TWI714528B - 甲醯胺衍生物 - Google Patents

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Abstract

本發明提供一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽；
Figure 104115287-A0305-02-0001-1
一種用於製造本發明化合物的方法；及其治療用途。本發明進一步提供藥理學上活性劑的組合與醫藥組合物。

Description

甲醯胺衍生物
本發明描述適用於療法之有機化合物。該等化合物顯示作為選擇性Smurf-1抑制劑之特性且因此可適用於治療多種病症，諸如肺動脈高血壓、青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合以及COPD及哮喘。
Smurf-1(Smad泛素化調節因子1)為E3泛素連接酶之HECT家族之一員，其標記經由泛素依賴性蛋白分解路徑進行蛋白分解分解之特異性受質。Smurf-1之主要受質包括RhoA、骨形態生成蛋白(BMP)、受體(BMPR)1及2、smad1及5、TNFα受體相關因子(TRAF)6及myD88(Andrews,P.S.等人Assay Drug Dev.Technol.2010)。鑒於受質之清單，確認Smurf-1在調節BMP信號傳導(Chen,D等人Growth Factors,2004)、神經元細胞極性(Stiess,M.及Bradke,F.Neuron,2011)、細胞遷移(Huang,C.Cell Adh.Migr.2010)、腫瘤細胞侵襲(Sahai,E.等人JCB,2007)、粒線體自體吞噬(Orvedahl,A.Nature,2011)、間葉細胞幹細胞增殖(Zhao,L.等人J.Bone Miner.Res.2010)及上皮間葉細胞轉化(EMT)(Ozdamar,B等人Science 2005)中的作用。
肺動脈高血壓(PAH)為多種病源學之危及生命的侵襲性及複雜疾病，且特徵在於引起右心室肥大/衰竭且在大多數情況下，過早死亡之進行性肺血管病變。當前藥理學療法為緩解性的。儘管已觀測到預 期存活期之改良，但關注於改變疾病之血管收縮因素之當前療法未停止或逆轉疾病進程，且移植(雙肺或心-肺)仍為唯一治癒性治療。鑒於當前治療類別之有限作用，需要靶向PAH之潛在進行性肺血管重塑之新穎療法。
轉型生長因子β(TGF-β)超家族受體骨形態生成蛋白受體II(BMPR-II)基因之生殖系突變在70%可遺傳及一些偶發性形式之特發性PAH(IPAH)中盛行。骨形態發生蛋白質為屬於TGF-β超家族之信號傳導分子。骨形態發生蛋白質最初由於其誘發軟骨及骨形成之能力而被發現，且接著鑑別為調節許多細胞類型(包括骨母細胞、上皮細胞、神經元、免疫細胞及平滑肌細胞)中之多種功能(諸如增殖、分化及細胞凋亡)的多功能蛋白質。迄今為止，已發現超過20種哺乳動物BMP，但僅三種I型及三種II型受體(分別為BMPR-I及BMPR-II)能夠與哺乳動物中選殖之BMP結合。自多種細胞類型(包括肺血管平滑肌細胞及內皮細胞)合成及分泌骨形態發生蛋白質。除BMPR-I及BMPR-II之突變以外，來自非家族性PAH患者之肺顯示顯著降低之血管BMPR-I及BMPR-II含量，意指PAH之多種形式中破壞BMP信號傳導之關鍵作用(Du,L等人N.Eng.J.Med,2003)。因此，PAH患者之肺脈管中BMP信號傳導之復原在用於治療PAH之新穎抗重塑療法之發展中受到極大關注。
已證實Smurf-1調節多種細胞類型中BMPR-I、BMPR-II以及smad1及5之分解，包括骨母細胞(Zhao,M等人JBC,2003)、成肌細胞(Ying,SX等人JBC,2003)、肺上皮細胞(Shi W等人，Am.J.Physiol.Cell.Mol.Physiol,2004)、神經元組織(Kallan,T等人Mol.Cell.Biol,2009)及心內膜細胞(Towsend,TA等人，Cells Tissues Organs,2011)。最近，出現第一條支持Smurf-1在PAH中之作用的證據，其中在PAH之慢性低氧及野百合鹼臨床前活體內模型中觀測到增 加含量之Smurf-1且與BMPR1及2之下調相關(Murakami,K等人，Exp.Biol.Med,2010及Yang,J.等人Circ.Res,2010)。
仍然需要用於肺動脈高血壓之新穎治療及療法。本發明提供化合物、其醫藥學上可接受之鹽或共晶體、其醫藥組合物及其組合，該等化合物為Smurf-1抑制劑。本發明亦提供治療、預防或改善肺動脈高血壓之方法，其包含投與有需要之個體有效量之Smurf-1抑制劑。
根據本發明之第一態樣，實施例1，提供式(I)化合物：
Figure 104115287-A0305-02-0005-4
或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其中R1為(C3-C6)烷基或(C3-C6)環烷基；R2為甲基；R3係選自(C6-C10)分支鏈烷基、(C6-C10)分支鏈烯基、(C5-C8)環烯基、(C5-C8)環烷基或Het；其中(C5-C8)環烯基或(C5-C8)環烷基未經取代或經一個、兩個、三個或四個取代基R4取代；及其中Het經一個、兩個、三個或四個取代基R4取代；各R4獨立地選自鹵基、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或鹵基(C1-C4)烷氧基；或兩個R4基團在連接至同一個碳原子時可與其所連接之碳原子共同形成環戊基、四氫呋喃或二氧雜環戊烷環；及Het為5或6員完全飽和或部分飽和雜環，其包含a)2或3位置的1個氧原子，或b)2及5或2及6位置的2個氧原子，其中編號係相對於連接 點；及(C5-C8)環烷基可為含有5、6、7或8個碳原子之單環或橋聯環系統。
在另一實施例中，提供如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一個實施例中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含治療有效量的如式(I)定義之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，或其子式及一或多種醫藥學上可接受之載劑。在另一個實施例中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含治療有效量的如式(I)定義之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或其子式，及一或多種醫藥學上可接受之載劑。
在另一實施例中，本發明提供治療選自以下之病症或疾病的方法：肺高血壓(包括肺動脈高血壓(PAH))、纖維化、類風濕性關節炎、骨折癒合、青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合以及COPD及哮喘，其包含投與個體治療有效量之如式(I)之定義之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，或其子式或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。在一些實施例中，投與個體治療有效量之如式(I)之定義之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在其他實施例中，投與個體治療有效量之如式(I)之亞屬之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。其他具體實例提供治療選自以下之病症或疾病的方法：青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
在另一實施例中，本發明提供組合，特定言之，醫藥組合，其包含治療有效量之如式(I)之定義之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，或其子式及一或多種治療活性劑。
本文描述本發明之各種實施例。
因此，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，上文描述為實施例1。
實施例2.如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其中R1為異丙基、環丁基或環己基。
實施例3.如實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其中R1為環己基。
實施例4.如任一前述實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其中R3係選自2,2-二甲基戊基、2,2-二甲基戊-2-烯基、環戊基、環己基、環己烯基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、二氧雜環己烷基、四氫呋喃基、二氧雜環戊烷基及雙環[2.2.2]辛基；其中環戊基、環己基、環己烯基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、二氧雜環己烷基、四氫呋喃基、二氧雜環戊烷基或雙環[2.2.2]辛基環未經取代或經一個、兩個、三個或四個取代基R4取代；及各R4獨立地選自鹵基、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或鹵基(C1-C4)烷氧基；或兩個R4基團在連接至同一個碳原子時可與其所連接之碳原子共同形成四氫呋喃或二氧雜環戊烷環。
實施例5.如任一前述實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其中R3為
Figure 104115287-A0305-02-0007-5
且m為1、2、3或4。實施例6.如任一前述實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽 或共晶體，其中R3為
Figure 104115287-A0305-02-0008-7
且m為1、2、3或4。
實施例7.如任一前述實施例之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其中各R4獨立地選自甲基、異丙基、第三丁基及甲氧基。
實施例8.如實施例1之式(I)化合物，其中該化合物係選自
實例1
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；
實例1.1
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6-乙基-4-甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例1.2
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6,6-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例1.3
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-乙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；
實例1.4
[5-(4-(第三丁基)環己-1-烯-1-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；
實例1.5
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(4-甲基環己-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲醯胺]；
實例1.6
5-(環庚-1-烯-1-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例1.7
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(4-(三氟甲基)環己-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲醯胺]；
實例2
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺；
實例2.1
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]；
實例2.2
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例3
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例4
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]；
實例5
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；
實例6
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例6.1
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基環戊基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；
實例7
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例8
(Z)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例9
(E)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例10
5-環己基-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例11
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺；
實例12
5-(6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例13
5-(6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例14
5-(6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-
二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例15
5-(6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例16
5-(6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例17
5-(6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例18
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6-異丙基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例19
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；
實例20
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；
實例21.1
[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；
實例21.2
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；
實例22
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；
實例23
5-(4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例24
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例25
5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例26
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。
實施例9.如實施例1之式(I)化合物，其中該化合物係選自
實例20
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；
實例26
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例2.2
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5- (4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；
實例2.1
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]；及
實例11
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。
實施例10.如實施例1之式(I)化合物，其中該化合物為
實例20
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺，或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。
實施例11.如實施例1之式(I)化合物，其中該化合物為
實例26
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺，或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。
實施例12.如實施例1之式(I)化合物，其中該化合物為
實例2.2
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。
實施例13.如實施例1之式(I)化合物，其中該化合物為
實例2.1
[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲 基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。
實施例14.如實施例1之式(I)化合物，其中該化合物為
實例11
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體。
如本文所使用，術語「鹵基」(或鹵素)係指氟、溴、氯或碘，特定言之氟、氯。經鹵素取代之基團及部分，諸如經鹵素取代之烷基(鹵烷基)可為單鹵化、多鹵化或全鹵化。
如本文所使用，術語「雜原子」係指氮(N)、氧(O)或硫(S)原子，特定言之氮或氧。
如本文所使用，術語「烷基」係指具有至多10個碳原子之完全飽和分支鏈或未分支烴部分。除非另外提供，否則烷基係指具有1至10個碳原子、1至6個碳原子或1至4個碳原子之烴部分。烷基之代表性實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基及其類似基團。分支鏈烷基之代表性實例包括(但不限於)異丙基、第二丁基、異丁基、第三丁基、異戊基、3-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基及其類似基團。經取代之烷基為含有一或多個，諸如一個、兩個或三個選自鹵素、羥基或烷氧基之取代基之烷基。
如本文所使用，術語「鹵烷基」係指經一或多個如本文所定義之鹵基取代之如本文所定義之烷基。鹵烷基可為單鹵烷基、二鹵烷基或多鹵烷基，包括全鹵烷基。單鹵烷基可在烷基內具有一個碘基、溴 基、氯基或氟基。二鹵烷基及多鹵烷基可在烷基內具有兩個或兩個以上相同鹵原子或不同鹵基之組合。通常，多鹵烷基含有至多12個，或10個，或8個，或6個，或4個，或3個，或2個鹵基。鹵烷基之非限制性實例包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基及二氯丙基。全鹵烷基係指所有氫原子皆由鹵原子置換之烷基。
如本文所使用，術語「烷氧基」係指烷基-O-，其中烷基在上文中定義。烷氧基之代表性實例包括(但不限於)甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、第三丁氧基、戊氧基、己氧基、環丙氧基-、環己氧基-及其類似基團。通常，烷氧基具有1-4個碳原子。
如本文所使用，術語「鹵烷氧基」係指經一或多個如本文所定義之鹵基取代之如本文所定義之烷氧基。
除非另外提供，否則如本文中所使用，術語「環烷基」係指具有3-8個碳原子之飽和單環、雙環或螺環烴基。除非另外提供，否則環烷基係指具有3個與6個之間或5個與8個之間的環碳原子的環烴基團。
如本文中所使用，術語「環烯基」係指具有3-8個碳原子之部分飽和單環、雙環或螺環烴基。除非另外提供，否則環烯基係指具有3個與6個之間或5個與8個之間的環碳原子的環烴基團。
視起始物質及程序之選擇而定，化合物可以可能的異構體之一或其混合物之形式存在，例如以純光學異構體的形式，或以異構體混合物的形式，諸如外消旋體及非對映異構體混合物(視不對稱碳原子數目而定)。本發明意欲包括所有該等可能異構體，包括外消旋混合物、非對映異構混合物及光學純形式。光學活性(R)及(S)異構體可使用對掌性合成組元或對掌性試劑製備，或使用習知技術解析。若化合 物含有雙鍵，則取代基可為E或Z組態。若化合物含有經雙取代之環烷基，則環烷基取代基可具有順式或反式組態。亦意欲包括所有互變異構形式。
如本文所用，術語「鹽」係指本發明之化合物的酸加成鹽或鹼加成鹽。「鹽」尤其包括「醫藥學上可接受之鹽」。術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留本發明化合物之生物學效用及特性且通常在生物學上或其他方面不為不合需要的鹽。
本發明之化合物，亦即含有能夠充當氫鍵之供體及/或接受體的基團之式(I)化合物可能能夠用適合之共晶體形成劑形成共晶體。此等共晶體可藉由已知共晶體形成程序自式(I)之化合物製備。該等操作步驟包括使式I之化合物與共晶體成劑在結晶條件下經研磨、加熱、共昇華、共熔融或在溶液中接觸，及分離藉此形成之共晶體。適合之共晶體形成劑包括描述於WO 2004/078163中之彼等共晶體形成劑。因此，本發明亦提供包含式(I)化合物之共晶體。
在許多情況下，本發明化合物能夠藉助於存在甲醯胺基或其類似基團形成酸鹽及/或鹼鹽及/或共晶體。
醫藥學上可接受之酸加成鹽或共晶體可用無機酸及有機酸形成。
可衍生鹽或共晶體之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似酸。
可衍生鹽或共晶體之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸及其類似酸。
醫藥學上可接受之鹼加成鹽或共晶體可用無機及有機鹼形成。
可衍生鹽或共晶體之無機鹼包括例如銨鹽及來自週期表第I至XII行之金屬。在某些實施例中，鹽來源於鈉、鉀、銨、鈣、鎂、銀及 鋅；尤其適合之鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。
可衍生鹽或共晶體之有機鹼包括例如一級胺、二級胺及三級胺、經取代之胺(包括天然存在之經取代之胺)、環胺、鹼性離子交換樹脂及其類似物。某些有機胺包括膽茶鹼、離胺酸、葡甲胺、哌嗪及緩血酸胺。
在另一態樣中，本發明提供呈以下形式之式I化合物：乙酸鹽、抗壞血酸鹽、己二酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、癸酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、麩胺酸鹽、戊二酸鹽、羥乙酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、半乳糖二酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、癸二酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽或羥萘甲酸鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺：乙酸鹽、抗壞血酸鹽、己二酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、癸酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、麩胺酸鹽、戊二酸鹽、羥乙酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、半乳糖二酸鹽、萘甲 酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、癸二酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽或羥萘甲酸鹽或共晶體。
在另一實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺：乙酸鹽、抗壞血酸鹽、己二酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、癸酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、麩胺酸鹽、戊二酸鹽、羥乙酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、半乳糖二酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、癸二酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽或羥萘甲酸鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺：乙酸鹽、抗壞血酸鹽、己二酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、癸酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、麩胺酸鹽、戊二酸鹽、羥乙酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、半乳糖二酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、 菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、癸二酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽或羥萘甲酸鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]：乙酸鹽、抗壞血酸鹽、己二酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、癸酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、麩胺酸鹽、戊二酸鹽、羥乙酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、半乳糖二酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、癸二酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽或羥萘甲酸鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺：乙酸鹽、抗壞血酸鹽、己二酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、癸酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、麩胺酸鹽、戊二酸鹽、羥乙酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、半乳糖二酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、 菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、癸二酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽或羥萘甲酸鹽或共晶體。
在另一態樣中，本發明提供呈以下形式之式I化合物：鈉、鉀、銨、鈣、鎂、銀、鋅、膽茶鹼、離胺酸、葡甲胺、哌嗪或緩血酸胺鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺：鈉、鉀、銨、鈣、鎂、銀、鋅、膽茶鹼、離胺酸、葡甲胺、哌嗪或緩血酸胺鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺：鈉、鉀、銨、鈣、鎂、銀、鋅、膽茶鹼、離胺酸、葡甲胺、哌嗪或緩血酸胺鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺：鈉、鉀、銨、鈣、鎂、銀、鋅、膽茶鹼、離胺酸、葡甲胺、哌嗪或緩血酸胺鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]：鈉、鉀、銨、鈣、鎂、銀、鋅、膽茶鹼、離胺酸、葡甲胺、哌嗪或緩血酸胺鹽或共晶體。
在一個實施例中，本發明提供呈以下形式之N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺：鈉、鉀、銨、鈣、鎂、銀、鋅、膽茶鹼、離 胺酸、葡甲胺、哌嗪或緩血酸胺鹽或共晶體。
本文給出之任何化學式亦意欲表示化合物之未經標記之形式以及經同位素標記之形式。經同位素標記之化合物具有如本文中給定之式所描繪之結構，除了一或多個原子為具有選定原子質量或質量數之原子所替換。可併入本發明之化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，分別諸如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl、123I、124I、125I。本發明包括如本文所定義之多種經同位素標記之化合物，例如存在放射性同位素之彼等，諸如3H及14C，或存在非放射性同位素之彼等，諸如2H及13C。此類經同位素標記之化合物適用於代謝研究(使用14C)；反應動力學研究(使用例如2H或3H)；偵測或成像技術，諸如正電子發射斷層攝影法(PET)或單光子放射電腦斷層攝影法(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈分析；或適用於患者之放射性治療。特定言之，18F或經標記之化合物可對於PET或SPECT研究來說尤其需要。經同位素標記之式(I)化合物一般可藉由熟習此項技術者所已知之習知技術，或藉由與隨附實例及製備中所描述之彼等方法類似的方法，使用經適當同位素標記之試劑替代先前採用之未標記試劑來製備。
此外，用較重的同位素，尤其氘(亦即，2H或D)取代可得到某些產生自更大代謝穩定性之治療優勢，例如提高活體內半衰期或減少劑量需求或在治療指數方面改良。應理解，在此情形下，氘被視為式(I)化合物之取代基。此類重同位素(具體而言，氘)之濃度可由同位素增濃因素定義。如本文所使用之術語「同位素增濃因素」意謂指定同位素之同位素豐度與天然豐度之間的比率。若本發明化合物中的取代基指示為氘，則該化合物所具有的各指定氘原子之同位素增濃因素分別為至少3500(在各指定氘原子處52.5%氘併入)、至少4000(60%氘併入)、至少4500(67.5%氘併入)、至少5000(75%氘併入)、至少5500 (82.5%氘併入)、至少6000(90%氘併入)、至少6333.3(95%氘併入)、至少6466.7(97%氘併入)、至少6600(99%氘併入)或至少6633.3(99.5%氘併入)。
根據本發明之醫藥學上可接受之溶劑合物包括其中結晶之溶劑可經同位素取代之彼等溶劑合物，例如D2O、d6-丙酮、d6-DMSO。
如本文所用，術語「醫藥學上可接受之載劑」包括如熟習此項技術者已知的任何及所有溶劑、分散介質、包衣、界面活性劑、抗氧化劑、防腐劑(例如抗細菌劑、抗真菌劑)、等張劑、吸收延遲劑、鹽、防腐劑、藥物穩定劑、黏合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、染料，及其類似物及其組合(參見例如，Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Printing Company,1990，第1289-1329頁)。除非任何習知載劑與活性成分不相容，否則考慮將其用於治療或醫藥組合物中。
術語本發明之化合物的「治療有效量」係指將誘發個體之生物學或醫學響應的本發明之化合物的量，該等響應例如降低或抑制酶或蛋白質活性或改善症狀、緩解病狀、減緩或延緩疾病進展或防止疾病等。在一個非限制性實施例中，術語「治療有效量」係指在向個體投與時有效實現以下各者的本發明之化合物的量：(1)至少部分緩解、抑制、預防及/或改善病狀或病症或疾病，該病狀或病症或疾病(i)由Smurf-1介導或(ii)與Smurf-1活性相關聯或(iii)其特徵在於Smurf-1之活性(正常或異常)；或(2)降低或抑制Smurf-1之活性；或(3)減少或抑制Smurf-1之表現。在另一個非限制性實施例中，術語「治療有效量」係指當向細胞或組織或非細胞生物材料或介質投與時，對以下各者有效的本發明之化合物的量：至少部分地降低或抑制Smurf-1之活性；或至少部分地減少或抑制Smurf-1之表現。
如本文所使用，術語「個體」係指動物。動物通常為哺乳動 物。個體亦指例如靈長類(例如人類，男性或女性)、牛、綿羊、山羊、馬、犬、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥及其類似者。在某些實施例中，個體為靈長類動物。在其他實施例中，個體為人類。
如本文所用，術語「抑制(inhibit、inhibition或inhibiting)」係指減少或遏止既定病狀、症狀、或病症、或疾病，或顯著減少生物活動或過程之基線活性。
如本文所用，術語「治療(treat/treating/treatment)」任何疾病或病症在一個實施例中係指改善疾病或病症(亦即，減緩或阻止或減少疾病或其臨床症狀中之至少一者的進展)。在另一實施例中，「治療」係指減輕或改善至少一個生理參數，該等生理參數包括患者可能無法辨別之彼等參數。在另一實施例中，「治療」係指在身體上(例如，穩定可辯別症狀)、生理上(例如，穩定生理參數)或在該兩者上調節疾病或病症。在另一實施例中，「治療」係指預防或延緩疾病或病症之起始或發展或進展。
如本文所用，若個體將在生物學、醫學或生活品質上受益於治療，則該個體「需要」該治療。
如本文所用，除非本文中另外指示或與上下文明顯矛盾，否則本發明之上下文中(尤其在申請專利範圍之上下文中)所用之術語「一(a/an)」、「該」及類似術語應解釋為涵蓋單數及複數兩者。
除非本文另外指示或另外與上下文明顯矛盾，否則本文所述之所有方法可以任何適合順序進行。使用本文所提供之任何及所有實例或示例性語言(例如「諸如」)僅意欲更好地闡明本發明，且並不對另外所主張的本發明之範疇造成限制。
本發明之化合物的任何不對稱原子(例如碳或類似者)可以外消旋或對映異構性增濃之形式存在，例如(R)構型、(S)構型或(R,S)構型。在某些實施例中，各不對稱原子在(R)構型或(S)構型中具有至少 50%對映異構體過量、至少60%對映異構體過量、至少70%對映異構體過量、至少80對映異構體過量、至少90%對映異構體過量、至少95%對映異構體過量或至少99%對映異構體過量。在具有不飽和雙鍵之原子處的取代基(若可能)以順式-(Z)-或反式-(E)-形式存在。
因此，如本文所用，本發明之化合物可呈可能異構體、旋轉異構體、滯轉異構體、互變異構體或其混合物之一的形式，例如呈實質上純幾何(順式或反式)異構體、非對映異構體、光學異構體(對映體)、外消旋體或其混合物之形式。
任何所得異構體之混合物可基於組分之物理化學差異經分離成純的或實質上純的幾何或光學異構體、非對映異構體、外消旋體，例如藉由層析及/或分步結晶。
任何所得終產物或中間體之外消旋體可藉由已知方法而解析為光學對映體，例如藉由分離其非對映異構體鹽(該鹽用光學活性酸或鹼獲得)及釋放光學活性酸性或鹼性化合物。特定言之，鹼性部分可因此用於將本發明之化合物解析為其光學對映體，例如藉由使由光學活性酸(例如酒石酸、二苯甲醯基酒石酸、二乙醯基酒石酸、二-O,O'-對甲苯甲醯基酒石酸、杏仁酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸)形成之鹽分步結晶。外消旋產物亦可藉由對掌性層析解析，例如使用對掌性吸附劑之高壓液相層析(HPLC)。
此外，本發明之化合物(包括其鹽)亦可以其水合物之形式獲得，或包括用於其結晶之其他溶劑。本發明之化合物可固有地或經設計以與醫藥學上可接受之溶劑(包括水)形成溶劑合物；因此，本發明意圖涵蓋溶劑化及非溶劑化形式兩者。術語「溶劑合物」係指本發明化合物(包括其醫藥學上可接受之鹽)與一或多個溶劑分子的分子複合物。 此等溶劑分子為醫藥技術中常用的已知對接受者無害之彼等溶劑分子，例如水、乙醇及其類似物。術語「水合物」係指其中溶劑分子為 水之複合物。
本發明化合物，包括其鹽、共晶體、水合物及溶劑合物可固有地或經設計以形成多晶型物。
通用流程
式(I)化合物通常可根據下文提供之流程來製備。
本發明之化合物可藉由描述於以下流程或實例中之途徑製備。
所有縮寫如下文中之實例部分中所定義。
流程1
Figure 104115287-A0305-02-0025-88
其中X及Y獨立地為H或-(C1-C6)烷基。
步驟1：鈀催化之交叉偶合反應。
典型條件：鈀(0)催化劑；適合的硼錫或鋅化合物，諸如硼酸、硼酸酯或錫烷；有機或無機鹼；在水中；在適合的溶劑中在80-110℃下
較佳條件：雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)、三氟硼酸乙烯酯鹽、含三乙胺之乙醇，在90℃下
步驟2：二羥基化
典型條件：四氧化鋨；適合的共氧化劑，諸如N-甲基嗎啉-N-氧化物；在適合的溶劑中
較佳條件：可使用四氧化鋨(Admix α或Admix β)獲得對掌性二醇，使用適合的添加劑，諸如甲烷磺醯胺。較佳溶劑系統為第三丁醇/水。
步驟3：氧化裂解
典型條件：含過碘酸鈉之THF/水溶劑系統
流程2
當R2為甲基時，可根據流程2製備式(I)化合物。
Figure 104115287-A0305-02-0026-87
其中X2及Y2經定義使得其與其所連接之碳原子共同形成R3取代基。
步驟1：硼酸乙烯酯形成
典型條件：a)在強鹼(諸如LDA或LHMDS)存在下烯醇化，接著用適合的磺酸鹵烷基酯或磺醯胺淬滅，得到穩定的烯醇形式。b)使用適 合的鈀(0)催化劑及雙頻哪醇根基二硼進行烯醇化物之鈀(0)催化之硼基化作用
較佳條件：a)含LDA之THF，在-78℃下，接著用1,1,1-三氟-N-(吡啶-2-基)-N-((三氟甲基)磺醯基)甲磺醯胺淬滅。b)1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物及雙頻哪醇根基二硼、乙酸鉀，在二噁烷中，在80-100℃下，持續4-16小時。
步驟2：鈀催化之交叉偶合
典型條件：如流程1步驟1中所描述
較佳條件：1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)二氯甲烷錯合物，含碳酸鉀(2M於水中)之MeCN，在80℃下，持續1.5小時
步驟3a：皂化
典型條件：適合的水性鹼，視情況使用適合的共溶劑，諸如THF
較佳條件：具有THF之2M氫氧化鈉(水溶液)，在室溫下持續30分鐘
步驟3b：醯胺偶合
典型條件：適合的偶合劑，諸如HATU、T3P、EDCI等，在適合的鹼(諸如三乙胺、DIPEA等)存在下，在適合的非質子性溶劑中。
較佳條件：含HATU及DIPEA之DMF，在室溫下持續約2小時
步驟4：氫化
式(I)化合物，其中R3含有C=C雙鍵，可經由氫化反應轉化成其中R3為完全飽和之式(I)化合物。
典型條件：不可溶鈀催化劑，氫氣，在適合的溶劑(諸如乙醇)中
較佳條件：含10%鈀/碳及氫氣之乙醇
流程3
Figure 104115287-A0305-02-0028-12
當X3為Br或I時，步驟3之產物亦為式(I)化合物。
步驟1：普林斯反應(Prins Reaction)
典型條件：含酸催化劑及適合的脫水劑之氯化溶劑
較佳條件：(i)含三氟乙酸及分子篩之DCM；或(ii)含InBr3及三甲基矽烷基溴之DCM；或(iii)含InOTf3及三甲基矽烷基三氟甲磺酸酯之DCM。
步驟2a：如流程2步驟3a中所描述之皂化反應
步驟2b：光延逆轉(Mitsunobu inversion)
典型條件：三芳基膦、二烷基氮雜二甲酸酯及苯甲酸，在適合的溶劑(諸如THF)中，在室溫下
較佳條件：三苯基膦、二異丙基偶氮二甲酸酯及2,4-二硝基苯甲酸，在THF中，在室溫下
步驟2c：甲基化
典型條件：含適合的強鹼及烷化劑之適合的溶劑
較佳條件：含氫化鈉及碘代甲烷之DMF
步驟2d、步驟3a、步驟4a：如流程2步驟3a中所描述之皂化反應
步驟2e、3b及4b：如流程2步驟3b中所描述之醯胺偶合
步驟5：如流程2步驟4中所描述之氫化
流程4
Figure 104115287-A0305-02-0029-89
步驟1：如流程3步驟1中所描述之普林斯反應
步驟2a：如流程2步驟3a中所描述之皂化反應
步驟2b：如流程2步驟3b中所描述之醯胺偶合
步驟3：如流程2步驟4中所描述之氫化
流程5
Figure 104115287-A0305-02-0030-90
步驟1：縮醛形成
典型條件：含強酸催化劑之適合的溶劑，在脫水條件下
較佳條件：pTSOH及甲苯，在迪恩斯塔克條件(Dean Stark conditions)下，在110℃下持續2-16小時
步驟2a：如流程2步驟3a中所描述之皂化反應
步驟2b：如流程2步驟3b中所描述之醯胺偶合
流程6
Figure 104115287-A0305-02-0031-15
PG為適合的保護基，諸如第三丁基二甲基矽烷基
X6及Y6各自獨立地為H或-(C1-C6)烷基。
步驟1：保護
典型條件：適合的保護基，諸如三烷基矽烷基氯，在適合的鹼存在下，在適合的溶劑中。
較佳條件：第三丁基二甲基矽烷基氯，在含三乙胺及DMAP之DMF存在下。
步驟2：烷基化反應
典型條件：烯丙基溴，在適合的鹼存在下，在適合的溶劑中
較佳條件：含3-溴-2-甲基丙-1-烯及氫化鈉之THF。
步驟3a：如流程2步驟3a中所描述之皂化反應
步驟3b：如流程2步驟3b中所描述之醯胺偶合
步驟4：去除保護基
典型條件：含氟源之適合的溶劑
較佳條件：含TBAF之THF
步驟5：環化反應
典型條件：含三氟乙酸汞(II)及氧化汞(II)之THF，在室溫下，接 著在-78℃下添加三乙基硼烷及硼氫化鈉。
本發明進一步包括本發明之方法之任何變型，其中可在其任何階段獲得之中間產物用作起始物質，且進行剩餘步驟，或其中在反應條件下原位形成起始物質，或其中反應組分以其鹽或光學純物質之形式使用。
本發明之化合物及中間物亦可根據熟習此項技術者一般已知之方法而轉化為彼此。
在另一態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含本發明之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。在另一實施例中，組合物包含至少兩種醫藥學上可接受之載劑，諸如本文所描述之彼等載劑。出於本發明之目的，除非另外指定，否則溶劑合物及水合物一般視為組合物。較佳地，醫藥學上可接受之載劑為無菌的。 醫藥組合物可針對諸如口服投藥、非經腸投藥及經直腸投藥等之特定投藥途徑加以調配。另外，本發明之醫藥組合物可以固體形式(包括(但不限於)膠囊、錠劑、丸劑、顆粒劑、散劑或栓劑)或以液體形式(包括(但不限於)溶液、懸浮液或乳液)製造。可對醫藥組合物進行習知醫藥操作(諸如滅菌)及/或該等醫藥組合物可含有習知惰性稀釋劑、潤滑劑或緩衝劑以及佐劑(諸如防腐劑、穩定劑、潤濕劑、乳化劑及緩衝劑等)。
醫藥組合物通常為錠劑或明膠膠囊，其包含活性成分與以下各者中之一或多者一起：a)稀釋劑，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇纖維素及/或甘胺酸；b)潤滑劑，例如二氧化矽、滑石、硬脂酸、硬脂酸之鎂鹽或鈣鹽及/或聚乙二醇；對於錠劑亦包含c)黏合劑，例如矽酸鎂鋁、澱粉糊、明膠、黃蓍、甲基纖維 素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯啶酮；若需要d)崩解劑，例如澱粉、瓊脂、褐藻酸或其鈉鹽或發泡混合物；及e)吸附劑、著色劑、香料及甜味劑。
根據此項技術中已知之方法，錠劑可經薄膜包覆或經腸溶包衣包覆。
用於經口投藥的適合之組合物包括有效量的呈以下形式之本發明之化合物：錠劑、口含錠、水性或油性懸浮液、可分散性散劑或顆粒劑、乳液、硬或軟膠囊、或糖漿或酏劑。欲用於經口使用之組合物根據此項技術中已知用於醫藥組合物之製造的任何方法來製備，且此類組合物可含有一或多種選自由以下各者組成之群的試劑：甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑，以提供醫藥學上精緻且可口之製劑。錠劑可含有活性成分與適合於製造錠劑的醫藥學上可接受之無毒賦形劑一起形成混雜物。此等賦形劑為例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；粒化劑及崩解劑，例如玉米澱粉或褐藻酸；黏合劑，例如澱粉、明膠或阿拉伯膠；及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。錠劑為未經包覆或藉由已知技術包覆的，以在胃腸道中延遲崩解及吸收，且藉此提供更長時間段之持續作用。舉例而言，可採用時間延遲材料，諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。 用於經口使用之調配物可以硬明膠膠囊之形式呈現，其中活性成分與惰性固體稀釋劑(例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合；或以軟明膠膠囊之形式呈現，其中活性成分與水或油狀介質(例如花生油、液體石蠟或橄欖油)混合。
某些可注射組合物為等滲水溶液或懸浮液，且栓劑為有利地製備自含脂肪的乳液或懸浮液。該等組合物可經滅菌，及/或含有佐劑，諸如防腐劑、穩定劑、潤濕劑或乳化劑、溶解促進劑、用於調控滲透壓之鹽及/或緩衝劑。此外，其亦可含有其他治療上有價值之物 質。該等組合物根據習知混合、粒化或塗覆方法分別製備，且含有約0.1-75%之活性成分，或含有約1-50%之活性成分。
用於經皮施用之適合之組合物包括有效量的本發明之化合物與適合之載劑。適合於經皮傳遞之載劑包括可吸收的藥理學上可接受之溶劑，以輔助穿過宿主之皮膚。舉例而言，經皮裝置為以繃帶之形式，其包含襯底部件、含有視情況具有載劑之化合物之儲集層、視情況在延長時間段內以受控及預定速率遞送宿主皮膚之化合物之速率控制障壁、及使裝置對皮膚安全之構件。
適合用於局部應用(例如對皮膚及眼腈)之組合物包括水溶液、懸浮液、軟膏、乳霜、凝膠或可噴塗之調配物(例如藉由噴霧劑或其類似物而傳遞的可噴射之調配物)。此等局部遞送系統將明確地說適合於經皮施用，例如用於治療皮膚癌，例如以防曬霜、洗劑、噴霧劑及其類似物用於預防性用途。因此，其尤其適用於此項技術中熟知之局部(包括化妝品)調配物。此類調配物可含有增溶劑、穩定劑、張力增強劑、緩衝劑及防腐劑。
如本文所用，局部施用亦可涉及吸入或鼻內施用。其可適宜地以乾燥散劑(單獨以混合物(例如與乳糖之無水摻和物)形式或混合組分顆粒(例如與磷脂))形式自乾燥散劑吸入器遞送，或以噴霧劑噴霧形式在使用或不使用適合之推進劑的情況下自加壓容器、泵、噴射器、霧化器或噴霧器遞送。
本發明進一步提供包含本發明之化合物作為活性成分之無水醫藥組合物及劑型，因為水可促進某些化合物之降解。
本發明之無水醫藥組合物及劑型可利用無水或含有較低水份之成份及較低水分或較低濕度之條件製備。可製備且儲存無水醫藥組合物，從而維持其無水性質。因此，使用已知防止暴露於水之材料封裝無水組合物以使得其可包括於適合處方集套組中。適合之包裝之實例 包括(但不限於)密封的箔片、塑膠、單位劑量容器(例如小瓶)、泡殼包裝及條帶包裝。
本發明亦提供醫藥組合物及劑型，其包含一或多種降低作為活性成分之本發明化合物之分解比率的藥劑。在本文中被稱為「穩定劑」之此等試劑包括(但不限於)諸如抗壞血酸之抗氧化劑、pH值緩衝劑或鹽緩衝劑等。
呈游離形式或以醫藥學上可接受之鹽形式的式I化合物呈現有價值之藥理學特性，例如Smurf-1調節特性(例如如在隨後部分中所提供之活體外及活體內測試中所指示)，且因此指定用於療法或用作研究化學品(例如作為工具化合物)。
本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽適用於治療不同適應症，包括：肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)
纖維化
類風濕性關節炎
骨折癒合
青光眼
遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)
蛋白尿
傷口癒合
COPD
哮喘
肺動脈高血壓(PAH)
肺動脈高血壓具有多因素病理學。血管收縮、肺血管壁之重塑及血塞有助於提高PAH中之肺血管耐受性(Humbert等人，J.Am.Coll.Cardiol.,2004.)。本文中所揭示之本發明化合物適用於治療PAH及其 症狀。肺動脈高血壓應理解為涵蓋肺高血壓之以下形式：特發性PAH(IPAH)；可遺傳PAH(HPAH)；由藥物或毒素誘導之PAH、與其他病狀相關之PAH(APAH)，諸如與結締組織疾病相關之PAH、與HIV感染相關之PAH、與門靜脈高血壓相關之PAH、與先天性心臟病相關之PAH、與血吸蟲病相關之PAH、PAH相關慢性溶血性貧血或新生兒之持續性肺高血壓(Galie等人，ERJ,2009；Simonneau等人，JACC,2009)。
特發性PAH係指未確定病因之PAH。可遺傳PAH係指懷疑或記錄有遺傳傳染之PAH，包括在BMP受體BMPR2中具有突變者，或在ALK1或內皮因子中具有突變者(具有或不具有遺傳性出血性毛細血管擴張性共濟失調)。
與藥物或毒素相關之PAH應理解為涵蓋與阿米雷司(aminorex)、氟苯丙胺化合物(例如氟苯丙胺(fenfluramine)或右芬氟拉明(dexfenfluramine))、某些毒性油(例如菜籽油)、吡咯
Figure 104115287-A0305-02-0036-126
啶(pyrrolizi-dine)生物鹼(例如灌木茶)、野百合鹼、安非他明(amphetamines)、L-色胺酸、甲基安非他明、可卡因、苯丙醇胺、金絲桃草(St John's Wort)、化學治療劑或SSRI之攝入相關的PAH。
與結締組織疾病相關之PAH應理解為涵蓋與全身性硬化症、肺纖維化、多發性肌炎、類風濕性關節炎、休格連氏症候群(Sjogren syndrome)相關之PAH或與全身性紅斑狼瘡相關之PAH。
與先天性心臟病相關之PAH應理解為涵蓋患有全身性至肺分流之患者、與艾生曼格症候群(Eisenmenger syndrome)、與小室間隔或心房間隔缺損相關之PAH或與矯正性心肌手術相關之PAH。
與慢性溶血性貧血相關之PAH應理解為涵蓋患有慢性遺傳性及後天性貧血之患者，包括患有鐮狀細胞疾病、地中海貧血、遺傳性球形紅血球症、口形紅血球症及微血管溶血性貧血之患者。
PAH之症狀包括呼吸困難、絞痛、暈厥及水腫(McLaughlin等人，Circulation,2006,114：1417-1431)。本文中所揭示之本發明化合物適用於治療PAH之症狀。
肺高血壓(PH)
肺高血壓(PH)應理解為與根據Dana Point臨床分類分組之以下病狀相關(Simonneau,G等人JACCC,2009)：
第1'組-PH理解應與患有肺靜脈閉塞疾病(PVOD)及肺毛細管血管瘤病(PCH)之患者相關。
第2組-與左心臟病相關之pH包括患有左側心室或瓣膜疾病之患者。
第3組-作為肺疾病及/或低氧之結果之PH。引起PH之肺疾病應理解為涵蓋患有肺纖維化、肺氣腫、組合型肺纖維化及肺氣腫、支氣管擴張、囊腫性纖維化及慢性阻塞性肺疾病(COPD)之患者。
第4組-與慢性血栓栓塞相關之PH(CTEPH)。
第5組-與病因不明或多重因素病源學相關之PH。此類別之PH患者應理解為涵蓋以下群組中之一者中之患者：1)慢性骨髓增生病症，包括真性紅血球增多症、原發性血小板增多症或慢性骨髓白血病；2)全身性病症，包括類肉瘤病、引起肺毛細管床破壞之病狀(諸如纖維化)、大型肺動脈之外源性擠壓，患有肺蘭格漢氏細胞組織細胞增多症(Langerhan's cell histocytosis)、肺淋巴管平滑肌增生症、1型神經纖維瘤及抗中性白細胞細胞質抗體相關脈管炎之患者；3)代謝障礙，包括Ia型肝糖貯積病、葡萄糖-6-磷酸酶不足、戈謝病(Gaucher disease)及甲狀腺疾病(甲狀腺功能低下及甲狀腺高能症)；4)涵蓋患有擴展至肺動脈中之腫瘤、由轉移性腫瘤栓塞引起之肺微血管閉塞、縱隔纖維化之患者，或患有接收長期血液透析之末期腎病患者。
纖維化
已證實TGFβ/BMP信號傳導路徑之失調在不同器官(包括腎臟、心、肺、皮膚、胰腺及肝)之纖維化以及全身性硬化症及相關病變中具有致病作用(如由Leask及Abraham,FASEB,2004評述)。已證實BMP7抵消TGFβ1誘導之上皮-間葉細胞轉化(EMT)(Zeisberg,M等人Nat.Med,2003)及膠原蛋白誘導(Izumi,N等人AJP.Lung,Cell,Mol.,Physiol.2005)，其皆為纖維化之發展中之關鍵機制。Smurf-1之纖維化病變中之作用之直接證據在腎臟之進行性小管間質性纖維化之單側輸尿管堵塞(UUO)小鼠模型中證明，其中患病腎中存在與保護性Smurf-1受質Smad7之含量降低相關之增加含量之Smurf-1(Fukasawa,H等人PNAS,2004)。最近，在肺上皮細胞中產生之資料中表明Smurf-1在肺纖維化中之作用，證明Smurf-1受質Smad7在限制EMT方面的重要作用(Shukla,MA等人，Am.J.Resp.Cell.Mol.Biol.2009)。 本文中所揭示之本發明化合物適用於治療纖維化及其症狀。纖維化應理解為涵蓋以下：患有肺纖維化、特發性肺部纖維化、囊腫性纖維化、肝硬化、心內膜心肌纖維化、縱隔纖維化、骨髓纖維化、腹膜後纖維化、進行性大規模纖維化、腎源性全身性纖維化、克羅恩氏病(Crohn's Disease)、瘢痕瘤、老年心肌梗塞、硬皮病(全身性硬化症)、關節纖維化或黏著劑之患者。
類風濕性關節炎
促炎性細胞激素，諸如腫瘤壞死因子α(TNFα)在慢性發炎病狀，諸如類風濕性關節炎(RA)之發作及維持中起重要作用。骨密度降低通常與RA相關且已證實Smurf-1在調節RA誘導之骨質流失中起重要作用。證實TNFα引起Smurf-1受質Smad1及Runx2(其對於骨形成成骨細胞活性皆為重要的)之蛋白水解分解。支持此關係之直接證據在smurf-1 KO小鼠中證明，其中TNFα未能影響來自Smurf-1 KO小鼠而非相應野生型小鼠之骨骼中之破骨細胞活性(Guo,R等人JBC,2008)。本文 中所揭示之本發明化合物適用於治療類風濕性關節炎及其症狀。RA應理解為涵蓋患有由滑膜細胞腫脹、滑液過量及關節內纖維組織形成所致之滑膜之慢性炎症的患者。此外，RA亦應涵蓋患有由壞死性肉芽腫、脈管炎、壞疽性膿皮病、斯威特氏症候群(Sweet's syndrome)、結節性紅斑、小葉脂層炎、數位皮膚萎縮、手掌紅斑或皮膚彌漫性薄化引起之RA的患者。RA亦擴展至其他器官且本文中將涵蓋患有肺纖維化、腎臟澱粉樣變性、由RA引起之動脈粥樣硬化、心包炎、心內膜炎、左心室衰竭、瓣炎及纖維化之患者。RA亦將涵蓋患有上鞏膜炎及乾眼症之眼部病狀、溫性自體免疫性溶血性貧血之血液病症、嗜中性白細胞減少症及血小板增多症、周邊神經病之神經病狀、多重單神經炎及腕隧道症候群、骨質疏鬆及淋巴瘤之患者。
骨折癒合
BMP路徑在此處起作用且Smurf-1抑制劑增加BMP信號傳導。本文中所揭示之本發明化合物適用於治療骨折癒合。骨折癒合應理解為涵蓋骨骼破裂修復之技術，藉此在骨骼破裂位點處以手術方式植入含有可遷移入骨母細胞及負載結締組織之孔的骨內植入物。在上述植入物之插入之後，Smurf-1之抑制劑之投藥可幫助植入物之整合及藉由增強間葉細胞幹細胞(其分化成骨母細胞)之增殖來加快恢復(Zhao,M等人JBC,2004)。
青光眼
眼內壓升高(IOP)為原發性開角型青光眼(POAG)之最危險因素之一。IOP藉由睫體中產生之水液保持在前室中且經由小樑網區域流出。已在青光眼患者中發現與小樑網區域中細胞外基質(ECM)沈積之聚集相關的增加水液流出耐受性。POAG患者中之此ECM病理學與多個非眼類系統中由TGFb蛋白質誘導之纖維化類似。在臨床前活體內及活體外模型中證明TGFb2誘導之IOP增加。在若干小規模臨床研究 中，亦報導POAG患者中水液中TGFb2蛋白質之含量升高。調節青光眼患者中之TGFb活性可潛在地降低IOP及產生新穎青光眼療法(Wordinger RJ JOURNAL OF OCULAR PHARMACOLOGY AND THERAPEUTICS第30卷，第2期，2014)。鑒於Smurf1經由其受質BMP9及SMAD 7調節TGFb信號傳導之作用，本文中所描述之本發明化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)將適用於治療青光眼。
遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)
遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)，亦稱為奧斯勒-韋伯-倫度症候群(Osler-Weber-Rendu Syndrome)，為影響1：5000至1：40,000之血管之基因病症。HHT患者具有形成缺乏動脈與靜脈之間的正常毛細管之血管的傾向，引起動脈血液在高壓力下直接流入靜脈，其可能破裂及出血。HHT之症狀可顯示為中度至重度，其中90-95%患者在成人期經歷鼻出血，90-95%在中年在臉部或手上發展毛細血管擴張，且40%發展肺動靜脈畸形(AVM)，其可造成巨大風險。AVM亦可在大腦、肝及腸中發生，具有不同嚴重度之健康含義。HHT可最通常藉由凝固療法、栓塞或感染組織之手術移除來治療。HHT突變引起BMP信號傳導之單倍劑量不足(Ricard等人Blood,2010)，引起血管成熟缺陷及脈管之過度分支，其部分歸因於BMP9信號傳導減弱(Choi等人，PlosOne,2013)。Smurf1下調BMP信號傳導(Murakami Exp.Biol.Res.2010及Cao等人，Sci.Rep.2014)且已報導在內皮細胞中表現(Crose等人，JBC,2009 and Human Protein Atlas and GeneCards)，且因此Smurf1抑制劑可用於恢復BMP信號傳導及矯正血管生成異常。因此，本文中所描述之本發明化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)適用於治療HHT。
蛋白尿
尿液中蛋白質量異常為慢性腎病之最早病徵之一，其可由高血壓、糖尿病或與腎炎相關之疾病引起。若保持不接受治療，則慢性腎 病可發展成末期腎病及腎臟衰竭。Smurf1涉及與腎功能及蛋白尿相關之多種機制。Smurf1受質Ras同源物基因家族，成員A(RhoA)在調節腎臟足細胞之遷移中起重要作用。突觸極蛋白能夠藉由阻斷Smurf1結合於RhoA及使其泛素化之能力而抑制腎臟足細胞內之纖維形成，由此促進足細胞動力及調節腎臟之足細胞過濾障壁之篩分特性(Asanuma等人，Nat.Cell Biol.2006)。此外，轉型生長因子(TGF)β之細胞內拮抗劑Smad7在腎臟中起重要保護性作用。已證實Smurf1活性使Smad7泛素化及降解，引起小管間質性纖維化及腎臟功能不全(Fukasawa等人，PNAS 2004)。總而言之，此等報導表明Smurf1抑制劑除阻斷腎臟中之促纖維化信號傳導之傳播以外，亦可實現足細胞遷移及維持足細胞過濾障壁，最終提供蛋白尿之治療效益。因此，本發明化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)將適用於治療蛋白尿。
傷口癒合
慢性非癒合創傷在年齡超過60歲之人群中最常見，引起大量生理疼痛且通常分成三組：靜脈潰瘍、糖尿病及褥瘡。轉型生長因子(TGF)β及骨促形態形成蛋白質(BMP)信號傳導路徑之活性之精確時序在纖維母細胞遷移及細胞外基質沈積、發炎性細胞流入、血管生成及上皮再形成之正常傷口癒合調節關鍵促癒合過程中為重要的(Pakyari,M等人Adv.Wound Care 2013)。TGFβ之活化延長可引起傷口癒合延遲及現有非癒合傷口之治療性干預，其中抗TGFβ抗體引起改良之癒合且降低疤痕肥大(Lu等人J.Am.Coll.Surg.2005)。Smurf1調節TGFβ及BMP信號傳導之程度(Murakami Exp.Biol.Res.2010及Cao等人，Sci.Rep.2014，Wang等人J.Cell.Mol.Med.2012)且因此，預期Smurf1抑制劑將矯正過度的TGFβ信號傳導，實現慢性傷口之癒合。 因此，本發明化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)通常將適用於治療慢性非癒合傷口及/或傷口癒合。
COPD及哮喘
呼吸道重塑在慢性阻塞性肺病(COPD)或哮喘患者中為明顯的。哮喘中呼吸道重塑之顯著特徵為纖維化、基底細胞膜變厚、杯狀細胞數量增加及平滑肌細胞塊增強(具有增強之收縮反應，認為其係由引起呼吸道超反應及可逆性呼吸道阻塞之慢性炎症誘導)(Carroll等人Am.Rev Resp.Dis.1993，Metcalfe等人，Physiol.Rev.1997及Roche等人，Lancet 1989)。在COPD中，肺重塑之特徵在於具有鱗狀化生、杯狀細胞增生及黏液分泌過多之大型呼吸道中上皮之結構紊亂，及肺氣腫發展中具有平滑肌擴張、纖維化及肺泡損壞之小型呼吸道重塑，最終導致氣流限制(De,Decramer等人，Lancet,2012，Pain等人Eur.Respir.Rev.2014及Chung,Proc.Am.Thorac.Soc.2005)。在兩種疾病中，存在BMP信號傳導下調(Kariyawasam等人，Am.J Resp.Crit.Care Med.2008)及TGFβ升高(Mak.等人Respir.Med.2009及Chakir等人J.All.Clin.Immunol.2003)之證據，其與促重塑機制(諸如纖維母細胞-間葉細胞轉化)(Araya等人，J.Clin.Invest.2007)、細胞外基質沈積(Baarsma等人，Am.J.Physiol.Lung Cell Mol.PHysiol.2011)及炎症(Chakir等人J.All.Clin.Immunol.2003)有關。Smurf1抑制劑可矯正重要促重塑細胞(諸如平滑肌及纖維母細胞)中之TGFβ信號傳導且阻斷重塑之進程，產生對COPD或哮喘患者之治療效益。因此，本發明化合物(或其醫藥學上可接受之鹽)將適用於治療COPD及/或哮喘。
由此，作為另一實施例，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽在療法中之用途。在另一實施例中，療法係選自可藉由Smurf-1之抑制來治療之疾病。在另一實施例中，疾病係選自前述清單，宜為肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。在另一實施例中，本發明提供式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於治療 選自以下之疾病：青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
由此，作為另一實施例，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於療法。在另一實施例中，療法係選自可藉由Smurf-1之抑制來治療之疾病。在另一實施例中，疾病係選自前述清單，宜為肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。在另一實施例中，疾病係選自青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
在另一實施例中，本發明提供一種治療藉由抑制Smurf-1治療的疾病之方法，其包含投與治療上可接受之量的式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，疾病係選自前述清單，宜為肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。
在另一實施例中，本發明提供一種經由抑制Smurf-1治療疾病之方法，該方法包含投與治療上可接受之量的式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中疾病係選自青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
因此，作為另一實施例，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽用於製造藥劑之用途。在另一個實施例中，藥劑係用於治療可藉由抑制Smurf-1治療之疾病。在另一實施例中，疾病係選自前述清單，宜為肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。
在另一實施例中，藥劑係用於治療選自以下之疾病：青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
在本發明之一個實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其係用於治療肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。
在本發明之另一實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
在本發明之另一實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其係用於治療肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。
在本發明之另一實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
在本發明之另一實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其係用於治療肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。
在本發明之另一實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧 基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
在本發明之另一實施例中，提供[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其係用於治療肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。
在本發明之另一實施例中，提供[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
在本發明之另一實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽或共晶體，其係用於治療肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化；類風濕性關節炎及骨折癒合；更宜為肺動脈高血壓(PAH)。
在本發明之另一實施例中，提供N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
對於約50-70kg之個體，本發明之醫藥組合物或組合可為約1-1000mg活性成分，或約1-500mg，或約1-250mg，或約1-150mg，或約0.5-100mg，或約1-50mg活性成分之單位劑量。化合物、醫藥組合物或其組合之治療上有效劑量取決於個體之物種、體重、年齡及個別病狀、病症或疾病或其所治療之強度。一般熟練之醫師、臨床醫生 或獸醫可容易地確定預防、治療或抑制病症或疾病之進展所需要的各活性成分之有效量。
可有利地使用哺乳動物(例如小鼠、大鼠、犬、猴)或經分離之器官、組織及其標本活體外及活體內測試證明上文引用之劑量特性。本發明之化合物可以溶液(例如水溶液)形式活體外施用，及經腸、非經腸、有利地靜脈內(例如以懸浮液形式或在水溶液中)活體內施用。活體外劑量可能在約10-3莫耳與10-9莫耳濃度之間的範圍內。視投與途徑而定，活體內治療有效量可在約0.1-500mg/kg之間或在約1-100mg/kg之間的範圍內。
本發明之化合物之活性可藉由以下活體外及活體內方法評估。
醫藥學分析法
本發明化合物及其醫藥學上可接受之鹽，下文替代性稱為「本發明之藥劑」，適用作藥劑。特定言之，化合物為選擇性Smurf-1抑制劑，且可在以下分析法中測試。
為了測定化合物之HECT E3連接酶選擇性，使用生物化學HECT E3連接酶自泛素化分析法之板(Smurf-1、Smurf-2、WWP1、WWP2、ITCH、Nedd4、Nedd4L及E6AP)。泛素與蛋白質受質之結合為多步驟過程。在最初需要ATP之步驟中，在泛素之羧基端與泛素活化酶(E1)之內部半胱胺酸殘基之間形成硫酯鍵。接著將活化泛素轉移至泛素共軛酶(E2)之特異性半胱胺酸殘基。E2將泛素供給HECT E3連接酶(E3)，泛素其該連接酶轉移至受質蛋白質。HECT E3接合酶可自泛素化。在用於此板之TR-FRET(時差式螢光共振能量轉移)分析法中偵測此事件。反應混合物含有E1、E2、經標記之E3、生物素結合泛素、含化合物及ATP之適合的緩衝液且培育45分鐘以允許E3連接酶之自泛素化。為了藉由TR-FRET量測自泛素化E3連接酶之程度，在反應完成之後添加結合於抗生蛋白鏈菌素之供體螢光團銪穴狀化合物(Eu3+穴 狀化合物)(抗生蛋白鏈菌素接著結合於生物素化泛素)及與標籤特異性抗體(HA、His或GST)偶合之經修飾之別藻藍蛋白XL665(HTRF®原發性受體螢光團)(其識別各別E3連接酶融合蛋白質)。當此等兩種螢光團藉由生物分子相互相用(在此情況下，E3連接酶之泛素化)變得在一起時，一部分由穴狀化合物在激勵期間捕獲之能量經由620nm處之螢光發射釋放，而其餘能量轉移至XL665。此能量接著由XL665以665nm處之特定螢光形式釋放。665nm處之光僅藉由銪經由FRET發射。 因為分析法中存在銪穴狀化合物，即使當生物分子相互相用未使XL665處於附近時，仍偵測到620nm處的光。
細胞中Smurf-1之自泛素化引起Smurf-1之蛋白酶體分解。因此，Smurf-1催化域之抑制可消除Smurf-1自泛素化及分解，引起細胞中受抑制的Smurf-1蛋白質之聚集。
使用DiscoverX PathHunter ProLabel偵測套組，在四環素誘導性促進劑之控制下，藉由量測穩定表現Prolabel標記之Smurf-1之HEK293細胞中Smurf-1蛋白質之聚集來評估Smurf-1 HECT結構域處化合物之細胞活性。此技術量測細胞溶解物之酶補充分析中Prolabel標記之Smurf-1之量。在此方法中，β-半乳糖苷酶之小型4kDa補充片段(稱為ProLabel)表現為與人類Smurf-1 N端融合。此標籤為酶供體(ED)且能夠在補充較大部分之β-半乳糖苷酶(對於酶受體，稱為EA)之後偵測目標蛋白質含量，以形成功能性β-半乳糖苷酶。EA以外源方式添加至細胞溶解物中。使用化學發光受質量測酶活性且與復原之酶之量且因此Smurf-1含量成比例。
在90% DMSO中在180x[最終]下製備測試及參考化合物，且在90% DMSO中以1：3稀釋。
對於生物化學分析板，將50nl測試化合物、參考化合物及緩衝液/DMSO對照物轉移至384孔白色GREINER「SMALL VOLUME」PS板 之各別孔中。分析板在Biomek FX液體操作工作站上在室溫下運行。向含有含50nl化合物或對照溶液之90%DMSO之分析板中每孔添加4.5μl E3連接酶溶液，接著添加4.5μl預先培育之E1/E2/Ub混合物或預先稀釋之泛素(LOW對照)。在每次添加之後，劇烈振盪板。在此分析法中，在8點劑量-反應曲線中，化合物濃度在3nM至10μM範圍內。
在培育45分鐘之後，藉由添加4.5μl 2mM NEM停止泛素化反應，接著立即添加4.5μl包括XL665標記之抗體及抗生蛋白鏈菌素偶合銪之偵測溶液使總體積達到18μl。在黑暗中45分鐘培育時間之後，將板轉移至Pherastar螢光讀取器中以量測TR-FRET信號。
對於細胞分析法，接著將250nl測試化合物、參考化合物及緩衝液/DMSO對照物轉移至無菌120μl 384孔白色GREINER PS,CELLSTAR,uClear組織培養板之各別孔中。為了在添加細胞之前在培養基中均勻分配化合物溶液，使用MULTIDROP 384分配器將10μl細胞培養基添加至含有化合物之板之各孔中且劇烈振盪。在短暫培育之後，用胰蛋白酶-EDTA自燒瓶剝離細胞，計數且在培養基中稀釋至1.5×106個細胞/毫升之濃度。藉由添加多西環素達到0.2μg/ml之最終濃度來誘導Smurf-1之表現。使用MULTIDROP 384分配器將10μl細胞懸浮液添加至含有化合物之板之各孔中。板在37℃、5% CO2下培育隔夜。在此分析法中，在8點劑量-反應曲線中，化合物濃度在6.75nM至22.5μM範圍內。
在與化合物一起培育隔夜之後，使用來自DiscoverX之PathHunter Prolabel偵測套組測定Smurf-1之含量。首先使用多通道分佈移液器手動添加10μl溶解/CL偵測工作溶液，接著添加5μl酶受體EA。板在板振盪器上混合且在室溫下培育2-3小時，隨後在PherStar板讀取器中量測化學發光信號。
下文實例之化合物具有上述資料量測中之Smurf-1 IC50值，如表 A中所示。
Figure 104115287-A0305-02-0049-16
Figure 104115287-A0305-02-0050-91
本發明之化合物可與至少一種其他治療劑同時、或在其之前、或在其之後投與。本發明之化合物可藉由相同或不同投藥途徑單獨投與，或與其他試劑在同一醫藥組合物一起投與。治療劑為例如化合物、肽、抗體、抗體片段或核酸，其為治療上活性的或在與本發明之化合物組合向患者投與時增強治療活性。
在一個實施例中，本發明提供一種產品，其包含呈組合製劑形式之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及至少一種其他治療劑，其用於在療法中同時、單獨或依序使用。在一個實施例中，療法為治療藉由Smurf-1介導之疾病或病狀。以組合製劑形式提供的產品包括組合物，該組合物包含式(I)化合物及共同存在於同一醫藥組合物中之其他治療劑，或包含式(I)化合物及呈單獨形式(例如呈套組形式)之其他治療劑。
在一個實施例中，本發明提供醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及另一種治療劑。如上文所述，醫藥組合物視情況可包含醫藥學上可接受之載劑。
在一個實施例中，本發明提供一種套組，其包含兩種或兩種以上單獨的醫藥組合物，其中至少一者含有式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中，該套組包含用於分別保留該等組合物之構件，諸如容器、分隔瓶或分隔箔片封包。該套組之一個實例為泡殼包裝，如通常用於錠劑、膠囊及其類似物之包裝。
本發明之套組可用於投與不同劑型(例如經口及非經腸)，用於以不同劑量區間投與各別組合物，或用於針對彼此滴定各別組合物。為輔助順應性，本發明之套組通常包含用於投藥之指導。
在本發明之組合療法中，本發明之化合物及其他治療劑可由相 同或不同製造商製造及/或調配。此外，本發明之化合物及其他治療劑可在以下情況中一起成為組合療法：(i)在向醫師發佈組合產品之前(例如在套組包含本發明之化合物及其他治療劑的情況下)；(ii)由醫師自身(或在醫師指導下)投與之前不久；(iii)在患者自身中，例如在依序投與本發明之化合物及其他治療劑期間。
因此，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀，其中該藥劑係製備用於與另一種治療劑一起投藥。本發明亦提供另一種治療劑之用途，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀，其中該藥劑與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽一起投與。
本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀之方法中，其中式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽係製備用於與另一種治療劑一起投藥。本發明亦提供另一種治療劑，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀之方法中，其中該另一種治療劑係製備用於與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽一起投藥。本發明亦提供式(I)化合物，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀之方法中，其中式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與另一種治療劑一起投與。本發明亦提供另一種治療劑，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀之方法中，其中該另一種治療劑與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽一起投與。
本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀，其中患者先前(例如24小時內)經另一種治療劑治療。本發明亦提供另一種治療劑之用途，其係用於治療由Smurf-1介導之疾病或病狀，其中患者先前(例如24小時內)經式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療。
以下實例意欲說明本發明，且不應解釋為對其進行限制。溫度 以攝氏度形式給出。若未另外提及，則所有蒸發均在減壓下，通常在約15mm Hg及100mm Hg之間(=20-133mbar)進行。終產物、中間物及起始材料之結構藉由標準分析方法(例如微量分析)及光譜表徵(例如MS、IR、NMR)來確定。所使用之縮寫為此項技術中習知者。
用於合成本發明之化合物的所有起始材料、建構組元、試劑、酸、鹼、脫水劑、溶劑及催化劑均為市售可得的或可藉由一般熟習此項技術者已知之有機合成方法來產生。此外，本發明化合物可藉由如以下實例中所示之一般熟習此項技術者已知的有機合成方法來產生。
一般條件：
使用來自以下構型之儀器範圍之電噴霧、化學及電子衝擊離子化方法，用LC-MS、SFC-MS或GC-MS系統獲得質譜：具有Agilent 6110質譜儀之Agilent 1100 HPLC系統，[M+H]+係指化學物質之質子化分子態離子。
在TopSpin程式控制下，使用ICON-NMR在Bruker AVANCE 400MHz或500MHz NMR光譜儀上獲得NMR譜圖。除非另外指明，否則在298K下量測譜圖且相對於溶劑共振進行參考。
儀器
MS方法：使用具有Agilent 6110質譜儀之Agilent 1100 HPLC系統
LowpH_v002
管柱 Phenomenex Gemini C18 50×4.6mm，3.0μm
管柱溫度 50℃
溶離劑：A：H2O，B：甲醇，皆含有0.1% TFA
流動速率 1.0ml/min
梯度 2.0min內5%至95% B，0.2min 95% B
2minLC_v003
管柱 Waters BEH C18 50×2.1mm，1.7μm
管柱溫度 50℃
溶離劑 A：H2O，B：乙腈，皆含有0.1% TFA
流動速率 0.8ml/min
梯度 0.20min 5% B；1.30min內5%至95% B，0.25min 95% B
8minLowpHv01：
管柱：Waters Acquity CSH 1.7μm,2.1×100mm
溫度：50℃
移動相：A：水+0.1%甲酸 B：乙腈+0.1%甲酸
流動速率：0.7mL/min
梯度：0.0min 2% B，0.3-6.5min 2-98% B，6.5-7.5min 98% B，7.5-8.0min 5-98% B
2minLowpH：
管柱：Waters Acquity CSH 1.7μm，2.1×50mm
溫度：50℃
移動相：A：水+0.1%甲酸 B：乙腈+0.1%甲酸
流動速率：1.0mL/min
梯度：0.0min 5% B，0.2-1.3min 5-98% B，1.3-1.55min 98% B，1.55-1.6min 98-5% B
2minLowpHv01：
管柱：Waters Acquity CSH 1.7μm，2.1×50mm
溫度：50℃
移動相：A：水+0.1%甲酸 B：乙腈+0.1%甲酸
流動速率：1.0mL/min
梯度：0.0min 5% B，0.2-1.55min 5-98% B，1.55-1.75min 98% B，1.75-1.8min 98-5% B
2minLowpHv03：
管柱：Waters Acquity CSH 1.7μm，2.1×50mm
溫度：50℃
移動相：A：水+0.1%甲酸 B：乙腈+0.1%甲酸
流動速率：1.0mL/min
梯度：0.0min 5% B，0.2-1.8min 5-98% B，1.8-2.1min 98% B，2.1-2.3min 98% B
2minHighpHv03：
管柱：Waters Acquity CSH 1.7μm，2.1×50mm
溫度：50℃
移動相：A：水+0.1%氨 B：乙腈+0.1%氨
流動速率：1.0mL/min
梯度：0.0min 5% B，0.2-1.8min 5-98% B，1.8-2.1min 98% B，2.1-2.3min 98-5% B
10minLowpHv01：
管柱：Waters Acquity CSH 1.7μm，2.1×100mm
溫度：50℃
移動相：A：水+0.1%甲酸 B：乙腈+0.1%甲酸
流動速率：0.7mL/min
梯度：0.0min 2% B，0.5-8.0min 2-98% B，8.0-9.0min 98% B，9.0-9.1min 98-2% B
LCMS(SRPb)
管柱：Acquity HSS T3 2.1×50mm，1.8微米
管柱溫度：60℃
溶離劑：A：H2O(0.05%甲酸，3.75mM乙酸銨)
B：乙腈(0.05%甲酸)
流動速率：1.0ml/min
梯度 1.4min內5%至98%
縮寫：
Figure 104115287-A0305-02-0055-19
Figure 104115287-A0305-02-0056-20
Figure 104115287-A0305-02-0057-21
製備最終化合物 實例1： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0058-22
步驟1：[三氟甲烷磺酸4-異丙基環己-1-烯-1-基酯]
在氮氣下且冷卻至-70℃之4-異丙基環己酮(1g，7.13mmol)於無水THF(3mL)中之溶液用2M LDA(於THF/庚烷/乙基苯中)(4.28mL，8.56mmol)逐滴處理。在添加完成之後，在-70℃下攪拌混合物1.5小時。向混合物中添加1,1,1-三氟-N-(吡啶-2-基)-N-((三氟甲基)磺醯基)甲磺醯胺(2.81g，7.84mmol)於無水THF(2mL)中之溶液。反應物保持在-70℃下，攪拌3小時且用水小心地淬滅且靜置隔夜。所得混合物用乙醚萃取且經合併之有機萃取物用10%NaOH(水溶液)洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到粗物質。粗物質吸附至二氧化矽上且用100%異己烷溶離，藉由層析純化，得到標題化合物；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.76(1H,t),2.45-2.30(2H,mults),2.22(1H,br d),1.99-1.90(2H,mults),1.61-1.52(1H,mult),1.48-1.36(2H,mults),0.93(6H,dd)。
步驟2：[2-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0058-127
]
[三氟甲烷磺酸4-異丙基環己-1-烯-1-基酯](1.75g，6.43mmol)於二噁烷(30mL)中之攪拌溶液用雙頻哪醇根基二硼(1.714g，6.75mmol)、乙酸鉀(1.892g，19.28mmol)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(0.157g，0.193mmol)處理，且在80℃下攪拌混合物6小時。所得混合物用EtOAc稀釋且用水洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到粗物質。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異 己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟3：[5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯]
向2-5mL微波小瓶中添加[2-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0059-128
](282mg，1.127mmol)、5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(264mg，1.127mmol)、PdCl2(dppf)(82mg，0.113mmol)、碳酸鉀(467mg，3.38mmol)、MeCN(2mL)及水(0.667mL)。小瓶用氮氣抽成真空，密封且放入微波中在80℃下保持1小時。所得混合物用EtOAc及水稀釋且分離各層。有機物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到棕色油，粗物質。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-10% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.73mins；MS m/z[M+H]+ 278.5；方法2minLowpHv03
步驟4：[5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸]
向[5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯](92mg，0.332mmol)於THF(5mL)及MeOH(3mL)中之溶液中添加2M氫氧化鈉(水溶液)(0.166mL，0.332mmol)且在室溫下攪拌混合物2小時。所得混合物在減壓下濃縮且用水稀釋。水層用EtOAc洗滌，用2M HCl(水溶液)酸化且用EtOAc萃取。有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.70mins；MS m/z[M+H]+ 250.2；方法2minLowpHv03
步驟5：[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
在氮氣下，向[5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸](42mg，0.168mmol)於無水DCM(3mL)中之溶液中相繼添加DMF(0.026mL，0.337mmol)及乙二醯氯(0.016mL，0.185mmol)，且在室 溫下攪拌混合物30分鐘。相繼添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(38.8mg，0.185mmol)及三乙胺(0.070mL，0.505mmol)，且攪拌混合物30分鐘。添加水且劇烈攪拌混合物，隨後通過相分離筒。收集有機溶離液且在減壓下濃縮，得到橙色油。粗物質溶解於DMSO(0.9mL)中且經50-98% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度，使用質量引導型自動逆相層析純化。在減壓下濃縮產物溶離份。其餘水性物質用碳酸氫鈉飽和水溶液處理且用DCM萃取，使有機萃取物通過相分離筒。在空氣流下移除溶劑且在減壓下乾燥，得到標題化合物；LC-MS：Rt=4.98mins；MS m/z[M+H]+ 441.4；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.04(1H,br s),6.33(1H,s),4.06(1H,tt),3.26(3H,s),2.62(1H,br d),2.48-2.35(2H,mults),2.31(3H,s),2.22(3H,s),2.05-1.86(8H,mults),1.71(1H,br d),1.60-1.52(1H,mults),1.43-1.17(5H,mults),0.96(3H,d),0.94(3H,d)。
藉由用適合的酮衍生物(可商購或下文描述之製劑)置換4-異丙基環己酮(步驟1)，藉由與實例1類似之方法製備實例1.1至1.2。
實例1.1： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6-乙基-4-甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之非對映異構混合物
Figure 104115287-A0305-02-0060-23
LC-MS：Rt=4.90mins；MS m/z[M+H]+ 441.1；方法 8minLowpHv01
實例1.2： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6,6-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0061-24
LC-MS：Rt=4.60mins；MS m/z[M+H]+ 427.7；方法8minLowpHv01
藉由用適合的硼酸或二氧雜硼戊烷衍生物(可商購或下文描述之製劑)置換2-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0061-129
(步驟3)，藉由與實例1類似之方法製備實例1.3至1.7。
實例1.3： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-乙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0061-25
LC-MS：Rt=4.77mins；MS m/z[M+H]+ 427.6；方法8minLowpHv01
實例1.4： [5-(4-(第三丁基)環己-1-烯-1-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0062-92
LC-MS：Rt=5.16mins；MS m/z[M+H]+ 455.4；方法8minLowpHv01
實例1.5： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(4-甲基環己-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0062-27
LC-MS：Rt=4.47mins；MS m/z[M+H]+ 414.5；方法8minLowpHv01
實例1.6： 5-(環庚-1-烯-1-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0062-94
LC-MS：Rt=4.42mins；MS m/z[M+H]+ 413.6；方法8minLowpHv01
實例1.7： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5- (4-(三氟甲基)環己-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0063-29
LC-MS：Rt=1.36mins；MS m/z[M+H]+ 467.4；方法2minLowpHv03
實例2： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0063-95
步驟1；螺[4.5]十一-6-烯-8-酮
向環戊烷甲醛(Aldrich)(0.82g，8.36mmol)於無水甲苯(10mL)中之溶液中相繼添加甲基乙烯基酮(Alfa Aesar)(0.684mL，8.36mmol)及催化量之濃H2SO4(0.045mL，0.836mmol)。混合物在45℃下加熱1.5小時，接著使用迪安-斯塔克分離器(Dean-Stark trap)回流1小時。反應混合物冷卻至室溫且再添加甲基乙烯基酮(Alfa Aesar)(0.684mL，8.36mmol)。反應混合物在回流下加熱1小時，冷卻至室溫且用1M NaHCO3(30mL)水溶液處理。水性物質用甲苯萃取且經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-20% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題 化合物；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.74(1H,d),5.86(1H,d),2.45(2H,t),1.92(2H,t),1.80-1.71(4H,br mults),1.71-1.61(4H,br mults)。
步驟2：螺[4.5]癸-8-酮
螺[4.5]十一-6-烯-8-酮(442mg，2.94mmol)於乙醇(15mL)中之溶液用氮氣沖洗且用10% Pd-C，50%濕潤(Alfa Aesar，38303)(313mg，2.94mmol)處理。反應混合物在氫氣氛圍下攪拌16小時且經由Celite®過濾，用乙醇沖洗。在減壓下濃縮濾液，得到標題化合物；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 2.31-2.25(4H,t),1.72-1.66(4H,t),1.65-1.60(4H,br mults),1.53-1.47(4H,br mults)。
步驟3：三氟甲烷磺酸螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯
在氮氣下在-78℃下，含1.6M n-BuLi之己烷(1.900mL，3.04mmol)添加至二異丙胺(0.454mL，3.19mmol)於無水THF(20mL)中之攪拌溶液中。溶液升溫至0℃保持20分鐘，隨後再冷卻至-78℃。經5分鐘添加螺[4.5]癸-8-酮(0.440g，2.89mmol)於無水THF(5mL)中之溶液且在-78℃下攪拌溶液50分鐘，隨後添加2-[N,N-雙(三氟甲基磺醯基)胺基]吡啶(Alfa Aesar)(1.141g，3.19mmol)於無水THF(5mL)中之溶液。攪拌混合物且升溫至室溫隔夜。所得混合物用NaHCO3飽和水溶液(4mL)淬滅。水性部分用TBME(×2)萃取且經合併之有機萃取物用10% NaOH水溶液、鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟4：4,4,5,5-四甲基-2-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0064-130
向三氟甲烷磺酸螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯(635mg，2.234mmoL)於無水1,4-二噁烷(15mL)中之攪拌溶液中添加雙(頻哪醇根基)二硼(Alfa Aesar)(567mg，2.234mmol)，接著添加乙酸鉀(Acros)(438mg，4.47 mmoL)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(Alfa Aesar)(54.7mg，0.067mmoL)。反應混合物用氮氣沖洗且加熱至80℃保持16小時。反應混合物冷卻至室溫且經由Celite®過濾，用TBME沖洗。在減壓下濃縮濾液且殘餘物分配於EtOAc(50mL)與水(50mL)之間。有機相用鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟5：4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯
向含有4,4,5,5-四甲基-2-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0065-131
(168mg，0.641mmol)於MeCN(2mL)中之溶液之2-5mL微波小瓶中添加5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(150mg，0.641mmol)，接著添加K2CO3(266mg，1.923mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(Alfa Aesar)(52.3mg，0.064mmol)及水(1mL)。小瓶用氮氣沖洗，密封且在微波(Biotage Smith Initiator)中在90℃下處理1小時。反應混合物分配於水(20mL)與EtOAc(20mL)之間且有機相用鹽水(20mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到橙色油。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.75mins；MS m/z[M+H]+ 290.4；方法2minLowpHv03
步驟6：4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸
向4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯(180mg，0.622mmol)於乙醇(10mL)中之攪拌溶液中添加2M NaOH(水溶液)(0.311mL，0.622mmol)且在室溫下攪拌反應混合物。所得混合物用水(30mL)稀釋且藉由添加2M HCl(水溶液)酸化至pH 5-6。水性物質用EtOAc(2×20mL)萃取且經合併之有機萃取物用鹽水(20mL)洗 滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.61mins；MS m/z[M+H]+ 262.3；方法2minLowpHv03
步驟7：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺
向4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸(95mg，0.364mmol)於無水NMP(3ml)中之攪拌溶液中添加HATU(152mg，0.400mmol)，接著添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(84mg，0.400mmol)及三乙胺(0.111mL，0.800mmol)且此物質在室溫下攪拌16小時。反應混合物分配於EtOAc(30mL)與1M NaOH(水溶液)(30mL)之間且有機相用水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到橙色油。粗物質溶解於DMSO中且經50-98% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度，使用UV引導型自動逆相層析純化。產物溶離份添加至EtOAc(50mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(50mL)洗滌。有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.59mins；MS m/z[M+H]+ 453.7；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.21(1H,br s),6.19(1H,mult),4.00(1H,tt),3.25(3H,s),2.46-2.40(2H,br mults),2.23(3H,s),2.14(3H,s),2.10-2.05(2H,mults),1.99-1.88(2H,mults),1.84-1.74(4H,br mults),1.66-1.53(7H,br mults),1.41-1.35(4H,br mults),1.34-1.23(2H,br mults),1.21-1.10(1H,br mult)。
實例2.1： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0067-32
藉由用[1-氧雜螺[4.5]癸-8-酮](Fluorochem)置換螺[4.5]癸-8-酮(步驟3)，藉由與實例2類似之方法製備標題化合物；LC-MS：Rt=1.10mins；MS m/z[M+H]+ 455.5；方法2minLowpHv01
實例2.2： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0067-96
藉由用4,4-二甲基環己-1-基硼酸、四甲基乙二醇酯(Combi Blocks)置換4,4,5,5-四甲基-2-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0067-132
(步驟5)，藉由與實例2類似之方法製備標題化合物；LC-MS：Rt=5.52mins；MS m/z 427.6[M+H]+；方法10minLowpHv01
實例3： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0068-34
步驟1：三氟甲烷磺酸4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基酯
在氮氣下在-78℃下，向4,4-二甲基環戊-2-烯酮(Atlantic)(0.500g，4.54mmol)於無水THF(25mL)中之攪拌溶液中添加含1M L-Selectride之THF(4.539mL，4.54mmol)。反應混合物在-78℃下攪拌1小時且用1,1,1-三氟-N-(吡啶-2-基)-N-((三氟甲基)磺醯基)甲磺醯胺(Alfa Aesar)(1.626g，4.54mmol)於無水THF(5mL)中之溶液處理。 攪拌混合物且升溫至室溫隔夜。所得混合物分配於己烷(60mL)與水(50mL)之間，分離各相且水相用己烷(50mL)萃取。經合併之有機萃取物用10% NaOH水溶液(40mL)、鹽水(40mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到淡黃色油。粗物質吸附至二氧化矽上且用100%異己烷溶離，藉由層析純化，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.54(1H,mult),2.42-2.39(2H,mult),2.23-2.20(2H,mult),1.17(3H,s),1.17(3H,s)。
步驟2：2-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0068-133
向三氟甲烷磺酸4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基酯(367mg，1.503mmol)於無水1,4-二噁烷(10mL)中之攪拌溶液中添加雙(頻哪醇根基)二硼(Alfa Aesar)(382mg，1.503mmol)，接著添加乙酸鉀(Acros)(295mg，3.01mmol)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(Alfa Aesar)(36.8mg，0.045mmol)。反應混合物在80℃下加熱且攪拌16小時。所得混合物冷卻至室溫且經由Celite®過濾，用TBME(100mL)洗滌。有機濾液用 水(50mL)、鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到棕色油。粗物質吸附至二氧化矽上且用100%異己烷溶離，藉由層析純化，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.34-6.31(1H,mult),2.21-2.18(2H,mult),2.17-2.14(2H,mult),1.20(12H,s)0.99(6H,s)。
步驟3：5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
向含有2-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0069-134
(214mg，0.966mmol)於乙腈(2mL)中之溶液之2-5mL微波中添加5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(226mg，0.966mmol)，接著添加K2CO3(400mg，2.90mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(Alfa Aesar)(79mg，0.097mmol)及水(1mL)。小瓶用氮氣沖洗，密封且在微波(Biotage Smith Initiator)中在90℃下加熱1小時。所得混合物經由Celite®過濾，用EtOAc(50mL)洗滌。濾液用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到棕色油。粗物質吸附至二氧化矽上且用100%異己烷溶離，藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.64mins；MS m/z[M+H]+ 250.9/251.5；方法2minLowpHv03
步驟4：5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸
向5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(243mg，0.975mmol)於乙醇(5mL)中之攪拌溶液中添加2M NaOH(水溶液)(0.975mL，1.949mmol)且在室溫下攪拌溶液。當完成時，反應混合物用水(30mL)稀釋且藉由添加2M HCl(水溶液)酸化至pH 5-6。水相用EtOAc(2×20mL)萃取且經合併之有機萃取物用鹽水(20mL)洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.46mins；MS m/z[M+H]+ 222.5；方法 2minLowpHv03.
步驟5：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
向5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸(105mg，0.475mmol)於無水NMP(3mL)中之攪拌溶液中添加HATU(198mg，0.522mmol)，接著添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(109mg，0.522mmol)及三乙胺(0.146mL，1.044mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。所得混合物分配於EtOAc(20mL)與1M NaOH(水溶液)(20mL)之間且有機相用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-60% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到粗物質。粗物質溶解於DMSO中且經40-80% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度，使用質量引導型自動逆相層析純化。產物溶離份添加至EtOAc(50mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(50mL)洗滌。有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.40mins；MS m/z[M+H]+ 413.1/414.6；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.09(1H,br s),6.27(1H,br t),4.06(1H,tt),3.27(3H,s),2.66(2H,mult),2.40(2H,mult),2.34(3H,s),2.22(3H,s),2.06-1.95(2H,br mults),1.92-1.83(4H,br mults),1.75-1.68(1H,br mult),1.44-1.31(2H,br mults),1.30-1.23(1H,br mult),1.19(6H,s)。
實例4： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0071-97
步驟1：1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯
使用迪安-斯塔克分離器在回流下經4小時攪拌4-側氧基環己烷甲酸乙酯(11.7g，68.7mmol)、乙二醇(5.75mL，103mmol)及P-TsOH(0.620g，3.26mmol)於甲苯(60mL)中之混合物，以收集水。所得混合物冷卻至室溫，用NaHCO3飽和水溶液(30mL)淬滅且用EtOAc(100mL)稀釋。有機層用鹽水(30mL)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到黃色油。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.14(2H,q),3.96(4H,s),2.38-2.31(1H,br mult),1.99-1.91(2H,br mults),1.87-1.76(4H,br mults),1.61-1.53(2H,br mults),1.26(3H,t)。
步驟2：8-(2-(苯甲氧基)乙基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯
在-78℃下在氮氣下，含(8-烯丙基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)甲醇(6g，28.0mmol)之無水THF(100mL)添加至預先冷卻之KHMDS(1M於THF中)(36.4mL，36.4mmol)於THF(100mL)中之溶液中。在此溫度下攪拌所得混合物2小時且添加((2-溴乙氧基)甲基)苯(5.31mL，33.6mmol)於THF(100mL)中之溶液。使反應混合物升溫至室溫且在室溫下攪拌隔夜。所得混合物用氯化銨飽和水溶液淬滅且添加EtOAc。有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-40% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到粗物質。粗物質再次吸附至二氧化矽上且用0-20% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 7.36-7.31(2H,mults),7.30-7.26(3H,mults),4.39(2H,s),4.01(2H,q),3.84(4H,s),3.40(2H,t),2.05-1.98(2H,br mults),1.78(2H,t),1.61-1.54(2H,br mults),1.49-1.41(4H,br mults),1.12(3H,t)。
步驟3：[1,4,10-三氧雜二螺[4.2.4.2]十四-9-酮]
含[8-(2-(苯甲氧基)乙基)-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯](1.6g，4.59mmol)之乙醇(5mL)充分脫氣，用氮氣再填充。添加Pd-C(0.147g，1.378mmol)且在氫氣氛圍下攪拌混合物。當完成時，反應混合物經由Celite®濾筒過濾，用EtOH溶離。收集濾液且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.29(2H,t),3.97(4H,mult),2.19(2H,t),2.08-1.99(2H,br mults),1.97-1.89(2H,br mults),1.71-1.56(4H,br mults)。
步驟5：[1,4,10-三氧雜二螺[4.2.4.2]十四-9-醇]
在氮氣下，含1,4,10-三氧雜二螺[4.2.4.2]十四-9-酮(880mg，4.15mmol)之甲苯(30mL)冷卻至-78℃且用1M DIBAL-H(1M於甲苯中)(4.56mL，4.56mmol)處理。在-78℃下攪拌反應混合物2小時。所得混合物用10%乙酸水溶液(18mL)/冰(60g)處理且與氯仿(150mL)一起攪拌5分鐘。分離水性物質且用氯仿(×3)萃取，且經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.13(1H,s),4.11(1H,mult),3.97(4H,mult),3.93(1H,mult),2.12(1H,s),1.95-1.77(3H,br mults),1.76-1.60(6H,br mults),1.58-1.49(1H,br mults)。
步驟6：[1,4,10-三氧雜二螺[4.2.4.2]十四烷]
在氮氣下在-78℃下，向三乙基矽烷(1.965mL，12.30mmol)於DCM(40mL)中之攪拌溶液中在-78℃下相繼添加三氟乙酸(0.948 mL，12.30mmol)及含[1,4,10-三氧雜二螺[4.2.4.2]十四-9-醇](0.878g，4.1mmol)之DCM(40mL)。所得混合物緩慢升溫至0℃且攪拌2小時。添加NaHCO3飽和水溶液且混合物用EtOAc萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物。
步驟7：[2-氧雜螺[4.5]癸-8-酮]
在室溫下，1,4,10-三氧雜二螺[4.2.4.2]十四烷(813mg，4.1mmol)於丙酮(28mL)中之攪拌溶液用10% HCl水溶液(12.46mL，41.0mmol)處理。在室溫下攪拌反應混合物1小時。所得混合物用鹽水(40mL)稀釋且用EtOAc(3×30mL)萃取。經合併之有機萃取物用NaHCO3飽和水溶液(2×30mL)及鹽水(1×30mL)洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。 在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 3.96(2H,t),3.70(2H,s),2.45-2.36(4H,br mults),1.95-1.89(6H,mults)。
步驟8：[三氟甲烷磺酸2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯]
在氮氣下，二異丙胺(0.407mL，2.85mmol)於THF(25mL)中之溶液冷卻至-78℃且用n-BuLi(1.0M於己烷中)(1.702mL，2.72mmol)處理。反應混合物經30分鐘升溫至0℃且冷卻至-78℃，隨後添加含2-氧雜螺[4.5]癸-8-酮(400mg，2.59mmol)之THF(25mL)。在-78℃下1.5小時之後，反應混合物用含1,1,1-三氟-N-(吡啶-2-基)-N-((三氟甲基)磺醯基)甲磺醯胺(1208mg，3.37mmol)之THF(10mL)處理且升溫至室溫隔夜。添加NaHCO3飽和水溶液，接著用EtOAc稀釋。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-25% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.77(1H,t),3.92(2H,t),3.56(2H,mult),2.46-2.29(2H,br mult),2.25-2.22(2H,br mult),1.83-1.76(4H, br mults)。
步驟9：[4,4,5,5-四甲基-2-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0074-135
]
含[三氟甲烷磺酸2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯](270mg，0.943mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-雙(1,3,2-二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0074-136
)(251mg，0.990mmol)之二噁烷(5mL)用乙酸鉀(185mg，1.886mmol)處理且混合物完全脫氣，用氮氣再填充。添加PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(23.11mg，0.028mmol)且混合物加熱至80℃保持16小時。粗反應混合物吸附至二氧化矽上且用0-15% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.54(1H,mult),3.88(2H,t),3.52(2H,mult),2.24-2.18(2H,br mults),2.15-2.12(2H,br mults),1.76-1.68(2H,br mults),1.62-1.57(2H,br mults),1.28(12H,s)。
步驟10：[4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯]
[4,4,5,5-四甲基-2-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-1,3,2-二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0074-137
](0.172g，0.651mmol)、5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(0.183g，0.781mmol)及Cs2CO3(0.849g，2.60mmol)在DME(3mL)及水(1.250mL)中組合。添加PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(0.016g，0.020mmol)且混合物完全脫氣，用氮氣再填充。在微波中在90℃下攪拌混合物1小時。分離雙相反應混合物且有機相吸附至二氧化矽上。用含EtOAc之異己烷之梯度溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.27(1H,mult),4.42(2H,q),3.91(2H,t),3.56(2H,mult),2.56-2.51(2H,br mults),2.31-2.27(2H,br mults),2.28(3H,s),1.83-1.72(4H,br mults),1.41(3H,t)。
步驟11：[4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸]
在室溫下，含[4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯](170mg，0.584mmol)之MeOH(3.60mL)及THF(6mL)用2M NaOH(水溶液)(0.584mL，1.167mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物且用2M HCl(水溶液)(0.2mL)及EtOAc處理。合併之有機層經MgSO4乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；
LC-MS：Rt=0.61mins；MS m/z[M+H]+ 264.4；方法2minHighpHv03
步驟12：[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]
[4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸](40mg，0.152mmol)於DMF(3mL)中之溶液用4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(38.2mg，0.182mmol)、DIPEA(0.106mL，0.608mmol)及HATU(75mg，0.198mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物16小時。向混合物中添加水且水性物質用EtOAc(×2)萃取。經合併之有機萃取物用0.5M氯化鋰(水溶液)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-5% MeOH/EtOAc溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
LC-MS：Rt=1.19mins；MS m/z[M+H]+ 455.5；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.31(1H,s),6.23(1H,mult),4.01(1H,tt),3.88(2H,t),3.53(2H,s),3.26(3H,s),2.51-2.44(2H,br mults),2.28-2.25(2H,mults),2.23(3H,s),2.14(3H,s),1.98-1.87(2H,br mults),1.81-1.70(8H,mults),1.65-1.58(1H,br mult),1.38-1.33(1H,br mult),1.31-1.25(1H,br mult),1.18-1.05(1H br mult)。
實例5： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙 氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0076-36
步驟1：1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇
在0℃下，向1,4-環己二酮單伸乙基縮醛(Aldrich)(2g，12.81mmol)於無水MeOH(30mL)中之攪拌溶液中逐份添加NaBH4(0.727g，19.21mmol)，保持溫度低於5℃。在0℃下攪拌反應混合物15分鐘且在室溫下攪拌2小時。在減壓下濃縮混合物，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 3.96(4H,s),3.86-3.78(1H,br mult),1.94-1.79(4H,br mults),1.73-1.76(4H,br mults),1.43(1H,br s)。
步驟2：8-異丙氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷
向1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-醇(0.5g，3.16mmol)於2-碘丙烷(5.37g，31.6mmol)中之攪拌溶液中添加氧銀(I)(1.392g，6.01mmol)且在室溫下攪拌反應混合物。當完成時，所得懸浮液用EtOAc稀釋且在減壓下過濾懸浮液。在減壓下濃縮濾液，得到淡黃色油。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 3.84(4H,s),3.63(1H,mult),3.44(1H,mult),1.72-1.62(4H,br mults),1.53-1.42(4H,br mults),1.06(3H,s),1.05(3H,s)。
步驟3：4-異丙氧基環己酮
向8-異丙氧基-1,4-二氧雜螺[4.5]癸烷(0.464g，2.317mmol)於THF(2mL)及水(2mL)中之攪拌溶液中添加p-TsOH(0.080g，0.463 mmol)。混合物加熱至100℃隔夜。所得混合物冷卻至室溫且分配於EtOAc(30mL)與水(30mL)之間。有機相用鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 3.78(1H,mult),3.73(1H,mult),2.40-2.31(2H,br mults),2.27-2.18(2H,br mults),1.96-1.87(2H,br mults),1.85-1.75(2H,br mults),1.12(3H,s),1.11(3H,s)。
步驟4：[三氟甲烷磺酸4-異丙氧基環己-1-烯-1-基酯]
在氮氣下在-78℃下，含1.6M nBuLi之己烷(Aldrich)(1.285mL，2.057mmol)添加至二異丙胺(Acros)(0.307mL，2.155mmol)於無水THF(30mL)中之溶液中。溶液升溫至0℃保持30分鐘，隨後再冷卻至-78℃。經5分鐘添加4-異丙氧基環己酮(306mg，1.959mmol)於無水THF(5mL)中之溶液且在-78℃下攪拌混合物1小時，隨後添加2-[N,N-雙(三氟甲基磺醯基)胺基]吡啶(Alfa Aesar))(772mg，2.155mmol)於無水THF(5mL)中之溶液。攪拌混合物且升溫至室溫隔夜。所得混合物用NaHCO3飽和水溶液(30mL)淬滅且水性物質用TBME(2×20mL)萃取。經合併之有機萃取物用10% NaOH水溶液(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-10% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 5.76(1H,mult),3.72-3.63(2H,mults),2.44-2.30(3H,br mults),2.14-2.06(1H,mult),1.86-1.73(2H,br mults),1.09-1.04(6H,mults)。
步驟5：[2-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0077-138
]
向[三氟甲烷磺酸4-異丙氧基環己-1-烯-1-基酯](459mg，1.592mmol)於無水二噁烷(15mL)中之攪拌溶液中添加雙(頻哪醇根基)二硼(Alfa Aesar)(404mg，1.592mmol)，接著添加乙酸鉀(Acros)(313 mg，3.18mmol)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(Alfa Aesar)(39.0mg，0.048mmol)。燒瓶用氮氣沖洗且加熱至80℃隔夜。所得混合物冷卻至室溫且經由Celite®過濾，用TBME洗滌。在減壓下濃縮有機濾液且殘餘物分配於EtOAc(50mL)與水(50mL)之間。有機相用鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟6；[5-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯]
向含有[2-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0078-139
](375mg，1.410mmol)於乙腈(2mL)中之溶液之2-5mL微波小瓶中添加5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(330mg，1.410mmol)，接著添加K2CO3(585mg，4.23mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(11.51mg，0.014mmol)及水(2mL)。小瓶用氮氣沖洗且在微波(拜泰齊Smith引發劑)中在80℃下處理90分鐘。將反應混合物分配於水(30mL)與EtOAc(30mL)之間。有機相用鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，經由Celite®墊過濾且在減壓下濃縮濾液。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-60% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.33分鐘；MS m/z[M+H]+ 294.4；方法2minLowpHv01
步驟7：[5-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸]
向[5-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯](393mg，1.340mmol)於THF(3mL)及乙醇(3mL)中之攪拌溶液中添加2M NaOH(水溶液)(4.179mL，8.36mmol)。在室溫下攪拌反應混合物。 當完成時，將所得混合物倒入水(20mL)中且藉由添加1M HCl(水溶液)將pH值調節至pH 6。水性物質用EtOAc(30mL)萃取且有機萃取物用鹽水(20mL)洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得 到標題化合物； LC-MS：Rt=1.13分鐘；MS m/z[M+H]+ 266.1；方法2minLowpHv01
步驟8：[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
向5-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸(174mg，0.656mmol)於無水NMP(3mL)中之攪拌溶液中添加HATU(274mg，0.721mmol)，接著添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(151mg，0.721mmol)及三乙胺(0.201mL，1.443mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜。所得混合物分配於EtOAc(20mL)與1M NaOH(水溶液)(20mL)之間且有機相用水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質溶解於DMSO中且藉由經9.5分鐘之40-80% MeCN/水(0.1%甲酸)之梯度，使用UV引導之逆相層析純化。產物溶離份添加至EtOAc(50mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(50mL)洗滌。有機相經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.19分鐘；MS m/z[M+H]+ 457.3；方法2minLowpHv01
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.47(1H,s),6.27(1H,mult),3.91(1H,mult),3.75(1H,mult),3.75-3.67(1H,br mult),3.22(3H,s),2.58-2.40(4H,br mults),2.19(3H,s),2.19-2.09(1H,br mults),2.06-2.01(4H,mults),1.99(1H,mult),1.96-1.86(1H,br mult),1.82-1.74(2H,br mults),1.72-1.58(4H,br mults),1.38-1.24(2H,br mults),1.11-1.07(6H,mults)。
實例6： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二 甲基環己基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0080-37
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(實例2.2)(40mg，0.094mmol)於乙醇(20mL)中之溶液用氮氣沖洗且用10% Pd-C，50%濕潤(Alfa Aesar，38303)(14.97mg，0.141mmol)處理。在氫氣氛圍下在室溫下攪拌反應混合物3小時。所得混合物經由Celite®過濾，相繼用乙醇及DCM洗滌。在減壓下濃縮濾液且殘餘物通過500mg二氧化矽-TMT濾筒，用乙醇：醚(1：1)溶離。收集濾液且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； LC-MS；Rt=1.33分鐘；MS m/z[M+H]+ 429.5；方法2minLowpHv01
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.40(1H,s),3.92(1H,tt),3.21(3H,s),2.84(1H,mult),2.07(3H,s),2.02(3H,s),2.03-1.95(2H,mults),1.82-1.58(9H,mults),1.50-1.43(2H,mults),1.37-1.22(5H,mults),0.97(3H,s),0.95(3H,s)。
實例6.1： [N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基環戊基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0081-38
藉由用N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(實例3)置換N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(實例2.2)(步驟1)，藉由與實例6類似之方法製備標題化合物。
LC-MS：Rt=1.46mins；MS m/z[M+H]+ 415.1/416.4；方法2minLowpHv03
實例7： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0081-98
步驟1：5-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(100mg，0.427mmol)及3,3-二甲基丁-1-炔(0.058mL，0.470mmol)於乙腈(3mL)中完全脫氣，用氮氣再填充。添加二環己胺(0.085mL，0.427mmol)、CuI(2.85mg，0.015mmol)及PdCl2(PPh3)2(7.50mg，10.68μmol)。混合物在微波中在100℃攪拌45分鐘。所得混合物吸附至二氧化矽上且藉由層析用0-10% EtOAc於異己烷中溶離純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.53mins；MS m/z[M+H]+ 236.4；方法2minLowpH v03
步驟2：5-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸
5-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(101mg，0.429mmol)於THF(3mL)及MeOH(1.800mL)中在室溫用2M NaOH(水溶液)(0.429mL，0.859mmol)處理1小時。添加2M HCl(水溶液)(0.6mL)及水且水層用EtOAc萃取。合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 14.07(1H,br s),2.14(3H,s),1.33(9H,s)。
步驟3：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
5-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸(85mg，0.410mmol)及4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(86mg，0.410mmol)於DMF(2mL)中在室溫用DIPEA(0.287mL，1.641mmol)及HATU(172mg，0.451mmol)處理且攪拌16小時。所得混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。合併之有機萃取物用0.5M氯化鋰(水溶液)溶液洗，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且藉由層析用0-100% EtOAc於異己烷中溶離純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.42mins；MS m/z[M+H]+ 399.7；方法2minLowpH v03
步驟4：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(30mg，0.075mmol)於 乙醇(5mL)中完全脫氣，用氮氣再填充且添加Pd-C(16.02mg，7.53μmol)。在氫氣氛圍下攪拌混合物。當完成時，反應混合物經由Celite®過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且藉由層析用0-100% EtOAc於異己烷中溶離純化，得到標題化合物；
LC-MS：Rt=1.37mins；MS m/z[M+H]+ 403.1/404.4；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.97(1H,br s),4.04(1H,tt),3.24(3H,s),2.72-2.66(2H,mult),2.19(3H,s),2.16(3H,s),2.04-1.92(2H,br mults),1.90-1.81(4H,br mults),1.70(1H,br mult),1.60-1.54(2H,mult),1.43-1.29(2H,br mults),1.27-1.18(1H,br mult),0.96(9H,s)。
實例8： (Z)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0083-99
步驟1：(Z)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
含N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-炔-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(實例7，步驟3)(30mg，0.075mmol)之EtOAc(3mL)用2,2'-(乙烷-1,2-二基雙(硫烷二基))二乙醇(13.72mg，0.075mmol)及Pd-5%硫酸鹽鋇(16.02mg，7.53μmol)處理。將混合物脫氣，用氮氣完全再填充且在室溫下在氫氣氛圍下攪拌混合物。再添加Pd-5%硫酸鋇(16.02mg，7.53μmol)且在氫 氣氛圍下在室溫下攪拌反應混合物16小時。所得混合物經由Celite®過濾，用EtOAc溶離，且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
LC-MS：Rt=1.35mins；MS m/z[M+H]+ 401.2；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.94(1H,br s),6.00(1H,d,J=12.9Hz),5.91(1H,d,J=12.9Hz),4.01-3.92(1H,tt),3.16(3H,s),2.13(3H,s),2.09(3H,s),1.96-1.84(2H,br mults),1.82-1.74(4H,br mults),1.62(1H,br mult),1.34-1.23(2H,mult),1.19-1.10(1H,br mult),1.05(9H,s)。
實例9： (E)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0084-100
步驟1：(E)-三丁基(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)錫烷
在黑暗中，在0℃下向3,3-二甲基丁-1-炔(500mg，6.09mmol)及Pd(Ph3P)4(70mg，0.06mmol)於THF(4mL)中之溶液中逐滴添加氫化三丁基錫(1.637mL，6.09mmol)。攪拌30分鐘之後，反應混合物升溫至室溫且攪拌16小時。在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用100%異己烷溶離，藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟2：(E)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
(E)-三丁基(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)錫烷(1194mg，0.8mmol)及5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(187mg，0.8mmol)溶解於 二噁烷(6mL)中且將混合物完全脫氣，用氮氣再填充。添加Pd(Ph3P)4(92mg，0.080mmol)且在100℃下攪拌混合物16小時。粗反應混合物吸附至二氧化矽上且用0-10% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.64(1H,d,J=17Hz),6.19(1H,d,J=17Hz),2.23(3H,s),1.45(3H,t),1.16(9H,s)。
步驟3：(E)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸
含(E)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(160mg，0.674mmol)之THF(3mL)及MeOH(1.8mL)用2M NaOH(水溶液)(1.349mL，2.70mmol)處理且在室溫下攪拌2小時。所得混合物用2M HCl(水溶液)處理且用乙酸乙酯(×3)萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物。
步驟4：(E)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
含(E)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸(102mg，0.487mmol)及4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(112mg，0.536mmol)之DMF(2mL)用DIPEA(0.341mL，1.950mmol)及HATU(222mg，0.585mmol)處理。在室溫下攪拌反應混合物2小時。所得混合物用水處理且用EtOAc萃取。經合併之有機萃取物用0.5M LiCl(水溶液)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.41mins；MS m/z[M+H]+ 401.0/402.5；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,MeOD)δ 6.64(1H,d,J=17Hz),6.33(1H,d,J=17Hz),4.16(1H,tt),3.36(3H,s),2.22(3H,s),2.20-2.09(2H,br mults),2.17(3H,s),1.95-1.82(4H,br mults),1.76-1.69(1H,br mult),1.50-1.38(2H,br mults),1.35-1.25(1H,br mult),1.18(9H,s)。
實例10： 5-環己基-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0086-42
步驟1：5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸
向5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(8.65g，37.0mmol)於MeOH(100mL)中之溶液中添加2M NaOH(水溶液)(18.48mL，37.0mmol)。在室溫下攪拌反應混合物10分鐘且所得混合物使用1M HCl(水溶液)酸化，且在減壓下濃縮以移除MeOH。水性物質用水稀釋且用EtOAc(×3)萃取，且經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；LC-MS：Rt=0.82mins；MS m/z[M+H]+ 206.0；方法2minLowpH
步驟2：5-溴-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
DMF(5.33mL，68.8mmol)於DCM(200mL)中之溶液冷卻至0℃且用乙二醯氯(3.31mL，37.9mmol)處理。添加5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸(7.09g，34.4mmol)且在冰冷卻下攪拌10分鐘。在0℃下添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(7.92g，37.9mmol)及三乙胺(14.39mL，103mmol)且在此溫度下攪拌混合物30分鐘。所得混合物用DCM稀釋且用飽和NaHCO3(水溶液)溶液洗滌。有 機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用100% TBME溶離，藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=0.93mins；MS m/z[M+H]+ 397.2/400.2；方法2minLowpH
步驟3：5-環己基-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
向5-溴-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(75mg，0.189mmol)中添加溴化環己基鋅(II)(0.5M於THF中)(1133μL，0.566mmol)及雙(三-第三丁基膦)鈀(0)(9.65mg，0.019mmol)且在微波中在100℃下攪拌混合物30分鐘。所得混合物用EtOAc稀釋且過濾，且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.12mins；MS m/z[M+H]+ 401.0/402.4；方法2minLowpH
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.40(1H,s),3.90(1H,m),3.20(3H,s),2.90(1H,m),2.05(3H,s),2.00(3H,s),2.80-1.00(20H,m)。
實例11： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0087-43
步驟1：三氟甲烷磺酸1,4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯
1,4-環己二酮單伸乙基縮醛(Aldrich)(2g，12.81mmol)於無水THF(30mL)中之攪拌溶液在氮氣下冷卻至-70℃且逐滴添加0.6M LDA(於庚烷/THF/乙基苯中)(25.6mL，15.37)，保持溫度低於-65℃。在-70℃下攪拌反應混合物20分鐘，隨後用2-[N,N-雙(三氟甲基磺醯基)胺基]吡啶(Alfa Aesar)(5.05g，14.09mmol)於無水THF(10mL)中之溶液經30分鐘逐滴處理，確保溫度不超過-65℃。在-70℃下攪拌反應混合物1小時，隨後逐漸溫至室溫且攪拌隔夜。所得混合物用NaHCO3飽和水溶液(100mL)淬滅且用TBME(2×150mL)萃取。經合併之有機萃取物用10%NaOH(水溶液)(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-10% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 5.80(1H,mult),3.91(4H,mult),2.51-2.49(2H,mult),2.49-2.43(2H,br mults),2.37-2.34(2H,br mults),1.86-1.81(2H,mults)。
步驟2：4,4,5,5-四甲基-2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-1,3,2--二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0088-140
向三氟甲烷磺酸1,4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基酯(1.19g，4.13mmol)於無水二噁烷(15mL)中之攪拌溶液中添加雙(頻哪醇根基)二硼(Alfa Aesar)(1.048g，4.13mmol)，接著添加乙酸鉀(Acros)(0.810g，8.26mmol)及PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(Alfa Aesar)(0.101g，0.124mmol)。反應混合物用氮氣沖洗且在80℃下攪拌隔夜。所得混合物冷卻至室溫且經由Celite®過濾，用TBME洗滌。在減壓下濃縮有機濾液且分配於EtOAc(50mL)與水(50mL)之間。有機相用鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟3：4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯
向含有4,4,5,5-四甲基-2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)-1,3,2-二氧硼
Figure 104115287-A0305-02-0089-141
(586mg，2.200mmol)於乙腈(2mL)中之溶液之2-5mL微波中添加5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物D)(515mg，2.200mmol)，接著添加K2CO3(912mg，6.60mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(17.97mg，0.022mmol)及水(0.667mL)。小瓶用氮氣沖洗且在微波(Biotage Smith Initiator)中在80℃下攪拌1小時且在100℃下攪拌30分鐘。所得混合物分配於水(30mL)與EtOAc(30mL)之間。有機相用鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到橙色油。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-40% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 6.26(1H,mult),4.37(2H,q),3.93(4H,s),2.62-2.56(2H,br mults),2.47-2.43(2H,mults),2.23(3H,s),1.82(2H,mult),1.23(3H,t)。
步驟4：4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯
4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯(556mg，1.896mmol)於乙醇(20mL)中之溶液用氮氣沖洗且接著用10% Pd-C，50%濕潤(Alfa Aesar，38303)(303mg，2.84mmol)處理。在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物經由Celite®過濾，用乙醇及DCM洗滌。在減壓下濃縮濾液且殘餘物通過500mg二氧化矽-TMT濾筒，用乙醇：醚(1：1)溶離。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.11mins；MS m/z[M+H]+ 296.2；方法2minLowpHv01
步驟5：4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲酸
向4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲酸乙酯(558mg，1.889mmol)於THF(5mL)中之攪拌溶液中添加2M NaOH(水溶 液)(4.179mL，8.36mmol)且在室溫下攪拌反應混合物15分鐘。將所得混合物倒入水(20mL)中且藉由添加1M HCl將pH值調節至pH 5-6。 水性物質用EtOAc(30mL)萃取且經合併之有機萃取物用鹽水(20mL)洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； LC-MS：Rt=0.89分鐘；MS m/z[M+H]+ 268.2；方法2minLowpHv01
步驟6：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺
向4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲酸(239mg，0.894mmol)於無水NMP(3mL)中之攪拌溶液中添加HATU(374mg，0.984mmol)，接著添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(206mg，0.984mmol)及三乙胺(0.274mL，1.967mmol)。在室溫下攪拌混合物16小時。所得混合物分配於EtOAc(20mL)與1M NaOH(20mL)之間。有機相用水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-2%MeOH/DCM溶離藉由層析純化，得到粗物質。分離之物質溶解於DMSO(2mL)中且用水(30mL)濕磨。在減壓下過濾所得懸浮液且固體用水(20mL)洗滌且在真空中乾燥，得到標題化合物； LC-MS：Rt=0.96分鐘；MS m/z[M+H]+ 459.5：方法2minLowpHv01
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.41(1H,s),3.96-3.86(5H,mults),3.21(3H,s),3.02(1H,mult),2.07(3H,s),2.05-1.92(2H,br mults),2.02(3H,s),1.84-1.72(8H,br mults),1.70-1.57(5H,br mults),1.38-1.23(2H,br mults),1.22-1.11(1H,br mult)。
實例12： 5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基 -1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0091-101
步驟1：5-(1-羥基丁-3-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
Figure 104115287-A0305-02-0091-45
向5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物C)(350mg，1.911mmol)於DCM(19mL)中之溶液中添加烯丙基三甲基矽烷(276μl，1.911mmol)且混合物冷卻至-78℃。醚合三氟化硼(278μl，2.198mmol)於DCM(5mL)中之溶液冷卻至-78℃且經5分鐘添加至反應混合物中。攪拌反應混合物15分鐘且添加三乙胺(266μl，1.911mmol)。 反應混合物保持在-78℃下15分鐘且升溫至室溫。藉由添加NaHCO3飽和水溶液(10mL)淬滅所得混合物且用DCM(2×10mL)萃取。經合併之有機萃取物通過相分離筒且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-40% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.06mins；MS m/z[M+H]+ 225.8/226.4；方法2minLowpHv03
步驟2： 2a：5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之外消旋混合物
Figure 104115287-A0305-02-0092-102
及2b：5-((2S,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2R,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之外消旋混合物
Figure 104115287-A0305-02-0092-47
向5-(1-羥基丁-3-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(140mg，0.622mmol)於DCM(6.2mL)中之溶液中添加特戊醛(67.5μl，0.622mmol)。逐滴添加TMSOTf(112μl，0.622mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。添加MeOH(2mL)且所得混合物分配於水(5mL)與DCM之間，分離各層且水性物質用DCM(2×5mL)萃取。經合併之有機萃取物經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-50% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 2a：5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之外消旋混合物
LC-MS：Rt=1.64mins；MS m/z[M+H]+ 326.6；方法2minLowpHv03
2b：5-((2S,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2R,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之外消旋混合物
LC-MS：Rt=1.54mins；MS m/z[M+H]+ 326.6；方法2minLowpHv03
步驟3：5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之外消旋混合物
Figure 104115287-A0305-02-0093-48
向2a：5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之外消旋混合物(9mg，0.028mmol)於MeOH(0.45mL)及THF(0.75mL)中之溶液中添加2M NaOH(水溶液)(59.9μl，0.120mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時。在減壓下濃縮所得混合物得到殘餘物，其用2M NaOH(水溶液)(5mL)稀釋且用DCM(5mL)洗滌。水層用2M HCl(水溶液)(8mL)酸化且用DCM(3×5mL)萃取。經合併之有機萃取物通過相分離筒且 在減壓下移除溶劑，得到5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之外消旋混合物；
LC-MS：Rt=1.44mins；MS m/z[M+H]+ 298.5；方法2minLowpHv03
步驟4：5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之外消旋混合物
向5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之外消旋混合物(9mg，0.030mmol)於NMP(0.3mL)中之溶液中添加HATU(12.66mg，0.033mmol)，接著添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(6.33mg，0.030mmol)及Et3N(8.39μl，0.061mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物分配於EtOAc(10mL)與NaHCO3飽和水溶液(10mL)之間。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-10% MeOH/DCM溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=4.57mins；MS m/z[M+H]+ 489.3；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.06(1H,br s),4.98(1H,dd),4.06(1H,tt),3.82(1H,mult),3.50(1H,dd),3.40(3H,s),3.26(3H,s),2.28(3H,s),2.21(3H,s),2.14-2.07(1H,mults),2.05-1.82(8H,br mults),1.71(1H,br mult),1.51(1H,mult),1.43-1.29(2H,br mults),1.29-1.17 (1H,br mult),0.92(9H,s)。
實例13： 5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0095-103
藉由在步驟3用2b置換2a，藉由與實例12類似之方法製備實例13；LC-MS：Rt=4.40mins；MS m/z[M+H]+ 489.4；方法8minLowpHv01
實例13a：5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及實例13b：5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫- 1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0096-50
使用超臨界流體層析對掌性分離實例13，得到個別對映異構體：
方法細節：
管柱：Chiralcel OD-H 250×10mm，5μm，在35℃下
移動相：35%異丙醇+0.1% v/v DEA/65% CO2
流動速率：10ml/min
偵測：UV，在220nm下
儀器：Berger Minigram SFC1
實例13a：5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
SFC滯留時間=4.86min
LCMS：Rt 1.42mins MS m/z[M+H]+ 489.5；方法2minLowpHv03
實例13b：5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃- 2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
SFC滯留時間=2.85mins
LCMS：Rt 1.42mins MS m/z[M+H]+ 489.5；方法2minLowpHv03
實例14： 5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之非對映異構混合物
Figure 104115287-A0305-02-0097-104
步驟1：5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-(2,2,2-三氟乙醯氧基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-(2,2,2-三氟乙醯氧基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物
5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(100mg，0.546mmol)及2,2-二甲基己-5-烯-3-醇(中間物F)(70.0mg，0.546mmol)在DCM(12mL)中組合且用烘箱乾燥之分子篩(100mg，0.546mmol)及TFA(3.15mL，40.9mmol)處理。在室溫下攪拌反應混合物2小時。添加特戊醛(0.059mL，0.546mmol)且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物用NaHCO3飽和水溶液淬滅且用DCM(×3)萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物。
步驟2：5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基 異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物
鈉(45.7mg，1.988mmol)溶解於乙醇中且在室溫下將所得溶液添加至5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-(2,2,2-三氟乙醯氧基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-(2,2,2-三氟乙醯氧基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(270mg，0.663mmol)於EtOH(5mL)中之混合物中。在室溫下攪拌反應混合物2小時。添加0.1M HCl(水溶液)(50mL)且分離水性物質且用EtOAc(×3)萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟4：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)-4-側氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)-4-側氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物
5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(35mg，0.112mmol)於DCM(20mL)中混合物在室溫下用戴斯-馬丁試劑(Dess-Martin reagent)(47.7mg，0.112mmol)處理且攪拌30分鐘。添加偏亞硫酸氫鈉飽和水溶液且攪拌混合物15分鐘。分離所得層且有機層用NaHCO3飽和水溶液洗滌。 水性部分用DCM萃取且經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-40% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.78(1H,dd),4.38(2H,q),3.34(1H,dd),2.83(1H,mult),2.62-2.56(1H,mults),2.45-2.33(2H,br mults),2.21(3H,s),1.35(3H,t),0.90(9H,s)。
步驟5：5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸化合物與5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之非對映異構混合物(1：1)
5-((2R,6S)-6-(第三丁基)-4-側氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)-4-側氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(420mg，1.358mmol)於THF(20mL)中之混合物冷卻至-78℃且用含1M L-Selectride之THF(1.426mL，1.426mmol)處理且在-78℃下攪拌3小時。所得混合物用乙酸淬滅且用1M HCl(水溶液)洗滌。水性物質用EtOAc(×2)萃取。合併所有有機層，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-50% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到粗物質。粗物質溶解於THF中，用2M NaOH(水溶液)處理且在室溫下攪拌2小時。所得混合物使用1M HCl(水溶液)酸化且用EtOAc萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾，且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.10mins；MS m/z[M+H]+ 284.3；方法2minLowpHv03
步驟6：5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯化合物與5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯之非對映異構混合物(1：1)及5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯化合物與5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯之非對映異構混合物(1：1)
在0℃下，將5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸化合物與5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-羥基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸(1：1)(31mg，0.109mmol)於DMF(0.5mL)中之非對映異構混合物添加至氫化鈉(10.94mg， 0.274mmol)於DMF(2mL)中之溶液中。混合物升溫至室溫，攪拌2小時且添加碘甲烷(0.068mL，1.094mmol)。在室溫下攪拌反應物隔夜。所得混合物用2M HCl(水溶液)淬滅且用EtOAc萃取。經合併之有機萃取物用0.5M LiCl(水溶液)、鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟7：5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之非對映異構混合物
含5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯化合物及5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯(1：1)與5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯化合物及5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸甲酯(1：1)之非對映異構混合物(14mg，0.045mmol)之THF(1mL)及MeOH(0.6mL)在室溫下用2M NaOH(水溶液)(0.090mL，0.180mmol)處理1小時。所得混合物用2M HCl(水溶液)(4mL)處理且用EtOAc(×2)萃取。T經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；
步驟8：含5-((2R,4R,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸及5-((2R,4S,6S)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2S,4R,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸及5-((2S,4S,6R)-6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之非對映異構混合物(20mg，0.067mmol)及4-胺基-2-環丁基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物E)(12.80mg，0.071mmol)之DMF(0.5mL)用DIPEA (0.047mL，0.269mmol)及HATU(33.2mg，0.087mmol)處理。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物用水處理且用EtOAc(×2)萃取。經合併之有機萃取物用0.5M氯化鋰(水溶液)、鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.38mins；MS m/z[M+H]+ 461.6；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.10(1H,br s),4.99(1H,d),4.63(1H,mult),3.82(1H,mult),3.51(1H,d),3.41(3H,s),3.28(3H,s),2.88-2.75(2H,br mults),2.41-2.31(2H,br mults),2.28(3H,s),2.22(3H,s),2.14-2.06(1H,br mult),1.99-1.83(3H,br mults),1.83-1.72(1H,br mult),1.52(1H,mult),0.92(9H,s)。
實例15： 5-(6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0101-105
步驟1：5-((2R,6S)-4-溴-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-4-溴-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(1：1)
在氮氣下，向含有含2,2-二甲基己-5-烯-3-醇(中間物F)(400mg，3.12mmol)及溴化銦(III)(55.4mg，0.156mmol)之無水DCM(31mL) 之冰冷卻之燒瓶中添加溴三甲基矽烷(0.405mL，3.12mmol)。反應混合物在冰冷卻下攪拌30分鐘。在第二燒瓶中，5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物C)(572mg，3.12mmol)於無水DCM(31mL)中之溶液在氮氣下在冰水中冷卻。此物質經30分鐘在冰冷卻下逐滴添加至第一燒瓶中。反應混合物在冰冷卻下攪拌1.5小時且在室溫下攪拌隔夜。向反應混合物中添加特戊醛(0.085mL，0.781mmol)且攪拌此物質2小時。再添加特戊醛(0.085mL，0.781mmol)且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。向所得混合物中添加NaHCO3飽和水溶液(水溶液)且劇烈攪拌混合物2分鐘。所得混合物通過相分離筒且收集有機溶離液且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；
LC-MS；Rt=1.68mins；MS m/z[M+H]+ 376.4；方法2minLowpHv03
步驟2：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(1：1)
在氮氣流下，向5-((2R,6S)-4-溴-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-4-溴-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(1：1)(233mg，0.623mmol)於EtOH(7.1ml)及EtOAc(0.7mL)中之混合物中添加10% Pd/C(26.5mg，0.249mmol)，且在氫氣氛圍下在室溫下攪拌混合物7小時。添加碳酸氫鈉(209mg，2.490mmol)且在氫氣氛圍下攪拌反應混合物隔夜。再添加10% Pd/C(26.5mg，0.249mmol)且繼續在氫氣氛圍下攪拌隔夜。所得混合物經由Celite®濾筒過濾，用EtOAc溶離且在減壓下移除有機溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-50% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.72mins；MS m/z[M+H]+ 296.3；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.54(1H,d),4.66(2H,q),3.01(1H,d),2.19(3H,s),1.94(1H,mult),1.83-1.77(1H,mult),1.73-1.48(3H,mults),1.34(3H,t),1.35-1.26(1H,mults),0.84(9H,s)。
步驟3：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之混合物(1：1)
在室溫下，向5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯及5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(1：1)(112mg，0.379mmol)於THF(2mL)及MeOH(1.2mL)中之攪拌溶液中添加2M NaOH(水溶液)(0.209mL，0.417mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。在減壓下移除溶劑且殘餘物用EtOAc及水稀釋。分離各層且水層用EtOAc(×2)洗滌。藉由添加2M HCl(水溶液)使水層呈性且用EtOAc(×3)萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；LC-MS；Rt 1.57mins；MS m/z[M+H]+ 268.3；方法2minLowpHv03
步驟4：5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
在氮氣下，向5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之混合物(1：1)(40mg，0.150mmol)於無水DCM(3mL) 中之溶液中添加乙二醯氯(0.014mL，0.165mmol)及DMF(0.023mL，0.299mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5分鐘且添加4-胺基-2-環丁基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物E)(27.1mg，0.150mmol)及三乙胺(0.063mL，0.449mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5分鐘。向所得混合物中添加水且將其劇烈攪拌，隨後通過相分離筒。收集有機物且在減壓下移除溶劑。接著粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到呈對映異構體之混合物形式之粗物質。
使用超臨界流體層析進行物質之對掌性分離，得到個別對映異構體：
方法細節：
管柱：Phenomenex LUX C2 250×10mm管柱，5μm，在35℃下
移動相：50%甲醇+0.1% v/v DEA/50% CO2
流動速率：10ml/min
偵測：UV，在220nm下
儀器：Berger Minigram SFC System 2
實例15a：5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
對掌性SFC：Rt=14.26mins
LC-MS：Rt=4.59mins；MS m/z[M+H]+ 431.5；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.28(1H,br s),4.69-4.59(2H,mults),3.32(3H,s),3.10(1H,d),2.83(2H,mults),2.41-2.34(2H,mults),2.29(3H,s),2.23(3H,s),2.03(1H,br d),1.96-1.60(6H,mults), 1.45-1.33(1H,mults),0.93(9H,s)。
實例15b：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
對掌性SFC：Rt=18.40mins
LC-MS：Rt=4.58mins；MS m/z[M+H]+ 431.5；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.28(1H,br s),4.69-4.59(2H,mults),3.32(3H,s),3.10(1H,d),2.83(2H,mults),2.41-2.34(2H,mults),2.29(3H,s),2.23(3H,s),2.03(1H,br d),1.96-1.60(6H,mults),1.45-1.33(1H,mults),0.93(9H,s)。
實例16： 5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0105-54
藉由用4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)置換步驟4中之4-胺基-2-環丁基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物E)，藉由與實例15類似之方法製備標題化合物。使用超臨界流體層析 進行對掌性分離，得到個別對映異構體：
方法細節：
管柱：Chiralpak OD-H 250×10mm，5μm，在35℃下
移動相：sc-CO2：異丙醇+0.1% DEA
流動速率：10mL/min
偵測：UV，在220nm下
儀器：Berger Minigram SFC1
5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
對掌性SFC Rt=8.19min；LC-MS：Rt=4.87mins；MS m/z[M+H]+ 459.5；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.99(1H,s),4.53(1H,dd),3.97(1H,tt),3.18(3H,s),3.01(1H,dd),2.20(3H,s),2.12(3H,s),1.96-1.86(2H,mults),1.83-1.74(4H,mults),1.72-1.49(6H,mults),1.35-1.22(2H,mults),1.21-1.11(2H,mults),0.84(9H,s)。
實例17： 5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0107-107
步驟1：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)-4-碘基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)-4-碘基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(1：1)
在氮氣下在室溫下，向5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(1g，5.46mmol)、2,2-二甲基己-5-烯-3-醇(中間物F)(0.700g，5.46mmol)及碘化鈉(0.818g，5.46mmol)於無水MeCN(20mL)中之攪拌溶液中經10秒逐滴添加TMSCl(0.698mL，5.46mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。向所得混合物中添加特戊醛(0.593mL，5.46mmol)且攪拌反應混合物3小時。所得混合物用EtOAc稀釋且用10%硫代硫酸鈉(水溶液)溶液(×1)及水(×1)洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。接著粗物質吸附至二氧化矽上且用0-50% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.76mins；MS m/z[M+H]+ 422.3；方法2minLowpHv03
步驟2：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(1：1)
向5-((2R,6S)-6-(第三丁基)-4-碘基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯及5-((2S,6R)-6-(第三丁基)-4-碘基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(1：1)(794mg，1.885mmol)於甲苯(3.8mL)中之溶液中添加DBU(0.284mL，1.885mmol)且在室溫下攪拌此物質隔夜。向所得混合物中添加DBU(0.142mL，0.94 mmol)且在室溫下攪拌此物質4小時。所得混合物用EtOAc及水稀釋且分離各層。水層用EtOAc萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。接著粗物質吸附至二氧化矽上且用0-20% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.64mins；MS m/z[M+H]+ 294.5；方法2minLowpHv03
步驟3：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物
在氮氣下，向5-((2R,6S)-6-(第三丁基)-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯及5-((2S,6R)-6-(第三丁基)-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(1：1)(212mg，0.723mmol)於乙醇(14.5mL)中之溶液中添加10% Pd/C(769mg，0.723mmol)。在氫氣氛圍下，在室溫下攪拌反應混合物隔夜。在氮氣下，所得混合物經由Celite®濾筒過濾，用EtOAc溶離。在減壓下移除有機溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.70mins；MS m/z[M+H]+ 296.4；方法2minLowpHv03
步驟4：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸及5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸(1：1)
向5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(100mg，0.339mmol)於THF(3mL)及MeOH(1.8mL)中之溶液中添加2M NaOH(水溶液)(0.186mL，0.372 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。在減壓下濃縮所得混合物且殘餘物用EtOAc及水稀釋。有機層用0.1M NaOH(水溶液)萃取。合併之水層用1M HCl(水溶液)酸化且用EtOAc(×3)萃取。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.52mins；MS m/z[M+H]+ 268.4；方法2minLowpHv03
步驟5：5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物(1：1)
在氮氣下，向5-((2R,6S)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2S,6R)-6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之混合物(1：1)(77mg，0.288mmol)於DCM(2mL)之溶液中添加乙二醯氯(0.026mL，0.302mmol)及DMF(2.230μl，0.029mmol)。添加4-胺基-2-異丙基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物G)(48.7mg，0.288mmol)及三乙胺(0.161mL，1.152mmol)且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。向所得混合物中添加1M NaOH及DCM且混合物通過相分離管柱。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。接著粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=4.50mins；MS m/z[M+H]+ 419.5；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.50(1H,s),4.72(1H,mult),4.36(1H,mult),3.22(3H,s),3.16(1H,d),2.14(3H,s),2.04(3H,s),1.99-1.90(1H,mult),1.84-1.78(1H,mult),1.70-1.59(3H,br mult),1.35(6H,d),1.38-1.23(1H,br mult),0.88(9H,s)。
實例18： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2R,6R)-6-異丙基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2R,6S)-6-異丙基-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2S,6R)-6-異丙基-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2S,6S)-6-異丙基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0110-108
步驟1：4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲酸乙酯
與中間物C步驟1類似地製備標題化合物。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 6.86(1H,dd),6.02(1H,d),5.69(1H,d),4.37(2H,q),2.19(3H,s),1.33(3H,t)。
步驟2：4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲酸
4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲酸乙酯(250mg，0.993mmol)溶解於THF(5.3mL)及MeOH(3.2mL)中且向其中添加2M NaOH(水溶液)(497μl，0.993mmol)。在室溫下攪拌反應混合物15分鐘。在減壓下濃縮所得混合物且用2M HCl(5mL)及水(5mL)處理。DCM添加至水性物質中，引起形成乳液。在減壓下移除溶劑。所得殘餘物懸浮於DCM(25mL)中且通過相分離管柱。在減壓下移除有機溶劑，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.04mins：MS m/z[M+H]+ 154.1：方法2minLowpHv03
步驟3：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲醯胺
冷卻至0℃之4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲酸(172mg，0.809mmol)於DCM(10mL)中之懸浮液用乙二醯氯(0.142mL，1.617mmol)及DMF(4滴)處理。在0℃下攪拌反應混合物1小時且在室溫下攪拌30分鐘。在減壓下移除溶劑且殘餘物溶解於DCM(8mL)中。添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(169mg，0.809mmol)(中間物D)及三乙胺(0.338mL，2.426mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物用水(15mL)稀釋且用DCM(×2)萃取。合併有機萃取物且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用20-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt 1.11mins：MS m/z[M+H]+ 345.4：方法2minLowpHv03
步驟4：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
向N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲醯胺(53mg，0.154mmol)於THF(1mL)及水(0.5mL)中之溶液中添加過碘酸鈉(99mg，0.462mmol)及EnCatTM(微膠囊化OsO4)(10.26mg，3.08μmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物經由棉花塞過濾且在減壓下濃縮溶離液，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.09(1H,s),8.34(1H,br s),4.07(1H,mult),3.32(3H,s),2.57(3H,s),2.23(3H,s),2.08-1.95(2H,br mults),1.94-1.80(4H,br mults),1.71(1H,br mult),1.44-1.30(2H,br mults),1.30-1.16(1H,br mult)。
步驟5：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(1-羥基丁-3-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(53mg，0.153mmol)於THF(1.5mL)中之溶液冷卻至0℃且經15分鐘逐滴添加含1M溴化烯丙基鎂之Et2O(337μl，0.337mmol)。反應混合物升溫至室溫且添加飽和NH4Cl(水溶液)。水層用DCM(×3)萃取。經合併之有機萃取物通過相分離筒且在減壓下移除有機溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用50-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟6：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2R,6R)-6-異丙基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2R,6S)-6-異丙基-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2S,6R)-6-異丙基-5,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2S,6S)-6-異丙基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(1-羥基丁-3-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(26mg，0.054mmol)於DCM(0.5mL)中之溶液冷卻至0℃且添加異丁醛(5.38μl，0.059mmol)及TMSOTf(10.66μl，0.059mmol)。在0℃下攪拌反應混合物1小時且在室溫下攪拌隔夜。向所得混合物中添加飽和NH4Cl(水溶液)溶液且用DCM(×3)萃取。經合併之有機萃取物通過相分離筒且在減壓下移除有機溶劑。粗物質溶解於DMSO中且使用Xselect CSH Prep C18管柱，經30-70% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度使用UV引導型逆相 層析純化，得到呈烯烴之混合物形式之標題化合物，由NMR提出之產物比率為3：2 4-烯：3-烯；提出之立體化學為順式。
LC-MS：Rt=1.40mins；MS m/z[M+H]+ 443.3：方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.13-8.07(m,2H),6.08-6.03(m,1H),5.936-5.92(m,1H),5.80-5.73(m,2H),5.46-5.42(m,1H),4.85(dd,J=10.37,3.3,1H),4.18-4.14(m,1H),4.10-4.04(m,3H),3.43-3.40(m,1H),3.32-3.24(m,7H),2.30(s,3H),2.27(s,3H),2.24-2.21(m,8H),2.02-1.50(m,16H),1.44-1.06(m,8H),1.01-0.94(m,12H)。
實例19： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2S,6S)-6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺與N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,6R)-6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0113-110
步驟1：5-(1-羥基丁-3-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
三氟化硼乙醚(54.1μl，0.427mmoL)於DCM(0.3mL)中之溶液冷卻至-78℃。在單獨燒瓶中，5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物C)(68mg，0.371mmol)及烯丙基三甲基矽烷(59.0μl，0.371mmol)於DCM中之溶液冷卻至-78℃且將此溶液逐滴添加至三氟化硼乙醚溶 液中。在-78℃下攪拌反應混合物1小時且在室溫下攪拌隔夜。向所得混合物中添加NaHCO3飽和溶液(水溶液)(5mL)且用DCM(×3)萃取。 經合併之有機萃取物通過相分離筒且在減壓下濃縮溶離液。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-50% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.07mins；MS m/z[M+H]+ 226.1：方法 2minLowpHv03
步驟2：4-甲基-5-(6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲酸乙酯
5-(1-羥基丁-3-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(35mg，0.155mmol)於DCM(1mL)中之溶液用乙醛(8.72μl，0.155mmol)處理且反應混合物冷卻至0℃。添加冷卻至0℃之TMSOTf(80.4μL，0.465mmol)於DCM(1.5mL)中之溶液且在0℃下攪拌反應混合物30分鐘且在室溫下攪拌隔夜。向所得混合物中添加氯化銨飽和溶液(水溶液)(2mL)且用DCM(×3)萃取。經合併之有機萃取物通過相分離筒且在減壓下濃縮溶離液。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.32mins：MS m/z[M+H]+ 252.2：方法 2minLowpHv03
步驟3：4-甲基-5-(6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲酸
向4-甲基-5-(6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲酸乙酯(14mg，0.056mmol)於MeOH(0.2mL)及THF(0.3mL)中之溶液中添加2M NaOH(水溶液)(27.9μl，0.056mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3小時。在減壓下濃縮所得混合物且添加2M NaOH(水溶液)(1mL)及水(1mL)。水性物質用DCM(×3)萃取且經合併之有機萃取物通過相分離筒。在減壓下濃縮溶離液，得到標題化合物。
步驟4：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4- 甲基-5-((2S,6S)-6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺與N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,6R)-6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺之外消旋混合物
向4-甲基-5-(6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲酸)(12.03mg，0.054mmoL)於NMP(0.5mL)中之溶液中添加HATU(20.49mg，0.054mmol)。添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(11.28mg，0.054mmol)及三乙胺(7.49μl，0.054mmoL)且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物分配於碳酸氫鈉飽和水溶液(10mL)與EtOAc(10mL)之間。有機物用鹽水(10mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用40-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=3.65mins：MS m/z[M+H]+ 415.3：方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.98(s,1H),5.86-5.77(m,1H),5.68-5.60(m,1H),4.77(dd,J=10.9,3.3Hz,1H),4.37(s,1H),4.04-3.93(m,1H),3.31(t,J=7.0Hz,1H),3.26(s,3H),2.67-2.54(m,1H),2.31(t,J=8.1Hz,1H),2.19-2.08(m,7H),2.02-1.87(m,2H),1.86-1.72(m,2H),1.64-1.59(m,1H),1.36-1.05(m,7H)。
實例20： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0116-58
步驟1：5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-羥基丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
在0℃下，第三丁基二甲基矽烷基氯(6.3g，41.5mmol)逐份添加至含5-((1R,2S)-1,2-二羥基丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物B)(8.65g，37.7mmol)、4-二甲胺基吡啶(1.38g，11.32mmol)及三乙胺(5.80mL)之DMF(100mL)中，且反應物升溫至室溫。在18小時之後，反應物分配於EtOAc與鹽水之間，用氯化銨飽和水溶液、鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用15% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.59mins；MS m/z[M+H]+ 344.4；方法2minLowpHv03
步驟2：5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯及5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸2-甲基烯丙酯
在室溫下，(700mg於礦物油中之60重量%分散液，17.47mmol)逐份添加至含5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-羥基丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(3.0g，8.73mmol)之THF(75mL)中，接著經10分鐘逐滴添加3-溴-2-甲基丙-1-烯(8.81mL，87mmol)。添加碘化四丁基銨(2.58g，6.99mmol)且所得反應物在58℃下加熱2小 時。反應物冷卻至室溫且相繼用鹽水(75mL)及EtOAc(75mL)淬滅，經Na2SO4乾燥且在減壓下濃縮，得到呈約9：1混合物形式之粗標題化合物； LC-MS：Rt=1.90mins；MS m/z[M+H]+ 398.5；方法2minLowpHv03
LC-MS：Rt=1.95mins；MS m/z[M+H]+ 424.5；方法2minLowpHv03
步驟3：5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸
單水合氫氧化鋰(3.20g，76mmol)逐份添加至含5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸2-甲基烯丙酯之混合物[4.5g，呈含有殘餘的碘化四丁基銨之約9：1混合物形式(25%w/w)]之THF/水(300mL，1.5/1.0)中且所得混合物在70℃下溫和加熱。冷卻至室溫後，分離各層且剩餘水性物質用1M鹽酸水溶液酸化且用EtOAc萃取。合併有機萃取物且用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且在減壓下濃縮，得到粗標題化合物；LC-MS：Rt=1.75mins；MS m/z[M+H]+ 370.5；方法2minLowpHv03
步驟4：5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(2.63g，12.55mmol)逐份添加至含5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸(4.14g，約 70% w/w)之DMF(100mL)中，接著添加DIPEA(7.8mL，44.8mmol)及HATU(4.8g，12.55mmol)。在室溫下攪拌18小時之後，反應混合物分配於EtOAc與鹽水之間。水相用EtOAc萃取且經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用50-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.77mins；MS m/z[M+H]+ 561.8；方法2minLowpHv03
步驟5：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((1R,2S)-2-羥基-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
氟化四丁基銨(15.16mL，15.16mmol)逐滴添加至含5-((1R,2S)-2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(5.06g，7.58mmol(假設76%純度))之THF(160ml)中且在室溫下攪拌所得混合物18小時。藉由依序添加水(150mL)及EtOAc(200mL)來淬滅所得混合物。有機物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用50-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.12mins；MS m/z[M+H]+ 447.5；方法2minLowpHv03
步驟6：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺
在室溫下，三氟乙酸汞(3.92g，9.19mmol)逐份添加至含N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((1R,2S)-2-羥基-1-((2-甲基烯丙基)氧基)丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(3.59g，8.03 mmol)之THF(160mL)中。添加紅色氧化汞(1.99g，9.19mmol)且在室溫下攪拌所得反應混合物。在1小時之後，反應物i冷卻至-78℃且逐滴添加三乙基硼烷(16.84mL，16.84mmol)，接著逐份添加硼氫化鈉(579mg，15.31mmol)。在-78℃下1小時之後，使反應物逐漸溫至室溫。所得混合物該等添加鹽水及EtOAc淬滅，分離，經Na2SO4乾燥且在減壓下濃縮。添加DCM(200mL)及Biotage Si-Thiol(17g1.4mmol/g負載，3當量)且在室溫下攪拌所得懸浮液18小時。過濾反應物，用DCM洗滌且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用90-95% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物(>95% ee)； LC-MS：Rt=1.16mins；MS m/z[M+H]+ 447.5；方法2minLowpHv03
1H NMR.([400MHz],[DMSO]9.55(1H,s),4.36(1H,d),4.09(1H,m),3.91(1H,m),3.65(1H,d),3.42(1H,d),3.21(3H,s),2.16(3H,s),2.03(3H,s),1.98(2H,m),1.78(2H,m),1.64(3H,m),1.37(3H,s),1.31(2H,m),1.17(1H,m),1.10(3H,s),0.87(3H,d)。
實例21.1 21.1[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
Figure 104115287-A0305-02-0119-59
及實例21.2：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0120-60
步驟1：[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯]
在氮氣下，向冰冷卻之2-甲基丁-3-烯-1-醇(Aldrich)(0.171mL，1.638mmol)、溴化銦(III)(28.3mg，0.082mmol)及無水DCM(10mL)中添加溴三甲基矽烷(0.213mL，1.638mmol)。反應混合物在冰冷卻下攪拌30分鐘。冰冷的5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物C)(300mg，1.638mmol)於無水DCM(2mL)中之溶液經5分鐘時段添加至反應混合物中。反應混合物在冰冷卻下攪拌且升溫至室溫度過週末。所得混合物用NaHCO3飽和水溶液(10ml)處理同時在0℃下攪拌。 所得混合物通過相分離筒且在減壓下移除溶離溶劑。粗物質溶解於DMSO中且經50-98% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度，使用UV引導型自動逆相層析純化。產物溶離份添加至EtOAc(50mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(50ml)洗滌。有機物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.47mins；MS m/z[M+H]+332.2/334.2：方法 2minLowpHv03
步驟2：[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸鉀]及(R)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲酸鉀及(S)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲酸鉀
向[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯](211mg，0.635mmol)於無水THF(5mL)中之溶液中添加三甲基矽醇化鉀(Aldrich)(107mg，0.953mmol)。在室溫下攪拌反應混合物且 進行音波處理。再添加THF且攪拌混合物3小時。在減壓下濃縮所得混合物，得到標題化合物之混合物； LC-MS：Rt=1.07mins；MS m/z[M+H]+ 224.2；Rt=1.20mins；MS m/z[M+H]+ 306.2：方法2minLowpHv03。
步驟3：[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]及(R)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺化合物與(S)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺之混合物(1：1)
向5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸鉀及4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲酸鉀(粗混合物)(217mg，0.634mmol)於無水NMP(4mL)中之攪拌溶液中添加HATU(Fluorochem)(265mg，0.697mmol)、4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(133mg，0.634mmol)及三乙胺(0.194mL，1.395mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜且分配於EtOAc(25mL)與1M NaOH(25mL)之間。有機物用水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。粗物質溶解於DMSO中且經30-70% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度，使用UV引導型自動逆相層析純化。產物溶離份添加至EtOAc(50mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(50mL)洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物。
實例21.1：[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]
LC-MS：Rt=1.30mins；MS m/z[M+H]+ 497.5：方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.88(1H,s),4.47(1H,mult),4.03-3.87(2H,br mults),3.80-3.72(1H,mult),3.14(3H,s),2.43-2.36(1H,br mult),2.13(3H,s),2.08(3H,s),2.01(1H,br mult),1.91-1.80(3H,br mults),1.79-1.68(5H,br mults),1.58(1H,br mult),1.31-1.18(2H,br mults),1.16-1.05(1H,br mult),0.95(3H,d)。
實例21.2：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺
LC-MS：Rt=1.25mins；MS m/z[M+H]+ 415.4：方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.04(1H,s),5.63(1H,mult),4.78(1H,dd),4.26-4.00(3H,br mults),3.26(3H,s),2.72-2.61(1H,br mult),2.28(3H,s),2.21(3H,s),2.07-1.93(3H,br mults),1.92-1.81(5H,br mults),1.75-1.66(2H,br mults),1.67(3H,s),1.44-1.30(2H,br mults),1.30-1.18(1H,br mult)。
實例22： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,5R)-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0122-61
在氮氣流下，向含(R)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺化合物與(S)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺之混合物(1：1)(實例21.2)(35mg，0.084mmol)之EtOH(15mL)中添加Pd- C(3.59mg，0.034mmol)。在室溫下，在0.35巴氫氣氛圍下攪拌反應混合物2小時。所得混合物經由Celite®過濾，用乙醇洗滌。在減壓下濃縮濾液且在重力下通過1g Biotage Silica-TMT濾筒。濾筒用乙醇洗滌且在減壓下濃縮溶離液。粗物質溶解於DMSO中且經30-70% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度，使用UV引導型自動逆相層析純化。產物溶離份添加至EtOAc(30mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(30ml)洗滌。有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到標題化合物； LC-MS：Rt 1.23mins；MS m/z[M+H]+ 417.4；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.35(1H,mult),4.77(1H,mult),4.17-3.99(2H,mults),3.72(1H,dd),3.50(1H,dd),3.34(3H,mult),2.29-2.22(6H,mults),2.08-1.97(4H,mults),1.86(3H,mults),1.75(1H,mult),1.63(1H mult),1.37(2H,mult),1.30-1.22(3H,mult),1.05(2H,mult),0.87(1H,mult)。
使用超臨界流體層析進行實例22之對掌性分離，得到順式非對映異構體之兩種個別對映異構體及反式非對映異構體之外消旋混合物：
方法細節：
管柱：Chiralpak AD-H 250×10mm，5μm，在35℃下
移動相：30%甲醇/70% CO2
流動速率：10ml/min
偵測：UV，在220nm下
儀器：Berger Minigram SFC2
實例22.a N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺之單一立體異構 體
Figure 104115287-A0305-02-0124-63
SFC滯留時間=9.74min
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.04(1H,br s),4.80-4.75(1H,br mult),4.05(1H,tt),3.76-3.70(1H,dd),3.55-3.48(1H,dd),3.25(3H,s),2.28(3H,s),2.21(3H,s),2.07-1.93(2H,br mults),1.93-1.75(8H,br mults),1.71(1H,br mult),1.67-1.58(1H,br mult),1.44-1.30(2H,br mults),1.30-1.18(1H,br mult),1.05(3H,d)。
實例22.b： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺之單一立體異構體
Figure 104115287-A0305-02-0124-112
SFC滯留時間=8.12mins
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.10(1H,br s),4.79-4.76(1H,br mult),4.06(1H,tt),3.75-3.70(1H,dd),3.53-3.48(1H,dd),3.27(3H,s),2.28(3H,s),2.22(3H,s),2.03-1.95(2H,mult),1.92-1.77(8H,br mults),1.71(1H,br mult),1.66-1.59(1H,br mult),1.42-1.32(2H,br mults),1.27-1.20(1H,br mult),1.05(3H,d)。
實例22.c： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2S,5R)-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺與N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,5S)-5-甲 基四氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0125-65
SFC滯留時間=5.84min
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.10(1H,br s),4.50(1H,dd),4.10-3.98(2H,br mults),3.26(3H,s),3.17(1H,t),2.27(3H,s),2.21(3H,s),2.09-1.92(4H,br mults),1.93-.177(7H,br mults),1.71(1H,br d),1.42-1.17(3H,br mults),0.87(3H,d)。
實例23： 5-((2R,4S)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2S,4R)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0125-66
步驟1：2,2-二甲基丁-3-烯-1-醇
向2,2-二甲基丁-3-炔-1-醇(PharmaBlocks)(3g，30.6mmol)於無水乙醚(40mL)中之溶液中添加2,2'-(乙烷-1,2-二基雙(硫烷二基))二乙醇(5.57g，30.6mmol)，接著添加5% Pd/硫酸鋇(Aldrich)(6.51g，3.06mmol)。混合物完全脫氣，用氮氣再填充且在氫氣氛圍下在室溫下攪拌4小時。在減壓下過濾所得混合物，用乙醚洗滌催化劑。在減壓下小心地濃縮濾液以移除大部分溶劑。過濾所得懸浮液且在減壓下濃縮濾液，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.71(1H,dd),5.05-4.97(2H,mults),3.27(2H,s),1.41(1H,br mult),0.95(6H,s)。
步驟2：5-((2R,4S)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,4R)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物
在氮氣下，向冰冷卻之2,2-二甲基丁-3-烯-1-醇(328mg，3.28mmol)、溴化銦(III)(56.6mg，0.164mmol)及無水DCM(20mL)之混合物中添加溴三甲基矽烷(0.425mL，3.28mmol)且所得混合物在冰冷卻下攪拌30分鐘。冰冷的5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物C)(600mg，3.28mmol)於無水DCM(2mL)中之溶液經15分鐘時段添加至反應混合物中且反應混合物在冰冷卻下攪拌85分鐘。所得混合物用NaHCO3飽和水溶液(10mL)處理同時在0℃下攪拌。雙相混合物通過相分離筒且在減壓下濃縮濾液。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-60% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.48mins；MS m/z[M+H]+ 346.2/348.2：方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.12(1H,dd),4.45(2H,q),4.10-4.01(2H,mult),2.73-2.65(1H,mult),2.46-2.39(1H,mult),2.27(3H,s),1.82(3H,s),1.80(3H,s),1.43(3H,t)。
步驟3：5-((2R,4S)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2S,4R)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之混合物
向5-((2R,4S)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯與5-((2S,4R)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯之混合物(442mg，1.277mmol)於THF(10mL)及MeOH(1mL)中之攪拌溶液中添加2M NaOH(水溶液)(1.277mL，2.55mmol)。 在室溫下攪拌反應混合物。當完成時，反應物添加至水(20mL)中且藉由添加1M HCl(水溶液)酸化至pH 5-6。水性物質用EtOAc(40mL)萃取且經合併之有機萃取物用鹽水(20mL)洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.18mins；MS m/z[M+H]+ 318.4/320.5：方法2minLowpHv03
步驟4：5-((2R,4S)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2S,4R)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
在氮氣下在0℃下，向經攪拌之DMF(0.073mL，0.943mmol)於無水DCM(15mL)中之混合物中添加乙二醯氯(0.045mL，0.519mmol)。在5分鐘之後，添加5-((2R,4S)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸與5-((2S,4R)-4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸之混合物(150mg，0.471mmol)於無水DCM(3mL)中之溶液且攪拌反應混合物10分鐘。添加4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(109mg，0.519mmol)於無水DCM(2mL)及三乙胺(0.197mL，1.414mmol)中之溶液且在0℃下攪拌反應混合物40分鐘。所得混合物分配於DCM(30mL)與NaHCO3飽和水溶液(30mL)之間。有機物通過相分離管柱且在減壓下濃縮溶離液。粗物質溶解於DMSO中且經30-70% MeCN/水(0.1%甲酸)之9.5分鐘梯度，使用UV引導型自動逆相層析純化。產物溶離份添加至EtOAc(50mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(50ml)洗滌。有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； LC：Rt=1.26mins：方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.06(1H,br s),5.19(1H,t),4.53 (1H,mult),4.40(1H,mult),4.05(1H,tt),3.26(3H,s),2.92-2.77(2H,br mult),2.28(3H,s),2.21(3H,s),2.06-1.94(2H,br mults),1.92-1.83(4H,br mults),1.72(3H,s),1.72-1.63(1H,br mults),1.64(3H,s),1.44-1.30(2H,br mults),1.29-1.19(1H,br mult)。
實例24： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2R,4R)-4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2S,4S)-4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
Figure 104115287-A0305-02-0128-113
在氮氣流下，向含5-(4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺(62mg，0.122mmol)之乙醇(10mL)中添加Pd-C(5.18mg，0.049mmol)。在0.35巴氫氣氛圍及室溫下攪拌混合物隔夜。向反應混合物中添加NaHCO3(40.9mg，0.487mmol)，且在0.35巴氫氣氛圍及室溫下攪拌反應混合物2.5小時。所得混合物經由Celite®過濾，用EtOH洗滌。濾液通過Biotage 1g Silica-TMT濾筒且在減壓下移除溶離液。經30-98% MeCN/水(0.1% TFA)之9.5分鐘梯度，藉由製備型HPLC-MS純化粗物質。產物溶離份溶解於EtOAc(20mL)中且用NaHCO3飽和水溶液(20mL)洗滌。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.30mins；MS m/z[M+H]+ 431.5：方法2minLowpHv03。
使用超臨界流體層析進行實例24之對掌性分離，得到單一對映異構體。
方法細節：
管柱：Chiralpak IB，250×10mm，5μm，在35℃下
移動相：40%異丙醇+0.1% v/v DEA/60% CO2
流動速率：10ml/min
偵測：UV，在220nm下
儀器：Berger Minigram SFC1
實例24.a：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2R,4R)-4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2S,4S)-4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
SFC Rt=3.99mins
LC-MS；Rt=1.30mins；MS m/z[M+H]+ 431.5；方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.99(1H,br s),5.09(1H,mult),4.09(1H,t),4.10-4.00(1H,tt),3.69(1H,t),3.24(3H,s),2.45-2.36(1H,mult),2.25(3H,s),2.21(3H,s),2.18-2.09(1H,br mult),2.06-1.93(2H,br mults),1.91-1.83(5H,br mults),1.71(1H,br mult),1.67-1.60(1H,br mult),1.44-1.30(2H,br mults),1.29-1.19(1H,br mult),1.00(3H,d),0.95(3H,d)。
實例24.b：N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2R,4R)-4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-((2S,4S)-4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
LC-MS：Rt 1.30mins；MS m/z[M+H]+ 431.6：方法2minLowpHv03
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.06(1H,br s),5.12-5.06(1H,mult),4.12-4.01(2H,mults),3.69(1H,t),3.26(3H,s),2.44-2.36(1H,mult),2.26(3H,s),2.21(3H,s),2.18-2.08(1H,mult),2.05-1.95(2H,br mults),1.91-1.83(5H,br mults),1.71(1H,br mult),1.68-1.59(1H,mult),1.44-1.31(2H,br mults),1.30-1.19(1H,br mult),1.00(3H,s),0.95(3H,s)。
實例25： 5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0130-114
步驟1：5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
向5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物C)(50mg，0.273mmol)於甲苯(0.5mL)中之溶液中添加3,3-二甲基丁烷-1,2-二醇(32.3mg，0.273mmol)且混合物在110℃下加熱4.5小時。所得混合物分配於EtOAc與水之間且有機層經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.42mins；MS m/z[M+H]+ 284.3：方法 2minHighpHv03
步驟2：5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸鉀
向5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(42mg，0.148mmol)於THF(4mL)中之溶液中添加三甲基矽醇化鉀(19.02mg，0.148mmol)且在室溫下攪拌混合物1.5小時。在減壓下濃縮混合物，得到標題化合物。
步驟3：5-((2R,4R)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及5-((2R,4S)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺與5-((2S,4R)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺及5-((2S,4S)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之混合物
向5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸鉀(43.5mg，0.148mmol)於NMP(0.7mL)中之溶液中添加HATU(62.0mg，0.163mmol)、三乙胺(45.5μl，0.326mmol)及4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(中間物D)(31.0mg，0.148mmol)且在室溫下攪拌反應混合物隔夜。向所得混合物中添加水及EtOAc。有機物用鹽水(×2)洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。接著粗物質吸附至二氧化矽上且用0-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到呈非對映異構體之混合物形式之標題化合物。
實例25a-25d： 5-((2R,4R)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5- ((2R,4S)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2S,4R)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺或5-((2S,4S)-4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0132-69
使用超臨界流體層析進行5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之對掌性分離，得到個別對映異構體。
方法細節：
管柱：Chiralpak IB，250×10mm，5μm，在35℃下
移動相：35%異丙醇+0.1% v/v DEA/65% CO2
流動速率：10ml/min
偵測：UV，在220nm下
儀器：Berger Minigram SFC1
實例25a：5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之單一立體異構體
SFC：Rt=3.36min
LC-MS：Rt=4.11mins；MS m/z[M+H]+ 447.6：方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.29(1H,br s),6.02(1H,s),4.14-4.00(2H,mults),3.97-3.87(2H,mults),3.36(3H,s),2.31(3H,s),2.23(3H,s),2.09-1.97(2H,mults),1.88(3H,br t),1.73(1H,br d),1.44-1.31(2H,mults),1.30-1.20(2H,mults),1.01(9H,s)。
實例25b：5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之單一立體異構體
對掌性SFC：Rt=3.78min
LC-MS：Rt=4.12mins；MS m/z[M+H]+ 447.5；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.06(1H,br s),6.19(1H,s),4.16-4.00(3H,mults),3.85(1H,t),3.30(3H,s),2.30(3H,s),2.22(3H,s),2.07-1.94(2H,mults),1.87(3H,br t),1.72(1H,br d),1.45-1.20(4H,mults),0.99(9H,s)。
實例25c：5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之單一立體異構體
對掌性SFC：Rt=4.05min
LC-MS：Rt=4.09mins；MS m/z[M+H]+ 447.5；方法 8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.99(1H,br s),6.02(1H,s),4.10-4.01(2H,mults),3.97-3.87(2H,mults),3.25(3H,s),2.32(3H,s),2.21(3H,s),2.06-1.93(2H,mults),1.88(3H,br t),1.71(1H,br d),1.44-1.30(2H,mults),1.30-1.20(2H,mults),1.00(9H,s)。
實例25d：5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺之單一立體異構體
對掌性SFC：Rt=5.95min
LC-MS：Rt=4.15mins；MS m/z[M+H]+ 447.6；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.00(1H,br s),6.20(1H,s),4.16-4.09(2H,mults),4.07-4.00(2H,mults),3.27(3H,s),2.30(3H,s),2.21(3H,s),2.07-1.94(2H,mults),1.87(3H,br t),1.72(1H,br d),1.45-1.20(4H,mults),0.99(9H,s)。
實例26： N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺
Figure 104115287-A0305-02-0134-115
藉由用2,2-二甲基丙烷-1,3-二醇置換3,3-二甲基丁烷-1,2-二醇(步驟1)，藉由與實例25類似之方法製備標題化合物； LC-MS：Rt=3.68mins；MS m/z[M+H]+ 433.4；方法8minLowpHv01
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.98(1H,s),5.58(1H,s),3.96(1H,tt),3.71(2H,d),3.55(2H,d),3.18(3H,s),2.26(3H,s),2.11(3H,s),1.97-1.86(2H,mults),1.80-1.74(3H,mults),1.62(1H,br d),1.33-1.11(4H,mults),1.23(3H,s),0.75(3H,s)。
中間物A： 5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
Figure 104115287-A0305-02-0135-116
步驟1：4-甲基-5-側氧基-4,5-二氫異噁唑-3-甲酸乙酯
向含丙酸二乙酯草醯酯(300g，1.48mol)之乙醇(2 l)中添加羥胺鹽酸鹽(124g，1.78mol)且反應混合物在80℃下加熱3小時。所得混合物冷卻至室溫且在減壓下移除溶劑。殘餘物用水及DCM處理且水性物質用DCM萃取。乾燥合併之有機物且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.40(2H,q),2.09(3H,s),1.38(3H,t)。
步驟2；5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
4-甲基-5-側氧基-4,5-二氫異噁唑-3-甲酸乙酯(42.5g，248mmol)與氧溴化磷(199g，695mmol)一起攪拌且加熱至80℃。經15分鐘逐滴添加三乙胺(34.6mL，248mmol)且反應混合物在80℃下攪拌3小時。 所得混合物冷卻至室溫。添加DCM(400mL)且混合物在攪拌下倒入冰(約400mL)中。添加2M NaOH(水溶液)(1250mL)直至pH 7且分離所得層。水層用DCM(2×300mL)萃取且合併所得有機萃取物，用水 (400mL)、硫代硫酸鈉(5% w/v溶液，400mL)、水(400mL)及鹽水(400mL)洗滌。有機物經MgSO4及炭乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.02mins：MS m/z[M+H]+ 234.0：方法2minLowpH
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.47(2H,q),2.21(3H,s),1.44(3H,t)。
中間物B： 5-((1R,2S)-1,2-二羥基丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
Figure 104115287-A0305-02-0136-117
步驟1：(E)-4-甲基-5-(丙-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲酸乙酯
反-1-丙烯基三氟硼酸鉀(9.86g，66.7mmol)、PdCl2(dppf).DCM加合物(907mg，1.11mmol)、5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(13g)及三乙胺(7.7mL)於EtOH(250mL)中之懸浮液在真空中脫氣且用氮氣回填，隨後在90℃下加熱18小時。冷卻至室溫後，反應物分配於EtOAc與鹽水之間，分離，經MgSO4乾燥且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用5-10% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物；LC-MS：Rt=1.30mins；MS m/z[M+H]+ 196.2；方法2minLowpHv03
步驟2：5-((1R,2S)-1,2-二羥基丙基)-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
含(E)-4-甲基-5-(丙-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲酸乙酯(500mg，2.56mmol)之第三丁醇-水(1mL)逐份添加至AD-混合-β(3.59g，7.63 mmol)、甲烷磺醯胺(731mg，7.68mmol)、經改質之AD-混合-β(DHQD)2PHAL(80mg，0.102mmol)及四氧化鋨(0.836mL，第三丁醇中之2.5重量%溶液，0.067mmol)於第三丁醇-水(1：1，19mL)中之混合物中且在室溫下攪拌所得反應混合物1.5小時。一次性添加亞硫酸鈉(3.9g)且攪拌反應物30分鐘。分離各相，且EtOAc相經Na2SO4乾燥且在減壓下濃縮。粗物質吸附至二氧化矽上且用65-75% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物(>96%ee)； LC-MS：Rt=0.78mins；MS m/z[M+H]+ 230.2；方法2minLowpHv03
中間物C： 5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
Figure 104115287-A0305-02-0137-118
步驟1：4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲酸乙酯
5-溴-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯(中間物A)(15g，64.1mmol)及三丁基(乙烯基)錫烷(22.48mL，77mmol)在無水二噁烷(250mL)中攪拌且在室溫下用氮氣吹掃90分鐘。添加肆(三苯基膦)鈀(3.70g，3.20mmol)且在100℃下攪拌反應混合物隔夜。反應混合物分配於乙酸乙酯(250mL)及水(250mL)中且分離。向有機層中添加氟化鈉溶液(約1M，250ml)且所得懸浮液經由Celite®過濾。分離各層且有機物用水、鹽水洗滌，經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-30% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.20mins：MS m/z[M+H]+ 182.5：方法 2minLowpHv03
步驟2：5-甲醯基-4-甲基異噁唑-3-甲酸乙酯
在室溫下，向含4-甲基-5-乙烯基異噁唑-3-甲酸乙酯(3g，16.56mmol)之THF(40mL)及水(20mL)中添加過碘酸鈉(10.62g，49.7mmol)及Osmium ENCAT 40(828mg，0.248mmol)。在室溫下攪拌反應混合物度過週末。所得混合物經由Celite®(5g)過濾，用EtOAc洗滌。分離各層且用EtOAc萃取水層。經合併之有機萃取物經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質懸浮於DCM中，進行音波處理且通過相分離筒。收集溶離液且在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 10.12(1H,s),4.50(2H,q),2.56(3H,s),1.46(3H,s)。
中間物D： 4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
Figure 104115287-A0305-02-0138-73
步驟1：2-環己基-5-甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
Figure 104115287-A0305-02-0138-74
環己基肼鹽酸鹽(AK Scientific)(700g，4643mmol)添加至DCM(3000mL)及冰冷的2M氫氧化鈉溶液(1778mL，3556mmol)之攪拌溶液中。反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。分離所得相且水層用DCM(4×2000mL)萃取。經合併之有機萃取物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮。所得固體溶解於水(1300mL)中，向其中添加乙 酸(1300mL)及乙醯乙酸乙酯(Fluka)(450mL，3556mmol)且在85℃下攪拌反應混合物1小時。所得混合物在減壓下濃縮至乾燥且殘餘物溶解於DCM(3000mL)及水(1000mL)中。使用2M K2CO3(水溶液)將pH值調節至pH 9，分離各相且有機萃取物用鹽水(1×2L)洗滌。用氯化鈉使第一水層飽和且合併之水相用DCM(4×2L)萃取。經合併之有機萃取物經無水硫酸鈉乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到固體。將粗固體粉碎，添加TBME(2000mL)且在50℃下攪拌混合物1小時，接著在室溫下攪拌1小時。過濾所得懸浮液，用TBME(4×500mL)洗滌固體。 在45℃下在真空中乾燥經分離之固體16小時，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 10.62(1H,br s),5.06(1H,s),3.89(1H,mult),1.98(3H,s),1.81-1.55(7H,mults),1.36-1.22(2H,mults),1.18-1.05(1H,mult)。
步驟2：2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
Figure 104115287-A0305-02-0139-119
2-環己基-5-甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(525g，2834mmol)於N,N-二甲基甲醯胺(2200mL)中之懸浮液加熱至40℃且添加碘代甲烷(532mL，8502mmol)。反應混合物加熱至70℃保持20小時。再添加碘代甲烷(177mL，2834mmol)且在75℃下攪拌混合物3.5小時，接著在80℃下攪拌20小時。所得混合物在減壓下濃縮且殘餘物用TBME(2000mL)濕磨。藉由過濾來收集產物，用TBME(5×500mL)洗滌，得到固體。分離之固體懸浮於DCM(2500)及水(500ml)中且使用2M K2CO3水溶液(1700mL)將pH值調節至pH 9。分離各相且水層用DCM(3×500mL)萃取。經合併之有機萃取物用鹽水(1000mL)洗滌且在減壓下濃縮。所得殘餘物溶解於乙酸乙酯(2000mL)中，經無水硫酸鈉乾燥且 經由200g矽膠(40-63μm)過濾，用10%MeOH/EtOAc(7×300mL)溶離。在減壓下濃縮濾液且在65℃下乾燥，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 5.02(1H,s),3.84(1H,tt),3.14(3H,s),2.06(3H,s),1.98-1.86(2H,mults),1.78-1.53(5H,mults),1.33-1.20(2H,mults),1.18-1.04(1H,mult)。
步驟3：2-環己基-1,5-二甲基-4-硝基-1H-吡唑-3(2H)-酮
Figure 104115287-A0305-02-0140-76
向冷卻至-15℃之三氟乙酸(1940mL)中添加2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮(535g，2231mmol)且反應混合物冷卻至0℃。在保持溫度低於15℃情況下經90分鐘逐滴添加硝酸90%(211mL，4461mmol)，且在10℃下攪拌反應混合物30分鐘。所得混合物緩慢倒入冰水(8L)中且攪拌30分鐘。藉由過濾來收集固體且用水(2×2L)、碳酸氫鈉飽和溶液(1×2L)、水(2×2L)、TBME(3×2L)及庚烷(2×2L)洗滌。分離之固體在真空烘箱中乾燥，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 4.06(1H,tt),3.61(3H,s),2.57(3H,t),2.15-2.03(2H,mults),1.81-1.65(4H,mults),1.64-1.55(1H,mult),1.38-1.24(2H,mults),1.19-1.06(1H,mult)。
步驟4：4-胺基-2-環己基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
Figure 104115287-A0305-02-0140-120
向含2-環己基-1,5-二甲基-4-硝基-1H-吡唑-3(2H)-酮(415g，1.73mol)之MeOH(4500ml)及THF(4500ml)中添加10% Pd/C(70g)且反應混合物在0.1巴及室溫下氫化57.5小時。所得混合物經由壓力濾網過濾 且用甲醇(1×1L)及THF(2×1L)洗滌。在減壓下濃縮濾液，得到暗紅色油。油立即溶解於TBME(4L)中，在減壓下濃縮至約2L且接種(100mg)。在室溫下攪拌懸浮液2小時且在冰浴中冷卻1小時。藉由過濾來收集固體且逐份用冰冷的TBME洗滌直至濾液無色且在真空中乾燥，得到標題化合物； LC-MS：Rt 0.55mins；MS m/z 210.1[M+H]+；方法(SRPb)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 3.68(1H,tt),3.53(2H,br s),2.77(3H,s),1.96-1.83(2H,mults),1.92(3H,s),1.78-1.69(2H,mults),1.64-1.53(3H,mults),1.33-1.19(2H,mults),1.17-1.04(1H,mult)。
中間物E： 4-胺基-2-環丁基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
Figure 104115287-A0305-02-0141-83
步驟1：2-環亞丁基肼甲酸第三丁酯
在氮氣下，環丁酮(16.96mL，227mmol)及肼甲酸第三丁酯(30g，227mmol)於異己烷(378mL)中之混合物在回流下攪拌1小時。反應混合物冷卻至室溫且攪拌1小時。過濾所得懸浮液，用異己烷(×2)沖洗固體。在30℃下在真空中乾燥固體，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.16(1H,br s),3.02(2H,mult),2,81(2H,mult),2.10-2.00(2H,mult),1.53(9H,s)。
步驟2：2-環丁基肼甲酸第三丁酯
在氮氣氛圍下，經1.5小時向硼烷四氫呋喃複合物(33.9mL，33.9mmol)之溶液中逐滴添加2-環亞丁基肼甲酸第三丁酯(5.0g，27.1mmol)於THF(50mL)中之溶液。在室溫下攪拌反應混合物2.5小時。 逐滴添加硼烷四氫呋喃(3mL，3mmol)且在室溫下攪拌混合物隔夜。 藉由添加水(50mL)小心地淬滅所得混合物且在減壓下濃縮混合物。 殘餘物用水(30mL)稀釋且用EtOAc(2×200mL)萃取，使用鹽水輔助分離。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用0-10% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物。
步驟3：1-環丁基-2-甲基肼
在氮氣氛圍下，向2.4M氫化鋰鋁之THF溶液(11.63mL，27.9mmol)中逐滴添加2-環丁基肼甲酸第三丁酯(1.0g，5.37mmol)於THF(26.8mL)中之溶液。一旦添加完成，反應混合物在回流下攪拌20小時。使用冰浴冷卻所得混合物，向其中添加水(1mL)、15% NaOH(1mL)及水(3mL)。攪拌所得懸浮液15分鐘且接著經由Celite®過濾。向濾液中添加HCl(4M於二噁烷中，1.4mL，5.6mmol)且在減壓下移除溶劑，與EtOH(×2)共沸。混合物用乙醚濕磨且過濾所得固體且用乙醚洗滌。在減壓下乾燥固體，得到標題化合物。
步驟4；(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-側氧基丁酸甲酯
在室溫下及在氮氣氛圍下，戴斯-馬丁高碘烷(2.84g，6.69mmol)於DCM(50mL)中之溶液添加至第三丁氧羰基-L-蘇胺酸甲酯(1.3g，5.57mmol)於DCM(20mL)中之溶液中。在室溫下攪拌白色懸浮液3小時。所得混合物用DCM(50mL)稀釋且藉由添加含有0.5M亞硫酸鈉(6.2g)之飽和NaHCO3(水溶液)(50mL)淬滅。分離各相且有機層用飽和NaHCO3(水溶液)(50mL)及水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且用10-50% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.72(1H,br d),5.07(1H,d),3.84(3H,s),2.38(3H,s),1.46(9H,s)。
步驟5：(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)胺基 甲酸第三丁酯
(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-3-側氧基丁酸甲酯(400mg，1.730mmol)於EtOAc(6.407mL)中之溶液相繼用1-環丁基-2-甲基肼(284mg，2.076mmol)及乙酸鈉(213mg，2.59mmol)處理。在室溫下攪拌懸浮液30分鐘且在80℃下攪拌4小時。所得混合物用水(10mL)稀釋且添加EtOAc。分離各層且水性物質用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。殘餘物溶解於EtOAc中且添加異己烷。過濾所得懸浮液且用異己烷沖洗固體。在減壓下濃縮濾液。接著粗物質吸附至二氧化矽上且用50-100% EtOAc/異己烷溶離藉由層析純化，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 6.19(1H,br s),4.61(1H,mult),3.23(3H,s),2.85-2.72(2H,mults),2.39-2.30(2H,mults),2.17(3H,s),1.93-1.83(1H,mult),1.81-1.71(1H,mult),1.48(9H,s)。
步驟6：4-胺基-2-環丁基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
向(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)胺基甲酸第三丁酯於DCM中之溶液(5mL)中添加硫酸(0.034mL，0.634mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。向反應混合物中再添加硫酸(0.068mL，1.268mmol)且攪拌2小時。所得混合物用DCM及水稀釋且分離各層。藉由逐滴添加2M NaOH(水溶液)使水層呈鹼性。水層用DCM(×3)萃取且經合併之有機萃取物通過相分離筒。在減壓下濃縮溶離液，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 4.54(1H,mult),2.94(3H,s),2.72(2H,mults),2.43(2H,br s),2.36-2.26(2H,mults),2.04(3H,s),1.90-1.78(1H,mult),1.78-1.67(1H,mult)。
中間物F： 2,2-二甲基己-5-烯-3-醇
Figure 104115287-A0305-02-0144-121
在0℃下，向三甲基乙醛(10.2mL，90.9mmol)於乙醚(200mL)中之溶液中添加溴化烯丙基鎂(100mL，1M於乙醚中)。在0℃下攪拌反應混合物1小時。所得混合物用飽和氯化銨淬滅且用乙醚萃取。有機萃取物用鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥且過濾。在減壓下小心地移除溶劑，得到標題化合物； 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 5.95-5.83(1H,mult),5.18(1H,mult),5.15(1H,mult),3.28(1H,mult),2.45-2.35(1H,mult),2.06-1.95(1H,mult),1.62(1H,s),0.95(9H,s)。
中間物G： 4-胺基-2-異丙基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
Figure 104115287-A0305-02-0144-84
步驟1：2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-羥基丁酸甲酯
向2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-羥基丁酸(5g，14.65mmol)於MeOH(50mL)中之溶液中添加H2SO4(0.781mL，14.65mmol)。在回流下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物冷卻至室溫且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且使用0-100% EtOAc/異己烷之梯度藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.27mins；MS m/z[M+H]+ 356.3：方法2minLowpHv03
步驟2：2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-側氧基丁酸甲酯
向2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-羥基丁酸甲酯(1.5g， 4.22mmol)於DCM(25mL)中之溶液中逐份添加戴斯-馬丁高碘烷(1.790g，4.22mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物用DCM及1：1 2M碳酸鈉(水溶液)稀釋且添加亞硫酸鈉飽和溶液(水溶液)，且在室溫下攪拌15分鐘。分離各層且有機層經MgSO4乾燥且過濾。在減壓下移除溶劑，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.36mins；MS m/z[M+H]+ 354.3：方法2minLowpHv03
步驟3：(2-異丙基-5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯
向2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-側氧基丁酸甲酯(2.766g，7.83mmol)於含1.25M HCl之乙醇(25mL)中之溶液中添加異丙基肼鹽酸鹽(1.298g，11.74mmol)。在回流下攪拌反應混合物。當完成時，反應混合物冷卻至室溫且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至二氧化矽上且使用0-100% EtOAc/異己烷及10% MeOH/EtOAc之梯度藉由層析純化，得到粗物質。粗物質溶解於IPA中，向其中添加水產生混濁混合物，進行音波處理且在室溫下靜置。過濾所得懸浮液且在減壓下乾燥固體，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.14mins；MS m/z[M+H]+ 378.3/379.3：方法2minLowpHv03
步驟4：(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯
向(2-異丙基-5-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(2.109g，5.59mmol)於DMF(30mL)中之溶液中添加碘代甲烷(2.80mL，44.7mmol)。在90℃下攪拌反應混合物隔夜。所得混合物用IPA及水淬滅且用EtOAc萃取。經合併之有機萃取物用鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾且在減壓下移除溶劑。粗物質吸附至 二氧化矽上且使用0-10% MeOH/EtOAc之梯度藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.20mins；MS m/z[M+H]+ 392.4：方法2minLowpHv03
步驟5：4-胺基-2-異丙基-1,5-二甲基-1H-吡唑-3(2H)-酮
在室溫下，向(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)胺基甲酸(9H-茀-9-基)甲酯(2.047g，5.23mmol)於DMF(30mL)中之溶液中添加哌啶(2.59mL，26.1mmol)。一旦添加完成，反應混合物添加至水(30mL)中。所得懸浮液用水(100mL)稀釋且用EtOAc萃取。合併之有機物用2M HCl(水溶液)萃取且酸性水性萃取物用碳酸氫鈉飽和溶液中和且裝載至C18濾筒上。管柱用水溶離且收集之水性物質用SCX-2漿化且過濾。樹脂用MeOH及含7M氨之MeOH沖洗。在減壓下移除MeOH及水性濾液溶劑。MeOH(150mL)添加至所得混合物中，音波處理，過濾且在減壓下濃縮濾液。EtOH添加至所得混合物中且過濾。在減壓下濃縮濾液。粗物質吸附至二氧化矽上且使用0-10% MeOH/DCM之梯度藉由層析純化，得到粗物質。含粗物質之MeOH用SCX-2(30g)漿化。過濾懸浮液且用MeOH洗滌。接著樹脂用含7M NH3之MeOH溶離。在減壓下濃縮甲醇氨，得到粗物質。接著粗物質吸附至二氧化矽上且使用0-10% MeOH/DCM之梯度藉由層析純化，得到標題化合物； LC-MS：Rt=1.48mins；MS m/z[M+H]+ 170.2：8minHighpHv01
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 9.72(2H,br s),4.42(1H,mult),3.28(3H,s),2.25(3H,s),1.36(6H,d)。
Figure 104115287-A0305-02-0002-142

Claims (13)

  1. 一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，
    Figure 104115287-A0305-02-0147-122
     其中R1為(C3-C6)烷基或(C3-C6)環烷基；R2為甲基；R3係選自(C6-C10)分支鏈烷基、(C6-C10)分支鏈烯基、(C5-C8)環烯基、(C5-C8)環烷基或Het；其中該(C5-C8)環烯基或(C5-C8)環烷基未經取代或經一個、兩個、三個或四個取代基R4取代；及其中Het經一個、兩個、三個或四個取代基R4取代；各R4獨立地選自鹵基、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或鹵基(C1-C4)烷氧基；或兩個R4基團在連接至同一個碳原子時可與其所連接之碳原子共同形成環戊基、四氫呋喃或二氧雜環戊烷(dioxolane)環，其中Het為5或6員完全飽和或部分飽和雜環，其包含a)2或3位置的1個氧原子，或b)2及5位置或2及6位置的2個氧原子，其中編號係相對於連接點；及(C5-C8)環烷基可為含有5、6、7或8個碳原子之單環或橋聯環系統。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1為異丙基、環丁基或環己基。
  3. 如請求項1或請求項2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R3 係選自2,2-二甲基戊基、2,2-二甲基戊-2-烯基、環戊基、環己基、環己烯基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、二氧雜環己烷基(dioxanyl)、四氫呋喃基、二氧雜環戊烷基及雙環[2.2.2]辛基；其中該環戊基、環己基、環己烯基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、二氧雜環己烷基、四氫呋喃基、二氧雜環戊烷基或雙環[2.2.2]辛基環未經取代或經一個、兩個、三個或四個取代基R4取代；及各R4獨立地選自鹵基、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或鹵基(C1-C4)烷氧基；或兩個R4基團在連接至同一個碳原子時可與其所連接之碳原子共同形成四氫呋喃或二氧雜環戊烷環。
  4. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R3為；
    Figure 104115287-A0305-02-0148-123
     且m為1、2、3或4。
  5. 如請求項1或2之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R4獨立地選自甲基、異丙基、第三丁基及甲氧基。
  6. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係選自由以下組成之群：[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基(oxo)-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6-乙基-4-甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6,6-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5- (4-乙基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；[5-(4-(第三丁基)環己-1-烯-1-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(4-甲基環己-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲醯胺]；5-(環庚-1-烯-1-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(4-(三氟甲基)環己-1-烯-1-基)異噁唑-3-甲醯胺]；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺；[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1-氧雜(oxa)螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環戊-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(2-氧雜螺[4.5]癸-7-烯-8-基)異噁唑-3-甲醯胺]；[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙氧基環己-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4,4-二甲基環己基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；[N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基環戊基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5- (3,3-二甲基丁基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；(Z)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；(E)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(3,3-二甲基丁-1-烯-1-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；5-環己基-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)異噁唑-3-甲醯胺；5-(6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；5-(6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；5-(6-(第三丁基)-4-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；5-(6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環丁基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；5-(6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；5-(6-(第三丁基)四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-異丙基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(6-異丙基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺； N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(6-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；[5-(4-溴-5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺]；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基-3,6-二氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-(5-甲基四氫-2H-哌喃-2-基)異噁唑-3-甲醯胺；5-(4-(2-溴丙-2-基)四氫呋喃-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(4-異丙基四氫呋喃-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；5-(4-(第三丁基)-1,3-二氧雜環戊烷-2-基)-N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽。
  7. 一種醫藥組合物，其包含治療有效量之如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑。
  8. 一種組合，其包含治療有效量之如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種治療活性劑。
  9. 一種如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽 之用途，其係用於製造用以調節Smurf-1活性之藥劑。
  10. 一種如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療選自以下之病症或疾病的藥劑：肺高血壓，包括肺動脈高血壓(PAH)；纖維化、類風濕性關節炎及骨折癒合。
  11. 一種如請求項1至6中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療選自以下之病症或疾病的藥劑：青光眼、遺傳性出血性毛細管擴張(HHT)、蛋白尿、傷口癒合、COPD及哮喘。
  12. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-4-甲基-5-((2R,3S)-3,5,5-三甲基-1,4-二氧雜環己烷-2-基)異噁唑-3-甲醯胺，其具下式：
    Figure 104115287-A0305-02-0152-124
  13. 如請求項6之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係N-(2-環己基-1,5-二甲基-3-側氧基-2,3-二氫-1H-吡唑-4-基)-5-(5,5-二甲基-1,3-二氧雜環己烷-2-基)-4-甲基異噁唑-3-甲醯胺，其具下式：
    Figure 104115287-A0305-02-0152-125
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9403833B2 (en) 2014-05-14 2016-08-02 Novartis Ag Carboxamide derivatives
TWI714528B (zh) 2014-05-14 2021-01-01 瑞士商諾華公司 甲醯胺衍生物
MX2020004400A (es) * 2017-11-01 2020-08-06 Bristol Myers Squibb Co Compuestos espirociclicos como moduladores del receptor farnesoide x.
CN108689976B (zh) * 2018-07-23 2021-12-28 陕西师范大学 5-磺基水杨酸协同二氯二茂钛催化合成4-碘代四氢吡喃衍生物的方法
AU2021341508A1 (en) 2020-09-10 2023-05-25 Precirix N.V. Antibody fragment against fap
WO2023203135A1 (en) 2022-04-22 2023-10-26 Precirix N.V. Improved radiolabelled antibody
WO2023213801A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Precirix N.V. Pre-targeting

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2655009A1 (de) 1976-12-04 1978-06-15 Hoechst Ag Isoxazolderivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende mittel
US7354722B1 (en) 1999-06-11 2008-04-08 Signal Pharmaceuticals Modulators of Smurf and BMP/TGFβ signaling pathways
AU782355B2 (en) * 1999-06-11 2005-07-21 Hsc Research And Development Limited Partnership Antagonists of BMP and TGFbeta signalling pathways
JP2007524596A (ja) 2003-02-28 2007-08-30 トランスフォーム・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 共結晶医薬組成物
GB0312368D0 (en) 2003-05-30 2003-07-02 Univ Aston Novel ureido- and amido-pyrazolone derivatives
JP2007506741A (ja) * 2003-09-23 2007-03-22 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド 向代謝性グルタミン酸受容体のピラゾール系調節剤
US7291743B2 (en) 2005-03-29 2007-11-06 Geneblue Corporation Isoxazole derivatives and methods of treating nitric oxide mediated diseases
WO2008121861A2 (en) 2007-03-28 2008-10-09 Xenon Pharmaceuticals Inc. Pyrazole and pyrrole compounds useful in treating iron disorders
WO2009011850A2 (en) 2007-07-16 2009-01-22 Abbott Laboratories Novel therapeutic compounds
CA2694663A1 (en) 2007-08-02 2009-02-05 N.V. Organon 5-phenyl-isoxazole-3-carboxamide derivatives as trpv1 modulators
MX2010002004A (es) 2007-08-22 2010-03-11 Irm Llc Compuestos de 5-(4-(halo-alcoxi)-fenil)-pirimidin-2-amina y composiciones con inhibidores de cinasa.
WO2009086303A2 (en) * 2007-12-21 2009-07-09 University Of Rochester Method for altering the lifespan of eukaryotic organisms
WO2011151361A1 (en) 2010-06-03 2011-12-08 Glaxo Group Limited Novel compounds
JP5987005B2 (ja) 2011-02-18 2016-09-06 アクテリオン ファーマシューティカルズ リミテッドＡｃｔｅｌｉｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｌｔｄ オレキシン拮抗薬として有用な新規なピラゾール及びイミダゾール誘導体
WO2015173659A2 (en) * 2014-05-14 2015-11-19 Novartis Ag Carboxamide derivatives
TWI714528B (zh) 2014-05-14 2021-01-01 瑞士商諾華公司 甲醯胺衍生物
US9403833B2 (en) 2014-05-14 2016-08-02 Novartis Ag Carboxamide derivatives
WO2015173683A1 (en) 2014-05-14 2015-11-19 Pfizer Inc. Pyrazolopyridines and pyrazolopyrimidines

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