BR112019023789A2

BR112019023789A2 - anticorpos anti-cd33 e métodos de uso dos mesmos

Info

Publication number: BR112019023789A2
Application number: BR112019023789-5A
Authority: BR
Inventors: Patricia Culp; Helen Lam; Arnon Rosenthal; Seung-Joo Lee; Nels P. Nielson; Robert Pejchal
Original assignee: Alector Llc
Priority date: 2017-08-03
Filing date: 2018-08-02
Publication date: 2020-07-28
Also published as: US10711062B2; US20210139581A1; ECSP19078414A; PH12019502463A1; CL2019003095A1; JP7299160B2; JP2023134445A; CN110662765B; IL270238B; IL289882A; CL2020001619A1; CN117700548A; PE20200486A1; JP2020532947A; MA47691A; CL2021003535A1; EP3589658A1; US20190040131A1; US11254743B2; WO2019028283A1

Abstract

A presente refere-se, de modo geral, a composições que incluem anticorpos, por exemplo, anticorpos humanizados monoclonais, quiméricos, fragmentos de anticorpos, etc., que se ligam especificamente a um ou mais epítopos dentro de uma proteína CD33, por exemplo, CD33 humana ou uma CD33 de mamífero, e têm características funcionais aprimoradas e/ou potencializadas, e ao uso dessas composições na prevenção, redução do risco, ou tratamento de um indivíduo em necessidade das mesmas.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "ANTICORPOS ANTI-CD33 E MÉTODOS DE USO DOS MESMOS".

REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido Provisório US Nº 62/541,024, depositado em 3 de agosto de 2017 e 62/667,388 apresentado em 4 de maio de 2018, que são incorporados a título de referência em sua totalidade.

SUBMISSÃO DA LISTAGEM DE SEQUÊNCIA NO ARQUIVO DE TEXTO ASCII

[002] O conteúdo da seguinte submissão em arquivo de texto ASCII é incorporado neste documento a título de referência em sua totalidade: um formulário legível por computador (CRF) da Listagem de Sequência (nome do arquivo: 735022001740SEQLIST.TXT, data de gravação: 2 de agosto de 2018, tamanho: 185 KB).

CAMPO DA INVENÇÃO

[003] A presente descrição refere-se a anticorpos anti-CD33 e usos terapêuticos de tais anticorpos.

ANTECEDENTES

[004] O precursor do antígeno CD33 da superfície celular mieloidemieloide (CD33), também conhecido como Siglec-3, é uma proteína transmembranar do tipo 1, semelhante à imunoglobulina, expressa em células imunes e hematopoiéticas, incluindo células mieloides imaturas e maduras, células dendríticas e células microgliais. (Crocker et al. (2007) Nat Rev Immunol. 7:255-266; McMillan and Crocker (2008) Carbohydr Res. 343:2050-2056; Von Gunten and Bochner (2008) Ann NY Acad Sci. 1143:61-82; Handgretinger et al. (1993) Immuno!l Lett. 37:223—228; and Hernández-Caselles et al. (2006) J Leukoc Biol. 79:46-58). O CD33 contém um domínio extracelular do tipo C2 do tipo Ig (semelhante à imunoglobulina) e um tipo V do tipo Ig

(semelhante à imunoglobulina), bem como dois motivos semelhantes ao ITIM em seu domínio citoplasmático. Foram identificadas três formas unidas alternativamente (isoformas) de CD33, incluindo uma variante de maior peso molecular, denominada CD33M, e uma isoforma menor CD33m, que não possui o domínio do tipo V do tipo Ig (o local de ligação ao ligante) e o ligante da ligação dissulfeto os domínios Ve C.

[005] Os estudos de associação genômica (GWAS) realizados em coortes estendidos (por exemplo, milhares de indivíduos) identificaram polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) rs3865444CC (AKA rs3826656) and rs3865444M4A em CD33 como moduladores genéticos de risco para doença de Alzheimer (DA) de início tardio. Na oncologia, as variantes de CD33 que levam à diminuição da expressão de CD33 demonstraram estar associadas a uma melhor taxa de sobrevida da leucemia mieloide aguda pediátrica (AML). A taxa de sobrevida global em três anos da remissão é de 84% +/- 8% para aqueles portadores da variante rs35112940ºº, que está em forte desequilíbrio de ligação com a variante rs38654444A, associada à menor expressão completa de CD33. A taxa de remissão para o alelo não protetor é de 68% +/- 15%. Os portadores do alelo protetor também apresentam menor risco de recaída e sobrevida livre de doença superior. Da mesma forma, pacientes homozigotos para o alelo variante menor (TT) do rs12459419, que está associado a uma expressão 46% mais baixa do CD33 completo, têm maior probabilidade de ter um resultado favorável da doença do que os portadores das variantes CC e CT (52% vs. 31%) e têm expressão de CD33 da explosão diagnóstica significativamente menor do que outros genótipos. Esse é o caso mesmo em pacientes em tratamento com anticorpo anticCD33 e um derivado tóxico da caliqueamicina-gama (Mortland et al., (2013) Clin Cancer Res; 1-8). Portadores do alelo 2459419”, bem como portadores do alelo rs12459419C”, que mostram mais de 25% de redução na expressão de

CD33 de comprimento total, também exibem risco reduzido de doença de Alzheimer (Malik M. et al. (2015) Human Molecular Genetics,1—14). Isso sugere que a expressão ou funcionalidade reduzida de CD33 pode ser benéfica na doença de Alzheimer e no câncer.

[006] Por conseguinte, existe a necessidade de anticorpos terapêuticos anti-CD33 para tratar doenças, distúrbios e condições associadas com a atividade da CD33 indesejada.

[007] Todas referências citadas neste documento, incluindo patentes e pedidos de patente são incorporadas neste documento a título de referência em sua totalidade.

SUMÁRIO

[008] A presente descrição é geralmente direcionada a composições que incluem anticorpos, por exemplo, anticorpos monoclonais, quiméricos, humanizados, fragmentos de anticorpos, etc., que se ligam especificamente à CD33 humana e aos métodos de uso de tais composições.

[009] Certos aspectos da presente descrição são baseados, pelo menos em parte, na identificação de anticorpos anti-CD33 com características funcionais melhoradas e/ou aprimoradas (por exemplo, em relação a um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência SEQ ID Nº: 104), incluindo, por exemplo, capacidades melhoradas e/ou aprimoradas de diminuir os níveis de CD33 na superfície celular de células imunes primárias humanas e/ou cinética de ligação melhorada e/ou aprimorada. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para CD33 humana que é pelo menos 9 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para CD33 humana que é pelo menos 3 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para CD33 humana que é pelo menos 3 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição reduzem os níveis da superfície celular de CD33 in vitro com uma ECrso que é pelo menos cerca de 50% menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº:34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição reduzem os níveis da superfície celular de CD33 in vitro com uma ECrso que é pelo menos cerca de 10% menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº:40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição reduzem os níveis da superfície celular de CD33 in vitro com uma ECrso que é pelo menos cerca de 10% menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº:52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição reduzem os níveis da superfície celular de CD33 in vitro com uma ECso que é pelo menos cerca de 10 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº:103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104, conforme medido por citometria de fluxo. Vantajosamente, os anticorpos anti-CD33 diminuem os níveis celulares de CD33 in vitro com uma concentração efetiva semimáxima (EC5o) que varia de cerca de 151,1 pM a cerca de 4,1 pM, ligam-se a células humanas (como células dendríticas primárias humanas) e têm uma constante de dissociação (Kp) para CD33 humana que varia de cerca de 8,57 nM a cerca de 202 pM.

[0010] Por conseguinte, em um aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula |: GX1X2X3TDYNXCH (SEQ ID Nº: 152), em que X1 é Y, A, ou V, Xcé Tou A, Xg é F, E, ou H, e Xa é L, EF, Y, ou N; uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula |l: FIYPX NX2IX3G (SEQ ID Nº: 153), em que X1 é Sou A, X2 é G, Q, R, ou V,eX;éTouR; e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Ill: SK-VDYFDX,> (SEQ ID Nº: 154), em que X1 é T,D, F, ou S, e Xoé Y, D, ou L; e em que o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121).

[0011] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, onde a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula IV: XX2SQX3VX1X5sSTYSYMH (SEQ ID Nº: 155), em que X: é Rou K, X2 é A, G, ou V, Xgé Sou D, Xa é S, G, ou H, e Xs é T ou A; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula V: YX1X2X3X4aX5S (SEQ ID Nº: 156), em que X1 É A, V, ou E, Xcé S, V, ou F, Xg é N, A, Y, ou F, Xa é Lou Ve Xs é E, G/ouN;e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula VI: XIHSX2X3X4PLXs (SEQ ID Nº: 157), em que Xx é Qou E, X2 é WouE, X3 é EouA,XélouL,eXséToukE;e que o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia leve que compreende uma HVR-L1 que compreende a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº 127), uma HVR-L2 que compreende a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e uma HVR- L3 que compreende a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[0012] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de acordo com para a Fórmula |: GX1X2X3TDYNXCH (SEQ ID Nº: 152), em que X: é Y, A, ou V, Xcé Tou A, Xg é F, E, ou H, e Xa é L, F, Y, ou N; uma HVR- H2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula |l: FIYPX:NX2IX3G (SEQ ID Nº: 153), em que X1 é Sou A, X2 é G, Q, R, ou V,eX;: é TouR; e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Ill: SKVDYFDX,> (SEQ ID Nº: 154), em que X1 é T, D, Ff, ou S, e Xco é Y, D, ou L; e a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula IV: XX>SQX3VX.XsSTYSYMH (SEQ ID Nº: 155), em que X: é Rou K, X2 é A, G, ou V, Xgé Sou D, X4 é S, G, ou H, e XKsé T ou A; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula V: YX1X2X3X4X5S (SEQ ID Nº: 156), em que X1 é A, V ou E, X2éS,V,ouF, Xgé N, A, Y, ou F, Xa é Lou V, e Xsé E, G, ou N; e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula VI: XIHSX2X3X4PLXs (SEQ ID Nº: 157), em que X1 é Qou E, Xxé Wou E, X3 É EouA, XélouL,eXséTouE; e em que o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[0013] E outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende a HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-

14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-

63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-

64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado nas Tabelas 3A a 3C).

[0014] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um antiorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia leve compreende a HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.3, AB-

14.4, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-

63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.2, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, ou AB-64.8 (conforme mostrado nas Tabelas 4A a 4C).

[0015] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um antiorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende a HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-

64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-

64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-

64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado nas Tabelas 3A a 3C); e a região variável de cadeia leve compreende a HVR-L1, HVR- L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.3, AB-14.4, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, ou AB-64.8 (conforme mostrado nas Tabelas 4A a 4C).

[0016] Em outro aspeto, a presente descrição se refere a um antiorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3, em que o anticorpo compreende a HVR-H1, HVR-H2, HVR-H3, HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-

63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-

64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-

64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-

64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado nas Tabelas 3Aa 3C e4Aa4C).

[0017] Outros aspectos da presente descrição referem-se a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende CDRs de Kabat; e/ou a região variável de cadeia leve compreende CDRs de Kabat. Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma CDR-H1 compreendendo a sequência de DYNLH (SEQ ID Nº 190), uma CDR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITGYAQKFQ (SEQ ID Nº: 194); e uma CDR-H3 compreendendo a sequência de YCARSDVD (SEQ ID Nº: 191). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende uma CDR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma CDR-L2 compreendendo a sequência de LLIKYAS (SEQ |D Nº 192) e um CDR-HL3 compreendendo a sequência de VYYCQHSWE (SEQ ID Nº: 193). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma CDR-H1 compreendendo a sequência de DYNLH (SEQ ID Nº: 190) uma CDRH2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITGYAQKFQ (SEQ ID Nº 19) e uma CDR-H3 compreendendo a sequência de YCARSDVD (SEQ ID Nº: 191); e a região variável de cadeia leve compreende uma CDR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma CDR-L2 compreendendo a sequência de LLIKYAS (SEQ ID Nº: 192); e um CDR-L3 compreendendo a sequência de VYYCQHSWE (SEQ ID Nº: 193).

[0018] Outros aspectos da presente descrição referem-se a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende CDRs de Kabat; e/ou a região variável de cadeia leve compreende CDRs de Kabat. Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma CDR-H1 compreendendo a sequência de DYNLH (SEQ ID Nº 190), uma CDR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITGYAQKFQ (SEQ ID Nº: 195); e uma CDR-H3 compreendendo a sequência de YCARSDVD (SEQ ID Nº: 191). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende uma CDR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma CDR-L2 compreendendo a sequência de LLIKYAS (SEQ ID Nº 192); e um CDR-L3 compreendendo a sequência de VYYCQHSWE (SEQ ID Nº: 193). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma CDR-H1 compreendendo a sequência de DYNLH (SEQ ID Nº: 190), uma CDRH2 compreendendo a sequência de FIYPSNRITGYAQKFQ (SEQ I|D Nº 195) e uma CDR-H3 compreendendo a sequência de YCARSDVD (SEQ ID Nº: 191) ea região variável de cadeia leve compreende uma CDR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma CDR-L2 compreendendo a sequência de LLIKYAS (SEQ ID Nº: 192); e um CDR-L3 compreendendo a sequência de VYYCQHSWE (SEQ ID Nº: 193).

[0019] Outros aspectos da presente descrição referem-se a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende CDRs de Kabat; e/ou a região variável de cadeia leve compreende CDRs de Kabat. Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma CDR-H1 compreendendo a sequência de DYNLH (SEQ ID Nº 190), uma CDR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNQITGYAQKFQ (SEQ ID Nº: 196); e uma CDR-H3 compreendendo a sequência de YCARSDVD (SEQ ID Nº: 191). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende uma CDR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma CDR-L2 compreendendo a sequência de LLIKYAS (SEQ |D Nº 192) e um CDR-L3 compreendendo a sequência de VYYCQHSWE (SEQ ID Nº: 193). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma CDR-H1 compreendendo a sequência de DYNLH (SEQ ID Nº: 190) uma CDR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNQITGYAQKFQ (SEQ ID Nº 196); e uma CDR-H3 compreendendo a sequência de YCARSDVD (SEQ ID Nº: 191) e a região variável de cadeia leve compreende uma CDR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma CDR-L2 compreendendo a sequência de LLIKYAS (SEQ ID Nº: 192); e um CDR-L3 compreendendo a sequência de VYYCQHSWE (SEQ ID Nº: 193).

[0020] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas entre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FR4, em que: VH FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VII: QVALVASGAEVKKPGX;SVKX2SCKAS (SEQ ID Nº: 158), em que X é AousS,eX é Voul; VH FR2 compreende uma sequência de SEQ ID Nº: 5; VH FR3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VII:

KIAK2K3XaXsXeRX7TXgTVDXaX10X11STX12Y MELSSLRSED TAVYYCAR (SEQ ID Nº: 159), em que X: é Y ou S, Xcé Qou E, Gg é K ou D, X4 é Fou D, Xs é Q, F, E, ou T, Xe é G, D, ou H, Xr é Vou A, Xg é M ou L, Xs é T, N, ou Q, Xin é Sou P, X11 é Tou A, e Xi2é Vou A; e VH FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula IX: WGQGTLX:TVSS (SEQ ID Nº: 160), em que X1 é V ou L; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3, e VL FR4, em que: VL FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula X: XIIX2X3 TASPXaSLXsXeSXK7 SXgRXgTIX10C (SEQ ID Nº: 161), em que X1 é Dou G, Xxé Qou V, Xgé MouL, Xa é Sou D, Xs é S, P, ou A, Xgé À ou V, Xr é VouL, Xgé Dou E, Xsé Vou A, e X1o é T, N, ou D; VL FR2 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula Xl: WYQQKPGX:X2PKLLIK (SEQ ID Nº: 162), em que X1 é Kou Q, e Xo é A ou P; VL FR3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula XII: GVYPX:IRFSGSGSGTDFTLTISSLQOX2EDX3AX.:YYC (SEQ ID Nº: 163), em que X é Sou D, Xcé Pou A, Xg é F, L, ou V e Xa é TouV;e VL FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula XIII: FGQGTKLEIX: (SEQ ID Nº: 164), em que X: é Kou E.

Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas entre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FRA4, em que: VH FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº“: 2-4; VH FR2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5; VH FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 6-19; e VH FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 20-21; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas entre VL FR1, VL FR2, VL FR3 e VL FR4, em que: VL FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 22 -26; VL FR2 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 27-28; VL FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 29-31; e VL FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 32-33.

[0021] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 34-72; e/ou uma região variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 77-101. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende a região variável de cadeia pesada do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-

14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 7); e/ou o anticorpo compreende a região variável de cadeia leve do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-

14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 8). Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a HVR- H1 compreende a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ |D Nº: 105), a HVR-H2 compreende a sequência de aminoácidos FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119), a HVR-H3 compreende a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), a HVR-L1 compreende a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), a HVR-L2 compreende a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e a HVR-L3 compreende a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146); ou a HVR-H1 compreende a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), a HVR-H2 compreende a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118), a HVR-H3 compreende a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), a HVR-L1 compreende a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), a HVR-L2 compreende a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e a HVR-L3 compreende a sequência e aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[0022] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que: a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1 compreendendo a sequência e aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119) e uma HVR- H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122) e a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146); ou a cadeia pesada compreende uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR- H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência e aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), e a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR- L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[0023] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um antiorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 34-72; e/ou uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 77-101. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende a região variável de cadeia pesada do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-

14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-

63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-

64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 7); e/ou o anticorpo compreende a região variável de cadeia leve do anticorpo AB-

14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 8). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59 e/ou a região variável de cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; ou a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65 e/ou a região variável de cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86.

[0024] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº“: 34, 40, 42, 52, 53, e 73-76; e/ou uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 77, 86 e 102. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende a região variável de cadeia pesada de AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 ou AB-H66 (conforme mostrado na Tabela 7); e/ou o anticorpo compreende a região variável de cadeia leve do anticorpo AB-H2, AB- H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 ou AB-H66 (conforme mostrado na Tabela 8).

[0025] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compete com um ou mais anticorpos selecionados do grupo consistindo em AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB- H65, AB-H66, e qualquer combinação destes pela ligação à CD33.

[0026] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga essencialmente a uma proteína CD33, em que o anticorpo se liga essencialmente ao mesmo epítopo de CD33 selecionado do grupo consistindo em AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-

14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 e AB-H66.

[0027] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de acordo com para a Fórmula |: GX1X2X3TDYNXCH (SEQ ID Nº: 186), em que X: é YouV, Xcé Tou A, Xgé F, E, ou H, e Xa é L, F, Y, ou N; uma HVR- H2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula |l: FIYPX NX2IX3G (SEQ ID Nº: 153), em que X1 é Sou A, X2 é G, Q, R, ou V,eX;éTouR; e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Ill: SKVDYFDX, (SEQ ID Nº: 187), em que X1 é T, D, ou F, e Xcé Y, D, ou L; e em que a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula IV: XiX2SQX3VXaX5sSTYSYMH (SEQ ID Nº: 188), em que X: é Rou K, X2 é A, G, ou V, Xgé Sou D, Xa é S, G, ou H, e Xs é T; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula V: YX1X2X3XaX5S (SEQ ID Nº: 189), em que X1 é Aou E, Xcé S ou F, X3 é NY, ouF,XéLouV, eXéEouN e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula VI: XIHSX2X3X4PLXs (SEQ ID Nº: 157), em que X: é Qou E, XXé Wou E, Xz É EouA Xéloul,eXséTouE.

[0028] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo um aminoácido sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 105 e 108-114; uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 115-120; e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 121-123 e 125-126; e a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste nas SEQ ID

Nº: 127-128 e 130-134; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada a partir do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 135 e 140-145; e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 146-

151.

[0029] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas entre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FRA4, em que: VH FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VII: QVALVAOSGAEVKKPGX;SVKX2SCKAS (SEQ ID Nº: 158), em que X1éAouSeX éVoul; VHFR2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5; VH FR3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VIII: KIAK2K3XaXsXeRXK7TX8TVDXaX10X11STX12Y MELSSLRSED TAVYYCAR (SEQ ID Nº: 159), em que X; é Y ou S, Xoé Qou E, Xg é K ou D, Xa« F ou D, Xs é Q, F, E, ou T, Xeé G, D, ou H, Xx é Vou A, Xsé M ou L, Xs é T, N, ou Q, X1né S ou P, X11 é Tou A, e Xi2é Vou A; e VH FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula IX: WGQGTLX:TVSS (SEQ ID Nº: 160), em que X1: é V ou L; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3, e VL FR4, em que: VL FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula X: X1IIX2X3 TASPXaSLXsXeSX7GXgRX9TIX10C (SEQ ID Nº: 161), em que X1 é D ou G, Xoé Q ou V, X3 é MouL, Xs é SouD, Xs é S, P, ou A, Xgé À ou V, Xr é VouL, Xsé Dou E, Xçé Vou A, e Xi1ioé T, N, ou D; VL FR2 compreende uma sequência de acordo com a fórmula Xl: WYQQKPGX:X2PKLLIK (SEQ ID Nº: 162), em que Xxé Kou Q, e Xo é A ou P; VL FR3 compreende uma sequência de acordo com a fórmula XII: GVYPX:IRFSGSGSGTDFTLTISSLQOX2EDX3AX.:YYC (SEQ ID Nº:

163), em que X: é Sou D, Xcé Pou A, Xg é F, L, ou V e Xx é TouV;e VL FR4 compreende uma sequência de acordo com a fórmula XIII: FGQGTKLEIX: (SEQ ID Nº: 164), em que Xré Kou E.

[0030] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas entre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FR4, em que: VH FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 2-4; VH FR2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5; VH FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 6-19; e VH FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 20-21; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três ou quatro regiões de estrutura principal selecionadas entre VL FR1, VL FR2, VL FR3 e VL FR4, em que: VL FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 22 -26; VL FR2 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 27-28; VL FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 29-31; e VL FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 32-33. Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a região variável de cadeia pesada compreende uma VH FR3 compreendendo uma sequência selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID Nº: 12-15.

[0031] Em outro aspecto, a presente descrição relata um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 38 e 40- 72; e/ou uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ

ID Nº: 86-101.

[0032] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 58 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada que compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59 e uma região variável de cadeia leve que compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada que compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 66 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência e aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 67 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 68 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 ou uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 69 e uma cadeia leve região variável compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86.

[0033] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo é da classe IgG, da classe IgM ou da classe IgA. Em algumas modalidades, o anticorpo é da classe IgG e possui um isotipo IgG1, IgG2, IgG3 ou IgG4. Em algumas modalidades, o anticorpo tem um isotipo IgG4, e em que o anticorpo compreende uma substituição de aminoácido S228P na posição do resíduo 228, uma substituição de aminoácido F234A na posição do resíduo 234, e uma substituição de aminoácido L235A na posição do resíduo 235, em que a numeração da posição dos resíduos está de acordo com a numeração UE.

Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma ou mais substituições de aminoácidos na região Fc em uma posição de resíduo selecionada do grupo que consiste em: C127S, L234A, L234F, L235A, L235E, S267E, K322A, L328F, A330S, P331S, E345R, E430G, S440Y e qualquer combinação destes, em que a numeração dos resíduos é de acordo com a numeração UE ou de Kabat.

Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos na posição E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração da UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições L243A, L235A e P331A, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração da UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições L243A, L235A, P331A e E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições K322A e E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições A330S, P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições K322A, A330S e P331S, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições K322A, P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração da UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos na posição E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições A330S, P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições S267E e L328F, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos na posição C127S, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; ou a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições ES45R, E430G e S440Y, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE; ou a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições L243A, L235A e P331S, em que a numeração da posição do resíduo é de acordo com a numeração UE.

[0034] Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 176 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 177 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 178 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína

CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 179 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 180 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 181 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 182 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 183 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 184 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 197 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID

Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 198 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 199 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 200 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 201 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 202 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 203 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 204 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185. Em outro aspecto, a presente descrição se refere a um anticorpo que se liga a uma proteína CD33, em que o anticorpo compreende uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 205 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 185.

[0035] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a proteína CD33 é uma proteina de mamífero ou uma proteína humana. Em algumas modalidades, a proteína CD33 é uma proteína do tipo selvagem. Em algumas modalidades, a proteína CD33 é uma variante que ocorre naturalmente. Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, a proteína CD33 é expressa em uma ou mais células selecionadas do grupo que consiste em células dendríticas humanas, macrófagos humanos, monócitos humanos, osteoclastos humanos, neutrófilos humanos, células T humanas, célula T auxiliar humana, células T citotóxicas humanas, granulócitos humanos e microglia humana.

[0036] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo se liga especificamente a uma proteína CD33 humana. Em algumas modalidades, o anticorpo se liga a uma proteína CD33 humana e não reage de maneira cruzada com um ortólogo ou homólogo de CD33 de outra espécie. Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo é um fragmento de anticorpo que se liga a um epítopo que compreende resíduos de aminoácidos no CD33 humana ou em uma proteína CD33 de mamífero. Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo é um fragmento de anticorpo que se liga a uma ou mais proteínas humanas selecionadas do grupo que consiste em CD33 humana, uma variante de CD33 humana natural e uma variante da doença de CD33 humana. Em algumas modalidades, o fragmento de anticorpo é reticulado a um segundo fragmento de anticorpo que se liga a uma ou mais proteínas humanas selecionadas do grupo consistindo em CD33 humana, uma variante de ocorrência natural de CD33 humana e uma variante de CD33 humana de doença. Em algumas modalidades, o fragmento é um fragmento Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv ou scFv.

[0037] Em algumas modalidades que podem ser combinadas a qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo é um anticorpo humanizado, um anticorpo biespecífico, um anticorpo monocional, um anticorpo multivalente, um anticorpo conjugado ou um anticorpo quimérico. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo monoclonal. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo biespecífico que reconhece um primeiro antígeno e um segundo antígeno. Em algumas modalidades, o primeiro antígeno é CD33 e o segundo antígeno é: um antígeno que facilita o transporte através da barreira hematoencefálica; um antígeno que facilita o transporte através da barreira hematoencefálica selecionada do grupo que consiste em receptor de transferrina (TR), receptor de insulina (HIR), receptor de fator de crescimento semelhante à insulina (IGFR), proteínas 1 e 2 relacionadas ao receptor de lipoproteínas de baixa densidade (LPR-1 e 2), receptor de toxina da difteria, CRM197, um anticorpo de domínio único de llama, TMEM 30(A), um domínio de transdução de proteínas, TAT, Syn-B, penetratina, um peptídeo de poli-arginina, um peptídeo de angiopep e ANG1005; um agente causador de doença selecionado do grupo que consiste em peptídeos ou proteínas causadores de doenças e ácidos nucleicos causadores de doenças, em que os peptídeos ou proteínas causadores de doenças são selecionados do grupo que consiste em placas beta amiloide, beta amiloide oligomérica, placas beta amiloide, proteína precursora de amiloide ou seus fragmentos, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS, C90orf72 (quadro de leitura aberta 72 do cromossomo 9), proteína c9RAN, proteína príon, PrPSc, huntingtina, calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpo de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide das ilhotas, insulina, apolipoproteína Al, amiloide sérico A, medina, prolactina, transtirretina, lisozima, microglobulina beta 2, gelsolina, queratoepitelina, cistatina, cadeia leve de imunoglobulina AL, proteína S-IBM, produtos de tradução não ATG associados a repetição (RAN), peptídeos de repetição de DiPeptide (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina-prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina-arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), peptídeos de repetição de ubiquitina e prolina-arginina (PR), e os ácidos nucleicos causadores de doenças são o RNA de expansão repetida anti- sense GGCCCC (G2C4); ligantes e/ou proteínas expressas nas células imunológicas, em que os ligantes e/ou proteínas selecionados do grupo que consiste em CD40, OX40, ICOS, CD28, CD137/4-1BB, CD27, GITR, PD-L1, CTLA4, PD-L2, PD-1, B7-H3, B7-H4, HVEM, LIGHT, BTLA, CD38, TIGIT, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIM4, A2AR, LAG3, DR5, CD39, CD70, CD73, TREM1, TREM?2, Siglec-5, Siglec-7, Siglec-9, Siglec-11, SirpA, CD47, receptor CSF1 e fosfatidilserina; e uma proteína, lipídeo, polissacarídeo ou glicolipídeo expresso em uma ou mais células tumorais.

[0038] Em algumas modalidades, que podem ser combinadas com quaisquer modalidades anteriores, o anticorpo é usado em combinação com um ou mais anticorpos que se ligam especificamente a um agente causador de doença selecionado do grupo consistindo em peptídeos causadores de doença, proteínas causadoras de doença, beta amiloide,

beta amiloide oligomérica, placas beta amiloides, proteína precursora amiloide ou fragmentos desta, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS, C90orf72 (quadro de leitura aberto 72 do cromossomo 9), proteina do príon, PrPSc, huntingtina, calcitoninay superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpos de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide da ilhota, insulina, apolipoproteína Al, amiloide A sérica, medina, prolactina, transtirretina, lisozima, beta 2 microglobulina, gelsolina, ceratoepitelina, cistatina, cadeia leve de imunoglobulina AL, proteína S-IBM, produtos da tradução não ATG associados à repetição (RAN), peptídeos de repetição de dipeptídeos (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina- prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina-arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), ubiquitina, e peptídeos de repetição de prolina-arginina (PR), e qualquer combinação destes; ou com um ou mais anticorpos que se ligam a uma proteína imunomoduladora selecionada do grupo consistindo em: CD40, OXA40, ICOS, CD28, CD137/4-1BB, CD27 , GITR, PD-L1, CTLAA4, PD-L2, PD- 1, B7-H3, B7-H4, HVEM, LIGHT, BTLA, CD38, TIGIT, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIM4, A2AR3, DR5, CD39, CD70, CD73, LAG3, TREM1, TREM?2, Siglec-5, Siglec-7, Siglec-9, Siglec-11, SirpA, CD47, receptor de CSF1, fosfatidilserina, ácidos nucleicos causadores de doença, RNA de expansão de repetição GGCCCC (G2C4) antisense, e qualquer combinação destes.

[0039] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo tem uma constante de dissociação (Kp) para CD33 humana que é pelo menos 4 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência e aminoácidos da SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; pelo menos 1 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; ou pelo menos 1 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que a Kp é determinado por ressonância plasmônica de superfície. Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo possui uma constante de dissociação (Kp) para CD33 humana que varia de cerca de 2 nM a cerca de 200 pM, ou menor que cerca de 200 pM, e em que a Kp é determinada por BioLayer Interferometry.

[0040] Em algumas modalidades que podem ser combinadas com qualquer uma das modalidades anteriores, o anticorpo reduz os níveis de CD33 na superfície celular. Em algumas modalidades, a CD33 é expressa na superfície das células dendríticas humanas. Em algumas modalidades, o anticorpo reduz os níveis de CD33 na superfície celular in vitro. Em algumas modalidades, o anticorpo reduz os níveis de CD33 in vitro na superfície celular com uma concentração efetiva meia máxima (ECs50o) inferior a 150 pM, conforme medido por citometria de fluxo. Em algumas modalidades, o anticorpo reduz os níveis da superfície celular de CD33 in vitro com uma ECr5o que é pelo menos 50% menor que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº:34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; pelo menos 10% menor que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; pelo menos 10% menor que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; ou pelo menos 10 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104, conforme medido por citometria de fluxo.

[0041] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a ácidos nucleicos isolados compreendendo uma sequência de ácido nucleico que codifica qualquer um dos anticorpos aqui descritos.

[0042] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a vetores compreendendo qualquer um dos ácidos nucleicos descritos neste documento. Em algumas modalidades, o vetor é um vetor de expressão e/ou um vetor de exibição.

[0043] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a células hospedeiras isoladas compreendendo qualquer um dos ácidos nucleicos ou vetores descritos neste documento.

[0044] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a um método de produção de um anticorpo que se liga a CD33 compreendendo a cultura de qualquer uma das células hospedeiras descritas neste documento, para que o anticorpo seja produzido. Em algumas modalidades, o método compreende ainda a recuperação do anticorpo produzido pela célula.

[0045] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a um anticorpo produzido por qualquer um dos métodos descritos neste documento.

[0046] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a composição farmacêutica compreendendo qualquer um dos anticorpos descritos neste documento e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, a presente descrição refere-se ao uso de qualquer um dos anticorpos descritos neste documento para a preparação de um medicamento.

[0047] Em outro aspecto, a presente descrição refere-se a um método de prevenção, redução de risco ou tratamento de uma doença, distúrbio ou lesão selecionada do grupo que consiste em demência, demência frontotemporal, doença de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de taupatia, infecções e câncer, compreendendo a administração a um indivíduo necessitado de uma quantidade terapeuticamente eficaz de qualquer um dos anticorpos descritos neste documento. Em algumas modalidades, a doença, distúrbio ou lesão é um câncer. Em algumas modalidades, o câncer é selecionado do grupo consistindo em câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstatay câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfobástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), e mieloma múltiplo. Em algumas modalidades, a presente descrição refere-se ao uso de qualquer um dos anticorpos aqui descritos para a preparação de um medicamento útil para prevenir, reduzir riscos ou tratar uma doença, distúrbio ou lesão selecionada do grupo que consiste em demência, demência frontotemporal, Doença de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de taupatia, infecções e câncer. Em algumas modalidades, a doença, distúrbio ou lesão é um câncer. Em algumas modalidades, o câncer é selecionado do grupo consistindo em câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfobástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mieloide crônica (CML), e mieloma múltiplo.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0048] A Figura 1 representa os resultados de um ensaio de citometria de fluxo medindo os níveis de CD33 na superfície de células dendríticas derivadas de monócitos humanos primários após tratamento com anticorpos CD33 humanizados.

[0049] A Figura 2 representa os resultados da citometria de fluxo que medem os níveis de CD33 na superfície das células dendríticas derivadas de monócitos humanos primários após incubação com diferentes concentrações de anticorpos CD33 maturados por afinidade.

[0050] A Figura 3 representa os resultados de um ensaio de bloqueio de ligantes, em que os glóbulos vermelhos contendo ligantes de ácido siálico para CD33 são avaliados quanto à sua capacidade de se ligar a CD33 na presença de diferentes concentrações de anticorpos CD33.

[0051] A Figura 4 representa resultados de um ensaio de citometria de fluxo medindo os níveis de CD33 na superfície de células dendríticas derivadas de monócitos humanos primários após tratamento com diferentes concentrações de anticorpos CD33 contendo diferentes regiões Fc.

[0052] A Figura 5 representa os resultados da citometria de fluxo que medem os níveis de CD33 humana na superfície das células huCD45*huCD14* em camundongos NSG humanizados injetados com anticorpos CD33.

[0053] A Figura 6A representa os resultados da citometria de fluxo que medem os níveis de CD33 humana na superfície das células CD11b*Gri* circulantes em camundongos transgênicos para CD33 humana que foram injetadas com anticorpos CD33. A Figura 6B representa os resultados de um ensaio de citometria de fluxo que mede os níveis de CD33 humana na superfície das células CD11b*Gr1* no sangue ou no baço em camundongos transgênicos de CD33 humana injetadas com anticorpos CD33.

[0054] A Figura 7 representa resultados de um ensaio para medir a atividade ADCC de anticorpos CD33.

[0055] A Figura 8 representa os resultados de um ensaio CDC na presença de anticorpos CD33.

[0056] A Figura 9 representa os resultados da citometria de fluxo que medem os níveis de CD33 humana e Siglec-7 humano na superfície das células em camundongos transgênicos para CD33 humana e Siglec-7 humano após tratamento com diferentes concentrações de um anticorpo CD33. A Figura 9A representa os níveis de CD33 humana na superfície da micróglia, a Figura 9B representa os níveis de Siglec-7 humano na superfície da microglia, a Figura 9C representa os níveis de CD33 humana na superfície dos neutrófilos em circulação, a Figura 9D representa os níveis de CD33 humana na superfície dos monócitos circulantes.

DESCRIÇÃO DETALHADA Técnicas Gerais

[0057] As técnicas e os procedimentos descritos ou referenciados neste documento são geralmente bem entendidos e vulgarmente empregadas utilizando metodologia convencional pelos versados na técnica, como, por exemplo, as metodologias amplamente utilizadas descritas em Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 3º edição (2001) Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.; Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel, et al. eds., (2003)); a série Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.): PCR 2: A Practical Approach (M.J. MacPherson, B.D. Hames e G.R. Taylor eds. (1995)), Harlow e Lane, eds. (1988) Antibodies, A Laboratory Manual, eAnimal Cell Culture (R.l. Freshney, ed. (1987)); Oligonucleotide Synthesis (M.J. Gait, ed., 1984); Methods in Molecular Biology, Humana Press; Cell Biology: A Laboratory Notebook (J.E. Cellis, ed., 1998) Academic Press; Animal Cell Culture (R.|l. Freshney), ed., 1987); Introduction to Cell and Tissue Culture (J.P. Mather e P.E. Roberts, 1998) Plenum Press; Cell and Tissue Culture: Laboratory Procedures (A. Doyle, J.B. Griffiths, e D.G. Newell, eds., 1993-8) J. Wiley & Sons; Handbook of Experimental Immunology (D.M. Weire C.C. Blackwell, eds.); Gene Transfer Vectors for Mammalian Cells (J.M. Miller e M.P. Calos, eds., 1987); PCR: The Polymerase Chain Reaction, (Mullis et al., eds., 1994); Current Protocols in Immunology (J.E. Coligan et al., eds., 1991); Short Protocols in Molecular Biology (Wiley e Filhos, 1999); Immunobiology (C.A. Janeway e P. Travers, 1997); Antibodies (P. Finch, 1997); Antibodies: A Practical Approach (D. Catty., ed., IRL Press, 1988-1989); Monoclonal Antibodies: A Practical Approach (P. Shepherd and C. Dean, eds., Oxford University Press, 2000); Using Antibodies: A Laboratory Manual (E. Harlow e D. Lane (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1999); The Antibodies (M. Zanetti and J. D. Capra, eds., Harwood Academic Publishers, 1995); e Cancer: Principles e Practice of Oncology (V.T. DeVita et al., eds., J.B. Lippincott Company, 1993).

Definições

[0058] Conforme usado neste documento, o termo "prevenção"; inclui o fornecimento de profilaxia com relação à ocorrência ou recorrência de uma doença, distúrbio ou condição específica em um indivíduo. Um indivíduo pode estar predisposto, suscetível a uma doença, distúrbio ou condição específica, ou correr o risco de desenvolver tal doença, distúrbio ou condição, mas ainda não foi diagnosticado com a doença, distúrbio ou condição.

[0059] Conforme usado neste documento, um indivíduo "em risco" de desenvolver uma doença, distúrbio ou condição específica pode ou não ter uma doença ou sintomas da doença detectáveis, e pode ou não ter exibido uma doença ou sintomas detectáveis antes dos métodos de tratamento descritos neste documento. "Em risco" denota que um indivíduo tem um ou mais fatores de risco, que são parâmetros mensuráveis que se correlacionam com o desenvolvimento de uma doença, distúrbio ou condição específica, como é conhecido na técnica. Um indivíduo com um ou mais desses fatores de risco tem maior probabilidade de desenvolver uma doença, distúrbio ou condição específica do que um indivíduo sem um ou mais desses fatores de risco.

[0060] Como utilizado neste documento, o termo "tratamento" refere-se à intervenção clínica projetada para alterar o curso natural do indivíduo sendo tratado durante o curso da patologia clínica. Os efeitos desejáveis do tratamento incluem diminuir a taxa de progressão, melhorar ou diminuir o estado patológico e remissão ou prognóstico aprimorado de uma doença, distúrbio ou condição específica. Um indivíduo é "tratado" com sucesso, por exemplo, se um ou mais sintomas associados a uma doença, distúrbio ou condição específica são mitigados ou eliminados.

[0061] Uma "quantidade eficaz" refere-se a pelo menos uma quantidade eficaz, em doses e por períodos de tempo necessários, para atingir o resultado terapêutico ou profilático desejado. Uma quantidade eficaz pode ser fornecida em uma ou mais administrações. Uma quantidade eficaz neste documento pode variar de acordo com fatores tais como o estado de doença, idade, sexo e peso do indivíduo, e a capacidade do tratamento de provocar uma resposta desejada no indivíduo. Uma quantidade eficaz também é uma na qual quaisquer efeitos tóxicos ou prejudiciais do tratamento são compensados pelos efeitos terapeuticamente benéficos. Para uso profilático, resultados benéficos ou desejados incluem resultados tais como a eliminação ou redução do risco, diminuição da gravidade, ou atraso do aparecimento da doença, incluindo sintomas bioquímicos, histológicos e/ou comportamentais da doença, suas complicações e fenótipos patológicos — intermediários que se apresentam durante o desenvolvimento da doença. Para uso terapêutico, os resultados benéficos ou desejados incluem resultados clínicos tais como a diminuição de um ou mais sintomas resultantes da doença, aumento da qualidade de vida daqueles que sofrem da doença, diminuição da dose de outros medicamentos necessários para tratar a doença, potencialização do efeito de outro medicamento, tal como visando o retardo da progressão da doença, e/ou prolongando a sobrevivência. Uma quantidade eficaz de droga, composto, ou composição farmacêutica é uma quantidade suficiente para realizar o tratamento profilático ou terapêutico direta ou indiretamente. Como se entende no contexto clínico, uma quantidade eficaz de uma droga, composto ou composição farmacêutica pode ou não ser alcançada em conjunto com outra droga, composto ou composição farmacêutica. Assim, uma "quantidade eficaz" pode ser considerada no contexto da administração de um ou mais agentes terapêuticos e um único agente pode ser considerado para ser dado em uma quantidade eficaz se, em conjunto com um ou mais outros agentes, um resultado desejável puder ser ou for atingido.

[0062] Conforme usado neste documento, a administração "em conjunto" com outro composto ou composição inclui administração simultânea e/ou administração em diferentes momentos. A administração em conjunto também abrange a administração como uma co-formulação ou administração como composições separadas, incluindo em diferentes frequências ou intervalos de dosagem, e usando a mesma via de administração ou diferentes vias de administração.

[0063] Um "indivíduo" para fins de tratamento, prevenção ou redução de risco refere-se a qualquer animal classificado como mamífero, incluindo seres humanos, animais domésticos e de fazenda e zoológico, de esporte ou animais de estimação, como cães, cavalos, coelhos, gado, porcos, hamsters, gerbil, camundongos, furões, ratos, gatos e similares. De preferência, o indivíduo é humano.

[0064] O termo "imunoglobulina" (Ig) é utilizado indistintamente com "anticorpo" neste documento. O termo "anticorpo" é usado neste documento no sentido mais amplo e abrange especificamente anticorpos — monoclonais, — anticorpos — policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos) formados a partir de pelo menos dois anticorpos intactos, e fragmentos de anticorpos, desde que exibam a desejada atividade biológica.

[0065] A unidade de anticorpo de 4 cadeias básica é uma glicoproteína heterotetramérica composta por duas cadeias leves (L) idênticas e duas cadeias pesadas (H) idênticas. O emparelhamento de uma V" e V. em conjunto forma um único sítio de ligação ao antígeno. Para estrutura e propriedades das diferentes classes de anticorpos, ver, por exemplo, Basic and Clinical Immunology, 8º Edição, Daniel P. Sties, Abba |. Terr e Tristram G. Parsolw (eds), Appleton & Lange, Norwalk, CT, 1994, página 71 e Capítulo 6.

[0066] A cadeia L de quaisquer espécies de vertebrados pode ser atribuída a um dos dois tipos claramente distintos, chamado Kappa ("K") e lambda ("A"), com base nas sequências de aminoácido de seus domínios constantes. Dependendo da sequência de aminoácido do domínio constante de suas cadeias pesadas (CH), as imunoglobulinas podem ser atribuídas a diferentes classes ou isotipos. Existem cinco classes de imunoglobulinas: IgA, IgD, IgE, IgG e IgM, com cadeias pesadas designadas alfa ("a"), delta ("5"), epsilon ("e"), gama ("y") e mu ("uu"), respectivamente. As classes y e a são ainda divididas em subclasses (isotipos) com base em diferenças relativamente menores na função e sequência de CH, por exemplo: os seres humanos expressam as seguintes subclasses: I9G1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 e IgA2. As estruturas das subunidades e configurações tridimensionais de diferentes classes de imunoglobulinas são bem conhecidas e descritas geralmente em, por exemplo, Abbas et al., Cellular and Molecular Immunology, 4º ed. (WB Saunders, Co., 2000).

[0067] "Anticorpos nativos" são usualmente glicoproteínas heterotetraméricas de cerca de 150.000 daltons, compostas por duas cadeias leves (L) idênticas e duas cadeias pesadas (H) idênticas. Cada cadeia leve está ligada a uma cadeia pesada por uma ligação dissulfeto covalente, enquanto o número de ligações dissulfeto varia entre as cadeias pesadas de diferentes isotipos de imunoglobulina. Cada cadeia pesada e leve tem também pontes de dissulfeto intracadeia espaçadas regularmente. Cada cadeia pesada tem, em uma extremidade, um domínio variável (Vn) seguido por um número de domínios constantes. Cada cadeia leve tem um domínio variável em uma extremidade (V.) e um domínio constante na sua outra extremidade; o domínio constante de cadeia leve está alinhado com o primeiro domínio constante de cadeia pesada, e o domínio variável de cadeia leve está alinhado com o domínio variável de cadeia pesada. Acredita-se que os resíduos de aminoácidos específicos formem uma interface entre os domínios variáveis de cadeia leve e de cadeia pesada.

[0068] Um anticorpo "isolado", como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, é aquele que foi identificado, separado e/ou recuperado de um componente de seu meio de produção (por exemplo, naturalmente ou recombinantemente). De preferência, o polipeptídeo isolado está livre de associação a todos os outros componentes contaminantes do seu meio de produção. Os componentes contaminantes do seu meio de produção, como os resultantes de células transfectadas recombinantes, são materiais que tipicamente interferem nas utilizações diagnósticas, terapêuticas ou de pesquisa para o anticorpo e podem incluir enzimas, hormônios e outros solutos proteináceos ou não proteináceos. Em modalidades preferidas, o polipeptídeo será purificado (1) até mais de 95% em peso do anticorpo, tal como determinado através de, por exemplo, o método de Lowry, e, em algumas modalidades, até mais de 99% em peso; (2) a um grau suficiente para obter pelo menos 15 resíduos da sequência de aminoácidos interna ou N-terminal através da utilização de, por exemplo, um sequenciador de copo giratório, ou (3) até a homogeneidade através de SDS-PAGE sob condições redutoras ou não redutoras usando azul de Coomassie ou, preferencialmente, coloração prata. Anticorpo isolado inclui o anticorpo in situ dentro de células T recombinantes, visto que pelo menos um componente do meio natural do anticorpo não estará presente. Normalmente, contudo, um polipeptídeo ou anticorpo isolado será preparado por pelo menos uma etapa de purificação.

[0069] A "região variável" ou "domínio variável" de um anticorpo, como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, refere-se aos domínios amino-terminais de cadeia pesada ou leve do anticorpo. Os domínios variáveis de cadeia pesada e de cadeia leve podem ser referidos como "VW" e "VW", respectivamente. Esses domínios geralmente são as partes mais variáveis do anticorpo (em relação a outros anticorpos da mesma classe) e contêm os sítios de ligação a antígenos.

[0070] O termo "variável" refere-se ao fato de que certos segmentos dos domínios variáveis diferem extensivamente em sequência entre os anticorpos, como os anticorpos anti-CD33 da presente descrição. O domínio V medeia a ligação ao antígeno e define a especificidade de um anticorpo particular para o seu antígeno específico. No entanto, a variabilidade não é distribuída uniformemente em toda a extensão dos domínios variáveis. Em vez disso, está concentrada em três segmentos denominados regiões hipervariáveis (HVRs), tanto nos domínios variáveis de cadeia leve como nos domínios variáveis de cadeia pesada. As porções mais altamente conservadas dos domínios variáveis são denominadas regiões de estrutura principal (FR). Os domínios variáveis de cadeias leves e pesadas nativas compreendem cada um, quatro regiões de FRs, adotando amplamente uma configuração folha-beta, conectada por três HVRs, as quais formam alças que conectam a, e em alguns casos formam parte da, estrutura folha-beta. As HVRs em cada cadeia são mantidas juntas em estreita proximidade pelas regiões FR e com as HVRs da outra cadeia, contribuem para a formação do sítio de ligação ao antígeno dos anticorpos (verKabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, Quinta Edição, National Institute of Health, Bethesda, MD (1991)) Os domínios constantes não estão envolvidos diretamente na ligação de um anticorpo a um antígeno, mas exibem várias funções efetoras, tais como participação do anticorpo na toxicidade celular dependente de anticorpos.

[0071] O termo "anticorpo monoclonal”, como usado neste documento, refere-se a um anticorpo como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição obtido a partir de uma população de anticorpos substancialmente homogêneos, isto é, os anticorpos individuais compreendendo a população são idênticos, exceto para possíveis mutações de ocorrência natural e/ou modificações pós-translacionais (por exemplo, isomerizações, amidações) que podem estar presentes em menores quantidades.

Os anticorpos monocionais são altamente específicos, sendo direcionados contra um ou mais sítios antigênicos.

Em algumas modalidades, um anticorpo monocional da presente descrição pode ser um anticorpo biespecífico.

Em contraste com preparações de anticorpo policlonal, as quais tipicamente incluem diferentes anticorpos direcionados contra diferentes determinantes (epítopos), cada anticorpo monoclional é direcionado contra um único determinante nos um ou mais sítios antigênicos.

O modificador "monoclonal" indica o caráter do anticorpo como sendo obtido de uma população substancialmente homogênea de anticorpos e não deve ser interpretado como exigindo a produção do anticorpo por qualquer método em particular.

Por exemplo, os anticorpos monoclonais a serem utilizados de acordo com a presente descrição podem ser produzidos por uma variedade de técnicas, incluindo, por exemplo, tecnologias de exibição de fagos (ver, por exemplo, Clackson et al., Nature, 352: 624- 628 (1991); Marks et al., J.

Mol.

Biol. 222: 581-597 (1992); Sidhu et al, J.

Mol.

Biol. 338(2): 299-310 (2004); Lee et al., J.

Mol.

Biol. 340(5):1073- 1093 (2004); Fellouse, Proc.

Nat'l Acad.

Sci.

USA 101(34):12467-472 (2004); e Lee et al., J.

Inmunol.

Methods 284(1-2):119-132 (2004), the hybridoma method (por exemplo, Kohler e Milstein., Nature, 256:495-97 (1975); Hongo et al., Hybridoma, 14 (3):253-260 (1995), Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2d ed. 1988); Hammerling et al., in: Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybridomas 563-681 (Elsevier, N.Y., 1981)), recombinant DNA methods (Ver, por exemplo, Patente US Nº. 4,816,567), yeast presentation technologies (ver, por exemplo, WO2009/036379A2; WO2010105256; WO2012009568, e Xu et al., Protein Eng.

Des.

Sel., 26(10): 663-70 (2013), e tecnologias para a produção de anticorpos humanos ou semelhantes aos humanos em animais que possuem partes ou todos os loci ou genes da imunoglobulina humana que codificam sequências de imunoglobulina humana (ver, por exemplo, WO 1998/24893; WO 1996/34096; WO 1996/33735; WO 1991/10741; Jakobovits et al., Proc. Nat' Acad. Sci. USA 90:2551 (1993); Jakobovits et al., Nature 362: 255- 258 (1993); Bruggemann et al., Year in Immunol. 7:33 (1993); Patente U.S. Nºs 5,545,807; 5,545,806; 5,569,825; 5,625,126; 5,633,425; e 5,661,016; Marks et al., Bio/Technology 10:779-783 (1992); Lonberg et al., Nature 368:856-859 (1994); Morrison, Nature 368:812-813 (1994); Fishwild et al., Nature Biotechnol. 14: 845-851 (1996); Neuberger, Nature Biotechnol. 14: 826 (1996); e Lonberg e Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93 (1995).

[0072] Os termos "anticorpo completo", "anticorpo intacto" ou "anticorpo inteiro" são usados indistintamente para se referir a um anticorpo, como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, em sua forma substancialmente intacta, em oposição a um fragmento de anticorpo. Especificamente, os anticorpos inteiros incluem aqueles com cadeias pesadas e leves, incluindo uma região Fc. Os domínios constantes podem ser domínios constantes de sequência nativa (por exemplo, domínios constantes de sequência nativa humana) ou variantes de sequência de aminoácidos destes. Em alguns casos, o anticorpo intacto pode ter uma ou mais funções efetoras.

[0073] Um "fragmento de anticorpo" compreendem uma porção de um anticorpo intacto, de preferência de ligação ao antígeno e/ou à região variável do anticorpo intacto. Exemplos de fragmentos de anticorpos incluem Fab, Fab', F(ab')) e fragmentos de Fv; diacorpos; anticorpos lineares (ver a Patente U.S. 5,641,870, Exemplo 2; Zapata et al., Protein Eng. 8(10):1057-1062, 1995)); moléculas de anticorpos de cadeia única; e anticorpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticorpos.

[0074] A digestão de anticorpos por papaína, como os anticorpos anti-CD33 da presente descrição, produz dois fragmentos de ligação a antígeno idênticos, chamados fragmentos "Fab" e um fragmento "Fc" residual, uma designação que reflete a capacidade de cristalizar rapidamente. O fragmento Fab consiste em uma cadeia L inteira juntamente com o domínio da região variável de cadeia H (Viu), e o primeiro domínio constante de uma cadeia pesada (Ch1). Cada fragmento Fab é monovalente em relação à ligação ao antígeno, isto é, ele tem um único sítio de ligação ao antígeno. O tratamento com pepsina de um anticorpo origina um único grande fragmento F(ab'): que corresponde aproximadamente a dois fragmentos Fab ligados por dissulfureto que possui atividade de ligação ao antígeno diferente e ainda é capaz de ligação cruzada ao antígeno. Os fragmentos Fab' diferem dos fragmentos Fab por possuirem alguns resíduos adicionais no terminal carboxi do domínio CH1 incluindo uma ou mais cisteínas da região de dobradiça do anticorpo. Fab'-SH é a designação neste documento para Fab' no qual o(s) resíduo(s) de cisteína dos domínios constantes carregam um grupo tiol livre. Fragmentos de anticorpo F(ab')2 foram originalmente produzidos como pares de fragmentos Fab', os quais têm cisteínas de dobradiça entre eles. Outros acoplamentos químicos de fragmentos de anticorpos também são conhecidos.

[0075] O fragmento Fc compreende as porções de terminais carboxi de ambas as cadeias H mantidas juntas por ligações dissulfeto. As funções efetoras de anticorpos são determinadas pelas sequências na região Fc; a região é também reconhecida pelos receptores Fc (FcR) encontrados em determinados tipos de células.

[0076] "Fv" é o fragmento de anticorpo mínimo que contém um sítio de reconhecimento de antígeno e um sítio de ligação. Este fragmento consiste em um dímero de um domínio de região variável de cadeia leve e cadeia pesada em associação estreita, não covalente. A partir da dobra destes dois domínios emanam seis alças hipervariáveis (3 alças cada das cadeias H e L) que contribuem com os resíduos de aminoácido para ligação de antígeno e conferem especificidade de ligação de antígeno para o anticorpo. Entretanto, até mesmo um domínio variável único (ou metade de um Fv que compreende somente três HVRs específicos para um antígeno) tem a habilidade de reconhecer e se ligar ao antígeno, embora com uma afinidade inferior ao sítio de ligação inteiro.

[0077] "Fvy de cadeia única" também abreviado como "sFv" ou "scFv"são fragmentos de anticorpos que compreendem os domínios de anticorpo de VH e VL ligados a uma única cadeia polipeptídica. De preferência, o polipeptídeo sFv compreende adicionalmente um ligante polipeptídico entre os domínios Vx e V. que permitem ao sFv formar a estrutura desejada para ligação ao antígeno. Para uma análise de sFv, ver Pluckthun em The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg e Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994).

[0078] "Fragmentos funcionais" de anticorpos, como anticorpos anti-CD33 da presente descrição, compreendem uma porção de um anticorpo intacto, geralmente incluindo a ligação ao antígeno ou região variável do anticorpo intacto ou a região F de um anticorpo que retém ou modificou a capacidade de ligação ao FcR. Exemplos de fragmentos de anticorpos incluem anticorpos lineares; moléculas de anticorpo de cadeia simples; e anticorpos multi-específicos formados a partir de fragmentos de anticorpo.

[0079] O termo "diacorpos" refere-se a pequenos fragmentos de anticorpo preparados através da construção de fragmentos sFv (ver o parágrafo anterior) com resíduos de ligantes curtos (cerca de 5-10) entre os domínios Vx e V. de tal modo que se obtenha um pareamento inter- cadeia, mas não intra-cadeia, dos domínios V, resultando em um fragmento bivalente, isto é, um fragmento possuindo dois sítios de ligação a antígeno. Diacorpos biespecíficos são heterodímeros de dois fragmentos sFv "crossover", em que os domínios Vu e V. dos dois anticorpos estão presentes em diferentes cadeias polipeptídicas. Diabodies são descritos mais detalhes em, por exemplo, EP 404.097; WO 93/11161; e Hollinger et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 90:6444-48 (1993).

[0080] Como utilizado neste documento, um "anticorpo quimérico" refere-se a um anticorpo (imunoglobulina), como um anticorpo anti- CD33 da presente descrição, no qual uma porção da cadeia pesada e/ou leve é idêntica ou homóloga às sequências correspondentes em anticorpos derivados de uma espécie específica ou pertencentes a uma classe ou subclasse de anticorpos específica, enquanto o restante da(s) cadeia(s) é(são) idêntico(s) ou homólogo(s) às sequências correspondentes em anticorpos derivados de outra espécie ou pertencentes a outra classe ou anticorpo subclasse, bem como fragmentos de tais anticorpos, desde que exibam a atividade biológica desejada (Patente US Nº 4,816,567; Morrison et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. EUA, 81: 6851-55 (1984)). Os anticorpos quiméricos de interesse neste documento incluem anticorpos PRIMATIZEDº em que a região de ligação ao antígeno do anticorpo é derivada de um anticorpo produzido pela, por exemplo, imunização de macacos Macaca com um antígeno de interesse. Tal como utilizado neste documento, "anticorpo humanizado" é utilizado como um subconjunto de "anticorpos quiméricos".

[0081] Formas "humanizadas" de anticorpos não humanos (por exemplo, murinos), como anticorpos anti-CD33 da presente descrição, são anticorpos quiméricos que contêm sequência mínima derivada de imunoglobulina não humana. Em uma modalidade, um anticorpo humanizado é uma imunoglobulina humana (anticorpo receptor) na qual resíduos de uma HVR do receptor são substituídos por resíduos de uma HVR de uma espécie não humana (anticorpo doador), tal como camundongo, rato, coelho ou um primata não humano, que possui a especificidade, afinidade e/ou capacidade desejadas. Em alguns casos, resíduos de FR da imunoglobulina humana são substituídos pelos resíduos não humanos correspondentes. Além disso, anticorpos humanizados podem compreender resíduos que não são encontrados no anticorpo receptor ou no anticorpo doador. Essas modificações podem ser feitas para refinar adicionalmente o desempenho do anticorpo, como a afinidade de ligação. Em geral, um anticorpo humanizado compreenderá substancialmente a totalidade de pelo menos um e, tipicamente dois, domínios variáveis, em que todas ou substancialmente todas as alças hipervariáveis correspondem aos de uma sequência de imunoglobulihna não humana e todas, ou substancialmente todas, as regiões FR são as de uma sequência de imunoglobulina humana, embora as regiões FR possam incluir uma ou mais substituições de resíduos FR individuais que melhoram a performance do anticorpo, como afinidade de ligação, isomeração, imunogenicidade, e semelhantes. O número dessas substituições de aminoácidos na FR é tipicamente não mais do que 6 na cadeia H, e não mais do que 3 na cadeia L. O anticorpo humanizado poderá, opcionalmente, compreender também pelo menos uma porção de uma região constante de imunoglobulina (Fc), tipicamente aquela de uma imunoglobulina humana. Para mais detalhes, ver, por exemplo, Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323- 329 (1988); e Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992). Ver também, por exemplo, Vaswani e Hamilton, Ann. Allergy, Asthma & Immunol. 1:105-115 (1998); Harris, Biochem. Soc. Transactions 23:1035-1038 (1995); Hurle e Gross, Curr. Op. Biotech. 5: 428-433 (1994); e Patentes U.S. Nº 6.982.321 e 7.087.409.

[0082] Um "anticorpo humano", é aquele que possui uma sequência de aminoácidos correspondente à de um anticorpo, como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, produzido por um humano e/ou foi produzido usando qualquer uma das técnicas para produzir anticorpos humanos como divulgado neste documento. Tal definição de um anticorpo humano exclui especificamente um anticorpo humanizado compreendendo resíduos de ligação ao antígeno não humano. Os anticorpos humanos podem ser produzidos utilizando várias técnicas conhecidas na técnica, incluindo bibliotecas de phage-display. Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227:381 (1991); Marks et al, J. Mol. Biol., 222:581 (1991) Também estão disponíveis para a preparação de anticorpos monoclonais humanos métodos descritos em Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner et al., J. Immunol., 147(1):86-95 (1991). Ver também van Dijk e van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5:368-74 (2001). Os anticorpos humanos podem ser preparados pela administração do antígeno a um animal transgênico, que foi modificado para produzir tais anticorpos em resposta ao desafio antigênico, mas cujos loci endógenos foram desativados, por exemplo, camundongos transgênicos imunizados (ver, por exemplo, Patentes U.S. Nºs 6,075,181 e 6,150,584 em relação a tecnologia XENOMOUSETY). Ver também, por exemplo, Li et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006) com relação a anticorpos humanos gerados por meio de uma tecnologia de hibridoma de células B humanas. Alternativamente, os anticorpos humanos também podem ser preparados empregando bibliotecas de leveduras e métodos como divulgado em, por exemplo, WOZ2009/036379A2; WOZ2010105256; WO2012009568; e Xu et al, Protein Eng. Des. Sel.26 (10): 663-70 (2013).

[0083] O termo "região hipervariável"", "HVR", ou "HV", quando utilizado neste documento, refere-se às regiões de um domínio variável de anticorpo, como o de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, que são hipervariáveis em sequência e/ou formar alças estruturalmente definidas. Geralmente os anticorpos compreendem seis HVRs; três na VH (H1, H2, H3) e três na VL (L1, L2, L3). Em anticorpos nativos, H3 e L3 exibem a maior diversidade das seis HVRs, e acredita-se que H3, em particular, desempenhe um papel único de conferir boa especificidade a anticorpos. Ver, por exemplo, Xu et al., Immunity 13:37- 45 (2000); Johnson e Wu em Methods in Molecular Biology 248: 1-25 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003)). Com efeito, os anticorpos de camelídeos de ocorrência natural e que consistem em uma cadeia pesada somente são funcionais e estáveis na ausência de cadeia leve. Ver, por exemplo, Hamers-Casterman et al., Nature 363:446-448 (1993) and Sheriff et al., Nature Struct. Biol. 3:733-736 (1996).

[0084] Uma quantidade de delimitações de HVR está em uso e é englobada neste documento. Em algumas modalidades, as HVRs podem ser regiões de Kabat determinantes- de complementaridade (CDRs) com base na variabilidade da sequência e são as mais comumente usadas (Kabat et al., supra). Em algumas modalidades, as HVRs podem ser CDRs de Chothia. Em vez disso, Chothia se refere à localização de alças estruturais (Chothia e Lesk J. Mol. Biol. 196:901- 917 (1987)). Em algumas modalidades, as HVRs podem ser HVRs de AbM. As HVRs de AbM representam um meio-termo entre as alças estruturais de CDRs de Kabat e Chothia, e são usadas pelo software AbM de modelagem de anticorpo da Oxford Molecular. Em algumas modalidades, as HVRs podem ser HVRs de "contato". As HVRs de contato baseiam-se em uma análise das estruturas cristalinas complexas disponíveis. Os resíduos de cada uma dessas HVRs estão descritos a seguir.

Alça Kabat AbM Chothia Contato 1 L24-L34 L24-L34 L26-L32 L30-L36 L2 L50-L56 L50-L56 L50-L52 L46-L55 L3 L89-L97 L89-L97 L91-L96 L89-L96 H1 H31-H35B H26-H35B H26-H32 H30-H35B (Numeração de Kabat) H1 H31-H35 H26-H35 H26-H32 H30-H35 (Numeração de Chothia) H2 H50-H65 H50-H58 H53-H55 H47-H58 H3 H95-H102 H95-H102 H96-H101 H93-H101

[0085] As HVRs podem compreender "HVRs estendidas", como se segue: 24-36 ou 24-34 (L1), 46-56 ou 50-56 (L2,) e 89-97 ou 89-96 (L3) na VL, e 26-35 (H1), 50-65 ou 49-65 (uma modalidade preferida) (H2) e 93-102, 94-102 ou 95-102 (H3) na VH. Os resíduos de domínio variável estão numerados de acordo com Eu ou Kabat et al., supra, para cada uma destas definições HVR estendidas.

[0086] Resíduos "FR" ou "Estrutura principal" são aqueles resíduos de domínio variável que não são os resíduos de HVR como definidos neste documento.

[0087] A expressão "numeração de resíduo de domínio variável como em UE ou Kabat" ou "numeração de posição de aminoácido como em UE ou Kabat", e variações das mesmas, refere-se ao sistema de numeração usado para os domínios variáveis de cadeia pesada ou domínios variáveis da cadeia leve da compilação de anticorpos em UE ou Kabat et al., supra. Usando esse sistema de numeração, a verdadeira sequência de aminoácidos linear pode conter mais ou menos aminoácidos adicionais correspondentes a um encurtamento, ou inserção, em uma FR ou HVR de domínio variável. Por exemplo, um domínio variável de cadeia pesada pode incluir a inserção de um único aminoácido (resíduo 52a segundo Kabat) depois do resíduo 52 de H2 e resíduos inseridos (por exemplo, resíduos 82a, 82b e 82c etc. segundo Kabat) depois do resíduo 82 da FR de cadeia pesada. A numeração de

UE ou Kabat de resíduos pode ser determinada para um dado anticorpo pelo alinhamento em regiões de homologia da sequência do anticorpo com uma sequência de Kabat "padrão" numerada.

[0088] O sistema de numeração de UE ou Kabat é geralmente usado ao se referir a um resíduo no domínio variável (aproximadamente resíduos 1-107 da cadeia leve e resíduos 1-113 da cadeia pesada) (por exemplo, Kabat et al., Sequences of Immunological Interest. 5º Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)). O "sistema de numeração da UE ou de Kabat" ou "índice de UE" é geralmente utilizado ao se referir a um resíduo em uma região constante de cadeia pesada da imunoglobulina (por exemplo, o índice de UE relatado em Kabat et al., supra). O "índice de UE como em Kabat" refere-se à numeração dos resíduos do anticorpo UE IgG1 humana. Salvo indicação em contrário, as referências aos números de resíduos no domínio variável de anticorpos significam numeração de resíduos pelo sistema de numeração de Kabat. Salvo indicação em contrário neste documento, referências aos números de resíduos no domínio constante de anticorpos significam a numeração de resíduos pelo sistema de numeração UE ou Kabat (por exemplo, ver a Publicação de Patente U.S. Nº 2010-280227).

[0089] Uma "estrutura principal de aceptor humano", como utilizado neste documento, é uma estrutura principal que compreende a sequência de aminoácidos de uma estrutura principal de VL ou VH derivado de uma estrutura principal de imunoglobulina humana ou de uma estrutura principal de consenso humano. Uma estrutura principal aceptor humano "derivado de" uma estrutura principal da imunoglobulina humana ou uma estrutura principal de consenso humano pode compreender a mesma sequência de aminoácidos desta ou pode conter alterações pré-existentes na sequência de aminoácidos. Em algumas modalidades, o número de alterações de aminoácidos pré-

existentes são 10 ou menos, 9 ou menos, 8 ou menos, 7 ou menos, 6 ou menos, 5 ou menos, 4 ou menos, 3 ou menos ou 2 ou menos. Onde alterações de aminoácidos preexistentes estão presentes em uma VH, essas alterações ocorrem preferencialmente em apenas três, duas ou uma das posições 71H, 73H e 78H; por exemplo, os resíduos de aminoácidos nessas posições podem por 71A, 73T e/ou 78A. Em uma modalidade, a estrutura principal de aceptor humano de VL é idêntico na sequência à sequência de estrutura principal da imunoglobulina humana de VL ou à sequência de estrutura principal de consenso humana.

[0090] Uma "estrutura principal de consenso humano" é uma estrutura principal que representa o resíduo de aminoácidos de ocorrência mais comum em uma seleção de sequências de estrutura principal de VL ou VH da imunoglobulina humana. Geralmente, a seleção das sequências VL ou VH da imunoglobulina humana é de um subgrupo de sequências de domínio variável. Em geral, o subgrupo de sequências é um subgrupo como em Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5º Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991). Exemplos incluem para o VL, o subgrupo pode ser o subgrupo Kappa |, kappa Il, kappa Ill ou kappa IV, como em Kabat et al., supra. Além disso, para VH, o subgrupo pode ser o subgrupo |, subgrupo Il ou subgrupo Ill, como em Kabat et al, supra.

[0091] Uma "alteração de aminoácidos" na posição especificada, por exemplo, de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, refere- se à substituição ou deleção do resíduo especificado, ou a inserção de pelo menos um resíduo de aminoácido adjacente ao resíduo especificado. A inserção "adjacente" a um resíduo especificado significa a inserção em um a dois dos resíduos destes. A inserção pode ser de terminal N ou terminal C relativamente ao resíduo especificado. À modificação de aminoácido preferida neste documento é uma substituição.

[0092] Um anticorpo "amadurecido por afinidade" como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, é um com uma ou mais alterações em uma ou mais HVRs deste, que resultam em melhoria na afinidade do anticorpo para o antígeno, em comparação com um anticorpo parental que não possua esta(s) alteração(ões). Em uma modalidade, um anticorpo amadurecido por afinidade tem afinidades nanomolares ou mesmo picomolares para o antígeno alvo. Os anticorpos maturados por afinidade são produzidos através de procedimentos conhecidos na técnica. Por exemplo, Marks et al, Bio/Technology 10:779-783 (1992) descreve a maturação por afinidade por embaralhamento de domínio VH- e VL-. A mutagênese aleatória de resíduos de estrutura principal e/ou HVR é descrita por, por exemplo: Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. EUA 91:3809-3813 (1994); Schier et al. Gene 169:147-155 (1995); Yelton et al. J. Immunol. 155:1994-2004 (1995); Jackson et al., J. Immunol. 154(7):3310-9 (1995); e Hawkins et al, J. Mol. Biol. 226: 889-896 (1992).

[0093] Como utilizado neste documento, o termo "reconhece especificamente" ou "liga-se especificamente a" refere-se a interações mensuráveis e reproduzíveis, como atração ou ligação entre um alvo e um anticorpo, como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, que é determinante da presença do alvo na presença de uma população heterogênea de moléculas incluindo moléculas biológicas. Por exemplo, um anticorpo, como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, que se liga específica ou preferencialmente a um alvo ou epítopo é um anticorpo que se liga a esse alvo ou epítopo com maior afinidade, avidez, mais prontamente e/ou com maior duração do que se liga a outros alvos ou outros epítopos do alvo. Também é compreendido pela leitura desta definição que, por exemplo, um anticorpo (ou uma fração)

que se liga específica ou preferencialmente a um primeiro alvo pode ou não se ligar específica ou preferencialmente a um segundo alvo. Assim, "ligação —específica" ou "ligação preferencia" não requer necessariamente (embora possa ser incluída) uma ligação exclusiva. Um anticorpo que se liga especificamente a um alvo pode ter uma constante de associação de pelo menos cerca de 10 ºM or 10 º*M 7, às vezes cerca de 10 ºM or 10 º M , em outros casos cerca de 10 6 M or 10 ”M, cerca de 10 6 M para 10 ºM “!, ou cerca de 10 *º M 7 to 10 ** Mou superior. Uma variedade de formatos de imunoensaio pode ser usada para selecionar os anticorpos especificamente imunorreativos com uma proteína em particular. Por exemplo, imunoensaios de ELISA de fase sólida são rotineiramente usados para selecionar anticorpos monoclonais especificamente imunorreativas com uma proteína. Ver, por exemplo, Harlow e Lane (1988) Antibodies, À Laboratory Manual, ColdSpring Harbor Publications, Nova lorque, para uma descrição de formatos de imunoensaio e condições que podem ser usadas para determinar uma imunorreatividade específica.

[0094] Como utilizado neste documento, uma "interação" entre uma proteína CD33 e uma segunda proteína abrange, sem limitação, interação proteína-proteína, interação física, interação química, ligação, ligação covalente e ligação iônica. Como utilizado neste documento, um anticorpo "inibe a interação" entre duas proteínas quando o anticorpo interrompe, reduz ou elimina completamente uma interação entre as duas proteínas. Um anticorpo da presente descrição, ou fragmento deste, "inibe a interação" entre duas proteínas quando o anticorpo ou fragmento do mesmo se liga a uma das duas proteínas.

[0095] Um anticorpo "agonista" ou um anticorpo "ativador" é um anticorpo, como um anticorpo agonista anti-CD33 da presente descrição, que induz (por exemplo, aumenta) uma ou mais atividades ou funções do antígeno após o anticorpo se ligar ao antígeno.

[0096] Um anticorpo "bloqueador", um anticorpo "antagonista" ou um anticorpo "inibitório" é um anticorpo, como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, que inibe ou reduz (por exemplo, diminui) a ligação a um ou mais ligantes após o anticorpo se ligar ao antígeno, e/ou que inibe ou reduz (por exemplo, diminui) uma ou mais atividades ou funções do antígeno após o anticorpo se ligar ao antígeno. Em algumas modalidades, os anticorpos de bloqueio ou anticorpos antagonistas, ou anticorpos inibitórios inibem substancial ou completamente a ligação do antígeno a um ou mais ligantes e/ou uma ou mais atividades ou funções do antígeno.

[0097] "Funções efetoras" de anticorpos referem-se às atividades biológicas atribuíveis à região Fc (uma região Fc de variante de sequência de aminoácido ou região Fc de sequência nativa) de um anticorpo e variam com o isotipo do anticorpo.

[0098] O termo "região Fc" é usado aqui para definir a região de terminal C de uma cadeia pesada de imunoglobulina, incluindo as regiões Fc de sequência nativa e as regiões Fc variantes. Embora os limites da região Fc de uma cadeia pesada de imunoglobulina possam variar, a região Fc de cadeia pesada de IgG humana está habitualmente definida para alongar a partir de um resíduo de aminoácido na posição Cys226, ou desde Pro230, até ao terminal carboxil da mesma. A lisina de terminal C (resíduo 447, de acordo com o sistema de numeração UE) da região Fc pode ser removida, por exemplo, durante a produção ou purificação do anticorpo ou pela modificação recombinante do ácido nucleico que codifca uma cadeia pesada do anticorpo. Consequentemente, uma composição de anticorpos intactos pode compreender populações de anticorpos com todos os resíduos K447 removidos, as populações de anticorpos com nenhum resíduo K447 removido e populações de anticorpo com uma mistura de anticorpos com e sem o resíduo K447. As regiões Fc de sequência nativa adequadas para uso nos anticorpos da presente descrição incluem a IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4 humanas.

[0099] Uma "sequência de região Fc nativa" compreende uma sequência de aminoácidos idêntica à sequência de aminoácidos de uma região Fc encontrada na natureza. Regiões Fc humanas de sequência nativa incluem uma região Fc humana de sequência nativa de I9G1 (alotipos A e não A); região Fc humana de sequência nativa de 19G2; região Fc humana de sequência nativa de IgG3; e região Fc humana de sequência nativa de IgG4 bem como variantes de ocorrência natural desta.

[00100] Uma "região Fc variante" compreende uma sequência de aminoácidos que difere da de uma região Fc de sequência nativa em virtude de pelo menos uma modificação de aminoácido, de preferência uma ou mais substituição(ões) de aminoácidos. Preferencialmente, a região Fc variante tem pelo menos uma substituição de aminoácidos em comparação com uma região Fc de sequência nativa ou uma região Fc de um polipeptídeo de origem, por exemplo, de cerca de uma a cerca de dez substituições de aminoácidos, e preferivelmente de cerca de uma a cerca de cinco substituições de aminoácidos numa região Fc de sequência nativa ou na região Fc do polipéptido de origem. A região Fc variante neste documento, preferencialmente irá possuir pelo menos cerca de 80% de homologia com uma região de sequência nativa de Fc e/ou com uma região Fc de um polipeptídeo parental e, mais preferencialmente, pelo menos cerca de 90% de homologia com esta, mais preferencialmente pelo menos cerca de 95% de homologia com esta.

[00101] O"receptor Fc" ou "FcR" descreve um receptor que se liga à região Fc de um anticorpo. O FcR preferencial é um FcR humano de sequência nativa. Além disso, um FcR preferido é um que se liga a um anticorpo IgG (um receptor gama) e inclui receptores das subclasses

FeyRI, FeyRI! e FeyRiII, incluindo variantes alélicas e formas alternadas emendadas destes receptores, os receptores FcyRII incluem FeyRIIA (um "receptor ativador ") e FCcyRIIB (um" receptor inibidor "), que possuem sequências de aminoácidos semelhantes que diferem principalmente nos seus domínios citoplasmáticos. Receptor de ativação de FCyRIIA contém um motivo de ativação de imunorreceptor baseado em tirosina ("ITAM") no seu domínio citoplasmático. O receptor de inibição de FCyRIIB contém um motivo de inibição de imunorreceptor baseado em tirosina ("ITIM") no seu domínio citoplasmático, (ver, por exemplo, M. Daêron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)). Os FcRs são analisados em Ravetch e Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-92 (1991); Capel et al., Imnmunomethods 4:25-34 (1994); e de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995). Outros FcRs, incluindo aqueles a serem identificados no futuro, são englobados pelo termo "FcR" neste documento. Os FcRs também podem aumentar a meia-vida sérica dos anticorpos.

[00102] A ligação a FcRn humano in vivo e meia vida no soro dos polipeptídeos humanos de elevada afinidade de ligação de FcRn pode ser ensaiada, por exemplo, em camundongos transgênicos ou linhas de células humanas transfectadas que expressam FcRn humano ou em primatas aos quais os polipeptídeos com uma região Fc variante são administrados. WO 2004/42072 (Presta) descreve variantes de anticorpos com ligação melhorada ou diminuída a FcRs. Ver também, por exemplo, Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2):6591-6604 (2001).

[00103] Conforme usado neste documento, "porcentagem (%) de identidade de sequência de aminoácidos" e "homologia" com relação a uma sequência de peptídeo, polipeptídeo ou anticorpo referem-se à porcentagem de resíduos de aminoácidos em uma sequência candidata que são idênticos aos resíduos de aminoácidos na sequência específica de peptídeo ou polipeptídeo, após o alinhamento das sequências e a introdução de lacunas, se necessário, para atingir a identidade percentual! máxima da sequência e sem considerar quaisquer substituições conservadoras como parte da identidade da sequência. O alinhamento para fins de determinação do percentual de identidade da sequência de aminoácidos pode ser atingido de muitas formas no estado da técnica, por exemplo, usando software de computador livre, tal como BLAST, BLAST-2, ALIGN ou MEGALIGNTM (DNASTAR). Aqueles versados na técnica podem determinar parâmetros apropriados para medir o alinhamento, incluindo quaisquer algoritmos conhecidos na técnica necessários para atingir o alinhamento máximo em relação ao comprimento total das sequências sendo comparadas.

[00104] Uma molécula de ácido nucleico "isolada" que codifica um anticorpo, como um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, é uma molécula de ácido nucleico que é identificada e separada de pelo menos uma molécula de ácido nucleico contaminante com a qual está normalmente associada no meio em que foi produzida. De preferência, o ácido nucleico isolado está livre de associação a todos os componentes associados ao meio de produção. As moléculas de ácido nucleico isoladas que codificam os polipeptídeos e anticorpos deste documento estão em uma forma diferente da forma ou configuração na qual são encontradas na natureza. As moléculas de ácido nucleico isoladas são, portanto, distinguidas do ácido nucleico que codifica os polipeptídeos e anticorpos deste documento existentes naturalmente nas células.

[00105] O termo "vetor", como aqui utilizado, pretende referir-se a uma molécula de ácido nucleico capaz de transportar outro ácido nucleico ao qual foi ligada. Um tipo de vetor é um "plasmídeo", que se refere a um DNA de cadeia dupla circular ao qual segmentos de DNA adicionais podem ser ligados. Um outro tipo de vetor é um vetor de fago. Outro tipo de vetor é um vetor viral, em que segmentos de DNA adicionais podem ser ligados no genoma viral. Certos vetores são capazes de replicação autônoma em uma célula hospedeira em que eles são introduzidos (por exemplo, vetores bacterianos, tendo uma origem bacteriana da replicação e vetores de mamíferos epissômicos). Outros vetores (por exemplo, vetores de mamíferos não epissômicos) são integrados ao genoma de uma célula hospedeira, mediante a introdução na célula hospedeira e, assim, são replicados junto com o genoma hospedeiro. Além disso, certos vetores são capazes de direcionar a expressão de genes aos quais estão ligados operativamente. Tais vetores são referidos neste documento como "vetores de expressão recombinantes", ou simplesmente "vetores de expressão". Em geral, os vetores de expressão de utilidade em técnicas de DNA recombinante estão frequentemente sob a forma de plasmídeos. No presente relatório descritivo, "plasmídeo" e "vetor" podem ser usados indistintamente, uma vez que o plasmídeo é a forma de vetor mais comumente usada.

[00106] "Polinucleotídeo" ou "ácido nucleico", conforme usados intercambiavelmente neste documento, referem-se a polímeros de nucleotídeos de qualquer comprimento e incluem DNA e RNA. Os nucleotídeos podem ser desoxirribonucleotídeos, ribonucleotídeos, nucleotídeos modificados ou bases, e/ou seus análogos ou qualquer substrato que pode ser incorporado a um polímero por DNA ou RNA polimerase ou por uma reação sintética. Um polinucleotídeo pode compreender nucleotídeos modificados, como nucleotídeos metilados e seus análogos. Se estiver presente, a modificação da estrutura do nucleotídeo pode ser transmitida antes ou após a montagem do polímero. A sequência de nucleotídeos pode ser interrompida por componentes não nucleotídeos. Um polinucleotídeo pode compreender modificação(ões) feita(s) após a síntese, tal como conjugação a um marcador. Outros tipos de modificações incluem, por exemplo, "caps",

substituição de um ou mais dos nucleotídeos que ocorrem naturalmente com um análogo, modificações internucleotídicas tais como, por exemplo, aquelas com ligações descarregadas (por exemplo, fosfonatos de metil, fosfotriésteres, fosfoamidatos, cabamatos, etc.) e com ligações carregadas (por exemplo, fosforotioatos, fosforoditioatos, etc.), aquelas que contêm porções pendentes, tais como, por exemplo, proteínas (por exemplo, nucleases, toxinas, anticorpos, peptídeos de sinal, ply-L-lisina, etc.), aquelas com intercaladores (por exemplo, acridina, psoraleno, etc.), aquelas contendo quelantes (por exemplo, metais, metais radioativos, boro, metais oxidativos, etc.), aquelas contendo alquiladores, aquelas com ligações modificadas (por exemplo, ácidos nucleicos alfa-anoméricos, etc), bem como formas não modificadas de polinucleotídeo(s). Além disso, qualquer um dos grupos hidroxil geralmente presentes nos açúcares pode ser substituído, por exemplo, por grupos fosfonato, grupos fosfato, protegido por grupos protetores padrão, ou ativado para preparar ligações adicionais para nucleotídeos adicionais, ou pode ser conjugado com suportes sólidos ou semissólidos.

Os terminais OH 5' e 3' podem ser fosforilados ou substituídos por aminas ou frações de grupos orgânicos de capping de 1 a 20 átomos de carbono.

Outras hidroxilas também podem ser derivatizadas de grupos protetores padrão.

Os polinucleotídeos também podem conter formas análogos de açúcares de ribose ou desoxirribose que geralmente são conhecidos na técnica, incluindo, por exemplo, 2'- O-metil-, 2'-O-alil, 2'-fluoro ou 2'-azido-ribose, análogos de açúcar carbocíclico, açúcares alfa-anoméricos, açúcares epiméricos, tais como arabinose, xilose ou lixose, açúcares de piranose, açúcares de furanose, heptuloses, análogos acíclicos e análogos de nucleosídeos básicos, como metil-ribósido.

Uma ou mais ligações de fosfodiéster podem ser substituídas por grupos de ligação alternativos.

Esses grupos de ligação alternativos incluem, mas não estão limitados a, modalidades em que o fosfato é substituído por P(O)JS ("tioato"), P(S)S ("ditioato"), (O)NR2 ("amidato"), P(O)R, P(O)OR', CO ou CH2 ("formacetal"), em que cada R ou R' é, independentemente, H ou alquil (1-20 C) substituído ou não substituído, contendo, opcionalmente, uma ligação (-O-) de éter, aril, alquenil, cicloalquil, cicloalquenil ou araldil. Nem todas as ligações em um polinucleotídeo precisam ser idênticas. A descrição anterior se aplica a todos os polinucleotídeos referidos neste documento, incluindo RNA e DNA.

[00107] Uma"célula hospedeira" inclui uma célula de cultura ou uma célula individual que pode ser ou ter sido um receptor para vector (es) para a incorporação de inserções de polinucleotídeos. As células hospedeiras incluem a descendência de uma única célula hospedeira e a descendência pode não ser necessariamente completamente idêntica (em morfologia ou em complemento do DNA genômico) à célula parental original devido a uma mutação natural, acidental ou deliberada. Uma célula hospedeira inclui células transfectadas in vivo com um polinucleotídeo (s) da presente descrição.

[00108] "Veículos", conforme usado neste documento, inclui veículos farmaceuticamente aceitáveis, excipientes ou estabilizadores que não sejam tóxicos para a célula ou para o mamífero exposto a eles nas dosagens e concentrações utilizadas. Frequentemente, o veículo fisiologicamente aceitável é uma solução aquosa tamponada de pH. Os exemplos de veículos fisiologicamente aceitáveis incluem tampões, como fosfato, citrato e outros ácido orgânicos; antioxidantes, incluindo ácido ascórbico; polipeptídeos de baixo peso molecular (menos de cerca de 10 resíduos); proteínas, tais como gelatina, imunoglobulinas ou albumina sérica; polímeros hidrofílicos, tais como polivinilpirrolidona, aminoácidos, tais como glicina, glutamina, asparaginas, arginina ou lisina; monossacarídeos, dissacarídeos, e outros carboidratos, incluindo glicose, manose, ou dextrinas; agentes quelantes, tais como EDTA;

álcoois de açúcar, tais como manitol ou sorbitol; contraíons formadores de sal, tais como sódio; e/ou surfactantes aniônicos, tais como TWEENTY, polietileno glicol (PEG) e PLURONICSTY,

[00109] Otermo "cerca de", como utilizado neste documento, refere- se à faixa de erro usual para o respectivo valor prontamente conhecido pela pessoa versada neste campo técnico. Referência a "cerca de" um valor ou parâmetro neste documento inclui (e descreve) modalidades que são dirigidas a esse valor ou parâmetro per se.

[00110] Tal como usado neste documento e nas reivindicações anexas, as formas singulares "um", "uma", e "o", "a" incluem o plural, a menos que o contexto indique claramente o contrário. Por exemplo, a referência a um "anticorpo" é uma referência a de um a muitos anticorpos, tais como quantidades molares, e inclui equivalentes dos mesmos conhecidos pelos versados na técnica, e assim por diante.

[00111] Entende-se que aspectose modalidades da presente descrição descritos neste documento incluem "compreendendo", "consistindo" e "consistindo essencialmente em" aspectos e modalidades. Perspectiva Geral

[00112] A presente descrição se refere, em parte, a anticorpos anti- CD33 que exibem uma ou mais características funcionais aprimoradas e/ou aprimoradas (por exemplo, em relação a um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104), incluindo, por exemplo, anticorpos capazes de diminuir os níveis da superfície celular de CD33 e/ou ligar CD33 com cinética melhorada/aprimorada; métodos para fabricar e usar esses anticorpos; composições farmacêuticas contendo tais anticorpos; ácidos nucleicos que codificam esses anticorpos; ecélulas hospedeiras contendo ácidos nucleicos que codificam esses anticorpos.

[00113] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma ou mais atividades que são devidas, pelo menos em parte, à capacidade dos anticorpos inibirem a interação entre CD33 e um ou mais ligantes de glicano naturais.

Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ter uma ou mais atividades que são devidas, pelo menos em parte, à capacidade dos anticorpos para reduzir a expressão celular (por exemplo, expressão da superfície celular) de CD33 por indução de degradação, regulação negativa, clivagem, dessensibilização do receptor e/ou direcionamento lisossômico de CD33. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 exibem uma ou mais das seguintes propriedades: a. têm uma constante de dissociação (Kp) para CD33 humana que é inferior à de um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104; b. ligar-se a células humanas, tais como células dendríticas humanas primárias; c. diminuir os níveis de CD33 na superfície celular (por exemplo, diminuir os níveis de CD33 na superfície das células dendríticas humanas primárias in vitro) com uma concentração efetiva semi-máxima (ECs5o) menor que a de um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104; d. têm uma constante de dissociação (Ko) para CD33 humana que pode variar de cerca de 8,57 nM a cerca de 4,1 pM, por exemplo, quando a Kp é determinada por ressonância plasmônica de superfície ou Interferometria BioLayer; e/ou e. diminuir os níveis de CD33 na superfície celular (por exemplo, diminuir os níveis de CD33 na superfície das células dendríticas humanas primárias in vitro) com uma concentração efetiva semi- máxima (ECso) que pode variar de cerca de 151,1 pM a cerca de 4,1 pM,

por exemplo, quando a ECso é determinado in vitro por citometria de fluxo. Conforme divulgado neste documento, a concentração efetiva semi-máxima (ECrs0) refere-se à concentração na qual um anticorpo anti- CD33 da presente descrição reduz os níveis celulares de CD33 em uma célula ou em uma célula para a metade do que nas células não tratadas, ou a concentração na qual o anticorpo atinge uma ligação meia-máxima ao CD33 em uma célula.

[00114] Vantajosamente, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição reduzem a expressão da superfície celular (por exemplo, até aproximadamente 18 vezes) de CD33 de forma mais potente (por exemplo, com uma ECrso inferior) em comparação com um anticorpo anti-CD33 de controle (por exemplo, um controle anticorpo anti-CD33 tendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104) (Ver, por exemplo, Exemplo 2). Além disso, vantajosamente, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma afinidade superior (por exemplo, afinidade até 25 vezes supeior) para CD33 (por exemplo, um valor Kp inferior, medido pela ressonância plasmônica de superfície) em comparação com um anti-controle Anticorpo -CD33 (por exemplo, um anticorpo anti- CD33 de controle com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104 (Veja por exemplo, Exemplos 1 e 3). Surpreendentemente, uma maior afinidade por CD33 não se correlaciona necessariamente com um aumento na capacidade ou potência de redução da expressão da superfície celular de CD33 (Veja, por exemplo, Exemplos 2 e 5).

[00115] Certos aspectos da presente descrição são baseados, pelo menos em parte, na identificação de anticorpos anti-CD33 que exibem uma ou mais características funcionais melhoradas e/ou aprimoradas(por exemplo, em relação a um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº 104), incluindo, uma capacidade melhorada/aprimorada de diminuir os níveis de CD33 na superfície celular nas células, resultando na redução, neutralização, prevenção ou restrição de uma ou mais atividades de CD33, incluindo, sem limitação, redução do crescimento celular de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas e/ou microglia; redução da proliferação de células T induzida por células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada, microglia M2, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados e/ou macrófagos M2; diminuição da sobrevida de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células auxiliares T, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada e/ou microglia M2; diminuição da proliferação de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T auxiliares, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativadas, e/ou microglia M2; inibindo a migração de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T auxiliares, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, Microglia M1, microglia M1 ativadas e/ou microglia M2; diminuição de uma ou mais funções de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2,

monócitos, osteoclastos, células T, células auxiliares T, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, M1 microglia, microglia M1 ativada, e/ou microglia M2; redução da proliferação de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; reduzir a funcionalidade geral de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de câncer selecionados de câncer de bexiga, câncer cerebral, câncer de mama, câncer de cólon, câncer retal, câncer endometrial, câncer renal, câncer de células renais, câncer de pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, não Linfoma de Hodgkin, leucemia mieloide aguda, câncer de pâncreas, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma e câncer de tireoide; inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de distúrbios neurológicos selecionados entre demência, demência frontotemporal, doença de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt- Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença de taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, tremor essencial, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy-Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar da base cortical, encefalomielite disseminada aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada à idade, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana e esclerose múltipla; ligação ao ligante CD33 nas células tumorais; ligação ao ligante CD33 em células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, microglia, células T, neutrófilos e/ou macrófagos; inibição da morte de células tumorais por uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; inibição da atividade de proliferação de células antitumorais de uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; inibição da atividade de metástase de células antitumorais de uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; expressão modulada de um ou mais receptores inflamatórios, como CD86, expressa em uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; aumentar a infiltração de um ou mais células dendríticas imunossupressoras, macrófagos imunossupressores, células supressoras derivadas de mieloides, macrófagos associados aos tumores, neutrófilos imunossupressores e células T reguladoras em tumores; aumento do número de células imunossupressoras mieloides/granulocíticas promotoras de tumores em um tumor, no sangue periférico ou em outro órgão linfoide; aumentar a atividade promotora de tumor de células supressoras derivadas de mieloides; diminuição da ativação de linfócitos T específicos de tumor com potencial de morte tumoral; diminuir a infiltração de linfócitos T específicos de tumores com potencial de morte tumoral; aumento da taxa de crescimento tumoral; aumento da taxa de recorrência do tumor; diminuição da eficácia de uma ou mais imunoterapias que modulam as respostas das células T antitumorais, opcionalmente em que a uma ou mais imunoterapias são imunoterapias direcionadas a uma ou mais proteínas selecionadas de CD40, OX40, ICOS, CD28, CD137/4-1BB, CD27, GITR, PD-L1, CTLA4, PD-L2, PD-1, B7-H3, B7-H4, HVEM, LIGHT, BTLA, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIM4, A2AR, LAG3, DR-

5, CD39, CD70, TREM1, TREM2, Siglec-5, Siglec-7, Siglec-9, Siglec- 11, SirpA, CD447, receptor CSF-1, e qualquer combinação destes, ou de um ou mais agentes quimioterápicos e/ou uma ou mais vacinas contra o câncer.

[00116] Em algumas modalidades, o tratamento de câncer com anticorpos anti-CD33, conforme descrito neste documento, pode: (i) aumentando o número de tumores infiltrados em células T CD3* ; (ii) diminuição dos níveis celulares de CD33 em células mieloides CD14*não tumorigênicas, opcionalmente em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas são células infiltrantes de tumor ou opcionalmente em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas estão presentes no sangue; (iii) reduzir o número de células mieloides CD14* não tumorigênicas, opcionalmente em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas são células infiltrtantes de tumor ou, opcionalmente, em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas estão presentes no sangue; (iv) d reduzir os níveis de PD-L1, PD-L2, B7-H7, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 em uma ou mais células, opcionalmente em que as uma ou mais células são células supressoras derivadas de mieloides não tumorigênicas (MDSC); (v) diminuição da taxa de crescimento tumoral de tumores sólidos; (vi) reduzindo o volume do tumor; (vii) eficácia crescente de um ou mais inibidores da PD-1; (viii) eficácia crescente de uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias imunomoduladoras, opcionalmente em que a uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias imunomoduladoras têm como alvo um ou mais CTLA, a via da adenosina, PD-L1, PD- L2, OX40, TIM3, LAG3 ou qualquer combinação destes; (ix) eficácia crescente de um ou mais agentes quimioterápicos, opcionalmente em que o um ou mais “agentes quimioterápicos sãogemcitabinay capecitabina, antraciclinas, doxorrubicina (Adriamicinaº), epirrubicina (Ellenceº), taxanos, paclitaxel (Taxolº), docetaxel (Taxotereº), 5-fluorouracil (5-

FU), ciclofosfamida (Cytoxanº), carboplatina (Paraplatinº), e qualquer combinação destes ; (x) i aumento da proliferação de células T na presença de células supressoras derivadas de mieloides não tumorigênicas (MDSC); (xi) inibição da diferenciação, sobrevivência e/ou uma ou mais funções de células supressoras derivadas de mieloides não tumorigênicas (MDSC); e (xii) matar células mieloides não tumorigênicas imunossupressoras que expressam CD33 e/ou células que expressam CD14 não tumorigênicas em tumores sólidos e vasos sanguíneos associados quando conjugados a uma toxina química ou radioativa.

[00117] Em algumas modalidades, as células mieloides da presente descrição incluem, sem limitação, células mieloides CD45 + CD14 +, células mieloides CD14 + e células supressoras derivadas de mieloides (MDSC). Em algumas modalidades, as células mieloides da presente descrição são células mieloides não tumorigênicas. Às vezes, as células imunossupressoras também são chamadas de células supressoras derivadas de mieloides (MDSC). Em seres humanos, os MDSCs podem ser definidos por uma das seguintes combinações de marcadores: (1) CD14+HLA-DRlow/-, (2) CD14+IL4Ra+, (3) CDI4+HLA-DR-IL4Ra+, (4) CD34+CD14+CD11b+CD33+, (5) CD11Ib+CD14+CD33+, (6) CD33+HLA-DR-, (7) Lin-HLA-DR-, (8) Lin-HLA-DR-CD33+, (9) Lin-HLA-DR-CD33+CD11b+, (10) Lin-CD33+CD11b+CD15+, (11) Lin-HLA-DR-CD33+CD11b+CD14-CD15+, (12) CD11b+CD14-CD33+, (13) CD11b+CD14-HLA-DR-CD33+CD15+, (14) CD33+HLA-DR-CD15+, (15) CD15+IL4Ra+, (16) CD11b+CD15+CD66b+, (17) CD15+FSCinferiorSSCsuperior, (18) CD15superiorCD33+, (19) CD11b+CD14-CD15+, (20) CD66b+SSCsuperior, e (21) CD11b+CD15+ (Veja também Solito S et al. Annals of the NY Academy of Sciences, 2014). Em camundongos, os MDSCs podem ser definidos pela expressão dos marcadores de superfície CD45 +, CD11b +, Gr + e/ou Il4Ra +. Outras linhagens monocíticas imunossupressores exemplares são CD45 +, CD11b +, Grisuperior; e CD45 +, CD11c +. Proteínas CD33

[00118] Em um aspecto, a presente descrição fornece anticorpos, como anticorpos isolados (por exemplo, monoclonais), que interagem com ou de outra forma se ligam a uma região, como um epítopo, dentro de uma proteína CD33 da presente descrição. Em algumas modalidades, os anticorpos interagem com ou de outra forma se ligam a uma região, como um epítopo, dentro de uma proteína CD33 da presente descrição com cinética melhorada/aprimorada (por exemplo, em relação a um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos interagem com ou de outra forma se ligam a uma região, como um epítopo, dentro de uma proteína CD33 em células humanas, como células dendríticas, com uma concentração efetiva semi-máxima (ECso) que é inferior à de um anticorpo de controle (por exemplo, em relação a um anticorpo anti- CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam a uma proteína CD33 e modulam uma ou mais atividades CD33 após a ligação à proteína CD33, por exemplo, uma atividade associada à expressão de CD33 em uma célula. As proteínas CD33 da presente descrição incluem, sem limitação, uma proteína CD33 de mamífero, proteína CD33 humana, proteína CD33 de camundongo e proteína CD33 de rato.

[00119] CD33 é referido como uma molécula CD33, Siglec3, Siglec-

3, antígeno CD33 (Gp67), P67, Gp67, lectina 3 semelhante a lg de ligação ao ácido siálico, antígeno mieloide de superfície celular CD33 ou FLJOO0391.

[00120] O CD33 é um receptor do tipo imunoglobulina expresso principalmente nas células da linhagem mieloide, incluindo, sem limitação, macrófagos, células dendríticas, osteoclastos, monócitos e microglia. Em algumas modalidades, CD33 forma um complexo de sinalização de receptor com CD64. Em algumas modalidades, a sinalização CD33 resulta na inibição a jusante de PISK ou outros sinais intracelulares. Nas células Mieloides, os sinais do receptor do tipo Toll (TLR) são importantes para a inibição das atividades do CD33, por exemplo, no contexto de uma resposta à infecção. Os TLRs também desempenham um papel fundamental na resposta inflamatória patológica, por exemplo, TLRs expressos em macrófagos e células dendríticas.

[00121] A sequência de aminoácidos do CD33 humano é apresentada abaixo como SEQ ID Nº: 1:

MPLLLLLPLL WAGALAMDPN FWLQVQESVT VQEGLCVLVP — CTFFHPIPY —YDKNSPVHGYW — FREGAIISRD SPVATNKLDQ —EVQOEETAGRF RLLGDPSRNN CSLSIVDARR RDNGSYFFRM ERGSTKYSYK SPQLSVHVTD LTHRPKILIP GTLEPGHSKN LTCSVSWACE QGTPPIFSWL SAAPTSLGPR TTHSSVLIIT PRPQDHGTNL TCQVKFAGAG VTTERTIQLN VTYVPQNPTT GIFPGDGSGK QETRAGVVHG AIGGAGVTAL LALCLCLIFF IVKTHRRKAA RTAVGRNDTH

[00122] “PTTGSASPKH QKKSKLHGPT ETSSCSGAAP

TVEMDEELHY ASLNFHGMNP SKDTSTEYSE VRTQ

[00123] Em algumas modalidades, a CD33 é uma pré-proteína que inclui uma sequência de sinais. Em algumas modalidades, a CD33 é uma proteína madura. Em algumas modalidades, a proteína CD33 madura não inclui umasequência de sinal. Em algumas modalidades, a proteína CD33 madura é expressa em uma célula. Em algumas modalidades, a proteína CD33 madura é expressa em uma célula, como a superfície de uma célula, incluindo, sem limitação, células dendríticas humanas, macrófagos humanos, monócitos humanos, osteoclastos humanos, neutrófilos humanos, células T humanas, célula T auxiliar humana, células T citotóxicas humanas, granulócitos humanos e microglia humana. Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem se ligar a qualquer uma das proteínas CD33 da presente descrição expressas em qualquer célula aqui divulgada.

[00124] As proteínas CD33 da presente descrição, como CD33 humana, contêm vários domínios, incluindo, sem limitação, uma sequência de sinal localizada nos resíduos de aminoácidos 1-17 da SEQ ID Nº: 1, um domínio de tipo variável (IQV) do tipo imunoglobulina extracelular localizado nos resíduos de aminoácidos 19-135 da SEQ ID Nº: 1, um domínio do tipo C2 do tipo Ig localizado nos resíduos de aminoácidos 145-228 da SEQ ID Nº: 1, um domínio transmembranar localizado nos resíduos de aminoácidos 260-282 de SEQ ID Nº: 1, um motivo ITIM 1 localizado nos resíduos de aminoácidos 338-343 da SEQ ID Nº: 1 e um motivo ITIM 2 localizado nos resíduos de aminoácidos 356-361 da SEQ ID Nº: 1. Como um versado na técnica apreciará, os resíduos inicial e final dos domínios da presente descrição podem variar dependendo do programa de modelagem por computador usado ou do método usado para determinar o domínio.

[00125] Certos aspectos dapresente descrição fornecem anticorpos anti-CD33 que se ligam a uma CD33 humana, ou um homólogo deste, incluindo, sem limitação, uma proteína CD33 de mamífero e ortólogos Cd33 de outras espécies. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-

CD33 da presente descrição se ligam a uma CD33 humana, ou seu homólogo, com cinética de ligação melhorada/aprimorada (por exemplo, em relação a um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104).

[00126] Por conseguinte, como utilizada neste documento, uma proteína "CD33" da presente descrição inclui, sem limitação, uma proteína CD33 de mamífero, proteína CD33 humana, proteína CD33 de primata, proteína CD33 de camundongo e proteína CD33 de rato. Além disso, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem se ligar a um epítopo dentro de uma proteína CD33 humana, o CD33 primata. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem se ligar especificamente à CD33 humana.

[00127] Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição podem se ligar a CD33 de maneira dependente do pH. Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição podem se ligar a CD33 a um pH neutro e ser internalizados sem se dissociar da proteína CD33. Alternativamente, a um pH ácido, os anticorpos da presente descrição podem se dissociar de CD33 uma vez internalizados e depois degradados pela via do endossoma/lisossomo. Em certas modalidades, um anticorpo anti-CD33 liga CD33 a um pH que varia de 5,5 a 8,0, de 5,5 a 7,5, de 5,5 a 7,0, de 5,5 a 6,5, de 5,5 a 6,0, de 6,0 a 8,0, de 6,5 a 8,0, de 7,0 a 8,0, de 7,5 a 8,0, de 6,0 a 7,5, de 6,0 a 7,0, de 6,5 a 7,5. Em certas modalidades, um anticorpo anti-CD33 se dissocia de CD33 a um pH inferior a 6,0, inferior a 5,5, inferior a 5,0, inferior a 4,5, inferior a 4,0, inferior a 3,5, inferior a 3,0, inferior a 2,5 ou inferior a 2,0.

[00128] Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição se ligam a uma proteína CD33 de tipo selvagem da presente descrição, variantes naturais da mesma e/ou variantes da doença.

[00129] Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição ligam uma variante da CD33 humana, em que a variante contém um único polimorfismo de nucleotídeo (SNP) rs3865444C com um nucleotídeo (C). Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição que diminuem os níveis celulares de CD33 e/ou que se ligam ou interagem com CD33, se ligam a uma variante da CD33 humana, em que a variante contém um SNP rs3865444 com um nucleotídeo (A). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição ligam uma variante de CD33 humana, em que a variante contém um SNPrs3865444º ou rs3865444ºC,

[00130] Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição que diminuem os níveis celulares de CD33 e/ou que se ligam ou interagem com CD33, ligam uma variante de CD33 humana, em que a variante contém um SNP rs35112940 com nucleotídeos GG, nucleotídeos AA ou nucleotídeos AG. Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição que diminuem os níveis celulares de CD33 e/ou que se ligam ou interagem com CD33, ligam uma variante de CD33 humana, em que a variante contém um SNP rs12459419 com os genótipos CC, CT ou TT. Em certas modalidades, o sujeito tem um homozigoto ou heterozigoto para os SNPs codificadores, rs1803 com nucleotídeos GG, nucleotídeos CG ou nucleotídeos CC.

[00131] Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição que diminuem os níveis celulares de CD33 e/ou que se ligam ou interagem com CD33, se ligam a uma proteína CD33 expressa na superfície de uma célula, incluindo, sem limitação, células dendríticas humanas, macrófagos humanos, humanos monócitos, osteoclastos humanos, neutrófilos humanos, células T humanas, célula auxiliar T humana, células T citotóxicas humanas, granulócitos humanos e microglia humana. Em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição que diminuem os níveis celulares de CD33 e/ou que se ligam ou interagem com CD33, se ligam a uma proteína CD33 expressa na superfície de uma célula e modulam (por exemplo, induzem ou inibem) pelo menos uma atividade CD33 da presente descrição após a ligação à proteína CD33 expressa na superfície. Em algumas modalidades da presente descrição, o anticorpo anti-CD33 se liga especificamente a uma proteína CD33. Em algumas modalidades da presente descrição, o anticorpo anti-CD33 se liga ainda a pelo menos uma proteína Siglec adicional. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 modula uma ou mais atividades da pelo menos uma proteína Siglec adicional ou de uma célula que expressa a pelo menos uma proteína Siglec adicional. Ligantes de CD33

[00132] As proteínas CD33 da presente descrição podem interagir com (por exemplo, se ligar a) um ou mais ligantes de CD33.

[00133] Exemplos de igantes de CD33 incluem, sem limitação, ácido siálico, glicolipídeos contendo ácido siálico, glicoproteínas contendo ácido siálico, glicolipídeos contendo ácido siálico ligados a alfa-2,6, glicoproteínas contendo ácido siálico ligados a alfa-2,6, glicolipídeos contendo ácido siálico ligados a alfa-2,3, glicoproteínas que contêm ácido siálico ligados a alfa-2,3, ácido de glicoproteína alfa-1 (AGP), proteína CD24, gangliosídeos (por exemplo, glicolipídeos contendo uma ceramida ligada a um glicano sialilado) , mucinas segregadas , ligantes de CD33 expressos nos glóbulos vermelhos, ligantes de CD33 expressos em células bacterianas, ligantes de CD33 expressos em células apoptóticas, ligantes de CD33 expressos em células tumorais, ligantes de CD33 expressos em vírus, ligantes de CD33 expressos em em células dendríticas, ligantes de CD33 expresso em células nervosas, ligantes de CD33 expressos em células gliais, ligantes de CD33 expressos em micróglia, ligantes de CD33 expressos em astrócitos, ligantes de CD33 em placas beta-amiloides, ligantes de CD33em emaranhados Tau, ligantesCD33 em causadores de doenças proteínas,

ligantes de CD33 em peptídeos causadores de doenças, ligantes de CD33 expressos em macrófagos, ligantes de CD33 expressos em células assassinas naturais, ligantes de CD33 expressos em células T, ligantesCD33 expressos em células T auxiliares, ligantes de CD33 expressos em células T auxiliares, ligantes de CD33 expressos nas células B, ligantes de CD33 expressos em células dendríticas imunossupressoras incorporadas ao tumor, ligantes de CD33 expressos em macrófagos imunossupressores inseridos no tumor, ligantes de CD33 expressos em células supressoras derivadas de mieloides e ligantes de CD33 expressos em células T reguladoras. Em algumas modalidades, os ligantes de CD33 da presente descrição são gangliosídeos. Os gangliosídeos geralmente compartilham um núcleo comum de lacto-ceramida e um ou mais resíduos de ácido siálico.

[00134] —Outrosexemplos de ligantes gangliosídeos adequados estão listados na Tabela A. Geralmente, um gangliosídeo é uma molécula composta por um glicosfingolipídeo com um ou mais ácidos siálicos (por exemplo, ácido n-acetil-neuramínico, NANA) ligados à cadeia de açúcar.

Tabela A: Estruturas de ligantes de gangliosídeo CD33 exemplares GMZ2-1 = aNeuSAc(2-3)DDGalp(1-?)DDGalNAc(1-?)bDGalNAc(1-?)bDGIcp(1-1)Cer GM3 = aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GM2,GM2a(?) = bDGalpNAc(1-4)[aNeuSAc(2-3)]bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GM2b(?) = aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GM1,GM1a = bDGalp(1-3)bDGalNAc[aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer asialo-GM1,GA1 = bDGalp(1-3)DDGalpNAc(1-4)bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer asialo-GM2, GA2 = bDGalpNAc (1-4) bDGalp (1-4) bDGIcp (1-1) Cer GM1b = aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)DDGalNAc(1-4)bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GD3 = aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GD2 = bDGalpNAc(1-4)[aNeuSAc(2-8)aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GD1a = aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)DDGalNAc(1-4)[aNeuSAc(2-3)]bDGalp(1- 4)bDGIcp(1-1)Cer GDialphha = aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)DDGalNAc(1-4)[aNeuSAc(2-6)]bDGalp(1-

4)bDGIcp(1-1)Cer GDIb = bDGalp(1-3)bDGalNAc(1-4)[aNeuSAc(2-8)aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1- 4)bDGIcp(1-1)Cer GT1a = aNeu5Ac(2-8)aNeuS5Ac(2-3)bDGalp(1-3)DDGalNAc(1-4)[aNeuSAc(2- 3)IbDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GT1,GT1b = aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)DDGalNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-8)aNeuSAc(2- 3)IbDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer OAc-GT1b = aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)DDGalNAc(1-4)aXNeu5Ac9Ac(2- 8)aNeu5Ac(2-3)]bDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GT1c = bDGalp(1-3)bDGalNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2- 3)IbDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GT3 = aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGal(1-4)bDGIc(1-1)CerGQ1b = aNeu5sAc(2-8)aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-3)DDGalNAc(1-4)[aNeu5Ac(2-8)aNeu5Ac(2- 3)IbDGalp(1-4)bDGIcp(1-1)Cer GGal = aNeu5Ac(2-3)bDGalp(1-1)Cer onde: aNeu5Ac = ácido 5-acetil-alfa-neuramínico aNeu5Ac9Ac = ácido 5,9-diacetil-alfa-neuramínico bDGalp = beta-D-galactopiranose bDGalpNAc = N-acetil-beta-D-galactopiranose bDGlcp = beta-D-glucopiranose Cer = ceramida (esfingoide N-acilado geral) Anticorpos CD33

[00135] Certos aspectos da presente descrição referem-se a anticorpos anti-cCD33 compreendendo uma ou mais características funcionais aprimoradas e/ou melhoradas. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma ou mais características funcionais melhoradas e/ou aprimoradas em relação a um anticorpo de controle (por exemplo, um anticorpo anti- CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma variável de cadeia leve região compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti- CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma afinidade por CD33 (por exemplo, CD33 humana) que é maior que a de um anticorpo anti-CD33 de controle (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam a células humanas, como células dendríticas, com uma concentração efetiva semimáxima (ECs50o) inferior à de um anticorpo de controle (por exemplo,um anticorpo de controle anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo o amino sequência de ácido de SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e anticorpo de controle anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti- CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 103 e uma variável de cadeia leve a região compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição diminuem os níveis celulares (por exemplo, níveis de superfície celular) de CD33 com uma concentração efetiva semi-máxima (ECso) que é menor que a de um anticorpo de controle (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104).

[00136] Os níveis celulares de CD33 podem se referir, sem limitação, aos níveis de superfície celular de CD33, aos níveis intracelulares de CD33 e aos níveis totais de CD33. Em algumas modalidades, uma diminuição nos níveis celulares de CD33 compreende uma diminuição nos níveis da superfície celular de CD33. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição que diminuem os níveis celulares de CD33 (por exemplo, níveis de CD33 na superfície celular)

têm uma ou mais das seguintes características: (1) inibe ou reduz uma ou mais atividades CD33; (2) a capacidade de inibir ou reduzir a ligação de uma CD33 a um ou mais de seus ligantes; (3) a capacidade de reduzir a expressão de CD33 em células que expressam CD33; (4) a capacidade de interagir, ligar ou reconhecer uma proteína CD33; (5) a capacidade de interagir especificamente ou se ligar a uma proteína CD33; e (6) a capacidade de tratar, melhorar ou prevenir qualquer aspecto de uma doença ou distúrbio aqui descrito ou contemplado.

[00137] Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ter afinidades nanomolares ou mesmo picomolares para o antígeno alvo (por exemplo, CD33 humana). Em certas modalidades, a constante de dissociação (Kp) do anticorpo é de cerca de 0,001 a cerca de 100 nM. Em certas modalidades, a Kp do anticorpo é de cerca de 0,01 a cerca de 10 nM. Em certas modalidades, aKp do anticorpo é de cerca de 0,202 a cerca de 8,57 nM. Em algumas modalidades, a Kp do anticorpo é menor ou igual a cerca de 100 nM, 90 nM, 80 nM, 70 nM, 60 nM, 50 nM, 40 nM, 30 nM, 20 nM, 10 nM, 9,5 nM, 9 nM, 8,5 nM, 8 nM, 7,5 nM, 7 AM, 6,5 nM, 6 NM, 5,5 nM, 5 NM, 4,5 nM, 4 NM, 3,5 NM, 3 NM, 2,5 NM, 2 nM, 1,5 nM, 1 nM 0,9 nM, 0,8 nM, 0,7 NM, 0,6 NM, 0,5 nM, 0,4 nM, 0,3 NM, 0,2 nM, 0,1 nM,.05nM,.01 NM, ou.005 nM. Em algumas modalidades, a Kp do anticorpo é inferior a cerca de 5,22 nM. Em algumas modalidades, a Kp do anticorpo é maior que aproximadamente ou igual a aproximadamente .001 nM,.005 nM,.01 nM,.05 nM, 0,1 nM, 0,2 nM, 0,3 NM, 0,4 NM, 0,5 nM, 0,6 nM, 0,7 nM, 0,8 nM, 0,9 nM, 1 NM, 1,5 nM, 2 NM, 2,5 nM, 3 nM 3,5 NM, 4 NM, 4,5 NM, 5 NM, 5,5 NM, 6 NM, 6,5 AM, 7 NM, 7,5 nM, 8 nM, 8,5 nM, 9 nM, 9,5 nM, 10 nM. 20 nM, 30 nM, 40 nM, 50 nM, 60 nM, 70 nM, 80 nM ou 90 nM. Ou seja, aKp do anticorpo pode ser um de um intervalo de afinidades com um limite superior de cerca de 100 nM, 90 nM, 80 nM, 70 nM, 60 nM, 50 nM, 40 nM, 30 nM, 20 nM, NM, 9,5 nM, 9 nM, 8,5 nM, 8 nM, 7,5 nM, 7 NM, 6,5 nM, 6 NM, 5,5 NM,

nM, 4,5 nM, 4 NM, 3,5 nM, 3 NM, 2,5 nM, 2 nM, 1,5 nM, 1 NM, 0,9 nM, 0,8 nM, 0,7 nM, 0,6 nM, 0,5 nM, 0,4 nM, 0,3 nM, 0,2 nM, 0,1 nNM,.05nNM,.01 nM, ou .005 nM e um limite inferior selecionado independentemente de cerca de .001 nM,.005 nM,.01 NM, ou.O5 nM, 0,1 NM, 0,2 nM, 0,3 NM, 0,4 NM, 0,5 nM, 0,6 nM, 0,7 NM, 0,8 nM, 0,9 nM, 1 nM, 1,5 NM, 2 nM, 2,5 NM, 3 NM 3,5 nM, 4 NM, 4,5 NM, 5 NM, 5,5 NM, 6 NM, 6,5 nM, 7 NM, 7,5 NM, 8 NM, 8,5 nM, 9 nM, 9,5 nM, 10 nM. 20 nM, nM, 40 nM, 50 nM, 60 nM, 70 nM, 80 nM ou 90 nM, em que o limite inferior é menor que o limite superior. Em algumas modalidades, aKp do anticorpo é de cerca de 10 nM, cerca de 9 nM, cerca de 8 nM, cerca de 7 NM, cerca de 6 nM, cerca de 5 nM, cerca de 4 nM, cerca de 3 nM, cerca de 2 nM, cerca de 1 nM, cerca de 900 pM, cerca de 800 pM, cerca de 700 pM, cerca de 600 pM, cerca de 500 pM, cerca de 400 pM, cerca de 300 pM, cerca de 200 pM ou cerca de 100 pM. Vários métodos para medir a afinidade de anticorpos são conhecidos na técnica, incluindo, por exemplo, o uso de ressonância plasmônica de superfície ou Interferometria BioLayer (Veja, por exemplo, Exemplo 1 abaixo). Em algumas modalidades, a Kpopara CD33 é determinada em uma temperatura de aproximadamente 25ºC. Em algumas modalidades, a Ko para CD33 é determinada em uma temperatura de aproximadamente 4ºC. Em algumas modalidades, a Kp é determinada usando um anticorpo monovalente (por exemplo, um Fab) ou um anticorpo completo em uma forma monovalente. Em algumas modalidades, a Ko é determinada usando um anticorpo bivalente e a proteína CD33 recombinante monomérica.

[00138] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma constante de dissociação mais baixa (Ko) para CD33 do que um anticorpo anti-CD33 controle (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID

Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para um alvo (por exemplo, CD33 humana) que é pelo menos cerca de 5%, pelo menos cerca de 10%, pelo menos cerca de 15%, pelo menos cerca de 20%, pelo menos cerca de 25%, pelo menos cerca de 30%, pelo menos cerca de 35%, pelo menos cerca de 40%, pelo menos cerca de 45%, pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 55%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 65%, pelo menos cerca de 70%, pelo menos cerca de 75%, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 85%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95% ou pelo menos cerca de 99% inferior à Ko de um anticorpo anti-CD33 de controle para o alvo (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e controlar o anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti- CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para um alvo (por exemplo, CD33 humana) que é pelo menos cerca de 1 vezes, pelo menos cerca de 1,1 vezes, pelo menos cerca de 1,5 vezes, pelo menos cerca de 2 vezes, pelo menos cerca de 3 vezes, pelo menos cerca de 4 vezes, pelo menos cerca de 5 vezes, pelo menos cerca de 6 vezes, pelo menos cerca de 7 vezes, pelo menos cerca de 8 vezes, pelo menos cerca de 9 vezes, pelo menos cerca de 10 vezes, pelo menos cerca de 12,5 vezes, pelo menos cerca de 15 vezes, pelo menos cerca de 17,5 vezes, pelo menos cerca de 20 vezes, pelo menos cerca de 22,5 vezes, pelo menos cerca de 25- vezes, pelo menos cerca de 27,5 vezes, pelo menos cerca de 30 vezes, pelo menos cerca de 50 vezes ou pelo menos cerca de 100 vezes mais baixo que a Kp de um anticorpo anti-CD33 de controle para o alvo (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada com apreender a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e controlar o anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para CD33 humana que é pelo menos 9 vezes maior que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para CD33 humana que é pelo menos 3 vezes maior que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma Kp para CD33 humana que é pelo menos 3 vezes maior que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, a afinidade é medida por ressonância plasmônica de superfície. Em algumas modalidades, a afinidade é medida em uma temperatura de aproximadamente 25ºC. Em algumas modalidades, a afinidade é medida em uma temperatura de aproximadamente 4ºC. Em algumas modalidades, a afinidade é medida usando a abordagem experimental, conforme descrito no Exemplo 1 abaixo.

[00139] Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem diminuir os níveis celulares (por exemplo, níveis de superfície celular) de CD33 com uma concentração efetiva semi-máxima (ECso) (por exemplo, quando medida in vitro usando células dendríticas humanas primárias) na faixa picomolar.

Em certas modalidades, a ECso do anticorpo é de cerca de 0,1 a cerca de 500 pM.

Em certas modalidades, a ECso do anticorpo é de cerca de 1 a cerca de 250 pM.

Em certas modalidades, a EC5so do anticorpo é de cerca de 4,1 a cerca de 151,1 PM.

Em algumas modalidades, a EC5o do anticorpo é menor ou igual a cerca de 500 pM, 400 pM, 300 pM, 250 pM, 225 pM, 200 pM, 175 pM, 150 pM, 125 pM, 100 pM, 75 pM, 50 pM, 25 pM, 10 pM, 1 pM ou 0,5 pM.

Em algumas modalidades, a ECso do anticorpo é menos que cerca de 74,3 pM.

Em algumas modalidades, a ECso do anticorpo é maior ou igual a cerca de 0,1 pM, 0,5pM, 1 pM, 10 pM, 25 pM, 50 pM, 75 pM, 100 pM, 125 pM, 150 pM, 175 pM, 200 pM, 225 pM, 250 pM, 300 pM ou 400 pM.

Ou seja, a ECs5o do anticorpo pode ser de qualquer faixa com um limite superior de cerca de 500 pM, 400 pM, 300 pM, 250 pM, 225 pM, 200 PM, 175 pM, 150 pM, 125 pM, 100 pM, 75 pM, 50 pM, 25 pM, 10 pM, 1 pM ou 0,5 pM e um limite inferior selecionado independentemente de cerca de 0,1 pM, 0,5pM, 1 pM, 10 pM, 25 pM, 50 pM, 75 pM, 100 pM, 125 pM, 150 pM, 175 pM, 200 pM, 225 pM, 250 pM, 300 pM ou 400 pM, em que o limite inferior é menor que o limite superior.

Em algumas modalidades, a ECs5o do anticorpo é de cerca de 1 pM, 2 pM, 3 pM, 4 PM, 5 pM, 6 pM, 7 pM, 8 pM, 9 pM, 10 pM, 15 pM, 20 pM, 25 pM, 30 pM, pM, 40 pM, 45 pM, 50 pM, 55 pM, 60 pM, 65 pM, 70 pM, 75 pM, 80 PM, 85 pM, 90 pM, 95 pM, 100 pM, 105 pM, 110 pM, 115 pM, 120 pM, 125 pM, 130 pM, 135 pM, 140 pM, 145 pM, 150 pM, 155 pM, 160 pM, 165 pM, 170 pM, 175 pM, 180 pM, 185 pM, 190 pM, 195 pM ou 200 pM.

Vários métodos para medir os valores de anticorpo EC5o são conhecidos na técnica, incluindo, por exemplo, por citometria de fluxo (ver, por exemplo, Exemplo 2). Em algumas modalidades, a EC5o é medida in vitro usando células dendríticas humanas primárias. Em algumas modalidades, a EC5so é medida in vitro usando monócitos humanos primários. Em algumas modalidades, a ECso é medida in vitro usando macrófagos humanos primários. Em algumas modalidades, a ECs5o é medida in vitro usando células cultivadas transfectadas com CD33 humana. Em algumas modalidades, a ECso é medida em uma temperatura de aproximadamente 4ºC. Em algumas modalidades, a EC5o é medida em uma temperatura de aproximadamente 25ºC. Em algumas modalidades, a ECso é medida em uma temperatura de aproximadamente 35ºC. Em algumas modalidades, a EC5o é medida em uma temperatura de aproximadamente 37ºC. Em algumas modalidades, a ECso é determinada usando um anticorpo monovalente (por exemplo, um Fab) ou um anticorpo completo em uma forma monovalente. Em algumas modalidades, a ECso é determinada usando anticorpos contendo regiões constantes que demonstram ligação potencializada com o receptor Fc. Em algumas modalidades, a ECso é determinada usando anticorpos contendo regiões constantes que demonstram ligação reduzida com o receptor Fc.

[00140] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição diminuem os níveis celulares (por exemplo, níveis de superfície celular) de CD33 com uma ECrso inefrior (por exemplo, conforme medidoin vitro usando células dendríticas humanas primárias) do que um anticorpo anti-CD33 de controle (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº:34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo um região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID

Nº: 86; e anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada que compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição diminuem os níveis celulares (por exemplo, níveis de superfície celular) de CD33 com uma ECrso que é pelo menos cerca de 5%, pelo menos cerca de 10%, pelo menos cerca de 15%, pelo menos cerca de 20%, pelo menos cerca de 25%, pelo menos cerca de 30%, pelo menos cerca de 35%, pelo menos cerca de 40%, pelo menos cerca de 45%, pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 55%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 65%, pelo menos cerca de 70%, pelo menos cerca de 75%, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 85%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95% ou pelo menos cerca de 99% inferior a EC5o de um anticorpo anti-CD33 de controle (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº:34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácido da SEQ ID Nº: 86; e controlar o anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti-

CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição diminuem os níveis celulares (por exemplo, níveis de superfície celular) de CD33 com uma EC5so que é pelo menos cerca de 1 vezes, pelo menos cerca de 1,1 vezes, pelo menos cerca de 1,5 vezes, pelo menos cerca de 2 vezes, pelo menos cerca de 3 vezes, pelo menos cerca de 4 vezes, pelo menos cerca de 5 vezes, pelo menos cerca de 6 vezes, pelo menos cerca de 7 vezes, pelo menos cerca de 8 vezes, em pelo menos cerca de 9 vezes, pelo menos cerca de 10 vezes, pelo menos cerca de 12,5 vezes, pelo menos cerca de 15 vezes, pelo menos cerca de 17,5 vezes, pelo menos cerca de 20 vezes, pelo menos cerca de 22,5 vezes, pelo menos cerca de 25 vezes, pelo menos cerca de 27,5 vezes, pelo menos cerca de 30 vezes, pelo menos cerca de 50 vezes ou pelo menos cerca de 100 vezes mais baixo que a ECso de um anticorpo anti-CD33 de controle (por exemplo,um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86; e controlar o anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; e/ou um anticorpo anti-CD33 de controle compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma ECso que é pelo menos 1,6 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº:34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 77. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma ECso que é pelo menos 1,05 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº:40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma ECs5o que é pelo menos 1,07 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº:52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma ECso que é pelo menos 1,2 vezes menor que um anticorpo anti-CD33 com uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 104. Em algumas modalidades, a ECs5o é medida in vitro usando células dendríticas humanas primárias.

Em algumas modalidades, a EC5o é medida in vitro usando monócitos humanos primários.

Em algumas modalidades, a EC5o é medida in vitro usando macrófagos humanos primários.

Em algumas modalidades, a ECso é medida in vitro usando células cultivadas transfectadas com CD33 humana.

Em algumas modalidades, a ECs5o é medida por citometria de fluxo.

Em algumas modalidades, a

EC5o é medida em uma temperatura de aproximadamente 25ºC. Em algumas modalidades, a ECso é medida em uma temperatura de aproximadamente 35ºC. Em algumas modalidades, a EC5o é medida em uma temperatura de aproximadamente 37ºC. Em algumas modalidades, a ECso é determinada usando anticorpos contendo regiões constantes que demonstram ligação potencializada com o receptor Fc. Em algumas modalidades, a ECso é determinada usando anticorpos contendo regiões constantes que demonstram ligação reduzida com o receptor Fc. Em algumas modalidades, a EC5o é medida usando a abordagem experimental, conforme descrito no Exemplo 2 abaixo.

[00141] Quaisquer ensaios baseados em células in vitro ou modelo adequado in vivo descrito no presente documento ou conhecido na técnica podem ser usados para medir a inibição ou redução da interação (por exemplo, ligação) entre a CD33 e um ou mais ligantes de CD33. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição inibem a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33 em pelo menos 21%, pelo menos 22%, pelo menos 23%, pelo menos 24%, pelo menos 25%, pelo menos 26%, pelo menos 27%, pelo menos 28%, pelo menos 29%, pelo menos 30%, pelo menos 31%, pelo menos 32%, pelo menos 33%, pelo menos 34%, pelo menos 35%, pelo menos 36%, pelo menos 37%, pelo menos 38%, pelo menos 39%, pelo menos 40%, pelo menos 41%, pelo menos 42%, pelo menos 43%, pelo menos 44%, pelo menos 45%, pelo menos 46%, pelo menos 47%, pelo menos 48%, pelo menos 49%, pelo menos 50%, pelo menos 51%, pelo menos 52%, pelo menos 53%, pelo menos 54%, pelo menos 55%, pelo menos 56%, pelo menos 57%, pelo menos 58%, pelo menos 59%, pelo menos 60%, pelo menos 61%, pelo menos 62%, pelo menos 63%, pelo menos 64%, pelo menos 65%, pelo menos 66%, pelo menos 67%, pelo menos 68%, pelo menos 69%, pelo menos 70%, pelo menos 71%, pelo menos 72%, pelo menos 73%, pelo menos 74%, pelo menos 75%, pelo menos 76%, pelo menos 77%, pelo menos 78%, pelo menos 79%, pelo menos 80%, pelo menos 81%, pelo menos 82%, pelo menos 83%, pelo menos 84%, pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mais em concentrações de anticorpos saturados utilizando qualquer ensaio in vitro ou ensaio de cultura baseado nas células descritas neste documento ou conhecidas na técnica.

[00142] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição inibem o agrupamento de CD33 na superfície celular. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição inibem uma ou mais atividades de uma proteína CD33, incluindo, sem limitação, a neutralização de uma ou mais da fosforilação de Tyr-340 e Tyr-358 por uma tirosina quinase da família Src, como LOCK e FYN; recrutamento e ligação às proteínas fosfatases específicas da tirosina SHP1 e SHP2; recrutamento e ligação ao PLC-gama1, que atua como um fator de troca de nucleotídeos de guanina para Dynamini-1; recrutamento e ligação a proteína contendo o domínio SH2 (por exemplo, Crkl); recrutamento e ligação ao baço tirosina quinase Syk; recrutamento e ligação à proteína 2 ligada ao receptor do fator de crescimento SH3-SH2-SH3 (Grb2); recrutamento e ligação a múltiplas proteínas contendo SH2; fosforilação de Ser-307 e Ser-342 pela proteína quinase C; expressão modulada de uma ou mais citocinas anti- inflamatórias, IL-4, 11-10, I1L-13, 11-35, IL-16, TGF-beta, IL-1Ra, G-CSF e receptores solúveis para TNF, IFN -beta1la, IFN-beta1b ou IL-6 em monócitos, macrófagos, células T, neutrófilos de células dendríticas e/ou microglia; diminuição da mobilização intracelular de cálcio; expressão modulada de uma ou mais citocinas pró-inflamatórias IFN- a4, IFN-b, I1L-16B, TNF-a, IL-6, IL-8, CRP, 11-20 membros da família, LIF,

IFN-gama, OSM, CNTF, GM-CSF, 11-11, 11-12, 11-17, 11-18, 11-23, CXCL10, 11-33, CRP, I1L-33,MCP-1, e MIP-1-beta em monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; expressão modulada de uma ou mais proteínas selecionadas dentre C1iga, C1qgB, C19gC, C1s, CIR, C4, C2, C3, ITGB2, HMOX1, LAT2, CASP1, CSTA, VSIG4, MS4A4A, C3AR1, GPX1, TyroBP, ALOXS5AP, ITGAM, SLC7A7 , CDA4, ITGAX, PYCARD, CD14, CD16, HLA-DR e CCR2; inibição da fosforilação extracelular de quinase regulada por sinal (ERK); diminuição da fosforilação da tirosina em múltiplas proteínas celulares; expressão modulada do receptor de quimiocina C- C 7 (CCR7); inibição da quimiotaxia de células microgliais em relação às células que expressam CCL19 e CCL21; ativação da fosfoinositida 3-quinase; reduzir o crescimento celular de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas e/ou microglia; redução da proliferação de células T induzida por células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada, microglia M2, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados e/ou macrófagos M2; inibição da produção de osteoclastos, diminuição da taxa de osteoclastogênese ou ambos; diminuição da sobrevivência de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T auxiliares, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1 ativadas Microglia M1 e/ou microglia M2; diminuição da proliferação de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T auxiliares, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1 ativadas Microglia M1 e/ou microglia M2; inibindo a migração de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T auxiliares, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1 ativadas Microglia M1 e/ou microglia M2; diminuição de uma ou mais funções de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células auxiliares T, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, M1 microglia, microglia M1 ativada e/ou microglia M2; inibição da maturação de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células auxiliares T, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1, ativadas Microglia M1, e/ou microglia M2; aumento da morte celular e apoptose de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; redução da atividade fagocítica de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; redução da proliferação de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; reduzir a funcionalidade geral de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia, fosforilação de um receptor contendo ITAM; fosforilação de moléculas de sinalização que medeia a sinalização de ITAM; reduzir a ativação de receptores de reconhecimento de padrões; reduzir a ativação de receptores do tipo Toll; reduzir a ativação de danos associados à depuração de detritos celulares e proteicos; interação entre CD33 e um ou mais de seus ligantes; interação entre CD33 e um co-receptor como CDG64; reduzir um ou mais tipos de depuração selecionados entre depuração de neurônios apoptóticos, depuração de detritos de tecido nervoso, depuração de sinapses disfuncional, depuração de detritos de tecido não nervoso,

depuração de bactérias ou outros corpos estranhos, depuração de proteínas causadoras de doenças e depuração de células tumorais; inibição da fagocitose de um ou mais neurônios apoptóticos, detritos do tecido nervoso, detritos do tecido não nervoso, bactérias, outros corpos estranhos, proteínas causadoras de doenças, peptídeos causadores de doenças, ácido nucleico causador de doenças, lipídios causadores de doenças ou tumor células; a inibição da depuração de um ácido nucleico causador de doença, tal como o ácido nucleico causador de doença, é um RNA antisense de expansão repetida por GGCCCC (G2C4); ativação da depuração de uma proteína causadora de doença selecionada de beta amiloide, placas beta amiloide, proteína precursora de amiloide ou seus fragmentos, Tau, IAPP, alfa-sinucleina, TDP-43, proteína FUS, C90orf72 (quadro de leitura aberto do cromossomo 9) proteína c9RAN, proteína prião, PrPSc, huntingtina, calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpo de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide de ilhota, insulina, apolipoproteína Al, amiloide sérico A, medina, prolactina, transtiretina, lisozima, microglobulina beta 2, gelsolina, queratoepitelina, cistatina, cadeia leve da imunoglobulina AL, proteína S-IBM, produtos de tradução não ATG (RAN) associados à repetição, repetição de DiPeptide (DPR) peptídeos, peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina- prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina-arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), peptídeos de repetição de prolina- alanina (PA), ubiquitina e peptídeos de repetição de prolina-arginina (PR)) ; inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de câncer selecionados de câncer de bexiga, câncer cerebral, câncer de mama, câncer de cólon, câncer retal, câncer endometrial, câncer renal, câncer de células renais, câncer de pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, não Linfoma de Hodgkin, leucemia mieloide aguda, câncer de pâncreas, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma e câncer de tireoide; inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de distúrbios neurológicos selecionados entre demência, demência frontotemporal, doença de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença de taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, tremor essencial, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy-Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar basal cortical, encefalomielite disseminada aguda, distúrbios granulomatosos, Sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada à idade, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana e esclerose múltipla; inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de distúrbios inflamatórios e infecciosos selecionados de lúpus, colite aguda e crônica, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, lúpus eritematoso sistêmico, artrite, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica e doença óssea de Paget; ligação ao ligante CD33 nas células tumorais; ligação ao ligante CD33 em células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, microglia, células T, neutrófilos e/ou macrófagos; inibição da morte de células tumorais por uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; inibição da atividade de proliferação de células antitumorais de uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos,

células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; inibição da atividade de metástase de células antitumorais de uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; promoção de células dendríticas imunossupressoras, macrófagos imunossupressores, células supressoras derivadas de mieloides, macrófagos associados a tumores ou células T reguladoras; inibição de um ou mais receptores contendo ITAM, como TREM1, TREM2, FcegR, DAP10 e DAP12; inibição de um ou mais receptores contendo o motivo D/Ex0-2YxxL/IX6-8YxxL/I (SEQ ID Nº: 165); inibição da sinalização por um ou mais receptores de reconhecimento de padrões (PRRs), como receptores que identificam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs) e receptores que identificam padrões moleculares associados a danos (DAMPs); inibição da sinalização por um ou mais receptores do tipo Toll; inibição da via de sinalização JAK-STAT; inibição do fator nuclear de potenciador kappa de cadeia leve de células B ativadas (NFKB); inibição da mobilização de PLCy/PKC/cálcio; inibição da sinalização PISK/Akt, Ras/MAPK; expressão reduzida de um ou mais receptores inflamatórios, como CD86, expressa em uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T auxiliares ou células T citotóxicas; expressão crescente de um ou mais genes dependentes de CD33; normalização da expressão do gene dependente de CD33 interrompida; e expressão decrescente de um ou mais genes dependentes de ITAM, como fatores de transcrição NFAT.

[00143] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição exibem uma ou mais atividades de uma proteína CD33, incluindo, sem limitação, aumentar o número de células T CD3* infiltradas em tumores; diminuição dos níveis celulares de CD33 em células mieloides CD14*, tais como células infiltrativas de tumor CD14* e células mieloides CD14* presentes no sangue; reduzir o número de células mieloides CD14*, como células mieloides CD14 *infiltradas em tumores e células mieloides CD14* presentes no sangue; reduzir os níveis de PD-L1, PD-L2, B7-H7, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 em uma ou mais células, como células supressoras derivadas de mieloides (MDSC); diminuição da taxa de crescimento tumoral de tumores sólidos; redução do volume do tumor; eficácia crescente de um ou mais inibidores de PD-1; eficácia crescente de uma ou mais terapias inibidoras de pontos de verificação e/ou terapias moduladoras do sistema imunológico, como terapias inibidoras de pontos de verificação e/ou terapias moduladoras imunológicas que têm como alvo um ou mais CTLA, a via da adenosina, PD-L1, PD-L2, OX40, TIM3, LAG3 ou qualquer combinação destes; eficácia crescente de um ou mais agentes quimioterápicos, opcionalmente em que um ou mais agentes quimioterápicos são gemcitabinay capecitabinay antraciclinas, doxorrubicina (Adriamycinº), epirrubicina (Ellenceº), taxanos, paclitaxel (Taxolº), docetaxel (Taxotereº), 5-fluorouracil (5-FU), ciclofosfamida (Cytoxanº), carboplatina (Paraplatinº), oxaliplatina (Elotaxinº), leucovorina, temazolamida (Temodarº) e qualquer combinação destes; aumento da proliferação de células T na presença de células supressoras derivadas de mieloides (MDSC); inibir a diferenciação, sobrevivência e/ou uma ou mais funções de células supressoras derivadas de mieloides (MDSC); e matar células mieloides não tumorigênicas imunossupressoras que expressam CD33 e/ou células que expressam CD14 não tumorigênicas em tumores sólidos e vasos sanguíneos associados quando conjugados com uma toxina química ou radioativa.

[00144] Emalgumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 inibem a interação (por exemplo, ligação) entre uma proteína CD33 da presente descrição e um ou mais ligantes de CD33, incluindo, sem limitação, ligantes de CD33 expressos em glóbulos vermelhos, ligantes de CD33 expressos em células bacterianas, ligantes de CD33 expressos em células apoptóticas, ligantes de CD33 expressos em células tumorais, ligantes de CD33 expressos em vírus, ligantes de CD33 expressos em células dendríticas, ligantes de CD33 expressos em células nervosas, ligantes de CD33 expressos em células gliais, ligantes de CD33 expressos em micróglias, ligantes de CD33 expressos em astrócitos, ligantes de CD33 em placas beta amiloides, ligantes de CD33 em emaranhados de Tau, ligantes de CD33 emproteínas causadoras de doenças, ligantes de CD33 em peptídeos causadores de doenças, ligantes de CD33 expressos em macrófagos, ligantes de CD33 expressos em células assassinas naturais, ligantes de CD33 expressos em célulasT, ligantes de CD33 expressos em células T auxiliares, ligantes de CD33 expressos em células T citotóxicas, ligantes de CD33 expressos em células B, ligantes de CD33 expressos em células dendríticas imunossupressoras embutidas em tumores, ligantes de CD33 expressos em macrófagos imunossupressores embutidos em tumores, ligantes de CD33 expressos em células supressoras derivadas de mieloides, ligantes de CD33 expressos em células T reguladoras, mucinas segregadas, ácido siálico, glicolipídeos contendo ácido siálico, glicoproteínas contendo ácido siálico, glicolipídeos contendo ácido siálico ligado a alfa-2,6, glicoproteínas contendo ácido siálico ligado a alfa-2,6, glicolipídeos contendo ácido siálico ligado a alfa-2,3, glicoproteínas contendo ácido siálico ligado a alfa-2,3, glicoproteína ácida de alfa-1 (AGP), proteína CD24 e gangliosídeos.

[00145] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam a uma proteína CD33 da presente descrição expressa na superfície da célula e os anticorpos puros inibem a interação (por exemplo, ligação) entre a proteína CD33 e um ou mais ligantes de CD33. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição que se ligam a uma proteína CD33 da presente interação de inibição (por exemplo, ligação) entre a proteína CD33 e um ou mais ligantes de CD33, reduzindo os níveis efetivos de CD33 que estão disponíveis para interagir com essas proteínas na superfície celular ou no interior da célula. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição que se ligam a uma proteína CD33 da presente interação inibem (por exemplo, ligação) entre a proteína CD33 e um ou mais ligantes de CD33, induzindo a degradação de CD33.

[00146] Conforme utilizado no presente documento, os níveis de CD33 podem referir-se a níveis de expressão do gene que codifica a CD33; a níveis de expressão de um ou mais transcritos que codificam a CD33; para níveis de expressão da proteína CD33; e/ou a quantidade de proteína CD33 presente nas células e/ou na superfície celular. Quaisquer métodos conhecidos na técnica para medir níveis de expressão gênica, transcrição, tradução e/ou abundância ou localização de proteínas podem ser utilizados para determinar os níveis de CD33.

[00147] Além disso, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser usados para prevenir, reduzir o risco ou tratar demência, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença tipo taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, lúpus, colite aguda e crônica, artrite reumatoide, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, tremor essencial, lúpus do sistema nervoso central, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy- Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar corticobasal, — encefalomielite — disseminada — aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada ao envelhecimento, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, esclerose múltipla, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica, doença óssea de Paget e câncer incluindo câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstatay câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), mieloma múltiplo, policitemia vera, trombocitose essencial, mielofibrose primária ou idiopática, mieloesclerose primária ou idiopática, tumores derivados de mieloides, tumores que expressam CD33, câncer de tireoide, infecções, herpes do SNC, infecções parasitárias, infecção por tripanossoma, infecção por Cruzi, infecção por Pseudomonas aeruginosa, infecção por Leishmania donovani, infecção por Streptococcus do grupo B, infecção por Campylobacter jejuni, infecção por Neisseria meningiditis, HIV tipo | e/ou Haemophilus influenza.

Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser utilizados para induzir ou promover a sobrevivência, maturação, funcionalidade, migração ou proliferação de uma ou mais células imunes em um indivíduo em necessidade; ou para diminuir a atividade, funcionalidade ou sobrevivência de células T reguladoras, células dendríticas imunossupressoras inseridas em tumor, macrófagos imunossupressores inseridos em tumor, células supressoras derivadas de mieloides, macrófagos associados aos tumores, macrófagos associados aos tumores , células de leucemia mieloide aguda (AML), leucemia linfocítica crônica (CLL) e/ou célula de leucemia mieloide crônica (CML) em um indivíduo necessitado. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição são anticorpos monoclonais.

[00148] Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição diminui os níveis celulares de CD33 (por exemplo, níveis de superfície celular, níveis intracelulares e/ou níveis totais). Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição induz a regulação negativa de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição induz a clivagem de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição induz a internalização de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição induz a supressão de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição induz a degradação de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição induz a dessensibilização de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético para ativar transitoriamente a CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti- CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético e ativa transitoriamente CD33 antes de induzir uma diminuição nos níveis celulares de CD33 e/ou inibição da interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais CD33 ligantes. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético e ativa transitoriamente o CD33 antes de induzir a degradação do CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético e ativa transitoriamente CD33 antes de induzir a clivagem de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético e ativa transitoriamente CD33 antes de induzir a internalização de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético e ativa transitoriamente o CD33 antes de induzir a degradação do CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético e ativa transitoriamente CD33 antes de induzir a regulação negativa da expressão de CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição atua como um ligante mimético e ativa transitoriamente CD33 antes de induzir a dessensibilização do CD33.

[00149] Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição é um anticorpo humano, um anticorpo humanizado, um anticorpo biespecífico, um anticorpo monocional, um anticorpo multivalente ou um anticorpo quimérico. As descrições exemplificativas de tais anticorpos são encontradas ao longo da presente descrição.

[00150] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam a uma CD33 humana, ou a um seu homólogo, incluindo, sem limitação, uma proteína CD33 de mamífero. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem se ligar especificamente à CD33 humana. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam à CD33 humana e não têm reatividade cruzada a ortólogos ou homólogos da CD33 de outras espécies.

[00151] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam a uma proteína CD33 da presente descrição expressa na superfície de uma célula e modulam (por exemplo, induzem ou inibem) uma ou mais atividades de CD33 da presente descrição, após a ligação à proteína CD33 expressa em superfície. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição são anticorpos inertes.

Regiões de ligação ao anticorpo anti-CD33

[00152] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem se ligar a um epítopo conformacional. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem se ligar a um epítopo CD33 descontínuo. Em algumas modalidades, o epítopo descontínuo de CD33 compreende dois ou mais peptídeos, três ou mais peptídeos, quatro ou mais peptídeos, cinco ou mais peptídeos, seis ou mais peptídeos, sete ou mais peptídeos, oito ou mais peptídeos, nove ou mais peptídeos, ou 10 ou mais peptídeos. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem se ligar a um epítopo CD33 compreendendo um ou mais peptídeos. Como divulgado neste documento, os epítopos de CD33 podem compreender um ou mais peptídeos compreendendo cinco ou mais, seis ou mais, sete ou mais, oito ou mais, nove ou mais, 10 ou mais, 11 ou mais, 12 ou mais, 13 ou mais, 14 ou mais, 15 ou mais, 16 ou mais, 17 ou mais, 18 ou mais, 19 ou mais, ou 20 ou mais resíduos de aminoácidos da sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 1 ou cinco ou mais, seis ou mais, sete ou mais, oito ou mais, nove ou mais, 10 ou mais, 11 ou mais, 12 ou mais, 13 ou mais, 14 ou mais, 15 ou mais, 16 ou mais, 17 ou mais, 18 ou mais, 19 ou mais, ou 20 ou mais resíduos de aminoácidos em uma proteína CD33 de mamífero correspondente à sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 1.

[00153] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam a um epítopo de CD33 humana que é igual ou se sobrepõe ao epítopo CD33 ligado por um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID

Nº: 104. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam essencialmente ao mesmo epítopo CD33 ligado por um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 104.

[00154] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição inibem competitivamente a ligação de um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 104. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição competem com um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104 para ligação a CD33.

[00155] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição inibem competitivamente a ligação de pelo menos um anticorpo selecionado dentre qualquer um dos anticorpos listados nas Tabelas 3A-3C, 4A-4C, 5A-5D, 6A-6D, 7 e 8. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição inibem competitivamente a ligação de pelo menos um anticorpo selecionado dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-

63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-

64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13,

AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, AB-H66, e qualquer combinação destes. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição compete com um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-

14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB -14.8, AB-14.9, AB-

14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-

63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB -64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB -64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66, e qualquer combinação destes, para ligação a CD33 quando o anticorpo anti-CD33 reduz a ligação de um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB- 63,4, AB-63,5, AB-63,6, AB-63,7, AB-63,8, AB-63,9, AB-63,10, AB-63,11, AB-63,12, AB-63,13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB -64.8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, AB-H66e qualquer combinação destes a CD33 em uma quantidade que varia de cerca de 50% a 100%, em comparação com a ligação a CD33 na ausência do anticorpo anti-CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição compete com um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-

14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB -14.8, AB-14.9, AB-

14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-

63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15,

AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB -64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB -64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66 e qualquer combinação destes para ligação a CD33 quando o anticorpo anti-CD33 reduz a ligação de um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-

63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-

64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB- 64,8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, AB-H66 e qualquer combinação destes a CD33 em pelo menos 50%, pelo menos 55%, por pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% ou 100%, em comparação com a ligação ao CD33 na ausência do anticorpo anti-CD33. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição que reduz a ligação de um ou mais anticorpos selecionados de AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB- 14,7, AB-14,8, AB-14,9, AB-

14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-

63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB- 64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1. 7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66 e qualquer combinação destes a CD33 em 100% indica que o anticorpo anti-CD33 é essencial completamente bloqueia a ligação de um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-

63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-

63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB- 64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-

64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB- 64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1. 14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB- H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66e qualquer combinação destes a CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti- CD33 e o um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB -14.9, AB-

14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-

63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB -64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66e qualquer combinação destes estão presentes em uma quantidade que corresponde a uma razão de 10: 1, razão de 9:1, razão de 8:1, razão de 7:1, razão de 6:1, razão de 5:1, razão de 4:1, razão de 3:1, razão de 2:1, razão de 1:1, razão de 0,75:1, razão de 0,5:1, razão de 0,25:1, razão de 0,1:1, razão de 0,075:1, razão de 0,050: 1, razão de 0,025: 1, razão de 0,01:1, razão de 0,0075:1, razão de 0,0050:1, razão de 0,0025: 1, razão de 0,001:1, razão de 0,00075:1, razão de 0,00050:1, razão de 0,00025:1, razão de 0,0001:, razão de 1:10, razão de 1:9, razão de 1:8, razão de 1: 7, razão de 1: 6, razão de 1: 5, razão de 1: 4, razão de 1:3,

razão de 1: 2, razão de 1: 0,75, razão de 1: 0,5, razão de 1: 0,25, razão de 1: 0,1, razão de 1: 0,075, razão de 1: 0,050, razão de 1: 0,025, razão de 1: 0,01, razão de 1: 0,0075, razão de 1: 0,0050, razão de 1: 0,0025, razão de 1: 0,001, razão de 1: 0,00075, razão de 1: 0,00050, razão de 1: 0,00025 ou razão de 1: 0,0001 de anticorpo anti-CD33 para um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-

14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB -63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB -64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1 .10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB -H63, AB- H64, AB-H65, AB-H66e qualquer combinação destesdestes. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 está presente em excesso por uma quantidade que varia de cerca de 1,5 a 100 vezes, ou superior a 100 vezes em comparação com a quantidade de um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB- 63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB- 64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, AB-H66, e qualquer combinação destesestes. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 está presente em uma quantidade que é cerca de 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 7 vezes, 8 vezes, 9 vezes, 10 vezes, 15 vezes, 20 vezes, 25 vezes, 30 vezes, 35 vezes, 40 vezes, 45 vezes, 50 vezes, 55 vezes, 60 vezes, 65 vezes, 70 vezes, 75 vezes, 80 vezes, 85 vezes, 90 vezes, 95 vezes ou 100 vezes em comparação com a quantidade de um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-

14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-

63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB -63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-

64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB -64.1.5, AB-

64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-

64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66 e qualquer combinação destes.

[00156] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam a um epítopo de CD33 humana que é igual ou se sobrepõe ao epítopo de CD33 ligado por pelo menos um anticorpo selecionado a partir de qualquer um dos anticorpos listados nas Tabelas 3A-3C, 4A -4C, 5A-5D, 6A-6D, 7 e 8. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descriçãose ligam a um epítopo de CD33 humana que é igual ou se sobrepõe ao epítopo CD33 ligado por pelo menos um anticorpo selecionado dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66.

[00157] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição se ligam essencialmente ao mesmo epítopo de CD33 ligado por pelo menos um anticorpo selecionado dentre qualquer um dos anticorpos listados nas Tabelas 3A-3C, 4A-4C, 5A-5D, 6A-6D, 7 e 8. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descriçãoligam essencialmente o mesmo epítopo CD33 ligado por pelo menos um anticorpo selecionado dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, AB-H66. Os métodos exemplares detalhados para o mapeamento de um epítopo ao qual um anticorpo se liga são fornecidos em Morris (1996) "Epitope Mapping Protocols", em Methods in Molecular Biology vol. 66 (Humana Press, Totowa, NJ).

[00158] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição competecom um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-

63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-

64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, AB-H66, e qualquer combinação destes pela ligação à CD33.

[00159] “Qualquer ensaio de competição adequado ou ensaio de ligação a CD33 conhecido na técnica, como análise BlAcore, ensaios ELISA ou citometria de fluxo, pode ser utilizado para determinar se um anticorpo anti-CD33 compete com um ou mais anticorpos selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-

63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-

64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, AB-H66, e qualquer combinação destes pela ligação à CD33. Em um ensaio de competição exemplificativo, CD33 imobilizada ou células que expressam CD33 na superfície celular são incubadas em uma solução compreendendo um primeiro anticorpo marcado que se liga à CD33 (por exemplo, primata humano ou não humano) e um segundo anticorpo não marcado que está sendo testado pela sua capacidade de competir com o primeiro anticorpo pela ligação à CD33. O segundo anticorpo pode estar presente em um sobrenadante do hibridoma. Como um controle, a CD33 imobilizada ou células que expressam CD33 são incubadas em uma solução compreendendo o primeiro anticorpo marcado, mas não o segundo anticorpo não marcado. Após a incubação sob condições permissivas para a ligação do primeiro anticorpo à CD33, o excesso de anticorpo não ligado é removido e a quantidade de marcador associado à CD33 imobilizada ou às células que expressam CD33 é medida. Se a quantidade de marcação associada à CD33 imobilizada ou células que expressam CD33 for substancialmente reduzida na amostra de teste em relação à amostra de controle, isso indica então que o segundo anticorpo está competindo com o primeiro anticorpo para a ligação à CD33. Ver, Harlow e Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual ch.14 (Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY). a Regiões variáveis de cadeia leve e cadeia pesada de anticorpo anti-CD33

[00160] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição incluem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais ou todas as três) HVRs selecionadas entre HVR-H1, HVR-H2 e HVR - H3 (como mostrado nas Tabelas 3A-3C). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1, uma HVR- H2 e uma HVR-H3 (como mostrado nas Tabelas 3A-3C). Em algumas modalidades, o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ |D Nº: 115), e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121).

[00161] Em algumas modalidades, a HVR-H1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula |: GX1X2X3TDYNXa4H (SEQ ID Nº: 152), em que X, é Y, A, ou V, Xcé Tou A, Xgé F, E, ou H, e Xa É L, E, Y, ou N. Em algumas modalidades, a HVR-H1 compreende uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 105-114. Em algumas modalidades, a HVR-H2 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula Il: FIYPXANX2IX3G (SEQ ID Nº: 153), em que X1 é Sou A, Xo é G, Q, R ou V, e Xg é T ou R. Em algumas modalidades, s HVR-H2 compreende uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 115-120. Em algumas modalidades, a HVR-H3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula Ill: SXK;VDYFDX>2 (SEQ ID Nº: 154), em que X1 é T, D, F, ou S, e Xo é Y, D, ou L. Em algumas modalidades, a HVR-H3 compreende uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 121-126.

[00162] Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1 de acordo com a Fórmula |, uma HVR-H2 de acordo com a Fórmula |l e uma HVR-H3 de acordo com a Fórmula Ill, e o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIVPSNGITG (SEQ |D Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 105-114, e HVR-H2 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 115-120 e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 121-126, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121).

[00163] Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende a HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-

14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-

64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-

64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-

64.1.15 (conforme mostrado nas Tabelas 3A a 3C).

[00164] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada, em que a região variável de cadeia pesada compreende um ou mais dentre: (a) uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, em pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de aminoácidos HVR- H1 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB -14.5, AB-

14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-

63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB -64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-

64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB -

64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-

64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15; (b) uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de aminoácido HVR-H2 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-

63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB- 63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-

64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB- 64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-

64.1.15; e (c) uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, em pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de aminoácido HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-

63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB -63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-

64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-

64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB -64.1.11, AB-64.1.12, AB-

64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo o sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105) uma HVR-H2 compreendendo os equivalência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121).

[00165] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR- H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122).

[00166] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve compreendendo uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais ou todas as três) HVRs selecionadas entre HVR-L1, HVR-L2 e HVR -L3 (como mostrado nas Tabelas 4A-4C). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1, uma HVR-L2 e uma HVR-L3 (como mostrado nas Tabelas 4A-4C). Em algumas modalidades, que o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00167] Em algumas modalidades, a HVR-L1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula IV: XX2SQX3VX4X5sSTYSYMH (SEQ ID Nº: 155), em que X: é Rou K, X2 é A, G, ou V, Xgé S ou D, Xa é S, G, ou H, e Xs é T ou A. Em algumas modalidades, a HVR-L1 compreende uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 127-134. Em algumas modalidades, a HVR-L2 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula V: YX1X2X3X4X5S (SEQ ID Nº: 156), em que X: é A, V ou E, Xoé S, V, ou F, XIgé N, A, Y, ou F, Xa é Lou V, € XKs É E, G, ou N. Em algumas modalidades, a HVR-L2 compreende uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 135-145. Em algumas modalidades, a HVR-L3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VI: XiIHSX2X3Xa4PLXs (SEQ ID Nº: 157), em que X1: é Qou E, X? é Wou E, Xgé E ou A, Xa é louL, e Xs é Tou E. Em algumas modalidades, a HVR-I3 compreende uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 146-151.

[00168] Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1 de acordo com a Fórmula IV, uma HVR-L2 de acordo com a Fórmula V e uma HVR-L3 de acordo com a Fórmula Vl, e o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 127-134, e HVR-L2 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 135-145 e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 146-151, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-LI1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº 135) e um HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00169] Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende a HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.3, AB-

14.4, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB -14.10, AB-14.11, AB-

63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.2, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7 ou AB-64.8 e qualquer combinação destes (como mostrado nas Tabelas 4A a 4C).

[00170] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia leve compreende um ou mais dentre: (a) uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, em pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos

96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-

14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB -14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB -

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB -64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15; (b) uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de aminoácido HVR-L2 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-

14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-

63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB- 63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-

64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-

64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB- 64.1.11, AB-64.1.12, AB-

64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15; e (c) uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, em pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de aminoácido HVR-L3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-

63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-

63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB -63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-

64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB -64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo o sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00171] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ |D Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR- L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00172] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição incluem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais ou todas as três) HVRs selecionadas entre HVR-H1, HVR-H2 e HVR - H3 (como mostrado nas Tabelas 3A-3C) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais ou todas as três) HVRs selecionadas entre HVR-L1, HVR-

L2 e HVR -L3 (como mostrado nas Tabelas 4A-4C). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1, uma HVR-H2 e uma HVR-H3 (como mostrado nas Tabelas 3A-3C), e a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1, uma HVR- L2 e uma HVR-L3 (como mostrado nas tabelas 4A-4C). Em algumas modalidades, o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00173] Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1 de acordo com a Fórmula |, uma HVR-H2 de acordo com a Fórmula |l e uma HVR-H3 de acordo com a Fórmula Ill, e a região variável de cadeia leve compreende uma HVR- L1 de acordo com a Fórmula IV, uma HVR-L2 de acordo com a Fórmula V e uma HVR-L3 de acordo com a Fórmula VI, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT

(SEQ ID Nº: 146). Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 105-114, e HVR-H2 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 115-120 e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº*: 121-126, e a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 127-134 e HVR-L2 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 135 -145, e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 146-151, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L 3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00174] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo a HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-

14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.8, AB-

63.9, AB-63.10, AB- 63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-

64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-

64.1.15 e qualquer combinação destes (como mostrado nas Tabelas 3A a 3C); e uma região variável de cadeia leve compreendendo HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.3, AB-14.4, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-

63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB- 63.18, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7 ou AB-64.8 e qualquer combinação destes (como mostrado nas Tabelas 4A a 4C). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1, HVR-L2 e HVR - L3, em que o anticorpo compreende HVR-H1, HVR-H2, HVR-H3, HVR- L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-

14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB- 63.9, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB- 64.1.14 ou AB-64.1.15 (como mostrado nas Tabelas 3A a 3C e 4A a 4C).

[00175] Em algumas modalidades, anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende um ou mais dentre: (a) uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade para uma sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, or AB-64.1.15; (b) uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de anticorpos de HVR-H2 do anticorpo AB-14.1, AB-

14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-

63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, or AB-

64.1.15; e (c) uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade a uma sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-

14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-

63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1,

AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-

64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-

64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-

64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121); e em que a região variável de cadeia leve compreende um ou mais dentre: (a) uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-

14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-

63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-

64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-

64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, or AB-64.1.15; (b) uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade a uma sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo B-14.1, AB-14.2, AB-

14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10,

AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15; e (c) uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade a uma sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-14.1, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-

64.1.15, e o anticorpo não é um anticorpo compreendendo uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00176] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR- H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119), uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos

SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ |D Nº 118), uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR- L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00177] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada de SEQ ID Nº: 34-72. Em certas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59. Em certas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10,

AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 7). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável! de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118) e uma HVR- H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122).

[00178] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada de SEQ ID Nº: 77-101. Em algumas modalidades, a região variável de cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-

14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 8). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR- L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00179] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada de SEQ ID Nº: 34-72 e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada de SEQ ID Nº: 77 -101. Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59e a região variável de cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65 e a região variável de cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-

14.6, AB-14.7, AB- 14,8, AB-14,9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-

63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18,

AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB- 64,7, AB- 64,8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-

64.1.6, AB-64.1.7, AB- 64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-

64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15 (como mostrado em Tabela 7) e uma região variável de cadeia leve do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-

14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB -63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64. 1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15 (como mostrado na Tabela 8). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável! de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119), uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR -L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118), uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR -L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

[00180] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada de SEQ ID Nº: 34, 40, 42, 52, 53, e 73-76. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada de AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 ou AB-H66 (como mostrado na Tabela 7) Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácido selecionada de SEQ ID Nº: 77, 86 e 102. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia leve do anticorpo AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 ou AB-H66 (como mostrado em Tabela 8). Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada de SEQ ID Nº: 34, 40, 42, 52, 53, and 73-76 e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada de SEQ ID Nº: 77, 86 e 102. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada de AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 ou AB-H66 (como mostrado na Tabela 7) e uma região variável de cadeia leve do anticorpo AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 ou AB-H66 (como mostrado na Tabela 8).

[00181] “Qualquer um dos anticorpos da presente descrição pode ser produzido por uma linhagem celular. Em algumas modalidades, a linhagem celular pode ser uma linha celular de mamífero. Em certas modalidades, a linhagem celular pode ser uma linha celular de hibridoma. Em outras modalidades, a linhagem celular pode ser uma linhagem celular de levedura. Qualquer linhagem celular conhecida na técnica adequada para produção de anticorpos pode ser usada para produzir um anticorpo da presente descrição. Linhagens de células exemplares para produção de anticorpos são descritas ao longo da presente descrição.

[00182] Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é um anticorpo monoclional anti-CD33 selecionado dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-

14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 ou AB- H66.

[00183] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreende um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, de pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR- L3 do anticorpo AB-64.1. Em algumas modalidades, o anticorpo anti- CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 52, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-64.1, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos

88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende que essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.

[00184] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 58; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, de pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99%, ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 58, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.1. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, de pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos

95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.1. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 58 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 58. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 58. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 58, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.1, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.1 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.1. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.1 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende que essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.1 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1.1 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.1, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.1 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.1.

[00185] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.2 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.2 ou à sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, de pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.2 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.2. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, de pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.2 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.2. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.2 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.2 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.2 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 59, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.2, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.2 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.2. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.2 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.2 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.2 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades,

substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1.2 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.2, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.2 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.2.

[00186] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.3 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 60; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, em identidade de pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.3 ou à sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.3 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 60, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.3. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.3 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.3. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.3 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 60 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.3 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 60. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.3 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 60. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 60, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VM compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.3, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.3 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.3. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.3 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.3 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.3 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1.3 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.3, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.3 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.3.

[00187] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.4 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 61; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, em identidade de pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminpácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.4 ou à sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64 .1.4 ou para a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 61, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.4. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.4 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.14. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH)

tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.4 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 61 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.4 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 61. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.4 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 61. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 61, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.4, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.4 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.4. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos

88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.4 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende que essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.4 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.4 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1.4 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.4, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.4 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.4.

[00188] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.5 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 62; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com um sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.5 ou com sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.5 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 62, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.5 Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos

95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade para uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.5 ou para sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.5. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.5 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 62 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.5 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 62. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.5 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 62. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 62, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.5, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.5 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.5. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.5 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.5 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.5 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1.5 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.5, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.5 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.5.

[00189] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.6 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 63; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.6 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.6 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 63, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.6. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.6 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.6. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.6 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 63 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.6 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 63. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.6 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 63. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 63, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.6, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.6 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.6. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.6 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende que essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.6 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.6 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades,

64.1.6 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.6, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.6 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.6.

[00190] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.7 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 64; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.7 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.7 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 64, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.7. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.7 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.7. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.7 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 64 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.7 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 64. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.7 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 64. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 64, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.7, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.7 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.7. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.7 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.7 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.7 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1.7 ou da SEQ ID Nº:86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.7, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.7 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.7.

[00191] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.8 ou com a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 65; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.8 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.8 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.8. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.8 ou para sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.8. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.8 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.8 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.8 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 65, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-64.1.8, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.8 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.8. Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%,

pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.8 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.8 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.8 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-64.1.8 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.8, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.8 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.8.

[00192] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.9 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 66; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.9 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.9 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 66, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.9. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos

99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.9 ou para sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.9. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.9 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 66 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.9 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 66. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.9 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 66. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 66, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.9, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.9 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.9. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.9 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.9 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.9 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-

64.1.9 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou trêê HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.9, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.9 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.9.

[00193] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.10 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 67; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.10 ou à sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.10 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 67, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1,

HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.10. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.10 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.10. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.10 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 67 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.10 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 67. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.10 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 67. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 67, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-

64.1.10, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-

64.1.10 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-

64.1.10. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.10 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.10 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.10 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-64.1.10 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.10, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.10 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.10.

[00194] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.11 ou com a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 68; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.11 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.11 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 68, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 de anticorpo AB-64.1.11. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.11 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 de anticorpo AB-64.1.11. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-cCD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.11 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 68 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.11 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 68. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.11 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 68. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 68, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-64.1.11, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.11 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.11. Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.11 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.11 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.11 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-64.1.11 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.11, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.11 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.11.

[00195] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.12 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 69; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%,

pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.12 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.12 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 69, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.12. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.12 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.12. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-cCD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos

85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.12 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 69 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.12 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 69. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.12 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 69. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 69, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-64.1.12, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.12 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.12. Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%,

pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.12 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar a CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.12 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.12 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº:

86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-64.1.12 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.12, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.12 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.12.

[00196] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.13 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade de uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.13 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.13 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.13. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%,

pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.13 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.13. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-cCD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.13 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.13 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.13 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 52, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-64.1.13, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.13 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.13. Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.13 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.13 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.13 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-64.1.13 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.13, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.13 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.13.

[00197] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.14 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 71; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.14 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.14 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 71, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.14. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade para com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.14 ou para sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.14. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-cCD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.14 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 71 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.14 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 71. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.14 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 71. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 71, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-64.1.14, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.14 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.14. Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.14 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.14 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.14 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-64.1.14 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.14, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.14 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.14.

[00198] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve e um domínio variável de cadeia pesada, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.15 ou com a sequência de aminoácidos de SEQ ID Nº: 72; e/ou o domínio variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.15 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia pesada que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.15 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 72, em que o domínio variável de cadeia pesada compreende as sequências de aminoácidos HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.15. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem um domínio variável de cadeia leve que compreende uma sequência de aminoácidos com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, de pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.15 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que o domínio variável de cadeia leve compreende as sequências de aminoácidos HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.15. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 compreende uma sequência do domínio variável de cadeia pesada (VH) tendo pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.15 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ

ID Nº: 72 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-

64.1.15 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 72. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos de domínio variável de cadeia pesada do anticorpo AB-64.1.15 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 72. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VH do anticorpo CD33 ou da SEQ ID Nº: 72, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VH compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-H1 do anticorpo AB-64.1.15, (b) a sequência de aminoácidos HVR-H2 do anticorpo AB-64.1.15 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-H3 do anticorpo AB-64.1.15. Em algumas modalidades, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição compreendem uma sequência do domínio variável de cadeia leve (VL) com pelo menos 85%, pelo menos 86%, pelo menos 87%, pelo menos 88%, pelo menos 89%, pelo menos 90%, pelo menos 91%, pelo menos 92%, pelo menos 93%, pelo menos 94%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou 100% de identidade com uma sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.15 ou com a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86 e contém substituições (por exemplo, inserções, deleções ou substituições conservativas em relação à sequência de referência), mas o anticorpo anti-CD33 que compreende essa sequência mantém a capacidade de se ligar ao CD33. Em certas modalidades, um total de 1 a 10 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-

64.1.15 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em certas modalidades, um total de 1 a 5 aminoácidos foi substituído, inserido e/ou deletado na sequência de aminoácidos do domínio variável de cadeia leve do anticorpo AB-64.1.15 ou na sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86. Em determinadas modalidades, substituições, inserções ou deleções ocorrem em regiões fora das HVRs (ou seja, nas regiões FR). Em algumas modalidades, as substituições, inserções ou deleções ocorrem nas regiões FR. Opcionalmente, o anticorpo anti-CD33 compreende a sequência de VL do anticorpo AB-64.1.15 ou da SEQ ID Nº: 86, incluindo modificações pós-tradução dessa sequência. Em uma modalidade específica, a VL compreende uma, duas ou três HVRs selecionadas dentre: (a) a sequência de aminoácidos HVR-L1 do anticorpo AB-64.1.15, (b) a sequência de aminoácidos HVR-L2 do anticorpo AB-64.1.15 e (c) a sequência de aminoácidos HVR-L3 do anticorpo AB-64.1.15.

[00199] Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é o anticorpo monocional anti-CD33 AB-64.1.2. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é umanticorpo isolado que se liga essencialmente ao mesmo epítopo CD33 que AB-64.1.2. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é um anticorpo isolado que compreende o domínio variável de cadeia pesada HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo monoclonal AB-64.1.2. Em algumas modalidades, o anticorpo anti- CD33 é um anticorpo isolado que compreende o domínio variável de cadeia leve HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo monocional AB-

64.1.2. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é um anticorpo isolado que compreende o domínio variável de cadeia pesada HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 e o domínio variável de cadeia leve HVR-L1, HVR- L2 e HVR-L3 do anticorpo monocilonal AB-64.1.2.

[00200] Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é o anticorpo monocional anti-CD33 AB-64.1.8. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é umanticorpo isolado que se liga essencialmente ao mesmo epítopo CD33 como AB-64.1.8. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é um anticorpo isolado que compreende o domínio variável de cadeia pesada HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo monocional AB-64.1.8. Em algumas modalidades, o anticorpo anti- CD33 é um anticorpo isolado que compreende o domínio variável de cadeia leve HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo monoclional AB-

64.1.8. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é um anticorpo isolado que compreende o domínio variável de cadeia pesada HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 e o domínio variável de cadeia leve HVR-L1, HVR- L2 e HVR-L3 do anticorpo monoclional AB-64.1.8.

[00201] Em certas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é um anticorpo antagonista. Em certas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é um anticorpo agonista ou um anticorpo inerte Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33da presente descrição são da classe IgG, da classe IgM ou da classe IgA. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição são da classe IgG e têm um isotipo IgG1, IgG2, IgG3 ou IgG4.

[00202] Os anticorpos anti-CD33 adicionais, por exemplo, anticorpos que se ligam especificamente a uma proteína-CD33 da presente descrição, podem ser identificados, triados e/ou caracterizados por suas propriedades físicas/químicas e/ou atividades biológicas por vários ensaios conhecidos na técnica. Anticorpos anti-CD33 capazes de se ligar a receptores gama Fc

[00203] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição mantêm a capacidade de ligar os receptores gama Fc. Em algumas modalidades, esses anticorpos quando têm a especificidade correta do epítopo que é compatível com a ativação do receptor, podem ter características que permitam se agrupar e estimular transitoriamente, por exemplo, o receptor CD33. Em algumas modalidades, esses anticorpos podem atuar subsequentemente como inibidores da expressão de CD33 a longo prazo e/ou uma ou mais atividades de uma proteína CD33 por induzir a degradação de CD33, dessensibilização a CD33, clivagem por CD33, internalização de CD33, supressão de CD33, regulação negativa da expressão de CD33, e/ou degradação lisossômica de CD33.

[00204] hn vivo, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem agrupar receptores e ativar transitoriamente a CD33 por qualquer um ou mais dos múltiplos mecanismos potenciais. Em algumas isotipos de anticorpos humanos, como IgG2 que tem, devido à sua estrutura única, uma capacidade intrínseca de agrupar receptores ou manter os receptores em uma configuração agrupada, ativando assim receptores tais como CD33 sem ligação a um receptor Fc (por exemplo, White et al., (2015) Cancer Cell 27, 138-148).

[00205] Em algumas modalidades, outros anticorpos podem agrupar receptores (por exemplo, CD33) ligando-se a receptores Fcg em células adjacentes. Em algumas modalidades, a ligação da região constante Fc de IgG do anticorpo com os receptores Fcg leva à agregação dos anticorpos, e os anticorpos, por sua vez, agregam os receptores aos quais se ligam através de sua região variável (Chu et al (2008) Mol Immunol, 45:3926-3933; e Wilson et al., (2011) Cancer Cell 19, 101— 113). Em algumas modalidades, a ligação com o receptor inibidor Fcg FcgR (FcgRIIB) que não provoca secreção de citocinas, explosão oxidativa, aumento da fagocitose e citotoxicidade mediada por células (ADCC) dependente de anticorpo potencializado é frequentemente uma maneira preferencial de agrupar anticorpos in vivo, visto que a ligação a FcgRIIB não está associada a efeitos adversos imunológicos.

[00206] Existem outros mecanismos pelos quais os anticorpos anti- CD33 da presente descrição podem agrupar receptores. Por exemplo, em algumas modalidades, os fragmentos de anticorpo (por exemplo, fragmentos Fab) que são reticulados juntos podem ser usados para agrupar receptores (por exemplo, CD33) de uma maneira semelhante a anticorpos com regiões Fc que se ligam a receptores Fcg, conforme descrito acima. Em algumas modalidades, os fragmentos de anticorpos reticulados (por exemplo, fragmentos Fab) podem funcionar como anticorpos agonistas se induzirem o agrupamento de receptores na superfície celular e se ligarem a um epítopo apropriado no alvo (por exemplo, CD33).

[00207] Portanto, em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição que se ligam a uma proteína CD33 podem incluir anticorpos que, devido à sua especificidade de epítopo, se ligam com CD33 e ativam transitoriamente uma ou mais atividades de CD33 antes que, por exemplo, diminuam os níveis celulares de CD33, inibam uma ou mais atividades de CD33 e/ou inibam a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33. Em algumas modalidades, tais anticorpos podem se ligar ao local de ligação ao ligante na CD33 e imitar transitoriamente a ação de um ligante natural, ou estimular o antígeno alvo a transduzir o sinal através da ligação com um ou mais domínios que não sejam os lugares de ligação ao ligante. Em algumas modalidades, esses anticorpos não interferem na ligação ao ligante. Em algumas modalidades, independentemente de os anticorpos se ligarem ou não com o local de ligação ao ligante na CD33, os anticorpos podem atuar subsequentemente como inibidores de longo prazo da expressão de CD33 e/ou uma ou mais atividades de uma proteína CD33, induzindo a degradação de CD33, dessensibilização de

CD33, clivagem de CD33, internalização de CD33, supressão de CD33, regulação negativa da expressão de CD33 e/ou degradação lisossômica de CD33.

[00208] Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição é um anticorpo que induz transitoriamente uma ou mais atividades de uma proteína CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo induz transitoriamente uma ou mais atividades após a ligação com uma proteína CD33 que é expressa em uma célula. Em algumas modalidades, a proteína CD33 é expressa na superfície celular. Em algumas modalidades, uma ou mais atividades de uma proteína CD33 que são induzidas transitoriamente por anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem incluir, sem limitação, fosforilação de Tyr-340 e Tyr-358 por uma tirosina quinase da família Src, como LCK e FYN; recrutamento e ligação com as proteínas tirosina fosfatases específicas SHP1 e SHP2; recrutamento e ligação com a PLC-gama1, que atua como um fator de troca de nucleotídeos de guanina para Dynamini-1; recrutamento e ligação com a proteína contendo o domínio SH2 (por exemplo, Crkl); recrutamento e ligação com a tirosina quinase de baço Syk; recrutamento e ligação com a proteína 2 ligada ao receptor do fator de crescimento SH3-SH2-SH3 (Grb2); recrutamento e ligação com múltiplas proteínas contendo SH2; fosforilação de Ser-307 e Ser-342 pela proteína quinase C; expressão modulada de uma ou mais citocinas anti-inflamatórias, IL-4, IL-10, 11-13, I1L-35, 11-16, TGF-beta, IL-1Ra, G- CSF e receptores solúveis para TNF, IFN- beta1a, IFN-betaib, ou IL-6 em monócitos, macrófagos, células T, neutrófilos de células dendríticas e/ou microglia; diminuição da mobilização intracelular de cálcio; expressão modulada de uma ou mais citocinas pró-inflamatórias IFN- a4, IFN-b, I1L-16B, TNF-a, IL-6, IL-8, CRP, 11-20 membros da família, LIF, IFN-gama, OSM, CNTF, GM-CSF, IL-11, 11-12, I1L-17, 11-18, 11-23, CXCL10, 11-33, CRP, 11-33, MCP-1 e MIP-1-beta em monócitos,

macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; expressão modulada de uma ou mais proteínas selecionadas dentre C1ga, C1qgB, C19gC, C1s, CIR, C4, C2, C3, ITGB2, HMOX1, LAT?2, CASP1, CSTA, VSIG4, MS4A4A, C3AR1, GPX1, TyroBP, ALOXSAP, ITGAM, SLC7A7, CDA4, ITGAX, PYCARD, CD14, CD16, HLA-DR e CCR2; inibição da fosforilação de quinase regulada por sinal extracelular (ERK); diminuição da fosforilação da tirosina em múltiplas proteínas celulares; expressão modulada do receptor de quimiocina C- C 7 (CCR7); inibição da quimiotaxia de células microgliais em relação às células que expressam CCL19 e CCL21; ativação da fosfoinositídeo 3-quinase; redução do crescimento celular de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas e/ou microglia; redução da proliferação de células T induzidas por células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada, microglia M2, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados e/ou macrófagos M2; inibição da produção de osteoclastos, diminuição da taxa de osteoclastogênese ou ambos; diminuição da sobrevivência de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T-helper, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada e / ou microglia M2; diminuição da proliferação de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T-helper, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1 ativadas microglia M1 e/ou microglia M2; inibição da migração de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T-helper,

células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada e/ou microglia M2; diminuição de uma ou mais funções de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T-helper, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada e/ou microglia M2; inibição da maturação de neutrófilos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, macrófagos, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados, macrófagos M2, monócitos, osteoclastos, células T, células T-helper, células T citotóxicas, granulócitos, microglia, microglia M1, microglia M1 ativada e/ou microglia M2; aumento da morte celular e apoptose de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; redução da atividade fagocítica de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; redução da proliferação de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia; redução da funcionalidade geral de monócitos, macrófagos, células T, células dendríticas, neutrófilos e/ou microglia, fosforilação de um receptor contendo ITAM; fosforilação de moléculas de sinalização que medeiam a sinalização de ITAM; redução da ativação de receptores de reconhecimento de padrão; redução da ativação de receptores do tipo Toll; redução da ativação de danos associados à depuração de detritos celulares e proteicos; interação entre CD33 e um ou mais de seus ligantes; interação entre CD33 e um co-receptor como CD64; redução de um ou mais tipos de depuração selecionadas a partir da depuração de neurônios apoptóticos, depuração de sinapses disfuncional, depuração de fragmentos de tecido nervoso, depuração de fragmentos de tecidos não nervosos, depuração de bactérias ou outros corpos estranhos, depuração de proteínas causadoras de doenças e depuração de células tumorais;

inibição da fagocitose de um ou mais neurônios apoptóticos, detritos do tecido nervoso, detritos do tecido não nervoso, bactérias, outros corpos estranhos, proteínas causadoras de doenças, peptídeos causadores de doenças, ácido nucleico causador de doenças, lipídios causadores de doenças ou células tumorais; inibição da depuração de um ácido nucleico causador de doença, tal como o ácido nucleico causador de doença é o RNA de expansão repetida anti-sense GGCCCC (G2C4); ativação da depuração de uma proteína causadora de doença selecionada dentre beta amiloide, placas beta amiloide, proteína precursora de amiloide ou fragmentos desta, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS, C90rf/2 (quadro de leitura 72 aberto do cromossomo 9), proteína c9RAN, proteína priônica, PrPSc, huntingtina, calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpo de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide de ilhota, insulina, apolipoproteína Al, amiloide sérico A, medina, prolactina, transtirretina, lisozima, microglobulina beta 2, gelsolina, queratoepitelina, cistatina, cadeia leve de imunoglobulina AL, proteína S-IBM, produtos de tradução não ATG (RAN) associados à repetição, peptídeos de repetição de dipeptídeo (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina-prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina- arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), ubiquitina e peptídeos de repetição de prolina-arginina (PR); inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de câncer selecionados dentre câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, leucemia mieloide aguda, câncer de pâncreas, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma e câncer de tireoide; inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de distúrbios neurológicos selecionados dentre demência, demência frontotemporal, doença de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt- Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença de taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, tremor essencial, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy-Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar basal cortical, encefalomielite disseminada aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão na medula espinhal,- lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada à idade, glaucoma, ritinite pigmentosa, degeneração da retina e esclerose múltipla; inibição da resposta imune benéfica a diferentes tipos de distúrbios inflamatórios e infecciosos selecionados a partir do lúpus, colite aguda e crônica, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerosa, obesidade, malária, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica e doença óssea de Paget; inibição da fagocitose de um ou mais neurônios apoptóticos, detritos do tecido nervoso, sinapses disfuncionais, detritos do tecido não nervoso, bactérias, outros corpos estranhos, proteínas causadoras de doenças, peptídeos causadores de doenças, ácidos nucleicos causadores de doenças ou células tumorais, em que os ácidos nucléicos causadores de doenças podem ser um RNA de expansão repetida anti-sense GGCCCC (G2C4), as proteínas causadoras de doenças podem incluir beta amiloide, beta amiloide oligomérica, placas beta amiloide, proteína precursora de amiloide ou fragmentos desta, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS, C90rf/2 (quadro de leitura aberta 72 do cromossomo 9), proteína c9RAN, proteína priônica, PrPSc, huntingtina,

calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpo de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide das ilhotas, insulina, apolipoproteína Al, amiloide sérico A, medina, prolactina, transtirretetina, lisozima, microglobulina beta 2, gelsolina, queratoepitelina, cistatina, cadeia leve da imunoglobulina AL, Proteína S-IBM, produtos de tradução não ATG (RAN) associados à repetição, peptídeos de repetição de dipeptídeo (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina-prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina- arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), ubiquitina e peptídeos de repetição de prolina-arginina (PR) e as células tumorais podem ser de um câncer selecionado a partir de câncer de bexiga, câncer cerebral, câncer de mama, câncer de cólon, câncer retal, câncer endometrial câncer de rim, câncer de células renais, câncer de pélvis renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer de pâncreas, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma ou câncer de tireoide; ligação com o ligante CD33 nas células tumorais; ligação com o ligante CD33 em células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, microglia, células T, neutrófilos e/ou macrófagos; inibição da morte de células tumorais por uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T-helper ou células T citotóxicas; inibição da atividade de proliferação de células antitumorais de uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T-helper ou células T citotóxicas; inibição da atividade de metástase de células antitumorais de uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T- helper ou células T citotóxicas; promoção de células dendríticas imunossupressoras, macrófagos imunossupressores, células supressoras derivadas de mieloides, macrófagos associados a tumores ou células T reguladoras; inibição de um ou mais receptores contendo motivo ITAM, como TREM1, TREM2, FegR, DAP10 e DAP12; inibição de um ou mais receptores contendo o motivo D/Ex0-2YxxL/IX6-8Y xxL/| (SEQ ID Nº: 165); inibição de sinalização por um ou mais receptores de reconhecimento de padrão (PRRs), como receptores que identificam padrões moleculares associados a patógenos (PAMPs), e receptores que identificam padrões moleculares associados a danos (DAMPs); inibição da sinalização por um ou mais receptores do tipo Toll; inibição da via de sinalização JAK-STAT; inibição do fator nuclear kappa- enhancer da cadeia leve de células B ativadas (NFKB); i nibição PLCy/PKC/mobilização de cálcio; inibição da sinalização PISK / Akt, Ras ! MAPK; expressão modulada de um ou mais receptores inflamatórios, como CD86, expressa em uma ou mais micróglias, macrófagos, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, neutrófilos, células T, células T-helper ou células T citotóxicas; aumento da expressão de um ou mais genes dependentes de CD33; normalização da expressão gênica dependente de CD33 interrompida; e diminuição da expressão de um ou mais genes dependentes de ITAM, como fatores de transcrição NFAT.

Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser testados quanto à sua capacidade de induzir transitoriamente uma ou mais atividades de uma proteína CD33 utilizando qualquer técnica ou ensaio adequado conhecido na técnica e divulgado neste documento.

Independentemente das atividades que tais anticorpos induzam transitoriamente, esses anticorpos podem agir subsequentemente como inibidores da expressão de CD33 a longo prazo e/ou uma ou mais atividades de uma proteína CD33, induzindo a degradação de CD33, dessensibilização de CD33, clivagem de CD33, internalização de CD33, supressão de CD33, regulação negativa da expressão de CD33 e/ou degradação lisossômica de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo CD33 induz transitoriamente uma ou mais atividades de uma proteína CD33 independentemente da ligação a um receptor Fc.

[00209] As modificações e isotipos Fc de anticorpo exemplificativos são fornecidos na Tabela B abaixo. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição que é capaz de se ligar a um receptor gama Fc tem um isótipo Fc listado na Tabela B abaixo. Tabela B: Isotipos Fc de anticorpo anti-CD33 exemplificativos que são capazes de se ligar ao receptor gama Fc sine r Tomsioesmmemeda mn 1961 L234A e L235A L234A e G237A L234A e L235A e G237A 1gG1 D270A e/ou P238D e/ou L328E e/ou E233D e/ou G237D e/ou A a o da 1961 P238D e S267E e L328F e E233D e G237D e H268D e P271G

A A CO east

Isotipo Fc Mutação (esquema de numeração UE) I1gG1 L234F e L235E e P331S 1gG2 C232S ou C233S IgG2 A3S30S e P331S I1gG1 S267E e L328F S267E sozinho 1gG2 S267E e L328F 1gG4 S267E e L328F IgG2 WT HC com Kappa (cadeia leve) LC HC C1278S com Kappa LC Kappa LC C214S Kappa LC C214S8 e HC C233S Kappa LC C2148S e HC C232S Qualquer uma das mutações listadas acima, juntamente com as mutações A330S e P331S Fragmento F(ab')2 de WT IgG1 e qualquer uma das mutações listadas acima I1gG1 Substituição da constante pesada 1 (CH1) e região de dobradiça de I9G1 por CH1 e região de dobradiça de IGg2

ASTKGPSVFP LAPCSRSTSE STAALGCLVK DYFPEPVTVS

WNSGALTSGV HTFPAVLOSS GLYSLSSVVT VPSSNFGTOT YTCNVDHKPS NTKVDKTVER KCCVECPPCP (SEQ |D Nº: 166) Com um Kappa LC I1gG1 Qualquer uma das mutações listadas acima, juntamente com A3S3SOL/A330S e/ou L234F e/ou L235E e/ou P331S IgG1, I9gG2 ou I9G4 Qualquer uma das mutações listadas acima, juntamente com M252Y e/ou S254T e/ou T256E I9G1 de camundongo, | Para modelos de doenças de camundongos IgG2a de camundongo, — IgG2b de camundongo

E430G, E430S, E430F, E430T, E345K, E345Q, ES45R, E345Y, S440Y, S440W e/ou qualquer combinação destes.

E430G, E430S, E430F, E430T, E345K, E345Q, E345R, E3S45Y, S440Y, S440W e/ou qualquer combinação destes.

[00210] Além dos isotipos descritos na Tabela C, e sem desejar se vincular à teoria, acredita-se que os anticorpos com isotipos I9gG1 ou IgG3 humanos e mutantes destes (por exemplo, Strohl (2009) Current Opinion in Biotechnology 2009, 20:685-691) que ligam os receptores Fcg 1, IA, 1IC, IA, 11IB em humanos e/ou receptores Fcg |, Ill e IV em camundongos, também podem atuar como anticorpos agonistas transitórios.

[00211] Emalgumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc é da classe IgG, da classe IgM ou da classe IgA. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc tem um isotipo I9gG1, IgG2, IgG3 ou IgG4. Em algumas modalidades, o anticorpo compreende um ou mais (por exemplo, um ou mais, dois ou mais, três ou mais, quatro ou mais, cinco ou mais, seis ou mais, sete ou mais, oito ou mais, nove ou mais, 10 ou mais, 11 ou mais, 12 ou mais, ou todas as treze) substituições de aminoácidos na região Fc em uma posição de resíduo selecionada do grupo que consiste em: C127S, L234A, L234F, L235A, L235E, S267E, K322A, L328F, A330S, P331S, ES45R, E430G, S440Y em qualquer combinação (posição do resíduo de acordo com a numeração UE ou Kabat). Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos na posição E430G. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições L243A, L235A e P331A. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições L243A, L235A, P331A. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições K322A e E430G. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições P331S e E430G. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições A330S, P331S e E430G. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições K322A, A330S e P331S. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições K322A, P331S e E430G. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições A330S, P331S e E430G. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições S267E e L328F. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos na posição C127S. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições E345R, E430G e S440Y. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições L243A, L235A e P331S.

[00212] Em certas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc tem um isotipo IgG2. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc contém uma região constante de IgG2 humana. Em algumas modalidades, a região constante de IgG2 humana inclui uma região Fc. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc se liga a um receptor Fc inibitório. Em certas modalidades, o receptor Fc inibitório é o receptor Fe-gama inibitório 1IB (FcylIB). Em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais modificações. Por exemplo, em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais substituições de aminoácidos (por exemplo, em relação a uma região Fc do tipo selvagem do mesmo isotipo). Em algumas modalidades, as uma ou mais substituições de aminoácidos são selecionadas dentre V234A (Alegre et al., (1994) Transplantation 57:1537-1543. 31; Xu et al., (2000) Cell Immunol, 200:16-26), G237A (Cole et al. (1999) Transplantation, 68:563-571), H268Q, V309L, A330S P331S (US 2007/0148167; Armour et al. (1999) Eur J Immunol 29: 2613- 2624; Armour et al. (2000) The Haematology Journal 1(Suppl.1):27; Armour et al. (2000) The Haematology Journal 1(Suppl.1): 27), C232S e/ou C233S (White et al. (2015) Cancer Cell 27, 138—-148), S267E 1L328F (Chu et al., (2008) Mol Immunol, 45:3926-3933), M252Y, S254T e/ou T256E, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat.

[00213] Emalgumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor Fc tem um isotipo IgG2 com um domínio constante de cadeia pesada que contém uma substituição de aminoácidos C1278S, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat (White et al., (2015) Cancer Cell 27, 138-148; Lightle et al., (2010) PROTEIN SCIENCE 19:753-762; e WO2008079246).

[00214] Emalgumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor Fc tem um isotipo IgG2 com um domínio constante de cadeia leve Kappa que contém uma substituição de aminoácidos C2148S, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat (White et al. (2015) Cancer Cell 27, 138-148; Lightte et al, (2010) PROTEIN SCIENCE 19:753-1762; e WO2008079246).

[00215] Em certas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc tem um isotipo IgG1.Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc contém uma região constante de IgG1 de camundongo. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc contém uma região constante de I9gG1 humano. Em algumas modalidades, a região constante de IMgG1 humano inclui uma região Fc. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc se liga a um receptor Fc inibitório. Em certas modalidades, o receptor Fc inibitório é o receptor Fce-gama inibitório 1IB (FcylIB). Em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais modificações. Por exemplo, em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais substituições de aminoácidos (por exemplo, em relação a uma região Fc do tipo selvagem do mesmo isotipo) Em algumas modalidades, uma ou mais substituições de aminoácidos são selecionadas dentre N297A (Bolt S et al. (1993) Eur J Immunol 23:403- 411), D265A (Shields et al. (2001) R. J. Biol. Chem. 276, 6591-6604), D270A, L234A, L235A (Hutchins et al. (1995) Proc Natl Acad Sci USA, 92:11980-11984; Alegre et al., (1994) Transplantation 57:1537-1543. 31; Xu et al., (2000) Cell Immunol, 200:16-26), G237A (Alegre et al. (1994) Transplantation 57:1537-1543. 31; Xu et al. (2000) Cell Immunol, 200:16-26), P238D, L328E, E233D, G237D, H268D, P271G, A330R, C226S, C229S, E233P, L234V, L234F, L235E (McEarchern et al, (2007) Blood, 109:1185-1192), P331S (Sazinsky et al., (2008) Proc Nat! Acad Sci USA 2008, 105:20167-20172), S267E, L328F, A330L, M252Y, S254T, T256E, N297Q, P238S, P238A, A327Q, A327G, P329A, K322A, and/or T394D, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat.

[00216] Em algumas modalidades, o anticorpo inclui um domínio constante de cadeia pesada do isotipo I9gG2 1(CH1) e uma região de dobradiça (White et al., (2015) Cancer Cell 27, 138—148). Em certas modalidades, o isotipo IIG2 CH1 e a região dobradiça contêm a sequência de aminoácidos de

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT

SGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKV DKTVERKCCVECPPCP (SEQ ID Nº: 166). Em algumas modalidades, a região Fc do anticorpo contém uma substituição de aminoácidos S267E, uma substituição de aminoácidos L328F, ou ambas, e/ou uma substituição de aminoácidos N297A ou N297Q, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat.

[00217] Em certas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc tem um isotipo IgG4. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc contém uma região constante de IgG4 humano. Em algumas modalidades, a região constante de IgG4 humano inclui uma região Fc. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc se liga a um receptor Fc inibitório. Em certas modalidades, o receptor Fc inibitório é o receptor Fc-gama inibitório IIB (FcylIB). Em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais modificações. Por exemplo, em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais substituições de aminoácidos (por exemplo, em relação com uma região Fc do tipo selvagem do mesmo isotipo). Em algumas modalidades, uma ou mais substituições de aminoácidos são selecionadas dentre L235A, G237A, S228P, L236E (Reddy et al., (2000) J Immunol, 164:1925-1933), S267E, E318A, L328F, M252Y, S254T e/ou T256E, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat.

[00218] Em certas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc tem um isotipo IgG2/4 híbrido. Em algumas modalidades, o anticorpo de ligação ao receptor gama Fc inclui uma sequência de aminoácidos contendo os aminoácidos 118 a 260 de acordo com a numeração UE ou Kabat de IgG2 humano e os aminoácidos 261-447 de acordo com a numeração UE ou Kabat de IgG4 humano (WO 1997/11971; WO 2007/106585).

[00219] Em certas modalidades, o anticorpo contém uma região constante de IgG4 de camundongo (Bartholomaeus, et al. (2014). J. Immunol. 192, 2091-2098).

[00220] Em algumas modalidades, a região Fc contém adicionalmente uma ou mais substituições de aminoácidos adicionais selecionadas dentre A330L, L234F; L235E ou P331S, de acordo com a numeração UE ou Kabat; e qualquer combinação destas.

[00221] Em certas modalidades, o anticorpo contém uma ou mais substituições de aminoácidos na região Fc em uma posição de resíduo selecionada a partir de: C127S, L234A, L234F, L235A, L235E, S267E, K322A, L328F, A330S, P331S, ES45R, E430G, S440Y e qualquer combinação destas, em que a numeração dos resíduos é de acordo com a numeração UE ou Kabat. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições E430G, L243A, L235A e P331S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições E430G e P331S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições E430G e K322A, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições E430G, A330S e P331S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições E430G, K322A, A330S e P331S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições E430G, K322A e A330S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições E430G, K322A e P331S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições S267E e L328F, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos na posição C1278S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma substituição de aminoácidos nas posições ES45R, E430G e S440Y, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Em algumas modalidades, a região Fc compreende uma substituição de aminoácidos nas posições E243A, L235A e P331S, em que a numeração da posição de resíduo é de acordo com a numeração UE. Anticorpos Inertes

[00222] Outra classe de anticorpos anti-CD33 da presente descrição inclui anticorpos inertes. Conforme utilizado neste documento, os anticorpos "inertes" se referem a anticorpos que se ligam especificamente ao antígeno alvo (por exemplo, CD33), mas não modulam (por exemplo, diminuem/inibem ou ativam/induzem) a função antigênica. Por exemplo, no caso de CD33, os anticorpos inertes não modulam os níveis celulares de CD33, não modulam a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33 ou não modulam uma ou mais atividades de uma proteína CD33. Em algumas modalidades, os anticorpos que não têm a capacidade de agrupar CD33 na superfície celular podem ser anticorpos inertes, mesmo que possuam uma especificidade de epítopo que é compatível com a ativação do receptor.

[00223] Em algumas modalidades, os anticorpos que se ligam a uma proteína CD33 podem incluir anticorpos que se ligam com CD33, mas, devido à sua especificidade ou características de epítopo, não diminuem os níveis celulares de CD33 e/ou inibem a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33. Em algumas modalidades, esses anticorpos podem ser usados como carga para, por exemplo, transportar toxinas (por exemplo, quimioterápicos) para as células tumorais. Portanto, em algumas modalidades, os anticorpos da presente descrição são anticorpos inertes que se ligam a CD33, mas são incapazes de diminuir os níveis celulares de CD33, inibindo a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33 ou induzindo uma ou mais atividades de uma proteína CD33.

[00224] Os anticorpos que diminuem ou não diminuem os níveis celulares de CD33 nas células podem ser combinados com uma região Fc inerte que exibe ligação reduzida a um ou mais receptores Fcg. Exemplos de tais regiões Fc e modificações são fornecidas na Tabela D abaixo. Em algumas modalidades, o anticorpo com uma região Fc inerte tem um isotipo Fc listado na Tabela D abaixo. Anticorpos inibitórios anti-CD33

[00225] Uma terceira classe de anticorpos anti-CD33 da presente descrição inclui anticorpos que bloqueiam ou inibem de outra forma uma ou mais atividades CD33. Em algumas modalidades, os anticorpos que se ligam a uma proteína CD33 podem incluir anticorpos que reduzem os níveis celulares de CD33 (por exemplo, níveis de superfície celular de CD33), inibem a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e/ou um ou mais ligantes de CD33 e inibem um ou mais atividades de uma proteína CD33. Tais anticorpos inibem uma ou mais atividades de uma proteína CD33, seja impedindo a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33 ou impedindo a transdução de sinal do domínio extracelular de CD33 no citoplasma celular na presença de um ou mais ligantes de CD33. Os anticorpos também podem inibir uma ou mais atividades de uma proteína CD33 diminuindo os níveis de CD33 na superfície celular, induzindo degradação de CD33, dessensibilização de CD33, clivagem de CD33, internalização de CD33, supressão de CD33, regulação negativa da expressão de CD33 e/ou degradação lisossômica de CD33. Em algumas modalidades, esses anticorpos anti-CD33 podem não ativar temporariamente o CD33.

[00226] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ter a especificidade do epítopo de um anticorpo anti-CD33 agonista transitório da presente descrição, mas têm um domínio Fc que não tem capacidade de se ligar aos receptores de Fcg e, portanto, é incapaz de, por exemplo, ativar e aglomerar transitoriamente o CD33.

[00227] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm, sem limitação, uma ou mais das seguintes atividades: a capacidade de diminuir a ligação de uma proteína CD33 com um ou mais ligantes de CD33, como glicolipídeos contendo ácido siálico ou glicoproteínas contendo ácido siálico, a capacidade de diminuir a ligação de um supressor de proteína de sinalização de citocina (SOCS) ( por exemplo, proteína SOCS3) com uma proteína CD33, a capacidade de aumentar a degradação proteasomal de uma proteína CD33, a capacidade de reduzir a expressão funcional de CD33 na superfície de macrófagos, monócitos, células T, microglia e/ou células dendríticas circulantes, a capacidade de diminuir a fosforilação de Tyr-340 e Tyr-358 por uma tirosina quinase da família Src, como LOCK e FYN, a capacidade para diminuir o recrutamento e a ligação com proteínas tirosina fosfatases específicas SHP1 e SHP2, a capacidade de diminuir o recrutamento e a ligação com PLC-g1, que atua como nucleotídeo de guanina, fator de troca para Dynami n-1, a capacidade de diminuir o recrutamento e a ligação com Crkl, a capacidade de diminuir o recrutamento e a ligação com a tirosina quinase de baço Syk, a capacidade de diminuir o recrutamento e a ligação com a proteína-2 ligada ao receptor do fator de crescimento (Grb2) SH3-SH2-SH3, a capacidade de diminuir o recrutamento e a ligação a várias proteínas contendo SH2, a capacidade de aumentar a mobilização intracelular de cálcio, a capacidade de modular a produção de citocinas pró- inflamatórias IL-18, IL-8 e TNF-a, a capacidade de diminuir a ativação da fosfoinositida 3-quinase, a capacidade de aumentar o crescimento de monócitos, macrófagos, células dendríticas, células T e/ou micróglia, a capacidade de aumentar a sobrevivência de monócitos, macrófagos, células dendríticas, células T, e/ou micróglia, a capacidade de aumentar a fosforilação da tirosina em várias proteínas celulares, a capacidade de aumentar a atividade fagocítica de monócitos, macrófagos, células dendríticas e/ou micróglia, a capacidade de aumentar o proliferação de células de monócitos, macrófagos, células dendríticas, células T e/ou microglia, a capacidade de aumentar a fosforilação das moléculas de sinalização que medeia a sinalização ITAM, a capacidade de aumentar a função dos receptores de reconhecimento de padrão, a capacidade de aumentar a função de receptores tipo Toll, a capacidade de aumentar a função dos receptores de padrão molecular associado a danos (DAMP), a capacidade de modular a expressão do receptor de quimiocina CC 7 (CCR7) e a capacidade de aumentar a depuração de resíduos celulares e de proteínas.

[00228] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição têm uma região Fc que exibe ligação reduzida com um ou mais receptores Fcg. Exemplos de tais regiões Fc e modificações são fornecidas na Tabela D abaixo. Em algumas modalidades, o anticorpo tem um isotipo Fc listado na Tabela D abaixo. Isotipos de anticorpo Fc com ligação reduzida a receptores gama Fc

[00229] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 com ligação reduzida aos receptores gama Fc têm um isótipo Fc listado na Tabela C abaixo.

Tabela C: Isotipos Fc de anticorpo anti-CD33 exemplificativos com ligação reduzida ao receptor gama Fc 1gG4 F235A e G237A e ES18A E233P e/ou F234V N297A ou N297Q 1gG4 S228P e L236E S241P S241P e L248E S228P e F234A e L235A 1gG1 Excluídos os E233P e L234V e L235A e G236 P238A D265A N297A A327Q ou A327G P329A 1962 C232S8 ou C233S A Temas 1962 V234A e G237A e P238S e H268A e V309L e

AS A 1961 Qualquer uma das mutações listadas acima, juntamente com

A SAIBA IgG1, IgG2 ou I9gG4 Qualquer uma das mutações listadas acima, juntamente com Cs MusaraamTAAE

[00230] Em certas modalidades, o anticorpo anti-CD33 tem um isotipo IG1. Em algumas modalidades, o anticorpo contém uma região constante de IgG1 de camundongo. Em algumas modalidades, o anticorpo contém uma região constante de IgG1 humano. Em algumas modalidades, a região constante de I9gG1 humano inclui uma região Fc. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais modificações. Por exemplo, em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais substituições de aminoácidos (por exemplo, em relação a uma região Fc do tipo selvagem do mesmo isotipo).

[00231] Em algumas modalidades, uma ou mais substituições de aminoácidos são selecionadas dentre N297A, N297Q (Bolt S et al. (1993) Eur J Immunol 23: 403-411), D265A, D270A, L234A, L235A (McEarchern et al., (2007) Blood, 109: 1185-1192), C226S, C229S (McEarchern et al., (2007) Blood, 109: 1185-1192), P238S (Davis et al., (2007) J Rheumatol, 34: 2204-2210), E233P, L234V (McEarchern et al., (2007) Blood, 109: 1185-1192), P238A, A327Q, A327G, P329A (Shields RL, et al., (2001) J Biol Chem. 276 (9): 6591-604), K322A, L234F, L235E (Hezareh, et al., (2001) J Virol 75, 12161-—12168; Oganesyan et al,, (2008). Acta Crystallographica 64, 700-704), P331S (Oganesyan et al., (2008) Acta Crystallographica 64, 700-704), T394D (Wilkinson et al. (2013) MAbs 5 (3): 406417), A330L, M252Y, S254T e/ou T256E, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat. Em certas modalidades, a região Fc inclui ainda uma exclusão de aminoácidos em uma posição correspondente à glicina 236, de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat.

[00232] Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 tem um isotipo IG1 com uma região constante de cadeia pesada que contém uma substituição de aminoácidos C2208 de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat. Em algumas modalidades, a região Fc contém adicionalmente uma ou mais substituições de aminoácidos adicionais selecionadas dentre A330L, L234F; L235E ou P331S, de acordo com a numeração UE ou Kabat. Em certas modalidades, o anticorpo anti-CD33 tem um isotipo IgG2. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 contém uma região constante de IgG2 humana. Em algumas modalidades, a região constante de IgG2 humana inclui uma região Fc. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais modificações. Por exemplo, em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais substituições de aminoácidos (por exemplo, em relação a uma região Fc do tipo selvagem do mesmo isotipo). Em algumas modalidades, uma ou mais substituições de aminoácidos são selecionadas dentreP238S, V234A, G237A, H268A, H268Q, H268E, V309L, N297A, N297Q, V309L, A330S, P331S, C232S, C233S, M252Y ou S254T e/ou T256E, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat (Vafa O. et al., (2014) Methods 65: 114—126).

[00233] Em certas modalidades, o anticorpo anti-CD33 tem um isotipo I9gG4. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 contém uma região constante de IgG4 humano. Em algumas modalidades, a região constante de I9gG4 humano inclui uma região Fc. Em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais modificações. Por exemplo, em algumas modalidades, a região Fc contém uma ou mais substituições de aminoácidos (por exemplo, em relação a uma região Fc do tipo selvagem do mesmo isotipo). Em algumas modalidades, uma ou mais substituições de aminoácidos são selecionadas dentre E233P, F234V, L235A, G237A, E318A (Hutchins et al. (1995) Proc Natl Acad Sci USA, 92: 11980-11984), S228P, L234A / F234A, L236E, S241P L248E (Reddy et al., (2000) J Immunol, 164: 1925-1933; Angal et al,, (1993) Mol Immunol. 30 (1): 105-8; US 8614299 B2; Vafa O. et al. (2014) Methods 65: 114—126), T394D, M252Y, S254T, T256E, N297A e/ou N297Q, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat. Em algumas modalidades, o anticorpo tem um isotipo IgG4, e compreende uma substituição de aminoácido S228P na posição do resíduo 228, uma substituição de aminoácido F234A na posição do resíduo 234, e uma substituição de aminoácido L235A na posição do resíduo 235, em que a numeração da posição dos resíduos está de acordo com a numeração UE.

[00234] Em algumas modalidades, a região Fc adicionalmente contém uma ou mais substituições de aminoácidos adicionais selecionadas dentre um M252Y, S254T e/ou T256E, em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat.

[00235] Mutações de IgG adicionais

[00236] Em algumas modalidades, uma ou mais das variantes de IgG1 descritas neste documento podem ser combinadas com uma mutação A330L (Lazar et al., (2006) Proc Natl Acad Sci USA, 103:4005- 4010), ou uma ou mais dentre as mutações L234F, L235E e/ou P331S (Sazinsky et al., (2008) Proc Nat! Acad Sci USA, 105:20167-20172), em que a posição de aminoácidos está de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat, para eliminar a ativação de complemento. Em algumas modalidades, as variantes de IgG descritas neste documento podem ser combinadas com uma ou mais mutações para aprimorar a meia-vida do anticorpo anti-CD33 no sérico humano (por exemplo, mutações M252Y, S254T, T256E de acordo com a convenção de numeração da UE ou Kabat) (Dall'Acqua et al., (2006) J Biol Chem, 281:23514-23524; e Strohl e al, (2009) Current Opinion in Biotechnology, 20:685-691).

[00237] Emalgumas modalidades, uma variante de IgG4 da presente descrição pode ser combinada com uma mutação S228P, de acordo com a convenção de numeração UE ou Kabat (Angal et al., (1993) Mol Immunol, 30:105-108) e/ou com uma ou mais mutações descritas em Peters et al., (2012) J Biol Chem. 13;287(29):24525-33) para aprimorar a estabilização de anticorpos.

Anticorpos Biespecíficos

[00238] Certos aspectos da presente descrição referem-se a anticorpos biespecíficos que se ligam a uma proteína CD33 da presente descrição e a um segundo antígeno. Os métodos de geração de anticorpos biespecíficos são bem conhecidos na técnica e descritos neste documento. Em algumas modalidades, os anticorpos biespecíficos da presente descrição se ligam a um ou mais resíduos de aminoácidos de uma proteína CD33 da presente descrição, como um ou mais resíduos de aminoácidos da CD33 humana (SEQ ID Nº: 1) ou resíduos de aminoácidos em uma proteína CD33 correspondente aos resíduos de aminoácidos de SEQ ID Nº: 1. Em algumas modalidades, os anticorpos biespecíficos da presente descrição reconhecem um primeiro antígeno e um segundo antígeno. Em algumas modalidades, o primeiro antígeno é uma proteína CD33 ou uma variante de ocorrência natural desta. Em algumas modalidades, o segundo antígeno também é uma proteína CD33, ou uma variante natural desta. Em algumas modalidades, o segundo antígeno é um antígeno que facilita o transporte através da barreira hematoencefálica (consultar, por exemplo, Gabathuler R., Neurobiol. Dis. 37 (2010) 48-57). Esses segundos antígenos incluem, sem limitação, receptor de transferrina (TR), receptor de insulina (HIR), receptor de fator de crescimento semelhante à insulina (IGFR), proteínas 1 e 2 relacionadas ao receptor de lipoproteína de baixa densidade 1 (LPR-1 e 2), receptor da toxina diftérica, CRM197, um anticorpo de domínio único de lhama, TMEM 30 (A), um domínio de transdução de proteínas, TAT, Syn-B, penetratina, um peptídeo de poli-arginina, peptídeos de Angiopep como ANG1005 (consultar, por exemplo, Gabathuler, 2010), e outras proteínas da superfície celular que são enriquecidas nas células endoteliais da barreira hematoencefálica (consultar, por exemplo, Daneman et al., PLoS One. 29 de outubro de 2010; 5(10):213741). Em algumas modalidades, o segundo antígeno é uma proteína causadora de doença, incluindo, sem limitação, beta amiloide, beta amiloide oligomérica, placas beta amiloide, proteína precursora amiloide ou fragmentos desta, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS C90orf72 (quadro de leitura aberta 72 do cromossomo 9), proteína cC9RAN, proteína priônica, PrPSc, huntingtina, calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpo de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide das ilhotas, insulina, apolipoproteína Al, amiloide sérico A, medina, prolactina, transtiretina, lisozima, microglobulina beta 2, gelsolina, queratoepitelina, cistatina, cadeia leve da imunoglobulina AL, proteína S-IBM, produtos da tradução não ATG associados à repetição (RAN), peptídeos por repetição de dipeptídeos (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina-prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina-arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), ubiquitina e peptídeos de repetição prolina- arginina (PR). Em algumas modalidades, o segundo antígeno é um ou mais ligantes e/ou proteínas expressas nas células imunes, incluindo, sem limitação, CD40, OX40, ICOS, CD28, CD137 /4-1BB, CD27, GITR, PD-L1, CTLAA4, PD -L2, PD-1, B7-H3, B7-H4, HVEM, LIGHT, BTLA, CD38, TIGIT, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIMA4, A2AR, LAG3, DRS5, CD39, CD70, CD73, TREM1, TREM2, Siglec-5, Siglec-7, Siglec-9, Siglec-11, SirpA, CD47, receptor CSF1, CD3 e fosfatidilserina. Em algumas modalidades, o segundo antígeno é uma proteína, lipídeo, polissacarídeo ou glicolipídeo expresso em uma ou mais células tumorais.

Fragmentos de Anticorpo

[00239] Certos aspectos da presente descrição referem-se a fragmentos de anticorpo que se ligam a um ou mais de uma proteína CD33 da presente descrição, uma variante de ocorrência natural de uma proteína CD33 e uma variante de doença de uma proteína CD33. Em algumas modalidades, o fragmento de anticorpo é um fragmento Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv ou scFv.

[00240] Em algumas modalidades, o fragmento de anticorpo é usado em combinação com um segundo anticorpo CD33 e/ou com um ou mais anticorpos que se ligam especificamente com uma proteína causadora de doença selecionados dentre: beta amiloide, beta amiloide oligomérica, placas beta amiloides, proteína precursora amiloide ou fragmentos desta, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS, C90orf72 (quadro de leitura aberto 72 do cromossomo 9), proteína c9RAN, proteína do príon, PrPSc, huntingtina, calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpo de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide da ilhota, insulina, apolipoproteína Al, amiloide sérico A, medina, prolactina, transtirretina, lisozima, beta 2 microglobulina, gelsolina, ceratoepitelina, cistatina, cadeia leve de imunoglobulina AL, proteína S- IBM, produtos da tradução não ATG associados à repetição (RAN), peptídeos de repetição de dipeptídeos (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina-prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina-arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), ubiquitina, e peptídeos de repetição de prolina- arginina (PR), e qualquer combinação desta; ou com um ou mais anticorpos que se ligam com uma proteína imunomoduladora selecionada do grupo que consiste em: CD40, OX40, ICOS, CD28, CD137/4-1BB, CD27 , GITR, PD-L1, CTLAA4, PD-L2, PD-1, B7-H3, B7- H4, HVEM, LIGHT, BTLA, CD38, TIGIT, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIMA4, A2AR, LAG3, DR5, CD39, CD70, CD73, TREM1, TREM2, CDA47, receptor CSF-1, Siglec-5, Siglec-7, Siglec-9, Siglec-11, fosfatidilserina, e qualquer combinação destas.

[00241] Em algumas modalidades, os fragmentos de anticorpo da presente descrição podem ser fragmentos funcionais que se ligam com o mesmo epítopo como qualquer um dos anticorpos anti-CD33 da presente descrição. Em algumas modalidades, os fragmentos de anticorpo são versões miniaturizadas dos anticorpos anti-CD33 ou fragmentos de anticorpo da presente descrição que têm o mesmo epítopo do anticorpo completo correspondente, mas têm um peso molecular menor. Tais fragmentos de anticorpo anti-CD33 miniaturizados podem ter melhor capacidade de penetração cerebral e meia-vida mais curta, o que é vantajoso para utilidades de imageamento e diagnóstico (consultar, por exemplo, Lútje S et al., Bioconjug Chem. 19 de fevereiro de 2014; 25 (2): 335-41; Tavaré R et al., Proc Natl Acad Sci US A.2014 21 de janeiro; 111 (3): 1108-13; e Wiehr S et al., Prostate. 2014 maio; 74 (7): 743-55). Por conseguinte, em algumas modalidades, os fragmentos de anticorpo anti-CD33 da presente descrição têm melhor penetração cerebral em comparação com seus anticorpos completos correspondentes e/ou têm uma meia-vida mais curta em comparação com seus anticorpos completos correspondentes. Estruturas principais de anticorpo

[00242] “Qualquer um dos anticorpos descritos neste documento inclui ainda uma estrutura principal. Em algumas modalidades, a estrutura principal é uma estrutura principal de imunoglobulina humana. Por exemplo, em algumas modalidades, um anticorpo (por exemplo, um anticorpo anti-CD33) compreende HVRs como em qualquer uma das modalidades acima e compreende adicionalmente uma estrutura principal de aceptor humano, por exemplo, uma estrutura principal de imunoglobulina humana ou uma estrutura principal de consenso humano. As estruturas principais de imunoglobulina humana podem ser parte do anticorpo humano, ou um anticorpo não humano pode ser humanizado pela substituição de uma ou mais estruturas principais endógenos por região(ões) de estrutura principal humana(s). As regiões de estrutura principal humanas que podem ser usadas para a humanização incluem, mas não estão limitadas a: regiões de estrutura principal selecionadas usando o método de "melhor ajuste" (vide, por exemplo, Sims et al. J. Immunol. 151:2296 (1993)); regiões de estrutura principal derivadas da sequência consenso de anticorpos humanos de um subgrupo específico de regiões variáveis de cadeia leve ou pesada (ver, por exemplo, Carter et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:4285 (1992); e Presta et al. !Immunol., 151:2623 (1993)); regiões de estrutura principal (mutantes somaticamente) regiões de estrutura principal ou regiões de estrutura principal de linha germinativa humana (consultar, por exemplo, Almagro e Fransson, Front. Biosci. 13:1619-1633 (2008)); e regiões de estrutura principal derivadas da triagem de bibliotecas de FR (vide, por exemplo, Baca et al., J. Biol. Chem. 272:10678-10684 (1997) e Rosok et al., J. Biol. Chem. 271:22611-22618 (1996)).

[00243] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais, três ou mais ou todas as quatro) regiões de estrutura principal selecionadas dentre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FR4 (conforme mostrado nas Tabelas 5A-5D). Em algumas modalidades, a VH FR1 compreende a sequência de acordo com a Formula VII: QVALVASGAEVKKPGX;SVKX2SCKAS (SEQ ID Nº: 158), em que X1 é AouS,eX é Voul. Em algumas modalidades, a VM FR1 compreende a sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 2-4. Em algumas modalidades, a VH Fr2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5. Em algumas modalidades, a VM FR3 compreende a sequência de acordo com a Formula VII: KIAK2XK3XaX5sXeRX7TXgTVDXaX1oX11STX12Y MELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 159), em que X: é You S, Xcé Qou E, Xgé Kou D, Ia é F ou D, Xs é Q, F, E, ou T, Xsé G, D, ou H, Xx é Vou A, Xgé M ou L, Xs é

T, N, ou Q, Xiné S ou P, X11 é Tou A, e X1i2é V ou A. Em algumas modalidades, VH FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 6-19. Em algumas modalidades, VH FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula IX: WGQGTLX;TVSS (SEQ ID Nº: 160), em que X) V ou L. Em algumas modalidades, VH FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 20-21. Em algumas modalidades, um anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada que compreende uma VH FR1 de acordo com a Fórmula VII, uma VH FR2 compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 5, uma VH FR3 de acordo com a Fórmula VIIl e VH FR4 de acordo com a Fórmula IX. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-cCD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende uma VH FR1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 2-4, uma VH FR2 compreendendo a sequência de SEQ ID Nº: 5, uma VH FR3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 6-19 e VH FR4 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 20-21. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FR4 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB- 14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-

14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-

64.5, AB- 64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-

64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-

64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 7).

[00244] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais, três ou mais ou todas as quatro) regiões de estrutura principal selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3 e VL FR4 (conforme mostrado nas Tabelas 6A-6D). Em algumas modalidades, a VL FR1 compreende a sequênciade acordo com a Formula X XIIX2Xa| TASPXaSLKsX6SK7 GX8gRXgTIX1o0C (SEQ ID Nº: 161), em que X1 é D ou G, X2é Q ou V, Xs é MouL, Xaé Sou D, Xs é S, P, ou A, XKgé À ou V, Xr é VouL, Xsé Dou E, Xs é Vou A, e X1né T, N, ou D.

Em outras modalidades, a VL FR1 compreende uma sequência selecionada a partir do grupo que consiste na SEQ ID Nº: 22-26. Em algumas modalidades, a VL FR2 compreende a sequência de acordo com a Formula Xl: WYQQKPGX:X2PKLLIK (SEQ ID Nº: 162), em que Xx é K ou Q, e X2 é A ou P.

Em algumas modalidades, a VL FR2 compreende a sequência selecionada a partir do grupo que consiste na SEQ ID Nº: 27-28. Em algumas modalidades, a VL FR3 compreende a sequência de acordo com a Formula XII: GVPX:RFSGSGSGTDFTLTISSLQOX2EDX3AXaYYC (SEQ ID Nº: 163), em que X; é Sou D, Xcé Pou A, Xg é F, L, ou V, e Xa é Tou V.

Em outras modalidades, a VL FR3 compreende uma sequência selecionada a partir do grupo que consiste na SEQ ID Nº: 29-31. Em algumas modalidades, VL FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula XIII: FGQGTKLEIX: (SEQ ID Nº: 164), em que Xr é Kou E.

Em algumas — modalidades, VL FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo que consiste em SEQ ID Nº: 32-33. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve compreendendo uma VL FR1 de acordo com a Fórmula X, uma VL FR2 de acordo com a Fórmula Xl, uma VL FR3 de acordo com a Fórmula XIl e VL FR4 de acordo com a Fórmula XIll.

Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia leve que compreende uma VL FR1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 22-26, uma VL FR2 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 27-28, uma VL FR3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 29- 31 e VL FR4 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 32-33. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FR4 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB- 14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-

14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-

64.5, AB- 64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-

64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-

64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 8).

[00245] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais, três ou mais, ou todas as quatro) regiões de estrutura principal selecionadas dentre VH FR1, VH FR2, VH FR3, e VH FR4 (conforme mostrado nas Tabelas 5A-5D), e uma região variável de cadeia leve que compreende uma ou mais (por exemplo, uma ou mais, duas ou mais, três ou mais, ou todas as quatro) regiões de estrutura principal selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3, and VL FR4 (conforme mostrado nas Tabelas 6A-6D). Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende uma VH FR1 de acordo com a Fórmula VII, uma VH FR2 compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 5, uma VH FR3 de acordo com a Fórmula VIll e VH FR4 de acordo com a

Fórmula IX, e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma VL FR1 de acordo com a Fórmula X, uma VL FR2 de acordo com a Fórmula Xl, uma VL FR3 de acordo com a Fórmula XIl e VL FR4 de acordo com a Fórmula XIll. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada que compreende uma VH FR1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ |D Nº: 24, uma VH FR2 compreendendo a sequência de SEQ ID Nº: 5, uma VH FR3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 6-19 e VH FR4 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 20- 21, uma região variável de cadeia leve compreendendo uma VL FR1 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 22- 26, uma VL FR2 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 27-28, uma VL FR3 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 29-31 e VL FR4 compreendendo uma sequência selecionada de SEQ ID Nº: 32-33. Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição compreendem uma região variável de cadeia pesada compreendendo VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FR4 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB- 14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-

63.5, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB- 64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1. 7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14 ou AB-64.1.15 (como mostrado na Tabela 7) e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma VL FR1, uma VL FR2, uma VLFR3 e VL FRA4 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB- 14.5, AB-

14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-

63.5, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB- 64.1.14 ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 8). Atividades da CD33 Expressão modulada de proteínas relacionadas ao sistema imunológico

[00246] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem modular a expressão de PD-L1, PD-L2, B7- H2, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 após a ligação com uma proteína CD33 expressa em uma célula. A expressão modulada (por exemplo, aumentada ou diminuída) pode incluir, sem limitação, modulação na expressão gênica, modulação na expressão transcricional ou modulação na expressão da proteína. Qualquer método conhecido na técnica para determinar gene, transcrição (por exemplo, mRNA) e/ou expressão de proteínas pode ser usado. Por exemplo, a análise de Northern blot pode ser usada para determinar os níveis de expressão do gene do mediador anti-inflamatório, a RT-PCR pode ser usada para determinar o nível de transcrição do mediador anti- inflamatórioe a análise de Western blot pode ser usada para determinar os níveis de proteína do mediador anti-inflamatório.

[00247] Conforme utilizado neste documento, PD-L1, PD-L2, B7-H2, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 podem ter expressão modulada se sua expressão em uma ou mais células de um sujeito tratado com anticorpos anti-CD33 da presente descrição for modulada (por exemplo, aumentada ou diminuída) em comparação com a expressão de PD-L1, PD-L2, B7-H2, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 expressa em uma ou mais células de um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode modular a expressão de PD-L1, PD-L2 , B7-

H2 , B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 em uma ou mais células de um sujeito por pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 45%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 100%, pelo menos 110%, pelo menos 115%, pelo menos 120%, pelo menos 125%, pelo menos 130%, pelo menos 135%, pelo menos 140%, pelo menos 145%, pelo menos 150%, pelo menos 160%, pelo menos 170%, pelo menos 180%, pelo menos 190% ou pelo menos 200%, por exemplo, em comparação com a expressão PD-L1, PD-L2, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 em uma ou mais células de um sujeito correspondente que é não tratado com o anticorpo. Em outras modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição modula a expressão de PD-L1, PD-L2 , B7-H2 , B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 em uma ou mais células de um sujeito por pelo menos 1,5 dobra, pelo menos 1,6 vezes, pelo menos 1,7 vezes, pelo menos 1,8 vezes, pelo menos 1,9 vezes, pelo menos 2,0 vezes, pelo menos 2,1 vezes, pelo menos 2,15 vezes, pelo menos 2,2 vezes, pelo menos 2,25 vezes, pelo menos 2,3 vezes, pelo menos 2,35 vezes, pelo menos 2,4 vezes, pelo menos 2,45 vezes, pelo menos 2,5 vezes, pelo menos 2,55 vezes, pelo menos 3,0 vezes, pelo menos 3,5 vezes, pelo menos 4,0 vezes, pelo menos 4,5 vezes, pelo menos 5,0 vezes, pelo menos 5,5 vezes, pelo menos 6,0 vezes, pelo menos 6,5 vezes, pelo menos 7,0 vezes, pelo menos 7,5 vezes, pelo menos 8,0 vezes, pelo menos 8,5 vezes, pelo menos 9,0 vezes, pelo menos 9,5 vezes ou pelo menos 10 vezes, por exemplo, em comparação com a expressão PD-L1, PD-L2, B7-H2, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206 em uma ou mais células de um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo.

[00248] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser usados para prevenção, redução do risco ou tratar condições e/ou doenças associadas com níveis anormais de PD-L1, PD-L2, B7-H2, B7-H3, CD200R, CD163 e/ou CD206, incluindo sem limitação demência, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença tipo taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, lúpus, colite aguda e crônica, artrite reumatoide, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, tremor essencial, lúpus do sistema nervoso central, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy-Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar corticobasal, encefalomielite disseminada aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada ao envelhecimento, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, esclerose múltipla, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica, doença óssea de Paget e câncer incluindo câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), mieloma múltiplo, policitemia vera, trombocitose — essencial, — mielofibrose — primária ou idiopática, mieloesclerose primária ou idiopática, tumores derivados de mieloides,

tumores que expressam CD33, câncer de tireoide, infecções, herpes do SNC, infecções parasitárias, infecção por tripanossoma, infecção por Cruzi, infecção por Pseudomonas aeruginosa, infecção por Leishmania donovani, infecção por Streptococcus do grupo B, infecção por Campylobacter jejuni, infecção por Neisseria meningiditis, HIV tipo | e/ou Haemophilus influenza.

Aprimoramento ou normalização da capacidade das células dendríticas derivadas da medula óssea de induzir a proliferação de células T específicas ao antígeno

[00249] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem melhorar e/ou normalizar a capacidade das células dendríticas derivadas da medula óssea de induzir a proliferação de células T específicas do antígeno após a ligação com uma proteína CD33 expressa em uma célula.

[00250] Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti- CD33 da presente descrição podem aprimorar e/ou normalizar a capacidade das células dendríticas derivadas da medula óssea de induzir a proliferação de células T específicas do antígeno em uma ou mais células dendríticas derivadas da medula óssea de um sujeito por pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 45%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 100%, pelo menos 110%, pelo menos 115%, pelo menos 120%, pelo menos 125%, pelo menos 130%, pelo menos 135%, pelo menos 140%, pelo menos 145%, pelo menos 150%, pelo menos 160%, pelo menos 170%, pelo menos 180%, pelo menos 190% ou pelo menos 200%, por exemplo, em comparação com a capacidade das células dendríticas derivadas da medula óssea de induzir a proliferação de células T específicas do antígeno em uma ou mais células dendríticas derivadas da medula óssea de um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo. Em outras modalidades, um anticorpo antagonista anti-CD33 pode aprimorar e/ou normalizar a capacidade das células dendríticas derivadas da medula óssea de induzir a proliferação de células T específicas do antígeno em uma ou mais células dendríticas derivadas da medula óssea de um sujeito por pelo menos pelo menos pelo menos 1,5 vezes, pelo menos 1,6 vezes, pelo menos 1,7 vezes, pelo menos 1,8 vezes, pelo menos 1,9 vezes, pelo menos 2,0 vezes, pelo menos 2,1 vezes, pelo menos 2,15 vezes, pelo menos 2,2 vezes, pelo menos 2,25 vezes, em pelo menos 2,3 vezes, pelo menos 2,35 vezes, pelo menos 2,4 vezes, pelo menos 2,45 vezes, pelo menos 2,5 vezes, pelo menos 2,55 vezes, pelo menos 3,0 vezes, pelo menos 3,5 vezes, pelo menos 4,0 vezes, pelo menos 4,5 vezes, pelo menos pelo menos 5,0 vezes, pelo menos 5,5 vezes, pelo menos 6,0 vezes, pelo menos 6,5 vezes, pelo menos 7,0 vezes, pelo menos 7,5 vezes, pelo menos 8,0 vezes, pelo menos 8,5 vezes, pelo menos 9,0 vezes, pelo menos 9,5 vezes ou pelo menos 10 vezes, por exemplo, em comparação com a capacidade das células dendríticas derivadas da medula óssea de induzir a proliferação de células T específicas ao antígeno em uma ou mais células dendríticas derivadas da medula óssea de um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo.

[00251] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição são benéficos para prevenção, redução do risco ou tratar condições e/ou doenças associadas com a capacidade diminuída e desregulada das células dendríticas derivadas da medula óssea de induzir a proliferação de células T específicas, incluindo sem limitação, demência, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington,

doença tipo taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, lúpus, colite aguda e crônica, artrite reumatoide, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, tremor essencial, lúpus do sistema nervoso central, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy-Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar corticobasal, encefalomielite disseminada aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada ao envelhecimento, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, esclerose múltipla, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica, doença óssea de Paget e câncer incluindo câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), mieloma múltiplo, policitemia vera, trombocitose — essencial, — mielofibrose — primária =ou idiopática, mieloesclerose primária ou idiopática, tumores derivados de mieloides, tumores que expressam CD33, câncer de tireoide, infecções, herpes do SNC, infecções parasitárias, infecção por tripanossoma, infecção por Cruzi, infecção por Pseudomonas aeruginosa, infecção por Leishmania donovani, infecção por Streptococcus do grupo B, infecção por Campylobacter jejuni, infecção por Neisseria meningiditis, HIV tipo | e/ou Haemophilus influenza.

Proliferação e sobrevivência de células que expressam CD33

[00252] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem aumentar a proliferação, sobrevivência e/ou função de células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células Langerhans da pele, células Kupffer, células T, células T auxiliares, células T citotóxicas e células microgliais após ligação com aproteína CD33 expressa em uma célula.

[00253] As células microgliais são um tipo de célula glial que são os macrófagos residentes do cérebro e da medula espinhal e, portanto, atuam como a primeira e principal forma de defesa imunológica ativa no sistema nervoso central (SNC). As células microgliais constituem 20% da população total de células gliais no cérebro. As células microgliais estão constantemente vasculhando o CNS em busca de placas, neurônios danificados e agentes infecciosos. O cérebro e a medula espinhal são considerados órgãos com "privilégios imunológicos", pois são separados do resto do corpo por uma série de células endoteliais conhecidas como barreira hematoencefálica, que impede a maioria das infecções de atingir o tecido nervoso vulnerável. No caso em que agentes infecciosos são introduzidos diretamente no cérebro ou atravessam a barreira hematoencefálica, as células microgliais devem reagir rapidamente para diminuir a inflamação e destruir os agentes infecciosos antes que danifiquem o tecido neural sensível. Devido à indisponibilidade de anticorpos do resto do corpo (poucos anticorpos são pequenos o suficiente para atravessar a barreira hematoencefálica), a micróglia deve ser capaz de reconhecer corpos estranhos, engoli-los e atuar como células apresentadoras de antígenos, ativando as células T. Como esse processo deve ser realizado rapidamente para evitar danos potencialmente fatais, as células microgliais são extremamente sensíveis a pequenas alterações patológicas no CNS. Elas alcançam essa sensibilidade em parte por possuir canais únicos de potássio que respondem a pequenas mudanças no potássio extracelular.

[00254] “Como usado neste documento, os macrófagos da presente descrição incluem, sem limitação, macrófagos M1, macrófagos M1 ativados e macrófagos M2. Como usado neste documento, as células microgliais da presente descrição incluem, sem limitação, células microgliais M1, células microgliais M1 ativadas e células microgliais M2.

[00255] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem aumentar a expressão de CD80, CD83 e/ou CD86 em células dendríticas, monócitos e/ou macrófagos.

[00256] Conforme utilizado neste documento, a taxa de proliferação, sobrevivência e/ou função de macrófagos, células dendríticas, monócitos, células T, neutrófilos e/ou micróglia pode incluir expressão aumentada se a taxa de proliferação, sobrevivência e/ou função de células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupífer e/ou micróglia em um sujeito tratado com um anticorpo anti-CD33 da presente descrição é maior que a taxa de proliferação, sobrevivência e/ou função de células dendríticas, “macrófagos, “monócitos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupffer, células T, neutrófilos e/ou micróglia em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode aumentar a taxa de proliferação, sobrevivência e/ou função de células dendríticas, macrófagos, monócitos, osteoclastos, células Langerhans da pele, células Kupffer, células T e/ou micróglia em um sujeito em pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 45%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 100%, pelo menos 110%, pelo menos 115%, pelo menos

120%, pelo menos 125%, pelo menos 130%, pelo menos 135%, pelo menos 140%, pelo menos 145%, pelo menos 150%, pelo menos 160%, pelo menos 170%, pelo menos 180%, pelo menos 190% ou pelo menos 200%, por exemplo, em comparação com a taxa de proliferação, sobrevivência e/ou função de células dendríticas, macrófagos, monócitos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células Kupffer, células T e/ou micróglia em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo. Em outras modalidades, um anticorpo anti- CD33 da presente descrição pode aumentar a taxa de proliferação, sobrevivência e/ou função de células dendríticas, macrófagos, monócitos, osteoclastos, células Langerhans da pele, células Kupífer, células T e/ou micróglia em uma sujeito pelo menos 1,5 vezes, pelo menos 1,6 vezes, pelo menos 1,7 vezes, pelo menos 1,8 vezes, pelo menos 1,9 vezes, pelo menos 2,0 vezes, pelo menos 2,1 vezes, pelo menos 2,15 vezes, pelo menos 2,2 vezes, pelo menos 2,25 dobra, pelo menos 2,3 vezes, pelo menos 2,35 vezes, pelo menos 2,4 vezes, pelo menos 2,45 vezes, pelo menos 2,5 vezes, pelo menos 2,55 vezes, pelo menos 3,0 vezes, pelo menos 3,5 vezes, pelo menos 4,0 vezes, pelo menos 4,5 dobra, pelo menos 5,0 vezes, pelo menos 5,5 vezes, pelo menos 6,0 vezes, pelo menos 6,5 vezes, pelo menos 7,0 vezes, pelo menos 7,5 vezes, pelo menos 8,0 vezes, pelo menos 8,5 vezes, pelo menos 9,0 vezes, pelo menos 9,5 vezes, ou pelo menos 10 vezes, por exemplo, em comparação com a taxa de proliferação, sobrevivência e/ou função de células dendríticas, macrófagos, monócitos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupffer, células T e/ou micróglia em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo.

[00257] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser usados para prevenção, reduzir o risco ou tratar condições e/ou doenças associadas com a redução na proliferação, sobrevivência, aumento da apoptese e/ou função de células dendríticas, neutrófilos, macrófagos, monócitos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupffer, células T e/ou microglia, incluindo sem limitação, demência, demência frontotemporal, doença de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença tipo taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, lúpus, colite aguda e crônica, artrite reumatoide, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, tremor essencial, lúpus do sistema nervoso central, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy- Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar corticobasal, — encefalomielite — disseminada — aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada ao envelhecimento, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, esclerose múltipla, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica, doença óssea de Paget e câncer incluindo câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstatay câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), mieloma múltiplo, policitemia vera, trombocitose essencial, mielofibrose primária ou idiopática, mieloesclerose primária ou idiopática, tumores derivados de mieloides, tumores que expressam CD33, câncer de tireoide, infecções, herpes do SNC, infecções parasitárias, infecção por tripanossoma, infecção por Cruzi, infecção por Pseudomonas aeruginosa, infecção por Leishmania donovani, infecção por Streptococcus do grupo B, infecção por Campylobacter jejuni, infecção por Neisseria meningiditis, HIVtipo le/ou Haemophilus influenza. Ativação de células imunológicas dependente de CD33

[00258] Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti- CD33 da presente descrição podem aumentar a atividade das células T citotóxicas, células T helper ou ambas. Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti-CD33 da presente descrição são benéficos para a prevenção, redução do risco ou tratamento de condições e/ou doenças associadas à diminuição da atividade das células T citotóxicas, células T helper ou ambas, incluindo, sem limitação, tumores, incluindo tumores sólidos, como câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma e câncer de tireoide.

[00259] Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti- CD33 da presente descrição podem induzir um aumento na proliferação, sobrevivência , atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3”, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupffer e/ou células microgliais. Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti-CD33 da presente descrição induzem um aumento na proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupffer e/ou células microgliais na presença de células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC).

[00260] Conforme usado neste documento, a taxa de proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupífer e/ou células microgliais podem incluir uma taxa aumentada se a taxa de proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupffer e/ou células microgliais em um sujeito tratado com um anticorpo anti-CD33 da presente descrição é maior que a taxa de proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupffer e/ou células microgliais em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo. Em algumas modalidades, um anticorpo anti- CD33 da presente descrição pode aumentar a proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupífer e/ou células microgliais em um sujeito em pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 45%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 100%, pelo menos 110%, pelo menos 115%, pelo menos 120%, pelo menos 125%, pelo menos 130%,

pelo menos 135%, pelo menos 140%, em pelo menos 145%, pelo menos 150%, pelo menos 160%, pelo menos 170%, pelo menos 180%, pelo menos 190% ou pelo menos 200%, por exemplo, em comparação com o nível de proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupífer e/ou células microgliais em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo.

Em outras modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode aumentar a proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células de Kupífer e/ou células microgliais em um sujeito em pelo menos 1,5 vez, pelo menos, pelo menos 1,6 vez, pelo menos 1,7 vez, pelo menos 1,8 vez, pelo menos 1,9 vez, pelo menos 2,0 vezes, em pelo menos 2,1 vezes, pelo menos 2,15 vezes, pelo menos 2,2 vezes, pelo menos 2,25 vezes, pelo menos 2,3 vezes, pelo menos 2,35 vezes, pelo menos 2,4 vezes, pelo menos 2,45 vezes, pelo menos 2,5 vezes, pelo menos 2,55 vezes, pelo menos 3,0 vezes, pelo menos 3,5 vezes, pelo menos 4,0 vezes, pelo menos 4,5 vezes, pelo menos 5,0 vezes, pelo menos 5,5 vezes, pelo menos 6,0 vezes, pelo menos 6,5 vezes, pelo menos 7,0 vezes, pelo menos 7,5 vezes, pelo menos 8,0 vezes, pelo menos 8,5 vezes, pelo menos 9,0 vezes, pelo menos 9,5 vezes ou pelo menos 10 vezes, por exemplo, em comparação com o nível de proliferação, sobrevivência, atividade e/ou número de células T, células T citotóxicas, células T CD3*, células T helper, células dendríticas, macrófagos, monócitos, neutrófilos, osteoclastos, células de Langerhans da pele, células Kupffer e/ou células microgliais em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo.

Inibição de células imunológicas associadas a tumores dependente de CcD33

[00261] Em algumas modalidades, os anticorpos agonistas anti- CD33 da presente descrição podem diminuir a atividade, diminuir a proliferação, diminuir a sobrevivência, diminuir a funcionalidade, diminuir a infiltração em tumores ou órgãos linfoides (por exemplo, baço e linfonodos), o número das células mieloides CD14*, diminuir a taxa de crescimento do tumor, reduzir o volume do tumor, reduzir ou inibir a diferenciação, a sobrevivência e/ou uma ou mais funções das células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC) e/ou promover a apoptose de células T reguladoras ou células dendríticas imunossupressoras inibidoras incorporadas ao tumor ou macrófagos associados a tumores ou células supressoras derivadas da linhagem mieloide. Em algumas modalidades, os anticorpos agonistas anti-CD33 da presente descrição são benéficos para a prevenção, diminuição do risco ou tratamento das condições e/ou doenças associadas à atividade de um ou mais tipos de células supressoras imunológicas, incluindo, sem limitação, tumores, incluindo tumores sólidos que não expressam CD33, tais como câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma, câncer de tireoide e tumores de sangue que expressam CD33, tais como células de leucemia.

[00262] Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti- CD33 da presente descrição podem diminuir o número de células mieloides CD14*, diminuir a taxa de crescimento do tumor, reduzir o volume do tumor ou reduzir ou inibir a diferenciação, sobrevivência e/ou uma ou mais funções das células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC).

[00263] Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode diminuir o número de células mieloides CD14*, diminuir a taxa de crescimento do tumor, reduzir o volume do tumor ou reduzir ou inibir a diferenciação, sobrevivência e/ou uma ou mais funções das células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC) em um sujeito em pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 45%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 100%, pelo menos 110%, pelo menos 115%, pelo menos 120%, pelo menos 125%, pelo menos 130%, pelo menos 135%, pelo menos 140%, pelo menos 145%, pelo menos 150%, pelo menos 160%, pelo menos 170%, pelo menos 180%, pelo menos 190% ou pelo menos 200%, por exemplo, em comparação com o número de células mieloides CD14*, taxa de crescimento do tumor, volume do tumor ou nível de diferenciação, sobrevivência e/ou uma ou mais funções de células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC) em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo.

Em outras modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode diminuir o número de células mieloides CD14*, diminuir a taxa de crescimento do tumor, reduzir o volume do tumor ou reduzir ou inibir a diferenciação, sobrevivência e/ou uma ou mais funções das células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC) em um sujeito em pelo menos 1,5 vez, pelo menos 1,6 vez, pelo menos 1,7 vez, pelo menos 1,8 vez, pelo menos 1,9 vez, pelo menos 2,0 vezes, pelo menos 2,1 vezes, pelo menos 2,15 vezes, pelo menos 2,2 vezes, pelo menos 2,25 vezes, pelo menos 2,3 vezes, pelo menos 2,35 vezes, pelo menos 2,4 vezes, pelo menos 2,45 vezes, pelo menos 2,5 vezes, pelo menos 2,55 vezes, pelo menos 3,0 vezes, pelo menos 3,5 vezes, pelo menos

4,0 vezes, pelo menos 4,5 vezes, pelo menos 5,0 vezes, pelo menos 5,5 vezes, pelo menos 6,0 vezes, pelo menos 6,5 vezes, pelo menos 7,0 vezes, pelo menos 7,5 vezes, pelo menos 8,0 vezes, pelo menos 8,5 vezes, pelo menos 9,0 vezes, pelo menos 9,5 vezes ou pelo menos vezes, por exemplo, em comparação com o número de células mieloides CD14*, taxa de crescimento do tumor, volume do tumor ou nível de diferenciação, sobrevivência e/ou uma ou mais funções de células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC) em um sujeito correspondente que não é tratado com o anticorpo.

Eficácia aumentada das terapias inibidoras de checkpoint

[00264] Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti- CD33 da presente descrição podem aumentar a eficácia de uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias de modulação imunológica, tais como inibidoras de PD-1 ou terapias que direcionam um ou mais CTLA, via da adenosina, PD-L1, PD-L2, OX40, TIM3 e/ou LAG3.

[00265] Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode aumentar a eficácia de uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias de modulação imunológica, como inibidoras de PD-1 ou terapias que direcionam um ou mais CTLA, a via da adenosina, PD-L1, PD-L2, OX40, TIM3 e/ou LAG3 em um sujeito que recebe uma ou mais terapias em pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 45%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 100%, pelo menos 110%, pelo menos 115%, pelo menos 120%, pelo menos 125%, pelo menos 130%, pelo menos 135%, pelo menos 140%, pelo menos 145%, pelo menos 150%, pelo menos 160%, pelo menos 170%, pelo menos 180%, pelo menos 190% ou pelo menos

200%, por exemplo, em comparação com o nível de eficácia de uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias de modulação imunológica, tais como inibidoras de PD-1 ou terapias que direcionam um ou mais dos CTLA, a via da adenosina, PD-L1, PD-L2, OX40, TIM3 e/ou LAG3 em um sujeito correspondente que recebe uma ou mais terapias que não é tratado com o anticorpo. Em outras modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode aumentar a eficácia de uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias de modulação imunológica, tais como inibidoras de PD-1 ou terapias que direcionam um ou mais CTLA, a via da adenosina, PD-L1, PD-L2, OX40, TIM3 e/ou LAG3 em um sujeito que recebe uma ou mais terapias por pelo menos 1,5 vez, pelo menos 1,6 vez, pelo menos 1,7 vez, pelo menos 1,8 vez, pelo menos 1,9 vez, pelo menos 2,0 vezes, pelo menos 2,1 vezes, pelo menos 2,15 vezes, pelo menos 2,2 vezes, pelo menos 2,25 vezes, pelo menos 2,3 vezes, pelo menos 2,35 vezes, pelo menos 2,4 vezes, pelo menos 2,45 vezes, pelo menos 2,5 vezes, pelo menos 2,55 vezes, pelo menos 3,0 vezes, pelo menos 3,5 vezes, pelo menos 4,0 vezes, pelo menos 4,5 vezes, pelo menos 5,0 vezes, pelo menos 5,5 vezes, pelo menos 6,0 vezes, pelo menos 6,5 vezes, pelo menos 7,0 vezes, pelo menos 7,5 vezes, pelo menos 8,0 vezes, pelo menos 8,5 vezes, pelo menos 9,0 vezes, pelo menos 9,5 vezes ou pelo menos vezes, por exemplo, em comparação com o nível de eficácia de uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias de modulação imunológica, tais como inibidores de PD-1 ou terapias que direcionam um ou mais CTLA, a via da adenosina, PD-L1, PD-L2, OX40, TIM3 e/ou LAG3 em um sujeito correspondente que recebe tais uma ou mais terapias que não é tratado com o anticorpo.

Maior eficácia dos agentes quimioterapêuticos

[00266] Em algumas modalidades, os anticorpos antagonistas anti- CD33 da presente descrição podem aumentar a eficácia de um ou mais agentes — quimioterápicos, tais como gemrcitabina, capecitabina, antraciclinas, doxorrubicina (Adriamycinº), epirubicina (Ellenceº), taxanos, paclitaxel (Taxolº), docetaxel (Taxotereº), 5-fluorouracil (5- FU), ciclofosfamida (Cytoxanº), carboplatina (Paraplatinº), oxaliplatina (Elotaxinº), leucovorina e/ou temozolomida (Temodarº).

[00267] Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode aumentar a eficácia de um ou mais agentes de quimioterapia em um sujeito que recebe uma ou mais terapias em pelo menos 10%, pelo menos 15%, pelo menos 20%, pelo menos 25%, pelo menos 30%, pelo menos 35%, pelo menos 40%, pelo menos 45%, pelo menos 50%, pelo menos 55%, pelo menos 60%, pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 100%, pelo menos 110%, pelo menos 115%, pelo menos 120%, pelo menos 125%, pelo menos 130%, pelo menos 135%, pelo menos 140%, pelo menos 145%, pelo menos 150%, pelo menos 160%, pelo menos 170%, pelo menos 180%, pelo menos 190% ou pelo menos 200%, por exemplo, em comparação com o nível de eficácia de um ou mais agentes quimioterápicos em um sujeito correspondente que recebe uma ou mais terapias que não é tratado com o anticorpo. Em outras modalidades, um anticorpo anti- CD33 da presente descrição pode aumentar a eficácia de um ou mais agentes quimioterápicos em um sujeito que recebe uma ou mais terapias por pelo menos 1,5 vez, pelo menos 1,6 vez, pelo menos 1,7 vez, pelo menos 1,8 vez, pelo menos 1,9 vez, pelo menos 2,0 vezes, pelo menos 2,1 vezes, pelo menos 2,15 vezes, pelo menos 2,2 vezes, pelo menos 2,25 vezes, pelo menos 2,3 vezes, pelo menos 2,35 vezes, pelo menos 2,4 vezes, pelo menos 2,45 vezes, pelo menos 2,5 vezes, pelo menos 2,55 vezes, pelo menos 3,0 vezes, pelo menos 3,5 vezes, pelo menos 4,0 vezes, pelo menos 4,5 vezes, pelo menos 5,0 vezes, pelo menos 5,5 vezes, pelo menos 6,0 vezes, pelo menos 6,5 vezes,

pelo menos 7,0 vezes, pelo menos 7,5 vezes, pelo menos 8,0 vezes, pelo menos 8,5 vezes, pelo menos 9,0 vezes, pelo menos 9,5 vezes ou pelo menos 10 vezes, por exemplo, em comparação com o nível de eficácia de um ou mais agentes quimioterápicos em um sujeito correspondente que recebe uma ou mais terapias que não é tratado com o anticorpo. Preparação do anticorpo

[00268] Os anticorpos anti-cCD33 da presente descrição podem abranger anticorpos policlonais, anticorpos monoclonais, anticorpos humanizados e quiméricos, anticorpos humanos, fragmentos de anticorpos (por exemplo, Fab, Fab'-SH, Fv, scFv e F(ab')2), anticorpos poliespecíficos e biespecíficos, anticorpos multivalentes, anticorpos heteroconjugados, anticorpos conjugados, anticorpos derivados de bibliotecas, anticorpos com funções efetoras modificadas, proteínas de fusão contendo uma porção de anticorpo e qualquer outra configuração modificada da molécula de imunoglobulina que inclui um sítio de reconhecimento de antígeno, como um epítopo com resíduos de aminoácidos de uma proteína CD33 da presente descrição, incluindo variantes de glicosilação de anticorpos, variantes de sequência de aminoácidos de anticorpos e anticorpos modificados covalentemente. Os anticorpos anti-CD33 podem ser humanos, murinos, de rato ou de qualquer outra origem (incluindo anticorpos quiméricos ou humanizados). (1) Anticorpos policlonais

[00269] — Anticorpos policlonais, tais como anticorpos policlonais anti- CD33, são geralmente criados em animais por múltiplas injeções subcutâneas (sc) ou intraperitoneais (ip) do antígeno relevante e um adjuvante. Pode ser útil conjugar o antígeno relevante (por exemplo, uma proteína CD33 purificada ou recombinante da presente descrição) a uma proteína que é imunogênica nas espécies a serem imunizadas,

por exemplo, hemocianina de lapa californiana (KLH), albumina sérica, tiroglobulina bovina, ou inibidor de tripsina de soja, usando um agente bifuncional ou derivatizante, por exemplo, éster de maleimidobenzoil sulfossuccinimida (conjugação através de resíduos de cisteína), N- hidroxissuccinimida (através de resíduos de lisina), glutaraldeído, anidrido succínico, SOClz ou RIN=C=NR, onde R e R' são independentemente grupos alquil inferiores. Os exemplos de adjuvantes que podem ser empregados incluem adjuvante completo de Freund e adjuvante MPL-TDM (monofosforil lipídio A, dicorinomicolato de trealose sintético). O protocolo de imunização pode ser selecionado por um versado na técnica sem experimentação indevida.

[00270] Os animais são imunizados contra o antígeno, conjugados imunogênicos ou derivados desejados combinando, por exemplo, 100 Vg (para coelhos) ou 5 ug (para camundongos) da proteína ou conjugado com 3 volumes de adjuvante completo de Freund e injetando a solução intradérmica em vários sítios. Um mês depois, os animais são reforçados com 1/5 a 1/10 da quantidade original de peptídeo ou conjugado em adjuvante completo de Freund por injeção subcutânea em vários sítios. De sete a quatorze dias depois, os animais são sangrados e o soro é ensaiado quanto ao título de anticorpos. Os animais são reforçados até o título atingir um platô. Os conjugados também podem ser feitos em cultura de células recombinantes como fusões de proteínas. Além disso, agentes agregantes, tais como alúmen, são adequados para potencializar a resposta imunológica. (2) Anticorpos monoclonais

[00271] — Anticorpos monoclionais, tais como anticorpos monoclonais anti-CD33, são obtidos de uma população de anticorpos substancialmente homogêneos, ou seja, os anticorpos individuais que compõem a população são idênticos, exceto por possíveis mutações que ocorrem naturalmente e/ou modificações pós-traducionais (por exemplo, isomerizações, amidações) que podem estar presentes em quantidades menores. Assim, o modificador "monoclional" indica o caráter do anticorpo como não sendo uma mistura de anticorpos discretos.

[00272] Por exemplo, os anticorpos monoclionais anti-CD33 podem ser produzidos utilizando o método de hibridoma descrito pela primeira vez por Kohler et al., Nature, 256:495 (1975), ou pode ser feito pelos métodos do DNA recombinante (Patente US. Nº 4.816.567).

[00273] No método de hibridoma, um camundongo ou outro animal hospedeiro apropriado, tal como um hamster, é imunizado como descrito acima para provocar linfócitos que produzem ou são capazes de produzir anticorpos que se ligam especificamente à proteína usada para imunização (por exemplo, uma proteína CD33 purificada ou recombinante da presente descrição). Alternativamente, os linfócitos podem ser imunizados in vitro. Os linfócitos são então fundidos com células de mieloma usando um agente de fusão adequado, tal como polietilenoglicol, para formar uma célula de hibridoma (Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp. 59-103 (Academic Press, 1986)).

[00274] O agente de imunização incluirá tipicamente a proteína antigênica (por exemplo, uma proteina CD33 purificada ou recombinante da presente descrição) ou uma variante de fusão desta. Geralmente, linfócitos de sangue periféricos ("PBLs") são usados se células de origem humana forem desejadas, enquanto células de baço ou linfonodos são usadas se fontes de mamíferos não humanos forem desejadas. Os linfócitos são então fundidos com uma linhagem celular imortalizada utilizando um agente de fusão adequado, tal como polietilenoglicol, para formar uma célula de hibridoma. Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, Academic Press (1986), pp. 59-103.

[00275] As linhagens celulares imortalizadas são, normalmente, células de mamíferos transformadas, particularmente células de mieloma originadas de roedores, bovinos ou humanos. Normalmente, linhagens celulares de mieloma de ratos ou camundongos são usadas. As células de hibridoma assim preparadas são semeadas e cultivadas em um meio de cultura adequado que preferencialmente contém uma ou mais substâncias que inibem o crescimento ou a sobrevivência das células de mieloma precursoras não fundidas. Por exemplo, se as células de mieloma precursoras não possuírem a enzima hipoxantina guanina fosforribosil transferase (HGPRT ou HPRT), o meio de cultura para os hibridomas tipicamente incluirá hipoxantina, aminopterina e timidina (meio HAT), substâncias estas que evitam o crescimento de células deficientes em HGPRT.

[00276] As células de mieloma imortalizadas preferidas são aquelas que se fundem eficientemente, suportam a produção estável de alto nível de anticorpos pelas células produtoras de anticorpos selecionadas e são sensíveis a um meio, tal como o meio HAT. Entre elas, são preferenciais as linhagens de mieloma murino, como as derivadas de tumores de camundongos MOPC-21 e MPC-11 (disponíveis no Salk Institute Cell Distribution Center, San Diego, Califórnia, EUA), bem como células SP-2 e seus derivados (por exemplo, X63-Ag8-653) (disponível na American Type Culture Collection, Manassas, Virginia, EUA). Foram também descritas linhagens celulares de mieloma humano e de heteromieloma de camundongo-humano para a produção de anticorpos monoclonais humanos (Kozbor, J. Immunol., 133:3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)).

[00277] O meio de cultura em que as células de hibridoma estão crescendo é ensaiado quanto à produção de anticorpos monoclonais direcionados contra o antígeno (por exemplo, uma proteína CD33 da presente descrição). Preferencialmente, a especificidade de ligação dos anticorpos monocionais produzidos pelas células de hibridoma é determinada por imunoprecipitação ou por um ensaio de ligação in vitro tal como radioimunoensaio (RIA) ou ensaio imunoabsorvente ligado a enzimas (ELISA).

[00278] O meio de cultura no qual as células de hibridoma são cultivadas pode ser testado quanto à presença de anticorpos monoclonais direcionados contra o antígeno desejado (por exemplo, uma proteína CD33 da presente descrição). Preferencialmente, a afinidade e especificidade de ligação do anticorpo monoclonal podem ser determinadas por imunoprecipitação ou por um ensaio de ligação in vitro, tal como radioimunoensaio (RIA) ou ensaio enzimático (ELISA). Essas técnicas e ensaios são conhecidas na técnica. Por exemplo, a afinidade de ligação pode ser determinada pela análise Scatchard de Munson et al., Anal. Biochem.107:220 (1980).

[00279] Após as células do hibridoma que produzem anticorpos da especificidade, afinidade e/ou atividade desejada serem identificadas, os clones podem ser subclonados por procedimentos de diluição limitantes e cultivados por métodos-padrão (Goding, supra). Os meios de cultura adequados para esse fim incluem, por exemplo, meio D-MEM ou RPMI-1640. Além disso, as células de hibridoma podem ser cultivadas in vivo como tumores em um mamífero.

[00280] Os anticorpos monoclonais secretados pelos subclones são adequadamente separados do meio de cultura, fluido de ascites, ou soro por procedimentos de purificação de imunoglobulina convencionais, tais como, por exemplo, cromatografia de proteina A-Sefarose, cromatografia por hidroxilapatite, eletroforese em gel, diálise, cromatografia por afinidade e outros métodos, tais como descrito acima.

[00281] Os anticorpos monoclonais anti-CD33 também podem ser produzidos por métodos de DNA recombinante, tais como os divulgados na Patente US. Nº 4.816.567, e como descrito acima. O DNA que codifica os anticorpos monoclionais é facilmente isolado e sequenciado usando procedimentos convencionais (por exemplo, usando sondas de oligonucleotídeos que se ligam especificamente a genes que codificam as cadeias pesadas e leves de anticorpos murinos). As células de hibridoma servem como uma fonte preferencial de tal DNA. Uma vez isolado, o DNA pode ser colocado em vetores de expressão, que são transfectados para células hospedeiras, como células de E. coli, células COS símias, células de ovário de hamster chinês (CHO) ou células de mieloma que, de outra forma, não produzem proteína de imunoglobulina, a fim de sintetizar anticorpos monoclonais em tais células hospedeiras recombinantes. Os artigos de revisão sobre expressão recombinante em bactérias de DNA que codificam o anticorpo incluem Skerra et al., Curr. Opin. Immunol., 5:256-262 (1993) e Plúckthun, Immunol. Rev. 130:151-188 (1992).

[00282] Em certas modalidades, os anticorpos anti-CD33 podem ser isolados a partir de bibliotecas de fagos de anticorpos gerados usando as técnicas descritas em McCatfferty et al., Nature, 348:552-554 (1990). Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) e Marks et al., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991) descreveu o isolamento de anticorpos murinos e humanos, respectivamente, a partir de bibliotecas de fagos. Publicações subsequentes descrevem a produção de anticorpos humanos de alta afinidade (faixa nanomolar ("nM")) por "shuffling" em cadeia (Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783 (1992)), bem como infecção combinatória e recombinação in vivo como estratégia para a construção de bibliotecas de fagos muito grandes (Waterhouse et al., Nucl. Acids Res., 21:2265- 2266 (1993)). Assim, essas técnicas são alternativas viáveis às técnicas tradicionais de hibridoma de anticorpos monoclonais para isolamento de anticorpos monocionais de especificidade desejada (por exemplo, aqueles que se ligam a uma proteína CD33 da presente descrição).

[00283] O DNA que codifica anticorpos ou fragmentos destes pode também ser modificado, por exemplo, substituindo a sequência de codificação por domínios constantes de cadeia pesada e leve humanos em vez das sequências murinas homólogas (Patente US. Nº 4.816.567; Morrison, et al., Proc. Natl Acad. Sci. EUA, 81:6851 (1984)), ou unindo covalentemente à sequência de codificação da imunoglobulina toda ou parte da sequência de codificação a um polipeptídeo que não é imunoglobulina. Tipicamente, tais polipeptídeos não imunoglobulina são substituídos pelos domínios constantes de um anticorpo ou são substituídos pelos domínios variáveis de um sítio de combinação de antígeno de um anticorpo para criar um anticorpo bivalente quimérico compreendendo um sítio de combinação de antígeno com especificidade para um antígeno e outro sítio de combinação de antígeno com especificidade para um antígeno diferente.

[00284] Os anticorpos monoclonais descritos neste documento (por exemplo, anticorpos anti-CD33 da presente descrição ou fragmentos destes) podem ser monovalentes, cuja preparação é bem conhecida na técnica. Por exemplo, um método envolve a expressão recombinante da cadeia leve de imunoglobulina e de uma cadeia pesada modificada. A cadeia pesada é truncada geralmente em qualquer ponto da região Fc, de modo a impedir a reticulação da cadeia pesada. Alternativamente, os resíduos de cisteína relevantes podem ser substituídos por outro resíduo de aminoácido ou são excluídos de modo a impedir a reticulação. Os métodos in vitro também são adequados para preparar anticorpos monovalentes. A digestão de anticorpos para produzir fragmentos destes, particularmente fragmentos Fab, pode ser realizada utilizando técnicas de rotina conhecidas na técnica.

[00285] Os anticorpos anti-CD33 quiméricos ou híbridos também podem ser preparados in vitro usando métodos conhecidos na química de proteínas sintéticas, incluindo aqueles que envolvem agentes de reticulação. Por exemplo, imunotoxinas podem ser construídas usando uma reação de troca de bissulfeto ou pela formação de uma ligação de tioéter. Iminotiolato e metil-4-mercaptobutirimidato são exemplos de reagentes apropriados para esta finalidade.

(3) — Anticorpos humanizados

[00286] Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição ou fragmentos de anticorpos destes podem ainda incluir anticorpos humanizados ou humanos. Formas humanizadas de anticorpos não humanos (por exemplo, murinos) são imunoglobulinas quiméricas, cadeias de imunoglobulina ou fragmentos destes (tais como Fab, Fab”- SH, Fv, scFv, F(ab')2 ou outras subsequências de ligação a antígeno de anticorpos), as quais contêm uma sequência mínima derivada de imunoglobulina não humana. Os anticorpos humanizados incluem imunoglobulinas humanas (anticorpo receptor) nas quais resíduos de uma região determinante de complementaridade (CDR) do recipiente são substituídos por resíduos a partir de uma CDR de uma espécie não humana (anticorpo doador) tal como camundongo, rato ou coelho, possuindo a especificidade, afinidade e capacidade. Em alguns casos, resíduos de estrutura principal Fv da imunoglobulina humana são substituídos pelos resíduos não humanos correspondentes. Os anticorpos humanizados também podem conter resíduos que não se encontram nem no anticorpo receptor nem nas sequências de CDR ou de estrutura principal importadas. Em geral, o anticorpo humanizado compreenderá substancialmente a totalidade de pelo menos um e, tipicamente dois, domínios variáveis, em que todos ou substancialmente todas as regiões de CDR correspondem aos de uma imunoglobulina não humana e todas, ou substancialmente todas, as regiões FR são as de uma sequência consenso de imunoglobulina humana. O anticorpo humanizado, de maneira ideal, também compreenderá pelo menos uma porção de uma região constante de imunoglobulina (Fc), normalmente o de uma imunoglobulina humana. Jones et al., Nature 321: 522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332: 323-329 (1988) e Presta, Curr. Opin. Struct. Biol. 2: 593-596 (1992).

[00287] “Métodos para humanizar anticorpos não humanos são bem conhecidos na técnica. Em geral, o anticorpo humanizado possui um ou mais resíduos de aminoácidos introduzidos nele de uma fonte que é não humana. Esses resíduos de aminoácidos não humanos são muitas vezes denominados resíduos de "importação", que são tirados normalmente de um domínio variável de "importação". A humanização pode ser essencialmente realizada seguindo o método de Winter e colaboradores, Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science 239:1534- 1536 (1988), ou substituindo CDRs de roedor ou sequências de CDR para as sequências correspondentes de um anticorpo humano. Dessa forma, tais anticorpos "humanizados" são anticorpos quiméricos (Patente US. Nº 4.816.567) em que substancialmente menos do que um domínio variável humano intacto foi substituído pela sequência correspondente de uma espécie não humana. Na prática, os anticorpos humanizados são anticorpos tipicamente humanos nos quais alguns resíduos da CDR e possivelmente alguns resíduos de FR são substituídos por resíduos de sítios análogos nos anticorpos de roedores.

[00288] A escolha de domínios variáveis humanos, tanto leves como pesados, para ser usado na fabricação de anticorpos humanizados é muito importante para reduzir a antigenicidade. De acordo com o denominado método de "melhor ajuste", a sequência de domínio variável de um anticorpo de roedor é triada contra toda a biblioteca das sequências de domínio variável humano conhecidas. A sequência humana mais próxima da do roedor é então aceita como a região estrutura principal humana (FR) para o anticorpo humanizado. Sims et al., J. Immunol., 151:2296 (1993); Chothia et al., J. Mol. Biol., 196:901

(1987). Outro método usa uma estrutura principal particular derivada da sequência consenso de todos os anticorpos humanos de um subgrupo particular de cadeias leves ou pesadas. A mesma estrutura principal pode ser utilizada para vários anticorpos humanizados diferentes. Carter et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immunol. 151:2623 (1993).

[00289] Além disso, também é importante ainda que os anticorpos sejam humanizados com retenção de alta afinidade em relação ao antígeno e outras propriedades biológicas favoráveis. Para alcançar este objetivo, de acordo com um método preferencial, os anticorpos humanizados são preparados por um processo de análise das sequências precursoras e de vários produtos humanizados e manipulados conceituais utilizando modelos tridimensionais das sequências precursoras e humanizadas. Modelos de imunoglobulina tridimensionais geralmente encontram-se disponíveis e são familiares àqueles versados na técnica. Os programas de computador estão disponíveis, os quais ilustram e exibem estruturas conformacionais tridimensionais prováveis de sequências de imunoglobulina do candidato selecionado. A inspeção destas exibições permite a análise do papel provável dos resíduos no funcionamento da sequência de imunoglobulina candidata, ou seja, a análise dos resíduos que influenciam a capacidade da imunoglobulina candidata de ligar seu antígeno. Dessa maneira, os resíduos de FR podem ser selecionados e combinados das sequências receptoras e de importação, para que a característica desejada do anticorpo, tal como afinidade aumentada pelo antígeno ou antígenos alvo (por exemplo, proteínas CD33 da presente descrição), seja alcançada. Em geral, os resíduos de CDR estão diretamente e mais substancialmente envolvidos em influenciar a ligação a antígeno.

[00290] São contempladas várias formas do anticorpo anti-CD33 humanizado. Por exemplo, o anticorpo anti-CD33 humanizado pode ser um fragmento de anticorpo, tal como um Fab, que é opcionalmente conjugado com um ou mais agentes citotóxicos, a fim de gerar um imunoconjugado. Alternativamente, o anticorpo anti-CD33 humanizado pode ser um anticorpo intacto, tal como um anticorpo 19G1 intacto. (4) Fragmentos de anticorpos

[00291] Em certas modalidades, há vantagens em usar fragmentos de anticorpo anti-CD33, em vez de anticorpos anti-CD33 inteiros. Tamanhos de fragmento menores permitem uma depuração rápida e uma melhor penetração no cérebro.

[00292] Várias técnicas foram desenvolvidas para a produção de fragmentos de anticorpos. Tradicionalmente, esses fragmentos são derivados da digestão proteolítica de anticorpos intactos (ver, por exemplo, Morimoto et al., J. Biochem. Biophys. Method. 24:107-117 (1992); e Brennan et al., Science 229:81 (1985)). No entanto, esses fragmentos podem agora ser produzidos diretamente por células hospedeiras recombinantes, por exemplo, usando ácidos nucleicos que codificam anticorpos anti-CD33 da presente descrição. Fragmentos de anticorpos Fab, Fv e scFv podem todos ser expressos e secretados a partir de E. coli, permitindo, assim, a produção direta de grandes quantidades desses fragmentos. Os fragmentos de anticorpos anti- CD33 também podem ser isolados das bibliotecas de fago de anticorpos discutidas acima. Alternativamente, os fragmentos Fab'-SH podem ser recuperados diretamente de E. coli e quimicamente acoplados para formar fragmentos F(ab')> (Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992)). De acordo com outra abordagem, fragmentos F(ab'), podem ser isolados diretamente a partir de cultura de células hospedeiras recombinantes. A produção de fragmentos de anticorpo Fab e F(ab') com meia-vidas in vivo aumentadas é descrita na Patente US. Nº

5.869.046. Em outras modalidades, o anticorpo de escolha é um fragmento Fv de cadeia simples (scFv). Ver WO 93/16185; Patente US. Nº 5.571.894; e Patente US. Nº 5.587.458. O fragmento de anticorpo anti-CD33 também pode ser um "anticorpo linear", por exemplo, conforme descrito na Patente US. 5.641.870. Tais fragmentos de anticorpos lineares podem ser monoespecíficos ou biespecíficos.

(5) — Anticorpos biespecíficos e poliespecíficos

[00293] Anticorpos biespecíficos (BsAbs) são anticorpos que possuem especificidades de ligação para pelo menos dois epítopos diferentes, incluindo aqueles na mesma ou em outra proteína (por exemplo, uma ou mais proteínas CD33 da presente descrição). Alternativamente, uma parte de um BsAb pode ser armada para se ligar ao antígeno CD33 alvo e outra pode ser combinada com um braço que se liga a uma segunda proteína. Tais anticorpos podem ser derivados de anticorpos de comprimento completo ou fragmentos de anticorpos (por exemplo, anticorpos biespecíficos F(ab')2).

[00294] Os métodos para preparar anticorpos biespecíficos são conhecidos na técnica. A produção tradicional de anticorpos biespecíficos de comprimento completo é baseada na coexpressão de dois pares de imunoglobulina de cadeia pesada/cadeia leve, onde as duas cadeias têm especificidades diferentes. Millstein et al., Nature, 305:537-539 (1983). Devido ao arranjo aleatório de cadeias pesadas e leves de imunoglobulina, esses hibridomas (quadromas) produzem uma mistura em potencial de 10 moléculas de anticorpo diferentes, das quais somente uma tem a estrutura biespecífica correta. A purificação da molécula correta, que é usualmente feita por etapas de cromatografia de afinidade, é bastante trabalhosa e os rendimentos de produto são baixos. Procedimentos semelhantes são divulgados no documento WO 93/08829 e em Traunecker et al., EMBO J., 10:3655-3659 (1991).

[00295] De acordo com uma abordagem diferente, domínios variáveis de anticorpo com as especificidades de ligação desejadas

(sítios de combinação anticorpo-antígeno) são fundidos às sequências de domínios constantes de imunoglobulina. A fusão é preferivelmente com um domínio constante de cadeia pesada de imunoglobulina, compreendendo pelo menos parte das regiões de dobradiça, Ch2 e Cn3. Prefere-se ter a primeira região constante de cadeia pesada (CH1), contendo o sítio necessário para ligação da cadeia leve, presente em pelo menos uma das fusões. Os DNAs que codificam as fusões de cadeia pesada de imunoglobulina e, se desejado, a cadeia leve de imunoglobulina, são inseridos em vetores de expressão separados e são co-transfectados para um organismo hospedeiro adequado. Isso provê maior flexibilidade no ajuste das proporções mútuas dos três fragmentos polipeptídicos em modalidades quando razões desiguais das três cadeias polipeptídicas utilizadas na construção proveem os rendimentos ótimos. É, no entanto, possível inserir as sequências codificadoras para duas ou para todas as três cadeias polipeptídicas em um vetor de expressão quando a expressão de pelo menos duas cadeias polipeptídicas em proporções iguais resulta em rendimentos elevados ou quando as proporções não têm significado em particular.

[00296] Em uma modalidade preferida dessa abordagem, os anticorpos biespecíficos são compostos por uma cadeia pesada de imunoglobulina híbrida com uma primeira especificidade de ligação em um braço, e um par de cadeia pesada-cadeia leve de imunoglobulina híbrida (provendo uma segunda especificidade de ligação) no outro braço. Verificou-se que essa estrutura assimétrica facilita a separação do composto biespecífico desejado das combinações de cadeias de imunoglobulina indesejadas, uma vez que a presença de uma cadeia leve de imunoglobuliha em somente metade das moléculas biespecíficas fornece uma forma fácil de separação. Esta abordagem é divulgada no documento WO 94/04690. Para mais detalhes da criação de anticorpos biespecíficos ver, por exemplo, Suresh et al., Methods in Enzymology 121: 210 (1986).

[00297] De acordo com outra abordagem descrita em WO 96/27011 ou Patente US. Nº 5.731.168, a interface entre um par de moléculas de anticorpos pode ser manipulada para maximizar a porcentagem de heterodímeros que são recuperados da cultura celular recombinante. À interface preferencial compreende, pelo menos, uma parte da região Cn3 de um domínio constante de anticorpo. Neste método, uma ou mais cadeias laterais pequenas de aminoácidos da interface da primeira molécula de anticorpo são substituídas por cadeias laterais maiores (por exemplo, tirosina ou triptofano). "Cavidades" compensatórias de tamanho idêntico ou semelhante à(s) cadeia(s) lateral(is) grande(s) são criadas na interface da segunda molécula de anticorpo substituindo cadeias laterais de aminoácidos grandes por cadeias menores (por exemplo, alanina ou treonina). Isso proporciona um mecanismo para aumentar o rendimento do heterodímero em relação a outros produtos finais indesejados, como homodímeros.

[00298] As técnicas para gerar anticorpos biespecíficos a partir de fragmentos de anticorpos foram descritas na literatura. Por exemplo, anticorpos biespecíficos podem ser preparados utilizando ligação química. Brennan et al, Science 229:81 (1985) descrevem um procedimento em que anticorpos intactos são clivados proteoliticamente para gerar fragmentos F(ab')r. Esses fragmentos são reduzidos na presença do agente complexante de ditiol, arsenito de sódio, para estabilizar ditiois vicinais e evitar a formação de dissulfeto intermolecular. Os fragmentos Fab' gerados são então convertidos em derivados de tionitrobenzoato (TNB). Um dos derivados Fab'-TNB é então reconvertido no derivado Fab'-TNB para formar o anticorpo biespecífico. Os anticorpos biespecíficos produzidos podem ser utilizados como agentes para a imobilização seletiva de enzimas.

[00299] Os fragmentos Fab' podem ser recuperados diretamente de E. coli e acoplados quimicamente para formar anticorpos biespecíficos. Shalaby et al., J. Exp. Med. 175: 217-225 (1992) descreve a produção de moléculas de anticorpo biespecífico F(ab'): totalmente humanizadas. Cada fragmento Fab' foi secretado separadamente a partir de E. coli e sujeito ao acoplamento químico direto in vitro para formar o anticorpo biespecífico. O anticorpo biespecífico assim formado foi capaz de se ligar a células que sobre-expressam o receptor ErbB2 e células T humanas normais, bem como desencadear a atividade lítica de linfócitos citotóxicos humanos contra alvos de tumor da mama humano.

[00300] Foram também descritas várias técnicas para produzir e isolar fragmentos de anticorpos bivalentes diretamente de cultura de células recombinantes. Por exemplo, heterodímeros bivalentes foram produzidos usando zíperes de leucina. Kostelny et al., J. Immunol., 148(5): 1547-1553 (1992). Os peptídeos de zíper de leucina das proteínas Fos e Jun foram ligados às porções Fab' de dois anticorpos diferentes por fusão de genes. Os homodímeros de anticorpo foram reduzidos na região da dobradiça para formar monômeros e depois reoxidados para formar os heterodímeros de anticorpo. A tecnologia de "diacorpo" descrita por Hollinger et al., Proc. Nat'l Acad. Sci. EUA, 90:6444-6448 (1993) forneceu um mecanismo alternativo para produzir fragmentos de anticorpos biespecíficos. Os fragmentos compreendem um domínio variável de cadeia pesada (VH) conectado a um domínio variável de cadeia leve (V.) por um ligante que é curto demais para permitir o pareamento entre os dois domínios na mesma cadeia. Por conseguinte, os domínios Vx e Vi de um fragmento são forçados a parear com os domínios complementares V. e Vu de outro fragmento, formando, desse modo, dois sítios de ligação ao antígeno. Relatou-se também outra estratégia para preparar fragmentos de anticorpo biespecíficos/bivalentes pela utilização de dímeros Fv(sFv) de cadeia simples. Ver Gruber et al., J. Immunol., 152:5368 (1994).

[00301] Os anticorpos com mais de duas valências também são contemplados. Por exemplo, anticorpos triespecíficos podem ser preparados. Tutt et al., J. Immunol. 147:60 (1991).

[00302] — Anticorpos biespecíficos exemplificativos podem se ligar a dois epítopos diferentes em uma dada molécula (por exemplo, uma proteína CD33 da presente descrição). Alternativamente, um braço direcionando um componente de sinalização CD33 pode ser combinado com um braço que se liga a uma molécula desencadeante em um leucócito, tal como uma molécula receptora de célula T (por exemplo, CD2, CD3, CD28 ou B7) ou receptores Fc para IgG (FeyR), tais como FeyRI (CD64), FeyRI! (CD32) e FeyRIll (CD16), de modo a focar os mecanismos de defesa celular na célula que expressa a proteína específica. Os anticorpos biespecíficos também podem ser usados para localizar agentes citotóxicos para células que expressam uma proteína particular. Esses anticorpos possuem um braço de ligação ao antígeno e um braço que liga um agente citotóxico ou um quelante de radionuclídeo, como EOTUBE, DPTA, DOTA ou TETA. Outro anticorpo biespecífico de interesse se liga à proteína de interesse e ainda se liga ao fator tecidual (TF). (6) — Anticorpos multivalentes

[00303] Um anticorpo multivalente pode ser internalizado (e/ou catabolizado) mais rapidamente do que um anticorpo bivalente por uma célula que expressa um antígeno ao qual os anticorpos se ligam. Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição ou fragmentos de anticorpo destes podem ser anticorpos multivalentes (que são diferentes que os da classe IgM) com três ou mais sítios de ligação ao antígeno (por exemplo, anticorpos tetravalentes), que podem ser produzidos facilmente por expressão recombinante de ácido nucleico que codifica as cadeias polipeptídicas do anticorpo. O anticorpo multivalente pode compreender um domínio de dimerização e três ou mais sítios de ligação ao antígeno.

O domínio de dimerização preferido compreende uma região Fc ou uma região de dobradiça.

Neste cenário, o anticorpo compreenderá uma região Fc e três ou mais sítios de ligação ao antígeno amino-terminal em relação à região Fc.

O anticorpo multivalente preferido neste documento contém três a cerca de oito, mas de preferência quatro, sítios de ligação ao antígeno.

O anticorpo multivalente contém pelo menos uma cadeia polipeptídica (e preferencialmente duas cadeias polipeptídicas), em que a(s) cadeia(s) polipeptídica(s) compreendem dois ou mais domínios variáveis.

Por exemplo, a cadeia ou cadeias polipeptídicas podem compreender VD1- (X1)n-VD2-(X2) n-Fc, em que VD1 é um primeiro domínio variável, VD2 é um segundo domínio variável, Fc é uma cadeia polipeptídica de uma região Fc, X1 e X2 representam um aminoácido ou polipeptídeo, e n é O ou 1. Da mesma forma, a cadeia ou cadeias polipeptídicas podem compreender cadeia da região V4-Cn1-ligante flexível-V4-Cn1-Fc; ou cadeia da região VH-CH1-V4-Ch1i-Fe.

O anticorpo multivalente preferencial neste documento compreende adicionalmente pelo menos dois (e preferencialmente quatro) polipeptídeos do domínio variável de cadeia leve.

O anticorpo multivalente neste documento pode, por exemplo, compreender de aproximadamente dois a cerca de oito polipeptídeos de domínio variável de cadeia leve.

Os polipeptídeos do domínio variável de cadeia leve contemplados neste documento compreendem um domínio variável de cadeia leve e, opcionalmente, compreendem adicionalmente um domínio CL.

Os anticorpos multivalentes podem reconhecer o antígeno CD33, bem como, sem limitação, antígenos adicionais de peptídeo A-beta, antígeno ou antígeno da proteína alfa-sinucleína ou antígeno da proteína Tau ou antígeno da proteína TDP-43 ou antígeno da proteína priônica ou antígeno da proteína huntingtina ou RAN, antígeno dos produtos de tradução, incluindo as repetições de dipeptídeo (peptídeos DPRs), compostas por glicina-alanina (GA), glicina-prolina (GP), glicina-arginina (GR), prolina-alanina (PA) ou prolina-arginina (PR), receptor de insulina, receptor de fator de crescimento semelhante à insulina, receptor de transferrina ou qualquer outro antígeno que facilita a transferência de anticorpos através da barreira hematoencetfálica. (7) — Anticorpos heteroconjugados

[00304] Anticorpos heteroconjugados também estão dentro do escopo da presente descrição. Os anticorpos heteroconjugados são compostos de dois anticorpos unidos covalentemente (por exemplo, anticorpos anti-CD33 da presente descrição ou fragmentos de anticorpos destes). Por exemplo, um dos anticorpos no heteroconjugado pode ser acoplado à avidina, e o outro, à biotina. Tais anticorpos foram, por exemplo, propostos para direcionar células do sistema imunológico para células indesejadas, Patente US. Nº

4.676.980, e foram usadas para tratar a infecção pelo HIV. Publicações Internacionais Nºs WO 91/00360, WO 92/200373 e EP 0308936. Contempla-se que os anticorpos podem ser preparados in vitro usando métodos conhecidos na química de proteínas sintéticas, incluindo aqueles envolvendo agentes de reticulação. Por exemplo, imunotoxinas podem ser construídas usando uma reação de troca de bissulfeto ou pela formação de uma ligação de tioéter. Exemplos de reagentes adequados para este fim incluem iminotiolato e metil-4- mercaptobutirimidato e aqueles divulgados, por exemplo, na Patente US. Nº 4.676.980. Os anticorpos heteroconjugados podem ser produzidos utilizando quaisquer métodos de reticulação convenientes. Agentes de reticulação adequados são bem conhecidos na técnica e são divulgados na Patente US. Nº 4.676.980, juntamente com várias técnicas de reticulação.

(8) — Manipulação de função efetora

[00305] Também pode ser desejável modificar um anticorpo anti- CD33 da presente descrição para modificar a função efetora e/ou aumentar a meia-vida sérica do anticorpo. Por exemplo, o sítio de ligação ao receptor Fc na região constante pode ser modificado ou mutado para remover ou reduzir a afinidade de ligação a certos receptores Fc, como FcyRI, FeyRIl e/ou FeyRIll. Em algumas modalidades, a função efetora é prejudicada pela remoção da N- glicosilação da região Fc (por exemplo, no domínio CH2 da IgG) do anticorpo. Em algumas modalidades, a função efetora é prejudicada por regiões de modificação, tais como 233-236, 297, e/ou 327-331 de IgG humana, conforme descrito em PCT WO 99/58572 e Armor et al, Molecular Immunology 40:585-593 (2003); Reddy et al., J. Immunology 164:1925-1933 (2000).

[00306] Para aumentar a meia-vida sérica do anticorpo, é possível incorporar um epítopo de ligação ao receptor de recuperação no anticorpo (especialmente um fragmento de anticorpo) conforme descrito na Patente US. 5.739.277, por exemplo. Conforme usado neste documento, o termo "epítopo de ligação ao receptor de recuperação" refere-se a um epítopo da região Fc de uma molécula de IgG (por exemplo, IgG1, IgG>2, IgG3 ou IgG4) que é responsável por aumentar a meia-vida sérica in vivo da molécula de I|gG. (9) — Outras modificações na sequência de aminoácidos

[00307] “Modificações na sequência de aminoácidos de anticorpos anti-CD33 da presente descrição, ou fragmentos de anticorpos destes, também são contemplados. Por exemplo, pode ser desejável melhorar a afinidade de ligação e/ou outras propriedades biológicas dos anticorpos ou fragmentos de anticorpo. As variantes da sequência de aminoácidos dos anticorpos ou fragmentos de anticorpo são preparadas através da introdução de alterações nucleotídicas apropriadas no ácido nucleico que codifica os anticorpos ou fragmentos de anticorpo, ou por síntese peptídica. Tais modificações incluem, por exemplo, deleções de, e/ou inserções em e/ou substituições de resíduos dentro das sequências de aminoácidos do anticorpo. Qualquer combinação de deleção, inserção e substituição é feita para chegar ao construto final, desde que o construto final possua as características desejadas (ou Seja, a capacidade de se ligar ou interagir fisicamente com uma proteína CD33 da presente descrição). As alterações de aminoácidos também podem alterar os processos pós-traducionais do anticorpo, tais como alteração do número ou posição dos sítios de glicosilação.

[00308] Um método útil para a identificação de certos resíduos ou regiões do anticorpo anti-CD33 que são localizações preferenciais para mutagênese é chamado de "mutagênese de varredura de alanina”" conforme descrito por Cunningham e Wells em Science, 244:1081-1085 (1989). Aqui, um resíduo ou grupo de resíduos alvo são identificados (por exemplo, resíduos carregados como arg, asp, his, Ilys e glu) e substituídos por um aminoácido neutro ou carregado negativamente (mais preferencialmente alanina ou polialanina) para afetar a interação dos aminoácidos com o antígeno alvo. Esses locais de aminoácidos demonstram sensibilidade funcional às substituições são então refinados por meio da introdução de variantes adicionais ou outras em, ou para, os sítios de substituição. Desta forma, embora o sítio para introdução de uma variação de sequência de aminoácidos seja predeterminado, a natureza da mutação per se não precisa ser predeterminada. Por exemplo, para analisar o desempenho de uma mutação em um determinado sítio, a varredura de alanina ou mutagênese aleatória é conduzida no códon ou região alvo e as variantes de anticorpos são selecionadas para a atividade desejada.

[00309] As inserções de sequência de aminoácidos incluem fusões amino ("N") e/ou carboxi- ("C") terminais que variam em comprimento de um resíduo a polipeptídeos que contém cem ou mais resíduos, bem como inserções intrassequenciais de resíduos de aminoácidos únicos ou múltiplos. Exemplos de inserções terminais incluem um anticorpo com um resíduo metionil do terminal N ou o anticorpo fundido com um polipeptídeo citotóxico. Outras variantes de inserção da molécula de anticorpo incluem a fusão ao terminal N ou C do anticorpo de uma enzima ou um polipeptídeo que aumenta a meia-vida sérica do anticorpo.

[00310] Outro tipo de variante é uma variante de substituição de aminoácidos. Estas variantes possuem pelo menos um resíduo de aminoácido na molécula de anticorpo substituído por um resíduo diferente. Os sítios de maior interesse para mutagênese de substituição incluem as regiões hipervariáveis, mas as alterações de FR também são contempladas. As substituições conservativas são mostradas na Tabela D abaixo, com o título de "substituições preferenciais”. Se estas substituições resultam numa alteração na atividade biológica, então alterações mais substanciais, denominadas "substituições exemplificativas" na Tabela D, ou conforme adicionalmente descrito acima em referência a classes de aminoácidos, podem ser introduzidas e os produtos triados. Tabela D: Substituições de Aminoácidos Resíduo Original | Substituições Exemplificativas Substituições

A AA [o fas a

Resíduo Original | Substituições Exemplificativas Substituições a Ji mes | seo ee O [er fa ae eo eneimeaa mera fe [mo [rota te minedae fe meo eme — est fas a em [remar seo fi

[00311] “Modificações substanciais nas propriedades biológicas do anticorpo são alcançadas por meio de substituições seletivas que se diferem de modo significativo em seus efeitos de manutenção de (a) da estrutura da cadeia principal de polipeptídeo na área da substituição, por exemplo, como uma conformação helical ou de lâmina, (b) da carga ou hidrofobicidade da molécula no sítio alvo ou (c) do total da cadeia lateral. Os resíduos de ocorrência natural estão divididos em grupos com base em propriedades comuns da cadeia lateral: (1) hidrofóbico: norleucina, met, ala, val, leu, ile; (2) hidrofílico neutro: cys, ser, thr; (3) acídico: asp, glu; (4) básico: asn, gln, his, Iys, arg;

(5) os resíduos que influenciam a orientação de cadeia: gly, pro; e (6) aromático: trp, tyr, phe.

[00312] As substituições não conservativas implicam a troca de um membro de uma dessas classes por outra classe.

[00313] Qualquer resíduo de cisteína não envolvido na manutenção da conformação adequada do anticorpo pode também ser substituído, geralmente por serina, para melhorar a estabilidade oxidativa da molécula e prevenir reticulação aberrante. Por outro lado, pode ser adicionada ligação(ões) de cisteína ao anticorpo para melhorar a sua estabilidade (particularmente quando o anticorpo é um fragmento de anticorpo tal como um fragmento Fv).

[00314] Umtipode variante de substituição particularmente preferido envolve a substituição de um ou mais resíduos da região hipervariável de um anticorpo de origem (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 humanizado ou humano). Geralmente, a(s) variante(s) resultante(s) selecionada(s) para desenvolvimento posterior terão propriedades biológicas melhoradas em relação ao anticorpo de origem a partir do qual elas são geradas. Uma maneira conveniente para gerar tais variantes de substituição envolve a maturação de afinidade usando exibição de fagos. Resumidamente, vários sítios de região hipervariáveis (por exemplo, 6-7 sítios) são mutados para gerar todas as substituições de aminoácidos possíveis em cada sítio. As variantes de anticorpos assim geradas são apresentadas de uma forma monovalente a partir de partículas de fagos filamentosos como fusões para o produto do gene Ill de M13 embalado dentro de cada partícula. As variantes exibidas no fago são então triadas quanto à sua atividade biológica (por exemplo, afinidade de ligação) como divulgado neste documento. De modo a identificar os sítios candidatos da região hipervariável para modificação, a mutagênese de varredura de alanina pode ser realizada para identificar resíduos da região hipervariável que contribuem significativamente para a ligação ao antígeno. Alternativamente, ou adicionalmente, pode ser benéfico analisar uma estrutura cristalina do complexo antígeno-anticorpo para identificar pontos de contato entre o anticorpo e o antígeno (por exemplo, uma proteína CD33 da presente descrição). Tais resíduos de contato e resíduos vizinhos são candidatos para substituição de acordo com as técnicas elaboradas neste documento. Uma vez que tais variantes são geradas, o painel de variantes é submetido a triagem conforme descrito neste documento e anticorpos com propriedades superiores em um ou mais ensaios relevantes podem ser selecionados para desenvolvimento posterior. A maturação de afinidade também pode ser realizada empregando uma tecnologia de apresentação de leveduras, tal como a divulgada em, por exemplo, WOZ2009/036379A2; WO2010105256; WO2012009568; e Xu et al., Protein Eng. Des. Sel., 26(10): 663-70 (2013).

[00315] Outro tipo de variante de aminoácido do anticorpo altera o padrão de glicosilação original do anticorpo. Por alteração designa-se a exclusão de uma ou mais frações do carboidrato encontrado no anticorpo e/ou adicionar um ou mais sítios de glicosilação que não estão presentes no anticorpo.

[00316] A glcosilação de anticorpos é tipicamente ligada a N ou ligada a O. Ligada a N se refere à ligação da fração de carboidrato a uma cadeia lateral de um resíduo de asparagina. As sequências tripeptídicas asparagina-X-serina e asparagina-X-treonina, onde X é qualquer aminoácido exceto prolinay9y são as sequências de reconhecimento para a ligação enzimática da fração carboidrato à cadeia lateral de asparagina. Assim, a presença de qualquer uma dessas sequências tripeptídicas em um polipeptídeo cria um sítio de glicosilação em potencial. A glicosilação de ligação a O se refere à ligação de um dos açúcares N-acetilgalactosamina, galactose ou xilose a um hidroxiaminoácido, mais comumente serina ou treonina, embora b-hidroxiprolina ou 5-hidroxilisina também possam ser usados.

[00317] A adição de sítios de glicosilação ao anticorpo é realizada convenientemente ao se alterar a sequência de aminoácidos de tal forma que contenha uma ou mais das sequências de tripeptídeo descritas acima (para sítios de glicosilação ligados a N). A alteração também pode ser pela adição de, ou substituição por, um ou mais resíduos de serina ou treonina à sequência do anticorpo original (para sítios de glicosilação ligada a O).

[00318] As moléculas de ácido nucleico que codificam variantes da sequência de aminoácidos do anticorpo anti-lgE são preparadas por uma variedade de métodos conhecidos na técnica. Esses métodos incluem, sem limitação, o isolamento de uma fonte natural (no caso de variantes de sequência de aminoácidos de ocorrência natural) ou preparação por mutagênese mediada por oligonucleotídeos (ou dirigida ao sítio), mutagênese por PCR e mutagênese por cassete de uma variante anterior preparada ou uma versão não variante dos anticorpos (por exemplo, anticorpos anti-cCD33 da presente descrição) ou fragmentos de anticorpo. (10) Conjugados de anticorpos

[00319] Os anticorpos anti-cCD33 da presente descrição, ou fragmentos de anticorpo destes, podem ser conjugados com um marcador detectável, uma toxina ou um agente terapêutico. Pode ser utilizado qualquer método adequado conhecido na técnica para conjugar moléculas, tal como um marcador detectável, uma toxina ou um agente terapêutico para anticorpos.

[00320] —Porexemplo, a conjugação de droga envolve o acoplamento de uma carga ou droga citotóxica (anticâncer) ativa e biológica a um anticorpo que se direciona especificamente a um determinado marcador tumoral (por exemplo, uma proteína que, idealmente, é encontrada apenas nas ou sobre as células tumorais). Os anticorpos rastreiam essas proteínas no corpo e se ligam à superfície das células cancerígenas. A reação bioquímica entre o anticorpo e a proteína alvo (antígeno) dispara um sinal na célula tumoral, que absorve ou internaliza o anticorpo juntamente com a citotoxina. Depois que o ADC é internalizado, a droga citotóxica é liberada e mata o câncer. Devido a esse direcionamento, o ideal é que a droga tenha efeitos colaterais menores e proporcione uma janela terapêutica mais ampla do que outros agentes quimioterapêuticos. As técnicas para conjugar anticorpos são divulgadas e conhecidas na técnica (ver, por exemplo, Jane de Lartigue, OncLive 5 de julho de 2012; ADC Review on antibody- drug conjugates; e Ducry et al., (2010). Bioconjugate Chemistry 21 (1): 5—13).

[00321] Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode ser conjugado com uma toxina selecionada a partir de ricina, cadeia A da ricina, doxorrubicina, daunorrubicina, um maitansinoide, taxol, brometo de etídio, mitomicina, etoposídeo, tenoposídeo, vincristina, vinblastina, colchicina, di-hidróxi-antracina diona, actinomicina, toxina da difteria, exotoxina de Pseudomonas (PE) A, PE40, abrina, cadeia A da abrina, cadeia A da modecina, alfa-sarcina, gelonina, mitogelina, retstrictocina, fenomicina, enomicina, curicina, crotina, caliqueamicina, inibidor da saponaria officinalis, glicocorticoide, auristatina, auromicina, ítrio, bismuto, combrestatina, duocarmicinas, dolastatina, cc1065 e uma cisplatina. (11) Outras modificações de anticorpos

[00322] Os anticorpos anti-cCD33 da presente descrição, ou fragmentos de anticorpos destes, podem ser modificados ainda mais para conter porções não proteicas adicionais que são conhecidas na técnica e prontamente disponíveis. De preferência, as porções adequadas para derivatização do anticorpo são polímeros solúveis em água. Exemplos não limitantes de polímeros solúveis em água incluem, mas não estão limitados ao polietilenoglicol (PEG), copolímeros de etilenoglicol/propilenoglicol, carboximetilcelulose, dextrano, álcool polivinílico, polivinil pirrolidona, poli-1,3-dioxolano, poli-1,3,6-trioxano, copolímero de etileno/anidrido maleico, poliaminoácidos (homopolímeros ou copolímeros aleatórios) e dextrano ou poli(n-vinil pirrolidona)polietilenoglicol, — homopolímeros de —propilenoglicol, copolímeros de óxido de polipropileno/óxido de etileno, poliois polioxietilados (por exemplo, glicerol), álcool polivinílico e misturas destes. O propionaldeído de polietilenoglicol pode ter vantagens na fabricação devido à sua estabilidade na água. O polímero pode ser de qualquer peso molecular e pode ser ramificado ou não ramiíficado. O número de polímeros ligados ao anticorpo pode variar, e se mais de um polímero for ligado, eles poderão ser moléculas iguais ou diferentes. Em geral, o número e/ou tipo de polímeros usados para derivatização pode ser determinado com base em considerações, incluindo, mas não se limitando às propriedades ou funções específicas do anticorpo a ser melhorado, se o derivado do anticorpo será usado em uma terapia sob condições definidas, etc. Tais técnicas e outras formulações adequadas são divulgadas em Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20º Ed., Alfonso Gennaro, Ed., Philadelphia College of Pharmacy and Science (2000).

Ensaios de ligação e outros ensaios

[00323] Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser testados para atividade de ligação ao antígeno, por exemplo, por métodos conhecidos como ELISA, ressonância plasmônica de superfície (SPR), Western blot, etc.

[00324] Em algumas modalidades, os ensaios de competição podem ser usados para identificar um anticorpo que compete com qualquer um dos anticorpos descritos neste documento. Em algumas modalidades,

os ensaios de competição podem ser utilizados para identificar um anticorpo que compete com qualquer um dos anticorpos listados nas Tabelas 3A-3C, 44-34, 5A-5D, 6A-6D, 7, e 8, ou selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-

14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-

63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-

63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-

64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-

64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-

64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, ou AB-H66 para ligação à CD33. Em certas modalidades, tal anticorpo competidor se liga ao mesmo epítopo (por exemplo, um epítopo linear ou conformacional) que é ligado por qualquer um dos anticorpos listados nas Tabelas 3A-3C, 4A-4C, 5A-5D, 6A-6D, 7 e 8, ou selecionados dentre AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-

63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-

64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-

64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, ou AB-H66. Os métodos exembplificativos detalhados para o mapeamento de um epítopo ao qual um anticorpo se liga são fornecidos em Morris (1996) "Epitope Mapping Protocols", em Methods in Molecular Biology vol. 66 (Humana Press, Totowa, NJ).

[00325] Em um ensaio de competição exemplificativo, CD33 imobilizada ou células que expressam CD33 na superfície celular são incubadas em uma solução compreendendo um primeiro anticorpo marcado que se liga à CD33 (por exemplo, primata humano ou não humano) e um segundo anticorpo não marcado que está sendo testado pela sua capacidade de competir com o primeiro anticorpo pela ligação à CD33. O segundo anticorpo pode estar presente em um sobrenadante do hibridoma. Como um controle, a CD33 imobilizada ou células que expressam CD33 são incubadas em uma solução compreendendo o primeiro anticorpo marcado, mas não o segundo anticorpo não marcado. Após a incubação sob condições permissivas para a ligação do primeiro anticorpo à CD33, o excesso de anticorpo não ligado é removido e a quantidade de marcador associado à CD33 imobilizada ou às células que expressam CD33 é medida. Se a quantidade de marcação associada à CD33 imobilizada ou células que expressam CD33 for substancialmente reduzida na amostra de teste em relação à amostra de controle, isso indica então que o segundo anticorpo está competindo com o primeiro anticorpo para a ligação à CD33. Ver, Harlow e Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual ch.14 (Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY).

Ácidos Nucleicos, vetores e células hospedeiras

[00326] Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser produzidos por meio da utilização de métodos recombinantes e composições, por exemplo, conforme descrito na Patente US. Nº

4.816.567. Em algumas modalidades, ácidos nucleicos isolados com uma sequência nucleotídica que codifica qualguer um dos anticorpos anti-CD33 da presente descrição são fornecidos. Tais ácidos nucleicos podem codificar uma sequência de aminoácidos contendo a VL e/ou uma sequência de aminoácidos contendo a VH do anticorpo anti-CD33 (por exemplo, as cadeias leve e/ou pesada do anticorpo). Em algumas modalidades, um ou mais vetores (por exemplo, vetores de expressão) contendo esses ácidos nucleicos são fornecidos. Em algumas modalidades, uma célula hospedeira contendo esse ácido nucleico também é fornecida. Em algumas modalidades, a célula hospedeira contém (por exemplo, foi transduzida com): (1) um vetor contendo um ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácidos contendo a VL do anticorpo e uma sequência de aminoácidos contendo a VH do anticorpo, ou (2) um primeiro vetor contendo um ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácidos contendo a VL do anticorpo e um segundo vetor contendo um ácido nucleico que codifica uma sequência de aminoácidos contendo a VH do anticorpo. Em uma modalidade, a célula hospedeira é eucariótica, por exemplo, uma célula de Ovário de Hamster chinês (CHO) ou células linfoides (por exemplo, células YO, NSO, Sp20).

[00327] Métodos de produção de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição são fornecidos. Em algumas modalidades, o método inclui cultivar uma célula hospedeira da presente descrição contendo um ácido nucleico que codifica o anticorpo anti-CD33, sob condições adequadas para a expressão do anticorpo. Em algumas modalidades, o anticorpo é subsequentemente recuperado da célula hospedeira (ou meio de cultura de células hospedeiras).

[00328] Para produção recombinante de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição, um ácido nucleico que codifica o anticorpo anti- CD33 é isolado e inserido em um ou mais vetores para posterior clonagem e/ou expressão em uma célula hospedeira. Esse ácido nucleico pode ser facilmente isolado e sequenciado por meio da utilização de procedimentos convencionais (por exemplo, utilizando sondas de oligonucleotídeos capazes de se ligar especificamente a genes que codificam as cadeias pesadas e leves do anticorpo).

[00329] Os vetores adequados contendo uma sequência de ácido nucleico que codifica qualquer um dos anticorpos anti-CD33 da presente descrição ou fragmentos destes, polipeptídeos (incluindo anticorpos)

descritos neste documento incluem, sem limitação, vetores de clonagem e vetores de expressão. Os vetores de clonagem adequados podem ser construídos de acordo com técnicas padrão ou podem ser selecionados dentre um grande número de vetores de clonagem disponíveis na técnica. Embora o vetor de clonagem selecionado possa variar de acordo com a célula hospedeira que se pretende utilizar, os vetores de clonagem úteis geralmente têm a capacidade de se autorreplicar, podem possuir um único alvo para uma endonuclease de restrição particular, e/ou podem carrear genes para um marcador que pode ser usado na seleção de clones que contenham o vetor. Os exemplos adequados incluem plasmídeos e vírus bacterianos, por exemplo, puC18, pUC19, Bluescript (por exemplo, pBS SK+) e seus derivados, mp18, mp19, pBR322, pMB9, ColE1, pCR1, RP4, DNA de fago e vetores de transferência, tais como PSA3 e pAT28. Estes e muitos outros vetores de clonagem estão disponíveis a partir de fornecedores comerciais tais como BioRad, Stratagene e Invitrogen.

[00330] Os vetores de expressão geralmente são construtos polinucleotídicos replicáveis que contém um ácido nucleico da presente descrição. O vetor de expressão pode ser replicável nas células hospedeiras como epissomas ou como parte integrante do DNA cromossômico. Vetores de expressão adequados incluem, mas não estão limitados aos plasmídeos, vetores virais, incluindo adenovírus, adenovírus associados, retrovírus, cosmídeos e vetor (es) de expressão descritos na Publicação PCT No. WO 87/04462. Os componentes do vetor podem geralmente incluir, mas não estão limitados a um ou mais dos seguintes: uma sequência de sinal; uma origem de replicação; um ou mais genes marcadores; elementos de controle transcricional adequado (tais como promotores, estimuladores e terminador). Para a expressão (ou seja, tradução), um ou mais elementos controladores de translação também são geralmente necessários, tais como sítios de ligação ao ribossomo, sítios de iniciação da tradução, e códons de parada.

[00331] Os vetores que contêm os ácidos nucleicos de interesse podem ser introduzidos na célula hospedeira por qualquer de um número de meios adequados, incluindo eletroporação, transfecção empregando cloreto de cálcio, cloreto de rubídio, fosfato de cálcio, DEAE-dextrano, ou outras substâncias; bombardeamento de micro- projéteis; lipofecção; e infecção (por exemplo, onde o vetor é um agente infeccioso tal como o vírus vaccinia). A opção de introduzir vetores ou polinucleotídeos dependerá frequentemente das características da célula hospedeira. Em algumas modalidades, o vetor contém um ácido nucleico contendo uma ou mais sequências de aminoácidos que codificam um anticorpo anti-CD33 da presente descrição.

[00332] As células hospedeiras adequadas para a clonagem ou expressão de vetores que codificam anticorpos incluem as células procarióticas ou eucarióticas. Por exemplo, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser produzidos em bactérias, em particular quando a glicosilação e a função efetora de Fc não são necessárias. Para a expressão de fragmentos de anticorpos e polipeptídeos em bactérias (por exemplo, as Patentes US. Nºs. 5.648.237, 5.789.199 e

5.840.523; e Charlton, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ, 2003), pp. 245-254, descrevendo a expressão de fragmentos de anticorpos em E. coli). Após a expressão, o anticorpo pode ser isolado da massa celular bacteriana em uma fração solúvel e pode ser posteriormente purificado.

[00333] Além de procariontes, microrganismos eucariontes tais como fungos filamentosos ou leveduras são hospedeiros de clonagem ou expressão adequados para vetores codificantes de anticorpo, incluindo cepas de fungos e leveduras cujas vias de glicosilação foram "humanizadas”", resultando na produção de um anticorpo com um padrão de glicosilação parcial ou totalmente humano (por exemplo, Gerngross, Nat. Biotech. 22:1409-1414 (2004); e Li et al., Nat. Biotech. 24:210-215 (2006)).

[00334] As células hospedeiras adequadas para a expressão do anticorpo glicosilado também podem ser derivadas de organismos multicelulares (invertebrados e vertebrados). Exemplos de células de invertebrados incluem células vegetais e de insetos. Foram identificadas inúmeras cepas de baculovírus que podem ser usadas em conjunto com células de insetos, particularmente para a transfecção de células de Spodoptera frugiperda. As culturas de células vegetais também podem ser utilizadas como hospedeiros (por exemplo, as Patentes US. Nºs

5.959.177, 6.040.498, 6.420.548, 7.125.978 e 6.417.429, descrevendo a tecnologia PLANTIBODIESTY" para a produção de anticorpos em plantas transgênicas.).

[00335] Células de vertebrados também podem ser usadas como hospedeiras. Por exemplo, linhagens celulares de mamífero que estão adaptadas para crescer em suspensão podem ser úteis. Outros exemplos de linhagens de células hospedeiras de mamíferos úteis são a linhagem CV1 de rim de macaco transformada por SV40 (COS-7); linhagem de rim embrionário humano (células 293 ou 293 conforme descrito, por exemplo, em Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)); células de rim de hamster bebê (BHK); células de Sertoli de camundongo (células TMA4, conforme descrito, por exemplo, em Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980); células de rim de macaco (CV1); células de rim de macaco verde africano (VERO-76); células de carcinoma cervical humano (HELA); células de rim canino (MDCK,; células de fígado de rato do tipo búfalo (BRL 3A); células de pulmão humano (W138); células de fígado humano (Hep G2); tumor de mamífero de camundongo (MMT 060562); células TRI, conforme descrito, por exemplo, em Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci. 383:44-

68 (1982); células MRC 5 e células FS4. Outras linhagens de células hospedeiras em mamíferos úteis incluem células ovarianas de hamster chinês (CHO), incluindo células DHFR-CHO (Urlaub et al, Proc. Natl. Acad. Sci. EUA 77:4216 (1980)); e linhagens celulares de mieloma tais como YO, NSO e Sp2/0. Para uma revisão de certas linhagens de células hospedeiras de mamífero adequadas para a produção de anticorpos, veja, por exemplo, Yazaki e Wu, Methods in Molecular Biology, Vol. 248 (B.K.C. Lo, ed., Humana Press, Totowa, NJ), pp. 255-268 (2003). Composições Farmacêuticas

[00336] Os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser incorporados em uma variedade de formulações para administração terapêutica combinando os anticorpos anti-CD33 com veículos ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis apropriados e podem ser formulados em preparações nas formas sólida, semissólida, líquida ou gasosa. Exemplos de tais formulações incluem, sem limitação, comprimidos, cápsulas, pós, grânulos, unguentos, soluções, supositórios, injeções, inalantes, géis, microesferas e aerossois. As composições farmacêuticas podem incluir, dependendo da formulação desejada, veículos de diluentes não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis, que são veículos comumente usados para formular composições farmacêuticas para administração animal ou humana. O diluente é selecionado para não afetar a atividade biológica da combinação. Exemplos de tais diluentes incluem, sem limitação, água destilada, água tamponada, solução salina fisiológica, PBS, solução de Ringer, solução de dextrose e solução de Hank. Uma composição ou formulação farmacêutica da presente descrição pode ainda incluir outros veículos, adjuvantes ou estabilizadores não tóxicos, não terapêuticos, não imunogênicos, excipientes e similares. As composições também podem incluir substâncias adicionais para aproximar condições fisiológicas, tais como agentes de ajuste e tampão de pH, agentes de ajuste de toxicidade, agentes umectantes e detergentes.

[00337] Uma composição farmacêutica da presente descrição também pode incluir qualquer uma de uma variedade de agentes estabilizadores, como um antioxidante, por exemplo. Quando a composição farmacêutica inclui um polipeptídeo, o polipeptídeo pode ser complexado com vários compostos conhecidos que melhoram a estabilidade in vivo do polipeptídeo ou melhoram suas propriedades farmacológicas (por exemplo, aumentam a meia-vida do polipeptídeo, reduzem sua toxicidade e melhoram a solubilidade ou absorção). Exemplos de tais modificações ou agentes complexantes incluem, sem limitação, sulfato, gluconato, citrato e fosfato. Os polipeptídeos de uma composição também podem ser complexados com moléculas que aumentam seus atributos in vivo. Tais moléculas incluem, sem limitação, carboidratos, poliaminas, aminoácidos, outros peptídeos, íons (por exemplo, sódio, potássio, cálcio, magnésio, manganês) e lipídios.

[00338] Outros exemplos de formulações que são adequadas para vários tipos de administração podem ser encontrados na Remington's Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Company, Filadélfia, PA, 17º ed. (1985). Para uma breve revisão dos métodos para administração de medicamentos, ver Langer, Science 249: 1527-1533 (1990).

[00339] Para administração oral, o ingrediente ativo pode ser administrado em formas de dosagem sólidas, como cápsulas, comprimidos e pós, ou em formas de dosagem líquidas, como elixires, xaropes e suspensões. O(s) componente(s) ativo(s) pode(m) ser encapsulado(s) em cápsulas de gelatina juntamente com ingredientes inativos e veículos em pó, como glicose, lactose, sacarose, manitol, amido, celulose ou derivados de celulose, estearato de magnésio, ácido esteárico, sacarina sódica, talco, carbonato de magnésio. Exemplos de ingredientes inativos adicionais que podem ser adicionados para fornecer cor, sabor, estabilidade, capacidade de tamponamento, dispersão ou outras características desejáveis conhecidas são óxido de ferro vermelho, sílica gel, lauril sulfato de sódio, dióxido de titânio e tinta branca comestível. Diluentes semelhantes podem ser usados para fazer comprimidos prensados. Tanto os comprimidos quanto as cápsulas podem ser fabricados como produtos de liberação sustentada para fornecer liberação contínua de medicamento por um período de horas. Os comprimidos podem ser revestidos com açúcar ou revestidos com película para mascarar qualquer sabor desagradável e proteger o comprimido da atmosfera, ou com revestimento entérico para desintegração seletiva no trato gastrointestinal. As formas de dosagem líquidas para administração oral podem conter corantes e aromas para aumentar a aceitação do paciente.

[00340] As formulações adequadas para administração parentérica incluem soluções de injeção estéril isotônicas aquosas e não aquosas, que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do destinatário pretendido e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão, solubilizantes, agentes espessantes, estabilizadores e conservantes.

[00341] Os componentes utilizados para formular as composições farmacêuticas são preferencialmente de elevada pureza e estão substancialmente isentos de contaminantes potencialmente prejudiciais (por exemplo, pelo menos de grau National Food (NF), geralmente e pelo menos de grau analítico, e mais tipicamente pelo menos de grau farmacêutico). Além disso, as composições destinadas ao uso in vivo são geralmente estéreis. Na medida em que um determinado composto deve ser sintetizado antes do uso, o produto resultante é tipicamente substancialmente livre de quaisquer agentes potencialmente tóxicos, particularmente quaisquer endotoxinas, que podem estar presentes durante o processo de síntese ou purificação. As composições para administração dos pais também são estéreis, substancialmente isotônicas e feitas sob condições de GMP.

[00342] As formulações podem ser otimizadas para retenção e estabilização no cérebro ou sistema nervoso central. Quando o agente é administrado no compartimento craniano, é desejável que o agente seja retido no compartimento e não difunda ou atravesse a barreira hematoencefálica. As técnicas de estabilização incluem reticulação, multimerização ou ligação a grupos como polietilenoglicol, poliacrilamida, veículos neutros de proteínas, etc., de modo a obter um aprimoramento no peso molecular.

[00343] Outras estratégias para aprimorar a retenção incluem o aprisionamento do anticorpo anti-CD33 da presente descrição em um implante biodegradável ou bioerodível. A taxa de liberação do agente terapeuticamente ativo é controlada pela taxa de transporte através da matriz polimérica e pela biodegradação do implante. O transporte da droga através da barreira polimérica também será afetado pela solubilidade do composto, hidrofiliidade do polímero, extensão da reticulação do polímero, expansão do polímero mediante absorção de água, de modo a tornar a barreira polimérica mais permeável à droga, geometria do implante e similares. Os implantes são de dimensões proporcionais ao tamanho e formato da região selecionada como sítio de implantação. Os implantes podem ser partículas, folhas, adesivos, placas, fibras, microcápsulas e similares e podem ter qualquer tamanho ou forma compatível com o sítio de inserção selecionado.

[00344] Osimplantes podem ser monolíticos, isto é, ter o agente ativo distribuído homogeneamente através da matriz polimérica ou encapsulada, onde um reservatório do agente ativo é encapsulado pela matriz polimérica. A seleção da composição polimérica a ser empregada variará com o sítio da administração, o período de tratamento desejado,

a tolerância do paciente, a natureza da doença a ser tratada e similares. As características dos polímeros incluirão biodegradabilidade no sítio da implantação, compatibilidade com o agente de interesse, facilidade de encapsulamento, meia-vida no ambiente fisiológico.

[00345] As composições poliméricas biodegradáveis que podem ser empregadas podem ser ésteres ou éteres orgânicos que, quando degradados, resultam em produtos de degradação fisiologicamente aceitáveis, incluindo os monômeros. Anidridos, amidas, ortoesteres ou outros semelhantes, sozinhos ou em combinação com outros monômeros, podem ser usados. Os polímeros serão polímeros de condensação. Os polímeros podem ser reticulados ou não reticulados. De particular interesse são os polímeros de ácidos carboxílicos hidroxialifáticos quer homo- ou copolímeros e polissacarídeos. Entre os poliésteres de interesse estão incluídos polímeros de ácido d-lático, ácido L-lático, ácido lático racêmico, ácido glicólico, policaprolactona e combinações destes. Ao empregar o L-lactato ou D-lactato, um polímero lentamente biodegradável é alcançado, enquanto a degradação é substancialmente aprimorada com o racemato. Os copolímeros de ácido glicólico e láctico são de particular interesse, onde a taxa de biodegradação é controlada pela proporção de ácido glicólico para ácido láctico. O copolímero mais rapidamente degradado possui quantidades aproximadamente iguais de ácido glicólico e láctico, onde qualquer homopolímero é mais resistente à degradação. A proporção de ácido glicólico para ácido lático também afetará a fragilidade do implante, onde um implante mais flexível é desejável para geometrias maiores. Entre os polissacarídeos de interesse estão o alginato de cálcio e celuloses funcionalizadas, particularmente ésteres de carboximetilcelulose caracterizados por serem insolúveis em água, um peso molecular de cerca de 5 kD a 500 kD, etc. Hidrogéis biodegradáveis também podem ser empregados nos implantes da presente descrição. Os hidrogéis são tipicamente um material de copolímero, caracterizado pela capacidade de absorver um líquido. Hidrogéis biodegradáveis exemplificativos que podem ser empregados são descritos em Heller em: Hydrogels in Medicine and Pharmacy, N. A. Peppes ed,., Vol. Ill, CRC Press, Boca Raton, Fla., 1987, pp 137-149. Dosagens Farmacêuticas

[00346] As composições farmacêuticas da presente descrição contendo um anticorpo anti-CD33 da presente descrição podem ser administradas a um indivíduo em necessidade de tratamento com o anticorpo, preferencialmente um humano, de acordo com métodos conhecidos, tais como administração intravenosa como um bolus ou por infusão contínua durante um período de tempo, por via intramuscular, intraperitoneal, intracerobrospinal, intracraniana, intraespinal, subcutânea, intra-articular, intrassinovial, intratecal, oral, tópica ou por inalação.

[00347] As dosagens e a concentração de droga desejadas das composições farmacêuticas da presente descrição podem variar dependendo da utilização particular prevista. A determinação da dosagem ou via de administração apropriada está dentro das habilidades daquele ordinariamente versado na técnica. Experiências em animais fornecem orientações confiáveis para a determinação de doses efetivas para terapia humana. O escalonamento de doses eficazes entre espécies pode ser realizado seguindo os princípios descritos em Mordenti, J. e Chappell, W. "The Use of Interspecies Scaling in Toxicokinetics" em Toxicokinetics and New Drug Development, Yacobi et al., Eds, Pergamon Press, Nova York 1989, pp.42-46.

[00348] Para administração in vivo de qualquer um dos anticorpos anti-CD33 da presente descrição, as quantidades de dosagem normais podem variar de cerca de 10 ng/kg até cerca de 100 mg/kg de peso corporal de um indivíduo ou mais por dia, preferencialmente cerca de 1 mg/kg/dia a 10 mg/kg/dia, dependendo da via de administração. Para administrações repetidas por vários dias ou mais, dependendo da gravidade da doença, distúrbio ou condição a ser tratada, o tratamento é mantido até que seja alcançada a supressão desejada dos sintomas.

[00349] Um regime de dosagem exemplificativo pode incluir a administração de uma dose inicial de um anticorpo anti-CD33, de cerca de 2 mg/kg, seguida por uma dose de manutenção semanal de cerca de 1 mg/kg a cada duas semanas. Outros regimes de dosagem podem ser úteis, dependendo do padrão de decaimento farmacocinético que o médico deseje atingir. Por exemplo, a dosagem de um indivíduo de uma a vinte e uma vezes por semana é contemplada neste documento. Em certas modalidades, a dosagem que varia de cerca de 3 ug / kg a cerca de 2 mg / kg (como cerca de 3 ug / kg, cerca de 10 ug / kg, cerca de 30 vg / kg, cerca de 100 ug / kg, cerca de 300 ug / kg, cerca de 1 mg / kg e cerca de 2 / mg / kg) pode ser usada. Em certas modalidades, a frequência de dosagem é três vezes por dia, duas vezes por dia, uma vez por dia, uma vez a cada dois dias, uma vez por semana, uma vez a cada duas semanas, uma vez a cada quatro semanas, uma vez a cada cinco semanas, uma vez a cada seis semanas, uma vez a cada sete semanas, uma vez a cada oito semanas, uma vez a cada nove semanas, uma vez a cada dez semanas ou uma vez por mês, uma vez a cada dois meses, uma vez a cada três meses ou mais. O progresso da terapia é facilmente monitorado por técnicas e ensaios convencionais. O regime de dosagem, incluindo o anticorpo anti-CD33 administrado, pode variar ao longo do tempo, independentemente da dose utilizada.

[00350] As dosagens para um anticorpo anti-CD33 específico podem ser determinadas empiricamente em indivíduos aos quais foi administrada uma ou mais administrações do anticorpo anti-CD33. Os indivíduos recebem doses incrementais de um anticorpo anti-CD33. Para avaliar a eficácia de um anticorpo anti-CD33, um sintoma clínico de qualquer uma das doenças, distúrbios ou condições da presente descrição (por exemplo, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, convulsões, distrofia retiniana, lesão cerebral traumática, uma lesão medular, depressão de longo prazo, doenças vasculares ateroscleróticas e sintomas indesejáveis do envelhecimento normal) podem ser monitorados.

[00351] A administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode ser contínua ou intermitente, dependendo, por exemplo, da condição fisiológica do receptor, se o objetivo da administração é terapêutico ou profilático e outros fatores conhecidos por profissionais habilidosos. A administração de um anticorpo anti-CD33 pode ser essencialmente contínua durante um período de tempo pré-selecionado ou pode estar em uma série de doses espaçadas.

[00352] Orientação sobre dosagens específicas e métodos de distribuição é fornecida na literatura; ver, por exemplo, as patentes US. Nºs 4.657.760; 5.206.344; ou 5.225.212. Está dentro do escopo da presente descrição que diferentes formulações serão eficazes para diferentes tratamentos e diferentes distúrbios, e que a administração destinada a tratar um órgão ou tecido específico pode exigir a distribuição de uma maneira diferente daquela para outro órgão ou tecido. Além disso, as dosagens podem ser administradas por uma ou mais administrações separadas ou por infusão contínua. Para administrações repetidas ao longo de muitos dias ou maiores, dependendo da condição, o tratamento é mantido até que ocorra uma supressão desejada dos sintomas de doença. No entanto, outros regimes de dosagem podem ser úteis. O progresso desta terapia é facilmente monitorado por técnicas e ensaios convencionais.

Usos Terapêuticos

[00353] Conforme divulgado neste documento, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição podem ser usados para a prevenção, redução do risco ou tratamento da demência, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença tipo taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, lúpus, colite aguda e crônica, artrite reumatoide, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, tremor essencial, lúpus do sistema nervoso central, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy- Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar corticobasal, — encefalomielite — disseminada — aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada ao envelhecimento, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, esclerose múltipla, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica, doença óssea de Paget e câncer incluindo câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstatay câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), mieloma múltiplo, policitemia vera, trombocitose essencial, mielofibrose primária ou idiopática, mieloesclerose primária ou idiopática, tumores derivados de mieloides, tumores que expressam CD33, câncer de tireoide, infecções, herpes do SNC, infecções parasitárias, infecção por tripanossoma, infecção por Cruzi, infecção por Pseudomonas aeruginosa, infecção por Leishmania donovani, infecção por Streptococcus do grupo B, infecção por Campylobacter jejuni, infecção por Neisseria meningiditis, HIV tipo | e/ou Haemophilus influenza. Em algumas modalidades, os anticorpos CD33 são anticorpos agonistas. Em algumas modalidades, os anticorpos são anticorpos inertes. Em algumas modalidades, os anticorpos são anticorpos antagonistas.

[00354] Em algumas modalidades, a presente descrição fornece métodos para a prevenção, redução do risco ou tratamento demência, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença tipo taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, lúpus, colite aguda e crônica, artrite reumatoide, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, tremor essencial, lúpus do sistema nervoso central, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy- Drager, paralisia supranuclear progressiva, degeneração ganglionar corticobasal, encefalomielite — disseminada — aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada ao envelhecimento, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, esclerose múltipla, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica, doença óssea de Paget, câncer, câncer de bexiga, câncer de cérebro,

câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstatay câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), mieloma múltiplo, policitemia vera, trombocitose essencial, mielofibrose primária ou idiopática, mieloesclerose primária ou idiopática, tumores derivados de mieloides, tumores que expressam CD33, câncer de tireoide, infecções, herpes do SNC, infecções parasitárias, infecção por tripanossoma, infecção por Cruzi, infecção por Pseudomonas aeruginosa, infecção por Leishmania donovani, infecção por Streptococcus do grupo B, infecção por Campylobacter jejuni, infecção por Neisseria meningiditis, HIV tipo | e Haemophilus influenza, por meio da administração a um indivíduo em necessidade deste de uma quantidade terapeuticamente efetiva de um anticorpo da presente descrição que diminui os níveis celulares de CD33, inibe a interação entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33, ou ambos.

[00355] Em algumas modalidades, a presente descrição fornece métodos de prevenção, redução de risco ou tratamento de câncer, administrando a um indivíduo em necessidade deste, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo da presente descrição que diminui os níveis celulares de CD33, inibe a interação entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33, ou ambos. Em algumas modalidades, o anticorpo inibe uma ou mais atividades de CD33 selecionadas dentre: (a) promoção da proliferação, maturação, migração, diferenciação e/ou funcionalidade de uma ou mais das células dendríticas imunossupressoras, “macrófagos —imunossupressores, neutrófilos imunossupressores, células supressoras não tumorigênicas derivadas da linhagem mieloide não tumorigênicas, macrófagos associados a tumores, células mieloides CD14* não tumorigênicas e células T reguladoras; (b) potencialização da infiltração de uma ou mais células dendríticas imunossupressoras, macrófagos imunossupressores, neutrófilos imunossupressores, células supressoras não tumorigênicas derivadas da linhagem mieloide, macrófagos associados a tumores e células T reguladoras em tumores; (c) aumento no número de células imunosupressoras mieloides/granulocíticas promotoras de tumor e/ou células mieloides CD14* não tumorigênicas em um tumor, no sangue periférico ou em outro órgão linfoide; (d) diminuição da ativação de linfócitos T específicos de tumor com potencial de morte do tumor; (e) diminuição da infiltração de linfócitos T específicos de tumor com potencial de morte do tumor; (f) aumento do volume do tumor; (g) aumento da taxa de crescimento do tumor; (h) aumento de metástase; (i) aumento da taxa de recorrência do tumor; (j)) aumento da expressão de um ou mais ligantes de PD-1; (k) eficácia decrescente de uma ou mais imunoterapias que modulam as respostas de células T antitumorais, opcionalmente em que a uma ou mais imunoterapias são imunoterapias que direcionam uma ou mais proteínas selecionadas a partir do grupo que consiste em CD40, OX40, ICOS, CD28, CD137/4- 1BB, CD27, GITR, PD-L1, CTLAA4, PD-L2, PD-1, B7-H3, B7-H4, HVEM, LIGHT, BTLA, CD38, TIGIT, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIMA, AZAR, LAG3, DR5, CD39, CD70, CD73, TREM1, TREM2, Siglec-5, Siglec-7, Siglec-9, Siglec-11, SirpA, CD47, receptor CSF-1 e qualquer combinação destes, ou de uma ou mais vacinas contra o câncer; e (|) diminuição da eficácia de um ou mais agentes quimioterápicos, opcionalmente em que um ou mais agentes quimioterápicos são gemcitabina, capecitabina, antraciclinas, doxorrubicina (Adriamycinº), epirubicina (Ellenceº), taxanos, paclitaxel (Taxolº),) docetaxel (Taxotereº), —B5-fluorouracil (5-FU), ciclofosfamida (Cytoxanº), carboplatina (Paraplatinº), oxaliplatina (Elotaxinº), leucovorina,

temozolmida (Temodarº), e qualquer combinação destes.

Em algumas modalidades, o anticorpo exibe uma ou mais atividades selecionadas dentre: (a) aumento do número de células T CD3* infiltrantes de tumores; (b) diminuição dos níveis celulares de CD33 em células mieloides CD14*não tumorigênicas, opcionalmente em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas são células infiltrantes de tumor ou opcionalmente em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas estão presentes no sangue; (c) redução do número de células mieloides CD14* não tumorigênicas, opcionalmente em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas são células infiltrantes de tumor ou opcionalmente em que as células mieloides CD14* não tumorigênicas estão presentes no sangue; (d) redução dos níveis de PD-L1 em uma ou mais células, opcionalmente em que as uma ou mais células são células supressoras derivadas da linhagem mieloide (MDSC) não tumorigênicas; (e) diminuição da taxa de crescimento do tumor de tumores sólidos; (f) redução do volume do tumor; (g) aumento da eficácia de um ou mais inibidores de PD-1; (h) aumento da eficácia de uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias de modulação imunológica, opcionalmente em que a uma ou mais terapias inibidoras de checkpoint e/ou terapias de modulação imunológica direcionam um ou mais CTLA, a via da adenosina, PD-L1, PD-L2, OX40, TIM3, LAG3 ou qualquer combinação destes; (i) aumento da eficácia de um ou mais agentes quimioterápicos, opcionalmente em que um ou mais agentes quimioterápicos são gemcitabina,y capecitabina, antraciclinas, doxorrubicina (Adriamycinº), epirubicina (Ellenceº), taxanos, paclitaxel (Taxolº), docetaxel (Taxotereº), 5-fluorouracil (5- FU), ciclofosfamida (Cytoxanº), carboplatina (Paraplatinº), oxaliplatina (Elotaxinº), leucovorina, temozolmida (Temodarº), e qualquer combinação destes; e (]) morte de células mieloides imunossupressoras que expressam CD33 e/ou células que expressam CD14 em tumores sólidos e vasos sanguíneos associados quando conjugados com uma toxina química ou radioativa.

[00356] Como divulgado neste documento, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição também podem ser utilizados para a indução e/ou promoção da maturação, funcionalidade, migração ou proliferação de sobrevivência de uma ou mais células imunológicas (por exemplo, células imunológicas inatas ou células imunológicas adaptativas). Em algumas modalidades, a presente descrição fornece métodos para a indução ou promoção da sobrevivência, maturação, funcionalidade, migração ou proliferação de uma ou mais células imunológicas em um indivíduo em necessidade deste, administrando ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo da presente descrição que diminui os níveis celulares de CD33, inibe a interação entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33, ou ambos. Em algumas modalidades, as uma ou mais células imunológicas são selecionadas dentre células dendríticas, macrófagos, micróglia, neutrófilos, células T, células T helper, células T citotóxicas e qualquer combinação destas.

[00357] Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo agonista anti-CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo anti-CD33 agonista transitório da presente descrição que atua inicialmente como um agonista e depois atua como um anticorpo antagonista de longo prazo. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo anti-CD33 inerte. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo antagonista anti-CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 reduz os níveis celulares (por exemplo, superfície celular, intracelular ou total) de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 induz a degradação de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 induz a clivagem de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 induz a internalização de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 induz a supressão de

CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 induz a regulação negativa da expressão de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 inibe a interação (por exemplo, ligação) entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 ativa transitoriamente e, em seguida, induz a degradação de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 ativa transitoriamente e, em seguida, induz a clivagem de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 ativa transitoriamente e, em seguida, induz a internalização de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 ativa transitoriamente e, em seguida, induz a supressão de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 é ativa transitoriamente e, em seguida, induz a regulação negativa da expressão de CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 ativa transitoriamente e, em seguida, induz a expressão diminuída de CD33. Em certas modalidades, o indivíduo tem um alelo CD33 variante com polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) rs3865444 CC ou AC. Em certas modalidades, o indivíduo tem um alelo CD33 variante com polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) 2459419 CC ou CT.

[00358] “Como divulgado neste documento, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ainda ser utilizados para diminuir a atividade, funcionalidade ou sobrevivência de células T reguladoras, células dendríticas imunossupressoras incorporadas ao tumor, macrófagos imunossupressores incorporados ao tumor, células supressoras derivadas da linhagem mieloide, macrófagos associados ao tumor, células de leucemia mieloide aguda (LMA), células de leucemia linfocítica crônica (LLC), e/ou células de leucemia mieloide crônica (LMC). Em algumas modalidades, a presente descrição fornece métodos para a diminuição da atividade, funcionalidade ou sobrevivência de células T reguladoras, células dendríticas imunossupressoras incorporadas ao tumor, macrófagos imunossupressores incorporados ao tumor, células supressoras derivadas da linhagem mieloide, macrófagos associados a tumores, células de leucemia mieloide aguda (LMA), células de leucemia linfocítica crônica (LLC), ou células de leucemia mieloide crônica (LMC) em um indivíduo em necessidade deste, administrando ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo que se liga ou interage com CD33. Em algumas modalidades, o anticorpo é selecionado a partir de um anticorpo antagonista, um anticorpo inerte ou um anticorpo agonista. Em algumas modalidades, o anticorpo é um anticorpo anti-CD33 isolado ou conjugado de anticorpo anti-CD33 da presente descrição. Em algumas modalidades, o conjugado de anticorpo anti-CD33 compreende um anticorpo anti-CD33 conjugado com um marcador detectável, uma toxina ou um agente terapêutico.

[00359] Conforme divulgado neste documento, os anticorpos anti- CD33 da presente descrição podem ser utilizados para a diminuição dos níveis celulares de CD33, inibição da interação entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33, ou ambos em uma ou mais células in vitro ou in vivo. Em algumas modalidades, a presente descrição fornece métodos para a diminuição dos níveis celulares de CD33, inibição da interação entre CD33 e um ou mais ligantes de CD33, ou ambos em uma ou mais células em um indivíduo em necessidade deste, administrando ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti- CD33 isolado da presente descrição. Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 diminui os níveis celulares de CD33 in vivo.

[00360] Como divulgado neste documento, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser utilizados para a diminuição dos níveis celulares de CD33 em uma ou mais células, incluindo, sem limitação, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, micróglia, células T e macrófagos e/ou linhas de células. Em algumas modalidades, a presente descrição fornece métodos para a diminuição dos níveis celulares de CD33 em uma ou mais células em um indivíduo em necessidade deste, administrando ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição.

Em algumas modalidades, as uma ou mais células são selecionadas dentre células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, micróglia, células T e macrófagos e qualquer combinação destes.

Em algumas modalidades, o anticorpo anti-CD33 diminui os níveis celulares de CD33 in vivo.

Os níveis celulares de CD33 podem se referir, sem limitação, aos níveis de superfície celular de CD33, aos níveis intracelulares de CD33 e aos níveis totais de CD33. Em algumas modalidades, uma diminuição nos níveis celulares de CD33 compreende uma diminuição nos níveis da superfície celular de CD33. Conforme usado neste documento, os níveis da superfície celular de CD33 podem ser medidos por quaisquer ensaios baseados em células in vitro ou modelo in vivo adequado descrito neste documento ou conhecido na técnica.

Em algumas modalidades, uma diminuição nos níveis celulares de CD33 compreende uma diminuição nos níveis intracelulares de CD33. Conforme usado neste documento, os níveis intracelulares de CD33 podem ser medidos por quaisquer ensaios baseados em células in vitro ou modelo in vivo adequado descrito neste documento ou conhecido na técnica.

Em algumas modalidades, uma diminuição nos níveis celulares de CD33 compreende uma diminuição nos níveis totais de CD33. Como usado neste documento, os níveis totais de CD33 podem ser medidos por quaisquer ensaios baseados em células in vitro ou modelo in vivo adequado descrito neste documento ou conhecido na técnica.

Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 induzem degradação de CD33, clivagem de CD33, internalização de CD33, supressão de CD33 e/ou regulação negativa da expressão de CD33. Em algumas modalidades, os níveis celulares de CD33 são medidos em células primárias (por exemplo, células dendríticas, células dendríticas derivadas da medula óssea, monócitos, micróglia, células T e macrófagos) ou em linhagens celulares utilizando um ensaio celular in vitro.

[00361] Outros aspectos da presente descrição referem-se a um método para a seleção de um sujeito em necessidade deste para tratamento com um anticorpo anti-CD33, o método compreendendo: a. obtenção de uma amostra (por exemplo, amostra de sangue) do sujeito; b. detecção dos alelos CD33 presentes no sujeito; e c. seleção do sujeito para tratamento com o anticorpo que se liga ou interage com CD33 é que o sujeito possui um ou mais alelos CD33, em que o um ou mais alelos CD33 são selecionados do grupo que consiste em rs3865444C, e rs3865444º", Outros aspectos da presente descrição se referem a um método para a avaliação da capacidade de resposta de um sujeito em necessidade deste a um anticorpo que se liga ou interage com CD33, o método compreendendo: a. medição dos níveis de expressão de CD45* e CD14* em células mieloides não tumorigênicas em uma amostra de sangue obtida do sujeito antes de administrar ao sujeito um anticorpo anti-CD33; b. administração ao sujeito de uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo; e C. medição dos níveis de expressão de CD45* e CD14* em células mieloides não tumorigênicas em uma amostra de sangue obtida do sujeito após a administração do anticorpo anti-CD33, em que uma redução nos níveis de CD45* CD14* em células mieloides não tumorigênicas após a administração do anticorpo anti-CD33 indica que o sujeito responde ao agente. Quaisquer métodos adequados para obter uma amostra, como uma amostra de sangue, podem ser utilizados. Além disso, será apreciado que qualquer método conhecido de detecção de variantes e/ou alelos CD33, como análise de SNP, possa ser utilizado. Em algumas modalidades, o método de avaliação da capacidade de resposta compreende ainda administrar uma ou mais quantidades terapeuticamente eficazes adicionais do anticorpo. Em algumas modalidades, o indivíduo é um humano.

[00362] Em algumas modalidades, o indivíduo tem uma variante de CD33. Em algumas modalidades, a variante inclui, sem limitação, um ou mais polimorfismos selecionados dentre: (a) SNP rs3865444C; (b) SNP rs3865444º"; (c) SNP rs3511294066, MAS: e (d) SNP rs12459419 CC, CTou TT: É quaisquer combinações destes.

[00363] Em algumas modalidades, os métodos da presente descrição podem envolver ainda a coadministração de anticorpos anti- CD33 ou anticorpos anti-CD33 biespecíficos, com anticorpos que se ligam a receptores de reconhecimento de padrões, anticorpos que se ligam a receptores do tipo Toll, anticorpos que se ligam a receptores de padrão molecular associado a dano (DAMP) e/ou anticorpos que se ligam a citocinas ou anticorpos a interleucinas).

[00364] Em algumas modalidades, os métodos da presente descrição podem incluir ainda a administração ao indivíduo de pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint e/ou uma ou mais terapias anticâncer padrão ou de investigação. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint é administrado em combinação com o anticorpo anti-CD33. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint é selecionado de um anticorpo anti-PD-L1, um anticorpo anti-CTLA4, um anticorpo anti-PD-L2, um anticorpo anti-PD-1, um anticorpo anti-B7-H3, um anticorpo anti-B7-H4 e anticorpo anti-HVEM, um anticorpo anti-atenuador de linfócitos B e T (BTLA), um anticorpo anti-receptor inibidor de Killer (KIR), um anticorpo anti-GAL9, anticorpo anti-TIM3, anticorpo anti-A2AR, anticorpo anti- LAG-3, anticorpo anti-fosfatidilserina, anticorpo anti-CD27, anticorpo anti-TNFa, anticorpo anti-Siglec-5, um anticorpo anti-Siglec-7, um anticorpo anti-Siglec-9, um anticorpo anti-Siglec-11, um anticorpo antagonista anti-TREM1, um anticorpo antagonista anti-TREM2 e qualquer combinação destes. Em algumas modalidades, a uma ou mais terapias anticâncer padrão ou em investigação são selecionadas dentre radioterapia, quimioterapia citotóxica, terapia direcionada, terapia com imatinibe, terapia com trastuzumabe, terapia com etanercepte, terapia de transferência de células adotivas (ACT), terapia de transferência de células T do receptor de antígeno quimérico (CAR-T), terapia vacinal e terapia com citocinas.

[00365] Em algumas modalidades, os métodos da presente descrição podem incluir ainda a administração ao indivíduo de pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma citocina inibitória. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula de citocina inibitória é administrado em combinação com o anticorpo anti-CD33. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma citocina inibitória é selecionado dentre um anticorpo anti-CCL2 um anticorpo anti-CSF-1, um anticorpo anti-IL-2 e qualquer combinação destes.

[00366] Em algumas modalidades, os métodos da presente descrição podem incluir ainda a administração ao indivíduo de pelo menos um anticorpo agonístico que se liga especificamente a uma proteína de checkpoint estimulante. Em algumas modalidades, a pelo menos um anticorpo agonístico que se liga especificamente a uma proteína de checkpoint estimulante é administrado em combinação com o anticorpo anti-CD33. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo agonístico que se liga especificamente a uma proteína de checkpoint estimulante é selecionado a partir de um anticorpo agonista anti-CD40, um anticorpo agonista anti-OX40, um anticorpo agonista anti-|COS, um anticorpo agonista anti-CD28, um anticorpo agonístico anti- TREM1I, um anticorpo agonístico anti-TREM2, um anticorpo agonista anti-CD137/4-1BB, um anticorpo agonista anti-CD27, um anticorpo agonista anti-proteína relacionada a TNFR induzida por glucocorticoide GITR, e qualquer combinação destes.

[00367] Em algumas modalidades, os métodos da presente descrição podem incluir ainda a administração ao indivíduo de pelo menos uma citocina estimuladora. Em algumas modalidades, pelo menos uma citocina estimuladora é administrada em combinação com o anticorpo anti-CD33. Em algumas modalidades, a pelo menos uma citocina estimuladora é selecionada dentre IFN-a4, IFN-b, IL-1B, TNF-a, IL-6, IL-8, CRP, 11-20 membros da família, LIF, IFN-gama, OSM, CNTF, GM-CSF, IL-11, 11-12, IL-17, 11-18, 11-23, CXCL10, 11-33, CRP, 11-33, MCP-1, MIP-1-beta e qualquer combinação destes.

[00368] Em algumas modalidades, um sujeito ou indivíduo é um mamífero. Os mamíferos incluem, sem limitação, animais domésticos (por exemplo, vacas, ovelha, gatos, cães e cavalos), primatas (por exemplo, primatas humanos e não humanos, tais como macacos), coelhos e roedores (por exemplo, camundongos e ratos). Em certas modalidades, o sujeito ou indivíduo é um ser humano. Demência

[00369] A demência é uma síndrome inespecífica (isto é, um conjunto de sinais e sintomas) que se apresenta como uma séria perda da capacidade cognitiva global em uma pessoa anteriormente intacta, além do que se pode esperar do envelhecimento normal. A demência pode ser estática como resultado de uma lesão cerebral global única. Alternativamente, a demência pode ser progressiva, resultando em declínio a longo prazo devido a danos ou doenças no corpo. Embora a demência seja muito mais comum na população geriátrica, também pode ocorrer antes dos 65 anos. As áreas cognitivas afetadas pela demência incluem, sem limitação, memória, atenção, linguagem e solução de problemas. Geralmente, os sintomas devem estar presentes por pelo menos seis meses antes de um indivíduo ser diagnosticado com demência.

[00370] Formas exemplificativxras de demência incluem, sem limitação, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência semântica e demência com corpos de Lewy.

[00371] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar a demência. Em algumas modalidades, um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com demência. Demência frontotemporal

[00372] Ademência frontotemporal (FTD) é uma condição resultante da deterioração progressiva do lobo frontal do cérebro. Com o tempo, a degeneração pode avançar para o lobo temporal. Perdendo apenas para a mal de Alzheimer (AD) na prevalência, a FTD responde por 20% dos casos de demência pré-senil. As características clínicas da FTD incluem déficits de memória, anormalidades comportamentais, alterações de personalidade e comprometimentos de linguagem (Cruts, M. & Van Broeckhoven, C., Trends Genet. 24:186-194 (2008); Neary, D., et al., Neurology 51:1546-1554 (1998); Ratnavalli, E., Brayne, C., Dawson, K. & Hodges, J. R., Neurology 58:1615-1621 (2002)).

[00373] Uma porção substancial dos casos de FTD é herdada de maneira autossômica dominante, mas mesmo em uma família, os sintomas podem abranger um espectro, desde FTD com distúrbios comportamentais, até Afasia Progressiva Primária, até Degeneração Ganglionar Corticobasal. A FTD, como a maioria das doenças neurodegenerativas, pode ser caracterizada pela presença patológica de agregados proteicos específicos no cérebro doente. Historicamente,

as primeiras descrições de FTD reconheceram a presença de acúmulos intraneuronais da proteína Tau hiperfosforilada em emaranhados neurofibrilares ou corpos de Pick. Uma função causal para a proteína Tau associada ao microtúbulo foi respaldada pela identificação de mutações no gene que codifica a proteína Tau em várias famílias (Hutton, M,., et al., Nature 393:702-705 (1998). No entanto, a maioria dos cérebros com FTD não mostra acúmulo de Tau hiperfosforilada, mas exibe imunorreatividade à ubiquitina (Ub) e à proteína de ligação ao DNA TAR (TDP43) (Neumann, M,, et al., Arch. Neurol. 64:1388-1394 (2007)). Foi demonstrado que a maioria dos casos de FTD com inclusões de Ub (FTD-U) carrega mutações no gene da Progranulina.

[00374] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar a FTD. Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com FTD. Mal de Alzheimer

[00375] Omalde Alzheimer (AD) é a forma mais comum de demência. Não há cura para a doença, que piora à medida que progride e, eventualmente, leva à morte. Na maioria das vezes, a AD é diagnosticada em pessoas com mais de 65 anos. No entanto, o Alzheimer de início precoce menos prevalente pode ocorrer muito mais cedo.

[00376] Os sintomas comuns do mal de Alzheimer incluem sintomas comportamentais, como dificuldade em lembrar eventos recentes; sintomas cognitivos, confusão, irritabilidade e agressão, alterações de humor, problemas de linguagem e perda de memória de longo prazo. À medida que a doença progride, as funções corporais são perdidas, levando à morte. O mal de Alzheimer se desenvolve por um período desconhecido e variável antes de se tornar totalmente aparente, e pode progredir sem diagnóstico por anos.

[00377] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar o mal de Alzheimer. Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com mal de Alzheimer. Doença de Parkinson

[00378] A doença de Parkinson, que pode ser chamada de parkinsonismo idiopático ou primário, síndrome rígida hipocinética (HRS) ou paralisia agitante, é um distúrbio cerebral neurodegenerativo que afeta o controle do sistema motor. A morte progressiva das células produtoras de dopamina no cérebro leva aos principais sintomas do Parkinson. Na maioria das vezes, a doença de Parkinson é diagnosticada em pessoas com mais de 50 anos. A doença de Parkinson é idiopática (sem causa conhecida) na maioria das pessoas. No entanto, fatores genéticos também desempenham um papel na doença.

[00379] Os sintomas da doença de Parkinson incluem, sem limitação, tremores nas mãos, braços, pernas, mandíbula e face, rigidez muscular nos membros e tronco, lentidão de movimento (bradicinesia), instabilidade — postural, dificuldade para caminhar, problemas neuropsiquiátricos, alterações na fala ou comportamento, depressão, ansiedade, dor, psicose, demência, alucinações e problemas de sono.

[00380] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar a doença de Parkinson Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com doença de Parkinson. Esclerose lateral amiotrófica (ALS)

[00381] Conforme usado neste documento, esclerose lateral amiotrófica (ALS) ou doença do neurônio motor ou doença de Lou

Gehrig são usadas de forma intercambiável e referem-se a uma doença debilitante com etiologia variada caracterizada por fraqueza rapidamente — progressiva, atrofia e fasciculações musculares, espasticidade muscular, dificuldade na fala (disartria), dificuldade em engolir (disfagia) e dificuldade em respirar (dispneia).

[00382] —Foidemonstrado que a Progranulina desempenha um papel na ALS (Schymick, JC et al, (2007) J Neurol Neurosurg Psychiatry.;78:754-6) e protege contra os danos causados por proteínas que causam ALS tal como TDP-43 (Laird, AS et al., (2010). PLoS ONE 5: e13368). Também foi demonstrado que o pro-NGF induz a morte de oligodendrócitos e neurônios corticospinais mediada por p75 após lesão medular (Beatty et al., Neuron (2002), 36, pp. 375-386; Giehl| et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA (2004), 101, pp 6226-30).

[00383] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar a ALS. Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com esclerose lateral amiotrófica. Doença de Huntington

[00384] A doença de Huntington (HD) é uma doença neurodegenerativa hereditária causada por uma mutação autossômica dominante no gene Huntingtina (HTT). A expansão de uma repetição de tripleto de citocina-adenina-guanina (CAG) no gene Huntingtina resulta na produção de uma forma mutante da proteína Huntingtina (Htt) codificada pelo gene. Essa proteína Huntingtina mutante (mHtt) é tóxica e contribui para a morte neuronal. Os sintomas da doença de Huntington costumam aparecer entre 35 e 44 anos, embora possam aparecer em qualquer idade.

[00385] Os sintomas da doença de Huntington incluem, sem limitação, problemas de controle motor, movimentos aleatórios e espasmódicos (coreia), movimentos oculares anormais, equilíbrio comprometido, convulsões, dificuldade em mastigar, dificuldade em engolir, problemas cognitivos, fala alterada, déficits de memória, dificuldades de pensamento, insônia, fadiga, demência, alterações na personalidade, depressão, ansiedade e comportamento compulsivo.

[00386] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar a doença de Huntington (HD). Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com doença de Huntington. Doença tipo Taupatia

[00387] As doenças tipo taupatia, ou tipo tauopatia, são uma classe de doença neurodegenerativa causada pela agregação da proteína tau associada ao microtúbulo no cérebro. O mal de Alzheimer (AD) é a doença tipo taupatia mais conhecida e envolve um acúmulo de proteína tau dentro dos neurônios na forma de emaranhados neurofibrilares insolúveis (NFTs). Outras doenças e distúrbios tipo taupatia incluem paralisia supranuclear progressiva, demência pugilística (encefalopatia traumática crônica), demência frontotemporal e parkinsonismo associado ao cromossomo 17, doença de Lytico-Bodig (complexo parkinsonismo-demência de Guam), demência com predomínio de emaranhados, ganglioglioma e gangliocitoma, meningioangiomatose, panencefalite esclerosante subaguda, encefalopatia por chumbo, esclerose tuberosa, doença de Hallervorden-Spatz, lipofuscinose, doença de Pick, degeneração corticobasal, doença por grãos argirofílicos (AGD), doença de Huntington, demência frontotemporal e degeneração lobar frontotemporal.

[00388] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar a doença tipo taupatia. Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com uma doença tipo taupatia. Esclerose Múltipla

[00389] A esclerose múltipla (MS) também pode ser referida como esclerose disseminada ou encefalomielite disseminada. A MS é uma doença inflamatória na qual as bainhas de mielina ao redor dos axônios do cérebro e da medula espinhal são danificadas, levando à desmielinização e cicatrização, bem como a um amplo espectro de sinais e sintomas. A MS afeta a capacidade das células nervosas do cérebro e da medula espinhal de se comunicarem efetivamente. As células nervosas se comunicam enviando sinais elétricos chamados potenciais de ação por fibras longas chamadas axônios, que estão contidos em uma substância isolante chamada mielina. Na MS, o próprio sistema imunológico do corpo ataca e danifica a mielina. Quando a mielina é perdida, os axônios não podem mais conduzir sinais de maneira efetiva. O início da MS geralmente ocorre em adultos jovens e é mais comum em mulheres. http://en.wikipedia.org/wiki/Multiple sclerosis - cite note- pmid18970977-1

[00390] Os sintomas da MS incluem, sem limitação, alterações na sensação, tais como perda de sensibilidade ou formigamento; ardência ou dormência, tais como hipoestesia e parestesia; fraqueza muscular; clônus; espasmos musculares; dificuldade de se mover; dificuldades com coordenação e equilíbrio, tais como ataxia; problemas na fala, tal como disartria, ou na deglutição, tais como disfagia; problemas visuais, tais como nistagmo, neurite óptica incluindo fosfenos e diplopia; fadiga; dor aguda ou crônica; e dificuldades na bexiga e intestino; comprometimento cognitivo em vários graus; sintomas emocionais de depressão ou humor instável; fenômeno de Uhthoff, que é uma exacerbação dos sintomas existentes devido a uma exposição a temperaturas ambientes mais altas do que as normais; e sinal de Lhermitte, que é uma sensação elétrica que desce pelas costas ao dobrar o pescoço.

[00391] Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição pode prevenir, reduzir o risco e/ou tratar a esclerose múltipla. Em algumas modalidades, a administração de um anticorpo anti-CD33 pode modular uma ou mais atividades de CD33 em um indivíduo com esclerose múltipla. Câncer

[00392] Ainda outros aspectos da presente descrição fornecem métodos para a prevenção, redução do risco ou tratamento de um indivíduo com câncer, compreendendo administrar ao indivíduo em necessidade desta uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti-CD33 isolado da presente descrição. Qualquer um dos anticorpos isolados da presente descrição pode ser usado nesses métodos. Em algumas modalidades, o anticorpo isolado é um anticorpo agonista da presente descrição. Em outras modalidades, o anticorpo isolado é um anticorpo antagonista da presente descrição. Em outras modalidades, o anticorpo isolado é um anticorpo inerte da presente descrição. Em outras modalidades, o anticorpo isolado é um conjugado de anticorpo da presente descrição.

[00393] Conforme descrito neste documento, sabe-se que oO microambiente do tumor é conhecido por conter um infiltrado imunológico heterogêneo, que inclui linfócitos T, macrófagos e células da linhagem mieloide/granulocítica. A presença e atividade de células T reguladoras, células mieloides imunossupressoras incorporadas ao tumor e/ou macrófagos M2 em tumores está associada a um mau prognóstico. Por outro lado, a presença e atividade de células T citotóxicas é benéfica para a terapia do câncer. Espera-se que as terapias que potencializam direta ou indiretamente a atividade das células T citotóxicas e reduzem o número e a atividade das várias células imunossupressoras proporcionem benefício terapêutico significativo. Um estudo pré-clínico seminal mostrou sinergias entre drogas que direcionam células imunossupressoras (por exemplo, anticorpos bloqueadores CSF1/CSF1R) e anticorpos bloqueadores de checkpoint imunológico que ativam células T citotóxicas, indicando que a manipulação de ambos os tipos de células mostra eficácia em modelos de tumores nos quais as terapias individuais são pouco eficazes (Zhu Y; Cancer Res. 15 de setembro de 2014; 74(18):5057-69). Portanto, em algumas modalidades, o bloqueio de CD33, que é expresso em células mieloides, subconjunto de células T e células imunológicas associadas a tumores, pode estimular uma resposta imunológica antitumoral benéfica, resultando em uma resposta imunológica antitumoral terapêutica.

[00394] Em algumas modalidades, os métodos para a prevenção, redução do risco ou tratamento de um indivíduo com câncer incluem ainda a administração ao indivíduo de pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint. Exemplos de anticorpos que se ligam especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint incluem, sem limitação, um anticorpo anti-PD-L1, um anticorpo anti-CTLA-4, um anticorpo anti-PD-L2, um anticorpo anti-PD- 1, um anticorpo anti-B7-H3, um anticorpo anti-B7-H4 e anticorpo anti- HVEM, um anticorpo anti-BTLA, um anticorpo anti- GAL9, um anticorpo anti-TIM3, um anticorpo anti-A2AR, um anticorpo anti-LAG-3, um anticorpo anti-fosfatidilserina e qualquer combinação destes. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint é administrado em combinação com um anticorpo anti-CD33 da presente descrição.

[00395] Em algumas modalidades, um câncer a ser prevenido ou tratado pelos métodos da presente descrição inclui, sem limitação,

câncer de células escamosas (por exemplo, câncer epitelial de células escamosas), câncer do pulmão, incluindo câncer das células pequenas do pulmão, câncer do pulmão de células não pequenas, adenocarcinoma do pulmão e carcinoma escamoso do pulmão, câncer do peritônio, câncer hepatocelular, câncer gástrico ou do estômago, incluindo câncer gastrintestinal e câncer estromal gastrointestinal, câncer pancreático, glioblastoma, câncer cervical, câncer do ovário, câncer do fígado, câncer da bexiga, câncer do carcinoma do trato urinário, hepatoma, câncer de mama, câncer do cólon, câncer do reto, câncer colorretal, câncer do endométrio ou uterino, carcinoma da glândula salivar, câncer do rim ou renal, câncer de próstata, câncer vulvar, câncer da tireoide, carcinoma hepático, carcinoma anal, carcinoma de pênis, melanoma, melanoma de espalhamento superficial, melanoma lentigo maligno, melanoma lentiginoso acral, melanomas nodulares, mieloma múltiplo e linfoma de células B; leucemia linfocítica crônica (LLC); leucemia linfoblástica aguda (LLA); leucemia de células pilosas; leucemia mieloblástica crônica; e distúrbio linfoproliferativo pós-transplante (PTLD), bem como a proliferação vascular anormal associada a facomatoses, edema (tal como o associado com tumores cerebrais), síndrome de Meigs, cérebro, bem como câncer da cabeça e pescoço, e metástases associadas.

Em algumas modalidades, o câncer é câncer colorretal.

Em algumas modalidades, o câncer é selecionado dentre câncer de pulmão de células não pequenas, glioblastoma, neuroblastoma, carcinoma de células renais, câncer de bexiga, câncer de ovário, melanoma, carcinoma da mama, câncer gástrico e carcinoma hepatocelular.

Em algumas modalidades, o câncer é câncer de mama triplo negativo.

Em algumas modalidades, o câncer pode ser um câncer em estágio inicial ou em estágio avançado.

Em algumas modalidades, o câncer pode ser um tumor primário.

Em algumas modalidades, o câncer pode ser um tumor metastático em um segundo sítio derivado de qualquer um dos tipos acima de câncer.

[00396] Em algumas modalidades, os anticorpos anti-CD33 da presente descrição podem ser usados para a prevenção, redução do risco ou tratamento do câncer, incluindo, sem limitação, câncer de bexiga, câncer de mama, câncer de cólon e do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma e câncer de tireoide.

[00397] Em algumas modalidades, a presente descrição fornece métodos para a prevenção, redução do risco ou tratamento de um indivíduo com câncer, administrando ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um anticorpo anti-CD33 da presente descrição.

[00398] Em algumas modalidades, o método inclui ainda administrar ao indivíduo pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula imunológica inibitória de checkpoint, e/ou outra terapia anticâncer padrão ou em investigação. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint é administrado em combinação com um anticorpo anti-CD33 da presente descrição. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint é selecionado dentre um anticorpo anti-PD-L1, um anticorpo anti-CTLA-4, um anticorpo anti-PD-L2, um anticorpo anti- PD-1, um anticorpo anti-B7-H3, um anticorpo anti-B7-H4 e anticorpo anti-HVEM, um anticorpo anti-atenuador de linfócito B e T (BTLA), um anticorpo anti-receptor inibidor de Killer (KIR), um anticorpo anti-GAL9, um anticorpo anti-TIM3, um anticorpo anti-A2AR, um anticorpo anti- LAG-3, um anticorpo anti-fosfatidilserina, um anticorpo anti-CD27 e qualquer combinação destes. Em algumas modalidades, a terapia anticâncer padrão ou em investigação é uma ou mais terapias selecionadas entre radioterapia, quimioterapia citotóxica, terapia direcionada, imatinibe (Gleevecº), trastuzumabe (Herceptinº), transferência de células adotivas (ACT), transferência de células T de receptor de antígeno quimérico (CAR-T), terapia vacinal e terapia de citocinas.

[00399] Em algumas modalidades, o método inclui ainda administrar ao indivíduo pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma citocina inibitória. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma citocina inibitória é administrado em combinação com um anticorpo anti-CD33 da presente descrição. Em algumas modalidades, pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma citocina inibitória é selecionado dentre um anticorpo anti-CCL2, um anticorpo anti-CSF-1, um anticorpo anti-IL-2 e qualquer combinação destes.

[00400] Em algumas modalidades, o método inclui ainda administrar ao indivíduo pelo menos um anticorpo agonístico que se liga especificamente a uma proteína de checkpoint estimulante imunológico. Em algumas modalidades, o pelo menos um anticorpo agonístico que se liga especificamente a uma proteína de checkpoint estimulante é administrado em combinação com o anticorpo anti-CD33 da presente descrição. Em algumas modalidades, pelo menos um anticorpo agonístico que se liga especificamente a uma proteína de checkpoint estimulante é selecionada a partir de um anticorpo agonista anti-CD40, um anticorpo agonista anti-OX40, um anticorpo agonista anti-|- COS, um anticorpo agonista anti-CD28, um anticorpo agonista anti-CD137/4-1BB, um anticorpo agonista anti-CD27, um anticorpo agonista anti-proteína relacionada a TNFR induzida por glucocorticoide GITR, e uma combinação destes.

[00401] Em algumas modalidades, o método inclui ainda administrar ao indivíduo pelo menos uma citocina estimuladora. Em algumas modalidades, pelo menos uma citocina estimuladora é administrada em combinação com o anticorpo anti-CD33 da presente descrição. Em algumas modalidades, a pelo menos uma citocina estimuladora é selecionada a partir de TNF-a, IL-6, IL-8, CRP, membro da família IL- 20, LIF, OSM, CNTF, 11-11, 11-12, 11-17, 1L-8, CRP, IFN-a, IFN-B, I1L-2, I1L-18, GM-CSF, G-CSF e qualquer combinação destes. Kits/Artigos de Fabricação

[00402] A presente descrição também fornece kits e/ou artigos de fabricação contendo um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento, ou um fragmento funcional deste. Kits e/ou artigos de fabricação da presente “descrição podem incluir um ou mais recipientes compreendendo um anticorpo purificado da presente descrição. Em algumas modalidades, os kits e/ou artigos de fabricação incluem ainda instruções para uso de acordo com os métodos desta descrição.

[00403] Em algumas modalidades, essas instruções compreendem uma descrição da administração do anticorpo anti-CD33 descrito neste documento para a prevenção, redução do risco ou tratamento de um indivíduo com uma doença, distúrbio ou lesão selecionada a partir de demência, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença de Creutzfeldt-Jakob, hidrocefalia de pressão normal, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença tipo taupatia, doença de Nasu-Hakola, acidente vascular cerebral, trauma agudo, trauma crônico, lúpus, colite aguda e crônica, artrite reumatoide, cicatrização de feridas, doença de Crohn, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa, obesidade, malária, tremor essencial, lúpus do sistema nervoso central, doença de Behcet, doença de Parkinson, demência com corpos de Lewy, atrofia de múltiplos sistemas, síndrome de Shy-Drager, paralisia supranuclear progressiva,

degeneração ganglionar corticobasal, encefalomielite disseminada aguda, distúrbios granulomatosos, sarcoidose, doenças do envelhecimento, convulsões, lesão medular, lesão cerebral traumática, degeneração macular relacionada ao envelhecimento, glaucoma, retinite pigmentosa, degeneração retiniana, infecção do trato respiratório, sepse, infecção ocular, infecção sistêmica, lúpus, artrite, esclerose múltipla, baixa densidade óssea, osteoporose, osteogênese, doença osteopetrótica, doença óssea de Paget, e câncer incluindo câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), mieloma múltiplo, policitemia vera, trombocitose — essencial, — mielofibrose — primária ou idiopática, mieloesclerose primária ou idiopática, tumores derivados de mieloides, tumores que expressam CD33, câncer de tireoide, infecções, herpes do CNS, infecções parasitárias, infecção por tripanossoma, infecção por Cruzi, infecção por Pseudomonas aeruginosa, infecção por Leishmania donovani, infecção por Streptococcus do grupo B, infecção por Campylobacter jejuni, infecção por Neisseria meningiditis, HIV tipo |, e Haemophilus influenza, de acordo com quaisquer métodos dessa descrição.

[00404] Em algumas modalidades, as instruções compreendem uma descrição de como detectar a proteína CD33, por exemplo, em um indivíduo, em uma amostra de tecido ou em uma célula. O kit e/ou artigo de fabricação pode compreender ainda uma descrição da seleção de um indivíduo adequado para tratamento com base na identificação se esse indivíduo tem a doença e o estágio da doença.

[00405] Em algumas modalidades, os kits e/ou artigos de fabricação podem incluir ainda outro anticorpo da presente descrição (por exemplo, pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma molécula inibidora de checkpoint, pelo menos um anticorpo que se liga especificamente a uma citocina inibitória e/ou pelo menos um anticorpo agonístico que se liga especificamente a uma proteína de checkpoint estimulante) e/ou pelo menos uma citocina estimuladora. Em algumas modalidades, os kits e/ou artigos de fabricação podem ainda incluir instruções para o uso do anticorpo e/ou citocina estimuladora em combinação com um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento, instruções para o uso de um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento em combinação com um anticorpo e/ou citocina estimuladora, ou instruções para usar um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento e um anticorpo e/ou citocina estimuladora, de acordo com qualquer método desta descrição.

[00406] Geralmente, as instruções incluem informações sobre dosagem, cronograma de dosagem e via de administração para o tratamento pretendido. Os recipientes podem ser doses unitárias, embalagens em lote (por exemplo, embalagens multi-dose) ou doses de sub-unidade. As instruções fornecidas nos kits e/ou artigos de fabricação da presente descrição são normalmente instruções escritas num rótulo ou folheto informativo (por exemplo, uma folha de papel incluída no kit), mas instruções legíveis por máquina (por exemplo, instruções transportadas em um disco de armazenamento magnético ou ótico) também são aceitáveis.

[00407] O rótulo ou folheto informativo indica que a composição é usada para o tratamento, por exemplo, uma doença da presente descrição. As instruções podem ser fornecidas para a prática de qualquer um dos métodos descritos neste documento.

[00408] Os kits e/ou artigos de fabricação desta descrição estão em embalagens adequadas. Embalagem adequada inclui, mas não está limitada às ampolas, garrafas, jarros, embalagens flexíveis (por exemplo, Mylar selado ou sacos de plástico), e semelhantes. Também estão contempladas as embalagens para o uso em combinação com um dispositivo específico, como um inalador, dispositivo de administração nasal (por exemplo, um atomizador) ou um dispositivo de infusão tal como uma minibomba. Os kits e/ou artigos de fabricação podem também ter uma porta de acesso estéril (por exemplo o recipiente pode ser um saco de solução intravenosa ou uma ampola possuindo uma rolha perfurável por uma agulha de injeção hipodérmica). O recipiente pode também ter uma porta de acesso estéril (por exemplo, o recipiente pode ser um saco de solução intravenosa ou uma ampola possuindo uma rolha perfurável por uma agulha de injeção hipodérmica). Pelo menos um agente ativo na composição é um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento. O recipiente pode ainda compreender um segundo agente farmaceuticamente ativo.

[00409] Kits e/ou artigos de fabricação podem opcionalmente fornecer componentes adicionais, como tampões e informações interpretativas. Normalmente, o kit compreende um recipiente e um rótulo ou folheto informativo (s) sobre ou associado com o recipiente. Usos Diagnósticos

[00410] Os anticorpos isolados da presente descrição (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento) também têm utilidade diagnóstica. Portanto, esta descrição fornece métodos para uso de anticorpos desta descrição, ou fragmentos funcionais destes, para fins de diagnóstico, tais como a detecção de proteína CD33 em um indivíduo ou em amostras de tecido derivadas de um indivíduo.

[00411] Em algumas modalidades, o indivíduo é um humano. Em algumas modalidades, o indivíduo é um paciente humano que sofre ou corre risco de desenvolver uma doença, distúrbio ou lesão da presente descrição. Em algumas modalidades, os métodos de diagnóstico envolvem detectar uma proteína CD33 em uma amostra biológica, tal como um espécime de biópsia, um tecido ou uma célula. Um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento é contatado com a amostra biológica e o anticorpo ligado ao antígeno é detectado. Por exemplo, um espécime de biópsia pode ser corado com um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento, a fim de detectar e/ou quantificar células associadas à doença. O método de detecção pode envolver a quantificação do anticorpo ligado ao antígeno. A detecção de anticorpos em amostras biológicas pode ocorrer com qualquer método conhecido na técnica, incluindo microscopia de imunofluorescência, imunocitoquímica, — imuno-histoquímica, ELISA, análise FACS, imunoprecipitação ou tomografia por emissão de micro-positrons. Em certas modalidades, o anticorpo é radiomarcado, por exemplo, com **F e, subsequentemente, detectado utilizando análise de tomografia por emissão de micro-positrons. A ligação de anticorpos também pode ser quantificada em um paciente por técnicas não invasivas, como tomografia = por emissão de pósittons (PET) tomografia computadorizada por raios-X, tomografia computadorizada por emissão de fóton único (SPECT), tomografia computadorizada (CT) e tomografia axial computadorizada (CAT).

[00412] Em outras modalidades, um anticorpo isolado da presente descrição (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento) pode ser usado para detectar e/ou quantificar, por exemplo, micróglia em um espécime de cérebro retirado de um modelo de doença pré-clínico (por exemplo, um modelo de doença não humana). Assim, um anticorpo isolado da presente descrição (por exemplo, um anticorpo anti-CD33 descrito neste documento) pode ser útil na avaliação da resposta terapêutica após o tratamento em um modelo para uma doença ou lesão do sistema nervoso, tal como demência frontotemporal,

mal de Alzheimer, demência vascular, convulsões, distrofia retiniana, doenças vasculares ateroscleróticas, doença de Nasu-Hakola, ou esclerose múltipla, em comparação com um controle.

[00413] A presente descrição será compreendida mais amplamente pela referência aos exemplos a seguir. Eles não devem, no entanto, ser interpretados como limitantes do escopo da presente descrição. Todas as citações ao longo da descrição são expressamente incorporadas a este documento por referência.

EXEMPLOS Exemplo 1: Humanização de um anticorpo anti-CD33 de murino e medições de afinidade de tais variantes humanizadas

[00414] O objetivro do exemplo a seguir foi gerar variantes humanizadas de um anticorpo CD33 de camundongo precursor e determinar as afinidades dos anticorpos humanizados para CD33. O anticorpo de camundongo anti-CD33 precursor continha uma região variável! de cadeia pesada compreendendo a sequência de

EVALAASGPELVKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVKLSHGKSLE

WIGFIYPSNGITGYNQKFKNKATLTVDNSSSTAYMELRSLTSEDSAVY YCARSTVDYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ ID Nº: 103), e uma região variável! de cadeia leve compreendendo a sequência de

DIVLTASPASLAVSLGQARATMSCRASQSVSTSTYSYMHWYQQKPGQ

PPKLLIKYASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDTATYYCQH SWEIPLTFGAGTKLELK (SEQ ID Nº: 104). O anticorpo CD33 de camundongo acima do qual contém uma região variável da cadeia pesada compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 103 e a região variável da cadeia leve compreendendo a sequência da SEQ ID Nº: 104 é o anticorpo murino anti-CD33 2F5,1, que é divulgado em WO 2016/201388.

[00415] O anticorpo CD33 precursor de camundongo (anticorpo murino anti-CD33 2F5,1) foi humanizado enxertando as CDRs do anticorpo precursor de camundongo em estruturas principais de linha germinativa humana mais próximas em sequência ao anticorpo de camundongo. Anticorpos com uma ou mais mutações reversas de estrutura principal também foram gerados. No total, 88 anticorpos humanizados foram produzidos. Um anticorpo quimérico, que continha a região variável da cadeia pesada (SEQ ID Nº: 103) e a região variável da cadeia leve (SEQ ID Nº: 104) do anticorpo anti-CD33 precursor de camundongo, também foi produzido e utilizado como um comparador (Chimeric Ab). Também foi feita uma variante do Ab quimérico, Ab quimérico nº 2, em que uma mutação foi introduzida na VAH-FR3 para remover um sítio de glicosilação N-ligado previsto. O Ab quimérico nº 2 continha a região variável da cadeia pesada

EEVOLQQASGPELVKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVKLSHGKSLE

WIGFIYPSNGITGYNQKFKNKATLTVDTSSSTAY MELRSLTSEDSAVY YCARSTVDYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ |D Nº: 167), a região variável da cadeia leve de SEQ NO: 104.

[00416] As afinidades (Kp) dos anticorpos humanizados para CD33 humana foram medidas para cada anticorpo por Interferometria de Biocamada em um ensaio ForteBio de acordo com técnicas padrão (Estep et al. (2013) MAbs 5(2): 270-8). Resumidamente, os Fabs foram gerados para cada anticorpo por digestão com papaína e as afinidades monoméricas dos anticorpos para CD33 foram medidas da seguinte forma: a CD33 humana foi imobilizada na ponta do sensor e foi incubada em tampão de ensaio contendo cada Fab a 100 nM por 180 segundos para medir a taxa de associação, após o qual as pontas foram transferidas para o tampão de ensaio por 180 segundos para medir a taxa de dissociação. O ensaio foi realizado à temperatura ambiente.

[00417] A maioria dos 88 anticorpos humanizados exibiu afinidades que estavam dentro de 3 vezes o anticorpo precursor de camundongo (dados não mostrados e na Tabela 1). Os dados para 8 desses anticorpos humanizados (AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 e AB-H66) são mostrados na Tabela 1 abaixo. Tabela 1: afinidade monovalente para CD33 de anticorpos humanizados

[00418] Os parâmetros de afinidade para 10 dos 88 anticorpos humanizados (AB-H1, AB-H3, AB-H6, AB-H11, AB-H22, AB-H24, AB- H26, AB-H63, AB-H64 e AB-H71) foram medidos em um experimento separado por uma técnica mais sensível, ressonância plasmônica de superfície (BlAcore), e comparados com o Ab Quimérico e Ab Quimérico nº2. As medições do BlAcore foram realizadas da seguinte forma: CD33 humana foi imobilizada na superfície de um chip C1 e os Fabs foram injetados por 300 s para monitorar a associação, seguidos por um fluxo de 900 s em tampão contínuo para monitorar a dissociação. Os Fabs foram medidos em 5 concentrações: uma alta concentração de 27 nM e diluições em série de 3 vezes. Os resultados são mostrados na Tabela 2 abaixo. Os 10 anticorpos humanizados tinham afinidades variando de 1,13 nM a 6,02 nM e estavam dentro de 4 vezes o Ab quimérico.

Tabela 2: afinidade monovalente para CD33 de anticorpos humanizados Fab Ko (M) Kon Kotr Fold . monovalente (1/Ms) (1s) Change de Anticorpo Ab quimérico Ab quimérico nº2 2,89E-09 9,91E+05 | 2,86E-03 AB-H1 1,58E-09 —|1,18E+06 | 1,86E-03 AB-H3 1,13E-09 —|1,23E+06 | 1,40E-03 AB-H6 1,37E-09 —[1,10E+06| 1,51E-03 AB-H11 1,33E-09 —|1,22E+06| 1,62E-03 AB-H22 2,63E-09 —|6,90E+05| 1,82E-03 Exemplo 2: regulação negativa de CD33 da superfície celular usando os anticorpos humanizados

[00419] O objetivo do exemplo a seguir foi testar se os anticorpos anti- CD33 humanizados (como descrito no Exemplo 1) foram capazes de reduzir o nível de CD33 na superfície celular em células dendríticas humanas primárias.

[00420] Os monócitos foram isolados do sangue de doadores humanos saudáveis usando o coquetel de anticorpos para isolamento de monócitos RosetteSep'Y (StemCell Technologies). Os monócitos isolados foram diferenciados em células dendríticas com 100 ng/mL de GM-CSF e 100 ng/mL de IL-4 (Peprotech). As células dendríticas foram plaqueadas em placas de 24 poços a 200.000 células por mL, ou em placas de 6 poços a 500.000 células em 2 mLs de RPM! suplementado com 10% de Hyclone FBS, glutamina 2 mM, pen/estrep e aminoácidos não essenciais. Anticorpos anti-CD33, ou anticorpos de controle de isotipo, foram adicionados aos poços e foram incubados por 24 horas a 37ºC com 5% de CO». A expressão do receptor da superfície celular foi detectada por análise FACS de acordo com técnicas padrão. Resumidamente, as células foram incubadas com o clone anti-CD33- FITC HIM3-4 por 30 minutos em gelo no escuro. As células foram lavadas duas vezes em tampão FACS (PBS + 2% FBS, 2 mM EDTA) e a citometria de fluxo foi realizada em um BD FACS Canto. Os dados foram analisados usando o software FlowJo (Ashland, OR) e a expressão da superfície de CD33 foi calculada como um percentual da expressão do receptor em relação à expressão na ausência de anticorpo.

[00421] Todos os 88 anticorpos humanizados foram capazes de reduzir o nível de CD33 na superfície celular; no entanto, eles exibiram uma variedade de potências, com muitos anticorpos sendo muito menos eficazes que o anticorpo precursor na diminuição da CD33 na superfície celular. Isso foi surpreendente, pois as afinidades dos anticorpos estavam dentro de 3 a 4 vezes o anticorpo precursor. De todos os anticorpos testados, o AB-H64 foi o mais potente. Uma comparação de dez dos anticorpos humanizados (AB-H1, AB-H3, AB-H6, AB-H11, AB- H22, AB-H24, AB-H26, AB-H63, AB-H64 e AB-H71) é mostrado na Figura 1.

[00422] A concentração semi-máxima (ECso) e a regulação negativa máxima de cada um desses anticorpos estão resumidas na Tabela 3 abaixo. Apesar de todos os anticorpos possuírem afinidades de ligação semelhantes, eles exibiram uma variação na capacidade de diminuir o nível de CD33 na superfície celular, e o AB-H64 foi o anticorpo mais potente. Assim, características além da afinidade contribuem para a capacidade de um anticorpo de internalizar seu receptor na superfície celular.

Tabela 3: Regulação negativa da CD33 de superfície celular com anticorpos humanizados Regulação Negativa Regulação Negativa Anticorpo de Receptor (ECs0) Máxima (% de CD33 me | ee ns

[00423] Enquanto os anticorpos humanizados exibiram uma variedade de potências em comparação com o anticorpo precursor de camundongo para diminuir os níveis de CD33 na superfície celular, oito dos anticorpos humanizados mostraram uma potência inesperadamente aumentada sobre o anticorpo comparador. Os dados para esses 8 anticorpos são mostrados na Tabela 4 abaixo. Desses anticorpos, AB-H63 e AB-H64 foram os mais potentes na regulação negativa da CD33 de superfície celular.

Tabela 4: Regulação negativa da CD33 de superfície celular com anticorpos humanizados Anticorpo (ECr5o) (PM):

[00424] O Ab quimérico nº2 também foi avaliado quanto à sua capacidade de reduzir a CD33 na superfície celular. Os dados estão resumidos na Tabela 3 acima. Comparado com o anticorpo precursor, o Ab Quimérico, Ab Quimérico nº2 foi inesperadamente menos potente na regulação negativa de CD33. A única diferença entre estes anticorpos é a presença de um sítio de glicosilação N-ligado em VH-FR3 no Ab Quimérico. No AB-HG64, o sítio de glicosilação N-ligado também é retido na VH-FR3, o que sugere que a glicosilação Fab neste anticorpo pode contribuir para sua potência na internalização de CD33. Exemplo 3: Maturação de afinidade de anticorpos humanizados e caracterização de tais anticorpos com maturação de afinidade

[00425] O objetivo deste exemplo foi gerar e caracterizar anticorpos anti-CD33 com maturação de afinidade.

[00426] A maturação de afinidade foi realizada em três dos anticorpos humanizados, AB-H14, AB-H63 e AB-H64, por exibição de levedura. Resumidamente, os resíduos nos polinucleotídeos que codificam as cadeias pesada ou leve dos três anticorpos humanizados foram mutagenizados e expressos em leveduras. As células de levedura que expressam os mutantes que mostraram ligação melhorada à proteína CD33 humana recombinante solúvel foram selecionadas através de várias rodadas de classificação FACS.

[00427] No total, foram selecionados 11 clones com maturação de afinidade da linhagem AB-H14, 15 clones com maturação de afinidade da linhagem AB-H63 e 8 clones da linhagem AB-H64. As sequências HVR da região variável da cadeia pesada dos anticorpos estão representadas nas Tabelas 9A a 9C abaixo. As sequências HVR da região variável da cadeia leve dos anticorpos estão representadas nas Tabelas 10A a 10C abaixo. As regiões de estrutura principal de cadeia pesada dos anticorpos estão representadas nas Tabelas 11A a 11D abaixo. As regiões de estrutura principal de cadeia leve dos anticorpos estão representadas nas Tabelas 12A a 12D abaixo. As sequências da região variável de cadeia pesada dos anticorpos estão representadas na Tabela 13 abaixo. As sequências de região variável de cadeia leve dos anticorpos estão representadas na Tabela 14 abaixo.

[00428] As afinidades de AB-H64 e suas variantes (Tabela 5) para CD33 humana foram medidas pelo ensaio Fortebio de acordo com o método descrito no Exemplo 1 acima.

Tabela 5A: Medições de afinidade do ensaio Fortebio do anticorpo humanizado AB-HG64, e suas variantes, para CD33 humana Afinidade Variação da melhora de Anticorpo Monovalente, Ko | afinidade em relação ao Ab mm ee to [AR geo

[00429] Os anticorpos com maturação de afinidade derivados do anticorpo humanizado AB-H64 (AB-64.1 a AB-64.8) apresentaram melhorias de afinidade de 3 a 12 vezes, conforme medido por ForteBio, como mostrado na Tabela 5A.

[00430] Em uma experiência separada, conforme determinado pela técnica BlAcore mais sensível, os parâmetros de afinidade dos anticorpos com maturação de afinidade derivados do anticorpo humanizado AB-H64 foram medidos e comparados diretamente com os do Ab quimérico, de acordo com o método descrito no Exemplo 1 acima. Comparados ao Ab quimérico, os anticorpos com maturação de afinidade exibiram melhorias de 15 a 443 vezes na afinidade, e comparados ao AB-H64, mostraram melhorias de 20 a 586 vezes na afinidade, mostrados na Tabela 5B.

Tabela 5B: Medições de afinidade BlAcore do anticorpo humanizado AB-HG64, e suas variantes, para CD33 humana Fab Ko (M) Kon Korr Fold Change Fold Change Anticorpo monovalente (1/Ms) (1/s) para Ab para AB-H64 quimérico [Peas | Taseos asseros | rea | [AR | ares roseros | age | o

[00431] Os anticorpos com maturação de afinidade foram caracterizados por sua capacidade de diminuir os níveis de CD33 na superfície celular. A concentração eficaz semi-máxima (ECso) de AB- H64 e suas variantes (Tabela 6A) para diminuir CD33 em células dendríticas humanas primárias foi medida de acordo com o método descrito no Exemplo 2 acima. Tabela 6A: Regulação negativa da CD33 de superfície celular com AB-H64 e suas variantes com maturação de afinidade Regulação Negativa de Receptor, (ECso) (pM):

[00432] A maioria dos anticorpos com maturação de afinidade exibiu melhora substancial na potência em relação aos anticorpos precursores. Inesperadamente, AB-64.1, que não era o anticorpo de maior afinidade, foi o mais eficaz na redução dos níveis de CD33.

[00433] Em um experimento separado, duas variantes que apresentaram melhorias modestas de afinidade de 20 a 50 vezes, AB-

64.1 e AB-64.2, e duas variantes que tiveram melhoras de afinidade maiores, 215 a 340 vezes, AB-64.6 e AB-64.7, foram comparados diretamente com o anticorpo humano precursor, AB-H64, e ao AB quimérico por sua capacidade de reduzir os níveis de CD33 na superfície celular, de acordo com o método descrito no Exemplo 2 acima. Os dados são mostrados na Figura 2 e a concentração efetiva semi-máxima (ECso) e a redução máxima de CD33 estão resumidas na Tabela 6B. Tabela 6B: Regulação negativa da superfície celular de CD33 com anticorpos humanizados Anticorpo Receptor, (ECso) (PM): de CD33 restante)

[00434] Inesperadamente, para os anticorpos da linhagem H64, os anticorpos CD33 com maior afinidade não foram os mais eficazes na redução máxima dos níveis de CD33 na superfície celular. Dos anticorpos com maturação de afinidade, o AB-64.1 e o AB-64.2, que apresentaram melhorias moderadas na afinidade, apresentaram as melhores diminuições máximas de CD33. Todos os anticorpos amadurecidos por afinidade exibiram potência aumentada na redução da CD33 de superfície celular em comparação com o Ab quimérico ou o anticorpo humanizado AB-H64. De todos os anticorpos com maturação de afinidade, o AB-64.1 (bem como sua variante AB-64.1.2) exibiu consistentemente a melhor potencialização de potência em relação ao Ab quimérico e ao anticorpo humanizado AB-H64. Exemplo 4: Avaliando os valores de afinidade e EC5o para anticorpos com modificações adicionais de aminoácidos.

[00435] O objetivo deste exemplo foi determinar se modificações adicionais de aminoácidos projetadas para remover possíveis sequências de responsabilidade de fabricação impactaram a afinidade dos anticorpos para CD33 ou sua capacidade de reduzir os níveis de CD33 na superfície celular.

[00436] Modificações adicionais de aminoácidos foram geradas no AB-64.1, e as afinidades dos anticorpos resultantes (AB-64.1.1 a AB-

64.1.15) foram medidas pelo ensaio ForteBio (Ver os métodos do Exemplo 1) (Tabela 7 abaixo). Os parâmetros de afinidade de dois dos anticorpos, 64.1.2 e 64.1.8, foram medidos em um experimento separado pelo BlAcore, onde foram diretamente comparados ao anticorpo precursor, AB-64.1, anticorpo humanizado precursor AB-H64 e o Ab quimérico. Os dados são mostrados na Tabela 5B acima.

Tabela 7: medições de afinidade para variantes modificadas do AB-64.1

[00437] Amodificação da sequência HVR-H2 de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) para FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119), FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118) ou FIYPSNVITG (SEQ ID Nº: 120) não teve um impacto substancial na afinidade, pois os valores medidos de Kp dos anticorpos que continham essas alterações estavam dentro de 3 vezes o anticorpo precursor AB-64.1.

[00438] A modificação da sequência de VH FR3 de YAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 12) a YAQKFQGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 18), YAQKFQGRATLTVDQSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ |D

Nº: 17), YAQKFOGRATLTVDISTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 16), ou YAQKFAQGRATLTVDNPTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 19) também não tiveram um impacto substancial na afinidade, pois os valores medidos de Kp dos anticorpos que continham essas alterações também estavam dentro de 3 vezes o anticorpo precursor AB-64.1.

[00439] Os anticorpos com as modificações adicionais de aminoácidos também foram testados quanto à sua capacidade de reduzir os níveis de CD33 na superfície celular. A Tabela 8 mostra a porcentagem de CD33 restante na superfície das células dendríticas humanas primárias após tratamento com AB-64.1 e suas variantes a 0,16 ug/mL por 24 horas. Tabela 8: Regulação negativa da CD33 de superfície celular com AB-64.1 e suas variantes Anticorpo anticorpo 0,16ug/mL)

[00440] A modificação da sequência HVR-H2 de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) a FIVPSNRITG (SEQ ID Nº: 119), FIYPSNQITG (SEQ |D Nº: 118) ou FIYPSNVITG (SEQ ID Nº: 120) não teve um impacto substancial na capacidade dos anticorpos de diminuir a CD33 na superfície celular, já que a porcentagem de CD33 restante na superfície celular após a incubação com os anticorpos contendo essas modificações estava dentro de 5% do anticorpo precursor AB-64.1.

[00441] A modificação da sequência de VH FR3 de YAQKFAQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 12) a YAQKFOGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 18), YAQKFAQGRATLTVDQASTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 17), YAQKFOGRATLTVDISTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 16), ou YAQKFAQGRATLTVDNPTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 19) também não tiveram um impacto substancial na capacidade dos anticorpos de diminuir a CD33 da superfície celular, pois a porcentagem de CD33 restante na superfície celular após a incubação com os anticorpos contendo essas modificações estava dentro de 5% do anticorpo precursor AB-64.1.

[00442] Em uma experiência separada, a capacidade de duas das variantes, AB-64.1.2 e AB-64.1.8, de reduzir a CD33 foi avaliada e comparada com o anticorpo precursor AB-64.1, anticorpo precursor humanizado AB-H64 e o Ab quimérico. A Tabela 6B acima mostra a concentração efetiva semi-máxima (ECso) e a redução máxima de CD33 na superfície das células dendríticas humanas primárias após 24 horas de exposição aos anticorpos.

[00443] A modificação da sequência HVR-H2 de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115) a FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119) ou FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118) não teve um impacto substancial na capacidade dos anticorpos de diminuir a CD33 de superfície celular, já que a EC5o dos anticorpos contendo essas modificações estava dentro de 2 vezes o anticorpo precursor AB-64.1 e a diminuição máxima de CD33 na superfície celular após a incubação com anticorpos contendo essas modificações estava dentro de 5% do anticorpo precursor AB-64.1.

[00444] A modificação da sequência — VH FR3 de YAQKFAQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 12) a YAQKFOGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 18) também não teve um impacto substancial na capacidade dos anticorpos de diminuir a CD33 da superfície celular, pois a ECso de anticorpos contendo essas modificações estava dentro de 2 vezes do anticorpo precursor AB-64.1 e a diminuição máxima de CD33 na superfície celular após a incubação com anticorpos contendo essas modificações estava dentro de 5% do anticorpo precursor AB-

64.1.

[00445] O AB-64.1.2 apresentou maior potência e maior redução máxima na superfície celular CD33 em comparação com o AB-64.1.8. No AB-64.1.2, o sítio de glicosilação N-ligado potencial em VH-FR3 reteve, enquanto no AB-64.1.8 foi removido, sugerindo que a glicosilação Fab pode contribuir para a capacidade desse anticorpo de diminuir a CD33 de superfície celular. Em uma comparação com seus anticorpos de linhagem precursora, o AB-64.1.2 tinha potência semelhante na diminuição da CD33 de superfície celular em comparação com o anticorpo precursor AB-64.1, mostrou um aumento de potência em 1,5 vezes em comparação com o anticorpo humanizado precursor AB-H64 e exibiu um aumento de 4,6 vezes na potência em comparação com o Ab quimérico.

Tabela 9A: Sequências HVR H1 de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-H63; AB-63.6; AB-63.7; 105 AB-63.13; AB-63.14; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-64.3; AB-64.4; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-

64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-

64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-

64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-

64.1.14; e AB-64.1.15 GYTFTDYNLH AB-14.1 GATFTDYNFH AB-14.3; AB-14.4; AB-14.5; AB-14.6; 108 AB-14.7; AB-14.8; AB-14.9; AB-14.10; AB-14.11; AB-63.4; AB-63.15; AB- GYTFTDYNYH

63.16; AB-63.17; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.7; e AB-64.8 AB-63.11 e AB-63.12 GYTFTDYNFH AB-63.18 GYTHTDYNLH Fórmula | GX1X2X3TDYNX:H 152 X1éY,AouV X2 é TouA X;éF,E ou H XéL,F,YouN

Tabela 9B: Sequências HVR H2 de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; AB- | FIYPSNGITG 115

14.4; AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; AB-14.8; AB-14.9; AB-14.10; AB-14.11; AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6; AB-63.7; AB-

63.8; AB-63.9; AB-63.10; AB-63.12; AB-

63.14; AB-63.15; AB-63.16; AB-63.17; AB-

63.18; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-

64.3; AB-64.4; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6 e AB-64.1.7 AB-63.11 FIYPANGITG AB-63.13 FIYPSNGIRG AB-64.1.1; AB-64.1.8; e AB-64.1.9 FIYPSNQITG AB-64.1.2; AB-64.1.10; AB-64.1.11, e AB- | FIVPSNRITG 119

64.1.12 AB-64.1.3; AB-64.1.13; AB-64.1.14 6 AB- | FIYPSNVITG 120

64.1.15 Fórmula |! FIYPXINX2IX;G 153 XéSouA X2éG,Q,RouV Xsé TouR

Tabela 9C: Sequências HVR H3 de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-14.4; AB-H63; AB-63.4; AB-63.6; AB- 121

63.7; AB-63.8; AB-H64 e AB-64.2 STVDYFDY AB-14.1; AB-14.3; AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; AB- 122

14.8; AB-14.9; AB-14.10; AB-63.5; AB-63.9; AB-

63.10; AB-63.11; AB-63.13; AB-63.14; AB-63.16; AB-

63.17; AB-63.18; AB-64.1; AB-64.4; AB-64.5; AB-

SDVDYFDY

64.6; AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-

64.1.3; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-64.1.11; AB-

64.1.12; AB-64.1.13; AB-64.1.14; e AB-64.1.15 AB-14.2 e AB-64.3 SFVDYFDY AB-14.11 SSVDYFDY AB-63.12 STVDYFDD Fórmula Ill SX:VDYFDX?2 154 XéT,D,FouS XéY,DouLl

Tabela 10A: Sequências HVR L1 de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-14.1; AB-H63; AB-63.4; AB- | RASOSVSTSTYSYMH 127

63.5; AB-63.13; AB-63.18; AB-H64; AB-

64.1; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB-

64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-

64.1.14 e AB-64.1.15 AB-14.6; AB-14.7; AB-14.8; AB-14.9; AB- | RASOSVGTSTYSYMH 128

64.5 e AB-64.7 AB-14.10 RASQSVSASTYSYMH AB-14.2, AB-14.3; AB-14.4; AB-14.5; AB- | RASQDVSTSTYSYMH 130

14.11; AB-63.6; AB-63.7; AB-63.8; AB-

63.9; AB-63.10; AB-63.11; AB-63.12; AB-

63.15; AB-64.3; AB-64.4; AB-64.6 e AB-

64.8 AB-63.14 KASQDVSTSTYSYMH AB-63.16 RASQSVHTSTYSYMH AB-63.17 RGSQSVSTSTYSYMH MocpvaTanátas Fórmula IV XIX2SQX3VXAXsSSTYSYM 155

H X1éRouK X2é A GouV X;sé SouD X:éS,GouH Xsé Tou A

Tabela 10B: Sequências HVR L2 de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 Lo AE RE sn | AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.5; AB-14.7; YASNLES 135 AB-14.10; AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6; AB-63.8; AB-63.10; AB-63.11; AB-63.13; AB-

63.14; AB-63.16; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-

64.5; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-

64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-64.1.11; AB-

64.1.12; AB-64.1.13; AB-64.1.14 e AB-64.1.15 Fórmula V YVXIX2X3XaXsS 156 X:éA VouE X2éS,VouF X:é N, A, You F XaéLouV Xs é E, G ou N

Tabela 10C: Sequências HVR L3 de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; AB-14.4; QHSWEIPLT 146 AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; AB-14.8; AB-14.9; AB-14.10; AB-14.11; AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6, AB-63.8; AB-63.11; AB-63.14; AB-

63.15; AB-63.16; AB-63.17; AB-63.18; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-

64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-64.1.8; AB-

64.1.9; AB-64.1.10; AB-64.1.11; AB-64.1.12; AB-

64.1.13; AB-64.1.14 e AB-64.1.15 AB-63.7 QHSWEIPLE AB-63.9; AB-64.3 e AB-64.4 EHSWEIPLT AB-63.10 QHSWELPLT AB-63.12 QHSWAIPLT AB-63.13 e AB-64.7 QHSEEIPLT Fórmula VI XIHSX2X3X4aPLXs5 157 X1éQouE XéWouE X3é E OU A XaélouL XséTouE

Tabela 11A: Sequências de estrutura principal 1 de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 A o VARA [ssainNs] AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB- QVALVOASGAEV 2

14.3; AB-14.4; AB-14.5; AB-14.6; KKPGASVKVSC AB-14.7; AB-14.8; AB-14.9; AB- KAS

14.10; AB-14.11; AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6; AB-63.7; AB-

63.9; AB-63.10; AB-63.11; AB-

63.12; AB-63.13; AB-63.15; AB-

63.16 e AB-63.17 AB-63.8; AB-63.14 e AB-63.18 QVQALVOSGAEV 3

KKPGSSVKVSC

KAS AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB- QVQAQLVOSGAEV 4

64.3; AB-64.4; AB-64.5; AB-64.6; KKPGASVKISCK AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.1; AB- AS

64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-

64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-

64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-

64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-64.1.14 e AB-64.1.15 Fórmula VII QVQAQLVOAOSGAEV 158 KKPGX1SVKXX:S

CKAS X:éAÃAouS X2éVoul

Tabela 11B: Sequências de estrutura principal 2 de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 [am | = Lex | AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; AB-14.4; WVRQ 5 AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; AB-14.8; AB-14.9; APGQ AB-14.10; AB-14.11; AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; | GLEWI AB-63.6; AB-63.7; AB-63.8; AB-63.9; AB-63.10; |G AB-63.11; AB-63.12; AB-63.13; AB-63.14; AB-

63.15; AB-63.16; AB-63.17; AB-63.18; AB-HG64; AB-64.1; AB-64.2; AB-64.3; AB-64.4; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-

64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-

64.1.6; AB-64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB-

64.1.10; AB-64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-64.1.14 e AB-64.1.15 Tabela 11C: Sequências de estrutura principal 3 de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 a RE O ssaibie AB-H14; AB-14.4; AB-14.5; AB- | YAQKFOGRVTMTVDTSTSTVY

14.6; AB-14.7; AB-14.8; AB- MELSSLRSEDTAVYYCAR

14.9; AB-14.10; AB-14.11; AB- H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-

63.6; AB-63.7; AB-63.9; AB-

63.10; AB-63.13; AB-63.14; AB-

63.15; AB-63.16; AB-63.17 e AB-63.18 AB-14.1 YAQDFOGRVTMTVDTSTSTVY 7

MELSSLRSEDTAVYYCAR AB-14.2 e AB-63.8 YAQKFQDRVTMTVDTSTSTVYM

ELSSLRSEDTAVYYCAR AB-14.3 SAQKFQGRVTMTVDTSTSTVY

MELSSLRSEDTAVYYCAR

FE IADE pr

E ESSA AB-63.12 YAQKFTGRVTMTVDTSTSTVYM E ra ARTE AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB- | YAQGKFOGRATLTVDNSTSTAYM 12

64.4; AB-64.6; AB-64.7; AB- ELSSLRSEDTAVYYCAR

64.1.1; AB-64.1.2 e AB-64.1.3 AB-64.3 YAEKFEGRATLTVDNSTSTAYM 13 ni asse AB-64.5 YAQKFFGRATLTVDNSTSTAYM 14 Esse AB-64.8 YAQKFQHRATLTVDNSTSTAYM 15

CRT AB-64.1.4; AB-S4.1.10 e AB- YAQKFOQGRATLTVDTSTSTAYM 16 RR esse AB-64.1.5; AB-S4.1.11 e AB- YAQKFOGRATLTVDOSTSTAYM 7 RR esse AB-64.1.6; AB-64.1.8; AB- YAQKFOAQGRATLTVDNSASTAYM 18 [Centenas Essrstme AB-64.1.7 e AB-64.1.9 YAQKFAGRATLTVDNPTSTAYM 19 A asse Fórmula VIII KIAXK2X3XaXs KeRX7TX8 TVDXaX10 159 XnSTX12YMELSSLRSEDTAVYY

CAR X1éYouS X2é Qou E XséKouD Xsé FouD Xs é Q, F, E ou T Xsé G, Dou H XréVouA Xsé MouL Xsé T, Nou Q Xwé SouP XnéTouA XréVouA

Tabela 11D: Sequências de estrutura principal 4 de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; AB- WGQGTLV 20

14.4; AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; AB-14.8; | TVSS AB-14.9; AB-14.10; AB-14.11; AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6; AB-63.7; AB-

63.8; AB-63.9; AB-63.10; AB-63.11; AB-

63.12; AB-63.13; AB-63.14; AB-63.15; AB-

63.16; AB-63.17 e AB-63.18 AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-64.3; AB- WGQGTLLT 21

64.4; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.7; AB-64.8; | VSS AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB-

64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-

64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-

64.1.14 e AB-64.1.15 Fórmula IX WGQGTLX: 160

TVSS X1éVouLl

Tabela 12A: Sequências de estrutura principal 1 de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 ABI) |VLFRtO | SEQIDNº: | AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; 22 AB-14.4; AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; | DDQMTQSPSSLS AB-14.10 e AB-14.11 ASVGDRVTITC DIQMTQSPSSLP 23 aee = Aco O GIQMTQSPSSL 24

AB VD AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6; 25 AB-63.7; AB-63.8; AB-63.9; AB-

63.10; AB-63.11; AB-63.12; AB-

63.13; AB-63.14; AB-63.15; AB-

63.16; AB-63.17; AB-63.18; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-64.3; AB-64.4; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-64.1.14 e AB- DIVLTASPDSLA

64.1.15 VSLGERATINC DIVLTASPDSLA 26 assita — [Msóeanmde| o Fórmula X X1IIX2X3TASPXCS 161 LXsXeSX7GXsgRXs TIX10C X1é DouG X2é QouV X;z é MouL Xsé SouD Xsé S,PouA Xsé A ou V XréVouLl Xsé Dou E Xsé VouA X1néT,N,ouD

Tabela 12B: Sequências de estrutura principal 2 de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; AB-14.4; 27 AB-14.6; AB-14.7; AB-14.8; AB-14.9; AB-14.10 | WYQQKPG e AB-14.11 KAPKLLIK AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6; AB-63.7; 28 AB-63.8; AB-63.9; AB-63.10; AB-63.11; AB-

63.12; AB-63.13; AB-63.14; AB-63.15; AB-

63.16; AB-63.17; AB-63.18; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-64.3; AB-64.4; AB-64.5; AB-64.6; | WYQQKPG AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB- QPPKLLIK

64.1.3; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB-

64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-

64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-64.1.14 e AB-64.1.15 AB-14.5 WYQORKPG 168

KAPKLLIK Fórmula XI WYQQAKPG 162 X1IX2PKLLIK X1éKouQ X2é AouP Fórmula XIV WYQOX:KPG 169 X2X3PKLLIK X1Éé QouR XéKouQ Xzé AouP

Tabela 12C: Sequências de estrutura principal 3 de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 A ssabN| AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; 29 AB-14.4; AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; | GVYPSRFSGSGS AB-14.8; AB-14.9 e AB-14.11 GTDFTLTISSLQ

PEDFATYYC GVPSRFSGSGS 30 AB-14.10 GTDFTLTISSLQ

PEDLATYYC AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-63.6; / | GVYPDRFSGSGS 31 AB-63.7; AB-63.8; AB-63.9; AB-63.10; | GTDFTLTISSLQ AB-63.11; AB-63.12; AB-63.13; AB- AEDVAVYYC

63.14; AB-63.15; AB-63.16; AB-63.17; AB-63.18; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-64.3; AB-64.4; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-

64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-

64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-

64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-

64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-

64.1.14 e AB-64.1.15 Fórmula XII GVPX:RFSGSG 163

SGTDFTLTISSL QX2EDX;AXaYY [( X1éSouD X2éPouA X;z é F,LouV XséTouV

Tabela 12D: Sequências de estrutura principal 4 de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 AB-H14; AB-14.1; AB-14.2; AB-14.3; AB- FGAGTK 32

14.4; AB-14.5; AB-14.6; AB-14.7; AB-14.8; LEIK AB-14.9; AB-14.10; AB-14.11; AB-H63; AB-

63.4; AB-63.5; AB-63.6; AB-63.7; AB-63.8; AB-63.9; AB-63.10; AB-63.11; AB-63.12; AB-63.13; AB-63.14; AB-63.16; AB-63.17; AB-63.18; AB-H64; AB-64.1; AB-64.2; AB-

64.3; AB-64.4; AB-64.5; AB-64.6; AB-64.7; AB-64.8; AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB-64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB-64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB-64.1.10; AB-

64.1.11; AB-64.1.12; AB-64.1.13; AB-

64.1.14 e AB-64.1.15 FGAGTK 33 AB-63.15 LEIE Fórmula XIII FGAGTK 164 LEIX: X1éKou

E

Tabela 13: Sequências da região variável de cadeia pesada da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33 TE TO ABRE asaiHA| AB-14.1 QVOLVASGAEVKKPGASVKVSCKASGATFTD 34

YNFHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQD FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-14.2 QVOLVASGAEVKKPGASVKVSCKASGATFTD 35

YNYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQDRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSFVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-14.3 QVOLVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 36

YNYHWVRQAPGOQGLEWIGFIYPSNGITGSAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-14.4 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 37

YNYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CADSTVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-14.5; AB- 38

14.6; AB-14.7; | QVOLVOSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD AB-14.8; AB- YNYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK

14.9; AB-14.10, | FAGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY AB-63.16 e AB- | CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS

63.17 AB-14.11 QVOLVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 39

YNYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSSVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.4 QVOLVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 40

YNYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSTVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.5 QVOLVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 41 O lwensocosemementarenas| |

RR ER sEGiDNS]

FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY [mi SSPOTEMEATETE AB-H14; AB- QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 42 H63; AB-63.6; YNLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK AB-63.7 e AB- | FOGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY H2 CARSTVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.8 QVALVASGAEVKKPGSSVKVSCKASGVTFTD 43

YNYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQDRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSTVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.9 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYAFTD 44

YNLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.10 QVALVAOSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTETD 45

YNLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.11 QVALVAOSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 46

YNFHWVRQAPGQGLEWIGFIYPANGITGYAQK DOQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.12 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 47

YNFHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FTGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSTVDYFDDWGOQGTLVTVSS AB-63.13 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 48

YNLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGIRGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-63.14 QVALVASGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTFTD 49

YNLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS

RR ER TsegiDNS AB-63.15 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 50

YNYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDLWGQGTLVTVSS AB-63.18 QVALVASGAEVKKPGSSVKVSCKASGYTHTD 51

YNLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQK FQGRVTMTVDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVYY

CARSDVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-64.1; AB- QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 52

64.4 NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF

QGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-H64 e AB- QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 53

64.2 NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF

QGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSTVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.3 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 54

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAEKF EGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSFVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.5 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 55

NYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF FGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.6 e AB- | QVQLVAOSGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 56

64.7 NYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF

QGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.8 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 57

NYHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF QHRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.1 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 58 O lmeaeamemonaarana |

RR DER TsEGiDN]

QGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC [açao a AB-64.1.2 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 59

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNRITGYAQKF QGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.3 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNVITGYAQKF QGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.4 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 61

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF QGRATLTVDTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.5 QVALVAOSGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 62

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF QGRATLTVDOSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.6 QVALVAOSGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 63

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF QGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.7 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 64

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF QGRATLTVDNPTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.8 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 65

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNQITGYAQKF QGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.9 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNQITGYAQKF QGRATLTVDNPTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS

RR ER TsEGiDNS AB-64.1.10 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 67

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNRITGYAQKF QGRATLTVDTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.11 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNRITGYAQKF QGRATLTVDOQSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.12 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNRITGYAQKF QGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.13 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 70

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNVITGYAQKF QGRATLTVDTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.14 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 71

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNVITGYAQKF QGRATLTVDOSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-64.1.15 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 72

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNVITGYAQKF QGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSDVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-H9 e AB- QVALVASGAELKKPGASVKVSCKASGYTFTDY 73 H7T1 NLHWVRQAPGORLEWIGFIYPSNGITGYSQKF

QGKATLTVDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSTVDYFDYWGQGTTVTVSS AB-H3 e AB- QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 74 H15 NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF

QGRATLTVDTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSTVDYFDYWGQGTLLTVSS AB-H65 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 75 O inumrocaementaaa |

A ER sEGIDNS

KFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVY RCC a AB-H66 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 76

NLHWVRQAPGQGLEWIGFIYPSNGITGYAQKF QGRATLTVDTSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSTVDYFDYWGQGTTVTVSS AB-H1 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 170

YNLHWVRQAPGQGLEWMGFIYPSNGITGYAQ KFQGRVTMTRDTSTSTVYMELSSLRSEDTAVY

YCARSTVDYFDYWGQGTLVTVSS AB-H6 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 171

YNLHWVRQAPGQGLEWMGFIYPSNGITGYAQ KFQGRVTMTVDTSTSTAYMELSSLRSEDTAVY

YCARSTVDYFDYWGQGTTVTVSS AB-H11 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 172

YNLHWVRQAPGQSLEWIGFIYPSNGITGYSQK FQGKATLTVDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYY

CARSTVDYFDYWGQGTTVTVSS AB-H22 QVALVAOSGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 173

NLHWVRQAPGORLEWIGFIYPSNGITGYNQKF KNKATLTVDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSTVDYFDYWGQGTTVTVSS AB-H24 QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDY 174

NLHWVRQAPGORLEWIGFIYPSNGITGYSQKF QGKATLTVDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYYC

ARSTVDYFDYWGQGTTVTVSS AB-H26 QVALVASGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTD 175

YNLHWVRQAPGQRLEWIGFIYPSNGITGYSQK FQGRATLTVDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYY CARSTVDYFDYWGQGTTVTVSS

Tabela 14: Sequências da região variável de cadeia leve da UE ou Kabat de anticorpos anti-CD33

E AA AB-H14; AB-14.1; AB-H15; AB-22; AB- | DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 77 24 e AB-26 RASQSVSTSTYSYMHWYQQKPG

KAPKLLIKYASNLESGVPSRFSGS GSGTDFTLTISSLOPEDFATYYC

QHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 78

RASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG AB-14.2 KAPKLLIKYASNLESGVPSRFSGS

GSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC

QHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 79 AB-14,3: AB14.4 6 AB-14.11 RASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG

KAPKLLIKYVSNLESGVPSRFSGS GSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC QHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC

RASQDVSTSTYSYMHWYQRKPG AB-14.5 KAPKLLIKYASNLESGVPSRFSGS

GSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC

QHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 81

RASQSVGTSTYSYMHWYQQKP AB-14.6 GKAPKLLIKYASALESGVPSRFSG

SGSGTDFTLTISSLQOPEDFATYYC

QHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC 82

RASQSVGTSTYSYMHWYQQKP AB-14.7 GKAPKLLIKYASNLESGVPSRFS

GSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYY

CQHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIQMTQSPSSLPASVGDRVTITC 83

RASQSVGTSTYSYMHWYQQKP AB14.8 GKAPKLLIKYASNLGSGVPSRFS

GSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYY a a LE eorenmFeTER LO gs seo

GIQMTOSPSSLSASVGDRVTITC

RASQSVGTSTYSYMHWYQQKP AB-14.9 GKAPKLLIKYAVNLESGVPSRFS

GSGSGTDFTLTISSLOPEDFATYY

CQHSWEIPLTFGQAGTKLEIK DIQMTOSPSSLSASVGDRVTITC 85

RASQSVSASTYSYMHWYQQKPG AB-14.10 KAPKLLIKYASNLESGVPSRFSGS

GSGTDFTLTISSLOPEDLATYYCQ

HSWEIPLTFGQGTKLEIK AB-H63; AB-63.4; AB-63.5; AB-H64; AB-64.1 AB-64.1.1; AB-64.1.2; AB-64.1.3; AB- DIVLTOSPDSLAVSLGERATINCR

64.1.4; AB-64.1.5; AB-64.1.6; AB- ASQSVSTSTYSYMHWYQQKPGQ

64.1.7; AB-64.1.8; AB-64.1.9; AB- PPKLLIKYASNLESGVPDRFSGS

64.1.10; AB-64.1.11; AB-64.1.12; AB- GSGTDFTLTISSLOAEDVAVYYC

64.1.13 QHSWEIPLTFGQAGTKLEIK AB-64.1.14; AB-64.1.15; AB-H65, AB- H66 e AB-71 DIVLTASPDSLAVSLGERATINCR 87

ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.6; AB-63.8; AB-63.11 e AB-64.8 | COHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIVLTOQSPDSLAVSLGERATINCR 88

ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYAFNLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.7 CQHSWEIPLEFGAGTKLEIK

DIVLTOSPDSLAVSLGERATINCR ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASYLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.9; AB-64.3 e AB-64.4 CEHSWEIPLTFGQGTKLEIK io joviTosposiaveeeRâmivaA | o | o e

ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNLESGVPDRFSG SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY

CQHSWELPLTFGOGTKLEIK DIVLTASPDSLAVSLGERATINCR 91

ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNVESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.12 CQHSWAIPLTFGQAGTKLEIK DIVLTAQSPDSLAVSLGERATINCR 92

ASQSVSTSTYSYMHWYQQKPGQ PPKLLIKYASNLESGVPDRFSGS

GSGTDFTLTISSLOAEDVAVYYC AB-63.13 QHSEEIPLTFGAGTKLEIK DIVLTAOSPDSLAVSLGERATIDCK 93

ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.14 CQHSWEIPLTFGQAGTKLEIK DIVLTAOSPDSLAVSLGERATINCR 94

ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNVESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.15 CQHSWEIPLTFGOGTKLEIE DIVLTAQSPDSLAVSLGERATINCR 95

ASQSVHTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.16 CQHSWEIPLTFGQAGTKLEIK

DIVLTAOSPDSLAVSLGERATINCR GSQSVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYESNLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-63.17 CQHSWEIPLTFGQAGTKLEIK Lo A

DIVLTAOSPDSLAVSLGERATINCR Ae samenemmenta o

PPKLLIKYESNLESGVPDRFSGS GSGTDFTLTISSLOAEDVAVYYC QHSWEIPLTFGOGTKLEIK

E DIVLTAQSPDSLAVSLGERATINCR nm

VSQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-64.2 CQHSWEIPLTFGQGTKLEIK

DIVLTQSPDSLAVSLGERATINCR ASQSVGTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNLESGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-64.5 CQHSWEIPLTFGQGTKLEIK DIVLTAQSPDSLAVSLGERATINCR 100

ASQDVSTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASFLESGVPDRFSGS

GSGTDFTLTISSLOAEDVAVYYC AB-64.6 QHSWEIPLTFGOGTKLEIK DIVLTAQSPDSLAVSLGERATINCR 101

ASQSVGTSTYSYMHWYQQKPG QPPKLLIKYASNLNSGVPDRFSG

SGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYY AB-64.7 CQHSEEI/PLTFGQGTKLEIK AB-H1; AB-H2; AB-H3; AB-H6; AB-H9 e | DIQMTOSPSSLSASVGDRVTITC 102 AB-H11 RASQSVSTSTYSYMHWYQQKPG

KAPKLLIYYASNLESGVPSRFSGS GSGTDFTLTISSLOPEDFATYYC

QHSWEIPLTFGQOGTKLEIK Exemplo 5: Maturação de afinidade de AB-H14 e AB-H63.

[00446] As afinidades de AB-H14 e suas variantes com maturação de afinidade (Tabela 15) e AB-H63 e suas variantes com maturação de afinidade (Tabela 16), para CD33 humana foram medidas pelo ensaio Fortebio de acordo com o método descrito no Exemplo 1 acima.

Tabela 15: medições de afinidade do anticorpo humanizado AB- H14, e suas variantes, para CD33 humana Variação da kKon (1/Ms) kotr (1/s) melhora de Afinidade afinidade em Anticorpo | monovalente, relação ao Ab Ko (M): precursor (AB-H14): AB-HI4 | 291E-09 = | 3,97E+05 | 1,15E-03 AB-14.1 2,99E-10 6,70E+05 2,00E-04 AB-14.2 2,02E-10 14,39 9,91E+05 2,00E-04 AB-14.3 2,36E-10 12,31 8,47E+05 2,00E-04 AB-14.4 2,24E-10 13,00 8,95E+05 2,00E-04 AB-14.5 2,12E-10 13,73 9,45E+05 2,00E-04 AB-14.6 2,95E-10 8,94E+05 2,64E-04 AB-14.7 2,46E-10 11,81 8,13E+05 2,00E-04 AB-14.8 2,14E-10 13,57 9,35E+05 2,00E-04 2,17E-10 9,21E+05 | 2,00E-04 AB-14.10 2,21E-10 13,15 9,06E+05 2,00E-04 AB-14.11 2,05E-10 14,14 9,74E+05 2,00E-04

[00447] Os anticorpos com maturação de afinidade derivados dos anticorpos humanizados AB-H14 e AB-H63 mostraram melhorias de 10 a 14 vezes e de 3 a 13 vezes na afinidade, respectivamente.

[00448] Os anticorpos com maturação de afinidade foram caracterizados por sua capacidade de diminuir os níveis de CD33 na superfície celular em células dendríticas primárias de acordo com o método descrito no Exemplo 2 acima.

[00449] A concentração efetiva semi-máxima (ECs5o) e a regulação negativa máxima de CD33 por AB-H14 e suas variantes e AB-H63 e suas variantes são mostradas na Tabela 17 e Tabela 18, respectivamente. A maioria dos anticorpos com maturação de afinidade exibiu melhora substancial na potência em relação aos anticorpos precursores. No entanto, surpreendentemente, como observado com os anticorpos da linhagem H64, os anticorpos CD33 com maior afinidade não eram necessariamente os mais eficazes na redução máxima dos níveis de CD33 de superfície celular. Tabela 17: Regulação negativa da CD33 de superfície celular com AB-H14 e suas variantes com maturação de afinidade Regulação Regulação Negativa Negativa do Máxima (% de CD33 Anticorpo Receptor, (EC50) restante) om | EEE, ES

Tabela 18: Regulação negativa da CD33 de superfície celular com AB-H63 e suas variantes com maturação de afinidade Anticorpo Receptor, (ECso) (pM): (% de CD33 restante) La a ão Exemplo 6: Caracterização da capacidade dos anticorpos CD33 de competir com o ligante de CD33 pela ligação a CD33

[00450] O objetivo deste exemplo foi testar se os anticorpos CD33 poderiam reconhecer o sítio de ligação ao ligante em CD33 e competir com a ligação ao ligante nos receptores de CD33.

[00451] O anticorpo com maturação de afinidade, AB-64.1 e duas de suas variantes, AB-64.1.2 e AB-64.1.8, foram avaliados quanto à sua capacidade de competir com o ligante de CD33 pela ligação a CD33 usando um ensaio de adesão sólida de glóbulos vermelhos (RBC), de acordo com protocolos padrão (Kelm, et al. Current Biology, 1994). Os glóbulos vermelhos são altamente decorados com glicoproteínas contendo ácidos siálicos; portanto, a capacidade de um anticorpo para bloquear a ligação de RBC à CD33 imobilizada foi usada para determinar a interferência do ligante. Resumidamente, as placas

Immunolon de 96 poços foram revestidas durante a noite com 5 ug/mL de CD33-Fc, depois foram lavadas com PBS e bloqueadas por uma hora com tampão de ligação (PBS contendo 0,25% de BSA e 1 mM de CaCl2). Os anticorpos CD33 foram adicionados e incubados por uma hora em temperatura ambiente com balanço suave. Após a remoção do anticorpo não ligado, as RBCs foram adicionadas a cada poço a 3,0 x 10º células/mL e incubadas à temperatura ambiente por uma hora. As RBCs não ligadas foram então cuidadosamente removidas lavando três vezes com PBS, após o que foi adicionada água a cada poço para induzir a lise hipotônica das RBCs ligadas. A placa foi transferida para - 80ºC por 10 minutos, seguida de 37ºC por 15 minutos. A quantificação de RBCs ligadas foi medida como atividade de peroxidase adicionando TMB, seguida pela adição de ácido sulfúrico 2N para interromper a reação. O sinal foi detectado a 450 nm. Os dados foram calculados como uma porcentagem da ligação de RBC à CD33-Fc ligada à placa na ausência de anticorpo. Os resultados são mostrados na Figura 3. Exemplo 7: Caracterização do impacto da região Fc em um anticorpo CD33 internalizante

[00452] O objetivo deste exemplo foi avaliar o impacto do Fc na capacidade de um anticorpo CD33 de diminuir o nível de superfície celular da CD33 em células mieloides primárias in vitro e in vivo.

[00453] A região de Fc de um anticorpo pode interagir com receptores de Fcy expressos na superfície das células, e as células mieloides que expressam endogenamente CD33 também expressam múltiplos receptores de Fcy. Assim, foi testado o efeito da interação de diferentes isotipos de IgG humana entre os receptores de Fc e de Fcy da superfície celular do anticorpo, a capacidade de agrupamento dos anticorpos e o impacto na capacidade do anticorpo de internalizar o receptor.

[00454] Anticorpos contendo a região variável AB-64.1 e diferentes variantes de IgG humana foram gerados. Os Fcs testados incluíram

IgG1, que liga todos os receptores de Fcy; SELF de IgG1, que contém as mutações S267E e L328F e exibe ligação potencializada a CD32B e à variante R131 de CD32A; I|gG2, que mostra ligação substancial apenas a CD32A; LALAPS IgG1, que contém as mutações L234A, L235A e P331S; e IgG1 N297A. As duas últimas variantes de Fc exibem pouca ou nenhuma ligação a qualquer um dos receptores de Fcy. Todos os cinco anticorpos foram avaliados quanto à sua capacidade de reduzir o nível de CD33 da superfície celular em células dendríticas humanas primárias, de acordo com o método descrito no Exemplo 1. Os dados são mostrados na Figura 4, e a Tabela 19 resume a concentração efetiva semi-máxima (ECrso) e a regulação negativa máxima de CD33 pelos anticorpos.

Tabela 19: Regulação negativa da superfície celular CD33 com variantes de Fc de AB-64.1 a ão) Eno | Anticorpo do Receptor, (pM, Máxima (% de CD33 ECs50) restante) AB-64.1 hulgG1 41,3

Ú AB-64.1 hulgG1 39,4 ars

[00455] Todas as variantes de Fc testadas reduziram os níveis de CD33 com ECrsos dentro de duas vezes uma da outra. Além disso, a I9gG1 humana, a IgG2 humana e a SELF de IgG1 humana exibiram redução máxima semelhante de CD33. Inesperadamente, os dois Fcs que não se ligam aos receptores de Fcy exibiram uma regulação negativa máxima substancialmente reduzida do receptor, sugerindo que alguma interação do receptor de Fcy é necessária para a redução máxima dos níveis de CD33 da superfície celular nas células dendríticas humanas primárias.

[00456] As variantes de Fc AB-64.1 também foram avaliadas quanto à sua capacidade de reduzir os níveis de CD33 nas células mieloides in vivo. Num conjunto de experiências, foram utilizados camundongos NSG humanizados (hu-NSG). Esses camundongos foram enxertados com células-tronco CD34+ hematopoiéticas humanas, adquiridas no Jackson Laboratory e utilizados 16 semanas após o enxerto. Os camundongos receberam uma injeção intraperitoneal única de AB-64.1 hulgG1, AB-64.1 hulgG2, AB-64.1 hulgG1 LALAPS ou um anticorpo controle a 10 mg/kg no dia O e amostras de sangue foram coletadas no dia 1 (24 horas após a dose), dia 6, dia 14 e 21, e processados para análise FACS.

[00457] Resumidamente, as amostras de sangue foram primeiro incubadas por 5 minutos em tampão de lise ACK para lisar os glóbulos vermelhos e depois lavadas extensivamente com tampão FACS frio (PBS, 2% FBS, 2 mM EDTA). Este procedimento foi repetido duas vezes. As células foram então incubadas em tampão FACS frio na presença de anti-cCD45-APC-Cy7 humano, CDA45-FITC anti- camundongo, CD3-PE-Cy7 anti-humano, CD14-Pacific Blue anti- humano, CD11b-PerCP-Cy5,5 anti-humano, anti-CD33-PE, anti-Siglec- 7-APC e um dado de viabilidade (ThermoFisher, Nº Cat L34957) por 30 minutos em gelo na presença de solução de bloqueio de Fc, e então lavadas duas vezes com tampão FACS frio. As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% em PBS. As células coradas foram adquiridas em um citômetro BD FACS Fortessa (Becton Dickinson, San Jose, CA) e os dados foram analisados com o software FlowJo (Ashland OR). O nível de expressão de CD33 foi determinado na população de células huCD45* huCD14”, e os níveis de CD33 foram normalizados para amostras de camundongos dosados com o anticorpo de controle.

[00458] Em camundongos hu-NSG administrados com uma dose única de AB-64.1 hulgG1, AB-64.1 hulgG2 ou AB-64.1 hulgG1 LALAPS, os níveis de CD33 nas células mieloides circulantes foram substancialmente reduzidos em 24 horas em todos os grupos, como mostra a Figura 5. Os níveis de CD33 não foram estatisticamente diferentes entre os grupos AB-64.1 hulgG1, AB-64.1 hulgG2 ou AB-64.1 hulgG1 LALAPS, e a redução em CD33 foi mantida por pelo menos 2 semanas. No dia 21, os níveis de CD33 em todos os grupos haviam retornado aos níveis de controle.

[00459] Num conjunto separado de experiências, a capacidade das variantes AB-64.1 Fc para reduzir os níveis de CD33 em células imunólogicas in vivo foi avaliada em camundongos C57BL/6 imunocompetentes — transgênicos para CD33 humana. Estes camundongos expressam CD33 humana em células mieloides em níveis semelhantes aos observados em células imunológicas humanas. Os camundongos foram administrados com uma injeção intraperitoneal única de AB-64.1 hulgG1, AB-64.1 hulgG2, AB-64.1 hulgG1 LALAPS ou um anticorpo controle a 10 mg/kg no dia O e amostras de sangue foram coletadas no dia 1 (24 horas após a dose), dia 3, e dia 6, e processados para análise FACS. Os camundongos foram sacrificados no dia 21 e sangue e baço foram processados para análise FACS.

[00460] Resumidamente, as amostras de sangue foram primeiro incubadas por 5 minutos em tampão de lise ACK para lisar os glóbulos vermelhos e depois lavadas extensivamente com tampão FACS frio (PBS, 2% FBS, 2 mM EDTA). Este procedimento foi repetido duas vezes. As amostras de baço foram esmagadas através de filtros de células e, em seguida, os glóbulos vermelhos foram lisados com tampão de lise ACK, seguido de lavagem extensa com tampão FACS frio. As células foram então incubadas em tampão FACS frio na presença de CD3-Pacific Blue antiscamundongo, NK1,1-APC-Cy7 anti-camundongo, CD11b-PerCP-Cy5,5 anti-camundongo, Gr1-PE-Cy7 anti-camundongo,

anti-CD33-PE, anti-Siglec-7-APC e uma matriz de viabilidade (ThermoFisher, Nº Cat L34957) por 30 minutos em gelo na presença de solução de bloqueio de Fc e depois lavada duas vezes com tampão FACS frio. As células foram fixadas com paraformaldeído a 4% em PBS. As células coradas foram adquiridas em um citômetro BD FACS Fortessa (Becton Dickinson, San Jose, CA) e os dados foram analisados com o software FlowJo (Ashland OR). O nível de expressão de CD33 foi determinado na população de células CD11* de camundongos e Gr1* de camundongos, e os níveis de CD33 foram normalizados para amostras de camundongos dosados com o anticorpo de controle.

[00461] Em camundongos transgênicos com CD33 humana administrados com uma dose única de AB-64.1 hulgG1, AB-64.1 hulgG2 ou AB-64.1 hulgG1 LALAPS, os níveis de CD33 nas células mieloides circulantes foram substancialmente reduzidos em 24 horas em todos os grupos, conforme mostrado na Figura 6A. A extensão da diminuição foi semelhante entre os grupos tratados com os anticorpos CD33. No dia 6, os níveis de CD33 nas células mieloides circulantes haviam retornado aos níveis de controle em todos os grupos. Por outro lado, no dia 21, enquanto os níveis de CD33 nas células sanguíneas circulantes estavam nos níveis de controle, os níveis do receptor de CD33 nas células mieloides esplênicas diminuíram substancialmente em comparação com os camundongos tratados com controle, conforme mostrado na Figura 6B. Assim, a recuperação da expressão de CD33 nas células imunológicas residentes em tecidos parece ser mais lenta do que nas células circulantes, sugerindo uma renovação mais lenta de CD33 nas células residentes em tecidos.

[00462] Enquanto variantes de Fc com pouca ou nenhuma ligação ao receptor de Fcy foram menos capazes de reduzir os níveis de CD33 em células dendríticas humanas primárias in vitro, in vivo, tanto em camundongos humanizados que expressam receptores de Fcy humanos e de camundongo quanto em camundongos imunocompetentes transgênicos para CD33 humana que expressa apenas receptores de Fcy de camundongo, o hulgG1 LALAPS reduziu os níveis de CD33 de maneira semelhante aos isotipos competentes para a ligação do receptor de Fcy. Exemplo 8: Atividade de ADCC de um anticorpo CD33 contendo diferentes variantes de Fc

[00463] O objetivo deste exemplo foi avaliar a capacidade das variantes de Fc do anticorpo AB-64.1 de induzir ADCC (citotoxicidade celular dependente de anticorpo) em células que expressam CD33. A ADCC demonstrou ser altamente dependente da interação entre a região de Fc de um anticorpo e os receptores de Fcy expressos nas células efetoras.

[00464] Foram avaliadas quatro variantes de Fc humanas diferentes do anticorpo AB-64.1 para a ADCC: IgG1 do tipo selvagem, IgG2, SELF de IgG1 e LALAPS de IgG1. A ADCC foi testada usando duas linhas celulares alvo diferentes, células HL60 e células U937. As células HL60 e U937 expressam CD33, com as células U937 expressando CD33 em níveis mais altos que as células HL60 (dados não mostrados). O ensaio ADCC foi realizado usando o ADCC Reporter Bioassay (Promega), de acordo com as instruções do fabricante, usando três razões efetor:alvo diferentes, 6:1, 10:1 e 25:1. Resumidamente, as células alvo foram primeiro opsonizadas com os anticorpos a 10 ug/ml, após o que as células efetoras foram adicionadas e incubadas por 6 horas a 37ºC com 5% de CO». A atividade de ADCC foi quantificada por adição do reagente de teste de luciferase e a placa foi lida em um luminômetro (Biotek). Incluído como controle positivo no ensaio estava um anticorpo CD33, clone 280-31-01 (mut), divulgado em WO2012/045752, que demonstrou ter uma atividade ADCC potente. Os resultados do ensaio ADCC são mostrados na Figura 7.

[00465] Nas células HL60 e U937 e nas três razões efetor:alvo, o anticorpo de controle positivo induziu a ADCC. Dos anticorpos variantes de Fc AB-64.1, apenas Fc IgG1 humano de tipo selvagem induziu qualquer aumento estatisticamente significativo na ADCC, mas apenas na linha celular de expressão mais alta, U937, apenas nas razões E:T mais altas e os níveis de ADCC induzidos eram inferiores a 2x o fundo. Assim, AB-64.1 induz pouca ou nenhuma ADCC. Exemplo 9: Atividade de CDC de um anticorpo CD33 com diferentes variantes de Fc

[00466] O objetivo deste exemplo foi avaliar o potencial das variantes de Fc do anticorpo AB-64.1 para induzir CDC (citotoxicidade dependente do complemento) em células que expressam CD33. A CDC é iniciada por um alvo opsonizado por um anticorpo que pode efetivamente se ligar e ativar o complemento através de sua região de Fc. Assim, a capacidade de um anticorpo para induzir CDC é dependente de seu isotipo: a I9G1 humana e o SELF de IgG1 humana são geralmente competentes na indução da CDC, enquanto as LALAPS IgG2 e IgG1 são geralmente mais fracas na indução da CDC.

[00467] Cinco variantes de Fc diferentes do anticorpo AB-64.1 foram avaliadas quanto ao potencial de induzir CDC:I9G1 humana de tipo selvagem, IgG2 humana, SELF de IgG1 humana, LALAPS IgG1 humana e N297A de IgG1 humana. O potencial para CDC foi testado medindo a ativação do complemento, deposição de C3b, na linha celular que expressa CD33, U937. Resumidamente, as células U937 foram incubadas com 10 ug/ml de CD33 ou anticorpos de controle por 30 minutos em gelo. Adicionaram-se soros humanos de complemento reunidos (Innovative Research) a uma concentração final de 20% e as células foram incubadas durante duas horas a 37ººC. As células foram lavadas uma vez com tampão FACS frio (PBS, 2% FBS, 2mM EDTA) e depois incubadas com anti-C3b-APC e uma matriz de viabilidade

(ThermoFisher, Nº Cat L34957) por 30 minutos em gelo na presença de solução de bloqueio de Fc. As células foram lavadas duas vezes com tampão FACS frio e depois fixadas com paraformaldeído a 4% em PBS. As células coradas foram adquiridas em um citômetro BD FACS Fortessa (Becton Dickinson, San Jose, CA) e os dados foram analisados com o software FlowJo (Ashland OR). O nível de deposição de C3b foi determinado pela MFI de C3b em células U937 e a deposição foi normalizada para amostras de células tratadas com o anticorpo de controle. Os resultados são mostrados na Figure 8.

[00468] Surpreendentemente, das variantes AB-64.1 testadas, apenas o isotipo N297A de IgG1 induziu uma ativação significativamente maior do complemento sobre as amostras tratadas com controle. Nem os isotipos I9G1 nem o SELF de IgG1 induziram a atividade de CDC acima dos níveis de fundo. Assim, AB-64.1 induziu pouca ou nenhuma CDC. Exemplo 10: Regulação negativa dos níveis de CD33 na micróglia do cérebro com um anticorpo internalizante de CD33

[00469] O objetivo deste exemplo foi testar a capacidade de um anticorpo CD33 para reduzir os níveis de CD33 na micróglia do cérebro.

[00470] O anticorpo AB-64.1.2 no Fc de I9gG2 humana (AB-64.1.2- huG2) foi gerado e avaliado quanto à sua capacidade de regular negativamente a CD33 na micróglia do cérebro e nas células circulantes em camundongos transgênicos CD33 humanos, descritos no Exemplo

7. Esses camundongos também são transgênicos para o Siglec-7 humano. No dia 0, os camundongos receberam uma dose única de AB-

64.1.2-huG2 (2 mg/kg, 10 mg/kg ou 40 mg/kg) ou um anticorpo de controle (40 mg/kg) e no dia 1, dia 3, dia 6, dia 10, dia 14, dia 20 e dia 28, os camundongos foram sacrificados e o sangue e o cérebro foram coletados para análise por citometria de fluxo.

[00471] Os cérebros foram colocados no HBSS e foram dissociados mecanicamente com um homogeneizador de dounce, após o qual

Percoll (GE Healthcare) foi adicionado a 30%. A suspensão foi mergulhada em uma camada de Percoll a 70% e foi centrifugada a 550g por 30 minutos. As micróglias enriquecidas foram coletadas a partir da interface das duas fases, depois lavadas em HBSS e coradas com CD11b Pacific Blue anti-camundongo (BioLegend), CD45 PE-Cy7 anti- camundongo (eBioscience), CD33 PE anti-humana (eBioscience), Siglec-7 APC anti-humano (BioLegend) e um corante de viabilidade na presença de bloqueio Fc, foram então analisados por citometria de fluxo. Micróglia foram bloqueadas como células CD45'N'CD11b*. O sangue foi coletado em tubos heparinizados no momento do sacrifício e foi centrifugado a 2.000 g por 10 minutos a 4ºC. O sedimento celular foi ressuspenso em PBS com EDTA 3 mM por vórtice, após o qual os glóbulos vermelhos foram lisados com 1 mL de tampão ACK por 10 minutos em gelo, seguido de centrifugação a 500 g por 10 minutos. As células foram coradas com CD11b Pacific Blue anti-ccamundongo Pacífico, Gr1 PE-Cy7 anti-ccamundongo (BioLegend), LyYSG APC anti- camundongo (BioLegend), LyS8C AF488 anti-camundongo (BioLegend), CD33 PE anti-humano, Siglec-7 APC anti-humano, e um corante de viabilidade na presença de bloqueio de Fc, e foram analisados por citometria de fluxo. Os neutrófilos foram bloqueados como células CD11b"t"Ly6G* e os monócitos foram bloqueados como células Ly6C"'gh"| y8GCD33*. Os resultados são mostrados na Figura 9.

[00472] A administração de uma dose única de AB-64.1.2-huG2 a 2 mg/kg, 10 mg/kg ou 40 mg/kg, resultou em reduções substanciais de CD33 na micróglia dentro de 24 horas após a administração (dia 1). Os efeitos mais profundos foram observados em 10 mg/kg e 40 mg/kg, onde os níveis de CD33 na micróglia eram quase indetectáveis no dia 1 (Figura 9A). No grupo de dose de 40 mg/Kg, a regulação negativa profunda de CD33 persistiu até o dia 28, enquanto no grupo de 10 mg/kg, os níveis de receptores permaneceram baixos até o dia 14 e voltaram aos níveis de controle no dia 28. Dosagem de 2 mg/kg resultou em uma redução da expressão de CD33, mas o efeito foi mais suave e mais transitório do que nas doses mais altas. O anticorpo não teve efeito no nível de Siglec-7 humano na micróglia em qualquer nível de dose (Figura 9B). Nos neutrófilos circulantes, a administração de AB-64.1.2- huG2 a 2 mg/kg, 10 mg/kg ou 40 mg/kg, resultou na regulação negativa de CD33 em aproximadamente 50% um dia após a administração (Figura 9C). Nos monócitos circulantes, os níveis de CD33 foram quase completamente ablados no dia 1 nos três grupos de dosagem (Figura 9D). Assim, nos neutrófilos e monócitos circulantes, foi observada uma regulação negativa máxima na dose mais baixa testada, 2 mg/kg. Em ambos os tipos de células, os níveis de receptor de CD33 permaneceram baixos até o dia 28 no grupo de 40 mg/kg, os níveis de CD33 retornaram aos níveis de controle no dia 28 no grupo de 10 mg/kg e a regulação negativa de CD33 foi mais transitória no grupo 2 mg/kg. Assim, a durabilidade da regulação negativa de CD33 em monócitos e neutrófilos exibiu um efeito dose-resposta e foi semelhante à observada na micróglia.

[00473] Estes resultados demonstram que o AB-64.1.2-huG2 reduziu fortemente a expressão de CD33 tanto na micróglia no cérebro quanto nas células que expressam CD33 circulante. A observação de que, na micróglia, foi observada uma regulação negativa máxima de CD33 na dose de 10 mg/kg, uma vez que apenas cerca de 0,1% dos anticorpos circulantes atravessam a barreira hematoencefálica (Pudoslo, et al. PNAS 1994). Estes resultados destacam a potência deste anticorpo para regular negativamente a CD33. A durabilidade da regulação negativa de CD33 de CD33 por esse anticorpo também foi surpreendente, pois após uma dose única de 10 mg/kg ou 40 mg/Kg, os níveis de CD33 na micróglia, monócitos e neutrófilos não se recuperaram por pelo menos 14 ou 28 dias, respectivamente. Em contraste, nesses mesmos camundongos tratados com o anticorpo precursor, AB-64.1, a 10 mg/kg, a regulação negativa de CD33 nas células CD33* circulantes persistiu por menos de 6 dias após a dosagem (Figura 6A). Assim, modificações adicionais de aminoácidos, que não afetam a afinidade, podem ter impactado a durabilidade da regulação negativa de CD33 pelo anticorpo in vivo.

SEQUÊNCIAS

[00474] Todasas sequências polipeptídicas são apresentadas em N- terminal a C-terminal a menos que observado de outra forma. Região variável de cadeia pesada de anticorpo de camundongo precursor:

EVOLQASGPELVKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVKLSHGKSLE

WIGFIYPSNGITGYNQKFKNKATLTVDNSSSTAYMELRSLTSEDSAVY YCARSTVDYFDYWGQGTTLTVSS (SEQ |D Nº: 103) Região variável de cadeia leve de anticorpo de camundongo precursor:

DIVLTASPASLAVSLGQARATMSCRASQSVSTSTYSYMHWYQQKPGQ

PPKLLIKYASNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDTATYYCQH SWEIPLTFGAGTKLELK (SEQ ID Nº: 104) Motivo de receptor: D/Ex0-2YxxL/IX6-8YxxL/I (SEQ ID Nº: 165) CH1 e região de dobradiça de IGg2:

ASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALT

SGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKV DKTVERKCCVECPPCP (SEQ ID Nº: 166) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1 hulgG1: Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQOGLE WIGFIYPSNGITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVWNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEL LGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 176)

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGQGLE WIGFIYPSNGITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEL LGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 197) Cadeia leve:

DIVLTASPDSLAVSLGERATINCRASQSVSTSTYSYMHWYQQKPGQP PKLLIKYASNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLOAEDVAVYYCQHS WEIPLTFGQAGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFY

PREAKVQWKVDNALQOSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1.2 hulgG1 Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNRITGYAQKFOQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVWNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEL LGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 177)

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOGLE WIGFIYPSNRITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVWNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEL LGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 198) Cadeia leve:

PREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1.8 hulgG1 Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNQITGYAQKFQGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEL LGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 178)

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 199) Cadeia leve:

DIVLTASPDSLAVSLGERATINCRASQSVSTSTYSYMHWYQQKPGQP PKLLIKYASNLESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQOAEDVAVYYCQHS WEIPLTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFY

PREAKVQWKVDNALQOSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1 hulgG2 Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNGITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEV HNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPA PIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ |D Nº: 179)

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOGLE WIGFIYPSNGITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEV HNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPA PIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 200) Cadeia leve:

PREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1.2 hulgG2 Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNRITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEV HNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPA PIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 180)

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGQGLE WIGFIYPSNRITGYAQKFOGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEV HNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPA PIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 201) Cadeia leve:

PREAKVQWKVDNALQOSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1.8 hulgG2 Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNQITGYAQKFQGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEV HNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPA PIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 181)

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQOGLE WIGFIYPSNQITGYAQKFQGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAG PSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVQFNWYVDGVEV HNAKTKPREEQFNSTFRVVSVLTVVHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPA PIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIA

VEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVF SCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 202) Cadeia leve:

PREAKVQWKVDNALQOSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1 hulgG1

LALAPS Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNGITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEA AGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 182)

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 203) Cadeia leve:

PREAKVQWKVDNALQOSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1.2 hulgG1

LALAPS Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOGLE WIGFIYPSNRITGYAQKFOGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVWNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEA AGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 183)

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNRITGYAQKFQGRATLTVDNSTSTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEA AGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 204) Cadeia leve:

PREAKVQWKVDNALQOSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185) Sequência de anticorpo de comprimento completo AB-64.1.8 hulgG1

LALAPS Cadeia pesada:

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQGLE WIGFIYPSNQITGYAQKFQGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEA AGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK (SEQ ID Nº: 184)

QVALVASGAEVKKPGASVKISCKASGYTFTDYNLHWVRQAPGOQOGLE WIGFIYPSNQITGYAQKFQGRATLTVDNSASTAYMELSSLRSEDTAVY YCARSDVDYFDYWGQGTLLTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTA ALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLOSSGLYSLSSVVT VPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPEA AGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDG VEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKA LPASIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPS

DIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGN VFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (SEQ ID Nº: 205) Cadeia leve:

PREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC (SEQ ID Nº: 185)

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula |: GX:X2X3TDYNXCH (SEQ ID Nº: 152), em que X, é Y, A, ou V, Xxé Tou A, Xg é F, E, ou H e X4 é L, F, Y, ou N; uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Il: FIYPX NX2IX3G (SEQ ID Nº: 153), em que X: é S ou A, Xc é 6, Q, R ou V,eXs é TouR;e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Ill: SXKVDYFDX2(SEQ ID Nº: 154), em que X é T, D, F, ou S, e Xcé Y, DjouL;e em que o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115), e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121).

2. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula IV: XX>SQX3VXaXsSTYSYMH (SEQ ID Nº: 155), em que X: é Rou K, X2 é A, G, ou V, Xgé S ou D, X4 é S, G, ou H, e XKsé T ou A; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula V: YX1X2X3X4XsS (SEQ ID Nº: 156), em que XKk É A, V,

ou E, Xoé S, V, ou F, XGé N, A, Y, ou F, Xa é Lou V e Xs É E, G, ou N; e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula VI: XIHSX2X3X4PLXs (SEQ ID Nº: 157), em que XK7 é Q ou E, Xxé Wou E, Xgé E ou A, Xa é louL, e Xsé TouE;e em que o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

3. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula |: GX1X2X3TDYNX4H (SEQ ID Nº: 152), em que X: é Y, A, ou V, Xcé Tou A, Xg é F, E, ou H e X4 é L, F, Y, ou N; uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Il: FIYPX NX2IX3G (SEQ ID Nº: 153), em que X: é S ou A, Xc é 6, Q, R ouV,eXs é TouR;e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Ill: SXK:VDYFDX2(SEQ ID Nº: 154), em que Xx é T, D, F, ou S, e Xcé Y, DjouL;e a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula IV: XiX2SQX3VXaXsSTYSYMH (SEQ ID Nº: 155), em que X: é R ou K, X2 é A, G, ou V, Xgé Sou D, Xa é S, G, ou H, e Xsé T ou A; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula V: YX1X2X3X4XsS (SEQ ID Nº: 156), em que XKx É A, V, ou E, Xo é S, V, ou F, X3é N, A, Y, ou F, X4 é Lou V, e XKsé E, G, ou N; e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula VI: XIHSX2X3X4PLXs (SEQ ID Nº: 157), em que X: é Q ou E, Xcé Wou E, Xgé E ou A, Xa é louL, eXsé TouE; e em que o anticorpo não é um anticorpo que compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1 compreendendo a sequência de GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de FIYPSNGITG (SEQ ID Nº: 115), e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de STVDYFDY (SEQ ID Nº: 121), e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1 compreendendo a sequência de RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

4. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende a HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-

14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-

64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-

64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-

64.1.15 (conforme mostrado nas Tabelas 9A a 9C).

5. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia leve compreende a HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.3, AB-14.4, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

63.12, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, ou AB-64.8 (conforme mostrado nas Tabelas 10A a 10C).

6. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende a HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-

14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.3, AB-64.4, AB-

64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-

64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-

64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-

64.1.15 (conforme mostrado nas Tabelas 9A a 9C); e a região variável de cadeia leve compreende a HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.3, AB-14.4, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-

63.12, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, ou AB-64.8 (conforme mostrado nas Tabelas 10A a 10C).

7. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma HVR-H1, HVR-H2 e HVR-H3 e uma região variável de cadeia leve compreendendo uma HVR-L1, HVR-L2 e HVR- L3, em que o anticorpo compreende a HVR-H1, HVR-H2, HVR-H3,

HVR-L1, HVR-L2 e HVR-L3 do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.:3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado nas Tabelas 9A a 9C e 10A a 10C).

8. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FRA, em que: VH FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VII: QVQLVOSGAEVKKPGX:SVKX:SCKAS (SEQ ID Nº: 158), em que X: é Aou S, e Xcé Voul; VH FR2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5; VH FR3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VII: KIAK2XK3XaXsXeRX7TXgTVDXaX1oX11STX12Y MELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 159), em que X: é Y ou S, Xcé Qou E, Xgé Kou D, Xaé F ou D, Xs é Q, F, E, ou T, Xeé G, D, ou H, Xx é Vou A, Xsé M ou L, Xo é T, N, ou Q, X1vé S ou P, X11 é Tou A, e Xcé Vou A; e VH FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula IX: WGQAGTLX:TVSS (SEQ ID Nº: 160), em que X: é VouL; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três, ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3 e VL FRA, em que:

VL FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula X: X1IX2X3TASPXaSLXsXeSX7 GXgRXgTIX10C (SEQ ID Nº: 161), em que X, é D ou G, Xoé QouV,X3 é MouL, X<é SouD, Xs é S,P, ou A, Xsé A ou V, Xr é VouL, Xsé DouE,Xsé VouA, e X1oé T, N, ou D; VL FR2 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula Xl: WYQQKPGX:X2PKLLIK (SEQ ID Nº: 162), em que X: é K ou Q, e Xçé A ou P; VL FR3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula XIl: GVPX:RFSGSGSGTDFTLTISSLQOX2EDX3AXaYYC (SEQ ID Nº: 163), em que X: é Sou D, Xoé POou A, Xg é F, L,/ ou V, e Ka é T ouV;e VL FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula XIII: FGQGTKLEIX: (SEQ ID Nº: 164), em que XKx é Kou E.

9. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FRA, em que: VH FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 2-4; VH FR2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5; VH FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 6-19; e VH FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 20-21; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três, ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3 e VL FRA, em que: VL FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 22-26; VL FR2 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 27-28; VL FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 29-31; e VL FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 32-33.

10. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 34-72; e/ou uma região variável de cadeia leve compreende uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 77-101.

11. Anticorpo, de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende a região variável de cadeia pesada do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-

63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-

63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-

64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 13); e/ou o anticorpo compreende a região variável de cadeia leve do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-

14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-

63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-

63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-

64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 14).

12. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que: (a) a HVR-H1 compreende a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), a HVR-H2 compreende a sequência de aminoácidos FIYPSNRITG (SEQ ID Nº: 119), a HVR-H3 compreende a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), a HVR-L1 compreende a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), a HVR-L2 compreende a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e a HVR-L3 compreende a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146); ou (b) a HVR-H1 compreende a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), a HVR-H2 compreende a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118), a HVR-H3 compreende a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), a HVR-L1 compreende a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), a HVR-L2 compreende a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e a HVR-L3 compreende a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

13. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que: (c) a região variável de cadeia pesada compreende uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIVPSNRITG (SEQ ID Nº: 119) e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº:

122), e a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ |D Nº 135) e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146); ou (d) a cadeia pesada compreende uma HVR-H1 compreendendo a sequência de aminoácidos GYTFTDYNLH (SEQ ID Nº: 105), uma HVR-H2 compreendendo a sequência de aminoácidos FIYPSNQITG (SEQ ID Nº: 118), e uma HVR-H3 compreendendo a sequência de aminoácidos SDVDYFDY (SEQ ID Nº: 122), e a região variável de cadeia leve compreende uma HVR-L1 compreendendo a sequência de aminoácidos RASQSVSTSTYSYMH (SEQ ID Nº: 127), uma HVR-L2 compreendendo a sequência de aminoácidos YASNLES (SEQ ID Nº: 135), e uma HVR-L3 compreendendo a sequência de aminoácidos QHSWEIPLT (SEQ ID Nº: 146).

14. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 34-72; e/ou uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 77-

101.

15. Anticorpo, de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende a região variável de cadeia pesada do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-

63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-

63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-

64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 13); e/ou o anticorpo compreende a região variável de cadeia leve do anticorpo AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-

14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-

63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-

63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-

64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, ou AB-64.1.15 (conforme mostrado na Tabela 14).

16. Anticorpo, de acordo com a reivindicação 14 ou 15, caracterizado pelo fato de que: (e) a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59, e/ou a região variável de cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; ou (f) a região variável de cadeia pesada compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65, e/ou a região variável de cadeia leve compreende a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86.

17. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 34, 40, 42, 52, 53, e 73-76; e/ou uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 77, 86, e 102.

18. Anticorpo, de acordo com a reivindicação O,

caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende a região variável de cadeia pesada de AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB- H64, AB-H65, ou AB-H66 (conforme mostrado na Tabela 13); e/ou o anticorpo compreende a região variável de cadeia leve do anticorpo AB- H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65, ou AB-H66 (conforme mostrado na Tabela 14).

19. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula |: GX:X2X3TDYNXaH (SEQ ID Nº: 186), em que X;: é Y ou V, Xcoé Tou A, Xg é F, E, ou H, e Xa é L, F, Y, ou N; uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Il: FIVPXNX2IX3G (SEQ ID Nº: 153), em que X; é S ou A, X2 é G, Q, R ouV,eXsé TouR;e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula Ill: SX;VDYFDX>2 (SEQ ID Nº: 187), em que Xx é T, D, ou F, e X-éY,D,oul;e em que a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-L1 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula IV: XX>SQX3VXaX5sSTYSYMH (SEQ ID Nº: 188), em que X: é RouK, X2 é A, G, ou V, Xgé Sou D, Xa é S, G, ou H, e Xs É T; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula V: YX:X2X3X4X5S (SEQ ID Nº: 189), em que X; é A ou E, Xxé Sou F, Xgé N, Y, ou F, Xaé Lou V e Xsé EouN;e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de acordo com a Fórmula VI: XIHSX2X3X4PLXs (SEQ ID Nº: 157), em que X1 é Q ou E, Xxé Wou E, Xgé E ou A, Xa é louL, e Xsé Tou E.

20. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33,

caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada e uma região variável de cadeia leve, em que a região variável de cadeia pesada compreende: uma HVR-H1 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 105 e 108-114; uma HVR-H2 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo em SEQ ID Nº: 115-120; e uma HVR-H3 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 121-123 e 125-126; e a região variável de cadeia leve compreende: uma HVR-LI compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo conisistindo nas SEQ ID Nº: 127- 128 e 130-134; uma HVR-L2 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 135 e 140-145; e uma HVR-L3 compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 146-

151.

21. Anticorpo, de acordo com a reivindicação O ou O, caracterizado pelo fato de que a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três, ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FRA, em que: VH FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VII: QVQLVAOSGAEVKKPGX:SVKX,SCKAS (SEQ ID Nº: 158), em que Xx é Aou S, eX>é Voul; VH FR2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5;

VH FR3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula VIII: KIAK2K3XaXsXeRX7TXgTVDXaX1oX11STX12Y MELSSLRSEDTAVYYCAR (SEQ ID Nº: 159), em que X: é Y ou S, Xcé Qou E, Xgé Kou D, Ia é F ou D, Xs é Q, F, E, ou T, Xsé G, D, ou H, Xx é Vou A, Xgé M ou L, Xg é T, N, ou Q, Xivé S ou P, X11 é Tou A, e Xcé Vou A; e VH FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula IX: WGQAGTLX:TVSS (SEQ ID Nº: 160), em que X: é VouL; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três, ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3 e VL FRA, em que: VL FR1 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula X: X1IX2X3TASPXCSLXsXsSX7 GXgRXgTIX10C (SEQ ID Nº: 161), em que X: é D ou G, Xcé QouV, X3 é MouL, X-é SouD, Xs é S, P, ou A, Xçé A ou V, Xr é VouL, Xsé Dou E, Xs é Vou A, e X1né T, N, ou D; VL FR2 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula Xl: WYQQKPGX:X2PKLLIK (SEQ ID Nº: 162), em que Xx é K ou Q, e Xcé A ou P; VL FR3 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula XIl: GVPX:RFSGSGSGTDFTLTISSLOX2EDX3AXaYYC (SEQ ID Nº: 163), em que X: é Sou D, Xoé Pou A, Ka é F, L,/ ou V, e Ma É T ouV;e VL FR4 compreende uma sequência de acordo com a Fórmula XIll: FGQGTKLEIX, (SEQ ID Nº: 164), em que Xx é Kou E.

22. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações O a O, caracterizado pelo fato de que a região variável de cadeia pesada compreende uma, duas, três ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VH FR1, VH FR2, VH FR3 e VH FRA,

em que: VH FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 2-4; VH FR2 compreende a sequência da SEQ ID Nº: 5; VH FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 6-19; e VH FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 20-21; e/ou a cadeia leve compreende uma, duas, três, ou quatro regiões de framework selecionadas dentre VL FR1, VL FR2, VL FR3 e VL FRA, em que: VL FR1 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 22-26; VL FR2 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 27-28; VL FR3 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 29-31; e VL FR4 compreende uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 32-33.

23. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações O a O, caracterizado pelo fato de que a região variável de cadeia pesada compreende uma VH FR3 compreendendo uma sequência selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 12-15.

24. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 38 e 40- 72; e/ou uma região variável de cadeia leve compreendendo uma sequência de aminoácidos selecionada do grupo consistindo nas SEQ ID Nº: 86-101.

25. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 58 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 59 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 65 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 66 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 67 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 68 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, ou uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 69 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86.

26. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é da classe IgG, classe IgM, ou classe IgA.

27. Anticorpoy, de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é da classe IgG e tem um isotipo IgG1, IgG2, IgG3 ou I19G4.

28. Anticorpoy de acordo com a reivindicação O,

caracterizado pelo fato de que o anticorpo tem um isotipo IgG4, e em que o anticorpo compreende uma substituição de aminoácido S228P na posição do resíduo 228, uma substituição de aminoácido F234A na posição do resíduo 234, e uma substituição de aminoácido L235A na posição do resíduo 235, em que a numeração da posição dos resíduos está de acordo com a numeração EU.

29. Anticorpoy de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende uma ou mais substituições de aminoácidos na região Fc em uma posição de resíduo selecionada do grupo consistindo em: C127S, L234A, L234F, L235A, L235E, S267E, K322A, L328F, A330S, P331S, ES45R, E430G, S440Y, e qualquer combinação destas, em que a numeração dos resíduos está de acordo com a numeração EU ou Kabat.

30. Anticorpoy de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que: (a) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido na posição E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (b) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições L243A, L235A e P331A, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (c) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições L243A, L235A, P331A e E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (d) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições K322A e E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (e) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU;

(f) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições A330S, P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (g) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições K322A, A330S e P331S, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (h) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições K322A, P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; () a região Fc compreende uma substituição de aminoácido na posição E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; ()) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições A330S, P331S e E430G, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (k) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições S267E e L328F, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (l) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido na posição C127S, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; (m) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições E345R, E430G e S440Y, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU; ou (n) a região Fc compreende uma substituição de aminoácido nas posições L243A, L235A e P331S, em que a numeração da posição do resíduo está de acordo com a numeração EU.

31. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que a proteína CD33 é uma proteína de mamífero ou uma proteína humana.

32. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que a proteína CD33 é uma proteína do tipo selvagem.

33. Anticorpo,y, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que a proteína CD33 é uma variante de ocorrência natural.

34. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que a proteína CD33 é expressa em uma ou mais células selecionadas do grupo consistindo em células dendríticas humanas, macrófagos humanos, monócitos humanos, osteoclastos humanos, neutrófilos humanos, células T humanas, células T helper humanas, células T citotóxicas humanas, granulócitos humanos e micróglia humana.

35. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo se liga especificamente a uma proteína CD33 humana.

36. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é um fragmento de anticorpo que se liga a um epítopo que compreende resíduos de aminoácidos na proteína CD33 humana ou em uma CD33 de mamífero.

37. Anticorpo,y de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é um fragmento de anticorpo que se liga a uma ou mais proteínas humanas selecionadas do grupo consistindo em CD33 humana, uma variante de ocorrência natural da CD33 humana e uma variante de CD33 humana de doença.

38. Anticorpo, de acordo com a reivindicação O ou O, caracterizado pelo fato de que o fragmento de anticorpo é reticulado a um segundo fragmento de anticorpo que se liga a uma ou mais proteínas humanas selecionadas do grupo consistindo em CD33 humana, uma variante de ocorrência natural de CD33 humana e uma variante de CD33 humana de doença.

39. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações O a O, caracterizado pelo fato de que o fragmento é um fragmento Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')2, Fv, ou scFv.

40. Anticorpoy de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é um anticorpo humanizado, um anticorpo biespecífico, um anticorpo monoclonal, um anticorpo multivalente, um anticorpo conjugado, ou um anticorpo quimérico.

41. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é um anticorpo monoclonal.

42. Anticorpoy de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é um anticorpo biespecífico que reconhece um primeiro antígeno e um segundo antígeno.

43. Anticorpo, de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que o primeiro antígeno é CD33 e o segundo antígeno é: (a) um antígeno que facilita o transporte através da barreira hematoencefálica; (b) um antígeno que facilita o transporte através da barreira hematoencefálica selecionada do grupo consistindo em receptor de transferrina (TR), receptor de insulina (HIR), receptor do fator de crescimento semelhante à insulina (IGFR), proteínas 1 e 2 relacionadas ao receptor de lipoproteína de baixa densidade (LPR-1 e 2), receptor da toxina diftérica, CRM197, um anticorpo de domínio único de lhama,

TMEM 30(A), um domínio de transdução de proteína, TAT, Syn-B, penetratina, um peptídeo poli-arginina, um peptídeo angiopep e ANG1005;

(c) um agente causador de doença selecionado do grupo consistindo em peptídeos ou proteínas causadoras de doença e ácidos nucleicos causadores de doença, em que os peptídeos ou proteínas causadoras de doença são selecionados do grupo consistindo em beta amiloide, beta amiloide oligomérica, placas beta amiloides, proteína precursora amiloide ou fragmentos desta, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS, C90orf/2 (quadro de leitura aberto 72 do cromossomo 9), proteína c9RAN, proteína do príon, PrPSc, huntingtina, calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpos de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide da ilhota, insulina, apolipoproteína Al, amiloide A sérica, medina, prolactina, transtirretina, lisozima, beta 2 microglobulina, gelsolina, ceratoepitelina, cistatina, cadeia leve de imunoglobulina AL, proteína S-IBM, produtos da tradução não-ATG associados à repetição (RAN), peptídeos de repetição de dipeptídeos (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina-prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina- arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), ubiquitina, e peptídeo de repetição de prolina-arginina (PR), e os ácidos nucleicos causadores de doença são RNA de expansão de repetição GGCCCC (G2C4) antissenso;

(d) ligantes e/ou proteínas expressas em células imunológicas, em que os ligantes e/ou proteínas selecionadas do grupo consistindo em de CD40, OX40, ICOS, CD28, CD137/4-1BB, CD27, GITR, PD-L1, CTLA4, PD-L2, PD-1, B7-H3, B7-H4, HVEM, LIGHT, BTLA, CD38, TIGIT, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIM4, AZAR, LAG3, DR5, CD39, CD70, CD73, TREM1, TREM?Z, Siglec-5, Siglec-7,

Siglec-9, Siglec-11, SirpA, CD47, receptor de CSF1, e fosfatidilserina; e (e) uma proteína, lipídio, polissacarídeo ou glicolípido expresso em uma ou mais células tumorais.

44, Anticorpoy, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo é usado em combinação com um ou mais anticorpos que se ligam especificamente a um agente causador de doença selecionado do grupo consistindo em peptídeos causadores de doença, proteínas causadoras de doença, beta amiloide, beta amiloide oligomérica, placas beta amiloides, proteína precursora amiloide ou fragmentos desta, Tau, IAPP, alfa-sinucleína, TDP-43, proteína FUS, C9orf72 (quadro de leitura aberto 72 do cromossomo 9), proteína do príon, PrPSc, huntingtina, calcitonina, superóxido dismutase, ataxina, ataxina 1, ataxina 2, ataxina 3, ataxina 7, ataxina 8, ataxina 10, corpos de Lewy, fator natriurético atrial, polipeptídeo amiloide da ilhota, insulina, apolipoproteína Al, amiloide A sérica, medina, prolactina, transtirretina, lisozima, beta 2 microglobulina, gelsolina, ceratoepitelina, cistatina, cadeia leve de imunoglobulina AL, proteína S-IBM, produtos da tradução não-ATG associados à repetição (RAN), peptídeos de repetição de dipeptídeos (DPR), peptídeos de repetição de glicina-alanina (GA), peptídeos de repetição de glicina-prolina (GP), peptídeos de repetição de glicina- arginina (GR), peptídeos de repetição de prolina-alanina (PA), ubiquitina, e peptídeos de repetição de prolina-arginina (PR), e qualquer combinação destes; ou com um ou mais anticorpos que se ligam a uma proteína imunomoduladora selecionada do grupo consistindo em: CDA40, OX40, ICOS, CD28, CD137/4-1BB, CD27 , GITR, PD-L1, CTLAA4, PD-L2, PD-1, B7-H3, B7-H4, HVEM, LIGHT, BTLA, CD38, TIGIT, VISTA, KIR, GAL9, TIM1, TIM3, TIM4, A2AR3, DR5, CD39, CD70, CD73, LAG3, TREM1, TREM2, Siglec-5, Siglec-7, Siglec-9, Siglec-11, SirpA, CD47, receptor de CSF1, fosfatidilserina, ácidos nucleicos causadores de doença, RNA de expansão de repetição GGCCCC (G2C4) antissenso, e qualquer combinação destes.

45. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo tem uma constante de dissociação (Kp) para a CD33 humana que é pelo menos 4 vezes menor que o anticorpo anti-CD33 que compreende uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; pelo menos 1 vez menor que o anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; ou pelo menos 1 vez menor que o anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve da sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86, em que a Kp é determinada por ressonância plasmônica de superfície.

46. Anticorpoy de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo tem uma constante de dissociação (Kp) para a CD33 humana que varia de cerca de 2 nM a cerca de 200 pM, ou menos que cerca de 200 pM, e em que a Kp é determinada por Interferometria de Biocamada.

47. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo reduz os níveis de CD33 de superfície celular.

48 Anticorpo, de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que a CD33 é expressa na superfície de células dendríticas humanas.

49. Anticorpo, de acordo com a reivindicação O ou O,

caracterizado pelo fato de que o anticorpo reduz os níveis de CD33 de superfície celular in vitro.

50. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações O a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo reduz os níveis de CD33 de superfície celular in vitro com uma meia concentração efetiva máxima (ECs5o) que é inferior a 150 pM, conforme medido por citometria de fluxo.

51. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações O a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo reduz os níveis de CD33 de superfície celular in vitro com uma ECrso que é pelo menos 50% mais baixa que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 34 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 77; pelo menos 10% mais baixa que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 40 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; pelo menos 10% mais baixa que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 52 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 86; ou pelo menos 10 vezes mais baixa que um anticorpo anti-CD33 compreendendo uma região variável de cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 103 e uma região variável de cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 104, conforme medido por citometria de fluxo.

52. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compete com um ou mais anticorpos selecionados do grupo consistindo em AB-

14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-

63.8, AB-63.9, AB-63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-

63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-

64.4, AB-64.5, AB-64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-

64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-

64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB- H65, AB-H66, e qualquer combinação destes pela ligação à CD33.

53. Anticorpo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a O, caracterizado pelo fato de que o anticorpo se liga essencialmente ao mesmo epítopo de CD33 que um anticorpo selecionado do grupo consistindo em AB-14.1, AB-14.2, AB-14.3, AB-

14.4, AB-14.5, AB-14.6, AB-14.7, AB-14.8, AB-14.9, AB-14.10, AB-

14.11, AB-63.4, AB-63.5, AB-63.6, AB-63.7, AB-63.8, AB-63.9, AB-

63.10, AB-63.11, AB-63.12, AB-63.13, AB-63.14, AB-63.15, AB-63.16, AB-63.17, AB-63.18, AB-64.1, AB-64.2, AB-64.3, AB-64.4, AB-64.5, AB-

64.6, AB-64.7, AB-64.8, AB-64.1.1, AB-64.1.2, AB-64.1.3, AB-64.1.4, AB-64.1.5, AB-64.1.6, AB-64.1.7, AB-64.1.8, AB-64.1.9, AB-64.1.10, AB-64.1.11, AB-64.1.12, AB-64.1.13, AB-64.1.14, AB-64.1.15, AB-H2, AB-H9, AB-H14, AB-H15, AB-H63, AB-H64, AB-H65 e AB-H66.

54. Anticorpo que se liga a uma proteína CD33, caracterizado pelo fato de que o anticorpo compreende (a) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 176 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185; (b) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 197 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185; (c) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 177 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(d) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 198 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(e) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 178 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(f) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 199 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(g) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 179 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(h) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 200 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(i)º uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 180 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(]))º uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 201 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(k) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 181 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(Il) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 202 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185;

(m) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 182 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185; (n) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 203 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185; (0) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 183 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185; (Pp) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 204 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185; (q) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 184 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185; ou (r) uma cadeia pesada compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 205 e uma cadeia leve compreendendo a sequência de aminoácidos da SEQ ID Nº: 185.

55. Ácido nucleico isolado, caracterizado pelo fato de que compreende uma sequência de ácido nucleico que codifica o anticorpo, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 54.

56. Vetor, caracterizado pelo fato de que compreende o ácido nucleico, como definido na reivindicação 55.

57. Célula hospedeira isolada, caracterizada pelo fato de que compreende o vetor, como definido na reivindicação O.

58. Método de produção de um anticorpo que se liga à CD33, caracterizado pelo fato de que compreende o cultivo da célula, como definida na reivindicação O, para que o anticorpo seja produzido.

59. Método, de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que compreende ainda a recuperação do anticorpo produzido pela célula.

60. Anticorpo isolado, caracterizado pelo fato de que se liga à CD33 produzida pelo método, como definido na reivindicação O ou O.

61. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o anticorpo, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 54, e um veículo farmaceuticamente aceitável.

62. Método de prevenção, redução do risco, ou tratamento de uma doença, distúrbio ou lesão selecionado do grupo consistindo em demência, demência frontotemporal, mal de Alzheimer, demência vascular, demência mista, doença tipo taupatia, infecções e câncer, caracterizado pelo fato de que compreende a administração, a um indivíduo em necessidade, de uma quantidade terapeuticamente eficaz do anticorpo, como foi definido em qualquer uma das reivindicações 1 a

54.

63. Método, de acordo com a reivindicação O, caracterizado pelo fato de que a doença, distúrbio, ou lesão é câncer.

64. Método, de acordo com a reivindicação O ou O, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado do grupo consistindo em câncer de bexiga, câncer de cérebro, câncer de mama, câncer de cólon, câncer do reto, câncer do endométrio, câncer de rim, câncer de células renais, câncer da pelve renal, leucemia, câncer de pulmão, melanoma, linfoma não-Hodgkin, câncer pancreático, câncer de próstata, câncer de ovário, fibrossarcoma, leucemia linfobástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), leucemia mieloide crônica (LMC), e mieloma múltiplo.