BR112020004787A2

BR112020004787A2 - polissulfato de pentosano, composição farmacêutica, anticoagulante, e, método para produzir polissulfato de pentosano

Info

Publication number: BR112020004787A2
Application number: BR112020004787-2A
Authority: BR
Inventors: Kotaro Ishikawa; Takuro KASHIWAMURA; Takuya Kato; Toru Koga; Suguru Toruishikawa
Original assignee: Oji Holdings Corporation
Priority date: 2017-09-12
Filing date: 2018-09-11
Publication date: 2020-09-24
Also published as: SG11202002250VA; CN111065655B; PH12020500458A1; WO2019054344A1; EP3683242A4; EP3683242A1; AU2018333249B2; MX2020002726A; CN111065655A; JP2022180509A; JPWO2019054344A1; KR20200051688A; CA3075485A1; JP7167039B2; AU2018333249A1; US11390693B2; US20200270372A1

Abstract

A presente invenção provê um polissulfato de pentosano que tem um teor de ácido urônico de 0,0% em massa a 6,0% em massa, preferivelmente um polissulfato de pentosano que tem uma estrutura representada pela fórmula geral I, um sal farmaceuticamente aceitável de um destes polissulfatos de pentosano, ou um solvato farmaceuticamente aceitável de um destes polissulfatos de pentosano. Na fórmula, cada R representa um átomo de hidrogênio, -COCH3 ou -SO3X e pelo menos um R representa SO3X; X representa um átomo de hidrogênio ou um metal monovalente ou bivalente; X representa um átomo de hidrogênio ou um metal monovalente ou bivalente; e n representa um número inteiro de 1 a 30 (inclusive). A presente invenção também provê um método para produzir um polissulfato de pentosano, que sequencialmente compreende uma etapa para a obtenção de um xilo-oligossacarídeo neutro pela despolimerização de um material de partida derivado de planta e uma etapa de sulfatação do xilo-oligossacarídeo neutro nesta ordem.

Description

1 / 37 POLISSULFATO DE PENTOSANO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, ANTICOAGULANTE, E, MÉTODO PARA PRODUZIR POLISSULFATO

DE PENTOSANO Campo Técnico

[001] A presente invenção se refere a um polissulfato de pentosano, e a um método para produzir o polissulfato de pentosano. Fundamentos da Técnica

[002] Heparina foi usada como um agente terapêutico para trombose, osteoartrite e similares. Entretanto, visto que a heparina é uma substância separada dos órgãos de animais, tais como bovinos ou porcos, é difícil controlar a sua qualidade. Além disso, existem casos onde o uso de heparina no tratamento causa hesitação do ponto de vista de éticas religiosas, etc. Portanto, o desenvolvimento de um agente terapêutico alternativo que seja livre de componentes derivados de animal e que possa ser usado ao invés de heparina, tem sido desejado.

[003] Como tal, uma substância alternativa para heparina, polissulfato de pentosano, por exemplo, é conhecida. O polissulfato de pentosano é obtido sulfatando-se um xilo-oligossacarídeo derivado de planta. Visto que tal polissulfato de pentosano é uma substância livre de componentes derivados de animal, o seu uso como um agente terapêutico alternativo para heparina foi esperado (por exemplo, Literatura de Patente (PTL) 1).

[004] Polissulfato de pentosano é produzido pela sulfatação química de xilano obtido de madeira dura (por exemplo, faia). Polissulfato de pentosano é composto de um polissacarídeo linear sulfatado em que β-D- xilopiranose é linearmente ligado; e tem ácido 4-O-metilglicurônico, isto é, ácido urônico, por aproximadamente cada 10 unidades de xilopiranose (Literatura de Patente (PTL) 1 e Literatura de Patente (PTL) 2). Lista de Citação

2 / 37 Literatura Patentária

[005] PTL 1: WO2010/000013 PTL 2: JP2009-532467A Sumário da Invenção Problema Técnico

[006] Um objetivo da presente invenção é prover um novo polissulfato de pentosano tendo atividade preferível para aplicações farmacêuticas ou tendo estabilidade na armazenagem. Um outro objetivo da presente invenção é prover um método barato e eficiente para produzir o sulfato de pentosano. Meios para Resolver o Problema

[007] Como um resultado de estudos intensivos para resolver o problema acima, os presentes inventores descobriram um novo polissulfato de pentosano tendo atividade anticoagulante superior à dos polissulfatos de pentosano convencionais, enquanto suprime efeitos colaterais ou tendo estabilidade na armazenagem. Os presentes inventores assim realizaram a presente invenção com base nesta descoberta. Especificamente, a presente invenção tem a seguinte constituição.

[008] [1] Um polissulfato de pentosano tendo um teor de ácido urônico de 0,0 % em massa a 6,0 % em massa; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[009] [2] O polissulfato de pentosano de acordo com [1], em que o polissulfato de pentosano tem um teor de ácido urônico de 0,0 % em massa a 4,0 % em massa; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3 / 37

[0010] [3] O polissulfato de pentosano de acordo com [1] ou [2], em que o polissulfato de pentosano tem uma estrutura representada pela Fórmula II: Fórmula II em que R1 cada um independentemente representa um átomo de hidrogênio, -COCH3 ou -SO3X1 e pelo menos um R1 na molécula é - SO3X1, em que X1 representa um átomo de hidrogênio ou um metal monovalente ou bivalente; n1 e n2 cada um independentemente representa um número inteiro de 0 ou mais e 30 ou menos e pelo menos um de n1 e n2 é um número inteiro de 1 ou mais; e R* representa um átomo de hidrogênio, -COCH3, - SO3X1 ou um resíduo de ácido urônico sulfatado ou não sulfatado; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0011] [4] O polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de

[1] a [3], em que o polissulfato de pentosano é representado pela Fórmula I: Fórmula I em que cada R independentemente representa um átomo de hidrogênio, -COCH3 ou -SO3X e pelo menos um R é -SO3X, em que X representa um átomo de hidrogênio ou um metal monovalente ou bivalente; e n representa um número inteiro de 1 a 30; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de

4 / 37 pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0012] [5] O polissulfato de pentosano de acordo com [4], em que cada R independentemente representa um átomo de hidrogênio ou -SO3X; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0013] [6] O polissulfato de pentosano de acordo com [4] ou [5], em que X é sódio; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0014] [7] Uma composição farmacêutica compreendendo o polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [1] a [6]; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0015] [8] Um anticoagulante compreendendo o polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [1] a [6]; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0016] [9] Um método para produzir polissulfato de pentosano compreendendo: uma primeira etapa de obter xilo-oligossacarídeo neutro a partir de uma matéria prima derivada de planta; e uma segunda etapa de obter polissulfato de pentosano a partir do xilo-oligossacarídeo neutro,

5 / 37 a primeira etapa compreendendo uma etapa de despolimerizar a matéria prima derivada de planta e a segunda etapa compreendendo uma etapa de sulfatar o xilo-oligossacarídeo neutro.

[0017] [10] O método para produzir polissulfato de pentosano de acordo com [9], em que a etapa de despolimerização é uma etapa de tratamento térmico.

[0018] [11] O método para produzir polissulfato de pentosano de acordo com [10], em que a etapa de tratamento térmico é uma etapa de aquecer a 120ºC ou mais alto sob condições não alcalinas.

[0019] [12] O método para produzir polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [9] a [11], em que a matéria prima derivada de planta é uma matéria prima derivada de madeira.

[0020] A partir de um outro ponto de vista, a presente invenção provê: uso de polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [1] a [6], um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como um anticoagulante; uso do polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [1] a [6], um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para produzir um anticoagulante; o polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [1] a [6], um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o uso como um anticoagulante; um método para inibir a coagulação sanguínea, compreendendo administrar a um ser humano ou um animal uma quantidade hidratantemente eficaz do polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [1] a [6], um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato

6 / 37 farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; um método para tratar a superfície de um dispositivo médico ou um material médico, compreendendo aplicar a uma superfície do dispositivo médico ou do material médico o polissulfato de pentosano de acordo com qualquer um de [1] a [6], um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Efeitos vantajosos da Invenção

[0021] A presente invenção provê um polissulfato de pentosano tendo uma atividade preferível para aplicações farmacêuticas ou tendo estabilidade na armazenagem. O polissulfato de pentosano da presente invenção é útil como uma composição farmacêutica, tal como um anticoagulante. A presente invenção provê adicionalmente um método barato e eficiente para produzir o polissulfato de pentosano. Breve Descrição dos Desenhos

[0022] A Fig. 1 é um diagrama ilustrando um método para produzir polissulfato de pentosano.

[0023] A Fig. 2 é um diagrama ilustrando um método para produzir polissulfato de pentosano.

[0024] A Fig. 3 é um gráfico mostrando a relação entre o teor de ácido urônico e a atividade anti-IIa ou atividade anti-Xa de cada polissulfato de pentosano.

[0025] A Fig. 4 é um gráfico mostrando a relação entre o teor de ácido urônico e a razão das atividades anti-Xa/anti-IIa de cada polissulfato de pentosano. Descrição das modalidades

[0026] A presente invenção é descrita abaixo em detalhes. Os aspectos constituintes podem ser descritos abaixo com base em modalidades

7 / 37 típicas e exemplos específicos; entretanto, a presente invenção não é limitada a tais modalidades. Polissulfato de pentosano

[0027] O polissulfato de pentosano é um composto obtido pela sulfatação de pelo menos um grupo hidroxila de xilo-oligossacarídeo. No presente relatório descritivo, o polissulfato de pentosano inclui sais de polissulfato de pentosano, solvatos de polissulfato de pentosano e solvatos de sais de polissulfato de pentosano. Os sais de polissulfato de pentosano são preferivelmente sais farmaceuticamente aceitáveis e os exemplos incluem polissulfato de pentosano sódico, polissulfato de pentosano potássico, polissulfato de pentosano cálcico e similares. Os solvatos são preferivelmente solvatos farmaceuticamente aceitáveis. Os exemplos de solventes incluem água.

[0028] O polissulfato de pentosano tem uma estrutura representada pela Fórmula II. O polissulfato de pentosano pode conter uma estrutura representada pela Fórmula II ou pode conter duas ou mais estruturas representadas pela Fórmula II. Quando o polissulfato de pentosano contém duas ou mais estruturas representadas pela Fórmula II, a estrutura representada pela Fórmula II é uma estrutura representando uma unidade de repetição de polissulfato de pentosano.

Fórmula II

[0029] Na Fórmula II, R1 cada um independentemente representa um átomo de hidrogênio, -COCH3 ou -SO3X1 e pelo menos um R1 na molécula é - SO3X1, em que X1 representa um átomo de hidrogênio ou um metal monovalente ou bivalente; e X1 é preferivelmente um átomo de hidrogênio, sódio, potássio ou cálcio, mais preferivelmente sódio, potássio ou cálcio e de modo particularmente preferível sódio. Além disso, n1 e n2 cada um

8 / 37 independentemente representa um número inteiro de 0 ou mais e 30 ou menos e pelo menos um de n1 e n2 é um número inteiro de 1 ou mais.

[0030] Na Fórmula II, n1 + n2 é preferivelmente de 1 a 27, mais preferivelmente de 2 a 18 e ainda mais preferivelmente de 3 a 10.

[0031] A porção que é uma extremidade da estrutura representada pela Fórmula II e que não se liga a uma estrutura representada pela Fórmula II pode ser -OR1. Isto é, -OR1 pode se ligar ao terminal esquerdo (lado n1) da Fórmula II, ao passo que -R1 pode se ligar ao terminal direito (lado n2) da Fórmula II. É particularmente preferível que -OR1X se ligue ao terminal esquerdo (lado n1) da Fórmula II e -R1X se ligue ao terminal direito (lado n2) da Fórmula II. Na Fórmula II, R1X é um átomo de hidrogênio ou -SO3X1; X1 é um átomo de hidrogênio ou um metal monovalente ou bivalente; e X1 é preferivelmente um átomo de hidrogênio, sódio, potássio ou cálcio, mais preferivelmente sódio, potássio ou cálcio e de modo particularmente preferível sódio.

[0032] R* é um átomo de hidrogênio, -COCH3, -SO3X1 ou um resíduo de ácido urônico sulfatado ou não sulfatado. O resíduo de ácido urônico sulfatado ou não sulfatado pode ser representado pela seguinte formula.

Fórmula I

[0033] X2 representa um átomo de hidrogênio ou um metal monovalente ou bivalente; preferivelmente sódio, potássio ou cálcio; e de modo particularmente preferível sódio. R1 cada um independentemente representa um átomo de hidrogênio, -COCH3 ou -SO3X1, como descrito acima. * representa uma posição de ligação.

[0034] O polissulfato de pentosano da presente invenção não inclui o polissulfato de pentosano da Fórmula II em que R* é um resíduo de ácido urônico ou pode possivelmente conter uma pequena quantidade de tal

9 / 37 polissulfato de pentosano. Especificamente, o polissulfato de pentosano da presente invenção tem um teor de ácido urônico de 0,0 % em massa a 6,0 % em massa. O polissulfato de pentosano da presente invenção preferivelmente tem um teor de ácido urônico de 0,0 % em massa a 4,0 % em massa, mais preferivelmente 0,0 % em massa a 2,0 % em massa, ainda mais preferivelmente 0,0 % em massa a 2,0 % em massa e ainda mais preferivelmente 0,0 % em massa a 1,0 % em massa. É particularmente preferível que o polissulfato de pentosano da presente invenção tenha um teor de ácido urônico de substancialmente 0,0 % em massa. A proporção acima não tem que ser atingida por uma única molécula, mas pode ser satisfeita pelo polissulfato de pentosano como uma mistura inteira de moléculas individuais.

[0035] Isto é, o polissulfato de pentosano da presente invenção preferivelmente tem uma estrutura representada pela Fórmula I.

Fórmula I

[0036] Na Fórmula I, cada R independentemente representa um átomo de hidrogênio, -COCH3 ou -SO3X e pelo menos um R por molécula é -SO3X, em que X representa um átomo de hidrogênio ou um monovalente ou bivalente; e n representa um número inteiro de 1 ou mais e 30 ou menos.

[0037] O composto representado pela Fórmula I é preferivelmente um composto representado pela seguinte Fórmula IX. Isto é, é preferível que o terminal R não seja -COCH3.

OR RO RX O

RXO O n Fórmula Ix

[0038] Na Fórmula IX, RX cada um independentemente representa um

10 / 37 átomo de hidrogênio ou -SO3X.

[0039] No polissulfato de pentosano da presente invenção, é preferível que 50% ou mais, mais preferivelmente 70% ou mais e ainda mais preferivelmente 90% ou mais, do número total de Rs na Fórmula II são -SO3X; e que 8% ou menos, mais preferivelmente 4% ou menos e ainda mais preferivelmente 1% ou menos, do número total de Rs na Fórmula II sejam - COCH3. É particularmente preferível que nenhum dos Rs seja -COCH3. Mais especificamente, é particularmente preferível que cada R independentemente represente um átomo de hidrogênio ou -SO3X. Em outras palavras, o polissulfato de pentosano da presente invenção preferivelmente não contém nenhum dos grupos acetila.

[0040] A proporção acima não tem que ser atingida por uma única molécula, mas pode ser satisfeita pelo polissulfato de pentosano como uma mistura inteira de moléculas individuais.

[0041] X é preferivelmente um átomo de hidrogênio, sódio, potássio ou cálcio. O mesmo é mais preferivelmente sódio, potássio ou cálcio e ainda mais preferivelmente sódio.

[0042] n é preferivelmente 3 ou mais, mais preferivelmente 4 ou mais e ainda mais preferivelmente 5 ou mais. Por outro lado, n é preferivelmente 30 ou menos, mais preferivelmente 25 ou menos e ainda mais preferivelmente 20 ou menos.

[0043] O polissulfato de pentosano da presente invenção pode ser uma mistura de moléculas representadas pela Fórmula I que são diferentes uma da outra no valor n, no tipo de substituinte R e/ou no grau de substituição.

[0044] O polissulfato de pentosano tem uma estrutura obtida pela sulfatação de xilo-oligossacarídeos. Entre os xilo-oligossacarídeos, os xilo- oligossacarídeo neutros são xilo-oligossacarídeos que não contêm ácido urônico. Os xilo-oligossacarídeos ácidos são xilo-oligossacarídeos em que

11 / 37 pelo menos um ácido urônico está ligado a pelo menos uma das unidades de xilose em uma molécula de xilo-oligossacarídeo. Isto é, xilo-oligossacarídeos ácidos têm pelo menos um resíduo de ácido urônico como uma cadeia lateral por molécula de xilo-oligossacarídeo. O número médio de resíduos de ácido urônico por molécula de xilo-oligossacarídeo ácido é preferivelmente 1 ou mais e 3 ou menos, mais preferivelmente 1 ou mais e 2 ou menos. O número de resíduos de ácido urônico contidos por molécula de xilo-oligossacarídeo pode ser medido pelo método do carbazol-ácido sulfúrico ou o método colorimétrico usando tetraborato de sódio.

[0045] O teor de enxofre do polissulfato de pentosano da presente invenção é preferivelmente 10,0 % em massa ou mais, mais preferivelmente 12,0 % em massa ou mais, ainda mais preferivelmente 15,5 % em massa ou mais e de modo particularmente preferível 16,5 % em massa ou mais. O teor de enxofre do polissulfato de pentosano é preferivelmente 20,0 % em massa ou menos. Aqui, o teor de enxofre do polissulfato de pentosano é um valor determinado de acordo com o método de combustão do frasco de oxigênio descrito na Farmacopeia Japonesa.

[0046] O polissulfato de pentosano da presente invenção preferivelmente tem um teor de grupo acetila de 0 a 2,0 % em massa, mais preferivelmente 0 a 1,0 % em massa, ainda mais preferivelmente 0 a 0,4 % em massa, de modo particularmente preferível 0 a 0,3 % em massa e ainda mais preferivelmente substancialmente 0 % em massa. Quando o teor de grupo acetila do polissulfato de pentosano é como descrito acima, atividade anti-Xa mais alto pode ser obtida.

[0047] O teor de grupo acetila do polissulfato de pentosano pode ser calculado a partir da razão integral de picos na medição de 1H-RMN. Especificamente, primeiro, a medição de 1H-RMN é realizada usando uma solução de medição de 1H-RMN contendo uma quantidade específica de polissulfato de pentosano e uma quantidade específica de uma substância

12 / 37 padrão interna. Comparando-se o pico para grupo acetila com o pico para um grupo específico da substância padrão interna no espectro obtido para se obter uma razão integral do mesmo, a quantidade molar dos grupos acetila na solução é obtida. A quantidade molar dos grupos acetila é depois multiplicada por 43; e o valor obtido é dividido pelo peso molecular médio obtido separadamente, de modo a se obter a % em massa dos grupos acetila.

[0048] O peso molecular médio ponderado (Mw) do polissulfato de pentosano da presente invenção não é particularmente limitado; e pode ser, por exemplo, 4000 ou menos, 3900 ou menos ou 3800 ou menos. Neste caso, o limite inferior do peso molecular médio ponderado (Mw) do polissulfato de pentosano é preferivelmente 1000.

[0049] O peso molecular médio ponderado (Mw) do polissulfato de pentosano pode ser maior do que 4000, 5000 ou mais, 7000 ou mais, 10000 ou mais, 15000 ou mais ou 20000 ou mais.

[0050] O peso molecular médio numérico (Mn) do polissulfato de pentosano não é particularmente limitado; e pode ser, por exemplo, 4000 ou menos, 3900 ou menos, 3800 ou menos ou 3750 ou menos. Neste caso, o limite inferior do peso molecular médio numérico (Mn) do polissulfato de pentosano é preferivelmente 300.

[0051] O peso molecular médio numérico (Mn) do polissulfato de pentosano pode ser 5000 ou mais, 7000 ou mais, 10000 ou mais, 15000 ou mais ou 20000 ou mais.

[0052] O peso molecular médio ponderado (Mw) e o peso molecular médio numérico (Mn) do polissulfato de pentosano da presente invenção podem ser medidos pela GPC (cromatografia de permeação em gel). Como a coluna de GPC, uma YMC-Pack Diol-300 e YMC-Pack Diol-60 (ambas fabricadas pela YMC) conectadas uma à outra podem ser usadas. As condições de GPC podem ser, por exemplo, as seguintes condições.

[0053] Eluente: 25 mM de di-hidrogeno fosfato de potássio/25 mM de

13 / 37 hidrogeno fosfato de dipotássio/50 mM de cloreto de potássio Taxa de fluxo: 0,7 mL/min Temperatura de medição: 40ºC Detector: detector de índice refrativo

[0054] O grau de dispersão do polissulfato de pentosano é preferivelmente 1,00 ou mais e 1,6 ou menos, mais preferivelmente 1,00 ou mais e 1,5 ou menos. O grau de dispersão do polissulfato de pentosano é também preferivelmente 1,00 ou mais e 1,4 ou mais. O grau de dispersão (D) do polissulfato de pentosano é calculado pela seguinte fórmula. Grau de dispersão (D) = Peso molecular médio ponderado (Mw)/Peso molecular médio numérico (Mn)

[0055] O polissulfato de pentosano obtido pelo método de produção da presente invenção descrito abaixo tem alta pureza e tende a ter uma distribuição de peso molecular estreita. O polissulfato de pentosano obtido pelo método de produção da presente invenção tem excelente estabilidade da qualidade. Aplicações do Polissulfato de Pentosano: Composição Farmacêutica e Anticoagulante

[0056] O polissulfato de pentosano da presente invenção pode ser usado para aplicações, tais como produtos farmacêuticos, alimentares e cosméticos. Por exemplo, uma composição farmacêutica compreendendo, como um ingrediente ativo, o polissulfato de pentosano da presente invenção (polissulfato de pentosano, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato do mesmo) pode ser provido. Em particular, visto que o polissulfato de pentosano tem uma atividade anticoagulante, a composição farmacêutica descrita acima pode ser usada como um anticoagulante.

[0057] No geral, a atividade anticoagulante está fundamentada na atividade de inibir os fatores de coagulação sanguínea. Especificamente, quando a atividade anticoagulante é alta, uma reação de coagulação sanguínea

14 / 37 é inibida. Fatores de coagulação sanguínea significam o sistema de ação de uma série de moléculas em um corpo vivo para coagular o sangue quando houver sangramento, etc. Muitos fatores de coagulação sanguínea são sucessivamente ativados para deste modo aglutinar fibrina e parar o sangramento na área de sangramento. Os exemplos representativos de fatores de coagulação sanguínea incluem o fator Xa e o fator IIa. A coagulação sanguínea pode ser inibida pela inibição da atividade destes fatores.

[0058] A atividade inibidora do fator Xa (atividade anti-Xa) de polissulfato de pentosano é preferivelmente 0,10 IU/mg ou mais e mais preferivelmente 0,12 IU/mg ou mais.

[0059] A atividade inibidora do fator IIa (atividade anti-IIa) do polissulfato de pentosano é preferivelmente 0,50 IU/mg ou menos, mais preferivelmente 0,40 IU/mg ou menos e de modo adicionalmente preferível 0,30 IU/mg ou menos.

[0060] Aqui, a atividade inibidora do fator Xa (atividade anti-Xa) pode ser medida usando Test Team (marca registrada) Heparin S (fabricado pela Sekisui Medical Co., Ltd.).

[0061] A atividade inibidora do fator IIa (atividade anti-IIa) pode ser medida usando Biophen heparin anti-IIa (fabricado pela Hyphen BioMed).

[0062] A razão de atividade da atividade inibidora do fator Xa (atividade anti-Xa) do polissulfato de pentosano para a atividade inibidora do fator IIa (atividade anti-IIa) do polissulfato de pentosano está preferivelmente dentro de uma faixa predeterminada. Especificamente, a razão atividade anti- Xa /atividade anti-IIa é preferivelmente 0,50 ou mais, mais preferivelmente 1,00 ou mais, ainda mais preferivelmente 1,10 ou mais e ainda mais preferivelmente 1,20 ou mais.

[0063] O polissulfato de pentosano da presente invenção pode ter atividade anti-Xa, atividade anti-IIa e uma razão atividade anti-Xa /atividade anti-IIa que são controladas dentro das faixas descritas acima. Em particular,

15 / 37 o polissulfato de pentosano da presente invenção pode ter atividade anti-IIa suprimida mais baixa do que a atividade anti-Xa. Quando a razão atividade anti-Xa/atividade anti-IIa é controlada para cair dentro da faixa mencionada acima, a atividade anticoagulante pode ser mais eficazmente aumentada; e a ocorrência de efeitos colaterais, tais como um risco aumentado de sangramento ou uma diminuição de plaquetas, podem ser suprimidos.

[0064] Uma composição farmacêutica compreendendo o polissulfato de pentosano da presente invenção pode ser usada, por exemplo, como um agente de tratamento de superfície para dispositivos médicos ou materiais médicos. A composição farmacêutica pode ser usada, por exemplo, como um agente de tratamento de superfície para órgãos artificiais implantáveis, vasos sanguíneos, cateteres, stents, bolsas de sangue, lentes de contato, lentes intraoculares e instrumentos auxiliares cirúrgicos. Os exemplos de métodos para imobilizar a composição farmacêutica sobre a superfície de um dispositivo médico ou um material médico incluem um método compreendendo levar a composição farmacêutica em contato com o dispositivo médico ou o material médico e irradiar a porção de contato com radiação.

[0065] A composição farmacêutica pode ter qualquer forma de dosagem e pode ser formada, por exemplo, em uma preparação de administração oral, uma injeção ou uma preparação externa. Método para Produzir Polissulfato de Pentosano

[0066] O polissulfato de pentosano da presente invenção pode ser produzido sulfatando-se um xilo-oligossacarídeo neutro. O polissulfato de pentosano da presente invenção é preferivelmente produzido sulfatando-se um xilo-oligossacarídeo neutro. O xilo-oligossacarídeo neutro pode ser obtido pela extração a partir de uma matéria prima derivada de planta, opcionalmente seguida pela despolimerização ou pela polimerização de D-xilose.

[0067] O polissulfato de pentosano da presente invenção pode ser

16 / 37 obtido, por exemplo, por um método para produzir polissulfato de pentosano, o método compreendendo uma primeira etapa de obter um xilo- oligossacarídeo neutro a partir de uma matéria prima derivada de planta e uma segunda etapa de obter polissulfato de pentosano a partir do xilo- oligossacarídeo neutro, como mostrado na Fig. 1. Neste método, a primeira etapa inclui uma etapa de despolimerizar uma matéria prima derivada de planta. Visto que o método compreende a etapa de despolimerizar uma matéria prima derivada de planta e a etapa de sulfatação nesta ordem, o método pode eficientemente produzir polissulfato de pentosano. O método para produzir polissulfato de pentosano pode incluir ainda uma etapa de desacetilação. Pela inclusão de uma etapa de desacetilação, o método pode produzir um polissulfato de pentosano tendo um teor de grupo acetila baixo. Matéria prima derivada de planta

[0068] Os xilo-oligossacarídeos neutros podem ser obtidos pela despolimerização de matérias-primas derivadas de planta. Os exemplos de matérias primas derivadas de planta incluem matérias primas derivadas de madeira, matérias primas derivadas de semente, matérias primas derivadas de grão, matérias primas derivadas de fruta, e similares. Além disso, os exemplos derivados de matérias-primas de planta que podem ser usadas incluem algodões tais como fibras de algodão e fiapos de algodão; plantas herbáceas tais como kenaf, cânhamo, rami, e palha de arroz; e similares. Como a matéria-prima derivada de planta, as matérias primas mencionadas acima derivadas de várias fontes também podem ser usadas em combinação.

[0069] Entre estas, as matérias primas derivadas de madeira são preferivelmente usadas como a matéria-prima derivada de planta. Os exemplos de matérias primas derivadas de madeira usáveis incluem matérias primas de madeira tais como madeiras moles e madeiras duras. A matéria- prima derivada de madeira é preferivelmente pelo menos uma selecionada de madeiras moles e madeiras duras; e madeiras duras são mais preferivelmente

17 / 37 usadas. As matérias primas derivadas de madeira podem ser uma mistura de madeira mole e madeira dura. Uma casca também pode ser usada como a matéria-prima derivada de madeira.

[0070] Os exemplos de madeiras duras incluem faia, Eucalyptus globulus, Eucalyptus grandis, Eucalyptus urograndis, Eucalyptus pellita, Eucalyptus braciana, Acacia mearnsii, e similares. Os exemplos de madeiras moles incluem Cedro japonês, Cipreste japonês, pinheiro, hiba, Cicuta japonesa, e similares.

[0071] A matéria-prima derivada de madeira preferivelmente tem uma gravidade específica de 450 kg/m3 ou mais e 700 kg/m3 ou menos, e mais preferivelmente de 500 kg/m3 ou mais e 650 kg/m3 ou menos. Quando a matéria-prima derivada de madeira tem uma gravidade específica dentro da faixa descrita acima, a eficiência de produzir xilo-oligossacarídeo neutro pode ser adicionalmente realçada.

[0072] A matéria-prima derivada de madeira é preferivelmente lascas de madeira obtidas pela trituração de uma ou mais das madeiras mencionadas acima. Quando lascas de madeira são usadas como uma matéria-prima derivada de planta, a despolimerização de uma matéria-prima derivada de planta pode ser eficientemente realizada, e a eficiência de produzir xilo- oligossacarídeo neutro pode ser realçada. Primeira Etapa Etapa de Despolimerização

[0073] A primeira etapa inclui uma etapa de despolimerizar uma matéria-prima derivada de planta. Na etapa de despolimerização de uma matéria-prima derivada de planta, a matéria-prima derivada de planta é química e/ou fisicamente decomposta para produzir um xilo-oligossacarídeo neutro. Os exemplos da etapa de decomposição química e/ou física incluem uma etapa de tratamento térmico, uma etapa de tratamento alcalino, uma etapa de tratamento ácido, uma etapa de tratamento enzimático, uma etapa de

18 / 37 tratamento iônico, uma etapa de tratamento catalítico, e similares. Entre estas etapas, a etapa de despolimerização é uma etapa de tratamento térmico ou uma etapa de tratamento enzimático; e é mais preferivelmente uma etapa de tratamento térmico. A etapa de tratamento térmico pode ser uma etapa de aquecimento e pressurização.

[0074] A etapa de despolimerização é preferivelmente realizada sob condições não alcalinas (no pH 9 ou menos, e preferivelmente pH 8 ou menos).

[0075] A etapa de tratamento térmico é uma etapa de aquecer uma matéria-prima derivada de planta na presença de uma solução. Visto que a matéria-prima derivada de planta é hidrolisada em uma tal etapa de tratamento térmico, a etapa de tratamento térmico é algumas vezes aludida como etapa de tratamento de hidrólise ou uma etapa de tratamento da pré- hidrólise. A solução usada na etapa de tratamento térmico é preferivelmente água. A razão (razão em massa) de água para a matéria-prima derivada de planta está preferivelmente na faixa de 1:1 a 1:10. Quando a razão de água para a matéria-prima derivada de planta é ajustada dentro da faixa descrita acima, a reação de hidrólise pode ser eficientemente realizada. A água usada na etapa de tratamento térmico pode ser água adicionada separadamente da matéria-prima derivada de planta; ou uma parte da água pode ser água originalmente contida na matéria-prima derivada de planta.

[0076] Na etapa de tratamento térmico, outros produtos químicos também podem ser adicionados, além da matéria prima derivada de planta e água. Os exemplos de tais outros produtos químicos incluem álcalis, ácidos e agentes quelantes. Além disso, produtos químicos que direta ou indiretamente ajudam na despolimerização de polissacarídeos, tais como inibidores de incrustação, agentes de controle de breu e líquidos iônicos, também podem ser adicionados.

[0077] A etapa de tratamento térmico é uma etapa de aquecer uma

19 / 37 matéria-prima derivada de planta na presença de água. A temperatura de aquecimento (temperatura líquida) nesta etapa é preferivelmente de 30°C ou mais alta, mais preferivelmente de 50°C ou mais alta, ainda mais preferivelmente de 75°C ou mais alta, ainda mais preferivelmente de 90°C ou mais alta, de modo particularmente preferível de 100°C ou mais alta, e mais preferivelmente de 120°C ou mais alta. Por outro lado, a temperatura de aquecimento (temperatura líquida) é preferivelmente de 300°C ou mais baixa, mais preferivelmente de 250°C ou mais baixa, e ainda mais preferivelmente de 200°C ou mais baixa.

[0078] O tempo de tratamento na etapa de tratamento térmico pode ser determinado, como apropriado, de acordo com a temperatura de tratamento. O tempo de tratamento é, por exemplo, preferivelmente de 5 minutos ou mais, mais preferivelmente de 10 minutos ou mais, e ainda mais preferivelmente de 20 minutos ou mais. O fator P expressado pela seguinte fórmula é um produto da temperatura de tratamento térmico e o tempo de tratamento térmico. É preferível ajustar o fator P dentro de uma faixa preferida.

[0079] Na fórmula acima, P representa um fator P, T representa uma temperatura absoluta (°C + 273,5), t representa o tempo de tratamento térmico, e KH1(T)/K100℃ representa a razão relativa de hidrólise de ligações glicosídicas.

[0080] Na etapa de tratamento térmico, o fator P é preferivelmente ajustado a 200 ou mais, mais preferivelmente de 250 ou mais, e ainda mais preferivelmente de 300 ou mais. Por outro lado, o fator P é preferivelmente de 1000 ou menos. Na etapa de tratamento térmico, o fator P é ajustado como apropriado de modo que o grau médio de polimerização e o peso molecular

20 / 37 do xilo-oligossacarídeo neutro pode estar dentro de faixas desejadas, por meio das quais o peso molecular do polissulfato de pentosano obtido pode ser ajustado.

[0081] Na etapa de tratamento térmico, a solução contendo uma matéria-prima derivada de planta preferivelmente tem um pH de 9 ou menos, mais preferivelmente pH 8 ou menos, e ainda mais preferivelmente pH 7 ou menos. Isto é, a etapa de tratamento térmico é preferivelmente realizada sob condições não alcalinas. Os valores de pH descritos acima se referem ao pH da solução antes do tratamento térmico.

[0082] Na etapa de tratamento térmico, um ácido derivado da matéria- prima pode ser dissociado, e a hidrólise ácida pode prosseguir pelo menos parcialmente. Os exemplos de ácidos derivados de matéria-prima vegetal incluem ácidos orgânicos, tais como ácido acético e ácido fórmico. Neste caso, o pH da solução contendo uma matéria-prima derivada de planta é adicionalmente diminuída depois da hidrólise ácida.

[0083] O método para produzir polissulfato de pentosano preferivelmente compreende uma etapa de tratamento térmico como a primeira etapa. Isto pode realçar a eficiência da produção de xilo- oligossacarídeo neutro e realçar adicionalmente a eficiência da produção de polissulfato de pentosano. Quando o método inclui uma etapa de tratamento térmico como a primeira etapa, o número de etapas requeridas para produzir xilo-oligossacarídeo neutro pode ser significantemente reduzida, quando comparada com os métodos convencionais. Pela inclusão de um tratamento térmico sob condições não alcalinas como a primeira etapa, o método pode eficientemente produzir xilo-oligossacarídeo neutro com coloração suprimida, porque o xilo-oligossacarídeo neutro não é substituído com ácido hexenurônico.

[0084] A etapa de despolimerização é preferivelmente uma etapa de tratamento térmico; entretanto, a mesma pode ser uma etapa outro que não a

21 / 37 etapa de tratamento térmico. Por exemplo, quando a etapa de despolimerização é uma etapa de tratamento enzimático, a etapa de despolimerização inclui uma etapa de misturar uma matéria-prima derivada de planta com uma enzima. Os exemplos de enzimas utilizáveis incluem hemicelulase e similares. Os exemplos específicos incluem preparações enzimáticas comercialmente disponíveis, tais como Cellulosin HC100 (nome comercial, fabricada pela HBI Enzymes Inc.), Cellulosin TP25 (nome comercial, fabricada pela HBI Enzymes Inc.), Cellulosin HC (nome comercial, fabricado pela HBI Enzymes Inc.), Cartazyme (nome comercial, fabricada pela Clariant AG), Ecopulp (nome comercial, fabricada pela Rohm Enzyme GmbH), Sumizyme (nome comercial, fabricada pela Shin Nihon Chemicals Corporation), Pulpzyme (fabricada pela Novo Nordisk), e Multifect 720 (Genencor); e xilanase produzida pelos micro-organismos pertencentes ao gênero Trichoderma, gênero Thermomyces, gênero Aureobasidium, gênero Streptomyces, gênero Aspergillus, gênero Clostridium, gênero Bacillus, gênero Thermotoga, gênero Thermoascus, gênero Cardoceram, gênero Thermomonospora, ou os semelhantes.

[0085] Na etapa de tratamento com enzima, uma enzima é adicionada a uma solução preparada misturando-se uma matéria-prima derivada de planta com água. A temperatura da solução durante este tratamento é preferivelmente de 10°C ou mais alta e 90°C ou mais baixa, e mais preferivelmente de 30°C ou mais alta e 60°C ou mais baixa. A temperatura da solução é preferivelmente uma temperatura próxima à temperatura ideal da enzima usada. O pH da solução também é preferivelmente ajustada a uma faixa em que a atividade da enzima é realçada. Por exemplo, o pH da solução é preferivelmente ajustado a um pH de 3 ou mais e um pH de 10 ou menos.

[0086] Quando a etapa de despolimerização é uma etapa de tratamento alcalino ou uma etapa de tratamento ácido, a etapa de despolimerização compreende uma etapa de misturar uma matéria-prima

22 / 37 derivada de planta com uma solução alcalina ou uma solução ácida. Na etapa de tratamento alcalino, hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio são preferivelmente adicionados. Na etapa de tratamento ácido, ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido acético, ou os semelhantes são preferivelmente adicionados. Em tais casos também, o aquecimento ou pressurização podem ser realizados, como apropriado.

[0087] Quando a etapa de despolimerização é pelo menos uma selecionada de uma etapa de tratamento enzimático, uma etapa de tratamento alcalino, e uma etapa de tratamento ácido, o método de produção pode compreender ainda, depois da etapa de tratamento, uma etapa de compressão, uma etapa de extração, uma etapa de aquecimento, uma etapa de filtração, uma etapa de separação, uma etapa de purificação, uma etapa de concentração, uma etapa de dessalinização, ou os semelhantes. O método pode compreender ainda uma etapa de redução do peso molecular realizada depois da etapa de tratamento. Os exemplos de outras etapas incluem as etapas descritas na JP 2003-183303A, os teores da qual são aqui incorporados por referência. Etapa de Filtração

[0088] A primeira etapa pode compreender ainda uma etapa de filtração realizada depois da etapa de despolimerização descrita acima. Na etapa de filtração, a mistura de reação é separada nos sólidos da matéria- prima derivada de planta, e uma solução outra que não dos sólidos. Mais especificamente, quando a primeira etapa inclui uma etapa de filtração realizada depois da etapa de despolimerização, o produto de reação é separado em sólidos, que são usados como uma matéria-prima de polpa e um filtrado. Os sólidos usados como uma matéria-prima de polpa são submetidos a uma etapa de digestão ou similar como uma pós-etapa de prover uma matéria- prima de celulose (polpa dissolvida).

[0089] O filtrado recuperado pode ser separado em uma camada

23 / 37 gasosa e uma camada líquida. Viston que a camada gasosa contém uma grande quantidade de furfurais, os furfurais podem ser isolados coletando-se estes furfurais da camada gasosa. Por outro lado, a camada líquida contém uma quantidade grande de hemicelulose incluindo xilo-oligossacarídeo neutro e xilo-oligossacarídeo ácido. Na etapa descrita abaixo, o xilo-oligossacarídeo neutro contido nesta camada líquida pode ser separado e purificado. Etapa de Separação e Purificação

[0090] A primeira etapa pode compreender adicionalmente uma etapa de separação e purificação realizada depois da etapa de despolimerização. Quando a primeira etapa compreende a etapa de filtração descrita acima, uma etapa de separação e purificação é preferivelmente provida depois da etapa de filtração.

[0091] A Fig. 2 é um fluxograma em que uma etapa de filtração é provida depois da etapa de despolimerização e uma etapa de separação e purificação é provida depois da etapa de filtração. A primeira etapa pode incluir uma etapa de separação e purificação imediatamente depois da etapa de despolimerização. Entretanto, a primeira etapa preferivelmente inclui uma etapa de filtração realizada depois da etapa de despolimerização; e inclui uma etapa de separar xilo-oligossacarídeo neutro do filtrado obtido e purificar o xilo-oligossacarídeo neutro. A etapa de filtração pode ser provida como uma parte da etapa de separação e purificação; ou pode ser provida como uma etapa que seja independente da etapa de separação e purificação, como mostrado na Fig. 2. A etapa de separação e purificação é uma etapa de separar e purificar xilo-oligossacarídeo neutro. Visto que o filtrado obtido na etapa de filtração contém vários sacarídeos, tais como xilo-oligossacarídeo ácido, além do xilo-oligossacarídeo neutro, a etapa de separação e purificação também é uma etapa de remoção de tais xilo-oligossacarídeos outros que não o xilo- oligossacarídeo neutro.

[0092] Na etapa de separação e purificação, por exemplo, a

24 / 37 cromatografia de troca iônica, cromatografia de afinidade, filtração em gel, tratamento de troca iônica, tratamento com membrana NF, tratamento com membrana UF, tratamento com membrana RO, tratamento com carvão ativado ou métodos semelhantes são preferivelmente usados. Na etapa de separação e purificação, também é preferível realizar os métodos acima em combinação. Em particular, quando a cromatografia de troca iônica é realizada na separação e purificação, xilo-oligossacarídeo neutro pode ser seletivamente separado e purificado. Na cromatografia de troca iônica, o xilo- oligossacarídeo ácido é adsorvido; consequentemente, o xilo-oligossacarídeo neutro pode ser principalmente obtido a partir do permeado. Mais especificamente, o líquido de açúcar é primeiro tratado com uma resina de troca catiônica forte para remover íons metálicos do líquido de açúcar. Subsequentemente, usando resina de troca aniônica forte, íons sulfato ou similares são removidos do líquido de açúcar. O líquido de açúcar resultante é tratado com uma resina de troca aniônica fraca para adsorver o xilo- oligossacarídeo ácido na resina. Etapa de Concentração

[0093] A primeira etapa pode compreender ainda uma etapa de concentração. A etapa de concentração é preferivelmente provida, por exemplo, depois a etapa de filtração e antes da etapa de separação e purificação, como mostrado na Figura 2. Quando a primeira etapa inclui uma tal etapa de concentração, a etapa de separação e purificação pode ser mais eficientemente realizada aumentando assim a eficiência de produção do polissulfato de pentosano.

[0094] Os exemplos da etapa de concentração incluem uma etapa de tratamento com membranas usando uma membrana NF, uma membrana de ultrafiltração, uma membrana de osmose reversa, ou os semelhantes; uma etapa de concentração usando evaporação etc.; e similares.

[0095] Na etapa de concentração, a solução é preferivelmente

25 / 37 concentrada, de modo que o teor do xilo-oligossacarídeo neutro seja 10% ou mais e 80% ou menos, e mais preferivelmente de 20% ou mais e 60% ou menos, com base na massa total do concentrado. Etapa de Desidratação

[0096] Na primeira etapa, o xilo-oligossacarídeo neutro pode ser obtido na forma de uma solução de xilo-oligossacarídeo neutro; ou pode ser submetido a uma etapa de desidratação e deste modo obtido na forma de um concentrado de xilo-oligossacarídeo neutro ou um pó de xilo-oligossacarídeo neutro. Quando um pó de xilo-oligossacarídeo neutro deva ser produzido, o método de produção preferivelmente compreende adicionalmente uma etapa de pulverização realizada depois da etapa de separação e purificação. Quando uma etapa de desidratação é incluída na presente invenção, a sulfatação na etapa de sulfatação descrita abaixo pode ser realizada mais eficientemente.

[0097] Na etapa de pulverização, a solução de xilo-oligossacarídeo neutro obtida na etapa de separação e purificação é tratada, por exemplo, usando um secador por pulverização, uma máquina de secagem por congelamento, uma máquina de secagem por ar quente ou um solvente orgânico solúvel em água, para se obter desse modo um pó de xilo- oligossacarídeo neutro. Segunda Etapa Etapa de Sulfatação

[0098] O xilo-oligossacarídeo neutro obtido na primeira etapa é sulfatado em uma segunda etapa para se obter desse modo o polissulfato de pentosano. Isto é, a segunda etapa compreende uma etapa de sulfatação.

[0099] O grau médio de polimerização do xilo-oligossacarídeo neutro a ser submetido à sulfatação é preferivelmente ajustado, como apropriado, de acordo com o peso molecular de polissulfato de pentosano a ser obtido como um produto final.

[00100] O grau médio de polimerização dos xilo-oligossacarídeos

26 / 37 neutros pode ser calculado dividindo-se a quantidade de açúcar total do xilo- oligossacarídeo neutro pela quantidade de açúcar redutor. No cálculo da quantidade de açúcar total, primeiro, uma solução de xilo-oligossacarídeo ácido é mantida a 50ºC e centrifugada a 15000 rpm durante 15 minutos. Em seguida, a quantidade de açúcar total do sobrenadante é quantificada pelo método do fenol-ácido sulfúrico (“Kangento no Teiryo-Ho (Método de Quantificar Açúcar Redutor)”; publicado por Gakkai Shuppan Center). A curva de calibração a ser usada na quantificação é produzida usando D-xilose (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). A quantidade de açúcar redutor é quantificada pelo método de Somogyi-Nelson (“Kangento no Teiryo-Ho (Método de Quantificar Açúcar Redutor)”; publicado pelo Gakkai Shuppan Center). A curva de calibração a ser usada nesta quantificação também é produzida usando D-xilose (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.).

[00101] Na etapa de sulfatação, ácido sulfúrico ou um derivado de ácido sulfúrico é adicionado à solução de xilo-oligossacarídeo neutro para sulfatar o xilo-oligossacarídeo neutro. Os exemplos de derivados do ácido sulfúrico incluem complexo de trióxido de enxofre piridina, ácido clorossulfônico e similares. Nesta etapa, a concentração da solução de xilo- oligossacarídeo neutro é preferivelmente 0,1 % em massa ou mais e 20 % em massa ou menos e ácido sulfúrico é preferivelmente adicionado à solução de xilo-oligossacarídeo neutro tendo uma tal concentração em uma quantidade de 0,1 % em massa ou mais e 50 % em massa ou menos. A solução de xilo- oligossacarídeo neutro depois da adição de ácido sulfúrico preferivelmente tem um pH de 7 ou mais. Etapa de Purificação Pós-Sulfatação

[00102] A segunda etapa pode compreender adicionalmente uma etapa de purificação pós-sulfatação realizada depois da sulfatação. Quando a segunda etapa inclui uma tal etapa de purificação pós-sulfatação, um polissulfato de pentosano de alta pureza pode ser obtido.

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[00103] Na etapa de purificação pós-sulfatação, por exemplo, centrifugação, filtração com membrana, diálise, tratamento com solvente orgânico solúvel em água, tratamento com carbono ativado ou método semelhante são preferivelmente usados. Entre estes, o tratamento com solvente orgânico solúvel em água e tratamento com carbono ativado são preferivelmente usados, porque o polissulfato de pentosano sulfonado pode ser seletivamente separado e purificado. Etapa de pulverização

[00104] Na segunda etapa, o polissulfato de pentosano sulfatado pode ser obtido na forma de uma solução de polissulfato de pentosano; ou pode ser submetido a uma etapa de pulverização e desse modo obtido na forma de um pó de polissulfato de pentosano. Quando um pó de polissulfato de pentosano deva ser produzido, a segunda etapa preferivelmente inclui adicionalmente uma etapa de pulverização realizada depois da etapa de purificação pós- sulfatação.

[00105] Na etapa de pulverização, a solução de polissulfato de pentosano obtida na etapa de purificação pós-sulfatação pode ser tratada, por exemplo, usando um secador por pulverização, uma máquina de secagem por congelamento, um máquina de secagem por ar quente, um solvente orgânico solúvel em água ou similares, para se obter desse modo um pó de polissulfato de pentosano.

[00106] O polissulfato de pentosano é obtido realizando-se a segunda etapa descrita acima. O polissulfato de pentosano assim obtido preferivelmente tem um teor de enxofre de 10 % em massa ou mais a 20 % em massa ou menos, com base na massa total do polissulfato de pentosano. O teor de enxofre do polissulfato de pentosano pode ser medido pelo método de combustão do frasco de oxigênio do General Tests of the Japanese Pharmacopoeia. Etapa de Desacetilação

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[00107] Na produção do polissulfato de pentosano, a desacetilação pode ser realizada. A etapa de desacetilação é preferivelmente realizada em qualquer estágio depois da etapa de despolimerização. A etapa de desacetilação pode reduzir o teor de grupo acetila do polissulfato de pentosano. Especificamente, a etapa de desacetilação é uma etapa de adicionar uma base a uma solução contendo uma substância obtida a partir de uma matéria-prima derivada de planta, tal como xilo-oligossacarídeo neutro, (também aqui aludido como uma “solução contendo xilo-oligossacarídeo neutro ou similares”) de modo a ajustar a solução até o pH 11 ou mais. Na etapa de desacetilação, a solução obtida depois da despolimerização, o filtrado obtido pela etapa de filtração, a solução contendo xilo-oligossacarídeo neutro depois da etapa de separação e purificação e antes da etapa de sulfatação, a solução contendo xilo-oligossacarídeo neutro depois da etapa de sulfatação (polissulfato de pentosano), ou similares pode ser ajustado para um pH de 11 ou mais. Entre estas soluções, quando a solução contendo xilo- oligossacarídeo neutro depois da etapa de separação/purificação e antes da etapa de sulfatação é ajustada até o pH 11 ou mais, um polissulfato de pentosano tendo uma qualidade estável e um teor reduzido de grupo acetila pode ser obtido, e os sítios onde grupos acetila foram ligados também podem ser sulfatados. Portanto, a eficiência de sulfatação e assim a eficiência de produzir o polissulfato de pentosano pode ser aumentada. Quando a solução contendo xilo-oligossacarídeo neutro obtida depois da etapa de sulfatação (polissulfato de pentosano) é ajustada até o pH 11 ou mais, a etapa de purificação pode ser realizada mais eficientemente. A solução contendo xilo- oligossacarídeo neutro ou similares é preferivelmente uma solução aquosa. A solução contendo xilo-oligossacarídeo neutro também pode ser aqui aludida como a solução do xilo-oligossacarídeo neutro.

[00108] O pH aplicado na etapa de desacetilação é preferivelmente pH 11 a 14, e mais preferivelmente pH 12 a 13. A solução a ser submetido a etapa

29 / 37 de desacetilação é preferivelmente mantida no pH 11 ou mais por 0,5 hora ou mais, mais preferivelmente no pH 11 ou mais por 1,0 hora ou mais, ainda mais preferivelmente no pH 11 ou mais por 2,0 horas ou mais, e de modo particularmente preferível no pH 11 ou mais por 3,0 horas ou mais. Em particular, quando o pH menor do que 12, a solução é preferivelmente mantida por 1,0 hora ou mais. As condições particularmente preferidas podem ser, por exemplo, condições nas quais a solução é mantida no pH 12 a 13 por 3 horas ou mais.

[00109] Enquanto a solução é mantida na faixa de pH descrita acima, a solução é preferivelmente agitada. A temperatura aplicada enquanto a solução é mantida na faixa do pH descrita acima não é particularmente limitada, mas é preferivelmente a temperatura ambiente.

[00110] Na etapa de desacetilação, uma base pode ser adicionada a uma solução a ser submetida à etapa de desacetilação (uma solução contendo xilo-oligossacarídeo neutro ou similares). A base a ser adicionada não é particularmente limitada, contanto que o pH desejado possa ser alcançado. A base é preferivelmente hidróxido de sódio.

[00111] A etapa de desacetilação pode compreender uma etapa de ajuste de pH de ajustar, a menos do que pH 11, o pH de uma solução que tenha pH 11 ou mais, que resulta da adição de uma base depois sendo mantida no pH descrito acima. Na etapa de ajuste de pH, a solução pode ser ajustada, por exemplo, até o pH 9 ou menos, pH 8 ou menos, pH 7 ou menos, pH 6 ou menos, pH 5 ou menos ou pH 4 ou menos. O ajuste pode ser realizado pela adição de um ácido. Os exemplos de ácidos usáveis incluem ácido clorídrico.

[00112] A etapa de desacetilação preferivelmente compreende uma etapa de dessalinização realizada depois da etapa de ajuste do pH. A dessalinização pode ser realizada, por exemplo, usando uma membrana de diálise ou uma membrana de NF.

[00113] A etapa desacetilação pode compreender adicionalmente uma

30 / 37 etapa de pulverizar o produto obtido para o tratamento subsequente. Outras Etapas Etapa de Ajuste do peso Molecular

[00114] O método para produzir polissulfato de pode compreender adicionalmente uma etapa de ajuste de peso molecular entre a primeira etapa e a segunda etapa. Quando o método para produzir polissulfato de pentosano inclui uma etapa desacetilação, a etapa de ajuste de peso molecular pode ser realizada antes ou depois da etapa de desacetilação. A Fig. 2 é um diagrama de fluxo incluindo uma etapa de ajuste de peso molecular entre a primeira etapa e a segunda etapa. Como mostrado na Fig. 2, na etapa de ajuste de peso molecular, o peso molecular do xilo-oligossacarídeo neutro obtido na primeira etapa é ajustado. Por exemplo, na etapa de ajuste de peso molecular, o peso molecular do xilo-oligossacarídeo neutro pode ser reduzido.

[00115] Na etapa de ajuste de peso molecular, um polissulfato de pentosano tendo um peso molecular médio ponderado de 1000 ou mais e 30000 ou menos pode ser obtido realizando-se, por exemplo, tratamento ácido, tratamento alcalino, tratamento enzimático, tratamento com membrana NF, tratamento com membrana UF, tratamento com membrana RO, tratamento de filtração em gel, tratamento com carbono ativado, tratamento de troca iônica, tratamento de eletrodiálise ou similares. Também é possível usar um método de coletar seletivamente polissulfato de pentosano tendo um peso molecular médio ponderado desejado realizando-se um tratamento com membrana ou similares na etapa de ajuste de peso molecular. Etapa de Separação e Purificação Pós-Ajuste de Peso Molecular

[00116] O método para produzir polissulfato de pentosano pode compreender adicionalmente uma etapa de separação e purificação pós-ajuste de peso molecular realizada depois da etapa de ajuste de peso molecular. Os exemplos da etapa de separação e purificação pós-ajuste de peso molecular podem incluir filtração em gel, tratamento de troca iônica, tratamento com

31 / 37 membrana NF, tratamento com membrana UF, tratamento com membrana RO, tratamento de eletrodiálise, tratamento com carbono ativado, tratamento com solvente orgânico solúvel em água, tratamento cromatográfico e similares. Quando o método de produção inclui uma tal etapa de separação e purificação pós-ajuste de peso molecular, o xilo-oligossacarídeo neutro tendo um peso molecular desejado obtido na etapa de ajuste de peso molecular pode ser seletivamente coletado e o polissulfato de pentosano tendo uma distribuição de peso molecular estreita pode ser eficientemente obtido. Exemplos

[00117] Os traços da presente invenção estão descritos abaixo mais especificamente com referência aos Exemplos de Produção. Os materiais, quantidades usadas, proporções, teor de tratamento, procedimentos de tratamento e similares descritos nos seguintes Exemplos de Produção podem ser apropriadamente trocados até o grau que tais mudanças não divirjam do espírito da presente invenção. Consequentemente, o escopo da presente invenção não deve ser interpretado como sendo limitada pelos seguintes exemplos específicos. Produção de Xilo-oligossacarídeo Neutro

[00118] Quarenta partes em massa de água foram adicionadas a 10 partes em massa de lascas de madeira (madeira dura) e um tratamento térmico foi realizado a 160ºC durante 3 horas. A mistura resultante foi depois submetida à separação sólido-líquido usando uma Prensa de Rosca (fabricada pela Shinryo Seisakusho: 250 × 1000 SPH-EN) e o filtrado foi recuperado. O filtrado foi filtrado através de um filtro de manga com uma taxa de mícron de 1 μm (fabricado pela ISP Filters). Depois 5 partes em massa de carbono ativado (PM-SX; fabricado pela Mikura Kasei Kabushiki Kaisha) foi adicionado ao filtrado obtido e um tratamento foi deixado prosseguir a 50ºC durante 2 horas, a mistura de reação, incluindo o carbono ativado, foi filtrado adicionalmente filtrado através de um filtro cerâmico com uma taxa de

32 / 37 mícrons de 0,2 μm (fabricado pela Nihon Pall Co., Ltd.) para recuperar um filtrado claro. Depois o filtrado claro foi concentrado 20 vezes com uma membrana de osmose reversa (NTR-7450; fabricada pela Nitto Denko Corporation) para se obter um líquido de açúcar concentrado, o líquido de açúcar concentrado foi passado na SV 1,5 através de um sistema de resina de troca iônica do tipo de 4 leitos 4 torres consistindo de uma resina catiônica forte (PK-218; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation), uma resina aniônica fraca (WA30; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation), uma resina catiônica forte (PK-218; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation) e uma resina aniônica fraca (WA30; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation) para deste modo recuperar uma solução de xilo- oligossacarídeo neutro. Hidróxido de sódio foi adicionado à solução de xilo- oligossacarídeo neutro obtida para alcançar um pH de 13 e a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante 3 horas para desacetilação. Depois ácido clorídrico foi adicionado à solução obtida para se obter um pH de menos do que 5 e o sal obtido foi removido usando uma membrana de diálise (Spectra/Por 7, membrana CE, MWCO 100-500; fabricado pela Spectrum), a mistura resultante foi pulverizada usando uma máquina de secagem por congelamento (fabricada pela Eyela). Produção de Xilo-oligossacarídeo Ácido

[00119] Quarenta partes em massa de água foi adicionada a 10 partes em massa de lascas de madeira (madeira dura) e um tratamento térmico foi realizado a 160ºC durante 3 horas. A mistura resultante foi depois submetida à separação de sólido-líquido usando uma Prensa de Rosca (fabricada pela Shinryo Seisakusho: 250 × 1000 SPH-EN) e o filtrado foi recuperado. O filtrado foi filtrado adicionalmente através de um filtro de manga com uma taxa de mícron de 1 μm (fabricado pela ISP Filters). Depois 5 partes em massa de carbono ativado (PM-SX; fabricado pela Mikura Kasei Kabushiki Kaisha) foram adicionadas para tratar o filtrado a 50ºC durante 2 horas, a

33 / 37 mistura de reação, incluindo o carbono ativado, foi filtrado adicionalmente através de um filtro cerâmico com uma taxa de mícron de 0,2 μm (fabricado pela Nihon Pall Co., Ltd.) para recuperar um filtrado claro. Depois o filtrado claro foi concentrado 20 vezes com uma membrana de osmose reversa (NTR- 7450; fabricada pela Nitto Denko Corporation) para se obter um líquido de açúcar concentrado, o líquido de açúcar concentrado foi passado a SV 1,5 através de um sistema de resina de troca iônica de 4 leitos 4 torres consistindo de uma resina catiônica forte (PK-218; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation), uma resina aniônica fraca (WA30; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation), uma resina catiônica forte (PK-218; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation) e uma resina aniônica fraca (WA30; fabricada pela Mitsubishi Chemical Corporation). O xilo-oligossacarídeo ácido foi adsorvido sobre a resina aniônica fraca da segunda e quarta torres. Uma solução aquosa a 50 mM de cloreto de sódio foi depois passada através da segunda e quarta torres em SV 1,5 para recuperar uma solução de xilo- oligossacarídeo ácido. Hidróxido de sódio foi adicionado à solução de xilo- oligossacarídeo ácido obtida para alcançar um pH de 13 e a mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante 3 horas para desacetilação. Depois ácido clorídrico foi adicionado à solução resultante para alcançar um pH de menos do que 5 e a dessalinização foi realizada usando uma membrana de diálise (Spectra/Por 7, membrana CE, MWCO 100-500; fabricado pela Spectrum), a mistura resultante foi pulverizada usando uma máquina de secagem por congelamento (fabricada pela Eyela). Produção de Polissulfato de Pentosano Sódio Exemplo 1

[00120] 25 mL de N,N-dimetilformamida, 12,4 g de complexo de trióxido de enxofre piridina e 1,5 g de pó de xilo-oligossacarídeo neutro produzido pelo método descrito acima foram colocados em um frasco separável de 100 mL e uma reação foi deixada prosseguir a 40ºC durante 3

34 / 37 horas. Depois de esfriar, a mistura de reação obtida foi adicionada às gotas a 500 mL de etanol. O precipitado gerado foi coletado pela filtração e 30 mL de água foram adicionados para dissolver o precipitado nesse ponto. Uma solução de hidróxido de sódio foi adicionada à solução obtida para alcançar um pH de 10. A solução resultante foi adicionada às gotas a 500 mL de etanol e o precipitado obtido foi depois coletado pela filtração. Em seguida, 30 mL de água foram adicionados para dissolver o precipitado nesse ponto; e carbono ativado foi adicionado à solução e agitados, seguido pela filtração. O filtrado foi concentrado usando um evaporador e pulverizado usando uma máquina de secagem por congelamento (fabricada pela Eyela). Exemplo 2

[00121] Polissulfato de pentosano sódico foi obtido da mesma maneira como no Exemplo 1, exceto que uma mistura de 1,125 g de pó de xilo- oligossacarídeo neutro e 0,375 g de xilo-oligossacarídeo ácido foi usada no lugar de 1,5 g do pó de xilo-oligossacarídeo neutro do Exemplo 1. Exemplo 3

[00122] Polissulfato de pentosano sódico foi obtido da mesma maneira como no Exemplo 1, exceto que uma mistura de 0,75 g de pó de xilo- oligossacarídeo neutro e 0,75 g de xilo-oligossacarídeo ácido foi usada no lugar de 1,5 g do pó de xilo-oligossacarídeo neutro do Exemplo 1. Exemplo Comparativo 1

[00123] Polissulfato de pentosano sódico foi obtido da mesma maneira como no Exemplo 1, exceto que uma mistura de 0,375 g de pó de xilo- oligossacarídeo neutro e 1,125 g de xilo-oligossacarídeo ácido foi usada no lugar de 1,5 g do pó de xilo-oligossacarídeo neutro do Exemplo 1. Exemplo Comparativo 2

[00124] Polissulfato de pentosano sódico foi obtido da mesma maneira como no Exemplo 1, exceto que pó de xilo-oligossacarídeo ácido foi usado no lugar do pó de xilo-oligossacarídeo neutro do Exemplo 1.

35 / 37 Teor de Ácido Urônico

[00125] Cerca de 10 mg de polissulfato de pentosano sódico obtido em cada um dos Exemplos foram pesados e dissolvidos em água destilada para completar o volume exatamente até 25 mL. 1 mL de cada solução foi colocada em um tubo de teste. Enquanto a solução foi resfriada em água gelada, 5 mL de uma solução de 0,025 M de tetraborato de sódio em ácido sulfúrico foi adicionado e misturado e a mistura resultante foi aquecida em um banho de água durante 10 minutos. Imediatamente depois do aquecimento, a mistura resultante foi esfriada em gelo e 0,2 mL de um reagente de carbazol foi adicionado e misturado. A mistura resultante foi aquecida em um banho de água durante 15 minutos e depois deixada esfriar para se obter uma solução da amostra. Separadamente, soluções de estoque padrão de ácido glicurônico em uma concentração de 10 a 100 μg/mL foram preparados e submetidos ao mesmo procedimento como acima para se obter soluções padrão. 1 mL de água destilada também foi submetido ao mesmo procedimento e o líquido resultante foi usado como um controle. A absorbância em um comprimento de onda de 530 nm foi medida. As curvas de calibração foram preparadas a partir da absorbância das soluções padrão e a quantidade de ácido glicurônico (μg) foi determinada. O teor de ácido urônico (% em massa) foi calculado de acordo com a seguinte fórmula. Quando o valor quantitativo foi negativo, o mesmo foi considerado como 0%. Teor de Ácido Urônico (% em massa) = Quantidade de ácido glicurônico (μg)/(Quantidade pesada de polissulfato de pentosano sódico (mg) x 1/25)/10 Teor de enxofre

[00126] O teor de enxofre foi medido pelo método de combustão do frasco de oxigênio descrito na Farmacopeia Japonesa. Peso Molecular Médio

[00127] O peso molecular médio ponderado (Mw) de polissulfato de pentosano foi medido pela GPC (cromatografia de permeação em gel). Uma

36 / 37 YMC-Pack Diol-300 e YMC-Pack Diol-60 (ambas fabricadas pela YMC) conectadas uma à outra pode ser usada como uma coluna GPC. A GPC foi realizada sob as seguintes condições.

[00128] Eluente: 25 mM de di-hidrogeno fosfato de potássio/25 mM de hidrogeno fosfato de dipotássio/50 mM de cloreto de potássio Taxa de fluxo: 0,7 mL/min Temperatura de medição: 40ºC Detector: detector de índice refrativo Tabela 1 Exemplo Exemplo Exemplo 3 Exemplo 2 Exemplo 1 Comparativo 2 Comparativo 1 Peso molecular médio 2781 2487 2387 2168 2053 ponderado Teor de ácido urônico (% 12,61 7,94 5,67 1,64 0,00 em massa) Teor de enxofre (% em 13,28 14,33 15,12 15,09 15,34 massa) Atividade Anti-II (IU/mg) 0,3361 0,2398 0,1722 0,1254 0,0301 Atividade Anti-Xa (IU/mg) 0,2246 0,2260 0,2563 0,2579 0,2381 Razão de atividade anti- 0,668 0,942 1,488 2,056 7,910 Xa/anti-II

[00129] As Figs. 3 e 4 são gráficos mostrando a relação entre o teor de ácido urônico e a atividade anti-IIa, atividade anti-Xa ou razão de atividade anti-Xa/anti-IIa de cada polissulfato de pentosano sódico obtido nos Exemplos e Exemplos Comparativos acima.

[00130] Como pode ser observado a partir dos resultados mostrados na Tabela 1 e Fig. 4, quanto mais baixo o teor de ácido urônico, mais alta a razão de atividade anti-Xa/anti-IIa. Tabela 2 Exemplo Exemplo Exemplo 3 Exemplo 2 Exemplo 1 Comparativo 2 Comparativo 1 Rendimento (g) 2,40 2,24 2,89 3,02 3,85

[00131] A Tabela 2 mostra os rendimentos quando o pó de polissulfato de pentosano sódico foi obtido a partir do pó de xilo-oligossacarídeo. Os resultados da Tabela 2 claramente mostram que como o teor de ácido urônico foi mais baixo, polissulfato de pentosano sódico foi obtido em uma quantidade maior (com um rendimento mais alto).

37 / 37 Estabilidade

[00132] 2 mL de uma solução aquosa a 100 mg/mL de polissulfato de pentosano sódico foram colocados em um frasco de 5 mL e armazenado a 40ºC durante 4 semanas. As propriedades de aparência da solução foram confirmadas. Tabela 3 Ex. Comp. 2 Ex. Comp. 1 Exemplo 3 Exemplo 2 Exemplo 1 Propriedades de aparência Transparente Transparente Transparente Transparente Transparente da solução (inicial) incolor incolor incolor incolor incolor Propriedades de aparência Levemente Levemente Transparente Transparente Transparente da solução (2 semanas de amarela amarela incolor incolor incolor armazenagem a 40ºC) transparente transparente

[00133] Os resultados da Tabela 3 claramente mostram que as soluções aquosas de polissulfato de pentosano sódico tendo um alto teor de ácido urônico (Exemplos Comparativos 1 e 2) viraram para amarelo depois da armazenagem La 40ºC durante 4 semanas; ao passo que as soluções aquosas de polissulfato de pentosano sódico tendo um teor de ácido urônico baixo (Exemplos 1 a 3) não exibiram nenhuma mudança e foram estáveis. Este resultado sugere que o polissulfato de pentosano da presente invenção (incluindo o polissulfato de pentosano em outras formas, tais como um pó) é menos susceptível aos efeitos adversos da umidade e é altamente estável.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Polissulfato de pentosano, caracterizado pelo fato de que compreende uma unidade de β-D-xilopiranose, e tem um teor de ácido urônico de 0,0 % em massa a 2,0 % em massa; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Polissulfato de pentosano de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o polissulfato de pentosano tem um teor de ácido urônico de 0,0 % em massa a 4,0 % em massa; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Polissulfato de pentosano de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que X é sódio; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é um sal de sódio.

4. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o polissulfato de pentosano como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 2 e 3; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Anticoagulante, caracterizado pelo fato de que compreende o polissulfato de pentosano como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 2 e 3; um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; ou um solvato farmaceuticamente aceitável do polissulfato de pentosano ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Método para produzir polissulfato de pentosano, caracterizado pelo fato de que compreende: uma primeira etapa de obter um xilo-oligossacarídeo neutro a partir de uma matéria prima derivada de planta; e uma segunda etapa de obter polissulfato de pentosano a partir do xilo-oligossacarídeo neutro, a primeira etapa compreendendo uma etapa de despolimerizar a matéria prima derivada de planta e a segunda etapa compreendendo uma etapa de sulfatar o xilo-oligossacarídeo neutro.

7. Método para produzir polissulfato de pentosano de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que a etapa de despolimerização é uma etapa de tratamento térmico.

8. Método para produzir polissulfato de pentosano de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a etapa de tratamento térmico é uma etapa de aquecer a 120ºC ou mais alto sob condições não alcalinas.

9. Método para produzir polissulfato de pentosano de acordo com em qualquer uma das reivindicações 6 a 8, caracterizado pelo fato de que a matéria prima derivada de planta é uma matéria prima derivada de madeira.