BR112019018649A2 - inibidores jak derivados da fusão de imidazopiperidina - Google Patents

Abstract

a invenção fornece compostos de fórmula (i): (i) onde as variáveis estão definidas na especificação, ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, portanto, que são úteis como inibidores de jak quinases. a invenção também fornece composições farmacêuticas que incluem tais compostos, métodos de uso de tais compostos para tratar doenças respiratórias e processos e intermediários úteis para preparar tais compostos.

Description

INIBIDORES JAK DERIVADOS DA FUSÃO DE IMIDAZOPIPERIDINA

HISTÓRICO DA INVENÇÃO

Campo da invenção [001J A invenção é direcionada a compostos úteis como inibidores da JAK quinase. A invenção também é direcionada a composições farmacêuticas que incluem tais ompostos, métodos de uso de tais compostos para tratar doenças respiratórias e processos e intermediários úteis para preparar tais compost

Esrado da nécnica [002] A asma é uma doença crônica das vias aéreas para a qual não há prevenção ou cura. A doença é caracterizada por inflamação, fibrose, hiper-responsividade e remodelamento das vias aéreas, que contribuem, para a limitação do fluxo de ar. Estima-se 300 milhões de pessoas em todo o mundo sofrem de asma e estima-se que o número de pessoas com asma vai crescer em mais de 100 milhões até 2025. Nos Estados Unidos, a asma acomete cerca de 6 % a 8 % da população, tornando-a uma das doenças crônicas mais comuns no pais. Embora a maioria dos pacientes pode obter o controle dos sintomas de asma com o uso de corticoides inalatórios que podem ser combinados com. um modificador de leucotrieno e/ou um beta-agonista de longa ação, continua a existir um subconjunto de pacientes com asma grave cuja doença não é controlada com as terapias convencionais. A asma persistente grave é definida como doença que permanece não controlada em doses altas de corticoides inalatórios.

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Embora os asmáticos graves sejam estimados em cerca de aproximadamente 5% de todos os doentes de asma, eles têm. alto risco de morbidade e mortalidade e são responsáveis por uma parte desproporcional do uso dos serviços de saúde entre os asmáticos. Ainda existe a necessidade de novas terapias para tratar esses pacientes.

[003] As citocinas são moléculas de sinalização intracelular que incluem quimiocinas, interferonas, interleucinas, linfocinas e fator de necrose tumoral. As citocinas são criticas para o crescimento celular normal e a imunorregulação, mas também disparam doenças mediadas pelo sistema imune e contribuem para o crescimento de células malignas. Níveis elevados de várias citocinas estão envolvidos na patologia da inflamação da asma. Por exemplo, foi demonstrado que as terapias baseadas em anticorpos direcionadas para interleucinas (IL)-5 e 13 fornecem benefício clinico em. subconjuntos de pacientes asmáticos graves. Entre as citocinas envolvidas na inflamação da asma, muitas agem por meio de vias de sinalização dependente da família Janus de tirosina quinases (JAKs), que sinalizam, via a família de Transdutor de sinal e Ativador de transcrição (STAT) de fatores de transcrição. As citocinas envolvidas na inflamação da asma que sinalizam pela via JAK-STAT incluem IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-9, IL-11, IL-13, IL-23, IL31, IL-27, polioxietileno estromal tímica (TSLP), gamainterferona (ΙΕΝγ) e fator estimulante para colônia de granulócitos-macrófagos (GM-CSF).

[004] A família JAK é composta por quatro membros, JAK1, JAK2, JAK3 e tirosina quinase 2 (TYK2). A ligação da citocina a um receptor de citocina dependente de JAK induz a

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3/136 dimerização do receptor que resulta na fosforilação de

resíduos de t	irosii	ia na JAK quii	lase, ativando	a JAK. As JAKs
f o s f o r i 1 a. d a s,	por í	sua vez, se 1:	igam e fosforil	Lam várias
proteínas STA	,T que	dimerizam., ii	11 e rn a1i z am η o	núcleo da

célula e modulam diretamente a transcrição do gene, levando entre outros efeitos, a efeitos downstream associados com a doença inflamatória. As JAKs em geral se associam com receptores de citocina em pares como homodimeros e heterodímeros. As citocinas especificas estão associadas com pareamentos específicos de JAK. Cada um dos quatro membros da família JAK está envolvido na sinalização de pelo menos uma das citocinas associadas com. a inflamação da asma. Consequentemente, um inibidor químico com atividade global contra todos os membros da família JAK podería modular uma ampla gama de vias pró-inflamatórias que contribuem para a asma grave.

[005] Entretanto, o amplo efeito anti-inflamatório de tais inibidores pode suprimir a função das células imunológicas normais, levando potencialmente ao aumento do risco de infecção. A evidência do aumento do risco de infecção foi observada com o inibidor de JAK tofacitinibe, que é administrado por via oral para o tratamento da artrite reumatoide. Na asma, a inflamação está localizada no trato respiratório. A inflamação das vias aéreas é característica de outras doenças respiratórias além, da asma. Doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), fibrose cística (FC), pneumonite, doenças intersticiais pulmonares (incluindo a fibrose pulmonar idiopática), lesão pulmonar aguda, síndrome da angústia respiratória aguda, bronquite, enfisema, bronquiolite obliterante e sarcoidose também são doenças do

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4/136 trato respiratório nas quais acredita^-se que a tisiopatoloqia está relacionada às citocinas sinalizadoras JAK. A administração local de um. inibidor de JAK para os pulmões por inalação oferece o potencial de ser terapeuticamente eficaz ao fornecer um potente agente anticitocina diretamente no local de ação, limitando a exposição sistêmica e, portanto, limitando o potencial para imunossupressão sistêmica adversa. Permanece a necessidade de um potente inibidor JAK adequado para a administração local para os pulmões para tratamento de doença respiratória.

[0061 As citocinas sinalizações JAK desempenham também um papel importante na ativação das células T, um. subtipo de células imunes que é central para muitos processos imunológicos. A ativação patológica das células T é fundamental na etiologia de várias doenças respiratórias. As células T autorreativas desempenham, um papel na bronquiolite obliterante com. pneumonia em organização (também chamada BOOP). Similar a BOOP, a etiologia das rejeições de transplante pulmonar está associada a uma ativação aberrante da ativação das células T dos receptores pelo pulmão transplantado do doador. As rejeições de transplante pulmonar podem ocorrer cedo como disfunção primária do enxerto (PGD), pneumonia em organização (PO), rejeição aguda (RA) ou bronquiolite linfocítica (BL) ou elas podem ocorrer anos após o transplante pulmonar como disfunção crônica do enxerto pulmonar (CLAD). A CLAD era anteriormente conhecida como bronquiolite obliterante (BO), mas agora é considerada, uma. síndrome que pode ter diferentes manifestações patológicas incluindo BO, CLAD restritiva (rCLAD ou RAS) e disfunção neutrofílica do enxerto. A

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 19/165 disfunção crônica do enxerto pulmonar (CLAD) é um grande desafio para o manejo em longo prazo dos receptores de transplante pulmonar visto que ela faz com. que o pulmão transplantado perda sua funcionalidade de forma progressiva (Gauthier et. al., Curr Transplant R.ep. , 2016, 3(3) , 18b— 191). A CLAD é pouco sensivel ao tratamento e, portanto, permanece a necessidade de compostos eficazes capazes de prevenir ou tratar esta condição. Várias citocinas dependentes de JAK, como ΙΕΝγ e IL-5 são superregulados na CLAD e na rejeição do transplante de pulmão (Berastegui et al, Clin Transplant. 2017, 31, el2898). Além disso, altos níveis de quimiocinas CXCR3 pulmonares como CXCL9 e CXCL10 que estão a jusante a sinalização de IFN dependente de JAK estão relacionados a piores desfechos nos pacientes submetidos a transplante de pulmão (Shino et al, PLGS One, 2017, 12 (7), e0180281). Foi demonstrado que a inibição sistêmica de JAK é eficaz na rejeição do transplante renal (Vicenti et al., American Journal of Transplantation, 2012, 12, 2446-56). Portanto, os inibidores de JAK têm o potencial para serem eficazes no tratamento ou prevenção do transplante pulmonar e CLAD. Eventos similares à ativação de células T como descrito como a base para a rejeição do transplante pulmonar também são considerados o principal fator da doença do enxerto contra, o hospedeiro pulmonar (DECH) que pode ocorrer após transplante de células-tronco hematopoiéticas. Similar à CLAD, a DECH pulmonar é uma condição progressiva com desfechos extremamente fracos e não existe tratamento atualmente aprovado. Um estudo de pesquisa multicêntrico, retrospectivo de 95 pacientes com DECH agudo ou crônico refratário a esteroide que receberam, o inibidor

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6/13 6 sistêmico de JAK ruxolitinibe como terapia de resgate demonstrou resposta completa ou parcial para ruxolitinibe na maioria dos pacientes, incluindo aqueles com DEUH pulmonar (Zeiser et al, Leukemia, 2015, 29, 10, 2062-68). Como a inibição sistêmica do JAK está associada a eventos adversos graves e a um pequeno índice terapêutico, permanece a necessidade de um inibidor não sistêmico de JAK, direcionado para o pulmão para evitar /ou tratar a rejeição do transplante pulmonar ou DECK pulmonar.

RESUMO DA INVENÇÃO [007] Em um aspecto, a invenção fornece novos compostos com atividade como inibidores da JAK quinase.

[008] Consequentemente, a invenção fornece um composto de fórmula (I):

R¹ é selecionado a partir do

Cs-ecicloalquil, e X é selecionado

CH₂R¹⁶, ou hidrogênio, Ci-aalquil, e o

a partir de -C(O)R e R¹ é selecionado partir de — (CH₂) 2NR^2uR'~ e um heterociclo de 4 a 6 membros contendo um átomo de nitrogênio, onde um átomo de nitrogênio é opcionalmente substituído por R^z2 e X é selecionado a partir de -CH₂OR²'³ e -C (O) OR²⁴,

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7/136 onde

R^z é selecionado a partir de -NR¹³R¹⁴ e -OR¹⁵, e R¹⁴ era conjunto com o átorao de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo monociclico ou biciclico de 6 ou 7 membros contendo um átomo de nitrogênio adicional, onde o átomo de nitrogênio adicional é substituído por R³ e o heterociclo é opcionalmente substituído por um ou dois R⁴ ou

Rt° e R¹⁴ em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 a 6 membros, onde o heterociclo é opcionalmente substituído por -NR⁵R⁶ e R⁷, ou

R^1J e R¹⁴ em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam morfolinil, ou

R¹³ é R⁸ e R¹⁴ é R⁹,

R³ é selecionado a partir de hidrogênio, C₃_ scycloalquil e Ci-₃alquil, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por -OH ou -OCi-₃alquil,

R⁴ é Ci-₃alquil, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por -OH,

R” e R^b são independentemente Ci-₃alquil ou R“ e R° em conjunto com o átomo de nitrogênio a que estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros, incluindo opcionalmente um átomo de oxigênio,

R·' é Ci-₃alquil, opcionalmente substituídos por um.

heterociclo de 5 ou 6 membros contendo um átomo de nitrogênio,

R⁸ é hidrogênio ou Ci-₃alquil,

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R^y é - (CH₂) 2NR^±0R¹¹ou um heterociclo de 4 a 6 membros contendo ura átomo de nitrogênio, onde ο nitrogênio é opcionalmente substituído por R~²,

R*° θ Rn _s~_o i_nd_ependentemente Ci-salquil ou R^lu e R¹¹ em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros,

Rⁱ² é Ci-3&lquil ou C3-6cicloalqu.il, onde C1-3alqu.il é opcionalmente substituído por -ΌΗ,

RC⁵ é selecionado a partir de Ci-₃alquil, C3ecicloalquil e um heterociclo de 5 ou 6 membros, incluindo um heteroátomo selecionado a partir de nitrogênio e oxigênio, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por -OH ou -N (Ci-₃alquil) _3f e um heterociclo e 5 ou 6 membros é opcionalmente substituído por Ci₃alquil,

R⁶ é selecionado a partir de — NR~⁷R²⁸ e —OR²',

R*' e R*° são independentemente Ci_4alquil ou C₃_ scicloalquil ou R¹' e R¹⁸ em conjunto com o átomo de nitrogênio a que estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros, incluindo opcionalmente um átomo de oxigênio, onde o heterociclo é opcionalmente substituído por Ci-₃alquil,

R^iy, R²⁰, R²ⁱ, R²², R^z' e R^z4 são independentemente seiecionaoos a partir de Ci-salquil, ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

[009J Como usado a seguir, a frase composto da fórmula (I), significa um composto da fórmula (I) ou seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, ou seja, esta frase significa um composto da fórmula (I) na forma de base

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9/13 6 livre ou na forma de sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, exceto se indicado de outra forma.

[0010] A invenção também fornece uma composição farmacêutica que inclui um composto da invenção e um. carreador aceitável do ponto de vista farmacêutico.

[0011] A invenção também fornece um método para tratar doença respiratória inflamatória, em particular, a asma, em um mamífero, o método incluindo a administração ao mamífero de um composto ou uma composição farmacêutica da invenção. Em aspectos separados e distintos, a invenção também, fornecer processos sintéticos e intermediários aqui descritos úteis para preparar os compostos da invenção.

[0012] A invenção também fornece um composto da invenção como aqui descrito para uso na terapia médica, assim como o uso de um composto da invenção na fabricação de uma formulação ou medicamento para tratar doença resoiratória em um mamífero.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO [0013] Entre outros aspectos, a invenção fornece inibidores da JAK quinase da fórmula (I), seus sais aceitos do ponto de vista farmacêutico e intermediários para sua preparação. Os substituintes e valores a seguir destinam-se a fornecer exemplos representativos de vários aspectos desta invenção. Esses valores representativos destinam-se a definir tais aspectos e não se destinam a excluir outros valores ou a limitar o escopo da invenção.

[0014] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio, Ci-salquil, e C3-6cicloalqu.il.

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10/136 [0015] Em outro aspecto específico, R^± é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-3alquil. Ainda em outro aspecto, R¹ é Ci-3 alquil.

[0016] Os valores específicos de R¹ incluem., mas não estão limitados a, metil, etil, n-propil e isopropil.

[0017] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-3alquil e X é -C(O)R², onde R^z é NR¹³R¹⁴, onde R^1J e R¹⁴ em. conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo monocíclico ou bicíclico de 6 ou 7 membros contendo um átomo de nitrogênio adicional, onde o átomo de nitrogênio adicional é substituído por R° e o heterociclo é opcionalmente substituído por um ou dois R⁴; R³ é selecionado a partir de hidrogênio, Cs-ecicloalquil, e Ci-salquil, onde Ci-salquil é opcionalmente substituído por -OH ou -OCi-3alquil; e R⁴ é Ci_₃alquil, opcionalmente substituído por -OH.

[0018] Os valores específicos de R³ incluem., mas não estão limitados a, hidrogênio, ciclopropil, ciclopentil, ciclohexil, metil, etil, propil, isopropil, tert-butil e hidroxiet.il.

[0019] Os exemplos de valores de R/¹ incluem, mas não estão limitados a, metil, etil e hidroximetil.

[0020] Em outro aspecto específico, Rò é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-aalquil ou R¹ é C1-3alqu.il e X é -C(O)R², onde R² é selecionado a partir de

onde R³ é hidrogênio ou Ci-salquil, onde Ci-salquil é opcionalmente substituído por -OH; a é 0, 1, ou 2; b é 1 ou

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2; desde que quando a for 0, R^J é Ci-₃alquil, onde Ci-₃alqui é opcionalmente substituído por —OH; e R'¹, quando presente [0021] Em. outro aspecto ainda, R¹ é selecionado a.

partir de hidrogênio e Ci-aalquil ou R'^; é i-3alquil e X é -~C(O)R² onde R^z é selecionado a partir de

onde

R^J é Ci-3alquil ou -(CH2)2OH; R^J£ é Ci-3alquil; a é 0, ou e R⁴, quando presente, é Ci-₃alquil.

[0022]

Em um aspecto específico,

R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-₃alquil e X é -C(O)R^Z, onde R² é NR^loR~⁴, onde R~³ e Rⁱ⁴ em conjunto com o átomo de nitrogênif ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 a 6 membros, onde o heterociclo é opcionalmente substituído por -NR°R° e R⁷; R'^J e R⁶ são Ci-₃alquil independentemente ou e R⁶ em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros opcionalmente incluindo um. átomo de oxigênio; e R^z é i_ ₃alquil, opcionalmente substituído por um heterociclo de 5 ou 6 membros contendo um átomo de nitrogênio. Em um aspec particular, R' é um Ci-₃ alqu.il, opcionalmente substituído por pirrolidinil.

[0023] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-aalquil e X é -C(O)R^Z onde R² é

onde R’ e R° são Ci_₃alquil ou R⁵

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 26/165 independentemente e R^D em conjunto com — (CHz) 4-5— e R^z é hidrogênio ou Ci-₃alquil.

[0024] Em outro aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci_₃alquil e X é -C(O)R^Z onde R² é um grupo selecionado a partir de:

ou Ci-₃alquil, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por

OH; a e 0, 1, ou 2; be .1. ou 2; n, , quancto presente, e Οχ₃alquil; desde que quando a for 0, R° é Ci_₃alquil, onde Ci-..₃alquil é opcionalmente substituído por -OH; R³ e R° são Ci-₃alquil independentemente ou R° e R° juntos formam -(0¾¾..

5-; e R' é hidrogênio ou Ci-₃alquil.

[0025] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci_₃alquil e X é ~C(O)R onde R² é - NR¹³R¹⁴, onde R¹³ e R¹⁴ juntos com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam morfolinil.

[0026] Em. um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci_3alquil e X é -C(O)R^Z onde R² é NR¹³Rf⁴, onde R^;o é R⁸ e R¹⁴ é R⁹; R⁸ é hidrogênio ou Cq.. 3alquil; R⁹ e - (CiqqNR^R¹¹ ou um heterociclo de 4 a 6 membros contendo um átomo de nitrogênio, onde o átomo de nitrogênio é substituído por R¹²; R^1U e R¹* são Ci_3alquil independentemente ou R¹⁰ e R¹¹ juntos com c· átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros e R¹² é Ci-3alquil ou C₃-6CÍcloalquil, onde Ci ₃alquil é opcionalmente substituído por —OH.

[0027] Em. outro aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Cq..₃alquil e X é -C(0)R² onde R² é Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

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NR¹³R’^l4, onde Rd'³ é R⁸ e Rⁱ⁴ é R⁹; R⁸ é Ci-aalquil; R^y é (CH2) 2NR^1uR·¹ ou piperidinil, onde piperidinil é substituída no átomo de nitrogênio por R¹; R¹⁰ e R^x~ são Ci-aalquil independentemente; e R¹² é Ci-aalquil ou C₃_6cicloalquil, onde Ci-salquil é opcionalmente substituído por —OH.

[0028] Em outro aspecto específico, R^± é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-3alquil e X é -C(O)R² onde R² é NR¹³R¹⁴, onde R¹³ é R⁸ e R¹⁴ é R⁹; R⁸ é -CH3; R⁹ é ~ (CH₂) ₂NRⁱ⁰R¹¹

N-R¹² alquil independentemente e Rⁱ² iquil.

[0029] Em onde R iquil e um membros li um oxigênio, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por ou --N ÍCi-salquil) 2/ e um heterociclo de 5 ou 6 membros é opcionalmente substituído por Ci-₃alquil.

0030] Em outro aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-₃alquil, e X é -C(O)R² onde R^z é OR¹³, onde R¹³ é selecionado a partir de Ci-₃alquil, C3scicloalquil e um heterociclo de 5 ou 6 membros, incluindo um heteroátomo selecionado a partir de nitrogênio e oxigênio, onde Ci_₃alquil é opcionalmente substituído por -OH e um. heterociclo e 5 ou 6 membros é opcionalmente substituído por Ci-₃alquil.

[0031] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-₃alquil, e X é -CH₂R¹⁶, onde R^lc é NR^x7R¹⁰, onde R^1? e RC⁸ são Ci-4aiquil ou C3-5c1cloalqu.il

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14/136 independentemente ou R¹' e R¹⁸ juntos com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros, incluindo opcionalmente um átomo de oxigênio, onde o heterociclo é opcionalmente substituído por Ci_3alquil.

[0032]	Em	outrt	□ aspecto eí	spec	ífico, Rf é	selecionado a
partir de hi	drogênio	e Ci-aalquil	, θ	X é -CH2R16,	onde R1q é —
NRlzRi8, onde	R17	e R18	s a o C i - 4 a 1 q i	lil	ou C.3-.5cicloa	lqui.1

independentemente ou R^1/ e R¹⁸ juntos com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros, onde o heterociclo é opcionalmente substituído por Ci-salquil.

[0033] Em. um. aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-aalquil, e X é -CH₂R^1S, onde R¹⁶ é - OR , onde R e hidrogênio ou Ci-aaiqun.

[0034] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de - (CH₂) 2NR^z0R^zl e um heterociclo de 4 a 6 membros contendo um átomo de nitrogênio, onde um. átomo de nitrogênio é opcionalmente substituído por R^z e X é -CH₂OR^z8, onde R^zU, R^zz, R²² e R²³ são independentemente selecionados a partir de hidrogênio e Ci-aalquil.

[00.35] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de - (CH₂) ₂NR^zUR²¹ e um heterociclo de 4 a 6 membros contendo um átomo de nitrogênio, onde um átomo de nitrogênio é opcionalmente substituído por R^z2 e X é -C(O) OR²⁴, onde R²⁰,

R~, R²² e R²⁴ são independentemente selecionados a partir de hidrogênio e Ci-3alquil.

[0036] Em um aspecto específico, R¹ é selecionado a partir de ” (CH₂) ₂NR²⁰R²¹,

N-R²²

selecionado a partir de -CH₂OR²³ e -C(O)OR²⁴, onde R²⁰, R²¹,

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R^z2, R²⁸, e R^z4 são independentemente selecionados a parti hidrogênio e Ci-₃alquil.

[0037] Em outro aspecto, a invenção fornece ura composto da fórmula (II):

onde:

R¹ é Ci-aalquil;

R² é um grupo selecionado a partir de:

e - NR⁸R^S, onde

R'· é hidrogênio ou Ci_.₃alquil, onde Ci-aalquil é opcionalmente substituído por —OH, ã é 0, 1, OU 2, b é 1 ou 2,

R⁴ quando presente, é Ci-aalquil, desde que quando a for 0, R^J é C1-3alqu.il, onde ₃alquil é opcionalmente substituído por —OH,

R° e R⁶ são independentemente Ci-3alquil ou R⁸ e em conjunto com -(CH2 )4..5-,

R' é hidrogênio ou Ci_₃alquil,

R⁸ é- CH₃,

R^s é - (CH₂) ₂NR¹⁰R^í1 ou

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 30/165 j_ ò 1 ò

Rd⁰ θ Rn _s ~_o C1-3alqu.il independent emente _f e

R^{1 z} é C i - 3 a 1 q u .i 1;

ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

[0038] Em outro aspecto, a invenção fornece um composto selecionado a partir dos seguintes compostos:

((S)-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil)-lu-indazol-

3-il)-5-propil-4,5,6,7-tetraidro~3H-imidazo[4,5-c]piridin-6 il) ( (IS, 4S) -5--metil-2,5-diazabiciclo- [2.2.1] heptan-2- i1)metanona, ((S)-3-(dimetilamino)pirrolidin-l-il)((S)-5-etil-2-(6(2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-4,5,6,7tetraidro-'377-imidazo [ 4,5-c] piridin-6-il) metanona, (S)-(2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-hidroxifnil)-lH-indazol-3 il)-5-isopropil-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridin-

6-il)(4-metil-l,4-diazepan-l-il)metanona, ((S)-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil)-líFindazol-

3-il)-5-meti1-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridin-6il)((R)-4-(2-hidroxietil)-2-metil-piperazin-l-il)metanona, (S) - (2- (6- (2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil) -lu-indazol3-il)-5-propil-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridin-6 il)(4-(2-hidroxietil)piperazin-l-il)metanona, e seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

[0039] Em ainda outro aspecto, a invenção fornece um composto onde o composto é((S)-2,4-dimetilpiperazin-lil) ( (S) -2- (6- (2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil) -l.H-indazol-3il)-5-meti1-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[5,4-c]piridin-6il)metanona ou um sal aceitável do ponto de vista f a rma c ê u t .i c o .

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17/136 [0040] Em ainda outro aspecto, a invenção fornece um composto onde o composto é (A)-N-(2-(dietilamino)etil)-5etil-2- ( 6- (2~etil~5-fluoro~4--hidroxifenil) “lH-indazol-3-il) N-metil-4,5,6,7-tetraidro~3H~imidazo[5,4-c]piridina-6~ carboxamida ou um sal aceitável do ponto de vista f a rma c ê u t i c o.

[0041] Em. ainda, outro aspecto, a invenção fornece um. composto onde o composto é ((S)-2-(6-(2~etil~5~fluoro-4~ hidroxifenili-lH-indazol-3-il)-5-propil-4,5, 6, 7-tetraidro3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)((IS,4S)-5-metí1-2,5diazabiciclo-[2.2.1]heptan-2-il)metanona da fórmula

relatório de acordo com as convenções da 1UPAC como

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18/136 implementado no programa ChemDraw (PerkinElmer, Inc.,

Cambridge, MA). Por exemplo, o composto do Exemplo 1:

F

é designado como ((Sj-2-(6-(2-etil-5-fluoro“4-hidroxifenil)lH-indazol-3-il) -5-propil-4,5, 6, 7-tetraidro-3H-imidazo [4,5-

c]piridin-6-il)((IS, 4S)-5-meti1-2,5-diazabiciclo- [2.2.1]heptan-2-il)metanona.

[0045] Além disso, a porção imidazo do grupo tetraidroimidazopiridina na estrutura da fórmula (I) existe nas formas tautoméricas, ilustradas abaixo para um fragmento do composto de Exemplo 1

A

B

De acordo com a convenção da IUPAC, origens a diferentes numerações dos estas representações dão átomos da porção imidazo1: 2 - (lA-indazol-3-il)-4,b,6,7-tetraidro-lnimidazo[4,b-c]piridina (estrutura A) versus 2

1H—1nda zo1 — 3 — il)-4,5,6,7-tetraidro-3H- imidazo[4,5-c]piridina (estrutura

B). Deve-se compreender que, embora as estruturas sejam apresentadas ou nomeadas, em uma forma particular, a invenção também inclui seu tautômero.

[0046] Os compostos da invenção podem conter um ou mais centros quirais e, portanto, tais compostos (e seus intermediários) podem existir como misturas racêmicas,

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 33/165 estereoisômeros puros (por ex., enantiômeros ou diastereômeros) misturas enriquecidas com estereoisômeros e semelhantes. Compostos quirais mostrados ou nomeados aqui sem uma estereoquímica definida em um centro quiral destinam-se a: qualquer uma ou todas as possíveis variações de estereoisômero no estereocentro indefinido, a menos que seja indicado o contrário. A representação ou nomeação de um. determinado estereoisômero significa que o estereocentro indicado tem a estereoquímica indicada com a compreensão de que pequenas quantidades de outros estereoisômeros também podem estar presentes, a menos que indicado de outra forma, desde que a utilidade do composto descrito ou chamado não é eliminada pela presença de outro estereoisômero.

[0047] Os compostos da fórmula (I) também têm vários grupos básicos (por exemplo, grupos amino) e, portanto, tais compostos podem existir como a base livre ou várias formas de sal, como uma forma de sal monoprotonado, diprotonado, triprotonado, ou suas misturas. Todas essas formas estão incluídas no escopo de aplicação da presente invenção, salvo indicação ao contrário.

[0048]	A presente invenção incli	ai tan	foém compostos da
fórmula (I)	marcados com isótopos,	ou	seja.	compostos da
fórmula (I)	onde um ou mais átomos	foi	. subs	tituído ou
enriquecido	com um átomo com o mesi	ro r	i úmero	atômico, mas cor

massa atômica diferente da que predomina na natureza.

Exemplos de isótopos que podem ser incorporados em um composto de fórmula (I) incluem, mas não estão limitados a, ²H, ³H, ⁿC, ¹³C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵N, ¹⁵O, ¹⁷O, ¹⁸O. De particular interesse são os compostos da fórmula (I) enriquecidos com. trítio, ou carbono-14, que podem, ser usados, por exemplo, em.

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20/136 estudos de distribuição tecidual. De particular interesse são também compostos de fórmula (I) enriquecidos com. deutério, especialmente em. um sitio do metabolismo, cujos compostos tenham, maior estabilidade metabólica. Além, disso, de particular interesse são compostos de fórmula (I) enriquecidos com um isótopo emissor de positrons, como, por exemplo, “C, ^lo0 e ¹³N, cujos compostos podem, ser utilizados, por exemplo, em estudos de Tomografia por Emissão de Positrons (PET).

Definições [0049] Ao descrever a. presente invenção, incluindo seus diversos aspectos e modalidades, os seguintes termos têm o seguinte significado, salvo indicação em contrário.

[0050] O termo alquil significa um grupo de hidrocarbonetos monovalentes saturados que pode ser linear ou ramificado ou suas combinações. A menos que de outra forma definido, tais grupos alquil normalmente contêm de 1 a 10 átomos de carbono. Os grupos alquil representativos incluem, por exemplo, metil (Me), etil (Et), n~propil (n-Pr) ou (nPr), isopropil (i-Pr) ou (iPr), n-butil (n-Bu) ou (nBu), sec-butil, isobutil, terc-butil (t-Bu) ou (tBu), npentil, n-hexil, 2,2-dimetilpropil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, 2-etilbutil, 2,2-dimetilpentil, 2-propilpentil e similares.

[0051] Quando um determinado número de átomos de carbono é destinado para um determinado nome, o número de átomos de carbono é mostrado antes do nome. Por exemplo, o termo C1-3 alquil significa um. grupo alquil com 1 a 3 átomos de carbono, onde os átomos de carbono estão em

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21/136 qualquer configuração quimicamente aceitável, incluindo configurações lineares ou ramificadas.

[0052] O termo cicloalquil significa um. grupo carbocíclico monovalente saturado que pode ser monocíclico ou multicíclico. A menos que de outra forma definido, tais grupos cicloalquil normalmente têm de 3 a 10 átomos de carbono. Os grupos representantes do cicloalquil incluem, por exemplo, ciclopropil (cPr), ciclobutil (cBu), ciclopentil, ciclohexil, cicloheptil, ciclo-octil, adamantil e similares.

[0053] O termo cpropil significa ciclopropil.

[0054] O termo heterociclil, heterociclo, heterocíclico ou anel heterocíclico significa um. grupo cíclico não aromático monovalente saturado ou parcialmente insaturado, com 3 a 10 átomos de anel total, onde o anel contém de 2 a 9 átomos de carbono e de 1 a 4 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Os grupos podem, ser heterocíclicos monocíclicos ou.

multicíclicos (ou seja, unidos ou ligados por pontes). Os grupos representativos de heterocíclicos incluem, por exemplo, pirrolidinil, piperidinil, piperazinil, imidazolidinil, morfolinil, tiomorfolil, indolin-3--il,

2-imidazolinil, tetraidropiranil, 1,2,3,4tetraidroisoquinolin-2-il, quinuclidinil, 7-azanorbornanil, nortropan.il, e similares, onde o ponto de fixação está em qualquer átomo de carbono ou nitrogênio disponível no anel. Quando o contexto torna o ponto de fixação do grupo heterocíclico evidente, tais grupos podem, alternativamente ser referidos como espécies não valentes, isto é, pirrolidina, piperidina, piperazina, imidazol, tetraidropirano, etc.

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22/136 [0055] O termo halo sicjnifica fluoro, cloro, bromo [0056] O termo quantidade terapeuticamente eficaz significa uma quantidade suficiente para tratar quando administrado a um doente que precisa de tratamento.

[0057] o termo para tratar ou tratamento significa atenuar ou suprimir a doença ou distúrbio médico a ser tratado (p. ex., uma doença respiratória) um paciente (particularmente um humano); ou aliviar os sintomas da condição médica, doença ou distúrbio médico.

[0058] O termo sal aceitável do ponto de vista farmacêutico significa um sal que é aceitável para a administração a um paciente ou a um mamífero, como um humano (por exemplo, sais com segurança aceitável em mamíferos para um determinado esquema de dosagem). Os sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico incluem sais de ácido acético, ascórbico, benzenossulfônico, benzoico, canforsulfônico, cítrico, etanossulfônico, edisílico, fumárico, gentísico, glicônico, glicurônico, glutâmico, nipúrico, bromídrico, clorídrico, isetionônico, lático, lactobiônico, maleico, málico, mandélico, metanossulfônico, múcico, naftalenossulfônico, naftaleno-1,5-dissulfônico, naftaleno2,6-dissulfônico, nicotínico, nítrico, orótico, pamoico, pantotênico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, ptoluenossulfônico e xinafoico e similares.

[0059] O termo seu sal significa um composto formado quando o hidrogênio de um ácido é substituído por um átion, como um cátion de metal ou um cátion orgânico e similares. Por exemplo, o cátion pode ser uma forma protonada de um composto da fórmula (1), ou seja, uma forma

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23/136 onde um ou mais grupamentos amino foram protonados por um ácido. Normalmente, o sal é um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, embora isso não seja necessário para sais de compostos intermediários que não são indicados para administração a um paciente.

[0060] O termo grupo de proteção do amino signifies um grupo de proteção adequado para prevenir reações indesejáveis em um. nitrogênio do amino. Os grupos representantes de proteção do amino incluem, mas não estão limitados a, formil; grupos acil, por exemplo, grupos alcanoil, tais como grupos acetil e tri-fluoroacetil; grupo alcoxicarbonil, tais como terc-butoxicarbonil (Boc); grupos arilmetoxicarbonil, como benziloxicarbonil (Cbz) e

9-fluorenilmetoxicarbonil (Fmoc); grupos arilmetil, tais como benzil (Bn) , tritil (Tr) , e l,l~di-<4’~ metoxifen.il ) metil; grupos silil, tais como grupos trimetilsilil (TMS), terc --but ildimetilsil.il (TBDMS) , [2(trimetilsilil)-etoxi]metil (SEM); e similares.

[0061] 0 termo grupo de proteção do hidroxi significa um grupo de proteção adequado para prevenir reações indesejáveis em um. grupo hidroxi. Os grupos de proteção do hidroxi representantes incluem, mas não estão limitados a, grupos alquil, como metil, etil e tert-butil; grupos acil, por exemplo, grupos alcanoil, como acetil; grupos arilmetil, como benzil (Bn), p-metoxibenzil (PMB), 9-fluorenilmetil (Fm) e difenilmetil (benzidril, DPM); grupos silil, como trimetilsilil (TMS) e tert~ butildimetilsilil (TBS); e similares.

[0062] Numerosos grupos protetores e sua introdução í remoção são descritos em. T. W. Greene e P.G.M. Wuts,

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Protecting Groups in Organic Synthesis, terceira edição, Wiley, Nova York

Procedimentos gerais de síntese [0063] Os compostos desta invenção, e seus intermediários, podem ser preparados de acordo com os seguintes métodos e procedimentos gerais utilizando materiais de partida e reagentes disponíveis comercialmente ou preparados na rotina. Os substituintes e variáveis (por exemplo, R¹, R^z, R³, R⁴, etc.) usados nos esquemas a seguir têm o mesmo significado como os definidos neste documento, a menos que seja indicado o contrário. Além disso, compostos com átomo ácido ou básico ou grupo funcional podem ser usados ou podem ser produzidos como um sal, a menos que indicado de outra forma (em alguns casos, o uso de um sal em uma reação particular vai exigir a conversão do sal para a forma, não sal, por exemplo, uma base livre, usando procedimentos de rotina antes de realizar a reação).

[0064] Apesar de uma determinada modalidade da presente invenção pode ser mostrada ou descrita nos procedimentos a seguir, aqueles que são versados na técnica vão reconhecer que outras modalidades ou aspectos da presente invenção também podem ser preparados com tais procedimentos, ou usando outros métodos, reagentes e materiais conhecidos por aqueles que são versados na técnica. Em particular, será apreciado que os compostos da invenção podem, ser preparados por várias vias de processo em que os reagentes são combinados em diferentes ordens para fornecer diferentes intermediários na via e produzir os produtos finais.

[0065] Um método geral de preparação dos compostos finais da invenção na qual a variável X é definida como Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

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C(O)PÚ e R* é C1-3alqu.il utiliza um intermediário chave 1 e uma amina de fórmula 2 como ilustrado comumente no Esquema 1 e, em particular, para um exemplo em que R é definido como

2a para exemplificar especificamente um produto final amida representante da fórmula (II).

Esquema 1

(II)

[0066] Para preparar os compostos de amida da fórmula (II), o ácido carboxílico da Fórmula 1 reagiu com a amina 2 de acordo com. as condições típicas de formação de ligação amida. Tipicamente, o ácido carboxílico 1 entra em contato com cerca de 1 a 4 equivalentes da amida 2 na presença de um excesso de base. Como é demonstrado nos exemplos a seguir, a reação de formação da ligação amida pode utilizar agentes de acoplamento, como hexafluorofosfato de

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6 /1 ci 6

Ν,Ν,Ν’ ,Ν'-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-l-il)urônio (HATU) ou outros acyent.es amida de acop.larri.ento conhecidos na. técnica. A reação é conduzida a temperatura ambiente entre cerca de 2 e 2 4 horas ou. até que a reação esteja consideravelmente concluída.

[0067] Compostos nos quais a variável X é definida como -C(O)OR^lj podem ser preparados por uma reação de esterificação do ácido carboxílico da fórmula 1 com um álcool de fórmula HO-R¹⁵ onde o ácido 1 entra em. contato com um grande excesso de álcool, por exemplo, 25 equivalentes de álcool, na presença de um reagente de acoplamento como HATU e um excesso de base. Onde R¹⁵ é definido como um. heterociclo substituído por Ci-aalquil, um reagente álcool sem o substitute· alquil pode ser usado na reação de esterificação e um substituto alquil é adicionado em uma etapa subsequente.

[0068] 0 ácido carboxílico da Fórmula 1 pode ser preparado como ilustrado no Esquema 2

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Pg'¹ representam diferentes grupos de proteção amino. Como descrito nos exemplos a seguir, uma escolha útil de grupos de proteção é o benzil ou metil como Pg¹, tetraidropiranil (THP) como Pg¹, tert-butoxicarbonil ÍBoc) ou benzil como Pg^3, e [2-(trimetilsilil)etoxi]metil (SEM) como Pg⁴. A primeira etapa do Esquema 2 é o acoplamento do paládio catalisado

Stille do intermediário 3 com o intermediário 4, onde o intermediário 3 fenil-indazol tem a porção trimetilestanil e

0' parceiro 4 da reação é o iodo substituído. A reação é conduzida a temperatura elevada, por exemplo, entre 80 °C e

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180 °C durante cerca de 10 a 24 horas ou até que a reação esteja consideravelmente concluída.

[0069] Quando o benzil é usado como Pg¹, na próxima etapa, o éster metílico do intermediário s 5 é convertido em. um. éster benzílico no intermediário 6 pela reação de 5 com. álcool benzílico. Ambos grupos protetores benzil são convenientemente removidos pela, hidrogenação do paládio catalisado para fornecer o intermediário 7 que pode ser completamente desprotegido pela reação com ácido, tipicamente, o ácido clorídrico. Em uma etapa final, o R¹ substituto é adicionado pela alquilação redutiva do intermediário 8 com um reagente R^±a onde R^la é um aldeído ou cetona definido de tal forma que com a reação, é produzido Rt Por exemplo, para adicionar um substituto metil R¹, o formaldeído é usado como reagente R^id, para adicionar uma porção isopropil como substituinte R¹, acetona é usada como reagente R^ld. A. reação é geralmente conduzida na presença de um agente redutor como cianoboroidreto e sódio ou triacetoxiboroidreto de sódio ou similar a temperatura ambiente por um período de cerca de 10 a cerca de 24 noras ou até a reação estiver substancialmente concluída.

[007 0] Os intermediários 3 e 4 podem, ser preparados a partir de materiais de partida comerciais ou de fácil preparo, como descrito em detalhes a seguir. Em particular, um processo de preparação do intermediário 3 no qual Pg é benzil e Pg° é THP que usa o acoplamento Suzuki-Miyaura do composto 9 com o composto 10 seguido por reações convencionais para adicionar o grupo trimetilestanil.

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do composto 11, que está comercialmente disponível nas formas racêmica e estereoespecítica e também pode ser preparado a partir de histidina.

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30/136 [0073] Como demonstrado no Esquema 3_; o substituto CH2NR¹⁷R^1B é adicionado a um intermediário' 12 protegido para formar um intermediário 14, que está completamente desprotegido, por exemplo, por reação com tribrometo de boro, para formar o intermediário 15. Na etapa final, o substituto R¹ é adicionado por alquilação redutiva como descrito no Esquema 2.

[0074] O intermediário aldeído 12 também é útil para a preparação de compostos finais da invenção nos quais X é definido como -CH₂OH. O composto 12 também pode estar em contato com um. agente redutor como boroidreto de sódio para fornecer um intermediário análogo ao composto 14 tendo CH₂OH no lugar de -CH₂NR¹⁷R^lb, que pode estar totalmente desprotegido e então reagir com um reagente R^±d como no Esquema 3 para fornecer os compostos nos quais X é -CíbOH· [0075] O intermediário aldeido 12 pode ser preparado ao usar a reação de Weinreb-Nahm como demonstrado no Esquema 4.

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31/136 [0076] O intermediário amida 17, que é preparado pela reação do composto 16 com dimetilidroxilamina, é seletivamente reduzido ao aldeido 12 ao entrar em contato com hidreto de litio alumínio. A. reação é conduzida a temperatura baixa, por exemplo, entre -60 °C e - 80 °C durante cerca de 1 a 3 horas ou até que a reação esteja consideravelmente concluída.

[0077] Assim, em um. aspecto do método, a invenção fornece um processo de preparação de um composto de fórmula (II) ou sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, o processo compreendendo reagir um composto de fórmula 1 com um composto de fórmula 2, como ilustrado no Esquema 1 para fornecer um composto de fórmula (II) ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

[0078] Em mais um aspecto do método, a invenção fornece um processo de preparação de um composto de fórmula 1, o processo compreendendo reagir um composto de fórmula 8 com R^xa na presença de um agente redutor, onde R^;,:i é um aldeido ou cetona definido de tal forma pela alquilação redutora do substituto R¹ onde R¹ é C1-3 alquil, está ligado ao composto de fórmula 8 para fornecer o composto de fórmula 1.

[0079] Em um aspecto adicional do método, a invenção fornece um processo de preparação de um composto de fórmula 8, o processo compreendendo desproteger um composto de fórmula 7.

[0080] Ainda em outro aspecto, a invenção fornece um composto de fórmula 1 e compostos de fórmula 7 e 8 úteis no preparo' de um composto de fórmula 1.

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Composições farmacêuticas [0081] Os compostos da invenção e seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico são normalmente usados na forma de uma composição ou formulação farmacêutica. Tais composições farmacêuticas podem vantajosamente ser administradas a um paciente por inalação. Além, disso, as composições farmacêuticas podem ser administradas a um. paciente por qualquer via. de administração aceitável, incluindo, mas não limitada a, oral, retal, nasal, tópica (incluindo a transdérmica), inalação e os tipos de administração parenteral.

[0082] Consequentemente, em um de seus aspectos de composição, a invenção é direcionada a uma composição farmacêutica compreendendo um carreador ou excipiente aceitável do ponto de vista farmacêutico e um composto da fórmula (I), onde, tal como definido acima, composto da fórmula (I), significa um composto da. fórmula (I) ou seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico. Opcionalmente, tais composições farmacêuticas podem ter outros agentes de formulação e/ou. terapêuticos se desejar. Quando falamos de composições e seus usos, o composto da invenção também pode ser aqui referido como o agente ativo. Como usado neste documento, o termo composto da invenção destina-se a incluir todos os compostos abrangidos pela fórmula (I), bem como as espécies contidas na fórmula (II) e seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

[0083] As composições farmacêuticas da invenção têm uma. quantidade terapeuticamente eficaz de um. composto da presente invenção. Aqueles que são versados na técnica vão reconhecer, porém, que uma composição farmacêutica, pode ter

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 47/165 ό 3 1 ò mais de uma quantidade terapêutica eficaz, ou seja, composições a granel ou menos de uma quantidade terapêutica eficaz, ou seja, doses unitárias individuais projetadas para a administração de doses múltiplas para atingir uma quantidade terapêutica, encaz.

[0084] Normalmente, tais composições farmacêuticas vão conter cerca de 0,01 a 95%, em peso, do agente ativo, incluindo, por exemplo, a partir de cerca de 0,05 a 30%, em peso, do agente ativo e a partir de 0,1% a cerca de 10% em peso do agente ativo.

[0085] Qualquer carreador ou excipiente convencionais podem ser usados nas composições farmacêuticas da invenção.

A escolha de um determinado carreador ou excipiente, ou combinações de carteadores ou excipientes, dependerei do modo de administração a ser usado para tratar um paciente em particular ou tipo do estado de doença ou condição médica. Neste contexto, a preparação de uma composição farmacêutica adequada para um determinado modo de administração está bem dentro do escopo daqueles que são versados na técnica farmacêutica. Além disso, os carteadores ou excipientes usados nas composições farmacêuticas desta invenção estão omercialmente disponíveis. Por meio de outra ilustração, as técnicas de formulação convencionais estão descritas em

Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th

Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Mariland (2000); e H.C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7^a edição, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (1999).

[0086] Exemplos representativos de materiais que podem servir como carreadores aceitáveis do ponto e vista

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34/136 farmacêutico incluem, mas não estão limitados aos seguintes: açúcares, como lactose, glicose e sacarose; amidos, tais como o amido de milho e fécula; celulose, como celulose microcristalina, e seus derivados, como a carboximetilcelulose de sódio, etilcelulose e acetato de celulose; tragacanto em pó; malte; gelatina; talco; excipientes, como a manteiga de cacau e ceras de supositórios; óleos, como óleo de amendoim., óleo de algodão, óleo de cártamo, óleo de gergelim, azeite, óleo de milho e óleo de soja; glicois, como propilenoglicol; poliois, tais como a glicerina, sorbitol, manitol e polietilenoglicol; ésteres, como oleato de etila e laurato de etila; ágar; agentes tamponantes, como o hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; ácido algínico; água apirógena; solução salina isotônica; solução de Ringer; álcool etílico; soluções tampão de fosfato; e outras substâncias não tóxicas compatíveis empregadas em composições farmacêuticas.

[0087] As composições farmacêuticas são geralmente preparadas ao agitar ou misturar completamente e de forma eficiente o agente ativo com. um carreador e um ou mais ingredientes opcionais aceitos do ponto de vista farmacêutico. A mistura agitada uniformemente resultante pode então ser moldada ou carregada em comprimidos, cápsulas, comprimidos e utilizando procedimentos e e quipamento s convenc i ona i s.

[0088] Em um aspecto, a composição farmacêutica da invenção é adequada para administração inalatória. As composições farmacêuticas adequadas para administração por inalação estão tipicamente na forma de aerossol ou pó. Tais composições são geralmente administradas usando dispositivos

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 49/165 de liberação inaladores, como um inalador de pó seco (DPI), um inalador dosimetrado (IDM), um inalador nebulizador ou um dispositivo de liberação similar.

[0089] Em. uma modalidade particular, a composição farmacêutica é administrada por inalação através de um inalador de pó seco. Tais inaladores de pó seco normalmente administram a composição farmacêutica como um pó de fluxo livre que é dispersado no fluxo de ar do paciente durante a inspiração. Para obter uma composição em pó de fluxo livre, o agente terapêutico geralmente é formulado com um excipiente adequado como lactose, amido, manitol, dextrose, ácido polilático (PLA) , poli(ácido lático~co~ácido glicólico) (PLGA) ou suas combinações. Tipicamente, o agente terapêutico é micronizado e combinado com um carreador adequado para formar uma composição adequada para inalação.

[0090] Uma composição farmacêutica representativa para uso em um inalador de pó seco compreende lactose e um composto da invenção na forma micronizada. Tal composição de pó seco pode ser preparada, por exemplo, ao combinar lactose seca e triturada com. o agente terapêutico e então misturar os com.ponent.es a seco. A composição é normalmente carregada em um dispensador de pó seco, em cartuchos ou cápsulas de inalação para uso em um dispositivo de liberação de pó seco.

[0091] Os dispositivos inaladores de pó seco adequados para administrar os agentes terapêuticos são descritos na técnica e exemplos de tais dispositivos estão disponíveis comercialmente. Por exemplo, os dispositivos ou produtos de liberação inalador de pó seco incluem Aeolizer (Novartis); Airmax (IVAX); ClickHaler (Innovata Biomed); Diskhaler (GlaxoSmithKline); Diskus/Accuhaler

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 50/165 (GlaxoSmithKline); Ellipta (GlaxoSmithKline); Easyhaler (Orion Pharma); Eclipse (Aventis); FlowCaps (Hovione); Handihaler (Boehringer Ingelheim); Pulvinal (Chiesi); Rotahaler (GlaxoSmithKline); SkyeHaler/Certihaler (SkyePharma); Twisthaler (Schering-Plough); Turbuhaler (AstraZeneca); Ultrahaler (Aventis) e similares.

[0092] Em outra modalidade particular, a composição farmacêutica é administrada por inalação através de um inalador dosimetrado. Tais inaladores dosimetrados descarregam uma quantidade medida de um agente terapêutico usando um. gás propulsor comprimido. Assim, as composições farmacêuticas administradas usando um inalador dosimetrado tipicamente compreendem uma solução ou suspensão do agente terapêutico em um propelente liquefeito. Qualquer propelente liquefeito adequado pode ser empregado inclusive hidrofluoralcanos (HFAs), como 1,1,1,2-tetrafluoroetano (HFA

134a) e 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoro~n~propano, (HFA 227); e clorofluorocarbonos, como CCI3F. Em uma modalidade particular, o propelente são hidrofluoralcanos. Em algumas modalidades, a formulação de hidrofluoralcano contém um cossolvente, como etanol ou pentano e/ou um surfactante, como trioleato de sorbinato, ácido oleico, lecitina e glicerina.

[0093] Uma composição farmacêutica representativa para uso em um. inalador dosimetrado dispõe de cerca de 0,01% a cerca de 5% em. peso de um composto da invenção; de cerca de 0% a cerca de 20% em peso de etanol e de cerca de 0% a cerca de 5% por peso de surfactante com o remanescente sendo um propelente HFA. Tais composições são normalmente preparadas pela adição de hidrofluoralcano refrigerado ou pressurizado para um. recipiente apropriado contendo o agente

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37/136 terapêutico, etanol (se presente) e o surfactante (se presente). Para preparar a suspensão, o agente terapêutico é micronizado e então combinado com o propelente. A composição é então carregada em. um recipiente aerossol, que normalmente faz parte de um dispositivo inalador dosimetracio.

[0094] Os dispositivos inaladores dosimetrados adequados para administrar os agentes terapêuticos são descritos na técnica e exemplos de tais dispositivos estão disponíveis comercialmente. Por exemplo, os dispositivos inaladores dosimetrados ou produtos representantes incluem AeroBid Inhaler System. (Forest Pharmaceuticals); Atrovent Inhalation Aerosol (Boehringer Ingelheim.) ; Flovent (GlaxoSmithKline); Maxair Inhaler (3M); Proventil Inhaler (Schering); Serevent Inhalation Aerosol (GlaxoSmithKline) e similares .

[0095] Em outro aspecto particular, a composição farmacêutica é administrada por inalação através de um. inalador nebulizador. Tais dispositivos nebulizadores geralmente produzem um vapor de ar de alta velocidade que faz com. que a composição farmacêutica pulverize como uma névoa que é carreada para o trato respiratório do paciente. Assim, quando formulado para uso em um nebulizador inalador, o agente terapêutico pode ser dissolvido em um carteador adequado para formar uma solução. Por outro lado, o agente terapêutico pode ser micronizado ou nanotriturado e combinado com um carreador adequado para formar uma suspensão.

[0096] Uma composição farmacêutica representativa para uso em um inalador nebulizador compreende uma solução ou suspensão compreendendo cerca de 0,05 ug/ml a cerca de 20 mg/ml de um composto da invenção e excipientes

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38/136 compatíveis com as formulações nebulizadas. Em uma modalidade, a solução tem um pH de cerca de 3 a cerca de 8.

[0097] Os dispositivos inaladores nebulizadores adequados para administrar os agentes terapêuticos são descritos na técnica e exemplos de tais dispositivos estão disponíveis comercialmente. Por exemplo, dispositivos nebulizadores ou produtos representantes incluem. Respimat Softmist Inhalaler (Boehringer Ingelheim); AERx Pulmonary Delivery System (Aradigm Corp.); PARI LC Plus Reusable Nebulizer (Pari GmbH) e similares.

[0098] Em ainda outro aspecto, as composições farmacêuticas da invenção podem, aiternat.ivamente, ser preparadas em uma forma farmacêutica destinada para a administração por via oral. As composições farmacêuticas adequadas para administração por via oral podem estar na formi de cápsulas, comprimidos, pastilhas, pílulas, drágeas, pós, grânulos, ou como urna solução ou suspensão em um. líquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão líquida óleo em águi ou água em óleo; ou como um elixir ou xarope e similares; cad; uma contendo uma quantidade pré-determinada de um composto da presente invenção como um ingrediente ativo.

[0099] Quando destinadas à administração por via oral em uma forma farmacêutica sólida, as composições farmacêuticas da invenção geralmente incluirão o agente ativo e um ou mais carreadores aceitáveis do ponto de vista farmacêutico, como citrato de sódio ou fosfato de dicálcio.

Opcional ou alternativamente, tais formas farmacêuticas sólidas também podem, compreender: preenchedores ou extensores, ligantes, umectantes, agentes retardadores de solução, aceleradores de absorção, agentes umectantes,

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39/136 absorventes, lubrificantes, agentes colorantes e agentes tamponantes. Os agentes de liberação, um.ectant.es, de revestimento, adoçantes, edulcorantes e aromatizantes, conservantes e ant.ioxid.ant.es também podem estar presentes na composição de composições farmacêuticas da invenção.

[00100Ί As formulações alternativas podem também incluir formulações de liberação controlada, formas farmacêuticas líquidas para administração por via oral, adesivos transdérmicos e formulações parenterais. Os excipientes convencionais e os métodos de preparação de tais formulações alternativas são descritos, por exemplo, na referência por Remington, citado acima.

[00101] Os seguintes exemplos não limitantes ilustram composições farmacêuticas representantes da presente invenção.

Composição do pó seco [00102] Um composto micronizado de fórmula (I) (1 g) é misturado com lactose triturada (25 g). Esta mistura combinada é então carregada em blisters individuais de um pacote de blister de fácil abertura em uma quantidade suficiente para fornecer entre cerca de 0,1 mg a 4 mg do composto de fórmula I por dose. O conteúdo dos blisters são administrados usando um inalador de pó seco.

Composição do pó seco [00103] Um composto micronizado de fórmula (I) (1 g) é misturado com lactose triturada (20 g) para formar uma composição em granel tendo uma relação de peso do composto para a lactose triturada de 1:20. A composição combinada é acondicionada em. um dispositivo de inalação de pó seco capaz de liberar entre cerca de 0,1 mg a cerca de 4 mg do composto de fórmula I por dose.

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Composição do inalador dosinietrado [00104] Um composto micronizado de fórmula (I) (10 g) é disperso em uma solução preparada dissolvendo lecitina (0,2 g) em água desmineralizada. (200 ml) . A suspensão resultante é secada com spray e micronizada para formar uma composição micronizada compreendendo partículas com um diâmetro médio de menos de 1,5 um. A composição micronizada é então carregado em cartuchos de inalador dosimetrado contendo 1,1,1,2-tetrafluoroetano pressurizado em uma quantidade suficiente para fornecer cerca de 0,1 a cerca de 4 mg do composto de fórmula I por dose quando administrado por inalador dosimetrado.

Composição do nebulizador [00105] Um composto de fórmula (I) (25 mg) é dissolvido em uma solução contendo 1,5-2,5 equivalentes de ácido clorídrico, seguido por adição de hidróxido de sódio para ajustar o pH para 3,5 a 5,5 e 3% em. peso de glicerol. A. solução é agitada bem até que todos os componentes estejam dissolvidos. A solução é administrada com um dispositivo nebulizador que fornece cerca de 0,1 mg a cerca de 4 mg do composto de fórmula I por dose.

Utilidade [00106] Os inibidores JAK inibidores da invenção foram concebidos para o tratamento da doença fibrótica e inflamatória do trato respiratório. Em particular, os compostos foram concebidos para permitir a entrega de um potente agente anticitocina diretamente no local de ação de doença respiratória no pulmão enquanto limita a exposição sistêmica.

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41/136 [00107] Foi demonstrado que os compostos da invençãc são potentes inibidores da família de enzimas JAK: JAK1, JAK2, JAK3 e TYK2. Além disso, os compostos demonstraram inibição potente das citocinas pró-inflamatórias e prófibróticas sem exibir citotoxicidade nos ensaios com células. Foi reconhecido que o amplo efeito antiinflamatório de inibidores de JAK pode suprimir a função das células imunológicas normais, levando potencialmente ao aumento do risco de infecção. Os presentes compostos foram otimizados para limitar a absorção a partir do pulmão para o plasma, minimizando assim o risco de imunossupressão.

[001081 Como descrito na seção experimental a seguir, foram feitos os perfis de absorção e distribuição dos compostos típicos nos ensaios pré-clínicos. Compostos selecionados testados em camundongos mostraram, ao mesmo tempo, alta concentração no tecido pulmonar e baixa absorção no plasma. Os compostos testados em camundongo exibiram, exposição no pulmão de uma a duas ordens de magnitude maior do que a exposição no plasma. Os compostos também apresentaram, retenção no pulmão de camundongo como evidenciado por uma meia-vida maior pulmonar de cerca de 5 horas. Importante, foi demonstrado que a concentração da substância no pulmão do camundongo tem correlação com o efeito farmacodinâmico previsto da inibição da enzima JAK. Foi demonstrado que os compostos da invenção inibem, um efeito da citocina pró-inflamatória IL-13 no tecido pulmonar de camundongo. Especificamente, os compostos demonstraram inibição dependente de dose e concentração da fosforilação de STAT6 induzida por IL-13 no tecido pulmonar que fornece evidência de envolvimento local do alvo JAK pulmonar in

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 56/165 vivo. Este efeito foi observado quando a citocina próinflamatória IL-13 é administrada 4 horas após a administração do composto em teste, fornecendo evidências adicionais de retenção significativa no pulmão.

[00109] Foi demonstrado que os compostos exibem potente atividade inibidora a nível celular e retenção significativa no tecido pulmonar. Extensiva investigação pelos presentes inventores determinou que embora seja possível identificar compostos que são potentes a nível celular ou compostos que apresentam retenção significativa no pulmão, é muito mais difícil descobrir compostos que apresentam ambas as características desejáveis ao mesmo tempo.

[00110] A atividade anti-inflamatória de inibidores de JAK foi demonstrada em modelos pré-clínicos de asma (Malaviya et ai., Int Immunopharmacol, 2010, 10, 829,-836;

Matsunaga et al., Biochem and Biophys Res Cominun, 2011, 404, 261-267; Kudlacz et al., Eur J Pharmacol, 2008, 582, 154161.) Assim, espera-se que os compostos da invenção sejam úteis para o tratamento de distúrbios respiratórios inflamatórios, em particular, a asma. A inflamação e fibrose do pulmão é característica de outras doenças respiratórias além de asma como doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), fibrose cística (FC), pneumonite, doenças pulmonares intersticiais (incluindo fibrose pulmonar idiopática), lesão pulmonar aguda, síndrome de angústia respiratória aguda, bronquite, enfisema, bronquiolite obliterante e sarcoidose. Espera-se, portanto, que os presentes compostos sejam úteis para o tratamento da doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose cística, pneumonite, doenças pulmonares intersticiais (incluindo fibrose pulmonar idiopática), lesão

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 57/165 pulmonar aguda, síndrome de angústia respiratória aguda, bronquite, enfisema, bronquiolite obliterante e sarcoidose.

[00111] Os compostos da divulgação demonstraram, inibição da ativação da célula T humana, inibição de citocinas associadas com a inflamação e atividade sobre os eosinófilos humanos e em modelos de eosinofilia pulmonar em camundongos. Portanto, é provável que os compostos da divulgação sejam úteis para o tratamento de determinadas doenças respiratórias específicas.

[00112] A inflamação eosinofílica das vias aéreas é uma característica de doenças coletivamente denominadas doenças pulmonares (Cottin et al., Clin. Chest. Med., 2016, 37(3), 535-56). As doenças eosinofílicas estão associadas com sinalização de IL-4, IL-13 e IL-5. As doenças pulmonares eosinofílicas incluem infecções (especialmente infecções helmínticas), pneumonite induzida por drogas (induzidas por exemplo, por drogas terapêuticas como antibióticos, fenitoína ou 1-triptofano), pneumonite induzida por fungos (p. ex., aspergilose broncopulmonar alérgica), pneumonite de hipersensibilidade e granulomatose eosinofílica com poliangiite (anteriormente conhecida como síndrome de ChurgStrauss). As doenças pulmonares eosinofílicas de etiologia desconhecida incluem pneumonia eosinofílica idiopática aguda, pneumonia eosinofílica idiopática crônica, síndrome hipereosi.no f1lica e síndrome de Lõffler. Foi demonstrado que os compostos da divulgação reduzem de forma significativa a eosinofilia pulmonar em modelo de vias aéreas de roedores e inibem potencialmente a sinalização de IL-13, IL-4 e IL-2 em. ensaios celulares. Além disso, foi demonstrado que o

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44/136 composto do exemplo 1 inibiu potencialmente a sobrevida eosinofílica humana mediada por IL-5.

[00113] Um polimorfismo no gene da IL-6 tem. sido associado com elevados níveis de 1L-6 e um risco aumentado de desenvolvimento de hipertensão arterial pulmonar (HAP) (Fang et al., J Am Soc Hypertens., 2017, 11(3), 171-177) . Corroborando com. o papel da IL-6 na HAP, a inibição da cadeia do receptor de IL-6 gpl30 melhorou a doença em um modelo de rato de HAP (Huang et al., Can J Cardiol., 2016, 32(11), 1356.el-1356.elO). Foi demonstrado que os compostos dos exemplos 1 e 3 mostraram inibir a sinalização de IL-6.

[00114] Citocinas como citocinas IFNy, IL-12 e IL-6 estão envolvidas em uma variedade de doenças pulmonares não alérgicas como sarcoidose e linfangioleiomiomatose (ElHashemite et al.. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol., 2005, 33, 227-230, e El-Hashemite et al., Cancer Res., 2004, 64, 34363443). Foi demonstrado que os compostos dos exemplos 1 e 3 inibem a sinalização de IL-6.

[00115] Bronquiectasia e doenças pulmonares infiltrativas são doenças crônicas associadas com inflamação neutrofílica crônica. Foi demonstrado que os compostos dos exemplos 1 e 3 inibem as citocinas que estão associadas com inflamação neutrofílica (p.ex., IL-6).

[00116] A ativação patológica das células T é fundamental na etiologia de várias doenças respiratórias. As células T autorreativas desempenham um papel na bronquiolite obliterante com pneumonia em organização (também chamada BOOP). Similar a BOOP, a etiologia das rejeições de transplante pulmonar está associada a uma ativação aberrante da ativação das células T dos receptores pelo pulmão

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 59/165 transplantado do doador. As rejeições de transplante pulmonar podem ocorrer cedo como disfunção primária do enxerto (PGD), pneumonia em organização (PO), rejeição aguda (RA) ou bronquiolite linfocítica (BL) ou elas podem ocorrer anos após o transplante pulmonar como disfunção crônica do enxerto pulmonar (CLAD). A CLAD era anteriormente conhecida como bronquiolite obliterante (BO), mas agora é considerada uma sindrome que pode ter diferentes manifestações patológicas incluindo BO, CLAD restritiva (rCLAD ou RAS) e disfunção neutrofilica do enxerto. A disfunção crônica do enxerto pulmonar (CLAD) é um grande desafio para o manejo em longo prazo dos receptores de transplante pulmonar visto que ela faz com que o pulmão transplantado perda sua funcionalidade de forma progressiva (Gauthier et al., Curr Transplant Rep., 2016, 3(3), 185-191). A CLAD é pouco sensível ao tratamento e, portanto, permanece a necessidade de compostos eficazes capazes de prevenir ou tratar esta condição. Várias citocinas dependentes de JAK, como IFNy e IL-5 são superregulados na CLAD e na rejeição do transplante de pulmão (Berastegui et al, Clin Transplant. 2017, 31, el2898) . Além disso, altos níveis de quimiocinas CXCR3 pulmonares como CXCL9 e CXCL10 que estão a jusante a sinalização de IFN dependente de JAK estão relacionados a piores desfechos nos pacientes submetidos a transplante de pulmão (Shino et al, PLGS One, 2017, 12 (7), e0180281). Foi demonstrado que a inibição sistêmica de JAK é eficaz na rejeição do transplante renal (Vicenti et al., American Journal of Transplantation, 2012, 12, 2446-56). Portanto, os inibidores de JAK têm o potencial para serem eficazes no tratamento ou prevenção do transplante pulmonar e CLAD.

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 60/165 ό / 1 ό

Eventos similares à ativação de células T como descrito como a base para a rejeição do transplante pulmonar também são considerados o principal fator da doença do enxerto contra o hospedeiro pulmonar (DECH) que pode ocorrer após transplante de células-tronco hematopoiéticas. Similar à CLAD, a DECH pulmonar é uma condição progressiva com desfechos extremamente fracos e não existe tratamento atualmente aprovado. Um estudo de pesquisa multicêntrico, retrospectivo de 95 pacientes com DECH agudo ou crônico refratàrio a esteroide que receberam o inibidor sistêmico de JAK ruxolitinibe como terapia de resgate demonstrou resposta completa ou parcial para ruxolitinibe na maioria dos pacientes, incluindo aqueles com DECH pulmonar (Zeiser et al, Leukemia, 2015, 29, 10, 2062-68). Como a inibição sistêmica do JAK está associada a eventos adversos graves e a um pequeno índice terapêutico, permanece a necessidade de um inibidor não sistêmico de JAK, direcionado para o pulmão para evitar /ou tratar a rejeição do transplante pulmonar ou DECH pulmonar. Os compostos da divulgação possuem as características necessárias para atender a essa necessidade. Mais recentemente, o inibidor do ponto de verificação imunológico induziu pneumonite, outra doença pulmonar mediada por célula T surgiu com o uso crescente de inibidores de ponto de verificação imunológico. Os pacientes com câncer tratados com esses agentes estimulantes de células T podem desenvolver pneumonite fatal. Foi demonstrado que certos compostos da divulgação inibem a liberação induzida por anti-CD3 e IL-2 do IFNy de células T isoladas de sangue periférico humano ativadas e assim tem o

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47/136 potencial para apresentar um novo tratamento para essas ci o e n ç a s r e s p i r a. c ó r i a s g r a v e s d e s a s s _l s t i d a s .

[00117] Em um aspecto, portanto, a invenção fornece ur método para tratar uma doença respiratória em um. mamífero (por exemplo, humano), o método compreendendo a administração ao mamífero de um composto da invenção ou uma composição farmacêutica compreendendo um. carreador aceitáve do ponto de vista farmacêutico e um composto da invenção.

[00118] Em um aspecto, a doença respiratória é asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), fibrose cística (FC), pneumonite, doenças pulmonares intersticiais (incluindo fibrose pulmonar idiopática), lesão pulmonar aguda, síndrome de angústia respiratória aguda, bronquite, enfisema, bronquiolite obliterante e sarcoidose. Em outro aspecto, a doença respiratória é asma ou doença pulmonar obstrutiva crônica.

[00119] Em. um aspecto, a doença pulmonar é uma infecção pulmonar, uma doença eosinofílica, uma infecção helmíntica, hipertensão arterial pulmonar, sarcoidose, linfangioleiomiomatose, bronquiectasia, uma doença pulmonar inf11trativa, pneumonite induzida por drogas, pneumonite induzida por fungos, aspergilose broncopulmonar alérgica, pneumonite por hipersensibilidade, granulomatose eosinofílica com poliangiite, pneumonia eosinofílica aguda idiopática, pneumonia eosinofílica crônica idiopática, síndrome hipereosinofílica, síndrome de Lõffler, bronquiolite obliterante com pneumonia organizativa, rejeições aguda e crônica de pulmão (incluindo PGD, OP, LB, AR e CLAD, BO, CLAD restritiva e disfunção neutrofílica do enxerto) , doença en.xerto~versus~hospede.iro, bronquiolite

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48/136 obliterante com pneumonia organizativa, hipertensão artéria pulmonar, bronquiectasias, ou pneumonite induzida por inibidor do ponto de verificação imunológico.

[001201 A invenção fornece também, um método para, tratar a asma em um mamífero, o método compreendendo a administração ao mamífero de um composto da invenção ou uma composição farmacêutica compreendendo um. carreador aceitáve do ponto de vista farmacêutico e um composto da invenção.

[001211 Quando usados para o tratamento de asma, os compostos da invenção serão administrados por via oral em dose única diária, ou em doses múltiplas por dia, embora possam ser usadas outras formas de administração. A quantidade de agente ativo administrado por dose ou a quantidade total administrada por dia será determinada por um médico, considerando as circunstâncias relevantes, incluindo a doença a ser tratada, a via de administração escolhida, o composto em. questão administrado e a sua atividade, a idade, o peso, e a resposta de cada paciente, gravidade dos sintomas do paciente e similares.

[001221 A invenção ainda, fornece um método para tratar uma doença respiratória (incluindo, entre outras, a doença aqui descrita) em um mamífero, o método compreendendo a administração ao mamífero de uma quantidade terapeuticament eficiente de um composto da invenção ou uma composição farmacêutica compreendendo um carreador aceitável, do ponto de vista farmacêutico e um composto da invenção.

[001231 Quando usados para o tratamento de uma doença respiratória (incluindo, mas não limitado a. doença descrita aqui), os compostos da invenção serão administrados em. dose única diária ou. em doses múltiplas por dia, embora, possam

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49/136 ser usadas outras formas de administração. A quantidade de agente ativo administrado por dose ou a quantidade total administrada por dia será determinada por um médico, considerando as circunstâncias relevantes, incluindo a doença a ser tratada, a via de administração escolhida, o composto em questão administrado e a sua atividade, a idade o peso, e a. resposta de cada paciente, a gravidade dos sintomas do paciente e similares.

[00124] Como inibidores de JAK, os compostos de divulgação também podem ser úteis para uma variedade de outras doenças. Os compostos da divulgação podem, ser úteis para várias indicações inflamatórias gastrintestinais que incluem, mas não estão limitados a, doença inflamatória intestinal, colite ulcerativa (proctosigmoidite, pancolite, proctite ulcerativa e colite do lado esquerdo), doença de Cronn, colite colagenosa, colite linfocítica, doença de Behcet, doença celiaca, colite induzida por inibidor do pont. de verificação imunológico, ileite, esofagite eosinofilica, colite relacionada à doença enxerto versus hospedeiro e colite infecciosa. Colite ulcerativa (Reimund et al., J Clin Immunology, 1996, 16, 144-150), doença de Cronn (Woywodt et al., Eur J Gastroenterology Hepatology, 1999, 11, 267-276), colite colagenosa (Kumawat et al., Mol Immunology, 2013, 55, 355-364), colite linfocítica (Kumawat et ai., 2013), esofagite eosinofílica (Weinbrand-Goichberg et al., Immunol Res, 2013, 56, 249-260), colite relacionada à doença enxerto versus hospedeiro (Coghill et. al., Blood, 2001, 117, 32683276), colite infecciosa (Stallmach et al., Int J Colorectal Dls, 2004, 19, 308-315), doença de Behcet (Zhou et al., Autolirmun Rev, 2012, 11, 699-704), doença celiaca (de Nitto

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50/136 et al., World J Gastroenterol, 2009, 15, 4609-4614), colite induzida por inibidor (ponto de verificação) checkpoint imunológico (p. ex., colite induzida por inibidor de CTLA-4; (Yano et al., J Translation Med, 2014, 12, 191), ou colite induzida por inibidor de PD-1- ou PD-L1), e ileite (Yamamoto et a±., Dig niver uís, 2008, 40, zo3—z59) sao caracterizadas pela elevação dos níveis de algumas citocinas próinf lamatórias. Como muitas citocinas pró-inflamatórias sinalizam via ativação de JAK, os compostos descritos nessa aplicação podem ser capazes de aliviar a inflamação e fornecer alívio para seus sintomas. Em particular, os compostos da divulgação podem ser úteis para a indução e manutenção da remissão da colite ulcerativa inespecífica, e para o tratamento da doença de Crohn, colite induzida por inibidor de checkpoint imunológico e os efeitos adversos gastrintestinais da doença enxerto versus hospedeiro. Em um aspecto, portanto, a invenção fornece um método para tratar uma doença gastrintestinal inflamatória em um mamífero (por exemplo, humano), o método compreendendo a administração ao mamífero de um composto da invenção ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico e um. composto ou uma composição farmacêutica compreendendo um carreador aceitável do ponto d vista farmacêutico e um composto da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

[00125] A dermatite atópica e outras doenças inflamatórias da pele estão associadas com a elevação de citocinas pró-inflamatórias que dependem da via JAK-STAT. Portanto, os compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico podem ser benéficos em várias condições inflamatórias ou pruriginosas dérmicas, que

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 65/165

51/136 incluem, mas não estão limitados a, dermatite atópica, alopecia areata, vitiligo, psoríase, dermatomiosite, linfoma cutâneo de células T (Netchiporouk et al., Cell Cycle. 2014; 13, 3331-3335) e subtipos (sindrome de Sezary, micose fungoide, reticulose pagetoide, pele frouxa granulomatosa, papulose linfomatosa, pitiriase liquenoide crônica, pitiriase liquenoide e varioliformis acuta, linfoma cutâneo de células T CD30+, linfoma cutâneo secundário de células grandes CD30+, fungoides não micóticos, linfoma cutâneo de células T grandes CD30-, linfoma pleomórfico de células T, linfoma de Lennert, linfoma de células T subcutâneo, linfoma angiocócito, linfoma blástico de células NK), prurigo nodularis, líquen plano, amiloidose cutânea localizada primária, pênfigo bolhoso, manifestações cutâneas de doença do enxerto versus hospedeiro, penfigoide, lúpus discoide, granuloma anulare, líquen simples crônico, prurido vulvar/escrotal/perianal, líquen escleroso, coceira pós-nevralgia herpética, líquen plano pilar e foliculite decalvante. Em especial, a dermatite atópica (Bao et al., Jak-STAT, 2013, 2, N24137), alopecia areada (Xing et al., Nat Med. 2014, 20, 1043-1049), vitiligo (Craiglow et al, J.Wi Dermatol. 2015, 151, 1110-1112), prurigo nodular (Sonkoly et al. , J Allergy Clin Immunol. 2006, 117, 411-417), líquen plano (Welz-Kubiak et al., J Imraunol R.es, 2015, ID:854747), amiloidose cutânea primária localizada (Tanaka et al., Br J Dermatol. 2009, 161, 12171224), penfigoide bolhoso (Feliciani et al., Int J Immunopathol Pharmacol. 1999, 12, 55-61), e manifestações cutâneas da doença enxerto versus hospedeiro (Okiyama et al., J Invest Dermatol. 2014, 134, 992-1000) são caracterizadas pela elevação de algumas citocinas que sinalizam via ativação

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 66/165

JAK. Desta forma, os compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, podem ser capazes cie ar i vi ar o pruri cio assoei act o á inilamaçao cutanea ou disparado por essas citocinas. Em. particular, espera-se que compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico sejam úteis para o tratamento da dermatite atópica e outras doenças inflamatórias da pele. Em. um. aspecto, portanto, a invenção fornece um método de tratamento de uma doença de pele inflamatória em um mamífero (por exemplo, humano), o método compreendendo a aplicação de uma composição farmacêutica compreendendo um composto da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico e um carreador farmacêutico na pele de mamíferos. Em um aspecto, a doença inflamatória de pele é a dermatite atópica.

[00126] Foi demonstrado que muitas doenças oculares estão associadas com a elevação de citocinas próinflamatórias que dependem, da via JAK-STAT. Os compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, portanto, podem ser úteis para o tratamento de várias doenças oculares que incluem, mas não estão limitados a, uveíte, retinopatia diabética, edema macular diabético, doença do olho seco, degeneração macular relacionada à idade e ceratoconjuntivite atópica. Em particular, uveíte (Horai and Caspi, J Interferon Cytokine Res, 2011, 31, 733-744), retinopatia diabética (Abcouwer, J Clin Cell Immunol, 2013, Suppl 1, 1-12), edema macular diabético (Sohn et ai., American Journal of Opthamology, 2011, 152, 686-694), doença do olho seco (Stevenson et al, Arch Ophthalmol, 2012, 130, 90-100) e degeneração macular relacionada à idade (Knickelbein et al, Int Ophthalmol Clin, 2015, 55(3), 63-78)

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 67/165 são caracterizadas por elevação de algumas citocinas próinflamatórias que sinalizam, através da via JAK-STAT. Desta forma, os compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, podem ser capazes de aliviar a inflamação ocular associada e reverter a progressão da doença ou melhorar os sintomas. Em um aspecto, portanto, a invenção fornece um. método de tratamento de uma doença, ocular em um mamífero, o método compreendendo a aplicação de uma composição farmacêutica compreendendo um composto da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico e um carreador farmacêutico para o olho de mamíferos. Em um aspecto, a doença ocular é uveíte, retinopatia diabética, edema macular diabético, doença do olho seco, degeneração macular relacionada à idade e ceratoconjuntivite atópica. Em um aspecto, o método compreende administrar o composto da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico por injeção intravítrea. Os compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, também podem ser usados em combinação com um ou mais compostos úteis para d o e n ç a s o c u 1 a r e s .

[00127] Os compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico, também podem ser úteis para o tratamento de outras doenças como doenças inflamatórias, doenças autoimunes ou. cânceres. Os compostos da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico podem, ser úteis para o tratamento de um ou mais de artrite, artrite reumatoide, artrite reumatoide juvenil, rejeição de transplante, xeroftalmia, artrite psoriática, diabetes, diabetes insulina dependente, doença do neurônio motor, síndrome mielodisplásica, dor, sarcopenia, caquexia, choque

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 68/165

54/13 6 séptico, lúpus eritematoso sistêmico, leucemia, leucemia linfocítica crônica, leucemia mielocltica crônica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielogênica aguda, espondilite anquilosante, mielofibrose, linfoma. de células B, carcinoma hepatocelular, doença de Hodgkin, câncer de mama, mieloma múltiplo, melanoma, linfoma não Hodgkin, câncer de célula não pequena do pulmão, câncer de células claras do ovário, tumor ovariano, tumor de pâncreas, policitemia vera, sindrome de Sjoegrens, sarcoma de partes moles, sarcoma, esplenomegalia, linfoma de células T e talassemia maior.

Terapia combinada [00128] Os compostos da divulgação ou um sal. aceitável do ponto de vista farmacêutico também podem ser usados combinados com um ou mais agentes que agem pelo mesmo mecanismo ou por mecanismos diferentes para tratar uma doença. Os diferentes agentes podem, ser administrados em sequência ou simultaneamente, em composições separadas ou na mesma composição. As classes úteis de agentes para terapia combinada incluem, mas não estão limitados a, um agonista adrenoceptor beta 2, um antagonista do receptor muscarinico, um. agonista de glicocorticoide, um antagonista do receptor 44 da proteína G acoplada, um antagonista de leucotrieno D4, um antagonista do receptor muscarinico M3, um antagonista do receptor H1 da histamina, um antagonista da imunoglobulina E, um inibidor de PDE 4, um antagonista de IL-4, um antagonista do receptor muscarinico Ml, um antagonista do receptor de histamina, um antagonista de IL-13, um antagonista de IL~5, um inibidor da 5-lipoxigenase, um agonista beta-adrenoceptor, um antagonista da quimiocina CCR3, um estimulador de CFTR, um modulador de imunoglobulina, um inibidor de ligante de

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 69/165 interleucina 33, um inibidor de PDE 3, ura inibidor de fosfoinositídeo-3 quinase delta, um antagonista de tromboxano A2, um inibidor da elastase, um inibidor Kit da tirosina quinase, um antagonista de leucotrieno E4, um antagonista do leucotrieno, um antagonista PGD2, um inibidor do ligante TNFalfa, um agente de ligação de TNF, um inibidor do complemento da cascata, um. inibidor do ligante eotaxina, um inibidor de glutationa reduta.se, um antagonista do receptor H4 da histamina, um antagonista de IL-6, um estimulador do gene IL2, um modulador do receptor de imunoglobulina gama Fc IIB, um. ligante da gamainterferona, um inibidor do ligante da interleucina 13, um inibidor do ligante da. interleucina 17 inibidor, um antagonista da L-selectina, um inibidor da elastase leucocitária, um antagonista de leucotrieno C4, um inibidor de leucotrienos C4 sintase, um inibidor a base de cobre da amino oxidase de membrana, um. inibidor de metaloprotease-12, inibidor de metaloprot.ease-9, um modulador de alérgenos de ácaros, um modulador de receptor muscarinico, um agonista do receptor nicotinico da acetilcolina, um inibidor do fator nuclear kappa B, um antagonista da. Pselectina, um inibidor de PDE 5, um. antagonista do receptor PDGF, um Inibidor fosfoinositideo-3 quinase gama, um agonista de TLR-7, antagonista de TNF, um inibidor de tirosina quinase Abl, um antagonista de receptor de acetilcolina, um. inibidor de quitinase ácida de mamífero, um agonista do receptor de ACTH, um modulador de polimerização de actina, um antagonista de receptor de adenosina Al, um estimulador de adenilato ciclase, um antagonista adrenoceptor, um. ligante do hormônio adrenocorticotrófico, um inibidor da álcool desidrogenase 5, um estimulador de antitripsina alfa 1, um inibidor de

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 70/165 proteinase alfa 1, nm modulador do receptor de andrógeno, um estimulador da enzima conversora da angiotensina 2, urn

agonista de	ANP, um	inib-i-doj:	? da proteína B	cr, um an	t. agonist, a.
a d r e η o c e p t o:	r beta 1	, antagor	1 i s t. a a d r e η o c e p	tor beta	2, um
modulador a<	drenocep	tor beta	2, um modulado	r de beta	-amiioide
um inibidor	do gene	BMP10, 1.	im i n i b r do r cio	gene BMP i	5, um

inibidor do canal de cálcio, um inibidor da catepsina G, urn. inibidor do gene CCL26, um modulador da quimiocina CCR3, um antagonista da quimiocina CCR.4, um inibidor da molécula de adesão celular, de um estimulador chaperonina, um inibidor de quitinase, um antagonista de colágeno I, um inibidor de complemento C.3, um antagonista CSF-1, um. antagonista da quimiocina CXCR2, um modulador de cadeia beta comum do receptor de citocina, um estimulador da proteina-4 do linfócito T citotóxico, um estimulador de desoxirribonuclease I, um. estimulador de desoxirribonuclease, um inibidor da dipeptidil peptidase I, um inibidor de DNA girase, urn.

modulador do receptor de prostanoide DP, um antagonista da ESelectina, um inibidor do receptor da tirosina quinase da familia EGER, um modulador de elastina, um antagonista da endotelina ET-A, um. antagonista da endotelina ET-B, um inibidor de epóxido hidrolase, um antagonista do receptor FGF3, um inibidor de tirosina quinase Fyn, um inibidor do fator de transcrição GATA 3, um modulador de Glucosilceramidase, um modulador do receptor de glutamato, um inibidor do ligante de GM-CS, um inibidor da guanilato ciclase, um estimulador de H+ K+ ATPase inibidor, um modulador de hemoglobina, um agonista de heparina, um.

inibidor de histona desacetila.se, um estimulador da histona deacetilase-2, um. inibidor da HMG CoA redutase, um. inibidor

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 71/165

37/136 de I-kappa B beta quinase, um inibidor do gene ICAM1, um antagonista de IL-17, um modulador do receptor de IL-17, um antagonista de IL-23, um modulador do receptor de IL-4, um. modulador da imunoglobulina G, um agonista de da imunoglobulina Gl, um modulador da imunoglobulina Gl, um antagonista do receptor IA da imunoglobulina epsilon Fc, um antagonista IIB do receptor Fc gama imunoglobulina antagonista, um. modulador da imunoglobulina kappa, um sensibilizador de insulina, um ligante betainterferona, um antagonista similar do receptor da interleucina 1, inibidor do ligante da Interleucina 18, um inibidor do receptor da interleucina 17A, urn. inibidor de ligante da interleucina-l beta, um inibidor de ligante interleucina-5, um inibidor de ligante da interleucina-6, inibidor do canal 3 KCNA dependente de voltagem, um inibidor de ligante kit, um agonista da lam.inina-5, urn antagonista de receptor de leucotrieno CysLTl, um antagonista de receptor de leucotrieno

CysLT2, um inibidor do gene LOXL2, um inibidor de Lyn tirosina quinase, um inibidor da proteína MARCKS, um inibidor da proteína associada 4 MDR, um modulador da metaloprotease

2, um. modulador da metaloprotease-9, um antagonista do receptor de mineralocorticoide, um antagonista do receptor muscarínico M2, um antagonista do receptor muscarínico M4, um antagonista do receptor muscarínico M5, um agonista do receptor do peptideo natriurético, um modulador do receptor de células natural killer, um estimulador da alfa subunidade

ACh do receptor nicotinico, um modulador do receptor das células NK, um. modulador do fator nuclear kappa B, um. agonista opioide do receptor de fator de crescimento, um inibidor da glicoproteina-P, urn antagonista de P2X3

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 72/165

58/136 purinoceptor, uni inibidor da p38 MAP quinase, um modulador da Peptidase 1, um inibidor da fosfolipase A2, ura inibidor da enzima fosfolipase C, ura inibidor do ativador de plasminogênio 1, um antagonista do receptor do fator ativador de plaquetas, urn agonista de PPAR gama, urn agonista de prostaciclina, um inibidor da proteína tirosina quinase, urn estimulador do domínio SH2 1 fosfatase de inositol, urn inibidor de transdução de sinal, um. inibidor do canal de sódio, um modulador de STAT-3, um inibidor do antigeno de células-tronco-1, um modulador de superóxido dismutase, um inibidor da glicoproteina de superfície de célula T CD28, um inibidor de CD8 glicoproteina de superfície de células T, um inibidor de TGF beta-agonista, antagonista de TGF beta, um inibidor de tromboxana sintetase, um inibidor de linfoproteina do estroma timico, um inibidor do ligante timosina, um. agonista beta 4 timosina, um agonista de TLR-8, um agonista de TLR-9, um estimulador de gene TLR9, um. inibidor da topoisomerase IV, um estimulador da troponina I fast do músculo esquelético, um estimulador da troponina T fast estimulador muscular esquelética, um antagonista do receptor I IL-1, um. modulador do receptor tipo II de TNF, um modulador de canal iônico, um estimulador de uteroglobina e um agoni s t a de VIP.

[00129] Agentes específicos que podem ser usados combinados com os compostos inibidores de JAK presentes incluem, mas não estão limitados a, acetato de rosiptor, brometo de umeclidínio, secukinumabe, acetato de metencetalina, acetato de tridecactídeo, propionato de fluticasona, sulforafana alfa-ciclodextrina-estabilizada tezepelumabe, furoato de mometasona, tíI-1467335, dupilumabe,

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 73/165

59/136 aclidínio, formoterol, AZD-1419, HI-1640V, rivipansel, CMP001, manitol, ANB-020, omalizumabe, tregalizumabe, Mitizax, benralizumabe, golimumabe, roflumilaste, imatinibe, REGN3500, masitinibe, apremilaste, RPL-554, Actimmune, adalimumabe, rupatadine, parogrelil, MK-1029, dipropionato de beclometasona, fumarato de formoterol, mogamulizumabe, seratrodaste, UCB-4144, nemiralisibe, CK-2127107, fevipiprante, danirizina, bosentana, abatacepte, EC-18, duvelisibe, dociparstato, ciprofloxacino, salbutamol HFA, erdosteina, PrEP-001, nedocromil, CDX-0158, salbutamol, enooosarma, R—1PR—022, i.enzi.lumabe, furoato de fluticasona, trifenatato de vilanterol, propionato de fluticasona, salmeterol, PT-007, PRS-060, remestemcel-L, citrulina, RPC4046, óxido nítrico, DS-102, gerilimzumabe, Actair, furoato de fluticasona, umeclidínio, vilanterol, AG-NPP709, Gamunex infliximabe, Ampion, acumapimode, canakinumabe, INS-1007, CYP-001, sirukumabe, propionato de fluticasona, mepolizumabe, pitavastatina, solithromicina, etanercepte, ivacaftor, anakinra, MPC-300-IV, brometo de glicopirrônio, brometo de aclidínio, FP-025, risankizumabe, glicopirrônio, fumarato de formoterol, Adipocell, YPL-001, brometo de tiotrópio, brometo de glicopirrônio, maleato de indacaterol andecaliximabe, olodaterol, esomeprazol, vacina anti-poeira de ácaro, vacina do alérgeno do pólen da artemísia, vamorolona, gefapixanto, revefenacina, gefitinibe, ReJoin, tipelucaste, bedoradrina, SCM-CGH, SHP-652, RNS-60, brodalumabe, BIO-11006, brometo de umeclidínio, trifenatato de vilanterol, brometo de ipratrópio, tralokinumabe, PUR1800, VX-561, VX-371, olopatadina, tulobuterol, fumarato de formoterol, triancinolona acetonida, reslizumabe, xinafoato

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 74/165

60/136 de salmeterol, propionate de fluticasone, dipropionato de beclometasona, fumarato de formoterol, brometo de tiotrópio, ligelizumabe, RUTI, bertilimumabe, omalizumabe, brometo de glicopirrônio, SENS-111, dipropionato de beclometasona, CHF5992, LT-4001, indacaterol, brometo de glicopirrônio, furoato de mometasona, fexofenadine, brometo de glicopirrônio, azitromicina, AZD-7594, formoterol, CHF-6001, batefenterol, OATD-01, olodaterol, CJM-112, rosiglitazona, salmeterol, setipiprante, betainterferona inalada, AZD-8871, plecanatida, fluticasone, salmeterol, monoglicérides do ácido eicosapentaenóico, lebrikizumabe, RG-6149, QBKPN, Mometasona, indacaterol, AZD-9898, piruvato de sódio, zileutona, CG-201, imidafenacina, CNTO-6785, CLBS-03, mometasona, RGN-137, procaterol, formoterol, CCI-15106, POL6014, indacaterol, beclometasona, MV-130, GC-1112,

Allergovac depot, MEDI-3506, QBW-251, ZPL-389, udenafila,

GSK-3772847, levocetirizin, AXP-1275, ADC-3680, timapiprante, abediterol, AZD-7594, brometo de ipratrópio, sulfato de salbutamol, tadekinig alia, ACT-774312, dornase alfa, iloproste, batefenterol, furoato de fluticasona, alicaforseno, ciclesonida, emeramida, arformoterol, SB-010, Ozagrel, BTT-1023, Dectrekumab, levalbuterol, pranlucaste, ácido hialurônico, GSK-2292767, Formoterol, NOV-14, Lucinactante, salbutamol, prednisolona, ebastina, cipecilato de dexametasona, GSK-2586881, BI-443651, GSK-2256294, VR179, VR-096, hdm-ASIT+, budesonida, GSK-2245035, VTX-1463, Emedastina, dexpramipexol, levalbuterol, N-6022, fosfato sódico de dexametasona, PIN-201104, OPK-0018, TEV-48107, suplataste, BI-1060469, Gemilucaste, gamainterferona, dalazatida, bilastina, propionate de fluticasona, xinafoato

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 75/165

61/136 de salmeterol, RP-3128, brometo de bencicloquidio, reslizumabe, PBF-680, antagonista de CRTH2, Pranlucaste, xinafoato de salmeterol, propionato de fluticasona, brometo monoidrato de tiotrópio, masilucaste, RG-7990, Doxofilina, abediterol, brometo de glicopirrônio, TEV-46017, ASM-024, propionato de fluticasona, brometo de glicopirrônio, xinafoato de salmeterol, salbutamol, TA-270, Flunisolida, cromoglicato de sódio, Epsi-gam, ZPL-521, salbutamol, aviptadila, TRN-157, Zafirlucaste, Stempeucel, pemirolasto sódico, nadolol, propionato de fluticasona + xinafoato de salmeterol, RV-1729, sulfato de salbutamol, dióxido de carbono + brometo de pertluorooctila, APL-1, dectrekumabe + VAK-694, acetilsalicilato de lisina, zileuton, TR-4, terapia de células progenitoras mesenquimais derivadas de tecido adiposo alogênico humano, MEDI-9314, PL-3994, HMP-301, TD

5471, NKTT-120, pemirolaste, dipropionato de beclometasona, trantinterol, alfaluminol monossódico, IMD-1041, AM-211, TBS-5, ARRY-502, seratrodaste, midismase recombinante, ASM8, deflazacorte, bambuterol, RBx-10017609, ipratrópio + fenoterol, fluticasona + formoterol, epinastina, WIN-901X, VALERGEN-DS,OligoG-COPD-5/20, tulobuterol, oxis Turbuhaler, DSP-3025, ASM-024, mizolastina, budesonida + salmeterol, LH011, AXP-E, imunoglobulina humana histamina, YHD-001, teofilina, ambroxol + erdosteina, ramatrobana, montelucaste, pranlucaste, AG~1321001, tulobuterol, ipratrópio + salbutamol, tranilaste, suleptanato de metilprednisolona, daropato de colforsina, repirinaste e doxofilina.

[00130] Aqui	também	é fornecida uma	composição
farmacêutica compr	•eendend'	o um composto da	divulgação ou u
sal aceitável do p	ionto de	vista farmacêut	ico e um ou mais

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62/136 agentes terapêuticos. 0 agente terapêutico pode ser selecionado da classe de agentes especificados acima e da lista de agente especifico descrita acima. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica é adequada para liberação para os pulmões. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica da invenção é adequada para administração inalatória ou por nebulização. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica é um pó seco ou uma composição líquida.

[00131] Além disso, em um aspecto do método, a invenção fornece um método para tratar uma doença, ou desordem em um. mamífero compreendendo a administração ao mamífero de um. composto da divulgação ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico e um ou mais agentes terapêuticos.

[00132] Quando utilizados em combinação terapêutica, os agentes poderão ser formulados em uma única composição farmacêutica, ou os agentes podem ser fornecidos em. diferentes composições que são administradas simultaneamente ou em tempos distintos, pela mesma via ou por diferentes vias de administração. Tais composições podem ser acondicionadas separadamente ou podem ser acondicionadas como um kit. Os dois ou mais agentes terapêuticos no kit podem ser administrados pela mesma via de administração ou por diferentes vias de administração.

[00133] Foi demonstrado que os compostos da invenção são potentes inibidores das enzimas JAK1, JAK2, JAK3 e TYK2 em ensaios de ligação enzimática e têm potente atividade funcional sem citotoxicidade em ensaios celulares, e exercem, os efeitos farmacodinâmicos da inibição da JAK nos modelos pré-clínicos, como descrito nos exemplos a seguir.

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 77/165

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EXEMPLOS

[00134]	Os exemplos sintéticos e biológicos a seguir são
O í. Θ 'C Θ C í. d-O 8 p â '1	sa ilustrar a invenção, e não são para ser
interpret ado s	de qualquer forma como uma limitação do escopo d
invenção· Nos	exemplos abaixo, as abreviaturas têm os seguinte
significados,	a menos que seja indicado de outra forma.
Abreviações né	so definidas abaixo têm seus significados aceitos
ACN	:== acetonitrila
DCM DIPEA	::: diclorometano = N r N- di - i s op rop i e t i 1 ami na
DMF	= N, .íV“dimetilformam.ida
EtCAc	==: acetato de etila
1t	= hora(s)
HATU	= hexaf luorofosfato de Ν,Ν,Ν’ ,M'-tetram.etil· 0-(7-azabenzotriazol-l-il)urônio
IPA I PAc	= álcool isopropílico ==: acetato de isopropila
Me OH	:== metanol
min.	= m.inuto(s)
Pd (PPh3)	4 = Tetrakis(trifenilfosfina)paládio(0)
TA	= temperatura ambiente
TEA THE	::: ácido trifluoroacético = tetraidrofurano

bis(pinacolato)diboron = 4,4,5, 5, 4' , 4',5’,5’-octametil[2,2’]bi [[1,3,2]dioxaborolanil] [00135] Os reagentes e solventes foram comprados de fornecedores comerciais (Aldrich, Fluka, Sigma, etc.), e usados sem purificação. O progresso da mistura da reação foi monitorado por cromatografia em camada fina (TLC) , cromatografia líquida de alta eficiência analítica (CLAE/HPLC

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64/136 analítica) e espectrometria de massa. As misturas da reação foram trabalhadas como descrito especificamente em cada reação; foram, purificadas por métodos de extração e outros de purificação, como cristalização e precipitação dependentes de temperatura e solvente. Além disso, as misturas da reação foram purificadas por cromatografia em coluna ou HPLC preparativa, geralmente utilizando empacotamento Cl8 ou BDS de coluna, e eluentes convencionais. As condições típicas de HPLC preparativa estão descritas abaixo.

[00136] A caracterização dos produtos da reação foi feita, utilizando espectrometria de massa e ^H-RMN. Para análise por RMN, as amostras foram dissolvidas em solventes deuterados (como CD₃OD, CDCI3, ou d₆~DMSO) , e foram adquiridos os espectros de Ã-RMN com o instrumento Varian Gemini 2000 (400 MHz) sob condições de observação padrões. A identificação por espectrometria de massa, dos compostos foi feita por um. método de ionização por electrospray (ESMS) com. um instrumento da Applied Biosystems, (Foster City CA) modelo API 150 EX ou um instrumento da Waters (Milford, MA)

3100, acoplaaos a sistemas de auLopurifícaçao.

Condições da HPLC preparativa

Coluna:	Cl8, 5 pm. 21,2 x 150 mm ou Cl8, 5 pm 21 x 250 ou Cl4, 5 pm 21x150 mm
Temperatura da coluna:	T emp e r a. t u r a amb i e n t e
Vazão do fluxo:	20,0 ml/min.
Fases móveis:	A == Água + 0,05 % TEA B == ACN + 0,05 % TEA,
Volume de injeção:	(100-1500 pl)

Comprimento de onda do 214 nm detector:

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65/136 [00137] Os compostos brutos foram dissolvidos em 1:1 de água: ácido acético em cerca de 50 mg/ml. Uma corrida de 4 minuto de escala analítica de teste foi realizada usando uma coluna C18 2,1 x 50 mm, seguida de uma corrida de escala preparativa de 15 ou 20 minutos usando injeção de 100 pL com o gradiente baseado na retenção de % B da corrida da escala analítica de teste. Os gradientes precisos dependiam, da amostra. Amostras com impurezas que tinham, tempos de retenção próximos eram verificadas com uma coluna 018 21 x

250 mm e/ou coluna C14 21 x 150 mm para melhor separação. As frações com o produto desejado eram identificadas por análise de espectrometria de massa [00138] Nos seguintes exemplos sintéticos, os compostos de números menor que 20 referem-se a intermediários apresentados nos Esquemas 1 a 4 onde o prime (primeiro) designa um composto com. uma escolha particular do grupo de proteção.

Preparação 1: 2~ (4-(Benziloxi) -~2~etil~5~fluorofenil) 4,4,5,5-te trame ti 1-1,3,2-d.ioxaborolano (9)

(a) 1-(Benziloxi)-4-bromo-5-etil-2-fluorobenzeno (21) [00139] A uma solução de 4-bromo-5-etil-2-fluorofenol (20) (20 g, 910,32 mmol) em ACN (250 ml) foi adicionado K2CO3 (31,55 g, 228,3 mmol) seguido por brometo de benzila (13,10 ml, 109,58 mmol), gota a gota. A mistura da reação resultante foi agitada a 80 °C durante 2 h. A camada aquosa

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 80/165 ό 1 6 foi extraída com EtOAc (três vezes), combinadas e lavada com salmoura. A camada orgânica foi seca mais sobre Na₂SO4 e evaporada sob pressão reduzida para alcançar o titulo intermediário como um liquido oleoso amarelo claro (25 g, 89% de rendimento). RMN ¹H (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,48 7,3 0 (m, 5H) , 7,2 7 (d, J -------- 10,5 Hz, 1H) , 6,8 7 (d, J ------- 8,7 H z, 1H) , 5, 12 ( s, 2 H) , 2,66 (q, <7 = 7, b H z, 2 H) , 1, 1 6 ( c, J = 7,5 Hz, 3H).

(b) 2-(4-(Benziloxi)-2-etil-5-fluorofenil)-4,4,5,5tetrametil-1,3,2-diozaborolano (9) [00140] A uma solução do produto da etapa anterior (21) (12,5 g, 40, 45 mmol) em. dioxa.no (100 ml) foi adicionado (bis)pinacolato diboron (15,40 g, 60,67 mmol) e KOAc (11,9 g, 121,35 mmol). A mistura da reação foi purgada com nitrogênio durante 15 min. seguida pela adição de [l,l^fbis(difenilfosfino)ferrocene]dicloropaládio(II), complexo com. diclorometano (1,65 g, 2,023 mmol). A mistura resultante da reação foi agitada e aquecida a 110 °C durante 3 h, filtrada através de Celite e o resíduo lavado com EtOAc. O filtrado foi diluído com excesso de EtOAc (200 ml) e lavado com. água (100 ml) seguido de salmoura (100 ml), secado sobre sulfato de sódio e concentrado em vácuo para obter o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna sobre (100200) silica gel, eluído com. 3-5% de EtOAc: hexano para obter o produto desejado como um. sólido quase branco (9,50 g, 66% de rendimento). RMN M-I (400 MHz, clorofórmio-d) δ 7,54 - 7,27 (m, 6H) , 6,81 (d, J ------- 7,9 Hz, 1H) , 5,16 (s,2H), 2,84 (q, J -----7, 5 Hz, 2H) , 1,32 (s, 12H) , 1,14 (t, J= 7,5 Hz, 3H) .

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Preparação 2: 6-(4-(benziloxi)“2-etil”5~fluorofenil)-1(tetraidrO“2H“piran-2“il)-3-(trimetilestanil)-IH-indazol (3’)

(a) 6-(4-(Benziloxi)-2-etil-5-fluorofenil)-1(tetraidro-2H-piran-2-il) -177-indazol (22) [00141] A uma solução de 6-bromo-l-(tetraidro-2H-piran2-il)-IH-indazol (10) (50 g, 178,57 iranol) e 2-(4-(benziloxi)2-etil--5-f luorof enil) -4,4,5, 5-tetrametil-l, 3,2-dioxaborolano (9) (76,3 g, 214,29 mmol) em DMFmUO (480:120 ml) foi adicionado K₃PO₄ (94,64 g, 446,86 rnmol). A mistura da reação foi desgaseifiçada com nitrogênio durante 15 minutos e então foi adicionado o catalisador Pd(PPh₃)₂Cl₂ (6,26 g, 8,93 rnmol) e a mistura foi novamente desgaseifiçada com nitrogênio durante 5 minutos e aquecida a 100-110 °C durante 5 horas. A mistura da reação foi filtrada através de Celite e o resíduo foi lavado com EtOAc. O filtrado foi diluído com EtOAc, lavado com água fria e salmoura, secado sobre sulfato de sódio e concentrado em vácuo para fornecer produto bruto que foi purificado por cromatografia. em coluna de flash para

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68/136 obter o intermediário de título como um sólido branco (65 g,

86% e rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 431,21 de

C27H27	-FN2O2 foi	encontrado 431,46. NMR ~H (4C	)0 MH	z, clorofórmio
d) δ	8,06 - 7	/98 (i	n, 2H) , /, ’0 (Ο, J — 8,2	H z s	1H), 7,51 -
7,3 2	(m, 5H) ,	7,08	(dd, J ------ 809, 6, 8,3 Hz,	1H) ,	7,03 (d, J -------
11,9	Hz, 1H),	6 Λ 95	(d, J ----- 8, 5 Hz, 1H) , 5,	7 6 —	5, 64 (m, 1H) ,
5,20	(s, 2H) ,	4,04	(d, J = 10,1 Hz, 1H), 3	, 72 (	L C, J = 9, I H z,,
1H) ,	2,0 2 í, q,	J ~ '	7,5 Hz, 2H) , 2,22 - 2,02	(m,	3H) , 1,8 0 -

1,71 (m, 3H) , 1,0 6 (t, J = 7,5 Hz, 3H) .

(b) 6-(4-(Benziloxi)-2-etil-5-fluorofenil)-IH-indazol (23) [001421 A uma solução do produto da etapa anterior (22) (65 g, 151,16 mmol) em metanol (700 ml) foi adicionado

HCL conc. (120 ml) e a solução resultante foi aquecida a 6065 °C durante 3 h, resfriado a TA e concentrado em vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado com solução saturada de NaHCCu e água. A camada orgânica foi seca sobre Na2SC'4 anidro e concentrada em vácuo para alcançar o título intermediário como um sólido branco (52 g, 99% (bruto)). RMN ^XH (4 00 MHz, clorofórmio-d) δ 8,13 (s, 1H) , 7,7 7 (d, J = 8,3 Hz, 1H) , 7,59 - 7,30 (m, 6H) , 7,10 (d, J= 8,3 Hz, 1H) , 7,01 (d, J --= 11,8 Hz, 1H) , 6,9 6 (d, J -------- 8,4 Hz, 1H) , 5,21 (s, 2H) , 2,53 (q, J ------- 7,5 Hz, 2H) , 1,05 (t, J ------- 7,5 Hz, 3H) .

(c) 6-(4-(Benziloxi)-2-etil-5-fluorofenil)-3-iodo-lH- indazol (24)

[00143] A uma solução de 6-	(4-(benziloxi)-2-etil-5-
fluorofenil)-IH-indazol (23) (56	g, 161,18 mmol) em DMF
(400 ml) foi adicionado KOH (36,(	2. g, 647,39 mmo1) e a
mistura foi agitada durante 5 mil	luLos. ./a solução ce iodo

(82,2 g, 323, 69 mmol) em. DMF (100 ml) foi edicionada

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69/136 lentamente a 0 °C e agitada a TA durante 30 minutos, diluída com água (3 x 150 ml) e extraída com. EtOAc (3 x 200 ml) . A camada orgânica foi lavada com. solução aquosa saturada de metabissulfito de sódio (3 x 200 ml) e água (400 ml), secada em NazSCq anidro e concentrada sobre pressão reduzida para jbter o produto bruto que foi purificado por cromatografia em coluna de flash para obter o título intermediário como um.

semissólido acastanhado (64 g, 84% de rendimento) . RMN •‘Ή (400 MHz, clorofórmio-d) δ 10,49 (s, 1H) , 7,57 - 7,32 (m, 7H) , 7,16 (d, J 8,3 Hz, 1H) , 7,04 - 6,91 (m, 2H) , 5,2 0 (s 2H) , 2,51 (q, J = 7,4 Hz, 2H) , 1,04 (t, J = 7,5 Hz, 3H) .

(d) 6-(4-(Benziloxi)-2-etil-5-fluorofenil)-3-iodo-l- (tetraidro-2H-piran-2-il) -líf-indazol (25) [00144] A uma solução gelada do produto da etapa anterior (24) (60 g, 127,12 mmol) em DCM (700 ml) foi adicionado ácido p-toluenossulfônico (4,84 g, 25,423 mmol) seguido por 3,4-diidro-2.H-pirano (17,4.3 ml, 190, 68 mmol) gota a gota. A mistura da reação foi agitada a TA durante a noite, diluída com DCM e lavada com solução aquosa saturada de NaHCCh e salmoura. A camada orgânica foi secado sobre Na2SC'4 anidro e concentrada sob pressão reduzida para fornecer produto bruto que foi purificada por cromatografia flash (silica gel) para obter o título intermediário como um sólido esbranquiçado (64 g, 91% de rendimento).

(m/z) : [M-í-H] calculado para 557 de C27H26FIN2O2 foi encontrado 557,30. RMN ‘Ή (400 MHz, clorofórmio-d) δ

7,56 7,31 (m, 7H) , 7,14 (d, J

Hz, 1H) , 7,01 (d, J ------ 11, 8

Hz, 1H) , 6,95 (d, J= 8,5 Hz, 1H) , 5,68 (d, J

9,3 Hz, 1H), (s, 2H),

4,08

3,99 (m, 1H) , 3, 77 (m, 1H), 2,50

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70/136 (q, J= 7,2 Hz, 2H) , 2,23 - 1,97 (m, 3H) , 1,81 - 1,68 (m, 3H), 1,06 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

(e) 6-(4-(benziloxi)-2-etil-5-fluorofenil)-1-(tetraidrc 2H-piran-2-il)-3-(trimetilestanil)-IH-indazol (3’) [00145] A uma solução de 6-(4-(benziloxi)-2-etil-5 fluorofenil) -3-iodo-l- (tetraidro-2B-piran-2-il) -IJf-indazol (25) (20 g, 35,97 mmol) em tolueno (150 ml) foi adicionado hexametilditina (9,2 ml, 43,17 mmol). A mistura da reação foi desgaseificada com nitrogênio durante 20 minutos, seguida por adição de tetrakis (2,0 g, 1,80 mmol) e então agitada a 100 °C durante 2 h, resfriada a TA, filtrada através de CELITE e o resíduo lavado com. EtCAc. O filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna (alumina neutra), eluído com 2-5% de EtOAc:hexano para obt o título composto (17,50 g, 82% de rendimento).

(in/z) : (M+Hj calculado para 557,10 de C27H26I' 1N2O2 foi encontrado 557,30. (m/z): [M+H]’ calculado para 595,17 de C30H35FN2O2, 593, 17 foi MHz, clorofórmio-d) δ (m, 6H) , 7,13 - 7,00

- 5,68 (m, 1H) , 5,21

3,66 (m, 1H) , 2,54 (q, J -------- 7,3 Hz, 2H) , 2,23 - 2,00 (m, 2H 1, 8 7 - 1,59 (m, 4H) , 1,0 8 (t, 7,5 Hz, 3H) , 0,4 7 (s, 9H encontrado 595,49, 593,5o. NMR Ή (4

7,68 (d, J -------- 8,0 Hz, 1H) , 7,57 - 7,2 (m, 2 H) , 6,96 (d, J = 8,4 Η z, 1H) , 5, (s. 2H) . 4.13 - 4.0 0 (m. 1H) , 3.81 Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

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Preparação 3: 5-(tert~but.il·) 6~met.il (S) ~2~iodo~3~ ( (2 trimetilsilil)etoxi) metil)- 3,4,6,7-tetraidro -5Himidazo[4,5-c]piridina-5,6-diaarboxilato (4')

(a) ácido (S')-4,5, 6, 7-tetraidro-3H-imidazo [4, 5-

c]piridina-6-carboxílico (11) [001461 A uma suspensão agitada de L-histidina (26) (50 g, 322,24 mmol) em. água (420 ml) foi adicionado HC1 conc.

(29 ml) gota a gota a 0 °C, seguido por formaldeido (55 ml, 676,72 mmol) em uma parte a 0 °C. A mistura resultante da reação foi agitada durante 30 minutos e então aquecida a °C durante 6 h e concentrada. O produto bruto resultante foi agitado durante 2 h com. éter dietílico, filtrado e lavado om 1PA:THF (100:300 ml) para fornecer o sal cloridrato do titulo intermediário como sólido esbranquiçado (75 g, 99% de rendimento (bruto)), (m/z) : [M+Hb calculado para 168, 07 de C7H9N3O2 foi. encontrado 168,17.

(b) Metil (S)-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-

c]piridina-6-carboxilato (27) [00147] A uma solução agitada do produto da etapa anterior (11) (75,0 g, 312,5 mmol) em metanol (1500 ml) foi adicionado SOCI2 (45,6 ml, 625 mmol) gota a gota a 0 °C e agitada a TA durante 16 h e então aquecido sob refluxo (70 °C) durante 1 hora. O solvente foi removido por

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 86/165 destilação e o produto bruto foi triturado com metanol seguido pelo éter dietílico para fornecer o sal cloridrato do título intermediário como um sólido esbranquiçado (80 g bruto). RMN ⁹H (4 00 MHz, DMSO~d₆) O 9,05 (s, 1H) , 4,71 (dd, J ------- 9,4, 5,2 Hz, 1H) , 4,3 6 (d, J --= 15,5 Hz, 1H) , 4,3 0 (d, J ------- 15,6 Hz, 1H) , 3,82 (s, 3H) , 3,4 4 - 3,21 (m, 2H) .

(c) 5-(tert-Butil) 6-metil (S)-3, 4, 6, 7-tetraidro-5Himidazo[4,5-cj piridina-5,6-dicarboxilato (28) [00148] A uma solução agitada do produto da etapa anterior (27) (80,0 g, 314,96 mmol) em metanol (1000 ml) foi adicionado DIPEA (282 ml, 1574 mmol) seguido por dicarbonato de di-tert-butila (172 ml, 787,48 mmol) a 0 °C. A mistura da reação foi agitada a TA durante 16 h e então NH₃ líquido (150 ml, 25% em água) foi adicionado e a mistura da reação foi agitada novamente durante 16 a TA, metanol foi removido por destilação e o resíduo foi extraído em DCM (3 x 200 ml). Os extratos orgânicos combinado foram, secados sobre Na2SO₄ anidro, concentrados e purificados por cromatografia flash (silica gel de 100-200 mesh (malha)), eluldo com 5% MeOH:DCM para obter o título intermediário (41 g, 46% de rendimento). ijn/z) : [M+H]’ calculado para 282,14 de C13H19N3O4 fol encontrad< 282,21. RMN ‘Ή (4 00 MHz, EMSO-de) δ 11,85 (s, 1H) , 7,50 (s, 1H) , 5,18 (dd, J ------ 49, 3, 5,1 Hz, 1H) , 4,51 (t, J --- 14,2 Hz, 1H) , 4,09 (dd, J= 4 3,9, 16,1 Hz, 1H) , 3,59 (s, 3H) , 3,08 (d, J= 15,5 Hz, 1H) , 2,94 (d, J= 15,1 Hz, 1H) , 1,45 (s, 9H) .

(d) 5-(tert-Butil) 6-metil (S')-2-iodo-3, 4, 6, 7tetraidro-5n-imidazo[4,5-c]piridina-5,6-dicarboxilato (29) [00149] A uma solução do produto da etapa anterior (29) (41,0 g, 145,9 mmol) em THE (500 ml) foi adicionado Niodossuccinimida (66,0 g, 291,8 mmol) a 0 °C e a solução

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 87/165 resultante foi agitada a TA durante 4 h, diluída com água e extraída corrí, acetato de etila. A porção orgânica foi lavada com solução e tiossulfato de sódio a 10% (3 x 2u0 mi) . A camada orgânica combinada foi secada sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer o título composto 60 g (bruto), que foi usado na próxima etapa sem purificação, (m/z) : [M+H]⁺ calculado para 408,31 de C13H18IN3O4 foi encontrado 408,03. RMN •‘Ή (400 MHz, DMSO-ah) δ 12,48 (s, 1Η) , 5, 34 - 4,97 (m, 1H) , 4, 67 - 4,35 (m, 1H) , 4,12 - 3,95 (m, 1H) , 3,60 (s, 3H) , 3,14 - 2,82 (m, 2H) , 1,44 (s, 9H) .

(e) 5-(tert-Butil) 6-metil (S)-2-iodo-3-((2trim.etilsi.lil) etoxi ) metil)- 3,4, 6, 7~tetra.id.ro -5Himidazo[4,5-c]piridina-5, 6~dica.rboxi.lato (4’) [00150] A uma solução agitada de 5-(tert-butil) 6metil (S) -2-iodo-3, 4, 6, 7-tetraidro-5.H-imidazo [4,5c]piridina-5,6-dicarboxilato (29) (40 g, 0,098 mol) em DMF (150 ml) foi adicionado DIPEA. (35,1 ml, 0,19 mol) a. 0 °C. A mistura da reação foi agitada por 10 minutos, então foi adicionado cloreto de 2-(trimetilsilil)-etoximetila (19,1 ml, 0,10 mol) gota a gota, a 0 °C. A. mistura resultante da reação foi agitada durante 3 h a TA. Após 4 h, foi adicionada água resfriada e a mistura da reação foi extraída com EtOAc (2 x 200 ml). A camada orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidro, concentrada e purificada por cromatograf ia em. coluna, de flash, eluída com. hexano: EtOAc

20-35%, para obter o título do produto como um líquido viscoso amarelo claro (27 g). (m/z): [M+H]⁺ calculado para

8,12 de C19H32IN.3O5SÍ foi encontrado 538,42. RMN ^H (400

MHz, DMaO-d_s) δ 5, 33 - 5, 04 (m, 3H) , 4,79 - 4,56 (m, 1H) ,

4,54 - 4,14 (m, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,47 (t, J= 7,8 Hz,

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3,31 - 3,16 (m, 1H) , 2,97 (t, J == 18,9 Hz, 1H) , 1,44 is, 9H) , 0, 92 - 0,74 (m, 2H) , -0,03 (s, 9H) .

Preparação 4: Ácido (6S)-5-(tert-butoxicarbonil)-2-(6(2-etil-5”fluoro-4“hidroxifenil)-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)lH-indazol-3-il )-3-((2- (trimetilsilil) etoxi)metil) -4,5,6,7tetraidro~3H~imidazo[4,5-c]piridina-6~carboxilico (7’)

F

HP SEM

6’

(a) 5-(tert-Butil) 6-metil (6S)-2-(6-(4-(benziloxi )-2 etil-5-fluorofenil) -1- (tetraidro-2H-piran-2-il) -177-indazol-

3-il)-3-( (2-(trimetilsilil) etoxi) metil)-3,4,6,7-tetraic

5.H-imidazo [4,5-c] piridina-.b, 6-dicarboxilato (5 ’ ) [001511 A uma solução agitada de 5-(tert-butil) 6metil (S)-2-iodo-3-((2-trimetilsilil)etoxi) metil)- 3,4,6,7 tetraidro -5H-imidazo[4,5-c]piridina-5,6-dicarboxilato (4’) (17,0 g, 31,65 mmol) em tolueno (500 ml) foi adicionada 6(4-(benziloxi)-2-etil-5-fluorofenil)-1-(tetraidro-2.H-piran2-il)-3-(trimetilestanill)-IH-indazol (3’) (20 g,

34,82 mmol). A mistura da reação foi purgada com argônio

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 89/165 durante 15 minutos, foram adicionados Pd(PPh₃)₄ (3,6 g,

3,16 mmol) e iodeto de cobre (1,20 g, 6,33 mmol) e a mistura da reação foi agitada, a 120 °C durante 16 h. A mistura da reação foi filtrada através de Celite, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia em coluna de silica gel (coluna Redisep 80 g, eluído com DCM durante 10 minutos e então em. 15-20% de EtOAc em. hexano para obter o título intermediário como um sólido amarelo (15,10 g, 58% de rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 840, 41 de C46H58FN5O7SÍ foi encontrado 840,54.

RMN 2Η (	4 00 MH	z, Cloi ( S , 1H	?ofórj ) , Ί,	mio-d) δ 8 05 (d, J =	,43 : 11,	(s, 1H ) , 4 Hz, 1H	I f 5 4 ) f ° f	- 7,33 9 5 (d, J
(m,	6H) ,
==: 8,	5 Hz	, 1H),	6, 0 9	O f Ό	9 (m, 3H),	O f o	9 - 5,36	(m,	1H) ,
5,20	(s,	2H) ,	4,97 -	4, 8 0	(m, 1H),	4, 12	- 3, 90	(w 1	H), 3,68
\ f	3H) ,	3, 57	- 3,47	(n't,	2H), 3,40	(d,	1H) , 3,2	-í __ 3	,05 (m,
1H) ,	z, /	4 - 2,	34 (m,	4H) ,	2,25 - 2,	07 (:	m, 2H),	1, 94	- 1,65
(m,	4H) ,	1,54	( S , 9 H	) , %	12 - 0,99	(m,	3H) , 0,9	1 - 0	,75 (m,
2H) ,	-0,	12 (s,	9H) .

(b) 6-Benzil 5-(tert-butil) (6S)-2-(6-(4-(benziloxi)-2etil-5-fluorofenil) -1- (tetraidro-2H-piran-2-il) -IFf-indazol3-11)-3-( (2-(trimetilsilil) etoxi) metil)-3,4,6,7-tetraidro5.H-imidazo [ 4,5-c] piridina-5, 6-dicarboxilato (6 ’) [00152] A um frasco de fundo redondo foi adicionado o produto da etapa anterior (5') (15,0 g, 17,85 mmol) em tolueno (400 ml), álcool benzílico (46,3 ml) e Ti(OEt)4 (7,15 ml, 35,70 mmol) e a mistura da reação foi refluída

vigoros	amente (140	o r, v, i	durante	48 h com	água e	extraída com
o DCM.	A suspensão	foi	fil trad?.	i, o filti	'ado ίο.'	. secado sobre
Na2SO4,	c o n c e n t r a d a.	SOb	pressão	reduzida	e puri	ficada por

cromatografia em. coluna de silica gel (coluna Redisep 80, 0Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 90/165

5% EtOAc em hexanos) durante 20 minutos para remover o

excess	ο ct e a 1 c o'	ol benzílico	então	eluída com. 10-15% EtOAc em.
hexano	) para fo	rnecer o títi	.ilo in	termediário. A RMN H1 está
em con	formidade	com a estrui	üura.	(m/z): [M+H]+ calculado

para 916,44 de C52H62FN5O7SÍ foi encontrado 916,86.

(c) ácido (6S)-5-(tert-butoxicarbonil)-2-(6-(2-etil-5f luoro-4-hidroxifenil) -1- (tetraidro-2.H-piran-2-il) -1Hindazol-3-il)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-4,5,6,7tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilico (7’) [00153] A uma solução agitada do produto da etapa anterior (6) (21,0 g, 22,92 mmol) em 1:1:IPA THE (400 ml)) foi adicionado Pd(OH)2 (5,0 g) . A mistura da reação foi agitada a TA durante 16 h sob um balão de hidrogênio, filtrada através de Celite, concentrada sob pressão reduzida e purificado por cromatografia em coluna de silica gel (coluna 80 Redisep, eluída com. 25-40% EtOAc em. hexano) para fornecer o titulo composto (6,1 g, 8,29 mmol) como um sólido esbranquiçado). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 736,35 de C38H50FN5O7SÍ foi encontrado 736, 5. A RMN H está em conformidade com. a estrutura, (zn/z) : [M+H]⁺ calculado para 736, 35 de C38H50FN5O7SÍ foi encontrado 736, 5. RMN ^]Ή (400 MHz,

DM SO	- de	) δ	12,94	\ S !	1H), 9,86	(s.	1H), 8,	, 34	\ L ; <	J :== 7	,6 Hz.
1H) ,	' f	6 6	( s, 1H	) , 7	,20 (d, J	- 8,	7 H z, 1	H) f	7, 03	(d,	J
1 1 H			H' 6	9 3 (	(Ί . 7 = C) i		i m £	1 'i	~ 5	77 (rr
J. .1. f		f -ί-			Zx f .J f .1.		-u J7J. ; f	, -L -c		1. f 11 }
5, 33	...	5, 0	6 (m,	1H) ,	4,87 - 4,	5 6 (	m, 1H),		2 -	4,14	(m,
1H) ,	3;	9 7	- 3,69	(m,	2H) , 3,53	--- 3	, 4 0 (m.	2H)	, 3,	2 3 ---	3,11
(m,	1H)	Λ 3	,11 -	2,93	(m, 1H),	2,47	- 2,44	(m,	2H)	, 2,1	3 ~
1,9 6	(11J	., 2	Η), 1,	68 (	d, <7 = / 0,	9 Hz	, 4H) ,	1,4 8	\ s,	9H) ,	1,02

(t, J~ 7,b Hz, 3H) , 0, 8 6 - 0, 68 (m, 2H) , -0,17 (s, 9H) .

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 91/165

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Preparação 5: Ácido (S)~2~(6~(2~etil~5~fluoro~4~ hidroxifenil) -lH-indazol-3-il) -4,5,6,7-tetraidro~3Jfimidazo[4,5-c]piridina-6-carboxílico (8')

[001541 A uma solução agitada de ácido (6S)-5-(tert butoxicarbonil)-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil)-1 (tetraidro-2A-piran-2-il) -lH-indazol-3-il) -3- ( (2(trimetlsililj etoxi)-metil)-4,5,6,7-tetraidro-3Himidazo[4,5-c]piridina-6-carboxílico (7’) (5,7 g, 7,75 mmol) em 5:1 dioxano: água. (60 ml) foi adicionado HC1 conc (20 ml) gota a gota a 0 °C. A mistura da reação foi aquecida e agitada a 90 °C durante 16 h e distilada sob vácuo para fornecer o resíduo bruto, que foi triturado em sequência com. éter dietílico e acetonitrila para fornecer o sal cloridrato do título composto (3,6 g, 95% de rendimento) como um sólido marrom-claro. (m/z): [M+H]⁺ calculado para 422,16 de C22H20IN50/3 roi encontrado 422,24. RMN ~u 1,400 Mhz, D₂0/DMSO— q’_õ) δ 8,22 (d, J= 8,4 Hz, 1H) , 7,49 (s, 1H) , 7,19 (d, J = 8,1 H z, 1 H) , 6,99 (d, J = 11,9 Η z, 1 H) , 6,91 (d, J = 9, 0

Hz, 1H), 4,56 - 4,51 (m, 1H),

4,3 6 (d, J == 15, 5 Hz, 1H) ,

4,30 (d, J = 15,5 Hz, 1H) , 3,35

3,25 1, m, 1H) , 3, 1 5 — 3,05 (m, 1H) , 2,4 - 2,55 (m, 2H) , 0,97 (t, d = 7,5 Hz, 3H) .

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 92/165

78/136

Preparação 6: Ácido (S)~2~(6~(2~etil~5~fluoro~4~ hidroxifenil) “lH-indazol-3-il) -5~propil--4,5,6,7-t.etraidro3H“imidazo [4,5~-c]piridina-6-carboxilico

[00155] A uma solução de ácido (S)-2-(6-(2~etil~5~ fluoro-4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-4,5, 6, 7-tetraidro3H~imidazo[4,5~c]piridina-6“carboxílico, HC1 (400 mg,

0,874 mmol) (8’) e propionaldeído (0,095 ml, 1,310 mmol) em DMF (7 ml) foi adicionado cianoboroidreto de sódio (165 mg, 2,62 mmol) e a mistura da. reação foi agitada a TA durante a noite. O boroidreto de sódio (33 mg, 0,874 mmol) foi adicionado, a solução foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TFA do título composto (179 mg, 37% de rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 4 64,2 0 de C25H26FN5O3 foi encontrado 4 64,5.

Preparação 7: Ácido (íJ)~2--(6--(2~et.il--5~fluoro~4~ hidroxifenil)-IH-indazol-S-il)~5~isopropil~4,5,6,7tetraidrO“3H“imidazo[4,5-a]piridina-6-carboxilico

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 93/165

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0,874 mmol), acetona (0,192 ml, 2,62 mmol) e ácido acético

(0,150 ml,	2,62 mmc	) 1) em.	DMF (7 ml) foi	a cl i c i o n. a d o
C .1. cl Γ10 O O -C 0.1. (	ire to de	sódio	(274 mg, 4,37 ra	•mol) e a mist	ura da
reação foi	agitada	a TA d	urante a noite.	0 boroidreto	de

sódio (33 mg, 0,874 mmol) foi adicionado, a solução foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TFA do título composto (115 mg, 23 % de rendimento). (m/z): [M+H]’ calculado para 464,20 de C25H26FN5O3 foi encontrado 4 64,5.

Preparação 8: Ácido (S) -2-(6-(2~etil~5~fluoro~4~ hidroxifenil) -IH-indazol-S-il) ~5-:metil~4,5,6,7~tetraidro-3Jí“ imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilico

fluoro-4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-4,5,6,7-tetraidro

3íf-imidazo [4,5-c] piridina-6-carboxí lico, HC1 (8’) (300 mg,

0,655 mmol) e formaldeído 37% peso em água (0,059 ml,

0,786 mmol) DMF (5 ml) foi adicionado cianoboroidreto de sódio (165 mg, 2,62 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite. O boroidreto de sódio· (25 mg,

0,655 mmol) foi adicionado, a solução foi concentrada e purificada por cromatografia em flash (100 g de coluna, 575% ACN/água), para fornecer o sal da TFA do título composto (85 mg, 24 % de rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 4 3 6, 17 de C23H22FN5O3 foi encontrado 436,45.

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 94/165

80/136

Preparação 9: Ácido (S)-5-eti1-2-(6-(2-etil”5-fluoro~4hidroxifenil) -lH-indazol-3-il) -4,5,6,7-tetraidro~3Jfimidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilico

[00158] A uma solução de ácido (S) -2-( 6- (2-etil-5fluoro-4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-4,5,6,7-tetraidro3H-imidazo [4,5-c] pir.idina.-6-carboxíl.ico, HC1 (8’) (450 mg, 0,983 mmol) e acetalcieído (0, 083 ml, 1,474 mmol) em DMF (7 ml) foi adicionado cianoboroidreto de sódio (247 mg, 3,93 mmol) e a mistura da. reação foi agitada, a TA durante a noite. Boroidreto de sódio (112 mg, 2,95 mmol) foi adicionado, a solução foi concentrada, dissolvida em 1:1 ácido acético:água + 300μ1 de TEA (7 ml) e purificada por cromatografia em. flash (100 g de coluna, 5-65 % ACN/água) , para, fornecer o sal de TFA do título composto (165 mg, 0,293 mmol, 30 % de rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 450, 19 de C24H24FN5O3 foi encontrado 450.

Exemplo 1: ( (S) -2-(6- (2“etil~5~fluoro~4“hidroxifenil) l/f-indazol-3-il) -5-propil-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo [4,5cJpiridin-6-il)((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il)metanona

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 95/165

81/136 [00159] A uma solução de ácido (S)-2-(6-(2-etil-5fluoro-4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-5-propil-4,5,6,7tetraidro-3íf-imidazo [4,5-c] piridina-6-carboxí lico, TEA (30 mg, 0,052 mmol), diidrobrometo de (lS,4S')-5-metil-2,5diazabiciclo[2.2.1]heptano (42,7 mg, 0,156 mmol), e DIPEA (0,064 ml, 0,364 mmol) em DMF (1,5 ml) foi adicionado HATU (29,6 mg, 0,078 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite. Hidrazina (5 eq) foi adicionada, a mistura da reação foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TEA do titulo composto (27 mg, 66 %

cio T.	endimento)	. (ffi/z) : [M	,+Hj+ calculado	para. 558,29 de
31-n3	íeFNvCb foi	encontrado	3 5 ó 3 e	RMN 5H	(4 00 MHz, Metanol·	-d4)
δ 8,	17 (dt, 1H	') , 7,59 - 7	,50 (m,	1H) , 7	',32 (dd, 1H) , 6,9	5
(d,	1H) , 6,90	(d, 1H), 5,	03 - 4,	91 (m,	2H) , 4,56 - 4,34	(m,
2H) ,	4,30 - 3,	88 (m, 4H),	3,76 -	3,55 (	m, 1H), 3,28 - 3,	10
(m,	1H), 3,10	- 2,9 6 (m,	4H), 2,	81 - 2,	62 (m, 2H) , 2,53	(q.
	2,47 - 2,	33 (m, 1H),	2,31 -	2,14 (	m, 1H), 1,79 - 1,	C) í
	2H) , 1,07	(t, 3H), 0,	97 (td,	3H) .

Exemplo 3: ((S)-3-(dimetilamino)pirrolidin~l~il)((S)-5etil-2- (6- (2“etil“5“fluoro“4“hidroxifenil) -IH-indazol-3--il) -

4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)metanona

fluoro-4-hidroxifenil) -lH-indazol-3-il) -5-isopropil-4,5, 6,7tetraidro-3A-imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilico, TEA (179 mg, 0,310 mmol), (S)-A’,M-dimetilpirrolidin-3-amina

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 96/165 (0,079 ml, 0,620 mmol) e DIPEA (0,162 ml, 0,930 mmol) em DMF (4 ml) toi adicionado HATU (177 mg, 0,46b mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite. Hidrazina (5 eq) foi adicionada, a mistura da reação foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TFA do título composto (107 mg, 44 % de rendimento).

(m/z) : [M+H]⁺ calculado para 560,31 de C31H38FN7O2 foi encontrado 560,2. RMN ¹H (400 MHz, Metanol-dj) δ 8,21 (d,

1H) ,	'' /	50 (s, 1H), 7,	2 6	(d, 1H) , 6, 94 (d,	1 n) , 6,90 (d, 1 h ) ,
4,83	__	4,6 6 (m, 1H) ,	4,	48 - 4,25 (m, 2H),	4,23 - 4,12 (m,
1H) ,	4,	12 - 3,93 (m,	2H	) , 3, 93 - 3, 63 (m,	3H), 3,62 - 3,48
(m,	1H)	, 3,2 6 - 3, 0 9	(m	., 1H) , 2,98 (d, 6H)	, 2, 67 - 2,57 (m,
1H) ,	2 f	53 (q, 2H), 2,	44	- 2,12 (m, 1H), 1,	41 (t, 3H), 1,31
(d,	3H)	, 1,05 (t, 3H)	O

Exemplo 5: (S)-(2~(6-(2”etil”5“fluoro“4“hidroxifenil)-ÍHindazol-3-il) ~5~isopropil“4,5,6,7“tetraidro~3Jf~imidazo [4,5c]piridin~6”il),4”diazepan~l”il)metanona

F

[001611 A uma solução de ácido (S)-2-(6-(2~etil~5~ fluoro-4-hidroxifenil) -IH-indazol-3-il) -5-isopropil-4,5, 6, 7tetraidro-SFI-imidazo [4,5-c] piridina-6-carboxílico, TEA (30 mg, 0,052 mmol), 1-metilhomopiperazina (0,019 ml,

0,156 mmol) e DIPEA (0,036 ml, 0,208 mmol) em DMF (1 ml) foi adicionado HATU (29,6 mg, 0,078 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante 3 horas. Hidrazina (5 eq) foi adicionada, a mistura da reação foi agitada a TA durante

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 97/165 ò 3 /⁷1 ό 6 minutos, concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TFA do título composto (26,9 mg, 66 % de rendimento) . (zn/z) : [M+H]⁺ calculado para 560,31 de CjiHaaFN-iO? foi encontrado 560,2.

Exemplo 6: ( (S) ~2~ (6~ (2~etil~5-~fluoro~4--hidroxifenil) ~ lH~indazol~3~il)~5~metil~4,5,6,7~tetraidro~3H~imidazo[4,5~ cJpiridin-6-il)((R)-4-(2-hidroxietil)“2-metil-piperazin-liljmetanona

fluoro“4~hidrozifenil)-IH-indazol-S-il)-5~metil-4,5,6,7tetraidro-3A-imidazo [4,5-c] piridina-6-carboxílico, TFA (30 mg, 0,052 mmol), (x)~2~(S-metilpiperazin-l-il)etanol, 2 HC1 (35,6 mg, 0,164 mmol), e DIPEA (0,057 ml, 0,328 mmol) em. DMF (1 ml) foi adicionado HATU (31,1 mg, 0, 082 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite.

Hidrazina (8,57 μΐ, 0,273 mmol) foi adicionada, a mistura da reação foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TEA do título composto (15,6 mg, 36 % de rendimento) . (zn/z) : [M+H]⁺ calculado para 562,29 de C30H36FN7O3 foi encontrado 562,2.

Pauta do .Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 98/165

Exemplo 7: (£>) - (2- (6- (2~etil~5-fluoro-4~hidroxifen.il) lH-indazol-3-il)~5~propil-4,5,6,7“tetraidro-3H~imidazo[4,5cJpiridin-6-il)(4-(2~hidroxietil)piperazin~l~il)metanona

fluoro-4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-5-propil-4,5,6, 7tetraidro~3.H-imidazo [4,5-c] piridina-6-carboxilico, TFA (30 mg, 0,052 mmol), 2-(piperazin-l-il)etanol, 2HC1 (0,19 ml, 0,156 mmol) e DIPEA (0,027 ml, 0,156 mmol) em DMF (1,5 ml) foi adicionado HATU (29,6 mg, 0,078 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite.

Hidrazina (5 eq) foi adicionada, a mistura da reação foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TEA do titulo composto (15,4 mg, 37 % de rendimento). (m/z): [M+H]’ calculado para 576,30 de

C31H38FN7O3 foi encontrado 576,2.

Preparação 10: tert-Butil 2~(6-(2~etil~5~fluoro~4~ metoxifenil) -1- (tetraidro-~2Jf-piran~2-il) -lH-indazol-3-il) -6(metoxi(metil)carbamoil)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)3,4,6,7-tetraidro-5H-imidazo[4,5-c]piridina-5-carboxilato (17’)

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 99/165 [00164] A uma solução agitada de ácido 5-(tert butoxicarbonilj-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-metoxifenil)-1('cetra,idro — 2H — piran—2 — i1)— iH—mdazol — 3 — il)— 3—((2 — (trimetilsilil) etozi) metil) -4,5, 6, 7-tetraidro-37í-imidazo [4,5c]piridina-6-carboxílico (16’j (4,0 g, 5,34 mmol) em DMF (20 ml) foi adicionado HATU (3,04 g, 8,01 mmol). A mistura da reação foi agitada a TA durante 3 0 minutos e foram, adicionados N, 0-dim.etilidroxilam.ina HC1 (628 mg, 6,4 mmol) e

D1PEA (2,87 ml, 16,02 ml) e a mistura da reação foi agitada a

TA durante 2	h. 0 precipitado resu	itante	foi tiltrado para
fornecer o s	ólido bruto que foi pu	rif icad'	0 por cromatografic
em coluna (1	00-200) silica~gel, ei	ui do co:	m 2 0 — 3 0 % E t. OAc :
hexano para	fornecer o titulo do c	omposto	(3,0 g, 71% de
rendimento)	como um sólido branco.	(m/z) :	[M+H]+ calculado
para 793,40	de C41H57FN6O7SÍ foi enc	ont r acto	793,6.

Preparação 11: tert-Butil 2-(6- (2-etil“5-fluoro-4“ metoxifenil) -1- (tetraidro-2H-piran-2-il) -lH-indazol-3-il) ~6~ formil-3-( (2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3,4,6,7-tetraidro5H-imidazo[4,5-c]piridina-5-carboxilato (12’)

[001651 A uma solução agitada de tert-butil 2-(6-(2etil-5-fluoro~4-metoxifen.il) -1- (tetraidro~2.H-piran-2-il) -1.Hindazol-3-il)-6-(metoxi(metil)carbamoil)-3-((2(trimetilsilil)etoxi)metil)-3,4,6,7-tetraidro~5Aimidazo[4,5-c]piridina-5-carbozilato (17’) (Preparação 10)

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 100/165 (3,0 g, 3,78 mmol) em THF seco (30 ml) foi adicionado 1 M de hidreto de litio alumínio em THF (11,34 ml, 11,34 mmol) a 78 °C sob nitrogênio e a mistura da reação foi agitada durante 1 h. Foi adicionado acetato de etila gota a gota para interromper a reação e a mistura foi agitada a 0 °C. À suspensão resultante foi adicionado KHSO4 (30 ml) e a mistura da reação foi extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com. salmoura, secada sobre Na2SÜ4 anidro, filtrada e concentrado a 40 °C para fornecer o título do produto (2,4 g, 87% de rendimento). A RMN H^± está em conformidade com a estrutura, (m/z): [M+H]⁺ calculado para 734,37 de C39H52FN5O6SÍ foi encontrado 734,59.

Preparação 12: 5-etil-2-fluoro-4-(3-(6”(pirrolidin-lilmetil) -4,5,6,7~tetraidro~3H~imidazo [4,5~c] piridin-2~il) lH-indazol-6-il)fenol

(a) tert-Butil 2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-metoxifenil)-1(tetraidro-217-piran-2-il) -lfí^r-indazol-3-il) -6- (pirrolidin-1ilmetil)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)-metil)-3,4,6,7tetraidro”5.H“imidazo [ 4,5-c] piridina-5-carboxilato [00166] tert-Butil 2- (6-(2-etil~5-fluoro-4metoxifenil)-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-lH-indazol-3-il) -6formil-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)-metil)-3,4,6,7-tetraidro577-imidazo [4,5-c] piridina-5-carboxilato (12’) ( 50 mg, 0,068 mmol), pirrolidina (0,028 ml, 0,341 mmol), ácido acético (0,039 ml, 0,681 mmol), e triacetoxiboroidreto de

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 101/165

87/136 sódio (144 mg, 0,681 mmol) foram combinados sequencialmente em DMF (1 ml) e agitados a TA durante a noite. O sólido amorfo foi retirado em. EtOAc (10 ml) e lavado com solução aquosa saturada de NaHCOa (2 x 3 ml) . As camadas orgânicas foram secadas em mgSCq e concentradas no vácuo para obter um óleo incolor (50 mg, 93% de rendimento).

(b) 5-et.il-2-fluoro-4- (3-(6- (pirrolidin-l-ilmetil) -

4,5,6,7-tetraidro-3.tt-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-IH-indazol6-il)fenol [00167] O produto da etapa anterior (0,05 g,

0,063 mmol) foi dissolvido em DCM (0,634 ml) e resfriado a 0 °C. Foi adicionado tribrometo de boro, 1 M em. DCM (0,634 ml, 0,634 mmol) gota a gota a gota durante vários minutos e a mistura da reação aqueceu lentamente a TA, agitada durante 1 h, diluída com MeOH (10 ml) e concentrada no vácuo durante a noite. O resíduo bruto foi dissolvido em dioxa.no (1 ml) . Foi adicionada água (0,2 ml) seguida por HC.) 4M em dioxano (1 ml) e a mistura da reação foi agitada a TA durante 30 minutos, congelada a - 78 °C e liofilizada. O pó liofilizado foi dissolvido em água:ácido acético 4:1 (10 ml), filtrado por seringa e purificado por HPLC preparativa. As frações puras foram combinadas e liofilizadas para fornecer o sal de TEA do título composto (32 mg, 73% de rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para

61,24 de C26H29FN6O2 foi encontrado 4 61.

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 102/165 ò Ei /1B 6

Exemplo 9: 5~etil~2~fluoro~4~ (3- (5~metil~6~ (pirrolidin-

1-ilmetil) -4,5,6,7“tetraidro-3Jf-imidazo [4,5-c]piridin-2-il) - lfí-indazol-6-il) fenol

fluoro-4- (3-(6- (pirrolidin-l-ilmetil)-4,5,6, 7-tetraidro-lífimidazo[4,5-c]piridin-2-il)-ln-indazol-6-il)fenol, 2TFA.

(Preparação 12) (32 mg, 0,046 mmol) foram combinados em MeOH (1 ml) a TA e agitados durante 5 minutos. Foi adicionada uma solução de cianoboroidreto de sódio (15 mg, 0239 mmol) em MeOH (1 ml) e a mistura da reação foi agitada durante a noite. Foi adicionado boroidreto de sódio (40 mg) e a mistura da reação foi agitada a TA durante 3 h, concentrada, dissolvida em água:ácido acético 4:1 e purificada por HPLC preparativa para obter o sal TFA do titulo composto (10 mg, 30% de rendimento). (m/z): [M+Hj⁴ calculado para 475,25 de C27H31FN6O foi encontrado 475,2.

Preparação 13: (R)-pirrolidin-3-il 2~(6“(2~etil-5~ fluoro-4-hidroxifenil) -lJí-indazol-3-il) -4,5,6,7-tetraidro3H-imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilato

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 103/165

89/136 (a) 6-((R)-1-(tert-Butoxicarbonil)pirrolidin-3-il) 5 (tert-butil) 2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-metoxifenil)-1(tetraidro-2H-piran-2-il) -líf-indazol-3-il) -3- ( (2(trimetilsilil) etoxi) -metil )-3,4,6, 7-t.etraidro-5.Himidazo[4,5-c]piridina-5,6-dicarboxilato [00169] A uma solução de ácido b-(tertbutoxicarbonil)-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-metoxifenil)-1(tetraidro-2H-piran-2-il) -lH-inda.zol-3-i.l) -3- ( (2(trimetilsilil)etoxi)metil)-4,5,6,7-tetraidro-3Himidazo[4,5-c]piridina-6-carboxílico (16’) (50 mg, 0,067 mmol), tert-butil (R)-3-hi.droxipirroli.dina-lcarboxilato (312 mg, 1,667 mmol) e HATU (0,028 g, 0,073 mmol) em DMF (1,5 ml) foi adicionado DIPEA (0,046 m 0,267 mmol) e a mistura da reação foi agitada a RT durant 2,5 dias e concentrada para fornecer o titulo intermediár que foi usado diretamente na próxima etapa.

(b) (R)-pirrolidin-3-il 2-(6-(2-etil-5-fluoro-4hidroxifenil) -lH-indazol-3-il) -4,5,6, 7-tetraidro-3Himidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilato [00170] O produto da etapa anterior (61 mg,

0,066 mmol) foi dissolvido em DCM (1 ml) e resfriado a 0 Foi adicionado tribrometo de sódio 1 M em HC1 (1,5 ml, 1,500 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durant 1 h. Foi adicionado metanol (5 ml) e a mistura da reação concentrada, dissolvida em 20% de água/dioxano (2 ml) e 4 de HC1 em dioxano (2 ml, 8,00 mmol) foi adicionado. A mistura da reação foi combinada com o produto de uma corr na mesma escala e purificada por HPLC preparativa. As frações puras foram combinadas, congeladas e liofilizadas para fornecer o sal de TEA do titulo composto (20 mg, 21

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 104/165 /13 6 de rendimento)(m/z): [M+H]⁺ calculado para 491,21 de C26H7FN6O3 foi encontrado 491,0.

Exemplo 10: (R)-l-metilpirrolidin-S-il 2-(6-(2~etil~5~ fluoro~4-hidroxifen.il) -lH~indazol~3~il) ~5~metil-4,5,6,7tetraidro-3J7-imidazo [4,5-c]piridina~6~carboxilato

hidroxifenil) -líf-indazol-3-il) -4,5,6, 7-tetraidro-3Aimidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilato, 2 TEA (12,1 mg, 0,017 mmol) e formaldeido (1,504 pl, 0,020 mmol) foram combinados em MeOH (1 ml) e agitados durante 5 min. Foi adicionado cianoboroidreto de sódio (5,40 mg, 0,086 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite, concentrada e purificada por HPLC preparativa. As frações relevantes foram, combinadas, congeladas e liofilizadas. 0 produto foi dissolvido em MeOH (1 ml). Foi adicionado boroidreto de sódio (50 mg, 1,322 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite, concentrada, dissolvida em água:ácido acético 1:1 (2 ml), filtrada através de um filtro de seringa 0,2 pm e purificada por HPL preparativa para obter o sal TEA do titulo composto (2,8 mg 22 % de rendimento). (m/z): [M+H] calculado para 519,24 de C28H3iFN₆O₃ foi encontrado 519,1.

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 105/165

91/136

Preparação 14: te.rt-Butü 2-(6- (2~etil~5~fluoro~4~ metoxifenil) -1- (tetraidro-2H-piran--2-il) -lJf-indazol-3-il) ~6~ (hidroximet.il) -3-((2- (trimetilsilil) etoxi) metil) -3,4,6,7tetraidro-5H-imidazo[4,5-c]piridina-5-carboxilato

[001721 A uma solução agitada de tert-butil 2-(6-(2etil-5-fluoro-4-metoxifenil)-1-(tetraidro-'2A-piran-2-il)-1Hindazol-3-il)-6-formil-3-((2-(trimetilsilil)etoxilmetil)-

3,4,6,7-tetraidro-5H-imidazo[4,5-c]piridina-5-carboxilato (12’) (1,8 g, 2,45 mmol) em MeOH (20 ml) foi adicionado NaBH₄ (186 mg, 4,91 mmol) a 0 ^,JC em. porções. A mistura da reação resultante foi agitada a TA durante 1 h, concentrada, diluída em água gelada e extraída com DCM. As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura, secadas sobre Na2SO₄ anidro e concentradas para fornecer o título do produto (1,5 g, 90 % de rendimento) . A RMN H¹ está em conformidade com a estrutura, (m/z): [M+H]⁺ calculado para 736,88 de 0,398.54FNsOgSi 1’oi encontrado /36,59.

Preparação 15: 4-(3-(5-(azetidin-3-il)-6(hidroximetil)-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridin-2il)-lH-indazol-6-il)-5-etil”2~fluorofenol

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 106/165 /13 6 (a) 5-etil-2-fluoro-4- (3- (6- (hidroximetil) - 4,5,6,7tetraidro-3H-imidazo [4,5-c]piridin-2-il) -l.H-indazol-6-il) fenol [00173] tert-Butil 2-(6-(2-etil-5-fluoro-4metoxifenil) -1- (tetraidro-2H-piran-2-il) -lH-indazol-3-il) -6 (hidroximetil)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3,4,6,7tetraidro-5H-imidazo[4,5-c]piridina-5-carboxilato (0,5 g, 0,679 mmol) foi dissolvido em DCM (7,5 ml) e agitado a TA. Tribrometo de boro, IM em DCM (5,10 ml, 5,10 mmol) foi adicionado e após 10 minutos, tribrometo de sódio adicional 1 M em DCM (5,10 ml, 5,10 mmol). A mistura da reação foi agitada a TA durante 2 n, diluída com MeOH (45 ml), agitada durante 5 minutos e concentrada a secura. O sólido foi dissolvido em dioxano (5 ml) e água (1 ml), 4 M HC1 em dioxano (5 ml, 20 mmol) foi adicionada e a mistura de reaçã foi agitada a TA durante a noite, congelada e liofilizada. resíduo foi combinado com o resíduo de uma corrida na escal de 0,1 g, dissolvida em 4:1 água:ácido acético e purificado por HPLC preparativa. As frações puras foram combinadas e liofilizadas para fornecer o sal de TEA do título (0,15 g, 42 % de rendimento) como um pó branco, (m/z): [M+H]^T calculado para 408, 18 de C22H22FN5O2 foi encontrado 408.

(b) 4-(3-(5-(azetidin-3-il)-6-(hidroximetil)-4,5,6,7tetraidro-37T-imidazo [4,5-c] piridin-2-il) -lA-indazol-6-il) -5 etil-2-f1uo ro feno1 [00174] A uma solução do produto da etapa anterior (50 mg, 0,123 mmol) em MeOH (1227 μΐ) foi adicionado tertbutil 3-oxoazetidina-l-carboxilato (210 mg, 1,227 mmol). A mistura da reação foi agitada durante lhe então foi adicionado cianoboroidreto (38,6 mg, 0,614 mmol). A mistura d reação foi agitada durante a noite, concentrada, tratada com

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 107/165 η 3 /1.5 6

DCM (1 ml) e 4 M de HC1 em dioxano (1 ml), agitado durante h, concentrada, coevaporada com --5 ml de EtOAc (5 mJ.) , dissolvida em ácido acético:água 1:1 e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal de TFA do titulo intermediári (19 mg, 33% de rendimento) como um pó branco, (m/z): [M+H]⁺ calculado para 4 63,22 de C25H27FN6O2 foi encontrado 4 63.

Exemplo 11: 5-etil--2-~fluoro~4“ (3- (6- (hidroximetil) -5(l-metilazetidin-3-il)-4,5,6,7-tetraidro-3H“imidazo[4,5c]piridin-2-il)-lH-indazol-6-il)fenol

[001751 Formaldeído (3,67 pl, 0,049 mmol) e 4-(3-(5(azetidin-3-il) -6- (hidroximetil.) -4,5, 6, 7-tetraidro~3Himidazo [4,5-c] piridin-2-il) -17f-indazol-6-il) -5-etil~2fluorofenol (19 mg, 0,041 mmol) foram combinados com MeOH (822 μΐ) a TA e agitados durante 5 minutos. Uma solução de cianoboroidreto de sódio (12,91 mg, 0,205 mmol) em MeOH (1 ml) e a mistura da reação foi agitada durante a noite. Foi adicionado boroidreto de sódio (7,77 mg, 0,205 mmol) e mistura da reação foi agitada durante 2 h, concentrada, dissolvida em água:ácido acético 4:1, filtrada em seringa e purificada por HPLC preparativa para obter o sal TFA do titulo composto (9,2 mg, 46 % de rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 4 7 /', 2 3 de C26H29FN6O2 foi encontrado 4 /7,2.

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 108/165

94/136

Exemplo 12: Metil 2-(6-(2~etil~5~fluoro~4~ hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-5-(1-metilpiperidin-4-il)-

(a) Metil 2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-metoxifenil)-1(tetraidro-2 ü--piran-2-il) -17í-indazol-3-il) -3- ( (2(trimetilsilil) etoxi) metil) -4,5,6, 7-tetraidro-3H-imidazo [4,5-c]piridina-6-carboxilato (30) [00176] Uma solução de metil 5-benzil-2 fluoro-4-metoxifenil)-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1Hindazol-3-1)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-4,5,6,7tetraidro-3rí-imidazo [4,5-c] piridina-6-carboxilato (5 ’ ) (138 mg, 0,183 mmol), formato de amônio (346 mg, 5,49 mmol) e hidróxido de paládio em carbono (51,4 mg, 0, 073 mmol) em. EtOH (3,66 ml) foi purgada com nitrogênio durante 10 min. O frasco da reação foi selado e a mistura agitada a 80 °C durante 5 h, diluída com etanol (10 ml), filtrada com

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 109/165

95/136 seringa, concentrada e purificada por HPLC preparativa. As frações relevantes foram combinadas, congeladas e liofilizadas para fornecer o sal de TFA do título intermediário (27 mg, 19 % de rendimento). (m/z): [M+H]’ calculado para 664,33 de C35H₄₅FN₅O₅Si foi encontrado 665.

(b) Metil 2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-metoxifenil)-1- (tetraidro-2íf-piran-2-il) -lH-indazol-3-il) -5- (1metilpiperidin-4-il)- 3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-

4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilato (31) [00177] O produto da etapa anterior (30) (27 mg,

0,035 mmol), l-metil-4-piperidona (0,171 ml, 1,388 mmol) e ácido acético (0, 079 ml, 1,388 mmol) foram combinados em. sequência em DMF (2 ml). À solução foi adicionado triacetoxiboroidreto de sódio (294 mg, 1,388 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante a noite, concentrada e purificada por HPLC preparativa. As frações relevantes foram, combinadas, concentradas a um óleo claro para fornecer o sal de TFA do título intermediário (33,3 mg, 97 % de rendimento). (m./z): [M+H] calculado para 761,41 de C41H57FN6O5SÍ foi encontrado 762.

(c) Metil 2-(6-(2~etil~5-fluoro“4~hidroxifenil)-1H~ indazol-3-il)-5-(l-metilpiperidin-4-il)-4,5,6, 7-tetraidro3H-imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilato [00178] O produto da etapa anterior (31) (26,6 mg,

0,035 mmol) foi dissolvido em DCM (0,70 ml) e resfriado a °C e uma solução 1 M de tribrometo de boro em DCM (0,350 ml, 0,350 mmol) foi adicionada. A mistura da reação foi agitada a TA durante 50 minutos, interrompida com MeOH (5 ml), concentrada e dissolvido em 20 % de água/dioxano (1 ml) . À. solução foi adicionado 4,0 M de HC1 em. dioxano

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 110/165 (1 ml, 4,00 mmol) e a mistura da reação foi agitada a ΤΑ durante a noite, concentrada e dissolvida em MeOH (2 ml). À solução foi adicionado etilenodiamina (9,38 pg, 0,140 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante 7 h e purificada por HPLC preparativa. As frações relevantes foram combinadas, congeladas e liofilizadas para fornecer o sal de TEA do título composto (9,2 mg, 35 % de rendimento). (m/z): [M+H]⁺ calculado para 533,2 6 de C29H33FN6O3 foi encontrado 533.

Preparação 16: (6S)-tert-butil 6-((S)-4-(tertbutoxicarbonil) ~2~metilpiperazina--l~carbonil) -2- (6- (2--et.il5~fluoro-4-hidroxifenil) -1- (tet.raidro~2H-piran~2“il) -1Hindazol-3-il)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7-diidro3H-imidazo[4,5-c]piridina-5(4H)-carboxilato

[00179] Ácido (6S)-5-(tert-butoxicarbonil)-2-(6-(2etil-5-fluoro-4-hidroxifenil)-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)lH-indazol-3-il)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-4,5,6,7tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxílico (50 mg, 0,068 mmol), (S)-4-n-boc~2-metilpiperazina (40,8 mg,

0,204 mmol) e DIPEA (0,036 ml, 0,204 mmol) foram dissolvidos em DMF (1,0 ml), então foi adicionado HATU (38,8 mg,

0,102 mmol) e a mistura da reação foi agitada a TA durante horas. A mistura da reação foi concentrada e o produto bruto foi purificado por cromatografia em silica gel (0-100% gradiente de EtOAc/Hexanos) para obter o título composto

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 111/165

97/136 (53 mg, 84% de rendimento). (m/z): [M+H]+ calculado para de CísHssFNvOsSí foi encontrado 919,1

Preparação 17: ((S)-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4 hidroxifen.il) -lH-indazol-3-il) -4,5,6,7~-tetraidro~3H~ imidazo[4,5-c]piridin-6-il)((S)-2-metilpiperazin-l-il)metanona

[00180] (6S)-tert-butil 6-( (S)-4-(tert butoxicarbonil)-2-metilpiperazina-l-carbonil)-2-(6-(2-etil-

5-fluoro-4-hidroxifenil)-1-(tetraidro-2H-piran-2-il)-1Hindazol-3-il)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6,7-diidro

3H-imidazo[4,5-c]piridina-5(4H)-carboxilato (52,7 mg,

0,057 mmol) foi dissolvido em dioxano (1,0 ml) e água (0,2 ml), então HC1 4M em dioxano (1,0 ml, 4,00 mmol) foi adicionado e a mistura da reação foi agitada a 50 °C durante 16 horas. A mistura da reação foi congelada e liofilizada e o sólido resultante foi dissolvido em 2 ml de MeOH. Foram adicionados etilenodiamina (0,015 ml, 0,230 mmol) e boroidreto de sódio (13,03 mg, 0,344 mmol) e a mistura da reação foi agitada a temperatura ambiente durante 12 horas. A solução foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TEA do título composto (18 mg, 42% de rendimento) . (m/z) : [M+H]+ calculado para 504, 6 de C27H30FN7O2 foi encontrado 504,5.

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 112/165 μ θ 11 σ 6

Exemplos 2-15: (S)-2,4-dimetilpiperaz;in-l~il) ( (S)-2-(6~ (2“etil“5“fluoro“4“hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-S-metil-

4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-c]piridin-6-il)metanona

[001811

2- (6- (2-etil-5-fluoro-4~hidroxifenil)-1H indazol-3-il)-4,5,6,7-tetraidro-3H-imidazo[4,5-cJpiridin-6il) ((S)-2-metilpiperazin-l-il)metanona, 2TFA (17,7 mg,

0,024 mmol) e formaldeido, 37% em. água (4,50 pl,

0,060 mmol) foram dissolvidos em metanol (1,0 ml) e então cianoboroidreto de sódio (7,60 mg, 0,121 mmol) foi adicionado e a mistura da reação foi agitada a temperatura ambiente durante 3 horas, Foi adicionado boroidreto de sódio (0,024 mmol) para retirar qualquer formaldeido remanescente, então a solução foi concentrada. O produto bruto foi purificado por HPLC preparativa para fornecer o sal da TFA do titulo composto (12 mg, 66% de rendimento). (m/z) : [M+H]+ calculado para 532, 6 de C29H34FN7O2 foi encontrado 532,2.

Exemplos 12-14: (R)-N-(2-(dietilamino)etil)-5-etil-2-(6(2-etil“5“fluorO“4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-N-metil-

4,5,6,7-tetraidro-3H”imidazo[4,5-c]piridina-6-carboxamido

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 113/165

99/136 [00182] Ácido (A)-5-etil-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-4,5,6,7-tetraidro-3Himidazo[4,5-c]piridina-6-carboxilico, TFA (40 mg, 0,071 mmol) , NI, Nl-dietil-N2-metiletano-l, 2-diamina.

(0,046 ml, 0,284 mmol), e DTPEA (0,062 ml, 0,355 mmol) foram dissolvidos em DMF (2,0 ml), então foi adicionado HATU (32,4 mg, 0,085 mmol) e a mistura da reação foi agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. Hidrazina (0,011 ml, 0,355 mmol) foi adicionada e a mistura da reação foi agitada a temperatura ambiente durante 10 minutos. A solução foi concentrada e purificada por HPLC preparativa para fornecer o sal da TEA do titulo composto (24 mg, 42% de rendimento).

(m/z) : [M+H] + calculado para 562,7 de C31H40FN7O2 foi encontrado 562,7.

[00183] Usando métodos sintéticos semelhantes, foram preparados os compostos das Tabelas 1-19. Nas tabelas a seguir, um branco em. qualquer coluna indica um átomo de hidrogênio, um * em uma estrutura no cabeçalho de uma tabela indica um centro quiral, a anotação (A) ou (S) na frente de um substituto denota a configuração do átomo de carbono ao qual o substituto foi ligado.

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 114/165

Tabela 1

Ex. No.	*	R1	R3	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
1-1		H	ch3	C27H30FN7O2	5 0 4,24	504,1
1-2		H	IPr	C 2 9 H 3 4 FN 7 O2	532,28	532,3
1-3		H	CH2CH2OH	C28H32FN7O3	534,26	534,2
1-4		H	cpent.il	C31H36FN7O2	5 5 8 2 9	558,3
1-5		H	chexi	C32H38FN7O2	572,31	572,3
1-6		H	cpropil	C29H32FN7O2	530,26	53 0,2
1-7			ch3	C28H32FN7O2	518,2 6	518,1
1-8		ch3	cpropil	C30H34FN7O2	544,28	544,2
1-9		CH3	chexi	C33H40FN7O2	586,32	5 8 6,2
1-10		CH3	CH2CH2OH	C 2 9 H 3 4 FN 7 0 3	548,27	54 8
1-11		CH3	cpentil	C32H38FN7O2	572,31	572
1-12		ch3	iPr	C30H36FN7O2	54 6, 29	54 7
1-13		C2H5	iPr	C31H38FN7O2	5 6 0, 31	5 60
1-14		C2H5	CH2CH2OH	C 3 0 H 3 6 FN 7 0 3	562,29	5 62
1-15	(S)	3 3	iPr	C 3 0 H 3 6 r N 7 U 2	54 6, 2 9	546
1-16	(R)	ch3	iPr	C30H36FN7O2	546, 29	546
1-17		1. r 1?	CH2CH2OH	C31H38FN7O3	57 6, 3 0	57 6,2
1-18		iThT	CH2CH2OH	C 31H 3 8 FN 7 0 3	57 6, 30	576,9
1-19	(S)	ch3	CH2CH2OH	C29H34FN7O3	548,27	548,2
1-2 0	(R)	ch3	CH2CH2OH	C29H34FN7O3	548,27	548,2
1-21	(S)	CH3	ch3	C28H32FN7O2	518,2 6	518,3

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 115/165

Ex. No.	*	R1	R3	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H]+ encontrado
1-22	(R)	ch3	ch3	C28H32FN7O2	518,26	518,3
1-23		1 hT	IPr	C32H40FN7O2	574,32	57 3, 8
1-24		CH3	tBu	OsiHvgjj N7O2	560,31	559,7
1-25		C2H5	t.BU	C32H40FR7O2	574,32	57 3,7
1-2 6		nPr	t.Bu	C33H42FN7O2	588,34	587,7
1-27		Ί P Ύ'	tBu	C 3 3 H 4 21N 7 0 2	588,34	587, 8
1-2 8	(R)	nPr	UH2RH2 OH	C31H30FN7O3.	57 6, 3 0	57 6,2
1-2 9	(S)	c2h5	CH2CH2OH	C30H36FN7O3	562,29	5 62,5
1-3 0	(R)	C2H5	CH2CH2OH	C30H36FN7O3	562,29	5 62,5
1-31		CH3	H	C27H30FN7O2	5 0 4,24	504,2
1-32		C2H5	ch3	c 2 9 h 3 4 m 7 o2	532,28	532,2
1-33		r,pr	ch3	C30H36FN7O2	.546/ 29	546,2
1-34		iPr	ch3	C3oH36FN702	54 6, 29	54 6, 3
1-35		Ui P Ύ~		C29H34FN7O2	532,28	532,2
1-3 6	(S)	C2H5	tBu	C232H4UFN7O2	574,32	57 4,3
1-37	(R)	C2H5	tBu	C32H40FN7O2	574,32	57 4,3
1-38		1. r Γ	H	C29H34FN7O2	532,28	532,2
1-39	(R)	1 Rr	H	C2 9H3 4 m 7 O2	532,28	532,2
1-40	(S)	1 Rr	H	C2 9H3 4 m 7 02	532,28	532,2

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 116/165

Ex. No.	*	R4a	R4b	r4c	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
2-1			(Si ch3	(R) CH3	6-3 oH 3 ΙΆ-Ί	54 6,29	b4 Ό
2-2		(R) CH3			C 2 9 Η 3 4 FN 7 Ο 2	532,28	532
O		(S) ch3			c2Sh34fn7o2	532,28	532
2-4		(S) ch3		(R) CH3	C30H3gFN7O2	5 4 6,2 9	54 6
2-5			(S) ÜH3		C2aH34FN7O2	532,28	532
2-6			(R) CH3		C 2 9 H 3 4 FN 7 0 2	532,28	532
2-7		(R) CH3		(R) CH3	c30h36fn7o2	546,29	546
2-8	(λ S)	(R) CH3			C2 gH34 FN7U2	532,28	5 3 2
2-9	(Λ)	(R) CH3			C29H34E ^7^2	532,28	532
2-10	(S)		(R) CH3		C 2 9 H 3 4 FN 7 O 2	532,28	531,7
2-11	(S)		(S) ch3		c2Sh34fn7o2	532,28	531, 8
2-12	(R)		( S’) ch3		C2 9H 3 4 FN- O2	532,28	531,7
2-13	(R)		(R) CH3		c2Sh34fn7o2	532,28	531,7
2-14		(R) CH3		(S') ch3	c30h36fn7o2	546,29	54 6
2-15	(S)	(S)ch3			c29h34fn7o2	532,28	532,3
2-16	k 5)	(S)CH3		(R) CH3	C3oH36FN702	54 6, 2 9	54 6, 3
2-17	(S)	(R) CH3		(R) CH3	6-3 oH 3 el 1^7^2	546,29	54 6, 6
2-18	(R)	(S) ch3			C 2 9 H 3 4 FN 7 O 2	532,28	532,2
2-19	(R)	(S') ch3		(R) CH3	c30h36fn7o2	54 6,29	546, 6
2-20	(R)	(R) CH3		(R) CH3	C3oH3gFN702	5 4 6,2 9	546, 2
2-21		(S)c2h5			C13oH3gFN702	54 6,2 9	545, 7
2-22		(λ)C2H5			C.3oH3gFN702	546,29	545, 8

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 117/165

3 /13 6

Ex. No.	*	R1	R4a	R413	r4c	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
3-1		H		(S)CH3	( R) CH3	C28H32FN7O2	518,26	518,2
3-2		ch3	(R.) CH3			C28H32FN7O2	518,26	517,7
3 3		ch3	(R) CH3		(R) CH3	C29H34FN7O2	532,28	532,2
3 — á		ch3		(S) ch3		C28H32FN7O2	518,2 6	518,2
3-5		ch3	( S) CH3		(-R) CH3	C29H345N7O2	532,28	532,2
3“ 6		ch3	(S) ch3			C 2 8 H 3 2 £ 'N 7 0 2	518,26	518,2
3-7		nPr	(S) ch3			C3oH3sFN702	546,29	546
3™ 8		nPr	(.R) CH3			c30h36fn7o2	546,29	546
3-9		nPr	(S) ch3		( R) CH3	C31H38FN7Q2	560,31	560
3-10		nPr	(R.) CH3		(R) CH3	C3iH38FN7O2	560,31	560
3-11		nPr		(S) ch3		C3oH3gFN702	54 6,29	54 6
3-12		1P r	(S) CH3		(R) CH3	C3iH38FN7O2	560,31	560,2
3-13		iPr	( S) CH3			C3oH36FN702	5 4 6,2 9	546, 2
3-14		iPr		(S)ch3		C 3 0 H 3 g FN 7 0 2	14 6,2 9	546, 3
3 — 15		iPr	(R) CH3			C3oH36FN702	546,29	546,2
3 -16		IPr	(R) CH3		(R) CH3	C3iH38FN7O2	560,31	5 6 0, 3
3-17	(S)	ch3	(-R) CH3			C28H32FN7Q2	518,26	518,4
3-18	(R)	ch3	(R) CH3			c28h32fn702	518,26	518,3
3-19	1 ~D\ \ ^-!	ch3	(S) C2H5			C29H34FN7O2	532,28	532,3
3-20	\ R}	ch3	(R)C2H5			C29H3iíFN7O2	532,28	532,2
3-21	1 <Z\ \ ‘-s /	nPr	( R) CH3		(-R) CH3	C3iH38FN7O2	560,31	560, 3

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 118/165

4/136

Ex. No.	*	R1	R4a	R4b	r4c	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
3-22	(S)	ch3	(R)C2H5			52eH34FN7O2	532,28	532,3
3-23	(S)	nPr		(S)CH3		^28^32 FN7O2	518,26	517,7
3-24	( ~D\ \ ^-!	nPr	(R) ch3		(R) CH3	C2ç,H34FN7O2	532,28	532,2
3-25	\ R}	nPr		(S) ch3		5-28H32FN7O2	518,2 6	518,2
í — 7 6	1 £	ch3	1, S) C2H3			U9H34FN7O2	532,28	532,2

Tabela 4

F

Ex. No.	*	&	R1	R3	Fórmula	[M+H] + calculado	[Μ+ΗΓ encontrado
4 -1		(R)	ch3	ch3	C29H34FN7O3	548,27	54 8,7
4-2		(. S)	ch3	ch3	C2qH34F'N7O3	548,27	54 8,7
4-3	(R)	(S)	C2H,5	ch3	C30H36F'N7O3	562,29	5 62,2
4-4	(R)	(R)	c2h5	ch3	C 3 0 H 3 6 FN 7 0 3	562,29	5 62,2
4-5	(R)	(R)	nPr	ch3	C31H30FN7O3	57 6, 3 0	57 6, 3
4-6	(R)	(S)	nPr	ch3	C31H38FN7O3	5 Ί 6, 3 0	576,2
4-7	(R)	(R)	iPr	ch3	C3iH38FN7O3	57 6, 3 0	57 6,2
4-8	(R)	(S')	iPr	ch3	C 31H 3 s FN 7 0 3	57 6, 30	576,2
4-9	(S)	(R)	iPr	ch3	C3iH38FN7O3	5 7 6, 3 0	576,2
4-10	(S)	(R)	c2h5	ch3	C30H36FN7O3	562,29	5 62
4-11	(S)	(. S)	C2H,5	ch3	C3oH36F'N703	562,29	562
4-12	(S)	(R)	nPr	ch3	CsiHsgFN-Os	57 6, 3 0	57 6
4-13	(S')	(S)	iPr	ch3	C/31H30FN7O3	5 Ί 6, 3 0	576,2

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 119/165

Tabela 5

Ex. No.	*	•»^43.1	r~j4â,2		R4b2	R3	Fórmula	calculado	[M-f-H] + encontrado
5-1		Cri 3	Cri 3			CH3	c30h36fn7o2	5 4 6,29	54 6
5-2	í A)	Τ'* b-í o	Τ'* b-í o			ch3	c30h36fn7o2	54 6,2 9	546, 2
5-3	(S)					ch3	c30h36fn7o2	546, 29	54 6, 2
5-4				- (CH2)3~	ch3	C3iH36FN7O2	558,29	557,8
5- 5		(R) CH3				k, c	C3oH3>5J?N702	54 6, 29	54 6, 2
5-6		ÍR} CH3				iPr	C3iH3gFN7O2	560,31	560,2
5-7		(R) CH3				cBu	C32H38FN7O2	572,31	571, 6
5-8		(R) CH3				(a)	c30h36fn7o3	563Λ 2 9	562
5-9	í A)	(R; CH3				(a)	c30h36fn7o3	562z 2 9	562,2
5-10	í A)			~ ( ch2 i 3-	H	c30h34fn7o2	544,28	544,3
5-11	(S)			- (CH2) 3-	H	c30h34fn7o2	544,28	544,2

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 120/165

Ex. No.		*	R1	R3	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
Ό “ .1.	A		H	H	C27H23FN7O2	502,23	502,2
6“ 2	A			ch3	c29h32fn7o2	530,26	530
6“ 3	A		nPr	H	c30h34fn7o2	544,28	344 Λ 3
6-4	A		nPr	ch3	C3iH36FN7O2	558,29	558,3
Ό 2	A		iPr	ch3	C 3 iH3 6 fn7 o2	558,29	558,3
6-6	A		ipr	H	C30H34FN7O2	544,28	544,2
6-7	A	(A)	nPr	ch3	c31h36fn7o2	558,29	558,2
6” 8	B	(S')	c2h5	ch3	C30H34FN7O2	544,28	Γ-'./4 4 ο xJ z-i ! .J
6-9	A	(S')	0'2 A 5	ch3	c30h34fn7o2	544,28	544,2
6-10	B	(S)	nPr	ch3	C3iH35FN7O2	558,29	5 8
6-11	p	I ~D\ \ ^-!	nPr	ch3	C31H36FN7O2	558,29	558,2
6-12	A		c2h3	ch3	c30h34fn7o2	544,28	544,3
6 -13	B	(A)	c2h5	ch3	c30h34fn7o2	544,28	544,3

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 121/165

Tabela 7

Ex. No.	*	R1	R3	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
7-1		CH3	ch3	C 2 y H 3 4 FN 7 0 2	532,28	532,2
*7 Q		CH3	iPr	CeiHagFNvCA	560,31	5 6 0, 1
7 - 3		CH3	cpropil	C 31H 3 q F N 7 u 2	558,29	558,1
7-4		/-1-,	cpentil	C33H40FN7Q2	5 8 6, .3 2	586,0
7-5		f'* o	cbut i1	C32H38FN7O2	572,31	572,1
7-6		A'· yj o	(a)	C31H38 FN7O3	57 6, 3 0	576,0
7 - 7		iPr	ch3	C31H38FN7O2	5 6 0,31	560,3
7-8		iPr	iPr	C33H42FN7O2	588,34	588,2
7-9	(.R)	IPr	ch3	Cai-tlag FN7O2	560,31	560,2
7-10		CH3		C28H32FN7O2	518,26	518,2
7-11		nPr	£4	C 3 0 H 3 6 F N 7 U 2	546,29	546,2
7-12		iPr		C30H36FN7O2	5 4 6, 2 9	546,2

(a) (CH₂)₂OCH₃

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 122/165

Tabela 9

Ex. No.	*	**	R1	R5	Rs	Fórmula	[M+H] + C3.1 cu 1 sdo	[M-t-H] + encontrado
9-1		(S)	ch3	( UH2 ) 4'“	C31 ΗβζΓ N7O2	558,29	558,2
9™ 2		(S)	ch3	- (CH2) 5-	c32h38fn7o2	572,31	572,3
9-3		(S)	c2h5	- (CH2)4-	c32h33fn7o2	572,31	572,2
O-Zi ~±		(β)	ch3	- (CH2)4-	C3iH35FN7O2	558,29	558,2
9-5	( S)	(S)	ch3	- (CH2)4-	C3iH36FN7O2	558,29	558,2
9- 6	íR)	(s)	ch3	(CH2) 4-	C3iH36FN7O2	558,29	558,2
9-7	(S)	(S)	ch3	- (CH2) 5-	c32h38fn7o2	572,31	572,2
9-8	(R)	(S)	ch3	- (CH2) 5-	c32h38fn7o2	572,31	b!2 f 3
9-9		(S)	nPr	( UH2 ) 4'“	C33H4QL’ N7O2	586,32	585, 8
9-10		(S)	.iPr	- (ch2)4-	C33H40FN7O2	586,32	585, 8
9-11		(β)	iPr	- (CH2)4-	C33H40FN7O2	586,32	58 6, 3
9-12		(β)	c2h5	(CH2) 4-	c32h38fn7o2	572,31	572,2
9-1.3		(β)	nPr	- (CH2) 4-	c33h40fn7o2	5 8 6 f 3 2	586, 2
9-14		(λ S)	nPr	ch3	Ch 3	C3iH38FN7O2	560,31	560,4
9-15		(β)	ch3	- (CH2) 5-	c32h38fn7o2	572,31	571,7
C)___3 (A,		(S)	ch3	CH,	Chi3	C29H34H N7O2	,5 3 2,2 8	531,8
9-17	(S)	(S)	c2h5	“ (CH2)4-	c32h38fn7o2	572,31	572,3
9-18	IR)	(S)	c2h5	- (CH2)4-	C32H38FN7O2	572,31	572,3
1 Q		(β)	iPr	ch3	T-T	C3iH38FN7O2	560,31	560,3
9-2 0	(S)	(S')	nPr	ch3	H	C3iH33jj N7O2	560,31	560,2
9-21	(β)	(S)	nPr	ch3		C31H38FN7O2	560,31	5 6 8 3
9-22		(S)	nPr	- (CH2) 5-	C34H42FN7O2	600,34	600,3

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 123/165

Ex. No.	*		R1	R5	Rs	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
9-23		(S)	c2h5	ch3	ch3	c30h36fn7o2	54 6,2 9	54 6,2
9-24		(S)	c2h5	- (CH2) 5-	c33h40fn7o2	586,32	58 6, 3
9 2 5	(S')	(S')	iPr	(CH2) 4-	C33H40FN7O2	586,32	5 8 6, 6
9-26	(R)	(S')	1P r	- (CH2) 4-	c33H40fn7o2	5 8 6 f 3 2	586, 3
9-27		(S)	iPr	- (CH2) 5 —	c34H42fn7o2	600,34	600,3
9-2 8	(R)	(S)	iPr	ch3	f'' _	C 31H3 A t N 7 O2	560,31	560,2
9-2 9	(S’)	(S')	iPr	( UH2 ) 5‘	C34H42FN7O2	6 0 0, 8> 3 9	600, 3
9-30	(R)	(S')	iPr	... (CH2) 5...	C34H42FN7O2	6 0 0, 8> 3 9	600, 3
9-31	(S)	(S)	nPr	- (CH2) 5-	C34H42FN7O2	6 0 0, 3 3 9	600, 6
9-32	(R)	(S)	nPr	- (CH2) 5-	C34H42FN7O2	6 0 0, 3 3 9	6 0 0, 6
9-33	(-K)	(S')	C2H,5	ch3	f·’ T-T -,	C30H35FN7O2	546, 292	54 6,2
9-34	(S')	(S')	c2h5	ch3	T-T -,	C 3 0H3 5 fn7 o2	54 6, 2 92	5 4 6, 2

Ex. No.	*	**	R1	R5	R6	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
10-1	(R)	(S)	ch3	ch3	H -,	c30h36fn7o2	546, 29	546, 3
10-2	(R)	(S)	c2h5	ch3		C3iH38FN7O2	5 6 0, 31	560, 3
10-3	(R)	(R)	c2h5	ch3	Ch 3	C3iH38FN7O2	560,31	o 6 0, 3
10-4	(S)	(S')	ch3	ch3	f'1 y.7	C3oH36FN702	5 4 6,2 9	54 6,2
10-5	(S)	(R)	ch3	ch3	Chia	C3oH36FN702	54 6,29	54 6,2
10-6	(S)	(S)	c2h5	ch3	L.H 3	C3iH38FN7O2	560,31	560,3
10-7	(S)	(R)	c2h5	ch3	ch3	C3iH38FN7O2	5 6 0, 31	5 60,2

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 124/165

110/136

Tabela 11

F

Ex. No.	*	**	R1	Fórmula	[M+H]+ calculado	encontrado
11-1		(Sj	CH3	C32H3A FN7O2	572,31	571,8
11-2		(S)	C2H5	Q33R4 0 - Π7 O2	586,32	58 6,8
11-3		(,S)	RpP	C34H42FN7O2	6 0 0, 3 4	599, 7
11-4		Í.S)	iPr	C34H42FN7O2	6 0 0,3 4	599, 8
11-5	í R'>	(s)	CH3	C32H38FN7O2	572,31	572,8

Tabela 12

F

HO

Ex. No.	*	R1	R10	R11	Fórmula	[M+H]+ calculado	[M+H] + encontrado
12-1		ch3	C2H5	C2H5	C30H38FN7O2	548,31	54 7,8
12-2		ch3	ch3	CH3	C 2 8 H 3 4 L· N 7 0 2	520,28	520, 3
12-3		ch3	- (CH2) 4-	C 3 0 H 3 6 r N 7 U 2	54 6, 2 9	546,2
12-4		iPr	ch3	ch3	C/30H30FN7O2	548,31	548,2
12 ~ 5		IPr	- (CH2) 4-	C32H40FN7O2	574,32	57 4, 6
12-6		nPr	CH3	Chi 3	C 3 0 H 3 g HN 7 O2	548,31	548,3
12-7		nPr	” (CH2) 4'”'	C32H4 0 FN 7O2	574,32	574,3

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 125/165

111/136

12-8		c2h5	C2.V5	c2h5	C31H40FN7O2	5 ό 2 Λ	32	5 61, 8
12-9		nPr	C2H5	C2H5	C32H42FN7O2	57 6,	34	57 5 9
12-10		iPr	C2H5	c2H5	^7θ2	57 6,	34	575,8
12-11	(S)	iPr	ch3	CHv	C3oH38FN702	54 8,	31	548,4
12-12	! Ri	IPr	ch3	ch3	C3oH38FN702	54 8,	31	54 8,2
12-13	(S}	c2h5	c2h5	c2h5	C31H40FN7O2	5 62,	32	5 62,7
12-14	\R'i	C2Ho	C 0 H c.	c.2h5	C31H40FN7O2	562,	32	5 62,7
12-15	\ S)	iPr	C 9 i'Í c·	c2h5	C32H42FN7O2	57 6,	34	57 6, 7
12-16	{R-'i	iPr	C2.V5	c2h5	C32H42FN7O2	5 Ί 6,	34	5 7 6, 6

Tabela 13

Ex . No.	*	R1	R12	Fórmula	[M+H]+ calculado	[M4-H] + encontrado
13-1		ch3	C'' R -j	330/7363'14702	54 6, 2 9	54 6
13-2		ΓιΡΓ	Ch O	C32H40 Η N7O2	574,32	O / f 2.
13-3		iPr	CR..,	C32H4oFN702	574,32	574,3
13-4		C2H5	ch3	C31H38FN7O2	560,31	560,2
13-5	(S}	73 P Ύ~	ch3	C32H40FN7O2	574,32	.5 / 4 Λ 6
13-6	(A)	nPr	ch3	R32H40- N7O2	574,32	574, 6
13-7		Π .P I?	C2H5	C33H42FN7O2	588,34	58 8
13-8		ΙΊ p' '	iPr	C34H.44FN7O2	602,35	602
13-9		cBu	C'' R -j	C 3 3 H 4 Q £ 'N 7 0 2	586,32	58 7
13-10		cBu	ch2ch2oh	C34H/12^ ^7^3	616,33	616
13-11	(S)	nPr	C2H5	C33H42FN7O2	588,34	588,6

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 126/165

112/136

13-12	(.R)	nPr	c2h5	C33H42FN7O2	588,34	588,6
13-13	(S)	nPr	iPr	C34H44FN7O2	602,35	602,7
13-14	(R)	nPr	iPr	U34H44L1 N7O2	602,35	6 0 2,8

Tabela 14

Ex. No.	*		R1	R12	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
14-1		1 S}	f'*	ch3	C30H36FN7O2	5 4 6, 29	54 6
14-2		1 rc /	C'' I-J -j	ch3	C30H36ÍJ N7O2	546, 29	54 7
14-3	1 S'j	1 S'j	Ch q	CH3	C30H36FN7O2	.546/ 29	545, 8
14-4	(S)	(R'i	CH3	G* Ί-Τ	C30H36FN7O2	54 6, 29	54 5,7
14-5		( R)	IPr	f'* o	C32H40FN7O2	574,32	575
14-6	(jR)	(S)	CH3	C'' I-J □	C 3 0 H 3 61N 7 0 2	546, 29	545, 7
14-7	(-R;	(R/	CH3	Ch q	C 3 0 H 3 6 r N 7 U 2	54 6, 2 9	54 5,7
14-8		(S)	iPr	CH3	C32H40FN7O2	574,32	57 4
14-9		! Ri	f'* o	IPr	C32H40FN7O2	574,32	57 4,3
14-10		(S}	C'' I-J □	iPr	C 3 2 H 4 0 FN 7 O2	574,32	574,3
14-11		\R'i	nPr	CH3	C32H4 η FN 7O2	574,32	57 4
14-12		{R-'i	c2h5	CH3	C31H38FN7O2	560,31	5 61
14-13		(S)	nPr	H	C31H38FN7O2	5 6 0, 31	5 60, 3
14-14		(S)	nPr	C'' I-J -j	C32H40FN7O2	574,32	57 4
14-15		(S/	nPr	IPr	C 3 4 H 4 4 Η N 7 0 2	602,35	602
14-16		(S)	G* Ί-Τ	H	C29H34FN7O2	532,28	5 32λ 2
14-17		(s}	C2H5	jtí	C30H36FN7O2	5 4 6, 2 9	54 6,2

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 127/165

13/

Ex. No.	*	**	R1	R12	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
14-18		(S)	c2h5	IPr	C33H42F'N7O2	588,34	58 8,3
14-19		(R)	nPr	iPr	C 3 4 H 4 4 1 N 7 0 2	602,35	602,3
14 - 2 0		(R/	nPr	TT	C3iH3gFN7C'2	560,31	5 60,3
J 4 - 2 J		(R)	iPr	IPr	C34H44FN7O2	602,3 5	62 0,3
14-22		! Ri	iPr	jtí	C3iH38FN7O2	560,31	560,3
14-23	(S}	i re;	iPr	OH 3	03211403/11702	574,32	574,2
14-24	\R'i	\R'i	IPr	CH3	N7O2	574,32	57 4,7

Tabela 15

Ex. No.	R1	R13	R12	Fórmula	[M+H] + calculado	[M4-H] + encontrado
15-1	ch3	H	ch3	C27H3oFN702	504,24	504
15-2	cPr	u	cPr	0 31H 3 4 E N 7 0 2	556,28	55 6, 3
15-3	ch3	Ch q	ch3		518,26	518
15-4	IPr	H	ch3	C29.n.34FN7O2	532,28	532,2
15 “ 5	nPr	jtí	ch3	C?.2yH34FN7O2	532,28	532,2
1 6	C2H5	M	ch3	C28H32FN7O2	518,26	517,8

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 128/165

114/136

Tabela 16

Ex. No.	R1	R17	R1S	Fórmula	calculado	[M4-H] + encontrado
1 6-1	H	- (C	H2 ) 5-	C27H3iFN6O	475,25	475,1
16-2	ch3	ch3	tBu	C28H35FN6O	491,29	491,1
1 6 - 3	ch3	(C	H2 ) 5”’	C28H33FN6O	489,27	489, 3
16-4	ch3	- (CH2)2	0 ( CH2 2-	C27H3iFN3O2	491,25	4 91, 1
16-5	ch3	~ (c	4 2 ) 3~~	C26H29FN6U	461,24	461,2
16-6	ch3	ch3	cpzopil	C27H3iFN6O	/ ^7 r n -d / O f z.	475, 1

Ex. No.	R1	γ->15	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
17-1	H	f'*	C23H22FN5O3	4 3 6, 17	4 3 6, 0
17-2	H	cpropil	c25h24fn5o3	462,19	4 62
17-3	H	(CH2) 2N ( ch3 ) 2	c26h29fn6o3	493,23	4 93
17-4	H	CH2CH2OH	c24h24fn5o4	4 6 6, 18	4 66,1
17-5	H	4”’C 7N~CH3	C28H3iFN6O3	519,24	519, 2

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 129/165

15/

Ex. No.	R1	R15	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
17-6	H		C27H28FN5O4	506,21	5 0 6, 1
17-7	H		c26h27fn6o3	491,21	4 91
17 - 8	H	j f~ \ { / \ í”\ )	Ü2 8^30	504,23	5 Ω 5
17-9	H		C26H26FN5O4	492,20	493
17-10	ch3		C29H32F2N5O3	551,25	b 5 3
17-11	ch3	-1--	c27h27f2n5o4	524,20	524,5
17-12	ch3	-J— \ /	C27H28F2NsO3	523,22	523

Tabela 18

F

Ex. No.		R1	X	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H]' encontrado
18-1		ch3	ch2oh	c23h24fn5o2	422,19	422,1
18-2		4-^~^n-ch3	ch2oh	c28h33fn602	505,27	505,2
18-3		(CH2) 2nhch3	ch2oh	c25h29fn6o2	465,23	465,2
18 - 4	(R)	-j-Z n~ch3 \___/ 3	ch2oh	c28h33fn6o2	505,27	5 5

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 130/165

116/136

Ex. No.	*	R1	X	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
18”5	I c \ \ /		CH2OH	ClgHjaFNgCy	505,27	505
1 d ” b	(R)	(CH2) 2NHCH3	CH2OH	C25H29FN6O2	465,23	4 65
18“ 1	(Sj	(CH2) 2NHCH3	CH2OH	C25H29FN6O2	465,23	4 65

Tabela 19

Ex. No.	R1	Fórmula	[M-f-H] + C3.1 cul ado	[M-f-H] + encontrado
19-1	F 9 j La 'VA I n I.L HN-n N 'X	C3iH3SFN7O2	560,31	560
19-2	F HO^xk elk. x- 9 J (1 A ΪΙ 1 1 ' !1 % Jk N k X hn-n n x 7 Ί	C32H3SFN7O3	588,30	588
19-3	F HOvS O W< 11 kl hn-n n-^- x H L_/	C32H38FN7O2	572,31	572, 1
19-4	F Η	C26H27FN6O2	475,22	475

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Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 131/165

11//136

Ex. No.	R1	Fórmula	[M+H] + calculado	[M+H] + encontrado
19-5	F 9 s j Xjl a H	C27H29tN5O2	489,23	489
19-6	F 9 ' Jj ' V \Á ! ! 1 / \ \AzNk HN-N H	C28H31FN6O2	5 0 3,2 5	503
19-7	F hoyS hn-n N H	C27H29FN6O2	489,23	490
19-8	F HC\ Ã 9 \ ‘\JL .NH L .0 hn-n	C26H27FN5O3	491,21	492
19-9	F HO. cXaihayãã HN-N H	C28H33FNsO	489,27	4 8 9, 2
19-10	F HO^X \ V \. JL . N. HN-N N H	c28h33fn6o	489,27	489,2

Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 132/165

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Ensaios biológicos [00184] Os compostos da invenção foram caracterizados em um ou mais dos seguintes ensaios biológicos.

Ensaio 1: Ensaios bioquímicos da quinase JAK [00185] Um painel de quatro ensaios bioquímicos LanthaScreen JAK (JAK1, 2, 3 e Tyk2) foi realizado em um tampão de reação comum para, quinase (50 mm de HEPES, pH 7,5, 0,01% Brij~35, 10 mm de mgC1.2, e 1 mm. de EGT.A) . As enzimas JAK marcadas com GST recombinante e o substrato de peptidio STAT1 marcado com GFP foram adquiridos da Life Technologies.

[00186] Os compostos com. diluição em série foram préincubados com cada uma das quatro enzimas JAK e o substrato em 384 microplacas de poço brancas (Corning) à temperatura ambiente durante 1 h. ATP foi adicionado posteriormente para iniciar as reações de quinase em 10 pL de volume total, com 1% de DMSO. As concentrações enzimáticas finais para JAK1, 2, 3 e Tyk2 são 4,2 nM, 0,1. nM, 1 nM, e 0,25 nM, respectivamente; as concentrações correspondentes de Km ATP usadas são 25 μΜ, 3 μΜ, 1,6 μΜ e 10 μΜ; enquanto a concentração de substrato é de 200 nM para todos os quatro ensaios. As reações da quinase continuaram por 1 hora à temperatura ambiente antes de serem, adicionados uma preparação de 10 μΐ de EDTA (10 mm de concentração final) e anticorpo Tb-anti-pSTATl (pTyr701) (Life Technologies, 2 nM concentração final.) em tampão de diluição TR-FRET (Life Technologies). As placas foram incubadas a temperatura ambiente por 1 hora antes de serem lidas no leitor Envision (Perkin Elmer). Os sinais de taxa de emissão (52 0 nm/495 nm.) foram registrados e usados para calcular a percentagem de valores de inibição com base no DMSO e nos controles de fundo.

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119/136 [00187] Para a análise de dose-resposta, dados de inibição percentual foram aplicados em um gráfico versus as concentrações dos compostos, e os valores de IC₅₀ foram determinados a partir de um modelo de ajuste robusto de 4 parâmetros com o software Prism (GraphPad Software). Os resultados foram expressos como pICso (logaritmo negativo de IC50) e, posteriormente, convertidos para pK± (logaritmo negativo da constante de dissociação, Ki) utilizando a equação de Cheng-Prusoff.

[00188] Os compostos em teste com um valor de K_L menor ou pKi maior em cada um dos quatro ensaios de JAK mostram, maior inibição da atividade de JAK.

Ensaio 2: Ensaio da potência celular da JAKI [00189] O ensaio da potência celular AlphaScreen JAKI foi feito ao medir a fosforilação de STAT6 induzida por interleucina-13 (IL-13, R&D Systems) em. células epiteliais do pulmão humano BEAS-2B (ATCC). O anticorpo anti~STAT6 (Cell Signaling Technologies) foi conjugado a pérolas de aceptor AlphaScreen (Perkin Elmer), enquanto o anticorpo anti-pSTATo (pTyr641) (Cell Signaling Technologies) foi biotinilado utilizando a sulfo-NHS-biotina EZ-Link (Thermo Scientific).

[00190] As células BEAS-2B foram cultivadas a 37 °C em uma incubadora umidificada a 5% de CO2 no meio 50% DMEM/50% F (Life Technologies), suplementado com 10% de FBS (Hyclone) , 100 U/ml de penicilina, 100 ug/ml de estreptomicina (Life Technologies), e 2 mm de GlutaMAX (Life Technologies). No dia 1 do ensaio, as células foram semeadas a uma densidade de 7.500 células/poço em. placas brancas com 384 poços revestidos com. poli-D-lisina (Corning) com 25 ;iL de meio, e ficaram durante a noite na incubadora para aderência.

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No dia 2 do ensaio, o meio foi removido e substituído com pL de tampão de ensaio (Hank's Balanced Salt Solution, 25 mm. HEPES e 1 mg/ml de alburaina sérica bovina/BSA) contendo respostas-dose dos compostos em teste. Os compostos foram, diluídos em série em DMSO e, então, diluídos 1000 vezes nos meios para chegar à concentração final de 0,1% de DMSO. As células foram incubadas com os compostos de teste a 37 °C por h, seguida pela adição de 12 μΐ de IL-13 pré-aquecido (80 ng/ml em tampão de ensaio) para estimulação. Após incubação a 37 °C por 30 minutos, o tampão do ensaio (contendo composto e IL-13) foi removido, e 10 μΐ de tampão de lise celular (25 mm HEPES, 0,1 % SDS, 1 % NP-40, 5 mm de mgCÍ2, 1,3 mm, 1 mm de EDTA, EGTA e suplementar com os inibidores de protease Ultra mini e PhosSTOP da Roche Diagnostics). As placas foram agitadas a temperatura ambiente por 30 minutos antes da adição dos reagentes de detecção. Uma mistura de pérolas aceptoras conjugadas anti-biotina-pSTAT6 e anti-STAT6 foi adicionada primeiro e incubada à temperatura ambiente por 2 h, seguida pela adição de pérolas doadoras conjugadas a estreptavidina (Perkin Elmer). Após um. mínimo de h de incubação, as placas de ensaio foram lidas no o leitor de placa EnVision. Os sinais de luminescência AlphaScreen foram gravados e usados para calcular a valores percentuais de inibição com base em DMSO e controles de fundo.

[00191] Para análise de resposta-dose, os dados percentuais de inibição foram inseridos em um gráfico versus as concentrações de compostos, e os valores de IC50 foram determinados a partir de um modelo de ajuste robusto de 4 parâmetros com. o programa Prism.. Os resultados também podem ser expressos como o logaritmo negativo do valor de IC50, pICso.

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121/136 [00192] Os compostos do teste com menor valor ICsc maior de pICso nesse ensaio mostraram maior inibição da fosforilação de STAT6 induzida por IL-13.

Resultados do ensaio in vitro [00193] Os compostos selecionados da invenção foram testados nos quatro ensaios da enzima JAK1; JAK2, JAK3 e Tyk2 e o ensaio de potência celular BEAS-2B descrito acima. Como mostrado na Tabela 19 abaixo, foi observado que a potência enzimática de JAK1 foi preditiva de ambas atividade enzimática pan-JAK e a potência celular no ensaio de BEASTS . Portanto, todos os compostos foram, testados no ensaio da enzima JAK1 e o ensaio celular de BEAS-2B e a maioria também foi testada no ensaio da enzima JAK3. Todos os compostos exibiram valores de K± de JAK1 entre 0,04 nM e 0,6 nM (pKi entre 9,2 e 10,4) . Os compostos testados no ensaio da enzima JAK3 exibiram valores de Ki entre 0,08 nM e 0,5 n.M (pK_± entre 9,3 e 10,1). Os compostos testados apresentaram valores de IC50 exibidos no ensaio de BEAS-2B entre 3> nM e 100 nM (pICso entre 7 e 8,5) .

Tabela 20

Número do exemplo	LJAJC1 Ki (nM)	JAK2 Ki (nM)	JAK3 Ki (nM)	Tyk2 Ki (nM)	BE AS—2 B IC50 (nM)
	0,05	0,02	0,08	0,25	5, 0
o	0,06	0,02	0, 10	0,40	5, 9
5	0, 0 8		0,20		6, 5
6	0 f 10		0,25		4,2
7	0, 0 6		O/j-6		5, 4
1-2	0,05	0,03	0 f 1 6	0,08	7,8
1-12	0, 0 6	0,06	0,25	0,25	5, 9

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1-37	0 f 10	0,04	0,50	1,2 6	% Ci
2-15	0, 0 6		0,16		4, 0
9-21	0, 0 6	0,03	0,25	1,0 0	4,0
12-14	0,06		0,2		3 f 3

Ensaio 3: Farmacocinética no plasma e no pulmão em camundongos [00194] Os níveis plasmático e de pulmão dos compostos testados e as suas proporções foram determinadas da seguinte maneira. Foram usados BALB/c de camundongos de Charles River Laboratories no ensaio. Os compostos testados foram individualmente formulados em 20% de propilenoglicol em tampão de citrato com pH 4 em um.a concentração de 0,2 mg/ml e 50 uL da solução administrada foi introduzida na traqueia de um camundongo por aspiração. Em vários momentos (normalmente 0,167, 2, 6, 24 h) pós-administração, foram retiradas amostras de sangue através de punção cardíaca e pulmões intactos foram retirados dos ratos. As amostras de sangue foram centrifugadas (centrifuga Eppendorf, 5804R) durante 4 minutos a aproximadamente 12.000 rpm a 4 °C para coletar o plasma. Os pulmões foram acolchoados a seco, pesados e homogeneizados em uma diluição de 1:3 em. água estéril. Os níveis plasmáticos e de pulmão do composto do teste foram determinados por análise LC-MS contra padrões analíticos construídos em uma curva padrão na matriz do teste. Foi determinada uma razão pulmão para plasma como a proporção de ASC do pulmão em pg hr/ml para a ASC plasmática em ug hr/ml, onde a ASC está convencionalmente definida como a área sob a curva do composto do teste versus tempo. Os compostos da invenção exibiram exposição no pulmão de uma a

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123/136 duas ordens de magnitude maior do que a exposição no plasma. Todos os compostos perfilados nesse ensaio apresentaram uma meia-vida entre cerca de 4,5 e cerca de 14 noras.

Ensaio 4: Modelo Murino (Camundongo) de indução de pSTAT6 induzida por IL-13 em tecido pulmonar [00195] IL-13 é uma citocina importante subjacente à fisiopatologia da asma (Kudlacz et al. Eur. J. Pharmacol, 2008, 582,154-161). IL-13 se liga aos receptores de superfície celular ativando os membros da familia de Janus de quinases (JAK) que então fosforilam STAT6 e subsequentemente ativa as vias de transcrição. No modelo descrito, uma dose de IL-13 foi entregue localmente nos pulmões do camundongo para induzir a fosforilação de STAT6 (pSTAT6) que é então medida como o ponto final (resultado).

[00196] Foram usados camundongos adultos balb/c de Harlan no ensaio. No dia do estudo, os animais foram levemente anestesiados com isoflurano e receberam administração de veículo ou composto do teste (1 mg/ml, 50 pL de volume total ao longo de várias respirações) via aspiração oral. Os animais foram, colocados em decúbito lateral pós-dose e monitorados para a. plena recuperação da anestesia antes de serem devolvido à sua gaiola. Quatro horas mais tarde, os animais foram novamente anestesiados brevemente e desafiados com qualquer veículo ou IL-13 (0,03 pg dose total liberada, 50 pL de volume total) através de aspiração oral antes de serem monitorados durante a recuperação da anestesia e devolvidos à sua gaiola. Uma hora após a administração de IL-13 ou veículo, os pulmões foram coletados para detecção de pSTAT6 usando um ELISA anti-STAT6 (anticorpo captura/revestimento mAb de coelho; anticorpo

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124/136 detecção/captura mAb de camundongo: anti-pSTAT6-pY641; anticorpo secundário: anti-camundongo IgG-HRP) e analisados para a concentração total do fármaco como descrito acima no ensaio 3.

[00197] Os compostos selecionados da invenção foram testados no ensaio. A atividade no modelo é evidenciada por uma diminuição no nível de pSTATo presente no pulmão dos animais tratados em 5 horas em. comparação aos animais tratados com veículos, controles desafiados com IL-13. A. diferença entre os animais controle que foram tratados com veículo, desafiados com IL-13 e os animais controle que foram tratados com veículo, desafiados com veículo ditaram 0 a 100% de feito inibitório, respectivamente, em qualquer experimento. Os compostos exemplares da invenção foram testados no ensaio e exibiram inibição da fosforilação de STA.T6 4 horas após o desafio com IL-13 como documentado a seguir. O composto de 9-22 foi observado como uma exceção sob as condições do ensaio.

[00198] Ao confirmar a relevância da via JAK-STAT na inflamação das vias aéreas, os compostos que demonstraram envolvimento no alvo in vivo no modelo de camundongo de pSTA_T6 induzido por IL-13 foram subsequentemente testados e comprovados serem eficazes em um modelo de camundongo de inflamação eosinofilica induzido por alérgenos.

Resultados do ensaio in vivo [00199] Os compostos selecionados da invenção foram caracterizados no ensaio farmacocinético (Ensaio 3) e ensaio farmacodinâmico (Ensaio 4). Foi observada uma boa correlação entre a concentração do composto teste no pulmão determinada no ensaio de farmacocinética e no ensaio de farmacodinâmica

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125/136 era uma dosagera de terapo similar pós-administração. A observação da concentração de composto significativa no pulmão de camundongo no ensaio de farmacodinâmica confirmou que a inibição observada da indução de pSTAT6 induzida por IL-13 era ura resultado da atividade do composto em teste.

[00200] Na tabela a seguir, para a proporção de exposição no pulmão à exposição plasmática (Ensaio 3), A denota uma proporção 100-200, B denota uma proporção entre 50 e 100 e C denota uma proporção entre 20 e 50. Para a inibição percentual de indução de pSTAT6 induzida por IL-13 (Ensaio 4), A representa entre 60% a 80% de inibição, B representa entre 40% e 60% de inibição e C representa entre 25 % e 40 % de inibição.

Tabela 21

Número do exemplo	Proporção pulmão plasma 3	Inibição de pSTAT6 Ensaio 4
_L	A	A
3	B	B
5	B	lZj
6	B	izi
7	B	n
1 -18	B	A
1-28	C	B
1-29	C	A
Ί ... β 7		c
2-2	c	B
2 - 3		A
2-8	c	p
2-9	c	c

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Número do exemplo	Proporção pulmão - plasma Ensaio 3	Inibição de pSTAT6 Ensaio 4
2-15		B
3-2	B	Ά
3-5		A
3-24		c
5-8	C	A.
9-3	A	lZj
9-21		iZÍ»
12-8		A
12-14	B	n
13-2	A.	A
13-5	A.	U
13-6	B	B

Ensaio 5: Modelo de Murino de inflamação eosinofílica do pulmão induzida por Alternaria alternata [00201] A eosinofilia das vias aéreas é uma marca da asma humana. Alternaria alternata é um aeroalérgeno fúngico que pode agravar a asma em humanos e induz inflamação eosinofílica em pulmões de ratos (Havaux et al. Clin Exp Immunol. 2005 Feb;139(2):179-88). Nos camundongos, foi demonstrado que Alternaria ativa indiretamente as células linfoides inatas tipo 2 residentes do tecido no pulmão, às quais respondem (p. ex., IL-2 e IL-7) e liberação citocinas ci e p e n d e n t es ci e u Ar (, p. e x . , .1 n—5 e .i. L — 1 o) e c o ou ci e n a r a inflamação eosinofílica (Bartemes et al. J Immunol. 2012 Fe

1; 188 (3) :1503-13) .

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12//136 [00202] Foram usados camundongos C57 de sete a nove semanas de vida de Tacocnic no estudo. No dia do estudo, os animais foram levemente anestesiados com isoflurano e receberam administração de veiculo ou composto do teste (0,03-1,0 mg/ml, 50 pL do volume total ao longo de várias respirações) via aspiração orofaringea. Os animais foram colocados em. decúbito lateral pós-dose e monitorados para a plena recuperação da anestesia antes de serem devolvido à sua gaiola. Uma hora depois, os animais foram novamente anestesiados brevemente e desafiados com veiculo ou extrato de Alternaria (200 pg de dose total liberada, 50 pL de volume total) através de aspiração orofaringea antes de serem monitorados durante a recuperação da anestesia e devolvidos à sua gaiola. Quarenta e oito horas após a administração de Alternaria, foi coletado fluido da lavagem broncoalveolar (BALF) e os eosinófilos foram contados no BALF utilizando o Advia 120 Hematology System (Siemens).

[00203] Os compostos selecionados da invenção demonstrando atividade in vivo no ensaio farmacodinâmico de IL-13-pSTAT6 foram testados no ensaio de Alternaria. A atividade no modelo é evidenciada por uma diminuição no nível de eosinófilos presentes no BALF dos animais tratados em 48 horas em comparação aos animais tratados com veículos, controles desafiados com Alternaria. Os dados são expressos como percentagem, de inibição da resposta dos eosinófilos da BALF tratados com veículo e desafiados com Alternaria. Para calcular a percentagem de inibição, o número de eosinófilos de BALF para cada condição foi convertido em. percentagem, da média de eosinófilos de BALF tratados com veículo, desafiado com Alternaria e subtraídos de 100%. Os compostos exemplares

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128/136 da invenção foram testados no ensaio e exibiram inibição contagem de eosinofilos de BALF 48 horas após o desafio com

Alternaria como documentado a seguir.

Resultados do ensaio in vivo [00204] Todos os compostos testados demonstraram uma faixa de inibição (73% - 93%) dos eosinófilos de BALF induzidos por Alternaria. A tabela a seguir reflete a máxima percentagem da inibição estatisticamente significativa do nivel de indução de eosinófilos nos tratados com veículos, desafiados com Alternaria.

Tabela 22

Número do exemplo	Percentagem de inibição e eosinófilos de BALF induzidos por Alternaria
	90
	93
6	7 3
/

Ensaio 6: Ensaio de sobrevida de eosinófilos mediada por IL-5 [00205] A potência do composto em teste para sobrevida de eosinófilos mediada por IL-5 foi medida em eosinófilos humano isolados do sangue humano (AllCells). Como a IL-5 sinaliza por meio da JAK, este ensaio fornece uma medida de potência celular de JAK.

[00206] Os eosinófilos humanos foram isolados do sangue humano fresco (AllCells) de doadores saudáveis. O sangue foi misturado com. 4,5 % de Dextrano (Sigma-Aldrich) em. uma solução de cloreto a 0,9% (Sigma-Aldrich) . As células

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129/136 vermelhas do sangue ficaram em repouso durante 35 minutos para sedimentar. A camada superior rica em leucócitos foi removida e sobreposta em Ficoll-Paque (GE Healthcare) e centrifugada a 600 g durante 30 minutos. O plasma e as camadas de células mononucleares foram removidos antes que a camada de granulócitos fosse lisada com água para remover qualquer contaminação de células vermelhas do sangue. Os eosinófilos foram posteriormente purificados usando kit de isolamento de eosinófilos humanos (Miltenyi Biotec). Uma fração dos eosinófilos purificados foi incubada com FITC anti-CD16 (Miltenyi Biotec) durante 10 minutos a 4 °C no escuro. A pureza foi analisada usando um. citômetro de fluxo LSR1I (BD Biosciences).

[00207] As células foram cultivadas a 37 °C, em incubadora umidificada a 5% de CO₂ em RPMI 1640 (Life Technologies), suplementadas com 10% de Soro Fetal Bovino Inativado pelo Calor (SUB, Life Technologies) , 2 mm. de Glutamax (Life Technologies), 25 mm HEPES (Life Technologies) e IX Pen/Strep (Life Technologies). As células foram semeadas em 10.000 células/poço nos meios (50 μΐ). A placa foi centrifugada a 300 g durante 5 minutos e o sobrenadante foi removido. Os compostos foram diluídos em série em DMSO e, então, diluídos 500 vezes para uma concentração final de ensaio de 2x nos meios. Os compostos do teste (50 gl/poço) foram adicionados às células e incubados a 37 °C, 5% de CO₂ durante 1 hora, seguida pela adição de IL-5 (R&D Systems; concentrações finais de 1 ng/ml e 10 ng/ml) em meios de ensaio pre-aquecido (50 p.i) durante /2 horas.

[00208] Após a estimulação de citocinas, as células foram centrifugadas a 300 g durante 5 minutos e lavadas duas

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130/136 vezes com DPBS frio (Life Technologies). Para acessar a viabilidade e a apoptose, as células foram incubadas com. iodeto de propídio (Thermo Fisher Scientific) e APC Annexin V (BD Biosciences) e analisadas usando um citômetro de fluxo LSRII (BD Biosciences). Os valores de IC50 foram determinados a partir da análise das curvas de viabilidade celular percentual versus concentração dos compostos. Os dados foram expressos em valores de pICso (IC50 logaritmo decádico negativo). O composto de exemplo 1 apresentou um valor de pICso de 7,310,4 na presença de 10 pg/ml de IL-5 e um. valor de pICso 5,710,1 na presença de 1 ng/ml de IL-5.

Ensaio 7: Ensaio da potência celular da JAK: inibição de IL-2/anti-CD3 estimulada por IFNy em PBMCs humanos [00209] A potência do composto de teste para inibição da interleucina-2 (IL-2)/anti-CD3 estimulada pela gama interferons (IFNy) foi medida em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) isoladas do sangue humano total (Stanford Blood Center). Como a IL-2 sinaliza por meio da JAK, este ensaio fornece uma medida de potência celular de JAK.

[00210] (1) As células mononucleares do sangue periférico (PBMC) foram isoladas do sangue humano total de doadores saudáveis usando um gradiente Ficoll. As células foram cultivadas a 37 °C, em incubadora umidificada a 5 % de CO2 em RPMI (Life Technologies), suplementadas com 10% de Soro Fetal Bovino Inativado pelo Calor (SFB, Life Technologies), 2 mm de Glutamax (Life Technologies), 25 mm HEPES (Life Technologies) e IX Pen/Strep (Life Technologies). As células foram semeadas em 200.000 células/poço nos meios (50 ui) e cultivadas durante 1 h. Os compostos foram diluídos em série em DMSO e, então, diluídos 500 vezes (para uma concentração

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131/136 final de ensaio de 2x) nos meios. Os compostos do teste (100 uL/poçoj foram adicionados às células e incubados a 37 °C, 5% de CO₂ durante 1 hora, seguida pela adição de IL-2 (R&D Systems; concentração final de 100 ng/ml) e anti-CD.3 (BD Biosciences; concentração' final de 1 pg/ml) em meios de ensaio pré-aquecido (50 pl) durante 24 horas.

[00211] (2) Após a estimulação de citocina, as células foram centrifugadas a 500 g durante 5 minutos e o sobrenadante removido e congelado a -80 °C. Para determinar a potência inibitória do composto em teste em resposta à IL2/anti-Cd3, foram medidas as concentrações de IFNy sobrenadante via ELISA (R&D Systems). Os valores de IC50 foram determinados a partir da análise das curvas de concentração de IFNv versus a concentração dos compostos. Os dados foram expressos em valores de pIC₅₀ (IC₅₀ logaritmo decádico negativo). O composto do Exemplo 1 exibiu um valor de pICso de cerca de 6,9 nesse ensaio. O composto do Exemplo 3 exibiu um valor de pICso cie cerca de 7,2 nesse ensaio. O composto do Exemplo 1-37 exibiu um valor de pICso de cerca de 7,2 n e s s e e n s a i o .

Ensaio 8: Ensaio da potência celular da JAK: inibição de pSTATS estimulada por IL-2 em células T CD4 + [00212] A potência dos compostos de teste para inibição da fosforilação de STAT5 estimulada pela interleucina-2 (IL-2)/anti-CD3 foi medida em. células T CD4 positivos (CD4+), células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) isoladas do sangue humano total (Stanford Blood

Senter) utilizando a citometria de fluxo. Como a IL-2 sinaliza por meio da JAK, este ensaio fornece uma medida de potência celular de JAK.

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132/136 [00213] Células T CD4+ foram identificadas utilizando um anticorpo anti-CD4 conjugado com ficoeritrobilina (PE) (Clone RPA-T4, BD Biosciences), enquanto foi usado um anticorpo anti~pSTAT5 conjugado Alexa Fluor 647 (pY694, Clone 47, BD Biosciences) para detectar a fosforilação de STAT5.

[00214] (1) O protocolo do parágrafo 7 do ensaio (1) foi seguido com exceção que a estimulação de citocinas com anti-CD3 foi realizada durante 30 minutos em vez de 24 h.

[00215] (2) Após a estimulação de citocinas, as células foram fixadas com solução de fixação pré aquecida (200 uL; BD Biosciences) durante 10 minutos a 37 °C, 5% de CO2, lavadas duas vezes com. tampão DPBS (1 ml, Life Technologies), e ressuspendidas em tampão III Perm resfriado (1000 pL, BD Biosciences) durante 30 minutos a 4 °C. As células foram lavadas duas vezes com 2% de SFB DPBS (tampão FACS) e então ressuspendidas em tampão FACS (100 pL) contendo anti-CD4 PE (diluição 1:50) e anti-CD3 antiCD3Alexa Fluor 647 (diluição 1:5) durante 60 minutos à temperatura ambiente no escuro. Após a incubação, as células foram lavadas duas vezes com. tampão FACS antes de serem analisadas usando o citômetro de fluxo LSRII (BD Biosciences). Para determinar a potência inibitória dos compostos de teste em resposta a IL~2/anti--CD3, foi medida a intensidade fluorescente mediana (IFM) de pSTAT5 em células T CD4+. Os valores de IC50 foram determinados a partir da análise das curvas de inibição da IMF versus concentração dos compostos. Os dados foram expressos em valores de pIC.50 (IC50 logaritmo decádico negativo). O composto do Exemplo 1 exibiu um valor de pICso de cerca de 7,3 nesse ensaio. O composto do Exemplo 3 exibiu um valor de pICso de cerca de

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7,7 nesse ensaio. 0 composto do Exemplo 1-37 exibiu um valor cie p 1C 5o cie ce r ca de 8, 1 ne s s e en s a i o .

Ensaio 9: Ensaio da potência celular da JAK: inibição de pSTAT6 estimulada por IL-4 em células T CD3+ [00216] A potência do composto de teste para inibição da fosforilação de STAT6 estimulada pela interleucina-4 (IL4) foi medida em. células T CD3-positivos (CD3+), células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) isoladas do sangue humano total (Stanford Blood Center) utilizando a citometria de fluxo. Como a IL-4 sinaliza por meio da JAK, este ensaio fornece uma medida de potência celular de JAK.

[00217] Células T CD3+ foram identificadas utilizando um anticorpo anti-CD3 conjugado com ficoeritrobilina (PE) (Clone UCHT1, BD Biosciences), enquanto foi usado um anticorpo anti-pSTAT6 conjugado Alexa Fluor 647 (pY641, Clone 18/P, BD Biosciences) para detectar a fosforilação de STAT6.

[00218] As células mononucleares do sangue periférico (PBMC) foram isoladas do sangue humano total de doadores saudáveis como nos Ensaios 7 e 8. As células foram semeadas na taxa de 250.000 células/poço em meios (200 p.L) , cultivadas por 1 h e, em seguida, ressuspendidas em meios de ensaio (50 uL) (RPMI suplementado com 0,1% de albumina de soro bovino (Sigma), 2 mm Glutamax, 25 mm HEPES e IX Penstrep) contendo diferentes concentrações de compostos de teste. Os compostos foram diluídos em série em DMSO e, então, diluídos 500 vezes (para uma concentração final de ensaio de 2x) nos meios de ensaio. Os compostos de teste (50 μι) 1’oram incubados com as ceiulas a 37 ^JC, 5% de CO₂ por 1 h, seguido pela adição IL-4 (50 μΐ) (R&D Systems; concentração final 20 ng/ml) em meio para ensaio préPauta do Advogado No.: P-338-PCT

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134/136 aquecido durante 30 minutos. Após estimulação das citocinas,

as célul (100 uL)	Las foram, fixadas com. solução de fixação pré-aquecida (BD Biosciences) por 10 minutos a 37 °C, 5% de CO2,
lavadas	duas vezes com tampão FACS (1 ml) (2% FBS de DPBS) e

ressuspendidas em tampão Perm III gelado (1000 pL) (BD Biosciences) durante 30 minutos a 4 °C. As células foram lavadas duas vezes com tampão FACS e, em. seguida, colocadas em. suspensão de tampão FACS (100 uL) contendo anti~CD3 PE

(diluiçé	ϊο 1:50) e anti-pSTAT6 Alexa Fluor 647 (diluição 1:5)
durante	60 minutos à temperatura ambiente no escuro. Após a
incuba çí	ío, as células foram lavadas duas vezes com. tampão
FACS ant	:es de serem analisadas usando o citômetro de fluxo
LSRII (I	3D Biosciences).

[00219] Para determinar a potência inibitória dc composto de teste em resposta a IL-4, foi medida a

intensic	iade fluorescente mediana (IFM) de pSTAT6 em células
T CD3+.	Os valores de IC50 foram determinados a partir da
análise	das curvas de inibição da IMF versus concentração

os compostos. Os dados foram expressos como pICso (IC50

logaritr	ao decádico negativo). 0 composto do Exemplo 1 exibiu
um vai01	r de pICso de cerca de 7,7 nesse ensaio. 0 composto do
Exemplo	3 exibiu um valor de pICso de cerca de 8 nesse
ensaio.	0 composto do Exemplo 16-4 exibiu um valor de pICso

de cerca de 8,1 nesse ensaio.

Ensaio 10: Ensaio da potência celular da JAK: inibição de pSTAT3 estimulada por IL-~6 em células T CD3+ [00220] Um protocolo análogo ao Ensaio 9 foi usado

para det

seminar a potência do composto de teste para

inibição de fosforilação de STAT3 estimulada por interleucina 6 (IL—6). Foi usado um anticorpo anti~STAT3

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135/136

Alexa Fluor 647 conjugado (ρΥ/05, Clone 4/P, BD Biosciences) para detectar a fosforilação de STAT3. 0 composto do Exemplo 1 ex i o i u urn va 1 o r cte p Σ C 50 0e ce r ca de 7,2 ne s s e en s a i 0 . 0 composto do Exemplo 3 exibiu um valor de pICso de cerca de 7,4 nesse ensaio.

Estrutura cristalina [00221] Foi obtida uma estrutura cristalina do composto do Exemplo 2 (um análogo dos compostos divulgados aqui que foi divulgado no pedido provisório para o qual este pedido tem prioridade) ligada a JAK1 humana numa resolução de 2,28 Â. Foi observado o ligante se ligar ao sitio de ligação do ATP. Foram identificadas sete pontes especificas de hidrogênio com base numa distância de 3,5 A ou menos entre os átomos doador e receptor. De especial nota, foi identificada uma ponte de hidrogênio entre o carbonil do amido exociclico do composto do Exemplo 2 e a cadeia lateral de Arg879 de JAK1. Em estudos de modelagem anteriores, foi proposta esta interação como uma forma de fornecer a seletividade para JAK1 sobre outras tirosinas quinases, pois, caso contrário, quinases intimamente relacionadas (p. ex., TRKA, VEGFR, ABL1) não possuem um. resíduo de arginina no local equivalente. Os resultados observados da ponte de hidrogênio na estrutura cristalina e seletividade de kinome melhorada em comparação com a série que não tem o amido exociclico validam a hipótese deste design.

[00222] Embora a presente invenção tenha sido descrita com referência a aspectos específicos ou suas modalidades, aqueles que são versados na técnica compreenderão que diversas alterações podem ser feitas ou equivalentes podem, ser substituídos, sem se afastar do verdadeiro espírito e do

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136/136 escopo cia invenção. Além disso, na medida do permiti estatutos e dos regulamentos aplicáveis sobre patent todas as publicações, patentes e pedidos citados aqu incorporados por referência em sua totalidade, da me forma como se cada documento tivesse sido incorporad individualmente por sua referência.

Claims (13)

1. O QUE SE REIVINDICA É:

   Um composto da fórmula (I):

   

   R¹ é selecionado a partir do hidrogênio, Ci-aalquil, o

   Cs-ecicloalquil, e X e selecionado a partir de -C(O)R e CH₂R^lb, ou

   R¹ é selecionado a partir de - (CH₂) ₂NR²⁰R²¹ e um heterociclo de 4 a 6 membros contendo um. átomo de nitrogêni onde um átomo de nitrogênio é opcionalmente substituído por o p 2 a '7 /1

   R· e X e selecionado a partir de -CH₂OR ^J e -C(O)OR , onde

   R é selecionado a partir de ~NR^1JR^1Z1 e “OR¹⁰,

   R^;o e R¹⁴ em conjunto com c· átomo de nitrogênio a qual estão ligados formam um heterociclo monociclico bicíclico de 6 ou 7 membros contendo um átomo de nitrogênio adicional, onde o átomo de nitrogênio adicional é substituído por R³ e o heterociclo é opcionalmente substituído por um ou dois R⁴ ou

   Rⁱ³ e R¹⁴ em. conjunto com o átomo de nitrogênio ac qual estão ligados formam, um heterociclo de 5 a 6 membros, onde o heterociclo é opcionalmente substituí por “NR⁰R⁶ e R’', ou

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2. 2/13

   Bf³ e R^±4 era conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam morfolinil, ou

   R¹³ é R⁸ e R¹⁴ é R⁹,

   R³ é selecionado a partir de hidrogênio, C3scycloalquil e Ci-₃alquil, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por —OH ou -OCi-salquil,

   R⁴ é C1-3alqu.il, onde C1-3alqu.il é opcionalmente substituído por -OH,

   R³ e R⁶ são independentemente Ci_₃alquil ou R° e R⁶ em conjunto com o átomo de nitrogênio a que estão ligados formam um. heterociclo de 5 ou 6 membros, incluindo opcionalmente um átomo de oxigênio,

   R' é Ci-₃alquil, opcionalmente substituídos por um heterociclo de 5 ou 6 membros contendo um átomo de nitrogênio,

   R⁸ é hidrogênio ou C1-3alqu.il,

   R⁹ é selecionado a partir de - (CH₂) ₂NR°R^1]· ou um heterociclo de 4 a 6 membros contendo um átomo de nitrogênio, onde um átomo de nitrogênio é substituído por R¹²,

   R^1U e R¹ são independentemente C1-3alqu.il ou R^lü e R¹¹ em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo de 5 ou 6 membros,

   R^±z é C1-3alqu.il ou Ca-scicloalquil, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por —ΌΗ,

   R¹³ é selecionado a partir de Ci-salquil, C₃ecicloalquil e um heterociclo de 5 ou 6 membros, incluindo um heteroátomo selecionado a partir de nitrogênio e oxigênio, onde Ci-3alquil é opcionalmente substituído por -OH ou -N (Ci-3alquil) 2, e um heterociclo

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3. 3/13 e 5 ou 6 membros é opcionalmente substituído por Cisa lqu.il ,

   R¹⁶ é se ilecionado a partir de -nr¹⁷r¹⁸ e -OR¹⁹, R¹⁷ e R¹ ° são independentement e Ci-4alquil ou C₃ scicloalquil ou R‘^l/ e R¹⁸ em conjun~ to com o átomo de

   nitrogênio a que estão ligados formam um heterociclo d 5 ou 6 membros, incluindo opcionalmente um átomo de oxigênio, onde o heterociclo é opcionalmente substituído por Ci-₃alquil,

   R^iy, R²⁰, R²ⁱ, R²², R^z3 e R^z4 são independentemente seiecionaoos a partir de Ci-₃alqurl, ou um. sal aceitável do ponto de vista farmacêutico

   2. 0 composto da Reivindicação 1, onde R¹ é selecionado a partir do hidrogênio e Ci-3alquil, e X é selecionado a partir de -C(0)R² e -CH2R¹⁶.

   3. 0 composto da Reivindicação 2, onde

   R*° θ r.:4 _{em cori}j_unr_{o com o} átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um heterociclo monociclico c bicíclico de 6 ou 7 membros contendo um átomo de nitrogênio adicional, onde o átomo de nitrogênio adicional é substituído por R³ e o heterociclo é opcionalmente substituído por um ou dois R⁴ ou

   R^±J e R¹⁴ em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam, um heterociclo de 5 a 6 membros, onde o heterociclo é opcionalmente substituid por -NR³R⁶ e R/, ou

   R¹³ é R⁸ e R¹⁴ é R⁹,

   R^J é selecionado a partir de hidrogênio e Ci-₃alquil onde Ci_₃alquil é opcionalmente substituído por -OH,

   Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

   Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 154/165
4. 4/13

   R³ e R^D são independentemente Ci-.₃alquil ou R° e R^c em conjunto com. o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um. heterociclo de 5 ou 6 membros, R·' é um Ci-3 alqu.il, opc.ionalm.ente substituído por pirroüdinil, R⁸ é Ci-3alquil, R⁹ é ~ (CH2) 2NRⁱ⁰R¹¹ ou piperidinil, onde piperidini) é substituído no átomo de nitrogênio por R^1Z, R^;0 e R^;1 são C1-3alqu.il independentemente, Rⁱ² é Ci-salquil ou Cs-gcicloalquil, onde Ci-salquil é opcionalmente substituído por —0H, R*° é selecionado a partir de Ci-salquil, C3scicloalquil e um heterociclo de 5 ou 6 membros incluindo um heteroátomo selecionado a partir de nitrogênio e oxigênio, onde Ci-₃alquil é opcionalmente substituído por -0H e um heterociclo de 5 ou 6 membros é opcionalmente substituído por Ci-salquil, R¹⁶ é selecionado a partir de -NR^;'R¹⁸ e R^z' e R^±8 são independentemente Ci-4alquil ou C3scicloalquil ou Rⁱ⁷ e Rⁱ⁸ em conjunto com 0 átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam morfolinil ou um heterociclo de 5 ou 6 membros onde 0 heterociclo é opcionalmente substituído por Ci-salquil. 4. 0 composto da Reivindicação 3, onde X é -C(O)R², onde R² é -NR¹³R¹⁴. 5. 0 composto da Reivindicação 3, onde X é -C(O)R², n. è 6. 0 composto da Reivindicação 3, onde X é -CH₂R¹⁶. 7. 0 composto da Reivindicação 1, onde R¹ é

   selecionado a partir de - (0¾) 2NR^z0R²¹ e um heterociclo de

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   Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 155/165

   4- a 6 membros contendo um átomo de nitrogênio, onde um átomo de nitrogênio é opcionalmente substituído por R^2z e é selecionado a partir de ~CH₂OR²³ e -C(O)OR²⁴.

   0 composto da Reivindicação 7, onde R¹ é selecion

   

   opcionalmente substituído por —OH,

   a. é 0, 1, ou 2, b é 1 ou 2,

   R⁴ quando presente, é Ci-aalquil, desde que quando a for 0, R² é Ci..₃alquil, onde ₃alquil é opcionalmente substituído por —OH,

   R⁵ e R° são independentemente Ci_₃alquil ou R° e R' conjunto com. ~ (CH₂) 4-
5. 5--, R' é hidrogênio ou Ci-₃alquil,

   Pauta do Advogado No.: P-338-PCT

   Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 156/165
6. 6/13

   R^s é~ CH₃,

   R⁹ é ~ (CH₂) ₂NR^1oR¹¹ ou

   

   R.¹⁰ θ são q1 ,aiqUii independentemente, e R¹² é Ci-.3alquil;

   ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

   10. O composto da Reivindicação 9, onde R^z é um grupo selecionado de:

   

   onde R° e R⁶ são Ci_₃alquil.

   11. O composto da Reivindicação 10, onde R² é um grupo s e1ec ionado de

   

   onde

   R^J é Ci_₃alquil; ou -(CH₂)₂OH, e

   R·³* é Ci-₃alquil.

   12. O composto da Reivindicação' 10, onde R² é

   

   ( (S') -2- (6- (2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil) -IH-indazol-

   3--11) -5-propil~4,5,6, 7-tetraidro-3 ü-imidazo [4,5-cj piridin-6 il) ((IS,4S)-5-metil-2,5-diazabiciclo-[2.2.11 heptan-2il)metanona,

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   Petição 870190088769, de 09/09/2019, pág. 157/165
7. 7/13 ((S)-3-(dimetilamino)pirrolldin-1-il)((S)-5-etil-2-(6(2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil)-lH-indazol-3-il)-4,5,6,7tetra.idro-3.H-imidazo [4,5-c] piridin-6-il) metanona, (5)-(2-(6- (2-etil-5-fluoro-4-hidroxifnil) -l.H-indazol-3 il) -5~isopropil-4,5,6, 7-tetraidro~3.fi-imidazo [ 4, 5-c] piridin-

   6-il)(4-metil-1,4-diazepan-1-il)metanona, ( (5) -2- (6- (2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil) -lif-indazol3-il)-5-metil~4,5,6,7-tetraidro~3H- imidazo[4,5-c]piridin-611)((A)-4-(2-hidroxietil)-2-metil-piperazin-l-il)metanona, (5)-(2-(6-(2-etil-5-fluoro-4-hidroxifenil)-IH-indazol3-il) -5-propil~4,5, 6, 7-tetraidro-3.H-im.ida.zo [4,5-c] piridin-6 il) (4-(2-hidroxietil) piperazin-1-il)metanona, e seus sais aceitáveis do ponto de vista farmacêutico.

   14. 0 composto da Reivindicação 9, onde o composto é ((5)~2,4-dimetilpiperazin-l-il)((S)-2-(6-(2-etil-5-fluoro-4 hidroxifenil) -líf-indazol-3-il) -5-m.etil-4,5, 6, 7-tetraidro-3.H imidazo[5,4-c]piridin-6-il)metanona ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

   15. 0 composto da Reivindicação 9, onde o composto é (R) -N- (2- (dietilamino) etil) -5-etil-2- (6- (2-etil-5-fluoro-4hidroxifenil) -lff-indazol-3-il) -N-metil-4,5, 6, 7-tetraidro-3.H imidazo[5,4-c]piridina-6-carboxamida ou um sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

   16 . ( (S) -2- ( 6- (2-etil-5-f lu.orO-4-hidroxifen.il) -1Hindazol-3-il) -5-propil-4,5, 6, 7-tet..raid.ro-3H-imidazo [4,5c]piridin-6-il)((IS,4S)-5-meti1-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il)metanona da fórmula

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8. 8/13

   

   Um composto de fórmula

   

   um.

   to de vista farmacê para preparar um compo ie for:

   

   R^z es a reaç.ão de um compo

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9. 9/13

   

   com um composto de tórmula 2:

   

   para fornecer um composto de tórmula (II) ou seu sal aceitável do ponto de vista farmacêutico.

   Um composto de qualquer uma das Reivindicações 1 a

   17 para uso no tratamento de uma doença respiratória em um mamífero.

   21. 0 composto da Reivindicação 20, onde a doença respiratória é asma, doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose cística, pneumonite, fibrose pulmonar idiopática, lesão pulmonar aguda, síndrome da angústia respiratória aguda, bronquite, enfisema, bronquiolite obliterante, ou sarcoidose.

   22. O composto da Reivindicação 21, onde a doença respiratória é asma ou doença pulmonar obstrutiva crônica.

   23. O composto da Reivindicação 20, onde a doença respiratória é uma doença eosinofílica, uma infecção helmintica, hipertensão arterial pulmonar, linfangioleioiriiomatose, bronquiectasia, uma doença pulmonar infiltrativa, pneumonite induzida por drogas, pneumonite induzida por fungos, aspergilose broncopulmonar alérgica, pneumonite por hipersensibilidade, granulomatose eosinofílica com. poliangiite, pneumonia eosinofílica aguda idiopática, pneumonia eosinofílica crônica idiopática,

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10. 10/13 sindrome hipereosinofilica, sindrome de Lõffler, bronquiolite obliterante corrí, pneumonia organizai iva, doença enxerto-versus-nospedeiro ou pneumonite induzida por inibidor do ponto de verificação imunológico.

    24. Um composto de qualquer uma das Reivindicações 1 a

    1/ para uso no tratamento de rejeição de transplante de pulmão em um. mamífero.

    25. O composto da transplante de pulmão· é pneumonia organizativa,

    Reivindicação 24, onde a rejeição do disfunção primária do· enxerto, rejeição aguda, bronquiolite linfocitica ou disfunção pulmonar crônica do enxerto.

    26. O composto da Reivindicação 24, onde a rejeição do transplante de pulmão é rejeição aguda do transplante de pulmão.

    27. O composto da Reivindicação 24, onde a rejeição do transplante de pulmão é disfunção crônica pulmonar do enxerto.

    28. O composto da Reivindicação 24, onde a rejeição do transplante de pulmão é bronquiolite obliterante, disfunção crônica pulmonar do enxerto restritiva ou disfunção neutrofílica do enxerto.

    29. Uso de um composto de qualquer uma das

    Reivindicações 1 a 17 para a produção de um medicamento para tratamento de uma doença respiratória em. um mamífero.

    30. O uso da Reivindicação 29, onde a doença respiratória é asma, doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose cistica, pneumonite, fibrose pulmonar idiopática, lesão pulmonar aguda, sindrome da angústia respiratória aguda, bronquite, enfisema, bronquiolite obliterante, ou sarcoidose.

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11. 11/13

    31. 0 uso da Reivindicação 30, onde a doença respiratória é asma ou doença pulmonar obstrutiva crônica.

    32. O uso da Reivindicação 29, onde a doença respiratória é uma doença eosinofilica, uma infecção helmintica, hipertensão arterial pulmonar, linfangioleiomiomatose, bronqulectasla, uma doença pulmonar infiltrativa, pneumonite induzida por drogas, pneumonite induzida por fungos, aspergilose broncopulmonar alérgica, pneumonite por hipersensibilidade, granulomatose eosinofilica com poliangiite, pneumonia eosinofllica aguda idiopática, pneumonia eosinofllica crônica idiopática, sindrome hipereosinofilica, sindrome de Loffler, bronquiolite obliterante com pneumonia organizativa, doença enxerto-versus-hospedeiro ou pneumonite induzida por inibidor do ponto de verificação imunológico.

    33. Uso de um composto de qualquer uma das Reivindicações 1 a 17 para a produção de um medicamento para o tratamento de rejeição de transplante de pulmão em um mamífero.

    34. O uso da Reivindicação 33, onde a rejeição do transplante de pulmão é disfunção primária do enxerto, pneumonia organizativa, rejeição aguda, bronquiolite linfocitica ou disfunção pulmonar crônica do enxerto.

    35. O uso da Reivindicação 33, onde a rejeição do transplante de pulmão é rejeição aguda do transplante de pulmão.

    36. O uso da Reivindicação 33, onde a rejeição do transplante de pulmão é disfunção crônica pulmonar do enxerto.

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12. 12/13

    37. 0 uso da Reivindicação 33, onde a rejeição do transplante de pulmão é bronquiolite obliterante, disfunção crônica pulmonar do enxerto restritiva ou disfunção neutrofilica do enxerto.

    38. Um método de tratamento de uma doença respiratória em um mamífero, o método compreendendo a administração ao mamífero de um composto de qualquer uma das Reivindicações 1 a 17 e um carreador aceitável do ponto de vista farmacêutico.

    39. 0 método da Reivindicação 38, onde a doença respiratória é asma, doença pulmonar obstrutiva crônica, fibrose cistica, pneumonite, fibrose pulmonar idiopática, lesão pulmonar aguda, síndrome da angústia respiratória aguda, bronquite, enfisema, bronquiolite obliterante, ou sarcoidose.

    40. O método da Reivindicação 38, onde a doença respiratória é asma ou doença pulmonar obstrutiva crônica.

    41. O método da Reivindicação 38, onde a doença respiratória é uma doença eosinofílica, uma infecção helmíntica, hipertensão arterial pulmonar, linfangioleiomiomatose, bronquiectasia, uma doença pulmonar inf11trativa, pneumonite induzida por drogas, pneumonite induzida por fungos, aspergilose broncopulmonar alérgica, pneumonite por hipersensibilidade, granulomatose eosinofílica com poliangiite, pneumonia eosinofílica aguda idiopática, pneumonia eosinofílica crônica idiopática, síndrome hipereosinofílica, síndrome de Lõffler, bronquiolite obliterante com pneumonia organizativa, doença enxerto-versus-hospedeiro ou pneumonite induzida por inibidor do ponto de verificação imunológico.

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13. 13/13

    42. Um método de tratamento de rejeição de transplant de pulmão em um mamífero, o método compreendendo a administração ao mamífero de um composto de qualquer uma da Reivindicações 1 a 17 e um carreador aceitável do ponto de vista farmacêutico.

    43. 0 método da Reivindicação 42, onde a rejeição do transplante de pulmão é disfunção primária do enxerto, pneumonia organizativa, rejeição aguda, bronquiolite linfocítica ou disfunção pulmonar crônica do enxerto.

    44. 0 método da Reivindicação 42, onde a rejeição do transplante de pulmão é rejeição aguda do transplante de pulmão.

    45. 0 método da Reivindicação 42, onde a doença respiratória é disfunção crônica pulmonar do enxerto.

    46. 0 método da Reivindicação 42, onde a rejeição do transplante de pulmão é bronquiolite obliterante, disfunção crônica pulmonar do enxerto restritiva ou disfunção neutrofílica do enxerto.