BR112012032206A2 - comparações de amostras de proteínas - Google Patents

comparações de amostras de proteínas

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Abstract

comparações de amostras de proteínas. são fornecidos métodos para detectar quantitativa e/ou quantitativamente a presença de mutações, modificações ou impurezas em uma amostra de proteína. os métodos utilizam variantes de aminoácidos isotopicamente marcadas incorporadoas nas proteínas antes da digestão de proteínas, de forma a permitir comparações de duas amostras de proteína em cromatografia líquida bottom-up. as medições obtidas pela presenta invenção levam em consideração não apenas as massas dos peptídeos gerados durante a digestão proteolítica, mas também a abundância de cada peptídeo resultante. a medição da abundância de peptídeos pela ms é permitida através da utilização de uma amostra sitrs que é misturada com uma proteína não-marcada antes da digestão das proteínas. tal como aqui utilizado, o termo "amostra sitrs" ou "padrão sitrs" significa uma proteína (por exemplo, um anticorpo) de sequência conhecida, etiquetada com uma variante estável marcada isotopicamente em pelo menos um aminoácido presente na proteína.
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