BR112016026552B1 - Derivados de carboxamida, seus usos, composição farmacêutica, e combinação - Google Patents

Derivados de carboxamida, seus usos, composição farmacêutica, e combinação Download PDF

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Lisa Ann Rooney
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Abstract

DERIVADOS DE CARBOXAMIDA, SEUS USOS, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E COMBINAÇÃO. A presente invenção forneceu um composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; (I) um método para a fabricação dos compostos da invenção, e seus usos terapêuticos. A presente invenção proporciona ainda uma combinação de agentes farmacologicamente ativos e uma composição farmacêutica.

Description

CAMPO DA INVENÇAO
[0001] A presente invenção descreve compostos orgânicos úteis em terapia. Os compostos demonstram propriedades como inibidores seletivos de Smurf-1 e podem assim ser úteis no tratamento de uma gama de distúrbios, como por exemplo hipertensão pulmonar arterial, glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, bem como COPD e asma.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[0002] O Smurf-1 (Smad regulador de ubiquitinação fator 1) é um membro da família HECT da ligase ubiquitina E3 marcando substratos específicos para a degradação proteolítica por meio de uma via prote- olítica de ubiquitina dependente. Os principais substratos de Smurf-1 incluem RhoA, receptor de proteína morfogenética óssea (BMPR) 1 e 2, smad1 e 5, fator associado ao receptor de TNFα (TRAF) 6 e myD88 (Andrews, PS et al., Assay Drug Dev. Technol. 2010). Dada a lista de substratos, Smurf-1 tem papéis estabelecidos na regulação da sinalização de BMP (Chen, D et al., Growth Factors, 2004), polaridade das células neuronais (Stiess, M. e Bradke, F. Neuron, Huang, C. Cell Adh. Migr., 2010), invasão de células tumorais (Sahai, E. et al., JCB, 2007), autofagia mitocondrial (Orvedahl, A. Nature, 2011) proliferação de células estaminais mesenquimais (Zhao, L. et al. J. Bone Miner, Res. 2010) e transição epitelial-mesenquimal (EMT) (Ozdamar, B et al., Science 2005). A hipertensão arterial pulmonar (PAH) é uma doença agressiva e complexa de múltiplas etiologias com risco de vida, caracterizada por uma vasculopatia pulmonar progressiva que provoca hipertrofia/falha ventricular direita e, na maioria dos casos, morte prematura. As terapi- as farmacológicas atuais são paliativas. Embora tenham sido observadas melhorias na expectativa de vida, terapias atuais, que se concentram na alteração dos elementos vasoconstritores da doença, não interrompem ou revertem a progressão da doença, e o transplante (pulmão duplo ou coração-pulmão) continua a ser o único tratamento curativo. Dado o efeito limitado das classes de tratamento atuais, são necessárias novas terapias que visem o remodelamento vascular pulmonar progressivo subjacente da PHA.
[0004] As mutações na linha germinativa no gene do receptor de proteína morfogenético ósseo II (BMPR-II) do receptor da superfamília do fator de crescimento de transformação β (TGF-β) são prevalentes em setenta por cento de formas hereditárias e algumas esporádicas de PAH idiopática (IPAH). As proteínas morfogenéticas do osso são moléculas sinalizadoras que pertencem à superfamília do TGF-β. As proteínas morfogenéticas do osso foram originalmente identificadas pela sua capacidade de induzir a formação de cartilagem e osso e subsequentemente identificadas como proteínas multifuncionais que regulam um amplo espectro de funções tais como proliferação, diferenciação e apoptose em uma grande variedade de tipos de células, incluindo os- teoblastos, células epiteliais, neurônios, células imunes e células de músculo liso. Até agora, foram identificadas mais de 20 BMPs de mamíferos, mas apenas três receptores de tipo I e três de tipo II (BMPR-I e BMPR-II, respectivamente), que são capazes de se ligar a BMPs, foram clonados em mamíferos. As proteínas morfogenéticas ósseas são sintetizadas e segregadas a partir de uma variedade de tipos de células, incluindo células de músculo liso vascular pulmonar e células endoteliais. Além das mutações em BMPR-I e II, os pulmões de pacientes com PAH não familiar exibem níveis marcadamente reduzidos de BMPR-1 e -II vascular que implicam um papel central para a sinalização de BMP inter-rompida em muitas formas de PAH (Du, L et al. N.Eng.J.Med, 2003). A restauração da sinalização de BMP na vasculatura pulmonar de pacientes com PAH é, portanto, de grande interesse no desenvolvimento de novas terapias anti-remodelação para o tratamento de PAH.
[0005] Mostrou-se que Smurf-1 medeia a degradação de BMPR-I, -II e smad 1 e 5 em uma variedade de tipos de células incluindo os- teoblastos (Zhao, M et al., JBC, 2003), mioblastos (Ying, SX et al., JBC, 2003), tecido epitelial de pulmão (Shi W, et ai., Am.J. Physi- ol.Cell.Mol. Physiol, 2004), tecido neuronal (Kallan, T et al., Mol. Cell. Biol, 2009) e células endocárdicas (Towsend, TA, et al., Cells Tissues Organs, 2011). Recentemente, surgiram as primeiras evidências que suportam um papel para Smurf-1 em PAH em que se observaram níveis elevados de Smurf-1 na hipoxia crônica e em modelos in vivo pré- clínicos de monocrotalina de PAH e associada à regulação negativa de BMPR 1 e 2 (Murakami, K, et al., Exp. Biol. Med, 2010 e Yang, J. et al., Circ. Res., 2010).
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0006] Permanece a necessidade de novos tratamentos e terapias para a hipertensão arterial pulmonar. A invenção proporciona compostos, sais ou co-cristais farmaceuticamente aceitáveis destes, suas composições farmacêuticas e suas combinações, cujos compostos são inibidores de Smurf-1. A invenção proporciona ainda métodos para tratar, prevenir ou melhorar a hipertensão arterial pulmonar, compreendendo administrar a um indivíduo, com a necessidade do mesmo, uma quantidade eficaz de um inibidor de Smurf-1.
[0007] De acordo com um primeiro aspecto da invenção, Modali dade 1, é proporcionado um composto de Fórmula(I):
Figure img0001
ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é (C3-C6)alquila ou (C3-C6)cicloalquila; R2 é metila; R3 é selecionado a partir de (C6-C10)alquila ramificada, (C6-C10) alquenila ramificada, (C5-C8)cicloalquenila, (C5-C8)cicloalquila, ou Het; em que a (C5-C8)cicloalquenila ou (C5-C8)cicloalquila é não substituída ou é substituída por um, dois, três ou quatro substituintes R4; e em que Het é substituído por um, dois, três ou quatro substituintes R4; cada R4 é independentemente selecionado entre halo, (C1-C4) alquila, halo(C1-C4)alquila, (C1-C4)alcóxi, ou halo(C1-C4)alcóxi; ou dois Grupos R4, quando ligado ao mesmo átomo de carbono, podem ser tomados em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados para formar um anel ciclopentila, tetra-hidrofurano ou dioxolano; e Het é um anel heterocíclico totalmente saturado ou parcialmente saturado de 5 ou 6 membros compreendendo a) 1 átomo de oxigênio na posição 2 ou 3, ou b) 2 átomos de oxigênio nas posições 2 e 5, ou nas posições 2 e 6, caracterizado pelo fato de que a numeração é relativa ao ponto de ligação; e (C5-C8)cicloalquila pode ser um anel monocíclico ou um sistema em anel em ponte contendo 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono.
[0008] Em uma outra modalidade é proporcionado um composto de Fórmula (I) como definido acima ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0003] Em outra modalidade, a invenção proporciona uma compo sição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a definição da Fórmula (I), ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou suas subFórmulas e um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis. Em outra modalidade, a invenção proporciona uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a definição da Fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, ou suas sub-Fórmulas e um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis.
[0004] Em outra modalidade, a invenção proporciona um método de tratamento de uma distúrbio ou doença selecionada a partir da Hipertensão Pulmonar, incluindo hipertensão arterial pulmonar (HAP), fibrose, artrite reumatoide, cicatrização de fraturas, glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, bem como COPD e asma, compreendendo administração ao indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de acordo com a definição da Fórmula (I), ou um sal ou co-cristal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, ou subFórmulas do mesmo sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em algumas modalidades, é administrada ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a definição da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em outras modalidades, é administrado ao indivíduo um quantidade terapeuticamente efetiva de um composto de acordo com um subgênero da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Ainda em outras modalidades, proporciona um método de tratamento de um distúrbio ou doença selecionada entre glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[0005] Em outra modalidade, a invenção fornece uma combinação, em particular uma combinação farmacêutica, compreendendo uma quantidade terapeuticamente efetiva do composto de acordo com a definição da Fórmula (I), ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou suas subFórmulas e uma ou mais agentes te- rapeuticamente ativos.
[0006] Várias modalidades da invenção são descritas aqui.
DESCRIÇÃO DETALHANDA
[0007] A invenção proporciona assim um composto da Fórmula (I) ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, aqui descrito acima como Modalidade 1.
[0008] Modalidade 2. Um composto de acordo com Modalidade 1 ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 é isopropila, ciclobutila ou ciclo-hexila.
[0009] Modalidade 3. Um composto de acordo com Modalidade 1 ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R1 é ciclo-hexila.
[00010] Modalidade 4. Um composto de acordo com qualquer mo-dalidade precedente ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R3 é selecionado a partir de 2,2-dimetilpentila, 2,2-dimetilpent-2-enila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, tetra- hidropiranila, di-hidropiranila, dioxanila, tetra-hidrofuranila, dioxolanila e biciclo [2,2,2]octanila; em que o anel de ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo- hexenila, tetra-hidropiranila, di-hidropiranila, dioxanila, tetra-hidrofura- nila, dioxolanila ou biciclo [2,2,2]octanila é não substituída ou é substituída por um, dois, três ou quatro substituintes R4; e cada R4 é independentemente selecionado entre halo, (C1-C4) alquila, halo(C1-C4)alquila, (C1-C4)alcóxi, ou halo(C1-C4)alcóxi; ou dois grupos R4, quando ligados ao mesmo átomo de carbono, podem ser tomados em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados para formar um anel de tetra-hidrofurano ou dioxolano.
[00011] Modalidade 5. Um composto de acordo com qualquer Mo-dalidade precedente, ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R3 é
Figure img0002
I e m é 1, 2, 3 ou 4. ou
[00012] Modalidade 6. Um composto de acordo com qualquer mo-dalidade precedente, ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R3 é
Figure img0003
I e m é 1, 2, 3 ou 4.
[00013] Modalidade 7. Um composto de acordo com qualquer mo-dalidade precedente, ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R4 é independentemente selecionado entre metila, isopropila, terc-butila e metóxi.
[00014] Modalidade 8. Um composto de Fórmula (I), de acordo com a Modalidade 1, em que o composto é selecionado a partir do Exemplo 1 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 1,1 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6-etil- 4-metilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 1,2 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6,6- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ; Exemplo 1,3 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- etilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 1,4 [5-(4-(terc-Butil)ciclo-hex-1-en-1-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 1,5 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(4-metilciclo-hex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 1,6 5-(Ciclo-hept-1-en-1-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 1,7 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(4-(trifluorometil)ciclo-hex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 2 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (espiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida; Exemplo 2,1 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(1-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 2,2 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 3 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 4 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 5 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 6 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hexil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 6,1 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3- dimetilciclopentil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; Exemplo 7 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3- dimetilbutil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 8 (Z)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5- (3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 9 (E)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5- (3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 10 5-Ciclo-hexil-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol- 4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 11 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida; Exemplo 12 5-(6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida; Exemplo 13 5-(6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida ; Exemplo 14 5-(6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida; Exemplo 15 5-(6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 16 5-(6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 17 5-(6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 18 N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6- isopropil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 19 N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida; Exemplo 20 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- ((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida; Exemplo 21,1 [5-(4-Bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida]; Exemplo 21,2 N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida; Exemplo 22 N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida ; Exemplo 23 5-(4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-di- metil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 24 N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- isopropiltetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 25 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 26 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5- dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo. [00015] Modalidade 9. Um composto de Fórmula (I), de acordo com a Modalidade 1, em que o composto é selecionado a partir de Exemplo 20 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- ((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida; Exemplo 26 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5- dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 2,2 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; Exemplo 2,1 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(1-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]; e Exemplo 11 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida; ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo .
[00016] Modalidade 10. Um composto de Fórmula (I), de acordo com a Modalidade 1, em que o composto é Exemplo 20 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- ((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida, ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00017] Modalidade 11. Um composto de Fórmula (I), de acordo com a Modalidade 1, em que o composto é Exemplo 26 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5- dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida, ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo .
[00018] Modalidade 12. Um composto de Fórmula (I), de acordo com a Modalidade 1, em que o composto é Exemplo 2,2 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamidaou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo .
[00019] Modalidade 13. Um composto de Fórmula (I), de acordo com a Modalidade 1, em que o composto é Exemplo 2,1 [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(1-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00020] Modalidade 14. Um composto de Fórmula (I), de acordo com a Modalidade 1, em que o composto é Exemplo 11 N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00021] Conforme utilizado aqui, o termo "halo" (ou halogênio) se refere a flúor, bromo, cloro ou iodo, em particular flúor e cloro. Grupos substituídos com halogênio e porções tais como alquila substituída por halogênio (haloalquila), podem ser mono-, poli- ou per-halogenatados. Conforme utilizado aqui, o termo "heteroátomos" se refere a átomos nitrogênio (N), oxigênio (O) ou enxofre (S), em particular nitrogênio ou oxigênio.
[00022] Conforme utilizado aqui, o termo "alquila" se refere a uma porção de hidrocarboneto ramificado ou não ramificado totalmente saturada tendo até 10 átomos de carbono. Salvo disposição em contrário, alquila se refere a porções de hidrocarboneto contendo de 1 a 10 átomos de carbono, 1 a 6 átomos de carbono, ou 1 a 4 átomos de carbono. Exemplos representativos de alquila incluem, mas não estão limitados a, metila, etila, n-propila, iso-propila, n-butila, sec-butila, iso- butila, terc-butila, n-pentila, isopentila, neopentila, n-hexila, 3- metilhexila, 2,2- dimetilpentila, 2,3-dimetilpentila, n-heptila, n-octila, n- nonila, n-decila e similares. Exemplos representativos de alquila ramificada incluem, mas não estão limitados a, iso-propila, sec-butila, iso- butila, terc-butila, isopentila, 3-metilhexila, 2,2- dimetilpentila, 2,3- dimetilpentila, e similares. Uma alquila substituída é um grupo alquila contendo um ou mais, tal como um, dois ou três substituintes selecionados a partir de grupos halogênio, hidróxi ou alcóxi.
[00023] Conforme utilizado aqui, o termo "haloalquila" se refere a um alquila como aqui definido, que é substituído por um ou mais grupos halo como aqui definidos. O haloalquila pode ser monoaloalquila, dialoalquila ou polialoalquila, incluindo perhaloalquila. Uma monoalo- alquila pode ter um iodo, bromo, cloro ou fluoro dentro do grupo alquila. Grupos dialoalquila e polialoalquila podem ter dois ou mais dos mesmos átomos de halo ou uma combinação de diferentes grupos halo dentro do alquila. Tipicamente o polialoalquila contém até 12, ou 10, ou 8, ou 6, ou 4, ou 3, ou 2 grupos halo. Exemplos não limitativos de haloalquila incluem fluorometila, difluorometila, trifluorometila, clorome- tila, diclorometila, triclorometila, pentafluoroetila, heptafluoropropila, difluoroclorometila, diclorofluorometila, difluoroetila, difluoropropila, di- cloroetila e dicloropropila. Um perhalo-alquila se refere a um alquila apresentando todos os átomos de hidrogênio substituídos por átomos halo.
[00024] Conforme utilizado aqui, o termo "alcóxi" se refere ao al- quil-O-, em que alquila é definido acima. Exemplos representativos de alcóxi incluem, mas não estão limitados a, metóxi, etóxi, propoxi, 2- propoxi, butoxi, terc-butoxi, pentiloxi, hexiloxi, ciclopropilóxi-, ciclo- hexilóxi- e similares. Tipicamente, grupos alcóxi apresentam 1 a 4 átomos de carbono.
[00025] Conforme utilizado aqui, o termo "haloalcóxi" se refere a um alcóxi como aqui definido, que é substituído por um ou mais grupos halo como aqui definidos.
[00026] Salvo disposição em contrário, conforme utilizado aqui, o termo "cicloalquila" se refere a grupos de hidrocarboneto monocíclico, bicíclico, ou espirocíclico saturados de 3 a 8 átomos de carbono. Salvo disposição em contrário, cicloalquila se refere a grupos de hidrocar- boneto cíclico contendo entre 3 e 6 ou entre 5 e 8 átomos de carbono no anel.
[00027] Conforme utilizado aqui, o termo "cicloalquenila" se refere a grupos de hidrocarboneto monocíclico, bicíclico, ou espirocíclico parcialmente saturado de 3 a 8 átomos de carbono. Salvo disposição em contrário, cicloalquenila se refere a grupos de hidrocarboneto cíclico contendo entre 3 e 6 ou entre 5 e 8 átomos de carbono no anel.
[00028] Dependendo da escolha dos materiais de partida e proce-dimentos, os compostos podem estar presentes na forma de um dos isômeros possíveis ou como misturas destes, por exemplo, como isô- meros ópticos puros, ou como misturas de isômeros, tais como racematos e misturas de diastereoisômeros, dependendo do número de átomos de carbono assimétricos. A presente invenção pretende incluir todos os possíveis isômeros, incluindo misturas racêmicas, misturas diastereoméricas e formas opticamente puras. Os isómeros (R) e (S) opticamente ativos podem ser preparados utilizando sintões quirais ou reagentes quirais, ou resolvidos utilizando técnicas convencionais. Se o composto contém uma ligação dupla, o substituinte pode ter configuração E ou Z. Se o composto contém uma cicloalquila dissubstituída o substituinte cicloalquila pode ter uma configuração cis- ou trans. Todas as formas tautoméricas também se destinam a ser incluídas.
[00029] Conforme utilizado aqui, os termos "sal" ou "sais" se refe-rem a um sal de adição de ácido ou sal de adição de base de um composto da invenção. "Sais" incluem em particular "sais farmaceuti- camente aceitáveis". O termo "sais farmaceuticamente aceitáveis" se refere a sais que retêm a eficácia biológica e as propriedades dos compostos desta invenção e, que tipicamente não são biologicamente ou de outro modo indesejáveis.
[00030] Os compostos da invenção, isto é, compostos de Fórmula (I) que contêm grupos capazes de atuar como dadores e/ou aceitadores para ligações hidrogénio podem ser capazes de formar co-cristais com formadores de co-cristais adequados. Estes co-cristais podem ser preparados a partir de compostos de Fórmula (I) por processos de formação de co-cristais conhecidos. Tais procedimentos incluem moagem, aquecimento, co-sublimação, co-fusão ou contatos em compostos em solução de Fórmula (I) com o formador de co-cristal em condi- ções de cristalização e co-cristais de isolamento assim formados. Os formadores de co-cristais adequados incluem aqueles descritos na WO 2004/078163. Assim, a invenção proporciona ainda co-cristais compreendendo um composto de Fórmula (I).
[00031] Em muitos casos, os compostos da presente invenção são capazes de formar sais ácidos e/ou sais e/ou co-cristais em virtude da presença do grupo carboxamida ou grupos semelhantes a estes.
[00032] Sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis ou co-cristais podem ser formados com ácidos inorgânicos e ácidos orgânicos.
[00033] Os ácidos inorgânicos dos quais sais ou co-cristais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e semelhantes.
[00034] Os ácidos orgânicos dos quais sais ou co-cristais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido toluenossulfônico, e semelhantes.
[00035] Sais ou co-cristais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com bases inorgânicas e orgânicas.
[00036] As bases inorgânicas a partir das quais se podem derivar sais ou co-cristais incluem, por exemplo, sais de amônio e metais das colunas I a XII da tabela periódica. Em certas modalidades, os sais são derivados de sódio, potássio, amônio, cálcio, magnésio, prata e zinco; sais particularmente adequados incluem sais de amônio, potássio, sódio, cálcio e magnésio.
[00037] As bases orgânicas das quais se podem derivar sais ou co- cristais incluem, por exemplo, aminas primárias, secundárias e terciárias, aminas substituídas incluindo aminas substituídas que ocorrem naturalmente, aminas cíclicas, resinas de permuta iónica básicas e semelhantes. Certas aminas orgânicas incluem colinato, lisina, me- glumina, piperazina e trometamina.
[00038] Em outro aspecto, a presente invenção proporciona com-postos de Fórmula I em sal ou co-cristal de acetato, ascorbato, adipa- to, aspartato, benzoato, besilato, brometo/bromidrato, bicarbona- to/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, cloreto/cloridrato, citrato, eta- nossulfonato, fumarato, gluceptato , gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, iodato/iodeto, isetionato, lactato, lactobio- nato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato , oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/ fosfato de hidrogênio /fosfato de di-hidrogênio, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, suc- cinato, sulfato, tartrato, tosilato trifenatato ou xinafoato.
[00039] Em uma modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R, 3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida em sal ou co- cristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, besilato, brometo/bromidrato, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sulfato, caprato, cloreto/cloridrato, citrato, etanossulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, iodato/iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, me- tilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoa- to, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/fosfato de hidrogênio/di- hidrogênio fosfato, poligalac-turonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, tosilato trifenato, ou xinafoato.
[00040] Em outra modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetil- 1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida em sal ou co-cristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, desilato, brometo e bromoidrato, bicarbonato/carbonato, bisulfato/sulfato, caprato, clore- to/cloridrato, citrato, etanossulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, iodeto/iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicotinato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfa- to/hidrogenofosfato/di-hidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, tosilato trifenato ou xina- foato.
[00041] Em outra modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida em sal ou co- cristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, desilato, brometo/bromoidrato, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sulfato, capra- to, cloreto/cloridrato, citrato, etanodissulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, iode- to/iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato , metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicoti- nato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfa- to/hidrogenofosfato/di-hidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, tosilato trifenatato ou xinafoato.
[00042] Em outra modalidade, a presente invenção forneceu [N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1- oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] em sal ou co-cris- tal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, desilato, bro- meto/bromoidrato, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sulfato, caprato, cloreto/cloridrato, citrato, etanodissulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, iode- to/iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato , metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicoti- nato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfa- to/hidrogenofosfato/di-hidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, tosilato trifenatato ou xinafoato.
[00043] Em outra modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4- dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida em sal ou co-cristal de acetato, ascorbato, adipato, aspartato, benzoato, desilato, brome- to/bromoidrato, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sulfato, caprato, clo- reto/cloridrato, citrato, etanodissulfonato, fumarato, gluceptato, gluconato, glucuronato, glutamato, glutarato, glicolato, hipurato, iode- to/iodeto, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato , metilsulfato, mucato, naftoato, napsilato, nicoti- nato, nitrato, octadecanoato, oleato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfa- to/hidrogenofosfato/di-hidrogenofosfato, poligalacturonato, propionato, sebacato, estearato, succinato, sulfato, tartarato, tosilato trifenatato ou xinafoato.
[00044] Em outro aspecto, a presente invenção forneceu compostos de Fórmula I em sal ou co-cristal de sódio, potássio, amónio, cálcio, magnésio, prata, zinco, colinato, lisina, meglumina, piperazina ou tro- metamina.
[00045] Em uma modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- ((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida em sal ou co-cristal de sódio, potássio, amônio, cálcio, magnésio, prata, zinco, colinato, lisina, meglumina, piperazina ou trometamina.
[00046] Em uma modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetil- 1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida em sla ou co-cristal de sódio, potássio, amônio, cálcio, magnésio, prata, zinco, colinato, lisina, meglumina, piperazina ou trometamina.
[00047] Em uma modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida em sal ou co- cristal de sódio, potássio, amônio, cálcio, magnésio, prata, zinco, coli- nato, lisina, meglumina, piperazina ou trometamina.
[00048] Em uma modalidade, a presente invenção forneceu [N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1- oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] em sal ou co- cristal de sódio, potássio, amônio, cálcio, magnésio, prata, zinco, coli- nato, lisina, meglumina, piperazina ou trometamina.
[00049] Em uma modalidade, a presente invenção forneceu N-(2- Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4- dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida em sal ou co-cristal de sódio, potássio, amônio, cálcio, magnésio, prata, zinco, colinato, lisina, meglumina, piperazina ou trometamina.
[00050] Qualquer Fórmula aqui dada pretende também representar formas não marcadas assim como formas isotopicamente marcadas dos compostos. Os compostos marcados isotopicamente têm estruturas representadas pelas Fórmulas dadas aqui exceto que um ou mais átomos são substituídos por um átomo com uma massa atómica ou número de massa selecionado. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da invenção incluem isótopos de hidrogénio, carbono, nitrogénio, oxigênio, flúor, fósforo e cloro, tais como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 18F 31P, 32P, 35S, 36Cl, 123I, 124I, 125I respectivamente . A invenção inclui vários compostos isotopicamente marcados como aqui definidos, por exemplo, aqueles nos quais isótopos radioativos, tais como 3H e 14C, ou aqueles nos quais isótopos não radioativos, tais como 2H e 13C, estão presentes. Tais compostos marca- dos isotopicamente são úteis em estudos metabólicos (com 14C), estudos cinéticos de reação (com, por exemplo, 2H ou 3H), detecção ou técnicas de imagem, tais como a tomografia por emissão de positrões (PET) ou a tomografia computadorizada de emissão de um único fóton (SPECT), incluindo ensaios de distribuição de fármaco ou de substrato, ou no tratamento radioativo de pacientes. Em particular, Um composto 18F ou marcado pode ser particularmente desejável para estudos PET ou SPECT. Os compostos isotopicamente marcados de Fórmula (I) podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas dos versados na arte ou por processos análogos aos descritos no acompanhamento dos Exemplos e Preparações utilizando um reagente marcado isotopicamente apropriado em vez do produto reagente não marcado anteriormente empregado.
[00051] Além disso, a substituição com isótopos mais pesados, particularmente deutério (isto é, 2H ou D), pode proporcionar certas vantagens terapêuticas resultantes de uma maior estabilidade metabólica, por exemplo, aumento da meia vida in vivo ou requisitos de dosagem reduzidos ou uma melhoria no índice terapêutico. Entende-se que o deutério, neste contexto, é considerado como um substituinte de um composto de Fórmula (I). A concentração de um isótopo mais pesado, especificamente deutério, pode ser definida pelo fator de enriquecimento isotópico. O termo "fator de enriquecimento isotópico" ,conforme utilizado aqui, significa a razão entre a abundância isotópica e a abundância natural de um isótopo especificado. Se um substituinte em um composto desta invenção é designado deutério, tal composto tem um fator de enriquecimento isotópico para cada átomo de deutério designado de pelo menos 3500 (52,5% incorporação de deutério em cada átomo de deutério designado), no mínimo 4000 (60% incorporação de deutério), ano mínimo 4500 (67,5% incorporação de deutério), no mínimo 5000 (75% incorporação de deutério), no mínimo 5500 (82,5% incorporação de deutério), no mínimo 6000 (90% incorporação de deu- tério), no mínimo 6333,3 (95% incorporação de deutério), no mínimo 6466,7 (97% incorporação de deutério), no mínimo 6600 (99% incorporação de deutério), ou no mínimo 6633,3 (99,5% incorporação de deu- tério).
[00052] Os solventes farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a invenção incluem aqueles em que o solvente de cristalização pode estar isotopicamente substituído, por exemplo, D2O, d6-acetona, d6- DMSO.
[00053] Conforme utilizado aqui, o termo "veículo farmaceuticamen- te aceitável" inclui todos e quaisquer solventes, meios de dispersão, revestimentos, surfactantes, antioxidantes, conservantes (por exemplo, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos), agentes isotônicos, agentes retardadores de absorção, sais, conservantes, estabilizadores de fármacos, ligantes, excipientes, agentes de desintegração, lubrificantes, agentes adoçantes, agentes aromatizantes, corantes e seme-lhantes e suas combinações, como seriam conhecidos por aqueles versados na arte (ver, por exemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18° Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289- 1329). Exceto na medida em que qualquer transportador convencional é incompatível com o ingrediente ativo, está contemplada a sua utilização nas composições terapêuticas ou farmacêuticas.
[00054] O termo "uma quantidade terapeuticamente efetiva" de um composto da presente invenção se refere a uma quantidade do composto da presente invenção que provocará a resposta biológica ou médica de um indivíduo, por exemplo, redução ou inibição de uma enzima ou atividade de uma proteína, ou melhorar os sintomas, aliviar as condições, retardar ou retardar a progressão da doença, ou prevenir uma doença, etc. Em uma modalidade não limitativa, o termo "uma quantidade terapeuticamente efetiva" se refere à quantidade do com- posto da presente invenção que, quando administrada a um indivíduo, é eficaz para (1) aliviar, inibir, prevenir, pelo menos parcialmente e/ou melhorar uma condição, ou um distúrbio ou uma doença (I) mediada por Smurf-1, ou (ii) associada à atividade Smurf-1, ou (iii) caracterizada por atividade (normal ou anormal) de Smurf-1; ou (2) reduzir ou inibir a atividade de Smurf-1; ou (3) reduzir ou inibir a expressão de Smurf-1. Em outra modalidade não limitante, o termo "uma quantidade terapeuticamente efetiva" se refere à quantidade do composto da presente invenção que, quando administrada a uma célula, ou a um tecido, ou a um material biológico não celular, ou a um meio, é eficaz para reduzir ou inibir pelo menos parcialmente a atividade de Smurf-1; ou pelo menos parcialmente reduzindo ou inibindo a expressão de Smurf-1.
[00055] Conforme utilizado aqui, o termo "indivíduo ou indivíduo" se refere a um animal. Tipicamente, o animal é um mamífero. Um indivíduo se refere também, por exemplo, a primatas (por exemplo, humanos, machos ou fêmeas), vacas, ovelhas, cabras, cavalos, cães, gatos, coelhos, ratos, camundongos, peixes, aves e semelhantes. Em certas modalidades, o indivíduo é um primata. Em outras modalidades, o indivíduo é um ser humano.
[00056] Conforme utilizado aqui, o termo "Inibição", "inibindo" ou "inibir" se refere à redução ou supressão de uma dada condição, sintoma ou distúrbio, ou doença, ou uma diminuição significativa na atividade de base de uma atividade ou processo biológico.
[00057] Conforme utilizado aqui, o termo "tratar", "tratando" ou "tra-tamento", de qualquer doença ou distúrbio, se refere em uma modalidade para melhorar a doença ou distúrbio (isto é, retardar ou parar ou reduzir o desenvolvimento da doença ou pelo menos um dos seus sintomas clínicos). Em outra modalidade "tratar", "tratando" ou "tratamento" se refere a aliviar ou melhorar pelo menos um parâmetro físico incluindo aqueles que podem não ser discerníveis pelo doente. Ainda em outra modalidade, "tratar", "tratando" ou "tratamento" se refere a modulação da doença ou distúrbio, quer fisicamente (por exemplo, estabilização de um sintoma discernível), fisiologicamente (por exemplo, estabilização de um parâmetro físico), ou ambos. Em uma outra modalidade, "tratar", "tratando" ou "tratamento" se refere a prevenir ou retardar o aparecimento, ou desenvolvimento, ou progressão da doença ou distúrbio.
[00058] Conforme aqui utilizado, um indivíduo é "necessitado" de um tratamento se tal indivíduo beneficiar biologicamente, medicamente ou na qualidade de vida desse tratamento.
[00059] Conforme utilizado aqui, os termos "um, uma, uns, umas", " o, a, os, as" e termos semelhantes utilizados no contexto da presente invenção (especialmente no contexto das reivindicações) devem ser interpretados como abrangendo tanto o singular como o plural, a menos que indicado de outra forma ou claramente contraditado pelo contexto.
[00060] Todos os métodos aqui descritos podem ser realizados em qualquer ordem adequada, a menos que aqui indicado de outra forma ou de outro modo claramente contradito pelo contexto. O uso de todos e quaisquer exemplos, ou linguagem exemplificativa (por exemplo, "tal como") aqui proporcionada, pretende apenas ilustrar melhor a invenção e não constitui uma limitação no âmbito da invenção reivindicada de outro modo.
[00061] Qualquer átomo assimétrico (por exemplo, carbono ou se-melhante) do(s) composto(s) da presente invenção pode estar presente em enriquecimento racémico ou enantiomericamente, por exemplo a configuração (R) -, (S) - ou (R, S) . Em certas modalidades, cada átomo assimétrico tem pelo menos 50% de excesso enantiomérico, no mínimo excesso enantiomérico de 60%, no mínimo excesso enantio- mérico de 70%, no mínimo excesso enantiomérico de 80%, no mínimo excesso enantiomérico de 90% ou pelo menos 99% de excesso enan- tiomérico na configuração (R) - ou (S) -. Substituintes em átomos com ligações duplas insaturadas podem, se possível, estar presentes na forma cis- (Z) - ou trans- (E).
[00062] Por conseguinte, conforme aqui utilizado, o composto da presente invenção pode estar na forma de um dos possíveis isómeros, rotâmeros, atropisômeros, tautômeros ou suas misturas, por exemplo, como isómeros geométricos (cis ou trans) substancialmente puros, di- astereómeros, isómeros ópticos (antipodes), racematos ou suas misturas.
[00063] Qualquer mistura resultante de isómeros pode ser separada com base nas diferenças físicoquímicas dos constituintes, nos isóme- ros geométricos ou ópticos puros ou substancialmente puros, diaste- reômeros, racematos, por exemplo, por cromatografia e/ou cristalização fracionada.
[00064] Todos os racematos resultantes de produtos finais ou in-termediários podem ser resolvidos nos antípodas ópticos por métodos conhecidos, por exemplo, separando os sais diastereoméricos dos mesmos, obtidos com um ácido ou base opticamente ativos e libertando o composto ácido ou básico opticamente ativo. Em particular, uma fração básica pode assim ser utilizada para resolver os compostos da presente invenção nos seus antípodas ópticos, por exemplo, por cristalização fracionada de uma sal formado com um ácido opticamente ativo, por exemplo ácido tartárico, ácido dibenzoil tartárico, ácido diacetil tartárico , Ácido di-O,O'-p-toluoil tartárico, ácido mandélico, ácido málico ou ácido canfor-10-sulfônico. Os produtos racémicos também podem ser resolvidos por cromatografia quiral, por exemplo, cromato- grafia líquida de alta pressão (HPLC) utilizando um adsorvente quiral.
[00065] Além disso, os compostos da presente invenção, incluindo os seus sais, podem também ser obtidos na forma dos seus hidratos, ou incluindo outros solventes utilizados para a sua cristalização. Os compostos da presente invenção podem inerentemente ou propositalmente formar solvatos com solventes farmaceuticamente aceitáveis (incluindo água); portanto, pretende-se que a invenção inclua tanto formas solvatadas como não solvatadas. O termo "solvato" se refere a um complexo molecular de um composto da presente invenção (incluindo os seus sais farmaceuticamente aceitáveis) com uma ou mais moléculas de solvente. Tais moléculas de solvente são aquelas comumente utilizadas na arte farmacêutica, que são conhecidas como inócuas para o receptor, por exemplo, água, etanol e semelhantes. O termo "hidrato" se refere ao complexo em que a molécula de solvente é água..
[00066] Os compostos da presente invenção, incluindo sais, co- cristais, hidratos e solvatos dos mesmos, podem inerentemente ou propositalmente formar polimorfos.
ESQUEMAS GENÉRICOS
[00067] Tipicamente, os compostos de Fórmula (I) podem ser pre-parados de acordo com os esquemas fornecidos infra.
[00068] Os compostos da presente invenção podem ser preparados pelas vias descritas nos esquemas seguintes ou nos exemplos.
[00069] Todas as abreviaturas são como definidas na seção aqui abaixo. Esquema 1
Figure img0004
[00070] Em que X e Y são independentemente H ou -(Ci-C6)alquila. Etapa 1: Uma reação de acoplamento cruzado catalisada por paládio. Condições típicas: Catalizador de paládio (0); um composto de boro, estanho ou zinco adequado tal como um ácido borônico, bo- roato éster ou estanano; base orgânica ou inorgânica; em água; em um solvente adequado a 80-110oC Condições preferenciais: Bis(difenilfosfino)ferroceno-paládio (II)dicloreto, sal de Vinil Trifluoroborato, trietilamina em etanol a 90oC Etapa 2: Di-hidroxilação Condições típicas: tetróxido de ósmio.; um co-oxidante adequado tal como N-Metilmorfolina-N-Óxido; em um solvente ade-quado Condições preferenciais: tetróxido de ósmio (Admix alfa ou Admix beta) pode ser utilizado para acessar dióis quirais, com um aditivo adequado tal como metano sulfonamida. Um sistema de solvente preferido é Butanol/água. Etapa 3: Clivagem oxidativa Condições típicas: Periodato de sódio em um sistema de solvente THF/água. Esquema 2
[00071] Quando R2 é metila, um composto de Fórmula (I) pode ser preparado de acordo com o esquema 2.
Figure img0005
[00072] Em que X2 e Y2 São definidos de tal forma que, em conjun to com os átomos de carbono a que estão ligados, formam o substi- tuinte R3. Etapa 1 : Fromação de Vinil boroato Condições típicas: a) enolização na presença de uma base forte, tal como LDA ou LHMDS, seguida de extinção com um halo- alquila sulfonato ou sulfonamida adequado para dar a forma enol estabilizada. b) Borilação catalisada por paládio (0) do enolato utilizando um Catalizador de paládio (0) compatível e bis pinacolatodiboro Condições preferenciais: a) LDA em THF a -78oC, seguido de extinção com 1,1,1-triflúor-N-(piridin-2-il)-N-((trifluorometil)sulfonil) metanossulfonamida. b) complexo de 1,1’-Bis(difenilfosfino)ferroceno- paládio(II)dicloreto diclorometano e bispinacolatodiboro, acetato de potássio, em dioxano, a 80-100oC, por 4 a 16h. Etapa 2 : acoplamento cruzado catalisado por paládio Condições típicas: com descrito no Esquema 1, etapa 1 Condições preferenciais: complexo de 1, 1’-Bis (difenilfos- fino) ferroceno-paládio (II) dicloreto diclorometano, carbonato de potássio (2M em água) em MeCN a 80oC, por 1,5 h Etapa 3a Saponificação Condições típicas: Uma base aquosa adequada, opcionalmente com um co-solvente adequado tal como THF Condições preferenciais: 2M Hidróxido de sódio (aquoso) com THF a temperatura ambiente por 30 minutos Etapa 3b Acoplamento de amida Condições típicas: Um reagente de acoplamento adequado tal como HATU, T3P, EDCI etc, na presença de uma base adequada tal como trietilamina, DIPEA etc, em um solvente aprótico adequado. Condições preferenciais: HATU e DIPEA em DMF a Temperatura ambiente em torno de 2h Etapa 4 Hidrogenação
[00073] Um composto de Fórmula (I), em que R3 uma dupla ligação C=C, pode ser convertido a um composto de Fórmula (I), em que R3 completamente saturado, por meio de uma reação de hidrogenação. Condições típicas: Um catalisador não solúvel de Paládio, gás hidrogênio, em um solvente adequado tal como um álcool Condições preferenciais: 10% de Paládio em Carbono e gás hidrogênio em etanol Esquema 3
Figure img0006
Etapa 1: Uma reação de Prins Condições típicas: Um catalisador ácido e um agente desi- dratante adequado em um solvente clorado. Condições preferenciais: (i) Ácido trifluoroacético e peneiras moleculares em DCM; ou (ii) InBr3 e brometo de trimetil silila em DCM; ou (iii) InOTf3 e triflato de Trimetil silila em DCM. Etapa 2a: Uma reação de saponificação como descrita do Esquema 2, etapa 3a Etapa 2b: Uma inversão de Mitsunobu Condições típicas: A triarilfosfino, dialquilazodicarboxilato e ácido benzóico, em um solvente adequado tal como THF a temperatu- ra ambiente Condições preferenciais: Trifenilfosfino, diisopropilazodicar- boxilato, e 2, ácido 4-dinitrobenzóico, em THF a temperatura ambiente Etapa 2c: Metilação Condições típicas: Uma base forte adequada e um agente alquilante em um solvente adequado Condições preferenciais: Hidreto de sódio e iodeto de meti- la em DMF Etapa 2d, Etapa 3a, Etapa 4a: Uma reação de Saponificação conforme descrito em Esquema 2, etapa 3a Etapa 2e, 3b e 4b: Um acoplamento de amida conforme descrito no Esquema 2, etapa 3b Etapa 5: Hidrogenação como descrito no Esquema 2, etapa 4 Esquema 4
Figure img0007
Etapa 1: Uma reação de Prins como descrita no Esquema 3, etapa 1 Etapa 2a: Uma reação de Saponificação conforme descrito em Es-quema 2, etapa 3a Etapa 2b: Um acoplamento de amida conforme descrito no Esquema 2, etapa 3b Etapa 3: Hidrogenação como descrito no Esquema 2, etapa 4 Esquema 5
Figure img0008
Etapa 1: Formação de acetal Condições típicas: Um catalisador ácido forte em um solvente adequado sob condições de desidratação Condições preferenciais: pTSOH e olueno sob condições de Dean Stark a 110oC por 2 a 16h. Etapa 2a: Uma reação de Saponificação conforme descrito em Es-quema 2, etapa 3a Etapa 2b: Um acoplamento de amida conforme descrito no Esquema 2, etapa 3b Esquema 6
Figure img0009
PG é um grupo de proteção adequado, tal como tButildime- tilsilila X6 e Y6 são idependentemente H ou -(Ci-C6)alquila. Etapa 1: Proteção Condições típicas: Um grupo protetor adequado, tal como um cloreto de trialquilsilila, na presença de uma base adequada em um solvente adequado. Condições preferenciais: cloreto de tButildimetilsilila na presença de trietilamina e DMAP e, DMF. Etapa 2: Uma reação de alquilação Condições típicas: Um brometo de alila na presença de uma base adequada em um solvente adequado Condições preferenciais: 3-bromo-2-metilprop-1-eno e hi- dreto de sódio em THF. Etapa 3a: Uma reação de Saponificação conforme descrito em Es-quema 2, etapa 3a Etapa 3b: Um acoplamento de amida conforme descrito no Esquema 2, etapa 3b Etapa 4: Desproteção Condições típicas: Uma fonte de fluoreto em um solvente adequado Condições preferenciais: TBAF em THF Etapa 5: Uma reação de ciclisação Condições típicas: Mercúrio (II) Trifluorocetato e Mercúrio (II) Óxido em THF a temperatura ambiente seguido por adição de trie- tilborano e boroidreto de sódio a -78oC.
[00074] A invenção inclui ainda qualquer variante dos presentes processos, na qual um produto intermediário que pode ser obtido em qualquer fase do mesmo é utilizado como material de partida e as restantes etapas são realizadas, ou onde os materiais de partida são for- mados in situ sob as condições de reação, ou onde os componentes da reação são utilizados na forma de seus sais ou materiais optica- mente puros.
[00075] Os compostos da invenção e intermediários podem também ser convertidos uns nos outros de acordo com métodos geralmente conhecidos pelos versados na arte.
[00076] Em outro aspecto, a presente invenção forneceu uma com-posição farmacêutica compreendendo um composto da presente in-venção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em uma outra modalidade, A composição compreende pelo menos dois veículos farmaceuticamente aceitáveis, tais como os aqui descritos. Para fins da presente invenção, a menos que designado de outro modo, solvatos e hidratos são geralmente considerados composições. Preferencialmente, os veículos farmaceuticamente aceitáveis são estéreis. A composição farmacêutica pode ser formulada para vias particulares de administração tais como administração oral, administração parentérica e administração retal, etc. Além disso, as composições farmacêuticas da presente invenção podem ser preparadas em uma forma sólida (incluindo, sem limitação, cápsulas, comprimidos, pílulas, grânulos, pós ou supositórios), ou em uma forma líquida (incluindo sem limitação soluções, sus-pensões ou emulsões) . As composições farmacêuticas podem ser submetidas a operações farmacêuticas convencionais tais como esterilização e/ou podem conter diluentes inertes convencionais, agentes lubrificantes ou agentes tamponantes, bem como adjuvantes, tais como conservantes, estabilizantes, agentes umidificantes, emulsionantes e tampões, etc.
[00077] Tipicamente, as composições farmacêuticas são comprimi-dos ou cápsulas de gelatina compreendendo o ingrediente ativo em conjunto com um ou mais de: a) diluentes, por exemplo, lactose, dextrose, sucrose, mannitol, sorbitol, celulose e/ou glicina; b) lubrificantes, por exemplo, sílica, talco, ácido esteárico, sal de magnésio ou cálcio e/ou polietilenoglicol; para comprimidos também c) ligantes, por exemplo, silicato de alumínio e magnésio, pasta de amido, gelatina, tragacanto, metilcelulose, sódio carboximetil- celulose e/ou polivinilpirrolidona; se desejado d) desintegrantes, por exemplo, amidos, ágar, ácido algíni- co ou seu sal de sódio, ou misturas efervescentes; e e) absorventes, corantes, flavorizantes e adoçantes.
[00078] Os comprimidos podem ser revestidos por película ou re-vestidos por entéricos de acordo com métodos conhecidos na arte.
[00079] As composições adequadas para administração oral inclu-em uma quantidade eficaz de um composto da invenção na forma de comprimidos, pastilhas, suspensões aquosas ou oleosas, pós ou grânulos dispersáveis, emulsão, cápsulas duras ou moles ou xaropes ou elixires. As composições destinadas a uso oral são preparadas de acordo com qualquer método conhecido na técnica para a fabricação de composições farmacêuticas e tais composições podem conter um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste em agentes adoçantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantes de modo a fornecerem preparações farmaceuticamente elegantes e saborosas. Os comprimidos podem conter o ingrediente ativo em mistura com excipientes farmaceuticamente aceitáveis não tóxicos que são adequados para a fabricação de comprimidos. Estes excipientes são, por exemplo, diluentes inertes, tais como carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio ou sódio fosfato; agentes de granulação e desintegração, por exemplo, amido de milho ou ácido algínico; agentes ligantes, por exemplo, amido, gelatina ou acácia; e agentes lubrificantes, por exemplo estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos não são revestidos ou revestidos por técnicas conhecidas para atrasar a desintegração e absorção no trato gastrointestinal e assim proporcionar uma ação sustentada durante um período mais longo. Por exemplo, pode ser utilizado um material de retardamento de tempo, tal como monoestearato de glicerila ou dies- tearato de gliceril. As formulações para utilização oral podem ser apresentadas como cápsulas de gelatina dura em que o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulim, ou como cápsulas de gelatina mole em que o ingrediente ativo é misturado com água ou um óleo, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida ou azeite.
[00080] Certas composições injetáveis são soluções ou suspensões aquosas isotónicas e os supositórios são vantajosamente preparados a partir de emulsões ou suspensões gordurosas. As referidas composições podem ser esterilizadas e/ou conter adjuvantes, tais como agentes conservantes, estabilizantes, humectantes ou emulsionantes, promotores de solução, sais para regular a pressão osmótica e/ou tampões. Além disso, também podem conter outras substâncias tera- peuticamente valiosas. As referidas composições são preparadas de acordo com métodos convencionais de mistura, granulação ou revestimento, respectivamente, e contêm cerca de 0,1 a 75%, ou contêm cerca de 1 a 50%, do ingrediente ativo.
[00081] Composições adequadas para aplicação transdérmica in-cluem uma quantidade eficaz de um composto da invenção com um veículo adequado. Os veículos adequados para administração trans- dérmica incluem solventes absorvíveis farmaceuticamente aceitáveis para auxiliar a passagem atravéz da pele do hospedeiro. Por exemplo, os dispositivos transdérmicos estão na forma de uma bandagem compreendendo um elemento de suporte, um reservatório contendo o composto opcionalmente com veículos, opcionalmente uma barreira de controle de velocidade para distribuir o composto da pele do hospedeiro a uma taxa controlada e predeterminada durante um período prolongado de tempo, e meios para fixar o dispositivo à pele.
[00082] As composições adequadas para aplicação tópica, por exemplo, à pele e aos olhos, incluem soluções aquosas, suspensões, unguentos, cremes, géis ou formulações pulverizáveis, por exemplo, para distribuição por aerossol ou semelhante. Tais sistemas de administração tópica serão particularmente apropriados para a aplicação dérmica, por exemplo, para o tratamento de cancro da pele, por exemplo, para utilização profiláctica em cremes solares, loções, pulverizações e semelhantes. São assim particularmente adequados para utilização em formulações tópicas, incluindo cosméticas, bem conhecidas na técnica. Estes podem conter solubilizantes, estabilizadores, agen-tes estimuladores da tonicidade, tampões e conservantes.
[00083] Conforme aqui utilizado uma aplicação tópica também pode pertencer a uma inalação ou a uma aplicação intranasal. Podem ser convenientemente fornecidos na forma de um pó seco (quer sozinho, como uma mistura, por exemplo, uma mistura seca com lactose, ou uma partícula de componente misturada, por exemplo com fosfolipí- dios) a partir de uma de inalador de pó seco ou de um aerossol apresentado a partir de um recipiente pressurizado, bomba, pulverizador, atomizador ou nebulizador, com ou sem o uso de um propulsor adequado.
[00084] A presente invenção proporciona ainda composições far-macêuticas anidras e formas de dosagem compreendendo os compostos da invenção anterior como ingredientes ativos, uma vez que a água pode facilitar a degradação de certos compostos.
[00085] As composições farmacêuticas anidrosas e formas de do-sagem da invenção podem ser preparadas utilizando ingredientes ani- drosos ou com baixa humidade e em condições de baixa humidade . Uma composição farmacêutica anidra pode ser preparada e armazenada de tal modo que a sua natureza anidra seja mantida. Em conformidade, as composições anidras são embaladas utilizando materiais conhecidos para evitar a exposição à água de tal modo que possam ser incluídos em kits de formulários adequados. Exemplos de embalagens adequadas incluem, mas não estão limitados a, folhas hermeticamente seladas, plásticos, recipientes de dose unitária (por exemplo, frascos), embalagens de blister e embalagens de tira.
[00086] A invenção proporciona ainda composições farmacêuticas e formas de dosagem que compreendem um ou mais agentes que reduzem a taxa pela qual o composto da presente invenção como ingrediente ativo se decomporá. Tais agentes, aqui referidos como "estabilizadores", incluem, mas não estão limitados a, antioxidantes tais como ácido ascórbico, tampões de pH, tampões de sal, etc.
[00087] Os compostos de Fórmula I na forma livre ou na forma sal farmaceuticamente aceitável exibem propriedades farmacológicas valiosas, por exemplo, propriedades modulação do Smurf-1, por exemplo, como indicado nos testes in vitro e in vivo como previsto nas próximas seções, e são portanto indicados para terapia ou para utilização como produtos químicos de investigação, por exemplo, como compostos de ferramentas.
[00088] Compostos da invenção ou os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos são úteis no tratamento de varias indicações incluindo: Hipertensão pulmonar, incluindo Hipertensão pulmonar arterial (PAH) Fibrose Artrite reumatoide Cicatrização de fraturas Glaucoma Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT) proteinúria cicatrização de feridas COPD asma Hipertensão pulmonar arterial (PAH)
[00089] Hipertensão pulmonar arterial tem uma patobiologia multifa- torial. Vasoconstrição, remodelação da parede pulmonar e trombose contribuem para aumento da resistência vascular pulmonar em PAH (Humbert et al, J. Am. Coll. Cardiol., 2004.). Os compostos da presente invenção divulgados aqui são úteis no tratamento de PAH e sintomas da mesma. Hipertensão pulmonar arterial deve ser entendida para abranger as seguintes formas de hipertensão pulmonar: PAH idio- pática (IPAH); PAH Hereditário (HPAH); PAH induzida por drogas ou toxinas, PAH associada a outras patologias (APAH), como PAH associada a doenças do tecido conjuntivo, PAH associada com infecção pelo HIV, PAH associada à hipertensão portal, PAH associada a cardi- opatias congênitas, PAH associada à esquistossomose, PAH associada com anemia hemolítica crônica, ou hipertensão pulmonar peristente do recém-nascido (Galiè et al, ERJ, 2009; Simonneau et al, JACC, 2009).
[00090] A PAH idiopática se refere a PAH de causa indeterminada. PAH hereditária se refere a PAH para a qual se suspeita ou documenta transmissão hereditária, incluindo aqueles que abrigam mutações no receptor de BMP, BMPR2 ou aqueles com mutações em ALK1 ou endoglina (com ou sem talangiectasia hemorrágica hereditária).
[00091] PAH associado a drogas ou toxinas deve ser entendido como englobando PAH associado à ingestão de aminorex, um composto de fenfluramina (por exemplo, fenfluramina ou dexfenfluramina), certos óleos tóxicos (por exemplo, óleo de colza), alcaloides de pirroli- zidina (por exemplo, chá de mato), monocrotalina, anfetaminas, L - tratoptofano, metanfetaminas, cocaína, fenilpro-panolamina, erva de São João, agentes quimioterapêuticos ou SSRI.
[00092] Deve entender-se que a PAH associada a doenças do teci-do conjuntivo inclui PAH associada à esclerose sistémica, fibrose pulmonar, polimiosite, artrite reumatoide, síndrome de Sjogren ou PAH associada com lúpus eritematoso sistémico.
[00093] PAH associada a cardiopatias congênitas devem ser en-tendidas como englobando pacientes com desvios sistêmicos a pulmonares, PAH associada à síndrome de Eisenmenger, defeitos ventriculares interventriculares ou septo atrial ou PAH associada à cirurgia cardíaca corretiva.
[00094] A PAH associada à anemia hemolítica crônica deve ser en-tendida para abranger pacientes com anemias crônicas hereditárias e adquiridas, incluindo pacientes com doença falciforme, talassemia, es- ferocitose hereditária, estomatocitose e anemia hemolítica microangio- pática.
[00095] Os sintomas de PAH incluem dispneia, angina, síncope e edema (McLaughlin et al., Circulation, 2006, 114: 1417-1431). Os compostos da presente invenção divulgados aqui são úteis no tratamento de sintomas de PAH.
Hipertensão pulmonar (PH)
[00096] Hipertensão pulmonar (PH) deve ser entendida como asso-ciado às seguintes condições agrupadas de acordo com a classificação clínica de Dana Point (Simonneau, G et al. JACCC, 2009): Grupo 1’ - PH deve ser entendida como associada a pacientes portadores de doença veno-oclusiva pulmonar (PVOD) e hemangiomatose capilar pulmonar (PCH). Grupo 2 - PH associada à doença cardíaca esquerda incluem aqueles pacientes com doenças ventriculares e valvares do lado esquerdo. Grupo 3 - PH como resultado de doenças pulmonares e/ou hipoxia. Considera-se que as doenças pulmonares resultantes de PH incluem pacientes com fibrose pulmonar, enfisema, fibrose e efisema pulmonar combinado, bronquiectasias, fibrose cística e doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD). Grupo 4 - PH associada a tromboembolismo crônico (CTEPH). Grupo 5 - PH associadas a etiologias pouco claras ou multifatoriais. Esta categoria de pacientes com PH deve ser entendida como englobando doentes de uma dos seguintes Grupos: 1) Distúrbios mieloproli- ferativos crônicos incluindo policitemia vera, trombocitemia essencial ou leucemia mieloide crônica; 2) Distúrbios sistêmicos incluindo sar- coidose, condições resultantes da destruição do leito capilar pulmonar, tais como fibrose, compressão extrínseca de grandes artérias pulmonares, pacientes com histocitose de células de Langerhan pulmonar, linfangioleiomiomatose, neurofibromatose tipo 1 e vasculite associada a anticorpos anticitoplasmáticos antineutrófilos; 3) Distúrbios metabólicos incluindo doença de armazenamento de glicogênio de tipo Ia, deficiência de glucose-6-fosfatase, doença de Gaucher e doenças da tiroi- de (hipotiroidismo e hipertireoidismo); 4) Abrangendo pacientes com tumores que se expandem para o lúmen da artéria pulmonar, oclusão de microvasculatura pulmonar por embolia de tumor metastático, fibrose mediastinal ou pacientes com doença renal terminal recebendo hemodiálise de longo prazo.
Fibrose
[00097] A desregulação das vias de sinalização TGFβ/BMP mostrou ter um papel causador na fibrose de vários órgãos incluindo rim, coração, pulmão, pele, pâncreas e fígado, assim como na esclerose sistémica e patologias associadas (Conforme revisto por Leask e Abraham, FASEB, 2004). Foi demonstrado que a BMP7 contraria a transição epi- telial-mesenquimática induzida por TGFβ1 (Zeisberg, M et al., Nat. Med, 2003) e a indução de colágeno (Izumi, N et ai., AJP, Lung, Cell, Mol., Physiol 2005) ambos mecanismos chave no desenvolvimento da fibrose. A evidência direta de um papel de Smurf-1 em patologias fibró- ticas foi demonstrada no modelo de obstrução ureteral unilateral (UUO) de fibrose tubulointersticial progressiva do rim onde níveis aumentados de Smurf-1 estavam presentes nos rins doentes associados a níveis diminuídos do Smurf-1, Smad7 (Fukasawa, H et al., PNAS, 2004). Mais recentemente, foi sugerido um papel para o Smurf-1 na fibrose pulmonar em dados gerados em células epiteliais pulmonares identificando um papel crucial para o substrato Smurf-1 Smad7 na limitação de EMT (Shukla, MA, et al., Am. J. Resp. Cell , Mol. Biol., 2009). Os compostos da presente invenção divulgados aqui são úteis no tratamento de fibrose e sintomas da mesma. Fibrose deve ser entendido como abrangendo os seguintes: pacientes com fibrose pulmonar, fibrose pulmonar idiopática, fibrose cística, cirrose, fibrose endomiocár- dica, fibrose mediastinal, mielofibrose, fibrose retroperitoneal, fibrose maciça progressiva, fibrose nefrogênica sistêmica, doença de Crohn, queloide, infarto do miocárdio pela idade, escleroderma (esclerose sistêmica), artrofibrose ou capsulite adesiva.
Artrite reumatoide
[00098] As citoquinas pró-inflamatórias tais como o fator de necrose tumoral alfa (TNFα) desempenha um papel chave no aparecimento e manutenção de estados inflamatórios crónicos tais como artrite reuma- toide (RA). Uma redução na densidade óssea é comumente associada com RA e Smurf-1 foi mostrado para desempenhar um papel fundamental na mediação de RA induzida pela perda óssea. Foi demonstrado que o TNFα desencadeou a degradação proteolítica dos substratos Smurf-1 Smad1 e Runx2, sendo ambos essenciais para a formação de osteoblastos. A evidência direta em apoio desta ligação foi demonstrada em camundongos KO de smurf-1 em que TNFα falhou no impacto na atividade de osteoclastos em ossos de camundongos KO de Smurf-1, mas não nos correspondentes de tipo selvagem (Guo, R et al., JBC, 2008) . Os compostos da presente invenção divulgados aqui são úteis no tratamento de artrite reumatoide e sintomas da mesma. RA deve ser entendida como englobando pacientes com inflamação crônica da membrana sinovial secundária ao inchaço de células sino- viais, excesso de líquido sinovial e formação de tecido fibroso dentro das articulações. Além disso, RA deve abranger também os doentes com RA devido a um granuloma necrotizante, vasculite, pioderma gangrenoso, síndrome de Sweet, eritema nodoso, paniculite lobular, atrofia da pele digital, eritema palmar ou diluição difusa da pele. RA também se estende a outros órgãos e abrangerá aqui pacientes com fibrose dos pulmões, amiloidose renal, aterosclerose como resultado de RA, pericardite, endocardite, insuficiência ventricular esquerda, val- vulite e fibrose. RA também abrangerá pacientes com condições oculares de episclerite e queratoconjuntivite sicca, distúrbios hematológicos de anemia hemolítica autoimune quente, neutropenia e thrmoboci- tose, condições neurológicas de neuropatia periférica, mononeurite múltipla e síndrome do túnel do carpo, osteoporose e linfoma.
Cicatrização de fraturas
[00099] A via de BMP desempenha um papel aqui e os inibidores de Smurf-1 aumentaram a sinalização de BMP. Os compostos da presente invenção divulgados aqui são úteis no tratamento de cicatriza- ção de fraturas. Cicatrização de fraturas deve se entendida como englobando a técnica de reparação da fractura óssea em que um implante endosteal contendo poros nos quais osteoblastos e tecido conjuntivo de suporte podem migrar, é implantado cirurgicamente no local da fractura óssea. A administração de inibidores de Smurf-1 após a inserção do implante descrito acima pode auxiliar a integração do implante e acelerar a recuperação aumentando a proliferação de células esta- minais mesenquimais que se diferenciam em osteoblastos (Zhao, M et al. JBC, 2004).
Glaucoma
[000100] A pressão intraocular elevada (IOP) é um dos principais fatores de risco para o glaucoma primário de ângulo aberto (POAG). A IOP é mantida na câmara anterior pelo líquido orgânico aquoso produzido no corpo ciliar e drenado pela região da malha trabecular Aumento da resistência ao escoamento do líquido orgânico aquoso associado ao acúmulo de deposição de matriz extracelular (ECM) na região de malha trabecular tem sido observado em pacientes com glaucoma. Esta patologia de ECM em pacientes com POAG assemelha-se à fibrose induzida por proteínas TGFb em muitos sistemas não oculares. O aumento da IPO induzida por TGFbr2 foi demonstrada em modelos pré-clínicos in vivo e ex vivo. Em vários estudos clínicos de pequena escala, o nível de proteína TGFbr2 no líquido orgânico aquoso também foi relatado como sendo elevado em pacientes com POAG. A modulação da atividade de TGFb em doentes com glaucoma poderia potencialmente baixar a PIO e conduzir a novas terapias de glaucoma (Wordinger RJ JOURNAL OF OCULAR PHARMACOLOGY e THERAPEUTICS Volume 30, Número 2, 2014). Tendo em vista o papel de Smurf1 na regulação da sinalização de TGFb através dos seus substratos BMP9 e SMAD 7, os compostos da presente invenção (ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis) aqui descritos seriam úteis no tratamento de Glaucoma.
Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT)
[000101] Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), também conhecida como Síndrome de Osler-Weber-Rendu, É uma doença genética dos vasos sanguíneos que afetam de 1:5000 a 1:40,000. Uma pessoa com HHT tende a formar vasos sanguíneos que não têm capilares normais entre uma artéria e uma veia, fazendo com que sangue arterial sob alta pressão flua diretamente para uma veia, que pode romper e sangrar. Os sintomas da HHT podem se manifestar de leve a grave, com 90 a 95% dos pacientes com sangramento nasal na idade adulta, 90 a 95% desenvolvendo telangiectasias na face ou mãos na meia idade e 40% desenvolvendo malformações arteriovenosas pulmonares (AVM), que podem representar um risco significativo. AVMs também podem ocorrer no cérebro, fígado e intestino, com gravidade variável de implicações de saúde. O HHT pode ser tratado, na maioria das vezes com terapia de coagulação, embolização ou remoção cirúrgica do tecido afetado. As mutações de HHT causam haploinsuficiên- cia na sinalização de BMP (Ricard et al., Blood, 2010), resultando em um defeito de maturação do vaso e ramificação excessiva da vascula- tura que é em parte atribuída à sinalização de BMP9 prejudicada (Choi et al., PlosOne, 2013). Smurf1 regula a sinalização BMP (Murakami Exp. Biol. Res. 2010 e Cao, et al., Sci. Rep. 2014) e foi relatado como sendo expresso nas células endoteliais (Crose et al., JBC, 2009 e Human Protein Atlas e GeneCards) e portanto, os inibidores de Smurf1 podem servir para restaurar a sinalização de BMP e corrigir a anormalidade da angiogênese. Tais compostos da presente invenção (ou seu sais farmaceuticamente aceitáveis) aqui descrito seriam úteis no tratamento de HHT.
Proteinúria
[000102] As quantidades anormais de proteína na urina são um dos sinais mais dolorosos de doença renal crônica que podem resultar de hipertensão, diabetes ou doenças associadas com a inflamação nos rins. Se não for tratada, a doença renal crônica pode progredir para doença renal terminal e insuficiência renal. O Smurf1 está envolvido em múltiplos mecanismos associados à função renal e proteinúria. O substrato Smurf1, família do gene homólogo Ras, membro A (RhoA), desempenha um papel crítico na regulação da migração dos podócitos dos rins. A sinaptopodina permite a formação de fibras de stress dentro dos podócitos dos rins, bloqueando a capacidade de Smurf1 de ligar-se e ubiquitinar RhoA, promovendo assim a motilidade dos podóci- tos e a modulação das propriedades de peneiração da barreira de filtração dos podócitos do rim (Asanuma, et al. Nat. Cell Biol. 2006). Adicionalmente, o antagonista intracelular do fator de crescimento trans- formante (TGF) β, Smad7 desempenha um papel protetor principal no rim. A atividade de Smurf1 mostrou ubiquitinar e degradar Smad7 levando a fibrose tubulointersticial e disfunção renal (Fukasawa, et al. PNAS 2004). Juntos, estes relatos sugerem que um inibidor Smurf1 pode permitir a migração de podócitos e a manutenção da barreira de filtração de podócitos, além de bloquear a propagação de sinalização pró-fibrótica com o rim, proporcionando em última instância benefício terapêutico para proteinúria. Assim, os compostos da invenção (ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis) seriam úteis no tratamento da proteinúria.
Cicatrização de feridas
[000103] As feridas não cicatrizantes crónicas são mais comuns em pessoas com mais de 60 anos, resultando em uma quantidade significativa de dor física e são, em geral, classificadas em três grupos: úlceras venosas, diabéticas e úlceras de pressão. O sincronismo preciso da atividade das vias de sinalização do fator de crescimento transfor- mante (TGF) β e da proteína morfogênica óssea (BMP) é essencial na cicatrização de feridas normais que regula os principais processos pró- cicatrizantes de migração de fibroblastos e deposição de matriz extra- celular, influxo de células inflamatórias, angiogênese e reepitelização (Pakyari, M et al. Adv. Wound Care 2013). A ativação prolongada de TGF β pode resultar em retardo na cicatrização de feridas e a intervenção terapêutica de feridas não cicatrizadas estabelecidas com anticorpos anti-TGFβ resulta em cicatrização melhorada e hipertrofia de cicatriz reduzida (Lu et al. J. Am. Coll. Surg. 2005). Smurf1 regula a extensão de TGF β e sinalização de BMP (Murakami Exp. Biol. Res. 2010 e Cao, et al. Sci. Rep. 2014, Wang et al. J. Cell. Mol. Med. 2012) e, portanto, prevê-se que um inibidor de Smurf1 normalizaria o excesso de sinalização de TGF β permitindo a cicatrização de feridas crônicas. Por conseguinte, os compostos da invenção (ou os seus sais far- maceuticamente aceitáveis) seriam úteis no tratamento de feridas crônicas não cicatrizantes e/ou cicatrização de feridas em geral.
COPD e asma
[000104] A remodelação das vias aéreas é evidente em pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) ou asma. As características predominantes do remodelamento das vias aéreas em asma são fibrose, espessamento da membrana basal, aumento do número de células caliciformes e aumento da massa das células do músculo liso com resposta contrátil melhorada que se acredita serem induzidas por inflamação crônica responsável pela hiper-responsividade das vias aéreas e obstrução reversível das vias aéreas (Carroll et al. Am.Rev Resp. Dis. 1993, Metcalfe, et al. Physiol. Rev. 1997 e Roche, et al. Lancet 1989). Na DPOC, a remodelação pulmonar é caracterizada pela desorganização do epitélio nas grandes vias aéreas com metaplasia escamosa, hiperplasia de células caliciformes e hipersecreção de muco, e remodelação de pequenas vias aéreas com expansão do músculo liso, fibrose e desestrução alveolar no desenvolvimento de enfise- ma, resultando em restrição de fluxo de ar (De, Decramer, et al. Lancet, 2012, Pain et al. Eur. Respir. Rev. 2014 e Chung, Proc. Am. Thorac. Soc. 2005). Em ambas as doenças, há evidências de sinalização BMP regulada para baixo (Kariyawasam, et al. Am. J Resp. Crit. Care Med. 2008) e elevado TGF β (Mak. Et al. Respir. Med. 2009 e Chakir et al. J. All. Clin. Immunol. 2003) ligada a um mecanismo de remodelagem, tal como a transição fibroblasto-mesenquimal (Araya, et al, J. Clin. Invest., 2007), deposição de matriz extracelular (Baarsma et al, Am. J. Physiol, Lung Cell Mol.PHysiol. 2011) e inflamação (Chakir et al., J. All. Clin. Immunol., 2003). Os inibidores de Smurf1 podem normalizar a sinalização de TGF β em células críticas de pro- remodelação tais como músculo liso e fibroblastos e bloquear a progressão da remodelação resultando em benefício terapêutico para pacientes com DPOC ou asma. Assim, os compostos da invenção (ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis) seriam úteis no tratamento da DPOC e/ou asma.
[000105] Assim, como uma modalidade adicional, a presente inven-ção se destina à utilização de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em terapia. Em uma outra modalidade, a terapia é selecionada a partir de uma doença que pode ser tratada por inibição de Smurf-1. Em outra modalidade, a doença é selecionada a partir da lista acima mencionada, devidamente hipertensão pulmonar, incluindo Hipertensão arterial pulmonar (PAH), fibrose, artrite reumatoide e cicatrização de fraturas, mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (HAP). Ainda em mais outra modalidade, a presente invenção forneceu a utilização de um composto de Fórmula I ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, no tratamento de uma doença selecionada entre glaucoma, telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000106] Assim, como uma outra modalidade, a presente invenção forneceu um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em terapia. Em uma outra modalidade, a terapia é selecionada a partir de uma doença que pode ser tratada por inibição de Smurf-1. Em outra modalidade, a doença é selecionado a partir de lista anteriormente mencionada, adequadamente Hipertensão pulmonar, incluindo Hipertensão pulmonar arterial (PAH), fibrose, artrite reuma- toide, e Cicatrização de fraturas; ainda mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH). Em outra modalidade, a doença é selecionada a partir de glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cica- trização de feridas, COPD e asma.
[000107] Em outra modalidade, a invenção proporciona uma método de tratamento de uma doença que é tratada por inibição de Smurf-1 compreendendo a administração de uma quantidade terapeuticamente aceitável de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma outra modalidade, a doença é selecionada a partir da lista acima mencionada, adequadamente Hipertensão pulmonar, encluindo Hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas; mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH). Ainda em outra modalidade, a invenção proporciona um método de tratamento de uma doença através da inibição de Smurf-1, compreendendo no referido método administração de uma quantidade terapeuticamente aceitável de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que a doença é selecionada a entre glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000108] Assim, como uma outra modalidade, a presente invenção forneceu o uso de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo para o fabricação de um medicamento. Em uma outra modalidade, a medicação é para o tratamento de uma doença que pode ser tratada por inibição de Smurf-1. Em outra modalidade, a doença é selecionada a partir da lista acima mencionada, adequadamente Hipertensão pulmonar, incluindo Hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas; mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH).
[000109] Ainda em outra modalidade, a medicação é para o tratamento de uma doença que é selecionada entre glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000110] Em uma modalidade da presente invenção, é proporciona-do N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de Hipertensão pulmonar, incluindo Hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas; mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH).
[000111] Em outra modalidade da presente invenção, é proporcionado N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida ou um sal farmaceutimente aceitável do mesmo para uso em tratamento de glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000112] Em outra modalidade da presente invenção, é proporcionado N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5- dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ou um sal ou co- cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de Hipertensão pulmonar, incluindo hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas; mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH).
[000113] Ainda em outra modalidade da presente invenção, é proporcionado N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4- il)-5-(5,5-dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000114] Em outra modalidade da presente invenção, é proporcionado N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de Hipertensão pulmonar, incluindo hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas; mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH).
[000115] Em ainda outra modalidade da presente invenção, é pro-porcionado N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4- il)-5-(4,4-dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), protei- núria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000116] Em outra modalidade da presente invenção, é proporcionado [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metil-5-(1-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de Hipertensão pulmonar, incluindo hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas; mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH).
[000117] Em outra modalidade da presente invenção, é proporcionado [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metil-5-(1-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida] ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000118] Em outra modalidade da presente invenção, é proporcionado N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida ou um sal ou co-cristal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de Hipertensão pulmonar, incluindo hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas; mais adequadamente Hipertensão pulmonar arterial (PAH).
[000119] Em uma outra modalidade da presente invenção, é propor-cionado N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso em tratamento de glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), protei- núria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
[000120] A composição farmacêutica ou combinação da presente invenção pode estar em dosagem unitária de cerca de 1-1000 mg do ingrediente(s) ativo para um indivíduo de cerca de 50-70 kg, ou cerca de 1-500 mg ou cerca de 1-250 mg ou cerca de 1-150 mg ou cerca de 0,5-100 mg, ou cerca de 1-50 mg de ingredientes ativos. A dosagem terapeuticamente eficaz de um composto, a composição farmacêutica, ou as suas combinações, dependem das espécies do indivíduo, do peso corporal, idade e estado individual, do distúrbio ou doença ou da sua gravidade ao ser tratada. Um médico, clínico ou veterinário com conhecimentos normais pode facilmente determinar a quantidade eficaz de cada um dos ingredientes ativos necessários para prevenir, tratar ou inibir o progresso do distúrbio ou doença.
[000121] As propriedades de dosagem acima mencionadas são de-monstráveis em testes in vitro e in vivo usando, com vantagem, mamíferos, por exemplo, camundongos, ratos, cães, macacos ou orgãos isolados, tecidos e suas preparações. Os compostos da presente invenção podem ser aplicados in vitro na forma de soluções, por exemplo, soluções aquosas, e in vivo quer entericamente, parenteralmente, vantajosamente por via intravenosa, por exemplo, como uma suspen- são ou em solução aquosa. A dosagem in vitro pode variar entre cerca de 10-3 molar e 10-9 concentrações molares. Uma quantidade tera- peuticamente efetiva in vivo pode variar dependendo da via de administração, entre cerca de 0,1-500 mg/kg, ou entre cerca de 1-100 mg/kg.
[000122] A atividade de um composto de acordo com a presente in-venção pode ser avaliada pelos seguintes métodos in vitro & in vivo.
Ensaio farmacêutico
[000123] Compostos da invenção e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, A seguir referidos alternativamente como "agentes da invenção", são úteis como produtos farmacêuticos. Em particular, os compostos são inibidores seletivos de Smurf-1 e podem ser testados nos seguintes ensaios.
[000124] Para determinar a seletividade de HECT E3 ligase dos compostos, utilizou-se um painel de ensaios bioquímicos de autoubi- quitinilação de ligase HECT E3 (Smurf-1, Smurf-2, WWP1, WWP2, ITCH, Nedd4, Nedd4L e E6AP). A conjugação de ubiquitina a um substrato protéico é um processo multietapa. Em uma etapa inicial requerida de ATP, é formada uma ligação tioéster entre o terminal car- boxila da ubiquitina e um resíduo de cisteína interno da enzima ativa- dora da ubiquitina (E1). A ubiquitina ativada é então transferida para um resíduo de cisteína específico de uma enzima de conjugação de ubiquitina (E2). E2s doa ubiquitina a uma HETA E3 ligase (E3) a partir da qual é transferida para a proteína substrato. HECT E3 ligases pode auto-ubiquitinilatar. Este evento é detectado no ensaio TR-FRET ( Transferência de energia de ressonância por fluorescência resolvida no tempo) utilizado neste painel. A mistura reacional contém E1, E2, E3 marcado, ubiquitina conjugada com biotina, o composto e ATP em um tampão adequado e é incubada durante 45 minutos para permitir auto-ubiquitinilação da ligase de E3. Para medir a extensão da ligase E3 ubiquitinilada por TR-FRET, o fluoróforo doador criptato de európio (cripta Eu3 +), conjugado com estreptavidina que subsequentemente liga-se a ubiquitina biotinilada e a aloficocianina XL665 modificada (fluoróforo aceitador primário HTRF®) (HA, His ou GST), que reconhece as respectivas proteínas de fusão da ligase E3, são adicionados após a reação estar completa. Quando estes dois fluoróforos são trazidos à luz por uma interação biomolecular (neste caso ubiquitinilação da ligase E3), uma porção da energia capturada pelo Criptato durante a excitação é libertada através da emissão de fluorescência a 620 nm, enquanto a energia restante é transferida para XL665. Esta energia é então libertada por XL665 como fluorescência específica a 665 nm. A luz a 665nm é emitida apenas através de FRET com Európio. Como o criptato de európio está presente no ensaio, a luz a 620 nm é detectada mesmo quando a interação biomolecular não traz XL665 dentro da proximidade.
[000125] A autoubiquitinilação de Smurf-1 em células leva à degra-dação proteasomal de Smurf-1. Por conseguinte, a inibição do domínio catalítico do Smurf-1 elimina a autoubiquitinilação e degradação do Smurf-1, conduzindo à acumulação de proteína Smurf-1 inibida na célula.
[000126] A atividade celular de compostos no domínio HECT de Smurf-1 é avaliada por medição da acumulação de proteína Smurf-1 em células HEK293 expressando de forma estável Smurf-1 marcado com Prolabel sob o controle de um promotor indutível por tetraciclina, utilizando o método DiscoverX Path -Hunter ProLabel Detecção Kit. Esta tecnologia mede a quantidade de Smurf-1 marcado com Prolabel em um ensaio de complementação enzimática do lisado celular. Nesta abordagem, um pequeno fragmento complementar de 4 kDa de betagalactosidase, denominado ProLabel, é expresso como uma fusão N- terminal com Smurf-1 humano. Esta etiqueta é o doador de enzima (ED) e permite a detecção dos níveis alvo de proteína após a com- plementação com a maior porção de beta-galactosidase, denominada EA para aceitador de enzima, para formar a enzima beta-galactosidase funcional. A EA é adicionada exogenamente aos lisados celulares. A atividade da enzima é medida utilizando um substrato quimiolu- minescente e é proporcional à quantidade de enzima reconstituída e, portanto, aos níveis de Smurf-1.
[000127] Os compostos de teste e de referência são preparados a 180x [final] em DMSO a 90%, e diluídos 1: 3 em DMSO a 90%.
[000128] Para o painel de ensaio bioquímico, 50 nl dos compostos de teste, compostos de referência e controle tampão/DMSO são transferidos para os respectivos poços de uma placa de 384 cavidades brancas GREINER "SMALL VOLUME" PS. O painel de ensaio é executado em uma estação de trabalho de manipulação de líquidos Bio- mek FX. Para as placas de ensaio contendo 50 nl de composto ou soluções de controle em DMSO a 90%, foram adicionados 4,5 ul de solução de ligase E3 em poços, seguidos por 4,5 ul da mistura E1/E2/Ub pré-incubada ou ubiquitina pré-diluída (baixo controle). As placas são agitadas vigorosamente após cada adição. Neste ensaio as concentrações do composto variam de 3 nM a 10 uM em uma curva -resposta dose de 8 pontos.
[000129] Após 45 min de incubação as reações de ubiquitinilação foram interrompidas por adição de 4,5 ul de NEM a 2 mM, seguidos imediatamente por 4,5 ul de uma solução de detecção incluindo o anticorpo marcado com XL665 e o európio acoplado a estreptavidina para dar um volume total de 18 ul. Após um tempo de incubação de 45 min no escuro, as placas são transferidas para o leitor de fluorescência Pherastar para medir o sinal TR-FRET.
[000130] Para o ensaio celular, 250 nl dos compostos de teste, compostos de referência e controle tampão/DMSO são então transferidos para os respectivas cavidades de uma placa estéril de cultura de tecidos uClear GREHER PS, CELLSTAR, brancos de 384 cavidades. Para distribuir a solução do composto uniformemente no meio antes da adição das células, adicionam-se 10 ul de meio de cultura celular a cada cavidade da placa contendo o composto utilizando o distribuidor MULTIDROP 384 e agita-se vigorosamente. As células são separadas a partir do fraco após uma curta incubação com tripsina-EDTA, contadas e diluídas até uma concentração de 1,5 x I06 células/mL em meio de cultura. A expressão de Smurf-1 é induzida pela adição de doxicili- na a uma concentração final de 0,2 ug/mL. Adicionam-se 10 ul da suspensão de células a cada cavidade das placas contendo o composto utilizando o distribuidor MULTIDROP 384. As placas são incubadas durante a noite a 37 ° C, CO2 a 5%. Neste ensaio as concentrações do composto variam desde 6,75 nM até 22,5 uM em uma curva de 8 pontos de resposta à dose.
[000131] Depois de uma incubação durante a noite com os compostos, os níveis de Smurf-1 são determinados utilizando o kit de detecção Pathhunter Prolabel da DiscoverX. Os primeiros 10 ul de uma solução de trabalho de uma detecção lise/CL são adicionados manualmente utilizando um pipe pipetador multicanal, seguido por adição de 5 ul de aceitador de enzima EA. As placas são misturadas em um agitador de placas e incubadas durante 2 a 3 horas à temperatura ambiente antes de se medir o sinal quimioluminescente no leitor de placas PherStar.
[000132] Os compostos dos exemplos, aqui abaixo, têm valores de IC50 de Smurf-1 nas medições de dados acima descritas como mostrado na Tabela A. Tabela A.
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[000133] O composto da presente invenção pode ser administrado simultaneamente com, ou antes ou depois, com um ou mais agentes terapêuticos. O composto da presente invenção pode ser administrado separadamente, pela mesma ou diferente via de administração, ou para tratar a mesma composição farmacêutica que os outros agentes. Um agente terapêutico é, por exemplo, um composto químico, péptido, anticorpo, fragmento de anticorpo ou ácido nucleico, que é terapeuti- camente ativo ou aumenta a atividade terapêutica quando administrado a um doente em combinação com um composto da invenção.
[000134] Em uma modalidade, a invenção fornece um produto com- preendendo um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e pelo menos um outro agente terapêutico como uma preparação combinada para utilização simultânea, separada ou sequencial em terapia. Em uma modalidade, a terapia é o tratamento de uma doença ou condição mediada por Smurf-1. Os produtos fornecidos como uma preparação combinada incluem uma composição compreendendo o composto de Fórmula (I) e o(s) outro(s) agente(s) terapêutico(s) para tratar na mesma composição farmacêutica, ou o composto de Fórmula (I) e o(s) outro(s) agente(s) terapeutico(s) em forma separada, por exemplo, na forma de um kit.
[000135] Em uma modalidade, a invenção fornece um composto farmacêutico compreendendo um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e outro(s) agente(s) terapêuti- co(s). Opcionalmente, a composição farmacêutica pode compreender um veículo farmaceuticamente aceitável, como descrito acima.
[000136] Em uma modalidade, A invenção proporciona um kit que compreende duas ou mais composições farmacêuticas separadas, no mínimo um dos quais contém um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma modalidade, o estojo (kit) compreende meios para reter separadamente as referidas compo-sições, tais como um recipiente, uma garrafa dividida ou um pacote de folha dividida. Um exemplo de um tal estojo é um blister, como tipicamente usado para a embalagem de comprimidos, cápsulas e similares.
[000137] O kit da invenção pode ser utilizado para administrar diferentes formas de dosagem, por exemplo, oral e parentérica, para administrar as composições separadas em diferentes intervalos de dosagem, ou para titulação das composições separadas uma contra a outra. Para auxiliar a conformidade, o kit da invenção compreende tipicamente orientações para administração.
[000138] Nas terapias de combinação da invenção, o composto da invenção e o outro agente terapêutico podem ser fabricados e/ou for-mulados pelos mesmos ou diferentes fabricantes. Além disso, o composto da invenção e o outro terapêutico podem ser levados a uma terapia de combinação: (i) antes da liberação do produto da combinação para médicos (por exemplo, no caso de um kit que compreende o composto da invenção e o outro agente terapêutico); (ii) pelo próprio médico (ou sob a orientação do médico) pouco antes da administração; (iii) no próprio paciente, por exemplo, durante a administração sequencial do composto da invenção e do outro agente terapêutico.
[000139] Em conformidade, a invenção proporciona a utilização de um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para tratar uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que o me dicamento é preparado para administração com outro agente terapêutico. A invenção também proporciona a utilização de outro agente terapêutico para o tratamento de uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que a medicação é administrada com um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[000140] A invenção também proporciona um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para utilização em um método de tratamento de uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que o composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo é preparado para administração com outro agente terapêutico. A invenção também proporciona outro agente terapêutico para utilização em uma forma de tratamento de uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que o outro agente terapêutico é preparado para administração com um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. A invenção também proporciona um composto de Fórmula (I) para utilização em uma forma de tratamento de uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que o composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo é administrado com outro agente terapêutico. A invenção também proporciona outro agente terapêutico para utilização em uma forma de tratamento de uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que o outro agente terapêutico é administrado com um composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[000141] A invenção proporciona também a utilização de um composto de Fórmula (I) ou um produto farmaceuticamente aceitável para tratar uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que o doente tem sido tratado anteriormente (por exemplo, dentro de 24 horas) com outro agente terapêutico. A invenção proporciona também a utilização de outro agente terapêutico para o tratamento de uma doença ou condição mediada por Smurf-1, em que o doente tem sido tratado anteriormente (por exemplo, dentro de 24 horas) com um composto de Fórmula (I) ou um produto farmaceuticamente aceitável.
[000142] Os exemplos que se seguem destinam-se a ilustrar a invenção e não devem ser interpretados como sendo limitações nele. As temperaturas são dadas em graus Celsius. Se não mencionado de outro modo, todas as evaporações são realizadas sob pressão reduzida, tipicamente entre cerca de 15 mm Hg e 100 mm Hg (= 20-133 mbar). A estrutura dos produtos finais, intermediários e materiais de partida é confirmada por métodos analíticos padrões, por exemplo, microanálise e características espectroscópicas, por exemplo, MS, IR, RMN. As abreviaturas utilizadas são as convencionais na arte.
[000143] Todos os materiais de partida, blocos de construção, reagentes, ácidos, bases, agentes desidratantes, solventes e catalisadores utilizados para a síntese ou estão disponíveis comercialmente ou podem ser produzidos por métodos de síntese orgânica conhecidos por um especialista na arte. Além disso, os compostos da presente invenção podem ser produzidos por métodos de síntese orgânica conhecidos por um especialista na arte, tal como ilustrado no seguinte exemplo.
Condições gerais:
[000144] Os espectros de massa foram adquiridos em sistemas de LC-MS, SFC-MS, GC-MS utilizando electrospray, métodos de ionização por impacto químico e de elétrons de uma gama de instrumentos das seguintes configurações: Sistemas de HPLC Agilent 1100 com um Espectrómetro de Massa Agilent 6110 [M + H] + se refere a iôns mole-culares protonados das espécies químicas.
[000145] Os espectros de RMN foram executados em espectróme- tros de Bruker AVANCE 400MHz ou 500MHz RMN utilizando ICON- RMN, sob controle do programa TopSpin. Os espectros foram medidos a 298K, salvo indicação em contrário, e foram referenciados relativamente à ressonância do solvente. Instrumentação MS Métodos: Using Agilent 1100 HPLC sistemas com um Agilent 6110 Espectômetro de massa Baixo pH v002 Coluna Phenomenex Gemini C18 50x4,6 mm, 3,0 µm Temperatura da coluna 50 °C Eluentes A: H2O, B: metanol, ambos contendo 0,1% TFA Taxa de fluxo 1,0 mL/min Gradiente 5% a 95% deB em 2,0 min, 0,2 min 95% B 2minLC_v003 Coluna Waters BEH C18 50x2,1 mm, 1,7 µm Temperatura da coluna 50 °C Eluentes A: H2O, B: acetonitrila, both containing 0,1% TFA Taxa de fluxo 0,8 mL/min Gradiente 0,20 min 5% de B; 5% a 95% de B em 1,30 min, 0,25 min 95% de B 8minLowpHv01: Coluna: Waters Acquity CSH 1,7 µm, 2,1 x 100mm Temperatura: 50 °C Fase móvel: A: Água+0,1% de ácido fórmico B: Acetonitrila +0,1% de ácido fórmico Taxa de fluxo: 0,7mL/min Gradiente: 0,0min 2% de B, 0,3-6,5min 2-98% de B, 6,5-7,5min 98% de B, 7,5-8,0min 5-98%B 2minLowpH: Coluna: Waters Acquity CSH 1,7 µm, 2,1 x 50mm Temperatura: 50 °C Fase móvel: A: Água +0,1% de ácido fórmico B: Acetonitrila +0,1% de ácido fórmico Taxa de fluxo: 1,0 mL/min Gradiente: 0,0min 5% de B, 0,2-1,3min 5-98% de B, 1,3-1,55min 98% de B, 1,55-1,6min 98 - 5% de B. 2minLowpHv01: Coluna: Waters Acquity CSH 1,7 µm, 2,1 x 50mm Temperatura: 50 °C Fase móvel: A: Água +0,1% de ácido fórmico B: Acetonitrila +0,1% de ácido fórmico Taxa de fluxo: 1,0 mL/min Gradiente: 0,0min 5% de B, 0,2-1,55min 5-98% de B, 1,55-1,75min 98% de B, 1,75-1,8min 98 - 5% de B. 2minLowpHv03: Coluna: Waters Acquity CSH 1,7 µm, 2,1 x 50mm Temperatura: 50 °C Fase móvel: A: Água +0,1% de ácido fórmico B: Acetonitrila +0,1% de ácido fórmico Taxa de fluxo: 1,0 mL/min Gradiente: 0,0min 5% de B, 0,2-1,8min 5-98% de B, 1,8-2,1min 98% de B, 2,1-2,3min 98%B 2minHighpHv03: Coluna: Waters Acquity CSH 1,7 µm, 2,1 x 50mm Temperatura: 50 °C Fase móvel: A: Água +0,1% Amônia B: Acetonitrila + 0,1% Amônia Taxa de fluxo: 1,0 mL/min Gradiente: 0,0min 5% de B, 0,2-1,8min 5-98% de B, 1,8-2,1min 98% de B, 2,1-2,3 min 98 - 5% de B. 10minLowpHv01: Coluna: Waters Acquity CSH 1,7 µm, 2,1 x 100mm Temperatura: 50 °C Fase móvel: A: Água +0,1% de ácido fórmico B: Acetonitrila + 0,1% de ácido fórmico Taxa de fluxo: 0,7mL/min Gradiente: 0,0min 2% de B, 0,5-8,0min 2-98% de B, 8,0 - 9,0min 98% de B, 9,0-9,1 min 98 - 2% de B LCMS (SRPb) Coluna: Acquity HSS T3 2,1 x 50mm, 1,8 micron Temperatura da coluna: 60°C Eluentes: A: H2O (0,05% de ácido fórmico, 3,75mM amônio acetato) B: acetonitrila (0,05% de ácido fórmico) Taxa de fluxo: 1,0 mL/min Gradiente 5% a 98% em 1,4 min Abreviações: aq aquoso br amplo d dupleto dd dupleto de dupletos DBU 1,8-Diazabicicloundec-7-eno DCM diclorometano DIBAL-H hidreto de diisobutilaalumínio DIPEA dietilisopropilamina DME Dimetóxietano DMF N,N-dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido °C graus Celsius EDCI 1-Etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida Et2O dietiléter EtOAc acetato de etila EtOH etanol Et3N trietilamina HATU (1- [Bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo [4,5-b]piri- dínio 3-óxido hexafluorofosfato HCl ácido clorídrico hr (s) H2SO4 hora(s) ácido sulfúrico K2CO3 Carbonato de potássio KHMDS Potássio bis(trimetilsilil)amida KOAc acetato de potássio LCMS cromatografia líquida e espectômetro de massa LDA lítio diisopropilamida M molar MgSO4 MeCN sulfato de magnésio acetonitrila MeOH metanol MS espectômetro de massa Mult(s) multipleto(s) mg min miligrama minutos mL mililitro mmol milimol m/z relação massa/carga NaBH4 sódio boroidreto NaH hidreto de sódio NaHCO3 Bicarbonato de sódio NaOH Hidróxido de sódio Na2SO4 sulfato de sódio n-BuLi butillítio NH4Cl cloreto de amônio NMP N-metil pirrolidona RMN ressonância nuclear magnética PdCl2(PPh3)2 dicloreto de paládio(bis trifenilfosfino) PdCl2(dppf) 1,1’-Bis(difenilfosfino)ferroceno-paládio(II)dicloreto PdCl2(dppf)-CH2Cl2 complexo de 1,1’-Bis(difenilfosfino)ferroceno-pa- ládio(II)dicloreto diclorometano Pd(Ph3P)4 Tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) ppm partes por milhão pTsOH ácido p-Toluenossulfônico q quarteto rac racêmico Rt tempo de retenção s sozinho t triplo TBAI tetrabutiliodeto de amônio TBAF tetrabutilamônio fluoreto TBME metil terc-butil éter TFA ácido trifluoroacético THF tetra-hidrofurano TMSCl cloreto de trimetilsilila TMSOTf triflato de trimetilsilila UV ultravioleta Preparação de compostos finais Exemplo 1: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
Figure img0013
Etapa 1: [4-Isopropilciclo-hex-1-en-1-il trifluorometanossulfonato]
[000146] Uma solução de 4-isopropilciclo-hexanona (1g, 7,13 mmol) em THF seco (3 mL) sob nitrogênio e resfriado a -70 °C foi tratado go- ta a gota com LDA a 2M(em THF/heptano/etilbenzeno) (4,28 mL, 8,56 mmol). Após a adição estar completa a mistura foi deixada a agitar a - 70 °C po 1,5 horas. À mistura foi adicionada uma solução de 1,1,1- triflúor-N-(piridin-2-il)-N-((trifluorometil) sulfonil)metanossulfonamida (2,81 g, 7,84 mmol) em THF seco (2 mL). A reação foi mantida a -70 °C, agitada por 3 horas e saciada cuidadosamente com água e deixada durante a noite. A mistura resultante foi extraída com dietila éter e os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaOH a 10% (aq), secado sobre MgSO4 e filtrado. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o material bruto. O material bruto foi adsor- vido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 100% de iso-hexano proporcionando o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 5,76 (1H, t), 2,45-2,30 (2H, mults), 2,22 (1H, br d), 1,99-1,90 (2H,mults), 1,61-1,52 (1H, mult), 1,48-1,36 (2H, mults), 0,93 (6H, dd).
Etapa 2: [2-(4-Isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dio- xaborolano]
[000147] Uma solução agitada de [4-isopropilciclo-hex-1-en-1-il triflu- orometanossulfonato] (1,75 g, 6,43 mmol) em dioxano (30 mL) foi tratada com bispinacolatodiboro (1,714 g, 6,75 mmol), acetato de potássio (1,892 g, 19,28 mmol) e PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (0,157 g, 0,193 mmol) e e a mistura foi agitada a 80 °C por 6 horas. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e lavada com água. A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o material bruto. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título.
Etapa 3: [Etil-5-(4-isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carbo- xilato]
[000148] A um frasco de microondas de 2-5 mL foi adicionado [2-(4- isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano] (282 mg, 1,127 mmol), etil-5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato (Intermediário A) (264 mg, 1,127 mmol), PdCl2(dppf) (82 mg, 0,113 mmol), carbonato de potássio (467 mg, 3,38 mmol), MeCN (2 mL) e água (0,667 mL). O frasco foi evacuado com nitrogênio, selado e colocado no microondas a 80 °C por 1 hora. A mistura resultante foi diluída com EtO- Ac e água e as camadas foram separadas. Os orgânicos foram secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer um óleo castanho, bruto. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 10% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,73 mins; MS m/z [M+H]+ 278,5; Método 2minLowpHv03
Etapa 4: ácido [5-(4-Isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-car- boxílico]
[000149] A uma solução de [5-(4-isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4-me- tilisoxazol-3-carboxilato] de etila (92 mg, 0,332 mmol) em THF (5 mL) e MeOH (3 mL) foi adicionado Hidróxido de sódio a 2M (aq) (0,166 mL, 0,332 mmol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por 2 hrs. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida e diluída com água. A camada aquosa foi lavada com EtOAc, acidificado com HCl a 2M(aq) e extraído com EtOAc. Os extratos orgânicos foram secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,70 mins; MS m/z [M+H]+ 250,2; Método 2minLowpHv03
Etapa 5: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-(4-isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
[000150] A uma solução de [ácido 5-(4-isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4- metilisoxazol-3-carboxílico] (42 mg, 0,168 mmol) em DCM seco (3 mL) sob nitrogênio foi adicionado DMF (0,026 mL, 0,337 mmol) seguido por cloreto de oxalila (0,016 mL, 0,185 mmol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por 30 minutos. 4-Amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil -1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (38,8 mg, 0,185 mmol) foi adi-cionado seguido por trietilamina (0,070 mL, 0,505 mmol) e a mistura foi agitada por 30 minutos. Água foi adicionada e a mistura foi agitada vi-gorosamente antes de passar através de um cartucho de separação de fase. O eluente orgânico foi coletado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um óleo laranja. O material bruto foi dissolvido em DMSO (0,9 mL) e purificado usando cromatografia de fase inversa automatizada dirigida em massa durante 9,5 minutos com gradientee de 50 a 98% de MeCN em água (0,1% de ácido fórmico). A fração do produto foi concentrada sob pressão reduzida. O remanescente aquoso foi tratado com um solução aquosa saturada de carbonato de hidrogênio e sódio e extraído com DCM, passando os extratos orgânicos através de um cartucho separador de fase. O solvente foi removido sob uma corrente de ar e secou-se sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 4,98 mins; MS m/z [M+H]+ 441,4; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,04 (1H, br s), 6,33 (1H, s), 4,06 (1H, tt), 3,26 (3H, s), 2,62 (1H, br d), 2,48-2,35 (2H, mults), 2,31 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,05-1,86 (8H,mults), 1,71 (1H, br d), 1,60-1,52 (1H,mults), 1,43-1,17 (5H, mults), 0,96 (3H, d), 0,94 (3H, d).
[000151] Exemplos 1,1 a 1,2 foram preparados por um método similar ao do Exemplo 1 por substituição de 4-isopropilciclo-hexanona (Etapa 1) com o derivado de cetona apropriado (quer comercialmente disponíveis quer as preparações descritas a seguir). Exemplo 1,1: Uma mistura diastereomérica de N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6-etil-4-metilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxa- zol-3-carboxamida
Figure img0014
LC-MS: Rt = 4,90 mins; MS m/z [M+H]+ 441,1; Método 8minLowpHv01 Exemplo 1,2: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6,6- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0015
LC-MS: Rt = 4,60 mins; MS m/z [M+H]+ 427,7; Método 8minLowpHv01
[000152] Exemplos 1,3 a 1,7 foram preparados por um método similar ao do Exemplo 1 substituindo 2-(4-isopropilciclo-hex-1-en-1-il)- 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (Etapa 3) com o apropriado ácido borônico ou dioxaborolano derivativo (quer comercialmente disponíveis quer as preparações descritas a seguir). Exemplo 1,3: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- etilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
Figure img0016
LC-MS: Rt = 4,77 mins; MS m/z [M+H]+ 427,6; Método 8minLowpHv01 Exemplo 1,4: [5-(4-(terc-Butil)ciclo-hex-1-en-1-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
Figure img0017
LC-MS: Rt = 5,16 mins; MS m/z [M+H]+ 455,4; Método 8minLowpHv01 Exemplo 1,5: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(4-metilciclo-hex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida]
Figure img0018
LC-MS: Rt = 4,47 mins; MS m/z [M+H]+ 414,5; Método 8minLowpHv01 Exemplo 1,6: 5-(Ciclo-hept-1-en-1-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0019
LC-MS: Rt = 4,42 mins; MS m/z [M+H]+ 413,6; Método 8minLowpHv01 Exemplo 1,7: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(4-(trifluorometil)ciclo-hex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida]
Figure img0020
LC-MS: Rt = 1,36 mins; MS m/z [M+H]+ 467,4; Método 2minLowpHv03 Exemplo 2: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (espiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0021
Etapa 1: espiro [4,5]dec-6-en-8-ona
[000153] A uma solução de ciclopentanecarbaldeído (Aldrich) (0,82 g, 8,36 mmol) em tolueno seco (10 mL), metil vinil cetona (Alfa Aesar) (0,684 mL, 8,36 mmol) foi adicionado seguido por uma quantidade ca- talizadora de H2SO4 concentrado (0,045 mL, 0,836 mmol). A mistura foi aquecida a 45 °C por 1,5 horas, em seguida submetido a refluxo durante 1 hora utilizando uma armadilha Dean-Stark. A mistura de reação foi resfriada a temperatura ambiente e mais metila vinil cetona (Alfa Aesar) (0,684 mL, 8,36 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida em refluxo por 1 hora, deixada para resfriar a temperatura ambiente e tratado com uma solução aquosa de NaHCO3 a 1M (30 mL). O aquoso foi extraído com tolueno e os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina, secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsor- vido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 20% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 6,74 (1H, d), 5,86 (1H, d), 2,45 (2H, t), 1,92 (2H, t), 1,80-1,71 (4H, br mults), 1,71-1,61 (4H, br mults).
Etapa 2: espiro [4,5]decan-8-ona
[000154] Uma solução de espiro [4,5]dec-6-en-8-ona (442 mg, 2,94 mmol) em etanol (15 mL) foi inundada com nitrogênio e tratada com 10% de Pd-C, 50% úmido (Alfa Aesar, 38303) (313 mg, 2,94 mmol). A mistura de reação foi agitada por 16 horas sob uma atmosfera de hidrogênio, filtrada através de Celite® e enxaguada com etanol. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCI3) δ 2,31-2,25 (4H, t), 1,72-1,66 (4H, t), 1,651,60 (4H, br mults), 1,53-1,47 (4H, br mults).
Etapa 3: espiro [4,5]dec-7-en-8-il trifluorometanossulfonato
[000155] 1,6M n-BuLi em hexano (1,900 mL, 3,04 mmol) foi adicio nado a uma solução agitada de diisopropilamina (0,454 mL, 3,19 mmol) em THF seco (20 mL) sob nitrogênio a -78 °C. A solução foi deixada aquecer até 0 °C por 20 minutos antes de resfriar a -78 °C. Uma solução de espiro [4,5]decan-8-ona (0,440 g, 2,89 mmol) em THF seco (5 mL) foi adicionado durante 5 minutos e a solução foi agitada a -78 °C por 50 minutos antes da adição de uma solução de 2- [N,N-Bis (trifluorometilsulfonil)amino]piridina (Alfa Aesar) (1,141 g, 3,19 mmol) em THF seco (5 mL). A mistura foi agitada e deixada para aquecer a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi saciada com NaHCO3 aquoso saturado (4 mL). A porção aquosa foi extraída com TBME (x2) e os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaOH aquoso a 10%, solução salina, secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O material bruto foi ad- sorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título.
Etapa 4: 4,4,5,5-Tetrametil-2-(espiro [4,5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxabo- rolano
[000156] A uma solução agitada de espiro [4,5]dec-7-en-8-il trifluoro- metanossulfonato (635 mg, 2,234 mmoL) em 1,4-dioxano seco (15 mL), bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (567 mg, 2,234 mmol) foi adicionado seguido por acetato de potássio (Acros) (438 mg, 4,47 mmoL) e PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (Alfa Aesar) (54,7 mg, 0,067 mmoL). A mistura de reação foi inundada com nitrogênio e aquecida a 80 °C por 16 horas. A mistura de reação foi resfriada a temperatura ambiente e filtrado através de Celite® e lavado com TBME. O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo particionado entre EtOAc (50 mL) e água (50 mL). A fase orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por croma- tografia eluindo com 0 a 30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título.
Etapa 5: 4-metil-5-(espiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etila
[000157] A um frasco de microondas 2-5 mL contendo uma solução de 4,4,5,5-tetrametil-2-(espiro [4,5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxaborolano (168 mg, 0,641 mmol) em MeCN (2 mL), 5-bromo-4-metilisoxazol-3- carboxilato de etila (Intermediário A) (150 mg, 0,641 mmol) foi adicionado seguido por K2CO3 (266 mg, 1,923 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (Alfa Aesar) (52,3 mg, 0,064 mmol) e água (1 mL). O frasco foi inundado com nitrogênio, selado e tratado em microondas (Iniciador de Biotage Smith) a 90 °C por 1 hora. A mistura de reação foi particionada entre água (20 mL) e EtOAc (20 mL) e a fase orgânica foi lavada com solução salina (20 mL), secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo laranja. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,75 mins; MS m/z [M+H]+ 290,4; Método 2minLowpHv03
Etapa 6: ácido 4-Metil-5-(espiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxílico
[000158] A uma solução agitada de etil-4-metil-5-(espiro [4,5]dec-7- en-8-il)isoxazol-3-carboxilato (180 mg, 0,622 mmol) em etanol (10 mL), NaOH a 2M (aq) (0,311 mL, 0,622 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente. A mistura resultante foi diluída com água (30 mL) e acidificado para pH 5 a 6 pela adição de HCl a 2M (aq). O aquoso foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL) e os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina (20 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,61 mins; MS m/z [M+H]+ 262,3; Método 2minLowpHv03
Etapa 7: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 4-metil-5-(espiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida
[000159] A uma solução agitada de ácido 4-metil-5-(espiro [4,5]dec-7- en-8-il)isoxazol-3-carboxílico (95 mg, 0,364 mmol) em NMP seco (3mL), HATU (152 mg, 0,400 mmol) foi adicionado seguido por 4- amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (84 mg, 0,400 mmol) e trietilamina (0,111 mL, 0,800 mmol) e isto foi agitado a temperatura ambiente por 16 horas. A mistura de reação foi particionada entre EtOAc (30 mL) e NaOH a 1M (aq) (30 mL) e a fase orgânica foi lavada com água (30 mL), solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo laranja. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando Cromatografia de fase reversa automatizada direcionado por UV durante um gradientee de 9,5 minutos 50 a 98% de MeCN em água (0,1% de ácido fórmico). A fração do produto foi adicionado a EtOAc (50 mL) e lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (50 mL). Os extratos orgânicos foram secados sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,59 mins; MS m/z [M+H]+ 453,7; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,21 (1H, br s), 6,19 (1H, mult), 4,00 (1H, tt), 3,25 (3H, s), 2,46-2,40 (2H, br mults), 2,23 (3H, s), 2,14 (3H, s), 2,10-2,05 (2H, mults), 1,99-1,88 (2H, mults), 1,84-1,74 (4H, br mults), 1,66-1,53 (7H, br mults), 1,41-1,35 (4H, br mults), 1,34-1,23 (2H, br mults), 1,21-1,10 (1H, br mult). Exemplo 2,1: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(1 -oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]
Figure img0022
[000160] O composto do título foi preparado por um método similar ao do Exemplo 2 substituindo espiro [4,5]decan-8-ona (etapa 3) com [1- oxaespiro [4,5]decan-8-ona] (Fluoroquímico); LC-MS: Rt = 1,10 mins; MS m/z [M+H]+ 455,5; Método 2minLowpHv01 Exemplo 2,2: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0023
[000161] O composto do título foi preparado por um método similar ao do Exemplo 2 substituindo 4,4,5,5-tetrametil-2-(espiro [4,5]dec-7-en- 8-il)-1,3,2-dioxaborolano (Etapa 5) por ácido 4,4-dimetilciclo-hexen-1-il borônico, pinacol éster (Combi Blocks); LC-MS: Rt = 5,52 mins; MS m/z 427,6 [M+H]+; Método 10minLowpHv01 Exemplo 3: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0024
Etapa 1: 4,4-Dimetilciclopent-1-en-1-il trifluorometanossulfonato
[000162] A uma solução agitada de 4,4-dimetilciclopent-2-enona (Atlantic) (0,500 g, 4,54 mmol) em THF seco (25 mL) sob nitrogênio a - 78 °C, 1M de L-Selectrida em THF (4,539 mL, 4,54 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a -78 °C por 1 hora e tratado com uma solução de 1,1,1-triflúor-N-(piridin-2-il)-N-((trifluorometil)sulfonil) metanossulfonamida (Alfa Aesar) (1,626 g, 4,54 mmol) em THF seco (5 mL). A mistura foi agitada e deixada para aquecer a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi particionada entre hexano (60 mL) e água (50 mL), as fases separadas e a fase aquosa foi extraída com hexano (50 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaOH aquoso a 10% (40 mL), solução salina (40 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo amarelo pálido. O material bruto foi adsorvi- do sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 100% de iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 5,54 (1H, mult), 2,42-2,39 (2H, mult), 2,23-2,20 (2H, mult), 1,17 (3H, s), 1,17 (3H, s).
Etapa 2: 2-(4,4-Dimetilciclopent-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dio- xaborolano
[000163] A uma solução agitada de 4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il tri- fluorometanossulfonato (367 mg, 1,503 mmol) em 1,4-dioxano seco(10 mL) foi adicionado bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (382 mg, 1,503 mmol) seguido por acetato de potássio (Acros) (295 mg, 3,01 mmol) e PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (Alfa Aesar) (36,8 mg, 0,045 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 80 °C e agitada por 16 horas. A mistura resultante foi resfriada a temperatura ambiente e filtrado através de Celite®, lavando com TBME (100 mL). O filtrado orgânico foi lavado com água (50 mL), solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um óleo castanho. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 100% de iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 6,34-6,31 (1H, mult), 2,21-2,18 (2H, mult), 2,17-2,14 (2H, mult), 1,20 (12H, s) 0,99 (6H, s).
Etapa 3: 5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila
[000164] A um frasco de microondas 2-5 mL contendo uma solução de 2-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboro- lano (214 mg, 0,966 mmol) em acetonitrila (2 mL), etil-5-bromo-4-me- tilisoxazol-3-carboxilato (Intermediário A) (226 mg, 0,966 mmol) foi adicionado seguido por K2CO3 (400 mg, 2,90 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (Alfa Aesar) (79 mg, 0,097 mmol) e água (1 mL). O frasco foi inundado com nitrogênio, selado e aquecido em microondas (Iniciador de Biotage Smith) a 90 °C por 1 hora. A mistura resultante foi filtrada através de Celite®, lavando com EtOAc (50 mL). O filtrado foi lavada com água (50 mL), solução salina (50 mL), secado sobre MgSO4, filtrado e concentrado sob pressão reduzida para fornecer um óleo castanho. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 100% de iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,64 mins; MS m/z [M+H]+ 250,9/251,5; Método 2minLowpHv03
Etapa 4: ácido 5-(4,4-Dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-car- boxílico
[000165] A uma solução agitada de etil-5-(4,4-dimetilciclopent-1-en- 1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato (243 mg, 0,975 mmol) em etanol (5 mL), NaOH a 2M (aq) (0,975 mL, 1,949 mmol) foi adicionado e a solução foi agitada a temperatura ambiente. Depois de completada, a mistura de reação foi diluída com água (30 mL) e acidificada para pH 5-6 pela adição de HCl a 2 M (aq). A fase aquosa foi extraída com EtOAc (2 x 20 mL) e os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina (20 mL), secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,46 mins; MS m/z [M+H]+ 222,5; Método 2minLowpHv03.
Etapa 5: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-(4,4-dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000166] A uma solução agitada de ácido 5-(4,4-dimetilciclopent-1- en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (105 mg, 0,475 mmol) em NMP seco (3 mL), HATU (198 mg, 0,522 mmol) foi adicionado seguido por 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (109 mg, 0,522 mmol) e trietilamina (0,146 mL, 1,044 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi particionada entre EtOAc (20 mL) e NaOH a 1M (aq) (20 mL) e a fase orgânica foi lavada com água (20 mL), solução salina (20 mL), secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por croma- tografia eluindo com 0-60% de EtOAc em iso-hexano fornecendo ma- terial bruto. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando cromatografia de fase inversa automatizada dirigida em massa durante um gradientee de 9,5 minutos 40 a 80% de MeCN em água (0,1% de ácido fórmico). A fração do produto foi adicionado a EtOAc (50 mL) e lavada com a solução aquosa saturada de NaHCO3 (50 mL). Os extratos orgânicos foram secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,40mins; MS m/z [M+H]+ 413,1/414,6; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,09 (1H, br s), 6,27 (1H, br t), 4,06 (1H, tt), 3,27 (3H, s), 2,66 (2H, mult), 2,40 (2H, mult), 2,34 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,06-1,95 (2H, br mults), 1,92-1,83 (4H, br mults), 1,75-1,68 (1H, br mult), 1,44-1,31 (2H, br mults), 1,30-1,23 (1H, br mult), 1,19 (6H, s). Exemplo 4: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]
Figure img0025
Etapa 1: 1,4-dioxaespiro [4,5]decano-8-carboxilato de etila
[000167] Uma mistura de 4-oxociclo-hexanecarboxilato de etila(11,7 g, 68,7 mmol), etileno glicol (5,75 mL, 103 mmol) e p-TsOH (0,620 g, 3,26 mmol) em tolueno (60 mL) foi agitada em refluxo usando uma armadilha Dean-Stark para colertar água durante 4 horas. A mistura resultante foi resfriada a temperatura ambiente, saciada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (30 mL) e diluída com EtOAc (100 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secado sobre sulfato de sódio anidroso e filtrado. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer um óleo amarelo. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,14 (2H, q), 3,96 (4H, s), 2,38-2,31 (1H, br mult), 1,99-1,91 (2H, br mults), 1,87-1,76 (4H, br mults), 1,61-1,53 (2H, br mults), 1,26 (3H, t). Etapa 2: Etil-8-(2-(benzilóxi)etil)-1,4-dioxaespiro [4,5]decano-8-carboxilato (8-Alil-1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)metanol (6 g, 28,0 mmol) em THF seco (100 mL) foi adicionado a uma solução pré resfriada de KHMDS (1M em THF) (36,4 mL, 36,4 mmol) em THF (100 mL) a -78 °C sob nitrogênio. A mistura resultante foi agitada a essa temperatura por 2 horas e uma solução de ((2-bromoetóxi)metil)benzeno (5,31 mL, 33,6 mmol) em THF (100 mL) foi adicionada. A mistura de reação foi deixada para aquecer a temperatura ambiente e agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi saciada com solução aquosa saturada de cloreto de amônio e EtOAc foi adicionado. Os extratos orgânicos foram secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 40% de EtOAc em iso-hexano fornecendo material bruto. O material bruto foi novamente adsorbido em sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 20% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,36-7,31 (2H, mults), 7,30-7,26 (3H, mults), 4,39 (2H, s), 4,01 (2H, q), 3,84 (4H, s), 3,40 (2H, t), 2,05-1,98 (2H, br mults), 1,78 (2H, t), 1,61-1,54 (2H, br mults), 1,49-1,41 (4H, br mults), 1,12 (3H, t). Etapa 3: [1,4, 10-Trioxadispiro [4,2,4. 2] tetradecan-9-ona]
[000168] [8-(2-(benzilóxi)etil)-1,4-dioxaespiro [4,5]decano-8-carboxila- to de Etila] (1,6 g, 4,59 mmol) em etanol (5 mL) foi desgaseificado completamente recarregando com nitrogênio. Pd-C (0,147 g, 1,378 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada sob uma atmosfera de hi- drogênio. Após completada a mistura de reação foi filtrada através de um cartucho de Celite® , eluindo com EtOH. O filtrado foi coletado e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,29 (2H, t), 3,97 (4H, mult), 2,19 (2H, t), 2,08-1,99 (2H, br mults), 1,97-1,89 (2H, br mults), 1,71-1,56 (4H, br mults).
Etapa 5: [1,4, 10-Trioxadiespiro [4,2,4. 2]tetradecan-9-ol]
[000169] 1, 4, 10-Trioxadiespiro [4,2,4. 2] tetradecan-9-ona (880 mg, 4,15 mmol) em tolueno (30 mL), sob nitrogênio, foi resfriado a -78 °C e tratado com DIBAL-H a 1 M (1M em tolueno) (4,56 mL, 4,56 mmol). A mistura de reação foi agitada a -78 °C por 2 horas. A mistura resultante foi tratada com solução aquosa de ácido acético a 10% (18 mL)/ gelo 60 g) e agitada por 5 minutos com clorofórmio (150 mL). O aquoso foi separado e extraído com clorofórmio (x3) e os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrado. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 5,13 (1H, s), 4,11 (1H, mult), 3,97 (4H, mult), 3,93 (1H, mult), 2,12 (1H, s), 1,95-1,77 (3H, br mults), 1,76-1,60 (6H, br mults), 1,58-1,49 (1H, br mults).
Etapa 6: [1,4,10-Trioxadispiro [4,2,4,2]tetradecano]
[000170] A uma solução agitada de trietilsilano (1,965 mL, 12,30 mmol) em DCM (40 mL), sob nitrogênio, a -78°C foi sucessivamente adicionado ácido trifluoroacético (0,948 mL, 12,30 mmol) e [1,4,10-trio- xadiespiro [4,2,4,2]tetradecan-9-ol] (0,878 g, 4,1 mmol) em DCM (40 mL) a -78 °C. A mistura resultante foi lentamente aquecida até 0 °C e agitada por 2 horas. Solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título.
Etapa 7: [2-Oxaespiro [4,5]decan-8-ona]
[000171] Uma solução agitada de 1,4,10-rioxadiespiro [4,2,4,2] tetra- decano(813 mg, 4,1 mmol) em acetona (28 mL) a temperatura ambiente foi tratada com uma solução aquosa de HCl a 10% (12,46 mL, 41,0 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 1 hora. A mistura resultante foi diluída com solução salina (40 mL) e extraída com EtOAc (3 x 30 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução aquosa saturada de NaHCO3 (2 x 30 mL) e solução salina (1 x 30 mL), secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvi- do sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,96 (2H, t), 3,70 (2H, s), 2,45-2,36 (4H, br mults), 1,95-1,89 (6H, mults).
Etapa 8: [2-Oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il trifluorometanossulfonato]
[000172] Uma solução de diisopropilamina (0,407 mL, 2,85 mmol) em THF (25 mL), sob nitrogênio, foi resfriada a -78 °C e tratada com n- BuLi (1,0 M em hexanos) (1,702 mL, 2,72 mmol). A mistura de reação foi aquecida a 0 °C durante 30 minutos e resfriada a -78 °C antes de adicionar 2-oxaespiro [4,5]decan-8-ona (400 mg, 2,59 mmol) em THF (25 mL). Após 1,5 horas a -78 °C a mistura de reação foi tratada com 1,1,1-triflúor-N-(piridin-2-il)-N-((trifluorometil)sulfonil)metanossulfonami- da (1208 mg, 3,37 mmol) em THF (10 mL) e deixada para aquecer a temperatura ambiente durante a noite. Solução aquosa saturada de NaHCO3 foi adicionada seguido por diluição com EtOAc. A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 25% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 5,77 (1H, t), 3,92 (2H, t), 3,56 (2H, mult), 2,46-2,29 (2H, br mult), 2,25-2,22 (2H, br mult), 1,83-1,76 (4H, br mults).
Etapa 9: [4,4,5,5-Tetrametil-2-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)-1,3,2- dioxaborolano]
[000173] [trifluorometanossulfonato de 2-Oxaespiro [4,5]dec-7-en-8- ila] (270 mg, 0,943 mmol) e 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2- dioxaborolano) (251 mg, 0,990 mmol) em dioxano (5 mL) foram tratados com acetato de potássio (185 mg, 1,886 mmol) e a mistura foi desgaseificado completamente recarregando com nitrogênio. PdCl2 (dppf).CH2Cl2 aduzido (23,11 mg, 0,028 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 80 °C por 16 horas. A mistura de reação bruta foi adsorvida sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 15% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 6,54 (1H, mult), 3,88 (2H, t), 3,52 (2H, mult), 2,24-2,18 (2H, br mults), 2,15-2,12 (2H, br mults), 1,76-1,68 (2H, br mults), 1,62-1,57 (2H, br mults), 1,28 (12H, s).
Etapa 10: [4-metil-5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxi- lato de etila]
[000174] [4,4,5,5-tetrametil-2-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)-1,3,2- dioxaborolano] (0,172 g, 0,651 mmol), 5-bromo-4-metilisoxazol-3-car- boxilato de etila (Intermediário A) (0,183 g, 0,781 mmol) e Cs2CO3 (0,849 g, 2,60 mmol) foram combinado em DME (3 mL) e água (1,250 mL). PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (0,016 g, 0,020 mmol) foi adicionado e a mistura foi desgaseificada completamente recarregando com nitrogênio. A mistura foi agitada no microondas a 90 oC por 1 hora. A mistura de reação bifásica foi separada e a fase orgânica foi adsorvida sobre sílica. Purificação por cromatografia eluindo com um gradientee de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 6,27 (1H, mult), 4,42 (2H, q), 3,91(2H, t), 3,56 (2H, mult), 2,56-2,51 (2H, br mults), 2,31-2,27 (2H, br mults), 2,28 (3H, s), 1,83-1,72 (4H, br mults), 1,41 (3H, t).
Etapa 11: [ácido 4-Metil-5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3- carboxílico]
[000175] [4-metil-5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3- carboxilato de etila] (170 mg, 0,584 mmol) em MeOH (3,60 mL) e THF (6 mL) foi tratado a temperatura ambiente com NaOH a 2M (aq) (0,584 mL, 1,167 mmol). A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente e tratada com HCl a 2 M (aq) (0,2 mL) e EtOAc. As camadas orgânica combinadas foram secadas sobre MgSO4 e filtradas e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 0,61mins; MS m/z [M+H]+ 264,4; Método 2minHighpHv03
Etapa 12: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4- il)-4-metil-5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]
[000176] Uma solução de [ácido 4-metil-5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en- 8-il)isoxazol-3-carboxílico] (40 mg, 0,152 mmol) em DMF (3 mL) foi tratada com 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (In termediário D) (38,2 mg, 0,182 mmol), DIPEA (0,106 mL, 0,608 mmol) e HATU (75 mg, 0,198 mmol). A mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 16 horas. Água foi adicionada à mistura e o aquoso foi extraído com EtOAc (x2). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com 0,5M cloreto de lítio (aq), secado sobre MgSO4, filtrado e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia elu- indo com 0 a 5% de MeOH em EtOAc forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,19 mins; MS m/z [M+H]+ 455,5; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,31 (1H, s), 6,23 (1H, mult), 4,01 (1H, tt), 3,88 (2H, t), 3,53 (2H, s), 3,26 (3H, s), 2,51-2,44 (2H, br mults), 2,282,25 (2H, mults), 2,23 (3H, s), 2,14 (3H, s), 1,98-1,87 (2H, br mults), 1,81-1,70 (8H, mults), 1,65-1,58 (1H, br mult), 1,38-1,33 (1H, br mult), 1,31-1,25 (1H, br mult), 1,18-1,05 (1H br mult). Exemplo 5: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
Figure img0026
Etapa 1: 1,4-Dioxaespiro [4,5]decan-8-ol
[000177] A uma solução agitada de 1,4-ciclo-hexadiona monoetileno acetal (Aldrich) (2 g, 12,81 mmol) em MeOH seco (30 mL) a 0 °C, NaBH4 (0,727 g, 19,21 mmol) foi adicionado em porções, mantendo a temperatura abaixo de 5 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C por 15 minutos e a temperatura ambiente por 2 horas. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 3,96 (4H, s), 3,86-3,78 (1H, br mult), 1,94-1,79 (4H, br mults), 1,73-1,76 (4H, br mults), 1,43 (1H, br s). Etapa 2: 8-Isopropóxi-1,4-dioxaespiro [4,5]decano
[000178] A uma solução agitada de 1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-ol (0,5 g, 3,16 mmol) em 2-iodopropano (5,37 g, 31,6 mmol), óxido de prata (I) (1,392 g, 6,01 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente. Após conclusão a suspenção resultante foi diluída com EtOAc e a suspenção filtrada sob pressão reduzida. O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo amarelo pálido. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 30% de EtOAc em isohexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,84 (4H, s), 3,63 (1H, mult), 3,44 (1H, mult), 1,72-1,62 (4H, br mults), 1,53-1,42 (4H, br mults), 1,06 (3H, s), 1,05 (3H, s).
Etapa 3: 4-Isopropoxiciclo-hexanona
[000179] A uma solução agitada de 8-isopropóxi-1,4-dioxaespiro [4,5]decano (0,464 g, 2,317 mmol) em THF (2 mL) e água (2 mL), p- TsOH (0,080 g, 0,463 mmol) foi adicionado. A mistura foi aquecida a 100 °C durante a noite. A mistura resultante foi deixada para resfriar a temperatura ambiente e particionada entre EtOAc (30 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4 e filtrado. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,78 (1H, mult), 3,73 (1H, mult), 2,402,31 (2H, br mults), 2,27-2,18 (2H, br mults), 1,96-1,87 (2H, br mults), 1,85-1,75 (2H, br mults), 1,12 (3H, s), 1,11 (3H, s).
Etapa 4: [4-Isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il trifluorometanossulfonato]
[000180] 1,6M nBuLi em hexano (Aldrich) (1,285 mL, 2,057 mmol) foi adicionado a uma solução de diisopropilamina (Acros) (0,307 mL, 2,155 mmol) em THF seco (30 mL) sob nitrogênio a -78 °C. A solução foi deixada aquecer até 0 °C por 30 minutos antes de voltar a resfriar a -78 °C. Uma solução de 4-isopropoxiciclo-hexanona (306 mg, 1,959 mmol) em THF seco (5 mL) foi adicionado durante 5 minutos e a mistura foi agitada a -78 °C por 1 hora antes de adicionar uma solução de 2- [N,N-bis(trifluorometilsulfonil)amino]piridina (Alfa Aesar) (772 mg, 2,155 mmol) em THF seco (5 mL). A mistura foi agitada e deixada para aquecer a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi saciada com uma solução aquosa saturada d NaHCO3 (30 mL) e o aquoso foi extraído com TBME (2 x 20 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaOH aquoso a 10 %(30 mL), solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pres- são reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 10% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 5,76 (1H, mult), 3,72-3,63 (2H, mults), 2,44-2,30 (3H, br mults), 2,14-2,06 (1H, mult), 1,86-1,73 (2H, br mults), 1,09-1,04 (6H, mults).
Etapa 5: [2-(4-Isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolano]
[000181] A uma solução agitada de [4-isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il trifluorometanossulfonato] (459 mg, 1,592 mmol) em dioxano seco (15 mL), bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (404 mg, 1,592 mmol) foi adici-onado seguido por acetato de potássio (Acros) (313 mg, 3,18 mmol) e PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (Alfa Aesar) (39,0 mg, 0,048 mmol). O frasco foi inundado com nitrogênio e aquecido a 80 °C durante a noite. A mistura resultante foi resfriada a temperatura ambiente e filtrado através de Celite®, foi lavado com TBME. O filtrado orgânico foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo particionado entre EtOAc (50 mL) e água (50 mL). A fase orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título.
Etapa 6: [Etil-5-(4-isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3- carboxilato]
[000182] A um frasco de microondas 2-5 mL contendo uma solução de [2-(4-isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano] (375 mg, 1,410 mmol) em acetonitrila (2 mL), etil-5-bromo-4-metiliso- xazol-3-carboxilato (Intermediário A) (330 mg, 1,410 mmol) foi adicionado seguido por K2CO3 (585 mg, 4,23 mmol), PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (11,51 mg, 0,014 mmol) e água (2 mL). O frasco foi inundado com nitro- gênio e tratado no microondas (Iniciador de Biotage Smith) a 80 °C por 90 minutos. A mistura de reação foi particionada entre água (30 mL) e EtOAc (30 mL). A fase orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secada sobre MgSO4, filtrada através de almofada de Celite® e o filtrado foi concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsor- vido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 60% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,33 minutos; MS m/z [M+H]+ 294,4; Método 2minLowpHv01
Etapa 7: [ ácido 5-(4-Isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3- carboxílico]
[000183] A uma solução agitada de [etil-5-(4-isopropoxiciclo-hex-1- en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato] (393 mg, 1,340 mmol) em THF (3 mL) e Etanol (3 mL), NaOH a 2M (aq) (4,179 mL, 8,36 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente. Após conclusão a mistura resultante foi vertida em água (20 mL) e o pH ajustado para pH 6 com a adição de HCl a 1 M(aq). O aquoso foi extraído com EtOAc (30 mL) e os extratos orgânicos foram lavados com solução salina (20 mL), secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,13 minutos; MS m/z [M+H]+ 266,1; Método 2minLowpHv01
Etapa 8: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-(4-isopropoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
[000184] A uma solução agitada de ácido 5-(4-isopropoxiciclo-hex-1- en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (174 mg, 0,656 mmol) em NMP seco (3 mL), HATU (274 mg, 0,721 mmol) foi adicionado seguido por 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (151 mg, 0,721 mmol) e trietilamina (0,201 mL, 1,443 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi particionada entre EtOAc (20 mL) e NaOH a 1M (aq) (20 mL) e a fase orgânica foi lavada com água (30 mL), solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando uma cromatografia de fase reversa direcionado por UV com um gradientee de 40-80% de MeCN em água (0,1% de ácido fórmico) durante 9,5 minutos. A fração do produto foi adicionado a EtOAc (50 mL) e lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (50 mL). A fase orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,19 minutos; MS m/z [M+H]+ 457,3; Método 2minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,47 (1H, s), 6,27 (1H, mult), 3,91 (1H, mult), 3,75 (1H, mult), 3,75-3,67 (1H, br mult), 3,22 (3H, s), 2,582,40 (4H, br mults), 2,19 (3H, s), 2,19-2,09 (1H, br mults), 2,06-2,01 (4H, mults), 1,99 (1H, mult), 1,96-1,86 (1H, br mult), 1,82-1,74 (2H, br mults), 1,72-1,58 (4H, br mults), 1,38-1,24 (2H, br mults), 1,11-1,07 (6H, mults). Exemplo 6: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hexil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0027
[000185] Uma solução de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxamida (Exemplo 2,2) (40 mg, 0,094 mmol) em etanol (20 mL) foi inundada com nitrogênio e tratada com 10% de Pd-C, 50% de umi- dade (Alfa Aesar, 38303) (14,97 mg, 0,141 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogênio por 3 horas. A mistura resultante foi filtrada através de Celite®, lavando com etanol seguido por DCM. O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi passado através de um cartucho de 500 mg de sílica-TMT, eluindo com etanol: éter (1:1). O filtrado foi coletado e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS; Rt = 1,33 minutos; MS m/z [M+H]+ 429,5; Método 2minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,40 (1H, s), 3,92 (1H, tt), 3,21 (3H, s), 2,84 (1H, mult), 2,07 (3H, s), 2,02 (3H, s), 2,03-1,95 (2H, mults), 1,82-1,58 (9H, mults), 1,50-1,43 (2H, mults), 1,37-1,22 (5H, mults), 0,97 (3H, s), 0,95 (3H, s). Exemplo 6,1: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3- dimetilciclopentil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
Figure img0028
[000186] O composto do título foi preparado por um método similar ao do Exemplo 6 substituindo N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxamida (Exemplo 2,2) (Etapa 1) com N-(2-ciclo-hexil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-dimetilciclopent-1-en- 1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (Exemplo 3). LC-MS: Rt = 1,46 mins; MS m/z [M+H]+ 415,1/416,4; Método 2minLowpHv03 Exemplo 7: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3- dimetilbutil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0029
Etapa 1: 5-(3,3-dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila
[000187] 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (Intermediário A) (100 mg, 0,427 mmol) e 3,3-dimetilbut-1-ina (0,058 mL, 0,470 mmol) em acetonitrila (3 mL) foram desgaseificados completamente recarregando com nitrogênio. Diciclo-hexilamina (0,085 mL, 0,427 mmol), CuI (2,85 mg, 0,015 mmol) e PdCl2(PPh3)2 (7,50 mg, 10,68 μmol) foram adicionados. A mistura foi agitada no microondas a 100 oC por 45 minutos. A mistura resultante foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-10% de EtOAc em isohexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,53 mins; MS m/z [M+H]+ 236,4; Método 2minLowpHv03 Etapa 2: ácido 5-(3,3-Dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico
[000188] 5-(3,3-dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (101 mg, 0,429 mmol) em THF (3 mL) e MeOH (1,800 mL) foi tratado a temperatura ambiente com NaOH a 2M (aq) (0,429 mL, 0,859 mmol) por 1 hora. HCl a 2 M (aq) (0,6 mL) e água foram adicionados e o aquoso foi extraído com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 14,07 (1H, br s), 2,14 (3H, s), 1,33 (9H, s).
Etapa 3: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-(3,3-dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000189] 5-(3,3-Dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico acid (85 mg, 0,410 mmol) e 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol- 3(2H)-ona (Intermediário D) (86 mg, 0,410 mmol) em DMF (2 mL) foram tratados com DIPEA (0,287 mL, 1,641 mmol) e HATU (172 mg, 0,451 mmol) a temperatura ambiente e agitado por 16 horas. A mistura resultante foi diluída com água e extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com uma solução de cloreto de lítio a 0,5 M (aq), secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em isohexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,42 mins; MS m/z [M+H]+ 399,7; Método 2minLowpHv03
Etapa 4: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-(3,3-dimetilbutil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000190] N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4- il)-5-(3,3-dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (30 mg, 0,075 mmol) em etanol (5 mL) foi desgaseificado completamente re-carregando com nitrogênio e Pd-C (16,02 mg, 7,53 μmol) foi adicionado. A mistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio. Após conclusão a mistura de reação foi filtrada através de Celite® e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtO- Ac em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,37 mins; MS m/z [M+H]+ 403,1/404,4; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,97 (1H, br s), 4,04 (1H, tt), 3,24 (3H, s), 2,72-2,66 (2H, mult), 2,19 (3H, s), 2,16 (3H, s), 2,04-1,92 (2H, br mults), 1,90-1,81 (4H, br mults), 1,70 (1H, br mult), 1,60-1,54 (2H, mult), 1,43-1,29 (2H, br mults), 1,27-1,18 (1H, br mult), 0,96 (9H, s). Exemplo 8: (Z)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5- (3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0030
Etapa 1: (Z)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol- 4-il)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000191] N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4- il)-5-(3,3-dimetilbut-1-in-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (Exemplo 7, Etapa 3) (30 mg, 0,075 mmol) em EtOAc (3 mL) foi tratado com 2,2'- (etano-1,2-diilbis(sulfanediil))dietanol (13,72 mg, 0,075 mmol) e Pd- Sulfato de bário a 5% (16,02 mg, 7,53 μmol). A mistura foi desgaseifi- cada, completamente racarregada com nitrogênio e a mistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio a temperatura ambiente durante a noite. Mais Pd-Sulfato de bário a 5% (16,02 mg, 7,53 μmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogênio por 16 horas. A mistura resultante foi filtrada através de Celite® eluindo com EtOAc e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em isohexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt =1,35 mins; MS m/z [M+H]+ 401,2; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,94 (1H, br s), 6,00 (1H, d, J = 12,9 Hz), 5,91 (1H, d, J = 12,9 Hz), 4,01-3,92 (1H, tt), 3,16 (3H, s), 2,13 (3H, s), 2,09 (3H, s), 1,96-1,84 (2H, br mults), 1,82-1,74 (4H, br mults), 1,62 (1H, br mult), 1,34-1,23 (2H, mult), 1,19-1,10 (1H, br mult), 1,05 (9H, s). Exemplo 9: (E)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5- (3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0031
Etapa 1: (E)-Tributil(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)estanano
[000192] Hidreto de Tributilestanho (1,637 mL, 6,09 mmol) foi adicionado gota a gota a uma solução de 3,3-dimetilbut-1-ina (500 mg, 6,09 mmol) e Pd(Ph3P)4 (70 mg, 0,06 mmol) em THF (4 mL) a 0 °C no escuro. Após 30 minutos de agitamento a mistura de reação foi aquecida a temperatura ambiente e foi agitada por 16 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 100% de iso-hexano forneceu o composto do título. Etapa 2: 5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de (E)-Etila
[000193] (E)-Tributil(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)estanano (1194 mg, 0,8 mmol) e 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (Intermediário A) (187 mg, 0,8 mmol) foram dissolvidos em dioxano (6 mL) e a mistura foi desgaseificada completamente, recarregada com nitrogênio. Pd(Ph3P)4 (92 mg, 0,080 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 100 °C por 16 horas. A mistura de reação bruta foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 10% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 6,64 (1H, d, J = 17 Hz), 6,19 (1H, d, J = 17 Hz), 2,23 (3H, s), 1,45 (3H, t), 1,16 (9H, s).
Etapa 3: ácido (E)-5-(3,3-Dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carbo- xílico
[000194] 5-(3,3-imetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de (E)-Etila (160 mg, 0,674 mmol) em THF (3 mL) e MeOH (1,8 mL) foi tratada com NaOH a 2M (aq) (1,349 mL, 2,70 mmol) e agitada a tem-peratura ambiente por 2 horas. A mistura resultante foi tratada com HCl a 2 M (aq) e extraído com acetato de etila (x3). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título.
Etapa 4: (E)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol- 4-il)-5-(3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000195] Ácido (E)-5-(3,3-Dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3- carboxílico (102 mg, 0,487 mmol) e 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil- 1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (112 mg, 0,536 mmol) em DMF (2 mL) foram tratados com DIPEA (0,341 mL, 1,950 mmol) e HATU (222 mg, 0,585 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. A mistura resultante foi tratada com água e extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com 0,5 M de LiCl (aq), secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtO- Ac em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,41 mins; MS m/z [M+H]+ 401,0/402,5; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ 6,64 (1H, d, J = 17 Hz), 6,33 (1H, d, J = 17 Hz), 4,16 (1H, tt), 3,36 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,20-2,09 (2H, br mults), 2,17 (3H, s), 1,95-1,82 (4H, br mults), 1,76-1,69 (1H, br mult), 1,50-1,38 (2H, br mults), 1,35-1,25 (1H, br mult), 1,18 (9H, s). Exemplo 10: 5-Ciclo-hexil-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol- 4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0032
Etapa 1: ácido 5-Bromo-4-metilisoxazol-3-carboxílico
[000196] A uma solução de etil-5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato (Intermediário A) (8,65 g, 37,0 mmol) em MeOH (100 mL) foi adicionado NaOH a 2M (aq) (18,48 mL, 37,0 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 10 minutos e a mistura resultante foi acidificada usando HCl a 1 M(aq) e concentrada sobre pressão reduzida para remover MeOH. O aquoso foi diluído com água e extraído com EtOAc (x3) e os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 0,82 mins; MS m/z [M+H]+ 206,0; Método 2minLowpH
Etapa 2: 5-Bromo-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000197] Uma solução de DMF (5,33 mL, 68,8 mmol) em DCM (200 mL) foi resfriada a 0 °C e tratada com cloreto de oxalila (3,31 mL, 37,9 mmol). Ácido 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxílico (7,09 g, 34,4 mmol) foi adicionado e agitado sobre resfriamento em gelo por 10 minutos. 4-Amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (7,92 g, 37,9 mmol) e trietilamina (14,39 mL, 103 mmol) foram adicionados a 0 °C e a mistura agitada a essa temperatura por 30 minutos. A mistura resultante foi diluída com DCM e lavada com uma solução saturada de NaHCO3 (aq). A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia elu- indo com 100% de TBME forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 0,93mins; MS m/z [M+H]+ 397,2/400,2; Método 2minLowpH
Etapa 3: 5-Ciclo-hexil-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000198] Ao 5-bromo-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (75 mg, 0,189 mmol) foi adicionado brometo de ciclo-hexilzinco(II) (0,5M em THF) (1133 μL, 0,566 mmol) e bis(tri-t-butilfosfino)paládio(0) (9,65 mg, 0,019 mmol) e a mistura foi agitada a100 °C no microondas por 30 minutos. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e filtrada e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em isohexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,12 mins; MS m/z [M+H]+ 401,0/402,4; Método 2minLowpH 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,40 (1H, s), 3,90 (1H, m), 3,20 (3H, s), 2,90 (1H, m), 2,05 (3H, s), 2,00 (3H, s), 2,80-1,00 (20H, m). Exemplo 11: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0033
Etapa 1: 1,4-Dioxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il trifluorometanossulfonato
[000199] Uma solução agitada de 1,4-ciclo-hexadiona monoetileno acetal (Aldrich) (2 g, 12,81 mmol) em THF seco (30 mL) sob nitrogênio foi resfriada a -70 °C e LDA a 0,6M (in heptano/THF/ etilbenzeno) (25,6 mL, 15,37 mmol) foi adicionado gota a gota mantendo a tempe- ratura abaixo de -65 °C. A mistura de reação foi agitada por 20 minutos a -70 °C antes de tratar gota a gota com uma solução de 2- [N,N- bis(trifluorometilsulfonil)amino]piridina (Alfa Aesar) (5,05 g, 14,09 mmol) em THF seco (10 mL) durante 30 minutos, garantindo que a temperatura não exceda -65 °C. A mistura de reação foi agitada a -70 °C por 1 hora antes de deixar para aquecer a temperatura ambiente gradualmente e foi agitada durante a noite. A mistura resultante foi saciada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (100 mL) e extraído com TBME (2 x 150 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com NaOH a 10% (aq) (100 mL), solução salina (100 mL), secado sobre MgSO4, filtrados e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-10% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 5,80 (1H, mult), 3,91 (4H, mult), 2,512,49 (2H, mult), 2,49-2,43 (2H, br mults), 2,37-2,34 (2H, br mults), 1,86-1,81 (2H, mults).
Etapa 2: 4,4,5,5-Tetrametil-2-(1,4-dioxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)-1,3,2- dioxaborolano
[000200] A uma solução agitada de 1,4-dioxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il trifluorometanossulfonato (1,19 g, 4,13 mmol) em dioxano seco (15 mL), bis(pinacolato)diboro (Alfa Aesar) (1,048 g, 4,13 mmol) foi adicionado se-guido por acetato de potássio (Acros) (0,810 g, 8,26 mmol) e PdCl2(dppf).CH2Cl2 aduzido (Alfa Aesar) (0,101 g, 0,124 mmol). A mistura de reação foi inundada com nitrogênio e agitada a 80 °C durante a noite. A mistura resultante foi resfriada a temperatura ambiente e filtrado através de Celite®, lavando com TBME. O filtrado orgânico foi concentrada sob pressão reduzida e particionado entre EtOAc (50 mL) e água (50 mL). A fase orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título.
Etapa 3: Etil-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3- carboxilato
[000201] A um frasco de microondas 2-5 mL contendo uma solução de 4,4,5,5-tetrametil-2-(1,4-dioxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioxa- borolano (586 mg, 2,200 mmol) em acetonitrila (2 mL) foi adicionado 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (Intermediário D) (515 mg, 2,200 mmol) seguido por K2CO3 (912 mg, 6,60 mmol), PdCl2 (dppf).CH2Cl2 aduzido (17,97 mg, 0,022 mmol), e água (0,667 mL). O frasco foi inundado com nitrogênio e agitado no microondas (Iniciador de Biotage Smith) a 80 °C por 1 hora e a 100 °C por 30 minutos. A mistura resultante foi particionada entre água (30 mL) e EtOAc (30 mL). A fase orgânica foi lavada com solução salina (30 mL), secado sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo laranja. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-40% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 6,26 (1H, mult), 4,37 (2H, q), 3,93 (4H, s), 2,62-2,56 (2H, br mults), 2,47-2,43 (2H, mults), 2,23 (3H, s), 1,82 (2H, mult), 1,23 (3H, t).
Etapa 4: 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxi- lato de etila
[000202] Uma solução de 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]dec-7-en-8- il)isoxazol-3-carboxilato de etila (556 mg, 1,896 mmol) em etanol (20 mL) foi inundada com nitrogênio e em seguida tratado com Pd-C a 10%, 50% de umidade (Alfa Aesar, 38303) (303 mg, 2,84 mmol). A mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi filtrada através de Celite®, lavando com etanol e DCM. O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi passado através de um catucho de 500 mg de sílica-TMT, eluindo com etanol: éter (1:1). O solvente foi re-movido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,11 mins; MS m/z [M+H]+ 296,2; Método 2minLowpHv01
Etapa 5: ácido 4-Metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3- carboxílico
[000203] A uma solução agitada de 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5] decan-8-il)isoxazol-3-carboxilato de etila (558 mg, 1,889 mmol) em THF (5 mL), NaOH a 2M (aq) (4,179 mL, 8,36 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 15 minutos. A mistura resultante foi vertida em água (20 mL) e o pH ajustado para pH 5 a 6 pela adição de HCl a 1M. O aquoso foi extraído com EtOAc (30 mL) e os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina (20 mL), secado sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 0,89 minutos; MS m/z [M+H]+ 268,2; Método 2minLowpHv01
Etapa 6: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida
[000204] A uma solução agitada de ácido 4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxílico (239 mg, 0,894 mmol) em NMP seco (3 mL), HATU (374 mg, 0,984 mmol) foi adicionado seguido por 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (206 mg, 0,984 mmol) e trietilamina (0,274 mL, 1,967 mmol). A mistura foi agitada a temperatura ambiente por 16 horas. A mistura resultante foi particionada entre EtOAc (20 mL) e NaOH a 1M (20 mL). A fase orgânica foi lavada com água (30 mL), solução salina (30 mL), secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-2% MeOH em DCM fornecendo material bruto. O material isolado foi dissolvido em DMSO (2 mL) e triturado com água (30 mL). A suspenção resultante foi filtrada sob pressão reduzida e o sólido foi lavado com água (20 mL) e deixado para secar sob vácuo para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 0,96 minutos; MS m/z [M+H]+ 459,5: Método 2minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,41 (1H, s), 3,96-3,86 (5H, mults), 3,21 (3H, s), 3,02 (1H, mult), 2,07 (3H, s), 2,05-1,92 (2H, br mults), 2,02 (3H, s), 1,84-1,72 (8H, br mults), 1,70-1,57 (5H, br mults), 1,381,23 (2H, br mults), 1,22-1,11 (1H, br mult).
Exemplo 12:
[000205] Uma mistura de 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra- hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2R,4R,6S)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0034
e Etapa 1: 5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de Etila
Figure img0035
[000206] A uma solução de etil-5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato (Intermediário C) (350 mg, 1,911 mmol) em DCM (19 mL) foi adicionado aliltrimetilsilano (276 μL, 1,911 mmol) e a mistura foi resfriada a -78 oC. Uma solução de trifluoreto de boro éterato (278 μL, 2,198 mmol) em DCM (5 mL) foi resfriada a -78 oC e adicionado à mistura de reação durante 5 min. A mistura de reação foi agitada por 15 minutos e trietila- mina (266 μL, 1,911 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi mantida a -78 oC por 15 minutos e deixada para aquecer a temperatura ambiente. A mistura resultante foi saciada pela adição de uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (10 mL) e extraído com DCM (2 x 10 mL). Os extratos orgânicos combinados foram passados através de um cartucho separador de fase e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-40% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,06 mins; MS m/z [M+H]+ 225,8/226,4; Método 2minLowpHv03 Etapa 2: 2a: Uma mistura racêmica de 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4- metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato e 5-((2R, 4R,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxilato de etila
Figure img0036
e e 2b: Uma mistura racêmica de 5-((2S,4R,6S)-6-(terc-butil)- 4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2R,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxilato de etila
Figure img0037
[000207] A uma solução de 5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxilato de etila (140 mg, 0,622 mmol) em DCM (6,2 mL) foi adicionado pivalaldeído (67,5 μL, 0,622 mmol). TMSOTf (112 μL, 0,622 mmol) foi adicionado gota a gota e a mistura de reação foi agitada por 1 hora a temperatura ambiente. MeOH (2 mL) foi adicionado e a mistura resultante foi particionada entre água (5 mL) e DCM, camadas separada e aquoso extraído com DCM (2 x 5 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre Na2SO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-50% de EtOAc em isohexano forneceu o composto do títulos; 2a: Uma mistura racêmica de 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4- metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2R,4R,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxilato de etila LC-MS: Rt = 1,64 mins; MS m/z [M+H]+ 326,6; Método 2minLowpHv03 2b: Uma mistura racêmica de 5-((2S,4R,6S)-6-(terc-butil)-4- metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2R,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metili- soxazol-3-carboxilato de etila LC-MS: Rt = 1,54 mins; MS m/z [M+H]+ 326,6; Método 2minLowpHv03 Etapa 3: Uma mistura racêmica de ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4- metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5- ((2R,4R,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxílico
Figure img0038
[000208] A uma solução de uma mistura racêmica de 2a: 5-((2S, 4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxilato de etila e 5-((2R,4R,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro- 2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (9 mg, 0,028 mmol) em MeOH (0,45 mL) e THF (0,75 mL), NaOH a 2M (aq) (59,9 μL, 0,120 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um resíduo que foi diluído com NaOH a 2M (aq) (5 mL) e lavado com DCM (5 mL). A camada aquosa doi acidificada com HCl a 2 M (aq) (8 mL) e extraído com DCM (3 x 5 mL). Os extratos orgânicos combinados foram passados através de um cartucho separador de fase e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer uma mistura racêmica de ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxílico; LC-MS: Rt = 1,44mins; MS m/z [M+H]+ 298,5; Método 2minLowpHv03 Etapa 4: Mistura racêmica de 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxi- tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2R,4R,6S)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000209] A uma solução de uma mistura racêmica de ácido 5-((2S, 4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxílico e ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro- 2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (9 mg, 0,030 mmol) em NMP (0,3 mL), HATU (12,66 mg, 0,033 mmol) foi adicionado, seguido por 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (6,33 mg, 0,030 mmol) e EtsN (8,39 μL, 0,061 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi particionada entre EtOAc (10 mL) e uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (10 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina (10 mL), secada sobre MgSO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-10% MeOH em DCM forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 4,57 mins; MS m/z [M+H]+ 489,3; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,06 (1H, br s), 4,98 (1H, dd), 4,06 (1H, tt), 3,82 (1H, mult), 3,50 (1H, dd), 3,40 (3H, s), 3,26 (3H, s), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,14-2,07 (1H, mults), 2,05-1,82 (8H, br mults), 1,71 (1H, br mult), 1,51 (1H, mult), 1,43-1,29 (2H, br mults), 1,29-1,17 (1H, br mult), 0,92 (9H, s). Exemplo 13:
[000210] Uma mistura de 5-((2S,4R,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra- hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2R,4S,6S)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0039
[000211] Exemplo 13 foi preparado por um similar método ao do Exemplo 12 substituindo 2a com 2b na etapa 3; LC-MS: Rt = 4,40mins; MS m/z [M+H]+ 489,4; Método 8minLowpHv01 Exemplo 13a: 5-((2S,4R,6R)-6-(terc-Butil)-4-metoxitetra-hidro-2H- piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 4-metilisoxazol-3-carboxamida ou 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-meto- xitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro -1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e Exemplo 13b: 5-((2S, 4R,6R)-6-(terc-Butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil- 1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carbo- xamida ou5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il) -N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metili- soxazol-3-carboxamida
Figure img0040
[000212] A separação quiral do Exemplo 13 utilizando cromatografia com fluido supercrítico proporcionou os enantiómeros individuais: DETALHES DO MÉTODO: Coluna: Chiralcel OD-H 250 x 10 mm, 5um @ 35degC Fase móvel: 35% Isopropanol + 0,1% v/v DEA/65% CO2 Fluxo: 10 mL/min Detecção: UV @ 220 nm Instrumento: Berger Minigram SFC1 Exemplo 13a: 5-((2S,4R,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran- 2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida ou 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-meto- xitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida SFC Tempo de retenção = 4,86 mins LCMS: Rt 1,42 mins MS m/z [M+H]+ 489,5; Método 2minLowpHv03 Exemplo 13b: 5-((2S,4R,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran- 2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida ou 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxite- tra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida SFC Tempo de retenção = 2,85 mins LCMS: Rt 1,42 mins MS m/z [M+H]+ 489,5; Método 2minLowpHv03 Exemplo 14: Uma mistura diastereomérica de 5-((2R,4R,6S)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2S,4S, 6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxa- mida
Figure img0041
Etapa 1: Uma mistura de 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-(2,2,2-triflu- oroacetóxi)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,4R,6R)-6-(terc-butil)-4-(2,2,2-trifluoroacetóxi)tetra-hidro- 2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila
[000213] 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (100 mg, 0,546 mmol) e 2,2-dimetilhex-5-en-3-ol (Intermediário F) (70,0 mg, 0,546 mmol) foram combinados em DCM (12 mL) e tratados com peneiras moleculares secadas no forno(100 mg, 0,546 mmol) e TFA (3,15 mL, 40,9 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. Pivaldeído (0,059 mL, 0,546 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi saciada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3 e extraído com DCM (x3). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título. Etapa 2: Uma mistura de 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-hidroxitetra- hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,4R, 6R)-6-(terc-butil)-4-hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxilato de etila
[000214] Sódio (45,7 mg, 1,988 mmol) foi dissolvido em etanol e a solução resultante foi adicionado a temperatura ambiente a uma mistura de 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-(2,2,2-trifluoroacetóxi)tetra-hidro- 2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,4R,6R)-6- (terc-butil)-4-(2,2,2-trifluoroacetóxi)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metiliso- xazol-3-carboxilato de etila (270 mg, 0,663 mmol) em EtOH (5 mL). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2 horas. HCl a 1 M(aq)(50 mL) foi adicionado e o aquoso foi separado e extraído com EtOAc (x3). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título. Etapa 4: Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)-4-oxotetra-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-6-(terc-butil)- 4-oxotetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila
[000215] Uma mistura de 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-hidroxitetra- hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,4R, 6R)-6-(terc-butil)-4-hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxilato de etila (35 mg, 0,112 mmol) em DCM (20 mL) foi tratado a temperatura ambiente com reagente Dess-Martin (47,7 mg, 0,112 mmol) e agitada por 30 minutos. Solução Aquosa saturada de metasul- feto de sódio foi adicionada e a mistura foi agitada por 15 minutos. As camadas resultantes foram separadas e a camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de NaHCO3. A porção aquosa foi extraída com DCM e os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-40% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,78 (1H, dd), 4,38 (2H, q), 3,34 (1H, dd), 2,83 (1H, mult), 2,62-2,56 (1H, mults), 2,45-2,33 (2H, br mults), 2,21 (3H, s), 1,35 (3H, t), 0,90 (9H, s). Etapa 5: Uma mistura diastereomérica de ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(terc- butil)-4-hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxílico (1:1)
[000216] Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)-4-oxotetra-hidro- 2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-6-(terc -butil)-4-oxotetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (420 mg, 1,358 mmol) em THF (20 mL) foi resfriada a -78 °C e tratado com 1M de L-Selectrida em THF (1,426 mL, 1,426 mmol) e agi-tada a -78 °C por 3 hrs. A mistura resultante foi saciada com ácido acético e lavada com HCl a 1 M(aq). O aquoso foi extraído com EtOAc (x2). Todas as camadas orgânicas foram combinadas, secadas sobre MgSO4, filtradas e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia elu- indo com 0-50% de EtOAc em iso-hexano forneceu material bruto. O material bruto foi dissolvido em THF, tratado com NaOH a 2M (aq) e agitado a temperatura ambiente por 2 horas. A mistura resultante foi acidificada usando HCl a 1 M(aq) e extraído com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrados e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,10 mins; MS m/z [M+H]+ 284,3; Método 2minLowpHv03 Etapa 6: Uma mistura diastereomérica de 5-((2R,4R,6S)-6-(terc-butil)- 4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de meti- la e 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxilato (1:1) de metila e 5-((2S,4R,6R)-6-(terc-butil) -4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de me- tila e 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxilato (1:1) de metila
[000217] Uma mistura diastereomérica de ácido 5-((2R,4R,6S)-6- (terc-butil)-4-hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxílico e ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-hidroxitetra-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1) (31 mg, 0,109 mmol) em DMF (0,5 mL) foi adicionado a uma solução de hidreto de sódio (10,94 mg, 0,274 mmol) em DMF (2 mL) a 0 °C. A mistura foi deixada para aquecer a temperatura ambiente, agitada por 2 horas e iodometano (0,068 mL, 1,094 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi saciada com HCl a 2 M (aq) e extraído com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com 0,5M LiCl (aq), solução salina, secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia elu- indo com 0-30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título. Etapa 7: Uma mistura diastereomérica de ácido 5-((2R,4R,6S)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico acid e 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxílico
[000218] Uma mistura diastereomérica de 5-((2R,4R,6S)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metila e 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)- 4-metilisoxazol-3-carboxilato de metila (1:1) e 5-((2S,4R,6R)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de metila e 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)- 4-metilisoxazol-3-carboxilato de metila (1:1) (14 mg, 0,045 mmol) em THF (1 mL) e MeOH (0,6 mL) foi tratada com NaOH a 2M (aq) (0,090 mL, 0,180 mmol) a temperatura ambiente por 1 hora. A mistura resul- tante foi tratada com HCl a 2 M (aq) (4 mL) e extraído com EtOAc (x2). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrado. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; Etapa 8: Uma mistura diastereomérica de ácido 5-((2R,4R,6S)-6- (terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxílico e ácido 5-((2R,4S,6S)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2S,4R,6R)-6-(terc- butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2S,4S,6R)-6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxílico (20 mg, 0,067 mmol) e ácido 4-amino-2- ciclobutil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário E) (12,80 mg, 0,071 mmol) em DMF (0,5 mL) foram tratados com DIPEA (0,047 mL, 0,269 mmol) e HATU (33,2 mg, 0,087 mmol).A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi tratada com água e extraído com EtOAc (x2). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com Cloreto de lítio a 0,5M (aq), solução salina, secados sobre MgSO4,filtrados e o solvente foi ramovido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido em sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,38 mins; MS m/z [M+H]+ 461,6; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,10 (1H, br s), 4,99 (1H, d), 4,63 (1H, mult), 3,82 (1H, mult), 3,51 (1H, d), 3,41 (3H, s), 3,28 (3H, s), 2,88-2,75 (2H, br mults), 2,41-2,31 (2H, br mults), 2,28 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,142,06 (1H, br mult), 1,99-1,83 (3H, br mults), 1,83-1,72 (1H, br mult), 1,52 (1H, mult), 0,92 (9H, s). Exemplo 15: 5-(6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0042
e Etapa 1: Uma mistura de 5-((2R,6S)-4-bromo-6-(terc-butil)tetra-hidro- 2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-4-bro- mo-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (1:1)
[000219] A um frasco resfriado no gelo sob nitrogênio contendo 2,2- dimetilhex-5-en-3-ol (Intermediário F) (400 mg, 3,12 mmol) e brometo de índio (III) (55,4 mg, 0,156 mmol) em DCM seco (31 mL) foi adicionado bromotrimetilsilano (0,405 mL, 3,12 mmol). A mistura de reação foi agitada com resfriamento em gelo por 30 minutos. A um segundo frasco uma solução de etil-5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato (Intermediário C) (572 mg, 3,12 mmol) em DCM seco (31 mL) sob nitrogênio foi resfriada no gelo. Essa foi adicionada ao frasco gota a gota durante 30 mins com resfriamento com gelo. A mistura de reação foi agitada com refriamento com gelo por 1,5 horas e a temperatura ambiente durante a noite. A uma mistura de reação foi adicionado pivalal- deído (0,085 mL, 0,781 mmol) e essa foi agitadas por 2 horas. Mais pivalaldeído (0,085 mL, 0,781 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A uma mistura resultante foi adicionado uma solução aquosa saturada de NaHCO3 (aq) e a mistura foi agitada vigorosamente por 2 minutos. A mistura resultante foi passada através de um cartucho separador de fase e o eluente orgânico foi coletado e concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-30% de EtOAc em iso-hexano forneceu os compostos títulos; LC-MS; Rt = 1,68 mins; MS m/z [M+H]+ 376,4; Método 2minLowpHv03 Etapa 2: Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran- 2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-6-(terc-butil) te- tra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (1:1)
[000220] A uma mistura de 5-((2R,6S)-4-bromo-6-(terc-butil)tetra- hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)- 4-bromo-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carbo- xilato de etila (1:1) (233 mg, 0,623 mmol) em EtOH (7,1 mL) e EtOAc (0,7 mL) under um Fluxo de nitrogênio foi adicionado em Pd/C a 10% (26,5 mg, 0,249 mmol) e a mistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio a temperatura ambiente por 7 horas. Bicarbonato de sódio (209 mg, 2,490 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio durante a noite. Mais Pd/C a 10% (26,5 mg, 0,249 mmol) foi adicionado e agitado continuamente sob uma tmosfera de hidrogênio durante a noite. A mistura resultante foi filtrada através de um cartucho de Celite®, eluindo com EtOAc e os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-50% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do títulos; LC-MS: Rt = 1,72 mins; MS m/z [M+H]+ 296,3; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,54 (1H, d), 4,66 (2H, q), 3,01 (1H, d), 2,19 (3H, s), 1,94 (1H, mult), 1,83-1,77 (1H, mult), 1,73-1,48 (3H, mults), 1,34 (3H, t), 1,35-1,26 (1H, mults), 0,84 (9H, s). Etapa 3: Uma mistura de ácido 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2S,6R)-6-(terc-butil) tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1)
[000221] A uma solução agitada de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra- hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)- 6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (1:1)(112 mg, 0,379 mmol) em THF (2 mL) e MeOH (1,2 mL) a temperatura ambiente foi adicionado NaOH a 2M (aq) (0,209 mL, 0,417 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido sob pressão reduzida ae o resíduo diluído com EtOAc e água. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi lavada com EtOAc (x2). A camada aquosa foi acidificada pela adição de HCl a 2 M (aq) e extraído com EtOAc (x3). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrado. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do títulos; LC-MS; Rt 1,57 mins; MS m/z [M+H]+ 268,3; Método 2minLowpHv03 Etapa 4: 5-((2S,6R)-6-(terc-Butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo- butil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida e 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2- ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxamida
[000222] A uma solução de uma mistura de ácido 5-((2R,6S)-6-(terc- butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5- ((2S,6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carbo- xílico (1:1) (40 mg, 0,150 mmol) em DCM seco (3 mL) sob nitrogênio foi adicionado cloreto de oxalila (0,014 mL, 0,165 mmol) e DMF (0,023 mL, 0,299 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 5 minutos e 4-amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)- ona (Intermediário E) (27,1 mg, 0,150 mmol) e trietilamina (0,063 mL, 0,449 mmol) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 5 minutos. À mistura resultante foi adicionada água e essa foi agitada vigorosamente antes de passar através de um cartucho de separação de fase. Os orgânicos foram coletados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi em seguida adsorvido em sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano fornecendo o material bruto como uma mistura de enantiômeros.
[000223] A separação quiral do material utilizando Cromatografia de Fluido Supercrítico proporcionou os enantiômeros individuais: DETALHES DO MÉTODO: Coluna: Phenomenex LUX C2 250 x 10 mm coluna, 5 um @ 35 deg C Fase móvel: 50% Metanol + 0,1% v/v DEA/50% CO2 Fluxo: 10 mL/min Detecção: UV @ 220 nm Instrumento: Berger Minigram SFC System 2 Exemplo 15a: 5-((2S,6R)-6-(terc-Butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2- ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxamida ou 5-((2R,6S)-6-(terc-Butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N- (2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida SFC Quiral: Rt = 14,26 mins LC-MS: Rt = 4,59 mins; MS m/z [M+H]+ 431,5; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,28 (1H, br s), 4,69-4,59 (2H, mults), 3,32 (3H, s), 3,10 (1H, d), 2,83 (2H, mults), 2,41-2,34 (2H, mults), 2,29 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,03 (1H, br d), 1,96-1,60 (6H, mults), 1,45-1,33 (1H, mults), 0,93 (9H, s). Exemplo 15b: 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2- ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxamida ou 5-((2S,6R)-6-(terc-Butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N- (2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida SFC Quiral: Rt = 18,40 mins LC-MS : Rt = 4,58 mins; MS m/z [M+H]+ 431,5; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,28 (1H, br s), 4,69-4,59 (2H, mults), 3,32 (3H, s), 3,10 (1H, d), 2,83 (2H, mults), 2,41-2,34 (2H, mults), 2,29 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,03 (1H, br d), 1,96-1,60 (6H, mults), 1,45-1,33 (1H, mults), 0,93 (9H, s). Exemplo 16: 5-((2S,6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxa- mida ou 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo- hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida
Figure img0043
[000224] O composto do título foi preparado por um método similar ao do Exemplo 15 substituindo 4-amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1H- pirazol-3(2H)-ona (Intermediário E) na Etapa 4 com 4-amino-2-ciclo- hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D). A separação quiral utilizando Cromatografia com Fluido Supercrítico proporcionou um enantiómero individual: DETALHES DO MÉTODO: Coluna: Chiralpak OD-H 250x10mm, 5μm @ 35 deg C Fase móvel: sc-CO2:Isopropanol +0,1% DEA Fluxo: 10 mL/min Detecção: UV @ 220 nm Instrumento: Berger Minigram SFC1 5-((2S,6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida ou 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2- ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida SFC Quiral Rt = 8,19 mins; LC-MS: Rt = 4,87 mins; MS m/z [M+H]+ 459,5; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,99 (1H, s), 4,53 (1H, dd), 3,97 (1H, tt), 3,18 (3H, s), 3,01 (1H, dd), 2,20 (3H, s), 2,12 (3H, s), 1,96-1,86 (2H, mults), 1,83-1,74 (4H, mults), 1,72-1,49 (6H, mults), 1,35-1,22 (2H, mults), 1,21-1,11 (2H, mults), 0,84 (9H, s).
Exemplo 17:
[000225] Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran -2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-me- tilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2S,6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran -2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-me- tilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0044
Etapa 1: Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)-4-iodotetra-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-6-(terc- butil)-4-iodotetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila(1:1)
[000226] A uma solução agitada de 5-formil-4-metilisoxazol-3-carbo- xilato de etila (1 g, 5,46 mmol), 2,2-dimetilhex-5-en-3-ol (Intermediário F) (0,700 g, 5,46 mmol) e iodeto de sódio (0,818 g, 5,46 mmol) em MeCN seco (20 mL) sob nitrogênio a temperatura ambiente foi adicionado TMSCl (0,698 mL, 5,46 mmol) gota a gota durante 10 segundos. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A uma mistura resultante foi adicionado pivalaldeído (0,593 mL, 5,46 mmol) e a mistura de reação foi agitada por 3 horas. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e lavada com uma solução de tiossul- fato de sódio a 10% (aq) (x1) e água (x1). A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi em seguida adsorvido em sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 50% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do títulos; LC-MS: Rt = 1,76 mins; MS m/z [M+H]+ 422,3; Método 2minLowpHv03 Etapa 2: Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)-5,6-di-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-6-(terc- butil)-5,6-di-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (1:1)
[000227] A uma solução de uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)- 4-iodotetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-6-(terc-butil)-4-iodotetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxilato de etila(1:1) (794 mg, 1,885 mmol) em tolueno (3,8 mL) foi adicionado DBU (0,284 mL, 1,885 mmol) e isto foi agitado a temperatura ambiente durante a noite. À mistura resultante foi adicionado DBU (0,142 mL, 0,94 mmol) e isto foi agitado a temperatura ambiente por 4 horas. A mistura resultante foi diluída com EtOAc e água e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi então adsorvido em sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-20% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do títulos; LC-MS: Rt = 1,64 mins; MS m/z [M+H]+ 294,5; Método 2minLowpHv03 Etapa 3: Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran- 2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,6R)-6-(terc-butil) te- tra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila
[000228] A uma solução de uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)- 5,6-di-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5- ((2S,6R)-6-(terc-butil)-5,6-di-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxilato de etila (1:1) (212 mg, 0,723 mmol) em etanol (14,5 mL) sob nitrogênio foi adicionado Pd/C a 10%(769 mg, 0,723 mmol). A mistura de reação foi agitada dob uma atmosfera de hidrogênio a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi filtrada através de um cartucho de Celite® sob nitrogênio, eluindo com EtOAc. Os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do títulos; LC-MS: Rt = 1,70 mins; MS m/z [M+H]+ 296,4; Método 2minLowpHv03 Etapa 4: ácido 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-meti- lisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2S,6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (1:1)
[000229] A uma solução de uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil) tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S, 6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (100 mg, 0,339 mmol) em THF (3 mL) e MeOH (1,8 mL) foi adicionado NaOH a 2M (aq) (0,186 mL, 0,372 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo diluído com EtOAc e água. A camada orgânica foi extraída com NaOH a 0,1M (aq). As camadas aquosas combinadas foram acidificadas com HCl a 1 M(aq) e extraídas com EtOAc (x3). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer os compostos títulos; LC-MS: Rt = 1,52 mins; MS m/z [M+H]+ 268,4; Método 2minLowpHv03 Etapa 5: Uma mistura de 5-((2R,6S)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran- 2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2S,6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H- piran-2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 4-metilisoxazol-3-carboxamida (1:1)
[000230] A uma solução de uma mistura de ácido 5-((2R,6S)-6-(terc- butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5- ((2S,6R)-6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxílico (1:1) (77 mg, 0,288 mmol) em DCM (2 mL) sob nitrogênio foi adicionado cloreto de oxalila (0,026 mL, 0,302 mmol) e DMF (2,230 μL, 0,029 mmol). 4-Amino-2-isopropil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário G) (48,7 mg, 0,288 mmol) e trietilamina (0,161 mL, 1,152 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. À mistura resultante foi adicionado NaOH a 1M e DCM e a mistura foi passada através de uma coluna de separação de fase. A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi em seguida adsorvido em silica e purificação por cromato- grafia eluindo com 0 a 100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do títulos; LC-MS: Rt = 4,50 mins; MS m/z [M+H]+ 419,5; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (1H, s), 4,72 (1H, mult), 4,36 (1H, mult), 3,22 (3H, s), 3,16 (1H, d), 2,14 (3H, s), 2,04 (3H, s), 1,991,90 (1H, mult), 1,84-1,78 (1H, mult), 1,70-1,59 (3H, br mult), 1,35 (6H, d), 1,38-1,23 (1H, br mult), 0,88 (9H, s).
Exemplo 18:
[000231] Uma mistura de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2R,6R)-6-isopropil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)- 4-metilisoxazol-3-carboxamida eN-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2R,6S)-6-isopropil-5,6-di-hidro-2H-piran-2- il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2S,6R)-6-isopropil-5,6-di-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil- 3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2S,6S)-6-isopropil-3,6-di-hidro- 2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0045
Etapa 1: Etil-4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxilato
[000232] O composto do título foi preparado analogamente ao Inter-mediário C, Etapa 1. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 6,86 (1H, dd), 6,02 (1H, d), 5,69 (1H, d), 4,37 (2H, q), 2,19 (3H, s), 1,33 (3H, t).
Etapa 2: ácido 4-Metil-5-vinilisoxazol-3-carboxílico
[000233] 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxilato de etila(250 mg, 0,993 mmol) foi dissolvido em THF (5,3 mL) e MeOH (3,2 mL) e a esse foi adicionado NaOH a 2M (aq) (497 μL, 0,993 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 15 minutos. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida e tratada com HCl a 2 M (5 mL) e água (5 mL). DCM foi adicionado ao aquoso resultante na formação de uma emulsão. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi suspenso em DCM (25 mL) e passado através de uma coluna de separação de fase. Os solventes orgânicos foram removidossob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,04 mins: MS m/z [M+H]+ 154,1: Método 2minLowpHv03
Etapa 3: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxamida
[000234] Uma suspensão de ácido 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxí- lico (172 mg, 0,809 mmol) em DCM (10 mL) resfriado a 0 oC foi tratada com cloreto de oxalila (0,142 mL, 1,617 mmol) e DMF (4 drops). A mistura de reação foi agitada a 0 oC por 1 hora e a temperatura ambiente por 30 minutos. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resídup dissolvido em DCM (8 mL). 4-Amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil- 1H-pirazol-3(2H)-ona (169 mg, 0,809 mmol) (Intermediário D) e trieti- lamina (0,338 mL, 2,426 mmol) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi diluída com água (15 mL) e extraída com DCM (x2). Os extratos orgânicos foram combinados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 20-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt 1,11 mins: MS m/z [M+H]+ 345,4: Método 2minLowpHv03
Etapa 4: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000235] A uma solução de N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxamida (53 mg, 0,154 mmol) em THF (1 mL) e água (0,5 mL) foi adicionado periodato de sódio (99 mg, 0,462 mmol) e Os EnCat™ (OsO4 microencapsulado) (10,26 mg, 3,08 μmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi filtrada através de uma bucha de algodão e o eluente foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 10,09 (1H, s), 8,34 (1H, br s), 4,07 (1H, mult), 3,32 (3H, s), 2,57 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,08-1,95 (2H, br mults), 1,94-1,80 (4H, br mults), 1,71 (1H, br mult), 1,44-1,30 (2H, br mults), 1,30-1,16 (1H, br mult). Etapa 5: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida Uma solução de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pira- zol-4-il)-5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxamida (53 mg, 0,153 mmol) em THF (1,5 mL) foi resfriada a 0 oC e brometo de alilmagnésio a 1M em Et2O (337 μL, 0,337 mmol) foi adicionado gota a gota durnate 15 minutos. A mistura de reação foi aquecida a temperatura ambiente e NH4Cl saturado (aq) foi adicionado. A camada aquosa foi extraída com DCM (x3). Os extratos orgânicos combinados foram passados através de um cartucho separador de fase e os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 50-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título.
Etapa 6: Uma mistura de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-5-((2R,6R)-6-isopropil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida e N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2R,6S)-6-isopropil-5,6-di-hidro-2H-piran-2-il)- 4-metilisoxazol-3-carboxamida e N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2S,6R)-6-isopropil-5,6-di-hidro-2H-piran-2- il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2S,6S)-6-isopropil-3,6-di-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000236] Uma solução de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carbo- xamida (26 mg, 0,054 mmol) em DCM (0,5 mL) foi resfriada a 0 oC e isobutiraldeído (5,38 μL, 0,059 mmol) e TMSOTf (10,66 μL, 0,059 mmol) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada a 0 oC por 1 hora e a temperatura ambiente durante a noite. A uma mistura resultante foi adicionado uma solução saturada de NH4Cl (aq) e essa foi extraída com DCM (x3). Os extratos orgânicos combinados foram passados através de um cartucho separador de fase e os solventes orgânicos foram removidos sob pressão reduzida. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando Cromatografia de fase reversa automatizada Direcionado por UV durante um gradientee de 9,5 minutos 30-70% de MeCN em água (0,1% de ácido fórmico) usando um Xselect CSH Prep coluna C18 para fornecer os compostos títulos como uma mistura de alquenos, proporção de produtos por RMN é 3:2 4- eno:3-eno; A estereoquímica proposta é sin. LC-MS: Rt = 1,40 mins; MS m/z [M+H]+ 443,3: Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,13 - 8,07 (m, 2H), 6,08 - 6,03 (m, 1H), 5,936 - 5,92 (m, 1H), 5,80 - 5,73 (m, 2H), 5,46 - 5,42 (m, 1H), 4,85 (dd, J = 10,37, 3,3, 1H), 4,18 - 4,14 (m, 1H), 4,10 - 4,04 (m, 3H), 3,43 - 3,40 (m, 1H), 3,32 - 3,24 (m, 7H), 2,30 (s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,24 - 2,21 (m, 8H), 2,02 - 1,50 (m, 16H), 1,44 - 1,06 (m, 8H), 1,01-0,94 (m, 12H).
Exemplo 19:
[000237] Uma mistura de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2S,6S)-6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida eN-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,6R)-6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0046
Etapa 1: 5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxila de etila
[000238] A uma solução de boro trifluoreto dietiléterate (54,1 μL, 0,427 mmoL) em DCM (0,3 mL) foi resfriada a -78 oC. Em um frasco separado uma solução de 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de eti- la (Intermediário C) (68 mg, 0,371 mmol) e aliltrimetilsilano (59,0 μL, 0,371 mmol) em DCM foram resfriados a -78 oC e essa solução foi adicionada gota a gota á solução de trifluoreto de boro dietiléterate. A mistura de reação foi agitada a -78 oC por 1 hora e a temperatura ambiente durante a noite. A uma mistura resultante foi adicionado uma solução saturada de NaHCO3 (aq) (5 mL) e essa foi extraída com DCM (x3). Os extratos orgânicos combinados foram passados através de um cartucho separador de fase e o eluente foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-50% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,07 mins; MS m/z [M+H]+ 226,1: Método 2minLowpHv03
Etapa 2: 4-metil-5-(6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carbo- xila de etila
[000239] A uma solução de 5-(1-hidroxibut-3-en-1-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxilato de etila (35 mg, 0,155 mmol) em DCM (1 mL) foi tratada com acetaldeído (8,72 μL, 0,155 mmol) e a mistura de reação foi resfriada a 0 oC. Uma solução de TMSOTf (80,4 μL, 0,465 mmol) em DCM (1,5 mL) resfriada a 0 oC foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a 0 oC por 30 minutos e a temperatura ambiente durante a noite. À mistura resultante foi adicionado uma solução saturada de cloreto de amônio (aq) (2 mL) e essa foi extraída com DCM (x3). Os extratos orgânicos combinados foram passados através de um cartucho separador de fase e o eluente foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,32 mins: MS m/z [M+H]+ 252,2: Método 2minLowpHv03
Etapa 3: ácido 4-Metil-5-(6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3- carboxílico
[000240] A uma solução de 4-metil-5-(6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxilato de etila (14 mg, 0,056 mmol) em MeOH (0,2 mL) e THF (0,3 mL) foi adicionado NaOH a 2M (aq) (27,9 μL, 0,056 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 3 horas. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida e NaOH a 2M (aq) (1mL) e água (1 mL) adicionados. O aquoso foi extraída com DCM (x3) e os extratos orgânicos combinados passados através de um cartucho separador de fase. O eluente foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título.
Etapa 4: Mistura racêmica de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2S,6S)-6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida e N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,6R)-6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida
[000241] Uma solução de ácido 4-metil-5-(6-metil-3,6-di-hidro-2H- piran-2-il)isoxazol-3-carboxílico) (12,03 mg, 0,054 mmoL) em NMP (0,5 mL) foi adicionado HATU (20,49 mg, 0,054 mmol). 4-Amino-2-ciclo- hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (11,28 mg, 0,054 mmol) e trietilamina (7,49 μL, 0,054 mmoL) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi particionada entre carbonato de hidrogênio e sódio aquoso saturado (10 mL) e EtOAc (10 mL). Os organicos foram lavados com solução salina (10 mL), secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 40100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 3,65 mins: MS m/z [M+H]+ 415,3: Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,98 (s, 1H), 5,86 - 5,77 (m, 1H), 5,68 - 5,60 (m, 1H), 4,77 (dd, J = 10,9, 3,3 Hz, 1H), 4,37 (s, 1H), 4,04 - 3,93 (m, 1H), 3,31 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 3,26 (s, 3H), 2,67 - 2,54 (m, 1H), 2,31 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,19 - 2,08 (m, 7H), 2,02 - 1,87 (m, 2H), 1,86 - 1,72 (m, 2H), 1,64 - 1,59 (m, 1H), 1,36 - 1,05 (m, 7H). Exemplo 20: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- ((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0047
Etapa 1: 5-((1R,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-hidroxipropil)-4-metili- soxazol-3-carboxilato de Etila
[000242] Cloreto de terc-butildimetilsilila (6,3 g, 41,5 mmol ) foi adici-onado em porções a 5-((1R,2S)-1,2-di-hidroxipropil)-4-metilisoxazol-3- carboxilato de etila (Intermediário B) (8,65 g, 37,7 mmol), 4-dimetila- minopiridina (1,38 g, 11,32 mmol) e trietilamina (5,80 mL, ) em DMF (100 mL) a 0°C e a reacão foi drixada para aquecer a temperatura ambiente. Após 18 h a reação foi particionada entre EtOAc e solução salina, lavada com cloreto de amônio aquoso saturado, solução salina, secado sobre Na2SO4 e concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 15% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,59 mins; MS m/z [M+H]+ 344,4; Método 2minLowpHv03 Etapa 2: 5-((1R,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-((2-metilalil)óxi) pro- pil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((1R,2S)-2-((terc-butildi- metilsilil)óxi)-1-((2-metilalil)óxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de 2-metilalila
[000243] NaH (700 mg de uma disperção com 60 % em peso em óleo mineral, 17,47 mmol) foi adicionado em porções a 5-((1R,2S)-2- ((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-hidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila (3,0 g, 8,73 mmol) em THF (75 mL) a temperatura ambiente, seguido por 3-bromo-2-metilprop-1-eno (8,81 mL, 87 mmol) gota a gota odurante 10 minutos. Iodeto de amônio tetrabutila (2,58 g, 6,99 mmol) foi adicionado e a reação resultante foi aquecida a 58°C por 2 horas. A reação foi resfriada a temperatura ambiente e saciada sequencialmente com solução salina (75 mL) e EtOAc (75 mL), secado sobre Na2SO4 e concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto como uma mistura aproximadade 9:1; LC-MS: Rt = 1,90 mins; MS m/z [M+H]+ 398,5; Método 2minLowpHv03 LC-MS: Rt = 1,95 mins; MS m/z [M+H]+ 424,5; Método 2minLowpHv03
Etapa 3: ácido 5-((1 R,2S)-2-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-1-((2-metilalil)óxi) propil)-4-metilisoxazol-3-carboxílico
[000244] Mono-hidrato de hidróxido de lítio (3,20 g, 76 mmol) foi adi-cionado em porções a uma mistura de 5-((1R,2S)-2-((terc-butildimetila silil)óxi)-1-((2-metilalil)óxi)propil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((1R,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-((2-metilalil)óxi)propil)-4-metili- soxazol-3-carboxilato de 2-metilalila [4,5g como uma mistura aproximada de 9:1contendo iodeto de amônio de tetrabutila residual (25% peso/peso)] em THF/água (300mL, 1,5/1,0) e a mistura resultante foi aquecida suavemente a 70°C. Após resfria a temperatura ambiente as camadas foram separadas e o remanescente aquoso foi acidificado com ácido hidroclorídrico aquosa a 1 M e extraído com EtOAc. Os extratos orgânicos foram combinados e lavados com solução salina, secado sobre Na2SO4 e concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título bruto; LC-MS: Rt = 1,75 mins; MS m/z [M+H]+ 370,5; Método 2minLowpHv03
Etapa 4: 5-((1R,2S)-2-((terc-Butildimetilsilil)óxi)-1-((2-metilalil)óxi) pro- pil)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-me- tilisoxazol-3-carboxamida
[000245] 4-Amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (In termediário D) (2,63 g, 12,55 mmol) foi adicionado em porções a ácido 5-((1R,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1-((2-metilalil)óxi)propil)-4- metilisoxazol-3-carboxílico (4,14g, ~70% w/w) em DMF (100 mL) seguido por DIPEA (7,8 mL, 44,8 mmol) e HATU (4,8 g, 12,55 mmol). Após agitar a temperatura ambiente por 18 h a mistura de reação foi particionada entre EtOAc e solução salina. A fase aquosa foi extraída com EtOAc e os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina, secados sobre Na2SO4 e concentrados sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 50 a 100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,77 mins; MS m/z [M+H]+ 561,8; Método 2minLowpHv03
Etapa 5: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 5-((1R,2S)-2-hidróxi-1-((2-metilalil)óxi)propil)-4-metilisoxazol-3- carboxamida
[000246] Fluoreto de amônio de Tetrabutila (15,16 mL, 15,16 mmol) foi adicionado gota a gota a 5-((1R,2S)-2-((terc-butildimetilsilil)óxi)-1- ((2-metilalil)óxi)propil)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida (5,06 g, 7,58 mmol (as-sumindo 76% de pureza)) em THF (160 mL) e a mistura resultante foi agitada a temperatura ambiente por 18 h. A mistura resultante foi saciada pela sequencial adição de água (150 mL) e EtOAc (200 mL). Os orgânicos foram lavados com solução salina, secados sobre Na2SO4 e concentrados sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 50-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,12 mins; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 2minLowpHv03
Etapa 6: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)- 4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida
[000247] Trifluoroacetato de mercúrio (3,92 g, 9,19 mmol) foi adicionado em porções a N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-5-((1R,2S)-2-hidróxi-1-((2-metilalil)óxi)propil)-4-metilisoxa- zol-3-carboxamida (3,59 g, 8,03 mmol) em THF (160 mL) a temperatura ambiente. Óxido de mercúrio vermelho (1,99 g, 9,19 mmol) foi adicionado e mistura de reação resultante foi agitada a temperatura ambiente. Após 1 h a reação foi resfriada a -78 °C e trietilborano (16,84 mL, 16,84 mmol) foi adicionado gota a gota seguido por sódio boroidreto (579 mg, 15,31 mmol) em porções. Após 1 h a -78°C A reação foi dei-xada a aquecer gradualmente a temperatura ambiente. A mistura re-sultante foi saciada pela adição de solução salina e EtOAc, separada, secada sobre Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. DCM (200 mL) e Biotage Si-Thiol (17g, 1,4mmol/g load, ~3 eq) foram adicionados e a suspenção resultante foi agitada a temperatura ambiente por 18 h. A reação foi filtrada, lavada com DCM e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 90-95% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título (>95% ee); LC-MS: Rt = 1,16mins; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 2minLowpHv03 1H RMN. ( [400MHz], [DMSO] 9,55 (1H, s), 4,36 (1H, d), 4,09 (1H, m), 3,91 (1H, m), 3,65 (1H, d), 3,42 (1H, d), 3,21 (3H, s), 2,16 (3H, s), 2,03 (3H, s), 1,98 (2H, m), 1,78 (2H, m), 1,64 (3H, m), 1,37 (3H, s), 1,31 (2H, m), 1,17 (1H, m), 1,10 (3H, s), 0,87 (3H, d). Exemplo 21,1 21,1 [5-(4-Bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]
Figure img0048
e Exemplo 21,2: N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3- carboxamida
Figure img0049
Etapa 1: [5-(4-bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxilato de etila]
[000248] A uma mistura gelada de 2-metilbut-3-en-1-ol (Aldrich) (0,171 mL, 1,638 mmol), brometo de índio (III) (28,3 mg, 0,082 mmol) e DCM seco (10 mL) sob nitrogênio, foi adicionado bromotrimetilsilano (0,213 mL, 1,638 mmol). A mistura de reação foi agitada com resfriamento com gelo por 30 minutos. Uma solução de 5-formil-4-metiliso- xazol-3-carboxilato de etila gelada (Intermediário C) (300 mg, 1,638 mmol) em DCM seco (2 mL) foi adicionado à mistura de reação durante 5 minutos. A mistura de reação foi agitada com resfriamento com gelo e aquecida a temperatura ambiente durante o fim de semana. A mistura resultante foi tratada com NaHCO3 aquosa saturada (10mL) com agitação a 0 °C. A mistura resultante foi passada através de um cartucho separador de fase e o solvente eluente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando Cromatografia de fase reversa automatizada direcionado por UV durante um gradientee de 9,5 minutos 50 - 98% MeCN em água(0,1% de ácido fórmico). A fração dos produtos foram adicionados a EtOAc (50 mL) e lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (50mL). Os orgânicos foram secados sobre MgSO4, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,47mins; MS m/z [M+H]+332,2/334,2: Método 2minLowpHv03
Etapa 2: [5-(4-bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxilato] de potássio e (R)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran- 2-il)isoxazol-3-carboxilato de potássio e (S)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di- hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxilato de potássio
[000249] A uma solução de [5-(4-bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran- 2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila] (211 mg, 0,635 mmol) em THF seco (5 mL), potássio trimetilsilanolato (Aldrich) (107 mg, 0,953 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente e sonicada. Mais THF foi adicionado e a mistura foi agitada por 3 horas. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer uma mistura dos compostos títulos; LC-MS: Rt = 1,07mins; MS m/z [M+H]+ 224,2; Rt = 1,20mins; MS m/z [M+H]+ 306,2: Método 2minLowpHv03. Etapa 3: [5-(4-Bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil- 1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida] e uma mistura de (R)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida e (S)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida (1:1)
[000250] A uma solução agitada de 5-(4-bromo-5-metiltetra-hidro-2H- piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de potássio e 4-metil-5-(5- metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxilato de potássio (mistura bruta) (217 mg, 0,634 mmol) em NMP seco (4 mL) foi adicionado HATU (Fluoroquímico) (265 mg, 0,697 mmol), 4-amino-2-ciclo-hexil- 1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (133 mg, 0,634 mmol) e trietilamina (0,194 mL, 1,395 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite e particionada entre EtOAc (25 mL) e NaOH a 1M (25 mL). Os organicos foram lavados com água (30 mL), solução salina (30 mL), secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando Cromatografia de fase reversa automatizada Direcionado por UV durante um gradientee de 9,5 minutos 30 - 70% de MeCN em água (0,1% de ácido fórmico). A fração dos produtos foi adicionada a EtOAc (50 mL) e lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (50 mL). A camada orgânicas foram secados sobre MgSO4, filtradas e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do títulos. Exemplo 21,1: [5-(4-bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo- hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida] LC-MS: Rt = 1,30mins; MS m/z [M+H]+ 497,5: Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,88 (1H, s), 4,47 (1H, mult), 4,03-3,87 (2H, br mults), 3,80-3,72 (1H, mult), 3,14 (3H, s), 2,43-2,36 (1H, br mult), 2,13 (3H, s), 2,08 (3H, s), 2,01 (1H, br mult), 1,91-1,80 (3H, br mults), 1,79-1,68 (5H, br mults), 1,58 (1H, br mult), 1,31-1,18 (2H, br mults), 1,16-1,05 (1H, br mult), 0,95 (3H, d). Exemplo 21,2: N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pira- zol-4-il)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxa- mida LC-MS: Rt = 1,25 mins; MS m/z [M+H]+ 415,4: Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,04 (1H, s), 5,63 (1H, mult), 4,78 (1H, dd), 4,26-4,00 (3H, br mults), 3,26 (3H, s), 2,72-2,61 (1H, br mult), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,07-1,93 (3H, br mults), 1,92-1,81 (5H, br mults), 1,75-1,66 (2H, br mults), 1,67 (3H, s), 1,44-1,30 (2H, br mults), 1,30 1,18 (1H, br mult). Exemplo 22: N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- ((2R,5R)-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0050
[000251] A uma mistura de (R)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida e (S)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida (1:1) (Exemplo 21,2) (35 mg, 0,084 mmol) em EtOH (15 mL) sobuma Fluxo de nitrogênio foi adicionado Pd-C (3,59 mg, 0,034 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente sob uma atmosfera de hidrogênio a 0,35 bar por 2 horas. A mistura resultante foi filtrada através de Celite®, lavando com etanol. O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida e passado através de um cartucho de 1g de Biotage Sílica-TMT cartridge sob gravidade. O cartucho foi lavado com etanol e o eluente foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando Cromatografia de fase reversa automatizada Direcionado por UV durante um gradientee de 9,5 minutos 30 - 70% MeCN em água (0,1% de ácido fórmico). A fração do produtos foi adicionada a EtOAc (30 mL) e lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (30 mL). Os extratos orgânicos foram secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt 1,23 mins; MS m/z [M+H]+ 417,4; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,35 (1H, mult), 4,77 (1H, mult), 4,17-3,99 (2H, mults), 3,72 (1H, dd), 3,50 (1H, dd), 3,34 (3H, mult), 2,29-2,22 (6H, mults), 2,08-1,97 (4H, mults), 1,86 (3H, mults), 1,75 (1H, mult), 1,63 (1H mult), 1,37 (2H, mult), 1,30-1,22 (3H, mult), 1,05 (2H, mult), 0,87 (1H, mult).
[000252] A separação quiral do Exemplo 22 utilizando cromatografia de Fluido Supercrítico proporcionou dois enantiômeros individuais do diastereômero cis e uma mistura racêmica do diastereómero trans: DETALHES DO MÉTODO: Coluna: Chiralpak AD-H 250 x 10 mm, 5 um @ 35degC Fase móvel: 30% Metanol/70% CO2 Fluxo: 10 mL/min Detecção: UV @ 220 nm Instrumento: Berger Minigram SFC2 Exemplo 22.a Estereoisômero único de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metiltetra-hidro-2H-piran- 2-il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0051
SFC Tempo de retenção = 9,74 mins 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,04 (1H, br s), 4,80-4,75 (1H, br mult), 4,05 (1H, tt), 3,76-3,70 (1H, dd), 3,55-3,48 (1H, dd), 3,25 (3H, s), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,07-1,93 (2H, br mults), 1,93-1,75 (8H, br mults), 1,71 (1H, br mult), 1,67-1,58 (1H, br mult), 1,44-1,30 (2H, br mults), 1,30-1,18 (1H, br mult), 1,05 (3H, d).
Exemplo 22.b:
[000253] Estereoisômero único de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(5-metiltetra-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0052
1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,10 (1H, br s), 4,79-4,76 (1H, br mult), 4,06 (1H, tt), 3,75-3,70 (1H, dd), 3,53-3,48 (1H, dd), 3,27 (3H, s), 2,28 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,03-1,95 (2H, mult), 1,92-1,77 (8H, br mults), 1,71 (1H, br mult), 1,66-1,59 (1H, br mult), 1,42-1,32 (2H, br mults), 1,27-1,20 (1H, br mult), 1,05 (3H, d).
Exemplo 22.c:
[000254] Uma mistura de N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2S, 5R)-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida e N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R, 5S)-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2- il)isoxazol-3-carboxamida
Figure img0053
SFC Tempo de retenção = 5,84 mins 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,10 (1H, br s), 4,50 (1H, dd), 4,10-3,98 (2H, br mults), 3,26 (3H, s), 3,17 (1H, t), 2,27 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,09-1,92 (4H, br mults), 1,93-,177 (7H, br mults), 1,71 (1H, br d), 1,421,17 (3H, br mults), 0,87 (3H, d).
Exemplo 23:
[000255] Uma mistura de 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hi- drofuran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol- 4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2- il)tetra-hidrofuran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0054
Etapa 1: 2,2-Dimetilbut-3-en-1-ol
[000256] Uma solução de 2,2-dimetilbut-3-in-1-ol (PharmaBlocks) (3 g, 30,6 mmol) em dietil éter seco (40 mL) foi adicionado 2,2'-(etano- 1,2-diilbis(sulfanediil))dietanol (5,57 g, 30,6 mmol), seguido por 5% Pd em sulfato de bário(Aldrich) (6,51 g, 3,06 mmol). A mistura foi desga- seificada completamente recarregando com nitrogênio e agitando sob uma atmosfera de hidrogênio a temperatura ambiente por 4 horas. A mistura resultante foi filtrado sob pressão reduzida, lavando o catalisa- dorcom dietil éter. O filtrado foi concentrada cuidadosamente sob pressão reduzida para remover a maior parte do solvente. A suspen- ção resultante foi filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 5,71 (1H, dd), 5,05-4,97 (2H, mults), 3,27 (2H, s), 1,41 (1H, br mult), 0,95 (6H, s). Etapa 2: Uma mistura de 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hidro- furan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,4R)-4-(2-bromo- propan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila
[000257] A uma mistura gelada de 2,2-dimetilbut-3-en-1-ol (328 mg, 3,28 mmol), brometo de índio (III) (56,6 mg, 0,164 mmol) e DCM seco (20 mL) sob nitrogênio foi adicionado bromotrimetilsilano (0,425 mL, 3,28 mmol) e a mistura resultante foi agitada com resfriamento por gelo por 30 minutos. Uma solução gelada de 5-formil-4-metilisoxazol-3- carboxilato de etila(Intermediário C) (600 mg, 3,28 mmol) em DCM seco (2 mL) foi adicionado a uma mistura de reação durante um período de 15 minutos e a mistura de reação foi agitada com resfriamento por gelo por 85 minutos. A mistura resultante foi tratada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (10 mL) com agitação a 0 °C. A mistura bifásica foi passada através de um cartucho separador de fase e o fil-trado foi concentrado sob pressão reduzida. O material bruto foi adsor- vido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 60% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,48mins; MS m/z [M+H]+ 346,2/348,2: Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 5,12 (1H, dd), 4,45 (2H, q), 4,10-4,01 (2H, mult), 2,73-2,65 (1H, mult), 2,46-2,39 (1H, mult), 2,27 (3H, s), 1,82 (3H, s), 1,80 (3H, s), 1,43 (3H, t). Etapa 3: Uma mistura de ácido 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetra- hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2S,4R)-4-(2- bromopropan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico
[000258] A uma solução agitada de uma mistura de 5-((2R,4S)-4-(2- bromopropan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila e 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-4-metili- soxazol-3-carboxilato de etila (442 mg, 1,277 mmol) em THF (10 mL) e MeOH (1 mL) foi adicionado NaOH a 2M (aq) (1,277 mL, 2,55 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente. Após conclusão à reação foi adicionada água (20 mL) e acidificada a pH 5 a 6 por adição de HCl a 1 M(aq). O aquoso foi extraída com EtOAc (40 mL) e os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina (20 mL), secados sobre MgSO4 e filtrado. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,18 mins; MS m/z [M+H]+ 318,4/320,5: Método 2minLowpHv03 Etapa 4: Uma mistura de 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hidro- furan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4- il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il) tetra-hidrofuran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
[000259] A uma mistura agitada de DMF (0,073 mL, 0,943 mmol) em DCM seco (15 mL) sob nitrogênio a 0 °C, cloreto de oxalila (0,045 mL, 0,519 mmol) foi adicionado. Após 5 minutos uma solução de uma mistura de ácido 5-((2R,4S)-4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-4- metilisoxazol-3-carboxílico e ácido 5-((2S,4R)-4-(2-bromopropan-2-il) tetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxílico (150 mg, 0,471 mmol) em DCM seco (3 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por 10 minutos. Uma solução de 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H- pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (109 mg, 0,519 mmol) em DCM seco (2 mL) e trietilamina (0,197 mL, 1,414 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 0 °C por 40 minutos. A mistura resultante foi particionada entre DCM (30 mL) e solução aquosa saturada de NaHCO3 (30 mL). Os orgânicos foram passados através de uma coluna de separação de fase e o eluente foi concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi dissolvido em DMSO e purificado usando Cromatografia de fase reversa automatizada direcionado por UV durante um gradientee de 9,5 minutos 30 - 70% MeCN em água (0,1% de ácido fórmico). A fração dos produtos foi adicionada a EtOAc (50 mL) e lavada com aquosa saturada NaHCO3 (50 mL). A camada orgânicas foi secado sobre MgSO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer os compostos títulos; LC: Rt = 1,26 mins: Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,06 (1H, br s), 5,19 (1H, t), 4,53 (1H, mult), 4,40 (1H, mult), 4,05 (1H, tt), 3,26 (3H, s), 2,92-2,77 (2H, br mult), 2,28 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,06-1,94 (2H, br mults), 1,92-1,83 (4H, br mults), 1,72 (3H, s), 1,72-1,63 (1H, br mults), 1,64 (3H, s), 1,441,30 (2H, br mults), 1,29-1,19 (1H, br mult). Exemplo 24: Uma mistura de N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2R,4R)-4-isopropiltetra-hidrofuran-2-il)-4-me- tilisoxazol-3-carboxamida e N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)-5-((2S,4S)-4-isopropiltetra-hidrofuran-2-il)-4-me- tilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0055
[000260] A 5-(4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-N-(2-ciclo- hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida (62 mg, 0,122 mmol) em etanol (10 mL) sob um fluxo de nitrogênio foi adicionado Pd-C (5,18 mg, 0,049 mmol). A mistura foi agitada sob uma atmosfera de hidrogênio a 0,35 bar e temperatura ambiente durante a noite. À mistura de reação foi adicionado NaHCO3 (40,9 mg, 0,487 mmol) e a mistura de reação foi agitada sob uma at-mosfera de hidrogênio a 0,35 bar e temperatura ambiente por 2,5 horas. A mistura resultante foi filtrada através de Celite®, lavada com EtOH. O filtrado foi passado através de um cartucho de Biotage 1g Si- lica-TMT e o eluente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por HPLC-MS preparativa durante um gradientee de 9,5 minutos 30-98% de MeCN em água (0,1% TFA). A fração dos produtos foi dissolvida em EtOAc (20 mL) e lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (20 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina (10 mL), secado sobre MgSO4, filtrado e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do títulos; LC-MS: Rt = 1,30 mins; MS m/z [M+H]+ 431,5: Método 2minLowpHv03.
[000261] A separação quiral do Exemplo 24 utilizando Cromatografia de Fluido Supercrítico proporcionou os enantiômeros simples. DETALHES DO MÉTODO: Coluna: Chiralpak IB, 250 x 10 mm, 5 um @ 35degC Fase móvel: 40% Isopropanol + 0,1% v/v DEA/60% CO2 Fluxo: 10 mL/min Detecção: UV @ 220 nm Instrumento: Berger Minigram SFC1 Exemplo 24.a: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol -4-il)-5-((2R,4R)-4-isopropiltetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxamida ou N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5- ((2S,4S)-4-isopropiltetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida SFC Rt = 3,99 mins LC-MS; Rt = 1,30 mins; MS m/z [M+H]+ 431,5; Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,99 (1H, br s), 5,09 (1H, mult), 4,09 (1H, t), 4,10-4,00 (1H, tt), 3,69 (1H, t), 3,24 (3H, s), 2,45-2,36 (1H, mult), 2,25 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,18-2,09 (1H, br mult), 2,06-1,93 (2H, br mults), 1,91-1,83 (5H, br mults), 1,71 (1H, br mult), 1,67-1,60 (1H, br mult), 1,44-1,30 (2H, br mults), 1,29-1,19 (1H, br mult), 1,00 (3H, d), 0,95 (3H, d). Exemplo 24.b: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pira- zol-4-il)-5-((2R,4R)-4-isopropiltetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida ou N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-5-((2S,4S)-4-isopropiltetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol- 3-carboxamida SFC Rt = 5,42 mins LC-MS: Rt 1,30 mins; MS m/z [M+H]+ 431,6: Método 2minLowpHv03 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,06 (1H, br s), 5,12-5,06 (1H, mult), 4,12-4,01 (2H, mults), 3,69 (1H, t), 3,26 (3H, s), 2,44-2,36 (1H, mult), 2,26 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,18-2,08 (1H, mult), 2,05-1,95 (2H, br mults), 1,91-1,83 (5H, br mults), 1,71 (1H, br mult), 1,68-1,59 (1H, mult), 1,44-1,31 (2H, br mults), 1,30-1,19 (1H, br mult), 1,00 (3H, s), 0,95 (3H, s). Exemplo 25: 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0056
Etapa 1: Etil-5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carbo- xilato
[000262] A uma solução de etil-5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato (Intermediário C) (50 mg, 0,273 mmol) em tolueno (0,5 mL) foi adicionado 3,3-dimetilbutano-1,2-diol (32,3 mg, 0,273 mmol) e a mistura foi aquecida a 110 °C por 4,5 horas. A mistura resultante foi particionada entre EtOAc e água e a camada orgânica foi secada sobre MgSO4, filtrado e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,42mins; MS m/z [M+H]+ 284,3: Método 2minHighpHv03 Etapa 2: 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de potássio
[000263] A uma solução de 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-4-metili- soxazol-3-carboxilato de etila (42 mg, 0,148 mmol) em THF (4 mL) foi adicionado potássio trimetilsilanolato (19,02 mg, 0,148 mmol) e a mistura foi agitada a temperatura ambiente por 1,5 horas. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título. Etapa 3: Uma mistura de 5-((2R,4R)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N- (2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2R,4S)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2- il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2S,4R)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2- il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida e 5-((2S,4S)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2- il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida
[000264] A uma solução de potássio 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2- il)-4-metilisoxazol-3-carboxilato (43,5 mg, 0,148 mmol) em NMP (0,7 mL) foi adicionado HATU (62,0 mg, 0,163 mmol), trietilamina (45,5 μL, 0,326 mmol) e 4-amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (Intermediário D) (31,0 mg, 0,148 mmol) e a mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A uma mistura resultante foi adicionado água e EtOAc. Os orgânicos foram lavados com solução salina (x2), secado sobre MgSO4, filtrado e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título como uma mistura de diastereoisôme- ros. Exemplo 25a-25d: 5-((2R,4R)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ou 5- ((2R,4S)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ou 5- ((2S,4R)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida ou 5- ((2S,4S)-4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0057
[000265] Separação qiral de 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2- ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida usando a cromatografia Fluida Supercríti- ca proporcionou os enantiômeros individuais. DETALHES DO MÉTODO: Coluna: Chiralpak IB, 250 x 10 mm, 5um @ 35degC Fase móvel: 35% Isopropanol + 0,1% v/v DEA/65% CO2 Fluxo: 10 mL/min Detecção: UV @ 220 nm Instrumento: Berger Minigram SFC1 Exemplo 25a: Estereoisômero único de 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2- il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida SFC: Rt = 3,36 mins LC-MS : Rt = 4,11 mins ; MS m/z [M+H]+ 447,6 : Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,29 (1H, br s), 6,02 (1H, s), 4,14-4,00 (2H, mults), 3,97-3,87 (2H, mults), 3,36 (3H, s), 2,31 (3H, s), 2,23 (3H, s), 2,09-1,97 (2H, mults), 1,88 (3H, br t), 1,73 (1H, br d), 1,44-1,31 (2H, mults), 1,30-1,20 (2H, mults), 1,01 (9H, s). Exemplo 25b: Estereoisômero único de 5-(4-(terc-Butil)-1,3-dioxolan-2- il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida SFC Quiral: Rt = 3,78 mins LC-MS: Rt = 4,12 mins; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,06 (1H, br s), 6,19 (1H, s), 4,16-4,00 (3H, mults), 3,85 (1H, t), 3,30 (3H, s), 2,30 (3H, s), 2,22 (3H, s), 2,071,94 (2H, mults), 1,87 (3H, br t), 1,72 (1H, br d), 1,45-1,20 (4H, mults), 0,99 (9H, s). Exemplo 25c: Estereoisômero único de 5-(4-(terc-Butil)-1,3-dioxolan-2- il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida SFC Quiral: Rt = 4,05 mins LC-MS: Rt = 4,09 mins; MS m/z [M+H]+ 447,5; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,99 (1H, br s), 6,02 (1H, s), 4,10-4,01 (2H, mults), 3,97-3,87 (2H, mults), 3,25 (3H, s), 2,32 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,06-1,93 (2H, mults), 1,88 (3H, br t), 1,71 (1H, br d), 1,44-1,30 (2H, mults), 1,30-1,20 (2H, mults), 1,00 (9H, s). Exemplo 25d: Estereoisômero único de 5-(4-(terc-Butil)-1,3-dioxolan-2- il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4- metilisoxazol-3-carboxamida SFC Quiral: Rt = 5,95 mins LC-MS: Rt = 4,15 mins; MS m/z [M+H]+ 447,6; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,00 (1H, br s), 6,20 (1H, s), 4,16-4,09 (2H, mults), 4,07-4,00 (2H, mults), 3,27 (3H, s), 2,30 (3H, s), 2,21 (3H, s), 2,07-1,94 (2H, mults), 1,87 (3H, br t), 1,72 (1H, br d), 1,45-1,20 (4H, mults), 0,99 (9H, s). Exemplo 26: N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5- dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida
Figure img0058
[000266] O composto do título foi preparado por um método similar ao do Exemplo 25 substituindo 3,3-dimetilbutano-1,2-diol (Etapa 1) com 2,2-dimetilpropano-1,3-diol; LC-MS: Rt = 3,68 mins; MS m/z [M+H]+ 433,4; Método 8minLowpHv01 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 7,98 (1H, s), 5,58 (1H, s), 3,96 (1H, tt), 3,71 (2H, d), 3,55 (2H, d), 3,18 (3H, s), 2,26 (3H, s), 2,11 (3H, s), 1,971,86 (2H, mults), 1,80-1,74 (3H, mults), 1,62 (1H, br d), 1,33-1,11 (4H, mults), 1,23 (3H, s), 0,75 (3H, s). Intermediário A: Etil-5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato
Figure img0059
Etapa 1: Etil-4-metil-5-oxo-4,5-di-hidroisoxazol-3-carboxilato
[000267] Ao Proprionato oxalila dietila (300 g, 1,48 mol) em etanol (2 l) foi adicionado hidroxilamina hidrocloreto (124 g, 1,78 mol) e a mistura de reação foi aquecida a 80 oC por 3 horas. A mistura resultante foi resfriada a temperatura ambiente e o solvente removido sob pressão reduzida. Os resíduos foram tratados com água e DCM e o aquoso extraído com DCM. Os orgânicos combinados foram secados e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,40 (2H, q), 2,09 (3H, s), 1,38 (3H, t). Etapa 2: 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato Etil-4-metil-5-oxo-4,5- di-hidroisoxazol-3-carboxilato de etila (42,5 g, 248 mmol) e oxibrometo de fósforo (199 g, 695 mmol) foram agitados agitada e aquecidos a 80 oC. Trietilamina (34,6 mL, 248 mmol) foi adicionado gota a gota durante 15 mins e a mistura de reação foi agitada a 80 oC por 3 horas. A mistura resultante foi resfriada a temperatura ambiente. DCM (400 mL) foi adicionado e a mistura foi vertina no gelo (~400 mL) com agitação. NaOH a 2M (aq) (1250 mL) foi adicionado até pH 7 e as camadas resultantes foram separadas. A camada aquosa foi extraída com DCM (2 x 300 mL) e os extratos orgânicos resultantes foram combinados, lavados com água (400 mL), sódio tiosulfato (solução com 5% pe- so/volume, 400 mL), água (400 mL) e solução salina (400 mL). Os orgânicos foram secados sobre MgSO4 e carvão, filtrados e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0 a 30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,02 mins: MS m/z [M+H]+ 234,0: Método 2minLowpH 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 4,47 (2H, q), 2,21 (3H, s), 1,44 (3H, t). Intermediário B: Etil-5-((1R,2S)-1,2-di-hidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato
Figure img0060
Etapa 1: (E)-Etil-4-metil-5-(prop-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxilato
[000268] Uma suspensão depotássio trans-1-propeniltrifluoroborato (9,86 g, 66,7 mmol), PdCl2(dppf).DCM aduzido (907 mg, 1,11 mmol), etil-5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato (Intermediário A) (13 g) e trietilamina (7,7 mL) em EtOH (250 mL) foi desgaseificada sobre vácuo e carregado com nitrogênio antes de aquecer a 90°C por 18 h. Após resfriar a temperatura ambiente, a reação foi particionada entre EtOAc e solução salina, separada, secado sobre MgSO4 e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 5-10% De EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,30 mins; MS m/z [M+H]+ 196,2; Método 2minLowpHv03 Etapa 2: 5-((1 R,2S)-1,2-di-hidroxipropil)-4-metilisoxazol-3-carboxilato de Etila (E)-Etil-4-metil-5-(prop-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxilato (500 mg, 2,56 mmol) em terc-BuOH-água (1 mL) foi adicionado em porções a uma mistura de AD-mix-beta (3,59 g, 7,63 mmol), metano sulfonami- da (731 mg, 7,68 mmol), modificada AD-mix-β (DHQD)2PHAL (80 mg, 0,102 mmol) e ósmio tetróxido (0,836 mL de uma solução a 2,5 % em peso em terc-BuOH, 0,067 mmol) em terc-BuOH-água (1:1, 19 mL) e a mistura de reação resultante foi agitada a temperatura ambiente por 1,5 horas. Sulfeto de Sódio (3,9 g) foi adicionado em uma porção e a reação foi deixada agitando por 30 minutos. As fases foram separadas e a fase EtOAc foi secada sobre Na2SO4 e concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 65-75% De EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título (96%ee); LC-MS: Rt = 0,78 mins; MS m/z [M+H]+ 230,2; Método 2minLowpHv03 Intermediário C: Etil-5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato
Figure img0061
Etapa 1: 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxilato de Etila 5-bromo-4-metilisoxazol-3-carboxilato de Etila (Intermediário A) (15 g, 64,1 mmol) e tributil(vinil)estanano (22,48 mL, 77 mmol) foi agitada em dioxano seco (250 mL) e purgado com nitrogênio por 90 minutos a temperatura ambiente. Tetracis(trifenilfosfino)paládio (3,70 g, 3,20 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a 100 °C durante a noite. A mistura de reação foi particionada em acetato de etila (250 mL) e água (250 mL) e separada. À camada orgânica foi adicionada solução de fluoreto de sódio (~1M, 250mL) e a suspenção resultante foi filtrada através de Celite®. As camadas foram separadas e os orgânicos foram lavados com água, solução salina, secados sobre MgSO4 e filtrados. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromato- grafia eluindo com 0-30% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,20 mins: MS m/z [M+H]+ 182,5: Método 2minLowpHv03 Etapa 2: 5-formil-4-metilisoxazol-3-carboxilato de etila
[000269] Para 4-metil-5-vinilisoxazol-3-carboxilato de etila (3 g, 16,56 mmol) em THF (40 mL) e água (20 mL) a temperatura ambiente, foi adicionado periodato de sódio (10,62 g, 49,7 mmol) e Ósmio ENCAT 40 (828 mg, 0,248 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante o fim de semana. A mistura resultante foi filtrada por Celite® (5 g), lavando com EtOAc. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extraída com EtOAc. Os extratos orgânicos com-binados foram secados sobre MgSO4, filtrado e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi suspendido em DCM, soni- cada e passado através de um cartucho separador de fase. O eluente foi coletado e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 10,12 (1H, s), 4,50 (2H, q), 2,56 (3H, s), 1,46 (3H, s). Intermediário D: 4-Amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona
Figure img0062
Etapa 1: 2-Ciclo-hexil-5-metil-1H-pirazol-3(2H)-ona
Figure img0063
[000270] Ciclo-hexilhidrazina hidrocloreto (AK Scientific) (700 g, 4643 mmol) foi adicionado a uma solução agitada de DCM (3000 mL) e solução de Hidróxido de sódio a 2M com gelo (1778 mL, 3556 mmol). A mistura de reação foi agitada por 10 minutos a temperatura ambiente. As fases resultantes foram separadas e a camada aquosa foi extraída com DCM (4 x 2000 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso, filtrados e concentrados sob pressão reduzida. O sólido resultante foi dissolvido em água (1300 mL), em que ácido acético (1300 mL) e etila acetoacetato (Fluka) (450 mL, 3556 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 85 °C por 1 hora. A mistura resultante foi concentrada ate secura sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM (3000 mL) e água (1000 mL). O pH goi ajustado a pH 9 usando K2CO3 a 2M (aq), as fases foram separadas e o extrato orgânico foi lavado com solução salina (1 x 2 L). A primeira camada aquosa foi saturada com cloreto de sódio e as fases combinadas aquosas foram extraídas com DCM (4 x 2 L). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um sólido. O sólido cru foi pulverizado, TBME (2000 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada a 50°C por 1 hora, seguido por 1 hora a temperatura ambiente. A suspenção resultante foi filtrada e lavada com TBME (4 x 500 mL). O sólido isolado foi secado sob vácuo a 45 °C por 16 horas para fornecer o composto do título; 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 10,62 (1H, br s), 5,06 (1H, s), 3,89 (1H, mult), 1,98 (3H, s), 1,81-1,55 (7H, mults), 1,36-1,22 (2H, mults), 1,18-1,05 (1H, mult). Etapa 2: 2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona
Figure img0064
[000271] Uma suspensão de 2-ciclo-hexil-5-metil-1H-pirazol-3(2H)- ona (525 g, 2834 mmol) em N,N-dimetilformamida (2200 mL) foi aquecida a 40 °C e iodeto de metila (532 mL, 8502 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi aquecida a 70 °C por 20 horas. Mais iodeto de metila (177 mL, 2834 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 75 °C por 3,5 horas, e então 80 °C por 20 horas. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi triturado com TBME (2000 mL). O produto foi coletado pro filtração, lavado com TBME (5x 500 mL) para fornecer um sólido. O sólido isolado foi suspendido em DCM (2500 mL) e água (500 mL) e o pH ajustado a pH 9 usando uma solução aquosa a 2M de K2CO3 (1700 mL). As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com DCM (3 x 500 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina (1000 mL) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi dissolvido em acetato de etila (2000 mL), secado sobre sulfato de sódio anidroso e filtrado através de 200 g de sílica gel (40-63 μm), eluindo com 10% de MeOH em EtOAc (7 x 300 mL). O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida e secado a 65°C para fornecer o composto do título; 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 5,02 (1H, s), 3,84 (1H, tt), 3,14 (3H, s), 2,06 (3H, s), 1,98-1,86 (2H, mults), 1,78-1,53 (5H, mults), 1,33-1,20 (2H, mults), 1,18-1,04 (1H, mult). Etapa 3: 2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-4-nitro-1H-pirazol-3(2H)-ona
Figure img0065
[000272] Para ácido trifluoroacético (1940 mL) resfriada a -15 °C foi adicionado 2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona (535 g, 2231 mmol) e a mistura de reação foi resfriada a 0°C. Ácido nítrico a 90% (211 mL, 4461 mmol) foi adicionado gota a gota durante 90 minutos mantendo a temperatura abaixo de 15 °C e a mistura de reação foi agitada por 30 minutos a 10 °C. A mistura resultante foi lentamente vertida em água gelada (8 L) e agitada por 30 minutos. O sólido foi coletado por filtração e lavado com água (2 x 2 L), solução saturada de Bicarbonato de sódio (1 x 2 L), água (2 x 2 L), TBME (3 x 2 L) e heptano (2 x 2 L). Secou-se o sólido isolado no forno de vácuo para fornecer o composto do título; 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 4,06 (1H, tt), 3,61 (3H, s), 2,57 (3H, t), 2,15-2,03 (2H, mults), 1,81-1,65 (4H, mults), 1,64-1,55 (1H, mult), 1,38-1,24 (2H, mults), 1,19-1,06 (1H, mult). Etapa 4: 4-Amino-2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona
Figure img0066
[000273] Para 2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-4-nitro-1H-pirazol-3(2H)-ona (415 g, 1,73 mol) em MeOH (4500 mL) e THF (4500 mL) foi adicionado Pd/C a 10%(70 g) e a mistura de reação foi hidrogenada a 0,1 bar a temperatura ambiente por 57,5 h. A mistura resultante foi filtrada através de um filtro de pressão e lavada com metanol (1x1 L) e THF (2x 1 L). O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo vermelho escuro. O óleo foi dissolvido imediatamente em TBME (4 L), concentrado sob pressão reduzida para cerca de 2 L e semeado (100 mg). A suspensão foi agitada por 2h a temperatura ambiente e resfrada com banho de gelo por 1 hora. O sólido foi coletado por filtração e lavado com TBME com gelo em porções até que o filtrado ficou incolor e foi secado sob vácuo para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt 0,55 mins; MS m/z 210,1 [M+H]+; Método (SRPb) 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 3,68 (1H, tt), 3,53 (2H, br s), 2,77 (3H, s), 1,96-1,83 (2H, mults), 1,92 (3H, s), 1,78-1,69 (2H, mults), 1,64-1,53 (3H, mults), 1,33-1,19 (2H, mults), 1,17-1,04 (1H, mult). Intermediário E: 4-Amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona
Figure img0067
Etapa 1: terc-Butil-2-ciclobutilidenehidrazinacarboxilato
[000274] Uma mistura de ciclobutanona (16,96 mL, 227 mmol) e terc- butila hidrazinacarboxilato (30 g, 227 mmol) em isoexano (378 mL), sob nitrogênio foi agitada em refluxo por 1 hora. A mistura de reação foi resfriada a temperatura ambiente e agitada por 1 hora. A suspenção resultante foi filtrada, o sólido foi enxaguado com iso-hexano (x2). O sóli-do foi secado sob vácuo a 30 oC para fornecer o composto do título; 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 7,16 (1H, br s), 3,02 (2H, mult), 2,81 (2H, mult), 2,10-2,00 (2H, mult), 1,53 (9H, s). Etapa 2: 2-ciclobutilhidrazinacarboxilato de terc-Butila
[000275] Uma solução de terc-butil-2-ciclobutilidenehidrazinacarbo- xilato (5,0 g, 27,1 mmol) em THF (50 mL) foi adicionado gota a gota durante 1,5 horas a uma solução de complexo tetra-hidrofurano bora- no (33,9 mL, 33,9 mmol) sob uma atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2,5 horas. Borano tetra-hidrofurano (3 mL, 3 mmol) foi adicionado gota a gota e a mistura foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi saciada cautelosamente pela adição de água (50 mL) e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluída com água (30 mL) e extraído com EtOAc (2 x 200 mL), usando solução salina para ajudar na separação. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina, secados sobre MgSO4, filtrado e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 0-10% De EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título.
Etapa 3: 1-Ciclobutil-2-metilhidrazina
[000276] Uma solução de terc-butil-2-ciclobutilhidrazinacarboxilato (1,0 g, 5,37 mmol) em THF (26,8 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de 2,4 M hidreto de alumínio e lítio em THF (11,63 mL, 27,9 mmol) sob uma atmosfera de nitrogênio. Uma vez que a adição fou completada a mistura de reação foi agitada em refluxo por 20 horas. A mistura resultante foi resfriada usando um banho de gelo em que água (1 mL), NaOH a 15% (1 mL) e água (3 mL) foram adicionados. A sus- penção resultante foi agitada por 15 minutos e em seguida filtrada através de Celite®. Ao filtrado foi adicionado HCl (4M em dioxano, 1,4 mL, 5,6 mmol) e o solvente removido sob pressão reduzida, azeotropia com EtOH (x2). A mistura foi triturada com éter e o sólido resultante foi filtrado e lavado com éter. O sólido foi secado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título.
Etapa 4: 2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3-oxobutanoato de (S)-Metila
[000277] Uma solução de Dess-Martin periodinano (2,84 g, 6,69 mmol) em DCM (50 mL) foi adicionado a uma solução de Boc-L- treonina metila éster (1,3g, 5,57 mmol) em DCM (20 mL) a temperatu- ra ambiente e so uma atmosfera de nitrogênio. A suspensão branca foi agitada a temperatura ambiente por 3 horas. A mistura resultante foi diluída com DCM (50 mL) e saciada pela adição de NaHCO3 saturado (aq) (50 mL) contendo 0,5 M de sulfeto de sódio (6,2 g). A fases foram separadas e a camada orgânica foi lavada com NaHCO3 satura- do(aq) (50 mL) e água, secado sobre MgSO4, filtrado e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia eluindo com 10-50% De EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 5,72 (1H, br d), 5,07 (1H, d), 3,84 (3H, s), 2,38 (3H, s), 1,46 (9H, s).
Etapa 5: terc-Butil-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol -4-il)carbamato
[000278] Uma solução de (S)-metil-2-((terc-butoxicarbonil)amino)-3- oxobutanoato (400 mg, 1,730 mmol) em EtOAc (6,407 mL) foi tratada com 1-ciclobutil-2-metilhidrazina (284 mg, 2,076 mmol) seguido por sódio acetato (213 mg, 2,59 mmol). A suspensão foi agitada a temperatura ambiente por 30 minutos e a 80 °C por 4 horas. A mistura resultante foi diluída com água (10 mL) e EtOAc foi adicionado. As camadas foram separadas e o aquoso extraído com EtOAc. As camadas orgânica combinadas foram lavados com solução salina, secado sobre MgSO4, filtrado e o solvente removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e iso-hexano foi adicionado. A suspenção resultante foi filtrada e o sólido enxaguado com iso-hexano. O filtrado foi concentrada sob pressão reduzida. O material bruto foi em segna ad- sorvido em sílica e purificação por cromatografia eluindo com 50-100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 6,19 (1H, br s), 4,61 (1H, mult), 3,23 (3H, s), 2,85-2,72 (2H, mults), 2,39-2,30 (2H, mults), 2,17 (3H, s), 1,93-1,83 (1H, mult), 1,81-1,71 (1H, mult), 1,48 (9H, s).
Etapa 6: 4-Amino-2-ciclobutil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona
[000279] A uma solução de terc-butila (2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)carbamato em DCM (5 mL) foi adicionado ácido enxofréico (0,034 mL, 0,634 mmol).
[000280] A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. Mais ácido enxofréico (0,068 mL, 1,268 mmol) foi adicionado à mistura de reação e essa foi agitada por 2 horas. A mistura resultante foi diluída com DCM e água e as camadas separadas. As camadas aquosas foram tornadas básicas com a adição gota a gota de NaOH a 2M (aq). A camada aquosa foi extraída com DCM (x3) e os extratos orgânicos combinados foram passados através de um cartucho separador de fase. O eluente foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,54 (1H, mult), 2,94 (3H, s), 2,72 (2H, mults), 2,43 (2H, br s), 2,36-2,26 (2H, mults), 2,04 (3H, s), 1,90-1,78 (1H, mult), 1,78-1,67 (1H, mult). Intermediário F: 2,2-Dimetilhex-5-en-3-ol
Figure img0068
[000281] A uma solução de trimetilacetaldeído (10,2 mL, 90,9 mmol) em dietil éter (200 mL) a 0 °C. foi adicionado brometo de alilmagnésio (100 mL, 1M em éter). A mistura de reação foi agitada a 0°C por 1 hora. A mistura resultante foi saciada com cloreto de amônio saturado e extraído com dietila éter. Os extratos orgânicos foram lavados com solução salina, secados sobre Na2SO4 e filtrados. O solvente foi cuidadosamente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; 1H RMN (400MHz, CDCl3) δ 5,95-5,83 (1H, mult), 5,18 (1H, mult), 5,15 (1H, mult), 3,28 (1H, mult), 2,45-2,35 (1H, mult), 2,06-1,95 (1H, mult), 1,62 (1H, s), 0,95 (9H, s). Intermediário G: 4-Amino-2-isopropil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona
Figure img0069
Etapa 1: 2-((((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonil)amino)-3-hidroxibutano- ato de metila
[000282] A uma solução de ácido 2-((((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbo- nil)amino)-3-hidroxibutanoico (5 g, 14,65 mmol) em MeOH (50 mL) foi adicionado H2SO4 (0,781 mL, 14,65 mmol). A mistura de reação foi agitada em refluxo durante a noite. A mistura resultante foi resfriada a temperatura ambiente e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia usando um gradientee de 0 a 100% de EtOAc em iso-hexano forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,27mins; MS m/z [M+H]+ 356,3: Método 2minLowpHv03
Etapa 2: Metil-2-((((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbonil)amino)-3-oxobuta- noato
[000283] A uma solução de metil-2-((((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbo- nil)amino)-3-hidroxibutanoato (1,5 g, 4,22 mmol) em DCM (25 mL) foi adicionado em porções Dess-Martin periodinano (1,790 g, 4,22 mmol). A mistura de reação foi agitada a temperatura ambiente durante a noite. A mistura resultante foi diluída com DCM e a 1:1 carbonato de sódio a 2M (aq) e solução saturada de sulfeto de sódio(aq) foram adicionados e agitados a temperatura ambiente por 15 minutos. As camadas foram separadas e A camada orgânica secada sobre MgSO4 e filtrada. O solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o compos- to do título; LC-MS: Rt = 1,36 mins; MS m/z [M+H]+ 354,3: Método 2minLowpHv03
Etapa 3: (9H-Fluoren-9-il)metila (2-isopropil-5-metil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)carbamato
[000284] A uma solução de metil-2-((((9H-fluoren-9-il)metóxi)carbo- nil)amino)-3-oxobutanoato (2,766 g, 7,83 mmol) em 1,25M HCl em etanol (25 mL) foi adicionado hidrocloreto de isopropilhidrazina (1,298 g, 11,74 mmol). A mistura de reação foi agitada em refluxo. Após conclusão a mistura de reação foi resfriada a temperatura ambiente e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O material bruto foi ad- sorvido sobre sílica e purificação por cromatografia usando um gradi- entee de 0 a 100% de EtOAc em iso-hexano e 10% MeOH em EtOAc forneceu material bruto. O material bruto foi dissolvido em IPA ao qual água foi adicionada para fornecer uma mistura turva que foi sonicada e deixada parada em temperatura ambiente. A suspenção resultante foi filtrada e o sólido secado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título; LC-MS: Rt = 1,14 mins; MS m/z [M+H]+ 378,3/379,3: Método 2minLowpHv03
Etapa 4: (9H-Fluoren-9-il)metila (2-isopropil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di- hidro-1H-pirazol-4-il)carbamato
[000285] A uma solução de (9H-fluoren-9-il)metila (2-isopropil-5- metil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)carbamato (2,109 g, 5,59 mmol) em DMF (30 mL) foi adicionado iodeto de metila (2,80 mL, 44,7 mmol). A mistura de reação foi agitada a 90 °C durante a noite. A mistura resultante foi saciada com IPA e água e extraído com EtOAc. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com solução salina, secados sobre MgSO4, filtrado e o solvente removido sob pressão reduzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia usando um gradientee de 0-10% de MeOH em EtOAc forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,20 mins; MS m/z [M+H]+ 392,4: Método 2minLowpHv03
Etapa 5: 4-Amino-2-isopropil-1,5-dimetil-1H-pirazol-3(2H)-ona
[000286] A uma solução de (9H-fluoren-9-il)metila (2-isopropil-1,5- dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)carbamato (2,047 g, 5,23 mmol) em DMF (30 mL) foi adicionado piperidina (2,59 mL, 26,1 mmol) a temperatura ambiente. Após conclusão da adição a mistura de reação foi adicionada a água (30 mL). A suspenção resultante foi diluída com água (100 mL) e extraída com EtOAc. Os combinados orgânicos foramm extraídos com HCl a 2 M (aq) e os extractos aquosos acídicos foram neutralizados com uma solução saturada de Bicarbonato de sódio e carregados em um cartucho C18. A coluna foi eluída com água e o aquoso recolhido foi suspenso com SCX-2 e filtrado. A resina foi en-xaguada com MeOH e amônia a 7M em MeOH. O MeOH e o solvente filtrado aquoso foi removido sob pressão reduzida. MeOH (150 mL) foi adicionado à mistura resultante, sonicado, filtrado e o filtrado foi con-centrada sob pressão reduzida. EtOH foi adicionado a uma mistura resultante e essa foi filtrada. O filtrado foi concentrada sob pressão re-duzida. O material bruto foi adsorvido sobre sílica e purificação por cromatografia usando uma gradientee de 0-10% de MeOH em DCM forneceu material bruto. O material bruto em MeOH foi supenso com SCX-2 (30 g). A suspensão foi filtrada e lavada com MeOH. A resina foi então eluída com 7M de NH3 em MeOH. A amônia metanólica foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer o material bruto. O material bruto foi em seguoda adsorvido em silica e purificação por cromatografia usando um gradientee de 0-10% de MeOH em DCM forneceu o composto do título; LC-MS: Rt = 1,48 mins; MS m/z [M+H]+ 170,2: 8minHighpHv01 1H RMN (400MHz, DMSO-d6) δ 9,72 (2H, br s), 4,42 (1H, mult), 3,28 (3H, s), 2,25 (3H, s), 1,36 (6H, d).

Claims (17)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (I):
Figure img0070
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na qual R1 é (C3-C6)alquila ou (C3-C6)cicloalquila; R2 é metila; R3 é selecionado de (C6-C10)alquila ramificada, (C6- C10)alquenila ramificada, (C5-C8)cicloalquenila, (C5-C8)cicloalquila, ou Het; sendo que a (C5-C8)cicloalquenila ou (C5-C8)cicloalquila é não substituída ou é substituída por um, dois, três ou quatro substituintes R4; e sendo que Het é substituído por um, dois, três ou quatro substi- tuintes R4; cada R4 é independentemente selecionado dentre halo, (C1C4) alquila, halo(C1-C4)alquila, (C1-C4)alcóxi, ou halo(C1-C4)alcóxi; ou dois Grupos R4, quando ligados ao mesmo átomo de carbono, podem ser tomados em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados para formar um anel ciclopentila, tetra-hidrofurano ou dioxolano; sendo que Het é um anel heterocíclico totalmente saturado ou parcialmente saturado de 5 ou 6 membros compreendendo (a) 1 átomo de oxigênio na posição 2 ou 3, ou (b) 2 átomos de oxigênio nas posições 2 e 5, ou nas posições 2 e 6, sendo que a numeração é relativa ao ponto de ligação; e (C5-C8)cicloalquila pode ser um anel monocíclico ou um sis-tema em anel em ponte contendo 5, 6, 7 ou 8 átomos de carbono.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R1 é isopropila, ciclobutila ou ciclohexila.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado a partir de 2,2-dimetilpentila, 2,2-dimetilpent-2- enila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, tetra-hidropiranila, di-hi- dropiranila, dioxanila, tetra-hidrofuranila, dioxolanila e biciclo [2,2,2] oc-tanila; sendo que o anel ciclopentila, ciclohexila, ciclohexenila ou anel biciclo [2,2,2]octanila é não substituído ou é substituído por um, dois, três ou quatro substituintes R 4; e sendo que a tetrahidropiranila, dihi- dropiralina, dioxanila, tetrahidrofuranila, ou anel dioxolanila é substituído por um, dois, trê ou quatro substituintes R4; e cada R4 é independentemente selecionado dentre halo, (C1-C4)alquila, halo(C1-C4)alquila, (C1-C4)alcóxi, ou halo(C1-C4)alcóxi; ou dois Grupos R4, quando ligado ao mesmo átomo de carbono, podem ser tomados em conjunto com o átomo de carbono ao qual estão ligados para formar um anel de tetrahidrofurano ou dioxolano.
4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, carac-terizado pelo fato de que: R3 é:
Figure img0071
I (R4)m^O (R4)m^O m é 1, 2, 3 ou 4.
5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, carac-terizado pelo fato de que cada R4 é independentemente selecionado dentre metila, isopropila, terc-butila e metóxi.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste em: [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- isopropilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6-etil- 4-metilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6,6- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4- etilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; [5-(4-(terc-Butil)ciclo-hex-1-en-1-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo- 2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(4-metilciclo-hex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida]; 5-(Ciclo-hept-1-en-1-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(4-(trifluorometil)ciclo-hex-1-en-1-il)isoxazol-3-carboxamida]; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (espiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida; [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(1-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4- dimetilciclopent-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil- 5-(2-oxaespiro [4,5]dec-7-en-8-il)isoxazol-3-carboxamida]; [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4-iso- propoxiciclo-hex-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4,4-di- metilciclo-hexil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; [N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3- dimetilciclopentil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(3,3-di- metilbutil)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; (Z)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5- (3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; (E)-N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5- (3,3-dimetilbut-1-en-1-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; 5-Ciclo-hexil-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol- 4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3-carboxamida; 5-(6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-di- metil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; 5-(6-(terc-butil)-4-metoxitetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-di- metil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; 5-(6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclobutil-1,5-dimetil-3-oxo -2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; 5-(6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; 5-(6-(terc-butil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-isopropil-1,5-dimetil-3- oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(6-iso- propil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (6-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- ((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3-carboxamida; [5-(4-Bromo-5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dime- til-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida]; N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (5-metil-3,6-di-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida; N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metil-5- (5-metiltetra-hidro-2H-piran-2-il)isoxazol-3-carboxamida; 5-(4-(2-bromopropan-2-il)tetra-hidrofuran-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dime- til-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(4-iso- propiltetra-hidrofuran-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; 5-(4-(terc-butil)-1,3-dioxolan-2-il)-N-(2-ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3- di-hidro-1H-pirazol-4-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-di- metil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3-carboxamida; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro-1H- pirazol-4-il)-4-metil-5-((2R,3S)-3,5,5-trimetil-1,4-dioxan-2-il)isoxazol-3 carboxamida, apresentando a seguinte Fórmula:
Figure img0072
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que é N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-5-(5,5-dimetil-1,3-dioxan-2-il)-4-metilisoxazol-3- carboxamida, e que apresenta a seguinte Fórmula:
Figure img0073
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é N-(2-Ciclo-hexil-1,5-dimetil-3-oxo-2,3-di-hidro- 1H-pirazol-4-il)-4-metil-5-(1,4-dioxaespiro [4,5]decan-8-il)isoxazol-3- carboxamida, e que apresenta a seguinte Fórmula:
Figure img0074
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
10. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais veículos farmaceuticamentes aceitáveis.
11. Combinação, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais agentes terapeutica- mente ativos.
12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, carac-terizado pelo fato de que é para uso no tratamento de um distúrbio ou doença selecionado entre Hipertensão pulmonar, incluindo hipertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cicatrização de fraturas.
13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 9, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, carac-terizado pelo fato de que é para uso no tratamento de um distúrbio ou doença selecionado entre glaucoma, Telangiectasia hemorrágica he-reditária (HHT), proteinúria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
14. Composto, de acordo com a reivindicação 12, caracteri-zado pelo fato de que a fibrose é fibrose pulmonar idiopática.
15. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medi-camento para tratamento de um um distúrbio ou doença selecionado dentre Hipertensão pulmonar, caracterizado pelo fato de que inclui hi-pertensão pulmonar arterial (PAH), Fibrose, Artrite reumatoide, e Cica- trização de fraturas.
16. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medi-camento para o tratamento de um distúrbio ou doença selecionado entre glaucoma, Telangiectasia hemorrágica hereditária (HHT), proteinú- ria, cicatrização de feridas, COPD e asma.
17. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que a fibrose é fibrose pulmonar idiopática.
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201623288A (zh) 2014-05-14 2016-07-01 諾華公司 甲醯胺衍生物
US9403810B2 (en) 2014-05-14 2016-08-02 Novartis Ag Carboxamide derivatives
ES2933184T3 (es) * 2017-11-01 2023-02-02 Bristol Myers Squibb Co Compuestos espirocíclicos como moduladores del receptor farnesoide X
CN108689976B (zh) * 2018-07-23 2021-12-28 陕西师范大学 5-磺基水杨酸协同二氯二茂钛催化合成4-碘代四氢吡喃衍生物的方法
WO2022011083A1 (en) * 2020-07-09 2022-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Pyrazolone formyl peptide 2 receptor agonists
EP4211171A2 (en) 2020-09-10 2023-07-19 Precirix N.V. Antibody fragment against fap
WO2023203135A1 (en) 2022-04-22 2023-10-26 Precirix N.V. Improved radiolabelled antibody
IL318992A (en) 2022-05-02 2025-04-01 Precirix N V Cancer treatment through advance directives
WO2024242594A1 (ru) * 2023-05-23 2024-11-28 Общество С Ограниченной Ответственностью "Ифар" Средство для лечения легочных гипертензий

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2655009A1 (de) 1976-12-04 1978-06-15 Hoechst Ag Isoxazolderivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende mittel
US7354722B1 (en) 1999-06-11 2008-04-08 Signal Pharmaceuticals Modulators of Smurf and BMP/TGFβ signaling pathways
AU782355B2 (en) * 1999-06-11 2005-07-21 Hsc Research And Development Limited Partnership Antagonists of BMP and TGFbeta signalling pathways
WO2004078163A2 (en) 2003-02-28 2004-09-16 Transform Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical co-crystal compositions of drugs such as carbamazepine, celecoxib, olanzapine, itraconazole, topiramate, modafinil, 5-fluorouracil, hydrochlorothiazide, acetaminophen, aspirin, flurbiprofen, phenytoin and ibuprofen
GB0312368D0 (en) 2003-05-30 2003-07-02 Univ Aston Novel ureido- and amido-pyrazolone derivatives
EP1667983A4 (en) 2003-09-23 2010-07-21 Merck Sharp & Dohme PYRAZOL MODULATORS OF METABOTROPIC GLUTAMATE RECEPTORS
US7291743B2 (en) 2005-03-29 2007-11-06 Geneblue Corporation Isoxazole derivatives and methods of treating nitric oxide mediated diseases
WO2008121861A2 (en) 2007-03-28 2008-10-09 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyrazole and pyrrole compounds useful in treating iron disorders
US20090069288A1 (en) 2007-07-16 2009-03-12 Breinlinger Eric C Novel therapeutic compounds
JP2011511756A (ja) 2007-08-02 2011-04-14 ナームローゼ・フエンノートチヤツプ・オルガノン Ｔｒｐｖ１モジュレータとしての５−フェニル−イソオキサゾール−３−カルボキサミド誘導体
ES2477878T3 (es) 2007-08-22 2014-07-18 Irm Llc Compuestos y composiciones de 5-(4-(aloalcoxi)fenil)pirimidin-2-amina como inhibidores de quinasas
AU2008345225A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-09 University Of Rochester Method for altering the lifespan of eukaryotic organisms
WO2011151361A1 (en) 2010-06-03 2011-12-08 Glaxo Group Limited Novel compounds
CA2823877C (en) 2011-02-18 2020-01-07 Actelion Pharmaceuticals Ltd Novel pyrazole and imidazole derivatives useful as orexin antagonists
US9403810B2 (en) 2014-05-14 2016-08-02 Novartis Ag Carboxamide derivatives
TW201623288A (zh) 2014-05-14 2016-07-01 諾華公司 甲醯胺衍生物
KR20170002623A (ko) 2014-05-14 2017-01-06 화이자 인코포레이티드 피라졸로피리딘 및 피라졸로피리미딘
WO2015173659A2 (en) * 2014-05-14 2015-11-19 Novartis Ag Carboxamide derivatives

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Publication number Publication date
UY36124A (es) 2016-01-08
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US20190381011A1 (en) 2019-12-19
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PL3143018T3 (pl) 2021-08-30
US9403810B2 (en) 2016-08-02
EP3143018A1 (en) 2017-03-22
CU20160166A7 (es) 2017-03-03
US10195181B2 (en) 2019-02-05
IL248785A0 (en) 2017-01-31
AP2016009550A0 (en) 2016-11-30
IL248785B (en) 2020-04-30
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