6,01 (bs, 1H), 6,91 - 7,02 (m, 2H), 7,23 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (bs, 3H), 8,43 (s, 1H), 10,94 (s, 1H). PROCEDIMENTO DZ: SÍNTESE DO COMPOSTO 166
[1317] (R)-3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-metóxi-3-oxopropil)-
1H-indol-1-carboxilato de terc-butila: Para uma solução de cloridrato de metil D-triptofanato (5,0 g, 19,63 mmol, 1 eq) em tetra-hidrofurano foi adicionada trietilamina (2,75 ml, 19,63 mmol, 1 eq) e 4- dimetilaminopiridina (3,59 g, 29,44 mmol, 1,5 eq) à temperatura ambiente. A mistura foi deixada resfriar a 0 °C e dicarbonato de di-terc- butila (11,27 ml, 49,075 mmol, 2,5 eq) foi adicionado a 0 °C lentamente. A mistura resultante foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 16 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura foi diluída com água (20 ml), extraída com acetato de etila (2 x 150 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com água (40 ml), salmoura (20 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter (R)-3-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-metóxi-3-oxopropil) -1H-indol-1-carboxilato de terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 1,36 (s, 9H), 1,60 (s, 9H), 2,93 – 2,99 (m, 1H), 3,06 – 3,08 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 4,25 (bs, 1H), 7,23 – 7,35 (m, 3H), 7,49 – 7,54 (m, 2H), 8,00 – 8,02 (m, 1H).
[1318] (R)-3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-hidroxipropil)-1H- indol-1-carboxilato de terc-butila: Para uma solução agitada de (R)-3-(2- ((terc-butoxicarbonil)amino)-3-metóxi-3-oxopropil)-1H-indol-1- carboxilato de terc-butila (0,2 g, 0,477 mmol 1 eq) em tetra-hidrofurano (5 ml) foi adicionado cloreto de lítio (0,05 g, 1,19 mmol, 2,5 eq) à temperatura ambiente. A mistura foi deixada resfriar a 0 °C e boro- hidreto de sódio (0,045 g, 1,19 mmol, 2,5 eq). A mistura resultante foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 10 min, e então etanol (5 ml) foi adicionado e agitado durante 14 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi extinta com cloreto de amônio aquoso saturado e extraída com acetato de etila (2 x 10 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (5 ml), salmoura (2 ml), secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 25% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter (R)-3- (2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-hidroxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 391,3 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,42 (s, 9H), 1,66 (s, 10H), 2,93 – 2,95 (m, 2H), 3,61 – 3,64 (m, 1H), 3,69 – 3,71 (m, 1H), 3,98 (s, 1H), 4,82 (s, 1H), 7,22 -7,25 (m, 1H), 7,29 – 7,33 (m, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,60 – 7,61 (m, 1H), 8,12 (s, 1H).
[1319] (R)-3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-metoxipropil)-1H- indol-1-carboxilato de terc-butila: Para uma solução de (R)-3-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-hidroxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc- butila (0,14 g, 0,358 mmol, 1 eq) em acetonitrila foi adicionado óxido de prata (X) (0,415 g, 1,79 mmol, 5 eq) e seguido pela adição de iodeto de metila (0,115 ml, 1,79 mmol, 5 eq) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 72 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura foi filtrada através de almofada de celilte, lavada com acetato de etila (50 ml). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter o produto do título (R)-3- (2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-metoxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 405,3 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,43 (s, 9H), 1,65 (s, 9H), 2,90 – 2,95 (m, 2H), 3,28 – 3,33 (m, 5H), 4,00 (s, 1H), 4,92 (s, 1H), 7,21 – 7,23 (m, 1H), 7,28 – 7,32 (m, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,63 – 7,65 (m, 1H), 8,10 (s, 1H).
[1320] ácido 2,2,2-trifluoroacético de (R)-1-(1H-indol-3-il)-3- metoxipropan-2-amina: Para solução agitada de (R)-3-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-metoxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc- butila (0,065 g, 0,16 mmol, 1 eq) em diclorometano foi adicionado ácido 2,2,2-trifluoroacético (1 ml) a 0 °C. A mistura de reação foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 12 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para obter ácido (R)-1-(1H-indol-3-il)-3-metoxipropan- 2-amina 2,2,2-trifluoroacético, que foi considerado como para a próxima etapa sem purificação. LC-MS (m/z) = 205,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,92 – 2,95 (m, 2H), 3,26 (s, 3H), 3,31 – 3,35 (m, 1H), 3,42 – 3,52 (m, 2H), 6,98 – 7,01 (m, 1H), 7,07 – 7,10 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,83 (bs, 3H), 10,99 (s, 1H).
[1321] (R)-1-(1H-indol-3-il)-3-metoxipropan-2-amina: Para uma mistura agitada de (R)-1-(1H-indol-3-il)-3-metoxipropan-2-amina ácido 2,2,2-trifluoroacético foi repartido entre solução de bicarbonato de sódio e diclorometano e agitado durante 10 min. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (2 x 50 ml), os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 8% de metanol em diclorometano como um eluente para obter (R)-1-(1H-indol-3-il)-3- metoxipropan-2-amina. LC-MS (m/z) = 205,2 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,87 (bs, 2H), 2,48 – 2,60 (m, 2H), 2,73 – 2,77 (dd, J = 4,8 Hz, 14,4 Hz, 1H), 3,11 – 3,14 (m, 2H), 3,22 (s, 3H), 6,94 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 10,80 (s, 1H).
[1322] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzamida: Em um tubo de vedação, (R)-1-(1H-indol-3-il)-3-metoxipropan-2-amina (0,22 g, 1,077 mmol, 1 eq), N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzamida (0,26 g, 1,077 mmol, 1,0 equiv) e hexafluoro-2-propanol (HFIP) (1,0 ml) foram retirados e o tubo de vedação foi fechado. A mistura foi aquecida a 80 °C e agitada por 16h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (5% de metanol em diclorometano), a reação foi resfriada à temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 3% de metanol em diclorometano como eluente para obter N-ciclopropil-3- fluoro-4-((1S,3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)benzamida. LC-MS (m/z) = 428,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 0,64 (s, 4H), 2,26 (bs, 1H), 2,57 – 2,63 (m, 1H), 2,85 – 2,88 (m, 1H), 3,29 (bs, 1H), 3,34 (s, 3H), 3,42 – 3,54 (m, 2H), 4,87 (s, 1H), 5,68 (s, 1H), 7,12 – 7,21 (m, 3H), 7,25 – 7,31 (m, 1H), 7,54 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,67 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H).
[1323] Preparação do composto 166. 4-((1S,3R)-2-(2-cloroacetil)-3- (metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil- 3-fluorobenzamida: Para uma solução agitada de N-ciclopropil-3-fluoro- 4-((1S,3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)benzamida (0,075 g, 0,174 mmol, 1,0 eq) e bicarbonato de sódio (0,044 g, 0,523 mmol, 3,0 eq) em clorofórmio foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,02 ml, 0,261 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi gradualmente deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 2 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi diluída com diclorometano (30 ml), lavada com água (2 x 20 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. Este foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20% de acetato de etila em diclorometano como um eluente para obter 4-((1S,3R)-2-(2-cloroacetil)- 3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzamida. LC-MS (m/z): 506,1 [M+H]+; RMN de H 1 (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,34 (bs, 2H), 0,45 (bs, 2H), 2,02 (s, 1H), 3,00 – 3,03 (m, 1H), 3,18 (s, 3H), 3,22 – 3,32 (m, 3H), 4,36 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 6,12 (s, 1H), 6,94 – 7,04 (m, 2H), 7,23 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,43 – 7,52 (m, 4H), 7,96 (s, 1H), 10,80 (s, 1H). PROCEDIMENTO EA: SÍNTESE DO COMPOSTO 234 E COMPOSTO 128
[1324] 2-metil-4-morfolinobenzaldeído(3): A uma solução de 4- fluoro-2-metilbenzaldeído (0,5 g, 3,61 mmol, 1,0 eq) em DMSO (10 ml) foi adicionado lentamente K2CO3 (1,5 g, 10,85 mmol, 3,0 eq) e morfolina (0,94 g, 10,85 mmol, 1,0 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida e, em seguida, o produto bruto foi diluído com EtOAc (150 ml) e lavado com água (2 x 50 ml). A camada orgânica foi seca com anidro Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 20% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 2-metil-4-morfolinobenzaldeído. LC-MS (m/z) = 206,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2,62 (s, 3H), 3,32 – 3,34 (m, 4H), 3,83 – 3,85 (m, 4H), 6,64 (s, 1H), 6,79 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 10,03 (s, 1H).
[1325] 4-(3-metil-4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)morfolina(5): Para uma solução de (S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (0,230 g, 1,31 mmol, 1,0 eq) em DCE (10,0 ml) foi adicionado 2-metil-4-morfolinobenzaldeído (0,298 g, 1,45 mmol, 1,1 eq) e TFA (0,30 g, 2,63 mmol, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 16 h. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e foi diluída com acetato de etila (80 ml) e lavada com solução saturada de NaHCO 3 (10 ml) e água (2 x 15 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 70-80% de EtOAc em hexano como um eluente para obter o produto 4-(3-metil-4- ((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)morfolina. LC-MS (m/z) = 438,0 [M+H]+
[1326] Preparação dos compostos 234 e 128.
[1327] 2-cloro-1-((1S,3S)-3-metil-1-(2-metil-4-morfolinofenil)- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona (234) e 2-cloro- 1-((1R,3S)-3-metil-1-(2-metil-4-morfolinofenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H- pirido[3,4-b]indol-2-il) etan-1-ona (128): Para uma solução de 4-(3-metil- 4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)morfolina (0,100 g, 0,276 mmol, 1,0 eq) em DCM (8,0 ml) foi adicionado TEA (0,03 ml, 0,55 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 min e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,046 g, 0,41 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 hora. LCMS e TLC (20% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e foi extraída com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash seguida por TLC preparativa com 30% de EtOAc em hexano como eluente para fornecer isômeros cis e trans de 2-cloro-1-((3S)-3-metil-1- (2-metil-4-morfolinofenil)-1,3,4,9-tetra- hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona.
[1328] Composto 234: LC-MS (ES) (m/z): 438,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO): δ 1,08 – 1,09 (m, 3H), 2,39 (s, 3H), 2,64 – 2,75 (m, 1H), 3,05 (m, 5H), 3,68 (S, 4H), 4,56 - 4,59 (m, 3H), 4,64 (bs, 1H), 6,03 - 6,03 (m, 3H), 6,78 (s, 1H), 7,96 – 7,03 (m, 2H), 7,26 -7,28 (m, 1H), 7,41 – 7,43 (m, 1H), 10,59 (s, 1H).
[1329] Composto 128: LC-MS (ES) (m/z): 438,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO): δ 1,13 – 1,15 (m, 3H), 2,64 (s, 3H), 2,84 – 2,88 (m, 1H), 3,09 (m, 5H), 3,65 (s, 4H), 4,64 (bs, 1H), 5,55 - 5,58 (m, 2H), 4,73 (s, 3H), 5,96 (s, 1H), 6,54 (m, 2H), 6,66 (s, 1H), 6,83 - 6,85 (m, 1H), 6,99 (m, 2H), 7,20 – 7,22 (m, 1H), 7,40 – 7,42 (m, 1H), 10,59 (s, 1H). PROCEDIMENTO EC: SÍNTESE DO COMPOSTO 214
[1330] Ácido 5-((1S,3S)-2-(terc-butoxicarbonil)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)picolínico: A uma solução do composto (1S,3S)-1-(6-(metoxicarbonil)piridin-3-il)-3-metil-1,3,4,9-tetra- hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-carboxilato de terc-butila (0,090 g, 0,21 mmol, 1 eq) em uma mistura de THF: MeOH: H2O (9 ml: 1 ml) de hidróxido de lítio foram adicionados (0,044 g, 1,06 mmol, 5 eq) e deixou- se agitar à temperatura ambiente durante 16 h. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e o produto bruto acidificado com solução de ácido cítrico a 5% (pH = 9). A mistura de reação foi diluída com EtOAc (50 ml) e a camada orgânica foi separada e seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto de ácido 5-((1S,3S)-2-(terc-butoxicarbonil)-3-metil-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)picolínico. LC-MS (m/z): 408,0 [M+H]+
[1331] terc-butil-(1S,3S)-1-(6-(ciclobutilcarbamoil)piridin-3-il)-3- metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-carboxilato: Para uma solução do composto de ácido de 5-((1S,3S)-2-(terc-butoxicarbonil)-3- metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)picolínico (0,065 g, 0,159 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionada trietilamina (0,03 ml, 0,47 mmol, 3 eq) e ciclobutanamina (0,01 g, 0,19 mmol, 1,2 eq) a 0 ºC e a mistura foi agitada durante 15 min. À mistura de reação acima T3P (50% em peso em EtOAc) (0,19 ml, 0,31 mmol, 2 eq) foi adicionado à mesma temperatura e agitada durante 16 h. TLC (70% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e o produto bruto foi diluído com EtOAc (50 ml) e lavado com água (2 x 50 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto de (1S,3S)-1-(6-(ciclobutilcarbamoil)piridin-3-il)-3-metil- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido [3,4-b]indol-2-carboxilato de terc-butila. LC- MS (m/z): 461,0 [M+H]+
[1332] N-ciclobutil-5-((1R,3S)-3-metil-2-(2,2,2-trifluoroacetil)- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-214-indeno[2,1-c]piridin-1-il)picolinamida: A uma solução do composto (1S,3S)-1-(6-(ciclobutilcarbamoil)piridin-3-il)-3- metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-carboxilato de terc- butila (0,40 g, 0,08 mmol, 1 eq) em DCM (10 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (0,01 g, 0,09 mmol, 1,1 eq) a 0 °C e a mistura foi agitada durante 2 h. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto de N-ciclobutil-5-((1R,3S)-3-metil-2- (2,2,2-trifluoroacetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-2l4-indeno[2,1-c]piridin-1- il)picolinamida. LC-MS (m/z): 361,0 [M+H]+
[1333] Preparação do composto 214.
[1334] 5-((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilpicolinamida: Para uma solução de N- ciclobutil-5-((1R,3S)-3-metil-2-(2,2,2-trifluoroacetil)-2,3,4,9-tetrahidro- 1H-2l4-indeno[2,1-c]piridin-1-il)picolinamida (0,05 g, 0,11 mmol, 1 eq) em DCM (8,0 ml) foi adicionado TEA (0,01 ml, 0,22 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 min e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,019 g, 0,17 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 hora. LCMS e TLC (50% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava completa. A mistura de reação foi diluída com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e foi extraída com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 50% c como eluente para obter 5-((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilpicolinamida. LC-MS (m/z): 437,2 [M+H]+. RMN de 1H (CDCl3) δ 1,16 (d, J = 6 Hz, 3H), 1,61 (s, 2H), 1,96 - 2,11 (m, 5H), 2,65 - 2,93 (m, 2H), 4,36 - 4,38 (m, 2H), 4,75 (m, 2H), 5,99 (s, 1H), 7,02 - 7,95 (m, 2H), 7,46 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,82 (s,
2H), 8,64 (s, 1H), 8,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 10,95 (s, 1H). PROCEDIMENTO ED: SÍNTESE DO COMPOSTO 213
[1335] 4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)benzaldeído: A uma solução de 4-fluorobenzaldeído (0,5 g, 4,02 mmol, 1,0 eq) em DMF (10 ml) foi adicionado K2CO3 lentamente (1,1 g, 8,05 mmol, 2,0 eq) e 2-oxa- 6-azaspiro[3,3]heptano (0,47 g, 4,83 mmol, 1,2 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida e, em seguida, o produto bruto foi diluído com EtOAc (150 ml) e lavado com água (2 x 50 ml). A camada orgânica foi seca com anidro Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 20% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-(2-oxa-6- azaspiro[3.3]heptan-6-il)benzaldeído. LC-MS (m/z) = 204,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 4,13 (s, 4H), 4,70 (s, 4H), 6,47 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 8 Hz, 2H), 9,64 (s, 1H).
[1336] 6-(4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)-2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptano: Para uma solução de 4-(2-oxa-6- azaspiro[3.3]heptan-6-il)benzaldeído (0,116 g, 0,63 mmol, 1,2 eq) em HFIP (5 ml) foi adicionado (S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,1 g, 0,57 mmol, 1,0 eq) e agitada durante 16 horas a 80 °C. LCMS e TLC
(5% de MeOH em DCM) mostraram que a reação foi concluída. Os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida para o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 10-15% de MeOH em DCM como um eluente para obter 6-(4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)-2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptano. LC-MS (ES) (m/z): 360,0 [M+H]+,
[1337] Preparação do composto 213.
[1338] 1-((1S,3S)-1-(4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)fenil)-3- metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b] indol-2-il)-2-cloroetano-1-ona: Para uma solução de 6-(4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido [3,4-b]indol-1-il)fenil)-2-oxa-6-azaspiro[3,3]heptano (0,100 g, 0,27 mmol, 1,0. eq) em DCM (8,0 ml) foi adicionado TEA (0,037 ml, 0,55 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 min e depois e cloreto de 2- cloroacetila (0,047 g, 0,41 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 h. LCMS e TLC (50% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava completa. A mistura de reação foi diluída com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e foi extraída com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash para obter 1-((1S,3S)-1-(4-(2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptan-6-il)fenil)-3-metil-1,3,4,9- tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b] indol-2-il)-2-cloroetan-1-ona. LC-MS (ES) (m/z): 436,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 1,08 – 1,10 (m, 3H), 2,83 – 2,86 (m, 2H), 3,95 - 4,07 (m, 7H), 4,63 – 4,72 (m, 5H), 6,31 (s, 2H), 5,87 (s, 1H), 6,92 – 6,98 (m, 2H), 7,14 – 7,23 (m, 3H), 7,38 – 7,40 (m, 2H), 10,86 (s, 1H). PROCEDIMENTO EE: SÍNTESE DO COMPOSTO 173
[1339] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((3S)-6-metóxi-3-metil-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida: Para uma solução de N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzenossulfonamida (0,142 g, 0,58 mmol, 1,0 eq) em HFIP (5 ml) foi adicionado (S)-1-(5-metóxi-1H- indol-3-il)propan-2-amina (0,120 g, 0,58 mmol, 1,0 eq) e agitada durante 16 horas a 80 °C. LCMS e TLC (5% MeOH em DCM) mostraram que a reação foi concluída. Os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida para o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 0 - 5% de MeOH em DCM como um eluente para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4-((3S)-6-metóxi-3- metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)benzenossulfonamida-heptano. LC-MS (ES) (m/z): 430,0 [M+H]+.
[1340] Preparação do composto 173.
[1341] 4-((3S)-2-(2-cloroacetil)-6-metóxi-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: Para uma solução de N-ciclopropil-3-fluoro-4-((3S)-6-metóxi-3-metil- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida (0,030 g, 0,139 mmol, 1,0 eq) em DCM (8,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,023 ml, 0,27 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 min e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,018 g, 0,16 mmol, 1,2 eq) foi adicionado a 0°C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1 h.
LCMS e TLC (5% MeOH em DCM) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi diluída com DCM e extraída com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 50% c como eluente e o Composto foi ainda purificado por HPLC Prep (Condição analítica: Coluna: Kinetex C18 (100 mm x 4,6 mm x 2,6 m), fase móvel (A): 0,1 % De TFA em água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 0,75 ml/min para obter 4-((3S)-2-(2-cloroacetil)-6-metóxi-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3- fluorobenzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 506,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,6 - 0,65 (m, 4H). 1,32 - 1,33 (m, 3H), 2,20 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 2,94 (d, J = 16 Hz, 1H), 3,35 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 4,11 (bs, 1H), 4,31 (bs, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,86 (s, 1H), 6,23 (s, 1H), 6,83 - 6,85 (m, 1H), 6,93 (s, 1H), 7,19 - 7,25 (m, 1H), 7,37 - 7,37 (m, 1H), 7,51 - 7,63 (m, 2H), 7,83 (s, 1H). PROCEDIMENTO EF: SÍNTESE DO COMPOSTO 165
[1342] (S)-(1-(5-metóxi-1H-indol-3-il)propan-2-il)carbamato de terc- butila: Para uma mistura de 5-metóxi-1H-indol (0,3 g, 2,03 mmol, 1 eq) e cloreto cuproso (0,26 g, 2,65 mmol, 1,3 eq) em frasco de fundo redondo foi purgado com vácuo e, em seguida, DCM (10 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada a 0 °C e MeMgCl (0,8 ml, 2,65 mmol, 1,3 eq) foi adicionado gota a gota. A mistura de reação foi mantida a 0 °C durante 1 h. Em seguida, (S)-3,4-dimetil-1,2,3- oxatiazolidina 2,2-dióxido (0,338 g, 1,42 mmol, 0,7 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado a -20 °C gota a gota e a reação foi agitada a -20 °C durante 5 h. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou a formação de um novo ponto. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi dissolvido em EtOAc (100 ml) e foi extinto com ácido cítrico a 10% a 0 °C e a mistura de reação foi filtrada através de leito de celite. O leito foi lavado com DCM (50 ml) e o filtrado foi lavado com água (2 x 10 ml) e solução salina (10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20% de EtOAc em hexano como um eluente para obter (S)-(1-(5-metóxi-1H-indol-3-il) propan-2-il)carbamato de terc- butila. LC-MS (m/z) = 249,2 [M+H]+ - após clivagem do grupo t-butila. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,00 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,33 (s, 9H), 2,60 – 2,64 (m, 1H), 2,77 – 2,79 (m, 1H), 3,47 – 3,69 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,66 - 6,71 (m, 2H), 7,03 (s, 2H), 7,19 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 10,59 (s, 1H).
[1343] (S)-(1-(5-metóxi-1H-indol-3-il)propan-2-il)carbamato de terc- butila: Para uma solução de (S)-(1-(5-metóxi-1H-indol-3-il)propan-2- il)carbamato de terc-butila (0,22 g, 0,72 mmol, 1 eq) em THF (20,0 ml) foi adicionado Quadrasil TA (2,0 g, 2,0 eq). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi filtrada através de funil sinterizado e ao filtrado foi novamente adicionado Quadrasil TA (2,0 g, 2,0 eq) e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi filtrada através de funil sinterizado e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter
(S)-(1-(5-metóxi-1H-indol-3-il)propan-2-il)carbamato de terc-butila. LC- MS (m/z) = 249,0 [M+H]+
[1344] (S)-1-(5-metóxi-1H-indol-3-il)propan-2-amina: Para uma solução de (S)-(1-(5-metóxi-1H-indol-3- il)propan-2-il)carbamato de terc-butila (0,2 g, 0,65 mmol, 1 eq) em DCM (10,0 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (0,06 ml) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 3 h. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. Foi diluída com água gelada (5 ml) e foi basificada com solução de NaOH a 5% (pH ajustado para 9) e foi extraída com EtOAc (100 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para obter (S)- 1-(5-metóxi-1H-indol-3-il)propan-2-amina. LC-MS (m/z) = 205,2 [M+H]-
[1345] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-metóxi-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida: A uma solução de (S)-1-(5-metóxi-1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,160 g, 0,78 mmol, 1 eq) em HFIP (2,0 ml) foi adicionado N-ciclopropil-3-fluoro-4- formilbenzenossulfonamida (0,190 g, 0,78 mmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h em um tubo selado. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30-35% de EtOAc em hexano como eluente para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-metóxi-3- metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida (ponto polar em TLC). LC-MS (m/z) = 430,1 [M+H]+
[1346] Preparação do composto 165.
[1347] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-metóxi-3-metil-2-propioil- 2,3,4,9-tetrahidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida: Para uma solução de N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-metóxi-3-metil-
2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida (0,06 g, 0,13 mmol, 1,0 eq) em DCM (10,0 ml) foi adicionada trietilamina (0,052 ml, 0,33 mmol, 2,4 eq) à temperatura ambiente, agitada durante 5 minutos e depois adicionado ácido propiólico (0,009 ml, 0,13 mmol, 1,0 eq) e iodeto de 2-cloro-1-metilpiridínio (0,042 g, 0,16 mmol, 1,2 eq). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 30 minutos.
TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída.
A mistura de reação foi diluída com DCM (100 ml) e foi lavada com água (2 x 10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto.
O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20 a 25% de EtOAc em hexano como um eluente e o composto foi ainda purificado por HPLC Prep (condição analítica: Coluna: Kinetex C18 (100 mm x 4,6 mm x 2,6 µm), fase móvel (A): 0,1% de TFA em água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 0,75 ml/min para fornecer N-ciclopropil-3-fluoro-4- ((1S,3S)-6-metóxi-3-metil-2-propioil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)benzenossulfonamida.
LC-MS (m/z): 482,1 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,34 - 0,44 (m, 3H), 1,21 (s, 4H), 2,01 (bs, 2H), 2,90 - 2,94 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 4,64 (s, 1H), 5,10 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 6,65 - 6,67 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 7,11 - 7,13 (m, 1H), 7,45 - 7,83 (m, 3H), 7,97 (s, 1H), 10,68 (s, 1H). PROCEDIMENTO EG: SÍNTESE DO COMPOSTO 150
[1348] (3R,5R,7R)-N-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)adamantan-1-amina: A uma solução de (S)-1- (1H-indol-3-il)propan-2-amina(0,19 g, 1,09 mmol, 1 eq) em HFIP (2,0 ml) foi adicionado 4-(((3s, 5s,7s)-adamantan-1-il)amino)benzaldeído (0,278 g, 1,09 mmol, 1 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h em um tubo selado. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30-35% de EtOAc em hexano como um eluente para fornecer o isômero cis e o isômero trans. O isômero trans foi levado para tratamento com sequestrante SiliaMet-S para obter (3R,5R,7R)-N-(4- ((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)adamantan-1-amina (trans) que foi levado para a próxima etapa. LC-MS (m/z) = 412,0 [M+H]+
[1349] Preparação do composto 150.
[1350] 1-((1S,3S)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)amino)fenil)-3- metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-2-cloroetan-1-ona: Para uma solução de (3R,5R,7R)-N-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-
hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il) fenil)adamantan-1-amina (0,06 g, 0,14 mmol, 1 eq) em CHCl3 (8,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,024 g, 0,29 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 minutos e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,02 ml, 0,29 mmol, 2,0 eq) foi adicionado a 0 °C.
A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente por 1 hora.
TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída.
A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto.
O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20-25% de EtOAc em hexano como um eluente e o composto foi ainda purificado por HPLC Prep (condição analítica: Coluna: Kinetex C18 (100 mm x 4,6 mm x 2,6 µm), fase móvel (A): 0,1% de TFA em água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 0,75 ml/min para obter 1-((1S,3S)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)amino)fenil)-3-metil- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-2-cloroetan-1-ona.
LC-MS (m/z): 488,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,09 - 1,11 (m, 3H), 1,58 (s, 6H), 1,79 (s, 6H), 2,07 (s, 3H), 2,83 - 2,86 (m, 1H), 3,08 - 3,32 (m, 1H), 4,57 (bs, 1H), 4,75 - 4,86 (m, 2H), 5,85 (s, 1H), 6,64 (s, 2H), 6,91 - 7,00 (m, 5H), 7,24 - 7,26 (m, 1H), 7,39 - 7,41 (m, 1H), 10,87 (s, 1H). PROCEDIMENTO EH: SÍNTESE DO COMPOSTO 129 E COMPOSTO 233
[1351] 4-bromo-2-fluorobenzoato de metila: A uma solução de ácido 4-bromo-2-fluorobenzoico (4,0 g, 18,26 mmol, 1 eq) em MeOH (30 ml) foi adicionado ácido sulfúrico lentamente (0,5 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 60 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida e, em seguida, o produto bruto foi diluído com EtOAc (150 ml), lavado com solução saturada de NaHCO3 (2 x 20 ml) e água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca com anidro Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para obter 4-bromo-2-fluorobenzoato de etila. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,92 (s, 3H), 7,25 – 7,36 (m, 2H), 7,81 (t, J = 7,8 Hz, 1H).
[1352] 2-fluoro-4-morfolinobenzoato de metila: a uma solução de morfolina (1,3 g, 14,92 mmol, 1 eq) e 4-bromo-2-fluorobenzoato de metila (3,82 g, 16,41 mmol, 1,1 eq) em tolueno (25,0 ml) foi adicionado carbonato de césio (7,3 g, 22,38 mmol, 1,5 eq) à temperatura ambiente, purgado sob argônio por 25 min e, em seguida, X-Phos (0,35 g, 0,75 mmol, 0,05 eq) e acetato de paládio (0,17 g, 0,75 mmol, 0,05 eq) foi adicionado. A reação foi agitada a 110 °C durante 16 h em um tubo vedado. TLC (20% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente, filtrada através de celite e o leito foi lavado com EtOAc (150 ml). A camada orgânica combinada foi seca com anidro. Na2SO4, filtrado e concentrado para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 20-25% de EtOAc em hexano como um eluente para fornecer 2-fluoro-4-morfolinobenzoato de metila. LC-MS (m/z) = 240,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,22 – 3,23 (m, 4H), 3,68 (s, 4H), 3,74 (s, 3H), 6,77 (t, J = 13,0 Hz, 2H), 7,69 (t, J = 8,8 Hz, 1H).
[1353] (2-fluoro-4-morfolinofenil)metanol: Para uma solução de metil 2-fluoro-4-morfolinobenzoato (2,08 g, 8,67 mmol, 1 eq) em THF (16 ml) e MeOH (2,0 ml) foi adicionado boro-hidreto de sódio (2,62 g, 69,33 mmol, 8,0 eq) a 0 °C e a reação foi agitada a 65 °C durante 16 h. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi dissolvido em EtOAc (200 ml) e foi lavado com água (2 x 25 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20-25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter (2-fluoro-4- morfolinofenil)metanol. LC-MS (m/z) = 212,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,07 (s, 4H), 3,68 (s, 4H), 4,38 (s, 2H), 5,00 (s, 1H), 6,65 – 6,71 (m, 2H), 7,22 (t, J = 8,6 Hz, 1H).
[1354] 2-fluoro-4-morfolinobenzaldeído: Para uma solução de (2- fluoro-4-morfolinofenil)metanol (1,4 g, 6,63 mmol, 1 eq) em DCM (50,0 ml) foi adicionado Desmartin periodinano (4,22 g, 9,94 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 horas. TLC (20% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava completa. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de
NaHCO3 (20 ml) a 0 °C e extraída com DCM (2 x 100 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter 2-fluoro- 4-morfolinobenzaldeído. Usado na próxima etapa sem purificação adicional. LC-MS (m/z) = 210,1 [M+H]+
[1355] 4-(3-fluoro-4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)morfolina: Para a solução de (S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (0,6 g, 3,44 mmol, 1 eq) em tolueno (10,0 ml) foi adicionado 2-fluoro-4-morfolinobenzaldeído (0,72 g, 3,44 mmol, 1 eq) e AcOH (0,2 ml, 3,44 mmol, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 120 °C durante 16 h. TLC (10% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente e diluída com acetato de etila (200 ml) e lavada com solução saturada de NaaHCO3 (20 ml) e água (2 x 15 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20-25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter o produto diastereomérico que foi adicionalmente separado por Chiral Prep HPLC (condição analítica: Coluna: CHIRALPAK IC (100 mm x 4,6 mm x 3 µM), fase móvel: n-hexano: IPA com 0,1% DEA (50:50), taxa de fluxo: 1,0 ml/min) para obter 4-(3-fluoro-4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il) fenil)morfolina (trans, polar por TLC) e 4-(3-fluoro- 4-((1R,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol- 1- il)fenil)morfolina (cis, não polar por TLC).
[1356] Dados analíticos do composto trans (geometria trans foi confirmada por COSY e NOESY): LC-MS (m/z) = 366,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,21 – 1,28 (m, 3H), 2,49 – 2,55 (m, 1H), 2,92 (dd, J = 4,0 Hz, 15,2 Hz, 1H), 3,13 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,22 – 3,27 (m, 1H), 3,82 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 3,99 – 4,05 (m, 1H), 5,58 (s, 1H), 6,48 (dd, J = 2,0 Hz, 8,8 Hz, 1H), 6,64 (dd, J = 2,0 Hz, 13,0 Hz, 1H), 6,75 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 7,09 – 7,18 (m, 2H), 7,27 (s, 1H), 7,53 (d, J= 7,6 Hz, 1H),
7,67 (s, 1H).
[1357] Dados analíticos do composto cis (a geometria cis é confirmada por COSY e NOESY): LC-MS (m/z) = 366,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ 1,35 (d, J= 6,0 Hz, 3H), 2,53 – 2,59 (m, 1H), 2,86 (dd, J = 2,0 Hz, 17,2 Hz, 1H), 3,15 (t, J = 5,0 Hz, 4H), 3,27 – 3,32 (m, 1H), 3,84 (t, J = 5,0 Hz, 4H), 3,99 – 4,05 (m, 1H), 5,53 (s, 1H), 6,60 – 6,91 (m, 2H), 7,09 – 7,22 (m, 4H), 7,49 – 7,51 (m, 2H).
[1358] 2-cloro-1-((1S,3S)-1-(2-fluoro-4-morfolinofenil)-3-metil- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: Para uma solução de 4-(3-fluoro-4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina (trans) (0,13 g, 0,35 mmol, 1 eq) em CHCl3 (8,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,06 g, 0,70 mmol, 2,0 eq) a 0°C, agitado durante 15 min e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,04 ml, 0,53 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 horas. LCMS e TLC (50% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e foi extraída com DCM (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 40-50% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 2-cloro-1-((1S,3S)-1-(2- fluoro-4-morfolinofenil)-3-metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol- 2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z): 442,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 1,29 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 2,92 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,08 (d, J = 2,4 Hz, 4H), 3,27 (bs, 1H), 3,79 (t, J = 4,4 Hz, 4H), 3,98 – 4,13 (m, 1H), 4,22 (bs, 1H), 4,90 (bs, 1H), 6,24 (s, 1H), 6,52 – 6,57 (m, 2H), 7,02 – 7,17 (m, 3H), 7,25 – 7,29 (m, 1H), 7,49 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H).
[1359] 2-cloro-1-((1R,3S)-1-(2-fluoro-4-morfolinofenil)-3-metil- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: Para uma solução de 4-(3-fluoro-4-((1R,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-
pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)morfolina (cis) (0,17 g, 0,46 mmol, 1 eq) em CHCl3 (10,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,077 g, 0,92 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitada durante 15 minutos e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,05 ml, 0,69 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 horas. LCMS e TLC (50% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com DCM (100 ml) e foi lavada com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e água (2 x 10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 40-50% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 2-cloro-1- ((1R,3S)-1-(2-fluoro-4-morfolinofenil)-3-metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H- pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z): 422,3 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,09 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,72 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,04 – 3,09 (m, 5H), 3,68 (t, J = 4,4 Hz, 4H), 4,56 (bs, 3H), 6,65 – 6,74 (m, 3H), 6,90 – 6,99 (m, 2H), 7,05 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 10,78 (s, 1H).
[1360] Um esquema sintético semelhante foi usado para sintetizar 129 e 233.
[1361] Composto 129: LC-MS (m/z): 442,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,35 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 2,85 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,16 (s, 5H), 3,82 (d, J = 4,4 Hz, 4H), 4,14 (bs, 1H), 4,20 - 4,23 (m, 1H), 4,80 (bs, 1H), 6,57 - 6,65 (m, 3H), 7,10 - 7,19 (m, 3H), 7,25 - 7,30 (m, 1H), 7,50 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H).
[1362] Composto 233: LC-MS (m/z): 442,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,29 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,92 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,08 (d, J = 2,8 Hz, 4H), 3,25 (bs, 1H), 3,79 (t, J = 4,6 Hz, 4H), 3,98 (bs, 1H), 4,21 (bs, 1H), 4,91 (bs, 1H), 6,24 (s, 1H), 6,52 - 6,57 (m, 2H), 7,02 - 7,16 (m, 3H), 7,25 - 7,29 (m, 1H), 7,50 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H). PROCEDIMENTO EI: SÍNTESE DO COMPOSTO 163
[1363] 4-(1H-imidazol-1-il)benzaldeído: A uma solução de 4- fluorobenzaldeído (1,0 g, 8,05 mmol, 1 eq) em DMF (10,0 ml) foi adicionado K2CO3 (1,66 g, 12,07 mmol, 1,5 eq) e então 1H-imidazol (0,66 g, 9,66 mmol, 1,2 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 120°C durante 5 horas sob atmosfera de N2. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi diluída com EtOAc (150 ml), lavada com água (2 x 20 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 50-60% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-(1H- imidazol-1-il)benzaldeído. LC-MS (m/z) = 173,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,14 (s, 1H), 7,90 (d, J = 9,6 Hz, 3H), 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 8,43 (s, 1H), 10,00 (s, 1H).
[1364] (3S)-1-(4-(1H-imidazol-1-il)fenil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol: Para uma solução de (S)-1-(1H-indol-3-il)propan- 2-amina (0,15 g, 0,86 mmol, 1 eq) em 1,2-DCE (10,0 ml) foi adicionado 4-(1H-imidazol-1-il)benzaldeído (0,16 g, 0,95 mmol, 1,1 eq) e, em seguida, ácido trifluoroacético (0,13 ml, 1,72 mmol, 2,0 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 6 h sob atmosfera de N2. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi diluída com DCM (100 ml) e foi lavada com água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 5 - 10% de MeOH em DCM como um eluente para obter (3S)-1-(4-(1H-imidazol-1-il)fenil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol. LC-MS (m/z) = 329,2[M+H]+
[1365] Preparação do composto 163.
[1366] 1-((3S)-1-(4-(1H-imidazol-1-il)fenil)-3-metil-1,3,4,9-tetra- hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-2-cloroetan-1-ona: Para uma solução de (3S)-1-(4-(1H-imidazol-1-il)fenil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol (0,26 g, 0,79 mmol, 1 eq) em DCM (10,0 ml) foi adicionada trietilamina (0,33 ml, 2,37 mmol, 3,0 eq) a 0 °C, agitada durante 15 min e então cloreto de 2-cloroacetila (0,075 ml, 0,95 mmol, 1,2 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h sob atmosfera de N2. TLC (10% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi diluída com água gelada (10 ml) e foi extraída com DCM (100 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 5 - 7% de MeOH em DCM como um eluente para obter o produto. O composto foi ainda purificado por HPLC Prep (condição analítica: Coluna: Inertsil ODS 3V (250 mm x 4,6 mm x 5 µM), fase móvel (A): 0,1% de amônia em água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 1,0 ml/min, Isocrático: (A:B): (50:50)) para obter 1-((3S)-1-(4-(1H-imidazol-1-il)fenil)-3-metil-1,3,4,9-tetra- hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-2-cloroetan-1-ona. (Os isômeros cis e trans não foram separados). LC-MS (m/z) = 405,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 1,20 – 1,25 (m, 3H), 2,88 (d, J = 14,8 Hz, 1H), 3,21 (bs, 1H), 4,25 (s, 2H), 4,65 (bs, 1H), 6,94 (bs, 2H), 7,20 – 7,25 (m, 3H), 7,32 – 7,36 (m, 3H), 7,54 – 7,61 (m, 3H), 7,79 (bs, 1H), 8,03 (bs, 1H).
PROCEDIMENTO EJ: SÍNTESE DO COMPOSTO 160 E COMPOSTO 219
[1367] 4-formil-N-(piridin-2-il)benzamida: A uma solução de ácido 4- formilbenzoico (0,96 g, 6,37 mmol, 1,2 eq) em DMF (10,0 ml) foi adicionado DIPEA (1,85 ml, 10,62 mmol, 2,0 eq), agitada durante 10 min e então EDC.HCl (1,53 g, 7,96 mmol, 1,5 eq) e HOBt (0,86 g, 6,37 mmol, 1,2 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada durante 5 min e, em seguida, piridin-2-amina (0,5 g, 5,31 mmol, 1,0 eq) foi adicionada e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi diluída com salmoura e extraída com acetato de etila (150 ml). A camada orgânica foi lavada com solução saturada de NaHCO3 (2 x 10 ml) e água (2 x 10 ml). A camada orgânica combinada foi seca com anidro de Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 25-30% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-formil-N-(piridin-2-il)benzamida. LC-MS (m/z) = 227,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,17 (t, J = 5,4 Hz, 1H),
7,84 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 8,16 - 8,17 (m, 3H), 8,39 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 10,09 (s, 1H), 11,01 (s, 1H).
[1368] 4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)- N-(piridin-2-il)benzamida: Para uma solução de (S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (0,25 g, 1,43 mmol, 1,0 eq) em tolueno (10,0 ml) foi adicionado 4-formil-N-(piridin- 2-il)benzamida (0,32 g, 1,43 mmol, 1,0 eq) e, em seguida, ácido acético (0,08 ml, 1,43 mmol, 1,0 eq) foi adicionado à temperatura ambiente. A mistura foi agitada a 120 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (70% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi diluído com EtOAc (100 ml) e foi lavado com solução saturada de NaHCO3 (2 x 10 ml) e água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 60-70% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4 -b]indol-1-il)-N-(piridin-2-il)benzamida. LC-MS (m/z) = 383,2 [M+H]+
[1369] 4-((3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-(piridina-2-il)benzamida: Para uma solução de 4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-(piridin- 2-il)benzamida (0,33 g, 0,86 mmol, 1 eq) em CHCl3 (10,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,144 g, 1,72 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 minutos e depois cloreto de 2-cloroacetil (0,1 ml, 1,29 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h sob atmosfera de N2. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi arrefecida com gelo e foi extraída com DCM (100 ml). A camada orgânica foi lavada com solução saturada de NaHCO3 (10 ml) e água (10 ml), separou-se as camadas, secou-se a camada orgânica sobre Na2SO4 anidro, concentrou-se sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 25-30% de EtOAc em hexano como um eluente para fornecer 4- ((1R,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)-N-(piridin-2-il)benzamida (pico 1, atribuído como cis, não polar em TLC quando comparado com o outro isômero correspondente).
[1370] Composto 160 (cis): LC-MS (m/z) = 459,1 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3): δ 1,14 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,86 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 3,23 (dd, J = 5,6 Hz, 15,6 Hz, 1H), 4,26 (s, 2H), 4,62 (bs, 1H), 6,96 (s, 1H), 7,10 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,17 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,40 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,54 - 7,60 (m, 3H), 7,78 - 7,86 (m, 3H), 8,15 (s, 1H), 8,30 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 8,41 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,87 (bs, 1H).
[1371] Composto 219 (trans): Pico 2 (ponto polar em TLC) foi ainda purificado por HPLC Prep (condição analítica: Coluna: Inertsil ODS 3V (250 mm x 4,6 mm x 5 µM), fase móvel (A): 100% de água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 1,0 ml/min, Composição de B: 0/10, 12/70, 25/90, 27/10, 30/10) para obter 4-((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-(piridin-2-il)benzamida (pico 2, designado como ponto polar trans em TLC quando comparado com o outro isômero correspondente). LC-MS (m/z) = 459,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 1,34 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,97 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,39 (bs, 1H), 4,09 (bs, 1H), 4,24 (bs, 1H), 4,82 (bs, 1H), 5,95 (s, 1H), 7,04 - 7,07 (m, 1H), 7,09 - 7,16 (m, 2H), 7,23 (s, 1H), 7,39 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,71 - 7,76 (m, 3H), 7,96 (s, 1H), 8,28 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 8,34 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H). PROCEDIMENTO EK: SÍNTESE DO COMPOSTO 210
[1372] 4-(1,1-dioxidotiomorfolino)benzaldeído: A uma solução de 4- fluorobenzaldeído (0,4 g, 3,22 mmol, 1,0 eq.) E 1,1-dióxido de tiomorfolina (0,65 g, 4,83 mmol, 1,5 eq.) Em água (20,0 ml) foi adicionado K2CO3 (0,67 g, 4,83 mmol, 1,5 eq.). A mistura foi agitada a 100 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi extraída com EtOAc (2 x 100 ml. A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 25-30% de EtOAc em hexano como eluente para obter 4-(1,1-dioxidotiomorfolino)benzaldeído. LC-MS (m/z) = 240,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,12 (s, 4H), 3,95 (s, 4H), 7,14 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,74 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 9,74 (s, 1H).
[1373] 1,1-dióxido de 4-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)tiomorfolina: A uma solução de (S)-1-(1H- indol-3-il)propan-2-amina (0,07 g, 0,4 mmol, 1,0 eq.) Em HFIP (3,0 ml) foi adicionado 4-(1,1-dioxidotiomorfolino)benzaldeído (0,096 g, 0,40 mmol, 1,0 eq.). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h em um tubo selado. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 2 - 3% de MeOH em DCM como um eluente para obter 1,1-dióxido de 4-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)tiomorfolina. LC-MS (m/z) = 396,0 [M+H]+
[1374] Preparação do composto 210.
[1375] 2-cloro-1-((1S,3S)-1-(4-(1,1-dioxidotiomorfolino)fenil)-3- metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: Para uma solução de 1,1-dióxido de 4-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3, 4-b]indol-1-il)fenil)tiomorfolina (0,05 g, 0,13 mmol, 1 eq.) Em clorofórmio (8,0 ml) foi adicionado bicarbonato de sódio (0,021 g, 0,26 mmol, 2,0 eq.) a 0 °C, agitada durante 15 minutos e então cloreto de 2- cloroacetil (0,02 ml, 0,13 mmol, 1,5 eq.) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h sob atmosfera de N2. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi diluída com DCM (80 ml) e foi lavada com água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 2 - 3% de MeOH em DCM como um eluente para obter o produto que foi posteriormente purificado por TLC preparativa usando 2% de MeOH em DCM como um eluente (eluído três vezes) para obter 2-cloro-1-((1S,3S)-1-(4-(1,1- dioxidotiomorfolino)fenil)-3-metil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4- b]indol-2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z) = 472,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,10 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,86 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,04 - 3,14 (m, 5H), 3,66 (s, 4H), 4,30 (bs, 1H), 4,62 (bs, 1H), 4,77 (bs, 1H), 5,91 (bs, 1H), 6,88 - 6,95 (m, 3H), 7,00 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,23 - 7,25 (m, 3H), 7,40 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 10,92 (s, 1H). PROCEDIMENTO EL: SÍNTESE ALTERNATIVA DO COMPOSTO 104
[1376] 4-(4-metilpiperazin-1-il)benzaldeído: Para uma solução de 4- fluorobenzaldeído (0,5 g, 4,03 mmol, 1,0 eq.) E 1-metilpiperazina (0,6 g, 6,04 mmol, 1,5 eq.) Em DMF (20,0 ml) foi adicionado K2CO3 (0,83 g, 6,04 mmol, 1,5 eq.). A mistura foi agitada a 130 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi extinta com gelo e foi extraída com EtOAc (2 x 100 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 3 - 4% de MeOH em DCM como um eluente para obter 4-(4-metilpiperazin-1- il)benzaldeído. LC-MS (m/z) = 205,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,19 (s, 3H), 2,40 (t, J = 5,2 Hz, 4H), 3,35 (t, J = 5,0 Hz, 4H), 7,02 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 9,69 (s, 1H).
[1377] (3S)-3-metil-1-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol: Para uma solução de (S)-1-(1H-indol-3- il)propan-2-amina (0,2 g, 1,15 mmol, 1,0 eq.) e 4-(4-metilpiperazin-1- il)benzaldeído (0,23 g, 1,15 mmol, 1,0 eq.) em tolueno (10,0 ml) foi adicionado ácido acético (0,066 ml, 1,15 mmol, 1,0 eq.) a 0 °C. A mistura foi agitada a 120 °C durante 16 h. TLC (10% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 5 - 8% de MeOH em DCM como um eluente para fornecer (3S)-3-metil-1-
(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol. LC-MS (m/z) = 361,3 [M+H]+
[1378] Preparação do composto 104.
[1379] 2-cloro-1-((1S,3S)-3-metil-1-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona: Para uma solução de (3S)-3-metil-1-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol (0,25 g, 0,69 mmol, 1 eq.) Em clorofórmio (10,0 ml) foi adicionado bicarbonato de sódio (0,12 g, 1,38 mmol, 2,0 eq.) A 0 °C, agitada durante 15 min e então cloreto de 2-cloroacetil (0,08 ml, 1,04 mmol, 1,5 eq.) Foi adicionado a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1,5 h sob atmosfera de N2. TLC (5% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 3 - 7% de MeOH em DCM como um eluente para obter o produto que foi posteriormente purificado por HPLC Prep (condição analítica: Coluna: KINETEX C18 (100 mm x 4,6 mm x 2,6 µm), fase móvel (A): 0,1% de TFA em água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 0,75 ml/min, Composição de B: 0/20, 5/90, 6/90, 8/20, 10/20) para obter 2-cloro-1- ((1S,3S)-3-metil-1-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H- pirido[3,4-b]indol-2-il)etan-1-ona. LC-MS (m/z) = 437,36 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 1,10 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 2,15 (s, 2H), 2,37 (s, 4H), 2,84 - 2,87 (m, 1H), 3,02 (s, 4H), 3,08 - 3,13 (m, 3H), 4,60 - 4,77 (m, 2H), 5,89 (s, 1H), 6,80 (s, 2H), 6,91 - 7,01 (m, 2H), 7,17 - 7,26 (m, 3H), 7,40 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 10,88 (s, 1H). PROCEDIMENTO EM: SÍNTESE DO COMPOSTO 169 E COMPOSTO 167
[1380] 4-(N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila: Para uma solução de 4- (clorossulfonil) -2-fluorobenzoato de metil (1,0 g, 3,96 mmol, 1 eq) e ciclopropanamina (0,27 ml, 3,96 mmol, 1 eq) em THF (25,0 ml) foi adicionado trietilamina (1,67 ml, 11,88 mmol, 3,0 eq.) a 0°C.
A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 12 h sob atmosfera de N2. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída.
A reação foi diluída com EtOAc (150 ml), lavada com água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto.
O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 30-35% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-(N- ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila.
LC-MS (m/z) = 274,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,36 (s, 2H), 0,48 - 0,51 (m, 2H), 2,15 - 2,17 (m, 1H), 3,87 (s, 2H), 7,66 - 7,73 (m, 2H), 8,10 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 8,20 (s, 1H).
[1381] N-ciclopropil-3-fluoro-4-(hidroximetil)benzenossulfonamida: Para uma solução de 4-(N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila (1,01 g, 3,69 mmol, 1 eq) em THF (10 ml) e MeOH (10,0 ml) foi adicionado boro-hidreto de sódio (1,37 g, 36,96 mmol, 10,0 eq) a 0 °C e a reação foi agitada a 80 °C durante 12 h. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi dissolvido em EtOAc (100 ml) e foi lavado com água (2 x 10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30 - 40% de EtOAc em hexano como um eluente para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4- (hidroximetil)benzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 244,1 [M+H]-. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,35 (s, 2H), 0,46 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 2,09 (s, 1H), 4,06 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 5,49 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,62 - 7,71 (m, 2H), 7,97 (s, 1H).
[1382] N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzenossulfonamida: A uma solução de N-ciclopropil-3-fluoro-4-(hidroximetil)benzenossulfonamida (0,7 g, 2,85 mmol, 1 eq) em DCM (25,0 ml) foi adicionado Desmartin periodinano (1,8 g, 4,28 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 2 horas. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 a 0 °C e extraída com DCM (100 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30 - 35% de EtOAc em hexano como um eluente para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4- formilbenzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 242,1 [M+H]-. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,37 (s, 2H), 0,50 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 2,17 (s, 1H), 7,72 - 7,78 (m, 2H), 8,05 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H). 10,23
(s, 1 H).
[1383] 4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: Para a solução de (S)-1- (1H-indol-3-il)hexan-2-amina (0,16 g, 0,74 mmol, 1 eq) em HFIP (2,0 ml) foi adicionado N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzenossulfonamida (0,22 g, 0,89 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20 - 25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3- fluorobenzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 442,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 0,35 (s, 2H), 0,47 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 0,78 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 1,13 - 1,17 (m, 2H), 1,25 - 1,26 (m, 2H), 1,40 - 1,41 (m, 2H), 2,08 (bs, 1H), 2,30 (t, J = 11,8 Hz, 2H), 2,64 - 2,82 (m, 2H), 5,47 (s, 1H), 6,89 - 7,04 (m, 3H), 7,22 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,42 - 7,49 (m, 2H), 7,58 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 10,64 (s, 1H).
[1384] Preparação do composto 169.
[1385] 4-((1S,3S)-3-butil-2-(2-cloroacetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: Para uma solução de 4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida (0,06 g, 0,14 mmol, 1 eq) em CHCl3 (10,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,023 g, 0,28 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 minutos e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,02 ml, 0,20 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 1,5 horas. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando
20-25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-((1S,3S)- 3-butil-2-(2-cloroacetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 518,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,34 - 0,44 (m, 4H), 0,76 (s, 3H), 1,21 (s, 4H), 1,44 (s, 2H), 2,02 (s, 1H), 3,03 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,10 - 3,20 (m, 1H), 4,39 - 4,49 (m, 2H), 6,68 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 6,10 (s, 1H), 6,94 - 7,03 (m, 2H), 7,23 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,37 - 7,52 (m, 4H), 7,97 (s, 1H), 10,80 (s, 1H).
[1386] Preparação do composto 167.
[1387] 4-((1S,3S)-3-butil-2-propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: Para uma solução de 4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida (0,06 g, 0,14 mmol, 1 eq) em DCM (8,0 ml) foi adicionada trietilamina (0,05 ml, 0,34 mmol, 2,4 eq) à temperatura ambiente, agitada durante 5 minutos e, em seguida, adicionado ácido propiólico (0,01 ml, 0,14 mmol, 1,0 eq) e iodeto de 2-cloro-1-metil piridínio (0,043 g, 0,17 mmol, 1,2 eq). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 16 horas. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava completa. A mistura de reação foi diluída com água (10 ml) e foi extraída com DCM (100 ml). A camada orgânica foi lavada com solução de salmoura (10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por HPLC Prep (condição analítica: Coluna: Inertsil ODS 3V (150 mm x 4,6 mm x 5 µM), fase móvel (A): 0,1% de amônia em água, fase móvel (B): ACN, taxa de fluxo: 1,0 ml/min, Composição de B: 0/20, 3/20, 7/80, 17/80, 18/20, 20/20) para obter 4-((1S,3S)-3-butil-2-propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b] indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida. LC- MS (m/z): 494,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,35 - 0,46 (m, 4H), 0,80 (s, 3H), 1,23 (bs, 4H), 1,51 (bs, 2H), 2,09 (s, 1H), 3,03 -
3,10 (m, 2H), 4,51 (s, 1H), 4,96 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 6,97 - 7,03 (m, 2H), 7,25 - 7,30 (m, 1H), 7,47 (d, J = 7,6 Hz, 4H), 7,83 (s, 1H), 10,71 (s, 1H). PROCEDIMENTO EN: SÍNTESE DO COMPOSTO 164 E COMPOSTO 153
[1388] 2,2-dióxido de (S)-3,4-dimetil-1,2,3-oxatiazolidina: A uma solução de cloreto de tionila (2,07 ml, 28,53 mmol, 2,5 eq) em DCM (20,0 ml) a -40 °C foi adicionado (S)-(1-hidroxipropan-2-il)carbamato de terc- butila (2,0 g, 11,41 mmol, 1 eq) em DCM (5,0 ml) e piridina (4,8 ml, 59,33 mmol, 5,2 eq.). A mistura foi agitada a -40 °C durante 2 h sob atmosfera de N2. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi diluída com DCM: EtOAc (1: 1) e o precipitado foi filtrado. O filtrado foi lavado com salmoura (50 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter 2-óxido de (4S)-3,4-dimetil-1,2,3-oxatiazolidina. 2-óxido de (4S)-3,4-dimetil-1,2,3-oxatiazolidina (4,0 g, 18,08 mmol, 1,0 eq) foi dissolvido em ACN (10 ml) e cloreto de rutênio (0,02 g, 0,09 mmol, 0,005 eq) e metaperiodato de sódio (4,25 g, 19,88 mmol, 1,1 eq) foi adicionado a 0 °C e, em seguida, foi adicionada água (10 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o leito foi lavado com EtOAc (100 ml). O filtrado foi lavado com solução de NaHCO3 (2 x 10 ml), água (20 ml) e solução salina (20 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 30 - 40% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 2,2- dióxido de (S)-3,4-dimetil-1,2,3-oxatiazolidina. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1,49 - 1,57 (m, 12H), 4,17 - 4,20 (m, 1H), 4,40 - 4,42 (m, 1H), 4,64 - 4,68 (m, 1H).
[1389] (S)-(1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)propan-2-il)carbamato de terc- butila: Para uma mistura de 5-fluoro-1H-indol (0,25 g, 1,85 mmol, 1 eq) e cloreto cuproso (0,24 g, 2,40 mmol, 1,3 eq) em frasco de fundo redondo foi purgado com vácuo e, em seguida, DCM (10 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada a 0 °C e MeMgCl (0,8 ml, 2,40 mmol, 1,3 eq) foi adicionado gota a gota. A mistura de reação foi mantida a 0 °C durante 1 h. Em seguida, 2,2-dióxido de (S)-3,4-dimetil- 1,2,3-oxatiazolidina (0,31 g, 1,29 mmol, 0,7 eq) em DCM (3 ml) foi adicionado a -20 °C gota a gota e a reação foi agitada a -20 °C durante 5 h. TLC (20% EtOAc em hexano) mostrou a formação de um novo ponto. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi dissolvido em EtOAc (100 ml) e foi extinto com ácido cítrico a 10% a 0 °C e a mistura de reação foi filtrada através de leito de celite. O leito foi lavado com DCM (50 ml) e o filtrado foi lavado com água (2 x 10 ml) e solução salina (10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20% de EtOAc em hexano como um eluente para obter (S)-(1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)propan-2-il)carbamato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 237,1 [M+H]+ - após clivagem do grupo t-butila. RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,98 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,32 (s, 9H), 2,58 - 2,76 (m, 2H), 3,63 - 3,66 (m, 1H), 6,72 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,86 (t, J = 9,0 Hz, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,26 - 7,27 (m, 2H), 10,87 (s, 1H).
[1390] (S)-1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)propan-2-amina: Para uma solução de (S)-(1-(5-fluoro-1H-indol-3- il)propan-2-il)carbamato de terc- butila (0,2 g, 0,68 mmol, 1 eq) em DCM (10,0 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (0,5 ml)) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 3 h. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. Foi diluída com água gelada (5 ml) e foi basificada com solução de NaOH a 5% (pH ajustado para 9) e foi extraída com EtOAc (100 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para obter (S)-1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)propan-2-amina. LC- MS (m/z) = 193,1 [M+H]-
[1391] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida: A uma solução de (S)-1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,14 g, 0,72 mmol, 1 eq) em HFIP (2,0 ml) foi adicionado N-ciclopropil-3-fluoro-4- formilbenzenossulfonamida (0,21 g, 0,87 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h em um tubo selado. TLC (50% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30 - 35% de EtOAc em hexano como um eluente para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-
metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il) benzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 418,1 [M+H]+
[1392] Procedimento para o tratamento de sequestraante de N- ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida: Para uma solução de N- ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida (0,06 g, 0,14 mmol, 1 eq) em THF (50,0 ml) foi adicionado Quadrasil TA (2,0 g, 2,0 eq). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi filtrada através de funil sinterizado e ao filtrado foi novamente adicionado Quadrasil TA (2,0 g, 2,0 eq) e a reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura de reação foi filtrada através de funil sinterizado e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-metil- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida. LC- MS (m/z) = 418,1 [M+H]+
[1393] Preparação do composto 164. 4-((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-6- fluoro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida: A uma solução de N- ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida (0,05 g, 0,12 mmol, 1 eq) em CHCl3 (8,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,02 g, 0,24 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 minutos e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,014 ml, 0,18 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente por 1 hora. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20 - 25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-((1S,3S)- 2-(2-cloroacetil)-6-fluoro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-
b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 494,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,35 - 0,46 (m, 4H), 1,18 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 2,00 - 2,10 (m, 1H), 2,89 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 3,20 - 3,30 (m, 1H), 4,44 - 4,46 (m, 1H), 4,70 - 4,76 (m, 2H), 6,15 (s, 1H), 6,87 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 - 7,27 (m, 2H), 7,40 - 7,45 (m, 2H), 7,52 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 10,94 (s, 1H).
[1394] Preparação do composto 153. N-ciclopropil-3-fluoro-4- ((1S,3S)-6-fluoro-3-metil-2-propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)benzenossulfonamida: A uma solução de N-ciclopropil-3- fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)benzenossulfonamida (0,08 g, 0,19 mmol, 1,0 eq) em DCM (10,0 ml) foi adicionada trietilamina (0,064 ml, 0,46 mmol, 2,4 eq) à temperatura ambiente, agitada durante 5 minutos e depois adicionado ácido propiólico (0,012 ml, 0,19 mmol, 1,0 eq) e iodeto de 2-cloro-1-metil piridínio (0,06 g, 0,23 mmol, 1,2 eq). A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 30 minutos. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com DCM (100 ml) e foi lavada com água (2 x 10 ml. As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20-25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3S)-6-fluoro-3-metil-2-propioloil- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida. LC- MS (m/z): 469,8 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,35 (s, 2H), 0,45 - 0,46 (m, 2H), 1,20 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,02 (bs, 1H), 2,94 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,45 (s, 1H), 4,66 (s, 1H), 5,17 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 6,16 (s, 1H), 6,88 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 7,22 -7,27 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,51 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,56 - 7,60 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 10,98 (s, 1 H). PROCEDIMENTO EO: SÍNTESE DO COMPOSTO EO
[1395] 2-(2-(2-azidoetóxi)etóxi)etan-1-ol: Para uma solução de 2-(2- (2-cloroetóxi)etóxi)etan-1-ol (5,0 g, 29,72 mmol, 1 eq.) em DMF (15 ml) a 0 °C azida de sódio (2,9 g, 44,58 mmol, 1,5 eq) foi adicionada. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante 16 h. A mistura de reação é resfriada até a temperatura ambiente e diluída com água e extraída com acetato de etila (2X100 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com água gelada (50 ml), salmoura (25 ml), seca com Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. 2-(2-(2-azidoetóxi)etóxi)etan-1-ol. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 3,40 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 3,61 (t, J = 4,4 Hz, 2H), 3,68 - 3,69 (m, 6H), 3,74 (t, J = 4,4 Hz, 2H).
[1396] 1-azido-2-(2-(2-bromoetóxi)etóxi)etano: Para uma solução de 2-(2-(2-azidoetóxi)etóxi)etan-1-ol (2,2 g, 12,55 mmol, 1 eq) em DCM
(40 ml) a 0 °C Trifenilfosfina (3,95 g, 15,06 mmol, 1,2 eq) e tetrabrometo de carbono (4,99 g, 15,06 mmol, 1,2 eq) foram adicionados. Em seguida, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. Em seguida, a reação foi diluída com água (15 ml) e foi extraída com DCM (2 x 15 ml). A camada orgânica foi seca em Na2SO4 anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 15 - 25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 1-azido-2-(2-(2- bromoetóxi)etóxi)etano. LC-MS (m/z) = Massa desejada não ionizada. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,38 - 3,39 (m, 2H), 3,46 - 3,49 (m, 2H), 3,68 (s, 6H), 3,81 - 3,84 (m, 2H).
[1397] 4-(N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila: Para uma solução de 4-(clorossulfonil)-2-fluorobenzoato de metila (0,750 g, 2,96 mmol, 1 eq) e ciclopropanamina (0,169 g, 2,96 mmol, 1 eq) em THF (20,0 ml) foi adicionado trietilamina (1,25 ml, 8,90 mmol, 3,0 eq.) a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h sob atmosfera de N2. TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi diluída com EtOAc (150 ml), lavada com água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 15 - 25% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-(N-ciclopropilsulfamoil)-2- fluorobenzoato de metila. LC-MS (m/z) = 272,1 [M-H]-. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 0,64 – 0,68 (m, 4H), 3,27 – 3,32 (m, 1H), 3,97 (s, 3H), 4,91 (s, 1H), 7,67 – 7,74 (m, 2H), 8,07 – 8,11 (m, 1H).
[1398] 4-(N-(N-(2-(2-(2-azidoetóxi)etóxi)etil)-N-ciclopropilsulfamoil)- 2-fluorobenzoato de metila: Para uma solução de 4-(N- ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila (0,440 g, 1,61 mmol, 1 eq) em acetonitrila (20 ml) a 0 °C Cs2CO3 (0,628 g, 1,93 mmol, 1,2 eq) seguido por 1-azido-2-(2-(2-bromoetóxi)etóxi)etano (0,460 g, 1,93 mmol, 1,2 eq) adicionado. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida a 80 °C durante 4 h. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, evaporada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 15 - 20% de EtOAc em hexano como um eluente para obter 4-(N-(2-(2-(2- azidoetóxi)etóxi)etil)-N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila. LC-MS (m/z) = 431,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0,73 – 0,74 (m, 2H), 0,91 (s, 2H), 2,17 (s, 1H), 3,37 – 3,44 (m, 4H), 3,58 (s, 4H), 3,64 – 3,66 (m, 4H), 3,96 (s, 3H), 7,64 – 7,71 (m, 2H), 8,05 – 8,09 (m, 1H).
[1399] 4-(N-(2-(2-(2-aminoetóxi)etóxi)etil)-N-ciclopropilsulfamoil)-2- fluorobenzoato de metila: Para uma solução de 4-(N-(2-(2-(2- azidoetóxi)etóxi)etil)-N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila (0,520 g, 1,19 mmol, 1 equiv.) em acetato de etila (25 ml) 10% Pd/C foi adicionado. A mistura de reação foi agitada sob H2-Balloon à temperatura ambiente por 5 h. Em seguida, a mistura de reação foi filtrada através de celite. Leito celitado cuidadosamente lavado com acetato de etila. Camada orgânica concentrada sob pressão reduzida para obter 4-(N-(2-(2-(2-aminoetóxi)etóxi)etil)-N-ciclopropilsulfamoil)-2- fluorobenzoato de metila bruto. LC-MS (m/z) = 401,5 [M+H]+
[1400] Metil-4-(N-ciclopropil-N-(2-(2-(2-(5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo- hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanamido)etóxi)etóxi)etil)sulfamoil)-2-fluorobenzoato: Para uma solução de 5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il)ácido pentanoico (0,298 g, 1,22 mmol, 1,2 eq) em DMF (20,0 ml) foi adicionado DIPEA (0,575 ml, 3,33 mmol, 3,0 eq) e metil 4-(N-(2-(2-(2-) aminoetóxi)etóxi)etil)-N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato (0,450 g, 1,11 mmol, 1 equiv) e agitado durante 5 minutos e depois EDC.HCl (0,318 g, 1,66 mmol, 1,5 eq) e HOBt (0,225 g, 1,66 mmol, 1,5 eq) foi adicionado. Em seguida, a reação foi agitada à temperatura ambiente durante 12 h sob atmosfera de N2. TLC (metanol a 10% em DCM) mostrou que a reação estava completa. A reação foi diluída com salmoura e extraída com acetato de etila (150 ml). A camada orgânica foi lavada com solução saturada de NaHCO3 (2 x 10 ml) e água (2 x 15 ml). A camada orgânica combinada foi seca com anidro de Na2SO4, concentrada sob pressão reduzida para se obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 6 - 7% de metanol em DCM como um eluente para obter 4-(N-ciclopropil- N-(2-(2-(2-(5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol- 4-il)pentanamido)etóxi)etóxi)etil)sulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila. LC-MS (m/z) = 631,3 [M+H]+
[1401] N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro-4- (hidroximetil)fenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo- hexahidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida: A uma solução de 4-(N-ciclopropil-N-(2-(2-(2-(5-((3aS,)4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro-1H- tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamido)etóxi)etóxi)etil)sulfamoil)-2- fluorobenzoato de metila (0,500 g, 0,792 mmol, 1 eq) em THF (12 ml) e MeOH (12,0 ml) foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,299 g, 7,92 mmol, 10,0 eq) a 0 °C e a reação foi agitada a 80 °C durante 14 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi dissolvido em EtOAc (100 ml) e foi lavado com água (2 x 10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 8 - 9% de metanol em DCM como um eluente para obter N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro- 4-(hidroximetil)fenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5-((3aS,4S,6aR)-2- oxo-hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida. LC-MS (m/z) = 603,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,35 (s, 2H), 0,46 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 2,09 (s, 1H), 4,06 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 5,49 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,62 - 7,71 (m, 2H), 7,97 (s, 1H).
[1402] N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro-4- formilfenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexahidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida: Para uma solução de N-(2-(2-(2- ((N-ciclopropil-3-fluoro-4-(hidroximetil)fenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5- ((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida (0,180 g, 0,298 mmol, 1 eq) em DCM (8,0 ml) foi adicionado Desmartin periodinano (0,126 g, 0,298 mmol, 1,0 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 5 horas. A mistura de reação foi extinta com solução saturada de NaHCO3 a 0 °C e extraída com DCM (100 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 6 - 7% de metanol em DCM como um eluente para obter N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro-4- formilfenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida. LC-MS (m/z) = 601,3 [M+H]+
[1403] N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro-4-((S)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5- ((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanamida: Em um tubo selado a uma solução de (S)-1-(1H-indol- 3-il)propan-2-amina (0,026 g, 0,149 mmol, 1 eq) em HFIP (2,0 ml) foi adicionado N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro-4- formilfenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo- hexahidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida (0,090 g, 0,149 mmol, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h. TLC (30% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 6 - 7% de metanol em DCM como um eluente para obter N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro- 4-((S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)
fenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5-((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro- 1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida. LC-MS (m/z) = 757,3 [M+H]+
[1404] Preparação do composto EO. N-(2-(2-(2-((4-((S)-2-(2- cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorofenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5-((3aS,4S,6aR)-2- oxo-hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il)pentanamida: Para uma solução de N-(2-(2-(2-((N-ciclopropil-3-fluoro-4-((S)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)etóxi)etóxi)etil)-5- ((3aS,4S,6aR)-2-oxo-hexa-hidro-1H-tieno[3,4-d]imidazol-4- il)pentanamida (0,040 g, 0,052 mmol, 1 eq) em CHCl3 (5,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,009 g, 0,28 mmol, 2,0 eq) a 0 °C, agitado durante 15 minutos e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,006 ml, 0,07 mmol, 1,5 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 6 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto bruto e levada para purificação de HPLC preparativa (coluna: intersil ODS 3V (150 mm X 4,6 mm X 5 µm); Fase móvel A: 0,1% de amônia em água; Fase móvel B: Acetonitrila). LC-MS (m/z): 832,7 [M+H]+
[1405] Um esquema sintético semelhante foi usado para sintetizar o Composto 170: LC-MS (m/z): 490,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 0,64 - 0,69 (m, 4H), 1,14 - 1,15 (m, 3H), 1,77 (s, 1H), 2,62 (s, 3H), 2,88 – 2,92 (m, 1H), 3,31 (s, 1H), 4,46 (s, 1H), 4,70 - 4,76 (m, 2H), 6,16 (s, 1H), 6,94 - 6,97 (m, 1H), 7,00 - 7,04 (m, 1H), 7,24 - 7,26 (m, 1H), 7,45 - 7,47 (m, 3H), 7,53 – 7,56 (m, 1H), 10,84 (s, 1H). PROCEDIMENTO EQ: SÍNTESE DO COMPOSTO 162
[1406] N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzamida: A uma solução agitada de ácido 3-fluoro-4-formilbenzoico (0,750 g, 4,46 mmol, 1,0 eq.) Em DCM (20 ml) foi adicionada trietilamina (1,84 ml, 13,15 mmol, 3 eq.) E T3P (50% em peso em acetato de etila) (4,2 ml, 6,68 mmol, 1,5 eq.) Foi adicionado gota a gota a 0 °C.
A reação foi agitada à temperatura ambiente por 10 minutos, em seguida, ciclopropanamina (0,254 g, 4,46 mmol, 1 eq) foi adicionada e a mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente por 14 h.
Após o consumo do material de partida, a mistura de reação foi diluída com água (6 ml) e extraída com DCM (2 x 10 ml), e a camada orgânica combinada foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (12 ml) e salmoura (10 ml). seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para obter o produto bruto.
O bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 15 - 20% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter o produto N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzamida.
LC-MS (m/z) = 208,1 [M+H] +. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 0,65 (s, 2H), 0,90 – 0,92
(m, 2H), 2,91 – 2,92 (m, 1H), 6,27 (s, 1H), 7,54 – 7,62 (m, 2H), 7,90 – 7,93 (m, 1H), 10,38 (s, 1H).
[1407] (R)-3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-metóxi-3-oxopropil)- 1H-indol-1-carboxilato de terc-butila: Para uma solução de cloridrato de metil D-triptofanato (5,0 g, 19,63 mmol, 1 eq) em THF a 0 °C, TEA (2,75 ml, 19,63 mmol, 1 eq), Boc2O (1 eq) e DMAP (3,59 g, 29,44 mmol, 1,5 eq) foram adicionados. Em seguida, a mistura de reação foi deixada a agitar à temperatura ambiente por 14 h. A mistura de reação foi diluída com água (20 ml), extraída com acetato de etila (2X150 ml). A camada orgânica combinada lavada com salmoura (20 ml), água (40 ml), seca com sulfato de sódio anidro. A camada orgânica foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 15 - 20% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter o produto (R)-3-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-metóxi-3-oxopropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm: 1,36 (s, 9H). 1,60 (s, 9H), 2,93 – 2,99 (m, 1H), 3,06 – 3,08 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 4,25 (bs, 1H), 7,23 – 7,35 (m, 3H), 7,49 – 7,54 (m, 2H), 8,00 – 8,02 (m, 1H).
[1408] (R)-3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-hidroxipropil)-1H- indol-1-carboxilato de terc-butila: Para uma solução de (R)-3-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-metóxi-3-oxopropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc-butila (0,200 g, 0,477 mmol 1 eq) em THF (5 ml) a 0 °C LiCl (0,050 g, 1,19 mmol, 2,5 eq) foi adicionado seguido pela adição de boro-hidreto de sódio (0,045 g, 2,5 eq, 1,19 mmol). Em seguida, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 10 minutos, em seguida, etanol (5 ml) foi adicionado e agitado durante 14 h. Em seguida, a mistura de reação foi extinta com cloreto de amônio aquoso e extraída com acetato de etila (2X10 ml). Camada orgânica combinada lavada com salmoura (2 ml), água (5 ml), seca com sulfato de sódio anidro. A camada orgânica foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20 - 25% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter o produto (R)- 3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-hidroxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 391,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 1,42 (s, 9H), 1,66 (s, 10H), 2,93 – 2,95 (m, 2H), 3,61 – 3,64 (m, 1H), 3,69 – 3,71 (m, 1H), 3,98 (s, 1H), 4,82 (s, 1H), 7,22 -7,25 (m, 1H), 7,29 – 7,33 (m, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,60 – 7,61 (m, 1H), 8,12 (s, 1H).
[1409] (R)-3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-metoxipropil)-1H- indol-1-carboxilato de terc-butila: Para uma solução de (R)-3-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-hidroxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc- butila (0,140 g, 0,358 mmol, 1 equiv) em acetonitrila à temperatura ambiente Ag2O (0,415 g, 1,79 mmol, 5 eq) foi adicionado seguido por iodeto de metila (0,115 ml, 1,79 mmol, 5 eq). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 72 h. A mistura de reação foi filtrada através de celilte, lavada com acetato de etila (50 ml). A filtração foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 15 a 20% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter o produto (R)- 3-(2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-metoxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 405,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 1,43 (s, 9H), 1,65 (s, 9H), 2,90 – 2,95 (m, 2H), 3,28 – 3,33 (m, 5H), 4,00 (s, 1H), 4,92 (s, 1H), 7,21 – 7,23 (m, 1H), 7,28 – 7,32 (m, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,63 – 7,65 (m, 1H), 8,10 (s, 1H),
[1410] (R)-1-(1H-indol-3-il)-3-metoxipropan-2-amina 2,2,2- trifluoroacetaldeído: Para uma solução de (R)-3-(2-((terc- butoxicarbonil)amino)-3-metoxipropil)-1H-indol-1-carboxilato de terc- butila (0,065 g, 0,160 mmol, 1 eq) em DCM a 0 °C TFA (1 ml) foi adicionado. Em seguida, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 12 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O bruto obtido é seco e encaminhado para o passo seguinte. LC-MS (m/z) = 205,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 2,92 – 2,95 (m, 2H), 3,26 (s, 3H), 3,31 – 3,35 (m, 1H), 3,42 – 3,52 (m, 2H), 6,98 – 7,01 (m, 1H), 7,07 – 7,10 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,83 (bs, 3H), 10,99 (s, 1H).
[1411] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzamida: Para uma solução de (R)-1- (1H-indol-3-il)-3-metoxipropan-2-amina2,2,2-trifluoroacetaldeído (45 mg, 0,143 mmol, 1 eq) em tolueno (5 ml) foi adicionada N-ciclopropil-3- fluoro-4-formilbenzamida (0,029 g, 0,143 mmol, 1 eq). Em seguida, AcOH (0,008 ml, 0,143 mmol, 1 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 120 °C durante 8 horas para obter uma solução amarela. A mistura de reação foi basificada a pH = 8 com NaHCO3 sat e extraída com acetato de etila (2X10 ml. As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter um produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 3 - 4% de metanol em DCM como eluente para obter o produto N-ciclopropil-3-fluoro-4-((3R)-3- (metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)benzamida. LC-MS (m/z) = 394,2 [M+H]+.
[1412] Preparação do composto 162. 4-((3R)-2-(2-cloroacetil)-3- (metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil- 3-fluorobenzamida: Para uma solução de N-ciclopropil-3-fluoro-4-((3R)- 3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b] foi adicionado indol- 1-il) benzamida (mistura de cis e trans) (0,035 g, 0,08 mmol, 1 eq) em CHCl3 (5 ml), NaHCO3 (0,014 g, 1,18 mmol, 2 eq). Após agitação durante 5 minutos foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,010 ml, 0,133 mmol, 1,5 eq) gota a gota a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3,5 horas para obter uma suspensão amarela clara. A mistura de reação foi diluída com água (5 ml) e extraída com DCM (2 × 15 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o produto bruto. O bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 40 - 50% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter o produto 4-((3R)-2-(2-cloroacetil)- 3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzamida (mistura 1: 4 de diastereômero). LC-MS (m/z) = 470,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 0,54 (s, 2H), 0,65 – 0,68 (m, 2H), 2,81 - 2,82 (m, 1H), 2,88 – 2,92 (m, 1H), 3,01 (s, 4H), 3,17 – 3,24 (m, 2H), 4,04 – 4,46 (m, 1H), 4,59 (bs, 1H), 4,71 – 4,75 (m, 1H), 6,09 (s, 0,2 H), 6,73 (s, 0,8 H), 6,92 – 7,10 (m, 3H), 7,12 – 7,27 (m, 1H), 7,42 – 7,49 (m, 1H), 7,50 – 7,56 (m, 1H), 7,63 – 7,65 (m, 1H), 8,38 – 8,49 (m, 1H), 10,67 - 10,74 (s, 1H). PROCEDIMENTO ER: SÍNTESE DO COMPOSTO 161 E COMPOSTO 217
[1413] Metil-4-(N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato: A uma solução agitada de ciclopropanamina (0,169 g, 2,96 mmol, 1 eq) em THF (15 ml) foi adicionada trietilamina (1,25 ml, 8,94 mmol, 3 eq.) seguido por 4-(clorossulfonil)-2-fluorobenzoato de metila (0,750 g, 2,96 mmol, 1 eq.) a 0 °C. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Após o consumo do material de partida (50% EA em hexano), o solvente foi evaporado sob pressão reduzida, para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica- gel (eluindo com: Hexano/EtOAc = 50:50) para obter 4-(N- ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila. LC-MS (m/z) = 272,1 [M-H]-. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 0,63 (s, 4H), 2,30 (s, 1H), 3,74 (s, 3H), 4,96 (s, 1H), 7,67 - 7,74 (m, 2H), 8,07 - 8,11 (m, 1H).
[1414] N-ciclopropil-3-fluoro-4-(hidroximetil)benzenossulfonamida: Para uma solução de 4-(N-ciclopropilsulfamoil)-2-fluorobenzoato de metila (710 mg, 2,58 mmol, 1 eq) em mistura de THF (15 ml) e metanol (15 ml) a 0 °C adicionou-se NaBH4 (0,982 g, 25,8 mmol, 10 eq). Em seguida, refluxo da mistura de reação por 18 h. A mistura de reação foi arrefecida até à temperatura ambiente, o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O bruto obtido foi arrefecido com cloreto de amônio saturado e extraído com acetato de etila (2 × 25 ml). A camada orgânica combinada lavada com água (10 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (eluindo com: Hexano/EtOAc = 50:50) para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4- (hidroximetil)benzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 246,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,36 - 0,41 (m, 2H), 0,42 – 0,47 (m, 2H), 2,09 – 2,11 (m, 1H), 4,60 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 5,47 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,64 – 7,68 (m, 1H), 7,70 – 7,72 (m, 1H), 7,97 (s, 1H).
[1415] N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzenossulfonamida: Para uma solução de N-ciclopropil-3-fluoro-4- (hidroximetil)benzenossulfonamida (410 mg, 1,67 mmol, 1 eq) em DCM (15 ml) foi adicionado periodinano de Dess martin (1,06 g, 2,50 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 horas. Em seguida, a mistura de reação foi extinta com bicarbonato de sódio saturado e extraída com DCM (2 x 25 ml). Camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter produto bruto. Este foi purificado por cromatografia em coluna flash usando acetato de etilo em hexano como eluente. As frações do produto coletadas e concentradas sob pressão reduzida para obter N- ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 242,1 [M-H]-. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 0,65 - 0,67 (m, 4H), 2,32 (bs, 1H), 4,97 (s, 1H), 7,74 - 7,81 (m, 2H), 8,02 - 8,06 (m, 1H), 10,42 (s, 1H).
[1416] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)benzenossulfonamida: Em um tubo para uma solução do composto (S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,180 g, 1,03 mmol, 1 eq) em HFIPA (2 ml) composto N-ciclopropil-3-fluoro-4- formilbenzenossulfonamida (0,251 g, 1,03 mmol, 1 eq) foi adicionado. Em seguida, a mistura de reação foi selada e aquecida a 80 °C durante 12 h. A mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. Este foi purificado por cromatografia em coluna flash usando acetato de etilo em hexano como eluente. As frações do produto (mistura de cis e trans) coletadas e concentradas sob pressão reduzida para obter a mistura de cis e trans de N-ciclopropil-3-fluoro-4- ((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)benzenossulfonamida. LC-MS (m/z): 400,2 [M+H]+
[1417] Preparação dos compostos 161 e 217. 4-((1R,3S)-2-(2- cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida (161) e 4-((1S,3S)-2-(2- cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida (217): Para uma solução de N- ciclopropil-3-fluoro-4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)benzenossulfonamida (mistura de cis e trans) (320 mg, 0,801 mmol, 1 eq) em acetato de etila (5 ml) NaHCO3 aquoso (0,134 mg, 1,60 mmol, 2 eq) em água (5 ml). Após agitação por 5 minutos foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,095 ml, 1,201 mmol, 1,5 eq) gota a gota a 0°C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 horas para obter uma suspensão amarela clara. A mistura de reação foi diluída com água (5 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 20 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto o qual foi purificado por cromatografia em coluna flash, utilizando acetato de etila em hexano como eluente. As frações do produto coletadas e concentradas sob pressão reduzida para obter o isômero 1 (não polar em TLC em comparação com outro isômero) 4-((1R,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida e isômero 2 (polar em TLC em comparação com outro isômero) 4- ((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)-N-ciclopropil-3-fluorobenzenossulfonamida.
[1418] Isômero - 1 (161): LC-MS (m/z): 476,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,36 (s, 2H), 0,47 - 0,48 (m, 2H), 1,11 (s, 3H), 2,11 (s, 1H), 2,75 – 2,79 (m, 1H), 3,07 - 3,11 (m, 1H), 4,60 (bs, 3H), 6,83 (s, 1H), 6,99 – 7,01 (m, 1H), 7,05 – 7,07 (m, 1H), 7,30 – 7,34 (m, 2H), 7,46 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,54 - 7,59 (m, 2H), 8,03 (s, 1H), 10,82 (s, 1H).
[1419] Isômero - 2 (217): LC-MS (m/z): 476,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ: 0,34 (s, 2H), 0,44 (s, 2H), 1,14 (s, 3H), 2,02 (s, 1H), 3,17 – 3,18 (m, 1H), 3,23 – 3,28 (m, 1H), 4,43 (s, 1H), 4,68 – 4,74 (m, 2H), 6,14 (s, 1H), 6,95 – 7,01 (m, 2H), 7,23 (s, 1H), 7,49 – 7,50 (m, 4H), 7,94 (s, 1H), 10,81 (s, 1H). PROCEDIMENTO ES: SÍNTESE DO COMPOSTO 130 E COMPOSTO 28
[1420] N-((3s,5s,7s)-adamantan-1-il)-4-formilbenzamida: A uma solução agitada de ácido 4-formilbenzoico (1,04 g, 6,34 mmol, 1,2 eq) em DCM (25 ml) foi adicionado trietil amina (2,23 ml, 15,86 mmol, 3 eq.) seguido por T3P (50% em peso em acetato de etila) (5,04 ml, 7,93 mmol, 1,5 eq.) a 0 °C.
A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 15 minutos, em seguida (3s,5s,7s)-adamantan-1-amina (0,8 g, 5,28 mmol, 1,0 eq) foi adicionado.
Permitiu-se que a mistura de reação agitasse a temperatura ambiente por 14 h.
Após o consumo do material de partida (40% EA em hexano), a mistura de reação foi diluída com água (10 ml) e extraída com DCM (2 × 25 ml), e a camada orgânica combinada foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (15 ml) e água (10 ml). seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para obter o produto bruto.
O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando acetato de etila em hexano como um eluente para se obter o produto N-((3s, 5s, 7s)-adamantan-1-il)-4- formilbenzamida.
O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel (eluindo com: Hexano/EtOAc = 60:40) para obter N-(3s,5s,7s)- adamantan-1-il)-4-formilbenzamida.
LC-MS (m/z) = 284,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,64 (s, 6H), 2,05 (s, 9H), 7,82 (s, 1H), 7,93
(s, 4H), 10,05 (s, 1H).
[1421] (1R,3R)-1-(4-(((3S,5S,7S)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila e (1S,3R)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila: Para uma solução de N-((3s,5s,7s)-adamantan-1-il)-4-formilbenzamida (900 mg, 3,176 mmol, 1 eq) e D-triptofanato de metila (0,831 mg, 3,811 mmol, 1,2 eq) em DCM (25 ml) foi adicionado TFA (0,243 ml, 3,17 mmol, 1 eq). A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 20 horas para obter uma solução vermelha escura. A mistura de reação foi arrefecida com NaHCO3 sat. (15 ml) e extraído com DCM (2 × 25 ml). Camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter produto bruto. Este foi purificado usando o seguinte método de HPLC quiral (Coluna: CHIRALPAK IA (100 mm X 4,6 mm X 3 µm); Fase Móvel: n- Hexano IPA com 0,1% DEA; Taxa de fluxo: 1,0 ml/min). As frações do produto coletadas e concentradas sob pressão reduzida para obter (1R,3R)-1-(4-(((3S,5S,7S)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila (Xn TLC não polar em comparação com outro isômero) e (1S,3R)-1-(4-(((3R,5R,7R)- adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-3-carboxilato de metila (Xn TLC Polar em comparação com outro isômero).
[1422] Isômero - 1 (isômero cis): (ponto não polar em comparação com isômero trans): LC-MS (m/z) = 484,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,71 (s, 6H), 2,11 (s, 9H), 2,94 – 3,02 (m, 1H), 3,20 – 3,23 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,94 - 3,96 (m, 1H), 5,24 (s, 1H), 5,82 (s, 1H), 6,91 – 7,16 (m, 3H), 7,38 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,51 - 7,52 (m, 1H), 7,63 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,73 (s, 1H).
[1423] Isômero - 2 (isômero trans) (mancha polar em comparação com o isômero cis): LC-MS (m/z) = 484,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz,
CDCl3) δ: 1,70 (s, 6H), 2,10 (s, 9H), 3,08 – 3,12 (m, 1H), 3,23 – 3,26 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 4,10 – 4,12 (m, 1H), 5,39 (s, 1H), 5,75 (s, 1H), 7,11 – 7,28 (m, 5H), 7,53 – 7,78 (m, 3H), 7,97 (s, 1H).
[1424] Preparação do composto 130. Metil-(1R,3R)-1-(4- (((3S,5S,7S)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2-(2-cloroacetil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato: Para uma solução de (1R,3R)-1-(4-(((3S,5S,7S)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila (200 mg, 0,413 mmol, 1 eq) e NaHCO3 (52 mg, 0,620 mmol, 1,5 eq) em CHCl3 (10 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,039 ml, 0,496 mmol, 1,2 eq) gota a gota a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3,5 horas para obter uma suspensão amarela clara. A mistura de reação foi diluída com água (5 ml) e extraída com DCM (2 × 25 ml). Camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para obter produto bruto. O qual foi purificado por cromatografia em coluna flash usando acetato de etila em hexano como eluente. As frações do produto coletadas e concentradas sob pressão reduzida para obter (1R,3R)-1-(4-(((3S,5S,7S)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2-(2- cloroacetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila. LC-MS (m/z): 560,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ: 1,70 (s, 6H), 2,07 - 2,16 (m, 9H), 3,04 (s, 3H), 3,19 - 3,24 (m, 1H), 3,66 - 3,77 (m, 1H), 4,18 - 4,22 (m, 1H), 4,33 - 4,36 (m, 1H), 4,93 (bs, 1H), 5,82 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 7,18 - 7,25 (m, 4H), 7,32 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,60 - 7,66 (m, 1H), 8,63 (s, 1H).
[1425] Preparação do composto 28. Metil-(1S,3R)-1-(4- (((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2-(2-cloroacetil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato: Para uma solução de (1S,3R)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila (80 mg, 0,165 mmol, 1 eq) e NaHCO3 (27 mg, 0,330 mmol, 2 eq) em CHCl3 (5 ml) foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,019 ml, 0,248 mmol, 1,5 eq) gota a gota a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3,5 horas para obter uma suspensão amarela clara. A mistura de reação foi diluída com água (5 ml) e extraída com DCM (2 × 25 ml). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para fornecer o produto bruto o qual foi purificado por cromatografia em coluna flash, utilizando acetato de etila em hexano como eluente. As frações do produto coletadas e concentradas sob pressão reduzida para obter (3R)-1-(4-(((3S,5S,7S)-adamantan-1-il)carbamoil)fenil)-2-(2- cloroacetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila. LC-MS (m/z): 560,2 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6, VT a 80 °C) δ: 1,63 (s, 6H), 2,02 (s, 9H), 3,28 - 3,31 (m, 1H), 3,46 - 3,51 (m, 4H), 4,23 (bs, 1H), 4,56 - 4,60 (m, 1H), 5,23 (bs, 1H), 6,14 (bs, 1H), 6,93 - 7,03 (m, 2H), 7,22 - 7,24 (m, 2H), 7,43 - 7,46 (m, 3H), 7,63 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 10,74 (s, 1H). PROCEDIMENTO ET: SÍNTESE DO COMPOSTO 175
[1426] 1-((1S,3S)-3-metil-1-(4-morfolinofenil)-1,3,4,9-tetra-hidro- 2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-2-(trifluorometil)prop-2-en-1-ona: Para uma solução de 4-(4-((1S,3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)morfolina (0,200 g, 0,575 mmol, 1 eq.) e ácido 2- (trifluorometil)acrílico (0,080 g, 0,575 mmol, 1 eq) em DCM (8 ml) foi adicionada trietilamina (0,194 ml, 1,38 mmol, 2,4 eq) seguido por iodeto de 2-cloro-1-metil-piridínio (0,176 g, 0,690 mmol, 1,2 eq) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h.
Após consumo do material de partida (TLC, 80% de acetato de etila em hexano), a reação foi diluída com solução aquosa saturada de NaHCO3 (5 ml) e foi extraída com DCM (25 ml). A camada orgânica foi seca com Na2SO4 anidro filtrado, e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto.
O produto bruto obtido foi purificado por cromatografia em coluna flash em sílica gel usando 26 - 30% de acetato de etila em hexano como eluente para obter 1-((1S,3S)- 3-metil-1-(4-morfolinofenil)-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2- il)-2-(trifluorometil)prop-2-en-1-ona.
LC-MS (m/z) = 470,4 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 1,14 – 1,15 (m, 3H), 2,82 – 2,86 (m, 1H), 3,00 (s, 4H), 3,18 - 3,22 (m, 1H), 3,66 (s, 4H), 4,63 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 6,26 (s, 1H), 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,00 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,40 – 7,41 (m, 1H), 10,75 (s, 1H). PROCEDIMENTO EV: SÍNTESE DO COMPOSTO 133 E COMPOSTO 218
[1427] 4-((4-(metoxicarbonil)fenil)sulfonamido)piperidina-1- carboxilato de terc-butila: Para uma solução agitada de 4- (clorossulfonil)benzoato de metila (2,0 g, 8,547 mmol, 1 eq) e trietilamina (3,5 ml, 25,64 mmol, 3,0 eq.) Em tetra-hidrofuron foi adicionado 4- aminopiperidina-1-carboxilato de terc-butilo (2,0 g, 10,25 mmol, 1,2 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada 18 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (50% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a reação foi diluída com acetato de etila (200 ml), lavada com água (2 x 50 ml), salmoura (50 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 30% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 4-((4- (metoxicarbonil)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 299,2 ([M+H]+ - grupo Boc).
[1428] 4-((4-(hidroximetil)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila: Para uma solução agitada de 4-((4- (metoxicarbonil)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,8 g, 2,009 mmol, 1 eq) em uma mistura de tetra-hidrofuron (20 ml) e metanol (20,0 ml) foi adicionado boro-hidreto de sódio (0,6 g, 16,076 mmol, 8,0 eq) a 0 °C. A mistura resultante foi gradualmente deixada aquecer até à temperatura ambiente e a reação foi aquecida a 80 °C durante 18 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (80% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo obtido foi dissolvido em água (100 ml) e acetato de etila (100 ml). A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etil (2 x 100 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 70% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 4-((4- (hidroximetil)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 271,1 ([M+H]+ - grupo Boc); RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,12 - 1,19 (m, 2H), 1,32 (s, 9H), 1,48 (d, J = 10,8 Hz, 2H), 2,72 (bs, 2H), 3,11 (bs, 1H), 3,66 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 4,55 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 5,36 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,68 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 2H).
[1429] N-ciclopropil-3-fluoro-4-formilbenzenossulfonamida: Para uma solução agitada de 4-((4-formilfenil)sulfonamido)piperidina-1- carboxilato de terc-butila (0,5 g, 1,35 mmol, 1 eq) em diclorometano (20,0 ml) foi adicionado periodinano de desmartina (0,85 g, 2,02 mmol, 1,5 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 2 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (70% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi resfriada a 0 °C e extinta com solução saturada de bicarbonato de sódio e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 70% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 4-((4- formilfenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 313,1 [(M+H)+ - (grupo t-butil)]; RMN de 1H (400 MHz, DMSO- d6) δ ppm 1,13 - 1,20 (m, 2H), 1,32 (s, 9H), 1,51 (d, J = 12,0 Hz, 2H), 2,73 (bs, 2H), 3,20 - 3,23 (m, 1H), 3,68 (d, J = 12,4 Hz, 2H), 7,99 - 8,00 (m, 3H), 8,07 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 10,07 (s, 1H).
[1430] terc-butil-4-((4-((3S)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato: Em um tubo selado, (S)-1-(1H-indol-3-il)propan-2-amina (0,2 g, 0,543 mmol, 1 eq), 4-((4-formilfenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,11 g, 0,651 mmol, 1,0 equiv) e hexafluoro-2-propanol (HFIP) (2,0 ml). O tubo de selagem fechou-se e a mistura foi aquecida a 50 °C e agitada durante 16 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (metanol a 10% em diclorometano), a reação foi resfriada até a temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando metanol a 6% em diclorometano como eluente para obter 4-((4-((3S)-3-metil- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (m/z) = 525,3 [M+H]+.
[1431] terc-butil-4-((4-((1R,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)piperidina-1- carboxilato e terc-butil-4-((4-((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)piperidina-1- carboxilato: Para uma solução agitada de 4-((4-((3S)-3-metil-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)piperidina-1- carboxilato de terc-butila (0,310 g, 0,590 mmol, 1 eq) em acetato de etila (4 ml) a 0 °C bicarbonato de sódio (0,099 g, 1,18 mmol, 2 eq) em água (4 ml) adicionado. Após agitação durante 5 minutos foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,070 ml, 0,886 mmol, 1,5 eq). A mistura foi deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 2,5 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (60% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi resfriada a 0 °C e extinta com água (5 ml) e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 40 a 45% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 4-((4-((1R,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-
metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila e a 50 - 55% de terc-butil-4-((4-((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato.
[1432] Análise do composto 133-1: LC-MS (m/z) = 601,4 [(M+H)+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,85 - 0,86 (m, 3H), 1,14 - 1,17 (m, 2H), 1,33 - 1,46 (m, 11H), 2,65 - 2,72 (m, 3H), 3,11 (bs, 2H), 3,63 (bs, 2H), 4,61 - 4,69 (m, 3H), 6,91 (bs, 1H), 7,01 - 7,03 (m, 1H), 7,36 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,46 - 7,50 (m, 3H), 11,12 (s, 1H).
[1433] Análise do composto 293: LC-MS (m/z) = 601,4 [(M+H)+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 1,12 - 1,13 (m, 5H), 1,32 (s, 9H), 1,44 (bs, 2H), 2,65-2,69 (m, 2H), 2,88-2,91 (m, 1H), 3,09 (bs, 1H), 3,20 (s, 1H), 3,62 - 3,64 (m, 2H), 4,41 (s, 1H), 4,77 (bs, 2H), 5,97 (bs, 1H), 6,93 - 7,03 (m, 2H), 7,24 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,54 - 7,65 (m, 5H), 10,93 (s, 1H).
[1434] Preparação do composto 133. 4-((1R,3S)-2-(2-cloroacetil)-3- metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ácido(piperidin-4- il)benzenossulfonamida2,2,2-trifluoroacético: Para uma solução de 4- ((4-((1R,3S)-2-(2-cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,080 g, 0,133 mmol, 1 eq) em DCM a 0 °C foi adicionado TFA (1 ml). Em seguida, a mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 1,5 h e à temperatura ambiente 1 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O bruto obtido foi dissolvido em uma mistura de acetonitrila (1 ml) e água (1 ml) e mantido sob liofilização por 14 h. LC-MS (m/z) = 501,1 [(M+H)+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,87 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,45 - 1,47 (m, 2H), 1,65 (bs, 2H), 2,65 - 2,72 (m, 1H), 2,84 - 2,86 (m, 2H), 3,11 (s, 2H), 3,28 (bs, 1H), 3,93 (bs, 1H), 4,64 - 4,69 (m, 3H), 6,89 (s, 1H), 7,01 - 7,03 (m, 1H), 7,09 - 7,13 (m, 1H), 7,36 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,48 - 7,52 (m, 3H), 7,75 - 7,78 (m, 2H), 7,95 (d, J = 7,2 Hz,
1H), 8,15 (bs, 1H), 8,40 (bs, 1H), 11,10 (s, 1H).
[1435] Preparação do composto 218. 4-((1S,3S)-2-(2-cloroacetil)-3- metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-(piperidin-4- il)benzenossulfonamida: Para uma solução de 4-((4-((1S,3S)-2-(2- cloroacetil)-3-metil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)sulfonamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila (0,080 g, 0,133 mmol, 1 eq) em DCM (5 ml) a 0 °C foi adicionado TFA (1 ml). Em seguida, a mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 1,5 h e à temperatura ambiente 1 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O bruto purificado obtido por HPLC preparativa seguinte (coluna: X-Bridge C18 (100 mm x 4,6 mm x 3,5 µM); Fase móvel (A): 0,1% TEA em água; fase móvel (B): Acetonitrila). LC-MS (m/z) = 501,2 [(M+H)+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) VT a 60 °C: δ ppm 0,14 (s, 3H), 1,50 (s, 2H), 1,70 (s, 2H), 2,87 - 2,97 (m, 7H), 4,29 (s, 1H), 4,62 (s, 1H), 4,79 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 6,95 - 7,00 (m, 2H), 7,25 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,50 - 7,54 (m, 2H), 7,68 - 7,81 (m, 3H), 8,15 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 10,85 (bs, 1H). PROCEDIMENTO EW: SÍNTESE DO COMPOSTO 134
[1436] Para a solução de EW-1 (44 g, 283,64 mmol, 1 eq) em MeOH (600 ml) foi adicionado H2SO4 (55,20 g, 551,56 mmol, 30 ml, 98% de pureza, 1,94 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 horas para obter uma solução marrom. Remoção da maior parte do solvente. A solução aquosa de NaHCO3 (300 ml) foi adicionada a solução de reação e pH ajustado = 8. A suspensão foi dissolvida em EtOAc (200 ml), extraída com EtOAc (80 ml x 2). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com sulfato de sódio, filtradas e concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi triturado com MTBE/PE (45 ml/120 ml) e filtrado para obter EW-2. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,64 - 7,69 (m, 2H), 6,72 - 6,79 (m, 1H), 4,08 - 4,19 (m, 2H), 3,87 (s, 3H).
[1437] A uma solução de EW-2 (14,74 g, 86,96 mmol, 1 eq) em EtOH (150 ml) e H2O (100 ml) adicionou-se CaCO3 (15,67 g, 156,53 mmol, 1,8 eq) e ICI (21,18 g, 130,44 mmol, 6,66 ml, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 36 horas para obter uma suspensão marrom. A TLC mostrou o local desejado encontrado. A reação foi diluída com NaHCO3 saturado (200 ml) e extraída com EtOAc (150 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (100 ml) e secas com sulfato de sódio, filtradas e concentradas para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por coluna flash (SiO2, EtOAc em PE a partir de 0 a 30%) para obter EW-3. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,15 (s, 1H), 7,62 - 7,68 (m, 1H), 4,59 (s largo, 2H), 3,88 (s, 3H).
[1438] A uma solução de (S)-(1-(trimetilsilil)oct-1-in-4-il)carbamato de terc-butila (1,9 g, 6,39 mmol, 1,1 eq) e EW-3 (1,71 g, 5,81 mmol, 1 eq) em DMF (15 ml) foram adicionados Na2CO3 (1,23 g, 11,61 mmol, 2 eq), LiCl (246,13 mg, 5,81 mmol, 118,90 µl, 1 eq) e Pd(dppf)Cl2 (424,81 mg, 580,58 mol, 0,1 eq) sobre N2. A mistura foi agitada a 100 °C sobre N2 durante 12 h para obter uma solução marrom. TLC mostrou que a reação estava concluída. A reação foi diluída com EtOAc/salmoura (80/20 ml) e filtrada através de celite. O filtrado foi lavado com salmoura (60 ml x 3) e seco sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por coluna flash (SiO2, EtOAc em PE de 0 a 9%) para obter EW-4. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,22 (br s, 2H), 7,57 (br d, J = 11,80 Hz, 1H), 4,36 (br d, J = 7,78 Hz, 1H), 3,84 - 3,96 (m, 4H), 2,86 - 3,04 (m, 2H), 1,25 (s, 15 H), 0,86 (t, J = 6,90 Hz, 3H), 0,44 (s, 9H).
[1439] A uma solução de EW-4 (2,3 g, 4,95 mmol, 1 eq) em THF (20 ml) foi adicionado TBAF (1 M, 20 ml, 4,04 eq). A mistura foi agitada a 30°C durante 12 h para obter uma solução marrom. TLC (PE/EtOAc = 3: 1) mostrou novo ponto encontrado. A reação foi diluída com H2O (70 ml) e extraiu-se com EtOAc (60 ml x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (60 ml) e secas com sulfato de sódio, filtradas e concentradas para fornecer o produto bruto. O produto bruto foi purificado por coluna flash (SiO2, EtOAc em PE a partir de 0 a 25%) para obter EW-5. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,43 (br s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,61 (d, J = 11,76 Hz, 1H), 7,15 (br s, 1H), 4,36 (br d, J = 8,25 Hz, 1H), 3,94 (s, 4H), 2,83 - 3,03 (m, 2H), 1,23 - 1,45 (m, 15 H), 0,86 - 0,92 (m, 3H).
[1440] EW-5 (1,21 g, 3,08 mmol, 1 eq) foi dissolvido em HCl/dioxano (4 M, 30 ml, 38,92 eq). A reação foi agitada a 10 °C durante 12h para obter uma solução amarela. TLC (PE/EtOAc = 3: 1) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi dissolvido em H2O (3 ml) e ajustada a pH = 8 com solução saturada de NaHCO3, concentrado para se obter o resíduo. O resíduo foi lavado com DCM/EtOH (150 ml/15 ml) e filtrado para obter EW-6, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8,87 (br s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,59 (dd, J = 11,80, 1,00 Hz, 1H), 7,13 (s, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,72 (s, 2H), 3,07 - 3,16
(m, 1H), 2,97 (dd, J = 14,31, 4,27 Hz, 1H), 2,64 (dd, J = 14,31, 8,78 Hz, 1H), 1,33 - 1,49 (m, 6H), 0,93 (t, J = 7,03 Hz, 3H).
[1441] A uma solução de EW-6 (500 mg, 1,71 mmol, 1 eq) em THF (10 ml) foi adicionado LiAlH4 (389,48 mg, 10,26 mmol, 6 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (0,39 ml), NaOH (15%, 0,39 ml) e H2O (1,17 ml). A mistura foi diluída com THF (50 ml) e filtrada em celite. O filtrado foi seco sobre Na2SO4 e concentrado para obter EW-6a, que foi usado na próxima etapa sem purificação adicional. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,47 (brs, 1H), 7,37 (s, 1H), 7,09 (s, 1H), 6,99 - 6,96 (m, 1H), 4,78 (s, 2H), 3,21 -3,08 (m, 1H), 2,97 - 2,92 (m, 1H), 2,63 - 2,57 (m, 1H), 1,56 - 1,54 (m, 6H), 0,96 - 0,90 (d, J = 6,8 Hz, 3H).
[1442] A uma solução de EW-6a (400 mg, 1,51 mmol, 1 eq) em DMF (10 ml) foram adicionados TBSCl (273,69 mg, 1,82 mmol, 222,51 µl, 1,2 eq), DMAP (18,49 mg, 151,32 µmol, 0,1 eq), imidazol (309,05 mg, 4,54 mmol, 3 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 2 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: EtOAc/MeOH = 5/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por coluna flash (eluindo com: ETOAc/MeOH = 100% EtOAc a 20%) para obter EW-7a. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 8,54 (brs, 1H), 7,10 (s, 1H), 7,07 (s, 1H), 6,77 - 6,74 (m, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,25 - 3,22 (m, 1H), 3,02 - 2,92 (m, 2H), 1,69 - 1,14 (m, 6H), 0,83 (s, 9H), 0,81 - 0,77 (m, 3H), 0,00 (s, 6H).
[1443] A uma solução de EW-7a (190 mg, 501,85 µmol, 1 eq) em tolueno (10 ml) foi adicionado 4-fluorobenzaldeído (62,29 mg, 501,85 µmol, 52,78 µl, 1 eq) e peneiras moleculares de 4Å (4 g). A mistura foi agitada a 120 °C durante 12 horas para obter uma suspensão amarela. A mistura foi filtrada. Ao filtrado foi adicionado TFA (57,22 mg, 501,85 µmol, 37,16 µl, 1 eq). A mistura foi agitada a 120 °C durante 30 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 5/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi basificada a pH = 8 com Et3N. A mistura foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) para obter EW-8a e [(3S)-3-butil-8-fluoro-1-(4- fluorofenil)-2, 3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-6-il]metanol. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,66 (brs, 1H), 7,14 - 7,05 (m, 3H), 6,91 - 6,88 (m, 2H), 6,79 - 6,76 (m, 1H), 5,10 (s, 1H), 4,68 (s, 2H), 2,95 - 2,81 (m, 2H), 2,40 - 2,38 (m, 1H), 1,42 - 1,14 (m, 6H), 0,83 (s, 9H), 0,77 - 0,73 (m, 3H), 0,00 (s, 6H).
[1444] A uma solução de EW-8a (60 mg, 123,79 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foram adicionados Et3N (62,63 mg, 618,95 µmol, 86,15 µl, 5 eq) e cloreto de prop-2-inoil (32,86 mg, 371,37 µmol, 3 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada agitar a 10 °C durante 12 horas para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) mostraram que a reação foi concluída. A mistura de reação foi extinta com H2O (15 ml) e extraiu-se com DCM (15 ml*3). As camadas orgânicas foram secas com Na2SO4 e concentradas para resultar o produto bruto. O produto bruto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 3/1) para obter EW-9.
[1445] Preparação do Composto 134
[1446] A uma solução de EW-9 (16 mg, 29,81 µmol, 1 eq) em DCM (5 ml) foi adicionado TFA (154,00 mg, 1,35 mmol, 0,1 ml, 45,31 eq). A mistura foi agitada a 10 °C durante 1 hora para obter uma solução amarela. LCMS e TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) mostraram que a reação foi concluída. A reação foi concentrada para obter o resíduo. O resíduo foi dissolvido em MeOH (10 ml). A mistura foi agitada a 40 °C durante 1 hora. LCMS mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi concentrada para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por prep-TLC (eluindo com: PE/EtOAc = 1/1) para obter o Composto 134. LC-MS (m/z): 423,1 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ = 7,67 (brs, 1H), 7,45 - 7,20 (m, 3H), 6,93 - 6,84 (m, 3H), 5,81 (s, 1H), 4,0 (brs, 2H), 4,70 - 4,68 (m, 2H), 3,83 - 2,97 (m, 4H), 1,32 - 1,18 (m, 6H), 0,81 - 0,79 (m, 3H). PROCEDIMENTO EX: SÍNTESE DO COMPOSTO 145
[1447] (S)-2-aminohexan-1-ol: a uma solução de ácido (S)-2- aminohexanoico (5 g, 38,14 mmol, 1 eq) em THF (140,0 ml) a -0 °C foi adicionado LAH 1 M solução em THF (76,28 ml, 76,28 mmol, 2 eq). A mistura de reação foi aquecida até à temperatura ambiente, depois a mistura foi agitada a 65 °C durante 7 h sob atmosfera de N2. TLC (10% MeOH em DCM) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi resfriada até a temperatura ambiente, a reação foi diluída com éter dietílico (50 ml), após o Fisher - workup, a mistura de reação foi filtrada através de funil sinterizado, usando éter dietílico, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter o produto, sem purificação adicional do produto bruto foi encaminhado para a próxima etapa. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,83 - 0,91 (m, 3H), 1,2 - 1,42 (m, 6H), 2,82 - 2,83 (m, 1H), 3,24 - 3,29 (m, 1H), 3,57 - 3,61 (m, 1 H).
[1448] (S)-(1-hidroxihexan-2-il)carbamato de terc-butila: Para uma solução de (S)-2-aminohexan-1-ol (4,2 g, 35,83 mmol, 1 equiv.) Em DCM (40 ml) foi adicionado TEA (10 ml, 71,67 mmol, 2 equiv.) a 0 °C gota a gota, foi agitado durante 5 min, em seguida di-terc-butil dicarbonato (9,86 ml, 43,00 mmol, 1,2 equiv). Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 18 h, lavou-se com água (75 ml) e salmoura (75 ml), secou-se sobre Na2S04, e concentrou-se in vácuo. O resíduo foi submetido a cromatografia em sílica-gel combiflash equipada com MeOH em DCM como um eluente para obter o produto. RMN de 1 H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,89 (s, 3H), 1,32 - 1,43 (m, 6H), 1,44 (s, 9H), 3,50 - 3,54 (m, 1H), 3,61 - 3,67 (m, 2H), 4,59 (bs, 1H).
[1449] 2-óxido de (4S)-4-butil-1,2,3-oxatiazolidina-3-carboxilato de terc-butila: A uma solução de 1H -imidazol (5,1 g, 75,57 mmol, 4 equiv) e trietilamina (7,9 ml, 56,68 mmol, 3 equiv) em diclorometano anidro (30 ml) a -78 °C foi adicionado cloreto de tionila (1,5 ml, 20,78 mmol, 1,1 equiv) gota a gota. A mistura de reação foi agitada por 5 minutos enquanto resfriava -78 °C e (S)-(1-hidroxihexan-2-il)carbamato de terc- butila (4,1 g, 18,89 mmol, 1 equiv) em diclorometano anidro (30 ml) foi adicionado gota a gota ao longo de 30 minutos. A mistura de reação foi agitada a -78 °C durante 3 horas. A mistura de reação foi agitada enquanto aquecia até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Água foi adicionada (100 ml) e a fase separada. A fase aquosa foi extraída adicionalmente em diclorometano (150 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com água (100 ml), secos com Na2SO4 anidro, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para obter o material em bruto de 2-óxido de (4S)-4-butil-1,2,3-oxatiazolidina-3- carboxylato de terc-butila, sem purificação adicional, o produto bruto foi encaminhado para a próxima etapa.
[1450] 2,2-dióxido de (S)-4-butil-1,2,3-oxatiazolidina-3-carboxilato de terc-butila: hidrato de cloreto de rutênio (III) (0,002 g, 0,013 mmol, 0,007 equiv), foi adicionado a uma solução de 2-óxido de (4S)-4-butil-
1,2,3-oxatiazolidina-3-carboxilato de terc-butila (5 g, 19,01 mmol, 1 equiv), em acetonitrila (50 ml) e água (50 ml) a 0 °C, seguido pela adição em porções de periodato de sódio (4,4 g, 20,91 mmol, 1,1 equiv). A mistura bifásica foi agitada a 20 °C durante 2 horas. Água (250 ml) foi adicionada e a mistura foi extraída em acetato de etila (2 x 150 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com água (150 ml), salmoura (150 ml), secos com Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para obter o produto bruto, o produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna usando 10% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 2,2-dióxido de (S)-4-butil-1,2,3- oxatiazolidina-3-carboxilato de terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0,90 – 1,25 (m, 3H), 1,31 – 1,38 (m, 6H), 1,48 (s, 9H), 1,75 – 1,95 (m, 2H), 4,27 – 4,32 (m, 2H), 4,61 – 4,65 (m, 1H).
[1451] (S)-(1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)hexan-2-il)carbamato de terc- butila: O 5-fluoro-1H-indol (2,0 g, 14,809 mmol, 1 eq) e cloreto cuproso (1,9 g, 19,252 mmol, 1,3 eq) foi tomado em frasco de fundo redondo e foi purgado com árgon, em seguida, diclorometano (25 ml) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada a 0 °C. Em seguida, MeMgCl (3M em THF) (6,43 ml, 19,252 mmol, 1,3 eq) foi adicionado gota a gota ao longo de um período de 10 min. A mistura de reação foi agitada durante 1 h a 0 °C. Após 1 h, uma solução de 2,2-dióxido de (S)-4-butil-1,2,3-oxatiazolidina-3-carboxilato de terc-butila (2,9 g, 10,366 mmol, 0,7 eq) em diclorometano (20 ml) foi adicionado gota a gota a - 20 °C. A mistura resultante foi agitada durante 6 h a -20 °C. Após 6 h, a reação foi extinta com solução de ácido cítrico a 10% a -20 °C e a mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente, filtrou a mistura através de almofada de celite, lavou a almofada de celite com diclorometano. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (2 x 50 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro,
filtrados e concentrados para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 15% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter (S)-(1-(5-fluoro-1H-indol-3- il)hexan-2-il)carbamato de terc-butila.
[1452] O produto isolado foi tratado com sequestrante de metal quadrasil AP (o composto foi dissolvido com THF (30 ml) e quadrasil TA (10 g) foi adicionado, a mistura foi agitada por 1 h, filtrada. Isso é repetido mais uma vez e concentrado). LC-MS (m/z) = 333,2 [M-H]+.
[1453] (S)-1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)hexan-2-amina: Para uma solução de (S)-(1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)hexan-2-il)carbamato de terc- butila (2,8 g, 8,372 mmol, 1 eq) em diclorometano (10 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (5 ml) a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente durante 3 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC, após a conclusão da reação; a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto bruto obtido foi dissolvido com água gelada (5 ml) e foi basificado por solução de hidróxido de sódio a 5% (pH ajustado para 12). O composto foi extraído com diclorometano (3 x 100 ml). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos sobre sulfato de sódio anidro, filtrados e concentrados. O produto bruto obtido foi triturado com n- pentano, decantado o n-pentano e seco sob vácuo para obter (S)-1-(5- fluoro-1H-indol-3-il)hexan-2-amina. LC-MS (m/z) = 235,0 [M+H]+.
[1454] 4-((1S, 3S)-3-butil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida: Em um tubo vedado, (S)- 1-(5-fluoro-1H-indol-3-il)hexan-2-amina (0,5 g, 2,133 mmol, 1 eq), N- ciclobutil-4-formilbenzenossulfonamida (0,51 g, 2,133 mmol, 1,0 eq) e hexafluoro-2-propanol (HFIP) (8 ml). O tubo de vedação foi fechado e a mistura foi aquecida a 90 °C e agitada durante 16 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (5% de metanol em diclorometano), a reação foi resfriada à temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 2% de metanol em diclorometano como eluente para obter 4-((1S,3S)-3-butil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 456,0 [M+H]+. Preparação do composto 145.
[1455] 4-((1S,3S)-3-butil-2-(2-cloroacetil)-6-fluoro-2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida: Para uma solução agitada de 4-((1S,3S)-3-butil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida (0,15 g, 0,329 mmol, 1 eq) e bicarbonato de sódio (0,08 g, 0,987 mmol, 3,0 eq) em clorofórmio foi adicionado cloreto de 2-cloroacetila (0,05 ml, 0,658 mmol, 2,0 eq) em 0 °C. A mistura foi gradualmente deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 2,5 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (50% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi diluída com diclorometano (50 ml), lavada com água (2 x 30 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 40% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter 4-((1S,3S)-3- butil-2-(2-cloroacetil)-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol- 1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 529,9 [M-H]+; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 0,76 (t, J = 6,0 Hz, 3H), 1,26 (m, 4H), 1,38 – 1,44 (m, 3H), 1,67 (bs, 2H), 1,82 – 1,83 (m, 2H), 3,00 – 3,16 (m, 2H), 3,46 – 3,55 (m, 2H), 4,45 (m, 2H), 4,65 (m, 1H), 5,92 (bs, 1H), 6,84 (m, 1H), 7,22 – 7,27 (m, 2H), 7,51 – 7,53 (m, 2H), 7,62 (bs, 2H), 7,85 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 11,00 (s, 1H). PROCEDIMENTO EY: SÍNTESE DO COMPOSTO 143
[1456] Cloreto de 3-(trimetilsilil)propioloil: a uma solução agitada de ácido 3-(trimetilsilil)propiólico (0,080 g, 0,562 mmol, 1 eq) em DMF (0,002 ml, 0,022 mmol, 0,04 eq) foi adicionado cloreto de oxalila (0,053 ml, 0618 mmol, 1,1 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada aquecer à temperatura ambiente e agitada 30 minutos. Em seguida, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter cloreto de 3- (trimetilsilil)propioílo. O bruto foi levado como tal para o próximo passo.
[1457] 4-((1R,3S)-3-butil-6-fluoro-2-(3-(trimetilsilil)propioloil)- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclobutilbenzenossulfonamida: Para uma solução agitada de 4- ((1R,3S)-3-butil-6-fluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclobutilbenzenossulfonamida (0,150 g, 0,329 mmol, 1,0 eq) em acetonitrila (10 ml) foi adicionado bicarbonato de sódio (0,276 g, 3,29 mmol, 10,0 eq) a 0 °C. Após agitação durante 5 minutos, foi adicionada uma solução de cloreto de 3-(trimetilsilil)propioloílo (0,079 g, 0,493 mmol, 1,5 eq) em acetonitrilo. A mistura resultante foi gradualmente deixada aquecer até à temperatura ambiente e agitada durante 1 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (50% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi filtrada através de almofada de celite, lavada a almofada de celite com acetonitrila. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter 4-((1R,3S)-3-butil-6-fluoro-2-(3-(trimetilsilil)propioloil) -2,3,4,9-tetra- hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida. O produto bruto isolado foi utilizado como tal na próxima etapa sem purificação adicional. LC-MS (m/z) = 579,8 ([M+H]+.
[1458] Preparação do composto 143.
[1459] 4-((1S,3S)-3-butil-6-fluoro-2-propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N-ciclobutilbenzenossulfonamida: A uma solução agitada de 4-((1R, 3S)-3-butil-6-fluoro-2-(3-(trimetilsilil)propioil)- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclobutilbenzenossulfonamida (0,220 g, 0,379 mmol, 1 eq) em THF (8,0 ml) foi adicionado fluoreto de tetra butil amônio (1M em THF) (0,758 ml, 0,758 mmol, 2 eq) a 0 °C. A mistura foi deixada aquecer à temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos. O progresso da reação foi monitorado por TLC (5% de metanol em DCM). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, o produto bruto obtido foi diluído com água (5 ml) e extraído com acetato de etila (2 x 5 ml). As camadas orgânicas foram secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por TLC preparativa usando 2% de metanol em DCM como um eluente para obter 4-((1S,3S)-3-butil-6-fluoro-2-propioloil- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)-N- ciclobutilbenzenossulfonamida. LC-MS (m/z) = 508,3 [M+H]+. RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,71 - 0,84 (m, 3H), 1,03 - 1,33 (m, 4H), 1,37 - 1,45 (m, 3H), 1,65 - 1,97 (m, 4H), 2,82 - 2,85 (m, 0,5 H), 2,920 - 2,94 (m, 0,5 H), 3,03 - 3,07 (m, 1H), 3,37 - 3,42 (m, 1H), 3,50 - 3,52 (m, 0,7 H), 3,99 (s, 0,3H), 4,54 - 4,63 (m, 1H), 4,92 - 4,93 (m, 1H), 5,92 (s, 0,5 H), 6,58 (s, 0,5 H), 6,82 - 6,91 (m, 1H), 7,20 - 7,49 (m, 2H), 7,50 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,62 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,74 - 7,94 (m, 1H), 10,99 (s, 0,7 H), 11,22 (s, 0,3H). PROCEDIMENTO EZ: SÍNTESE DO COMPOSTO 144
[1460] N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3R)-3-(metoximetil)-2- propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)benzenossulfonamida: Para uma mistura agitada de N-ciclopropil-3- fluoro-4-((1S,3R)-3-(metoximetil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)benzenossulfonamida (0,17 g, 0,395 mmol, 1 eq), em diclorometano (5 ml) foi adicionada trietilamina (0,13 ml, 0,949 mmol, 2,4 eq), ácido propiólico (0,024 ml, 0,395 mmol, 1 eq) e seguido pela adição de iodeto de 2-cloro-1-metilpiridínio (0,12 g, 0,474 mmol, 1,2 eq) à temperatura ambiente.
A mistura foi agitada durante 30 min.
O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em diclorometano). Após a conclusão da reação, a mistura foi diluída com diclorometano (50 ml), lavada com água (20 ml), salmoura (10 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30% de acetato de etila em diclorometano como um eluente para obter N-ciclopropil-3-fluoro-4-((1S,3R)-3-(metoximetil)- 2-propioil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)benzenossulfonamida.
LC-MS (m/z) = 482,1 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6, a 70 °C) δ 0,37 - 0,46 (m, 4H), 2,11 (s, 1H), 3,10 (m, 2H), 3,23 (s, 3H), 3,32 (s, 2H), 4,43 (s, 1H), 5,14 (s, 1H), 6,12 (s, 1H), 6,98 - 7,04 (m, 2H), 7,21 (s, 1H), 7,47 (bs, 4H), 7,78 (s, 1H), 10,85 (s, 1H). PROCEDIMENTO FA: SÍNTESE DO COMPOSTO 147
[1461] 4-(prop-2-in-1-ilóxi)benzaldeído: A uma solução de 4- hidroxibenzaldeído (2,0 g, 16,37 mmol, 1,0 eq) em acetona (10 ml) foi adicionado K2CO3 (3,39 g, 24,56 mmol, 1,5 eq) e 3-bromoprop-1-ino (5,84 g, 49,13 mmol, 1,0 eq) à temperatura ambiente e a mistura de reação foi submetida a refluxo a 50 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. Após este tempo, TLC (40% de EtOAc em hexano) mostrou que a reação estava concluída. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e foi concentrada sob pressão reduzida para o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 20% de EtOAc em hexano como eluente para obter 4-(prop-2-in-1-ilóxi)benzaldeído. LC- MS (m/z) = 161,0 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 4,78 - 4,79 (m, 3H), 7,06 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,87 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 9,91 (s, 1H).
[1462] (1S,3R)-1-(4-(prop-2-in-1-ilóxi)fenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila: Para uma solução de 4-(prop- 2-in-1-ilóxi)benzaldeído (0,61 g, 3,85 mmol, 1,2 eq) em HFIP (5,0 ml) foi adicionado D-triptofanato de metila (0,70 g, 1,0 mmol, 1,2 eq) e agitado durante 16 horas a 80 °C. LCMS e TLC (50% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava concluída. Os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida para o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 40% de EtOAc em hexano como eluente para obter (1S,3R)-1-(4-(prop-2-in-1- ilóxi)fenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila. LC-MS (m/z) = 410,0 [M+H]+.
Preparação do composto 147.
[1463] (1S,3R)-2-(2-cloroacetil)-1-(4-(prop-2-in-1-ilóxi)fenil)-2,3,4,9- tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila: A uma solução de (1S,3R)-1-(4-(prop-2-in-1-ilóxi)fenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila (0,15 g, 0,41 mmol, 1,0. eq) em clorofórmio (10,0 ml) foi adicionado NaHCO3 (0,116 g, 1,38 mmol, 2,0 eq.) a 0 °C e agitado durante 15 min e depois e cloreto de 2-cloroacetila (0,056 g, 0,49 mmol, 1,2 eq.) foi adicionado a 0 °C. A mistura foi deixada a agitar a essa temperatura durante 1 hora. LCMS e TLC (50% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava concluída. A mistura de reação foi diluída com DCM (50 ml). As camadas orgânicas foram separadas, secas com Na2SO4 e concentradas sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 10 - 20% de EtOAc em hexano como um eluente para obter (1S,3R)-2-(2-cloroacetil)-1-(4-(prop-2-in-1- ilóxi)fenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila. LC-MS (m/z) = 437,1 [M+H] +; RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) 3,13 - 3,22 (m, 1H), 3,27 - 3,37 (m, 2H), 3,51 (s, 3H), 4,19 - 4,22 (m, 1H), 4,56 - 4,59 (m, 1H), 4,71 (s, 2H), 5,10 (bs, 1H), 6,10 (s, 1H), 6,91 - 7,04 (m, 4H), 7,23 - 7,25 (m, 1H), 7,34 - 7,35 (m, 2H), 7,43 - 7,45 (m, 1H), 10,77 (s, 1H). PROCEDIMENTO FB: SÍNTESE DO COMPOSTO 146
[1464] (1S,3R)-1-(4-fluorofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-3-carboxilato de metila: Para uma solução agitada de D- triptofanato de metila (0,6 g, 2,749 mmol, 1,0 eq) em acetato de etila (5 ml) foi adicionado 4-fluorobenzaldeído (0,3 ml, 2,749 mmol, 1,0 eq) à temperatura ambiente. A mistura foi resfriada a 0 °C e T3P (4,37 ml, 6,8725 mmol, 2,5 eq) foi adicionado e aquecido a 110 °C durante 1 h sob condição de micro-ondas. O progresso da reação foi monitorado por TLC (40% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a reação foi diluída com acetato de etila (50 ml), lavada com água (2 x 10 ml), salmoura (10 ml), seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 30% de acetato de etila em hexano como um eluente para obter (1S,3R)-1-(4-fluorofenil)- 2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3, 4-b]indol-3-carboxilato de metila. LC-MS (m/z) = 324,9 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm 3,13 - 3,18 (m, 1H), 3,26 - 3,34 (m, 1H), 3,48 (s, 1H), 3,53 (s, 3H), 3,89 - 3,98 (m, 1H), 5,44 (s, 1H), 7,02 (t, J = 8 Hz, 2H), 7,15 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 7,24 - 7,40 (m, 2H), 7,54 - 7,56 (m, 2H). Preparação do composto 146.
[1465] (1S,3R)-1-(4-fluorofenil)-2-propioil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila: Para ácido 3- (trimetilsilil)propiólico (0,197 g, 1,38 mmol, 1,0 eq), DMF (0,004 g, 0,05 mmol, 0,04 eq) e cloreto de oxalila (0,13 ml, 1,52 mmol, 1,1 eq) foram adicionados e agitados durante 30 min. Após este tempo, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter o cloreto de 3- (trimetilsilil)propioloil bruto e este produto bruto foi diluído com ACN (1 ml) e adicionado a uma mistura de reação contendo uma solução agitada de (1S,3R)-1-(4-fluorofenil)-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-3-carboxilato de metila (0,3 g, 0,925 mmol, 1,0 eq) e NaHCO3 (0,583 g, 0,925 mmol, 7,5 eq) em ACN (5 ml) a 0 °C e agitado durante 15 min. LCMS e TLC (50% de EtOAc em hexano) mostraram que a reação estava concluída. A reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20 - 22% de EtOAc em Hexano como um eluente para obter (1S,3R)-1-(4-fluorofenil)-2- propioloil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-3-carboxilato de metila. LC-MS(m/z)= 377,12 [M+H]+; RMN de 1H (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 3,15 – 3,24 (m, 1H), 3,44 – 3,51 (m, 1H), 3,53 (s, 3H), 4,66 – 4,72 (m, 1H), 6,02 (s, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,93 – 7,09 (m, 3H), 7,19 – 7,39 (m, 2H), 7,40 – 7,44 (m, 3H), 10,78 (s, 1H). PROCEDIMENTO FC: SÍNTESE DO COMPOSTO 149 E COMPOSTO 148
[1466] 4-(((3s,5s,7s)-adamantan-1-il)amino)benzaldeído: Para uma solução agitada de 4-bromobenzaldeído (4,1 g, 22,16 mmol, 1 eq) e (3s,5s,7s)-adamantan-1-amina (5 g, 33,24 mmol, 1,5 eq) em tolueno foi adicionado rac-BINAP (0,69 g, 1,10 mmol, 0,05 eq), fosfato de potássio tribásico (9,39 g, 13,29 mmol, 2 eq) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi purgada sob árgon durante 15 minutos e, em seguida, acetato de paládio (0,15 g, 0,66 mmol, 0,03 eq) foi adicionado e a reação foi agitada a 110 °C durante 16 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (10% de acetato de etila em hexano). Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi filtrada através de leito de celite e o leito foi lavado com acetato de etila (50 ml). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter o produto bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash usando 8 - 9% de acetato de etila em hexano como um eluente para se obter 4-(((3s, 5s, 7s)-adamantan-1-
il)amino)benzaldeído. LC-MS (m/z) = 256,0 ([M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,62 - 1,70 (m, 6H), 1,94 (s, 6H), 2,07 (bs, 3H), 6,38 (s, 1H), 6,81 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,51 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 9,55 (s, 1H).
[1467] (3R,5R,7R)-N-(4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)adamantan-1-amina: Em um tubo vedado, (S)-1-(1H-indol-3-il)hexan-2-amina (0,4 g, 1,85 mmol, 1 eq), 4- (((3s,5s,7s)-adamantan-1-il)amino)benzaldeído (0,52 g, 2,03 mmol, 1,1 eq) e DCM (5,0 ml) foi tomado e para esse ácido trifluoroacético (0,28 ml, 3,70 mmol, 2 eq) foi adicionado a 0 °C. A mistura de reação foi aquecida a 80 °C e agitada durante 6 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (70% de acetato de etila em hexano). A reação foi resfriada à temperatura ambiente, concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto, que foi dissolvido em acetato de etila (100 ml) e foi lavado com solução de bicarbonato de sódio (20 ml) e água (2 x 10 ml). A camada orgânica combinada foi seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 30 - 35% de acetato de etila em hexano para obter o produto desejado. O tratamento com eliminador foi realizado dissolvendo o produto em THF (15 ml) e adicionando quadrasil TA (0,003 g, 1,0 eq). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e depois filtrada através de funil sinterizado. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter (3R,5R,7R)-N-(4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4- b]indol-1-il)fenil)adamantan-1-amina de terc-butila. LC-MS (m/z) = 454,0 [M+H]+.
[1468] Preparação do composto 149.
[1469] 1-((1S,3S)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)amino)fenil)-3- butil-1,3,4,9-tetrahidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-2-cloroetan-1-ona: A uma solução de ácido 2-cloroacético (0,021 g, 0,22 mmol, 1 eq) em
DCM a 0 °C foi adicionado TEA (0,12 ml, 0,88 mmol, 4 eq), agitado por 15 minutos e, em seguida, T3P (50% em peso em EtOAc) (0,26 ml, 0,44 mmol, 2 eq) foi adicionado e agitado por mais 5 minutos. Então, (3R, 5R, 7R)-N-(4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol-1- il)fenil)adamantan-1-amina (0,1 g, 0,27 mmol, 1 eq) foi adicionado à mistura de reação e, em seguida, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). A mistura de reação foi diluída com DCM (100 ml) e foi lavada com solução de bicarbonato de sódio (10 ml) e água (10 ml). A camada orgânica combinada foi seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20 a 25% de acetato de etila em hexano para obter 1-((1S,3S)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1- il)amino)fenil)-3-butil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)-2- cloroetano-1-ona. LC-MS (m/z) = 430,4 [(M+H)+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,75 - 0,77 (m, 3H), 1,16 - 1,22 (m, 4H), 1,38 (bs, 2H), 1,59 (s, 6H), 1,79 (s, 6H), 2,00 (s, 3H), 2,96 (s, 2H), 4,42 (bs, 1H), 4,52 (bs, 1H), 4,87 (bs, 1H), 5,86 (bs, 1H), 6,65 (bs, 2H), 6,92 - 7,00 (m, 5H), 7,24 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 10,84 (s, 1H).
[1470] Preparação do composto 148.
[1471] 1-((1S,3S)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)amino)fenil)-3- butil-1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)prop-2-in-1-ona: A uma solução de (3R,5R,7R)-N-(4-((1S,3S)-3-butil-2,3,4,9-tetra-hidro- 1H-pirido[3,4-b]indol-1-il)fenil)adamantan-1-amina (0,07 g, 0,15 mmol, 1 eq) em DCM na sala temperatura foi adicionado TEA (0,05 ml, 0,36 mmol, 2,4 eq), agitado durante 5 minutos e, em seguida, ácido propiólico (0,01 ml, 0,15 mmol, 1 eq) e iodeto de 2-cloro-1-metil-piridínio (0,046 g, 0,18 mmol, 1,2 eq) à mistura de reação e, em seguida, a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. O progresso da reação foi monitorado por TLC (30% de acetato de etila em hexano). A mistura de reação foi diluída com DCM (100 ml) e foi lavada com água (10 ml). A camada orgânica combinada foi seca com sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para obter o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna flash usando 20 a 25% de acetato de etila em hexano para obter 1-((1S,3S)-1-(4-(((3R,5R,7R)-adamantan-1-il)amino)fenil)-3-butil- 1,3,4,9-tetra-hidro-2H-pirido[3,4-b]indol-2-il)prop-2-in-1-ona. LC-MS (m/z) = 506,3 [(M+H)+. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) VT a 65 °C: δ ppm 0,76 (s, 3H), 1,00 - 1,25 (m, 6H), 1,61 (s, 6H), 1,81 (s, 6H), 2,02 (s, 3H), 4,40 (s, 2H), 4,71 (s, 2H), 5,85 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,62 (s, 1H), 6,74 (s, 1H), 6,90 - 7,10 (m, 4H), 7,27 (s, 1H), 7,43 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 10,67 (s, 1H).
[1472] Os compostos fornecidos na Tabela 1, bem como aqueles testados nos ensaios biológicos mostrados nas tabelas abaixo, podem ser ou foram sintetizados de acordo com os procedimentos descritos acima usando os reagentes e materiais de partida apropriados. Os dados para compostos selecionados são fornecidos abaixo na Tabela 1a. TABELA 1A
EXEMPLOS BIOLÓGICOS EXEMPLO 1: ENSAIOS DE ESTABILIDADE DE SANGUE TOTAL
[1473] Amostras de sangue fresco foram coletadas de doador humano masculino e camundongo CD-1 masculino com EDTA- K2 como anticoagulante. O sangue foi coletado no dia do experimento e armazenado em gelo úmido a 4 °C e, então, equilibrado à temperatura ambiente antes do uso.
[1474] Os compostos foram dissolvidos em DMSO a uma concentração de 10 mM. O brometo de propantelina, usado como controle positivo, foi preparado em água na concentração de 10 mM.
[1475] Uma solução intermediária de um mM de compostos de teste foi preparada diluindo 10 µl da solução estoque (10 mM) com 90 µl de
DMSO. Uma solução intermediária de um mM de composto de controle positivo foi preparada diluindo 10 µl da solução estoque (10 mM) com 90 µl de água. Soluções de trabalho 100 μM foram preparadas diluindo 10 μl das soluções intermediárias (compostos de teste e controle positivo) com 90 μl de 45%MeOH/H2O.
[1476] Uma alíquota de 98 μl de sangue em branco foi enriquecida com 2 μl de solução de trabalho (100 μM) para atingir 2 μM de concentração final para os compostos de teste e controle positivo. As amostras da solução foram incubadas por 0, 30 e 60 minutos a 37 °C em banho-maria. As amostras foram rotuladas como T0, T30 e T60, por tempo de incubação de 0, 30 e 60 minutos, respectivamente.
[1477] No final da incubação, 100 μl de água foram adicionados às cavidades de amostra e bem misturados, então, 800 μl de acetonitrila 100% contendo padrões internos (200 ng/ml de tolbutamida e 20 ng/ml de buspirona) adicionados em cada recipiente de amostra. Os recipientes de amostra foram misturados a 800 rpm por 10 minutos e centrifugados a 4000 rpm por 20 minutos. Uma alíquota de 100 µl de sobrenadante de cada recipiente foi transferida para placas de amostra e misturada com 200 µl de água. Todas as amostras foram agitadas no agitador de placas a 800 rpm por cerca de 10 minutos antes da análise LC-MS.
[1478] A coluna Ace 5 Phenyl 50 x 2,1 mm foi usada para a análise de HPLC. As fases móveis foram 0,1% de ácido fórmico em água (fase móvel A); e 0,1% de ácido fórmico em acetonitrila (fase móvel B). O volume de injeção foi de 10 µl. O espectrômetro de massa foi calibrado e ajustado para cada composto de teste.
[1479] A % restante do composto de teste no sangue foi calculada usando a seguinte equação:
[1480] % Restante = 100 x (PAR em um tempo de incubação especificado/PAR em T0)
[1481] em que PAR é a razão da área do pico do analito em relação ao padrão interno (VS).
[1482] Estabilidade no sangue total para metabólitos K601 (RSL3), K601 (RSL3) (compostos 3, 4 e 5) e exemplos de compostos adicionais são mostrados na Tabela 24. EXEMPLO 2: ESTUDOS FARMACOCINÉTICOS (PK) EM CAMUNDONGOS NUDE BALB/C POR INJEÇÃO INTRAPERITONEAL
[1483] Os compostos de teste foram dissolvidos em solução aquosa a 20% (p/p) de sulfobutiléter-β-ciclodextrina (SBECD) pH 3-7, ou 5% DMSO/(30-50%) PEG400/(65-45%) água. As soluções de dosagem do composto de teste foram administradas intraperitonealmente a camundongos machos nus Balb/c. Amostras de sangue foram coletadas em vários pontos de tempo com EDTA-K2 como anticoagulante em gelo e centrifugadas para obter amostras de plasma. As amostras de plasma foram armazenadas a -20 °C até a análise.
[1484] Em 10 µl das amostras de plasma do composto de teste foram adicionados 2 µl de DMSO e depois 200 µl de 5 ng/ml de padrão interno (VTSD) (Terfenadina) em MeOH/acetonitrila. A mistura foi agitada com vórtex durante 1 minuto e centrifugada a 4000 rpm durante 15 minutos. Os padrões de calibração foram preparados adicionando uma quantidade conhecida de compostos de teste em amostras de plasma em branco. A solução sobrenadante foi diluída 5 vezes com Acetonitrila/H2O (com 0,1% de ácido fórmico, 1: 1, v/v), e esta é a solução para análise por LC-MS/MS. O limite de quantificação (LOQ) foi de 1 ng/ml.
[1485] As fases móveis de HPLC típicas foram a fase móvel de 5mM NH4OAc (com 0,05% de ácido fórmico); e fase móvel B de acetonitrila (com 0,1% de ácido fórmico). A coluna de HPLC era Kinetex C18 (30 mm x 3,00 mm). O espectrômetro de massa foi ajustado para cada composto no modo de varredura de Monitoramento de Reações
Múltiplas (MRM) e no modo de ionização por eletroaspersão. O limite inferior de quantificação foi 1 - 10 ng.
[1486] Uma tabela de gradiente de HPLC típica é descrita abaixo: TABELA 2 Tempo (min) Taxa de fluxo (ml/min) A (%) B (%) 0,40 0,7 80,0 20,0 1,50 0,7 5,00 95,0 2,20 0,7 5,00 95,0 2,21 0,7 80,0 20,0 3,00 0,7 80,0 20,0 A. PERFIS PK DE K601 (RSL3, OU (1S, 3R)-RSL3)) E SEUS METABÓLITOS EM CAMUNDONGOS NUDE BALB/C VIA INJEÇÃO
INTRAPERITONEAL
[1487] Os perfis PK de K601 (RSL3) e seus metabólitos são mostrados abaixo. Neste estudo, K601 (RSL3) foi formulado em 5% DMSO/30% PEG 400/65% água a 1,5 mg/ml. O volume de injeção por via intraperitoneal foi de 10 ml/kg para a dose de 15 mg/kg. K601 (RSL3) e seus metabólitos (produtos hidrolisados in vivo) foram analisados por LC-MS com o método descrito acima. O limite de quantificação (LOQ) foi de 1 ng/ml.
[1488] Pode-se observar que RSL3 hidrolisa rapidamente in vivo e é quase indetectável 30 minutos após a injeção. Correspondentemente, todos os três produtos hidrolisados de K601 (RSL3), denotados como composto 4, composto 5 e composto 3, respectivamente, foram detectados in vivo em 30 minutos, 1 hora e 2 horas. Os parâmetros PK estão resumidos na tabela abaixo. Composto 4, composto 5 e composto 3 são inativos (consultar Tabela 24).
[1489] O perfil PK de K601 (RSL3) indicou que K601 (RSL3) não possui propriedade farmacêutica para administração sistêmica.
TABELA 3A: PERFIL PK DE K601 (RSL3).
ALDQ = Abaixo do limite de quantificação (que era 1 ng/ml) TABELA 3B: PERFIL PK DO COMPOSTO 4.
ALDQ = Abaixo do limite de quantificação (que era 1 ng/ml) TABELA 3C: PERFIL PK DO COMPOSTO 5.
ALDQ = Abaixo do limite de quantificação (que era 1 ng/ml) TABELA 3D: PERFIL PK DO COMPOSTO 3.
ALDQ = Abaixo do limite de quantificação (que era 1 ng/ml)
[1490] Resumo dos parâmetros de PK de K601 e seus metabólitos no plasma de camundongo após injeção intraperitoneal (VP) a 15 mg/kg são fornecidos abaixo. TABELA 3E *NC = não calculável. B. PERFIS PK DO COMPOSTO 1 EM CAMUNDONGOS NUDE BALB/C VIA INJEÇÃO INTRAPERITONEAL
[1491] Os perfis PK do composto 1 são mostrados abaixo. Neste estudo, o composto foi formulado em 20% (p/p) sulfobutiléter-β- ciclodextrina (SBECD), solução aquosa de pH 5 a 1,5 mg/ml. O volume de injeção por via intraperitoneal foi de 10 ml/kg para a dose de 15 mg/kg. A concentração dos compostos de teste no plasma foi analisada por LC-MS com o método descrito acima. O limite de quantificação foi de 1 ng/ml.
[1492] Surpreendentemente, na mesma dose de 15 mg/kg em camundongo via administração IP, o composto 1 mostrou maior exposição, como a concentração máxima (Cmáx) e a área sob a curva (AUC) do que K601 (RSL3) com um modificação na posição 1S. A AUC média para o composto 1 é 123 ng/ml * hora e a Cmáx média é 126 ng/ml. Em comparação, a AUC média para K601 (RSL) é de 1,28 ng/ml * hora e a Cmáx média é de 1,33 ng/ml. TABELA 4A: PERFIL PK DO COMPOSTO 1.
[1493] Parâmetros PK de K601 e composto 1 em plasma de camundongo após injeção intraperitoneal (IP) a 15 mg/kg TABELA 4B C. PERFIL PK DO COMPOSTO BX TAMBÉM CONHECIDO COMO (1S, 3R)-RSL3-ALQUINO EM CAMUNDONGOS NUDE BALB/C VIA
INJEÇÃO INTRAPERITONEAL
[1494] O perfil PK do composto BX é mostrado abaixo. Este composto é divulgado em Yang et al., 2013, Cell 156, 317 a 331. Foi formulado em 5% DMSO/50% PEG400/45% Água pH ajustado para 4 com HCl como uma solução aquosa a 1,0 mg/ml. O volume de injeção por via intraperitoneal foi de 15 ml/kg para a dose de 15 mg/kg. A concentração dos compostos de teste no plasma foi analisada por LC- MS com o método descrito acima. O limite de quantificação foi de 1 ng/ml. Nenhum composto BX foi detectado no plasma. O limite de quantificação foi de 1 ng/ml. TABELA 5
ALDQ = Abaixo do limite de quantificação (que era 1 ng/ml) D. PERFIL PK DO COMPOSTO 24, COMPOSTO 28 E COMPOSTO 67 EM CAMUNDONGOS NUDE BALB/C VIA INJEÇÃO
INTRAPERITONEAL
[1495] Os perfis PK dos compostos 24, 28 e 67 são mostrados abaixo. Os compostos 24 e 28 foram formulados em 20% (p/p) de sulfobutiléter-β-ciclodextrina (SBECD) com pH 3 e pH 4, respectivamente, como uma solução aquosa a 1,0 mg/ml. O composto 67 estava em solução aquosa de DMSO a 5%/PEG 400 a 50%/água a 45%, pH 4 (ajustado com HCl 12 N) a 1,0 mg/ml. O volume de injeção por via intraperitoneal foi de 10 ml/kg para a dose de 15 mg/kg. A concentração dos compostos de teste no plasma foi analisada por LC- MS com o método descrito acima. O limite de quantificação foi de 1 ng/ml. Na mesma dose de 15 mg/kg em camundongo via administração IP, os compostos 24 e 28 mostraram maior exposição, como a concentração máxima (Cmáx) e a área sob a curva (AUC) do que K601 (RSL3) com um modificação na posição 1S-. O composto 67 mostrou maior exposição, como a concentração máxima (Cmáx) e a área sob a curva (AUC) do que K601 (RSL3) com modificações na posição 1S- e na posição 3R-. TABELA 6: PERFIL PK DO COMPOSTO 24
TABELA 7: PERFIL PK DO COMPOSTO 28 TABELA 8: PERFIL PK DO COMPOSTO 67 EXEMPLO 3: ESTUDOS FARMACOCINÉTICOS (PK) VIA INFUSÃO
INTRAVENOSA
[1496] Os compostos de teste foram dissolvidos em solução aquosa a 20% (p/p) de sulfobutiléter-β-ciclodextrina (SBECD) pH 3-7, ou 5% DMSO/(30-50%)PEG400/(65-45%) água. As soluções de dosagem do composto de teste foram administradas por infusão intravenosa a um rato macho Sprague-Dawley. Amostras de sangue foram coletadas em vários pontos de tempo com EDTA-K2 como anticoagulante em gelo e centrifugadas para obter amostras de plasma. As amostras de plasma foram armazenadas a -20 °C até a análise.
[1497] Em 50 µl das amostras de plasma do composto de teste foram adicionados 5 µl de DMSO e depois 200 µl de 25 ng/ml de padrão interno (ITSD) (Verapamil) em MeOH/acetonitrila (1: 1, v/v). A mistura foi agitada com vórtex durante 1 minuto e centrifugada a 4000 rpm durante 15 minutos. Os padrões de calibração foram preparados adicionando uma quantidade conhecida de compostos de teste em amostras de plasma em branco. A solução sobrenadante foi diluída 5 vezes com H2O (com ácido fórmico 0,1%,
1: 1, v/v), e esta é a solução para análise por LC-MS/MS. O limite de quantificação (LOQ) foi de 1 ng/ml.
[1498] As fases móveis típicas de HPLC foram fase móvel A de água com 0,1% de ácido fórmico; e fase móvel B de acetonitrila (com 0,1% de ácido fórmico). A coluna de HPLC era Kinetex C18 (30 mm x 3,00 mm). O espectrômetro de massa foi ajustado para cada composto no modo de varredura de monitoramento de reação múltipla (MRM) e no modo de ionização por eletroaspersão. O limite inferior de quantificação foi 1 - 10 ng. Uma tabela de gradiente de HPLC típica é descrita abaixo: TABELA 9 Tempo (min) Taxa de fluxo (ml/min) A (%) B (%) 0,40 0,7 80,0 20,0 1,50 0,7 5,00 95,0 2,20 0,7 5,00 95,0 2,21 0,7 80,0 20,0 3,00 0,7 80,0 20,0 A. PERFIS PK DO COMPOSTO 24 E COMPOSTO 28 EM RATO SPRAGUE-DAWLEY VIA INFUSÃO INTRAVENOSA
[1499] Os perfis PK do composto 24 e do composto 28 são mostrados abaixo. Neste estudo, ambos os compostos foram formulados em solução aquosa a 20% (p/p) de sulfobutiléter-β-ciclodextrina (SBECD) pH 4 a 1,0 mg/ml. O volume de injeção por via de infusão intravenosa foi ajustado para uma dose de 2, 4 e 8 mg/kg. A concentração dos compostos de teste no plasma foi analisada por LC-MS com o método descrito acima. O limite de quantificação foi de 1 ng/ml. TABELA 9A: PERFIS PK DO COMPOSTO 24
Perfis PK do Composto 24, infusão IV de 1 hora, 2, 4 e 8 mg/kg, Rato Sprague-Dawley Infusão IV (1 hora) 2 mg/kg 4 mg/kg 8 mg/kg Concentração plasmática (ng/ml) Tempo (h) Rato nº 1 Rato nº 2 Rato nº 3 1,0167 51,7 159 259 1,0833 14,1 36,4 97,5 1,25 4,95 13,8 34,0 1,5 2,18 5,07 17,3 2 ALDQ 2,62 6,52 3 ALDQ ALDQ 2,92 5 ALDQ ALDQ ALDQ ALDQ = Abaixo do limite de quantificação (que era 1 ng/ml) TABELA 9B: PERFIS PK DO COMPOSTO 28 Perfis de PK do Composto 28, infusão IV de 1 hora, 2, 4 e 8 mg/kg, Rato Sprague-Dawley Infusão IV (1 hora) 2 mg/kg 4 mg/kg 8 mg/kg Concentração plasmática (ng/ml) Tempo (h) Rato nº 4 Rato nº 5 Rato nº 6 1,0167 32,7 57,8 233 1,0833 18,0 26,9 85,2 1,25 11,0 26,6 42,7 1,5 6,80 19,8 28,7 2 5,54 15,7 17,6 3 3,86 9,99 12,7 5 1,88 4,00 6,92 B. PERFIS PK DOS COMPOSTOS 148, 149, 150, 156 E 169 EM CAMUNDONGOS NUDE BALB/C VIA INFUSÃO INTRAVENOSA
[1500] Os perfis PK dos compostos 148, 149, 150, 156 e 169 são mostrados abaixo. O composto 156 foi formulado em 30% de Kolliphor EL (Cremophor EL) em água e os compostos 148, 149, 150 e 169 foram formulados em 30% de Kolliphore EL com 1% de poloxamar 407 em água. Todos os compostos foram doseados com 5 mg/kg. Amostras de sangue foram coletadas em vários pontos de tempo e analisadas usando o método descrito acima. TABELA 10A. PERFIL PK DO COMPOSTO 156
Concentração plasmática IV (ng/ml), BID q12, pós 2ª dose Tempo (h) 5 mg/kg 0,0833 18.500 0,25 4.640 0,5 984 1 302 2 105 4 45,9 8 24,4
TABELA 10B: PERFIL PK DO COMPOSTO 156 AUCúltima t1/2 (h) C0 (ng/ml) AUCInf (h*ng/ml) Vz (l/kg) Vss (l/kg) Cl (ml/min/kg) MRTInf (h) (h*ng/ml)
3,00 38.200 5.809 5.918 3,72 0,480 14,5 0,553
TABELA 11A: PERFIL PK DO COMPOSTO 148 t1/2 AUC0-t AUC0-∞ C0 (ng/ml) Cmáx (ng/ml) Cl (ml/min/kg) Vd (l/kg) Vss (l/kg) (h) (ng•h/ml) (ng•h/ml) 5,76 40.558 33.024 17.225 17.411 4,79 2,39 0,47 Pontos de tempo considerados para cálculo de t1/2: 4-24 h
TABELA 11B: PERFIL PK DO COMPOSTO 149 t1/2 AUC0-t AUC0-∞ C0 (ng/ml) Cmáx (ng/ml) Cl (ml/min/kg) Vd (l/kg) Vss (l/kg) (h) (ng•h/ml) (ng•h/ml) 2,12 29.386 21.978 6.536 6.549 13,0 2,34 0,53 Pontos de tempo considerados para cálculo de t1/2: 2-8 h
TABELA 11C: PERFIL PK DO COMPOSTO 150 t1/2 AUC0-t AUC0-∞ C0 (ng/ml) Cmáx (ng/ml) Cl (ml/min/kg) Vd (l/kg) Vss (l/kg) (h) (ng•h/ml) (ng•h/ml) 0,33 3.401 2.264 735 740 113 3,25 1,64 Pontos de tempo considerados para cálculo de t1/2: 0,25 - 2 h
TABELA 11D: PERFIL PK DO COMPOSTO 169 t1/2 AUC0-t AUC0-∞ C0 (ng/ml) Cmáx (ng/ml) Cl (ml/min/kg) Vd (l/kg) Vss (l/kg) (h) (ng•h/ml) (ng•h/ml) 0,25 5.384 2.218 760 762 109 2,39 0,98 Pontos de tempo considerados para o cálculo de t1/2: 0,25 - 2 h (1 h excluída) EXEMPLO 4: EFEITO DO COMPOSTO INDUTOR NO CRESCIMENTO
DE CÉLULAS EPITELIAIS NORMAIS E CANCEROSAS
[1501] O ensaio de viabilidade celular foi realizado para avaliar a potência dos compostos em linhagens celulares de câncer humano KP4 (adenocarcinoma ductal pancreático), MiaPaCa-2 (carcinoma pancreático), AsPC-1 (adenocarcinoma pancreático, ascite), 143B (osteossarcoma) e SJSA- 1 (osteossarcoma). Os compostos selecionados também foram ensaiados em uma linhagem celular epitelial de mama humana MCF-10A, uma linhagem celular não tumorigênica como um controle para avaliar a atividade diferencial. As células a uma densidade de 500 - 5.000 células/cavidade foram semeadas em placas de 96 cavidades e incubadas a 37 °C de um dia para o outro. Uma série de 9 concentrações diferentes de estoques de compostos (500x) foi criada por diluição em série de 3 vezes em DMSO. Esses compostos foram posteriormente diluídos em meio de cultura e, em seguida, adicionados às células de modo que a concentração final de DMSO fosse igual a 0,25% ou menos. Após 96 horas de incubação, 50 μl do reagente CellTiter Glo (Promega) foram adicionados a cada cavidade e a luminescência foi medida após 10 minutos usando EnVision (PerkinElmer). Compostos titulados de concentração superior de até 30 μM. Os compostos selecionados foram testados inicialmente a partir de 30 μM como a concentração superior em duplicatas (faixa de 4,6 nM -30 μM). A concentração superior foi, então, ajustada para mais alta (de até 1.000 μM) ou mais baixa para compostos que mostraram potência fora da faixa inicial. A luminescência de células tratadas com
DMSO sozinho foi definida como Máx e a % de inibição foi calculada como se segue: % de inibição = (valor de amostra máx.)/Máx*100. Os dados foram analisados usando software XL-fit (ID Business Solutions Ltd.). IC50, IC50 relativa, ou % de inibição superior foi calculada.
[1502] Um grupo de análogos selecionados foi ainda perfilado em ensaios de viabilidade celular descritos acima em várias linhas de células de câncer adicionais, incluindo câncer de pulmão, melanoma, hepatocarcinoma, câncer pancreático, leucemia, linfoma, câncer de ovário, câncer de mama, câncer de cólon e linhas de células de sarcoma. Os números de semeadura de células iniciais foram ajustados para cada linha de células. Normalmente, 500 a 5.000 células/cavidade para células aderentes e 5.000 a 10.000/cavidade para células em suspensão foram semeadas em placas de 96 cavidades.
[1503] Os resultados do ensaio nas linhagens celulares de câncer de pulmão H1299 e H2228 são fornecidos na Tabela 12. TABELA 12 IC50 μM 00 H1299 H2228 K601 0,035 0,075 24 0,003 0,018 28 0,005 0,019 29 0,005 0,032 83 0,041 0,112 92 0,013 0,050 94 0,005 0,019 98 0,006 0,017 101 0,038 0,163 102 0,003 0,009 103 0,021 0,034 106 0,007 0,055 109 0,032 0,057 112 0,038 0,066 113 0,079 0,145 110 0,030 0,051
[1504] Os resultados do ensaio na linhagem celular de melanoma MDA-MB-435S são fornecidos na Tabela 13. TABELA 13
[1505] Os resultados do ensaio no carcinoma hepatocelular Huh7 são fornecidos na Tabela 14 TABELA 14
[1506] Os resultados do ensaio nas linhas de células pancreáticas são fornecidos na Tabela 15a para PANC1, Tabela 15b para MiaPaCa- 2 e Tabela 15c para AsPC-1. TABELA 15A: PANC1
TABELA 15B: MiaPaCa-2 TABELA 15C: AsPC-1
[1507] Os resultados do ensaio nas linhagens celulares de leucemia são fornecidos na Tabela 16a para MV-4-1 e na Tabela 16b para HL-60 e Kasumi-1. TABELA 16A: MV-4-1 TABELA 16B: HL-60 E Kasumi-1
[1508] Os resultados do ensaio nas linhagens celulares de linfoma REC-1 e Raji são fornecidos na Tabela 17. TABELA 17
[1509] Os resultados do ensaio na linhagem celular de câncer de ovário SK-OV-3 são fornecidos na Tabela 18. TABELA 18
[1510] Os resultados do ensaio na linhagem celular de câncer de mama HCC1954 são fornecidos na Tabela 19. TABELA 19
[1511] Os resultados do ensaio nas linhagens celulares de câncer de cólon HT29 e SW480 são fornecidos na Tabela 20. TABELA 20
ND: não determinado.
[1512] Os resultados do ensaio em linhagens celulares de sarcoma são fornecidos na Tabela 21a para HT-1080 luc2 (fibrossarcoma que expressa um gene de luciferase), Tabela 21b para 143B (osteossarcoma) e Tabela 21c para SJSA-1 (osteossarcoma).
TABELA 21A: HT-1080 luc2 TABELA 21B: 143B
TABELA 21C: SJSA-1
[1513] Os resultados do ensaio na linhagem celular epitelial mamária não tumorigênica MCF-10A são fornecidos na Tabela 22. Paclitaxel foi usado como controle positivo para citotoxicidade. TABELA 22
[1514] Na linhagem celular epitelial da mama não tumorigénico MCF-10A, a maioria dos compostos testados, exceto para o composto 41, que mostrou um IC50 > 0,1 uM (0,040 µM), mostrou um IC50 > 1µM.
Os resultados indicam que os compostos não inibem as células não tumorais de forma eficiente, proporcionando assim uma janela terapêutica direcionada seletivamente aos tumores.
A sensibilidade diferencial (definida como IC50 de MCF-10A/IC50 de uma linhagem celular de tumor sensível) frequentemente excede 100 vezes e até mais de 1.000 vezes.
Exemplos de compostos que demonstram sensibilidade diferencial > 100 vezes são mostrados na Tabela 23. TABELA 23
EXEMPLO 5: EFEITO DO COMPOSTO INDUTOR NO CRESCIMENTO DE CÉLULAS A549 E KP4
[1515] O ensaio de viabilidade celular foi realizado para avaliar a potência dos compostos na linhagem celular de câncer KP4 (adenocarcinoma do duto pancreático). As células a uma densidade de
1.000-10.000 células/cavidade foram semeadas em placas de 96 cavidades e incubadas a 37 °C de um dia para o outro. Uma série de 9 concentrações diferentes de estoques de compostos (500x) foi criada por diluição em série de 3 vezes em DMSO. Esses compostos foram posteriormente diluídos em meio de cultura e, em seguida, adicionados às células de modo que a concentração final de DMSO fosse igual a 0,25% ou menos. Após 96 horas de incubação, 50 μl do reagente CellTiter Glo (Promega) foram adicionados a cada cavidade e a luminescência foi medida após 10 minutos usando EnVision (PerkinElmer). Todos os compostos foram testados inicialmente a partir de 30 μM como a concentração superior em duplicatas (faixa de 4,6 nM -30 μM). A concentração superior foi, então, ajustada para mais alta (de até 1.000 μM) ou mais baixa (de tão baixo quanto 0,1 μM) para compostos que mostraram potência fora da faixa inicial. A luminescência de células tratadas com DMSO sozinho foi definida como Máx e a % de inibição foi calculada como se segue: % de inibição = (valor de amostra máx.)/Máx*100. Os dados foram analisados usando software XL-fit (ID Business Solutions Ltd.). IC50, IC50 relativa, ou % de inibição superior foi calculada.
[1516] Os resultados do ensaio sobre a estabilidade no sangue e os valores de IC50 para a linhagem celular de câncer pancreático KP4 são fornecidos abaixo na Tabela 24. “A” indica um IC50 ≤ 0,01 μM ou razão IC50 (composto para K601 ou RSL-3) <5; “B” indica um IC50 de > 0,01 μM e ≤ 0,1 μM, ou razão IC50 (composto para K601 ou RSL-3) > 5 e <50; “C” indica um IC50 > 0,1 μM e ≤ 0,5 μM, ou razão IC50 (composto para
K601 ou RSL-3)> 50 e <250; “D” indica um IC50 > 0,5 μM e ≤1 μM, ou razão IC50 (composto para K601 ou RSL-3) > 250 e <500; “E” indica o valor IC50 de > 1 μM, ou razão IC50 (composto para K601 ou RSL-3) >
500. Para os compostos 1-122, exceto para os compostos listados abaixo, o IC50 para A549 é maior que 1 μM. Para os compostos 41, 52, 54, 61a, 93 e 120, IC50 para A549 é 0027 - 0,04 μM, 0,28 - 0,36 μM, 0,79 μM, 0,21 μM, 0,25 μM e 0,81 μM, respectivamente. Dados adicionais para compostos selecionados testados são mostrados na Tabela 25.
TABELA 24 Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min) O 60 0,2 42,5
O Cl
N O
N K601 (RSL3) 30 0,2 60,8 A
H
O O 0 100,0 100,0 60 67,9 82,0 5 30 86,3 106,3 E 0 100,0 100,0 60 63,9 57,9 4 30 76,6 59,3 E 0 100,0 100,0 1 60 46,6 43,0 A
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 59,6 60,5
0 100,0 100,0
60 0,1 39,4
2 30 0,1 58,5 B
0 100,0 100,0
60 23,6 29,4
3 30 51,3 43,0 E
0 100 100
60 4,7 33,0
6 30 12,4 54,8 B
0 100,0 100,0
60 48,6 44,5
7 B 30 68,2 60,1
0 100,0 100,0
60 30,5 26,5 8 A 30 53,0 52,0
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
0 100,0 100,0
60 40,6 47,0
9 30 61,9 53,8 A
0 100,0 100,0
60 65,0 54,3
10 D 30 82,2 84,0
0 100,0 100,0
60 38,6 59,9
11 B 30 56,9 67,1
0 100,0 100,0
60 0,0 0,1
12 B 30 0,0 0,0
67,1 100,0 100,0
60 0,0 29,2
13 C 30 0,0 34,9
0 100,0 100,0
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
60 0,0 59,9
13a D 30 0,0 56,6
0 100,0 100,0
60 0,7 0,0
14 30 2,8 0,0 B
0 100,0 100,0
60 61,6 45,2
265 30 75,5 61,6 C
0 100,0 100,0
294 N/D N/D N/D N/D
60 50,2 66,8
15 30 83,0 72,7 C
0 100,0 100,0
16 60 63,3 36,9 A
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 84,1 54,3
0 100,0 100,0
60 21,2 35,6
19 A 30 44,5 44,4
0 100,0 100,0
60 19,1 41,6
20 30 39,9 50,7 A
0 100,0 100,0
21a C N/D N/D N/D
60 3,2 24,3
21 B 30 14,0 49,7
0 100,0 100,0
22 60 27,6 24,9 A
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 47,4 58,8
0 100,0 100,0
60 34,4 30,8
23 A 30 55,5 48,9
0 100,0 100,0
60 78,6 72,7
23a 30 83,8 83,2 E
0 100,0 100,0
60 37,0 50,2
24 A 30 62,0 61,7
0 100,0 100,0
60 24,4 51,9
25 C 30 46,2 55,0
0 100,0 100,0
60 55,7 22,9 26 B 30 67,7 47,1
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
0 100,0 100,0
60 73,2 48,3
27 30 78,2 63,9 B
0 100,0 100,0
60 81,1 40,9
27a 30 92,5 54,1 C
0 100,0 100,0
60 68,9 51,6
28 30 78,3 73,4 A
0 100,0 100,0
60 51,1 49,2
29 A
30 61,9 67,3
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
0 100,0 100,0
60 75,9 38,1
30 30 85,3 62,1 D
0 100,0 100,0
60 75,5 32,6
31 30 90,0 49,4 C
0 100,0 100,0
60 0,0 0,1
32 30 0,0 0,1 E
0 100,0 100,0
60 0,0 0,9 32a E 30 0,0 1,9
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
0 100,0 100,0
60 69,3 103,8
33 30 78,9 104,7 E
0 100,0 100,0
60 80,6 113,4
34 30 75,6 104,9 E
0 100,0 100,0
60 14,8 20,5
35 30 32,9 39,3 B
0 100,0 100,0
60 9,8 17,9
37 B
30 25,4 37,8
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min) 0 100,0 100,0 N 60 62,0 28,5
O Cl
N
O 38 30 72,9 46,2 D
N H
N 0 100,0 100,0
O 60 60,4 50,4 39 30 73,2 64,5 C 0 100,0 100,0 60 0,0 100,0 41 30 0,0 82,4 B 0 100,0 100,0 42 60 62,0 28,5 E
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 72,9 46,2
0 100,0 100,0
60 81,5 56,4
45 30 91,2 71,4 E
0 100,0 100,0
60 52,5 13,7
49 30 82,5 43,0 E
0 100,0 100,0
50 N/D N/D N/D C
60 52,0 59,4
52 B 30 79,9 51,8
0 100,0 100,0
60 13,8 40,4
54 B
30 42,9 44,9
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
0 100,0 100,0
60 24,6 20,6
55 30 51,4 50,6 C
0 100,0 100,0
60 60,4 16,7
55a 30 82,3 42,6 D
0 100,0 100,0
60 0,0 27,5
55c 30 0,0 46,0 B
0 100,0 100,0
60 0,0 41,2
55d 30 0,0 60,8 C
0 100,0 100,0
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
60 38,9 60,7
56 30 84,1 59,3 B
0 100,0 100,0
60 67,0 40,5
58 30 89,9 64,4 E
0 100,0 100,0
60 65,6 51,5
59 30 97,9 48,9 C
0 100,0 100,0
60 6,8 34,0
61 30 20,5 49,2 A
0 100,0 100,0
62 60 0,0 43,5 B
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 0,0 82,4
0 100,0 100,0
60 0,0 66,5
62a 30 0,0 116,4 C
0 100,0 100,0
60 108,4 70,7
63 30 97,0 113,1 B
0 100,0 100,0
60 0,0 14,7
64 30 0,0 44,3 C
0 100,0 100,0
60 0,0 13,2
63a E
30 4,5 35,0
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
H O O
N N Cl
H 0 100,0 100,0
O
O 60 3,2 15,5 64a 30 8,3 38,0 E 0 100,0 100,0 60 26,8 45,8 66 30 69,8 79,1 B 0 100,0 100,0 60 13,3 37,3 67 30 38,7 56,8 B 0 100,0 100,0 60 18,2 15,5 67a E 30 52,4 35,5
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
0 100,0 100,0
60 36,9 20,6
68 30 65,0 36,8 B
0 100,0 100,0
60 29,3 18,3
69 30 63,8 48,4 B
0 100,0 100,0
60 36,6 23,8
70 30 63,3 46,0 C
0 100,0 100,0
71a 60 43,8 25,7 E
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 76,5 54,9
0 100,0 100,0
60 75,5 59,3
71 E 30 90,4 80,4
0 100,0 100,0
60 0,2 7,0
72 30 0,0 28,0 B
0 100,0 100,0
60 1,1 36,1
73 30 48,5 55,1 D
0 100,0 100,0
60 0,0 29,0
74 A
30 0,0 58,2
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min) 0 100,0 100,0 60 0,9 41,5 75 30 1,8 68,1 A 0 100,0 100,0 60 0,0 27,5 77 30 0,5 54,1 A 0 100,0 100,0 60 0,0 14,8 77a 30 0,0 47,5 D 0 100,0 100,0 60 0,0 15,5 78 (mistura 1S,
C 1R) 30 0,0 39,1
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
0 100,0 100,0
60 0,0 51,1
BX 30 0,0 70,1 A
0 100,0 100,0
60 0,0 46,8
BXa 30 0,0 95,7 B
0 100,0 100,0
BY N/D N/D N/D B
BYa N/D N/D N/D E
BZ 60 30,7 40,8 A
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min) 30 65,4 73,5 0 100,0 100,0 60 33,2 48,9 30 80,8 86,9
CA A 0 100,0 100,0 60 58,6 49,6 80 30 72,3 60,9 B 0 100,0 100,0 60 0,0 33,5 CC 30 0,0 63,8 A 0 100,0 100,0 60 39,8 40,6 81 30 64,2 48,0 A 0 100,0 100,0 60 21,7 34,5 82 A 30 43,1 47,6 0 100,0 100,0
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
60 30,0 52,9
83 30 66,1 78,5 A
0 100,0 100,0
60 0,0 58,3
84 30 0,0 87,7 A
0 100,0 100,0
60 0,0 54,4
85 30 0,0 73,5 A
0 100,0 100,0
60 0,0 49,6
86 30 0,0 78,3 A
0 100,0 100,0
60 0,0 32,2
87 30 0,0 63,2 A
0 100,0 100,0
60 0,0 27,0
88 30 0,0 56,4 A
0 100,0 100,0
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
60 0,0 91,2
89 30 0,0 84,8 A
0 100,0 100,0
60 0,0 36,3
90 30 0,0 57,2 A
0 100,0 100,0
60 0,0 47,2
91 30 0,0 65,8 A
0 100,0 100,0
60 0,0 21,0
92 30 0,0 40,2 C
0 100,0 100,0
60 0,0 44,9
93 30 0,0 66,3 C
0 100,0 100,0
60 0,0 27,1
94 30 0,0 50,3 A
0 100,0 100,0
95 60 0,0 85,6 B
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 1,5 109,5
0 100,0 100,0
60 0,0 10,9
96 30 0,0 29,1 A
0 100,0 100,0
60 0,0 44,1
97 30 0,0 69,6 A
0 100,0 100,0
60 0,0 54,8
98 30 0,0 79,2 A
0 100,0 100,0
60 0,0 67,9
99 30 4,0 94,5 E
0 100,0 100,0
60 10,8 44,3
100 A 30 35,8 60,9
0 100,0 100,0
101 60 113,2 29,8 A
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
30 82,2 46,8
0 100,0 100,0
60 90,1 75,6
102 30 87,2 96,3 A
0 100,0 100,0
60 56,6 75,2
103 A 30 87,1 98,4
0 100,0 100,0
60 49,1 45,9
104 B 30 78,9 64,9
0 100,0 100,0
60 46,6 25,3
105 30 75,1 52,3 D
0 100,0 100,0
60 95,5 98,6
106 30 103,6 111,8 A
0 100,0 100,0
107 60 91,9 67,9 E
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min) 30 73,7 72,4 0 100,0 100,0 O 60 58,0 51,5
N Cl NH 108 30 64,1 58,9 A 0 100,0 100,0 60 87,7 68,1 109 30 79,2 96,1 A 0 100,0 100,0 60 111,0 51,7 110 30 127,4 68,3 A 0 100,0 100,0 60 87,7 68,1 111 30 79,2 96,1 D 0 100,0 100,0 60 69,3 44,6 112 A 30 68,7 58,3 0 100,0 100,0
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min)
60 2,4 92,7
113 30 89,5 85,1 A
0 100,0 100,0
0 100,0 100,0
114 30 59,3 88,1 A
60 0,0 50,8
0 100,0 100,0
115 30 34,2 72,9 A
60 0,0 44,0
60 67,1 62,0
116 30 82,6 79,2 C
0 100,0 100,0
60 45,8 70,3
117 30 92,3 80,5 A
0 100,0 100,0
0 100,0 100,0
118 30 60,7 100,2 A
60 0,0 68,8
120 C
Estabilidade de sangue total IC50 Nº do % Restante a 37 °C Estrutura µM Composto Tempo Camundongo Humano KP4 (min) N/D N/D N/D 0 100,0 100,0 121 30 84,3 90,3 A 60 50,0 61,3 EXEMPLO 6: ENSAIO DE PROLIFERAÇÃO CELULAR (ALAMAR BLUE)
[1517] O ensaio de viabilidade celular foi realizado para avaliar a potência dos compostos nas linhas de células de câncer humano 786- O (carcinoma de células renais) e SJSA-1 (osteossarcoma). Linhagens celulares adicionais, tais como aquelas descritas acima no Exemplo 4, bem como várias outras, por exemplo, linhagens celulares de câncer pancreático (Panc 02.13, BxPC-3, Panc 12, Panc 02.03, Panc 6.03, PSN-1, HPAC e Capan-1) e linhagens celulares de câncer de próstata (PC-3, DU145, 22Rv1, NCI-H660, BPH1, LNCaP, BM-1604 e MDA PCa 2b) foram testadas para compostos selecionados, conforme mostrado na Tabela 25.
[1518] As células (SJSA-1, 786-O e A431) foram semeadas (5.000 células/100 µl/cavidade) em placa de cultura de tecidos de 96 cavidades e incubadas a 37C/ 5% CO2 durante 16 - 24 horas. As células foram, então, tratadas com compostos (25 µl de 5X). As concentrações do composto foram de 10 - 0,0005 µM preparadas em diluições em série de 3 vezes com concentração final de DMSO de 1%. As placas foram, então, incubadas por 24 h a 37C/ 5% de CO2 em um ambiente úmido. Em seguida, o reagente Alamar Blue™ (concentração final 1X-12,5 µl) foi adicionado a cada cavidade e incubado por 1,5 horas a 37C/ 5% de CO2. As placas foram lidas em leitor de fluorescência em comprimentos de onda de excitação de 540 nm e emissão de 590 nm. Os valores de IC50 foram subsequentemente determinados usando uma curva sigmoidal de resposta à dose (declive variável) no software GraphPad Prism® 5.
[1519] A Tabela 25 mostra os dados de proliferação celular para compostos exemplares, conforme descrito acima. Os ensaios de proliferação celular para os compostos mostrados na Tabela 25 foram realizados de acordo com os protocolos descritos neste documento, incluindo os Exemplos 4 e 6.
[1520] A Tabela 26 mostra que os compostos fornecidos neste documento são inibidores de GPX4. Estudos demonstraram que antioxidantes lipofílicos, como a ferrostatina, podem resgatar células da ferroptose induzida por inibição do GPX4. Por exemplo, as células knockout do GPX4 do estado mesenquimal podem sobreviver na presença de ferrostatina, no entanto, quando o fornecimento de ferrostatina é encerrado, essas células sofrem ferroptose (consultar, por exemplo, Viswanathan et al., Nature 547: 453 a 457, 2017). Também foi determinado experimentalmente que o GPX4i pode ser resgatado pelo bloqueio de outros componentes das vias de ferroptose, como sequestrantes de ROS de lipídios (Ferrostatina, Liproxstatina), inibidores de lipoxigenase, quelantes de ferro e inibidores de caspase, que um inibidor apoptótico não resgata. Esses achados são sugestivos de morte celular oxidativa não apoptótica, dependente de ferro (ou seja, ferroptose). Consequentemente, a capacidade de uma molécula de induzir o extermínio de células cancerosas ferroptóticas, e que essa capacidade é advertida pela adição de ferrostatina, é uma indicação clara de que a molécula é um inibidor de GPX4. Os dados na Tabela 26 mostram que os compostos fornecidos neste documento perderam a atividade inibidora na presença de ferrostatina e são, portanto, inibidores de GPX4 eficazes.
TABELA 25
TABELA 26
[1521] Todas as publicações, patentes, pedidos de patentes e outros documentos citados neste pedido são incorporados por referência na sua totalidade para todos os fins, na mesma medida como se cada publicação, patente, pedido de patente ou outro documento individual fosse individualmente indicado para ser incorporado por referência para todos os efeitos.
[1522] Embora se tenha ilustrado e descrito várias modalidades específicas, perceber-se-á que várias alterações podem ser feitas sem divergir do âmbito e da essência da presente invenção.

Claims (49)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula (I): (I) ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: o anel A é C4-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila; X é NR5, O ou S; p é 0, 1, 2 ou 3; q é 0, 1, 2 ou 3; R1 é C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1- C6haloalquila, C3-C10cicloalquila, -CN, -OH,-C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, - OC(O)R6, -S(O)2R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -S(O)R8, -NH2, - NHR8, -N(R8)2, -NO2, -OR8, -C1-C6alquil-OH, -C1-C6alquil-OR8, ou - Si(R15)3; R2 é -C(O)R9; cada R3 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, - NO2, -Si(R12)3, -SF5, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, - NR12C(O)OR8, -OC(O)N(R7)2, -OC(O)R8, -C(O)R6, - OC(O)CHR8N(R12)2, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3- C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1-C6alquil- heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila;
em que cada C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3- C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3- C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1-C6alquil- heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2- C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila de R3 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10; cada R4 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, - NO2, -Si(R15)3, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -OC(O)R8, - C(O)R6, -NR12C(O)OR8, -OC(O)N(R7)2, -OC(O)CHR8N(R12)2, C1- C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2- C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2- C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1- C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila; em que cada C1- C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2- C6alquenilC3-C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2- C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1- C6alquil-heteroarila, ou -C2-C6alquenil-heteroarila de R4 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10; R5 é hidrogênio ou C1-C6alquila; cada R6 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada R6 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R11;
cada R7 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10 cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C6cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C6cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, - C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, -C1-C6alquil-heteroarila, -C2- C6alquenil-heteroarila, ou dois R7 juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, formam uma heterociclila de 4 a 7 membros; em que cada R7 ou anel formado desse modo é, independentemente, adicionalmente substituído por um a três R11; cada R8 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, -C1-C6alquilC3-C10cicloalquila, -C2-C6alquenilC3- C10cicloalquila, -C1-C6alquil-heterociclila, -C2-C6alquenil-heterociclila, -C1-C6alquilarila, -C2-C6alquenilarila, -C1-C6alquil-heteroarila, ou -C2- C6alquenil-heteroarila; em que cada R8 é, independentemente, adicionalmente substituído por um a três R11; R9 é -C1-C2haloalquila, -C2-C3alquenila, -C2- C3haloalquenila, C2alquinila ou -CH2OS(O)2-fenila, em que C1- C2alquil-halo e -C2-C3alquenil-halo são opcionalmente substituídos por um ou dois -CH3, e a C2alquinila e fenila são opcionalmente substituídas por um -CH3; cada R10 é, independentemente, halo, -CN, -OR12, -NO2, - N(R12)2, -S(O)R13, -S(O)2R13, -S(O)N(R12)2, -S(O)2N(R12)2, - Si(R12)3, -C(O)R12, -C(O)OR12, -C(O)N(R12)2, -NR12C(O)R12, - OC(O)R12, -OC(O)OR12, -OC(O)N(R12)2, -NR12C(O)OR12, - OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila, C1-C6haloalquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila, em que cada C1-C6alquila, C1-C6halogenoalquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila de R10 é opcionalmente independentemente substituído por um a três R11; cada R11 é, independentemente, halo, -CN, -OR12, -NO2, - N(R12)2, -S(O)R13, -S(O)2R13, -S(O)N(R12)2, -S(O)2N(R12)2, - Si(R12)3, -C(O)R12, -C(O)OR12, -C(O)N(R12)2, -NR12C(O)R12, - OC(O)R12, -OC(O)OR12, -OC(O)N(R12)2, -NR12C(O)OR12, - OC(O)CHR12N(R12)2, C1-C6alquila, C1-C6haloalquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C10cicloalquila, heterociclila, arila, ou heteroarila; cada R12 é, independentemente, hidrogênio, C1-C6alquila ou C3-C10cicloalquila; cada R13 é, independentemente, C1-C6alquila ou C3- C10cicloalquila; e cada R15 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil- e heteroarilC2-C6alquenil-; com a condição de que: (a) quando X for NH, R1 seja -C(O)OR6, R2 seja -C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F, q seja 1, p seja 0 e o anel A com o R3 seja ; então, (i) R3 e R6 não são simultaneamente -NO2 e -CH3, respectivamente, e (ii) quando R6 for -CH3, então, R3 será diferente de H, halo e -NO2; e (b) quando X for NH, R1 seja –C(O)OR6, R2 seja –
C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F, q seja 1, p seja 0, anel A com o R3 é , e R3 -C(O)OR6; então ambos R6 não são simultaneamente (i) -CH3; (ii) -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; ou
(iii) -CH2CH3 and -CH3, respectivamente; e (c) quando X for NH, R1 seja -C(O)OCH3, R2 seja - C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F, q seja 1, p seja 0, e R3 seja H; então, o anel A seja diferente de fenila; e d) quando X for NH, R1 seja -C(O)N(R7)2, em que R7 é H, R2 seja –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F, q seja 1, p seja 0 e o anel A seja fenila; então, R3 seja diferente de H ou halo; e (e) o composto não seja , , ,
O
O
O
N Cl
N
H
O
O , , , ou .
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é representado pela seguinte fórmula (II):
(II).
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é representado pela seguinte fórmula (III): (III).
4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anel A é C4- C10cicloalquila.
5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anel A é heterociclila.
6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anel A é arila.
7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o anel A é heteroarila.
8. Composto, de acordo qualquer com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R1 é C1- C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1-C6haloalquila, C3-
C10cicloalquila, -CN, -C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -OH, -OR8, -C1-C6 alquil-OH ou -C1-C6alquil-OR8.
9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que R1 é C1-C6 alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C1-C6haloalquila, C3-C10cicloalquila, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -OH, -OR8, -C1-C6alquil-OH ou -C1-C6alquil- OR8.
10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que R1 é -C(O)OR6 ou -C(O)N(R7)2.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é representado pela seguinte fórmula (IV): (IV).
12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que cada R4 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, - S(O)2R8, -S(O)R8, -S(O)2N(R7)2, -S(O)N(R7)2, -NO2, -Si(R15)3, - C(O)OR6, -C(O)N(R7)2, -NR12C(O)R8, -OC(O)R8, -C(O)R6, C1- C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, ou C3-C10cicloalquila; em que cada C1-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, ou C3- C10cicloalquila de R4 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10.
13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que cada R4 é, independentemente, halo, -CN, -OH, -OR8, C1-C6alquila, C2- C6alquinila, ou C3-C10cicloalquila; em que cada C1-C6alquila, C2- C6alquinila,ou C3-C10cicloalquila de R4 é, independentemente, opcionalmente substituído por um a três R10.
14. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que p é 0.
15. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que q é 0.
16. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13 e 15, caracterizado pelo fato de que p é 1, 2 ou 3.
17. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14 e 16, caracterizado pelo fato de que q é 2 ou 3.
18. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula (V): (V) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; A é uma cicloalquila de 4 a 7 membros, heterociclila de 4 a 7 membros, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos independentemente selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; R1 é H, C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, –C(O)OR6, - C(O)N(R7)2, -OC(O)R6, -SO2R8, -SOR8,NO2, -OR8, -C1-C6alquil- OR12, ou -Si(R15)3;
R2 é -C(O)R9; R3 é H, halo, -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0- C6alquilC3-C8cicloalquila, -C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, - SO2R8, -SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3; R4 é, independentemente, halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; cada R6 é, independentemente, C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-; cada R7 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; cada R8 é, independentemente, C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila,
heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1- C6alquil-, ou (R11)2N-; R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-Calquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todos H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contendo 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N; cada R12 é, independentemente, H ou C1-C6alquila; cada R13 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é, independentemente, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são, independentemente, opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- , e R12O(O)C-; com a condição de que: quando X for N; R1 seja –C(O)OR6 R2 seja –C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F; o anel A com R3 seja
; p seja 0; e R5 seja H; então, (i) R3 e R6 não são simultaneamente -NO2 e –CH3, respectivamente, e (ii) quando R6 for –CH3, então, R3 será diferente de H, halo, e –NO2; e quando X for N; R1 for –C(O)OR6 R2 for –C(O)CH2Cl ou C(O)CH2F; anel A com R3 seja
; R3 seja -C(O)OR10; p seja 0; e R5 seja H; então, R6 e R10, não são simultaneamente (i) -CH3; (ii) -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; e (iii) -CH2CH3 e –CH3, respectivamente; e quando X for N; R1 seja –C(O)OR6, em que R6 é –CH3; R2 é –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F; p é 0;
R3 é H; e R5 é H; então o anel A é diferente de fenila; e quando X for N; R1 seja -C(O)N(R7)2, em que R7 é H;R2 é –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F; p é 0; R5 é H; e anel A é fenila; então R3 é diferente de H ou halo.
19. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui a estrutura de fórmula (Va): (Va), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R1 é C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, –C(O)OR6, - C(O)N(R7)2, -OC(O)R6, -SO2R8, -SOR8, NO2, -OR8, -C1-C6alquil- OR12, ou -Si(R15)3; R2 é -C(O)R9; R3 é -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0- C6alquilC3-C8cicloalquila,-C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, - SO2R8, -SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-
C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; cada R6 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-; cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N; cada R8 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1- C6alquil-, ou (R11)2N-;
R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-Calquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é, independentemente, H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- , e R12O(O)C-; com a condição que: quando X for N; R1 seja –C(O)OR6 R2 seja –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F; p seja 0; e R5 seja H; então, (i) R3 e R6 não sejam simultaneamente -NO2 e – CH3, respectivamente; quando X for N;
R1 seja –C(O)OR6 R2 seja –C(O)CH2Cl ou –C(O)CH2F; R3 seja -C(O)OR10; p seja 0; e R5 seja H; então, R6 e R10 não sejam simultaneamente -CH3; -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; e -CH2CH3 e –CH3, respectivamente.
20. Composto, de acordo com a reivindicação 18 ou 19, caracterizado pelo fato de que R9 é –C1-C2alquil-halo, em que opcionalmente um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério.
21. Composto, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que R9 é –CH2Cl ou –CD2Cl.
22. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui uma estrutura de fórmula (Vb): (Vb) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O;
p é 0, 1, 2 ou 3; R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-; R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-Calquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; R10 is C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N; cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil- e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- , e R12O(O)C-; com a condição de que quando X for N; R9 seja –CH2Cl, –CD2F, –CD2Cl, ou –CD2F; p seja 0; e
R5 seja H, então, R6 e R10 não serão simultaneamente -CH3; -CH3 e C2-C6alquinila, respectivamente; e -CH2CH3 e –CH3, respectivamente.
23. Composto, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que R6 é metila, etila, n-propila, n-butila, isopropila, t-butila, pentila ou hexila.
24. Composto, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O; R6 é C1-C6alquila; R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; R10 é C2-C6alquila; R12 é H ou C1-C6alquila; e p é 0, 1, 2 ou 3.
25. Composto, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O; R6 é C3-C6alquila; R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério;
R10 é C1-C6alquila; R12 é H ou C1-C6alquila; e p é 0, 1, 2 ou 3.
26. Composto, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, ––OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O; R6 é C1-C6alquila; R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; R10 é C3-C6alquila; R12 é H ou C1-C6alquila; e p é 0, 1, 2 ou 3.
27. Composto, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O; R6 é C1-C6alquila; R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; e R10 é adamantila ou adamantilC1-C6alifático-; R12 é H ou C1-C6alquila; e p é 0, 1, 2 ou 3.
28. Composto, de acordo com a reivindicação 18,
caracterizado pelo fato de que possui a estrutura de fórmula (Vc):
(Vc) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; cada R6 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-; R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todo H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-,
arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenill-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- , e R12O(O)C-.
29. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui uma estrutura de fórmula (Vd): (Vd) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; R9 é C1-C6alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halo, um ou dois –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; R10 is C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-,heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
30. Composto, de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1-C8 alquila, –OR12, -C1-C6aquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou -OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O; R6 é C1-C6 alquila; R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; R11 é como definido para a fórmula (V) acima; e R12 é independentemente H ou C1-C6 alquila.
31. Composto, de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O; R7 é como definido para a fórmula (V) acima; R9 é -C1-C2alquilCl, em que opcionalmente um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; R10 é C1-C6alquila; e R12 é independentemente H ou C1-C6alquila.
32. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui uma estrutura de fórmula (Ve) ou (Vf): (Ve) (Vf) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou -
OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; R6 é C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-,heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-; R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halos, um ou dois –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; R10 é C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituído por um grupo protetor de N; cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
33. Composto, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que:
X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou está ausente quando X é S ou O; R6 é C1-C6alquila; R9 é -C1-C2 alquilCl, em que opcionalmente um ou até todos os H em -C1-C2 alquila são substituídos por deutério; e R10, R12 e R13 são conforme definido para o composto de fórmula (Ve) ou (Vf).
34. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui uma estrutura de fórmula (Vg): (Vg) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-
C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; R9 é C1-C6alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halo, um ou dois –CH3, ou um ou até todos H em -C1-C2alquila é substituído por deutério; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C- , e R12O(O)C-.
35. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui como estrutura a fórmula (Vi): (Vi)
ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; R6 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, ou (R11)2NC2-C6alquenil-; R8 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2N-; R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halo, um ou dois –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-,
adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -
NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R3R12O(O)C-; R12O(O)C-.
36. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui uma estrutura de fórmula (Vj):
O N(R7)2
O
N (R4) R9 p
X R5
O
S O R8 (Vj) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; cada R7 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O-C1-C6alquil-, ou R12O(O)C-C1-C6alquil-, ou dois R7 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R7 é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, uma heterociclila de 4 a 6 membros, ou (R11)2N-, em que a heterociclila de 4 a 6 membros quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; R8 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1- C6alquil-, ou (R11)2N-; R9 é C1-C6alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halo, um ou dois –CH3, ou um ou até todos os H em -C1-C2alquila são substituídos por deutério; cada R11 é independentemente H, C1-C6alquila, C2- C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-,heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N;
cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado a outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
37. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui uma estrutura de fórmula (Vn): (Vn), ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R1 é C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, ou -C1-C6alquil-
OR12; R2 é -C(O)R9; R3 é -C(O)OR10, -C(O)N(R11)2, -OC(O)R10, -C0- C6alquilC3-C8cicloalquila, -C0-C6alquil-heterociclila, -N(R11)2, - SO2R8, -SOR8, -NO2 ou -Si(R15)3; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12,-C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; R8 é independentemente C1-C6alquila, C3-C6alquila, C2- C6alquenila, C2-C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1- C6alquil-, (R11)2N-, ou R14C0-C6alquil-; R9 é C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halo, um ou dois –CH3, ou um ou até todos de H são substituídos por deutério; R10 is C1-C6alquila, C2-C6alquila, C2-C6alquenila, C2- C6alquinila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3- C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-,heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil- ou (R15)3SiC0-C6alquil-; cada R11 é independentemente H, C1- C6alquila, C2-C6alquenila, C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila,
heteroarila, C3-C6cicloalquilC1-C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2- C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1- C6alquil-, arilC1-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2- C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-,R12O-C1-C6alquil-, (R11)2NC1-C6alquil-, (R11)2NC2-C6alquenil-, R12O(O)C-C1-C6alquil- , R13(NH2)CH-, R14C0-C6alquil-, (R15)3SiC0-C6alquil-, ou um grupo protetor de N; ou dois R11 em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual os mesmos estão ligados formam uma heterociclila de 4 a 7 membros, em que a heterociclila formada pelos dois grupos R11 tem opcionalmente 0, 1 ou 2 heteroátomos adicionais selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, e a heterociclila é opcionalmente substituída por OH, halo, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O(O)C-, (R11)2N-, ou uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por OH, halo, -NH2, ou C1- C6alquila, ou quando contém 2 ou mais átomos de N é opcionalmente substituída por um grupo protetor de N; cada R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; cada R13 é independentemente H, C1-C6alquila, C3- C6cicloalquila, heterociclila, arila, heteroarila, C3-C6cicloalquilC1- C6alquil-, C3-C6cicloalquilC2-C6alquenil-, heterociclilC1-C6alquil-, heterociclilC2-C6alquenil-, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, heteroarilC2-C6alquenil-, adamantila, adamantilC1-C6alifático-, ou um grupo protetor de N; R14 é um anel bicíclico em ponte com 0 a 2 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre; e cada R15 é independentemente C1-C6alquila, C2- C6alquenila, arila, heteroarila, arilC1-C6alquil-, arilC2-C6alquenil-, heteroarilC1-C6alquil-, e heteroarilC2-C6alquenil-; em que a C1-C6alquila, -C3-C6cicloalquila, heterociclila, arila,
heteroarila, ou anel bicíclico em ponte, por si só ou ligado à outra porção química, são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, - NH2, C1-C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
38. Composto, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que possui uma estrutura de fórmula (Vp): (Vp) ou um enantiômero ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é N, O ou S; R1 é C1-C6alquila, -C1-C6alquil-halo, ou -C1-C6alquil- OR12; R3 é -C0-C6alquilC3-C8cicloalquila ou -C0-C6alquil- heterociclila; R4 é independentemente halo, CN, -NH2, -SO2, C1- C8alquila, –OR12, -C1-C6alquil-OR12, -C1-C6alquil-NR12 ou - OC(O)R12; R5 é H, C1-C6alquila, ou é ausente quando X é S ou O; p é 0, 1, 2 ou 3; R9 é -C1-C2alquil-halo, -C2-C3alquenil-halo, ou C2alquinila, em que a C1-C2alquila é opcionalmente substituída por um ou dois halo, um ou dois –CH3, ou um ou até todos os H são substituídos por deutério; R12 é independentemente H ou C1-C6alquila; em que a C0-C6alquila ou -C3-C8cicloalquila são independentemente opcionalmente substituídos por 1 a 3 substituintes selecionados a partir do grupo que consiste em OH, halo, -NH2, C1- C6alquila, C1-C6alquil-O-, R12O-C1-C6alquil(O)C-, e R12O(O)C-.
39. Composto caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste em compostos listados na Tabela 1, ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
40. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 39, e um carreador farmaceuticamente aceitável.
41. Método para inibir GPX4 em uma célula caracterizado pelo fato de que compreende o contato de uma célula com uma quantidade eficaz de um composto, ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 39.
42. Método, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que a célula é uma célula cancerosa.
43. Método para tratar câncer em um sujeito caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um sujeito com câncer uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, ou um tautômero, estereoisômero, mistura de estereoisômeros, análogo isotopicamente enriquecido, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 39.
44. Método, de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer adrenocortical, câncer anal, câncer biliar, câncer de bexiga, câncer ósseo, câncer cerebral, câncer de mama, câncer cervical, câncer de cólon, câncer endometrial, câncer de esôfago, câncer de cabeça e pescoço, câncer intestinal, câncer de fígado, câncer de pulmão, câncer oral, câncer de ovário, câncer de pâncreas, câncer renal, câncer de próstata, câncer de glândula salivar, câncer de pele, câncer de estômago, câncer testicular, câncer de garganta, câncer de tireoide, câncer uterino, câncer vaginal, sarcoma ou um carcinoma de tecidos moles.
45. Método, de acordo com a reivindicação 44, caracterizado pelo fato de que o câncer é osteossarcoma, glioma, astrocitoma, neuroblastoma, câncer do intestino delgado, câncer brônquico, câncer de pulmão de células pequenas, câncer de pulmão de células não pequenas, carcinoma basocelular ou melanoma.
46. Método, de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que o câncer é um câncer hematológico.
47. Método, de acordo com a reivindicação 45, caracterizado pelo fato de que o câncer hematológico é leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), linfoma (por exemplo, linfoma de Hodgkin, linfoma não Hodgkin, linfoma de Burkitt), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), leucemia mieloide crônica de células pilosas (CML) ou mieloma múltiplo.
48. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 43 a 47, caracterizado pelo fato de que compreende ainda administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um segundo agente terapêutico.
49. Método, de acordo com a reivindicação 48, caracterizado pelo fato de que o segundo agente terapêutico é um agente platinante, agente alquilante, antibiótico anticâncer, antimetabólito, inibidor de topoisomerase I, inibidor de topoisomerase II ou agente antimicrotúbulo.
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