BG98305A - Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеробицикличен алкохол - Google Patents

Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеробицикличен алкохол Download PDF

Info

Publication number
BG98305A
BG98305A BG98305A BG9830593A BG98305A BG 98305 A BG98305 A BG 98305A BG 98305 A BG98305 A BG 98305A BG 9830593 A BG9830593 A BG 9830593A BG 98305 A BG98305 A BG 98305A
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
compound
enantiomer
atom
general formula
configuration
Prior art date
Application number
BG98305A
Other languages
English (en)
Other versions
BG61511B1 (bg
Inventor
Nicolaas Buizer
Chris G Kruse
Der Laan Melle Van
Georges Langrand
Scharrenburg Gustaaf J Van
Maria C Snoek
Original Assignee
Duphar Int Res
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Duphar Int Res filed Critical Duphar Int Res
Publication of BG98305A publication Critical patent/BG98305A/bg
Publication of BG61511B1 publication Critical patent/BG61511B1/bg

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D265/00Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D265/281,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines
    • C07D265/341,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines condensed with carbocyclic rings
    • C07D265/361,4-Oxazines; Hydrogenated 1,4-oxazines condensed with carbocyclic rings condensed with one six-membered ring
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/101,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes
    • C07D319/141,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D319/161,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D319/201,4-Dioxanes; Hydrogenated 1,4-dioxanes condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring with substituents attached to the hetero ring
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07DHETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D327/00Heterocyclic compounds containing rings having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D327/02Heterocyclic compounds containing rings having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms one oxygen atom and one sulfur atom
    • C07D327/06Six-membered rings
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/02Oxygen as only ring hetero atoms
    • C12P17/06Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/14Nitrogen or oxygen as hetero atom and at least one other diverse hetero ring atom in the same ring
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P41/00Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
    • C12P41/003Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
    • C12P41/004Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of alcohol- or thiol groups in the enantiomers or the inverse reaction
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02PCLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеробицикличен алкохол с обща формулав която X означава 0, S, NH, ГЧ-(С1-С4)алкил или СН2, Y1, ¥2 и Y3 независимо един от друг означав ат водород или заместител, избран от групата, включваща халоген, С1-С4 алкил, С1-С4 алкокси, С1-С4 халоалкил, нитро и циано, заместителят N02 е присъединен към бицикличния пръстен на 5-то или 7-мо мяс то и хиралният С*-атом има R или S конфигурация, и от съответния му алкохолен рацемат чрез последователно провеждане на следните реакционни етапи: (i) ацилиране на рацемата с ацилиращ реагент под възд ействието на ензим със стереоселективна естерифицираща активност; (ii) отделяне на неестерифицираното съединение от получения естер и изолиране на желания по същество чист енантиомер на алкохол е форм ула I или на негов естер; (iii) подлагане на получения естер на хидролиза, при което той се превръща в съответния алкохолен енантиомер, характеризиращ се с това, че нежеланият алкохолен енантиомер се превръща в изходния алкохолен рацемат при алкални условия, така че да може да се използва отново.

Description

ЕНЗИМЕН МЕТОД ЗА СТЕРЕОСЕЛЕКТИВНО ПОЛУЧАВАНЕ НА
ЕНАНТИОМЕР НА ХЕТЕРО-БИЦИКЛИЧЕН АЛКОХОЛ
- Настоящето изобретение се отнася до ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеро-бицикличен алкохол» Изобретението се отнася също до енантиомер на алкохол, който, фактически е чист продукт и до използване на този енантиомер за получаване на фармакологично активни пиперазинови производни»
Различни биологично активни вещества, които могат да се използват например във фармацевтични състави за приложение в хуманната или ветеринарна медицина, съдържат в молекулната си структура хирален център, който определя съществуването на оптични изомери. На специалистите в тази област е известно, че често само единият от изомерите проявява желаната оптимална биологична активност» Присъствието на другия оптичен антипод, в състава или средството може да причини или да засили някои странични ефекти и да обремени тялото на човека или на животното, които приемат лекарството. Общо взето все по-често се , смята желателно приложението на биологично активното вещество под формата на пв. същество чист енантиомер, който специфично притежава желаната биологична активност. Поради това разделянето на рацемата на неговите енантиомери често представлява
- 2 важен етап на метода за получаване на биологична активни вещества.
Съществуват три метода, подходящи за разделяне на рацемаи?и в съответните им енантисмери. Първият от тях е методът за разделяне, който се основава на разлика във физичните свойства, напр. в кристалната структура, и е приложим само в редки случаи.
Вторият метод, който е много по-често използван,се състои в разделяне чрез реакция с подходящ оптично активен реагент до получаване на диастереомери, които се различават по физични характеристики, позволяващи разделянето им., Така, получените по този метод диастереомери могат да бъдат разделени напр. чрез.прекристализация, след която съответните енантиомери могат да се получат при допълнително, химично третиране. Може да се види, че този метод за разделяне на рацемати е лабораторно трудоемък и скъп, като. се. ка предвид, използването и. регенерирането на скъпи оптично-активни реагенти.
Напоследък е създаден един по-икономичен метод за разделяне, при който се използват ензими за химично селективно модифициране на единия енантиомер от рацемата, след което модифицирания енантиомер се разделя от немодифицирания. Един пример за използването на такъв мет.од е описан от
И др /^•Ога. Chevft.., 1988 , 53, 5531-5534/, които съобщават за използването на карбоксилни анхидриди като ацилиращи. реагенти при катализирано с липаза селективно естерифициране на рацемични алкохоли.. Те са успели да получат някои първични и вторични алкохоли с висока оптична активност, напр. със съдържание на желания енантиомер над. 95 В действителност, при повелете от случаите на фармацевтично приложение на енантиомери е желателно съдържанието на активния енантиомер да бъде
- 3 най-малко 95'/. , Макар, че някои резултати получени от ВПолъск! и сътрудници са обещаващи;, при работа с някои алкохоли не се наблюдава сТереоселективно превръщане; или то е недостатъчно. В две. скорошни: побликации на ,Ьмм5 и дро /Tetrahedron. Lett., 1992, 33, 6283-6286 и 6287-6290/ е описано приложение на методиката на ензимно разделяне при 2-хидроксиметил-1,4-бензодиокеани. Авторите са установили, че чрез еднократно прилагане на този метод за разделяне не може да се постигне изискваната от стандартите оптична активност, така че се налага повтаряне на метода за ензимно разделяне.
С цел да се улесни разделянето на естери, получени от алкохоли, Т4Гчм> и др. /Chem . Pham. Butt., 1989, 37, 16531655/ използват анхидрид на янтарната киселина за получаване на енантиомер на моноестер на янтарната киселина, който полесно може да се отдели от другия, непрореагирал алкохолен енантиомер чрез промиване с алкален разтвор. По този начин желаният активен енантиомер може; да бъде отделен от нежелания неактивен енантиомер с по-малко усилия, макар че получената оптична чистота, определена от съдържанието на желания енантиомер общо взето не е задоволителна. Само в един случай, а именно при работа с /1-хидроксиетил/бензен, който е вторичен алкохол, ензимното разделяне на рацематите при енантиоселективно естерифициране с янтарен анхидрид дава задоволителни резултати.
Освен често непредсказуемите резултати, получаващи се при ензимното разделяне на алкохолни рацемични дмеси, от горните публикации може да се направи извод, че има и друг проблем, който е присъщ изобщо за разделянето на желан алкохолен енантиомер от съответния рацемат. В действителност, при всяко разделяне на рацемична смес освен желания енантиомер се· получава и нежелан оптичен антипод, който в общия случай не се използва. Това означава;, че най-малко 50 % от в общия случай скъпо струващото рацемично вещество трябва да се приеме като химически отпадък или с други, думи добивът на активното вещество при разделяне на рацемати: е най-много 50 Това ясно е илюстрирано с Таблиците в цитираните по-горе, публикации на Ьи-плъ и др., които показват, че от първоначалния рацемат може да се получи, най-много 50 % добив, на желания енантиомер или под формата на непревърнат алкохол, или след превръщането му в естер. .
Предмет на настоящето изобретение е да осигури икономически изгоден метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеро-бицикличен алкохол. Това се постига по метода, съгласно изобретението чрез ензимен метод, който се състои в това, че по. същество, чист енантиомер с обща формула I
в която Х е 0, S , НН, К-Д^-С4/алкил или СН^;
и У3 независимо един от друг означават водород или заместители:, избрани от групата, съдържаща хало ген, С^-С^алкил, С^-С^алкокси., С^-С^халоалкил, нитро и циано;
Μ02 групата, е присъединена към бицикличната система в 5та илк позиция}, и
С*-атомът има или Е или 5 конфигурация;
се получава от съответния му алкохолен рацемат при използване
- 5 на следните последователни реакционни етапи:
/I/ ацилиране на рацемичната смес с ацилиращ реагент под въздействието на ензим, притежаващ стереоселективна естерифицираща активност;
/Li/ отделяне на нееятерифицираното съединение от получения, естер и изолиране на желания чист посъщество алкохолен енантиомер с формула I или на негов естер;
/ttt/ подлагане на получения естер на хидролиза, при което той се превръща в съответния алкохолен енантиомер; и /ь/ / превръщане на нежелания алкохолен енантиомер в изходния алкохолен рацемат при алкални условия, така че той да може да се използва отново.
Напълно против очакванията, описаното по-горе третиране с база /етап ίν / води до рацемизиране на нежелания алкохолен енантиомер. Този феномен не може, да бъде обяснен, тъй като протонът, който е присъединен към хиралния център /С / изобщо не е киселинен. Така полученият алкохолен рацемат може да се използва отново като изходен материал за следващата реакция за разделяне на енантиомерите. Очевидно е, че настоящето ** изобретение осигурява един приложим ензимно катализиран стереоселективен метод за получаване на алкохолен енантиомер, както от икономическа, така и от гледна точка на неговите качества и предимства.
Подходящи като ацилиращи реагенти за описания по-горе етап на ацилиране са киселинните анхидриди, както ще бъдат посочени по-долу, и винилестери, такива като винилацетат, винилпропионат, винилбутират, винилизобутират и други подобни. Реакцията на ацилиране се провежда за предпочитане, в органичен разтворител, съдържащ малко количество вода или воден буфер.
- 6 Ензимът, който се използва най-често е суров твърд препарат, търговски достъпен, което улеснява неговото регенеригране. Ензимът, обаче, може да се използва също и в имобилизирано състояние-, напр» свързан ковалентно или адсорбиран върху подходящ носител. Неестерифициранрто съединение може да се отдели от получения естер при използване на различни познати метода за разделяне на подобни съединения, като например екстракция, прекристализация, препаративна колонна хроматография и други· подобни.
По същество /фактически/ чистият алкохолен енантиомер, както е споменат по-горе, трябва да се разбира като алкохол със съдържание на единия енантиомер над приблизително 95 % . Ако при ензимния метод, съгласно изобретението не. може да. се постигне такава чистота на енантиомера, то енантиомерната чистота може да се повиши до желаното ниво чрез обичайния метод на прекристализация. Изолирането на желания чист по същество алкохолен енантиомер, както е описан по-горе, може също да изисква провеждане на прекристализация, с цел да се подобри чистотата на енантиомера и да се. отстранят малки количества от онечиствания.
Решаващият етап на метода, а именно, рацимизирането на нежелания алкохолен енантиомер при алкално третиране, може, по-лесно да се проведе както при апрстонни, така и. при протонни условия. Подходящи за използване бази са натриева основа, калиев хидроксид, литиев хидроксид, амониев хидроксид и други подобни, разтворени във вода или във водна смес от разтворители, съдържаща смесими с вода органични разтворители, като алкохоли. Примери за бази,които могат да се използват в апротонни системи са : а/ хидрида, напр. натриев хидрид в апротонен разтворител като диметилсулфоксид /0MSO/;
-Ί W‘ б/ калиеви алкоксиди, като калиев трет.бутоксид и калиев метил-2-бутоксид, в апротонЕИ. разтворители, като естери /напр» тетрахидрофуран /ТНБ/; и с/ алкиллитиеви съединения и литиеви алкиламиди, като напр» метиллитий, бутиллитиеви съединения и литиев диизопропил амид, също в апротоннй разтворители, като тетрахидрофуран» Алкохолният рацемат може да бъде възстановен с добри добиви след неутрализация с киселина, напр. чрез екстракция с подходящ органичен разтворител из водната фаза и длед това ако е желателно след изпаряване на разтворителя е готов за ново използване.
Хидролизата на получения естер, която е описана като етап /tvl / по-горе може по подходящ начин да се 'проведе в кисела среда или в слабо алкална среда, за да се избегне рацемизирането на алкохолния енантиомер, който се получава.
При едно специфично изпълнение на настоящето изобретение, обаче, описаната по-горе хидролиза на естера и рацемизирането на алкохолния енантиомер могат да се: обединят. По този начин етапите /tie/ и /tv/ на реакцията се комбинират така, че редукцията се.постига в един реакционен етап.» За да се осъществят двете реакции едновременно, а именно хидролиза и рацемизиране, са необходими подходящи силно-алкални условия, както е описано по-горе за етапа на рацемизиране»
Методът, съгласно изобретението е подходящ за приложение за предпочитане при стереоселективно получаване, на по същество чист алкохолен енантиомер със структурата на бензодиокеана, а именно на съединение с обща формула II
/II/
- 8 в която У» е водород или заместител, избрал от хлоро, флуоро и. метил;, заместителят. NOg е присъединен към. 5Т0 или: ?м0 място в бензодиоксановия пръстен;, и: хиралният. С -атом е в Е. или $ конфигурация; се прилагат реакционните етапи, както са описани: по-горе, до получаване на съединение с формула /!/<»
За предпочитане ензимът се прилага като твърдо вещество, което позволява той по-лесно да се регенерира и да се използва отново* Възстановяването на ензима обикновено се осъществява след провеждане на етап / е/, описан по-горе, така че след етапа на. ацилиране. той се, възстановява при използване, на подходящ за таш цел метод, например чрез обикновено филтриране* Ако се използва ензим, който е свързан с подходящ носител, напр. целит /вж* цитираната по-горе публикация на и др./ или стъклени топчета, то ензимът може да се регенерира, също чрез обикновено филтриране, при. желание последвано от промиване, за отстраняване на онечистванията*
Използването на анхидриди на карбоксилни киселини се предпочита, в сравнение с използването на винилестери като ацилиращи агенти, тъй като анхидридите., като оцетен анхидрид, пропионов анхидрид, бутанов анхидрид, изобутанов анхидрид или хексанов анхидрид, в присъствие на подходящи ензими общо взето осигуряват по-добро ацилиране. За улесняване на отделянето на неестерифициранате съединение от получения естер се предпочита използването на анхидриди на циклични карбоксилни киселини, като янтарен анхидрид или глутаров анхидрид* Полученият по този начин моноестар може по-лесно да се отдели от неестерифицираното съединение чрез екстракция със слабо алкален разтвор при такива условия, че естерът остава незасегнат*
Подходящи ензими за провеждане на стереоселективното
- 9 ввстерифициране са хидролизи, като напр» природно съществуващи или инженерно създадени липази и естсрази. Примери за подходящи, липази са следните: Aspergillus niger, Candida cylindracea /като Melto MY 3Oj Amantr AY/, Candida lipolytica, Chromobacterium viscosum, Geotrichum candidum, Humicola lanuginosa, Mucor miehei, Mucor javanicus /като Amanos/, Pig pancreatic lipase, PeniciLLium cyclopium, Penicillium roqueforti, Pseudomonas cepacia /Amano PS/, Pseudomonas /К\ fluorescence / като Amano® Р/, Rhizopus niveus /като Amano“* N/, Rhizopus javanicus / като Amanor* F/, Rhizopus arrhizus И Rhizopus delemar.
Противно на предположенията, описани в публикацията на ΒίοΜίλλ и др», сега е установено, че някои липази, и в частност липазата Candida су&пАгасеа имат предпочитано въздействие спрямо S енантиомера» Поради това, такива липази са в състояние да естерифицират стереоселективно Sенантиомера, в резултат на което оставащият Е. енантиомер може да се получи с висок добив и стереохимична чистота» Други липази, напр» сеМсе и много други липази превръщат с ' 4W, предпочитание Е енантиомера и поради: това са много подходящи за изолиране на S енантиомера, също така с висок добив и стереохимична чистота.
Настоящето изобретение се; отнася също така до чисти по същество алкололни енантиомери с обща формула I, посочена погоре, в която заместителите X и У имат дадените по-горе, значения, заместителят NOg е присъединен на 5Т0 или 7МО място и хиралният С-атом има Е конфигурация.
Този енантиомер може да бъде получен по подходящ начин, чрез използване на ензимния метод, съгласно изобретението.» Този енантиомер може да се използва като основен иевдинен продукт за получаване на някои фармакологично активни пиперазинови производни, както ще бъде: описано по-долу.
В списанието Future , 1988, 13, 31-33 е описан метод за получаване: на флесиноксан хидрохлорид, който е мощен орално активен б-НТ^ агонист. По този метод рацемичният бензодиоксан, с.формула, отговаряща на формула II, дадена по-горе., в която У» означава хлорен заместител на 7МО място, първоначално взаимодейства с бензоилхлорид за да се защити хидроксилната му група. Тогава се провежда каталитично хидрогениране, последвано от взаимодействие с бис/хлороетил/'*** амин до получаване на рацемично пиперазиново съединение. В този етап се провежда разделяне на пиперазиновия рацемат при използване на /+/-камфорсулфонова киселина. След няколкократно прекристализиране се получава оптически чист й-/+/-енантиомер. Този енайтиомер взаимодейства с И-/4-флуоробензоил/азиридин, защитената хидроксилна група се освобождава чрез осапунване на бензоатния естер и накрая, чрез третиране със солна киселина се получава желания чист по същество /+/-енантиомер, а именно флесиноксан.HCI. В споменатата по-горе публикация на EvwubS и др» /Tetra^izlro'a- 1992 , 33 , 62876290/, е описано ензимно разделяне на флесиноксан и на неговите оптични антиподи в крайния етап на разделяне. След труден двукратен ензимен процес желаният флесиноксан може да се. изолира с задоволителна енантиомерна чистота.
От описаното по-горе може да се види, че известните методи за получаване на флесиноксан са трудоемки и скъпи, особено поради това, че се налага лабораторно разделяне на рацемата в един напреднал етап на многоетапния синтетичен метод. Очевидно е, че неизбежните загуби на активния материал по време на разделянето са по-големи и вредни в напредналия стадий на
- 11 сиятеза.
Сега бе установено, че по същество чист енантиомер на алкохол с обща формула I може, да се получи по подходящ начин при използване на основен междинен продукт при синтеза на фармакологично активни пиперазинови производни, при което се избягва необходимостта от лабораторно, разделяне на рацшличната смес в един напреднал етап на. многоетапния синтез..
Освен това, настоящето изобретение; се отнася до използване на по същество чист енантиомер на алкохол с обща формула I, посочена по-горе, в която X и заместителите У имат посочените по-горе, значения, заместителят Н02 е присъединен на 5 място, във бицикличната пръстенова система и хиралният С-атом има Е. конфигурация, за получаване на фармакологично активни пиперазинови производни, чрез· подлагане на посочения енантиомер на следната после
дователност. от реакционни етапи:
/е/ защита на свободната хидроксилна група с подходяща хидрокси-защитна група, при запазване на абсолютната конфигурация на С-атома, до получаване на съединение с обща формула
^2-0¾ /III/ в която е хидрокси-защитна група;
/сί/редукция на нитро групата, така че по същество чистия енантиомер с формула III да се превърне, в амино съединение с обща формула /П/
при запазване на абсолютната конфигурация на С-^атома; /ид/ превръщане на получения по-горе, амин с формула П в пиперазин с обща формула
л/ при запазване на абсолютната конфигурация на С-атома;
Д*/ превръщане на пиперазиновото съединение с формула V при запазване на абсолютната конфигурация на С^-атома в пиперазин. с обща формула
А-КШ-СО-В
Л1/ в която А означава права или разклонена алкиленова група и В е фенилна. или хетероциклична група, избрана
- 13 от тиенил, пиранил, фурил, пиролил, пиридил и пиразинил, които могат да бъдат заместени с един или повече заместители избрани от халоген, С^-Сд-алкил, С^-С^-халоалкил, циано, нитро, хидрокси, естирифицирана хидрокси и С^-С^-алкокси група, при взаимодействие на пиперазиновото съединение; с формула V или с /а/ съединение с обща формула
L -А-НН-СО-В
Дп/ в която I» е отцепваща се група, за предпочитане хлора,
мезидат или тозилат, или с /б/ съединение с обща формула
Лш/ до получаване на пиперазиново производно с обща формула с обща формула VI, в която А е етилен; и накрая /ν / отцепване на защитната група на съединение с формула VI до получаване на свободен алкохолен енантиомер с обща формула
А - ΗΉ- CO - В /IX/ *
в която С - атомът има R конфигурация.
От горепосоченото става ясно, че описаната по-горе реакционна последователност на етапите може лесно да се осъществи при запазване на абсолютната конфигурация на С*- атома, така
- 14 че енантиомерната чистота на крайното пиперазиново производно не се нарушава.
Свободната хидроксилна група може да бъде защитена /реакционен етап /*// чрез получаване на подходяща естарна или етерна група. Примери за подходящи хидрокси-защитни групи са: /трихидрокарбил/силил, /дихидрокарбил//хидрокарбилокси/силил, трет./С4-С^2/-алкил, в даден случай заместен фенокси/УС^-Сд/диалкил/етил, /С^-С^/алкокси/7С2-Сд/диалкил7метил, /тио/ацетал-съртавящи групи, като ди- и тетра-хидропиран-2-ил и даи тетрахидрофур-2-ил, и естер-образуващи групи, производни на монот ди- или три-заместена оцетна киселина, при които заме стителите са избрани за предпочитане от /Си -С^/алкил и в даден случай заместен с един или повече заместители фенил, по избор с едиа. или повече метилови групи заместена циклохексан карбоксилова киселина или адамантан карбоксилова киселина.
Използваното по-горе понятие ’’хидрокарбил включва СП-Сд-алкил, Сд-Сд-алкенил, Сд-Сд-алкинил, фенил или фанил, заместен с един или повече, заместители. Подходящи заместители за спо-
менатите по-горе фенил и финокси групи са: хидрокси, алкокси, алкилкарбонилокси, амино, алкиламино., диалкиламино, алкилкарбониламино, алкилсулфониламино, нитро, алкилсулфонил, алкилкарбонил, халоген, циано, алкил, като алкиловите заместители съдържат 1 до 5 въглеродни атома, и /Сд-Ср/циклоалкил.
Редукцията на нитро групата до амино група /етап }Х/ може да се извърши по подходящ начин с водород при въздействие на подходящ метален катализатор, напр. Pd/C, в подходящ полярен органичен разтворител, напр. алкохол.
* *
Превръщането на амино групата в пиперазин /етап ил / може лесно да се осъществи, напр. с помощта на бис/2-хлороетил/амин, в подходящ органичен разтворител, напр. ароматен
- 15 въглеводород, като толуен, хлоробензен и други подобни.
Реакционният етап, обозначен с /tv/ по-горе се. провежда за предпочитане по начина, описан в описанието на Европейски патент М 138280, а именно, в инертен органичен разтворител или в отсъствие на разтворител, при реакционните условия, както са описани в патента.
Крайното отстраняване на хидрокси-защитната група може да се. проведе с реагенти подходящи, за отцепване на естерифициращата или етерифициращата група. Естерите могат да се хидролизират по подходящ начин при слабо алкални или при киселинни условия на реакцията, при запазване на абсолютната конфигурация на С -атома. Етерното отцепване се провежда за предпочитане с помощта на силни киселини в органичен разтворител.
ОсЕен това, настоящето изобретение се отнася до нови междинни продукти, получаващи се в описаната по-горе реакционна последователност, а именно до чисти по същество енантиомери на съединенията е обща формула III и IV, посочени по-горе, з които X и заместителите У имат посочените по-горе значения и конфигурацията на С^атома съответства на Е конфигурацията на С- атома на споменатото по-горе съединение с формула I.
Накрая, изобретението се. отнася също, и до метод за получаване на по същество чисти енантиомери. на пиперазинови производни с обща формула IX, посочена по-горе, при който първоначално се получава по същество чист алкохолен енантиомер с обща формула I, представена по-горе, в която С-ат.ома има Е. конфигурация, от съответния алкохолен рацемат, при прилагане на последователност от реакционни етапи, както са отисани погоре, последвано от превръщане на съединението с формула I в желания пиперазин, чрез реакционна последователност, както е
- 16 описана по-горе.
Изобретението е описано по-подробно чрез следващите специфични примери
Пример I
Разтвор на 125'W/Ι /4/-2,3-дихидро-5-нитрот7-хлоро-1,4бензодиоксан-2-метанол /ВМ/, 250 прошюнов анхидрид и 0.2 % М*/ липаза РшИотюпаа /Алмхл^о® Р/ в трет.бутилметилетер /ТВМЕ//хексан/вода /50/5С/0Ф1 обем/обем/ обем/ се подлага на инкубация при 37°С при разбъркване. След 80 % превръщане /естерифициране на алкохола/ реакцията се
спира чрез отстраняване на ензима чрез- филтриране» Полученият естер и останалият алкохол се разделят на Zoriw* С-8 колона. Енантиомерният излишък от остатъчния алкохол се анализира при използване на хирална -^иодикопротеин /АСР/-колона. Енантиомерният излишък от остатъчен алкохол и полученият еοι тер се определят също и чрез Н-ЯМР без. да се разделят, при използване на /+/- или /-/-трифлуорометил-9-антраценметанол като хирален агент. Оставащият алкохол съдържа S-/-/-алкохол с енантиомерен излишък от 97.5 Я .
Пример II
По подобен на описания в Пример I начин се извършва естерификация с 0.2 % /тегло/обем/ липаза CaxicUda cylitidracea /Mett <5® МУ/. След превръщане на 69 % от алкохола реакцията се спира. Останалият непревърнат алкохол представлява Е-/+/-алкохол с енантиомерен излишък 97.5 % . Е-/+/-алкохолът
Ί се охарактеризира чрез неговия Н-ЖР спектър, както е описа но в Пример I. Определен е също и ъгъла на специфично въртене на Е-/+/-2,3-дахидро-5-нитро-7-хлоро-1,4-бензодиоксан-2-мета нола /ВШ/ в ацетонитрил, който е
181.1°.
По подобен начин се получават също. Е.-/+/-2,3-дихидро5-нитро-7-метил-1,4-бензодаоксан-2~метанол и Е.-/+/-2,3-дихидро-5-нитро-1,4-бензодиоксан-2-метанол, които имат висок енантиомерен излишък.
Пример III
Разтвор от 250 /V-BJM, маслен анхидрид и 0.5 /тегло/обем/ липаза СапсЦДа cyliftdracea /МеIto® МУ/ в хексан /етилацетат/вода в обемни съотношения 50/50/0.2 се подлага на инкубация при 25°С при разбъркване. След превръщане на 65 % от алкохола реакцията се прекъсва. Останалият непре** върнат алкохол представлява Е-/+/-алкохол с енантиомерен излишък от 97.5 ,
Пример IV
По подобен на описания в Пример III начин, 250 /±/-ВМ се подлага на инкубация с 500 νη М изомаслен, респективно хексаноен анхидрид. След превръщане на 63 /» , респективно на 60 % ат алкохола реакцията се спира. Останалият алкохол съдържа Е-/+/-алкохол, и в двата случая със съдържание на енантиомера над 97.5 .
Пример V
Разтвор на 350 м М /-/-ВЗк янтарен /сукцинил/ анхидрид и 2.4 % /тегло/обем/ липаза Candida cylbndracea /Mett^ МУ/ в смес от ТВМЕ/ацетонитрил/вода в обемно съотношение 90/10/0.6 се подлага на инкубация при стайна температура и разбъркване.. След превръщане на 70 от алкохола реакцията се спира чрез филтриране на ензима. Останалият непревърнат алкохол съдържа Е-/+/-енантиомер с енантиомерен излишък от 98 7«
Пример VI
Енантио-селектевно естерифициране
- 18 Реакционна схема
r_/+/-BJM
Разтвор на 15.2 к^ /±/-ВМ, 7.6 kj сукциниланхидрид и 3.7 липаза Candida cyUdracea /МеЬМ^МУ / в смес от 2001» трет.бутилметилетер ДТВЕ/, 17.5 £ ацетонитрил и 925 т£ вода се, подлага на инкубация под атмосфера на азот при стайна температура в реактор. След като се постигне превръщане от 60-63 %> /което се установява чрез високоефективна течна хроматография, приблизително около 20 часа/, реакцията се прекъсва чрез отфилтриране на ензима. Ензимът се промива двукратно с 10 £ МТВЕ и органичният слой се промива последователно с 90 £ и с 30 £ воден разтвор на натриев карбонат /150
KagCOg в 1 I вода/. Карбонатният разтвор се екстрахира двукратно с 10 Ζ МТВЕ. Тогава обединените органични слоеве последователно се промиват е 30 £ вода, с разредена солна киселина, получена при разтваряне на 40 mt 36 % HCI в 15 £ вода, и с 10 I вода. Третичният бутилметилетер /мТВЕ/ се отдестилира във вакуум при 60°С. Кристалният остатък /4.6 к<| / се разтваря в 15 £ 96 етанол при 60°С и към този разтвор при разбъркване се прибавя 10 £ n-хексан. Сместа се охлажда приблизително до 10°С и след разбъркване в Продължение на
2 до 10 часа кристалният материал се отделя чрез изсмукване., промива се последователно с 10 Ь етанол/хексан в обемно съотношение· 1S/35 и с 5 1 п-хексан и се суши·. Кристалният материал е чист /с енантиомерен излишък от 98. % / /+/-енантиомер, а именно. Е-/+/-2,3-дихидро-5^нитро-7-хлоро-1,4-бензодиоксан2-метансл /K-/+/-BDA/; Добивът е приблизително 4 к^. Т.т. 116*0°С; = * 194.8° /с = 4.5; метанол/.
Пример VII
Осапунване на получения S-/-/-BM естер
Реакционна схема:
Към обединените водни слоеве от експеримента, описан в Пример VI се прибавя . 15 £ 50 % натриева , основа при около 23°С. Реакционната смес се разбърква в продължение на около 15 часа при 23°С и след това се охлажда до 5°С. След присаждане, сместа се бърка в продължение на 3 часа при 5°С. Кристалният материал се филтрира под вакуум, промива се с SO t вода и се суши. Нолученият алкохол, който съдържа излишък от S -/-/-BM енантиомера се. получава с добив приблизително 10 ка.
Пример VIII
Рацемизиране на 5-/-/-ВШ енантиомера
Реакционна схема:
/±/
Еацемична ВМ
5-/-/-ВМ, получена съгласно Нример VII , с тегло 1 к^ се разтваря soln, -пропанол под. атмосфера на азот. и. се нагрява до кипене под. обратен хладник. Към този разтвор се добавя 235 мл 2II водна натриева основа приблизително за 15 минути. Сместа се оставя да кипи в продължение на 1.5 часа. След охлаждане до около 40°С се прибавя разтвор на концентрирана солна киселина - 47 хгЛ /до получаване на рН=3/. Пропанолът се от дестилира във вакуум при около 60°С. Към остатъка са прибавя 4 ί «г-хексан и разтворът се присажда при охлаждане до 20°С и бавно разбъркване:. След това се бърка два часа при 20°С и в продължение на една нощ при 0°С и кристалният материал се отделя чрез филтриране и се промива двукратно с 0.5 С h-хексан. Кристалният материал се разбърква след това с 7.5 I вода при около 70°С в продължение на 1 час. След, охлаждане до 20°С се прибавя 350 tnI γχ-хексан и се бърка още един час, кристалният материал се филтрира и се промива двукратно с 0.5 I νι-хексан. След изсушаване се получава желаният рацемичен ВМ с добив 850 j, съдържание 95 % , енантиомерен излишък = 0. Т.т. 108.2°С.
Рацемизацията протича също така успешно с помощта на литиев диизопропиламид като, база в разтворител тетрахидрофуран, при реакционна температура 40°С, като, се постига пълнеь рацемизация след 5.5 часа.
Пример П
Осапунване и едновременно радемизиране на S-/-/-BlA-eетера
Към проба, която съдържа 43.5 j /126 кпто1/ S -/-/-ВМестер, 620 гоЛ воден, разтвор на
1.1 вода/, 150 вода и. 59 vnt карбонат /150 ЪХа^СО^ в ацетонитрил, от основния воден
слой, получен както. е описано в Пример VI, се прибавя 250 mt етанол и 50 50 /а тегло/обем воден разтвор на натриев хид роксид. Реакционната смес се бърка при кипене под обратен хладник в продължение на 16 часа. След охлаждане, до 40°С, внимателно се прибавя 160 ml 1231 воден разтвор на солна киселина /рН е приблизително 5/. Реакционната смес се охлажда до стай на температура след което твърдият материал се отделя чрез филтриране, промива се с вода и се суши. Получава са 23.8 светло кафяв /i/-BM с енантиомерен излишък = 0.
Пример X
Получаване на флесиноксан от Е-/+/-ВМ
Реакционна схема:
-22 /а/ Бензоилиране на E-/+/-BJM /4/ с бензоилхлорид в метилен. хлорид като разтворител, до получаване на съединение /2/.
Към разтвор на 20 /0.081 mot / от съединение /1/ в
250 ml дихлорометан и 12 ml триетиламин се прибавя на капки 10.1 ml /0.086 moV бензоилхлорид при температура 25°С. След прибавяне на 10 ml вода и бъркане, в продължение на 10 минути сместа се оставя да се разслои и слоевете;, се. разделят. Органичният слой се промива с 50 ml вода и обединените водни слоеве се екстрахират с 25 ml дихлорометан. Органичните слоеве се обединяват и изпаряват при 100 m бара и 30°С. След прибавяне на 100 ml толуен, продуктът се изпарява до. сухо / 10 <тбара, 50°С /.
желаното съединение /2/ се получава с добив 97.3 % , чистота 97.5 % Тънкослойна хроматография /елуенти СН9С1?:
CHo0H:NH40H = 94:5:1/ : Щ = 0.71.
/б/ Редукция на нитро-съедйнението /2/ до съответното амицо съединение /3/ в ство от Pd/C , с
Към разтвор
120 ml етанол и катализатор /39.1 % Pd/C 10 %и 60.9 % вода/. След разбъркване водород в присъствие на каталитично разтворител етанол.
на 6.0 (j /16.7 m«vol/ от съединение количе/2/ в mt етилацетат се. прибавя 1.50 Pd/C не в продължение на 5 минути се прибавя 10.8 /10 еквивалента/ амониев формиат и сместа се бърка първоначално в продъл жение на 1 час при стайна температура и след това 2 часа при 40°С. Реакционната смес се охлажда до 20-25°С и катализаторът се филтрира и се промива с 50 mt етанол. Етанолът се изпарява при 100 m бара и 50°С. Остатъкът се разтваря в 75 ml е.тилацетат и 15 ml 2Ь1 воден разтвор на натриев хидрид. След раниделяне на слоевете, водният слой се екстрахира двукратно с 10 етилацетат. Обединените органични слоеве се промиват .
- 23 двукратно c 25 mt вода и се изпаряват до сухо при 100 п^бара и 50°С. След изсушаване във вакуум при 50°C се. получава желания продукт /3/ с чистота 96.0 % с добив 97.0 /о .
Тънкослойна хроматография /при условията, посочени погоре Д Е/. = 0.67. Т.т. на НИ.сол: 218-223°С.
_ + 55дО /с _ зоз8, метанол/.
/е/ Превръщане на амино-съединението /3/ в съответния пиперазин с формула /4/ при взаимодействие с бис/2-хлороетил/амин. хидрохлорид в ксилен като разтворител
Към разтвор на 4.40 /14.8 от съединение /3/ •хлороетид^амин.НИ. Реакционната смес се. кипи под обратен хладния в атмосфера на азот в продължение на 48 часа. След охлаждане та реакционната смес до 35°С се прибавя 1.36 nd 50 ft воден разтвор на натриев хидроксид в 25 ml 5 ft воден разтвор на HaHCOg. Реакционната смес се бърка при 35°С в продължение на 3 часа, след което се прибавя 10 mt 2KL воден разтвор на натриев хидроксид и 20 mt вода. След разбъркване при 35°С за 10 минути реакционната смес се охлажда до 20-25°С и слоевете се разделят. Ксиленовият слой се промива трикратно с 25 mt вода. Органичният слой се изпарява до сухо /100 % алкохол като увличащо вещество/ при 10 m бара и 50°С. Желаният продукт /4/ се получава с чистота 85.5 ft и с добив 82.3 % .
Тънкослойна хроматография /при условията, посочени погоре/: £-4 = 0.07. Т.т. на ECI-сол: 183-186°С.
С^5 _ +θ3βθθθ /с _ io37f метанол/.
/ц /.Взаимодействие на пиперазиновото съединение /4/ с 4флуоробензоилазиридин до получаване на съединение /5/.
р-Флуоробензоилазиридин /53.8 , 325 / и 200 mt толуен се прибавят към 100.7 о, /284 hvmoi / от съединение /4/.
Реакционната смессе оставя при понижено налягане и температура 80°С /ротационен вакуум изпарител/; 150 nxl се изпаряват. След прибавяне на 100 ml толуен реакционната смея; се третира както е описано по-горе в продължение на още два часа. След изпаряване до сухо, към остатъка се. добавя метанол и продуктът, се оставя дц изкристализира при ,5°С. Продуктът се филтрира, промива се с метанол /200 ml / и хексан /400 ϊηί / и се суши. Желаното съединение /5/ се получава с чистота 82 % и добив 105 /71 % /. При обработване на матерната луга се получава допълнително количество от желания продукт.
** Тънкослойна хроматография /виж условията, посочени по-горе/:
В| = 0.59. Т.т.: 126-127°С. (Х)|5 = + 56°. /с = 4.32, СЕ^ОН/. /е/ Осапунване. на естер /5/ с КОН в етанол, последвано от подкиселяване със солна киселина в етанол, до получаване на флесинокеан /6/.
Към суспензия на 104 Cj. /0.2 mol/ от съединение /5/ в 1500 ml 96 % етанол се прибавя разтвор на 14 <^/0.25 /
КОН в 10 вода. След разбъркване при 20-25°С в продължение на 3.5 часа, етанолът се изпарява при 100 m бара и 50°С. Към остатъка се прибавя вода /500 / и дихлорометан /200 ш-С / и реакционната смес се бърка 5 минути. След разделяне на слоевете водният слой се екстрахира с 250 тЛ дихлорометан. Обединените органични слоеве се промиват два пъти с 100 mt вода. След изсушаване, органичният разтвор се изпарява до остатъчен обем от приблизително 200 vnl. Към този остатък се добавя 300 YYst етилацетат и се изпарява 100 ml от течността. Прибавя се 100 ml to -хексан и продуктът се оставя да изкристализира през нощта при 5°Св Кристалният продукт се филтрира, промива се последователно с 30 tot студен етилацетат и 200 т.1 ·*,- хексан и се суши при 30°С. Получава се флесиноксан /чистота 785« / c добив 73 Q» d
Тънкослойна хроматография /виж по-горе/: 1Ц - 0*67. Т*т*; 183-185°С* = + 27.8° /с = 2.49; СНдОН/*
Пример XI
Разтвор на 0*2 М 5-хлоро-2,3-дихидро-7-нитро-1,4-бензодигоксин-2-метанол, 0.34 М янтарен анхидрид и 2 % /тегло/обея/ липаза Candida cylvndracea /Melto. МУ/ в ТВМЕ/ацетонитрил/вода в обемно съотношение 90/10/0.3 се подлага на инкубация при ста йна температура и разбъркване* След превръщане на 41 % от алко хола /определен при използване на Zorbax 0-8 колона/ реакцията се опира чрез филтриране* Останалият алкохол съдържа /+/-енантиомер с енантиомерен излишък 38 % / определен чрез използване на Chiracel-0D -колона/*
Пример XII
Получаване на о-хлоро-
3-метанол.
Реакционна схема:
,о-дихидро-8-нитро-1,4-бензоксазин-
/а/ Към суспензия на 18*5 fat толуен при разбъркване тен анхидрид. След нагряване /91 vnmot / от съединение /7/ в се прибавя 30 mt /314 wvtaot / оцев продължение1 на 4 часа при 100°С
- 26 се прибавя още 10 mZ оцетен анхидрид. Нагряването се продължава допълнително за два часа. След отстраняване на нагряващата баня внимателно се прибавя около 25 тпХ етанол. Реакционната смес се охлажда до стайна температура и се обработва с етилацетат и вода. Органичният слой се промива два пъти с вода и се суши над магнезиев сулфат. След филтриране разтворителят се изпарява под вакуум. Към 18.23 от светло кафявото твърдо вещество се прибавя 75 mt етанол и 80 mt 2М воден разтвор на натриев хидрок сид. Тъмно червената суспензия се бърка в продължение на една нощ при стайна температура. След охлаждане до 0°С се прибавя 90 nA 2SL воден разтвор на солна киселина. Твърдото вещество се филтрира и се промива двукратно с вода. След изсушаване при стайна температура и при нормално налягане се получава 16.5 съединение /8/ във вид на оранжев прах.
Тънкослойна хроматография /елуенти: етилацетат/петролев етер с температура на кипене 40-65°С в обемно съотношение 50/50/: Е|= 0.3. Т.т.: 156-160¾.
/6/ Към разтвор на 8 ^/34.5 от съединение /8/ в смес от 80 толуен и 80 vnt 1 -метил-2-пиролидон се прибавя 5.6 /40 mm<Z/ калиев карбонат на прах. Реакционната смес се б®р— ка при температурата на кипене в продължение на един час под обратен хладник и водата се отстранява с помощта на апаратче на Дийн и Старк. Толуенът се отстранява чрез дестилация при атмосферно налягане. След охлаждане до 100°С се прибавя ^.3 о /41 mmot/ глицидилтозилат. Суспензията се бърка при 120°С в продължение на 4.5 часа и се охлажда до стайна температура. Реакционната смес се разрежда с вода и етилацетат и се довежда до pH 5 чрез подкисляване с 2N воден разтвор на солна киселина. Родният слой се екстрахира два пъти с етилацетат. Обединените органични слоеве се промиват с наситен воден раз-27 твор на натриев хлорид и се сушат над магнезиев сулфат. След филтриране на магнезиевия сулфат и изпаряване на разтворителя във вакуум се получава 10.86 а тъмно кафяво масло. След пре9 чистване чрез колонна хроматография под налягане /елуенти: етилацетат/петролев етер 40-65°С = 25/75 се получава 4.18 от съединение /9/ във вид на червени пластинки.. Т.т.: 76-84°С. Тънкослойна хроматография /виж по-гора/: B,j = 0.15.
/с/ Към суспензия от 3 q от съединение /9/ /10 rr.vnoj/ в смес от 100 tai метанол и 30 вода се прибавя прахообразен калиев карбонат - 1.44 . След разбъркване при стайна температура в продължение на 1.5 часа, реакционната смес, се обработва чрез, разреждане с вода и се екстрахира два пъти с етилацетат. Обе динените органични слоеве се. промиват трикратно с разреден воден разтвор на натриев хлорид и се сушат над магнезиев сулфат. След филтриране на магнезиевия сулфат и изпаряване на развакуум се получават 2.53 от съединение /10/, творителя във доказано чрез
ЖР, във вид на оранжево твърдо вещество.
Тънкослойна хроматография /етилацетат/петролев етер 40-65°С в обемно съотношение 75/25/: =0.3.
^ЖЖР: 8 /ррт./ 6.99 /сА , 1Н, аром./; 6.90 /в, 1Н, NH/; 6.88 /с(, 1Е, аром./;, 5.02 /t , 1Н, CHgOH/; 4.19 /dol, 1Н, OCHgCH/; 4.11 /dd, 1Н, OCHgCH/; 3.40/3.50 /кластер, ЗЕ, СНСН20Н/.
Пример XIII
Разтвор от 0.35 М 6-хлоро-2,3-дихидро-8-нитро-1,4-бен.зоксазин-3-метанол, 0.6 М янтарен анхидрид и 3.3 % /тегло/обем/ липаза Candida cyllndracea Aiello® МУ/ в THv-Е/ацетонитрил/ вода в обемно съотношение 90/10/0.6 се подлага на инкубация при стайна температура и разбъркване. След превръщане на 47 % от алкохола /установено при използване на Zxrbax С-8 колона/
- 28 реакцията се прекъсва чрез, филтриране;. Останалият непревърнат алкохол съдържа /+/внантио.мер с енантиомерен излишък 39 °/<> .
/определен при използване на Chiracel^-OD колона/.
Пример XIV
Разтвор на 0.13 М 2,3-дихидро-7-нитро-1,4-бензоди.ок.син2-метанол, 0.24 М маслен, анхидрид и 25 % /тегло/обем/ липаза в диизопропилетер/ацетонитрил/вода в обемни съотношение 50/50/0.5 се подлага на инкубация при стайна температура и при разбъркване. След превръщане на 64 % от алкохола реакцията се спира чрез филтриране. Останалият алкохол съдържа /+/-енантиомер с енантиомерен излишък от 42.4 % .
Пример XV
Рацемизиране на /+/-2,3-дихидро-7-нитро-1,4-бензодиоксин2-метанол
етанол/ в 15 тЕ етанол се прибавя 0.2 гг.Е /40 / 2Ъ1 воден разтвор на натриев кидроксид. След като се загрява при кипене под обратен хладник. в продължение на 125 часа реакционната смес се охлажда до стайна температура. Реакционната смес се разрежда с вода и се екстрахира двукратно с етилацетат. Органичният слой се суши върху магнезиев сулфат. След отстраняване на магнезиевия сулфат чрез филтриране и изпаряване на разтворителя във вакуум се получава 0.1 о, светло кафяв твърд материал. Ъгълът на специфично въртене /виж по-горе/ е 0. Анализът на енантиомерния излишък при използване на хирален -гликопротеин /АСР/ в колоната показва, че енантиомерният излишък е = 0.
При използване на ^—пропанол като разтворител времето за провеждане на реакцията е 30 часа.
- 29 Пример XVI
Рацемизиране на /+/-5-хлоро-2,3-дихидро-7-нитро-1,4-бензодиоксин-2-метанол
Към разтвор на 0.85 (j /3.46 «\W&/ /+/-5-хлоро^2,3-дихидро7-нитро-1,4-бензодиоксин-2-метанол
етанол// в 80 ьХ етанол се прибавя 15 2N воден разтвор на натриев хидроксид. След кипене под обратен хладник в продължение на '16 часа сместа се охлажда до стайна температура и се, разработва по начина, описан в пример XV о Ъгълът на.специфично въртене /виж по-горе/ на получения твърд материал е = 0. Хиралният анализ на Ciiiracel-OD колона показва енантиомерен изли шък = 0.
Пример XVII
Рацемизиране на /+/-6-хлоро-2,3-дихидро-8-нитро-1,4-бензоксазин-3-метанол
Към разтвор на 2 о /8.18 rcmot / /+/-6-хлоро-2,3-дихидро-
8-нитро-1,4-бензов.сазин-З-метанол + 14 /с =0.71, 96 етанол// в 50 rct етанол се прибавя 2KL воден разтвор на натриев хидроксид. След като сместа се оставя да кипи под обратен хладник в продължение на 3 часа към нея се прибавя ново количество от 1 mt 2N воден разтворена натриев хидроксид. Тогава реакционната смес се оставя да кипи в продължение на 32 часа, оставя се да се охлади до стайна температура и се разрежда с воден разтвор на натриев хлорид. Водният слой се екстрахира двукратно с етилацетат. Обединените органични слоеве се промиват двукратно със разреден воден разтвор на натриев хлорид и се сушат с магнезиев сулфат. След отстраняване на магнезиевия сулфат чрез филтриране и изпаряване на разтворителя във вакуум се получава 1.83 оранжево-кафяв твърд материал. Ъгълът на специфично въртене е 0 и при хирален анализ на Chtfacel-OD колона се установява, че енантиомерният излишък « 0.
Пример XVIII
Рацемизиране с помощта на натриев хидрид
Към смес на 0.2 С| /0.8 wot/ Е-/+/-ВРА и 0.01 /0.5 еквивалента/ 60 % суспензия на натриев хидрид в минерално масло се прибавя 5 диметилформамид, /Ж₽/. След прекратяване на отделянето на газ оранжевият разтвор се бърка при стайна температура,, Рацемизирането се извършва за 0.75 часа, което се установява чрез аналид. с помощта на ChiraceI-ОЗ колона. При използване на тетрахидрофуран като разтворител, реакцията протича също така успешно.

Claims (12)

  1. ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ
    Ι. Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеро-бицикличен алкохол, характеризиращ се с това, че по същество чист енантиомер на съединение, с фбща формула
    ОН /I/ в която X означава 0, $, НН, N-/0^-0^/алкил или CHg;
    Ур У2 й означават независимо един от друг водород или заместител, избран от групата, включваща халоген, С-ι — С4—алкил, —С4—алкокси, С4—С4—халоалкил, нитро и циано;
    заместителят М09 е присъединен към бицикличният пръстен на 5Т0 или 7^° място; и хиралният С-атом има Е или Ъ конфигурация;
    се получава от съотния му алкохолен рацемат чрез последователно провеждане на следните реакционни етапи;
    /с/ ацилиране на рацемата с ацилиращ реагент, под въздействието иа ензим, притежаващ стереоселективна естерифицираща активност;
    /и / отделяне на неестерифицираното съединение от получения естер и изолиране на желания чист по същество енантиомер на алкохол с формула 1 или на негов естер;
    гч подлагане на получения естер на хидролиза, при което той се превръща в съответния алкохолен енантиомер; и
    - 32 /^/'превръщане на нежелания алкохолен енантиомер в изходния алкохолен рацемат при алкални условия, така че той да може да се използва отново.
  2. 2. Метод, съгласно претенция 1, характеризиращ се сптова, че реакционните етапи Лм, / и /ίν/ се съчетават, като се използват достатъчно силни алкални условия, така че да се осъществи едновременно хидролиза на естера и рацемизиране. на. алкохолния енантиомер.
  3. 3, Метод, съгласно претенции 1 и 2, характеризиращ се с това, че по същество чист енантиомер на съединение с обща формула /II/ в която У| е водород или заместител,избран от групата включваща хлоро, флуоро или метил; заместителят MOg е присъединен на 5Т0 или 7МО място в бицикличната пръстенова система; и С-атомът има Е. или S -конфигурация;
    се получава при последователно провеждане на реакционните етапи, както са дефинирани в претенция 1о
  4. 4. Метод, съгласно всяка от претенции 1 до 3, характеризиращ се с това, че-след провеждане на реакционния етап /1/ ензимът се регенерира, като се използва процедура, подходяща за тази цел»
  5. 5. Метод, съгласно всяка от претенции от 1 до 4, характеризиращ се с това, че като ацилиращ реагент се използва анхидрид на карбоксилна киселина»
  6. 6. Метод, съгласно претенция 5, характеризиращ се с това, че като ацилиращ реагент се използва янтарен анхидрид или глута- ров анхидрид.
  7. 7. Метод, съгласно всяка от претенции от 1 до 6, характери зиращ се с това, че като ензим се използва липаза или естераза, притежаващи стереоселективна естерифицираща активност.
  8. 8. По същество чист алкохолен енантиомер с обща формула /I/, посочена в претенция 1, в която X и заместителите У имат значенията, посочени в претенция 1, заместителят N0^ е присъединен на 5ТО или 7МО място ва бицикличната пръстенна система и %
    С-атомът има Е конфигурация.
  9. 9. Използване на по същество чист енантиомер на алкохол с обща формула I, съгласно претенция 1, в която X и заместителите У имат значенията, посочени в претенция 1, заместителят no2
    е. присъединен на 5Т0 място към бицикличната пръстенна ·* система и С -атомът има Е конфигурация, за получаване на фармакологично активно пиперазиново производно, чрез подлагане на енантиомера на следните реакционни етапи: /U защита на свободната хидрокси група с подходяща хидроксизащитна група, при запазване на абсолютната конфигурация на С*-атома, др получаване на съединение с обща формула СН2'^0В1 /III/ в която Е^ е хидрокси-защитна група;
    / редукция на нитро заместителя по такъв начин, че по същество чистият енантиомер с формула III да се превърне в амино съединение с обща формула ™2 /И/ при запазване на абсолютната конфигурация на С-атома;
    /νίί/ превръщане на полученото по-горе амино съединение с формула И в пиперазиново съединение с обща формула л/ при запазване на абсолютната конфигурация на С -атома; /U/ превръщане на пиперазиновото съединение с формула V, при запазване на абсолютната конфигурация на С -атома, в пи
    W*· перазиново производно с обща формула
    - 35 разклонена въглеродна верига и В е фенилна или хетероциклична група, избрана от тиенил, пиранил, фурил, пиролил, пиридил и .пяразинил, която група може да бъде заместена с един или повече заместители, избрани от халоген, С^-Сдалкил, СрСд-халоалкил, циано, нитро, хидрокси, естерифицирана хидрокси. и C^-Cg-алкокси, при взаимодействие на, пиреразиновото съединение с формула V или /а/ със. съединение с обща формула
    L - А - NH-C0-B /VII/ в което. I» е отцепваща се група, за предпочитане избрана от . хлоро, мезилат или тозилат., или /Ь/ със съединение с обща формула
    Г/>Я-СО-Ь , ЛШ/ до получаване на пиперазиново производно с обща формула VI, в което А е етилен и накрая .
    /V/ отстраняване на защитната група от съединението с формула V до свободен енантиомер на алкохола с обща формула *
    в която С -атомът има Е. конфигурация.
  10. 10. По същество чист енантиомер с обща формула III, представена в претенция 9, в която X и заместителите У имат значенията, определени в претенция 1 и конфигурацията на С -атома съответства на Е конфигурацията на С %.тома на съединение с формула I, представена в претенция 1.
  11. 11. По същество чист енантиомер с обща формула IV, посочена в претенция 9, в коята X и заместителите У имат значенията, определени в претенция 1 и конфигурацията на 0'-атома съответства на Е конфигурацията на С -атома на съединение с формула I, посочена в претенция 1.
  12. 12. Метод за получаване на по същество чист енантиомер на пиперазиново съединение с обща формула IX, посочена в претенция 9, в която X и заместителите У имат значенията, определени в претенция 1, А и В имат значенията, посочени в претенция 9 и С- атомът има Е конфигурация, характеризиращ се с това, че: /а/ по същество чист енантиомер на алкохол с обща формула I, посочена в претенция 1, в която С -атомът има В. конфигура-, . ция се получава от съответния му алкохолен рацемат, чрез последователно провеждане на реакционните етапи, които са посочени в претенция 1;
    /Ь/ свободната хидроксилна група на получения алкохолен енантиомер се защитава с хидрокси-защитна група, при запазване на абсолютната конфигурация на С -атома, до получаване на съединение с обща формула III, посочена в претенция 9; zfc/ полученият по същество чист енантиомер се превръща в амино съединение с обща формула IV, посочена в претенция 9, чрез редукция на нитро заместителя, при запазване на абсочг лютната конфигурация на С -атома;
    /с/ полученото амино съединение се превръща в пиперазиново
    - 37 съединение с обща формула V, посочена в претенция 9., при запазване на абсолютната конфигурация на С *-атома;
    /е/ пиперазиновото съединение се. превръща в негово производно, при запазване на абсолютната конфигурация на С -атома, чрез взаимодействие със съединение с обща формула VII или
    VIII, представени в претенция 9, в които символите имат значенията, определени з претенция 9, до получаване на съединение с обща формула VI, посочена в претенция 9; и ' /|/ от съединението с бормула VI се отстранява защитната група до получаване на свободен енантиомер на алкохол с обща формула IX, представена в претенция 9, където символите имат значенията, определени в претенция 9, при запазване на Е конфигурацията на С-атома,
BG98305A 1992-12-21 1993-12-16 Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеробицикличен алкохол BG61511B1 (bg)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP92204043 1992-12-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG98305A true BG98305A (bg) 1994-07-29
BG61511B1 BG61511B1 (bg) 1997-10-31

Family

ID=8211159

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG98305A BG61511B1 (bg) 1992-12-21 1993-12-16 Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеробицикличен алкохол

Country Status (24)

Country Link
US (1) US5914263A (bg)
EP (2) EP0605033B1 (bg)
JP (1) JPH06237790A (bg)
KR (1) KR940014808A (bg)
CN (1) CN1255496A (bg)
AT (1) ATE182367T1 (bg)
AU (1) AU674547B2 (bg)
BG (1) BG61511B1 (bg)
CA (1) CA2111607A1 (bg)
CZ (2) CZ286077B6 (bg)
DE (1) DE69325698T2 (bg)
DK (1) DK0605033T3 (bg)
ES (1) ES2134241T3 (bg)
FI (1) FI935676A (bg)
GR (1) GR3031446T3 (bg)
IL (1) IL108090A (bg)
NO (1) NO934652L (bg)
NZ (1) NZ250478A (bg)
PL (2) PL177831B1 (bg)
RO (1) RO112517B1 (bg)
RU (1) RU2124506C1 (bg)
SK (1) SK143793A3 (bg)
TW (1) TW381120B (bg)
ZA (1) ZA939435B (bg)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2724184B1 (fr) * 1994-09-05 1997-01-03 Rhone Poulenc Chimie Procede de resolution d'un melange d'alcools stereoisomeres
AU701883B2 (en) * 1996-01-25 1999-02-11 Duphar International Research B.V. Process for the stereoselective preparation of a hetero-bicyclic alcohol enantiomer
DE19706337A1 (de) 1997-02-19 1998-08-20 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von enantiomerenreinen Estern
WO2003007956A1 (en) 2001-07-20 2003-01-30 Psychogenics, Inc. Treatment for attention-deficit hyperactivity disorder
FR2853327B1 (fr) 2003-04-04 2012-07-27 Solvay Procede pour la fabrication de derives de beta-aminoacides enantiopurs et derives de beta-aminoacides enantiopurs
KR100527231B1 (ko) * 2003-06-03 2005-11-08 엔자이텍 주식회사 무수숙신산에 의한 광학활성 1,2-디올 유도체와 이의 에스테르 제조방법
WO2005044262A1 (en) 2003-10-29 2005-05-19 Wyeth Sustained release pharmaceutical compositions comprising aplindore and derivatives thereof
DE102004004719A1 (de) * 2004-01-29 2005-08-18 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von enantiomerenreinen Aminoalkoholen
TW200811182A (en) * 2006-05-25 2008-03-01 Wyeth Corp Oxindoledioxans, synthesis thereof, and intermediates thereto
CZ2009687A3 (cs) * 2009-10-21 2010-12-15 Mikrobiologický ústav AV CR, v.v.i. Zpusob výroby opticky cistých stereomeru silybinu A a silybinu B
CA2932003A1 (en) * 2013-12-11 2015-06-18 F. Hoffmann-La Roche Ag Process for the preparation of chiral 2-aryl morpholines

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3692775A (en) * 1969-03-17 1972-09-19 Allied Chem Racemization of d-or l-{60 -amino-caprolactam in the presence of metal ions
GB1389217A (en) * 1971-06-02 1975-04-03 Glaxo Lab Ltd Phenylglycine derivatives
FR2479825A1 (fr) * 1980-04-04 1981-10-09 Fabre Sa Pierre Benzodioxanne 1,4 methoxy-2 propanolamines, leur preparation et leur application en tant que medicaments
FR2523961B1 (fr) * 1982-03-23 1985-08-30 Centre Nat Rech Scient Procede de preparation d'un alpha-amino-acide libre l
US4659671A (en) * 1983-07-01 1987-04-21 Massachusetts Institute Of Technology Enzymatic separation of racemic mixtures of hydroxy compounds
AU577802B2 (en) * 1983-10-17 1988-10-06 Duphar International Research B.V. Blood-pressure lowering piperazine derivatives
DE3586794T2 (de) * 1984-12-21 1993-05-27 Duphar Int Res Arzneimittel mit psychotroper wirkung.
EP0185429A1 (en) * 1984-12-21 1986-06-25 Duphar International Research B.V New bicyclic heteroaryl piperazines
IT1201408B (it) * 1985-03-22 1989-02-02 Montedison Spa Processo per la preparazione biotecnologica di acidi alfa-arilalcanoici otticamente attivi
US4889852A (en) * 1987-09-11 1989-12-26 Duphar International Research B.V. Anxiolytically active piperazine derivatives
IL92544A0 (en) * 1988-12-08 1990-08-31 Duphar Int Res Piperazine derivatives,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US5166062A (en) * 1990-01-26 1992-11-24 University Of New Mexico Methods for separating diol and triol stereoisomers from a stereoisomer mixture

Also Published As

Publication number Publication date
RO112517B1 (ro) 1997-10-30
PL301539A1 (en) 1994-06-27
DK0605033T3 (da) 2000-02-07
CA2111607A1 (en) 1994-06-22
SK143793A3 (en) 1994-09-07
PL178517B1 (pl) 2000-05-31
FI935676A (fi) 1994-06-22
IL108090A0 (en) 1994-04-12
DE69325698T2 (de) 2000-01-27
NZ250478A (en) 1995-03-28
EP0939135A1 (en) 1999-09-01
US5914263A (en) 1999-06-22
NO934652L (no) 1994-06-22
CN1255496A (zh) 2000-06-07
CZ278493A3 (en) 1994-07-13
BG61511B1 (bg) 1997-10-31
ATE182367T1 (de) 1999-08-15
FI935676A0 (fi) 1993-12-16
NO934652D0 (no) 1993-12-16
AU674547B2 (en) 1997-01-02
RU2124506C1 (ru) 1999-01-10
ZA939435B (en) 1994-08-09
KR940014808A (ko) 1994-07-19
TW381120B (en) 2000-02-01
PL177831B1 (pl) 2000-01-31
EP0605033A1 (en) 1994-07-06
ES2134241T3 (es) 1999-10-01
IL108090A (en) 1998-10-30
AU5250293A (en) 1994-06-30
JPH06237790A (ja) 1994-08-30
CZ286162B6 (cs) 2000-01-12
GR3031446T3 (en) 2000-01-31
EP0605033B1 (en) 1999-07-21
CZ286077B6 (cs) 2000-01-12
DE69325698D1 (de) 1999-08-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7189847B2 (en) Process for producing benzoxazine derivative and production intermediate thereof
JP2022553225A (ja) (4s)-(4-シアノ-2-メトキシフェニル)-5-エトキシ-2,8-ジメチル-1,4-ジヒドロ-1,6-ナフチリジン-3-カルボン酸のアシルオキシメチルエステルの製造方法
BG98305A (bg) Ензимен метод за стереоселективно получаване на енантиомер на хетеробицикличен алкохол
US5770438A (en) Process for enantioselective hydrolysis of α-(2-amino)-phenyl-benzenemethanol ester type compounds using bacillus, pseudomonas or streptomyces
US4980291A (en) Process for the enzymatic separation of the optical isomers of racemic α-alkyl-substituted primary alcohols
AU2001230192B2 (en) Method for the enzymatic resolution of the racemates of aminomethyl-aryl-cyclohexanol derivatives
EP0528607B1 (en) Process for preparing optically active 3-phenylglycidic acid esters
US5128264A (en) Process for preparing optically active 3-hydroxybutane derivatives using lipase
EP2218788B1 (en) Process for the preparation of optically active cyclopentenones
EP2196458A1 (en) Process for obtaining enantiomerically enriched pyrazole derivatives
US5731464A (en) Process for preparation of indenol
Guzzo et al. Preparation of optically active (acyloxy) alkyl esters from optically active O-acyl-α-hydroxy acids
WO2006013399A1 (en) Pharmaceutical intermediates and a process for the preparation thereof
HU213569B (en) Enzymatic process for the stereoselective preparation of a heterobicyclic alcohol enantiomer
RU2258069C2 (ru) Способ получения производного бензоксазина, способы получения его промежуточного соединения и промежуточные соединения
EP1601778A1 (en) Stereoselective chemoenzymatic process for preparing optically enriched phenylglycidates
JPH07322889A (ja) 光学活性な2,5−ピロリジンジオン誘導体の製造法
EP0490407A2 (en) Process for the enzymatic separation of the optical isomers of tosyloxy-alkanols
JPH02291290A (ja) ロイコトリエンアンタゴニストの製造方法