Sumário
A presente invenção refere-se a formulações contendo extratos de Vaccinium myrtillus ou outras espécies ricas em antocianosídeos, Punica granatum, Echinacea e opcionalmente Krameria triandra. As ditas formulações são úteis no tratamento e na prevenção de distúrbios da boca e suas partes acessórias, a garganta e o trato respiratório e no tratamento de influenza.
Em particular, as combinações de acordo com a presente invenção, incorporadas em carreadores úteis, são particularmente úteis nos distúrbios bacterianos e virais da infância.
Introdução
Avermelhamento, inflamação e infecção bacteriana e/ou fúngica da garganta, com formação de placas, são sintomas que acompanham influenza, resfriados e distúrbios similares comuns. O resfriado e a influenza comuns, que afetam tanto crianças quanto adultos até três vezes ao ano em média, estão principalmente associados a infecções virais, dos quais 40% são causados por rinovírus, 10% por coronavírus e uma proporção menor por adenovírus e vírus parainfluenza.
O tratamento preventivo e de cura de influenza é uma meta im-portante, porque esta doença afeta milhões de pessoas em todo o mundo a cada ano, com repercussões principais em termos de saúde pública, devido às complicações graves frequentes que debilitam pacientes, levando a um risco grave de morte e em termos financeiros, devido à perda de horas de trabalho.
A influenza é particularmente perigosa nos idosos, devido às suas complicações ou a distúrbios respiratórios existentes que são típicos destes pacientes. O mesmo problema ocorre em crianças, em que a influenza deixa uma consequência de resfriados contínuos e reincidências. Durante muitos anos, a vacinação preventiva foi considerada como sendo o método mais eficiente de lidar com doenças virais; entretanto, sua eficácia é limitada por uma capacidade de mutação do antígeno não usual devido ao aparecimento de novas variantes de vírus capazes de vencer a imunidade que resistia às cepas anteriores.
Embora não haja tratamento específico para estes distúrbios, agentes anti-histamínicos, agentes descongestionantes e agentes anti- inflamatórios são considerados úteis, porque a redução de edema alivia a dor e encurta o período de tempo do distúrbio que sustenta a inflamação. Estes distúrbios algumas vezes envolvem complicações devido ao início de infecções bacterianas secundárias, devido ao fato de que as saídas dos seios nasais são frequentemente obstruídas por congestão das membranas mucosas onde germes patogênicos podem facilmente se proliferar, causando febre e dor localizada. Neste caso, o tratamento com antibióticos ou bac- teriostáticos é requerido em adição aos tratamentos sintomáticos. Entretanto, os antibióticos diminuem as defesas do corpo, especialmente em crianças, levando a reincidências.
Os inibidores de neuraminidase introduzidos na última década também apresentam baixa eficácia e frequentemente problemas de toxicidade e indução de resistência aos vírus. Estas substâncias possuem impactos diferentes sobre as cepas A e B, de forma que as substâncias que atacam ambas as cepas são essenciais quando o tipo de infecção não é conhecido a priori.
Entretanto, nem todas as preparações atualmente disponíveis no mercado podem ser utilizadas por crianças e mulheres grávidas. Isto significa que preparações antivirais que são razoavelmente inofensivas tanto a pacientes adultos (incluindo mulheres grávidas) quanto a crianças e não causam o desenvolvimento de vírus resistentes, são essenciais.
Descrição da invenção
Foi agora descoberto que formulações que contêm extrato de Vaccinium myrtillus ou de outras espécies ricas em antocianosídeos, extrato de Punica granatum, extrato de Echinacea e opcionalmente extrato de Kra- meria triandra, possuem atividade antiviral notável em direção a várias cepas de influenza A e B e em direção a adenovírus, paramixovírus, vírus herpes catarrhalis, citomegalovírus e vírus sincicial respiratório, junto com atividade antimicrobiana considerável e provaram consequentemente ser eficientes no tratamento dos distúrbios da boca e suas partes acessórias, a garganta e o trato respiratório e na prevenção e no tratamento de influenza.
A presente invenção refere-se, portanto, a novas formulações que contêm: a) extrato de Vaccinium myrtillus ou de outras espécies ricas em antocianosídeos; b) extrato de Punica granatum; c) extrato de Echinacea; e opcionalmente d) extrato de Krameria triandra.
De acordo com a presente invenção, o termo "Vaccinium myrtil- lus ou outras espécies" compreende plantas que contêm antocianosídeos. Os antocianosídeos presentes nestas plantas são principalmente cianidina e glucosídeos de delfinidina, para os quais atividades em relação à proteção capilar, à inflamação, à angiogênese e à imunomodulação foram descritas.
O efeito anti-inflamatório realizado pelos antocianosídeos está associado à inibição de NFkB e ao seu poder antiangiogenético; uma vez que o processo de angiogênese é essencial na inflamação e a angiogênese é dependente do VEGF (fator de crescimento endotelial vascular), estes parâmetros foram avaliados e a atividade foi observada no nível nanomolar. As ditas moléculas também inibem 5- e 12-lipoxigenase na concentração nanomolar. O fator nuclear NF-kB, que está envolvido tanto na inflamação quanto na resposta imunológica às infecções, é significativamente inibido por antocianos e por taninos e metabólitos dos mesmos e este fator é também inibido em concentrações nanomolares.
De acordo com a invenção, o extrato de Punica granatum é um extrato obtido do fruto com um teor de polifenol de 90%. O dito extrato demonstrou propriedades antivirais e suavemente antibacterianas, aumentando as defesas do corpo pela maior síntese de interferon .
A preparação deste extrato compreende a extração do fruto e/ou partes aéreas das plantas com C1-C3 alcoóis diferentemente diluídos com água, preferencialmente com uma mistura a 50% v/v de etanol/água; concentração subsequente do extrato de água/etanol até o solvente orgânico ter sido completamente eliminado, tratamento da suspensão nebulosa com uma quantidade de polivinilpirrolidona equivalendo a 0,2% do peso da biomassa e filtração para eliminar os taninos poliméricos indesejáveis, absorção da solução clara sobre resina de poliestireno e lavagem da resina até as substâncias solúveis terem sido completamente eliminadas. O ingrediente ativo que constitui o extrato utilizado na presente invenção é recuperado através da lavagem da resina com etanol a 90%. A concentração do eluato de etanol até um volume pequeno e a secagem do resíduo a vácuo a uma temperatura que não excede 50°C fornece o estrato enriquecido com polifenol.
De acordo com a invenção, o extrato de Echinacea é preferenci-almente um extrato alcoólico das raízes e das partes aéreas de Echinacea angustifolia e/ou purpurea.
A atividade antimicrobiana e antiviral foi descrita para o extrato de Echinacea, especialmente sobre as cepas de Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus (resistente à penicilina), Haemophilus influenzae e Legionella pneumophila. Estas atividades estão associadas tanto com a parte de polifenol quanto com a parte lipofílica que é rica em isobutilamidas de ácidos poli-insaturados (Phytomedicine, 17, 563, 2010). As isobutilamidas são ligantes potentes dos receptores TRPV1 canabinóides e vanilóides e consequentemente atuam sobre a dor, a inflamação e a resposta imunológi- ca. Os compostos agonistas a canabinóides são também associados ao reforço da resposta imunológica, como demonstrado recentemente para derivados de Cannabis.
De acordo com a invenção, o extrato de Krameria triandra é um extrato de água/álcool obtido partindo das raízes e das partes aéreas da planta, purificado de acordo com o procedimento descrito anteriormente para a preparação de extrato de Punica granatum. O extrato de Krameria triandra obtido dessa maneira possui um teor de 14% de benzofurano e um teor de elagitanino e tanino protocatecuíco de 70%. O extrato de Krameria é conhecido por sua ação antibacteriana e antifúngica em concentrações de micro- gramas por mL.
Foi descoberto agora de forma surpreendente que as formulações de acordo com a invenção possuem atividade antimicrobiana e antiviral que excede consideravelmente aquelas de vários extratos quando administrados separadamente, sugerindo a presença de um mecanismo sinérgico in vivo não previsível a priori em termos terapêuticos ou preventivos, que em particular reforça a atividade antimicrobiana e antiviral da substância.
As formulações de acordo com a invenção provaram ser altamente ativas contra as cepas mais comuns de vírus, especialmente o vírus influenza, prevenindo a formação de placas bacterianas com febre que normalmente acompanham os resfriados e influenza. Estas formulações são também eficientes na otite purulenta e nas infecções da boca em geral.
De acordo com um aspecto preferido, as formulações de acordo com a invenção contêm os ingredientes ativos dentro dos intervalos de peso a seguir por dose unitária: a) extrato de Vaccinium myrtillus ou outras espécies ricas em an- tocianosídeos; 20 até 80 mg; b) extrato de Punica granatum: 20 até 40 mg; c) extrato de Echinacea: 20 até 100 mg; e opcionalmente d) extrato de Krameria triandra: 10 até 30 mg.
De acordo com um aspecto particularmente preferido, as composições de acordo com a invenção conterão os ingredientes ativos a seguir nas faixas de peso a seguir por dose unitária: a) extrato de Vaccinium myrtillus ou outras espécies ricas em an- tocianosídeos; 40 até 60 mg; b) extrato de Punica granatum: 25 até 35 mg; c) extrato de Echinacea: 40 até 60 mg; e opcionalmente d) extrato de Krameria triandra: 15 até 20 mg.
As formulações farmacêuticas que serão utilizadas são principalmente formuladas na forma de comprimidos que se dissolvem lentamente na cavidade oral ou na forma de gomas de mascar que permitem a liberação lenta dos constituintes ativos. Estas formulações são principalmente utilizadas em tratamentos preventivos, mas também de forma curativa e para higiene oral.
As ditas formulações serão, portanto, preparadas de acordo com métodos convencionais bem conhecidos, tais como os descritos em "Remington’s Pharmaceutical Handbook", Mack Publishing Co., N.Y., USA, junto com excipientes adequados. Os exemplos a seguir ilustram a invenção em detalhes.
Exemplo I - comprimidos mastigáveis de 1000 mg contendo Extrato de Punica granatum 30,0 mg Extrato de Vaccinium myrtillus (40% de antocianosídeos) 60,0 mg Extrato de Echinacea 50,0 mg Manitol 429,5 mg Frutose 300,0 mg Ácido cítrico anidro 10,0 mg Sal de sódio de carboximetilcelulose 40,0 mg Behenato de glicerila 20,0 mg Sacarina sódica 0,5 mg Aromatizante de frutos suaves 20,0 mg
Exemplo II - comprimidos mastigáveis de 1000 mg contendo Extrato de Punica granatum 40,0 mg Extrato de Vaccinium myrtillus (40% de antocianosídeos) 80,0 mg Extrato de Krameria triandra 35,0 mg Extrato de Echinacea 50,0 mg Sacarose 472,0 mg Manitol 230,0 mg Ácido cítrico anidro 10,0 mg Sal de sódio de carboximetilcelulose 40,0 mg Behenato de glicerila 20,0 mg Sacarina sódica 0,5 mg Glicirrizinato de amônio 3,0 mg Aromatizante de frutos suaves 20,0 mg
Exemplo III - Granulado para suspensão preparada conten- 5 do: Extrato de Punica granatum 40,0 mg Extrato de Vaccinium myrtillus (40% de antocianosídeos) 60,0 mg Extrato de Krameria triandra 20,0 mg Extrato de Echinacea 50,0 mg 10 Manitol 900,0 mg Goma guar 100,0 mg Ciclamato de sódio 21,0 mg Ácido cítrico anidro 30,0 mg Glicirrizinato de amônio 10,0 mg 15 Acessulfame K 3,0 mg Hidroxipropilcelulose 1,0 mg
Exemplo IV - Granulado para suspensão preparada conten-do: Extrato de Punica granatum 40,0 mg 20 Extrato de Vaccinium myrtillus (40% de antocianosídeos) 60,0 mg Extrato de Echinacea 50,0 mg Manitol 920,0 mg Goma guar 100,0 mg Ciclamato de sódio 21,0 mg 25 Ácido cítrico anidro 30,0 mg Glicirrizinato de amônio 10,0 mg Acessulfame K 3,0 mg Hidroxipropilcelulose 1,0 mg
Exemplo V - Atividade biológica 30 As composições de acordo com a invenção foram testadas em seis grupos de 10 pacientes de ambos os sexos sofrendo de infecção bacte- riana da cavidade oral.
Os pacientes foram tratados com comprimidos contendo a com-binação (Exemplo II) ou o ingrediente isolado, 3 vezes ao dia durante 3 dias. Uma hora antes do primeiro tratamento e uma hora após o último tratamento a hiperemia da faringe e das amígdalas também foi avaliada em uma escala 5 de 4 pontos (nenhuma = 0, ligeira = 1, moderada = 2, grave = 3). Os resultados são apresentados na Tabela 1.
Ao mesmo tempo, os pacientes que gargarejaram durante 20 s 10 com 10 mL de água destilada esterilizada e amostras foram coletados.
As amostras foram adequadamente diluídas em solução de Ringer contendo 0,2% de ditiotreitol e 0,5 mL de cada diluição foram plaquea- das sobre 4 placas de ágar (Columbia) suplementadas com 5% de sangue de ovelha; as placas foram incubadas em atmosfera de CO2 durante 72 ho- ras para a cultura anaeróbica. Após a incubação, o número de colônias foi contado. Os resultados são mostrados na Tabela 2.