BR112019021992A2

BR112019021992A2 - inibidores de ahr de indol e usos dos mesmos

Info

Publication number: BR112019021992A2
Application number: BR112019021992A
Authority: BR
Inventors: C Castro Alfredo; Anne Evans Catherine
Original assignee: Kyn Therapeutics
Priority date: 2017-04-21
Filing date: 2018-04-20
Publication date: 2020-06-09
Also published as: IL270025A; TW201841917A; CO2019011584A2; CN110831600A; EP3612030A2; SG11201909710XA; TWI778050B; JP2022116319A; CA3059939A1; US20180327411A1; CN110831600B; US20200331917A1; IL270025B2; IL270025B1; JP2020517734A; JP7232244B2; WO2018195397A3; MX2019012431A; CL2019003015A1; US10689388B1

Abstract

a presente invenção refere-se a compostos úteis como inibidores de ahr, composições dos mesmos, e métodos de uso dos mesmos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para INIBIDORES DE AHR DE INDOL E USOS DOS MESMOS.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0001] O receptor de aril-hidrocarboneto (AHR) é um fator de transcrição que sem ligante existe no estado inativo no citoplasma ligado ao HSP90. Após a ligação do ligante, o AHR se transloca para o núcleo, onde dimeriza com o ARNT, formando um fator de transcrição funcional. AHR / ARNT liga elementos de resposta à dioxina (DRE) no promotor de muitos genes, onde modula a transcrição de genes. Os genes mais bem documentados regulados pelo AHR são os genes do citocromo P450 Cyp1b1 e Cyp1a1, onde a ativação do AHR aumenta significativamente a expressão desses genes. Portanto, os níveis de mRNA de Cyp1b1 e Cyp1a1 são uma leitura seletiva da ativação de AHR (revisado em Murray et al., 2014).

[0002] Existem muitos agonistas exógenos e endógenos da AHR que ativam o receptor. A classe de ligantes exógenos melhor caracterizada são as dioxinas. Um dos primeiros ligantes endógenos a serem caracterizados é a quinurenina, gerada por TDO (Opitz 2011) ou IDO (Mezrich 2010). A quinurenina é um metabólito estável na via IDO / TDO e é o produto da degradação do triptofano. A cinurenina demonstrou ativar o AHR conforme medido por um aumento nos níveis de mRNA de Cyp1a1 e / ou Cyp1b1 em vários tipos de células, juntamente com outros genes controlados por DRE.

[0003] A ativação do AHR tem efeitos pró-tumorais agindo diretamente nas células tumorais e indiretamente causando imunossupressão, portanto, não permitindo que o próprio sistema imunológico do corpo ataque o tumor. Por exemplo, a ativação do AHR por meio de múltiplos ligantes leva ao aumento da expressão do FoxP3 e resulta em uma polarização das células T CD4 + em direção a um subconjunto supressor chamado células reguladoras do Foxp3 + T

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2/652 (Tregs). Essas células T-reg inibem a proliferação de células T ativadas (Funatake 2005, outras refs). Curiosamente, a quinurenina demonstrou induzir Tregs imunossupressores através da AHR. A cinurenina não afeta a geração de T-reg nas células T nulas AHR ou quando um antagonista da AHR é adicionado (Mezrich). Além dos T-regs, a ativação do AHR também leva à expansão de células T supressoras Tr1 (Gandhi 2010). Também foi demonstrado que a expressão do IDO é regulada pela ativação do AHR nas células tumorais e nas células T, levando ao aumento da supressão imune (Vogei). É provável que também haja um papel para a AHR nas células mieloides imunossupressoras (Nguyen 2013). A supressão imunológica é frequentemente associada a altos níveis de citocinas anti-inflamatórias e há evidências de que o AHR está envolvido na ativação de muitas dessas citocinas, como a IL-10 (Gandhi 2010, Wagage 2014).

[0004] Permanece uma necessidade não atendida de desenvolver inibidores da AHR para o tratamento de doenças, distúrbios e condições associadas a eles.

SUMARIO DA INVENÇÃO

[0005] Foi agora descoberto que os compostos desta invenção e suas composições farmaceuticamente aceitáveis são eficazes como inibidores da AHR. Tais compostos têm a fórmula geral I:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que cada variável é como definida e descrita aqui.

[0006] Os compostos da presente invenção, e suas composições farmaceuticamente aceitáveis, são úteis para o tratamento de uma

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3/652 variedade de doenças, distúrbios ou condições associadas à AHR. Tais doenças, distúrbios ou condições incluem aqueles aqui descritos.

[0007] Os compostos fornecidos por esta invenção também são úteis para o estudo de AHR em fenômenos biológicos e patológicos; o estudo das vias de transdução de sinal intracelular; e a avaliação comparativa de novos inibidores de AHR in vitro ou in vivo.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0008] A FIG. 1 representa um gráfico mostrando a inibição dos níveis de expressão de IL22 e RNA cyplal com um composto aqui descrito.

[0009] A FIG. 2 representa um gráfico que mostra a diminuição da proteína IL-22 (em cima) e o aumento em IL-2 (em baixo) por tratamento de células T ativadas com um composto aqui descrito.

[0010] A FIG. 3 representa um gráfico mostrando o estudo de eficácia de CT26 com um veículo, um composto aqui descrito, anti-PD1 e uma combinação dos mesmos.

[0011] A FIG. 4 representa um gráfico mostrando o estudo de eficácia de B16-IDO com um veículo, um composto aqui descrito, antiPD-1 e uma combinação dos mesmos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DE ALGUMAS MODALIDADES

1. Descrição Geral de Compostos da Invenção·.

[0012] Em certas modalidades, a presente invenção fornece inibidores de AHR. Em algumas modalidades, esses compostos incluem aqueles de fórmula I:

/TV(^Ry)n ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que:

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O Anel A é selecionado de :

cada R¹ são independentemente selecionados de R, -C(O)R, C(O)OR, -SO2R, -C(O)N(R)₂, ou -SO₂RN(R)₂;

cada R é independentemente hidrogênio, deutério, ou um grupo opcionalmente substituído selecionado de C1-6 alifático, um anel carbocíclico monocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 3 a 8 membros, fenila, um anel carbocíclico aromático bicíclico de 8 a 10 membros; um anel heterocíclico monocíclicosaturado ou parcialmente insaturado de 4 a 8 membros tendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel heteroaromático bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 5 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

cada ou R^x, R^y, e R^z são independentemente selecionados de R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)₂, -N(R)C(O)R, -C(O)N(R)₂, N(R)C(O)N(R)₂, -N(R)C(O)OR, -OC(O)N(R)₂, -N(R)SO₂R, SO₂RN(R)₂, -C(O)R, -C(O)OR, -OC(O)R, -C(O)OR, -S(O)R,

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5/652 ou -SO2R, ou :

dois R^x no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S; ou:

dois R^y no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S;

cada de m e n é independentemente 1,2,3, 4, ou 5;

O Anel B é fenila, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

O Anel C é fenila ou um anel heteroarila de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre; ou um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

L¹ é uma ligação covalente ou uma cadeia hidrocarboneto bivalente linear ou ramificada de C1-6 membros opcionalmente substituídos em que uma unidade metileno de L¹ é opcionalmente substituída com -Cy-, -O-, -S-, -NR-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R)-, N(R)C(O)-, -SO2-, -N(R)SO₂-, ou -SO₂N(R)-S; e

-Cy- é anel monocíclico bivalente saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 3 a 8 membros tendo 0 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel bicíclico bivalente saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 8 a 10 membros tendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre.

[0013] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece

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6/652 inibidores de AHR, tais compostos incluem aqueles de fórmula I':

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que:

O Anel A é selecionado de :

cada p é independentemente 0, 1, ou 2, como a valência o permitir;

cada R¹ são independentemente selecionados de R, -C(O)R, C(O)OR, -SO₂R, -C(O)N(R)₂, ou -SO₂RN(R)₂;

cada R é independentemente hidrogênio, deutério, ou um grupo

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7/652 opcionaímente substituído selecionado de C1-6 alifático, um anel carbocíclico monocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 3 a 8 membros, fenila, um anel carbocíclico aromático bicíclico de 8 a 10 membros; um anel heterocíclico monocíclicosaturado ou parcialmente insaturado de 4 a 8 membros tendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel heteroaromático bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 5 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre; ou dois R no mesmo nitrogênio são tomados junto com seus átomos intermediários para formar um um anel saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 4 a 7 membros tendo 1 a 2 heteroátomos além do nitrogênio independentemente selecionados de oxigênio, nitrogênio, ou enxofre;

cada ou R^x, R^y, e R^z são independentemente selecionados de R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)₂, -N(R)C(O)R, -C(O)N(R)₂, C(O)N(R)OR, -N(R)C(O)N(R)₂, -N(R)C(O)OR, -OC(O)N(R)₂, N(R)SO₂R, -SO₂RN(R)₂, -C(O)R, -C(O)OR, -OC(O)R, -C(O)OR, S(O)R, ou -SO₂R, ou :

dois R^x no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S; ou:

dois R^y no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S; cada de m e n é independentemente 1,2,3, 4, ou 5;

O Anel B é fenila, um anel bicíclico parcialmente insaturado ou carbocíclico aromático de 7 a 10 membros, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4

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8/652 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel tricíclico de 12 a 15 membros parcialmente insaturado ou aromático 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

O Anel C é fenila ou um anel heteroarila de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

L¹ é uma ligação covalente ou uma cadeia hidrocarboneto bivalente linear ou ramificada de C1-6 membros opcionalmente substituídos em que uma unidade metileno de L¹ é opcionalmente substituída com -Cy-, -O-, -S-, -NR-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R)-, N(R)C(O)-, -SO₂-, -N(R)SO₂-, ou -SO₂N(R)-S; e

[0014] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I ou fórmula I', com a condição de que

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; e/ou Anel C não ou

[0015] Como de modo geral definido acima, o Anel A é selecionado de :

[0016] Alguém versado na técnica facilmente entenderá e apreciará que existam múltiplas orientações de Anel A. Por exemplo,

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10/652 e para os propósitos de clareza, quando o Anel A é selecionado ser

modalidades podem ser consideradas pelas quais o Anel A é orientado em fórmula I ou fórmula Γ como

Consequentemente, ambas as tais orientações são contempladas pela presente invenção.

[0017] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I ou fórmula I', com a condição de que L¹ não seja

-NHCH2CH2-. Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I ou fórmula I', com a condição de que quando

, L¹ não seja -NHCH2CH2-.

2. Compostos e Definições:

[0018] Compostos desta invenção incluem aqueles descritos de modo geral acima, e são também ilustrados pelas classes, subclasses, e espécies descritas aqui. Quando usadas aqui, as seguintes definições devem aplicar-se, a menos que de outro modo indicado. Para os propósitos desta invenção, os elementos químicos são identificados de acordo com a Tabela Periódica dos Elementos, versão CAS, Handbook of Chemistry e Physics, 75^a Ed. Adicionalmente, os princípios gerais de química orgânica são descritos em Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, e March’s Advanced

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Organic Chemistry, 5^a Ed., Ed.: Smith, M.B. e March, J., John Wiley & Sons, New York: 2001, a íntegra dos quais é pelo presente incorporada por referência.

[0019] O termo alifático ou grupo alifático, quando usado aqui, significa uma cadeia hidrocarboneto linear (isto é, não ramificada) ou ramificada, substituída ou não substituída que é completamente saturada ou que contém uma ou mais unidades de insaturação, ou um hidrocarboneto monocíclico ou hidrocarboneto bicíclico que é completamente saturada ou que contém uma ou mais unidades de insaturação, porém que não é aromática (também referida aqui como carbociclo, cicloalifático ou cicloalquila), que tem um único ponto de ligação ao restante da molécula. A menos que de outro modo especificado, grupos alifáticos contêm 1 a 6 átomos de carbono alifáticos. Em algumas modalidades, grupos alifáticos contêm 1 a 5 átomos de carbono alifáticos. Em outras modalidades, grupos alifáticos contêm 1 a 4 átomos de carbono alifáticos. Ainda em outras modalidades, grupos alifáticos contêm 1 a 3 átomos de carbono alifáticos, e todavia em outras modalidades, grupos alifáticos contêm 1 a 2 átomos de carbono alifáticos. Em algumas modalidades, cicloalifático (ou carbociclo ou cicloalquila) refere-se a um C3-C6 hidrocarboneto monocíclico que é completamente saturado ou que contém uma ou mais unidades de insaturação, porém que não é aromático, que tem um único ponto de ligação ao restante da molécula. Grupos alifáticos adequados incluem, porém não estão limitados a, grupos alquila, alquenila, alquinila lineares ou ramificados, substituídos ou não substituídos e híbridos dos mesmos tal como (cicloalquil)alquila, (cicloalquenil)alquila ou (cicloalquil)alquenila.

[0020] O termo alquila inferior refere-se a um grupo C1-4 alquila linear ou ramificado. Exemplos de grupos alquila inferiores são metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, e terc-butila.

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[0021] O termo haloalquila inferior refere-se a um grupo C1-4 alquila linear ou ramificado que é substituído com um ou mais átomos de halogênio.

[0022] O termo heteroátomo significa um ou mais de oxigênio, enxofre, nitrogênio, fósforo, ou silício (incluindo, qualquer forma oxidada de nitrogênio, enxofre, fósforo, ou silício; a forma quaternizada de qualquer nitrogênio básico ou; um nitrogênio substituível de um anel heterocíclico, por exemplo, N (como em 3,4-di-hidro-2/-/-pirrolila), NH (como em pirrolidinila) ou NR⁺ (como em N-pirrolidinila substituída).

[0023] O termo insaturado, quando usado aqui, significa que uma porção tem uma ou mais unidades de insaturação.

[0024] Quando usado aqui, o termo a cadeia hidrocarboneto, saturada ou insaturada, linear ou ramificado Ci-e (ou Ci-β) bivalente, refere-se às cadeias alquileno, alquenileno, e alquinileno bivalentes que são lineares ou ramificadas como aqui definido.

[0025] O termo alquileno refere-se a um grupo alquila bivalente. Uma cadeia alquileno é um grupo polimetileno, isto é, -(CH2)n-, em que n é um número inteiro positivo, preferivelmente, de 1 a 6, de 1 a 4, de 1 a 3, de 1 a 2, ou de 2 a 3. Uma cadeia alquileno substituída é um grupo polimetileno em que um ou mais átomos de hidrogênio de metileno são substituídos com um substituinte. Substituintes adequados incluem aqueles descritos abaixo para um grupo alifático substituído.

[0026] O termo alquenileno refere-se a um grupo alquenila bivalente. Uma cadeia alquenileno substituído é um grupo polimetileno contendo pelo menos uma ligação dupla em que um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos com um substituinte. Substituintes adequados incluem aqueles descritos abaixo para um grupo alifático substituído.

[0027] Quando usado aqui, o termo ciclopropilenila refere-se a um grupo ciclopropila bivalente da seguinte estrutura: .

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[0028] Quando usado aqui, o termo ciclobutilenila refere-se a um grupo ciclobutila bivalente da seguinte estrutura:

[0029] Quando usado aqui, o termo oxetanila refere-se a um grupo

exetanila bivalente da seguinte estrutura: °

[0030] O termo halogênio significa F, Cl, Br, ou I.

[0031] O termo arila usado sozinho ou como parte de uma porção maior como em aralquila, aralcóxi, ou ariloxialquila, refere-se a sistemas de anel monocíclico ou bicíclico tendo um total de cinco a quatorze membros de anel, em que pelo menos um anel no sistema é aromático e em que cada anel no sistema contém 3 a 7 membros de anel. O termo arila pode ser usado alternadamente com o termo anel arila.

[0032] O termo arila usado sozinho ou como parte de uma porção maior como em aralquila, aralcóxi, ou ariloxialquila, refere-se a sistemas de anel monocíclico e bicíclico tendo um total de cinco a 10 membros de anel, em que pelo menos um anel no sistema é aromático e em que cada anel no sistema contém três a sete membros de anel. O termo arila pode ser usado alternadamente com o termo anel arila. Em certas modalidades da presente invenção, arila refere-se a um sistema de anel aromático que inclui, porém não está limitado a, fenila, bifenila, naftila, antracila e similares, que pode conter um ou mais substituintes. Também incluído no escopo do termo arila, como é usado aqui, é um grupo em que um anel aromático é fundido a um ou mais anéis não aromáticos, tal como indanila, ftalimidila, naftimidila, fenantridinila, ou tetra-hidronaftila, e similares.

[0033] Os termos heteroarila e heteroar-, usados sozinhos ou como parte de uma porção maior, por exemplo, heteroaralquila, ou heteroaralcóxi, referem-se a grupos que contém 5 a 10 átomos de

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14/652 anel, preferivelmente, 5, 6, ou 9 átomos de anel; tendo 6, 10, ou 14 π elétrons compartilhados em uma disposição cíclica; e tendo, em adição a átomos de carbono, de um a cinco heteroátomos. O termo heteroátomo refere-se a nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, e inclui qualquer forma oxidada de nitrogênio ou enxofre, e qualquer forma quaternizada de um nitrogênio básico. Grupos heteroarila incluem, sem limitação, tienila, furanila, pirrolila, imidazolila, pirazolila, triazolila, tetrazolila, oxazolila, isoxazolila, oxadiazolila, tiazolila, isotiazolila, tiadiazolila, piridila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, indolizinila, purinila, naftiridinila, e pteridinila. Os termos heteroarila e heteroar-, quando usadas aqui, também incluem grupos em que um anel heteroaromático é fundido a um ou mais anéis arila, cicloalifático, ou heterociclila, onde o radical ou ponto de ligação está sobre o anel aromático. Exemplos não limitantes incluem indolila, isoindolila, benzotienila, benzofuranila, dibenzofuranila, indazolila, benzimidazolila, benztiazolila, quinolila, isoquinolila, cinnolinila, ftalazinila, quinazolinila, quinoxalinila, 4/-/—quinolizinila, carbazolila, acridinila, fenazinila, fenotiazinila, fenoxazinila, tetra-hidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, e pirido[2,3-b]-1,4-oxazin-3(4H)-ona. Um grupo heteroarila pode ser mono- ou bicíclico. O termo heteroarila pode ser usado alternadamente com os termos anel heteroarila, grupo heteroarila, ou heteroaromático, qualquer de tais termos incluem anéis que são opcionalmente substituídos. O termo heteroaralquila refere-se a um grupo alquila substituído por uma heteroarila, em que as porções alquila e heteroarila independentemente são opcionalmente substituídas.

[0034] Quando usados aqui, os termos heterociclo, heterociclila, radical heterocíclico, e anel heterocíclico são usados alternadamente e se referem a uma porção heterocíclica de 5 a 7 membros monocíclica ou 7 a 10 membros bicíclica que é saturada ou parcialmente insaturada, e tendo, em adição a átomos de carbono, um ou mais, preferivelmente,

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15/652 um a quatro, heteroátomos, como definido acima. Quando usado em referência a um átomo de anel de um heterociclo, o termo nitrogênio inclui um nitrogênio substituído. Como um exemplo, em um anel saturado ou parcialmente insaturado tendo 0 a 3 heteroátomos selecionados de oxigênio, enxofre ou nitrogênio, o nitrogênio pode ser N (como em 3,4—di-hidro—2/-/—pirrolila), NH (como em pirrolidinila), ou ⁺NR (como em Λ/—pirrolidinila substituída).

[0035] Um anel heterocíclico pode ser ligado a seu grupo pendente em qualquer heteroátomo ou átomo de carbono que resulta em uma estrutura estável e qualquer dos átomos de anel podem ser opcionalmente substituídos. Exemplos de tais radicais heterocíclicos saturados ou parcialmente insaturados incluem, sem limitação, tetrahidrofuranila, tetra-hidrotiofenil pirrolidinila, piperidinila, pirrolinila, tetrahidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, deca-hidroquinolinila, oxazolidinila, piperazinila, dioxanila, dioxolanila, diazepinila, oxazepinila, tiazepinila, morfolinila, e quinuclidinila. Os termos heterociclo, heterociclila, anel heterociclila, grupo heterocíclico, porção heterocíclica, e radical heterocíclico, são usados alternadamente aqui, e também incluem grupos em que um anel heterociclila é fundido a um ou mais anéis arila, heteroarila, ou cicloalifáticos, tal como indolinila, 3H-indolila, cromanila, fenantridinila, ou tetra-hidroquinolinila, onde o radical ou ponto de ligação é no anel heterociclila. Um grupo heterociclila pode ser mono- ou bicíclico. O termo heterociclilalquila refere-se a um grupo alquila substituído por uma heterociclila, em que as porções alquila e heterociclila independentemente são opcionalmente substituídas.

[0036] Quando usado aqui, o termo parcialmente insaturado refere-se a uma porção de anel que inclui pelo menos uma ligação dupla ou tripla. O termo parcialmente insaturado é destindo a abranger anéis tendo múltiplos sítios de insaturação, porém não se destina a incluir

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16/652 porções arila ou heteroarila, como aqui definido.

[0037] Como descrito aqui, compostos da invenção podem conter porções opcionalmente substituídas. Em geral, o termo substituído, se precedido pelo termo opcionalmente ou não, significa que um ou mais hidrogênios da porção designada são substituídos com um substituinte adequado. A menos que de outro modo indicado, um grupo opcionalmente substituído pode ter um substituinte adequado em cada posição substituível do grupo, e quando mais de uma posição em qualquer dada estrutura podem ser substituídas com mais de um substituinte selecionados de um grupo especificado, o substituinte pode ser o mesmo ou diferente em todas as posições. Combinações de substituintes considerados por esta invenção são, preferivelmente, aqueles que resultam na formação de compostos estáveis ou quimicamente viáveis. O termo estável, quando usado aqui, refere-se a compostos que não são substancialmente alterados quando submetidos a condições que permitam sua produção, detecção, e, em certas modalidades, sua recuperação, purificação, e uso para um ou mais dos propósitos descritos aqui.

[0038] Substituintes monovalentes adequados em um átomo de carbono substituível de um grupo opcionalmente substituído são independentemente halogênio; -(CH2)o-4R°; -(CH2)o-40R°; -0(CH2)o₄R°, -0-(CH₂)o-₄C(0)OR°; -(CH₂)o-₄CH(OR°)₂; -(CH₂)o-4SR°; -(CH₂)o₄Ph, que podem ser substituídos com R°; -(CH2)o-₄0(CH2)o-iPh que pode ser substituído com R°; -CH=CHPh, que pode ser substituído com R°; -(CH2)o-₄0(CH2)o-i-piridyl que pode ser substituído com R°; -NO2; -CN; -N₃; -(CH₂)o-₄N(R°)₂; -(CH₂)o-₄N(R°)C(0)R°; -N(R°)C(S)R°; (CH₂)o-₄N(R⁰)C(0)NR⁰2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)o-4N(R°)C(0)OR°; N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R^o)C(O)NR^o2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; (CH₂)o-₄C(0)R°; -C(S)R°; -(CH₂)o-₄C(0)OR°; -(CH₂)o₄C(O)SR°; -(CH₂)o-₄C(0)OSíR°₃; -(CH₂)o-₄OC(0)R°; -OC(0)(CH₂)oPetição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 46/704

17/652 ₄SR-, SC(S)SR°; -(CH₂)o-4SC(0)R°; -(CH₂)o-4C(0)NR°₂; -C(S)NR^o2; C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH2)0-4OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)o-4SSR°; -(CH2)o4S(0)2R^o; -(CH2)o-4S(0)₂OR°; -(CH₂)o-40S(0)₂R°;

S(0)₂NR^o2; -(CH2)o-4S(0)R°; -N(R^o)S(O)2NR°₂; -N(R^o)S(O)2R°; N(OR°)R°; -C(NH)NR^o2; -P(0)₂R^o; -P(0)R^o2; -0P(0)R^o2; OP(O)(OR°)₂; SíR°3; -(C1-4 alquileno linear ou ramificado)O-N(R°)₂; ou -(C1-4 alquileno linear ou ramificado)C(O)O-N(R°)₂, em que cada R° pode ser substituído como definido abaixo e é independentemente hidrogênio, C1-6 alifático, -CH₂Ph, -0(CH₂)o-iPh, -CH₂-(anel heteroarila de 5 a 6 membros), ou um anel de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou, não obstante a definição acima, duas ocorrências independentes de R°, tomados junto com seu(s) átomo(s) intermediário(s), formam um anel mono- ou bicíclico de 3 a 12 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, que pode ser substituído como definido abaixo.

[0039] Substituintes monovalentes adequados em R° (ou 0 anel formado tomando duas ocorrências independentes de R° junto com seus átomos intermediários), são independentemente halogênio, (CH₂)₀-₂R·, -(haloR·), -(CH₂)₀-₂OH, -(CH₂)₀-₂OR·, -(CH₂)₀ ₂CH(OR*)₂; -O(haloR·), -CN, -N₃, -(CH₂)o-₂C(0)R·, -(CH₂)₀-₂C(O)OH, -(CH₂)o-₂C(0)OR·, -(CH₂)o-₂SR*, -(CH₂)o-₂SH, -(CH₂)o-₂NH₂, -(CH₂)o₂NHR·, -(CH₂)o-₂NR*₂, -NO₂, -SíR*3, -OSíR*3, -C(O)SR* -(C1-4 alquileno linear ou ramificado)C(O)OR·, ou -SSR* em que cada R* é não substituído ou onde precedido por halo é substituído apenas com um ou mais halogênios, e são independentemente selecionados de C14 alifático, -CH₂Ph, -0(CH₂)o-iPh, ou um anel de 5 a 6 membros

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18/652 saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Substituintes divalentes adequados em um átomo de cabono saturado de R° incluem =0 e =S.

[0040] Substituintes divalentes adequados em um átomo de cabono saturado de um grupo opcionalmente substituído incluem os seguintes: =0, =S, =NNR‘₂, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR‘, =NNHS(O)₂R‘, =NR*, =NOR*, -O(C(R*₂))₂_₃O-, ou -S(C(R*₂))₂_₃S-, em que cada ocorrência independente de R* é selecionado de hidrogênio, C1-6 alifático que pode ser substituído como definido abaixo, ou um anel não substituído de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Substituintes divalentes adequados que são ligados a carbonos substituíveis vicinais de um grupo opcionalmente substituído incluem: -O(CR*₂)₂-₃O-, em que cada ocorrência independente de R* é selecionado de hidrogênio, Ciβ alifático que pode ser substituído como definido abaixo, ou um anel não substituído de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre.

[0041] Substituintes adequados no grupo alifático de R* incluem halogênio, -R·, -(haloR·), -OH, -OR·, -O(haloR·), -CN, -C(O)OH, C(O)OR·, —NH₂, -NHR·, -NR*₂, ou -NO₂, em que cada R* é não substituído ou onde precedido por halo é substituído apenas com um ou mais halogênios, e é independentemente C1-4 alifático, -CH₂Ph, 0(CH₂)o-iPh, ou um anel de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre.

[0042] Substituintes adequados em um nitrogênio substituível de um grupo opcionalmente substituído incluem -R^f, -NR^f ₂, -C(O)R^f,

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C(O)OR^f, -0(0)0(0^, -C(0)CH2C(0)R^t, -S(0)2R^t, -S(O)₂NRt₂, C(S)NRt₂, -C(NH)NRt₂, ou -N(Rt)S(O)₂R^t; em que cada Rt é independentemente hidrogênio, C1-6 alifático que pode ser substituído como definido abaixo, -OPh não substituído, ou um anel não substituído de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou, não obstante a definição acima, duas ocorrências independentes de R^f, tomados junto com seu(s) átomo(s) intermediário(s) formam um anel não substituído de 3 a 12 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila mono- ou bicíclico tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre.

[0043] Substituintes adequados no grupo alifático de R^f são independentemente halogênio, -R·, -(haloR·), -OH, -OR·, -O(haloR·), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR·, -NH₂, -NHR·, -NR*₂, ou -NO₂, em que cada R* é não substituído ou onde precedido por halo é substituído apenas com um ou mais halogênios, e é independentemente Ci4 alifático, -CH₂Ph, -0(CH₂)o-iPh, ou um anel de 5 a 6 membros saturado, parcialmente insaturado, ou arila tendo 0 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre.

[0044] Quando usado aqui, o termo sal farmaceuticamente aceitável refere-se àqueles sais que se incluem no escopo de diagnóstico médico seguro, adequado para uso em contato com os tecidos de humanos e animais inferiores sem a indevida toxicidade, irritação, resposta alérgica e similares, e são comensurados com uma relação benefício/risco razoável. Sais farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, S. M. Berge etaL, descrevem sais farmaceuticamente aceitáveis em detalhes em J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19, incorporado aqui por referência. Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos desta invenção incluem

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20/652 aqueles derivados de bases e ácidos inorgânicos e orgânicos adequados. Exemplos de sais de adição de ácido não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis são sais de um grupo amino formado com ácidos inorgânicos tal como ácido hidroclórico, ácido hidrobrômico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico e ácido perclórico ou ácidos orgânicos tal como ácido acético, ácido oxálico, ácido maleico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido succínico ou ácido malônico ou usando outros métodos usados na técnica, tal como troca de íon. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzenossulfonato, benzoato, bissulfato, borato, butirato, canforato, canforsulfonato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato, formiato, fumarato, glucoheptonato, glicerofosfato, gluconato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, hidroiodeto, 2-hidróxi-etanessulfonato, lactobionato, lactato, laurato, lauril sulfato, malato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, pivalato, propionato, estearato, suei nato, sulfato, tartarato, tiocianato, p-toluenossulfonato, undecanoato, valerato, e similares.

[0045] Sais derivados de bases apropriadas incluem sais de metal alcalino, metal alcalino terroso, amônio e N⁺(Ci-4alquil)4. Sais de metal alcalino ou alcalino terroso representativos incluem sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio, e similares. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, quando apropriado, cátions amônio não tóxico, amônio quaternário, e amina formados usando contraíons, tais como haleto, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquila inferior e sulfonato de arila.

[0046] A menos que de outro modo estabelecido, estruturas representadas aqui são também se destinam a incluir todas as formas isoméricas (por exemplo, formas enantioméricas, diastereoméricas, e

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21/652 geométricas (ou conformacionais)) da estrutura; por exemplo, as configurações ReS para cada centro assimétrico, isômeros de ligação dupla Z e E, e isômeros conformacionais Z e E. Portanto, isômeros estereoquímicos individuais, bem como misturas enantioméricas, diastereomérica, e geométricas (ou conformacionais) dos presentes compostos incluem-se no escopo da invenção. A menos que de outro modo estabelecido, todas as formas tautoméricas dos compostos da invenção incluem-se no escopo da invenção. Adicionalmente, a menos que de outro modo estabelecido, estruturas representadas aqui são também entendidas incluir compostos que se diferenciam apenas na presença de um ou mais átomos isotopicamente enriquecidos. Por exemplo, compostos tendo as presentes estruturas incluindo a substituição de hidrogênio por deutério ou trítio, ou a substituição de um carbono por um carbono enriquecido por ¹³C- ou ¹⁴C incluem-se no escopo desta invenção. Tais compostos são úteis, por exemplo, como ferramentas analíticas, como sondas em ensaios biológicos, ou como agentes terapêuticos de acordo com a presente invenção.

3. Descrição de Modalidades Exemplares:

[0047] Em certas modalidades, a presente invenção fornece inibidores de AHR. Em algumas modalidades, tais compostos incluem aqueles de fórmula I:

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que: O Anel A é selecionado de :

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cada R¹ é independentemente selecionado de R, -C(O)R, C(O)OR, -SO2R, -C(O)N(R)₂, ou -SO₂RN(R)₂;

cada ou R^x, R^y, e R^z são independentemente selecionados de R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)₂, -N(R)C(O)R, -C(O)N(R)₂, N(R)C(O)N(R)₂, -N(R)C(O)OR, -OC(O)N(R)₂, -N(R)SO₂R, SO₂RN(R)₂, -C(O)R, -C(O)OR, -OC(O)R, -C(O)OR, -S(O)R, ou -SO₂R, ou :

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23/652 dois R^x no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S; ou:

dois R^y no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S;

cada um de m e n é independentemente 1,2,3, 4, ou 5;

-Cy- é anel monocíclico bivalente saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 3 a 8 membros tendo 0 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel bicíclico de 8 a 10 membros bivalente saturado, parcialmente insaturado, ou aromático tendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre.

[0048] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece inibidores de AHR, tais compostos incluem aqueles de fórmula I':

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ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que:

O Anel A é selecionado de :

cada p é independentemente 0, 1, ou 2, como a valência o permitir;

cada R é independentemente hidrogênio, deutério, ou um grupo

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25/652 opcionalmente substituído selecionado de C1-6 alifático, um anel carbocíclico monocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 3 a 8 membros, fenila, um anel carbocíclico aromático bicíclico de 8 a 10 membros; um anel heterocíclico monocíclicosaturado ou parcialmente insaturado de 4 a 8 membros tendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel heteroaromático bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 5 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre; ou dois R no mesmo nitrogênio são tomados junto com seus átomos intermediários para formar um um anel saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 4 a 7 membros tendo 1 a 2 heteroátomos além do nitrogênio independentemente selecionados de oxigênio, nitrogênio, ou enxofre;

cada ou R^x, R^y, e R^z são independentemente selecionados de R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)2, N(R)C(O)R, -C(O)N(R)₂, -C(O)N(R)OR, -N(R)C(O)N(R)₂, N(R)C(O)OR, -OC(O)N(R)₂, -N(R)SO₂R, -SO₂RN(R)₂, -C(O)R, C(O)OR, -OC(O)R, -C(O)OR, -S(O)R, ou -SO₂R, ou :

dois R^x no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S; ou:

dois R^y no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S;

cada de m e n é independentemente 1,2,3, 4, ou 5;

O Anel B é fenila, um anel bicíclico parcialmente insaturado ou carbocíclico aromático de 7 a 10 membros, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4

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26/652 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel tricíclico de 12 a 15 membros parcialmente insaturado ou aromático 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

O Anel C é fenila ou um anel heteroarila de 5 a 6 membros tendo 1 a heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

L¹ é uma ligação covalente ou uma cadeia hidrocarboneto bivalente linear ou ramificada de C1-6 membros opcionaímente substituídos em que uma unidade metileno de L¹ é opcionaímente substituída com -Cy-, -O-, -S-, -NR-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R)-, N(R)C(O)-, -SO₂-, -N(R)SO₂-, ou -SO₂N(R)-S; e

[0049] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I ou fórmula I', com a condição de que quando 0

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[0050] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I ou fórmula I', com a condição de que L¹ não seja

R^z o Anel A for

R¹ , L¹ não seja -NHCH2CH2-.

[0051] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I ou fórmula I', com a condição de que 0 composto seja diferente de:

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Em algumas modalidades, um composto

Λ Ο ’ fornecido é diferente de Em algumas modalidades, um composto fornecido é diferente de

Em algumas modalidades, um composto fornecido é diferente

Em algumas modalidades, um composto fornecido é diferente de

Em algumas modalidades, um composto fornecido é diferente

Em algumas modalidades, um composto fornecido é diferente de

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Cl

[0052] Como de um modo geral definido acima, R¹ é R, -C(O)R, C(O)OR, -SO2R, -C(O)N(R)2, ou -SO2RN(R)2. Em algumas modalidades, R¹ é hidrogênio. Em algumas modalidades, R¹ é R. Em algumas modalidades, R¹ é -C(O)R. Em algumas modalidades, R¹ é C(O)OR. Em algumas modalidades, R¹ é -SO2R. Em algumas modalidades, R¹ é -C(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R¹ é SO2RN(R)₂. Em algumas modalidades, R¹ é hidrogênio. Em algumas modalidades, R¹ é deutério. Em algumas modalidades, R¹ é um grupo opcionalmente substituído selecionado de C1-6 alifático. Em algumas modalidades, R¹ é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0053] Como de um modo geral definido acima, cada R^x é independentemente R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)2, N(R)C(O)R, -C(O)N(R)2, -C(O)N(R)OR, -N(R)C(O)N(R)2, N(R)C(O)OR, -OC(O)N(R)2, -N(R)SO2R, -SO2RN(R)2, -C(O)R, C(O)OR, -OC(O)R, -C(O)OR, -S(O)R, ou -SO2R, ou dois R^x no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S. Em algumas modalidades, cada R^x é igual. Em algumas modalidades, cada R^x é diferente. Em algumas modalidades, R^x é hidrogênio. Em algumas modalidades, R^x é R. Em algumas modalidades, R^x é halogênio. Em algumas modalidades, R^x é ciano. Em algumas modalidades, R^x é nitro. Em algumas modalidades, R^x é -OR. Em algumas modalidades, R^x é SR. Em algumas modalidades, R^x é -N(R)2. Em algumas modalidades, R^x é -N(R)C(O)R. Em algumas modalidades, R^x é -C(O)N(R)₂. Em algumas modalidades, R^x é -C(O)N(R)OR. Em algumas modalidades,

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R^x é -N(R)C(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^x é -N(R)C(O)OR. Em algumas modalidades, R^x é -OC(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^x é -N(R)SO2R. Em algumas modalidades, R^x é SO2RN(R)2. Em algumas modalidades, R^x é -C(O)R. Em algumas modalidades, R^x é -C(O)OR. Em algumas modalidades, R^x é -CO(O)R. Em algumas modalidades, R^x é -S(O)R. Em algumas modalidades, R^xé -SO2R. Em algumas modalidades, dois R^x no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S. Em algumas modalidades, R^x é hidrogênio. Em algumas modalidades, R^x é deutério. Em algumas modalidades, R^x é um grupo opcionalmente substituído selecionado de C1-6 alifático. Em algumas modalidades, R^x é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0054] Como de um modo geral definido acima, cada R^y é independentemente R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)2, N(R)C(O)R, -C(O)N(R)₂, -C(O)N(R)OR, -N(R)C(O)N(R)_2jN(R)C(O)OR, -OC(O)N(R)₂, -N(R)SO₂R, -SO₂RN(R)₂, -C(O)R, C(O)OR, -OC(O)R, -C(O)OR, -S(O)R, ou -SO2R, ou dois R^y no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S. Em algumas modalidades, cada R^y é igual. Em algumas modalidades, cada R^y é diferente. Em algumas modalidades, R^y é hidrogênio. Em algumas modalidades, R^y é R. Em algumas modalidades, R^y é halogênio. Em algumas modalidades, R^y é ciano. Em algumas modalidades, R^y é nitro. Em algumas modalidades, R^y é -OR. Em algumas modalidades, R^y é SR. Em algumas modalidades, R^y é -N(R)2. Em algumas modalidades, R^y é -C(O)N(R)OR. Em algumas modalidades, R^y é -N(R)C(O)R. Em algumas modalidades, R^y é -C(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^yé -N(R)C(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^y é -N(R)C(O)OR. Em algumas modalidades, R^y é-OC(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^yé -N(R)SO2R. Em algumas modalidades, R^y é -SO2RN(R)2. Em algumas modalidades, R^y é -C(O)R. Em algumas modalidades, R^y é Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 60/704

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C(O)OR. Em algumas modalidades, R^y é -CO(O)R. Em algumas modalidades, R^y é -S(O)R. Em algumas modalidades, R^y é -SO2R. Em algumas modalidades, dois R^y no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S. Em algumas modalidades, R^y é hidrogênio. Em algumas modalidades, R^y é deutério. Em algumas modalidades, R^y é um grupo opcionalmente substituído selecionado de C1-6 alifático. Em algumas modalidades, R^y é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0055] Como de um modo geral definido acima, cada R^z é independentemente R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)2, N(R)C(O)R, -C(O)N(R)₂, -C(O)N(R)OR, -N(R)C(O)N(R)₂, N(R)C(O)OR, -OC(O)N(R)₂, -N(R)SO₂R, -SO₂RN(R)₂, -C(O)R, C(O)OR, -OC(O)R, -C(O)OR, -S(O)R, ou -SO₂R. Em algumas modalidades, R^z é hidrogênio. Em algumas modalidades, R^z é R. Em algumas modalidades, R^z é halogênio. Em algumas modalidades, R^z é ciano. Em algumas modalidades, R^z é nitro. Em algumas modalidades, R^z é -OR. Em algumas modalidades, R^z é -SR. Em algumas modalidades, R^z é -N(R)2. Em algumas modalidades, R^z é C(O)N(R)OR. Em algumas modalidades, R^z é -N(R)C(O)R. Em algumas modalidades, R^z é -C(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^zé -N(R)C(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^z é -N(R)C(O)OR. Em algumas modalidades, R^zé-OC(O)N(R)2. Em algumas modalidades, R^zé -N(R)SO2R. Em algumas modalidades, R^z é -SO2RN(R)2. Em algumas modalidades, R^z é -C(O)R. Em algumas modalidades, R^z é C(O)OR. Em algumas modalidades, R^z é -CO(O)R. Em algumas modalidades, R^z é -S(O)R. Em algumas modalidades, R^z é -SO2R. Em algumas modalidades, R^z é hidrogênio. Em algumas modalidades, R^z é deutério. Em algumas modalidades, R^z é um grupo opcionalmente substituído selecionado de C1-6 alifático. Em algumas modalidades, R^zé selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

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[0056] Como de um modo geral definido acima, p é 0, 1 ou 2. Em algumas modalidades, p é 0. Em algumas modalidades, pé 1. Em algumas modalidades, p é 2. Em algumas modalidades, p é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0057] Como de um modo geral definido acima, n é 1, 2, 3, 4 ou 5. Em algumas modalidades, n é 1. Em algumas modalidades, n é 2. Em algumas modalidades, n é 3. Em algumas modalidades, n é 4. Em algumas modalidades, n é 5. Em algumas modalidades, n é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0058] Como de um modo geral definido acima, m é 1, 2, 3, 4 ou 5. Em algumas modalidades, m é 1. Em algumas modalidades, m é 2. Em algumas modalidades, m é 3. Em algumas modalidades, m é 4. Em algumas modalidades, m é 5. Em algumas modalidades, m é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0059] Como de um modo geral definido acima, o Anel B é fenila, um anel bicíclico parcialmente insaturado ou carbocíclico aromático de 7 a 10 membros, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel tricíclico de 12 a 15 membros parcialmente insaturado ou aromático 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Em algumas modalidades, o Anel B é um anel carbocíclico de 7 a 10 membros bicíclico parcialmente insaturado ou aromático. Em algumas modalidades, o Anel B é um anel tricíclico de 12 a 15 membros parcialmente insaturado ou aromático tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Em algumas modalidades, o Anel B é um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4

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33/652 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Em algumas modalidades, o Anel B é um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Em algumas modalidades, o Anel B é fenila. Em algumas modalidades, o Anel B é tienila, furanila, pirrolila, imidazolila, pirazolila, triazolila, tetrazolila, oxazolila, isoxazolila, oxadiazolila, tiazolila, isotiazolila, tiadiazolila, piridila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, indolizinila, purinila, naftiridnila ou pteridinila, indolicarl, isoindolila, benzotienila, benzofuranila, dibenzofuranila, indazolila, benzimidazolila, benztiazolila, quinolila, isoquinolila, cinnolinila, ftalazinila, quinazolinila, quinoxalinila, 4/-/—quinolizinila, carbazolila, acridinila, fenazinila, tetra-hidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, ou pirido[2,3-b]-1,4-oxazin-3(4H)-ona. Em algumas modalidades, o Anel B é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0060] Como de um modo geral definido acima, o Anel C é fenila, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Em algumas modalidades, o Anel C é fenila. Em algumas modalidades, o Anel C é um anel heteroarila de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Em algumas modalidades, o Anel C é tienila, furanila, pirrolila, imidazolila, pirazolila, triazolila, tetrazolila, oxazolila, isoxazolila, oxadiazolila, tiazolila, isotiazolila, tiadiazolila, piridila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, indolizinila, purinila, naftiridnila ou pteridinila, indolila, isoindolila, benzotienila, benzofuranila, dibenzofuranila, indazolila, benzimidazolila, benztiazolila, quinolila, isoquinolila, cinnolinila, ftalazinila, quinazolinila, quinoxalinila, 4H

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34/652 quinolizinila, carbazolila, acridinila, fenazinila, tetra-hidroquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, ou pirido[2,3-b]-1,4-oxazin-3(4H)-ona. Em algumas modalidades, o Anel C é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0061] Como de um modo geral definido acima, L¹ é uma ligação covalente ou uma cadeia hidrocarboneto bivalente linear ou ramificada de C1-6 membros opcionalmente substituídos em que uma unidade metileno de L¹ é opcionalmente substituída com -Cy-, -O-, -S-, -NR-, C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, -C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -SO2-, -N(R)SO2-, ou -SO2N(R)-S. Em algumas modalidades, L¹ é uma ligação covalente. Em algumas modalidades, L¹ é uma cadeia hidrocarboneto bivalente linear ou ramificada de C1-6 membros opcionalmente substituídos. Em algumas modalidades, L¹ é -Cy-. Em algumas modalidades, L¹ é fenileno, heterociclileno, heteroarileno, ciclopropileno, ciclobutilenila, ciclopentileno, ciclo-hexileno ou oxetanila. Em algumas modalidades, L¹é -NR-. Em algumas modalidades, L¹ é -N(CH2)₂-, Em algumas modalidades, L¹ é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo. [0062] Em algumas modalidades, -Cy- é fenileno, heterociclileno, heteroarileno, ciclopropileno, ciclobutilenila, ciclopentileno, ciclohexileno e oxetanila. Em algumas modalidades, -Cy- é selecionado de:

; em que X é um heteroátomo selecionado de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre. Em algumas modalidades, -Cy- é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, abaixo.

[0063] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas l-a, l-b, l-c, l-d, Ie, l-f, l-g, l-h, l-i, l-j, l-k, l-l, l-m, l-n, l-o e l-p:

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36/652 ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos; em que cada variável é como aqui definido e descrito em modalidades para fórmula I e fórmula I', supra, ou descrito em modalidades aqui, tanto singularmente quanto em combinação.

[0064] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas ll-a, ll-b, ll-c, ll-d, ll-e, ll-f, ll-g, ll-h, ll-i, ll-j, ll-k, ll-l, ll-m, ll-n, ll-o e ll-p:

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ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos; em que cada variável é como aqui definido e descrito em modalidades para fórmula I e fórmula I', supra, ou descrito em modalidades aqui, tanto singularmente quanto em combinação.

[0065] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas lll-a, lll-b, lll-c, IIId, lll-e, lll-f, lll-g, lll-h, lll-i, lll-j, lll-k, lll-l, lll-m, lll-n, lll-o, lll-p, lll-q, IIIr, lll-s, lll-t lll-u, lll-v, lll-w, lll-x, lll-y, lll-z, lll-aa, lll-bb, lll-cc, lll-dd, IIIee, lll-ff, lll-gg, lll-hh, lll-ii, lll-jj e lll-kk:

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lll-kk ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos; em que cada variável é como aqui definido e descrito em modalidades para fórmula I e fórmula I', supra, ou descrito em modalidades aqui, tanto singularmente quanto em combinação.

[0066] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas IV-a, IV-b, IV-c, IV-d, IV-e, IV-f, IV-g, IV-h, IV-i, IV-j, IV-k, IV-I, IV-m, IV-n, IV-o, IV-p e IV-

j3^(Ry)n _H| (^RX)m k X W (R^X)m X 0^a l 0^a IV-a JjH-(R^y)n ^N |0^S\ f IV-d

( b4- r* _n ( B4-(R7)_n Z\A-7 N ^v I 1 Η -N [ .N (R^X)m L LA R^z 07 IV-b IV-c JjX^(Ry)n r^)~^(Ry)n hlN / irAr^(RZ)p nA^/(^rz)p L JL / (R^x)m L II z ^N 1 0> ^N IV-e IV-f

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[0067] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas V-a, V-b, V-c, Vd, V-e, V-f, V-g, V-h, V-i, V-j, V-k e V-l:

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[0068] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas Vl-a, Vl-b, Vl-c, Vl-d, Vl-e e Vl-f:

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ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos em que X é N ou

CH; em que cada variável é como aqui definido e descrito em modalidades para fórmula I e fórmula I', supra, ou descrito em modalidades aqui, tanto singularmente quanto em combinação.

[0069] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas Vll-a, Vll-b, VII-c,

Vll-d, Vll-e, Vll-f e Vll-g:

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Vll-g ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos em que X é N ou CH; em que cada variável é como aqui definido e descrito em modalidades para fórmula I e fórmula I', supra, ou descrito em modalidades aqui, tanto singularmente quanto em combinação.

[0070] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas Vlll-a, Vlll-b, VIIIc, Vlll-d, Vlll-ee Vlll-f:

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos em que X é N ou CH; em que cada variável é como aqui definido e descrito em modalidades para fórmula I e fórmula I', supra, ou descrito em modalidades aqui, tanto singularmente quanto em combinação.

[0071] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas IX-a, IX-b e IX-c:

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[0072] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas X-a, X-b, X-c, Xd, X-e, X-f, X-g, X-h eX-i:

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos em que X é N ou CH; em que cada variável é como aqui definido e descrito em

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46/652 modalidades para fórmula I e fórmula I', supra, ou descrito em modalidades aqui, tanto singularmente quanto em combinação.

[0073] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas Xl-a, Xl-b, Xl-c, Xl-d, Xl-e, Xl-f, Xl-g, Xl-h e Xl-i:

[0074] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto selecionado de qualquer uma das fórmulas Xll-a, Xll-b e XI c:

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Xll-a

ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos em que X é N ou

[0075] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I e fórmula I' contanto que quando o Anel A for

[0076] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I e fórmula I' contanto que L¹ não seja NHCH2CH2-. Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um composto de fórmula I e fórmula I' contanto que quando 0 Anel A for

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, L¹ não seja -NHCH2CH2-.

[0077] Compostos exemplares da presente invenção são mencionados na Tabela 1, abaixo:

Tabela 1. Compostos Exemplares de Fórmula I

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[0078] Em certas modalidades, a presente invenção fornece qualquer composto selecionado daqueles representados na Tabela 1, acima, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

4. Usos, Formulação e Administração e Composições Farmaceuticamente Aceitáveis

[0079] De acordo com outra modalidade, a invenção fornece uma composição compreendendo um composto desta invenção ou um sal, éster ou sal éster farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável. A quantidade de composto nas composições desta invenção é tal que seja eficaz para mensuravelmente inibir AHR, em uma amostra biológica ou em um paciente. Em certas modalidades, a quantidade de composto nas composições desta invenção é tal que seja eficaz para mensuravelmente inibir AHR, em uma amostra biológica ou em um paciente. Em certas modalidades, uma composição desta invenção é formulada para administração a um paciente necessitado dessa composição. Em algumas modalidades, uma composição desta invenção é formulada para administração oral a um paciente.

[0080] O termo paciente, como aqui utilizado, significa um animal, preferivelmente um mamífero, e mais preferivelmente um humano.

[0081] O termo veículo, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável refere-se a um veículo, adjuvante ou veículo não tóxico que não destrói a atividade farmacológica do composto com o qual é formulado. Os veículos, adjuvantes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis que podem ser utilizados nas composições desta invenção incluem, porém não estão limitados a, trocadores de íons, alumina, estearato de alumínio, lecitina, proteínas séricas, como albumina sérica humana, substâncias tampão como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas parciais de glicerídeos de ácidos graxos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, como sulfato de protamina,

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79/652 hidrogenofosfato dissódico, hidrogenofosfato de potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trissilicato de magnésio, polivinilpirrolidona, substâncias à base de celulose, polietileno glicol, carboximetilcelulose de sódio, poliacrilatos, ceras, polímeros em bloco de polietileno-polioxipropileno, polietileno glicol e gordura de lã.

[0082] Um derivado farmaceuticamente aceitável significa qualquer sal, éster, sal de um éster ou outro derivado não tóxico de um composto desta invenção que, mediante administração a um destinatário, seja capaz de fornecer, direta ou indiretamente, um composto desta invenção ou um metabólito inibidoramente ativo ou resíduo do mesmo.

[0083] As composições da presente invenção podem ser administradas por via oral, parenteral, por spray de inalação, topicamente, retal, nasal, bucal, vaginal ou via reservatório implantado. O termo parenteral, como aqui utilizado, inclui técnicas de injeção ou infusão subcutânea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intra-hepática, intralesional e intracraniana. Preferivelmente, as composições são administradas por via oral, intraperitoneal ou intravenosa. As formas injetáveis estéreis das composições desta invenção podem ser suspensões aquosas ou oleaginosas. Estas suspensões podem ser formuladas de acordo com técnicas conhecidas na técnica, utilizando agentes dispersantes ou umectantes e agentes de suspensão adequados. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injetável estéril em um diluente ou solvente parenteralmente aceitável não tóxico, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão água, solução de Ringer e solução isotônica de cloreto de sódio. Além disso, óleos fixos estéreis são convencionalmente empregados como solvente ou meio de suspensão.

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[0084] Para este fim, qualquer óleo fixo suave pode ser empregado, incluindo mono- ou di-glicerídeos sintéticos. Os ácidos graxos, como o ácido oleico e seus derivados de glicéridos, são úteis na preparação de injetáveis, assim como os óleos naturais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, como o azeite ou o óleo de rícino, especialmente nas versões polioxietiladas. Essas soluções ou suspensões oleosas também podem conter um diluente ou dispersante de álcool de cadeia longa, como carboximetilcelulose ou agentes dispersantes similares que são comumente usados na formulação de formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis, incluindo emulsões e suspensões. Outros surfactantes comumente usados, como Tweens, Spans e outros agentes emulsificantes ou intensificadores de biodisponibilidade que são comumente usados na fabricação de formas sólidas, líquidas ou outras formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis também podem ser utilizados para os propósitos da formulação.

[0085] As composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção podem ser administradas por via oral em qualquer forma de dosagem aceitável por via oral, incluindo, entre outras, cápsulas, comprimidos, suspensões ou soluções aquosas. No caso de comprimidos para uso oral, os portadores comumente usados incluem lactose e amido de milho. Agentes lubrificantes, como estearato de magnésio, também são tipicamente adicionados. Para administração oral em forma de cápsula, diluentes úteis incluem lactose e amido de milho seco. Quando suspensões aquosas são requeridas para uso oral, o ingrediente ativo é combinado com agentes emulsificantes e de suspensão. Se desejado, certos agentes adoçantes, aromatizantes ou corantes podem também ser adicionados.

[0086] Alternativamente, as composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção podem ser administradas na forma de supositórios para administração retal. Estas podem ser preparadas

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81/652 misturando o agente com um excipiente não irritante adequado que é sólido em temperatura ambiente, porém líquido em temperatura retal e, portanto, derrete no reto para liberar o fármaco. Tais materiais incluem manteiga de cacau, cera de abelha e polietileno glicóis.

[0087] As composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção também podem ser administradas topicamente, especialmente quando o alvo de tratamento inclui áreas ou órgãos facilmente acessíveis por aplicação tópica, incluindo doenças dos olhos, pele ou trato intestinal delgado. Formulações tópicas adequadas são prontamente preparadas para cada uma dessas áreas ou órgãos.

[0088] A aplicação tópica para o trato intestinal delgado pode ser realizada em uma formulação de supositório retal (ver acima) ou em uma formulação de enema adequada. Também podem ser utilizados adesivos topicamente transdérmicos.

[0089] Para aplicações tópicas, as composições farmaceuticamente aceitáveis fornecidas podem ser formuladas em um unguento adequado contendo o componente ativo suspenso ou dissolvido em um ou mais veículos. Os veículos para administração tópica de compostos desta invenção incluem, porém não estão limitados a, óleo mineral, petrolato líquido, petrolato branco, propileno glicol, polioxietileno, composto de polioxipropileno, cera emulsificante e água. Alternativamente, as composições farmaceuticamente aceitáveis fornecidas podem ser formuladas em uma loção ou creme adequado contendo os componentes ativos suspensos ou dissolvidos em um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis. Os veículos adequados incluem, porém não estão limitados a, óleo mineral, monoestearato de sorbitano, polissorbato 60, cera de ésteres cetílicos, álcool cetearílico, 2 octildodecanol, álcool benzílico e água.

[0090] Para uso oftálmico, as composições farmaceuticamente aceitáveis fornecidas podem ser formuladas como suspensões

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82/652 micronizadas em solução salina estéril isotônica com ajuste de pH ou, preferivelmente, como soluções em solução salina estéril isotônica com ajuste de pH, com ou sem conservante, como cloreto de benzilalcônio. Alternativamente, para usos oftálmicos, as composições farmaceuticamente aceitáveis podem ser formuladas em uma pomada como petrolato.

[0091] As composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção também podem ser administradas por aerossol nasal ou inalação. Tais composições são preparadas de acordo com técnicas bem conhecidas na arte da formulação farmacêutica e podem ser preparadas como soluções em solução salina, empregando álcool benzílico ou outros conservantes adequados, promotores de absorção para aumentar a biodisponibilidade, fluorocarbonetos e / ou outros agentes solubilizantes ou dispersantes convencionais.

[0092] Mais preferivelmente, as composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção são formuladas para administração oral. Tais formulações podem ser administradas com ou sem alimentos. Em algumas modalidades, as composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção são administradas sem alimentos. Em outras modalidades, as composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção são administradas com alimentos.

[0093] A quantidade de compostos da presente invenção que podem ser combinados com os materiais transportadores para produzir uma composição em uma forma de dosagem única variará dependendo do hospedeiro tratado, do modo particular de administração. De preferência, as composições fornecidas devem ser formuladas de modo que uma dosagem entre 0,01 a 100 mg / kg de peso corporal / dia do inibidor possa ser administrada a um paciente que esteja recebendo essas composições.

[0094] Também deve ser entendido que um regime de dosagem e

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83/652 tratamento específico para qualquer paciente em particular dependerá de vários fatores, incluindo a atividade do composto específico empregado, idade, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta, tempo administração, taxa de excreção, combinação de medicamentos e diagnóstico do médico assistente e severidade da doença em particular. A quantidade de um composto da presente invenção na composição também dependerá do composto particular na composição.

Usos de Compostos e Composições Farmaceuticamente Aceitáveis

[0095] A atividade de um composto utilizado nesta invenção como inibidor de AHR pode ser testada in vitro ou in vivo. Uma avaliação in vivo da eficácia dos compostos da invenção pode ser feita usando um modelo animal de obesidade ou síndrome metabólica, por exemplo, um modelo de roedor ou primata. Os ensaios baseados em células podem ser realizados utilizando, por exemplo, uma linhagem celular isolada de um tecido que expressa AHR. Além disso, ensaios bioquímicos ou com base em mecanismos, por exemplo, ensaios de transcrição usando uma proteína purificada, Northern blot, TR-PCR, etc., podem ser realizados. Ensaios in vitro incluem ensaios que determinam morfologia celular, expressão de proteína e / ou citotoxicidade, atividade inibidora de enzimas e / ou as subsequentes conseqüências funcionais do tratamento de células com compostos da invenção. Ensaios alternativos in vitro quantificam a capacidade do inibidor se ligar a moléculas de proteína ou ácido nucleico dentro da célula. A ligação do inibidor pode ser medida marcando radiomarcando o inibidor antes da ligação, isolando o complexo de inibidor / molécula alvo e determinando a quantidade de ligação por radiomarcação. Alternativamente, a ligação do inibidor pode ser determinada executando uma experiência de competição em que novos inibidores são incubados com proteínas purificadas ou ácidos nucleicos ligados a radioligantes conhecidos. As

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84/652 condições detalhadas para testar um composto utilizado nesta invenção como inibidor da AHR são apresentadas nos Exemplos abaixo. Os ensaios acima mencionados são exemplares e não se destinam a limitar o escopo da invenção. O prático versado na técnica pode apreciar que modificações podem ser feitas a ensaios convencionais para desenvolver ensaios equivalentes que obtenham o mesmo resultado. [0096] Conforme usados neste documento, os termos tratamento, tratar e tratando referem-se a reverter, aliviar, atrasar o início de, ou inibir o progresso de uma doença ou distúrbio, ou um ou mais sintomas do mesmo, como aqui descrito. Em algumas modalidades, o tratamento pode ser administrado após o desenvolvimento de um ou mais sintomas. Em outras modalidades, o tratamento pode ser administrado na ausência de sintomas. Por exemplo, o tratamento pode ser administrado a um indivíduo suscetível antes do início dos sintomas (por exemplo, à luz de uma história de sintomas e / ou à luz de fatores genéticos ou outros fatores de suscetibilidade). O tratamento também pode ser continuado após a resolução dos sintomas, por exemplo, para prevenir ou retardar sua recorrência.

[0097] Os compostos e composições, de acordo com o método da presente invenção, podem ser administrados usando qualquer quantidade e qualquer via de administração eficaz para tratar ou diminuir a severidade de um distúrbio ou condição metabólica, câncer, infecção bacteriana, infecção fúngica, uma infecção parasitária (por exemplo, malária), um distúrbio autoimune, um distúrbio neurodegenerativo ou neurológico, esquizofrenia, um distúrbio relacionado com ossos, doença hepática ou um distúrbio cardíaco.

[0098] Em algumas modalidades, os compostos e composições, de acordo com o método da presente invenção, podem ser administrados usando qualquer quantidade e qualquer via de administração eficaz para tratar ou diminuir a severidade de uma doença associada com o

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AHR.

[0099] A quantidade exata requerida variará de indivíduo para indivíduo, dependendo da espécie, idade e condição geral do sujeito, a severidade da infecção, o agente particular, seu modo de administração e similares. Os compostos da invenção são preferivelmente formulados na forma de unidade de dosagem para facilitar a administração e uniformidade da dosagem. A expressão forma de unidade de dosagem, como aqui utilizada, refere-se a uma unidade de agente fisicamente discreta apropriada para o paciente a ser tratado. Será entendido, no entanto, que o uso diário total dos compostos e composições da presente invenção será decidido pelo médico assistente dentro do escopo de diagnóstico médico seguro. O nível de dose efetivo específico para qualquer paciente ou organismo particular dependerá de vários fatores, incluindo o distúrbio que está sendo tratado e a severidade do distúrbio; a atividade do composto específico empregado; a composição específica empregada; a idade, peso corporal, estado geral de saúde, sexo e dieta do paciente; o tempo de administração, via de administração e taxa de excreção do composto específico empregado; a duração do tratamento; fármacos utilizados em combinação ou coincidentemente com o composto específico empregado e fatores semelhantes bem conhecidos nas técnicas médicas. O termo paciente, como aqui utilizado, significa um animal, preferivelmente um mamífero, e mais preferivelmente um humano.

[00100] As composições farmaceuticamente aceitáveis desta invenção podem ser administradas a seres humanos e outros animais por via oral, retal, parentérica, intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, tópica (como por pós, unguentos ou gotas), bucal, como um spray oral ou nasal ou similares, dependendo da severidade da infecção a ser tratada. Em certas modalidades, os compostos da invenção podem ser administrados por via oral ou parentérica em níveis de dosagem de

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86/652 cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 50 mg/kg e preferivelmente de cerca de 1 mg/kg a cerca de 25 mg/kg, de peso corporal do indivíduo, por dia, uma ou mais vezes por dia, para obter o efeito terapêutico desejado.

[00101] As formas de dosagem líquidas para administração oral incluem, porém não estão limitadas a, emulsões, microemulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. Além dos compostos ativos, as formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes comumente usados na técnica, como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes solubilizantes e emulsificantes, tal como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, propileno glicol, 1,3-butileno glicol, dimetilformamida, óleos (em particular, óleos de sementes de algodão, amendoim, milho, germe, oliva, rícino e sésamo), glicerol, álcool tetra-hidrofurfurílico, polietileno glicóis e ésteres de ácido graxo de sorbitano, e misturas dos mesmos. Além dos diluentes inertes, as composições orais podem também incluir adjuvantes, tais como agentes umectantes, agentes emulsificantes e de suspensão, adoçantes, aromatizantes e perfumantes.

[00102] Preparações injetáveis, por exemplo, suspensões aquosas ou oleaginosas injetáveis estéreis podem ser formuladas de acordo com a técnica conhecida usando agentes dispersantes ou umectantes e agentes de suspensão adequados. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução, suspensão ou emulsão injetável estéril em um diluente ou solvente não tóxico parenteralmente aceitável, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão a água, solução de Ringer, solução U.S.P. e isotônica de cloreto de sódio. Além disso, óleos fixos estéreis são convencionalmente empregados como solvente ou meio de suspensão. Para este fim, qualquer óleo fixo suave pode ser empregado, incluindo mono- ou diglicerídeos sintéticos. Além disso,

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87/652 ácidos graxos, como o ácido oleico, são utilizados na preparação de injetáveis.

[00103] As formulações injetáveis podem ser esterilizadas, por exemplo, por filtração através de um filtro de retenção de bactérias ou pela incorporação de agentes esterilizantes na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estéril ou outro meio injetável estéril antes do uso.

[00104] A fim de prolongar o efeito de um composto da presente invenção, é frequentemente desejável retardar a absorção do composto após a injeção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser realizado pelo uso de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo com baixa solubilidade em água. A taxa de absorção do composto depende então da sua taxa de dissolução que, por sua vez, pode depender do tamanho do cristal e da forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada de uma forma de composto administrada parenteralmente é realizada dissolvendo ou suspendendo o composto em um veículo oleoso. As formas de depósito injetáveis são feitas através da formação de matrizes microencapsuladas do composto em polímeros biodegradáveis, como polilactídeo-poliglicolídeo. Dependendo da relação de composto para polímero e da natureza do polímero particular empregado, a taxa de liberação do composto pode ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). As formulações injetáveis de depósito também são preparadas aprisionando o composto em lipossomas ou microemulsões que são compatíveis com os tecidos corporais.

[00105] As composições para administração retal ou vaginal são preferivelmente supositórios que podem ser preparados misturando os compostos desta invenção com excipientes ou veículos não irritantes adequados, como manteiga de cacau, polietilenoglicol ou uma cera de supositório que são sólidos em temperatura ambiente, porém líquidos

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88/652 em temperatura corporal e, portanto, derretem no reto ou na cavidade vaginal e liberam o composto ativo.

[00106] As formas de dosagem sólidas para administração oral incluem cápsulas, comprimidos, pílulas, pós e grânulos. Em tais formas de dosagem sólidas, o composto ativo é misturado com pelo menos um excipiente ou veículo inerte, farmaceuticamente aceitável, tal como citrato de sódio ou fosfato dicálcico e/ou a) cargas ou extensores, tais como amidos, lactose, sacarose, glicose, manitol e ácido silícico, b) aglutinantes tais como, por exemplo, carboximetilcelulose, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidinona, sacarose e acácia, c) umectantes tal como glicerol, d) agentes desintegrantes como ágar - ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, certos silicatos e carbonato de sódio, e) agentes retardantes de solução, tal como parafina, f) aceleradores de absorção, como compostos de amônio quaternário, g) agentes umectantes, tais como, por exemplo, álcool cetílico e monoestearato de glicerol, h) absorventes tais como argila de caulim e de bentonita, e i) lubrificantes tais como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietileno glicóis sólidos, lauril sulfato de sódio e suas misturas. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, a forma de dosagem pode também compreender agentes de tamponamento.

[00107] Composições sólidas de um tipo similar podem também ser empregadas como cargas em cápsulas de gelatina mole e dura usando excipientes tais como lactose ou açúcar de leite, bem como polietileno glicóis de alto peso molecular e similares. As formas de dosagem sólidas de comprimidos, drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser preparadas com revestimentos e cascas, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na arte de formulação farmacêutica. Eles podem opcionalmente conter agentes opacificantaes e podem também ser de uma composição que libere apenas o

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89/652 ingrediente ativo, ou preferivelmente, em uma determinada parte do trato intestinal, opcionaímente, de uma maneira retardada. Exemplos de composições de embutimento que podem ser usadas incluem substâncias e ceras poliméricas. Composições sólidas de um tipo similar podem também ser empregadas como cargas em cápsulas de gelatina mole e dura, usando excipientes tais como lactose ou açúcar de leite, bem como, polietilenoglicóis de alto peso molecular e similares. [00108] Os compostos ativos podem também estar na forma microencapsulada com um ou mais excipientes, como mencionado acima. As formas de dosagem sólida de comprimidos, drágeas, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser preparadas com revestimentos e cascas, tais como revestimentos entéricos, revestimentos de controle de liberação e outros revestimentos bem conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Em tais formas de dosagem sólidas, o composto ativo pode ser misturado com pelo menos um diluente inerte, tal como sacarose, lactose ou amido. Tais formas de dosagem também podem compreender, como é prática normal, substâncias adicionais que não sejam diluentes inertes, por exemplo, lubrificantes para comprimidos e outros auxiliares para formação de comprimidos, tais como estearato de magnésio e celulose microcristalina. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, as formas de dosagem também podem compreender agentes de tamponamento. Elas podem opcionaímente conter agentes opacificantes e também podem ser de uma composição que libere apenas o ingrediente ativo, ou preferivelmente, em uma determinada parte do trato intestinal, opcionaímente, de uma maneira retardada. Exemplos de composições de embutimento que podem ser usadas incluem substâncias e ceras poliméricas.

[00109] As formas de dosagem para administração tópica ou transdérmica de um composto desta invenção incluem unguentos, pastas, cremes, loções, géis, pós, soluções, sprays, inalantes ou

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90/652 emplastros. O componente ativo é misturado em condições estéreis com um veículo farmaceuticamente aceitável e qualquer conservante ou tampão necessário, como pode ser requerido. Formulação oftálmica, gotas otológicas e gotas oftálmicas são também contempladas como incluídas no escopo desta invenção. Além disso, a presente invenção contempla o uso de emplastros transdérmicos, que têm a vantagem adicional de fornecer a liberação controlada de um composto para o corpo. Tais formas de dosagem podem ser feitas dissolvendo ou dispensando o composto no meio apropriado. Os realçadores de absorção podem também ser usados para aumentar o fluxo do composto através da pele. A taxa pode ser controlada fornecendo uma membrana de controle da taxa ou dispersando o composto em uma matriz ou gel poliméricos.

Usos e Métodos de Tratamento

[00110] De acordo com uma modalidade, a invenção refere-se a um método de inibição de AHR em uma amostra biológica compreendendo a etapa de contato da referida amostra biológica com um composto desta invenção ou uma composição compreendendo o referido composto.

[00111] O termo amostra biológica, quando aqui utilizado, inclui, sem limitação, culturas ou extratos celulares da mesma; material biopsiado obtido de um mamífero ou extratos do mesmo; e sangue, saliva, urina, fezes, sêmen, lágrimas ou outros fluidos corporais ou extratos dos mesmos.

[00112] A inibição de enzimas em uma amostra biológica é útil para uma variedade de propósitos que são conhecidos por alguém versado na técnica. Exemplos de tais propósitos incluem, porém não estão limitados a ensaios biológicos, estudos de expressão de gene e identificação de alvo biológico.

[00113] Outra modalidade da presente invenção refere-se a um

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91/652 método de inibição do AHR em um paciente compreendendo a etapa de administração ao referido paciente de um composto da presente invenção ou de uma composição compreendendo o referido composto. [00114] Os compostos fornecidos são inibidores do AHR e, portanto, são úteis no tratamento de um ou mais distúrbios associados à atividade do AHR. Desse modo, em certas modalidades, a presente invenção fornece um método para o tratamento de um distúrbio mediado por AHR compreendendo a etapa de administração, a um paciente em necessidade do mesmo, de um composto da presente invenção ou composição farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00115] Quando usados neste documento, os termos distúrbios, doenças e / ou condições mediadas por AHR, significam qualquer doença ou outra condição deletéria na qual sabe-se que AHR, ou um mutante do mesmo, desempenha um papel. Por conseguinte, outra modalidade da presente invenção refere-se ao tratamento ou diminuição da severidade de uma ou mais doenças nas quais se sabe que o AHR, ou um mutante do mesmo, desempenha um papel.

[00116] Os distúrbios mediados por AHR estão bem estabelecidos na técnica. O nexo entre AHR e distúrbios, doenças e/ou condições mediadas por AHR, como aqui citado, está bem estabelecido nas técnicas relevantes. Por exemplo, veja: Uyttenhove etal., Evidence for tumoral imune resistance mechanism based on tryptofano degradation by indoleamine 2,3-dioxigenase Nature Medicine, 2003 vol. 9 (10), 1038; Murray etal., AH RECEPTOR LIGANDS IN CÂNCER: FRIEND AND FOE Nat. Rev. Câncer, dezembro de 2014, vol. 14 (12), páginas 801 a 814; Moon et al., Targeting the indoleamine 2,3-dioxigenase pathway in câncer” J. ImmunoTherapy of Câncer, 2015 vol 3, página 51; Ishida et al., Ativation of aryl hydrocarbon receptor de promotes invasion of clear cell renal cell carcinoma and is associated with poor prognosis and cigarette smoke Int. J. Câncer, julho de 2015, vol. 15, n°

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137(2), páginas 299 a 310; Ishida et al., Ativation of the aryl hydrocarbon receptor pathway enhances câncer cell invasion by upregulating the MMP expression and is associated with poor prognosis in upper urinary tract urothelial câncer” Carcinogenesis, fevereiro de 2010 vol. 31(2), páginas 287 a 295. Su et al., Prognostic value of nuclear translocation of aryl hydrocarbon receptor for non-small cell lung câncer¹' Anticancer Res., Setembro de 2013, vol. 33(9), páginas 39533961; Peng et al., Aryl hydrocarbon receptor pathway activation enhances gastric câncer cell invasiveness likely through a c-Jundependent induction of matrix metaloproteinase-9 BMC Cell BioL, Abril de 2009 vol. 16; páginas 10 a 27; Jin et al., Aryl Hydrocarbon Receptor Activation Reduces Dendritic Cell Function during Influenza Virus Infection Toxicol Sei., Agosto de 2010, vol. 116(2), páginas 514 a 522; Head etal., The aryl hydrocarbon is a modulator of anti-viral immunity Biochem. PharmacoL, Fevereiro de 2009 vol. 15; n° 77(4), páginas 64253; Jin etal., New insights into the role of the aryl hydrocarbon receptor in the function of CD11c⁺ cells during respiratory viral infection Eur. J. Immunol. June 2014, vol. 44(6), páginas 1685 a 98; Nguyen etal., Aryl hydrocarbon receptor and kynurenine: recente advances in autoimune disease research Front Immunol. Outubro de 2014, vol. 29, n° 5, página 551; Esser et al., The aryl hydrocarbon receptor in immunity Trends in Immunology, Vol,30, N° 9.

[00117] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método para o tratamento de um ou mais distúrbios, doenças e/ou condições em que o distúrbio, doença ou condição é uma doença proliferativa tal como câncer, um distúrbio inflamatório ou uma infecção viral.

[00118] Em certas modalidades, a presente invenção fornece um método de tratamento de câncer ou outro distúrbio proliferativo, compreendendo a administração de um composto ou composição da

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93/652 presente invenção a um paciente com câncer ou outro distúrbio proliferativo. Em certas modalidades, o método de tratamento de câncer ou outro distúrbio proliferativo compreende a administração de compostos e composições da presente invenção a um mamífero. Em certas modalidades, o mamífero é um humano.

[00119] Quando usados aqui, os termos inibição do câncer e inibição da proliferação de células cancerígenas referem-se à inibição do crescimento, divisão, maturação ou viabilidade das células cancerígenas e/ou causam a morte das células cancerígenas, individualmente ou em agregado com outras células cancerígenas, por citotoxicidade, depleção de nutrientes ou indução de apoptose.

[00120] Exemplos de tecidos contendo células cancerígenas cuja proliferação é inibida pelos compostos e composições aqui descritos e contra os quais os métodos aqui descritos são úteis incluem, porém não estão limitados à mama, próstata, cérebro, sangue, medula óssea, fígado, pâncreas, pele, rim, cólon, ovário, pulmão, testículo, pênis, tireóide, paratireóide, pituitária, timo, retina, úvea, conjuntiva, baço, cabeça, pescoço, traquéia, vesícula biliar, reto, glândula salivar, glândula adrenal, garganta, esôfago, linfonodos, glândulas sudoríparas, glândulas sebáceas, músculo, coração e estômago.

[00121] Em algumas modalidades, o câncer tratado por compostos ou composições da invenção é um melanoma, lipossarcoma, câncer de pulmão, câncer de mama, câncer da próstata, leucemia, câncer de rim, câncer de esôfago, câncer cerebral, linfoma ou câncer de cólon. Em certas modalidades, o câncer é um linfoma de efusão primária (PEL).

[00122] Os compostos da presente invenção são úteis no tratamento de uma doença proliferativa selecionada de um tumor benigno ou maligno, carcinoma do cérebro, rim, fígado, glândula adrenal, bexiga, mama, estômago, tumores gástricos, ovários, cólon, reto, próstata, pâncreas, pulmão, vagina, colo do útero, testículo, trato genitourinário,

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94/652 esôfago, laringe, pele, osso ou tireóide, sarcoma, glioblastomas, neuroblastomas, mieloma múltiplo ou câncer gastrointestinal, especialmente carcinoma do cólon ou adenoma colorretal ou um tumor do pescoço e cabeça, hiperproliferação epidérmica, psoríase, hiperplasia da próstata, neoplasia, neoplasia de caráter epitelial, adenoma, adenocarcinoma, ceratoacantoma, carcinoma epidermóide, carcinoma de células grandes, carcinoma pulmonar de células não pequenas, linfomas, Hodgkins e não Hodgkins, Macroglobulinemia de Waldenstrôm, carcinoma mamário, carcinoma folicular, carcinoma indiferenciado, carcinoma papilar, seminoma, melanoma, um distúrbio controlado por MYD88, DLBCL, ABC DLBCL, um distúrbio controlado por IL-1, latência de mieloma múltiplo indolente ou leucemia.

[00123] O câncer inclui, em algumas modalidades, sem limitação, leucemias (por exemplo, leucemia aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielocítica aguda, leucemia mieloblástica aguda, leucemia promielocítica aguda, leucemia mielomonocítica aguda, leucemia monocítica aguda, eritroleucemia aguda, leucemia crônica, leucemia mielocítica crônica, leucemia linfocítica crônica), policitemia vera, linfoma (por exemplo, doença de Hodgkin ou doença não-Hodgkin), macroglobulinemia de Waldenstrôm, mieloma múltiplo, doença da cadeia pesada e tumores sólidos tais como sarcomas e carcinomas (por exemplo, fibrossarcoma, mixossarcoma, lipossarcoma, condrossarcoma, sarcoma osteogênico, condordoma, angiossarcoma, endoteliossarcoma, linfangiossarcoma, linfangioendoteliossarcoma, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiossarcoma, rabdomiossarcoma, carcinoma do cólon, câncer de pâncreas, câncer de mama, câncer de ovário, câncer da próstata, carcinoma de célula escamosa, carcinoma de célula basal, adenocarcinomas, carcinoma de glândula sudorípara, carcinoma de glândula sebácea, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, cistadenocarcinoma, carcinoma

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95/652 medular, carcinoma broncogênico, carcinoma de célula renal, hepatoma, carcinoma do dueto biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionário, tumor de Wilm, câncer cervical, câncer uterino, câncer testicular, carcinoma pulmonar, carcinoma de pulmão de célula pequena, carcinoma bexiga, carcinoma epitelial, glioma, astrocitoma, glioblastoma multiforme (GBM, também conhecido como glioblastoma), meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, schwannomas, neurofibrossarcoma, meningioma, melanoma, neuroblastoma, e retinoblastoma).

[00124] Em algumas modalidades, o câncer é glioma, astrocitoma, glioblastoma multiforme (GBM, também conhecido como glioblastoma), meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, schwannoma, neurofibrossarcoma, meningioma, melanoma, neuroblastoma, ou retinoblastoma.

[00125] Em algumas modalidades, o câncer é neuroma acústico, astrocitoma (por exemplo, Grau I - Astrocitoma Pilocítico, Grau II Astrocitoma de Baixo grau, Grau III - Astrocitoma Anaplásico ou Grau IV - Glioblastoma (GBM)), cordoma, linfoma do CNS, craniofaringioma, glioma do tronco cerebral, ependimoma, glioma misto, glioma do nervo óptico, subependimoma, meduloblastoma, meningioma, tumor cerebral metastático, oligodendroglioma, tumores da pituitária, tumor neuroectodérmico primitivo (PNET) ou schwannoma. Em algumas modalidades, o câncer é um tipo encontrado mais comumente em crianças do que em adultos, tal como glioma do tronco cerebral, craniofaringioma, ependimoma, astrocitoma pilocítico juvenil (JPA), meduloblastoma, glioma do nervo óptico, tumor pineal, tumores neuroectodérmicos primitivos (PNET), ou tumor rabdoide. Em algumas modalidades, o paciente é um humano adulto. Em algumas

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96/652 modalidades, o paciente é um paciente infantil ou pediátrico.

[00126] O câncer inclui, em outra modalidade, sem limitação, mesotelioma, hepatobiliar (dueto hepático e biliar), câncer ósseo, câncer pancreático, câncer de pele, câncer de cabeça ou pescoço, melanoma cutâneo ou intra-ocular, câncer de ovário, câncer de cólon, câncer retal, câncer da região anal, câncer de estômago, gastrointestinal (gástrico, colorretal e duodenal), câncer uterino, carcinoma das trompas de falópio, carcinoma do endométrio, carcinoma do colo do útero, carcinoma da vagina, carcinoma da vulva, Doença de Hodgkin, câncer do esôfago, câncer do intestino delgado, câncer do sistema endócrino, câncer da glândula tireóide, câncer da glândula paratireóide, câncer da glândula adrenal, sarcoma dos tecidos moles, câncer da uretra, câncer do pênis, câncer da próstata, câncer testicular, leucemia crônica ou aguda, leucemia mieloide crônica, linfomas linfocíticos, câncer de bexiga, câncer do rim ou ureter, carcinoma de célula renal, carcinoma da pelve renal, linfoma não Hodgkins, tumores do eixo espinhal, glioma do tronco cerebral, adenoma da pituitária, câncer adrenocortical, câncer da vesícula biliar, mieloma múltiplo, colangiocarcinoma, fibrossarcoma, neuroblastoma, retinoblastoma ou uma combinação de um ou mais dos cânceres anteriormente citados.

[00127] Em algumas modalidades, o câncer é selecionado de carcinoma hepatocelular, câncer de ovário, câncer epitelial de ovário ou câncer de trompa de falópio; cistadenocarcinoma seroso papilar ou carcinoma seroso papilar uterino (UPSC); câncer da próstata; câncer testicular; câncer de vesícula biliar; hepatocolangiocarcinoma; sarcoma sinovial de tecido mole e osso; rabdomiossarcoma; osteossarcoma; condrossarcoma; Sarcoma de Ewing; câncer de tireóide anaplásico; adenoma adrenocortical; câncer pancreático; carcinoma dutal pancreático ou adenocarcinoma pancreático; câncer gastrointestinal / estomacal (GIST); linfoma; carcinoma de célula escamosa da cabeça e

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97/652 pescoço (SCCHN); câncer de glândula salivar; glioma ou câncer cerebral; tumores malignos da bainha do nervo periférico associado à neurofibromatose-1 (MPNST); Macroglobulinemia de Waldenstrom; ou meduloblastoma.

[00128] Em algumas modalidades, o câncer é selecionado de carcinoma hepatocelular (HCC), hepatoblastoma, câncer de cólon, câncer retal, câncer de ovário, câncer epitelial de ovário, câncer de trompa de falópio, cistadenocarcinoma seroso papilar, carcinoma seroso papilar uterino (UPSC), hepatocolangiocarcinoma, sarcoma sinovial de tecido mole e de osso, rabdomiossarcoma, osteossarcoma, câncer de tireoide anaplásico, adenoma adrenocortical, câncer pancreático, carcinoma dutal pancreático, adenocarcinoma pancreático, glioma, tumores malignos da bainha do nervo periférico associados à neurofibromatose-1 (MPNST), macroglobulinemia de Waldenstrom, ou medulobastoma.

[00129] Em algumas modalidades, o câncer é um tumor sólido, como um sarcoma, carcinoma ou linfoma. Os tumores sólidos geralmente compreendem uma massa anormal de tecido que normalmente não inclui cistos ou áreas líquidas. Em algumas modalidades, o câncer é selecionado de carcinoma de célula renal ou câncer de rim; carcinoma hepatocelular (HCC) ou hepatoblastoma ou câncer de fígado; melanoma; câncer de mama; carcinoma colorretal ou câncer colorretal; câncer de colo; câncer retal; câncer anal; câncer de pulmão, como câncer de pulmão de célula não pequena (NSCLC) ou câncer de pulmão de célula pequena (SCLC); câncer de ovário, câncer epitelial de ovário, carcinoma ovariano ou câncer de trompa de falópio; cistadenocarcinoma seroso papilar ou carcinoma seroso papilar uterino (UPSC); câncer de próstata; câncer de testicular; câncer de vesícula biliar; hepatocolangiocarcinoma; sarcoma sinovial de tecido mole e osso; rabdomiossarcoma; osteossarcoma; condrossarcoma; Sarcoma

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98/652 de Ewing; câncer de tireoide anaplásico; carcinoma adrenocortical; câncer pancreático; carcinoma dutal pancreático ou adenocarcinoma pancreático; câncer gastrointestinal / estomacal (GIST); linfoma; carcinoma de célula escamosa da cabeça e pescoço (SCCHN); câncer de glândula salivar; glioma ou câncer cerebral; tumores malignos da bainha do nervo periférico associados à neurofibromatose-1 (MPNST); Macroglobulinemia de Waldenstrom; ou meduloblastoma.

[00130] Em algumas modalidades, o câncer é selecionado de carcinoma de célula renal, carcinoma hepatocelular (HCC), hepatoblastoma, carcinoma colorretal, câncer colorretal, câncer de cólon, câncer retal, câncer anal, câncer de ovário, câncer epitelial de ovário, carcinoma de ovário, câncer de trompa de falópio, cistadenocarcinoma seroso papilar, carcinoma seroso papilar uterino (UPSC), hepatocolangiocarcinoma, sarcoma sinovial de tecido mole e osso, rabdomiossarcoma, osteossarcoma, condrossarcoma, câncer anaplásico da tireoide, carcinoma adrenocortical, câncer pancreático, carcinoma dutal pancreático, adenocarcinoma pancreático, glioma, câncer cerebral, tumores malignos da bainha do nervo periférico associados à neurofibromatose-1 (MPNST), macroglobulinemia de Waldenstrom ou meduloblastoma.

[00131] Em algumas modalidades, o câncer é selecionado de carcinoma hepatocelular (HCC), hepatoblastoma, câncer de cólon, câncer retal, câncer de ovário, câncer epitelial de ovário, carcinoma de ovário, câncer de trompa de falópio, cistadenocarcinoma seroso papilar, carcinoma seroso papilar uterino (UPSC), hepatocolangiocarcinoma, sarcoma sinovial de tecido mole e osso, rabdomiossarcoma, osteossarcoma, câncer de tireoide anaplásico, carcinoma adrenocortical, câncer de pâncreas, carcinoma dutal pancreático, adenocarcinoma de pâncreas, glioma, tumores malignos da bainha de nervo periférico associados à neurofibromatose-1 (MPNST),

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99/652 macroglobulinemia de Waldenstrom, ou meduloblastoma.

[00132] Em algumas modalidades, o câncer é carcinoma hepatocelular (HCC). Em algumas modalidades, o câncer é hepatoblastoma. Em algumas modalidades, o câncer é câncer de cólon. Em algumas modalidades, o câncer é câncer retal. Em algumas modalidades, o câncer é câncer de ovário ou carcinoma ovariano. Em algumas modalidades, o câncer é um câncer epitelial do ovário. Em algumas modalidades, o câncer é um câncer das trompas de falópio. Em algumas modalidades, o câncer é cistadenocarcinoma seroso papilar. Em algumas modalidades, o câncer é carcinoma seroso papilar uterino (UPSC). Em algumas modalidades, o câncer é hepatocolangiocarcinoma. Em algumas modalidades, o câncer é sarcoma sinovial de tecido mole e de osso. Em algumas modalidades, o câncer é rabdomiossarcoma. Em algumas modalidades, o câncer é osteossarcoma. Em algumas modalidades, o câncer é um câncer de tireóide anaplásico. Em algumas modalidades, o câncer é carcinoma adrenocortical. Em algumas modalidades, o câncer é câncer pancreático ou carcinoma dutal pancreático. Em algumas modalidades, o câncer é adenocarcinoma pancreático. Em algumas modalidades, o câncer é glioma. Em algumas modalidades, o câncer é um tumor maligno da bainha do nervo periférico (MPNST). Em algumas modalidades, o câncer é MPNST associado à neurofibromatose-1. Em algumas modalidades, o câncer é a macroglobulinemia de Waldenstrom. Em algumas modalidades, o câncer é meduloblastoma.

[00133] Em algumas modalidades, o câncer é leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mieloide aguda (AML), carcinoma adrenocortical, câncer anal, câncer de apêndice, tumor teratoide / rabdoide atípico, carcinoma de célula basal, câncer do duto biliar, câncer de bexiga, câncer ósseo, tumor cerebral, astrocitoma, tumor cerebral e da medula espinhal, glioma do tronco cerebral, tumor

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100/652 teratoide / rabdoide atípico do sistema nervoso central, tumores embrionários do sistema nervoso central, câncer de mama, tumores brônquicos, linfoma de Burkitt, tumor carcinóide, carcinoma de câncer do sistema nervoso central, primário desconhecido, câncer cervical, câncer da infância, cordoma, leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mielogenosa crônica (CML), distúrbios mieloproliferativos crônicos, câncer de cólon, câncer colorretal, craniofaringioma, linfoma cutâneo de células T, carcinoma dutal in situ (DCIS), tumores embrionários, câncer endometrial, ependimoblastoma, ependimoma, câncer de esôfago, estesioneuroblastoma, sarcoma de Ewing, tumor de célula germinativa extracraniana, câncer do duto biliar extra-hepático, câncer ocular, histiocitoma fibroso de osso, câncer da vesícula biliar, câncer gástrico e tumor carcinóide gastrointestinal, tumores estromais gastrointestinais (GIST), Tumor de células germinativas, Tumor de células germinativas do ovário, Tumor trofoblástico gestacional, glioma, leucemia de células pilosas, câncer de cabeça e pescoço, câncer de coração, câncer hepatocelular, histiocitose, câncer de célula de Langerhans, Linfoma de Hodgkin, câncer hipofaríngeo, melanoma intraocular, tumores de células das ilhotas, sarcoma de Kaposi, câncer renal, histiocitose de células de Langerhans, câncer de laringe, leucemia, câncer de lábio e cavidade oral, câncer de fígado, carcinoma lobular in situ (LCIS), câncer de pulmão, linfoma e linfoma relacionado com a AIDS, Macroglobulinemia, câncer de mama masculino, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, carcinoma de célula Merkel, Mesotelioma maligno, Câncer escamoso metastático do pescoço com carcinoma do trato da linha mediana, primário oculto, envolvendo o gene NUT, câncer da boca, síndrome de neoplasia endócrina múltipla, mieloma múltiplo/neoplasma de célula plasmática, fungoides de micose, síndrome mielodisplásica, neoplasma mielodisplásico/ mieloproliferativo, leucemia mielogenosa crônica

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101/652 (CML), leucemia mieloide aguda (AML), mieloma, mieloma múltiplo, distúrbio mieloproliferativo crônico, câncer de cavidade nasal, Câncer de Seio Paranasal, câncer nasofaríngeo, neuroblastoma, Linfoma NãoHodgkin, câncer de pulmão de célula não pequena, câncer oral, câncer da cavidade oral, câncer labial, câncer orofaríngeo, osteossarcoma, câncer de ovário, câncer pancreático, papilomatose, paraganglioma, câncer de seio paranasal, câncer da cavidade nasal, câncer da paratireóide, câncer penil, câncer faríngeo, feocromocitoma, tumores parenquimatosos de pineais de diferenciação intermediária, pineoblastoma, tumor da pituitária, neoplasma de célula plasmática, blastoma pleuropulmonar, câncer de mama, linfoma do sistema nervoso central primário (CNS), câncer da próstata, câncer retal, câncer de célula renal, carcinoma de célula renal de células claras, câncer da pelve renal, câncer de ureter, câncer de célula transicional, retinoblastoma, rabdomiossarcoma, câncer da glândula salivar, sarcoma, síndrome de Sezary, câncer da pele, câncer de pulmão de célula pequena, câncer de intestino delgado, sarcoma de tecido mole, carcinoma de célula escamosa, câncer de pescoço escamoso com carcinoma de célula escamosa, primário oculto da cabeça e pescoço (HNSCC), câncer de estômago, tumores neuroectodérmicos primitivos supratentoriais, linfoma de células T, câncer testicular, câncer de garganta, timoma, carcinoma tímico, câncer da tireóide, câncer de célula transicional da pelve renal e ureter, câncer de mama triplo negativo (TNBC), tumor trofoblástico gestacional, primário desconhecido, câncer incomum da infância, câncer uretral, câncer uterino, sarcoma uterino, macroglobulinemia de Waldenstrom ou tumor de Wilms.

[00134] Os compostos de acordo com a invenção são úteis no tratamento de doenças inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas, resultando, por exemplo, na redução de danos aos tecidos, inflamação das vias aéreas, hiper-reatividade brônquica, remodelação ou

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102/652 progressão da doença. As doenças inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas às quais a presente invenção é aplicável incluem asma de qualquer tipo ou gênero, incluindo asma intrínseca (não alérgica) e asma extrínseca (alérgica), asma leve, asma moderada, asma severa, asma bronquítica, asma induzida por exercício, asma ocupacional e asma induzida por infecção bacteriana. O tratamento da asma é também entendido como abrangendo o tratamento de indivíduos, por exemplo, com menos de 4 ou 5 anos de idade, exibindo sintomas de chiado no peito e diagnosticados ou diagnosticáveis como bebês sibilantes, uma categoria estabelecida de paciente de maior preocupação médica e atualmente frequentemente identificados como asmáticos incipientes ou em fase inicial.

[00135] A eficácia profilática no tratamento da asma será evidenciada pela frequência ou severidade reduzida de ataque sintomático, por exemplo, ataque asmático agudo ou broncoconstritor, melhora da função pulmonar ou melhora da hiper-reatividade das vias aéreas. Pode ainda ser evidenciada pela necessidade reduzida de outra terapia sintomática, tal como terapia para ou destinada a restringir ou abortar o ataque sintomático quando ele ocorre, por exemplo, antiinflamatório ou broncodilatador. O benefício profilático na asma pode, em particular, ser evidente em indivíduos propensos a mergulho matinal. Mergulho matinal é uma síndrome asmática reconhecida, comum a uma porcentagem substancial de asmáticos e caracterizada por ataque de asma, por exemplo, entre 4 e 6 horas da manhã, isto é, em um momento normalmente substancialmente distante de qualquer terapia sintomática previamente administrada.

[00136] Os compostos da presente invenção podem ser utilizados para outras doenças e condições inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas às quais a presente invenção é aplicável e incluem lesão pulmonar aguda (ALI), síndrome da dificuldade respiratória do

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103/652 adulto/aguda (ARDS), doença pulmonar, das vias aéreas ou pulmonar obstrutiva crônica, (COPD, COAD ou COLD), incluindo bronquite crônica ou dispnéia associada a ela, enfisema, bem como exacerbação da hiper-reatividade das vias aéreas resultante de outra terapia medicamentosa, em particular outra terapia medicamentosa inalada. A invenção também é aplicável ao tratamento de bronquite de qualquer tipo ou gênero, incluindo, porém não limitado a, bronquite aguda, araquídica, catarral, crupe, bronquite crônica ou ftinóide. Outras doenças inflamatórias ou obstrutivas das vias aéreas às quais a presente invenção é aplicável incluem pneumoconiose (uma doença pulmonar inflamatória, geralmente ocupacional, frequentemente acompanhada de obstrução das vias aéreas, seja crônica ou aguda, e ocasionada por inalação repetida de pós) de qualquer tipo ou gênero, incluindo, por exemplo, aluminose, antracose, asbestose, calicose, ptilose, siderose, silicose, tabaco e bissinose.

[00137] No que diz respeito à sua atividade anti-inflamatória, em particular em relação à inibição da ativação de eosinófilos, os compostos da invenção também são úteis no tratamento de distúrbios relacionados com eosinófilos, por exemplo, eosinofilia, em particular distúrbios das vias aéreas relacionados aos eosinófilos (por exemplo, envolvendo infiltração eosinofílica mórbida de tecidos pulmonares) incluindo hipereosinofilia, uma vez que afeta as vias aéreas e / ou pulmões, bem como, por exemplo, distúrbios das vias aéreas relacionados com eosinófilos, conseqüentes ou concomitantes à síndrome de Loffler, pneumonia eosinofílica, infestação parasitária (em particular o metazoário) (incluindo eosinofilia tropical), aspergilose broncopulmonar, poliarterite nodosa (incluindo a síndrome de ChurgStrauss), granuloma eosinofílico e distúrbios relacionados aos eosinófilos que afetam as vias aéreas causadas por reação medicamentosa.

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[00138] Os compostos da invenção também são úteis no tratamento de condições inflamatórias ou alérgicas da pele, por exemplo psoríase, dermatite de contato, dermatite atópica, alopecia areata, eritema multiforma, dermatite herpetiforme, esclerodermia, vitiligo, angiite por hipersensibilidade, urticária, penfigóide bolhoso, lúpus eritematoso, lúpus eritematoso sistêmico, pênfigo vulgar, pênfigo foliáceo, pênfigo paraneoplásico, epidermólise bolhosa adquirida, acne vulgar e outras condições inflamatórias ou alérgicas da pele.

[00139] Os compostos da invenção também podem ser utilizados para o tratamento de outras doenças ou condições, tais como doenças ou condições com um componente inflamatório, por exemplo, tratamento de doenças e condições oculares, tal como alergia ocular, conjuntivite, ceratoconjuntivite seca e conjuntivite vernal, doenças que afetam o nariz, incluindo rinite alérgica e doença inflamatória nas quais estão envolvidas reações autoimunes ou tendo componente ou etiologia autoimune, incluindo distúrbios hematológicos autoimunes (por exemplo, anemia hemolítica, anemia aplásica, anemia de célula vermelha pura e trombocitopenia idiopática), lúpus eritematoso sistêmico, artrite reumatóide, policondrite, esclerodermia, granulomatose de Wegener, dermatomiosite, hepatite ativa crônica, miastenia grave, síndrome de Steven-Johnson, espru idiopático, doença inflamatória intestinal auto-imune (por exemplo, colite ulcerativa e doença de Crohn), síndrome do intestino irritável, doença celíaca, periodontite, doença da membrana hialina, doença renal, doença glomerular, doença hepática alcoólica, esclerose múltipla, oftalmopatia endócrina, doença de Graves, sarcoidose, alveolite, pneumonite de hipersensibilidade crônica, esclerose múltipla, cirrose biliar primária, uveíte (anterior e posterior), síndrome de Sjogren, ceratoconjuntivite seca e ceratoconjuntivite vernal, fibrose intersticial pulmonar, artrite psoriática, artrite idiopática juvenil sistêmica, síndrome periódica

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105/652 associada à criopirina, nefrite, vasculite, diverticulite, cistite intersticial, glomerulonefrite (com e sem síndrome nefrótica, por exemplo, incluindo síndrome nefrótica idiopática ou nefropatia por alteração minai), doença granulomatosa crônica, endometriose, doença renal por leptospirose, glaucoma, doença da retina, envelhecimento, dor de cabeça, dor, síndrome da dor regional complexa, hipertrofia cardíaca, perda de massa muscular, distúrbios catabólicos, obesidade, retardo do crescimento fetal, hipercolesterolemia, doenças cardíacas, insuficiência cardíaca crônica, mesotelioma, displasia ecodérmica anidrótica, doença de Behcet, incontinência pigmentar, doença de Paget, pancreatite, síndrome da febre periódica hereditária, asma (alérgica e não alérgica, leve, moderada, grave, bronquítica e induzida por exercício), lesão pulmonar aguda, síndrome da dificuldade respiratória aguda, eosinofilia, hipersensibilidades, anafilaxia, sinusite nasal, alergia ocular, doenças induzidas por sílica, COPD (redução de dano, inflamação das vias aéreas, hiper-reatividade brônquica, remodelação ou progressão da doença), doença pulmonar, fibrose cística, lesão pulmonar induzida por ácido, hipertensão pulmonar, polineuropatia, catarata, inflamação muscular em conjunto com esclerose sistêmica, dermatomiosite, polimiosite, miosite do corpo de inclusão, miastenia grave, tireoidite, doença de Addison, líquen plano, diabetes tipo 1 ou diabetes tipo 2.

[00140] Em algumas modalidades, a doença inflamatória que pode ser tratada de acordo com os métodos desta invenção é selecionada entre gota aguda e crônica, artrite gotosa crônica, psoríase, artrite psoriática, artrite reumatóide, artrite reumatóide juvenil, artrite idiopática juvenil sistêmica (SJIA)), Síndromes periódicas associadas à criopirina (CAPS) ou osteoartrite.

[00141] Em algumas modalidades, a doença inflamatória que pode ser tratada de acordo com os métodos desta invenção é selecionada de uma doença mediada por TH17. Em algumas modalidades, a doença

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106/652 mediada por TH17 é selecionada de lúpus eritematoso sistêmico, esclerose múltipla, doença inflamatória intestinal, incluindo Crohn ou colite ulcerativa.

[00142] Em algumas modalidades, a doença inflamatória que pode ser tratada de acordo com os métodos desta invenção é selecionada de distúrbios alérgicos da síndrome de Sjogren, osteoartrite. Condições oculares, como alergia ocular, conjuntivite, ceratoconjuntivite seca e conjuntivite vernal, doenças que afetam o nariz, incluindo rinite alérgica. [00143] Em algumas modalidades, a doença inflamatória que pode ser tratada de acordo com os métodos desta invenção é selecionada entre dermatite de contato, dermatite atópica, alopecia areata, eritema multiforma, dermatite herpetiforme, esclerodermia, vitiligo, angiite de hipersensibilidade, urticária, penfigoide bolhoso, pênfigo vulgar, pênfigo foliáceo, pênfigo paraneoplásico, epidermólise bolhosa adquirida e outras condições inflamatórias ou alérgicas da pele.

[00144] Em certas modalidades, um composto fornecido é útil para o tratamento de uma infecção, doença ou condição viral. Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método de tratamento de uma doença viral selecionada de doenças retrovirais, tais como HIV-1, HIV-2, vírus-l da leucemia de células T humanas (HTLV-I), HTLV-II, HTLV-III, vírus da imunodeficiência símia (SIV), vírus associado à linfadenopatia (LAV-2), vírus-l linfotrófico T símio (STLV-I), STLV-II, STLV-III, vírus símio B-linfotrófico (SBL), vírus da leucemia de macaco Gibão (GALV), vírus da leucemia bovina (BLV), vírus da anemia infecciosa dos equídeos (EIAV), vírus da leucemia felina (FELV), vírus da leucemia murina (MuLV), vírus da leucose aviária (ALV); outras infecções por vírus, tais como hepadnaviridae (Hepatite B); herpesviridae (Herpes simples I, Herpes simples II, Varicela-Zóster, vírus Epstein-Barr e citomegalovírus); parvoviridae (parvovírus humano B-19); papovaviridae (vírus do papiloma humano tipos 1 a 60, viroses

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JC e BK); vírus da varíola (varíola maior, varíola menor, vacínia, varíola do macaco, varíola, paravacínia ou vírus do nó ordenhador, varíola ou vírus da ORF, molusco contagioso) e cânceres, linfomas e outras leucemias.

Terapias de Combinação

[00145] Dependendo da condição, ou doença particular, a ser tratada, agentes terapêuticos adicionais, que são normalmente administrados para tratar essa condição, podem ser administrados em combinação com compostos e composições desta invenção. Como aqui utilizado, agentes terapêuticos adicionais que são normalmente administrados para tratar uma doença ou condição particular, são conhecidos como apropriados para a doença ou condição que está sendo tratada.

[00146] Em certas modalidades, um composto fornecido, ou uma composição do mesmo, é administrado em combinação com outro agente anticâncer, citotoxina ou quimioterápico, a um paciente em necessidade do mesmo.

[00147] Em certas modalidades, os agentes anticâncer ou quimioterápicos usados em combinação com compostos ou composições da invenção incluem, porém não estão limitados a, metformina, fenformina, buformina, imatinibe, nilotinibe, gefitinibe, sunitinibe, carfilzomibe, salinosporamida A, ácido retinóico, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina, mecloretamina, ciclofosfamida, clorambucila, ifosfamida, azatioprina, mercaptopurina, doxifluridina, fluorouracila, gencitabina, metotrexato, tioguanina, vincristina, vimblastina, vinorelbina, vindesina, podofilotoxina, etoposídeo, teniposídeo, tafluposídeo, paclitaxel, docetaxel, irinotecano, topotecano, ansacrina, actinomicina, doxorubicina, daunorubicina, valrubicina, idarubicina, epirubicina, plicamicina, mitomicina, mitoxantrona, melfalan, bussulfan, capecitabina, pemetrexed,, epotilonas, ácido 13-cis-retinoico, 2-CdA, 2Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 137/704

108/652 clorodeoxiadenosina, 5-azacitidina, 5-fluorouracila, 5-FU, 6Mercaptopurina, 6-MP, 6-TG, 6-Tioguanina, Abraxane, Accutane®, Actinomicina-D, Adriamicina®, Adrucil®, Afinitor®, Agrylin®, Ala-Cort®, aldesleucina, alentuzumabe, ALIMTA, alitretinoína, Alkaban-AQ®, Alkeran®, ácido transretinóico, Interferon alfa, altretamina, ametopterina, amifostina, aminoglutetimida, anagrelida, anandron®, anastrozol, arabinosilcitosina, Ara-C, Aranesp®, Aredia®, Arimidex®, Aromasin®. Arranon®, trióxido de arsênico, Arzerra™, Asparaginase, ATRA, Avastin®, azacitidina, BCG, BCNU, Bendamustina, Bevacizumabe, Bexaroteno, BEXXAR®, bicalutamida, BiCNU, Blenoxane®, bleomicina, bortezomibe, bussulfano, Busulfex®, C225, Leucovorina cálcica, Campath®, Camptosar®, Camptotecina-11, Capecitabina, Carac™, Carboplatina, Carmustina, Wafer Carmustina, Casodex®, 00-5013, CCI-779, CCNU, CDDP, CeeNU, Cerubidine®, cetuximabe, clorambucila, Fator Citrovorum, cladribina, Cortisona, Cosmegen®, CPT-11, Cytadren®, Cytosar-U®, Cytoxan®, dacarbazina, dacogênio, dactinomicina, Darbepoetina alfa, dasatinibe, daunomicina, cloridrato de daunorubicina, daunorubicina lipossômica, DaunoXome®, decadron, decitabina, Delta-Cortef®, Deltasone®, denileucina, diftitox, DepoCyt™, dexametasona, acetato de dexametasona, fosfato de sódio de dexametasona, dexasona, Dexrazoxano, DHAD, DIC, Diodex, Docetaxel, Doxil®, doxorrubicina, doxorrubicina lipossômica, Droxia™, DTIC, DTIC-Dome®, Duralone®, Efudex®, Eligard™, Ellence™, Elspar®, Emcyt®, epirubicina, epoetina alfa, Erbitux, Erlotinibe, Erwinia L-asparaginase, estramustina, etilol, Etopophos®, etoposídeo, fosfato de etoposídeo, Eulexin®, everolimus, Evista®, exemestano, Fareston®, filgrastim, floxuridina, Fludara®, fludarabina, Fluoroplex®, fluorouracila, fluorouracila (creme), fluoximesterona, flutamida, ácido folínico, FUDR®, fulvestrant, G-CSF, gefitinibe, gencitabina, gentuzumabe, ozogamicina, GemzarGIeevec™, Gliadel® Wafer, GM-CSF, goserelina,

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109/652 granulócitos - Fator de Estimulação de Colônia Granulócitos, Fator de Estimulação de Colônias de Macrófago de Granulócito, Halotestin®, Herceptin®, hexadrol, Hexalen®, hexametilmelamina, HMM, Hycantin®, Hydrea®, Hydrocort Acetate®, hidrocortisona, fosfato de sódio de hidrocortisona, suei nato de sódio de hidrocortisona, fosfato de hidrocortisona, hidroxiureia, Ibritumomabe, Ibritumomabe, tiuxetano, Idamicina®, Idarubicina Ifex®, IFN-alfa, Ifosfamida, IL-11, IL-2, mesilato de imatinibe, imidazol carboxamida, interferon alfa, interferon alfa-2b (Conjugado de PEG), lnterleucina-2, lnterleucina-11, Intron A® (interferon alfa-2b), Iressa®, irinotecano, isotretinoína, ixabepilona, Ixempra™, Kidrolase®, Lanacort®, lapatinibe, L-asparaginase, LCR, lenalidomida, letrozol, leucovorina, Leuceran, Leukine™, leuprolida, leurocristina, Leustatin™, Ara-C lipossômica, Liquid Pred®, lomustina, L-PAM, L-Sarcolisina, Lupron®, Lupron Depot®, Matulane®, maxidex, mecloretamina, cloridrato de mecloremetamina, Meddralone® , Medrol®, Megace®, megestrol, acetato de megestrol, melfalano, mercaptopurina, mesna, Mesnex™, metotrexato, Metotrexato sódico, metilprednisolona, Meticorten®, mitomicina, mitomicina-C, Mitoxantrona, M-Prednisol®, MTC, MTX, Mustargen®, mustina, Mutamicina®, Myleran®, Mylocel™, Mylotarg®, Navelbine®, nelarabina, Neosar®, Neulasta™, Neumega®, Neupogen®, Nexavar®, Nilandron®, nilotinibr, nilutamida, Nipent®, Mostarda de Nitrogênio, Novaldex®, Novantrone®, Nplato, Octreotida, acetato de Octreotide, ofatumumabe, Oncospar®, Oncovin®, Ontak®, Onxal™, Oprelvecina, Orapred®, Orasone®, oxaliplatina, paclitaxel, Paclitaxel ligado a proteína, pamidronato, panitumumabe, Panretin®, Paraplatin®, pazopanibe, Pediapred®, PEG Interferon, Pegaspargase, Pegfilgrastim, PEG-INTRON™, PEG-L-asparaginase, PEMETREXED, pentostatina, mostarda de fenilalanina, Platinol®, Platinol-AQ®, prednisolona, p Prednisona, Prelone®, procarbazina, PROCRIT®, Proleukin®,

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Prolifeprospan 20 com Implante de carmustina, Purinethol®, raloxifeno, Revlimid®, Rheumatrex®, Rituxan®, rituximabe, Roferon-A® (Interferon Alfa-2a), romiplostim, Rubex®, cloridrato de rubidomicina, Sandostatin®, Sandostatin LAR®, sargramostim, Solu-Cortef®, SoluMedrol®, sorafenibe, SPRYCEL™, STI-571, Estreptozocina, SU11248, sunitinibe, Sutent®, tamoxifeno, Tarceva®, Targretin®, Tasigna®, Taxol®, Taxotere®, Temodar®, Temozolomida, Tensirolimus, TESPA, talidomida, Thalomid®, TheraCys®, tioguanina, Tioguanina Tabloid ®, tiofosfoamida, Tioplex®, tiotepa, TICE®, Toposar®, Topotecano, Toremifeno, Torisel®, Tositumomabe, Trastuzumabe, Treanda®, tretinoína, Trexall™, Trisenox®, TSPA, TYKERB®, VCR, Vectibix™, Velban®, Velcade®, VePesid®, Vesanoid®, Viadur™, Vidaza®, Vinblastina, Sulfato de Vinblastina, Vincasar Pfs®, vincristina, vinorelbina, tartarato de vinorelbina, VLB, VM-26, vorinostat, votrient, VP-16, Vumon®, Xeloda®, Zanosar®, Zevalin™, Zinecard®, Zoladex®, ácido zoledrônico, zolinza, Zometa® ou combinações de qualquer dos acima mencionados.

[00148] Em certas modalidades, um agente de imuno-oncologia pode ser administrado com um composto como aqui descrito para o tratamento de um distúrbio proliferativo como aqui descrito. Quando usado aqui, o termo um agente de imuno-oncologia refere-se a um agente que é eficaz para realçar, estimular e/ou super-regular respostas imunes em um indivíduo. Em algumas modalidades, a administração de um agente imuno-oncológico com um composto como aqui descrito tem um efeito sinérgico no tratamento de câncer.

[00149] Em algumas modalidades, um composto como aqui descrito é sequencialmente administrado antes da administração de um agente de imuno-oncologia. Em algumas modalidades, um composto como aqui descrito é administrado concomitantemente com um agente de imuno-oncologia. Em algumas modalidades, um composto como aqui

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111/652 descrito é administrado sequencialmente após a administração de um agente de imuno-oncologia.

[00150] Em algumas modalidades, um composto como aqui descrito pode ser coformulado com um agente de imuno-oncologia.

[00151] Um agente de imuno-oncologia pode ser, por exemplo, um fármaco de molécula pequena, um anticorpo ou uma molécula biológica ou pequena. Exemplos de agentes imuno-oncológicos biológicos incluem, porém não estão limitados a, vacinas contra o câncer, anticorpos e citocinas. Em algumas modalidades, um anticorpo é um anticorpo monoclonal. Em algumas modalidades, um anticorpo monoclonal é humanizado ou humano.

[00152] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é (i) um agonista de um receptor estimulador (incluindo um coestimulador) ou (ii) um antagonista de um sinal inibitório (incluindo um co-inibidor) nas células T, ambos resultam na amplificação de respostas de células T específicas do antígeno.

[00153] Certas moléculas estimuladoras e inibidoras são membros da super família de imunoglobulinas (IgSF). Uma família importante de ligantes ligados à membrana que se ligam a receptores coestimuladores ou co-inibidores é a família B7, que inclui B7-1, B7-2, B7H1 (PD-L1), B7-DC (PD-L2), B7-H2 (ICOS-L), B7-H3, B7-H4, B7-H5 (VISTA) e B7-H6. Outra família de ligantes ligados à membrana que se ligam a receptores co-estimuladores ou co-inibidores é a família de moléculas de TNF que se ligam a membros da família de receptores de TNF cognatos, que inclui CD40 e CD40L, OX-40, OX-40L, CD70, CD27L, CD30, CD30L, 4-1BBL, CD137 (4-1 BB), TRAIL/Apo2-L, TRAILR1/DR4, TRAILR2/DR5, TRAILR3, TRAILR4, OPG, RANK, RANKL, TWEAKR/Fn14, TWEAK, BAFFR, EDAR, XEDAR, TACI, APRIL, BCMA, LTpR, LIGHT, DcR3, HVEM, VEGI/TL1A, TRAMP/DR3, EDAR, EDA1, XEDAR, EDA2, TNFR1, Linfotoxina a/TNFp, TNFR2,

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TNFa, LTpR, Linfotoxina α1β2, FAS, FASL, RELT, DR6, TROY, NGFR. [00154] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma citocina que inibe a ativação de células T (por exemplo, IL-6, IL-10, TGF-β, VEGF e outras citocinas imunossupressoras) ou uma citocina que estimula a ativação de células T , para estimular uma resposta imune.

[00155] Em algumas modalidades, uma combinação de um composto como aqui descrito e um agente imuno-oncológico pode estimular as respostas das células T. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é: (i) um antagonista de uma proteína que inibe a ativação de células T (por exemplo, inibidores de ponto de verificação imune), como CTLA-4, PD-1, PD-L1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, Galectina 9, CEACAM-1, BTLA, CD69, Galectina-1, TIGIT, CD113, GPR56, VISTA, 2B4, CD48, GARP, PD1H, LAIR1, TIM-1 e TIM-4; ou (ii) um agonista de uma proteína que estimula a ativação de células T, como B7-1, B7-2, CD28, 4-1 BB (CD137), 4-1BBL, ICOS, ICOS-L, 0X40, OX40L, GITR, GITRL , CD70, CD27, CD40, DR3 e CD28H.

[00156] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de receptores inibitórios nas células NK ou um agonista de receptores de ativação nas células NK. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista do KIR, tal como o lirilumabe.

[00157] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um agente que inibe ou esgota macrófagos ou monócitos, incluindo porém não limitado a antagonistas de CSF-1R, tais como anticorpos antagonistas de CSF-1R, incluindo RG7155 (WO 11/70024, WO 11/107553, WO 11/131407, WO 13/87699, WO 13/119716, WO 13/132044) ou FPA-008 (WO 11/140249; WO 13/169264; WO 14/036357).

[00158] Em algumas modalidades, um agente imuno-oncológico é

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113/652 selecionado de agentes agonísticos que se ligam a receptores coestimulatórios positivos, agentes bloqueadores que atenuam a sinalização através de receptores inibitórios, antagonistas e um ou mais agentes que aumentam sistemicamente a frequência de células T antitumorais, agentes que superam vias imunossupressoras distintas no microambiente tumoral (por exemplo, bloqueiam o envolvimento de receptor inibidor (por exemplo, interações PD-L1/PD-1), esgotam ou inibem Tregs (por exemplo, usando um anticorpo monoclonal anti-CD25 (por exemplo, daclizumabe) ou por depleção ex vivo de conta antiCD25), inibem enzimas metabólicas tal como IDO ou reverte / previne energia ou exaustão de célula T) e agentes que desencadeiam a ativação imune inata e / ou inflamação nos sítios de tumor.

[00159] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de CTLA-4. Em algumas modalidades, um antagonista de CTLA-4 é um anticorpo antagonista de CTLA-4. Em algumas modalidades, um anticorpo antagonista de CTLA-4 é YERVOY (ipilimumabe) ou tremelimumabe.

[00160] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de PD-1. Em algumas modalidades, um antagonista de PD-1 é administrado por infusão. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um anticorpo ou uma porção de ligação ao antígeno do mesmo que se liga especificamente a um receptor de Morte Programada-1 (PD-1) e inibe a atividade de PD-1. Em algumas modalidades, um antagonista de PD-1 é um anticorpo antagonista de PD-1. Em algumas modalidades, um anticorpo antagonístico de PD-1 é OPDIVO (nivolumabe), KEYTRUDA (pembrolizumabe) ou MEDI-0680 (AMP-514; WO 2012/145493). Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia pode ser pidilizumabe (CT-011). Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma proteína recombinante composta pelo domínio extracelular de PD-L2 (B7-DC)

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114/652 fundida à porção Fc de IgG 1, chamada AMP-224.

[00161] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de PD-L1. Em algumas modalidades, um antagonista de PD-L1 é um anticorpo antagonístico de PD-L1. Em algumas modalidades, um anticorpo PD-L1 é MPDL3280A (RG7446; WO 2010/077634), durvalumabe (MEDI4736), BMS-936559 (WO

2007/005874) e MSB0010718C (WO 2013/79174).

[00162] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de LAG-3. Em algumas modalidades, um antagonista de LAG-3 é um anticorpo antagonista de LAG-3. Em algumas modalidades, um anticorpo LAG3 é BMS-986016 (WO 10/19570, WO 14/08218) ou IMP-731 ou IMP-321 (WO 08/132601, WO 009/44273).

[00163] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um agonista de CD137 (4-1 BB). Em algumas modalidades, um agonista de CD137 (4-1 BB) é um anticorpo agonístico de CD137. Em algumas modalidades, um anticorpo CD137 é urelumabe ou PF-05082566 (WO 12/32433).

[00164] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um agonista de GITR. Em algumas modalidades, um agonista de GITR é um anticorpo agonístico de GITR. Em algumas modalidades, um anticorpo GITR é BMS-986153, BMS-986156, TRX-518 (WO 006/105021, WO 009/009116) ou MK-4166 (WO 11/028683).

[00165] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de IDO. Em algumas modalidades, um antagonista de IDO é INCB-024360 (WO 2006/122150, WO 07/75598, WO 08/36653, WO 08/36642), indoximod ou NLG-919 (WO 09/73620, WO 009/1156652, WO 11/56652, WO 12/142237).

[00166] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um agonista de 0X40. Em algumas modalidades, um agonista de 0X40 é um anticorpo agonístico de 0X40. Em algumas modalidades, um

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115/652 anticorpo 0X40 é MEDI-6383 ou MEDI-6469.

[00167] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de OX40L. Em algumas modalidades, um antagonista de OX40L é um anticorpo antagonista de 0X40. Em algumas modalidades, um antagonista de OX40L é RG-7888 (WO 06/029879).

[00168] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um agonista de CD40. Em algumas modalidades, um agonista de CD40 é um anticorpo agonístico de CD40. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um antagonista de CD40. Em algumas modalidades, um antagonista de CD40 é um anticorpo antagonista de CD40. Em algumas modalidades, um anticorpo CD40 é lucatumumabe ou dacetuzumabe.

[00169] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um agonista de CD27. Em algumas modalidades, um agonista de CD27 é um anticorpo agonista de CD27. Em algumas modalidades, um anticorpo CD27 é varlilumabe.

[00170] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é MGA271 (a B7H3) (WO11/109400).

[00171] Em algumas modalidades, um agente imuno-oncologia é abagovomabe, adecatumumabe, afutuzumabe, alemtuzumabe, anatumomabe mafenatox, apolizumabe, atezolimabe, avelumabe, blinatumomab, BMS-936559, catamaxomabe, durvalumabe, epacadostate, epratuzumabe, indoximod, inotuzumabe ozagamicina, intelumumabe, ipilimumabe, isatuximabe, lambrolizumabe, MED14736, MPDL3280A, nivolumabe, obinutuzumabe, ocaratuzumabe, ofatumumabe, olatatumabe, pembrolizumabe, pidilizumabe, rituximabe, ticilimumabe, samalizumabe, ou tremelimumabe.

[00172] Em algumas modalidades, um agente imuno-oncológico é um agente imunoestimulatório. Por exemplo, anticorpos que bloqueiam o eixo inibitório de PD-1 e PD-L1 podem desencadear células T reativas

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116/652 ao tumor ativadas e demonstrou em ensaios clínicos induzir respostas antitumorais duráveis em um número crescente de histologias tumorais, incluindo alguns tipos de tumores que convencionalmente não foram considerados sensíveis à imunoterapia. Ver, por exemplo, Okazaki, T. etal. (2013) Nat. Immunol. 14, 1212-1218; Zou etal. (2016) Sei. Transi. Med. 8. O anticorpo anti-PD-1 nivolumabe (Opdivo®, Bristol-Myers Squibb, também conhecido como ONO-4538, MDX1106 e BMS936558) mostrou potencial para melhorar a sobrevida global em pacientes com RCC que tiveram progressão da doença durante ou após terapia antiangiogênica anterior.

[00173] Em algumas modalidades, a terapêutica imunomodulatória induz especificamente a apoptose das células tumorais. A terapêutica imunomodulatória aprovada que pode ser utilizada na presente invenção inclui pomalidomida (Pomalyst®, Celgene); lenalidomida (Revlimid®, Celgene); mebutato de ingenol (Picato®, LEO Pharma).

[00174] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma vacina contra o câncer. Em algumas modalidades, a vacina contra o câncer é selecionada entre o sipuleucel-T (Provenge®, Dendreon/Valeant Pharmaceuticals), que foi aprovado para o tratamento de câncer da próstata resistente à castração metastático assintomático ou minimamente sintomático (refratário a hormônios); e talimogene laherparepvec (Imlygic®, BioVex/Amgen, anteriormente conhecido como T-VEC), uma terapia viral oncolítica geneticamente modificada aprovada para o tratamento de lesões cutâneas, subeutâneas e nodais irressecáveis no melanoma. Em algumas modalidades, um agente imuno-oncológico é selecionado de uma terapia viral oncolítica, tal como pexastimogene devacirepvec (PexaVec/JX-594, SilIaJen/anteriormente Jennerex Biotherapeutics), um vírus da vacínia com deficiência de timidina cinase (TK-) modificado para expressar GM-CSF, para carcinoma hepatocelular

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117/652 (NCT02562755) e melanoma (NCT00429312); pelareorep (Reolysin®, Oncolytics Biotech), uma variante do vírus órfão entérico respiratório (reovírus) que não se replica em células que não são ativadas por RAS, em vários cânceres, incluindo câncer colorretal (NCT01622543); câncer da próstata (NCT01619813); câncer de célula escamosa da cabeça e pescoço (NCT01166542); adenocarcinoma pancreático (NCT00998322); e câncer de pulmão de célula não pequena (NSCLC) (NCT 00861627); enadenotucirev (NG-348, PsiOxus, anteriormente conhecido como ColoAdl), um adenovírus modificado para expressar uma CD80 de tamanho natural e um fragmento de anticorpo específico para a proteína CD3 de receptor de células T, em câncer de ovário (NCT02028117); tumores epiteliais metastáticos ou avançados, tais como câncer colorretal, câncer de bexiga, carcinoma de célula escamosa da cabeça e pescoço e câncer de glândula salivar (NCT02636036); ONCOS-102 (Targovax/anteriormente Oncos), um adenovírus modificado para expressar GM-CSF, em melanoma (NCT03003676); e doença peritoneal, câncer colorretal ou câncer de ovário (NCT02963831); Foram estudados o GL-ONC1 (GLV-1 h68/GLV1 h153, Genelux GmbH), vírus da vacínia modificados para expressar beta-galactosidase (beta-gal)/beta-glucoronidase ou betagal/symportador de de iodeto de sódio humano (hNIS), respectivamente, na carcinomatose peritoneal (NCT01443260); câncer das trompas de falópio, câncer do ovário (NCT 02759588); ou CG0070 (Cold Genesys), um adenovírus modificado para expressar GM-CSF, no câncer de bexiga (NCT02365818).

[00175] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é selecionado de JX-929 (SiliaJen/anteriormente Jennerex Biotherapeutics), um vírus da vacínia deficiente do fator de crescimento de TK e vacínia modificados para expressar citosina desaminase, capaz de converter o profármaco 5-fluorocitosina em relação ao fármaco

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118/652 citotóxico 5-fluorouracila; TG01 e TG02 (Targovax/anteriormente Oncos), agentes de imunoterapia com base em peptídeo, direcionados a mutações RAS de difícil tratamento; e TILT-123 (TILT Biotherapeutics), um adenovírus modificado designado: Ad5/3-E2Fdelta24-hTNFa-IRES-hlL20; e VSV-GP (ViraTherapeutics), um vírus de estomatite vesicular (VSV), modificado para expressar a glicoproteína (GP) do vírus da coriomeningite linfocítica (LCMV), que pode ser também modificado para construir resposta de célula T CD8⁺ específica de antígeno.

[00176] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma célula T modificada para expressar um receptor de antígeno quimérico, ou CAR. As células T modificadas para expressar tal receptor de antígeno quimérico são referidas como células CAR-T.

[00177] CARs foram construídas, as quais consistem em domínios de ligação, que podem ser derivados de ligantes naturais, fragmentos variáveis de cadeia única (scFv) derivados de anticorpos monoclonais específicos para antígenos da superfície celular, fundidos a endodomínios que são a extremidade funcional de receptor de células T (TCR), como o domínio de sinalização CD3-zeta dos TCRs, que é capaz de gerar um sinal de ativação nos linfócitos T. Após a ligação ao antígeno, tais CARs se ligam a vias de sinalização endógenas na célula efetora e geram sinais de ativação similares aos iniciados pelo complexo TCR.

[00178] Por exemplo, em algumas modalidades, a célula CAR-T é uma daquelas descritas na Patente Norte-americana 8.906.682 (junho; pelo presente incorporada por referência em sua íntegra), que descreve as células CAR-T modificadas para compreender um domínio extracelular que tem um domínio de ligação a antígeno (tal como um domínio que se liga a CD19), fundido a um domínio de sinalização intracelular da cadeia zeta do complexo receptor de antígeno de célula

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T (tal como CD3 zeta). Quando expresso na célula T, o CAR é capaz de redirecionar o reconhecimento de antígeno com base na especificidade de ligação a antígeno. No caso de CD19, o antígeno é expresso em células B malignas. Mais de 200 ensaios clínicos estão atualmente em andamento, empregando o CAR-T em uma ampla gama de indicações. [https://clinicaltrials.gov/ct2/results?term=chimeric+antigen+receptors& pg=i]·

[00179] Em algumas modalidades, um agente imunoestimulatório é um ativador do receptor γ órfão relacionado com o receptor de ácido retinoico (RORyt). O RORyt é um fator de transcrição com papéis-chave na diferenciação e manutenção de subconjuntos efetores do Tipo 17 de células T CD4+ (Th17) e CD8+ (Tc17), bem como na diferenciação de IL-17 que expressa subpopulações de célula imune inata, tais como células NK. Em algumas modalidades, um ativador de RORyt é o LYC55716 (Lycera), que está sendo avaliado atualmente em experiências clínicas para o tratamento de tumores sólidos (NCT02929862).

[00180] Em algumas modalidades, um agente imunoestimulatório é um agonista ou ativador de um receptor do tipo Toll (TLR). Ativadores adequados de TLRs incluem um agonista ou ativador de TLR9, tal como SD-101 (Dynavax). SD-101 é um CpG imunoestimulatório que está sendo estudado para linfomas de célula B, foliculares e outros (NCT02254772). Agonistas ou ativadores de TLR8 que podem ser utilizados na presente invenção incluem motolimod (VTX-2337, VentiRx Pharmaceuticals) que está sendo estudado para câncer de célula escamosa da cabeça e pescoço (NCT02124850) e câncer de ovário (NCT02431559).

[00181] Outros agentes imuno-oncológicos que podem ser utilizados na presente invenção incluem urelumabe (BMS-663513, Bristol-Myers Squibb), um anticorpo monoclonal anti-CD137; varlilumab (CDX-1127, Celldex Therapeutics), um anticorpo monoclonal anti-CD27; BMS

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986178 (Bristol-Myers Squibb), um anticorpo monoclonal anti-OX40; lirilumabe (IPH2102/BMS-986015, Innate Pharma, Bristol-Myers Squibb), um anticorpo monoclonal anti-KIR; monalizumabe (IPH2201, Innate Pharma, AstraZeneca) um anticorpo monoclonal anti-NKG2A; andecaliximabe (GS-5745, Gilead Sciences), um anticorpo anti-MMP9; MK-4166 (Merck & Co.), um anticorpo monoclonal anti-GITR.

[00182] Em algumas modalidades, um agente imunoestimulatório é selecionado de elotuzumabe, mifamurtida, um agonista ou ativador de um receptor do tipo Toll e um ativador do RORyt.

[00183] Em algumas modalidades, um terapêutico imunoestimulatório é uma interleucina humana recombinante 15 (rhlL15). O rhlL-15 foi testado na clínica como uma terapia para melanoma e carcinoma de célula renal (NCT01021059 e NCT01369888) e leucemias (NCT02689453). Em algumas modalidades, um agente imunoestimulatório é a interleucina 12 humana recombinante (rhlL-12). Em algumas modalidades, um imunoterápico à base de IL-15 é IL-15 heterodimérico (hetlL-15, Novartis/Admune), um complexo de fusão composto por uma forma sintética de IL-15 endógena complexada à cadeia alfa de recepor de IL-15 de proteína de ligação a IL-15 solúvel (IL15: SIL-15RA), que foi testada em experiências clínicas de Fase 1 para melanoma, carcinoma de célula renal, câncer de pulmão de célula não pequena e carcinoma de célula escamosa de cabeça e pescoço (NCT02452268). Em algumas modalidades, uma interleucina 12 humana recombinante (rhlL-12) é NM-IL-12 (Neumedicines, Inc.), NCT02544724 ou NCT02542124.

[00184] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é selecionado dentre aqueles descritos em Jerry L. Adams ET. AL., Big opportunities for small molecules in immuno-oncology, Câncer Therapy 2015, vol. 14, páginas 603 a 622, cujo teor é aqui incorporado por referência em sua íntegra. Em algumas modalidades, um agente de

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121/652 imuno-oncologia é selecionado dentre os exemplos descritos na Tabela 1 de Jerry L. Adams ET. AL. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma molécula pequena direcionada a um alvo de imuno-oncologia selecionado dentre aqueles listados na Tabela 2 de Jerry L. Adams ET. AL. Em algumas modalidades, um agente de imunooncologia é uma molécula pequena direcionada a alvo de imunooncology selecionado dentre aqueles listados na Tabela 2 de Jerry L. Adams ET. AL.

[00185] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é selecionado dentre os agentes de imuno-oncologia de pequenas moléculas descritos em Peter L. Toogood, Small molecule immunooncology therapeutic agentes, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2018, Vol. 28, páginas 319 a 329, cujo teor é aqui incorporado por referência em sua íntegra. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um agente direcionado a vias conforme descrito em Peter L. Toogood.

[00186] Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é selecionado dentre aqueles descritos em Sandra L. Ross et al., Bispecific T cell engager (BiTE®) antibody constructs can mediate bystander tumor cell killing, PLoS ONE 12 (8 ): e0183390, cujo teor é aqui incorporado por referência em sua íntegra. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma construção de anticorpo de acoplamento à célula T biespecífica (BiTE®). Em algumas modalidades, uma construção de anticorpo biespecífica de acoplamento à célula T (BiTE®) é uma construção de anticorpo biespecífico CD19/CD3. Em algumas modalidades, uma construção de anticorpo de acoplamento à célula T biespecífica (BiTE®) é uma construção de anticorpo biespecífico de EGFR/CD3. Em algumas modalidades, uma construção de anticorpo de acoplamento de célula T biespecífica (BiTE®) ativa células T. Em algumas modalidades, uma construção de

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122/652 anticorpo de acoplamento à célula T biespecífica (BiTE®) ativa células T, que liberam citocinas que induzem a super-regulação de molécula 1 de adesão intercelular (ICAM-1) e FAS nas células espectadoras. Em algumas modalidades, um construção de anticorpo de acoplamento à célula T biespecífica (BiTE®) ativa células T que resultam em lise de célula espectadora induzida. Em algumas modalidades, as células espectadoras estão em tumores sólidos. Em algumas modalidades, as células espectadoras que estão sendo lisadas estão próximas das células T ativadas por BiTE®. Em alguma modalidade, as células espectadoras compreendem células cancerígenas negativas do antígeno associado ao tumor (TAA). Em alguma modalidade, as células espectadoras compreendem células cancerígenas negativas para EGFR. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é um anticorpo que bloqueia o eixo PD-L1/PD1 e/ou CTLA4. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma célula T infiltrante de tumor expandida ex vivo. Em algumas modalidades, um agente de imuno-oncologia é uma construção de anticorpo biespecífica ou receptores de antígeno quiméricos (CARs) que se conectam diretamente a células T com antígenos de superfície associados a tumor (TAAs).

[00187] Em certas modalidades, uma combinação de 2 ou mais agentes terapêuticos pode ser administrada juntamente com os compostos da invenção. Em certas modalidades, uma combinação de 3 ou mais agentes terapêuticos pode ser administrada com compostos da invenção.

[00188] Outros exemplos de agentes aos quais os inibidores desta invenção também podem ser combinados incluem, sem limitação: vitaminas e suplementos nutricionais, vacinas contra câncer, tratamentos para neutropenia (por exemplo, G-CSF, filgrastim, lenograstim), tratamentos para trombocitopenia (por exemplo,

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123/652 transfusão sanguínea, eritropoietina), inibidores da PI3 cinase (PI3K), inibidores da MEK, inibidores de mTOR, inibidores da CPT1, ativadores da AMPK, inibidores da PCSK9, inibidores da protease do sítio 1 SREBP, inibidores da protease do sítio 1 SREBP, inibidores da HMG CoA-redutase, antieméticos (por exemplo, antagonistas de receptor 5HT3, antagonistas da dopamina, antagonistas dos receptores NK1, antagonistas de receptor de histamina, canabinóides, benzodiazepínicos ou anticolinérgicos), tratamentos para a doença de Alzheimer, tais como Aricept® e Excelon®; tratamentos para a Doença de Parkinson, tais como L-DOPA/carbidopa, entacapona, ropinrole, pramipexol, bromocriptina, pergolida, tri-hexafendila e amantadina; agentes para 0 tratamento da esclerose múltipla (MS), como interferon beta (por exemplo, Avonex® e Rebif®), Copaxone® e mitoxantrona; tratamentos para asma tais como albuterol e Singulair®; agentes para 0 tratamento da esquizofrenia, como ziprexa, risperdal, seroquel e haloperidol; agentes anti-inflamatórios tais como corticosteróides, bloqueadores de TNF, IL-1 RA, azatioprina, ciclofosfamida e sulfassalazina; agentes imunomodulatórios e imunossupressores, tais como ciclosporina, tacrolimus, rapamicina, micofenolato de mofetila, interferons, corticosteróides, ciclofofamida, azatioprina e sulfassalazina; fatores neurotróficos, tais como inibidores da acetilcolinesterase, inibidores da MAO, interferons, anticonvulsivantes, bloqueadores de canal de íon, riluzol e agentes anti-Parkinson; agentes para 0 tratamento de doenças cardiovasculares, tais como betabloqueadores, inibidores da AGE, diuréticos, nitratos, bloqueadores dos canais de cálcio e estatinas, fibratos, inibidores da absorção de colesterol, sequestrantes de ácidos biliares e niacina; agentes para 0 tratamento de doenças do fígado, tais como corticosteróides, colestiramina, interferons e agentes antivirais; agentes para 0 tratamento de distúrbios sanguíneos, tais como corticosteróides, agentes anti-leucêmicos e fatores de

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124/652 crescimento; agentes para o tratamento de distúrbios de imunodeficiência tais como gama globulina; e agentes antidiabéticos, tais como biguanidas (metformina, fenformina, buformina), tiazolidinadionas (rosiglitazona, pioglitazona, troglitazona), sulfonilureias (tolbutamida, acetohexamida, tolazamida, clorpropamida, glipizida, gliburida, glimarpirida, glimepirida, gliclazida), meglitinidas (rapaglinida, nateglinida), inibidores de alfa-glicosidase (miglitol, acarbose), miméticos de incretina (exanatida, liraglutida, taspoglutida), análogos de peptídeo inibitório gástrico, inibidores de DPP-4 (vildagliptina, sitagliptina, saxagliptina, linagliptina, alogliptina), análogos de amilina (pranlintida), e insulina e análogos de insulina.

[00189] Em certas modalidades, os compostos da presente invenção, ou uma composição farmaceuticamente aceitável dos mesmos, são administrados em combinação com agentes antissentido, um anticorpo monoclonal ou policlonal ou um terapêutico de siRNA.

[00190] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método de tratamento de uma doença inflamatória, distúrbio ou condição, administrando a um paciente com necessidade do mesmo, um composto da presente invenção e um ou mais agentes terapêuticos adicionais. Tais agentes terapêuticos adicionais podem ser pequenas moléculas ou agentes biológicos recombinantes e incluem, por exemplo, acetaminofeno, fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs), tais como aspirina, ibuprofeno, naproxeno, etodolac (Lodine®) e celecoxibe, colquicina (Colcrys®), corticosteróides tais como prednisona, prednisolona, metilprednisolona, hidrocortisona e similares, probenecide, alopurinol, febuxostate (Uloric®), sulfassalazina (Azulfidine®), antimaláricos como hidroxicloroquina (Plaquenil®) e cloroquina (Aralen®), metotrexato (Rheumatrex®), sais de ouro tais como tioglucose de ouro (Solganal®), tiomalato de ouro (Myochrysine®) e auranofina (Ridaura®), D-penicilamina (Depen® ou Cuprimine®),

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125/652 azatioprina (Imuran®), ciclofosfamida (Cytoxan®), clorambucila (Leukeran®), ciclosporina (Sandimmune®), leflunomida (Arava®) e agentes anti-TNF, como etanercepte (Enbrel®), infliximabe (Remicade®), golimumabe (Simponi®), certolizumabe pegol (Cimzia®) e adalimumabe (Humira®), agentes anti-IL-1, como anacinra (Kineret®) e rilonacepte (Arcalyst®), canacinumabe (llaris®), inibidores anti-Jak como tofacitinibe, anticorpos tais como rituximabe (Rituxan®), agentes anti-células T tal como abatacepte (Orencia®), agentes antiIL-6 tal como tocilizumabe (Actemra®), diclofenaco, cortisona, ácido hialurônico (Synvisc® ou Hyalgan®), anticorpos monoclonais tais como tanezumabe, anticoagulantes como heparina (Calcinparine® ou Liquaemin®) e varfarina (Coumadin®), antidiarreicos tais como difenoxilato (Lomotil®) e loperamida (Imodium®), agentes de ligação a ácidos biliares tais como colestiramina, alosetron (Lotronex®), lubiprostona (Amitiza®), laxantes como Leite de Magnésia, polietileno glicol (MiraLax®), Dulcolax®, Correctol® e Senokot®, anticolinérgicos ou antiespasmódicos tal como diciclomina (Bentyl®), Singulair®, agonistas beta-2 tal como albuterol (Ventolin® HFA, Proventil® HFA), levalbuterol (Xopenex®), metaproterenol (Alupent®), acetato de pirbuterol (Maxair®), sulfato de terbutalina (Brethaire®), xinafoato de salmeterol (Serevent®) e formoterol (Foradil®), agentes anticolinérgicos tais como o brometo de ipratrópio (Atrovent®) e tiotrópio (Spiriva®), corticosteróides inalados, tais como dipropionato de beclometasona (Beclovent®, Qvar® e Vanceril®), acetonida de triancinolona (Azmacort®), mometasona (Asthmanex®), budesonida (Pulmocort®) e flunisolida (Aerobid®), Afviar®, Symbicort®, Dulera®, cromolina sódica (Intal®), metilxantinas tais como teofilina (Theo-Dur®, Theolair®, Slobid®, Uniphyl®, Theo-24®) e aminofilina, anticorpos IgE tal como omalizumabe (Xolair®), inibidores de transcriptase reversa de nucleosídeo, tais como zidovudina (Retrovir®), abacavir (Ziagen®),

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126/652 abacavir/lamivudina (Epzicom®), abacavir/lamivudina/zidovudina (Trizivir®), didanosina (Videx®), entricitabina (Emtriva®), lamivudina (Epivir®), lamivudina/zidovudina (Combivir®) estavudina (Zerit®) e zalcitabina (Hivid®), inibidores de transcriptase reversa de nãonucleosídeo, tais como delavirdina (Rescriptor®), efavirenz (Sustiva®), nevairapina (Viramune®) e etravirina (Intelence®), inibidores da transcriptase reversa de nucleotídeo, tal como tenofovir (Viread®), inibidores de protease como amprenavir (Agenerase®), atazanavir (Reyataz®), darunavir (Prezista®), fosamprenavir (Lexiva®), indinavir (Crixivan®), lopinavir e ritonavir (Kaletra®), nelfinavir (Viracept®), ritonavir (Norvir®), saquinavir (Fortovase® ou Invirase®) e tipranavir (Aptivus®), inibidores de entrada tal como enfuvirtida (Fuzeon®) e maraviroc (Selzentry®), inibidores de integrase tal como raltegravir (Isentress®), doxorrubicina (Hydrodaunorubicin®), vincristina (Oncovin®), bortezomibe (Velcade®) e dexametasona (Decadron®) em combinação com lenalidomida (Revlimid®), ou qualquer combinação dos mesmos.

[00191] Em algumas modalidades, um composto fornecido é administrado em combinação com um agente antiviral, incluindo, por exemplo, aciclovir, penciclovir, cidofovir, idoxuridina, zidovudina, ribavarina, amantadina, foscarnet, didanosina, aciclovir, ganciclovir, cidofovir, zalcitabina, rimantadina, calaciclovir, famiciclovir, abacavir, didanosina, entricitalbina, lamivudina, estavudina, tenofovir, zalcitabina, zidovudina calaciclovir, famiciclovir, abacavir, didanosina, emtricitabina, lamivudina, estavudina, tenofovir, zalcitabina, zidovudina, zidovudinalamivudina, TRIZIVIR (zidovudina, lamivudina, abacavir), EPZICOM (aba-cavir-lamiuvudina), TRUVADA (tenofovir-entricitabina), efavirenz, nevirapina e delavirdina, amprenavir, atazanavir, fosamprenavir, indinavir, lopinavir-ritonavir, nelfinavir, ritonavir, saquinavir e tipranavir. Em algumas modalidades, o agente antiviral é um agente anti-influenza

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127/652 incluindo, por exemplo, rimantadina, amantadina, oseltamivir e zanamivir.

[00192] Esses agentes adicionais podem ser administrados separadamente de uma composição contendo o composto da invenção, como parte de um regime de dosagem múltipla. Alternativamente, esses agentes podem fazer parte de uma forma de dosagem única, misturada com um composto desta invenção em uma única composição. Se administrados como parte de um regime de dosagem múltipla, os dois agentes ativos podem ser submetidos simultaneamente, sequencialmente ou dentro de um período de tempo de espaço entre si, normalmente dentro de cinco horas entre si.

[00193] Quando aqui utilizado, o termo combinação, combinado e termos relacionados se referem à administração simultânea ou sequencial de agentes terapêuticos de acordo com esta invenção. Por exemplo, um composto da presente invenção pode ser administrado com outro agente terapêutico simultaneamente ou sequencialmente em formas de dosagem unitárias separadas ou em conjunto em uma única forma de dosagem unitária. Consequentemente, a presente invenção fornece uma única forma de dosagem unitária que compreende um composto da presente invenção, um agente terapêutico adicional e um veículo (carrier), adjuvante ou veículo (vehicle) farmaceuticamente aceitável.

[00194] A quantidade de ambos, um composto fornecido e um agente terapêutico adicional (nessas composições que compreendem um agente terapêutico adicional como descrito acima) que podem ser combinados com os materiais veículo (carrier) para produzir uma forma de dosagem unitária variarão dependendo do hospedeiro tratado e do modo particular de administração. Preferivelmente, as composições desta invenção devem ser formuladas de modo que uma dosagem entre 0,01 e 100 mg/kg de peso corporal/dia de um composto inventivo possa

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128/652 ser administrada.

[00195] Nas composições que compreendem um agente terapêutico adicional, esse agente terapêutico adicional e o composto desta invenção podem agir sinergicamente. Portanto, a quantidade de agente terapêutico adicional em tais composições será menor do que a requerida em uma monoterapia utilizando apenas esse agente terapêutico. Em tais composições, pode ser administrada uma dosagem entre 0,01 e 100 pg/kg de peso corporal/dia do agente terapêutico adicional.

[00196] A quantidade de agente terapêutico adicional presente nas composições desta invenção não será maior do que a quantidade que seria normalmente administrada em uma composição compreendendo esse agente terapêutico como o único agente ativo. Preferivelmente, a quantidade de agente terapêutico adicional nas composições presentemente descritas variará de cerca de 50% a 100% da quantidade normalmente presente em uma composição compreendendo esse agente como o único agente terapeuticamente ativo.

[00197] Em uma modalidade, a presente invenção fornece uma composição compreendendo um composto da presente invenção e um ou mais agentes terapêuticos adicionais. O agente terapêutico pode ser administrado em conjunto com um composto da presente invenção, ou pode ser administrado antes ou após a administração de um composto da presente invenção. Agentes terapêuticos adequados são descritos em maiores detalhes abaixo. Em certas modalidades, um composto da presente invenção pode ser administrado até 5 minutos, 10 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 5 horas, 6 horas, 7 horas, 8 horas, 9 horas, 10 horas, 11 horas, 12 horas, 13 horas, 14 horas, 15 horas, 16 horas, 17 horas ou 18 horas antes do agente terapêutico. Em outras modalidades, um composto de fórmula I pode

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129/652 ser administrado até 5 minutos, 10 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 1 hora, 2 horas, 3 horas, 4 horas, 5, horas, 6 horas, 7 horas, 8 horas, 9 horas, 10 horas, 11 horas, 12 horas, 13 horas, 14 horas, 15 horas, 16 horas, 17 horas ou 18 horas após o agente terapêutico.

[00198] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um medicamento que compreende pelo menos um composto da presente invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.

EXEMPLIFICAÇÃO

[00199] Como representado nos Exemplos abaixo, em certas modalidades exemplares, os compostos são preparados de acordo com os seguintes procedimentos gerais. Será apreciado que, embora os métodos gerais representem a síntese de certos compostos da presente invenção, os seguintes métodos gerais e outros métodos conhecidos por alguém versado na técnica, podem ser aplicados a todos os compostos e subclasses e espécies de cada um destes compostos, como aqui descrito.

Exemplo 1A

Ensaio de repórter DRE-Luciferase

[00200] O AHR se liga aos Elementos Responsivos à Dioxina (DRE) a montante dos genes que ele ativa. Uma medida da atividade do AHR é a ativação de um gene repórter, como a luciferase, a jusante de um ou vários elementos DRE. A atividade da luciferase refletirá a ativação e inibição de AHR nas células que expressam seu repórter.

[00201] Hepa1-6 murina ou Hepa-1c1c7 ou outra linhagem celular murina com um repórter de DRE-luciferase transfectado de maneira estável ou transitória foram semeadas em meio em placas (placas de 96 cavidades, 384 cavidades ou outras) e incubadas durante a noite a 37 °C em uma incubadora de CO2. Da mesma forma, HepG2 humano ou outra linhagem celular humana com um repórter de DRE-luciferase

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130/652 transfectado de maneira estável ou transitória foram semeadas em meio em placas (placas de 96 cavidades, 384 cavidades ou outras) e incubadas durante a noite a 37°C em uma incubadora de CO2.

[00202] No dia seguinte, um ligante de ativação de AHR, tal como TCDD, quinurenina, ITE (metil éster 2-(1 H-indol-3-ilcarbonil)-4tiazolocarboxílico), VAF347, BNF (beta-naftoflavona), FICZ (6formilindolo(3,2-b) carbazol ou outros ligantes de AHR, foram adicionados com ou sem antagonista de AHR.

[00203] As células foram incubadas por 4, 15 ou 24 horas ou outro ponto no tempo e depois lisadas para determinação de atividade da luciferase como uma leitura da ativação ou inibição do AHR. A luciferase foi medida com um kit comercial, como 0 kit Promega Luciferase ou qualquer kit ou reagentes que forneçam 0 substrato da luciferina para medir a atividade da luciferase. O nível de luciferase com apenas 0 ligante de ativação adicionado foi 0 sinal máximo, enquanto a luciferase sem ligante foi 0 sinal mínimo. Os valores de IC50 foram determinados como a concentração que inibe metade da atividade da luciferase. Os compostos testados e seus valores de IC50 são mostrados na Tabela 2 abaixo.

[00204] Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 de 520 μΜ. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 < 5 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 < 1 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 < 0,1 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 < 0,01 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 <0,001 pM.

[00205] A atividade de certos compostos da presente invenção como obtida pelo ensaio acima é apresentada na Tabela 2 abaixo.

[00206] Na Tabela 2, os valores de IC50 são reportados como A, B, C e D, em que A representa um IC50 de <0,5 pM; B representa um IC50 entre 0,5 e 1,0 pM; e C representa um IC50 entre 1,0 e 1,5 pM; e D

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131/652 representa um IC50 de > 1,5 μΜ.

Tabela 2. IC50 Valores para compostos selecionados analisados de acordo com o Exemplo 1A.

Composto	ICso
1-1	C
I-2	A
I-3	C
I-4	A
I-5	D
I-6	A
I-7	A
I-9	C
1-19	B

Exemplo 1B

Ensaio de Repórter DRE-Luciferase (Método Alternativo)

[00207] O AHR se liga aos Elementos Responsivos à dioxina (DRE) a montante dos genes que ativa. Uma medida da atividade do AHR é a ativação de um gene repórter, como a luciferase, a jusante de um ou vários elementos DRE. A atividade da luciferase refletirá a ativação e inibição do AHR nas células que expressam seu repórter.

[00208] Hepa1-6 murina ou Hepa-1c1c7 ou outra linhagem celular murina com um repórter de DRE-luciferase transfectado de maneira estável ou transitória foram semeados em meios em placas (placas de 96 cavidades, 384 cavidades ou outras) e incubados durante a noite a 37°C em uma incubadora de CO2 ou composto e agonista foram adicionados no momento do revestimento. Da mesma forma, HepG2 humano ou outra linhagem celular humana com um repórter de DREluciferase transfectado de maneira estável ou transitória foram semeados em meios em placas (placas de 96 cavidades, 384 cavidades

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132/652 ou outras) e incubados durante a noite a 37 °C em uma incubadora de CO2 ou composto e agonista foram adicionados no momento do revestimento.

[00209] No momento em que as células são semeadas ou após a incubação durante a noite, um ligante ativador de AHR, como TCDD, quinurenina, ITE (2-(1 H-indol-3-ilcarbonil)-4-tiazolocarboxílico), VAF347, BNF (beta-naftoflavona), FICZ (6-formilindolo(3,2-b) carbazol ou outros ligantes de AHR, foi adicionado com ou sem antagonista de AHR.

[00210] As células foram incubadas por 4, 15 ou 24 horas ou outro ponto no tempo e depois lisadas para determinação da atividade de luciferase como uma leitura da ativação ou inibição do AHR. A luciferase foi medida com um kit comercial, como 0 kit Promega Luciferase ou qualquer kit ou reagente que forneça 0 substrato da luciferina para medir a atividade da luciferase. O nível de luciferase com apenas 0 ligante de ativação adicionado foi 0 sinal máximo, enquanto a luciferase sem ligante foi 0 sinal mínimo. Os valores de IC50 foram determinados como a concentração que inibe metade da atividade da luciferase. Os compostos testados e seus valores de IC50 são mostrados na Tabela 3 abaixo.

[00211] Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 de 520 μΜ. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 <5 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 <1 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 <0,1 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 <0,01 pM. Em algumas modalidades, os compostos têm um IC50 <0,001 pM.

[00212] A atividade de certos compostos da presente invenção como obtida pelo ensaio acima é apresentada na Tabela 3 abaixo.

[00213] Na Tabela 3, os valores de IC50 são reportados como A, B, C e D, em que A representa um IC50 de <0,5 pM; B representa um IC50

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133/652 entre 0,5 e 1,0 μΜ; e C representa um IC50 entre 1,0 e 1,5 μΜ; e D representa um IC50 de > 1,5 μΜ.

Tabela 3. Valores de IC50 para os compostos selecionados analisados de acordo com 0 exemplo 1B.

Composto	IC50	Composto	IC50
1-1	A	I-58	D
I-2	A	I-59	A
I-3	A	I-60	B
I-4	A	1-61	A
I-5	A	I-62	A
I-6	A	I-63	A
I-7	D	I-64	A
I-8	D	I-65	A
I-9	B	I-66	A
1-10	D	I-67	A
1-11	A	I-68	B
1-13	D	I-69	A
1-14	D	I-70	A
1-15	A	1-71	A
1-16	A	I-72	A
1-19	A	I-73	A
I-20	A	I-74	B
1-21	A	l-75a	D
I-22	A	l-75b	D
I-23	A	I-77	A
I-24	D	I-78	A
I-25	D	I-79	A
I-26	D	I-80	B
l-27a	B	1-81	A
l-28a	D	l-82b	D
I-29	D	I-83	A

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134/652

1-30	A	I-84	D
1-31	D	I-85	B
l-32a	D	I-86	A
I-33	A	I-87	A
I-34	D	I-88	B
I-35	D	I-89	A
I-36	D	I-90	A
l-37a	D	1-91	A
I-38	D	I-92	A
I-39	A	I-93	A
I-40	A	l-94a	D
1-41	D	I-95	D
l-42a	D	I-96	A
I-43	B	l-97a	D
I-44	D	l-98a	D
I-45	A	I-99	A
I-46	A	1-100	D
I-47	A	1-101	A
I-48	A	1-102	A
I-49	A	1-103	A
I-50	D	1-104	B
1-51	A	1-105	A
I-52	B	1-106	A
I-53	A	1-107	A
I-54	A	1-108	A
I-55	A	1-109	A
I-56	A	1-110	B
I-57	A	1-111	A
1-120	D	1-185	D
1-121	D	1-186	B
1-122	D	1-187a	D
1-123	C	1-187b	D

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135/652

1-124	D
1-125	D	1-189	D
1-126	A	1-190a	D
1-128a	D	1-190b	D
1-128b	D	1-192	B
1-129	A	1-193	D
1-130	A	1-194	D
1-131	A	1-195	D
1-132	B	1-196	A
1-133	A	1-197	A
1-134	D	1-198a	A
1-135	A	1-198b	B
1-136	A	I-200	A
1-137a	A	1-201	A
1-137b	A	I-202	A
1-139a	A	I-203	A
1-139b	A	l-204a	A
1-141	A	l-204b	A
1-142	D	I-206	D
1-143	D	I-207	D
1-144a	C	I-208	D
1-144b	A	I-209	B
1-146a	D	1-210	C
1-146b	D	1-211	D
1-148	D	1-212	D
1-149	D	1-213	A
1-150a	A	1-214	A
1-150b	C	1-215	D
1-152a	D	1-216a	B
1-152b	A	1-216b	D
1-154	A	1-218	A
1-155	B	1-219	A

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136/652

1-156	D	I-220	A
1-157	D	1-221	D
1-158a	D	l-222a	A
1-158b	D	l-222b	A
1-160a	D	I-224	A
1-160b	D	I-225	A
1-162	A	I-226	A
1-163	A	I-227	A
1-164	A	I-228	D
1-165	A	I-229	D
1-166	A	I-230	A
1-167	D	1-231	D
1-168	D	I-232	A
1-169	B	I-233	B
1-170	D	I-234	B
1-171	C	I-235	A
1-172	C	I-236	D
1-173	D	I-237	A
1-174	D	I-238	D
1-175	D	I-239	D
1-176	D	I-240	D
1-177	A	1-241	A
1-178	D	I-242	A
1-179	A	l-243a	D
1-180	B	l-243b	D
1-181	D	I-245	D
1-182	D	I-246	C
1-183	D	I-247	D
1-184	D	I-248	D
l-249a	A	l-249b	A
I-250	D	1-251	D
l-252a	A	l-252b	A

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137/652

1-253	A	I-254	D
1-255	A	I-256	A
1-257	A	I-258	D
l-259a	A	l-259b	A
1-260	D	1-261	D
1-262	A	l-263a	C
l-263b	C	I-264	D
1-265	A	I-266	D
1-267	A	I-268	D
1-269	D	I-270	A
1-271	D	I-272	D
I-273	C	I-274	A
I-275	A	I-276	A
I-277	A	I-278	A
I-279	D	I-280	D
1-281	A	I-282	A
I-283	D	I-284	B
I-285	D	I-286	A
I-287	D	I-288	A
I-289	A

Exemplo 10

Estudo Farmacocinético de Camundongo

[00214] As formulações dos compostos apresentados na Tabela 4 foram administradas intravenosamente ou oralmente por meio de gavagem a camundongos CD-1. Tipicamente, nas 0,167, 0,5, 1,2, 4, 6, 12 e 24 horas após a dose, o sangue foi coletado e processado no plasma por centrifugação e armazenado a -80 °C até a análise.

[00215] Padrão interno foi adicionado a cada amostra antes da precipitação de proteínas com acetonitrila. Os precipitados foram filtrados através de uma placa de filtro de remoção de fosfolipídios Phree

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138/652 e as amostras foram analisadas por LC/MS/MS. Uma curva padrão foi preparada no plasma tipicamente de 1,0 ng/mL a 3000 ng/mL e processada da mesma maneira que as amostras. A análise da amostra foi tipicamente realizada em um sistema LC/MS/MS adequado, equipado com uma coluna analítica de UPLC e os compostos eluídos da coluna analítica com um gradiente de 30 a 95% de ácido fórmico a 0,1% (v/v) em ACN: 0,1% de ácido fórmico (v/v) em água. A detecção espectrométrica de massa do composto de teste e o padrão interno foi realizada por MRM no modo positivo. A farmacocinética de cada composto foi analisada pelo software Phoenix WinNonlin (Pharsight, St. Louis, MO) através de análise não compartimental. Os resultados estão resumidos na Tabela 4 abaixo.

Tabela 4. Dados Farmacocinéticos do Camundongo de acordo com o Exemplo 1C.

Com post o	Do se (mg /kg)	Via	Formulação	Cmax (ng/ mL)	Tma X (h)	γ1/2 (h)	Vds s (L/k g)	Cl (mU min/ kg)	Tiast (h)	AUC 0last (ng* h/ mL)	AUC 0-inf (ng* h/ mL)	Biod ispo nibili dade (%)
1137a	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			8,2	6,6	25	24	1921	2008
I137a	30	po	3 mg/mLem metilcelulose a 0,5% e Tween a 0,2% 80, suspensão	953	0,5	3,5			24	3782	3835	19
I137b	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			11,2	16,6	37	24	1220	1352
I137b	30	PO	3 mg/mLem 0,5% metilcelulose e Tween a 0,2% 80, suspensão	476	2	5,9			24	3630	3828	28

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139/652

1144b	30	po	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			1,3	0,8	44	6	1140	1145
I144b	30	po	3 mg/mLem metilcelulose a 0,5% e Tween a 0,2% 80, suspensão	599	0,2	2			6	613	727	6
1-154	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			12	13,7	16,5	24	2414	3034
1-154	30	PO	3 mg/mLem metilcelulose a 0,5% e Tween a 0,2% 80, suspensão	840	2	9,6			24	9358	1120 7	39
I198a	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			4,3	12,1	64,8	24	765	772
I198a	30	PO	3,00 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão	721	1	4,2			24	3961	4048	52
1-201	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			8,5 2	19,6	37,5	24	1203	1334
1-201	30	PO	3,00 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão	1413	1	7,1 6			24	9653	1055 8	79
I-203	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			2,3	5,8	88,5	12	555	565
I-203	30	PO	3,00 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão	604	0,2	0,7			6	656	657	12

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140/652

1204b	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			0,9	4	110	6	454	455
1204b	30	po	3,00 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão	55	0,2	3,2			12	63	67	2
1-219	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			0,7	2,4	73,3	6	678	682
1-219	30	PO	3,00 mg / mL em 30% de PEG400/10 % de solutol / 60% de água, suspensão	48,9	0,2				12	132	215	2
I222a	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			2,4	1,5	36,9	6	1329	1329
I222a	30	PO	3,00 mg / mL em 30% de PEG400/10 % de solutol / 60% de água, solução	2873	0,2	1,7			12	2231	2239	16
I222b	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			1,8	2	88,1	6	564	567
I222b	30	PO	3,00 mg / mL em 30% de PEG400/10 % de solutol / 60% de água, solução	2167	0,2	3,3			24	2865	2870	51
I-39	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			1,3 1	3,5	53,7	6	908	931

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141/652

1-39	30	po	3,00 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução	799		3,3 5			24	1597	1609	17
1-40	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			8,4	24	41,2	24	1066	1213
1-40	30	PO	3,00 mg / mL em 30% de PEG400/10 % de solutol / 60% de água, solução	853	2	8,8			24	7560	9142	75
1-65	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			0,7	2,7	93,1	4	522	537
1-65	30	PO	3,00 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução	574	0,2	0,8			6	370	373	7
1-70	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			1,0 8	3,2	54,9	6	862	872
1-70	30	PO	10,0 mg / mL em solução de 30% de PEG/70% de (20% hp-?CD), solução clara	900	0,5	2,2 6			12	1944	1993	26
1-73	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			2	7,7	90	12	553	556
1-73	30	PO	3,00 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão	37,5	1	2,1	6		24	96	108	2
l-75a	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			13, 8	13,7	14,4	24	2666	2265

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142/652

l-75a	30	po	3,0 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução	969	2	9,8			24	1357 9	936	51
1-103	3	iv	3,00 mg / mL em 40% de PEG400/10 % de solutol / 50% de água, solução			0,6 2	1,4	43,9	6	1137	1140
1-103	30	PO	6,00 mg / mL em 40% de PEG400/10 % de solução/50% de água, solução	713	0,2	2,1 5			12	649	671	6
1-107	3	iv	3,00 mg / mL em DMSO:solut ol: Água = 5:10:85, solução			2,1 8	43,2	540	6	88	92
1-107	15	PO	3,00 mg / mL em DMSO:solut ol: Água = 5:10:85, solução	0	0				0	0	0	0
I-2	3	iv	3,00 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução			1,9 9	9,6	82	6	554	610
I-2	30	PO	6,00 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução	182	0,2	3,9			24	730	743	12
I259a	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução clara			1,2	4,7	59	6	825	842
I259a	30	PO	3,0 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão opaca homogênea	82	0,5	1,2			6	237	249	3

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143/652

1-118	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução clara			0,6	4,9	136	4	364	368
1-118	30	po	3,0 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão opaca homogênea	41	1	1,9			6	107	121	3
1-126	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução clara			8,8	17	30	24	1463	1651
1-126	30	PO	3,0 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão opaca homogênea	1870	1	6,1			24	1374 8	1474 1	100
1-129	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução clara			14	22	31	24	1339	1615
1-129	30	PO	3,0 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão opaca homogênea	1043	2	6,4			24	7034	7532	53
1-130	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução clara			2,6	7,5	39	12	1223	1272
1-130	30	PO	3,0 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão opaca homogênea	936	2	3,5			24	6624	6689	53

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144/652

1-59	3	iv	1,5 mg / mL em DMSO : PEG400 Água = 5:75:20, solução clara			6,6	11,2	53	24	925	949
1-59	30	po	3,0 mg / mL em metilcelulose a 0,5%, suspensão opaca homogênea	719	0,5	4,3			24	2110	2130	22

Exemplo 1D

Ensaio de Estabilidade Metabólica do Fígado de Camundongo S9 in vitro

[00216] O fígado de camundongo CD-1 S9 foi adquirido da Corning ou XenoTech LLC ou BioreclamationIVT, LLC ou WuXi preparado. As células foram armazenadas a -80°C em um freezer antes do uso. βNicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADP), glicose 6-fosfato (G6P), glicose 6-fosfato desidrogenase de levedura (G6PDH), uridina sal trissódico do ácido 5'-difofoglucurônico (UDPGA) e hidrato de sal de lítio de 5'-fosfossulfato de 3'-fosfato de adenosina (PAPS) estava disponível comercialmente na Sigma.

[00217] Os compostos foram diluídos em DMSO para produzir uma solução mãe a 10 mM. 5 μΙ_ desta solução mãe (10 mM, DMSO) foram diluídos com 45 μΙ_ de DMSO e 450 μΙ_ de metanol/água a 50% para produzir solução intermediária (100 μΜ, MeOH a 45%, DMSO a 10%). 50 μΙ_ de solução mãe intermediária foram diluídos com 450 μΙ_ de tampão fosfato a 100 mM para fazer uma solução mãe final (10 μΜ, MeOH a 4,5%, DMSO a 1%). 10 uL da solução mãe final foram adicionados a 90 uL do sistema de fígado S9 (concentração final de 1 μΜ, MeOH a 0,45%, DMSO a 0,1%).

[00218] Os compostos de teste foram incubados a 37 °C com o fígado S9 (reunido de vários doadores) a 1 μΜ na presença de um sistema de regeneração NADPH, UDPGA e PAPS a 1 mg / mL de proteína S9. As amostras de tempo (0 e 60 minutos) foram removidas e

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145/652 imediatamente misturadas com acetonitrila fria contendo padrão interno (IS). As amostras foram analisadas por LC/MS/MS e o desaparecimento dos compostos de teste foram avaliados com base nas razões de área de pico de analito/IS (sem curva padrão). Todas as amostras foram injetadas e analisadas usando LC-MS/MS. As razões analito/área de pico padrão interno foram convertidas em porcentagem restante (% restante) com a seguinte equação: % restante em 60 min = (razão de área de pico de analito para IS a 60 min/razão de área de pico do analito para IS em t = 0) x 100%. Os resultados estão resumidos na Tabela 5 abaixo.

Tabela 5. Dados de estabilidade do camundonqo de acordo com o Exemplo 1D.

Composto	Estabilidade do Camundongo S9: % restante após 60 minutos	Composto	Estabilidade do Camundongo S9: % restante após 60 minutos
1-6	0	I-40	87
1-2	13	I-39	30
1-4	0	I-36	29
1-21	26	I-30	11
1-16	2	I-235	2
1-109	10	I-224	0
1-107	0	l-222b	0
1-106	1	l-222a	1
1-105	8	1-219	5
1-103	7	1-214	0
1-101	1	I-209	0
l-98b	0	I-208	0
I-96	36	l-204b	0
I-92	0	I-203	0
I-90	11	I-202	0
1-81	2	1-201	34
I-78	1	I-200	0
l-75a	65	1-198a	30
I-73	11	1-196	0

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146/652

1-72	3	1-177	2
1-70	0	1-166	4
1-68	4	1-165	3
1-67	5	1-164	0
1-67	1	1-162	54
1-65	0	1-156	28
1-59	11	1-154	13
1-47	50	1-152b	3
1-45	19	1-152a	2

Exemplo 1E

Ensaio de Moldagem Cyp1a1 de fígado e baço de camundongo In Vivo

[00219] Camundongos C57BL/ 6, fêmeas, 6-8 semanas de idade, pesando aproximadamente 18 a 20 g, foram adquiridos da Shanghai Lingchang Biological Technology Co., Ltd ou de outros fornecedores certificados e utilizados nos estudos. As condições de criação, alimentação e saúde dos animais estão de acordo com as diretrizes de bem-estar animal. VAG539 (30 mg/kg, po) foi utilizado como agonista de AHR e os compostos de teste foram formulados em veículos adequados, tipicamente metilcelulose a 0,5%.

[00220] Os camundongos C57BL/6 (n = 3 por grupo) foram tratados com agonista de AHR sozinho ou com agonista de AHR e compostos de teste. Os animais foram sacrificados 4 ou 10 horas após o tratamento no qual seus fígados e baços foram coletados e subsequentemente analisados por qPCR. A indução de multiplicação normalizada de cyplal foi determinada pela comparação das contagens de mCYP1A1 e mGAPDH (ct) de acordo com: multiplicação normalizada = 2^ΔΔΟί. A porcentagem de inibição foi calculada de acordo com:

«VsSSgss lísSiS far AS® Sgsdiit isrisá CfsrSsXsífií! írASÍSSd mwiM fofê íer ÀNs agonisí tmí J

Os resultados estão resumidos na Tabela 6 abaixo.

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147/652

Tabela 6. Dados de inibição de Cyp1a1 de acordo com o Exemplo 1E.

Composto	Dose	Inibição de Cyp1a1
Fígado	Baço
4h	10h
1-2	30 mg/kg	50%
1-103	30 mg/kg	94%	0%
l-75a	30 mg/kg	55%
I-57	30 mg/kg	77%		66%
I-46	30 mg/kg	96%		94%
I-39	30 mg/kg	90%		69%
I-70	30 mg/kg	98%
10 mg/kg	99%	81%
10 mg/kg	98%	98%	88%
5 mg/kg	93%	96%	79%
2 mg/kg	83%	63%	65%
1 mg/kg	52%	34%	38%
I-40	25 mg/kg	98%	97%	96%
10 mg/kg	93%	75%	74%
5 mg/kg	77%	48%	34%
1-201	25 mg/kg	86%	97%	72%
10 mg/kg	72%	59%	46%
5 mg/kg	58%	44%	40%

Exemplo 1F

Estudo de células T com 1-70

[00221] As células T humanas foram isoladas por seleção negativa de CD3 após o isolamento de PBMCs do sangue de doadores humanos por meio de centrifugação gradiente de densidade Ficoll. Um milhão de células T foram ativadas com 25uL de tetrâmero CD3/CD28 (Stemcell) na presença ou ausência de I-70 por 24 horas, após o qual o meio foi removido e armazenado a -80C para posterior análise de citocinas. As

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148/652 células foram lavadas 2x com PBS, antes de isolar o RNA de acordo com as instruções do fabricante para o mini kit RNAeasy (Qiagen).

[00222] O RNA foi convertido em cDNA usando mastermix TR VILOIV TR (Thermofisher), e o q-TR-PCR foi realizado para determinar os níveis de IL-22 (Hs01574154_m1), Cyp1a1 (Hs01054797_g1) e GAPDH (Hs00266705_g1). Os dados foram analisados usando o método ddCT, no qual cada amostra é primeiro normalizada para o gene de limpeza GAPDH antes de ser normalizada para controlar o tratamento. Os níveis de expressão de IL22 e cyplal RNA são inibidos por tratamento com I70, como mostrado na FIG. 1.

[00223] Os níveis de citocinas foram determinados utilizando a plataforma de descoberta de mesoescala (MSD) (K15067L-2) e o software de análise MSD de acordo com as instruções do fabricante. Os níveis de proteína IL-22 são reduzidos e os níveis de proteína próinflamatória IL-2 são aumentados por tratamento com I-70, como mostrado na FIG. 2.

[00224] As células T ativadas por CD3/CD28 são ativadas por AHR, conforme medido pela expressão de gene e produção de citocinas. O tratamento com o inibidor de AHR leva à inibição da expressão dos genes cyplal e IL22 e produção de citocina IL-22. A inibição do AHR também aumenta a produção da citocina pró-inflamatória IL-2.

Exemplo 1G

Estudo de eficácia de i-70 e inibidor de ponto de verificação antiPD-1 no modelo de câncer colorretal de camundongo CT26 em camundongos Balb/c

[00225] CT26 é uma linhagem celular de carcinoma de cólon murino obtida de ATCC. As células CT26 foram cultivadas em RPMI suplementado com 10% de FBS. 5 χ 10⁵ células CT26 em 100 pL de PBS foram implantadas por via subcutânea em camundongos Balb/c fêmeas com 6-8 semanas de idade. A dosagem para o estudo de

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149/652 eficácia começa 4 dias após o implante: o antagonista da AHR foi administrado oralmente, todos os dias (QD) a 10 mg/kg por 3 semanas. Anti-PD-1 (BioXcell RMP1-14) foi duas vezes por semana, intraperitonealmente (IP) a 10 mg/kg por cinco doses totais. Os tumores foram monitorados por medição de paquímetro a cada 2-3 dias e o peso corporal medido três vezes por semana.

[00226] O crescimento do tumor é inibido pelo antagonista da AHR I70 sozinho ou em combinação com anti-PD-1, como mostrado na FIG. 3. A inibição do crescimento tumoral é estatisticamente significativa com ο I-70 como agente único em comparação com o veículo, com valor de p = 0,0166. Além disso, a inibição do crescimento do tumor no grupo de combinação foi significativa em comparação com o anti-PD-1 sozinho, valor de p = 0,0420. Valores de p determinados pela análise do teste T de Student.

Exemplo 1H

Estudo de eficácia de I-70 e inibidor de ponto de verificação antiPD-1 no Modelo de Melanoma de Camundongo B16-IDO em Camundongos C57BL/6

[00227] B16-IDO é uma linhagem celular de carcinoma de melanoma murino que foi projetada para superexpressar IDO1 (Holmgaard, 2015 Cell Reports). As células B16-IDO foram cultivadas em DMEM suplementado com 10% de FBS. 2 x 10⁵ células B16-IDO em 50 pl de PBS foram implantadas por via intradérmica em camundongos C57BL/6 fêmeas com 6-8 semanas de idade. A dosagem para o estudo de eficácia começa 7 dias após o implante: o antagonista I-70 do AHR foi administrado por via oral, todos os dias (QD) a 10 mg/kg por 2 semanas. O anti-PD-1 (BioXcell RMP1-14) foi administrado a cada 3 dias, por via intraperitoneal (IP) a 250 pg/camundongo por cinco doses totais. Os tumores foram monitorados por medição de paquímetro a cada 2-3 dias e o peso corporal medido três vezes por semana.

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[00228] O crescimento do tumor foi inibido pelo antagonista da AHR I-70 sozinho ou em combinação com anti-PD-1, como mostrado na FIG. 4. A inibição do crescimento tumoral foi estatisticamente significativa com ο I-70 como agente único em comparação ao veículo, com valor de p < 0,001. Além disso, a inibição do crescimento tumoral no grupo de combinação foi significativa em comparação ao anti-PD-1 sozinho, valor de p < 0,03. Valores de p determinados pela análise do teste T de Student.

Exemplo 2

Expressão de gene dependente de AHR

[00229] Hepa1-6 murina ou Hepa-1c1c7 ou outra linhagem celular murina são semeadas em meios em placas (6, cavidades, 12 cavidades ou outras placas) e incubadas durante a noite a 37°C em uma incubadora de CO2; ou HepG2 humana ou outra linhagem celular humana são semeadas em meios em placas (placas de 6 cavidades, 12 cavidades ou outras) e incubadas durante a noite a 37°C em uma incubadora de CO2.

[00230] No dia seguinte, ligante de ativação de AHR, como TCDD, quinurenina, ITE (metil éster 2-(1H-indol-3-ilcarbonil)-4tiazolocarboxílico), VAF347, BNF (beta-naftoflavona), ICZ (6Formilindolo(3,2-b) carbazol ou outros ligantes de AHR adicionados com ou sem antagonista de AHR. As células são incubadas por 4, 15 ou 24 horas ou outro ponto no tempo e depois as células são lisadas para a coleta de RNA. O RNA pode ser coletado através de um RNA kit de isolamento, como Qiagen ou qualquer outro método de isolamento de RNA. A expressão de gene é determinada por RT-PCR quantitativa usando sondas para genes específicos, incluindo um gene doméstico como Gapdh, β-actina ou outros genes constitutivamente expressos para normalização. Os genes dependentes de AHR a serem examinados incluem, porém não estão limitados a: cyplal, cyplbl,

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AHRR, ID01, ID02, cox2, IL6, VEGFA, ciclinaDI, cdc2, MMP-9, c-myc.

Exemplo 3

[00231] A expressão de gene dependente de AHR é medida em amostras de tecido como tumor ou fígado. O RNA é extraído do tecido através de métodos como o kit de isolamento de RNA, como Qiagen ou qualquer outro método de isolamento de RNA conhecido por alguém versado na técnica. A extração de RNA pode ser realizada a partir de células totais ou pós-triagem para populações específicas de células, como células tumorais, células T associadas a tumores, células mieloides associadas a tumores ou outras. A expressão de gene é determinada por TR-PCR quantitativa usando sondas para genes específicos, incluindo um gene de limpeza, como Gapdh, β-actina ou outros genes constitutivamente expressos para normalização. Os genes dependentes de AHR a serem examinados incluem, porém não estão limitados a: cyplal, cyplbl, AHRR, IDO1, IDO2, cox2, IL6, VEGFA, ciclinaDI, cdc2, MMP-9, c-myc.

Exemplo 4

Síntese de 1-5

Esquema sintético:

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Μ

Etapa 1: Λ/-(2-(1 H-indol-3-i l)eti l)-2-clorotieno[2,3-d]piri midin-4amina

[00232] A uma solução de 2,4-diclorotieno[2,3-d]pirimidina (200 mg, 975,31 umol, 1 eq.) em /-PrOH (15 mL) foi adicionado (630,24 mg, 4,88 mmol, 849,38 uL, 5,0 eq.) e 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (203,14 mg, 1,27 mmol, 1,3 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 3 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi diluída com H2O (15 mL) e extraída com DCM (15 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre NazSCU, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (ISCO®; 12 g de Coluna Rápida de Sílica SepaFlash®, Eluente de 20-30% EtOAc/PE gradiente @ 50 mL/ min.) para fornecer 2-cloro-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]tieno[2,3-d]pirimidin4-amina (260 mg, 774,90 umol, 79,4% de produção) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,67 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,40-7,35 (m, 2 H), 7,31 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,10-7,05 (m, 2 H), 7,00

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6,93 (m, 1 Η), 3,86-3,79 (m, 2 Η), 3,11 (t, J= 7,4 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 329,0, 331,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: A/-(2-(1H-jndol-3-il)etil)-2-(5-fluoropirjdin-3-il)tieno[2,3d]pirimidin-4-amina (I-5)

[00233] A uma solução de 2-cloro-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]tieno[2,3d]pirimidin-4-amina (100 mg, 298,04 umol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (3 mL) e H2O (1 mL) foi adicionado ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (75,59 mg, 536,47 umol, 1,8 eq), CS2CO3 (291,32 mg, 894,11 umol, 3,0 eq. ) e Pd(dppf)CI₂ (32,71 mg, 44,71 umol, 0,15 eq). A mistura foi agitada a 120 °C sob irradiação de micro-ondas durante 1 hora. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi filtrada. O filtrado foi diluído com H₂O (15 mL) e extraído com EtOAc (15 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 75%, 12 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fIuoro-3-piridil)-A/-[2-( 1 H-indol3-il)etil]tieno[2,3-d]pirimidin-4-amina (54,40 mg, 109,05 umol, 36,59% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,19 (s, 1 H), 8,84 (s, 1 H), 8,58 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 7,63-7,57 (m, 2 H), 7,54 (d, J= 5,7 Hz, 1 H), 7,19 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,02-6,90 (m, 3 H), 4,08 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,19 (t, J = 6,7 Hz, 2H); ES-LCMS m/z390,0 [M+H]⁺.

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Exemplo 5

Síntese de 1-4

Etapa 1:2,4-Dicloro-7-isopropil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina

[00234] Uma mistura de 2,4-dicloro-7/-/-pirrolo[2,3-d]pirimidina (1 g, 5,32 mmol, 1 eq), 2-bromopropano (3,27 g, 26,59 mmol, 2,50 mL, 5,0 eq.) e K2CO3 (3,68 g, 26,59 mmol, 5 eq. ) em DMSO (20 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ por 3 vezes, e em seguida a mistura foi agitada a 10-20°C durante 48 horas sob atmosfera de N₂. TLC (PE/EA = 3/1, Rt = 0,50) indicou que 0 material de partida foi consumido, e uma maior nova mancha com maior polaridade foi detectada. A

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155/652 mistura de reação foi diluída com H2O (50 mL) e extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 4/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,50) para fornecer 0 produto 2,4-dicloro-7-isopropil-pirrolo[2,3d]pirimidina (650 mg, 2,71 mmol, 50,99% de produção, 96% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,33 (d, J = 3,7 Hz, 1 H), 6,62 (d, J = 3,5 Hz, 1 H), 5,20-5,01 (m, 1 H), 1,53 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z230,0, 232,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-ΟΙοΐΌ-Λ/-[2-(1Η-ίηάοΙ-3-ίΙ)6ΐίΙ]-7-ί8ορΐΌρίΙ-ρίΐΊΌΐο[2,3d]pirimidin-4-amina

[00235] Uma mistura de 2,4-dicloro-7-isopropil-pirrolo[2,3d]pirimidina (100 mg, 417,22 umol, 1 eq) , 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (100 mg, 620 umol, 1,2 eq.) e DIEA (161,77 mg, 1,25 mmol, 218,02 uL, 3 eq. ) em /-PrOH (5 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ por 3 vezes. Em seguida a mistura foi agitada a 50 °C durante 11 h sob atmosfera de N₂. LC-MS mostrou que restou 15% de material de partida. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílicagel (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,28) para fornecer 0 produto 2-cloro-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-7-isopropil-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-amina (120 mg, 315,39 umol, 75,59% de produção, 93% de pureza) como um óleo vermelho claro. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,06 (s, 1 H), 7,69 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,41 (d, J = 7,9 Hz, 1 H),

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7,26-7,20 (m, 1 Η), 7,18-7,13 (m, 1 Η), 7,09 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,96 (d, J = 3,5 Hz, 1 H), 6,23 (s, 1 H), 5,22 (s, 1 H), 5,03 (d, J = 6,8, 13,5 Hz, 1 H), 3,99 (q, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,17 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 1,46 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z353,8, 354,9 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-7-isopropilpirrolo[2,3-d]pirimidin-4-amina (I-4)

[00236] 2-Cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-7-isopropil-pirrolo[2,3d]pirimidin-4-amina (80 mg, 210,26 umol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3piridiI)borônico (44,44 mg, 315,39 umol, 1,5 eq), Pd(dppf)Cl2 (15,38 mg, 21,03 umol, 0,1 eq.) e CS2CO3 (205,52 mg, 630,78 umol, 3 eq.) em 1,4dioxano (2 mL) e H2O (0,5 mL) foram capturados em um tubo de microondas. A mistura de reação foi borbulhada com N2 durante 3 minutos, e em seguida selada e aquecida a 110°C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que 90% de composto desejado foram detectados. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/H2O como eluentes, condição acídica, Instrumento: DC/Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm/fase móvel: água (0,05% de HCI) - ACN/Gradiente: B de 47% a 77% em 10 min/ Taxa de vazão: 25mL/min.) seguida por liofilização para produzir 2-(5fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-7-isopropil-pirrolo[2,3-d]pirimidin4-amina (51,57 mg, 120,95 umol, 57,52% de produção, 97,21% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 9,41 (s, 1 H), 8,72 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,64 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,35 (d, J = 8,2 Hz,

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Η), 7,23 (s, 1 Η), 7,07 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,02-6,93 (m, 1 H), 6,69 (s, 1 H), 5,06 (s, 1 H), 3,89 (s, 1 H), 3,80-3,77 (m, 2 H), 3,20-3,00 (m, 2 H), 1,48 (d, J = 6,6 Hz, 6H); ES-LCMS m/z414,9 [M+H]⁺.

Exemplo 6

Síntese de 1-3

Etapa 1: Λ/-(2-(1 H-indol-3-il)etil)-7-bromo-2-clorotieno[3,2d]pirimidin-4-amina

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[00237] A uma solução de 7-bromo-2,4-dicloro-tieno[3,2-d]pirimidina (100 mg, 352,16 umol, 1 eq. ) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (84,63 mg, 528,24 umol, 1,5 eq. ) em APrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (136,54 mg, 1,06 mmol, 184,02 uL, 3 eq). A mistura foi agitada a 50°C durante 3 h. LC-MS mostrou que nenhum material de partida foi mantido e 93% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de DCM/MeOH = 1/0 a 100/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,42) para fornecer 7-bromo2-cloro-A/-[2-(1 H-i ndol-3-i I )eti l]tieno[3,2-d]pi ri midi η-4-am i na (140 mg, 339,94 umol, 96,53% de produção, 99% de pureza) como um sólido cinza. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,11 (s, 1 H), 7,69-7,66 (m, 2 H), 7,43 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,25-7,23 (m, 1 H), 7,18-7,14 (m, 1 H), 7,09 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 5,25 (s, 1 H), 4,01 (q, J= 6,4 Hz, 2 H), 3,18 (t, J = 6,5 Hz, 2H); ES-LCMS m/z406,9, 408,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: Λ/-(2-(1 H-indol-3-il)etil)-2-cloro-7-(prop-1 -en-2-il)tieno[3,2d]pirimidin-4 -amina

[00238] 7-Bromo-2-cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]tieno[3,2-d]pirimidin4-amina (120 mg, 291,38 umol, 1 eq), 2-isopropenil-4,4,5,5-tetrametil1,3,2-dioxaborolano (39,17 mg, 233,10 umol, 0,8 eq), Pd(dppf)Cl2 (42,64

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159/652 mg, 58,28 umol, 0,2 eq. ) e CS2CO3 (284,81 mg, 874,14 umol, 3,0 eq. ) em 1,4-dioxano (5 mL) e H2O (1 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas. O tubo foi purgado com N₂ durante 3 minutos, e em seguida selado e aquecido a 80 °C durante 10 min sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que a maior parte do material de partida foi consumida e 68% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação combinada foi diluída com H₂O (20 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,45) para fornecer 0 produto Λ/-(2-(1 /-/-indol-3-il)etil)-2-cloro-7-(prop-1en-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4-amina (95 mg, 73,85% de produção, 98% de pureza) como um óleo amarelo claro; ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,10 (s, 1 H), 7,69 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,26-7,22 (m, 1 H), 7,20-7,13 (m, 1 H), 7,09 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 6,37 (s, 1 H), 5,38 (s, 1 H), 5,11 (s, 1 H), 4,00 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,18 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 2,21 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 369,0, 371,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: Λ/-(2-(1 H-indol-3-il)etil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7-(prop-1 -en2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4-amina

[00239] 2-Cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-7-isopropenil-tieno[3,2d]pirimidin-4-amina (95 mg, 252,38 umol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3piridiI)borônico (53,34 mg, 378,58 umol, 1,5 eq), Pd(dppf)CI₂ (18,47 mg, 25,24 umol, 0,1 eq.) e CS2CO3 (246,69 mg, 757,15 umol, 3 eq.) em 1,4

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160/652 dioxano (2 mL) e H2O (0,5 mL) foram capturados em um tubo de microondas. O tubo selado foi purgado com N2 por 3 min e em seguida aquecido a 110 °C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que a maior parte do material de partida foi consumida e 85% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,44) para fornecer 0 produto 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-7-isopropenil-tieno[3,2d]pirimidin-4-amina (85 mg, 188,00 umol, 74,49% de produção, 95% de pureza) como um óleo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,59 (s, 1 H), 8,55 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,48 (d, J= 10,1 Hz, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,69 (d, J = 7,9Hz, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,42 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,26-7,22 (m, 1 H), 7,20-7,15 (m, 1 H), 7,11 (s, 1 H), 6,70 (s, 1 H), 5,46 (s, 1 H), 5,06 (s, 1 H), 4,14 (q, J = 6,5 Hz, 2 H), 3,26 (t, J = 6,5 Hz, 2 H), 2,30 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 430,0 [M+H]⁺.

Etapa 4: Λ/-(2-(1 H-indol-3-il)etil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7isopropiltieno[3,2-d]pirimidin-4-amina (I-3)

[00240] A uma solução de 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-7-isopropenil-tieno[3,2-d]pirimidin-4-amina (50 mg, 110,59 umol, 1 eq. ) em MeOH (20 mL) e THF (2 mL) foi adicionado Pd/C (10%, 50 mg) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 por 3 vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 10-15°C por 0,5 h. LC-MS mostrou que não restou nenhum material de partida e 95% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi filtrada e 0

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161/652 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/HzO como eluentes, condição acídica, Instrumento: DC/Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm/ fase móvel: água (0,05% de HCI) - ACN/Gradiente: B de 62% a 92% em 10 min/ Taxa de vazão: 25mL/min.) seguida por liofilização para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-7-isopropil-tieno[3,2d]pirimidin-4-amina (40,32 mg, 74,05 umol, 66,96% de produção, 99,34% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,85 (s, 1 H), 9,46 (s, 1 H), 8,69 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,42 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 8,19 (t, J = 5,6 Hz, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,22 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,07 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 6,99-6,95 (m, 1 H), 3,93-3,87 (m, 2 H), 3,463,41 (m, 1 H), 3,12 (t, J = 7,4 Hz, 2 H), 1,37 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 432,0 [M+H]⁺.

Exemplo 7

Síntese de 1-2

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 191/704

162/652

Etapa 1:2-Formjl-3-metilbutanenjtrjla ck

[00241] A uma mistura de di-isopropilamina (2,43 g, 24,06 mmol, 3,40 mL, 1 eq.) em THF (20mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M, 10,10 mL, 1,05 eq) gota a gota a -78°C sob N₂. A mistura foi agitada a -78°C durante 10 min, em seguida aquecida a 0°C e agitada por 1 hora. A mistura foi resfriada para -78°C, 3-metilbutanenitrila (2 g, 24,06 mmol, 2,53 mL, 1 eq) dissolvida em THF (15 mL, anidroso) foi adicionada gota a gota e agitada a -78°C durante 10 min. Uma solução de formato de etila (1,87 g, 25,26 mmol, 2,03 mL, 1,05 eq.) em THF (15 mL, anidroso) foi adicionada gota a gota e agitada a -78°C durante 40 min, em seguida a mistura foi aquecida a 5-14°C durante 16 h. TLC (PE/EA=3/1, Rt = 0,34) indicou que uma nova maior mancha foi detectada. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de solução de HCI a 1 Λ/ (50 mL) a -78°C, e extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 192/704

163/652 orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/4, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,34) para fornecer 2-formil-3metil-butanenitrila (2 g, 16,20 mmol, 67,32% de produção, 90% de pureza) como um óleo amarelo claro. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,57 (s, 1 H), 3,43 (d, J= 4,4 Hz, 1 H), 2,56-2,40 (m, 1 H), 1,20 (d, J = 6,8 Hz, 3 H), 1,12 (d, J= 6,8 Hz, 3 H).

Etapa 2: 4-lsopropil-l H-pirazol-5-amina

[00242] Uma mistura de 2-formil-3-metil-butanenitrila (500 mg, 4,05 mmol, 1 eq), hidrato de hidrazina (168,67 mg, 5,26 mmol, 190,37 uL, 1,3 eq. ) e AcOH (425,50 mg, 7,09 mmol, 405,24 uL, 1,75 eq. ) em EtOH (20 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi agitada a 80-90 °C (refluxo) por 16 h sob atmosfera de N2 e em seguida concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com solução de NaHCOs saturada (20 mL) e extraída com DCM (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 0 produto cru 4-isopropil-1 H-pirazol-5-amina (420 mg, 3,02 mmol, 74,58% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,13 (s, 1 H), 2,69 (t, J= 6,9 Hz, 1 H), 1,21 (d, J= 6,8 Hz, 6H).

Etapa 3: Metil 3-(5-fluoropiridin-3-il)-3-oxopropanoato oh o

Tj u

[00243] A uma solução de ácido 5-fluoropiridina-3-carboxílico (500

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 193/704

164/652 mg, 3,54 mmol, 1 eq.) em THF (20 mL) foi adicionado GDI (689,51 mg, 4,25 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 5-14°C durante 2 h. (3Metóxi-3-oxo-propanoil)oxipotássio (553,43 mg, 3,54 mmol, 1 eq.) e MgCI₂ (337,39 mg, 3,54 mmol, 1 eq) foi adicionado e a reação foi agitada a 5-14°C durante 16 h. TLC (PE/EA= 1/1, Rf = 0,58) indicou que o material de partida foi consumido e uma maior nova mancha com maior polaridade foi detectada. A mistura de reação foi diluída com solução de HCI a 3 Λ/ (20 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/4, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,58) para fornecer metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-3-oxo-propanoato (175 mg, 843,21 umol, 23,80% de produção, 95% de pureza) como um sólido branco e metil 3(5-fluoro-3-piridil)-3-oxo-propanoato (175 mg, 843,21 umol, 23,80% de produção, 95% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 12,48 (s, 1 H), 8,97 (s, 1 H), 8,82 (s, 1 H), 8,70 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,56 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 7,96 (d, J= 2,2, 8,6 Hz, 1 H), 7,867,73 (m, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 4,04 (s, 2 H), 3,84 (s, 3 H), 3,78 (s, 3 H); ESLCMS m/z 198,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 5-(5-Fluoropiridin-3-il)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirjmjdin7-ol

[00244] A uma solução de metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-3-oxopropanoato (200 mg, 963,67 umol, 1 eq. ) em AcOH (5 mL) foi adicionado 4-isopropil-1 H-pirazol-5-amina (134,03 mg, 963,67 umol, 1 eq). A mistura foi agitada a 120 °C durante 0,5 h. LCMS mostrou que 0

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 194/704

165/652 material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto cru 5-(5-fluoro-3-piridil)3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (300 mg, 639,05 umol, 66,31% de produção, 58% de pureza) como um óleo amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,79 (m, 1 H), 8,63-8,67 (m, 1 H), 8,09-8,06 (m, 1 H), 7,87 (m, 1 H), 6,06 (m, 1 H), 3,26-3,25 (m, 1 H), 2,75-2,70 (m, 1 H), 1,30 (d, J= 6,8 Hz, 3 H), 1,15-1,09 (m, 3 H); ES-LCMS m/z567,0 [2M+Na]⁺.

Etapa 5: 7-Cloro-5-(5-fluoropiridin-3-il)-3-isopropilpirazolo[1,5a]pirimidina

[00245] Uma solução de 5-(5-fluoropiridin-3-il)-3isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (300 mg, 639,05 umol, 1 eq. ) em POCI3 (4,95 g, 32,28 mmol, 3 mL, 50,52 eq) foi agitada a 110°C durante 3 h. LC-MS mostrou que não restou nenhum material de partida e 67% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e em seguida diluída com DCM (20 mL x 2), concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 2/5, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,64) para fornecer 0 produto 7-cloro-5-(5-fluoropiridin-3-il)-3-isopropilpirazolo[1,5a]pirimidina (140 mg, 385,25 umol, 60,28% de produção, 80% de pureza) como um sólido amarelo.¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,10 (s, 1 H), 8,61-8,60 (m, 1 H), 8,22-8,14 (m, 2 H), 7,41-7,27 (m, 1 H), 3,473,38 (m, 1 H), 1,48-1,44 (m, 6H); ES-LCMS m/z291,0, 293,0[M+H]⁺.

Etapa 6: Λ/-(2-(1 H-indol-3-il)etil)-5-(5-fluoropiridin-3-il)-3Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 195/704

166/652 isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-2)

[00246] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (80 mg, 220,14 umol, 1 eq. ) e 2-(1 H-indol-3il)etanamina (52,90 mg, 330,21 umol, 1,5 eq. ) em APrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (85,36 mg, 660,42 umol, 115,03 uL, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 50°C durante 3 h. LCMS mostrou que não restou nenhum material de partida e 92% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/hkO como eluentes, condição acídica, Instrumento: DC/Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm/fase móvel: água (0,05%de HCI) - ACN/Gradiente: B de 47% a 57% em 10 min/ Taxa de vazão: 25mL/min.) seguida por liofilização para produzir 5-(5-f I uoro-3-piridil)-N-[2-( 1 H-i ndol-3-il)etil]-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (88,45 mg, 168,66 umol, 76,61% de produção, 99,89% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,73 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,55 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,43 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,07 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 6,86 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,72 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 3,95 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 3,17-3,12 (m, 3 H), 1,26 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z415,2 [M+H]⁺.

Exemplo 8

Síntese de 1-10

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 196/704

167/652

Etapa 1: terc-Butil A/-[2-(2-nitroanilino)etil]carbamato no.

H N

NHBoc

[00247] A uma solução de 1-fluoro-2-nitro-benzeno (10 g, 70,87 mmol, 7,46 mL, 1 eq. ) e terc-Butil A/-(2-aminoetil)carbamato (11,35 g, 70,87 mmol, 11,13 mL, 1 eq. ) em DMF (50 mL) foi adicionado K2CO3 (15,67 g, 113,39 mmol, 1,6 eq). A mistura foi agitada a 70 °C durante 18 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 5/1, Rf = 0,69) mostrou que a maior parte do material de partida foi consumida. A mistura foi diluída com H2O (100 mL), extraída com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas foram

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 197/704

168/652 secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida. O material cru foi purificado em cromatografia em coluna de sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/4, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f = 0,69) para fornecer terc-Butil A/-[2-(2-nitroanilino)etil]carbamato (19 g, 67,54 mmol, 95,3% de produção, 100% de pureza) como um sólido laranja. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,19 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,47-7,43 (m, 1 H), 6,95 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 6,69-6,65 (m, 1 H), 3,50-3,43 (m, 4H), 1,46 (s, 9H); ES-LCMS m/z304,0 [M+Na]⁺.

Etapa 2: terc-Butil A/-[2-(2-aminoanilino)etil]carbamato nh₂ < NHBoc

[00248] A uma solução de terc-Butil Λ/-[2-(2nitroanilino)etil]carbamato (5 g, 17,77 mmol, 1 eq.) em MeOH (50 mL) foi adicionado Pd/C (10%, 500 mg) sob atmosfera de N₂. A suspensão foi desgaseificada e purgada com H₂ por 3 vezes. A mistura foi agitada sob H₂ (15 Psi) a 2-9 °C durante 18 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer terc-Butil A/-[2-(2-aminoanilino)etil]carbamato cru (4,4 g, 17,51 mmol, 98,50% de produção, cru) como um óleo vermelho escuro que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 6,70-6,67 (m, 2 H), 6,62 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 6,56 (t, J=7,2 Hz, 1 H), 3,29-3,26 (m, 2 H), 3,18-3,17 (m, 2 H), 1,42 (s, 9H); ES-LCMS m/z252,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: terc-Butil A/-[2-(2-oxo-3H-benzimidazol-1-il)etil]carbamato

[00249] A uma solução de terc-Butil Λ/-[2-(2

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169/652 aminoanilino)etil]carbamato (2 g, 7,96 mmol, 1 eq.) em THF (20 mL) foi adicionado GDI (1,55 g, 9,55 mmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 2 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura foi diluída com EtOAc (50 mL), lavada com solução de ácido cítrico (aq., 20 mL x 2), secada sobre anidroso Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/4, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,31). O óleo amarelo leve obtido foi diluído com solução de HCI a 1 N (5 mL), filtrado e coletado o sólido. O sólido foi triturado com isopropil éter (20 mL), filtrado e coletado o produto terc-Butil A/-[2-(2-oxo-3/-/-benzimidazol-1-il)etil] carbamato (1,63 g, 5,73 mmol, 72,0% de produção, 97,52% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,13-7,01 (m, 4H), 3,93 (t, J= 6,0 Hz, 2 H), 3,35-3,31 (m, 2 H), 1,29, 1,17 (s, 9H); ES-LCMS m/z 300,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 3-(2-Aminoetil)-1 H-benzimidazol-2-ona

[00250] A uma solução de terc-Butil A/-[2-(2-oxo-3H-benzimidazol-1il)etil]carbamato (646,02 mg, 2,27 mmol, 1 eq. ) em DOM (10 mL) foi adicionado HCI/1,4-dioxano (4 M, 5,00 mL, 8,80 eq) gota a gota a 0 °C. Após adição, a mistura foi agitada a 4-12 °C durante 1 hora. LC-MS mostrou que a maior parte do material de partida foi consumida. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 3-(2-aminoetil)-1/-/-benzimidazol-2-ona cru (400 mg, 1,87 mmol, 82,4% de produção, sal de HCI) como um sólido branco, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,187,17 (m, 1 H), 7,11-7,08 (m, 3 H), 4,19-4,16 (m, 2 H), 3,31-3,28 (m, 2H);

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170/652

ES-LCMS m/z 178,1 [M+H]⁺. Etapa 5: 3-[2-[(2-Cloro-9-isopropil-purin-6-il)amino]etil]-1 Hbenzimidazol-2-ona

[00251] A uma solução de 2,6-dicloro-9-isopropil-purina (200 mg, 827,24 umol, 1 eq. ) em isopropanol (10 mL) foi adicionado DIEA (427,65 mg, 3,31 mmol, 576,35 uL, 4,0 eq.) e 3-(2-aminoetil)-1 Hbenzimidazol-2-ona (265,13 mg, 1,24 mmol, 1,5 eq, HCI). A mistura foi agitada a 50 °C durante 5 h. LC-MS mostrou que a maior parte do material de partida foi consumida. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover isopropanol. O resíduo foi diluído com H2O (20 mL) e extraído com DCM/isopropanol (20 mL x 3, v/v = 3/1). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel (de DCM/MeOH = 1/0 a 10/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, R_f = 0,15) para fornecer 3-[2-[(2-cloro-9-isopropil-purin-6-il)amino]etil]-1 Hbenzimidazol-2-ona (280 mg, 730,45 umol, 88,3% de produção, 97% de pureza) como um sólido branco.; ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,14 (s, 1 H), 7,28 (d, J= 7,2 Hz, 1 H), 7,06-6,97 (m, 3 H), 4,78-4,75(m, 1 H), 4,22 (t, J= 6,0 Hz, 2 H), 3,97(t, J= 6,0 Hz, 2 H), 1,62 (d, J= 6,4 Hz, 6H); ES-LCMS m/z372,1,374,0 [M+H]⁺.

Etapa 6: 3-[2-[[2-(5-Fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6il]amino]etil]-1 H-benzimidazol-2-ona (1-10)

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171/652

[00252] A uma solução de 3-[2-[(2-cloro-9-isopropil-purin-6il)amino]etil]-1/-/-benzimidazol-2-ona (100 mg, 260,88 umol, 1 eq. ) e ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (73,52 mg, 521,75 umol, 2 eq.) em 1,4dioxano (2 mL) e H2O (0,5 mL) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (9,54 mg, 13,04 umol, 0,05 eq. ) e CS2CO3 (255,00 mg, 782,63 umol, 3 eq). A mistura foi purgada com N2 por 3 min e agitada a 120 °C durante 0,5 h sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que a maior parte do material de partida foi consumida e 0 composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com EtOAc/MeOH/THF (10mL/10mL/10mL) e agitado por 5 min, filtrado. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/H2O como eluentes, condição acídica, Instrumento: DC/Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm/ fase móvel: água (0,05% de HCI) - ACN/Gradiente: B de 20% a 50% em 12 min/ Taxa de vazão: 25mL/min.) seguida por liofilização para produzir 3-[2[[2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6-il]amino]etil]-1 H-benzimidazol2-ona (11,08 mg, 21,29 umol, 8,16% de produção, 97,1% de pureza, sal de 2HCI, 10,85 mg foi liberado) como um sólido amarelo claro. ¹H RMN (400MHz, CD3OD) δ ppm 9,51-9,27 (m, 2 H), 9,15-8,90 (m, 2 H), 7,23 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 6,92 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,75 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 6,63 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 5,19-4,97 (m, 1 H), 4,30-4,15 (m, 4H), 1,67 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z433,1 [M+H]⁺.

Exemplo 9

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 201/704

172/652

Síntese de 1-19

Esquema sintético:

!-19

Etapa 1: Λ/-(2-(1 H-lndol-3-il)etil)-7-bromo-2-cloropirrolo[2,1 f] [1,2,4]triazin-4-amina

[00253] A uma solução de 7-bromo-2,4-dicloro-pirrolo[2,1f][1,2,4]triazina (100 mg, 374,66 umol, 1 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (242,10 mg, 1,87 mmol, 326,29 uL, 5,0 eq. ) e 2-(1/-/indol-3-il)etanamina (78,03 mg, 487,06 umol, 1,3 eq). A mistura foi agitada a 50°C durante 1,5 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi diluída com H2O (15 mL) e extraída

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173/652 com DCM (15 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílicagel rápida (ISCO®; 4 g de Coluna Rápida de Sílica SepaFlash®, Eluente de 20-25% acetato de Etila/éter de petróleo gradiente @ 55 mL/ min.) para fornecer 7-bromo-2-cloro-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirrolo[2,1 f][1,2,4]triazin-4-amina (140 mg, 354,78 umol, 94,7% de produção) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 8,08 (s, 1 H), 7,66 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,42 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,26-7,23 (m, 1 H), 7,19-7,14 (m, 1 H), 7,09 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 6,59 (d, J = 4,6 Hz, 1 H), 6,40 (br s, 1 H), 5,55 (m, 1 H), 3,99 (q, J= 6,2 Hz, 2 H), 3,17 (t, J= 6,6 Hz, 2H); ES-LCMS m/z389,9, 392,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: M-(2-(1 H-lndol-3-il)etil)-2-cloro-7-(prop-1 -en-2i l)pi rrolo[2,1 -f] [1,2,4]triazin-4-amina

[00254] A uma solução de 7-bromo-2-cloro-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirrolo[2,1 -f][1,2,4]triazin-4-amina (90 mg, 228,07 umol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (2 mL) e H₂O (0,5 mL) foi adicionado 2-isopropenil-4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (38,33 mg, 228,07 umol, 1,0 eq), Pd(dppf)Cl2 (33,38 mg, 45,61 umol, 0,2 eq.) e CS2CO3 (222,93 mg, 684,22 umol, 3,0 eq). A mistura foi agitada sob micro-ondas a 80°C durante 30 min. LCMS mostrou 67% do produto desejado foi encontrado. A mistura de reação foi filtrada e 0 filtrado foi diluído com H₂O (15 mL) e em seguida extraída com EtOAc (15 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi

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174/652 purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (ISCO®; 12 g de Coluna Rápida de Sílica SepaFlash®, Eluente de 10-13% Acetato de etila/éter de petróleo gradiente @ 50 mL/ min.) para fornecer 2-cloro-A/-[2-(1 Hindol-3-il)etil]-7-isopropenil-pirrolo[2,1 -f][1,2,4]triazin-4-amina (65 mg, 144,10 umol, 63,2% de produção) como um óleo incolor. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,08 (br s, 1 H), 7,67 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,41 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,26-7,23 (m, 1 H), 7,20-7,14 (m, 1 H), 7,09 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 6,58 (d, J = 4,6 Hz, 1 H), 6,36 (br s, 1 H), 6,25 (s, 1 H), 5,50 (br s, 1 H), 5,35 (s, 1 H), 4,02-3,96 (m, 2 H), 3,16 (t, J = 6,5 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H); ES-LCMS m/z352,0, 354,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: M-(2-(1 H-lndol-3-il)etil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7-(prop-1 en-2-il)pirrolo[2,1 -f] [1,2,4]triazin-4-amina

[00255] A uma solução de 2-cloro-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-7isopropenil-pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina (65 mg, 144,10 umol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (3 mL) e H₂O (1 mL) foi adicionado ácido (5-fluoro3-piridil)borônico (30,46 mg, 216,15 umol, 1,5 eq), Pd(dppf)Cl2 (15,82 mg, 21,62 umol, 0,15 eq.) e CS2CO3 (140,85 mg, 432,31 umol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 110°C sob irradiação de micro-ondas durante 0,5 h. LCMS mostrou que cerca de 72% de produto desejado foi detectado. A mistura de reação foi filtrada e 0 filtrado foi diluído com H₂O (15 mL) e em seguida extraída com EtOAc (15 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por TLC preparativa (ΡΕ/EtOAc = 1,5/1, Rf = 0,6) para fornecer 2-(5-fluoro-3piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-7-isopropenil-pirrolo[2,1 -f][1,2,4]triazin-4

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175/652 amina (40 mg, 76,61 umol, 53,2% de produção) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,29 (s, 1 H), 8,38 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,23-8,16 (m, 1 H), 8,05 (br s, 1 H), 7,55 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,30-7,27 (m, 1 H), 7,30-7,24 (m, 1 H), 7,14-7,09 (m, 1 H), 7,07-7,02 (m, 1 H), 6,95 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 6,54 (d, J= 4,6 Hz, 1 H), 6,34-6,23 (m, 2 H), 5,45 (t, J= 5,6 Hz, 1 H), 5,27 (s, 1 H), 3,95 (q, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,09 (t, J=6,6 Hz, 2 H), 2,15 (s, 3 H); ES-LCMS m/z413,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: AZ-(2-(1 H-lndol-3-il)etil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7isopropilpirrolo[2,1 -f][1,2,4]triazin-4-amina (1-19)

[00256] A uma solução de 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-7-isopropenil-pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina (30 mg, 57,46 umol, 1 eq.) em MeOH (8 mL) foi adicionado Pd/C (10%, 40 mg). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes e em seguida a mistura foi agitada em H2 (15 psi) a 20 °C durante 0,5 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm;fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 75% a 95%, 12min) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-( 1 H-\ndol-3-il)etil]-7isopropil-pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-amina (6,75 mg, 12,89 umol, 17,72% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,05 (s, 1 H), 8,76 (br s, 1 H), 8,42 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,63 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 7,23 (d, J= 7,7

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176/652

Hz, 1 Η), 7,06-6,97 (m, 3 Η), 6,92 (d, J= 4,0 Hz, 1 H), 6,54 (d, J= 4,0 Hz, 1 H), 4,01 (t, J= 7,1 Hz, 2 H), 3,55 (d, J= 7,0, 14,1 Hz, 1 H), 3,17 (t, J= 6,8 Hz, 2H); ES-LCMS m/z415,1 [M+H]⁺.

Exemplo 10

Síntese de I-22

Etapa 1: 2-(Clorometil)imidazo[1,2-alpiridina

[00257] A uma solução de piridin-2-amina (5 g, 53,13 mmol, 1 eq. ) em DME (10 mL) foi adicionado 1,3-dicloropropan-2-ona (13,49 g, 106,25 mmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOH (50 mL) e em seguida agitado a 90 °C durante 16 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e o MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi hidrolisado com solução saturada de carbonato de sódio (100 mL). A mistura de reação foi extraída com DCM (60 mL x 3), combinada, secada com Na2SO4, filtrada, e concentrada sob pressão reduzida para produzir 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridina (8,85 g, cru), que foi usada na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,14 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 7,70-7,59 (m, 2 H), 7,26-7,20 (m, 1 H), 6,85 (t, J = 6,8 Hz, 1 H), 4,79 (s, 2H); ES-LCMS m/z 167,2, 169,5 [M+H]⁺.

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177/652

Etapa 2: 2-lmidazo[1,2-a]piridin-2-ilacetonitrila

[00258] Uma mistura de 2-(clorometil)imidazo[1,2-a]piridina (3 g, 18,01 mmol, 1 eq.) e KCN (1,52 g, 23,41 mmol, 1,3 eq.) em DMSO (50 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. Em seguida a mistura foi agitada a 80 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. LC-MS mostrou que restou 27% do material de partida e 17% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi interrompida bruscamente com água (200 mL) e em seguida extraída com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de DCM/MeOH = 1/0 a 10/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, Rf = 0,49) para produzir 2-imidazo[1,2-a]piridiη-2-ilacetonitriIa (200 mg, 890,75 umol, 5,0% de produção, 70% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 8,59-8,49 (m, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 7,55-7,49 (m, 1 H), 7,28-7,11 (m, 1 H), 6,92-6,85 (m, 1 H), 4,12 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 158,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-lmidazo[1,2-a]piridin-2-iletanamina h₂n n

[00259] A uma solução de 2-imidazo[1,2-a]piridiη-2-ilacetonitriIa (100 mg, 445,37 umol, 1 eq. ) em THF (5 mL) foi adicionado BH3-Me2S (10 M, 445,37 uL, 10 eq). A mistura foi agitada a 80 °C durante 2 h até que LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi interrompida bruscamente com MeOH a 10 °C seguido por agitação a 80 °C durante

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178/652 hora. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 2-imidazo[1,2-a]piridin-2-iletanamina (71,8 mg, cru) como um sólido branco, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,82-8,61 (m, 1 H), 8,21-8,06 (m, 1 H), 8,02-7,61 (m, 2 H), 7,52-7,21 (m, 1 H), 3,61-3,38 (m, 2 H), 3,35-3,28 (m, 2H); ES-LCMS m/z 162,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-(5-Fluoro-3-pirjdil)-/V-(2-jrmdazo[1,2-a]pirjdin-2-jletil)-9isopropil-purin-6-amina (I-22)

[00260] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (50 mg, 164,55 umol, 1 eq. ) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado

DIEA (106,33 mg, 822,73 umol, 143,31 uL, 5 eq.) e 2-imidazo[1,2a]piridin-2-iletanamina (71,8 mg, 445,40 umol, 2,71 eq). A mistura foi agitada a 90 °C durante 16 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm x 30 mm, 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 10% a 38%, 12 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-(2imidazo[1,2-a]piridin-2-iletil)-9-isopropil-purin-6-amina (22,38 mg, 41,71 umol, 25,4% de produção, 98% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,62 (s, 1 H), 9,36 (s, 1 H), 9,18-8,90 (m, 2 H), 8,71 (d, J = 6,2 Hz, 1 H), 8,17 (s, 1 H), 7,96-7,76 (m, 2 H), 7,43 (t, J = 6,8 Hz, 1 H), 5,16 (s, 1 H), 4,30 (s, 2 H), 3,43 (t, J = 6,4

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179/652

Hz, 2 Η), 1,75 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z417,1 [M+H]⁺.

Exemplo 11

Síntese de I-20

Esquema sintético:

Etapa 1:4,6-Dicloro-2-iodo-pirimidina ci

[00261] A uma solução de 4,6-dicloropirimidin-2-amina (5 g, 30,49 mmol, 1 eq.) em acetonitrila (40 mL) foi adicionado CH2I2 (8,98 g, 33,54 mmol, 2,71 mL, 1,1 eq.) e nitrito de isopentila (17,86 g, 152,45 mmol, 20,53 mL, 5,0 eq). A mistura foi agitada a 80°C durante 3,5 h. LCMS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover acetonitrila. O resíduo foi diluído com EtOAc (50 mL), lavado com solução de Na2SOs (50 mL x 2), secado sobre Na2SO4,

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180/652 filtrado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,90) para produzir 4,6dicloro-2-iodo-pirimidina (6,32 g, 22,60 mmol, 74,1% de produção, 98,3% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,79-7,76 (m, 1 H); ES-LCMS m/z274,7, 276,8 [M+H]⁺.

Etapa 2: 4,6-Djcloro-2-(5-fluoro-3-pirjdil)pirjmidina

[00262] 4,6-Dicloro-2-iodo-pirimidina (500 mg, 1,79 mmol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (251,96 mg, 1,79 mmol, 1 eq), NazCOs (568,55 mg, 5,36 mmol, 3,0 eq.) e Pd(dppf)Cl2 (130,84 mg, 178,81 umol, 0,1 eq. ) em 1,4-dioxano (6 mL) e água (1,2 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas. O tubo selado foi aquecido a 80 °C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LCMS mostrou que 53% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (30 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,80) para produzir 4,6-dicloro-2-(5fluoro-3-piridil)pirimidina (165 mg, 676,08 umol, 37,8% de produção, 100% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,36 (s, 1 H), 8,67 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,52-8,44 (m, 1 H), 7,76 (s, 1 H); ES-LCMS m/z243,9, 245,9 [M+H]⁺.

Etapa 3: 6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirimidin-4-amina

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181/652

[00263] A uma solução de 4,6-dicloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirimidina (165 mg, 676,08 umol, 1,0 eq.) em APrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (262,13 mg, 2,03 mmol, 353,28 uL, 3,0 eq.) e 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (108,32 mg, 676,08 umol, 1,0 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 3 h. LCMS mostrou 88% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada para produzir 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-AZ[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-4-amina (240 mg, cru) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 9,31-9,23 (m, 1 H), 8,86-8,20 (m, 2 H), 8,11 (s, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 7,57 (dd, J = 7,8, 11,8 Hz, 1 H), 7,42-7,29 (m, 1 H), 7,26-7,17 (m, 1 H), 7,13-6,93 (m, 2 H), 6,55 (s, 1 H), 3,83-3,70 (m, 2 H), 3,04-2,95 (m, 2H); ES-LCMS m/z 368,0, 369,0 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-A/6-[2-(1 H-jndol-3-il)etil]-A/4-jsopropilpirimidina-4,6-diamina (I-20)

[00264] 6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirimidin4-amina (60 mg, 140,62 umol, 1,0 eq), propan-2-amina (1,03 g, 17,46 mmol, 1,5 mL, 124,16 eq. ) e DIEA (90,87 mg, 703,10 umol, 122,46 uL, 5,0 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em /-PrOH (3 mL). O tubo selado foi aquecido a 125 °C durante 6 h sob irradiação de micro

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182/652 ondas. LCMS mostrou 66% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover /-PrOH. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/6-[2-(1 Hindol-3-il)etil]-A/4-isopropil-pirimidina-4,6-diamina (19,11 mg, 38,19 umol, 27,16% de produção, 99,90% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,99 (s, 1 H), 8,75 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 7,62 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,17-6,98 (m, 4H), 3,73 (s, 2 H), 3,13 (t, J = 6,4 Hz, 3 H), 1,21 (s, 6H); ES-LCMS m/z 391,3 [M+H]⁺.

Exemplo 12

Síntese de 1-15

Esquema sintético:

«r-H. <ΐ-% \ sdfei-s oe tfsmewa nc ,< .·· a SOMS Λ Z'?

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183/652

Etapa 1:1-lmidazo[1,2-a]piridin-3-il-/V,/V-dimetil-metanamina .n

;.JÚb

[00265] Uma mistura de imidazo[1,2-a]piridina (500 mg, 4,23 mmol, 1 eq), A/-metilmetanamina (414,16 mg, 5,08 mmol, 1,2 eq, HCI), e HCHO (412,16 mg, 5,08 mmol, 378,13 uL, 37% em água, 1,2 eq.) em n-BuOH (5 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ por 3 vezes. Em seguida a mistura foi agitada a 120°C durante 3 h sob atmosfera de N₂. LC-MS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 1 -imidazo[1,2-a]piridin3-il-A/,A/-dimetil-metanamina (742 mg, cru) como um sólido amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,85 (d, J= 6,8 Hz, 1 H), 8,27 (d, J= 6,8 Hz, 1 H), 7,857,73 (m, 2 H), 7,68 (s, 1 H), 4,41 (s, 2 H), 2,64 (s, 6H); ES-LCMS m/z 176,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-lmidazo[1,2-a]piridiη-3-ilacetonitriIa ,__N

[00266] A uma solução de 1-imidazo[1,2-a]piridin-3-il-A/,ΛΖ-dimetilmetanamina (742,00 mg, 4,23 mmol, 1 eq. ) em THF (6 mL) foi adicionado dimetil sulfato (534,10 mg, 4,23 mmol, 401,58 uL, 1 eq) gota a gota . A mistura resultante foi aquecida a 70 °C durante 30 minutos. O solvente foi removido e 0 resíduo foi dissolvido em H₂O (5 mL). À mistura foi adicionado KCN (303,30 mg, 4,66 mmol, 1,1 eq. ) e a mistura foi aquecida a 110 °C durante 3 h. LC-MS mostrou que restou 27% da mistura de partida e 33% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de NaHCOs (30 mL) e em seguida extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas

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184/652 orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre anidroso Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de DCM/MeOH = 1/0 a 10/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, Rt = 0,48) para produzir 2-imidazo[1,2-a]piridin-3-ilacetonitrila (900 mg, 50,4% de produção, 87,6% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,39 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,32 (ddd, J = 1,1,6,7, 9,0 Hz, 1 H), 7,06 (dt, J = 0,9, 6,8 Hz, 1 H), 4,47 (s, 2H); ES-LCMS m/z 158,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-lmidazo[1,2-a]piridin-3-letanamina

---N

[00267] A uma solução de 2-imidazo[1,2-a]piridin-3-ilacetonitrila (80 mg, 421,70 umol, 1 eq. ) em THF (8 mL) foi adicionado BHs-Me₂S (10 M, 421,70 uL, 10 eq) gota a gota . A mistura foi agitada a 70 °C durante 2 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de MeOH (20 mL) e HCI/MeOH (4 M, 0,1 mL) lentamente seguida pela agitação a 70 °C durante 3 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 2-imidazo[1,2-a]piridin3-iletanamina (68 mg, cru) como um óleo incolor, 0 qual foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,48-8,43 (m, 1 H), 7,89-7,65 (m, 1 H), 7,69-7,44 (m, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,26-7,17 (m, 1 H), 3,17-3,10 (m, 2 H), 3,09-3,01 (m, 2H); ES-LCMS m/z 162,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 6-Cloro-9-isopropil-purjn-2-amjna

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[00268] A uma solução de 6-cloro-9H-purin-2-amina (27 g, 159,22 mmol, 1 eq.) em DMSO (220 mL) foi adicionado K2CO3 (66,02 g, 477,67 mmol, 3 eq. ) e 2-bromopropano (97,92 g, 796,12 mmol, 74,75 mL, 5 eq). A mistura foi agitada a 15 °C durante 88 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de água (1000 mL) em seguida extraída com EtOAc (500 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (100 mL x 2), solução salina (100 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo como um sólido amarelo. O resíduo foi adicionado com PE / EtOAc (5/1, 500 mL) e em seguida agitado a 15 °C durante 2 h. A suspensão foi filtrada e 0 bolo foi lavado com PE (30 mL x 2). O sólido foi coletado e secado sob vácuo para produzir 6-cloro-9-isopropil-purin2-amina cru (28 g, 130,97 mmol, 82,2% de produção, 99% de pureza) como um sólido amarelo claro, que foi usado para a etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,84 (s, 1 H), 5,20 (s, 2 H), 4,74-4,64 (m, 1 H), 1,57 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 212,0, 214,0 [M+H]⁺.

Etapa 5: 6-Cloro-2-jodo-9-isopropil-purjna

[00269] A uma mistura de 6-cloro-9-isopropil-purin-2-amina (10 g,

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46,78 mmol, 1 eq), l₂ (11,87 g, 46,78 mmol, 1 eq), Cul (8,91 g, 46,78 mmol, 1 eq), e CH2I2 (125,28 g, 467,75 mmol, 37,73 mL, 10 eq. ) em THF (400 mL) foi adicionado nitrito de isopentila (16,44 g, 140,33 mmol, 18,89 mL, 3 eq). A mistura foi agitada a 70 °C durante 3 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi filtrada através de celita e 0 bolo foi lavado com EtOAc (100 mL x 2). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e 0 resíduo foi diluído com EtOAc (300 mL), lavado com Na₂SO3 (100 mL), solução salina (100 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,58) para produzir 6-cloro-2-iodo-9-isopropil-purina (12,5 g, 31,39 mmol, 67,1% de produção, 81% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,09 (s, 1 H), 4,98-4,82 (m, 1 H), 1,63 (d, J = 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 322,8, 324,8 [M+H]⁺.

Etapa 6: 6-Cloro-2-(5-fluoro-3-pirÍdil)-9-isopropil-purjna

[00270] 6-Cloro-2-iodo-9-isopropil-purina (3 g, 8,28 mmol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (1,17 g, 8,28 mmol, 1 eq), Pd(dppf)CI₂(302,86 mg, 413,91 umol, 0,05 eq.) e CS2CO3 (2,70 g, 8,28 mmol, 1 eq. ) em 1,4-dioxano (50 mL) e H₂O (10 mL) foi desgaseificado e em seguida aquecido a 80 °C durante 16 h sob N₂. LCMS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi vertida em H2O (100 mL) em seguida extraída com EtOAc (80 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secada sobre Na₂SO4 anidroso, concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo

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187/652 que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,58) para produzir 6-cloro-2(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purina (1,71 g, 5,63 mmol, 68,0% de produção, 96% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,54 (s, 1 H), 8,58 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,48 (td, J = 2,1, 9,5 Hz, 1 H), 8,21 (s, 1 H), 5,10-4,93 (m, 1 H), 1,73 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 292,0, 294,0 [M+H]⁺.

Etapa 7: 2-(5-Fluoro-3-pirjdil)-A/-(2-jmjdazo[1,2-a]pirÍdin-3-iletil)-9isopropil-purin-6-amina (1-15)

[00271] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (50 mg, 164,55 umol, 1 eq), e 2-imidazo[1,2-a]piridin-3iletanamina (68 mg, 421,83 umol, 2,56 eq. ) em APrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (106,33 mg, 822,73 umol, 143,31 uL, 5 eq). A mistura foi agitada a 95°C durante 16 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 MS desejado (m/z = M/2+H) foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e 0 resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Kinetex XB-C18 150mm x 30mm, 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 7% a 37%, 12 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-(2-imidazo[1,2-a]piridin3-iletil)-9-isopropil-purin-6-amina (34,09 mg, 63,53 umol, 38,6% de produção, 98% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,50 (s, 1 H), 9,33 (s, 1 H), 9,03-8,88 (m, 3 H), 8,00 (s, 1 H), 7,96-7,88 (m, 1 H), 7,86-7,79 (m, 1 H), 7,54 (t, J = 6,8 Hz, 1 H), 5,21 -5,07 (m, 1 H), 4,32 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,58 (t, J =

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6,3 Hz, 2 Η), 1,74 (d, J = 6,6 Hz, 6H); ES-LCMS m/z416,9 [M+H]⁺.

Exemplo 13

Síntese de 1-1

Etapa 1: ácido 3-lsopropil-4-nitro-1H-pirazol-5-carboxílico

[00272] A um banho de gelo e solução agitada de HNOsfumegante (700,00 mg, 11,11 mmol, 0,5 mL, 1,71 eq.) e H2SO4 fumegante (1,88 g, 18,76 mmol, 1,02 mL, 98% de pureza, 2,89 eq) foi adicionado ácido 3

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189/652 isopropil-1 H-pirazol-5-carboxílico (1 g, 6,49 mmol, 1 eq.) em porções a 0°C durante 5 min. Após adição, a mistura foi agitada a essa temperatura por 1 h e em seguida a 100 °C durante 6 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura foi vertida em água gelada (30 g), o precipitado branco foi filtrado e secado para produzir ácido 3isopropil-4-nitro-1/-/-pirazol-5-carboxílico (700 mg, 3,20 mmol, 49,36% de produção, 91,1% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,56 (spt, J = 7,0 Hz, 1 H), 1,35 (d, J=7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 200,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 3-lsopropil-4-nitro-1 H-pirazol-5-carboxamida

[00273] A uma solução de ácido 3-isopropil-4-nitro-1 H-pirazol-5carboxílico (700 mg, 3,20 mmol, 1 eq.) em DCM (15 mL) e DMF (0,1 mL) foi adicionado cloreto de oxalila (1,22 g, 9,61 mmol, 840,83 uL, 3 eq) gota a gota durante 5 min. Após adição, a mistura foi agitada a 15°C durante 1 h e em seguida a mistura resultante foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em THF (10 mL) e resfriado a 0°C. ΝΗ3Ή2Ο (9,75 g, 77,90 mmol, 10,71 mL, 28% de pureza, 24,33 eq) foi adicionado em gota a gota. Após adição, a mistura foi agitada a 15°C durante 1 hora. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e 0 resíduo foi diluído com EtOAc (50 mL) e extraído com EtOAc (50 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 3-isopropil-4-nitro1 /-/-pirazol-5-carboxamida (0,6 g, 2,91 mmol, 90,96% de produção,

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96,2% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,68-3,60 (m, 1 H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 199,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-Amino-3-isopropil-1 H-pirazol-5-carboxamida

[00274] A uma mistura de 3-isopropil-4-nitro-1 H-pirazol-5carboxamida (600 mg, 2,91 mmol, 1 eq.) em MeOH (20 mL) foi adicionado Pd/C (10%, 0,1 g) sob N2. A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 várias vezes. A mistura foi agitada sob H2 (15 psi) a 15 °C durante 3 h. TLC (PE/EA = 1/1, Rf = 0,1) mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado para produzir 4-amino-3-isopropil1/-/-pirazol-5-carboxamida (500 mg, 2,68 mmol, 91,86% de produção, 90% de pureza) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,02 (spt, J = 7,0 Hz, 1 H), 1,27 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ESLCMS m/z 169,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 3-lsopropil-1,4-di-hidropirazolo[4,3-d]pirimidina-5,7-diona

[00275] A uma solução de 4-amino-3-isopropil-1 H-pirazol-5carboxamida (500 mg, 2,68 mmol, 1 eq. ) em DMF (10 mL) foi adicionado GDI (477,20 mg, 2,94 mmol, 1,1 eq.) e a mistura foi agitada a 80°C durante 12 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi

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191/652 detectado. A mistura de reação foi concentrada para produzir 3isopropil-1,4-di-hidropirazolo[4,3-d]pirimidina-5,7-diona (550 mg, cru) como um sólido marrom. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,22-3,13 (m, 1 H), 1,30 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 195,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 5,7-Dicloro-3-isopropil-1 H-pirazolo[4,3-d]pirimidina

[00276] Uma solução de 3-isopropil-1,4-di-hidropirazolo[4,3d]pirimidina-5,7-diona (500 mg, 2,57 mmol, 1 eq.) em POCI3 (10 mL) foi agitada a 100°C durante 2 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com EtOAc (50 mL), pH ajustado para 8 e extraído com EtOAc (50 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (ISCO®; 4 g de Coluna Rápida de Sílica SepaFlash®, Eluente de 0-30% Acetato de etila/éter de petróleo gradiente @ 15 mL/min.) para produzir 5,7-dicloro-3isopropil-1/-/-pirazolo[4,3-d]pirimidina (110 mg, 442,22 umol, 17,18% de produção, 92,9% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 10,39 (br s, 1 H), 3,51 (spt, J = 6,9 Hz, 1 H), 1,47 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z231,3, 233,3 [M+H]⁺.

Etapa 6: 5-Cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropi 1-1 H-pirazolo[4,3d]pirimidin-7-amina

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A uma solução de 5,7-dicloro-3-isopropil-1/-/-pirazolo[4,3-d]pirimidina (110 mg, 442,22 umol, 1 eq), 2-(1H-indol-3-il)etanamina (85,02 mg, 530,67 umol, 1,2 eq. ) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (171,46 mg, 1,33 mmol, 231,08 uL, 3 eq). A mistura foi agitada a 8 °C durante 16 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 5-cloro-/\/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-1/-/-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7amina (160 mg, 392,29 umol, 88,71% de produção, 87% de pureza) como um sólido marrom. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,67 (br s, 1 H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,14-7,08 (m, 2 H), 7,04-6,98 (m, 1 H), 3,94 (q, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,43 (brs, 1 H), 3,17 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,39 (s, 6H); ES-LCMS m/z 355,2, 357,1 [M+H]⁺.

Etapa 7: 5-(5-Fuoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropi 1-1Hpirazolo[4,3-d]pirimidin-7-amina (1-1)

[00277] A uma mistura de 5-cloro-A/-[2-(1 H-\ndol-3-il)etil]-3-isopropil1/-/-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-amina (80 mg, 196,15 umol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (33,17 mg, 235,38 umol, 1,2 eq), CS2CO3 (159,77 mg, 490,37 umol, 2,5 eq.) em 1,4-dioxano (2 mL) e água (0,5

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193/652 mL) foi adicionado Pd(dppf)CÍ2 (7,18 mg, 9,81 umol, 0,05 eq) sob N2. A mistura foi agitada sob N2 a 120°C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que 82,5% de produto foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e 0 resíduo foi diluído com DCM (20 mL) e extraído com DCM (20 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25 mm*10 um; fase móvel: [água (0,05% HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 5-(5-fIuoro-3-piridil)-A/-[2-( 1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropil-1Hpirazolo[4,3-d]pirimidin-7-amina (66,84 mg, 123,15 umol, 62,78% de produção, 96,7% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,93 (s, 1 H), 8,74 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,01 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,55 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,16 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,04 (s, 1 H), 6,94 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 6,88-6,81 (m, 1 H), 4,18 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,57 (d, J = 7,0, 13,9 Hz, 1 H), 3,21 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 1,44 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z415,9 [M+H]⁺.

Exemplo 14

Síntese de I-9

Esquema sintético:

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194/652

Etapa 1: A/,/V-Dimetil-1-(1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)metanamina

[00278] A uma solução de 1 /-/-pirrolo[2,3-c]piridina (900 mg, 7,62 mmol, 1 eq.) em n-BuOH (15 mL) foi adicionado HCHO (680,06 mg, 8,38 mmol, 623,91 uL, 37% em água, 1,1 eq. ) e hidrocloreto de Λ/metilmetanamina (695,78 mg, 8,53 mmol, 1,12 eq). A mistura foi agitada a 120°C durante 3 h. TLC (DCM/MeOH = 10/1, Rt = 0,06) indicou que o material de partida foi consumido completamente e uma maior nova mancha foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir A/,A/-dimetil-1-(1/-/-pirrolo[2,3-c]piridin-3il)metanamina (1,85 g, cru) como um óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,83 (d, J= 1,1 Hz, 1 H), 8,22 (d, J = 5,7 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,91 (d, J= 0,7 Hz, 1 H), 4,56 (s, 2 H), 2,87 (s, 6H); ES-LCMS m/z 176,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(1 H-Pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)acetonitrila

CN

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[00279] A uma solução de A/,A/-dimetil-1-(1 /-/-pirrolo[2,3-c]piridin-3il)metanamina (2,75 g, 8,55 mmol, 1 eq.) em THF (20 mL) foi adicionado sulfato de dimetila (1,08 g, 8,55 mmol, 810,81 uL, 1,0 eq) gota a gota . A mistura resultante foi agitada a 70°C por 30 min. THF foi removido e o resíduo foi dissolvido em água (15 mL). À mistura foi adicionado KCN (612,44 mg, 9,40 mmol, 1,1 eq.) e a mistura foi agitada a 110 °C durante 3 h. LCMS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi diluída com água (40 mL) e extraída com EtOAc (45 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir 2-(1/-/pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)acetonitrila (417,0 mg, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,70 (s, 1 H), 8,13 (d, J= 5,8 Hz, 1 H), 7,67 (d, J= 5,8 Hz, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 4,01 (s, 2H); ES-LCMS m/z 158,1 [M+H]+.

Etapa 3: 2-(1 /-/-Pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)etanamina

[00280] A uma solução de 2-(1/-/-pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)acetonitrila (417,0 mg, 2,65 mmol, 1 eq.) em THF (20 mL) foi adicionado BHs-Me₂S (10 M, 2,65 mL, 10 eq). A mistura foi agitada a 70 °C durante 2 h. LCMS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal foi detectado. MeOH (50 mL) foi adicionado na mistura de reação gota a gota e essa foi agitada a 70 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 2-(1/-/-pirrolo[2,3c]piridin-3-il)etanamina (423,9 mg, cru) como um sólido amarelo que foi usado na Etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,71-8,59 (m, 1 H), 8,08-8,00 (m, 1 H), 7,73-7,64 (m, 1

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Η), 7,63-7,53 (m, 1 Η), 3,09-2,92 (m, 4H); ES-LCMS m/z 162,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-9-isopropil-/V-[2-(1 H-piirolo[2,3c]piridin-3-il)etil]purin-6-amina (I-9)

[00281] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (49,35 mg, 148,88 umol, 1,0 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (57,72 mg, 446,64 umol, 77,79 uL, 3,0 eq. ) e 2-(1 H-pirrolo[2,3c]piridin-3-il)etanamina (72,00 mg, 446,64 umol, 3,0 eq}. A mistura foi agitada a 50 °C durante 15 h. LCMS mostrou 71% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover /-PrOH. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 30% a 60%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5fluoro-3-piridil)-9-isopropil-A/-[2-(1 /-/-pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)etil]purin-6amina (11,84 mg, 21,76 umol, 14,62% de produção, 96,66% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,54 (s, 1 H), 9,36 (s, 1 H), 9,05-8,98 (m, 2 H), 8,96 (s, 1 H), 8,278,22 (m, 1 H), 8,21-8,16 (m, 2 H), 5,15 (td, J= 6,7, 13,6 Hz, 1 H), 4,21 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,39 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 1,74 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 417,0 [M+H]⁺.

Exemplo 15

Síntese de 1-11

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Etapa 1: A/-(2-(5,7-Difluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)eti 1)-2-(5fluoropiridin-3-il)-9-isopropil-9H-purin-6-amina (1-11)

[00282] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (50 mg, 150,83 umol, 1 eq. ) em /-PrOH (2 mL) foi adicionado DIEA (97,47 mg, 754,17 umol, 131,36 uL, 5 eq. ) e 2-(5,7-difluoro-2metil-1 /-/-indol-3-il)etanamina (45,29 mg, 150,83 umol, 1 eq, ácido oxálico). A mistura foi agitada a 50 °C durante 16 h. LCMS mostrou 65% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% HCI) - ACN]; % de B: 50% a

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80%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir Λ/-(2-(5,7difluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-9-isopropil-9/-/purin-6-amina (53,81 mg, 36,8% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo claro. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,36 (s, 1 H), 8,85 (s, 1 H), 8,76 (s, 1 H), 8,61 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,95 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 6,49 (t, J= 10,2 Hz, 1 H), 5,11-4,99 (m, 1 H), 4,03 (s, 2 H), 3,08 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 2,31 (s, 3 H), 1,70 (d, J= 6,8 Hz, 6H);

ES-LCMS m/z 466,0 [M+H]⁺.

Exemplo 16

Síntese de 1-14

Etapa 1: terc-Butil (2-(1 H-indol-3-il)etil)carbamato

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 228/704

199/652

BocHN

[00283] A uma solução de 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (2,8 g, 17,48 mmol, 1 eq.) em anidroso DCM (30 mL) foi adicionado TEA (5,31 g, 52,44 mmol, 7,30 mL, 3 eq. ) e (Boc^O (4,58 g, 20,98 mmol, 4,82 mL, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 15 °C durante 3 h. LCMS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. H2O (20 mL) foi adicionado e a mistura foi extraída com DCM (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL x 2), secadas sobre NazSCXi anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, Rf = 0,45) para produzir tercButil (2-(1 /-/-indol-3-il)etil)carbamato (3,55 g, 13,50 mmol, 77,2% de produção, 99% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δppm 8,13 (brs, 1 H), 7,61 (d, J=7,9 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,24-7,16 (m, 1 H), 7,16-7,08 (m, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 4,59 (br s, 1 H), 3,47 (q, J= 6,4 Hz, 2 H), 2,96 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 1,46 (s, 9H); ES-LCMS m/z 283,0 [M+Na]⁺.

Etapa 2: ferc-Butil (2-(1-metil-1 H-indol-3-il)etil)carbamato

[00284] A uma solução de terc-Butil Λ/-[2-(1 H-indol-3il)etil]carbamato (1,5 g, 5,70 mmol, 1 eq. ) em THF (30 mL) foi adicionado NaH (456,30 mg, 11,41 mmol, 60% de pureza, 2,0 eq) a 0°C durante 5 min. Após adição, a mistura foi agitada a essa temperatura por 20 min e em seguida Mel (809,67 mg, 5,70 mmol, 355,12 uL, 1,0 eq) foi adicionado gota a gota a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 10°C

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 229/704

200/652 durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rt = 0,49) indicou que o material de partida foi consumido completamente e duas novas manchas formadas. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de água (50 mL) a 10°C em seguida extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na₂SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílicagel rápida (de PE/EA = 1/0 a 3/1, TLC: PE/EA = 3/1, R_f = 0,49) para produzir terc-Butil A/-[2-(1-metilindol-3-il)etil]carbamato (900 mg, 50,4% de produção, 87,6% de pureza) como um óleo incolor; ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,98 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,74-7,57 (m, 2 H), 7,557,43 (m, 1 H), 4,99 (br s, 1 H), 4,13 (s, 3 H), 3,89-3,81 (m, 2 H), 3,32 (t, J= 6,4 Hz, 2 H), 1,82 (s, 9H); ES-LCMS m/z219,0 [M-í-Bu+H]⁺.

Etapa 3: 2-(1-Metil-1H-indol-3-il)etanamina

[00285] A uma solução de terc-Butil Λ/-[2-(1 -metilindol-3il)etil]carbamato (700 mg, 2,24 mmol, 1 eq. ) em DCM (20 mL) foi adicionado HCI/MeOH (4 M, 5 mL, 8,95 eq). A mistura foi agitada a 10°C durante 4 h. TLC (EtOAc, Rt = 0,0) indicou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 2-(1-metilindol-3-il)etanamina cru (500 mg, cru, 2HCI) como um sólido branco que foi usado para a etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,58 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,36 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,20 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,14-7,04 (m, 2 H), 3,78 (s, 3 H), 3,27-3,19 (m, 2 H), 3,15-3,07 (m, 2H); ES-LCMS m/z 175,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-Cloro-9-isopropil-/V-(2-(1 -metil-1 H-indol-3-il)etil)-9Hpurin-6-amina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 230/704

201/652

[00286] A uma solução de 2,6-dicloro-9-isopropil-purina (200 mg, 827,24 umol, 1 eq.) em APrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (855,30 mg, 6,62 mmol, 1,15 mL, 8 eq.) e 2-(1-metilindol-3-il)etanamina (306,70 mg, 992,69 umol, 1,2 eq, 2HCI). A mistura foi agitada a 50°C durante 14 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover /-PrOH (10 mL) e o resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/2, R_f = 0,62) para produzir 2cloro-9-isopropi Ι-Λ/-[2-( 1 -meti I i ndol-3-i I )etil]puri η-6-am i na (250 mg, 81,9% de produção, 100% de pureza) como um óleo incolor. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,48-8,19 (m, 2 H), 7,73 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,37 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,25-6,94 (m, 3 H), 4,70-4,58 (m, 1 H), 3,773,64 (m, 5H), 3,06-2,91 (m, 2 H), 1,50 (d, J= 6,5 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 369,1,371,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 2-(5-Fluoropiridin-3-il)-9-isopropil-/V-(2-(1 -metil-1 H-indol-3il)etil)-9H-purin-6-amina (1-14)

[00287] 2-Cloro-9-isopropil-A/-[2-(1-metilindol-3-il)etil]purin-6-amina (100 mg, 271,10 umol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (95,50

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 231/704

202/652 mg, 677,76 umol, 2,5 eq), Pd(dppf)Cl2 (19,84 mg, 27,11 umol, 0,1 eq. ) e CS2CO3 (264,99 mg, 813,31 umol, 3,0 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (3 mL) e H2O (0,6 mL). O tubo selado foi aquecido a 120 °C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (50 mL) e filtrado através de SÍO2. O bolo foi lavado com EtOAc (10 mL x 2). A camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro3-piridil)-9-isopropil-A/-[2-( 1 -metilindol-3-il)etil]puriη-6-amina (53,81 mg, 36,8% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,36 (s, 1 H), 9,11 (br s, 1 H), 8,84 (s, 1 H), 8,75 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,60 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,20 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,07 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,02-6,93 (m, 2 H), 5,09 (td, J= 6,8, 13,6 Hz, 1 H), 4,16-4,10 (m, 2 H), 3,61 (s, 3 H), 3,20 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 1,72 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z430,2 [M+H]⁺.

Síntese de I-7

Exemplo 17

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 232/704

203/652

Etapa 1: A/,/V-Dimetil-1-(1H-pirrolo[3,2-ô]piridin-3-il)metanamina

[00288] A uma solução de 1 /-/-pirrolo[3,2-b]piridina (500 mg, 4,23 mmol, 1 eq.) em n-BuOH (5 mL) foi adicionado HCHO (377,65 mg, 4,65 mmol, 346,47 uL, 37% em água, 1,1 eq.) e A/-metilmetanamina (379,43 mg, 4,65 mmol, 1,1 eq, sal de HCI). A mistura foi agitada a 120°C durante 3 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer A/,A/-dimetil-1-(1 H-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)metanamina (559,7 mg, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,32 (dd, J= 1,1,4,6 Hz, 1 H), 7,80 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,16 (dd, J= 4,8, 8,3 Hz, 1 H), 3,80 (s, 2 H), 2,28 (s, 6H); ES-LCMS m/z 176,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(1 H-Pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)acetonitrila

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 233/704

204/652

CN

[00289] A uma solução de A/,A/-dimetil-1-(1/-/-pirrolo[3,2-í?]piridin-3il)metanamina (200,00 mg, 1,14 mmol, 1 eq. ) em THF (1,5 mL) foi adicionado sulfato de dimetila (143,96 mg, 1,14 mmol, 108,24 uL, 1,0 eq) gota a gota. A mistura resultante foi agitada a 70 °C durante 30 min. O solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em água (1,2 mL). À mistura foi adicionado KCN (81,76 mg, 1,26 mmol, 1,1 eq.) e a mistura foi agitada a 110°C durante 3 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi diluída com água (5 mL) e extraída com EtOAc (15 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 2-(1/-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)acetonitrila (131,7 mg, 662,72 umol, 58,1% de produção, 79,1% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,37-8,29 (m, 1 H), 7,87-7,78 (m, 1 H), 7,64-7,51 (m, 1 H), 7,25-7,14 (m, 1 H), 4,01 (d, J= 0,9 Hz, 2H); ESLCMS m/z 158,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-(1 H-Pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina

[00290] A uma solução de 2-(1/-/-pirrolo[3,2-ó]piridin-3-il)acetonitrila (131,70 mg, 662,72 umol, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado BH3Me2S (1 mL, 10 M em Me2S) gota a gota. A mistura de reação foi agitada a 70°C durante 2 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e um pico principal foi detectado. MeOH (30

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 234/704

205/652 mL) foi adicionada gota a gota e a mistura foi agitada a 70 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 2(1/-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina (50,00 mg, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,30 (d, J= 4,6 Hz, 1 H), 7,80 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 7,16 (dd, J= 4,6, 8,2 Hz, 1 H), 3,35 (s, 2 H), 3,03 (s, 2H); ES-LCMS m/z 162,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-Cloro-9-isopropil-/V-[2-(1 H-pirrolo[3,2-b]piridin-3il)etil]purin-6-amina

[00291] A uma solução de 2,6-dicloro-9-isopropil-purina (76,49 mg, 320,46 umol, 1,2 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (172,57 mg, 1,34 mmol, 232,57 uL, 5,0 eq.) e 2-(1/-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3il)etanamina (50,00 mg, 267,05 umol, 1 eq). A mistura foi agitada a 50°C durante 12 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e 55% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada e 0 resíduo foi purificado por TLC preparativa (S1O2, DCM/MeOH = 10/1, Rt= 0,65) para produzir 2-cloro-9-isopropilΛ/-[2-(1/-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etil]purin-6-amina (25,00 mg, 70,26 umol, 26,3% de produção, 100% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,30 (dd, J= 1,3, 4,8 Hz, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 7,77 (dd, J= 1,1,8,2 Hz, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 7,14 (dd, J= 4,8, 8,3 Hz, 1 H), 4,79-4,68 (m, 1 H), 3,96-3,87 (m, 2 H), 3,20 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 1,56 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z356,1,358,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-9-isopropil-/V-[2-(1 H-piirolo[3,2b]piridin-3-il)etil]purin-6-amina (I-7)

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206/652

[00292] 2-Cloro-9-isopropil-A/-[2-(1 H-pi rrolo[3,2-b]pi ridi n-3il)etil]purin-6-amina (25,00 mg, 70,26 umol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3piridil)borônico (24,75 mg, 175,65 umol, 2,5 eq), CS2CO3 (68,68 mg, 210,78 umol, 3,0 eq.) e Pd(dppf)CÍ2 (5,14 mg, 7,03 umol, 0,1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (2 mL) e água (0,4 mL). O tubo selado foi aquecido a 120 °C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e 60% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (10 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (condição HCI, coluna: Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 5% a 35%, 12 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3piridil)-9-isopropil-A/-[2-(1 /-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etil]purin-6-amina (8,83 mg, 16,14 umol, 23,0% de produção, 96,1% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido branco.; ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,37 (s, 1 H), 8,92 (s, 1 H), 8,78 (s, 1 H), 8,69 (s, 1 H), 8,51 (s, 1 H), 8,43 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 5,06 (td, J = 6,8, 13,6 Hz, 1 H), 4,22 (t, J= 6,4 Hz, 2 H), 3,38 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 1,70 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 417,2 [M+H]⁺.

Exemplo 18

Síntese de 1-13

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207/652

Etapa 1: Λ/-(2-(1 H-Benzo[d]imidazol-1 -il)etil)-2-cloro-9-isopropil-9Hpurin-6-amina

[00293] A uma solução de 2,6-dicloro-9-isopropil-purina (200 mg, 827,24 umol, 1 eq.) em /-PrOH (8 mL) foi adicionado DIEA (106,91 mg, 827,24 umol, 144,09 uL, 1 eq.) e 2-(benzimidazol-1-il)etanamina (160,02 mg, 992,69 umol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 50°C durante 16 h. LCMS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi

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208/652 concentrada sob pressão reduzida para remover /-PrOH para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia rápida em coluna de sílica-gel (de DCM/MeOH = 1/0 a 10/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, R_f = 0,33) para produzir A/-[2-(benzimidazol-1-il)etil]-2-cloro-9-isopropilpurin-6-amina (275 mg, 93,4% de produção, 100% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,98-7,71 (m, 2 H), 7,54 (d, J= 7,5 Hz, 2 H), 7,38-7,18 (m, 2 H), 6,77 (br s, 1 H), 4,86-4,67 (m, 1 H), 4,53 (t, J = 6,0 Hz, 2 H), 4,02 (br s, 2 H), 1,69-1,46 (m, 6H); ES-LCMS m/z 356,1,357,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: M-(2-(1 H-Benzo[d]imidazol-1 -iI)etil)-2-(5-fIuoropiridin-3il)-9-isopropil-9H-purin-6-amina (1-13)

[00294] A/-[2-(Benzimidazol-1 -il)etil]-2-cloro-9-isopropil-purin-6amina (120 mg, 337,24 umol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (95,04 mg, 674,49 umol, 2 eq), CS2CO3 (329,64 mg, 1,01 mmol, 3,0 eq. ) e Pd(dppf)Cl2 (12,34 mg, 16,86 umol, 0,05 eq.) em 1,4-dioxano (5 mL) e H2O (1 mL) foi desgaseificado e recarregado com N2. A mistura foi aquecida a 80 °C durante 12 h. LC-MS mostrou 58% de composto desejado. A mistura de reação foi vertida em H2O (30 mL) e em seguida extraída com EtOAc (20 mL x 3). A fase orgânica foi combinada, lavada com solução salina (10 mL), secada sobre anidroso Na2SÜ4 e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v) ACN]; % de B: 38% a 68%, 10 min.) para produzir A/-[2-(benzimidazol1 -il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6-amina (31,40 mg, 22,4%

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209/652 de produção, 100% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,08 (br s, 1 H), 8,43 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,17 (s, 1 H), 8,15-7,95 (m, 2 H), 7,67 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,38 (d, J= 8,2 Hz, 1

H), 7,26 (t, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,17-7,00 (m, 1 H), 4,88-4,83 (m, 1 H), 4,62 (t, J = 5,4 Hz, 2 H), 4,20 (br s, 2 H), 1,63 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 417,1 [M+H]⁺.

Síntese de 1-8

Exemplo 19

Etapa 1:2,6-Dicloro-9-isopropil-purjna

[00295] A uma solução de 2,6-dicloro-9H-purina (20 g, 105,82 mmol,

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210/652 eq.) em DMSO (160 mL) foi adicionado K2CO3 (73,13 g, 529,09 mmol, 5 eq. ) e 2-bromopropano (65,07 g, 529,09 mmol, 49,67 mL, 5 eq). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1 /1, R_f = 0,45) indicou que 0 material de partida foi consumido completamente e uma maior nova mancha foi detectada. A mistura de reação foi diluída com água (200 mL) e extraída com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavada com água (80 mL x 3), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia rápida em coluna de sílica-gel (de PE / EtOAc = 5/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,45) para produzir 2,6-dicloro-9-isopropil-purina (3,52 g, 14,75 mmol, 13,9% de produção, 96,8% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,66 (s, 1 H), 4,97-4,89 (m, 1 H), 1,65 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z231,0, 232,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-Cloro-9-isopropil-/V-[2-(1 H-pirrolo[3,2-c]piridin-3il)etil]purin-6-amina

[00296] A uma solução de 2,6-dicloro-9-isopropil-purina (148,07 mg, 620,33 umol, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (400,86 mg, 3,10 mmol, 540,24 uL, 5,0 eq. ) e 2-(1 H-pirrolo[3,2-c]piridin-3il)etanamina (100 mg, 620,33 umol, 1 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 12 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e 33% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover 0 solvente. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de DCM/MeOH = 100/1 a 5/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, R_f = 0,68) para

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211/652 produzir 2-cloro-9-isopropil-A/-[2-(1 /-/-pirrolo[3,2-c]piridin-3-il)etil]purin-6amina (74,5 mg, 33,8% de produção, cru) como um sólido amarelo; ESLCMS m/z 356,0, 357,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-9-isopropil-/V-[2-(1 H-piirolo[3,2c]piridin-3-il)etil]purin-6-amina (I-8)

[00297] 2-Cloro-9-isopropil-A/-[2-(1 H-pi rrolo[3,2-c]pi ridi n-3il)etil]purin-6-amina (74,5 mg, 104,69 umol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3piridil)borônico (36,88 mg, 261,72 umol, 2,5 eq), CS2CO3 (102,33 mg, 314,06 umol, 3,0 eq.) e Pd(dppf)Cl2 (7,66 mg, 10,47 umol, 0,1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (3 mL) e água (0,6 mL). O tubo selado foi aquecido a 120 °C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente, 56% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (15 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (condição de HCI, coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 15% a 45%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-9isopropil-A/-[2-(1 /-/-pirrolo[3,2-c]piridin-3-il)etil]purin-6-amina (22,19 mg, 42,20 umol, 40,3% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido branco.; ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δppm 9,53 (s, 1 H), 9,31 (s, 2 H), 9,00-8,94 (m, 2 H), 8,28 (d, J= 6,5 Hz, 1 H), 7,85 (d, J= 6,8 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 5,14 (d, J= 6,7, 13,5 Hz, 1 H), 4,23 (s, 2 H), 3,41 (t, J=6,7 Hz, 2H), 1,74 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z417,2 [M+H]⁺.

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212/652

Exemplo 20

Síntese de 1-21

t-21

Etapa 1:4,6-Dicloro-2-(5-fluoro-3-pirjdil)pirjmjdina

[00298] 4,6-Dicloro-2-iodo-pirimidina (1 g, 3,58 mmol, 1 eq), ácido (5fluoro-3-piridil)borônico (503,91 mg, 3,58 mmol, 1 eq), NazCCb (1,14 g, 10,73 mmol, 3,0 eq.) e Pd(dppf)Cl2 (261,67 mg, 357,62 umol, 0,1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (14 mL) e água (2,4 mL). O tubo selado foi aquecido a 80 °C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. LCMS mostrou que 58% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (50

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 242/704

213/652 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf= 0,80) para produzir 4,6-dicloro-2-(5fluoro-3-piridil)pirimidina (275 mg, 1,13 mmol, 37,8% de produção, 100% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,34 (t, J= 1,4 Hz, 1 H), 8,66 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,51-8,43 (m, 1 H), 7,75 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 243,9, 245,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-pirjdil)-6-isopropóxi-pirjmidina

A uma solução de /-PrOH (14,78 mg, 245,85 umol, 18,82 uL, 1 eq.) em THF (4 mL) foi adicionado NaH (11,80 mg, 295,02 umol, 60% em óleo mineral, 1,2 eq}. A mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min. 4,6-dicloro2-(5-fluoro-3-piridil)pirimidina (60 mg, 245,85 umol, 1,0 eq} foi adicionado na solução acima e a mistura foi agitada a 15 °C durante 12 h. LCMS mostrou que 83% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi diluído com água (30 mL) e extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir 4cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-pirimidina (50 mg, 167,92 umol, 68,3% de produção, 89,9% de pureza) como um sólido marrom, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,39-9,28 (m, 1 H), 8,68-8,58 (m, 1 H), 8,50-8,39 (m, 1 H), 6,85 (s, 1 H), 5,57 (m, 1 H), 1,44 (d, J = 6,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 268,0, 270,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-isopropóxiPetição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 243/704

214/652 pjrjmjdin-4-amjna (1-21)

[00299] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxipirimidina (50 mg, 167,92 umol, 1,0 eq. ) em /-PrOH (4 mL) foi adicionado DIEA (65,11 mg, 503,76 umol, 87,74 uL, 3,0 eq. ) e 2-(1/-/indol-3-il)etanamina (134,52 mg, 839,60 umol, 5 eq). A mistura foi agitada a 70°C durante 12 h. LCMS mostrou que os materiais de partida foram mantidos e não havia composto desejado. A mistura de reação foi adicionada em um tubo de micro-onda e aquecida a 125 °C durante 3 h sob irradiação de micro-ondas. LCMS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e 28% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-AZ[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-6-isopropóxi-pirimidin-4-amina (26,35 mg, 52,45 umol, 31,2% de produção, 99,7% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,15 (s, 1 H), 8,66 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,32 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,60 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,29 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,13-6,95 (m, 3 H), 5,69 (m, 1 H), 5,04 (m, 1 H), 3,78 (m, 2 H), 3,09 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 1,40-1,33 (m, 6H); ES-LCMS m/z 392,1 [M+H]⁺.

Exemplo 21

Síntese de I-23

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215/652

Etapa 1: /erc-Butil /V-(2-bromo-4,6-difluoro-fenil)carbamato

[00300] Uma mistura de 2-bromo-4,6-difluoro-anilina (5 g, 24,04 mmol, 1 eq), BOC2O (15,74 g, 72,11 mmol, 16,57 mL, 3 eq), DMAP (293,67 mg, 2,40 mmol, 0,1 eq. ) em THF (50 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e em seguida a mistura foi agitada a 70 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 di-BOC intermediário foi detectado.

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216/652

A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi dissolvido em MeOH (50 mL) e K2CO3 (9,97 g, 72,11 mmol, 3 eq) foi adicionada. A mistura foi agitada a 70 °C durante 4 h. LC-MS mostrou que 0 intermediário foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi filtrada, 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado água (100 mL), extraída com EtOAc (60 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo. Ao resíduo foi adicionado n-heptano (100 mL) e em seguida foi agitado por 1 h a 15 °C. A suspensão foi filtrada, 0 bolo foi lavado com n-heptano (30 mL x 2), secado sob vácuo para produzir terc-Butil A/-(2-bromo-4,6-difluoro-fenil)carbamato (4,15 g, 13,47 mmol, 56,0% de produção, 100% de pureza) como um sólido branco, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,18 (td, J = 2,3, 7,7 Hz, 1 H), 6,89 (dt, J = 2,8, 8,9 Hz, 1 H), 5,91 (s, 1 H), 1,51 (s, 9H); ES-LCMS m/z251,9, 253,9 [M-í-Bu+H]⁺.

Etapa 2: ferc-Butil A/-[2,4-difluoro-6-(2trimetilsililetinil)fenil]carbamato

BocHN F

[00301] Uma mistura de terc-Butil A/-(2-bromo-4,6-difluorofenil)carbamato (4 g, 12,98 mmol, 1 eq), etinil(trimetil)silano (2,55 g, 25,96 mmol, 3,60 mL, 2,0 eq), TEA (3,94 g, 38,95 mmol, 5,42 mL, 3,0 eq), Cul (247,24 mg, 1,30 mmol, 0,1 eq. ) e Pd(PPh3)2CÍ2 (455,60 mg, 649,10 umol, 0,05 eq.) em DMF (80 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, e em seguida a mistura foi agitada a 100 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 MS desejado foi detectado. A mistura de

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217/652 reação foi interrompida bruscamente pela adição de água (300 mL), extraída com EtOAc (200 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 20/1, R_f = 0,31) para produzir terc-Butil Λ/-[2,4difluoro-6-(2-trimetilsililetinil)fenil]carbamato (2,05 g, 5,04 mmol, 38,8% de produção, 80% de pureza) como um sólido marrom preto. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,00-6,94 (m, 1 H), 6,90-6,81 (m, 1 H), 6,10 (s, 1 H), 1,51 (s, 9H), 0,27 (m, 9H); ES-LCMS m/z270,0 [M-FBu+H]⁺.

Etapa 3: 5,7-Difluoro-1H-indol

[00302] A EtOH (100 mL) foi adicionado Na (791,23 mg, 34,42 mmol, 8 eq) lentamente. Depois de ser agitado por 1h a 15 °C, terc-Butil Λ/[2,4-difluoro-6-(2-trimetilsililetinil)fenil]carbamato (1,75 g, 4,30 mmol, 1 eq) foi adicionado à solução acima. A mistura foi agitada a 85 °C durante 16 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover EtOH. Ao resíduo foi adicionado água (100 mL) e extraída com EtOAc (60 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 20/1, R_f = 0,17) para produzir 5,7difluoro-1 H-indole (410 mg, 1,87 mmol, 43,5% de produção, 70% de pureza) como um óleo preto. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,31 (s, 1 H), 7,29-7,22 (m, 1 H), 7,09 (dd, J = 2,1,9,2 Hz, 1 H), 6,73 (ddd, J = 2,2, 9,4, 11,1 Hz, 1 H), 6,59-6,51 (m, 1 H); ES-LCMS: Nenhuma massa

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 247/704

218/652

correta foi encontrada.

Etapa 4: 5,7-Difluoro-1 H-indol-3-carbaldeído

[00303] A uma solução de DMF (10 mL) foi adicionado POCI3 (350,46 mg, 2,29 mmol, 212,40 uL, 2,0 eq) gota a gota a -20°C durante um período de 10 mins sob Nz.Após ser agitado por 1 h, 5,7-difluoro-1 Hindol (250 mg, 1,14 mmol, 1 eq. ) em DMF (2 mL) foi adicionado à solução acima durante a qual a temperatura foi mantida abaixo de 20°C. A mistura de reação foi aquecida a 15°C e agitada por 1 hora. LCMS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e 0 MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de NaHCOs (30 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre anidroso Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,40) para produzir 5,7-difluoro-1 H-indol-3carbaldeídeo (200 mg, 993,71 umol, 86,9% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, Acetona) δ ppm 11,74 (s, 1 H), 10,06 (d, J = 0,8 Hz, 1 H), 8,38 (s, 1 H), 7,74 (dd, J = 2,3, 9,0 Hz, 1 H), 7,03 (ddd, J = 2,3, 9,5, 11,3 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z 182,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 5,7-Difluoro-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol

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[00304] A uma solução de 5,7-difluoro-1 H-indol-3-carbaldeído (200 mg, 993,71 umol, 1 eq. ) em nitronetano (8 mL) foi adicionado NHLOAc (229,79 mg, 2,98 mmol, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 110 °C durante 16 h. LC-MS mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e o MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover nitronetano. O resíduo foi diluído com EtOAc (50 mL), lavado com água (10 mL), solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 5,7-difluoro-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (160 mg, 599,56 umol, 60,3% de produção, 84% de pureza) como um sólido marrom, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,23 (d, J = 13,6 Hz, 1 H), 7,74-7,58 (m, 2 H), 7,26-7,11 (m, 1 H), 6,91-6,75 (m, 1 H); ES-LCMS m/z225,0 [M+H]⁺.

Etapa 6: 2-(5,7-Difluoro-1 H-indol-3-il)etanamina

[00305] A uma solução de 5,7-difluoro-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (50 mg, 187,36 umol, 1 eq. ) em THF (5 mL) foi adicionada gota a gota LAH (1 M, 936,82 uL, 5 eq) a 0°C. Após adição, a mistura foi agitada a 80°C durante 2 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi diluída com THF (50 mL), interrompida bruscamente por adição de água (0,05 mL), seguida por 10% de NaOH (0,05 mL) e água (0,15 mL) em sequência a 0°C. Após ser agitado por 30 min, a mistura foi filtrada através de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 2-(5,7-difluoro-1 Hindol-3-il)etanamina (36 mg, cru) como um óleo amarelo, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,18 (s, 1 H), 7,13-7,01 (m, 1 H), 6,73-6,67 (m, 1 H), 2,97-2,79 (m,

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4H); ES-LCMS m/z 197,2 [M+H]⁺.

Etapa 7: A/-[2-(5,7-Difluoro-1H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-9isopropil-purin-6-amina (I-23)

[00306] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (50 mg, 164,55 umol, 1 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (106,33 mg, 822,73 umol, 143,30 uL, 5 eq. ) e 2-(5,7-difluoro-1 Hindol-3-il)etanamina (35,51 mg, 181,00 umol, 1,1 eq). A mistura foi agitada a 60°C durante 16 h. LC-MS mostrou que restaram 21% do material de partida e 66% de composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover /-PrOH para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% HCI) - ACN]; %de B: 46% a 76%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir A/-[2-(5,7-difluoro-1 H-indol-3-il)etil]2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6-amina (20,82 mg, 36,75 umol, 22,3% de produção, 99% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,45 (s, 1 H), 9,20 (s, 1 H), 8,90 (s, 1 H), 8,83 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,11 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,67-6,58 (m, 1 H), 5,11 (m, 1 H), 4,13 (s, 2 H), 3,17 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 1,73 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z452,2 [M+H]⁺.

Exemplo 22

Síntese de 1-16

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Etapa 1: Cloreto de 5-Fluoropiridine-3-carbonjla

[00307] A uma solução de ácido 5-fluoropiridina-3-carboxílico (7 g, 49,61 mmol, 1 eq. ) em SOCI2 (57,40 g, 482,47 mmol, 35,00 mL, 9,73 eq) foi adicionado DMF (0,1 mL) a 0°C. Após adição, a mistura foi agitada a 50°C durante 2 h. TLC (PE/EA = 1/1, R_f = 0,75, MeOH adicionado) mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura foi concentrada para produzir 0 cloreto de 5fluoropiridina-3-carbonila (7 g, cru) como um óleo amarelo claro, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação.

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Etapa 2: 5-Fluoropiridina-3-carboxamjda o

[00308] A uma solução de ΝΗ3Ή2Ο (31,85 g, 254,47 mmol, 35,00 mL, 28% de pureza, 5,80 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado a solução de cloreto de 5-fluoropiridina-3-carbonila (7 g, 43,87 mmol, 1 eq. ) em THF (30 mL) gota a gota a 0 °C sob N2. A mistura foi agitada a 15 °C durante 1 hora. LCMS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente e um pico principal com a MS desejada foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida par remover 0 solvente. O resíduo foi diluído com EtOAc (50 mL) e extraído com EtOAc (50 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir 5-fluoropiridina-3-carboxamida (6 g, 42,39 mmol, 96,6% de produção, 99,0% de pureza) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,87 (s, 1 H), 8,62 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,06-8,01 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 141,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-Fluoropiridina-3-carbonjtrjla

XJ

[00309] A uma mistura de 5-fluoropiridina-3-carboxamida (6 g, 42,39 mmol, 1 eq. ) e TEA (6,43 g, 63,59 mmol, 8,85 mL, 1,5 eq. ) em DCM (60 mL) foi adicionado TFAA (13,36 g, 63,59 mmol, 8,85 mL, 1,5 eq) gota a gota a 15°C sob N2. A mistura foi agitada a 15°C durante 12 h. TLC (PE/EA = 1/1, Rf = 0,89) indicou que 0 material de partida foi consumido completamente e uma nova mancha foi formada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (ISCO®; 24 g de Coluna Rápida de Silica SepaFlash®, Eluente de

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0-20% Acetato de etila/éter de petróleo gradiente @ 30 mL/ min.) para produzir 5-fluoropiridina-3-carbonitrila (4,7 g, 36,57 mmol, 86,3% de produção, 95,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,82-8,71 (m, 2 H), 8,14-8,06 (m, 1 H); ES-LCMS: Nenhuma massa correta foi encontrada.

Etapa 4: 5-Fluoro-/V-(4-isopropil-1 H-pirazol-5-il)piridina-3carboxamidina

[00310] Uma mistura de 5-fluoropiridina-3-carbonitrila (1,02 g, 7,91 mmol, 1 eq.) e 4-isopropil-1 /-/-pirazol-5-amina (880,27 mg, 6,33 mmol, 0,8 eq.) em xileno (20 mL) foi agitada por 30 minutos a 70°C. Em seguida AIMes (2 M, 4,75 mL, 1,2 eq) foi adicionado a mistura acima e, uma porção a 70°C sob N2. A mistura foi agitada a 100 °C durante 15 h. LC-MS mostrou que 16% do MS desejado foi detectado. A mistura foi interrompida bruscamente por MeOH (20 mL), concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (ISCO®; 12 g de Coluna Rápida de Sílica SepaFlash®, Eluente de 0-10% MeOH/DCM éter gradiente @ 30 mL/ min.) para produzir 5fluoro-A/-(4-isopropi 1-1 /-/-pirazol-5-il)piridina-3-carboxamidina (600 mg, 1,94 mmol, 24,5% de produção, 80% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,96 (s, 1 H), 8,54 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,11 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 3,06 (m, 1 H), 1,25 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z248,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ol

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[00311] A uma mistura de 5-fluoro-A/-(4-isopropil-1/-/-pirazol-5il)piridina-3-carboxamidina (100 mg, 323,53 umol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (10 mL) e THF (5 mL) foi adicionado trifosgene (33,60 mg, 113,24 umol, 0,35 eq.) e em seguida a mistura foi agitada por 15 h a 80°C. LC-MS mostrou que 57,5% de MS desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 2-(5-fluoro-3-piridil)8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ol (88 mg, cru) como um sólido marrom, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação.¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,90-8,85 (m, 2 H), 8,18 (d, J = 2,3, 8,6 Hz, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 3,04 (d, J = 6,9, 13,7 Hz, 1 H), 1,26 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 274,3 [M+H]⁺.

Etapa 6: 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-pirÍdil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a] [1,3,5]triazina

[00312] Uma mistura de 2-(5-fIuoro-3-piridiI)-8-isopropil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ol (88 mg, 322,03 umol, 1 eq.) em POCI3 (8,1 g, 52,83 mmol, 4,91 mL, 164,04 eq) foi agitada por 2 h a 100°C. LC-MS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo, e então diluída com DCM (20 mL) e extraída com DCM (20 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (15 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para

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225/652 fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (ISCO®; 12 g de Coluna Rápida de Sílica SepaFlash®, Eluente de 0—15% Acetato de etila/éter de petróleo gradiente @ 30 mL/ min.) para produzir 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina (15 mg, 49,78 umol, 15,5% de produção, 96,8% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 9,49 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,42 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 8,17 (s, 1 H), 3,35 (d, J = 6,7, 13,9 Hz, 1 H), 1,43 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 292,0, 294,0 [M+H]⁺.

Etapa 7: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-jndol-3-il)etil]-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (1-16)

[00313] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (15 mg, 49,78 umol, 1 eq), DIEA (19,30 mg, 149,33 umol, 26,01 uL, 3 eq. ) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (9,57 mg, 59,73 umol, 1,2 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi agitada por 3 h a 50°C. LCMS mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Kinetex XB-C18 150 mm * 30 mm, 5 pm;fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 17 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2(1 H-\ndol-3-il)etil]-8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (6,17 mg, 11,70 umol, 23,5% de produção, 99,5% de pureza, 3HCI) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,14 (s, 1 H), 8,81 (br s, 1 H), 8,56 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,69-7,63 (m, 1 H), 7,18

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7,12 (m, 1 Η), 7,00-6,94 (m, 3 Η), 4,04 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 3,27-3,20 (m, 1 H), 3,17 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 1,37 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 416,2 [M+H]⁺.

Exemplo 23

Síntese de 1-24

Etapa 1: [5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-morfolinometanona (I-24)

[00314] A uma solução de ácido 5-(5-fIuoro-3-piridiI)-7-[[(3Λ?)-2,3,4,9tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 256/704

227/652 carboxílico (25 mg, 55,60 μηποΙ, 1 eq. ) em DCM (3 mL) foi adicionado HATU (31,71 mg, 83,40 qmol, 1,5 eq), TEA (11,25 mg, 111,20 μηποΙ, 15,48 uL, 2 eq.) e morfolina (9,69 mg, 111,20 μηποΙ, 9,79 μί, 2 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12 h sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, em seguida água (30 mL) foi adicionada e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 μιτι; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir [5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-morfolinometanona (8,45 mg, 13,61 μηποΙ, 24,4% de produção, 100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,24 (s, 1 H), 8,66 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,55-8,48 (m, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 7,39 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,10-7,01 (m, 2 H), 6,996,93 (m, 1 H), 4,54 (br s, 1 H), 3,80 (s, 8H), 3,37-3,34 (m, 1 H), 3,203,05 (m, 1 H), 3,04-2,87 (m, 2 H), 2,36 (br s, 1 H), 2,28 (d, J= 6,2 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z512,3 [M+H]⁺.

Exemplo 24

Síntese de 1-25

Esquema sintético:

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Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-metóxi-/V-metil-7-[[(3fí)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-

[00315] A uma solução de ácido 5-(5-fIuoro-3-piridiI)-7-[[(3Λ?)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3carboxílico (30 mg, 63,06 pmol, 1 eq. ) em DCM (4 mL) foi adicionado HATU (35,97 mg, 94,59 pmol, 1,5 eq), TEA (12,76 mg, 126,12 pmol, 17,55 pL, 2 eq.) e A/-metoximetanamina (12,30 mg, 126,12 pmol, 2 eq, HCI). A mistura foi agitada a 20°C durante 1 h sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, em seguida água (30 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. A mistura foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-metóxi-AZmetil-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carboxamida (15,98 mg, 26,86 pmol, 42,6% de produção,

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100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δppm 9,10 (s, 1 H), 8,82 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,67 (s, 1 H), 8,47 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 7,39 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,35-7,25 (m, 2 H), 7,05 (t,

J= 7,0 Hz, 1 H), 7,00-6,91 (m, 1 H), 4,69 (br s, 1 H), 3,87 (s, 3 H), 3,43 (s, 3 H), 3,18-2,95 (m, 4H), 2,37 (dd, J= 5,6, 10,2 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 486,2 [M+H]⁺.

Exemplo 25

Síntese de 1-26

1-26

Etapa 1: (3fí)-/V-(3-isopropil-5-fenil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-26)

[00316] Uma mistura de 7-cloro-3-isopropil-5-fenil-pirazolo[1,5a]pirimidina (60 mg, 218,15 pmol, 1 eq), (3R)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (44,69 mg, 239,96 pmol, 1,1 eq), DIEA (84,58 mg,

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654,44 μηποΙ, 113,99 μΙ_, 3 eq. ) em /-PrOH (2 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, em seguida a mistura foi agitada a 80 °C durante 12 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm*10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir (3R)-A/-(3-isopropil-5-fenilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (45,09 mg, 91,19 μιτιοΙ, 41,8% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,12 (s, 1 H), 7,97 (d, J = 7,7 Hz, 2 H), 7,68-7,50 (m, 3 H), 7,39 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,27 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,09-7,01 (m, 1 H), 7,00-6,92 (m, 1 H), 6,78 (s, 1 H), 4,56 (m, 1 H), 3,39-3,33 (m, 2 H), 3,16-2,90 (m, 3 H), 2,53-2,07 (m, 2 H), 1,39 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z422,2 [M+H]⁺.

Exemplo 26

Síntese de l-27a

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[(5S)-4,5,6,7-tetraPetição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 260/704

231/652 hidro-1 H-benzimidazol-5-il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-27)

[00317] Uma mistura de 4,5,6,7-tetra-hidro-1 /-/-benzimidazol-5amina (62 mg, 451,95 μιτιοΙ, 1 6Q),7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (145,99 mg, 451,95 pmol, 1 eq. ) e DIEA (175,24 mg, 1,36 mmol, 236,17 μΙ_, 3 eq. ) em APrOH (3 mL) was agitada a 90°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 20/0 para 0/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,10). A fração desejada foi secada sob pressão reduzida à secura. O resíduo foi separado por SFC preparativa (coluna: AD (250 mm*30mm, 5 um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O IPA]; % de B: 35% a 35%, min.) para fornecer 0 Pico 1 (Tr = 5,226) e Pico 2 (Tr = 5,531). O Pico 1 foi concentrado sob pressão reduzida à secura para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para fornecer 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-[(5S)4,5,6,7-tetra-hidro-1 /-/-benzimidazol-5-il]pirazolo[1,5-<a]pirimidin-7amina (25,12 mg, 50,16 pmol, 11,1% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) (Tr = 5,226, [a²⁵’⁵ _D = -18,573 (0,105 g/100 mL em MeOH, ee% = 97,4%) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,08 (s, 1 H), 8,83 (s, 1 H), 8,77 (s, 1 H), 8,47 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 8,25 (s, 1 H), 7,07 (s, 1 H), 4,72 (br s, 1 H), 3,45-3,31 (m, 2 H), 3,07-2,87 (m, 3 H), 2,44-2,35 (m, 1 H), 2,33-2,22 (m, 1 H), 1,39 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 392,2 [M+H]⁺.

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Exemplo 27

Síntese de l-28a

Esquema sintético:

1-28

Etapa 1: 2-(4-Metoxifenjl)propanonitrjlo

[00318] A uma solução agitada de 1-(4-metoxifenil)etanol (2 g, 13,14 mmol, 1 eq. ) em DCM (10 mL) foi adicionado a solução de TMSCN (2,61 g, 26,28 mmol, 3,29 mL, 2 eq. ) e tribromoindigano (465,90 mg,

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1,31 mmol, 0,1 eq. ) em DCM (10 mL) gota a gota durante 30 min. Em seguida, a mistura resultante foi agitada a 30 °C durante 15 min. TLC (ΡΕ/EtOAc = 10/1, Rf = 0,55) mostrou que o composto desejado foi detectado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílicagel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, R_f = 0,55) para fornecer 2-(4-metoxifenil)propanonitrilo(1 g, 5,58 mmol, 42,5% de produção, 90,0% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,27 (s, 2 H), 6,97-6,86 (m, 2 H), 3,91-3,79 (m, 4H), 1,63 (d, J = 7,3 Hz, 3 H).

Etapa 2: 2-(4-Metoxifenil)propan-1 -amina

[00319] A uma solução de 2-(4-metoxifenil)propanonitrilo (800 mg, 4,47 mmol, 1 eq. ) em MeOH (40 mL) foi adicionado Raney-Ni (0,5 g). A mistura foi desgaseificada e purgada com H2 três vezes e a mistura foi agitada a 30 °C durante 5 h sob atmosfera de H2. TLC (ΡΕ/EtOAc = 10/1, Rf = 0,10) mostrou 0 reagente 1 quase consumido e uma nova mancha foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de DCM/MeOH = 10/1 a 5/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, Rf = 0,60) para fornecer 2-(4-metoxifenil)propan-1 -amina (710 mg, 3,87 mmol, 86,6% de produção, 90,0% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,13 (d, J= 8,5 Hz, 2 H), 6,87 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 3,80 (s, 3 H), 2,88-2,69 (m, 3 H), 1,23 (d, J= 6,8 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 166,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[2-(4metoxifenil)propil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

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[00320] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (250 mg, 773,93 pmol, 1,0 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (300,07 mg, 2,32 mmol, 404,41 pL, 3,0 eq. ) e 2-(4-metoxifenil)propan-1 -amina (200 mg, 1,09 mmol, 1,41 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,75) para fornecer 5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-A/-[2-(4-metoxifenil)propil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7amina (300 mg, 715,15 pmol, 92,4% de produção, 100,0% de pureza) como sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 9,02 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 8,53 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,19-8,12 (m, 1 H), 7,86 (s, 1 H), 7,22 (d, J= 8,6 Hz, 2 H), 6,94-6,86 (m, 2 H), 6,38 (t, J= 5,7 Hz, 1 H), 6,19 (s, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,68-3,53 (m, 2 H), 3,39-3,29 (m, 1 H), 3,22-3,13 (m, 1 H), 1,47-1,39 (m, 9H); ES-LCMS m/z420,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 4-[(1 S)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-1 -metil-etil]fenol (I-28)

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[00321 ] 5-(5-Fl uoro-3-pi ridi I )-3-isopropi I-Λ/-[2-(4metoxifenil)propil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (290,00 mg, 691,31 pmol, 1 eq) foi adicionado em HBr (25 mL, 60% em água). A mistura foi agitada a 120 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,50). Os compostos foram separados por SFC (condition: coluna: OJ (250mm x 30mm, 5um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O ETOH]; % de B: 25% a 25%, min.). A solução após a separação foi concentrada para fornecer os produtos crus, os quais foram purificados por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 45% a 75%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 4-[(1 S)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-1 -metil-etil]fenol (26,29 mg, 54,96 pmol, 7,9% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI salt (Tr = 4,768 min, ee% = 100,0 e [o]²⁵d = +81,522 (MeOH, c = 0,104 g/100 mL)) como sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,81-8,79 (m, 2 H), 8,24 (s, 1 H), 8,11 (td, J= 2,2, 9,0 Hz, 1 H), 7,12-7,06 (m, 2 H), 6,62-6,56 (m, 2 H), 6,30 (s, 1 H), 3,90-3,79 (m, 2 H), 3,30-3,25 (m, 1 H), 3,19-3,11 (m, 1 H), 1,41 (d, J= 7,1 Hz, 3 H), 1,36 (dd, J = 2,5, 6,9 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 406,2 [M+H]⁺.

Exemplo 28

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Síntese de 1-29

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de metila

[00322] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carboxilato de metila (300 mg, 929,31 pmol, 1 eq. ) em /PrOH (20 mL) foi adicionado DIEA (360,32 mg, 2,79 mmol, 485,61 pL, 3 eq.) e (3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (190,39 mg, 1,02

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237/652 mmol, 1,1 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 3 h sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, em seguida água (80 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,6) para produzir um produto de 5-(5fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de metila (270 mg, 561,92 μηποΙ, 60,4% de produção, 95% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,09 (s, 1 H), 8,58 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,47 (s, 1 H), 8,37-8,25 (m, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,47 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,35 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,22-7,06 (m, 2 H), 6,79 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 6,66 (s, 1 H), 4,36 (br s, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 3,41 (dd, J = 4,5, 15,3 Hz, 1 H), 3,07-2,88 (m, 3 H), 2,42-2,27 (m, 2H); ES-LCMS m/z 457,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de metila

[00323] A uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato de metila (220 mg, 457,86 pmol, 1 eq. ) em H2O (4 mL), MeOH (2 mL) e THF (2 mL) foi adicionado LiOH-H₂O (275,60 mg, 6,57 mmol, 14,34 eq). A mistura foi agitada a 50°C durante 12 h sob atmosfera de N2. O resíduo foi dissolvido em água (30 mL), ajustado ao pH a 6 por 1N de

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HCI, em seguida extraído com EtOAc (40 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer metil ácido 5-(5-fIuoro-3-piridil)-7-[[(3fí)2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3carboxílico (150 mg, 315,29 pmol, 68,8% de produção, 93,0% de pureza)) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,25 (s, 1 H), 8,598,50 (m, 2 H), 8,49-8,40 (m, 1 H), 7,38 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,09 (s, 1 H), 7,06-6,87 (m, 2 H), 4,50 (s, 1 H), 3,28 (s, 1 H), 3,15-3,02 (m, 1 H), 3,00-2,83 (m, 2 H), 2,43-2,31 (m, 1 H), 2,30-2,15 (m, 1 H); ES-LCMS m/z443,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: [5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-(4-metilpiperazin1-il)metanona (I-29)

[00324] A uma solução de ácido 5-(5-fIuoro-3-piridil)-7-[[(3F?)-2,3,4,9tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3carboxílico (50 mg, 105,10 pmol, 1 eq.) em DCM (5 mL) foi adicionado HATU (59,94 mg, 157,65 pmol, 1,5 eq.) e TEA (21,27 mg, 210,20 pmol, 29,26 pL, 2 eq.) e 1-metilpiperazina (15,79 mg, 157,65 pmol, 17,49 pL, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 20°C durante 1 h sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, em seguida água (20 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (20 mL x 3). As

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239/652 camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre NazSCU, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250x50mmx10pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 10% a 40%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir [5-(5-fluoro3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-(4-metilpiperazin-1-il)metanona (24,27 mg, 36,20 pmol, 34,4% de produção, 100% de pureza, 4HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,41 (s, 1 H), 9,01-8,88 (m, 2 H), 8,43 (s, 1 H), 7,37 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,27 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,04 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,99-6,93 (m, 1 H), 4,79-4,51 (m, 3 H), 3,60 (d, J= 11,9 Hz, 4H), 3,29 (s, 3 H), 3,20-3,07 (m, 1 H), 3,03-2,90 (m, 5H), 2,43-2,21 (m, 2H); ES-LCMS m/z525,3 [M+H]⁺.

Exemplo 29

Síntese de 1-30

Etapa 1: (3fí)-/V-(6-Cloro-3-isopropil-imidazo[1,2-a]pirazin-8-i I)2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

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[00325] A uma solução de 6,8-dicloro-3-isopropil-imidazo[1,2a]pirazina (45 mg, 195,57 pmol, 1 eq. ) e (3R)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (38,25 mg, 205,35 pmol, 1,05 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (75,83 mg, 586,72 μιτιοΙ, 102,20 pL, 3 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 3 h. LC-MS mostrou 55% de material de partida permaneceu e 5% de composto desejado foi detectado. A mistura foi agitada a 60°C durante 16 h. LC-MS mostrou 34% de material de partida permaneceu e 30% de composto desejado foi detectado. A mistura foi agitada a 60 °C durante 16 h. LC-MS mostrou 21% de material de partida permaneceu e 53% de composto desejado foi detectado. A mistura foi agitada a 60 °C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,45) para fornecer o produto (3fl)-A/-(6-cloro-3-isopropil-imidazo[1,2-a]pirazin-8-il)-2,3,4,9tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (60 mg, 157,94 μιτιοΙ, 80,8% de produção, 100,0% de pureza) foi obtido como óleo amarelo claro. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,80 (s, 1 H), 7,45 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,17-7,12 (m, 1 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 6,28 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 4,81 (br s, 1 H), 3,29 (dd, J = 5,4, 16,0 Hz, 1 H), 3,15-3,04 (m, 1 H), 2,99-2,89 (m, 2 H), 2,81 (dd, J = 6,9, 15,1 Hz, 1 H), 2,28-2,25 (m, 1 H), 2,23-2,15 (m, 1 H), 1,37 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 380,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3/7)-/V-[6-(5-Fluoro-3-pirjdil)-3-isopropil-imjdazo[1,2Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 270/704

241/652

a]pirazin-8-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-30)

[00326] A uma solução de (3R)-A/-(6-cloro-3-isopropil-imidazo[1,2a]pirazin-8-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-amina (60 mg, 157,94 prnol, 1 eq.) e ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (44,51 mg, 315,89 μηποΙ, 2,0 eq. ) em 1,4-dioxano (2 mL) e H2O (0,5 mL) foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (11,56 mg, 15,79 μηποΙ, 0,1 eq. ) e CS2CO3 (154,38 mg, 473,83 μηποΙ, 3,0 eq). O tubo selado foi purgado com N2 durante 3 min e aquecido a 110°C durante 0,5 h sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa duas vezes (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10min; coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 0 composto (3fí)-A/-[6-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-imidazo[1,2-a]pirazin8-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (26,85 mg, 60,59 prnol, 38,4% de produção, 99,4% de pureza) como um sólido branco.. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,07 (s, 1 H), 8,38 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,25 (td, J = 2,2, 10,2 Hz, 1 H), 8,19 (s, 1 H), 7,34 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,287,23 (m, 2 H), 7,04-6,97 (m, 1 H), 6,96-6,89 (m, 1 H), 4,82-4,74 (m, 1 H), 4,59 (s, 1 H), 3,39-3,31 (m, 1 H), 3,27-3,21 (m, 1 H), 2,93 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 2,83 (dd, J = 7,2, 15,1 Hz, 1 H), 2,35 (dt, J = 2,5, 6,4 Hz, 1 H), 2,252,13 (m, 1 H), 1,38 (dd, J = 2,3, 6,7 Hz, 6H); ES-LCMS m/z441,3 [M+H]⁺.

Exemplo 30

Síntese de 1-31

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242/652

Etapa 1: 7-hÍdróxi-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-6carboxilato de etila

[00327] Uma mistura de 2-(etoximetileno)propanodioato de dietila (621,89 mg, 2,88 mmol, 581,21 μΙ_, 1 eq), 4-isopropil-1 H-pirazol-5-amina (400 mg, 2,88 mmol, 1 eq. ) em AcOH (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi agitada a 120°C durante 2 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi resfriada a 0°C e filtrada. O sólido foi lavado com etanol e éter de petróleo e secado sob pressão reduzida para fornecer 7-hidróxi-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-6

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243/652 carboxilato de etila (700 mg, 2,65 mmol, 92,3% de produção, 94,5% de pureza) como um sólido branco, que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,55 (s, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 4,34 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 3,11 (m, 1 H), 1,40-1,31 (m, 9H); ESLCMS m/z 250,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 3-lsopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol

[00328] A uma solução de 7-hidróxi-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidina-6-carboxilato de etila (300 mg, 1,20 mmol, 1 eq. ) em H2O (3 mL) foi adicionado ácido hidroclórico (6,12 g, 61,27 mmol, 6 mL, 36,5%, 50,90 eq). A mistura foi agitada a 120°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 3isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (200 mg, 902,92 pmol, 75,0% de produção, 80,0% de pureza) como um sólido marrom escuro que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,12 (s, 1 H), 7,94 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 5,98 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 2,91 - 2,78 (m, 1 H), 1,25 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 178,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 7-Cloro-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

[00329] Uma solução de 3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (100 mg, 564,33 pmol, 1 eq. ) em POCI3 (88,6 g, 577,83 mmol, 53,70 mL, 1023,93 eq) foi agitada a 120°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qula foi

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244/652 diluído com gelo, em seguida NaHCCh sólido foi adicionado à solução acima até o pH a 8. A mistura de reação foi extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 7-cloro-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 511,12 pmol, 90,6% de rendimento) como óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 8,34 (d, J = 4,4 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 6,93 (d, J=4,4 Hz, 1 H), 2,92-2,88 (m, 1 H), 1,29 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 196,1 [M+H]⁺

Etapa 4: Λ/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin7-amina (1-31)

[00330] Uma mistura de 7-cloro-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (75,20 mg, 384,36 pmol, 1 eq), 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (73,90 mg, 461,24 μιτιοΙ, 1,2 eq), DIEA (496,76 mg, 3,84 mmol, 669,49 μί, 10 eq. ) em /-PrOH (2 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi agitada a 55 °C durante 3 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Syneri Max-RP C12 100*30 5u; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 15% a 45%, 12 min.), seguida por liofilização para produzir Λ/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (22,81 mg, 54,77 μιτιοΙ , 14,3% de produção, 94,2% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3CD) δ ppm 8,14 (s, 1 H), 7,80 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,44 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,157,06 (m, 1 H), 6,98 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,78 (t, J= 7,2 Hz, 1 H), 5,95 (d,

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245/652

J= 7,3 Hz, 1 H), 3,93 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,21 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,10 (m, 1 H), 1,32 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z320,0 [M+H]⁺.

Exemplo 31

Síntese de l-32a

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-(4,5,6,7-tetra-hidro-1 Hindazol-6-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

[00331] Uma solução de 4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indazol-6-amina (40 mg, 291,58 prnol, 1 eq), 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (84,77 mg, 291,58 pmol, 1 eq), DIEA (376,85 mg, 2,92 mmol, 507,89 μΙ_, 10 eq.) em /-PrOH (4 mL) foi agitada a 120°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica

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246/652 gel rápida (de PE / EtOAc=100/1 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,5) para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-(4,5,6,7-tetra-hidro-1Hindazol-6-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (90 mg, 218,42 pmol, 74,9% de produção, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,16 (t, J= 1,4 Hz, 1 H), 8,52 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,37 (td, J= 2,2, 9,9 Hz, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 6,77 (s, 1 H), 4,42 (s, 1 H), 3,48-3,31 (m, 2 H), 2,91 - 2,84 (m, 1 H), 2,84-2,76 (m, 2 H), 2,31-1,97 (m, 2 H), 1,40 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 492,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[(6S)-4,5,6,7-tetra-hidro1 H-indazol-6-il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-32)

[00332] 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-(4,5,6,7-tetra-hidro-1 Hindazol-6-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (130 mg, 327,45 μιτιοΙ, 1 eq) foi separado por SFC (coluna: OD (250mm*30mm, 5um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O MeOH]; % de B: 45% a 45%, min.) para fornecer 0 pico 1 (ír = 1,465 min ) e pico 2 (ír = 1,687 min ). A mistura reacional (pico 1) foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-[(6S)-4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indazol-6il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (39,42 mg, 76,66 pmol, 23,4% de produção, 97,4% de pureza, 3HCI) (EE = 99,3%, ír = 1,465 min.), [o]²⁶d = -27,146, C = 0,106 g/100 mL, MeOH ) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,10 (s, 1 H), 8,85 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,50 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 8,27 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,09 (s, 1 H), 4,76

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247/652 (s, 1 Η), 3,50 (dd, J= 5,3, 16,5 Hz, 1 H), 3,39 (m J= 6,8 Hz, 1 H), 3,193,11 (m, 1 H), 2,93 (dd, J = 4,4, 7,9 Hz, 2 H), 2,41 - 2,30 (m, 1 H), 2,282,14 (m, 1 H), 1,40 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z392,2 [M+H]⁺.

Exemplo 32

Síntese de 1-33

1-33

Esquema sintético:

Etapa 1: 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo [1,5a]pirjmjdin-7-jl]amjno]etil]indol-1-carboxilato de terc-butila

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248/652

[00333] A uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (650 mg, 1,75 mmol, 1 eq. ) em 1,4-dioxano (30 mL) foi adicionado DMAP (639,72 mg, 5,24 mmol, 3 eq.) e (Boc)2O (1,14 g, 5,24 mmol, 1,20 mL, 3 eq). A mistura foi agitada a 110°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,75) para fornecer o composto 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(5fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 -carboxilato de terc-butila (575 mg, 985,06 pmol, 56,4% de produção, 98,1% de pureza) foi obtido como sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,74 (t, J= 1,5 Hz, 1 H), 8,55 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,19 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 8,01 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 7,87-7,81 (m, 1 H), 7,47 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,27-7,23 (m, 2 H), 7,20-7,14 (m, 1 H), 6,77 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,57 (s, 1 H), 4,25 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,13 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 1,62 (s, 9H), 1,42 (s, 9H); ES-LCMS m/z 573,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-iodopirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 -carboxilato de tercbutila

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249/652

[00334] Uma mistura de 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3piridiI)pirazolo[1,5-a]pirimidiη-7-il]amino]etil]indol-1 -carboxilato de tercbutila (250 mg, 428,29 pmol, 1 eq. ) e NIS (192,72 mg, 856,58 pmol, 2 eq. ) em DCM (10 mL) e MeCN (10 mL) foi agitada a 25 °C durante 12 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 4/1, Rf = 0,40) mostrou que o material de partida foi completamente consumido. A mistura de reação foi interrompida bruscamente com NazSzCh aquoso (10 mL) e extraída com DCM (10 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre NazSCU, filtrada e concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 20/1 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 4/1, Rf = 0,40). A fração desejada foi concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer 3-[2-[tercbutoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-iodo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]etil]indol-1-carboxilato de terc-butila (280 mg, 400,84 pmol, 93,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400MHz, CDCI₃) δ ppm 8,76 (s, 1 H), 8,57 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,00 (br s, 1 H), 7,96-7,91 (m, 1 H), 7,45 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,26 (br s, 2 H), 7,20-7,15 (m, 1 H), 6,58 (s, 1 H), 4,23 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,12 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 1,62 (s, 9H), 1,42 (s, 9H); ES-LCMS m/z 699,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: 3-[2-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]etil]indol-1 -carboxilato de tercbutila

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[00335] Uma mistura de 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3piridil)-3-iodo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 -carboxilato de terc-butila (150 mg, 214,74 pmol, 1 eq), tributil(1-etoxivinil)estanano (310,21 mg, 858,95 pmol, 289,92 pL, 4 eq. ) e Pd(dppf)CI₂ (31,43 mg, 42,95 pmol, 0,2 eq. ) em tolueno (2 mL) foi borbulhada com N₂ por 2 minutos e em seguida selada. A mistura de reação foi irradiada sob micro-ondas 1 bar) a 100 °C durante 2 h. À mistura foi adicionado KF aquoso (10 mL, 1 g/10 mL). A mistura foi agitada a 25 °C durante 30 minutos e em seguida extraída com EtOAc (10 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na₂SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 4/1, Rf = 0,20). A fração desejada foi concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer 3-[2-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]etil]indol-1carboxilato de terc-butila (80 mg, 124,17 pmol, 57,8% de produção, 95,4% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ ppm 8,78 (s, 1 H), 8,66 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,61 (s, 1 H), 7,96 (br s, 1 H), 7,80 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,42 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,24-7,21 (m, 2 H), 7,14 (t, J= 7,2 Hz, 1 H), 6,65 (s, 1 H), 4,33-4,27 (m, 2 H), 3,14 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,84 (s, 3 H), 1,59 (s, 9H), 1,43 (s, 9H); ES-LCMS m/z 615,3 [M+H]⁺.

Etapa 4: 1 -[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona

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ΗΝ

[00336] Uma mistura de 3-[2-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]etil]indol-1carboxilato de terc-butila (80 mg, 124,17 pmol, 1 eq. ) e TFA (4,62 g, 40,52 mmol, 3 mL, 326,32 eq. ) em DCM (9 mL) foi agitada a 25 °C durante 30 min. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,50) mostrou que o material de partida foi completamente consumido. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida a 30 °C à secura. O resíduo foi dissolvido em água (10 mL), basificado com NaHCOs aquoso saturado até o pH = 8 e extraído com EtOAc (15 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer 1-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona (50 mg, 101,34 pmol, 81,6% de produção, 84,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfô) δ ppm 10,81 (s, 1 H), 9,16 (s, 1 H), 8,71 (d, J=2,8 Hz, 1 H), 8,62 (t, J= 6,4 Hz, 1 H), 8,53 (s, 1 H), 8,26-8,20 (m, 1 H), 7,65 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,20 (s, 1 H), 7,08-7,03 (m, 1 H), 7,01-6,97 (m, 1 H), 6,86 (s, 1 H), 3,94-3,85 (m, 2 H), 3,13 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 2,71 (s, 3 H); ES-LCMS m/z415,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 1 -[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanol (I-33)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 281/704

252/652

[00337] A uma solução de 1-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pinmidin-3-il]etanona (50 mg, 101,34 μιτιοΙ, 1 eq. ) em MeOH (5 mL) foi adicionado NaBH4 (38,34 mg, 1,01 mmol, 10 eq. ) e em seguida a mistura foi agitada a 25 °C durante 1 hora. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,40) mostrou que o material de partida foi completamente consumido. A mistura de reação foi interrompida bruscamente com água (10 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi extraído com EtOAc (15 mL x 3). A camada orgânica foi secadas sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 36% a 66%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para fornecer 1 -[5-(5fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 /-/-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-<a]pirimidin-3il]etanol (3,29 mg, 7,90 pmol, 7,8% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido branco.. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 8,79 (s, 1 H), 8,51 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,04 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,84 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 7,69 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,37 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,22 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 7,07 (s, 1 H), 6,56 (br s, 1 H), 6,09 (s, 1 H), 5,35 (s, 1 H), 3,89-3,83 (m, 2 H), 3,27 (t, J= 6,4 Hz, 2 H), 3,21 (d, J = 3,6 Hz, 1 H), 1,70 (d, J= 6,4 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z417,2 [M+H]⁺.

Exemplo 33

Síntese de 1-34

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 282/704

253/652

L(R)

Etapa 1: (3R)-/V-[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-34)

[00338] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 171,13 pmol, 1 eq), (3F?)-2,3,4,9-tetrahidro-1/-/-carbazol-3-amina (31,87 mg, 171,13 pmol, 1 eq. ) e DIEA (22,12 mg, 171,13 pmol, 29,81 μΙ_, 1 eq.) em /-PrOH (2 mL) foi agitada a 80°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Syneri Max-RP C12 100*30 5u; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 70%, 12 min.). A fração desejada foi liofilizada para fornecer (3F?)-A/-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 283/704

254/652 pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-amina (29,03 mg, 55,63 pmol, 32,5% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo.¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 10,76 (s, 1 H), 9,25 (s, 1 H), 8,67 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,46 (td, J= 2,0, 10,4 Hz, 1 H), 8,30 (br s, 1 H), 8,04 (s, 1 H), 7,32 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,24 (d, J =8,0 Hz, 1 H), 7,03 (s, 1 H), 6,97 (t, J= 6,8 Hz, 1 H), 6,93-6,87 (m, 1 H), 4,58-4,40 (m, 1 H), 3,14-2,95 (m, 2 H), 2,94-2,78 (m, 2 H), 2,29 (s, 3 H), 2,15 (brs, 2H); ES-LCMS m/z413,2 [M+H]⁺.

Exemplo 34

Síntese de 1-35

Etapa 1: (3fí)-/V-[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-(trifluorometil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-35)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 284/704

255/652

[00339] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (35 mg, 102,58 pmol, 1 eq. ) e (3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-amina (21,02 mg, 112,83 pmol, 1,1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (39,77 mg, 307,73 μιτιοΙ, 53,60 pL, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir (3fí)A/-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (28,79 mg, 49,45 umol, 48,2% de produção, 98,9% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,36 (s, 1 H), 8,87-8,79 (m, 2 H), 8,34 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,066,99 (m, 1 H), 6,98-6,91 (m, 1 H), 4,57-4,46 (m, 1 H), 3,33-3,31 (m, 1 H), 3,17-3,04 (m, 1 H), 3,00-2,88 (m, 2 H), 2,42-2,33 (m, 1 H), 2,31 - 2,19 (m, 1 H); ES-LCMS m/z467,2 [M+H]⁺.

Exemplo 35

Síntese de 1-36

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 285/704

256/652

Etapa 1: (3F?)-/V-[6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirimidin-4-il]-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

[00340] Uma mistura de 4,6-dicloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirimidina (100 mg, 389,26 pmol, 1 eq), (3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (79,75 mg, 428,19 pmol, 1,1 eq), DIEA (150,93 mg, 1,17 mmol, 203,41 μΙ_, 3 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 for 3 vezes. A mistura foi agitada a 55°C durante 12 h sob atmosfera

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 286/704

257/652 de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc=100/1 a 3/1,TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf =0,4 ) para produzir (3fl)-A/-[6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirimidin-4-il]-2,3,4,9tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (130 mg, 320,18 pmol, 82,3% de produção, 97,0% de pureza) como um sólido branco.. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,38 (s, 1 H), 8,55 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,34 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,47 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,34 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,21-7,16 (m, 1 H), 7,14-7,10 (m, 1 H), 6,34 (s, 1 H), 3,25 (dd, J = 5,0, 15,5 Hz, 1 H), 3,04-2,74 (m, 4H), 2,23 (s, 2H); ES-LCMS m/z394,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3fí)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-6-pirrolidin-1 -il-pirimidin-4-il]2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-36)

[00341] (3fí)-A/-[6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirimidin-4-il]-2,3,4,9tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (60 mg, 147,77 pmol, 1 eq.) e pirrolidine (727,50 mg, 10,23 mmol, 853,87 pL, 69,22 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em /-PrOH (2 mL). O tubo selado foi aquecido a 135 °C durante 3 h sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela Durashell C18 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 12 min.), seguida por liofilização para produzir (3fí)A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)-6-pirrolidin-1-il-pirimidin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro1/-/-carbazol-3-amina (42,07 mg, 78,06 pmol, 52,8% de produção,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 287/704

258/652

99,8% de pureza, 3HCI) como um sólido marrom. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 10,83 (s, 1 H), 9,30 (s, 1 H), 8,85 (s, 1 H), 8,67-8,48 (m, 1 H), 8,31 (s, 1 H), 7,35 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,26 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,03-6,98 (m, 1 H), 6,96-6,89 (m, 1 H), 5,78 (s, 1 H), 4,29 (m, 1 H), 3,75-3,60 (m, 3 H), 3,51 (s, 1 H), 3,10 (dd, J= 4,6, 15,0 Hz, 1 H), 3,022,89 (m, 2 H), 2,76-2,63 (m, 1 H), 2,22-2,02 (m, 2 H), 1,98 (s, 4H); ESLCMS m/z 429,3 [M+H]⁺.

Exemplo 36

Síntese de l-37a

l-37a

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 288/704

259/652

Etapa 1: 5-(5-Bromo-3-piridil)-3-isopropil-/V-(5-metoxiindan-2il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

[00342] A uma solução de 5-(5-bromo-3-piridil)-7-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (100,00 mg, 264,48 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado 5-metoxiindan-2-amina (52,81 mg, 264,48 μιτιοΙ, 1 eq, HCI) e DIEA (341,82 mg, 2,64 mmol, 460,67 pL, 10 eq). A mistura foi agitada a 90 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,31) para produzir 5-(5-bromo-3-piridil)-3-isopropilA/-(5-metoxiindan-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (120 mg, 250,84 μιτιοΙ, 94,8% de produção, 100% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,18 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 8,74 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,58 (t, J= 2,1 Hz, 1 H), 7,87 (s, 1 H), 7,18 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,79 (dd, J= 2,5, 8,3 Hz, 1 H), 6,58 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 6,37 (s, 1 H), 4,71-4,60 (m, 1 H), 3,81 (s, 3 H), 3,50 (m, 2 H), 3,37 (t, J = 6,9 Hz, 1 H), 3,08 (m, 2 H), 1,42 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 478,1,480,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-[3-lsopropil-7-[(5-metoxiindan-2-jl)amjno]pirazolo[1,5a]pirimidin-5-il]piridina-3-carbonitrilo

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 289/704

260/652

[00343] A uma solução de 5-(5-bromo-3-piridil)-3-isopropil-A/-(5metoxiindan-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (120,0 mg, 250,84 pmol, 1 eq. ) em DMF (6 mL) foi adicionado Zn(CN)2 (117,83 mg, 1,00 mmol, 4 eq. ) e Pd(PPh3)4 (57,97 mg, 50,17 pmol, 0,2 eq) sob N2.A mistura foi agitada a 85°C durante 32 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de água (30 mL), em seguida extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,55) para produzir 5-[3-isopropil-7-[(5metoxiindan-2-il)amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina-3carbonitrilo (80 mg, 188,46 pmol, 75,1% de produção, 100% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,47 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,94 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,72 (t, J= 2,1 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,18 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 6,88-6,76 (m, 2 H), 6,65 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,38 (s, 1 H), 4,73-4,58 (m, 1 H), 3,82 (s, 3 H), 3,51 (m, 2 H), 3,36 (t, J = 7,0 Hz, 1 H), 3,09 (m, 2 H), 1,42 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 425,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-[7-[[(2S)-5-Hidroxiindan-2-il]amino]-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina-3-carbonitrilo(l-37)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 290/704

261/652

[00344] Uma mistura de 5-[3-isopropil-7-[(5-metoxiindan-2il)amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina-3-carbonitrilo(35,00 mg, 74,21 pmol, 1 eq. ) e piridina; cloridrato (428,76 mg, 3,71 mmol, 50 eq) foi agitada a 190°C durante 1 h sob N₂. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de NaHCOs aquoso saturado (20 mL) vagarosamente, em seguida extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo o qual foi purificado por TLC preparativa (PE/EtOAc = 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,53) para produzir 5-[7-[(5Hidroxiindan-2-il)amino]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina3-carbonitrilo (15 mg, 34,20 pmol, 46,0% de produção, 93,6% de pureza) como um sólido amarelo (Nota: Tatol 80 mg de alvo de duas bateladas foi empregado para separação de SFC). O racemato foi separado por SFC quiral (AD (250mm x 30mm, 10pm); fase móvel: [0,1% de NH₃H₂O IPA]; % de B: 55% a 55%, min; pico 1 (Tr = 1,817) e pico 2 (Tr = 2,477)). A solução após a separação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 5-[7-[[(2S)-5-Hidroxiindan-2il]amino]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina-3-carbonitrilo (19,05 mg, 39,41 pmol, 22,7% de produção, 100% de pureza, 2HCI) (EE=100%, Tr = 1,817 min, [a]²⁶ _D = 3,608 (c = 1,03 mg/mL, MeOH)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,44 (d, J

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 291/704

262/652 = 2,2 Hz, 1 Η), 9,08 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,84 (t, J= 2,1 Hz, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,07 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 6,88 (s, 1 H), 6,71 (s, 1 H), 6,64 (dd, J = 2,2, 8,2 Hz, 1 H), 4,96-4,90 (m, 1 H), 3,50-3,41 (m, 2 H), 3,38-3,33 (m, 1 H), 3,19-3,03 (m, 2 H), 1,40 (d, J= 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 411,2 [M+H]⁺.

Exemplo 37

Síntese de 1-38

Etapa 1: (3fí)-/V-[5-(5-Bromo-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 292/704

263/652

[00345] Uma mistura de 5-(5-bromo-3-piridil)-7-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (150 mg, 396,73 pmol, 1 eq), (3fí)-2,3,4,9-tetrahidro-1/-/-carbazol-3-amina (77,59 mg, 416,56 pmol, 1,05 eq. ) e DIEA (153,82 mg, 1,19 mmol, 207,31 pL, 3 eq. ) em /-PrOH (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi agitada a 80°C durante 2 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,34) para fornecer (3fí)-A/-[5(5-bromo-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-amina (150 mg, 296,16 pmol, 74,6% de produção, 99,0% de pureza) como um sólido verde. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,17 (d, J= 1,8 Hz, 1 H), 8,73 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,60-8,55 (m, 1 H), 7,90-7,87 (m, 1 H), 7,47 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,19 (brt, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,15-7,10 (m, 1 H), 6,58 (br d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,40 (s, 1 H), 4,32 (br s, 1 H), 3,45-3,32 (m, 2 H), 3,06-2,90 (m, 3 H), 2,44-2,23 (m, 2 H), 1,43 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 501,1, 503,1 [M+H]⁺.

[00346] Etapa 2: 5-[3-lsopropil-7-[[(3R)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina-3carbonitrilo (I-38)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 293/704

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[00347] Uma mistura de (3F?)-A/-[5-(5-bromo-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pi ri midi n-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-amina (80 mg, 157,95 μηποΙ, 1 eq), Pd(PPh3)4 (73,01 mg, 63,18 μηποΙ, 0,4 eq. ) e Zn(CN)₂ (74,19 mg, 631,81 μηποΙ, 4 eq.) em DMF (5 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes. A mistura foi agitada a 85 °C durante 19 h sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada e água (80 mL) foi adicionado, extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas ao resíduo 0 qual foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10pm; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 70% a 100%, 10 min.) para produzir 0 produto de 5-[3-isopropil-7-[[(3F?)-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina-3carbonitrilo (11,7 mg, 26,14 μηποΙ, 16,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-ok) δ ppm 10,78 (s, 1 H), 9,66 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 9,08-9,01 (m, 2 H), 8,03 (s, 1 H), 7,96 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 7,36 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,06 (s, 1 H), 7,01 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 6,96-6,90 (m, 1 H), 4,534,41 (m, 1 H), 3,32-3,22 (m, 1 H), 3,19-3,00 (m, 2 H), 2,97-2,81 (m, 2 H), 2,23-2,13 (m, 2 H), 1,38 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z448,2 [M+H]⁺.

Exemplo 38

Síntese de 1-39

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 294/704

265/652

Etapa 1: 3-Bromo-7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina

[00348] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (50 mg, 168,39 pmol, 1 eq.) em DCM (2 mL) e ACN (4 mL) foi adicionado NBS (32,97 mg, 185,23 pmol, 1,1 eq). A mistura foi agitada a 30°C durante 1 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 3-bromo-7-cloro-5(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (55,16 mg, 168,41 pmol, 100,0% de produção, 100% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,12 (s, 1 H), 8,65 (d, J=2,6 Hz, 1 H), 8,43-8,19 (m, 2 H),

7,51 (s, 1 H); ES-LCMS m/z327,0, 329,0 [M+H]⁺

Etapa 2:

3-Bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1H-indol-3 il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-39)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 295/704

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[00349] A uma solução de 3-bromo-7-cloro-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (55,16 mg, 168,41 μιτιοΙ, 1 eq. ) em /PrOH (4 mL) foi adicionado DIEA (65,30 mg, 505,22 pmol, 88,00 pL, 3 eq. ) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (53,96 mg, 336,81 μιτιοΙ, 2 eq). A mistura foi agitada a 60°C durante 5 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela Durashell C18 150χ25χ5μ; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 12 min.) seguida por liofilização para produzir 3bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (65 mg, 115,93 μιτιοΙ, 68,8% de produção, 100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,71 (s, 1 H), 8,55 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 7,70 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,62 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,16 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,05-6,91 (m, 3 H), 5,94 (s, 1 H), 3,98 (t, J= 5,9 Hz, 2 H), 3,22 (t, J= 6,0 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 451,1,453,1 [M+H]⁺.

Exemplo 39

Síntese de 1-40

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 296/704

267/652

Esquema sintético:

Etapa 1: (3fí)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-40)

[00350] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (60,00 mg, 205,68 pmol, 1 eq), (3fí)2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (42,14 mg, 226,25 pmol, 1,1 eq), DIEA (79,75 mg, 617,05 pmol, 107,48 pL, 3 eq.) em /-PrOH (4 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ for 3 vezes. A mistura foi agitada a 55°C durante 3 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 umjfase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 70% a 100%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir (3R)-A/-[2-(5fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetrahidro-1 H-carbazol-3-amina (42,07 mg, 75,45 pmol, 36,7% de produção, 98,8% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,46 (s, 1 H), 8,81 ( d, J = 9,3 Hz, 1 H), 8,76 ( s, 1 H), 8,12-7,92 (m, 1 H), 7,37 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,27 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,08-7,00 (m, 1 H), 6,99-6,90 (m, 1 H), 3,34 ( s, 1 H), 3,31-3,25 (m, 2 H),

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268/652

3,18-2,79 (m, 3 Η), 2,44-2,21 (m, 2 Η), 1,42 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ESLCMS m/z 442,2 [M+H]⁺.

Exemplo 40

Síntese de 1-41

Etapa 1: (3fí)-/V-[5-(5-Fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-41)

[00351] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (50 mg, 166,91 pmol, 1,0 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (64,71 mg, 500,72 μιτιοΙ, 87,21 pL, 3,0 eq.) e (3fí)2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (37,30 mg, 200,29 μιτιοΙ, 1,2 eq}. A mistura foi agitada a 60 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 298/704

269/652 purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 38% a 68%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir (3fl)-A/-[5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (61,30 mg, 120,71 prnol, 72,3% de produção, 100,0% de pureza, 3 sal de HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,01 (s, 1 H), 8,77 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,34-8,27 (m, 2 H), 7,39 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,13 (s, 1 H), 7,09-7,01 (m, 1 H), 7,00-6,93 (m, 1 H), 6,66 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 4,68 (s, 1 H), 3,37-3,32 (m, 2 H), 3,143,01 (m, 2 H), 2,44-2,28 (m, 2H); ES-LCMS m/z339,2 [M+H]⁺.

Exemplo 41

Síntese de l-42a

Esquema sintético:

Etapa 1:5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[(5S)-4,5,6,7-tetra-hidro1 H-indazol-5-il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-42)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 299/704

270/652

[00352] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (60 mg, 206,38 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (266,73 mg, 2,06 mmol, 359,47 pL, 10 eq. ) e 4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indazol-5-amina (43,36 mg, 206,38 pmol, 1 eq, 2HCI). A mistura foi agitada a 90 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 0/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,16) para produzir um produto. O produto foi separado por SFC quiral (AD (250mmx30mm, 5pm); fase móvel: [0,1%NH₃H₂O IPA]; % de B: 35% a 35%, min; pico 1 (Tr = 5,512) e pico 2 (Tr = 6,038)). A solução após a separação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/[(5S)-4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indazol-5-il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (29,07 mg, 58,0 pmol, 24,1% de produção, 100% de pureza, 3HCI) (EE = 94,6%, Tr = 5,512 min, [a]²⁶ _D = -18,785 (c 1,05 mg/mL, MeOH)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,07 (s, 1 H), 8,77 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,39 (td, J = 2,2, 9,2 Hz, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 6,98 (s, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 3,40-3,34 (m, 1 H), 3,26 (dd, J = 5,2, 15,3 Hz, 1 H), 3,15-3,04 (m, 2 H), 2,92 (dd, J= 9,6, 15,3 Hz, 1 H), 2,45-2,36 (m, 1 H), 2,31 - 2,19 (m, 1 H), 1,41 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ESLCMS m/z 392,2 [M+H]⁺.

Exemplo 42

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271/652

Síntese de 1-43

Etapa 1:3-(5-bromo-3-piridil)-3-oxo-propanoato de metila & (2)-3-(5bromo-3-piridil)-3-hidróxi-prop-2-enoato de metila

O O OH O ^Br\ / ^Br\ /

Cf Cf

[00353] A uma mistura de ácido 5-bromopiridina-3-carboxílico (5 g, 24,75 mmol, 1 eq.) e TEA (2,50 g, 24,75 mmol, 3,45 mL, 1 eq.) em THF (100 mL) foi adicionado GDI (6,02 g, 37,13 mmol, 1,5 eq. ) em uma porção a 30°C sob N2. A mistura foi agitada a 30°C durante 1 hora.

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272/652

Potássio; 3-metóxi-3-oxo-propanoato (7,73 g, 49,50 mmol, 2 eq. ) e MgCÍ2 (4,71 g, 49,50 mmol, 2 eq) foi adicionado e a mistura foi agitada a 30°C durante 16 h. A mistura foi ajustada ao pH para 5-6 com 3 Λ/HCI, extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografiade coluna em sílica-gel (de PE/EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,47) para fornecer 3-(5-bromo-3-piridil)-3-oxopropanoato de metila (1,85 g, 6,45 mmol, 26,1% de produção, 90,0% de pureza) e (Z)-3-(5-bromo-3-piridil)-3-hidróxi-prop-2-enoato de metila (1,85 g, 6,45 mmol, 26,1% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 12,46 (s, 1 H), 9,05 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,90-8,87 (m, 2 H), 8,75 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,39-8,36 (m, 1 H), 8,21 (t, J = 2,1 Hz, 1 H), 5,72 (s, 1 H), 4,02 (s, 2 H), 3,84 (s, 3 H), 3,78 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 258,0, 260,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(5-Bromo-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol

[00354] Uma mistura de 3-(5-bromo-3-piridil)-3-oxo-propanoato de metila (1,11 g, 3,87 mmol, 1 eq.) e 1 H-pirazol-5-amina (386,37 mg, 4,65 mmol, 1,2 eq.) em AcOH (5 mL) foi agitada a 120 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 5-(5-bromo-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (1 g, 3,44 mmol, 88,7% de produção, pureza crua) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 10,31 (s, 1 H), 9,00 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,88 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,52 (t, J = 2,1 Hz, 1 H), 7,91 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 6,25-6,21 (m, 2H); ES-LCMS m/z293,0, 295,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-Bromo-3-piridil)-7-cloro-pirazolo[1,5-a]pirimidina

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[00355] Uma solução de 5-(5-bromo-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin7-ol (1 g, 3,44 mmol, 1 eq. ) em POCI3 (8 mL) foi agitada a 100 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi purificado por preparativa-TLC (TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,65) para produzir 5-(5-bromo-3-piridil)-7-cloropirazolo[1,5-a]pirimidina (0,8997 g, 2,91 mmol, 84,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo.¹H RMN (400 MHz, CDCI3) óppm 9,18 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,81 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,62 (t, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,30 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 6,91 (d, J = 2,4 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z309,0, 311,0 [M+H]⁺.

Etapa 4: 5-(5-Bromo-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina

[00356] A uma mistura de 5-(5-bromo-3-piridil)-7-cloro-pirazolo[1,5a]pirimidina (500 mg, 1,62 mmol, 1 eq. ) e 2-(1/-/-indol-3-il)etanamina (388,18 mg, 2,42 mmol, 1,5 eq.) em /-PrOH (20 mL) foi adicionado DIEA (626,28 mg, 4,85 mmol, 844,04 pL, 3 eq. ) em uma porção. A mistura foi agitada a 80°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografiade coluna em sílica-gel (de PE/EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC:

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PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,35) para produzir 5-(5-bromo-3-piridil)-A/-[2-( 1Hindol-3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (629 mg, 1,45 mmol, 89,9% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,87 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 8,71 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,41-8,37 (m, 1 H), 8,08 (br s, 1 H), 8,01 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 7,68 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,38 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,23-7,17 (m, 2 H), 7,11 (s, 1 H), 6,61 (br s, 1 H), 6,55 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 6,12 (s, 1 H), 3,86 (q, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,28 (t, J = 6,6 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 435,0, 437,0 [M+H]⁺.

Etapa 5: 5-[7-[2-(1 H-lndol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-5il]piridina-3-carbonitrilo(l-43)

[00357] Uma mistura de 5-(5-bromo-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (150 mg, 346,18 pmol, 1 eq), Zn(CN)₂ (162,60 mg, 1,38 mmol, 87,89 pL, 4 eq. ) e Pd(PPh₃)₄ (80,01 mg, 69,24 μιτιοΙ, 0,2 eq. ) em DMF (5 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ for 3 vezes. A mistura foi agitada a 85°C durante 19 h sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada e solução de NaHCOs saturado (10 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. Ao produto cru foi adicionado MeOH (30 mL) e agitado durante 10 min. A suspensão foi filtrada e 0 sólido foi coletado, lavado com PE / EtOAc (2/1, 30 mL x 2), secado sob vácuo para produzir 5-[7-[2-(1 /-/-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-5

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275/652 il]piridina-3-carbonitrilo(67,84 mg, 176,30 pmol, 50,9% de produção, 98,6% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSOd₆) δ ppm 10,80 (br s, 1 H), 9,46 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 9,08 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,76 (t, J = 2,1 Hz, 1 H), 8,19 (br s, 1 H), 8,14 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,29 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 7,096,97 (m, 2 H), 6,70 (s, 1 H), 6,52 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 3,85 (d, J = 6,0 Hz, 2 H), 3,14 (t, J = 7,3 Hz, 2H); ES-LCMS m/z380,2 [M+H]⁺.

Exemplo 43

Síntese de 1-44

HN

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-indan-2-il-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (I-44)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 305/704

276/652

[00358] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 168,55 pmol, 1 eq), indan-2-amina (26,94 mg, 202,25 pmol, 1,2 eq.) e DIEA (65,35 mg, 505,64 pmol, 88,07 μΙ_, 3 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi agitada a 80 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 10 min.) para fornecer 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-indan-2-il-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (27,63 mg, 59,44 pmol, 35,3% de produção, 99,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 9,32 (t, J= 1,6 Hz, 1 H), 8,66 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,50-8,46 (m, 1 H), 8,16 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,287,25 (m, 2 H), 7,20-7,17 (m, 2 H), 7,00 (s, 1 H), 4,95-4,84 (m, 1 H), 3,433,38 (m, 2 H), 3,26-3,22 (m, 1 H), 3,20-3,14 (m, 2 H), 1,37 (d, J= 7,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z388,2 [M+H]⁺.

Exemplo 44

Síntese de 1-45

1-45

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 306/704

277/652

Etapa 1: 3-lsopropil-5-fenjl-pjrazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol

[00359] Uma mistura de 3-oxo-3-fenil-propanoato de metila (100 mg, 561,21 prnol, 1 eq), 4-isopropil-1 H-pirazol-5-amina (70,25 mg, 561,21 μηποΙ, 1 eq. ) em AcOH (33,70 mg, 561,21 pmol, 32,10 μΙ_, 1 eq) foi desgaseificada e purgada com N2 for 3 vezes. A mistura foi agitada a 120°C durante 1 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 3-isopropil-5-fenilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (90 mg, 355,31 prnol, 63,3% de rendimento) como óleo marrom escuro que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ES-LCMS m/z 254,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 7-Cloro-3-isopropil-5-fenjl-pjrazolo[1,5-a]pirimidina

[00360] Uma solução de 3-isopropil-5-fenil-pirazolo [1,5-a] pirimidin7-ol (90 mg, 355,31 prnol, 1 eq.) em POCI3 (2 mL) foi agitada a 110 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 307/704

278/652 diluída com DCM (10 mL x 2), concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc=100/1 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, R_f = 0,55) para produzir 7-cloro-3-isopropil-5-fenil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (60 mg, 207,11 μηποΙ, 58,3% de produção, 93,8% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,15-8,07 (m, 3 H), 7,577,49 (m, 3 H), 7,40 (s, 1 H), 3,37-3,48 (m, 1 H), 1,45 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 272,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: AZ-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropil-5-fenil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (I-45)

[00361] Uma mistura de 7-cloro-3-isopropil-5-fenil-pirazolo[1,5a]pirimidina (60 mg, 207,11 μηποΙ, 1 eq), 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (49,77 mg, 310,66 μηποΙ, 1,5 eq.) e DIEA (133,84 mg, 1,04 mmol, 180,37 pL, 5 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 for 3 vezes. A mistura foi agitada a 50°C durante 3 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 250 * 50 mm*10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir Λ/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-5-fenilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (38,50 mg, 81,29 μηποΙ, 39,3% de produção, 98,9% de pureza, 2HCI) como um sólido cinzento. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,12 (s, 1 H), 7,58-7,52 (m, 2 H), 7,49-7,43 (m, 2 H), 7,23 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,20-7,15 (m, 2 H), 7,07-7,02 (m, 2 H), 6,90-6,84 (m, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 3,96 (t, J= 5,8 Hz, 2 H), 3,29-3,23

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 308/704

279/652 (m, 1 Η), 3,23-3,19 (m, 2 Η), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z

396,2 [M+H]⁺.

Síntese de 1-46

Exemplo 45

Esquema sintético:

Etapa 1: 3-lsopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol

[00362] Uma mistura de 3-oxo-3-(3-piridil)propanoato de metila (100 mg, 558,12 prnol, 1 eq. ) e 4-isopropil-1 H-pirazol-5-amina (69,86 mg, 558,12 prnol, 1 eq. ) em AcOH (2 mL) foi agitada a 120°C for 0,5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 309/704

280/652 o produto cru 3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (120 mg, 471,91 prnol, 84,6% de produção, pureza crua) como óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 9,47-8,95 (m, 1 H), 8,80-8,70 (m, 1 H), 8,30-8,20 (m, 1 H), 7,87, 7,38 (m, 1 H), 7,60-7,50 (m, 1 H), 7,08, 1,24 (d, J = 6,8 Hz, 3 H), 1,07 (dd, J = 3,5, 6,8 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z255,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 7-Cloro-3-isopropil-5-(3-pirjdil)pirazolo[1,5-a]pirjmjdina

[00363] Uma solução de 3-lsopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol (120,00 mg, 471,91 pmol, 1 eq. ) em POCL (4,95 g, 32,28 mmol, 3 mL, 68,41 eq) foi agitada a 110°C for 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, diluída com DCM (20 mL) 0 qual foi purificado por preparativa-TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,40) para fornecer 7-cloro-3-isopropil-5-(3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (58 mg, 212,66 pmol, 45,1% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido verde. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,32 (br s, 1 H), 8,75 (br s, 1 H), 8,45 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 8,12 (br s, 1 H), 7,52-7,44 (m, 1 H), 7,43-7,39 (m, 1 H), 3,45-3,40 (m, 1 H), 1,51-1,41 (m, 6H); ES-LCMS m/z273,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: /V-[2-(1 H-lndol-3-il)etil]-3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (I-46)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 310/704

281/652

[00364] A uma solução de 7-cloro-3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (40 mg, 146,66 pmol, 1 eq. ) e 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (35,25 mg, 220,00 μιτιοΙ, 1,5 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (56,87 mg, 439,99 μιτιοΙ, 76,64 pL, 3 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*10pm; fase móvel: [água (0,05% HCI) - ACN]; % de B: 25% - 55%, 10 min.) para produzir N-[2(1 /-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7amina (31,67 mg, 60,73 μιτιοΙ, 41,4% de produção, 97,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,84 (dd, J= 1,2, 5,4 Hz, 1 H), 8,74 (d, J= 1,8 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 8,047,98 (m, 1 H), 7,91 (dd, J = 5,2, 7,8 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,01-6,95 (m, 2 H), 6,91-6,86 (m, 1 H), 5,81 (s, 1 H), 4,00-3,94 (m, 2 H), 3,24-3,16 (m, 3 H), 1,32 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 397,2 [M+H]⁺.

Exemplo 46

Síntese de 1-47

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 311/704

282/652

OH

M7

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-(trifluorometil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol

OH

[00365] A uma solução de (Z)-3-(5-fluoro-3-piridil)-3-hidróxi-prop-2enoato de metila (100,00 mg, 486,91 pmol, 1 eq.) em AcOH (2 mL) foi adicionado 4-(trifluorometil)-1 H-pirazol-5-amina (91,32 mg, 486,91 pmol, 1 eq, HCI). A mistura foi agitada a 120 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o produto cru 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (100 mg, 335,35 pmol, 68,9% de produção, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,00 (d, J = 1,3 Hz, 1 H), 8,87-8,79 (m, 2 H), 8,35 (s, 1 H), 8,23-8,11 (m, 2H); ES-LCMS m/z299,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: 7-Cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-(trjfluorometil)pirazolo[1,5a]pirimidina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 312/704

283/652 ci

[00366] Uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (100 mg, 335,35 pmol, 1 eq. ) em POCI3 (18,85 g, 122,94 mmol, 11,42 mL, 366,59 eq) foi agitada a 110°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover 0 solvente. O resíduo foi diluída com DCM (20mL x 2) e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,64) para fornecer 0 produto composto 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (34 mg, 80,53 pmol, 24,0% de produção, 75,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,13 (s, 1 H), 8,67 (s, 1 H), 8,48 (s, 1 H), 8,30 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 7,65 (s, 1 H); ES-LCMS m/z317,1,319,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-FI uoro-3-piridi l)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-47)

[00367] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (30 mg, 71,06 pmol, 1 eq. ) e 2(1 H-indol-3-il)etanamina (17,08 mg, 106,59 pmol, 1,5 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (27,55 mg, 213,18 pmol, 37,13 pL, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 h. A mistura de reação foi

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 313/704

284/652 concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150*25mm*1 Opm; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 52% a 82%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 5-(5-f luoro-3-pi ridil)-A/-[2-( 1 H-i ndol-3-il)etil]-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (24,84 mg, 45,09 pmol, 63,5% de produção, 99,8% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,77 (br s, 1 H), 8,67 (s, 1 H), 8,28 (s, 1 H), 7,91 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,71-7,63 (m, 1 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 7,04-6,96 (m, 2 H), 6,90 (s, 1 H), 6,02 (s, 1 H), 3,90 (t, J = 6,1 Hz, 2 H), 3,16 (t, J = 6,1 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 441,2 [M+H]⁺.

Exemplo 47

Síntese de 1-48

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 314/704

285/652

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-9-isopropil-/V-(5-metoxiindan-2il)purin-6-amina

[00368] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (50 mg, 164,55 pmol, 1 eq. ) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (170,13 mg, 1,32 mmol, 229,29 pL, 8 eq.) e 5-metoxiindan-2amina (33,60 mg, 168,27 pmol, 1,02 eq, HCI) sob N2. A mistura foi agitada a 60°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-A/-(5metoxiindan-2-il)purin-6-amina cru (60 mg, 102,80 pmol, 62,4% de produção, 71,7% de pureza) como óleo marrom escuro que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 11,16 (s, 1 H), 9,54 (s, 1 H), 8,51 (d, J=2,9 Hz, 1 H), 8,45 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,83 (s, 1 H), 7,17 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,77 (dd, J= 2,5, 8,3 Hz, 1 H), 4,92 (m, 1 H), 4,04 (td, J= 6,1, 12,3 Hz, 1 H), 3,84-3,79 (m, 3 H), 3,48 (dt, J= 7,3, 16,5 Hz, 2 H), 3,05-2,92 (m, 2 H), 1,22 (d, J = 6,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z419,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-pirjdil)-9-isopropil-/V-(5-metoxiindan-2il)purin-6-amina (1-48)

[00369] Uma solução de 2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-A/-(5metoxiindan-2-il)purin-6-amina (60 mg, 102,80 pmol, 1 eq. ) em HBr (5

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 315/704

286/652 mL, 60% em água) foi agitada a 120 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250x50mmx10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 2-[[2-(5fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6-il]amino]indan-5-ol (21,36 mg, 44,75 μιτιοΙ, 43,5% de produção, 100% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,58 (s, 1 H), 9,22 (s, 1 H), 8,98 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 8,90 (s, 1 H), 7,09 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 6,73 (s, 1 H), 6,65 (dd, J= 2,4, 8,2 Hz, 1 H), 5,24 (s, 1 H), 5,16 (td, J= 6,8, 13,6 Hz, 1 H), 3,46 (ddd, J= 7,2, 12,7, 15,8 Hz, 2 H), 3,02 (dt, J= 4,5, 14,9 Hz, 2 H), 1,75 (d, J= 6,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z405,1 [M+H]⁺

Exemplo 48

Síntese de 1-49

Esquema sintético:

Etapa 1: 4-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]etil]fenol (I-49)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 316/704

287/652

[00370] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (50 mg, 164,89 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (170,49 mg, 1,32 mmol, 229,77 pL, 8 eq. ) e 4-(2-aminoetil)fenol (33,93 mg, 247,34 pmol, 1,50 eq) sob N₂. A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 4-[2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]etil]fenol (46,38 mg, 109,83 pmol, 66,6% de produção, 100% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,85-8,75 (m, 2 H), 8,27 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 8,09 (td, J= 2,3, 9,2 Hz, 1 H), 7,07 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,65-6,56 (m, 3 H), 6,46 (s, 1 H), 3,97 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,00 (t, J= 6,5 Hz, 2H); ESLCMS m/z 350,2 [M+H]⁺.

Exemplo 49

Síntese de 1-50

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 317/704

288/652

1-50

Esquema sintético:

° 1 °\

Pd/c, H₂ \ J| JT y con. HCI, MeOH z^N=\ JÍ JL con. ^H2SO₄, AcOH HO O

Etapa 1: (6E)-6-Hidroxi-imino-5H-ciclopenta[f][1,3]benzodioxol-7ona o

[00371] A suspensão de 5,6-di-h-drociclopenta[f][1,3]benzodioxol-7ona (0,5 g, 2,84 mmol, 1 eq. ) em MeOH (45 mL) foi aquecida a 45 °C, em seguida nitrito de isopentila (539,40 mg, 4,60 mmol, 0,62 mL, 1,62 eq. ) e con. HCI (12 M em água, 0,47 mL, 1,99 eq) foram adicionados. A mistura foi agitada a 45°C durante 1,5 h. A mistura foi filtrada, o bolo foi lavado com MeOH frio (5 mL x 2), secado sob vácuo para fornecer um produto (300 mg). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo o qual foi adicionado MeOH (5 mL), em seguida foi filtrado, secado sob vácuo para fornecer um produto (200 mg). O composto (6E)-6-Hidroxi-imino-5/-/-ciclopenta[f][1,3]benzodioxol7-ona (500 mg, 2,44 mmol, 85,8% de produção, 100% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 12,47 (s, 1 H), 7,14 (d, J = 10,4 Hz, 2 H), 6,18 (s, 2 H), 3,64 (s, 2H); ES-LCMS m/z 206,1 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 318/704

289/652

Etapa 2: 6,7-Di-hidro-5H-ciclopenta[f][1,3]benzodioxol-6-amina

[00372] A uma solução de (6E)-6-Hidroxi-imino-5/-/ciclopenta[f][1,3]benzodioxol-7-ona (500 mg, 2,44 mmol, 1 eq. ) em AcOH (25 mL) e H2SO4 con. (0,3 mL) foi adicionado Pd/C (0,13 g, 10%). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 h sob H2 2,10918 kg/cm² (30 psi). A mistura foi filtrada, 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi adicionado água (50 mL), ajustado ao pH a 10-11 com 2 N NaOH aquoso, extraída com DCM (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 6,7-di-hidro-5H-ciclopenta[f][1,3]benzodioxol-6-amina (250 mg, 1,13 mmol, 46,3% de produção, 80% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 6,68 (s, 2 H), 5,90 (s, 2 H), 3,91-3,76 (m, 1 H), 3,09 (dd, J= 6,8, 15,3 Hz, 2 H), 2,58 (dd, J= 4,9, 15,4 Hz, 2H); ES-LCMS m/z Nenhuma massa correta foi encontrada.

Etapa 3: W-(6,7-Di-hidro-5H-ciclopenta[f][1,3]benzodioxol-6-il)-5-(5fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-50)

[00373] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (60 mg, 197,87 pmol, 1 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (127,87 mg, 989,37 pmol, 172,33 pL, 5 eq. ) e 6,7-dihidro-5/-/-ciclopenta[f][1,3]benzodioxol-6-amina (65,74 mg, 296,81 pmol,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 319/704

290/652

1,5 eq). A mistura foi agitada a 90 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250x50mmx10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir A/-(6,7-dihidro-5H-ciclopenta[f][1,3]benzodioxol-6-il)-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (21,53 mg, 46,43 pmol, 23,4% de produção, 99,7% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,02 (t, J = 1,3 Hz, 1 H), 8,81 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,34-8,29 (m, 1 H), 8,28 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 6,76 (s, 2 H), 6,66 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 5,94-5,90 (m, 2 H), 5,08 (t, J= 6,8 Hz, 1 H), 3,46 (dd, J= 7,7, 15,4 Hz, 2 H), 3,18 (dd, J= 6,3, 15,5 Hz, 2H); ESLCMS m/z 390,1 [M+H]⁺.

Exemplo 50

Síntese de 1-51

[00374] Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 320/704

291/652

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-(5-metoxiindan-2-il)-3-metil-

[00375] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (35 mg, 133,25 μιτιοΙ, 1,0 eq. ) em /-PrOH (4 mL) foi adicionado DIEA (86,10 mg, 666,24 pmol, 116,04 pL, 5,0 eq.) e 5-metoxiindan-2-amina (30 mg, 150,24 pmol, 1,13 eq, sal de HCI). A mistura foi agitada a 60°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 5-(5-fIuoro-3-piridil)-A/(5-metoxiindan-2-il)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (50 mg, 113,24 pmol, 85,0% de produção, 88,2% de pureza) foi obtido como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,07 (s, 1 H), 8,55 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,21 (d, J= 9,9 Hz, 1 H), 7,86 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 6,876,75 (m, 2 H), 6,60 (m, 1 H), 6,39 (s, 1 H), 4,66 (s, 1 H), 3,81 (s, 3 H), 3,70-3,64 (m, 4H), 2,39 (s, 3 H); ES-LCMS m/z390,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-[[5-(5-Fluoro-3-pirjdil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirjmjdin-7il]amino]indan-5-ol (1-51)

[00376] 5-(5-Fluoro-3-piridil)-A/-(5-metoxiindan-2-il)-3-metil

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 321/704

292/652 pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (50 mg, 113,24 pmol, 1 eq) foi adicionado into HBr (5 mL, 60% em água) e a mistura foi agitada a 120°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-[[5-(5fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-<a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (15,05 mg, 33,46 μιτιοΙ, 29,5% de produção, 99,6% de pureza, 2 sal de HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,03 (s, 1 H), 8,75 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,31 (td, J= 2,3, 9,3 Hz, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,08 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 6,89 (s, 1 H), 6,72 (s, 1 H), 6,68-6,62 (m, 1 H), 4,99-4,95 (m, 1 H), 3,50-3,41 (m, 2 H), 3,21-3,10 (m, 2 H), 2,37 (s, 3 H); ES-LCMS m/z376,1 [M+H]⁺.

Exemplo 51

Síntese de I-52

HN

I-52

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 322/704

293/652

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-(5-metoxiindan-2-il)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina

[00377] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (50 mg, 164,89 pmol, 1,0 eq. ) em /-PrOH (6 mL) foi adicionado DIEA (106,56 mg, 824,47 pmol, 143,61 pL, 5,0 eq. ) e 5metoxiindan-2-amina (35 mg, 175,28 pmol, 1,06 eq, sal de HCI). A mistura foi agitada a 60°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. O composto 5-(5-fluoro3-piridil)-A/-(5-metoxiindan-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (60 mg, 139,21 pmol, 84,4% de produção, 87,1% de pureza) foi obtido como um óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,97 (s, 1 H), 8,49 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,09 (td, J= 2,3, 9,5 Hz, 1 H), 7,94 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 7,11 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 6,79-6,69 (m, 2 H), 6,51 (d, J = 2,2 Hz, 1 H),

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 323/704

294/652

6,37 (s, 1 Η), 4,63-4,55 (m, 1 Η), 3,77-3,68 (m, 3 Η), 3,59 (dt, J = 3,0, 6,6 Hz, 4H); ES-LCMS m/z376,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]indan-5-ol

[00378] 5-(5-Fluoro-3-piridil)-A/-(5-metoxiindan-2-il)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (60 mg, 139,21 pmol, 1 eq) foi adicionado em HBr (6 mL, 60% em água) e a mistura foi agitada a 120°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (32,33 mg, 72,95 pmol, 52,4% de produção, 98,0% de pureza, 2 sal de HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,01 (s, 1 H), 8,82 (s, 1 H), 8,34-8,26 (m, 2 H), 7,12-7,05 (m, 2 H), 6,73 (s, 1 H), 6,69-6,63 (m, 2 H), 5,06 (s, 1 H), 3,47 (td, J= 8,3, 15,9 Hz, 2 H), 3,27-3,15 (m, 2H); ES-LCMS m/z 362,1 [M+H]⁺.

Exemplo 52

Síntese de 1-53

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 324/704

295/652

Etapa 1: 5-[4-Cloro-6-(ciclopentóxi)pirjmidin-2-jl]pjrjdina-3carbonitrilo

[00379] A uma solução de ciclopentanol (20,84 mg, 241,96 umol, 21,96 μΙ_, 1,5 eq.) em THF (3 mL) foi adicionado NaH (9,68 mg, 241,96 μηποΙ, 60% em óleo mineral, 1,5 eq). A mistura foi agitada a 0°C durante 30 min. 5-(4,6-dicloropirimidin-2-il)piridina-3-carbonitrilo(50 mg, 161,31 μηποΙ, 1 eq) foi adicionado na solução acima e a mistura foi agitada a 28°C durante 12 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 325/704

296/652 por adição de NH4CI (2 mL) e água (1 mL), em seguida extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi purificado por TLC preparativa (PE/EtOAc = 13/1, TLC: PE / EtOAc = 13/1, R_f = 0,54) para produzir 5-[4-cloro-6(ciclopentóxi)pirimidin-2-il] piridina-3-carbonitrilo (35 mg, 108,23 pmol, 67,1% de produção, 93,0% de pureza) como um sólido branco.. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,70 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 9,04 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 9,01 (t, J= 2,1 Hz, 1 H), 6,91 (s, 1 H), 5,72-5,67 (m, J= 3,1,6,0 Hz, 1 H), 2,15-2,08 (m, 2 H), 1,95-1,88 (m, 2 H), 1,87-1,83 (m, 2 H), 1,77-1,70 (m, 2H); ES-LCMS m/z301,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-[4-(Ciclopentóxi)-6-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]pirimidin2-il]piridina-3-carbonitrilo(l-53)

[00380] 5-[4-Cloro-6-(ciclopentóxi)pirimidin-2-il]piridina-3carbonitrilo(60 mg, 185,54 pmol, 1 eq), 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (74,32 mg, 463,85 pmol, 2,5 eq.) e DIEA (23,98 mg, 185,54 pmol, 32,32 uL, 1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em /-PrOH (4 mL). O tubo selado foi aquecido a 135°C durante 3 h sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 250 * 50 mm*10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 5-[4-(ciclopentóxi)-6-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirimidin-2-il]piridina-3-carbonitrilo(21,28 mg, 39,58 pmol, 21,3% de produção, 99,3% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 326/704

297/652 ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 10,81 (br s, 1 H), 9,61 (s, 1 H), 9,10 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,87 (s, 1 H), 7,56 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,46 (br s, 1 H), 7,31 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 7,21-7,15 (m, 1 H), 7,07-7,01 (m, 1 H), 7,006,94 (m, 1 H), 5,72 (s, 1 H), 5,39 (br s, 1 H), 3,68 (br s, 2 H), 2,96 (t, J = 7,4 Hz, 2 H), 1,96 (d, J= 6,0 Hz, 2 H), 1,74-1,64 (m, 4H), 1,62-1,52 (m, 2H); ES-LCMS m/z425,2 [M+H]⁺.

Exemplo 53

Síntese de 1-54

Etapa 1:5-(4,6-DÍcloropirjmjdin-2-jl)pjrjdina-3-carbonjtrjlo

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 327/704

298/652

[00381] Uma mistura de 4,6-dicloro-2-iodo-pirimidina (813,84 mg, 2,91 mmol, 1 eq), ácido (5-ciano-3-piridil)borônico (409,00 mg, 2,76 mmol, 0,95 eq), Pd(dppf)Cl2 (212,96 mg, 291,04 μηποΙ, 0,1 eq), Na2CO₃(925,42 mg, 8,73 mmol, 3,0 eq.) e água (2,4 mL) in 1,4-dioxano (12 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, em seguida a mistura foi agitada a 80°C durante 1 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (50 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc=100/1 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f = 0,7) para produzir 5(4,6-dicloropirimidin-2-il)piridina-3-carbonitrilo (180 mg, 580,71 μιτιοΙ, 20,0% de produção, 81,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,81 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 9,03 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,99 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,44 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 250,9, 252,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(4-Cloro-6-isopropóxi-pirjmjdin-2-jl)pjrÍdina-3carbonitrilo

[00382] A uma solução de /-PrOH (9,69 mg, 161,31 μηποΙ, 12,35 μί, 1 eq.) em THF (3 mL) foi adicionado NaH (6,45 mg, 161,31 μηποΙ, 60%, 1 eq). A mistura foi agitada a 0°C durante 30 min. 5-(4,6-dicloropirimidin2-il)piridina-3-carbonitrilo(50 mg, 161,31 μηποΙ, 1 eq) foi adicionado na solução acima. A mistura foi agitada a 28°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi diluído com NH4CI (30 mL) e extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₃SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 328/704

299/652 o qual foi purificado por TLC preparativa (ΡΕ/EtOAc = 10/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, Rf = 0,55) para produzir 5-(4-cloro-6-isopropóxi-pirimidin2-il)piridina-3-carbonitrilo (25 mg, 87,37 pmol, 54,2% de produção, 96,0% de pureza) como um sólido branco.. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,70 (s, 1 H), 9,05 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 9,01 (t, J = 2,1 Hz, 1 H), 6,90 (s, 1 H), 5,61 (td, J= 6,3, 12,4 Hz, 1 H), 1,44 (d, J = 6,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 275,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-[4-[2-(1H-indol-3-il)etilamino]-6-isopropóxi-pirimidin-2i l]piridina-3-carbon itri lo(l-54)

[00383] 5-(4-cloro-6-isopropóxi-pirimidin-2-il)piridina-3-carbonitrilo (25 mg, 91,01 pmol, 1 eq), 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (21,87 mg, 136,51 pmol, 1,5 eq. ) e DIEA (35,29 mg, 273,02 pmol, 47,56 pL, 3 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em /-PrOH (3 mL). O tubo selado foi aquecido a 135 °C durante 5 h sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 250 * 50 mm*10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 5-[4-[2-(1/-/-indol-3-il)etilamino]-6-isopropóxipirimidin-2-il]piridina-3-carbonitrilo(16,5 mg, 32,17 pmol, 35,3% de produção, 99,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 10,84 (s, 1 H), 9,62 (s, 1 H), 9,12 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,90 (s, 1 H), 7,58 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,20 ( s, 1 H), 7,09-7,02 (m, 1 H), 7,01-6,95 (m, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 5,41-5,30 (m, 1 H), 3,71 (m, 2 H), 2,97 (t, J= 7,3 Hz, 2 H), 1,31 (d, J =

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 329/704

300/652

6,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z399,2 [M+H]⁺.

Exemplo 54

Síntese de 1-55

Etapa 1: [5-(5-FI uoro-3-piridi l)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a] pi r i mi d i η-3-i l]-( 1 -piperidil)metanona (I

55)

[00384] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (50 mg, 120,07 pmol, 1 eq. ) em piridina (2 mL) foi adicionado piperidina (15,34 mg, 180,11 pmol, 17,79 pL, 1,5 eq.) e T₃P (152,82 mg, 240,15 pmol, 142,82 pL, 50%, 2 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo o qual foi diluído com EtOAc (10 mL) e extraído

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 330/704

301/652 com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 42% a 72%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir [5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 Hindol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-(1 -piperidil)metanona (12,74 mg, 21,49 pmol, 17,9% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,72-8,68 (m, 1 H), 8,57 (s, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 7,71 (td J= 2,4, 8,9 Hz, 1 H), 7,60 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,14 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,02-6,96 (m, 2 H), 6,946,89 (m, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 4,00 (t, J= 6,0 Hz, 2 H), 3,71 (m, 4H), 3,23 (t, J= 6,1 Hz, 2 H), 1,75 (m, 2 H), 1,68 (m, 4H); ES-LCMS m/z 484,2 [M+H]⁺.

Exemplo 55

Síntese de 1-56

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 331/704

302/652

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]-A/,AAdimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (I-56)

[00385] Uma mistura de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (40 mg, 96,06 μηποΙ, 1 eq), A/-metilmetanamina (23,50 mg, 288,18 μηποΙ, 3 eq, HCI) e T3P (611,29 mg, 960,60 μηποΙ, 571,30 μΙ_, 50% em EtOAc, 10 eq. ) em piridina (5 mL) foi agitada a 30°C durante 12 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi diluído com EtOAc (20 mL) e água (20 mL), extraído com EtOAc (20 mL x 3), secado sobre Na2SO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 33% a 63%, 10 min.) para fornecer 5-(5-fluoro3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]-A/,A/-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carboxamida (16,67 mg, 29,67 μηποΙ, 30,9% de produção, 98,4% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 10,82 (br s, 1 H), 9,12 (s, 1 H), 8,69 (d, J= 3,2 Hz, 1 H), 8,43 (t, J= 6,0 Hz, 1 H), 8,31 (s, 1 H), 8,21 (d, J= 10,0 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,29 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 1,6 Hz, 1 H), 7,07-7,02 (m, 1 H), 7,00-6,97 (m, 1 H), 6,78 (s, 1 H), 3,87 (q, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,16-3,03 (m, 8H); ES-LCMS m/z444,2 [M+H] ⁺.

Exemplo 56

Síntese de 1-57

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 332/704

303/652

Etapa 1: 1 -[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona (I-57)

[00386] A uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]-A/-metóxi-A/-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (50 mg, 96,85 pmol, 1 eq. ) em THF (10 mL) foi adicionado MeMgBr (3 M in EtzO, 4,68 mL, 145,10 eq) gotaagotaa25°C. Em seguida a mistura foi agitada a 25°C durante 0,5 h. A mistura foi interrompida bruscamente com NH4CI saturado (20 mL), extraída com EtOAc (20 mL x 3), secada sobre Na2SO₄, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi purificado por TLC preparativa (S1O2, PE/EA = 1/1, Rf = 0,56), em seguida purificada por HPLC preparativa

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 333/704

304/652 (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.) para fornecer 1[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 /-/-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]etanona (17,52 mg, 32,98 pmol, 34,1% de produção, 98,6% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) δ ppm 10,81 (br s, 1 H), 9,16 (s, 1 H), 8,72 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,62 (t, J= 6,4 Hz, 1 H), 8,53 (s, 1 H), 8,23 (d, J= 10,0 Hz, 1 H), 7,65 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,20 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,06-7,03 (m, 1 H), 7,02-6,99 (m, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 3,89 (q, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,14 (t, J= 7,2 Hz, 2 H), 2,72 (s, 3 H); ES-LCMS m/z415,2 [M+H]⁺.

Exemplo 57

Síntese de 1-58

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 334/704

305/652

Etapa 1.: 4-[5-(5-f luoro-3-piridi 1)-7-(2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbonil]piperazina-1carboxilato de terc-butila

[00387] Uma mistura de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (50 mg, 120,07 pmol, 1 eq), piperazina-1-carboxilato de terc-butila (26,84 mg, 144,09 pmol, 1,2 eq. ) e T3P (382,06 mg, 600,37 μιτιοΙ, 357,06 uL, 50%, 5 eq. ) em piridina (1 mL) foi agitada a 25 °C durante 16 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente com água (5 mL) e extraída com EtOAc (10 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer 4-[5-(5-fluoro3-pi ridil)-7-[2-( 1 H-i ndol-3-il)etilami no]pi razolo [1,5-a]pi ri midi na-3carbonil]piperazina-1-carboxilato de terc-butila (100 mg, cru) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte diretamente sem nova purificação.

Etapa 2: [5-(5-Fluoro-3-piridi l)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-piperazin-1 -il-metanona (I58)

[00388] À solução de 4-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carbonil]piperazina-1-carboxilato

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 335/704

306/652 de terc-butila (100 mg, 171,04 pmol, 1 eq. ) em MeOH (3 mL) foi adicionado HCI/MeOH (4 M, 3 mL) e em seguida a mistura foi agitada a 25 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para fornecer [5-(5fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 /-/-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]piperazin-1-il-metanona (19,42 mg, 39,99 pmol, 23,4% de produção, 99,8% de pureza) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfô) δ ppm 10,80 (s, 1 H), 9,12 (s, 1 H), 8,69 (d, J=2,8 Hz, 1 H), 8,41 (t, J= 6,0 Hz, 1 H), 8,32 (s, 1 H), 8,23-8,16 (m, 1 H), 7,63 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,29 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,22 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 7,05 (t, J= 7,2 Hz, 1 H), 7,00-6,95 (m, 1 H), 6,77 (s, 1 H), 3,87 (q, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,54 (m, 4H), 3,13 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 2,77-2,73 (m, 4H); ES-LCMS m/z 485,2 [M+H]⁺.

Exemplo 58

Síntese de 1-59

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 336/704

307/652

Etapa 1: 4,6-Dicloro-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina

[00389] A uma suspensão de 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (666,18 mg, 4,16 mmol, 1,05 eq.) em THF seco (10 mL) foi adicionado NaH (223,55 mg, 5,59 mmol, 60% em óleo mineral, 1,41 eq) sob banho de gelo e atmosfera de N2. Após ser agitada durante 30 min, a suspensão foi resfriada para -60°C e uma solução de 4,6-dicloro-2-metilsulfonilpirimidina (900 mg, 3,96 mmol, 1,0 eq. ) em THF seco (10 mL) foi adicionada gota a gota e mantida em temperatura abaixo de -55°C. A mistura resultante foi agitada durante 1 h a -55°C. A mistura de reação foi derramada em água (100 mL) vagarosamente e extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina, secadas sobre Na₂SO4 e concentradas para fornecer o resíduo o qual foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,45) para produzir 4,6-dicloroΛ/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (840 mg, 2,68 mmol, 67,6% de produção, 98,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,04 (s, 1 H), 7,68 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,36 (d, J = 7,9 Hz,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 337/704

308/652

Η), 7,23 (dt, J= 1,1,7,6 Hz, 1 H), 7,19-7,14 (m, 1 H), 6,98 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 6,59 (s, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 3,83-3,73 (m, 2 H), 3,07 (t, J= 6,8 Hz, 2H); ES-LCMS m/z307,0, 309,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: 4-Cloro-6-(ciclopentóxi)-/V-[2-(1 H-jndol-3-il)etil]pirjmjdin-2amina

[00390] A uma solução de NaH (30,63 mg, 765,68 pmol, 60% em óleo mineral, 1,2 eq.) em THF (3 mL) foi adicionado ciclopentanol (57,71 mg, 669,97 pmol, 60,81 pL, 1,05 eq). A mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min. 4,6-dicloro-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (200 mg, 638,07 pmol, 1 eq) foi adicionado na solução acima e a mistura foi agitada a 15 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 4-cloro-6-(ciclopentóxi)-A/-[2-(1 Hindol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (170 mg, 309,66 pmol, 48,5% de produção, 65,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 8,03 (s, 1 H), 7,66 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,39 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,257,19 (m, 1 H), 7,18-7,10 (m, 1 H), 7,08-7,02 (m, 1 H), 6,60 (s, 1 H), 5,98 (s, 1 H), 5,31 (m, 1 H), 3,80-3,72 (m, 2 H), 3,11-3,04 (m, 2 H), 2,01-1,54 (m, 8H); ES-LCMS m/z357,1,358,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-(Ciclopentóxi)-6-(5-fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirimidin-2-amina (I-59)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 338/704

309/652

[00391 ] 4-Cloro-6-(ciclopentóxi )-Λ/-[2-( 1 H-ϊ ndol-3-i l)etiI]pi ri midi n-2amina (170 mg, 304,89 pmol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (128,88 mg, 914,67 pmol, 3 eq), CS2CO3 (298,02 mg, 914,67 pmol, 3,0 eq.) e Pd(dppf)CÍ2 (22,31 mg, 30,49 pmol, 0,1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (6 mL) e água (1,2 mL). O tubo selado foi aquecido a 80 °C durante 30 minutos sob irradiação de microondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (100 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,40), em seguida re-purificada por HPLC preparativa (condição de HCI, coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 48% a 78%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 4-(ciclopentóxi)6-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirimidiη-2-amina (25,91 mg, 48,46 pmol, 15,9% de produção, 98,5% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,13 (s, 1 H), 8,88 (s, 1 H), 8,64 (s, 1 H), 8,40 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,63 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,38 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,25 (s, 1 H), 7,20 (t, J= 7,4 Hz, 1 H), 7,15-7,09 (m, 1 H), 6,32 (s, 1 H), 5,27 (s, 1 H), 3,85 (q, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,17 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 1,94 (d, J = 5,8 Hz, 2 H), 1,84-1,74 (m, 4H), 1,70-1,62 (m, 2H); ES-LCMS m/z418,2 [M+H]⁺.

Exemplo 59

Síntese de 1-60

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 339/704

310/652

1-60

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-piperazin-1 il-pirimidin-4-amina

[00392] Uma mistura de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol3-il)etil]pirimidin-4-amina (60 mg, 161,50 pmol, 1 eq), piperazina (139,11 mg, 1,61 mmol, 10 eq. ) e DIEA (104,36 mg, 807,49 pmol, 140,65 pL, 5 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi selada e irradiada sob micro-ondas (4 bar) at 150°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida à secura para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm*10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 8% a 38%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para fornecer 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2(1 /-/-indol-3-il)etil]-6-piperazin-1-il-pirimidin-4-amina (60,34 mg, 106,30 pmol, 65,8% de produção, 99,2% de pureza, 4HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,05 (s, 1 H), 8,77 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,33 (d, J= 9,2 Hz, 1 H), 7,64 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,33 (d,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 340/704

311/652

J= 7,6 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,12-7,07 (m, 1 H), 7,06-7,01 (m, 1 H), 5,58 (br s, 1 H), 3,86-3,72 (m, 6H), 3,27-3,24 (m, 4H), 3,14 (t, J= 6,0 Hz, 2H); ES-LCMS m/z418,1 [M+H]⁺.

Exemplo 60

Síntese de 1-61

1-61

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1H-indol-3-il)etilamino]-/V-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (1-61)

[00393] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (60 mg, 144,09 pmol, 1 eq. ) em DCM anidroso (5 mL) foi adicionado DIEA (55,87 mg, 432,27 pmol, 75,29 pL, 3 eq), HATU (136,97 mg, 360,22 pmol, 2,5 eq. ) e cloridrato de metanamina (19,46 mg, 288,18 pmol, 2 eq). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 h. H2O (10 mL) foi adicionado, a mistura foi extraída com DCM (10 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 341/704

312/652 com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas para fornecer o produto cru o qual foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/hLO como eluentes, condição acídica, Instrumento: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm*10 um/Fase móvel: água (0,05% de HCI) - ACN/Gradiente: B de 35% a 65% em 10 min/ Taxa de vazão: 25mL/min.) seguida por liofilização para produzir 5-(5fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 /-/-indol-3-il)etilamino]-A/-metil-pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carboxamida (19,25 mg, 35,73 pmol, 24,79% de produção, 100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,73 (d, J= 12,5 Hz, 2 H), 8,47 (s, 1 H), 7,94 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,70 (dd, J= 3,0, 6,0 Hz, 1 H), 7,15 (dd, J= 2,9, 6,1 Hz, 1 H), 7,07-7,02 (m, 2 H), 6,97 (s, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 3,97 (t, J= 6,0 Hz, 2 H), 3,23 (t, J = 6,1 Hz, 2 H), 3,04-2,99 (m, 3 H); ES-LCMS m/z 452,1 [M+Na]⁺.

Exemplo 61

Síntese de I-62

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-N-[2-(1H-indol-3-il)etil]-6-(1piperidil)pirimidin-4-amina (I-62)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 342/704

313/652

[00394] 6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirimidin4-amina (60,61 mg, 163,13 μιτιοΙ, 1,0 eq), piperidina (862,20 mg, 10,13 mmol, 1 mL, 62,07 eq. ) e DIEA (63,25 mg, 489,39 μιτιοΙ, 85,24 pL, 3,0 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas in /-PrOH (3 mL). O tubo selado foi aquecido a 150°C durante 3 h sob irradiação de microondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo o qual foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini C18 250 x 50 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2(1 /-/-indol-3-il)etil]-6-(1-piperidil)pirimidin-4-amina (33,57 mg, 63,84 μηποΙ, 39,1% de produção, 100,0% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 10,92 (s, 1 H), 9,29 (s, 1 H), 8,83 (s, 1 H), 8,52 (d, J= 6,8 Hz, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,59 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,40-7,25 (m, 2 H), 7,16-6,91 (m, 2 H), 5,77 (s, 1 H), 4,17 (s, 4H), 3,63 (d, J= 6,6 Hz, 2 H), 3,02 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 1,75-1,47 (m, 6H); ES-LCMS m/z417,2 [M+H]⁺.

Exemplo 62

Síntese de 1-63

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 343/704

314/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-pi ridi l)-A/6-[2-(1 H-indol-3-i l)eti Ι]-Λ/4,Λ/4dimetil-pirimidina-4,6-diamina (I-63)

[00395] 6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirimidin4-amina (80,81 mg, 217,51 umol, 1,0 eq), A/-metilmetanamina (177,36 mg, 2,18 mmol, 10 eq, sal de HCI) e DIEA (168,66 mg, 1,31 mmol, 227,31 μΙ_, 6,0 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas. O tubo selado foi aquecido a 150°C durante 3 h sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% HCI) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro3-piridil)-A/6-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-A/4,A/4-dimetil-pirimidina-4,6-diamina (28,13 mg, 56,54 pmol, 26,0% de produção, 97,7% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-ok) δ ppm 10,93 (s, 1 H), 9,31 (s, 1 H), 8,85 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,55 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,60 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,42-7,25 (m, 2 H), 7,107,04 (m, 1 H), 7,02-6,96 (m, 1 H), 5,59 (s, 1 H), 4,04 (s, 6H), 3,62 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 3,03 (t, J= 6,7 Hz, 2H); ES-LCMS m/z377,2 [M+H]⁺.

Exemplo 63

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315/652

Síntese de 1-64

Esquema sintético:

1-64

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-morfolinopirimidin-4-amina (I-64)

[00396] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 Hindol-3-il)etil]pirimidin-4-amina (60 mg, 161,50 pmol, 1 eq. ) em APrOH (1,5 mL) foi adicionado DIEA (208,72 mg, 1,61 mmol, 281,29 pL, 10 eq), morfolina (281,39 mg, 3,23 mmol, 284,24 pL, 20 eq). A mistura foi agitada a 150°C durante 1,5 h em micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 2-(5-fIuoro-3-piridil)Λ/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-morfolino-pirimidin-4-amina (53,33 mg, 101,03

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316/652 μηποΙ, 62,5% de produção, 100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 10,87 (s, 1 H), 9,30 (s, 1 H), 8,86-8,32 (m, 2 H), 7,59 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,25 (s, 1 H), 7,11-7,04 (m, 1 H), 7,03-6,94 (m, 1 H), 5,70 (s, 1 H), 3,78-3,60 (m, 11 H), 3,01 (t, J= 7,1 Hz, 2H); ES-LCMS m/z419,2 [M+H]⁺.

Exemplo 64

Síntese de 1-65

Esquema sintético:

Etapa 1: [5-(5-FI uoro-3-piridi l)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-morfolino-metanona (I-65)

[00397] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (40 mg, 96,06 μηποΙ, 1 eq. ) em piridina (3 mL) foi adicionado T₃P (122,26 mg, 192,12 μηποΙ,

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114,26 μΙ_, 50%, 2 eq. ) e morfolina (16,74 mg, 192,12 pmol, 16,91 pL, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de água (50 mL), em seguida extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250x50mmx10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir [5-(5-fluoro3-piridil)-7-[2-(1 /-/-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]morfolino-metanona (19,50 mg, 32,66 pmol, 34,0% de produção, 99,6% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,71-8,59 (m, 2 H), 8,34 (s, 1 H), 7,73 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 7,63 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,05-6,90 (m, 3 H), 6,06 (s, 1 H), 3,97 (t, J= 6,1 Hz, 2 H), 3,75 (s, 8H), 3,22 (t, J= 5,8 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 486,2 [M+H]⁺.

Exemplo 65

Síntese de 1-66

Esquema sintético:

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318/652

SH Ο

Etapa 1: 7-Fluoro-2-metil-3-metilsulfanil-1 H-indol

[00398] 2-Fluoroanilina (0,9 g, 8,10 mmol, 782,61 μΙ_, 1 eq. ) e 1metilsulfanilpropan-2-ona (371,24 mg, 3,56 mmol, 0,44 eq) foram inicialmente introduzidos em acetato de n-Butila (4 ml) e resfriados a 30°C sob N₂. Uma solução de cloreto de sulfurila (437,28 mg, 3,24 mmol, 323,91 μΙ_, 0,4 eq.) em acetato de n-Butila (4 ml) foi adicionada gota a gota. A mistura foi agitada durante 2 h a -30°C. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de água (50 mL) a 0°C, em seguida extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 20/1, R_f = 0,34) para produzir um produto 7-fluoro-2-metil-3-metilsulfanil-1 H-indol (1 g, 4,56 mmol, 56,3% de produção, 89,0% de pureza) como óleo vermelho-amarronzado. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,31 (s, 1 H), 7,45 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,07 (dt, J= 4,7, 7,9 Hz, 1 H), 6,89 (dd, J= 7,8, 10,9 Hz, 1 H), 2,56 (s, 3

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Η), 2,27 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 195,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 7-Fluoro-2-metil-1 H-indol

[00399] A uma solução de 7-fluoro-2-metil-3-metilsulfanil-1 H-indol (737,08 mg, 3,36 mmol, 1 eq.) em TFA (8 mL) foi adicionado ácido 2sulfanilbenzoico (1,30 g, 8,40 mmol, 2,5 eq). A mistura foi agitada a 25°C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 20/1, Rf = 0,40) mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e uma nova mancha formou-se. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de água (100 mL), em seguida ajustado a um Ph a 10 por 1N de NaOH aquoso, extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 20/1, R_f = 0,40) para produzir 7-fluoro2-meti 1-1 H-indol (400 mg, 2,09 mmol, 62,3% de produção, 78,0% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 11,33 (s, 1 H), 7,20 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,92-6,74 (m, 2 H), 6,19 (s, 1 H), 2,38 (s, 3 H); ES-LCMS m/z Nenhuma massa correta foi encontrada.

Etapa 3: 7-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-carbaldeído

[00400] A uma solução de DMF (10 mL) foi adicionado POCL (481,07 mg, 3,14 mmol, 291,56 pL, 2,0 eq) gota a gota a -20°C durante um período de 10 min sob N₂. Após 1 h, 7-fluoro-2-metil-1 H-indol (300 mg, 1,57 mmol, 1 eq. ) em DMF (2 mL) foi adicionado à solução acima

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320/652 durante o que a temperatura foi mantida abaixo de -20 °C. A mistura de reação foi agitada a 15 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi interrompida bruscamente pela adição de NaHCOs aquoso (50 mL), em seguida extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,40) para produzir 7-fluoro-2-metil-1 Hindol-3-carbaldeído (200 mg, 936,93 pmol, 59,7% de produção, 83,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 12,44 (s, 1 H), 10,08 (s, 1 H), 7,85 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,13 (dt, J = 5,1, 7,8 Hz, 1 H), 7,02 (dd, J = 7,9, 11,2 Hz, 1 H), 2,70 (s, 3 H); ESLCMS m/z 177,9 [M+H]⁺.

Etapa 4: 7-Fluoro-2-metil-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol

[00401] A uma solução de 7-fluoro-2-metil-1 H-indol-3-carbaldeído (200 mg, 936,93 pmol, 1 eq.) em nitrometano (8 mL) foi adicionado NH4OAC (216,66 mg, 2,81 mmol, 3 eq). A mistura foi agitada a 110 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (50 mL), lavado com água (10 mL), solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um cru 0 qual foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,61) para produzir 7fluoro-2-metil-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (150 mg, 619,89 pmol, 66,2% de produção, 91,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,82 (br s, 1 H), 8,32 (d, J = 13,5 Hz, 1 H), 7,76 (d,

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J= 13,5 Hz, 1 H), 7,46 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,25-7,16 (m, 1 H), 7,01 (dd, J= 8,2, 10,6 Hz, 1 H), 2,67 (s, 3 H); ES-LCMS m/z220,9 [M+H]⁺.

Etapa 5: 2-(7-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etanamina

[00402] A uma solução de 7-fluoro-2-metil-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 Hindol (150 mg, 619,89 pmol, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionada gota a gota LAH (1 M em THF, 3,10 mL, 5 eq) a 0°C. Após a adição, a mistura foi agitada a 80 °C durante 2 h. A mistura de reação foi diluída com THF (50 mL), interrompida bruscamente pela adição de água (0,05 mL), NaOH aquoso (0,05 mL, 10% em água) e água (0,15 mL) em sequência a 0°C. Após ser agitada durante 30 min, a mistura foi filtrada através de celita, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um 2-(7-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etanamina cru (100 mg, 436,97 pmol, 70,5% de produção, 84,0% de pureza) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte diretamente sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,23 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,93-6,82 (m, 1 H), 6,72 (dd, J= 7,9, 11,4 Hz, 1 H), 2,90-2,80 (m, 4H), 2,39 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 193,2 [M+H]⁺.

Etapa 6: AF[2-(7-Fluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoiO-3piridil)-3-isopropil-pirazolo (I-66)

[00403] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (40,82 mg, 137,59 pmol, 1 eq. ) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (53,35 mg, 412,76 pmol, 71,89 pL, 3,0 eq. ) e

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322/652

2-(7-fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etanamina (37,78 mg, 165,11 pmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Gemini 150x25x5pm; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 70% a 100%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir A/-[2-(7-fluoro-2metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (20,36 mg, 45,36 pmol, 33,0% de produção, 99,5% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,58 (s, 1 H), 8,45 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,64-7,57 (m, 1 H), 7,37 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 6,96 (dt, J= 4,6, 7,8 Hz, 1 H), 6,69 (dd, J= 7,8, 11,6 Hz, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 3,83 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,29-3,22 (m, 1 H), 3,13 (t, J= 6,1 Hz, 2 H), 2,11 (s, 3 H), 1,38 (d, J= 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 447,2 [M+H]⁺.

Exemplo 66

Síntese de 1-67

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-FI uoro-3-pi ridi l)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-(4metilpiperazin-1 -il)pirimidin-4-amina (I-67)

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323/652

[00404] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 Hindol-3-il)etil]pirimidin-4-amina (60 mg, 161,50 pmol, 1 eq. ) e 1metilpiperazina (24,26 mg, 242,25 pmol, 26,87 uL, 1,5 eq) em Z-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (62,62 mg, 484,49 pmol, 84,39 pL, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 110 °C durante 16 h. LC-MS mostrou que 83% de material de partida permaneceu e 17% de composto desejado foi detectado. A mistura foi colocada em um tubo de micro-ondas. 1metilpiperazina (500 mg, 5 mmol) foi adicionada. A mistura foi purgada com N2 durante 1 min. O tubo selado foi aquecido a 150 °C durante 3 h sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 42% a 72%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 2-(5-fluoro-3piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-6-(4-metilpiperazi n-1 -il)pirimidin-4-amina (49,11 mg, 113,81 pmol, 70,5% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 10,82 (br s, 1 H), 9,30 (s, 1 H), 8,64 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,32 (d, J = 10,1 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,20 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,07 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,98 (t, J = 7,4 Hz, 2 H), 5,59 (br s, 1 H), 3,60 (br s, 2 H), 3,51 (br s, 4H), 2,97 (t, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,37 (d, J = 4,2 Hz, 4H), 2,20 (s, 3 H); ES-LCMS m/z432,2 [M+H]⁺.

Exemplo 67

Síntese de 1-68

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 353/704

324/652

Etapa 1: [5-(5-FI uoro-3-piridi 1)-7-(2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-(4-metilpiperazin-1il)metanona (I-68)

[00405] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (50 mg, 120,07 prnol, 1 eq.) e 1-metilpiperazina (18,04 mg, 180,11 μηποΙ, 19,98 μΙ_, 1,5 eq.) em DCM (5 mL) foi adicionado HATU (54,79 mg, 144,08 μιτιοΙ, 1,2 eq. ) e DIEA (46,55 mg, 360,21 μηποΙ, 62,74 pL, 3,0 eq). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 h. LC-MS mostrou 42% of material de partida permaneceu e 51% de composto desejado foi detectado. 1metilpiperazina (18,04 mg, 180,11 prnol, 19,98 pL, 1,5 eq), HATU (54,79

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 354/704

325/652 mg, 144,08 pmol, 1,2 eq), DIEA (46,55 mg, 360,21 pmol, 62,74 pL, 3,0 eq.) e DMF (2 mL) foi adicionada. A mistura foi agitada a 25 °C durante 5 h. A mistura de reação foi diluída com Η₂Ο (20 mL), extraída com DCM (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 36% a 66%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir [5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-(4-metilpiperazin-1-il)metanona (15,94 mg, 31,97 pmol, 26,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo claro. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,63 (s, 1 H), 8,48 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,26 (s, 1 H), 7,71-7,62 (m, 2 H), 7,19-7,13 (m, 1 H), 7,07-6,95 (m, 3 H), 6,05 (s, 1 H), 3,90 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,75 (br s, 4H), 3,19 (t, J = 6,1 Hz, 2 H), 2,54 (br s, 4H), 2,33 (s, 3 H); ESLCMS m/z 499,2 [M+H]⁺.

Exemplo 68

Síntese de 1-69

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 355/704

326/652

Etapa 1: A/-[2-(5-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3piridil)-9-isopropil-purin-6-amina (I-69)

[00406] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurine (50 mg, 164,55 pmol, eq.) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (106,33 mg, 822,73 pmol, 143,31 pL, 5 eq. ) e 2-(5-fluoro-2-metil-1 Hindol-3-il)etanamina (37,96 mg, 197,46 pmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% HCI) - ACN]; % de B: 45% a 75%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir A/-[2-(5-fluoro-2-metil-1 H-indol-3il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6-amina (32,52 mg, 58,40 pmol, 35,5% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,35 (s, 1 H), 8,93 (s, 1 H), 8,77 (s, 1 H), 8,62 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 7,15-6,94 (m, 2 H), 6,63 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 5,10-4,99 (m, 1 H), 4,04 (m, 2 H), 3,09 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 2,30 (s, 3 H), 1,71 ( d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z448,0 [M+H]⁺.

Exemplo 69

Síntese de 1-70

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 356/704

327/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-i l)eti l]-3-meti Ipirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-70)

[00407] A uma solução de 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (29,28 mg, 182,74 μιτιοΙ, 1,2 eq.) em APrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (59,04 mg, 456,85 μηποΙ, 79,57 pL, 3 eq. ) e 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (40 mg, 152,28 μηποΙ, 1 eq). A mistura foi agitada a 50 °C durante 16 h sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover /-PrOH para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-3metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (32,43 mg, 65,15 μηποΙ, 42,8% de produção, 99,6% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,72 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,56-7,52 (m, 1 H), 7,50-7,45 (m, 1 H), 7,16-7,10 (m, 1 H), 6,98 (s, 1 H), 6,97-6,92 (m, 1 H), 6,85 (m, 1 H), 5,76 (s, 1 H), 4,06-3,99 (m, 2 H), 3,24-3,19 (m, 2 H), 2,30 (s, 3 H); ES-LCMS m/z387,0 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 357/704

328/652

Exemplo 70

Síntese de 1-71

Etapa 1: /V-[2-(7-Fluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3piridil)-9-isopropil-purin-6-amina (1-71)

[00408] A uma solução de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (41,67 mg, 137,12 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (53,16 mg, 411,37 pmol, 71,65 pL, 3,0 eq), 2-(7-fluoro-2-metil-1 Hindol-3-il)etanamina (37,66 mg, 164,55 pmol, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 60 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 46% a 76%, 10 min.)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 358/704

329/652 seguida por liofilização para produzir A/-[2-(7-fluoro-2-metil-1/-/-indol-3il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6-amina (27,83 mg, 49,98 prnol, 36,4% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,30 (s, 1 H), 8,80 (s, 1 H), 8,74 (dd, J= 1,1,2,9 Hz, 1 H), 8,61-8,56 (m, 1 H), 7,28 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 6,84 (dt, J = 4,7, 7,9 Hz, 1 H), 6,63 (dd, J = 7,9, 11,7 Hz, 1 H), 5,03 (td, J= 6,9, 13,6 Hz, 1 H), 4,04 (m, 2 H), 3,12 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 2,30 (s, 3 H), 1,70 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z447,9 [M+H]⁺.

Exemplo 71

Síntese de I-72

Etapa 1:2,4-Dicloro-6-isopropóxi-pirjmjdina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 359/704

330/652

ci

[00409] A uma solução de APrOH (344,04 mg, 5,72 mmol, 438,27 μΙ_, 1,05 eq. ) em THF (8 mL) foi adicionado NaH (261,69 mg, 6,54 mmol, 60% em óleo mineral, 1,2 eq). A mistura foi agitada a 0°C durante 30 min. 2,4,6-Tricloropirimidina (1 g, 5,45 mmol, 625,00 pL, 1,0 eq) foi adicionado na solução acima e a mistura foi agitada a 15°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover THF. O resíduo foi diluída com água (150 mL), extraído com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO₄, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílicagel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 50/1, TLC: PE / EtOAc = 100/1, R_f= 0,20) para produzir a mistura 4,6-dicloro-2-isopropóxi-pirimidina (347 mg, cru) e 2,4-dicloro-6-isopropóxi-pirimidina (173 mg, cru) como um óleo incolor. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,00 (s, 1 H), 5,35-5,23 (m, 1 H), 1,40 (d, J= 6,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z207,1,209,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 4-Cloro-/V-[2-(1H-indol-3-il)etil]-6-isopropóxi-pirimidin-2amina

[00410] A uma solução de (2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (680,92 mg, 4,25 mmol, 2,2 eq. ) e 2,4-dicloro-6-isopropóxi-pirimidina (100 mg, 482,96 pmol, 0,25 eq. ) em APrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (749,01 mg, 5,80 mmol, 1,01 mL, 3,0 eq. ) e 4,6-dicloro-2-isopropóxi-pirimidina (200 mg, 965,92 pmol, 0,5 eq). A mistura foi agitada a 26 °C durante 12

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 360/704

331/652

h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo o qual foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rfi = 0,55, Rf2 = 0,45) para produzir 4-cloro-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-6isopropóxi-pirimidin-2-amina (90 mg, 220,37 pmol, 11,4% de produção, 81,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 8,05 (s, 1 H), 7,68-7,61 (m, 1 H), 7,39 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,257,19 (m, 1 H), 7,16-7,10 (m, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 5,97 (s, 1 H), 3,78-3,69 (m, 2 H), 3,10-3,03 (m, 2 H), 1,33 (d, J = 5,3 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 331,1,332,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1H-indol-3-il)etil]-6-isopropóxipirimidin-2-amina (I-72)

[00411 ] 4-Cloro-A/-[2-(1 H- i ndo l-3-i I )eti I]-6-i sopropóxi-pi ri m idi n-2amina (90,00 mg, 220,37 pmol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (62,10 mg, 440,73 pmol, 2 eq), CS2CO3 (215,40 mg, 661,10 pmol, 3,0 eq.) e Pd(dppf)CI₂ (16,12 mg, 22,04 pmol, 0,1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (3 mL) e água (0,6 mL). O tubo selado foi aquecido a 120°C durante 30 minutos sob irradiação de microondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (20 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi purificado por prep-HPLC (condição de HCI, coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 30mm x 4um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 37% a 67%, 12 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 4-(5-fluoro3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-6-isopropóxi-pirimidin-2-amina (52,48

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 361/704

332/652 mg, 104,79 μηποΙ, 47,5% de produção, 100,0% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,75 (m, 2 H), 8,06 (s, 1 H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,14 (s, 1 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 7,04-6,99 (m, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 5,18 (s, 1 H), 3,92 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,15 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 1,36 (d, J= 6,3 Hz, 6H); ES-LCMS m/z392,2 [M+H]⁺.

Exemplo 72

Síntese de 1-73

Etapa 1:2-Metil-3-oxo-propanonitrjlo

[00412] A uma solução de DIPA (1,84 g, 18,16 mmol, 2,57 mL, 1 eq.) em THF (20 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em n-hexano, 7,63 mL,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 362/704

333/652

1,05 eq). A mistura foi agitada a -65°C durante 30 min. A solução de propanonitrilo (1 g, 18,16 mmol, 1,30 mL, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado na mistura acima gota a gota. A mistura foi agitada a -65°C durante 30 minutos sob atmosfera de N2. Uma solução de formiato de etila (1,41 g, 19,06 mmol, 1,53 mL, 1,05 eq.) em THF (10 mL) foi adicionada gota a gota e ela foi agitada a -65°C durante 3 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,45) mostrou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de 1 N de solução de HCI (50 mL) a -65°C, extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 2-metil-3-oxo-propanonitrilo (1,1 g, cru) foi obtido como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,60 (s, 1 H), 3,54 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 1,55 (s, 3 H).

Etapa 2: 4-Meti 1-1 H-pirazol-5-amina

[00413] A uma solução de 2-metil-3-oxo-propanonitrilo (1,1 g, 13,24 mmol, 1 eq. ) em EtOH (12 mL) foi adicionado AcOH (1,39 g, 23,17 mmol, 1,32 mL, 1,75 eq. ) e hidrazina (550,00 mg, 17,16 mmol, 620,77 pL, 1,3 eq). A mistura foi agitada a 90°C durante 12 h. TLC (PE/EtOAc = 1/1, Rf = 0,10) mostrou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi diluído com a solução NaHCOs (100 mL), extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de DCM/MeOH = 100/1 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, Rf = 0,75) para produzir 0 composto 4-metil-1 H-pirazol-5-amina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 363/704

334/652 (230 mg, 2,37 mmol, 17,9% de produção, cru) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,13 (s, 1 H), 1,94-1,92 (m, 3 H).

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol

[00414] A uma solução de 3-(5-fluoro-3-piridil)-3-oxo-propanoato de metila (400 mg, 1,99 mmol, 1 eq. ) em AcOH (6 mL) foi adicionado 4metil-1 /-/-pirazol-5-amina (230 mg, 2,37 mmol, 1,19 eq). A mistura foi agitada a 120°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 5-(5-fIuoro-3-piridiI)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidiη-7-ol (500 mg, cru) foi obtido como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ES-LCMS m/z 245,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 7-Cloro-5-(5-fluoro-3-pirÍdil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidina

[00415] A uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol (500 mg, 655,14 pmol, 1 eq. ) em POCI3 (5 mL) foi agitada a 120°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover POCI3. O resíduo foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,40) para produzir 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (145 mg, 552,02 pmol, 84,3% de produção, 100,0% de pureza) como sólido amarelo ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,10 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,24 (dd, J = 1,8, 9,3 Hz, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 2,47 (s, 3 H); ES-LCMS m/z

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 364/704

335/652

262,9, 264,9 [Μ+Η]⁺.

Etapa 5: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-/V-[2-(2,5,7-trifluoro-1 H-indol3-il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-73)

[00416] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (40 mg, 152,28 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (157,45 mg, 1,22 mmol, 212,19 pL, 8,0 eq. ) e 2(5,7-difluoro-2-metil-1/-/-indol-3-il)etanamina (54,87 mg, 182,74 pmol, 1,2 eq, sal de ácido oxálico). A mistura foi agitada a 50°C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo o qual foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 42% a 62%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir o composto 5-(5-fluoro-3-piridil)-3metil-A/-[2-(2,5,7-trifluoro-1 /-/-indol-3-il)etil]pirazolo[1,5-<a]pirimidin-7amina (15,56 mg, 27,91 pmol, 18,3% de produção, 98,6% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,75 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,45 (s, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,66-7,61 (m, 1 H), 7,00 (dd, J= 2,2, 9,3 Hz, 1 H), 6,44 (ddd, J= 2,2, 9,5, 11,2 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 4,00 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 3,16-3,10 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H), 2,15 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 437,2 [M+H]⁺.

Exemplo 73

Síntese de 1-74

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 365/704

336/652

[00417] Esquema sintético:

Etapa 1: /V-[2-(5,7-Difluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3piridil)-6-isopropóxi-pirimidin-4-amina (I-74)

[00418] 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-pirimidina (90 mg, 322,77 pmol, 1,0 eq), 2-(5,7-difluoro-2-metil-1/-/-indol-3-il)etanamina (145,37 mg, 484,15 pmol, 1,5 eq, sal de ácido oxálico) e DIEA (333,71 mg, 2,58 mmol, 449,75 uL, 8 eq. ) em /-PrOH (5 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas. O tubo selado foi aquecido a 150°C durante 6 h sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo o qual foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (de PE / EtOAc = 100/1

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 366/704

337/652 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,50) e em seguida re-purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 60% a 90%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir N-[2(5,7-difluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxipirimidin-4-amina (26,48 mg, 48,07 pmol, 14,9% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δppm 9,10 (s, 1 H), 8,71 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,27 (s, 1 H), 6,99 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 6,54 (t, J= 9,9 Hz, 1 H), 5,69 (s, 1 H), 5,05 (s, 1 H), 3,74 (m, 2 H), 2,97 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 2,34 (s, 3 H), 1,37 (d, J = 6,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z442,2 [M+H]⁺.

Exemplo 74

Síntese de l-75a, l-75b e l-75c

l-75a l-75b l-75c

Esquema sintético:

Etapa 1: /V-(2,3,4,9-tetra-hidro-1H-carbazol-3-il)carbamato de tercbutila

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 367/704

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[00419] A uma solução de A/-(4-oxocicloexil)carbamato de terc-butila (1 g, 4,69 mmol, 1,00 mL, 1 eq.) em DCM (30 mL) foi adicionado MgSCU (564,38 mg, 4,69 mmol, 1©q) e fenilhidrazina (507,05 mg, 4,69 mmol, 460,96 pL, 1 eq). A mistura foi agitada a 28 °C durante 2 h. Em seguida MgSO4 foi filtrado, o filtrado foi evaporado sob pressão reduzida. O óleo marrom resultante foi dissolvido em tolueno (20 mL), ZnCL (3,20 g, 23,44 mmol, 5 eq) foi adicionado, a mistura foi aquecida a 110 °C durante 4 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílicagel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f = 0,30) para produzir o composto A/-(2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3il)carbamato de terc-butila (700 mg, 1,96 mmol, 41,7% de produção, 80,0% de pureza) como um sólido amarelo.¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,33 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,23 (td, J= 0,9, 7,9 Hz, 1 H), 7,04-6,97 (m, 1 H), 6,97-6,90 (m, 1 H), 3,92-3,79 (m, 1 H), 2,92-2,78 (m, 2 H), 2,572,31 (m, 2 H), 1,93-1,68 (m, 2 H), 1,47 (s, 9H); ES-LCMS m/z231,1 [MFBu+H]⁺.

Etapa 2: 2,3,4,9-Tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

[00420] A uma solução de A/-(2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3il)carbamato de terc-butila (700 mg, 1,96 mmol, 1 eq.) em DCM (10 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,01 mmol, 2,0 mL, 13,81 eq). A mistura foi agitada a 28°C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 5/1, Rf = 0) indicou que 0 material de partida foi completamente consumido e uma nova

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339/652 mancha formou-se. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo o qual foi diluído com água (30 mL), ajustado ao pH = 10 por 1% de solução de NaOH. A mistura foi extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (400 mg, 1,80 mmol, 92,3% de produção, 84,0% de pureza) foi obtido como um sólido marrom escuro que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,80 (s, 1 H), 7,44 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,27-7,23 (m, 1 H), 7,13-7,04 (m, 2 H), 3,34-3,24 (m, 1 H), 3,07-2,97 (m, 1 H), 2,81 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,50-2,43 (m, 1 H), 2,132,05 (m, 1 H), 1,84-1,76 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 187,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: (3S)-/V-[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (l-75b) & (3F?)-/V-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (l-75a)

[00421] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (153,06 mg, 515,96 pmol, 1,0 eq. ) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (200,05 mg, 1,55 mmol, 269,60 pL, 3,0 eq.) e 2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (145,09 mg, 654,35 pmol, 1,27 eq). A mistura foi agitada a 50°C durante 15 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,80). Os compostos foram separados por SFC (condição: coluna: AD (250mm x 30mm, 5um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O EtOH]; % de B: 45% a 45%, min.). A solução, após a

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340/652 separação, foi concentrada para fornecer os produtos crus os quais foram purificados por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 30mm x4um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 12 min.), seguida por liofilização para produzir um enantiômero (36,18 mg, 65,79 μηποΙ, 12,8% de produção, 100,0% de pureza, sal de 3HCI) (Tr = 4,768 min, ee% = 100,0 e [a]²⁹D = -3,430 (/-ProH, c = 0,107 g/100 mL)) como um sólido amarelo; ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,00 (s, 1 H), 8,78 (s, 1 H), 8,36-8,29 (m, 1 H), 8,24 (d, J= 1,3 Hz, 1 H), 7,38 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,27 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,08-6,93 (m, 3 H), 4,63 (s, 1 H), 3,43-3,32 (m, 2 H), 3,182,93 (m, 3 H), 2,43-2,26 (m, 2 H), 1,40 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 441,2 [M+H]⁺; e outro enantiômero (36,49 mg, 66,36 μιτιοΙ, 12,9% de produção, 100,0% de pureza, sal de 3HCI) (Tr = 5,778 min, ee% = 96,4 e [a]²⁹D = +3,121 (/-ProH, c = 0,104 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,03 (s, 1 H), 8,73 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,36-8,30 (m, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 7,38 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,29-7,25 (m, 1 H), 7,04 (dt, J= 1,2, 7,6 Hz, 1 H), 7,00-6,93 (m, 2 H), 4,60 (s, 1 H), 3,40-3,32 (m, 2 H), 3,16-2,92 (m, 3 H), 2,43-2,24 (m, 2 H), 1,40 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z441,3 [M+H]⁺.

Exemplo 75

Síntese de 1-77

1-77

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 370/704

341/652

Etapa 1: 5-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-carbaldeído

[00422] Ao DMF (40 mL) foi adicionado POCI₃ (4,11 g, 26,82 mmol, 2,49 mL, 2 eq) gota a gota a -20 °C durante um período de 10 min sob atmosfera de N2. Após ser agitado durante 1 h, 5-fluoro-2-metil-1 H-indol (2 g, 13,41 mmol, 1 eq) foi adicionado à solução acima durante 0 que a temperatura foi mantida abaixo de -20°C. A mistura de reação foi aquecida a 15°C e agitada durante 1 hora. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por NaHCOs aquoso saturado (100 mL) e extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc =1/0 a 1/1 ,TLC : PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,67) para produzir 5-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3carbaldeído (1,3 g, 5,73 mmol, 42,7% de produção, 78,1% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 10,17 (s, 1 H), 8,39 (br s, 1 H), 7,93 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,08-6,89 (m, 1 H), 2,75 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 178,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-Fluoro-2-metil-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 371/704

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[00423] A uma solução de 5-fluoro-2-metil-1 H-indol-3-carbaldeído (1,1 g, 4,85 mmol, 1 eq.) em nitronetano (45 mL) foi adicionado NhUOAc (1,12 g, 14,54 mmol, 3 eq). A mistura foi agitada a 110 °C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover o nitronetano. O resíduo foi extraído com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 5-fluoro-2metil-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (0,92 g, cru) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação; ES-LCMS m/z 221,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-(5-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etanamina

[00424] A uma solução de 5-fluoro-2-metil-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 Hindol (1,40 g, 6,36 mmol, 1 eq.) em THF (30 mL) foi adicionado LAH (1 M, 31,79 mL, 5 eq) a 0°C. Após a adição, a mistura foi agitada a 80°C durante 2 h. A mistura de reação foi diluída com THF (10 mL) e em seguida foi interrompida bruscamente por adição de água (1,4 mL), 10% de NaOH (1,4 mL) e água (4,2 mL) em sequência a 0°C. Após ser agitada durante 30 min, a mistura foi filtrada através de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 2-(5-fluoro-2-metil1 H-indol-3-il)etanamina (1,0 g, cru) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte diretamente sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,14 (dd, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,07 (dd, J = 10,0 Hz, 1 H),

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 372/704

343/652

6,72 (td, J = 5,0, 9,1 Hz, 1 H), 2,85-2,74 (m, 4H), 2,33 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 192,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: /V-[2-(5-Fluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-77)

[00425] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (64,30 mg, 216,75 pmol, 1 eq. ) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (140,07 mg, 1,08 mmol, 188,77 pL, 5 eq.) e 2(5-fluoro-2-metil-1/-/-indol-3-il)etanamina (50 mg, 260,10 pmol, 1,2 eq) a mistura foi agitada a 60°C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover /-PrOH para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 7 min.) seguido por liofilização para produzir A/-[2-(5-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (17,49 mg, 31,46 umol, 14,5% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,75 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,40 (s, 1 H), 8,21 (s, 1 H), 7,54 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 7,07 (dd, J= 2,3, 9,8 Hz, 1 H), 6,95 (dd, J= 4,4, 8,6 Hz, 1 H), 6,59 ( J=2,4, 9,0 Hz, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 4,03-3,95 (m, 2 H), 3,28-3,20 (m, 1 H), 3,16-3,09 (m, 2 H), 2,16 (s, 3 H), 1,34 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z447,1 [M+H]⁺.

Exemplo 76

Síntese de 1-78

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 373/704

344/652

Etapa 1: 5-(5-FI uoro-3-piridi 1)-7-(2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (I-78)

[00426] Uma mistura de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (35 mg, 84,05 pmol, 1 eq), HATU (63,92 mg, 168,10 pmol, 2 eq), DIEA (32,59 mg, 252,16 pmol, 43,92 pL, 3 eq. ) e NH₄CI (13,49 mg, 252,16 pmol, 3 eq. ) em DMF (5 mL) foi agitada a 25°C durante 3 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 374/704

345/652 móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 36% a 56%, 10 min.), liofilizada para fornecer 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (16,47 mg, 31,08 μηποΙ, 37,0% de produção, 99,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,85 (s, 1 H), 8,73 (s, 1 H), 8,51 (s, 1 H), 8,03 (d, J= 9,2 Hz, 1 H), 7,72-7,69 (m, 1 H), 7,12 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,04-7,01 (m, 2 H), 6,95 (s, 1 H), 6,08 (s, 1 H), 3,98 (t, J = 5,6 Hz, 2 H), 3,22 (t, J= 5,6 Hz, 2H); ES-LCMS m/z416,2 [M+H]⁺.

Exemplo 77

Síntese de 1-79

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-9-isopropil-/V-[2-(2-metil-1H-indol-3il)etil]purin-6-amina (I-79)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 375/704

346/652

[00427] Uma mistura de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (52,08 mg, 171,40 pmol, 1 eq), 2-(2-metil-1 /-/-indol-3-il)etanamina (29,87 mg, 171,40 pmol, 1 eq. ) e DIEA (66,46 mg, 514,21 pmol, 89,57 pL, 3 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi agitada a 55 °C durante 19 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi 018 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% HCI) - AON]; % de B: 42% a 72%, 12 min.) seguida por liofilização para produzir 2-(5fluoro-3-piridil)-9-isopropil-A/-[2-(2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]purin-6-amina (18,99 mg, 34,91 pmol, 20,4% de produção, 99,1% de pureza, 3 sal de HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,279,11 (m, 2 H), 8,85 (s, 1 H), 8,68 (d, J= 8,78 Hz, 1 H), 7,51-7,43 (m, 1 H), 7,07-7,00 (m, 1 H), 6,92-6,83 (m, 2 H), 5,13-5,00 (m, 1 H), 4,07 (s, 2 H), 3,11 (t, J= 6,53 Hz, 2 H), 2,27 (s, 3 H), 1,73 (d, J= 6,53 Hz, 6H); ESLCMS m/z 430,2 [M+H]⁺.

Exemplo 78

Síntese de 1-80

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 376/704

347/652

Esquema sintético:

Etapa 1:4,6-Dicloro-2-isopropóxi-pirimidina

[00428] A uma suspensão de NaH (248,00 mg, 6,20 mmol, 60% em óleo mineral, 1,41 eq.) em THF seco (10 mL) foi adicionado Z-PrOH (277,91 mg, 4,62 mmol, 354,03 pL, 1,05 eq) sob banho de geloand atmosfera de N2. Após ser agitada durante 30 min, a suspensão foi resfriada para -60°C e 4,6-dicloro-2-metilsulfonil-pirimidina (1 g, 4,40 mmol, 625,00 pL, 1,0 eq.) em THF seco (10 mL) foi adicionada gota a gota e mantida em temperatura abaixo de -55 °C. A mistura resultante foi agitada durante 1 h a -55 °C. A mistura de reação foi derramada em água (100 mL) vagarosamente e extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina, secadas sobre Na2SÜ4 e concentrada para produzir 4,6-dicloro-2-isopropóxi-pirimidina (565 mg, 2,56 mmol, 58,2% de produção, 94% de pureza) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,02-6,96 (m, 1 H), 5,29 (m, 1 H), 1,40 (d, J = 6,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 206,9, 208,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 6-Cloro-A/-[2-(1H-indol-3-il)etil]-2-isopropóxi-pirimidin-4Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 377/704

348/652 amina

[00429] A uma solução de 4,6-dicloro-2-isopropóxi-pirimidina (200 mg, 907,96 pmol, 0,5 eq. ) em APrOH (6 mL) foi adicionado DIEA (704,07 mg, 5,45 mmol, 948,88 pL, 3,0 eq.) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (329,00 mg, 2,05 mmol, 1,13 eq). A mistura foi agitada a 26 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo o qual foi purificado por cromatografia rápida em sílica-gel (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,45) para produzir 6-cloro-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-2-isopropóxipirimidin-4-amina (290 mg, 841,57 pmol, 46,3% de produção, 96% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,10 (s, 1 H), 7,60 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,43-7,37 (m, 1 H), 7,24 (dt, J= 1,0, 7,6 Hz, 1 H), 7,18-7,12 (m, 1 H), 7,05 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 5,95 (s, 1 H), 5,265,17 (m, 1 H), 3,68 (s, 2 H), 3,08 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 1,35 (d, J= 6,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z330,9, 332,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 6-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-2-isopropóxipirimidin-4-amina (I-80)

[00430] 6-Cloro-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-2-isopropóxi-pirimidin-4amina (90 mg, 261,18 pmol, 1 eq), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico

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349/652 (92,00 mg, 652,94 pmol, 2,5 eq), CS2CO3 (255,29 mg, 783,53 pmol, 3,0 eq.) e Pd(dppf)Cl2 (19,11 mg, 26,12 pmol, 0,1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em água (1,2 mL) e 1,4-dioxano (6 mL). O tubo selado foi aquecido a 120°C durante 30 minutos sob irradiação de microondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (15 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 0 resíduo 0 qual foi purificado por HPLC preparativa (condição de HCI, coluna: coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25mm x 10um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 25% a 55%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 6-(5fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-2-isopropóxi-pirimidin-4-amina (43,81 mg, 87,48 pmol, 33,5% de produção, 100% de pureza, 3 sal de HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD+Na2CO3) δ ppm 8,92 (s, 1 H), 8,53 (m, 1 H), 8,12 (m, 1 H), 7,61 (m, 1 H), 7,33 (m, 1 H), 7,09 (d, J= 7,0 Hz, 2 H), 7,02 (m, 1 H), 6,57 (s, 1 H), 5,38-5,26 (m, 1 H), 3,77 (m, 2 H), 3,09 (t, J = 7,0 Hz, 2 H), 1,40 (d, J = 5,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 392,0 [M+H]⁺.

Exemplo 79

Síntese de 1-81

1-81

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 379/704

350/652

[00431] Uma mistura de ácido 5-bromopiridina-3-carboxílico (1 g, 4,95 mmol, 1 eq.) e GDI (1,20 g, 7,43 mmol, 1,5 eq. ) em THF (10 mL) foi agitada a 20°C durante 1 h, TEA (500,93 mg, 4,95 mmol, 689,03 pL, 1 eq) foi adicionado, a mistura foi agitada a 20°C durante 1 h, em seguida (3-metóxi-3-oxo-propanoil)oxipotássio(1+) (1,55 g, 9,90 mmol, 2 eq. ) e MgCL (942,66 mg, 9,90 mmol, 406,32 pL, 2 eq) foram adicionados. A mistura foi agitada a 20°C durante 11 h. A mistura de reação foi ajustada ao pH a 2 com 2N de HCI, extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 10/1 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, Rf = 0,58) para produzir 3-(5-bromo-3-piridil)-3-oxo-propanoato de metila (554 mg, 1,50 mmol, 30,4% de produção, 70% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,07-9,06 (m, 1 H), 8,95 (d, J= 1,6 Hz, 1 H), 8,89 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,76 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,53-8,52 (m, 1 H), 8,42 (t, J= 2,0 Hz, 1 H), 5,97 (s, 1 H), 3,82

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 380/704

351/652 (s, 3 Η), 3,74 (s, 3 H); ES-LCMS m/z259,9, 261,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(5-Bromo-3-pirjdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirjmjdin-7ol

[00432] Uma mistura de 3-(5-bromo-3-piridil)-3-oxo-propanoato de metila (300 mg, 813,74 pmol, 1 eq. ) e 4-isopropil-1 H-pirazol-5-amina (122,23 mg, 976,49 pmol, 1,2 eq.) em AcOH (10 mL) foi agitada a 120°C durante 0,5 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 5-(5-bromo-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (450 mg, cru) como óleo marrom o qual foi empregado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 8,998,88 (m, 1 H), 8,74-8,73 (m, 1 H), 8,39-8,37 (m, 2 H), 7,79 (s, 1 H), 3,21 3,20 (m, 1 H), 1,39-1,33 (m, 6H); ES-LCMS m/z333,0, 335,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-Bromo-3-piridil)-7-cloro-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidina

[00433] Uma solução de 5-(5-bromo-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (450 mg, 1,35 mmol, 1 eq. ) em POCI3 (8,2 g, 53,48 mmol, 4,97 mL, 39,60 eq) foi agitada a 110°C durante 1 hora. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 10/1 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f = 0,58) para produzir 5(5-bromo-3-piridil)-7-cloro-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (331 mg, 847,20 pmol, 62,7% de produção, 90% de pureza) como um sólido

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 381/704

352/652 amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,20 (s, 1 H), 8,79 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,59 (t, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 3,42 (s, 1 H), 1,45 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 350,9, 352,9 [M+H] ⁺.

Etapa 4: 5-(5-Bromo-3-piridil)-/V-[2-(1 H-jndol-3-il)etil]-3-isopropilpirazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina

[00434] Uma mistura de 5-(5-bromo-3-piridil)-7-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (60 mg, 153,57 μιτιοΙ, 1 eq), 2-(1 H-indol-3il)etanamina (36,91 mg, 230,36 μιτιοΙ, 1,5 eq.) e DIEA (59,54 mg, 460,71 μιτιοΙ, 80,25 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo 0 qual foi purificado por TLC preparativa (S1O2, PE / EtOAc = 1/1, Rt = 0,28) para produzir 5-(5-bromo-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (70 mg, 117,80 prnol, 76,7% de produção, 80% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 9,21 (d, J = 1,6 Hz, 1 H), 8,77 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,62 (s, 1 H), 7,99-7,95 (m, 2 H), 7,64 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,31 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,09-6,99 (m, 2 H), 6,66 (s, 1 H), 3,84 (q, J= 6,0 Hz, 2 H), 3,27-3,22 (m, 1 H), 3,13-3,10 (m, 2 H), 1,35 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z474,9, 476,9 [M+H]⁺.

Etapa 5: 5-[7-[2-(1 H-lndol-3-il)etilamino]-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidiη-5-iI] piridina-3-carbonitrilo(l-81)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 382/704

353/652

[00435] Uma mistura de 5-(5-bromo-3-piridil)-A/-[2-( 1 H-\ndol-3-il)etil]3-isopropil-pirazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina (70 mg, 117,80 pmol, 1 eq), Pd(PPh₃)₄ (13,61 mg, 11,78 pmol, 0,1 eq.) e Zn(CN)₂ (27,67 mg, 235,60 pmol, 2 eq.) em DMF (5 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ for 3 vezes. A mistura foi agitada a 85°C durante 12 h sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Gemini 150*25 5u; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 10 min.) para produzir 5-[7-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il]piridina-3-carbonitrilo (18,46 mg, 43,72 pmol, 37,1% de produção, 99,819% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,07 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,86 (d, J= 1,6 Hz, 1 H), 7,97 (t, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,747,71 (m, 1 H), 7,18-7,17 (m, 1 H), 7,13-7,10 (m, 2 H), 6,95 (s, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 3,87 (t, J= 6,0 Hz, 2 H), 3,28-3,19 (m, 1 H), 3,18 (t, J= 6,0 Hz, 2 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z422,0 [M+H]⁺.

Exemplo 80

Síntese de l-82a, l-82b e l-82c

Esquema sintético

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 383/704

354/652

Etapa 1: /V-Benzil-6-metóxi-tetralin-2-amina °\

[00436] A uma solução de 6-metoxitetralin-2-ona (300 mg, 1,70 mmol, 1 eq.) em DCM anidroso (5 mL) foram adicionados fenilmetanamina (182,43 mg, 1,70 mmol, 185,58 pL, 1 eq.), AcOH (102,23 mg, 1,70 mmol, 97,37 pL, 1 eq.) e NaBH(OAc)₃ (541,24 mg, 2,55 mmol, 1,5 eq.). A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas. NaOH aquoso (1 M, 20 mL) foi adicionado e a mistura foi extraída com DCM (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas para dar origem ao produto cru que foi purificado em cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, Rf = 0,67) para fornecer A/-benzil-6-metóxi-tetralin-2amina (255 mg, 883,18 pmol, 51,88% de produção, 92,6% de pureza) como um óleo marrom. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,38-7,28 (m, 4H), 7,26-7,21 (m, 1 H), 6,98 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 6,67 (dd, J= 2,5, 8,3 Hz, 1 H), 6,61 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 3,89 (s, 2 H), 3,75 (s, 3 H), 3,04Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 384/704

355/652

2,93 (m, 2 Η), 2,91 - 2,72 (m, 2 Η), 2,64-2,50 (m, 1 Η), 2,12-1,99 (m, 1

Η), 1,62-1,56 (m, 2H); ES-LCMS m/z268,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 6-Metoxitetralin-2-amina

[00437] A uma solução de A/-benzil-6-metóxi-tetralin-2-amina (255 mg, 883,18 μηποΙ, 1 eq.) em EtOH anidroso (10 mL) e THF anidroso (10 mL) foi adicionado Pd/C (10%, 255 mg) sob atmosfera de N2. A suspensão foi desgaseificada e purgada com H2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada sob H2 (3,51 kg/cm² (50 psi)) a 50 °C durante 8 h. A mistura foi filtrada e concentrada para dar origem ao produto cru de 6metoxitetralin-2-amina (210 mg, 874,40 μηποΙ, 99,0% de produção, 73,8% de pureza) como óleo preto que foi usado para a etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 6,94 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 6,68-6,64 (m, 1 H), 6,62 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 3,74-3,71 (m, 3 H), 3,10 (ddt, J= 3,3, 5,1, 10,2 Hz, 1 H), 2,93 (dd, J= 4,1, 15,5 Hz, 1 H), 2,88-2,81 (m, 2 H), 2,49 (dd, J= 9,8, 15,5 Hz, 1 H), 2,06-1,97 (m, 1 H), 1,64-1,51 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 178,3 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-Aminotetralin-6-ol

[00438] Uma solução de 6-metoxitetralin-2-amina (210 mg, 874,39 μηποΙ, 1 eq.) em solução de HBr (5 mL) foi agitada a 100 °C durante 8 h. A mistura foi concentrada para fornecer 0 produto cru 2-aminotetralin-6ol (195 mg, 350,66 μηποΙ, 40,10% de produção, 43,9% de pureza, HBr) como um sólido marrom que foi usado para a etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 6,91 (d, J=8,4Hz, 1 H), 6,58 (dd, J= 2,4, 8,4 Hz, 1 H), 6,53 (s, 1 H), 3,54-3,44 (m, 1 H), 3,06 (dd, J= 5,1, 15,4 Hz, 1 H), 2,86 (dd, J= 5,1,8,2 Hz, 2 H), 2,71 (dd, J = 10,1, 15,4 Hz, 1 H), 2,21 - 2,12 (m, 1 H), 1,85-1,75 (m, 1 H); ES-LCMS

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 385/704

356/652 m/z 164,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]tetralin-6-ol

[00439] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 337,09 pmol, 1 eq.) em/-prOH (5 mL) foram adicionados DIEA (130,70 mg, 1,01 mmol, 176,14 pL, 3 eq.) e 2aminotetralin-6-ol (150,39 mg, 404,51 pmol, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 120 °C durante 3 horas sob micro-ondas sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada para remover 0 solvente. H2O (10 mL) foi adicionado, extraído com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas para dar origem ao produto cru que foi purificado em cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,60) para fornecer 2-[[5-(5fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]tetralin-6ol (78 mg, 184,97 pmol, 54,9% de produção, 99,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,15 (s, 1 H), 8,51 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,36 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 6,93 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,74 (s, 1 H), 6,61-6,53 (m, 2 H), 4,58 (s, 2 H), 4,354,23 (m, 1 H), 2,94-2,81 (m, 2 H), 2,35-2,18 (m, 1 H), 2,09-1,86 (m, 2 H), 1,40 (d, J= 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z418,0 [M+H]⁺.

Etapa 5: (2fí)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]tetralin-6-ol (l-82b) & (2S)-2-[[5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]tetralin-6-ol (l-82a)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 386/704

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[00440] 2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin7-il]amino]tetralin-6-ol (78 mg, 184,97 pmol, 1 eq) foi separado por SFC (coluna: AD (250 mm * 30 mm, 5 pm); fase móvel: [0,1% de NH3H2O IPA]; % de B: 40% a 40%, min.). A solução após separação foi concentrada para fornecer os produtos crus que foram purificados por HPLC preparativa (MeCN/HzO como eluentes, condição acídica, Instrumento: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um/Fase móvel:água (0,05% de HCI) - ACN/Gradiente: B de 55% a 85% em 12 min/ Taxa de vazão: 25 mL/ min.), seguida por liofilização para produzir um enantiômero (24,75 mg, 50,47 pmol, 27,3% de produção, 100% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 5,168 min, ee = 100%, OR: [a]²⁶’⁶ _D = 167,660) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,97 (s, 1 H), 8,79 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,34-8,28 (m, 1 H), 8,25 (s, 1 H), 6,98-6,91 (m, 2 H), 6,61-6,55 (m, 2 H), 4,47 (s, 1 H), 3,40-3,33 (m, 1 H), 3,18 (dd, J= 4,6, 15,4 Hz, 1 H), 3,09-2,99 (m, 2 H), 2,96-2,87 (m, 1 H), 2,25 (s, 1 H), 2,07 (dq, J = 5,5, 11,8 Hz, 1 H), 1,38 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z418,0 [M+H]⁺; e 0 outro enantiômero (26,47 mg, 53,98 pmol, 29,2% de produção, 100% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 5,742 min, ee = 100%, OR: [a]²⁶⁸D = -167,394) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,97 (s, 1 H), 8,78 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,30 (td, J = 2,2, 9,0 Hz, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 6,98-6,91 (m, 2 H), 6,62-6,54 (m, 2 H), 4,48 (s, 1 H), 3,37-3,31 (m, 1 H), 3,22-3,13 (m, 1 H), 3,09-2,98 (m, 2 H), 2,962,87 (m, 1 H), 2,26 (d, J = 10,4 Hz, 1 H), 2,07 (tdd, J = 5,6, 11,6, 17,7 Hz, 1 H), 1,38 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z418,0 [M+H]⁺.

Exemplo 81

Síntese de I-83

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 387/704

358/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropil-2metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-83)

[00441] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-2metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 160,79 pmol, 1 eq.), 2-(1 H-indol3-il)etanamina (25,76 mg, 160,79 pmol, 1 eq.) e DIEA (62,34 mg, 482,37 prnol, 84,02 μΙ_, 3 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi agitada a 80 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 50% a 80%, 12 min.) para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)Λ/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-2-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7amina (41,24 mg, 76,67 prnol, 47,7% de produção, 100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,68 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,33 (s, 1 H), 7,51 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,47-7,45 (m, 1 H), 7,15 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,02 (s, 1 H), 6,97 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,84-6,82 (m, 1 H), 5,71 (s, 1 H), 4,01-3,97 (m, 2 H), 3,27 (t, J= 7,2 Hz,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 388/704

359/652

Η), 3,23-3,19 (m, 2 Η), 2,57 (s, 3 Η), 1,36 (d, J=7,2Hz, 6H); ES-LCMS m/z 429,3 [M+H]⁺.

Exemplo 82

Síntese de 1-84

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-ΑοθΐίΙ-3-ΠΊθΐίΙ-όυΐ3ηοηίΐπΐ3

[00442] A uma mistura de DIPA (1,22 g, 12,03 mmol, 1,70 mL, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em THF, 5,05 mL, 1,05 eq) gota a gota a -78°C sob N₂. A mistura foi agitada a -78°C durante 15 min, em seguida aquecida para 0 °C e agitada durante 1 hora. A mistura

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360/652 foi resfriada para -78 °C, 3-metilbutanonitrila (1 g, 12,03 mmol, 1,27 mL, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado gota a gota e agitado a -78 °C durante 15 min. Uma solução de acetato de etila (1,11 g, 12,63 mmol, 1,24 mL, 1,05 eq.) em THF (10 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura foi agitada a 20 °C durante 16 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,74) indicou que uma nova mancha formou-se. A mistura foi interrompida bruscamente com HCI a 2 N (10 mL), extraída com EtOAc (50 mL x 3), lavada com solução salina (20 mL), secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 10/1 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,74) para produzir 2-acetil-3-metilbutanonitrila (661 mg, 4,22 mmol, 35,1% de produção, 80,0% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 3,32 (d, J = 5,2 Hz, 1 H), 2,44-2,38 (m, 1 H), 2,37 (s, 3 H), 1,11 (d, J= 6,8 Hz, 3 H), 1,091,05 (m, 3 H); ES-LCMS: Nenhuma massa correta foi encontrada.

Etapa 2: 4-lsopropil-3-metil-1 H-pirazol-5-amina

[00443] Uma mistura de 2-acetil-3-metil-butanonitrila (750,00 mg, 4,79 mmol, 1 eq.), hidrato de hidrazina (311,96 mg, 6,23 mmol, 302,87 pL, 1,3 eq.) e AcOH (503,76 mg, 8,39 mmol, 479,77 pL, 1,75 eq.) em EtOH (20 mL) foi agitada a 90°C durante 16 h sob N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi diluído com NaHCOs sat. (20 mL) e extraído com DCM (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 4-isopropiI3-metil-1/-/-pirazol-5-amina (560 mg, 3,62 mmol, 75,5% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 2,82-2,69 (m, 1 H), 2,18 (s, 3 H), 1,23 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES

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LCMS m/z 140,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-2-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol

[00444] Uma mistura de 4-isopropil-3-metil-1/-/-pirazol-5-amina (502,05 mg, 3,25 mmol, 0,8 eq.) e metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-3-oxopropanoato (816,33 mg, 4,06 mmol, 1 eq.) em AcOH (10 mL) foi agitada a 120°C durante 3 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 5-(5-f I uoro-3-piridil)-3-isopropil-2-metil-pi razolo[1,5a]pirimidin-7-ol (1,2 g, cru) como um sólido púrpuro que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) óppm 8,82 (s, 1 H), 8,68-8,66 (m, 1 H), 8,14-8,08 (m, 2 H), 3,30-3,24 (m, 1 H), 2,46-2,41 (m, 3 H), 1,37 (d, J= 7,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z287,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 7-Cloro-5-(5-fluoro-3-pirjdil)-3-isopropil-2-metil-

[00445] Uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-2-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (1,2 g, 4,19 mmol, 1 eq.) em POCI3 (16,3 g, 106,31 mmol, 9,88 mL, 25,36 eq) foi agitada a 110°C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 10/1 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,75) para produzir 7-cloro-5(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-2-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (381 mg, 1,23 mmol, 29,2% de produção, 98,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,08 (s, 1 H), 8,57 (d, J =

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2,4 Hz, 1 Η), 8,20-8,15 (m, 1 Η), 7,28 (s, 1 Η), 3,36-3,24 (m, 1 Η), 2,57 (s, 3 Η), 1,48 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z305,0 [M+H]⁺.

Etapa 5: /V-[2-(5,7-Difluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-2-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-84)

[00446] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-2metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 160,79 pmol, 1 eq.), 2-(5,7difluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etanamina (33,80 mg, 160,79 pmol, 1 eq.) e DIEA (62,34 mg, 482,36 pmol, 84,02 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80°C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 58% a 78%, 10 min.) para produzir A/-[2-(5,7-difluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)3-isopropil-2-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (32,01 mg, 54,45 pmol, 33,9% de produção, 100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,75 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 7,66-7,63 (m, 1 H), 6,93-6,89 (m, 1 H), 6,46-6,39 (m, 1 H), 5,73 (s, 1 H), 3,97-3,94 (m, 2 H), 3,31-3,23 (m, 1 H), 3,13-3,09 (m, 2 H), 2,57 (s, 3 H), 2,23 (s, 3 H), 1,36 (d, J= 7,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z479,3 [M+H]⁺.

Exemplo 83

Síntese de 1-85

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363/652

Etapa 1: A/-(2-(5,7-Difluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etil)-5-(5fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-85)

[00447] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (40 mg, 147,68 pmol, 1 eq.), 2-(5,7-difluoro-2-metil-1 Hindol-3-il)etanamina (60 mg, 153,73 pmol, 1,04 eq, ácido oxálico 2) e DIEA (60,00 mg, 464,24 pmol, 80,86 pL, 3,14 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi agitada a 50 °C durante 19 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida até a secura para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 30 mm x 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 52%, 12 min.). A fração desejada foi liofilizada para fornecer A/-(2-(5,7-difluoro-2metil-1 /-/-indol-3-il)etil)-5-(5-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-<a]pirimidin-7amina (22,94 mg, 43,14 pmol, 29,2% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,71 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,47 (s, 1 H), 8,22 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 7,59 (td, J= 2,4, 9,2 Hz, 1 H), 7,01 (dd, J = 2,4, 9,2 Hz, 1 H), 6,51 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,44 (ddd, J = 2,4, 9,6, 11,2 Hz, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 4,043,92 (m, 2 H), 3,17-3,08 (m, 2 H), 2,13 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 423,2 [M+H]⁺.

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Exemplo 84

Síntese de 1-86

Etapa 1:2-Ciclopropil-3-oxo-propanonitrjla ck ^NC^>—7

[00448] A uma solução de DIPA (3,74 g, 36,98 mmol, 5,23 mL, 1 eq.) em THF (15 mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M em n-hexano, 15,53 mL, 1,05 eq.). A mistura foi agitada a -78°C durante 10 min. A solução de 2ciclopropilacetonitrila (3 g, 36,98 mmol, 3,42 mL, 1 eq.) em THF (15 mL) foi adicionada à mistura acima gota a gota. Em seguida, a mistura foi agitada a -78°C durante 10 minutos sob atmosfera de N₂. Uma solução de formiato de etila (2,88 g, 38,88 mmol, 3,13 mL, 1,05 eq.) em THF (15

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365/652 mL) foi adicionada gota a gota e agitada a -78°C durante 40 min. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida para 25°C durante 12 horas. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, R_f = 0,50) mostrou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de solução de HCI a 1 N (50 mL) a 0 °C, extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,50) para produzir composto 2-ciclopropil-3-oxo-propanonitrila (3,4 g, cru) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,61 (d, J= 1,1 Hz, 1 H), 4,61-4,55 (m, 1 H), 4,01-3,84 (m, 1 H), 1,92-1,79 (m, 2 H), 1,66-1,52 (m, 2H).

Etapa 2: 4-Ciclopropil-1 H-pirazol-5-amina

[00449] A uma solução de 2-ciclopropil-3-oxo-propanonitrila (3,4 g, 31,16 mmol, 1 eq.) em EtOH (30 mL) foram adicionados AcOH (3,27 g, 54,52 mmol, 3,12 mL, 1,75 eq.) e hidrazina (1,30 g, 40,50 mmol, 1,46 mL, 1,3 eq.). A mistura foi agitada a 90°C durante 12 horas. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,10) mostrou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 0 resíduo que foi diluído com solução de NaHCOs (200 mL) e extraído com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 0 resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de DCM/MeOH = 100/1 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, Rf = 0,70) para produzir 4-ciclopropil-1 H-pirazol-5amina (1,7 g, cru) como um sólido marom. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ

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366/652 ppm 7,04 (d, J = 0,7 Hz, 1 H), 1,49-1,39 (m, 1 H), 0,83-0,75 (m, 2 H), 0,49-0,41 (m, 2H); ES-LCMS m/z nenhum MS desejado foi detectado.

Etapa 3: 3-Ciclopropil-5-(5-fluoro-3-pirjdil)pirazolo[1,5-a]pirjmjdin7-ol

[00450] A uma solução de metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-3-oxopropanoato (500 mg, 2,49 mmol, 1 eq.) em AcOH (6 mL) foi adicionado 4-ciclopropil-1/-/-pirazol-5-amina (370,54 mg, 3,01 mmol, 1,21 eq.). A mistura foi agitada a 120 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 3-ciclopropil-5-(5fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (830 mg, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 8,90 (s, 1 H), 8,80 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 8,25 (td, J= 2,2, 9,7 Hz, 1 H), 7,68 (s, 1 H), 6,09 (s, 1 H), 2,05 (m, 2 H), 0,940,87 (m, 2 H), 0,73-0,64 (m, 2H); ES-LCMS m/z271,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 7-Cloro-3-ciclopropil-5-(5-fluoro-3-pirÍdil)pirazolo[1,5a]pirimidina

Cl

[00451] Uma solução de 3-ciclopropil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (830 mg, 3,07 mmol, 1 eq.) em POCL (5 mL) foi agitada a 110°C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 0 resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,40) para produzir composto 7-cloro

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3-ciclopropil-5-(5-fl uoro-3-pi ridil)pi razolo[1,5-a]pirimidina (290 mg, 924,12 pmol, 30,1% de produção, 92,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,09 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,20 (td, J= 2,1,9,4 Hz, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 2,17 (tt, J= 5,2, 8,4 Hz, 1 H), 1,11-1,03 (m, 2 H), 1,02-0,95 (m, 2H); ESLCMS m/z 289,0, 291,0 [M+H]⁺.

Etapa 5: 3-Ciclopropil-5-(5-fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirazolo [1,5-a]pirimidin-7-amina (I-86)

[00452] A uma solução de 7-cloro-3-ciclopropil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (45 mg, 143,40 pmol, 1,0 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (55,60 mg, 430,19 pmol, 74,93 pL, 3,0 eq) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (29,87 mg, 186,42 pmol, 1,3 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 0 resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (condição de HCI, coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 43% a 73%, 10 min.) e a fração desejada foi liofilizada para produzir 3-ciclopropil-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-( 1 H-indol3-il)etil] pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (40,50 mg, 77,61 pmol, 54,1% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,73 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,36 (s, 1 H), 8,00 (s, 1 H), 7,54-7,46 (m, 2 H), 7,15 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 6,97 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,85-6,80 (m, 1 H), 5,78 (s, 1 H), 4,07-3,99 (m, 2 H), 3,26-3,19 (m, 2 H), 1,96-1,87 (m, 1 H), 1,05-0,97 (m, 2 H), 0,780,70 (m, 2H); ES-LCMS m/z412,9 [M+H]⁺.

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368/652

Exemplo 85

Síntese de 1-87 \_-NH

1-87

Etapa 1:3-Ciclopropil-/V-(2-(5,7-difluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil)-5 (5-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-87)

[00453] Uma mistura de 7-cloro-3-ciclopropil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (40 mg, 127,46 pmol, 1 eq.), 2-(5,7difluoro-2-metil-1/-/-indol-3-il)etanamina (54,72 mg, 140,21 pmol, 1,1 eq, ácido oxálico 2) e DIEA (0,055 g, 425,56 pmol, 74,12 pL, 3,34 eq.) em /PrOH (3 mL) foi agitada a 50°C durante 19 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida até a secura para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 30mm x 4um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 45%

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369/652 a 75%, 12 min.). A fração desejada foi liofilizada para fornecer 3ciclopropil-A/-(2-(5,7-difluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil)-5-(5-fluoropiridin3-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (22,33 mg, 37,39 μιτιοΙ, 29,3% de produção, 95,7% de pureza, 3HCI) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,73 (d, J = 1,6 Hz, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,62 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,93 (dd, J= 2,0, 9,2 Hz, 1 H), 6,49-6,35 (m, 1 H), 5,73 (s, 1 H), 3,96 (t, J= 5,2 Hz, 2 H), 3,10 (t, J= 5,6 Hz, 2 H), 2,14 (s, 3 H), 1,98-1,86 (m, 1 H), 1,07-0,94 (m, 2 H), 0,79-0,67 (m, 2H); ES-LCMS m/z463,2 [M+H]⁺.

Exemplo 86

Síntese de 1-88

Esquema sintético:

Etapa 1: /V-[2-(5,7-Difluoro-1 H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-6isopropóxi-pirimidin-4-amina (I-88)

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370/652

[00454] 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-pirimidina (55 mg, 172,59 μηποΙ, 1 eq.), 2-(5,7-difluoro-1 H-indol-3-il)etanamina (50,31 mg, 225,64 qmol, 1,31 eq.) e DIEA (66,92 mg, 517,77 μπιοΙ, 90,19 μΕ, 3,0 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas. O tubo selado foi aquecido a 125 °C durante 6 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 30 mm x 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 65% - 95%, 12 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir A/-[2-(5,7-difluoro1 /-/-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-pirimidin-4-amina (15,59 mg, 28,70 μηποΙ, 16,6% de produção, 98,81% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δppm 9,12 (s, 1 H), 8,76 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,36 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 7,11 (dd, J = 1,6, 9,2 Hz, 1 H), 6,66 (t, J = 9,9 Hz, 1 H), 5,80 (s, 1 H), 5,07 (s, 1 H), 3,81 (s, 2 H), 3,06 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 1,39 (d, J= 6,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 428,2 [M+H]⁺.

Exemplo 87

Síntese de 1-89

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 400/704

371/652

Etapa 1:5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[2-(2-metil-1H-indol-3il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-89)

[00455] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (40 mg, 132,08 pmol, 1 eq.) e 2-(2-metil-1 Hindol-3-il)etanamina (34,52 mg, 198,13 pmol, 1,5eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (51,21 mg, 396,25 pmol, 69,02 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 70°C durante 16 h. A mistura de reação concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 47% a 72%, 12 min.) seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-A/-[2-(2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin7-amina (47,07 mg, 86,87 pmol, 65,8% de produção, 99,3% de pureza, 3HCI) como um sólido vermelho. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,68 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,32-7,27 (m, 1 H), 6,86-6,82 (m, 1 H), 6,69 (dquin, J = 1,3, 7,0 Hz, 2 H), 5,43 (s, 1 H), 3,89-3,83 (m, 2 H), 3,15-3,07 (m, 1 H), 3,03-2,98 (m, 2 H), 1,95 (s, 3 H), 1,19 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z429,3 [M+H]⁺.

Exemplo 88

Síntese de 1-90

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 401/704

372/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 3-terc-Butil-5-(5-fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-90)

[00456] A uma solução de 3-fórc-butil-7-cloro-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (40 mg, 128,63 pmol, 1 eq.) e 2-(1/-/indol-3-il)etanamina (30,91 mg, 192,95 pmol, 1,5 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (49,87 mg, 385,89 pmol, 67,21 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 70°C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover o solvente para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 70% a 90%, 12 min.), seguida por liofilização para produzir 3-terc-butil-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-7-indol3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (42,66 mg, 78,86 pmol, 61,3% de produção, 99,4% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-ok) δ ppm 10,82 (br s, 1 H), 9,13 (s, 1 H), 8,67 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,22 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,04 (br s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,64 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,31 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,23 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,10-6,95 (m, 2 H), 6,64 (s, 1 H), 3,83 (q, J= 6,9 Hz, 2 H), 3,11 (t, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,46 (s, 9H); ES-LCMS m/z429,3 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 402/704

373/652

Exemplo 89

Síntese de 1-91

1-91

Etapa 1:2-Formjl-3,3-dimetil-butanonjtrjla

CK

[00457] A uma mistura de DIPA (833,20 mg, 8,23 mmol, 1,16 mL, 1 eq.) em THF (20mL) foi adicionado n-BuLi (2,5 M, 3,46 mL, 1,05 eq)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 403/704

374/652 gota a gota a -78 °C sob N2. A mistura foi agitada a -78 °C durante 10 min, em seguida aquecida para 0°Ce agitada durante 1 hora. A mistura foi resfriada para -78°C, 3,3-dimetilbutanonitrila (800 mg, 8,23 mmol, 12,66 mL, 1 eq) dissolvida em THF (15 mL, anidroso) foi adicionada gota a gota e agitada a -78°C durante 10 min. Uma solução de formiato de etila (640,46 mg, 8,65 mmol, 695,40 pL, 1,05 eq.) em THF (15 mL, anidroso) foi adicionada gota a gota e agitada a -78°C durante 40 min, em seguida a mistura foi aquecida para 5 a 14°C durante 16 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rt = 0,34) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de solução de HCI a 1 N (50 mL) a -78°C, extraída com DCM (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílicagel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,34) para fornecer 0 produto 2-formil-3,3-dimetil-butanonitriIa (750 mg, 5,39 mmol, 65,5% de produção, 90,0% de pureza) como um óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,66 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 3,27 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 1,23 (s, 9H).

Etapa 2: 4-íerc-Butil-1 H-pirazol-5-amina

[00458] Uma mistura de 2-formil-3,3-dimetil-butanonitrila (750 mg, 5,39 mmol, 1 eq.), hidrazina (224,65 mg, 7,01 mmol, 253,56 pL, 1,3 eq.) e AcOH (566,71 mg, 9,44 mmol, 539,73 pL, 1,75 eq.) em EtOH (20 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. Em seguida, a mistura foi agitada a 80-90°C (refluxo) durante 16 horas sob atmosfera de N2. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rt = 0,55) indicou que a maior parte do material de partida foi consumida e uma maior nova mancha com maior

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 404/704

375/652 polaridade foi detectada. A mistura de reação concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com H2O (20 mL), ajustado para pH 9-10 com NaHCOs sólido e extraído com DCM (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 0 produto cru 4-tercbutil-1 H-pirazol-5-amina (750 mg, 5,39 mmol, 99,9% de produção, pureza crua) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,12 (s, 1 H), 1,30 (s, 9H).

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7ol

OH

[00459] A uma solução de metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-3-oxopropanoato (1,08 g, 5,37 mmol, 1 eq.) em AcOH (20 mL) foi adicionado 4-terc-butil-1 /-/-pirazol-5-amina (747,23 mg, 5,37 mmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 120 °C durante 0,5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover 0 solvente para fornecer produto cru 5-(5-fIuoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidiη-7-ol (1,46 g, 5,36 mmol, 100,0% de produção, cru) como um óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação.

Etapa 4: 3-íerc-Butil-7-cloro-5-(5-fluoro-3-pirjdil)pirazolo[1,5a]pirimidina

Cl

[00460] Uma mistura de 3-terc-butil-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol (1,67 g, 5,83 mmol, 1 eq.) em POCI3 (37,81 g, 246,59

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 405/704

376/652 mmol, 22,92 mL, 42,28 eq) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. Em seguida, a mistura foi agitada a 110°C durante 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover 0 solvente. O resíduo foi diluído com DCM (50 mL x 2) e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,48) para fornecer 0 produto 3-terc-butil-7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (950 mg, 3,05 mmol, 52,4% de produção, 98,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,13 (t, J = 1,5 Hz, 1 H), 8,61 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,22-8,16 (m, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 1,56 (s, 9H); ES-LCMS m/z305,1,307,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 3-íerc-Butil-/V-[2-(5,7-difluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-5(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-91)

[00461] A uma solução de 3-fórc-butil-7-cloro-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (40 mg, 128,63 pmol, 1 eq.) e 2-(5,7difluoro-2-metiI-1 H-indol-3-il)etanamina (57,93 mg, 192,95 pmol, 1,5 eq, ácido oxálico) em APrCH (10 mL) foi adicionado DIEA (49,87 mg, 385,89 pmol, 67,21 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 70°C durante 16 h. A mistura de reação concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 70% a 90%, 12 min.) para fornecer 3-terc-butil-A/-[2-(5,7difluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (34,14 mg, 57,39 pmol, 44,6% de produção, 98,8%

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 406/704

377/652 de pureza, 3HCI) como um sólido laranja. ¹H RMN (400 MHz, DMSOd₆) δ ppm 11,21 (s, 1 H), 9,06-8,98 (m, 1 H), 8,66 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,13-8,01 (m, 2 H), 7,95 (s, 1 H), 7,22 (dd, J = 2,1, 9,6 Hz, 1 H), 6,76 (ddd, J = 2,2, 9,6, 11,4 Hz, 1 H), 6,42 (s, 1 H), 3,71 (q, J = 6,8 Hz, 2 H), 3,01 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 1,47 (s, 9H); ES-LCMS m/z479,3 [M+H]⁺.

Exemplo 90

Síntese de 1-92

Esquema sintético:

1-92

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 407/704

378/652

Etapa 1: Metil 5-amino-1H-pirazol-4-carboxilato

[00462] Uma solução de ácido 5-amino-1 /-/-pirazol-4-carboxílico (1 g, 7,87 mmol, 1 eq.) em HCI/MeOH (4 M, 40 mL, 20,34 eq) foi agitada a 60°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer metil 5-amino-1/-/-pirazol-4-carboxilato (1,4 g, 7,49 mmol, 95,2% de produção, 95,0% de pureza, HCI) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,31 (s, 1 H), 3,84 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 142,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: Metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-hidróxi-pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carboxilato

[00463] A uma solução de metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-3-oxopropanoato (160 mg, 795,28 pmol, 1 eq.) em AcOH (5 mL) foi adicionado metil 5-amino-1/-/-pirazol-4-carboxilato (148,67 mg, 795,28 pmol, 1 eq, HCI). A mistura foi agitada a 120 °C durante 4 h. A mistura de reação foi concentrada para produzir metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-hidróxipirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (230 mg, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,83 (s, 1 H), 8,72 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,29 (s, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 6,34 (s, 1 H), 3,92 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 289,2 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 408/704

379/652

Etapa 3: Metil 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina3-carboxilato

[00464] Uma solução de metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-hidróxipirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (230 mg, 797,96 pmol, 1 eq.) em POCI3 (5 mL) foi agitada a 110°C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 0 resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (ISCO®; 12 g de Coluna Rápida de Sílica SepaFlash®, Eluente de 0-50% de gradiente de acetato de etila/éter de petróleo @ 30 mL/ min.) para produzir metil 7cloro-5-(5-f I uoro-3-pi ridi I )pi razolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (180 mg, 516,50 pmol, 64,7% de produção, 88,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,08 (s, 1 H), 8,65 (s, 1 H), 8,59 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 7,69 (s, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 3,93 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 307,1,309,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: Metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato

[00465] A uma solução de metil 7-cloro-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (180 mg, 516,50 pmol, 1 eq.), 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (82,75 mg, 516,50 pmol, 1 eq.) em /PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (200,26 mg, 1,55 mmol, 269,90 pL, 3 eq.). Em seguida, a mistura foi agitada a 60 °C durante 3 h. A mistura

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 409/704

380/652 de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer metil 5(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 /-/-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina3-carboxilato (120 mg, 242,55 pmol, 47,0% de produção, 87,0% de pureza) como um sólido esbranquiçado que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,59 (s, 1 H), 8,46 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,41 (s, 1 H), 7,84 (br s, 1 H), 7,15-7,15 (m, 1 H), 7,13-7,08 (m, 3 H), 6,94 (s, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 3,86 (s, 3 H), 3,113,05 (m, 4H); ES-LCMS m/z431,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: Ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico

[00466] A uma solução de metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-( 1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (60 mg, 121,27 pmol, 1 eq.) em MeOH (2 mL), THF (2 mL) e água (4 mL) foi adicionado LÍOH H2O (72,00 mg, 1,72 mmol, 14,15 eq.) e a mistura foi agitada a 50°C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi diluído com EtOAc (20 mL) e extraído com EtOAc (20 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer ácido 5-(5-fluoro-3piridil)-7-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3carboxílico (50 mg, 84,05 pmol, 69,3% de produção, 70,0% de pureza) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,58 (s, 1 H), 8,46 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,40 (s, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,54 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,10 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 6,95 (m, 2 H), 6,07 (s, 1

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 410/704

381/652

Η), 3,90 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,13-3,08 (m, 2H); ES-LCMS m/z 417,2 [M+H]⁺.

Etapa 6: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]-A/metóxi-/V-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (I-92)

[00467] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (50 mg, 84,05 pmol, 1 eq.) e AZ-metoximetanamina (12,30 mg, 126,08 pmol, 1,5 eq, HCI) em DCM (5 mL) foram adicionados HATU (47,94 mg, 126,08 pmol, 1,5 eq.) e TEA (17,01 mg, 168,10 pmol, 23,40 pL, 2 eq.). Em seguida, a mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi diluído com EtOAc (20 mL) e extraído com EtOAc (20 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 10 min.). A fração desejada foi evaporada para fornecer 5-(5fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]-A/-metóxi-A/-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxamida (20,19 mg, 35,14 pmol, 41,8% de produção, 99,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo claro. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,74 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,61 (s, 1 H), 8,40 (s, 1 H), 7,57-7,51 (m, 2 H), 7,10 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,01 (s, 1 H), 6,94 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,87-6,81 (m, 1 H), 6,04 (s, 1 H), 4,07 (t, J = 5,8 Hz, 2 H), 3,85 (s, 3 H), 3,37 (s, 3 H), 3,24 (t, J = 5,7 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 460,4 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 411/704

382/652

Exemplo 91

Síntese de I-93

Esquema sintético:

I-93

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-A/6-[2-(1 H-indol-3-il)etiΙ]-Λ/4isopropil-A/4-metil-pirimidina-4,6-diamina (1-93)

[00468] 6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirimidin4-amina (60 mg, 163,13 pmol, 1,0 eq.), A/-metilpropan-2-amina (702,00 mg, 9,60 mmol, 1 mL, 58,84 eq.) e DIEA (63,25 mg, 489,39 pmol, 85,24 pL, 3,0 eq.) em /-PrOH (2 mL) foram capturados em um tubo de microondas. O tubo selado foi aquecido a 125°C durante 10 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 30 mm x 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 22% a 52%, 12 min.) e a fração desejada foi liofilizada para

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383/652 produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/6-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-A/4-isopropil-A/4metil-pirimidina-4,6-diamina (19,96 mg, 49,25 pmol, 30,2% de produção, 99,80% de pureza, sal de HCI 3) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD+Na₂CO₃) δ ppm 9,26 (s, 1 H), 8,47 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,39-8,33 (m, 1 H), 7,65-7,59 (m, 1 H), 7,35-7,31 (m, 1 H), 7,12-7,06 (m, 2 H), 7,04-6,98 (m, 1 H), 5,34 (s, 1 H), 4,95 (s, 1 H), 3,66 (t, J= 6,9 Hz, 2 H), 3,07 (t, J= 6,9 Hz, 2 H), 2,79 (s, 3 H), 1,18 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 405,3 [M+H]⁺.

Exemplo 92

Síntese de l-94a l-94a

Esquema sintético:

NKiQAc.

Etapa 1:3-Aminotetralin-6-ol

[00469] A uma solução de 7-hidroxitetralin-2-ona (500 mg, 3,08 mmol, 1 eq.) em MeOH anidroso (5 mL) foi adicionado NH4OAC (7,13 g,

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92,49 mmol, 30 eq.). Após agitar durante 5 h, NaBHU (349,88 mg, 9,25 mmol, 3 eq) foi adicionado. A mistura foi agitada a 25°C durante 3 h. A mistura foi concentrada para remover o solvente. H2O (10 mL) foi adicionado, a mistura foi extraída com EtOAc (20 mL x 2). O aquoso foi ajustado por HCI a 3 N para pH = 6-7, extraído com EtOAc (10 mL x 2). O aquoso foi ajustado por NaOH a 1 N para pH = 6-7. Em seguida, a mistura foi liofilizada para fornecer 0 sólido. O sólido foi dissolvido em /PrOH (10 mL). A mistura resultante foi filtrada e concentrada para fornecer 3-aminotetralin-6-ol (550 mg, 2,66 mmol, 86,4% de produção, 79,0% de pureza) como um óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 6,91 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 6,58 (dd, J= 2,4, 8,4 Hz, 1 H), 6,51 (s, 1 H), 3,533,42 (m, 1 H), 3,06 (dd, J= 5,4, 15,5 Hz, 1 H), 2,89-2,73 (m, 3 H), 2,17 (d, J= 10,1 Hz, 1 H), 1,84-1,74 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 164,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: 3-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino] tetralin-6-ol

[00470] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 330,21 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foram adicionados DIEA (128,03 mg, 990,63 pmol, 172,55 pL, 3 eq.) e 3-aminotetralin-6-ol (204,67 mg, 990,63 pmol, 3 eq.). A mistura foi agitada a 120°C durante 3 horas sob micro-ondas sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada para remover 0 solvente. H2O (10 mL) foi adicionado, a mistura foi extraída com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas para dar origem ao produto cru que foi purificado em cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE /

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EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, R_f = 0,50) para fornecer 3[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]tetralin-6-ol (63 mg, 138,83 μιτιοΙ, 42,0% de produção, 92,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,19 (s, 1 H), 8,56 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,45-8,37 (m, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 6,98 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 6,78 (s, 1 H), 6,66-6,56 (m, 2 H), 4,62 (s, 2 H), 4,32 (s, 1 H), 3,01 - 2,89 (m, 3 H), 2,28 (s, 1 H), 2,03 (d, J = 5,5 Hz, 1 H), 1,44 (d, J= 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z418,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: (3fí)-3-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino] tetralin-6-ol (I-94)

[00471] 3-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]tetralin-6-ol (100 mg, 220,37 pmol, 1 eq) foi separado por SFC (coluna: Chiralcel OD 250 * 30 5 u; fase móvel: [0,1% de NH3.H2O EtOH]; % de B: 45% a 45%, min.) para produzir 0 produto (Tr = 3,922 min.) que foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/H2O como eluentes, condição acídica, Instrumento: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um/Fase móvel: água (0,05% de HCI) - ACN/Gradiente: B de 50% a 80% em 10 min/ Taxa de vazão: 25 mL/min.) seguida por liofilização para produzir (3F?)-3-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]tetralin-6-ol (19,02 mg, 45,10 pmol, 20,47% de produção, 99,0% de pureza) ([o]²⁵d = -23,996) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,99 (s, 1 H), 8,81 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,38-8,31 (m, 1 H), 8,25 (s, 1 H), 7,00-6,91 (m, 2 H), 6,60 (dd, J= 2,5, 8,3 Hz, 1 H), 6,55 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 4,50 (s, 1 H), 3,41-3,32 (m, 1 H), 3,23-3,15 (m, 1 H), 3,11-3,02 (m, 1 H), 3,01 - 2,94

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386/652 (m, 1 Η), 2,94-2,86 (m, 1 Η), 2,32-2,21 (m, 1 Η), 2,14-2,02 (m, 1 Η), 1,38 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z418,2 [M+H]⁺.

Exemplo 93

Síntese de 1-95

1-95

Etapa 1: Metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidina-7-carboxilato

[00472] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (270 mg, 659,39 μηποΙ, 1 eq, 71,0%) em DMF (10 mL) e MeOH (8 mL) foram adicionados EtaN (333,62 mg, 3,30 mmol, 458,90 μΙ_, 5,0 eq.), Pd(OAc)₂ (22,21 mg, 98,91 qmol, 0,15 eq.) e DPPF

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387/652 (54,83 mg, 98,91 pmol, 0,15 eq.). A mistura foi purgada com CO (3,51 kg/cm² (50 psi)) três vezes e agitada a 70°C durante 24 horas sob CO (3,51 kg/cm² (50 psi)). A mistura de reação concentrada sob vácuo elevado para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,47) para fornecer o produto metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-7-carboxilato (180 mg, 538,32 pmol, 81,6% de produção, 94,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,17 (d, J = 6,8 Hz, 1 H), 8,62 (d, J = 5,3 Hz, 1 H), 8,22 (dd, J = 7,9, 17,9 Hz, 2 H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 4,224,00(m, 3 H), 3,47-3,45 (m, 1 H), 1,47 (t, J = 7,4 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 315,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: Ácido 5-(5-fluoro-3-pirÍdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidina-7-carboxílico

[00473] A uma solução de metil 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina-7-carboxilato (180 mg, 538,32 pmol, 1 eq.) em MeOH (10 mL), THF (10 mL) e H₂O (5 mL) foi adicionado LiOH (128,92 mg, 5,38 mmol, 10 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com H₂O (20 mL), ajustado para pH = 3 a 4 com solução de HCI a 1 N, extraído com DCM (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 0 produto cru ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-7-carboxílico (100 mg, 293,05 pmol, 54,4% de produção, 88,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação.

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388/652 ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,23 (s, 1 H), 8,65 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,26 (td, J= 2,3, 9,3 Hz, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 3,59-3,35 (m, 1 H), 1,49 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z301,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-A/-[(3-hidroxifenil)metil]-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina-7-carboxamida (I-95)

[00474] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina-7-carboxílico (70 mg, 205,14 pmol, 1 eq.) e 3(aminometil)fenol (50,53 mg, 410,27 pmol, 2,0 eq.) em DCM (20 mL) foram adicionados HATU (117,00 mg, 307,71 μιτιοΙ, 1,5 eq.) e DIEA (79,54 mg, 615,41 pmol, 107,19 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 h. A mistura de reação combinada foi diluída com H2O (20 mL), extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 47% a 77%, 12 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3piridil)-A/-[(3-hidroxifenil)metil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-7carboxamida (16,16 mg, 33,78 pmol, 16,5% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-ok) δ ppm 10,41 (t, J= 5,8 Hz, 1 H), 9,34-9,27 (m, 1 H), 8,76 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,62-8,49 (m, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 7,15 (t, J= 7,7 Hz, 1 H), 6,88-6,80 (m, 2 H), 6,72-6,61 (m, 1 H), 4,62 (d, J = 6,0 Hz, 2 H), 3,42-3,35 (m, 1 H), 1,41 (d, J= 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z406,2 [M+H]⁺.

Exemplo 94

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389/652

Síntese de 1-96

Esquema sintético:

Etapa 1: N-[2-(5,7-Difluoro-1 H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-8isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (I-96)

[00475] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (40 mg, 137,12 pmol, 1 eq.), 2-(5,7-difluoro1 /-/-indol-3-il)etanamina (45,86 mg, 205,68 pmol, 1,5 eq.) e DIEA (17,72 mg, 137,12 pmol, 23,88 pL, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi lavado com MeOH (10 mL), filtrado e secado sob pressão reduzida para produzir A/-[2-(5,7-difluoro-1/-/-indol-3-il)etil]2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (18,95 mg, 41,98 pmol, 30,6% de produção, 100% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm 11,37 (s, 1 H), 9,29 (t, J= 1,6 Hz, 1 H), 9,03-9,01 (m, 1 H), 8,70 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,26

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390/652

8,22 (m, 1 Η), 8,10 (s, 1 Η), 7,34 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,27 (dd, J=2,0, 7,2 Hz, 1 H), 6,91-6,87 (m, 1 H), 3,92 (q, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,22-3,15 (m, 1 H), 3,09 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,35 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 452,2 [M+H]⁺.

Exemplo 95

Síntese de l-97a

Etapa 1:1 -Metóxi-4-[(E)-2-nitroprop-1 -enil]benzeno

[00476] Uma mistura de 4-metoxibenzaldeído (5 g, 36,72 mmol, 4,46 mL, 1 eq.), NH4OAC (566,17 mg, 7,34 mmol, 0,2 eq.) em EtNOz (50 mL) foi agitada a 110°C durante 5 horas sob atmosfera de N2. Em seguida,

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391/652 a mistura foi agitada a 110°C durante mais 40 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 5/1, Rf = 0,73) indicou que material de partida foi consumido completamente e uma nova mancha formou-se. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc =10/1 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, Rf = 0,73) para produzir 1-metóxi-4-[(E)-2-nitroprop-1-enil]benzeno (3,7 g, 18,19 mmol, 49,5% de produção, 95% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,06 (s, 1 H), 7,52-7,49 (m, 2 H), 7,05-7,02 (m, 2 H), 3,85 (s, 3 H), 2,45 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 194,0 [M+H]⁺.

Etapa 2:1 -(4-Metoxifenil)propan-2-amina

X Τ T

[00477] Uma mistura de 1-metóxi-4-[(E)-2-nitroprop-1-enil]benzeno (1 g, 4,92 mmol, 1 eq.) e LAH (1 M em THF, 14,75 mL, 3 eq.) em THF (10 mL) foi agitada a 60 °C durante 14 h. A mistura foi interrompida bruscamente com água (0,5 mL), 15% de NaOH (0,5 mL) e água (1,5 mL), a mistura foi agitada durante 3 horas a 20 °C. A mistura foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir 1-(4metoxifenil)propan-2-amina (800 mg, cru) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,08 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 6,86-6,81 (m, 2 H), 3,72 (s, 3 H), 2,96-2,91 (m, 1 H), 2,51 - 2,42 (m, 2 H), 0,92 (d, J= 6,4 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 166,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-(2-Aminopropil)fenol

[00478] Uma mistura de 1 -(4-metoxifenil)propan-2-amina (1,2 g, 7,26 mmol, 1 eq.) em uma solução de HBr (8 mL) em H2O (3 mL) foi agitada a 100°C durante 3 h. A mistura foi extraída com EtOAc (20 mL), pH foi ajustado para 9 com 15% de NaOH, a solução aquosa foi extraída com

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392/652

EtOAc (20 mL x 3), secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 4-(2-aminopropil)fenol (445 mg, cru) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,00 (d, J= 8,4 Hz, 2 H), 6,73-6,70 (m, 2 H), 3,07-3,01 (m, 1 H), 2,56-2,51 (m, 2 H), 1,07 (d, J = 6,4 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 152,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 4-[(2/7)-2-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]propil]fenol (I-97)

[00479] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 330,21 pmol, 1 eq.), 4-(2aminopropil)fenol (99,86 mg, 660,42 pmol, 2 eq.) e DIEA (128,03 mg, 990,63 pmol, 172,55 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, a mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por SFC (coluna: Chiralpak AS-H 250 * 30 5 u; fase móvel: [0,1% de NH3H2O EtOH]; % de B: 20% a 20%, min.) para fornecer 4-[(2F?)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]propil]fenol (Tr = 4,781 min, 50 mg) e HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150*30 mm*4 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 52% a 62%, 12 min.) para produzir 4-[(2F?)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino] propil]fenol (27,45 mg, 57,15 umol, 17,3% de produção, 99,6% de pureza, 2HCI) ([cc]²⁵d = -90,432) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,81-8,76 (m, 2 H), 8,25 (s, 1 H), 8,12-8,07 (m, 1 H), 7,04 (d, J= 8,4 Hz, 2 H), 6,54 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 6,34 (s, 1 H), 4,42 (br s, 1 H), 3,31-3,29 (m, 1 H), 3,04 (dd,

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393/652

J=4,4, 13,6 Hz, 1 H), 2,87-2,83 (m, 1 H), 1,54 (d, J= 6,4 Hz, 3 H), 1,36 (t, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z406,2 [M+H]⁺.

Exemplo 96

Síntese de l-98a

Esquema sintético:

Etapa 1: 3-[(E)-2-Nitroprop-1 -enil]-1 H-indol

[00480] Uma mistura de 1 H-indol-3-carbaldeído (5 g, 34,45 mmol, 1 eq.), NH4OAC (531,02 mg, 6,89 mmol, 0,2 eq.) em nitroetano (50 mL) foi agitada a 110°C durante 24 h. TLC (DCM/MeOH = 10/1, Rf = 0,8) indicou que material de partida foi consumido completamente e uma nova mancha formou-se. A mistura foi resfriada para 0°C. A mistura foi filtrada e a massa filtrada foi secada sob pressão reduzida para fornecer 3-[(E)

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394/652

2-nitroprop-1-enil]-1 H-indol (5,1 g, 25,22 mmol, 73,2% de produção, 100% de pureza) como um sólido marom. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,53 (s, 1 H), 7,79-7,75 (m, 2 H), 7,46 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,267,20 (m, 2 H), 2,52 (s, 3 H); ES-LCMS m/z203,0 [M+H]⁺.

Etapa 2:1 -(1 H-lndol-3-il)propan-2-amina

H

[00481] A uma solução de 3-[(E)-2-nitroprop-1-enil]-1 H-indol (1 g, 4,95 mmol, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado LAH (1 M em THF, 14,84 mL, 3 eq) a 0°C. Em seguida, a mistura foi agitada a 60 °C durante 2 h. A mistura foi diluída com EtOAc (200 mL), interrompida bruscamente com água (0,5 mL), 15% de NaOH (0,5 mL), água (1,5 mL), agitada durante 3 h, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer 1-(1 H-indol-3-il)propan-2-amina (1,3 g, 3,73 mmol, 75,4% de produção, 50% de pureza) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,567,53 (m, 1 H), 7,35-7,30 (m, 1 H), 7,10-7,06 (m, 2 H), 7,01-6,97 (m, 1 H), 3,21-3,17 (m, 1 H), 2,85-2,79 (m, 1 H), 2,73-2,69 (m, 1 H), 1,15-1,10 (m, 3 H); ES-LCMS m/z 175,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-FIuoro-3-piridiI)-N-[(1 S)-2-(1 H-indol-3-il)-1 -metil-etil]3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-98)

[00482] Uma mistura de 1 -(1 H-indol-3-il)propan-2-amina (172,61 mg,

495,32 pmol, 1,5 eq.), 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil

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395/652 pirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 330,21 pmol, 1 eq.) e DIEA (42,68 mg, 330,21 pmol, 57,52 pL, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ por 3 vezes, a mistura foi agitada a 50°C durante 3 horas sob atmosfera de N₂. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (SiO₂, PE / EtOAc = 10/1 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,55) e também separado por SFC (coluna: OD(250 mm * 30 mm, 5 pm); fase móvel: [0,1% de NH₃/H₂O EtOH]; % de B: 30% - 30%, min.) para fornecer 5-(5-fIuoro-3-piridiI)-Λ/-[( 1 S)-2-(1 /-7-indol-3-iI)-1 -metiletil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (Tr = 3,870 min, 30 mg ) que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 50% - 80%, 12 min.) para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)Λ/-[( 1 S)-2-(1 /-7-i ndol-3-i I)-1 -metil-eti l]-3-isopropi l-pi razolo[1,5-a]pi ri midi n7-amina (16,33 mg, 29,93 pmol, 9,1% de produção, 98,6% de pureza, 3HCI) ([o]²⁵d = -261,788) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δppm 8,67 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 7,54 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,45 (d, J = 2,0, 8,8 Hz, 1 H), 7,14 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 6,99 (s, 1 H), 6,95 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,83-6,81 (m, 1 H), 5,80 (s, 1 H), 4,48-4,43 (m, 1 H), 3,28 (d, J=2,8 Hz, 1 H), 3,23-3,17 (m, 1 H), 3,053,01 (m, 1 H), 1,64 (d, J = 6,4 Hz, 3 H), 1,34 (t, J = 7,2 Hz, 6H); ESLCMS m/z 429,3 [M+H]⁺.

Exemplo 97

Síntese de 1-99

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396/652

Esquema sintético:

1-99

Etapa 1: íerc-Butil /V-(2-bromo-4,6-difluoro-fenil)carbamato

F

[00483] Uma mistura de 2-bromo-4,6-difluoro-anilina (10 g, 48,08 mmol, 1 eq.), BOC2O (31,48 g, 144,23 mmol, 33,13 mL, 3 eq.), DMAP (587,34 mg, 4,81 mmol, 0,1 eq.) em THF (100 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 70°C durante 16 horas sob N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi dissolvido em MeOH (100 mL), adicionado K2CO3 (19,93 g, 144,23 mmol, 3 eq.) e agitado a 70°C durante 4 h. A mistura de reação foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. À mistura crua foi adicionada água (100 mL), extraída com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas, concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi

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397/652 purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE/ EtOAc = 10/1, R_f = 0,36) para produzir terc-butil Λ/-(2bromo-4,6-difluoro-fenil)carbamato (12,5 g, 40,57 mmol, 84,3% de produção, 100% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,10 (td, J= 2,3, 7,7 Hz, 1 H), 6,86-6,77 (m, 1 H), 5,84 (s, 1 H), 1,43 (s, 9H); ES-LCMS m/z 251,9, 253,9 [M-í-Bu+H]⁺.

Etapa 2: ferc-Butil A/-[2,4-difluoro-6-(2trimetilsililetinil)fenil]carbamato

[00484] Uma mistura de terc-butil A/-(2-bromo-4,6-difluorofenil)carbamato (4 g, 12,98 mmol, 1 eq.), etinil(trimetil)silano (1,91 g, 19,47 mmol, 2,70 mL, 1,5 eq.), TEA (3,94 g, 38,95 mmol, 5,42 mL, 3,0 eq.), Cul (247,24 mg, 1,30 mmol, 0,1 eq.) e Pd(PPh3)2Cl2 (455,60 mg, 649,10 pmol, 0,05 eq.) em DMF (80 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, em seguida agitada a 100°C durante 16 horas sob N2. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de água (300 mL), em seguida extraída com EtOAc (200 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílicagel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE/ EtOAc = 20/1, R_f = 0,31) para produzir terc-butil A/-[2,4-difluoro-6-(2trimetilsililetinil)fenil]carbamato (3,0 g, 8,20 mmol, 63,2% de produção, 89,0% de pureza) como um sólido marrom-preto. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,00-6,93 (m, 1 H), 6,90-6,81 (m, 1 H), 6,09 (s, 1 H), 1,49 (s, 9H), 0,26 (s, 9H); ES-LCMS m/z270,1 [M-í-Bu+H]⁺.

Etapa 3: 5,7-Difluoro-1 H-indol

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398/652

[00485] A uma solução de EtOH (150 mL) foi adicionado Na (1,51 g, 65,64 mmol, 8 eq) lentamente. Após ser agitado durante 1 hora a 15°C enquanto Na foi dissolvido completamente, à mistura foi adicionado tercbutil A/-[2,4-difluoro-6-(2-trimetilsililetinil)fenil]carbamato (3,0 g, 8,20 mmol, 1 eq.) e a mistura foi agitada a 85 °C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover EtOH. Ao resíduo foi adicionada água (100 mL), extraída com EtOAc (60 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílicagel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, R_f = 0,17) para produzir 5,7-difluoro-1 H-indol (600 mg, 3,68 mmol, 44,8% de produção, 94,0% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) õppm 8,36 (s, 1 H), 7,27-7,25 (m, 1 H), 7,09 (dd, J= 2,0, 9,0 Hz, 1 H), 6,74 (dt, J= 2,1, 10,2 Hz, 1 H), 6,60-6,47 (m, 1 H); ES-LCMS m/z. Nenhuma massa foi encontrada.

Etapa 4: 5,7-Difluoro-1 H-indol-3-carbaldeído

F

[00486] A uma solução de DMF (18 mL) foi adicionado POCI3 (1,13 g, 7,37 mmol, 684,54 pL, 2,0 eq) gota a gota a -20°C durante um período de 10 minutos sob N2. Após 1 h, 5,7-difluoro-1 H-indol (600 mg, 3,68 mmol, 1 eq.) em DMF (2 mL) foi adicionado à solução acima durante 0 que a temperatura foi mantida abaixo de -20°C. A mistura de reação foi aquecida para 15°C e agitada a 15°C durante 1 hora. TLC (ΡΕ/EtOAc =

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399/652

1/1, Rt = 0,40) mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e uma nova mancha formou-se. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de NaHCOs (100 mL) a 0°C, extraída com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/2, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,40) para produzir 5,7-difluoro-1 Hindol-3-carbaldeído (500 mg, 2,35 mmol, 63,7% de produção, 85,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, Acetona) δ ppm 11,72 (s, 1 H), 10,05 (s, 1 H), 8,36 (s, 1 H), 7,73 (dd, J = 2,4, 9,0 Hz, 1 H), 7,02 (ddd, J= 2,2, 9,4, 11,3 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z 182,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 5,7-Difluoro-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol

F

[00487] A uma solução de 5,7-difluoro-1 H-indol-3-carbaldeído (500 mg, 2,35 mmol, 1 eq.) em nitrometano (15 mL) foi adicionado NH4OAC (542,57 mg, 7,04 mmol, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 110 °C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover nitrometano. O resíduo foi diluído em EtOAc (50 mL), lavado com água (10 mL), solução salina (10 mL), secado sobre Na₂SO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE/ EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE/ EtOAc = 1/1, R_f = 0,70) para produzir 5,7-difluoro3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (420 mg, 1,82 mmol, 77,4% de produção, 97,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,23 (d, J= 13,5 Hz, 1 H), 7,76-7,57 (m, 2 H), 7,25-7,16 (m, 1 H), 6,91-6,78 (m, 1 H); ES-LCMS m/z225,1 [M+H]⁺.

Etapa 6: 2-(5,7-Difluoro-1 H-indol-3-il)etanamina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 429/704

400/652

[00488] A uma solução de 5,7-difluoro-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (420 mg, 1,82 mmol, 1 eq.) em THF (15 mL) foi adicionado gota a gota LAH (1 M em THF, 6,36 mL, 3,5 eq) a 0°C. Após adição, a mistura foi agitada a 80 °C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,04) mostrou que o material de partida foi totalmente consumido e uma nova mancha formou-se. A mistura de reação foi diluída com THF (75 mL), interrompida bruscamente por adição de água (0,25 mL), NaOH aq. (0,25 mL, 10% em água), água (0,75 mL) a 0°C em sequência. Após ser agitada durante 20 min, a mistura foi filtrada através de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir uma 2-(5,7-difIuoro1 H-indol-3-il)etanamina crua (320 mg, 1,44 mmol, 78,9% de produção, 88,0% de pureza) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte diretamente sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,18 (s, 1 H), 7,08 (dd, J= 2,1,9,4 Hz, 1 H), 6,70 (ddd, J = 2,3, 9,5, 11,3 Hz, 1 H), 2,94-2,82 (m, 4H); ES-LCMS m/z 197,1 [M+H]⁺.

Etapa 7: W-[2-(5,7-Difluoro-1H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-99)

[00489] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (40 mg, 132,08 pmol, 1 eq.), 2-(5,7-difluoro-1 Hindol-3-il)etanamina (44,17 mg, 198,13 pmol, 1,5 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (85,35 mg, 660,42 pmol, 115,03 pL, 5 eq.). A

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401/652 mistura foi agitada a 60°C durante 16 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por TLC preparativa (DCM/MeOH = 20/1, TLC: DCM/MeOH = 20/1, R_f = 0,48) para produzir A/-[2-(5,7-difluoro-1 H-indol-3-il)etil]-5-(5fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (30,31 mg, 66,35 μηποΙ, 50,2% de produção, 98,6% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,82 (t, J= 1,4 Hz, 1 H), 8,49 (d, J= 2,6 Hz, 1 H), 7,97-7,85 (m, 2 H), 7,21-7,11 (m, 2 H), 6,726,58 (m, 1 H), 6,11 (s, 1 H), 3,85 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,30-3,24 (m, 1 H), 3,15 (t, J= 6,3 Hz, 2 H), 1,38 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 451,3 [M+H]⁺.

Exemplo 98

Síntese de 1-100

Esquema sintético:

Etapa 1:5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[(4-hidroxifenil)metil]-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina-7-carboxamida (1-100)

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402/652

[00490] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina-7-carboxílico (40 mg, 130,54 pmol, 1 eq.) e 4(aminometil)fenol (19,29 mg, 156,65 pmol, 1,2 eq.) em DCM (20 mL) foram adicionados HATU (74,45 mg, 195,81 pmol, 1,5 eq.) e DIEA (50,61 mg, 391,63 pmol, 68,21 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 25 °C durante 16 h. A mistura de reação combinada foi diluída com H2O (20 mL), extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 47% a 77%, 12 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3piridil)-A/-[(4-hidroxifenil)metil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-7carboxamida (14,42 mg, 29,79 pmol, 22,8% de produção, 98,8% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-ok) δ ppm 9,35 (s, 1 H), 8,77 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,69 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 8,31 (s, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 7,26 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,82-6,72 (m, 2 H), 4,66 (s, 2 H), 3,48-3,42 (m, 1 H), 1,46 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 406,1 [M+H]⁺.

Exemplo 99

Síntese de 1-101

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 432/704

403/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-/V-[2-(1 H-piirolo[3,2b]piridiη-3-il)etiI]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (1-101)

[00491] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (40 mg, 137,12 umol, 1 eq.) e 2-(1Hpirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina (33,58 mg, 164,55 pmol, 1,2 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (53,17 mg, 411,37 pmol, 71,65 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 90°C durante 3 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLCpreparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 12 min.) para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil-A/-[2-(1 Hpi rrolo[3,2-b]pi ridi η-3-i l)etil]pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (26,15 mg, 49,73 pmol, 36,27% de produção, 100% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,43-9,38 (m, 1 H),

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 433/704

404/652

9,00-8,93 (m, 2 Η), 8,49 (d, J= 5,6 Hz, 1 H), 8,41 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 8,01 (s, 2 H), 7,59-7,54 (m, 1 H), 4,19 (t, J= 6,4 Hz, 2 H), 3,41-3,37 (m, 2 H), 3,29-3,22 (m, 1 H), 1,39 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 417,3 [M+H]⁺.

Exemplo 100

Síntese de 1-102

Etapa 1: 2-Metil-4-[(E)-2-nitrovinil]fenol

[00492] Uma mistura de 4-hidróxi-3-metil-benzaldeído (1 g, 7,34 mmol, 1 eq.) e NaOAc (602,53 mg, 7,34 mmol, 1 eq.) em CH3NO2 (10 mL) foi agitada a 110°C durante 48 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 5/1, Rf = 0,23) indicou que material de partida foi consumido completamente e uma nova mancha formou-se. A mistura foi concentrada sob pressão

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 434/704

405/652 reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, Rt = 0,23) para produzir 2-metil-4-[(E)-2-nitrovinil]fenol (400 mg, 1,12 mmol, 15,2% de produção, 50% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,98 (d, J = 13,6 Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 13,6 Hz, 1 H), 7,65-7,59 (m, 1 H), 7,46-7,37 (m, 1 H), 6,88 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 2,24 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 180,1 [M+H]⁺

Etapa 2: 4-(2-Amjnoetil)-2-metil-fenol

OH h₂n

[00493] A uma solução de 2-metil-4-[(E)-2-nitrovinil]fenol (400 mg, 1,12 mmol, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado LAH (1 M, 3,35 mL, 3 eq} a 0 °C. Em seguida, a mistura foi agitada a 70 °C durante 2 h. A mistura foi interrompida bruscamente com água (0,25 mL), 15% de NaOH (0,25 mL) e água (0,75 mL). Em seguida, a mistura foi agitada a 20 °C durante 3 h. A mistura foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir 4-(2-aminoetil)-2-metil-fenol (350 mg, cru) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,05 (s, 1 H), 6,92 (s, 1 H), 6,85-6,84 (m, 1 H), 3,58-3,55 (m, 2 H), 2,17 (s, 3 H), 1,60-1,57 (m, 2H); ES-LCMS m/z 152,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]etil]-2-metil-fenol (1-102)

[00494] A uma solução de

7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilPetição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 435/704

406/652 pirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 165,11 pmol, 1,0 eq.) e 4-(2-aminoetil)2-metil-fenol (29,96 mg, 198,13 μιτιοΙ, 1,2 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (64,02 mg, 495,33 μιτιοΙ, 86,28 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi lavado com MeOH (20 mL), filtrado. A massa filtrada foi liofilizada para produzir 4-[2-[[5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]-2-metil-fenol (26,08 mg, 63,29 μιτιοΙ, 38,3% de produção, 98,4% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 9,24 (s, 1 H), 9,03 (s, 1 H), 8,67 (s, 1 H), 8,40-8,36 (m, 1 H), 7,99 (s, 1 H), 7,92 (t, J= 6,0 Hz, 1 H), 7,02 (s, 1 H), 6,90 (dd, J= 2,0, 8,2 Hz, 1 H), 6,73 (s, 1 H), 6,64 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 3,74-3,67 (m, 2 H), 3,27-3,19 (m, 1 H), 2,85 (t, J = 7,6 Hz, 2 H), 2,07 (s, 3 H), 1,36 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z406,2 [M+H]⁺.

Exemplo 101

Síntese de 1-103

NH

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirazolo[1,5

a]pirimidin-7-amina (1-103)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 436/704

407/652

[00495] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (30 mg, 110,76 pmol, 1,0 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (42,94 mg, 332,28 pmol, 57,88 pL, 3,0 eq.) e 2-(1/-/indol-3-il)etanamina (24,00 mg, 149,80 pmol, 1,35 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 29% a 49%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 5-(5-fluoro3-pi ridil)-A/-[2-( 1 H-i ndol-3-il)etil]pi razolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (25,41 mg, 52,74 pmol, 47,62% de produção, 100% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,73 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 8,38 (s, 1 H), 8,26 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 7,56 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,46 (td, J= 2,3, 9,0 Hz, 1 H), 7,12 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 6,96 (t, J= 7,2 Hz, 1 H), 6,89-6,84 (m, 1 H), 6,52 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 4,07 (t, J = 5,9 Hz, 2 H), 3,27-3,23 (m, 2H); ES-LCMS m/z 373,3 [M+H]⁺.

Exemplo 102

Síntese de 1-104

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 437/704

408/652

Etapa 1:4-Cloro-2-(5-fluoro-3-pirjdil)-6-isopropóxi-pirjmÍdina

[00496] A uma solução de /-PrOH (43,10 mg, 717,06 μηποΙ, 54,90 μΕ, 1 eq.) em THF (8 mL) foi adicionado NaH (34,42 mg, 860,47 μηποΙ, 60% de pureza, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 0°C durante 30 min. 4,6Dicloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirimidina (175 mg, 717,06 pmol, 1,0 eq) foi adicionado à solução acima e a mistura foi agitada a 15°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover THF. O resíduo foi diluído com água (50 mL) e extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-pirimidina (220 mg, 690,36 pmol, 96,2% de produção, 84,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,41 (s, 1 H), 8,58 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,408,31 (m, 1 H), 6,67 (s, 1 H), 5,53 (m, 1 H), 1,43 (d, J= 6,3 Hz, 6H); ESLCMS m/z 268,1,270,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-/V-[2-(1 H-piirolo[3,2b] pi rid i η-3-i l)eti I] pi ri m id i η-4-ami na (1-104)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 438/704

409/652

[00497] 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-pirimidina (60 mg, 188,28 pmol, 1,0 eq.), 2-(1 H-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina (45 mg, 220,53 pmol, 1,17 eq.) e DIEA (73,00 mg, 564,84 pmol, 98,38 pL, 3,0 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas. O tubo selado foi aquecido a 125°C durante 6 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover o solvente. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 25% a 55%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-6isopropóxi-A/-[2-(1 H-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etil]pirimidin-4-amina (20,08 mg, 38,97 pmol, 20,7% de produção, 97,4% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,20 (s, 1 H), 8,93 (dd, J= 1,0, 2,5 Hz, 1 H), 8,62 (s, 1 H), 8,53-8,46 (m, 2 H), 8,06 (s, 1 H), 7,65-7,58 (m, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 5,22 (s, 1 H), 5,29-5,16 (m, 1 H), 3,96 (m, 2 H), 3,30-3,27 (m, 2 H), 1,42 (d, J= 6,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 393,2 [M+H]⁺.

Exemplo 103

Síntese de 1-105

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 439/704

410/652

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-pirrolidin-1il-pirimidin-4-amina (1-105)

[00498] 6-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirimidin4-amina (80 mg, 215,33 pmol, 1,0 eq.), pirrolidina (1,28 g, 17,97 mmol, 1,5 mL, 83,45 eq.) e DIEA (139,15 mg, 1,08 mmol, 187,53 pL, 5,0 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em /-PrOH (1,5 mL). O tubo selado foi aquecido a 130°C durante 3 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para remover o solvente. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 25% a 55%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2(1/-/-indol-3-il)etil]-6-pirrolidin-1-il-pirimidin-4-amina (47,28 mg, 91,26 pmol, 42,3% de produção, 98,8% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,00 (s, 1 H), 8,77 (s, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 7,64 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,16-6,98 (m, 4H), 3,72 (d, J= 6,0 Hz, 4H), 3,15 (t, J= 5,8 Hz, 4H), 2,00 (s, 4H); ES-LCMS m/z 403,3 [M+H]⁺.

Exemplo 104

Síntese de 1-106

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 440/704

411/652

Esquema sintético:

PtKdppnCb, CssCOs dtoxariõ·' ^H2°

NH

Etapa 1:1-Amino-3-metil-butan-2-ol

[00499] Uma mistura de 2-isopropiloxirano (600 mg, 6,97 mmol, 1 eq.) em ΝΗ3Ή2Ο (5 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. Em seguida, a mistura foi agitada a 10 a 15 °C durante 16 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer 0 produto cru 1-amino-3-metil-butan-2-ol (700 mg, 6,79 mmol, 97,4% de produção, cru) como óleo incolor que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 441/704

412/652

CDCI₃) δ ppm 3,39-3,22 (m, 1 H), 2,91 - 2,72 (m, 1 H), 2,60-2,49 (m, 1

H), 1,71-1,62 (m, 1 H), 0,98-0,91 (m, 6H); ES-LCMS m/z. Nenhuma massa correta foi encontrada.

Etapa 2:1 -[(3-Cloropirazin-2-il)amino]-3-metil-butan-2-ol ci oh

[00500] Uma mistura de 2,3-dicloropirazina (670 mg, 4,50 mmol, 1 eq.) e 1-amino-3-metil-butan-2-ol (695,93 mg, 6,75 mmol, 1,5 eq.) em 1,4-dioxano (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 110 °C durante 16 horas sob atmosfera de N₂. TLC (ΡΕ/EtOAc = 5/1, Rf = 0,54) mostrou que o material de partida não foi consumido completamente e uma nova mancha foi encontrada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, Rf = 0,54) para fornecer o produto 1-[(3-cloropirazin-2-il)amino]-3-metilbutan-2-ol (500 mg, 2,27 mmol, 50,5% de produção, 98,0% de pureza) como óleo incolor. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,92 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 5,61 (br s, 1 H), 3,74 (ddd, J = 2,4, 6,5, 13,8 Hz, 1 H), 3,59-3,58 (m, 1 H), 3,44-3,37 (m, 1 H), 2,83 (d, J = 4,4 Hz, 1 H), 1,89-1,72 (m, 1 H), 1,03 (dd, J = 6,8, 10,6 Hz, 6H); ESLCMS m/z216,0, 218,1 [M+H]⁺.

Etapa 3:1 -[(3,5-Dicloropirazin-2-il)amino]-3-metil-butan-2-ol ci oh

[00501] Uma mistura de 1-[(3-cloropirazin-2-il)amino]-3-metil-butan2-ol (380 mg, 1,73 mmol, 1 eq.) e NCS (276,68 mg, 2,07 mmol, 1,2 eq.) em CHCI₃ (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ durante 3 vezes

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413/652 e agitada a 70 °C durante 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,46) para fornecer 0 produto de 1-[(3,5-dicloropirazin-2-il)amino]-3-metil-butan-2-ol (345 mg, 1,23 mmol, 71,1% de produção, 89,0% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,95 (s, 1 H), 5,59 (br s, 1 H), 3,74 (ddd, J = 2,8, 6,7, 13,7 Hz, 1 H), 3,58-3,56 (m, 1 H), 3,38-3,33 (m, 1 H), 1,83-1,73 (m, 1 H), 1,03 (dd, J = 6,8, 10,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z250,0, 252,0 [M+H]⁺.

Etapa 4:1 -[(3,5-Dicloropirazin-2-il)amino]-3-metil-butan-2-ona

[00502] A uma solução de 1-[(3,5-dicloropirazin-2-il)amino]-3-metilbutan-2-ol (405 mg, 1,44 mmol, 1 eq.) em DCM (30 mL) foi adicionado Dess-Martin (733,47 mg, 1,73 mmol, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 20°C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf= 0,51) mostrou que cerca de 50% de material de partida foi mantido. Dess-Martin (300 mg, 0,71 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada a 20°C durante 16 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf= 0,51) mostrou que cerca de 20% de material de partida foi mantido. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de solução de NazSzOs saturada (50 mL), extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,51) para fornecer 0 produto de 1 -[(3,5-dicloropirazin-2-il)amino]3-metil-butan-2-ona (200 mg, 669,06 pmol, 46,4% de produção, 83,0% de pureza) como um óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,96 (s, 1 H), 6,03 (br s, 1 H), 4,35 (d, J = 4,4 Hz, 2 H), 2,76 (m, 1 H),

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414/652

1,22 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z247,9, 249,9 [M+H]⁺.

Etapa 5: 6,8-DÍcloro-3-isopropil-imjdazo[1,2-a]pirazina

[00503] A uma solução de 1-[(3,5-dicloropirazin-2-il)amino]-3-metilbutan-2-ona (180 mg, 602,16 pmol, 1 eq.) em TFA (2 mL) foi adicionado TFAA (379,41 mg, 1,81 mmol, 251,27 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 20°C durante 5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,48) para fornecer o produto 6,8-dicloro-3isopropil-imidazo[1,2-a]pirazina (120 mg, 521,53 pmol, 86,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo claro. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,94 (s, 1 H), 7,69 (s, 1 H), 3,22-3,16 (m, 1 H), 1,44 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z230,0, 232,0 [M+H]⁺.

Etapa 6: 6-Cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropil-imidazo[1,2a]pirazin-8-amina

[00504] A uma solução de 6,8-dicloro-3-isopropil-imidazo[1,2a]pirazina (50 mg, 217,30 pmol, 1 eq.) e 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (41,78 mg, 260,76 μιτιοΙ, 1,2 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi adicionado DIEA (84,25 mg, 651,91 pmol, 113,55 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 45°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 444/704

415/652

PE / EtOAc = 1/1, Rt = 0,44) para fornecer o produto 6-cloro-A/-[2-(1 Hindol-3-il)etil]-3-isopropil-imidazo[1,2-a]pirazin-8-amina (60 mg, 162,78 pmol, 74,9% de produção, 96,0% de pureza) como um óleo marrom. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,07 (br s, 1 H), 7,71 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,38 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,24-7,19 (m, 2 H), 7,17-7,12 (m, 1 H), 7,11 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 6,21 (br s, 1 H), 4,02-3,89 (m, 2 H), 3,17 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 3,12-3,02 (m, 1 H), 1,37 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ESLCMS m/z 354,0, 356,1 [M+H]⁺.

Etapa 7: 6-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-jndol-3-il)etil]-3-isopropilimidazo[1,2-a]pirazin-8-amina (1-106)

[00505] 6-Cloro-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-i midazo[1,2a]pirazin-8-amina (60 mg, 162,78 pmol, 1 eq.), ácido (5-fluoro-3piridil)borônico (45,87 mg, 325,56 pmol, 2,0 eq.), Pd(dppf)CÍ2 (11,91 mg, 16,28 pmol, 0,1 eq.) e CS2CO3 (159,11 mg, 488,35 pmol, 3,0 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (2 mL) e H2O (0,5 mL). A mistura foi purgada com N2 durante 3 min. O tubo selado foi aquecido a 110°C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 * 30 mm * 4 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 12 min.), seguida por liofilização para produzir 6-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-( 1 H-indol-3-il)etil]3-isopropil-imidazo[1,2-a]pirazin-8-amina (50,13 mg, 94,00 pmol, 57,8% de produção, 98,2% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 445/704

416/652 (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,21 (br s, 1 H), 8,86 (br s, 1 H), 8,74 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 8,57 (s, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,51 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,09 (s, 1 H), 6,94 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 6,89-6,81 (m, 1 H), 4,06 (t, J = 6,1 Hz, 2 H), 3,46 (d, J = 6,0 Hz, 1 H), 3,18 (t, J = 6,3 Hz, 2 H), 1,42 (d, J = 6,3 Hz, 6H); ES-LCMS m/z415,3 [M+H]⁺.

Exemplo 105

Síntese de 1-107

Esquema sintético:

Etapa 1: A/-[2-(5,7-Difluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-107)

[00506] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (120 mg, 404,51 pmol, 1 eq.) e 2-(5,7-difluoro2-metil-1 H-indol-3-il)etanamina (182,19 mg, 606,76 pmol, 1,5 eq, ácido oxálico) em /-PrOH (20 mL) foi adicionado DIEA (261,40 mg, 2,02 mmol,

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352,29 μΙ_, 5,0 eq.). A mistura foi agitada a 70°C durante 18 h. A mistura de reação concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 63% a 93%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir A/-[2-(5,7-difluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (94,41 mg, 196,14 pmol, 48,5% de produção, 96,5% de pureza, 92,85 mg foram para liberação) como um sólido amarelo claro. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-ok) δ ppm 11,16 (s, 1 H), 8,96 (s, 1 H), 8,61 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,06-7,95 (m, 3 H), 7,20 (dd, J = 2,0, 9,5 Hz, 1 H), 6,80-6,68 (m, 1 H), 6,34 (s, 1 H), 3,69 (q, J = 6,5 Hz, 2 H), 3,19 (spt, J = 6,8 Hz, 1 H), 2,99 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 2,16 (s, 3 H), 1,33 (d, J = 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z465,3 [M+H]⁺.

Exemplo 106

Síntese de 1-108

Etapa 1: 4-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino] etil]fenol (1-108)

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418/652

[00507] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (52,08 mg, 171,99 umol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados 4-(2-aminoetil)fenol (28,31 mg, 206,38 pmol, 1,2 eq.) e DIEA (66,68 mg, 515,96 pmol, 89,87 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 60 °C durante 16 h. A mistura foi concentrada para fornecer o produto cru que foi purificado por HPLC preparativa (MeCN/HzO como eluentes, condição acídica, Instrumento: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm/Fase móvel: água (0,05% de HCI)-CAN /Gradiente: B de 42% a 72% em 10 min/ Taxa de vazão: 25 mL/min.), seguida por liofilização para produzir 4-[2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]fenol (49,37 mg, 105,68 pmol, 61,5% de produção, 99,4% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,83 (d, J= 2,5 Hz, 2 H), 8,27 (s, 1 H), 8,16 (dd, J= 1,8, 8,8 Hz, 1 H), 7,08 (d, J= 8,3 Hz, 2 H), 6,63 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 6,38 (s, 1 H), 3,97 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,38 - 3,34 (m, 1 H), 3,01 (t, J = 6,5 Hz, 2 H), 1,39 (d, J = 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 392,1 [M+H]⁺.

Exemplo 107

Síntese de 1-109

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Esquema sintético:

Etapa 1:5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-(5-metoxiindan-2il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

[00508] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (80 mg, 264,17 pmol, 1,0 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (102,42 mg, 792,51 pmol, 138,04 pL, 3,0 eq) e 5-metoxiindan-2-amina (60 mg, 367,61 pmol, 1,39 eq.). A mistura foi agitada a 50 °C durante 15 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,70) para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3isopropil-A/-(5-metoxiindan-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (120 mg, 155,51 pmol, 58,9% de produção, 54,1% de pureza) como um óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,08 (s, 1 H), 8,55 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,21 (td, J= 2,3, 9,5 Hz, 1 H), 7,87 (s, 1 H), 7,18 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 6,83 (s, 1 H), 6,57 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,41 (s, 1 H), 4,70-4,60 (m, 1 H), 3,81 (s, 3 H), 3,50 (ddd, J=6,8, 12,6, 15,7 Hz, 2 H), 3,42-3,30 (m, 1 H), 3,08 (dt, J= 4,5, 16,1 Hz, 2 H), 1,42 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES

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LCMS m/z 418,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (1-109)

[00509] Uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-(5metoxiindan-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (95 mg, 123,11 pmol, 1 eq.) em HBr (9 mL) foi agitada a 120°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 49% a 79%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il] amino]indan-5-ol (30,69 mg, 61,40 pmol, 49,8% de produção, 95,3% de pureza, sal de 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,00 (s, 1 H), 8,83 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,35 (td, J= 2,3, 9,0 Hz, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 7,08 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 6,96 (s, 1 H), 6,71 (s, 1 H), 6,65 (dd, J= 2,3, 8,0 Hz, 1 H), 5,02 (t, J = 6,9 Hz, 1 H), 3,51-3,40 (m, 2 H), 3,40-3,32 (m, 1 H), 3,25-3,12 (m, 2 H), 1,39 (d, J = 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z404,2 [M+H]⁺.

Exemplo 108

Síntese de 1-110

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 450/704

421/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[2-(1 H-piirolo[3,2b]piridiη-3-il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-110)

[00510] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (45 mg, 123,83 umol, 1,0 eq.) em /-PrOH (2 mL) foram adicionados DIEA (48,01 mg, 371,49 μηποΙ, 64,70 pL, 3,0 eq.) e 2-(1 /-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina (25 mg, 155,08 μηποΙ, 1,25 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 15 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 x 25 mm x 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-[2-(1 H

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 451/704

422/652 pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (16,32 mg, 30,38 pmol, 24,5% de produção, 97,7% de pureza, sal de 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,97 (s, 1 H), 8,84 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,57-8,52 (m, 2 H), 8,35 (td, J= 2,1,9,0 Hz, 1 H), 8,23 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,70-7,65 (m, 1 H), 6,90 (s, 1 H), 4,15 (t, J= 6,9 Hz, 2 H), 3,45 (t, J= 6,9 Hz, 2 H), 3,38-3,33 (m, 1 H), 1,38 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 416,2 [M+H]⁺.

Exemplo 109

Síntese de 1-120

Esquema sintético:

Etapa 1: 4,6-Dicloro-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina

[00511] A uma mistura de 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (2,96 g, 18,50 mmol, 1,05 eq.) em THF (50 mL) foi adicionado NaH (1,06 g, 26,42

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 452/704

423/652 mmol, 1,5 eq.). A mistura foi agitada durante 30 minutos a 0°C sob atmosfera de N2. Uma solução de 4,6-dicloro-2-metilsulfonil-pirimidina (4 g, 17,62 mmol, 1 eq.) em THF (50 mL) foi adicionada à mistura gota a gota. A mistura foi agitada a -55°C durante 12 horas. À mistura de reação foi adicionada solução de NH4CI a 1 N (5 mL) e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (PE/EtOAc = 3/1, Rf = 0,5) para produzir 4,6-dicloro-A/-[2-( 1 H-indol-3-il)etil]pirimidin2-amina (2,1 g, 5,81 mmol, 33,0% de produção, 85% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,68 (s, 1 H), 8,00 (d, J= 10,8 Hz, 1 H), 7,64 (t, J = 6,1 Hz, 1 H), 7,39-7,33 (m, 1 H), 7,267,20 (m, 1 H), 7,16-7,09 (m, 1 H), 7,08-6,99 (m, 1 H), 6,61-6,53 (m, 1 H), 3,84-3,70 (m, 2 H), 3,05 (d, J = 6,1 Hz, 2H); ES-LCMS m/z307,0, 309,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 4-Cloro-6-(5-fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirimidin-2-amina

[00512] A uma mistura de 4,6-dicloro-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirimidin-2-amina (300 mg, 830,14 mol, 1 eq.) e ácido (5-fluoro-3piridil)borônico (93,58 mg, 664,11 mol, 0,8 eq.) em 1,4-dioxano (3 mL) e H2O (2 mL) foram adicionados CS2CO3 (540,95 mg, 1,66 mmol, 2 eq.) e Pd(dppf)CÍ2 (60,74 mg, 83,01 mol, 0,1 eq) sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 110°C durante 20 minutos sob irradiação de microondas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,33) para produzir 4-cloro-6-(5-fluoro3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (70 mg, 171,29 mol, 20,6% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo claro. ¹H

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424/652

RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,91 (br s, 1 H), 8,50 (br s, 1 H), 7,97 (br s, 2 H), 7,60 (d, J= 7,1 Hz, 1 H), 7,32 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,15 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,10-7,04 (m, 1 H), 7,02 (br s, 1 H), 6,92 (s, 1 H), 5,39 (br s, 1 H), 3,79 (br s, 2 H), 3,05 (t, J = 6,7 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 368,1, 370,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2amina (1-120)

[00513] A uma solução de 4-cloro-6-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 Hindol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (70 mg, 171,29 mol, 1 eq.) em MeOH (5 mL) e ΝΗ3Ή2Ο (0,2 mL) foi adicionado Pd/C (30 mg, 10% de pureza). A suspensão foi desgaseificada sob vácuo e purgada com H2 diversas vezes. A mistura foi agitada sob atmosfera de H2 (1,05 kg/cm² (15 psi)) a 10 °C durante 0,5 h. A mistura de reação foi filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 33% a 63%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 4-(5-fluoro-3piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (20,8 mg, 50,20 pmol, 29,3% de produção, 98,1% de pureza, 2 HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,06 (br s, 1 H), 8,74 (br s, 1 H), 8,32-8,06 (m, 2 H), 7,59-7,55 (m, 1 H), 7,43 (d, J = 6,6 Hz, 1 H), 7,247,04 (m, 2 H), 7,01-6,93 (m, 2 H), 4,05-3,96 (m, 2 H), 3,15 (t, J= 6,4 Hz, 2H); ES-LCMS m/z334,1 [M+H]⁺.

Exemplo 110

Síntese de 1-121

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 454/704

425/652

1-121

Esquema sintético:

t-w

Etapa 1: (3/?)-/V-(2-Metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-iI)2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

[00514] A uma solução de 4-cloro-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina (500 mg, 1,69 mmol, 1 eq, HCI) em MeCN (30 mL) foram adicionados DIEA (1,31 g, 10,12 mmol, 1,76 mL, 6 eq.) e (3H)-2,3,4,9tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (314,20 mg, 1,69 mmol, 1 eq.). A

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 455/704

426/652 mistura foi agitada a 50°C durante 2 h. A mistura foi concentrada. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,4) para produzir (3H)-A/-(2-metiIsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9tetra-hidro-1 /7-carbazol-3-amina (300 mg, 770,46 pmol, 45,7% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,90-7,77 (m, 2 H), 7,44 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,30 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,18-7,12 (m, 1 H), 7,11-7,06 (m, 1 H), 6,61 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 6,21 (s, 1 H), 3,28 (dd, J = 5,0, 15,5 Hz, 1 H), 3,00-2,78 (m, 4H), 2,55 (s, 3 H), 2,31 - 2,15 (m, 2H); ES-LCMS m/z351,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: ferc-Butil (3fí)-3-[íerc-butoxicarbonil-(2metilsulfanilpirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

[00515] A uma solução de (3H)-A/-(2-metilsulfanilpirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /7-carbazol-3-amina (200 mg, 513,64 pmol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (30 mL) foram adicionados DMAP (188,25 mg, 1,54 mmol, 3 eq.) e BOC2O (672,60 mg, 3,08 mmol, 708,00 pL, 6 eq.). A mistura foi agitada a 110 °C durante 24 h. A mistura foi concentrada. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f= 0,5) para produzir terc-butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-(2metilsulfani Ipi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (300 mg, 492,49 pmol, 95,9% de produção, 90,4% de pureza) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,11-8,02 (m, 2 H), 7,33 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,23-7,14 (m, 2 H), 6,41 (s, 1 H), 4,79-4,72 (m, 1 H), 3,31-3,01 (m, 4H), 2,56 (s, 3

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427/652

Η), 2,41 - 2,17 (m, 2 Η), 1,64 (s, 9Η), 1,32 (s, 9H); ES-LCMS m/z551,3 [M+H]⁺.

Etapa 3: terc-Butil (3fí)-3-[(8-bromo-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

[00516] A uma solução de terc-butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-(2metilsulfani Ipi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (260 mg, 426,82 pmol, 1 eq.) em MeCN (20 mL) e DCM (20 mL) foi adicionado NBS (79,76 mg, 448,17 pmol, 1,05 eq.). A mistura foi agitada a 10°C durante 30 min. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE / EtOAc = 5/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f = 0,58) para produzir terc-butil (3R)-3-[(8-bromo-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (200 mg, 299,89 pmol, 70,3% de produção, 94,4% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 8,09 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,25-7,17 (m, 2 H), 4,83-4,73 (m, 1 H), 3,34-3,25 (m, 1 H), 3,23-3,02 (m, 3 H), 2,62 (s, 3 H), 2,36 (td, J = 6,2, 12,0 Hz, 1 H), 2,23-2,21 (m, 1 H), 1,66 (s, 9H), 1,36 (s, 9H); ES-LCMS m/z629,2, 631,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: fôrc-Butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-(8-isopropenil-2metilsulfanil-pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 457/704

428/652

[00517] A uma solução de terc-butil (3fí)-3-[(8-bromo-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (200 mg, 299,89 pmol, 1 eq.), 2isopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (75,59 mg, 449,83 pmol, 1,5 eq.) em 1,4-dioxano (4 mL) e Η₂Ο (2 mL) foram adicionados CS2CO3 (293,13 mg, 899,67 pmol, 3 eq.) e Pd(dppf)CI₂ (21,94 mg, 29,99 pmol, 0,1 eq) sob atmosfera de N₂. A mistura foi agitada a 110°C durante 1 hora sob irradiação de micro-ondas. Após filtração, 0 filtrado foi concentrado. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 5/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f= 0,65) para produzir terc-butil (3fl)-3-[terc-butoxicarbonil-(8isopropenil-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino]1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (180 mg, 274,23 pmol, 91,5% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,13-8,05 (m, 2 H), 7,32 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,237,15 (m, 2 H), 5,86 (s, 1 H), 5,12 (s, 1 H), 4,79-4,74 (m, 1 H), 3,29-3,01 (m, 4H), 2,57 (s, 3 H), 2,33-2,18 (m, 5H), 1,34 (s, 9H), 1,26 (s, 9H); ESLCMS m/z 591,3 [M+H]⁺.

Etapa 5: terc-Butil (3fí)-3-[íerc-butoxicarbonil-[2-(3-fluorofenil)-8isopropenil-pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il]amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 458/704

429/652

[00518] Uma mistura de terc-butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-(8isopropenil-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)amino]1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (140 mg, 213,29 pmol, 1 eq.), ácido (3-fluorofenil)borônico (89,53 mg, 639,88 pmol, 3 eq.), Pd(PPh3)4 (24,65 mg, 21,33 umol, 0,1 eq.) e CuTC (122,02 mg, 639,88 pmol, 3 eq.) em THF (2 mL) foi apreendida em um tubo de micro-ondas sob atmosfera de N₂. A mistura foi agitada a 100°C durante 3 horas sob irradiação de micro-ondas. Após filtração, o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado com TLC preparativa (ΡΕ/EtOAc = 5/1, Rf= 0,68) para fornecer terc-butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-[2-(3-fluorofenil)-8isopropenil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (70 mg, 64,11 pmol, 30,1% de produção, 58,5% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,21-8,13 (m, 2 H), 8,02 (d, J = 8,1 Hz, 2 H), 7,31-7,23 (m, 2 H), 7,13-7,06 (m, 3 H), 5,97 (s, 1 H), 5,17 (s, 1 H), 4,85-4,83 (m, 1 H), 3,102,97 (m, 4H), 2,22-2,14 (m, 5H), 1,29 (d, J = 4,4 Hz, 18H); ES-LCMS m/z 639,4 [M+H]⁺.

Etapa 6: (3fí)-/V-[2-(3-Fluorofenil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a] [1,3,5]tr i az iη-4-iI] -2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-121)

[00519] A uma solução de terc-butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-[2-(3fluorofenil)-8-isopropenil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-i l]ami no]-1,2,3,4

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 459/704

430/652 tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (60 mg, 54,95 μηποΙ, 1 eq.) e ΝΗ3Ή2Ο (546,00 mg, 4,36 mmol, 600,00 μΙ_, 28% de pureza, 79,38 eq.) em MeOH (15 mL) foi adicionado Pd/C (30 mg, 9,16 umol, 10% de pureza). A mistura foi agitada sob atmosfera de H2 (1,05 kg/cm² (15 psi)) a 25 °C durante 6 h. Após filtração, 0 filtrado foi concentrado. Ao resíduo foram adicionados DCM (3 mL) e TFA (1,54 g, 13,51 mmol, 1 mL, 245,78 eq.). A mistura foi agitada a 15°C durante 1 hora. A mistura foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 80% a 100%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fí)-A/-[2-(3-f I uorofeni l)-8-isopropil-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (12,51 mg, 26,23 μηποΙ, 9,8% de produção, 100% de pureza, HCI, OR: [a]²²’⁴ _D = +9,972, (MeOH, c = 0,071 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,24 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 8,09 (d, J= 10,3 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,45 (dt, J = 5,9, 7,9 Hz, 1 H), 7,37 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,20 (dt, J = 2,1,8,3 Hz, 1 H), 7,02 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,97-6,91 (m, 1 H), 4,89-4,85 (m, 1 H), 3,28-3,23 (m, 1 H), 3,08-2,87 (m, 3 H), 2,43-2,33 (m, 1 H), 2,30-2,19 (m, 1 H), 1,39 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 441,3 [M+H]⁺.

Exemplo 111

Síntese de 1-122

1-122

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 460/704

431/652

Etapa 1: Etil A/-(1 H-pirazol-5-ilcarbamotioil)carbamato

[00520] A uma suspensão de 3H-pirazol-3-amina (15,84 g, 190,62 mmol, 1 eq.) em DCM (160 mL) foi adicionado isotiocianato de etoxicarbonila (25 g, 190,62 mmol, 22,52 mL, 1 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25°C durante 12 horas sob atmosfera de N₂. A mistura foi filtrada. A massa filtrante foi lavada com DCM (20 mL x 2), secada para produzir etil Λ/-(1 H-pirazol-5-ilcarbamotioil)carbamato (26 g, 109,22 mmol, 57,3% de produção, 90% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,59 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 7,12 (s, 1 H), 4,27 (q, J= 7,2 Hz, 2 H), 1,34 (t, J= 7,1 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 215,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-Tioxo-1 H-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ona

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 461/704

432/652

[00521] A uma mistura de etil Λ/-(1 H-pirazol-5ilcarbamotioil)carbamato (25,5 g, 107,12 mmol, 1 eq.) em MeCN (300 mL) foi adicionado K2CO3 (44,42 g, 321,36 mmol, 3 eq.). A mistura foi agitada a 85°C durante 4 h. A mistura diluída com água (100 mL) e ajustado pH para 5-6 com HCI a 2 N. Os solventes foram evaporados e 0 resíduo foi suspenso em água (600 mL). O sólido foi filtrado, lavado com água (60 mL x 2), secado para produzir 2-tioxo-1 H-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ona (16 g, 90,38 mmol, 84,4% de produção, 95% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,83 (s, 1 H), 5,93 (d, J= 1,7 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z 169,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-Metilsulfanil-3H-pjrazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ona o

[00522] A uma suspensão de 2-tioxo-1 H-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-ona (16 g, 90,38 mmol, 1 eq.) em EtOH (120 mL) foi adicionado NaOH (7,23 g, 180,76 mmol, 2 eq.) em H₂O (9,6 mL), Mel (15,96 g, 112,44 mmol, 7,0 mL, 1,24 eq) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada a 15°C durante 1 hora. A mistura foi acidificada com HCI aquoso a 1 N (80 mL) e EtOH foi evaporado. A mistura foi filtrada, lavada com H2O (50 mL x 2). A massa filtrante foi secada para produzir 2-metilsulfanil3H-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ona (16 g, 83,42 mmol, 92,3% de produção, 95% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,74 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 5,99 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 2,48 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 183,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: 8-Bromo-2-metilsulfanjl-3H-pjrazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4ona

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 462/704

433/652

[00523] A uma solução de 2-metilsulfanil-3H-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ona (3,0 g, 15,64 mmol, 1 eq.) em DMF (30 mL) foi adicionado NBS (2,51 g, 14,08 mmol, 0,9 eq.). A mistura foi agitada a 15°C durante 0,5 h. A mistura foi concentrada para produzir 8-bromo-2metilsulfanil-3/-/-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ona (4 g, 12,26 mmol, 78,4% de produção, 80% de pureza) como óleo verde. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,72 (s, 1 H), 2,49 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 261,0, 263,0 [M+H]⁺.

Etapa 5: 8-Bromo-4-cloro-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina

[00524] Uma suspensão de 8-bromo-2-metilsulfanil-3H-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ona (2,0 g, 6,13 mmol, 1 eq.) e A/,A/-dimetilanilina (742,58 mg, 6,13 mmol, 776,76 pL, 1 eq.) em POCI3 (16,50 g, 107,61 mmol, 10 mL, 17,56 eq) foi agitada a 130°C durante 4 h. A mistura foi adicionada em água (100 mL) a 0 °C, extraída com EtOAc (200 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,8) para produzir 8-bromo4-cloro-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (600 mg, 2,08 mmol, 33,9% de produção, 97% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,12 (s, 1 H), 2,66 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 278,9, 280,9 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 463/704

434/652

Etapa 6: (3R)-/V-(8-Bromo-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

Br

[00525] A uma solução de 8-bromo-4-cloro-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (600 mg, 2,08 mmol, 1 eq.) em /-PrOH (12 mL) foram adicionados DIEA (807,22 mg, 6,25 mmol, 1,09 mL, 3 eq.) e (3fl)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (426,55 mg, 2,29 mmol, 1,10 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 2 h. A mistura foi concentrada, extraída com EtOAc (60 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir (3fí)-A/-(8-bromo-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (800 mg, 1,68 mmol, 80,6% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 7,86-7,80 (m, 2 H), 7,45 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,32 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,17 (t, J= 6,8 Hz, 1 H), 7,13-7,07 (m, 1 H), 6,59 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 4,82-4,78 (m, 1 H), 3,31-3,26 (m, 1 H), 2,99-2,84 (m, 3 H), 2,61 (s, 3 H), 2,30-2,20 (m, 2H); ES-LCMS m/z 429,1,431,1 [M+H]⁺.

Etapa 7: (3/?)-/V-(8-lsopropenil-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

[00526] A uma mistura de (3fl)-A/-(8-bromo-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 464/704

435/652 amina (400 mg, 838,50 pmol, 1 eq.), Pd(dppf)Cl2 (61,35 mg, 83,85 pmol, 0,1 eq.), CS2CO3 (683,00 mg, 2,10 mmol, 2,5 eq.) em 1,4-dioxano (10 mL) e H2O (2,5 mL) foi adicionado 2-isopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolano (704,51 mg, 4,19 mmol, 5 eq) sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 110°C durante 1,5 horas sob atmosfera de N2 sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação combinada foi concentrada, extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,46) para produzir (3R)-A/-(8-isopropenil2-meti Isulfanil-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1Hcarbazol-3-amina (250 mg, 550,57 pmol, 65,6% de produção, 86% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,87 (s, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,45 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,32 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,17 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,13-7,08 (m, 1 H), 6,57 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 5,86 (s, 1 H), 5,06 (s, 1 H), 4,82-4,77 (m, 1 H), 3,29 (dd, J = 4,8, 15,5 Hz, 1 H), 2,99-2,82 (m, 3 H), 2,58 (s, 3 H), 2,32-2,23 (m, 2 H), 2,21 (s, 3 H); ES-LCMS m/z391,2 [M+H]⁺.

Etapa 8: (3/7)-/V-(8-lsopiOpil-2-metilsulfanjl-pjrazolo[1,5a] [1,3,5]triazin-4-i 1)-2,3,4,9 -tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-122)

[00527] A uma mistura de (3R)-A/-(8-isopropenil-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (100 mg, 220,23 pmol, 1 eq.) em EtOAc (12 mL) foi adicionado PtO₂ (250 mg, 1,10 mmol, 5,00 eq) sob atmosfera de N₂. A mistura foi agitada a 15°C durante 20 minutos sob atmosfera de H₂ (1,05 kg/cm²

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 465/704

436/652 (15 psi)). A mistura foi filtrada. O filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 70% a 100%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fl)-A/-(8-isopropil-2metilsulfani l-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi η-4-i 1)-2,3,4,9-tetra-hidro-1Hcarbazol-3-amina (50 mg, 116,56 pmol, 52,9% de produção, 100% de pureza, HCI) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,90 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,087,00 (m, 1 H), 6,96 (t, J= 7,3 Hz, 1 H), 4,73-4,68 (m, 1 H), 3,23 (dd, J = 4,9, 14,7 Hz, 1 H), 3,14-3,11 (m, 1 H), 2,95 (s, 2 H), 2,91 - 2,82 (m, 1 H), 2,58 (s, 3 H), 2,30 (s, 1 H), 2,21 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z393,2 [M+H]⁺.

Exemplo 112

Síntese de 1-123

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 466/704

437/652

Etapa 1: (3R)-/V-[8-(Ciclo-hexen-1 -il)-2-(5-fluoro-3piridi l)pi razolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4 -il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina

[00528] Uma mistura de (3H)-A/-[8-bromo-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol3-amina (200 mg, 408,10 pmol, 1 eq.), 2-(ciclo-hexen-1-il)-4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (84,94 mg, 408,10 pmol, 87,75 pL, 1 eq.), Pd(dppf)CI₂ (29,87 mg, 40,81 pmol, 0,1 eq.), Cs₂CO₃ (332,47 mg, 1,02 mmol, 2,5 eq.) em H₂O (2 mL) e 1,4-dioxano (6 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ por 3 vezes, a mistura foi agitada a 90°C durante 2 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE/EA = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,7) para produzir (3R)-A/-[8-(ciclo-hexen-1il)-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetrahidro-1 H-carbazol-3-amina (110 mg, 193,83 pmol, 47,5% de produção, 84,5% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSOofe) δ ppm 10,79 (s, 1 H), 9,38 (s, 1 H), 9,08 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,798,66 (m, 1 H), 8,48-8,37 (m, 1 H), 8,28 (s, 1 H), 7,35 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,27 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,05-6,97 (m, 1 H), 6,96-6,88 (m, 1 H), 6,73 (br s, 1 H), 4,84-4,82 (m, 1 H), 3,64 (s, 2 H), 3,12 (dd, J= 5,1, 14,9 Hz, 1 H), 3,07-2,83 (m, 3 H), 2,24-2,15 (m, 4H), 1,77-1,75 (m, 2 H), 1,67-1,65 (m, 2H); ES-LCMS m/z480,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3/7)-/V-[8-Ciclo-hexil-2-(5-fluoro-3-pirjdil)pirazolo[1,5Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 467/704

438/652

a][1,3,5]triazin-4-il] -2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-123)

[00529] A uma solução de (3fí)-A/-[8-(ciclo-hexen-1-il)-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol3-amina (90 mg, 158,59 pmol, 1 eq.) em EtOAc (5 mL) foi adicionado Pd/C (50 mg, 10% de pureza) sob N2. A suspensão foi desgaseificada e purgada com H2 diversas vezes. A mistura foi agitada sob H2 (1,05 kg/cm² (15 psi)) a 10°C durante 12 horas. A mistura de reação foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (condição de HCI; coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 85% a 100%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fí)-A/-[8-ciclohexil-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-amina (16,46 mg, 28,78 pmol, 18,2% de produção, 96,9% de pureza, 2HCI, OR: [a]²⁴⁶D = 9,235 (7,5 mg/10 mL em MeOH)) como um sólido amarelo (Rotação óptica: [a]²⁵o = 9,235 (7,5 mg/10 mL em MeOH)). ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,79 (s, 1 H), 9,37 (s, 1 H), 9,02 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,70 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,44 (dd, J = 1,6, 9,9 Hz, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,34 (d, J=7,6 Hz, 1 H), 7,27 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 7,07-6,97 (m, 1 H), 6,96-6,88 (m, 1 H), 4,90-4,75 (m, 1 H), 3,15-3,07 (m, 1 H), 3,05-2,80 (m, 4H), 2,20-2,19 (m, 2 H), 1,82-1,79 (m, 2 H), 1,87-1,69 (m, 3 H), 1,62-1,59 (m, 2 H), 1,44-1,41 (m, 2 H), 1,311,22 (m, 1 H); ES-LCMS m/z482,3 [M+H]⁺.

Exemplo 113

Síntese de 1-124

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 468/704

439/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 3-Metilpirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diol

[00530] A uma solução de 4-metil-1 H-pirazol-5-amina (2 g, 20,59 mmol, 1 eq.) e propanodioato de dimetila (2,86 g, 21,62 mmol, 2,48 mL, 1,05 eq.) em MeOH (20 mL) foi adicionada uma solução de Na (946,88 mg, 41,19 mmol, 976,16 pL, 2,0 eq.) em MeOH (20 mL) sob N2 a 20°C. A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi resfriada para 20°C, filtrada e coletado 0 sólido branco. O sólido foi diluído com HCI a 1 N (20 mL) e agitado durante 10 min, filtrado e 0 sólido foi secado sob pressão reduzida para produzir produto de 3metilpirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diol (2 g, 12,11 mmol, 58,8% de produção, pureza crua) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 10,54 (br s, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 4,21 (br s, 1 H), 1,96 (s, 3 H).

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 469/704

440/652

Etapa 2: 5,7-DÍcloro-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

[00531] Uma solução de 3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diol (500 mg, 3,03 mmol, 1 eq.) em POCI3 (5 mL) foi agitada a 110 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com DCM (20 mL x 2) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com DCM (20 mL), ajustado para pH 9—10 com DIEA e concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, R_f = 0,68) para produzir produto de 5,7-dicloro-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (400 mg, 1,98 mmol, 65,3% de produção, 99,8% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,09 (s, 1 H), 6,93 (s, 1 H), 2,37 (s, 3 H); ES-LCMS m/z202,0, 204,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-Cloro-7-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidina

[00532] 5,7-Dicloro-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (190 mg, 938,52 pmol, 1 eq.), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (138,86 mg, 985,45 pmol, 1,05 eq.), Pd(dppf)CI₂ (68,67 mg, 93,85 pmol, 0,1 eq.) e Cs₂CO₃ (611,58 mg, 1,88 mmol, 2 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (3 mL) e H₂O (1 mL). O tubo selado foi aquecido a 110°C durante 1 hora sob irradiação de micro-ondas. A mistura foi concentrada e água (10 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 470/704

441/652 filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1 /0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,50) para produzir 5-cloro-7-(5-fluoro-3piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (130 mg, 494,92 pmol, 52,7% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,97 (s, 1 H), 8,69 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,38-8,31 (m, 1 H), 8,04 (s, 1 H), 6,92 (s, 1 H), 2,40 (s, 3 H); ES-LCMS m/z263,0, 265,0 [M+H]⁺.

Etapa 4: 7-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-metiIpirazolo[1,5-a] pirimidin-5-amina (1-124)

[00533] 5-Cloro-7-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (70 mg, 266,49 pmol, 1 eq.), 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (64,04 mg, 399,74 pmol, 1,5 eq.) e DIEA (103,33 mg, 799,48 pmol, 139,26 pL, 3 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em i-PrOH (2 mL). O tubo selado foi aquecido a 150 °C durante 3 horas sob irradiação de microondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela Durashell C18 150 * 25 5u; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 32% a 55%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 7-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-5-amina (28,21 mg, 59,77 pmol, 22,4% de produção, 97,3% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD+Na₂CO₃) δ ppm 8,80 (br s, 1 H), 8,62 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,18 (brs, 1 H), 7,74-7,65 (m, 2 H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,12-7,04 (m, 2 H), 7,03-6,97 (m, 1 H), 6,27 (br s, 1 H), 3,78 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 3,11 (t, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,24 (s, 3 H); ES-LCMS m/z387,1 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 471/704

442/652

Exemplo 114

Síntese de 1-125

Esquema sintético:

Etapa 1: S-Fluoro-Af-O H-imidazol-2-il)piridina-3-carboxamidina

[00534] A uma mistura de etil 5-fluoropiridina-3-carboximidato (1 g, 5,65 mmol, 1 eq.) e 1 /-/-imidazol-2-amina (563,27 mg, 6,78 mmol, 1,2 eq.) em ACN (15 mL) foi adicionado AcONa (926,84 mg, 11,30 mmol, 2 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 25 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, R_f = 0,35) para produzir 5-fluoro-/V-(1/-/-imidazol-2-il)piridina-3carboxamidina (400 mg, 1,75 mmol, 31,1% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 472/704

443/652

11,67 (br s, 1 H), 9,97 (br s, 1 H), 9,05 (s, 1 H), 8,70 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,29-8,12 (m, 2 H), 6,92 (s, 1 H), 6,85 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 206,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-piridil)imjdazo[1,2-a][1,3,5]triazin-4-ol

[00535] A uma solução de 5-fluoro-A/*-(1 /-/-imidazol-2-il)piridina-3carboxamidina (400 mg, 1,75 mmol, 1 eq.) em THF (5 mL) e 1,4-dioxano (5 mL) foi adicionado difosgênio (694,18 mg, 3,51 mmol, 423,28 pL, 2 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi lavado com DMF (5 mL), filtrado e concentrado para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)imidazo[1,2-a][1,3,5]triazin-4-ol (250 mg, 973,24 pmol, 55,5% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 13,64 (br s, 1 H), 9,29 (s, 1 H), 8,78 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,35 (J= 10,0 Hz, 1 H), 7,73-7,65 (m, 2H); ES-LCMS m/z 232,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)imidazo[1,2-a][1,3,5]triazina

[00536] A uma solução de 2-(5-fluoro-3-piridil)imidazo[1,2a][1,3,5]triazin-4-ol (100 mg, 389,30 pmol, 1 eq.) em POCI3 (12 mL) foi adicionado DIEA (1,48 g, 11,48 mmol, 2 mL, 29,49 eq.). A mistura foi agitada a 120°C durante 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 4-cloro-2-(5fluoro-3-piridil)imidazo[1,2-a][1,3,5]triazina (90 mg, 360,53 pmol, 92,6%

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 473/704

444/652 de produção, cru) como um sólido preto que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ES-LCMS m/z 350,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: (3F?)-/V-[2-(5-Fluoro-3-pirjdil)imjdazo[1,2-a][1,3,5]triazin-4il]-2,3,4,9 -tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-125)

[00537] A uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)imidazo[1,2a][1,3,5]triazina (90 mg, 360,53 μηποΙ, 1 eq.) e (3R)-2,3,4,9-tetra-hidro1 H-carbazol-3-amina (80,58 mg, 432,64 μηποΙ, 1,2 eq.) em ACN (10 mL) foi adicionado DIEA (5,34 g, 41,34 mmol, 7,20 mL, 114,65 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela DuraShell 150 mm_25 mm_5 μιτι; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 23% a 53%, 8,5 min.), seguida por liofilização para produzir um produto que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 μιτι; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) ACN]; % de B: 40% a 70%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fí)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)imidazo[1,2-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (15,11 mg, 37,83 μηποΙ, 10,5% de produção, 100,0% de pureza, [o]²⁴d = 98,97 (MeOH, c = 0,050 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,39 (s, 1 H), 8,55-8,47 (m, 2 H), 7,93 (d, J= 1,7 Hz, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,05-6,98 (m, 1 H), 6,976,90 (m, 1 H), 4,85-4,79 (m, 1 H), 3,36 (J = 5,1 Hz, 1 H), 3,08-2,83 (m, 3 H), 2,44 (J = 9,8 Hz, 1 H), 2,26-2,14 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 400,2 [M+H]⁺.

Exemplo 115

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 474/704

445/652

Síntese de 1-126

Esquema sintético:

Etapa 1: (3fí)-/V-(2-Cloropirido[3,2-d]pirimidin-4-il)-2,3,4,9-tetrahidro-1 H-carbazol -3-amina

[00538] A uma solução de 2,4-dicloropirido[3,2-d]pirimidina (100 mg, 499,94 pmol, 1 eq.) em THF (3 mL) foram adicionados DIEA (193,84 mg, 1,50 mmol, 261,24 pL, 3 eq.) e (3F?)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol3-amina (93,11 mg, 499,94 pmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílicagel rápida (de PE / EtOAc= 100/1 a 1/1,TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,5) para produzir (3F?)-A/-(2-cloropirido[3,2-d]pirimidin-4-il)-2,3,4,9-tetrahidro-1/7-carbazol-3-amina (150 mg, 428,80 pmol, 85,8% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,72 (dd, J = 1,5, 4,4 Hz, 1 H), 7,95 (dd, J = 1,5, 8,3 Hz, 1 H), 7,75 (dd, J= 4,2, 8,6 Hz, 1 H), 7,37 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,26 (d, J

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 475/704

446/652 = 8,1 Hz, 1 Η), 7,07-7,00 (m, 1 Η), 6,98-6,92 (m, 1 Η), 4,80-4,68 (m, 1 Η), 3,21 (dd, J= 5,1, 15,2 Hz, 1 H), 3,06-2,80 (m, 3 H), 2,37-2,12 (m, 2H); ES-LCMS m/z350,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3Z7)-A/-[2-(5-Fluoro-3-piridil)piriclo[3,2-cl]pirimiclin-4-il]2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-126)

[00539] (3H)-A/-(2-cloropirido[3,2-d]pirimidin-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro1 H-carbazol-3-amina (60 mg, 171,52 pmol, 1 eq.), ácido (5-fluoro-3piridiI)borônico (29,00 mg, 205,82 pmol, 1,2 eq.), Pd(dppf)Cl2 (12,55 mg, 17,15 pmol, 0,1 eq.) e CS2CO3 (167,65 mg, 514,56 pmol, 3 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (2 mL) e H2O (0,5 mL). O tubo selado foi aquecido a 110°C durante 0,5 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com água (5 mL) e extraída com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3H)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)pirido[3,2d]pi ri midi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (39,09 mg, 95,24 pmol, 55,5% de produção, 100,0% de pureza, OR: [α]²³ % = 0,471 (MeOH, c = 0,110 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,32 (s, 1 H), 9,01 (dd, J= 1,2, 4,4 Hz, 1 H), 8,83 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,61-8,49 (m, 1 H), 8,32 (dd, J= 1,2, 8,6 Hz, 1 H), 8,04 (dd, J= 4,4, 8,6 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,25 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 6,98 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,91-6,81 (m, 1 H), 5,22-5,04 (m, 1 H), 3,28 (s, 1 H), 3,12-2,86 (m, 3 H), 2,43-2,27 (m, 2H); ES-LCMS m/z

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 476/704

447/652

411,2 [Μ+Η]⁺.

Exemplo 116

Síntese de 1-128a

Etapa 1: (6S)-A/6-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a] [1,3,5]triaziη-4-iI] -4,5,6,7-tetra-hidro-l ,3-benzotiazol-2,6-diamina (1-128a)

[00540] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (70 mg, 236,12 pmol, 1 eq.), (6S)-4,5,6,7 tetra-hidro-1,3-benzotiazol-2,6-diamina (43,96 mg, 259,74 pmol, 1,1 eq.) e DIEA (91,55 mg, 708,37 pmol, 123,39 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80°C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi lavado com MeOH (20 mL x 2) para produzir (6S)-A/6-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 477/704

448/652 pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-4,5,6,7-tetra-hidro-1,3-benzotiazol-2,6diamina (22,62 mg, 53,29 pmol, 22,6% de produção, 100,0% de pureza, SFC: Tr = 5,691 min, ee = 99,8%, OR: [a]²¹’⁹ _D = -34,176 (CHCI₃, c = 0,104 g/100 mL)) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, DMSOofe) δ ppm 9,37 (s, 1 H), 8,97 (br s, 1 H), 8,71 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,44 (d, J= 10,0 Hz, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 6,72 (s, 2 H), 4,75-4,72 (m, 1 H), 3,49-3,19 (m, 1 H), 2,90-2,83 (m, 2 H), 2,65-2,58 (m, 1 H), 2,54-2,50 (m, 1 H), 2,09-2,05 (m, 2 H), 1,36 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 425,2 [M+H]⁺

Exemplo 117

Síntese de 1-128b

Etapa 1: (6fí)-A/6-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il]-4,5,6,7-tetra-hidro-1,3-benzotiazol-2,6-diamina (1-128b)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 478/704

449/652

[00541] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (70 mg, 236,12 pmol, 1 eq.), (6R)-4,5,6,7tetra-hidro-1,3-benzotiazol-2,6-diamina (43,96 mg, 259,74 pmol, 1,1 eq.) e DIEA (91,55 mg, 708,37 pmol, 123,38 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80°C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi lavado com MeOH (20 mL x 2) para produzir (6R)-A/6-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-4,5,6,7-tetra-hidro-1,3-benzotiazol-2,6diamina (20,56 mg, 48,43 pmol, 20,5% de produção, 100,0% de pureza, SFC: Tr = 7,228 min, ee = 98,44%, OR: [a]²²’¹ _D = 29,753 (CHCI₃, c = 0,100 g/100 mL )) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, DMSOofe) δ ppm 9,37 (s, 1 H), 8,97 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 8,71 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,46-8,42 (m, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 6,72 (s, 2 H), 4,77-4,72 (m, 1 H), 3,23-3,17 (m, 1 H), 2,90-2,83 (m, 2 H), 2,67-2,64 (m, 1 H), 2,58-2,53 (m, 1 H), 2,07-2,05 (m, 2 H), 1,36 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 425,2 [M+H]⁺.

Exemplo 118

Síntese de 1-129

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 479/704

450/652

Etapa 1: AT-^-ÍDimetilaminoJ-l H-pirazol-5-il]-5-fluoro-piridina-3carboxamidina

[00542] A uma solução de Λ/4,Λ/4-dimetil-1 /-/-pirazol-4,5-diamina (1,2 g, 6,27 mmol, 1 eq, HCI) em ACN (20 mL) foi adicionado etil 5fluoropiridina-3-carboximidato (1,11 g, 6,27 mmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 12 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de DCM/MeOH = 1/0 a 5/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, R_f = 0,3) para produzir /V-[4-(dimetilamino)-1 /-/-pirazol-5-il]-5-fluoro-piridina-3-carboxamidina (700 mg, 2,52 mmol, 40,2% de produção, 89,5% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cf₆) δ ppm 11,96 (br s, 1 H), 9,07 (s, 1 H), 8,66 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,17 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 2,72 (br s, 6H); ES-LCMS m/z 248,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-8-(Djmetilamjno)-2-(5-Fluoro-3-pirÍdil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ol

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 480/704

451/652

[00543] A uma solução de /V-[4-(dimetilamino)-1 H-pirazol-5-il]-5fluoro-piridina-3-carboxamidina (160 mg, 576,82 pmol, 1 eq.) em THF (1 mL) e tolueno (8 mL) foi adicionado difosgênio (342,34 mg, 1,73 mmol, 208,74 pL, 3 eq) sob N2 a 15°C, a mistura foi agitada a 15°C durante 0,5 h. Em seguida, a mistura foi agitada a 130°C durante 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 8-(dimetilamino)-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triaziη-4-ol (150 mg, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 9,15 (s, 1 H), 9,07 (s, 1 H), 8,92 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,79 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,03 (s, 1 H), 3,03 (s, 6H); ES-LCMS m/z275,1 [M+H]⁺.

Etapa 3 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/,/V-dimetil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin -8-amina

[00544] Uma mistura de 8-(dimetilamino)-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ol (150 mg, 546,94 pmol, 1 eq.) em POCI3 (9 g, 58,70 mmol, 5,45 mL, 107,32 eq) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, agitada a 120°C durante 1 hora sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi interrompido bruscamente por adição de água (50 mL), ajustado pH para 8 por NaHCOs aquoso, extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 481/704

452/652 purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,31) para produzir 4-cloro-2-(5-fluoro3-piridil)-A/,A/-dimetil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-amina (25 mg, 76,87 pmol, 14,0% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,35 (s, 1 H), 8,51 (br s, 1 H), 8,27 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 3,05 (s, 6H); ES-LCMS m/z 293,1, 295,0 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-A/8,A/8-dimetil-A/4-[(3fí)-2,3,4,9-tetrahidro-1 H-carbazol -3-iI]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-4,8-diamina (I129)

[00545] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-A/,A/-dimetilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-amina (25 mg, 76,87 pmol, 1 eq.) em /PrOH (3 mL) foi adicionado (3R)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (17,18 mg, 92,24 pmol, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 40°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 38% a 68%, 8 min.) duas vezes, seguida por liofilização para produzir 2-(5fluoro-3-piridil)-A/8,A/8-dimetil-A/4-[(3R)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol3-il]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-4,8-diamina (34,45 mg, 62,30 pmol, 81,0% de produção, 99,8% de pureza, 3HCI, [o]²⁰’⁶d = +36,080 (MeOH, c = 0,1 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,51 (br s, 1 H), 8,74 (m, 2 H), 8,42 (br s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,04 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 6,99-6,92 (m, 1 H), 5,00-4,92 (m, 1 H), 3,53 (br s, 6H), 3,28-2,89 (m, 4H), 2,44Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 482/704

453/652

2,23 (m, 2H); ES-LCMS m/z443,2 [M+H]⁺.

Exemplo 119

Síntese de 1-130

Etapa 1: terc-Butil (3F?)-3-[[8-bromo-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5] triazin-4-il]-terc-butoxicarbonil-amino]

1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato

[00546] Uma mistura de (3fl)-A/-[8-bromo-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazolPetição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 483/704

454/652

3-amina (560 mg, 1,09 mmol, 1 eq.), BOC2O (1,43 g, 6,57 mmol, 1,51 mL, 6 eq.) e DMAP (534,93 mg, 4,38 mmol, 4 eq.) em 1,4-dioxano (50 mL) foi agitada a 110°C durante 12 horas. TLC (ΡΕ/EtOAc = 5/1, Rf = 0,65) mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f = 0,65) para produzir terc-butil (3F?)-3-[[8-bromo-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il]-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (660 mg, 972,66 pmol, 88,9% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,49 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,44 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 8,23 (s, 1 H), 8,10 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,33 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,227,16 (m, 2 H), 4,92 (br s, 1 H), 3,34 (d, J= 16,8 Hz, 1 H), 3,25-3,11 (m, 3 H), 2,50 (m, 1 H), 2,33 (m, 1 H), 1,67 (s, 9H), 1,39 (s, 9H); ES-LCMS m/z 678,2, 680,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carbonitrila (I130)

[00547] Uma mistura de terc-butil (3F?)-3-[[8-bromo-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-terc-butoxicarbonil-amino]1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (50 mg, 72,36 pmol, 1 eq.), Zn(CN)₂ (33,99 mg, 289,44 pmol, 18,37 pL, 4 eq.) e Pd(PPh₃)₄ (16,72 mg, 14,47 pmol, 0,2 eq.) em DMF (3 mL) foi capturada em um tubo de micro-ondas e em seguida purgada com N2 durante 1 min. O tubo selado foi agitado a 170 °C durante 20 minutos sob micro-ondas (1 bar). A

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 484/704

455/652 mistura de reação foi extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-4-[[(3H)-2,3,4,9-tetrahidro-1 /7-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carbonitrila (15,36 mg, 29,98 pmol, 41,4% de produção, 97,1% de pureza, 2HCI, [a]¹⁸¹D = 45,287, (MeOH, c = 0,078 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,48 (s, 1 H), 8,80-8,71 (m, 2 H), 8,43 (s, 1 H), 7,32 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,24 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,00 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 6,94-6,88 (m, 1 H), 4,83 (m, 1 H), 3,26 (m, 1 H), 3,082,88 (m, 3 H), 2,37-2,35 (m, 1 H), 2,31 - 2,18 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 425,2 [M+H]⁺.

Exemplo 120

Síntese de 1-131

Esquema sintético:

1-131

Etapa 1: /V-(2-(1H-lndol-3-il)etil)-8-(íerc-butil)-2-(5-fluoropiridin-3iI)pirazoIo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (1-131)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 485/704

456/652

[00548] A uma solução de 8-fórc-butil-4-cloro-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (60 mg, 176,62 pmol, 1 eq.) em /PrOH (3 mL) foram adicionados 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (29,43 mg, 183,68 pmol, 1,04 eq.) e DIPEA (114,13 mg, 883,10 pmol, 153,82 pL, 5 eq.). A mistura de reação foi agitada a 50 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela Durashell 018 150 * 25 5 u; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - AON]; % de B: 75% a 95%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 8-terc-butil-2-(5f I uoro-3-pi ridil)-A/-[2-( 1 H-i ndol-3-il)etil]pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4amina (27,49 mg, 54,18 pmol, 30,7% de produção, 99,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400MHz, CD3OD) δ ppm 9,13 (s, 1 H), 8,80 (s, 1 H), 8,55 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,69-7,62 (m, 1 H), 7,19-7,12 (m, 1 H), 7,01-6,93 (m, 3 H), 4,02 (J= 6,7 Hz, 2 H), 3,16 (t, J=6,7 Hz, 2 H), 1,48 (s, 9H); ES-LCMS m/z430,3 [M+H]⁺.

Exemplo 121

Síntese de 1-132

1-132

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 486/704

457/652

Etapa 1: (Z)-A/'-(4-(íerc-Butil)-1 H-pirazol-5-il)-5-

[00549] A uma solução de etil 5-fluoropiridina-3-carboximidato (400 mg, 2,26 mmol, 1 eq.) em tolueno (15 mL) foi adicionado 4-terc-butiI-1Hpirazol-5-amina (314,54 mg, 2,26 mmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 130°C durante 24 horas sob N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,23) para produzir /V-(4-terc-butil-1/-/-pirazol-5il)-5-fluoro-piridina-3-carboxamidina (400 mg, 1,45 mmol, 64,4% de produção, 95,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,59 (s, 1 H), 8,94 (s, 1 H), 8,57-8,48 (m, 1 H), 8,02 (d, J

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 487/704

458/652 = 9,5 Ηζ, 1 Η), 7,23 (s, 1 Η), 1,41 (s, 9H); ES-LCMS m/z262,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 8-(terc-Butil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ol

[00550] A uma solução de /V-(4-terc-butil-1 /-/-pirazol-5-il)-5-fluoropiridina-3-carboxamidina (400 mg, 1,45 mmol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (5 mL) e THF (5 mL) foi adicionado difosgênio (575,40 mg, 2,91 mmol, 350,85 pL, 2 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 7 horas sob N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 8-terc-butil-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ol (400 mg, 1,32 mmol, 91,0% de produção, 95,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,22 (s, 1 H), 8,89 (s, 1 H), 8,55 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 8,03 (s, 1 H), 1,49 (s, 9H); ES-LCMS m/z287,8 [M+H]⁺.

Etapa 3: 8-(terc-Butil)-4-cloro-2-(5-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina

[00551] Uma solução de 8-terc-butil-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ol (400 mg, 1,32 mmol, 1 eq.) em POCI3 (2 g, 13,04 mmol, 1,21 mL, 9,86 eq) foi agitada a 110°C durante 2 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água gelada (10 mL) e extraído com DCM (10 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na₂SO4, filtrada e concentrada para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 488/704

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PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,7) para produzir 8-terc-butil-4-cloro-2-(5-fluoro3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (130 mg, 382,68 pmol, 28,9% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,44 (s, 1 H), 8,56 (s, 1 H), 8,35 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 1,47 (s, 9H); ES-LCMS m/z305,7 [M+H]⁺.

Etapa 4: (fí)-/V-(8-(terc-Butil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il) -2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-132)

[00552] A uma solução de 8-terc-butil-4-cloro-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (60 mg, 176,62 pmol, 1 eq.) em /PrOH (3 mL) foram adicionados (3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3amina (34,21 mg, 183,69 pmol, 1,04 eq.) e DIPEA (114,14 mg, 883,11 pmol, 153,82 pL, 5 eq.). A mistura de reação foi agitada a 50°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela Durashell C18 150 * 25 5 u; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 75% a 95%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fí)-A/-[8-terc-butil-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (28,87 mg, 53,29 pmol, 30,2% de produção, 97,6% de pureza, 2HCI, [o]²¹d = 18,883 (MeOH, c = 0,100 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,41 (s, 1 H), 8,69-8,61 (m, 2 H), 7,94 (s, 1 H), 7,35 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,25 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,01 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 6,97-6,87 (m, 1 H), 4,81 (m, 1 H), 3,25 (d, J = 4,9 Hz, 1 H), 3,10-2,84 (m, 3 H), 2,35 (m, 1 H), 2,29-2,18 (m, 1 H), 1,50 (s, 9H); ES-LCMS m/z456,3 [M+H]⁺.

Exemplo 122

Síntese de 1-133

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 489/704

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1-133

Esquema sintético:

Cl

Etapa 1: 3-(2-Aminoetil)-1 H-indol-7-ol

H

[00553] A uma solução de 2-(7-benzilóxi-1 H-indol-3-il)etanamina (150 mg, 563,19 pmol, 1 eq.) em MeOH (10 mL) foi adicionado Pd/C (50 mg, 10%). A mistura foi desgaseificada e purgada com H2 durante 3 vezes e agitada a 50°C durante 1 hora. A mistura foi filtrada e concentrada para produzir 3-(2-aminoetil)-1 H-indol-7-ol (90 mg, 510,74 pmol, 90,7% de produção) como sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,067,00 (m, 2 H), 6,85-6,77 (m, 1 H), 6,50 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 2,96-2,83 (m, 4H).

Etapa 2: 3-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-(hjdroximetil)pirazolo[1,5a]piri midin-7-i I] amino]etil]-1 H-indol-7-ol (1-133)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 490/704

461/652

[00554] Uma mistura de [7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]metanol (55 mg, 171,12 pmol, 1 eq.), 3-(2-aminoetil)-1 Hindol-7-ol (39,20 mg, 222,45 pmol, 1,3 eq.) e DIEA (66,35 mg, 513,35 pmol, 89,42 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80 °C durante 5 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água-ACN]; %de B: 17% a 47%, 8,5 min.), seguida por liofilização para produzir 3-[2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-(hidroximetil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]etil]-1 H-indol-7-ol (16,9 mg, 38,27 pmol, 22,4% de produção, 94,8% de pureza) como um sólido cinzento. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,67 (s, 1 H), 8,47 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 7,73-7,67 (m, 1 H), 7,21 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 6,94-6,87 (m, 2 H), 6,51 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 5,96 (s, 1 H), 4,80 (s, 2 H), 3,88 (t, J = 6,1 Hz, 2 H), 3,21-3,11 (m, 2H); ES-LCMS m/z419,1 [M+H]⁺.

Exemplo 123

Síntese de 1-135

1-135

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 491/704

462/652

Etapa 1: (3R)-/V-(4-Cloro-6-isopropóxi-1,3,5-triazin-2-il)-2,3,4,9tetra-h idro-1 H -carbazol-3-amina

[00555] A uma solução de 2,4-dicloro-6-isopropóxi-1,3,5-triazina (150 mg, 648,90 pmol, 1 eq.) em THF (5 mL) foi adicionado DIPEA (119,93 mg, 927,92 pmol, 161,63 pL, 1,43 eq.) e (3fl)-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-amina (125,69 mg, 674,85 pmol, 1,04 eq.) em THF (5 mL) gota a gota a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C durante 1 hora e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,47) para produzir (3fl)-/V-(4cloro-6-isopropóxi-1,3,5-triazin-2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (220 mg, 553,33 pmol, 85,3% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 7,80 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 7,45-7,38 (m, 1 H), 7,29 (dd, J= 3,1, 7,7 Hz, 1 H), 7,187,05 (m, 2 H), 6,06-5,59 (m, 1 H), 5,41-4,98 (m, 1 H), 4,65-4,51 (m, 1 H), 3,16 (d, J= 15,4 Hz, 1 H), 2,96-2,66 (m, 3 H), 2,18-2,06 (m, 2 H), 1,31 (d, J= 5,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z358,1 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 492/704

463/652

Etapa 2: (3F?)-/V-[4-(5-Fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi-1,3,5-triazin-2il]-2,3,4,9-tetra-hidro -1 H-carbazol-3-amina (1-135)

[00556] A uma solução de (3fí)-A/-(4-cloro-6-isopropóxi-1,3,5-triazin2-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-amina (200 mg, 503,02 μηποΙ, 1 eq.) em 1,4-dioxano (3 mL) e H2O (1 mL) foram adicionados ácido (5fluoro-3-piridil)borônico (70,88 mg, 503,02 μηποΙ, 1 eq.), Pd(dppf)Cl2 (36,81 mg, 50,30 μηποΙ, 0,1 eq.) e CS2CO3 (491,68 mg, 1,51 mmol, 3 eq) sob N2. A mistura foi agitada a 100 °C durante 3 horas sob N2. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 8 min.) para produzir (3F?)-A/-[4-(5-fluoro-3-piridil)-6-isopropóxi1,3,5-triazi η-2-i l]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (55,56 mg, 113,07 μηποΙ, 22,5% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI, [o]²¹²d = 56,652 (MeOH, c = 0,100 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,26 (s, 1 H), 8,75 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,30 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,20 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,03-6,86 (m, 2 H), 5,44 (s, 1 H), 4,65-4,37 (m, 1 H), 3,16 (d, J = 14,7 Hz, 1 H), 2,89 (s, 2 H), 2,70 (dd, J= 8,8, 14,2 Hz, 1 H), 2,24 (s, 1 H), 2,03 (s, 1 H), 1,41 (d, J=5,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z419,0 [M+H]⁺.

Exemplo 124

Síntese de 1-136

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 493/704

464/652

1-136

Esquema sintético:

Etapa 1: 2,4-Dicloro-6-isopropóxi-1,3,5-triazina

[00557] A uma solução de /-PrOH (322,62 mg, 5,37 mmol, 410,98 μΙ_, 1,1 eq.) em THF (12 mL) foi adicionado NaH (253,76 mg, 6,34 mmol, 60% de pureza, 1,3 eq) a 0°C sob N₂. A mistura foi agitada a 0°C durante 0,5 h. Em seguida, 2,4,6-tricloro-1,3,5-triazina (1 g, 4,88 mmol, 1 eq.) em THF (8 mL) foi adicionado à mistura gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 10°C durante 11,5 h sob N₂. TLC (ΡΕ/EtOAc = 6:1, Rt = 0,6) mostrou que a reação foi concluída. A mistura de reação foi dissolvida em água (50 mL) a 0°C lentamente. A mistura foi extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na₂SO₄, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílicagel (de PE / EtOAc = 1/0 a 20/1, TLC: PE / EtOAc = 6/1, R_f = 0,6) para produzir 2,4-dicloro-6-isopropóxi-1,3,5-triazina (430 mg, 1,86 mmol, 38,1% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 5,40-5,25 (m, 1 H), 1,37 (d, J= 6,1 Hz, 6H).

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 494/704

465/652

Etapa 2: 4-Cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-isopropóxi-1,3,5-triazin2-amina

[00558] A uma solução de 2,4-dicloro-6-isopropóxi-1,3,5-triazina (100 mg, 432,60 pmol, 1 eq.) em THF (10 mL) foram adicionados DIPEA (79,95 mg, 618,62 pmol, 107,75 pL, 1,43 eq.) e 2-(1 H-indol-3il)etanamina (72,08 mg, 449,90 umol, 1,04 eq.) em THF (5 mL) gota a gota a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 1 hora e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,47) para produzir 4-cloro-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-6-isopropóxi-1,3,5-triazin-2-amina (90 mg, 244,12 pmol, 56,4% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,13-7,96 (m, 1 H), 7,59-7,47 (m, 1 H), 7,33-7,24 (m, 1 H), 7,16-7,10 (m, 1 H), 7,09-7,04 (m, 1 H), 6,96 (t, J= 10,9 Hz, 1 H), 5,39-4,97 (m, 1 H), 3,84-3,59 (m, 2 H), 3,48 (d, J= 4,9 Hz, 1 H), 3,092,86 (m, 2 H), 1,25-1,19 (m, 6H); ES-LCMS m/z332,1,334,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6-isopropóxi1,3,5-triazin-2 -amina (1-136)

[00559] A uma solução de 4-cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6isopropóxi-1,3,5-triazin-2-amina (90 mg, 244,12 pmol, 1 eq.) em 1,4dioxano (3 mL) e H2O (1 mL) foram adicionados ácido (5-fluoro-3

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 495/704

466/652 piridil)borônico (34,40 mg, 244,12 pmol, 1 eq.), CS2CO3 (238,62 mg, 732,37 pmol, 3 eq.) e Pd(dppf)Cl2 (17,86 mg, 24,41 pmol, 0,1 eq) sob N2. A mistura foi agitada a 100°C durante 3 horas sob N2. A mistura de reação foi filtrada e concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 8 min.) para produzir 4-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-6-isopropóxi-1,3,5-triazin-2-amina (25,60 mg, 55,01 pmol, 22,5% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,80 (s, 1 H), 9,24 (d, J= 16,1 Hz, 1 H), 8,75 (s, 1 H), 8,38-8,18 (m, 2 H), 7,56 (dd, J = 8,2, 13,8 Hz, 1 H), 7,29 (t, J= 8,4 Hz, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 7,06-6,99 (m, 1 H), 6,98-6,90 (m, 1 H), 5,36-5,16 (m, 1 H), 3,75-3,51 (m, 2 H), 2,95 (s, 2 H), 1,34-1,26 (m, 6H); ES-LCMS m/z393,1 [M+H]⁺.

Exemplo 125

Síntese de 1-137a, 1-137b e 1-137c

l-137a l-137b l-137c

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 496/704

467/652

Etapa 1: Óxima de 1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona

[00560] Uma mistura de 1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona (150 mg, 1,11 mmol, 1 eq.), NH₂OH-HCI (92,54 mg, 1,33 mmol, 1,2 eq.) e NaOAc (136,56 mg, 1,66 mmol, 1,5 eq.) em THF (10 mL) foi agitada a 60°C durante 3 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, R_f = 0,20) mostrou que o material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi diluída com H₂O (20 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na₂SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir óxima de 1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona (160 mg, cru) como uma goma marrom que foi usada na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ 7,81 (br s, 1 H), 6,69-6,64 (m, 1 H), 6,06-5,98 (m, 1 H), 3,63-3,35 (m, 2 H), 2,81 - 2,74 (m, 2 H), 2,682,53 (m, 2H); ES-LCMS m/z 151,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 4,5,6,7-Tetra-hidro-l H-indol-5-amina

[00561] Uma mistura de óxima de 1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona (160 mg, 1,07 mmol, 1 eq.) e níquel Raney (200 mg) em MeOH (10 mL) foi agitada sob H₂ (1,05 kg/cm² (15 psi)) a 10°C durante 12 horas. A mistura

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 497/704

468/652 de reação foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir 4,5,6,7-tetra-hidro-1 /-/-indol-5-amina (140 mg, cru) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 6,55 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 5,80 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 3,17-3,05 (m, 1 H), 2,79 (dd, J= 4,8, 14,8 Hz, 1 H), 2,71 -2,63 (m, 2 H), 2,33 (dd, J=8,8, 14,8 Hz, 1 H), 2,06-1,96 (m, 1 H), 1,77-1,64 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 137,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil-/V-[(5S)-4,5,6,7-tetra-hidro1 H-indol-5-il]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (1-137a) e 2-(5fluoro-3-piridil)-8-isopropil-/V-[(5fí)-4,5,6,7-tetra-hidro-1H-indol-5iI]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (1-137b)

[00562] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (120,48 mg, 330,41 pmol, 1 eq.) e 4,5,6,7tetra-hidro-1/-/-indol-5-amina (45 mg, 330,41 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (341,63 mg, 2,64 mmol, 460,41 pL, 8 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rt = 0,5) indicou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,50) para produzir 0 produto que foi separado por SFC quiral (coluna: DAICEL CHIRALCEL OJ-H (25 Omm * 30 mm, 5 um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O MeOH]; % de B: 35% a 35%) para produzir pico 1 (SFC: Tr = 3,442) e pico 2 (SFC: Tr = 3,780). O pico 1 foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 * 25

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 498/704

469/652 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 75% a 100%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir um enantiômero (17,61 mg, 35,16 pmol, 10,6% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI, SFC: Tr = 3,442, ee = 100%, OR: [α]²⁰’²ο = -0,069 (MeOH c = 0,086 g/100 mL)) como um sólido cinzento. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 10,37 (br s, 1 H), 9,36 (s, 1 H), 8,87 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 8,71 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,46-8,39 (m, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 6,56 (t, J= 2,4 Hz, 1 H), 5,77 (t, J= 2,4 Hz, 1 H), 4,66 (br s, 1 H), 3,27-3,17 (m, 1 H), 2,86-2,74 (m, 3 H), 2,68 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 2,12-1,97 (m, 2 H), 1,36 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z392,2 [M+H]⁺. O pico 2 (SFC: Tr = 3,780) foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 75% a 100%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir o outro enantiômero (16,18 mg, 32,31 pmol, 9,8% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI, SFC: Tr = 3,780, ee = 99,12%, OR: [a]²⁰’³D = 0,066 (MeOH c = 0,084 g/100 mL)) como um sólido cinzento. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 10,38 (br s, 1 H), 9,36 (s, 1 H), 8,88 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,71 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,46-8,38 (m, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 6,56 (br s, 1 H), 5,77 (br s, 1 H), 4,66 (br s, 1 H), 3,21 (td, J= 6,8, 13,7 Hz, 1 H), 2,84-2,72 (m, 3 H), 2,71 - 2,66 (m, 1 H), 2,12-1,99 (m, 2 H), 1,36 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z392,2 [M+H]⁺.

Exemplo 126

Síntese de 1-139a, 1-139b e 1-139c

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 499/704

470/652

Etapa 1: (3S)-6,8-difluoro-/V-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (1-139a) e (3fí)-6,8-difluoro-/V-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8isopropil-pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (1-139b)

[00563] A uma solução de 6,8-difluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (180 mg, 509,83 pmol, 1 eq, TFA) e 4-cloro-2-(5fl uoro-3-pi ridil)-8-isopropil-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazina (221,40 mg, 607,18 pmol, 1,19 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (527,13 mg, 4,08 mmol, 710,42 pL, 8 eq.). A mistura foi agitada a 50 °C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,5) indicou que o material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 500/704

471/652 pressão reduzida até a secura para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,50). A fração desejada foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um produto que foi separado por SFCquiral (coluna: DAICEL CHIRALPAK AD (250 mm *30 mm, 10 um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O IPA]; % de B: 45% a 45%, min.) para produzir pico 1 (SFC: Tr = 1,851) e pico 2 (SFC: Tr = 2,254). O pico 1 foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 75% a 100%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir um enantiômero (64,24 mg, 114,88 pmol, 22,5% de produção, 98,4% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 1,851, ee = 100%, OR: [a]²⁰’²D= 0,206 (MeOH c = 0,110 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 11,38 (s, 1 H), 9,38 (s, 1 H), 9,06 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,69 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 8,44 (d, J= 10,0 Hz, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,02 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 6,86 (m, J= 10,6 Hz, 1 H), 4,84 (br s, 1 H), 3,22 (d, J= 7,1, 14,0 Hz, 1 H), 3,12-2,98 (m, 2 H), 2,88 (d, J= 15,4 Hz, 2 H), 2,20 (br s, 2 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 478,3 [M+H]⁺. O pico 2 foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 75% a 100%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 0 outro enantiômero (70,3 mg, 125,02 pmol, 24,5% de produção, 97,9% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 2,254, ee = 99,79%, OR: [a]²⁰’²D = -0,239 (MeOH c = 0,117 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 11,38 (s, 1 H), 9,38 (s, 1 H), 9,05 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,69 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,49-8,38 (m, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,02 (dd, J= 1,8, 9,4 Hz, 1 H), 6,91-6,80 (m, 1 H), 4,94-4,75 (m, 1 H), 3,22 (d, J= 6,9, 13,8 Hz, 1 H), 3,13-2,98 (m, 2 H), 2,96-2,83 (m, 2 H), 2,282,13 (m, 2 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z478,2 [M+H]⁺.

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472/652

Exemplo 127

Síntese de 1-141

1-141

Esquema sintético:

Etapa 1: 8-Bromo-2-(5-fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirazolo[1,5-a][1,3,5] triazin-4-amina (1-141)

[00564] A uma solução de 8-bromo-4-cloro-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (50 mg, 152,19 pmol, 1 eq.) em /PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (59,01 mg, 456,58 pmol, 79,53 pL, 3 eq.) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (29,26 mg, 182,63 pmol, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 8 min;), seguida por liofilização para produzir 8-bromo-2-(5-fluoro-3

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473/652 piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (19,80 mg, 37,70 pmol, 24,8% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,81 (s, 1 H), 9,34 (s, 2 H), 8,76 (s, 1 H), 8,38 (s, 1 H), 8,29 (d, J= 9,8 Hz, 1 H), 7,66 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,29 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,20 (s, 1 H), 7,04 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,00-6,91 (m, 1 H), 3,95 (t, J= 7,2 Hz, 2 H), 3,13 (t, J= 7,2 Hz, 2H); ES-LCMS m/z452,1,454,1 [M+H]⁺.

Exemplo 128

Síntese de 1-143

Etapa 1:3-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-(hidroximetil)pirazolo[1,5a]piri midin-7-i I] amino]etil]-1 H-indol-5-ol (1-143)

[00565] A uma solução de [7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]metanol (80 mg, 287,08 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (4 mL) foram adicionados 3-(2-aminoetil)-1 H-indol-5-ol (50,59 mg, 287,08 pmol, 1 eq.) e DIEA (111,31 mg, 861,24 pmol, 150,01 pL, 3 eq.). A

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474/652 mistura foi agitada a 90°C durante 3 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 3-[2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3(hidroximetil)pirazolo[1,5-a]pi ri midi n-7-il]amino]eti I]-1 H-indol-5-ol (3,76 mg, 8,99 pmol, 3,1% de produção, 100% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,73 (s, 1 H), 8,48 (s, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 7,78 (d, J= 9,5 Hz, 1 H), 7,09-7,02 (m, 2 H), 6,93 (s, 1 H), 6,67 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 6,05 (s, 1 H), 4,80 (s, 2 H), 3,86 (t, J =6,1 Hz, 2 H), 3,13 (t, J= 5,9 Hz, 2H); ES-LCMS m/z440,8 [M+Na]⁺.

Exemplo 129

Síntese de 1-144a

Esquema sintético: Cl Cl

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475/652

Etapa 1:7-Cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3carbaldeído

[00566] A uma solução de DMF (10 mL) foi adicionado POCI3 (5 g) gota a gota a -20 °C durante um período de 12 minutos sob atmosfera de N₂. Após 1 h, 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (1 g, 3,76 mmol, 1 eq.) em DMF (5 mL) foi adicionado à solução acima durante 0 que a temperatura foi mantida abaixo de -20 °C. A mistura foi aquecida para 20 °C e agitada durante 12 horas sob atmosfera de N₂. POCI3 (12,85 g ) em DMF (10 mL) foi adicionado à solução acima. A mistura foi agitada a 20 °C durante 12 horas sob atmosfera de N₂. A mistura foi concentrada e água (200 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com DCM (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com 5% de LiCI (50 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas para produzir 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carbaldeído (800 mg, 2,77 mmol, 73,5% de produção, 95,7% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 10,29 (s, 1 H), 9,42 (s, 1 H), 8,9-8,79 (m, 2 H), 8,63 (d, J= 10,0 Hz, 1 H), 8,52 (s, 1 H); ES-LCMS m/z277,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: [7-Cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirjmjdin-3il]metanol

[00567] A uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carbaldeído (400 mg, 1,38 mmol, 1 eq.) em THF (10 mL)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 505/704

476/652 foi adicionado NaBHU (78,52 mg, 2,08 mmol, 1,5 eq) a 0°C, a mistura foi agitada a 20°C durante 12 horas sob atmosfera de N2. À mistura de reação foi adicionado HCI aquoso a 0,5 N (0,05 mL). A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,27) para produzir [7-cloro-5(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]metanol (130 mg, 421,25 pmol, 30,4% de produção, 90,3% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,28 (s, 1 H), 9,70 (d, J=2,2 Hz, 1 H), 9,48 (d, J= 10,3 Hz, 1 H), 9,33 (s, 1 H), 9,15 (s, 1 H), 6,10 (br s, 1 H), 5,71 (br s, 2H); ES-LCMS m/z 279,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: (1 S)-2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-(hidroximetil)pirazolo[1,5a]piri midin-7-i I] amino]-1-(1 H-indol-3-il)etanol (1-144a)

[00568] A uma solução de [7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]metanol (55 mg, 178,22 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados (1 S)-2-amino-1-(1 H-indol-3-il)etanol (36,95 mg, 178,22 pmol, 1 eq.) e DIEA (69,10 mg, 534,66 pmol, 93,13 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 90°C durante 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (1 S)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3(hidroximetil)pirazolo[1,5-a]pi ri m idi η-7-i l]am i no]-1 -(1 H-indol-3-il)etanol

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 506/704

477/652 (40 mg, 94,55 pmol, 53,0% de produção, 98,9% de pureza, SFC: Tr= 4,476, ee = 99,1%, [a]¹⁹’⁶D= -11,254 (MeOH, c = 0,106 g/100 mL)) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,73 (s, 1 H), 8,48 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,88-7,81 (m, 2 H), 7,29-7,21 (m, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,13-7,05 (m, 2 H), 6,16 (s, 1 H), 5,30 (t, J= 5,6 Hz, 1 H), 4,81 (s, 2 H), 4,07-3,95 (m, 2H); ES-LCMS m/z419,1 [M+H]⁺.

Exemplo 130

Síntese de 1-144b

Esquema sintético:

Etapa 1: (1 fí)-2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-(hidroximetil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-1-(1 H-indol-3-il)etanol (1-144b)

[00569] A uma solução de [7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]metanol (66,45 mg, 215,31 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 507/704

478/652 foram adicionados DIEA (83,48 mg, 645,93 pmol, 112,51 pL, 3 eq.) e (1 H)-2-amino-1-(1 H-indol-3-il)etanol (53,32 mg, 279,90 pmol, 1,3 eq.). A mistura de reação foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa duas vezes (condição básica; coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir (1 H)-2-[[5-(5-fluoro-3pi ridi I )-3-(hidroxi meti I )pi razolo[1,5-<a]pi ri midi η-7-i l]am i no]-1 -(1 H-i ndol-3il)etanol (18,50 mg, 44,21 pmol, 20,5% de produção, 100,0% de pureza, SFC: Tr = 3,628 min, ee = 99,4%, [a]¹⁹’⁵ _D = +12,650 (MeOH, c = 0,106 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,74 (s, 1 H), 8,48 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 7,90-7,80 (m, 2 H), 7,25 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,13-7,05 (m, 2 H), 6,17 (s, 1 H), 5,31 (t, J= 5,7 Hz, 1 H), 4,81 (s, 2 H), 4,09-3,95 (m, 2H); ES-LCMS m/z 419,1 [M+H]⁺.

Exemplo 131

Síntese de 1-150a

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 508/704

479/652

Etapa 1: (1 F?)-2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-1 -(1 H-indol-3-il)etanol (1-150a)

[00570] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 185,97 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (120,18 mg, 929,87 pmol, 161,96 pL, 5 eq.) e (1 F?)-2-amino-1-(1 H-indol-3-il)etanol (46,06 mg, 241,77 pmol, 1,3 eq.). A mistura foi agitada a 90°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/2, TLC: PE/EtOAc = 1/1, R_f = 0,12) para produzir (1 F?)-2-[[5-(5-fluoro3-pi ridi I )-3-meti l-pi razolo[1,5-a]pi ri midi η-7-i l]ami no]-1 -(1 H-indol-3il)etanol (15,35 mg, 38,14 pmol, 20,5% de produção, 100% de pureza, SFC: Tr = 1,560, ee = 99,008%, [a]²²¹ _D = +6,048 (MeOH, c = 0,133 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,73 (s, 1 H), 8,48 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,85-7,79 (m, 2 H), 7,25 (d, J= 7,0 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,12-7,05 (m, 2 H), 6,11 (s, 1 H), 5,30 (t, J= 5,6 Hz, 1 H), 4,06-3,96 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H); ES-LCMS m/z403,1 [M+H]⁺.

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480/652

Exemplo 132

Síntese de 1-150b

Esquema sintético:

Etapa 1: Cloreto de 2-(1H-indol-3-il)-2-oxo-acetila

[00571] A uma solução de indol (10 g, 85,36 mmol, 1 eq.) em THF (100 mL) foi adicionado gota a gota (COCI)2 (11,05 g, 87,07 mmol, 7,62 mL, 1,02 eq) a 0 a 5 ^QC sob N2. A mistura foi agitada a 0 a 5°C durante 3 h. A suspensão amarela foi filtrada, a massa foi lavada com PE (10 mL x 2), secada sob pressão reduzida para produzir cloreto de 2-(1/-/

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 510/704

481/652 indol-3-il)-2-oxo-acetila cru (15 g, 72,25 mmol, 84,6% de produção, 100% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCh) δ ppm 13,31 (br s, 1 H), 8,64-8,57 (m, 1 H), 8,34-8,25 (m, 1 H), 7,45-7,38 (m, 1 H), 7,26-7,15 (m, 2H).

Etapa 2: 2-(1 H-lndol-3-il)-2-oxo-acetamida

[00572] A uma solução de ΝΗ3Ή2Ο (42,20 g, 337,17 mmol, 46,37 mL, 28%, 10 eq.) em EtOH (100 mL) foi adicionado cloreto de 2-(1/-/indol-3-il)-2-oxo-acetila (7 g, 33,72 mmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 0°C durante 1,5 h. A suspensão foi filtrada, a massa filtrante foi lavada com água (20 mL x 2), secada sob pressão reduzida para produzir 2(1 /-/-indol-3-il)-2-oxo-acetamida (5,5 g, 28,00 mmol, 83,0% de produção, 95,8% de pureza) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 12,18 (br s, 1 H), 8,69 (s, 1 H), 8,27-8,17 (m, 1 H), 8,08 (br s, 1 H), 7,71 (br s, 1 H), 7,58-7,48 (m, 1 H), 7,30-7,19 (m, 2H); ES-LCMS m/z 189,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: Cianeto de 1H-indol-3-carbonila

[00573] A uma solução de 2-(1 /-/-indol-3-il)-2-oxo-acetamida (5,5 g, 28,00 mmol, 1 eq.) e piridina (6,64 g, 84,00 mmol, 6,78 mL, 3 eq.) em EtOAc (100 mL) foi adicionado TFAA (8,82 g, 42,00 mmol, 5,84 mL, 1,5 eq) a 10 °C sob N2. A mistura foi agitada a 10 °C durante 4 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de NaHCOs (100

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482/652 mL), extraída com EtOAc (80 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com HCI aquoso a 0,5 N (20 mL), solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir cianeto de 1 H-indol-3-carbonila cru (3,2 g, 12,73 mmol, 45,5% de produção, 67,7% de pureza) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 12,88 (br s, 1 H), 8,63 (s, 1 H), 8,07-8,01 (m, 1 H), 7,58 (dd, J= 1,3, 7,0 Hz, 1 H), 7,34 (dq, J= 1,3, 7,2 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 171,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: (1S)-2-Amino-1-(1 H-indol-3-il)etanol ^NH h₂i\t

[00574] A uma solução de cianeto de 1 H-indol-3-carbonila (1 g, 3,98 mmol, 1 eq.) em THF (40 mL) foi adicionado LAH (302,00 mg, 7,96 mmol, 2 eq) a 0 °C sob N2. A mistura foi agitada a 15°C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,18) mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura foi diluída com THF (50 mL), resfriada para 0 °C, interrompida bruscamente por água (0,3 mL), 10% de NaOH aq. (0,3 mL), água (0,9 mL) em sequência. Após ser agitada durante 30 min, a mistura foi filtrada através de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de EtOAc/MeOH = 1/0 a 1/1, TLC: EtOAc/MeOH = 10/1, Rf = 0,18) para produzir 0 produto que foi purificado por separação de SFC duas vezes (primeiro: DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm * 30 mm, 10 pm); fase móvel: [0,1% de NH3H2O IPA]; % de B: 35% a 35%. Segundo: coluna: DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm * 30 mm, 5 pm); fase móvel: [0,1% de NH3H2O IPA]; % de B: 45% a 45%) para produzir (1 F?)-2-amino-1-(1 H-indol-3il)etanol (120 mg, 629,91 pmol, 15,8% de produção, 92,5% de pureza,

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483/652 ee = 92,5%) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,66 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,35 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,10 (t, J= 7,2 Hz, 1 H), 7,05-6,95 (m, 1 H), 4,96 (t, J= 6,3 Hz, 1 H), 3,02 (d, J = 6,3 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 159,2 [M-H2O+H]⁺ e (1 S)-2-amino-1-(1 Hindol-3-il)etanol (125 mg, 602,96 pmol, 15,2% de produção, 85,0% de pureza, ee = 98,698%) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,23 (s, 1 H), 7,11 (t, J= 7,2 Hz, 1 H), 7,05-6,99 (m, 1 H), 4,99 (t, J = 6,3 Hz, 1 H), 3,08-3,02 (m, 2H); ES-LCMS m/z 159,2 [M-H2O+H]⁺.

Etapa 5 (1 S)-2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-1 -(1 H-indol-3-il)etanol (1-150b)

[00575] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 185,97 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (72,11 mg, 557,92 pmol, 97,18 pL, 3 eq.) e (1S)-2-amino-1-(1H-indol-3-il)etanol (57,47 mg, 277,22 pmol, 1,49 eq.). A mistura foi agitada a 90°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/2, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,18) para produzir (1 S)-2-[[5-(5-fluoro3-pi ridi I )-3-meti l-pi razolo[1,5-a]pi ri midi η-7-i l]ami no]-1 -(1 H-indol-3il)etanol (29,26 mg, 71,26 pmol, 38,3% de produção, 98,0% de pureza, SFC: Tr = 2,204, ee = 98,378, [a]²¹’⁴ _D = -8,227 (MeOH, c = 0,10 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,72 (s, 1 H), 8,48 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,82 (d, J= 5,9 Hz, 2 H),

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484/652

7,25 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,14-7,02 (m, 2 H), 6,10 (s, 1 H), 5,30 (t, J= 5,7 Hz, 1 H), 4,08-3,95 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 403,2 [M+H]⁺.

Exemplo 133

Síntese de 1-152a, 1-152b, 1-152c

Etapa 1: (3fí)-6,8-difluoro-/V-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (1-152b) e (3S)-6,8-difluoro-/V-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8isopropil-pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (1-152a)

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485/652

[00576] A uma solução de 6,8-difluoro-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (180 mg, 509,83 pmol, 1 eq, TFA) e 4-cloro-2-(5fl uoro-3-pi ridil)-8-isopropil-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazina (221,40 mg, 607,18 pmol, 1,19 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (527,13 mg, 4,08 mmol, 710,42 pL, 8 eq.). A mistura foi agitada a 50 °C durante 2 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,5) indicou que o material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida até a secura para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,50). A fração desejada foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um produto que foi separado por SFCquiral (coluna: DAICEL CHIRALPAK AD(250 mm * 30 mm, 10 um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O IPA]; % de B: 45% a 45%, min.) para produzir pico 1 (SFC: Tr = 1,851) e pico 2 (SFC: Tr = 2,254). O pico 1 foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 75% a 100%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir um enantiômero (64,24 mg, 114,88 pmol, 22,5% de produção, 98,4% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 1,851, ee = 100%, OR: [a]²⁰’²D= 0,206 (MeOH c = 0,110 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11,38 (s, 1 H), 9,38 (s, 1 H), 9,06 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,69 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 8,44 (d, J= 10,0 Hz, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,02 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 6,86 (m, J= 10,6 Hz, 1 H), 4,84 (br s, 1 H), 3,22 (d, J= 7,1, 14,0 Hz, 1 H), 3,12-2,98 (m, 2 H), 2,88 (d, J= 15,4 Hz, 2 H), 2,20 (br s, 2 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 478,3 [M+H]⁺. O pico 2 foi concentrado para produzir um

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486/652 resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 75% a 100%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir o outro enantiômero (70,3 mg, 125,02 pmol, 24,5% de produção, 97,9% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 2,254, ee = 99,79%, OR: [a]²⁰’²D = -0,239 (MeOH c = 0,117 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 11,38 (s, 1 H), 9,38 (s, 1 H), 9,05 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,69 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,49-8,38 (m, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,02 (dd, J= 1,8, 9,4 Hz, 1 H), 6,91-6,80 (m, 1 H), 4,94-4,75 (m, 1 H), 3,22 (d, J= 6,9, 13,8 Hz, 1 H), 3,13-2,98 (m, 2 H), 2,96-2,83 (m, 2 H), 2,282,13 (m, 2 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z478,2 [M+H]⁺.

Exemplo 134

Síntese de 1-154

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 516/704

487/652

Etapa 1: 8-Bromo-4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina

[00577] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina (110 mg, 423,02 μηποΙ, 1 eq.) em MeCN (2 mL) e DCM (1 mL) foi adicionado NBS (82,82 mg, 465,33 μηποΙ, 1,1 eq.). A mistura foi agitada a 30 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 8-bromo-4-cloro-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (120 mg, 365,27 μηποΙ, 86,4% de produção) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 9,56 (s, 1 H), 8,68 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,51 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 8,32 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 327,9, 329,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3F7)-/V-[8-Bromo-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a] [1,3,5]triazin-4-i I] -2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-154)

[00578] Uma mistura de 8-bromo-4-cloro-2-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (70 mg, 204,55 μηποΙ, 1 eq.), (3R)2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (41,91 mg, 225,00 μηποΙ, 1,1 eq.) e DIEA (79,31 mg, 613,65 μηποΙ, 106,89 pL, 3 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 60 °C durante 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 517/704

488/652 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 63% a 93%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fl)-A/-[8-bromo-2(5-f I uoro-3-pi ridil)pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi η-4-i l]-2,3,4,9-tetra-hidro-1Hcarbazol-3-amina (32,48 mg, 58,92 pmol, 28,8% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI, OR: [a]²²’¹ _D = 0,234 (MeOH, c = 0,105 g/100 mL) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,45 (s, 1 H), 8,85-8,72 (m, 2 H), 8,12 (s, 1 H), 7,34 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,02 (t, J= 7,6 Hz, 1 H), 6,97-6,89 (m, 1 H), 4,89-4,83 (m, 1 H), 3,27 (m, 1 H), 3,08-2,86 (m, 3 H), 2,43-2,17 (m, 2H); ES-LCMS m/z 480,1,482,1 [M+H]⁺.

Exemplo 135

Síntese de 1-155

Esquema sintético:

Etapa 1: 4,6-Dicloro-/V-[2-(1 /7-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 518/704

489/652 ci

[00579] A uma mistura de 2-(1 /-/-indol-3-il)etanamina (666,77 mg, 4,16 mmol, 1,05 eq.) em THF seco (10 mL) foi adicionado NaH (237,58 mg, 5,94 mmol, 1,5 eq) sob banho de gelo em atmosfera de N₂. Após ser agitada durante 30 min, a mistura foi resfriada para -60 °C e 4,6dicloro-2-metilsulfonil-pirimidina (900 mg, 3,96 mmol, 1 eq.) em THF seco (10 mL) foi adicionado gota a gota e mantido em temperatura abaixo de -55°C. A mistura resultante foi agitada durante 1 hora a -55°C. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de H₂O (15 mL), diluída com H₂O (15 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H₂O (15 mL x 2), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 1/3, R_f= 0,43) para produzir 4,6-dicloro-A/-[2(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (570 mg, 1,48 mmol, 37,5% de produção, 80% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,96 (br s, 1 H), 7,59 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,15 (t, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,11-7,05 (m, 1 H), 6,99 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 6,52 (s, 1 H), 5,37 (br s, 1 H), 3,73-3,68 (m, 2 H), 3,00 (t, J = 6,7 Hz, 2H); ES-LCMS m/z307,0, 309,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: 4-Cloro-/V-[2-(1H-indol-3-il)etil]-6-isopropóxi-pirimidin-2amina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 519/704

490/652

[00580] A uma solução de /-PrOH (75,12 mg, 1,25 mmol, 95,70 pL, 1,2 eq.) em THF (3 mL) foi adicionado NaH (62,50 mg, 1,56 mmol, 1,5 eq.), a mistura foi agitada a 0 °C durante 30 min. À mistura foi adicionada uma solução de 4,6-dicloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirimidin-2-amina (400 mg, 1,04 mmol, 1 eq.) em THF (3 mL), a mistura foi agitada a 60 °C durante 12 horas. À mistura foi adicionado H₂O (3 mL) e concentrado para produzir um resíduo que foi purificado com TLC preparativa (ΡΕ/EtOAc = 3/1, R_f = 0,5) para produzir 4-cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]6-isopropóxi-pirimidin-2-amina (470 mg, 710,37 pmol, 68,2% de produção, 50% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,03 (br s, 1 H), 7,66-7,60 (m, 1 H), 7,36 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,20 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,15-7,09 (m, 1 H), 7,03 (s, 1 H), 6,57 (s, 1 H), 5,26 (d, J = 19,3 Hz, 1 H), 3,78-3,69 (m, 2 H), 3,05 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 1,62-1,18 (m, 6H); ES-LCMS m/z331,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: /7-(2-(1 H-lndol-3-il)etil)-4-isopropóxi-6-fenilpirimidin-2amina (1-155)

[00581] A uma mistura de 4-cloro-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-6isopropóxi-pirimidin-2-amina (450 mg, 680,15 pmol, 1 eq.) e ácido fenilborônico (124,39 mg, 1,02 mmol, 1,5 eq.) em 1,4-dioxano (10 mL) e H2O (2 mL) foram adicionados Pd(dppf)CÍ2 (49,77 mg, 68,01 pmol, 0,1 eq.) e CS2CO3 (664,81 mg, 2,04 mmol, 3 eq) sob atmosfera de N₂. A mistura foi apreendida em um tubo de micro-ondas e aquecida a 110 °C durante 30 min. A mistura foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir Λ/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-4

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 520/704

491/652 isopropóxi-6-fenil-pirimidin-2-amina (19,18 mg, 44,68 pmol, 6,6% de produção, 95,3% de pureza, HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,76 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 7,69-7,62 (m, 1 H), 7,58 (t, J = 6,6 Hz, 3 H), 7,31 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,12 (s, 1 H), 7,07 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,01-6,96 (m, 1 H), 6,50 (s, 1 H), 5,13 (td, J = 6,1, 12,2 Hz, 1 H), 3,89 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,13 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 1,32 (d, J = 6,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z373,3 [M+H]⁺.

Exemplo 136

Síntese de (1-160a, 1-160b e 1-160c)

l-160a l-160b 1-160c

Esquema sintético:

M MBUO N _t._160a

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 521/704

492/652

Etapa 1:2-[1-(BenzenossulfonÍI)jndol-3-il]acetonjtrjla

[00582] Uma solução de 1-(benzenossulfonil)-3-(bromometil)indol (7 g, 19,99 mmol, 1 eq.) em THF (50 mL) foi adicionada a uma suspensão bem agitada de KCN (2,07 g, 31,79 mmol, 1,59 eq.) em DMSO (50 mL) e THF (20 mL) gota a gota a 0°C sob atmosfera de N2. A mistura foi aquecida para 25°C e agitada durante 15,5 horas sob atmosfera de N2. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rt = 0,30) indicou que uma nova mancha maior foi detectada e 0 material de partida foi mantido. KCN (1,76 g, 27,03 mmol, 1,35 eq) foi adicionado à mistura. A mistura foi agitada durante 16 horas sob atmosfera de N2. Água gelada (200 mL) foi adicionada à mistura. A mistura foi extraída com EtOAc (200 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (150 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,30) para produzir 2-[1(benzenossulfonil)indol-3-il]acetonitrila (2,0 g, 5,47 mmol, 27,6% de produção, 81,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,97-7,93 (m, 2 H), 7,71 (s, 1 H), 7,64-7,59 (m, 2 H), 7,55-7,49 (m, 2 H), 7,42-7,37 (m, 1 H), 7,337,28 (m, 1 H), 3,97 (d, J= 1,0 Hz, 2H); ES-LCMS m/z297,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-[1-(BenzenossulfonÍI)jndol-3-il]propanonjtrjla

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 522/704

493/652

[00583] A uma solução de 2-[1-(benzenossulfonil)indol-3il]acetonitrila (1 g, 2,73 mmol, 1 eq.) em THF (50 mL) foi adicionado nBuLi (2,5 M, 1,09 mL, 1 eq) gota a gota a -78 °C sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a -78 °C sob atmosfera de N2 durante 1 hora. Uma solução de Mel (387,96 mg, 2,73 mmol, 170,16 pL, 1 eq.) em THF (5 mL) foi adicionada gota a gota à mistura. A mistura foi agitada a 20 °C sob atmosfera de N2 durante 3 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,38) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. Água gelada (30 mL) foi adicionada à mistura, a mistura foi extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,38) para produzir 2-[1-(benzenossulfonil)indol-3-il]propanonitrila (420 mg, 1,14 mmol, 41,6% de produção, 84,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,03 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,94-7,89 (m, 2 H), 7,62-7,55 (m, 3 H), 7,52-7,46 (m, 2 H), 7,42-7,37 (m, 1 H), 7,347,29 (m, 1 H), 4,13 (q, J = 7,1 Hz, 1 H), 1,75 (d, J = 7,1 Hz, 3 H); ESLCMS m/z 311,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-[1 -(BenzenossulfoniI)indol-3-iI]propan-1 -amina

[00584] A uma solução de 2-[1-(benzenossulfonil)indol-3il]propanonitrila (420 mg, 1,14 mmol, 1 eq.) em MeOH (10 mL) foram adicionados níquel Raney (453,70 mg, 5,30 mmol, 4,66 eq.) e ΝΗ3Ή2Ο (910,00 mg, 6,49 mmol, 1 mL, 5,71 eq.). A mistura foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes, agitada a 25°C durante 16 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,16) indicou que uma nova mancha maior foi

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 523/704

494/652 detectada. A mistura de reação foi filtrada e concentrada para produzir 2-[1-(benzenossulfonil)indol-3-il]propan-1 -amina (330 mg, 818,70 pmol, 72,0% de produção, 78,0% de pureza) como sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 7,5 Hz, 2 H), 7,58-7,51 (m, 2 H), 7,48-7,40 (m, 2 H), 7,38-7,30 (m, 2 H), 7,26-7,21 (m, 1 H), 4,93 (br s, 2 H), 3,08-2,93 (m, 2 H), 2,92-2,86 (m, 1 H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 315,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-(1 H-lndol-3-il)propan-1 -amina

[00585] A uma solução de 2-[1 -(benzenossulfonil)indol-3-il]propan-1 amina (330 mg, 818,70 pmol, 1 eq.) em MeOH (10 mL) foi adicionado NaOH (327,46 mg, 8,19 mmol, 10 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 4 horas sob atmosfera de N₂. TLC (DCM/MeOH = 10/1, Rt = 0,20) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura foi concentrada e água (10 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas para produzir 2-(1 H-indol-3il)propan-1-amina (130 mg, 746,09 pmol, 91,1%de produção, cru) como sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,05 (br s, 1 H), 7,67 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,42-7,36 (m, 1 H), 7,21 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,12 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,03 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 3,18-3,10 (m, 1 H), 3,05-2,92 (m, 2 H), 1,401,36 (m, 3 H).

Etapa 5: 5-(5-Fluoro-3-pi ridi l)-N-[(2S)-2-(1 H-indol-3-i l)propil]-3metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina & 5-(5-f I uoro-3-pi r id i l)-/V[(2f?)-2-(1 H-indol-3-il)propil]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7amina (1-160a, 1-160b)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 524/704

495/652

[00586] A uma mistura de 2-(1 H-indol-3-il)propan-1-amina (130 mg, 746,09 pmol, 1 eq.) e 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidina (200,59 mg, 746,09 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (289,28 mg, 2,24 mmol, 389,87 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 15 horas sob atmosfera de N2 e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,34) para produzir 5-(5-fIuoro-3-piridil)-A/-[2-( 1Hindol-3-il)propil]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (300 mg, 689,22 pmol, 92,4% de produção, 92,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi separado por SFC (coluna: DAICEL CHIRALCEL OJ (250 mm * 30 mm, 10 pm); fase móvel: [0,1% de ΝΗ3Ή2Ο EtOH]; % de B: 40% a 40%, min.). A solução foi concentrada para produzir produtos crus que foram purificados por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 48% a 68%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir um enantiômero (27,27 mg, 57,61 pmol, 8,4% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 3,079 min, ee = 98,49%, OR: [α]²³⁹0 = +48,385 (MeOH, c = 0,110 g/100mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,73 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,39 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,54 (d, J = 8,1 Hz, 2 H), 7,11 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 6,91 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,76 (t, J = 7,1 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 4,00-3,94 (m, 2 H), 3,58-3,51 (m, 1 H), 2,27 (s, 3 H), 1,59 (d, J = 7,1 Hz, 3 H); ESLCMS m/z401,1 [M+H]⁺; e 0 outro enantiômero (64,75 mg, 136,78 pmol, 19,85% de produção, 100% de pureza, 2HCI, SFC: Tr = 3,374 min, ee = 98,93%, OR: [a]²³’⁸D = -32,08 (MeOH, c = 0,120 g/100 mL)) como um

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 525/704

496/652 sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,73 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,39 (s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,57-7,51 (m, 2 H), 7,12 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,06 (s, 1 H), 6,92 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,76 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 4,02-3,92 (m, 2 H), 3,59-3,51 (m, 1 H), 2,28 (s, 3 H), 1,60 (d, J = 7,1 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z401,1 [M+H]⁺.

Exemplo 137

Síntese de 1-162

Etapa 1: (3fí)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin-6-il]-2,3,4,9tetra-hidro-1 H -carbazol-3-amina (1-162)

[00587] Uma mistura de 6-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropilpurina (60 mg, 187,17 pmol, 1 eq.), (3H)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (38,35 mg, 205,89 pmol, 1,1 eq.) e DIEA (72,57 mg, 561,51 pmol, 97,81 pL, 3 eq.) em /-PrOH (6 mL) foi desgaseificada e

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 526/704

497/652 purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80 °C durante 15 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fl)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)-9-isopropil-purin6-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (30,19 mg, 58,51 pmol, 31,3% de produção, 99,7% de pureza, 2HCI, [a]²²’³ _D = -22,78 (MeOH, c = 0,149 g/100 mL) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,57 (br s, 1 H), 9,40 (s, 1 H), 9,14 (J = 8,0 Hz, 1 H), 8,99 (br s, 1 H), 7,31 (J = 7,5 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,00 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 6,94-6,87 (m, 1 H), 5,23-5,12 (m, 1 H), 5,01 (m, 1 H), 3,28 (J = 5,0 Hz, 1 H), 3,01 - 2,94 (m, 2 H), 2,90 (J = 6,8, 15,3 Hz, 1 H), 2,422,32 (m, 1 H), 2,27 (td, J = 7,0, 13,7 Hz, 1 H), 1,78-1,74 (m, 6H); ESLCMS m/z 442,1 [M+H]⁺.

Exemplo 138

Síntese de 1-163

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 527/704

498/652

Etapa 1:2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]-1 -(1 H-indol-3-il)etanol

[00588] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (70 mg, 260,36 pmol, 1 eq.), 2-amino-1-(1 Hindol-3-il)etanol (53,72 mg, 260,36 pmol, 1 eq.), DIEA (100,95 mg, 781,09 pmol, 136,05 pL, 3 eq.) em /-PrOH (15 mL) foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de DCM puro a DCM/MeOH = 10/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, R_f = 0,60) para produzir 2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]-1-(1/-/-indol-3-il)etanol (80 mg, 152,08 pmol, 58,4% de produção, 76,5% de pureza) como um sólido marom. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,77 (s, 1 H), 8,46 (s, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 7,91 (d, J

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 528/704

499/652 = 8,3 Hz, 1 Η), 7,82 (s, 1 Η), 7,78 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,35 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,20 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 6,83-6,76 (m, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 5,38 (t, J= 5,4 Hz, 1 H), 3,92 (t, J= 5,9 Hz, 2 H), 2,35 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 403,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]-1 -(1 H-indol-3-il)etanona (1-163)

[00589] A uma solução de 2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pi ri m idi η-7-i l]ami no]-1 -(1 H-indol-3-il)etanol (80 mg,

152,08 pmol, 1 eq.) em DCM (10 mL) foi adicionado MnO₂ (396,64 mg, 4,56 mmol, 30 eq.). A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela DuraShell 150 mm_25 mm_5 pm; fase móvel: água (0,05% de HCI) - ACN; % de B: 40% a 70%, 8 min.) duas vezes, seguida por liofilização para produzir 2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]-1 (1 H-indol-3-il)etanona (13,82 mg, 27,88 pmol, 18,3% de produção, 95,5% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,95 (s, 1 H), 8,76 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,38 (d, J= 3,2 Hz, 1 H), 8,28-8,24 (m, 1 H), 8,23-8,18 (m, 2 H), 7,48 (d, J= 7,1 Hz, 1 H), 7,29-7,20 (m, 2 H), 6,87 (s, 1 H), 5,24 (s, 2 H), 2,40 (s, 3 H); ESLCMS m/z 401,2 [M+H]⁺.

Exemplo 139

Síntese de 1-164

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 529/704

500/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-i l)eti l]-8-meti Ipirazolo[1,5-a][1,3,5] triazin-4-amina (1-164)

[00590] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (50 mg, 182,24 pmol, 1 eq.) e 2-(1 H-indol3-il)etanamina (32,12 mg, 200,47 pmol, 1,1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (188,43 mg, 1,46 mmol, 253,95 pL, 8 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 3 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rt = 0,2) indicou que o material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Agela DuraShell 150 mm_25 mm_5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - AON]; % de B: 45% a 75%, 9 min.). A fração desejada foi

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 530/704

501/652 liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-8metil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (22,72 mg, 48,65 pmol, 26,7% de produção, 98,6% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,15 (s, 1 H), 8,83 (br s, 1 H), 8,59 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,68 (dd, J = 2,4, 6,1 Hz, 1 H), 7,20-7,12 (m, 1 H), 7,05-6,91 (m, 3 H), 4,05 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 3,19 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 2,29 (s, 3 H); ES-LCMS m/z388,2 [M+H]⁺.

Exemplo 140

Síntese de 1-165

1-165

Esquema sintético:

Etapa 1: (3fí)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-165)

[00591] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina (44,89 mg, 172,65 pmol, 1 eq.), (3R)-2,3,4,9-tetra-hidro1/-/-carbazol-3-amina (39,30 mg, 189,92 pmol, 1,1 eq.) e DIEA (66,94

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 531/704

502/652 mg, 517,95 pmol, 90,22 pL, 3 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3fí)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triaziη-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (20,39 mg, 42,52 pmol, 24,6% de produção, 98,5% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,46 (s, 1 H), 8,90 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 8,82 (s, 1 H), 8,13 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 7,35 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,25 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,06-6,98 (m, 1 H), 6,97-6,91 (m, 1 H), 6,57 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 4,89 (m, 1 H), 3,31-3,26 (m, 1 H), 3,11 2,88 (m, 3 H), 2,42-2,34 (m, 1 H), 2,33-2,21 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 400,2 [M+H]⁺; Rotação óptica ([a]²¹’⁴ _D = 0,396 (MeOH, c = 0,102 g/100 mL).

Exemplo 141

Síntese de 1-166

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 532/704

503/652

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-/V-[2-(1 H-piirol-3il)etiI]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (i-166)

[00592] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (50 mg, 168,66 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (21,80 mg, 168,66 pmol, 29,38 pL, 1 eq.) e 2-(1 /-/-pirrol-3-il)etanamina (27,87 mg, 252,99 pmol, 1,5 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil-A/-[2-(1 /-7-pirrol3-il)etil]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (15,28 mg, 32,18 pmol, 19,1% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,52 (s, 1 H), 9,39 (s, 1 H), 8,93 (t, J= 5,6 Hz, 1 H), 8,73 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,41 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 6,65 (d, J= 2,4 Hz, 2 H), 5,98 (s, 1 H), 3,84-3,75 (m, 2 H), 3,23-3,16 (m, 1 H), 2,84 (t, J = 7,3 Hz, 2 H), 1,35 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 366,2 [M+H]⁺.

Exemplo 142

Síntese de 1-169

1-169

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 533/704

504/652

Esquema sintético:

Etapa 1: Metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-2-metil-3-oxo-propanoato

[00593] A uma solução de metil (Z)-3-(5-fluoro-3-piridil)-3-hidróxiprop-2-enoato (600,00 mg, 2,83 pmol, 1 eq.) e Mel (401,71 mg, 2,83 pmol, 176,19 pL, 1 eq.) em DMF (20 mL) foi adicionado K2CO3 (391,14 mg, 2,83 pmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 20°C durante 3 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição H2O (50 mL), extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SÜ4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografiade coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, Rf = 0,37) para produzir 0 produto de metil 3-(5fluoro-3-piridil)-2-metil-3-oxo-propanoato (605 mg, 2,69 pmol, 95,0% de produção, 93,9% de pureza) como um óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz CDCI3) δ ppm 9,00 (d, J= 1,5 Hz, 1 H), 8,78-8,61 (m, 1 H), 8,03-7,90 (m, 1 H), 4,36 (q, J = 7,1 Hz, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 1,57-1,52 (m, 3 H); ESLCMS m/z 212,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(5-Fluoro-3-pirjdil)-3,6-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirjmjdin-7ol

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505/652

[00594] Metil 3-(5-fluoro-3-piridil)-2-metil-3-oxo-propanoato (300 mg, 1,33 pmol, 1 eq.), 4-metil-1 H-pirazol-5-amina (647,37 mg, 6,67 pmol, 5 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em AcOH (5 mL). O tubo selado foi aquecido a 150°C durante 1 hora sob irradiação de micro-ondas. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3,6-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (300 mg, 1,16 pmol, 87,14% de produção) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação.

Etapa 3: 7-Cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3,6-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina

[00595] Uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-3,6-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol (270 mg, 1,05 pmol, 1 eq.) em POCI3 (8,25 g, 53,80 pmol, 5,00 mL, 51,46 eq) foi agitada a 110 °C durante 3 h. A mistura de reação foi vertida em água gelada (50 g), extraída com DCM (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre NazSCXi anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílicagel (de PE / EtOAc = 1 /0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,51) para produzir 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3,6-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (200 mg, 337,55 pmol, 32,3% de produção, 46,7% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,01 (d, J=1,2Hz, 1 H), 8,68 (s, 1 H), 8,61 (s, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 2,65 (s, 3 H), 2,63 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 277,1 [M+H]⁺.

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506/652

Etapa 4: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1H-indol-3-il)etil]-3,6-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-169)

[00596] A uma solução de

7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3,6-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 168,78 pmol, 1 eq.) e 2-(1 H-indol-3il)etanamina (40,56 mg, 253,17 pmol, 1,5 eq.) em /-PrOH (4 mL) foi adicionado DIEA (87,25 mg, 675,11 pmol, 117,59pL, 4 eq.). A mistura foi agitada a 70 °C durante 3 horas e concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /7-indol-3-il)etil]-3,6-dimetil pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (33,61 mg, 83,93 pmol, 49,7% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,49 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,52 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,30-7,26 (m, 1 H), 7,20 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,07 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 6,98 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,71 (s, 1 H), 4,164,12 (m, 2 H), 3,12-3,09 (m, 2 H), 2,26 (s, 3 H), 1,88 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 401,2 [M+H]⁺.

Exemplo 143

Síntese de 1-171

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507/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)propil]-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-171)

[00597] A uma mistura de 2-(1 /-/-indol-3-il)propan-1-amina (30 mg, 172,17 pmol, 1 eq.) e 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidina (46,29 mg, 172,17 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (6 mL) foi adicionado DIEA (66,76 mg, 516,52 pmol, 89,97 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 15 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 48% a 68%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)Λ/-[2-(1 /-/-indol-3-il)propil]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (18,71 mg, 39,52 pmol, 23,0% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido laranja. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,80 (br s, 1 H), 8,44 (br s, 1 H), 8,09 (s, 1 H), 7,64 (br s, 1 H), 7,56 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,12 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 6,92 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,80-6,74 (m, 1 H), 5,75 (s, 1 H), 4,04-3,92 (m, 2 H), 3,59-3,50 (m, 1 H), 2,28 (s, 3 H), 1,59 (d, J = 7,3 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z401,1 [M+H]⁺.

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508/652

Exemplo 144

Síntese de 1-172

Etapa 1: 7-Metóxi-1 H-indol-3-carbaldeído

[00598] A uma solução de POCI3 (1,13 g, 7,37 mmol, 684,85 μΙ_, 1,08 eq.) em DMF (12 mL) foi adicionado 7-metóxi-1 H-indol (1 g, 6,79 mmol, 884,96 pL, 1 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0~20°C durante 3 horas

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509/652 sob atmosfera de N2. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,25) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura foi ajustada para pH 10-12 com NaOH a 2 Ν. A mistura foi extraída com DCM (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/2, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,25) para produzir 7-metóxi-1 H-indol-3carbaldeído (900 mg, 5,03 mmol, 74,1% de produção, 98,0% de pureza) como um sólido rosa. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 10,07 (s, 1 H), 9,18 (brs, 1 H), 7,89 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 3,1 Hz, 1 H), 7,24 (t, J = 7,9 Hz, 1 H), 6,78 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 3,98 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 176,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 7-Metóxi-3-[(£)-2-nitrovinil]-1 H-indol

[00599] A uma mistura de 7-metóxi-1 H-indol-3-carbaldeído (900 mg, 5,03 mmol, 1 eq.) e NH4OAC (504,52 mg, 6,55 mmol, 1,3 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado CH3NO2 (11,30 g, 185,12 mmol, 10 mL, 36,77 eq.). A mistura foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes e agitada a 80°C durante 19 horas sob atmosfera de N2. TLC (PE/EtOAc = 1/1, Rf= 0,60) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílicagel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/2, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,60) para produzir 7-metóxi-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (660 mg, 2,87 mmol, 57,1% de produção, 95,0% de pureza) como um sólido laranja. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,92 (br s, 1 H), 8,29 (d, J = 13,5 Hz, 1 H), 7,79 (d, J= 13,5 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 3,1 Hz, 1 H), 7,38 (d, J = 8,2 Hz, 1 H),

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510/652

7,26-7,24 (m, 1 Η), 6,80 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 4,00 (s, 3 H).

Etapa 3: 2-(7-Metóxi-1 H-indol-3-il)etanamina

[00600] A uma solução de 7-metóxi-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (300 mg, 1,31 mmol, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado L1AIH4 (247,86 mg, 6,53 mmol, 5 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 2 horas sob atmosfera de N2. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf= 0,10) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. 2 mL de H2O e 1 mL de NaOH a 2Λ/foram adicionados à mistura. A mistura foi filtrada e concentrada para produzir 2-(7-metóxi-1 H-indol-3-il)etanamina (240 mg, 1,20 mmol, 91,8% de produção, 95,0% de pureza) como sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,22 (br s, 1 H), 7,23 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,07-7,01 (m, 2 H), 6,66 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 3,06-3,01 (m, 2 H), 2,93-2,87 (m, 2H).

Etapa 4: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-A/-[2-(7-metóxi-1H-indol-3-il)etil]-3metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

[00601] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (230 mg, 855,48 pmol, 1 eq.), 2-(7-metóxi-1 Hindol-3-il)etanamina (217,00 mg, 1,03 mmol, 1,2 eq.) e DIEA (331,70 mg, 2,57 mmol, 447,03 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob

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511/652 pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela DuraShell 150 mm_25 mm_5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(7metóxi-1 H-\ndol-3-il)etil]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (240 mg, 490,42 pmol, 57,3% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,72 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,30 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,43 (td, J = 2,3, 9,0 Hz, 1 H), 7,15 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 6,80 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,48 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 5,62 (s, 1 H), 4,04-3,98 (m, 2 H), 3,81 (s, 3 H), 3,21-3,16 (m, 2 H), 2,29 (s, 3 H); ES-LCMS m/z417,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: 3-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a] pi ri midin-7-i l]ami no]eti l]-1 H-indol-7-ol (1-172)

[00602] A uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(7-metóxi-1 Hindol-3-il)etil]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (200 mg, 480,25 pmol, 1 eq.) em DCM (10 mL) foi adicionado BBrs (240,63 mg, 960,50 pmol, 92,55 pL, 2 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0~20°C durante 0,5 horas sob atmosfera de N₂. 1 mL de MeOH foi adicionado à mistura. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 8 min.) seguida por liofilização para produzir 3-[2-[[5-(5-fluoro-3piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]-1 H-indol-7-ol (22,74 mg, 45,54 pmol, 9,5% de produção, 95,2% de pureza, 2HCI) como um sólido laranja. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,71 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,43 (J = 9,0 Hz, 1 H), 7,04

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512/652 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 6,69 (td, J = 3,8, 7,9 Hz, 1 H), 6,36 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 5,65 (s, 1 H), 4,04-3,98 (m, 2 H), 3,21-3,15 (m, 2 H), 2,29 (s, 3 H); ES-LCMS m/z403,1 [M+H]⁺.

Exemplo 145

Síntese de 1-175

Etapa 1:5-(5-FluoiO-3-piridil)-A/3,N3-dimetil-/V7-[(3fl)-2,3,4,9-tetrahidro-1 H-carbazol-3-il]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3,7-diamina (1-175)

[00603] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/,A/-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-3-amina (50 mg, 171,40 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foram adicionados DIEA (66,46 mg, 514,21 pmol, 89,56 pL, 3 eq.) e (3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (35,12 mg, 188,54 pmol, 1,1 eq.). A mistura foi agitada a 90 °C durante 12 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC

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513/652 preparativa (coluna: Agela DuraShell 150 mm_25 mm_5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/3,Λ/3-dimetil/V7-[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-il]pirazolo[1,5-a]pirimidina3,7-diamina (22,71 mg, 43,35 pmol, 25,3% de produção, 98,2% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 10,82 (s, 1 H), 9,41 (s, 1 H), 8,72 (s, 1 H), 8,66-8,55 (m, 2 H), 8,49 (br s, 1 H), 7,36 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,31-7,25 (m, 2 H), 7,04-6,98 (m, 1 H), 6,96-6,91 (m, 1 H), 4,56 (br s, 1 H), 3,37 (s, 6H), 3,18-3,01 (m, 2 H), 2,99-2,82 (m, 2 H), 2,28-2,09 (m, 2H); ES-LCMS m/z442,3 [M+H]⁺.

Exemplo 146

Síntese de 1-177

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]propan-2-ol (1-177)

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514/652

[00604] Ao MeLi (1,3 M, 5 mL, 57,13 eq) foi adicionada uma solução de 1 -[5-(5-f I uoro-3-pi ridi I )-7-[2-( 1 H-i ndol-3-i I )eti lami no]pi razolo[1,5a]pirimidin-3-il]etanona (50 mg, 113,77 pmol, 1 eq.) em THF (2 mL) gota a gota sob atmosfera de N2 a -20°C. A mistura foi agitada sob atmosfera de N2 a -20°C durante 0,5 h. A reação foi interrompida bruscamente com água (10 mL) e extraída com EtOAc (50 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela Durashell C18 150 * 30 5 u; fase móvel: [água (N^HCCha 10 mM)-ACN]; % de B: 40% a 60%, 9 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]propan-2-ol (13,48 mg, 31,31 pmol, 27,5% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,69 (s, 1 H), 8,43 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,74 (td, J = 2,0, 9,6 Hz, 1 H), 7,68 (dd, J= 2,8, 6,0 Hz, 1 H), 7,24-7,16 (m, 1 H), 7,09-7,02 (m, 2 H), 6,98 (s, 1 H), 6,00 (s, 1 H), 3,86 (t, J=6,0 Hz, 2 H), 3,18 (t, J=6,0 Hz, 2 H), 1,72 (s, 6H); ES-LCMS m/z 431,1 [M+H]⁺.

Exemplo 147

Síntese de 1-179

1-179

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 544/704

515/652

Etapa 1: 7-Metóxi-1 H-indol-3-carbaldeído

[00605] A uma solução de POCI3 (1,13 g, 7,37 mmol, 684,85 μΙ_, 1,08 eq.) em DMF (12 mL) foi adicionado 7-metóxi-1 H-indol (1 g, 6,79 mmol, 884,96 pL, 1 eq) a 0°C. A mistura foi agitada a 0~20°C durante 3 horas sob atmosfera de N2. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rt = 0,25) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura foi ajustou pH para 10-12 com NaOH a 2 N. A mistura foi extraída com DCM (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir 0 resíduo que foi purificado em cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/2, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,25) para produzir 7-metóxi-1 H-indol-3carbaldeído (900 mg, 5,03 mmol, 74,1% de produção, 98,0% de pureza) como um sólido rosa. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 10,07 (s, 1 H), 9,18 (brs, 1 H), 7,89 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,81 (d, J = 3,1 Hz, 1 H), 7,24 (t, J = 7,9 Hz, 1 H), 6,78 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 3,98 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 176,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 7-Metóxi-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 545/704

516/652

[00606] A uma mistura de 7-metóxi-1 H-indol-3-carbaldeído (900 mg, 5,03 mmol, 1 eq.) e NhhOAc (504,52 mg, 6,55 mmol, 1,3 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado CH3NO2 (11,30 g, 185,12 mmol, 10 mL, 36,77 eq.). A mistura foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes e agitada a 80 °C durante 19 horas sob atmosfera de N2. TLC (PE/EtOAc = 1/1, Rf= 0,60) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílicagel (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/2, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,60) para produzir 7-metóxi-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (660 mg, 2,87 mmol, 57,1% de produção, 95,0% de pureza) como um sólido laranja. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,92 (br s, 1 H), 8,29 (d, J = 13,5 Hz, 1 H), 7,79 (d, J= 13,5 Hz, 1 H), 7,63 (d, J = 3,1 Hz, 1 H), 7,38 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,26-7,24 (m, 1 H), 6,80 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 4,00 (s, 3 H).

Etapa 3: 2-(7-Metóxi-1 H-indol-3-il)etanamina

[00607] A uma solução de 7-metóxi-3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-indol (300 mg, 1,31 mmol, 1 eq.) em THF (10 mL) foi adicionado L1AIH4 (247,86 mg, 6,53 mmol, 5 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 2 horas sob atmosfera de N2. TLC (PE/EtOAc = 3/1, Rf= 0,10) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. H2O (2 mL) foi adicionado, seguido por NaOH a 2 N (1 mL) à mistura. A mistura foi filtrada e concentrada para

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 546/704

517/652 produzir 2-(7-metóxi-1 H-indol-3-il)etanamina (240 mg, 1,20 mmol, 91,8% de produção, 95,0% de pureza) como sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,22 (br s, 1 H), 7,23 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,07-7,01 (m, 2 H), 6,66 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 3,97 (s, 3 H), 3,06-3,01 (m, 2 H), 2,93-2,87 (m, 2H).

Etapa 4: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(7-metóxi-1H-indol-3-il)etil]-3metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-179)

[00608] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (230 mg, 855,48 pmol, 1 eq.), 2-(7-metóxi-1 Hindol-3-il)etanamina (217,00 mg, 1,03 mmol, 1,2 eq.) e DIEA (331,70 mg, 2,57 mmol, 447,03 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela DuraShell 150 mm_25 mm_5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - AON]; % de B: 35% a 65%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(7metóxi-1 H-\ndol-3-il)etil]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (240 mg, 490,42 pmol, 57,3% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,72 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,30 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,43 (td, J = 2,3, 9,0 Hz, 1 H), 7,15 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 6,80 (t, J = 7,8 Hz, 1 H), 6,48 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 5,62 (s, 1 H), 4,04-3,98 (m, 2 H), 3,81 (s, 3 H), 3,21-3,16 (m, 2 H), 2,29 (s, 3 H); ES-LCMS m/z417,1 [M+H]⁺.

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518/652

Exemplo 148

Síntese de 1-180

Etapa 1: 2-(1 H-Pirazol-3-il)acetonitrila

H n-n NC. J-Lj

[00609] A uma solução de 3-(clorometil)-1 H-pirazol (350 mg, 2,29 mmol, 1 eq, HCI) em CH3CN (5 mL) foram adicionados KCN (300 mg, 4,61 mmol, 197,37 pL, 2,01 eq.) e H2O (1 mL). A mistura foi agitada a 50 °C durante 12 horas. TLC (DCM/MeOH = 10/1, Rf = 0,4) indicou que material de partida foi consumido completamente e uma nova mancha formou-se. A mistura de reação foi diluída com H2O (10 mL) e extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 548/704

519/652 para produzir 2-(1/-/-pirazol-3-il)acetonitrila (150 mg, 1,33 mmol, 58,2% de produção, 95,0% de pureza) como um óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δppm 12,84 (s, 1 H), 7,73 (s, 1 H), 6,23 (s, 1 H), 3,95 (s, 2H); ES-LCMS: Nenhuma massa correta foi encontrada.

Etapa 2: 2-(1 H-Pirazol-3-il)etanamina

[00610] A uma solução de 2-(1/-/-pirazol-3-il)acetonitrila (150 mg, 1,33 mmol, 1 eq.) em MeOH (10 mL) foi adicionado níquel Raney (600 mg, 7,00 mmol, 5,26 eq) sob atmosfera de Ar. A suspensão foi desgaseificada e purgada com H2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada sob H2 (1,05 kg/cm² (15 psi)) a 20°C durante 12 horas. TLC (DCM/MeOH = 10/1, Rf = 0,4) indicou que material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir 2-(1 H-pirazol-3il)etanamina (100 mg, 899,73 pmol, 67,6% de produção, cru) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 12,64 (s, 1 H), 7,42-7,35 (m, 1 H), 5,98 (s, 1 H), 3,10-2,94 (m, 2 H), 2,82 (d, J= 17,6 Hz, 2H); ES-LCMS: Nenhuma massa correta foi encontrada.

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-/V-[2-(1 H-pirazol-3il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-180)

[00611] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (75 mg, 279,53 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 549/704

520/652 foram adicionados DIEA (180,64 mg, 1,40 mmol, 243,45 pL, 5 eq.) e 2(1 /-/-pirazol-3-il)etanamina (62,14 mg, 559,07 pmol, 2 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 15% a 45%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-A/-[2(1 /-/-pirazol-3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (21,84 mg, 48,89 pmol, 17,5% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,07 (s, 1 H), 8,88 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,45 (td, J = 2,3, 8,9 Hz, 1 H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 7,01 (s, 1 H), 6,80 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 4,16 (t, J= 7,0 Hz, 2 H), 3,37 (t, J= 7,0 Hz, 2 H), 2,40 (s, 3 H); ES-LCMS m/z338,1 [M+H]⁺.

Exemplo 149

Síntese de 1-186

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-metil-/V-[2-(1H-pirrolo[3,2-b]piridin3-il)etiI]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (1-186)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 550/704

521/652

[00612] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (50 mg, 189,64 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foram adicionados DIEA (73,53 mg, 568,92 pmol, 99,09 pL, 3 eq.) e 2-(1/-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina (40 mg, 248,13 pmol, 1,31 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 10% a 40%, 9 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metiΙ-Λ/-[2-( 1 H-pirrolo[3,2b]piridin-3-il)etil]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (30,06 mg, 60,39 pmol, 31,8% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,37 (d, J= 1,3 Hz, 1 H), 8,92 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 8,82 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 8,48 (d, J= 5,8 Hz, 1 H), 8,40 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,98 (d, J= 10,5 Hz, 2 H), 7,55 (dd, J= 5,9, 8,2 Hz, 1 H), 4,19 (t, J= 6,3 Hz, 2 H), 3,38 (t, J= 6,4 Hz, 2 H), 2,29 (s, 3 H); ES-LCMS m/z389,1 [M+H]⁺.

Exemplo 150

Síntese de 1-187b

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 551/704

522/652

Esquema sintético:

Etapa 1: Ácido (2S)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-3-(1 H-indol-3-il)propanoico

[00613] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 380,71 pmol, 1 eq.), ácido (2S)-2amino-3-(1/7-indol-3-il)propanoico (77,75 mg, 380,71 pmol, 1 eq.), DIEA (147,61 mg, 1,14 mmol, 198,93 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para produzir ácido (2S)-2-[[5-(5-f luoro-3-pi ridil)-3-metil-pi razolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-3-(1/7-indol-3-il)propanoico (160 mg, 371,72 pmol, 97,6% de produção, 100,0% de pureza) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,69 (s, 1 H), 8,91 (s, 1 H), 8,57 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 7,96 (d, J= 10,0 Hz, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,59-7,50 (m, 2 H), 7,19 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,02-6,94 (m, 2 H), 6,91-6,85 (m, 1 H), 6,29 (s, 1 H),

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 552/704

523/652

4,62 (s, 1 Η), 3,58-3,54 (m, 1 Η), 2,94 (s, 2 Η), 2,21 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 431,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: (2S)-2-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-3-(1 H-indol-3-il)-/V,/V-dimetil-propanamida (I187b)

[00614] A uma solução de ácido (2S)-2-[[5-(5-fIuoro-3-piridiI)-3-metiIpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]-3-(1 H-indol-3-il)propanoico (80 mg, 183,26 pmol, 1 eq.) e cloridrato de A/-metilmetanamina (29,89 mg, 366,52 pmol, 2,0 eq.) em DMF (20 mL) foram adicionados HATU (139,36 mg, 366,52 pmol, 2,0 eq.) e EtsN (92,72 mg, 916,30 pmol, 127,54 pL, 5,0 eq.). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir (2S)-2-[[5-(5-f luoro-3-pi ridil)-3-metil-pi razolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]-3-(1 H-indol-3-il)-A/,A/-dimetil-propanamida (17,77 mg, 32,74 pmol, 17,9% de produção, 97,7% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,73 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,39 (s, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,57 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,45 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,07 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,01 (s, 1 H), 6,91 (t, J= 7,4 Hz, 1 H), 6,84-6,77 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 5,40 (d, J= 8,5 Hz, 1 H), 3,52 (dd, J= 3,0, 14,6 Hz, 1 H), 3,31 (s, 3 H), 3,13-3,07 (m, 1 H), 3,04 (s, 3 H), 2,27 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 458,3 [M+H]⁺.

Exemplo 151

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 553/704

524/652

Síntese de 1-192

1-192

Esquema sintético:

Etapa 1: 3-Bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-piirolo[3,2b]piridiη-3-il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-192)

[00615] A uma solução de 3-bromo-7-cloro-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (100 mg, 305,31 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foram adicionados 2-(1/-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina (50 mg, 310,17 pmol, 1,02 eq.) e DIEA (118,38 mg, 915,92 pmol, 159,54 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 3-bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-pirrolo[3,2

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525/652

b]piridin-3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (37,41 mg, 65,74 pmol, 21,5% de produção, 98,7% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,11 (s, 1 H), 8,72 (d, J= 2,5 Hz, 1

H), 8,50-8,47 (m, 2 H), 8,46 (s, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 7,62 (dd, J= 5,9, 8,2 Hz, 1 H), 6,69 (s, 1 H), 4,03 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 3,39 (t,

J= 6,8 Hz, 2H); ES-LCMS m/z452,0, 454,0 [M+H]⁺.

Exemplo 152

Síntese de 1-195

HN

1-195

Etapa l:terc-Butil Λ/-[2-[4(metanossulfonamido)fenil]etil]carbamato

[00616] A uma solução de terc-butil A/-[2-(4-aminofenil)etil]carbamato (150 mg, 634,76 pmol, 1 eq.) em DCM (10 mL) foram adicionados MsCI (327,20 mg, 2,86 mmol, 221,08 pL, 4,5 eq.) e TEA (321,16 mg, 3,17

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 555/704

526/652 mmol, 441,76 μΙ_, 5 eq.). A mistura foi agitada a 20°C durante 20 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de NaHCOs saturado (50 mL), extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,37) para produzir terc-butil A/-[2-[4-(metanossulfonamido)fenil]etil]carbamato (190 mg, 186,13 pmol, 29,3% de produção, 30,8% de pureza) como óleo incolor. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,25-7,11 (m, 4H), 6,45 (br s, 1 H), 4,58-4,49 (m, 1 H), 3,37 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 3,01 (s, 3 H), 2,79 (t, J = 7,0 Hz, 2 H), 1,44 (s, 9H); ES-LCMS m/z337,1 [M+Na]⁺.

Etapa 2: A/-[4-(2-Amjnoetil)fenjl]metanossulfonamjda

[00617] A uma solução de terc-butil Λ/-[2-[4(metanossulfonamido)fenil]etil]carbamato (190 mg, 186,13 pmol, 1 eq.) em DCM (3 mL) foi adicionado TFA (212,23 mg, 1,86 mmol, 137,81 pL, 10 eq.). A mistura foi agitada a 20 °C durante 20 min. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,06) mostrou que 0 material de partida foi consumido. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir uma A/-[4-(2-aminoetil)fenil]metanossulfonamida crua (61 mg, crus, TFA) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação.

Etapa 3: A/-[4-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]etil]fenil]metanossulfonamida (1-195)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 556/704

527/652

[00618] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (48,80 mg, 185,80 μηποΙ, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foram adicionados DIEA (120,07 mg, 929,01 μηποΙ, 161,81 μί, 5 eq.) e A/-[4-(2-aminoetil)fenil]metanossulfonamida (61 mg, 185,80 μηποΙ, 1 eq, TFA). A mistura foi agitada a 60°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 μιτι; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir Λ/-[4-[2[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]etil]fenil]metanossulfonamida (50,35 mg, 95,81 μηποΙ, 51,5% de produção, 97,7% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,89 (s, 1 H), 8,85 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 8,278,22 (m, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,26 (d, J= 8,3 Hz, 2 H), 7,08 (d, J= 8,5 Hz, 2 H), 6,53 (s, 1 H), 4,01 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 3,08 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 2,87 (s, 3 H), 2,36 (s, 3 H); ES-LCMS m/z441,0 [M+H]⁺.

Exemplo 153

Síntese de 1-196

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 557/704

528/652

Etapa 1: 3-[(E)-2-Nitrovinil]-1 H-pirrol ^NH

[00619] A uma solução de 1 H-pirrol-3-carbaldeído (1 g, 10,52 mmol, 1 eq.) em CH3NO2 (10 mL) e THF (10 mL) foi adicionado NH4OAC (891,60 mg, 11,57 mmol, 1,1 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas. TLC (TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,45) indicou que nenhum material de partida foi mantido e uma nova mancha maior com polaridade mais baixa foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,45) para produzir 0 produto 3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-pirrol (1,2 g, 7,82 mmol, 74,4% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,64 (brs, 1 H), 8,03 (d, J= 13,4 Hz, 1 H), 7,44 (d, J = 13,3 Hz, 1 H), 7,22 (td, J = 1,6, 2,8 Hz, 1 H), 6,88 (q, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,49-6,43 (m, 1 H).

Etapa 2: 2-(1H-Pjrrol-3-il)etanamjna

[00620] A uma solução de 3-[(E)-2-nitrovinil]-1 H-pirrol (300 mg, 1,95

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529/652 mmol, 1 eq.) em THF (20 mL) foi adicionado L1AIH4 (370,96 mg, 9,77 mmol, 5,0 eq) sob banhos de gelo. A mistura foi agitada a 80°C durante 2 h. TLC (TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,56) indicou que nenhum material de partida foi mantido e uma maior nova mancha com maior polaridade foi detectada. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de H₂O (1,5 mL), NaOH a 1 N (1,5 mL) e H₂O (1,5 mL) sob banhos de gelo, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir 0 produto cru 2-(1 H-pirrol-3-il)etanamina (180 mg, 1,63 mmol, 83,6% de produção, pureza crua) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,12 (brs, 1 H), 6,80-6,72 (m, 1 H), 6,63 (d, J= 1,3 Hz, 1 H), 6,146,08 (m, 1 H), 2,93-2,85 (m, 2 H), 2,63 (t, J = 6,7 Hz, 2H).

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-A/-[2-(1 H-piirol-3il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-196)

[00621] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 190,35 pmol, 1 eq.) e 2-(1 H-pirrol-3il)etanamina (41,94 mg, 380,71 pmol, 2,0 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (73,81 mg, 571,06 pmol, 99,47 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 70 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 9 min;) para produzir 0 resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-A/-[2-(1 H-pirrol-3

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530/652 il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (15,72 mg, 46,73 pmol, 24,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,03 (s, 1 H), 8,53 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,19 (d, J = 9,5 Hz, 2 H), 7,87 (s, 1 H), 6,80 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,72 (s, 1 H), 6,48 (brs, 1 H), 6,27 (s, 1 H), 6,19 (br s, 1 H), 3,69 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,99 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 2,39 (s, 3 H); ES-LCMS m/z337,2 [M+H]⁺.

Exemplo 154

Síntese de 1-197

1-197

Esquema sintético:

₁ 1-197

Etapa 1: [5-(5-FI uoro-3-piridi l)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin -3-il]metanol (1-197)

[00622] A uma solução de ácido 5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol3-il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (50 mg, 110,71 pmol, 1 eq.) em THF (8 mL) foi adicionado LAH (50 mg, 1,32 mmol,

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11,90 eq) a 0 °C. A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi diluída com THF (40 mL), interrompida bruscamente por adição de água (0,5 mL), 10% de NaOH (0,5 mL) e água (1,5 mL) em sequência a 0 °C. Após ser agitada durante 30 min, a mistura foi filtrada através de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xbridge 150 * 30 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir [5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2(1 H-\ndol-3-iI)etiIamino]pirazolo[1,5-a]pirimidiη-3-iI]metanol (6 mg, 14,91 pmol, 13,5% de produção, 100% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,65 (s, 1 H), 8,47 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 7,74 (d, J= 9,8 Hz, 1 H), 7,71-7,66 (m, 1 H), 7,24-7,18 (m, 1 H), 7,12-7,02 (m, 2 H), 6,98 (s, 1 H), 6,00 (s, 1 H), 4,80 (s, 2 H), 3,88 (t, J= 6,2 Hz, 2 H), 3,20 (t, J= 6,1 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 403,2 [M+H]⁺.

Exemplo 155

Síntese de 1-198a, 1-198b e 1-198c

l-198a l-198b 1-198c

Esquema sintético:

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Etapa 1: (3R)-/V-[3-bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-iI] -2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

[00623] Uma mistura de 3-bromo-7-cloro-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (440 mg, 1,34 mmol, 1 eq.), (3fí)-2,3,4,9tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (274,54 mg, 1,47 mmol, 1,1 eq.) e DIEA (519,56 mg, 4,02 mmol, 700,21 μΙ_, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para produzir o resíduo que foi purificado em cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, R_f = 0,25) para produzir (3fl)-A/-[3-bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (520 mg, 1,06 mmol, 79,2% de produção, 97,4% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,76 (s, 1 H), 9,30 (s, 1 H), 8,65 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,46 (td, J= 2,2, 10,4 Hz, 1 H), 8,32-8,24 (m, 2 H),

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7,33 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 7,026,86 (m, 2 H), 4,49 (td, J = 4,8, 9,4 Hz, 1 H), 3,14-2,98 (m, 2 H), 2,942,79 (m, 2 H), 2,23-2,10 (m, 2H); ES-LCMS m/z477,1,479,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: ferc-Butil (3R)-3-[[3-bromo-5-(5-fluoro-3piridi l)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il] -íerc-butoxicarbonil-amino]1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato

[00624] Uma mistura de (3fl)-A/-[3-bromo-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (500 mg, 1,02 mmol, 1 eq.), ΒοοςΟ (556,67 mg, 2,55 mmol, 585,97 pL, 2,5 eq.) e DMAP (373,93 mg, 3,06 mmol, 3 eq.) em 1,4dioxano (10 mL) foi agitada a 110°C durante 5 h. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,7) para produzir terc-butil (3fl)-3-[[3-bromo-5(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonilamino]-1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (600 mg, 664,15 umol, 65,1% de produção, 75,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,06 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 3,0 Hz, 1 H), 8,26-8,18 (m, 2 H), 8,06 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7,25-7,13 (m, 3 H), 4,86-4,76 (m, 1 H), 3,26-3,16 (m, 2 H), 2,66 (d, J= 10,5 Hz, 1 H), 2,36 (m, 1 H), 2,10-1,92 (m, 2 H), 1,64 (s, 9H), 1,34 (s, 9H); ES-LCMS m/z 677,2, 679,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: íerc-Butil (3fí)-3-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

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[00625] terc-Buti I (3fí)-3-[[3-bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol9-carboxilato (550 mg, 608,80 pmol, 1 eq.), tributil(1 -etoxivinil)estanano (1,02 g, 2,82 mmol, 953,27 pL, 4,64 eq.) e Pd(dppf)CI₂ (89,09 mg, 121,76 pmol, 0,2 eq.) em tolueno (8 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas e em seguida purgados com N₂ durante 1 min. O tubo selado foi aquecido a 120°C durante 5 horas sob micro-ondas (1 bar). À mistura foi adicionado KF aquoso (10 mL, 1 g/10 mL). A mistura foi agitada a 25 °C durante 30 minutos e extraída com EtOAc (30 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na₂SO4, filtrada e concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílicagel rápida (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,45) para produzir terc-butil (3R)-3-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (340 mg, 524,83 pmol, 91,0% de produção, 98,9% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,12 (s, 1 H), 8,73 (s, 1 H), 8,64 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,15 (d, J= 9,5 Hz, 1 H), 8,05 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,257,19 (m, 1 H), 7,18-7,13 (m, 1 H), 4,83 (s, 1 H), 3,27-3,11 (m, 3 H), 2,90 (s, 3 H), 2,72-2,62 (m, 1 H), 2,37 (s, 1 H), 2,13-2,06 (m, 1 H), 2,05 (s, 1 H), 1,64 (s, 9H), 1,34 (s, 9H); ES-LCMS m/z641,4 [M+H]⁺.

Etapa 4: 1 -[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino] pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona

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[00626] A uma solução de terc-butil (3H)-3-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (340 mg, 524,83 pmol, 1 eq.) em DCM (8 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,01 mmol, 2 mL, 51,47 eq.). A mistura de reação foi agitada a 20°C durante 30 min. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi dissolvido em água (10 mL), basificado com NaHCOs aquoso saturado até pH = 8 e extraído com DCM (30 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre NazSCU, filtrada e concentrada para produzir 1-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[[(3F?)-2,3,4,9tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona (250 mg, 515,36 pmol, 98,2% de produção, 90,8% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,11 (s, 1 H), 8,58 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 8,49 (s, 1 H), 8,20 (td, J = 2,4, 9,4 Hz, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,44 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,17 (t, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,137,07 (m, 1 H), 6,76 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 6,63 (s, 1 H), 4,34 (s, 1 H), 3,38 (dd, J= 4,9, 15,0 Hz, 1 H), 3,02-2,91 (m, 3 H), 2,84 (s, 3 H), 2,35 (m, 1 H), 2,31 - 2,23 (m, 1 H); ES-LCMS m/z441,3 [M+H]⁺.

Etapa 5: (1 fí)-1 -[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[[(3R)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il] amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanol (1-198a) & (1 S)-1 -[5-(5-f I uoro-3-pi r id i l)-7-[[(3 R) -2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanol (1-198b)

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[00627] A uma solução de 1-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[[(3fí)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona (100 mg, 206,14 pmol, 1 eq.) em MeOH (2,5 mL) e EtOH (2,5 mL) foi adicionado NaBHL (31,19 mg, 824,57 pmol, 4 eq.) em porções a 20°C. A mistura de reação foi agitada a 20°C durante 0,5 h. H2O (10 mL) foi adicionado para interromper bruscamente a reação e extraído com DCM (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Gemini 150 * 25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 55% a 70%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir um enantiômero (12,50 mg, 28,25 pmol, 13,7% de produção, 100,0% de pureza) (SFC: Tr = 6,742, ee = 100%) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 10,79 (s, 1 H), 9,34 (s, 1 H), 8,66 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,50 (td, J= 2,2, 10,4 Hz, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 7,99 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 7,37 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,07 (s, 1 H), 7,046,98 (m, 1 H), 6,97-6,91 (m, 1 H), 5,20-5,12 (m, 1 H), 5,05 (d, J= 4,5 Hz, 1 H), 4,50 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 3,18-3,00 (m, 2 H), 2,98-2,82 (m, 2 H), 2,24-2,13 (m, 2 H), 1,57 (d, J= 6,3 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z443,2 [M+H]⁺; e 0 outro enantiômero (18,17 mg, 40,22 pmol, 19,5% de produção, 97,9% de pureza) (SFC: Tr = 5,398, ee = 82,9%) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 10,75 (s, 1 H), 9,30 (s, 1 H), 8,62 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,50-8,43 (m, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 7,95 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 7,32 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,24 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,03 (s, 1 H), 7,00-6,94 (m, 1 H), 6,93-6,87 (m, 1 H), 5,16-5,08 (m, 1 H), 4,99

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537/652 (d, J= 4,4 Hz, 1 H), 4,46 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 3,13-2,98 (m, 2 H), 2,922,79 (m, 2 H), 2,14 (m, 2 H), 1,53 (d, J = 6,4 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 443,2 [M+H]⁺.

Exemplo 156

Síntese de I-200

Esquema sintético:

Etapa 1: S-Fluoro-Af-O H-pirazol-5-il)piridina-3-carboxamidina

[00628] Uma mistura de 5-fluoropiridina-3-carbonitrila (1 g, 7,78 mmol, 1 eq.) e 1 /-/-pirazol-5-amina (775,80 mg, 9,34 mmol, 1,2 eq.) em xileno (15 mL) foi agitada a 70°C durante 30 min, em seguida AIMea (2 M, 7,78 mL, 2 eq) (2 M em tolueno, 19,45 mL, 1 eq) foi adicionado em uma porção a 70°C. A mistura foi agitada a 100°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de

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DCM/MeOH = 100/1 a 10/1, TLC: DCM/MeOH = 10/1, R_f = 0,3) para produzir 5-fluoro-/V-(1 H-pirazol-5-il)piridina-3-carboxamidina (700 mg, 2,73 mmol, 35,1% de produção, 80,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,89 (s, 1 H), 8,59 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,06 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 7,56 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 6,16 (d, J= 2,2 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z206,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ol

[00629] Uma mistura de 5-fluoro-/V-(1 /-/-pirazol-5-il)piridina-3carboxamidina (600 mg, 2,34 mmol, 1 eq.), GDI (758,62 mg, 4,68 mmol, 2 eq.) e DMAP (142,89 mg, 1,17 mmol, 0,5 eq.) em DMSO (10 mL) foi agitada a 130°C durante 12 horas. A mistura foi purificada por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 15% a 43%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-ol (150 mg, 627,42 pmol, 26,8% de produção, 96,7% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,17 (s, 1 H), 8,82 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,55-8,36 (m, 1 H), 8,10 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 6,65 (d, J= 2,0 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z232,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina

[00630] Uma mistura de 2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ol (150 mg, 627,42 pmol, 1 eq.) e A/,A/-dimetilanilina (304,12 mg, 2,51 mmol, 318,12 pL, 4 eq.) em POCI3 (59,33 g, 386,94 mmol, 35,96 mL, 616,72 eq) foi desgaseificada e purgada com N2

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539/652 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 110°C durante 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi diluído com água gelada, em seguida NaHCOs saturado foi adicionado à solução acima até pH = 8, extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,5) para produzir 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina (50 mg, 172,65 pmol, 27,5% de produção, 86,2% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,51 (s, 1 H), 8,65 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,50-8,42 (m, 1 H), 8,34 (d, J= 2,2 Hz, 1 H), 6,86 (d, J= 2,2 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z250,0, 252,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: /V-[2-(7-Fluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3piridi l)pirazolo [1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (I-200)

[00631] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina (50 mg, 172,65 pmol, 1 eq.), 2-(7-fluoro-2-metil-1 Hindol-3-il)etanamina (57,03 mg, 224,45 umol, 1,3 eq, HCI) e DIEA (111,57 mg, 863,27 pmol, 150,37 pL, 5 eq.) em /-PrOH (2 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir A/-[2-(7-fluoro-2-metil-1 H-indol-3

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 569/704

540/652 i I )eti l]-2-(5-f I uoro-3-pi ridi I )pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (19,54 mg, 40,85 pmol, 23,7% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,15 (s, 1 H), 8,53 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,12 (d, J = 9,5 Hz, 1 H), 8,05 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,33 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 6,86 (dt, J= 4,6, 7,8 Hz, 1 H), 6,61 (dd, J= 7,8,

11,2 Hz, 1 H), 6,43 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 3,98 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,13 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 2,26 (s, 3 H); ES-LCMS m/z406,1 [M+H]⁺.

Exemplo 157

Síntese de 1-201

1-201

Esquema sintético:

Etapa 1: (3fí)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-metil-pirazolo[1,5a] [1,3,5]triazin-4-i I] -2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-201)

[00632] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (11 mg, 24,27 pmol, 1 eq.), (3H)-2,3,4,9tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (5,43 mg, 29,13 pmol, 1,2 eq.) e DIEA

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541/652 (15,69 mg, 121,37 pmol, 21,14 pL, 5 eq.) em /-PrOH (2 mL) foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir (3H)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (4,32 mg, 8,72 pmol, 35,9% de produção, 98,2% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,48 (s, 1 H), 8,94 (d, J= 9,2 Hz, 1 H), 8,82 (br s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,34 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,25 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,04-6,98 (m, 1 H), 6,96-6,90 (m, 1 H), 4,86 (m, 1 H), 3,25 (d, J= 5,6 Hz, 1 H), 3,12-2,84 (m, 3 H), 2,402,33 (m, 1 H), 2,32 (s, 3 H), 2,29-2,17 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 414,2 [M+H]⁺.

Exemplo 158

Síntese de 1-202

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 571/704

542/652

Etapa 1:

carboxamidina

5-Fluoro-/V-(4-metil-1 H-pirazol-5-il)piridina-3-

[00633] Uma mistura de 5-fluoropiridina-3-carbonitrila (1 g, 6,55 mmol, 1 eq.) e 4-meti 1-1 /-/-pirazol-5-amina (707,02 mg, 6,55 mmol, 1 eq.) em xileno (10 mL) foi agitada a 70 °C durante 0,5 h. Em seguida, AIMes (2 M, 3,93 mL, 1,2 eq) foi adicionado à mistura em uma porção a 100°C. A mistura foi agitada a 100°C durante 16 h. A mistura foi interrompida bruscamente com MeOH (30 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de DCM/MeOH = 1/0 a 5/1, TLC: DCM/MeOH = 5/1, R_f = 0,40) para produzir produto de 5-fIuoro-/V-(4-metiI-1 /-/-pirazol-5-il)piridina-3-carboxamidina (1,09 g, 3,86 mmol, 58,9% de produção, 77,7% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,98 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 2,14 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 220,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-8-metil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4ol

[00634] Uma mistura de 5-fluoro-/V-(4-metil-1 /-/-pirazol-5-il)piridina3-carboxamidina (600 mg, 2,46 mmol, 1 eq.), GDI (799,20 mg, 4,93 mmol, 2 eq.) e DMAP (301,07 mg, 2,46 mmol, 1 eq.) em DMSO (15 mL) foi agitada sob atmosfera de N₂ a 130°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 14% a 44%, 9

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 572/704

543/652 min.), seguida por liofilização para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ol (120 mg, 412,82 pmol, 16,8% de produção, 96,9% de pureza, HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,12 (s, 1 H), 8,72 (s, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 2,28 (s, 3 H); ES-LCMS m/z246,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 4-Cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina

[00635] Uma mistura de 2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ol (150 mg, 422,79 pmol, 1 eq, 2HCI), N,Ndimetilanilina (69,12 mg, 570,36 pmol, 72,30 pL, 1,35 eq.) e POCI3 (11,40 g, 74,38 mmol, 6,91 mL, 175,91 eq) foi agitada a 110°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionada água gelada (50 mL). A mistura foi basificada com NaHCOs até pH = 8 e extraída com EtOAc (50 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, Rf = 0,40) para produzir 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina (100 mg, 379,28 pmol, 89,7% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,52 (s, 1 H), 8,63 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,46 (d, J= 9,2 Hz, 1 H), 8,19 (s, 1 H), 2,44 (s, 3 H) ; ES-LCMS m/z 264,0, 266,0 [M+H]⁺.

Etapa 4: A/-[2-(7-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3piridi l)-8-meti I- pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (I-202)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 573/704

544/652

[00636] Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (20 mg, 75,86 pmol, 1 eq.), 2-(7-fluoro-2metil-1 H-indol-3-il)etanamina (21,20 mg, 83,44 pmol, 1,1 eq, HCI) e DIEA (49,02 mg, 379,28 pmol, 66,06 pL, 5 eq.) em /-PrOH (2 mL) foi agitada a 90°C durante 10 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 9 min.) para produzir A/-[2-(7-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-2-(5-fluoro-3-piridil)-8metil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (4,66 mg, 9,21 pmol, 12,1% de produção, 97,3% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,17 (s, 1 H), 8,53 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,18 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,33 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 6,92-6,76 (m, 1 H), 6,60 (dd, J = 7,6, 11,2 Hz, 1 H), 3,95 (t, J=6,8 Hz, 2 H), 3,10 (t, J = 6,8 Hz, 2 H), 2,27 (s, 3 H), 2,23 (s, 3 H); ES-LCMS m/z420,2 [M+H]⁺.

Exemplo 159

Síntese de I-203

I-203

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 574/704

545/652

Etapa 1: íerc-Butil A/-(4-nitro-1 H-pirazol-5-il)carbamato

[00637] A uma solução de ácido 4-nitro-1 H-pirazol-5-carboxílico (14 g, 89,12 mmol, 1 eq.) em tolueno (280 mL) foram adicionados TEA (22,55 g, 222,81 mmol, 31,01 mL, 2,5 eq.) e DPPA (26,98 g, 98,04 mmol, 21,24 mL, 1,1 eq) a 25°C. A mistura foi agitada a 25°C durante 1,5 h. tBuOH (66,06 g, 891,24 mmol, 85,24 mL, 10 eq) foi adicionado à solução acima, a mistura foi agitada a 130°C durante 12 horas sob N2. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,49) mostrou que 0 material de partida foi totalmente consumido e uma maior mancha formou-se. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de NaHCOs saturado (100 mL), extraída com EtOAc (80 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,49) para produzir terc-butil A/-(4-nitro1 H-pirazol-5-il)carbamato (6,0 g, 21,03 mmol, 23,6% de produção, 80% de pureza) como um sólido branco.¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 575/704

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13,80-13,47 (m, 1 Η), 9,35 (br s, 1 H), 8,58-7,94 (m, 1 H), 1,44 (br s, 9H).

Etapa 2: terc-Butil /V-(4-amino-1H-pirazol-5-il)carbamato

[00638] Uma mistura de terc-butil A/-(4-nitro-1/-/-pirazol-5il)carbamato (5 g, 17,53 mmol, 1 eq.), níquel Raney (5 g, em água) e ΝΗ3Ή2Ο (2,19 g, 17,53 mmol, 2,41 mL, 28%, 1 eq.) em MeOH (100 mL) foi desgaseificada e purgada com H2 por 3 vezes, a mistura foi agitada a 20 °C durante 2 horas sob H2 (1,05 kg/cm² (15 psi)). A mistura de reação foi filtrada e 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um produto cru de terc-butil A/-(4-amino-1/-/-pirazol-5il)carbamato (3,47 g, 16,44 mmol, 93,7% de produção, 93,9% de pureza) como um sólido púrpuro que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfô) δ ppm 11,65 (br s, 1 H), 8,76 (br s, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 3,50 (br s, 2 H), 1,50-1,36 (m, 9H); ESLCMS m/z 143,1 [M-t-Bu+H]⁺.

Etapa 3: terc-Butil /V-[4-(dimetilamino)-1 H-pirazol-5-il]carbamato

[00639] A uma solução de terc-butil A/-(4-amino-1/-/-pirazol-5il)carbamato (1,5 g, 7,11 mmol, 1 eq.) em MeOH (30 mL) foram adicionados HCHO (938,76 mg, 31,26 mmol, 4,4 eq.) e NaBH₃CN (4,47 g, 71,06 mmol, 10 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi interrompido bruscamente por adição de água (100 mL), extraído com EtOAc (80 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a

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0/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,20) para produzir terc-butil Λ/-[4(dimetilamino)-l/-/-pirazol-5-il]carbamato (1,2 g, 3,87 mmol, 54,4% de produção, 73,0% de pureza) como um óleo marrom avermelhado. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,29 (s, 1 H), 2,64 (s, 6H), 1,49 (s, 9H). Etapa 4: A/4,A/4-Dimetil-1 H-pirazol-4,5-diamina

[00640] Uma mistura de terc-butil A/-[4-(dimetilamino)-1 H-pirazol-5il]carbamato (1,2 g, 3,87 mmol, 1 eq.) em HCI/MeOH (4 M, 15 mL) foi desgaseificada e purgada com N₂ por 3 vezes, a mistura foi agitada a 15°C durante 12 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um produto cru de A/4,A/4-dimetil-1/-/-pirazol-4,5-diamina (629 mg, cru, HCI) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,47 (s, 1 H), 3,32 (s, 6H).

Etapa 5: 3-(Djmetilamjno)-5-(5-fluoro-3-pirÍdil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol

OH

[00641] A/4,A/4-Dimetil-1 /-/-pirazol-4,5-diamina (300 mg, 1,57 mmol, 1 eq, HCI) foi dissolvido em MeOH (10 mL), em seguida ajustado pH para 9-10 por NaOH aquoso a 2 N. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo. O resíduo e metil (Z)-3-(5-fluoro-3piridil)-3-hidróxi-prop-2-enoato (332,44 mg, 1,57 mmol, 1 eq.) em AcOH (15 mL) foram agitados a 120°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um produto cru de 3(dimetilamino)-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (616 mg,

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548/652 cru, 2H0AC) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfô) δ ppm 10,71 (s, 1 H), 9,05 (s, 1 H), 8,89 (d, J= 1,5 Hz, 1 H), 8,30 (s, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 6,37 (s, 1 H), 2,72-2,52 (m, 6H); ES-LCMS m/z274,2 [M+H]⁺.

Etapa 6: 7-Cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/,/V-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidin-3-amina ci

[00642] Uma solução de 3-(dimetilamino)-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (616 mg, 1,57 mmol, 1 eq, 2HOAC) em POCI3 (16,50 g, 10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 por 3 vezes, a mistura foi agitada a 110°C durante 4 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi interrompido bruscamente por adição de água gelada (100 mL) a 0 °C, ajustado pH para 9-10 por NaHCOs saturado, extraído com EtOAc (80 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,21) para produzir 7-cloro-5-(5-fluoro3-piridil)-A/,A/-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-amina (190 mg, 651,33 pmol, 41,5% de produção, 100% de pureza) como um sólido vermelho. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,08 (s, 1 H), 8,57 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,18-8,10 (m, 1 H), 7,87 (s, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 3,10 (s, 6H); ESLCMS m/z 292,2, 294,2 [M+H]⁺.

Etapa 7: 5-(5-Fluoro-3-pi ridi l)-/V7-[2-(1 H-indol-3-i l)eti Ι]-Λ/3,Λ/3dimetil-pirazolo [1,5-a]pirimidina-3,7-diamina (I-203)

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[00643] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/,A/-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-3-amina (40 mg, 137,12 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foram adicionados DIEA (53,17 mg, 411,37 pmol, 71,65 pL, 3 eq.) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (28,56 mg, 178,26 pmol, 1,3 eq.). A mistura foi agitada a 90°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 25% a 55%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3piridil)-A/7-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-A/3,A/3-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina3,7-diamina (27,03 mg, 55,35 pmol, 40,3% de produção, 100% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,87 (d, J= 1,0 Hz, 1 H), 8,82 (d, J = 1,2 Hz, 1 H), 8,36 (s, 1 H), 8,17-8,12 (m, 1 H), 7,71-7,67 (m, 1 H), 7,17-7,11 (m, 1 H), 7,07-7,00 (m, 2 H), 6,98 (s, 1 H), 6,18 (s, 1 H), 3,96 (t, J= 6,1 Hz, 2 H), 3,48 (s, 6H), 3,21 (t, J=6,0 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 416,1 [M+H]⁺.

Exemplo 160

Síntese de l-204a

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 579/704

550/652

HCI concentrado, MeOH

Píi'G , H_?..............

HjSOí concentrado. AeOH

Etapa 1: (2E)-2-Hidróxi-imino-5-metóxi-indan-1 -ona o

[00644] Uma solução de 5-metoxiindan-1-ona (5 g, 30,83 mmol, 1 eq.) em MeOH (500 mL) foi aquecida para 45°C, nitrito de isopentila (5,42 g, 46,24 mmol, 6,23 mL, 1,5 eq.) e HCI con. (12 M, 5,14 mL, 2 eq) foram adicionados. A mistura foi agitada a 45°C durante 2 h. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo e MeOH (30 mL) foi adicionado. A suspensão foi filtrada, secada em vácuo para produzir (2E)-2-hidróxi-imino-5-metóxi-indan-1-ona (5,0 g, 22,75 mmol, 73,8% de produção, 87,0% de pureza) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 12,47 (s, 1 H), 7,68 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,01 (dd, J= 2,3, 8,5 Hz, 1 H), 3,92-3,84 (m, 3 H), 3,71 (s, 2H); ES-LCMS m/z 192,1 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 580/704

551/652

Etapa 2: (2/7)-5-Metoxiindan-2-amina

[00645] A uma solução de (2E)-2-hidróxi-imino-5-metóxi-indan-1 -ona (5 g, 22,75 mmol, 1 eq.) em AcOH (250 mL) e H2SO4 con. (3,5 mL) foi adicionado Pd/C (1 g, 10%). A mistura foi agitada a 25 °C durante 12 horas sob H2 (1,05 kg/cm² (15 psi)). A mistura foi filtrada, 0 filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi vertido em água gelada (200 mL), ajustado pH para 10-11 com NaOH a 2 N, extraído com EtOAc (150 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um produto cru de 5metóxi-indan-2-amina (2,0 g, 11,48 mmol, 50,4% de produção, 93,7% de pureza) como um sólido marom. 5-Metóxi-indan-2-amina (1 g, 5,74 mmol) foi separado por SFC quiral (coluna: AD-3_EtOH (DEA), AD (250 mm x30 mm, 10 pm); fase móvel: [0,1% de NH3H₂O IPA]; %de B: 55% a 55%, min.) por três vezes para produzir (2R)-5-metóxi-indan-2-amina (220 mg, 1,35 mmol, 23,4% de produção, 100% de pureza) (Tr = 3,581 min, ee = 100%, [o]²²d = 24,733 (13,5 mg/10 mL, CHCI3)) como um óleo marrom. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,11 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 6,78 (s, 1 H), 6,72 (dd, J= 2,5, 8,3 Hz, 1 H), 3,88-3,81 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,15 (dt, J= 6,7, 14,6 Hz, 2 H), 2,71 - 2,59 (m, 2H); ES-LCMS m/z 164,2 [M+H]⁺ e (2S)-5-metóxi-indan-2-amina (350 mg, 2,14 mmol, 37,3% de produção, 100% de pureza) (Tr = 3,762 min, ee = 100%, [o]²²d = -16,666 (10,3 mg/10 mL, CHCI3)) como um óleo marrom. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δppm 7,11 (d, J=7,9 Hz, 1 H), 6,78 (s, 1 H), 6,72 (dd, J = 2,5, 8,3 Hz, 1 H), 3,87-3,81 (m, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,15 (dt, J= 6,8, 14,7 Hz, 2 H), 2,71 - 2,57 (m, 2H); ES-LCMS m/z 164,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V7-[(2fl)-5-metóxi-indan-2-il]-N3,/V3dimetil-pirazolo [1,5-a]pirimidina-3,7-diamina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 581/704

552/652

HN^V

[00646] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/,A/-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-3-amina (50 mg, 171,40 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foram adicionados DIEA (66,46 mg, 514,21 pmol, 89,56 pL, 3 eq.) e (2H)-5-metóxi-indan-2-amina (36,37 mg, 222,82 pmol, 1,3 eq.). A mistura foi agitada a 70°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um 5-(5-fluoro-3piridil)-/V7-[(2H)-5-metóxi-indan-2-il]-A/3,A/3-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina-3,7-diamina cru (71 mg, 123,18 pmol, 71,9% de produção, 72,6% de pureza) como óleo marrom avermelhado que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 9,01 (s, 1 H), 8,44 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,17-8,10 (m, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,10 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 6,75 (s, 1 H), 6,71 (dd, J= 2,3, 8,2 Hz, 1 H), 6,43 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 6,29 (s, 1 H), 4,63-4,55 (m, 1 H), 3,73 (s, 3 H), 3,58-3,54 (m, 2 H), 3,46-3,37 (m, 2 H), 2,93 (s, 6H); ES-LCMS m/z419,2

Etapa 4: (2/?)-2-[[3-(Djmetilamjno)-5-(5-fluoro-3-pirjdil)pirazolo[1,5a]piri midin-7-i I] amino]indan-5-ol (l-204a)

[00647] Uma solução de

5-(5-fluoro-3-piridil)-/V7-[(2H)-5-metóxiindan-2-iΙ]-Λ/3,Λ/3-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-3,7-diamina (71 mg, 123,18 pmol, 1 eq.) em HBr aq. (5 mL, 60%) foi agitada a 120 °C durante

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 582/704

553/652 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 23% a 53%, 8 min.) seguida por liofilização para produzir (2R)-2-[[3-(dimetilamino)-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (33,84 mg, 67,84 pmol, 55,1% de produção, 95,7% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,68 (s, 1 H), 9,31 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 9,12 (s, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,07 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 6,72 (s, 1 H), 6,65 (d, J =8,1 Hz, 1 H), 4,97-4,94 (m, 1 H), 3,54 (s, 6H), 3,52-3,43 (m, 2 H), 3,19-3,02 (m, 2H); ES-LCMS m/z 405,2 [M+H]⁺.

Exemplo 161

Síntese de l-204b

Esquema sintético:

N'

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 583/704

554/652

Etapa 1:5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V7-[(2S)-5-metóxi-indan-2-il]-A/3,A/3dimetil-pirazolo [1,5-a]pirimidina-3,7-diamina

[00648] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/,A/-dimetilpirazolo[1,5-a]pirimidin-3-amina (50 mg, 171,40 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foram adicionados DIEA (66,46 mg, 514,20 pmol, 89,56 pL, 3 eq.) e (2S)-5-metóxi-indan-2-amina (27,98 mg, 171,40 pmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 70°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um 5-(5-fluoro-3piridil)-/V7-[(2S)-5-metóxi-indan-2-il]-A/3,A/3-dimetil-pirazolo[1,5a]pirimidina-3,7-diamina cru (71 mg, 128,27 pmol, 74,8% de produção, 75,6% de pureza) como óleo marrom avermelhado que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCL) δ ppm 9,12-9,05 (m, 1 H), 8,52 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,21 (td, J= 2,2, 9,8 Hz, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 6,86-6,76 (m, 2 H), 6,51 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,37 (s, 1 H), 4,72-4,57 (m, 1 H), 3,81 (s, 3 H), 3,66 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 3,50 (ddd, J = 7,0, 12,6, 15,9 Hz, 2 H), 3,01 (s, 6H); ESLCMS m/z 419,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: (2S)-2-[[3-(Dimetilamjno)-5-(5-fluoro-3-pirjdil)pirazolo[1,5a]piri midin-7-i I] amino]indan-5-ol (l-204b)

[00649] Uma solução de 5-(5-fluoro-3-piridil)-/V7-[(2S)-5-metóxiindan-2-iΙ]-Λ/3,Λ/3-dimetil-pirazolo[1,5-a]pirimidina-3,7-diamina (71 mg,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 584/704

555/652

128,27 pmol, 1 eq.) em HBr aq. (5 mL, 60%) foi agitada a 120 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 20% a 50%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (2S)-2-[[3-(dimetilamino)-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]indan-5-ol (32,5 mg, 77,95 pmol, 60,7% de produção, 97,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,64 (s, 1 H), 9,25 (d, J= 9,3 Hz, 1 H), 9,08 (s, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,08 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 6,72 (s, 1 H), 6,65 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 4,97-4,92 (m, 1 H), 3,54 (s, 6H), 3,44-3,41 (m, 2 H), 3,18-3,03 (m, 2H); ES-LCMS m/z 405,2 [M+H]⁺.

Exemplo 162

Síntese de I-208

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-pirrolo[3,2-b]piridin-3il)etil]pirazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina (I-208)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 585/704

556/652

[00650] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (60 mg, 225,62 pmol, 1 eq.), 2-(1 H-pirrolo[3,2-b]piridin-3il)etanamina (43,65 mg, 270,75 pmol, 1,2 eq.), DIEA (87,48 mg, 676,87 pmol, 117,90 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para fornecer o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 5% a 35%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)Λ/-[2-(1 /-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (37,11 mg, 75,38 pmol, 33,4% de produção, 98,7% de pureza, 3 HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,99 (s, 1 H), 8,82 (s, 1 H), 8,56-8,50 (m, 2 H), 8,35 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 8,26 (s, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,69-7,63 (m, 1 H), 7,04 (s, 1 H), 6,65 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 4,22-4,13 (m, 2 H), 3,46 (t, J = 6,6 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 374,2 [M+H]⁺.

Exemplo 163

Síntese de I-209

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 586/704

557/652

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-/V-[2-(1H-piirolo[3,2-b]piridin3-il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-209)

[00651] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (60 mg, 228,42 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foram adicionados DIEA (88,56 mg, 685,27 pmol, 119,36 pL, 3 eq.) e 2(1/-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etanamina (45 mg, 279,15 pmol, 1,22 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 15% a 45%, 9 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 5-(5fluoro-3-piridil)-3-metil-A/-[2-(1 /-/-pirrolo[3,2-b]piridin-3-il)etil]pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (28,89 mg, 56,64 pmol, 24,8% de produção, 97,4% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,94 (s, 1 H), 8,79 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,57-8,50 (m, 2 H), 8,31 8,24 (m, 1 H), 8,09 (d, J= 7,6 Hz, 2 H), 7,71-7,63 (m, 1 H), 6,80 (s, 1 H), 4,12 (t, J= 7,0 Hz, 2 H), 3,43 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 2,37 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 388,2 [M+H]⁺.

Exemplo 164

Síntese de 1-210

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 587/704

558/652

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(3-metoxifenil)etil]-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

[00652] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 190,35 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados 2-(3-metoxifenil)etanamina (43,17 mg, 285,53 pmol, 41,92 pL, 1,5 eq.) e DIEA (73,81 mg, 571,06 pmol, 99,47 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 588/704

559/652

5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(3-metoxifenil)etil]-3-metil-pirazolo[1,5a]pinmidin-7-amina (70 mg, 185,47 pmol, 97,4% de produção) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,01 (s, 1 H), 8,54 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,25-8,18 (m, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,18-7,10 (m, 1 H), 6,89-6,83 (m, 2 H), 6,73-6,65 (m, 1 H), 6,36 (s, 1 H), 3,83 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,67 (s, 3 H), 3,03 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 2,33 (s, 3 H); ES-LCMS m/z378,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: 3-[2-[[5-(5-Fluoro-3-pirjdil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirjmjdin7-il]amino]etil] fenol (1-210)

[00653] Uma mistura de 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(3-metoxifenil)etil]3-metil-pirazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina (70 mg, 185,47 pmol, 1 eq.) e HBr aq. (4,47 g, 33,15 mmol, 3 mL, 60% de pureza, 178,72 eq) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 120 °C durante 1 hora sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir 3-[2-[[5-(5fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]fenol (40,74 mg, 93,37 pmol, 50,3% de produção, 100% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CO3OD) δ ppm 8,87-8,85 (m, 2 H), 8,22 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,06-6,95 (m, 1 H), 6,776,68 (m, 2 H), 6,60-6,51 (m, 1 H), 6,44 (s, 1 H), 4,01 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 3,02 (t, J= 6,4 Hz, 2 H), 2,36 (s, 3 H); ES-LCMS m/z364,1 [M+H]⁺.

Exemplo 165

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 589/704

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Síntese de 1-211

1-211

Esquema sintético:

Cl

Etapa 1: /V-[2-(4-Aminofenil)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-211)

[00654] A uma solução de 4-(2-aminoetil)anilina (25,92 mg, 190,35 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados 7-cloro-5-(5-fluoro-3piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 190,35 pmol, 1 eq.) e DIEA (73,81 mg, 571,06 pmol, 99,47 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 50 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 20% a 50%, 8 min.) seguida por liofilização para produzir A/-[2-(4-aminofenil)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)-3metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (73,99 mg, 155,10 pmol, 81,5% de produção, 98,9% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 590/704

561/652 (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,94 (s, 1 H), 8,80 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,28 (td, J=2,4, 8,9 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,54 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 7,35 (d, J= 8,3 Hz, 2 H), 6,80 (s, 1 H), 4,02 (t, J= 7,2 Hz, 2 H), 3,19 (t, J= 7,2 Hz, 2 H), 2,37 (s, 3 H); ES-LCMS m/z363,3 [M+H]⁺.

Exemplo 166

Síntese de 1-213

Etapa 1:4-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin7-jl]amino]etil]fenol (1-213)

[00655] A uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (60 mg, 228,42 pmol, 1 eq.) e 4-(2aminoetil)fenol (37,60 mg, 274,11 pmol, 1,2 eq.) em /-PrOH (12 mL) foi adicionado DIEA (88,57 mg, 685,27 pmol, 119,36 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 75 °C durante 19 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 591/704

562/652 que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 4-[2-[[5-(5-fluoro-3piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pi ri midi n-7-il]amino]etil]fenol (55,37 mg, 126,91 pmol, 55,6% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,84 (br s, 2 H), 8,238,12 (m, 2 H), 7,06 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,63-6,57 (m, 2 H), 6,36 (s, 1 H), 3,96 (t, J = 6,5 Hz, 2 H), 2,99 (t, J = 6,5 Hz, 2 H), 2,36 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 364,0 [M+H]⁺.

Exemplo 167

Síntese de 1-214

1-214

Esquema sintético:

Etapa 1: A/-[2-(7-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-214)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 592/704

563/652

[00656] A uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (100 mg, 376,04 pmol, 1 eq.) em DIEA (5 mL) e APrOH (3 mL) foi adicionado 2-(7-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etanamina (95,55 mg, 376,04 pmol, 1 eq, HCI). A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Gemini 150 * 25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 45% a 75%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir A/-[2-(7-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (58,73 mg, 141,11 pmol, 37,5% de produção, 97,2% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,70 (s, 1 H), 8,44 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 7,93 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 7,81-7,76 (m, 1 H), 7,25 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 6,99 (dt, J = 4,8, 8,0 Hz, 1 H), 6,83-6,79 (m, 1 H), 6,47 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 5,99 (s, 1 H), 3,72 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,11 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,24 (s, 3 H); ESLCMS m/z 405,2 [M+H]⁺.

Exemplo 168

Síntese de 1-215

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 593/704

564/652

Etapa 1: 3-[2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin7-il]amino]etil]-1 H-indol-5-ol (1-215)

[00657] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (60 mg, 228,42 pmol, 1 eq.), 3-(2-aminoetil)1H-indol-5-ol (60,37 mg, 283,87 pmol, 1,24 eq, HCI) em i-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (147,61 mg, 1,14 pmol, 198,94 pL, 5 eq.). A mistura foi agitada a 60 °C durante 4 h. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,25) para produzir o produto 3-[2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]-1/-/-indol-5-ol (73,19 mg, 179,69 pmol, 78,7% de produção, 98,8% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,52 (br s, 1 H), 9,16 (s, 1 H), 8,77-8,55 (m, 2 H), 8,27 (d, J = 9,7 Hz, 1 H), 8,07-7,93 (m, 2 H), 7,207,02 (m, 2 H), 6,91 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 6,65 (s, 1 H), 6,62-6,58 (m, 1 H), 3,91-3,74 (m, 2 H), 3,03 (t, J = 7,1 Hz, 2 H), 2,28 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 403,2 [M+H]⁺.

Exemplo 169

Síntese de 1-216a

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 594/704

565/652

Etapa 1: (3F?)-8-Fluoro-/V-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (1-216a)

[00658] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 190,35 pmol, 1 eq.), (3F?)-8-fluoro2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (47,36 mg, 209,39 pmol, 1,1 eq.) e DIEA (123,01 mg, 951,76 pmol, 165,78 pL, 5 eq.) em /-PrOH (2 mL) foi agitada a 90°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir (3F?)8-fluoro-A/-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (21,98 mg, 51,06 pmol, 26,8% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo (SFC: Rt =

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 595/704

566/652

2,106, ee% = 97,3%). ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,97 (s, 1 H), 8,75 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,29 (td, J = 2,0, 9,2 Hz, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,16 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 6,89 (dt, J = 4,8, 8,0 Hz, 1 H), 6,76 (dd, J= 8,0, 11,6 Hz, 1 H), 4,62 (m, 1 H), 3,32 (s, 1 H), 3,16-3,06 (m, 1 H), 3,03-2,95 (m, 2 H), 2,37 (s, 3 H), 2,36-2,23 (m, 2H); ES-LCMS m/z 431,2 [M+H]⁺.

Exemplo 170

Síntese de 1-218

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-/V-(2-feniletil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (1-218)

[00659] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 190,35 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (3 mL) foram adicionados DIEA (73,80 mg, 571,06 pmol, 99,47 pL, 3 eq.) e 2

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 596/704

567/652 feniletanamina (34,60 mg, 285,53 pmol, 35,86 pL, 1,5 eq.). A mistura foi agitada a 60 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 45% a 75%, 9 min.), seguida por liofilização para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-A/-(2feniletil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (37,43 mg, 89,05 pmol, 46,78% de produção, 100% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,83-8,78 (m, 2 H), 8,17-8,13 (m, 2 H), 7,327,27 (m, 2 H), 7,23 (t, J= 7,3 Hz, 2 H), 7,18-7,13 (m, 1 H), 6,51 (s, 1 H), 4,01 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 3,09 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 2,34 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 348,2 [M+H]⁺.

Exemplo 171

Síntese de 1-219

HN’

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 597/704

568/652

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[(2S)-5-metóxi-indan-2-il]-3-metilpirazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina

[00660] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 190,35 pmol, 1 eq.), (2S)-5-metóxiindan-2-amina (33,05 mg, 190,35 pmol, 1 eq.), DIEA (73,80 mg, 571,06 pmol, 99,47 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para produzir 5-(5-fluoro-3piridil)-A/-[(2S)-5-metóxi-indan-2-il]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7amina (60 mg, 122,03 pmol, 64,1% de produção, 79,2% de pureza) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,06-8,95 (m, 1 H), 8,588,43 (m, 1 H), 8,22-8,09 (m, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,15-7,00 (m, 1 H), 6,806,61 (m, 2 H), 6,53 (d, J= 7,1 Hz, 1 H), 6,32 (s, 1 H), 4,59 (s, 1 H), 3,74 (s, 3 H), 3,60 (d, J= 6,4 Hz, 2 H), 3,06-3,02 (m, 2 H), 2,31 (s, 3 H); ESLCMS m/z 390,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: (2S)-2-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino] indan-5-ol (1-219)

[00661] 5-(5-Fluoro-3-piridil)-A/-[(2S)-5-metóxi-indan-2-il]-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (60 mg, 122,03 pmol, 1 eq.) em HBr (5 mL, 60% em água) foi agitada a 120 °C durante 2 h. A mistura de reação

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 598/704

569/652 foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 30% a 60%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir (2S)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (23,51 mg, 52,44 pmol, 43,0% de produção, 100,0% de pureza, 2 HCI) ((SFC: Rt = 2,090, ee = 100%) como um sólido amarelo.¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,08 (s, 1 H), 8,90 (s, 1 H), 8,45 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 7,09 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,01 (s, 1 H), 6,73 (s, 1 H), 6,66 (dd, J= 2,0, 8,0 Hz, 1 H), 5,11-5,02 (m, 1 H), 3,54-3,42 (m, 2 H), 3,28-3,14 (m, 2 H), 2,41 (s, 3 H); ES-LCMS m/z376,2 [M+H]⁺.

Exemplo 172

Síntese de I-220

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 599/704

570/652

Etapa 1:5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[(2S)-5-metóxi-indan-2iI]pirazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina

[00662] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 154,79 pmol, 1 eq.), (2S)-5-metóxiindan-2-amina (26,88 mg, 154,79 pmol, 1 eq.) e DIEA (60,02 mg, 464,36 pmol, 80,88 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para produzir 5-(5-fluoro-3piridil)-3-isopropil-A/-[(2S)-5-metóxi-indan-2-il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7amina (60 mg, 115,69 pmol, 74,7% de produção, 80,5% de pureza) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,06-8,93 (m, 1 H), 8,548,42 (m, 1 H), 8,13 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,10 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 6,79-6,58 (m, 2 H), 6,51 (d, J= 7,3 Hz, 1 H), 6,33 (s, 1 H), 4,57 (s, 1 H), 3,75-3,62 (m, 3 H), 3,59 (d, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,02 (d, J= 8,6 Hz, 3 H), 1,15 (d, J= 2,2 Hz, 6H); ES-LCMS m/z418,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: (2S)-2-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino] indan-5-ol (I-220)

[00663] 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-[(2S)-5-metóxi-indan-2il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (60 mg, 115,69 pmol, 1 eq.) em HBr (5 mL, 60% em água) foi agitada a 120°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada para produzir 0 resíduo que foi purificado por

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 600/704

571/652

HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir (2S)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (17,20 mg, 36,11 pmol, 31,2% de produção, 100,0% de pureza, 2 HCI) (SFC: Rt = 2,050, ee = 99,374%) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,04 (s, 1 H), 8,86 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 8,40 (d, J= 9,0 Hz, 1 H), 8,26 (s, 1 H), 7,09 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 6,99 (s, 1 H), 6,73 (s, 1 H), 6,66 (dd, J= 2,5, 8,0 Hz, 1 H), 5,09-5,01 (m, 1 H), 3,54-3,43 (m, 2 H), 3,39 (td, J= 6,8, 13,9 Hz, 1 H), 3,26-3,15 (m, 2 H), 1,41 (d, J= 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z404,2 [M+H]⁺.

Exemplo 173

Síntese de l-222a, l-222b e l-222c

l-222a l-222b l-222c

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 601/704

572/652

Etapa 1: 7-Cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-iodo-pirazolo[1,5a]pirimidina

[00664] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (600 mg, 2,24 mmol, 1 eq.) em DCM (25 mL) e MeCN (25 mL) foi adicionado NIS (1,01 g, 4,48 mmol, 2 eq) parcialmente e a mistura foi agitada a 20°C durante 24 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,41) mostrou que o material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi interrompida bruscamente com Na2S₂O3 saturado (100 mL) e concentrada sob pressão reduzida para remover DCM e MeCN. O resíduo foi extraído com EtOAc (100 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 4/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 602/704

573/652

Rf = 0,41) para produzir 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-iodo-pirazolo[1,5a]pirimidina (1,03 g, 2,75 mmol, 61,4% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,12 (s, 1 H), 8,64 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,34-8,26 (m, 2 H), 7,53-7,45 (m, 1 H); ESLCMS m/z 374,9 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-i l)eti l]-3-iodopirazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina

[00665] Uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-iodopirazolo[1,5-a]pirimidina (650 mg, 1,74 mmol, 1 eq.), 2-(1/-/-indol-3il)etanamina (333,66 mg, 2,08 mmol, 1,2 eq.) e DIEA (672,89 mg, 5,21 mmol, 906,86 pL, 3 eq.) em /-PrOH (50 mL) foi agitada a 60 °C durante 12 horas. TLC (ΡΕ/EtOAc = 2/1, Rf = 0,30) mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi resfriada para 20°C e filtrada. O sólido foi lavado com /-PrOH (5 mL), secado sob pressão reduzida para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-3-iodo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (620 mg, 1,24 mmol, 71,3% de produção, 99,3% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,78 (s, 1 H), 8,52 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,10-7,90 (m, 3 H), 7,68 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,39-7,32 (m, 1 H), 7,247,18 (m, 2 H), 7,06 (s, 1 H), 6,57 (br s, 1 H), 6,12 (s, 1 H), 3,86 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,27 (t, J= 6,4 Hz, 2H); ES-LCMS m/z499,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: terc-Butil 3-[2-[íerc-butoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3iodo-pirazolo[1,5-a] pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1-carboxilato

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 603/704

574/652

[00666] Uma mistura de 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]3-iodo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (900 mg, 1,81 mmol, 1 eq.), ΒοοςΟ (1,58 g, 7,22 mmol, 1,66 mL, 4 eq.) e DMAP (1,10 g, 9,03 mmol, 5 eq.) em 1,4-dioxano (60 mL) foi agitada a 120°C durante 12 horas. TLC (ΡΕ/EtOAc = 3/1, Rf = 0,60) mostrou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,60) para produzir terc-butiI 3-[2-[terc-butoxicarbonil[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-iodo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol1-carboxilato (1 g, 1,41 mmol, 78,2% de produção, 98,7% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,73 (s, 1 H), 8,55 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,98 (br s, 1 H), 7,90 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,42 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,25-7,23 (m, 2 H), 7,19-7,12 (m, 1 H), 6,55 (s, 1 H), 4,24-4,18 (m, 2 H), 3,15-3,06 (m, 2 H), 1,59 (s, 9H), 1,39 (s, 9H); ES-LCMS m/z699,2 [M+H]⁺.

Etapa 4: ferc-Butil 3-[2-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]piri midin-7-i I] -terc-butoxicarbonil-amino]etil]indol-1-carboxilato

Boc

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 604/704

575/652

[00667] Uma mistura de terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(5fluoro-3-piridil)-3-iodo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 carboxilato (200 mg, 282,60 pmol, 1 eq.), tributil(1-etoxivinil)estanano (880 mg, 2,44 mmol, 822,43 pL, 8,62 eq.) e Pd(dppf)CI₂ (206,78 mg, 282,60 pmol, 1 eq.) em tolueno (6 mL) foi borbulhada com N₂ durante 2 minutos e selada. A mistura de reação foi irradiada sob micro-ondas (1 bar) a 100°C durante 2 h. As reações foram realizadas em paralelo 5 vezes. KF (100 mL, 2M) foi adicionado à mistura combinada. A mistura foi agitada a 25°C durante 1 hora e extraída com EtOAc (100 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na₂SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 4/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,40) para produzir terc-butil 3-[2-[[3-acetil-5-(5fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonilamino]etil]indol-1-carboxilato (450 mg, 732,11 pmol, 51,8% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,79 (s, 1 H), 8,66 (s, 1 H), 8,61 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 7,97 (d, J= 6,4 Hz, 1 H), 7,80 (td, J= 2,4, 9,2 Hz, 1 H), 7,42 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,26-7,20 (m, 2 H), 7,17-7,11 (m, 1 H), 6,65 (s, 1 H), 4,30 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,18-3,12 (m, 2 H), 2,84 (s, 3 H), 1,59 (s, 9H), 1,43 (s, 9H); ES-LCMS m/z615,3 [M+H]⁺.

Etapa 5: 1 -[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona

[00668] A uma mistura de terc-butil 3-[2-[[3-acetil-5-(5-fluoro-3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]etil]indol-1 Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 605/704

576/652 carboxilato (450 mg, 732,11 pmol, 1 eq.) em MeOH (50 mL) foi adicionado HCI/H2O (6 M, 150 mL, 1229,33 eq) a 20°C. A mistura foi agitada a 35 °C durante 3 h. A mistura foi basificada com NaOH aquoso (15%) até pH = 8 e concentrada sob pressão reduzida para remover MeOH. O resíduo foi extraído com EtOAc (50 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir 1-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona (300 mg, 723,88 pmol, 98,9% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/e) δ ppm 10,77 (br s, 1 H), 9,11 (s, 1 H), 8,67 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,60 (t, J= 6,0 Hz, 1 H), 8,49 (s, 1 H), 8,18 (d, J= 10,4 Hz, 1 H), 7,61 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,16 (d, J= 1,6 Hz, 1 H), 7,05-6,99 (m, 1 H), 6,98-6,93 (m, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 3,84 (q, J= 6,4 Hz, 2 H), 3,09 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 2,67 (s, 3 H); ES-LCMS m/z415,1 [M+H]⁺. Etapa 6: (1 S)-1-[5-(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanol (l-222b) &. (1/7)-1-(5(5-Fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3-il)etilamino]pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]etanol (l-222a)

[00669] A uma solução de 1-[5-(5-fluoro-3-piridil)-7-[2-(1 H-indol-3il)etilamino]pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]etanona (250 mg, 603,23 pmol, 1 eq.) em THF (50 mL) e EtOH (20 mL) foi adicionado NaBH4 (114,11 mg, 3,02 mmol, 5 eq) parcialmente a 20°C. A mistura foi agitada a 20°C durante 3 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente com água (50 mL) e concentrada sob pressão reduzida a 30°C para remover EtOH e THF. O resíduo foi extraído com EtOAc (80 mL x 3), secado

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 606/704

577/652 sobre Na₂SO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi separado por SFC quiral (coluna: DAICEL CHIRALPAK AD-H (250 mm * 30 mm, 5 um); fase móvel: [0,1% de NHa-FkO/EtOH]; % de B: 40% a 40%). O pico 1 foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir um enantiômero (32,78 mg, 76,81 pmol, 12,7% de produção, 97,6% de pureza) como um sólido branco. (SFC: Rt = 6,825, ee = 98,8%; Rotação óptica: [a]²²’³D =-9,540 (10,04 mg/10 mLem MeOH)). ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,78 (s, 1 H), 8,51 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,07 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,87-7,80 (m, 1 H), 7,68 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,40-7,32 (m, 1 H), 7,26-7,18 (m, 2 H), 7,06 (s, 1 H), 6,56 (br s, 1 H), 6,08 (s, 1 H), 5,34 (d, J= 6,0 Hz, 1 H), 3,89-3,83 (m, 2 H), 3,29-3,24 (m, 3 H), 1,70 (d, J= 6,4 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z417,2 [M+H]⁺. O pico 2 foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 40% a 70%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 0 resíduo que foi separado por SFC quiral (coluna: DAICEL CHIRALPAK AD-H (250 mm * 30 mm, 5 um); fase móvel: [0,1% de NH3-H2O/EtOH]; % de B: 40% a 40%) novamente. A fração desejada foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 42% a 72%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 0 outro enantiômero (30,13 mg, 72,35 pmol, 12,0% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido branco. (SFC: Rt = 7,042, ee = 99,0%; Rotação óptica: [a]²²’²D= 1,916 (6,44 mg/10 mLem MeOH)). ¹H RMN (400 MHz,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 607/704

578/652

CDCI₃) δ ppm 8,77 (s, 1 H), 8,51 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,11 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,83 (td, J= 2,0, 9,6 Hz, 1 H), 7,68 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,36 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,27-7,18 (m, 2 H), 7,06 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 6,58 (t, J= 5,6 Hz, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 5,42-5,26 (m, 1 H), 3,85 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,34-3,22 (m, 3 H), 1,70 (d, J = 6,4 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 417,2 [M+H]⁺.

Exemplo 174

Síntese de I-224

Esquema sintético:

Etapa 1: /V-[2-(7-Fluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-

[00670] A uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (60 mg, 228,42 pmol, 1 eq.) e 2-(7-fluoro-2metil-1 H-indol-3-il)etanamina (79,89 mg, 296,95 pmol, 1,3 eq, HCI) em i-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (88,57 mg, 685,27 pmol, 119,36 pL,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 608/704

579/652 eq.) e purgado com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80 °C durante 16 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela Durashell C18 150 * 25 5 u; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 12 min.) para produzir um produto que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Gemini 150 * 25 5u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir A/-[2-(7-fluoro-2-metil-1 H-i ndol-3-il)etil]-5-(5-f I uoro-3piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (16,79 mg, 40,13 pmol, 17,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,80 (s, 1 H), 8,50 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 8,00 (br s, 1 H), 7,95-7,82 (m, 2 H), 7,32 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,10-7,03 (m, 1 H), 6,89 (dd, J = 8,2, 11,0 Hz, 1 H), 6,49 (br s, 1 H), 6,01 (s, 1 H), 3,78 (q, J = 6,5 Hz, 2 H), 3,21-3,13 (m, 2 H), 2,38 (s, 3 H), 2,29 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 419,2 [M+H]⁺.

Exemplo 175

Síntese de I-225

I-225

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 609/704

580/652

Etapa 1: Metil 7-[2-(7-fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etilamino]-5-(5fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato

[00671] A uma solução de 2-(7-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etanamina (50 mg, 196,77 pmol, 1 eq, HCI) em i-PrOH (5 mL) foram adicionados metil 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (63,52 mg, 196,77 pmol, 1 eq.) e DIEA (76,29 mg, 590,31 pmol, 102,82 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 horas sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida e água (50 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir metil 7-[2-(7fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etilamino]-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carboxilato (90 mg, 173,79 pmol, 88,3% de produção, 89,3% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,51 8,46 (m, 2 H), 8,41 (s, 1 H), 7,72-7,65 (m, 1 H), 7,38 (d, J= 8,0 Hz, 1 H),

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 610/704

581/652

6,98-6,92 (m, 1 Η), 6,69-6,60 (m, 1 Η), 5,85 (s, 1 Η), 3,88 (s, 3 Η), 3,83 (br s, 2 H), 3,16-3,07 (m, 2 H), 2,08 (s, 3 H); ES-LCMS m/z463,2 [M+H]⁺. Etapa 2: Ácido 7-[2-(7-fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etilamino]-5-(5fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico

[00672] A uma solução de metil 7-[2-(7-fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3il)etilamino]-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxilato (90 mg, 173,79 pmol, 1 eq.) em MeOH (5 mL) foi adicionado NaOH (2 M, 4,96 mL, 57,09 eq.). A mistura foi agitada a 50 °C durante 4 horas sob atmosfera de N₂. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água (50 mL), ajustado para pH 3 por solução de HCI a 1 N, extraído com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas para produzir ácido 7-[2-(7-fluoro-2metil-1 /-/-indol-3-il)etilamino]-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina-3-carboxílico (80 mg, 160,56 pmol, 92,4% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,48 (s, 2 H), 8,41 (s, 1 H), 7,68 (d, J= 9,8 Hz, 1 H), 7,38 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 6,95 (dt, J= 4,5, 7,9 Hz, 1 H), 6,68-6,60 (m, 1 H), 5,85 (s, 1 H), 3,893,83 (m, 2 H), 3,15-3,08 (m, 2 H), 2,08 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 449,2 [M+H]⁺.

Etapa 3: [7-[2-(7-Fluoro-2-metil-1H-indol-3-il)etilamino]-5-(5-fluoro3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-3-il]-morfolino-metanona (I-225)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 611/704

582/652

[00673] A uma solução de ácido 7-[2-(7-fluoro-2-metil-1 H-indol-3il)etilamino]-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidina-3-carboxílico (80 mg, 160,56 pmol, 1 eq.) em DCM (10 mL) foram adicionados morfolina (20,98 mg, 240,84 pmol, 21,19 pL, 1,5 eq.), HATU (91,58 mg, 240,84 pmol, 1,5 eq.) e TEA (32,49 mg, 321,12 pmol, 44,70 pL, 2 eq.). A mistura foi agitada a 20°C durante 1 hora sob atmosfera de N₂. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, água (30 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (20 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (30 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 33% a 63%, 10 min.), seguida por liofilização para produzir [7-[2-(7fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etilamino]-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-3-il]-morfolino-metanona (29,09 mg, 56,21 pmol, 35,0% de produção, 100% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,78 (d, J= 2,5 Hz, 1 H), 8,60 (s, 1 H), 8,38 (s, 1 H), 7,79-7,70 (m, 1 H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 6,87 (dt, J= 4,7, 7,8 Hz, 1 H), 6,60 (dd, J= 7,7, 11,4 Hz, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 4,01-3,93 (m, 2 H), 3,76 (s, 8H), 3,20-3,14 (m, 2 H), 2,12 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 518,3 [M+H]⁺.

Exemplo 176

Síntese de I-226

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 612/704

583/652

Esquema sintético:

Díbbpy.

N :C l( t, 2 -dimeto-xjet ano)

THF; íuz ftorescetáe

Etapa 1: terc-Butil 3-[2-[[3-bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]etil]indol-1-carboxilato

[00674] A uma solução de 3-bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 Hindol-3-il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (750 mg, 1,63 mmol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (30 mL) foram adicionados DMAP (596,31 mg, 4,88 mmol, 3 eq.) e (Boc)2O (887,73 mg, 4,07 mmol, 934,45 pL, 2,5 eq.). A mistura foi agitada a 110°C durante 5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,75) para produzir terc-butil 3-[2-[[3

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584/652 bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-íercbutoxicarbonil-amino]etil]indol-1-carboxilato (950 mg, 1,46 mmol, 89,6% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo.

¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,73 (s, 1 H), 8,57 (d, J = 2,8 Hz, 1 H), 8,16 (s, 1 H), 8,00 (d, J = 7,0 Hz, 1 H), 7,91 (td, J= 2,1,9,3 Hz, 1 H), 7,45 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,27-7,21 (m, 2 H), 7,21-7,14 (m, 1 H), 6,57 (s, 1 H), 4,24 (t, J= 6,8 Hz, 2 H), 3,12 (t, J= 6,7 Hz, 2 H), 1,62 (s, 9H), 1,42 (s, 9H); ES-LCMS m/z651,2, 652,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: fôrc-Butil 3-[2-[íerc-butoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3tetra-hidrofuran-2-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1carboxilato

[00675] 4-terc-Butil-2-(4-terc-butil-2-piridil)piridina (24,72 mg, 92,09 pmol, 0,1 eq.) e dicloroníquel;1,2-dimetoxietano (20,23 mg, 92,09 pmol, 0,1 eq) foram adicionados a THF (4 mL). A mistura foi agitada a 50°C sob atmosfera de N₂ até uma solução verde ser obtida. [lr{dFCF₃ppi}₂(bpi)]PF₆ (51,66 mg, 46,05 pmol, 0,05 eq.), K₂HPO₄(320,81 mg, 1,84 mmol, 2 eq.) e uma solução de terc-butil 3-[2-[[3bromo-5-(5-fluoro-3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-tercbutoxicarbonil-amino]etil]indol-1-carboxilato (600 mg, 920,92 pmol, 1 eq.) em THF (20 mL) foram adicionados à mistura acima sob atmosfera de N₂. A mistura resultante foi agitada e irradiada com uma lâmpada de luz de LED 72 W padrão a 25 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,45) para produzir terc-butil 3-[2-[terc

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585/652 butoxicarbonil-[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-tetra-hidrofuran-2-il-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1-carboxilato (190 mg, 274,04 pmol, 29,8% de produção, 92,7% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,83-8,76 (m, 1 H), 8,55 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 8,05 (s, 1 H), 7,90-7,79 (m, 1 H), 7,47 (t, J= 6,9 Hz, 1 H), 7,31 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,19 (t, J= 7,6 Hz, 2 H), 6,59 (s, 1 H), 5,38-5,29 (m, 1 H), 4,214,15 (m, 2 H), 4,10 (m, 1 H), 4,01-3,92 (m, 1 H), 3,11 (t, J=6,9 Hz, 2 H), 2,45-2,35 (m, 1 H), 2,33-2,24 (m, 1 H), 2,23-2,16 (m, 1 H), 2,15-2,07 (m, 1 H), 1,60 (s, 9H), 1,46-1,39 (m, 9H); ES-LCMS m/z643,3 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-tetrahidrofuran-2-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-226)

[00676] A uma solução agitada de terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-tetra-hidrofuran-2-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]etil]indol-1 -carboxilato (70 mg, 100,96 pmol, 1 eq.) em DCM (8 mL) foi adicionado ZnBr2 (2,27 g, 10,10 mmol, 100 eq.). A mistura de reação foi agitada a 25 °C durante 15 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, R_f = 0,35) indicou que uma nova mancha maior foi detectada. MeOH (30 mL) foi adicionado à mistura de reação e diluído com água (50 mL), ajustado pH para 8-9 com solução de NaHCOs saturada, extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,35) para produzir um resíduo que foi novamente purificado por HPLC preparativa (condição básica; coluna: Gemini 150 * 25 5 u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 55% a 75%, 8 min.). A

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586/652 fração desejada foi liofilizada para produzir 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2(1 /-/-indol-3-il)etil]-3-tetra-hidrofuran-2-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7amina (5,91 mg, 12,85 pmol, 12,7% de produção, 96,2% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,80 (s, 1 H), 8,50 (s, 1 H), 8,03 (s, 2 H), 7,85 (d, J= 9,5 Hz, 1 H), 7,69 (d, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,36 (d, J= 7,7 Hz, 1 H), 7,26-7,18 (m, 2 H), 7,05 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 6,54 (s, 1 H), 6,07 (s, 1 H), 5,29 (t, J= 7,3 Hz, 1 H), 4,12 (q, J= 7,3 Hz, 1 H), 3,99-3,90 (m, 1 H), 3,85 (q, J = 6,3 Hz, 2 H), 3,25 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 2,39-2,28 (m, 2 H), 2,24-2,15 (m, 1 H), 2,14-2,04 (m, 1 H); ESLCMS m/z 443,2 [M+H]⁺.

Exemplo 177

Síntese de I-227

Esquema sintético:

Etapa 1:1,3-Benzodioxol-4-il(trimetil)estanano

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587/652

[00677] A uma solução de 4-iodo-1,3-benzodioxol (100 mg, 403,20 pmol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (5 mL) foi adicionado trimetil(trimetilestanil)estanano (132,10 mg, 403,20 pmol, 83,61 pL, 1 eq.) e 4-difenilfosfanilbutil(difenil)fosfano (17,20 mg, 40,32 pmol, 0,1 eq) foi purgado com N2 durante 15 min. Pd(OAc)2 (9,05 mg, 40,32 pmol, 0,1 eq) foi adicionado e a mistura foi agitada a 110 °C durante 3 h. TLC (ΡΕ/EtOAc = 10/1, Rf = 0,44) indicou que uma nova mancha maior com polaridade mais baixa foi detectada. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,44) para produzir 0 produto 1,3-benzodioxol-4-il(trimetil)estanano (80 mg, 252,70 pmol, 62,7% de produção, 90,0% de pureza) como óleo incolor. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 6,88-6,76 (m, 3 H), 5,91 (s, 2 H), 0,42-0,26 (s, 9H).

Etapa 2: fôrc-Butil 3-[2-[[5-(1,3-benzodioxol-4-il)-3-isopropil pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonil-amino]etil]indol-1carboxilato

[00678] A uma solução de 1,3-benzodioxol-4-il(trimetil)estanano (50 mg, 157,94 pmol, 1 eq.) e terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-(5-cloro-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]etil]indol-1 -carboxilato (75,06 mg, 134,25 pmol, 0,85 eq.) em DMF (5 mL) foi purgado com N2 durante 25 min. Pd(dppf)Cl2 (10,98 mg, 15,00 pmol, 0,095 eq.) e Cul (2,86 mg, 15,00 pmol, 0,095 eq) foram adicionados e a mistura foi

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588/652 agitada a 110 °C durante 2 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por TLC preparativa (TLC: PE / EtOAc = 10/1, Rf = 0,46) para produzir o produto terc-butil 3-[2-[[5-(1,3benzodioxol-4-il)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-tercbutoxicarbonil-amino]etil]indol-1-carboxilato (80 mg, 106,42 pmol, 67,4% de produção, 85,1% de pureza) como óleo amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,03 (s, 2 H), 7,99 (s, 1 H), 7,87 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,50 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,39 (br s, 2 H), 7,23-7,14 (m, 1 H), 7,036,96 (m, 1 H), 6,95-6,90 (m, 1 H), 6,09-6,04 (m, 2 H), 4,19 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 3,46-3,37 (m, 1 H), 3,06 (t, J = 6,9 Hz, 2 H), 1,63 (s, 9H), 1,45 (d, J = 6,4 Hz, 6H), 1,36 (s, 9H); ES-LCMS m/z640,4 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-(1,3-Benzodioxol-4-il)-N-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-227)

[00679] Uma solução de terc-butil 3-[2-[[5-(1,3-benzodioxol-4-il)-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-terc-butoxicarbonilamino]etil]indol-1-carboxilato (80 mg, 106,42 pmol, 1 eq.) em HCI/MeOH (4 M, 5 mL, 187,94 eq) foi agitada a 25 °C durante 12 h. LC-MS mostrou que 0 material de partida não foi consumido completamente. A mistura foi agitada a 25 °C durante mais 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 35% a 65%, 9 min.) seguida por liofilização para produzir 5-(1,3-benzodioxol4-il)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 618/704

589/652 (47,73 mg, 100,08 pmol, 94,0% de produção, 99,8% de pureza, HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,16 (s, 1 H), 7,51 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,14 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,05-7,00 (m, 2 H), 6,97-6,92 (m, 2 H), 6,86-6,80 (m, 1 H), 6,53 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 6,07 (s, 2 H), 5,76 (s, 1 H), 3,96 (t, J = 5,8 Hz, 2 H), 3,23-3,18 (m, 3 H), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z440,3 [M+H]⁺.

Exemplo 178

Síntese de I-229

Esquema sintético:

Etapa 1: terc-Butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-(3-isopropil-5pirimidin-5-il-pirazolo [1,5-a]pirimidin-7-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

[00680] terc-Butil (3H)-3-[terc-butoxicarbonil-(5-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]-1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9carboxilato (200 mg, 316,66 pmol, 1 eq.), ácido pirimidin-5-ilborônico

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590/652 (47,08 mg, 379,99 pmol, 1,2 eq.), CS2CO3 (309,52 mg, 949,98 pmol, 3 eq.) e Pd(dppf)Cl2 (23,17 mg, 31,67 pmol, 0,1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (6 mL) e H2O (2 mL). O tubo selado foi aquecido a 110 °C durante 1 hora sob micro-ondas (2 bar). A mistura foi concentrada e em seguida NaHCOs saturado (10 mL) foi adicionado, extraído com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,30) para produzir terc-butil (3F?)-3-[terc-butoxicarbonil-(3isopropil-5-pirimidin-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (180 mg, 288,58 pmol, 91,1% de produção, 100,0% de pureza) como uma goma amarela. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,39 (s, 2 H), 9,22 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,94 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,19 (br s, 1 H), 7,14-7,02 (m, 2 H), 4,79 (m, 1 H), 3,48 (m, 1 H), 3,43-3,36 (m, 2 H), 3,18-3,08 (m, 2 H), 2,36-2,28 (m, 2 H), 1,63 (s, 9H), 1,45 (d, J= 7,1 Hz, 6H), 1,30 (s, 9H); ES-LCMS m/z 624,4 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3/?)-/V-(3-lsopiOpil-5-pirjmjdin-5-il-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-i 1)-2,3,4,9 -tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-229)

[00681] A uma solução de terc-butil (3F?)-3-[terc-butoxicarbonil-(3isopropil-5-pirimidin-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (180 mg, 288,58 pmol, 1 eq.) em DCM (5 mL) foi adicionado TFA (1 mL). A mistura foi desgaseificada e purgada com N₂ por 3 vezes, a mistura foi agitada sob atmosfera de N₂a 20°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão

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591/652 reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 μιτι; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 9 minutos) para produzir o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 μιτι; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 56% a 86%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir (3fí)-A/-(3-isopropil-5-pirimidiη-5-ilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (12 mg, 28,33 pmol, 9,8% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,51 (s, 2 H), 9,21 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,39 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,27 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,07-7,01 (m, 1 H), 6,99-6,93 (m, 1 H), 6,84 (s, 1 H), 4,47 (m, J = 8,6 Hz, 1 H), 3,37-3,34 (m, 2 H), 3,14-3,03 (m, 1 H), 3,00-2,88 (m, 2 H), 2,41 2,33 (m, 1 H), 2,28-2,19 (m, 1 H), 1,42 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 424,2 [M+H]⁺.

Exemplo 179

Síntese de I-230

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[2-(1 H-indol-3-i l)eti l]-3-vini Ipirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-230)

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Λ_λ

[00682] Uma mistura de 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]3-iodo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (55 mg, 109,71 pmol, 1 eq.), 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (50,69 mg, 329,14 pmol, 55,83 pL, 3 eq.), CS2CO3 (178,74 mg, 548,57 pmol, 5 eq.) e Pd(dppf)Cl2 (40,14 mg, 54,86 pmol, 0,5 eq.) em 1,4-dioxano (3 mL) e H2O (1,5 mL) foi borbulhada com N₂ durante 2 minutos e selada. A mistura de reação foi irradiada sob micro-ondas (2 bar) a 120 °C durante 2 h. A mistura de reação foi diluída com H₂O (10 mL) e extraída com EtOAc (10 mL x 3). A camada orgânica foi secada sobre Na₂SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por TLC preparativa (ΡΕ/EtOAc = 2/1, Rf = 0,23) e em seguida por HPLC preparativa (coluna: Gemini 150 * 25 5 u; fase móvel: [água (0,05% de hidróxido de amônia v/v) - ACN]; % de B: 60% a 90%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 5-(5-fIuoro-3-piridil)-A/-[2-( 1 H-indol3-il)etil]-3-vinil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (15,4 mg, 38,65 pmol, 35,2% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,82 (s, 1 H), 8,51 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,06 (s, 2 H), 7,95-7,88 (m, 1 H), 7,69 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,39-7,33 (m, 1 H), 7,27-7,18 (m, 2 H), 7,06 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 6,90 (dd, J= 11,2, 17,6 Hz, 1 H), 6,55 (t, J= 6,4 Hz, 1 H), 6,11 (s, 1 H), 6,07 (dd, J= 1,6, 17,6 Hz, 1 H), 5,27 (dd, J= 2,0, 11,2 Hz, 1 H), 3,85 (q, J= 6,4 Hz, 2 H), 3,27 (t, J= 6,4 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 399,2 [M+H]⁺.

Exemplo 180

Síntese de I-232

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Esquema sintético:

Etapa 1:5-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[(2fí)-5-metóxi-indan-2-il]-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

[00683] A uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 190,35 pmol, 1 eq.), (2fí)-5-metóxiindan-2-amina (38,01 mg, 190,35 pmol, 1 eq, HCI) em i-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (73,80 mg, 571,06 pmol, 99,47 uL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 12 horas. A mistura foi concentrada para produzir um composto 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[(2fí)-5-metóxi-indan-2-il]3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina cru (70 mg, 130,90 pmol, 68,8% de produção, 72,8% de pureza) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação; ES-LCMS m/z 390,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: (2fí)-2-[[5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (I-232)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 623/704

594/652

[00684] Uma mistura de 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[(2H)-5-metóxi-indan2-il]-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (70 mg, 130,90 pmol, 1 eq.) em solução de HBr (7,45 g, 55,25 mmol, 5 mL, 60%, 422,06 eq) foi agitada a 80 °C durante 1 hora. A mistura foi concentrada para produzir um resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 6 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir (2H)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-metil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]amino]indan-5-ol (17,22 mg, 38,27 pmol, 29,2% de produção, 99,6% de pureza, 2HCI, ee = 98,2%) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,98 (s, 1 H), 8,80 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,29 (td, J = 2,4, 9,2 Hz, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,06 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 6,69 (s, 1 H), 6,63 (dd, J = 2,4, 8,0 Hz, 1 H), 5,07-4,96 (m, 1 H), 3,473,39 (m, 2 H), 3,23-3,15 (m, 2 H), 2,36 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 376,1 [M+H]⁺.

Exemplo 181

Síntese de 1-234

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 624/704

595/652

Etapa 1: 5-(5-Fluoro-3-piridil)-3-isopropil-/V-[(2R)-5-metóxi-indan-2il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina

[00685] A uma mistura de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidina (50 mg, 154,79 pmol, 1 eq.), (2F?)-5-metóxiindan-2-amina (27,79 mg, 170,27 pmol, 1,1 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (60,01 mg, 464,36 pmol, 80,88 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura foi concentrada para produzir o produto de 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-[(2F?)-5-metóxiindan-2-il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (60 mg, 102,65 pmol, 66,3% de produção, 71,4% de pureza) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ES-LCMS m/z 418,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: (2/7)-2-[[5-(5-Fluoro-3-pirÍdil)-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (I—234)

[00686] Uma mistura de 5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropil-A/-[(2F?)-5metóxi-indan-2-il]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (60 mg, 102,04 pmol,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 625/704

596/652 eq.) em solução de HBr (5,29 g, 39,22 mmol, 3,55 mL, 60%, 384,39 eq) foi agitada a 120°C durante 2 h. A mistura foi concentrada para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 45% a 75%, 9 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir (2R)-2-[[5-(5-fluoro-3-piridil)-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]indan-5-ol (13,92 mg, 31,34 pmol, 30,7% de produção, 99,0% de pureza, HCI) (97,1% ee) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,98 (s, 1 H), 8,80 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 8,32-8,29 (m, 1 H), 8,21 (s, 1 H), 7,05 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 6,92 (s, 1 H), 6,62 (dd, J= 2,4, 8,4 Hz, 1 H), 6,61 (m, 1 H), 5,02-4,93 (m, 1 H), 3,49-3,40 (m, 2 H), 3,37-3,31 (m, 1 H), 3,21-3,09 (m, 2 H), 1,36 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z404,3 [M+H]⁺.

Exemplo 182

Síntese de I-235

Etapa 1: /V-[2-(7-Fluoro-2-metil-1 H-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3piridil)-3-(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-235)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 626/704

597/652

[00687] A uma solução de 7-cloro-5-(5-fluoro-3-piridil)-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidina (30 mg, 87,92 pmol, 1 eq.) e 2-(7fluoro-2-metil-1/-/-indol-3-il)etanamina (24,15 mg, 105,51 pmol, 1,2 eq.) em /-PrOH (5 mL) foi adicionado DIEA (34,09 mg, 263,77 pmol, 45,94 pL, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 80°C durante 9 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir Λ/-[2-(7fluoro-2-metil-1 /-/-indol-3-il)etil]-5-(5-fluoro-3-piridil)-3(trifluorometil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (10,90 mg, 19,97 pmol, 22,7% de produção, 99,9% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 8,86 (dd, J = 1,3, 2,5 Hz, 1 H), 8,74 (d, J = 1,5 Hz, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 7,94 (td, J = 2,3, 8,7 Hz, 1 H), 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 6,98 (dt, J = 4,8, 7,9 Hz, 1 H), 6,67 (dd, J = 7,9, 11,4 Hz, 1 H), 5,92 (s, 1 H), 3,98-3,91 (m, 2 H), 3,21-3,14 (m, 2 H), 2,13-2,05 (m, 3 H); ES-LCMS m/z473,2 [M+H]⁺.

Exemplo 183

Síntese de I-237

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 627/704

598/652

Etapa 1: 3-Eti l-5-(5-f luoro-3-piridi Ι)-ΛΛ[2-(1 H-indol-3il)etiI]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-237)

[00688] Uma mistura de 5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]3-vinil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (140 mg, 196,77 pmol, 1 eq.) e Pd/C (50 mg, 10% de pureza) em EtOAc (20 mL) foi agitada sob H2 (1,05 kg/cm² (15 psi)) a 25 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 35% a 65%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 3-etil-5-(5-fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3il)etil]pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (7,13 mg, 15,06 pmol, 7,7% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,65 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 8,37 (s, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,53 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,50-7,46 (m, 1 H), 7,14 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 6,99 (s, 1 H), 6,96 (t, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,87-6,82 (m, 1 H), 5,78 (s, 1 H), 3,98 (t, J = 5,6 Hz, 2 H), 3,20 (t, J = 5,6 Hz, 2 H), 2,72 (q, J = 7,6 Hz, 2 H), 1,28 (t, J= 7,6 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z401,2 [M+H]⁺.

Exemplo 184

Síntese de I-240

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 628/704

599/652

Esquema sintético:

Etapa 1: terc-Butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[3-isopropil-5-(2metoxifenil)pirazolo

[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]eti l]indol-1 carboxilato

[00689] A uma solução de terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-(5-cloro3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]etil]indol-1-carboxilato (100 mg, 178,86 pmol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (6 mL) e água (2 mL) foram adicionados ácido (2-metoxifenil)borônico (81,53 mg, 536,57 pmol, 3 eq.), K3PO4 (113,89 mg, 536,57 pmol, 3 eq.) e sphos paladaciclo (13,61 mg, 17,89 pmol, 0,1 eq.). A mistura foi agitada a 110 °C durante 1 hora sob atmosfera de N₂. A mistura foi concentrada sob pressão reduzida, em seguida água (30 mL) foi adicionada. A mistura foi extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas para produzir terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[3-isopropil-5-(2

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 629/704

600/652 metoxifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 -carboxilato (200 mg, 164,28 pmol, 91,8% de produção, 51,4% de pureza) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,96 (s, 1 H), 7,92-7,87 (m, 1 H), 7,73 (dd, J = 1,7, 7,6 Hz, 1 H), 7,65-7,60 (m, 1 H), 7,47 (dd, J= 1,4, 8,7 Hz, 1 H), 7,19-7,13 (m, 2 H), 7,07 (s, 1 H), 6,97-6,94 (m, 1 H), 6,94-6,91 (m, 2 H), 4,1 (m, 2 H), 3,81 (s, 3 H), 3,36 (s, 1 H), 3,06 (t, J= 6,4 Hz, 2 H), 1,611,55 (m, 9H), 1,48-1,45 (m, 6H), 1,37-1,35 (m, 9H); ES-LCMS m/z626,4 [M+H]⁺.

Etapa 2: N-[2-(1 H-lndol-3-i l)eti l]-3-isopropi 1-5-(2metoxifenil)pirazolo [1,5-a] pirimidin-7-amina (l-240_

[00690] A uma solução de terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[3isopropil-5-(2-metoxifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 carboxilato (185 mg, 151,96 pmol, 1 eq.) em DCM (10 mL) foi adicionado TFA (3,08 g, 27,01 mmol, 2 mL, 177,76 eq.). A mistura foi agitada a 25 °C durante 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 23% a 53%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir Λ/-[2-(1 H-indol-3il)etil]-3-isopropil-5-(2-metoxifenil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (27,57 mg, 63,69 pmol, 41,9% de produção, 98,3% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,11 (s, 1 H), 7,577,47 (m, 2 H), 7,25 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,13 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,066,95 (m, 3 H), 6,84 (t, J= 7,5 Hz, 2 H), 5,79 (s, 1 H), 3,93 (t, J= 6,1 Hz, 2 H), 3,83 (s, 3 H), 3,21 (t, J = 6,1 Hz, 2 H), 3,19-3,12 (m, 1 H), 1,33 (d,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 630/704

601/652

J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z426,2 [M+H]⁺.

Exemplo 185

Síntese de 1-241

Esquema sintético:

Etapa 1: terc-Butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-(3-isopropil-5-pirimidin5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]etil]indol-1 -carboxilato

[00691 ] terc-Buti I 3-[2-[terc-butoxicarbonil-(5-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pi ri m idi η-7-i I )ami no]eti l]i ndol-1 -carboxilato (100 mg, 178,86 pmol, 1 eq.), ácido pirimidin-5-ilborônico (22,16 mg, 178,86 pmol, 1 eq.), Pd(dppf)CI₂ (13,09 mg, 17,89 pmol, 0,1 eq.) e Cs₂CO₃ (174,82 mg, 536,57 pmol, 3 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em H₂O (2 mL) e 1,4-dioxano (6 mL). O tubo selado foi aquecido a 110°C durante 1 hora sob irradiação de micro-ondas. A mistura foi concentrada e NaHCOs saturado (10 mL) foi adicionado, extraído com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas para produzir terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 631/704

602/652 (3-isopropil-5-pirimidin-5-il-pirazolo[1,5-<a]pirimidin-7-il)amino]etil]indol1-carboxilato (100 mg, 167,31 pmol, 93,5% de produção, cru) como sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 9,23-9,22 (m, 1 H), 9,21-9,20 (m, 1 H), 8,97 (s, 1 H), 7,81 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,45 (d, J = 7,6 Hz, 2 H), 7,41 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,09-7,02 (m, 2 H), 6,93 (t, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,33 (d, J = 6,4 Hz, 2 H), 4,30 (s, 1 H), 3,11 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 1,59 (s,9H), 1,39 (s, 6H), 1,37 (s, 9H); ES-LCMS m/z598,4 [M+H]⁺.

Etapa 2: Λ/-[2-(1 /-/-lndol-3-il)etil]-3-isopropil-5-pirimidin-5-ilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (1-241)

[00692] A uma solução de terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-(3isopropil-5-pirimidin-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]etil]indol-1carboxilato (100 mg, 167,31 pmol, 1 eq.) em DCM (7,5 mL) foi adicionado TFA (1,5 mL). A mistura foi desgaseificada e purgada com N₂ durante 3 vezes e agitada sob atmosfera de N₂ a 20°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; %de B: 35% a 65%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir Λ/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-5pirimidin-5-il-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (17,94 mg, 34,12 pmol, 20,4% de produção, 96,4% de pureza, 3HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,31 (s, 1 H), 8,68 (s, 2 H), 8,18 (s, 1 H), 7,50 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,16 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,03 (s, 1 H), 6,99-6,92 (m, 1 H), 6,83-6,77 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 4,04-3,97 (m, 2 H), 3,25-3,16 (m, 3 H), 1,35 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z398,1 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 632/704

603/652

Exemplo 186

Síntese de 1-242

Esquema sintético:

Etapa 1: terc-Butil /V-(2-bromo-4,6-difluoro-fenil)carbamato

[00693] terc-Butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-(5-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pi ri m idi η-7-i I )ami no]eti l]i ndol-1 -carboxi lato (100 mg, 178,86 pmol, 1 eq.), ácido (3-fluorofenil)borônico (75,08 mg, 536,57 pmol, 3 eq.), Pd(dppf)Cl2 (13,09 mg, 17,89 pmol, 0,1 eq.), CS2CO3 (174,82 mg, 536,57 pmol, 3 eq.) e H2O (2 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (6 mL). O tubo selado foi aquecido a 110°C durante 1 hora sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi diluído com NaHCOs aq. (20 mL) e extraído com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir terc-butil 3[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(3-fluorofenil)-3-isopropil-pirazolo[1,5

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 633/704

604/652

a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 -carboxilato (100 mg, 97,77 pmol, 54,7% de produção, 60,0% de pureza) como um sólido marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,98 (s, 1 H), 7,94 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,59 (d, J= 1,2 Hz, 1 H), 7,56 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,48 (d, J = 3,6 Hz, 1 H), 7,46 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,26 (s, 1 H), 7,19-7,15 (m, 1 H), 6,65-6,57 (m, 1 H), 4,24-4,21 (m, 2 H), 3,58-3,44 (m, 1 H), 3,11 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 1,56 (s, 9H), 1,50-1,45 (m, 6H), 1,37 (s, 9H); ES-LCMS m/z 614,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: 5-(3-Fluorofenil)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropiIpirazolo[1,5-a] pirimidin-7-amina (I-242)

[00694] Uma solução de terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-[5-(3fluorofenil)-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]amino]etil]indol-1 carboxilato (80 mg, 78,21 pmol, 1 eq.) em HCI/MeOH (4 M, 3 mL, 153,43 eq) foi agitada a 25 °C durante 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini C18 250 * 50 mm * 10 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 35% a 65%, 10 min.) seguida por liofilização para produzir 5-(3-fIuorofeniΙ)-Λ/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina (38,32 mg, 76,97 pmol, 98,4% de produção, 97,7% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,16 (s, 1 H), 7,55-7,46 (m, 2 H), 7,31-7,36 (m, 1 H), 7,20 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,10 (d, J= 8,8 Hz, 1 H), 7,06-6,92 (m, 3 H), 6,85 (t, J= 7,6 Hz, 1 H), 5,74 (s, 1 H), 4,08-3,92 (m, 2 H), 3,29-3,24 (m, 1 H), 3,24-3,19 (m, 2 H), 1,34 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z414,2 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 634/704

605/652

Exemplo 187

Síntese de 1-245

Esquema sintético:

Etapa 1: 3-lsopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol

[00695] Uma mistura de metil 3-oxo-3-(3-piridil)propanoato (440 mg, 2,46 mmol, 1 eq.) e 4-isopropil-1 H-pirazol-5-amina (307,39 mg, 2,46 mmol, 1 eq.) em AcOH (20 mL) foi agitada a 120°C durante 0,5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-ol (600 mg, 1,60 mmol, 65,3% de produção, cru, 2HOAC) como um óleo marrom que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,19-9,17 (m, 1 H), 8,83-8,78 (m, 1 H), 8,27 (td, J= 1,9, 8,0 Hz, 1 H), 7,50-7,42 (m, 2 H), 7,14 (s, 1 H), 2,84-2,75 (m, 1 H), 1,22 (d, J = 2,0

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Hz, 6H); ES-LCMS m/z255,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 7-Cloro-3-isopropil-5-(3-pirjdil)pirazolo[1,5-a]pirjmjdina

[00696] Uma solução de 3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidin-7-ol (600 mg, 1,60 mmol, 1 eq, 2HOAC) em POCI3 (15 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 110°C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que ajustou-se para pH 7-8 com TEA. O resíduo foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,35) para produzir 7-cloro-3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5-a]pi ri midi na (100 mg, 322,66 pmol, 20,1% de produção, 88,0% de pureza) como um sólido verde.¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,33 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 8,74 (dd, J= 1,5, 4,9 Hz, 1 H), 8,46 (td, J = 2,0, 7,9 Hz, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,50 (dd, J = 4,7, 8,0 Hz, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 3,42 (td, J = 6,9, 13,8 Hz, 1 H), 1,46 (d, J = 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z273,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: (3fí)-/V-[3-lsopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-245)

[00697] Uma mistura de 7-cloro-3-isopropil-5-(3-piridil)pirazolo[1,5a]pirimidina (60 mg, 193,60 pmol, 1 eq.), (3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina (36,06 mg, 193,60 pmol, 1 eq.) e DIEA (75,06 mg, 580,79 pmol, 101,16 pL, 3 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi desgaseificada e purgada com N2 durante 3 vezes. A mistura foi agitada a 80 °C durante

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607/652 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 42% a 70%, 7 min.) seguida por liofilização para produzir (3R)-A/-[3-isopropil-5-(3piridil)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (40,65 mg, 76,42 pmol, 39,5% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI) como um sólido vermelho. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,52 (s, 1 H), 9,17 (J = 8,2 Hz, 1 H), 8,97 (J = 5,3 Hz, 1 H), 8,21-8,15 (m, 2 H), 7,34 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,10 (s, 1 H), 7,00 (t, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,95-6,88 (m, 1 H), 4,62 (br s, 1 H), 3,41 (td, J = 7,0, 13,8 Hz, 1 H), 3,27 (J = 4,9 Hz, 1 H), 3,13 (J = 9,7 Hz, 1 H), 3,01 - 2,91 (m, 2 H), 2,42-2,22 (m, 2 H), 1,42 (dd, J = 3,1, 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 423,2 [M+H]⁺.

Exemplo 188

Síntese de I-246

Esquema sintético:

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Etapa 1: 3-lsopropil-4H-pirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diona

[00698] Na (367,33 mg, 15,98 mmol, 2 eq) foi adicionado ao EtOH (25 mL) e a mistura foi agitada a 24°C durante 2 h. 4-lsopropil-1 Hpirazol-5-amina (1 g, 7,99 mmol, 1 eq.) e dietil propanodioato (1,41 g, 8,79 mmol, 1,33 mL, 1,1 eq) foram adicionados à mistura de reação acima e agitados a 80°C durante 5 h. A solução foi resfriada para temperatura ambiente e filtrada. O sólido obtido foi lavado com EtOH e dissolvido em água (20 mL). Em seguida, a solução foi acidificada para pH = 1 - 2 com ácido hidroclórico concentrado em um banho de gelo. O precipitado foi filtrado, lavado com água e secado sob pressão reduzida para produzir 3-isopropil-4H-pirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diona (300 mg, 1,55 mmol, 19,4% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,80-7,73 (m, 2 H), 3,02 (td, J = 6,7, 13,7 Hz, 1 H), 1,28 (d, J=7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 194,2 [M+H]⁺.

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Etapa 2: 5,7-DÍcloro-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina

[00699] 3-lsopropil-4H-pirazolo[1,5-a]pirimidina-5,7-diona (285 mg, 1,48 mmol, 1 eq) foi adicionado ao POCI3 (20 mL). A mistura de reação foi agitada a 110°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 5/1, TLC: PE / EtOAc = 10/1, Rf = 0,30) para produzir 5,7-dicloro-3isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidina (300 mg, 1,30 mmol, 88,4% de produção, 100,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,10 (s, 1 H), 6,94-6,90 (m, 1 H), 3,37-3,26 (m, 1 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z230,1,232,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 5-Cloro-/V-[2-(1 H-jndol-3-il)etil]-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidin-7-amina

[00700] A uma solução de 5,7-dicloro-3-isopropil-pirazolo[1,5a]pirimidina (200 mg, 869,21 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (6 mL) foram adicionados DIEA (337,02 mg, 2,61 mmol, 454,20 pL, 3 eq.) e 2-(1/-/indol-3-il)etanamina (167,11 mg, 1,04 mmol, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 90°C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC : PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,60) para produzir 5-cloro-A/-[2-(1/-/-indol-3il)etil]-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (240 mg, 672,83 pmol, 77,4% de produção, 99,2% de pureza) como sólido amarelo. ¹H

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RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,11 (s, 1 H), 7,81 (s, 1 H), 7,62 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,41 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 7,27-7,22 (m, 1 H), 7,20-7,13 (m, 1 H), 7,11 (d, J= 2,3 Hz, 1 H), 6,45 (s, 1 H), 5,88 (s, 1 H), 3,71 (q, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,33-3,18 (m, 3 H), 1,33 (d, J=7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 354,1,355,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: fôrc-Butil 3-[2-[íerc-butoxicarbonil-(5-cloro-3-isopropilpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]etil]indol-1 -carboxilato

[00701 ] A uma solução de 5-cloro-A/-[2-(1 H-\ndol-3-iI)etil]-3-isopropiIpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (120 mg, 336,42 pmol, 1 eq.) em 1,4dioxano (6 mL) foram adicionados DMAP (123,30 mg, 1,01 mmol, 3 eq.) e (Boc)₂O (183,56 mg, 841,04 pmol, 193,22 pL, 2,5 eq.). A mistura foi agitada a 110°C durante 5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,75) para produzir terc-butil 3-[2-[tercbutoxicarbonil-(5-cloro-3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7il)amino]etil]indol-1-carboxilato (150 mg, 262,33 pmol, 77,9% de produção, 96,9% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,09 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,43 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,35 (s, 1 H), 7,32-7,27 (m, 1 H), 7,20-7,13 (m, 1 H), 6,39 (s, 1 H), 4,21-4,15 (m, 2 H), 3,28 (td, J= 7,0, 13,9 Hz, 1 H), 3,06 (t, J = 7,4 Hz, 2 H), 1,67 (s, 9H), 1,41 (s, 9H), 1,36 (d, J= 7,1 Hz, 6H); ESLCMS m/z 554,3, 556,3 [M+H]⁺.

Etapa 5: 5-(1,3-Benzodioxol-5-il)-/V-[2-(1 H-indol-3-il)etil]-3-isopropiIpirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (I-246)

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[00702] A uma solução de terc-butil 3-[2-[terc-butoxicarbonil-(5-cloro3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)amino]etil]indol-1 -carboxilato (100 mg, 174,88 pmol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (6 mL) e água (2 mL) foram adicionados K3PO4 (111,37 mg, 524,65 pmol, 3 eq.), sphos paladaciclo (13,30 mg, 17,49 pmol, 0,1 eq.) e ácido 1,3-benzodioxol-5-ilborônico (87,06 mg, 524,65 pmol, 3 eq.). A mistura foi desgaseificada e purgada com N2 três vezes e agitada a 110°C durante 1 hora sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com EtOAc (50 mL) e filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi dissolvido em DCM (1 mL) e HCI/EtOAc (1 mL, 4 M) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a 25°C durante 14 h. A mistura de reação foi diluída com água (50 mL) e ajustado para pH = 2 por solução de NaOH aquosa a 10%. A mistura foi extraída com EtOAc (50 mL x 3), secada sobre Na2SO4 anidroso, filtrada e 0 filtrado foi concentrado para fornecer 0 resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Phenomenex Gemini 150 * 25 mm * 10 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 30% a 60%, 10 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 5-(1,3-benzodioxol-5-il)-A/-[2-(1/-/-indol-3-il)etil]3-isopropil-pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-amina (22,10 mg, 43,13 pmol, 25,1% de produção, 100,0% de pureza, 2 HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,09 (s, 1 H), 7,56 (d, J= 7,9 Hz, 1 H), 7,22 (d, J= 8,2 Hz, 1 H), 7,08-7,02 (m, 2 H), 6,92-6,86 (m, 2 H), 6,80 (d, J= 1,8 Hz, 1 H), 6,73 (dd, J= 1,9, 8,3 Hz, 1 H), 6,08 (s, 2 H), 5,70 (s, 1 H), 3,99-3,93 (m, 2 H), 3,28-3,18 (m, 3 H), 1,33 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 440,2 [M+H]⁺.

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612/652

Exemplo 189

Síntese de l-249a, l-249b e l-249c

l-249a l-249b l-249c

Esquema sintético:

Etapa 1:1 -(1,4-Dioxaespiro[4,5]dec-7-en-8-il)pirrolidina OOO

[00703] A uma mistura de 1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ona (18 g, 115,25 mmol, 1 eq.), TsOH (198,47 mg, 1,15 mmol, 0,01 eq.) em tolueno (200 mL) foi adicionada pirrolidina (12,30 g, 172,88 mmol, 14,43 mL, 1,5 eq) sob atmosfera de N2. A mistura foi agitada a 110°C durante 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi concentrada para produzir 1-(1,4-dioxaespiro[4,5]dec-7-en-8-il)pirrolidina (24 g, 103,21 mmol, 89,6% de produção, 90% de pureza) como um óleo marrom. ¹H RMN

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613/652 (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 4,17 (t, J = 3,7 Hz, 1 H), 4,11 (s, 2 H), 4,074,05 (m, 2 H), 3,12 (t, J= 6,5 Hz, 2 H), 2,97 (t, J= 6,2 Hz, 2 H), 2,59 (t, J= 7,1 Hz, 2 H), 2,54-2,49 (m, 1 H), 2,45-2,43 (m, 1 H), 2,09 (t, J= 7,1 Hz, 2 H), 1,94-1,90 (m, 2 H), 1,87-1,73 (m, 2H).

Etapa 2: 7-Fenacil-1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ona o

[00704] Uma solução de 1-(1,4-dioxaespiro[4,5]dec-7-en-8iI)pirrolidina (24 g, 103,21 mmol, 1 eq.) em tolueno (200 mL) foi aquecido ao refluxo sob atmosfera de N₂ e 2-bromo-1-fenil-etanona (20,54 g, 103,21 mmol, 1 eq.) em tolueno (60 mL) foi adicionada lentamente. A mistura foi agitada a 110°C durante 2 horas sob atmosfera de N₂. Em seguida, H₂O (60 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada a 110 °C durante mais 2 horas sob atmosfera de N₂. A mistura foi concentrada e água (50 mL) foi adicionada, extraída com EtOAc (100 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,4) para produzir 7-fenacil-1,4dioxaespiro[4,5]decan-8-ona (13 g, 42,65 mmol, 41,3% de produção, 90% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,01-7,93 (m, 2 H), 7,59-7,53 (m, 1 H), 7,49-7,43 (m, 2 H), 4,174,06 (m, 2 H), 4,05-3,96 (m, 2 H), 3,64-3,45 (m, 2 H), 2,85-2,68 (m, 2 H), 2,48-2,39 (m, 1 H), 2,25-2,14 (m, 1 H), 2,13-2,02 (m, 2 H), 1,89-1,77 (m, 1 H); ES-LCMS m/z275,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2'-Fenilespiro[1,3-dioxolano-2,5'-1,4,6,7-tetra-hidroindol]

[00705] Uma mistura de 7-fenacil-1,4-dioxaespiro[4,5]decan-8-ona

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614/652 (5 g, 16,40 mmol, 1 eq.) e (NH₄)₂CO₃ (5,00 g, 52,04 mmol, 5,56 mL, 3,17 eq.) em tubo selado foi agitada a 110 °C durante 2 horas sob atmosfera de N2. À mistura foi adicionada água (50 mL), extraída com EtOAc (100 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (40 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas para produzir 2'fenilespiro[1,3-dioxolano-2,5'-1,4,6,7-tetra-hidroindol] (4 g, 14,10 mmol, 86,0% de produção, 90% de pureza) como um sólido marom. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,07-7,86 (m, 1 H), 7,40 (d, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,36-7,29 (m, 2 H), 7,20-7,10 (m, 1 H), 6,25 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 4,083,99 (m, 4H), 2,84 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 2,80 (s, 2 H), 2,02 (t, J= 6,5 Hz, 2H); ES-LCMS m/z256,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 2-Fenil-1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona

[00706] A uma solução de 2'-fenilespiro[1,3-dioxolano-2,5'-1,4,6,7tetra-hidroindol] (3,9 g, 13,75 mmol, 1 eq.) em acetona (30 mL) foi adicionado HCI (1 M, 13,75 mL, 1 eq.), a mistura foi agitada a 50°C durante 3 h. A mistura foi concentrada e ajustado pH para 7 com solução de NaHCOs saturada, extraída com EtOAc (80 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rt = 0,3) para produzir 2-fenil-1,4,6,7-tetrahidroindol-5-ona (0,7 g, 2,32 mmol, 16,9% de produção, 70,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,15 (s, 1 H), 7,44 (d, J = 7,6 Hz, 2 H), 7,36 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 7,237,17 (m, 1 H), 6,29 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 3,45 (s, 2 H), 3,09-3,03 (m, 2 H), 2,74 (t, J=6,8 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 212,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: Óxima de 2-fenil-1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona

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615/652

[00707] A uma solução de 2-feniI-1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona (600 mg, 1,99 mmol, 1 eq.) em THF (15 mL) foram adicionados NaOAc (244,64 mg, 2,98 mmol, 1,5 eq.) e NH2OH HCI (165,78 mg, 2,39 mmol, 1,2 eq.). A mistura foi agitada a 60 °C durante 3 h. A mistura foi filtrada. O filtrado foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc =1 /1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, Rf = 0,4) para produzir óxima de 2-fenil1,4,6,7-tetra-hidroindol-5-ona (350 mg, 1,24 mmol, 62,2% de produção, 80% de pureza) como um sólido vermelho. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,02 (s, 1 H), 7,47-7,41 (m, 2 H), 7,38-7,33 (m, 2 H), 7,21-7,16 (m, 1 H), 6,32 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 3,66 (s, 2 H), 2,89-2,81 (m, 2 H), 2,71 - 2,63 (m, 1 H); ES-LCMS m/z227,1 [M+H]⁺.

Etapa 6: 2-Fenil-4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indol-5-amina

[00708] A uma solução de óxima de 2-feniI-1,4,6,7-tetra-hidroindol-5ona (350 mg, 1,24 mmol, 1 eq) em MeOH (6 mL) foi adicionado níquel Raney (200 mg, 2,33 mmol, 1,89 eq) sob atmosfera de N₂. A mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora sob atmosfera de H₂ (1,05 kg/cm² (15 psi)). A mistura foi filtrada. O filtrado foi concentrado para produzir 2fenil-4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indol-5-amina (250 mg, 942,11 pmol, 76,1% de produção, 80% de pureza) obtido como um sólido marrom-preto. ¹H RMN (500 MHz, CD3OD) δ ppm 7,50-7,46 (m, 2 H), 7,26 (t, J= 7,9 Hz, 2 H), 7,09-7,03 (m, 1 H), 6,18 (s, 1 H), 3,12-3,04 (m, 1 H), 2,86-2,63 (m, 3 H), 2,30 (dd, J= 8,9, 14,8 Hz, 1 H), 2,05-1,97 (m, 1 H), 1,73-1,64 (m, 1 H); ES-LCMS m/z213,2 [M+H]⁺.

Etapa 7: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-/V-[(5fí)-2-fenil-4,5,6,7Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 645/704

616/652 tetra-hidro-1 H-indol-5-il]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazjn-4-amjna (I249b) e 2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-/V-[(5S)-2-fenil-4,5,6,7tetra-hidro-1 H-indol-5-il]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazjn-4-amjna (I249a)

[00709] A uma solução de 2-fenil-4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indol-5amina (207,84 mg, 783,24 umol, 1,2 eq.) e DIEA (253,07 mg, 1,96 mmol, 341,07 μΙ_, 3 eq.) em /-PrOH (15 mL) foi adicionado 4-cloro-2-(5-fluoro3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (200 mg, 652,70 pmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 50°C durante 2 h. A mistura foi concentrada. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 2/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, R_f= 0,5) para produzir o resíduo que foi separado por SFC (coluna: DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 mm * 30 mm, 5 pm); fase móvel: [0,1% de NH3H2O EtOH]; % de B: 40% a 40%, min.) para produzir pico 1 e pico 2. O pico 1 foi concentrado e purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 75% a 100%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir um enantiômero (18,68 mg, 31,16 pmol, 4,8% de produção, 96,249% de pureza, 3 HCI. SFC: Rt = 5,229 min, ee = 95,522%, [a]²⁶’⁵D = +24,339, (CHCI3, c = 0,1015 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 10,89 (s, 1 H), 9,38 (s, 1 H), 8,89 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,70 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,43 (td, J= 2,2, 9,8 Hz, 1 H), 8,18-8,07 (m, 1 H), 7,55 (d, J= 7,6 Hz, 2 H), 7,30 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 7,14-7,03 (m, 1 H), 6,27 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 4,77-4,60 (m, 1 H), 3,263,15 (m, 1 H), 2,93-2,71 (m, 4H), 2,17-2,00 (m, 2 H), 1,36 (d, J= 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z468,3 [M+H]⁺. O pico 2 foi concentrado para produzir

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 646/704

617/652 um resíduo que foi dissolvido em MeCN (20 mL), solução de HCI a 1 M (1,2 mL) e H2O (40 mL), seguido por liofilização para produzir 0 outro enantiômero (23,41 mg, 40,58 pmol, 6,2% de produção, 100% de pureza, 3 HCI. SFC: Rt = 6,074 min, ee = 100%, [a]²⁶’⁵ _D = -26,002, (CHCI3, c = 0,1002 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 10,90 (br s, 1 H), 9,38 (s, 1 H), 8,89 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 8,70 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,43 (d, J= 9,8 Hz, 1 H), 8,23-8,04 (m, 1 H), 7,55 (d, J= 7,6 Hz, 2 H), 7,30 (t, J= 7,8 Hz, 2 H), 7,17-7,03 (m, 1 H), 6,27 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 4,68 (d, J= 5,1 Hz, 1 H), 3,27-3,13 (m, 1 H), 2,92-2,66 (m, 4H), 2,19-2,00 (m, 2 H), 1,36 (d, J= 6,8 Hz, 6H);

ES-LCMS m/z 468,3 [M+H]⁺.

Exemplo 190

Síntese de l-252a, l-252b e l-252c

Etapa 1: 2-Cloro-A/-(4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indol-5-il)pirido[3,2

d]pirimidin-4-amina

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 647/704

618/652

[00710] Uma mistura de 2,4-dicloropirido[3,2-d]pirimidina (150 mg, 749,91 pmol, 1 eq.), 4,5,6,7-tetra-hidro-1 /-/-indol-5-amina (113,48 mg, 749,91 pmol, 1 eq.) e DIEA (387,68 mg, 3,00 mmol, 522,48 pL, 4 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi agitada a 55°C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada para produzir o resíduo que foi purificado em cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 3/1 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,50) para produzir 2-cloro-A/-(4,5,6,7-tetra-hidro1/-/-indol-5-il)pirido[3,2-d]pirimidin-4-amina (120 mg, 397,52 pmol, 53,0% de produção, 99,3% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,64 (dd, J= 1,5, 4,3 Hz, 1 H), 8,01 (dd, J= 1,5, 8,5 Hz, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 7,64 (dd, J= 4,3, 8,3 Hz, 1 H), 7,44 (d, J= 8,5 Hz, 1 H), 6,70 (t, J = 2,6 Hz, 1 H), 6,04 (t, J = 2,6 Hz, 1 H), 4,80-4,70 (m, 1 H), 3,10 (dd, J= 5,3, 15,3 Hz, 1 H), 2,99-2,45 (m, 3 H), 2,24-2,08 (m, 2H); ES-LCMS m/z300,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-/V-[(5fí)-4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indol-5il]pirido[3,2-d]pirimidin-4-amina (l-252b) e 2-(5-fluoro-3-piridil)-AA[(5S)-4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indol-5-il]pirido[3,2-d]pirimidin-4-amina (l-252a)

[00711] 2-Cloro-A/-(4,5,6,7-tetra-hidro-1 H-indol-5-il)pirido[3,2d]pirimidin-4-amina (120 mg, 397,52 pmol, 1 eq.), ácido (5-fluoro-3piridil)borônico (168,04 mg, 1,19 mmol, 3 eq.), Pd(dppf)Cl2 (29,09 mg, 39,75 pmol, 0,1 eq.) e CS2CO3 (518,08 mg, 1,59 mmol, 4 eq.) em 1,4dioxano (3 mL) e H2O (1 mL) foram capturados em um tubo de microPetição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 648/704

619/652 ondas e purgados com atmosfera de N₂ durante 1 min. O tubo selado foi aquecido a 110 °C durante 1 hora sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE puro a PE / EtOAc = 1/1, TLC: PE / EtOAc = 2/1, Rf = 0,40) para produzir um resíduo que foi separado por SFC quiral (coluna: DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 mm * 30 mm, 5 pm); fase móvel: [0,1% de NH3H₂O EtOH]; % de B: 40% a 40%) para produzir um enantiômero (19,36 mg, 52,04 pmol, 13,1% de produção, 96,9% de pureza, SFC: Rt = 4,040, ee = 100%, Rotação óptica: [a]^{23 9}D = -8,542 (CHCh, c = 0,075 g/100 mL)) como um sólido vermelho. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,43 (s, 1 H), 8,71 (dd, J = 1,5, 4,2 Hz, 1 H), 8,56-8,48 (m, 2 H), 8,15 (dd, J= 1,5, 8,6 Hz, 1 H), 7,76-7,73 (m, 1 H), 6,62 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 5,90 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 4,84-4,78 (m, 1 H), 3,09 (dd, J= 4,9, 15,2 Hz, 1 H), 2,85-2,69 (m, 3 H), 2,27 (d, J= 12,5 Hz, 1 H), 2,14 (d, J=6,6 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z361,2 [M+H]⁺ e 0 outro enantiômero (17,54 mg, 47,86 pmol, 12,0% de produção, 98,3% de pureza) como um sólido vermelho (SFC: Rt = 4,941, ee = 100%, Rotação óptica: [a]^{25 0} _D= +10,973 (CHCI3, c = 0,054g/100 mL)). ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,44 (s, 1 H), 8,71 (dd, J= 1,2, 4,2 Hz, 1 H), 8,57-8,49 (m, 2 H), 8,16 (dd, J = 1,2, 8,6 Hz, 1 H), 7,75 (dd, J = 4,2, 8,6 Hz, 1 H), 6,64 (s, 1 H), 5,92 (d, J= 2,4 Hz, 1 H), 4,86-4,81 (m, 1 H), 3,11 (dd, J= 5,0, 15,0 Hz, 1 H), 2,88-2,70 (m, 3 H), 2,28 (d, J= 9,8 Hz, 1 H), 2,19-2,11 (m, 1 H); ES-LCMS m/z361,2 [M+H]⁺.

Exemplo 191

Síntese de I-253

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 649/704

620/652

Esquema sintético:

Etapa 1: (3fí)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-(2-tetra-hidropiran-2i lpirazol-3-i l)pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-amina

[00712] (3 R)-A/-[8-bromo-2-(5-f I uoro-3-pi ridi I )pi razolo[1,5a][1,3,5]triaziη-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-amina (100 mg, 202,79 pmol, 1 eq.), CS2CO3 (66,07 mg, 202,79 pmol, 1 eq.), Pd(dppf)Cl2 (148,39 mg, 202,79 pmol, 1 eq.) e 1-tetra-hidropiran-2-il-5-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirazol (56,41 mg, 202,79 pmol, 1 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (6 mL) e H2O (2 mL). O tubo selado foi aquecido a 110 °C durante 30 minutos sob irradiação de micro-ondas. TLC (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,4) indicou que 0 material de partida foi consumido completamente. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE/EA = 1/0 a 1/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,4) para produzir (3R)-A/-[2-(5-fluoro

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 650/704

621/652

3-piridil)-8-(2-tetra-hidropiran-2-ilpirazol-3-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (70 mg, 122,27 pmol, 60,3% de produção, 96,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,82 (s, 1 H), 9,41-9,38 (m, 2 H), 8,73 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,49-8,47 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 8,38 (s, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7,37-7,35 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,29-7,27 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,02-6,99 (m, 1 H), 6,95-6,92 (m, 1 H), 6,74 (s, 1 H), 5,66-5,64 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 4,89 (d, 1 H), 3,95-3,91 (m, 2 H), 3,59-3,57 (m, 1 H), 3,152,88 (m, 4H), 2,23 (br s, 2 H), 1,64-1,52 (m, 3 H), 1,23 (m, 1 H), 0,850,83 (d, J= 7,8 Hz, 1 H); ES-LCMS m/z550,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3fí)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-(1 H-pirazol-5-il)pirazolo[1,5a][1,3,5] triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-253)

[00713] Uma solução de (3fí)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-(2-tetrahidropiran-2-ilpirazol-3-il)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-amina (70 mg, 122,27 pmol, 1 eq.) em HCI/MeOH (10 mL) foi agitada a 15 °C durante 20 min. A mistura de reação foi basificada com solução de NaHCOs aquosa até pH 7-8, extraída com EtOAc (50 mL x 3), secada sobre Na₂SO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (condição de HCI; coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 53% a 83%, 8 min.) para produzir (3fl)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-(1/-/-pirazol-5il)pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (19,45 mg, 33,83 pmol, 27,7% de produção, 100,0% de pureza, 3HCI, [a]²⁶’⁴D = +13,329 (MeOH, c = 0,098 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/6) δ ppm 10,82 (s, 1 H), 9,51 (s,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 651/704

622/652

Η), 9,29-9,27 (d, J= 8,6 Hz, 1 H), 8,75 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,68 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 8,64 (s, 1 H), 7,84-7,83 (d, J= 2,0 Hz, 1 H), 7,37-7,35 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 7,29-7,27 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,04-7,00 (m, 2 H),

6,95-6,93 (m, 1 H), 4,89-4,87 (d, J= 7,6 Hz, 1 H), 3,17-3,12 (m, J= 5,5, 14,8 Hz, 1 H), 3,04-2,88 (m, 3 H), 2,24-2,23 (d, J = 3,7 Hz, 2H); ESLCMS m/z 466,2 [M+H]⁺.

Exemplo 192

Síntese de I-254

Esquema sintético:

Etapa 1: terc-Butil (3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-(8-isopropil-2morfolino-pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazin-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

[00714] terc-Butil-(3fí)-3-[terc-butoxicarbonil-(8-isopropil-2metilsulf i nil-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (100 mg, 156,06 pmol, 1 eq.) e morfolina (40,79 mg, 468,17 pmol, 41,20 pL, 3 eq.) em FBuOH (4 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas e purgados com N2 durante 1

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 652/704

623/652 min. O tubo selado foi aquecido a 120 °C durante 2 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada para produzir tercbutil (3F?)-3-[terc-butoxicarbonil-(8-isopropil-2-morfolino-pirazolo[1,5a][1,3,5]triaziη-4-il)amino]-1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (100 mg, 142,46 pmol, 91,3% de produção, 90% de pureza) como óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,10 (d, J=8,0 Hz, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,35 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,22 (dd, J= 6,7, 13,9 Hz, 2 H), 4,74 (s, 1 H), 3,79-3,74 (m, 8H), 3,23 (d, J= 10,8 Hz, 2 H), 3,15-3,07 (m, 3 H), 2,26 (d, J= 4,3 Hz, 2 H), 1,65 (s, 9H), 1,36 (s, 9H), 1,33 (d, J = 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 632,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: (3/7)-/V-(8-lsopropil-2-morfolino-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-254)

[00715] A uma solução de terc-butil (3F?)-3-[terc-butoxicarbonil-(8isopropil-2-morfolino-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-i l)ami no]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (100 mg, 142,46 pmol, 1 eq.) em DCM (4 mL) foi adicionado TFA (1,54 g, 13,51 mmol, 1 mL, 94,81 eq.). A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 0,5 h. A mistura de reação foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 50% a 80% ,8 min.), seguida por liofilização para produzir (3F?)-A/-(8-isopropil-2-morfolino-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (28,19 mg, 59,32 pmol, 41,6% de produção, 98,5% de pureza, HCI, [a]²⁴’⁷ _D = +84,327, MeOH, c = 0,074 g/100 mL) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,95 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,087,02 (m, 1 H), 7,00-6,94 (m, 1 H), 4,72-4,63 (m, 1 H), 3,93-3,87 (m, 4H),

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 653/704

624/652

3,83-3,78 (m, 4H), 3,27-3,19 (m, 2 H), 3,03-2,86 (m, 3 H), 2,35-2,18 (m, 2 H), 1,32 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z432,3 [M+H]⁺.

Exemplo 193

Síntese de I-255

Esquema sintético:

1-255

Etapa 1: (3F?)-/V-[8-lsopropil-2-(3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-255)

[00716] (3fí)-A/-(8-isopropil-2-metilsulfanil-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-amina (100 mg, 242,03 pmol, 1 eq.), ácido 3-piridilborônico (89,25 mg, 726,08 pmol, 3 eq.), Pd(PPh3)4 (27,97 mg, 24,20 pmol, 0,1 eq.) e tiofeno-2carboniloxicobre (138,46 mg, 726,08 pmol, 3 eq.) em 1,4-dioxano (3 mL) foram capturados em um tubo de micro-ondas e purgados com N2 durante 1 min. O tubo selado foi aquecido a 120 °C durante 2 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 654/704

625/652 para fornecer o resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) ACN]; % de B: 35% a 65%, 8 min.) duas vezes, seguida por liofilização para produzir (3H)-A/-[8-isopropil-2-(3-piridil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (28,39 mg, 56,08 pmol, 23,2% de produção, 98,1% de pureza, 2 HCI, [a]²⁵’¹D = +34,261 (MeOH, c = 0,071 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,69 (s, 1 H), 9,49 (d, J= 8,3 Hz, 1 H), 8,89 (d, J= 4,5 Hz, 1 H), 8,16-8,10 (m, 1 H), 8,06 (s, 1 H), 7,38 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,29 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,08-7,03 (m, 1 H), 7,00-6,94 (m, 1 H), 4,90-4,88 (m, 1 H), 3,37-3,34 (m, 1 H), 3,30 (d, J= 7,0 Hz, 1 H), 3,13-2,90 (m, 3 H), 2,44-2,24 (m, 2 H), 1,45 (d, J = 7,0 Hz, 6H); ES-LCMS m/z 424,3 [M+H]⁺.

Exemplo 194

Síntese de I-256

I-256

Esquema sintético:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 655/704

626/652

CfCQQEt, Na₂COj thf/h₂o &OOC_S ..COOfct “Ν'

POO_S. EtgN-HCl tubo seiadc

O

NH3H.0 _um.A, ...N

................ ·.............>- ^h7 Γ > Á-PrOH tübc seisdo ..<k. .N-- Λ^ζ

Ο'- ίψ'

12Q°C_; I6ho^f5s 34

Etapa 1: Etil 1-aminoimidazol-2-carboxilato

[00717] A uma solução de etil 1 H-imidazol-2-carboxilato (1 g, 7,14 mmol, 1 eq.) em DMF (80 mL) resfriada para -10°C foi adicionado LiHMDS (1 M, 7,85 mL, 1,1 eq.). A mistura foi agitada a-10°C durante 0,5 h. À mistura foi adicionado A/-difeniIfosforiIhidróxilamina (1,83 g, 7,85 mmol, 1,1 eq.). A mistura foi agitada a 15°C durante 11,5 h. A mistura foi interrompida bruscamente com solução de NH4CI aquosa saturada (50 mL) a -10 °C. A mistura foi concentrada e ao resíduo foi adicionado EtOAc (100 mL). Após filtração, lavado com EtOAc (50 mL x 3), 0 filtrado foi concentrado para produzir etil 1-aminoimidazol-2-carboxilato (3 g, cru) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,10 (s, 1 H), 6,98 (s, 1 H), 5,74 (s, 2 H), 4,33 (q, J = 7,2 Hz, 2 H), 1,36-1,33 (m, 3 H); ES-LCMS m/z 156,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: Etil 1-[bis(etoxicarbonjl)amjno]imjdazol-2-carboxilato

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 656/704

627/652

EtOOC_x ^COOEt N

[00718] A uma solução de etil 1-aminoimidazol-2-carboxilato (5,3 g, 17,08 mmol, 1 eq.) em THF (80 mL) e H₂O (80 mL) foram adicionados Na₂COs (12,67 g, 119,56 mmol, 7 eq.) e etil carbonocloridato (8,47 g, 78,05 mmol, 7,43 mL, 4,57 eq.). A mistura foi agitada a 15 °C durante 2 h. À mistura foi adicionado H₂O (100 mL), extraído com EtOAc (100 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas. O resíduo foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,6) para produzir etil 1-[bis(etoxicarbonil)amino]imidazol-2carboxilato (2,69 g, 6,29 mmol, 36,8% de produção, 70% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,30 (d, J = 1,0 Hz, 1 H), 7,10 (s, 1 H), 4,44-4,33 (m, 4H), 4,19-4,08 (m, 2 H), 1,39 (td, J = 7,3, 16,3 Hz, 6H), 1,08 (t, J = 7,2 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z300,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: 1 H-lmidazo[2,1 -f] [1,2,4]triazina-2,4-diona o

[00719] Uma solução de etil 1-[bis(etoxicarbonil)amino]imidazol-2carboxilato (2,1 g, 4,91 mmol, 1 eq.) e ΝΗ3Ή2Ο (97,50 g, 778,99 mmol, 107,14 mL, 158,59 eq.) em /-PrOH (20 mL) foi agitada em um tubo selado a 120 °C durante 16 h. A mistura foi concentrada. Ao resíduo foi adicionado PE/MeOH (10/1,50 mL) e agitado em temperatura ambiente durante 10 min. Após filtração, lavada com PE/MeOH (10/1, 15 mL), a massa filtrante foi secada em vácuo. O produto cru (1 g) foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de DCM/MeOH = 10/1 a 1/2, TLC: DCM/MeOH = 10/1, R_f = 0,3) para produzir 1 H-imidazo[2,1

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 657/704

628/652

f][1,2,4]triazina-2,4-diona (0,9 g, 96,4% de produção, 80,0% de pureza). ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,02 (br s, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,13 (brs, 1 H), 7,07 (s, 1 H).

Etapa 4: 2,4-Dicloroimjdazo[2,1 -f][1,2,4]triazina ci

[00720] Uma mistura de 1 H-imidazo[2,1-f][1,2,4]triazina-2,4-diona (500 mg, 2,63 mmol, 1 eq.), cloridrato de A/,A/-dietiletanamina (723,95 mg, 5,26 mmol, 2 eq.) e POCI₃ (87,18 g, 568,57 mmol, 52,84 mL, 216,21 eq) foi agitada em um tubo selado a 120 °C durante 24 h. A mistura foi concentrada e ao resíduo foi adicionado DCM (30 mL). A mistura foi vertida em água resfriada (50 mL), extraída com DCM (30 mL x 2). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre NazSCU, filtradas e concentradas para produzir 2,4dicloroimidazo[2,1-f][1,2,4]triazina (400 mg, 1,27 mmol, 48,3% de produção, 60% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,09 (s, 1 H), 8,02 (s, 1 H); ES-LCMS m/z 189,2, 191,1 [M+H]⁺.

Etapa 5: (3fí)-/V-(2-cloroimidazo[2,1 -f][1,2,4]triazin-4-i 1)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

[00721] Uma mistura de 2,4-dicloroimidazo[2,1-f][1,2,4]triazina (400 mg, 1,27 mmol, 1 eq.), DIEA (492,34 mg, 3,81 mmol, 663,53 pL, 3 eq.) e (3F?)-2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (236,51 mg, 1,27 mmol, 1 eq.) em CH3CN (15 mL) foi agitada a 70 °C durante 6 h. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE / EtOAc = 5/1 a 1/2, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,4)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 658/704

629/652 para produzir (3R)-A/-(2-cloroimidazo[2,1-f][1,2,4]triazin-4-il)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (220 mg, 636,38 pmol, 50,1% de produção, 98,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 7,83 (br s, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,48-7,36 (m, 2 H), 7,30 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,18-7,12 (m, 1 H), 7,11-7,04 (m, 1 H), 6,84 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 4,86-4,84 (m, 1 H), 3,27 (dd, J = 4,9, 15,7 Hz, 1 H), 2,98-2,80 (m, 3 H), 2,29-2,17 (m, 2H); ES-LCMS m/z339,1 [M+H]⁺.

Etapa 6: (3fí)-/V-[2-(5-fluoro-3-piridil)imidazo[2,1 -f][1,2,4]triazin-4il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-256)

[00722] Uma mistura de (3R)-A/-(2-cloroimidazo[2,1 -f][1,2,4]triazin-4il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1/-/-carbazol-3-amina (100 mg, 289,26 pmol, 1 eq.), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (81,52 mg, 578,52 pmol, 2 eq.), CS2CO3 (282,74 mg, 867,78 pmol, 3 eq.) e Pd(dppf)CI₂ (21,17 mg, 28,93 pmol, 0,1 eq.) em 1,4-dioxano (2 mL) e H₂O (0,5 mL) foi agitada a 110 °C durante 2 horas sob atmosfera de N₂. Após filtração, 0 filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por TLC preparativa (ΡΕ/EtOAc = 1/1, Rf = 0,3) para produzir (3R)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)imidazo[2,1 f][1,2,4]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (60,97 mg, 152,65 pmol, 52,8% de produção, 100% de pureza, [a]²⁶⁹D = + 9,272 (MeOH, c = 0,101 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,30 (s, 1 H), 8,54 (d, J = 2,7 Hz, 1 H), 8,42 (td, J = 2,1,9,8 Hz, 1 H), 7,96 (d, J= 1,0 Hz, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,05-6,97 (m, 1 H), 6,96-6,89 (m, 1 H), 4,98-4,90 (m, 1 H), 3,26 (br s, 1 H), 2,97 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 2,90 (dd, J = 7,2, 15,3 Hz, 1 H), 2,40-2,32 (m, 1 H), 2,31 - 2,21 (m, 1 H); ESLCMS m/z 399,9 [M+H]⁺.

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 659/704

630/652

Exemplo 195

Síntese de 1-257

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-Cloro-/V-[2-(1 H-indol-3-i l)eti l]pirido[3,2-d]piri midin-4amina

[00723] A uma solução de 2,4-dicloropirido[3,2-d]pirimidina (100 mg, 499,94 pmol, 1 eq.) em THF (3 mL) foram adicionados DIEA (193,84 mg, 1,50 mmol, 261,24 pL, 3 eq.) e 2-(1 H-indol-3-il)etanamina (88,11 mg, 549,93 pmol, 1,1 eq.). A mistura foi agitada a 60 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,2) para produzir 2-cloro-A/-[2-(1 H-i ndol-3-il)etil]pi rido[3,2-d]pi ri midi η-4-ami na (90 mg, 271,57 pmol, 54,3% de produção, 97,7% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 8,61 (dd, J = 1,3, 4,3 Hz, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 8,01 (dd, J= 1,3, 8,4 Hz, 1 H), 7,71 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,63 (dd, J= 4,3, 8,4 Hz, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,41 (d, J= 8,1 Hz, 1

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 660/704

631/652

Η), 7,24 (t, J= 7,5 Hz, 1 H), 7,18-7,12 (m, 2 H), 4,03 (q, J= 6,7 Hz, 2 H), 3,22 (t, J= 6,8 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 324,1 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 H-indol-3-il)etil]pirido[3,2d]pirimidin-4-amina (I-257)

[00724] 2-Cloro-A/-[2-(1 /-7-indol-3-il)etil]pirido[3,2-d]pirimidin-4-amina (50 mg, 150,87 pmol, 1 eq.), ácido (5-fluoro-3-piridil)borônico (25,51 mg, 181,05 pmol, 1,2 eq.), Pd(dppf)Cl2 (11,04 mg, 15,09 pmol, 0,1 eq.) e CS2CO3 (147,47 mg, 452,62 pmol, 3 eq) foram capturados em um tubo de micro-ondas em 1,4-dioxano (2 mL) e H2O (1 mL). O tubo selado foi aquecido a 110 °C durante 0,5 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi diluída com água (5 mL) e extraída com EtOAc (10 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Xtimate C18 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 45% a 75%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 2-(5fluoro-3-piridil)-A/-[2-(1 /-/-indol-3-il)etil]pirido[3,2-d]pirimidin-4-amina (24,02 mg, 51,42 pmol, 34,1% de produção, 97,9% de pureza, 2HCI) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,03 (s, 1 H), 9,01 (dd, J= 1,3, 4,3 Hz, 1 H), 8,82 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,20 (dd, J = 1,5, 8,6 Hz, 1 H), 8,10-8,05 (m, 1 H), 8,01 (dd, J= 4,3, 8,7 Hz, 1 H), 7,56 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,14 (d, J= 8,1 Hz, 1 H), 7,05 (s, 1 H), 6,92 (t, J= 7,2 Hz, 1 H), 6,85-6,71 (m, 1 H), 4,26 (t, J= 6,6 Hz, 2 H), 3,26 (t, J = 6,6 Hz, 2H); ES-LCMS m/z385,2 [M+H]⁺.

Exemplo 196

Síntese de I-258

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 661/704

632/652

Esquema sintético:

Etapa 1: (3fí)-/V-[2-(3,6-Di-hidro-2H-piran-4-il)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina

[00725] Uma solução agitada de (3H)-A/-(8-isopropil-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (300 mg, 703,15 pmol, 1 eq.) e 2-(3,6-di-hidro-2H-piran-4-il)4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (443,15 mg, 2,11 mmol, 3 eq) em 1,4-dioxano (15 mL) foi desgaseificada e purgada com N2, em seguida adicionados tiofeno-2-carboniloxicobre (268,17 mg, 1,41 mmol, 2 eq.) e Pd2(dba)3 (64,39 mg, 70,31 pmol, 0,1 eq.). A mistura de reação foi agitada a 130 °C durante 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 100/1 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,55) para produzir (3H)-A/-[2-(3,6-di-hidro-2Hpiran-4-il)-8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 662/704

633/652 hidro-1 H-carbazol-3-amina (60 mg, 127,97 pmol, 18,2% de produção, 91,4% de pureza) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 7,87 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,29-7,20 (m, 2 H), 7,03 (t, J= 7,1 Hz, 1 H), 6,98-6,92 (m, 1 H), 4,73 (s, 1 H), 4,34 (d, J= 2,7 Hz, 2 H), 3,89 (t, J= 5,5 Hz, 2 H), 3,29-3,15 (m, 2 H), 3,00-2,91 (m, 2 H), 2,86 (dd, J= 8,9, 15,0 Hz, 1 H), 2,69 (d, J= 1,7 Hz, 2 H), 2,32 (s, 1 H), 2,26-2,17 (m, 1 H), 1,35 (d, J= 7,1 Hz, 6H); ES-LCMS m/z429,3 [M+H]⁺. Etapa 2: (3/7)-/V-(8-lsopiOpil-2-tetra-hjdiOpiran-4-jl-pjrazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-258)

[00726] A uma solução agitada de (3R)-A/-[2-(3,6-di-hidro-2/-/-piran4-il)-8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1Hcarbazol-3-amina (55 mg, 117,31 pmol, 1 eq.) em MeOH (20 mL) foi adicionado Pd/C (0,1 g, 10% peso). A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante 5 horas sob atmosfera de H₂ (1,05 kg/cm² (15 psi)). A mistura de reação foi filtrada através de uma almofada de celita. O filtrado foi concentrado para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (Condição de HCI; coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 55% a 85%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir (3R)-A/-(8-isopropil2-tetra-hidropiran-4-il-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9-tetrahidro-1/-/-carbazol-3-amina (16,60 mg, 36,74 pmol, 31,3% de produção, 95,3% de pureza, [a]^{25 0} _D = +9,739 (MeOH, c = 0,098 g/100 mL)) como um sólido branco. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,08 (s, 1 H), 7,37 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,27 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 7,07-7,01 (m, 1 H), 6,996,93 (m, 1 H), 4,86-4,77 (m, 1 H), 4,05 (dd, J= 2,0, 11,5 Hz, 2 H), 3,613,50 (m, 2 H), 3,28-3,17 (m, 2 H), 3,10-2,88 (m, 4H), 2,39-2,20 (m, 2 H),

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 663/704

634/652

2,11-1,98 (m, 2 Η), 1,96-1,87 (m, 2 Η), 1,35 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ESLCMS m/z 431,3 [M+H]⁺.

Exemplo 197

Síntese de l-259a, l-259b e l-259c

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-metil-/V-[(5fí)-4,5,6,7-tetra-hidro-1H· indol-5-il]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (l-259b) e 2-(5-fluoro3-piridil)-8-metil-/V-[(5S)-4,5,6,7-tetra-hidro-1H-indol-5iI]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-amina (l-259a)

[00727]

Uma mistura de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-metilPetição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 664/704

635/652 pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (100 mg, 379,28 pmol, 1 eq.), 4,5,6,7-tetrahidro-1 /-/-indol-5-amina (56,82 mg, 417,21 pmol, 1,1 eq.) e DIEA (147,06 mg, 1,14 mmol, 198,19 pL, 3 eq.) em /-PrOH (3 mL) foi agitada a 60 °C durante 2 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por cromatografia em sílicagel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,60) para produzir produto cru que foi separado por SFC quiral (coluna: DAICEL CHIRALPAK AD (250 mm * 50 mm, 10 um); fase móvel: [0,1% de NH3H2O/IPA]; % de B: 40% a 40%) para produzir pico 1 e pico 2. O pico 1 foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi dissolvido em MeCN (20 mL) e H2O (40 mL) e liofilizado para produzir um enantiômero (20,50 mg, 56,41 pmol, 14,9% de produção, 100,0% de pureza, SFC: R_t = 1,488, ee = 100%, [a]²⁶’¹D = - 32,731 (CHCI3, c = 0,108 g/100 mL)) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,51 (s, 1 H), 8,56 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,508,41 (m, 1 H), 7,94-7,87 (m, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 6,72 (t, J= 2,4 Hz, 1 H), 6,66 (d, J= 8,0 Hz, 1 H), 6,05 (t, J = 2,4 Hz, 1 H), 4,88-4,77 (m, 1 H), 3,17 (dd, J= 4,8, 15,2 Hz, 1 H), 2,88-2,71 (m, 3 H), 2,35 (s, 3 H), 2,28 (dq, J= 2,4, 6,0 Hz, 1 H), 2,23-2,12 (m, 1 H); ES-LCMS m/z 364,2 [M+H]⁺. O pico 2 foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi dissolvido em MeCN (20 mL) e H2O (40 mL) e liofilizado para produzir 0 outro enantiômero (19,32 mg, 53,17 pmol, 14,0% de produção, 100,0% de pureza, SFC: Rt = 1,691, ee = 100%, [a]^{26 0}D = + 10,595 (CHCI3, c = 0,102 g/100 mL)) como um sólido esbranquiçado. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,51 (br s, 1 H), 8,56 (br s, 1 H), 8,46 (d, J= 9,2 Hz, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 6,72 (s, 1 H), 6,66 (d, J= 8,4 Hz, 1 H), 6,05 (s, 1 H), 4,90-4,80 (m, 1 H), 3,16 (d, J= 10,8 Hz, 1 H), 2,87-2,73 (m, 3 H), 2,35 (s, 3 H), 2,30-2,22 (m, 1 H), 2,20-2,10 (m, 1 H); ES-LCMS m/z364,2 [M+H]⁺.

Exemplo 198

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636/652

Síntese de 1-262

Esquema sintético:

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carboxilato

[00728] Uma solução de 2-(5-fluoro-3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9-tetrahidro-1 H-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carbonitrila (200 mg, 335,51 pmol, 1 eq.) em HCI/MeOH (4 M, 10 mL) foi agitada a 70°C durante 12 horas em tubo selado. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi interrompido bruscamente por adição de água (50 mL), ajustado pH para 9 por NaHCOs aquoso, extraído com EtOAc (50 mL x 3). As

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637/652 camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (20 mL), secadas sobre NazSCU, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por TLC preparativa (PE/EtOAc = 1/2, TLC: PE / EtOAc = 1/2, Rf = 0,53) para produzir metil 2-(5-fluoro3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carboxilato (50 mg, 96,84 pmol, 28,8% de produção, 88,6% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI₃) δ ppm 9,57 (br s, 1 H), 8,67-8,48 (m, 2 H), 8,41 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,55-7,42 (m, 1 H), 7,36 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,19 (t, J = 7,7 Hz, 1 H), 7,15-7,10 (m, 1 H), 6,96 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 4,99 (s, 1 H), 3,98 (s, 3 H), 3,39 (dd, J = 4,8, 15,3 Hz, 1 H), 3,09-2,97 (m, 3 H), 2,43-2,32 (m, 2H); ES-LCMS m/z458,2 [M+H]⁺.

Etapa 2: Ácido 2-(5-fluoro-3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carboxílico

[00729] A uma solução de metil 2-(5-fluoro-3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9tetra-hidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi na-8carboxilato (140 mg, 306,04 pmol, 1 eq.) em THF (2 mL), MeOH (2 mL) e H2O (1 mL) foi adicionado LiOH (73,29 mg, 3,06 mmol, 10 eq) e foi agitado a 50 °C durante 12 horas. A solução foi ajustada para pH 6 por solução de HCI aquosa a 2 N, concentrada para produzir ácido 2-(5fluoro-3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carboxílico (120 mg, 187,00 pmol, 61,1% de produção, 69,1% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,69 (s, 1 H), 9,21 (d, J = 6,6 Hz, 1 H), 8,93 (s, 1 H), 8,49 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,29-7,17 (m, 1 H), 7,08-6,89

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638/652 (m, 2 Η), 4,93 (d, J = 4,2 Hz, 1 H), 3,30-3,20 (m, 1 H), 3,19-2,88 (m, 3 H), 2,53-2,08 (m, 2H); ES-LCMS m/z444,1 [M+H]⁺.

Etapa 3: [2-(5-Fluoro-3-piridil)-4-[[(3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il]-morfolinometanona (I-262)

[00730] A uma solução de ácido 2-(5-fIuoro-3-piridil)-4-[[(3í?)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8carboxílico (50 mg, 77,91 pmol, 1 eq.), morfolina (20,36 mg, 233,74 pmol, 20,57 pL, 3 eq.) em DMF (2 mL) foram adicionados HATU (35,55 mg, 93,50 pmol, 1,2 eq.) e TEA (23,65 mg, 233,74 pmol, 32,53 pL, 3 eq.). A mistura foi agitada a 15 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por adição de água (50 mL), extraída com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: DuraShell 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 32% a 62%, 7 min.), seguida por liofilização para produzir [2-(5-fluoro-3-piridil)-4-[[(3F?)-2,3,4,9-tetrahidro-1 /-/-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-8-il]-morfolinometanona (15,18 mg, 25,93 pmol, 33,2% de produção, 100% de pureza, 2HCI, [a]²⁴’³D = +20,863 (MeOH, c = 0,059 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,52 (s, 1 H), 8,90 (dd, J = 1,5, 9,0 Hz, 1 H), 8,85 (s, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,04 (t, J = 7,0 Hz, 1 H), 6,99-6,93 (m, 1 H), 4,99-4,92 (m, 1 H), 3,81 (s, 8H), 3,29 (d, J = 5,6 Hz, 1 H), 3,17-2,91 (m,

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639/652

Η), 2,46-2,23 (m, 2H); ES-LCMS m/z513,3 [M+H]⁺.

Exemplo 199

Síntese de l-263a, l-263b e l-263c

Esquema sintético:

Etapa 1: (2S)-/V-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a] [1,3,5]triaziη-4-il]-1,2,3,4-tetra-hidrociclopenta[b]indol-2-amina (I263a) e (2fí)-/V-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5a] [1,3,5]triaziη-4-il]-1,2,3,4-tetra-hidrociclopenta[b]indol-2-amina (I263b)

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640/652

[00731] A uma solução de 4-cloro-2-(5-fluoro-3-piridil)-8-isopropilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (120 mg, 391,62 pmol, 1 eq.) e 1,2,3,4tetra-hidrociclopenta[b]indol-2-amina (67,45 mg, 391,62 pmol, 1 eq.) em /-PrOH (10 mL) foi adicionado DIEA (404,91 mg, 3,13 mmol, 545,71 pL, 8 eq.). A mistura foi agitada a 50 °C durante 2 horas e concentrada para produzir A/-[2-(5-fIuoro-3-piridil)-8-isopropil-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-il]-1,2,3,4-tetra-hidrociclopenta[b]indol-2-amina (120 mg, 274,65 pmol, 70,1% de produção, 97,8% de pureza) que foi separada por SFC quiral (coluna: DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 mm * 30 mm, 5 pm); fase móvel: [0,1% de NH3H2O EtOH]; % de B: 40% a 40%) para produzir pico 1 e pico 2. O pico 1 foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 68% a 98%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir um enantiômero (31,51 mg, 62,97 pmol, 16,1% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI, SFC: R_t = 5,092, ee = 99,41%, [a]²⁴’⁵D= + 37,706 (MeOH, c = 0,093g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfô) δ ppm 10,94 (s, 1 H), 9,43-9,40 (m, 2 H), 8,71 (d, J= 2,9 Hz, 1 H), 8,45-8,41 (m, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,35-7,31 (m, 2 H), 7,00-6,95 (m, 2 H), 5,65-5,60 (m, 1 H), 3,43-3,34 (m, 2 H), 3,24-3,19 (m, 2 H), 3,03 (dd, J=6,6, 13,9 Hz, 1 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z428,2 [M+H]⁺. O pico 2 foi concentrado sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 68% a 98%, 8 min.). A fração desejada foi liofilizada para produzir 0 outro enantiômero (24,54 mg, 49,04 pmol, 12,5% de produção, 100,0% de pureza, 2HCI, SFC: Rt = 6,749, ee = 99,76%, [a]²⁴’⁶ _D= - 41,018 (MeOH, c = 0,087g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-cfô) δ ppm 10,93 (s, 1 H), 9,43-9,40 (m, 2 H), 8,71 (d, J= 2,7 Hz, 1 H), 8,45-8,41 (m, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,35-7,31 (m, 2 H), 7,02-6,95 (m,

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641/652

J = 7,0, 15,1 Hz, 2 H), 5,67-5,60 (m, 1 H), 3,41-3,34 (m, 2 H), 3,24-3,21 (m, J= 7,2, 14,1 Hz, 2 H), 3,04-2,99 (dd, J= 6,4, 13,9 Hz, 1 H), 1,37 (d, J= 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z428,2 [M+H]⁺.

Exemplo 200

Síntese de 1-264

Esquema sintético:

Etapa 1: íerc-Butil (3fí)-3-[íerc-butoxicarbonil-(8-isopropil-2 metilsulfanil-pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazjn-4-jl)amjno]-1,2,3,4-tetra hidrocarbazol-9-carboxilato

[00732] A uma solução de (3H)-A/-(8-isopropil-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (300 mg, 726,08 pmol, 1 eq.) em 1,4-dioxano (30 mL) foram

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642/652 adicionados DMAP (266,12 mg, 2,18 mmol, 3 eq.) e BOC2O (950,78 mg, 4,36 mmol, 1,00 mL, 6 eq.). A mistura foi agitada a 110 °C durante 10 h. À mistura foi adicionado BOC2O (950,78 mg, 4,36 mmol, 1,00 mL, 6 eq.). A mistura foi agitada a 110°C durante mais 16 h. A mistura foi concentrada. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE puro a PE / EtOAc = 3/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, R_f= 0,7) para produzir terc-butil (3R)-3-[terc-butoxicarbonil-(8-isopropil-2metilsulfani l-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (420 mg, 637,71 pmol, 87,8% de produção, 90,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,10-8,04 (m, 1 H), 7,93 (s, 1 H), 7,33 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,237,13 (m, 2 H), 4,76-4,74 (m, 1 H), 3,33-2,97 (m, 5H), 2,59-2,51 (m, 3 H), 2,37-2,27 (m, 1 H), 2,24-2,26 (m, 1 H), 1,63 (s, 9H), 1,54 (s, 9H), 1,36 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z593,3 [M+H]⁺.

Etapa 2: terc-Butil (3fí)-3-[íerc-butoxicarbonil-(8-isopropil-2metilsulfinil-pirazolo[1,5-a] [1,3,5]triazjn-4-jl)amjno]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato

[00733] A uma solução de terc-butil (3R)-3-[terc-butoxicarbonil-(8isopropil-2-metilsulfani l-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (400 mg, 607,34 pmol, 1 eq.) em MeOH (20 mL) foi adicionado oxônio (373,37 mg, 607,34 pmol, 1 eq.). A mistura foi agitada a 15 °C durante 3 h. Após ser filtrado, à filtração foi adicionado EtOAc (80 mL) e interrompido bruscamente por adição com solução de Na2SOs saturada (50 mL). A camada aquosa foi extraída com EtOAc (30 mL x 3) e as camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (50 mL), secadas sobre Na2SO4, filtradas e

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643/652 concentradas. O material cru foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE / EtOAc = 10/1 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 5/1, Rf = 0,2) para produzir terc-butil (3H)-3-[terc-butoxicarbonil-(8-isopropil2-meti Isulfinil-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (250 mg, 403,70 pmol, 66,5% de produção, 98,3% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,16 (s, 1 H), 8,07 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,32 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,24-7,14 (m, 2 H), 4,85-4,83 (m, 1 H), 3,40 (td, J = 6,8, 13,8 Hz, 1 H), 3,34-3,01 (m, 4H), 2,94 (d, J = 2,7 Hz, 3 H), 2,43 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), 2,27 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 1,64 (s, 9H), 1,45-1,29 (m, 15H); ES-LCMS m/z 631,3 [M+Na]⁺.

Etapa 3: terc-Butil (3R)-3-[[8-isopropil-2-(1-piperidil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il]amino]-1,2,3,4-tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato

[00734] Uma solução de terc-butil (3H)-3-[terc-butoxicarbonil-(8isopropil-2-metilsulf i nil-pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (100 mg, 161,48 pmol, 1 eq.) e piperidina (172,44 mg, 2,03 mmol, 0,2 mL, 12,54 eq.) em FBuOH (1 mL) foi irradiada e agitada a 120 °C durante 2 horas sob irradiação de microondas. A mistura foi concentrada para produzir terc-butil (3H)-3-[[8isopropil-2-(1-piperidil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]amino]-1,2,3,4tetra-hidrocarbazol-9-carboxilato (80 mg, 137,44 pmol, 85,1% de produção, 91,0% de pureza) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,35 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,27 (br s, 1 H), 7,23-7,17 (m, 1 H), 6,26 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 4,60-4,59 (m, 1 H), 3,79 (d, J = 4,6 Hz, 4H), 3,35 (d, J = 5,1 Hz, 3 H), 3,27-3,14 (m, 3 H), 3,02 (td, J = 6,8, 13,8 Hz, 1 H), 2,72 (dd, J = 7,7,

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14,6 Hz, 1 Η), 2,25 (br s, 1 H), 2,12 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 1,54-1,39 (m, 12H), 1,28 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z530,4 [M+H]⁺.

Etapa 4: (3fí)-/V-[8-lsopropi 1-2-(1 -piperidil)pirazolo[1,5a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-264)

[00735] Uma solução de terc-butil (3fí)-3-[[8-isopropil-2-(1 piperidil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]amino]-1,2,3,4-tetrahidrocarbazol-9-carboxilato (80 mg, 137,44 pmol, 1 eq.) e TFA (1,12 g, 9,83 mmol, 728,00 pL, 71,54 eq.) em DCM (5 mL) foi agitada a 20 °C durante 2 h. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: Agela ASB 150 * 25 mm * 5 pm; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 50% a 80%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir (3F?)-A/-[8-isopropil-2-(1-piperidil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triaziη-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (34,59 mg, 71,55 pmol, 52,1% de produção, 96,4% de pureza, HCI; Rotação óptica: [o]²²’²d = + 82,409, (MeOH, c = 0,096 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, CD₃OD) δ ppm 7,89 (s, 1 H), 7,37 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,04 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,00-6,93 (m, 1 H), 4,69-4,57 (m, 1 H), 3,87 (br s, 4H), 3,28-3,16 (m, 2 H), 2,97 (br s, 2 H), 2,93-2,82 (m, 1 H), 2,37-2,15 (m, 2 H), 1,74 (br s, 6H), 1,31 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z430,3 [M+H]⁺.

Exemplo 201

Síntese de I-265

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645/652

1-265

Etapa 1: 2-(5-Fluoro-3-piridil)-4-[[(3R)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 Hcarbazol-3-il]amino] pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carboxamida (I265)

[00736] Uma solução de 2-(5-fluoro-3-piridil)-4-[[(3R)-2,3,4,9-tetrahidro-1 H-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina-8-carbonitrila (170 mg, 396,53 pmol, 1 eq.) em HCI/MeOH (4 M em MeOH, 30 mL) foi agitada a 80 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi interrompido bruscamente por adição de NaHCO3 aquoso saturado (50 mL), extraído com EtOAc (30 mL x 3). As camadas orgânicas foram lavadas com solução salina (10 mL), secadas sobre Na₂SO4, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo. O resíduo foi purificado por cromatografia de sílica-gel rápida (de PE / EtOAc = 1/0 a 0/1, TLC: PE / EtOAc = 1/1, R_f = 0,11) para produzir 2-(5-fluoro-3-piridil)-4-[[(3R)

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646/652

2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-il]amino]pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina8-carboxamida (60 mg, 135,61 pmol, 34,2% de produção, 100% de pureza, [a]^{23 7}D = +21,368 (MeOH, c = 0,088 g/100 mL)) como um sólido amarelo. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-c/₆) δ ppm 10,79 (s, 1 H), 9,56-9,41 (m, 2 H), 8,78-8,67 (m, 2 H), 8,50 (s, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,34 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 7,8 Hz, 1 H), 7,05-6,98 (m, 1 H), 6,97-6,89 (m, 1 H), 4,86 (s, 1 H), 3,23-2,77 (m, 4H), 2,22 (s, 2H); ESLCMS m/z 443,1 [M+H]⁺.

Exemplo 202

Síntese de 1-267

Esquema sintético:

H₂O

Etapa 1: Etil /V-[[4-(trifluorometil)-1H-pirazol-5-il]carbamotioil] carbamato

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647/652

[00737] Uma solução de cloridrato de 4-(trifluorometil)-1 H-pirazol-5amina (1 g, 4,46 mmol, 1 eq, HCI) e etil A/-(tioxometileno)carbamato (585,47 mg, 4,46 mmol, 1 eq.) em DCM (10 mL) e DMF (10 mL) foi agitada a 20 °C durante 2,5 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo de etil A/-[[4-(trifluorometil)1 H-pirazol-5-il]carbamotioil]carbamato (1,1 g, 3,90 mmol, 87,3% de produção, pureza crua) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 11,52 (s, 1 H), 11,06 (s, 1 H), 8,34 (s, 1 H), 4,21 (q, J = 7,0 Hz, 2 H), 1,25 (t, J = 7,0 Hz, 3 H); ES-LCMS m/z 283,0 [M+H]⁺.

Etapa 2: 2-Tioxo-8-(trifluorometil)-1 H-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin4-ona o

[00738] A uma solução de etil A/-[[4-(trifluorometil)-1 H-pirazol-5il]carbamotioil]carbamato (1,1 g, 3,90 mmol, 1 eq.) em CH3CN (5 mL) foi adicionado K2CO3 (1,62 g, 11,69 mmol, 3,0 eq.). A mistura foi agitada a 60°C durante 3 h. A mistura de reação foi interrompida bruscamente por solução de AcOH (6 mL), diluída com H2O (50 mL) e extraída com EtOAc (50 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre Na2SO4 anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para produzir um resíduo. O resíduo foi diluído com EtOAc/PE (2 mL/10 mL), filtrado e coletado 0 sólido para produzir 2-tioxo-8-(trifluorometil)1 H-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ona (900 mg, 3,33 mmol, 85,4% de produção, 87,3% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-ofe) δ

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648/652 ppm 12,65 (br s, 1 H), 8,16 (s, 1 H); ES-LCMS m/z237,0 [M+H]⁺.

Etapa 3: 2-MetilsulfanÍI-8-(trjfluorometil)-3H-pjrazolo[1,5-a][1,3,5] triazin-4-ona o

cf₃

[00739] A uma solução de 2-tioxo-8-(trifluorometil)-1 H-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-ona (900 mg, 3,33 mmol, 1 eq.) em EtOH (15 mL) foi adicionada uma solução de NaOH (266,12 mg, 6,65 mmol, 2 eq.) em H2O (6 mL) e em seguida Mel (472,20 mg, 3,33 mmol, 207,11 pL, 1 eq) foi adicionado gota a gota. A mistura foi agitada a 20 °C durante 1 hora. A mistura de reação foi acidificada com solução de HCI a 1 N (10 mL) e concentrada sob pressão reduzida para remover EtOH, 0 sólido foi formado, filtrado e coletado para produzir 2-metilsulfanil-8(trifluorometil)-3/-/-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ona (800 mg, 3,00 mmol, 90,2% de produção, 93,8% de pureza) como um sólido amarelo que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8,16 (s, 1 H), 2,64 (s, 3 H); ES-LCMS m/z 251,1 [M+H]⁺.

Etapa 4: 4-Cloro-2-metilsulfanÍI-8-(trjfluorometil)pirazolo[1,5a][1,3,5]triazina

Cl

cf₃

[00740] Uma solução de 2-metilsulfanil-8-(trifluorometil)-3/-/pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-ona (200 mg, 749,80 pmol, 1 eq.) e DIEA (290,72 mg, 2,25 mmol, 391,80 pL, 3,0 eq.) em POCI3 (34,43 g, 224,55 mmol, 20,87 mL, 299,47 eq) foi agitada a 130 °C durante 12 horas sob atmosfera de N₂. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 4-cloro-2-metilsulfanil-8

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649/652 (trifluorometil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (200 mg, 744,47 pmol, 99,3% de produção, pureza crua) como um óleo marrom-preto que foi usado na etapa seguinte sem nova purificação. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 8,29 (s, 1 H), 2,66-2,64 (m, 3 H).

Etapa 5: (3/7)-/V-[2-Metilsulfanjl-8-(trjfluorometil)pirazolo[1,5a] [1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina

cf₃

[00741] A uma solução de 4-cloro-2-metilsulfanil-8(trifluorometil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazina (200 mg, 744,47 pmol, 1 eq.) e (3fí)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (166,39 mg, 893,37 pmol, 1,2 eq.) em ACN (10 mL) foi adicionado DIEA (962,18 mg, 7,44 mmol, 1,30 mL, 10 eq.). A mistura foi agitada a 60 °C durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílicagel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,32) para produzir 0 produto de (3fl)-A/-[2-metilsulfanil-8(trifl uorometi l)pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1Hcarbazol-3-amina (150 mg, 353,10 pmol, 47,4% de produção, 98,5% de pureza) como um óleo marrom. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 7,99 (s, 1 H), 7,84 (br s, 1 H), 7,47 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,24-7,08 (m, 2 H), 6,65 (d, J = 9,3 Hz, 1 H), 4,82 (m, 1 H), 3,31 (dd, J = 5,4, 15,4 Hz, 1 H), 3,03-2,84 (m, 3 H), 2,60 (s, 3 H), 2,31 - 2,21 (m, 2H); ES-LCMS m/z419,1 [M+H]⁺.

Etapa 6: (3fl)-N-[2-(5-Fluoro-3-piridil)-8(trifluorometil)pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro1 H-carbazol-3-amina (I-267)

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 679/704

650/652

[00742] A uma solução de (3fí)-A/-[2-metilsulfanil-8(trifl uorometi l)pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1Hcarbazol-3-amina (100 mg, 235,40 pmol, 1 eq.) e ácido (5-fluoro-3piridil)borônico (99,51 mg, 706,20 pmol, 3,0 eq.) em 1,4-dioxano (6 mL) foram adicionados Pd(PPh3)4 (27,20 mg, 23,54 pmol, 0,1 eq.) e tiofeno2-carboniloxicobre (89,78 mg, 470,80 pmol, 2,0 eq.). A mistura foi purgada com N2 durante 1 minuto e agitada a 120 °C durante 5 horas sob irradiação de micro-ondas. A mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para produzir um resíduo que foi purificado sobre cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 10/3, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,38) e HPLC preparativa (coluna: DuraShell 150 * 25 mm * 5 um; fase móvel: [água (0,05% de HCI) - ACN]; % de B: 45% a 75%, 8 min.), seguida por liofilização para produzir 0 produto de (3R)-A/-[2-(5-fluoro-3-piridil)-8(trifl uorometi l)pi razolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il]-2,3,4,9-tetra-hidro-1Hcarbazol-3-amina (36,04 mg, 66,30 pmol, 28,2% de produção, 99,4% de pureza, 2HCI, Rotação óptica: ([a]²⁴³D = +51,474, (MeOH, c = 0,048 g/100 mL)) como um sólido amarelo.¹H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 9,48 (br s, 1 H), 8,71 (d, J = 8,8 Hz, 2 H), 8,35 (s, 1 H), 7,36 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,26 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,06-6,99 (m, 1 H), 6,97-6,88 (m, 1 H), 4,91 (d, J = 3,8 Hz, 1 H), 3,29 (d, J = 5,5 Hz, 1 H), 3,10-2,90 (m, 3 H), 2,45-2,35 (m, 1 H), 2,33-2,21 (m, 1 H); ES-LCMS m/z468,2 [M+H]⁺.

Exemplo 203

Síntese de 1-270

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651/652

Ι-270

Esquema sintético:

Etapa 1: 5-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirimidina

[00743] Uma mistura de 5-bromopirimidina (1 g, 6,29 mmol, 1 eq.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,3,2dioxaborolano (1,76 g, 6,93 mmol, 1,10 eq.), Pd(dppf)Cl2'CH2Cl2 (513,66 mg, 628,99 pmol, 0,1 eq.), KOAc (1,85 g, 18,87 mmol, 3 eq.) em 1,4dioxano (40 mL) e DMF (10 mL) foi agitada a 100 °C durante 2 horas sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado sobre cromatografia de coluna de sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 3/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, Rf = 0,23) para produzir 5-(4,4,5,5-tetrametil1,3,2-dioxaborolan-2-il)pirimidina (1,5 g, 5,82 mmol, 92,6% de produção, 80% de pureza) como óleo vermelho. ¹H RMN (400 MHz, CDCI3) δ ppm 9,25 (s, 1 H), 9,00 (br s, 2 H), 1,33 (s, 12H).

Etapa 2: (3/?)-/V-(8-lsopropil-2-pjrjmjdin-5-il-pirazolo[1,5a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9 -tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (I-270)

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652/652

[00744] Uma mistura de (3H)-A/-(8-isopropil-2-metilsulfanilpirazolo[1,5-a][1,3,5]triazi n-4-il)-2,3,4,9-tetra-hidro-1 H-carbazol-3amina (150 mg, 351,57 pmol, 1 eq.), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)pirimidina (271,66 mg, 1,05 mmol, 3 eq.), Pd2(dba)s (32,19 mg, 35,16 pmol, 0,1 eq.) e tiofeno-2-carbonilóxi de cobre (I) (134,08 mg, 703,15 pmol, 2 eq.) em 1,4-dioxano (4 mL) foi agitada a 110 °C durante 12 horas sob atmosfera de N2. A mistura foi concentrada para produzir material cru que foi purificado em cromatografia de coluna em sílica-gel (de PE / EtOAc = 1/0 a 2/1, TLC: PE / EtOAc = 3/1, R_f = 0,25) para produzir um sólido cinza que foi suspenso com MeCN/HEO/DMF (3/1/0,5, 10 mL). Após filtração, a massa filtrante foi lavada com MeCN (10 mL x 3) e secada sob vácuo para produzir (3fí)A/-(8-isopropil-2-pirimidin-5-il-pirazolo[1,5-a][1,3,5]triazin-4-il)-2,3,4,9tetra-hidro-1 H-carbazol-3-amina (42,34 mg, 99,74 pmol, 28,4% de produção, 100% de pureza, [a]²⁴’⁵ _D = +83,175 (DMSO, c = 0,102 g/100 mL)) como um sólido cinzento. ¹H RMN (400 MHz, DMSO) δ ppm 10,75 (s, 1 H), 9,57 (s, 2 H), 9,26 (s, 1 H), 9,01 (br s, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 7,31 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,24 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,01-6,94 (m, 1 H), 6,936,86 (m, 1 H), 4,80-4,77 (m, 1 H), 3,11-3,00 (m, 2 H), 2,99-2,81 (m, 3 H), 2,18 (m, 2 H), 1,34 (d, J = 6,8 Hz, 6H); ES-LCMS m/z425,2 [M+H]⁺.

[00745] Embora tenha sido descrita uma série de modalidades desta invenção, é evidente que os exemplos básicos podem ser alterados para fornecer outras modalidades que utilizem os compostos e métodos desta invenção. Portanto, será apreciado que 0 escopo desta invenção deve ser definido pelas reivindicações anexas ao invés de pelas modalidades específicas que foram representadas por meio de exemplo.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula I':

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:

O Anel A é selecionado de:

cada p é independentemente 0,1, ou 2, como a valência vai permitir;

cada R¹ é independentemente selecionado de R, -C(O)R, -C(O)OR,

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2/17

-SO₂R, -C(O)N(R)₂, ou -SO₂RN(R)₂;

cada R é independentemente hidrogênio, deutério, ou um grupo opcionalmente substituído selecionado de C1-6 alifático, um anel carbocíclico monocíclico saturado ou parcialmente insaturado de 3 a 8 membros, fenila, um anel carbocíclico aromático bicíclico de 8 a 10 membros; um anel heterocíclico monocíclicosaturado ou parcialmente insaturado de 4 a 8 membros tendo 1 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel heteroaromático bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 5 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre; ou dois R no mesmo nitrogênio são tomados junto com seus átomos intermediários para formar um anel saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 4 a 7 membros tendo 1 a 2 heteroátomos além do nitrogênio independentemente selecionados de oxigênio, nitrogênio, ou enxofre;

cada ou R^x, R^y, e R^z é independentemente selecionado de R, halogênio, ciano, nitro, -OR, -SR, -N(R)₂, -N(R)C(O)R, C(O)N(R)₂, -C(O)N(R)OR, -N(R)C(O)N(R)₂, -N(R)C(O)OR, OC(O)N(R)₂, -N(R)SO₂R, -SO₂RN(R)₂, -C(O)R, -C(O)OR, OC(O)R, -C(O)OR, -S(O)R, ou -SO₂R, ou :

dois R^x no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S; ou:

dois R^y no mesmo carbono são tomados juntos para formar =0 ou =S;

cada de m e n é independentemente 1,2,3, 4, ou 5;

O Anel B é fenila, um anel bicíclico parcialmente insaturado ou

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3/17 carbocíclico aromático de 7 a 10 membros, um anel heteroaromático monocíclico de 5 a 6 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, um anel heteroarila bicíclico de 8 a 10 membros tendo 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel tricíclico de 12 a 15 membros parcialmente insaturado ou aromático 1 a 4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

O Anel C é fenila ou um anel heteroarila de 5 a 6 membros tendo 1 a

4 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

L¹ é uma ligação covalente ou uma cadeia hidrocarboneto bivalente linear ou ramificada de C1-6 membros opcionalmente substituídos em que uma unidade metileno de L¹ é opcionalmente substituída com -Cy-, -O-, -S-, -NR-, -C(O)-, -C(O)O-, -OC(O)-, C(O)N(R)-, -N(R)C(O)-, -SO₂-, -N(R)SO₂-, ou -SO₂N(R)-S; e

-Cy- é anel monocíclico bivalente saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 3 a 8 membros tendo 0 a 2 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre, ou um anel bicíclico bivalente saturado, parcialmente insaturado, ou aromático de 8 a 10 membros tendo 0 a 3 heteroátomos independentemente selecionados de nitrogênio, oxigênio, ou enxofre;

com a condição de que quando 0 Anel A for

R^z , 0 Anel B

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2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas l-a, l-b, l-c, l-d, l-e, l-f, l-g, l-h, l-i, l-j, l-k, l-l, l-m, l-n, l-o e l-p:

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5/17

l-p ;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas ll-a, ll-b, ll-c, ll-d, ll-e, ll-f, ll-g, ll-h, ll-i, ll-j, ll-k, ll-l, ll-m, ll-n, ll-o e ll-p:

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ll-p ;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

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7/17

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas lll-a, lll-b, lll-c, lll-d, lll-e, lll-f, lll-g, lll-h, lll-i, lll-j, lll-k, lll-l, IIIm, lll-n, lll-o, lll-p, lll-q, lll-r, lll-s, lll-t, lll-u, lll-v, lll-w, lll-x, lll-y, lll-z, lll-aa, lll-bb, lll-cc, lll-dd, lll-ee, lll-ff, lll-gg, lll-hh, lll-ii, lll-jj e lll-kk

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 689/704

8/17

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 690/704

9/17

lll-kk ;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas IV-a, IV-b, IV-c, IV-d, IV-e, IV-f, IV-g, IV-h, IV-i, IV-j, IV-k, IV-I,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 691/704

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IV-m, IV-n, IV-o, IV-p e IV-q:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 692/704

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IV-p IV-q ;ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas V-a, V-b, V-c, V-d, V-e, V-f, V-g, V-h, V-i, V-j, V-k e V-l:

V-g

V-h

V-i

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 693/704

12/17

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas Vl-a, Vl-b, Vl-c, Vl-d, Vl-e e Vl-f:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X é N ou CH.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas Vll-a, Vll-b, VII-c, Vll-d, Vll-e, Vll-f e Vll-g:

Vll-a Vll-b VII-c

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 694/704

13/17

Vll-d Vll-e Vll-f e

Vll-g ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X é N ou CH.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas Vlll-a, Vlll-b, VIII-c, Vlll-d, Vlll-e e Vlll-f:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X é N ou CH.

10. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas IX-a, IX-b e IX-c:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 695/704

14/17

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X é N ou CH.

11. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas X-a, X-b, X-c, X-d, X-e, X-f, X-g, X-h e X-i:

X-a X-b X-c

X-d X-e X-f

X-g X-h and X-i ;

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X é N ou CH.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 1,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 696/704

15/17 caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas Xl-a, Xl-b, Xl-c, Xl-d, Xl-e, Xl-f, Xl-g, Xl-h e Xl-i:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X é N ou

CH.

13. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado de qualquer uma das fórmulas Xll-a, Xll-b e Xl-c:

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 697/704

16/17 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que X é N ou CH.

14. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado daqueles mostrados na Tabela 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

15. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo (carrier), adjuvante, ou veículo (vehicle) farmaceuticamente aceitável.

16. Método de inibição de AHR em um paciente em necessidade do mesmo, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao referido paciente composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

17. Método de inibição de AHR em uma amostra biológica, caracterizado pelo fato de que compreende contatar a amostra biológica com o composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

18. Método para o tratamento de um distúrbio mediado por AHR, em um paciente em necessidade do mesmo, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao referido paciente composto, como definido na reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

19. Método, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que o distúrbio mediado por AHR é um câncer.

20. Método, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que o distúrbio mediado por AHR é um distúrbio anti-inflamatório.

21. Método, de acordo com a reivindicação 18,

Petição 870190105888, de 18/10/2019, pág. 698/704

17/17 caracterizado pelo fato de que o composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é administrado como parte de uma composição farmaceuticamente aceitável.

22. Método, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pelo fato de que o composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é administrado oralmente.

23. Método, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que o composto ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é administrado em uma faixa de 0,01 a 100 mg/kg de peso corporal do paciente.